ES2203701T3

ES2203701T3 - Uso de proteinas morfogenicas de hueso para sanar y reparar uniones de tejido conjuntivo.

Info

Publication number: ES2203701T3
Application number: ES96916513T
Authority: ES
Inventors: John M. Wozney; Russel F. Warren; Scott A. Rodeo; Jo A. Hannafin
Original assignee: NEW YORK SOCIETY; Genetics Institute LLC; New York Society for Relief of Ruptured and Crippled
Current assignee: NEW YORK SOCIETY; Genetics Institute LLC; New York Society for Relief of Ruptured and Crippled
Priority date: 1995-06-05
Filing date: 1996-05-21
Publication date: 2004-04-16
Anticipated expiration: 2016-05-21
Also published as: DE69629294D1; KR19990014932A; CA2220555A1; HUP9802556A1; FI974395A0; CA2220555C; EP0831884B1; FI116511B; HU222664B1; DE69629294T2; EP1364656A2; FI974395L; CN1133462C; DK1364656T3; CN1186438A; ES2440441T3; WO1996039169A1; ATE245996T1; AU5923496A; EP1364656A3

Abstract

SE PROPORCIONAN METODOS Y COMPOSICIONES PARA EL TRATAMIENTO DE DEFECTOS Y ENFERMEDADES QUE IMPLICAN LA UNION FUNCIONAL DE TEJIDO CONJUNTIVO, TAL COMO TENDONES O LIGAMENTOS, A HUESO. LOS METODOS PREFERIDOS COMPRENDEN LA ADMINISTRACION DE UNA COMPOSICION QUE COMPRENDE UNA PROTEINA MORFOGENETICA Y UN TRANSPORTADOR ADECUADO. EL METODO TIENE COMO RESULTADO LA REGENERACION DE UNION FUNCIONAL ENTRE EL TEJIDO CONJUNTIVO Y EL HUESO, DE MANERA QUE SE FORMA UN MINIMO DE TEJIDO FIBROSO O GRANULOSO EN LA INTERFICIE ENTRE EL HUESO REGENERADO Y EL TEJIDO CONJUNTIVO. EL METODO Y COMPOSICION SON UTILES PARA AUMENTAR LOS INJERTOS DE TEJIDO EN CIRUGIA RECONSTRUCTORA. EL METODO Y LA COMPOSICION TIENEN COMO RESULTADO UNA APOSICION MAS ESTRECHA DE HUESO AL TEJIDO CONJUNTIVO EN PUNTOS TEMPORALES MAS TEMPRANOS Y UNA FUERZA AUMENTADA DE FIJACION EN PUNTOS TEMPORALES MAS TEMPRANOS.

Description

Uso de proteínas morfogénicas de hueso para sanar y reparar uniones de tejido conjuntivo.

Campo del invento

El presente invento se refiere al campo de la reparación de tejido, específicamente, la regeneración de una unión funcional entre tejido conjuntivo, tales como tendón, cartílago o ligamento a hueso. Esta unión funcional puede ser destruida por un trauma o tensión, o por una enfermedad degenerativa o congénita. Así, el presente invento puede ser útil en cirugía reconstructiva u otros procedimientos para la regeneración de una unión funcional entre tejido conjuntivo y hueso.

Antecedentes del invento Antecedentes de la incidencia y etiología de la necesidad

Aunque varios de los procedimientos de cirugía reconstructiva confían en la firme cicatrización o unión del tejido conjuntivo, particularmente tendón o ligamento, al hueso, se conoce poco sobre el proceso de cicatrización en la interfaz del tendón al hueso. Puesto que el lugar de fijación del injerto al hueso representa el área más débil en los inicios del periodo post-transplante, los métodos para mejorar la fuerza de fijación inicial del injerto tienen una aplicación clínica significativa. Esto es de particular importancia en operaciones en la rodilla, hombro, cadera, mano, tobillo y codo.

El desarrollo de la inserción de tendón o ligamento en el hueso se entiende de forma muy pobre. El lugar de inserción está mediado por fibras de colágeno, conocidas como "fibras de Sharpey", las cuales son continuas desde el tendón hasta el interior del hueso. Las fibras de Sharpey se piensa que se forman en el esqueleto en desarrollo por mineralización progresiva de ligamento o fibras de colágeno periosteal, por el hueso que se desarrolla durante el crecimiento. Ciertos estudios han indicado que el hueso cicatriza al tendón por crecimiento del hueso en el tejido interfaz fibrovascular el cual se forma inicialmente entre el tendón y el hueso. Hay una mineralización progresiva del tejido interfaz con el posterior crecimiento del hueso en el tendón externo. A pesar de la evidencia de que el hueso crece en un tejido colagénico, el mecanismo de tal crecimiento del hueso hacia el interior, y la efectividad y la fuerza de la unión permanece incierta. Un estudio previo de la cicatrización del tendón a hueso demostró la formación de un tejido interfaz fibroso entre el tendón y el hueso. Rodeo et al., J.Bone and Joint Surgery,75-A:1795-1803 (1993).

De acuerdo con esto, a pesar de los substanciales esfuerzos en este campo, permanece una necesidad de un método efectivo de reparación de una unión funcional entre tejido conjuntivo, tales como tendón o ligamento, y hueso.

Compendio del invento

El presente invento proporciona el uso de una o más proteínas morfogenéticas del hueso (BMP) para la preparación de una composición farmacéutica para la regeneración de una unión funcional entre tejido conjuntivo o tendón y hueso, con la condición que dichas BMPs no incluyen BMP-12,BMP-13 o BMP-15. En particular, el presente invento es útil en métodos de tratar pacientes con uniones de tendón o ligamento a hueso separadas o degeneradas. Algunos ejemplos incluyen cirugía reconstructiva en la rodilla, hombro, mano, tobillo, y codo. Áreas en particular donde el presente invento puede probarse útil incluyen la reconstrucción del ligamento anterior cruzado (ACL), o el manguito de los rotadores. Las composiciones preparadas según el presente invento son ventajosas en que pueden utilizar proteínas osteogénicas, las cuales se pueden producir vía tecnología de DNA recombinante, y en consecuencia son de una fuente potencialmente ilimitada. Las composiciones preparadas según el presente invento son adicionalmente ventajosas en que la regeneración del aparato de unión puede ser acelerada o puede ser de una fuerza extremadamente mayor, y la unión formada entre el tejido conjuntivo y hueso puede alcanzar antes una fuerza funcional después de que se efectúe una cirugía o reparación. Las composiciones preparadas según el presente invento son adicionalmente ventajosas en que inducen la regeneración de la unión funcional entre tejido conjuntivo y hueso, mientras que minimizan o evitan la formación de tejido fibroso o granulomatoso en la interfaz entre los tipos de tejido.

Las composiciones preparadas según el presente invento son particularmente aplicables a la fijación de un tendón redondo en un túnel del hueso o un tendón plano sobre una superficie del hueso. Son relevantes varios ejemplos clínicos. Un ejemplo clínico común es la reconstrucción del ligamento anterior cruzado (ACL). La reconstrucción puede ser realizada usando el tercio central del tendón rotular con un bloque unido de hueso tanto de la tibia como de la rótula, o usando los tendones semitendinosos y gracilis. Los beneficios del uso del tendón rotular incluyen una fijación ósea inmediata permitiendo una rehabilitación post-operatoria agresiva y una fuerza incrementada. Sin embargo, el uso del tercio central del tendón rotular ha sido asociado con secuelas adversas incluyendo fractura rotular, ruptura de ligamento rotular y degeneración de la articulación rotulo-femoral. Los beneficios del uso de los tendones semitendonosos y gracilis incluyen recolecciones de injerto más fáciles, la no ruptura del mecanismo extensor de la rodilla, mayor fuerza en el cuadriceps a un año del post-operatorio, y mínima pérdida de fuerza en la mutilación. El mayor escollo es la preocupación sobre la fuerza de fijación del tendón entre los túneles del hueso y el riesgo de fallo del injerto en el lugar de fijación. La principal diferencia entre estos dos métodos de reconstrucción de ligamentos es la fijación del injerto.

El uso de BMP para aumentar la cicatrización tendón a hueso puede dar como resultado mejores métodos para utilizar tendones semitendinosos y gracilis para la reconstrucción del ACL, obviando así el defecto rotular y la interrupción concomitante del mecanismo extensor inherente en la recolección de ligamentos de la rótula. Evaluaciones preclínicas indican que el rhBMP-2 mejora la cicatrización temprana del injerto de hueso a tendón, como se demuestra por evaluación histológica y biomecánica. El aumento de la fuerza de la fijación tendón a hueso permitirá una rehabilitación más temprana y más agresiva, que da como resultado una vuelta más temprana a las actividades normales, trabajo, o deporte.

Otros ejemplos clínicos comunes para los cuales el invento tiene aplicación directa incluyen los siguientes: reparación del tendón del manguito de los rotadores a la tuberosidad más grande del húmero, reunión del labrum glenoideo al cuello escapular, reconstrucción de los ligamentos laterales del tobillo usando un injerto de tendón situado a través de los túneles del hueso, reconstrucción del ligamento colateral medio del codo o rodilla usando un injerto de tendón fijado a la superficie del hueso o a través de los túneles del hueso, reconstrucción del ligamento ulnar colateral del pulgar usando un injerto de tendón situado en un túnel del hueso, y reparación de los tendones flexores o extensores de los dedos en los túneles de los huesos o a la superficie del hueso de las falanges. El invento es ampliamente aplicable a cualquier situación en la cual el tejido conjuntivo (tendón, ligamento, labrum, fascia, o cápsula articular) se vuelve a unir al hueso; ya sea a la superficie del hueso o en un túnel en el hueso.

Descripción detallada del invento

Según el presente invento, se proporcionan medios para el tratamiento de pacientes que requieren cirugía reconstructiva para la reparación de la unión funcional entre tejido conjuntivo y hueso. Las composiciones preparadas según el presente invento son ventajosas en que se puede realizar la reparación o mejora de la totalidad del aparato de unión: el tendón o ligamento, el hueso adyacente, así como la unión funcional. El uso de las composiciones comprende el aplicar al lugar que necesita la cirugía reconstructiva, o al lugar de un defecto, desgarro o separación de tejido conjuntivo al hueso, una cantidad de composición que comprende una o más proteínas osteogénicas purificadas, lo cual es efectivo para regenerar la unión funcional del tejido conjuntivo al hueso. El uso de las composiciones puede adicionalmente comprender la administración de una composición que comprende una proteína osteogénica purificada o recombinante a un lugar con necesidad de regeneración de la unión del tejido conjuntivo al hueso en un vehículo adecuado tal que el tejido conjuntivo, el hueso, y el aparato de la unión funcional son regenerados con reducido tejido fibroso o granulomatoso en el lugar donde ocurre la unión. La composición es preferiblemente administrada en combinación con un vehículo efectivo. Una de las ventajas claves del presente invento es que permite la regeneración controlada del tejido conjuntivo, hueso y el aparato de la unión funcional de una manera acelerada tal que la unión puede conseguir mayor fuerza funcional, en un punto mas temprano en el tiempo que con un procedimiento similar realizado sin la adición de proteínas osteogénicas.

Proteínas osteogénicas

La proteína osteogénica es preferiblemente de la subclase de proteínas conocidas generalmente como proteínas morfogenéticas del hueso (BMPs), las cuales han sido divulgadas por tener una actividad osteogénica, y otras actividades de tipo crecimiento y diferenciación. Estas BMPs incluyen BMP-2, BMP-4, BMP-5,BMP-6, BMP-7, BMP-8 BMP-9,BMP-10, BMP-11, BMP-12, y BMP-13, y puede también incluir otros miembros de la superfamilia de proteínas TGF-\beta,tales como factores de crecimiento y diferenciación, o GDFs , y MP52. Las estructuras de un número de proteínas BMP están divulgadas en las patentes de EE.UU. 4.877.864;5.108.922; 5.013.649; 5.116.738; 5.106.748; 5.187.076; 5.141.905; y solicitudes del Tratado de Cooperación de Patentes (PCT) WO91/18098; WO 93/00432; WO 94/26893; y WO 94/26892; y en la patente EE.UU.5.658.882. El documento WO 88/00205 divulgó productos de factor inductivo del hueso humano y bovino y su uso para el tratamiento de defectos óseos y periodontales. El documento WO 95/16035 mostró BMP-12 y BMP-13 y composiciones inductoras de tendón de las mismas, mientras que el documento WO 96/36710 divulgó composiciones de BMP-15 para el tratamiento de hueso y cartílago y/u otros defectos tisulares. La estructura de un número de GDFs se divulga en los documentos WO 94/15965; WO 94/15949; WO 95/01801; WO 95/01802; WO 94/21681; WO 94/15966. La estructura de MP52 se divulga en el documento WO 93/16099. La BMP es preferiblemente BMP-2, cuya secuencia se divulga en la patente EE.UU. 5.013.649. Se puede también usar otras BMPs conocidas en la técnica. En el presente, la BMP más preferida es la BMP-2.

La BMP puede ser producida por recombinación, o purificada a partir de una composición de proteína. La BMP puede ser homodímera o puede ser heterodímera con otras BMPs (por ejemplo, un heterodímero compuesto de un monómero de cada uno de BMP-2 y BMP-6) o con otros miembros de la superfamilia TGB-\beta, tales como activinas, inhibinas TGF-\beta1 (por ejemplo , un heterodímero compuesto de un monómero de cada de uno de una BMP y un miembro afín de la superfamilia TGB-\beta). Ejemplos de tales proteínas heterodímeras se describen por ejemplo en la solicitud de patente publicada del Tratado de Cooperación de Patentes (PCT) WO 93/09229.

La cantidad de proteína osteogénica útil en la presente invención es aquella cantidad efectiva para estimular una actividad osteogénica incrementada de infiltrar células progenitoras, y dependerá del tamaño y naturaleza del defecto que se está tratando, así como el vehículo que se emplea. Generalmente, la cantidad de proteína para ser administrada esta en un intervalo desde alrededor de 0,05 a alrededor de 1,5 mg.

En una realización preferida, la proteína osteogénica se administra junto con una cantidad efectiva de una proteína que es capaz de inducir la formación de tejido semejante a tendón o ligamento. Tales proteínas, incluyen BMP-12 y BMP-13, y otros miembros de la subfamilia BMP-12, así como también MP-52. Estas proteínas y su uso para la regeneración de tendón y tejidos semejantes a ligamento están divulgadas en la patente EE.UU.5.658.882.

Vehículo

Materiales que pueden ser útiles como vehículo en la práctica del presente invento incluyen materiales farmacéuticamente aceptables que tienen una viscosidad y una polaridad tal que, cuando se añaden a la proteína morfogenética del hueso, forman una composición que posee unas características de manipulación adecuadas(es decir, no es demasiado líquida para permanecer en el lugar del defecto) para la aplicación en el lugar de reconstrucción del tejido conjuntivo a la unión del hueso. Añadir el vehículo a la proteína morfogenética permite que la proteína permanezca en el lugar de la enfermedad o lesión por un tiempo suficiente para permitir a la proteína incrementar la, de otra forma natural, velocidad de actividad regenerativa osteogénica de las células progenitoras de mamíferos infiltradas, y formar un espacio en el cual el nuevo tejido puede crecer y permitir el crecimiento interno de las células. El vehículo puede también permitir la proteína morfogenética del hueso ser liberada desde el lugar del defecto o la lesión en un intervalo de tiempo apropiado para incrementar de forma óptima la velocidad de actividad osteogénica regenerativa de las células progenitoras.

La familia mas preferida de vehículos comprende los materiales colagénicos. Los materiales preferidos de colágeno incluyen esponjas de colágeno Collastat® y Helistat® (Integra Life Sciences Corp. Plainsboro, NJ.). Otros materiales de colágeno que pueden ser adecuados para el uso en el presente invento se describen en las patentes de EE.UU. 5.206.028; Patente EE.UU. 5.024.841; Patente de EE.UU. 5.256.418. El vehículo de colágeno está preferiblemente en la forma de una esponja. La esponja de colágeno puede ser cargada con proteína antes de la administración empapando la esponja en el volumen y concentración deseada de proteína durante un periodo de tiempo adecuado. La esponja de colágeno se carga empapándola preferiblemente con proteína en un intervalo desde alrededor de 10% a alrededor del 150% v/v [ml proteína/cm^{3} esponja seca], más preferiblemente de alrededor de 10 a alrededor del 60% v/v. Alternativamente, la proteína puede ser adsorbida a la esponja de colágeno durante la producción. En este caso, la proteína morfogenética del hueso se añade preferiblemente a la esponja de colágeno durante la producción, y es liofilizada para formar un producto unitario. La proteína se añade preferiblemente en una proporción desde alrededor de 10 a alrededor del 150% v/v, más preferiblemente en un intervalo desde alrededor de 60 a alrededor de 80% v/v. Otras formas de colágeno que pueden ser útiles en el presente invento son el gel de colágeno y el colágeno polimérico reticulado.

Otra familia preferida de vehículos para la administración de las proteínas morfogenética del hueso son los polímeros en partículas porosos, descritos en detalle en la patente EE.UU. 5.171.579. Preferiblemente, los polímeros en partículas porosos son co-polímeros de ácido poliláctico y ácido poliglicólico. La proteína y polímeros son preferiblemente secuestrados por un agente secuestrante, tal como sangre autóloga. Un vehículo alternativo útil para el presente invento es una formulación de proteína osteogénicas, polímeros en partículas porosos y otro agente secuestrante, tal como un material celulósico. Otros agentes secuestrantes preferidos incluyen ácido hialurónico, alginato de sodio, poli(etilenglicol), óxido de polioxietileno, polímero carboxivinílico y alcohol poli(vinílico). El más preferido como agente secuestrante para esta realización es la carboxymetilcelulosa. Estas composiciones se describen en la solicitud PCT publicada WO 93/00050. El agente secuestrante de proteína celulósica está presente preferiblemente en una concentración de alrededor de 1 a alrededor del 10% (p/v de implante). El polímero en partículas poroso/agente secuestrante celulósico puede combinarse opcionalmente además con glicerol acuoso como diluyente, preferiblemente en concentraciones desde alrededor de 10 a alrededor de 80% (v/v); y las relaciones del agente secuestrante/solución líquida: polímeros en partículas porosos están preferiblemente desde alrededor de 0,1 a alrededor de 0,9 (v/v). Alternativamente, los polímeros en partículas porosos pueden ser formados en una esponja fusionada, como se describe en la patente de EE.UU. 5.520.923. La cantidad de proteína osteogénica usada con polímeros en partículas porosos está generalmente en el intervalo de 0,01 a 1 mg de proteína, preferiblemente de 0,05 a 0,6 mg de proteína por cada centímetro cúbico de la composición empleada.

Otra familia preferida de vehículos son materiales celulósicos tales como alquilcelulosa (incluyendo hidroxialquilcelulosa), incluyendo metilcelulosa, etilcelulosa, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, y carboximetilcelulosa, siendo las más preferidas las sales catiónicas de carboxymetilcelulosa (CMC).

En el caso de vehículos celulósicos y geles de colágeno, se prefiere que el vehículo esté en la forma de un gel viscoso celulósico hidratado. La viscosidad puede ser aumentada a través de medios mecánicos, tales como alta agitación durante un periodo de tiempo adecuado, seguido por un tratamiento en autoclave, o químico. La BMP y el vehículo celulósico están preferiblemente en una solución de un tampón adecuado. Una solución tamponada preferida es una composición que comprende, además de la proteína osteogénica, de alrededor de 1,0 a alrededor de 10,0% (p/v) de glicina, de alrededor de 0,1 a alrededor 5,0% (p/v) de un azúcar, preferiblemente sacarosa, de alrededor de 1 a alrededor de hidrocloruro de ácido glutámico 20 mM, y opcionalmente de alrededor 0,01 a alrededor de 0,1% de un tensoactivo no iónico, tal como polisorbato 80. Soluciones preferidas son desde alrededor de 1% a alrededor del 20% p/v vehículo celulósico/tampón. Si se desea, se puede añadir una sal. Un vehículo de gel viscoso preferido se describe en el Ejemplo 2 a continuación. La cantidad de proteína osteogénica útil con vehículo de gel viscoso está generalmente en un intervalo desde alrededor de 0,05 hasta alrededor de 1,5 mg, preferiblemente desde alrededor de 0,1 hasta alrededor 1,0 mg por centímetro cúbico de material de implante requerido.

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Otros materiales que pueden ser adecuados para el uso como vehículos para BMPs en las composiciones preparadas según el presente invento incluyen ácido hialurónico, malla quirúrgica o suturas, poligliconato, polímeros termo-sensibles, hueso desmineralizado, minerales y cerámicas, tales como fosfatos de calcio, hidroxiapatita, etc., así como combinaciones de los materiales anteriormente descritos.

En una realización preferida del presente invento, sin embargo no se usa vehículo. En su lugar, la proteína del presente invento, en un tampón adecuado tal como se describe anteriormente, se aplica directamente al lugar con necesidad de reparación de tejido. Por ejemplo, la proteína puede ser aplicada usando un cepillo u otro aplicador adecuado, tal como una jeringa para inyección. Alternativamente, la proteína puede ser aplicada directamente al lugar con necesidad de reparación de tejido.

Los siguientes ejemplos describen adicionalmente la práctica de realizaciones del invento con BMP-2 en un vehículo de esponja de colágeno. Los ejemplos no son restrictivos, y como será apreciado por aquellos expertos en la técnica, pueden ser variados de acuerdo con la memoria descriptiva anterior.

Ejemplos Ejemplo 1 BMP-2 y vehículo polimérico de esponja de colágeno en defectos de separación de tendón a hueso creados quirúrgicamente

Se utilizaron veinte perros mestizos adultos. Los tendones extensores largos de los dedos de ambas articulaciones de la rodilla fueron separados de su inserción femoral y transplantados a través de un agujero de taladro en la metáfisis proximal tibial. El tendón extensor largo de los dedos de la articulación de la rodilla de ambos miembros traseros se separó de su inserción femoral y se transplantó, a través de un túnel del hueso, dentro de la metáfisis tibial proximal. Se aplicó BMP-2 humano recombinante (rhBMP-2) al interfaz tendón-hueso en un miembro, usando como vehículo una esponja de colágeno Tipo I [Figura 1]. El miembro contra-lateral recibió la esponja de colágeno sin rhBMP-2[control].

Los animales se anestesiaron durante la cirugía. Se llegó a la articulación de la rodilla a través de una incisión pararotular; Se identificó el tendón extensor largo de los dedos y entonces se separó de su inserción sobre el cóndilo femoral lateral por una disección aguda. Entonces se cortó la fascia sobre el músculo tibial anterior y el músculo fue retraído lateralmente. Se hizo un agujero de taladro, de 4,8 mm de diámetro, en la metáfisis proximal tibial en un ángulo de 45 grados en el eje largo del hueso. Una esponja de colágeno Helistat® se cargó con BMP-2 humano recombinante (rhBMP-2), y entonces se envolvió la esponja alrededor del tendón separado. Se tiró manualmente del extremo libre del tendón a través del agujero de taladro y se fijó, bajo tensión, en la cara media de la metáfisis proximal tibial con suturas simples interrumpidas de acero inoxidable 4-0. Se ajustó perfectamente el tendón en el túnel del hueso y estuvo en contacto con el hueso a lo largo de todo el túnel. La cápsula articular, fascia y tejidos subcutáneos se cerraron con suturas interrumpidas de tripa crómica 3-0, y la piel se cerró con suturas interrumpidas de acero inoxidable 3-0. Entonces se hizo el procedimiento en la rodilla contra-lateral. Los miembros no fueron inmovilizados y se permitió a los perros ejercitarse ad libitum en pistas individuales interiores.

Se sacrificaron ocho perros a las dos y a las cuatro semanas; cuatro perros se sacrificaron a las ocho semanas. Se hicieron radiografías de alta resolución y se examinaron secciones microscópicas de la interfaz tendón-hueso bajo microscopia de luz y luz polarizada. Se examinaron secciones marcadas con tetraciclina bajo microscopia de fluorescencia. Se efectuó un ensayo biomecánico de carga extrema al fallo para los especímenes de dos y cuatro semanas en una máquina de pruebas de materiales MTS en una velocidad de tracción 50,8 mm/segundo. Las cargas de fallo fueron promediadas y el lado tratado con rhBMP-2 se comparó con el lado de control usando un ensayo t de Student pareado.

Resultados

Un análisis histológico en serie reveló una proliferación extensiva de fibroblastos, células regordetas semejantes a osteoblastos, y nuevo hueso trabecular en la interfaz tendón-hueso, en los miembros tratados con rhBMP-2, comparado con los miembros que recibieron solamente el vehículo de colágeno. A medida que la cicatrización progresaba, el nuevo hueso trabecular en el interfaz del miembro tratado con rhBMP-2 maduró y estaban en una proximidad más cercana al tendón, mientras que en el miembro sin rhBMP-2, había una zona de tejido fibroso o granulomatoso separando el tendón y el túnel del hueso. Las secciones con tinción de Von Kossa y la microscopía de fluorescencia de muestras marcadas con fluorocromo en microscopía de fluorescencia demostraron una mineralización progresiva del recién formado hueso en la interfaz tendón-hueso. Radiografías de alta resolución demostraron que durante el proceso de inducción del hueso, el hueso lamelar preexistente se reabsorbió, y se observó nuevo hueso para progresivamente mineralizarse en los especímenes rhBMP-2 en la semana cuatro y ocho. No hubo evidencia de una respuesta inmunológica del huésped al implante de colágeno.

Comparaciones pareadas de resistencia extrema a la tracción (N) demostraron que los miembros tratados con rhBMP-2 eran significativamente más fuertes tanto en los especímenes de dos semanas (p=0,035) como en los especímenes de cuatro semanas (p=0,05). Hubo una aumento estadísticamente significativo en resistencia de dos a cuatro semanas en los miembros tratados con rhBMP (p=0,02) y el miembro control (p=0,005). [Figura 2].

Discusión

La proteína morfogenética del hueso mejora la cicatrización del un injerto de tendón en un túnel del hueso. Un estudio previo de la cicatrización tendón a hueso demostró una interfaz de tejido fibroso entre el tendón y el hueso. En el presente estudio, la rhBMP-2 indujo una nueva deposición extensiva de hueso en este tejido interfaz, que da como resultado una aposición mas cercana del hueso al tendón en puntos mas tempranos en el tiempo y un establecimiento más regular de las fibras de Sharpey entre el tendón y el hueso en los miembros tratados con rhBMP-2. La fuerza de fijación incrementada está en correlación con el grado histológico de crecimiento del hueso hacia el interior visto en los miembros tratados con rhBMP-2.

Claims

1. Uso de una o más proteínas morfogenéticas del hueso (BMP) para la preparación de una composición farmacéutica para la regeneración de una unión funcional entre tejido conjuntivo o tendón y hueso, con la condición que dichas BMPs no incluyen BMP-12,BMP-13 o BMP-15.

2. El uso de la reivindicación 1, en el que dicha composición farmacéutica comprende además una proteína que es capaz de inducir la formación de tejido semejante a tendón o ligamento.

3. El uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que dicha composición farmacéutica comprende BMP-2 recombinante humano.

4. El uso de la reivindicación 2 ó 3, en el que dicha proteína capaz de inducir la formación de tejido semejante a tendón o ligamento es MP52.

5. El uso de una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, en el que dicha BMP y dicha proteína capaz de inducir la formación de tejido semejante a tendón o ligamento forma heterodímeros.

6. El uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicha composición farmacéutica comprende además un vehículo adecuado.

7. El uso de la reivindicación 6, en el que dicho vehículo comprende materiales colagénicos preferiblemente en la forma de una esponja, o polímeros en partículas porosos y un agente secuestrante.

8. El uso de reivindicación 6, en el que el vehículo es un gel viscoso celulósico.

9. El uso de reivindicación 7, en el que dicho agente secuestrante es un material celulósico o sangre autóloga.