ES2234677T3 - Procedimientos para preparar soluciones de componentes de sangre o plasma con concentraciones mejoradas. - Google Patents

Abstract

Un procedimiento para la preparación de fibrina a partir de sangre o plasma, que comprende las etapas de: someter la sangre o el plasma a condiciones para catalizar la formación de una forma polimerizada de dicho componente; recuperar dicha forma polimerizada de dicho componente, que se caracteriza por la centrifugación de dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente en una cámara de un aparato de centrífuga mientras se añade una cantidad inicial de disolvente a dicha cámara que contiene dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente para disolver dicha forma polimerizada de dicho componente, siendo dicha cantidad inicial de disolvente una cantidad inferior a una cantidad total predeterminada de disolvente para disolver toda la forma polimerizada recuperada de dicho componente mientras es suficiente para mantener dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente disuelta en dicha cantidad inicial de disolvente en solución sin que se produzca la precipitación del componente; y añadir disolvente adicional a dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente, añadiéndose dicho disolvente adicional a dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente en una cantidad equivalente a una diferencia entre dicha cantidad total predeterminada de disolvente y dicha cantidad inicial de disolvente añadida para disolver dicha forma polimerizada de dicho componente.

Description

Procedimientos para preparar soluciones de componentes de sangre o plasma con concentraciones mejoradas.

Antecedentes de la invención 1. Campo de la invención

La invención se refiere a procedimientos para separar componentes de la sangre o el plasma y, más específicamente, la invención se refiere a procedimientos con una recuperación mejorada del componente sanguíneo o plasmático.

2. Descripción de la técnica anterior relacionada

El documento WO 96/16714 describe un recipiente para separar un componente de la sangre o del plasma, por ejemplo monómero de fibrina, de la sangre o el plasma mediante centrifugación alrededor de un eje vertical. Este recipiente comprende una primera cámara anular delimitada por una pared cilíndrica externa y una pared cilíndrica interna, donde ambas paredes se extienden coaxialmente alrededor de un eje común, así como por una pared superior y una pared inferior, donde la pared inferior está formada por un pistón desplazable dentro de la primera cámara. El recipiente además comprende una segunda cámara acomodada por debajo de la primera cámara y que se comunica con la primera cámara a través de un primer conducto. La segunda cámara está definida por la pared cilíndrica externa, la pared inferior de la primera cámara y por una segunda pared inferior. Esta segunda cámara sirve como cámara de reacción para recibir el plasma y tratar el plasma para obtener el componente deseado. Por ejemplo, el tratamiento de fibrinógeno plasmático con trombina o con una enzima del tipo de la trombina convierte el fibrinógeno en el monómero fibrina que polimeriza de forma espontánea en un polímero de fibrina no reticulada.

La introducción de este recipiente en una centrífuga para la reacción descrita anteriormente produce que el polímero de fibrina no reticulada se separe del plasma y se deposite en una pared externa de la cámara de reacción durante la centrifugación. Cuando a continuación se acciona el pistón se elimina el plasma restante de la cámara de reacción. Después se añade un disolvente para disolver el polímero de fibrina no reticulada depositada de este modo y formar la solución deseada de monómero de fibrina.

Como se describe con detalle en el documento EP 592242, esta solución de monómero de fibrina es extremadamente útil en, por ejemplo, los procedimientos de taponamiento de la de fibrina. Es deseable usar dispositivos como los descritos en la patente de EE.UU. 5.603.845, el documento WO 96/16713, la patente de EE.UU. número 5.935.432, el documento WO 96/16714, la patente de EE.UU. número 5.824.230, el documento WO 96/16715 y la patente de EE.UU. número 5.733.446, cuyas descripciones se incorporan en la presente memoria descriptiva como referencia, para preparar productos sanguíneos tales como componentes taponadores de la fibrina justo en el momento de la cirugía de forma que se pueda utilizar sangre autóloga. Desde el punto de vista de un cirujano, también puede ser deseable usar productos taponadores que sean relativamente uniformes de un procedimiento a otro. Sin embargo, esto es casi imposible para los productos de preparación reciente, ya que la concentración de fibrinógeno en la sangre humana puede variar en \pm 300% en poblaciones de pacientes humanos y también cariarán los componentes taponadores recién preparados de fuentes individuales.

La mayoría de los seres humanos poseen niveles de fibrinógeno de entre 2 y 6 mg/ml de plasma y algunos seres humanos pueden tener un nivel tan bajo como 1 mg/ml y algunos un nivel tan elevado como 10 mg/ml (plasma fibrinógeno).

Como se ha descrito en el documento WO 98/
30887 y el la patente de EE.UU. número 5.955.026, cuyas descripciones se incorporan en la presente memoria descriptiva como referencia, se conocen un procedimiento y un aparato que implican la introducción de sangre o plasma en un recipiente que tenga una pared transmisora de luz y proporcionar una reacción que tenga como resultado una forma polimerizada del componente que se está depositando en la pared. Una lectura óptica de la diferencia en la transmisión de luz a través de la pared sola y de la pared con el polímero en ella se puede relacionar con la cantidad total del componente de la muestra de sangre o de plasma.

Usados de este modo, el aparato y los procedimientos descritos en el documento WO/30887 y la patente de EE.UU. nº 5.955.026 son útiles para determinar la concentración del componente en la sangre o el plasma. Además, conociendo la cantidad de disolvente o de tampón que se va a usar para solubilizar el componente polimerizado para dar la solución de componentes deseada, la concentración de la solución resultante está disponible con facilidad. Todavía más, cuando se lleva a cabo la determinación óptica de la concentración del componente en sangre o plasma (o la determinación de la cantidad de componente polimerizado), estos datos se pueden usar para controlar la cantidad de tampón o de disolvente usada para solubilizar el polímero para preparar soluciones de las concentraciones deseadas. Todavía más, cuando también se usa el tampón o el disolvente para que las soluciones resultantes sean de un valor o un intervalo de valores de pH específico, se pueden emplear límites de la cantidad mínima y máxima de tampón o de disolvente. Por ejemplo, cuando una fracción de plasma reacciona para formar un polímero de fibrina y se usa un tampón de acetato para pH 4 para solubilizar el polímero para formar una solución deseada de monómero de fibrina, en el procedimiento y el aparato se pueden programar cantidades mínimas y máximas de tampón para mantener el pH resultante dentro de un intervalo deseado, por ejemplo 4,0-4,5. Los procedimientos descritos en el documento WO 98/30887 pueden proporcionar soluciones de monómero de fibrina de aproximadamente 20 mg/ml \pm 25% mientras se mantiene de forma simultánea el valor de pH entre 4,0-4,5. Esto representa un excepcional incremento de 10 veces la reproducibilidad de la solución de monómero de fibrina autóloga o recién preparada. También es importante destacar que el aparato de detección óptica y los procedimientos descritos en el documento 98/30887 determinan las cantidades/concentraciones de componentes en un recipiente que rota a velocidades elevadas, por ejemplo de hasta 9000-10.000 RPM en lugar de tomar una medición óptica en una posición fija.

Los aparatos y los procedimientos tales como los comentados anteriormente, aunque ventajosos pueden no reconocer todo el polímero de fibrina depositado en la paredes del recipiente. En consecuencia, sería ventajoso asegurar la eliminación de toda o casi toda la forma polimerizada del componente depositado en la pared del recipiente con el fin de maximizar la cantidad de recuperación del componente.

Resumen de la invención

En consecuencia, un objeto de la invención es proporcionar un procedimiento en el que el suministro de disolvente está controlado y, en particular, el disolvente se aplica en varias etapas para maximizar la recuperación de la forma polimerizada del componente deseado.

Para alcanzar el anterior objeto y otros objetos se proporciona un procedimiento para preparar una solución de un componente de la sangre o del plasma con una recuperación mejorada del componente de la sangre o el plasma. El procedimiento de acuerdo con la presente invención incluye la etapa de someter la sangre o el plasma a las condiciones para catalizar la formación de una forma polimerizada de dicho componente de dicha sangre o plasma. Después se recupera la forma polimerizada del componente y a la forma polimerizada recuperada del componente se añade una cantidad inicial de una solución de disolvente para disolverla. La cantidad inicial de disolvente es una cantidad inferior a la cantidad total predeterminada de solución tampón para disolver toda la forma polimerizada recuperada del componente. A la forma polimerizada recuperada del componente se añade disolvente adicional. El disolvente adicional se añade a la forma polimerizada recuperada del componente se añade una cantidad equivalente a una diferencia entre la cantidad total predeterminada de disolvente y la cantidad inicial de disolvente añadida para disolver la forma polimerizada del componente.

Breve descripción de las figuras

La invención se describe con más detalle a continuación haciendo referencia a las figuras adjuntas, en las que:

Fig. 1 es una vista transversal axial de un recipiente para separar el monómero de fibrina del plasma sanguíneo;

La Fig. 2 es una vista esquemática de un aparato durante la manipulación de un recipiente del tipo que se muestra en la Fig. 1.

La Fig. 3 es una segunda vista esquemática de un aparato adicional durante la manipulación de un recipiente del tipo que se muestra en la Fig. 1; y

La fig. 4 es un gráfico que muestra las mediciones de un fotómetro frente al tiempo.

Descripción detallada de las formas de realización preferidas

La presente invención proporciona procedimientos para preparar soluciones de un componente de sangre o de plasma de concentraciones conocidas o controladas y con una recuperación mejorada del componente. Esto proporciona la capacidad única para preparar tales soluciones en una unidad de centrífuga automática en menos de 30 minutos de forma que se puedan utilizar componentes recién preparados, y preferentemente autólogos. La posible desventaja de usar soluciones o componentes recién preparados, es decir, el hecho de que los niveles del componente pueden variar de un paciente a otro, se supera en la presente invención. La concentración de una solución del componente, por ejemplo una solución de monómero de fibrina, se mejora.

A lo largo de esta solicitud se describe la presente invención en relación con las formas de realización preferidas, por ejemplo el aparato, los recipientes y los procedimientos preferidos útiles para preparar soluciones de monómero de fibrina de sangre entera o de plasma. Sin embargo, los expertos en la técnica deberán entender con facilidad que con los procedimientos generales descritos en la presente memoria descriptiva también se pueden preparar o extraer otros componentes sanguíneos o plasmáticos.

En cuanto a las figuras en las que números similares indican elementos similares, en la Fig: 1 se muestra un recipiente. El recipiente está constituido por partes que permiten la simetría de la rotación y permiten la colocación del recipiente en un aparato de centrífuga que se muestra en la Fig. 2 de forma que se centrifugue alrededor de un eje central 1. A este respecto, aparatos y procedimientos de separación líquida conocidos adecuados para usar en la presente invención se describen en las patentes de EE.UU. números 5.603.845, 5.738.784 y 5.750.657, cuyas descripciones se incorporan, cada una de ellas, en la presente memoria descriptiva como referencia.

Preferentemente, el recipiente de la presente invención es de un material plástico de grado médico y se prefiere el material de policarbonato. Por las razones que se comentan a continuación, el material puede transmitir la luz en un cierto intervalo de longitud de onda. El recipiente comprende una parte externa del recipiente 2 y una parte interna del recipiente 3 que se ajustan completamente una en otra y en todas partes están en estrecho contacto entre sí aparte de la porción donde se proporciona un conducto intermedio que se extiende axialmente 4. El conducto 4 se proporciona por una muesca formada en la parte interna del recipiente 3. Las partes 2 y 3 del recipiente incluyen los fondos 5 y 6, respectivamente, donde los fondos definen una apertura central 7 que permite el paso de un cilindro de pistón 8. Alrededor de la apertura 7, las dos partes del recipiente incluyen las porciones 9 y 10 que se extienden axialmente, respectivamente, que se extienden cerca de un cilindro de pistón hueco 8 en una dirección distal hacia el interior de las partes del recipiente. La parte externa del recipiente 2 linda con el cilindro de pistón 8 a lo largo de un reborde que se extiende radialmente 11 provisto de un hueco 12 que recibe un anillo de cierre 13.

Como se ilustra en la Fig. 1, el conducto 4 continúa entre las partes interna y externa del recipiente, desde las paredes cilíndricas externas de las partes interna y externa del recipiente a lo largo de los fondos 5 y 6 y las porciones axiales 9 y 10 hasta la apertura justo por debajo del anillo de cierre 13 en la apertura 7. La porción axial 10 de la parte interna del recipiente 3 que linda con la apertura 7 tiene unas dimensiones tales que existe un paso estrecho y libre hacia el interior de las partes del recipiente 2 y 3 alrededor del cilindro de pistón hueco 8.

La parte externa del recipiente 2 comprende una porción cilíndrica de un diámetro uniforme. En dirección descendente, cuando se ve en relación con la Fig. 1, esta porción continúa en una porción cilíndrica 14 de un diámetro ligeramente mayor a través de una corta porción de transición 15 que forma una superficie interna 16 frusto-cónica. La parte interna del recipiente 3 termina en la localización en la que la porción de transición 15 de la parte externa del recipiente 2 continúa en la porción cilíndrica 14 de un diámetro mayor. El extremo inferior de la parte interna del recipiente 3 comprende una superficie externa 17 de una forma frusto-cónica que coincide con la forma de la superficie frusto-cónica 16 del lado interno de la parte externa del recipiente 2. Justo por debajo del extremo inferior de la parte interna del recipiente 3, que termina en una superficie radial 18 se proporciona un disco anular externo y uno interno 19 y 20, respectivamente. Estos discos lindan estrechamente entre sí, aparte del hecho de que definen entre ellos un conducto 21 que se extiende en un plano axial de una apertura central 22 y hacia el lado interno de la parte externa del recipiente 2, donde el conducto 21 se comunica con el conducto 4 entre la parte externa del recipiente 2 y la parte interna del recipiente 3 a través de una porción 23 que se extiende axialmente. El conducto 21 y la porción 23 que se extienden axialmente se proporcionan de un modo adecuado por medio de una muesca en el lado del disco interno 20 hacia el disco externo 19. Los dos discos 19 y 29 tienen una forma con un curso oblicuo de forma que comprenden sustancialmente las superficies frusto-cónicas interna y externa y, por tanto, se inclinan en dirección descendente hacia la apertura central 22 en una dirección distal de la apertura 7 del cilindro de pistón hueco 8 en una parte externa del recipiente 2 y una parte interna del recipiente 3. El disco interno 20 también incluye una superficie radial 24 que linda con la superficie radial adyacente 18 sobre la parte interna del recipiente 3. La superficie radial 24 del disco interno 20 se proporciona con un hueco 25 para recibir un anillo de cierre 26.

Los dos discos 19 y 20 se mantienen en posición lindando con la superficie radial 18 de la parte interna del recipiente 3 por medio de una cubierta 27 que cierra la parte externa del recipiente en dirección descendente. La cubierta 27 comprende una porción circunferencial con forma de manguito 28 adaptada para lindar estrechamente con la cara interna de la parte externa del recipiente 2, a la que se asegura de un modo adecuado, tal como por medio de una unión de disparo entre un cordoncillo circunferencial 29 en la cara externa del manguito 28 y una correspondiente muesca circunferencial 30 en la cara interna de la parte externa del recipiente 2. Se asegura una conexión de hermética por medio de un anillo hermético 31 en un hueco circunferencial 32 en la periferia externa del disco externo 19. La cubierta 27 también incluye una pared relativamente fina 32 adaptada para formar el fondo inferior del recipiente en la posición que se muestra en la Fig. 1. La pared 32 se extiende sustancialmente a lo largo de un curso paralelo a los discos externo e interno 19 y 20 de tal modo que la pared 32 se extiende desde la cara interna del manguito 27 en una porción adyacente a los discos 19 y 20 y de forma descendente hacia una porción sustancialmente en un nivel con el borde inferior 33 de la parte externa del recipiente 2. Con el fin de reforzar esta pared relativamente fina 32 se proporciona un cordoncillo radial de refuerzo 34 a intervalos regulares, donde sólo uno de los cordoncillos aparecen en la Fig. 1a. El cordoncillo 34 se configura en parte con una porción localizada en la pared externa 32 y en parte con una porción que se localiza en la pared interior 32. Esta última porción interior se designa con el número de referencia 35 y está configurado de forma que linda con el fondo del disco externo 19, con el resultado de que contribuye al mantenimiento de los discos 19 y 20 en una posición fiable.

La separación 36 se localiza entre el disco externo 19 y la cubierta 27. La separación 36 comprende un tramo de tubo central 37 que está montado encima de una clavija 38 que se proyecta axialmente hacia el interior y configurada incorporada con la pared 32 de la cubierta 37. El tramo de tubo 37 está incorporado en un disco circunferencial de pared 39 que se extiende hacia el exterior desde el tramo de tubo 37 de un modo tal que inicialmente se inclina ligeramente en dirección descendente hacia la pared 32 de la cubierta 27, desde donde se extiende a lo largo de un curso axial corto y continua siguiendo un curso que se extiende sustancialmente paralelo a la pared 32 de la cubierta.. El disco de la pared 39 termina en una corta periferia 40 que se extiende radialmente y descansa sobre un soporte 41 encima de las porciones de los cordoncillos 35 de la cubierta 27. Entre la periferia externa 40 del disco de la pared 39 y el fondo del disco externo 19 se localiza una unidad anular de filtro 42. La unidad anular de filtro 42 linda con una superficie configurada sustancialmente en sentido radial 43 sobre la cara externa adyacente del disco externo 19.

Con el fin de asegurar la estabilidad en la separación 36, entre el tramo del tubo 37 y el disco de la pared 39 se localizan cordoncillos radiales de refuerzo que de designan con el número de referencia 44.

En el extremo de la cubierta 27 opuesto al tramo de tubo 27 de la separación 36 se asegura una cápsula designada con el número de referencia 45. Esta cápsula comprende un tramo de pipa elongado 46 incorporado en un disco radial 47 y lleva dos discos adicionales radiales y anulares 48 y 49. Los discos radiales 48 y 49 se aseguran mediante ajuste por rozamiento en su lado respectivo del disco fijo 47. Los discos sueltos 48 y 49 se colocan a su respectiva distancia del anillo fijo 47 por medio de soportes circunferenciales 50 y 51 respectivamente en el tramo del tubo 46. Todos los tres discos 47, 48 y 49 tienen el mismo diámetro externo y llevan a lo largo de sus periferias respectivas un manguito circunferencial montado para que de pueda desplazar 52.

Como se ilustra en la Fig. 1, el disco inferior 49 linda con el extremo superior del tramo de tubo 37 de la separación 36, gracias a lo cual se determina la posición de la cápsula 45 en dirección axial. Esta posición también se determina de un modo tal que cuando se desplaza en dirección axial el manguito desplazable 52 de la cápsula entra en una unión hermética por su extremo inferior, con el borde más interno 53 del disco externo 19 en la apertura central 22. En esta posición del manguito 52, todavía existe una comunicación entre el espacio dentro del disco interno 20 que rodea el manguito 52 y la entrada al interior de conducto 21 entre el disco externo 19 y el disco interno 20. La longitud axial del manguito desplazable 52 está adaptada de tal forma que se encaja con el disco externo 19 antes de que el extremo superior del manguito 52 se separe del anillo fijo 47 durante el desplazamiento descendente axial del manguito 52. El diámetro interno del manguito 52 también se adapta al diámetro externo de la porción que se extiende en dirección axial del disco de la pared 39 de la separación 36 de tal modo que el desplazamiento descendente continuo del manguito 52 hacia la cubierta 27 hace que el manguito 52 se encaje de forma fija con la separación 36 una vez que se ha separado del disco externo 19. La longitud de la porción axial de la separación 36 corresponde también con la longitud axial del manguito 52 de tal modo que la separación 36 soporta casi por completo el manguito 52 en la posición inferior.

Como se ilustra en la Fig. 1, el cilindro del pistón hueco 8 comprende un pistón circunferencial 55 dentro de la parte externa del recipiente 2 y de la parte interna del recipiente 3, donde el pistón 55 encaja de forma hermética en la cara interna de la parte interna del recipiente 3 a través de un anillo de de cierre 56.

En el interior del cilindro de pistón hueco 8 existe un Luer de acoplamiento para la jeringuilla convencional 58 con un émbolo que actúa como un pistón 59que actúa sobre el contenido de la jeringuilla 58. El acoplador 57 tiene una forma casi igual a la de un tramo de tubo que comunica con una apertura central 61 en un pistón 55 a través de una porción frusto-cónica 60. El tramo de tubo 57 está provisto de una red que se proyecta hacia el interior radialmente 62 para dirigir el fluido que sale de la jeringuilla 58 lejos de una vía axial, por tanto alrededor del tramo de pipa elongado 46 hacia abajo al interior dentro de la cápsula 45. El último tramo de tubo 46 tiene tal longitud y tales dimensiones que se puede encajar de forma hermética en el tramo del tubo 57 dentro del cilindro de pistón hueco 8 cuando el pistón 55 está en la posición inferior cerca de la cubierta 27. Con el fin de estimular la conexión hermética anterior, la cara interna del tramo del tubo 57 se forma con un diámetro en disminución gradual al final del pistón adyacente 55.

La falda que se proyecta en dirección axial está formada incorporada con el pistón 55 alrededor de la apertura central 61 del pistón. La falda 63 está configurada con un diámetro tal y tal longitud que mediante un desplazamiento adecuado del pistón 55 puede activar el desplazamiento anterior del manguito desplazable 52 de la cápsula 45 en las posiciones en las que se encaja con el borde interno 53 de la apertura central 22 a través de dos discos 19 y 20, seguido por una unión de la separación 36.

La junta de labios anular, resiliente se asegura alrededor del cilindro de pistón hueco 8 en la parte superior dentro de las partes 2 y 3 del recipiente. Esta junta de labios 64 se adapta para prevenir un paso indeseado de fluido procedente del interior de las partes 2 y3 del recipiente hacia el conducto 4, pero permite el paso de fluido cuando se aplica una fuerza a través del pistón 55.

Como se indica en la parte superior de la Fig. 1 se proporciona una conexión a un tubo flexible 65 a través de una apertura 66 en las partes externa e interna 2 y 3 del recipiente, respectivamente. Esta conexión se conoce y, por tanto, no se muestran con mayor detalle, pero permite una interrupción de la conexión con el tubo flexible cuando se desee. Además, de un modo convencional se proporciona una apertura con escape de aire con un filtro adecuado y, por tanto, ni se muestra ni se describe más detalladamente.

Se deja un paso 69 desde el área entre la separación 36 y la cubierta 27 y hacia arriba a través del interior del tramo de tubo 37 y la separación 36 y a través del interior del tramo de tubo 46 de la cápsula 45. El paso 69 permite la transferencia de fluido a la jeringuilla 58 desde esta área cuando el tramo de tubo 46 se acopla al tramo de tubo 57 en el interior del cilindro de pistón 8. El paso 38a se proporciona en la porción inferior de la clavija 38 en la cubierta 27 mediante la configuración de la clavija 38 con una superficie axial plana, en la que la clavija tiene una sección transversal sustancialmente circular. Como resultado se proporciona un espacio entre e+la clavija y la porción adyacente de la cara interna del tramo de tubo 37. El área 67 se encuentra justo por encima de la clavija 38 donde la separación 36 presenta un diámetro interno ligeramente reducido. De este modo es posible colocar un pequeño filtro 68 justo por encima de esta área, por donde el fluido debe atravesar el filtro antes de entrar en el tramo de tubo 46 de la cápsula 45.

El recipiente descrito comprende una primera cámara anular 70 definida hacia dentro por un cilindro de pistón hueco 8 que forma una pared interna cilíndrica 71 y hacia fuera por una pared cilíndrica externa 72 formada por la parte externa 2 del recipiente y la parte interna 3 del recipiente. Cuando se usa en la posición convencional de la Fig. 1, la cámara anular 70 está definida en dirección ascendente por la pared superior 73 formada por los fondos 5 y 6, respectivamente, de la parte externa 2 del recipiente y la parte interna del recipiente 3. En dirección descendente, la cámara anular 70 está definida por una pared inferior 74 formada por un el pistón 55. LA segunda cámara 75 está definida por debajo del pistón 55, en la que la segunda cámara está definida hacia fuera por la misma pared externa cilíndrica 72 que la primera cámara 70. En dirección descendente, la segunda cámara 75 está definida por una segunda pared inferior 76 formada por un disco externo 19 y un disco interno 20. La cápsula 45 se localiza en el centro en el interior de la segunda cámara 75. Por debajo de la segunda pared inferior 76 se localiza una tercera cámara 777 y esta tercera cámara 77 está definida por la separación 36 y la unidad de filtro anular 42. Además, la tercera cámara 77 se comunica con la segunda cámara 75 a través de un paso formado pos la apertura central 22 en el disco externo 19 y el disco interno 20. Por último, por debajo de la separación 36 se localiza una cuarta cámara 78, estando la cuarta cámara 78 definida en dirección descendente por la pared 32 de la cubierta 27 y también por porciones de manguito 28 de la cubierta 27 y la cara inferior del disco externo 19.

Como se ha descrito antes, el recipiente en cuestión es adecuado, principalmente, para la separación de un componente, tal como monómero de fibrina de la sangre, y, para este propósito se llena antes la segunda cámara 75, y preferentemente la cámara superior 80 de la cápsula 46, con una enzima adecuada, que puede catalizar la escisión de los fibrinopéptidos A y/o B del fibrinógeno, es decir, convertir el fibrinógeno en fibrina, tal como batroxobina. Como se entiende del documento EP nº 592.242 y la patente de EE.UU. nº 5.750.657, cuyas descripciones se incorporan en la presente memoria descriptiva como referencia, se puede emplear cualquier enzima similar a la trombina. Entre tales enzimas se incluyen la propia trombina o cualquier material con una actividad similar, tal como Ancrod, Acutin, Venyyme, Asperasa, Botropasa, Crotabase, Flavorxobina, Gabonasa y la preferida, batroxobina. La batroxobina se puede unir químicamente a la biotina, que es una sustancia sintética que permite que la captura de la batroxobina de un modo convencional por medio de la avidina en una composición de avidina-agarosa. En consecuencia, la avidina-agarosa se localiza en la cámara más inferior 81 de la cápsula. Tanto la composición de biotina-batroxobina como la composición avidina-agarosa son relativamente fáciles de cargar en las respectivas cámaras 80 y 81 dentro de la cápsula 45 antes de que la cápsula se coloque en el interior del dispositivo.

Por último, la jeringuilla 58 se localiza en el cilindro de pistón 8, donde la jeringuilla 58 contiene un tampón a pH 4 de un acetato diluido con ácido acético. La jeringuilla 58 se usa después para recibir la solución deseada de monómero de fibrina.

También se puede usar otro tampón conocido de la técnica anterior. El agente tampón de redisolución puede ser cualquier solución tampón ácida, preferentemente aquéllas con un pH entre 1 y 5. Entre los ejemplos adecuados se incluyen ácido acético, ácido succínico, ácido glucurónico, ácido cisteico, ácido crotónico, ácido itacónico, ácido glutónico, ácido fórmico, ácido aspártico, ácido adípico y se prefieren las sales de ácido acético, por ejemplo acetato sódico. Asimismo, la solubilización también se puede llevar a cabo a un pH neutro por medio de un agente caotrópico. Entre los agentes adecuados se incluyen urea, bromuro sódico, clorhidrato de guanidina, KCNS, yoduro potásico y bromuro potásico. Las concentraciones y los volúmenes de tal tampón ácido o tal agente caotrópico son como se ha descrito en el documento EP nº 592.242.

Durante o justo después del suministro de sangre, el cilindro de pistón 8 se empuja tanto en el interior del recipiente que el manguito desplazable 52 de la cápsula 45 se mueve hacia abajo hacia una unión hermética a través del paso, a través de la pared inferior 76 hasta llegar a la segunda cámara 77. Como resultado, el acceso se abre de forma simultánea a la composición de biotina-batroxobina dentro de la cámara más superior 80 de la cápsula.

Cuando el recipiente está listo para usar se introduce una muestra de sangre en la primera cámara a través de una aguja que no se muestra y un tubo flexible 65 de un modo convencional, la muestra de sangre se mezcla, preferentemente, con un anticoagulante también de un modo convencional. Durante la introducción de la sangre a través del tubo flexible 65 y la apertura 66 en el interior de la primera cámara 70 se elimina el aire de la cámara de un modo convencional. Tras la introducción de la sangre, se elimina el tubo flexible 65 y la apertura 65 se cierra de forma hermética. Posteriormente, el recipiente con la sangre se coloca en un aparato de centrífuga que, entre otras cosas, contribuye a la compresión hermética de las diversas porciones. El aparato de centrífuga se describe más adelante y hace que el recipiente rote alrededor de un eje de rotación 1. Como resultado de la centrifugación, la sangre se separa en la primera cámara 70 en una fracción plasmática que se deposita radialmente dentro de las porciones restantes de la sangre, donde las porciones restantes que contienen las células sanguíneas rojas y blancas dispuestas en la porción más externa de la cámara 70. Como se describe en el documento EP nº 592.242, las plaquetas pueden estar presentes en la fracción plasmática o la fracción dispuesta en la porción más externa de la cámara 70, como se desee, mediante la variación de la velocidad y el tiempo de centrifugación.

Cuando se han estabilizado las interfases entre el plasma y las porciones restantes de la sangre, es decir cuando la separación es completa, se inicia una reducción del volumen de la primera cámara 70 mediante el cilindro de pistón 8 y, en consecuencia, se retira el pistón 55. Como resultado, primero una posible capa fina de aire atraviesa los conductos 4 y 21 hacia la segunda cámara 75 y un posterior movimiento del pistón 55 tiene como resultado el paso del plasma a la segunda cámara 75. El movimiento del pistón 55 se para cuando toda la capa de plasma se ha forzado en la segunda cámara 75, es decir cuando la interfase entre la fracción plasmática y la porción restante de la sangre dispuesta en la porción más externa de la cámara 70 alcanza la pared interna 71 de la primera cámara 70.

Como se ha descrito en el documento WO 98/
30887 y la patente de EE.UU. nº 5.955.026, la introducción de la cantidad de tampón a pH 4 y en consecuencia la activación de la jeringuilla 58, puede ser según una cantidad fija predeterminada de tampón que se va a añadir o se puede llevar a cabo como respuesta a la cantidad de polímero de fibrina no reticulada presente en la segunda cámara 75 del recipiente 110. Es decir, la cantidad de polímero de fibrina presente en la segunda cámara 75 se puede medir mediante un fotómetro 130 dispuesto de forma fija en el aparato en frente de la segunda cámara 75. El fotómetro puede comprender un dispositivo emisor de luz y un sensor de luz (no se muestra) dispuestos de forma que se pueda medir la intensidad de la transmisión de luz a través de la pared del recipiente 110. Se puede usar cualquier emisor de luz dependiendo del material de la pared. Los emisores de luz preferidos se encuentran en el intervalo de longitud de onda de 400-1100 nanómetros. Los preferidos son los LED que tienen una longitud de onda de 920 ó 654 mm. El modelo SFH460 de Siemens es adecuado para este propósito. Como se describe en el documento WO 98/30887, el fotómetro 130 mide la cantidad de polímero de fibrina en la pared externa de la segunda cámara 75 mediante la observación de la disminución de la intensidad de luz transmitida a través de la pared de la cámara con el polímero en comparación con una lectura de referencia de la transmisión de la luz a través de la pared sola. Las lecturas de la transmisión se pueden llevar a cabo continuamente al menos durante el periodo que comienza justo antes de la adición del tampón a pH4 y que termina después de la finalización de la adición. Al principio de este periodo se registra el grosor y en consecuencia la cantidad de polímero de fibrina y según ellos se determina la cantidad de tampón a pH4 que se va a añadir. La última determinación de la cantidad de tampón a pH 4 se realiza en la unidad de control 131 que recibe información acerca de los valores medidos del fotómetro a través del conducto 132. Posteriormente, la unidad de control 131 activa el motor 115 a través del conducto 133 para impulsar el huso 116 y, en consecuencia, la barra de activación, que a su vez activa el pistón 59 de la jeringuilla 58.

Como también se ha descrito en el documento WO 98/30887 y en la patente de EE.UU. 5.955.026 y se ha ilustrado en la Fig. 3 se puede usar un segundo fotómetro 130'. Como se ha descrito antes, preferentemente la transmisión de la luz del emisor de luz es continua durante el procedimiento de depositar el componente polimerizado del plasma/suero líquido en la pared de la cámara de transmisión de la luz. La Fig. 3 muestra, en sección transversal parcial, la relación del componente polimerizado, el líquido (plasma o suero) y el pistón 55 durante la sedimentación por centrifugación del componente polimerizado en la pared. Dado que el líquido puede interferir en la exactitud de los datos observados mediante el primero fotómetro o 130, el segundo fotómetro 130' puede colocarse en una posición en la que cabe esperar que se transmita la luz a través de la pared y el líquido, pero no a través del componente polimerizado. Una comparación de estas lecturas puede eliminar las posibles interferencias del líquido sobre la exactitud de las lecturas.

También es útil observar que se pueden modular uno o más fotómetros, 130 y 130', de forma que la porción detectora permanezca "encendido", pero el pulso LED "encendido y apagado". De este modo, la porción detectora de los fotómetros puede tener en cuenta (y programarse para despreciar) la luz del entorno que pueda estar en las proximidades del presente aparato. Preferentemente, la modulación del LED se lleva a cabo a una frecuencia que no es igual a, o que no es múltiplo de, la velocidad rotacional de la centrífuga.

La Fig. 3 ilustra un gráfico de las medidas del fotómetro frente al tiempo. El gráfico muestra las mediciones del fotómetro desde el comienzo del aparato de centrífuga hasta el final del suministro del tampón a pH 4 a la segunda cámara 75. La porción del gráfico de A a B muestra las mediciones tomadas cuando el pistón 55 está en una posición inferior y bloquea el paso para la señal del fotómetro. En C, el pistón se ha elevado y el fotómetro mide la transmisión de la luz a través del material plástico solo del que está hecho el recipiente, mientras que la segunda cámara 75 todavía está vacía. La medición en C se usa para calibrar el fotómetro de forma que las mediciones satisfactorias tienen en cuenta la translucidez del recipiente 110, donde la translucidez varía de un recipiente a otro. De C a D, el plasma se transfiere a la segunda cámara 75 junto con algo de aire. De D a E, se elimina el aire del plasma y la enzima, tal como batroxobina, se libera en la segunda cámara 75. Alrededor del punto E, las mediciones también proporcionan información acerca de las características, tales como la concentración y la claridad de la sangre, que pueden variar de una porción de la sangre a otra porción de la sangre. De E a F, el polímero de fibrina no reticulada se libera de la fracción de plasma. De F a G, la porción restante relativamente fluida de la fracción de plasma se transfiere a la primera cámara 70 extrayendo primero el aire de la primera cámara 70 a la segunda cámara 75 mediante la elevación del pistón 55. Después, la fracción plasmática fluida restante se transfiere a la primera cámara 70 al bajar el pistón 55. Durante el último periodo, se llevan a cabo más centrifugaciones y activaciones del pistón con el resultado de que toda la fracción plasmática fluida se elimina del polímero de fibrina. En G, la medición muestra el grosor del polímero de fibrina pura y, por tanto, la cantidad de polímero de fibrina presente en la segunda cámara 75. Según la última medición se determina la cantidad de tampón a pH 4 que se va a añadir. De G a H tiene lugar la disolución del polímero de fibrina por medio del tampón a pH 4 suministrado.

Cuando se ha añadido la cantidad deseada de tampón a pH 4, se interrumpe la activación del pistón 59 de la jeringuilla 58. La cantidad de tampón a pH 4 que queda opcionalmente en la jeringuilla 58 no se expele hasta después en la segunda cámara, momento en el que se expele inmediatamente antes de que el tramo de tubo 46 se acople a la jeringuilla 58 para la succión de la solución de monómero de fibrina desde la cuarta cámara 78. Como se ha descrito en el documento WO 98/30887, la cantidad de polímero de fibrina depositada en la pared se puede determinar usando un fotómetro que comprende una fuente de luz, por ejemplo LED, láser u otro emisor de luz, y un sensor dispuesto para medir la disminución de la transmisión de la luz a través de la pared de la cámara a medida que la fibrina se deposita en la misma. Se puede emplear cualquier fotómetro conveniente y el intervalo de longitudes de onda de la fuente de luz se selecciona de modo que sea sensible en la gama del material que se está depositando y teniendo en cuenta en material de la pared. En el caso del depósito de polímero de fibrina en la pared de la cámara se ha encontrado útil un diodo de emisión de luz (LED) de una longitud de onda de 654 nanómetros. A la disminución de la transmisión de la luz se llega mediante la toma de una lectura de referencia (R) de la transmisión de la luz a través de la pared de la cámara antes de la sedimentación del polímero de fibrina y después se mide la transmisión final de luz (F) después de completada la sedimentación de polímero de fibrina. Una correlación entre el log natural de una comparación de estas intensidades de la transmisión de la luz y la masa de fibrina se puede expresar como:

(1)Masa de fibrina = C Ln (R/F)

donde C = un coeficiente del componente, por ejemplo un coeficiente de fibrina.

El coeficiente de fibrina (C) se puede establecer de forma experimental mediante la interrupción del procedimiento y la medición de la masa de fibrina en una serie de procesos para los valores observados de ln R/F. Mediante la representación gráfica donde disminuye la masa de fibrina medida experimentalmente frente a la transmisión de luz observada, es posible definir un coeficiente de fibrina (la pendiente de la línea representada).

A continuación, las reducciones medidas en la transmisión de la luz expresadas como ln (R/F), multiplicadas por el coeficiente de fibrina, son indicativas de la cantidad de polímero de fibrina formado y el conocimiento de una cantidad predeterminada de disolvente o de tampón que se debe usar para solubilizar el polímero de fibrina proporciona la concentración de la solución de monómero de fibrina resultante. Obviamente, el coeficiente del componente tendría que volverse a establecer para diferentes procedimientos y diferentes componentes del plasma o de la sangre. Esta concentración se puede expresar como:

(2)Conc = \frac{\text{masa de fibrina}}{VT}

donde conc es concentración, VT es volumen total y donde VT = Masa de F + VB, donde VB es el valor del tampón o el disolvente añadido para solubilizar la fibrina.

De acuerdo con el procedimiento descrito anteriormente, también se ha descubierto que algo del suero y otras proteínas de la sangre o de la fuente de plasma pueden quedar atrapadas en y alrededor del polímero de fibrina depositado en la pared. De hecho, la masa de fibrina real puede ser sólo una pequeña porción de la masa de suero de fibrina depositado. Esto depende del procedimiento usado, es decir, puede variar según la velocidad (RPM) y el tiempo de centrifugación durante la sedimentación del polímero de fibrina en la pared. Por ejemplo, al centrifugar el plasma (obtenido de 120 ml de sangre) a aproximadamente 9000 RPM durante alrededor de 5-10 minutos en presencia de cantidades suficientes de enzima que convierte el fibrinógeno en fibrina, se ha descubierto que la masa de fibrina real es sólo de aproximadamente el 5-10% de la masa de fibrina/suero que se deposita en la pared. En caso de que haya suero presente, la concentración se puede expresar como

(3)Conc = \frac{\text{masa de fibrina}}{VS + VB}

donde VS = volumen de fibrina y de suero retenido en la fibrina.

Experimentalmente se ha determinado que el volumen de fibrina + suero (VS) posee una relación lineal con la masa de fibrina, que puede expresarse como

\hskip1cm

VS = a+b Masa de Fibrina

\hskip1.4cm

(4)

\vskip1.000000\baselineskip

donde

a = volumen de sólo suero

b = volumen de fibrina por mg de fibrina + suero

\vskip1.000000\baselineskip

Tanto (a) como (b) se pueden determinar experimentalmente mediante la representación gráfica de la masa medida de fibrina `suero frente a la masa de fibrina, siendo (a) la ordenada y, y (b) la pendiente de la línea representada.

Esto proporciona la relación

(5)Conc = \frac{\text{Masa de fibrina}}{VB + a + b \ masa \ de \ fibrina}

Mediante la sustitución de la fórmula (1) por "Masa de fibrina" en ambos casos en la fórmula (5), se llega a la siguiente expresión

(6)Conc = \frac{C. ln(R/F)}{VB + a+b.C \ ln (R/F)}

Por tanto, para un procedimiento dado donde C, a y b se han determinado de modo experimental como se ha descrito antes y donde se conoce el volumen del tampón de solubilización (VB), la concentración de una solución del componente de la sangre, por ejemplo una solución de monómero de fibrina, se puede determinar mediante la observación de la disminución de la transmisión de luz a través de un polímero depositado a partir del que se prepara la solución y mediante el uso de la fórmula (6) anterior.

En otras palabras, un aparato accionado con un microprocesador se puede programar con la fórmula y las constantes anteriores determinadas experimentalmente para un procedimiento dado tal que las señales de las lecturas del fotómetro a través de la pared de la cámara antes y después de que dicho componente polimerizado se deposite en la misma permitirán que el microprocesador determine la concentración de la solución del componente de la sangre que resultará de la solubilización del componente polimerizado con una cantidad conocida de tampón o disolvente. Además, se puede proporcionar el suministro medido del disolvente o el tampón, de forma que se pueden utilizar cantidades variables de tampón o de disolvente para solubilizar en la solución deseada el componente de la sangre polimerizado. De este modo, se puede producir una solución de una concentración deseada del componente de la sangre con independencia de la concentración inicial del componente en la sangre mediante la determinación de la cantidad de polímero de fibrina (y suero) depositado y la introducción de una cantidad de tampón como respuesta a esta información, lo que tendrá como resultado la misma concentración de un proceso a otro. Esto se lleva a cabo volviendo a expresar la fórmula (6) para resolver la cantidad de tampón (VB) necesaria para producir una solución de la concentración deseada (Conc), del siguiente modo

(7)VB = C.ln (R/F) ((¡/Conc)-b)-a

Por tanto, de acuerdo con lo anterior, se proporciona un aparato y procedimientos para producir soluciones de componentes sanguíneos, por ejemplo soluciones de monómero de fibrina, a concentraciones deseadas constantes incluso cuando se parte de sangre o de plasma con concentraciones iniciales variables de fibrinógeno, por ejemplo 1-10 mg/ml, como se puede encontrar en la población humana.

De acuerdo con la presente invención, a la segunda cámara 75 se aplica una cantidad inicial de disolvente o de tampón inferior a la cantidad total de disolvente o de tampón (VB) para solubilizar el polímero de fibrina no reticulada presente en la misma. Como se usa en la presente memoria descriptiva, se pretende que los términos "disolvente" y "tampón" se usen de forma intercambiable y se definen como materiales que solubilizan el polímero de fibrina no reticulada de acuerdo con la presente invención. Además, debe interpretarse que incluyen los agentes caotrópicos comentados anteriormente.

A continuación, a la segunda cámara 75 se aplica una cantidad de lavado del tampón para capturar el polímero de fibrina no reticulada restante en la misma y también el polímero de fibrina no reticulada atrapada en el filtro 42. Es decir, de acuerdo con la presente invención, una cantidad denominada "segura" del disolvente se introduce en la segunda cámara 75, siendo la cantidad segura de disolvente una cantidad que asegure la solubilización del polímero de fibrina no reticulada sin o sustancialmente sin la precipitación del polímero de fibrina. Por ejemplo, para un tampón de acetato, el límite superior del pH de la solución de fibrina será un pH de 4,60. Por encima de este pH se puede producir la precipitación de fibrina. Por tanto, para el tampón acetato se usa una cantidad que tendrá como resultado un pH de la solución de fibrina de 3,9 a 4,60, siendo, en general, el pH de la fibrina y del suero sanguíneo contenido en la misma de 7 o neutro. Después, se añade la cantidad restante del volumen total del tampón (VB) para solubilizar o "FLUsH" el polímero de fibrina no reticulada restante en la segunda cámara 75 y solubilizar o capturar el polímero de fibrina no reticulada presente en el filtro 42 debido a las etapas de filtración llevadas a cabo previamente.

La cantidad de la porción del volumen total del disolvente o tampón (VB) añadido inicialmente de acuerdo con la presente invención dependerá, como reconocerá un experto en la técnica, de la "fuerza" de la solución tampón. Es decir, la cantidad dependerá de la capacidad del disolvente o del tampón para mantener el pH de la solución de fibrina resultante dentro de un intervalo de pH que mantenga la fibrina en solución sin, o sustancialmente sin, precipitación de la fibrina. Por ejemplo, esta porción puede variar de 20 a 80% en vol del volumen total del disolvente o del tampón (VB). Un disolvente o tampón que tenga una capacidad relativamente fuerte para mantener la fibrina en solución permitirá el uso de una cantidad inferior del volumen total del disolvente o del tampón (VB) inicialmente, porque cuando tal disolvente o tampón se mezcla con la fibrina y cualquier suero sanguíneo que pueda estar presente, resultará una solución de fibrina con un pH adecuado que evite la precipitación de fibrina. Por otro lado, una solución de tampón o de disolvente de "fuerza" baja requerirá el uso de un porcentaje relativamente mayor del volumen total del disolvente o del tampón (VB) inicialmente con el fin de conseguir una solución de fibrina que tenga un pH que evitará la precipitación de la fibrina.

Asimismo, de acuerdo con la presente invención, el polímero de fibrina no reticulada puede solubilizarse mediante el uso de una porción inicial del volumen total de la solución de disolvente o de tampón (VB), como se ha descrito antes, y después la cantidad restante del volumen total puede añadirse en varias etapas. Por ejemplo, inicialmente se puede añadir aproximadamente el 60% del volumen total del disolvente o el tampón (VB), para solubilizar la fibrina, y después la cantidad restante del volumen total del disolvente o tampón (VB) se puede añadir en dos o más etapas distintas. Es decir, el 40% restante del volumen total de disolvente o tampón (VB) puede añadirse en dos etapas, en las que una etapa contiene el 20% del volumen total de disolvente o el tampón (VB) y otra etapa contiene el 20% restante del volumen total de disolvente o el tampón (VB). De este modo, la adición de la cantidad restante del volumen total de disolvente o el tampón (VB) tras la adición inicial se puede dividir en cualquier número adecuado de adiciones de solución de disolvente o tampón con el fin de recuperar el polímero de fibrina no reticulada de la segunda cámara 75 y del filtro 42 a cualquier grado deseado.

En general, el procedimiento de acuerdo con la presente invención se puede llevar a cabo del siguiente modo. Como se ha descrito antes, la cantidad del volumen total de disolvente o el tampón (VB) se calcula según la cantidad de polímero de fibrina en la pared externa de la segunda cámara 75 medida mediante un fotómetro 130. A continuación se activa la jeringuilla 58 para introducir inicialmente una porción, por ejemplo 80% en vol, del volumen total de disolvente o el tampón (VB) a la segunda cámara 75, habiéndose determinado previamente la cantidad exacta de esta porción mediante la consideración adecuada de la fuerza del tampón. A continuación se lava el polímero de fibrina no reticulado para preparar una solución de fibrina de un pH adecuado y esta solución se filtra usando un filtro 42 del modo descrito antes con el fin de capturar la enzima usada para catalizar la escisión de los fibrinopéptidos A y/o B del fibrinógeno contenido en la sangre o el plasma y formar el polímero de fibrina no reticulada. A continuación se activa de nuevo la jeringuilla 58, momento en el que se introduce la porción restante del volumen total de disolvente o el tampón (VB) en una o más etapas a la segunda cámara 75 para solubilizar todo o casi todo el polímero de fibrina no reticulada restante en las paredes de la segunda cámara 75. A continuación, esta solución de fibrina adicional que contiene polímero de fibrina no reticulada recuperado de la segunda cámara 75 se filtra del modo comentado anteriormente usando el filtro 42. Esta filtración recupera de forma ventajosa más polímero de fibrina no reticulada con la solución de fibrina de la solubilización inicial del polímero de fibrina no reticulada usando la porción inicial del volumen total de disolvente o el tampón (VB). Después de eliminar de la jeringuilla 58 cualquier tampón sin usar, las soluciones de de fibrina combinadas se suspenden en la jeringuilla 58 del modo descrito anteriormente y son adecuadas para usar en un taponador de fibrina o para cualquier otro propósito deseado.

De acuerdo con la presente invención, la cantidad de fibrina recuperada aumenta de forma ventajosa, lo que tiene como resultado soluciones de fibrina con concentraciones de fibrina mayores. Cualquier incremento en la recuperación de fibrina, en especial los que se pueden conseguir de acuerdo con la presente invención, es particularmente ventajoso por lo que se ha comentado anteriormente, la concentración de fibrinógeno en la sangre humana puede variar en \pm 300% en las poblaciones de pacientes humanos y los componentes taponadores recién preparados procedentes de fuentes individuales también variarán. En particular, se pueden obtener soluciones de fibrina mejoradas de forma significativa para preparar componentes taponadores recién preparados para seres humanos con niveles bajos de fibrinógeno.

Claims (11)

1. Un procedimiento para la preparación de fibrina a partir de sangre o plasma, que comprende las etapas de:

someter la sangre o el plasma a condiciones para catalizar la formación de una forma polimerizada de dicho componente;

recuperar dicha forma polimerizada de dicho componente, que se caracteriza por la centrifugación de dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente en una cámara de un aparato de centrífuga mientras se añade una cantidad inicial de disolvente a dicha cámara que contiene dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente para disolver dicha forma polimerizada de dicho componente, siendo dicha cantidad inicial de disolvente una cantidad inferior a una cantidad total predeterminada de disolvente para disolver toda la forma polimerizada recuperada de dicho componente mientras es suficiente para mantener dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente disuelta en dicha cantidad inicial de disolvente en solución sin que se produzca la precipitación del componente; y

añadir disolvente adicional a dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente, añadiéndose dicho disolvente adicional a dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente en una cantidad equivalente a una diferencia entre dicha cantidad total predeterminada de disolvente y dicha cantidad inicial de disolvente añadida para disolver dicha forma polimerizada de dicho componente.

2. El procedimiento según la Reivindicación 1, que se caracteriza porque dicho disolvente es una solución de acetato.

3. El procedimiento según la Reivindicación 2, que se caracteriza porque dicha solución de acetato tiene un pH de aproximadamente 4.

4. El procedimiento según la Reivindicación 1, que se caracteriza porque dicha cantidad inicial de disolvente añadido para disolver dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente es de aproximadamente el 80% vol de dicha cantidad total predeterminada de disolvente, y dicha cantidad de disolvente adicional añadido a dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente es de aproximadamente el 20% vol. de dicha cantidad total de disolvente predeterminada.

5. El procedimiento según la Reivindicación 1, que se caracteriza porque en dicha etapa de adición de dicho disolvente adicional a dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente comprende las etapas de añadir una primera porción predeterminada de dicho disolvente adicional hasta dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente y, posteriormente, la adición de una segunda porción predeterminada de dicho disolvente adicional a dicha forma polimerizada recuperada de dicho componente.

6. El procedimiento según la Reivindicación 1, que se caracteriza porque dichas condiciones para catalizar dicha forma polimerizada de dicho componente de dicha sangre o plasma comprende poner en contacto dicha sangre o plasma con una enzima para catalizar la formación de dicha forma polimerizada de dicho componente.

7. El procedimiento según la Reivindicación 1, que se caracteriza porque dicho componente de la sangre o el plasma es fibrinógeno.

8. El procedimiento según la Reivindicación 7, que se caracteriza porque dichas condiciones para catalizar dicha forma polimerizada de dicho fibrinógeno comprende poner en contacto dicho fibrinógeno con una enzima para catalizar la escisión de los fibropéptidos A y/o B de dicho fibrinógeno.

9. El procedimiento según la Reivindicación 8, que se caracteriza porque dicha enzima es batroxobina.

10. El procedimiento según la Reivindicación 1, que se caracteriza porque dicha etapa de recuperación de dicha forma polimerizada de dicho componente comprende las etapas de depositar en una pared de una cámara de un aparato de centrífuga dicha forma polimerizada de dicho componente.

11. El procedimiento según la Reivindicación 10, que se caracteriza porque dicha etapa de depositar dicha forma polimerizada de dicho componente en dicha pared de dicha cámara comprende la etapa de centrifugar dicha cámara en dicho aparato de centrífuga mientras que dicha forma polimerizada de dicho componente está presente en ella.