ES2230848T3 - Anticuerpos monoclonales con inmunogenicidad reducida. - Google Patents
Anticuerpos monoclonales con inmunogenicidad reducida.Info
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Abstract
Un anticuerpo que comprende todas las CDR donantes procedentes de un anticuerpo específico de antígenos de una especie de roedor, los residuos del marco de lectura aceptor derivados de una región constante de primate superior y una región constante humana.
Description
Anticuerpos monoclonales con inmunogenicidad
reducida.
Esta invención se refiere a anticuerpos
monoclonales (mAc) con capacidad inmunógena reducida en humanos.
Por motivos de velocidad y sencillez, muchos
anticuerpos monoclonales potencialmente terapéuticos se generan
primero en un sistema de hibridoma murino. Los anticuerpos
monoclonales no humanos contienen regiones sustanciales de
secuencias de aminoácidos que serán inmunogénicas cuando se inyecten
en un paciente humano. Se conoce bien que tras la inyección de un
anticuerpo extraño, tal como un anticuerpo murino, un paciente puede
tener una fuerte respuesta de anticuerpos humanos
anti-ratón (siglas en inglés, HAMA) que elimina
esencialmente la utilidad terapéutica del anticuerpo tras el
tratamiento inicial, así como la utilidad de cualquier otro
anticuerpo murino administrado posteriormente.
Se conocen bien las técnicas de humanización para
producir anticuerpos monoclonales que exhiban una capacidad
inmunógena reducida en humanos, mientras mantienen la afinidad de
unión del anticuerpo monoclonal original no humano parental. Véase,
por ejemplo, aquellos descritos en las Patentes de los Estados
Unidos nº 5.585.089, 5.693.761, 5.693.762 y 5.225.539.
En general, estos procedimientos dependen de la
sustitución de las regiones determinantes de la complementariedad
(CDR) de las regiones variables ligera y pesada humanas con CDR
específicas de antígenos no humanos, proceso conocido como injerto
de CDR. También se conoce bien que en los experimentos de injerto de
CDR, se potencia el mantenimiento de la afinidad original de unión
al antígeno y en muchos casos depende de la elección de regiones de
marco de lectura del aceptor humano que se correspondan
ajustadamente con los correspondientes marcos de lectura de las CDR
del anticuerpo donante.
Sin embargo, como el genoma humano contiene un
repertorio limitado de regiones de marco de lectura de la cadena
ligera y pesada, estos procedimientos sufren la limitación de los
marcos de lectura aceptores humanos disponibles. Esta restricción en
el repertorio del marco de lectura del aceptor puede limitar
necesariamente el grado de apareamiento entre el anticuerpo donante
no humano y el anticuerpo aceptor humano. Así, los procedimientos de
injerto de CDR están limitados por el repertorio disponible conocido
de las regiones de marco de lectura de VH y VL humanas.
Evidentemente, existe una necesidad por un intervalo más amplio de
regiones V acepto-
ras.
ras.
Con esto, la presente invención proporciona un
anticuerpo que comprende todas las tres CDR donantes procedentes de
un donante específico de antígeno de una especie de roedores, un
marco de lectura aceptor, residuos procedentes de un primate
superior y una región constante humana.
La figura 1 es una secuencia de aminoácidos de la
región de VL de 4A6 diseñada. Los asteriscos encima de la secuencia
del 4A6 indican los residuos del marco de lectura de 4A6 mantenidos
en la molécula diseñada. Las letras en negrita y en cursiva indican
las CDR.
La figura 2 es una secuencia de aminoácidos de la
región de VH de 4A6 diseñada. Los asteriscos encima de la secuencia
del 4A6 indican los residuos del marco de lectura de 4A6 mantenidos
en la molécula diseñada. Las letras en negrita y en cursiva indican
las CDR.
La figura 3 es un alineamiento de secuencia de
aminoácidos que compara la secuencia del anticuerpo murino
B9V\kappa con las secuencias de V\kappa y de J\kappa
seleccionadas en chimpancé con mayor apareamiento. Las regiones CDR
se indican con letras en negrita y cursiva. Los huecos están
indicados por puntos. La convención de numeración es de Kabat et
al., más abajo.
La figura 5 es un alineamiento de secuencia de
aminoácidos que compara la secuencia del anticuerpo murino
3G9V\kappa con las secuencias de V\kappa y de J\kappa
seleccionadas en chimpancé con mayor apareamiento. Las regiones CDR
se indican con letras en negrita y cursiva. Los huecos están
indicados por puntos. Los asteriscos indican los residuos del marco
de lectura que se predicen para interaccionar con las CDR y afectan
a la afinidad de unión al antígeno. La convención de numeración es
de Kabat et al., más abajo.
La figura 6 es un alineamiento de secuencia de
aminoácidos que compara la secuencia del anticuerpo murino 3G9VH con
las secuencias de VH y de JH seleccionadas en chimpancé con mayor
apareamiento. Las regiones CDR se indican con letras en negrita y
cursiva. Los huecos están indicados por puntos. Los asteriscos
indican los residuos del marco de lectura que se predicen para
interaccionar con las CDR y afectan a la afinidad de unión al
antígeno. La convención de numeración es de Kabat et al., más
abajo.
Los aspectos genéticos moleculares de la
estructura de anticuerpo se han revisado por S. Tonegawa en
Nature 302:575-581 (1983). De manera concisa,
los anticuerpos son heterodímeros compuestos por al menos dos
cadenas pesadas y dos cadenas ligeras. Los dominios
N-terminal de cada cadena pesada y ligera,
denominadas respectivamente VH y VL, se pliegan juntos para
configurar el sitio de combinación con el antígeno. En el ámbito
genético, el dominio VL está codificado por dos segmentos distintos
de genes, denominados V\kappa o VI, y J\kappa o JI que se unen
de manera conjunta para formar una región VL continua. De manera
similar, el dominio VH está codificado por tres segmentos de genes,
VH, DH y JH, que se unen de manera conjunta para formar una región
VH continua. Por lo tanto, diferentes regiones VL y VH pueden estar
codificadas por diferentes combinaciones de V\kappa o VI,
J\kappa o Jl y VH, DH y JH. Esta diversidad combinatoria es, en
parte, el medio por el cual la respuesta inmune genera una
innumerable diversidad de diferentes moléculas de anticuerpo y sus
especificidades asociadas al antígeno.
En el ámbito proteico, cada dominio de la región
V de la cadena pesada y ligera se puede repartir además en tres CDR.
Tres CDR de la cadena pesada y tres CDR de la cadena ligera se
pliegan juntas para formar la superficie de unión al antígeno y
parte de las estructuras subyacentes de soporte que se necesitan
para mantener la estructura tridimensional exacta del sitio de
combinación con el antígeno. Flanqueando cada CDR, hay regiones de
marco de lectura que en la mayoría de los casos no interaccionan
directamente con el antígeno específico, y en cambio sirven para
formar el esqueleto que soporta las propiedades de unión al antígeno
de las CDR. Cada cadena pesada y ligera tiene cuatro regiones de
marco de lectura, tres derivadas del segmento de gen VH o VL, y la
cuarta procede del segmento del gen JH, J\kappa, o JI. Por lo
tanto, el orden de los marcos de lecturas y CDR desde el extremo N
es marco de lectura I, CDRI, marco de lectura II, CDRII, marco de
lectura III, CDRIII, marco de lectura IV. En el ámbito genético,
todos los marcos de lectura I al marco de lectura III están
codificados por el segmento del gen de la región V; la CDRIII está
codificada conjuntamente por los segmentos de los genes de la región
V y la región J; el marco de lectura IV se codifica completamente a
partir del segmento del gen J.
La expresión "cuerpo donante" se refiere a
un anticuerpo monoclonal o recombinante que aporta las secuencias de
ácidos nucleicos de sus regiones variables, CDR u otros fragmentos
funcionales o análogos de las mismas, a un anticuerpo diseñado, para
proporcionar la región codificante del anticuerpo diseñado y dar
lugar al anticuerpo diseñado expresado con la especificidad
antigénica y la característica de actividad neutralizante del
anticuerpo donante.
La expresión "anticuerpo aceptor" se refiere
a anticuerpos monoclonales o recombinantes heterólogos con el
anticuerpo donante, que aportan al anticuerpo diseñado todas, o una
porción, de las secuencias de ácidos nucleicos que codifican sus
regiones de marco de lectura de la cadena pesada y/o ligera y/o sus
regiones constantes de la cadena pesada y/o ligera o secuencias
consenso de la subfamilia de la región V.
Un "fragmento funcional" es una secuencia
variable parcial de la cadena ligera o pesada (por ejemplo,
deleciones sin importancia en el extremo amino o carboxi de la
región variable de una inmunoglobulina) que mantiene la misma
especificidad y afinidad de unión al antígeno que el anticuerpo del
que procede el fragmento.
Un "análogo" es una secuencia de aminoácidos
modificada por al menos un aminoácido, en la que dicha modificación
puede ser química o una sustitución, cuya modificación permite a la
secuencia de aminoácidos retener las características biológicas, por
ejemplo, la especificidad de antígeno y la elevada afinidad, de la
secuencia sin modificar.
Los procedimientos se proporcionan para preparar
anticuerpos diseñados con una capacidad inmunógena reducida en
humanos y primates a partir de anticuerpos no humanos. Las CDR de
anticuerpos no humanos específicas de antígeno, típicamente de
origen roedor, se injertan dentro de marcos de lectura aceptores
homólogos de primates no humanos. Preferiblemente, los marcos de
lectura aceptores de primates no humanos son de simios del Viejo
Mundo. Lo más preferiblemente, el marco de lectura aceptor de simios
del Viejo Mundo procede de Pan troglodytes, Pan
paniscus o Gorilla gorilla. El chimpancé Pan
troglodytes es particularmente preferido. También se prefieren
los marcos de lectura aceptores de monos del Viejo Mundo. Lo más
preferiblemente, los marcos de lectura aceptores de monos del Viejo
Mundo son del género Macaca. El macaco de Java Macaca
cynomolgus es particularmente preferido.
Los marcos de lectura particularmente preferidos
de la región variable (VH) de la cadena pesada de chimpancé (Pan
troglodytes) son CPVH41-12 con la secuencia de
aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID
SEC Nº: 10 y la secuencia de aminoácidos del marco de lectura IV
mostrada en la ID SEC Nº: 83; CPVH41-1 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 11 y la secuencia de aminoácidos del marco
de lectura IV mostrada en la ID SEC Nº: 85; CPVH41-4
con la secuencia de aminoácidos de marco de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 12; CPVH41-7 con la
secuencia de aminoácidos de marco de lectura I, II y III mostrada en
la ID SEC Nº: 13; CPVH41-8 con la secuencia de
aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID
SEC Nº: 14, CPVH41-9 con la secuencia de aminoácidos
de los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID SEC Nº: 15 y
la secuencia de aminoácidos del marco de lectura IV mostrada en la
ID SEC Nº: 81; CPVH41-10 con la secuencia de
aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID
SEC Nº: 16 y la secuencia de aminoácidos del marco de lectura IV
mostrada en la ID SEC Nº: 82; CPVH41-18 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 17; y CPVH41-19 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 18 y la secuencia de aminoácidos del marco
de lectura IV mostrada en la ID SEC Nº: 84.
Los marcos de lectura particularmente preferidos
de la región variable (V\kappa) de la cadena ligera K de chimpancé
(Pan troglodytes) son CPV\kappa46-1 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 28; CPV\kappa46-3 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 29; CPV\kappa46-4 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 30; CPV46-5 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 31; CPV\kappa46-6 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 32 y la secuencia de aminoácidos del marco
de lectura IV mostrada en la ID SEC Nº: 86;
CPV\kappa46-7 con la secuencia de aminoácidos de
los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID SEC Nº: 33 y la
secuencia de aminoácidos del marco de lectura IV mostrada en la ID
SEC Nº: 87; CPV\kappa46-8 con la secuencia de
aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID
SEC Nº: 34; CPV\kappa46-11 con la secuencia de
aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID
SEC Nº: 35; y CPV\kappa46-14 con la secuencia de
aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID
SEC Nº: 36.
Los marcos de lectura particularmente preferidos
de la región variable (VH) de la cadena pesada del macaco de Java
(Macaca cynomolgus) son CYVH2-1 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 45 y la secuencia de aminoácidos del marco
de lectura IV mostrada en la ID SEC Nº: 88; CYVH2-3
con la secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 46 y la secuencia de aminoácidos del marco
de lectura IV mostrada en la ID SEC Nº: 89; CYVH2-4
con la secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 47 y la secuencia de aminoácidos del marco
de lectura IV mostrada en la ID SEC Nº: 90; CYVH2-5
con la secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 48 y la secuencia de aminoácidos del marco
de lectura IV mostrada en la ID SEC Nº: 93; CYVH2-6
con la secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 49 y la secuencia de aminoácidos del marco
de lectura IV mostrada en la ID SEC Nº: 91; CYVH2-7
con la secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 50; CYVH2-8 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 51; y CYVH2-10 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 52 y la secuencia de aminoácidos del marco
de lectura IV mostrada en la ID SEC Nº: 92.
Los marcos de lectura particularmente preferidos
de la región variable (V\kappa) de la cadena ligera K del macaco
de Java (Macaca cynomolgus) son
CYV\kappa4-2 con la secuencia de aminoácidos de
los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID SEC Nº: 59;
CYV\kappa4-3 con la secuencia de aminoácidos de
los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID SEC Nº: 60 y la
secuencia de aminoácidos del marco de lectura IV mostrada en la ID
SEC Nº: 94; CYV\kappa4-5 con la secuencia de
aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID
SEC Nº: 61; CYV\kappa4-6 con la secuencia de
aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III mostrada en la ID
SEC Nº: 62 y la secuencia de aminoácidos del marco de lectura IV
mostrada en la ID SEC Nº: 95; CYV\kappa4-10 con la
secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 63; y CYV\kappa4-11 con
la secuencia de aminoácidos de los marcos de lectura I, II y III
mostrada en la ID SEC Nº: 64 y la secuencia de aminoácidos del marco
de lectura IV mostrada en la ID SEC Nº: 96.
Las moléculas de ácidos nucleicos aisladas que
codifican las secuencias de aminoácidos de marco de lectura aceptor
I, II y III de VH y V\kappa de chimpancé de ID SEC Nº: 10, 11, 12,
13, 14, 15, 16, 17, 18, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35 ó 36 y las
secuencias de aminoácidos del marco de lectura IV de ID SEC Nº: 81,
82, 83, 84, 85, 86 u 87 forman parte también de la presente
invención. Además, las moléculas de ácidos nucleicos aisladas que
codifican las secuencias de aminoácidos de marco de lectura aceptor
I, II y III de VH y V\kappa de macaco de Java de ID SEC Nº: 45,
46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 59, 60, 61, 62, 63 ó 64 y las secuencias
de aminoácidos del marco de lectura IV de ID SEC Nº: 88, 89, 90, 91,
92, 93, 94. 95 ó 96 forman parte también de la presente invención.
Las secuencias de ácidos nucleicos que codifican los fragmentos o
análogos funcionales de las secuencias de aminoácidos del marco de
lectura aceptor de VH y V\kappa forman también parte de la
presente invención.
Además de las secuencias de ácidos nucleicos
aisladas que codifican los marcos de lectura aceptores de VH y
V\kappa descritos en la presente memoria, mediante la presente
invención se incluyen también las secuencias de ácidos nucleicos
complementarias a estas regiones de marco de lectura. Las secuencias
de ADN incluyen aquellas secuencias que hibridan en condiciones
estrictas de hibridación con las secuencias de ADN. Véase, T.
Maniatis et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold
Spring Harbor Laboratory (1982), págs. 387-389. Un
ejemplo de una condición estricta de hibridación es la hibridación
con SSC 4X a 65ºC, seguido de un lavado con SSC 0,1X a 65ºC durante
una hora. De manera alternativa, una condición estricta de
hibridación de ejemplo es formamida al 50%, SSC 4X a 42ºC.
Preferiblemente, estas secuencias de ADN hibridantes tienen, al
menos, aproximadamente 18 nucleótidos de longitud.
Los marcos de lectura adecuados se seleccionan
mediante la búsqueda computerizada de homología entre los miembros
de una base de datos de regiones VH y VL de simios o monos del Viejo
Mundo. Las porciones de marco de lectura de anticuerpos de primates
son útiles como componentes de anticuerpos terapéuticas. Además, los
marcos de lectura de anticuerpos de primates serán tolerados cuando
se usen en el tratamiento de humanos gracias a su estrecha homología
de secuencia entre los genes de los primates y los humanos. Por
tanto, la presente invención prevé el injerto de CDR desde un
anticuerpo donante no humano específico de antígeno a regiones V
aceptoras procedentes de especies de primates no humanos.
La especificidad de antígeno y la cinética de
unión del anticuerpo donante, que puede ser de roedor o de cualquier
otro origen no humano, se conservan mejor seleccionando las regiones
V aceptoras del primate que se determinan mediante búsqueda
computerizada de homología por ser lo más parecidas al anticuerpo
donante. De manera alternativa, el anticuerpo aceptor puede ser una
secuencia consenso generada a partir de subfamilias de la región V
de primates, o porciones de las mismas, que presentan la mayor
homología con el anticuerpo donante.
Las construcciones diseñadas resultantes, en las
que las CDR donantes se insertan en marcos de lectura aceptores de
primates, se afinan posteriormente mediante análisis de modelos
tridimensionales basados en las estructuras cristalinas conocidas de
anticuerpos, como se encuentra, por ejemplo, en el Protein Data
Bank. De manera alternativa, los modelos tridimensionales generados
por ordenador del anticuerpo donante se pueden calcular mediante
programas informáticos disponibles comercialmente tales como
"AbM" (Oxford Molecular, Oxford, RU).
El análisis estructural de estos modelos puede
revelar residuos del marco de lectura donante que son residuos de
contacto con CDR y que se observa que son importantes en la
presentación de bucles de CDR, y por lo tanto en la avidez de unión.
Un residuo de contacto con CDR es aquél que se observa en los
modelos tridimensionales por encontrarse dentro del radio de van der
Waals de un residuo de CDR, o puede interaccionar con un residuo de
CDR a través de un puente salino o por interacción hidrofóbica.
Tales residuos del marco de lectura donante (de contacto con CDR) se
pueden mantener en la construcción diseñada.
Los experimentos de modelización también pueden
revelar que los residuos del marco de lectura están expuestos en su
mayor parte al medio del disolvente. Además, las construcciones
diseñadas se pueden mejorar mediante la sustitución de algunos o de
todos estos residuos de aminoácidos accesibles al disolvente por
aquellos descubiertos en la misma posición entre las regiones V
humanas con mayor homología con la construcción diseñada, como se
describe en la Patente de los Estados Unidos nº 5.639.641.
Después se unen las regiones V diseñadas a una o
más regiones constantes diferentes de simios del Viejo Mundo o
humanos, dependiendo de las funciones inmunes secundarias deseadas
tales como la fijación del complemento o la unión al receptor de Fc.
Las regiones constantes humanas se pueden seleccionar de clases e
isotipos de inmunoglobulinas humanas, tales como IgG (subtipos 1 a
4), IgM, IgA e IgE. También se puede seleccionar una variante del
subtipo IgG_{4} que contiene las mutaciones S228P y L235E
(mutación PE) en la región constante de la cadena pesada que dé
lugar a una función efectora reducida. Véanse las Patentes de los
Estados Unidos nº 5.624.821 y 5.648.260.
Los genes completos de la cadena ligera y pesada
se transfieren a vectores de expresión adecuados y se coexpresan en
las células huésped apropiadas tales como células de ovario de
hámster chino, COS, o células de mieloma. Se espera que el
anticuerpo diseñado resultante tenga una capacidad inmunógena
sustancialmente reducida cuando se administre a humanos, y mantenga
una completa afinidad de unión por el antígeno.
Las regiones V aceptoras se pueden aislar de
forma específica para cada región V donante mediante metodología
dirigida de PCR en la que se examina una genoteca de ADNc de
primates no humanos para los marcos de lectura aceptores más
similares con el anticuerpo donante. Para dirigir la amplificación
por PCR de una genoteca de ADNc de linfocitos de un primate no
humano, por ejemplo, de chimpancé, se usan cebadores
oligonucleótidicos de PCR homólogos con el marco de lectura I
donante del anticuerpo (apareado con la región C de los cebadores 3'
de PCR). Esto seleccionaría regiones V con regiones del marco de
lectura I similares al anticuerpo donante, y el análisis de
secuencia de los clones obtenidos revelaría las secuencias asociadas
del marco de lectura II y III (y IV). Después se diseñarían los
cebadores 3' de PCR en función del conocimiento de las secuencias
del marco de lectura III de primates no humanos así obtenidas, y se
usarían para dirigir la amplificación por PCR de la genoteca
original de ADNc junto con un cebador 5' de PCR específico de
vector. Los clones de ADNc obtenidos de la segunda ronda de
amplificación por PCR tendrían las secuencias de marco de lectura I
y III lo más similares al anticuerpo donante, y las secuencias del
marco de lectura II mostrarían un grado similar de homología de
secuencia.
Ahora se describirá la presente invención en
referencia a los siguientes ejemplos específicos no limitativos.
Se recogieron y se mezclaron cinco ml de sangre
periférica de tres chimpancés (Pan troglodytes) y se aislaron
las células mononucleares de la sangre periférica mediante
procedimientos estándar de centrifugación en gradiente de densidad.
Estas células, que incluyen los linfocitos que producen anticuerpos,
se disolvieron en el reactivo TRIzol (GIBCO, Gaithersburg, MD,
EE.UU.) y se recuperó el ARN total a partir de este material por
extracción con disolvente y precipitación según las especificaciones
del fabricante.
Las regiones V de la cadena pesada de chimpancé
se clonaron a partir del ARN total, usando la metodología RACE
Marathon (Clontech, Palo Alto, CA, EE.UU.) siguiendo de manera
exacta el protocolo del fabricante, que usa los cebadores 3'
específicos del gen Cg1. Tras la amplificación por PCR RACE, se
extrajeron las bandas de ADN del tamaño esperado de los geles de
agarosa, y el ADN se purificó y clonó en un vector plasmídico.
Aunque esta genoteca de ADNc contiene muchos clones distintos de la
región V de la cadena pesada, se seleccionaron nueve al azar para el
análisis de secuencia. Las secuencias completas de ácidos nucleicos
y las secuencias de proteínas predichas de los clones con ADNc de VH
de chimpancé 41-12, 41-1,
41-4, 41-7, 41-8,
41-9, 41-10, 41-18 y
41-19 se muestran en las ID SEC Nº: 1, 2, 3, 4, 5,
6, 7, 8 y 9, respectivamente. Las secuencias de aminoácidos de la
región desde el primer aminoácido de la región madura de VH al
segundo residuo conservado de cisteína en la posición 92, adyacente
a la CDR III de estos clones, es decir, CPVH41-12,
CPVH41-1, CPVH41-4,
CPVH41-7, CPVH41-8,
CPVH41-9, CPVH4-10,
CPVH41-18 y CPVH41-19, se muestran
en las ID SEC Nº: 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 y 18,
respectivamente. Las secuencias de aminoácidos de la región que
codifica el marco de lectura IV de estos clones para
CPVH41-9, CPVH41-10,
CPVH41-12, CPVH41-19 y CPVH
41-1 se muestran en las ID SEC Nº: 81, 82, 83, 84 y
85, respectivamente.
Como secuencias de consulta en la búsqueda
computerizada de homología de la base de datos de Kabat de
Secuencias de Proteínas de Interés Inmunológico, se usaron las
secuencias de aminoácidos de VH de chimpancé desde el extremo N
maduro y el segundo residuo conservado de cisteína en la posición
92, adyacente a la CDRIII. Los resultados de este análisis se
muestran en la tabla 1.
En cada caso, el mayor ajuste fue con la región
VH humana, mostrando entre el 76% (41-1/HHC20G) y el
94% (41-10/HHC20Y) de identidad de secuencia en el
ámbito de aminoácidos. Los ajustes se descubrieron para cada uno de
los tres subgrupos principales de VH humana, lo que indica que el
repertorio de VH de chimpancé incluye al menos algunos miembros
homólogos a cada uno de los principales subgrupos humanos. La
homología con los subgrupos humanos se presenta en la tabla 1.
Los resultados muestran que la identidad de
secuencia completa entre las regiones VH de humanos y de chimpancés
oscilaba entre el 76% y el 94% con una identidad promedio del 84%.
En función de esta observación, un muestreo adicional de la genoteca
aleatoria de VH de chimpancé proporcionará probablemente una
diversidad sustancialmente mayor de secuencias de VH de la que
elegir los óptimos marcos de lectura aceptores para cada región VH
donante particular.
Las regiones V\kappa de la cadena ligera de
chimpancé se clonaron desde el ARN total, usando la metodología RACE
Marathon (Clontech, Palo Alto, CA, EE.UU.) siguiendo de manera
exacta el protocolo del fabricante, que usa los cebadores 3'
específicos del gen C\kappa. Tras la amplificación por PCR RACE,
se extrajeron las bandas de ADN del tamaño esperado de los geles de
agarosa, y el ADN se purificó y clonó en un vector plasmídico.
Aunque esta genoteca de ADNc contiene muchos clones distintos de la
región V\kappa de la cadena ligera, se seleccionaron nueve al azar
para el análisis de secuencia. Las secuencias completas de ácidos
nucleicos y las secuencias de proteínas predichas de los clones con
ADNc de V\kappa de chimpancé, 46-1,
46-3, 46-4, 46-5,
46-6, 46-7, 46-8,
46-11 y 46-14 se muestran en la ID
SEC Nº: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 y 27, respectivamente. Las
secuencias de aminoácidos de la región desde el primer aminoácido de
la región madura de V\kappa al segundo residuo conservado de
cisteína en la posición 88, adyacente a la CDR III de estos clones,
es decir, CPV\kappa46-1,
CPV\kappa46-3, CPV\kappa46-4,
CPV\kappa46-5, CPV\kappa46-6,
CPV\kappa46-7, CPV\kappa46-8,
CPV\kappa46-11 y CPV\kappa46-14
se muestran en las ID SEC Nº: 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35 y 36,
respectivamente. Las secuencias de aminoácidos de la región que
codifica el marco de lectura IV de estos clones para
CPV\kappa46-6 y CPV\kappa46-7 se
muestran en las ID SEC Nº: 86 y 87, respectivamente.
Como secuencias de consulta en la búsqueda
computerizada de homología de la base de datos de Kabat se usaron
las secuencias de aminoácidos de V\kappa de chimpancé desde el
extremo N maduro y el segundo residuo conservado de cisteína en la
posición 88. Los resultados de este análisis se muestran en la tabla
2. En cada caso, el mayor ajuste fue con la región V\kappa humana,
mostrando entre el 68% (46-4/HKL310) y el 97%
(46-11/HKL106) de identidad de secuencia en el
ámbito de aminoácidos. Es evidente que las secuencias de V\kappa
de chimpancé son distintas de la colección de V\kappa humanas
encontradas en la base de datos Kabat.
La homología con los subgrupos humanos se
presenta en la tabla 2. De los cuatro subgrupos principales de
V\kappa humana, se encontraron los emparejamientos para los dos
aislados con mayor frecuencia, lo que indica que el repertorio de
V\kappa de chimpancé es homólogo al menos con los miembros de la
mayoría del repertorio de V\kappa humana. Un muestreo adicional de
la genoteca de ADNc de V\kappa de chimpancé identificará
probablemente una diversidad mayor de regiones V\kappa de
chimpancé, incluidas aquellas homólogas con los dos grupos restantes
de V\kappa humana (V\kappaII y V\kappaIV).
El ARN de bazo se recuperó a partir de un único
macaco de Java donante (Macaca cynomolgus) por medio de la
práctica estándar de laboratorio. Las regiones V de la cadena pesada
de macaco de Java se clonaron a partir del ARN total, usando la
metodología RACE Marathon (Clontech, Palo Alto, CA, EE.UU.)
siguiendo de manera exacta el protocolo del fabricante, que usa los
cebadores 3' específicos del gen Cg1. Tras la amplificación por PCR
RACE, se extrajeron las bandas de ADN del tamaño esperado de los
geles de agarosa, y el ADN se purificó y se clonó en un vector
plasmídico. Aunque esta genoteca de ADNc contiene muchos clones
distintos de la región V de la cadena pesada, se seleccionaron ocho
al azar para el análisis de secuencia. Las secuencias completas de
ácidos nucleicos y las secuencias de proteínas predichas de los
clones con ADNc de VH de macaco de Java 2-1,
2-3, 2-4, 2-5,
2-6, 2-7, 2-8 y
2-10 se muestran en las ID SEC Nº: 1, 37, 38, 39,
40, 41, 42, 43 y 44, respectivamente. Las secuencias de aminoácidos
de la región desde el primer aminoácido de la región madura de VH al
segundo residuo conservado de cisteína en la posición 92, adyacente
a la CDR III de estos clones, es decir, CyVH2-1,
CyVH2-3, CyVH2-4,
CyVH2-S, CyVH2-6,
CyVH2-7, CyVH2-8 y
CyVH2-10, se muestran en las ID SEC Nº: 45, 46, 47,
48, 49, 50, 51 y 52, respectivamente. Las secuencias de aminoácidos
de la región que codifica el marco de lectura IV de estos clones
para CyVH2-1, CyVH2-3,
CyVH2-4, CyVH2-6,
CyVH2-10 y CyVH2-5 se muestran en
las ID SEC Nº: 88, 89, 90, 91, 92 y 93, respectivamente.
Como secuencias de consulta en la búsqueda
computerizada de homología de la base de datos de Kabat se usaron
las secuencias de aminoácidos de VH de macaco de Java desde el
extremo N maduro y el segundo residuo conservado de cisteína en la
posición 92, adyacente a la CDRIII. Los resultados de este análisis
se muestran en la tabla 3. En cada caso, el mayor ajuste fue con la
región VH humana, mostrando entre el 62%
(2-6/HHC20E) y el 84% (2-5/HHC20F)
de identidad de secuencia en el ámbito de aminoácidos. Es evidente
que las secuencias de VH de macaco de Java son distintas de la
colección de VH humanas encontradas en la base de datos Kabat. Los
emparejamientos se descubrieron para cada uno de los tres subgrupos
principales de VH humana, lo que indica que el repertorio de VH del
macaco de Java incluye al menos algunos miembros homólogos a cada
uno de los principales subgrupos humanos. La homología con los
subgrupos humanos se presenta en la tabla 3.
Los resultados muestran que la identidad de
secuencia completa entre las regiones VH de humanos y de macacos de
Java oscilaba entre el 62 y el 84% con una identidad promedio del
77%. En función de esta observación, un muestreo adicional de la
genoteca aleatoria de VH de macaco de Java proporcionará
probablemente una diversidad sustancialmente mayor de secuencias de
VH de la que elegir los óptimos marcos de lectura aceptores para
cada región VH donante particular.
Las regiones V\kappa de la cadena ligera de
macaco de Java se clonaron a partir del ARN total de bazo, usando la
metodología RACE Marathon (Clontech, Palo Alto, CA, EE.UU.)
siguiendo de manera exacta el protocolo del fabricante, y los
cebadores 3' específicos del gen C\kappa. Tras la amplificación
por PCR RACE, se extrajeron las bandas de ADN del tamaño esperado de
los geles de agarosa, y el ADN se purificó y clonó en un vector
plasmídico. Aunque esta genoteca de ADNc contiene muchos clones
distintos de la región V\kappa de la cadena ligera, se
seleccionaron seis al azar para el análisis de secuencia. Las
secuencias completas de ácidos nucleicos y las secuencias de
proteínas predichas de los clones con ADNc de V\kappa de macaco de
Java, 4-2, 4-3, 4-5,
4-6, 4-10 y 4-11 se
muestran en la ID SEC Nº: 53, 54, 55, 56, 57 y 58, respectivamente.
Las secuencias de aminoácidos de la región desde el primer
aminoácido de la región madura de V\kappa al segundo residuo
conservado de cisteína en la posición 88, adyacente a la CDR III de
estos clones, es decir, CyV\kappa4-2,
CyV\kappa4-3, CyV\kappa4-5,
CyV\kappa4-6, CyV\kappa4-10 y
CyV\kappa4-11 se muestran en las ID SEC Nº: 59,
60, 61, 62, 63 y 64, respectivamente. Las secuencias de aminoácidos
de la región que codifica el marco de lectura IV de estos clones
para CyV\kappa4-3, CyV\kappa4-6
y CyV\kappa4-11 se muestran en las ID SEC Nº: 94,
95 y 96, respectivamente.
Como secuencias de consulta en la búsqueda
computerizada de homología de la base de datos de Kabat se usaron
las secuencias de aminoácidos de V\kappa de macaco de Java desde
el extremo N maduro y el segundo residuo conservado de cisteína en
la posición 88. Los resultados de este análisis se muestran en la
tabla 4. En cada caso, el mayor ajuste fue con la región V\kappa
humana, mostrando entre el 73% (4-11/HKL10S) y el
94% (4-3/ HKL400) de identidad de secuencia en el
ámbito de aminoácidos. Es evidente que las secuencias de V\kappa
de macaco de Java son distintas de la colección de V\kappa humanas
encontradas en la base de datos Kabat.
La homología con los subgrupos humanos se
presenta en la tabla 4. Los emparejamientos para tres de los cuatros
subgrupos principales de V\kappa humana, lo que indica que el
repertorio de V\kappa de macaco de Java es ampliamente homólogo
con los miembros de la mayoría del repertorio de V\kappa humana.
Un muestreo adicional de la genoteca de ADNc de V\kappa del macaco
de Java identificará probablemente una mayor diversidad de regiones
V\kappa de macaco de Java, incluidas aquellas homólogas con el
grupo restante de V\kappa humana (V\kappaIII).
Los resultados muestran que la identidad de
secuencia completa entre las regiones V\kappa de humanos y de
macacos de Java oscilaba entre el 73% y el 94% con una identidad
promedio del 85%. En función de esta observación, un muestreo
adicional de la genoteca aleatoria de V\kappa de macaco de Java
proporcionará probablemente una diversidad sustancialmente mayor de
secuencias de V\kappa de la que elegir los óptimos marcos de
lectura aceptores para cada región V\kappa donante particular.
Los genes V\kappa y VH del anticuerpo 4A6 de
rata anti-interleucina 5 (IL-5) se
muestran en la ID SEC Nº: 65 y 66, respectivamente. Estos genes
codifican un anticuerpo monoclonal neutralizante de elevada
afinidad, específico para la IL-5 humana, útil para
el tratamiento del asma. Véase la Patente de los Estados Unidos nº
5.693.323.
La cadena ligera de 4A6 se diseñó como sigue. La
secuencia del anticuerpo donante V\kappa4A6 (ID SEC Nº: 65) se
alineó con la región V\kappa de la cadena ligera del anticuerpo
aceptor Mab C108G de chimpancé (Mol. Immunol.
32:1081-1092 (1995)) (ID SEC Nº: 67) como se muestra
en la figura 1. Ya que el V\kappa4A6 nativo tiene una única
deleción del residuo 10, el alineamiento de secuencia incluía la
inserción de un hueco en esa posición. Los residuos de CDR se
identificaron como define la convención de Kabat et al. en
Sequences of Proteins of Immunological Interest, 4ª edición,
U.S. Department of Health and Human Services, National Institutes of
Health (1987).
Los residuos del marco de lectura que pudieron
influir en la presentación de CDR se identificaron por análisis de
los modelos tridimensionales de acuerdo con estructuras cristalinas
conocidas de anticuerpos. Los residuos de este conjunto de contacto
con CDR se compararon entre las secuencias alineadas de V\kappa4A6
y V\kappaC108G, y se marcaron las posiciones del grupo que
diferían entre el V\kappa4A6 y el V\kappaC108G (Fig. 1,
asteriscos). Las CDR y los residuos marcados del marco de lectura de
V\kappa4A6 (el anticuerpo donante) se transfirieron sustituyendo
los correspondientes residuos de V\kappaC108G (el anticuerpo
aceptor). La región V de la cadena ligera diseñada completa de 4A6
se muestra en la ID SEC Nº: 68. Se mantuvieron seis residuos del
marco de lectura donante en la molécula diseñada en los residuos 1 a
4, 49 y 60.
De manera análoga, se usó un procedimiento
similar para diseñar la cadena pesada de 4A6. La secuencia del
anticuerpo donante VH4A6 (ID SEC Nº: 66) se alineó con la región V
de la cadena pesada del anticuerpo aceptor del Mab C108G de
chimpancé (ID SEC Nº: 69) como se muestra en la figura 2. Se
introdujo un hueco amplio en el alineamiento de la CDRIII de VH4A6,
tal como la CDRIII de VHC108G es 10 residuos mayor. Los residuos de
CDR se identificaron como define la convención de Kabat et
al., según anteriormente.
Los residuos del marco de lectura que pudieron
influir en la presentación de CDR se identificaron por análisis de
los modelos tridimensionales de acuerdo con estructuras cristalinas
conocidas de anticuerpos. Los residuos de este conjunto de contacto
con CDR se compararon entre las secuencias alineadas de VH4A6 y
VHC108G, y se marcaron las posiciones del grupo que diferían entre
el VH4A6 y el VHC108G (Fig. 2, asteriscos). En total, se
seleccionaron y marcaron 11 de tales residuos de contacto con CDR
que diferían entre el VH4A6 y el VHC108G. Las CDR y los residuos
marcados del marco de lectura de contacto de VH4A6 (el anticuerpo
donante) se transfirieron sustituyendo los correspondientes residuos
de VHC108G (el anticuerpo aceptor). La región V de la cadena pesada
diseñada completa de 4A6 se muestra en la ID SEC Nº: 70. Se
mantuvieron once residuos del marco de lectura donante en la
molécula diseñada en los residuos 27, 30, 38, 49, 66, 67, 69, 71,
73, 78 y 94.
El 4A6 diseñado se puede expresar en células
usando procedimientos bien conocidos para aquellos expertos en la
técnica. De manera concisa, los genes que codifican las regiones VH
y V\kappa completas diseñadas de 4A6 se pueden ensamblar desde
largos oligonucleótidos sintéticos y ligar en vectores adecuados de
expresión eucariota que contenían las regiones constantes del
anticuerpo deseado. Tal vector de expresión contendrá marcadores
seleccionables, por ejemplo, resistencia a neomicina y secuencias
reguladoras, por ejemplo, el promotor de CMV, necesario para dirigir
la expresión de las cadenas pesada y ligera del anticuerpo de
longitud completa Posteriormente, la transfección de las células
huésped apropiadas, por ejemplo, de ovario de hámster chino, daría
lugar a la expresión del 4A6 diseñado completamente activo.
Los genes V\kappa y VH del anticuerpo B9 murino
anti-integrina se muestran en las ID SEC Nº: 71 y
72, respectivamente. Estos genes codifican un anticuerpo monoclonal
neutralizante de elevada afinidad, específico para la integrina
\alpha_{v}\beta_{3} humana, útil para el tratamiento de las
enfermedades vasculares.
La cadena ligera de B9 se diseñó como sigue. La
secuencia de aminoácidos del anticuerpo donante V\kappaB9 (ID SEC
Nº: 72) se comparó con cada una de las nueve secuencias de V\kappa
de chimpancé descritas anteriormente y se determinó el porcentaje de
identidad de secuencia mediante búsqueda computerizada de homología
usando el programa LASERGEME "MEGALIGN" (DNASTAR, Inc..
Madison, WI). Los clones CPV\kappa46-3 (ID SEC Nº:
29) y CPV\kappa46-14 (ID SEC Nº: 36) se
identificaron como las regiones V\kappa de chimpancé con la mayor
similitud global de secuencia (77%) con la V\kappa del donante B9.
El CPV\kappa46-3 se seleccionó como el marco de
lectura aceptor.
De modo similar, se seleccionó el segmento del
gen J\kappa de CPV\kappa46-1 de chimpancé (ID
SEC Nº: 97) como marco de lectura IV aceptor. Se alinearon las
secuencias de las regiones V del V\kappaB9 donante y
CPV\kappa46-3, CPV\kappa46-1
aceptores y se determinaron las posiciones de sus respectivos marcos
de lectura y CDR como se muestran en la figura 3.
Los residuos de CDR se identificaron como define
la convención de Kabat et al., según anteriormente. Los
resultados muestran que V\kappaB9 y
CPV\kappa46-3 comparten un 77% de la identidad de
secuencia total, con las regiones de marco de lectura I a III que
comparten un 81% de identidad de secuencia.
Los residuos del marco de lectura que pudieron
influir en la presentación de CDR se identificaron por análisis de
los modelos tridimensionales de acuerdo con estructuras cristalinas
conocidas de anticuerpos. Los residuos de este conjunto de contacto
con CDR se compararon entre las secuencias alineadas de VLB9 y
Cmpk46-3, y no se encontró ninguno de este conjunto
que difiriese entre el VLB9 y el Cmp46-3. Por lo
tanto, sólo se transfirieron las CDDR del VLB9 (el anticuerpo
donante), sustituyendo los correspondientes residuos de
Cmp46-3 (el anticuerpo aceptor). Por último, las
secuencias del marco de lectura IV de Cmp46-1
sustituyeron a los correspondientes residuos del marco de lectura IV
de la región variable de la cadena ligera de B9. La región V de la
cadena ligera completa diseñada de B9 se muestra en la ID SEC Nº:
73. No se mantuvo ningún residuo del marco de lectura en la región
variable de la cadena ligera diseñada.
La cadena pesada de B9 se diseñó de manera
análoga. La secuencia de aminoácidos del anticuerpo donante VHB9 (ID
SEC Nº: 71) se comparó con cada una de las nueve secuencias de VH de
chimpancé descritas anteriormente mediante búsqueda computerizada de
homología. Se identificó el clon AMP41CL18 (ID SEC Nº: 17) como la
región VH de chimpancé con la mayor similitud global de secuencia
(58%) con la VH del B9 donante.
El segmento del gen JH de AMP41CL10 de chimpancé
(ID SEC Nº: 82) se seleccionó como marco de lectura IV aceptor. Se
alinearon las secuencias de las regiones V del VHB9 donante y
aceptoras de chimpancé y se determinaron las posiciones de sus
respectivos marcos de lectura y CDR como se muestran en la figura
4.
Los residuos de CDR se identificaron como define
la convención de Kabat et al., según anteriormente. Los
resultados muestran que VHB9 y AMP41CL18-3 comparten
un 58% de la identidad de secuencia total, con las regiones de marco
de lectura I a III que comparten un 65% de identidad de
secuencia.
Los residuos del marco de lectura que pudieron
influir en la presentación de CDR se identificaron por análisis de
los modelos tridimensionales de acuerdo con estructuras cristalinas
conocidas de anticuerpos. Los residuos de este conjunto de contacto
con CDR se compararon entre las secuencias alineadas de VHB9 y
AMP41CL18, y se marcaron los nueve residuos del conjunto que
diferían entre los marcos de lectura de VHB9 y el marco de lectura
aceptor de chimpancé. Las CDR y los residuos marcados del marco de
lectura del anticuerpo donante VHB9 se transfirieron sustituyendo
los correspondientes residuos de AMP41CL18 (el anticuerpo aceptor).
Por último, las secuencias del marco de lectura IV de AMP41CL10
sustituyeron a los correspondientes residuos del marco de lectura IV
de la región variable de la cadena pesada de B9. La región V de la
cadena pesada diseñada completa de B9 se muestra en la ID SEC Nº:
74. Se mantuvieron nueve residuos del marco de lectura donante en la
región variable de la cadena pesada diseñada en las posiciones 24,
27, 38, 48, 66, 67, 69, 93 y 94.
El anticuerpo diseñado B9 se expresó en células
usando procedimientos bien conocidos para aquellos expertos en la
técnica. De manera concisa, los genes que codifican las regiones VH
y V\kappa completas diseñadas de B9 se ensamblaron desde largos
oligonucleótidos sintéticos y se ligaron en vectores adecuados de
expresión eucariota que contenían las regiones constantes \kappa
del anticuerpo IgG1. El vector de expresión contenía un marcador
seleccionable para la resistencia a neomicina y las secuencia
reguladoras del promotor de CMV. La transfección posterior de las
células huésped COS dio lugar a la expresión del B9 diseñado
(CPB9).
La avidez relativa de unión de CPB9 se comparó
con la del anticuerpo B9 murino original como sigue. Los anticuerpos
CPB9 presentes en los sobrenadantes del cultivo de las células
mantenidos en cultivo durante 5 días tras la transfección con las
construcciones de expresión se compararon con el anticuerpo B9
murino original usando la tecnología ORIGEN (IGEN Inc, Gaithersburg,
MD). De manera concisa, se incubaron diferentes diluciones de
variantes de B9 con integrina \alpha_{v}\beta_{3} humana
purificada, que se había biotinilado previamente, y con un resto TAG
electroquimioluminiscente específico para las regiones C del
anticuerpo. La variante del anticuerpo B9 unida a la integrina se
midió mediante la captura de inmunocomplejos sobre perlas de
estreptavidina seguido del análisis con el instrumento ORIGEN. Los
resultados mostraron que las curvas de unión de CPB9 y el B9 murino
se desplazaron sólo aproximadamente el triple, lo que indica que la
avidez global de unión específica del CPB9 y el B9 murino para
\alpha_{v}\beta_{3} es del triple de una a la otra. Por lo
tanto, los resultados muestran que el injerto de CDR de CDR de
roedor en marcos de lectura de chimpancé como se describe en la
presente invención, mantuvo casi toda la avidez de unión del mAc de
roedor de original.
Los genes V\kappa y VH del anticuerpo 3G9
murino anti-receptor de eritropoyetina se muestran
en las ID SEC Nº: 75 y 76, respectivamente. Estos genes
codifican un anticuerpo monoclonal neutralizante de elevada
afinidad, específico para el receptor humano de la eritropoyetina
(EPOr), útil para el tratamiento de los trastornos
hematopoyéticos.
La cadena ligera de 3G9 se diseñó como sigue. La
secuencia de aminoácidos del anticuerpo donante VL3G9 (ID SEC Nº:
76) se comparó con cada una de las nueve secuencias de V\kappa de
chimpancé descritas anteriormente y se determinó el porcentaje de
identidad de secuencia mediante búsqueda computerizada de homología
como se ha descrito antes. Los clones
CPV\kappa46-3 (ID SEC Nº: 29)
CPV\kappa46-5 (ID SEC Nº: 31),
CPV\kappa46-8 (ID SEC Nº: 34) y
CPV\kappa46-14 (ID SEC Nº: 36) se identificaron
como las regiones V\kappa de chimpancé con la mayor similitud
global de secuencia (65%) con la V\kappa del donante 3G9. El
CPV\kappa46-14 se seleccionó como el marco de
lectura aceptor.
El segmento del gen J\kappa de
V\kappa46-41 de chimpancé fue idéntico al del
CPV\kappa46-1 (ID SEC Nº: 97) y se seleccionó como
marco de lectura IV aceptor. Se alinearon las secuencias de las
regiones V del VL3G9 donante y V\kappa46-14,
CPV\kappa46-1 aceptores y se determinaron las
posiciones de sus respectivos marcos de lectura y CDR como se
muestran en la figura 5.
Los residuos de CDR se identificaron como define
la convención de Kabat et al., según anteriormente. Los
resultados muestran que VL3G9 y V\kappa46-14
comparten un 65% de la identidad de secuencia total, con las
regiones de marco de lectura I a III que comparten un 73% de
identidad de secuencia.
Los residuos del marco de lectura que pudieron
influir en la presentación de CDR se identificaron por análisis de
los modelos tridimensionales de acuerdo con estructuras cristalinas
conocidas de anticuerpos. Los residuos de este conjunto de contacto
con CDR se compararon entre las secuencias alineadas de VL3G9 y
V\kappa46-14, y se marcaron las posiciones de este
conjunto que diferían entre V3G9 y V\kappa46-3.
Las CDR y los residuos marcados del VL3G9 se transfirieron
sustituyendo los correspondientes residuos de
V\kappa46-14 (el anticuerpo aceptor). Por último,
las secuencias del marco de lectura IV de
V\kappa46-14 sustituyeron a los correspondientes
residuos del marco de lectura IV de la región variable de la cadena
ligera de 3G9. La región V de la cadena ligera diseñada completa de
3G9 se muestra en la ID SEC Nº: 77. Se mantuvieron tres residuos del
marco de lectura donante en la región variable de la cadena ligera
diseñada en los residuos 3, 46 y 60.
La cadena pesada de 3G9 se diseñó de manera
análoga. La secuencia de aminoácidos del anticuerpo donante VH3G9
(ID SEC Nº: 75) se comparó con cada una de las nueve secuencias de
VH de chimpancé descritas anteriormente mediante búsqueda
computerizada de homología. Se identificó el clon
chimp41-18 (ID SEC Nº: 17) como la región VH de
chimpancé con la mayor similitud global de secuencia (53%) con la VH
del 3G9 donante.
El segmento del gen JH de
chimp41-18 de chimpancé fue idéntico al
CPVH41-9 (ID SEC Nº: 81) y se seleccionó como marco
de lectura IV aceptor. Se alinearon las secuencias de las regiones V
del VH3G9 donante y aceptoras de chimpancé y se determinaron las
posiciones de sus respectivos marcos de lectura y CDR, como se
muestra en la figura 6.
Los residuos de CDR se identificaron como define
la convención de Kabat et al., según anteriormente. Los
resultados muestran que VH3G9 y Chimp41-18 comparten
un 53% de la identidad de secuencia total, con las regiones de marco
de lectura I a III que comparten un 62% de identidad de
secuencia.
Los residuos del marco de lectura que pudieron
influir en la presentación de CDR se identificaron por análisis de
los modelos tridimensionales de acuerdo con estructuras cristalinas
conocidas de anticuerpos. Los residuos de este conjunto de contacto
con CDR se compararon entre las secuencias alineadas de VH3G9 y
Chimp41-18, y se marcaron doce residuos del conjunto
que diferían entre los marcos de lectura de VH3G9 y el marco de
lectura aceptor de chimpancé. Las CDR y los residuos marcados del
marco de lectura del anticuerpo donante VH3G9 se transfirieron
sustituyendo los correspondientes residuos de
Chimp41-18 (el anticuerpo aceptor). Por último, las
secuencias del marco de lectura IV de Chimp41-18
sustituyeron a los correspondientes residuos del marco de lectura IV
de la región variable de la cadena pesada de 3G9. La región V de la
cadena pesada diseñada completa de 3G9 se muestra en la ID SEC Nº:
78. Se mantuvieron nueve residuos del marco de lectura donante en la
región variable de la cadena pesada diseñada en las posiciones 24,
27, 38, 48, 66, 67, 69, 93 y 94. Doce residuos del marco de lectura
donante se mantuvieron en la región variable diseñada de la cadena
pesada en las posiciones 24, 27, 30, 38, 48, 66-69,
71, 73 y 94.
El anticuerpo diseñado 3G9 se expresó en células
usando procedimientos bien conocidos para aquellos expertos en la
técnica. De manera concisa, los genes que codifican las regiones VH
y V\kappa completas diseñadas de 3G9 se ensamblaron desde largos
oligonucleótidos sintéticos y se ligaron en vectores adecuados de
expresión eucariota que contenían las regiones constantes \kappa
del anticuerpo IgG1. El vector de expresión contenía un marcador
seleccionable para la resistencia a neomicina y la secuencia
reguladora del promotor de CMV. La transfección posterior de las
células huésped COS dio lugar a la expresión del 3G9 diseñado
(CP3G9).
Los sobrenadantes del cultivo de las células COS
transfectadas de forma transitoria con el marco de lectura diseñado
3G9 de chimpancé se compararon con otra variante de 3G9 para su
capacidad de unir el EPOr humano. El dominio extracelular completo
de EPOr se expresó como proteína recombinante, se purificó, y se
adsorbió en los pocillos de placas para ELISA. Las diluciones de
diferentes anticuerpos se analizaron después para su capacidad de
unirse de forma especifica al EPOr asociado a la fase sólida.
KZ3G9 es una variante humanizada de 3G9 en la que
se usan marcos de lectura humanos en experimentos tradicionales de
injerto de CDR. La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de
3G9 humanizado se muestra en la ID SEC Nº: 79. La secuencia de la
cadena ligera de 3G9 humanizado se muestra en la ID SEC Nº: 80. Los
experimentos previos mostraron que HZ3G9 retuvo toda la afinidad de
unión y la avidez del 3G9 murino de origen. Por lo tanto, como
HZ3G9G1 es idéntico a la versión de chimpancé en todos los aspectos
excepto en el casete de la región V, se usó en los presentes
experimentos comparativos de unión en forma de sustituto para el 3G9
murino. También se analizaron anticuerpos de control negativo,
incluyendo el HZD12, que es un anticuerpo humanizado específico para
la integrina humana, y el CPB9, que es un anticuerpo diseñado para
chimpancé de marco de lectura, específico para integrinas humanas
descrito anteriormente. Se incubaron diferentes concentraciones de
variantes de 3G9 y anticuerpos de control durante una hora. Después
del lavado, se detectaron los anticuerpos unidos mediante la
incubación con el conjugado de anticuerpo anti-H+L
humano y enzima, un lavado final y la adición de cromágeno.
Las curvas de unión obtenidas para CP3G9 y HZ3G9
fueron superponibles. Este resultado indica que las versiones
diseñadas humana y de chimpancé del marco de lectura de 3G9 tienen
una idéntica avidez de unión completa para el antígeno específico
EPOr humano. Como las regiones constantes de HZ3G9 y CP3G9 son
idénticas, los resultados también sugieren que la afinidad de unión
completa del 3G9 original de roedor se mantiene en la versión de
chimpancé de 3G9. Por lo tanto, los resultados muestran que el
injerto de CDR de CDR de roedor en marcos de lectura aceptores de
chimpancé como se describe en la presente invención mantiene toda la
avidez de unión del anticuerpo de roedor de origen.
Se realizó un análisis BIAcore (Pharmacia) para
determinar la afinidad de unión para el EPOr humano de 3G9 murino y
CP3G9. La interacción de CP3G9 así como de 3G9 murino con EPOr se
caracterizó usando un biosensor BIAcore 1000. Las descripciones de
la instrumentación y las superficies sensibles se describen en
Brigham-Burke et al., Anal. Biochem.,
205:125-131 (1992).
CP3G9 se capturó dentro de una superficie
sensible de proteína A inmovilizada. Las constantes cinéticas de
unión se determinaron pasando disoluciones de EPOr monomérica sobre
la superficie y monitorizando la unión frente al tiempo. Luego se
obtuvo la constante de equilibrio de disociación para la interacción
a partir de la relación entre las constantes cinéticas. El 3G9
original murino se capturó dentro de una superficie de anticuerpo
policlonal de conejo específico de Fc anti-ratón y
capturado con proteína A. La cinética y la constante de disociación
para la cinética con EPOr se determinó como se ha descrito antes.
Todas las medidas se realizaron en fosfato sódico 10 mM,
NaCl 150 mM, EDTA 3 mM pH 7,2 y Tween 20 al 0,005%. El caudal fue de 60 \muL/min. La temperatura fue 20ºC.
NaCl 150 mM, EDTA 3 mM pH 7,2 y Tween 20 al 0,005%. El caudal fue de 60 \muL/min. La temperatura fue 20ºC.
| k_{a} (M^{-1}s^{-1}) | k_{d} (s^{-1}) | K_{D} (nM) | |
| 3G9 murino | 1,2 x 10^{6} | 4,0 x 10^{-3} | 3,3 |
| CP3G9 | 1,0 x 10^{6} | 9,1 x 10^{-3} | 9,1 |
Estos resultados muestran que las constantes de
equilibrio de disociación determinadas para las versiones murina y
de chimpancé del marco de lectura de 3G9 son del triple entre sí.
Este dato está de acuerdo con los resultados del estudio basado en
ELISA descrito anteriormente. Por consiguiente, los resultados
muestran que el procedimiento usado para generar la versión de
chimpancé de 3G9 mantuvo en su mayor parte la afinidad de unión del
anticuerpo monoclonal original de roedor.
La presente invención se puede realizar en otras
formas específicas sin desviarse del espíritu o las características
esenciales de la misma, y por lo tanto, se debe hacer referencia a
las reivindicaciones adjuntas más que la anterior memoria
descriptiva, que indica el alcance de la invención.
<110> Taylor, Alexander H
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<120> Anticuerpos monoclonales con
inmunogenicidad reducida
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<130> P50770
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<150> 60/083.367
\vskip0.400000\baselineskip
<151>
28-04-1998
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 97
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<170> FastSEQ para Windows Versión 3.0
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 429
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(429)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 1
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 2
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 414
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(414)
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 2
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 3
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 427
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(427)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 3
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 4
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 402
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(402)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 4
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 5
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 408
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(408)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 5
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 6
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 421
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(421)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 6
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 7
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 417
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(417)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 7
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 8
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 369
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(369)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 8
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 9
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 423
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(423)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 9
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 10
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 97
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(37)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (52)...(67)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 10
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 96
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(37)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (52)...(67)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 11
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 12
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 96
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOHAIN
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(35)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(66)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 12
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 13
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 96
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(35)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(66)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 13
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 14
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 96
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMAIN
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(35)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMAIN
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(66)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 14
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 96
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMAIN
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(35)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMAIN
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(66)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 15
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 16
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 97
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(37)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (52)...(67)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 16
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 17
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 96
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(35)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(66)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 17
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 18
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 96
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(35)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMAIH
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(66)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 18
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 381
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(381)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
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<213> Macaca cynomolgus
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<213> Macaca cynomolgus
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<220>
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<221> CDS
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<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
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<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
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<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
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<222> (1)...(420)
\vskip1.000000\baselineskip
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<212> PRT
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\vskip1.000000\baselineskip
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<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
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<223> CDRI
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<223> CDRII
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<211> 98
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<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
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<220>
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<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(35)
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<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
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<221> DOMINIO
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<222> (50)...(66)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\newpage
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<400> 46
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<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(35)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(66)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 47
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 48
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 98
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(35)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(66)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 48
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 49
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 98
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)... (35)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(66)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 49
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 50
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 100
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)... (35)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(68)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 50
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 51
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 98
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(35)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(66)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 51
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 52
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 99
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (31)...(36)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (51)...(67)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 52
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 53
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 390
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(390)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 53
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 54
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 384
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(384)
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 54
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 55
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 399
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(399)
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 55
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 56
\vskip0.400000\baselineskip
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\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(384)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 56
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\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
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<211> 390
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(390)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 57
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 58
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 390
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(390)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 58
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 59
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 88
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (24)...(34)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(56)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 59
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 60
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 94
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (24)... (40)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (56) ...(62)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 60
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 61
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 93
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (24)... (39)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (54)...(61)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 61
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 62
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 88
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (24)...(34)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(56)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 62
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 63
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 88
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (24)...(34)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDR1
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(56)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 63
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 64
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 88
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (24)...(34)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<221> DOMINIO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (50)...(56)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> CDRII
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 64
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 65
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 360
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Rata
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(360)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 65
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 66
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 360
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Rata
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(360)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 66
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 67
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 109
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 67
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 68
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 108
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Secuencia de rata / chimpancé
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 68
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 69
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 128
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 69
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 70
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 118
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Secuencia de rata / chimpancé
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 70
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 71
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 354
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Murina
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (X)...(354)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 71
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 72
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 324
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Murina
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(324)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 72
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 73
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 108
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Secuencia murina/chimpancé
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 73
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 74
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 1X8
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Secuencia murina /chimpancé
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 74
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 75
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 360
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Murina
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> CDS
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)...(360)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 75
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\vskip0.400000\baselineskip
<210> 76
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<211> 336
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<212> ADN
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<213> Murina
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<220>
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<221> CDS
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<222> (1)...(336)
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<400> 76
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<210> 77
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<211> 107
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<212> PRT
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<213> Secuencia artificial
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\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 78
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 118
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
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<223> Secuencia murina / chimpancé
\newpage
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<400> 77
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<210> 78
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<211> 118
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<212> PRT
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<213> Secuencia artificial
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<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Secuencia murina / chimpancé
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<400> 78
\vskip1.000000\baselineskip
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<210> 79
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<211> 119
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<212> PRT
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<213> Secuencia artificial
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<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Secuencia murina / humana
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<400> 79
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<210> 80
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<211> 102
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<212> PRT
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<213> Secuencia artificial
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<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Secuencia murina / humana
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 80
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\vskip0.400000\baselineskip
<210> 81
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<211> 11
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<212> PRT
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<213> Pan troglodytes
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<400> 81
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\sa{Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser
Ser}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 82
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<211> 11
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<212> PRT
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<213> Pan troglodytes
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\vskip0.400000\baselineskip
<400> 82
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
Ser}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 83
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 83
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
Ser}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 84
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
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<213> Pan troglodytes
\newpage
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<400> 84
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Trp Gly Gln Gly Ile Leu Val Thr Val Ser
Ser}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 85
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
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<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 85
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Trp Gly Arg Gly Ile Leu Val Ile Val Ser
Ser}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 86
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 86
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
Arg}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 87
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
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<213> Pan troglodytes
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 87
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
Arg}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 88
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
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<212> PRT
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<213> Macaca cynomolgus
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\vskip0.400000\baselineskip
<400> 88
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\sa{Trp Gly Arg Gly Val Leu Val Thr Val Ser
Ser}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 89
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
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<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 89
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Trp Gly Gln Gly Val Gln Val Thr Val Ser
Ser}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 90
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
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<212> PRT
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<213> Macaca cynomolgus
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\vskip0.400000\baselineskip
<400> 90
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Trp Gly Pro Gly Val Met Val Thr Val Ser
Ser}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 91
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
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<212> PRT
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<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 91
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Trp Gly Arg Gly Leu Leu Val Thr Val Ser
Ser}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 92
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 92
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Trp Gly Gln Gly Val Leu Val Thr Val Ser
Ser}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 93
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 93
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Trp Gly Gln Gly Leu Arg Val Thr Val Ser
Ser}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 94
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
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<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
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<400> 94
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
Arg}
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<210> 95
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<211> 11
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<212> PRT
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<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 95
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Phe Gly Gln Gly Thr Thr Val Glu Ile Lys
Arg}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 96
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Macaca cynomolgus
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 96
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
Arg}
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 97
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
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<213> Pan troglodytes
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\vskip0.400000\baselineskip
<400> 97
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
Arg}
Claims (5)
1. Un anticuerpo que comprende todas las CDR
donantes procedentes de un anticuerpo específico de antígenos de una
especie de roedor, los residuos del marco de lectura aceptor
derivados de una región constante de primate superior y una región
constante humana.
2. El anticuerpo de la reivindicación 1 en el que
el primate superior es Pan troglodytes, Pan paniscus o
Gorilla gorilla.
3. El anticuerpo de la reivindicación 2 en el que
el primate superior es Pan troglodytes.
4. El anticuerpo de la reivindicación 1 que
comprende además uno o más residuos de contacto con CDR del
anticuerpo donante.
5. El anticuerpo de la reivindicación 1 en el que
uno o más residuos del marco de lectura expuestos al disolvente se
sustituyen por los correspondientes residuos de un marco de lectura
homólogo no humano seleccionado.
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| US6761888B1 (en) * | 2000-05-26 | 2004-07-13 | Neuralab Limited | Passive immunization treatment of Alzheimer's disease |
| TWI239847B (en) * | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
| US7790856B2 (en) | 1998-04-07 | 2010-09-07 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| US7964192B1 (en) | 1997-12-02 | 2011-06-21 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Prevention and treatment of amyloidgenic disease |
| US20080050367A1 (en) | 1998-04-07 | 2008-02-28 | Guriq Basi | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| US6160099A (en) * | 1998-11-24 | 2000-12-12 | Jonak; Zdenka Ludmila | Anti-human αv β3 and αv β5 antibodies |
| EP1169352A4 (en) * | 1999-04-14 | 2005-05-04 | Smithkline Beecham Corp | ANTIBODY AGAINST THE ERYTHROPOIETIN RECEPTOR |
| US20030059427A1 (en) * | 2000-04-28 | 2003-03-27 | Force Walker R. | Isolation and characterization of highly active anti-CD40 antibody |
| JP5007409B2 (ja) * | 2000-05-08 | 2012-08-22 | セルデックス リサーチ コーポレーション | 樹状細胞に対するヒトモノクローナル抗体 |
| US7560534B2 (en) | 2000-05-08 | 2009-07-14 | Celldex Research Corporation | Molecular conjugates comprising human monoclonal antibodies to dendritic cells |
| AU2005200250B2 (en) * | 2000-05-08 | 2007-10-25 | Celldex Therapeutics, Inc. | Human monoclonal antibodies to dendritic cells |
| PE20020574A1 (es) * | 2000-12-06 | 2002-07-02 | Wyeth Corp | Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido amiloideo beta |
| US7700751B2 (en) | 2000-12-06 | 2010-04-20 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize β-amyloid peptide |
| CA2658221C (en) | 2001-04-27 | 2012-11-27 | Kyowa Kirin Co., Ltd. | Anti-cd40 monoclonal antibody |
| DK1392359T4 (da) | 2001-05-11 | 2013-06-10 | Ludwig Inst For Cancer Res Ltd | Specifikke bindingsproteiner og deres anvendelser. |
| US20100056762A1 (en) | 2001-05-11 | 2010-03-04 | Old Lloyd J | Specific binding proteins and uses thereof |
| US7321026B2 (en) | 2001-06-27 | 2008-01-22 | Skytech Technology Limited | Framework-patched immunoglobulins |
| US7084257B2 (en) | 2001-10-05 | 2006-08-01 | Amgen Inc. | Fully human antibody Fab fragments with human interferon-gamma neutralizing activity |
| MY139983A (en) | 2002-03-12 | 2009-11-30 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| MXPA05002514A (es) | 2002-09-06 | 2005-05-27 | Amgen Inc | Anticuerpo monoclonal anti-il-1r1 humano terapeutico. |
| US9259459B2 (en) | 2003-01-31 | 2016-02-16 | Celldex Therapeutics Inc. | Antibody vaccine conjugates and uses therefor |
| WO2004074432A2 (en) | 2003-01-31 | 2004-09-02 | Celldex Therapeutics, Inc. | Antibody vaccine conjugates and uses therefor |
| KR20050118669A (ko) * | 2003-02-01 | 2005-12-19 | 뉴랄랩 리미티드 | 가용성 ａ-베타에 대한 항체를 생성하기 위한 능동 면역화 |
| TWI306458B (en) * | 2003-05-30 | 2009-02-21 | Elan Pharma Int Ltd | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| US7622113B2 (en) | 2003-12-08 | 2009-11-24 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Monoclonal antibodies that bind or neutralize dengue virus |
| EP1707627B1 (en) | 2003-12-25 | 2012-11-14 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Antagonistic anti-CD40 antibody mutant |
| BRPI0509367A (pt) | 2004-03-30 | 2007-09-11 | Glaxo Group Ltd | anticorpo, fragmento de ligação de antìgeno, composição farmacêutica, métodos de tratar um paciente humano afligido com uma doença ou distúrbio, de triar um anticorpo, e de detectar hosm em uma amostra biológica, uso de um anticorpo terapêutico ou fragmento de ligação de antìgeno, medicamento, vetor, polunucleotìdeo, célula hospedeira recombinante estavelmente transformada ou transfectada, e, processo para a fabricação de um anticorpo terapêutico |
| US20050227289A1 (en) * | 2004-04-09 | 2005-10-13 | Reilly Edward B | Antibodies to erythropoietin receptor and uses thereof |
| TWI307630B (en) | 2004-07-01 | 2009-03-21 | Glaxo Group Ltd | Immunoglobulins |
| TWI309240B (en) * | 2004-09-17 | 2009-05-01 | Hoffmann La Roche | Anti-ox40l antibodies |
| CN101023102B (zh) * | 2004-09-17 | 2013-05-29 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 抗-ox40l抗体 |
| JP4958555B2 (ja) * | 2004-09-22 | 2012-06-20 | 協和発酵キリン株式会社 | 安定化されたヒトＩｇＧ４抗体 |
| ES2396555T3 (es) | 2004-12-15 | 2013-02-22 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Anticuerpos que reconocen péptido beta amiloide |
| EP1838348B1 (en) | 2004-12-15 | 2013-06-26 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized amyloid beta antibodies for use in improving cognition |
| WO2007002223A2 (en) * | 2005-06-20 | 2007-01-04 | Medarex, Inc. | Cd19 antibodies and their uses |
| WO2007019620A1 (en) * | 2005-08-15 | 2007-02-22 | Arana Therapeutics Limited | Engineered antibodies with new world primate framework regions |
| EP2006380A4 (en) * | 2006-03-23 | 2010-08-11 | Kyowa Hakko Kirin Co Ltd | AGONIST ANTIBODY AGAINST THE HUMAN THROMBOPOIETINE RECEPTOR |
| US8784810B2 (en) | 2006-04-18 | 2014-07-22 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of amyloidogenic diseases |
| RU2498999C2 (ru) | 2006-07-14 | 2013-11-20 | Ац Иммуне Са | Гуманизированное антитело к амилоиду бета |
| AU2007283463B2 (en) | 2006-08-11 | 2012-04-26 | Csl Limited | Treatment of pulmonary disease conditions |
| ES2501947T3 (es) | 2006-10-19 | 2014-10-02 | Csl Limited | Antagonistas de anticuerpos de alta afinidad del receptor alfa 1 de interleucina |
| PL2068922T3 (pl) | 2006-10-19 | 2012-11-30 | Csl Ltd | Przeciwciała anty-IL-13R alfa1 i ich zastosowania |
| CL2007003622A1 (es) * | 2006-12-13 | 2009-08-07 | Medarex Inc | Anticuerpo monoclonal humano anti-cd19; composicion que lo comprende; y metodo de inhibicion del crecimiento de celulas tumorales. |
| US9090693B2 (en) | 2007-01-25 | 2015-07-28 | Dana-Farber Cancer Institute | Use of anti-EGFR antibodies in treatment of EGFR mutant mediated disease |
| JP5618549B2 (ja) | 2007-03-15 | 2014-11-05 | ルードヴィッヒ インスティテュート フォー キャンサーリサーチ リミテッド | Ｅｇｆｒ抗体及びｓｒｃ阻害剤を用いる治療方法及び関連製剤 |
| BRPI0809042B1 (pt) | 2007-03-22 | 2021-08-31 | Biogen Ma Inc. | Proteína de ligação a cd154 isolada, seu uso, e composição |
| EP2626372B1 (en) | 2007-03-29 | 2018-03-21 | Genmab A/S | Bispecific antibodies and methods for production thereof |
| US8003097B2 (en) | 2007-04-18 | 2011-08-23 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of cerebral amyloid angiopathy |
| US8178101B2 (en) | 2007-05-21 | 2012-05-15 | Alderbio Holdings Inc. | Use of anti-IL-6 antibodies having specific binding properties to treat cachexia |
| US8062864B2 (en) | 2007-05-21 | 2011-11-22 | Alderbio Holdings Llc | Nucleic acids encoding antibodies to IL-6, and recombinant production of anti-IL-6 antibodies |
| US9701747B2 (en) | 2007-05-21 | 2017-07-11 | Alderbio Holdings Llc | Method of improving patient survivability and quality of life by anti-IL-6 antibody administration |
| NZ601583A (en) * | 2007-05-21 | 2013-08-30 | Bristol Myers Squibb Co | Novel rabbit antibody humanization methods and humanized rabbit antibodies |
| US8404235B2 (en) | 2007-05-21 | 2013-03-26 | Alderbio Holdings Llc | Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP |
| DK2164514T3 (en) | 2007-05-21 | 2017-02-27 | Alderbio Holdings Llc | Antibodies to IL-6 and its use |
| US8252286B2 (en) | 2007-05-21 | 2012-08-28 | Alderbio Holdings Llc | Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis |
| US7906117B2 (en) | 2007-05-21 | 2011-03-15 | Alderbio Holdings Llc | Antagonists of IL-6 to prevent or treat cachexia, weakness, fatigue, and/or fever |
| AU2008255352B2 (en) | 2007-05-31 | 2014-05-22 | Genmab A/S | Stable IgG4 antibodies |
| EP2615175B1 (en) | 2007-05-31 | 2018-08-08 | Genmab A/S | Monovalent human antibodies |
| US8613923B2 (en) | 2007-06-12 | 2013-12-24 | Ac Immune S.A. | Monoclonal antibody |
| HRP20150086T1 (xx) * | 2007-06-12 | 2015-02-27 | Ac Immune S.A. | Humanizirana antitijela za beta amiloid |
| US8048420B2 (en) * | 2007-06-12 | 2011-11-01 | Ac Immune S.A. | Monoclonal antibody |
| ES2498040T3 (es) | 2007-07-27 | 2014-09-24 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Tratamiento de enfermedades amiloidogénicas con anticuerpos anti-beta humanizados |
| JP5532486B2 (ja) | 2007-08-14 | 2014-06-25 | ルードヴィッヒ インスティテュート フォー キャンサー リサーチ | Ｅｇｆ受容体を標的とするモノクローナル抗体１７５ならびにその誘導体および用途 |
| PL2238166T3 (pl) * | 2007-10-05 | 2014-07-31 | Genentech Inc | Zastosowanie przeciwciała anty-Beta amyloidowego w chorobach oczu |
| CA2701788C (en) * | 2007-10-05 | 2017-06-13 | Genentech, Inc. | Humanized beta-amyloid antibody for treating ocular diseases |
| JO3076B1 (ar) | 2007-10-17 | 2017-03-15 | Janssen Alzheimer Immunotherap | نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe |
| US8236318B2 (en) | 2007-11-07 | 2012-08-07 | Celldex Therapeutics Inc. | Antibodies that bind human dendritic and epithelial cell 205 (DEC-205) |
| EP2172481B1 (en) * | 2008-10-06 | 2014-10-29 | Novoplant GmbH | Proteolytically stable antibody formats |
| US9067981B1 (en) | 2008-10-30 | 2015-06-30 | Janssen Sciences Ireland Uc | Hybrid amyloid-beta antibodies |
| US9212223B2 (en) | 2008-11-25 | 2015-12-15 | Alderbio Holdings Llc | Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis |
| US9452227B2 (en) | 2008-11-25 | 2016-09-27 | Alderbio Holdings Llc | Methods of treating or diagnosing conditions associated with elevated IL-6 using anti-IL-6 antibodies or fragments |
| US8992920B2 (en) | 2008-11-25 | 2015-03-31 | Alderbio Holdings Llc | Anti-IL-6 antibodies for the treatment of arthritis |
| US8323649B2 (en) | 2008-11-25 | 2012-12-04 | Alderbio Holdings Llc | Antibodies to IL-6 and use thereof |
| US8337847B2 (en) | 2008-11-25 | 2012-12-25 | Alderbio Holdings Llc | Methods of treating anemia using anti-IL-6 antibodies |
| US8420089B2 (en) | 2008-11-25 | 2013-04-16 | Alderbio Holdings Llc | Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP |
| EP2504032A4 (en) | 2009-11-24 | 2013-06-19 | Alderbio Holdings Llc | IL-6 ANTAGONISTS FOR PREVENTING OR TREATING THROMBOSIS |
| US9775921B2 (en) | 2009-11-24 | 2017-10-03 | Alderbio Holdings Llc | Subcutaneously administrable composition containing anti-IL-6 antibody |
| PT2560993T (pt) | 2010-04-20 | 2024-09-16 | Genmab As | Proteínas contendo anticorpo heterodimérico fc e métodos para a produção das mesmas |
| US9221900B2 (en) | 2010-07-30 | 2015-12-29 | Ac Immune S.A. | Methods for identifying safe and functional humanized antibodies |
| US8992908B2 (en) | 2010-11-23 | 2015-03-31 | Alderbio Holdings Llc | Anti-IL-6 antibodies for the treatment of oral mucositis |
| US20120189633A1 (en) | 2011-01-26 | 2012-07-26 | Kolltan Pharmaceuticals, Inc. | Anti-kit antibodies and uses thereof |
| US8785603B2 (en) | 2011-05-20 | 2014-07-22 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Antibodies to 25-hydroxyvitamin D2 and D3 and uses thereof |
| IN2014CN03887A (es) | 2011-10-27 | 2015-10-16 | Genmab As | |
| EP4063391A1 (en) | 2012-07-25 | 2022-09-28 | Celldex Therapeutics, Inc. | Anti-kit antibodies and uses thereof |
| RU2681994C2 (ru) | 2012-12-26 | 2019-03-14 | Онкосинерджи, Инк. | КОМПОЗИЦИИ АНТИТЕЛА К ИНТЕГРИНУ β1 И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ |
| SG10201706383XA (en) * | 2013-02-06 | 2017-09-28 | Inhibrx Lp | Non-platelet depleting and non-red blood cell depleting cd47 antibodies and methods of use thereof |
| LT3148579T (lt) | 2014-05-28 | 2021-05-25 | Agenus Inc. | Anti-gitr antikūnai ir jų panaudojimo būdai |
| EP3233907B1 (en) | 2014-12-19 | 2021-03-03 | Genmab A/S | Rodent bispecific heterodimeric proteins |
| KR102618312B1 (ko) | 2015-03-17 | 2023-12-28 | 메모리얼 슬로안 케터링 캔서 센터 | 항muc16 항체 및 그의 용도 |
| EP3292152A1 (en) | 2015-05-07 | 2018-03-14 | Agenus Inc. | Anti-ox40 antibodies and methods of use thereof |
| US10940204B2 (en) | 2015-07-31 | 2021-03-09 | Research Institute At Nationwide Children's Hospital | Peptides and antibodies for the removal of biofilms |
| US11091559B2 (en) | 2015-08-27 | 2021-08-17 | Celldex Therapeutics, Inc. | Anti-ALK antibodies and methods for use thereof |
| EP3365027B1 (en) | 2015-10-14 | 2022-03-30 | Research Institute at Nationwide Children's Hospital | Hu specific antibodies and their use in inhibiting biofilm |
| EP3565589A1 (en) | 2017-01-04 | 2019-11-13 | Research Institute at Nationwide Children's Hospital | Dnabii vaccines and antibodies with enhanced activity |
| AU2018206560B9 (en) | 2017-01-04 | 2025-04-03 | Research Institute At Nationwide Children's Hospital | Antibody fragments for the treatment of biofilm-related disorders |
| EP3595445B1 (en) | 2017-03-15 | 2024-09-04 | The Research Institute at Nationwide Children's Hospital | Composition and methods for disruption of bacterial biofilms without accompanying inflammation |
| CN110709417B (zh) | 2017-04-07 | 2023-10-31 | 美天施生物科技有限责任两合公司 | 具有突变人IgG4的多肽 |
| IL273484B2 (en) * | 2017-09-23 | 2025-12-01 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | A33 antibody compositions and methods of using the same in radioimmunotherapy |
| JP7539834B2 (ja) | 2018-02-01 | 2024-08-26 | メモリアル スローン ケタリング キャンサー センター | ガレクチン－３に対する抗体及びその使用方法 |
| US20210139610A1 (en) | 2018-06-29 | 2021-05-13 | Research Institute At Nationwide Children's Hospital | Compositions and methods for mediating eps |
| CN112771074A (zh) | 2018-10-05 | 2021-05-07 | 国家儿童医院研究所 | 用于酶促破坏细菌生物膜的组合物和方法 |
| TWI874341B (zh) | 2018-12-18 | 2025-03-01 | 美商健生生物科技公司 | 產生異二聚體抗體之方法 |
| CA3145385A1 (en) | 2019-07-08 | 2021-01-14 | Steven D. Goodman | Antibody compositions for disrupting biofilms |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5225539A (en) * | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
| US5530101A (en) * | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
| GB8928874D0 (en) * | 1989-12-21 | 1990-02-28 | Celltech Ltd | Humanised antibodies |
| AU658396B2 (en) * | 1991-03-06 | 1995-04-13 | Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung | Humanized and chimeric monoclonal antibodies |
| US5756096A (en) * | 1991-07-25 | 1998-05-26 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Recombinant antibodies for human therapy |
| NZ243706A (en) * | 1991-07-25 | 1994-08-26 | Idec Pharma Corp | Recombinant monkey antibodies, pharmaceutical compositions |
| GB9203459D0 (en) * | 1992-02-19 | 1992-04-08 | Scotgen Ltd | Antibodies with germ-line variable regions |
| DE69334275D1 (de) * | 1992-08-21 | 2009-05-20 | Univ Bruxelles | Immunoglobuline ohne Leichtkette |
| US5639641A (en) * | 1992-09-09 | 1997-06-17 | Immunogen Inc. | Resurfacing of rodent antibodies |
| TW458985B (en) * | 1993-05-31 | 2001-10-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Reconstructed human antibody against human interleukin-6 |
| GB9424449D0 (en) * | 1994-12-02 | 1995-01-18 | Wellcome Found | Antibodies |
-
1999
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