ES2245778T3 - Vacuna contra el cancer de prostata. - Google Patents

Abstract

VACUNAS CAPACES DE PRODUCIR UNA RESPUESTA INMUNE ANTITUMORAL INMUNE PARA TUMORES DE PROSTATA. EL INGREDIENTE ACTIVO EN TALES VACUNAS SE SELECCIONA DEL GRUPO QUE INCLUYE: AL MENOS UN ANTIGENO SOBRERREPRESENTADO EN LA GLANDULA PROSTATICA O UNA PARTE INMUNOLOGICAMENTE EFICAZ DE LA MISMA.; UN SISTEMA DE EXPRESION CAPAZ DE GENERAR IN SITU DICHO ANTIGENO O PARTE DEL MISMO; UN DNA PURO QUE CODIFICA DICHO ANTIGENO O PARTE DEL MISMO; Y UN ANTICUERPO ANTIIDIOTIPICO O FRAGMENTO DEL MISMO QUE REFLEJA DICHO ANTIGENO O PARTE.

Description

Vacuna contra el cáncer de próstata.

Campo técnico

La presente invención se refiere al campo de la prevención y tratamiento del cáncer de próstata. Más específicamente, la invención se refiere al uso de (1) antígeno o antígenos asociados a la próstata, (2) sistemas de expresión de antígeno o antígenos asociados a la próstata que son péptidos o proteínas o (3) anticuerpos antiidiotípicos portadores de la imagen interna del o de los antígenos formulados como vacunas para producir una respuesta inmunitaria para prevenir o tratar el cáncer de próstata.

Técnica anterior

El cáncer es la segunda causa de muerte en los Estados Unidos que supone casi 500.000 muertes al año. Anualmente se diagnostica en los Estados Unidos más de 1.000.000 de nuevos casos de cáncer. La incidencia de cáncer está creciendo en gran medida como consecuencia del mayor tiempo de vida de la población anciana. El cáncer es una causa importante de muerte en todas las naciones industrializadas, en las que la esperanza de vida sigue aumentando. Se espera que la morbilidad y la mortalidad por cáncer sigan aumentando en todas las áreas industrializadas del mundo.

El cáncer de próstata es el tumor maligno más común entre los varones en los Estados Unidos, y constituye el 28% de los tumores malignos en varones. Se estima que en los Estados Unidos habrá 165.000 nuevos casos de cáncer de próstata en 1993 y 35.000 muertes (Boring, CC, y col. CA Cancer J Clin (1993) 43:7-26).

El cáncer de próstata sigue siendo refractario al tratamiento a pesar de muchos años de esfuerzos para mejorar la terapia. La cirugía y la radiación siguen siendo los fundamentos de la terapia; se necesitan mejores modalidades terapéuticas. El desarrollo de vacunas ha sido lento y en la actualidad no existe en el mercado ninguna vacuna aprobada por la FDA para comercialización en ninguna forma de cáncer. Por tanto, existe una necesidad continuada de desarrollo de nuevos compuestos terapéuticos y profilácticos eficaces en la prevención y el tratamiento de cáncer de próstata

Se conoce el uso de vacunas como terapia contra el cáncer (revisado en Hoover, Jr. HC y Hanna, Jr. MG, Biological Therapy of Cancer (1991), Devita, Jr., DT, y col., eds. J.B. Lippincott Co., pág. 670-701. Existen numerosos informes en la bibliografía abierta de vacunas consistentes en células tumorales enteras autólogas o alogénicas o sus extractos formulados con adyuvantes bacterianos como el Bacilo Calmette-Guerrin (BCG), Corynebacterium parvum o virus vaccinia. No se han dado informes del uso de un antígeno único para la próstata, como una proteína asociada a la próstata o un anticuerpo antiidiotípico portador de la imagen interna del antígeno de próstata como vacuna para el cáncer de próstata.

La patente de EE.UU. n° 3.960.827 describe un antígeno de polipéptido asociado a cáncer que se describe como poseedor de un peso molecular de 20 a 27 kd y como asociado a una serie de tipos de cánceres. Se sugiere el uso de este antígeno en vacunas antitumorales. La patente de EE.UU. n° 4.372.945 describe el uso de células tumorales como antígenos secundarios en tratamiento inmunoterapéutico del cáncer. La patente de EE.UU. n° 4.446.122 describe el uso de antígeno específico de la próstata (PSA) aislado a partir de tejido humano para preparar anticuerpos para diagnóstico de tumores. La patente de EE.UU. n° 4.468.457 describe el aislamiento de un antígeno de colon específico que se digiere con tripsina para obtener un péptido usado para producir anticuerpos monoespecíficos contra el antígeno. La patente de EE.UU. n° 4.689.222 describe un procedimiento para aliviar el dolor sintomático asociado con las neoplasias administrando una dosis baja de gonadotropina coriónica humana insuficiente para provocar una respuesta humoral. La patente de EE.UU. n° 4.877.611 describe vacunas que contienen antígenos asociados a tumores. Las vacunas contienen el antígeno asociado a tumor en presencia de adyuvantes específicos. La solicitud PCT WO91/11465 describe vacunas anticancerosas que usan anticuerpos antiidiotípicos que emulan un antígeno producido por o asociado con la célula maligna.

La patente de EE.UU. n° 5.053.224 concedida el 1 de octubre de 1991 describe la preparación de anticuerpos antiidiotípicos policlonales y monoclonales que reconocen el parátopo de un anticuerpo antitumoral. La patente concedida describe además el uso de estos anticuerpos antiidiotípicos generalmente para estimular la producción de anticuerpos anti-antiidiotípicos en pacientes con tumores. Se ha descrito la generación de anticuerpos antiidiotípicos monoclonales para tumores de próstata de rata de Dunning (C.B. Dai y col., FASEB J., volumen 2, 1988, pA692, resumen n° 2301, y, C.L. Lee y col., Proc. Am. Assoc. Cancer Res. Annu. Meet., 1988, 29, 253).

Se conoce el uso de liposomas como portadores de antígenos de proteínas o péptidos (C.R. Alving, Journal of immunological methods 190 (1991) 1-13 y documento WO 93/10763.

Se ha postulado la inmunización profiláctica y terapéutica para el tratamiento de cáncer de próstata mediante estimulación activa, pasiva o inespecífica (R.J. Albin, Oncology 31, 177-202, 1975).

La presente invención se refiere al uso de antígenos de próstata o sus representantes en vacunas para producir una respuesta inmunitaria para prevenir o tratar el cáncer de próstata.

Descripción de la invención

Mientras la técnica anterior sugiere el uso de antígenos asociados exclusivamente a tejido tumoral como componentes de vacunas antitumorales, no parece existir ninguna sugerencia para usar antígenos que estén representados exclusivamente en tejido huésped para el tumor. Como la próstata no es un órgano esencial, la eliminación de la glándula prostática, que pudiera ser un efecto concomitante de las vacunas de la invención, no influye de manera adversa en la salud general del sujeto. Así, el cáncer de próstata ofrece una oportunidad única para tratamiento con vacunas que caracterizan al órgano huésped en sí, en vez de a la naturaleza maligna o metastásica de las células en sí.

En consecuencia, según un aspecto, la invención se dirige al uso de un ingrediente activo seleccionado del grupo constituido por:

(a) al menos un antígeno sobrerrepresentado en la glándula prostática normal de dicho sujeto o una parte inmunológicamente eficaz del mismo en el que dicho antígeno es PSA humano, PSMA humano o PAP producido por recombinación o sintéticamente;

(b) un sistema de expresión que genera en dicho sujeto un antígeno del párrafo (a) o una parte inmunológicamente eficaz del mismo; y

(c) ADN desnudo que codifica dicho antígeno del párrafo (a) o una parte inmunológicamente eficaz del mismo;

para la preparación de una composición farmacéutica que desencadena una respuesta inmunitaria en un sujeto humano.

Modos de realizar la invención

La invención utiliza composiciones que contienen, como ingrediente activo, al menos un antígeno que está sobrerrepresentado en un tejido de próstata o una parte inmunológicamente eficaz del mismo o un representante del mismo. Por "sobrerrepresentado" se entiende que la concentración de este antígeno en la próstata es suficientemente mayor que su concentración en cualquier otro tejido, como el de la próstata, como para ser objeto eficazmente de la respuesta inmunitaria suscitada contra este antígeno con receso con respecto a otros órganos o tejidos. El receso puede medirse mediante toxicidad clínica global en el sujeto. La toxicidad en el sujeto es generalmente de grado 3 o inferior, preferentemente de grado 2 o inferior, más preferentemente de grado 1 o grado 0. El enfoque no pierde valor con respecto al cáncer de próstata metastástico, dado que los antígenos sobrerrepresentados en la glándula prostática también son transportados por las células metastásicas.

Por "parte inmunológicamente eficaz del mismo" se entiende la parte de un antígeno, tomada en solitario, que es capaz de desencadenar una respuesta inmunitaria. Normalmente, dichas partes representan un epítopo individual o un subconjunto específico de epítopos que comprende el antígeno completo.

El antígeno puede ser cualquier sustancia que sea, en el sentido usado anteriormente, única o esté sobrerrepresentada en el tejido prostático. Así, el antígeno puede ser una proteína o un péptido, o un fragmento de péptido de la proteína, o puede ser un hidrato de carbono, glucoproteína, lipoproteína o lípido. Más comúnmente, el antígeno será una proteína o un fragmento de péptido de la misma; o una proteína que incluya la secuencia de aminoácidos del antígeno o epítopo. Las proteínas pueden modificarse por glicosilación u otra derivación. Está claro que en el caso de antígeno de proteína, pueden usarse también péptidos que representen epítopos del antígeno. La secuencia relevante de aminoácidos puede suministrarse en el contexto de una gran proteína de fusión que contiene secuencia de aminoácidos heteróloga para el antígeno o su epítopo.

También se entiende que en el caso de antígenos de péptidos o de antígenos de proteínas, los antígenos pueden generarse in situ proporcionando sistemas de expresión adecuados que contienen el ADN que codifica el péptido o proteína deseado (incluyendo proteínas de fusión que contienen la secuencia relevante); entonces pueden usarse sistemas de expresión como ingrediente activo en las vacunas. Por "sistemas de expresión" se entiende cualquier constructo de ADN que sea eficaz para producir la proteína codificada en el entorno deseado. Los sistemas de expresión convencionales contienen el ADN de codificación ligado operativamente a secuencias de control como promotores, señales de terminación y similares. Sin embargo, recientemente se ha demostrado que las secuencias de codificación en sí pueden comportarse como sistemas de expresión eficaces in situ cuando se inyectan en animales. El trabajo de Ulmer, J.B. y col., Science (1993) 259:1745-1749, y resumido en una presentación de "Research News" por Cohen, J., sobre la misma cuestión en las páginas 1691-1692 demuestra este concepto. La inyección de ADN "desnudo" que codifica la nucleoproteína de influenza A demostró tener carácter protector frente a una acometida del virus. Aunque no se entiende por qué dicho ADN desnudo es capaz aparentemente de expresión para proporcionar la proteína in situ, aparentemente éste es el caso. En consecuencia, dicho ADN "desnudo" se incluye en la definición de sistemas de expresión en la presente memoria descriptiva.

Por otra parte, cualquier antígeno puede ser emulado por un anticuerpo antiidiotípico; desde hace tiempo se reconoce que los anticuerpos antiidiotípicos pueden prepararse de manera que lleven una imagen interna de antígenos asociados con tumor (Herlyn, D., y col., Science (1986) 232:100-102.

Antígenos ilustrativos

El primer antígeno ampliamente estudiado que está sobrerrepresentado en la glándula prostática es la fosfatasa ácida prostática (PAP). Niveles elevados de PAP en el torrente sanguíneo se consideran indicativos de cáncer de próstata, y esta enzima se ha estudiado ampliamente (Yarn, Amer J Med (1974) 56:604). Se describieron procedimientos mejorados de detección de cáncer usando esta enzima en Chu y col. en la solicitud PCT WO79/00475. La estructura de la enzima ha sido estudiada también por Sharief, F.S., y col., Biochem Biophys Res Commun (1992) 184:1468-1476 y por Van Etten, R.L., y col., J Biol Chem (1991) 266:9993-9999. La secuencia de nucleótidos que codifican PAP humana se ha determinado a partir de un clon de ADNc de longitud completa (Sharief, F.S., y col., Biochem Biophys Res Commun (1989) 180:79-86; Tailor, P.G., y col., Nucleic Acids Res (1990) 18:4928).

Además de PAP, se conocen otros candidatos adecuados para antígenos sobrerrepresentados en tejido prostático. El más destacado entre éstos es el "antígeno específico de la próstata" o "PSA".

La patente de EE.UU. n° 4.446.122 describe procedimientos para la purificación de antígeno específico de la próstata (PSA) humano a partir de tejido de próstata humano canceroso o normal, fluido prostático, células malignas prostáticas humanas cultivadas o sus medios. También se describen anticuerpos policlonales y monoclonales para antígeno específico de la próstata y su uso en un procedimiento para diagnosticar carcinoma de la próstata. PSA es un miembro de la familia de calicreína glandular y es una proteasa con especificidad restringida semejante a quimiotripsina; está presente en las células epiteliales que comprenden los elementos ductales prostáticos. Se ha demostrado en todos los tumores prostáticos primarios y metastásicos comprobados y en próstata benigna normal, pero no en tejidos cancerosos no prostáticos o en tejidos normales distintos de los de la próstata.

Se ha determinado la secuencia completa de aminoácidos de PSA a partir de plasma seminal humano (Watt KW y col., Proc Natl Acad Sci USA (1986) 83:3166-3170). El PSA consta de una única cadena de polipéptidos con 240 residuos de aminoácidos y tiene un peso molecular calculado de 26.496. Posiblemente hay cadenas laterales de hidratos de carbono unidas. El ADNc que codifica PSA ha sido producido y caracterizado (Lundwall A, Lilja, H, FEBS Lett (1987) 214:317-322; Schultz P, y col., Nucleic Acids Res (1988) 16:6226; y Henttu P y Bihko P, Biochem and Biophys Res Commun (1989) 160:903-910). También se ha caracterizado el gen para PSA (Lundwall A, Biochem and Biophys Res Commun (1989) 162:1151-1159, Riegman, PHJ, y col., Biochem and Biophys Res Commun (1989) 159:103-111 y Klobeck G, y col., Nucleic Acids Res 1989 17:3981).

También se ha descrito el ADNc que codifica un antígeno de membrana específico de la próstata (PSMA) diferente (Israeli RS y col., Cancer Res (1993) 53:227-230). El ADNc consiste en 2,65 kilobases y una parte de la región de codificación desde el nucleótido 1.250 al 1.700 tiene una homología del 54% con respecto al ARNm receptor de transferrina humano. En contraste con PSA y la fosfatasa ácida prostática que secretan proteínas, el antígeno de membrana específico de la próstata es una proteína de membrana integral.

El PSMA (peso molecular 100.000) tiene análogamente representación en células de próstata benignas y neoplásicas con tinción más intensa observada en células malignas. Las metástasis de cáncer de próstata tienen también representación del antígeno. Este antígeno, por tanto, es un candidato atractivo para la vacuna por las mismas razones que las descritas para PSA. Por otra parte, PSMA es una proteína de membrana integral y no una proteína secretada, como PSA, y, por tanto, puede ser un componente de vacuna todavía más apropiado.

La lista anterior de antígenos conocidos que están sobrerrepresentados en la próstata: fosfatasa ácida prostática (PAP); antígeno específico de la próstata (PSA); y antígeno de membrana específico de la próstata (PSMA), se ofrecen con fines ilustrativos.

Estos antígenos bien conocidos (o los fragmentos portadores de epítopos de los mismos) son proteínas (o péptidos) y son útiles en las vacunas de la invención. Sin embargo, la invención incluye cualquier otro antígeno sustancialmente presente exclusivamente en la glándula prostática de manera que el tejido obtenido de próstata pueda distinguirse de otros tejidos en virtud de la presencia de estos antígenos.

Preparación de los antígenos

Los antígenos útiles en las vacunas pueden prepararse mediante cualquier procedimiento adecuado. Los antígenos pueden aislarse y purificarse a partir de tejido prostático usando procedimientos convencionales. Ya se conoce la purificación de los antígenos representativos expuestos anteriormente, y pueden emplearse técnicas conocidas por la técnica para su purificación. Además, pueden usarse ventajosamente columnas de afinidad que emplean anticuerpos o fragmentos de los mismos para adsorción específica del antígeno deseado. La naturaleza del procedimiento de purificación dependerá, por supuesto, de la naturaleza del antígeno obtenido.

En antígenos que son proteínas o péptidos, se dispone de una serie de opciones además del aislamiento y la purificación. Además, para técnicas de ingeniería genética, pueden prepararse péptidos, e incluso proteínas, usando procedimientos estándar de síntesis química, preferentemente las técnicas disponibles comercialmente basadas en fase sólida. Estas técnicas son bien conocidas y pueden adquirirse sistemas automatizados para realizarlas, y emplearse según las instrucciones del fabricante.

Además, los antígenos de proteínas o péptidos pueden prepararse usando ingeniería genética. Los procedimientos para la producción de antígenos puros a partir de ADN que codifica el antígeno deseado son bien conocidos por los expertos en la técnica. Brevemente, el ADN preferido se expresa en un vector de expresión recombinante adecuado como el adaptado para E. coli; levaduras, como Saccharomyces cerevisiae o Pichia pastoris; u hongos filamentosos como Aspergillus nidulans. Las levaduras, hongos o bacterias pueden cultivarse en cultivo continuo para producir proteína recombinante, que después puede aislarse y purificarse. Alternativamente, pueden usarse organismos superiores para producción de proteínas recombinantes. Por ejemplo, el ADN codificador puede expresarse en un vector de expresión de virus de insecto, como un baculovirus recombinante, y usar el baculovirus recombinante resultante para infectar células SF9 cultivadas susceptibles (células de insecto Spodotera frugiperda) para producir el producto de proteína del ADN. Otros sistemas de expresión usados comúnmente incluyen los apropiados para la producción de proteínas en células de mamífero, como células CHO, o incluso en células vegetales. La elección del huésped determinará la naturaleza del procesamiento postraduccional, y es una consideración en la concepción de técnicas de
purificación.

La preparación de formas recombinantes de antígenos de proteínas en una diversidad de células huésped produce una diversidad de modificaciones postraduccionales que afectan a la inmunogenicidad y a otras propiedades farmacéuticas, como la farmacocinética, del producto. En consecuencia, aunque se ha usado antígeno específico de la próstata (PSA) humano aislado de tejidos humanos para inducir la producción de anticuerpos para uso diagnóstico, el inmunogén preparado de esta forma difiere del inmunogén preparado en células no humanas, como células de insecto. Las modificaciones postraduccionales peculiares del huésped recombinante producen alternancias en el patrón de glicosilación, el plegamiento y similares.

La técnica de expresión recombinante puede usarse también para producir partes del antígeno deseado, en vez del antígeno completo. Por ejemplo, puede ser deseable expresar el dominio extracelular sin los dominios intracelular y/o transmembrana para facilitar la purificación del antígeno asociado a membrana. Análogamente, puede ser deseable expresar exclusivamente los epítopos de elección, eliminando los epítopos competidores o no relacionados. Todo lo anterior puede realizarse mediante técnicas bien conocidas para los expertos en la materia. Las técnicas para identificar péptidos que representan epítopos importantes del antígeno se conocen bien, y se resumen en Berzofsky, JA y Berkower IJ, Fundamental Immunology, 2ª edición, Raven Press, (1989), W.E. Paul (ed.) pág. 169-208. Los péptidos identificados pueden sintetizarse entonces usando síntesis convencional de péptidos en fase sólida (Merrifield RB, J Am Chem Soc (1983) 85:2149-2154) que ahora se ha automatizado (Merrifield RB, Science (1965) 150:178-185), según se describe anteriormente. Un procedimiento alternativo diseñado para formar un gran número de péptidos para detección selectiva es la técnica de la "bolsa de té" (Houghten RA, Proc Natl Acad Sci USA (1985) 82:5131-
5135.

Ya se prepare el antígeno o un epítopo adecuado sintéticamente o por recombinación, puede prepararse inicialmente como una proteína de fusión que contiene una secuencia de aminoácidos heteróloga con la secuencia de aminoácidos de interés. La construcción de dichas proteínas de fusión es común en la producción recombinante para estabilizar el producto producido en la célula. Puede ser innecesario estabilizar de esta forma el péptido o proteína deseado, especialmente si debe secretarse desde la célula recombinante. Sin embargo, la proteína de fusión en sí puede ser útil como ingrediente en la vacuna, especialmente si la secuencia de aminoácidos heteróloga adicional suministra una inmunogenicidad que potencia la propiedad en el epítopo relevante. Así, las proteínas de fusión que contienen las secuencias de aminoácidos relevantes pueden usarse simplemente como precursores del inmunogén o pueden proporcionarse como producto final para su uso en la vacuna. Si se pretende que la proteína de fusión sea un producto intermedio, es útil proporcionar un sitio de escisión entre la parte heteróloga y el epítopo deseado. Dichos sitios de escisión incluyen, por ejemplo, las secuencias diana de diversas enzimas proteolíticas, o, si el epítopo no contiene metionina, pueden constituir simplemente un residuo de metionina que está escindido por bromuro de cianógeno. Los procedimientos para proporcionar sitios de escisión son bien conocidos en la técnica.

Preparación de anticuerpos antiidiotípicos

Un enfoque alternativo para formular las vacunas de la invención consiste en preparar un "representante" del antígeno en forma de un anticuerpo antiidiotípico que lleva una imagen interna del antígeno. Los anticuerpos antiidiotípico pueden prepararse en relación con antígenos de cualquier naturaleza química, incluyendo, además de péptidos y proteínas, hidratos de carbono, lípidos y pequeñas moléculas.

En la patente de EE.UU. n° 5.053.224 se describen formas de preparar anticuerpos antiidiotípicos monoclonales y policlonales que llevan la imagen interna de los antígenos asociados a tumor, cuya descripción se incorpora como referencia en la presente memoria descriptiva. Brevemente, los anticuerpos antiidiotípicos policlonales pueden producirse inmunizando animales con anticuerpos antiidiotípicos monoclonales dispuestos contra el antígeno y detectados selectivamente en cuanto a reactividad con el antígeno y en cuanto a detección selectiva de antisueros que reaccionan con los anticuerpos antiidiotípicos para antígenos prostáticos. También pueden prepararse anticuerpos monoclonales a partir de dichos animales usando técnicas estándar de inmortalización de las células secretoras de anticuerpos del animal y detección selectiva de los cultivos con anticuerpos idiotípicos en competencia con el antígeno prostático. Se prefieren monoclonales humanos o murinos; también pueden usarse preparaciones policlonales en una diversidad de sistemas de mamíferos.

Composiciones de vacunas

Mientras los antígenos prostáticos de la invención pueden constituir en sí mismos la vacuna, es una característica adicional de la invención administrar estos antígenos prostáticos en una formulación diseñada para potenciar las respuestas antitumorales. Las formulaciones incluyen, pero no se limitan a, la incorporación del antígeno prostático en un liposoma con o sin adyuvantes adicionales, el uso de adyuvantes y/o la clonación de ADN que codifica antígenos de péptidos o proteínas en un vector viral o bacteriano.

Por supuesto, las formulaciones pueden no contener sólo un único ingrediente activo; puede usarse cualquier combinación de las sustancias inmunogénicas de la invención. Sin embargo, generalmente, dichos "cócteles" comprenden ingredientes activos del mismo tipo, es decir, generalmente la mezcla de ingredientes activos incluirá dos o más antígenos, dos o más sistemas de expresión para antígenos de proteínas o péptidos o dos o más anticuerpos antiidiotípicos que representan diferentes antígenos. Sin embargo, no hay ninguna razón teórica para que, por ejemplo, una vacuna individual no pueda incluir tanto anticuerpo antiidiotípico como un sistema de expresión.

Si va a usarse la forma de proteína del antígeno, puede ser deseable acoplar la proteína o péptido a un portador para potenciar la inmunogenicidad. Dicho acoplamiento puede efectuarse usando técnicas de acoplamiento estándar y convencionales, utilizando opcionalmente fracciones de espaciador para proporcionar una yuxtaposición correcta del portador y el epítopo. Se conoce un gran número de portadores adecuados para dichos fines, incluyendo hemocianina de lapa californiana, proteína de cápside interno VP6 de rotavirus, proteína pilina y similares. Además, puede obtenerse inmunogenicidad potenciada suministrando el epítopo o antígeno en forma de una proteína de fusión en la que la parte portadora del epítopo se funde con secuencias de aminoácidos heterólogas para potenciar el efecto del epítopo administrado.

Ya se administren en solitario, acoplados a un portador o como parte de una proteína de fusión, las proteínas portadoras del epítopo de la invención, los constructos de ADN y los anticuerpos antiidiotípicos se administran en presencia de excipientes adecuados. Pueden usarse excipientes convencionales, pero son de particular interés los siguien-
tes.

Pueden usarse composiciones que emplean liposomas que encapsulan o conjugan el ingrediente activo de la vacuna y se prefieren especialmente. Los liposomas se localizan en el sistema reticuloendotelial, uno de los sitios de generación de la respuesta inmunitaria en un huésped mamífero incluyendo al ser humano y potencia la respuesta inmunitaria a antígenos incorporados en el liposoma. Las formulaciones liposómicas que incorporan los antígenos prostáticos pueden incluir también adyuvantes del sistema inmunitario, incluyendo uno o más lipopolisacáridos (LPS), lípido A o dipéptido de muramilo (MDP), según se describe en Liposomes, Ostro MJ, Editor, Marcel Dekker, Inc. (1983) página 249. Pueden incorporarse también otros adyuvantes del sistema inmunitario como glucano o ciertas citoquinas, incluyendo interleuquinas, interferones y factores de estimulación de colonias, como IL1, IL2, interferón gamma y GM-CSF con antígeno en el liposoma.

El antígeno prostático puede formularse también con varios adyuvantes que potencian la respuesta antitumoral, en particular, la respuesta inmunitaria celular a los antígenos de próstata. Dichos adyuvantes incluyen, pero no se limitan a, Adyuvante Completo de Freund, alumbre, lípido A, monofosforil lípido A, Bacilo de Calmette-Guérin (BCG) y otras bacterias, polisacáridos como glucano, acemannano y lentinano, saponinas, endotoxina detoxificada (DETOX), tripéptido de muramilo, dipéptido de muramilo y sus derivados, SAFI, linfoquinas y citoquinas, incluyendo interleuquinas e interferones como IL2 e interferón gamma, así como factores de estimulación de colonias como GM-CSF, copolímeros de bloque no fónicos o complejos de estimulación de inmunidad (ISCOMS).

En una formulación adicional, el ADN que codifica proteínas como, por ejemplo, PAP, PSA, PSMA o partes de las mismas se administra en un vector de expresión viral como vaccinia u otros poxvirus o vectores bacterianos como BCG. Los vectores virales se describen, por ejemplo, en Hruby, D.E., Vet Parasitol (1988) 29:281-282, y en Ulu, SI "AIDS Research Reviews", Dekker, Inc. (1991) 1:403-416. Los vectores recombinantes pueden administrarse de la manera tradicional a través de vía cutánea o de una inyección o pueden incluirse en un liposoma inyectable según se ha descrito anteriormente. Como se ha observado anteriormente, el ADN "desnudo" puede usarse también en forma de sistema de expresión en las vacunas de la invención.

Administración y uso

En el procedimiento de la invención, la vacuna contra el cáncer de próstata se administra para prevención y tratamiento del cáncer de próstata. La vacuna contra el cáncer de próstata de la invención se administra a sujetos en riesgo de desarrollar cáncer de próstata o de mostrar un diagnóstico del mismo. Mientras que el cáncer diana es específicamente el asociado a la glándula prostática, el efecto de las vacunas de la invención será el de potenciar el potencial del sistema inmunitario en general, generando respuestas de células T, así como la producción de anticuerpos. En la medida en que se efectúa la potenciación del sistema inmunitario celular, las vacunas de la invención son útiles en la prevención y terapia de otros tipos de cáncer, además del de próstata. Así, las respuestas celulares generadas son eficaces, por ejemplo, contra cánceres de colon, pulmón, vejiga, estómago, mama, cuello uterino y similares, así como contra ciertos linfomas y leucemias.

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Las composiciones se formulan para administración parenteral usando una formulación apropiada para la ruta de administración como las que se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences, última edición, Mack Publishing Company, Easton, Pensilvania.

Las rutas adecuadas para administración parenteral incluyen inyección intracutánea, subcutánea, intramuscular e intravenosa o administración oral. Para formulación en inyección, la vacuna se formula generalmente en un líquido adecuado como solución de Hank o solución de Ringer, junto con excipientes adecuados que proporcionan tamponamiento, estabilización y otras características deseables, así como componentes adicionales deseados, según se describe más adelante. Las rutas alternativas de administración parenteral incluyen administración oral, en cuyo caso pueden incluirse también componentes adicionales para estabilizar la preparación.

Además de la administración en un vehículo isotónico apropiado para inyección, se usan liposomas de modo deseable como un vehículo para dirigir el producto al sistema inmunitario.

En general, el intervalo de dosificación para los antígenos de próstata de la invención se sitúa en el orden de 0,01 g a 100 mg por dosis, preferentemente de 0,1 g a 10 mg por dosis y más preferentemente de 10 g a 1 mg por dosis. Los volúmenes adecuados de administración parenteral son de aproximadamente 0,1 a 5 ml.

Los protocolos pueden implicar la administración de cócteles de varios antígenos o sus representantes o puede implicar la administración secuencial de estos ingredientes activos. Los antígenos y sus representantes pueden representar una diversidad de inmunógenos o pueden representar diferentes formas del mismo inmunógeno. En general, pueden diseñarse protocolos que impliquen a una o más especies inmunogénicas según los procedimientos de optimización rutinarios.

La vacuna contra el cáncer de próstata de la invención se administra generalmente en dosis múltiples, normalmente una vez por semana durante uno o dos meses y con frecuencia decreciente posterior durante un período que se extiende hasta un año aproximadamente. Después del curso inicial de vacunación de un año, pueden darse inoculaciones de recuerdo cada dos meses a cinco años. En casos individuales pueden ser adecuados protocolos alternativos. Por ejemplo, si la formulación de la vacuna implica el uso de liposomas y se administra por vía intramuscular, la vacuna puede administrarse una vez al mes desde el principio, debido al efecto de depósito de los liposomas.

Además, puede ser ventajoso sustituir en las primeras administraciones una forma recombinante del antígeno en la que el gen de antígeno o el ADNc se administren en un vector de expresión vivo como, por ejemplo, virus vaccinia.

Una característica adicional de la invención es que la vacuna puede formularse junto con adyuvantes que potencian las respuestas inmunitarias según se ha descrito anteriormente. Los antígenos de próstata pueden formularse con estos adyuvantes en solitario o pueden incorporarse en liposomas.

Claims (10)

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   1. Uso de un ingrediente activo seleccionado del grupo constituido por:

   (a) al menos un antígeno sobrerrepresentado en la glándula prostática normal de un sujeto o una parte inmunológicamente eficaz del mismo en el que dicho antígeno es PSA humano, PSMA humano o PAP producido por recombinación o sintéticamente;

   (b) un sistema de expresión que genera en dicho sujeto un antígeno del párrafo (a) o una parte inmunológicamente eficaz del mismo; y

   (c) ADN desnudo que codifica dicho antígeno del párrafo (a) o una parte inmunológicamente eficaz del mismo;

   para la preparación de una composición farmacéutica para inducir una respuesta inmunitaria antitumoral en un sujeto portador de un tumor prostático potencial o real.
2. 2. El uso de la reivindicación 1 en el que el antígeno está encapsulado en un liposoma o acoplado a un liposoma.
3. 3. El uso de la reivindicación 1 ó 2 en el que dicha composición incluye además al menos un adyuvante capaz de potenciar dicha respuesta inmunológica.
4. 4. El uso de la reivindicación 3 en el que dicho adyuvante se selecciona del grupo constituido por adyuvante completo de Freund;

   alumbre;

   lípido A;

   monofosforil lípido A;

   Bacilo Calmette-Guérin (BCG) u otro polisacárido bacteriano;

   saponinas;

   endotoxina detoxificada (DETOX);

   tripéptido de muramilo o dipéptido de muramilo o sus derivados;

   SAFI;

   linfoquinas o citoquinas;

   factores de estimulación de colonias;

   copolímeros de bloque no fónicos; y

   complejos de estimulación de inmunidad (ISCOMS).
5. 5. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 en el que dicho ingrediente activo es dicho antígeno o una parte inmunológicamente eficaz del mismo.
6. 6. El uso de la reivindicación 5 en el que dicho antígeno es PSA humano producido por recombinación.
7. 7. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 en el que dicho ingrediente activo es un sistema de expresión según se presenta en (b) de la reivindicación 1.
8. 8. El uso de la reivindicación 7 en el que dicho sistema de expresión comprende un vector de expresión vivo.
9. 9. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 en el que dicho ingrediente activo es ADN desnudo según se presenta en (c) de la reivindicación 1.
10. 10. El uso de las reivindicaciones 1 a 9

    en el que dicha composición sirve para tratar a un sujeto afectado de cáncer de próstata metastásico; y/o en el que dicha composición sirve para tratar a un sujeto tratado quirúrgicamente para extirpar dicho tumor pero que presenta un riesgo de recurrencia y en el que dicho sujeto recibe opcionalmente un tratamiento "neoadyuvante" antes de la extirpación quirúrgica de dicho tumor de próstata; o en el que dicha composición sirve para tratar a un sujeto portador potencial de un tumor de próstata en riesgo de dicho tumor.