ES2243798T3

ES2243798T3 - Procedimiento para la produccion de desclaritromicina, asi como prodcutos intermedios.

Info

Publication number: ES2243798T3
Application number: ES02802638T
Authority: ES
Inventors: Heiner Jendralla; Gerhard Korb; Jurgen Mueller-Lehar
Original assignee: Aventis Pharma Deutschland GmbH
Current assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Priority date: 2001-11-07
Filing date: 2002-11-02
Publication date: 2005-12-01
Anticipated expiration: 2022-11-02
Also published as: MXPA04003026A; DE50203529D1; EP1444244B1; CA2466358C; EP1444244A1; IL161800A0; ATE298762T1; JP2005508391A; IL161800A; WO2003040162A1; CA2466358A1; JP4344243B2; AU2002357482B2; DK1444244T3; PT1444244E

Abstract

Procedimiento para la producción de desclaritromicina, caracterizado porque a) se hace reaccionar eritromicina A con R3SiCl y/o R3Si-imidazol o o (R3Si)2NH o R3SiO3SCF3, donde R significa CH3, C2H5 bajo condiciones básicas, para obtener compuestos de la fórmula (IX), y b) R = CHA, C2H6 seguidamente se oxida mediante la adición de un agente de oxidación, obteniéndose un compuesto de la fórmula X

Description

Procedimiento para la producción de desclaritromicina, así como productos intermedios.

La presente invención describe un procedimiento para la producción de desclaritromicina por medio de las nuevas etapas intermedias del N-óxido de eritromicina y del N-óxido de 6-O-metileritromicina, protegidos con grupos sililo. Además, se describen la nueva etapa intermedia del N-óxido de desclaritromicina.

La desclaritromicina (II) es un bloque constructivo para nuevos antibióticos macrólidos. La producción de desclaritromicina (II), partiendo de claritromicina (I), que puede producirse por diversas vías de síntesis a partir de eritromicina A (III), es conocida (véase, por ejemplo, Abbott Laboratories, documento WO 97/36912). En este caso se obtiene la desclaritromicina (II) mediante tratamiento ácido de la claritromicina (I). En este caso se desdobla selectivamente la cladinosa, y se obtiene la desclaritromicina (II) resultante (J. Med. Chem. 1998, 41, 4080-4100) (esquema de fórmulas I)

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Además, es posible producir la desclaritromicina (II) directamente a partir de eritromicina A (III) según la siguiente secuencia de síntesis:

Primero se oxima eritromicina A (III) por acción de hidroxilamina (véase, por ejemplo, Abbott Laboratories, documento WO 97/38000). La cladinosa se desdobla de la eritromicinoxima resultante por tratamiento ácido, y se la separa por extracción (esquema de fórmulas II). Se obtiene eritromicinoxima decladinosada (IV).

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Seguidamente se protegen (según Bonnet et. al. Patente de los EE.UU. Nº 5.969.161) los grupos oxima con metoxipropeno bajo condiciones ligeramente ácidas, y los grupos hidroxilo por acción de trimetilclorosilano bajo condiciones básicas (esquema de fórmulas III).

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Mediante acción de, por ejemplo, yoduro de metilo y de una base fuerte (por ejemplo, hidróxido de potasio) se metila el compuesto protegido en posición 6-O, y seguidamente se convierte en la desclaritromicinoxima (VI) mediante desdoblamiento ácido de los grupos protectores (esquema de fórmulas IV).

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Se obtiene ahora la desclaritromicina (II) por acción de metabisulfito sódico sobre la desclaritromicina (VI) (esquema de fórmulas V).

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En este procedimiento es desventajosa la formación de productos secundarios varias veces metilados, que además de la metilación en posición 6-O también muestran grupos hidroxilo metilados en la posición 11 y/ó 12 de la molécula (por ejemplo, fórmulas (VII) y (VIII)). Estos molestan durante la elaboración ulterior de la desclaritromicina (II) para su conversión en antibióticos macrólidos, y por ello deben separarse previamente por medio de costosos procesos de purificación. Además, es desventajosa la utilización de etapas intermedias oximadas, ya que aquí se presentan isómeros E/Z, que poseen diferentes propiedades físicas (por ejemplo, solubilidad), y que por ello conducen a pérdidas de rendimiento en la conversión.

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La misión de la presente invención es hallar un procedimiento para la producción de desclaritromicina (II), que evite las desventajas anteriormente descritas. Esto puede lograrse adoptando la siguiente vía de síntesis, que se caracteriza por nuevos compuestos intermedios:

Objeto de la presente invención es un procedimiento para la producción de desclaritromicina A (III), en el que se silila eritromicina A (III) en primer lugar mediante sililación con agentes básicos (se prefieren trialquilclorosilano y trialquilsililimidazol) de manera conocida, Y. Kawashima et al, Chem. Pharm. Bull. 38, 1485-1489, 1990, en la posición 2'-O y en la posición 4''-O (IX). Se prefieren las condiciones descritas en Y. Kawashima et al, Chem. Pharm. Bull. 38, 1485-1489, 1990 (esquema de fórmulas VI).

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Seguidamente se convierte la eritromicina sililada A en el N-óxido (X) de eritromicina sililada A por medio de oxidación con agentes de oxidación usuales, se prefieren peróxido de hidrógeno o ácido m-cloroperbenzoico (Esquema de fórmulas VII).

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Opcionalmente pueden también intercambiarse los dos primeros pasos (o sea, primero N-oxidar la eritromicina y después introducir los grupos sililo protectores), o es posible combinar los dos pasos en una reacción en un sólo recipiente.

Seguidamente se metila selectivamente el compuesto protegido en posición 6-O con un agente de metilación -se prefieren yoduro de metilo o dimetilsulfato- bajo condiciones básicas, preferiblemente la basificación mediante la adición de hidróxido de potasio (esquema de fórmulas VIII).

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Del N-óxido de 6-O-metileritromicina siladada, (XI), se desdoblan la cladinosa y los grupos sililo protectores mediante tratamiento ácido, se prefiere la adición de HCl (esquema de fórmulas (IX)). De esta manera se obtiene el N-óxido de desclaritromicina (XII).

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El N-óxido de desclaritromicina (XII) se reduce siguiendo métodos conocidos, preferentemente catalíticamente con paladio/carbón en presencia de hidrógeno o de un transportador de hidrógeno, preferentemente con ciclohexeno), níquel Raney e hidrógeno o bisulfito de sodio, obteniéndose desclaritromicina (II) (esquema de fórmulas X).

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Opcionalmente es también posible intercambiar el orden de secuencia de los dos últimos pasos (esquemas de fórmulas IX y X) (es decir, reducir en primer lugar el N-óxido en amina y seguidamente desdoblar la cladinosa y los grupos protectores), o es posible combinar los dos pasos en una reacción en un solo recipiente, por ejemplo mezclando con agitación la solución, obtenida según el esquema de fórmulas (IX) anterior, de N-óxido de desclaritromicina (XII) con una solución acuosa de bisulfito de sodio, hasta que (XII) se haya reducido en desclaritromicina (II), y se aísla esta última de la mezcla de reacción, por ejemplo por cristalización.

Los pasos de reacción descritos, que se han ilustrado mediante los esquemas de fórmulas (VI) a (X), pueden discurrir bajo diversas condiciones. Es conveniente variar las condiciones de reacción teniendo en cuenta métodos correspondientes del estado de la técnica, generalmente conocidos, a efectos de descubrir la mejor forma de realización. De acuerdo con el estado actual del conocimiento se prefieren las siguientes condiciones de reacción:

La reacción representada en el esquema de reacciones VI tiene lugar en un disolvente orgánico, preferentemente acetato de etilo, acetato de butilo, diclorometano, MTB-éter, THF, tolueno, en especial acetato de etilo. La reacción puede tener lugar bajo distintas temperaturas, se prefiere la realización a temperatura ambiente.

La reacción representada en el esquema de fórmulas VII tiene lugar en un disolvente orgánico, preferentemente diclorometano, acetato de etilo, acetato de butilo, DMF, N,N-dimetilacetamida, NMP, en especial diclorometano. La reacción puede tener lugar bajo distintas temperaturas, se prefiere la realización a aproximadamente 0ºC.

La reacción representada en el esquema de fórmulas VIII tiene lugar en un disolvente orgánico, preferentemente dimetilsulfóxido, tetrahidrofurano, DMF, N,N-dimetilacetamida, NMP, dimetiltetrahidropirimidinona (DMPU), en especial en una mezcla de preferentemente partes iguales de dimetilsulfóxido y tetrahidrofurano. La reacción puede tener lugar bajo distintas temperaturas, se prefiere la realización a temperatura ambiente.

La reacción representada en el esquema de fórmulas IX tiene preferentemente lugar en fase acuosa. La reacción puede tener lugar bajo distintas temperaturas, se prefiere la realización a temperatura ambiente.

La reacción representada en el esquema de fórmulas X tiene lugar en un disolvente orgánico, preferentemente diclorometano, acetato de etilo, acetato de butilo, THF, DMF, N,N-dimetilacetamida, NMP, en especial diclorometano. La reacción puede tener lugar bajo distintas temperaturas, se prefiere la realización a temperatura ambiente.

Para las reacciones según los esquemas de fórmulas VI a X puede ser útil llevar a cabo la reacción bajo una atmósfera de gas protectora. El aíslamiento de los productos obtenidos puede tener lugar de distintas maneras, como por ejemplo mediante separación por filtración, extracción, por cromatografía, etc.

Los compuestos de las fórmulas X, XI y XII no son conocidos hasta ahora, y son, así como los procedimientos para su producción, también objeto de la presente invención. Los compuestos mencionados son especialmente adecuados como productos intermedios en la síntesis química, en especial en la producción de desclaritromicina.

La presente invención será explicada con mayor detalle por medio de los siguientes ejemplos de realización, sin que la invención quede restringida a la forma de realización descrita en los ejemplos. Las distintas características de los ejemplos representan formas de realización especiales que pueden combinarse con características generalizadas, como se da a conocer en el texto de memoria y/o de las reivindicaciones.

Se llevaron a cabo análisis de DC sobre placas de vidrio recubiertas (5 x 20 cm, gel de sílice 60 F254 de la Firma Merck Darmstadt) en el modo creciente; estando la fase de gas saturada con vapor de agua del eluyente. La tinción (detección de los productos de reacción separados) después del revelado de la placa de DC y secado mediante secador de aire caliente tuvo lugar mediante breve inmersión de la placa de DC en una solución de 25 g de ácido molibdatofosfórico y 10 g de sulfato de cerio (II) en 940 ml de agua y 60 ml de ácido sulfúrico concentrado, secado por goteo y subsiguiente calentamiento de la placa de DC a aproximadamente 160ºC sobre una Thermoplate® de DESAGA. Los espectros de RMN -^{1}H- y -^{13}C se midieron con un espectrómetro Bruker 400 UltraShield®. Para la interpretación de los espectros de RMN-^{13}C, los átomos de carbono 1º, 2º, 3º y 4º se diferenciaron por medición de espectros de DEPT 135º. Sin embargo, no se midió ningún espectro multidimensional (correlación de ^{1}H-^{1}H- o ^{1}H-^{13}C). Por ello no cabe excluir la posibilidad que sea necesario intercambiar alternadamente asociaciones de señales, en especial en el caso de protones o de átomos ^{13}C de igual multiplicidad.

Ejemplo 1 Síntesis de 2',4''-O-bis(trimetilsilil)eritromicina A (fórmula IX, R = CH_{3}) [modificada, sobre la base de Y. Kawashima et al Chem. Pharm. Bull. 38, 1485-1489 (1990)]

En esta tanda se empleó eritromicina A de la Firma Abbott Laboratories, que contenía eritromicina A al 94,0 por ciento plano de HPLC. El contenido en agua según titulación de Karl-Fischer era de 0,5% en peso.

En un matraz de 2 L con agitador mecánico, termómetro y embudo de goteo se disolvieron en forma transparente, bajo atmósfera de nitrógeno, 36,7 g (50,0 mmol tal cual, contenido 47,0 mmol) de eritromicina A en 1.000 ml de acetato de etilo. Manteniendo la temperatura a 20ºC (baño de agua) se agregó por goteo una solución de 8,15 g (74,3 mmol) de trimetilclorosilano y 10,52 g (72,7 mmol) de N-(trimetilsilil)-imidazol en 50 ml de acetato de etilo en el espacio de 30 min. La reacción fue exotérmica. 15 min después de comenzar la adición por goteo se formó un precipitado, que primero se aglomeró en forma de grumos o terrones, pero que después se transformó en una suspensión bien distribuida. La vigilancia por DC (CH_{2}Cl_{2}/MeOH 9:1 más 1% de solución de amoníaco al 25%) mostró, después de 0,25 horas, una conversión completa de la eritromicina A (R_{f} = 0,43) en el compuesto del título (aproximadamente 70%; R_{f} = 0,67) y en el producto monosililo (aproximadamente 30%; R_{f} = 0,54).R_{f} = 0,54). Después de 2,5 h el producto intermedio monosililo se había transformado en el compuesto del título, a excepción de un residuo de aproximadamente 5%. La suspensión se vertió bajo agitación magnética sobre una solución helada de 15 g (178,6 mmol) de hidrógeno-carbonato de sodio en 285 ml de agua. La fase acuosa se separó y la fase orgánica se lavó primero con 300 ml de agua y después con 300 ml de solución de cloruro de sodio saturada. La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, se concentró a una temperatura del baño de 40ºC bajo vacío hasta sequedad, y el residuo cristalino se secó bajo alto vacío (AV) (44,6 g, 101,5% del valor teórico), de producto bruto. El residuo se mezcló con 150 ml de n-heptano, y se calentó lentamente. A 84ºC se formó una solución incolora transparente. Se dejó enfriar con separación del baño de calentamiento, y se inoculó a 65ºC con cristales del compuesto del título.Bajo agitación mecánica (320 rpm) se dejó nuevamente enfriar a temperatura ambiente, se enfrió seguidamente a 15ºC, y se agitó durante otros 15 min a esta temperatura. El precipitado se separó por succión sobre una frita de vidrio G4, se continuó lavando con 20 ml de n-heptano, y seguidamente se secó en vacío en corriente de nitrógeno a 40ºC. Se obtuvieron 31,0 g de cristales blancos. Las aguas madre se concentraron en vacío débil hasta aproximadamente un tercio del volumen, haciéndose la solución ligeramente turbia. Se enfrió hasta 10ºC y se continuó agitando a esta temperatura durante 15 min. El precipitado se filtró con succión, se continuó lavando con 10 ml de n-heptano, y seguidamente se secó en AV. Se obtuvieron 4,4 g de cristales blancos. Rendimiento total: 35,4 g (40.3 mmol, 85,7% del valor teórico), Punto de fusión: 213-215ºC (Lit. 194.197ºC). ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 4,98 (dd, 1H, 13-H), 4,83 (d, 1H, 1''-H), 4,39 (d, 1H, 1'-H), 4,22 (m, 1H, 5''-H), 4,16 (d, 1H, 3-H), 3,83 (1H, 11-OH), 3,80 (1H, 11-H), 3,59 (m, 1H, 5'-H), 3,56 (d, 1H, 5-H), 3,30 (s, 3H, 3''-OMe), 3,18 (m, 1H, 2'-H), 3,17 (d, 1H, 4''-H), 3,11 (qua, 1H, 10-H), 3,01 (s, 1H, 12-OH), 2,80 (qui, 1H, 2-H), 2,74 (m, 1H, 8-H), 2,53 (m, 1H, 3'-H), 2,37 (d, 1H, 2''-H), 2,23 (s ancho, SH, NMe_{2}), 1,97-1,82 (m, 3H, 14-H, 4-H, 7-H), 1,72-1,60 (m, 4H. 7-H, 6-OH, 4'-H), 1,55-1,45 (m, 2H, 2'-H, 14-H), 1,44 (s, 3H, 6-Me), 1,23-1,10 (22H, 6''-Me, 8-Me, 3''-Me, 4'-H, 6'-Me, 12-Me, 10-Me, 2-Me), 1,09 (d, 3H, 4-Me), 0,87 (t, 3H, 15-H), 0,16 (s, 9H, 4''-OSiMe_{3}), 0,10 (s, 9H, 2'-OSiMe_{3}). ^{13}C-RMN (100 MHz, CDCl_{3}): \delta = 221,3 (C-9), 176,4 (C-1), 102,9 (C-1'), 96,8 (C-1''), 81,7 (C-5), 81,0 (C-4''), 79,6 (C-3), 77,1 (C-13), 75,3 (C-6), 75,0 (C-12), 73,3 (C-2'), 73,1 (C-3''), 69,0 (C-11), 67,8 (C-5'), 65,2 (C-3-), 65,1 (C-5''), 49,8 (3''-OMe), 44,9 (C-2),44,4 (C-8),41,0 (NMe_{2}), 40,5 (C-4), 39,0 (C-7),38,7 (C-10), 35,9 (C-2- -),29,8 (C-4'), 27,3 (6-Me), 22,2 (5'-Me), 21,7 (3''-Me), 21,4 (C-14),19,4 (5''-Me), 18,3 (8-Me), 16,4 (12-Me), 15,6 (2-Me), 11,8 (10-Me), 10,9 (0-15), 9,7 (4-Me), 1,02 [2'-OSi(CH_{3})3], 0,96 [4''-OSi(CH_{3})_{3}]. EM (ESI): [M+H]^{+} m/z = 878 (C_{43}H_{83}NO_{13}Si_{2}).

En lugar de en n-heptano, se logra también la recristalización/reprecipitación del producto, y con un alto rendimiento y pureza, en acetona-agua.

Ejemplo 2 Síntesis de N-óxido de 4''-O-(trimetilsilil)eritromicina A (fórmula X, R =CH_{3}, R1 =H) a) Producción de ácido 3-cloro-peroxibenzoico al 99% a partir de ácido 3-cloro-peroxibenzoico comercial (Aldrich)

En un matraz redondo de 1 L con agitador KPG, termómetro y electrodos de pH calibrados se dispensaron bajo atmósfera de nitrógeno 400 ml de tampón fosfato pH 7 (Riedel 10240). Se ajustó el valor del pH a 7,5 mediante la adición de en total 8,47 g dihidrógeno-fosfato sódico. A esto se agregó en una sola vez 50,16 g (223,8 mmol) de ácido 3-cloro-peroxibenzoico al 77%. Se formó una suspensión. El pH cayó primero rápidamente y después lentamente, hasta detenerse en un pH 6,42. Mediante adición de 13,92 g de dihidrógeno-fosfato sódico se elevó el pH nuevamente a 6,95. La suspensión se filtró con succión. El sólido se lavó con agua, cuyo pH había sido previamente ajustado a 7, y seguidamente se secó en el desecador en AV. Se obtuvieron 31,9 g de cristales blancos (83% del valor teórico referido al contenido del material comercial empleado). El contenido en agua (titulación K.F.) era de 0,27%.

b) N-óxido de 4''-O-(trimetilsilil)eritromicina A

En un matraz de 250 ml con agitador mecánico, termómetro y embudo de goteo se disolvieron de manera transparente bajo una atmósfera de nitrógeno 13,18 g (15,0 mmol) de disilileritromicina A (del Ejemplo 1) en 25 ml de diclorometano (contenido en agua 0,025% según titulación K.-F), y se añadieron 2,27 g (27,0 mmol) de hidrógeno-carbonato de sodio seco. La suspensión se enfrió a 0ºC con un baño de hielo. A esto se añadió gota a gota una solución de 3,12 g (17,9 mml) del ácido 3-cloro-peroxibenzoico anterior, a aproximadamente 99%, en 50 ml de diclorometano. Se retiró el baño frío, se dejó calentar a 23ºC, y se agitó durante otra hora a esta temperatura, con lo cual se formó una suspensión espesa. DC (CH_{2}Cl_{2}/MeOH 9:1 más 1% de solución de amoníaco al 25%) de una muestra del precipitado filtrada con succión mostró una transformación cuantitativamente limpia del precursor (R_{f}= 0,67) en el producto (R_{f}= 0.25). La suspensión se enfrió en el baño de hielo a 2ºC, se mezcló con 40 ml de solución acuosa semisaturada de hidrógeno-carbonato de sodio, y se agitó intensamente. Se filtró la mezcla con succión y se volvió a lavar con 2 x 10 ml de solución semisaturada enfriada de hidrógeno-carbonato de sodio, se filtró con exactitud por succión, y seguidamente se secó en AV sobre pentóxido de fósforo. Se obtuvieron 11,8 g (14,4 mmol, 95,6% del valor teórico) de cristales incoloros, punto de fusión: 204-205ºC (descomposición). ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}):\delta = 5,03 (dd, 1H,
13-H), 4,89 (d, 1H, 1''-H), 4,68 (d, 1H, 1'-H), 4,18 (m, 1H, 5''-H), 3,98 (d, 1H, 3-H), 3,88 (s, 1H, 11-OH), 3,84 (m, 1H, 5'-H), 3,80 (m, 1H, 11-H), 3,74 (dd, 1H, 2'-H); 3,58 (d, 1H, 5-H), 3,47 (m,1H, 3'-H), 3,36 (s, 3H, 3''-OMe), 3,18 y 3,17 (2 x s, 2 x 3H, N(O)Me_{2}), 3,16 (oculto, 1H, 4''-H), 3,09 (qua, 1H, 10-H), 3,05 (s, 1H, 12-OH), 2,90 (qui, 1H, 2-H), 2,68 (m, 1H, 8-H), 2,38 (d, 1H, 2''-H), 2,36 (s, 1H, 6-OH), 2,06-1,83 (m, 4H, 4'-, 4-, 7-, 14-H), 1,71 (d, 1H, 2'-OH), 1,57 -1,45 (m, 3H, 4'-2''-, 14-H), 1,45 (s, 3H, 6-Me), 1,30 (m, 1H, 7-H), 1,24 -1,08 (2414, 8 x Me), 0,85 (t, 3H, 15-H), 0,15 (s, 9H, 4''-OSiMe_{3}). ^{13}C-RMN (100 MHz, CDCl_{3}): \delta = 221,7 (C-9), 175,9 (C-1), 101,8 (C-1'), 96,2 (C-1'7, 83,1 (C-5), 80,7 (C-3), 79,3 (C-4''), 76,6 (0-13), 75,8 (C-3'),74,8 y 74,7 (C-6, C-12), 73,2 (C-3''), 72,8 (C-2'), 68,9 (C-11), 66,1 (C-5'); 65,0 (C-5''), 58,8 [N(O)-CH_{3}), 51,8 [N(O)-CH_{3}], 49,7 (3''-OCH_{3}), 45,1 (C-2), 44,6 (C-8), 39,3 (C-4), 38,5 (C-7), 37,8 (C-10), 35,6 y 35,0 (C-2'', C-4'), 26,8 (6-CH_{3}), 22,2 (5'-CH_{3}), 21,6 (3''-CH_{3}), 21,1 (C-14), 19,3 (5''-CH_{3}), 18,3 (8-CH_{3}), 16,1 (12-CH_{3}), 15,9 (2-CH_{3}), 12,0 (10-CH_{3}), 10,6 (C-15), 9,1 (4-CH_{3}), 0,9 [4''-OSi(CH_{3})_{3}). MS (ESI) m/z = 822 (C_{40}H_{75}NO_{14}Si).

Si se hace reaccionar 1,0 equiv. de disilil-eritromicina (Ejemplo 1) en diclorometano a 0ºC con 1,25 equiv. de ácido 3-cloroperoxibenzoico comercial al 77% (formación de una mezcla bifásica), en este caso también tiene lugar una formación pura del N-óxido, que puede aislarse con un rendimiento de 90-93% del valor teórico.

Ejemplo 3 Metilación de N-óxido de 4''-O-(trimetilsilil)-eritromicina A, obteniéndose N-óxido de 4''-O-(trimetilsilil)-claritromicina N-óxido de [6-O-metil-4''-O-(trimetilsilil)-eritromicina A fórmula XI, R = CH_{3}, R'= H]

En un matraz de 100 ml con agitador mecánico, termómetro y tabique de separación se agitaron bajo atmósfera de nitrógeno 5,48 g (6,66 mmol) de N-óxido de 4''-O-(trimetilsilil) eritromicina A (del Ejemplo 2) en 25 ml de dimetilsulfóxido y 25 ml de tetrahidrofurano hasta obtener una suspensión diluida. Se enfrió a 0ºC mediante un baño de hielo. 559 mg (8,47 mmol) de hidróxido de potasio en polvo al 85% se añadieron de una sola vez. Se formó una solución turbia, de color amarillo intenso, a la cual se añadieron, bajo agitación a 0ºC, 1,04 ml (16,40 mmol) de yoduro de metilo, y la temperatura de la reacción se elevó de +2 a +4ºC. En el intervalo de media hora se dejó calentarse la mezcla de reacción a temperatura ambiente bajo agitación, con lo cual se volvió amarilla pálida. Se agitó durante otras dos horas a temperatura ambiente, y a continuación se añadieron 180 ml de acetato de etilo y 120 ml de agua helada. Se separó la fase acuosa, y la fase orgánica se lavó con 120 ml de agua y seguidamente con 50 ml de agua. Se sometieron inmediatamente las fases acuosas del lavado reunidas a nueva extracción con 50 ml de acetato de etilo, y este extracto se lavó con 20 ml de agua/5 ml de solución de cloruro de sodio saturada. Las fases orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, se concentraron en vacío, y el residuo se secó bajo AV hasta obtener una espuma sólida. Se obtuvieron 5,23 g (6,25 mmol, 94% del valor teórico) de producto bruto, que consistía en aproximadamente 50-60% en el compuesto del título. ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 3,37 (s, 3H, 3''-OMe), 3,22 [2 x s, 6H, 3'-N(O)Me_{2}], 3,04 (s, 3H, 6-OMe), 0,15 (s, 9H, 4''-OSiMe_{3}). ^{13}C-RNM (100 MHz, CDCl_{3}): \delta = 221,5 (C-9), 176,2 (C-1), 102,6 (C-1', 58,6 [N(O)CH_{3}], 52,5 [N(O)CH_{3}], 51,0 (6-OCH_{3}), 49,9 (3''-OCH_{3}), 0,9 [4''-OSi(CH_{3})_{3}]. EM (ESI): [M+H]^{+} m/z = 836 (C_{41}H_{77}NO_{14}Si).

Ejemplo 4 Desdoblamiento de cladinosa y sililo, obteniéndose N-óxido de desclaritromicina N-óxido de [6-O-metil-eritromicina A; fórmula XII]

En un matraz de 100 ml con agitador mecánico se añadió 5,2 g (6,22 mmol) del producto bruto del Ejemplo 3 bajo atmósfera de nitrógeno y con enfriamiento por baño de hielo, la solución de 3,2 ml de ácido clorhídrico 12 N (38,4 mmol de HCl) en 32 ml de agua. La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente, seguidamente se saturó con cloruro de sodio, se ajustó a pH 8 mediante solución acuosa de amoníaco, y se extrajo con 5 veces 50 ml de acetato de etilo. Los extractos reunidos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, evaporaron al vacío hasta sequedad, y secaron en AV. Se obtuvieron 4,7 g de sólido pardo pálido.

Se obtuvo una muestra analítica por cromatografía de resolución rápida de una muestra (200 mg) de este producto bruto mediante 40 g de gel de sílice (Merck, 0,040-0,063 mm) con el eluyente diclorometano/metanol 8:2. Se obtuvieron 95 mg de cristales blancos, punto de fusión: 209-210ºC (descomposición), pureza superior a 97% según análisis por HPLC (LiChroCART 125 x 4 mm, LiChrospher 100 RP18e, 5 \mum, Det.210 nm, 25ºC, caudal 0,5 ml 1 min, eluyente A: CH_{3}CN/CF_{3}CO_{2}H 1000: 0,5, eluyente B: H_{2}O/CF_{3}CO_{2}H 1000: 0,5; gradiente lineal de 30% de A/70% de B con inyección hasta 50% de A/50% de B después de 10 minutos de tiempo de cromatografía. Tiempo de retención: 8,55 min), mancha unitaria según análisis DC(CH_{2}Cl_{2}/CH_{3}OH 8:2 más 1% de solución de amoníaco al 25%, R_{f} = 0,34). ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 5,17 (dd, 1H, 13-H), 4,48 (d, 1H, 1'-H), 3,88 (s, 1H, 11-OH), 3,86 (d, 1H, 11-H), 3,80 (dd, 1H, 2'-H), 3,72 (s, 1H, 5- H), 3,64 (m, 1H, 5'-H), 3,57 (d, 1H, 3-H), 3,38 (m, 1H, 3'-H), 3.27 (s, 1H, 12-OH), 3,18 [s, 3H, N(O)Me], 3,15 [s, 3H, N(O)Me], 3,01 (m, 1H, 10-H), 2,97 (s, 3H, 6-OMe), 2,65 (m, 1H, 2-H), 2,57 (m, 1H, 8-H), 2,09 (qua, 1H, 4'-H), 2,02 (m, 3H, 4-, 7-,14-H), 1,53 (d, 1H, 2'-OH), 1,49 (m, 1H, 14-H), 1,40 (d, 1H, 4'-H), 1,37 (s, 3H, 2-Me), 1,31 (d, 3H, 5'-Me), 1,27 (d, 3H, 2-Me), aproximadamente 1,26 (m, oculto, 1H, 7-H), 1,19 (s, 3H, 6-Me), 1,16 (d, 3H, 8-Me), 1,15 (d, 3H, 10-Me), 1,13 (d, 3H, 4-Me), 0,84 (t, 3H, 15-H). ^{13}C-RMN (100 MHz, CDCl_{3}): \delta = 220,4 (C-9),175,2 (C-1), 106,1 (C-1'), 89,0 (C-5), 78,7 (C-3), 78,0 (C-6), 76,5 (C-13), 75,7 (C-3`), 74,2 (C-12), 72,1 (C-2'), 69,7 (C-5'), 68,2 (C-11), 59,0 [N(O)-CH_{3}], 51,9 [N(O)-CH_{3}], 49,4 (6-OCH_{3}), 45,4 (C-2), 44,6 (C-8), 38,7 (C-7), 37,6 (C-4), 36,0 (C-10), 34,4 (C-4-), 21,4 (C-14),20,9 (5'-CH_{3}), 18,7 (6-CH_{3}), 17,7 (8-CH_{3}), 16,2 (12-CH_{3}), 15,3 (2-CH_{3}), 12,5 (10-CH_{3}), 10,3 (C-15),8,3 (4-CH_{3}). EM (ESI): [M+H]^{+} m/z = 606 (C_{30}H_{55}NO_{11}).

Ejemplo 5 Reducción del N-óxido bruto para obtener desclaritromicina [6-O-metil-eritromicina A fórmula II]

En un matraz de 100 ml con agitador mecánico se mezclaron 4,5 g del N-óxido de desclaritromicina bruto del Ejemplo 4 con 50 ml de diclorometano y la solución de 1,5 g (7,9 mmol) de metabisulfito de sodio (Na_{2}S_{2}O_{5}) en 15 ml de agua, y la mezcla bifásica se agitó enérgicamente bajo atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente. La reducción pudo continuarse con el sistema de HPLC descrito en el Ejemplo 4 (tiempo de retención de II = 7,37 min) y con el sistema de DC descrito en el Ejemplo 4 (R_{f} II = 0,52), y se había completado después de 3 horas. La fase acuosa se separó y se extrajo con 20 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se concentraron en vacío en una cantidad de aproximadamente 15 ml, seguidamente se mezclaron con 45 ml de agua, y se ajustó a pH 1,0 mediante ácido clorhídrico al 36%. Se separó la fase orgánica, y la cladinosa restante y su metabolito se lavaron de la fase ácida acuosa mediante extracción con 5 x 10 ml de diclorometano. Este proceso pudo continuarse con el sistema de DC descrito en el Ejemplo 4. La fase acuosa se ajustó seguidamente a pH 5,3 mediante amoníaco acuoso al 25%, se desconectó el agitador, se recubrió la solución acuosa con 5 ml de metilisobutilcetona (MIBC), y la mezcla bifásica se agitó con una velocidad de agitación muy lenta (aproximadamente 20 rpm) sin un mezclado a fondo de las fases digno de mención, durante 15 minutos a 20ºC. La fase de MIBC (que contenía impurezas) se separó en el embudo separador, y la fase acuosa se ajustó lentamente a pH 9,5 mediante amoníaco acuoso al 25% bajo agitación enérgica a 25ºC (ligera refrigeración), inoculándose la solución a pH 7,5 con cristales puros de producto, y el producto se separó por cristalización a partir de aproximadamente pH 8,3. La suspensión se agitó durante otros 30 minutos a 25ºC, y durante otros 30 minutos a 15-20ºC. Se filtró el precipitado por succión, se lavó con 30 ml de agua, se secó por succión, y se secó en AV a 40ºC durante 16 horas Se obtuvieron 1,8 g de cristales blancos (3,05 mmol, 46% del valor teórico referido al N-óxido de 4''-O-(trimetilsilil)-eritromicina empleado en el Ejemplo 3). Teniendo en cuenta los 200 mg retirados en el Ejemplo 4 para obtener la muestra analítica, resultó para las reacciones descritas en los Ejemplos 3 a 5 un rendimiento total de 48% del valor teórico), punto de fusión 154-155ºC. ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 5,18 (dd, 1H, 13-H), 4,38 (d, 1H, 1'-1-1), 3,92 (s, 1H, 11-OH), 3,87 (s ancho, 1H, 3-OH), 3,86 (d, 1H, 11-H), 3,68 (s, 1H, 5-H), 3,55 (m, 2H, 3- y 5'-H), 3,26 (s, 1H, 12-OH), 3,24 (cid, 1H, 2'-H), 3,01 (qua, 1H, 10-H), 2,97 (s, 31-1, 6-OMe), 2,66 (m, 1H, 2-H), 2,58 (m, 1H, 8-H), 2,47 (m, 1H, 3'-H), 2,26 (s, 61-1, NMe_{2}), 2,12 (m, 1H, 4'-H), 1,94 (m, 2H, 4- y 7-H), 1,66 (d qua, 1H, 14-H), 1,56 (dd, 1H, 4'-H), 1,49 (m, 1H, 14-H), 1,37 (s, 3H, 12-Me), 1,26 (d, 6H, 5'-Me y 2-Me), aproximadamente 1,25 (m, oculto, 1H, 7-H), 1,18 (s, 3H, 6-Me), 1,13 (d, 6H, 8-Me y 10-Me), 1,12 (d, 3H, 4-Me), 0,84 (t, 3H, 15-H). ^{13}C-RMN (100 MHz, CDCl_{3}): \delta = 220,6 (C-9),175,0 (C-1), 106,6 (C-1'), 88,2 (C-5), 78,9 (C-3), 78,1 (C-6), 76,6 (C-1 3), 74,2 (C-12), 70,7 (C-2`), 70,2 (C-11), 69,8 (C-5'), 65,6 (C-3'), 49,5 (6-OCH_{3}), 45,5 (C-2), 44,5 (C-8), 40,2 [3'-N(CH_{3})_{2}], 38,7 (C-7), 37,5 (C-4), 35,9 (C-10), 28,1 (C-4'), 21,4 (C-14), 21,2 (5'-CH_{3}), 18,8 (6-CH_{3}), 17,7 (8-CH_{3}), 16,2 (12-CH_{3}), 15,2 (2-CH_{3}), 12,6 (10-CH_{3}), 10,4 (C-15), 8,2 (4-CH_{3}). EM (ESI): [M+H)^{+} m/z = 590 (C_{30}H_{55}NO_{10}).

Las siguientes reivindicaciones, que pertenecen al contenido de la memoria descriptiva, contribuyen a la divulgación de la invención.

Claims

1. Procedimiento para la producción de desclaritromicina, caracterizado porque

a) se hace reaccionar eritromicina A con R_{3}SiCl y/o R_{3}Si-imidazol o (R_{3}Si)_{2}NH o R_{3}SiO_{3}SCF_{3}, donde R significa CH_{3}, C_{2}H_{5} bajo condiciones básicas, para obtener compuestos de la fórmula (IX), y b)

12

seguidamente se oxida mediante la adición de un agente de oxidación, obteniéndose un compuesto de la fórmula X

13

14

y el compuesto obtenido de la fórmula (X) se transforma, c) mediante adición de un agente de metilación bajo condiciones básicas, en el compuesto de la fórmula (XI)

y seguidamente d) se transforma el compuesto de la fórmula (XI) por hidrólisis ácida, en el compuesto de la fórmula (XII)

15

y seguidamente e) se transforma el compuesto de la fórmula (XII) bajo condiciones reductoras en desclaritromicina (II)

16

2. Procedimiento conforme a la reivindicación 1, caracterizado porque se intercambia la sucesión de las reacciones químicas de los pasos a) y b).

3. Procedimiento conforme a las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque se intercambia la sucesión de las reacciones químicas de los pasos d) y e).

4. Compuestos de la fórmula (X)

17

en la que R significa CH_{3} o C_{2}H_{5} y en la que R' significa H o SiR_{3}.

5. Procedimiento para la producción de un compuesto de la fórmula (X) conforme a la reivindicación 4, caracterizado porque a un compuesto de la fórmula (IX)

18

se añade un agente de oxidación

o porque la eritromicina A se oxida por adición de un agente de oxidación, y seguidamente tiene lugar una reacción con R_{3}SiCl y/o R_{3}Si-imidazol o (R_{3}Si)_{2}NH o R_{3}SiO_{3}SCF_{3}, donde R significa CH_{3}, C_{2}H_{5}, bajo condiciones básicas para la generación del compuesto de la fórmula (X).

6. Compuestos de la fórmula (XI)

19

en la que R significa CH_{3} o C_{2}H_{5} y en la que R' significa H o SiR_{3}.

7. Procedimiento para la producción de un compuesto de la fórmula (XI) conforme a la reivindicación 6, caracterizado porque se mezcla un compuesto de la fórmula (X) conforme a la reivindicación 4 bajo condiciones básicas con un agente de metilación.

8. Compuesto de la fórmula (XII)

20

9. Procedimiento para la producción del compuesto de la fórmula (XII) conforme a la reivindicación 8, caracterizado porque se hidroliza un compuesto de la fórmula (XI) conforme a la reivindicación 6 bajo condiciones ácidas.

10. Uso de uno o más de los compuestos X, XI o XII conforme a las reivindicaciones 4, 6 u 8 en la producción de desclaritromicina.