ES2247423T3 - Dispositivo recubierto homogeneamente que tiene propiedades osteoinductoras y osteoconductoras. - Google Patents
Dispositivo recubierto homogeneamente que tiene propiedades osteoinductoras y osteoconductoras.Info
- Publication number
- ES2247423T3 ES2247423T3 ES02803343T ES02803343T ES2247423T3 ES 2247423 T3 ES2247423 T3 ES 2247423T3 ES 02803343 T ES02803343 T ES 02803343T ES 02803343 T ES02803343 T ES 02803343T ES 2247423 T3 ES2247423 T3 ES 2247423T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- protein
- bone
- support
- gdf
- osteoinductive
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 81
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 81
- 230000002138 osteoinductive effect Effects 0.000 claims abstract description 48
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims abstract description 37
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 claims abstract description 32
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 claims abstract description 30
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 20
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims abstract description 17
- 230000000278 osteoconductive effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 78
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 66
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 61
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 55
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 41
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 37
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 32
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims description 24
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 14
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 13
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 13
- 239000007943 implant Substances 0.000 claims description 12
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 11
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 9
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 7
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 claims description 6
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 5
- 102100035379 Growth/differentiation factor 5 Human genes 0.000 claims description 5
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 5
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 5
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 5
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 5
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 claims description 5
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 claims description 5
- 108010090254 Growth Differentiation Factor 5 Proteins 0.000 claims description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 4
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 3
- 239000004568 cement Substances 0.000 claims description 3
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 claims description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 3
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010090250 Growth Differentiation Factor 6 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100035368 Growth/differentiation factor 6 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100035363 Growth/differentiation factor 7 Human genes 0.000 claims description 2
- 101710204283 Growth/differentiation factor 7 Proteins 0.000 claims description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052586 apatite Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000023753 dehiscence Effects 0.000 claims description 2
- VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;fluoride;triphosphate Chemical compound [F-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D 0.000 claims description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 claims description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 claims description 2
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 claims description 2
- 229910000391 tricalcium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000019731 tricalcium phosphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940078499 tricalcium phosphate Drugs 0.000 claims description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 69
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 27
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 22
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 14
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 14
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 13
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 12
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 11
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 10
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 10
- 108010007726 Bone Morphogenetic Proteins Proteins 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 9
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 8
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 8
- 102000007350 Bone Morphogenetic Proteins Human genes 0.000 description 7
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 7
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 229940112869 bone morphogenetic protein Drugs 0.000 description 7
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 7
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 7
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 229910010293 ceramic material Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 6
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 6
- 210000004409 osteocyte Anatomy 0.000 description 6
- 230000002188 osteogenic effect Effects 0.000 description 6
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 6
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 241000906034 Orthops Species 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 5
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 5
- 230000004819 osteoinduction Effects 0.000 description 5
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 108010014172 Factor V Proteins 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- 101001023988 Homo sapiens Growth/differentiation factor 5 Proteins 0.000 description 3
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 3
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 3
- -1 for example Proteins 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 3
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005618 Fries rearrangement reaction Methods 0.000 description 2
- 108010058683 Immobilized Proteins Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 208000006735 Periostitis Diseases 0.000 description 2
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000316 bone substitute Substances 0.000 description 2
- 239000004068 calcium phosphate ceramic Substances 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 230000001582 osteoblastic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003455 parietal bone Anatomy 0.000 description 2
- 210000003460 periosteum Anatomy 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 2
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 2
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- QAXBVGVYDCAVLV-UHFFFAOYSA-N tiletamine Chemical compound C=1C=CSC=1C1(NCC)CCCCC1=O QAXBVGVYDCAVLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 2
- CPKVUHPKYQGHMW-UHFFFAOYSA-N 1-ethenylpyrrolidin-2-one;molecular iodine Chemical compound II.C=CN1CCCC1=O CPKVUHPKYQGHMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NPUKDXXFDDZOKR-UHFFFAOYSA-N 3-(1-phenylethyl)-4-imidazolecarboxylic acid ethyl ester Chemical compound CCOC(=O)C1=CN=CN1C(C)C1=CC=CC=C1 NPUKDXXFDDZOKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 108091071247 Beta family Proteins 0.000 description 1
- 108010049931 Bone Morphogenetic Protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010049870 Bone Morphogenetic Protein 7 Proteins 0.000 description 1
- 102100024506 Bone morphogenetic protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100022544 Bone morphogenetic protein 7 Human genes 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 241001269524 Dura Species 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710204282 Growth/differentiation factor 5 Proteins 0.000 description 1
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 1
- 101000762366 Homo sapiens Bone morphogenetic protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001059454 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase MARK2 Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 229920000153 Povidone-iodine Polymers 0.000 description 1
- 102100028904 Serine/threonine-protein kinase MARK2 Human genes 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 102000046299 Transforming Growth Factor beta1 Human genes 0.000 description 1
- 101800002279 Transforming growth factor beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 241000425571 Trepanes Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008468 bone growth Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000002805 bone matrix Anatomy 0.000 description 1
- 230000010478 bone regeneration Effects 0.000 description 1
- 210000003557 bones of lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000012928 buffer substance Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000022159 cartilage development Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 108010033702 ethnor Proteins 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000002070 germicidal effect Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 1
- 102000045896 human BMP2 Human genes 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 238000000399 optical microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000006259 organic additive Substances 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 229960001621 povidone-iodine Drugs 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 description 1
- 230000029983 protein stabilization Effects 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 108010023714 recombinant human bone morphogenetic protein-2 Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 231100001055 skeletal defect Toxicity 0.000 description 1
- 230000012488 skeletal system development Effects 0.000 description 1
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 210000000798 superior sagittal sinus Anatomy 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 229960004523 tiletamine Drugs 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 229940099456 transforming growth factor beta 1 Drugs 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001366 zolazepam Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
- A61L27/227—Other specific proteins or polypeptides not covered by A61L27/222, A61L27/225 or A61L27/24
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/02—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing inorganic materials
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
- A61L24/10—Polypeptides; Proteins
- A61L24/108—Specific proteins or polypeptides not covered by groups A61L24/102 - A61L24/106
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/02—Inorganic materials
- A61L27/12—Phosphorus-containing materials, e.g. apatite
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/28—Materials for coating prostheses
- A61L27/34—Macromolecular materials
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Surgery (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Glass Compositions (AREA)
- Apparatuses And Processes For Manufacturing Resistors (AREA)
- Dental Preparations (AREA)
- Permanent Magnet Type Synchronous Machine (AREA)
- Prostheses (AREA)
- Indole Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Dispositivo que tiene propiedades osteoinductoras y osteoconductoras in vivo, que comprende un soporte que contiene fosfato de calcio y una proteína osteoinductora, en el que dicho soporte está completamente recubierto con dicha proteína osteoinductora y en el que cantidades esencialmente idénticas de dicha proteína osteoinductora están presentes en todas y cada una de las zonas de la superficie de dicho soporte.
Description
Dispositivo recubierto homogéneamente que tiene
propiedades osteoinductoras y osteoconductoras.
La presente invención se refiere a un dispositivo
que tiene propiedades osteinductoras y osteoconductoras in
vivo, que comprende un soporte que contiene fosfato de calcio y
una proteína osteoinductora, en el que dicho soporte está recubierto
homogéneamente con dicha proteína. Además, la presente invención se
refiere a un método para la producción de un dispositivo que tiene
propiedades osteoinductoras y osteoconductoras in vivo. La
invención engloba una composición farmacéutica que comprende el
dispositivo de la invención o un dispositivo que es obtenible
mediante el método de la invención y se refiere al uso de dicho
dispositivo para la preparación de una composición farmacéutica que
va a utilizarse para el aumento de los huesos, para tratar defectos
óseos, para tratar enfermedades degenerativas y traumáticas del
disco intervertebral, para la elevación del piso sinusal y para el
tratamiento de la dehiscencia ósea. Finalmente, la invención se
refiere a un kit que comprende el dispositivo de la invención o un
dispositivo que es obtenible mediante el método de la invención.
Se ha demostrado que diversos fosfatos de calcio,
tales como el fosfato tricálcico beta
(Ca_{3}(PO_{4})_{2}) (FTC beta), fosfato
tricálcico alfa (FTC alfa) e hidroxiapatita (HA), son eficaces como
materiales de sustitución ósea. El FTC beta, por ejemplo, es
adecuado como material granulado y en trozos (bloques) para el
tratamiento de los defectos óseos. Los materiales de sustitución
ósea que contienen fosfato de calcio se utilizan normalmente cuando
la regeneración del hueso ya no es posible o sólo es posible con
dificultades. Además, los materiales de sustitución ósea se utilizan
cuando la formación de hueso adicional es un requisito previo para
la fijación posterior de un implante. Los fosfatos de calcio
muestran un efecto osteoconductor, es decir, representan una
estructura inerte que facilita la migración de las células desde el
hueso circundante. Sin embargo, la presencia de huesos o de células
mesenquimatosas diferentes es una condición previa para la nueva
formación de los huesos. El efecto de los fosfatos de calcio puede
aumentarse significativamente añadiendo esquirlas óseas. Los huesos
no son sólo osteoconductores, sino también osteogénicos
(estimulación de las células óseas para la neosíntesis de material
óseo) y osteoinductores, es decir, producen la transformación de
células madre mesenquimatosas no diferenciadas en osteoblastos y
condrocitos. Por motivos de seguridad, se prefieren las esquirlas
óseas autógenas para las preparaciones alogénicas o xenogénicas. Sin
embargo, la producción de huesos autogénicos siempre implica una
segunda intervención quirúrgica que, en muchos casos, no es aceptada
por el paciente.
Una alternativa al uso de huesos autogénicos es
el uso de factores de crecimiento y diferenciación óseos específicos
tales como GDF-5 (factor de crecimiento y
diferenciación 5) o diferentes proteínas morfogenéticas óseas (PMO).
Estos factores proteicos tienen un efecto osteoinductor que, sin
embargo, sólo pueden ejercer si se utilizan en forma inmovilizada.
En la bibliografía se describen fosfatos de calcio, colágeno y
colágeno mineralizado (fosfato de calcio que contiene colágeno) como
soportes (hidroxiapatita y FTC beta) (Hotz, 1994), apatita
hidroxílica procedente de extractos de algas (Gao, 1996), extractos
óseos (Gombotz, 1996) y colágeno (Friess, 1999). Los análisis de la
potencia de los soportes recubiertos, que están descritos en la
bibliografía, no presentan un aspecto uniforme, sino que muestran
variaciones significativas que son una consecuencia del tipo de
soporte seleccionado o del método de recubrimiento (Terheyden et
al. (1997)). Se describen varios métodos. En el documento WO
98/21972, se logra el recubrimiento mediante la precipitación rápida
de GDF-5 sobre FTC beta, disolviendo primero el
GDF-5 en un disolvente orgánico y precipitándolo
después añadiendo agua. Sin embargo, debido a la toxicidad de muchos
disolventes, no se prefiere un procedimiento de este tipo para la
producción de composiciones farmacéuticas. Lind et al. (1996)
llevan a cabo el recubrimiento de diversos materiales cerámicos de
fosfato de calcio en presencia de gelatina (obtenida normalmente a
partir de huesos de animales bovinos o cerdos) como proteína de
protección. Sin embargo, debido al aumento del riesgo de infección,
debe evitarse el uso de sustancias animales para la producción de
composiciones farmacéuticas y especialidades farmacéuticas. Friess
et al. (1999) y Gao et al. (1996) describen el
recubrimiento de colágenos con PMO-2. Sin embargo,
debido a la baja resistencia a la compresión de los colágenos, tales
soportes no son adecuados para todas las indicaciones. Esto se
aplica particularmente a las indicaciones en las que el hueso recién
formado tiene que sostener una carga de presión posterior. Además,
hasta ahora las calidades farmacéuticas del colágeno sólo están
disponibles a partir de fuentes animales. El documento DE 196 47 853
describe implantes óseos que comprenden una matriz de fosfato de
calcio recubierta con proteína (por ejemplo, PMO, GDF). Dichos
implantes se utilizan para el aumento óseo tras defectos
artificiales, defectos óseos tras la extirpación de quistes o
tumores, para tratar enfermedades del disco intervertebral y para la
elevación del
seno.
seno.
El documento US 5.385.887 describe formulaciones
de proteínas morfogenéticas óseas que se dice que han mejorado la
solubilidad y/o la estabilidad. Se describe que dicha mejora de la
solubilidad y estabilidad se logra utilizando una composición de
sacarosa, glicina y ácido glutámico.
El documento US 5.422.340 describe discos de
fosfato tricálcico impregnados con FCT-beta 1
(factor de crecimiento transformante beta 1) y Alam et al.,
Biomaterials 22 (2001), 1643-1651 describe
materiales cerámicos de fosfato de calcio bifásico impregnados con
proteína morfogenética ósea humana recombinante.
Por tanto, aunque diversos artículos describen el
uso de soportes recubiertos con proteína para el aumento óseo, no se
dispone de métodos eficaces y fiables para la fabricación y la
utilización para el tratamiento de los defectos óseos, aunque no
obstante son sumamente deseables.
Por tanto, el problema técnico que subyace a la
presente invención es proporcionar medios y métodos para tratar de
manera eficaz y fiable defectos óseos que comprendan el aumento
óseo. El problema técnico se resuelve mediante las realizaciones
caracterizadas en las reivindicaciones.
En consecuencia, la presente invención se refiere
a un dispositivo que tiene propiedades osteoinductoras y
osteoconductoras in vivo que comprende un soporte que
contiene fosfato de calcio y una proteína osteoinductora, en el que
dicho soporte está completamente recubierto con dicha proteína
osteoinductora y en el que cantidades esencialmente idénticas de
dicha proteína osteoinductora están presentes en todas y cada una de
las zonas de la superficie de dicho soporte.
El término "dispositivo", tal como se
utiliza según la presente invención, se refiere a una entidad que
comprende al menos dos componentes. Uno de dichos componentes es una
matriz de soporte. Preferiblemente, dicha matriz de soporte consiste
en materiales cerámicos inorgánicos. Dichos materiales cerámicos
tienen una superficie particularmente elevada debido a la presencia
de macroporos y microporos. Preferiblemente, dichos macroporos
tienen un diámetro de aproximadamente 100 a 400 nm, mientras que los
microporos tienen un diámetro inferior a 10 nm. Más preferiblemente,
dicho soporte es un fosfato de calcio tal como se hace referencia
más adelante.
Otro componente de dicho dispositivo es una
proteína o polipéptido que tiene propiedades osteoinductoras, tal
como se explicará en detalle más adelante. La proteína o polipéptido
se inmoviliza sobre la superficie del soporte. Las proteínas y los
polipéptidos osteoinductores aplicados según la presente invención
tienen una afinidad particularmente alta por las matrices de soporte
inorgánicas, tales como el fosfato de calcio. Preferiblemente, la
unión de dicha proteína o polipéptido al soporte es reversible. De
este modo, se permite la disolución de dicha proteína una vez que el
dispositivo se ha llevado a un entorno adecuado in vivo, tal
como una cavidad ósea. Preferiblemente, dicha disolución de las
proteínas es de liberación lenta, lo que permite la difusión de la
proteína en el tejido que rodea al dispositivo. Por tanto, el
dispositivo sirve como una fuente in vivo para proteínas
osteoinductoras que se liberan lentamente y que pueden distribuirse
eficazmente de esta manera en los tejidos circundantes o tener un
efecto en la forma inmovilizada.
Además, el dispositivo puede comprender
excipientes adicionales. Estos excipientes sirven para la
estabilización de la proteína, por ejemplo, sacáridos, aminoácidos,
polioles o detergentes, o para el mantenimiento del pH, por ejemplo,
sustancias tampón. Los excipientes preferidos englobados por esta
invención se tratan en detalle más adelante.
El término "osteoinductor" se refiere a la
capacidad de transformación de las células madre mesenquimatosas en
osteoblastos y condrocitos. Un requisito previo para la
osteoinducción es una señal que se distribuye por el dispositivo
hacia los tejidos circundantes en los que los precursores de
osteoblastos mencionados anteriormente llegan a activarse.
Osteoinducción, tal como se utiliza en el presente documento,
engloba la diferenciación de las células mesenquimatosas en las
células precursoras óseas, los osteoblastos. Además, la
osteoinducción también comprende la diferenciación de dichos
osteoblastos en osteocitos, las células maduras del hueso. Además,
también se engloba en la osteinducción, la diferenciación de las
células mesenquimatosas en condrocitos. En particular, en los huesos
largos, los condroblastos y los condrocitos que se alojan en el
pericondrio del hueso también pueden diferenciarse en osteocitos.
Por tanto, la osteoinducción requiere la diferenciación de células
no diferenciadas o menos diferenciadas en osteocitos que pueden
formar el hueso. Por tanto, un requisito previo para la
osteoinducción es una señal que se distribuye por el dispositivo
hacia los tejidos circundantes, en los que residen normalmente los
precursores de los osteocitos mencionados anteriormente. Tal como se
ha descrito anteriormente, las proteínas osteoinductoras utilizadas
según la presente invención se liberan lentamente desde el
dispositivo tras el implante y se distribuyen eficazmente en los
tejidos circundantes. Además, las proteínas y los polipéptidos
englobados por la presente invención tienen propiedades
osteoinductoras in vivo. Por ejemplo, es bien conocido en la
técnica que la superfamilia del factor de crecimiento transformante
\beta (FCT-\beta) engloba miembros que tienen
propiedades osteoinductoras. Los miembros individuales de dicha
superfamilia de FCT-\beta que tienen propiedades
osteoinductoras particularmente buenas se enumeran más adelante. En
conclusión, las proteínas osteoinductoras del dispositivo de la
presente invención tras haberse liberado del soporte sirven como
señal osteoinductora para los precursores de los osteocitos del
tejido que rodea el sitio de implantación del
dispositivo.
dispositivo.
El término "osteogénico" describe la
síntesis de hueso nuevo por los osteoblastos. Según la presente
invención, el hueso preexistente en los alrededores del sitio de
implantación del dispositivo crece en el dispositivo utilizando la
estructura del dispositivo como una matriz sobre la que pueden
adherirse los osteocitos.
El término "soporte" engloba matrices
tridimensionales, tales como los materiales cerámicos a los que se
hizo referencia anteriormente. Además, tal como se describió
anteriormente, dicho soporte tiene preferiblemente una superficie
ampliada debido a la formación de macro y microporos. El material de
soporte tiene una alta afinidad por las proteínas osteoinductoras,
aunque no obstante permite la liberación de dichas proteínas in
vivo. Según la presente invención, dicho soporte es,
preferiblemente, un fosfato de calcio. El soporte comprendido en el
dispositivo de la invención puede llevarse a una forma adecuada para
la administración del dispositivo in vivo, tal como
materiales cerámicos en forma de gránulos, bloques, cubos, cementos
y pastas amorfas. Además, el soporte puede recubrirse sobre una
superficie metálica.
El término "fosfato de calcio" engloba
composiciones que comprenden iones calcio, iones fosfato y,
opcionalmente, otros iones o átomos que son adecuados para el
soporte de la presente invención. Los fosfatos de calcio, tal como
se utilizan según la presente invención, son cristales que tienen
una estructura tridimensional adecuada para el dispositivo de la
presente invención, tal como se explicó anteriormente. Más adelante
se facilita una lista de fosfatos de calcio preferidos y bien
conocidos.
El término "proteína osteoinductora", tal
como se explicó anteriormente, se refiere a miembros de la
superfamilia del factor de crecimiento transformante \beta
(FCT-\beta) que tienen propiedades
osteoinductoras, tal como el factor de crecimiento y diferenciación
5; véase más adelante. Estas proteínas osteoinductoras muestran una
alta afinidad por los fosfatos de calcio. El fosfato de calcio puede
estar presente, por ejemplo, en la forma de FTC beta,
FTC-\alpha o hidroxiapatita. Dependiendo de los
macroporos (100-400 nm) y los microporos (< 10
nm), estos minerales inorgánicos absorben disoluciones acuosas.
Durante este proceso, proteínas tales como GDF-5 o
PMO-2 se adsorben fuertemente sobre la superficie
del soporte. Una condición previa importante para este proceso es
una solubilidad suficiente de las proteínas en la disolución de
recubrimiento.
El término "recubierto homogéneamente"
significa que la superficie del soporte está totalmente recubierta
con dicha proteína osteoinductora, por lo que están presentes
cantidades esencialmente idénticas de proteína en todas y cada una
de las zonas de la superficie de dicho soporte. Un soporte
recubierto homogéneamente según esta invención muestra,
preferiblemente, una cobertura máxima con la proteína osteoinductora
sobre su superficie. El recubrimiento homogéneo es un requisito
previo para la liberación eficaz y la distribución homogénea y para
la actividad de la proteína osteoinductora en el tejido que rodea al
sitio de implantación. Además, ha de entenderse que las proteínas
osteoinductoras no están agregadas y están parcial o totalmente
inactivadas debido a precipitación o a microprecipitación, en su
lugar, el recubrimiento homogéneo debe lograr la unión de proteínas
no agregadas y biológicamente activas. Dicho recubrimiento homogéneo
puede lograrse mediante el método de la presente invención y se
describe en los ejemplos adjuntos. Además, se describen medios y
métodos para controlar el recubrimiento homogéneo, la cuantificación
y la caracterización de la proteína inmovilizada en los ejemplos
adjuntos.
Ventajosamente, se ha encontrado según la
presente invención que el dispositivo descrito anteriormente de la
presente invención tiene propiedades osteoinductoras y
osteoconductoras mejoradas y fiables in vivo tras la
implantación en un sujeto, preferiblemente un ser humano. Un
requisito previo para un dispositivo de este tipo es un
recubrimiento homogéneo del soporte con una proteína osteoinductora,
no agregada y biológicamente activa. Se ha encontrado que incluso la
agregación producida por microprecipitación conduce a un
recubrimiento no homogéneo, dando como resultando al menos la
disminución significativa de las propiedades osteoinductoras, tal
como se describe para otros dispositivos en la técnica anterior, por
ejemplo, en el documento WO98/21972. Además, se ha encontrado que
pueden evitarse efectos secundarios no deseados, tales como
reacciones tóxicas y de inflamación del sujeto tras la implantación
mediante el dispositivo de la presente invención que carece de
impurezas tóxicas o contaminantes infecciosos. En particular, el uso
de proteínas de protección (tales como por ejemplo, gelatina) como
mediadores de solubilidad es totalmente innecesario para el
dispositivo de la presente invención.
Además, la presente invención se refiere a un
método para la producción del dispositivo de la presente invención
que tiene propiedades osteoinductoras y osteoconductoras in
vivo, que comprende las etapas de:
- (a)
- proporcionar una disolución que comprende proteína osteoinductora disuelta y un tampón que mantiene dicha proteína disuelta durante un tiempo suficiente para permitir el recubrimiento homogéneo de un soporte que contiene fosfato de calcio cuando se pone en contacto con dicho soporte;
- (b)
- poner en contacto la disolución de la etapa (a) con un soporte que contiene fosfato de calcio;
- (c)
- permitir el recubrimiento homogéneo de la superficie de dicho soporte con dicha proteína disuelta; y
- (d)
- secar el soporte recubierto obtenido en la etapa (c).
Las definiciones de los términos utilizados para
describir el dispositivo de la invención se aplican, cambiando lo
que se deba cambiar, al método anteriormente mencionado y a los
métodos a los que se hace referencia más adelante.
El término "secar" engloba los medios para
eliminar líquidos, tal como una disolución tampón en exceso, que
todavía están presentes tras recubrir el soporte con la proteína
osteoinductora. Preferiblemente, el secado se logra mediante secado
a vacío o liofilización.
El término "tampón que mantiene dicha proteína
disuelta durante un tiempo suficiente para permitir el recubrimiento
homogéneo" se refiere a un tampón en el que las proteínas
osteoinductoras pueden disolverse eficazmente y que puede equilibrar
el aumento de pH producido al poner en contacto la disolución tampón
con el soporte de fosfato de calcio, de manera que la proteína no
precipite inmediatamente, por ejemplo, debido a un aumento de pH. La
persona experta en la técnica puede componer dicho tampón basándose
en la solubilidad de la proteína osteoinductora que depende del pH,
la fuerza iónica y la influencia del soporte sobre dichos parámetros
tras poner en contacto el soporte con dicha disolución tampón. Según
la presente invención, se ha encontrado que un tampón adecuado para
el método de la presente invención comprende una sustancia tampón en
una baja concentración, un ácido débil, un alcohol o un
sacárido.
Una ventaja de la presente invención es el
recubrimiento homogéneo que se logra mediante la limitación del
aumento del pH de la disolución de recubrimiento durante el proceso
de recubrimiento. El proceso descrito permite la distribución
homogénea y la inmovilización de la proteína osteoinductora en dicho
soporte. Además, la eficacia del proceso de recubrimiento se
mantiene mediante el soporte debido a las fuerzas capilares que
resultan de la presencia de numerosos macro y microporos que debido
a su tamaño pueden absorber la disolución en los poros. Además, a
diferencia de otros métodos descritos en la técnica, por ejemplo, en
el documento WO98/21972, la proteína o polipéptido osteoinductor se
aplica, según el método de la presente invención, mediante la unión
a los soportes, en lugar de mediante precipitación o
microprecipitación. Estos hallazgos en que se basa la presente
invención, demuestran que la agregación de las proteínas puede
evitarse mediante el uso de aditivos adecuados, tal como se describe
en el presente documento. Una condición previa importante es el
conocimiento de la solubilidad de la proteína osteoinductora
dependiente del valor de pH, la fuerza iónica y las superficies
presentes. La ralentización del aumento del pH producido por el
contacto de la disolución de recubrimiento con los fosfatos de
calcio que reaccionan de una manera alcalina, en particular,
desempeña un importante papel durante el recubrimiento.
Ventajosamente, mediante el método de la presente invención tiene
lugar la distribución uniforme a través de la superficie interna del
material de soporte y la capacidad de unirse a las superficies antes
de una precipitación inducida por el pH de dicha proteína. Podría
demostrarse que el aumento de pH que se produce durante el
recubrimiento de los fosfatos de calcio se decelera suficientemente
mediante el uso de un ácido débil, tal como el ácido acético.
Además, la adición de combinaciones orgánicas tales como etanol o
sacarosa demuestra ser adicionalmente ventajosa. Además, una fuerza
iónica baja es una condición previa importante para el recubrimiento
satisfactorio. Además, las pruebas demuestran que también el volumen
de la disolución de recubrimiento tiene un efecto considerable sobre
la calidad del recubrimiento. Finalmente, el método de la presente
invención se dirige a evitar disolventes orgánicos perjudiciales,
tales como el acetonitrilo, que se utilizan habitualmente en los
métodos descritos en la técnica. Al evitar dichos disolventes
orgánicos perjudiciales, pueden mejorarse el perfil de seguridad y
la tolerancia local del dispositivo de la presente
invención.
invención.
En una realización preferida del método de la
invención, dicho tampón tiene una concentración de tampón inferior a
100 mmol/l, inferior a 50 mmol/l o inferior a 20 mmol/l.
De lo anterior se deduce que más preferiblemente,
dicho tampón contiene un ácido débil. El término "ácido débil"
se refiere a compuestos orgánicos o inorgánicos que contienen al
menos un átomo de hidrógeno unido de manera ionogénica. Los ácidos
débiles son bien conocidos en la técnica y se describen en los
libros de texto habituales, tales como Römpp, léxico de química.
Preferiblemente, dichos ácidos débiles que tienen bajos grados de
disociación y se describen por valores de pKa de entre 3 y 7,
preferiblemente de entre 4 y 6.
Más preferiblemente, dicho ácido débil es ácido
acético o ácido succínico.
En otra realización preferida del método de la
invención, dicho tampón comprende sacáridos. El término
"sacáridos" engloba mono, di y polisacáridos. La estructura y
la composición de los mono, di y polisacáridos son bien conocidas en
la técnica y se describen en libros de texto habituales, tales como
Römpp, léxico de química.
Más preferiblemente, dicho sacárido es un
disacárido. Más preferiblemente, dicho disacárido es sacarosa o
trehalosa.
En otra realización preferida del método de la
invención, dicho tampón comprende un alcohol. Los alcoholes
adecuados son bien conocidos en la técnica y se describen en libros
de texto habituales, tales como Römpp, léxico de química.
Más preferiblemente, dicho alcohol es etanol o
manitol.
En una realización preferida del dispositivo o el
método de la invención, dicho fosfato de calcio es fosfato
tricálcico beta, fosfato tricálcico alfa, apatita o un cemento que
contiene fosfato de calcio. Dichos fosfatos de calcio son
particularmente muy adecuados como soportes para el dispositivo de
la presente invención. Sus propiedades in vivo se han
descrito en Hotz, 1994, Gao, 1996, y en el documento WO98/21972.
En otra realización preferida del dispositivo o
el método de la invención, dicha proteína osteoinductora es un
miembro de la familia FCT-\beta.
Se ha demostrado que la familia
FCT-\beta de factores de crecimiento y
diferenciación participa en numerosos procesos biológicos que
comprenden la formación de hueso. Todos los miembros de dicha
familia son polipéptidos secretados que comprenden una estructura
de dominio característico. En el propio extremo
N-terminal, los miembros de la familia de
FCT-\beta comprenden un péptido señal o secuencia
líder de secreción. Esta secuencia va seguida, en el extremo
C-terminal, por el prodominio y por la secuencia
del polipéptido maduro. La secuencia del polipéptido maduro
comprende siete cisteínas conservadas, seis de las cuales son
necesarias para la formación de enlaces disulfuro intramoleculares,
mientras que otra es necesaria para la dimerización de dos
polipéptidos. El miembro de la familia FCT-\beta
biológicamente activo es un dímero, compuesto preferiblemente por
dos polipéptidos maduros. Los miembros de la familia
FCT-\beta se secretan normalmente como
proproteínas que comprenden, además de la secuencia madura, el
prodominio. Los prodominios se escinden extracelularmente y no
forman parte de la molécula de señalización. Sin embargo, se ha
informado de que el (los) prodominio(s) pueden necesitarse
para la estabilización extracelular de los polipéptidos maduros. En
el contexto de la presente invención, el término "miembro de la
familia FCT-\beta" o las proteínas de dicha
familia a las que se hace referencia más adelante, abarcan todas
las variantes biológicamente activas de dichas proteínas o miembros
de todas las variantes, así como sus precursores inactivos. Por
tanto, las proteínas que comprenden simplemente la secuencia
madura, así como las proteínas que comprenden la proteína madura y
el prodominio o la proteína madura, el prodominio y la secuencia
líder, están dentro del alcance de la invención, así como
fragmentos biológicamente activos de las mismas. Si un fragmento de
un miembro de FCT-\beta tiene actividad biológica
puede determinarse fácilmente mediante ensayos biológicos
descritos, por ejemplo, en: Katagiri T, Yamaguchi A, Ikeda T,
Yoshiki S, Wozney JM, Rosen V, Wang EA, Tanka H, Omura S, Suda T,
(1990): The non-osteogenic mouse pluripotent cell
line, C3H10T1/2, is induced to differentiate into osteoblastic
cells by recombinant human bone morphogenetic
protein-2. Biochem. Biophys. Res. Commun. 172:
295-299 o Nishitoh H, Ichijo H, Kimura M, Matsumoto
T, Makishima F, Yamaguchi A, Yamashita H, Enomoto S, Miyazono K
(1996): Identification of type I and type II serine/threonine kinase
receptors for growth/differentiation factor-5. J.
Biol. Chem. 271: 21345-21352.
Preferiblemente, la actividad biológica según la
invención puede determinarse mediante modelos in vivo, tal
como se describe en los ejemplos adjuntos. Además, en la presente
invención se engloban variantes de los miembros de
FCT-\beta que tienen secuencias de aminoácidos que
son idénticas en al menos el 75%, al menos el 80%, al menos el 90%,
al menos el 95%, al menos el 96%, al menos el 97%, al menos el 98%
o al menos el 99% a las secuencias de aminoácidos de los miembros de
la familia FCT-\beta.
Un resumen de los miembros de la superfamilia
FCT-\beta se facilita en: Wozney JM, Rosen V
(1998): Bone morphogenetic protein and bone morphogenetic protein
gene family in bone formation and repair. Clin Orthop 346:
26-37. Las secuencias de aminoácidos de los
miembros de la familia FCT-\beta pueden obtenerse
a partir de bases de datos bien conocidas, tales como
Swiss-Prot a través de Internet
(http://www.expasy.ch/sprot/sprot-top.html).
Las secuencias de aminoácidos para PMO-2,
PMO-7 y GDF-5, miembros de la
familia FCT-\beta con un potencial osteoinductor
particularmente alto, también se muestran en SEQ ID Nº: 1 a 3,
respectivamente. Las secuencias de aminoácidos para
PMO-2, PMO-7 y
GDF-5, miembros de la familia
FCT-\beta con un potencial osteogénico
particularmente alto, también se muestran en SEQ ID Nº: 1 a 3,
respectivamente. Las secuencias de aminoácidos para
PMO-2, PMO-7 y
GDF-5, miembros de la familia
FCT-\beta con un potencial osteogénico
particularmente alto, también se muestran en SEQ ID Nº: 1 a 3,
respectivamente.
Más preferiblemente, dicho miembro de la familia
FCT-\beta es un miembro de la subfamilia de PMO.
Se ha demostrado que los miembros de la subfamilia de la proteína
morfogenética ósea (PMO) participan, entre otros, en la inducción y
la remodelación del tejido óseo. Las PMO se aislaron originalmente
de la matriz ósea. Estas proteínas se caracterizan por su capacidad
para inducir nueva formación ósea en sitios ectópicos. Varios
estudios in vivo demostraron la potenciación de la
osteogénesis y la condrogénesis de las células precursoras por las
PMO y el aumento de la posibilidad de que cada molécula de PMO
desempeñe un papel distinto durante el desarrollo del esqueleto.
Más detalles acerca de las propiedades moleculares y biológicas de
las PMO se describen en: Wozney JM, Rosen V (1998): Bone
morphogenetic protein and bone morphogenetic protein gene family in
bone formation and repair. Clin Orthop 346: 26-27,
Schmitt J, Hwang K, Winn, SR, Hollinger J (1999): Bone
morphogenetic proteins: an update on basic biology and clinical
relevance. J Orthop Res 17: 269-278 y Lind M (1996):
Growth factors: possible new clinical tools. A review. Acta Orthop
Scand 67: 407-17.
Más preferiblemente, dicho miembro de la familia
PMO es PMO-2 o PMO-7.
La secuencia de aminoácidos para la preproforma
de PMO-2 se deposita con el número de registro
P12643 de Swiss-Prot y se muestra más adelante. Los
aminoácidos 1 a 23 corresponden a la secuencia señal, los
aminoácidos 24 a 282 corresponden al propéptido y los aminoácidos
283 a 396 corresponden a la proteína madura. La secuencia de
aminoácidos para la preproforma de PMO-7 está
depositada con el número de registro P 18075 de
Swiss-Prot o se muestra en SEQ ID Nº: 2. Los
aminoácidos 1 a 29 corresponden a la secuencia líder, los
aminoácidos 30 a 292 corresponden a la proforma y los aminoácidos
293 a 431 corresponden a la proteína madura. Preferiblemente,
PMO-2 o PMO-7 se refieren a la
preproforma, a la proforma o al péptido maduro
PMO-2 o PMO-7, respectivamente.
Además, también se engloban fragmentos de dichas proteínas que
tienen esencialmente la misma actividad biológica, preferiblemente
propiedades osteoinductoras. Más adelante se facilita más
información sobre las secuencias para PMO-2 y
PMO-7.
También más preferiblemente, dicho miembro de la
familia FCT-\beta es un GDF. También se ha
demostrado que el factor de crecimiento y diferenciación (GDF)
participa, entre otros, en la inducción y la remodelación del tejido
óseo. El factor de crecimiento y diferenciación 5
(GDF-5), también conocido como proteína
morfogenética derivada del cartílago 1 (CDMP-1) es
un miembro del subgrupo de la familia PMO, que también incluye
otras proteínas relacionadas, preferiblemente, GDF-6
y GDF-7. La forma madura de la proteína es un
homodímero de 27 kDa. Varios estudios in vivo e in
vitro demuestran el papel de GDP-5 durante la
formación de diferentes características morfológicas en el
esqueleto de los mamíferos. Las mutaciones de GDF-5
son responsables de anomalías en el esqueleto, incluyendo la
disminución de la longitud de los huesos largos de las
extremidades, el desarrollo anómalo de las articulaciones en las
extremidades y el esternón (Storm y Kingsley (1999), Development
Biology, 209, 11-27). La secuencia de aminoácidos
entre el ratón y el ser humano está altamente conservada.
Más preferiblemente, dicho miembro de la
subfamilia GDF es GDF-5.
La secuencia de aminoácidos para la preproforma
de GDF-5 está depositada con el número de registro
P 43026 en Swiss-Prot o se muestra en la SEQ ID Nº:
3. Los aminoácidos 1 a 27 corresponden a la secuencia líder, los
aminoácidos 28 a 381 corresponden a la proforma y los aminoácidos
382 a 501 corresponden a la proteína madura. Preferiblemente,
GDF-5 se refiere a la preproforma, a la proforma o
al péptido GDF-5 maduro. Además, también se
engloban los fragmentos de GDF-5 que tienen
esencialmente la misma actividad biológica, preferiblemente
propiedades osteoinductoras. Más preferiblemente, dicho fragmento
comprende los aminoácidos 383 a 501 de la secuencia mostrada en SEQ
ID Nº: 3.
En otra realización preferida del dispositivo o
el método de la invención, dicho dispositivo carece de sustancias
tóxicas. El término "sustancias tóxicas", preferiblemente,
engloba aquellos aditivos y disolventes orgánicos tóxicos que se
utilizan en los métodos descritos en la técnica, por ejemplo, el
acetonitrilo. Dichas sustancias pueden producir inflamación y otras
reacciones tras la implantación de los dispositivos que contienen
dichas sustancias. Dichos dispositivos son terapéuticamente menos
aceptables debido a dichos efectos secundarios no deseados que no
pueden evitarse mediante los métodos de recubrimiento descritos en
la técnica. Además, la directriz internacional para el desarrollo
de proteínas terapéuticas exige que deben evitarse sustancias
tóxicas y perjudiciales en el proceso de fabricación (para más
detalles véase: Conferencia Internacional sobre Armonización (ICH),
Tema Q3C; www. emea.eu.int/). Sin embargo, el dispositivo de
la presente invención o un dispositivo que es obtenible mediante el
método de la presente invención, carecen ventajosamente de dichas
sustancias tóxicas y, por tanto, es terapéuticamente muy aceptable
y cumple los requisitos de las autoridades normativas.
Además, en otra realización preferida del
dispositivo o el método de la invención, dicho dispositivo carece
de material infeccioso.
Además de las sustancias tóxicas, el material
infeccioso comprendido en el dispositivo puede producir infecciones
graves en un sujeto en el que se ha trasplantado el dispositivo.
Sin embargo, se utiliza gelatina potencialmente infecciosa derivada
de huesos bovinos o porcinos como una proteína de protección en
muchos métodos del estado de la técnica (Und, 1996).
La invención engloba una composición farmacéutica
que comprende el dispositivo de la invención o un dispositivo que
es obtenible mediante el método de la invención. El producto de la
presente invención puede formularse como una composición
farmacéutica o un dispositivo médico. La composición de dicho
producto puede comprender compuestos adicionales, como
estabilizantes, sustancias tampón y otros excipientes. La cantidad
del producto de la presente invención aplicado al paciente se
determinará por el médico que le atienda y según otros factores
clínicos; preferiblemente según cualquiera de los métodos descritos
anteriormente. Tal como se conoce bien en las técnicas médicas, la
cantidad aplicada a un paciente depende de muchos factores,
incluyendo la talla del paciente, el área de superficie corporal,
la edad, el sexo, el momento y la vía de administración, la salud
general y otros fármacos que se le estén administrando
simultáneamente. El progreso puede monitorizarse mediante la
evaluación periódica.
Gracias a la presente invención, es posible
tratar varios defectos óseos que incluyen cavidades grandes. En
particular, las cavidades grandes no podían tratarse eficazmente o
sólo con la utilización de material de hueso autógeno. Sin embargo,
debido a las propiedades osteoinductoras y osteoconductoras fiables
y eficientes del dispositivo de la presente invención o de un
dispositivo que es obtenible mediante el método de la invención, el
tratamiento de los defectos óseos que requiere la reparación o un
aumento óseo importante es ahora posible sin una segunda
cirugía.
La invención también engloba el uso del
dispositivo de la invención o de un dispositivo que es obtenible
mediante el método de la invención, para la preparación de una
composición farmacéutica que va a utilizarse para el aumento óseo.
Las definiciones de los términos a los que se hizo referencia
anteriormente se aplican, cambiando lo que se deba cambiar, al uso
mencionado anteriormente de la presente invención y los descritos
más adelante. El término "aumento óseo" se refiere a una
formación terapéutica de hueso, que está indicada con el fin de
tratar defectos óseos, cavidades en huesos, o enfermedades y
trastornos acompañados por pérdida de tejido óseo o para preparar el
entorno posterior de un implante. Las enfermedades y trastornos
descritos a continuación son bien conocidos en la técnica y se
describen en detalle en libros de texto médicos habituales, tales
como Pschyrembel o Stedman.
Preferiblemente, dicho aumento óseo sigue a
defectos por traumatismo, cáncer o artificiales.
Otra realización de la presente invención se
refiere al uso del dispositivo de la invención o de un dispositivo
que es obtenible mediante el método de la invención para la
preparación de una composición farmacéutica para tratar defectos
óseos.
Más preferiblemente, dichos defectos óseos son
defectos en los huesos largos o defectos óseos tras apicoectomía,
extirpación de quistes o tumores, extracción de dientes o
extracción quirúrgica de dientes retenidos.
La invención también se refiere al uso del
dispositivo de la invención o de un dispositivo que es obtenible
mediante el método de la invención para llenar cavidades y para la
regeneración de tejido guiada por soporte en periodontología.
Otra realización de la presente invención se
refiere al uso del dispositivo de la invención o de un dispositivo
que es obtenible mediante el método de la invención para la
preparación de una composición farmacéutica que va a utilizarse para
la elevación del piso sinusal, el aumento de la cresta maxilar y
mandibular atrofiada y la estabilización de los implantes
inmediatos.
También dentro del alcance de la presente
invención está un método para tratar una o más de las enfermedades
a las que se hace referencia según los usos de la presente
invención, en el que dicho método comprende al menos la etapa de
administrar el dispositivo de la invención o un dispositivo que es
obtenible mediante el método de la invención en una forma
farmacéuticamente aceptable a un sujeto. Preferiblemente, dicho
sujeto es un ser humano.
Finalmente, la invención se refiere a un kit que
comprende el dispositivo de la invención o un dispositivo que es
obtenible mediante el método de la invención. Las partes del kit de
la invención pueden envasarse individualmente en viales o en otros
medios apropiados, dependiendo del componente respectivo o en
combinación en envases o unidades de múltiples envases adecuados.
La fabricación del kit sigue preferiblemente los procedimientos
habituales conocidos por la persona experta en la técnica.
Las tablas siguientes muestran las secuencias de
aminoácidos para PMO-2, PMO-7 y
GDF-5:
\vskip1.000000\baselineskip
| Clave | Desde | Hasta | Longitud |
| SEÑAL | 1 | 23 | 23 |
| PROPEP | 24 | 282 | 259 |
| hPMO-2 | 283 | 396 | 114 |
\vskip1.000000\baselineskip
[1] SECUENCIA DEL ÁCIDO NUCLEICO.
MEDLINE = 89072730; PubMed = 3201241;
Wozney J.M., Rosen V.,
Celeste A.J., Mitsock L.M., Whitters M.J.,
Kriz R.W., Hewick R.M., Wang E.A.;
"Novel regulators of bone formation: molecular
clones and activities.";
Science
242:1528-1534(1988).
\newpage
[2] CRISTALOGRAFÍA DE RAYOS X (2,7 ANGSTROMS) DE
292-396.
MEDLINE = 99175323; PubMed = 10074410;
Scheufler C., Sebald W.,
Huelsmeyer M.;
"Crystal structure of human bone morphogenetic
protein-2 at 2.7 A resolution.";
J. Mol. Biol.
287:103-115(1999).
| Clave | Desde | Hasta | Longitud |
| SEÑAL | 1 | 29 | 29 |
| PROPEP | 30 | 292 | 263 |
| hPMO-7 | 293 | 431 | 139 |
[1] SECUENCIA DEL ÁCIDO NUCLEICO Y SECUENCIA
PARCIAL.
TEJIDO = Placenta;
MEDLINE = 90291971; PubMed = 2357959;
Oezkaynak E., Rueger D.C.,
Drier E.A., Corbett C., Ridge R.J.,
Sampath T.K., Oppermann H.; "OP-1
cDNA encodes an osteogenic protein in the FCT-beta
family."; EMBO J. 9:2085-2093
(1990).
[2] SECUENCIA DEL ÁCIDO NUCLEICO.
MEDLINE = 91088608; PubMed = 2263636;
Celeste A.J., Iannazzi J.A.,
Taylor R.C., Hewick R.M., Rosen V.,
Wang E.A., Wozney J.M.; "Identification of
transforming growth factor beta family members present in
bone-inductive protein purified from bovine
bone.";
Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.
87:9843-9847 (1990).
[3] CRISTALOGRAFÍA DE RAYOS X (2,8 ANGSTROMS) DE
293-431.
MEDLINE = 96149402; PubMed = 8570652;
Griffith D.L., Keck P.C.,
Sampath T.K., Rueger D.C., Carlson W.D.;
"Three-dimensional structure of
recombinant human osteogenic protein 1: structural paradigm for the
transforming growth factor beta superfamily.";
Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.
93:878-883 (1996).
| Clave | Desde | Hasta | Longitud |
| SEÑAL | 1 | 27 | 27 |
| PROPEP | 28 | 381 | 354 |
| hGDF-5 | 382 | 501 | 120 |
[1] SECUENCIA DEL ÁCIDO NUCLEICO.
TEJIDO = Placenta;
MEDLINE = 95071375; PubMed = 7980526;
Hoetten G., Neidhardt H.,
Jacobowsky B., Pohl J.;
"Cloning and expression of recombinant human
growth/differentiation factor 5.";
Biochem. Biophys. Res. Commun.
204:646-652(1994).
[2] SECUENCIA DEL ÁCIDO NUCLEICO.
TEJIDO = Cartílago articular;
MEDLINE = 95050604; PubMed = 7961761;
Chang S., Hoang B., Thomas
J.T., Vukicevic S., Luyten F.P., Ryba N.J.P.,
Kozak C.A., Reddi A.H., Moos M.;
"Cartilage-derived
morphogenetic proteins. New members of the transforming growth
factor-beta superfamily predominantly expressed in
long bones during human embryonic development.";
J. Biol. Chem.
269:28227-28234(1994).
Las figuras muestran:
Figura 1: Solubilidad de GDF-5 en
ácido acético 5 mM, H_{3}PO_{4} 5 mM/NaOH, NaCl 150 mM a
diferentes valores de pH.
Figura 2: Solubilidad de GDF-5 en
arginina 20 mM/ácido acético a diferentes valores de pH.
Figura 3: Solubilidad de GDF-5 en
dos tampones que tienen diferentes fuerzas iónicas y valores de pH
(HAc = ácido acético).
Figura 4: Aumento del pH durante el recubrimiento
en presencia de HCl 10 mmol/l.
Figura 5: Aumento del pH en presencia de
acetonitrilo al 75%.
Figura 6: Dependencia del pH de las disoluciones
de recubrimiento que tienen diferentes concentraciones de ácido
acético durante el recubrimiento.
Figura 7: Homogeneidad de la distribución de
GDF-5 sobre FTC beta (100 \mug de
GDF-5 sobre 100 mg de FTC beta) lograda por el
recubrimiento en presencia de ácido acético 10 mmol/l con (derecha)
y sin sacarosa (izquierda).
Figura 8: Homogeneidad de la distribución de
GDF-5 sobre FTC beta (100 \mug de
GDF-5 sobre 100 mg de FTC beta) lograda por el
recubrimiento en presencia de etanol al 60%.
Figura 9: Homogeneidad de la distribución de
GDF-5 sobre FTC beta (100 \mug de
GDF-5 sobre 100 mg de FTC beta) lograda por el
recubrimiento en presencia de glicina 20 mmol/l/NaOH, pH 10.
Figura 10: Análisis histomorfométrico de un
implante recubierto en presencia de glicina 20 mmol/l/NaOH, pH
10.
Figura 11: Análisis histomorfométrico de un
implante recubierto en presencia de etanol al 60%.
Figura 12: Homogeneidad de la distribución de
rhPMO-2 sobre FTC beta.
Figura 13: Homogeneidad de la distribución de
GDF-5 sobre FTC beta lograda por el recubrimiento
en presencia de sacarosa (izquierda) y trehalosa (derecha).
Figura 14: Homogeneidad de la distribución de
GDF-5 sobre FTC beta lograda por el recubrimiento
en presencia de etanol (izquierda) y manitol (derecha).
La invención se describirá ahora mediante la
referencia a los siguientes ejemplos biológicos que son meramente
ilustrativos y no se interpretan como una limitación del alcance de
la presente invención.
El contenido de GDF-5 se
determinó mediante análisis de HPLC en fase inversa (RP). Se
analizaron alícuotas de la muestra utilizando una columna Poros
C8-18 (R2/10, 2,1* 30 mm, Applied Biosystems). Se
utilizó ácido fórmico al 0,1% en acetonitrilo al 21% (disolvente A)
y ácido fórmico al 0,1% en acetonitrilo al 84% (disolvente B) como
disolventes a una velocidad de flujo de 0,4 ml/min. El perfil de
elución se registró midiendo la absorbancia a 220 nm. Las
cantidades de GDF-5 se calcularon a partir del área
de pico a 220 nm utilizando una curva patrón.
Método
A
Se suspendió FTC beta recubierto (40 mg) en 700
\mul de matriz de disolución (ácido cítrico 1,22 mol/l, HCl 1,22
mol/l, urea 8 mol/l) y se incubó durante 60 min. a 4ºC. Tras la
centrifugación (13200* g, 2 min) se analizaron 50 \mul del
sobrenadante mediante RP-HPLC (véase el ejemplo 1).
La curva patrón se tomó con diversas cantidades de
GDF-5 en la disolución de matriz respectiva.
Método
B
Se suspendió FTC beta recubierto (40 mg) en 700
\mul de matriz de disolución (Tris 10 mmol/l/HCl, pH 7,4, urea 8
mol/l, EDTA 100 mmol/l) y se incubó durante 60 min. a 4ºC y se
centrifugó (5 min. a 13.500* g). Posteriormente, el sobrenadante se
cuantificó tal como se describe en el método A o se analizó
adicionalmente.
GDF-5 se ajusta a una
concentración de 4 mg/ml en HCl 10 mmol/l. Se diluyen 1:100
alícuotas (50 \mul) de la disolución madre con ácido acético 5
mmol/l, H_{3}PO_{4} 5 mmol/l/NaOH, NaCl 150 mmol/l con
diferentes valores de pH cada uno. Las muestras se incubaron
durante 15 min. y se centrifugaron (2 min. a 13.200* g). Se
determinaron el valor del pH y el contenido de proteína en el
sobrenadante. En una segunda prueba, la disolución madre se diluyó
con arginina 20 mmol/l/HOAc con diferentes valores de pH cada uno.
Los datos en las figuras 1 y 2 muestran que GDF-5 en
tampones con fuerza iónica baja (\leq 20 mmol/l) sólo es soluble
en una disolución ácida (pH \leq 5) o alcalina (> pH 10). Sin
embargo, en el intervalo de pH de entre 6,0 y 9,5, la solubilidad es
< 5 \mug/ml.
Se ajusta GDF-5 a una
concentración de 4 mg/ml en HCl 10 mmol/l. Se diluyen 1:100
alícuotas (50 \mul) de la disolución madre con ácido acético 10
mmol/l/NaOH y con ácido acético 5 mmol/l, H_{3}PO_{4} 5
mmol/l/NaOH, NaCl 150 mmol/l con diferentes valores de pH cada uno.
Las muestras se incubaron durante 15 min. y se centrifugaron (2
min. a 13.200* g). Se determinaron el valor del pH y el contenido de
proteína en el sobrenadante. Los datos en la figura 3 muestran que
con todos los valores de pH medidos, la solubilidad de
GDF-5 en un tampón con fuerza iónica superior, que
corresponde al estado fisiológico, es significativamente inferior
que en el tampón con fuerza iónica baja (aproximadamente 10
mmol/l).
Se disolvió GDF-5 liofilizado en
acetonitrilo puro, se incubó durante 15 min. a temperatura ambiente
y se centrifugó (13.200* g, 2 min). No pudo detectarse
GDF-5 en el sobrenadante.
Se disolvió GDF-5 liofilizado (50
\mug) con 50 \mul de acetonitrilo al 75%, se incubó durante 15
min. a temperatura ambiente y se centrifugó (13.200* g, 2 min). En
el sobrenadante, se midió el pH y se determinó el contenido de
GDF-5. Se detectó el 100% del GDF-5
utilizado y el valor del pH de la disolución era de 3,0.
Posteriormente, se ajustó el valor del pH a 7,4 añadiendo NaOH, se
incubó durante 15 min. a temperatura ambiente de nuevo y se
centrifugó. Sólo se detectaron 3 \mug/ml correspondientes a una
solubilidad de 60 \mug/ml.
Los datos muestran que GDF-5 no
es soluble en acetonitrilo puro, pero que es soluble en
disoluciones acuosas ácidas que contienen acetonitrilo. Según los
resultados encontrados en los sistemas acuosos, la solubilidad
disminuye en mezclas de acetonitrilo - agua con el aumento del
pH.
En un recipiente de reacción, se mezclan 200 mg
de FTC beta con 200 \mul de una disolución de recubrimiento que
contiene GDF-5 (1 mg/ml; producida a partir de un
liofilizado producido a partir de una disolución en HCl). El valor
del pH de la suspensión se observa durante 30 min. Los resultados
ilustrados en las figuras 4-5 muestran que tras
aproximadamente 2 min, el pH de la suspensión alcanza el intervalo
de pH > 6,5, que es crítico para la solubilidad de
GDF-5, cuando se utilizan disoluciones de
recubrimiento no tamponadas tales como por ejemplo HCl 10 mmol/l o
acetonitrilo al 75% (el pH ácido inicial en el acetonitrilo al 75%
resulta de las cantidades restantes de HCl presente). Debido a la
solubilidad insuficiente, tiene lugar la precipitación de la
proteína y la formación de agregación, que puede detectarse
mediante tinción de Coomassie (véase el ejemplo 7). El uso de una
disolución de recubrimiento tamponada con acetato (figura 6)
produce una reducción del aumento del pH durante el recubrimiento.
Mientras el pH aumenta hasta 8 en las disoluciones no tamponadas,
el pH de la disolución de recubrimiento tamponada con acetato
(40-80 mmol/l) alcanza su máximo a pH 5,4. De esta
forma, se garantiza una solubilidad suficiente durante el proceso
de recubrimiento. El GDF-5 utilizado puede
extenderse uniformemente y unirse al soporte sin que tenga lugar
precipitación (véase el ejemplo 7). También se logra un retraso del
aumento del pH utilizando etanol al 60%. El retraso es suficiente
para lograr una distribución uniforme de GDF-5 a
través del soporte (véase el ejemplo 7).
La proteína adsorbida se hace visible tiñendo con
azul brillante de Coomassie sobre el soporte. La distribución del
color azul se correlaciona con la distribución de la proteína
respectiva sobre el soporte de FTC beta.
Se incuban 3-4 gránulos
recubiertos con 200 \mul de disolución de tinción (60% de PBS,
40% de metanol, 0,4% de azul brillante de Coomassie R250) en una
cavidad de una placa de 96 pocillos y se incuban durante 30 min. a
temperatura ambiente. Un soporte no recubierto se trata de la misma
forma como control. El exceso de agente de tinción se elimina
mediante lavado con 60% de PBS, 40% de metanol, hasta que el soporte
no recubierto utilizado como control se decolora completamente. El
soporte teñido se seca a 40ºC y se documenta fotográficamente.
Se colocan 200 mg de FTC-\beta
(tamaño del gránulo de 0,5-1,0 mm) en forma seca en
un recipiente de vidrio 2R. La disolución madre de
rhGDF-5 (4 mg/ml en HCl 10 mM) se diluye hasta 1
\mug/ml por medio del tampón de recubrimiento correspondiente. Se
pipetean 200 \mul de disolución GDF-5 obtenida de
esta manera sobre el FTC beta y se absorben. El material granulado
húmedo se incuba durante 1 hora a 25ºC y después se seca a
vacío.
Se colocan 200 mg de FTC-\beta
(tamaño del gránulo de 0,5-1,0 mm) en forma seca en
un recipiente de vidrio 2R. La disolución madre de
rhGDF-5 (4 mg/ml en HCl 10 mM) se diluye hasta 1
\mug/ml por medio del tampón de recubrimiento correspondiente. Se
pipetean 200 \mul de disolución GDF-5 obtenida de
esta manera sobre el FTC beta y se absorben. El material granulado
húmedo se incuba durante 1 hora a 25ºC y después se liofiliza.
Un bloque de FTC beta que tiene una masa de 360
mg se coloca en un recipiente de reacción adecuado (Eppendorf), se
mezcla con 500 \mul de la disolución de recubrimiento, se incuba
durante una hora y se seca a vacío o se liofiliza.
Debido al uso de disoluciones de recubrimiento
tamponadas con acetato, la formación de precipitación pudo reducirse
significativamente. Otra mejora se logró añadiendo sacarosa. La
calidad del recubrimiento con y sin sacarosa se ilustra en la
figura 7. Mientras que todavía pueden reconocerse precipitados
individuales como manchas de color azul oscuro sin sacarosa, el
recubrimiento en presencia de sacarosa da como resultado un
recubrimiento sin manchas.
La importancia de la homogeneidad del
recubrimiento se aclara al comparar dos preparaciones que se
produjeron durante la investigación utilizando disoluciones de
recubrimiento en etanol al 60% y glicina 20 mmol/NaOH, pH 10,
respectivamente. Mientras que se logró una distribución homogénea en
presencia de etanol al 60% (figura 8), tiene lugar una formación de
precipitación significativa sobre la superficie del soporte en
presencia de glicina (figura 9). Ambos soportes se compararon en un
modelo de defectos en la bóveda craneal de la rata (véase más
adelante).
Se obtuvo FTC beta recubierto con
rhGDF-5 (50 \mug/25 mg de FTC beta) utilizando
diferentes tampones de recubrimiento (glicina 20 mmol/l/NaOH, pH 10
(C1) y etanol al 60% (C2)). Las ratas se anestesiaron mediante
inyección intramuscular de tiletamina - zolazepam (ZOLETIL® VIRBAC,
CARROS, Francia, 50 mg/kg, i.m.). Se cortó el pelo de la parte
dorsal del cráneo. A continuación la piel se lavó con un jabón
germicida (VETEDINE®, VETOQUINOL, LURE, Francia). El sitio
quirúrgico se lavó con un antiséptico, tal como povidona yodada
(disolución VETEDINE®, VETOQUINOL, LURE, Francia). Se realizó una
incisión de 20 mm de longitud en el cuero cabelludo a lo largo de
la sutura sagital, y la piel, la musculatura y el periostio, se
reflejaron dejando al descubierto los huesos parietales. Se utilizó
un trépano de 6 mm (COVELY, GENAY, Francia) para crear el defecto en
la parte dorsal del hueso parietal, lateral a la sutura sagital
bajo irrigación constante con solución fisiológica estéril
(AGUETTANT, LYON, Francia). Se crearon dos defectos idénticos por
animal. Se tuvo cuidado para evitar la lesión de la duramadre y
para evitar la punción del seno sagital superior. Una vez aplicados
los implantes, el periostio y los músculos se suturaron en su sitio
y se suturó el cuero cabelludo (hilo de polipropileno,
Prol\thetane®, ETHNOR, ISSY LES MOULINEAUX, Francia). Tras un
seguimiento de 6 semanas, los animales se anestesiaron mediante
inyección intramuscular de ZOLETIL® (50 mg/kg), después se
sacrificaron mediante la inyección de una dosis letal de DOLETHALND
(pentobarbital sódico, VETOQUINOL, LURE, Francia). Se tomaron
muestras de los explantes y se fijaron en disolución de formalina
tamponada al 10%. A continuación, las muestras se deshidrataron en
disoluciones de alcohol de concentraciones crecientes y se
incluyeron en PMMA (poli(metacrilato de metilo), Merck KGaA,
Darmstadt, Alemania). Se obtuvo una sección de 20 \mum de espesor
mediante una técnica de microcorte y molienda adaptada de Donath
(Donath K. Breuner G., A method for the study of undecalcified bone
and teeth with attached soft tissues. J. Oral. Pathol. 11,
318-326, 1982). Se tiñó una sección con Paragon
modificado para análisis cualitativo y
semi-cuantitativo mediante microscopía óptica. Las
secciones histológicas se observaron utilizando un microscopio
Polyvar (REICHERT) equipado con un objetivo x4, x10, x25 y x40.
Se observaron grandes cantidades de médula ósea y
células osteoblásticas en el sitio tratado con C2. Por el
contrario, la formación ósea fue escasa con C1. La degradación del
material del implante también aumentó con C2 en comparación con C1.
Para los resultados de los análisis histomorfométricos de los
materiales de implante, véanse la tabla 1 y las figuras 10 y
11.
| Muestra | % de tejido | % de | % de tejido | % de tejido |
| óseo | implante | lagunar | fibroso | |
| C1 | 8,9 | 39,2 | 2,1 | 49,8 |
| C2 | 43,4 | 18,5 | 21,4 | 16,7 |
Se colocan 200 mg de FTC beta (tamaño de gránulo
de 0,5-1,0 mm) en un recipiente de vidrio 2R. La
disolución madre de PMO-2 se diluye hasta 1 mg/ml
con el tampón de recubrimiento correspondiente (ácido acético 10
mmol/l, sacarosa al 10%). Se incuban 200 \mul de la disolución de
recubrimiento con FTC beta (1 h, 4ºC) y se liofilizan. La
distribución de PMO-2 sobre el soporte recubierto se
mostró mediante tinción de Commassie (figura 12).
Se colocan 200 mg de FTC beta (tamaño de gránulo
de 0,5-1,0 mm) en un recipiente de vidrio 2R. La
disolución madre de GDF-5 (4 mg/ml en HCl 10 mmol/l)
se diluye hasta 1 mg/ml con el tampón de recubrimiento
correspondiente. Las dos variantes del tampón de recubrimiento
contienen sacarosa al 10% y trehalosa al 10%, respectivamente. Se
incuban 200 \mul de la disolución de recubrimiento con FTC beta (1
h, 4ºC) y se liofilizan. La distribución de GDF-5
sobre el soporte recubierto se mostró mediante tinción de Commassie
(figura 13).
Se colocan 200 mg de FTC beta (tamaño de gránulo
de 0,5-1,0 mm) en un recipiente de vidrio 2R. La
disolución madre de GDF-5 (4 mg/ml en HCl 10 mmol/l)
se diluye hasta 1 mg/ml con el tampón de recubrimiento
correspondiente. Las dos variantes del tampón de recubrimiento
contienen 60% de etanol y 10% de manitol, ácido acético 10 mmol/l,
respectivamente. Se incuban 200 \mul de la disolución de
recubrimiento con FTC beta (1 h, 4ºC) y se liofilizan. La
distribución de GDF-5 sobre el soporte recubierto
se mostró mediante tinción de Commassie (figura 14).
Celeste A.J., et al. (1990)
"Identification of transforming growth factor ..."; Proc.
Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87: 9843-9847.
Chang, S. et al. (1994);
"Cartilage-derived morphogenetic proteins...";
J. Biol. Chem. 269: 28227-28234.
EMEA, ICH Topic Q 3C, Impurities: Residual
Solvents
Friess, W. et al. (1998);
Pharm. Dev. Technol. 4, 387-396.
Gao, T et al. (1996);
Int. Orthopaedics 20, 321-325.
Gombotz, W et al. (1996) en
Formulation, characterization and stability of protein drugs,
Plenum Press, Nueva York, EE.UU., págs. 219-245.
Griffith, D.L. et al.
(1996); "Three-dimensional structure of
recombinant human..."; Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 93:
878-883.
Hoetten, G. et al. (1994);
"Coning and expression of recombinant human
growth/differentiation factor 5."; Biochem. Biophys. Res.
Commun. 204: 646-652.
Hotz, G et al. (1994);
Int. J. Oral Maxillofac. Surg. 23,
413-417.
Katagiri, T. et al. (1990);
Biochem. Biophys. Res. Commun. 172:
295-299.
Lind, M et al. (1996); J.
Orthopaedic Res. 14, 343-350.
Lind, M. (1996); Acta. Orthop.
Scand. 67: 407-17.
Nishitoh, H. et al (1996);
J Biol. Chem. 271: 21345-21352.
Oezkayanak, E. et al.
(1990); "OP-1 cDNA encodes an osteogenic
protein in the TGF-beta family"; EMBO J.
9: 2085-2093.
Scheufler, C. et al. (1990);
"Crystal structure of human bone morphogenetic
protein-2 at 2.7 A resolution".
Schmitt, J. et al. (1999);
J. Orthop. Res. 17: 269-278.
Shore, E.M. et al. (1997);
"Human bone morphogenetic protein-2
(BMP-2) genomic DNA sequence".
Storm & Kingsley (1999);
Development Biology, 209, 11-27.
Terheyden, H et al. (1997);
Mund Kiefer Gesichtschir. 1, 272-275.
Wang, E.A. et al. (1990);
"Identification of transforming growth factor beta family members
present in bone-inductive protein purified from
bovine bone."; Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87:
9843-9847.
Wozney, J.M. et al. (1998);
Clin. Orthop. 346: 26-37.
Wozney, J.M. et al. (1988);
Science 242: 1528-1534.
<110> SCIL Biomedicals GmbH
\vskip0.400000\baselineskip
<120> Dispositivo que tiene propiedades
osteoinductoras y osteoconductoras
\vskip0.400000\baselineskip
<130> F 2849 PCT
\vskip0.400000\baselineskip
<150> 01 12 7573.2
\vskip0.400000\baselineskip
<151>
2001-11-19
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 3
\vskip0.400000\baselineskip
<170> PatentIn versión 3.1
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 396
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo Sapiens
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 1
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 2
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 431
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo Sapiens
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 2
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 3
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 501
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo Sapiens
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 3
Claims (26)
1. Dispositivo que tiene propiedades
osteoinductoras y osteoconductoras in vivo, que comprende un
soporte que contiene fosfato de calcio y una proteína
osteoinductora, en el que dicho soporte está completamente
recubierto con dicha proteína osteoinductora y en el que cantidades
esencialmente idénticas de dicha proteína osteoinductora están
presentes en todas y cada una de las zonas de la superficie de
dicho soporte.
2. Método para la producción del dispositivo
según la reivindicación 1 que tiene propiedades osteoinductoras y
osteoconductoras in vivo, que comprende las etapas de:
- (a)
- proporcionar una disolución que comprende proteína osteoinductora disuelta y un tampón que contiene un ácido débil que tiene un valor de pK entre 3 y 7, preferiblemente entre 4 y 6, manteniendo dicho tampón dicha proteína disuelta durante un tiempo suficiente para permitir el recubrimiento homogéneo de un soporte que contiene fosfato de calcio cuando se pone en contacto con dicho soporte y pudiendo dicho tampón equilibrar el aumento de pH producido al poner en contacto la disolución tampón con el soporte de fosfato de calcio, de manera que la proteína no precipite inmediatamente debido a dicho aumento de pH;
- (b)
- poner en contacto la disolución de la etapa (a) con un soporte que contiene fosfato de calcio;
- (c)
- permitir el recubrimiento homogéneo de la superficie de dicho soporte con dicha proteína disuelta; y
- (d)
- secar el soporte recubierto obtenido en la etapa (c).
3. Método según la reivindicación 2, en el que
dicho tampón tiene una concentración de tampón inferior a 100
mmol/l, inferior a 50 mmol/l o inferior a 20 mmol/l.
4. Método según la reivindicación 3, en el que
dicho ácido débil es el ácido acético o el ácido succínico.
5. Método según una cualquiera de las
reivindicaciones 2 a 4, en el que dicho tampón además comprende
sacáridos.
6. Método según la reivindicación 5, en el que
dicho sacárido es un disacárido.
7. Método según la reivindicación 6, en el que
dicho disacárido es sacarosa o trehalosa.
8. Método según una cualquiera de las
reivindicaciones 2 a 7, en el que dicho tampón comprende un
alcohol.
9. Método según la reivindicación 8, en el que
dicho alcohol es etanol o manitol.
10. Dispositivo según la reivindicación 1 o
método según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 9, en el
que dicho fosfato de calcio es fosfato tricálcico beta, fosfato
tricálcico alfa, apatita o un cemento que contiene fosfato de
calcio.
11. Dispositivo según la reivindicación 1, método
según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 9 o dispositivo o
método según la reivindicación 10, en el que dicha proteína
osteoinductora es un miembro de la familia
FCT-\beta.
12. Dispositivo o método según la reivindicación
11, en el que dicho miembro de la familia
FCT-\beta es un miembro de la subfamilia de
PMO.
13. Dispositivo o método según la reivindicación
12, en el que dicho miembro de la familia PMO es
PMO-2 o PMO-7.
14. Dispositivo o método según la reivindicación
11, en el que dicho miembro de la familia
FCT-\beta es una proteína del grupo de
GDF-5, GDF-6 y
GDF-7.
15. Dispositivo o método según la reivindicación
14, en el que dicho GDF es GDF-5.
16. Dispositivo según la reivindicación 1, método
según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 9 o dispositivo o
método según una cualquiera de las reivindicaciones 10 a 15, en el
que dicho dispositivo carece de sustancias tóxicas.
17. Dispositivo según la reivindicación 1, método
según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 9 o dispositivo o
método según una cualquiera de las reivindicaciones 10 a 16, en el
que dicho dispositivo carece de material infeccioso.
18. Composición farmacéutica que comprende el
dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 1, o 10 a
17 o que es obtenible mediante el método según una cualquiera de las
reivindicaciones 2 a 17.
\newpage
19. Uso del dispositivo según una cualquiera de
las reivindicaciones 1, o 10 a 17 o que es obtenible mediante el
método según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 17, para la
preparación de una composición farmacéutica que va a utilizarse para
el aumento óseo.
20. Uso según la reivindicación 19, en el que
dicho aumento óseo sigue a defectos por traumatismo, cáncer o
artificiales o es un requisito previo para la fijación posterior de
un implante.
21. Uso del dispositivo según una cualquiera de
las reivindicaciones 1, o 10 a 17 o que es obtenible mediante el
método según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 17, para la
preparación de una composición farmacéutica para tratar defectos
óseos.
22. Uso según la reivindicación 21, en el que
dichos defectos óseos son defectos en los huesos largos, defectos
en la zona maxilofacial o defectos óseos tras
apicoectomía,extirpación de quistes o tumores, extracción de dientes
o extracción quirúrgica de dientes retenidos.
23. Uso del dispositivo según una cualquiera de
las reivindicaciones 1, o 10 a 17 o que es obtenible mediante el
método según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 17, para la
preparación de una composición farmacéutica para tratar enfermedades
degenerativas y traumáticas del disco intervertebral.
24. Uso del dispositivo según una cualquiera de
las reivindicaciones 1, o 10 a 17 o que es obtenible mediante el
método según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 17, para la
preparación de una composición farmacéutica para tratar la
dehiscencia ósea.
25. Uso del dispositivo según una cualquiera de
las reivindicaciones 1, o 10 a 17 o que es obtenible mediante el
método según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 17, para la
preparación de una composición farmacéutica que va a utilizarse para
la elevación del piso sinusal o el aumento de la cresta maxilar o
mandibular atrofiada.
26. Kit que comprende el dispositivo según una
cualquiera de las reivindicaciones 1, o 10 a 17 o que es obtenible
mediante el método según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a
17.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP01127573 | 2001-11-19 | ||
| EP01127573 | 2001-11-19 | ||
| PCT/EP2002/003463 WO2003043673A1 (en) | 2001-11-19 | 2002-03-27 | Device having osteoinductive and osteoconductive properties |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2247423T3 true ES2247423T3 (es) | 2006-03-01 |
| ES2247423T5 ES2247423T5 (es) | 2015-12-30 |
Family
ID=8179288
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES02803343.9T Expired - Lifetime ES2247423T5 (es) | 2001-11-19 | 2002-03-27 | Método de producción de un dispositivo recubierto homogéneamente que tiene propiedades osteoinductoras y osteoconductoras |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8546334B2 (es) |
| EP (1) | EP1448246B2 (es) |
| JP (2) | JP4473576B2 (es) |
| CN (1) | CN100425285C (es) |
| AT (1) | ATE303169T1 (es) |
| AU (1) | AU2002308204B9 (es) |
| BR (1) | BR0214275A (es) |
| CA (1) | CA2466947C (es) |
| CY (1) | CY1105664T1 (es) |
| DE (1) | DE60205937T3 (es) |
| DK (1) | DK1448246T4 (es) |
| ES (1) | ES2247423T5 (es) |
| PT (1) | PT1448246E (es) |
| SI (1) | SI1448246T2 (es) |
| WO (1) | WO2003043673A1 (es) |
Families Citing this family (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1462126A1 (en) * | 2003-03-28 | 2004-09-29 | BIOPHARM GESELLSCHAFT ZUR BIOTECHNOLOGISCHEN ENTWICKLUNG VON PHARMAKA mbH | Improved Osteoinductive Materials |
| ATE478008T1 (de) * | 2004-03-10 | 2010-09-15 | Scil Technology Gmbh | Überzogene implantate, ihre herstellung und verwendung davon |
| EP1604694A1 (en) * | 2004-06-09 | 2005-12-14 | Scil Technology GmbH | Composite device having osteoinductive and osteoconductive properties |
| US20100112028A1 (en) * | 2004-06-09 | 2010-05-06 | Klaus Hellerbrand | Composite material for use as protein carrier |
| EP1604693A1 (en) | 2004-06-09 | 2005-12-14 | Scil Technology GmbH | In situ forming scaffold, its manufacturing and use |
| US20060286171A1 (en) * | 2005-06-17 | 2006-12-21 | Tianhong Zhou | Bone morphogenetic protein formulations |
| CN101330934B (zh) * | 2005-12-14 | 2013-03-20 | Scil技术有限公司 | 一种用于骨再生的可模压的生物材料及其制备方法和用途 |
| US20070299520A1 (en) * | 2006-06-26 | 2007-12-27 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Surface treatment of implantable devices |
| AU2007234612B2 (en) * | 2006-12-14 | 2013-06-27 | Johnson & Johnson Regenerative Therapeutics, Llc | Protein stabilization formulations |
| DE102006060958A1 (de) * | 2006-12-20 | 2008-06-26 | Jennissen, Herbert P., Prof. Dr. | Verfahren zur Herstellung einer Polymermatrix, daraus bestehende Implantate sowie deren Verwendung |
| US20080221681A1 (en) * | 2007-03-09 | 2008-09-11 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Methods for Improving Fatigue Performance of Implants With Osteointegrating Coatings |
| US7678764B2 (en) | 2007-06-29 | 2010-03-16 | Johnson & Johnson Regenerative Therapeutics, Llc | Protein formulations for use at elevated temperatures |
| JP5323832B2 (ja) * | 2007-08-07 | 2013-10-23 | アドバンスト・テクノロジーズ・アンド・リジェネレイティブ・メディスン・エルエルシー | 酸性水溶液中にｇｄｆ−５を含むタンパク質製剤 |
| US20090061002A1 (en) * | 2007-09-05 | 2009-03-05 | Venbrocks Rudolf A | Calcium phospate based delivery of growth and differentiation factors to compromised bone |
| DE102007051914A1 (de) * | 2007-10-29 | 2009-05-07 | Herbert Prof. Dr. Jennissen | Verfahren zur Herstellung von mit Wachstumsfaktoren beladenen Partikeln sowie die so erhaltenen Partikel |
| BRPI0911048A2 (pt) * | 2008-04-14 | 2015-12-29 | Atrm Llc | formulações líquidas tamponadas de gdf-5 |
| US20110059149A1 (en) * | 2008-06-16 | 2011-03-10 | Little Marisa A | Process for depositing calcium phosphate therapeutic coatings with different release rates and a prosthesis coated via the process |
| US9861725B2 (en) | 2009-05-28 | 2018-01-09 | Addbio Ab | Multilayer protein films, methods of making, and drug delivery devices and biomedical implants employing the films |
| US20130122066A1 (en) * | 2010-07-30 | 2013-05-16 | Biopham Gesellschaft Zur Biotechnologischen Entwicklung Von Pharmaka Mbh | Drug delivery devices and growth factor formulations for accelerated wound healing |
| WO2012093939A1 (en) | 2011-01-05 | 2012-07-12 | Vereniging Voor Christelijk Hoger Onderwijs, Wetenschappelijk Onderzoek En Patiëntenzorg | Particles comprising calcium phosphate and use thereof |
| CN113166202B (zh) * | 2018-10-12 | 2024-09-13 | 治疗调适公司 | 包括β-磷酸三钙-结合序列的多肽及其用途 |
| ES2971657T3 (es) | 2018-11-12 | 2024-06-06 | Nobel Biocare Services Ag | Implante dental, componente para aplicaciones dentales, sistema de implante para aplicaciones dentales, método para formar una capa protectora sobre la superficie de un componente de implante o implantable, componente de implante o implantable que tiene una capa protectora, y uso de una capa protectora |
| EP3682931A1 (en) * | 2019-01-21 | 2020-07-22 | Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf | Thoracic catheter |
Family Cites Families (139)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3329128A1 (de) | 1983-08-11 | 1985-02-28 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | 3-cycloalkyl-1-(1,3-dioxan-5-yl)-2-(1,2,4-triazol-1-yl)-propan-1-one und -propan-1-ole |
| US4596574A (en) | 1984-05-14 | 1986-06-24 | The Regents Of The University Of California | Biodegradable porous ceramic delivery system for bone morphogenetic protein |
| US5106748A (en) | 1986-07-01 | 1992-04-21 | Genetics Institute, Inc. | Dna sequences encoding 5 proteins |
| US5366875A (en) | 1986-07-01 | 1994-11-22 | Genetics Institute, Inc. | Methods for producing BMP-7 proteins |
| US6432919B1 (en) | 1986-07-01 | 2002-08-13 | Genetics Institute, Inc. | Bone morphogenetic protein-3 and compositions |
| US5187076A (en) | 1986-07-01 | 1993-02-16 | Genetics Institute, Inc. | DNA sequences encoding BMP-6 proteins |
| US6150328A (en) | 1986-07-01 | 2000-11-21 | Genetics Institute, Inc. | BMP products |
| US5631142A (en) | 1986-07-01 | 1997-05-20 | Genetics Institute, Inc. | Compositions comprising bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) |
| US5939388A (en) | 1986-07-01 | 1999-08-17 | Rosen; Vicki A. | Methods of administering BMP-5 compositions |
| IL83003A (en) | 1986-07-01 | 1995-07-31 | Genetics Inst | Osteoinductive factors |
| US5543394A (en) | 1986-07-01 | 1996-08-06 | Genetics Institute, Inc. | Bone morphogenetic protein 5(BMP-5) compositions |
| US4877864A (en) | 1987-03-26 | 1989-10-31 | Genetics Institute, Inc. | Osteoinductive factors |
| ZA874681B (en) | 1986-07-01 | 1988-04-27 | Genetics Inst | Novel osteoinductive factors |
| US5108922A (en) | 1986-07-01 | 1992-04-28 | Genetics Institute, Inc. | DNA sequences encoding BMP-1 products |
| US5013649A (en) | 1986-07-01 | 1991-05-07 | Genetics Institute, Inc. | DNA sequences encoding osteoinductive products |
| US5459047A (en) | 1986-07-01 | 1995-10-17 | Genetics Institute, Inc. | BMP-6 proteins |
| US5162114A (en) | 1989-02-23 | 1992-11-10 | Stryker Corporation | Bone collagen matrix for xenogenic implants |
| US5258494A (en) | 1988-04-08 | 1993-11-02 | Stryker Corporation | Osteogenic proteins |
| WO1989009787A2 (en) | 1988-04-08 | 1989-10-19 | Creative Biomolecules, Inc. | Osteogenic devices |
| US5011691A (en) | 1988-08-15 | 1991-04-30 | Stryker Corporation | Osteogenic devices |
| US5344654A (en) | 1988-04-08 | 1994-09-06 | Stryker Corporation | Prosthetic devices having enhanced osteogenic properties |
| US5266683A (en) | 1988-04-08 | 1993-11-30 | Stryker Corporation | Osteogenic proteins |
| US5324819A (en) | 1988-04-08 | 1994-06-28 | Stryker Corporation | Osteogenic proteins |
| US4975526A (en) | 1989-02-23 | 1990-12-04 | Creative Biomolecules, Inc. | Bone collagen matrix for zenogenic implants |
| US5670336A (en) | 1988-04-08 | 1997-09-23 | Stryker Corporation | Method for recombinant production of osteogenic protein |
| US6586388B2 (en) | 1988-04-08 | 2003-07-01 | Stryker Corporation | Method of using recombinant osteogenic protein to repair bone or cartilage defects |
| US5354557A (en) | 1988-04-08 | 1994-10-11 | Stryker Corporation | Osteogenic devices |
| US5108436A (en) | 1988-09-29 | 1992-04-28 | Collagen Corporation | Implant fixation |
| US5207710A (en) | 1988-09-29 | 1993-05-04 | Collagen Corporation | Method for improving implant fixation |
| US5258029A (en) | 1988-09-29 | 1993-11-02 | Collagen Corporation | Method for improving implant fixation |
| DK0429570T3 (da) | 1989-03-28 | 1998-04-27 | Genetics Inst | Osteoinducerende præparater |
| US5158934A (en) | 1989-09-01 | 1992-10-27 | Genentech, Inc. | Method of inducing bone growth using TGF-β |
| US5422340A (en) | 1989-09-01 | 1995-06-06 | Ammann; Arthur J. | TGF-βformulation for inducing bone growth |
| WO1991005802A1 (en) | 1989-10-17 | 1991-05-02 | Creative Biomolecules, Inc. | Osteogenic devices |
| DK27390D0 (da) | 1990-02-02 | 1990-02-02 | Troels Torp Andreassen | Fremgangsmaade og apparat til administration af biologisk aktive stoffer |
| JPH07500487A (ja) | 1990-10-18 | 1995-01-19 | ストライカー コーポレイション | 骨形成ペプチド |
| US6399569B1 (en) | 1991-03-11 | 2002-06-04 | Curis, Inc. | Morphogen treatments for limiting proliferation of epithelial cells |
| CA2363965C (en) | 1991-03-11 | 2010-05-18 | Curis, Inc. | Protein-induced morphogenesis |
| US5674844A (en) | 1991-03-11 | 1997-10-07 | Creative Biomolecules, Inc. | Treatment to prevent loss of and/or increase bone mass in metabolic bone diseases |
| US5849686A (en) | 1991-03-11 | 1998-12-15 | Creative Biomolecules, Inc. | Morphogen-induced liver regeneration |
| US6495513B1 (en) | 1991-03-11 | 2002-12-17 | Curis, Inc. | Morphogen-enhanced survival and repair of neural cells |
| DK0575555T3 (da) | 1991-03-11 | 2001-11-05 | Curis Inc | Proteininduceret morfogenese |
| US6800603B2 (en) | 1991-03-11 | 2004-10-05 | Curis, Inc. | Morphogen-induced neural cell adhesion |
| US5652337A (en) | 1991-03-11 | 1997-07-29 | Creative Biomolecules, Inc. | OP-3-induced morphogenesis |
| US6090776A (en) | 1991-03-11 | 2000-07-18 | Creative Bio Molecules, Inc. | Morphogen treatment of organ implants |
| US5652118A (en) | 1991-03-11 | 1997-07-29 | Creative Biomolecules, Inc. | Nucleic acid encoding a novel morphogenic protein, OP-3 |
| US5656593A (en) | 1991-03-11 | 1997-08-12 | Creative Biomolecules, Inc. | Morphogen induced periodontal tissue regeneration |
| US5972884A (en) | 1991-03-11 | 1999-10-26 | Creative Biomolecules, Inc. | Morphogen treatment of gastrointestinal ulcers |
| US6194376B1 (en) | 1991-03-11 | 2001-02-27 | Creative Biomolecules, Inc. | Method for modulating inflammatory response comprising administering morphogen |
| US6723698B2 (en) | 1991-03-11 | 2004-04-20 | Curis, Inc. | Methods and compositions for the treatment of motor neuron injury and neuropathy |
| US6211146B1 (en) | 1991-03-11 | 2001-04-03 | Curis, Inc. | 60A protein-induced morphogenesis |
| US5650276A (en) | 1991-03-11 | 1997-07-22 | Creative Biomolecules, Inc. | Morphogenic protein screening method |
| US5707810A (en) | 1991-03-11 | 1998-01-13 | Creative Biomolecules, Inc. | Method of diagnosing renal tissue damage or disease |
| US6077823A (en) | 1991-03-11 | 2000-06-20 | Creative Biomolecules, Inc. | Method for reducing tissue damage associated with ischemia-reperfusion or hypoxia injury |
| US6506729B1 (en) | 1991-03-11 | 2003-01-14 | Curis, Inc. | Methods and compositions for the treatment and prevention of Parkinson's disease |
| US6395883B1 (en) | 1991-03-11 | 2002-05-28 | Curis, Inc. | Soluble morphogenic protein complex compositions of matter |
| US5290763A (en) | 1991-04-22 | 1994-03-01 | Intermedics Orthopedics/Denver, Inc. | Osteoinductive protein mixtures and purification processes |
| US5563124A (en) | 1991-04-22 | 1996-10-08 | Intermedics Orthopedics/ Denver, Inc. | Osteogenic product and process |
| US5177406A (en) | 1991-04-29 | 1993-01-05 | General Motors Corporation | Active matrix vacuum fluorescent display with compensation for variable phosphor efficiency |
| DE4121043A1 (de) | 1991-06-26 | 1993-01-07 | Merck Patent Gmbh | Knochenersatzmaterial mit fgf |
| EP0523926A3 (en) | 1991-07-15 | 1993-12-01 | Smith & Nephew Richards Inc | Prosthetic implants with bioabsorbable coating |
| DE69233559T2 (de) | 1991-08-30 | 2006-08-31 | Curis, Inc., Cambridge | Osteogenische proteine in der behandlung von metabolischen knochenkrankheiten |
| US6022853A (en) | 1991-08-30 | 2000-02-08 | Creative Biomolecules, Inc. | Morphogen-enriched dietary composition |
| JP3693338B2 (ja) | 1991-08-30 | 2005-09-07 | キュリス インコーポレイテッド | 組織形成因子誘導による炎症反応の調節 |
| SE469653B (sv) | 1992-01-13 | 1993-08-16 | Lucocer Ab | Poroest implantat |
| US6120760A (en) | 1992-02-12 | 2000-09-19 | Biopharm Gesellschaft Zur Biotechnologischen Entwicklung | Growth/differentiation factors of the TGF-β family |
| DK0625989T3 (da) | 1992-02-12 | 2000-06-26 | Bioph Biotech Entw Pharm Gmbh | DNA-sekvenser kodende for hidtil ukendte vækst-/differentieringsfaktorer |
| US6013853A (en) | 1992-02-14 | 2000-01-11 | The University Of Texas System | Continuous release polymeric implant carrier |
| US5876452A (en) | 1992-02-14 | 1999-03-02 | Board Of Regents, University Of Texas System | Biodegradable implant |
| CA2117379C (en) | 1992-02-14 | 1999-11-16 | Kypriacos A. Athanasiou | Multi-phase bioerodible implant/carrier and method of manufacturing and using same |
| US5610021A (en) | 1992-02-21 | 1997-03-11 | Creative Biomolecules, Inc. | Compositions and methods for identification and use of soluble complex forms of osteogenic proteins |
| US6071695A (en) | 1992-02-21 | 2000-06-06 | Creative Biomolecules, Inc. | Methods and products for identification of modulators of osteogenic protein-1 gene expression |
| US5397235A (en) | 1993-07-02 | 1995-03-14 | Dental Marketing Specialists, Inc. | Method for installation of dental implant |
| AU671721B2 (en) | 1993-01-12 | 1996-09-05 | Genentech Inc. | Tgf-beta formulation for inducing bone growth |
| EP0690871A4 (en) | 1993-01-12 | 1999-10-20 | Univ Johns Hopkins Med | GROWTH DIFFERENTIATION FACTOR-5 |
| US5385887A (en) * | 1993-09-10 | 1995-01-31 | Genetics Institute, Inc. | Formulations for delivery of osteogenic proteins |
| US6027919A (en) | 1993-12-07 | 2000-02-22 | Genetics Institute, Inc. | BMP-12 and BMP-13 proteins and DNA encoding them |
| AU689184B2 (en) | 1993-12-07 | 1998-03-26 | Genetics Institute, Llc | BMP-12, BMP-13 and tendon-inducing compositions thereof |
| US6013517A (en) | 1994-05-09 | 2000-01-11 | Chiron Corporation | Crossless retroviral vectors |
| US5681746A (en) | 1994-12-30 | 1997-10-28 | Chiron Viagene, Inc. | Retroviral delivery of full length factor VIII |
| WO1996026737A1 (en) | 1995-03-01 | 1996-09-06 | Creative Biomolecules, Inc. | Morphogen-induced dentine regeneration |
| US5782919A (en) * | 1995-03-27 | 1998-07-21 | Sdgi Holdings, Inc. | Interbody fusion device and method for restoration of normal spinal anatomy |
| US5635372A (en) | 1995-05-18 | 1997-06-03 | Genetics Institute, Inc. | BMP-15 compositions |
| US6027742A (en) | 1995-05-19 | 2000-02-22 | Etex Corporation | Bioresorbable ceramic composites |
| US6132463A (en) | 1995-05-19 | 2000-10-17 | Etex Corporation | Cell seeding of ceramic compositions |
| US5676976A (en) | 1995-05-19 | 1997-10-14 | Etex Corporation | Synthesis of reactive amorphous calcium phosphates |
| US6117456A (en) | 1995-05-19 | 2000-09-12 | Etex Corporation | Methods and products related to the physical conversion of reactive amorphous calcium phosphate |
| US6287341B1 (en) | 1995-05-19 | 2001-09-11 | Etex Corporation | Orthopedic and dental ceramic implants |
| US8333996B2 (en) | 1995-05-19 | 2012-12-18 | Etex Corporation | Calcium phosphate delivery vehicle and adjuvant |
| US6541037B1 (en) | 1995-05-19 | 2003-04-01 | Etex Corporation | Delivery vehicle |
| EP1364656B1 (en) | 1995-06-05 | 2013-11-20 | Genetics Institute, LLC | Use of bone morphogenetic proteins for healing and repair of connective tissue attachment |
| AU4721696A (en) * | 1996-02-29 | 1997-09-16 | T. Sam Lindholm | An osteogenic device and a method for preparing the device |
| EP0806212B1 (en) | 1996-05-10 | 2003-04-02 | IsoTis N.V. | Device for incorporation and release of biologically active agents |
| US6143948A (en) | 1996-05-10 | 2000-11-07 | Isotis B.V. | Device for incorporation and release of biologically active agents |
| EP0806211B1 (en) | 1996-05-10 | 2002-10-23 | IsoTis N.V. | Implant material and process for producing it |
| CA2205104A1 (en) | 1996-05-10 | 1997-11-10 | Eugenia Ribeiro De Sousa Fidalgo Leitao | Device for incorporation and release of biologically active agents |
| US6953594B2 (en) | 1996-10-10 | 2005-10-11 | Etex Corporation | Method of preparing a poorly crystalline calcium phosphate and methods of its use |
| DE69729647T2 (de) | 1996-10-16 | 2005-07-07 | Etex Corp., Cambridge | Verfahren zur Herstellung von wenigkristallinem Calciumphosphat und Verfahren zu dessen Verwendung |
| DE19647853A1 (de) * | 1996-11-19 | 1998-05-20 | Bioph Biotech Entw Pharm Gmbh | Verbindungen mit verbesserter knorpel- und/oder knocheninduzierender Aktivität |
| US20020082224A1 (en) | 1997-01-14 | 2002-06-27 | Douglas J. Jolly | Non-immunogenic prodrugs and selectable markers for use in gene therapy |
| CA2278546C (en) | 1997-01-30 | 2008-04-01 | Hoechst Marion Roussel Ltd. | Freeze-dried composition of bone morphogenetic protein human mp52 |
| JP4388602B2 (ja) | 1997-02-07 | 2009-12-24 | ストライカー コーポレイション | マトリクスを含まない骨形成デバイス、移植片、およびその使用方法 |
| US20020098222A1 (en) | 1997-03-13 | 2002-07-25 | John F. Wironen | Bone paste |
| US20030032586A1 (en) | 1997-05-15 | 2003-02-13 | David C. Rueger | Compositions for morphogen-induced osteogenesis |
| US6129928A (en) | 1997-09-05 | 2000-10-10 | Icet, Inc. | Biomimetic calcium phosphate implant coatings and methods for making the same |
| CA2304983A1 (en) | 1997-09-24 | 1999-04-01 | The Regents Of The University Of California | Non-primate lentiviral vectors and packaging systems |
| US20020048805A1 (en) | 1998-01-16 | 2002-04-25 | Julie C. Johnston | Feline immunodeficiency virus gene therapy vectors |
| WO1999036511A2 (en) | 1998-01-16 | 1999-07-22 | Chiron Corporation | Feline immunodeficiency virus gene therapy vectors |
| CA2328404C (en) | 1998-05-13 | 2007-07-24 | Genetix Pharmaceuticals, Inc. | Novel lentiviral packaging cells |
| US6261322B1 (en) | 1998-05-14 | 2001-07-17 | Hayes Medical, Inc. | Implant with composite coating |
| KR100298178B1 (ko) | 1998-06-29 | 2001-08-07 | 박종섭 | 이미지센서의포토다이오드 |
| US6328765B1 (en) | 1998-12-03 | 2001-12-11 | Gore Enterprise Holdings, Inc. | Methods and articles for regenerating living tissue |
| US6423544B1 (en) | 1998-12-31 | 2002-07-23 | Chiron Corporation | Compositions and methods for producing recombinant virions |
| AU770196B2 (en) | 1999-02-04 | 2004-02-12 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Osteogenic paste compositions and uses thereof |
| CA2362049A1 (en) | 1999-02-04 | 2000-08-10 | Sdgi Holdings, Inc. | Highly-mineralized osteogenic sponge compositions, and uses thereof |
| US6730297B1 (en) | 1999-05-28 | 2004-05-04 | Chiron Corporation | Use of recombinant gene delivery vectors for treating or preventing lysosomal storage disorders |
| SE514202C2 (sv) | 1999-05-31 | 2001-01-22 | Nobel Biocare Ab | På implantat till ben- eller vävnadsstruktur anordnat skikt samt sådant implantat och förfarande för applicering av skiktet |
| SE514323C2 (sv) | 1999-05-31 | 2001-02-12 | Nobel Biocare Ab | Implantat samt förfarande och användning vid implantat |
| SE515695C2 (sv) * | 1999-05-31 | 2001-09-24 | Nobel Biocare Ab | Implantat med beläggning av bentillväxtstimulerande substans för applicering i ben och förfarande vid sådant implantat |
| AU6499700A (en) * | 1999-07-28 | 2001-02-19 | Regeneration Technologies, Inc. | Reduced antigenicity tissue (rat) implants |
| US6696410B1 (en) * | 1999-09-27 | 2004-02-24 | Stryker Corporation | Compositions and therapeutic methods using morphogenic proteins, hormones and hormone receptors |
| WO2001028603A1 (en) | 1999-10-15 | 2001-04-26 | Genetics Institute, Inc. | Formulations for delivery of osteogenic proteins |
| DK1223990T3 (da) | 1999-10-15 | 2004-11-29 | Inst Genetics Llc | Formuleringer af hyaluronsyre til tilförsel af osteogene proteiner |
| DE19950386A1 (de) | 1999-10-19 | 2001-05-10 | Miladin Lazarov | Biokompatibler Gegenstand |
| ATE244027T1 (de) † | 2000-02-04 | 2003-07-15 | Isotis Nv | Proteinbeschichtung |
| US20020022885A1 (en) * | 2000-05-19 | 2002-02-21 | Takahiro Ochi | Biomaterial |
| US20020037281A1 (en) | 2000-05-26 | 2002-03-28 | Davidson Beverly L. | Methods of transducing neural cells using lentivirus vectors |
| US6533821B1 (en) | 2000-06-22 | 2003-03-18 | Thomas Lally | Bio-adhesive composition, method for adhering objects to bone |
| US7419829B2 (en) | 2000-10-06 | 2008-09-02 | Oxford Biomedica (Uk) Limited | Vector system |
| US20030003565A1 (en) | 2000-11-27 | 2003-01-02 | Dubensky Thomas W. | Functional lentiviral vector from an MLV-based backbone |
| US20020082679A1 (en) | 2000-12-22 | 2002-06-27 | Avantec Vascular Corporation | Delivery or therapeutic capable agents |
| WO2002054088A2 (en) | 2001-01-05 | 2002-07-11 | Duke University | Contrast enhancement agent for magnetic resonance imaging |
| US6949251B2 (en) | 2001-03-02 | 2005-09-27 | Stryker Corporation | Porous β-tricalcium phosphate granules for regeneration of bone tissue |
| US20030049328A1 (en) | 2001-03-02 | 2003-03-13 | Dalal Paresh S. | Porous beta-tricalcium phosphate granules and methods for producing same |
| WO2002083188A2 (en) | 2001-04-16 | 2002-10-24 | Cassidy James J | Dense/porous structures for use as bone substitutes |
| EP1389978B1 (en) | 2001-05-01 | 2009-01-07 | Amedica Corporation | Radiolucent bone graft |
| US20030039636A1 (en) | 2001-05-01 | 2003-02-27 | Genetix Pharmaceuticals, Inc. | Novel self-inactivating (SIN) lentiviral vectors |
| SE519566C2 (sv) | 2001-07-04 | 2003-03-11 | Nobel Biocare Ab | Förfarande för behandling av implantat genom beläggning med kalciumfosfat och bentillväxtstimulerande medel |
| SE519564C2 (sv) | 2001-07-04 | 2003-03-11 | Nobel Biocare Ab | Implantat, t ex dentalt implantat, belagt med bentillväxtstimulerande medel |
-
2002
- 2002-03-27 ES ES02803343.9T patent/ES2247423T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-03-27 AU AU2002308204A patent/AU2002308204B9/en not_active Ceased
- 2002-03-27 DK DK02803343.9T patent/DK1448246T4/en active
- 2002-03-27 CN CNB028192745A patent/CN100425285C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2002-03-27 DE DE60205937.2T patent/DE60205937T3/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-03-27 JP JP2003545351A patent/JP4473576B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2002-03-27 PT PT02803343T patent/PT1448246E/pt unknown
- 2002-03-27 US US10/496,399 patent/US8546334B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-03-27 SI SI200230206T patent/SI1448246T2/sl unknown
- 2002-03-27 AT AT02803343T patent/ATE303169T1/de active
- 2002-03-27 WO PCT/EP2002/003463 patent/WO2003043673A1/en not_active Ceased
- 2002-03-27 EP EP02803343.9A patent/EP1448246B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-03-27 CA CA2466947A patent/CA2466947C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-03-27 BR BR0214275-9A patent/BR0214275A/pt not_active IP Right Cessation
-
2005
- 2005-11-04 CY CY20051101348T patent/CY1105664T1/el unknown
-
2009
- 2009-12-29 JP JP2009299102A patent/JP5054091B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2013
- 2013-09-27 US US14/040,500 patent/US20150080303A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1448246A1 (en) | 2004-08-25 |
| EP1448246B1 (en) | 2005-08-31 |
| BR0214275A (pt) | 2004-09-21 |
| JP2010075737A (ja) | 2010-04-08 |
| CA2466947A1 (en) | 2003-05-30 |
| AU2002308204B2 (en) | 2007-09-27 |
| EP1448246B2 (en) | 2015-09-09 |
| US8546334B2 (en) | 2013-10-01 |
| CN1561235A (zh) | 2005-01-05 |
| AU2002308204B9 (en) | 2008-06-12 |
| AU2002308204A1 (en) | 2003-06-10 |
| CN100425285C (zh) | 2008-10-15 |
| CY1105664T1 (el) | 2010-12-22 |
| ES2247423T5 (es) | 2015-12-30 |
| PT1448246E (pt) | 2005-11-30 |
| JP5054091B2 (ja) | 2012-10-24 |
| SI1448246T2 (sl) | 2015-12-31 |
| DK1448246T4 (en) | 2015-12-21 |
| HK1071315A1 (zh) | 2005-07-15 |
| ATE303169T1 (de) | 2005-09-15 |
| DE60205937T3 (de) | 2016-01-21 |
| DE60205937D1 (de) | 2005-10-06 |
| DK1448246T3 (da) | 2005-12-27 |
| CA2466947C (en) | 2012-05-22 |
| DE60205937T2 (de) | 2006-06-14 |
| JP2005509494A (ja) | 2005-04-14 |
| US20060088565A1 (en) | 2006-04-27 |
| US20150080303A1 (en) | 2015-03-19 |
| WO2003043673A1 (en) | 2003-05-30 |
| SI1448246T1 (sl) | 2005-12-31 |
| JP4473576B2 (ja) | 2010-06-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2247423T3 (es) | Dispositivo recubierto homogeneamente que tiene propiedades osteoinductoras y osteoconductoras. | |
| ES2385212T3 (es) | Pasta de endurecimiento in situ, su fabricación y uso | |
| EP2446862B1 (en) | Amphiphilic peptides and hydrogel matrices thereof for bone repair | |
| US7365051B2 (en) | Compounds with improved cartilage-inducing and/or bone-inducing activity | |
| ES2305757T3 (es) | Materiales osteoinductivos mejorados. | |
| ES2902872T3 (es) | Matrices suplementadas para la reparación de fracturas óseas | |
| BRPI0210282B1 (pt) | Composições compreendendo veículos de distribuição de fosfato de cálcio para proteínas osteoindutivas, e respectivo uso | |
| ES2260685T3 (es) | Implante metalico recubierto, a una concentracion de oxigeno reducida, con proteina osteoinductora. | |
| EP2200537B1 (en) | Calcium phosphate based delivery of growth and differentiation factors to compromised bone | |
| HK1071315B (zh) | 具有骨诱导和骨传导特性的装置 | |
| ES2973123T3 (es) | Partículas bioactivas de reparación ósea | |
| Cho et al. | The effects of synthetic peptide derived from hBMP-2 on bone formation in rabbit calvarial defect | |
| EP1604649A1 (en) | Composite material for use as protein carrier | |
| EP1604694A1 (en) | Composite device having osteoinductive and osteoconductive properties |