ES2242226T3 - Composiciones que contienen analogos del lipido a y procedimiento parasu preparacion. - Google Patents

Composiciones que contienen analogos del lipido a y procedimiento parasu preparacion.

Info

Publication number
ES2242226T3
ES2242226T3 ES97929518T ES97929518T ES2242226T3 ES 2242226 T3 ES2242226 T3 ES 2242226T3 ES 97929518 T ES97929518 T ES 97929518T ES 97929518 T ES97929518 T ES 97929518T ES 2242226 T3 ES2242226 T3 ES 2242226T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
lipid
preparation
solution
aqueous solution
analog
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES97929518T
Other languages
English (en)
Inventor
Yasuyuki Asai
Katsumi Onai
Kazuhide Ashizawa
Kiyoshi Iwamoto
Yasuo Ishibashi
Sumio Watanabe
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Eisai Co Ltd
Original Assignee
Eisai Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Eisai Co Ltd filed Critical Eisai Co Ltd
Application granted granted Critical
Publication of ES2242226T3 publication Critical patent/ES2242226T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7024—Esters of saccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7032—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a polyol, i.e. compounds having two or more free or esterified hydroxy groups, including the hydroxy group involved in the glycosidic linkage, e.g. monoglucosyldiacylglycerides, lactobionic acid, gangliosides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

LA PRESENTE INVENCION PROPORCIONA UNA PREPARACION PARA INYECCION QUE CONTIENE UN ANALOGO DEL LIPIDO A Y UN PROCESO PARA SU PREPARACION, UN PREPARADO PARA INYECCION PREPARADA POR DISOLUCION DE UN ANALOGO DEL LIPIDO A O UNA SAL FARMACEUTICAMENTE ACEPTABLE DEL MISMO, EN SOLUCION ACUOSA ALCALINA, A TEMPERATURA ELEVADA SI ES NECESARIO, Y LA ADICION POSTERIOR DE UN TAMPON A LA MISMA, Y UN PROCESO PARA SU PREPARACION.

Description

Composiciones que contienen análogos del lípido A y procedimiento para su preparación.
Antecedentes de la invención Campo de la invención
La presente invención se refiere a una preparación para inyección que contiene un análogo del lípido A o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un procedimiento para preparar el mismo.
Estado de la técnica
El lípido A, que es la parte principal que produce las actividades del lipopolisacárido (a partir de ahora llamado LPS), tiene diversas actividades biológicas tales como estimulación de macrófagos, efecto antitumor y pirogenicidad (por ejemplo, Haruhiko Takada y Shoso Kotani, Protein, Nucleic Acid and Enzyme, 31(4), 361(1986)).
Recientemente, varios análogos del lípido A se han sintetizado y analizado por sus actividades biológicas (Yuji Ogawa et al., Metabolism 26(5), 415(1989)). Los análogos del lípido A originalmente tienen la estructura de glicolípido. De ese modo, la mayoría de análogos del lípido A son insolubles o escasamente solubles en agua, de tal manera que es difícil preparar una inyección con análogos del lípido A. Por lo tanto, se han llevado a cabo varias investigaciones con el fin de obtener una solución acuosa altamente transparente de los mismos. Como resultado, se ha propuesto, por ejemplo, añadir trietilamina, suero de albúmina bovina, lípidos, o similares como agente solubilizante (Y.B. Kim, et al, Eur. J. Biochem. 31, 230(1972) y R. B. Ramsey, et al, Blood, 56, 307 (1980), J. Dijkstra, et al, J. Immunol., 138, 2663 (1987)).
Además, el documento de patente JP-A-4-198192 divulga un método que emplea aminoácidos básicos o poliaminas como agente solubilizante. Sin embargo, todos los pH de las soluciones acuosas en el método son tan altos como aproximadamente pH 10.
Por otra parte, como método de dispersión de un lípido tal como lecitina o similar en agua para formar agregados de liposomas o similares, se conoce un método para añadir un lípido a un tampón que tiene un pH aproximadamente neutro, seguido por calentamiento y sonicación.
El método de solubilización de análogos del lípido A usando agentes solubilizantes no es satisfactorio en vista de la estabilidad física en agua, la estabilidad química, los efectos farmacológicos y la seguridad, y hasta ahora no se ha llevado a cabo sobre una base practica. Además, una solución transparente de un análogo del lípido A no se podía obtener, así mismo, por el método de dispersión de un lípido en un tampón que tiene un pH de aproximadamente la neutralidad seguido por sonicación. Por lo tanto, se ha buscado con empeño una inyección práctica que contiene un análogo del lípido A, esto es, una inyección que exhibe una alta transparencia en forma de solución acuosa, tiene un intervalo de pH con valores adecuados para inyección y tiene una excelente estabilidad.
Descripción de la invención
Con el fin de superar la situación descrita anteriormente, los inventores de la presente invención han investigado intensamente para encontrar una preparación altamente estable y transparente para inyección que contiene un análogo del lípido A y un procedimiento para la preparación de la misma. Como resultado, los presentes inventores descubrieron que los objetivos deseados se podían alcanzar mediante las presentaciones siguientes. La presente invención se ha logrado sobre la base de este descubrimiento.
La presente invención proporciona una preparación para inyección que contiene agregados que tienen un diámetro de partícula medio de 30 nm o menos, preparados mediante disolución de un análogo del lípido A en una solución acuosa alcalina y añadiendo subsiguientemente tampón a eso, y un procedimiento de preparación de la misma.
Según la presente invención, es posible preparar una preparación estable y transparente para inyección con un análogo del lípido A (a partir de ahora llamada simplemente análogo del lípido A). Esto es, por lo tanto, un objeto de la presente invención.
Ejemplos preferidos del análogo del lípido A para usar en la presente invención incluyen 2-desoxi-6-O-[2-desoxi-3-O-[(R)-3-(Z)-dodeca-5-enoiloxidecil)]-6-O-metil-2-[3-oxo-tetradecanoilamino]-4-O-fosfonato-\beta-D-glucopiranosil]-3-O-[(R)-3-hidrosidecil]-2-(3-oxotetradecanoilamino)-\alpha-D-glucopiranosilfosfato; \alpha-D-glucopiranosa, 3-O-decil-2-desoxi -6-O-[2-desoxi-3-O-(3-metoxidecil)-6-O-metil-2-[(1-oxo-11-octadecenil)amino]-4-O-fosfono-\beta-D-glucopiranosil]-2-[(1, 3-dioxotetradecil)amino]-, 1-(dihidrogenfosfato), disodio [6(2Z, 3R)]; y \alpha-D-glucopiranosa, 3-O-decil-2-desoxi-6-O-[2-desoxi-3-O-(3-metoxidecil)-6-O-metil-2-[(1-oxo-11-octadecenil)amino]-4-O-fosfono-\beta-D-glucopiranosil]-2-[(1,3-dioxotetradecil)amino]-, 1-(dihidrogenfosfato), tetrasodio [6(2Z, 3R)]. Estos compuestos están representados por las siguientes fórmulas de estructura química (III) y (IV).
1 
\vskip1.000000\baselineskip
2
La solución acuosa alcalina para usar en la presente invención es una solución acuosa de hidróxido sódico o de hidróxido potásico. La concentración de la solución acuosa generalmente va de 0,0001 M a 0,1 M, preferiblemente de 0,0005 M a 0,01 M, y más preferiblemente de 0,001 M a 0,005 M.
En la presente invención, después de añadir una solución acuosa alcalina a un análogo del lípido A, la temperatura de la mezcla puede ser elevada. La temperatura elevada debe ser más alta que la temperatura de transición de fase del análogo del lípido A, pero no tiene más limitaciones. La temperatura elevada generalmente va de 30ºC a 60ºC, preferiblemente de 45ºC a 55ºC. El tiempo de agitación mientras que la temperatura se eleva varía generalmente de 10 minutos a 3 horas. La agitación se puede llevar a cabo con un aparato convencional. El tiempo de agitación necesario para obtener una solución transparente (que tenga una turbidez de 0,6 NTU o inferior) varía dependiendo de los análogos del lípido A usados. Para los compuestos representados por la fórmula (III) citada anteriormente, el tiempo de agitación generalmente requiere 90 minutos o más a una temperatura elevada de 40ºC o inferior, o puede estar dentro de los 60 minutos a una temperatura elevada de 40ºC o superior. Cuando un análogo del lípido A se disuelve en una solución acuosa alcalina calentada, el análogo del lípido A se puede añadir a una solución acuosa alcalina que se calienta con antelación. Alternativamente, se puede calentar la muestra después de añadir un análogo del lípido A a la solución acuosa alcalina. En la presente invención, el propósito de elevar la temperatura es acelerar la hidratación de los análogos del lípido A para mejorar la dispersibilidad por elevación de la temperatura hasta la temperatura de transición de fase de los análogos del lípido A o superior, para obtener, de ese modo, una solución transparente agitando durante un periodo de tiempo reducido.
Ejemplos del componente del tampón para usar en la presente invención incluyen fosfatos, Tris (hidroximetil)aminometano, citratos y glicina. La concentración del tampón generalmente varía de 1 mM a 20 mM. El valor del pH final de la solución acuosa del análogo del lípido A es 4 a 9, preferiblemente 6 a 8, más preferiblemente 6,8 a 7,8. El valor del pH final se puede ajustar añadiendo una solución de hidróxido sódico o ácido clorhídrico, después de la adición del tampón.
Si es necesario, la adición de sacáridos y/o de aminoácidos al tampón puede dar un resultado más preferible. En este caso, los sacáridos y/o aminoácidos a añadir pueden ser uno cualquiera de los dos, o dos o más clases de los mismos. Ejemplos del sacárido incluyen el azúcar de la leche (lactosa), el sorbitol, la glucosa, la trehalosa, el manitol y el dextrano. Ejemplos del aminoácido incluyen aminoácidos neutros tales como la glicina, aminoácidos ácidos tales como el ácido aspártico, y aminoácidos básicos tales como la arginina.
En la presente invención, la solución acuosa de análogo del lípido A resultante se puede liofilizar mediante un método convencional para obtener una preparación liofilizada. A saber, el lípido A o un análogo del mismo se disuelve en una solución acuosa alcalina, además se agita a temperatura elevada si es necesario, seguido de la adición de un tampón para ajustar el pH de la mezcla. Después de una filtración esterilizante la mezcla se rellena en un vial o similar, seguido por congelación y secado para dar una preparación liofilizada.
Cuando una preparación para inyección según la presente invención se va a administrar en forma de solución acuosa, el rango de presión osmótica de la preparación se ajusta preferiblemente a un valor adecuado para la administración en humanos, generalmente alrededor de 1.
En la preparación para inyección según la presente invención, las moléculas del análogo del lípido A se agregan para formar partículas que son casi esféricas y tienen un diámetro de partícula medio de aproximadamente 30 nm o más pequeño. Los agregados no cambian de tamaño entre inmediatamente después de la producción de la preparación para inyección, y después de la reconstitución de una preparación liofilizada. En términos generales, la liofilización a menudo destruye los agregados. Sin embargo, en la presente invención, el diámetro de partícula de los agregados sigue siendo aún 30 nm o más pequeño incluso después de la reconstitución. Este es uno de los efectos prominentes de la presente invención. Según un estudio detallado, los agregados en la presente invención, en el caso del compuesto representado por la fórmula (III) mencionada anteriormente, tiene una fase acuosa interna de aproximadamente 0,196 litro por mol (a pH 11,0). La agitación continua durante la preparación produce agregados que tienen un diámetro casi constante de aproximadamente 15 nm. Por lo tanto, el diámetro de partícula de los agregados en la presente invención varia de aproximadamente 15 nm a 30 nm, en el caso del procedimiento general de pro-
ducción.
Los agregados del análogo del lípido A en la presente invención apenas están influenciados por la coexistencia del ión magnesio o el ión calcio en el diámetro de partícula, la turbidez y similares. Por otro lado, el ión magnesio o el ión calcio influyen en los agregados en la fluidez de la membrana. De ese modo, la fluidez de los agregados baja si estos iones metálicos están presentes. La fluidez de la membrana afecta a la farmacocinética después de la administración de análogos del lípido A. La disminución de la fluidez de la membrana acelera la pérdida de análogos del lípido A de la materia viva.
Ejemplos
La presente invención se explica a continuación con más detalle con relación a los siguientes ejemplos.
Ejemplo 1
Se añadió 60 mg del análogo del lípido A representado por la formula (III) mencionada anteriormente a 90 ml de una solución 0,003 M de hidróxido sódico a 45ºC y se disolvió en su seno, y se agitó durante 30 minutos a la misma temperatura. De esta mezcla se sacó una cantidad de 5 ml, y se evaluó la turbidez de la misma con un turbidímetro. La turbidez de la solución fue 0,178 NTU (unidad nefelométrica de turbidez). A 7,5 ml de esta solución acuosa alcalina se le añadió 30 ml de un tampón fosfato 7,08 mM que contenía 16,7% de lactosa. Luego, el pH de la solución se ajustó a pH 7,39 con una solución de hidróxido sódico, seguido de la adición de agua destilada para inyección para hacer el volumen total de la solución resultante 50 ml. La turbidez de esta solución acuosa fue 0,181 NTU. Se colocaron 5,3 ml de esta solución acuosa en un vial, y se liofilizaron con un aparato de congelación y secado a vacío (Triomaster A04, Kyowa Manufacturing Co., Ltd.).
Ejemplo 2
Se añadió 60 mg del análogo del lípido A usado en el ejemplo 1 a 90 ml de una solución 0,003 M de hidróxido sódico a 55ºC, y se disolvió en su seno, y se agitó durante 60 minutos a la misma temperatura. De esta solución acuosa alcalina se sacaron 5 ml, y la turbidez de la misma se evaluó con un turbidímetro. La turbidez de la solución fue 0,133 NTU. A 7,5 ml de esta solución acuosa alcalina, se le añadió 30 ml de un tampón fosfato 7,08 mM que contenía 16,5% de lactosa. Luego, el pH de la solución se ajustó a pH 7,41 con una solución acuosa al 3% de hidróxido sódico, seguido por la adición de agua destilada para inyección para hacer el volumen total de la solución resultante 50 ml. La turbidez de esta solución acuosa fue 0,212 NTU.
Ejemplo 3
Se añadió 60 mg del análogo del lípido A usado en el ejemplo 1 a 90 ml de una solución 0,001 M de hidróxido sódico a 50ºC y se disolvió en su seno, y se agitó durante 60 minutos a la misma temperatura. De esta solución acuosa alcalina se sacaron 5 ml, y la turbidez de la misma se evaluó con un turbidímetro. La turbidez de la solución fue 0,142 NTU. A 7,5 ml de esta solución acuosa alcalina, se le añadió 30 ml de tampón Tris (hidroximetil)aminometano 7,08 mM que contenía un 8,35% de manitol. Luego se ajustó el pH de la solución a pH 7,39 con ácido clorhídrico 1 N, seguido por la adición de agua destilada para inyección para hacer el volumen total de la solución resultante 50 ml. La turbidez de esta solución acuosa fue 0,133 NTU.
Ejemplo 4
Se añadió 60 mg del análogo del lípido A usado en el ejemplo 1 a 90 ml de una solución 0,005 M de hidróxido sódico a 50ºC, y se disolvió en su seno y se agitó durante 60 minutos a la misma temperatura. De esta solución acuosa alcalina se sacaron 5 ml, y la turbidez de la misma se evaluó con un turbidímetro. La turbidez de la solución fue 0,150 NTU. A 7,5 ml de esta solución acuosa alcalina, se le añadió 30 ml de un tampón fosfato 7,08 mM que contenía un 16,5% de lactosa. Luego se ajustó el pH de la solución a pH 7,37 con una solución acuosa de hidróxido sódico al 0,3%, seguido por la adición de agua destilada para inyección para hacer el volumen total de la solución resultante 50 ml. La turbidez de esta solución acuosa fue 0,205 NTU.
Ejemplo 5
Se añadió 60 mg del análogo del lípido A usado en el ejemplo 1 a 90 ml de una solución 0,003 M de hidróxido sódico a 35ºC y se disolvió en su seno, y se agitó durante 150 minutos a la misma temperatura. De esta solución acuosa alcalina se sacaron 5 ml, y la turbidez de la misma se evaluó con un turbidímetro. La turbidez de la solución fue 0,669 NTU. A 7,5 ml de esta solución acuosa alcalina se le añadió 30 ml de un tampón fosfato 7,08 mM que contenía un 8,35% de dextrano 70 (peso molecular medio de 70.000). Luego se ajustó el pH de la solución a pH 7,30 con una solución acuosa de hidróxido sódico al 0,3%, seguido por la adición de agua destilada para inyección para hacer el volumen total 50 ml. La turbidez de esta solución acuosa fue 1,25 NTU.
Ejemplo 6
Se añadió 6,09 mg del análogo del lípido A representado por la fórmula (IV) anteriormente mencionada a 9,0 ml de una solución 0,01 M de hidróxido sódico, y se agitó durante 60 minutos. Esta solución tenía un pH de 12,08. Se añadió a esta solución 30 ml de un tampón fosfato que contenía lactosa. La solución resultante tenía un pH de 7,46. Se añadió a esta solución agua destilada para inyección para hacer el volumen total de la solución resultante 60 ml. Esta solución era una solución de inyección de pH 7,50 que contenía el análogo del lípido A en una concentración de 0,1 mg/ml, lactosa al 10%, y tampón fosfato 4,25 mM.
Ejemplo 7
Después de que la solución de inyección obtenida en el ejemplo 6 se sometiera a filtración esterilizante, la solución de inyección se vertió en viales en una cantidad de 3 ml, respectivamente, y se liofilizó para dar preparaciones liofilizadas que contenían análogo del lípido A. Las condiciones de liofilización fueron como sigue (aparato de liofilización: EDWARD Model Lyo fast S08):
Temperatura de congelación: -40ºC; temperatura de secado primaria: 20ºC; presión de secado primaria 0,075\pm0,025 mbar; temperatura de secado secundaria: 27ºC; presión de secado secundaria: (la máxima capacidad del aparato); tiempo de secado secundario: 18 horas.
Ejemplo 8
Se añadió 40,16 mg del análogo del lípido A usado en el ejemplo 6 a 9,0 ml de una solución 0,003 M de hidróxido sódico, y se agitó durante 60 minutos. Esta solución tenía un pH de 11,49. Se añadió a esta solución, 10 ml de un tampón fosfato que contenía lactosa. La solución resultante tenía un pH de 8,44. Luego, el pH de la solución se ajustó pH 7,4 con ácido fosfórico al 4%, seguido por la adición de agua destilada para inyección para hacer el volumen total de la solución resultante 20 ml. Esta solución era una solución de inyección de pH 7,51 que contenía el análogo del lípido A a una concentración de 2,0 mg/ml, 10% de lactosa, y tampón fosfato 4,25 mM.
Ejemplo 9
Después de que la solución de inyección obtenida en el ejemplo 8 se sometiera a filtración esterilizante, la solución de inyección se echó en viales en una cantidad de 3 ml, respectivamente, y se liofilizó para dar preparaciones liofilizadas que contenían un análogo del lípido A. Las condiciones de liofilización fueron como sigue (aparato de liofilización: EDWARD Model Lyo fast S08):
Temperatura de liofilización: -40ºC; temperatura de secado primaria: 20ºC; presión de secado primaria 0,075\pm0,025 mbar; temperatura de secado secundaria: 27ºC; presión de secado secundaria: (la máxima capacidad del aparato); tiempo de secado secundario: 18 horas.
A continuación se dan ejemplos experimentales para demostrar los efectos según la presente invención.
Ejemplo experimental 1
Evaluación de transparencia de una preparación según la presente invención 1. Métodos Experimentales
Se examinaron por turbidez las soluciones acuosas de un análogo del lípido A preparadas en el siguiente ejemplo comparativo y en el presente método 1. La medición se llevó a cabo con un turbidímetro Hach 2100AN.
Ejemplo comparativo
Se añadió 60 mg del análogo del lípido A usado en el ejemplo 1 a un tampón fosfato 4,25 mM a 50ºC que contenía 10% de lactosa y se disolvió en su seno, y se agitó a la misma temperatura. Se recogió una muestra de 12,5 ml después de 30 minutos, 60 minutos, 120 minutos, y 180 minutos de agitación, respectivamente. Las muestras se examinaron por turbidez usando 5 ml de las muestras respectivas. Además, se añadió un tampón fosfato 4,25 mM que contenía 10% de lactosa a 7,5 ml de cada solución de muestra para hacer el volumen total de la solución resultante 50 ml. Las soluciones resultantes se examinaron por turbidez y pH.
Presente método 1
Se añadió 60 mg del análogo del lípido A usado en el ejemplo 1 a 90 ml de una solución acuosa 0,003 M de hidróxido sódico a 50ºC y se disolvió en su seno, y se agitó a la misma temperatura. Se recogió una muestra de 12,5 ml de solución acuosa alcalina después de 30 minutos, 60 minutos, 120 minutos, y 180 minutos de agitación, respectivamente. Las muestras se examinaron por turbidez con un turbidímetro usando 5 ml de las respectivas muestras. Además, a 7,5 ml de cada muestra de la solución acuosa alcalina se añadió 30 ml de un tampón fosfato 7,08 mM que contenía 16,5% de lactosa. Luego, el pH de las respectivas soluciones se ajustó a aproximadamente 7,4 con una solución acuosa de hidróxido sódico al 3%. Después de eso se le añadió agua destilada para inyección, para hacer el volumen total de la solución resultante 50 ml. Las soluciones resultantes se examinaron por turbidez y pH.
2. Resultados experimentales
Los resultados obtenidos mediante los métodos experimentales descritos anteriormente se muestran en la Tabla 1.
TABLA 1
Tiempo de Turbidez (NTU) Turbidez (NTU) Después PH Después de la
agitación Solución de un tampón de adición de un
alcalina la adición tampón
Ejemplo 30 min 39,9 14,4 7,38
comparativo 60 min 45,7 15,0 7,36
120 min 44,6 13,5 7,36
180 min 47,5 13,4 7,37
Presente 30 min 0,163 0,188 7,40
método 1 60 min 0,154 0,194 7,37
120 min 0,151 0,204 7,36
180 min 0,152 0,181 7,39
Los resultados mostrados en la Tabla 1 demuestran claramente que la solución acuosa del análogo del lípido A obtenido en el presente método 1 según la presente invención exhibe una excelente transparencia, superior a la de la solución acuosa del análogo del lípido A preparado en el ejemplo comparativo, el cual es un método convencional representativo.
Ejemplo Experimental 2
Evaluación de la propiedad de reconstitución de una preparación liofilizada de un análogo del lípido A 1. Métodos Experimentales
Presente Método 2
Se añadió 60 mg del análogo del lípido A usado en el ejemplo 1 a 90 ml de una solución acuosa 0,003 M de hidróxido sódico a 50ºC y se disolvió en su seno, y se agitó a la misma temperatura. Se recogió una muestra de 12,5 ml de solución acuosa alcalina después de 30 minutos, 60 minutos, 120 minutos, y 180 minutos de agitación, respectivamente. Las muestras se examinaron por turbidez con un turbidímetro usando 5 ml de las muestras respectivas. Además, a 7,5 ml de cada muestra de la solución acuosa alcalina se le añadió 30 ml de un tampón fosfato 7,08 mM que contenía un 16,5% de lactosa. Luego, el pH de las respectivas soluciones se ajustó a aproximadamente pH 7,4 con una solución acuosa de hidróxido sódico al 0,3%. Después de eso, se les añadió agua destilada para inyección para hacer el volumen total de la solución resultante 50 ml. Se colocó en un vial 5,3 ml de esta solución acuosa, y se liofilizó usando un aparato de congelación-secado a vacío (Kyowa Manufacturing Co., Ltd., Triomaster A-04). Además, a la preparación liofilizada resultante se le añadió 5 ml de agua destilada para inyección para disolver de nuevo la preparación ahí. La solución resultante se examinó por turbidez usando un turbidímetro Hach 2100AN.
Presente Método 3
Se añadió 200 mg del análogo del lípido A usado en el ejemplo 1 a 100 ml de una solución acuosa 0,003 M de hidróxido sódico a 50ºC y se disolvió en su seno, y se agitó a la misma temperatura. Una muestra de 7,5 ml de la solución acuosa alcalina se recogió después de 30 minutos, 60 minutos, 120 minutos, y 180 minutos de agitación respectivamente. Las muestras se examinaron por turbidez con un turbidímetro usando 5 ml de las respectivas muestras. Además, a 2,5 ml de cada muestra de la solución acuosa alcalina se le añadió 30 ml de un tampón fosfato 7,08 mM que contenía 16,5% de lactosa. Luego, el pH de las respectivas soluciones se ajustó a aproximadamente pH 7,4 con una solución de hidróxido sódico al 0,3%. Después, se le añadió agua destilada para inyección, para hacer el volumen total de la solución resultante 50 ml. Se depositó en un vial 5,3 ml de esta solución acuosa, y se liofilizó usando un aparato de congelación-secado a vacío (Kyowa Manufacturing Co., Ltd., Triomaster A-04). Además, se añadió 5 ml de agua destilada para inyección a la preparación liofilizada resultante para disolver de nuevo la preparación ahí. La solución resultante se examinó por turbidez. La medición de la turbidez se llevó a cabo usando un turbidímetro Hach 2100AN.
Los resultados se muestran en la Tabla 2.
TABLA 2
Tiempo de Turbidez (NTU) Solución Turbidez (NTU) Solución
agitación acuosa antes de la rehidratada después de
liofilización la liofilización
Presente 30 min 0,183 0,217
Método 2 60 min 0,182 0,211
120 min 0,141 0,206
180 min 0,157 0,193
Presente 30 min 0,149 0,219
Método 3 60 min 0,167 0,190
120 min 0,172 0,178
180 min 0,152 0,200
Los resultados mostrados en la Tabla 2 demuestran claramente que las preparaciones liofilizadas según la presente invención exhiben una excelente transparencia incluso cuando se disuelven de nuevo en agua.

Claims (11)

1. Una preparación para inyección preparada disolviendo un análogo del lípido A en una solución acuosa alcalina de hidróxido sódico o hidróxido potásico y subsiguientemente añadiéndole un tampón, caracterizada porque
el valor del pH final de la solución es de 4 a 9,
el diámetro medio de partícula de los agregados formados por el análogo del lípido A es 30 nm o menor, y
el análogo del lípido A es un compuesto representado por la siguiente fórmula (III) o (IV):
\vskip1.000000\baselineskip
3
4
2. La preparación para inyección de acuerdo con la reivindicación 1, en la que la solución acuosa alcalina es una solución acuosa alcalina de temperatura elevada.
3. La preparación para inyección de acuerdo con la reivindicación 2, en la que la temperatura de la solución acuosa alcalina de temperatura elevada es elevada a la temperatura de transición de fase del análogo del lípido A o superior.
4. La preparación para inyección de acuerdo con la reivindicación 2, en la que la solución acuosa alcalina de temperatura elevada es una solución acuosa alcalina que tiene una temperatura de 30ºC a 60ºC.
5. La preparación para inyección de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el tampón tiene un pH de 4 a 9.
6. La preparación para inyección de acuerdo con la reivindicación 5, en la que el tampón contiene un sacárido.
7. Una preparación liofilizada, la cual se obtiene por liofilización de la preparación de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6.
8. Un procedimiento para preparar una preparación para inyección, que comprende disolver un análogo del lípido A como se definió en la reivindicación 1 en una solución acuosa alcalina de hidróxido sódico o hidróxido potásico y subsiguientemente añadir un tampón a la misma, en el que el valor del pH final se ajusta de 4 a 9.
9. El procedimiento para preparar una preparación para inyección de acuerdo con la reivindicación 8, en el que la solución acuosa alcalina es una solución acuosa alcalina de temperatura elevada.
10. El procedimiento para preparar una preparación para inyección de acuerdo con la reivindicación 8, en el que el tampón tiene un pH de 4 a 9.
11. El procedimiento para preparar una preparación para inyección de acuerdo con la reivindicación 8, en el que las moléculas del análogo del lípido A se agregan para formar partículas, las cuales tienen un diámetro medio de partícula de 30 nm o inferior.
ES97929518T 1996-07-03 1997-07-03 Composiciones que contienen analogos del lipido a y procedimiento parasu preparacion. Expired - Lifetime ES2242226T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP17361596 1996-07-03
JP17361596 1996-07-03

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2242226T3 true ES2242226T3 (es) 2005-11-01

Family

ID=15963903

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES97929518T Expired - Lifetime ES2242226T3 (es) 1996-07-03 1997-07-03 Composiciones que contienen analogos del lipido a y procedimiento parasu preparacion.

Country Status (9)

Country Link
US (1) US6235724B1 (es)
EP (1) EP0909562B1 (es)
CN (1) CN1150001C (es)
AT (1) ATE298578T1 (es)
CA (1) CA2259520C (es)
DE (1) DE69733651T2 (es)
DK (1) DK0909562T3 (es)
ES (1) ES2242226T3 (es)
WO (1) WO1998001139A1 (es)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002501540A (ja) * 1997-05-23 2002-01-15 エーザイ株式会社 製薬製剤を調製するための方法
US6306404B1 (en) 1998-07-14 2001-10-23 American Cyanamid Company Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid A
CA2333578C (en) * 1998-07-14 2010-11-16 American Cyanamid Company Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid a
US6635261B2 (en) 1999-07-13 2003-10-21 Wyeth Holdings Corporation Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid A
US6906042B2 (en) * 2000-02-18 2005-06-14 Eisai Co., Ltd. Micelles
ATE534401T1 (de) 2000-10-18 2011-12-15 Glaxosmithkline Biolog Sa Mage antigen gekoppelt an einem protein d fragment enthaltende impfstoffe
WO2002094019A1 (en) * 2001-05-22 2002-11-28 Eisai Co., Ltd Highly purified antiendotoxin compound
EP2468300B1 (en) 2006-09-26 2017-12-20 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
US20090181078A1 (en) 2006-09-26 2009-07-16 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
JP5775451B2 (ja) 2008-06-19 2015-09-09 バリエーション バイオテクノロジーズ インコーポレイティド インフルエンザを処置するための組成物および方法
CA2764374C (en) 2009-06-05 2019-11-19 Infectious Disease Research Institute Synthetic glucopyranosyl lipid adjuvants
MX2012000372A (es) 2009-07-06 2012-02-28 Variation Biotechnologies Inc Metodos para preparar vesiculas y formulaciones producidas a partir de las mismas.
US9907746B2 (en) 2009-07-06 2018-03-06 Variation Biotechnologies, Inc. Methods for preparing vesicles and formulations produced therefrom
CA2840079C (en) 2010-07-06 2018-07-03 Variation Biotechnologies Inc. Compositions and methods for treating influenza
US10736844B2 (en) 2011-01-13 2020-08-11 Variation Biotechnologies Inc. Compositions and methods for treating viral infections
AU2012205315B2 (en) 2011-01-13 2017-05-04 Variation Biotechnologies, Inc. Methods for preparing vesicles and formulations produced therefrom
NZ616304A (en) 2011-04-08 2016-01-29 Immune Design Corp Immunogenic compositions and methods of using the compositions for inducing humoral and cellular immune responses
CA2894442C (en) 2012-01-12 2020-01-21 Variation Biotechnologies Inc. Compositions and methods for treating viral infections
EP4008354A1 (en) 2012-01-27 2022-06-08 Variation Biotechnologies Inc. Methods and compositions for therapeutic agents
SMT201800368T1 (it) 2012-05-16 2018-09-13 Immune Design Corp Vaccini per l'infezione da virus-2 herpes simplex
CA2909221A1 (en) 2013-04-18 2014-10-23 Immune Design Corp. Gla monotherapy for use in cancer treatment
US9463198B2 (en) 2013-06-04 2016-10-11 Infectious Disease Research Institute Compositions and methods for reducing or preventing metastasis
WO2016109880A1 (en) 2015-01-06 2016-07-14 Immunovaccine Technologies Inc. Lipid a mimics, methods of preparation, and uses thereof
EP3678695A1 (en) 2017-09-08 2020-07-15 Infectious Disease Research Institute Liposomal formulations comprising saponin and methods of use

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1216686B (it) 1988-04-01 1990-03-08 Chiesi Farma Spa Formulazioni farmaceutiche acquose di piroxicam e procedimento per laloro preparazione.
JPH04198192A (ja) * 1990-11-28 1992-07-17 Japan Tobacco Inc リピッドａ類縁体の水溶液
US5530113A (en) * 1991-10-11 1996-06-25 Eisai Co., Ltd. Anti-endotoxin compounds
AU660325B2 (en) * 1991-10-11 1995-06-22 Eisai Co. Ltd. Anti-endotoxin compounds and related molecules and methods
US5750664A (en) * 1995-06-05 1998-05-12 Eisai Co., Ltd. Substituted liposaccharides useful in the treatment and prevention of endotoxemia

Also Published As

Publication number Publication date
EP0909562B1 (en) 2005-06-29
DE69733651D1 (de) 2005-08-04
CN1150001C (zh) 2004-05-19
DK0909562T3 (da) 2005-08-22
EP0909562A1 (en) 1999-04-21
EP0909562A4 (en) 1999-12-29
CN1224355A (zh) 1999-07-28
ATE298578T1 (de) 2005-07-15
WO1998001139A1 (fr) 1998-01-15
CA2259520A1 (en) 1998-01-15
CA2259520C (en) 2007-09-11
US6235724B1 (en) 2001-05-22
DE69733651T2 (de) 2006-05-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0909562B1 (en) Injections containing lipid a analogues and process for the preparation thereof
ES2331791T5 (es) Método de producción de una preparación catiónica de liposomas que comprende un compuesto lipófilo
ES2272496T3 (es) Procedimiento de deshidratacion/rehidritacion para la preparacion de lipososmas.
JP6041673B2 (ja) リポペプチド組成物および関連する方法
US5952303A (en) Lyophilized pulmonary surfactant peptide compositions
JPH08268893A (ja) スタウロスポリン誘導体の静脈内投与のための医薬組成物
WO2006067608A1 (en) Aqueous formulations based on sodium hyaluronate for parenteral use
HU186296B (en) Process for producing parenteral pharmaceutical compositions
HU200101B (en) Process for producing stabilized pharmaceutical compositions containing human tissue plasminogene activator
PT618808E (pt) Composicoes farmaceuticas contendo gonadotrofina com estabilizador de sacarose
CA1336003C (en) Pentamidine salts useful in the treatment and prophylaxis of pneumocystis carinii pneumonia
CA2424656A1 (en) Composition and method for stable injectable liquids
JP2603480B2 (ja) 安定化されたアンスラサイクリン系製剤
ES2317695T3 (es) Composiciones secas solubles en agua.
CA1305058C (en) Parenteral suspension containing diclofenac
KR20220034053A (ko) 재조합 단백질의 안정적인 제형
US20210101929A1 (en) Method for stabilizing protein comprising formulations by using a meglumine salt
KR100807650B1 (ko) Ｎ-[ｏ-(ｐ-피발로일옥시벤젠술포닐아미노)벤조일]글리신·모노나트륨염·4수화물의 동결 건조 제제 및 그 제조 방법
US5972912A (en) Method for lyophilizing ifosfamide
AU718856B2 (en) Liposome preparations of indolocarbazole derivatives
ES2269393T3 (es) Inhibicion de pepsina mediante alginatos.
EP0136463A2 (en) Injectable therapeutic compositions containing stable S-Adenosyl-L-Methionine salts
JP3917820B2 (ja) オザグレルナトリウム含有注射液およびその安定化方法
US5352453A (en) Compositions containing non-glycosylated human tissue type plasminogen activator
JP4326030B2 (ja) リピッドａ類縁体含有注射用製剤及びその製造方法