ES2276980T3

ES2276980T3 - Derivados sustituidos de la 4-fenil-4-(1h-imidazol-2-il) piperidina para reducir el daño isquemico.

Info

Publication number: ES2276980T3
Application number: ES02799040T
Authority: ES
Inventors: Frans Eduard Janssens; Joseph Elisabeth Leenaerts; Francisco Javier Fernandez-Gadea; Antonio Gomez-Sanchez; W.; c/o K.U.Leuven Res. & Development FLAMENG; P.; c/o K.U.Leuven Res. & Development HERIJGERS; Theo Frans Meert; Marcel J. M. Borgers
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2001-10-15
Filing date: 2002-10-10
Publication date: 2007-07-01
Anticipated expiration: 2022-10-10
Also published as: WO2003039440A3; KR100967599B1; HUP0402332A3; HUP0402332A2; HRP20040325A2; DE60216310D1; EP1438049B1; AU2002363369B2; ZA200402816B; AR036800A1; JP4418676B2; NZ531733A; JP2005507943A; CN1568186A; CN1283252C; MXPA04003480A; PT1438049E; UA75980C2; KR20050035120A; HK1072562A1

Abstract

Uso de un compuesto de **Fórmula**, una sal de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptable, una forma estereoquímicamente isomérica del mismo, una forma tautoméra del mismo y una forma N-óxido del mismo, para la fabricación de un medicamento para reducir el daño isquémico a un órgano en un mamífero.

Description

Derivados sustituidos de la 4-fenil-4-[1H-imidazol-2-il]-piperidina para reducir el daño isquémico.

Campo de la invención

La presente invención se refiere al uso de derivados de la 4-fenil-4-[1H-imidazol-2-il]-piperidina para la fabricación de un medicamento para reducir el daño isquémico a un órgano, así como a composiciones farmacéuticas que comprenden dichos derivados de piperidina y al menos un segundo agente terapéutico que comprende un agente antitrombótico y/o un factor de crecimiento angiogénico, y al uso de dichos derivados de la piperidina para la fabricación de un medicamento para la prevención y el tratamiento del daño isquémico a un órgano, en particular para reducir el daño isquémico cardíaco y cerebral.

Antecedentes de la invención

En el marco de esta solicitud, la isquemia se define como la reducción o pérdida del flujo sanguíneo hacia un tejido y, asociada con ella, la reducción o pérdida de, por ejemplo, el aporte de oxígeno a un tejido.

En el marco de esta solicitud, el daño isquémico se define como los efectos perjudiciales asociados a un episodio isquémico, como, por ejemplo, la necrosis isquémica o el infarto. Los fenómenos metabólicos que se supone que subyacen a dicha degeneración celular y muerte celular comprenden: fallo en el aporte de energía debido al agotamiento del ATP; acidosis celular; liberación de glutamato; afluencia de iones de calcio; estimulación de la degradación de los fosfolípidos de la membrana y posterior acumulación de ácidos grasos libres; y generación de radicales libres.

Existe una creciente necesidad de compuestos que puedan proporcionar protección contra la isquemia y sus efectos perjudiciales asociados.

Recientemente se ha descubierto que ciertos agonistas de receptores opioides delta-2 altamente específicos pueden proporcionar una amplia protección isquémica para el miocardio farmacológicamente inducida, a través de un proceso similar al que tiene lugar en el precondicionamiento isquémico (IPC)(Govindaswami y otros, en Proceedings of the 11^{th} International Hibernation Symposium 2000, págs. 377-384, Springer-Verlag, Berlín, Alemania). El precondicionamiento isquémico describe el fenómeno mediante el cual un período corto de isquemia precondiciona el corazón de tal modo que un período de isquemia posterior produce menos daño. A su vez, esto da lugar a una menor infartación del miocardio y menos arritmias. Se cree que el mecanismo se basa en modificaciones en la función (apertura) del canal mitocondrial de K sensible al ATP (mitoK_{ATP}). Un agonista delta-2 conocido es DADLE (D-Ala2-D-Leu5-encefalina), que se ha mostrado que induce el mismo efecto que el precondicionamiento isquémico sobre un órgano. En consecuencia, la forma de actuar tanto del precondicionamiento isquémico como de los compuestos químicos deben considerarse como un disparador que activa un modo celular más basal o protector. Puesto que los receptores opioides delta se encuentran en la mayoría de los tejidos, incluidos los tejidos cardíaco y cerebral, es de esperar que los compuestos que ejercen una protección isquémica sobre, por ejemplo, el tejido cardíaco, lo harán también sobre el tejido cerebral, así como, por ejemplo, sobre el tejido pulmonar, renal o hepático.

En la actualidad hay dos áreas terapéuticas principales en las que la isquemia juega un papel importante: la isquemia cardíaca y la isquemia cerebral o ictus.

Isquemia cardíaca

La cirugía cardíaca está siempre asociada con la imposición controlada de uno o más episodios de isquemia y reperfusión. En la cirugía cardíaca convencional, se para el corazón y se enfría con una solución cardiopléjica para reducir el consumo de oxígeno por parte del miocardio de modo que sea posible imponer un período más largo de isquemia al corazón sin demasiado daño. No obstante, esto requiere mantener la circulación de la sangre mediante un sistema de circulación extracorpórea, lo que conlleva diversos inconvenientes importantes: induce una importante reacción inflamatoria del organismo, da lugar a microembolias y trastorna completamente el sistema de coagulación y fibrinolítico de la sangre. Además, las microembolias y la circulación no pulsátil durante la intervención con circulación extracorpórea son responsables de una perfusión subóptima de órganos vitales como, por ejemplo, el cerebro, los riñones y los intestinos. Esto da lugar, por ejemplo, a un incremento del metabolismo anaerobio (incremento de los lactatos en el período postoperatorio), a un deterioro de la función renal y a confusión.

Debido al desarrollo de estabilizadores locales (mecánicos) a lo largo de los últimos años, para evitar los inconvenientes antes mencionados, la cirugía coronaria se ha realizado sin la ayuda de la circulación extracorpórea. La desventaja, sin embargo, es que el corazón permanece en estado normotérmico y debe llevar a cabo trabajo mecánico mientras se impone una isquemia local. En la actualidad, un 30% de la cirugía coronaria en todo el mundo se realiza sin el uso de circulación extracorpórea. Para esta solicitud resultaría extremadamente útil un agente cardioprotector. Dicho agente, debería ser capaz de ejercer una acción protectora sobre el tejido miocárdico usando un mecanismo celular basal, prolongando de este modo el período de la isquemia impuesta.

Por otra parte, existe un potencial campo de aplicación en la conservación de corazones de donantes, que todavía es un problema pendiente, puesto que el período de isquemia aceptable todavía está limitado de 4 a 6 horas. Asimismo la cirugía cardiaca que requiera complejas reconstrucciones con largos períodos de isquemia durante la intervención, se puede beneficiar de un agente cardioprotector además del paro cardiopléjico usado en el presente.

En general, existe un potencial campo de aplicación en todos los procedimientos de intervención quirúrgica y percutánea en los que la secuencia isquemia-reperfusión impuesta a cualquier órgano juegue un papel como, por ejemplo, la cirugía de trasplantes, la cirugía de aneurisma, la cirugía vascular para afecciones vasculares obstructivas y las intervenciones percutáneas en arterias coronarias, carótidas y periféricas estenosadas.

En particular, existe un potencial campo de aplicación para los pacientes antes de ser sometidos a anestesia por cualquier circunstancia en la que se den unas afecciones de disminución del aporte sanguíneo a los órganos como, por ejemplo, en la angina estable o inestable, o afecciones que pueden ser causadas por los efectos hemodinámicos de la anestesia como, por ejemplo, la disminución de la tensión arterial, así como para los pacientes durante las primeras horas tras el comienzo de un ataque cardíaco y antes de la formación de coágulos de sangre.

Isquemia cerebral

El cerebro, más que cualquier otro órgano del cuerpo, depende para su supervivencia y adecuado funcionamiento de un aporte relativamente constante de sangre oxigenada. Aunque su peso es de sólo el 2% del peso del cuerpo, el cerebro recibe el 15% de la sangre que sale del corazón y consume el 20% del oxígeno usado por el cuerpo. Además, se requiere un suministro constante de sangre para proporcionarle al cerebro glucosa, el principal sustrato energético usado por el cerebro para producir fosfatos de alta energía como, por ejemplo, el ATP (véase, por ejemplo, el documento WO 96/27380 (Interneuron Pharmaceuticals, Inc)).

En el marco de esta solicitud, la isquemia cerebral se define como la interrupción o reducción del flujo sanguíneo en las arterias que alimentan el cerebro, usualmente como resultado de un coágulo de sangre (trombo) u otra sustancia (émbolo) que ocluye las arterias, lo que da lugar a un ictus isquémico. Tal como se ha definido en la presente solicitud, el ictus isquémico es un síndrome causado por diversas etiologías como, por ejemplo, la enfermedad aterosclerótica cerebrovascular como, por ejemplo, la hipoperfusión y el trombo arteriogénico; la enfermedad de arteria penetrante; el embolismo cardiogénico como, por ejemplo, pero no limitado a, la fibrilación auricular, la enfermedad valvular y el trombo ventricular; el ictus criptogénico; y otras causas más inusuales como, por ejemplo, estados protrombóticos, disecciones, arteritis, migraña o vasoespasmo y abuso de drogas (véase, por ejemplo, Cardiovascular Thrombosis: Thrombocardiology and Thromboneurology, editado por M. Verstraete, V. Fuster y E.J. Topol, Segunda Edición, Lippincot-Raven Publishers, Filadelfia, 1998).

El ictus es la tercera causa de muerte en los Estados Unidos y cada año se producen aproximadamente 500.000 nuevos casos. A escala mundial, el ictus es la causa número uno de muerte debido a la incidencia particularmente alta del mismo en Asia. El ictus isquémico es la forma de ictus más común y es responsable de aproximadamente el 85% de todos los ictus.

En cuestión de prevención del ictus, existe un potencial campo de aplicación en ciertos casos, por ejemplo durante las intervenciones quirúrgicas en las que existe un riesgo de un episodio isquémico, en la atenuación del daño isquémico en caso de un ictus, en la reducción de la extensión del infarto cerebral posterior a la isquemia cerebral y en el tratamiento del ictus isquémico, en particular, el tratamiento agudo del ictus tras un episodio isquémico.

Técnica anterior antecedente

El documento WO 99/04795 (Toray Industries Inc.) divulga ciertos derivados de la piridina y la piracina tetracíclicas que tienen el perfil farmacológico de un agonista de un receptor opioide delta, y su uso para reducir el daño isquémico a un órgano. Los compuestos divulgados en dicha solicitud no están relacionados estructuralmente con los compuestos de la presente invención.

El documento WO 00/37470 (Janssen Pharmaceutica N.V.) divulga algunos derivados de la 4-fenil-4-[1h-imidazol-2-il]-piperidina, que no forman parte sin embargo del ámbito de esta invención, y se usan como productos intermedios para la síntesis de compuestos antihistamínicos.

El documento EP-A-1038872 (Pfizer Prod. Inc.) divulga derivados de la 4-fenil-4-heteroarilpiperidina para ser usados como ligandos de un receptor opioide; estos compuestos difieren de los compuestos presentes en el patrón de sustitución sobre el componente imidazolil y en su función farmacológica, que no se especifica que sea agonista por naturaleza ni selectiva respecto a mu.

Descripción de la invención

En esta solicitud se describe el uso de un grupo de compuestos, basado en un derivado sustituido de la 4-fenil-4-[1H-imidazol-2-il]-piperidina, que tiene importantes ramificaciones clínicas en relación con la reducción del daño isquémico a un órgano en un mamífero, en particular al tejido cardíaco y cerebral, en particular para la prevención de las complicaciones y consecuencias de las enfermedades de la arteria coronaria en un mamífero induciendo un efecto cardioprotector.

Los compuestos per se se reivindican en la solicitud de los solicitantes también en trámite WO 03/033486 A (Janssen Pharmaceutica N.V.).

El objeto de la presente invención es el uso de un compuesto para la fabricación de un medicamento para reducir el daño isquémico a un órgano en un mamífero, compuesto que es un derivado sustituido de la 4-fenil-4-[1H-imidazol-2-il]-piperidina de acuerdo con la Fórmula general (I)

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las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo, en el que:

A=B se escoge del grupo de C=O, C=N-R^{6}, donde R^{6} es hidrógeno o ciano, C=S, S=O, SO_{2} y C=CR^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son, de forma independiente, cada uno, hidrógeno, nitro o alquilo;

X es un enlace covalente, -CH_{2}- o -CH_{2}CH_{2}-;

R^{1} es hidrógeno, alquiloxi, alquilcarboniloxi, Ar-oxi, Het-oxi, Ar-carboniloxi, Het-carboniloxi, Ar-alquiloxi, Het-alquiloxi, alquilo, polihaloalquilo, alquiloxialquilo, Ar-alquilo, Het-alquilo, Ar, Het, tio, alquiltio, Ar-tio, Het-tio, o NR^{9}R^{10}, en donde R^{9} y R^{10} son, cada uno de forma independiente, hidrógeno, alquilo, Ar, Ar-alquilo, Het, Het-alquilo, Ar-carbonilo, Het-carbonilo o alquiloxicarbonilalquilo; o A=B y R^{1} juntos forman un radical Het^{2} o Het^{3} carbocíclico o heterocíclico, aromático o semiaromático, opcionalmente sustituido;

R^{2} es hidroxi, alquiloxi, alquilcarboniloxi, feniloxi, fenilcarboniloxi, halo, ciano, alquilo, polihaloalquilo, alquiloxialquilo, formilo, carboxi, alquilcarbonilo, alquiloxicarbonilo, aminocarbonilo, mono o dialquilaminocarbonilo, fenilo, nitro, amino, mono o dialquil-amino, tio o alquiltio;

R^{3} es alquilo, Ar, Ar-alquilo, Ar-alquenilo, Ar-carbonilo, Het, Het-alquilo, Het-alquenilo o Het-carbonilo;

R^{4}, R^{5} cada uno, de forma independiente, es hidrógeno, alquilo, carboxi, aminocarbonilo, alquiloxicarbonilo, halo o hidroxialquilo;

p es un entero igual a cero, 1, 2 ó 3.

En el marco de esta solicitud, alquilo es un radical hidrocarburo saturado, lineal o ramificado que tiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono; o es un radical hidrocarburo saturado cíclico (cicloalquilo) que tiene desde 3 hasta 7 átomos de carbono; o es un radical hidrocarburo saturado cíclico que tiene desde 3 hasta 7 átomos de carbono unido a un radical hidrocarburo saturado lineal o ramificado que tiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono; en donde cada átomo de carbono puede estar opcionalmente sustituido con amino, nitro, tio, hidroxi, oxo, ciano, formilo o carboxi. Preferiblemente, alquilo es metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, tert-butilo, ciclopropilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexilmetilo y ciclohexiletilo.

En el marco de esta solicitud, alquenilo es un radical alquilo tal como se ha definido más arriba que tiene uno o más enlaces dobles. Preferiblemente, alquenilo es etenilo y propenilo.

En el marco de esta solicitud, Ar es un homociclo escogido del grupo de fenilo y naftilo, cada uno de ellos sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes, siendo escogido cada sustituyente de forma independiente del grupo de hidroxi, alquiloxi, alquilcarboniloxi, feniloxi, fenilcarboniloxi, polihaloalquiloxi, halo, ciano, alquilo, polihaloalquilo, alquiloxialquilo, formilo, haloformilo, carboxi, alquilcarbonilo, alquiloxicarbonilo, aminocarbonilo, mono o dialquilaminocarbonilo, fenilalquilo, fenilo, nitro, amino, mono o dialquil-amino, tio, alquiltio o SO_{2}-CH_{3}. Preferiblemente, Ar es naftilo o fenilo, cada uno de ellos sustituido opcionalmente con hidroxi, metiloxi, etiloxi, feniloxi, trihalometiloxi, halo, metilo, trifluorometilo, cloroformilo, carboxi, metiloxicarbonilo, etiloxicarbonilo, dietilaminocarbonilo, fenilo, nitro, metiltio, trifluorometiloxi o SO_{2}-C_{1-3}alquilo.

En el marco de esta solicitud, halo es un sustituyente escogido del grupo de flúor, cloro, bromo y yodo y polihaloalquilo es un radical hidrocarburo saturado lineal o ramificado que tiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono, o un radical hidrocarburo cíclico saturado que tiene desde 3 hasta 7 átomos de carbono, en donde uno o más átomos de carbono están sustituidos con uno o más átomos halo. Preferiblemente, halo es bromo, flúor o cloro y, preferiblemente, polihaloalquilo es trifluorometilo.

En el marco de esta solicitud, Het es un radical heterocíclico escogido del grupo de Het^{1}, Het^{2} y Het^{3}. Het^{1} es un radical heterocíclico monocíclico alifático escogido del grupo de pirrolidinilo, dioxolilo, imidazolidinilo, pirazolidinilo, piperidinilo, dioxilo, morfolinilo, ditianilo, tiomorfolinilo, piperacinilo y tetrahidrofuranilo; Het^{2} es un radical heterocíclico monocíclico semiaromático escogido del grupo de 2H-pirrolilo, pirrolinilo, imidazolinilo y pirazolinilo; Het^{3} es un radical heterocíclico monocíclico aromático escogido del grupo de pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, furanilo, tienilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, piridinilo, pirimidinilo, piracinilo, piridiacinilo o triacinilo; o un radical heterocíclico bicíclico aromático escogido del grupo de quinolinilo, quinoxalinilo, indolilo, bencimidazolilo, benzoxazolilo, bencisoxazolilo, benzotiazolilo, bencisotiazolilo, benzofuranilo y benzotienilo; cada radical heterocíclico monocíclico y bicíclico puede estar opcionalmente sustituido sobre un átomo de carbono y/o un heteroátomo con halo, hidroxi, alquiloxi, alquilo, Ar, Ar-alquilo o piridinilo.

Un grupo de compuestos interesante son aquellos compuestos de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base de los mismos farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas de los mismos, las formas tautómeras de los mismos y las formas N-óxido de los mismos, en los que R^{1} se escoge del grupo de alquiloxi, Ar-alquiloxi, alquilo, polihaloalquilo, alquiloxialquilo, Ar-alquilo, Het-alquilo, Ar, piperacinilo, pirrolilo, tiazolilo, pirrolidinilo y NR^{9}R^{10}, en donde R^{9} y R^{10} son cada uno de forma independiente, hidrógeno, alquilo, Ar, Ar-alquilo, piridinilo o alquiloxicarbonilalquilo.

Otro grupo de compuestos interesante son aquellos compuestos de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base de los mismos farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas de los mismos, las formas tautómeras de los mismos y las formas N-óxido de los mismos, en los que A=B y R^{1} juntos forman un radical escogido del grupo de Het^{2} y Het^{3}. Más preferiblemente, A=B y R^{1} juntos forman un radical escogido del grupo de benzoxazolilo, tiazolilo, benzotiazolilo, bencimidazolilo y pirimidinilo.

Aún otro grupo de compuestos interesante son aquellos compuestos de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base de los mismos farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas de los mismos, las formas tautómeras de los mismos y las formas N-óxido de los mismos, en los que X es un enlace covalente o un componente -CH_{2}-. Preferiblemente, X es un enlace covalente.

Aún otro grupo de compuestos interesante son aquellos compuestos de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base de los mismos farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas de los mismos, las formas tautómeras de los mismos y las formas N-óxido de los mismos, en los que R^{2} es alquiloxi o halo.

Aún otro grupo de compuestos interesante son aquellos compuestos de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base de los mismos farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas de los mismos, las formas tautómeras de los mismos y las formas N-óxido de los mismos, en los que R^{3} se escoge del grupo de fenilalquilo y naftilo, cada uno de ellos sustituido de forma independiente con al menos un sustituyente escogido del grupo de halo, alquiloxicarbonilo, hidroxi, alquiloxi y dialquilaminocarbonilo.

Cuando R^{3} es alquilo, entonces, preferentemente, alquilo es ciclohexilmetilo.

Todavía otro grupo de compuestos interesante son aquellos compuestos de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base de los mismos farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas de los mismos, las formas tautómeras de los mismos y las formas N-óxido de los mismos, en los que A=B es C=O o SO_{2}, R^{1} es alquiloxi, alquiloxialquilo, Ar o NR^{9}R^{10}, en donde R^{9} y R^{10} son cada uno, de forma independiente, hidrógeno o Ar; o A=B y R^{1} juntos forman un radical benzoxazolilo; p es cero, R^{3} es bencilo opcionalmente sustituido con hidroxi, alquilo o alquiloxicarbonilo y R^{4} y R^{5} son cada uno hidrógeno.

Más específicamente, los siguientes compuestos son los más preferidos: 1-etoxicarbonil-4-fenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina; 1-propiloxicarbonil-4-fenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina; 1-etoxicarbonil-4-fenil-4-[1-[(4-hidroxifenil)metil]-1H-imidazol-2-il]-piperidina; 1-etoxicarbonil-4-fenil-4-[1-(1-feniletil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina; 1-isopropiloxicarbonil-4-fenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina; 1-etoxicarbonil-4-fenil-4-[1-[[4-(metoxicarbonil)fenil]metil]-1H-imidazol-2-il]-piperidina; 1-benzoil-4-fenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina; 1-(metoxiacetil)-4-fenil-4-[1-(1-feniletil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina; 4-[[2-(1-benzoil-4-fenil-4-piperidinil)-1H-imidazol-1-il]metil]-metilbenzoato; 4-[[2-(1-(2-benzoxazolil)-4-fenil-4-piperidinil)-1H-imi-
dazol-1-il]metil]-metilbenzoato; 1-benzoil-4-fenil-4-[1-(1-feniletil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina; 1-etoxicarbonil-4-fenil-4-[1-[1-[4-(etoxicarbonil)fenil]etil]-1H-imidazol-2-il]-piperidina; N,4-difenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-
il]-1-piperidinsulfonamida y ácido [4-(1-bencil-1H-imidazol-2-il)-4-fenil-piperidin-1-il]-acético.

Las sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables se definen de modo que comprenden las formas de sales de adición de ácidos no tóxicas terapéuticamente activas que los compuestos de acuerdo con la Fórmula (I) son capaces de formar. Dichas sales de adición de ácidos se pueden obtener tratando la forma básica de los compuestos de acuerdo con la Fórmula (I) con ácidos apropiados, por ejemplo ácidos inorgánicos, por ejemplo un ácido halohídrico, en particular, ácido clorhídrico o ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico y ácido fosfórico; ácidos orgánicos, por ejemplo ácido acético, ácido hidroxiacético, ácido propanoico, ácido láctico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido malónico, ácido succínico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido mandélico, ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido p-toluensulfónico, ácido ciclámico, ácido salicílico, ácido p-aminosalicílico y ácido pamoico.

Los compuestos de acuerdo con la Fórmula (I) que contienen protones ácidos se pueden convertir también en sus formas de sales de adición de bases no tóxicas terapéuticamente activas mediante tratamiento con bases orgánicas e inorgánicas apropiadas. Las formas de las sales básicas apropiadas comprenden, por ejemplo, la sales de amonio, las sales de metales alcalinos y alcalinotérreos, en particular las sales de litio, sodio, potasio, magnesio y calcio, sales con bases orgánicas, por ejemplo la benzatina, N-metil-D-glucamina, sales de hidramina y sales con aminoácidos, por ejemplo arginina y lisina.

Recíprocamente, dichas formas de sales de adición de ácidos o bases se pueden convertir en las formas libres mediante tratamiento con una base o un ácido apropiados.

El término sal de adición, tal como se usa en el marco de esta solicitud, comprende también los solvatos que los compuestos de acuerdo con la Fórmula (I), así como las sales de los mismos, son capaces de formar. Estos solvatos son hidratos y alcoholatos.

La expresión "formas estereoquímicamente isoméricas", tal como se usa en la presente solicitud, define todas las posibles formas isoméricas que pueden poseer los compuestos de Fórmula (I). A menos que se mencione o indique lo contrario, la designación química de los compuestos denota la mezcla de todas las posibles formas estereoquímicamente isoméricas, conteniendo dichas mezclas todos los diastereómeros y enantiómeros de la estructura molecular básica. Más en particular, los esterecentros pueden tener la configuración R- o S-; los sustituyentes sobre radicales (parcialmente) saturados cíclicos bivalentes pueden tener la configuración cis- o trans-. Obviamente, se pretende que las formas estereoquímicamente isoméricas de los compuestos de Fórmula (I) estén incluidas en el ámbito de esta invención.

De acuerdo con las normas de nomenclatura CAS, cuando dos estereocentros de configuración absoluta conocida están presentes en una molécula, al centro quiral de menor numeración, el centro de referencia, se le asigna un descriptor R o S (de acuerdo con la regla de secuencia Cahn-Ingold-Prelog). La configuración del segundo estereocentro se indica mediante los descriptores relativos [R*,R*] o [R*,S*], donde R* se especifica siempre como el centro de referencia y [R*,R*] indica centros con la misma quiralidad y [R*,S*] indica centros con quiralidad diferente. Por ejemplo, si el centro quiral de menor numeración de la molécula tiene una configuración S y el segundo centro es R, el descriptor estéreo se especificará como S-[R*,S*]. Si se usan "\alpha" y "\beta": la posición del sustituyente de prioridad más alta sobre el átomo de carbono asimétrico en el sistema de anillos que tenga el número de anillo más bajo, está siempre arbitrariamente en la posición "\alpha" del plano medio determinado por el sistema de anillos. La posición del sustituyente de prioridad más alta sobre otro el átomo de carbono asimétrico en el sistema de anillos en relación con la posición del sustituyente de prioridad más alta sobre el átomo de referencia se denomina "\alpha" si se encuentra al mismo lado del plano determinado por el sistema de anillos, o "\beta" si se encuentra al otro lado del plano medio determinado por el sistema de anillos.

Se hace notar que el átomo de carbono sustituido en la posición 4 en el resto piperidinilo es un átomo aquiral; por lo tanto, los compuestos de Fórmula (I) sólo pueden tener al menos un estereocentro en su estructura en virtud de un sustituyente quiral R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4} o R^{5}.

Se debe entender que las formas tautómeras de los compuestos de Fórmula (I) comprenden aquellos compuestos de Fórmula (I) en los que, por ejemplo, un grupo enol se convierte en un grupo ceto (tautomerismo ceto-enol).

Se debe entender que las formas N-óxido de los compuestos de acuerdo con la Fórmula (I) comprenden aquellos compuestos de Fórmula (I) en los que uno o varios átomos de nitrógeno se encuentran oxidados en la forma denominada N-óxido, particularmente aquellos N-óxidos en los que el nitrógeno del resto piperidinilo y/o del resto imidazolilo se encuentra oxidado.

Los compuestos de Fórmula (I), tal como se preparan mediante el proceso descrito más abajo, se pueden sintetizar en forma de mezclas racémicas de enantiómeros que se pueden separar entre sí siguiendo procedimientos de separación conocidos en la técnica. Los compuestos racémicos de Fórmula (I) se pueden convertir en las formas de sales diastereoméricas correspondientes mediante reacción con un ácido quiral apropiado. Dichas formas de sales diastereoméricas se separan más tarde, por ejemplo mediante cristalización selectiva o fraccionada y los enantiómeros se liberan a partir de la misma mediante un álcali. Una forma alternativa de separar las formas enantiómeras de los compuestos de Fórmula (I) requiere cromatografía líquida usando una fase estacionaria quiral. Dichas formas isoméricas estereoquímicamente puras se pueden derivar también de las correspondientes formas isoméricas estereoquímicamente puras de los materiales iniciales apropiados, siempre que la reacción tenga lugar estereoespecíficamente. Preferiblemente, si se desea un estereoisómero específico, dicho compuesto se sintetizará mediante métodos de preparación estereoespecíficos. Estos métodos emplearán ventajosamente materiales iniciales enantioméricamente puros.

Preferentemente, el órgano es un corazón, un cerebro, un hígado, un pulmón, o un riñón y el mamífero es un humano.

Más específicamente, un modo de realización preferido de la presente invención se refiere al uso de un compuesto para la fabricación de un medicamento para reducir el daño isquémico al corazón de un mamífero, que es un compuesto de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo. Preferentemente, el mamífero es un humano.

Los estados que se relacionan con el daño isquémico al corazón son, por ejemplo, el síndrome de isquemia coronaria, la angina de pecho, la angina de pecho inestable, la angina de pecho tras el infarto de miocardio, el infarto de miocardio, el infarto agudo de miocardio, la cardioprotección en la cirugía de derivación (o bypass) cardiopulmonar (CPB) tradicional, así como la cirugía cardíaca sin bypass, en la cirugía no cardíaca en humanos con enfermedad declarada o con riesgo de enfermedad de las arterias coronarias (CAD) y restenosis coronaria tras una PTCA. En el marco de esta solicitud, el daño isquémico se debe interpretar como cualquier clase de daño a cualquier parte del corazón, incluyendo las coronarias, y comprendiendo el daño celular directo debido, por ejemplo, a la falta de oxígeno, así como daños indirectos.

Más específicamente, un modo de realización preferido de la presente invención se refiere al uso de un compuesto para la fabricación de un medicamento para reducir el daño isquémico al cerebro de un mamífero, que es un compuesto de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo. Preferentemente, el mamífero es un humano.

Los estados que se relacionan con el ictus son, por ejemplo, la enfermedad ateroesclerótica cerebrovascular como, por ejemplo, la hipoperfusión y la embolia arteriogénica; la enfermedad de la arteria penetrante; el embolismo cardiogénico como, por ejemplo, la fibrilación auricular, la enfermedad valvular y el trombo ventricular; el ictus criptogénico; y otras causas más inusuales como, por ejemplo, los estados protrombóticos, disecciones, arteritis, migraña o vasoespasmo y abuso de drogas. El daño isquémico se interpreta como cualquier clase de daño a cualquier parte del cerebro, incluyendo el daño celular directo debido, por ejemplo, a la falta de oxígeno, y daños indirectos, por ejemplo el aumento de la presión intracraneal.

Más específicamente, un modo de realización preferido de la presente invención se refiere al uso de un compuesto para la fabricación de un medicamento para inducir un efecto cardioprotector en un mamífero, que es un compuesto de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo. Con efecto cardioprotector se quiere decir que el tejido cardíaco está más protegido contra la isquemia que el tejido cardíaco no protegido.

En otros modos de realización preferidos el órgano es un pulmón, un hígado o un riñón.

La invención también se refiere a una composición farmacéutica para reducir el daño isquémico a un órgano en un mamífero, que comprende un excipiente farmacéuticamente aceptable y, como ingrediente activo, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo, y, al menos, un segundo agente terapéutico que comprende un agente antitrombótico y/o un factor de crecimiento angiogénico.

Preferentemente, el órgano es un corazón, un cerebro, un hígado, un pulmón o un riñón, y el mamífero es un humano.

Más específicamente, un modo de realización preferido de la presente invención se refiere a una composición farmacéutica para reducir el daño isquémico al corazón en un mamífero, un excipiente farmacéuticamente aceptable y, como ingrediente activo, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo, y, al menos, un segundo agente terapéutico que comprende un agente antitrombótico y/o un factor de crecimiento angiogénico. Preferentemente, el mamífero es un humano.

Más específicamente, un modo de realización preferido de la presente invención se refiere a una composición farmacéutica para reducir el daño isquémico a un cerebro en un mamífero, que comprende un excipiente farmacéuticamente aceptable y, como ingrediente activo, un compuesto de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo, y, al menos, un segundo agente terapéutico que compren-
de un agente antitrombótico y/o un factor de crecimiento angiogénico. Preferentemente, el mamífero es un humano.

Otro modo de realización preferido de esta invención se refiere a una composición farmacéutica para inducir un efecto cardioprotector en un mamífero, que comprende un excipiente farmacéuticamente aceptable y, como ingrediente activo, un compuesto de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo, y, al menos, un segundo agente terapéutico que comprende un agente antitrombótico y/o un factor de crecimiento angiogénico. Preferentemente, el mamífero es un humano.

Otro modo de realización preferido de esta invención se refiere a una composición farmacéutica en forma de una solución cardiopléjica que contiene una cantidad efectiva de un compuesto de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo, y, al menos, un segundo agente terapéutico que comprende un agente antitrombótico y/o un factor de crecimiento angiogénico, y un excipiente
apropiado.

En un modo de realización preferido, los compuestos de acuerdo con la invención se pueden administrar en combinación, bien simultánea o secuencialmente, con un agente antitrombótico y/o un factor de crecimiento angiogénico. Como agente antitrombótico se puede escoger cualquier agente que se conozca que ejerce dicho efecto, por ejemplo un antagonista de la glucoproteína IIb/Ixia, un inhibidor de la trombina, un inhibidor del factor Xa, un inhibidor de la vía del factor tisular, un antagonista del receptor de la trombina o una heparina de bajo peso molecular. Como factor de crecimiento angiogénico se puede escoger un factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) como, por ejemplo, los divulgados en el documento GB-2332373 A (Merck & Co, Inc.) o, por ejemplo, como se divulga en el documento WO 98/07832 (Ludwig Institute for Cancer research) o en el documento WO 98/49300 (Collateral Therapeutics). El modo de realización anterior ofrece la ventaja de que el riesgo de síndrome agudo de isquemia coronaria se reduce en pacientes de riesgo de dicho síndrome. Los pacientes de riesgo incluyen aquellos que sufren síntomas iniciales del síndrome de isquemia coronaria y que tienen, por lo tanto, mayor probabilidad de experimentar posteriormente trombosis y daño isquémico de los tejidos, que otros que no hayan padecido tales síntomas. Especialmente, se consideran los pacientes que han sufrido un infarto coronario y a los que se administra la composición farmacéutica de acuerdo con el modo de realización anterior dentro de las 6 horas posteriores al comienzo del infarto y antes de que se forme definitivamente el coágulo de sangre. Por consiguiente, el modo de realización anterior reduce la probabilidad de formación posterior de coágulos para el paciente, al mismo tiempo que reduce el daño a los tejidos y mejora la reparación de los mismos. También se consideran los pacientes bajo tratamiento trombolítico para la oclusión de arterias periféricas o, en general, para el tratamiento de la trombosis causada por la liberación de un trombo y la obstrucción de un vaso sanguíneo craneal.

La invención, por lo tanto, también se refiere a una composición farmacéutica para el tratamiento de un mamífero que ha experimentado un episodio isquémico, que comprende una cantidad efectiva de un compuesto de acuerdo con la invención y, al menos, un segundo agente terapéutico que comprende un agente antitrombótico y/o un factor de crecimiento angiogénico, o sus respectivas sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo, las formas N-óxido del mismo, y un excipiente apropiado, así como con el uso de un compuesto de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento para reducir el daño isquémico cardíaco, que comprende el compuesto de acuerdo con la invención y, al menos, un segundo agente terapéutico que comprende un agente antitrombótico y/o un factor de crecimiento angiogénico.

Específicamente, el compuesto de acuerdo con la Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo, las formas N-óxido del mismo y las composiciones de los mismos también pueden tener un alto potencial para la conservación de órganos de donantes.

Los compuestos de acuerdo con la presente invención para reducir el daño isquémico a un órgano en un mamífero se pueden administrar per se. No obstante, se pueden administrar usualmente en diversas formas farmacéuticas a efectos de administración. Como composiciones apropiadas se pueden citar todas las composiciones empleadas usualmente para la administración sistémica de fármacos. Para preparar las composiciones farmacéuticas de esta invención se combina en una mezcla íntima una cantidad efectiva del compuesto particular, opcionalmente en forma de sal de adición, como ingrediente activo, con un excipiente farmacéuticamente aceptable, excipiente que puede tomar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración. Estas composiciones farmacéuticas son deseables en forma de dosis unitarias apropiadas, en particular, para su administración mediante inyección o infusión parenteral. Por ejemplo, en la preparación de las composiciones se puede emplear cualquiera de los medios farmacéuticos usuales. Para las composiciones parenterales, el excipiente comprenderá usualmente agua esterilizada, al menos en gran parte, aunque se pueden incluir otros ingredientes, por ejemplo para favorecer la solubilidad. Se pueden preparar, por ejemplo, soluciones inyectables en las que el excipiente comprende una solución salina, una solución de glucosa o una mezcla de soluciones salina y de glucosa. También se pueden preparar suspensiones inyectables, en cuyo caso se pueden emplear excipientes líquidos, agentes de suspensión, similares, apropiados. También están incluidas las preparaciones en forma sólida concebidas para ser convertidas en preparaciones en forma líquida poco antes de ser usadas.

Dependiendo del modo de administración, la composición farmacéutica contendrá, preferiblemente, desde el 0,05 hasta el 99% en peso, más preferiblemente desde el 0,1 hasta el 70% en peso, de ingrediente activo y desde el 1 hasta el 99,95% en peso, más preferiblemente desde el 30 hasta el 99,9% en peso, de un excipiente farmacéuticamente aceptable, estando referidos todos los porcentajes a la composición total.

Las dosificaciones se escogen apropiadamente en función de factores como, por ejemplo, los síntomas, la edad, el peso corporal y los métodos de administración, pero en caso de administración parenteral como, por ejemplo, inyecciones para adultos, se pueden administrar desde 0,01 mg hasta 1,0 g por día del compuesto de acuerdo con la invención, bien de una vez o repartidos en varias administraciones. En el caso de la administración oral para adultos, se pueden administrar desde 0,1 mg hasta 3 g por día del compuesto de acuerdo con la invención, bien de una vez o repartidos en varias administraciones.

La composición farmacéutica puede contener adicionalmente otros ingredientes diversos conocidos en la técnica, por ejemplo un agente estabilizante, un agente tamponador, un agente emulgente, una agente regulador de la viscosidad, un tensioactivo o un conservante.

Preferiblemente, la composición farmacéutica se administra por vía intravenosa, por ejemplo mediante infusión (administración intravenosa continua) o administración mediante bolus intravenoso.

Un modo de realización preferido de la presente invención se refiere al uso de un compuesto de Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo, así como cualquiera de las composiciones farmacéuticas del mismo previamente mencionadas, para la fabricación de un medicamento para reducir el daño isquémico al corazón en un mamífero, preferiblemente un humano.

Más específicamente, un modo de realización preferido de la presente invención se refiere al uso de un compuesto de Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo, así como cualquiera de las composiciones farmacéuticas del mismo previamente mencionadas, para la fabricación de un medicamento para reducir el daño isquémico al cerebro en un mamífero, preferiblemente un humano.

Adicionalmente, la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo y las formas N-óxido del mismo, así como cualquiera de las composiciones farmacéuticas del mismo previamente mencionadas, para la fabricación de un medicamento para inducir un efecto cardioprotector en un mamífero, preferiblemente un humano.

Adicionalmente, la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo, las formas N-óxido del mismo, así como cualquiera de las composiciones farmacéuticas del mismo previamente mencionadas, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un mamífero que ha experimentado un episodio isquémico, que comprende la administración de una cantidad efectiva de un compuesto de acuerdo con la invención y, al menos, un segundo agente terapéutico que comprende un agente antitrombótico y/o un factor de crecimiento angiogénico, o sus respectivas sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo, las formas N-óxido del mismo y un excipiente apropiado.

Además, la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de Fórmula (I), las sales de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptables, las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo, las formas tautómeras del mismo, las formas N-óxido del mismo, así como cualquiera de las composiciones farmacéuticas del mismo previamente mencionadas, para la fabricación de un medicamento para la prevención y/o el tratamiento de un episodio isquémico cardíaco o cerebral en un mamífero.

Generalmente, los compuestos de acuerdo con la invención se pueden preparar mediante una sucesión de pasos, cada uno de los cuales es conocido para la persona experimentada. En particular, los compuestos de acuerdo con la Fórmula (I-a) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (II) de acuerdo con el esquema de reacción (1), una reacción que se lleva a cabo en un disolvente apropiado inerte a las condiciones de la reacción tal como tolueno, en presencia de una base apropiada tal como trietilamina. En el esquema de reacción (1), todas las variables se definen como en la Fórmula (I) y W^{1} junto con el resto al que está unido, es igual a R^{1}; ejemplos de W^{1} son alquilo, Ar o Het. Un ejemplo de W^{1}OC(=O)Cl es el cloroformiato.

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Esquema 1

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2

Los compuestos de acuerdo con las Fórmulas (I-a), (I-b), (I-c), (I-d), (I-e), (I-f), (I-g) y (I-h) también se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (III) de acuerdo con cualesquiera de las reacciones que se muestran en el esquema de reacción (2). En dichas reacciones, todas las variables se definen como en la Fórmula (I) y W^{1} junto con el resto al que está unido, es igual a R^{1}; ejemplos de W^{1} son alquilo, Ar o Het.

La reacción (a) se lleva a cabo en un disolvente apropiado tal como dicloroetano, y usando BOC_{2}O. La reacción se realiza convenientemente durante varias horas a reflujo.

La reacción (b) se lleva a cabo en un disolvente apropiado tal como THF. La reacción se lleva a cabo convenientemente entre una y varias horas a temperatura ambiente.

La reacción (c) se lleva a cabo en un disolvente apropiado tal como diclorometano, en presencia de una base apropiada tal como Et_{3}N a temperatura ambiente durante una hora.

La reacción (d) se lleva a cabo en un disolvente apropiado tal como THF o DMF a temperatura ambiente durante varias horas sin que sea necesaria ninguna base.

La reacción (e) se lleva a cabo en acetona sometida a reflujo o en DMF en presencia de una base apropiada tal como carbonato de potasio y se puede realizar convenientemente a 80ºC.

La reacción (f) se lleva a cabo en un disolvente apropiado tal como diclorometano en presencia de una base apropiada tal como trietilamina y a temperatura ambiente entre 30 y 120 minutos.

La reacción (g) se lleva a cabo en un disolvente apropiado tal como acetonitrilo a reflujo durante 24 horas.

La reacción (h) se lleva a cabo bajo diferentes condiciones en función de R^{1}; por ejemplo, cuando R^{1}=CF_{3}, la reacción se lleva a cabo en presencia de trietilamina en diclorometano a -78ºC durante 1 hora. Para R^{1}=NH_{2}, la reacción se lleva a cabo en dioxano durante 12 horas a la temperatura de reflujo. Para R^{1}=CH_{3}, la reacción se lleva a cabo en diclorometano a temperatura ambiente durante 3 horas en presencia de trietilamina.

La reacción (i) se lleva a cabo en un disolvente apropiado tal como isopropanol a la temperatura de reflujo durante 12-36 horas.

La reacción (j) se lleva a cabo en un disolvente apropiado tal como acetonitrilo a la temperatura de reflujo durante 24 horas.

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Esquema 2

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3

Los compuestos de acuerdo con las Fórmulas (I-c) también se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (IV) con un haluro. En dicha reacción, todas las variables se definen como en la Fórmula (I). La reacción se lleva a cabo con una base tal como NaH (60% en aceite mineral) y en un disolvente inerte a las condiciones de la reacción tal como DMF o THF.

4

El material inicial y los compuestos intermedios de acuerdo con las Fórmulas (II), (III) y (IV) son compuestos que, o bien se encuentran comercialmente disponibles, o se pueden preparar de acuerdo con procedimientos de reacción convencionales conocidos generalmente en la técnica.

Los compuestos intermedios de Fórmula (II) se pueden preparar de acuerdo con el siguiente esquema de reacción (4), en el que todas las variables se definen como en la Fórmula (I):

Esquema 4

5

El esquema de reacción 4 comprende un paso (a) en el que se hace reaccionar un cloruro de acilo del tipo mostrado con una amina primaria sustituida, por ejemplo bencilamina, en presencia de una base apropiada tal como Et_{3}N y en un disolvente inerte a las condiciones de la reacción apropiado tal como diclorometano. La reacción se puede realizar convenientemente a temperatura ambiente. En un siguiente paso (b) el aducto obtenido en el paso (a) es sometido a reflujo con SOCl_{2}, tras lo cual se hace reaccionar el producto obtenido con 2,2-dimetoxietilamina apropiadamente sustituida en un disolvente inerte a las condiciones de la reacción tal como DMF, por ejemplo a temperatura ambiente (paso c). En el paso (d), el aducto obtenido en el paso (c) se cicla en HC para obtener el resto imidazol sustituido.

Los compuestos intermedios de Fórmula (III) se pueden preparar a partir de compuestos de acuerdo con la Fórmula (I-c) reduciendo selectivamente el resto alquiloxicarbonilo del componente piperidinilo de acuerdo con la siguiente reacción:

6

La reacción se lleva a cabo en presencia de una base apropiada tal como KOH, en un disolvente inerte a las condiciones de la reacción apropiado tal como 2-propanol, y a la temperatura de reflujo.

Los compuestos intermedios de acuerdo con la Fórmula (IV) se pueden preparar hidrogenando compuestos de acuerdo con la Fórmula (I-c) de acuerdo con la siguiente reacción:

7

en la que todas la variables se definen como en la Fórmula (I). La reacción se lleva a cabo en presencia de un catalizador tal como Pd/C (10%) en metanol a una temperatura moderadamente elevada.

En las reacciones precedentes y en las que siguen, es evidente que los productos de reacción pueden ser separados del medio de reacción y, si es necesario, purificados posteriormente de acuerdo con metodologías generalmente conocidas en la técnica como, por ejemplo, extracción, cristalización y cromatografía. Además es evidente que los productos de reacción que se encuentran en más de una forma enantiomérica pueden ser separados de su mezcla mediante técnicas conocidas, en particular la cromatografía preparativa como, por ejemplo, HPLC preparativa.

Los siguientes ejemplos ilustran la presente invención.

Parte experimental

Experimentalmente no se determinó la configuración estereoquímica absoluta del (de los) átomo(s) de carbono estereogénico(s) de algunos compuestos. En esos casos, la forma estereoquímicamente isomérica que se aisló en primer lugar se designa como "A" y la segunda como "B", sin más referencias a la configuración estereoquímica real. No obstante, dichas formas isoméricas "A" y "B" pueden ser reconocidas sin ambigüedad por una persona experimentada en la técnica mediante métodos conocidos en la misma tal como, por ejemplo, difracción de rayos X. El método de separación se describe en detalle más abajo.

En lo que resta de la presente solicitud, "DMF" se define como N,N-dimetilformamida, "THF" se define como tetrahidrofurano y "DIPE" se define como diisopropil éter.

A. Preparación de los compuestos intermedios

Ejemplo A1

Se añadió poco a poco cloruro de 1-metil-4-fenil-4-piperidincarbonilo (0,49 mol) a temperatura ambiente a una mezcla en agitación de bencenometanamina (0,49 mol) y N,N-dietiletanamina (1,223 mol) en CH_{2}Cl_{2} (2500 ml). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadieron K_{2}CO_{3} (150 g) y H_{2}O. Se agitó la mezcla y se separaron sus capas. Se extrajo la capa acuosa con CH_{2}Cl_{2}. Se secó (MgSO_{4}) y filtró la capa orgánica combinada y se evaporó el disolvente. Se obtuvieron: 144 g (95%) de 1-metil-4-fenil-N-(fenilmetil)-4-piperidincarboxamida (producto intermedio 1).

Ejemplo A2

Se agitó y sometió a reflujo durante 1 hora una mezcla del producto intermedio 1 (0,47 mol) en SOCl_{2} (750 ml). Se evaporó el disolvente. Se añadió tolueno dos veces y se evaporó de nuevo. Se obtuvieron: 190 g (100%) de monohidrocloruro de N-[cloro(1-metil-4-fenil-4-piperidinil)metileno]-bencenometanamina (producto intermedio 2).

Ejemplo A3

Se enfrió sobre un baño de hielo una mezcla del producto intermedio 2 (0,47 mol) en DMF (750 ml). Se añadió gota a gota 2,2-dimetoxietanamina (0,54 mol) disuelta en DMF. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Se evaporó el disolvente. Se obtuvieron: 210 g (100%) de dihidrocloruro de N-(2,2-dimetoxietil)-1-metil-4-fenil-N'-(fenilmetil)-4-piperidin-carboximidamida (producto intermedio 3).

Ejemplo A4

Se agitó una mezcla del producto intermedio 3 (0,47 mol) en HCl 6N (1500 ml) hasta obtener una solución turbia, a continuación se lavó con CH_{2}Cl_{2} (900 ml), se agitó a 80ºC durante una hora, se enfrió, se alcalinizó con una solución de NaOH 50% y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. Se separó, se secó (MgSO_{4}) y filtró la capa orgánica y se evaporó el disolvente. El residuo se cristalizó a partir de CH_{3}CN. El precipitado se filtró y se secó. Se obtuvieron: 38,3 g (25%) de 1-metil-4-fenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]piperidina (producto intermedio 4).

Ejemplo A5

Se hidrogenó a 50ºC una mezcla del Compuesto 1 (0,089 mol) en metanol (250 ml) con Pd/C 10% (3 g) como catalizador. Tras la extracción del hidrógeno (1 equiv), se filtró el catalizador y se evaporó el filtrado. El residuo se cristalizó a partir de CH_{3}CN. El precipitado se filtró y se secó. Se obtuvieron: 23,89 g (90%) de 4-fenil-4-(1H-imidazol-2-il)-1-piperidincarboxilato de etilo (producto intermedio 5).

Ejemplo A6

Se agitó y sometió a reflujo durante 10 horas una mezcla del producto intermedio 5 (0,026 mol) y KOH (0,26 mol) en 2-propanol (150 ml). Se evaporó el disolvente. Se recogió el residuo en H_{2}O y se extrajo la mezcla con CH_{2}Cl_{2}. Se separó, se secó y filtró la capa orgánica y se evaporó el disolvente. Se obtuvieron: 9,4 g de 4-fenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]piperidina (producto intermedio 6).

Ejemplo A7

Reacción en atmósfera de N_{2}. Se añadió gota a gota una mezcla del producto intermedio 5 (0,0033 mol) en DMF (5 ml) y THF (5 ml) a una solución de NaH 60% en aceite mineral (0,004 mol) en THF (10 ml) y se agitó a temperatura ambiente. Se agitó durante una hora la mezcla a temperatura ambiente. A continuación, se añadió gota a gota una solución de 4-(acetiloxi)bencenometanol (0,004 mol) en THF y la mezcla de la reacción resultante se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. Se secó (Na_{2}SO_{4}) y filtró la capa orgánica separada y se evaporó el disolvente. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna abierta corta sobre un gel de sílice (eluyente: CH_{2}Cl_{2}/(CH_{3}OH/NH_{3}) 95/5). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente. Se obtuvieron: 1,33 g de 4-fenil-4-[1-((4-metilcarboxi)fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-1-piperidincarboxilato de etilo (producto intermedio 7).

B. Preparación de los compuestos finales

Ejemplo B1

Se agitó a 100ºC una mezcla del producto intermedio 4 (0,05 mol) y N,N-dietiletanamina (0,15 mol) en tolueno (750 ml). Se añadió gota a gota cloroformato de etilo (0,25 mol) y se agitó y se sometió a reflujo durante 1 hora la mezcla de racción y, a continuación, se enfrió. La mezcla se vertió en una solución acuosa de K_{2}CO_{3} (35 g de K_{2}CO_{3}). Se separaron las capas. La capa de agua se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. Se secó (MgSO_{4}) y filtró la capa orgánica separada y se evaporó el disolvente. Se purificó el residuo sobre gel de sílice en un filtro de vidrio (eluyente: CH_{2}Cl_{2}/C_{2}H_{5}OH 98/2). Se recogieron las fracciones deseadas y se evaporó el disolvente. El residuo se cristalizó a partir de CH_{3}CN, se filtró y se secó. Se obtuvieron: 16,7 g (86%) de 4-fenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-1-piperidincarboxilato de etilo (Compuesto 1).

Ejemplo B2

8

Se añadió cloruro de benzoilo (0,0023 mol) a una mezcla del producto intermedio 6 (0,0019 mol) y N,N-dietiletana-
mina (0,0024 mol) en CH_{2}Cl_{2} (15 ml) y se agitó a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. Se añadió agua. Se separaron las capas. Se extrajo la capa acuosa con CH_{2}Cl_{2}. Se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se filtraron las capas orgánicas combinadas y se evaporó el disolvente. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna abierta corta sobre gel de sílice (eluyente: CH_{2}Cl_{2}/(CH_{3}OH/NH_{3}) 98/2). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente. El residuo se recristalizó a partir de n-hexano, se filtró y se secó. Se obtuvieron: 0,42 g (52%) del Compuesto 2; pf. 122,7ºC.

Ejemplo B3

9

Reacción en atmósfera de N_{2}. Se añadió gota a gota una mezcla del producto intermedio 5 (0,0054 mol) en DMF (10 ml) y THF (10 ml) a NaH (0,00624 mol) en THF (30 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. A continuación, se añadió gota agota 4-(bromometil)benzoato de metilo (0,00624 mol) en THF (5 ml) y la mezcla de reacción se agitó a 60ºC durante 3 horas. Se añadió agua y se extrajo la mezcla con CH_{2}Cl_{2}. Se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se filtraron las capas orgánicas combinadas, y se evaporó el disolvente. Se purificó el residuo mediante cromatografía de columna abierta corta sobre gel de sílice (eluyente: CH_{2}Cl_{2}/(CH_{3}OH/NH_{3}) 98/2). Se recogieron las fracciones deseadas y se evaporó el disolvente. Se cristalizó el residuo a partir de DIPE, se filtró y se secó. Se obtuvieron: 1,7 g (70%) del Compuesto 3; p.f. 149,1ºC.

Ejemplo B4

10

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Se agitó y sometió a reflujo durante 24 horas una mezcla del producto intemedio 6 (0,0059 mol) y
11 (0,0059 mol) en CH_{3}CN (70 ml). Se evaporó el disolvente. Se añadió agua. Se extrajo la mezcla con CH_{2}Cl_{2}. Se secó (Na_{2}SO_{4}, anhidro) y filtró la capa orgánica separada, y se evaporó el disolvente. Se cristalizó el residuo a partir de DIPE, se filtró, y recristalizó a partir de CH_{3}CN, se filtró y se secó. Se obtuvieron: 0,33 g del Compuesto 4; p.f. 84,2ºC.

Ejemplo B5

12

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Se agitó y sometió a reflujo durante 4 horas una mezcla del Compuesto 4 (0,0001 mol) y HCl 6N (22,8 ml). Se alcalinizó la mexcla de reacción y, a continuación, se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. Se secó (Na_{2}SO_{4}, anhidro) y filtró la capa orgánica separada, y se evaporó el disolvente. Se recristalizó el residuo a partir de DIPE, se filtró y se secó. Se obtuvieron: 0,24 g (62%) del Compuesto 5.

Ejemplo B6

13

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Se añadió gota a gota isocianatobenceno (0,0094 mol) al producto intermedio 6 (0,0094 mol) en THF (50 ml) y se agitó la mezcla de reacción durante 30 min a temperatura ambiente. Se añadió agua y se extrajo esta mezcla con CH_{2}Cl_{2}. Se secó (Na_{2}SO_{4}) y filtró la capa orgánica separada, y se evaporó el disolvente. Se lavó el residuo sólido con 2-propanona, se filtró y se secó. Se obtuvieron: 2,7 g (68%) del Compuesto 6.

Ejemplo B7

14

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Se añadió 2-isocianatobenzoato de metilo (0,0007 mol) al producto intermedio 6 (0,0007 mol) en THF (10 ml) y se agitó la mezcla de reacción durante 3 horas a temperatura ambiente. Se añadió agua y se extrajo esta mezcla con CH_{2}Cl_{2}. Se secó (Na_{2}SO_{4}) y filtró la capa orgánica separada, y se evaporó el disolvente. El residuo (0,4 g) se purificó mediante HPLC sobre gel de sílice (eluyente: CH_{2}Cl_{2}/CH_{3}OH 98/2). Se recogieron las fracciones deseadas y se evaporó el disolvente. Se obtuvieron: 0,2 g (66%) del Compuesto 7.

Ejemplo B8

15

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Se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas una mezcla del Compuesto 3 (0,002 mol) y LiOH (0,02 mol) en THF (11ml) y H_{2}O. Se añadió H_{2}O. La mezcla se llevó a a pH 6 y, a continuación, se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. Se separó, secó y filtró la capa orgánica, y se evaporó el disolvente. Se lavó el residuo con CH_{2}Cl_{2}. Se obtuvieron: 0,72 g (83%) del Compuesto 8; p.f. 251,6ºC.

16

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Reacción en atmósfera de N_{2}. Se agitó a temperatura ambiente una solución de NaH 60% (0,000642 mol) en DMF (2 ml). Se añadió gota a gota una solución del Compuesto 6 (0,000642 mol) en DMF (8 ml) y se agitó la mezcla de reacción durante una hora a temperatura ambiente. Se añadió CH_{3}I (0,001284 mol) y se agitó la mezcla de reacción a 60ºC en un reactor a presión Parr durante 2 horas. Se evaporó el disolvente. Se purificó el residuo mediante cromatografía líquida de alta resolución sobre gel de sílice (eluyente: CH_{2}Cl_{2}/CH_{3}OH 98/2). Se recogieron las fracciones deseadas y se evaporó el disolvente. Se obtuvieron: 0,14 g (49%) del Compuesto 9.

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Se añadió gota a gota LiAlH_{4} 1M en THF (0,000444 mol) a una solución del Compuesto 7 (0,000404 mol) en THF (5 ml) y se agitó a 0ºC. Se agitó la mezcla de reacción durante 30 min a 0ºC. Se trató la mezcla con una solución acuosa al 10% de NH_{4}Cl y se extrajo con EtOAc. Se secó (Na_{2}SO_{4}) y filtró la capa orgánica separada, y se evaporó el disolvente. Se purificó el residuo mediante CC-TLC en un cromatógrafo Chromatotron (eluyente: CH_{2}Cl_{2}/CH_{3}OH 96/4). Se recogieron las fracciones deseadas y se evaporó el disolvente. Se cristalizó el residuo a partir de CH_{3}OH/H_{2}O, se filtró y se secó. Se obtuvieron: 0,020 g (10%) del Compuesto 10.

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Se añadió poco a poco LiOH (0,001423 mol) a una solución del Compuesto 7 (0,0006469 mol) en dioxano/H_{2}O 1/1 (6 ml). Se agitó la suspensión resultante durante 18 horas a temperatura ambiente. Se evaporó el disolvente. Se recogió el residuo en agua y se extrajo con una mezcla de EtOAC y 1-butanol. Se separó la capa orgánica, se secó (Na_{2}SO_{4}) y filtró, y se evaporó el disolvente. Se recogió el residuo en HCl 1N y, a continuación, se extrajo con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se lavó con agua salada, se secó (Na_{2}SO_{4}) y filtró, y se evaporó el disolvente. Se cristalizó el residuo a partir de Et_{2}O/CH_{2}Cl_{2}, se filtró y se secó. Se obtuvieron: 0,16 g (51%) del Compuesto 11.

Ejemplo B9

Se añadió LiOH (0,018 mol) a una mezcla del producto intermedio 7 (0,0018 mol) en THF (10 ml) y H_{2}O (10 ml). Se agitó la mezcla de reacción durante 3 horas a temperatura ambiente. Se añadió agua. Se añadió CH_{2}Cl_{2}. Se extrajo la mezcla de reacción. Se separó la capa orgánica, se secó (Na_{2}SO_{4}) y filtró, y se evaporó el disolvente. Se lavó el residuo sólido blanco con metanol y CH_{2}Cl_{2} y, a continuación, se secó. Se obtuvieron: 0,54 g de 4-fenil-4-[1-(4-hidroxifenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-1-piperidincarboxilato de etilo (Compuesto 12).

Se prepararon los siguientes compuestos tal como se relacionan en las Tablas 1-5 (todos los puntos de fusión (p.f.) en ºC):

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TABLA 1

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TABLA 2

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TABLA 3

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TABLA 4

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TABLA 5

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C. Ejemplos Farmacológicos

Se examinaron las propiedades farmacológicas para analizar la fijación de los radioligandos, así como ensayos de fijación del GPT\gammaS, de los compuestos escogidos sobre los receptores opioides \delta, \kappa y \mu humanos clonados, expresadas en líneas celulares de mamífero. Se midió la señalización del segundo mensajero sobre preparaciones de mebrana mediante estimulación de la fijación del [^{35}S]GPT\gammaS. En este ensayo funcional se estudiaron las propiedades agonísticas y antagonísticas de los compuestos.

Se usó DPDPE ((D-Pen^{ 2,5})encefalina) como agonista de referencia y naltrindol como antagonista de referencia para el receptor opioide \delta (Malatynska E., Wang Y., Knapp R.J., Santoro G., Li X., Waite S., Roeske W.R., Yamamura H.I.: Human \delta opioid receptor: a stable cell line for functional studies of opioids. NeuroReport 6, 613-616, 1995) y (Portoghese P.S., Sultana M., Takemori A.E.: Naltrindole, a highly selective and potent non-peptide \delta opioid receptor antagonist. Eur. J Pharmacol. 146, 185-186, 1988) y se usaron U69593 y nor-binaltorfimina (n-BNI) como agonista y antagonista de referencia, respectivamente, para el receptor opioide \kappa. Para el receptor opioide \mu se usó morfina como agonista de referencia y naloxona como antagonista de referencia (Alt A., Mansour A., Akil H., Medzihradsky F., Traynor J.R., Woods J.H.: Stimulation of guanosine-5'-O-(3-[^{35}S]thio)triphosphate binding by endogenous opioids acting at a cloned Mu receptor. J Pharmacol. Exp. Ther. 286, 282-288, 1998) y (Smart D., Hirst R.A., Hirota K., Grandy D.K., Lambert D.G.: The effects of recombinant rat \mu-opioid receptor activation in CHO cells on phospholipase C, [Ca^{2+}]I and adenylyl cyclase. Br. J. Pharmacol. 120, 1165-1171, 1997).

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C.1. Materiales y métodos Cultivo celular

Se cultivaron células CHO transfectadas de forma permanente con el receptor opioide \kappa o \mu en un medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM)/mezcla de nutrientes F12 de Ham (proporción 1:1), suplementado con un 10% de suero fetal vacuno inactivado por calor y una solución de antibióticos que contenía 100 UI/ml de penicilina G, 100 \mug/ml de sulfato de estreptomicina, 110 \mug/ml de ácido pirúvico y 300 \mug/ml de L-glutamina. Las células de glioma C6, transfectadas de forma permanente con el receptor opioide \delta, requirieron un medio DMEM enriquecido con un 10% de suero fetal vacuno inactivado por calor y la solución de antibióticos que se ha descrito más
arriba.

Preparación de la mebrana

Las membranas se prepararon como fracciones particuladas totales. Todas las líneas de células se cultivaron sobre placas de Petri de 145 mm hasta obtener una confluencia del 90% y se trataron con butirato de sodio 5 mM 24 horas antes de la recolección. Se eliminó el medio de cultivo y las células se lavaron con tampón fosfato salino helado (PBS sin Ca^{2+} y Mg^{2+}), se retiraron de las placas en tampón Tris-HCl 50 mM, pH 7,4, y se recogieron mediante centrifugación (10 minutos a 16.000 rpm a 4ºC). El aglomerado de células se resuspendió en tampón Tris-HCl 5 mM hipotónico, pH 7,4, y se volvió a homogeneizar mediante un homogeneizador Ultra Turrax. Se centrifugó el homogenado a 18000 rpm durante 20 minutos a 4ºC. Se resuspendió el aglomerado final en tampón Tris-HCl 50 mM, pH 7,4, y se almacenó en fracciones a -70ºC. Se llevó a cabo una determinación de proteínas mediante un ensayo de proteínas Biorad (Bradford) usándose seroalbúmina bovina (BSA) como estándar (Bradford, M.M.: A rapid and sensitive method for the quantification of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical Biochem. 72: 248-254, 1976).

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C.2. Fijación del radioligando

Se realizaron experimentos preliminares de fijación del radioligando para poner de manifiesto las condiciones de ensayo óptimas para estos subtipos de receptores opioides en sus correspondientes membranas de células de
mamífero.

Se llevó a cabo la inhibición competitiva del [^{3}H]DPDPE mediante los compuestos con una concentración del radioligando de 2 nM (K_{d} = 1,7 nM) y diversas concentraciones en singlete de los compuestos, abarcando al menos 3 órdenes de magnitud alrededor del valor pIC_{50}. Para la fijación en competencia a los receptores \kappa y \mu se usaron [^{3}H]U69593 (Kd = 0,4 nM) y [^{3}H]DAMGO (Kd = 0,6 nM) respectivamente a una concentración de 1 nM. Las membranas se descongelaron sobre hielo y se diluyeron en un tampón de Tris-HCl 50 mM, pH 7,4. Para el receptor opioide \delta, este tampón de incubación se suplementó con MgCl_{2} 2 mM, EGTA 1 mM y 0,1% de BSA. Se definió la fijación no específica en presencia de 1 \muM de naltrindol, espiradolina y dextromoramida para los receptores \delta, \kappa y \mu, respectivamente. Se observó que una incubación de 1 hora a 25ºC resultaba óptima para los ensayos de fijación en competencia para los tres subtipos de receptores. Los ensayos se realizaron en un volumen final de 500 \mul. La reacción se terminó mediante filtración rápida en un UniFilter®-96, GF/B® bajo presión reducida usando un recolector Filtermate 196 (Packard). La cantidad de radiactividad ligada en la unidad del filtro se determinó tras secar el filtro y añadir un escintilante (Microscint-O; Packard) mediante recuento en centelleo líquido.

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C.3. Fijación del [^{35}S]GTP\gammaS

Se realizó la determinación de la fijación del [^{35}S]GTP\gammaS a las proteínas G con un procedimiento de Lazareno modificado (Lazareno S.: Measurement of agonist-stimulated[^{35}S]GTP\gammaS binding to cell membranes. Meth. Molec. Biol. 106, 231-243, 1999).

Se optimizaron las condiciones del ensayo en experimentos preliminares de fijación del [^{35}S]GTP\gammaS, lo que dio como resultado la elección de los siguientes tampones: Hepes 20 mM con NaCl 100 mM, conteniendo GDP 3 \muM y MgCl_{2} 1 mM para el receptor opioide \mu de la membrana de las células CHO, conteniendo GDP 10 \muM y MgCl_{2} 1 mM para el receptor opioide \delta de la membrana de las células de glioma C6, y GDP 10 \muM y MgCl_{2} 0,3 mM para el receptor opioide \kappa de la membrana de las células CHO. Las mezclas del ensayo contenían 10 \mug de proteína de membrana. Se añadió una saponina adicional de 10 \mug/ml a las membranas diluidas como detergente para maximizar la penetración del [^{35}S]GTP\gammaS a través de las membranas.

Para comprobar la actividad agonística, se incubaron previamente 175 \mul de membranas diluidas en el tampón descrito más arriba, junto con 25 \mul de tampón y 25 \mul de diversas concentraciones del compuesto en un volumen total de 225 \mul. Para las actividades antagonísticas, los 25 \mul del tampón añadido se reemplazaron con el agonista de referencia para estimular los niveles basales. Para las tres líneas de células se usaron unas concentraciones de 300 nM de DPDPE, U69593 y morfina para sus correspondientes subtipos de receptores. Tras un período de preincubación de 20 minutos a 37ºC, se añadieron 25 \mul de [^{35}S]GTP\gammaS a una concentración final de 0,25 nM y se incubaron de nuevo las mezclas del ensayo durante 20 minutos a 37ºC. Los [^{35}S]GTP\gammaS ligado y libre se separaron mediante filtración rápida en un UniFilter®-96, GF/B® bajo presión reducida usando un recolector Filtermate 196 (Packard). La cantidad de radiactividad ligada en la unidad del filtro se determinó tras secar el filtro y añadir un escintilante (Microscint-O; Packard) mediante recuento en centelleo líquido.

La fijación basal del [^{35}S]GTP\gammaS se midió en ausencia de compuestos. La estimulación mediante el agonista se calculó como el incremento de porcentaje de por encima de los niveles basales. Se analizaron mediante regresión no lineal, usando el programa GraphPad Prism, las curvas sigmoides de respuesta a la concentración del agonista para identificar el incremento en la fijación del [^{35}S]GTP\gammaS, y las de inhibición del antagonista para identificar la inhibición de la fijación de referencia del [^{35}S]GTP\gammaS estimulada por el agonista. Se obtuvieron datos a partir de experimentos independientes y los diferentes puntos de concentración se calcularon por duplicado.

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C.4. Resultados

Todos los compuestos de acuerdo con la invención mostraron un valor pIC_{50} de al menos 6 para el receptor opioide delta y un valor pIC_{50} de 6 o menos para cualquiera de los receptores mu y kappa.

Los compuestos que se relacionan en la Tabla 6 mostraron un valor pIC_{50} entre 7 y 8 para el recpetor opioide delta y un valor pIC_{50} de 6 o menos para cualquiera de los receptores mu y kappa.

Los compuestos que se relacionan en la Tabla 7 mostraron un valor pIC_{50} por encima de 8 para el recpetor opioide delta y un valor pIC_{50} de 6 o menos para cualquiera de los receptores mu y kappa. La selectividad por el receptor opiode delta respecto al receptor opioide mu llega a ser de unas 600 veces.

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TABLA 6 Valores pIC_{50} para el test del agonista del receptor opioide delta

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TABLA 7 Resultados del test de fijación agonista receptor (pIC_{50}) y fijación transporte señal (pIC_{50}) (n.d.: no determinado)

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D. Experimentos clínicos: Isquemia cardíaca D.1. Modelo de Langendorff en roedores Compuestos probados

Se probaron los compuestos 1, 24 y 25.

Modelo

Se disecciona rápidamente un corazón de roedor, se une a través de la aorta a una cánula y se perfunde con un tampón fisiológico (tampón Krebs-Henseleit modificado: NaCl 118 mmol/l, KCl 4,7 mmol/l, MgSO_{4} 1,2 mmol/l, KH_{2}PO_{4} 1,2 mmol/l, CaCl_{2} 1,8 mmol/l, NaHCO_{3} 23 mmol/l, glucosa 11 mmol/l) sin sangre a una presión de perfusión de 80 mmHg. Se disuelve oxígeno en el tampón fisiológico. El corazón se hace latir a un ritmo auricular de 350 pulsaciones por minuto. Se inserta en el ventrículo izquierdo un balón que puede estar opcionalmente lleno (precarga de ajuste). Se miden la presión diastólica y la presión desarrollada, así como la tasa máxima de incremento de desarrollo de la presión como una medida de la contractilidad (inotropismo) y la tasa mínima de disminución de la presión como una medida de la relajación. Las ventajas de este modelo son: el corazón está aislado y se estudia en circunstancias controladas sin interacción con otros órganos, y el método es razonablemente rápido y económico. Las desventajas son: no se perfunde sangre, tan solo oxígeno disuelto, por lo tanto, mayores velocidades de flujo coronario con vasodilatación considerable del sistema coronario; un sistema cerrado sin metabolismo y sin interacción con otros órganos y un modelo animal pequeño, relativamente alejado de la realidad clínica.

Protocolo

El período de estudio de la isquemia es de 20 minutos. Las mediciones tras el período de estudio de la isquemia (fase de reperfusión) se realizan siempre durante 40 minutos. Las mediciones anteriores al período de estudio de la isquemia se realizan durante 30 minutos y se llevan a cabo después de la estabilización. En el grupo con precondicionamiento isquémico, durante esos 30 minutos se mide lo siguiente: 10 minutos en condiciones basales, 5 minutos isquemia, 5 minutos reperfusión, 5 minutos isquemia y 5 minutos reperfusión. En el grupo de los compuestos de acuerdo con la invención (4 \mug/500 ml de solución tampón), hay en primer lugar 15 minutos en condiciones basales, seguidos por 15 minutos de tratamiento. Consecuentemente, todo coincide en el tiempo.

Resultados

La recuperación de la función contráctil del corazón aislado tratado con los compuestos de acuerdo con la invención es al menos tan buena como en el grupo con precondicionamiento isquémico. Sin embargo, es necesario advertir que la administración de los compuestos de acuerdo con la invención produce efectos inotrópicos negativos en el corazón, como se pone de manifiesto por el incremento de la presión diastólica final en el ventrículo izquierdo y la disminución de la presión desarrollada y en la dP/dt_{max}. Esto puede estar relacionado con el disolvente ciclodextrina, puesto que se observó el mismo efecto en 2 experimentos en los que se administró la misma concentración de ciclodextrina. No obstante, la recuperación funcional tras el período de estudio de la isquemia no resultó mejor comparada con la del grupo de control. Esto indica que no es el efecto inotrópico negativo previo a la isquemia lo que es cardioprotector.

El análisis estadístico muestra un cambio significativo entre el grupo de control y el grupo tratado con compuestos de acuerdo con la invención por lo que respecta a la presión desarrollada, la presión diastólica final, dP/dt_{max} y dP/dt_{min}, con p<0,000001 (véanse la Figura 1 y la Figura 2).

Durante la reperfusión se produjo fibrilación ventricular en un número de roedores significativamente más pequeño en el grupo tratado con los compuestos de acuerdo con la invención en comparación con el grupo de control, así como también en comparación con el grupo con precondicionamiento isquémico. Además, el número de episodios de fibrilación ventricular resultó más pequeño en el grupo tratado con los compuestos de acuerdo con la invención en comparación con los otros grupos (Tabla 8).

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TABLA 8 Resultados de los experimentos Langendorff en roedores

- IC: Contractura isquémica (mmHg).

- V_{fib}: Número de fibrilaciones ventriculares durante la reperfusión.

- EDP: Grado de normalizazión de la EDP durante la reperfusión: 0 = recuperación hasta la EDP basal; +...mmHg
{}\hskip0,7cm = cantidad de mmHg por encima de la EDP basal.

- Recup: % de recuperación de la presión desarrollada al final de la reperfusión.

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D.2 Modelo ovino

Para superar las debilidades del modelo anterior se usó un modelo complejo ovino in vivo, en el que no obstante existió un buen control sobre los efectos cardíacos.

Compuestos probados

Se probó el compuesto 1.

Modelo

El modelo consiste en una oveja anestesiada con quetamina e isoflurano. La circulación extracorpórea se conecta mediante canulación venosa de las dos venas cavas y canulación arterial por medio de la carótida. Una cánula adicional con medidor de flujo en el ventrículo derecho permite observar el caudal en las arterias coronarias. Además de las mediciones del ritmo cardíaco y de la presión sanguínea arterial, se mide la presión instantánea del ventrículo izquierdo, así como los volúmenes del ventrículo izquierdo, por medio de un catéter de conductancia. Hay también en la cánula arterial del corazón artificial un conducto lateral que conduce a la arteria pulmonar. Por medio de esta vía es posible modular la precarga del ventrículo izquierdo de una forma perfectamente controlada para obtener medidas de la contractilidad del ventrículo izquierdo que no dependan de la carga, antes y después del período de estudio de la isquemia. También se midió el consumo de oxígeno cardíaco, así como la perfusión regional, con la ayuda de microesferas coloreadas.

La ventaja de este modelo es que se trata de un modelo de animal grande, que usa circulación extracorpórea, en un modelo metabólicamente activo, posiblemente con la presencia de otros efectos no cardíacos, en circunstancias cardíacas bien controladas y en el que el corazón se perfunde con sangre. La naturaleza técnicamente difícil del modelo se considera una desventaja.

Protocolo

El período de estudio de la isquemia fue de 30 minutos mientras el corazón permanecía en estado normotérmico y se descargaba completamente mediante la circulación extracorpórea y ventilación de los ventrículos. El grupo de control se hizo coincidir en el tiempo con los otros grupos. El grupo con precondicionamiento isquémico se sometió a 3 intervalos de 5 minutos de isquemia de precondicionamiento con intervalos de reperfusión de 5 minutos. En los tres grupos, se inició la circulación extracorpórea 30 minutos antes de que se impusiera el período de estudio de la isquemia. La circulación extracorpórea se detuvo 40 minutos después de finalizar el período de estudio de la isquemia. El Compuesto 1 (78 mg/20 ml) se administró 15 minutos antes del comienzo del período de estudio de la isquemia en cinco experimentos técnicamente exitosos, administrándose 10 ml de la solución en uno de los experimentos y 100 ml en los otros cuatro. Aquí sólo se tratarán estos cuatro. En los otros grupos se procesan siempre 7 experimentos. Antes de cada medición de las proporciones entre presión y volumen en el ventrículo izquierdo el sistema se cambió al modelo de bypass en el corazón derecho, en el que el flujo venoso se desvia hacia la circulación extracorpórea a través de las venas cavas y la sangre se hace retornar al animal a través de la arteria pulmonar. Esto se hizo siempre en condiciones basales, inmediatamente después del precondicionamiento isquémico o la administración del Compuesto 1, inmediatamente antes de que se impusiera el período de estudio de la isquemia, y 40, 70 y 100 minutos después de la terminación del período de estudio de la isquemia.

Resultados Parámetros convencionales

No se encontraron diferencias significativas entre los grupos en relación con la presión promedio de la sangre. La administración del Compuesto 1 tampoco dió como resultado un cambio significativo en la presión sanguínea. Hay que señalar que el Compuesto 1 se administró en el período de circulación extracorpórea, lo que obviamente afecta a la presión sanguínea.

No se observaron diferencias significativas en la presión auricular izquierda, aunque había una tendencia a que la presión auricular izquierda fuera ligeramente más alta en el grupo de control en comparación con los otros dos.

Lo mismo sucede con el flujo cardíaco después de la reperfusión, con una tendencia a que el flujo cardíaco sea más alto en el grupo con precondicionamiento isquémico y en grupo tratado con el Compuesto 1.

Relaciones presión-volumen

Se estudiaron las relaciones presión-volumen en el ventrículo izquierdo, en el grupo de control, el grupo con precondicionamiento isquémico y el grupo tratado con el Compuesto 1.

Por lo que concierne a los parámetros independientes de la carga, se estudió el trabajo sistólico recuperable en la carga (PRSW, M_{SW}), cuyos resultados se muestran en la Figura 3. El índice PRSW indica la relación entre el "trabajo sistólico" y el volumen diastólico final. El trabajo sistólico es el trabajo mecánico efectivo realizado por el corazón para expulsar la sangre. El índice PRSW es mayor cuando se realiza el mismo trabajo mecánico externo a un volumen diastólico final inferior (por lo tanto, una longitud de sarcómera menor), que es la definición del estado
contráctil.

El índice PRSW es significativamente mejor en el grupo con precondicionamiento isquémico y en el grupo tratado con el Compuesto 1 en comparación con el grupo de control tras 70 y 100 minutos de reperfusión y se aproxima al valor en condiciones basales. Por lo tanto, el precondicionamiento isquémico y la administración del Compuesto 1 dan como resultado una mejor recuperación del estado contráctil cardíaco tras 30 minutos de isquemia en condiciones normotérmicas durante las cuales el ventrículo es descargado.

Tau es una medida de la relajación ventricular. Cuanto más pequeño es el valor de tau, más pronto se produce la relajación ventricular. Esta medida es importante porque es conocido que la función diastólica del ventrículo es aún más susceptible a la isquemia que la función sistólica. Tau es significativamente menor en el grupo tratado con el Compuesto 1 en comparación con el grupo de control 70 y 100 minutos después de finalizar el período de estudio de la isquemia y, también, significativamente menor en el grupo con precondicionamiento isquémico en comparación con el grupo de control tras 100 minutos de reperfusión (Figura 4).

El parámetro SW/PVA es una medida de la eficacia con la que se usa el trabajo mecánico cardíaco. El trabajo sistólico es el trabajo mecánico externo y PVA es la energía mecánica producida por el corazón durante el trabajo sistólico, pero también la energía potencial necesaria para conseguir un aumento de presión a un volumen específico. Hasta el momento, este PVA (presión-volumen-área) es el parámetro mecánico con la mejor correlación respecto al consumo de oxígeno. Cuanto mayor es la relación SW/PVA, más se usa el trabajo ventricular como trabajo externo para bombear la sangre. El grupo de control tiene una relación SW/PVA significativamente menor en comparación tanto con el grupo con precondicionamiento isquémico como con el grupo tratado con el Compuesto 1 40, 70 y 100 minutos después de finalizar el período de estudio de la isquemia (Figura 5).

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La eficacia contráctil, que es una medida de la eficacia con la que el consumo de O_{2} se convierte en PVA, o energía mecánica, es significativamente mayor en el grupo con precondicionamiento isquémico (44,5%) y en el grupo tratado con el Compuesto 1 (46,7%) en comparación con el grupo de control (32,8%, p<0,001).

Como ventaja adicional de los compuestos de acuerdo con la invención hay que mencionar que el corazón se nota más blando en el grupo tratado con el Compuesto 1 en comparación tanto con el grupo de control como con el grupo con precondicionamiento isquémico.

En resumen, como mecanismo cardioprotector, los compuestos de acuerdo con la invención son al menos tan efectivos como el precondicionamiento isquémico convencional frente a una isquemia miocárdica normotérmica de 30 minutos mientras se mantiene circulación extracorpórea. Mejora la contractilidad y la función diastólica cardíaca. La eficacia energética cardíaca, tanto en consumo de O_{2} para el desarrollo de PVA como en la conversión de PVA en SW como trabajo externo, también es mayor. La protección farmacológica con los compuestos de acuerdo con la invención es preferible respecto al precondicionamiento isquémico, puesto que aquellos ofrecen la misma eficacia que el precondicionamiento isquémico, implica menos riesgos (pinzamiento de la aorta, conmoción moderada) y requiere menos tiempo. Así mismo, en comparación con las concentraciones de DADLE que se usan en experimentos similares, los compuestos de acuerdo con la invención se administran en concentraciones inferiores en al menos un orden de magnitud.

D. Experimentos clínicos: Isquemia cerebral

La reducción de la isquemia cerebral o la acción cerebroprotectora de los compuestos de acuerdo con la invención se pudieron determinar mediante un modelo de isquemia cerebral anterior temporal en roedores en el que la extensión del infarto se determina tras la oclusión de la arteria cerebral media (MCA), por ejemplo mediante sutura. Dicho modelo se describe en el documento WO 96/27380. Así mismo, para evaluar las repercusiones funcionales tras la isquemia se pueden realizar algunos tests de comportamiento, como se divulga en el documento WO 96/27380.

Descripción de la figuras

Figura 1: Presión diastólica final (EDP) y presión sistólica pico (PSP) para los 3 grupos. 41 : EDP para el grupo de control; 42 : EDP para el grupo con precondicionamiento isquémico; 43 : EDP para el grupo tratado con el Compuesto 1; 44 : PSP para el grupo de control; 45 : PSP para el grupo con precondicionamiento isquémico; 46 : PSP para el grupo tratado con el Compuesto 1.

Figura 2: dP/dt_{max} en los tres grupos. 41 : Grupo de control; 42 : Grupo precondicionado isquémicamente; 43 : Grupo tratado con el Compuesto 1.

Figura 3: Relaciones presión-volumen en el ventrículo izquierdo para los 3 grupos. El parámetro estudiado es el trabajo sistólico recuperable en la carga (M_{SW}). A: Grupo de control; B: Grupo precondicionado isquémicamente; C: Grupo tratado con el Compuesto 1.

Figura 4: Relajación ventricular para los 3 grupos. El parámetro estudiado es Tau. A: Grupo de control; B: Grupo precondicionado isquémicamente; C: Grupo tratado con el Compuesto 1.

Figura 5: SW/PVA para los 3 grupos. A: Grupo de control; B: Grupo precondicionado isquémicamente; C: Grupo tratado con el Compuesto 1.

Claims

1. Uso de un compuesto de Fórmula (I), una sal de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptable, una forma estereoquímicamente isomérica del mismo, una forma tautoméra del mismo y una forma N-óxido del mismo, para la fabricación de un medicamento para reducir el daño isquémico a un órgano en un mamífero

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en el que:

A=B se escoge del grupo de C=O, C=N-R^{6}, donde R^{6} es hidrógeno o ciano, C=S, S=O, SO_{2} y C=CR^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno de forma independiente, hidrógeno, nitro o alquilo;

X es un enlace covalente, -CH_{2}- o -CH_{2}CH_{2}-;

R^{1} es hidrógeno, alquiloxi, alquilcarboniloxi, Ar-oxi, Het-oxi, Ar-carboniloxi, Het-carboniloxi, Ar-alquiloxi, Het-alquiloxi, alquilo, polihaloalquilo, alquiloxialquilo, Ar-alquilo, Het-alquilo, Ar, Het, tio, alquiltio, Ar-tio, Het-tio, o NR^{9}R^{10}, en donde R^{9} y R^{10} son, cada uno de forma independiente, hidrógeno, alquilo, Ar, Ar-alquilo, Het, Het-alquilo, Ar-carbonilo, Het-carbonilo o alquiloxicarbonilalquilo; o A=B y R^{1} juntos forman un radical Het^{2} o Het^{3} carbocíclico o heterocíclico, semiaromático o aromático, opcionalmente sustituido;

R^{3} es alquilo, Ar, Ar-alquilo, Ar-alquenilo, Ar-carbonilo, Het, Het-alquilo, Het-carbonilo, o Het-alquenilo;

p es un entero igual a cero, 1, 2 ó 3;

alquilo es un radical hidrocarburo saturado, lineal o ramificado que tiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono; o es un radical hidrocarburo saturado cíclico (cicloalquilo) que tiene desde 3 hasta 7 átomos de carbono; o es un radical hidrocarburo saturado cíclico que tiene desde 3 hasta 7 átomos de carbono, unido a un radical hidrocarburo saturado, lineal o ramificado que tiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono; en donde cada átomo de carbono puede estar opcionalmente sustituido con amino, nitro, tio, hidroxi, oxo, ciano, formilo o carboxi;

alquenilo es un radical alquilo que tiene uno o más enlaces dobles;

Ar es un homociclo escogido del grupo de fenilo y naftilo, cada uno sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes, siendo escogido cada sustituyente de forma independiente del grupo de hidroxi, alquiloxi, feniloxi, alquilcarboniloxi, fenilcarboniloxi, polihaloalquiloxi, halo, ciano, alquilo, polihaloalquilo, alquiloxialquilo, formilo, haloformilo, carboxi, alquilcarbonilo, alquiloxicarbonilo, aminocarbonilo, mono o dialquilaminocarbonilo, fenilalquilo, fenilo, nitro, amino, mono o dialquil-amino, tio, alquiltio o SO_{2}-CH_{3};

halo es un sustituyente que se escoge del grupo de flúor, cloro, bromo y yodo;

polihaloalquilo es un radical hidrocarburo saturado, lineal o ramificado que tiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono, o un radical hidrocarburo saturado cíclico que tiene desde 3 hasta 7 átomos de carbono, en donde uno o más átomos de carbono están sustituidos con uno o más átomos halo;

Het es un radical heterocíclico escogido del grupo de Het^{1}, Het^{2} y Het^{3};

Het^{1} es un radical heterocíclico monocíclico alifático escogido del grupo de pirrolidinilo, dioxolilo, imidazolidinilo, pirazolidinilo, piperidinilo, dioxilo, morfolinilo, ditianilo, tiomorfolinilo, piperacinilo y tetrahidrofuranilo;

Het^{2} es un radical heterocíclico monocíclico semiaromático escogido del grupo de 2H-pirrolilo, pirrolinilo, imidazolinilo y pirazolinilo;

Het^{3} es un radical heterocíclico monocíclico aromático escogido del grupo de pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, furanilo, tienilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, piridinilo, pirimidinilo, piracinilo, piridiacinilo y triacinilo; o un radical heterocíclico bicíclico aromático escogido del grupo de quinolinilo, quinoxalinilo, indolilo, bencimidazolilo, benzoxazolilo, bencisoxazolilo, benzotiazolilo, bencisotiazolilo, benzofuranilo y benzotienilo; cada radical Het^{1}, Het^{2} y Het^{3} heterocíclico monocíclico y bicíclico puede estar opcionalmente sustituido sobre un átomo de carbono y/o heteroátomo con halo, hidroxi, alquiloxi, alquilo, Ar, Ar-alquilo o piridinilo.

2. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque R^{1} se escoge del grupo de alquiloxi, Ar-alquiloxi, alquilo, polihaloalquilo, alquiloxialquilo, Ar-alquilo, Het-alquilo, Ar, piperacinilo, pirrolilo, tiazolilo, pirrolidinilo, y NR^{9}R^{10}, en donde R^{9} y R^{10} son, cada uno de forma independiente, hidrógeno, alquilo, Ar, Ar-alquilo, piridinilo o alquiloxicarbonilalquilo.

3. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque A=B y R^{1} juntos forman un radical escogido del grupo de Het^{2} o Het^{3}.

4. Uso de acuerdo con la reivindicación 3, caracterizado porque A=B y R^{1} juntos forman un radical escogido del grupo de benzoxazolilo, tiazolilo, benzotiazolilo, bencimidazolilo y pirimidinilo.

5. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque X es un enlace covalente.

6. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque R^{2} es alquiloxi o halo.

7. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque R^{3} se escoge del grupo de fenilalquilo y naftilo, cada uno sustituido de forma independiente con al menos un sustituyente escogido del grupo de halo, alquiloxicarbonilo, hidroxi, alquiloxi y dialquilaminocarbonilo.

8. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que A=B es C=O o SO_{2}, R^{1} es alquiloxi, alquiloxialquilo, Ar o NR^{9}R^{10}, en donde R^{9} y R^{10} son cada uno de forma independiente hidrógeno o Ar; o A=B y R^{1} juntos forman un radical benzoxazolilo; p es cero, R^{3} es bencilo sustituido opcionalmente con hidroxi, alquilo o alquiloxicarbonilo, y R^{4} y R^{5} son cada uno hidrógeno.

9. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto de acuerdo con la Fórmula (I) se escoge del grupo de:

1-etoxicarbonil-4-fenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina;

1-propiloxicarbonil-4-fenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina;

1-etoxicarbonil-4-fenil-4-[1-[(4-hidroxifenil)metil]-1H-imidazol-2-il]-piperidina;

1-etoxicarbonil-4-fenil-4-[1-(1-feniletil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina;

1-isopropiloxicarbonil-4-fenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina;

1-etoxicarbonil-4-fenil-4-[1-[[4-(metoxicarbonil)fenil]metil]-1H-imidazol-2-il]-piperidina;

1-benzoil-4-fenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina;

1-(metoxiacetil)-4-fenil-4-[1-(1-feniletil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina;

4-[[2-(1-benzoil-4-fenil-4-piperidinil)-1H-imidazol-1-il]metil]-metilbenzoato;

4-[[2-[1-(2-benzoxazolil)-4-fenil-4-piperidinil]-1H-imidazol-1-il]metil]-metilbenzoato;

1-benzoil-4-fenil-4-[1-(1-feniletil)-1H-imidazol-2-il]-piperidina;

1-etoxicarbonil-4-fenil-4-[1-[1-[4-(etoxicarbonil)fenil]etil]-1H-imidazol-2-il]-piperidina; y

N,4-difenil-4-[1-(fenilmetil)-1H-imidazol-2-il]-1-piperidinsulfonamida.

10. Uso del ácido [4-(1-bencil-1H-imidazol-2-il)-4-fenil-piperidin-1-il]-acético, una sal de adición de ácido o base del mismo farmacéuticamente aceptable, una forma estereoquímicamente isomérica del mismo, una forma tautómera del mismo y una forma N-óxido del mismo, para la fabricación de un medicamento para reducir el daño isquémico a un órgano en un mamífero.

11. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, caracterizado porque el órgano es un corazón, un cerebro, un hígado, un pulmón o un riñón, y el mamífero es un humano.

12. Uso de un compuesto como se ha descrito en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para la fabricación de un medicamento para inducir un efecto cardioprotector en un mamífero.

13. Uso de acuerdo con la reivindicación 12, caracterizado porque el mamífero es un humano.

14. Composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un compuesto como se ha descrito en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, y al menos un segundo agente terapéutico, que comprende un agente antitrombótico y/o un factor de crecimiento angiogénico.

15. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 14, en la que el agente antitrombótico es un antagonista de la glucoproteína IIb/Ixia, un inhibidor de la trombina, un inhibidor del factor Xa, un inhibidor de la vía del factor tisular, un antagonista del receptor de la trombina o una heparina de bajo peso molecular.

16. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 14, en la que el factor de crecimiento angiogénico es un factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF).

17. Composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 16, en la que la composición está en forma de una solución cardioplégica.

18. Uso de una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 17 para la fabricación de un medicamento para reducir el daño isquémico a un órgano en un mamífero.

19. Uso de acuerdo con la reivindicación 18, caracterizado porque el órgano es un corazón, un cerebro, un hígado, un pulmón o un riñón, y el mamífero es un humano.

20. Uso de una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 17 para la fabricación de un medicamento para inducir un efecto cardioprotector en un mamífero.

21. Uso de una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 17 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un mamífero que ha experimentado un episodio isquémico.

22. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 20 y 21, caracterizado porque el mamífero es un humano.