ES2240165T3 - Procedimiento de preparacion de derivados 3.amino de acidos biliares. - Google Patents

Procedimiento de preparacion de derivados 3.amino de acidos biliares.

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ES2240165T3 ES00964034T ES00964034T ES2240165T3 ES 2240165 T3 ES2240165 T3 ES 2240165T3 ES 00964034 T ES00964034 T ES 00964034T ES 00964034 T ES00964034 T ES 00964034T ES 2240165 T3 ES2240165 T3 ES 2240165T3
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Marino Brocchetta
Chiara Gallotti
Massimo Visigalli
Pier Lucio Anelli
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Abstract

Un procedimiento para la preparación de los compuestos de la fórmula general (I): **(Fórmula)** en la que: R1 es H o OH; R2 es H, a-OH, o /-OH; y R3 es grupo alquilo de C1-C4 recto o ramificado, o un grupo bencilo; que comprende la reducción de los compuestos de la fórmula general (III): **(Fórmula)** en la que R1, R2 y R3 tienen los mismos significados que en la fórmula (I), en la presencia de borohidruro sódico y en un disolvente aprótico dipolar seleccionado entre el grupo formado por dimetilacetamida, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, N-metilpirrolidona, para proporcionar los compuestos de la fórmula general (IV): **(Fórmula)** en la que R1, R2 y R3 tienen los mismos significados que en la Reivindicación 1, y la posterior desprotección de los compuestos (IV) mediante tratamiento ácido.

Description

Procedimiento de preparación de derivados 3-amino de ácidos biliares.
La presente invención se refiere a un nuevo procedimiento para la preparación de derivados de ácidos biliares en los que está presente un grupo amino en la posición 3\beta.
Los ácidos biliares más importantes están representados en el siguiente esquema 1:
Esquema 1
1
Más particularmente, la invención se refiere a un procedimiento para la preparación de los compuestos de la fórmula (I) a partir de los compuestos de la fórmula (II):
2 
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en la que:
R_{1} es H o OH;
R_{2} es H, \alpha-OH, o \beta-OH; y
R_{3} es un grupo alquilo de C_{1}-C_{4} recto o ramificado, o un grupo bencilo.
Los compuestos de la fórmula general (I) son compuestos intermedios importantes para la preparación de compuestos útiles para un cierto número de aplicaciones farmacéuticas. Por ejemplo, se usan para la preparación de inhibidores de la absorción intestinal de ácidos biliares (véase Documento EP-A-0489423) o como vehículos para compuestos activos en la circulación enter-hepática (véase Documento EP-A-0417725).
Por último, pero no menos importante, es el uso de los mismos para la preparación de agentes de contraste para la diagnosis médica usando resonancia magnética, tales como los descritos en el Documento WO-A-95/32741, resultantes de la conjugación de un ácido biliar con un agente quelante, el cual es capaz de la quelación de iones metálicos bi- y trivalentes paramagnéticos, en particular el ión gadolinio, o los descritos en la publicación de Anelli, P.L. y otros, Acta Radiologica, vol. 38, pág. 125, (1997).
El Documento EP-A-614.908, describe la preparación de los derivados de la fórmula general (I), la cual comprende las etapas siguientes:
a) formación de derivados ftalimido de la fórmula general (III), mediante la reacción de los compuestos de la fórmula general (II) con ftalimida:
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3 
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b) tratamiento de los compuestos de la fórmula general (III) con hidrato de hidracina o fenilhidracina;
c) posterior tratamiento de los productos de reacción procedentes de la etapa b) con ácidos minerales para formar las sales de adición, y
d) liberación de la sal para obtener los compuestos de la fórmula general (I).
Como ya se ha expuesto ampliamente en el Documento EP-A-614.908, la formación del derivado ftalimido se lleva a cabo mediante la bien conocida reacción de Mitsunobo (véanse Synthesis, vol. 1, (1981); Org. React., vol. 42, pág. 335, (1992)), fundamentalmente en presencia de una fosfina adecuada y de DEAD (dietilazodicarboxilato) o de DIAD (diisopropilazodicarboxilato), en un disolvente orgánico tal como dioxano o tetrahidrofurano, a una temperatura que varía desde 20ºC hasta 50ºC. La reacción de Mitsunobu proporciona los productos finales con inversión de la configuración.
El procedimiento ilustrado usa hidrato de hidracina o fenilhidracina, productos particularmente peligrosos debido a su descubierta cancerogenicidad.
De manera sorprendente, se ha descubierto ahora que la reducción del grupo ftalimido en los compuestos de la fórmula (III) puede llevarse a cabo de manera ventajosa con borohidruro sódico.
De acuerdo con ello, el objeto de la presente invención es un procedimiento para la preparación de los compuestos de la fórmula general (I), el cual comprende la reacción de reducción de los compuestos de la fórmula general (III) en presencia de borohidruro sódico, de acuerdo con el Esquema 2 siguiente:
\newpage
Esquema 2
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64 
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en el que:
R_{1} es H o OH;
R_{2} es H, \alpha-OH, o \beta-OH; y
R_{3} es un grupo alquilo de C_{1}-C_{4} recto o ramificado, o un grupo bencilo.
El procedimiento de la presente invención, tal como se ha mencionado previamente, se lleva a cabo a través de la formación de los nuevos compuestos de la fórmula general (IV), y posterior desprotección mediante el tratamiento de dichos compuestos con ácidos, de acuerdo con el Esquema 3 siguiente:
\newpage
Esquema 3
4
en el que R_{1}, R_{2} y R_{3} tienen los significados anteriormente definidos.
Los compuestos de la fórmula general (IV) son compuestos intermedios nuevos, útiles en el procedimiento de acuerdo con el Esquema 3 y su recuperación se describirá en la Sección Experimental.
Particularmente preferido es el procedimiento para la preparación de los compuestos de la fórmula (Ia), de acuerdo con el Esquema 3, partiendo de los compuestos de la fórmula (IIIa), los cuales son derivados del ácido cólico o desoxicólico:
5
en la que:
R_{3} tiene los significados anteriormente definidos, y
R_{4} puede ser un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxi.
Un objeto adicional de la presente invención es el procedimiento para la preparación de los compuestos de la fórmula (Ib), de acuerdo con el Esquema 4, partiendo de los compuestos de la fórmula (IIIb), los cuales son derivados del ácido desoxicólico:
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Esquema 4
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6 
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en el que:
R_{3} tiene los significados anteriormente definidos.
Particularmente preferido es el procedimiento para la preparación de los compuestos de la fórmula (Ic), de acuerdo con el Esquema 5, partiendo del compuesto de la fórmula (IIIc), un derivado del ácido desoxicólico:
\newpage
Esquema 5
7
Los compuestos de las fórmula (IIIc) y (IVc), éster metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-3-[1,3-dihidro-1,3-dioxo-2H-isoindol-2-il]-hidroxicolan-24-óico y éster metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-12-hidroxi-3-[[(2-hidroximetil)benzoil]amino]colan-24-óico, respectivamente, son nuevos y son compuestos intermedios útiles para la preparación del compuesto de la fórmula (Ic), un derivado del ácido desoxicólico.
Los compuestos de la fórmula (III) se sintetizaron de acuerdo con el procedimiento general ya descrito anteriormente y ejemplificado en el Documento EP-A-614.908.
Las condiciones de reacción preferidas comprenden:
1) selección de una temperatura de reacción desde 15ºC hasta 25ºC, disminuyéndose, de esta forma, la cantidad de diisopropilazodicarboxilato a un pequeño exceso con respecto al estequiométrico;
2) cristalización de los derivados ftalimido (III) a partir de MeOH en lugar de 2-PrOH, reduciéndose, de esta forma, el volumen de disolvente de cristalización en al menos cuatro veces.
La reducción de los derivados ftalimido con NaBH_{4} no ha sido descrita nunca antes en el campo de los compuestos de la presente invención, pero existen referencias en la literatura (T.W. Greene; P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3ª Ed. John Wiley & Sons, New York, (1999)), en la que se informa del uso de un gran exceso de este agente de reducción (5-10 mol) para desproteger un grupo ftalimido.
Las enseñanzas contenidas en el documento más importante (Osby, Tetrahedron Letters, vol. 25, pág. 2093, (1984)), es decir, el uso de 2-PrOH/H_{2}O = 6:1 como un disolvente de reducción, han probado ser definitivamente inadecuadas para el procedimiento de la presente invención. De hecho, debido a la pobre solubilidad de los compuestos de la fórmula (III), fue necesario operar a temperaturas de alrededor de 40ºC y con una concentración máxima del 2,5%, lo cual es, por supuesto, industrialmente inaceptable.
Por otra parte, Osby puso ya en evidencia que las condiciones propuestas no eran particularmente adecuadas para desproteger grupos ftalimido a partir de derivados que contienen una función éster. El propio Osby, de hecho, observó que la desprotección de este grupo en dichos derivados estuvo acompañada por la reducción e hidrólisis del grupo éster, con la consiguiente disminución de los rendimientos de la reacción.
El Solicitante de la presente invención ha encontrado que, cuando se reducen los compuestos de la fórmula (III) bajo las condiciones de Osby, los compuestos de la fórmula (I) se recuperaron con rendimientos de alrededor del 65%, pero contaminados por cantidades importantes de subproductos, fundamentalmente el producto de la reducción del grupo éster en la posición 24 a alcohol. Este fenómeno es aún significativo incluso cuando se reduce de manera importante el exceso de NaBH_{4}. Con el fin de conocer mejor la génesis de los subproductos, la reacción llevada a cabo bajo las condiciones de Osby se trató al final de la reducción con NaBH_{4} y antes de la hidrólisis ácida y los subproductos recuperados mediante cromatografía sobre sílice tenían las fórmulas (V) - (VIII). Estos subproductos son, por supuesto, los precursores de las impurezas evidenciadas en los compuestos de la fórmula (I) y responsables de los bajos rendimientos de la reacción.
8
En la Sección Experimental se informa de la recuperación y la caracterización de los diversos compuestos intermedios, en particular en el caso del ácido desoxicólico.
Los compuestos de la fórmula (IV) son substancialmente inseparables de los compuestos (V) por cristalización a partir de diferentes disolventes. Por el contrario, la conversión de los compuestos (IV) en los ácidos correspondientes de la fórmula (VI) permite la eliminación de los subproductos de la fórmula (V).
De manera sorprendente, se ha encontrado que usando disolventes apróticos dipolares tales como DMA (dimetilacetamida), DMF (dimetilformamida), DMSO (dimetilsulfóxido), NMP (N-metilpirrolidona), en lugar de un disolvente alcohólico, tal como isopropanol descrito por Osby, estos problemas pueden evitarse. Esta es una característica esencial de la presente invención. Los particularmente preferidos son la dimetilacetamida y N-metilpirrolidona.
Usando dichos disolventes, la concentración de los compuestos (III) pudo incrementarse hasta más del 10%, sin aumentar la cantidad de subproductos.
Más aún, bajo las condiciones de la presente invención, el exceso de NaBH_{4} pudo disminuirse, en comparación con la informada anteriormente.
En particular, los equivalentes molares de agente reductor pueden reducirse desde un fuerte exceso (aproximadamente 5) hasta valores substancialmente estequiométricos (1,2 - 0,85) con respecto al substrato, sin afectar negativamente los rendimientos de la reacción.
Un aspecto adicional de la presente invención es el uso, simultáneamente con los disolventes apróticos dipolares, de una solución tampón a pH 7,5 - 9, la cual permite controlar el pH durante la reacción. Esto permite inhibir la hidrólisis de funciones sensibles minimizándose la formación de subproductos (VI) - (VIII).
A continuación, los compuestos de la fórmula (IV) se transforman en los de la fórmula (I) mediante tratamiento en disolvente alcohólico o aprótico dipolar, opcionalmente mezclado con agua, y en presencia de un ácido mineral u orgánico (tal como ácido acético).
Particularmente preferido es el uso de HCl en solución metanólica. La posterior liberación de la base libre a partir de la sal se lleva a cabo mediante tratamiento de la solución en uno de los disolventes anteriormente citados con bases acuosas (tal como NaOH, Na_{2}CO_{3}, etc.).
Tal como se ha mencionado anteriormente, los compuestos de la fórmula (I) son útiles para la preparación de medicamentos para la disminución de los niveles plasmáticos de colesterol (Documentos EP-A-417.725 o EP-A-489.423) o de agentes de contraste para la diagnosis por resonancia magnética nuclear, tal como se describe en el Documento WO-A-95/32741.
Para esta última, la síntesis conocida comprende la transformación de los compuestos (II) en los compuestos (I) correspondientes, mediante la formación del compuesto intermedio de la azida en la posición 3\beta, de acuerdo con la reacción de Mitsunobu, tal como se representa en el Esquema 6 siguiente:
Esquema 6
9
Este esquema de síntesis es inadecuado para una mayor escala, al ser las azidas potencialmente peligrosas y el reactivo clave (difenilfosforil azida) extremadamente costoso.
La presente invención se refiere a un procedimiento para la preparación de agentes quelantes de la fórmula general (IX), capaces de la quelación de iones metálicos bi- y trivalentes paramagnéticos, seleccionados entre el grupo formado por Fe^{(2+)}, Fe^{(3+)}, Cu^{(2+)}, Cr^{(3+)}, Gd^{(3+)}, Eu^{(3+)}, Dy^{(3+)}, La^{(3+)}, Yb^{(3+)} o Mn^{(2+)},
10
en la que:
R_{1} y R_{2} tienen los significados definidos anteriormente;
R_{5} es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{5} no substituido o substituido con un grupo carboxílico;
X es el resto de un ligando poliaminocarboxílico y de derivados del mismo, seleccionado entre el grupo formado por: ácido etilenodiaminotetraacético (EDTA), ácido dietilenotriaminopentaacético (DPTA), ácido 1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1,4,7,10-tetraacético (DOTA), ácido 1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1,4,7-triacético (DO3A), ácido 10-(2-hidroxipropil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1,4,7-triacético (HPDO3A), ácido 4-carboxi-5,8,11-tris(carboxi-metil)-1-fenil-2-oxa-5,8,11-triazatridecan-13-óico (BOPTA);
L es un resto de la fórmula:
11
m es un número entero desde 1 hasta 10, en el que para valores superiores a 1, los valores de p y q pueden diferir en las unidades monómeras;
q es 0 ó 1;
p puede variar desde 0 hasta 10, no siendo p y q al mismo tiempo cero,
comprendiendo dicho procedimiento las etapas siguientes:
12
a) formación de los compuestos (III) partiendo de los compuestos (II) mediante reacción con ftalimida de acuerdo con el procedimiento de Mitsunobu, a temperaturas que varían desde 15ºC hasta 25ºC, en presencia de un azodicarboxilato seleccionado entre DEAD (dietilazodicarboxilato) o DIAD(diisopropilazodicarboxilato) en cantidades que varían desde 1,1 hasta 1,3 equivalentes molares, en un disolvente seleccionado entre el grupo formado por THF, dioxano, tolueno y DMF;
b) reducción de los compuestos (III) con NaBH_{4} para proporcionar los compuestos (IV) en el disolvente aprótico dipolar anteriormente mencionado;
c) hidrólisis ácida de los compuestos (IV), seguido de neutralización para proporcionar los compuestos (I);
d) condensación de los compuestos (I) con los restos reactivos de los ligandos poliaminocarboxílicos anteriormente definidos.
Particularmente preferido es el procedimiento para la preparación de los compuestos (IXa), los cuales son derivados del ácido cólico o desoxicólico, de acuerdo con el Esquema 7 siguiente:
Esquema 7
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13 
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en el que R_{3}, R_{4} y R_{5} tienen los significados anteriormente definidos.
Además, es particularmente preferido el procedimiento para la preparación de los compuestos (X), en el que en la fórmula (IXa) el resto X es DPTA substituido sobre la cadena en la posición central, R_{6} puede ser un átomo de hidrógeno o un grupo carboxílico y la cadena L, R_{4} y R_{5} tienen los significados anteriormente definidos:
14
Particularmente preferido es el procedimiento para la preparación de los compuestos (Xa):
15
en el que la cadena L, R_{4} y R_{5} tienen los significados anteriormente definidos.
Además, es particularmente preferido el procedimiento para la preparación del nuevo compuesto siguiente, de la fórmula general (Xa):
ácido [3\beta(S),5\beta,12\alpha]-3-[[4-[bis-[2-[bis-(carboximetil)-amino]etil]amino]-4-carboxi-1-oxobutil]amino]-12-hidroxicolan-24-óico:
16
Otros compuestos que pertenecen a esta clase, cuyas preparaciones han sido ya descritas en el Documento WO-A-95/32741, son los siguientes:
ácido [3\beta(S),5\beta,7\alpha,12\alpha]-3-[[4-[bis-[2-[bis-(carboximetil)-amino]etil]amino]-4-carboxi-1-oxobutil]amino]-7,12-
dihidroxicolan-24-óico:
17
ácido [3\beta(S),5\beta,7\alpha,12\alpha]-3-[[4-[[5-[bis-[2-[bis-(carboximetil)-amino]etil]amino]-5-carboxipentil]amino]-1,4-dioxobutil]-amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico:
18
Además, es preferido el procedimiento para la preparación de los compuestos siguientes de la fórmula (Xb), en el que en la fórmula (X) R_{6} es un átomo de hidrógeno y R_{4}, R_{5} y L tienen los significados anteriormente definidos:
19
Igualmente preferido es el procedimiento para la preparación del nuevo compuesto siguiente, que pertenece a la clase de la fórmula general (Xb):
ácido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3-[[[bis-[2-[bis-(carboximetil)-amino]etil]amino]acetil]amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico:
20
Otros compuestos que pertenecen a esta clase, ya descritos en el Documento WO-A-95/32741, son los siguientes:
ácido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3-[[[[bis-[2-[bis-(carboximetil)-amino]etil]amino]acetil]amino]acetil]amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico:
21
ácido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3-[[6-[[bis-[2-[bis-(carboximetil)-amino]etil]amino]acetil]amino]-1-oxohexil]amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico:
22
Particularmente preferido es igualmente el procedimiento para la preparación de los compuestos de la fórmula (XI), en el que en la fórmula (IXa) el resto X procede de DPTA y R_{4}, R_{5} y L tienen los significados anteriormente definidos:
23
Otros compuestos que pertenecen a esta clase, cuya preparación ha sido ya descrita en el Documento WO-A-95/32741, son los siguientes:
ácido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3-[[N-[N-[2-[[2-[bis-(carboximetil)-amino]etil]-(carboximetil)amino]etil]-N-(carboximetil)glicil]glicil]amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico:
24
ácido 18-[[(3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-23-carboxi-7,12-dihidroxi-24-nor-colan-3-il]amino]-3,6,9-tris-(carboximetil)-11,18-
dioxo-3,6,9,12-tetraazooctadecanóico:
25
Particularmente preferido es igualmente el procedimiento para la preparación de los compuestos siguientes de la fórmula (XII), en el que en la fórmula (IXa) el resto X es DOTA y R_{4}, R_{5} y L tienen los significados anteriormente definidos:
26
Además, es preferido el procedimiento para la preparación de los compuestos de la fórmula (XIII), en el que en la fórmula (IXa) el resto X es EDTA y R_{4}, R_{5} y L tienen los significados anteriormente definidos:
27
Particularmente preferido es el procedimiento para la preparación de los compuestos siguientes de la fórmula (XIII):
ácido [3\beta(S),5\beta,7\alpha,12\alpha]-3-[[4-[[5-[[2-[bis-(carboximetil)-amino]etil]-(carboximetil)amino]-5-carboxipentil]-amino]-1,4-dioxobutil]amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico:
28
ácido [3\beta(S),5\beta,12\alpha]-3-[[4-[[2-[[bis-(carboximetil)-amino]etil]-(carboximetil)amino]-4-carboxi-1-oxobutil]ami-
no]-12-hidroxicolan-24-óico:
29
ácido [3\beta(S),5\beta]-3-[[4-[[2-[[bis-(carboximetil)-amino]etil]-(carboximetil)amino]-4-carboxi-1-oxobutil]amino]-
12-oxocolan-24-óico:
30
Las condiciones experimentales usadas se ilustrarán con detalle en la Sección Experimental.
Sección experimental Ejemplo 1 Ester metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-3-[1,3-dihidro-1,3-dioxo-2H-isoindol-2-il)]-12-hidroxicolan-24-óico
31
Se suspendió ftalimida (202,8 g; 1,376 mol) en una solución de éster metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-3,12-dihidroxicolan-24-óico (preparado tal como se ha descrito en Steroids, vol. 37, pág. 239) (511,9; 1,259 mol) y trifenilfosfina (372,7 g; 1,421 mol) en THF (1,5 l) y, a continuación, se agregó gota a gota a ella una solución de diisopropilazodicarboxilato (284,7 g; 1,408 mol) en THF (0,49 l) a lo largo de 1,5 horas, manteniéndose la temperatura a 15ºC. La solución resultante se dejó a temperatura ambiente durante 18 horas. El disolvente se eliminó por destilación y al residuo aceitoso se agregó MeOH (3,2 l) y se agitó durante 20 horas. El producto cristalino resultante se filtró, se lavó con MeOH (1,4 l) y se secó, proporcionando el producto deseado (481,3 g; 0,898 mol). Los licores madre y los lavados se concentraron, proporcionando una segunda cosecha de producto (61,6 g; 0,114 mol).
Rendimiento: 80%.
P.fus.: 160-162ºC.
Ensayo mediante HPLC: 98,7%.
Fase estacionaria: Lichrosorb RP-Select B 5 \mum; columna de 250x4 mm Merck KGaA.
Temperatura: 45ºC.
Fase móvil: gradiente de elución:
A = H_{3}PO_{4} 0,017 M en agua
B = CH_{3}N.
Gradiente: minutos %A %B
0 82 18
30 15 85
45 15 85
Flujo: 1 ml min^{-1}.
Detección (UV): 210 nm.
Análisis elemental: C H N
% calc.: 73,99 8,47 2,61
% encon.: 73,96 8,51 2,62
TLC: placa de gel de sílice 60F 254 Merck.
Eluyente: AcOEt/n-hexano = 4:6, Rf: 0,35.
Detección: 2% Ce(SO_{4})\cdot4H_{2}O, 4,2% (NH_{4})_{6}Mo_{7}O_{24}, 6% H_{2}SO_{4} en agua.
Los espectros de ^{1}H-NMR, ^{13}C-NMR, IR y MS estuvieron de acuerdo con la estructura indicada.
Ejemplo 2
Reducción de compuestos de la fórmula (III) de acuerdo con un procedimiento similar al descrito por Osby, en Tetrahedron Letters, vol. 25, pág. 2093, (1984)
Ester metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-3-amino-12-hidroxicolan-24-óico
32
El compuesto preparado en el Ejemplo 1 (75 g; 0,14 mol) se disolvió en 2-PrOH (2,5 l) a 75ºC. La solución se agitó vigorosamente y se enfrió a 50ºC y, a continuación, se agregó H_{2}O (430 ml), obteniéndose una suspensión a la que se agregó NaHB_{4} sólido (26,5 g; 0,70 mol) en porciones durante 30 minutos. La mezcla de reacción se agitó a 45ºC durante 2,5 horas. Se agregó cuidadosamente CH_{3}COOH hasta pH 4,5-5 y la mezcla se calentó a 80ºC durante 24 horas, manteniéndose el pH a 4,5-5 mediante repetidas adiciones de CH_{3}COOH. Después de enfriamiento a temperatura ambiente y evaporación del disolvente, se obtuvo un residuo, el cual se disolvió en agua (1 l). La solución se alcalinizó hasta pH 10 con NaOH 2 M, obteniéndose un precipitado, el cual se agitó durante 1 hora y, a continuación, se filtró, se lavó con agua y se secó.
La cristalización a partir de acetonitrilo (1,2 l) proporcionó el producto deseado (36,9 g; 0,091 mol).
Rendimiento: 65%.
Ensayo mediante HPLC: 87%.
Fase estacionaria: Lichrosorb RP-Select B 5 \mum; columna de 250x4 mm Merck KGaA.
Temperatura: 45ºC.
Fase móvil: gradiente de elución:
A = pentanosulfonato sódico 0,01 M en agua tamponado a pH 2,5 con H_{2}SO_{4}.
B = CH_{3}N.
Gradiente: minutos %A %B
0 82 18
30 15 85
45 15 85
Flujo: 1 ml min^{-1}.
Detección (UV): 210 nm.
La cromatografía sobre gel de sílice del compuesto bruto proporcionó el subproducto principal (2,5 g), el cual era:
33 
\vskip1.000000\baselineskip
P.fus.: 174-175ºC.
Análisis elemental: C H N
% calc.: 76,34 11,48 3,71
% encon.: 76,18 11,65 3,52
Los espectros de ^{1}H-NMR, ^{13}C-NMR, IR y MS estuvieron de acuerdo con la estructura indicada.
En otra reacción llevada a cabo bajo las condiciones anteriormente descritas, al final de la reducción el exceso de NaHB_{4} se destruyó con ácido acético y la mezcla de reacción (a pH aproximadamente neutro) se evaporó y se recogió en agua, obteniéndose un producto bruto, el cual se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice. Conjuntamente con el compuesto esperado (IVb) (véase Ejemplo 3), se recuperaron cantidades importantes de los subproductos, reproducidos aquí más adelante conjuntamente con su caracterización analítica. Esto explica ampliamente el bajo rendimiento de recuperación del compuesto (Ib) después de hidrólisis con ácido acético a 80ºC:
N-[(3\beta,5\beta,12\alpha)-12,14-dihidroxicolan-3-il]-2-(hidroximetil)-benzamida
34 
\vskip1.000000\baselineskip
P.fus.: 200-203ºC.
Análisis elemental: C H N
% calc.: 75,11 9,65 2,74
% encon.: 74,66 9,61 2,71
Acido (3\beta,5\beta,12\alpha)-12-hidroxi-3-[[2-(hidroximetil)-benzoil]amino]-colan-24-óico
35
P.fus.: >260ºC.
Análisis elemental: C H N
% calc.: 73,11 9,01 2,66
% encon.: 73,32 9,15 2,76
N-[(3\beta,5\beta,12\alpha)-12-hidroxi-24-metoxi-24-oxocolan-3-il]-2-(hidroximetil)benzamida
36
El producto se caracterizó como sal de amonio.
P.fus.: 156-162ºC.
Análisis elemental: C H N
% calc.: 69,94 8,83 4,91
% encon.: 69,27 8,89 4,82
Acido (3\beta,5\beta,12\alpha)-12-hidroxi-3-[[2-carboxibenzoil]-amino]colan-24-óico
37
P.fus.: 193-196ºC.
Análisis elemental: C H N
% calc.: 71,48 8,06 2,60
% encon.: 71,18 8,25 2,55
Los espectros de ^{1}H-NMR, ^{13}C-NMR, IR y MS estuvieron de acuerdo con la estructura indicada.
Ejemplo 3 Ester metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-12-hidroxi-3-[[(2-hidroximetil)benzoil]amino]colan-24-óico
38
Una solución del compuesto preparado en el Ejemplo 1 (225 g; 0,42 mol) en DMA (1,75 l), agitada vigorosamente a 34ºC, se diluyó con tampón de fosfato 2 M a pH 8 (500 ml), obteniéndose una mezcla a 43ºC. Se agregó NaBH_{4} sólido (15,45 g; 0,408 mol) en 5 minutos y la suspensión se agitó a 47-48ºC. Después de 55 minutos se obtuvo una solución casi transparente, a la cual se agregó CH_{3}COOH para neutralizar el exceso de hidruro y ajustar el pH desde 12,8 hasta aproximadamente 8.
La mezcla se vertió en H_{2}O y se agitó durante 3 horas, el precipitado se filtró y se suspendió en H_{2}O y, a continuación, se agitó durante 30 minutos. Finalmente, el precipitado se filtró, se lavó con H_{2}O y se secó, proporcionando el producto deseado (224,6 g; 0,416 mol).
Rendimiento: 99%.
P.fus.: 190,2-192,7ºC.
Ensayo mediante HPLC: 93%.
Fase estacionaria: Lichrosorb RP-Select B 5 \mum; columna de 250x4 mm Merck KGaA.
Temperatura: 45ºC.
Fase móvil: gradiente de elución:
A = H_{3}PO_{4} 0,017 M en agua
B = CH_{3}N.
Gradiente: minutos %A %B
0 82 18
30 15 85
45 15 85
Flujo: 1 ml min^{-1}.
Detección (UV): 210 nm.
Análisis elemental: C H N
% calc.: 73,43 9,15 2,60
% encon.: 73,43 9,19 2,56
TLC: placa de gel de sílice 60F 254 Merck.
Eluyente: AcOEt/n-hexano/MeOH = 5:5:1, Rf: 0,79.
Detección: 2% Ce(SO_{4})\cdot4H_{2}O, 4,2% (NH_{4})_{6}Mo_{7}O_{24}, 6% H_{2}SO_{4} en agua.
Los espectros de ^{1}H-NMR, ^{13}C-NMR, IR y MS estuvieron de acuerdo con la estructura indicada.
Ejemplo 4 Clorhidrato del éster metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-3-amino-12-hidroxicolan-24-óico
39
Una suspensión del compuesto preparado en el Ejemplo 3 (223,5 g; 0,414 mol) en MeOH (1,5 l) y HCl al 37% (52 ml; 0,63 mol), se calentó a 50ºC bajo agitación. Después de aproximadamente 1,5 horas, se obtuvo una solución y, después de otras 2 horas, la reacción se completó. El disolvente se eliminó por evaporación y el residuo se agitó a 60ºC durante 2 horas con CH_{3}CN. Después de 15 horas a temperatura ambiente, el precipitado se filtró, se lavó con CH_{3}CN y se secó, proporcionando el producto deseado (183,3 g; 0,414 mol).
Rendimiento: 100%.
P.fus.: >250ºC.
Ensayo mediante HPLC: 95%.
Fase estacionaria: Lichrosorb RP-Select B 5 \mum; columna de 250x4 mm Merck KGaA.
Temperatura: 45ºC.
Fase móvil: gradiente de elución:
A = pentanosulfonato sódico 0,01 M en agua tamponada a pH 2,5 con H_{2}SO_{4}.
B = CH_{3}N.
Gradiente: minutos %A %B
0 82 18
30 15 85
45 15 85
Flujo: 1 ml min^{-1}.
Detección (UV): 210 nm.
Ejemplo 5 Ester metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-3-amino-12-hidroxicolan-24-óico 
\vskip1.000000\baselineskip
40
El compuesto preparado en el Ejemplo 4 (89,5 g; 0,202 mol) se disolvió en MeOH (460 ml) a 55ºC y, a continuación, la solución se enfrió hasta aproximadamente 40ºC y se vertió, bajo fuerte agitación, sobre H_{2}O mientras se agregaba Na_{2}CO_{3} sólido para mantener el pH en 9,8. Después de agitación durante 2 horas, la suspensión se filtró, el sólido se suspendió en H_{2}O y se agitó durante 2 horas, se filtró y se lavó con H_{2}O. Después de secado, se obtuvo el producto deseado (74,9 g; 0,185 mol).
Rendimiento: 91%.
P.fus.: 155-155,5ºC.
Ensayo mediante HPLC: 96,5%.
Fase estacionaria: Lichrosorb RP-Select B 5 \mum; columna de 250x4 mm Merck KGaA.
Temperatura: 45ºC.
Fase móvil: gradiente de elución:
A = pentanosulfonato sódico 0,01 M en agua tamponada a pH 2,5 con H_{2}SO_{4}.
B = CH_{3}N.
Gradiente: minutos %A %B
0 82 18
30 15 85
45 15 85
Flujo: 1 ml min^{-1}.
Detección (UV): 210 nm.
Ensayo mediante GC: 96,3%.
Fase estacionaria: PE 1 (OV 1).
Espesor de película: 0,25 \mum.
Columna (WCOT): 30 m x 0,32 mm.
Temperatura de partida en el horno: 225ºC; después de 5 minutos, la temperatura se incrementó en 0,6ºC/min hasta alcanzar 290ºC.
Temperatura del inyector: 290ºC.
Temperatura FID: 290ºC.
Análisis elemental: C H N
% calc.: 74,03 10,69 3,45
% encon.: 73,91 10,78 3,44
TLC: placa de gel de sílice 60F 254 Merck.
Eluyente: CHCl_{3}/MeOH/NH_{4}OH al 25% = 6:2:0,5, Rf: 0,69.
Detección: 2% Ce(SO_{4})\cdot4H_{2}O, 4,2% (NH_{4})_{6}Mo_{7}O_{24}, 6% H_{2}SO_{4} en agua.
Los espectros de ^{1}H-NMR, ^{13}C-NMR, IR y MS estuvieron de acuerdo con la estructura indicada.
Los compuestos de la fórmula (I), cuyas fórmulas y datos analíticos se reproducen aquí más adelante, se prepararon de manera análoga:
41
^{a}TLC: placa de gel de sílice 60F 254 Merck.
Eluyente: CHCl_{3}/MeOH/NH_{4}OH al 25% = 6:2:0,5.
Detección: 2% Ce(SO_{4})\cdot4H_{2}O, 4,2% (NH_{4})_{6}Mo_{7}O_{24}, 6% H_{2}SO_{4} en agua.
Los espectros de ^{1}H-NMR, ^{13}C-NMR, IR y MS, así como los análisis elementales, estuvieron de acuerdo con la estructura indicada.
Ejemplo 6 Acido [3\beta(S),5\beta,12\alpha]-3-[[4-[bis-[2-[bis-(carboximetil)amino]-etil]-amino]-4-carboxi-1-oxobutil]amino]-12-hidroxicolan-24-óico
42
A) Ester metílico del ácido [3\beta(S),5\beta,12\alpha]-3-[[4-[bis-[2-[bis-[2-(1,1-dimetiletoxi)-2-oxoetil]amino]-etil]-amino]-5-(1,1-dimetiletoxi)-1,5-dioxopentil]-amino]-12-hidroxicolan-24-óico
Se agregó trietilamina (2,23 g; 22 mol) a una solución de 8,93 g de éster metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-3-amino-12-hidroxicolan-24-óico (preparado en el Ejemplo 5) (22 mmol), 16,41 g de éster (1,1-dimetiletilo) del ácido N,N-bis-[2-[bis-[2-(1,1-dimetiletoxi)-2-oxoetil]amino]etil]-L-glutámico (preparado tal como se describe en el Documento WO-A-95/32741; Ejemplo 15) (22 mmol) y 3,91 g de cianofosfato de dietilo (24 mmol) en 300 ml de DMF a 0ºC. Después de 1,5 horas a 0ºC y 18 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se evaporó y el residuo se disolvió en AcOEt. La solución se lavó con una solución saturada de NaHCO_{3} y H_{2}O, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. El producto bruto se purificó mediante cromatografía rápida, proporcionando el producto deseado (20,67 g; 18,2 mmol).
Rendimiento: 83%.
[\alpha]^{20}_{D} = -6,75 (c 2,0, CHCl_{3}).
Análisis elemental: C H N
% calc.: 65,69 9,60 4,94
% encon.: 66,54 9,95 4,99
TLC: soporte: placa de gel de sílice 60F 254 Merck.
Eluyente: n-hexano/EtOAc = 1:1, Rf: 0,09.
Detección: 0,18% Ce(SO_{4})\cdot4H_{2}O, 3,83% (NH_{4})_{6}Mo_{7}O_{24}, en 10% de H_{2}SO_{4}.
Los espectros de ^{1}H-NMR, ^{13}C-NMR, IR y MS estuvieron de acuerdo con la estructura indicada.
B) Acido [3\beta(S),5\beta,12\alpha]-3-[[4-[bis-[2-[bis-(carboximetil)amino-etil-amino]-4-carboxi-1-oxobutil]-amino]-12-hidroxicolan-24-óico
El compuesto preparado en la Etapa A) (19,72 g; 17,4 mmol) se disolvió en 105 ml de CF_{3}CO_{2}H a temperatura ambiente. Después de 26 horas, la solución se evaporó y el residuo se trató con H_{2}O; el sólido se filtró, se lavó con H_{2}O y se secó parcialmente bajo vacío. El compuesto intermedio resultante se disolvió en H_{2}O a pH 13 con NaOH 1 M.
Después de 5 horas a temperatura ambiente, a la solución se agregó gota a gota HCl 0,5 M hasta pH 1,4. Después de 15 horas a temperatura ambiente, el precipitado se filtró, se lavó con H_{2}O y se secó bajo vacío, proporcionando un producto bruto, el cual se purificó mediante cromatografía sobre resina Ambarlite^{R} XAD 1600, obteniéndose el producto deseado (9,29 g; 11,8 mmol).
Rendimiento: 68%.
P.fus.: 184ºC (desc.).
Grado de acomplejamiento (GdCl_{3} 0,1 M): 99,3%.
Grado de acidez (NaOH 0,1 M): 99,8%.
[\alpha]^{20}_{D} = -6,75 (c 2,0, NaOH 0,1 M).
\lambda(nm): 589 578 546 436 405 365
[\alpha] : +23,61 +24,59 +27,90 +43,67 +55,61 +71,40
Análisis elemental: C H N
% calc.: 58,70 7,93 6,68
% encon.: 58,22 8,16 6,59
H_{2}O 0,70%.
TLC: placa de gel de sílice 60F 254 Merck.
Eluyente: CHCl_{3}/MeOH/NH_{4}OH = 5:4:2, Rf: 0,13.
Detección: 0,18% Ce(SO_{4})\cdot4H_{2}O, 3,83% (NH_{4})_{6}Mo_{7}O_{24}, en 10% de H_{2}SO_{4}.
Los espectros de ^{1}H-NMR, ^{13}C-NMR, IR y MS estuvieron de acuerdo con la estructura indicada.
Ejemplo 7 Acido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3-[[[bis-[2-[bis-(carboximetil)amino]-etil]-amino]acetil]amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico
43
A) N-[[bis-[2-[bis-[2-(1,1-dimetiletoxi-2-oxoetil]amino]-etil]-amino]-acetilglicina
Se suspendieron 6,5 g de glicilglicina (49,4 mmol) en 100 ml de una mezcla 1:1 de H_{2}O/EtOH y se disolvieron a pH 10 con NaOH 10 M (4,8 ml). Se agregó gota a gota a lo largo de 2 horas éster 1,1-dimetiletilo de N-(bromoetil)-N-[2-(1,1-dimetiletoxi)-2-oxoetil]glicina (42 g; 110,9 mmol) en 40 ml de EtOH, manteniéndose el pH en 10,5 con NaOH 10 M (5,8 ml). La solución cambió rápidamente a una emulsión, la cual se disolvió después de 2,5 horas mediante la adición de NaOH 10 M. Después de 22 horas, el disolvente se eliminó por evaporación, el residuo se diluyó con agua y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La fase orgánica se lavó con H_{2}O, se secó y se evaporó, proporcionando un residuo, el cual se purificó mediante cromatografía rápida. El residuo se disolvió en agua, el pH se ajustó a 4,5 mediante la adición de HCl 1 M y la solución se extrajo con cloroformo. La fase orgánica se lavó con H_{2}O, se secó y se evaporó, proporcionando 13 g del compuesto deseado (19,3 mmol).
Rendimiento: 39%.
Análisis elemental: C H N
% calc.: 56,95 8,66 8,30
% encon.: 56,67 8,68 8,30
TLC: placa de gel de sílice 60F 254 Merck.
Eluyente: CHCl_{3}/MeOH/NH_{4}OH al 25% = 6:3:1, Rf: 0,65.
Detección: KMnO_{4} en solución alcalina.
Los espectros de ^{1}H-NMR, ^{13}C-NMR, IR y MS estuvieron de acuerdo con la estructura indicada.
B) Ester metílico del ácido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3-[[[[[bis-[2-[bis-2-(1,1-dimetiletoxi)-2-oxoetil]amino]-etil]amino]acetil]-amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico
Se agregaron gota a gota 2,8 ml de TEA (20,2 mmol) a lo largo de 5 minutos a una solución de 13,6 g del compuesto preparado en la Etapa A) (20,2 mmol), 8,52 g de éster metílico del ácido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3-amino-7,12-dihidroxicolan-24-óico (preparado en el Ejemplo 5) (20,2 mmol) y DEPC (3,4 ml; 22,2 mmol) en DMF (290 ml) con agitación a 0ºC. Después de 1 hora, la reacción se calentó a temperatura ambiente y la solución se agitó durante 6,5 horas. Se agregaron 0,3 ml de DEPC (2 mmol) y la solución se agitó durante otras 15,5 horas más. La DMF se eliminó por evaporación, el residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con NaHCO_{3} acuoso y, a continuación, con agua y, finalmente, se secó. La purificación mediante cromatografía rápida proporcionó 13,7 g del producto deseado (12,7 mmol).
Rendimiento: 63%.
[\alpha]^{20}_{D} = +5,26 (c 1,5, CHCl_{3}).
Análisis elemental: C H N
% calc.: 63,48 9,25 6,49
% encon.: 63,22 9,40 6,40
Los espectros de ^{1}H-NMR, ^{13}C-NMR, IR y MS estuvieron de acuerdo con la estructura indicada.
C) Acido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3-[[[[[bis-[2-[bis-(carboximetil)amino]-etil]amino]acetil]-amino]acetil]amino]-7,12- dihidroxicolan-24-óico
Se disolvieron 12,5 g del compuesto preparado en la Etapa B) (12 mmol) en TFA (210 ml) con agitación a 0º/5ºC. Después de 16 horas, el TFA se eliminó por evaporación, proporcionando un residuo, el cual se disolvió en 90 ml de NaOH 0,8 M a pH 13 y se agitó a temperatura ambiente durante 15 horas. La solución se concentró hasta 50 ml, se vertió en forma de gotas en 105 ml de HCl 0,6 M y se agitó durante 2 horas. El sólido se filtró, se lavó con HCl 0,1 M y se secó, obteniéndose un producto bruto, el cual se purificó mediante cromatografía. Las fracciones que contenían el producto deseado en forma salina se evaporaron, proporcionando un residuo, el cual se disolvió en agua y se vertió en forma de gotas en HCl 1 M a pH 1,45. El precipitado se filtró, se lavó con HCl 0,1 M y se secó, proporcionando 2,6 g del producto deseado (3,1 mmol).
Rendimiento: 26%.
P.fus.: 120-125ºC.
Ensayo mediante HPLC: 98% (% de área).
Los espectros de ^{1}H-NMR, ^{13}C-NMR, IR y MS estuvieron de acuerdo con la estructura indicada.
Ejemplo 8 Preparación de agentes quelantes derivados del ácido cólico
Usando el éster metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-3-amino-12-hidroxicolan-24-óico preparado tal como se ha descrito en el Ejemplo 5, y siguiendo los procedimientos descritos en el Documento WO-A-95/32741, se prepararon los agentes quelantes siguientes:
ácido [3\beta(S),5\beta,7\alpha,12\alpha]-3-[[4-[bis-[2-[bis-(carboximetil)amino]-etil]-amino]-4-carboxi-1-oxobutil]amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico;
ácido [3\beta(S),5\beta,7\alpha,12\alpha]-3-[[4-[[5-[bis-[2-[bis-(carboximetil)amino]-etil]-amino]-5-carboxipentil]amino]-1,4-dioxobutil]amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico;
ácido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3-[[[[[bis-[2-[bis-(carboximetil)-amino]-etil]amino]acetil]amino]acetil]amino]-7,12-dihi-
droxicolan-24-óico;
ácido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3-[[6-[[[bis-[2-[bis-(carboximetil)-amino]-etil]-amino]acetil]amino]-1-oxohexil]amino]-
7,12-dihidroxicolan-24-óico;
ácido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-3-[[N-[N-[2-[[2-[bis-(carboximetil)-amino]-(carboximetil)amino]etil]-N-(carboximetil)-gicil]glicil]amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico;
ácido 18-[[(3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha)-23-carboxi-7,12-hidroxi-24-norcolan-3-il]amino]-3,6,9-tris-(carboximetil)-11,18-dioxo-3,6,9,12-tetraazooctadecanóico.

Claims (24)

1. Un procedimiento para la preparación de los compuestos de la fórmula general (I):
\vskip1.000000\baselineskip
44 
\vskip1.000000\baselineskip
en la que:
R_{1} es H o OH;
R_{2} es H, \alpha-OH, o \beta-OH; y
R_{3} es grupo alquilo de C_{1}-C_{4} recto o ramificado, o un grupo bencilo;
que comprende la reducción de los compuestos de la fórmula general (III):
\vskip1.000000\baselineskip
45 
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R_{1}, R_{2} y R_{3} tienen los mismos significados que en la fórmula (I), en la presencia de borohidruro sódico y en un disolvente aprótico dipolar seleccionado entre el grupo formado por dimetilacetamida, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, N-metilpirrolidona, para proporcionar los compuestos de la fórmula general (IV):
\vskip1.000000\baselineskip
46 
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R_{1}, R_{2} y R_{3} tienen los mismos significados que en la Reivindicación 1, y la posterior desprotección de los compuestos (IV) mediante tratamiento ácido.
2. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 1, para la preparación de los compuestos de la fórmula general (Ia):
47
en la que R_{3} tiene el mismo significado que en la Reivindicación 1 y R_{4} puede ser un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo.
3. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 2, para la preparación de los compuestos de la fórmula general (Ib):
48
en la que R_{3} tiene el mismo significado que en la Reivindicación 1.
4. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 3, para la preparación del compuesto de la fórmula (Ic):
49
5. Un procedimiento tal como se reivindica en una cualquiera de las Reivindicaciones 1-4, en el que la reducción con borohidruro sódico se lleva a cabo en un disolvente aprótico dipolar seleccionado entre dimetilacetamida y N-metilpirrolidona.
6. Un procedimiento de acuerdo con las Reivindicaciones 1 a 5, en el que los moles de NaBH_{4} varían desde 1,2 hasta 0,85.
7. Un procedimiento de acuerdo con las Reivindicaciones 1 a 6, en el que la reducción con borohidruro sódico se lleva a cabo en un disolvente aprótico dipolar y en la presencia de una solución tampón a pH 7,5-9.
8. Un procedimiento de acuerdo con las Reivindicaciones 1 a 7, en el que los compuestos de la fórmula (IV) se transforman en los de la fórmula (I) mediante tratamiento en un disolvente aprótico dipolar, opcionalmente mezclado con agua, y en la presencia de un ácido orgánico o mineral.
9. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 8, en el que el ácido mineral es HCl en solución metanólica.
10. Ester metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-3-[1,3-dihidro-1,3-dioxo-2H-isoindol-2-il)]-12-hidroxicolan-24-óico de la fórmula (IIIc):
50
11. Compuestos de la fórmula general (IV):
51
en la que:
R_{1} es H o OH;
R_{2} es H, \alpha-OH, o \beta-OH; y
R_{3} es grupo alquilo de C_{1}-C_{4} recto o ramificado, o un grupo bencilo.
12. Un compuesto tal como se reivindica en la Reivindicación 11, éster metílico del ácido (3\beta,5\beta,12\alpha)-12-hidroxi-3-[[(2-hidroximetil)benzoil]amino]colan-24-óico de la fórmula (IVc):
52
13. Un procedimiento tal como se reivindica en una cualquiera de las Reivindicaciones 1-9, para la preparación de los agentes quelantes de la fórmula (IX), capaces de la quelación de iones metálicos bi- y trivalentes paramagnéticos seleccionados entre el grupo formado por Fe^{(2+)}, Fe^{(3+)}, Cu^{(2+)}, Cr^{(3+)}, Gd^{(3+)}, Eu^{(3+)}, Dy^{(3+)}, La^{(3+)}, Yb^{(3+)} o Mn^{(2+)},
53 
\newpage
en la que:
R_{1} es H o OH;
R_{2} es H, \alpha-OH, o \beta-OH; y
R_{5} es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{5} no substituido o substituido con un grupo carboxílico;
X es el resto de un ligando poliaminocarboxílico y de derivados del mismo, seleccionado entre el grupo formado por: ácido etilenodiaminotetraacético, ácido dietilenotriamino-pentaacético, ácido 1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1,4,7,10-tetraacético, ácido 1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1,4,7-triacético, ácido 10-(2-hidroxipropil)-1,4,7,10-tetraaza-ciclododecano-1,4,7-triacético, ácido 4-carboxi-5,8,11-tris(carboxi-metil)-1-fenil-2-oxa-5,8,11-triazatride-
can-13-óico;
L es un resto de la fórmula:
54
m es un número entero desde 1 hasta 10, en el que para valores superiores a 1, los valores de p y q pueden diferir en las unidades monómeras;
q es 0 ó 1;
p puede variar desde 0 hasta 10, no siendo p y q al mismo tiempo cero,
comprendiendo dicho procedimiento las etapas siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Esquema pasa a página siguiente)
55 
\vskip1.000000\baselineskip
a) preparación de los compuestos de la fórmula (III) partiendo de los compuestos de la fórmula (II) mediante reacción con ftalimida de acuerdo con el procedimiento de Mitsunobu, a temperaturas que varían desde 15ºC hasta 25ºC, en la presencia de un azodicarboxilato seleccionado entre dietilazodicarboxilato o diisopropilazodicarboxilato en cantidades desde 1,1 hasta 1,3 equivalentes molares, en un disolvente seleccionado entre el grupo formado por THF, dioxano, tolueno y DMF;
b) reducción de los compuestos de la fórmula (III) con NaBH_{4} para proporcionar los compuestos de la fórmula (IV);
c) hidrólisis ácida de los compuestos de la fórmula (IV), seguido de neutralización para proporcionar los compuestos de la fórmula (I);
d) condensación de los compuestos de la fórmula (I) con restos reactivos de los ligandos poliaminocarboxílicos anteriormente definidos.
14. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 13, para la preparación de los compuestos de la fórmula (IXa):
56
en la que R_{4} tiene el mismo significado que en la Reivindicación 2 y R_{5}, X y L tienen los mismos significados que en la Reivindicación 13.
15. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 13, para la preparación de los compuestos de la fórmula (IXb):
57
en la que X, L y R_{5} tienen los mismos significados que en la Reivindicación 13.
16. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 13, para la preparación de los compuestos de la fórmula (X):
58
en la que R_{6} puede ser un átomo de hidrógeno o un grupo carboxílico, R_{4} tiene el mismo significado que en la Reivindicación 2 y L y R_{5} tienen los mismos significados que en la Reivindicación 13.
17. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 16, para la preparación de los compuestos de la fórmula (Xa):
59
en la que R_{4} tiene el mismo significado que en la Reivindicación 2 y L y R_{5} tienen los mismos significados que en la Reivindicación 13.
18. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 17, para la preparación de los compuestos siguientes:
ácido [3\beta(S),5\beta,12\alpha]-3-[[4-[bis-[2-[bis-(carboximetil)amino]-etil]-amino]-4-carboxi-1-oxobutil]amino]-12-hidroxicolan-24-óico;
ácido [3\beta(S),5\beta,7\alpha,12\alpha]-3-[[4-[bis-[2-[bis-(carboximetil)amino]-etil]-amino]-4-carboxi-1-oxobutil]amino]-7,12-dihidroxicolan-24-óico.
19. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 13, para la preparación de los compuestos de la fórmula (Xb):
60
en la que R_{4} tiene el mismo significado que en la Reivindicación 2 y R_{5} y L tienen los mismos significados que en la Reivindicación 13.
20. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 19, para la preparación del compuesto siguiente:
ácido (3\beta,5\beta,7\alpha,12\alpha]-3-[[[bis-[2-[bis-(carboximetil)-amino]-etil]-amino]acetil]amino]-7,12-dihidroxicolan-24-
óico.
21. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 13, para la preparación de los compuestos de la fórmula (XI):
61
en la que R_{4} tiene el mismo significado que en la Reivindicación 2 y R_{5} y L tienen los mismos significados que en la Reivindicación 13.
22. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 13, para la preparación de los compuestos de la fórmula (XII):
62
en la que R_{4} tiene el mismo significado que en la Reivindicación 2 y R_{5} y L tienen los mismos significados que en la Reivindicación 13.
23. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 13, para la preparación de los compuestos de la fórmula (XIII):
63
en la que R_{4} tiene el mismo significado que en la Reivindicación 2 y R_{5} y L tienen los mismos significados que en la Reivindicación 13.
24. Un procedimiento tal como se reivindica en la Reivindicación 13, para la preparación de los compuestos siguientes:
ácido [3\beta(S),5\beta,12\alpha]-3-[[4-[[2-[[bis-(carboximetil)-amino]-etil]-(carboximetil)amino]-4-carboxi-1-oxobutil]amino]-12-hidroxicolan-24-óico;
ácido [3\beta(S),5\beta]-3-[[4-[[2-[[bis-(carboximetil)amino]-etil]-(carboximetil)amino]-4-carboxi-1-oxobutil]amino]-12-hidroxicolan-24-óico.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW319763B (es) 1995-02-01 1997-11-11 Epix Medical Inc
WO2005113008A1 (en) * 2004-05-21 2005-12-01 Mediplex Corp. Delivery agents for enhancing mucosal absorption of therapeutic agents
ES2296463B1 (es) * 2005-07-13 2009-02-16 Universidade De Santiago Compostela Nuevos amidoderivados de acidos billares funcionalizados en la posicion 3 del anillo a. procedimientos para su obtencion y aplicaciones.
KR101139553B1 (ko) * 2009-06-10 2012-04-30 한양대학교 산학협력단 유기 겔과 무기 겔에 의한 나노 복합체의 조성물 및 그의 박막 코팅과 필름 제조방법
CN102153610B (zh) * 2011-02-28 2012-12-12 中国药科大学 一氧化氮供体型胆汁酸衍生物、其制备方法及医药用途
CN102766188B (zh) * 2012-07-24 2016-01-13 上海交通大学 胆固醇衍生物、螯合物、重组高密度脂蛋白及其用途
US20170299379A1 (en) * 2016-04-15 2017-10-19 Lockheed Martin Corporation Precision Hand-Held Scanner
MA52762A (fr) * 2018-05-30 2021-04-14 Translate Bio Inc Lipides cationiques comprenant une fraction stéroïdienne
CN114904557B (zh) * 2022-06-13 2024-03-19 南华大学 一种胆酸钠衍生多孔Fe-N-C催化剂及其制备方法和应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0614908B1 (de) * 1993-03-09 1997-05-07 Hoechst Aktiengesellschaft Verfahren zur Herstellung von 3beta-Aminocholansäurederivaten
IT1269839B (it) * 1994-05-26 1997-04-15 Bracco Spa Coniugati di acidi biliari, loro derivati con complessi metallici e relativi usi

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