ES2229287T3

ES2229287T3 - Peptidos antineoplasicos.

Info

Publication number: ES2229287T3
Application number: ES96943076T
Authority: ES
Inventors: Wilhelm Amberg; Teresa Barlozzari; Harald Bernard; Ernst Buschmann; Andreas Haupt; Hans-Guenther Hege; Bernd Janssen; Andreas Kling; Helmut Lietz; Kurt Ritter; Martina Ullrich; Jurgen Weymann; Thomas Zierke
Original assignee: Abbott GmbH and Co KG
Current assignee: Abbott GmbH and Co KG
Priority date: 1995-12-15
Filing date: 1996-12-11
Publication date: 2005-04-16
Anticipated expiration: 2016-12-11
Also published as: WO1997022621A3; ZA9610510B; KR100463739B1; DK0866800T3; EP1593686A1; SK285286B6; PL327175A1; CA2237721C; HUP0000172A2; KR20000064400A; CN1204342A; JP2000502092A; AU2004220772A1; AU2004220772B2; WO1997022621A2; CZ296908B6; PT866800E; NO319273B1; DE69633457D1; TR199801102T2

Abstract

SE DESCRIBEN NUEVOS PEPTIDOS DE LA SIGUIENTE FORMULA (I): R 1 R 2 N CHX CO A B D E (G) S K, TENIENDO R 1 , R 2 , A, B, D, E, G, K, X Y S LOS SIGNIFICADOS DADOS EN LA DESCRIPCION, TAMBIEN SE DESCRIBEN SUS PREPARACIONES. LOS NUEVOS PEPTIDOS POSEEN UN EFECTO ANTINEOPLASICO.

Description

Péptidos antineoplásicos.

Nuevos péptidos, preparación y uso de ellos.

La invención descrita en la presente memoria proporciona nuevos péptidos y derivados de ellos que ofrecen utilidades terapéuticas potencialmente mejoradas para el tratamiento de enfermedades neoplásicas comparados con la dolastatina -10 y -15 (patentes de EE.UU. números 4.897.276 y 4.816.444) y los compuestos descritos en el documento WO 93/23.424. El documento DE 4.415.997 A1 concierne al derivado de la dolastina

Me_{2}Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NH(CH_{2}Ph)

que se dice exhibe una actividad antineoplásica particularmente buena

Los compuestos de esta invención son péptidos de la fórmula I:

IR^{1}R^{2}N-CHX-CO-A-B-D-E-K

en el que:

R^{1}: es metilo;

R^{2}: es metilo;

A: es un resto de valina;

B: es un resto de N-metil-valina;

D: es un resto de prolilo;

E: es un resto de prolilo;

X: es isopropilo;

en el que

K es -NHC(CH_{3})_{3}, -NHCH(CH_{2}CH_{3})CH(CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{3})C(CH_{3})_{3}, -N(CH_{3})OCH_{2}CH_{3}, -N(CH_{3})OCH_{2}CH_{2}
CH_{3}, -N(CH_{3})OCH(CH_{3})_{2}, -N(CH_{3})O(CH_{2})_{3}CH_{3}, -N(CH_{3})OCH_{2}C_{6}H_{5}, -NHC(CH_{3})_{2}C_{6}H_{5}, -NHC(CH_{3})_{2}CH_{2}CH_{3},
-NHC(CH_{3})(CH_{2}CH_{3})_{2}, -NHCH[CH(CH_{3})_{2}]_{2}, -NHC(CH_{3})_{2}CN, -NHCH(CH_{3})CH(OH)C_{6}H_{5}, -NH-C(CH_{3})_{2}CH=CH_{2}, -NHC(CH_{3})_{2}C\equivCH, -NHC(CH_{2}CH_{3})_{2}C\equivCH, -NHC(CH_{3})_{2}CH_{2}CH_{2}OH, -NHC(CH_{3})_{2}CH(CH_{3})_{2}, -NHC(CH_{3})_{2}CH_{2}
CH_{2}CH_{3}, -NHC(CH_{3})_{2}CH_{2}C_{6}H_{5}, -N(OCH_{3})CH(CH_{3})_{2}, -N(OCH_{3})CH_{2}CH_{3}, -N(OCH_{3})CH_{2}CH_{2}CH_{3}, -N(OCH_{3})CH_{2}
C_{6}H_{5}, -N(OCH_{3})C_{6}H_{5}, -N(CH_{3})OC_{6}H_{5}, -N(OCH_{3})CH_{2}CH_{2}CH_{2}CH_{3},

o K es: -NHCH(C_{2}H_{5})_{2}, -NHCH(C_{2}H_{5})CH(CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{3})CH(CH_{3})_{2}, -NHC(CH_{3})_{2}C_{2}H_{5}, -NHC(CH_{3})_{2}CH
(CH_{3})_{2}, -NHCH(C_{3}H_{7})_{2}, -NHCH(C_{2}H_{5})C_{3}H_{7}, -NHCH(CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{3})C_{2}H_{5}, -NH-ciclohexil, NH-cicloheptil,

o K es:

1

100

o K es:

2

y sus sales con ácidos fisiológicamente tolerados.

Los compuestos anteriores de la fórmula (I) corresponden a péptidos de fórmula (Ia)

(Ia)(CH_{3})_{2}N-CH(CH(CH_{3})_{2})-CO-(valil)-(N-metil-valil)-(prolil)-(prolil)-K

en la que K es como se definió anteriormente.

Los compuestos preferidos de fórmula I o Ia son aquellos en los que K es: -NH-alquilo, -NH-cicloalquilo, alquilo-N-alquilo, en cuyos restos un grupo CH_{2} se puede reemplazar por O, un H por fenilo o 1 ó 2 H por F, excepto el resto de N-metoxi-N-metilamino, N-bencilamino, o N-metil-n-bencilamino, o K es:

3

4

Más preferiblemente K es:

-NHCH(CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{3})CH_{2}CH_{3}, -NHCH(CH_{2}CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{2}CH_{2}CH_{3})_{2}, -NHC(CH_{3})_{3}, -NHCH(CH_{2}
CH_{3})CH_{2}CH_{2}CH_{3}, -NHCH(CH_{3})CH(CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{2}CH_{3})CH(CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{3})C(CH_{3})_{3}, -NH-ciclohexilo,
-NH-cicloheptilo, -N(CH_{3})OCH_{2}CH_{3}, -N(CH_{3})OCH_{2}CH_{2}CH_{3}, -N(CH_{3})OCH(CH_{3})_{2}, -N(OCH_{3})CH(CH_{3})_{2}, -N(CH_{3})OCH_{2}C_{6}H_{5}, -NHC(CH_{3})_{2}C_{6}H_{5}, -NHC(CH_{3})_{2}CH_{2}CH_{3}, -NHC(CH_{3})(CH_{2}CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{3})CH(OH)C_{6}H_{5}, -NHC(CH_{3})_{2}CH_{2}CH_{2}OH, -NHC(CH_{3})_{2}CH(CH_{3})_{2}, -NHC(CH_{3})CH=CH_{2}, -NHC(CH_{3})_{2}CN, -NHC(CH_{3})_{2}C\equivCH, -N(OCH_{3})C_{6}H_{5}, -NHCH[CH(CH_{3})_{2}]_{2}, -N(OCH_{3})CH_{2}C_{6}H_{5}, -N(OCH_{3})CH_{2}CH_{3}, -N(OCH_{3})CH_{2}CH_{2}CH_{3}, -N(OCH_{3})CH_{2}CH_{2}CH_{2}
CH_{3},

5

Esta invención también proporciona métodos para preparar los compuestos de la fórmula I o Ia, composiciones farmacéuticas que contienen tales compuestos junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable y métodos para usar los mismos para tratar el cáncer en mamíferos.

Los nuevos compuestos pueden estar presentes como sales con ácidos fisiológicamente tolerados tales como: ácido clorhídrico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido láctico, ácido fosfórico, ácido metanosulfónico, ácido acético, ácido fórmico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido málico, ácido succínico, ácido malónico, ácido sulfúrico, ácido L-glutámico, ácido L-aspártico, ácido pirúvico, ácido múcico, ácido benzoico, ácido glucurónico, ácido oxálico, ácido ascórbico y acetilglicina.

Los nuevos compuestos se pueden preparar por métodos conocidos de la química de péptidos. Así, los péptidos se pueden ensamblar secuencialmente a partir de aminoácidos o uniendo pequeños fragmentos de péptidos adecuados. En el ensamblaje secuencial, comenzando en el carbono terminal la cadena del péptido se alarga por pasos con un aminoácido cada vez. En la copulación de fragmentos es posible unir juntos fragmentos de diferentes longitudes, y los fragmentos en cambio se pueden obtener por ensamblaje secuencial de aminoácidos o de ellos mismos por copulación de fragmentos.

Tanto en el ensamblaje secuencial como en la copulación de fragmentos es necesario unir las unidades formando un enlace amida. Son adecuados para esto los métodos enzimáticos y químicos.

Los métodos químicos para formar el enlace amida se describen en detalle por Mueller, Methoden der organischen Chemie Vol. XV/2, páginas 1 a 364, Thieme Verlag, Stuttgart, 1974; Stewart, Young, Solid Phase Peptide Synthesis, páginas 31 a 34, 71 a 82, Pierce Chemical Company, Rockford, 1984; Bodanszky, Klausner, Ondetti, Peptide Synthesis, páginas 85 a 128, John Wiley & Sons, New York, 1976; The Practice of Peptide Synthesis, M. Bodanszky, A. Bodanszky, Springer-Verlag, 1994, y otros trabajos estándar en la química de péptidos. Se da preferencia particular al método de la azida, al método del anhídrido simétrico y mezclado, ésteres activos generados in situ o preformados, al uso de anhídridos de amino ácidos N-carboxi protegidos con uretano y a la formación del enlace amida usando reactivos de copulación, especialmente diciclohexilcarbodiimida (DCC), diisopropilcarbodiimida (DIC), 1-etoxicarbonil-2-etoxi-1,2-dihidroquinolina (EEDQ), cloruro de pivaloilo, hidrocloruro de 1-ethyl-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDCI), anhídrido n-propanofosfónico (PPA), cloruro de N,N-bis(2-oxo-3-oxazolodinil) -amido-fosforilo (BOP-Cl), hexafluorfosfato de bromo-tris-pirrolidinofosfonio (PyBrop), difenilfosforil azida (DPPA), reactivo de Castro (BOP, PyBop) , sales de O-benzotriazolil-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HBTU), sales de O-azabenzotriazolil-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU), dietilfosforil cianuro (DEPCN), dióxido de 2, 5-difenil-2, 3-dihidro-3-oxo-4-hidroxitiofeno (reactivo de Steglich; HOTDO) and 1,1'-carbonildiimidazol (CDI). Los reactivos de copulación se pueden emplear solos o en combinación con aditivos tales como N,N-dimetil-4-aminopiridina (DMAP), N-hidroxi-benzotriazol (HOBt), N-hidroxibenzotriazina (HOOBt), azabenzotriazol, N-hidroxisuccinimida (HOSu) o 2-hidroxipiridina.

Mientras que normalmente es posible prescindir de grupos protectores en la síntesis enzimática de péptidos, en la síntesis química es necesaria la protección reversible de los grupos reactivos no implicados en la formación del enlace amida para ambos reactivos. Se prefieren tres técnicas convencionales de grupo protector para la síntesis química de péptidos: las técnicas del benziloxicarbonilo (Z), del t-butoxicarbonilo (Boc) y del 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc).

El grupo protector se identifica en cada caso en el grupo alfa-amino de la unidad de extensión de cadena. Una recopilación detallada de los grupos protectores de aminoácidos viene dada por Mueller, Methoden der organischen Chemie Vol. XV/1, páginas 20 a 906, Thieme Verlag, Stuttgart, 1974. Las unidades empleadas para ensamblar la cadena de péptidos se pueden hacer reaccionar en disolución, en suspensión o por un método parecido al descrito por Merrifield en J. Amer. Chem. Soc. 85 (1963) 2149.

Son adecuados para la síntesis de péptidos en disolución todos los disolventes que son inertes en las condiciones de reacción, especialmente agua, N,N-dimetilformamida (DMF), dimetil sulfóxido (DMSO), acetonitrilo, diclorometano (DCM), acetato de etilo, 1,4-dioxano, tetrahidrofurano (THF), N-metil-2-pirrolidona (NMP) y mezclas de dichos disolventes.

La síntesis de péptidos sobre el soporte polímero se puede llevar a cabo en todos los disolventes orgánicos inertes en los que son solubles los derivados usados de los aminoácidos. Sin embargo, los disolventes preferidos tienen adicionalmente propiedades de hinchamiento de la resina, tales como DMF, DCM, NMP, acetonitrilo y DMSO, y mezclas de estos disolventes. Después de que la síntesis se ha completado, el péptido se corta del soporte polímero. Las condiciones en las que es posible la escisión de los distintos tipos de resinas se describen en la bibliografía. Las reacciones de escisión más comúnmente usadas son catalizadas por ácido y por paladio, especialmente escisión en fluoruro de hidrógeno líquido anhidro, en ácido trifluormetanosulfónico anhidro, en ácido trifluoracético diluido o concentrado, escisión catalizada por paladio en THF o mezclas THF-DCM en presencia de una base débil tal como morfolina o escisión en mezclas de ácido acético/diclorometano/trifluoretanol. Dependiendo de los grupos protectores elegidos, éstos pueden ser retenidos o igualmente liberados con las condiciones de escisión.

También puede merecer la pena la desprotección parcial del péptido cuando se llevan a cabo ciertas reacciones de derivatización.

Se pueden preparar los péptidos dialquilados en el N terminal por copulación de los N,N-di-alquilaminoácidos apropiados en disolución o en el soporte polímero, por alquilación reductora del péptido ligado a la resina en DMF/ácido acético al 1% con NaCNBH_{3} y los aldehídos apropiados, por hidrogenación del péptido en disolución en presencia de aldehído o cetona y Pd/C.

Los distintos aminoácidos no naturales así como los distintos restos de no-aminoácidos descritos en la presente memoria se pueden obtener a partir de fuentes comerciales o sintetizar a partir de materiales comercialmente disponibles usando métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, los bloques de construcción de aminoácidos con restos R^{1} y R^{2} se pueden preparar según E. Wuensch, Houben Weyl, Meth. d. Org. Chemie, Bd. XV, 1, página 306 y siguientes, Thieme Verlag Stuttgart 1974 y la bibliografía citada en él.

Los compuestos de esta invención se pueden usar para inhibir o tratar de otra manera los tumores sólidos (por ejemplo, tumores de pulmón, mama, colon, próstata, vejiga, recto, o tumores endometriales) o malignidades hematológicas (por ejemplo, leucemias, linfomas) por administración del compuesto al mamífero.

Es una ventaja especial de los nuevos compuestos que son muy resistentes a la degradación enzimática y que también se pueden administrar oralmente.

La administración puede ser por cualquiera de los medios que son convencionales para agentes farmacéuticos, preferiblemente oncológicos, incluyendo medios orales y parenterales tales como subcutáneo, intravenoso, intramuscular e intraperitoneal.

Los compuestos se pueden administrar solos o en forma de composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la fórmula I junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable apropiado para la ruta de administración deseada. Tales composiciones farmacéuticas pueden ser productos de combinación, es decir, también pueden contener otros ingredientes terapéuticamente activos.

La dosis que se ha de administrar al mamífero contendrá una cantidad inhibidora tumoral efectiva del ingrediente activo que dependerá de factores convencionales que incluyen la actividad biológica del compuesto particular empleado; el medio de administración; la edad; salud y peso corporal del receptor; la naturaleza y extensión de los síntomas; la frecuencia del tratamiento; la administración de otras terapias; y el efecto deseado. Una dosis típica diaria será aproximadamente 0,05 a 50 miligramos por kilogramo de peso corporal en la administración oral y aproximadamente 0,01 a 20 miligramos por kilogramo de peso corporal en administración parenteral.

Los nuevos compuestos se pueden administrar en formas de administración farmacéutica sólida o líquida, por ejemplo, comprimidos sin revestir o revestidos (de película), cápsulas, polvos, gránulos, supositorios o disoluciones. Éstos se producen de una manera convencional. Las sustancias activas se pueden procesar para este propósito con agentes coadyuvantes farmacéuticos convencionales tales como agentes ligantes de comprimidos, agentes de carga, agentes conservantes, agentes desintegrantes de comprimidos, agentes reguladores de flujo, agentes plastificantes, agentes humectantes, agentes dispersantes, agentes emulsionantes, disolventes, composiciones de liberación sostenida, agentes antioxidantes y/o gases propelentes (confróntese H. Sucker et al.: Pharmazeutische Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart, 1978). Las formas de administración obtenidas de esta forma normalmente contienen 1-90% en peso de la sustancia activa.

Los siguientes ejemplos se destinan a ilustrar la invención. Los aminoácidos proteinógenos se abrevian en los ejemplos usando el conocido código de tres letras. Otras abreviaturas usadas:

Me_{2}Val = N,N-dimetilvalina, MeVal = N-metilvalina.

A. Procedimientos generales

I.: Los péptidos reivindicados en la reivindicación 1 se sintetizan por síntesis clásica en disolución usando metodología Z y Boc estándar como se describió anteriormente o por métodos estándar de síntesis en fase sólida usando técnicas de grupos protectores Boc y Fmoc.

: En el caso de síntesis en fase sólida, los ácidos N,N-dialquilpenta- o hexa-péptidos se liberan del soporte sólido y se copulan adicionalmente con las correspondientes aminas de C terminal en disolución. BOP-Cl y PyBrop se usaron como reactivos para la copulación del aminoácido resultante de los ácidos N-metilamino. Los tiempos de reacción se incrementaron correspondientemente. Para la alquilación reductora del N terminal, el péptido-resina se desprotegió en el N terminal y después de hizo reaccionar con un exceso 3 veces molar de aldehído o cetona en DMF/ácido acético al 1% con adición de 3 equivalentes de NaCNBH_{3}. Después de que se completó la reacción (ensayo de Kaiser negativo) la resina se lavó varias veces con agua, isopropanol, DMF y diclorometano.

: En la síntesis en disolución, el uso de NCAs de aminoácidos protegidos con Boc (N-tert-butiloxicarbonil-aminoácido-N-carboxo-anhidridos), NCAs de aminoácidos protegidos con Z (N-benciloxicarbonil-aminoácidos-N-carboxi-anhidridos), o el uso de cloruro de pivaloilo como agente condensante respectivamente es más ventajoso para la copulación del aminoácido resultante de los ácidos N-metilamino. La alquilación reductora del N terminal se puede realizar, por ejemplo, por reacción de los péptidos o aminoácidos desprotegidos en el N terminal con los correspondientes aldehídos o cetonas usando NaCNBH_{3} o hidrógeno, Pd/C.

II. Purificación y caracterización de los péptidos

: La purificación se llevó a cabo por cromatografía de gel (SEPHADEX G-10, G-15/10% HOAc, SEPHADEX LH20/MeOH), cromatografía de presión media (fase estacionaria: HD-SIL C-18, 20-45 micrómetros, 100 Ángstrom; fase móvil: gradiente con A = 0,1% TFA/MeOH, B = 0,1% TFA/agua), o HPLC preparativa (fase estacionaria: Waters Delta pack C-18, 15 micrómetros, 100 Angstrom; fase móvil: gradiente con A = 0,1% TFA/MeOH, B = 0,1% TFA/agua).

: La pureza de los productos resultantes se determinaron por HPLC analítico (fase estacionaria: 100 2,1 mm VYDAC C-18, 5 1, 300 A; fase móvil: gradiente de acetonitrilo-agua, tamponado con TFA al 0,1%, 40ºC).

: La caracterización fue por análisis de aminoácidos y espectrometría de masas por bombardeo con átomos rápidos.

B. Procedimientos específicos Ejemplo 1

(SEQ ID NO: 1)

Me_{2}Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH_{3})_{2} a) Z-MeVal-Pro-OMe

: Se disolvieron 66,25 g (250 mmol) de Z-MeVal-OH en 250 ml de diclorometano seco. Después de la adición de 36,41 ml (262,5 mmol) de trietilamina, la mezcla de reacción se enfrió a -25ºC y se añadieron 32,27 ml (262,5 mmol) de cloruro de pivaloilo. Después de agitar durante 2,5 h, se añadieron a la mezcla de reacción 41,89 g (250 mmol) de H-Pro-OMe.HCl en 250 ml de diclorometano neutralizado con 36,41 ml (262,5 mmol) de trietilamina a 0ºC. Se continuó la agitación durante 2 h a -25ºC y durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y se lavó minuciosamente con disolución acuosa saturada de NaHCO_{3} (tres veces), agua (una vez), ácido cítrico al 5% (tres veces) y disolución saturada de NaCl. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó a sequedad. El residuo (91,24 g) se agitó con éter de petróleo durante toda la noche y se filtró. Se obtuvieron 62,3 g del producto.

b) H-MeVal-Pro-OMe

: Se disolvieron 48,9 g (130 mmol) de Z-MeVal-Pro-OMe en 490 ml de metanol. Después de la adición de 10,9 ml (130 mmol) de ácido clorhídrico concentrado y 2,43 g de paladio al 10%/carbón vegetal, la mezcla de reacción se hidrogenó. La filtración y evaporación a sequedad produjo 36,43 g del producto.

c) Z-Val-MeVal-Pro-OMe

: Se agitaron 18,1 g (65 mmol) de H-MeVal-Pro-OMe, 21,6 g (78 mmol) de Z-Val-N-carboxianhídrido y 22,8 ml (130 mmol) de diisopropiletilamina en 110 ml de DMF a 40ºC durante 2 días. Después de la evaporación de la DMF, se añadió diclorometano y la fase orgánica se lavó con disolución acuosa saturada de NaHCO_{3} (tres veces), agua (una vez), ácido cítrico al 5% (tres veces) y disolución saturada de NaCl. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó a sequedad. El producto (29,3 g) se obtuvo como un aceite viscoso.

d) H-Val-MeVal-Pro-OMe

: Se disolvieron 29,3 g (61,6 mmol) de Z-Val-MeVal-Pro-OMe en 230 ml de metanol. Después de la adición de 1,15 g de paladio al 10%/carbón vegetal, se hidrogenó la mezcla de reacción. La filtración y evaporación a sequedad produjo 21,96 g del producto.

e) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe

: Se disolvieron 15,29 g (61 mmol) de Z-Val-OH y 21,96 g (61 mmol) de H-Val-MeVal-Pro-OMe en 610 ml de diclorometano y se enfrió a 0ºC. Después de la adición de 8,16 ml (73,2 mmol) de N-metilmorfolina, 2,77 g (20,3 mmol) de HBOt y 11,74 g (61 mmol) de EDCI, la mezcla de reacción se agito toda la noche a temperatura ambiente, se diluyó con diclorometano y se lavó minuciosamente con disolución acuosa saturada de NaHCO_{3} (tres veces), agua (una vez), ácido cítrico al 5% (tres veces) y disolución saturada de NaCl. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó a sequedad para producir 31,96 g del producto.

f) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH

: Se disolvieron 31,96 g (57 mmol) de Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe en 250 ml de metanol. Se añadieron a la disolución 102,6 ml de disolución 1 N de LiOH y la mezcla se agito toda la noche a temperatura ambiente. Después de la adición de 500 ml de agua, la fase acuosa se lavó tres veces con acetato de etilo, se ajustó a pH 2 a 0ºC y se extrajo tres veces con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó a sequedad produciendo 30,62 g del producto deseado como un sólido blanco.

g) Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH_{3})_{2}

: Se disolvieron 2 g (3,35 mmol) de Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH y 0,664 g (3,35 mmol) de H-Pro-NHCH(CH_{3})_{2} en 34 ml de diclorometano seco. Después de enfriar a 0ºC, se añadieron 1,35 ml (12,1 mmol) de N-metilmorfolina, 0,114 g (0,84 mmol) de HOBt y 0,645 g (3,35 mmol) de EDCI y la mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se añadieron 80 ml de diclorometano y la fase orgánica se lavó minuciosamente con disolución acuosa saturada de NaHCO_{3} (tres veces), agua (una vez), ácido cítrico al 5% (tres veces) y disolución saturada de NaCl (una vez). La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó a sequedad para producir 1,96 g del producto que se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional.

h) Me_{2}-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH_{3})_{2}

: Se disolvieron 1,96 g de Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH_{3})_{2} en 11 ml de metanol. Se añadieron 0,054 g de Pd al 10%/C en atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se hidrogenó a temperatura ambiente durante 4 h. Después de la adición de 0,86 ml (11,24 mmol) de una disolución acuosa de formaldehído al 37% y de 0,281 g de Pd al 10%/C, se continuó la hidrogenación durante 5 h. La filtración y evaporación del disolvente dio origen a 2,77 g de producto bruto. La purificación adicional se realizó disolviendo el péptido en agua, ajustando el pH a 2 y extrayendo la fase acuosa tres veces con acetato de etilo. La fase acuosa se ajustó después a pH 8-9 y se extrajo cuatro veces con diclorometano. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico para producir 1,37 g del producto purificado como una espuma blanca. El compuesto se purificó adicionalmente usando cromatografía líquida de presión media (10 - 50% de A en 10 min.; 50 - 90% de A en 320 min.). Las fracciones que contenían el producto se combinaron, liofilizaron, redisolvieron en agua y el pH se ajustó a 9 con LiOH 1 N. Después de la extracción con diclorometano, la fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó a sequedad. La liofilización produjo 500 mg de producto puro, que se caracterizó por espectrometría de masas por bombardeo con átomos rápidos ([M+H]^{+} = 593).

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Ejemplo 2

(SEQ ID NO: 1)

M_{2}Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHC(CH_{3})_{3} i) Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHC(CH_{3})_{3}

: Se disolvieron 2 g (3,35 mmol) de Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH y 0,692 g (3,35 mmol) de H-Pro-NHC (CH_{3})_{3} en 34 ml de diclorometano seco. Después de enfriar a 0ºC, se añadieron 1,35 ml (12,1 mmol) de N-metilmorfolina, 0,114 g (0,84 mmol) de HOBt y 0,645 g (3,35 mmol) de EDCI y la mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se añadieron 80 ml de diclorometano y la fase orgánica se lavó minuciosamente con disolución acuosa saturada de NaHCO_{3} (tres veces), agua (una vez), ácido cítrico al 5% (tres veces) y disolución saturada de NaCl (una vez). La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó a sequedad para producir 1,8 g del producto que se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional.

k) M_{2}Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHC(CH_{3})_{3}

: Se disolvieron 1,8 g de Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHC(CH_{3})_{3} en 10 ml de metanol. Se añadieron 0,049 g de Pd al 10%/C en atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se hidrogenó a temperatura ambiente durante 4 h. Después de la adición de 0,86 ml (11,24 mmol) de una disolución acuosa de formaldehído al 37% y de 0,252 g de Pd al 10%/C, se continuó la hidrogenación durante 5 h. La filtración y evaporación del disolvente dio origen a 1,82 g de producto bruto. El compuesto se purificó adicionalmente usando cromatografía líquida de presión media (10 - 50% de A en 10 min.; 50 - 90% de A en 320 min.). Las fracciones que contenían el producto se combinaron, liofilizaron, redisolvieron en agua y el pH se ajustó a 9 con LiOH 1 N. Después de la extracción con diclorometano, la fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó a sequedad. La liofilización produjo 547 mg de producto puro, que se caracterizó por espectrometría de masas por bombardeo con átomos rápidos ([M+H]^{+} = 607).

Los siguientes compuestos se prepararon o se pueden preparar según los ejemplos 1 y 2:

3.	Xaa Val Xab Pro Xac
4.	Xaa Val Xab Pro Xad
5.	Xaa Val Xab Pro Xae
6.	Xaa Val Xab Pro Xaf
7.	Xaa Val Xab Pro Xag
8.	Xaa Val Xab Pro Xah
9.	Xaa Val Xab Pro Xai
10.	Xaa Val Xab Pro Xak
11.	Xaa Val Xab Pro Xal
12.	Xaa Val Xab Pro Xam
13.	Xaa Val Xab Pro Xan
14.	Xaa Val Xab Pro Xao
15.	Xaa Val Xab Pro Xap
16.	Xaa Val Xab Pro Xaq
17.	Xaa Val Xab Pro Xar
18.	Xaa Val Xab Pro Xas
19.	Xaa Val Xab Pro Xat
20.	Xaa Val Xab Pro Xau
21.	Xaa Val Xab Pro Xav
22.	Xaa Val Xab Pro Xaw
23.	Xaa Val Xab Pro Xax
24.	Xdd Val Xab Pro Xay
25.	Xaa Val Xab Pro Xaz
26.	Xaa Val Xab Pro Xba
27.	Xaa Val Xab Pro Xbb
28.	Xaa Val Xbc Pro Xay
29.	Xaa Val Xab Pro Xbd

30.	Xaa Val Xab Pro Xbe
31.	Xaa Val Xab Pro Xbf
32.	Xaa Val Xab Pro Xbg
33.	Xaa Val Xab Pro Xbh
34.	Xaa Val Xab Pro Xbi
35.	Xaa Val Xab Pro Xbk
36.	Xaa Val Xab Pro Xbl
37.	Xaa Val Xab Pro Xbm
38.	Xaa Val Xab Pro Xbn
39.	Xaa Val Xab Pro Xbo
40.	Xaa Val Xab Pro Xbp
41.	Xaa Val Xab Pro Xbq
42.	Xaa Val Xab Pro Xbr
43.	Xaa Val Xab Pro Xbs
44.	Xaa Val Xab Pro Xbt
45.	Xaa Val Xab Pro Xbu
46.	Xaa Val Xab Pro Xbv
47.	Xaa Val Xab Pro Xbw
48.	Xaa Val Xab Pro Xbx
49.	Xaa Val Xab Pro Xby
50.	Xaa Val Xab Pro Xbz
51.	Xaa Val Xab Pro Xca
52.	Xaa Val Xab Pro Xcb
53.	Xaa Val Xab Pro Xcc
54.	Xaa Val Xab Pro Xcd
55.	Xaa Val Xab Pro Xce
56.	Xaa Val Xab Pro Xcf
57.	Xaa Xdf Xab Pro Xay
58.	Xaa Val Xab Pro Xch
59.	Xaa Val Xab Pro Xci
60.	Xaa Val Xab Pro Xck
61.	Xaa Val Xab Pro Xcl
62.	Xaa Val Xab Pro Xcm
63.	Xaa Val Xab Pro Xcn
64.	Xaa Val Xab Pro Xco
65.	Xaa Val Xab Pro Xcp
66.	Xaa Val Xab Pro Xcq
67.	Xaa Val Xab Pro Xcr
68.	Xaa Val Xab Pro Xcs
69.	Xaa Val Xab Pro Xct
70.	Xaa Val Xab Pro Xcu
71.	Xcw Val Xab Pro Xcv
72.	Xcx Val Xab Pro Xcv
73.	Xaa Val Xab Pro Pro Xcy
74.	Xaa Val Xab Pro Pro Xcz
75.	Xaa Val Xda Pro Xcv
76.	Xaa Xdb Xab Pro Xcv
77.	Xdc Val Xab Pro Xcv
78.	Xaa Ile Xab Pro Xcv
79.	Xdd Val Xab Pro Xcv
80.	Xde Val Xab Pro Xcv
81.	Xaa Xdf Xab Pro Xcv
82.	Xaa Val Xab Pro Xcg
83.	Xaa Val Xab Pro Pro Xdg
84.	Xaa Val Xab Pro Pro Xdh
85.	Xaa Val Xab Pro Pro Xdi

86.	Xaa Val Xab Pro Pro Xdk
87.	Xaa Val Xdl Pro Xcv
88.	Xde Val Xab Pro Xay
89.	Xaa Val Xdl Pro Xay
90.	Xaa Val Xab Pro Xdm
91.	Xaa Val Xab Pro Xdn
92.	Xaa Val Xab Pro Xdo
93.	Xaa Val Xab Pro Xdp
94.	Xaa Val Xab Pro Xdq
95.	Xaa Val Xab Pro Pro Xdr
96.	Xaa Val Xab Pro Xds
97.	Xaa Val Xbc Pro Xcv
98.	Xaa Ile Xab Pro Xay
99.	Xcw Val Xab Pro Xay
100.	Xaa Val Xbc Pro Xal
101.	Xaa Val Xdl Pro Xal
102.	Xaa Xdf Xab Pro Xal
103.	Xaa Ile Xab Pro Xal
104.	Xdd Val Xab Pro Xal
105.	Xde Val Xab Pro Xal
106.	Xcx Val Xab Pro Xcy
107.	Xcw Val Xab Pro Xal
108.	Xcx Val Xab Pro Xal
109.	Xcw Val Xab Pro Xav
110.	Xcx Val Xab Pro Xav
111.	Xcw Val Xab Pro Xaw
112.	Xcx Val Xab Pro Xaw
113.	Xab Val Xab Pro Xay
114.	Xab Val Xab Pro Xcv
115.	Xab Val Xab Pro Xal
116.	Xab Val Xab Pro Xam
117.	Xab Val Xab Pro Xan
118.	Xab Val Xab Pro Xao
119.	Xab Val Xab Pro Xav
120.	Xab Val Xab Pro Xaw
121.	Xab Val Xab Pro Xat
122.	Xab Val Xab Pro Xau
123.	Xab Val Xab Pro Xbf
124.	Xab Val Xab Pro Xbm
125.	Xab Val Xab Pro Xbn
126.	Xab Val Xab Pro Xbo
127.	Xab Val Xab Pro Xch
128.	Xaa Val Xab Pro Xdt
129.	Xaa Val Xab Pro Xdu
130.	Xaa Val Xab Pro Xdv
131.	Xaa Val Xab Pro Xdw
132.	Xaa Val Xab Pro Xdx
133.	Xaa Val Xab Pro Xdy
134.	Xaa Val Xab Pro Xdz
135.	Xaa Val Xab Pro Xea
136.	Xaa Val Xab Pro Xeb
137.	Xaa Val Xab Pro Xec
138.	Xaa Val Xab Pro Xed
139.	Xaa Val Xab Pro Xef
140.	Xaa Val Xab Pro Xeg
141.	Xaa Val Xab Pro Xeh

142.	Xaa Val Xab Pro Xei
143.	Xaa Val Xab Pro Xek
144.	Xaa Val Xab Pro Xel
145.	Xaa Val Xab Pro Xem
146.	Xaa Val Xab Pro Xen
147.	Xaa Val Xab Pro Xeo
148.	Xaa Val Xab Pro Xep
149.	Xaa Val Xab Pro Xeq
150.	Xaa Val Xab Pro Xer
151.	Xaa Val Xab Pro Xcg

Los ejemplos para la caracterización por espectrometría de masas de los nuevos compuestos sintetizados se dan en la siguiente tabla:

Ejemplo	Análisis por MS por bombardeo con átomos rápidos
[Número]	[Peso molecular (medido)]
3.	565
4.	579
5.	593
6.	607
7.	621
8.	635
11.	607
12.	607
13.	621
14.	649
15.	635
16.	635
17.	635
18.	635
19.	621
20.	621
21.	635
22.	635
25.	633
26.	647
27.	661
31.	623
32.	671
33.	667
34.	681
35.	655
36.	655
37.	669
38.	621
39.	635
41.	649
42.	621
43.	633
44.	667
45.	607
46.	647
47.	668
48.	655
49.	669
50.	685
51.	629

(Continuación)

Ejemplo	Análisis por MS por bombardeo con átomos rápidos
[Número]	[Peso molecular (medido)]
52.	625
53.	721
55.	579
58.	623
61.	597
62.	621
63.	609
64.	625
65.	635
66.	591
67.	715
68.	685
69.	685
70.	591
71.	607
72.	621
74.	706
75.	579
76.	579
77.	579
78.	607
79.	607
80.	607
81.	607
82.	637
83.	692
84.	706
85.	706
86.	706
87.	607
90.	635
92.	659
93.	617
94.	636
95.	678
128.	671
131.	625
139.	625
151.	637

TABLA I Secuencia de identificación de los compuestos preparados según los Ejemplos 1 y 2

Compuesto número(s)	Número de Secuencia ID
1-56, 58-72, 75, 77, 79, 80, 82, 87-94, 96, 97, 99-101, 104-151	1
73, 74, 83-86, 95,	2
57, 76, 81, 102	3
78, 98, 103	4

Los símbolos Xaa en el resumen tienen los siguientes significados:

Xaa:	N,N-dimetilvalina
Xab:	N-metilvalina

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

Los compuestos de esta invención se pueden ensayar para la actividad anti-cáncer por métodos convencionales, incluyendo, por ejemplo, los métodos descritos a continuación.

A. Metodología in vitro

La citotoxicidad se midió usando una metodología estándar para las estirpes celulares adherentes tal como el ensayo de microcultivo con tetrazolio (MTT). Se han publicado los detalles de este ensayo (Alley, MC et al., Cancer Research 48:589-601, 1988). Los cultivos de crecimiento exponencial de células tumorales tales como el carcinoma de colon HT-29 o el tumor de pulmón LX-1 se usan para hacer cultivos en placas de microtitulación. Las celdas se siembran con 3.000 células por pocillo en placas de 96 pocillos (en 150 \mul de medio), y se cultivan durante la noche a 37ºC. Se añaden los compuestos de ensayo, en diluciones de 10 veces cariando desde 10^{-4} M a 10^{-10} M. Las celdas se incuban después durante 72 horas. Para determinar el número de células viables en cada pocillo, se añade el colorante MTT (50 \mul de disolución de 3 mg/ml de bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio en disolución salina). Esta mezcla se incuba a 37ºC durante 5 horas, y después se añade a cada pocillo 50 \mul de SDS al 25%, pH 2. Después de una incubación durante toda la noche, se lee la absorbancia de cada pocillo a 550 nm usando un lector ELISA. Se calculan los valores para la media +/- SD de los datos de los pocillos replicados, usando la fórmula %T/C (% de células viables tratadas/control).

\frac{\text{Densidad óptica de las células tratadas}}{\text{Densidad óptica de las células control}} x 100 = %T/C

La concentración del compuesto ensayado que da un T/C de 50% de inhibición del crecimiento se designó como el valor IC_{50}.

B. Metodología in vivo

Los compuestos de la invención de ensayaron adicionalmente en ensayos pre-clínicos para la actividad in vivo que es indicativa de la utilidad clínica. Tales ensayos se llevaron a cabo con ratones desnudos en los que se había transplantado (xenoinjertado) tejidos tumorales, preferiblemente de origen humano, como es bien conocido en este campo. Los compuestos de ensayo se evaluaron para su eficacia anti-tumoral después de la administración a los ratones portadores del xenoinjerto.

Más específicamente, los tumores de mama humanos (MX-1) que habían crecido en ratones desnudos atímicos se trasplantaron a nuevos ratones receptores, usando fragmentos del tumor que eran de aproximadamente 50 mg de tamaño. El día del trasplante se designó como día 0. Seis a diez días después, los ratones se trataron con los compuestos de ensayo administrados como una inyección intravenosa u oralmente, en grupos de 5-10 ratones para cada dosis. Los compuestos se administraron cada dos días, durante 3 semanas, en dosis de 1-200 mg/kg de peso corporal.

Los diámetros tumorales y los pesos corporales se midieron dos veces a la semana. Los volúmenes tumorales se calcularon usando los diámetros medidos con calibradores de Vernier, y la fórmula:

(longitud x anchura^{2})/2 = mm^{3} de volumen tumoral

Los volúmenes tumorales medios se calcularon para cada grupo de tratamiento, y los valores T/C se determinaron para cada grupo en relación a los tumores de control sin tratar.

Los nuevos compuestos poseen buenas propiedades de inhibición tumoral.

(1) INFORMACIÓN GENERAL

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(i): SOLICITANTE:

\vskip0.500000\baselineskip

(A): BASF Aktiengesellschaft

\vskip0.500000\baselineskip

(B): CALLE: Carl-Bosch-Strasse 38

\vskip0.500000\baselineskip

(C): CIUDAD: Ludwigshafen

\vskip0.500000\baselineskip

(E): PAÍS: Bundesrepublik Deutschland

\vskip0.500000\baselineskip

(F): ZIP: D-67056

\vskip0.500000\baselineskip

(G): TELEFONO: 0621/6048526

\vskip0.500000\baselineskip

(H): TELEFAX: 0621/6043123

\vskip0.500000\baselineskip

(I): TELEX: 1762175170

\vskip0.800000\baselineskip

(ii): TÍTULO DE LA INVENCIÓN: Nuevos péptidos, la preparación y el uso de ellos

\vskip0.800000\baselineskip

(iii): NÚMERO DE SECUENCIAS: 4

\vskip0.800000\baselineskip

(iv): FORMULARIO LEGIBLE DEL ORDENADOR

\vskip0.500000\baselineskip

(A): TIPO DE MEDIO: Disquete, 3,5 pulgadas, 2 DD

\vskip0.500000\baselineskip

(B): ORDENADOR: IBM AT compatible, procesador 80286

\vskip0.500000\baselineskip

(C): SISTEMA OPERATIVO: MS-DOS versión 5.0

\vskip0.500000\baselineskip

(E): SOFTWARE: WordPerfect

\vskip1.000000\baselineskip

(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 1:

\vskip0.800000\baselineskip

(i): CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:

\vskip0.500000\baselineskip

(A): LONGITUD: 5 aminoácidos

\vskip0.500000\baselineskip

(B): TIPO: aminoácido

\vskip0.500000\baselineskip

(D): TOPOLOGÍA: lineal

\vskip0.800000\baselineskip

(ii): TIPO DE MOLÉCULA: Péptido

\vskip0.800000\baselineskip

(iii): DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 1:

\vskip1.000000\baselineskip

Xaa Val Xaa Pro Xaa

\vskip1.000000\baselineskip

(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 2:

\vskip0.800000\baselineskip

(i): CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:

\vskip0.500000\baselineskip

(A): LONGITUD: 6 aminoácidos

\vskip0.500000\baselineskip

(B): TIPO: aminoácido

\vskip0.500000\baselineskip

(D): TOPOLOGÍA: lineal

\vskip0.800000\baselineskip

(ii): TIPO DE MOLÉCULA: Péptido

\vskip0.800000\baselineskip

(iii): DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 2:

\vskip1.000000\baselineskip

Xaa Val Xaa Pro Pro Xaa

\vskip1.000000\baselineskip

(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 3:

\vskip0.800000\baselineskip

(i): CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:

\vskip0.500000\baselineskip

(A): LONGITUD: 5 aminoácidos

\vskip0.500000\baselineskip

(B): TIPO: aminoácido

\vskip0.500000\baselineskip

(D): TOPOLOGÍA: lineal

\vskip0.800000\baselineskip

(ii): TIPO DE MOLÉCULA: Péptido

\vskip0.800000\baselineskip

(iii): DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 3:

\vskip1.000000\baselineskip

Xaa Xaa Xaa Pro Xaa

\vskip1.000000\baselineskip

(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 4:

\vskip0.800000\baselineskip

(i): CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:

\vskip0.500000\baselineskip

(A): LONGITUD: 5 aminoácidos

\vskip0.500000\baselineskip

(B): TIPO: aminoácido

\vskip0.500000\baselineskip

(D): TOPOLOGÍA: lineal

\vskip0.800000\baselineskip

(ii): TIPO DE MOLÉCULA: Péptido

\vskip0.800000\baselineskip

(iii): DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 4:

\vskip1.000000\baselineskip

Xaa Ile Xaa Pro Xaa

Claims

1. Un péptido de la fórmula (Ia)

en el que

K es -NHC(CH_{3})_{3}, -NHCH(CH_{2}CH_{3})_{2}CH(CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{3})C(CH_{3})_{3}, -N(CH_{3})OCH_{2}CH_{3}, -N(CH_{3})OCH_{2}CH_{2}CH_{3}, -N(CH_{3})OCH(CH_{3})_{2}, -N(CH_{3})O(CH_{2})_{3}CH_{3}, -N(CH_{3})OCH_{2}C_{6}H_{5}, -NHC(CH_{3})_{2}C_{6}H_{5}, -NHC(CH_{3})_{2}CH_{2}CH_{3}, -NHC(CH_{3})(CH_{2}CH_{3})_{2}, -NHCH[CH(CH_{3})_{2}]_{2}, -NHC(CH_{3})_{2}CN, -NHCH(CH_{3})CH(OH)C_{6}H_{5}, -NH-C(CH_{3})_{2}CH=CH_{2}, -NHC(CH_{3})_{2}C\equivCH, -NHC(CH_{2}CH_{3})_{2}C\equivCH, -NHC(CH_{3})_{2}CH_{2}CH_{2}OH, -NHC(CH_{3})_{2}CH(CH_{3})_{2}, -NHC(CH_{3})_{2}CH_{2}CH_{2}CH_{3}, -NHC(CH_{3})_{2}CH_{2}C_{6}H_{5}, -N(OCH_{3})CH(CH_{3})_{2}, -N(OCH_{3})CH_{2}CH_{3}, -N(OCH_{3})CH_{2}CH_{2}CH_{3}, -N(OCH_{3})CH_{2}C_{6}H_{5}, -N(OCH_{3})C_{6}H_{5}, -N(CH_{3})OC_{6}H_{5}, -N(OCH_{3})CH_{2}CH_{2}CH_{2}CH_{3},

o K es: -NHCH(C_{2}H_{5})_{2}, -NHCH(C_{2}H_{5})CH(CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{3})CH(CH_{3})_{2}, -NHC(CH_{3})_{2}C_{2}H_{5}, -NHC(CH_{3})_{2}CH
(CH_{3})_{2}, -NHCH(C_{3}H_{7})_{2}, -NHCH(C_{2}H_{5})C_{3}H_{7}, -NHCH(CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{3})C_{2}H_{5}, NH-ciclohexilo, NH-cicloheptilo,

o K es:

\vskip1.000000\baselineskip

25

\vskip1.000000\baselineskip

26

\vskip1.000000\baselineskip

o K es

27

y sus sales con ácidos fisiológicamente tolerados.

2. Un péptido según la reivindicación 1, en el que

K es -NHC(CH_{3})_{3}, -NHCH(CH_{3})C_{2}H_{5}, -NHCH(C_{2}H_{5})_{2}, -NHCH(C_{2}H_{5})CH(CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{3})CH(CH_{3})_{2}, -NHCH(CH_{3})C(CH_{3})_{3}, -NHC(CH_{3})_{2}-C_{2}H_{5}, -NHCH[CH(CH_{3})_{2}]_{2}, -NHC(CH_{3})_{2}-CH(CH_{3})_{2}, -NHCH(C_{3}H_{7})_{2}, -NHCH(C_{2}H_{5})C_{3}H_{7}, -NH-ciclohexilo, -NH-cicloheptilo, -N(CH_{3})OC_{3}H_{7}, -NHC(CH_{3})_{2}C_{6}H_{5}, -NHC(CH_{3})(CH_{2}CH_{3})_{2}, -NHC
(CH_{3})_{2}C\equivCH, -NHC(CH_{3})_{2}CH_{2}CH_{2}OH, -NHCH(CH_{3})_{2}, -N(OCH_{3})CH_{2}C_{6}H_{5}.

\newpage

o K es

28

y sus sales con ácidos fisiológicamente tolerados.

3. El péptido según la reivindicación 1, en el que K es -NHC(CH_{3})_{3}, y sus sales con ácidos fisiológicamente tolerados.

4. Un péptido o una sal según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para usar en terapia.

5. Una composición farmacéutica, que comprende un péptido o una sal según una cualquiera de la reivindicaciones 1 a 3 junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

6. El uso de un péptido o una sal según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para la preparación de una composición farmacéutica para tratar el cáncer.

7. Un procedimiento para preparar un péptido o una sal según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende ensamblar secuencialmente aminoácidos adecuados o sus derivados y/o unir fragmentos de péptidos adecuados por síntesis en disolución o en fase sólida, y recuperar el péptido resultante.