ES2208971T3

ES2208971T3 - Construcciones tubulares de injerto submucosal.

Info

Publication number: ES2208971T3
Application number: ES97954035T
Authority: ES
Inventors: Michael C. Hiles; Umesh H. Patel; Leslie A. Geddes; Stephen F. Badylak
Original assignee: Purdue Research Foundation
Current assignee: Purdue Research Foundation
Priority date: 1996-12-10
Filing date: 1997-12-10
Publication date: 2004-06-16
Anticipated expiration: 2017-12-10
Also published as: EP0961595A1; PL184497B1; SK71399A3; JP2008029866A; KR100646121B1; KR100645120B1; ATE249182T1; AU728848B2; JP4074666B2; DE69731553T2; CA2273077A1; EP0954254A1; WO1998025543A1; DE69724827D1; WO1998025546A1; JP2001509701A; AU5791498A; AU5603798A; JP2001505466A; CA2273077C

Abstract

LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE A UN TUBO MECANICAMENTE RESISTENTE Y DE FACIL PRODUCCION DE UN TEJIDO SUBMUCOSO IMPLANTABLE, DESARROLLADO PARA FABRICARSE SEGUN UNA LONGITUD, UN ESPESOR DE PARED O UN DIAMETRO DESEADOS. LA CONSTRUCCION PRODUCIDA SEGUN EL PROCEDIMIENTO DE LA PRESENTE INVENCION PUEDE UTILIZARSE COMO INJERTO PARA ARTERIAS, VENA, URETERES, URETRAS O ANASTOMOSIS O PARA CUALQUIER APLICACION QUE REQUIERA UN TUBO COMPATIBLE CON LOS TEJIDOS CON ADAPTACION DE FORMA. LA FABRICACION DE LA PROTESIS DE TEJIDO SUBMUCOSO IMPLICA GENERALMENTE EL ENROLLAMIENTO DE UNA PRIMERA HOJA DE TEJIDO SUBMUCOSO (60) Y DE UNA SEGUNDA HOJA DE TEJIDO SUBMUCOSO (70) ALREDEDOR DE UN MANDRIL (50) EN EL QUE EL PRIMER EXTREMO (74) Y EL SEGUNDO EXTREMO OPUESTO (76) DE LA SEGUNDA HOJA DE TEJIDO SUBMUCOSO (70) ESTAN SUTURADOS POR SUTURAS (78). EL TEJIDO SUBMUCOSO ESTA COMPRIMIDO Y SECADO EN EL MANDRIL (50) ANTES DE LA RETIRADA DE LA CONSTRUCCION, POR TRACCION EN EL PRIMER EXTREMO (54) Y EN EL SEGUNDO EXTREMO (56) DE UNA BANDA PERMEABLE AL AGUA, PARA DESENROLLAR LA BANDA Y ASI DEJAR LIBRE LA CONSTRUCCION PARA UNA POSIBLE UTILIZACION.

Description

Construcciones tubulares de injerto submucosal.

Campo técnico

Esta patente se refiere a las construcciones de injerto tisular, biológicas, implantables, adecuadas para diversas aplicaciones médicas y al proceso para la producción de tales construcciones de injerto. Más específicamente, el tejido submucosal es utilizado para formar construcciones multilaminares tubulares, de diámetro variante. Las construcciones de injerto tisular tienen aplicaciones como injertos arteriales y venosos, reemplazos del uréter y de la uretra, y como diversos conductos y derivaciones.

Antecedentes de la invención

Los investigadores en las técnicas quirúrgicas han estado trabajando durante muchos años para desarrollar nuevas técnicas y materiales para el uso como injertos, para reemplazar o reparar las estructuras tisulares dañadas o enfermas, particularmente huesos y tejidos conectivos, tales como ligamentos y tendones, y para acelerar el sanado de las fracturas. Es muy común hoy en día, por ejemplo, para un cirujano ortopédico el cosechar un tendón patelar de origen autógeno o alógeno para el uso como un reemplazo para un ligamento cruciforme roto. Los métodos quirúrgicos para tales técnicas son bien conocidos. Además, se ha vuelto común para los cirujanos el utilizar prótesis implantables, formadas a partir de materiales plásticos, metálicos y/o de cerámica para la reconstrucción o el reemplazo de estructuras fisiológicas. Todavía, a pesar de su uso difundido, las prótesis quirúrgicamente implantadas, actualmente disponibles, presentan muchos riesgos para el paciente. Por lo tanto, los cirujanos están en necesidad de un material de injerto de alta resistencia a la tracción, no inmunogénico que pueda ser utilizado para la reparación quirúrgica de huesos, tendones, ligamentos y otras estructuras tisulares funcionales.

Más recientemente los investigadores han estado trabajando para desarrollar tejidos biológicos para el uso como implantes y para el uso en la reparación de tejidos dañados o enfermos, ya que los materiales plásticos o poliméricos tienen inconvenientes en estas aplicaciones médicas. Mientras que los plásticos y polímeros pueden tener algunas propiedades mecánicas deseables (por ejemplo, resistencia a la tracción) se ha encontrado que los plásticos se llegan a infectar y en aplicaciones vasculares los plásticos han sido reportados como inductores de trombogénesis.

Las prótesis tubulares elaboradas a partir de tejidos naturales han sido ampliamente utilizadas en años recientes en la reparación quirúrgica y reemplazo de vasos sanguíneos enfermos o dañados en pacientes humanos. Las prótesis tisulares naturales caen dentro de tres categorías generales: prótesis autógenas, homólogas y heterólogas. Las prótesis tisulares de material autógeno son preparadas a partir de tejidos tomados del cuerpo mismo del paciente (por ejemplo, injertos de la vena safena). El uso de tales prótesis elimina la posibilidad de rechazo de la prótesis implantada, pero requiere una intervención quirúrgica más extensa y consume más tiempo, con los riesgos inherentes para el paciente. Las prótesis de tejido natural homólogas son preparadas a partir de tejido tomado de otro ser humano, mientras que las prótesis de tejido natural heterólogo son preparadas a partir de tejido proveniente de una especie diferente. El uso de los vasos del cordón umbilical, homólogos y heterólogos, por ejemplo, prótesis vasculares y uretrales se describen en las patentes norteamericanas núms. 3.894.530; 3.974.526; y 3.988.782.

Además, las prótesis vasculares autógenas preparadas a partir de hojas de tejido pericárdico han sido descritas por Yoshio Sako, "Prevention of Dilation in Autogenous Venous and Pericardial Grafts in the Thoracic Aorta", Surgery, 30, págs. 148-160 (1951) y por Robert G. Allen y Francis H. Cole, Jr., "Modified Blalock Shunts Utilizing Pericardial Tube Grafts" Jour. Pediatr. Surg., 12 (3), págs. 287-294 (1977). Las prótesis vasculares heterólogas preparadas a partir de hojas de tejido pericárdico porcino han sido descritas por Ornvold K. y colaboradores, "Structural Changes of Stabilized Porcine Pericardium after Experimental and Clinical Implantation", en Proc. Eur. Soc. for Artif. Organs, Vol. VI, Ginebra, Suiza (1979).

Las características necesarias de una prótesis vascular tubular son la compatibilidad biológica, la resistencia adecuada, la resistencia a la infección, la resistencia a la degradación biológica, la no trombogenicidad y la falta de formación de aneurismas. Como se utiliza en esta solicitud, el término compatibilidad biológica significa que la prótesis es no tóxica en el ambiente in vivo de su uso pretendido, y no es rechazada por el sistema fisiológico del paciente (por ejemplo, es no antigénica). Además, es deseable que la prótesis sea capaz de producirse a un costo económico en una amplia variedad de longitudes, diámetros y formas (por ejemplo, recta, curvada, bifurcada), que sea fácilmente anastomosada al cuerpo del paciente y a otras prótesis tubulares del mismo tipo o de tipo diferente, y que muestre estabilidad dimensional en el uso.

El documento GB-A-1195992 se refiere específicamente a un injerto vascular tubular, de capas múltiples, de submucosa.

Como se describe en la patente norteamericana nº 4.902.508, las construcciones de injerto vascular que comprenden tejido submucosal intestinal han sido previamente descritas y utilizadas para reemplazar tejidos vasculares dañados o enfermos. Las construcciones de injerto vascular fueron preparadas mediante la inserción de una varilla de vidrio del diámetro apropiado dentro del lumen o luz del tejido submucosal y suturando manualmente a lo largo de la unión del tejido submucosal. Los injertos vasculares de tejido submucosal son asépticamente fabricados durante la cirugía y típicamente le toma a un cirujano aproximadamente media hora el prepararlos. Por lo tanto, para evitar el gasto de tiempo en la preparación de las construcciones de injerto durante la cirugía, son deseables injertos preesterilizados, prefabricados, de diferentes diámetros.

El documento US-A-4502159 se refiere específicamente a un injerto tubular elaborado con tejido de pericardio preferentemente de origen bovino, con bordes longitudinales suturados uno al otro para formar el injerto tubular.

La preparación de una prótesis tubular de la longitud y de la forma correctas, incrementa la facilidad de implantación y mejora la funcionalidad del implante. Por ejemplo, una prótesis tubular que es demasiado larga para la aplicación pretendida puede retorcerse después de la implantación, mientras que la implantación de una prótesis que es demasiado corta pone tensión excesiva sobre las anastomosis en sus extremos, lo cual da como resultado trauma a las anastomosis. De este modo, podría ser altamente deseable proporcionar un arreglo de prótesis tubular que varíe en tamaño y que pueda ser cortada transversalmente a una longitud deseada en cualquier punto entre sus extremos, sin dañar sustancialmente de otro modo la prótesis.

La presente invención está dirigida a una prótesis tubular que comprende tejido submucosal y los métodos para la preparación de tal prótesis. El tejido submucosal, preparado de acuerdo con la presente invención, ha sido previamente descrito como un material de injerto no trombogénico, biocompatible, que mejora la reparación del tejido huésped dañado o enfermo. Numerosos estudios han mostrado que las submucosas de los vertebrados de sangre caliente son capaces de inducir la proliferación de tejido del huésped, la remodelación y la regeneración de las estructuras tisulares después del implante en un número de microambientes in vivo, incluyendo el tracto urinario inferior, paredes corporales, tejidos de los tendones, ligamentos, huesos, tejidos cardiovasculares y del sistema nervioso central. Después del implante, se observa la infiltración celular y una neovascularización rápida y el material submucosal es remodelado dentro del tejido de reemplazo del huésped con las propiedades estructurales y funcionales específicas del sitio.

El tejido submucosal puede ser obtenido a partir de diversas fuentes tisulares, cosechado de animales criados para la producción de carne, incluyendo, por ejemplo, cerdos, ganado y ovejas u otros vertebrados de sangre caliente. Más particularmente, la submucosa es aislada de una variedad de fuentes tisulares incluyendo los tractos alimentario, respiratorio, intestinal, urinario o genital de vertebrados de sangre caliente. En general, la submucosa es preparada a partir de estas fuentes tisulares mediante la deslaminación de la submucosa a partir de las capas del músculo liso y de capas mucosales. La preparación de submucosa intestinal se describe y se reivindica en la patente norteamericana nº 4.902.508. La submucosa de la vejiga urinaria y su preparación se describe en la patente norteamericana nº 5.554.389, la descripción de la cual se incorpora expresamente por referencia en la presente. La submucosa estomacal ha sido también obtenida y caracterizada utilizando técnicas de procesamiento tisular similares. Esto se describe en el documento de patente US-A-6099567 titulada INJERTO DE TEJIDO DERIVADO DE LA SUBMUCOSA ESTOMACAL, presentada el 10 de Diciembre de 1996. En resumen, la submucosa estomacal es preparada a partir de un segmento de estómago en un procedimiento similar a la preparación de submucosa intestinal. Un segmento de tejido estomacal es primeramente sujeto a abrasión utilizando un movimiento de frotación longitudinal para retirar las capas exteriores (particularmente las capas del músculo liso) y las porciones luminales de las capas de la mucosa de la túnica. El tejido submucosal resultante tiene un espesor de aproximadamente 100 hasta aproximadamente 200 micrómetros, y consiste principalmente (más de 98%) de material de matriz extracelular, que se tiñe eosinofílicamente (tinción H&E) acelular.

Breve descripción de la invención

De acuerdo con la presente invención, se prepara una prótesis tubular implantable que comprende tejido submucosal, en la forma de un tubo. La construcción tubular comprende una primera hoja de tejido submucosal enrollada en la forma de un tubo de capas múltiples del tejido submucosal, y una segunda hoja de tejido submucosal que es envuelta alrededor del tubo de tejido submucosal. La segunda hoja de tejido submucosal es superpuesta sobre el tubo de tejido submucosal, de modo que un primer borde está en contacto con el tejido submucosal, y el segundo borde opuesto es ya sea suturado al primer borde o se extiende sobre el primer borde y es suturado a la segunda hoja del tejido submucosal. Las construcciones de injerto tubulares de capas múltiples de la presente invención, son formadas para tener uniones herméticas al fluido, y pueden ser conformadas para acoplarse al tejido endógeno que va a ser reemplazado por la construcción de injerto.

Además, de acuerdo a la presente invención, se proporciona un proceso para producir una construcción de injerto de tejido implantable formada en la forma de un tubo en la forma que tiene una unión que se extiende longitudinalmente a lo largo de la longitud del injerto, en donde la unión ha sido sellada para resistir el movimiento de los fluidos desde el lumen o luz a través de la unión hacia el exterior del tubo. Un método para la formación de las construcciones tubulares submucosales de la presente invención comprende los pasos de:

A. el superponer una hoja de tejido submucosal alrededor de la circunferencia de un mandril para formar un tubo de tejido submucosal que tiene una región traslapada de capas múltiples;

B. la fijación de las capas tisulares submucosales en la región traslapada, una a la otra;

C. el traslape de una segunda hoja de tejido submucosal sobre el tubo del tejido submucosal para formar un segundo tubo de tejido submucosal, en donde la unión del segundo tubo del tejido submucosal es sellada por suturas; y

D. la compresión de las capas superpuestas de tejido submucosal bajo condiciones de deshidratación.

La presente invención permite la construcción de construcciones de injerto tubular de capas múltiples a partir de hojas de tejido submucosal, en donde las paredes de la prótesis tubular formada no contienen perforaciones que proporcionen una vía de paso directa desde el lumen o luz del tubo hacia la superficie exterior. La prótesis tubular de capas múltiples tiene suficiente resistencia y durabilidad para ser utilizada en aplicaciones vasculares sin fuga o falla de la prótesis tubular.

Breve descripción de los dibujos

La invención, será además descrita en relación con las figuras de dibujos anexas que muestran las realizaciones preferidas de la invención, incluyendo las partes específicas y los arreglos de las partes. Se pretende que los dibujos incluidos como una parte de esta descripción sean ilustrativos de las realizaciones preferidas de la presente invención, y no deben ser considerados de ningún modo como una limitación del alcance de la invención.

La Figura 1 es una vista en perspectiva de una cámara de compresión con un mandril cubierto con tejido submucosal, insertado dentro de la luz o lumen de la cámara de compresión.

La Figura 2 es una vista seccional de la cámara de compresión de la Figura 1.

La Figura 3 es una vista en perspectiva de una tira simple de tejido submucosal, helicoidalmente enrollada alrededor de un mandril.

La Figura 4 es una vista seccional del mandril cubierto con submucosa, en donde un extremo del mandril ha sido sellado y se atrae vacío sobre el extremo abierto.

La Figura 5a es una vista en perspectiva de una tira simple de material permeable al agua, envuelto alrededor de un mandril de orificios múltiples.

La Figura 5b es una vista en perspectiva de un mandril de orificios múltiples que ha sido envuelto con una tira simple de material permeable al agua, y una primera hoja de tejido submucosal.

La Figura 5c es una vista en perspectiva de un mandril de orificios múltiples que ha sido envuelto con una tira simple de material permeable al agua, una primera hoja de tejido submucosal y una segunda hoja de tejido submucosal.

Descripción detallada de las realizaciones preferidas

En muchas aplicaciones médicas es deseable una prótesis tubular de tejido biológico, implantable. La presente invención proporciona una construcción de injerto de tejido biológico, de capas múltiples, de diámetro arbitrario, de longitud arbitraria. El producto puede ser manipulado para adecuarse a diversas aplicaciones médicas donde se desea una construcción tubular o conducto. Los ejemplos de posibles aplicaciones son injertos arteriales y venosos, reemplazos de uréter y uretra, y diversos conductos y derivaciones. El proceso de fabricación de las construcciones tubulares de la presente invención, involucra la preparación de una hoja de tejido submucosal de acuerdo con la patente norteamericana nº 4.902.508, y la superposición del tejido alrededor de un mandril del diámetro apropiado para formar un tubo de tejido submucosal. La hoja de tejido submucosal puede ser envuelta alrededor del mandril múltiples veces, para formar un tubo de capas múltiples del tejido submucosal. Una segunda hoja de tejido submucosal es luego envuelta alrededor de la circunferencia del tubo formado del tejido submucosal, y el extremo de la segunda hoja del tejido submucosal es suturado a la construcción de injerto para formar un sello hermético al agua que se expande longitudinalmente a lo largo de la longitud del tubo. El tejido submucosal es luego comprimido bajo condiciones de deshidratación, y opcionalmente calentado, para producir la prótesis tubular unitaria de la presente invención.

El tejido submucosal adecuado para el uso en la formación de las presentes construcciones de injerto, comprende proteínas de matriz extracelular naturalmente asociadas, glucoproteínas y otros factores. Más particularmente, los tejidos submucosales para el uso de acuerdo a la presente invención incluyen submucosa intestinal, submucosa estomacal, submucosa de la vejiga urinaria, y submucosa uterina. El tejido submucosal intestinal es un material preferido, y más particularmente la submucosa del intestino delgado.

El tejido submucosal intestinal, adecuado, comprende típicamente la submucosa de la túnica, deslaminada a partir de la túnica muscularis y al menos la porción luminal de la túnica mucosa. En una realización de la presente invención, el tejido submucosal intestinal comprende la túnica submucosa y porciones basilares de la túnica mucosa, incluyendo la lámina muscularis mucosa y el estrato compacto, cuyas capas se sabe que varían en espesor y en definición dependiendo de la especie vertebrada fuente.

La preparación del tejido submucosal intestinal para el uso de acuerdo con esta invención se describe en la patente norteamericana nº 4.902.508. Un segmento de intestino de vertebrado, preferentemente cosechado de una especie porcina, ovina o bovina, pero no excluyendo otras especies, se sujeta a abrasión utilizando un movimiento de frotación longitudinal para retirar las capas exteriores, que comprenden tejidos del músculo liso, y la capa más interna, por ejemplo, la porción de la luz o luminal de la túnica mucosa. El tejido submucosal es enjuagado con solución salina y opcionalmente se esteriliza.

Conforme un tejido submucosal para injerto tisular sufre remodelación e induce el desarrollo de los tejidos endógenos después del implante dentro de un huésped. Éste se ha utilizado exitosamente en injertos vasculares, en vejiga urinaria y en reparación de hernias, en el reemplazo y reparación de tendones y ligamentos, e injertos dérmicos. Cuando se utilizan en tales aplicaciones, las construcciones de injerto parecen no solamente servir como una matriz para el recrecimiento de los tejidos reemplazados por las construcciones de injerto, sino también promueven o inducen tal recrecimiento de tejido endógeno. Los eventos comunes a este proceso de remodelación incluyen: la neovascularización muy difundida y muy rápida, la proliferación de células mesenquimales de granulación, la biodegradación/resorción del material tisular submucosal intestinal, implantado, y la falta de rechazo por el sistema inmune.

Las construcciones de injerto de tejido submucosal tubular de la presente invención pueden ser esterilizadas utilizando técnicas esterilización convencionales, incluyendo curtido con glutaraldehído, curtido con formaldehído en pH ácido, tratamiento con óxido de propileno u óxido de etileno, esterilización con plasma gaseoso, radiación gamma, radiación por haz de electrones, esterilización con ácido peracético. Las técnicas de esterilización que no afectan de manera adversa la resistencia mecánica, la estructura y las propiedades biotrópicas del tejido submucosal, son preferidas. Por ejemplo, la radiación gamma fuerte puede provocar pérdida de la resistencia de las hojas de tejido submucosal. Las técnicas de esterilización preferidas incluyen la exposición del injerto a ácido peracético, radiación gamma de 1-4 megarads (más preferentemente 1-2,5 megarads de radiación gamma), tratamiento con óxido de etileno o esterilización con plasma gaseoso; la esterilización con ácido peracético es el método de esterilización más preferido. Típicamente, el tejido submucosal se sujeta a dos o más procesos de esterilización. Después de que el tejido submucosal se esteriliza, por ejemplo mediante tratamiento químico, el tejido puede ser envuelto en un plástico o envoltura de lámina y esterilizado nuevamente utilizando técnicas de esterilización por haz de electrones o radiación gamma.

El tejido submucosal puede ser almacenado en un estado hidratado o deshidratado. El tejido submucosal liofilizado o secado al aire puede ser rehidratado y utilizado de acuerdo a la presente invención, sin pérdida significativa de sus propiedades biotrópicas y mecánicas.

Las hojas de tejido submucosal pueden ser acondicionadas, como se describe en la patente norteamericana nº 5.275.826 para alterar las propiedades viscoelásticas del tejido submucosal. De acuerdo con una realización, las submucosas deslaminadas de la túnica muscular y la porción luminal de la túnica mucosa es acondicionada para tener un estiramiento de no más del 20%. El tejido submucosal es acondicionado mediante estiramiento, tratamiento químico, tratamiento enzimático o exposición del tejido a otros factores ambientales. En una realización, las tiras de tejido submucosal intestinal son acondicionadas mediante el estiramiento en una dirección longitudinal o lateral, de modo que las tiras del tejido submucosal intestinal tienen un estiramiento de no más del 20%.

En una realización, el tejido submucosal es acondicionado mediante el estiramiento del material de injerto longitudinalmente a una longitud más larga que la longitud del tejido submucosal a partir de la cual se formó la construcción de injerto. Un método de acondicionamiento del tejido mediante estiramiento involucra la aplicación de una carga dada a la submucosa por tres a cinco ciclos. Cada ciclo consiste de la aplicación de una carga al tejido de injerto durante cinco segundos, seguido por una fase de relajación de diez segundos. De tres a cinco ciclos producen un material de injerto acondicionado por estiramiento, el cual reduce la deformación. El material de injerto no regresa inmediatamente a su tamaño original; éste permanece en una dimensión "estirada". Opcionalmente, el material de injerto puede ser preacondicionado mediante el estiramiento de éste en la dimensión lateral.

En una realización, el tejido submucosal es estirado utilizando el 50% de la carga última predicha. La "carga última" es la carga máxima que puede ser aplicada al tejido submucosal sin dar como resultado falla del tejido (por ejemplo, el punto de rompimiento del tejido). La carga última puede ser predicha para una tira dada de tejido submucosal, con base en la fuente y en el espesor del material. En consecuencia, un método de acondicionamiento de tejido mediante estiramiento involucra la aplicación de 50% de la carga última predicha a la submucosa, por tres a diez ciclos. Cada ciclo consiste de la aplicación de una carga al material de injerto durante cinco segundos, seguido por una fase de relajación de diez segundos. El tejido submucosal acondicionado, resultante, tiene un estiramiento o deformación de menos de 30%, más típicamente una deformación de aproximadamente 20% hasta aproximadamente 28%. En una realización preferida, el tejido submucosal acondicionado tiene una deformación o estiramiento de no más de 20%. El término estiramiento o deformación como se utiliza en la presente, se refiere a la cantidad máxima de alargamiento del tejido antes de la falla o rompimiento del tejido, cuando el tejido es estirado bajo una carga aplicada. Éste es expresado como un porcentaje de la longitud del tejido antes de la carga. Las tiras submucosales acondicionadas pueden ser utilizadas para formar la construcción tubular o alternativamente la construcción tubular puede ser acondicionada después de su formación.

Las construcciones de injerto tubulares de la presente invención son formadas como una construcción de laminados múltiples, en donde una primera lámina u hoja de tejido submucosal es formada en la forma de un tubo de tejido submucosal, y una segunda hoja se superpone sobre el tubo del tejido submucosal. Las dimensiones de las hojas individuales del tejido submucosal utilizado no son críticas, y el término "hoja de tejido submucosal" es definido en la presente para incluir el tejido submucosal proveniente de una o más fuentes u órganos de vertebrados en una amplia variedad de tamaños y formas. Después de que la segunda hoja de tejido submucosal ha sido colocada en capas sobre el mandril, se aplica presión a las porciones traslapadas, para comprimir la submucosa contra el mandril. En las realizaciones preferidas, las superficies del mandril son permeables al agua. El término "superficie permeable al agua" como se utiliza en la presente, incluye las superficies que son absorbentes del agua, microporosas o macroporosas. Los materiales macroporosos incluyen placas perforadas o mallas elaboradas de plástico, metal, cerámica o madera.

En una realización preferida, las capas múltiples del tejido submucosal son comprimidas bajo condiciones de deshidratación. El término "condiciones de deshidratación" se define para incluir cualquier condición mecánica o ambiental que promueva o induzca la remoción de agua del tejido submucosal. Para promover la deshidratación del tejido submucosal comprimido, al menos una de las dos superficies que comprimen el tejido es permeable al agua. La deshidratación del tejido puede opcionalmente ser mejorada o aumentada por la aplicación de material secante, calentando el tejido o soplando aire a través del exterior de las superficies de compresión.

El tejido submucosal tiene típicamente una superficie abluminal y una luminal. La superficie luminal es la superficie submucosal de cara al lumen o luz del órgano fuente y típicamente adyacente a una capa de mucosa interna in vivo, mientras que la superficie abluminal es la superficie submucosal alejada del lumen o luz del órgano fuente, y típicamente en contacto con el tejido del músculo liso in vivo. En una realización, una o más hojas de tejido submucosal se envuelven sobre el mandril con la superficie luminal del tejido submucosal en contacto con la superficie del mandril. De este modo la superficie luminal de la hoja de tejido submucosal está de cara al lumen del tubo formado de tejido submucosal. No obstante, el tubo de tejido submucosal puede también ser formado a partir de una o más hojas de tejido submucosal con la superficie abluminal de cara al lumen o luz de la construcción de injerto tubular formada.

De acuerdo con una realización, una prótesis tubular se fabrica comprendiendo una primera hoja de tejido submucosal formada en la forma de un tubo de tejido submucosal, y una segunda hoja de tejido submucosal envuelta circunferencialmente alrededor y en contacto adherente con el tubo de tejido submucosal, en donde la unión o costura formada por la pieza extrema de la segunda hoja del tejido submucosal es suturada para formar un sello hermético al agua. El tubo de tejido submucosal comprende la primera hoja de tejido submucosal, que tiene un primer borde y un segundo borde opuesto, formado en la forma de un tubo en donde el segundo borde opuesto de la primera hoja se extiende sobre el primer borde de la primera hoja, para definir una región traslapada de capas múltiples de tejido submucosal. Como se utiliza en la presente, el término "región traslapada" se refiere a la porción de tubo de capas múltiples definida por un ángulo de traslape (\theta) que se extiende entre el primero y segundo bordes de la primera hoja de tejido submucosal formada como un tubo (ver Figura 5b). Las capas de tejido submucosal en la región traslapada se fijan una a la otra utilizando técnicas convencionales conocidas por los entendidos en la técnica. Alternativamente, las capas de tejido submucosal pueden ser fijadas una a la otra mediante el tratamiento del tejido con glutaraldehído y "prensando a vacío" las capas tisulares traslapadas, como se describe más adelante.

En una realización, las capas múltiples de tejido submucosal en la región traslapada se fijan una a la otra mediante tratamiento con un agente de reticulación, por ejemplo un aldehído tal como formaldehído o más preferentemente glutaraldehído. En una realización, la unión formada en el tubo de tejido submucosal puede ser "soldada por puntos" para asegurar que la pieza extrema no se suelte. De acuerdo con esta realización, una varita con punta de algodón Q, humedecida por \chi % de glutaraldehído (u otro agente de reticulación o adhesivo), es frotada a lo largo de la región traslapada que forma la unión o sello. El valor para \chi es aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 1,0%, más preferentemente aproximadamente 0,5%, pero existe una relación entre la anchura de la unión, la concentración de glutaraldehído y el número de vueltas que determina la presión de estallido. En una realización, la construcción de injerto completa puede ser sumergida en una solución diluida de glutaraldehído (que comprende aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 1,0% de glutaraldehído), y luego comprimida bajo condiciones de deshidratación para fijar las capas múltiples del tubo de tejido submucosal una a la otra. Además, las capas múltiples de tejido submucosal en la región traslapada pueden ser suturadas una a la otra, y en una realización las capas de la región traslapada son fijadas con suturas en ausencia de tratamiento con un agente de reticulación.

En una realización preferida, el tubo de tejido submucosal formado por la primera hoja de tejido submucosal, es formado tal que el primero y segundo bordes opuestos de la primera hoja de tejido submucosal están sustancialmente paralelos uno al otro, como se muestra en la Figura 1 y en la Figura 5b. En esta realización, la hoja de tejido submucosal es enrollada en la forma de un tubo que tiene capas múltiples. Típicamente, el tubo de tejido submucosal comprende dos capas de tejido submucosal y la región traslapada múltiple comprende tres capas de tejido submucosal.

Las construcciones de injerto de la presente invención comprenden además una segunda hoja de tejido submucosal en donde la segunda hoja está en contacto adherente con la superficie exterior del tubo de tejido submucosal. En una realización, el primero y segundo bordes opuestos de la segunda hoja de tejido submucosal son suturadas conjuntamente a lo largo de la longitud del tubo de tejido submucosal, sin perforar el tubo subyacente de tejido submucosal. En una realización alternativa, el segundo borde opuesto de la segunda hoja se extiende sobre el primer borde de la segunda hoja, y es suturado a la segunda hoja de tejido submucosal sin perforar el tubo subyacente de tejido submucosal.

En las realizaciones preferidas, la región traslapada del tubo de tejido submucosal está desplazada de las suturas formadas en la segunda hoja de tejido submucosal (por ejemplo la región traslapada no hace contacto con la región suturada de la segunda hoja). En una realización, las suturas formadas en la segunda hoja de tejido submucosal están situadas a 90-180º a lo largo de la circunferencia del tubo de tejido submucosal en relación a la región traslapada, y en una realización las suturas están localizadas a 180º a lo largo de la circunferencia del tubo, de tejido submucosal, en relación a la región traslapada (ver Figura 5c).

De acuerdo con una realización, la prótesis tubular, comprende una primera hoja de tejido submucosal, que tiene primero y segundo bordes que están sustancialmente paralelos uno al otro, enrollados en la forma de un tubo de capas múltiples que tiene una región traslapada en donde el primero y segundo bordes permanecen sustancialmente paralelos uno al otro en el tubo formado, y las capas de la región traslapada se fijan una a la otra con suturas, o mediante la exposición a un agente de reticulación. La construcción tubular comprende además una segunda hoja de tejido submucosal adherida a la superficie exterior del tubo formado de tejido submucosal, en donde la segunda hoja, que tiene primero y segundo bordes que están sustancialmente paralelos uno al otro, es envuelta circunferencialmente alrededor del tubo de tejido submucosal y el primero y segundo bordes son fijados uno al otro con suturas.

De acuerdo con una realización, la prótesis tubular de la presente invención es formada mediante los siguientes pasos. Se selecciona un mandril que tiene un diámetro que se ajusta al diámetro preferido de la construcción final. El mandril es típicamente de forma cilíndrica y en las realizaciones preferidas comprende un tubo hueco que es permeable al agua. Una primera hoja de tejido submucosal, que tiene un primer borde y un segundo borde opuestos, es luego superpuesta sobre el mandril para formar un tubo de tejido submucosal, en donde el segundo borde opuesto de la primera hoja de tejido submucosal se extiende sobre el primer borde la primera hoja de tejido submucosal para definir una región traslapada de capas múltiples de tejido submucosal. Las capas de tejido submucosal en la región traslapada son luego fijadas una a la otra para formar una unión que se extiende longitudinalmente a lo largo de la longitud del tubo formado. Una segunda hoja de tejido submucosal, que tiene un primer borde y un segundo borde opuesto es luego superpuesta sobre el tubo de tejido submucosal, y el segundo borde opuesto de la segunda hoja de tejido submucosal es suturado a la segunda hoja superpuesta de tejido submucosal, a lo largo de la longitud del tubo de tejido submucosal, sin perforar el tubo de tejido submucosal. En una realización, el primero y segundo bordes de la segunda hoja de tejido submucosal son suturados conjuntamente para formar un segundo tubo de capa simple que abarca el primer tubo de tejido submucosal. Las capas de tejido submucosal son luego comprimidas contra el mandril bajo condiciones de deshidratación.

La invención será además descrita con respecto a las realizaciones preferidas como se ilustra en las figuras de los dibujos. Con referencia a la Figura 1, se ilustra una realización preferida de un mandril 10 para envolver hojas de tejido biológico. El mandril 10 es un tubo metálico o de plástico hueco que comprende orificios 12 en la pared del tubo a lo largo de una porción de, o, alternativamente, a lo largo de la longitud completa del tubo metálico. El tamaño de los orificios en el mandril no es crítico, con la condición de que el mandril sea suficientemente poroso para permitir la deshidratación del tejido submucosal después de la compresión del tejido submucosal envuelto 14. En una realización preferida, el mandril es un tubo metálico, y más preferentemente, el tubo metálico está compuesto de aluminio. El tejido submucosal 14 es superpuesto sobre el mandril 10 para formar un tubo de capas múltiples de tejido submucosal. El mandril cubierto con el tejido submucosal es luego insertado dentro del espacio luminal de una cámara de compresión 20 que se utiliza en una realización para preparar las construcciones tubulares de la presente invención. La cámara de compresión 20 comprende la protección exterior 22, una vejiga 24 y la compuerta de presión 26. La vejiga 24 puede ser acoplada o adherida a la pared interna de la hoja exterior 22 mediante diversas técnicas, por ejemplo, con un adhesivo o unión en caliente. Como se muestra en la Figura 2, el mandril envuelto 10 es insertado dentro de la cámara de compresión 20 donde la membrana interna 18 de la vejiga 24 hace contacto y comprime el tejido submucosal 14 cuando un fluido es distribuido hacia la compuerta de presión 26 para inflar la vejiga 24 . La vejiga 24 es inflada a la presión deseada, y la presión es mantenida hasta que el tejido submucosal ha sido suficientemente deshidratado.

Opcionalmente, el proceso de compresión y secado puede ser aumentado con calentamiento a baja temperatura (por ejemplo, menor de aproximadamente 50ºC) de la construcción de injerto tisular. Además, se puede hacer pasar aire o un gas inerte (por ejemplo, nitrógeno) a través del lumen o luz del mandril, como un medio alternativo o conjunto para aumentar el proceso de secado. El aire/gas extraído a través del lumen puede ser calentado opcionalmente para acelerar adicionalmente el proceso de deshidratación. Los orificios 12 formados en las paredes del mandril 10 ayudan al proceso de secado de tejido submucosal 14, no obstante, esta estructura representa meramente una realización de un mandril, adecuado para el uso de acuerdo a la presente invención (ver Figura 1). El mandril puede también ser formado como un cilindro sólido o como un tubo que carece de orificios. En una realización, el mandril comprende un tubo hueco con orificios formados en las paredes del mandril, y la compresión del tejido submucosal es ayudada mediante la extracción de un vacío sobre el lumen del mandril.

Alternativamente, la compresión del tejido submucosal puede ser lograda mediante el enrollamiento continuo del mandril que contiene las hojas envueltas de tejido biológico, en contacto directo con otra superficie para proporcionar una fuerza de compresión directa. Además, en una realización preferida, como se muestra en la Figura 4, la aplicación de un vacío puede proporcionar la fuerza de compresión única para la compresión de las porciones traslapadas de las tiras múltiples de tejido submucosal (presión de vacío). En esta realización, un mandril 30, formado como un tubo hueco que tiene una pluralidad de orificios 32 formados en la pared del mandril 30, es cubierta con capas múltiples de tejido submucosal 34. El mandril 30 está provisto con un tapón 36 para sellar el primer extremo del mandril 30 y una compuerta terminal 40 para retirar aire del lumen del mandril. La compuerta terminal 40 está conectada a una fuente generadora de vacío y se extrae un vacío por encima del mandril 30, extrayendo de este modo el aire a través de las capas múltiples de tejido submucosal, al tiempo que se comprimen los tejidos uno contra el otro. Una capa no permeable puede ser envuelta alrededor de las capas múltiples de tejido submucosal (por ejemplo el mandril puede ser colocado dentro de una bolsa de plástico 44 que está sellada con una abrazadera 46 en la compuerta de vacío) para proporcionar una segunda superficie que coactúa con el mandril 30 para comprimir las capas múltiples de tejido submucosal 34 entre la segunda superficie y el mandril 30. Se aplica un vacío, en general en el intervalo de 474,5 a 2370 hPa (35,6 a 177,8 cm de Hg o 0,49-2,46 kg/cm^{2}) y más preferentemente el vacío aplicado es de aproximadamente 1726,5 hPa (129,5 cm de Hg o 1,76 kg/cm^{2}). Opcionalmente se puede colocar un manto de calentamiento sobre la parte superior del aparato para calentar el tejido submucosal durante la compresión del tejido. Después de la compresión del tejido submucosal por un periodo de tiempo suficiente, el tejido submucosal comprimido es removido del mandril como una construcción unitaria de tejido dócil.

Las tiras múltiples de tejido submucosal son típicamente comprimidas durante 12 a 48 horas a temperatura ambiente, aunque puede ser también aplicado calor. Por ejemplo se puede aplicar un manto de calentamiento al exterior de las superficies de compresión para elevar la temperatura del tejido comprimido hasta aproximadamente 40ºC a aproximadamente 50ºC. Las porciones traslapadas son usualmente comprimidas por una longitud de tiempo determinada por el grado de deshidratación del tejido. El uso de calor incrementa la velocidad de deshidratación y de este modo disminuye la cantidad de tiempo que se requiere para que las porciones traslapadas de tejido sean comprimidas. Típicamente, el tejido es comprimido durante un tiempo suficiente para producir un material rígido pero flexible. Suficiente deshidratación del tejido es también indicada por un incremento en la impedancia de la corriente eléctrica que fluye a través del tejido. Cuando la impedancia se ha incrementado en 100 a 200 ohms, el tejido está suficientemente deshidratado y la presión puede ser liberada.

En una realización preferida mostrada en la Figura 5a, el mandril 50 es primeramente envuelto con un material de listón poroso 52, removible, permeable al agua, antes de que las hojas de tejido submucosal sean superpuestas sobre el mandril 50. Preferentemente, el material de listón removible 52 comprende un material permeable al agua que es resistente al desgarre, incluyendo un material plástico poroso o de otro tipo que no se adhiere al tejido submucosal o al mandril. En una realización, el material de listón poroso 52 comprende cinta umbilical. Las capas de tejido submucosal son luego colocadas en capas directamente sobre el material de listón y secadas para formar una construcción tubular unitaria. Después del secado del tejido submucosal, el material de listón poroso 52 es desenvuelto del mandril 50 al jalar sobre el primer extremo 54 y el segundo extremo 56 del material 52 permeable al agua (ver Figura 5a). El retiro del listón de material permeable al agua 52 deja un espacio entre la construcción submucosal y el mandril 50, permitiendo el retiro de la construcción desde el mandril.

De acuerdo con una realización, como se muestra en la Figura 5a-Figura 5c, el método de formación de la construcción comprende la selección de un mandril hueco 50, permeable al agua, de diámetro apropiado, y el envolvimiento en espiral del mandril 50 con una tira de material de listón poroso 52, por ejemplo cinta umbilical. El mandril es preferentemente permeable al agua y en una realización está provisto con una pluralidad de orificios. Luego, se aplica el número deseado de vueltas de una primera hoja de tejido submucosal 60 en donde una "vuelta de tejido submucosal" está definida como una pieza de tejido submucosal envuelta 360º alrededor del mandril. Típicamente 1 ó 2 vueltas proporcionan una resistencia al estallido de aproximadamente 1333,2-2666,4 hPa (1000-2000 mmHg) después de la fabricación, como se describe más adelante. La primera hoja de tejido submucosal 60 es aplicada al mandril 50 mediante un movimiento rotatorio con el número deseado de capas (típicamente dos) y una región traslapada 62 (definida por un ángulo de traslape (\theta) que se extiende entre el primer borde 64 y el segundo borde opuesto 66 de la primera hoja de tejido submucosal 60) para formar un tubo de tejido submucosal que tiene una región traslapada 62 que se extiende longitudinalmente, que forma la unión del tubo (Figura 5b). El ángulo de traslape está en el intervalo típicamente de aproximadamente 20º hasta aproximadamente 90º, más típicamente de aproximadamente 20º hasta aproximadamente 40º, y en una realización el ángulo de traslape es de aproximadamente 30º. El tejido submucosal es envuelto sobre el mandril dejando el primer extremo 54 y el segundo del material permeable al agua 56, expuestos.

En una realización, la unión del tejido envuelto puede ser "soldada por puntos" para asegurar que el segundo borde opuesto 66 no se suelte. De acuerdo con esta realización, una varita con punta de algodón, humedecida con \chi % de glutaraldehído (u otro agente de reticulación o adhesivo), es frotado a lo largo de las superficies de la porción de tejido submucosal que forma la región traslapada 62. El valor para \chi es de aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 1,0%, más preferentemente de aproximadamente 0,5%, pero existe una relación entre la anchura de la región traslapada 62, la concentración de glutaraldehído y el número de vueltas que determina la presión de estallido. Las capas de tejido submucosal que forman la región traslapada pueden también ser reticuladas para asegurar que la pieza extrema no se suelte al sumergir el tubo completo del tejido submucosal en una solución de un agente de reticulación tal como glutaraldehído. El tubo tratado con glutaraldehído de tejido submucosal puede ser opcionalmente comprimido bajo condiciones de deshidratación antes de la superposición de la segunda hoja de tejido submucosal sobre el tubo de tejido submucosal (incluyendo el uso de prensado a vacío) para unir adicionalmente las capas de tejido submucosal una a la otra.

Alternativamente, la unión del tubo de tejido submucosal puede ser fijada mediante sutura de las capas múltiples del tubo de tejido submucosal a lo largo de la región traslapada. El uso de suturas niega la necesidad para reticular las capas de tejido submucosal de la región traslapada.

De acuerdo a la presente invención, la primera hoja de tejido submucosal puede ser envuelta sobre el mandril en una variedad de diferentes orientaciones. En una realización, las hojas tienen una anchura igual a la longitud del mandril tal que una hoja simple cubre completamente el mandril cuando es envuelta 360º alrededor del mandril (ver Figura 5b).

Pueden ser utilizadas otras técnicas de envolvimiento para formar la primera hoja de tejido submucosal en el tubo de tejido submucosal, con la condición de que no existan espacios libres entre las uniones de tejidos traslapados. En una realización, la hoja de tejido submucosal puede tener una anchura menor que la longitud deseada del tubo formado de tejido submucosal. En esta realización alternativa, una hoja angosta de tejido submucosal 80 es envuelta alrededor del mandril 82 varias veces, en donde la hoja es al menos parcialmente traslapada conforme ésta es superpuesta sobre el mandril, no dejando porción expuesta del mandril subyacente (ver Figura 3) . El mandril es permeable al agua y en una realización está provisto con una pluralidad de orificios 84. La cantidad de traslape en tales hojas parcialmente traslapadas de tejido submucosal, está en el intervalo entre 10 y 60% de la anchura de la hoja individual, y más preferentemente la porción traslapada es un traslape de 50%. En una realización, piezas múltiples de tejido submucosal pueden ser superpuestas sobre el mandril, con la condición de que al menos una porción de cada pieza de tejido submucosal se traslape a una porción de otra pieza de tejido submucosal envuelta sobre el mandril. En una realización adicional, una hoja angosta, larga de tejido submucosal puede ser espiralmente envuelta sobre el mandril con un traslape, seguido por un envolvimiento espiral en la dirección opuesta. Esto proporcionará 4 capas de tejido submucosal para soportar la presión interna. En estas realizaciones, las uniones formadas por las hojas traslapadas de tejido submucosal deben superponerse por 0,5 a 3 cm, y más preferentemente de 1 a 2 cm. En las realizaciones donde la primera hoja de tejido submucosal utilizada para formar el tubo de tejido submucosal tiene una anchura menor que la longitud del tubo deseado de tejido submucosal, las uniones del tubo serán fijadas preferentemente mediante la exposición a un agente de reticulación.

Después de la formación del tubo de tejido submucosal, se envuelve luego circunferencialmente una segunda hoja de tejido submucosal 70 alrededor de la superficie exterior del tubo formado de tejido submucosal 60. En una realización, la segunda hoja de tejido submucosal 70 es superpuesta sobre el tubo de tejido submucosal 60, envuelta alrededor del tubo una vez, y el primer borde 74 y el segundo borde opuesto 76 de la segunda hoja de tejido submucosal son suturados conjuntamente a lo largo de la longitud del tubo de tejido submucosal, con suturas 78 sin perforar el tubo de tejido submucosal 60 (ver Figura 5c). Alternativamente, la segunda hoja de tejido submucosal es superpuesta sobre el tubo de tejido submucosal, envuelta alrededor del tubo al menos una vez, en donde el segundo borde opuesto de la segunda hoja se extiende sobre el primer borde de tejido submucosal, y el segundo borde opuesto de la segunda hoja es suturado a lo largo de la longitud del tubo de tejido submucosal, sin perforar el tubo de tejido submucosal.

Además, cuando la segunda hoja de tejido submucosal es superpuesta sobre el tubo de tejido submucosal formado de la primera hoja de tejido submucosal, la segunda hoja puede ser superpuesta con su superficie abluminal o su superficie luminal en contacto con el tubo del tejido submucosal. Cada una de estas combinaciones de traslape de las hojas de tejido submucosal provenientes del mismo o de diferentes fuentes de vertebrado o de órgano, producirán una construcción de injerto tisular submucosal, de forma tubular unitaria después de la compresión de al menos las porciones traslapadas, bajo condiciones que permiten la deshidratación del tejido.

Después de que el mandril ha sido envuelto con la segunda hoja de tejido submucosal, el tejido submucosal es comprimido bajo condiciones de deshidratación. En una realización, el tejido es prensado a vacío, en donde un extremo del mandril es cerrado y el interior del mandril cubierto con tejido submucosal está conectado a una bomba de vacío. El vacío provoca que la presión atmosférica comprima las capas de tejido submucosal, y en aquellas realizaciones que utilizan un agente de reticulación, que reticule las capas de tejido submucosal una a la otra, el procedimiento de prensado a vacío provoca que el agente de reticulación penetre el espesor completo del sello o unión. El proceso de sellado/secado a vacío es completado en aproximadamente cuatro horas típicamente.

Después de que se completa el proceso de sellado/secado, el primero y segundo extremos (54 y 56, respectivamente), del material de listón poroso 52 permeable al agua (por ejemplo, cinta umbilical) son sujetados y jalados longitudinalmente. La cinta se desenrolla fácilmente bajo el tubo de tejido submucosal y el tubo de tejido submucosal se desliza luego fuera del mandril fácilmente. El resultado es un tubo sin unión que parece como un popote.

En una realización, un tubo de tejido submucosal puede ser preparado a partir de una o más hojas de tejido submucosal mediante el envolvimiento de una o más hojas de tejido submucosal alrededor de la circunferencia de un mandril, exponiendo el tejido submucosal envuelto a un agente de reticulación, y que comprende el tejido envuelto bajo condiciones de deshidratación. Las hojas de tejido pueden ser superpuestas sobre el mandril utilizando una variedad de técnicas de envolvimiento, con la condición de que no existan espacios libres entre las uniones o costuras de las hojas superpuestas de tejido submucosal. En una realización, una hoja simple de tejido submucosal, que tiene una primera porción de borde y una segunda porción de borde es superpuesta sobre un mandril, tal que la primera y segunda porciones de borde de la hoja de tejido submucosal son superpuestas para formar un tubo de tejido submucosal. En una realización, el segundo borde de la hoja de tejido submucosal es extendido más allá del primer borde de la hoja de tejido submucosal, en donde el primer borde está sustancialmente paralelo al segundo borde, para formar una construcción tubular heterolaminada como se muestra en la Figura 5b. Alternativamente, una hoja angosta simple de tejido submucosal puede ser espiralmente envuelta alrededor del mandril como se muestra en la Figura 3. Las porciones superpuestas de la hoja de tejido submucosal se ponen luego en contacto con un agente de reticulación. En una realización, la construcción de injerto completa es sumergida en una solución de reticulación. Un agente de reticulación preferido es el glutaraldehído, en una concentración en el intervalo de aproximadamente 0,1% hasta aproximadamente 1% de glutaraldehído. Después de que las capas superpuestas o traslapadas de tejido submucosal han sido tratadas con el agente de reticulación, las capas superpuestas son comprimidas bajo condiciones de deshidratación. En una realización, las capas superpuestas de tejido submucosal se prensan a vacío, en donde un extremo del mandril se cierra y el interior del tejido submucosal se pone en contacto a una bomba de vacío. El vacío provoca que la presión atmosférica comprima las capas de tejido submucosal y el procedimiento de prensado a vacío provoca que el agente de reticulación penetre el espesor completo de la construcción de injerto.

Como se indica por los datos del Ejemplo 4, los tubos de tejido submucosal que han sido tratados con una solución de glutaraldehído de al menos 1% de glutaraldehído, muestran durabilidad significativa bajo las pruebas de presión pulsátil. Además, un tubo de tejido submucosal formado mediante el envolvimiento de las hojas de tejido submucosal en un tubo heterolaminado y tratado con glutaraldehído y prensado a vacío, proporciona un tubo de tejido submucosal con una superficie luminal lisa.

Se sabe que el tratamiento de los biomateriales con glutaraldehído promueven la calcificación, la pobre incorporación del tejido del huésped y la falla mecánica final de las bioprótesis. Para minimizar los efectos dañinos de los tratamientos con glutaraldehído de los biomateriales, las construcciones tubulares de la presente invención son expuestas a soluciones relativamente diluidas de glutaraldehído de aproximadamente 0,1% a 1% de glutaraldehído. Las construcciones tubulares tratadas con glutaraldehído, formadas de acuerdo con la presente invención, mediante el tratamiento con una solución que comprende menos de 1% de glutaraldehído pueden ser utilizadas en diversas aplicaciones no vasculares tales como reemplazos de uréter y uretra y como diversos conductos y derivaciones. Además un tubo de tejido submucosal, que tiene las uniones del tubo de tejido submucosal selladas por un agente de reticulación, puede ser unido a una segunda hoja de tejido submucosal para soportar las uniones hechas por el glutaraldehído. En una realización, el tubo de tejido submucosal es rehidratado y la segunda hoja de tejido submucosal es envuelta alrededor del tubo de tejido submucosal y comprimida contra el tubo de tejido submucosal bajo condiciones deshidratación. En una realización, se prepara un tubo de tejido submucosal a partir de una hoja de tejido submucosal, y se pone en contacto con una solución de glutaraldehído (en donde la concentración de glutaraldehído es menor de 1%, y más preferentemente menor de 0,5%), se prensa a vacío y se envuelve posteriormente con una segunda hoja de tejido submucosal que se sutura a lo largo de su longitud completa, como se muestra en la Figura 5c. La segunda hoja de tejido submucosal en esta realización proporciona suficiente soporte para el tubo subyacente de tejido submucosal, tal que la construcción puede ser utilizada en diversas aplicaciones vasculares, incluyendo reemplazo arterial y venoso, a pesar de la baja concentración del agente de reticulación utilizado para sellar el tubo de tejido submucosal.

En una realización, el método de preparar una prótesis tubular submucosal comprende la superposición de una primera tira de material permeable al agua alrededor de la circunferencia de un mandril, y luego superponiendo una segunda tira de material permeable al agua sobre la parte superior de la primera tira de material permeable al agua. Una primera hoja de tejido submucosal, que tiene un primer borde y un segundo borde opuesto, es luego superpuesta sobre el material espiralmente envuelto para formar un tubo de tejido submucosal, en donde el segundo borde opuesto se extiende sobre el primer borde para definir una región traslapada de capas múltiples, de tejido submucosal. El tubo de tejido submucosal es luego comprimido contra la superficie del mandril bajo condiciones de deshidratación para formar una construcción en forma de tubo. La segunda tira de material permeable al agua es luego removida del mandril para liberar la construcción en forma de tubo del mandril. Las capas de tejido submucosal de la región traslapada del tubo liberado de tejido submucosal son luego suturadas conjuntamente, utilizando una sutura continua, para asegurar que el tubo no se desenredará. La construcción en forma de tubo es luego colocada nuevamente sobre el mandril mediante el deslizamiento del tubo sobre la primera tira de material permeable al agua que cubre el mandril. Una segunda hoja de tejido submucosal, que tiene un primer borde y un segundo borde opuesto, es luego superpuesta sobre el tubo de tejido submucosal. El primero y segundo bordes opuestos de la segunda hoja de tejido submucosal son suturados conjuntamente a lo largo de la longitud del tubo de tejido submucosal, sin perforar el tubo de tejido submucosal, y las capas múltiples de tejido submucosal son comprimidas conjuntamente bajo condiciones de deshidratación. La primera tira de material permeable al agua es luego removida del mandril para liberar la prótesis tubular del mandril. En las realizaciones preferidas, las suturas de la segunda hoja de tejido submucosal no se traslapan a las suturas formadas en la región traslapada del tubo de tejido submucosal.

Las construcciones de injerto de tejido multilaminadas, pueden ser formadas para tener propiedades sustancialmente isotrópicas. Estos injertos sustancialmente isotrópicos (pseudoisotrópicos) son preparados a partir de al menos dos hojas de tejido submucosal intestinal, deslaminado a partir de la túnica muscularis y de la porción luminal de la túnica mucosa de un vertebrado de sangre caliente. Cada una de las hojas de tejido submucosal intestinal están caracterizadas por tener un eje longitudinal que corresponde a la orientación predominante de las fibras de colágeno en las hojas de tejido submucosal. El método para la formación de las construcciones de injerto pseudoisotrópico, comprende la colocación de una primera hoja de tejido submucosal sobre el mandril, superponiendo la primera hoja con al menos una hoja adicional de tejido submucosal, de modo que los ejes longitudinales de cada hoja individual de tejido submucosal forman un ángulo de aproximadamente 90º con el eje longitudinal de la otra hoja de tejido submucosal que forma el injerto heterolaminado.

Los implantes o construcciones de tejido biológico producidos de acuerdo a la presente invención, superan el problema de fuga de fluido alrededor de los orificios de la sutura de los tejidos biológicos cosidos. La construcción de dos tubos concéntricos de tejido submucosal, en donde las uniones suturadas del tubo de los dos tubos están desplazadas una con relación a la otra seguido por la adherencia de los dos tubos de tejido submucosal conjuntamente, que asegura que los orificios de sutura no tendrán fuga en la prótesis formada. Además, las realizaciones que utilizan un tratamiento de reticulación para sellar la unión del primer tubo claramente, no tienen ninguna perforación formada en la pared del tubo, y de este modo no tendrán fugas. Los tubos de construcción producidos de acuerdo a la presente invención muestran un tubo esencialmente sin unión el cual no permitirá que se fugue el fluido ni requerirá precauciones extra asociadas con el eflujo del fluido. Esta propiedad es particularmente importante cuando la construcción va a ser utilizada como un injerto vascular, reemplazo de uréter o como una derivación. La construcción puede ser además manipulada (por ejemplo, cortada, plegada, suturada, etc.) para adecuarse a las diversas aplicaciones médicas donde se requiere material submucosal de la presente invención.

Ejemplo 1 Preparación de construcciones de injerto de tejido submucosal tubular

En una realización, el método para la formación de la construcción comprende la selección de un mandril hueco permeable al agua, de diámetro apropiado, y envolviendo en espiral el mandril con cinta umbilical. Luego se aplica el número deseado de vueltas de tejido submucosal en donde una "vuelta o envoltura de tejido submucosal" es definida como una pieza de tejido submucosal envuelta 360º alrededor del mandril. Típicamente una o dos vueltas proporcionan una resistencia al estallido de aproximadamente 1333,2 a 2666,4 hPa (1000 a 2000 mmHg) después de la fabricación, como se describe más adelante.

Una hoja de tejido submucosal es colocada sobre una superficie lisa, plana, con el lado mucosal hacia arriba. El mandril envuelto con cinta es colocado sobre éste con el eje longitudinal paralelo al eje longitudinal de tejido submucosal. Se utiliza luego una navaja de rasurar para cortar el tejido submucosal paralelo al eje del mandril, para formar un borde lineal para el tejido submucosal. El tejido submucosal es aplicado al mandril mediante un movimiento giratorio con el número deseado de capas (típicamente dos) y una región de traslape (definida por un ángulo de traslape (\theta) de aproximadamente 30 grados que se extiende entre los dos bordes laterales del tejido submucosal) forma un tubo de tejido submucosal que tiene una unión que se extiende longitudinalmente.

Después de que el mandril ha sido completamente envuelto, un extremo del mandril es cerrado y el interior del mandril cubierto con tejido submucosal es conectado a una bomba de vacío. El vacío provoca que la presión atmosférica comprima las capas de tejido submucosal y acelera la deshidratación del tejido submucosal. El proceso de sellado/secado a vacío se completa en aproximadamente cuatro horas típicamente.

Después del tratamiento de secado/sellado, los extremos de la cinta umbilical son sujetados y jalados longitudinalmente. La cinta se desenrolla fácilmente bajo el tubo de tejido submucosal la cual luego se desliza fuera del mandril, fácilmente. El resultado son tubos sin costura que parecen como un popote o pajilla.

Se pueden utilizar otros tipos de sellador, concentraciones y técnicas de envoltura. Por ejemplo, el enrollamiento en espiral de una tira angosta, larga, de tejido submucosal sobre el mandril con un traslape es una opción, seguido por un envolvimiento en espiral en la dirección opuesta, que es otra más. Esto proporcionará 4 capas de tejido submucosal para soportar la presión interna. Esta doble hélice podría ser combinada con las técnicas de envolvimiento mostradas en la Figura 3. De acuerdo con la presente invención, el tejido submucosal puede ser envuelto sobre el mandril en una variedad de diferentes orientaciones. Una limitación es que no deben existir espacios vacíos entre las uniones de tejidos traslapados. En las realizaciones preferidas, las unidades formadas por las tiras traslapadas de tejido submucosal deben traslaparse por 0,5 a 3 cm, y más preferentemente de 1 a 2 cm.

Ejemplo 2 Soldadura por puntos de las uniones de tejido submucosal

En una realización, la unión del tejido envuelto puede ser "soldada por puntos" para asegurar que la pieza extrema no se suelte. De acuerdo con una realización, la unión es soldada por puntos con un agente de reticulación tal como glutaraldehído. Una varita con punta de algodón tipo Q tip, humedecida con

\hbox{ \chi  %}

de glutaraldehído (u otro agente de reticulación o adhesivo), se frota a lo largo del traslape el cual es la unión. El valor para \chi es aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 1,0%, más preferentemente aproximadamente 0,5%, pero existe una relación entre la anchura de la unión, la concentración del glutaraldehído y el número de vueltas que determina la presión de estallido. Alternativamente, la unión puede ser soldada por puntos a través del uso de un láser.

En otra realización más, la unión del tubo submucosal puede ser térmicamente soldada por puntos para sellar adicionalmente la unión del tejido en un tubo unitario de submucosa. Existen cuatro factores que controlan la calidad de una soldadura por puntos térmica aplicada al tejido submucosal: 1) temperatura, 2) fuerza, 3) tiempo de aplicación de la fuerza, y 4) la forma de la herramienta de soldadura térmica. Una herramienta en punta realiza una soldadura con un orificio. Una punta plana no hace orificio y una punta con un radio puede hacer un orificio pequeño.

Utilizando una pequeña plancha de soldadura con una punta de temperatura calibrada, el tejido submucosal puede ser fundido en sitios discretos para formar un punto de "soldadura" entre dos piezas de tejido submucosal. Al colocar un especímen de tejido submucosal sobre una placa de vidrio (para evitar el encogimiento por calor) la punta caliente es aplicada al tejido submucosal para determinar la temperatura y el tiempo de aplicación, necesarios para fundir el tejido. Los estudios han conducido a tiras de 1 cm de ancho de tejido submucosal traslapadas por 1 cm para determinar el número de soldaduras térmicas por puntos, requeridas para sujetar dos piezas de tejido submucosal conjuntamente. Las soldaduras de cinco puntos en el área de traslape de 1 x 1 cm producen una soldadura que es más fuerte que la fuerza necesaria para romper una tira de 1 cm de ancho, de espesor simple. Una punta aguzada produce una pequeña soldadura con un orificio; por lo tanto, el reto es identificar los parámetros que produzcan la soldadura más fuerte con el orificio más pequeño.

Para optimizar las condiciones de soldadura por puntos, se condujeron los siguientes experimentos. Piezas de 1 cm de ancho y 10 cm de longitud de tejido submucosal, son utilizadas y se fabricarán 50 especímenes y se probarán con tres de las cuatro variables (temperatura, tiempo, fuerza y forma de la punta) que son mantenidas constantes y una varía. En estos primeros estudios, será utilizada la punta aguzada. Posteriormente los estudios serán repetidos con la punta de radio de 0,5 mm, luego con una punta plana de diámetro de 1 mm. El resultado será la fórmula para la soldadura más fuerte con el orificio más pequeño, que se mide con un microscopio. Se determinará también la resistencia al rompimiento de los especímenes seleccionados, utilizando la máquina MTS.

b) Modelo animal

El modelo de rata weanling será utilizado para investigar la respuesta del huésped a las tiras de tejido submucosal soldadas por puntos. La anestesia será inducida y mantenida con metafano administrado por medio de una máscara facial. El abdomen ventral será sujetado con pinzas y preparado para la cirugía aséptica. Se realizarán incisiones longitudinales en la piel en cada cuadrante abdominal. Luego las bolsas subcutáneas bilaterales serán creadas en el subcutis de cada rata mediante disección roma. Un espécimen de prueba de 1 cm^{2} será colocado subcutáneamente con cada bolsa y asegurado en posición con una sutura de polipropileno 5-0 a la fascia subyacente. Las incisiones en la piel serán cerradas con un patrón de sutura interrumpida simple con polipropileno 5-0. Serán utilizadas en el estudio veinticuatro ratas.

Después del tiempo transcurrido, se realizará la eutanasia con cloruro de potasio intracardíaco (a las 1, 2, 4 y 8 semanas después del implante).

c) Análisis morfológico

Las muestras removidas para la evaluación morfológica serán fijadas en fijador de Trump por 24 horas, luego colocadas en un amortiguador de fosfato. Los especímenes para microscopia de luz serán incrustados en parafina y seccionados en 2-3 \mum. Las secciones serán teñidas con hematoxilina y eosina (H&E) para la morfología completa y tinción de VonKossa para la evaluación de la calcificación.

Ejemplo 3 Fabricación y prueba de tubo de tejido submucosal

La meta de este estudio es producir injertos con un diámetro exterior de 5,0 mm. Un mandril hueco de orificios múltiples de 4 mm de diámetro es envuelto en espiral con cinta umbilical no traslapada. Luego se aplican dos y media vueltas de tejido submucosal para formar un tubo de tejido submucosal, y la porción traslapada se fija con glutaraldehído en un grupo y con suturas en otro grupo. Una segunda hoja de tejido submucosal es luego envuelta alrededor del tubo de tejido submucosal y los extremos opuestos de la segunda hoja de tejido submucosal son suturados conjuntamente. Después del envolvimiento, un extremo del mandril es conectado a una bomba de vacío y el otro extremo del mandril se cierra. El vacío resultante en el mandril provoca que la presión atmosférica presione las capas de tejido submucosal conjunta y firmemente, y extrae la humedad del tejido submucosal, lo cual requiere aproximadamente 24 horas.

Después del secado de las capas de tejido submucosal, los extremos de la cinta umbilical son sujetados y jalados longitudinalmente. La cinta se desenrolla uniformemente bajo el tubo de tejido submucosal, el cual se desliza luego fuera del mandril, fácilmente.

e) Prueba estática

Antes de la prueba del estallido, cada injerto de tejido submucosal será remojado en solución salina al 0,9% a 37ºC por 24 horas. El objetivo de este procedimiento es determinar la durabilidad de las uniones.

Para determinar la resistencia al estallido, un extremo del injerto de tejido submucosal tubular, es montado a un accesorio el cual será utilizado para aplicar presión de aire. El otro extremo del injerto de tejido submucosal tubular se cierra con una sutura y se aplica presión de aire cada vez mayor. Un registro continuo de la presión versus el tiempo permite la identificación exacta de la presión de estallido. El objetivo es una presión de estallido de 1333,2 hPa (1000 mmHg) o más. Una técnica de fabricación exitosa es una que produce un estallido (a cualquier presión), sin deslaminación. El injerto de tejido submucosal tubular que pasa esta prueba estática procederá hacia la prueba pulsátil.

f) Prueba pulsátil

El período crítico para un injerto de tejido submucosal tubular son las primeras pocas semanas después el implante, cuando éste está en la etapa inicial de remodelación y se expone a la sangre caliente con una presión estática (diastólica) y pulsátil. Durante este tiempo es esencial saber si el injerto conservará su resistencia durante la remodelación temprana. En consecuencia se realizará la prueba de presión pulsátil con las construcciones de injerto en solución salina a 37ºC. Una presión pulsátil de 266,4/200 hPa (200/150 mmHg) será utilizada con una frecuencia de 1/segundo. La prueba continuará durante 2 semanas después de lo cual el injerto será probado en estallido estático.

Ejemplo 4 Prueba pulsátil de tubos de tejido submucosal

Para probar la durabilidad de las construcciones tubulares derivadas de la submucosa, fabricadas a partir de hojas de tejido submucosal de acuerdo con la presente invención, se desarrolló un método de prueba pulsátil. Se montó una bomba de presión pulsátil la cual suministra pulsos de presión de intensidad ajustable a 4,5 Hz. El fluido de trabajo para el sistema es agua estéril. La presión es suministrada a las construcciones de injerto tubular de tejido submucosal formadas, las cuales se acoplan a la salida de la bomba. Los tubos son sumergidos en agua a 37ºC para simular las condiciones fisiológicas. Típicamente, el sistema de prueba pulsátil es corrido a presiones de 200/66,7 hPa (150/50 mmHg) o 533,3/266,4 hPa (400/200 mmHg). Una caída en la presión aplicada es indicativa de falla del injerto tisular.

Resultados de prueba de los tubos derivados de la submucosa Tubos de tejido submucosal tratados con glutaraldehído

Tejido submucosal del intestino delgado, hidratado (2,5 vueltas), se envolvió alrededor de un mandril hueco de orificios múltiples, y se sumergió en una solución diluida de glutaraldehído (GA) y se secó a vacío como se describe anteriormente. Estos tubos tratados con GA de tejido submucosal fueron luego probados sobre una máquina de prueba pulsátil.

Los injertos que fueron tratados con \geq de solución al 1% de GA (p/p) mostraron durabilidad significativa bajo presión pulsátil 533,2/266,6 hPa (400/200 mmHg), sobreviviendo a más de 5,5 millones de ciclos pulsátiles. Los tubos tratados con solución de GA a < del 1% (p/p) fueron significativamente menos durables, durando menos de quinientos mil ciclos bajo condiciones similares. En consecuencia, el tratamiento de los tubos de tejido submucosal con 1% (p/p) o más de solución de GA proporcionó un tubo de tejido submucosal que tiene la durabilidad deseada a la presión pulsátil.

Tubos de tejido submucosal suturados a mano, no tratados

El tejido de la submucosa del intestino delgado, hidratado, se envolvió alrededor de un mandril hueco, de orificios múltiples, se secó a vacío, la unión se suturó y luego se envolvió con una capa adicional de tejido submucosal del intestino delgado, y se suturó a mano longitudinalmente como se muestra en las Figuras 5b y 5c. Estos tubos suturados a mano, no tratados, fueron luego probados sobre la máquina de prueba pulsátil.

Los resultados de estas pruebas mostraron que los tubos suturados a mano sobrevivieron más de 6 millones de ciclos pulsátiles, siendo descontinuada intencionalmente la prueba y el limite de durabilidad no se ha evaluado todavía.

Claims

1. Una prótesis de tejido submucosal de capas múltiples, unitario, caracterizado porque comprende:

una primera hoja de tejido submucosal (14, 60), que tiene un primer borde (64) y un segundo borde opuesto (66), formada en la forma de un tubo de tejido submucosal, en donde el segundo borde opuesto de la primera hoja se extiende sobre el primer borde de la primera hoja, para definir una región traslapada(62) de capas múltiples de tejido submucosal, en donde las capas de tejido submucosal en la región traslapada son fijadas una a la otra; y

una segunda hoja de tejido submucosal (70), que tiene un primer borde (74) y un segundo borde opuesto (76), en donde la segunda hoja (70) está en contacto adherente con el tubo de tejido submucosal y el primer borde y el segundo borde opuesto de la segunda hoja son suturados conjuntamente a lo largo de la longitud del tubo de tejido submucosal, sin perforar el tubo subyacente de tejido submucosal, para formar un segundo tubo.

2. La prótesis de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el tubo de tejido submucosal es formado a partir de la primera hoja de tejido submucosal de modo tal que el primero y el segundo bordes opuestos de la primera hoja de tejido submucosal están sustancialmente paralelos uno al otro.

3. La prótesis de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque el tubo de tejido submucosal comprende dos capas de tejido submucosal y la región traslapada múltiple comprende tres capas de tejido submucosal.

4. La prótesis de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque las capas múltiples de tejido submucosal en la región traslapada son fijadas una a la otra mediante tratamiento con un agente de reticulación.

5. La prótesis de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque el tubo de tejido submucosal y la segunda hoja de tejido submucosal son fusionadas una a la otra al comprimir el tejido submucosal bajo condiciones que conducen a la deshidratación del tejido.

6. La prótesis de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque el agente de reticulación es glutaraldehído.

7. La prótesis de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque las capas múltiples de tejido submucosal en la región traslapada son fijadas una a la otra por suturas, y la región traslapada es desplazada de las suturas formadas en la segunda hoja de tejido submucosal.

8. La prótesis de conformidad con la reivindicación 7, caracterizada porque el tubo de tejido submucosal y las segundas hojas de tejido submucosal se fusionan una a la otra al comprimir el tejido submucosal bajo condiciones que conducen a la deshidratación del tejido.

9. La prótesis de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el tejido submucosal comprende submucosa de tejido intestinal deslaminada de las capas musculares abluminales y al menos la porción luminal de la túnica mucosa de un vertebrado de sangre caliente.

10. La prótesis de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el tubo de tejido submucosal es formado con la superficie abluminal de la hoja de tejido submucosal sobre el exterior del tubo.

11. Una prótesis de tejido submucosal, de capas múltiples, unitaria, caracterizada porque comprende:

una primera hoja de tejido submucosal (14, 60), que tiene un primer borde (64) y un segundo borde opuesto (66), formada en la forma de un tubo de tejido submucosal, en donde el segundo borde opuesto de la primera hoja se extiende sobre el primer borde de la primera hoja, para definir una región traslapada (62) de capas múltiples de tejido submucosal, en donde las capas de tejido submucosal en la región traslapada son fijadas una a la otra; y

una segunda hoja de tejido submucosal (70), que tiene un primer borde (74) y un segundo borde opuesto (76), en donde la segunda hoja (70) está en contacto adherente con el tubo de tejido submucosal y el segundo borde puesto de la segunda hoja se extiende sobre el primer borde de la segunda hoja y se sutura a la segunda hoja de tejido submucosal, sin perforar el tubo subyacente de tejido submucosal, para formar un segundo tubo.

12. La prótesis de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque el tubo de tejido submucosal es formado a partir de la primera hoja de tejido submucosal tal que el primero y el segundo bordes opuestos de la primera hoja de tejido submucosal están sustancialmente paralelos uno al otro.

13. La prótesis de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque las capas múltiples de tejido submucosal en la región traslapada son fijadas una a la otra mediante tratamiento con un agente de reticulación.

14. La prótesis de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque el tubo de tejido submucosal y la segunda hoja de tejido submucosal son fusionadas una a la otra al comprimir el tejido submucosal bajo condiciones que conducen a la deshidratación del tejido.

15. La prótesis de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque el agente de reticulación es glutaraldehído.

16. La prótesis de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque las capas múltiples de tejido submucosal en la región traslapada son fijadas una a la otra por suturas, y la región traslapada es desplazada de las suturas formadas en la segunda hoja de tejido submucosal.

17. La prótesis de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque el tubo de tejido submucosal y las segundas hojas de tejido submucosal se fusionan una a la otra al comprimir el tejido submucosal bajo condiciones que conducen a la deshidratación del tejido.

18. La prótesis de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque el tejido submucosal comprende submucosa de tejido intestinal deslaminada de las capas musculares abluminales y al menos la porción luminal de la túnica mucosa de un vertebrado de sangre caliente.

19. Un método para preparar una prótesis tubular a partir de hojas de tejido submucosal, caracterizado el método porque comprende:

la selección de un mandril (10) que tiene un diámetro predeterminado;

la superposición de una primera hoja (14, 60) de tejido submucosal, que tiene un primer borde (64)y un segundo borde opuesto (66), sobre el mandril para formar un tubo de tejido submucosal, en donde el segundo borde opuesto de la primera hoja de tejido submucosal se extiende sobre el primer borde de la primera hoja de tejido submucosal, para definir una región traslapada (62) de capas múltiples de tejido submucosal;

la fijación de las capas de tejido submucosal en la región traslapada (62), una a la otra;

la superposición de una segunda hoja de tejido submucosal (70), que tiene un primer borde (74) y un segundo borde opuesto (76), sobre el tubo de tejido submucosal;

la sutura del segundo borde opuesto de la segunda hoja de tejido submucosal a la segunda hoja traslapada de tejido submucosal, a lo largo de la longitud del tubo de tejido submucosal, sin perforar el tubo de tejido submucosal; y

la compresión del tubo de tejido submucosal y la segunda hoja de tejido submucosal contra el mandril, bajo condiciones de deshidratación.

20. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque comprende el paso de superponer una tira de material permeable al agua sobre el mandril, antes de que la primera hoja de tejido submucosal sea superpuesta sobre el mandril, en donde después de la formación de la prótesis tubular, la tira de material permeable al agua es removida del mandril para ayudar a la liberación de la prótesis tubular del mandril.

21. El método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el primero y segundo bordes opuestos de la segunda hoja de tejido submucosal son suturados conjuntamente a lo largo de la longitud del tubo de tejido submucosal, sin perforar el tubo de tejido submucosal.

22. El método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el segundo borde opuesto de la segunda hoja se extiende sobre el primer borde de la segunda hoja de tejido submucosal, y el segundo borde opuesto de la segunda hoja se sutura a lo largo de la longitud del tubo de tejido submucosal, sin perforar el tubo de tejido submucosal.

23. Un método para preparar una prótesis tubular a partir de hojas de tejido submucosal, caracterizado el método porque comprende:

la selección de un mandril (10) que tiene un diámetro predeterminado;

la superposición de una primera hoja de tejido submucosal (14, 60), que tiene un primer borde (64) y un segundo borde opuesto (66), sobre la tira de material permeable al agua para formar un tubo de tejido submucosal , en donde el segundo borde opuesto (66) de la primera hoja de tejido submucosal (14, 60) se extiende sobre el primer borde (64) de la primera hoja de tejido submucosal (14, 60) para definir una región traslapada (62) de capas múltiples de tejido submucosal;

el poner en contacto el tubo de tejido submucosal con una solución que contiene un agente de reticulación;

la superposición de una segunda hoja de tejido submucosal (70), que tiene un primer borde (74) y un segundo borde opuesto (76) sobre el tubo de tejido submucosal;

la sutura del primero (74) y segundo (76) bordes opuestos de la segunda hoja de tejido submucosal, conjuntamente a lo largo de la longitud del tubo de tejido submucosal, sin perforar el tubo de tejido submucosal; y

24. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado además porque comprende el paso de superponer una tira de material permeable al agua sobre el mandril, antes de que la primera hoja de tejido submucosal sea superpuesta sobre el mandril, en donde después de la formación de la prótesis tubular, la tira de material permeable al agua es removida del mandril para ayudar a la liberación de la prótesis tubular del mandril.

25. El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado además porque comprende el paso de comprimir el tubo de tejido submucosal contra el mandril bajo condiciones que conducen a la deshidratación del tejido después de que el tubo de tejido submucosal se pone en contacto con el agente de reticulación, y antes de que la segunda hoja de tejido submucosal se superponga sobre el tubo de tejido submucosal.

26. El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque la solución de reticulación comprende de aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 1,0% de glutaraldehído.

27. El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque el mandril es un tubo poroso hueco que tiene un espacio luminal, y el paso de comprimir el tejido biológico es llevado a cabo mediante la extracción de un vacío sobre el lumen del mandril.

28. El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque el tubo de tejido submucosal y la segunda hoja de tejido submucosal se calientan durante el paso de compresión del tubo de tejido submucosal y la segunda hoja de tejido submucosal.

29. El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque el paso de comprimir el tubo de tejido submucosal y la segunda hoja de tejido submucosal se lleva a cabo mediante una cámara de compresión.

30. Un método para preparar una prótesis tubular a partir de hojas de tejido submucosal, caracterizado el método porque comprende:

la selección de un mandril (10) que tiene un diámetro predeterminado;

el traslape de una primera hoja de tejido submucosal (14, 60), que tiene un primer borde (64) y un segundo borde opuesto (66), sobre el material permeable al agua para formar un tubo de tejido submucosal, en donde el segundo borde opuesto (66) de la primera hoja de tejido submucosal (14, 60) se extiende sobre el primer borde de la primera hoja de tejido submucosal para definir una región traslapada de capas múltiples de tejido submucosal;

la compresión del tubo de tejido submucosal contra el mandril, bajo condiciones de deshidratación;

la sutura de las capas de la región traslapada, conjuntamente;

la superposición de una segunda hoja de tejido submucosal (70), que tiene un primer borde lateral (74) y un segundo borde opuesto (76), sobre el tubo de tejido submucosal;

la sutura del primero (74) y segundo (76) bordes opuestos de la segunda hoja de tejido submucosal (70), conjuntamente a lo largo de la longitud del tubo, sin perforar el tubo de tejido submucosal; y

la compresión del tubo de tejido submucosal y la segunda hoja de tejido submucosal contra el mandril bajo condiciones de deshidratación.

31. El método de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado además porque comprende el paso de superponer una tira de material permeable al agua sobre el mandril, antes de que la primera hoja de tejido submucosal sea superpuesta sobre el mandril, en donde después de la formación de la prótesis tubular, la tira de material permeable al agua es removida del mandril para ayudar a la liberación de la prótesis tubular del mandril.

32. El método de conformidad con la reivindicación 31, caracterizado porque el mandril es un tubo hueco poroso que tiene un espacio luminal, y el paso de comprimir el tejido biológico es llevado a cabo mediante la imposición de un vacío sobre el lumen del mandril.

33. El método de conformidad con la reivindicación 31, caracterizado porque el tubo de tejido submucosal y la segunda hoja de tejido submucosal se calientan durante el paso de compresión del tubo de tejido submucosal y la segunda hoja de tejido submucosal.

34. El método de conformidad con la reivindicación 31, caracterizado porque el paso de compresión del tubo de tejido submucosal y la segunda hoja de tejido submucosal se logra mediante una cámara de compresión.

35. Un método para la formación de una construcción tubular heterolaminada unitaria a partir de una hoja de tejido submucosal, caracterizado el método porque comprende:

la superposición de una hoja de tejido submucosal (14, 60) que tiene una primera porción de borde (64) y una segunda porción de borde (66) sobre un mandril (10), en donde la primera (64) y segunda (66) porciones de borde de la hoja de tejido submucosal (14, 60) se traslapa para formar un tubo de tejido submucosal;

el contacto de la primera (64) y segunda (66) porciones de borde traslapadas con un agente de reticulación; y la compresión de la primera (64) y segunda (66) porciones de borde traslapadas, bajo condiciones de deshidratación.

36. El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque la primera y segunda porciones traslapadas son comprimidas mediante presión de vacío.

37. El método de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porque el agente de reticulación es glutaraldehído.