CZ184698A3 - Nové peptidy, příprava a jejich využití - Google Patents

Nové peptidy, příprava a jejich využití Download PDF

Info

Publication number
CZ184698A3
CZ184698A3 CZ981846A CZ184698A CZ184698A3 CZ 184698 A3 CZ184698 A3 CZ 184698A3 CZ 981846 A CZ981846 A CZ 981846A CZ 184698 A CZ184698 A CZ 184698A CZ 184698 A3 CZ184698 A3 CZ 184698A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
methyl
nhc
prolyl
residue
tert
Prior art date
Application number
CZ981846A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ296908B6 (cs
Inventor
Wilhelm Dr. Amberg
Teresa Barlozzari
Harald Dr. Bernard
Ernst Dr. Buschmann
Andreas Dr. Haupt
Hans-Guenther Dr. Hege
Bernd Dr. Janssen
Andreas Dr. Kling
Helmut Lietz
Kurt Dr. Ritter
Martina Dr. Ulrich
Jürgen Dr. Weymann
Thomas Dr. Zierke
Original Assignee
Basf Aktiengesellschaft
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Basf Aktiengesellschaft filed Critical Basf Aktiengesellschaft
Publication of CZ184698A3 publication Critical patent/CZ184698A3/cs
Publication of CZ296908B6 publication Critical patent/CZ296908B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/10—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using coupling agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

•<3
Nové peptidy, příprava a jejich využití
Popis vynálezu
Vynález zde popsaný poskytuje nové peptidy a jejich deriváty, které nabízejí potenciálně vylepšené terapeutické využití při léčbě neoplastiekých onemocněni ve srovnání s dolastinem-10 a -15 (Patent USA č. 4,879,276 a 4.8ió,444) a sloučeninami popsaným v WO 93/23424.
Sloučeniny tohoto vynálezu zahrnují nové peptidy o vzorci 1
R^UN-CHX-CO-A-B-D-E-jGR-K I kde
R1 je vodík, methyl nebo ethyl;
R2 je methyl nebo ethyl; nebo
R^N-R2 jsou společně pyrrolidinový kruh;
A je valylový, isolcucylový, allo-isoleucylový, 2-terc.butylglycylový, 2ethyIglyeylový. norleucylový nebo norvalylový zbytek;
B je N-methyl-valylový. N-tnethyl-norvalylový, N-methyl-leucylový, Nmcthyl-isoleucylový, N-methyl-2-terc.butyIglyeylový, N-methyl-2tiiyiglyeylový nebo N-ineiliyl-iiorlcucySový zbytek,
O je prolylový, homoprolylový, hydroxyprolylový nebo lhiazolidin-4karbonylový zbytek;
E je prolylový, homoprolylový. hydroxyprolylový. thiazolidin-4karbonylový, trans-4-lluoro-L-prolylový, cis-4-íluoro-E-prolylový, trans-4-ehloro-L-prolylový nebo cts-4-chloro-L-prolylový zbytek;
X je ethyl, propyl, butyl, isopropyl, sek.butyl, tert.buty 1, cyklopropyl nebo cyklopentyl;
G je L-2-terc.butylglycylový, D-2-terc.butylglycylový, D-valylový, Disoleucylový. D-leucylový, D-norvalylový, 1-aminopentyl-1karbonylový nebo 2.2-dimelhylglycylový zbytek;
s je 0 nebo 1;
K je -NH-Crs-alkylový, -NII-C3.s-alkenylový, -NH-Cj.g-alkinylový, NH- Gé-s-cykloalkyiový, -NH-Cu-alken-C3.8cykioalkylový; C|4-aikylN- Ci-6-alkylový zbytek, ve kterém jedna CH2 skupina může být nahrazena O nebo S, jeden H fenylem nebo kyano skupinou nebo 1.2.3 H jsou nahrazeny F s výjimkou N-methoxy-N-methylamino, Nbenzylamino nebo N-metbyl-N-benzylamino skupin nebo K je
0 0 0 a jejich soli s fyziologicky tolerovanými kyselinami.
K může být specificky -NHCH3, -NFICH2CH3, -NH(CH2)2CH3,
-NH(CH2)3CH3, -NII(CíI2)4CH3, -NH(CH2)5CH3, -NH(CH2)6CII3, -NHCII(CH2)7CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH(CH3)CH2CH3, -NHCH(CH2CH3)2, -NHCII(CH2CH2CH3)2, -NHC(CH3)3, -NHCH(CH2CI13)CH2CH2CH3,-NHCH(C!í3)CH(CH3)2, -NIICH(CH2CH3)CH(CH3)2, -NHCII(CH3)C(CH3)3, -NH-cyklohexyl, -NH-cykloheptyi, -NH-cykiooktyi, -N(CH3)OCH2CH3, -N(CII3)OCH2CH2CH3, -N(CH3)OCH(CII3)2, -N(CH3)O(CH2)3CII3, -N(CH3)OCH2C6I I5. -NH(CH2)2C6H5, -NH(CH2)3C6Hs, -NI1CII(CTi3)C6Hs -NHC(CH3)2C6H5, -NIIC(CH3)2CH2CH3. -NIIC(CH3)(CH2CH3)2. -NHCIl[Cn(CH3)2]2,-NHC(CH3)2CN, -NHCII(CH3)CH(OH)C6H5, -NHCH2-cyklohexyl,-NI1CH2C(CH3),. -NIICH,CH(CH3)2. -N(CH3)2, -N(CH2C113)2, -N(CI12CH2CH,)2. -NHCH,CF;, -NHCH(CH2F)2, -NIICII2CIRF, -NHCII2CII2OCH3, -NHCH2CH2SCH3, -NUCIECHCIE, -NHC(CH3)2CH=CH2, -NHC(CH3)2C=CH, -NHC(CII2CH3)2C=CH, -NHC(CH3)2CH2CH2OH. -NH(CH2CH,O)2CH2CH„-NH(CH2Cn2O),CH2CII3, -NHC(CH3)2CH(CH3)2,-NHC{CH3)2C112CH2CH„
-NHC(CH3)2CH2C6H5. -N(OCI1,)CH(CH3)2,-N(OCH3)CH2CH3, -N(OCH3)CH,CU2CI í3, -NO IIjCH-C IE. -N(OCH3)C6H5, -N(OCH3)OC6H5, -NIlC] l[CH(C'H,)2j2, -N(()CH3)CH2CH2UH2CH3, nebo speciální kruhové systémy zmíněné výše.
Upřednostňované jsou sloučeniny o vzorci 1, kde substituenty R1, R?', A. B, D, E, X, (i a s mají následující význam:
R? vodík, methyl nebo ethyl, speciálně pak methyl;
R’ vodík, nebo ethyl, speciálně pak methyl;
·· · · ·
Λ · · • · »Μ ···« • · · · · • · · · ·· ♦·
A valyl, isoleucyl, 2-terc.butylglycyl, 2-cthylglycyl, norleucyl nebo norvalyl, speciálně valyl, isoleucyl, 2-terc.butylglycyl, 2-ethylglycyl;
B N-mcthyl-valyl, N-methyi-norvalyl, N-methyl-isoleucyl,
N-methyl-2-terc.butylglycyl, N-methyl-2-ethylglycyl nebo N-methyl-norleucyl, speciálně N-methyl-valyl, N-methyl2-eihylgiycyi. N-methyl-norleucyi, N-methyi-isoieucyl nebo N-methyl-2-terc.butyl-glycyl;
D prolyl, homprolyl nebo thiazolidin-4-karbonyl, speciálně pralyI nebo thiazolidin-4-karbonyl;
E prolyl. homprolyl, thíazolidin-4-karbonyl, trans-4-fluor-Lprolyl, eis-4-íluor-L-prolyk trans-4-chlor-L-prolyl nebo cis-4-fluor-L-prolyl, speciálně prolyl, trans-4-lluor-prolvl, cis-4-lluor-prolyl, trans-4-chlor-prolyl nebo cis-4-chlorprolvl;
X ethyl, propyl, isopropyl, sek.butyl, terč.butyl cyklopropyl, speciálně ethyl, isopropyl, sek.butyl nebo tere.butyl;
G L-2-ícíc.buíyiglycyiúvý, B-2-íěic.buíyiglycylovy, Dvalylový, D-isoleucylový. D-leucylový nebo 2,2dimethylglycylový zbytek;
s 0 nebo 1.
Upřednostňovaný významy pro K představují:
• 9 ·
-NH-C |.g-alkylový, -NH-CY-cykloalkylový, -NFI-CH2-cyklohexylový,
C]4-alkyl-N-C[.6-alkylový zbytek, ve kterém jedna CH2 skupina může být nahrazena O, jeden H fenylem nebol nebo 2 H jsou nahrazeny F s výjimkou N-methoxy-N-melhylaminového, N-benzylaminonového nebo N-methyl-N-benzylaminového zbytku, K též je
9 99 9 9
Upřednostňované substitucnty jsou:
-NHCFh, -NHCFUCFU, -NU(CH2)2CH3, NI I(CII2)3CII3.
K!1 Ιί/'ΤΙ \ /·’Π ΜΠι/'ΊΙ \ PIT XtTl/Pll \ ΛΊΤ 11TÍPTI/
-ΙΝΓ11 v i η 113 s -ιήι^ι i2ASVi ij, -i ni i (v π 2 )(Λ i13, -in π v ri(
-NUCU(CII3)2. -NlICn(ClIj)CII2CH3, -NIICH(CH2CH3)2.
-NHCH(CH2CH2CH3)2, -NHC(CH3)3, -NHCI I(CI I2CH3)C’H2CH2CH3, -NIICIÍ(CII3)C’II(C113)2. - NI ICI T(C?ÍI2C113)CH(CIΪ02.
-NHCH(CH3)C(CH3)3.-NH-cyklohcxyl, -NH-cykloheptyh -NH-cyklooktyl, -N(CH3)OCH2CH3, - N(CH3)t)CU2CH2CU3,
4 • · *
-N(CH3)OCH(CH3)2, -N(CH3)O(CH2)3CH3, -N(CIÍ3)OCH2C6II5, -NH(CH2)2CfiH5, -NH(CII2)3C6H5, -NHCH(CH3)C6H5, -NHC(Cn3)2C6H5,-NHC(CH3)2CH2CIl3, -NHC(CH3)(CII2CH3)2, -NHCII(CH,)CH(OH)C6H5, -NIICIL-cyklohexy], -N(CH3)2, -N(CH3CH3)2, -N(CH2CH2CH,)2. -NHCH(CH2F)2,
-NHC(CH3)2CH2Cí I2OH, -NH(CH2CH2O)2CI I2CH3, -NHC(CHj)2CH2CH2CH3, -NHC(CH3)>CH=CH2, -NHC(CH3)2CN, -NHC(CH3)?C=CH, -NHC(CH2CH3)2C=CH,-NHC(CH3)2CONH2, -N(0CH,)C6H5, -NHCH[CH(CH,)2]2, -N(OCH3)CH2C6H5, -N(OCH3)CII,CH3. -N(OCH3)CH2CI í,CH3. -N(OCH3)CH2CH2CI í,CH„
Speciálně preferované sloučeniny o vzorci I jsou:
R1 a 1<2 jsou methyl;
A je valylový, isoleucylový, 2-terc.butylglycylový zbytek;
B N-melhyl-valylový, N-methyl-isoleueylový,
N-mcthyl-2-terc.butylglycylový zbytek;
I) je prolylový nebo thiazolidin-4-karbonylový zbytek;
• · ··· · *· •4 «4 44 4444 I • 4 4 4 4 4 «
I · 44 ·· ··
E je prolyí, thiazolidin-4-karbonyl, cis-4-fluor-I .-proly 1 nebo cis-4-ehlor-prolyl;
X je isopropylový, sek.butylový, terc.butylový zbytek;
s 0 nebo 1, a
K je
-NHCII(CH3)2, -NHCH(CI1j)CH2CH3, -NHCH(CH2CH3)2, -NHCH(CH2CH2CH3)2. -NHC(CH3)3, ’NHCH(CH2CIl3)CH2CH2CH3. -NHCH(CII3)CII(CHO2. - NHCII(CH2CH3)CH(CH3)2? -NHCH(CH3)C(CIl3b, -NH-cvkloheptyk -NH-cyklooktyl. -N(CHj)OCH2CH3, - N(CH3)OCH2CI-l2CIl3, -NÍCHjjOCIKCIlj/, -N(()CH3)CII(CH3)„ -Ν(€Η3)Οί’ΠΓήΗ,, -NH(CH2)3CGH5, -NH(CH3)3C6H5, -NlíCHjCHÚCJHj, -NHC(CH3)2C6H5, -NHC(CH3)2Cn2CH3,-NHC(CH3)(CH2CH3)?,
-NHCH(CII3)CH(OH)C(;H5, -NI ICH(CI kb/ -NHC(CH,),CH2CH,OII. -NH(CH,CIΙΌΚ1 12CH3, -NI1C(CH3)XTI=CH;, -NIIC(CH3)2CH(C!I3b, -N(OCH3)C’lkCH3.-N(OCH,)CH,CH2CIl3. -NHC(CH3)?CN, -NHC(CH/C-CH, -NHCH|CH(CH3)2|,. -NHC(CI1.),CONH,. -NI IC(CH3)?CII2CJI3, -N(OCIIt)C(lHs, -N(OCH3)CH2C(!H5.
t_r. r·
— NH ch3
--CO-NH—CH2—CH2—CH3 .
CH3 ·· » · • ··· · 0 00 »0 ·0 · · ·000 ·
0 0 0 0 0 0 *0 00 0· · ·
Tento vynález též poskytuje metody přípravy sloučenin o vzorci I, farmaceutických složení obsahujících takovéto sloučeniny společně s farmaceuticky přijatelným nosičem a metody použití těchto sloučenin pro léčbu rakoviny u savců.
Tyto nové sloučeniny mohou být přítomné jako soli fyziologicky tolerantních kyselin jakými jsou: kyselina chlorovodíková, kyselina citrónová, kyselina vinná, kyselina mléčná, kyselina fosforečná, kyselina methansulfonová, kyselina octová, kyselina mravenčí, kyselina maleinová, kyselina fumarová, kyselina jablečná, kyselina jantarová, kyselina malonová, kyselina sírová, kyselina L-glutamová, kyselina Laspartová, kyselina pyrohroznová, kyselina slízová, kyselina benzoová, kyselina glukuronová, kyselina šťavelová, kyselina askorbová a acety lglycin.
Nové sloučeniny lze připravit známými metodami peplidove chemie. Tak např., peptidy lze sestavit sekvenčně z aminokyselin nebo spojením malých peptidových fragmentů. V sekvenčním spojování se začíná s Ckonee a peptidový řetězec je postupně rozšiřován přidáváním jedné aminokyseliny. V fragmentovém spojování je možné spojovat dohromady fragmenty o rozdílných délkách a tyto fragmenty lze naopak získat sekvenčním spojováním z aminokyselin nebo fragmentovým snninváním menšírh frnnm^ntij
J ’ ........J-----¢-,. xxwt.lV·.
Jak v sekvenčním spojování tak i ve spojování fragmentovém je nutný jednotlivé jednotky spojovat vytvářením amidové vazby. Pro toto jsou vhodné enzymatické i chemické metody.
• · ··· ··φφ • ·» • · » φ φ · φφ φφ • φφφ φφ·φ φ φ φ φ φφ φφ
Chemické metody tvořící amidovou vazbu jsou podrobně popsány Muellerem , Methoden der organischen Chemie Vol. XV/5, str. 1 - 364, Thiemc Verlag, Sutgart, 1974; Stewart, Young, Solid Phase Peptide Synthesis, str. 31 - 34, 71 - 82, Pierce Chemical Company, Rockford, 1984; Bodanszky, Klausner, Ondetti, Peptide Synthesis, str. 85-128, John Wiley & Sons, New York, 1976; The Practícc of Peptide Synthesis, M. Bodanszky, A. Bodanszky, Springer - Verlag, 1994 a další standardní práce pojednávající i peptidové syntéze. Speciálně jsou používány azidová metoda, metoda symetrických a smíšených anhydridů, metoda esterů generovaných in šitu nebo esterů aktivních, použití urethanu chráněného N-karboxyanhydridy aminokyselin a vytváření amidové vazby užitím spojovacích prostředků, speciálně pak dicykíohexylkarbodiiinidu (DCC), diisopropylkarbodiimidu (D1C), 1ethoxykarbonyl-2-ethoxy-l ,2-dihydrochinolinu (EEDQ), pivaloylchloridu, hydrogenchloridu 1 -etliy 1-3-(3dimethylaminopropyljkarbodiimidu (EDCl), anhydridů kyseliny npropanfodfonové (PPA). N,N-bis(2-oxo-3-oxazolodinyl)-amido fosforylchloridu (BOP-CI), bromo-trís-pyrrolidinofosfonium hexafluoro fosfátu (PyBrop), di fenyl fosfory lazidu (DPPA), Castrova činidla (BOP, PyBop), O-benzoíriazolyl-Ν,Ν,Ν'.Ν’tctramethvluroniových solí (HBTU), O-azabenzotriaz,olyl-N,N,N’,N'tctramethyluroniových solí (HAT(J), diethyífosforyIkyanidu (DEPCN), 2.5-diícriy’-2.j-uuiydio-3-oxo-4-hydroxyťnioienoxidu (Stegiíchovo činidlo; UOTDO) a 1,1’-karbony Idiimidazolu (CDI).
Spojovací činidla lze použit samostatně nebo v kombinaci s přídavnými látkami jakými jsou N,N-dimelhyl-4-arninopyridin (DMAP), N-hydroxybenzotriazol (IlOBt), N-hydroxybenzotriazin (HOOBl). azabenzotriazol, N-hydroxysukcinimid (HOSu) nebo 2-hydroxypyridin.
φφφφ φ φφφ • φ φφ φφ φφ φφφφ φ φφ φφφφ φφφ |0 φφφ ΦΦΦΦ ΦΦ ΦΦ ΦΦ *·
Jestliže je zcela možné odstranit chránící skupiny v enzymatické peptidové syntéze, tak reverzibilní ochrana reaktivních skupin nezahrnutých do tvorby amidové vazby je nutná pro oba reaktanty v chemické syntéze. Při peptidové syntéze je přednost dávána třem konvenčním technikám chránění: technika benzyloxykarbonylová (Z), tbutoxykarbonylová (Boc) a 94’luorenylmethoxykarbonylová (Fmoc).
V každém případě je identifikovaná chránící skupina na alfaaminoskupine jednotky rozšiřující řetězec. Detailní přehled chránících skupin aminokyselin lze nalézt v Mucller. Methodcn der organischen Chemie Vol. XV/1 str. 20 - 906. Thieme Verlag, Stuttgart, 1974. Jednotky používané pro spojování peptidového řetězce mohou reagovat v roztoku, suspenzi nebo pomocí metody popsané Merrifcldem v J. Anter. Chem.Soc. 85 (1963) 2149.
Vhodná rozpouštědla pro peptidovou syntézu v roztoku jsou všechna rozpouštědla, která jsou inertní za daných reakčních podmínek, speciálně pak voda. Ν,Ν-dimethylfcrmamid (DMF), dimethylsulfoxid (DMSO). acetonitril, dichlormctan (DCM), ethylacetat, 1,4-dioxan, tetrahydrofuran (THF), N-mcthyl-2-pyrrolldin (NMP) a lze též použít jejich směsi.
Peptidovou syntézu na polymerním nosiči lze provádět ve všech inertních organických rozpouštědlech, ve kterých jsou použité deriváty aminokyselin rozpustné. Avšak upřednostňovaná rozpouštědla mají též takové vlastnosti, že bobtnají pryskyřice, takovýmito rozpouštědly jsou DMF, DCM, NMP, acetonitril a DMSO a též směsi těchto rozpouštědel. Poté. co je syntéza dokončená, tak je peptid odštěpen od polymerního nosiče. Podmínky, za kterých je odštěpení peptidu od rozdílných tvpu pryskyřic provedeno, jsou možné najít v literatuře. Nejčastčji používané odštěpující reakce jsou katalyzované kyselinami a paladiem, speciálně lze použít kapalný bezvodý fluorovodík, bezvodá kyselina triíluormethansulfonová, zředěná nebo koncentrovaná kyselina trifluoroctová, odštěpení katalyzované paladiem v THF nebo smčsíehTHF-DCM lze provést v přítomnosti slabých bází jako je morfolin, odštěpení lze též provést ve směsích kyseliny octové/dichlormetanu/trilluorethanolu. V závislosti na chránící skupině, ty lze buď zachovat nebo za daných podmínek odštěpit.
Částečná sejmutí chránící skupiny peptidu může být užitečné, pokud mají být provedeny jisté derivatizaění reakce.
Peptidy dialkylované na N-koncích lze připravit buď spojováním na vhodných NfN-di-alkylaminokyselinách v roztoku nebo na polymerním nosiči, reduktivní alkylací peptidu vázaného na pryskyřici v DMF/1% kyselině octové s NaCNBJR a vhodnými aldehydy, hydrogenací peptidu v roztoku v přítomnosti aldehydu nebo ketonu a Pd/C.
Různé aminokyseliny, které se nevyskytují v přírodě, právě tak i části rozdílných aminokyselin zde uvedených lze získat z komerčních zdrojů nebo mohou být syntetizovány z komerčně dostupných materiálů použitím metod, které jsou známé zkušeným v oboru. Např. stavební jednotky aminokyselin se skupinám.1. R a R“ 1 jil nrinrn, id *·^ 4 I T' •Λ, pl |p| U V i V pVJUlV
Wuensch, Metli. d. Org. Chem., Bd XV, 1, od str. 306, Thieme Verlag. Stuttgart 1974 a literatura tam citovaná.
Sloučeniny tohoto vynálezu lze použít k inhibování nebo k jinému druhu léčby pevných nádorů (např. nádory plic, prsu, tlustého střeva, prostaty, žlučníku, konečníku nebo endometriálnícb nádorů) nebo zhoubných * · · · • « · · * · · nádorů krve (např. leukémie, nádory lymfatických uzlin) podáváním sloučeniny savci.
Velkou výhodou těchto nových sloučenin je, že jsou vysoce odolné vůči enzymatické degradaci a dají se též podávat ústně.
Podávání lze provádět jakýmkoliv prostředkem, který je běžný pro podávání léků, zvláště pak onkologických činidel, včetně orálních nebo parenterálních způsobů, jako subkutánně, intravenózně, intramuskulárnč nebo intraperitoneálně.
Sloučeniny lze podávat samostatně nebo ve formě farmaceutických složení obsahujících sloučeninu o vzorci I společně s farmaceuticky přijatelným nosičem vhodným pro žádaný způsob podávání. Takováto farmaceutická složení mohou být kombinační produkty, tj. mohou obsahovat jiné terapeuticky aktivní ingredienty.
Dávka podávaná savci obsahuje účinné množství aktivní složky, která inhibuje tumor, toto množství závisí na konvenčních faktorech včetně biologické aktivity použité sloučeniny; na způsobu podávání; na věku. zdraví a tělesné váze příjemce; povaze a rozsahu symptomu; frekvenci léčby; podávání ostatních terapií a žádaném vlivu. Typická denní dávka je okolo 0,05 až 50 miligramů na kilogram tělesné váhy při orálním podávání a asi 0,01 až 20 mg na kilogram váhy při parenterálním podávání.
Tylo nové sloučeniny lze podávat v konvenčních pevných nebo kapalných farmaceutických lékových formách, např. nepotažených nebo lilmem potažených tabletách, kapslích, prášcích, granulích, Čípkách nebo roztocích. Tyto jsou připravovány konvenčním způsobem. Aktivní látky lze pro tento účel zpracoval pomocí konvenčních farmaceutických • · · · pomůcek, jako jsou pojivá, plniva, ochranné látky, tabletové dezintegrátory, regulátoru prostupu, změkčovadla. smácedla, dispergátory, emulgátory, rozpouštědla, sloučeniny pro trvalé spouštění, antioxidanty a/nebo hnací plyny (srov. H. Sucker et al.; Pharmazeutische Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart, 1978). Formy pro podávání tímto způsobem běžně obsahují 1-90 hm. % aktivní látky.
Smyslem následujících příkladů je ilustrovat tento vynález.
Aminokyseliny budující proteiny jsou v následujícím textu označeny zkratkami za použití třípísmenkového kódu. Další použité zkratky : Me^Val - Ν,Ν-dimethylvalin, MeVal - N-methylvalin.
Příklady provedení vynálezu
A. Obecné postupy
1. Peptidy nárokované v nároku 1 jsou syntetizovánu buď klasickou syntézou v roztoku za použiti standardní 7- a Boc-metodologie, tak jak je popsáno výše nebo standardními metodami syntézy v pevné fázi za použití technik Boc a Fmoc chránících skupin.
V případě syntézy v pevné fázi, kyseliny Ν,Ν-dialkypenta nebo hexapeptidů jsou uvolněny z pevného nosiče a dále spojeny v roztoku s příslušnými C-terminálními aminy ΒΟΡ-ΓΊ a PyBrop byly použity jako činidla pro spojování aminokyselin , které následují Nmethylaminokyseliny. Reakční časy byly odpovídajícím způsobem zvyšovány. Za účelem redukční alkylace N-konce byla odchráněna peptidová pryskyřice a byla provedena redukce s trojnásobným molárním přebytkem aldehydy nebo ketonu v DMI/1% kyselině octové přidáním 3 ekvivalentů NaCNBHn Po skončení reakce · » · * ♦ · (negativní Kaiserův test) byla pryskyřice několikrát promyta vodou, isopropanolem, DMF a dichlormethanem.
Při syntézách probíhajících v roztocích je nejvýhodnější použít buď Boc-chráněnou aminokyselinu NCAS (N-terc.butyloxykarbonylaminokyselina-N-karboxyanhydridy), Z-chráněnou aminokyselinu NCAs ((N-benzyloxykarbonyl-aminokysclina-N-karboxyanhydridy) nebo použít pivaloylchlorid jako kondenzující činidlo pro spojování aminokyseliny následující N-methylaminokyseliny. Reduktivní alkylace N-konců lze např. dosáhnout reakcí peptidů s odchráněnými N-konci nebo aminokyselin s odpovídajícími aldehydy nebo ketony za použití NaCNBFf nebo vodíku. Pd/C.
II. Čištění a charakterizace peptidů
Čištění bylo prováděno gelovou chromatografií (SEPHADFX G-IO. G-15/10% HOAc, SEPHADFX EH20/Mc()H), střednetlakovou chromatografií (stacionární fáze: HD-SII, C-18, 20-45 mikron, 100 Angstroem; mobilní fáze: gradient s A=0,l% TFA/MeOII. B - 0.1% TFA/voda) nebo preparativní HPI.C (stacionární láze: Waters DeltaPak C-18, 15 mikron, 100 Angstroem; mobilní fáze: gradient s A-0,1% TFA/MeOH, B-0,1% TFA/voda).
Čistota výsledných produktů byla určena analytickou HPLC (stacionární fáze: 100 2,1 mm VYDAC C-18. 5 1, 300 A; mobilní fáze: gradient acetonitríl-voda s 0,1% TFA, 40 C)·
Charakterizace byla založena na analýze aminokyselin a hmotnostní spektroskopií s rychlým ostřelováním.
· 4 4 ·♦· · · ·· t · 4* 44 · 4 4 · 4 « 4»#· 44 •44444 «4 «4 44 44
B. Specifické postupy (SEK ID Č: 1)
Příklad I (SEK IDČ: 1)
Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NIICH(CH3)2
a) Z-MeVal-Pro-OMe
66,25 g (250 mmol) Z-MeVal-OIl bylo rozpuštěno vc 250 ml suchého dichlormethanu. Po přidání 36,41 ml (262,5 mmol) triethylaminu byla reakční směs ochlazena na -25 °C a bylo přidáno 32.27 ml (262,5 mmol) pivaloylchloridu. Po míchání po dobu 2,5 h bylo přidáno 41,89 g (250 mmol) H-Pro-OMe x HCI ve 250 ml dichlormethanu, který byl neutralizován 36,41 ml (262,5 mmol) triethylaminu při 0 °C.Míchání pokračovalo po dobu 2 h při -25 °C a dále přes noc při obyčejné teplotě. Reakční směs byla zředěna dichlormethanem a řádné promyta nasyceným vodním roztokem NaliCO;, (3 x), vodou (1 x), 5% kyselinou citrónovou (3 x) a nasyceným roztokem NaCI. Organická fáze byla vysušena síranem sodným a odpařena do sucha. Zbytek (91,24 g) byl míchán přes noc v petroletheru a zťiltrován. Bylo získáno 62,3 g produktu.
b) H-MeVal-Pro-Ome
48,9 g (130 mmol) Z-MeVal-Pro-Ome bylo rozpuštěno ve 490 ml methanolu. Po okyselení 10,9 ml (130 mmol) koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou a přidání 2,43 g 10% paladium/aktivní uhlí byla reakční směs hydrogenována. filtrace a odpaření do sucha poskytly 36,43 g produktu, ···· « 0«0 · · · · · 0 ·
0 0 0 · · • 0 0 « · ·
c) Z-Val-MeVal-Pro-Ome
18,1 g (65 mmol) II-MeVal-Pro-Ome, 21,6 g (78 mmol) Z-Val-Nkarboxyanhydridu a 22,8 ml {130 mmol) diisopropylethylaminu bylo mícháno ve 110 ml DMP při 40 °C po dobu dvou dní. Po odpaření DMF byl přidán dichlormethan a organická fáze byla promyta nasyceným vodním roztokem NaHCCb (3 x), vodou (lx), 5% kyselinou citrónovou (3 x) a nasyceným roztokem NaCl. Organická fáze byla vysušena síranem sodným a odpařena do sucha. Produkt (29.3 g) byl získán ve formě vískózního oleje.
d) H-Val-MeVaFPro-Ome
29,3 g (61,6 mmol) Z-Val-MeVal-Pro-Ome bylo rozpuštěno ve 230 ml methanolu. Po přidání 1,15 g 10 % paladium/aktivní uhlí byla reakční směs hydrogenována. Filtrace a odpaření do sucha poskytly
21,96 g produktu.
e) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe
15,29 g (61 mmol) Z-Val-OI 1 a 21,96 g (61 mmol) H-Val-MeValPro-Ome byly rozpuštěny v 610 ml dichlormethanu a směs byla ochlazena na 0 UC Po přidání 8,16 ml (73,2 mmo!) Nmethylmorfolinu, 2,77 g (20,3 mmol) HOBt a 11,74 g (61 mmol) EDCI byla reakční směs míchána při obyčejné teplotě přes noc. zředěna dichlorinethanem a řádně promyta nasyceným vodním roztokem NaHCCF,(3 x), vodou (lx), 5% kyselinou citrónovou (3 x) a nasyceným roztokem NaCl. Organická fáze byla vysušena síranem sodným a odpařena do sucha za poskytnutí 31,96 g produktu.
• « * 0 ··· 0 · ’ o 0 00 · · 0 · 0 0 0 0 * ·0«· 0 0 000000 00 00 0* · ·
O Z-Val-Val-MeVal-Pro-OII
31,96 g (57 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe bylo rozpuštěno ve 250 ml methanolu. Bylo přidáno 102,6 ml 1 N roztoku LiOH a směs se nechala míchat při obyčejné teplotě přes noc. Po přidání 500 ml vody byla vodní fáze třikrát promyta ethylacetatem, pH bylo nastaveno na 2 při 0 °C a třikrát extrahována ethylacetatem. Organická fáze byla vysušena síranem sodným a odpařena do sucha. Produkt (30,62 g) byl získán ve formě bílé tuhé látky.
g)Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH3)2 g (3.35 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH a 0,664 g (3,35 mmol) II-Pro-NHCH(CH;,)2 bylo rozpuštěno ve 34 ml suchého dichlormethanu. Po ochlazení na 0 ”C bylo přidáno 1,35 ml (12.1 mmol) N-methylmorfolinu, 0,114 g (0,84 mmol) HOBt a 0.645 g (3,35 mmol) EDC! a reakční směs byla míchána při obyčejné teplotě přes noc. Bylo přidáno 80 ml dichlormethanu a organická fáze byla řádně promyta nasyceným vodním roztokem NaHCOs (3 x), vodou (lx), 5% kyselinou citrónovou (3 x) a nasyceným roztokem NaCl (1 χ). Organická fáze byla vysušena síranem sodným a odpařena do sucha za poskytnutí 1,96 g produktu, který byl použit v další reakci
h) Me2Va|-Val-McVal-Pro-Pro-NHCH(CHj)2
1,96 g Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCEl(Chb)2 bylo rozpuštěno v 11 ml methanolu. V dusíkové atmosféře bylo přidáno 0,054 g 10% Pd/C a reakční směs byla hydrogenována při obyčejné teplotě po • ·
4·· • 4
««· 4444 • 4
dobu 4 h. Po přidání 0,86 ml (11,24 mmol) 37% vodního roztoku formaldehydu a 0,281 g 10% Pd/C hydrogenacc pokračovala ještě 5 h. Filtrace a odpaření poskytly 2,77 g surového produktu. Další čištění bylo dosaženo rozpuštěním peptidu ve vodě, nastavením pH na 2 a extrahováním vodní fáze třikrát pomocí ethylacetatu. U vodní směsi bylo pil upraveno na 8-9 a tato fáze byla čtyřikrát extrahována dichlormethanem. Organická fáze byla vysušena síranem sodným za poskytnuti 1,37 g přečištěného produktu ve formě bílé pěny. Sloučenina byla dále přečištěna použitím kapalinové chromatografie o středním tlaku (10 - 50 % A za 10 min.; 50 - 90 % A za 320 min). Frakce obsahující produkt byly spojeny, lyofilizovány, znovu rozpuštěny ve vodě a pH bylo pomocí LiOH nastaveno na 9. Po extrakci s dichlormethanem byla organická fáze vysušena síranem sodným a odpařena do sucha. Lyofilizace vedla k 500 mg čistého produktu, který byl charakterizován hmotnostní spektroskopií s rychlým ostřelováním ([M+H]’' = 593).
Přiklad 2 (SEK ID Č: 1)
Me2Val-Val-MeVal-PiO-Pro-NHCH(CH3)2
i) Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH3)? g (3,35 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH a 0.692 g (3,35 mmol) H-Pro-NHCHíCLfifi bylo rozpuštěno ve 34 ml suchého dichlormethanu. Po ochlazení na 0 °C bylo přidáno 1,35 ml (12,1 mmol) N-methyhnorfolinu. 0,114 g (0,84 mmol) HOBt a 0,645 g (3.35 mmol) F.DC1 a reakční směs byla míchána při obyčejné teplotě přes noc. Bylo přidáno 80 ml dichlormethanu a organická fáze byla • · · · ~ · φ · · ·»φ φ φφ· • · φφ φφ φφ φφφφ · •φ φφφφ φφ· «φφ «φφφ << φφ <· ·· řádně promyta nasyceným vodním roztokem NaHCOj (3 x), vodou (1 x), 5% kyselinou citrónovou (3 x) a nasyceným roztokem NaCl (1 x). Organická fáze byla vysušena síranem sodným a odpařena do sucha za poskytnutí 1,8 g produktu, který byl použit v další reakci bez dalšího čištění.
k) Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CI I3)2
1,8 g Z-Val-Val-McVal-Pro-Pro-NHCII(Cll3)2 bylo rozpuštěno v 10 ml methanolu. V dusíkové atmosféře bylo přidáno 0,049 g 10% Pd/C a reakční směs byla hydrogenována při obyčejné teplotě po dobu 4 h. Po přidání 0,86 ml (11,24 mmol) 37% vodního roztoku formaldchydu a 0,252 g 10% Pd/C hydrogcnace pokračovala ještě 5 h. Filtrace a odpaření poskytly 1,82 g surového produktu. Sloučenina byla dále přečištěna použitím kapalinové chrotnalografie o středním tlaku (10-50 % A za 10 min.; 50 - 90 % A za 320 min). Frakce obsahující produkt byly spojeny, lyofilizovány, znovu rozpuštěny ve vodě a pil bylo pomocí FiOH nastaveno na 9, Po extrakci s dichlormethanem byla organická fáze vysušena síranem sodným a odpařena do sucha. Lyofilizace vedla k 547 mg čistého produktu, který byl charakterizován hmotnostní spektroskopií s rychlým ostřelováním ([M+H ]‘ 607).
Podle příkladu 1 a 2 lze připravit následující sloučeniny;
* 4 * 4 • · · · • 4 4 4 44 44 · 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 > 4 4 • 4 44*4 4 4 44 44 44
3. Xaa Val Xab Pro Xac
4. Xaa Val Xab Pro Xad
5. Xaa Val Xab Pro Xae
6. Xaa Val Xab Pro Xaf
7. Xaa Val Xab Pro Xag
8. Xaa Val Xab Pro Xah
9. Xaa Val Xab Pro Xai
10. Xaa Val Xab Pro Xak
11. Xaa Val Xab Pro Xal
12. Xaa val Xab Pro Xam
13. Xaa Val Xab Pro Xan
14 . Xaa Val Xab Pro Xao
15. Xaa Val Xab Pro Xap
16 . Xaa val Xab Pro Xaq
17. Xa a Val Xab Pro Xar
18. Xaa Val Xab Pro Xas
19 . Xaa Val Xab Pro Xat
20. Xaa Val Xab Pro Xau
21. Xaa Val Xab Pro Xav
22. Xaa Val Xab Pro Xaw
23 . Xaa Val Xab Pro Xax
24. Xdd Val Xab Pro Xay
25. Xaa val Xab Pro Xaz
26. Xaa Val Xab Pro Xba
27 . Xaa Val Xab Pro Xbb
··«· · · ·« • ♦ · · ·«· • · * · * · ♦ »·· ·· ·· »· «·
28. Xaa Val Xbc Pro Xay
29 , Xaa Val Xab Pro Xbd
30. Xaa Val Xab Pro Xbe
31. Xaa val xab Pro Xbf
32. Xaa Val Xab Pro Xbg
33. Xaa Val Xab Pro Xbh
34. Xaa Val Xab Pro Xbi
35. Xaa Val Xab Pro Xbk
36. Xaa Val Xab Pro Xbl
37. Xaa Val Xab Pro Xbm
38. Xaa Val Xab Pro Xbn
39. Xaa Val Xab Pro Xbo
40. Xaa Val Xab Pro Xbp
41. Xaa Val Xab Pro Xbq
42. Xaa Val Xab Pro Xbr
43. Xaa Val Xab Pro Xbs
44. Xaa Val Xab Pro Xbt
45. Xaa Val Xab Pro Xbu
46. Xaa Val Xab Pro Xbv
47. Xaa Val Xab Pro Xbw
48. Xaa Val Xab Pro Xbx
49. Xaa Val Xab Pro Xby
50. Xaa Val Xab Pro Xbz
51. Xaa Val Xab Pro Xca
52. Xaa Val xab Pro Xcb
53. Xaa Val Xab Pro Xcc
54. Xaa Val Xab Pro Xcd
55. Xaa Val Xab Pro Xce
56. Xaa Val Xab Pro Xcf
57 . Xaa Xdf Xab Pro Xay
58. Xaa Val Xab Pro Xch
59. Xaa val Xab Pro Xci
60. Xaa Val Xab Pro Xck
61. Xaa val Xab Pro Xcl
ď η v z· » V -> -L ALIU V -» T » U X V -> u L X. kJ Y/lřA /wai
63. Xaa Val Xab Pro Xcn
64 . Xaa val Xab Pro Xco
65. Xaa val Xab Pro Xcp
66. Xaa Val Xab Pro Xcq
67. Xaa Val Xab Pro Xcr
68. Xaa Val Xab Pro Xcs
69. Xaa Val Xab Pro Xct
70. Xaa Val Xab Pro Xcu
71. Xcw Val Xab Pro Xcv
72. Xcx Val Xab Pro Xcv
73. Xaa val Xab Pro Pro Xcy
74 . Xaa Val Xab Pro Pro Xcz
• v • ·
75. Xaa V dl Xda Pro XCV
76. Xaa Xdb Xab Pro Xcv
77. Xdc Val Xab Pro Xcv
78. Xaa Ile Xab Pro Xcv
79 . Xdd Val Xab Pro Xcv
80. Xde Val Xab Pro Xcv
81. Xaa Xdf Xab Pro xcv
82. Xaa Val Xab Pro Xcg
83. Xaa Val Xab Pro Pro Xdg
84. Xaa Val Xab Pro Pro Xdh
85. Xaa Val Xab Pro Pro Xdi
86. Xaa Val xab Pro Pro Xdk
87. Xaa Val Xdl Pro Xcv
88. Xde val Xab Pro Xay
89. Xaa Val Xdl Pro Xay
90. Xaa Val Xab Pro Xdm
91. Xaa Val Xab Pro Xdn
92. xaa Val Xab Pro Xdo
93. Xaa Val Xab Pro Xdp
94. Xaa Val Xab Pro Xdq
95. Xaa Val Xab Pro Pro Xdr
96. Xaa Val Xab Pro Xds
97. Xaa Val Xbc Pro Xcv
98. Xaa Ile Xab Pro Xay
99. Xcw Val Xab Pro Xay
100. Xaa Val Xbc Pro Xal
101, Xaa Val Xdl Pro Xal
102. Xaa Xdf Xab Pro Xal
103. Xaa Ile Xab Pro Xal
104. Xdd Val Xab Pro Xal
105. Xde Val Xab Pro Xal
106. Xcx Val Xab Pro Xcy
107. Xcw Val Xab Pro Xal
108. Xcx Val Xab Pro Xal
109 . Xcw val Xab Pro Xav
110. Xcx Val Xab Pro Xav
111. Xcw Val Xab Pro Xaw
112. Xcx Val Xab Pro Xaw
113. Xab Val Xab Pro Xay
114. Xab Val Xab Pro Xcv
115. Xab Val xab Pro Xal
116. Xab Val Xab Pro Xam
117 . Xab Val Xab Pro Xan
118. Xab Val Xab Pro Xao
119. Xab Val Xab Pro Xav
120. Xab Val Xab Pro Xaw
121. Xab Val Xab Pro Xat
φφ φ φ*·φ φφφφ φ φ φ· φ* φφ φ·φ > · φφφφ · φ φ φφ φ· φφ
122. Xab val xab Pro Xau
123. Xab Val Xab Pro Xbf
124. Xab Val Xab Pro Xbm
125. Xab Val Xab Pro Xbn
126. Xab Val Xab Pro Xbo
127. Xab Val Xab Pro Xch
128. Xaa Val Xab Pro Xdt
129. Xaa Val Xab Pro Xdu
130.’ Xaa Val Xab Pro Xdv
131. Xaa Val Xab Pro Xdw
132. Xaa Val Xab Pro Xdx
133. Xaa Val Xab Pro Xdy
134. Xaa Val Xab Pro Xdz
135. Xaa Val Xab Pro Xea
136. Xaa Val Xab Pro Xeb
137. Xaa Val Xab Pro xec
138. Xaa Val Xab Pro Xed
139. Xaa Val Xab Pro Xef
140. Xaa Val Xab Pro Xeg
141. Xaa Val Xab Pro Xeh
142. Xaa Val Xab Pro Xei
143. Xaa Val Xab Pro Xek
144. Xaa Val Xab Pro Xel
145. Xaa Val Xab Pro Xem
146. Xaa Val Xab Pro Xen
147. Xaa Val Xab Pro Xeo
148. Xaa Val Xab Pro Xep
149. Xaa Val Xab Pro Xeq
150. xaa Val Xab Pro Xer
151. Xaa Val Xab Pro Xcg
» ··· • · ·««· · · · · »· «· · · ·· « · • · · · · · · ·· · ·* ··
Příklady charakterizací nových sloučenin pomocí MS jsou udány v následující tabulce.
Příklad Analýz; atomů
[č.] [Mol. hi
3. 565
4. · 579
5. 593
6 . 607
7 . 621
8. 635
11. 607
12. 607
13. 621
14 . 649
15. 635
16. 635
17. 635
18. 635
19. 621
20. 621
21. 635
22. 635
25. 633
26 . 647
Λ <1
Z Z . o t> 1
31. 623
32. 671
33. 667
34 . 681
35. 655
36. 655
37 . 669
38. 621
39 . 635
41 . 649
42. 621
43 . 633
• 44 ··· ··«·
Příklad Analýza MS rychlým ostřelováním • » »· * · · * · · * 1 4 • 4 44
45. atomů 607
46. 647
47 . 668
48. 655
49. 669
50. · 685
51. 629
52. 625
53. 721
55. 579
58. 623
61. 597
62. 621
63. 609
64 . 625
65. 635
66. 591
67. 715
68. 685
69. 685
70. 591
71. 607
72 . 621
74 . 706
75. 579
7 6 . 579
77 . 579
78. 607
79. 607
80. 607
81. 607
82 . 637
83. 692
84 . 706
85. 706
86 . 706
87. 6 07
90. 635
* • 0 • « • · • · • •0 0···
0 00 0 0 0 0 0 0 0 00 00
0# 0
0 00
00·0 0
0 0
00
Příklad Analýza MS rychlým ostřelováním
atomů
92. 659
93. 617
94 . 636
95. 678
128. 671
131. ' 625
139 625
151. 637
Tabulka 1 - Identifikace sekvence sloučenin připravených podle příkladů 1 a 2
Číslo sloučeniny (sloučenin)
Sekvenční ID číslo
1-56.58-72,75.77,79.80,82 1
87-94, 96,97. 99 - 101, 104 -151 73, 74.83 - 86. 95 2
57.76.81,102 3
78,98,103 4
Xab:
Symboly Xaa ve shrnutí mají následující význam: Xaa: N.N-dimethylvnlin
N-methylvalin
Xac:
Xad:
Xaf
Xag
b 4 4 4 • « * ··
Xah:
Xak:
Xal:
Xam
Xan
4 4 *
Xao
Xap
Xag
Xar
4 4 4 • 4 4
Xas
• » 0 ·
JO
Xat:
Xav:
Xaw
Xax
Xbc :
N-Methyl -isoleucin.
· • 4
Xbe
Xbf
Xhg
O'
N,
CH3
Xbh
O
Xbk
O
Xbl
Xbm
Xhn
Xbo
Xbp
v ·
0 · 0
Xbu
Xbv
O
Kbw
Xbx:
»«* ♦ · ·♦ • ·· ·· · · · • « * · · • v ·· ··
φφφ
Xcb
Xcc
Xcd
Xce
Xcf xcg * * · · * · φ φφ φφφφ φ • · · · · · · • Φ φφ ·« φ ·
Prolin adamantyl(1)amid
O
O
OH • 0
000 «··»
Xch:
OH
Xci:
Xck:
Xci:
Xcm:
Xcn
CH3
00·· 0 0 0*
00 00*0 · • 0 0 0 0 * 00 00 ·0
Xcq;
Xcr:
« · · • · • 1 ♦
Xct
Xcu
Xcv
Xcw
Xcx
Xcy
N-Methyl-N-ethyl -valín
N,N-Diethylvalin
Xcz
O
00 · • 0 • 0 4
Xda:
Xdb:
Xde:
Xdd:
Xde:
Xdf:
N-methyl-2-amínobutyroyl
2-aminobulyroyl
N,N-dimethyl-2-aminobutyroyl
Ν,Ν-dimethylísoIeuein
Ν,Ν-dimethylisoleuein
2-terc.bulylglycin
Xdg
H3C'X^^X-CH3 0 ch3
Xdh ch3 h3C\Tch3
0 ch3
Xdi:
0 ch3 ch3
Xdk:
h3cx —N
NH^CH3 ch3 «4 « · ···· * ··· ···
Xdl: N-Methyl-2-tert.butylglycin
Xdm
Xdn
Xdr
Xds
O • · » W www• 4 4 4 4 4 4 · · · ·
4 4 4 ·· 4· 4·· 4 *
4 444· 444
444 4444 44 44 44 44
• * · «
Xeg:
Xek « · • ·
1*9 ·*♦*
O • v
Xeo
Xeq
Sloučeniny tohoto vynálezu lze testovat na jejich proti rakovinovou aktivitu pomocí konvenčních metod, včetně těch, které jsou popsány níže.
A. Metodologie in vitro
Cylotoxicita byla měřena použitím standardní metodologie pro přilnavé buněčné linie, touto metodologií může být mikrokulturový telrazoliumový test (Μ 11). Podrobnosti tohoto testu byly publikovány (Alley, MC et al., Cancer Research 48:589-601, 1988). Exponenciálně rostoucí kultury nádorových buněk jako je HT-29 karcinom kolonu nebo LX-1 pliení nádor se používají na přípravu mikiOliterových plotnových kultur. Buňky jsou naočkovány ve formě 3000 buněk na jednu sádku do 96 očkovacích ploten (ve 150 pl roztoku) a nechají sc růst přes noc při 37 Ύ.'. Jsou přidány testované φφφ · · ·· φ φ φ · φ φ φ φ φφφφ « · φφ φφ φφ φ · látky v 1 Oti násobných zředění měnících se od 10'4 do 10‘5M. Buňky jsou potom inkubovány po dobu 72 hodin. Aby se stanovil počet životaschopných buněk v každé sádce, tak je přidáno barvivo MTT (50μΙ 3 mg/1 roztoku 3-94,5-dimethylthiazol-2-y])-2,5-difenyl (etrazolium bromid ve fyziologickém roztoku. Tato směs je inkubována při 37 °C po dobu 5 hodin a pak je přidáno ke každé sádce 50 μΐ 25% SDS. pH = 2. Po inkubování přes noc se odečítá v každé sádce absorbanee při 550 nm za použití čítače ELISA. Jsou vypočítány hodnoty průměru ± SD údajů z replikovaných sádek. použitím vzorce % TC (% zpracovaných životaschopných buněk / standard).
OD zpracovaných buněk
- x 100 % T/C
OD kontrolních buněk
Koncentrace testované sloučenina, která poskytuje T/C o hodnotě 50% inhibice růstu byla označena jako hodnota 10%.
B. Metodologie in vivo
Sloučeniny tohoto vynálezu byly dále testovány v předkliniekýeh testech na aktivitu in vivo. která indikuje klinické využití. Takovéto testy byly prováděny s myšmi, do kterých byla transplantována (xenografována) rakovinová tkáň, přednostně pak lidského původu. Testované sloučeniny byly vyhodnocovány na protirakovinovou účinnost po podání myším nesoucím xcnograft.
«00 000* v « * · · «000 0 0 »· • 0 00 «000 0 0 0 0 0 0 0 ♦ 00 00 ·· ··
Specifičtěji se transplantují lidské nádory prsu (MX-1), které se nechaly růst v atymických myších, do nových myší, za použití 50 mg nádorových fragmentů. Den transplantace byl označen jako den 0. O šest až deset dní později byly myší léčeny testovanými sloučeninami, které byly podány ustiič nebo intravenóznč, každá dávka byla aplikována na skupinu 5-10 myší. Sloučeniny byly podávány každý další den po dobu 3 týdnů, v dávkách 1-200 mg/kg tělesné váhy.
Průměry nádorů a tělesná váha byly měřeny dvakrát týdně. Objemy nádorů byly počítány za použití průměrů měřených Vemierovým posuvným měřítkem a pomocí vzorce:
(délka x šířka)/2 =7 mm’ objemu nádoru.
Střední objemy nádorů byly počítány pro každou léčenou skupinu a pro každou skupinu byly též stanoveny hodnoty T/C vzhledem ke standardním nádorům.
Nové sloučeniny vykazují dobré inhibující vlastnosti.
SEZNAM SEKVENCÍ (1) OBECNÉ INFORMACE (i) ŽADATEL·:
(A) BASF, a.s.
(B) ULICE: Carl-Bosch-Strasse 38 (C) MĚSTO: Ludwigshafen (D) ZEMĚ: Spolková republika Německo (E) POŠTOVNÍ KÓD: D-67056 (F) TELEFON: 0621/6048526 (G) TELEFAX: 0621/6043123 (H) TELEX: 1762175170 (ii) NÁZEV VYNÁLEZU: Nové peptidy, příprava a jejich využití (iii) POČET SEKVENCÍ: 4 (iv) FORMA ČTENÁ POČÍTAČEM:
(A) TYP MÉDIA: Disketa, 3,5 inch, 2DD (B) POČÍTAČ: IBM AT-kompatibilní, procesor 80286 (C) OPERAČNÍ SYSTÉM: MS-DOS version 5.0 (D) SOFTWARE: WordPerfect ,-ι ·, i x r i ’ζί i v » 4 * z 11 ' ť \ ητ-Ί-τ t r-i A i (2; IINIUMVI/WtOSCK. 11ΛΙ. i:
(i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKY (A) DÉLKA: 5 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: peptid « 44 44
4 4 4 4
4 4 4
4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 (iii) POPIS SEKVENCE: SEK ID Č: 1:
Xaa Val Xaa Pro Xaa (2) INFORMACE 0 SEK. ID. Č: 2:
(i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKY (A) DÉLKA: 6 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: peptid (iii) POPIS SEKVENCE: SEK ID Č: 2;
Xaa Val Xaa Pro Pro Xaa (2) INFORMACE O SEK. II). Č: 3:
(i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKY (A) DÉLKA: 5 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: peptid (iii) POPIS SEKVENCE: SEK ID Č: 3:
Xaa Xaa Xaa Pro Xaa (2) INFORMACE O SEK. ID. Č: 4:
(i) SEKVENČNÍ CHARAKTERISTIKY (A) DÉLKA: 5 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina
V · »«·«« * · · · • »···»«« ··· · · • · ♦ · · · · · ·*«··· *« « * · · · · (C) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: peptid (iíi) POPIS SEKVENCE: SEK ID Č: 4:
Xaa Ile Xaa Pro Xaa • · · « · · · * » » · · 4 4444 4 44» •4 44 4» 4444 ·
4 4 4 » · · «« 44 ·· 44

Claims (9)

  1. Patentové nároky
    1. Nové peptidy o vzorci I
    R1 R2N-CHX-CO-A-B-D-E-(G)S-K I kde
    R1 je vodík, methyl nebo ethyl;
    R je methyl nebo ethyl; nebo
    R -N-R jsou společně pyrrolidinový kruh;
    A je valylový. isoleucylový, allo-isoleueylový, 2-lerc.butylglycylový. 2ethylglycylový, norleucylový nebo norvalylový zbytek:
    B je N-methyl-valylový, N-methyl-norvalylový, N-methyl-leucylový, Nmethyl-isoleucylový. N-methyl-2-terc.bulylglycylový, N-methyl-2thylglycylový nebo N-melhyl-norlcucylový zbytek:
    D je prolylový, homoprolylový. hydroxyprolylový nebo thiazolidin-4karbonylový zbytek;
    E je prolylový, homoprolylový, hydroxyprolylový, thiazolidin-4karbonvlový. trans-4-fluoro-I.-prolylový. cis-4-fluoro-E-prolylový, trans-4-chloro-I.-prolylový nebo cis-4-chloro-L-prolylový zbytek;
    Xje ethyl, propyl, butyl, isopropyl, sek.butyl, tert.butyl, cyklopropyl nebo cyklopentyl;
    G je L-2-íeic.butyIglycylový. D-2-terc.butyÍglycylový. D-valylový, Disoleucylový, D-leucylový. D-norvalylový, 1-aminopentyl-lkarbonylový nebo 2,2-dimethylglycylový zbytek;
    s je 0 nebo 1,
    K je -NH-C|.g-aIkylový, -NH-Cvg-alkenylový, -NH-Cj.s-alkinylový, NI I- (?6_8-cykloalkylový. -NH-C|.4-alken-Cj.gcykloalkylový; C^-alkv 1N- Ci-6-alkylový zbytek, ve kterém jedna Cí l· skupina může být t ···♦ 4 · « · · « ·«·· 4 · *· ·· · · · · ··· · 4 ft « « * · · ·· * · ·· · · nahrazena O nebo S, jeden H fenylem nebo kyano skupinou nebo 1,2,3 H jsou nahrazeny F s výjimkou N-methoxy-N-methy lamino, Nbenzylamino nebo N-methyl-N-benzylamino skupin nebo K je • «··♦ • ··· • · · ·
    4 « *
  2. 2. Nové peptidy o vzorci I
    RlR2N-CHX-CO-A-tí-D-E-(G)s-K kde
    R1 jc vodík, methyl nebo ethyl;
    R* je methyl nebo ethyl; nebo
    R -N-R jsou společné pyrrolídinový kruh;
    A je valylový, isoleucylový, allo-ísoleucylový, 2-tere.butylglycylový, 2ethylglycylový, norleucylový nebo norvaíylový zbytek;
    B je N-methyl-valylový, N-methyl-norvalylový, N-methyl-leucylový, Nmethyl-isoleucylový, N-mcthyl-2-terc.bulylglycylový, N-methyl-2thyIglycylovy nebo N-melhyl-norleucylový zbytek;
    D je prolylový, homoprolylový, hydroxyprolylový nebo thiazolidin-4karbonylový zbytek;
    E je prolylový, homoprolylový. hydroxyprolylový, thiazolidin-4karbonylový. (rans-4-fiuoro-I.-prolylový. cis-4-fluoro-I,-prolylový, trans-4-chIoro-l.-prolylový nebo cis-4-ehloro-L-prolylový zbytek;
    X je ethyl, propyl, butyl, isopropyk sek.butyl. tert.butyl, cyklopropyl nebo cyklopentyl;
    G je L-2-terc.butyIglycylový. O-2-lerc.butylglycyIový, D-valylový, Disoleucylový. D-Ieucylový, D-norvalylový, 1-aminopentyl-1karbonylový nebo 2.2-dimethylglycylový zbytek;
    S je 0 nebo 1:
    K je -NHCIh, -NHCíbCH,, -N11(CH2)2CH3,
    -NH(CH2hCH f, -NH(CH2)4CH;,. -N11(CH2)5CH3, -NI I(CI í2)f,CIb, -NIICH(CH2)7CH:!, -NHCH(C1I3)2. -N11CH(CH ,)('H2CH?„ -NHCH(CI12CH3)2, -NHCH(CH2CII2CH.,)2, -NHC(CHi)3,
    -NHCIKCI ECI 13)CI 12C1ΚΊ i3, -NHCH(CH3)CI I(CH;,j2, » 4 4 4 · 4 4 ·
    4 4 4 444 · 4 ··
    4 4 4 4 4 4 Μ* 4 ·
    4 4 4 4 4 4 ·
    4 44 44 44 *·
    44 4 44 »
    -NHCH(CH2CH3)CH(CII3)2,-NHCH(CH3)C(CH3)3, -NH-cyklohexyt, -NH-cyklohcptyl, -NH-cykíooktyl, -N(CH3)OCH2CH3. -N(CH3)OCH2CH2CH3, -N(CH3)OCH(CM3)2, -N(CH3)O(CII2)jCH3 , -N(CH3)OCH2CďH5, -NH(CH2)2C6Hs, -NH(CH2)3C6H5, -NIICH(CII3)CfiH5, -NHC(CII3)2C6H5, -NIIC(CH3)2CH2CH3, -NHC(CH3)(CH2CÍI3)2, -NIICH[CII(CH3)2]2, -NHC(CH3)2CN, -NMCH(CH,)CH(OH)C6H5, -NHCH2-cyklohexyI, -NHCH2C(CII3)3, -NHCH2CII(CH3)2, -N(CH3)2, -N(CH2CH3)2, -N(CH2CH2CII3)2, -NHCHjCF,, -NHCH(CH2F)2, -nhcfi2ch2f, -nhch2ch,ocfu -nhch2ch2sch3, -niich2ciich2. -NHC(CH3),CÍ 1=CH2, -NI IC(CH3),C=CH, -NHC(CH,CI t JXGCTl, -NHC(CH3)2C11,CH2OI k -NH(C1 LCH2O)2CH2CH3. -NIÍ(CH2CH2O)2CH2CII3, -NHC(CH3),C1](CHO2! -NIíC(CH3)2CHrH,CH3.
    nebo K je
    Pír • 4 • · »·
    4 4 4 4 t 4 4 4
    44 44 «44 4 4 4
    44 « a jejich soli s fyziologicky tolerovanými kyselinami.
  3. 3, Nové peptidy o vzorci
    R‘R2N-CHX-CO-A-B-D-E-(G)s-K kde
    R1 je vodík, methyl nebo ethyl;
    R je methyl nebo ethyl; nebo 1 2
    R -N-R jsou společně pyrrolídinový kruh;
    A je valylový, isoleucylový, allo-isoleucylový, 2-tcrc.butylglycylový, 2ethylglycylový. norleucylový nebo norvalylový zbytek;
    B je N-methyl-valylový, N-methyl-norvalylový, N-methyl-lcucylový, Nmethyl-isoleucylový, N-methyl-2-terc.butylglycylový. N-methyí-2thylglycylový nebo N-tnethyl-norleucylový zbytek;
    D je prolylový, homoprolylový, hydtOxyprolylový nebo thiazoIidin-4karbony 1 ový zbytek;
    E je prolylový. homoprolylový, hydroxyprolylový, thiazolidin-4karbonylový. trans-4-ťluoro-E-prolylový. cis-4-fluoro-L-prolyIový, trans-4-chloro-E-prolylový nebo eis-4-chloro-L-prolylový zbytek;
    X je ethyl, propyl, butyl. isopropyl, sek.butyl. lert.butyl. cyklopropyl nebo cyklopentyl;
    G je L-2-terc.butylglycylový, I)-2-terc.butylglycylový, D-valylový, Disoleucylový, D-leucylový, D-norvalylový, 1 -aminopenty 1-1 karbonylový nebo 2.2-dímethylglycylový zbytek;
    sje 0 nebo I;
    K je -NlI-Ci-s-alkylový, -NH-C^-cykloalkylový, -NH-CH?cyklohexylový, C|.4-aIkyl-N-Gj.6-alkylový zbytek, ve kterém jedna CIL skupina muže být nahrazena O, jeden 11 fenylem nebol nebo 2
    II jsou nahrazeny l· s výjimkou N-niethoxy-N-methvlaminového, N56 • · ·· * • * · * · »«· * « · » · · »· ·· • · · · • · *· benzylaminonového nebo N-methyl-N-bcnzylaminového zbytku, K též je
  4. 4. Nové peptidy o vzorci I
    R'R2N-CHX-CO-A-B-D-1>((1)s-K vvv * · V · * · 4 • · 4···· ii·»
    4 · ·· 44 ·» · * · 4
    44 4 · · 4 44«
    44*444 4· ·· 44 44 kde
    R1 je methyl;
    R2 je methyl;
    A je valylový, isoleucylový, 2-lerc.butylglycylový zbytek;
    B N-methyl-valylový, N-mcthyl-isoleucylový, N-methyl-2terc.butylglycylový zbytek;
    D je prolylový nebo thiazalidin-4-karbonylový zbytek;
    E je prolyl, thiazolidin 4-karbonyl, cis-4-fiUor-L-prolyl nebo eis-4-chlor-prolyl;
    X je isopropylový, sek.butylový, tere.butylový zbytek;
    G je L-2-terc.butylglycylový, D-2-terc.butylglycylový, D-valylový, Disoleucylový, D-leucylový nebo 2,2-dimethylglycylový zbytek;
    s 0 nebo 1, a
    K je NH-Cj.g-alkylový, -NH-CVg-cykloalkylový. -NH-CFFcyklohexylový, C |.4-alkyl-N-C |.(l-alkylový zbytek, ve kterém jedna CH2 skupina může být nahrazena O, jeden H fenylem nebol nebo 2 H jsou nahrazeny F s výjimkou N-methoxy-N-methylaminového, Nbcnzylaminonového nebo N-methyl-N-benzylaminového zbytku,
    K též. je
    4 * • 4 4 444» 4 4 ·· • · »4 44 44 4444 ·
    4· 4444 4··
    44« 4444 44 44 4· 4· ch3 —NH ch3
    CONH2 ch3
  5. 5. Nove peptidy o vzorci I , R‘R2N-CHX-CO-A-B-D E (G)s K I kde
    R1 je methyl;
    R2 je methyl;
    A je valylový, isoleucvlový. 2-terc.butylglycylový zbytek;
    B N-methyl-valylový, N-melhyl-isoleucylový, N-methyl-2terc.butylglycylový zbytek;
    D je prolylový nebo thiazolidin-4-karbonylový zbytek;
    E je prolyh cis-4-fluor-L-proly 1 nebo cis-4-chlor-prolyl;
    X je isopropylový, sek.butylový, terč. butyl o vý zbytek;
    s je 0;
    K je -NHC(C1E)3. -NHC1I(CH2CH3)C1I(CH3)2,
    -NHCH(CII3)C(CH3)3, -N(CH3)OCH2CH3, - N(CH3)OCH2CJbCH3, -N(CH3)OCH(CH3)2, -N(CH3)O(CH2)3CI l3, -N(CI h)O(7H2C(,H5-NH(CH2)3C6II5, -NHC(CH3)2CH2CH3, - NIICH[GH(CH3)2]2, -NHC(CH,)2CN. -NHClÍ(CIh)CIΪ(ΟΙ4)Cťlí h-NHC(CH3)2CH-CEk -NHC(CH,)XYClh -NHC(CH?CH j2CYCH. “NHCTCII JjCIEClEOIl, -NHC(CH3)2CH(CH3)2, -NHC(CH,),CH2CH,CÍ I„ -NHC(CI I,)7CH,C6H5, -NíOCHOCHíCHA^-NíOCHAClECH,,
    -ΝΐΟΟΙΕΚΉΑ'ίΙΧ'ΙΕ,-ΝΗσίΕΤΕΕΕΗΧΤ,ΙΕ, • 0 • ·· · · · »
    0 0 » ·« * · · « · 0 0 0 ·
    -N(OCH3)C6H5, -N(OCH3)CH2 ch2 ch3, nebo Kje
    -NH -
    CH3 ch3 •NH or conh2 — NH
    CHi
    CO NH CH2— CH2 CH3 ch3 a jejich soli s farmaceuticky tolerovanými kyselinami.
    « · · » * · · · *· • · · v · · ♦ · » ♦ * · · · · *·» «»« ··♦♦ Μ ·· ·» ·*
  6. 6. Nové peptidy o vzorci 1
    R'R2N-C[IX-CO-A-B-D-E-(G),-K I kde
    R1 je methyl;
    R2 je methyl;
    A je valylový zbytek;
    B N-niethyl-valylový zbytek;
    D je prolylový zbytek;
    E je prolylový zbytek;
    X jc isopropyl;
    s je 0;
    K je -NHCíCHýb. -N11CH(CH2CH3)CH(CH3)2,
    -NHCU(CH0C(CíI3)3. -N(CII3)0CH2CH3, - N(CH3)OCH2CH2CH3, -N(CH3)()CH(CH3)2, -N(CH3)O(CI 12)3CH3, -N(CH,)OCH,C(1H5. -NH(CH2)3C6Hs -NHC(CH3)2CH2CH3. -NHCH[CH(CII3)2J2, -NHC(CHj,CN. -NHCH(CTl,)CH(OÍ I)CňH5.
    -NHC(CH3),CU-=-CH,?-NIlC(CHí),C=CH, -N11C(CIECH/),C=CEI, -NHC(CH,),CIRCH,OK -NHC(CII3)2CH(CH,)2. -NHCíCllOriKCIRCH^-NllCXCHOrH^IC, -N(OCH3)CH(CH,)2, -N(OCl 1,)CH3CH„
    -N(0CI I.,)CH,CH2CI u -NI IC(CH,),CH3C6H?,
    -N(OCII0C(,H5, -N(OCH0CII, CH, Cil,.
    nebo K je t fl ··» · · ·· • · · · ·· ·♦ · * « • * · · » · 1 « · ·· · » 99
    CH3 CHj
    -NH —nebo —NH
    CONH2
    CH3
    CO — NH— CH2— CH2— CH3
    CH3 a jejich solí s fyziologicky tolerovanými kyselinami.
  7. 7. Nové peptidy o vzorci I
    R^N-CHX-CO-A-B-D-E-ÍGk-K l kde
    R1 je methyl;
    R2 je methyl;
    A je valylový. isoleucylový, 2-ierc.bulylglycylový zbytek;
    B N-methyl-valylový, N-methyl-isoleucylový, N-methyl-2lere.bnty 1 glycy 1 ový zbytek;
    D je prolylový nebo thiazolidin-4-karbonylový zbytek;
    E je prolylový zbytek;
    X je isopropylový. sek.butylový, terc.butylový zbytek;
    G D-2-terc.butylglycylový, D-isoleucylový, 2,2-dimelhylglycylový zbytek. D-valyiový, I ,-2-ierc.buiyigiycyiovv;
    s je 1;
    K je -NHCHj, -NHCH.CHj, -ΝΗ(€ίΙ2)2(Τ13, -NH(CH2).,CH3, -NH(CII2)4CH3, -NH(CH3)5CH,, -NIICH(CHi),,
    -NHCHÍCH,) GI-ECIR, -NHCII(CH2C1I3)2.
    44 >
    4 4
    44 4 4444 • 4 4 4 4 4
    4 444 4 4 4«
    4 4 4 4 444 4 4
    4 4 4 4 4 4 4
    44 44 >4 44
    -NHCH(CH3)C(CH3)3, -N(CH3)OCH2CII3, - N(CH3)OCH2CH2CH3, -N(CH3)OCH(CII3)2, -N(CH3)O(CH2)3CH3. -N(CH,)OCH2C6II5, -NH(Cíí2)3C6H5, -NHC(CH3)2CH2CH3, -NHCH[CH(CH3)2j2,
    -NHC(CHJ3, -NH-cyklohexyl, -NHC(CII,),CN, -NHC(CH3),C=CH nebo NHCÍCH^CONH;; nebo Kje nebo a jejich soli s fyziologicky tolerovanými kyselinami.
  8. 8. Sloučeniny o vzorci 1 a jejich soli v jejich využití pro léčbu nemocí.
  9. 9. Metoda nebo příprava sloučenin o vzorci I podle nároku I charakterizována v tom, že jsou připraveny podle známých metod peptidové chemie.
CZ0184698A 1995-12-15 1996-12-11 Antineoplastické peptidy, zpusob jejich prípravy a jejich pouzití CZ296908B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US57342295A 1995-12-15 1995-12-15

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ184698A3 true CZ184698A3 (cs) 1998-09-16
CZ296908B6 CZ296908B6 (cs) 2006-07-12

Family

ID=24291935

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0184698A CZ296908B6 (cs) 1995-12-15 1996-12-11 Antineoplastické peptidy, zpusob jejich prípravy a jejich pouzití

Country Status (30)

Country Link
EP (2) EP0866800B1 (cs)
JP (1) JP3939354B2 (cs)
KR (1) KR100463739B1 (cs)
CN (1) CN1127514C (cs)
AR (1) AR004382A1 (cs)
AT (2) ATE471944T1 (cs)
AU (2) AU731458B2 (cs)
BG (1) BG64563B1 (cs)
BR (1) BR9611987A (cs)
CA (1) CA2237721C (cs)
CO (1) CO4750840A1 (cs)
CZ (1) CZ296908B6 (cs)
DE (2) DE69638206D1 (cs)
DK (1) DK0866800T3 (cs)
ES (1) ES2229287T3 (cs)
HR (1) HRP960585A2 (cs)
HU (1) HU228275B1 (cs)
IL (2) IL124342A (cs)
MX (1) MX9803953A (cs)
MY (1) MY114327A (cs)
NO (1) NO319273B1 (cs)
NZ (1) NZ324691A (cs)
PL (1) PL186721B1 (cs)
PT (1) PT866800E (cs)
RU (1) RU2182911C2 (cs)
SK (1) SK285286B6 (cs)
TR (1) TR199801102T2 (cs)
TW (1) TW474946B (cs)
WO (1) WO1997022621A2 (cs)
ZA (1) ZA9610510B (cs)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6143721A (en) * 1997-07-18 2000-11-07 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives
US5985837A (en) * 1998-07-08 1999-11-16 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives
EP1159273A1 (en) 1999-03-02 2001-12-05 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Compounds useful as reversible inhibitors of cathepsin s
US6420364B1 (en) 1999-09-13 2002-07-16 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compound useful as reversible inhibitors of cysteine proteases

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4879276A (en) * 1983-12-19 1989-11-07 Uniroyal Chemical Ltd./Uniroyal Chemical Ltee Method for reducing serum uric acid levels
US4816444A (en) * 1987-07-10 1989-03-28 Arizona Board Of Regents, Arizona State University Cell growth inhibitory substance
CA2136339C (en) * 1992-05-20 2008-02-05 Andreas Haupt Derivatives of dolastatin
US5831002A (en) * 1992-05-20 1998-11-03 Basf Aktiengesellschaft Antitumor peptides
PL178766B1 (pl) * 1992-12-16 2000-06-30 Basf Ag Nowe peptydy
DE4415997A1 (de) * 1994-05-06 1995-11-09 Basf Ag Neuer peptidischer Wirkstoff und dessen Herstellung
DE4415998A1 (de) * 1994-05-06 1995-11-09 Basf Ag Neue Tetrapeptide, ihre Herstellung Verwendung
US5807984A (en) * 1995-11-09 1998-09-15 Basf Aktienegesellschaft Oligopeptides, the preparation and use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
WO1997022621A3 (en) 1998-02-26
ZA9610510B (en) 1998-06-15
KR100463739B1 (ko) 2005-02-28
DK0866800T3 (da) 2005-01-17
EP1593686A1 (en) 2005-11-09
SK285286B6 (sk) 2006-10-05
PL327175A1 (en) 1998-11-23
CA2237721C (en) 2008-01-29
HUP0000172A2 (en) 2000-07-28
KR20000064400A (ko) 2000-11-06
CN1204342A (zh) 1999-01-06
JP2000502092A (ja) 2000-02-22
AU2004220772A1 (en) 2004-11-11
AU2004220772B2 (en) 2008-06-12
WO1997022621A2 (en) 1997-06-26
CZ296908B6 (cs) 2006-07-12
PT866800E (pt) 2005-01-31
NO319273B1 (no) 2005-07-11
DE69633457D1 (de) 2004-10-28
TR199801102T2 (xx) 1998-12-21
IL166853A (en) 2013-03-24
DE69633457T2 (de) 2005-09-22
SK76798A3 (en) 1999-02-11
ES2229287T3 (es) 2005-04-16
AU731458B2 (en) 2001-03-29
PL186721B1 (pl) 2004-02-27
AR004382A1 (es) 1998-11-04
ATE471944T1 (de) 2010-07-15
DE69638206D1 (de) 2010-08-05
CA2237721A1 (en) 1997-06-26
JP3939354B2 (ja) 2007-07-04
NO982711D0 (no) 1998-06-12
EP0866800B1 (en) 2004-09-22
BG102479A (en) 1999-06-30
NZ324691A (en) 1999-11-29
CO4750840A1 (es) 1999-03-31
TW474946B (en) 2002-02-01
MY114327A (en) 2002-09-30
HU228275B1 (en) 2013-02-28
EP0866800A2 (en) 1998-09-30
RU2182911C2 (ru) 2002-05-27
EP1593686B1 (en) 2010-06-23
ATE277076T1 (de) 2004-10-15
BR9611987A (pt) 1999-02-17
IL124342A (en) 2005-06-19
MX9803953A (es) 1998-09-30
HRP960585A2 (en) 1998-02-28
BG64563B1 (bg) 2005-07-29
NO982711L (no) 1998-06-12
HUP0000172A3 (en) 2000-09-28
IL124342A0 (en) 1998-12-06
AU1192597A (en) 1997-07-14
CN1127514C (zh) 2003-11-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU725170B2 (en) Novel dolastatin derivatives, their preparation and use
AU679479B2 (en) Dolostatin analog
CZ293905B6 (cs) Deriváty dolastatinu@�Q v kombinaci s taxany
CZ184698A3 (cs) Nové peptidy, příprava a jejich využití
US7807779B2 (en) Antineoplastic peptides
AU775090B2 (en) Antineoplastic peptides
SK282467B6 (sk) Peptidy, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie
HK1080871A (en) Antineoplastic peptides

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20141211