ES2249362T3 - Produccion de microesferas. - Google Patents

Abstract

Una microesfera que comprende una sustancia fisiológicamente activa y un polímero biodegradable, que es obtenible a partir de un procedimiento que comprende someter una emulsión a/o/a o una emulsión a/o, en la cual dicha sustancia fisiológicamente activa esta en una fase acuosa interna en la emulsión a/o/a o en una fase oleosa en la emulsión o/a, y dicho polímero biodegradable está en una fase oleosa, a un método de desecación del agua interior en las siguientes condiciones: 1) la cantidad de microesferas por m3 de una fase acuosa externa es 0, 1 a 500 kg, 2) la raíz cuadrada del área (unidad: m2) de la superficie líquida en contacto con la fase gaseosa es 0, 2 a 4, 5 por la raíz cúbica del volumen (unidad: m3) de una fase acuosa externa, 3) la emulsión a/o/a o la emulsión o/a se sustituye a una frecuencia de sustitución de 0, 01 a 10 veces/minuto, 4) se sopla un gas en la emulsión a/o/a o en la emulsión o/a a una velocidad de transferencia de gas próximo a la superficie líquida de 0, 1 a 300 m/segundo, y 5) el gas se sustituye a una frecuencia de sustitución no menor de 0, 5 veces/minuto.

Description

Producción de microesferas.

La presente invención se refiere a la producción de microesferas.

Antecedentes de la invención

Como tecnología de la técnica anterior, en el documento de Patente Europea EP-A-481732 por ejemplo, se describe una preparación de liberación sostenida que comprende un fármaco, un ácido poliláctico y un copolímero de ácido glicólico/ácido hidroxicarboxílico [HOCH(alquil C_{2}-C_{8})COOH]. Como método de producción para dicha preparación, se describe el método de desecación del agua interior, en el cual una emulsión agua/aceite (a/o) que comprende una solución acuosa de un péptido fisiológicamente activo como fase acuosa interna y una solución de disolvente orgánico de un polímero biodegradable como fase oleosa, se añade a agua o similar para producir una emulsión agua/aceite/agua, a partir de la cual se producen las microesferas de liberación sostenida.

También, en las publicaciones de Patentes Japonesas no examinadas Nos. 100516/1985 (EP-A-145240) y 201816/
1987 (EP-A-190833) se describe la producción de microcápsulas usando un fármaco soluble en agua y un polímero mediante el método de desecación del agua interior.

En la desecación del agua interior, la insuficiente eliminación del disolvente, debido a la inadecuada velocidad de eliminación del disolvente de las microesferas, es probable que cause la agregación de las esferas, dando lugar a problemas relacionados con la dispersabilidad de las esferas y la capacidad de paso a través de la aguja durante la administración. Un intento para conseguir una suficiente eliminación del disolvente da como resultado un tiempo de desecación del agua interior significativamente extenso, lo cual a su vez disminuye la proporción de captura del fármaco en las microesferas obtenidas y no puede aportar resultados satisfactorios.

Resumen de la invención

Mediante una investigación intensiva de estos antecedentes, los presentes inventores encontraron que es posible aumentar la velocidad de eliminación del disolvente de las microesferas y mejorar notablemente la proporción de captura del fármaco en las microesferas sometiendo a las microcápsulas a desecación del agua interior bajo condiciones particulares, y desarrollaron la presente invención.

Por consiguiente, la presente invención se refiere a un método de producción de microesferas, el cual comprende someter una emulsión agua/aceite/agua o una emulsión aceite/agua a un método de desecación del agua interior bajo las siguientes condiciones:

1. La cantidad de microesferas por m^{3} de la fase acuosa externa es 0,1 a 500 kg, 2. La raíz cuadrada del área (unidad: m^{2}) de la superficie líquida en contacto con la fase gaseosa es 0,2 a 4,5 por la raíz cúbica del volumen (unidad: m^{3}) de una fase acuosa externa, 3. La emulsión agua/aceite/agua o la emulsión aceite/agua se sustituye con una frecuencia de sustitución de 0,01 a 10 veces/minuto, 4. Se sopla un gas a la emulsión agua/aceite/agua o a la emulsión aceite/agua a la velocidad de transferencia del gas próximo a la superficie liquida de 0,1 a 300 m/segundo, y 5. El gas se sustituye a una frecuencia de sustitución no menor de 0,5 veces/minuto.

Descripción detallada de la invención

En la presente descripción, las abreviaturas para aminoácidos, grupos protectores y otros se basan en las abreviaturas especificadas por la Comisión IUPAC-IUB sobre Nomenclatura Bioquímica o abreviaturas de uso común en áreas relevantes. Cuando un isómero óptico puede estar presente en un aminoácido, su configuración es L a menos que se indique lo contrario.

Las abreviaturas usadas en la presente descripción se definen como sigue:

NAcD2Nal	:	N-acetil-D-3-(2-naftil)alanilo
D4ClPhe	:	D-3-(4-clorofenil)alanilo
D3Pal	:	D-3-(3-piridil)alanilo
NMeTyr	:	N-metiltirosilo
DLys(Nic)	:	D-(epsilon-N-nicotinoil)lisilo
Lys(Nisp)	:	(Epsilon-N-isopropil)lisilo
DhArg(Et_{2})	:	D-(N,N'-dietil)homoarginilo

Con respecto al peso molecular medio en peso y al grado de dispersión, la presente descripción sostiene que el primero mencionado es en relación con el poliestireno el que se determinó por cromatografía de permeación en gel (GPC), usando 9 poliestirenos como sustancias de referencia con pesos moleculares medios en peso de 120.000, 52.000, 22.000, 9.200, 5.050, 2.950, 1.050, 580 y 162, respectivamente, y el segundo mencionado se calcula a partir de ahí. La determinación anterior se llevó a cabo usando una columna de GPC KF804Lx2 (fabricada por Showa Denko) y un monitor de RI L-3300 (fabricado por Hitachi, Ltd.), con cloroformo como fase móvil.

Las microesferas de la presente invención no están limitadas, siempre y cuando sean partículas finas (microesferas) que comprendan una sustancia fisiológicamente activa (a partir de ahora también llamada fármaco) y un polímero biodegradable.

Ejemplos de microesferas incluyen microesferas que contienen un núcleo de fármaco en cada partícula, microcápsulas con núcleo múltiple que contienen un gran número de núcleos de fármaco en cada partícula, partículas adecuadas en las cuales un fármaco en una forma molecular se disuelve o se dispersa en un polímero como una solución sólida, etc.

Las sustancias fisiológicamente activas incluyen pero no se limitan a péptidos fisiológicamente activos, agentes antitumorales, antibióticos, agentes antipiréticos, analgésicos, agentes antinflamatorios, expectorantes antitusivos, sedantes, relajantes musculares, antiepilépticos, agentes antiulcerosos, antidepresivos, agentes antialérgicos, cardiotónicos, agentes antiarrítmicos, vasodilatadores, diuréticos hipotensores, antidiabéticos, agentes antihiperlipidémicos, anticoagulantes, hemolíticos, agentes antituberculosos, hormonas, antagonistas de narcóticos, supresores de la resorción ósea, promotores de la osteogénesis e inhibidores de la angiogénesis.

El péptido fisiológicamente activo es preferiblemente uno que consiste en 2 o más aminoácidos y que tiene un peso molecular de aproximadamente 200 a aproximadamente 80.000. El péptido fisiológicamente activo es preferiblemente LH-RH (hormona liberadora de hormona luteinizante) o un análogo de la misma. Ejemplos de análogos de LH-RH incluyen agonistas de LH-RH y antagonistas de LH-RH.

Ejemplos de agonistas de LH-RH incluyen un péptido representado por la fórmula:

(I)(Pyr)Glu-R_{1}-Trp-Ser-R_{2}-R_{3}-R_{4}-Arg-Pro-R_{5}

donde R_{1} representa His, Tyr, Trp o p-NH_{2}-Phe; R_{2} representa Tyr o Phe; R_{3} representa Gly o un residuo de aminoácido tipo D; R_{4} representa Leu, Ile o Nle; R_{5} representa Gly-NH-R_{6} (R_{6} es H o un grupo alquilo con o sin grupo hidroxilo) o NH-R_{7} (R_{7} es H, un grupo alquilo con o sin un grupo amino o hidroxilo, o ureido (-NH-CO-NH_{2})); [a partir de ahora llamado también péptido (I)] o una sal del mismo.

Con respecto a la fórmula (I) citada anteriormente, el residuo de aminoácido tipo D en R_{3} se ejemplifica mediante \alpha-D-aminoácidos que tienen hasta 9 átomos de carbono (por ejemplo, D-Leu, Ile, Nle, Val, Nval, Abu, Phe, Phg, Ser, Thr, Met, Ala, Trp, \alpha-Aibu). Estos residuos de aminoácidos opcionalmente pueden tener un sustituyente (por ejemplo, terc-butilo, terc-butoxi, terc-butoxicarbonilo, metilo, dimetilo, trimetilo, 2-naftilo, indol-3-ilo, 2-metilindolilo, benzilimidazol-2-ilo) según sea oportuno.

En la fórmula (I), el grupo alquilo en R_{6} o R_{7} es preferiblemente un grupo alquilo C_{1-4}. Ejemplos del grupo alquilo incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo y terc-butilo.

Ejemplos de la sal del péptido (I) incluyen sales de ácidos (por ejemplo, carbonato, bicarbonato, acetato, trifluoroacetato, propionato, succinato) y compuestos de complejos metálicos (por ejemplo, complejos de cobre, complejos de zinc).

El péptido (I) o una sal del mismo se puede producir, por ejemplo, mediante el método que se divulga en las Patentes de EE.UU. Nos. 3.853.837, 4.008.209 y 3.972.859, la Patente Británica No. 1.423.083, Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America, Vol. 78, pp. 6509-6512 (1981), o un método similar.

El péptido (I) es preferiblemente el siguiente de (a) a (j)

(a) Leuprorelina [un péptido representado por la fórmula (I) en la que R_{1} es His, R_{2} es Tyr, R_{3} es D-Leu, R_{4} es Leu, y R_{5} es NHCH_{2}-CH_{3}];

(b) Gonadrelina

\vskip1.000000\baselineskip

1

(Patente Alemana No. 2.213.737);

\newpage

(c) Buserelina

2

(Patente de EE.UU. No. 4.024.248, Patente alemana No. 2.438.352, Publicación de Patente Japonesa no examinada No. 41359/1976);

(d) Triptorelina

3

(Patente de EE.UU. No. 4.010.125, Publicación de Patente Japonesa no examinada No. 31073/1977);

(e) Goserelina

4

(Patente de EE.UU. No. 4.100.274, Publicación de Patente Japonesa no examinada No. 136172/1977);

(f) Nafarelina

5

(Patente de EE.UU. No. 4.234.571, Publicaciones de Patentes Japonesas no examinadas Nos. 164663/1980,
264498/1988 y 25794/1989;

(g) Histrelina

6

(h) Deslorelina

7

(Patentes de EE.UU. Nos. 4.569.967 y 4.218.439);

(i) Meterelina

8

(documento WO9118016);

(j) Lecirelina

9

(Patente de Bélgica No. 897.455, Publicación de Patente Japonesa no examinada No. 59654/1984).

En las fórmulas (c) a (j) descritas anteriormente, un aminoácido que corresponde a R_{3} en la fórmula (I) es de configuración D.

El péptido (I) o una sal del mismo es preferiblemente en particular leuprorelina o acetato de leuprorelina.

Ejemplos de antagonistas de LH-RH incluyen aquellos divulgados en las Patentes de EE.UU. Nos. 4.086.219, 4.124.577, 4.253.997 y 4.317.815, o un péptido representado por la fórmula:

10

11

en la que X representa un átomo de hidrógeno o tetrahidrofurilcarboxamida; Q representa un átomo de hidrógeno o metilo; A representa nicotinoil o N,N'-dietilamidino; B representa isopropilo o N,N'-dietilamidino; ( a partir de ahora llamado péptido (II)) o una sal del mismo.

Con respecto a la Fórmula (II), X es preferiblemente tetrahidrofurilcarboxamida, más preferiblemente (2S)-tetrahidrofurilcarboxamida. También A es preferiblemente nicotinoil; B es preferiblemente isopropilo.

Cuando el péptido (II) tiene uno o más tipos de átomos de carbono asimétricos, están presentes dos o más isómeros ópticos. Dichos isómeros ópticos y sus mezclas también se incluyen en el ámbito de la presente invención.

El péptido (II) o una sal del mismo se pueden producir por métodos de por sí conocidos. Dichos métodos incluyen los métodos descritos en la publicación de Patente Japonesa no examinada No. 101695/1991 y en The Journal of Medicinal Chemistry, Vol. 35, p. 3942 (1992) y otras publicaciones, y métodos similares.

La sal del péptido (II) es preferiblemente una sal farmacéuticamente aceptable. Dichas sales incluyen sales formadas con ácidos inorgánicos (por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico), ácidos orgánicos (por ejemplo, ácido carbónico, ácido bicarbónico, ácido succínico, ácido acético, ácido propiónico, ácido trifluoroacético), etc. Más preferiblemente, la sal del péptido (II) es una sal formada con un ácido orgánico (por ejemplo, ácido carbónico, ácido bicarbónico, ácido succínico, ácido acético, ácido propiónico, ácido trifluoroacético), dando mayor preferencia a la sal formada con ácido acético. Estas sales pueden ser desde mono hasta tri-sales.

A continuación se enumeran ejemplos preferentes del péptido (II) o una sal del mismo.

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en los que m representa un número real de 1 a 3.

(3) NAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-Tyr-DhArg(Et_{2})-Leu-hArg(Et_{2})-Pro- DAlaNH_{2}

(4) NAcD2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-Tyr-DhArg(Et_{2})-Leu-hArg(Et_{2})-Pro- DAlaNH_{2}.n(CH_{3}COOH)

en los que n representa un numero real de 1 a 3.

El péptido (II) o una sal del mismo en los ejemplos (1) o (2) citados anteriormente es especialmente preferente.

Ejemplos de péptidos fisiológicamente activos incluyen insulina, somatostatina, un derivado de somatostatina (Sandostatina; ver las Patentes de EE.UU. Nos. 4.087.390, 4.093.574, 4.100.117 y 4.253.998), hormonas del crecimiento, prolactina, hormona adrenocorticotrópica (ACTH), derivados de la ACTH (por ejemplo ebiratida), hormona estimulante de melanocitos (MSH), hormona liberadora de tirotropina [representada por la fórmula estructural (Pyr)Glu-His-ProNH_{2}, a partir de ahora también llamada TRH] y sales y derivados de los mismos (ver las publicaciones de Patentes Japonesas no examinadas Nos. 121273/1975 y 116465/1977), hormona estimulante del tiroides (TSH), hormona luteinizante (LH), hormona estimulante del folículo (FSH), vasopresina, derivado de vasopresina [desmopresina, ver Folia Endocrinologica Japonica, Vol. 54, No. 5, pp. 676-691 (1978)], oxitocina, calcitonina, hormona paratiroidea (PTH), glucagón, gastrina, secretina, pancreocimina, colecistoquinina, angiotensina, lactógeno de placenta humana, gonadotropina coriónica humana (HCG), encefalina, derivados de encefalina, (ver el documento de Patente de EE.UU. No. 4.277.394 y la publicación de Patente Europea No. 31567), endorfina, kyotorfina, interferones (por ejemplo, \alpha-, \beta- y \gamma-interferones), interleuquinas (por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 y 12), tuftsina, timopoyetina, timosina, timoestimulina, factor humoral tímico (THF), factor tímico de la sangre (FTS) y derivados de los mismos (ver el documento de Patente de EE.UU. No. 4.229.438), otros factores tímicos [Igaku no Ayumi, Vol. 125, No. 10, pp. 835-843 (1983)], factor de necrosis tumoral (TNF), factores estimulantes de colonia (por ejemplo, CSF, GCSF, GMCSF, MCSF), motilina, dinorfina, bombesina, neurotensina, cauruleina, bradiquinina, uroquinasa, asparaginasa, calicreina, sustancia P, factores de crecimiento análogos a la insulina (IGF-I, IGF-II), factor de crecimiento nervioso (NGF), factores de crecimiento celular (por ejemplo EGF, TGF-\alpha, TGF-\beta, PDGF, FGF acídico, FGF básico), factor morfogénico óseo (BMP), factores de nutrición nerviosa (por ejemplo, NT-3, NT-4, CNTF, GDNF, BDNF), factores de coagulación de la sangre VIII y IX, cloruro de lisozima, polimixina B, colistina, gramicidina, bacitracina, eritropoyetina (EPO), trombopoyetina (TPO), y péptidos antagonistas de la endotelina, (ver publicaciones de Patentes Europeas Nos. 436189, 457195 y 496452, publicaciones de Patentes Japonesas no examinadas Nos. 94692/1991 y 130299/1991).

Ejemplos de agentes antitumorales incluyen bleomicina, metotrexato, actinomicina D, mitomicina C, sulfato de binblastina, sulfato de bincristina, daunorubicina, adriamicina, neocartinostatina, citosinearabinosida, fluorouracilo, tetrahidrofuril-5-fluorouracilo, krestina, Picibanilo, lentinano, levamisol, Bestatina, azimexona, glicirricina, poliI:C, poliA:U y poliICLC.

Ejemplos de antibióticos incluyen gentamicina dibecacina, canendomicina, lividomicina, tobramicina, amikacina, fradiomicina, sisomicina, hidrocloruro de tetraciclina, hidrocloruro de oxitetraciclina, rolitetraciclina, hidrocloruro de doxiciclina, ampicilina, piperacilina, ticarcilina, cefalotina, cefaloridina, cefotiam, cefsulodina, cefmenoxima, cefmetazol, cefazolina, cefotaxima, cefoperazona, ceftizoxima, mochisalactam, tienamicina, sulfazecina y aztreonam.

Ejemplos de agentes antipiréticos, agentes analgésicos y antinflamatorios incluyen ácido salicílico, sulpirina, ácido flufenámico, diclofenaco, indometacina, morfina, hidrocloruro de petidina, tartrato de levorfanol y oximorfona.

Ejemplos de expectorantes antitusivos incluyen hidrocloruro de efedrina, hidrocloruro de metilefedrina, hidrocloruro de noscapina, fosfato de codeína, fosfato de dihidrocodeína, hidrocloruro de alocramida, hidrocloruro de clofedanol, hidrocloruro de picoperidamina, cloperastina, hidrocloruro de protoquilol, hidrocloruro de isoproterenol, sulfato de sulbutamol y sulfato de terbutalina.

Ejemplos de sedantes incluyen clorpromacina, proclorperacina, trifluorperacina, sulfato de atropina y bromuro de metilescopolamina.

Ejemplos de relajantes musculares incluyen metanosulfonato de pridinol, metanesulfonato, cloruro de tubocurarina y bromuro de pancuronio.

Ejemplos de antiepilépticos incluyen fenitoina, etosuximida, acetazolamida de sodio y clordiazepóxido.

Ejemplos de agentes antiulcerosos incluyen metoclopramida e hidroclururo de histidina.

Ejemplos de antidepresivos incluyen imipramina, clomipramina, noxiptilina y sulfato de fenerdina.

Ejemplos de agentes antialérgicos incluyen hidrocloruro de difenidramina, maleato de clorfeniramina, hidrocloruro de tripelenamina, hidrocloruro de metdilazina, hidrocloruro de clemizol, hidrocloruro de difenilpiralina e hidrocloruro de metoxifenamina.

Ejemplos de cardiotónicos incluyen trans-pi-oxocanfor, teofilol, aminofilina e hidrocloruro de etilefrina.

Ejemplos de agentes antiarrítmicos incluyen propanol, alprenolol, bufetolol y oxprenolol.

Ejemplos de vasodilatadores incluyen hidrocloruro de oxifedrina, diltiazem, hidrocloruro de tolazolina, hexobendina y sulfato de bametan.

Ejemplos de diuréticos hipotensores incluyen bromuro de hexametonio, pentolinio, hidrocloruro de mecamilamina, hidrocloruro de ecarazina y clonidina.

Ejemplos de antidiabéticos incluyen glimidina sódica, glipicida, hidrocloruro de fenformina, hidrocloruro de buformina y metformina.

Ejemplos de agentes antihiperlipidémicos incluyen pravastatina sódica, simvastatina, clinofibrato, clofibrato, simfibrato y bezafibrato.

Ejemplos de anticoagulantes incluyen heparina sódica.

Ejemplos de hemolíticos incluyen tromboplastina, trombina, hidrogenosulfito sódico de menadiona, acetomenaftona, ácido \varepsilon-aminocaproico, ácido tranexámico, sulfonato sódico de carbazocromo y metanosulfonato adrenocromo de monoaminoguanidina.

Ejemplos de agentes antituberculosos incluyen isoniacida, etambutol y ácido p-aminosalicílico.

Ejemplos de hormonas incluyen predonizolona, fosfato sódico de predonizolona, sulfato sódico de dexametasona, fosfato sódico de betametasona, fosfato de hexestrol, acetato de hexestrol y metimazol.

Ejemplos de antagonistas narcóticos incluyen tartrato de levalorfan, hidrocloruro de nalorfina e hidrocloruro de naloxona.

Ejemplos de supresores de la reabsorción ósea incluyen ipriflavona.

Ejemplos de promotores de la osteagénesis incluyen polipéptidos tales como BMP, PTH, TGF-\beta y la (2R,4S)-(-)-N-[4-(dietoxifosforilmetil)fenil]-1,2,4,5-tetrahidro-4-metil-7,8-metilenedioxi-5-oxo-3-benzotiepina-2-carboxamida y el ácido 2-(3-piridil)-etano-1,1-difosfónico.

Ejemplos de supresores de la angiogénesis incluyen esteroides que suprimen la angiogénesis [ver Science, Vol.221., p. 719 (1983)], fumagilina (ver la publicación de Patente Europea No. 325199 y derivados de fumagilol (ver las publicaciones de Patentes Europeas Nos. 357061, 359036, 386667 y 415294).

La sustancia fisiológicamente activa se puede usar como tal o como una sal farmacéuticamente aceptable (por ejemplo, sales formadas con ácidos inorgánicos tales como el ácido clorhídrico, el ácido sulfúrico y el ácido nítrico, y sales formadas con ácidos orgánicos tales como el ácido carbónico y el ácido succínico, cuando la sustancia fisiológicamente activa tenga un grupo básico tal como el grupo amino; sales formadas con bases inorgánicas ejemplarizadas por metales alcalinos tales como sodio y potasio, sales formadas con compuestos de base orgánica ejemplarizados por aminas orgánicas tales como trietilamina, y aminoácidos básicos tales como arginina, cuando la sustancia fisiológicamente activa tenga un grupo ácido tal como el grupo carboxilo).

En la presente invención, la sustancia fisiológicamente activa es preferiblemente un péptido fisiológicamente activo, más preferiblemente LH-RH o un análogo de la misma, más preferiblemente aún leuprorelina o acetato de leuprorelina.

Como polímero biodegradable, se usa preferiblemente uno que tenga un grupo carboxilo terminal libre.

Un polímero biodegradable que tenga un grupo carboxilo terminal libre es un polímero biodegradable en el que el peso molecular medio en número basado en medidas de GPC y el peso molecular medio en número basado en la cuantificación del grupo terminal casi coinciden entre si.

El peso molecular medio en número basado en la cuantificación del grupo terminal se calcula como sigue:

Se disuelven aproximadamente de 1 a 3 g del polímero biodegradable en un disolvente heterogéneo de acetona (25 ml) y metanol (5 ml), y la solución se titula rápidamente con una solución alcohólica 0,05 N de hidróxido potásico mientras que se agita a temperatura ambiente (20ºC) con fenolftaleina como indicador para determinar el contenido de grupo carboxilo; el peso molecular medio en número se calcula a partir de la siguiente ecuación:

Peso molecular medio en número basado en la cuantificación del grupo terminal = 20.000 x A/B

A:

Masa en peso (g) de polímero biodegradable

B:

Cantidad (ml) de la solución alcohólica 0,05 N de hidróxido potásico añadida hasta que se alcanza el punto final de la titulación.

Por ejemplo en el caso de un polímero que tiene un grupo carboxilo terminal libre y que se sintetiza a partir de uno o más ácidos \alpha-hidroxi mediante polimerización condensación deshidratación sin catalizador, el peso molecular medio en número basado en medidas sobre GPC y el peso molecular medio en número basado en la cuantificación de grupos terminales casi coinciden entre sí.

Por otro lado, en el caso de un polímero que no tiene esencialmente grupos carboxilo terminal libres y que se sintetiza a partir de un dímero cíclico mediante polimerización con apertura de anillo utilizando un catalizador, el peso molecular medio en número basado en la cuantificación del grupo terminal es significativamente más alto que el basado en la medida por GPC.

Esta diferencia hace posible diferenciar claramente un polímero que tiene un grupo carboxilo terminal libre de un polímero que no tiene un grupo carboxilo terminal libre.

Mientras el peso molecular medio en número basado en la cuantificación de grupo terminal es un valor absoluto, el basado en la medida de GPC es un valor relativo que varía dependiendo de diferentes condiciones analíticas (por ejemplo, tipo de fase móvil, clase de columna, sustancia de referencia, anchura de banda elegida, línea base elegida, etc.); es, por consiguiente, difícil tener una representación numérica absoluta de estos dos valores. Sin embargo, la mención de que el peso molecular medio en número basado en la medida de GPC y la cuantificación de grupo terminal casi coinciden significa que el último está dentro del rango de aproximadamente 0,4 a aproximadamente 2 veces, preferiblemente de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 2 veces, y más preferiblemente de aproximadamente 0,8 a aproximadamente 1,5 veces el primero mencionado. También, la descripción de que el peso molecular medio en número basado en la cuantificación del grupo terminal es significativamente más alto que el basado en la medida de GPC significa que el primero mencionado es aproximadamente 2 veces o más el último mencionado.

Ejemplos de polímeros biodegradables que tienen un grupo carboxilo terminal libre incluyen homopolímeros y copolímeros sintetizados de uno o más \alpha-hidroxiácidos (por ejemplo, ácido glicólico, ácido láctico, ácido hidróxibutírico), ácidos hidroxidicarboxílicos (por ejemplo, ácido málico), ácidos hidroxitricarboxílicos (por ejemplo, ácido cítrico), etc., mediante polimerización condensación deshidratación sin catalizador, mezclas de los mismos, poli-\alpha-cianoacrilatos, poliaminoácidos (por ejemplo ácido poli-\gamma-bencil-L-glutámico) y copolímeros de anhídrido maleico (por ejemplo, copolímeros de estireno-ácido maleico).

Con respecto al polímero biodegradable descrito anteriormente, la polimerización puede ser de tipo al azar, de bloque o de injerto. Cuando los ácidos \alpha-hidroxi mencionados anteriormente, los ácidos hidroxidicarboxílicos y los ácidos hidroxitricarboxílicos tienen un centro de actividad óptica en sus estructuras moleculares, pueden tener la configuración D-, L- o DL.

El polímero biodegradable que tiene un grupo carboxilo terminal es preferiblemente, (1) un polímero de ácido láctico/ácido glicólico (que incluye homopolímeros tales como el ácido poliláctico y ácido poliglicólico, y copolímeros de ácido láctico y ácido glicólico), o (2) un polímero biodegradable que consiste en una mezcla de (A) un copolímero de ácido glicólico y ácido hidroxicarboxílico representado por la fórmula:

(III)HO ---

\uelm{C}{\uelm{\para}{R}}

H --- COOH

en la que R representa un grupo alquilo que tiene de 2 a 8 átomos de carbono, y (B) un ácido poliláctico.

Cuando el polímero biodegradable usado es un polímero de ácido láctico/ácido glicólico, su relación de composición (ácido láctico/ácido glicólico) (mol%) es preferiblemente aproximadamente 100/0 a aproximadamente 40/60, más preferiblemente aproximadamente 90/10 a aproximadamente 50/50.

El peso molecular medio en peso del polímero de ácido láctico/ácido glicólico descrito anteriormente es preferiblemente aproximadamente 5.000 a aproximadamente 25.000, más preferiblemente aproximadamente 7.000 a aproximadamente 20.000.

El grado de dispersión (peso molecular medio en peso/peso molecular medio en número) del polímero de ácido láctico/ácido glicólico es preferiblemente aproximadamente 1,2 a aproximadamente 4,0, más preferiblemente aproximadamente 1,5 a aproximadamente 3,5.

El polímero de ácido láctico/ácido glicólico descrito anteriormente se puede producir mediante un procedimiento conocido, tal como el que se describe en la publicación de Patente Japonesa no examinada No. 28521/1986.

La velocidad de descomposición/eliminación de un polímero de ácido láctico/ácido glicólico varía ampliamente dependiendo de la composición o del peso molecular. La duración del tiempo de liberación del fármaco se puede prolongar disminuyendo la proporción de ácido glicólico o aumentando el peso molecular, puesto que la descomposición/eliminación normalmente se retrasa a medida que la proporción de ácido glicólico disminuye. Por el contrario, la duración del tiempo de liberación del fármaco se puede acortar incrementando la proporción de ácido glicólico o disminuyendo el peso molecular. Para obtener una preparación de liberación sostenida a largo plazo (por ejemplo 1-4 meses), es preferible usar un polímero de ácido láctico/ácido glicólico cuya relación de composición y peso molecular medio en peso caiga en los intervalos señalados anteriormente. Con un polímero de ácido láctico/ácido glicólico que se descomponga más rápidamente que aquel cuya relación de composición y peso molecular medio en peso cae dentro de los intervalos mencionados anteriormente, el despliegue inicial es difícil de eliminar. Por el contrario, con un polímero de ácido láctico/ácido glicólico que se descomponga más lentamente que aquel cuya relación de composición y peso molecular medio en peso cae dentro de los intervalos mencionados anteriormente, es probable que durante algún tiempo no se libere ninguna cantidad eficaz del fármaco.

Con respecto a la fórmula (III) mencionada anteriormente, el grupo alquilo de cadena lineal o ramificada representado por R, el cual tiene de 2 a 8 átomos de carbono, se ejemplifica mediante etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, isopentilo, neopentilo, terc-pentilo, 1-etilpropilo, hexilo, isohexilo, 1,1-dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 3,3-dimetilbutilo y 2-etilbutilo. Preferiblemente, se usa un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene de 2 a 8 átomos de carbono. Dichos grupos alquilo incluyen etilo, propilo, isopropilo, butilo e isobutilo. Más preferiblemente, R es etilo.

El ácido hidroxicarboxílico representado por la fórmula (III) se ejemplifica mediante el ácido 2-hidroxibutírico, el ácido 2-hidroxivalérico, el ácido 2-hidroxi-3-metilbutírico, el ácido 2-hidroxicaproico, el acido 2-hidroxiisocaproico y el ácido 2-hidroxicaprico, con preferencia dada para el ácido 2-hidroxibutírico, el ácido 2-hidroxivalérico, el ácido 2-hidroxi-3-metilbutírico y el ácido 2-hidroxicaproico, con más preferencia dada para el ácido 2-hidroxibutírico. Aunque el ácido hidroxicarboxílico puede tener la configuración -D, -L o -D,L, es preferible usar una mezcla de las configuraciones D y L en la que la relación de la configuración D/L (mol%) cae preferiblemente dentro del intervalo de aproximadamente 75/25 a aproximadamente 25/75, más preferiblemente de aproximadamente 60/40 a aproximadamente 40/60, y todavía más preferentemente de aproximadamente 55/45 a aproximadamente 45/55.

Con respecto al copolímero de ácido glicólico y ácido hidroxicarboxílico representado por la formula (III) (a partir de ahora llamado copolímero de ácido glicólico (A)), la polimerización puede ser de tipo al azar, de bloque o de injerto. Se prefiere un copolímero al azar.

El ácido hidroxicarboxílico representado por la fórmula (III) puede ser una mezcla de uno o más tipos en una proporción dada.

Con respecto a la relación de composición del ácido glicólico y del ácido hidroxicarboxílico representados por la fórmula (III) en el copolímero del ácido glicólico (A), es preferible que el ácido glicólico represente aproximadamente 10 a aproximadamente 75 mol% y el ácido hidroxicarboxílico represente la parte restante.

Más preferiblemente, el ácido glicólico representa aproximadamente 20 a aproximadamente 75 mol%, y todavía más preferiblemente aproximadamente 40 a aproximadamente 70 mol%. El peso molecular medio en peso del copolímero del ácido glicólico es normalmente aproximadamente 2.000 a aproximadamente 50.000, preferiblemente aproximadamente 3.000 a aproximadamente 40.000, y más preferiblemente aproximadamente 8.000 a aproximadamente 30.000. El grado de dispersión (peso molecular medio en peso/peso molecular medio en número) del copolímero del ácido glicólico es preferiblemente aproximadamente 1,2 a aproximadamente 4,0, más preferiblemente aproximadamente 1,5 a aproximadamente 3,5.

El copolímero del ácido glicólico (A) descrito anteriormente se puede producir mediante un procedimiento conocido, como por ejemplo el descrito en la publicación de Patente Japonesa no examinada No. 28521/1986.

Aunque el ácido poliláctico (B) descrito anteriormente puede ser de configuración D o L o una mezcla de los mismos, se prefiere que la relación de la configuración D/L (mol%) caiga dentro del intervalo de aproximadamente 75/25 a aproximadamente 20/80. La relación de la configuración D/L (mol%)es más preferiblemente aproximadamente 60/40 a aproximadamente 25/75, y todavía más preferiblemente de aproximadamente 55/45 a aproximadamente 25/75. El peso molecular medio en peso de dicho ácido poliláctico es preferiblemente aproximadamente 1.500 a aproximadamente a aproximadamente 30.000, más preferiblemente aproximadamente 2.000 a aproximadamente 20.000, y todavía más preferiblemente aproximadamente 3.000 a aproximadamente 15.000. También, el grado de dispersión del ácido poliláctico es preferiblemente aproximadamente 1,2 a aproximadamente 4,0, más preferiblemente aproximadamente 1,5 a aproximadamente 3,5.

Para producir un ácido poliláctico se conocen dos métodos: la polimerización del láctido con apertura de anillo, un dímero del ácido láctico, y la polimerización condensación deshidratación del ácido láctico. Para obtener un ácido poliláctico de relativamente bajo peso molecular según la presente invención, se prefiere la polimerización condensación deshidratación directa del ácido láctico. Dicho método, por ejemplo, se puede llevar a cabo de acuerdo con el método descrito en la publicación de Patente Japonesa no examinada No. 28521/1986, o un método similar a este.

El copolímero del ácido glicólico (A) y el ácido poliláctico (B) se usan en una mezcla en la que la relación (A)/(B) (% en peso) cae dentro del intervalo de aproximadamente 10/90 a aproximadamente 90/10. La relación de la mezcla (% en peso) es preferiblemente aproximadamente 20/80 a aproximadamente 80/20, y más preferiblemente aproximadamente 30/70 a aproximadamente 70/30. Si cada componente (A) o (B) está en exceso, la preparación obtenida muestra un patrón de liberación del fármaco no demasiado diferente del obtenido con el uso del componente (A) o (B) aisladamente; el patrón de liberación lineal que se obtiene con la base heterogénea no se puede esperar en la última fase de la liberación del fármaco. Aunque la velocidad de descomposición/eliminación del copolímero de ácido glicólico (A) y del ácido poliláctico varía ampliamente dependiendo del peso molecular o la composición, la duración del tiempo de liberación del fármaco se puede extender incrementando el peso molecular del ácido poliláctico heterogéneo o disminuyendo la relación de la mezcla (A)/(B), puesto que la velocidad de descomposición/eliminación del copolímero de ácido glicólico (A) es normalmente más alta. Por el contrario, la duración del tiempo de liberación del fármaco se puede acortar disminuyendo el peso molecular del ácido poliláctico heterogéneo o aumentando la relación de la mezcla (A)/(B). La duración del tiempo de liberación del fármaco también se puede ajustar alterando el tipo y la relación de composición del ácido hidroxicarboxílico representado por la fórmula (III).

Un polímero biodegradable que tiene un grupo carboxilo terminal libre es más preferible a un polímero de ácido láctico/ácido glicólico. Particularmente, un polímero de ácido láctico/ácido glicólico que tiene una relación de composición (ácido láctico/ácido glicólico) (mol%) de 100/0 es un ácido poliláctico.

Las microesferas producidas usando un ácido poliláctico son capaces de liberar una sustancia fisiológicamente activa de forma estable a largo plazo, tan largo como aproximadamente 3 meses o más. Por lo tanto, un polímero biodegradable que tiene un grupo carboxilo terminal libre es todavía más preferido a un ácido poliláctico.

En la presente invención, una emulsión a/o/a y una emulsión o/a se producen obteniendo respectivamente (i) una emulsión a/o con una solución acuosa, una dispersión o una suspensión de una sustancia fisiológicamente activa como fase acuosa interna y una solución de disolvente orgánico de un polímero biodegradable como fase oleosa, o (ii) una fase oleosa producida disolviendo o dispersando una sustancia fisiológicamente activa en una solución de disolvente orgánico de un polímero biodegradable; añadiendo (i) o (ii) en agua (fase acuosa externa); y dispersando y emulsionando.

El apartado (i) descrito anteriormente, es decir una emulsión a/o con una solución acuosa, una dispersión o una suspensión de una sustancia fisiológicamente activa como fase acuosa interna, y una solución de disolvente orgánico de un polímero biodegradable como fase oleosa, se produce de la siguiente manera.

Primeramente, la sustancia fisiológicamente activa se disuelve, se dispersa o se suspende en agua para obtener una fase acuosa interna. La concentración de la sustancia fisiológicamente activa en la solución acuosa, dispersión o suspensión es, por ejemplo, 0,001 a 90% (a/a), preferiblemente 0,01 a 80% (a/a).

Aunque varía dependiendo del tipo de sustancia fisiológicamente activa, la acción farmacológicamente deseada, la duración de la acción y otros factores, la cantidad de sustancia fisiológicamente activa que se usa es normalmente aproximadamente 0,01 a aproximadamente 50% (a/a), preferiblemente aproximadamente 0,1 a aproximadamente 40% (a/a), y más preferiblemente aproximadamente l a aproximadamente 30% (a/a), respecto al polímero biodegradable.

Para facilitar la captura de una sustancia fisiológicamente activa en microcápsulas, si es necesario se puede añadir a la fase acuosa interna una sustancia que retiene el fármaco como por ejemplo gelatina, agar, alginato sódico, alcohol polivinílico, un aminoácido básico (por ejemplo, arginina, histidina, lisina) y similares.

La cantidad añadida de sustancia que retiene el fármaco es normalmente 0,01 a 10 veces según el peso de la sustancia fisiológicamente activa.

La fase acuosa interna puede ser liofilizada una vez para obtener un polvo, el cual se puede disolver en agua a una concentración apropiada.

El polímero biodegradable se disuelve por separado en un disolvente orgánico para producir una fase oleosa. Ejemplos de disolventes orgánicos incluyen hidrocarburos halogenados (por ejemplo, diclorometano, cloroformo, cloroetano, tricloroetano, tetracloruro de carbono), esteres de ácidos grasos (por ejemplo etilacetato, butilacetato), e hidrocarburos aromáticos (por ejemplo benceno, tolueno, xileno), con preferencia dada al diclorometano.

Aunque varía dependiendo del tipo y del peso molecular del disolvente orgánico, la concentración del polímero biodegradable en el disolvente orgánico es normalmente 0,01 a 90% (a/a), preferiblemente 0,01 a 70% (a/a). Se recomienda que el polímero biodegradable se disuelva de tal modo que ninguna parte quede no disuelta.

A la solución de disolvente orgánico de un polímero biodegradable (fase oleosa) así obtenida, se le añade la solución acuosa, dispersión o suspensión descrita anteriormente de una sustancia fisiológicamente activa (fase acuosa interna), seguido de dispersión y emulsificación utilizando un homogenizador o similar, para producir una emulsión a/o.

El apartado (ii) anteriormente descrito, es decir, la fase oleosa producida disolviendo o dispersando una sustancia fisiológicamente activa en una solución de disolvente orgánico de un polímero biodegradable, se produce de la siguiente manera.

Primeramente, se produce una solución de disolvente orgánico de un polímero biodegradable. El disolvente orgánico que se usa, esta hecho sustancialmente de lo mismo que el que se usa para producir la emulsión a/o descrita anteriormente. La concentración del polímero biodegradable en la solución de disolvente orgánico varía dependiendo del peso molecular del polímero biodegradable y del tipo de disolvente pero normalmente es aproximadamente 0,01 a aproximadamente 70% (a/a), preferiblemente aproximadamente 1 a aproximadamente 60% (a/a).

A continuación, una sustancia fisiológicamente activa se disuelve o se suspende en una solución de disolvente orgánico de un polímero biodegradable, para producir una fase oleosa.

La cantidad de sustancia fisiológicamente activa que se utiliza se selecciona de manera que la relación de sustancia fisiológicamente activa a polímero biodegradable sea la misma que en el caso de producir la emulsión a/o (i) descrita anteriormente. La sustancia fisiológicamente activa que se utiliza en (ii) es preferiblemente insoluble o escasamente soluble en agua.

A continuación, la emulsión a/o (i) descrita anteriormente o la fase oleosa (ii) se añade además a una fase acuosa externa y se dispersa y emulsiona usando un homogenizador o similar, para producir una emulsión a/o/a o una emulsión o/a, respectivamente. La fase acuosa externa se usa en un volumen 1 a 10.000 veces, preferiblemente 10 a 2.000 veces, y más preferiblemente 50 a 500 veces, el del descrito anteriormente (i) o (ii). La fase acuosa externa normalmente se complementa con un emulsionante. Se puede usar cualquier emulsionante, siempre y cuando produzca, en general, una emulsión a/o/a o una emulsión o/a estable. Dichos emulsionantes incluyen tensioactivos aniónicos, tensioactivos no iónicos, derivados polioxietilenados de aceite de ricino, polivinilpirrolidona, alcohol polivinílico, carboximetilcelulosa, lecitina, gelatina y ácido hialurónico, con preferencia dada al alcohol polivinílico. La concentración del emulsionante en la fase acuosa externa es normalmente 0,001 a 20% (a/a), preferiblemente 0,01 a 10% (a/a), y más preferiblemente 0,05 a 5% (a/a).

La emulsión a/o/a obtenida de ese modo o la emulsión w/o (éstas, a partir de ahora también llamadas abreviadamente emulsiones) se someten a un método de desecación del agua interior para eliminar el disolvente orgánico contenido en estas emulsiones, para obtener las microesferas.

A continuación se describen en detalle varias condiciones preferibles en la realización del método de desecación del agua interior.

La relación entre la fase acuosa externa y las microesferas se representa, por ejemplo, mediante la relación del volumen de la fase acuosa externa y de la cantidad de microesferas (cantidad de peso total de una sustancia fisiológicamente activa, una sustancia que retiene un fármaco y un polímero biodegradable), y la cantidad de microesferas por m^{3} de una fase acuosa externa es normalmente aproximadamente 0,1 a aproximadamente 500 kg, preferiblemente aproximadamente 0,5 a aproximadamente 100 kg, y más preferiblemente aproximadamente 1,0 a aproximadamente 20 kg.

El método de desecación del agua interior se lleva a cabo en un recipiente adecuado, preferiblemente un recipiente hermético cuyo interior está separado de las condiciones ambientales.

La relación entre el recipiente y la fase acuosa externa se representa mediante, por ejemplo, la relación del volumen de la fase acuosa externa y el área de la fase acuosa externa en contacto con la fase gaseosa. La raíz cuadrada del área (unidad: m^{2}) de superficie líquida en contacto con la fase gaseosa, por la raíz cúbica del volumen (unidad: m^{3}) de la fase acuosa externa, es aproximadamente 0,2 a aproximadamente 4,5, preferentemente aproximadamente 0,5 a aproximadamente 3,0.

También, dependiendo del tamaño y de la forma del recipiente, la cantidad de microesferas en la fase acuosa externa por m^{2} de superficie líquida en contacto con la fase gaseosa es preferiblemente aproximadamente 0,01 a aproximadamente 7.000 kg, más preferiblemente aproximadamente 0,02 a aproximadamente 100 kg, y todavía más preferiblemente aproximadamente 0,05 a aproximadamente 20 kg.

La emulsión está preferiblemente fluidizada. La fluidización de la emulsión se puede conseguir mediante circulación o agitación. Por ejemplo, la circulación se consigue aspirando una parte de la emulsión desde el fondo del recipiente y devolviéndola desde la parte superior del recipiente al mismo mediante una tubería, utilizando normalmente una bomba. La agitación también se consigue por medio de agitación en reactores usados en síntesis química normal etc., es decir, usando una paleta de agitación o agitador magnético. En este caso, se recomienda que la emulsión en el recipiente sea fluidizada uniformemente.

El grado de circulación o agitación se representa por la frecuencia de sustitución de una emulsión. La frecuencia de sustitución se expresa mediante el recíproco del tiempo medio de residencia. Específicamente, la frecuencia de sustitución se expresa dividiendo la cantidad de líquido circulante por minuto por la cantidad de emulsión en el recipiente cuando la emulsión se distribuye usando una bomba. Cuando se agita una emulsión, la frecuencia de sustitución de la emulsión se expresa dividiendo la velocidad media angular de la emulsión por 2\pi. En el método de desecación del agua interior de la presente invención, la frecuencia de sustitución de una emulsión es 0,01 a 10 veces/minuto, preferentemente 0,1 a 10 veces/minuto, y más preferiblemente 0,5 a 10 veces/minuto.

Se deja que un gas esté presente preferentemente por encima de la superficie líquida de la emulsión. Dicho gas puede ser cualquiera, siempre que no afecte al método de desecación del agua interior, tales gases incluyen aire, gas carbónico, gas nitrógeno, gas argón y gas helio.

Puesto que el gas por encima de la superficie líquida de una emulsión contiene un disolvente orgánico evaporado de la emulsión, se sustituirá deseablemente con uno nuevo libre de disolvente orgánico mediante separación secuencial de porciones del mismo.

La sustitución del gas se lleva a cabo, por ejemplo, soplando un gas hacia la superficie líquida. El gas usado para el soplado es normalmente del mismo tipo que el gas de encima de la superficie líquida de la emulsión. Por ejemplo, el gas se sopla en los alrededores de uno o varios orificios de 0,2 a 1,5 cm de diámetro interior a una velocidad de flujo de 1.000 litros/minuto, preferentemente 50 a 500 litros/minuto, y más preferentemente 100 a 400 litros/minuto. La presión del gas se establece, por ejemplo, en 0,3 a 4,0 kg/cm^{2}, preferentemente en 0,5 a 3,0 kg/cm^{2}.

También, la velocidad de transferencia del gas cerca de la superficie líquida de una emulsión es 0,1 a 300 m/segundo, preferiblemente 10 a 200 m/segundo, y más preferiblemente 50 a 150 m/segundo.

La sustitución del gas se realiza de tal forma que la frecuencia de sustitución de gas en el recipiente es como mínimo 0,5 veces/minuto, preferiblemente aproximadamente 0,5 a aproximadamente 10 veces/minuto, y más preferiblemente aproximadamente 1 a aproximadamente 10 veces/minuto.

Usando las diferentes condiciones descritas anteriormente, el método de desecación del agua interior se completa en un corto periodo de tiempo de aproximadamente 0,5 a 5 horas.

Las microesferas obtenidas de ese modo se recuperan mediante centrifugación, tamizado o similar, después de lo cual se añade opcionalmente un inhibidor de la agregación tal como un azúcar, alcohol de azúcar o sal inorgánica, preferiblemente manitol o sorbitol, para prevenir la agregación mutua de las microesferas, las cuales se someten a liofilización.

La relación de la mezcla (relación en peso) de las microesferas y el inhibidor de la agregación es normalmente de 50:1 a 1:1, preferiblemente de 20:1 a 1:1; y más preferiblemente de 10:1 a 5:1.

La manera de añadir el inhibidor de la agregación no está limitada en tanto en cuanto se emplee un método en el que las microesferas y el inhibidor de la agregación se mezclen uniformemente. Tal método se ejemplifica mediante un método en el que las microesferas se dispersan en una solución acuosa de un inhibidor de la agregación.

Aunque las microesferas de la presente invención se pueden administrar en un ser vivo tal como están, también se pueden administrar después de configurarse en diferentes preparaciones.

Dichas preparaciones incluyen preparaciones inyectables, implantes, preparaciones orales (por ejemplo, polvos, gránulos, cápsulas, comprimidos, jarabes, emulsiones, suspensiones), preparaciones nasales y supositorios (por ejemplo supositorios rectales, supositorios vaginales).

Estas preparaciones se pueden producir por métodos conocidos en el uso corriente en producción farmacéutica.

Por ejemplo, las preparaciones inyectables se preparan por dispersión de microesferas en un dispersante acuoso o en un dispersante oleoso.

Ejemplos de dispersantes acuosos incluyen una solución que se prepara disolviendo un agente isotonizante en agua destilada (por ejemplo, cloruro sódico, glucosa, D-manitol, sorbitol, glicerol), un agente dispersante (por ejemplo, Tween 80, HCO-50, HCO-60 (suministrados por Nikko Chemicals), carboximetilcelulosa, alginato sódico), un conservante (por ejemplo alcohol bencílico, cloruro de benzalconio, fenol), un agente calmante (por ejemplo glucosa, gluconato cálcico, hidrocloruro de procaína) etc. Ejemplos de dispersante oleoso incluyen aceite de oliva, aceite de sésamo, aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite de maíz, y glicéridos de ácidos grasos de cadena interme-
dia.

Las preparaciones inyectables se pueden introducir en la cámara de una jeringa precargada. También, los dispersantes descritos anteriormente y las microesferas se pueden introducir separadamente en una cámara diferente de una Jeringa Precargada de Doble Cámara (DPS), que es una jeringa precargada que tiene dos cámaras.

Una preparación oral se puede preparar, por ejemplo, añadiendo un excipiente (por ejemplo, lactosa, sacarosa, almidón), un agente desintegrante (por ejemplo, almidón, carbonato cálcico), un aglutinante (por ejemplo almidón, goma arábiga, carboximetilcelulosa, polivinilpirrolidona, hidroxipropilcelulosa) o un lubricante (por ejemplo, talco, estearato de magnesio, polietilenglicol 6000) para microesferas, sometiendo la mezcla a un moldeo compresivo, seguido por un revestimiento para enmascarar el gusto o si fuera necesario, confiriendo características de liberación sostenida o entérica mediante un método bien conocido.

Agentes de revestimiento útiles incluyen hidroxipropilmetilcelulosa, etilcelulosa, hidroximetilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, polioxietilenglicol, Tween 80, Pluronic F68, acetato-ftalato de celulosa, acetato-sucinato de hidroximetilcelulosa, Eudragit (Rohm Company, West Germany, copolímero de ácido metacrílico-ácido acrílico), y colorantes tales como óxido de titanio y óxido de hierro rojo.

La preparación nasal puede ser sólida, semisólida o líquida. Por ejemplo, normalmente una preparación nasal sólida se puede producir añadiendo un excipiente (por ejemplo, glucosa, manitol, almidón, celulosa microcristalina), un agente espesante (por ejemplo, caucho natural, derivados de celulosa, polímero de ácido acrílico) etc., a las microesferas y mezclándolas, aunque las microesferas pueden usarse como tales. Una preparación nasal líquida se puede preparar casi de la misma manera que una preparación inyectable. Todas estas preparaciones pueden contener un regulador de pH (por ejemplo, ácido carbónico, ácido fosfórico, ácido cítrico, ácido hidroclórico, hidróxido sódico), un antiséptico (por ejemplo, p-oxibenzoato, clorobutanol, cloruro de benzalconio), etc.

El supositorio puede ser oleoso o acuoso; y sólido, semisólido o liquido. El supositorio se produce normalmente usando bases oleosas, bases acuosas o bases de geles acuosos. Dichas bases oleosas incluyen glicéridos de ácidos grasos superiores [por ejemplo, grasa de cacao, productos de la serie Witepsol (Dynamite Nobel Company)], ácidos grasos moderados [por ejemplo, productos de la serie MIGLYOL (Dynamite Nobel Company)], y aceites vegetales (por ejemplo, aceite de sésamo, aceite de soja, aceite de semilla de algodón). Las bases acuosas incluyen polietilenglicoles y propilenglicol. Las bases de geles acuosos incluyen caucho natural, derivados de celulosa, polímeros de vinilo y polímeros ácido acrílico.

Las microesferas de la presente invención se usan preferentemente en forma de preparación inyectable.

El diámetro medio de partícula de las microcápsulas en la presente invención se elige por encima del intervalo en el que se encuentran los requerimientos que conciernen al grado de dispersión y a la capacidad de paso a través de la aguja, cuando las microesferas se usan en forma de suspensión inyectable. Por ejemplo, el diámetro medio cae dentro del intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 300 \mum, preferiblemente aproximadamente 5 a aproximadamente 100 \mum.

Las microesferas de la presente invención y una preparación que comprende las microesferas (a partir de ahora, estas se llaman abreviadamente preparación de microesferas) tienen baja toxicidad y se pueden usar de forma
segura.

Aunque varía dependiendo del tipo y contenido de la sustancia fisiológicamente activa, el ingrediente activo, la forma de dosificación, la duración del tiempo de la liberación de una sustancia fisiológicamente activa, las especies animales a las que van dirigidos (por ejemplo, mamíferos de sangre caliente tales como ratones, ratas, caballos, bovinos y humanos) y del propósito de su administración, la dosis de la preparación de microesferas se puede establecer a cualquier nivel, siempre y cuando el ingrediente activo sea eficaz. La dosis de la preparación para administración se puede elegir como adecuada por encima del intervalo de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 10 g, preferiblemente de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 2 g por adulto (peso 50 kg) en relación con el peso de las microesferas. Cuando la preparación de microesferas es una preparación inyectable, el volumen del dispersante se puede elegir como adecuado por encima del intervalo de aproximadamente 0,5 a aproximadamente
3 ml.

Especialmente, cuando una sustancia fisiológicamente activa es, por ejemplo, un péptido (I), (II), o una sal de los mismos, una preparación de microesferas es útil como preparación para el tratamiento o profilaxis de enfermedades hormona-dependientes tales como cáncer prostático, hipertrofia prostática, cáncer de pecho, endometriosis, mioma de útero, y pubertad precoz neurogénica, o un anticonceptivo.

Especialmente, cuando una sustancia fisiológicamente activa en una preparación de microesferas es un péptido (I) o una sal del mismo, la preparación es una preparación inyectable, y la preparación se usa como una preparación para tratamiento o profilaxis de las enfermedades descritas anteriormente, la dosis de la preparación para la administración en relación con el péptido (I) o una sal del mismo varía preferiblemente de aproximadamente 1 a aproximadamente 100 mg, más preferiblemente de aproximadamente 1 a aproximadamente 10 mg por adulto (peso 50 kg).

La presente invención se describe a continuación con más detalle por medio de los siguientes Ejemplos, el Ejemplo Comparativo, y los Ejemplos Experimentales. A menos que se especifique lo contrario, % significa % en peso.

Ejemplo 1

En un matraz erlenmeyer, se pesaron 65,0 g de acetato de leuprorelina y 10,3 g de gelatina y se disolvieron completamente en 66 ml de agua para inyección. A esta solución, se añadieron 521,9 g de un copolímero de ácido láctico/ácido glicólico [ácido láctico/ácido glicólico = 75/25 (mol %), peso molecular medio en peso: aproximadamente 11,000] disueltos en 873,6 g de diclorometano (cloruro de metileno), seguido por agitación y emulsificación usando el autominimezclador durante 10 minutos para obtener una emulsión a/o.

Después de que 150 litros de una solución acuosa de alcohol polivinílico (Gosenol EG40) (desde ahora llamada solución de PVA) (fase acuosa externa) se vertieran en un tanque de 200 litros, se añadió a la solución la emulsión a/o descrita anteriormente, seguido por agitación y emulsificación, para producir una emulsión a/o/a. La cantidad de emulsión a/o vertida realmente en el tanque fue 99% o más, aunque observó adhesión de la emulsión dentro del tanque y de una tubería. La emulsión a/o/a se sometió a desecación del agua interior durante 3 horas bajo las condiciones mostradas a continuación.

\vskip1.000000\baselineskip

\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 Tamaño del recipiente  \+    :    200 litros\cr
\+\cr  Cantidad de fase gaseosa \+     :    50
litros\cr \+\cr  Cantidad de fase acuosa externa \+     :
   150 litros\cr \+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm}
Cantidad de microesferas por m ^{3}  de fase acuosa externa
\end{minipage}  \+     :    4,0 kg\cr \+\cr 
 \begin{minipage}[b]{57mm} Cantidad de microesferas en la fase
acuosa externa \end{minipage}  \+     :   
1,2 kg por m ^{2}  de superficie líquida en contacto con la fase
gaseosa\cr \+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm} Raíz cuadrada del
área (unidad: m ^{2} ) de la superficie líquida en contacto con la
fase gaseosa por raíz cúbica del volumen  (unidad: m ^{3} ) de fase
acuosa externa \end{minipage}  \+     :   
1,3\cr \+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm} Frecuencia de
sustitución de la emulsión \end{minipage}   \+     :
   1,3 veces/minuto (200 litros/minuto)\cr \+\cr 
 \begin{minipage}[b]{57mm} Velocidad de transferencia del gas
próximo a la superficie líquida \end{minipage}  \+    
:    100 m/segundo\cr \+\cr 
 \begin{minipage}[b]{57mm}Frecuencia de sustitución del gas por
encima de la superficie líquida \end{minipage}  \+    
:    6
veces/minuto\cr}

\vskip1.000000\baselineskip

La fluidización de una emulsión se llevó a cabo mediante circulación de la emulsión, es decir, tomando una parte de la emulsión desde el fondo del depósito por medio de una tubería y devolviéndola a la parte superior de la fase líquida por medio de una tubería usando una bomba. Además, la fluidización del gas próximo a la superficie líquida se llevó a cabo soplando aire comprimido a una velocidad de flujo de 300 litros/minuto con un ángulo de aproximadamente 30 grados de la superficie líquida, por medio de una tubería de 6 mm de diámetro interno de aproximadamente 10 cm por encima de la superficie líquida.

Después de la desecación del agua interior, se recuperaron las microesferas obtenidas, seguido de la adición de manitol (94,1 g) y liofilización, para obtener polvos de microesferas.

Ejemplo 2

Se añadió a una solución acuosa de 0,5 g de la hormona liberadora de tirotropina (TRH) en 0,2 g de agua, una solución de 4,5 g de un copolímero de ácido láctico/ácido glicólico [ácido láctico/ácido glicólico = 75/25 (a/a), peso molecular medio en peso: aproximadamente 14.000] en diclorometano, para obtener una emulsión a/o.

La emulsión se dispersó en 1 litro de una solución de PVA al 0,1% (fase acuosa externa) para obtener una emulsión a/o/a.

La emulsión a/o/a/se sometió a desecación del agua interior durante 3 horas bajo los condiciones mostradas a continuación.

\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 Tamaño del recipiente \+    :    2,5 litros\cr
\+\cr  Cantidad de fase gaseosa \+    :    1,5
litros\cr \+\cr  Cantidad de fase acuosa externa \+    :
   1 litro\cr \+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm}
Cantidad de microesferas por m ^{3}   de fase acuosa externa
\end{minipage}  \+    :    5 kg\cr \+\cr 
 \begin{minipage}[b]{57mm} Cantidad de microesferas en la fase
acuosa externa \end{minipage} \+    :    
0,09 kg por m ^{2}  de superficie líquida en contacto con la fase
gaseosa\cr \+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm} Raíz cuadrada del
área (unidad: m ^{2} ) de la superficie líquida en contacto con la
fase gaseosa por raíz cúbica del volumen (unidad: m ^{3} ) de fase
acuosa externa \end{minipage}  \+    :    
2,4\cr \+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm} Frecuencia de
sustitución de la emulsión \end{minipage}  \+    :
    1,9 veces/minuto (velocidad media angular 3,8
 \pi /minuto)\cr \+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm} Velocidad de
transferencia del gas próximo a la superficie líquida
\end{minipage}  \+    :    100 m/segundo\cr
\+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm} Frecuencia de sustitución del
gas por encima de la superficie líquida \end{minipage} \+
   :    5
veces/minuto\cr}

La fluidización de la emulsión se llevó a cabo agitando la emulsión en un depósito usando un agitador mecánico. Además, la fluidización del gas próximo a la superficie líquida se llevó a cabo soplando nitrógeno a una velocidad de flujo de 100 litros/minuto con un ángulo de aproximadamente 20 grados de la superficie líquida, por medio de una tubería de 3 mm de diámetro interior, desde aproximadamente 5 cm por encima de la superficie líquida.

Después de la desecación del agua interior, las microesferas se recogieron a continuación mediante centrifugación y liofilización. Mediante el soplado de nitrógeno, la proporción de captura del fármaco en las microesferas se incrementó un 4%, en comparación con las microesferas preparadas sin el soplado de nitrógeno.

Ejemplo 3

En un matraz erlenmeyer se pesaron 119,3 g de acetato de leuprorelina y 18,7 g de gelatina, y se disolvieron completamente en 120 ml de agua para inyección. A esta solución se le añadieron 957,2 g de un copolímero de ácido láctico/ácido glicólico [ácido láctico/ácido glicólico = 75/25 (mol %), peso molecular medio en peso: aproximadamente 11.000] disueltos en 1.602,8 g de diclorometano, seguido por agitación y emulsificación utilizando un autohomogenizador durante 10 minutos, para obtener una emulsión a/o.

Después de verter 200 litros de una solución de PVA al 0,1% (fase acuosa externa) en un depósito de 360 litros, se añadió a la solución la emulsión w/o descrita anteriormente, seguido de agitación y emulsificación para obtener una emulsión a/o/a. La cantidad de emulsión a/o vertida realmente en el deposito fue del 99% o más aunque que se observó adhesión de la emulsión en el interior del depósito y una tubería. La emulsión a/o/a se sometió a desecación del agua interior durante 3 horas en las condiciones mostradas a continuación.

\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 Tamaño del recipiente \+    :     360 litros\cr
\+\cr  Cantidad de fase gaseosa \+     :     160
litros\cr \+\cr  Cantidad de fase acuosa externa \+    :
    200 litros\cr \+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm}
Cantidad de microesferas por m ^{3}  de fase acuosa externa 
\end{minipage}  \+    :     aproximadamente
5,5 kg\cr \+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm} Cantidad de
microesferas en la fase acuosa externa  \end{minipage} \+ 
   :     aproximadamente 2,2 kg por m ^{2}  de 
superficie líquida en contacto\cr  \+  \hskip0.3cm  con la
fase gaseosa\cr \+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm} Raíz cuadrada
del área (unidad: m ^{2} ) de la superficie líquida en contacto con
la fase gaseosa por raíz cúbica del volumen (unidad: m ^{3} ) de
fase acuosa externa  \end{minipage}  \+     :
    1,2\cr \+\cr   \begin{minipage}[b]{57mm} Frecuencia
de sustitución de la emulsión  \end{minipage}  \+    :
    1 vez/minuto (200 litros/minuto)\cr \+\cr 
 \begin{minipage}[b]{57mm}Velocidad de transferencia del gas
próximo a la superficie líquida \end{minipage}  \+    
:     100 m/segundo\cr \+\cr 
 \begin{minipage}[b]{57mm} Frecuencia de sustitución del gas por
encima de la superficie líquida  \end{minipage} \+    
:     1,8
veces/minuto\cr}

La fluidización de una emulsión y la fluidización de un gas se llevaron a cabo de la misma manera que en el Ejemplo 1.

Después de la desecación del agua interior, se recuperaron los microesferas obtenidas, seguido de la adición de manitol (172,6 g) y liofilización, para obtener polvos de microesferas.

Ejemplo 4

En un matraz erlemmeyer se pesaron 86,7 g de acetato de leuprolerina y se disolvieron completamente en 100 ml de agua para inyección. A esta solución, se le añadieron 765,1 g de ácido poliláctico [peso molecular medio en peso: aproximadamente 14.000] disueltos en 1.280 g de diclorometano, seguido de agitación y emulsificación usando el autohomogenizador durante 13,5 minutos, para obtener una emulsión a/o.

Después de verter 200 litros de una solución de PVA al 0,1% (fase acuosa externa) en un recipiente de 360 litros, se añadió a la solución la emulsión descrita anteriormente, seguido de agitación y emulsificación, para obtener una emulsión a/o/a. La cantidad de emulsión a/o vertida realmente en el recipiente fue del 99% o más, aunque se observó adhesión de la emulsión en el interior del depósito y una tubería.

La emulsión a/o/a se sometió a desecación del agua interior de la misma manera que en el Ejemplo 3, excepto en que la cantidad de microesferas por m^{3} de la fase acuosa externa fue aproximadamente 4,2 kg, y la velocidad de flujo de gas fue de 350 litros/minuto.

Después de la desecación del agua interior, se recuperaron las microesferas obtenidas, seguido de adición de manitol (134,3 g) y de liofilización, para obtener polvos de microesferas.

Ejemplo 5

La desecación del agua interior se llevó a cabo de la misma manera que en el Ejemplo 1 para obtener las microesferas, excepto en que la velocidad de sustitución de la emulsión fue de 0,13 veces/minuto (20 litros/minuto).

\newpage

Se recuperaron las microesferas, se siguió con adición de manitol (94,1 g) y liofilización, para obtener los polvos de microesferas.

Ejemplo 6

La desecación del agua interior se llevó a cabo de la misma manera que en el Ejemplo 1 para obtener las microesferas, excepto en que la fluidización de la emulsión se llevó a cabo por agitación de la emulsión en un recipiente, y la frecuencia de sustitución de la emulsión fue de 1,3 veces/minuto (200 litros/minuto).

Se recuperaron las microesferas, se siguió con adición de manitol (94,1 g) y liofilización, para obtener los polvos de microesferas.

Ejemplo 7

La desecación del agua interior se llevó a cabo de la misma manera que en el Ejemplo 1 para obtener las microesferas, excepto en que la velocidad de sustitución del gas por encima de la superficie líquida fue de 1,3 veces/minuto (200 litros/minuto) por medio de una tubería de 12 mm de diámetro interior, y la velocidad de transferencia del gas próximo a la superficie líquida fue de 15 m/segundo.

Se recuperaron las microesferas, se siguió con adición de manitol (94,1 g) y liofilización, para obtener los polvos de microesferas.

Ejemplo 8

En un matraz erlenmeyer se pesaron 80,5 g de acetato de leuprolerina y 12,6 g de gelatina y se disolvieron completamente en 80 ml de agua para inyección. A esta solución, se le añadieron 646,1 g de un copolímero de ácido láctico/ácido glicólico [ácido láctico/ácido glicólico = 75/25 (mol %), peso molecular medio en peso: aproximadamente 11.000] disueltos en 1.081,9 g de diclorometano, seguido de agitación y emulsificación utilizando el autohomogenizador durante 10 minutos para obtener una emulsión a/o.

Después de verter 135 litros de una solución de PVA al 0,1% (fase acuosa externa) en un depósito de 300 litros, se añadió a la solución la emulsión descrita anteriormente, seguido de agitación y emulsificación para obtener una emulsión a/o/a. La cantidad de emulsión a/o vertida realmente en el recipiente fue del 99% o más, aunque se observó adhesión de la emulsión en el interior del depósito y una tubería.

La emulsión a/o/a se sometió a desecación del agua interior durante 3 horas en las condiciones mostradas a continuación.

Tamaño del recipiente	: 300 litros
Cantidad de fase gaseosa	: 165 litros
Cantidad de fase acuosa externa	: 135 litros
\begin{minipage}[b]{57mm} Cantidad de microesferas por m^{3} de fase acuosa externa \end{minipage}	: aproximadamente 5,5 kg
\begin{minipage}[b]{57mm} Raíz cuadrada del área (unidad: m^{2}) de la superficie líquida en contacto con la fase gaseosa por raíz cúbica del volumen (unidad: m^{3}) de fase acuosa externa \end{minipage}	: 1,4
\begin{minipage}[b]{57mm} Frecuencia de sustitución de la emulsión \end{minipage}	: 2,2 veces/minuto (300 litros/minuto)
\begin{minipage}[b]{57mm} Velocidad de transferencia del gas próximo a la superficie líquida \end{minipage}	: 100 m/segundo
\begin{minipage}[b]{57mm} Frecuencia de sustitución del gas por encima de la superficie líquida \end{minipage}	: 1,8 veces/minuto

La fluidización de una emulsión y la fluidización de un gas se llevaron a cabo de la misma manera que en el Ejemplo 1.

Después de la desecación del agua interior, los microesferas obtenidas se recuperaron utilizando un separador centrífugo.

Ejemplo Comparativo

La desecación del agua interior se llevó a cabo de la misma manera que en el Ejemplo 8, excepto en que la frecuencia de sustitución de la emulsión fue de 0,8 veces/minuto (100 litros/minuto), y no se realizó soplado de aire comprimido. Se recuperaron las microesferas obtenidas.

Ejemplo Experimental 1

Con respecto a las microesferas y a los polvos de microesferas obtenidos en los Ejemplos 5, 6 y 7, los contenidos de disolvente al final de la desecación del agua interior y la relación de captura de ingrediente activo al final de la liofilización se muestran respectivamente en la Tabla 1.

TABLA 1

Ejemplo Nº	Contenido de disolvente en las	Proporción de captura de ingrediente
	microesferas	activo después de la liofilización
5	3.000 ppm	94%
6	1.000 ppm	95%
7	20.000 ppm	91%

Como queda claro en la Tabla 1, se pueden producir microesferas que tienen bajo contenido de disolvente y alta proporción de captura del componente activo de acuerdo al método de la presente invención.

Ejemplo Experimental 2

Con respecto a las microesferas obtenidas en el Ejemplo 8 y en el Ejemplo Comparativo, los contenidos de disolvente al final de la desecación del agua interior y la viabilidad en la recuperación se muestran en la Tabla 2.

TABLA 2

	Contenido de disolvente en las	Viabilidad en la recuperación
	microesferas
Ejemplo 8	1.200 ppm	Muy buena
Ejemplo		Se observó agregación de
Comparativo	40.000 ppm	microesferas y mala viabilidad

Como se evidencia en la Tabla 2, se pueden producir microesferas que tienen bajo contenido de disolvente y excelente viabilidad en la recuperación mediante soplado de un gas a una emulsión en la desecación del agua interior.

Según el método de la presente invención, se incrementa la velocidad de eliminación del disolvente de las microesferas en la desecación del agua interior y se puede reducir la cantidad de disolvente en las microesferas en poco tiempo. Y, es posible producir microesferas que contienen pequeñas cantidades de disolvente y tienen una alta proporción de captura del componente activo.

También, se pueden obtener microesferas con excelente viabilidad en el momento de la recogida.

Además, las microesferas producidas mediante el método de la presente invención tienen excelente dispersabilidad y capacidad de paso a través de la aguja cuando se usan como preparación médica inyectable.

Claims (15)

1. Una microesfera que comprende una sustancia fisiológicamente activa y un polímero biodegradable, que es obtenible a partir de un procedimiento que comprende someter una emulsión a/o/a o una emulsión a/o, en la cual dicha sustancia fisiológicamente activa esta en una fase acuosa interna en la emulsión a/o/a o en una fase oleosa en la emulsión o/a, y dicho polímero biodegradable está en una fase oleosa, a un método de desecación del agua interior en las siguientes condiciones:

1)

la cantidad de microesferas por m^{3} de una fase acuosa externa es 0,1 a 500 kg,

2)

la raíz cuadrada del área (unidad: m^{2}) de la superficie líquida en contacto con la fase gaseosa es 0,2 a 4,5 por la raíz cúbica del volumen (unidad: m^{3}) de una fase acuosa externa,

3)

la emulsión a/o/a o la emulsión o/a se sustituye a una frecuencia de sustitución de 0,01 a 10 veces/minuto,

4)

se sopla un gas en la emulsión a/o/a o en la emulsión o/a a una velocidad de transferencia de gas próximo a la superficie líquida de 0,1 a 300 m/segundo, y

5)

el gas se sustituye a una frecuencia de sustitución no menor de 0,5 veces/minuto.

2. La microesfera según la reivindicación 1, en la que la cantidad de microesferas por m^{3} de una fase acuosa externa es 0,5 a 100 kg.

3. La microesfera según la reivindicación 1, en la que la raíz cuadrada del área (unidad: m^{2}) de la superficie líquida en contacto con la fase gaseosa es 0,5 a 3,0 por la raíz cúbica del volumen (unidad: m^{3}) de una fase acuosa externa.

4. La microesfera según la reivindicación 1, en la que la sustancia fisiológicamente activa es un péptido fisiológicamente activo.

5. La microesfera según la reivindicación 1, en la que la sustancia fisiológicamente activa es un agonista LH-RH o un antagonista LH-RH.

6. La microesfera según la reivindicación 1, en la que el polímero biodegradable tiene un grupo carboxilo terminal libre.

7. La microesfera según la reivindicación 1, en la que el polímero biodegradable es un polímero de ácido láctico/ácido glicólico.

8. La microesfera según la reivindicación 1, en la que la velocidad de transferencia del gas próximo a la superficie líquida es 10 a 200 m/segundo.

9. La microesfera según la reivindicación 1, en la que la velocidad de transferencia de gas próximo a la superficie líquida es 50 a 150 m/segundo.

10. La microesfera según la reivindicación 7, en la que la relación de composición de un polímero de ácido láctico/ácido glicólico es de 90/10 a 50/50.

11. La microesfera según la reivindicación 1, en la que la sustancia fisiológicamente activa es una sustancia seleccionada del grupo que consiste en un agonista de LH-RH, un antagonista de LH-RH, un agente antitumoral, un antibiótico, un agente antipirético, un analgésico, un agente antinflamatorio, un expectorante antitusivo, un sedante, un relajante muscular, un antiepiléptico, un agente antiulceroso, un antidepresivo, un agente antialérgico, un cardiotónico, un agente antiarrítmico, un vasodilatador, un diurético hipotensor, un antidiabético, un agente antihiperlipidémico, un anticoagulante, un hemolítico, un agente antituberculoso, una hormona, un antagonista narcótico, un supresor de la reabsorción ósea, un promotor de la osteogénesis y un inhibidor de la angiogénesis.

12. La microesfera según la reivindicación 1, en la que la sustancia fisiológicamente activa es:

(1) un péptido representado por la fórmula:

(I)(Pyr)Glu-R_{1}-Trp-Ser-R_{2}-R_{3}-R_{4}-Arg-Pro-R_{5}

en la que R_{1} representa His, Tyr, Trp o p-NH_{2}-Phe; R_{2}representa Tyr o Phe; R_{3} representa Gly o un residuo aminoacídico tipo D; R_{4} representa Leu, Ile o Nle; R_{5} representa (a) Gly-NH-R_{6} (en la que R_{6} es H o un grupo alquilo con o sin un grupo hidroxilo o (b) NH-R_{7} (R_{7} es H, un grupo alquilo con o sin un grupo amino o un grupo hidroxilo, o (c) ureido (-NH-CO-NH_{2}); o

\newpage

(2) un péptido representado por la fórmula:

13

14

en la que X representa un átomo de hidrógeno o tetrahidrofurilcarboxamida; Q representa un átomo de hidrógeno o metilo; A representa nicotinoilo o N,N'-dietilamidino; B representa isopropilo o N,N'-dietilamidino;

o una sal de los mismos.

13. Una microesfera según la reivindicación 1, en la que la sustancia fisiológicamente activa es leuprorelina o acetato de leuprorelina.

14. Una microesfera de liberación sostenida que comprende una sustancia fisiológicamente activa y un polímero biodegradable, que es obtenible a partir de un procedimiento que comprende someter una emulsión a/o/a o una emulsión o/a, en la que dicha sustancia fisiológicamente activa está en una fase acuosa interna en la emulsión a/o/a o en una fase oleosa en la emulsión o/a y dicho polímero biodegradable está en una fase oleosa, a un método de desecación del agua interior en las siguientes condiciones:

1)

la cantidad de microesferas por m^{3} de fase acuosa externa es 0,1 a 500 kg,

2)

la raíz cuadrada del área (unidad: m^{2}) de la superficie líquida en contacto con la fase gaseosa es 0,2 a 4,5 por la raíz cúbica del volumen (unidad: m^{3}) de una fase acuosa externa,

3)

la emulsión a/o/a o la emulsión o/a se sustituye con una frecuencia de sustitución de 0,01 a 10 veces/minuto,

4)

se sopla un gas a la emulsión a/o/a o a la emulsión o/a a una velocidad de transferencia del gas próximo a la superficie líquida de 10 a 200 m/segundo, y

5)

el gas se sustituye con una frecuencia de sustitución no menor de 0,5 veces/minuto,

en el que la sustancia fisiológicamente activa es leuprorelina o acetato de leuprorelina, y el polímero biodegradable es un polímero de ácido láctico/ácido glicólico que tiene una relación de composición de 90/10 a 50/50.

15. Una preparación de liberación sostenida que comprende una microesfera según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 junto con un dispersante, un excipiente, un agente desintegrante, un aglutinante, un lubricante, un agente espesante o una base farmacéuticamente aceptables.