ES2226954T3 - Texanos de carbonato c-4. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula I, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, en la que: R es fenilo, isopropilo o terc-butilo; R1 es C(O)Rz, donde Rz es (CH3)CO-, (CH3)3CCH2, CH3(CH2)3O-, ciclobutilo, ciclohexiloxi o (2-furilo); y R2 es CH3C(O)O-

Description

Taxanos de carbonato C-4.

Antecedentes de la invención Campo de la invención

La presente invención se refiere a compuestos antitumorales. Más particularmente, la invención proporciona nuevos derivados de paclitaxel activos por vía oral, formulaciones de los mismos y su uso como agentes antitumorales orales.

Antecedentes de la técnica

El paclitaxel es un producto natural que se extrae de la corteza de los tejos del Pacífico, Taxus brevifolia, y el constituyente activo del agente antitumoral TAXOL®. En modelos animales in vivo se ha demostrado que posee una actividad antitumoral excelente y estudios recientes han aclarado su particular modo de acción, que implica la polimerización anormal de la tubulina y la alteración de la mitosis. Clínicamente se usa contra un gran número de cánceres humanos. Es un agente antitumoral importante desde el punto de vista tanto terapéutico como comercial. En la actualidad están en marcha numerosos estudios clínicos para extender y aumentar la utilidad de este agente para el tratamiento de enfermedades proliferativas humanas. Numerosos autores han revisado los resultados de los estudios clínicos realizados con TAXOL®. En el número de los Seminarios en Oncología 1999, 26 (1, supl. 2) se encuentra una reciente recopilación de artículos escritos por diferentes autores. Otros ejemplos son, por ejemplo, los trabajos de Rowinsky y col. en TAXOL®: A Novel Investigational Antimicrotubule Agent, J. Natl. Cancer Inst., 82: páginas 1247-1259, 1990; de Rowinsky y Donehower en "The Clinical Pharmacology and Use of Antimicrotubule Agents in Cancer Chemotherapeutics", Pharmac. Ther., 52: 35-84, 1991; de Spencer y Faulds en "Paclitaxel, A Review of its Pharmacodynamics and Pharmacokinetic Properties and Therapeutic Potential in The Treatment of Cancer", Drugs, 48 (5) 794-847, 1994; de K. C. Nicolau y col., en "Chemistry and Biology of TAXOL®", Angew. Chem., Int. Ed. Engl., 33: 15-44, 1994; de F. A. Holmes, A. P. Kudelka, J. J. Kavanaugh, M. H. Huber, J. A. Ajani, V. Valero en el libro "Taxane Anticancer Agents Basic Science and Current Status" editado por Gunda I. Georg, Thomas T. Chen, Iwao Ojima y Dolotrai M., Vyas, 1995, American Chemical Society, Washington D. C., 31-57; de Susan G. Arbuck y Barbara Blaylock en el libro "TAXOL® Science and Applications" editado por Mathew Suffness, 1995, CRC Press Inc., Boca Ratón, Florida, 379-416; y también en la bibliografía citada en ellos.

También se ha encontrado que un análogo semisintético del paclitaxel denominado docetaxel posee una buena actividad antitumoral y es el ingrediente activo del agente tumoral disponible comercialmente TAXOTERE®. Véase Biologically Active Taxol Analogues with Deleted A-Ring Side Chain Substituents and Variable C-2' Configurations, J. Med. Chem., 34, páginas 1176-1184 (1991); Relationships between the Structure of Taxol Analogues and Their Antimitotic Activity, J. Med. Chem., 34, páginas 992-998 (1991). En el Journal of Clinical Oncology 1995, 13 (10), 2643 a 2655 ha aparecido una revisión de la actividad clínica de TAXOTERE® por Jorge E. Cortés y Richard Pazdur. Las estructuras de paclitaxel y docetaxel se muestran a continuación junto con el sistema de numeración convencional para las moléculas pertenecientes a la clase; teste sistema de numeración también se usa en esta solicitud.

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paclitaxel (TAXOL®): R= Fe; R'= acetilo

docetaxel (TAXOTERE®): R= t-butoxi; R'= hidrógeno

Se puede encontrar amplia evidencia de que paclitaxel no posee actividad oral en la siguiente cita de la solicitud PCT de patente WO98/53811 por los inventores Samuel Broder, Kenneth L. Duchin y Sami Selim y la bibliografía mencionada en la cita, que declara "Paclitaxel se absorbe muy mal cuando se administra por vía oral (menos del 1%); véase Eiseman y col., Second NCI Workshop on Taxol and Taxus (Sept 1992); Suffness y col., en TAXOL Science and Applications (CRC Press 1995). Eisemann y col. indican que paclitaxel tiene una biodisponibilidad del 0% tras la administración oral y Suffness y col. informan que no pareció posible la dosificación oral con paclitaxel dado que no se encontraron pruebas de actividad antitumoral tras la administración oral de hasta 160 mg/ mg/kg/día. Es más. no se ha desarrollado ningún procedimiento eficaz que permita la administración eficaz de paclitaxel oral (es decir, un procedimiento para aumentar la biodisponibilidad oral de paclitaxel) u otros taxanos orales o análogos de paclitaxel tales como docetaxel, que exhiban actividad antitumoral. Por esta razón, hasta ahora no se ha administrado paclitaxel por vía oral a pacientes humanos, y ciertamente no durante el curso del tratamiento de enfermedades que responden a paclitaxel".

Otro informe de J. Terwogt y col. en The Lancet, 25 de julio de 1998, vol. 352, página 285 también describe la baja biodisponibilidad de paclitaxel tras la dosificación oral. En el propio trabajo de los inventores, han administrado paclitaxel por vía oral a dosis tan elevadas como 160 mg/kg/iny. en modelos de tumores murinos (en ratones) (sc M109) sin que se observaran signos de ninguna eficacia, incluso aunque no se alcanzaron dosis tóxicas. Además, hasta la fecha los propios intentos de los inventores para demostrar actividad de paclitaxel administrado por vía oral frente a xenoinjertos tumorales humanos implantados en ratones atímicos o en ratas atímicas no han tenido éxito.

La intención de esta invención es describir análogos de taxanos carbonato de metilo C-4, que poseen una sorprendente actividad oral y, por tanto, tendrían utilidad frente a enfermedades proliferativas tras la administración oral. Algunas de las técnicas anteriores que atañen a esta invención se muestran a continuación.

En la técnica se han descrito ciertos derivados taxanos con modificaciones en el grupo hidroxi C-4.

La patente de EE.UU. 5.808.102 concedida a Poss y col. y la solicitud de patente PCT publicada WO 94/14787 contienen descripciones de análogos de taxanos con modificaciones en las posiciones C-4.

Gunda I. Georg y col. describen la síntesis de un análogo de éster C-4 en Tetrahedron Letters, 1994, 35(98) 8931-8934.

S. Chen y col. describen la síntesis de un análogo éster de ciclopropilo C-4 en el Journal of Organic Chemistry 1994, 59 (21), 6156-8.

El 24 de noviembre de 1998 se ha concedido la patente de EE.UU. 5.840.929 concedida a Chen, Shu-Hui en la que se cubren los derivados éter metoxi. También ha aparecido una publicación acerca del mismo tema:

Chen Shu-Hui. First synthesis of C-4 methyl ether paclitaxel analogs and the unexpected reactivity of 4-deacetyl-4-methyl ether baccatin III. Tetrahedron Lett. 1996, 37 (23), 3935-3938.

En la siguiente referencia se analiza una serie de análogos éster o carbonatos C-4: Chen, Shu-Hui; Wein, Jian-Mei; Long, Byron H.; Fairchild, Craig A.; Carboni, Joan; Mamber, Steven W.; Rose, William C.; Johnston, Kathy; Casazza, Anna M.; y col. Novel C-4 paclitaxel (Taxol) analogs: potent antitumor agents. Bioorg. Med. Chem. Lett. 1995, 5 (22), 2741-6.

La preparación de análogos carbamato aziridinilo C-4 se ha descrito en: Chen, Shu-Hui; Fairchild, Craig; Long, Byron H. Synthesis and Biological Evaluation of Novel C-4-Aziridine-Bearing Paclitaxel (Taxol) Analogs . J. Med. Chem. 1995, 38 (12), 2263-7.

Los siguientes artículos describen reacciones o transformaciones que se describen como de potencial para la preparación de análogos C-4.

Un nuevo procedimiento para modificar la posición C-4 de 10-desacetilbacatina III. Uoto, Kpuichi; Takenoshita, Haruhiro; Ishiyama, Takashi; Terasawa, Hirofumi; Soga; Tsunehiko. Chem. Pharm. Bull. 1997, 45 (12), 2093-2095.

Samaranayake, Gamini; Neidigh, Kurt A.; Kingston, David G. I. Modified taxols, 8. Deacylation and reacylation of baccatin III. J. Nat. Prod. 1993, 56 (6), 884-98.

Datta, Apurba; Jayasinghe, Lalith R.; Georg, Gunda I.4-Deacetyltaxol and 10-Acetyl-4-deacetyltaxotere: Synthesis and Biological Evaluation. J. Med. Chem. 1994, 37 (24), 4258-60.

A pesar de los ejemplos de análogos C-4 mencionados anteriormente o de la metodología para prepararlos, no se ha proporcionado ninguna prueba de análogos C-4 oralmente activos. Ni TAXOL® ni TAXOTERE® poseen actividad oral en modelos animales o humanos, como se ha mencionado en las siguientes técnicas previas que se describen más adelante sobre taxanos y moduladores orales. Por tanto, la técnica hasta la fecha no sugiere que los taxanos C-4 sean diferentes que otros taxanos y, por tanto, no son oralmente activos. Por lo que conocemos, de ningún modo la técnica identifica ningún análogo C-4 que pueda tener utilidad oral. La invención descrita en esta solicitud de patente identifica nuevos análogos C-4 que, debido a su sustitución única, poseen, de forma sorprendente, actividad oral.

Las siguientes referencias describen procedimientos o posibles procedimientos para los taxanos oralmente activos.

Se ha comunicado que los procedimientos para administrar taxanos en presencia de moduladores aumentan la cantidad de taxanos en plasma después de la administración oral: Terwogt, Jetske M. Meerum; Beijnem, Jos H.; Ten Bokkel Huinink, Wim W.; Rosing, Hilde; Schellens, Jan H. M. La administración conjunta de ciclosporina permite el tratamiento oral con paclitaxel. Lancet (1998), 352 (9124), 285.

Terwogt, Jetske M. Meerum; Malingre, Mirte M.; Beijnem, Jos H.; Huinink, Wim W.; ten Bokkel; Rosing, Hilde; Koopman, Franciska J.; Van Tellingen, Olaf; Swart, Martha; Schellens, Jan H. M. La administración conjunta de ciclosporina A permite el tratamiento oral con paclitaxel. Clin. Cancer Res. (1999), 3379-3384.

Hansel, Steven B. Un procedimiento para preparar taxanos oralmente biodisponibles mediante la coadministración de cinconina. Solicitud PCT. Int. WO 9727855 publicada el 7 de agosto de 1997.

Broder, Samuel; Duchin, Kenneth L.; Selim, Sami. Procedimiento y composiciones para administrar taxanos por vía oral a pacientes humanos usando una ciclosporina para aumentar la biodisponibilidad. Solicitud PCT Int. WO 9853811 publicada el 3 de diciembre de 1998. Estos informes no contienen ningún dato de eficacia antitumoral pero se extrapola la presencia de taxanos en el plasma para mostrar su potencial de utilidad anticancerosa.

En la técnica previa ha aparecido al menos un informe acerca de la actividad oral de profármacos en modelos preclínicos con animales: Scola, Paul M.; Kadow, John F.; Vyas, Dolatrai M. Preparación de derivados de profármaco de paclitaxel. Solicitud de patente europea EP 747385, publicada el 11 de diciembre de 1996. No se ha descrito la biodisponibilidad oral del profármaco que poseía eficacia oral y no han aparecido más informes acerca del progreso de estos compuestos en seres humanos.

Muy recientemente, en la Asociación Americana de Investigadores de Cáncer celebrada en Filadelfia en 1999 un resumen describió un análogo de taxano (IDN-5109) con actividad oral frente a tumores en ratones. La referencia del resumen es:

Pratesi G, Polizzi D, Totreto M, Riva A, Bombardelli E, Zunino F: IDN5109 a new taxane active after oral administration. Proc Am Assoc Cancer Res 1999 40 Abs 1905; Istituto Nazionale Tumori, 20133 Milan e Indena SpA, 20139, Milán, Italia. La estructura de este compuesto es bastante diferente de la de los compuestos descritos en la presente invención. Al contrario que los compuestos abarcados por la presente invención, IDN-5109 deriva de 14-betahidroxi bacatina III y tiene un acetato en el grupo hidroxi en la posición C-4.

Para completar se incluyen dos referencias sobre la actividad iv de este compuesto.

Nicoletti ML, Rossi C, Monardo C, Stura S, Morazzoni P, Bombardelli E, Valoti G, Giavazzi R.: Antitumor efficacy of a paclitaxel analogue, IDN5109, on human ovarian carcinoma xenografts with different sensitivity to paclitaxel. Proc Am Assoc Cancer Res 1999 40 Abs 1910 [Evals + citaciones].

Polizzi, Donatella; Pratesi, Graziella; Tortoreto, Monica; Supino, Rosanna; Riva, Antonello; Bombardelli, Ezio; Zunino, Franco. A novel taxane with improved tolerability and therapeutic activity in a panel of human tumor xenografts. Cancer Res. 1999, 59 n(5), 1036-1040.

Paclitaxel es un fármaco muy dependiente del programa que tradicionalmente se beneficia de tiempos prolongados de exposición del tumor. Esto se refiere al mecanismo de acción de paclitaxel ya que los taxanos sólo reconocen y se unen a la tubulina en estado polimerizado, que sólo se produce durante un breve periodo del ciclo de la célula cancerosa. Las infusiones intravenosas usadas en la actualidad (1-3 horas) ahora se aceptan con facilidad y eficacia y excluyen el uso rutinario de programas continuos prolongados (> 24 horas). Sin embargo, un taxano oral puede proporcionar un modo conforme y rentable de conseguir tal duración extendida de la exposición. Recientemente, la utilidad clínica también se ha demostrado usando administraciones repetidas una vez a la semana de dosis moderadas (es decir, distintas a las máximas toleradas) de TAXOL® y un taxano oral sería ideal para tales regímenes prolongados. Otras indicaciones clínicas propuestas para el uso de taxanos (por ejemplo, artritis reumatoide, esclerosis múltiple) también se beneficiarían de la disponibilidad de un taxano oral. Un taxano eficaz administrado por vía oral ofrecería una alternativa atractiva del formato parenteral del actual uso clínico del taxano y una posible ventaja terapéutica a causa de las muchas posibilidades de calendario que todavía se deben
investigar.

Por tanto, está claro que existe una gran necesidad de identificar taxanos con una buena biodisponibilidad y una buena eficacia oral, que sean comparables al paclitaxel administrado por vía parenteral.

Resumen de la invención

Esta invención se refiere a nuevos compuestos antitumorales representados por la fórmula I, o sales de los mismos farmacéuticamente aceptables:

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I

en la que:

R es fenilo, isopropilo o terc butilo;

R^{1} es -C(O)R^{Z}, en el que R^{Z} es (CH_{3})_{3}CO-, (CH_{3})_{3}CCH_{2}-, CH_{3}(CH_{2})_{3}O-, ciclobutilo, ciclohexiloxi o (2-furilo);

R^{2} es CH_{3}C(O)O-.

Otro aspecto de la presente invención proporciona un procedimiento para inhibir el crecimiento tumoral en un huésped mamífero, que comprende la administración a dicho huésped mamífero una cantidad antitumoral eficaz de un compuesto de fórmula I, o sus sales farmacéuticamente aceptables. Preferentemente, el procedimiento de administración es oral.

Además, otro aspecto de la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una cantidad antitumoral eficaz de un compuesto de fórmula I, o sus sales farmacéuticamente aceptables, en combinación con uno o más vehículos, excipientes, diluyentes o adyuvantes farmacéuticamente aceptables.

Descripción detallada de la invención

En esta descripción de la invención, a menos que se especifique lo contrario explícitamente o en el contexto, se aplican las siguientes definiciones. En esta solicitud, una vez definidos, los símbolos mantienen el mismo significado en toda la solicitud hasta que se vuelvan a definir.

Los números en el subíndice tras el símbolo "C" definen el número de átomos de carbono que un determinado grupo puede contener. Por ejemplo, "alquilo C_{1-6}" quiere decir una cadena de carbono saturada lineal o ramificada que tiene de uno a seis átomos de carbono; entre los ejemplo se incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, isobutilo, t-butilo, n-pentilo, sec-pentilo, isopentilo y n-hexilo. Dependiendo del contexto, "alquilo C_{1-6}" también puede referirse a alquileno C_{1-6}, que une dos grupos; entre los ejemplos se incluyen propano-1,3-diilo, butano-1,4-diilo, 2-metil-butano-1,4-diilo, etc. "Alquenilo C_{2-6}" quiere decir una cadena de carbono lineal o ramificada que tiene al menos un doble enlace carbono-carbono y con de dos a seis átomos de carbono; entre los ejemplos se incluyen etenilo, propenilo, isopropenilo, butenilo, isobutenilo, pentenilo y hexenilo. Dependiendo del contexto, "alquenilo C_{2-6}" también se puede referir a alquenodiílo C_{2-6} que une dos grupos; entre los ejemplos se incluyen etilen-1,2-diílo (vinileno), 2-metil-2-buen-1,4-diílo, 2-hexeno-1,6-diílo, etc. "Alquinilo C_{2-6}" quiere decir una cadena de carbonos lineal o ramificada que tiene al menos un triple enlace carbono-carbono y de dos a seis átomos de carbono; entre los ejemplo se incluyen etinilo, propinilo, butinilo y hexinilo. Como se usa en la presente memoria descriptiva, t-butiloxi y t-butoxi se usan de forma intercambiable.

"Arilo" significa hidrocarburo aromático que tiene de seis a diez átomos de carbono; entre los ejemplos se incluyen fenilo y naftilo. "Arilo sustituido" significa arilo sustituido de forma independiente con de uno a cinco (pero preferiblemente de uno a tres) grupos seleccionados de entre alcanoiloxi C_{1-6}, hidroxi, halógeno, alquilo _{C1-6}, trifluorometilo, alcoxi C_{1-6}, arilo, alquenilo C_{2-6}, alcanoílo C_{1-6}, nitro, amino, ciano, azido, alquilamino C_{1-6}, dialquilamino C_{1-6} y amido. "Halógeno" significa flúor, cloro, bromo y yodo.

"Heteroarilo" significa un anillo aromático de cinco o seis miembros que contiene al menos uno y hasta cuatro átomos distintos a carbono seleccionados de entre oxígeno, azufre y nitrógeno. Entre los ejemplos de heteroarilo se incluyen tienilo, furilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, tetrazolilo, tiatriazolilo, oxatriazolilo, piridilo, pirimidilo, pirazinilo, piridazinilo, triazinilo, tetrazinilo y anillos similares.

"Grupos protectores de hidroxi" incluyen, pero no se limita a ellos, éteres tales como metilo, t-butilo, bencilo, p-metoxibencilo, p-nitrobencilo, alilo, tritilo, metoximetilo, metoxietoximetilo, etoxietilo, 1-metil-1-metoxietilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, dialquilsililéteres, tales como éter de dimetilisililo, y triaqluilsililéteres tales como éter de trimetilsililo, éter de trietilsililo y éter de t-butildimetilsililo, dialquil alcoxi silil éteres tales como éteres de disopropil metoxi sililo,; ésteres tales como benzoílo, acetilo, fenilacetilo, formilo, mono-, di- y trihaloacetilos tal como cloroacetilo, dicloroacetilo, tricloroacetilo, trifluoroacetilo; y carbonatos tales como metilo, etilo, 2,2,2-tricloroetilo, alilo, bencilo y p-nitrofenilo. Ejemplos adicionales de grupos protectores de hidroxi pueden encontrase en trabajos convencionales de referencia tales como los de Greene y Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3ª ed., 1999, John Wiley & Sons, Nueva York.

"Fe" quiere decir fenilo; "ipr" significa isopropilo;

Los sustituyentes de los grupos y restos sustituidos alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo y heteroarilo descritos en la presente memoria descriptiva, pueden ser alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo y/o pueden contener nitrógeno, oxígeno, azufre, halógenos, e incluyen, por ejemplo, un alcoxi menor tal como metoxi, etoxi, butoxi, un halógeno tal como cloro o flúor, nitro, amino y ceto.

Una forma de realización preferida consiste en los compuestos I, o sales de los mismos farmacéuticamente aceptables, que se representan en la Tabla I a continuación.

TABLA I Taxanos de metil carbonato C-4 oralmente activos

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Una forma de realización incluso más preferida consiste en los compuestos I, o sus sales farmacéuticamente aceptables, que se muestran en la Tabla II.

TABLA II

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Los nuevos compuestos que tienen la fórmula general I exhiben un efecto inhibidor significativo de la proliferación celular anómala y poseen propiedades terapéuticas que hacen posible tratar a pacientes que tienen afecciones patológicas asociadas con una proliferación celular anómala. Además, estos compuestos poseen una biodisponibilidad oral significativa y, por tanto, pueden provocar sus efectos terapéuticos positivos después de su administración oral.

Las afecciones patológicas incluyen la proliferación celular anómala de células malignas o no malignas en varios tejidos y/o órganos, incluidos, aunque no de forma limitante, músculos, huesos y/o tejido conjuntivo; la piel, el cerebro, los pulmones y los órganos sexuales; el sistema linfático y/o el sistema renal; células mamarias y/o células sanguíneas; el hígado, el aparato digestivo y el páncreas; y el tiroides y/o la glándula suprarrenal. Estas afecciones patológicas también pueden incluir psoriasis; tumores sólidos, cáncer de ovario, mama, próstata, colon, estómago, riñón y/o testicular, sarcoma de Kaposi; colangiocarcinoma, coriocarcinoma; neuroblastoma; tumor de Wilm, enfermedad de Hodgkin; melanomas; mielomas múltiples; leucemias linfocíticas crónicas y linfomas granulocíticos crónicos.

Los nuevos compuestos de acuerdo con la invención son particularmente útiles para el tratamiento del linfoma no Hodgkin, el, el melanoma y los cánceres de ovario, urotelial, esofágico, de pulmón y de mama. Los compuestos se pueden utilizar para prevenir o retrasar la aparición o la reaparición, o para tratar estas afecciones patológicas. Los compuestos pueden usarse como inhibidores de la antiangiogénesis para las actividades anticancerosas o para la cicatrización anómala de heridas u otras enfermedades hiperproliferativas dependientes de la formación de
sangre.

Además, los compuestos de fórmula I son útiles para tratar y/o prevenir las enfermedades renales poliquísticas (PKD) y la artritis reumatoide. Los compuestos de esta invención también pueden ser útiles para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer o de Parkinson o la esclerosis múltiple. Aunque algunos de los productos de fórmula general I son de interés debido a sus ventajas sobre los taxanos comerciales tras la administración iv, su principal característica se debe a sus propiedades únicas tras la administración oral.

Los compuestos de esta invención pueden prepararse mediante técnicas del repertorio de química orgánica convencional. Los esquemas 1-3, que representan procedimientos a través de los cuales se pueden preparar los compuestos que están dentro del alcance de la fórmula I, sólo se muestran con el propósito de ilustrar y no deben interpretarse como limitante de los procedimientos para preparar los compuestos mediante cualquier otro procedimiento.

Un compuesto de fórmula I pueden producirse mediante los procedimientos como se representa en los siguientes Esquemas 1-3. Los procedimientos pueden adaptarse con facilidad a variaciones, con el fin de producir compuestos que entren dentro del alcance de la fórmula I pero no se describen de forma específica. Asimismo, más variaciones de los procedimientos para producir los mismos compuestos de una forma algo diferente serán evidentes para un experto en la técnica. La numeración del derivado de bacatina III de fórmula II según se usa en esta solicitud se muestra en la estructura inicial del taxano.

Una de las formas mediante la cual los compuestos de esta invención se pueden preparar consiste en el procedimiento general que se muestra en el Esquema I. En la etapa (a) del esquema, la azetidinona IV reacciona con un compuesto de fórmula II (un derivado de bacatina III). La clase general de azetidinonas (\beta-lactamas) de fórmula IV se conocen bien. Los procedimientos para preparar \beta-lactamas sustituidas de forma adecuada se pueden encontrar en la patente de EE.UU. 5.175.315, la solicitud de patente europea 0 590 267 A2, las otras patentes de EE.UU. o la bibliografía mencionada anteriormente, o las referencias incluidas en ellas de Ojima y col. en Tetrahedron, 48, nº 34, páginas 6985-7012 (1992); Journal of Organic Chemistry, 56, páginas 1681-1683 (1991); y en Tetrahedron Letters, 33, nº 39, páginas 5737-5740 (1992); de Brieva y col. en J. Org. Chem., 58, páginas 6429-6432 (1990) y en Rey, Allan W.; Droghini, Robert; Douglas, James L.; Vemishetti, Purushotham; Boettger, Susan D.; Racha, Saibaba; Dillon, John L. Can. J. Chem. 72 (10), 2131-6 (1994).

Todas las descripciones se incorporan en su totalidad en la presente memoria descriptiva. Los procedimientos que se pueden adaptar a variaciones para producir otras azetidinonas dentro del alcance de la fórmula IV, pero que no se describen específicamente en la presente memoria descriptiva en las referencias anteriores o que se han comunicado en cualquier otro sitio, serán obvios para el experto en la técnica.

Los derivados de bacatina III pueden estar unidos a una cadena lateral usando cualquiera de las metodologías que en la actualidad ya se conocen en la técnica. Las muchas referencias citadas en la descripción de esta invención y en Tetrahedron 48, nº 24, páginas 6985-7012 (1992) describen procedimientos mediante los cuales la clase de azetidinonas de fórmula IV reacciona con el grupo hidroxi (C)13 de los derivados de bacatina III o su alcóxido de metal, para proporcionar análogos taxanos con una variedad de cadenas laterales (C)13. En la etapa (a) del esquema 1, es una ventaja convertir el grupo hidroxi en el carbono (C)13 en un alcóxido de metal antes del acoplamiento. La formación de un alcóxido de metal deseado puede llevarse a cabo mediante la reacción del un compuesto de fórmula II con una base metálica fuerte, tal como diisopropilamida de litio, alquillitio C1-6, bis(trimetilsilil)amida de litio o de sodio o de potasio, fenillitio, hidruro sódico, hidruro potásico, hidruro de litio o una base similar. Por ejemplo, cuando se desea alcóxido de litio, un compuesto de fórmula II puede reaccionar con n-butillitio en un disolvente inerte tal como tetrahidrofurano. Para consultar ejemplos de la unión de bacatinas sustituidas con una lactama adecuadamente sustituida a través del procedimiento de Holton, véase las patentes de EE.UU. 5.175.315, 5.466.834, 5.229.526, 5.274.124, EE.UU. 5.243.045, de 5.227.400, 5.336.785 y 5.254.580, 5.294.637 o el documento EP O 590 267 A2. Algunos ejemplos del uso de \beta-lactamas para preparar otros derivados taxanos sustituidos se encuentran en el documento PCT WO94/14787. Esta patente también describe un procedimiento alternativo para unir cadenas laterales de isoserina sustituida a bacatinas sustituidas, que sería aplicable a los compuestos de esta invención. Este mismo procedimiento alternativo se describe en otra publicación de Kingston y col., Tetrahedron Lett. (1994), 35 (26), 4483-4. Más información acerca de los procedimientos alternativos para unir cadenas laterales a bacatinas se contienen en Thottathil y col., solicitud de patente europea, EP 735036 publicada el 10/2/96.

Esquema 1

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\newpage

Esquema 2

7

Como se usa en la presente memoria descriptiva, R^{3} y R^{4} son grupos protectores de hidroxi convencionales. Los grupos protectores de hidroxi convencionales son restos que se pueden usar para bloquear o proteger una función hidroxi y son bien conocidos para los expertos en la técnica. Preferiblemente, dichos grupos son aquéllos que se pueden eliminar mediante procedimientos que no dan lugar a una destrucción aplicable de la porción restante de la molécula. Entre los ejemplos de tales grupos protectores de hidroxi eliminables con facilidad se incluyen cloroacetilo, metoximetilo, 1-metil-1-metoxietilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, dialquilsililéteres, tales como éter de dimetilsililo, y trialquilsililéteres tales como éter de trimetilsililo, éter de trietilsililo y éter de t-butildimetilsililo, éteres de alquil alcoxi sililo tales como éter de diisopropilo metoxi sililo; 2,2,2-tricloroetioximetilo, 2,2,2-tricloroetiloxicarbonilo (o simplemente tricloroetiloxicarbonilo), benciloxicarbonilo y similares. Otros grupos protectores de hidroxi adecuados que se pueden usar se encuentran en el capítulo 2 de "Protecting Groups in Organic Synthesis", tercera ed., de Theodora W. Greene y Peter G. M. Wuts (1999, John Wiley & Sons, Nueva York). Un grupo protector para compuestos de fórmula IV que se ha usado con frecuencia en la bibliografía es trialquilsililo. Entre los grupos para R^{3} más preferidos se incluyen 1-metil-1-metoxietilo (MOP), un éter de trialquil sililo o un éter de dialquil alcoxi sililo tal como éter de diisopropil metoxi sililo. El grupo más preferido para R^{4} es un éter de dialquil alcoxi sililo tal como éter de diisopropil metoxi sililo, aunque también podría preferirse un éter de trialquil sililo o un carbonato tal como carbonato de bencilo. En la etapa (b), se elimina el grupo protector R^{3} o R^{4}, o posiblemente ambos. Si R^{3} o R^{4} son grupos protectores con base de sililo, la eliminación se lleva a cabo mediante trifluorhidrato de trietilamina en disolvente THF. También podrían utilizarse otras fuentes de fluoruro. Por ejemplo los compuestos fluoruro de tetrabutil amonio, fluorhidrato de piridinio, fluoruro potásico o fluoruro de cesio pueden encontrar utilidad. El fluoruro potásico puede usarse combinado con un agente formador de complejos tal como 18-corona-6 o similares, para contribuir a la desililación. En estas condiciones típicamente se usa un disolvente como acetonitrilo. Otras condiciones tales como ácido clorhídrico acuoso suave o ácido trifluoroacético y un codisolvente tal como acetonitrilo o THF pueden ser útiles para la desprotección de los grupos sililo. Las mismas condiciones ácidas funcionan bien en la eliminación del grupo protector 1-metil-1-metoxietilo (MOP).

Las condiciones empleadas en realidad dependerán de los grupos protectores usados para R^{3} y R^{4}. Por ejemplo, una vía preferida podría emplear un grupo MOP para R^{3} y un éter de diisopropil metoxi sililo para R^{4}. En este caso, la etapa b implicaría un trabajo ácido suave usando ácido clorhídrico acuoso y un disolvente orgánico. El compuesto resultante desprotegido en 2' se expondría a una fuente de fluoruro tal como trifluorhidrato de trietilamina en disolvente THF en la etapa c, para producir el compuesto 1 después de la purificación cromatográfica o cristalográfica.

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Esquema 3

Síntesis preferida de bacatina carbonato de metilo C-4

8

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9

Otro aspecto de la invención implica la síntesis de compuestos I sin nuevos sustituyentes R^{2} en la posición C-10. Estos compuestos pueden prepararse mediante la unión de un éster alternativo en lugar del grupo éster acetato que se une en el Esquema 3.

Una preparación alternativa de compuestos I se representa en el Esquema 2. Implica la conversión de un compuesto V en el que R' forma un grupo protector de nitrógeno tal como tBuO(CO)-(tBoc) o FeCH_{2}OC(O)-(CBZ). Los grupos se pueden eliminar mediante hidrólisis ácida o, en el caso de CBZ, por hidrogenólisis. La preparación de la amina intermedia VI se describe en los ejemplos y se lleva a cabo mediante metodología bien conocida en la técnica. L amina intermedia VI se disuelve en un disolvente inerte tal como acetato de etilo y se añade una base tal como bicarbonato sódico. Para dar el compuesto 1 directamente se añade una cantidad estequiométrica o ligeramente mayor de, más preferiblemente, un cloruro ácido (es decir, -R^{1}-C(O)Cl) cloroformiato o, de forma alternativa, anhídrido
ácido.

La preparación de los derivados de bacatina de estructura II (como se muestra en el Esquema 1 donde R2 es AcO-) se muestra en el Esquema 3 y se ilustra en la preparación 7. Los siguientes ejemplos ilustran la síntesis de los compuestos de la presente invención y no deben interpretarse como limitantes de la invención, en su influencia o su alcance. El procedimiento puede adaptarse a variaciones para producir el compuesto abarcado por esta invención pero no descritos de forma específica. Además, las variaciones de los procedimientos para producir el mismo compuesto de un modo algo diferente también serán evidente para el experto en la técnica.

En los siguientes procedimientos experimentales se entiende que, cuando no se especifique, todas las temperaturas están en grados centígrados (ºC). Las características del espectro de resonancia magnética nuclear (RMN) se refieren respecto a los desplazamientos químicos (\delta) expresados en partes por millón (ppm) frente a tetrametilsilano (TMS) como referencia estándar. El área relativa registrada para los diversos desplazamientos en los datos del espectro de RMN de protones corresponde al número de átomos de hidrógeno de un determinado tipo funcional en a molécula. La naturaleza de los desplazamientos en cuanto a la multiplicidad se comunica como singlete ancho (sa o s a), doblete ancho (da o d a), triplete ancho (ta o t a), cuarteto ancho (ca o c a), singlete (s), multiplete (m), doblete (d), cuarteto (c), triplete (t), doblete de dobletes (dd), doblete de tripletes (dt) y doblete de cuartetos (dc). Los disolventes empleados para tomar el espectro de RMN son acetona-d6 (acetona de deuterio). DMSO-d6 (perdeuterodimetilsulfóxido), D2O (agua de deuterio), CDCl3 (deuterocloroformo) y otros disolventes de deuterio convencionales. La descripción del espectro en infrarrojos (IR) incluye sólo los números de onda de absorción (cm-1) con un valor de identificación del grupo funcional.

Celite es una marca comercial registrada de la Johns-Manville Products Corporation para tierras diatomeas.

El gel de sílice usado en los siguientes experimentos es gel de sílice 60 con un tamaño de partícula de malla 230-400, obtenido de EM Separations Technology.

Las abreviaturas usadas en la presente memoria descriptiva son abreviaturas convencionales ampliamente empleadas en la técnica. Algunas de las cuales son: DAB (desacetilbacatina III); EM (espectrometría de masas); HRMS (espectrometría de masas de alta resolución); Ac (acetilo); Fe (fenilo); v/v (volumen/volumen); FAV (bombardeo de átomos rápidos), NOBA (alcohol m-nitrobencílico); min (minuto o minutos); h o hr (hora u horas); DCC (1,3-diciclohexilcarbodiimida); BOC (t-butoxicarbonilo); CBZ o Cbz (benciloxicarbonilo); Bn (bencilo); Bz (benzoílo); Troc (2,2,2-tricloroetiloxicarbonilo), DMS (dimetilsililo), TBAF (fluoruro de tetrabutilamonio), DMAP (4-dimetilaminopiridina); TES (trietilsililo); DMSO (dimetilsulfóxido); THF (tetrahidrofurano); HMDS (hexametildisilizano); MeOTf (metiltriflato); NMO (N-óxido de morfolina); (DHQ)2PHAL (hidroquinina diéter de 1,4-ftalazinediílo). Tf= triflato= trifluorometanosulfonato; LRMS (espectrometría de masas de baja resolución); ESI (electronebulización por ionización); TEMPO (2,2,6,6-tetrametil-1-piperidiniloxi, radical lobre); DBU (diazobicicloundeceno); MOMCl (éter de clorometil metilo); Ac (acetilo); Ar (arilo); Bz (benzoílo); Cbz (bencilozicarbonilo); DCl (ionización química por desorpción); DMF dimetilformamida); FAB (bombardeo con átomos rápidos); H (hora u horas); HRMS (espectrometría de masas de alta resolución): LiHMDS (hexametildisilazano de litio o bis(rimetilsilil)amida de litio); HMDS (hexametildisilzano); i-PrOH (alcohol isopropílico); min (minuto o minutos); EM (espectrometría de masas); Fe (fenilo); ta (temperatura ambiente); tBu (teriaributilo); TES (trietilsililo); TLC (cromatografía en capa fina) R (rendimiento), TPAP (peruretano de tetrapropil amonio); MCPBA (ácido meta cloroperoxi benzoico); LDA (diisopropilamida de litio); TBS (terc-butil-dimetilsililo); 18-corona-6 (1,4,7,10,13,16-hexaoxaciclo-octadecano); DEAD (dietilazodicarboxilato); RedAI® (catálogo de Aldrich) es solución del % en peso de 65+ de hidruro bis(2-metoxietoxi)aluminio de sodio en tolueno; DCM significa diclormetano; "sat" quiere decir
saturado.

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Preparaciones

Preparación 1

(+)cis-4-terc-butil-1-terc-butiloxicarbonil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona

10

A una suspensión agitada de p-anisidina (18,4 g, 0,150 mmol) y Na_{2}SO_{4} (a50 g) en DCM anhidro (250 ml) a TA se añadió trimetilacetaldehído (20,3 ml, 1,25 eq.). Después de 2 horas, esto se filtró y el sólido se lavó con DCM anhidro adicional. Se eliminó el disolvente del filtrado y el residuo cristalino se disolvió en DCM anhidro (750 ml) y se introdujo en una atmósfera de nitrógeno. Se añadió trietilamina (48,0 ml, 2,3 eq.) y la reacción se enfrió hasta -78ºC. Gota a gota se añadió cloruro de benciloxiacetilo (27,2 ml, 1,15 eq.) y después se dejó calentar la reacción hasta la TA. Tras 24 horas, esto se lavó con HCl 0,5M (dos veces),solución de NaHCO_{3} acuoso sat., salmuera y se secó (Na2SO_{4}). Se eliminó el disolvente y el residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (elución en gradiente con DCM al 20% en hexano con de 0 a 20% de EtOAc, para proporcionar (\pm) cis-4-terc-butil-3-benciloxi-1-p-metoxibencil-azetidinona en forma de un sólido cristalino (46,9 g, 92%): RMN ^{1}H (CDCl^{3}) \delta 1,09 (s, 9H), 3,81 (s, 3H), 4,15 (d, 1H, J= 5,5 Hz), 4,77 (, 1H, J= 11,9 Hz), 4,81 (d, 1H, J= 55,5 Hz), 5,03 (d, 1H, J= 11,9 Hz), 6,87-7,43 (m, 9 Hz); LRMS (ESI) 340 ([M + H]^{+}). A una solución bien agitada de la azetidinona (10,38 g, 30,6 mmol) en acetonitrilo (600 ml) en un baño de hielo durante 1 hora se añadió una solución de nitrato amónico cérico (60,4 g, 3,6 eq.) en 900 ml de agua. A continuación se extrajo la reacción con EtOAc (dos veces) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con una solución de NaHCO_{3} acuosa sat. (dos veces), solución al 20% de NaHSO_{3} acuoso, solución de NaHCO_{3} acuoso sat. y salmuera. Después de secado (Na_{2}SO_{4}), se eliminaron los disolventes y el residuo se purificó mediante cromatografía en una gel de sílice (elución por gradiente con porciones de hexano que contienen de 10 a 40% de EtOAc), para proporcionar 5,64 g de (\pm) cis-3-benciloxi-4-terc-butil-azetidin-2-ona ligeramente impuro: RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,04 (s, 9H), 3,51 (d, 1H, J= 5,2 Hz), 4,71 (m, 2H), 4,96 (d, 1H, J= 11,9 Hz), 6,10 (sa, 1H), 7,35 (m, 5 H). Se hidrogenó una suspensión de este material (5,54 g, 23,8 mmol) y 2,5 g de Pd al 10% sobre carbón en EtOH absoluto (100 ml) (34 psi de H_{2}, aparato Parr) durante 23 horas. Se añadieron otros 2 g del catalizador de Pd y la hidrogenación continuó durante otras 17 horas a 50 psi de H_{2}. El catalizador se eliminó mediante filtración y se retiró el disolvente del filtrado, para dejar (\pm) cis-3-hidroxi-4-(terc-butil)-azetidin-2-ona bruto: RMN ^{1}H (CDCl_{3}+ 1 gota de D_{2}O) \delta 1,05 (s, 9H), 3,48 (d, 1H, J= 5,0 Hz), 4,98 (d, 1H, J= 5,0 Hz). Este material se disolvió en DMF seca (40 ml) y se añadieron imidazol (3,24 g, 2 eq.) y cloruro de trietilsililo (4,0 ml, 1 eq.). Teas 10 minutos, la reacción se repartió entre agua y una mezcla de EtOAc y hexano (1:1). La fase orgánica se lavó con agua (dos veces), salmuera y, después, se secó (Na_{2}SO_{4}). Se eliminaron los disolventes y el residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (elución por gradiente con de 20% a 25% de EtOAc en hexano), para proporcionar de (\pm) cis-4-terc-butil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona (3,86 g): : RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,70 (m, 6H), 0,98 (m, 18H), 3,39 (d, 1H, J= 5,0 Hz), 4,88 (dd, 1H, J= 2,1, 5,0 Hz), 6,08 (sa, 1H). Una solución de esta azetidinona (2,04 g, 7,92 mmol), diisopropiletilamina (1,66 ml, 1,2 eq.), dicarbonato de di-terc-butilo (1,90 g, 1,1 eq.) y p-dimetilaminopiridina (194 mg, 0,2 eq.) en CDM seco (24 ml) se dejó agitando a TA durante 3 horas. La reacción se diluyó con DCM, se lavó con salmuera y se secó (Na_{2}SO_{4}). La eliminación del disolvente, seguida por la purificación por cromatografía en una columna de gel de sílice (elución por gradiente con de 0 a 20% de EtOAc en hexano) proporcionó 2,71 g (96%) del compuesto del título en forma de un aceite: : RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,70 (m, 6H), 1,00 (m, 9H), 1,09 (s, 9H), 1,53 (s, 9H), 3,90 (d, 1H, J= 6,50 Hz), 4,93 (d, 1H, J= 6,5 Hz).

Preparación 2

(\pm) cis-1-terc-butiloxicarrbonil-4-iso-propil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona

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A una solución agitada de p-anisidina (5,00 g, 40,7 mmol) y Na_{2}SO_{4} anhidro (25 g) en DCM anhidro (80 ml) a TA se añadió isobutiraldehído (4,62 ml, 1,25 eq.). Tras 1 hora, esto se filtró y el sólido se lavó con DCM anhidro adicional. Se eliminó el disolvente del filtrado y el residuo se disolvió en DCM anhidro (200 ml) y se introdujo en una atmósfera de nitrógeno. Se añadió trietilamina (13,1 ml, 2,3 eq.) y la reacción se enfrió hasta -78ºC. Gota a gota se añadió cloruro de acetoxiacetilo (5,00 ml, 1,15 eq.) y se dejó calentar la reacción hasta la T. Después de 20 horas, esto se lavó con HCl 0,5M (dos veces), una solución de NaHCO_{3} acuoso sat., salmuera y se secó (Na_{2}SO_{4}), se eliminó el disolvente y el residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (elución por gradiente con de 20% a 30% de EtOAc en hexano), para proporcionar (\pm) cis-3-acetoxi-4-sopropil-1-p-metoxibencil-azetidin-2-ona en forma de un sólido (7,15 g, 63%): RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,99 (d, 3H, J= 7,0 Hz), 1,02 (d, 3H, J= 7,0 Hz), 2,20 (s, 3H), 3,82 (s, 3H), 4,24 (t, 1H, J= 5,6 Hz), 6,06 (d, 1H, J= 5,3 Hz), 6,88-7,38 (m, 4H).A una solución bien agitada de azetidinona (7,20 g, 26,0 mmol) en acetonitrilo (500 ml) en un baño de hielo durante 1 hora se añadió una solución de nitrato amónico cérico (51,3 g, 3,6 eq.) en 750 ml de agua. A continuación, la reacción se extrajo con EtOAc (dos veces) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con una solución de NaHCO_{3} acuoso sat. (dos veces), una solución del 20% de NaHSO_{3} acuoso, una solución de NaHCO_{3} acuoso sat. y salmuera. Después de secado (Na_{2}SO_{4}), se eliminaron los disolventes para dejar 4,26 g de (\pm) cis-3-acetoxi-4-isopropil-1-azetidin-2-ona bruto: RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,86 (d, 3H, J= 6,6 Hz), 1,02 (d, 3H, J= 7,0 Hz), 2,20 (s, 3H), 0,99 (d, 3H, J= 6,6 Hz), 1,89 (m, 1H); 2,17 (s, 3H), 3,52 (dd, 1H, J= 4,8, 9,0 Hz), 5,96 (dd, 1H, J= 2,5, 4,6 Hz), 6,38 (sa, 1H). LMS (ESI negativa) 170 [(M + H)^{-}]. Una suspensión de este material (4,26 g, 24,9 mmol) y K_{2}CO_{3}(102 mg, 0,03 eq.) en MeOH (40 ml) se dejó agitar a TA durante 1,5 horas. Después se añadió Amberlite-IR-20 para neutralizar la reacción. esto se filtró y se eliminó el disolvente del filtrado para obtener (+) cis-3-hidroxi-4-iso-propil-azetidin-2-ona bruto. Este material se disolvió en DMF seco (40 ml) y se añadieron imidazol (3,39 g, 2 eq.) y cloruro de trietilsililo (4,19 ml, 1 eq.). Tras 10 minutos, la reacción se repartió entre agua y una mezcla de EtOAc y hexano (1:1). La fase orgánica de lavó con agua (dos veces), salmuera, y después se secó (Na_{2}SO_{4}). Se eliminaron los disolventes y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (elución por gradiente con de 25% a 35% de EtOAc en hexano), para proporcionar (\pm) cis-4-isopropil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona (4,63 g, 77%): RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,65-1,03 (m, 21H), 1,93 (m, 1H), 3,29 (dd, 1H, J= 4,8, 9,1 Hz), 4,87 (dd, 1H, J= 2,8, 4,7 Hz), 6,05 (sa, 1H). Una solución de esta azetidinona (1,05 g, 4,32 mmol), diisopropiletilamina (0,90 ml, 1,2 eq.), dicarbonato de di-terc-butilo (1,04 g, 1,1 eq.) y p-dimetilamino piridina (10 mg, 0,2 eq.) en DCM seco (10 ml) se dejó agitando a TA durante 30 minutos. La reacción se diluyó con DCM, se lavó con salmuera y se secó (Na_{2}SO_{4}). La eliminación del disolvente seguida por la cromatografía en columna de gel de sílice (elución por gradiente con de 10% al 20% de EtOAc en hexano), proporcionó 1,31 g (88%) del compuesto del título en forma de un aceite: RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,66-1,07 (m, 21H), 1,53 (s, 9H), 2,15 (m, 1H), 3,87 (t, 1H, J= 6,4, Hz), 4,88 (d, 1H, J= 6,1 Hz); LRMS (ESI) 344 [(M + H)]^{+}.

Preparación 3

(\pm) cis-1-benzoil-4-isopropil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona

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Una solución de (+) cis-4-isopropil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona (486 mg, 2,00 mmol), cloruro de benzoílo (0,255 ml, 1,1 eq.), diisopropiletilamina (0,346 ml, 1,2 eq.) y p-dimetilaminopiridina (244 mg, 1 eq.) en DCM seco (6 ml) se dejó agitando a 0ºC durante 6 horas. Se eliminó el baño y la reacción se dejó agitando durante la noche. Después se diluyó con DCM y se lavó con agua, una solución de HCl ac. (0,1N), una solución de NaHCO_{3} ac. saturado, salmuera y se secó (Na_{2}SO_{4}). La eliminación del disolvente seguida por la cromatografía en columna de gel de sílice (elución por gradiente con de 0% a 5% de EtOAc en hexano), proporcionó el compuesto del título: RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,47-0,94 (m, 21H), 2,09 (m, 1H), 4,07 (m, 1H), 4,75 (m, 1H), 7,24-7,76 (m, 5H).

Preparación 4

(3R,4R)-1-neopentilcarbonil-4-fenil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona

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Siguiendo el procedimiento anterior y usando cloruro de neopentilcarbonilo y (3R,4R)-4-fenil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona se convirtieron en el producto del título: RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,19-0,62 (m, 15H), 0,88 (s, 3H), 2,43 (d, 1H, J= 13,8 Hz), 2,62 (d, 1H, J= 14,1 Hz), 4,90 (d, 1H, J= 5,7 Hz), 4,95 (d, 1H, J= 6,0 Hz), 7,05-7,17
(m, 5H).

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Preparación 5

(3R,4R)-1-ciclobutilcarbonil-4-fenil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona

14

Siguiendo el procedimiento anterior y usando cloruro de ciclobutilcarbonilo, el compuesto (3R,4R)-4-fenil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona se convirtió en el producto del título: RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,18-0,61 (m, 15H), 1,66-2,22 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 4,89 (d, 1H, J= 5,7 Hz), 4,94 (d, 1H, J= 5,7 Hz), 7,03-7,18 (m, 5H).

Preparación 6

(3R,4R)-1-neopentiloxicarbonil-4-fenil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona

15

Siguiendo el procedimiento anterior y usando neopentilcloroformiato, el compuesto (3R,4R)-4-fenil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona se convirtió en el producto del título: RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,39-0,97 (m, 24H), 3,73 (d, 1H, J= 10,2 Hz), 3,90 (d, 1H, J= 10,2 Hz), 5,10 (m, 2H), 7,31 (m, 5H).

Preparación 7

1) Síntesis del derivado 1 de bacatina

16

A una solución de 10-desacetilbacatina (47,4 g, 87 mmol) en N,N-dimetilformamida (DMF) anhidra (500 ml) se añadió imidazol (47 g, 691 mmol) a temperatura ambiente. La solución se agitó durante 10-15 minutos hasta que se observó una solución clara. Gota a gota se añadió diisopropildiclorosilano (58 ml, 322 mmol) a la mezcla de reacción. La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. A la solución se añadió una cantidad adicional de diisopropildiclorosilano (6 ml) y la reacción se agitó durante 60 minutos. En este punto, la HPLC indicó la finalización de la reacción. A la mezcla se añadió metanol (36 ml) y la solución se agitó durante 60 minutos. La reacción se detuvo y se diluyó con una mezcla de terc-butil-metil cetona (TBME) (500 ml) y agua (200 ml). Se separaron las capas y la fase orgánica se lavó con salmuera (250 ml), se secó (sulfato sódico) y se evaporó, para proporcionar el derivado 1 de bacatina trisililada (91 g, rendimiento> 100%) en forma de un compuesto amorfo de color blanco que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

ESILRMS M^{+}calculado para C_{50}H_{84}O_{13}Si_{3}: 977; Encontrado: 977.

2) Síntesis del derivado 2 de bacatina

17

A una solución del derivado 1 de bacatina (90 g, 92 mmol) en DMF (500 ml) se añadió imidazol (22 g, 320 mmol) a 0ºC. Gota a gota se añadió dimetilclorosilano (35 ml, 320 mmol) a 0ºC. En este punto se observó precipitación del compuesto. La mezcla (pasta) de reacción se agitó durante 0,5 h a 0ºC. El sólido se filtró y se lavó con DMF frío (3 x 150 ml). Después de secar al aire, el sólido se volvió a disolver en TBME (700 ml) y la solución se lavó con agua (3 x 200 ml), salmuera (250 ml) y se secó (sulfato sódico). La solución se filtró a través de una lámina corta de sílice. La eliminación del disolvente en condiciones de vacío proporcionó el compuesto 2 con un rendimiento del 77% (70 g).

ESILRMS M+ calculado para C_{50}H_{90}O_{13}Si_{4}: 1035. Encontrado 1035.

3) Síntesis del derivado 3 de bacatina

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A una solución agitada de 2 (66,3 g, 64 mmol) en tolueno (680 ml) a -34ºC se añadió Red-A1 (50 ml, 160 mmol, 65% en peso en la solución de hidruro bis(2-metoxietoxi)aluminio sódico en tolueno), gota a gota durante un periodo de 10 minutos. La mezcla de reacción se calentó hasta -25ºC y se agitó durante 1,5 h. A la mezcla de reacción se añadió gota a gota metanol (62 ml), manteniendo la temperatura interna entre -20ºC y -25ºC. La solución se diluyó con TBME (500 ml), seguido por la adición de una solución de hidróxido sódico 1N (60 ml) y salmuera (60 ml). La solución se agitó durante 30 minutos. A la mezcla se añadió celite (12 g), se agitó durante 10 minutos y se filtró a través de una lámina de celite. Se separaron las capas. La capa orgánica se lavó con agua, salmuera y se secó (sulfato sódico). A continuación, la solución se pasó por una lámina corta de sílice antes de eliminar el disolvente. El compuesto se obtuvo con un rendimiento del 97% (62 g) en forma de un sólido blanco.

ESILRMS M+ calculado para C_{50}H_{88}O_{12}Si_{4}: 993. Encontrado 993.

4) Síntesis del derivado 4 de bacatina

19

En una atmósfera de argón, a una solución de 3 (62 g, 62 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (THF) (600 ml) a -60ºC se añadió gota a gota LHMDS (bis(trimetilsilil)amida de litio (125 ml, 125 mmol, solución 1M en THF). La solución se agitó durante 15 minutos, seguido por la adición de cloroformiato de metilo (9 ml, 116 mmol); se mantuvo la temperatura interna de la solución a -60ºC. La reacción se calentó lentamente hasta 0ºC y la mezcla se agito durante 3 horas. Después de completada la reacción, se añadió cloruro amónico saturado (300 ml). La mezcla de reacción se extrajo con TBME (100 ml). La capa orgánica se lavó con cloruro amónico saturado (200 ml), agua (200 ml), salmuera (200 ml), se secó (sulfato sódico) y se evaporó, para proporcionar el compuesto 4 en forma de un aceite (67 g, >100%). El material bruto se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

ESILRMS M+ calculado para C_{52}H_{90}O_{14}Si_{4}: 1051. Encontrado 1051.

5) Síntesis del derivado 5 de bacatina

20

A una solución del derivado 4 de bacatina (62 g, 59 mmol) en THF seco (260 ml) se añadió el complejo trietilamina-ácido fluorhídrico (56 ml, 344 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante 3 horas. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (350 ml) y se lavó con agua (200 ml), salmuera (200 ml), se secó (sulfato sódico) y se evaporó, para proporcionar el compuesto 5 (43 g, >100% de rendimiento bruto). La nueva mezcla del compuesto bruto en una mezcla de acetato de etilo caliente (350 ml) y hexanos (50 ml) dio el compuesto 5 puro con un rendimiento del 90%.

ESILRMS M+ calculado para C_{29}H_{36}O_{11}: 560. Encontrado 560.

6) Síntesis del derivado 6 de bacatina

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21

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A una solución agitada de bacatina (32 g, 57 mmol) e imidazol (11,7, 172 mmol en DMF (220 ml) a -65ºC se añadió diisopropildiclorosilano (26,8 ml) en argón. La temperatura de la mezcla de reacción se mantuvo a -60ºC y la mezcla se agitó durante 2 h. Tras la finalización de la reacción (HPLC), se añadió una solución de imidazol en metanol (11,7 g de imidazol disueltos en 35 ml de metanol) y la solución se agitó a 0ºC durante 30 minutos. La mezcla se extrajo con TBME (500 ml). La fase orgánica se lavó con agua (4 x 150 ml), se secó (sulfato sódico) y se evaporó, para proporcionar el compuesto 6 bruto (45 g). El material bruto se disolvió después en acetonitrilo (150 ml) y la solución se lavó con hexanos (3 x 100 ml). La eliminación de acetonitrilo dio el compuesto 6 puro en forma de un sólido blanco (34 g, rendimiento del 84%).

ESILRMS M+ calculado para C_{36}H_{52}O_{12}Si: 704. Encontrado 704.

7) Síntesis del derivado 7 de bacatina 4-desacetil-7-[bisisopropil(metoxi)]sililoxi-4-metoxicarbonil-bacatina

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A una solución del derivado 6 de bacatina (33,2 g, 47 mmol) en DMF (200 ml) se añadió, gota a gota, LHMDS (61,2 ml, 61,2 mmol) a -43ºC. La reacción se agitó durante 15 minutos seguido por la adición de anhídrido acético (5,8 ml, 63 mmol). La reacción se agitó durante 30 minutos a -40ºC. Se añadió ácido acético (3,6 ml) y se eliminó el baño de enfriamiento. La mezcla de reacción se extrajo con TBME (300 ml). Se separó la capa orgánica y se lavó con agua (3 x 150 ml), salmuera (150 ml), se secó (sulfato sódico) y se evaporó. para proporcionar el producto bruto. La purificación de este compuesto se consiguió mediante cristalización en una mezcla de THF:heptano (1:6). La introducción de 40 g proporcionó 21 g de derivado 7 de bacatina cristalizado (rendimiento del 60%).

ESILRMS M+ calculado para C_{38}H_{54}O_{13}Si: 746. Encontrado 746.

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Ejemplo 1

Compuesto Ia

3'-terc-butil-3'-N-terc-butiloxicarbonil-4-desacetil-3'-desfenil-3'-N-desbenzoil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel

23

Una solución de (\pm)-cis-4-terc-butil-1-(terc-butiloxicarbonil)-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona (2,71 g, 5 eq.) y 4-desacetil-7-[biisopropil(metoxi)]sililoxi-4-metoxicarbonil-bacatina (1,13 g, 1,52 mmol) en THF seco (100 ml) en N_{2} se enfrió hasta -50ºC y se añadió una solución de LiHMDSA (1,97 ml, 1,3 eq., 1,0M en THF). Después de 5 minutos, esto se transfirió a un baño que se mantuvo de -35ºC a -30ºC durante 20 h y después a -25ºC durante 24 h. Después, la reacción se inactivó con una solución de NH_{4}Cl acuoso saturado y se extrajo con una mezcla de EtOAc y hexano (1:1). Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera y se secaron (Na_{2}SO_{4}). Se eliminaron los disolventes y el residuo se purificó mediante cromatografía (cromatografía radial en una placa de gel de sílice de 6 mm; elución por gradiente con de 5% a 20% de EtOAc en hexano), para proporcionar 1,55 g de 3'-terc-butil-3'-N-terc-butiloxicarbonil-7-[bisisopropil(metoxi)]sililoxi-4-desacetil-3'-desfenil-3'-N-desbenzoil-4-O-metoxicarbonil-2'-trietilsililoxi-paclitaxel en forma de una mezcla de 2', 3'-diastereómeros. Esta mezcla se disolvió en THF seco (60 ml) y se añadió trifluorhidrato de trietilamina (0,92 ml, 4 eq.). Después de 22 h a TA, la reacción se neutralizó con una solución de NaHCO_{3} ac. saturado y después se extrajo con EtOAc. los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se eliminaron los disolventes. El residuo se purificó mediante cromatografía (cromatografía radial; placa de gel de sílice de 2mm; elución por gradiente en de 10% a 50% de EtOAc en hexano), para proporcionar (en el orden de elución): 210 mg (18%) de 2'S,3'S-terc-butil-3'-N-terc-butiloxicarbonil-4-desacetil-3'-desfenil-3'-N-desbenzoil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel { RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,04 (s, 9H), 1,13 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,37 (s, 9H), 1,65 (s, 1H), 1,66 (s, 3H), 1,84-1,93 (m, 2H), 2,17 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,55 (m, 3H), 3,00 (d, 1H, J= 6,5 Hz), 3,74 (d, 1H, J= 10,8 Hz), 3,79 (d, 1H, J= 6,9 Hz), 3,92 (s, 3H), 4,16 (d, 1H, J= 8,5 Hz), 4,33 (d, 1H, J= 8,5 Hz), 4,42 (m, 1H), 4,54 (d, 1H, J= 6,5 Hz), 4,87 (d, 1H, J= 10,6 Hz), 5,01 (d, 1H, J= 7,7 Hz), 5,68 (d, 1H, J= 7,0 Hz), 5,76 (m, 1H), 6,32 (s, 1H), 7,44-8,05 (m, 5H); LRMS (ESI) 846 [(M + H)+]} y 668 mg (56%) del compuesto el título {RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,07 (s, 9H), 1,14 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,66 (s, 4H), 2,23 (s, 3H), 2,38-2,59 (m, 4H), 3,11 (d, 1H, J= 5,8 Hz), 3,77 (d, 1H, J= 11,1 Hz), 3,82 (d, 1H, J= 7,0 Hz), 3,96 (s, 3H), 4,20 (d, 1H, J= 8,6 Hz), 4,33 (d, 1H, J= 8,6 Hz), 4,39 (m, 1H), 4,53 (d, 1H, J= 5,4 Hz), 4,88 (d, 1H, J= 10,6 Hz), 4,98 (d, 1H, J= 7,9 Hz), 5,69 (d, 1H, J= 7,1 Hz), 6,03 (m, 1H), 6,28 (s, 1H), 7,40-8,11 (m, 5H); LRMS (ESI) 846 [(M + H)+]}.

Ejemplo 2

Compuesto Ib

3'-N-terc-butiloxicarbonil-4-desacetil-3'-desfenil-3'-N-desbenzoil-3'-isopropil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel

Siguiendo el procedimiento anterior, el compuesto (\pm)-cis-1-terc-butiloxicarbonil-4-isopropil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona se acopló con 4-desacetil-7-[biisopropil(metoxi)]sililoxi-4-O-metoxicarbonil-bacatina. La desprotección seguida pos cromatografía dio el compuesto del título RMN ^{1}H (CDCl_{3}+ D_{2}O) \delta 1,03 (d, 3H, J= 6,7 Hz), 1,09 (d, 3H, J= 6,7 Hz), 1,14 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,31 (s, 9H), 1,66 (m, 3H), 1,83-2,02 (m, 5H), 2,24 (s, 3H), 2,25-2,59 (m, 3H), 3,68 (dd, 1H, J= 2,0, 9,2 Hz), 3,82 (d, 1H, J= 6,9 Hz), 3,98 (s, 3H), 4,19 (d, 1H, J= 8,6 Hz), 4,34 (d, 1H, J= 8,6 Hz), 4,39 (m, 1H), 4,43 (d, 1H, J= 2,0 Hz), 4,82 (sa, 1H), 4,98 (d, 1H, J= 7,8 Hz), 5,69 (d, 1H, J= 7,0 Hz), 6,11 (m, 1H), 6,28 (s, 1H), 7,45-8,12 (m, 5H); LRMS (ESI) 832 [(M + H)^{+}].

Ejemplo 3

Compuesto Ic

3'-N-neopentilcarbonil-4-desacetil-3'-N-desbenzoil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel

Una solución de (3R,4R)-1-neopentil-4-fenil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona (525 mg, 1,4 eq.) y 4-desacetil-7-[biisopropil(metoxi)]sililoxi-4-O-metoxicarbonil-bacatina (523 mg, 0,700 mmol) en THF seco (15 ml) se enfrió hasta -50ºC y se añadió en agitación una solución de LiHMDSA (0,84 ml, 1,2 eq., 1,0M en THF). Después de 40 minutos, se dejó calentar la reacción hasta 0ºC. Después de 1,5 h, esto se inactivó con una solución ac. saturada de NH_{4}Cl, la reacción se extrajo con EtOAc. El extracto orgánico se lavó con una solución ac. saturada de NH_{4}Cl, salmuera y se secó (Na_{2}SO_{4}). La eliminación de los disolventes seguida por cromatografía en columna de gel de sílice (elución por gradiente con mezclas del 0% al20% de EtOAc en hexano), proporcionó 2,78 mg (54%) de 3'-N-neopentiloxicarbonil-7-[biisopropil(metoxi)]sililoxi-4-desacetil-3'-N-desbenzoil-4-O-metoxicarbonil-2'-trietilsililoxi-paclitaxel. Esto se tomó directamente y se trató con trifluorhidrato de trietilamina (0,161 ml, 4 eq.) en THF seco (6 ml) y se dejó agitando a TA durante la noche. Después de la neutralización con una solución ac. saturada de NaHCO_{3}, la reacción se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera y se secaron (Na_{2}SO_{4}). La eliminación de los disolventes seguida por la cromatografía en columna de gel de sílice /elución por gradiente con mezclas del 20% al 50% de EtOAc en hexano) proporcionó 151 mg (71%) del producto del título: RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,96-2,58 [32H, incluyendo 0,96 (s, 9H), 1,14 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,66 (s, 3H), 1,84 (s, 3H), 2,23 (s, 3H)], 3,58 (sa, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,80 (d, 1H, J= 5,5 Hz), 4,19 (d, 1H, J= 8,3 Hz), 4,33 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 4,36 (m, 1H), 4,65 (d, 1H, J= 2,0 Hz), 4,95 (d, 1H, J= 8,5 Hz), 5,58 (dd, 1H, J= 2,3, 8,8 Hz), 5,69 (d, 1H, J= 7,0 Hz), 6,11 (d, 1H, J= 8,9 Hz), 6,16 (m, 1H), 6,27 (s, 1H), 7,29-8,12 (m, 10H); LRMS (ESI) 864 [(M + H)^{+}].

Ejemplo 4

Compuesto Id

3'-N-ciclobutil-4-desacetil-3'-N-desbenzoil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel

Siguiendo el procedimiento anterior y usando (3R,4R)-1-ciclobutil-4-fenil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona, el compuesto 4-desacetil-7-[biisopropil(metoxi)]sililoxi-4-O-metoxicarbonil-bacatina se convirtió en el producto del título: RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,14-2,53 [m, 27H, incluyendo:1,14 (s, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,67 (s, 3H), 1,84 (s, 3H), 2,24 (s, 3H)], 3,01 (m, 1H), 3,56 (sa, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,82 (m, 1H), 4,20 (d, 1H, J= 8,4 Hz), 4,34 (d, 1H, J= 8,5 Hz), 4,37 (m, 1H), 4,68 (d, 1H, J= 2,3 Hz), 4,96 (d, 1H, J= 8,6 Hz), 5,58 (dd, 1H, J= 2,4. 9,0 Hz), 5,70 (d, 1H, J= 7,0 Hz), 6,16 (m, 2H), 6,27 (s, 1H), 7,29-8,14 (m, 10H); LRMS (ESI) 848 [(M + H)^{+}].

Ejemplo 5

Compuesto Ie

3'-terc-butil-3'-N-ciclohexiloxicarbonil-4-desacetil-3'-desfenil-3'-N-desbenzoil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel

Siguiendo el mismo procedimiento anterior con ciclohexiloxicloroformiato, el compuesto 3'-terc-butil-3'-N-terc-butiloxicarbonil-4-desacetil-3'-desfenil-3'-N-desbenzoil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel se convirtió en el producto del título: RMN ^{1}H (CDCl_{3} + D_{2}O) \delta 1,10-2,61 [38H, incluyendo 1,10 (s, 9H), 1,16 (s, 3H), 1,26 (s, 3H), 1,69 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 2,26 (s, 3H)], 3,84 (m, 2H), 3,99 (s, 3H), 4,23 (d, 1H, J= 8,6 Hz), 4,40 (m, 3H), 4,57 (s, 1H), 5,02 (m, 2H), 5,7 (d, 1H, J= 7,08 Hz), 6,06 (m, 1H), 6,30 (s, 1H), 7,46-8,13 (m, 5H); LRMS (ESI) 872 [(M + H)^{+}].

Ejemplo 6

Compuesto If

3'-terc-butil-4-desacetil-3'-desfenil-3'-N-desbenzoil-3'-N-neopentilcarbonil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel

Siguiendo el mismo procedimiento anterior con cloruro de terc-butilacetilo, el compuesto 3'-terc-butil-3'-N-terc-butiloxicarbonil-4-desacetil-3'-desfenil-3'-N-desbenzoil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel se convirtió en el producto del título: RMN ^{1}H (CDCl_{3} + D_{2}O) \delta 1,00-2,56 [39H, incluyendo 1,00 (s, 9H), 1,11 (s, 9H), 1,16 (s, 3H), 1,26 (s, 3H), 1,69 (s, 3H), 1,91 (s, 3H), 2,26 (s, 3H)], 3,83 (d, 1H, J= 7,1 Hz), 3,98 (s, 1H), 5,00 (d, 1H, J= 7,5 Hz), 5,73 (m, 2H), 6,02 (m, 1H), 6,29 (s, 1H), 7,45-8,13 (m, 5H); LRMS (ESI) 844 [(M + H)^{+}].

Ejemplo 7

Compuesto Ig

4-desacetil-3'-N-desenzoil-3'-N-tercbutoxicarbonil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel

Siguiendo los procedimientos anteriores y usando (3R,4R)-1-terc-butiloxicarbonil-4-fenil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona, se preparó el compuesto Ig. RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,13-8,10 (m, 2H), 7,61-7,26 (m, 8H), 6,27 (s, 1H), 6,19 (m, 1H), 5,68 (d, J= 6,9 Hz), 5,35-5,29 (m, 2H), 4,97 (d, J= 7,7 Hz, 1H), 4,63 (d, J= 3,9 Hz, 1H), 4,42-4,37 (m, 1H), 4,25 (AB c, J= 8,8 Hz, J= 47,7 Hz, 2H), 3,85-3,81 (m, 4H), 3,40 (d, J= 5,1 Hz, 1H), 2,59-1,03 (m, 30H, incluye singletes a 2,24, 1,87, 1,71, 1,27, 1,14, 3H cada uno, 1,32, 9H).

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Ejemplo 8

Compuesto Ih

4-desacetil-3'-N-desbenzoil-3'-N-nbutoxicarbonil-4-O-metoxicarbonil-paclitaxel

Usando los procedimientos descritos antes con (3R,4R)-1-nbutoxicarbonil-4-fenil-3-trietilsililoxi-azetidin-2-ona, se preparó el compuesto Ih. RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 8,11 (d, J= 7,4 Hz, 2H), 7,62-7,29 (m, 10H), 6,27 (s, 1H), 6,27 (m, 1H), 5,69 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 5,41 (abq, J= 47,9, 9,4 Hz, 2H), 4,97 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 4,66 (sa, 1H), 4,38-4,32 (m, 1H), 4,26 (abq, 45,0, 8,6 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,42 (da, J= 4,1 Hz, 1H), 2,59-2,35 (m, 4H), 2,24 (m, 3H), 1,86 (s, 3H), 1,67 (s, 3H), 1,65 (d, J= 33,0 Hz, 3H), 1,67 (s, 3H), 1,51-1,47 (, 2H), 1,24 (s, 3H), 1,14 (s, 3H), 0,83 (m, 3H).

Anál. calculado para C_{45}H_{55}NO_{16}: C, 62,42; H, 1,62. Encontrado: C, 62,28; H, 6,45; N, 1,55.

Ejemplo 9

Compuesto Ij

3'-N-desbenzoil-3'-N-ciclobutilcarbonil-3'-desfenil-3'-terc-butil-4-desacetil-4-metoxicarbonil-paclitaxel

Una solución de 3'-N-desbenzoil-3'-N-terc-butil-3'-desfenil-3'-terc-butil-4-desacetil-4-metoxicarbonil-paclitaxel (2,30 g, 2,72 mmoles) en DCM (15,0 ml) se trató con ácido trifluoroacético (15,0 ml) y se agitó a 0ºC durante 1,5 h. La mezcla se diluyó con 100 ml de DCM y se vertió en una solución fría (0ºC) formada por 50,0 g de NaHCO_{3} en 150 ml de agua. Se separaron las fases y la capa orgánica se concentró al vacío. El producto se pudo purificar mediante cromatografía en columna de gel de sílice eluyendo con metanol al 4%/DCM, aunque generalmente se usó sin purificar. El 3'-N-desbenzoil-3'-desfenil-3'-terc-butil-4-desacetil-4-metoxicarbonil-paclitaxel bruto se disolvió en acetato de etilo (15,0 ml) y se trató con NaHCO_{3} saturado (15,0 ml). Se añadió cloruro de ciclobutano carbonilo (460,0 \mul, 4,08 mmoles, 1,5 eq.) y la mezcla bifásica se agitó enérgicamente a temperatura ambiente durante 20 minutos. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se separaron las fases. La fase orgánica se lavó con NaHCO_{3} saturado y después con salmuera. La solución orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtró y se concentró al vacío. La purificación mediante cromatografía preparativa de fase inversa eluyendo con 20% de acetonitrilo/agua durante 5 minutos, ascendiendo hasta 60% de acetonitrilo/agua durante 45 minutos, después isocrático durante 45 minutos, a un caudal de 250 ml/min, proporcionó el compuesto del título (1,47 g, rendimiento del 65%, pureza del 97% mediante análisis HPLC) en forma de un sólido amorfo de color blanco que exhibía las siguientes propiedades físicas: RMN ^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 8,08 (d, J= 7,1 Hz, 2H), 7,62-7,55 (m, 1H), 7,48-7,43 (m, 2H), 6,27 (s, 1H), 5,99 (dd, J= 7,8 Hz, J= 9,0 Hz, 1H), 5,69 (m, 2H), 4,98 (dd, J= 2,0 Hz, J= 9,5 Hz, 1H), 4,55 (dd, J= 1,1 Hz, J= 5,2 Hz, 1H), 4,40-4,32 (ma, 2H), 4,22 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 4,14 (d, J= 19,2 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,80 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 3,30 (d, J= 5,1 Hz, 1H), 2,97 (p, J= 7,9 Hz, 1H), 2,58-2,36 (ma, 4H), 2,23 (s, 3H), 2,19-2,03 (ma, 4H), 1,92-1,76 (ma, 3H), 1,88 (s, 3H), 1,66 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,14 (s, 3H), 1,06 (s, 9H): RMN ^{13}C (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 203,70, 174,99, 174,93, 171,46, 166,89, 153,21, 142,54, 133,74, 133,20, 130,22, 129,81, 128,72, 84,13, 83,21, 78,92, 76,09, 75,68, 74,94, 73,39, 72,06, 70,17, 58,36, 57,73, 56,03, 51,07, 45,74, 43,34, 39,91, 35,94, 35,47, 27,37, 26,85, 25,60, 25,44, 22,12, 20,95, 18,29, 14,95, 9,72: LRMS (ESI): 828,51 ((M + 1)^{+}, 100%), 886,57 ((M + NH_{4} + ACN)^{+}, 15%); 826,48 ((M + 1)^{-}, 100%).

Ejemplo 10

Compuesto Ik

3'-N-desbenzoil-3'-N-(2-furoílo)-3'-desfenil-3'-terc-butil-4-desacetil-4-metoxicarbonil-paclitaxel

Se prepara de igual forma que el ejemplo 9 anterior. El compuesto del título (2,13 g, rendimiento del 73%, pureza del 98% mediante análisis HPLC) se obtuvo en forma de un sólido amorfo de color blanco que exhibía las siguientes propiedades físicas: RMN ^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 8,15-8,08 (m, 2H), 7,64-7,56 (m, 1H), 7,52-7,25 (m, 3H), 7,03 (dd, J= 0,6 Hz, J= 3,4 Hz, 1H), 6,78 (d, J= 10,2 Hz, 1H), 6,48 (dd, J= 1,8 Hz, J= 3,5 Hz, 1H), 6,25 (s, 1H), 6,06 (dd, J= 7,6 Hz, J= 8,9 Hz, 1H), 5,70 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 5,00 (dd, J= 1,9 Hz, J= 9,4 Hz, 1H), 4,40-4,32 (m, 3H), 4,23 (d, J= 8,6 Hz, 1H), 4,05 (s, 3H), 3,48 (d, J= 4,5 Hz, 1H), 2,60-2,50 (m, 2H), 2,38 (dd, J= 3,3 Hz, J= 8,8 Hz, 1H), 2,23 (s, 3H), 2,05 (s, 1H), 1,95-1,85 (m, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,68 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,14 (s, 12H); RMN ^{13}C (CDCl_{3}, 75 MHz) \delta 203,71, 174,23, 171,55, 167,06, 158,22, 153,06, 147,65, 144,30, 142,53, 133,93, 133,36, 130,32, 129,42, 128,88, 114,95, 112,51, 84,20, 83,48, 79,06, 77,65, 76,20, 75,81, 75,05, 72,96, 70,55, 58,50, 57,97, 56,40, 46,07, 43,33, 36,09, 35,55, 27,53, 27,05, 22,00,21,25, 21,06, 14,97, 14,39, 9,83; LRMS (ESI): 840,43 ((M + 1)^{+}, 100%), 838,43 ((M - 1)^{-}, 100%).

Datos biológicos

Otro aspecto de la presente invención se refiere a un procedimiento para inhibir tumores humanos y/o de otros mamíferos, que comprende la administración por vía oral a un huésped que tiene un tumor una cantidad eficaz como antitumoral de un compuesto de fórmula I.

Los materiales y procedimientos utilizados para las pruebas antitumorales in vivo de nuestros taxanos orales se resumen a continuación:

Materiales

Animales. A ratones convencionales o atímicos ("desnudos") y ratas desnudas se les implantó por vía subcutánea (sc) fragmentos o restos blandos de un tumor. Los tumores murinos se implantaron en los ratones convencionales, los tumores humanos se implantaron en ratones o ratas desnudas.

Tumores. Los tumores utilizados más a menudo incluyeron los siguientes: carcinoma pulmonar murino, M109, carcinoma de mama murino, MAM 16/C, carcinoma ovárico humano, A2780, tumores colónicos humanos, HCT-116 y HCY-116/pk. Los compuestos I exhibían actividad antitumoral después de su administración oral en uno o más de los modelos de tumores mencionados anteriormente.

Procedimientos para los resultados de la Tabla III

Los experimentos se llevaron a cabo usando ratones atímicos ("desnudos". Típicamente, los tratamientos se comenzaron cuando los tumores tenían un tamaño de entre 100 y 500 mg (por lo general del día 7 al día 12 tras la implantación del tumor) para el modelo de xenoinjerto del tumor ovárico humano A2780. Los tamaños de los grupos fueron típicamente de 8 por grupo de tratamiento y control en los experimentos con ratones. El compuesto se administró a la dosis indicada en la Tabla III, a saber, una vez al día en días alternos durante 5 ciclos de tratamiento (es decir, c2dx5).

Los tratamientos con taxanos administrados por vía oral (vo) se llevaron a cabo con sonda usando un vehículo consistente en 10% de etanol + 10% de Cremofor EL + 80% de agua. El volumen de líquido administrado fue de 0,01 ml por gramo de peso corporal, en el caso de los ratones. Un experimento típico con ratones implicaría la evaluación de cada compuesto de prueba a tres niveles de dosis diferentes.

La actividad antitumoral se evaluó determinando el tamaño de los tumores en todos los experimentos animales tratados y control en el tiempo. Cada animal se identificó individualmente y el crecimiento del tumor implantado a cada animal se midió una o dos veces a la semana usando un compás. Se calculó la diferencia en el tiempo medio que los tumores de cada uno de los grupos tratado (T) y control (C) tardaron en alcanzar un tamaño predeterminado (por ejemplo, 500 o 1.000 miligramos) y sobre la base de lo que tardan en alcanzar en alcanzar determinados tamaños de tumores se evaluaron para determinar los efectos antitumorales absolutos y relativos (por ejemplo, entre compuestos). Los animales cuyos tumores al final del experimento eran de 35 mg o menores se denominaron "curas". Los experimentos típicamente se concluyeron después de un periodo de tiempo transcurrido después del tratamiento de al menos 10 veces tiempo en el que se dobla el volumen del tumor (TDVT) del crecimiento medio del tumor en los animales control, evaluado antes de que el tumor alcance el tamaño objetivo predeterminado en cada experimento. La actividad en un grupo de prueba se definió como la inducción de un retraso en el crecimiento del tumor (tiempo medio hasta que el tumor alcance el tamaño objetivo) en relación con el crecimiento del tumor control concomitante (es decir, T-C) de 3,32 veces el TDVT. La actividad se expresó como el "log de muerte celular", que era igual a (T-C)/(TDVT x 3,32). La toxicidad se determinó midiendo el peso corporal medio de todos los animales participantes en un experimento antes de, y justo después de, cualquier tratamiento del experimento. Además, se consideraba que los animales habían muerto a causa de lesiones inducidas por el tratamiento cuando su muerte se produjo antes de que se produjera alguna muerte en el grupo control con tumores menores que el tamaño objetivo. No se usó ningún resultado de la terapia ni ninguna declaración de actividad para un grupo de tratamiento determinado si más de un animal había muerto en ese grupo de un modo caracterizado como inducido por el tratamiento.

Todos los compuestos de la Tabla III exhibieron actividad antitumoral oral en un modelo de tumor ScM109 implantado en ratones, que se juzgó que era equivalente a la actividad antitumoral de paclitaxel administrado por vía intravenosa según su calendario óptimo de administración y dosis.

TABLA III Actividad in vivo frente a Sc A2780 de taxanos de carbonato de metilo C-4 activos por vía oral

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\begin{minipage}[t]{150mm} a. Nivel de dosis tolerada óptima o máxima probada en miligramos por kilogramo. La dosis administrada es para una sola administración y se repite en cada una de las cinco administraciones. La cantidad total de compuesto administrada durante el curso completo del tratamiento es, por tanto, cinco veces la dosis oral indicada en la Tabla III.\end{minipage}

** Se curó uno de ocho ratones de la prueba.

\begin{minipage}[t]{150mm}b. El número de ratones considerados como curas (como se ha definido antes) dividido por el número total de ratones tratados es el significado de "curas/tratados" que aparece entre paréntesis de la Tabla III.\end{minipage}

c. "Log de la muerte celular" ya se ha definido anteriormente.

Como se puede observar en los resultados de la Tabla III, todos los compuestos Ia-Ik exhibieron una actividad antitumoral oral significativa. La actividad antitumoral significativa se define como de aproximadamente un log de la muerte celular. Esto se contrastar con los resultados que se observarían para compuestos sin actividad oral, tales como paclitaxel (es decir, que tiene un log de la muerte celular de aproximadamente cero). Debe reconocerse que el paclitaxel, que es el ingrediente activo del fármaco anticancerosos disponible en el mercado TAXOL®, se administra por vía intravenosa y no se usa para administración oral ya que no es eficaz.

Para tratar una variedad de tumores, el compuesto de fórmula I de la presente invención puede usarse de forma similar a la del paclitaxel, por ejemplo véase Physician's Desk Reference, 49ª edición, Medical Economics, pág. 682, 1995. La dosificación, el modo y el calendario de administración del compuesto de esta invención no están particularmente restringidos; un oncólogo experto en la técnica del tratamiento del cáncer será capaz de establecer, sin excesiva experimentación, un prtocolo terapéutico adecuado para dministrar el compuesto de la presente invención. Por tanto, el compuesto de fórmula I puede administrarse a través de cualquier vía de administración adecuada, parenteral u oral. La administración parenteral incluye la administración intravenosa, intraperitoneal, intramuscular y subcutánea.

Las dosis utilizadas para aplicar los procedimientos de acuerdo con la invención son aquéllas que hacen posible administrar tratamiento profiláctico o inducir una respuesta terapéutica máxima. Las dosis varían en función del tipo de administración, el producto concreto seleccionado y las características personales del sujeto que se va a tratar. En general, las dosis son aquéllas que son terapéuticamente eficaces para el tratamiento de trastornos causados por la proliferación celular anómala. Los productos según la invención se pueden administrar tan a menudo como sea necesario con el fin de obtener el efecto terapéutico deseado. Algunos de los pacientes pueden responder con rapidez a dosis relativamente altas o bajas y después requerir una dosis suave de mantenimiento o ninguna dosis de mantenimiento. A través de la vía iv, la dosificación puede estar, por ejemplo, en el intervalo de aproximadamente 20 a aproximadamente 500 mg/m^{2} durante de 1 a 100 horas. A través de la vía oral, la dosificación puede estar en el intervalo de 5-1000 mg/kg/día de peso corporal. La dosis real usada variará según la composición particular formulada, la vía de administración y la localización concreta, el huésped y el tipo de tumor que se está tratando. Se deberán tener en cuenta muchos factores que modifican la acción del fármaco al determinar la dosificación, incluidos la edad, el peso, el sexo, la dieta y el estado físico del paciente.

La presente invención también proporciona formulaciones farmacéuticas (Composiciones) que contienen una cantidad antitumoral eficaz de compuestos de fórmula en combinación con uno o más vehículos, excipientes, diluyentes o adyuvantes farmacéuticamente aceptables. Las composiciones pueden prepararse de acuerdo con procedimientos convencionales. Ejemplos para formular paclitaxel o derivados del mismo se pueden encontrar en, por ejemplo, las patentes de Estados Unidos números 4.960.790 y 4.814.470, y pueden seguirse tales ejemplos para formular el compuesto de esta invención. Otros ejemplos de formulaciones de paclitaxel se encuentran en la bibliografía general que se ha citado anteriormente en el apartado de los antecedentes de la técnica. Por ejemplo, el compuesto de fórmula I puede formularse en forma de comprimidos, píldoras, mezclas de polvos, cápsulas, inyecciones, soluciones, supositorios, emulsiones, dispersiones, premezcla de alimento y en otras formas adecuadas. También puede fabricarse en forma de composiciones sólidas estériles, por ejemplo, liofilizadas y, si se desea, combinados con otros excipientes farmacéuticamente aceptables. Tales composiciones sólidas se pueden reconstituir con agua estéril, suero salino fisiológico o una mezcla de agua y disolvente orgánico, tal como propilenglicol, etanol y similares, o algún otro medio inyectable estéril, justo antes de su uso en la administración parenteral.

Vehículos farmacéuticamente aceptables típicos son, por ejemplo, manitol, urea, dextranos, lactosa, almidones de patata y de maíz, estearato de magnesio, talco, aceites vegetales, polialquilenglicoles, etilcelulosa, poli(vinilpirrolidona), carbonato cálcico, oleato de etilo, miristato de isopropilo, benzoato de bencilo, carbonato sódico, gelatina, carbonato potásico, ácido silícico. La preparación farmacéutica también puede contener sustancias auxiliares inocuas tales como agentes emulsionantes, conservantes, humectantes y similares como, por ejemplo, monolaurato de sorbitano, oleato de trietanolamina, monoestearato de polioxietileno, tripalmitato de glicerilo, dioctil sulfosuccinato sódico, y similares.

Claims (11)

1. Un compuesto de fórmula I, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable,

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en la que:

R es fenilo, isopropilo o terc-butilo;

R^{1} es C(O)R^{z}, donde R^{z} es (CH_{3})CO-, (CH_{3})_{3}CCH_{2}, CH_{3}(CH_{2})_{3}O-, ciclobutilo, ciclohexiloxi o (2-furilo); y

R^{2} es CH_{3}C(O)O-

2. Un compuesto de la reivindicación 1 seleccionado del grupo constituido por

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3. El compuesto Ia de la reivindicación 2.

4. Un compuesto de la reivindicación 2, que se selecciona del grupo constituido por:

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5. El compuesto de la reivindicación 1, en el que R es terc butilo.

6. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad antitumoral eficaz de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-5 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

7. La composición de la reivindicación 6, en la que el compuesto es cualquier compuesto de la reivindicación 2, y la composición además comprende cremofor, etanol y agua.

8. La composición de la reivindicación 7, en la que dicho compuesto es el compuesto Ia.

9. La composición de la reivindicación 6 para la administración oral a un mamífero.

10. Uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-5 en la fabricación de un medicamento para inhibir el crecimiento tumoral en un huésped mamífero.

11. El uso de la reivindicación 10, en el que el medicamento es adecuado para la administración oral.