ES2278345T3

ES2278345T3 - Imidazo-pirimidinas y triazolo-pirimidinas: ligandos de receptores de benzodiazepinas.

Info

Publication number: ES2278345T3
Application number: ES04779031T
Authority: ES
Inventors: Linghong Xie; Bingsong Han; Yuelian Xu; George Maynard; Bertrand L. Chenard; Kenneth Shaw; Yang Gao
Original assignee: Neurogen Corp
Current assignee: Neurogen Corp
Priority date: 2003-07-25
Filing date: 2004-07-23
Publication date: 2007-08-01
Anticipated expiration: 2024-07-23
Also published as: WO2005012306A3; WO2005012306A2; EP1648899A2; DK1648899T3; US7271170B2; PL1648899T3; EP1648899B1; AU2004261591A1; IL173265A0; US20050038043A1; JP2007500130A; KR20060098425A; ATE350382T1; MXPA06000887A; DE602004004143D1; NZ544262A; PT1648899E; US20080139580A1; DE602004004143T2; AR045117A1

Abstract

Un compuesto de la **fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptables del mismo, en don- de: Z1 es nitrógeno o CR1, Z2 es nitrógeno o CR2, y Z3 es nitrógeno o CR3, tal que al menos uno, pero no más de dos, de Z1, Z2 y Z3 son nitrógeno; R1, R2, R3 y R4 se seleccionan cada uno independiente-mente de: (a) hidrógeno, halógeno, nitro y ciano; y (b) grupos de la fórmula, en donde: L es un enlace o alquileno C1-C8; G es un enlace, N(RB), O, C(=O), C(=O)O, C(=O)N(RB), N(RB)C(=O), S(O)m, CH2C(=O), S(O)mN(RB) o N(RB)S(O)m; en donde m es 0, 1 ó 2; y RA y cada RB se seleccionan independientemente de: (i) hidrógeno; y (ii) alquilo C1-C8, alquenilo C2-C8, alquinilo C2-C8, (cicloalquil C3-C8)alquilo C0-C4, (hete-rocicloalquil de 3 a 7 miembros)alquilo C0-C4, (aril C6-C10)alquilo C0-C2 o (heteroaril de 5 a 10 miembros)-alquilo C0-C2, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 4 sustitu-yentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, al-quilo C1-C4, alcoxi C1-C4, alcanoílo C1-C4, mo-no- y di(alquil C1-C4)amino, haloalquilo C1-C4 y haloalcoxi C1-C4.

Description

Imidazo-pirimidinas y triazolo-pirimidinas: ligandos de receptores de benzodiazepinas.

Campo de la invención

La presente invención se refiere generalmente a imidazopirimidinas y triazolopirimidinas que tienen propiedades farmacológicas útiles. La invención se refiere adicionalmente a composiciones farmacéuticas que comprenden tales compuestos y al uso de tales compuestos en el tratamiento de enfermedades del sistema nervioso central
(CNS).

Antecedentes de la invención

La superfamilia de receptores GABA_{A} distribuido representa una de las clases de receptores a través de los cuales actúa el importante neurotransmisor inhibidor ácido \gamma-amino-butírico (GABA). Distribuido ampliamente, aunque de modo desigual, en todo el cerebro de los mamíferos, GABA media muchas de sus acciones por interacción con un complejo de proteínas denominado el receptor GABA_{A}, que causa alteración en la conductancia del cloruro y la polarización de la membrana. Cierto número de fármacos, que incluyen las benzodiazepinas ansiolíticas y sedantes, se fijan también a este receptor. El receptor GABA_{A} comprende un canal de cloruro que se abre en respuesta a GABA, permitiendo que el cloruro entre en la célula. Esto, a su vez, produce una ralentización de la actividad neuronal por hiperpolarización del potencial de membrana de la célula.

Los receptores GABA_{A} se componen de 5 subunidades proteínicas. Cierto número de cDNAs para estas subunidades de receptores GABA_{A} se han clonado y se han determinado sus estructuras primarias. Si bien estas subunidades comparten un motivo básico de 4 hélices que abrazan la membrana, existe suficiente diversidad de secuencia para clasificarlas en varios grupos. Hasta la fecha, se han identificado al menos seis subunidades \alpha, tres \beta, tres \gamma, una \varepsilon, una \delta, y dos \rho han. Los receptores nativos GABA_{A} se componen típicamente de dos subunidades \alpha, dos subunidades \beta y una subunidad \gamma. Diversas líneas de evidencia (tales como distribución de mensajes, localización en el genoma y resultados de estudios bioquímicos) sugieren que las combinaciones principales de receptores que existen naturalmente son \alpha_{1}\beta_{2}\gamma_{2}, \alpha_{2}\beta_{3}\gamma_{2}, \alpha_{3}\beta_{3}\gamma_{2} y \alpha_{5}\beta_{3}\gamma_{2}.

Los sitios de fijación de los receptores GABA_{A} para GABA (dos por complejo receptor) están formados por aminoácidos de las subunidades \alpha y \beta. Los aminoácidos de las subunidades \alpha y \gamma forman juntos un sitio de las benzodiazepinas por receptor, en el cual ejercen su actividad farmacológica las benzodiazepinas. Adicionalmente, el receptor GABA_{A} contiene sitios de interacción para varias otras clases de fármacos. Éstas incluyen un sitio de fijación de esteroides, un sitio de picrotoxinas y un sitio de barbituratos. El sitio de las benzodiazepinas del receptor GABA_{A} es un sitio distinto en el complejo receptor que no se solapa con los sitios de interacción para otras clases de fármacos o GABA.

En un mecanismo alostérico clásico, la fijación de un fármaco al sitio de las benzodiazepinas altera la afinidad del receptor de GABA para GABA. Las benzodiazepinas y fármacos afines que mejoran la capacidad de GABA para abrir los canales del receptor GABA_{A} se conocen como agonistas o agonistas parciales, dependiendo del nivel de intensificación de GABA. Otras clases de fármacos, tales como derivados de \beta-carbolina, que ocupan el mismo sitio y modulan negativamente la acción de GABA se denominan agonistas inversos. Aquellos compuestos que ocupan el mismo sitio, y sin embargo tienen poco o ningún efecto sobre la actividad de GABA, pueden bloquear la acción de los agonistas o agonistas inversos y se hace por ello referencia a los mismos como antagonistas de los receptores
GABA_{A}.

Los importantes efectos moduladores alostéricos de los fármacos que actúan en el sitio de las benzodiazepinas fueron reconocidos tempranamente, y la distribución de las actividades en subtipos diferentes de receptores ha sido un área de descubrimientos farmacológicos intensos. Se sabe que los agonistas que actúan en el sitio de las benzodiazepinas exhiben efectos ansiolíticos, sedantes, anticonvulsivos e hipnóticos, mientras que los compuestos que actúan como agonistas inversos en este sitio provocan efectos ansiogénicos, mejoradores de la cognición y proconvul-
sivos.

Si bien las benzodiazepinas han gozado de uso farmacéutico prolongado, estos compuestos pueden exhibir cierto número de efectos secundarios indeseables. De acuerdo con ello, existe necesidad en la técnica de agentes terapéuticos adicionales que modulen la activación y/o actividad de los receptores GABA_{A}. La presente invención satisface esta necesidad, y proporciona ventajas afines adicionales.

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Sumario de la invención

La presente invención proporciona imidazopirimidinas y triazolopirimidinas de Fórmula I:

1

así como sales farmacéuticamente aceptables de tales compuestos, en donde:

Z_{1} es nitrógeno o CR_{1}; Z_{2} es nitrógeno o CR_{2}; Z_{3} es nitrógeno o CR_{3}; y al menos uno (pero no más de dos) de Z_{1}, Z_{2} y Z_{3} son nitrógeno;

R_{1}, R_{2}, R_{3} y R_{4} se seleccionan cada uno independientemente de:

(a) hidrógeno, halógeno, nitro y ciano; y

(b) grupos de la fórmula:

2

en donde:

: L es un enlace o alquileno C_{1}-C_{8};

: G es un enlace, N(R_{B}) (es decir, 1000), O, C(=o) (es decir, 1001), C(=O)O (es decir, 1002), C(=O)N(R_{B}) (es decir, 1003), N(R_{B}C(=O) (es decir, 1004), S(O)_{m} (es decir, -S-, 1005 o 1006), CH_{2}C(=O), S(O)_{m}NR_{B} (v.g., 1007) o N(R_{B})S(O)_{m} (v.g., 1008); en donde m es 0, 1 o 2; y

: R_{A} y cada R_{B} se seleccionan independientemente de:

(i): hidrógeno; y

(ii): alquilo C_{1}-C_{8}, alquenilo C_{2}-C_{8}, alquinilo C_{2}-C_{8}, (cicloalquil C_{3}-C_{8})alquilo C_{0}-C_{4}, heterocicloalquil de 3 a 7 miembros)-alquilo C_{0}-C_{4}, (aril C_{6}-C_{10})alquilo C_{0}-C_{2} y (heteroaril de 5 a 10 miembros)alquilo C_{0}-C_{2}, dada uno de los cuales está sustituido opcionalmente, y está sustituido preferiblemente con 0 a 4 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, nitro, ciano; amino, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, alcanoílo C_{1}-C_{4}, mono- y di(alquil C_{1}-C_{4})amino, haloalquilo C_{1}-C_{4} y haloalcoxi C_{1}-C_{4};

: R_{5} es:

(a): hidrógeno, halógeno o ciano; o

(b): alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, o mono- o di-(alquil C_{1}-C_{4})-amino, cada uno de los cuales está sustituido opcionalmente, y está sustituido preferiblemente con 0 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, alcoxi C_{1}-C_{4}, haloalquilo C_{1}-C_{2}, haloalcoxi C_{1}-C_{2}, mono- y di-(alquil C_{1}-C_{4})amino, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, fenilo, fenil-alcoxi C_{1}-C_{4} y heteroarilo de 5 ó 6 miembros;

: R_{6} y R_{7} son independientemente hidrógeno, metilo, etilo o halógeno;

: R_{8} representa 0, 1 ó 2 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, mono- y di-(alquil C_{1}-C_{4})amino, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, haloalquilo C_{1}-C_{2}, y haloalcoxi C_{1}-C_{2}; y

: Ar representa fenilo, naftilo o heteroarilo de 5 a 10 miembros, cada uno de los cuales está sustituido opcionalmente, y está sustituido preferentemente con 0 a 4 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, alquilo C_{1}-C_{8}, alquenilo C_{2}-C_{8}, alquinilo C_{2}-C_{8}, alcoxi C_{1}-C_{8}, (cicloalquil C_{3}-C_{7})alquilo C_{0}-C_{4}, (cicloalquil C_{3}-C_{7})alcoxi C_{1}-C_{4}, alquil C_{2}-C_{8}-éter, alcanona C_{1}-C_{8}, alcanoílo C_{1}-C_{8}, (heterocicloalquil de 3 a 7 miembros) alquilo C_{0}-C_{4}, haloalquilo C_{1}-C_{8}, haloalcoxi C_{1}-C_{8}, oxo, hidroxialquilo C_{1}-C_{8}, aminoalquilo C_{1}-C_{8}, y mono- y di-(alquil C_{1}-C_{8})amino-alquilo C_{0}-C_{8}.

En ciertos aspectos, tales compuestos son moduladores del receptor GABA_{A} proporcionado en esta memoria que modulan la activación del receptor GABA_{A} y/o la transducción de señales mediadas por el receptor GABA_{A}. Tales moduladores del receptor GABA_{A} son preferiblemente ligandos del receptor GABA_{A} de alta afinidad y/o alta selectividad, y actúan como agonistas, agonistas inversos o antagonistas de los receptores GABA_{A}, tales como receptores GABA_{A} humanos. Como tales, aquéllos son útiles en el tratamiento de diversos trastornos del CNS.

En aspectos adicionales, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden uno o más compuestos o sales como se ha descrito arriba en combinación con un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable. Se proporcionan también preparaciones farmacéuticas empaquetadas, que comprenden una composición farmacéutica de este tipo en un envase e instrucciones para uso de la composición a fin de tratar un paciente que sufre un trastorno del CNS tal como ansiedad, depresión, un trastorno del sueño, trastorno de déficit de atención, esquizofrenia, o un trastorno cognitivo tal como pérdida de la memoria inmediata o demencia de Alzheimer.

La presente invención proporciona adicionalmente, en otros aspectos, métodos para el tratamiento de pacientes que sufren ciertos trastornos del CNS. Tales como ansiedad, depresión, un trastorno del sueño, trastorno de déficit de atención, esquizofrenia o un trastorno cognitivo, que comprende administrar a un paciente que se encuentra en necesidad de dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto como se ha descrito arriba. Se proporcionan también métodos para mejorar la memoria inmediata en un paciente, que comprenden administrar a un paciente que se encuentra en necesidad de dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto como se ha descrito arriba. La presente invención abarca el tratamiento de humanos, animales domésticos de compañía (mascotas)
o cabezas de ganado que padecen ciertos trastornos del CNS con un compuesto como se proporciona en esta memoria.

En un aspecto separado, la invención proporciona métodos de potenciación de la acción de otros compuestos activos sobre el CNS. Estos métodos comprenden administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto o sal de Fórmula I en asociación con la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de otro compuesto con actividad sobre el CNS.

La presente invención se refiere adicionalmente al uso de compuestos de fórmula I como sondas para la localización de receptores GABA_{A} en una muestra (v.g., una sección de tejido). En ciertas realizaciones, se detectan los receptores GABA_{A} utilizando autorradiografía. Adicionalmente, la presente invención proporciona métodos para determinación de la presencia o ausencia de un receptor GABA_{A} en una muestra, que comprenden los pasos de: (a) poner en contacto una muestra con un compuesto como se ha descrito arriba en condiciones que permiten la fijación del compuesto al receptor GABA_{A}; (b) retirar el compuesto que no se ha fijado al receptor GABA_{A} y (c) detectar el compuesto fijado al receptor GABA_{A}.

En otro aspecto adicional, la presente invención proporciona métodos para preparar los compuestos descritos en esta memoria, con inclusión de los compuestos intermedios.

Estos y otros aspectos de la presente invención resultarán evidentes después de considerar la descripción detallada siguiente.

Descripción detallada de la invención

Como se ha indicado arriba, la presente invención proporciona imidazopirimidinas y triazolopirimidinas de Fórmula I, que incluyen imidazo[1,5-c]pirimidinas, imidazo[1,2-c]pirimidinas, [1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidinas y [1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidinas. Ciertas composiciones preferidas se fijan al receptor GABA_{A}, preferiblemente con selectividad alta; más preferiblemente, tales compuestos proporcionan adicionalmente una modulación beneficiosa de la función del cerebro. Sin desear quedar ligados a ninguna teoría de operación particular, se cree que dicha interacción de tales compuestos con el sitio de las benzodiazepinas del receptor GABA_{A} da como resultado los efectos farmacológicos de estos compuestos. Tales compuestos pueden utilizarse in vitro o in vivo para determinar la localización de los receptores GABA_{A} o para modular la actividad de los receptores GABA_{A} en una diversidad de contextos.

Descripción química y terminología

Los compuestos proporcionados en esta memoria se describen generalmente utilizando nomenclatura estándar. Para los compuestos que tienen centros asimétricos, debe entenderse que (a no ser que se especifique otra cosa) están abarcados la totalidad de los isómeros ópticos y mezclas de los mismos. Se contemplan todas las formas quirales (enantiómeras y diastereoisómeras) y racémicas, así como todas las formas de isómeros geométricos de una estructura, a no ser que se indique específicamente la estereoquímica o forma isómera específica. Pueden estar presentes también en los compuestos descritos en esta memoria, isómeros geométricos de olefinas, enlaces dobles C=N y análogos, y se contemplan en la presente invención la totalidad de dichos isómeros estables. Se contemplan también isómeros geométricos cis y trans, y pueden aislarse como una mezcla de isómeros o como formas isómeras separadas. Se contemplan también compuestos en los cuales uno o más átomos están reemplazados con un isótopo (es decir, un átomo que tiene el mismo número atómico pero un número másico diferente). A modo de ejemplo general, y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen tritio y deuterio, y los isótopos de carbono incluyen ^{11}C, ^{13}C y ^{14}C.

Ciertos compuestos se describen en esta memoria utilizando una fórmula general que incluye variables. A no ser que se especifique de otro modo, cada variable dentro de una forma de este tipo se define con independencia de otras variables, y cualquier variable que se presente más de una vez dentro de una fórmula se define independientemente en cada aparición. Así, por ejemplo, si un grupo se describe como estando sustituido con 0-2 R*, entonces el grupo puede estar insustituido o sustituido con hasta dos grupos R*, y R* se selecciona en cada aparición independientemente de la definición de R*. Además, será evidente que son permisibles combinaciones de sustituyentes y/o variables únicamente si tales combinaciones dan como resultado un compuesto estable (es decir, un compuesto que puede aislarse, caracterizarse y ensayarse respecto a actividad biológica).

Una "sal farmacéuticamente aceptable" es una forma de sal de ácido o base de un compuesto, siendo dicha forma de sal adecuada para uso en contacto con los tejidos de los seres humanos o animales sin toxicidad excesiva o carcinogenicidad, y preferiblemente sin irritación, respuesta alérgica, u otro problema o complicación. Dichas sales incluyen sales de ácidos minerales y orgánicos o residuos básicos tales como aminas, así como sales alcalinas u orgánicas de residuos ácidos tales como ácidos carboxílicos. Sales farmacéuticas específicas incluyen, pero sin carácter limitante, sales de ácidos tales como los ácidos clorhídrico, fosfórico, bromhídrico, málico, glicólico, fumárico, sulfúrico, sulfámico, sulfanílico, fórmico, toluenosulfónico, metanosulfónico, bencenosulfónico, etanodisulfónico, 2-hidroxietilsulfónico, nítrico, benzoico, 2-acetoxibenzoico, cítrico, tartárico, láctico, esteárico, salicílico, glutámico, ascórbico, pamoico, succínico, fumárico, maleico, propiónico, hidroximaleico, yodhídrico, fenilacético, alcanoico tal como acético, HOOC-(CH_{2})_{n}-COOH donde n es 0-4, y análogos. De manera similar, cationes farmacéuticamente aceptables incluyen, pero sin carácter limitante, sodio, potasio, calcio, aluminio, litio y amonio. Las personas con experiencia ordinaria en la técnica reconocerán sales farmacéuticamente aceptables adicionales para los compuestos proporcionados en esta memoria, con inclusión de las enumeradas en Remington's Pharmaceutical Sciences, edición 17ª, Mack Publishing Company, Easton, PA, p. 1418 (1985). En general, una sal de ácido o base farmacéuticamente aceptable puede sintetizarse a partir de un compuesto originario que contiene un resto básico o ácido por cualquier método químico convencional. Resumidamente, dichas sales pueden prepararse por reacción de las formas libres de ácido o base de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido apropiados en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de los dos; generalmente, se prefiere el uso de medios no acuosos, tales como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo.

Será evidente que cada compuesto de Fórmula I puede, pero sin carácter necesario., formularse como un hidrato, solvato o complejo no covalente. Adicionalmente, las diversas formas cristalinas y polimorfos están dentro del alcance de la presente invención. Se proporcionan también en esta invención profármacos de los compuestos de Fórmula I. Un "profármaco" es un compuesto que puede no satisfacer plenamente los requerimientos estructurales de los compuestos proporcionados en esta memoria, pero se modifica in vivo, después de la administración a un paciente, para producir un compuesto de Fórmula I, u otra fórmula proporcionada en esta memoria. Por ejemplo, un profármaco puede ser un derivado acilado de un compuesto como se proporciona en esta memoria. Los profármacos incluyen compuestos en los cuales grupos hidroxi, amina o sulfhidrilo están unidos a cualquier grupo que, cuando se administra a un mamífero, se escinde para formar un grupo hidroxi, amino o sulfhidrilo libre, respectivamente. Ejemplos de profármacos incluyen, pero sin carácter limitante, derivados de acetato, formiato y benzoato de grupos funcionales alcohol y amina en los compuestos proporcionados en esta invención. Los profármacos de los compuestos proporcionados en esta invención pueden prepararse por modificación de grupos funcionales presentes en los compuestos de tal manera que las modificaciones se escinden in vivo para producir los compuestos originarios.

Un "sustituyente", como se utiliza en esta memoria, hace referencia a un resto molecular que está unido covalentemente a un átomo dentro de una molécula de interés. Por ejemplo, un "sustituyente de anillo" puede ser un resto tal como halógeno, grupo alquilo, grupo haloalquilo u otro sustituyente indicado en esta memoria que está unido covalentemente a un átomo (preferiblemente un átomo de carbono o nitrógeno) que es un miembro del anillo. El término "sustitución" hace referencia al reemplazamiento de un átomo de hidrógeno en una estructura molecular con un sustituyente como se ha descrito arriba, de tal modo que la valencia en el átomo designado no se sobrepasa, y de tal modo que resulta de la sustitución un compuesto químicamente estable (es decir, un compuesto que puede aislarse, caracterizarse, y ensayarse en cuanto a actividad biológica). Cuando un sustituyente es oxo (es decir, =O), entonces se reemplazan dos hidrógenos en el átomo. Cuando los restos aromáticos están sustituidos con un grupo oxo, el anillo aromático se reemplaza por el anillo parcialmente insaturado correspondiente. Por ejemplo, un grupo piridilo sustituido con oxo es una piridona.

La expresión "sustituido opcionalmente" indica que un grupo puede estar insustituido o sustituido en uno o más de cualquiera de las posiciones disponibles, típicamente 1, 2, 3, 4 ó 5 posiciones, con uno o más sustituyentes adecuados tales como los expuestos en esta memoria. La sustitución opcional se indica también por la expresión "sustituido con 0 a X sustituyentes", en la cual X es el número máximo de sustituyentes.

Un guión ("-") que no está comprendido entre dos letras o símbolos se utiliza para indicar un punto de unión para un sustituyente. Por ejemplo, -CONH_{2} está unido a través del átomo de carbono.

Como se utiliza en esta memoria, "alquilo" tiene por objeto incluir grupos hidrocarbonados alifáticos saturados tanto ramificados como de cadena lineal; donde se especifica, dicho grupo tiene el número indicado de átomos de carbono. Así, el término alquilo C_{1}-C_{6}, tal como se utiliza en esta memoria, indica un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. "Alquilo C_{0}-C_{4}" hace referencia a un enlace o un grupo alquilo C_{1}-C_{4}. Los grupos alquilo incluyen grupos que tienen de 1 a 8 átomos de carbono (alquilo C_{1}-C_{8}), de 1 a 6 átomos de carbono (alquilo C_{1}-C_{6}) y de 1 a 4 átomos de carbono (alquilo C_{1}-C_{4}), tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, 2-pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, 2-hexilo, 3-hexilo y 3-metilpentilo. En ciertas realizaciones, los grupos alquilo preferidos son metilo, etilo, propilo, butilo y 3-pentilo. "Aminoalquilo" es un grupo alquilo como se define en esta memoria sustituido con uno o más sustituyentes -NH_{2}. "Hidroxialquilo" es un grupo alquilo como se define en esta memoria sustituido con uno o más sustituyentes -OH.

"Alquenilo" se refiere a una cadena de hidrocarburo lineal o ramificado que comprende uno o más enlaces dobles carbono-carbono, tales como etenilo y propenilo. Grupos alquenilo incluyen grupos alquenilo C_{2}-C_{8}, alquenilo C_{2}-C_{6} y alquenilo C_{2}-C_{4}, (que tienen de 2 a 8,"alquinilo" hace referencia a cadenas de hidrocarburo lineales o ramificadas que comprenden uno o más enlaces triples carbono-carbono. Grupos alquinilo incluyen grupos alquinilo C_{2}-C_{8}, alquinilo C_{2}-C_{6} y alquinilo C_{2}-C_{4}, que tienen de 2 a 8, 2 a 6 ó 2 a 4 átomos de carbono, respectivamente. Grupos alquinilo incluyen, por ejemplo, grupos tales como etinilo y propinilo.

Por "alcoxi", como se utiliza en esta memoria, se entiende un grupo alquilo, alquenilo o alquinilo como se ha descrito arriba unido por un puente de oxígeno. Grupos alcoxi incluyen grupos alcoxi C_{1}-C_{6} y alcoxi C_{1}-C_{4}, que tienen de 1 a 6 ó 1 a 4 átomos de carbono, respectivamente. Metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, n-butoxi, sec-butoxi, terc-butoxi, n-pentoxi, 2-pentoxi, 3-pentoxi, isopentoxi, neopentoxi, hexoxi, 2-hexoxi, 3-hexoxi y 3-metilpentoxi son grupos alcoxi específicos. Análogamente, "alquiltio" hace referencia a un grupo alquilo, alquenilo o alquinilo como se ha descrito arriba unido por un puente de azufre.

Un "cicloalquilo" es un grupo cíclico saturado o parcialmente saturado en el cual todos los miembros del anillo son carbono, tal como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, norbornilo, adamantilo, decahidro-naftalenilo, octahidro-indenilo, y variantes parcialmente saturadas de cualquiera de los anteriores, tal como ciclohexenilo. Tales grupos contienen típicamente de 3 a aproximadamente 10 átomos de carbono en el anillo; en ciertas realizaciones, tales grupos tienen de 3 a 7 átomos de carbono en el anillo (es decir, cicloalquilo C_{3}-C_{7}). Si están sustituidos, cualquier átomo de carbono del anillo puede estar unido a cualquier sustituyente indicado.

En el término "(cicloalquil)alquilo", "cicloalquil" y "alquilo" son como se ha definido arriba, y el punto de unión se encuentra en el grupo alquilo. Algunos de tales grupos son (cicloalquil C_{3}-C_{7})-alquilo C_{0}-C_{4}, en el cual el grupo cicloalquilo está enlazado por un enlace directo o un grupo alquilo C_{1}-C_{4}. Este término abarca, por ejemplo, ciclopropilmetilo, ciclohexilmetilo y ciclohexiletilo. Análogamente, "(cicloalquil C_{3}-C_{7})alcoxi C_{1}-C_{4}" hace referencia a un grupo cicloalquilo C_{3}-C_{7} enlazado por un grupo alcoxi C_{1}-C_{4}.

El término "alcanoílo" hace referencia a un grupo alquilo como se define arriba unido a través de un puente carbonilo. Grupos alcanoílo incluyen grupos alcanoílo C_{2}-C_{8}, alcanoílo C_{2}-C_{6} y alcanoílo C_{2}-C_{4}, que tienen de 2 a 8, 2 a 6 ó 2 a 4 átomos de carbono, respectivamente. "Alcanoílo C_{1}" hace referencia a -(C=O)-H, que (junto con alcanoílo C_{2}-C_{8}) está abarcado por el término "alcanoílo C_{1}-C_{8}". Etanoílo es alcanoílo C_{2}.

El término "oxo", tal como se utiliza en esta memoria, hace referencia a un grupo ceto (C=O). Un grupo oxo que es un sustituyente de un anillo no aromático da como resultado una conversión de -CH_{2}- en -C(=O)-. Será evidente que la introducción de un sustituyente oxo en un anillo aromático destruye la aromaticidad.

Una "alcanona" es un grupo cetona en el cual los átomos de carbón están en una configuración de alquilo lineal o ramificado. "Alcanona C_{3}-C_{8}", "alcanona C_{3}-C_{6}" y "alcanona C_{3}-C_{4}" hacen referencia a una alcanona que tiene de 3 a 8, 6 ó 4 átomos de carbono, respectivamente. A modo de ejemplo, un grupo alcanona C_{3} tiene la estructura -CH_{2}-(C=O)-CH_{3}.

Análogamente, "alquil-éter" hace referencia a un sustituyente éter lineal o ramificado unido por un enlace carbono-carbono. Grupos alquil-éter incluyen grupos alquil-éter C_{2}-C_{8}, alquil-éter C_{2}-C_{6} y alquil-éter C_{2}-C_{4}, que tienen 2 a 8, 6 ó 4 átomos de carbono, respectivamente. A modo de ejemplo, un grupo alquil-éter C_{2} tiene la estructura -CH_{2}-O-CH_{3}.

El término "alcoxicarbonilo" hace referencia a un grupo alcoxi unido por un carbonilo (es decir, un grupo que tiene la estructura general -C(=O)-O-alquilo). Grupos alcoxicarbonilo incluyen grupos alcoxicarbonilo C_{2}-C_{8}, C_{2}-C_{6} y C_{2}-C_{4}, que tienen 2 a 8, 6 ó 4 átomos de carbono, respectivamente. "Alcoxicarbonilo C_{1}" hace referencia a -C(=O)-OH, que está abarcado por el término "alcoxicarbonilo C_{1}-C_{8}". Tales grupos pueden designarse también como grupos alquilcarboxilato. Por ejemplo, metil-carboxilato hace referencia a -C(=O)-O-CH_{3} y etil-carboxilato hace referencia a -C(=O)-O-CH_{2}CH_{3}.

El término "carboxamido" hace referencia a un grupo amida (es decir, -(C=O)NH_{2}).

"Alquilamino" hace referencia a un sustituyente amina secundaria o terciaria que tiene la estructura general -NH-alquilo o -N-(alquil)(alquilo), donde cada alquilo puede ser el mismo o diferente. Tales grupos incluyen, por ejemplo, grupos mono- y di-(alquil C_{1}-C_{6})amino, en los cuales cada alquilo puede ser el mismo o diferente y puede contener de 1 a 6 átomos de carbono, así como grupos mono- y di-(alquil C_{1}-C_{4})amino. Alquilaminoalquilo hace referencia a un grupo alquilamino unido por un grupo alquilo (es decir, un grupo que tiene la estructura general -alquil-NH-alquilo o -alquil-N(alquil)(alquilo)). Tales grupos incluyen, por ejemplo, mono- y di-(alquil C_{1}-C_{8})amino-alquilo C_{1}-C_{8}, en los cuales cada alquilo puede ser el mismo o diferente. "Mono- o di-(alquil C_{1}-C_{8})amino-alquilo C_{0}-C_{8}" hace referencia a un grupo mono- o di-(alquil C_{1}-C_{8})amino unido por un enlace directo o un grupo alquilo C_{1}-C_{8}. Los siguientes son grupos alquilaminoalquilo representativos:

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El término "halógeno" hace referencia a flúor, cloro, bromo y yodo. Un "haloalquilo" es un grupo alquilo ramificado o de cadena lineal, sustituido con uno o más átomos de halógeno (v.g., los grupos "haloalquilo C_{1}-C_{8}" tienen de 1 a 8 átomos de carbono; los grupos "haloalquilo C_{1}-C_{2}" tienen de 1 a 2 átomos de carbono). Ejemplos de grupos haloalquilo incluyen, pero sin carácter limitante, mono- di- o tri-fluorometilo; mono-, di- o tri-clorometilo; mono-, di-, tri-, tetra- o penta-fluoroetilo; y mono-, di-, tri-, tetra- o penta-cloroetilo. Grupos haloalquilo típicos son trifluorometilo y difluorometilo. El término "haloalcoxi" hace referencia un grupo haloalquilo como se define arriba unido por un puente de oxígeno. Los grupos "haloalcoxi C_{1}-C_{8}" tienen de 1 a 8 átomos de carbono.

Como se utiliza en esta memoria, el término "arilo" indica grupos aromáticos que contienen solamente carbono en el o los anillos aromáticos. Tales grupos aromáticos pueden estar sustituidos adicionalmente con átomos o grupos de carbono o distintos de carbono. Grupos arilo típicos contienen 1 a 3 anillos separados, condensados, espiro o colgantes y de 6 a aproximadamente 18 átomos de carbono, sin heteroátomos como miembros del anillo. Grupos arilo preferidos son grupos de 6 a 12 miembros, tales como fenilo, naftilo (con inclusión de 1-naftilo y 2-naftilo) y bifenilo. Los grupos arilalquilo son grupos arilo enlazados por un grupo alquilo; los grupos arilalcoxi. son grupos arilo unidos por un resto alcoxi. Por ejemplo, fenil-alcoxi C_{1}-C_{2} hace referencia a benciloxi o feniletoxi (conocido también como fenetiloxi).

El término "heterociclo" o "grupo heterocíclico" se utiliza para indicar grupos saturados, parcialmente insaturados o aromáticos que tienen 1 ó 2 anillos, con 3 a 8 átomos en cada anillo, y en al menos un anillo de 1 a 4 heteroátomos seleccionados independientemente (a saber, oxígeno, azufre o nitrógeno). El anillo heterocíclico puede estar unido por cualquier heteroátomo o átomo de carbono del anillo que da como resultado una estructura estable, y puede estar sustituido en el o los átomos de carbono y/o nitrógeno si el compuesto resultante es estable. Cualesquiera heteroátomos de nitrógeno y/o azufre pueden estar oxidados opcionalmente, y cualquier átomo de nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado.

Ciertos heterociclos son "heteroarilo" (es decir, comprenden al menos un anillo aromático que tiene de 1 a 4 heteroátomos, siendo los átomos restantes del anillo carbono), tales como grupos monocíclicos de 5 a 7 miembros y grupos bicíclicos de 7 a 10 miembros. Cuando el número total de átomos de S y O en el grupo heteroarilo excede de 1, entonces estos heteroátomos no son adyacentes uno a otro; preferiblemente, el número total de átomos de S y O en el grupo heteroarilo no es mayor que 1, 2 ó 3, más preferiblemente no mayor que 1 ó 2 y muy preferiblemente no mayor que 1. Ejemplos de grupos heteroarilo incluyen piridilo, indolilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirazinilo, imidazolilo, oxazolilo, tienilo, tiazolilo, triazolilo, isoxazolilo, quinolinilo, pirrolilo, pirazolilo y 5,6,7,8-tetrahidroisoquinolina. Los grupos heteroarilo bicíclicos pueden contener, pero no necesariamente, un anillo saturado además del anillo aromático (v.g., un grupo tetrahidroquinolinilo o tetrahidroisoquinolinilo). Un "heteroarilo de 5 ó 6 miembros" es un heteroarilo monociclo que tiene 5 ó 6 miembros de anillo.

Otros heterociclos se designan en esta memoria como "heterocicloalquilo" (es decir, heterociclos saturados o parcialmente saturados). Los grupos heterocicloalquilo tienen de 3 a aproximadamente 8 átomos de anillo, y más típicamente de 3 a 7 (o de 5 a 7) átomos de anillo. Ejemplos de grupos heterocicloalquilo incluyen morfolinilo, piperazinilo y pirrolidinilo. Un grupo (heterocicloalquil de 3 a 6 miembros)-alquilo C_{0}-C_{4} es un grupo heterocicloalquilo que tiene de 3 a 6 miembros de anillo que está unido por un enlace directo o un grupo alquilo C_{1}-C_{4}. Ejemplos de grupos heterocicloalquilo incluyen grupos morfolinilo, piperazinilo y pirrolidinilo.

Los términos "receptor GABA_{A}" y "receptor de benzodiazepina" se refieren a un complejo proteínico que fija GABA de modo detectable y media una alteración dependiente de la dosis en la conductancia del cloruro y la polarización de la membrana. Por lo general, se prefieren receptores que comprenden subunidades receptoras GABA_{A} de mamífero (especialmente humano o de rata) existentes naturalmente aunque las subunidades pueden estar modificadas con la condición de que cualesquiera modificaciones no inhiban sustancialmente la capacidad del receptor para fijar GABA (es decir, se retiene al menos 50% de la afinidad de fijación del receptor para GABA). La afinidad de fijación de un receptor GABA_{A} candidato para GABA puede evaluarse utilizando un ensayo estándar de fijación de ligandos como se proporciona en esta memoria. Será evidente que existe una diversidad de subtipos de receptores GABA_{A} que caen dentro del alcance del término "receptor GABA_{A}". Estos subtipos incluyen, pero sin carácter limitante, subtipos de receptores \alpha_{2}\beta_{3}\gamma_{2}, \alpha_{3}\beta_{3}\gamma_{2}, \alpha_{5}\beta_{3}\gamma_{2} y \alpha_{1}\beta_{2}\gamma_{2}. Los receptores GABA_{A} pueden obtenerse de una diversidad de fuentes, por ejemplo de preparaciones de córtex de rata o de células que expresan receptores GABA_{A} humanos clonados. Subtipos particulares pueden prepararse fácilmente utilizando técnicas estándar (v.g., por introducción de mRNA que codifica las subunidades deseadas en una célula hospedadora, como se describe en esta memoria).

Un "agonista" de un receptor GABA_{A} es un compuesto que mejora la actividad de GABA en el receptor GABA_{A}. Los agonistas pueden, pero sin carácter necesario, mejorar también la fijación de GABA al receptor GABA_{A}. La capacidad de un compuesto para actuar como un agonista de GABA_{A} puede determinarse utilizando un ensayo electrofisiológico, tal como el ensayo proporcionado en el Ejemplo 7.

Un "agonista inverso" de un receptor GABA_{A} es un compuesto que reduce la actividad de GABA en el receptor GABA_{A}. Los agonistas inversos pueden inhibir también, aunque sin carácter necesario, la fijación de GABA al receptor GABA_{A}. La reducción de la actividad del receptor GABA_{A} inducida por GABA puede determinarse por un ensayo electrofisiológico tal como en el ensayo del Ejemplo 7.

Un "antagonista" de un receptor GABA_{A}, como se utiliza en esta memoria, es un compuesto que ocupa el sitio de las benzodiazepinas del receptor GABA_{A}, pero no tiene efecto detectable alguno sobre la actividad de GABA en el receptor GABA_{A}. Tales compuestos pueden inhibir la acción de los agonistas o agonistas inversos. La actividad antagonista del receptor GABA_{A} puede determinarse utilizando una combinación de un ensayo de fijación de receptores GABA_{A} adecuado, tal como el ensayo proporcionado en el Ejemplo 6, y un ensayo funcional adecuado, tal como el ensayo electrofisiológico proporcionado en el Ejemplo 7, de esta memoria.

Un "modulador del receptor GABA_{A}" es cualquier compuesto que actúa como agonista, agonista inverso o antagonista del receptor GABA_{A}. En ciertas realizaciones, un modulador de este tipo puede exhibir una constante de afinidad (K_{i}) menor que 1 micromolar en un ensayo estándar de fijación de radioligandos del receptor GABA_{A}, o un CE_{50} menor que 1 micromolar en un ensayo electrofisiológico. En otras realizaciones, un modulador del receptor GABA_{A} puede exhibir una constante de afinidad o CE_{50} menor que 500 nM, 200 nM, 100 nM, 50 nM, 25 nM, 10 nM, o 5 nM.

Se dice que un modulador del receptor GABA_{A} tiene "afinidad alta" si el valor K_{i} en un receptor GABA_{A} es menor que 1 micromolar, preferiblemente menor que 100 nanomolar o menor que 10 nanomolar. Un ensayo representativo para determinar K_{i} en un receptor GABA_{A} se proporciona en el Ejemplo 6, de esta memoria. Será evidente que el valor K_{i} puede depender del subtipo de receptor utilizado en el ensayo. Dicho de otro modo, un compuesto de afinidad alta puede ser "específico de subtipo" (es decir, el valor K_{i} es al menos 10 veces mayor para un subtipo que para otro subtipo). Se dice que tales compuestos tienen afinidad alta para el receptor GABA_{A} si el valor K_{i} para al menos un subtipo de receptor GABA_{A} cumple cualquiera de los criterios anteriores.

Se dice que un modulador del receptor GABA_{A} tiene "selectividad alta" si el mismo se fija a al menos un subtipo de receptor GABA_{A} con un valor K_{i} que es al menos 10 veces menor, preferiblemente al menos 100 veces menor, que el valor K_{i} para fijación a otro u otros (es decir no GABA_{A}) receptores fijados a la membrana. En particular, un compuesto que exhibe selectividad alta debería tener un valor K_{i} que es al menos 10 veces mayor en los receptores siguientes que en un receptor GABA_{A}: serotonina, dopamina, galanina, VR1, C5a, MCH, NPY, CRF, bradiquinina y taquiquinina. Los ensayos para determinar K_{i} en otros receptores pueden realizarse utilizando protocolos estándar de ensayos de fijación, tales como la utilización de un ensayo de fijación de receptores de membrana disponible comercialmente (v.g., los ensayos de fijación disponibles de MDS PHARMA SERVICES, Toronto, Canadá y CEREP, Redmond, WA).

Un "trastorno del CNS" es una enfermedad o afección del sistema nervioso central que es sensible a la modulación de los receptores GABA_{A} en el paciente. Tales trastornos incluyen trastornos de ansiedad (v.g., trastorno de pánico, trastorno obsesivo-compulsivo, agorafobia, fobia social, fobia específica, distimia, trastornos de ajuste, ansiedad de separación, ciclotimia y trastorno de ansiedad generalizado), trastornos de estrés (v.g., trastorno de estrés post-traumático, trastorno de estrés agudo de ansiedad anticipatorio y trastorno de estrés agudo), trastornos depresivos (v.g., depresión, depresión atípica, trastorno bipolar y fase deprimida de trastorno bipolar), trastornos del sueño (v.g., insomnio primario, trastorno del sueño de ritmo circadiano, disomnia NOS, parasomnia que incluye trastorno de pesadillas, trastorno del sueño por terror, trastornos del sueño secundarios a depresión, ansiedad y/u otros trastornos mentales y trastorno del sueño inducido por sustancias), trastornos cognitivos (v.g., deterioro de la cognición, deterioro cognitivo ligero (MCI), decadencia cognitiva relacionada con la edad (ARCD), esquizofrenia, lesión traumática cerebral, Síndrome de Down, enfermedades neurodegenerativas tales como enfermedad de Alzheimer y enfermedad de Parkinson y derrame cerebral), demencia asociada al SIDA, demencia asociada con depresión, ansiedad o psicosis, trastornos de déficit de atención (v.g., trastorno de déficit de atención y trastorno de déficit de atención e hiperactividad), trastornos convulsivos (v.g., epilepsia), sobredosis de benzodiazepinas y adicción a drogas y alcohol.

Un "agente del CNS" es cualquier fármaco utilizado para tratar o prevenir un trastorno del CNS o para inducir o prolongar el sueño en un paciente sano. Agentes CNS incluyen, por ejemplo: moduladores de los receptores GABA_{A}, agonistas y antagonistas de los receptores de serotonina (v.g., 5-HT_{1A}) e inhibidores selectivos de la reabsorción de serotonina (SSRIs); antagonistas de los receptores de neuroquinina; antagonistas de los receptores del factor liberador de corticotropina (CRF_{1}); agonistas del receptor de melatonina; agonistas nicotínicos; agentes muscarínicos; inhibidores de la acetilcolinesterasa y agonistas de los receptores de dopamina.

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Una "cantidad terapéuticamente eficaz" (o dosis) es una cantidad que, al ser administrada a un paciente, da como resultado un beneficio apreciable para el paciente (v.g., disminución de uno o más síntomas de un trastorno del CNS o un efecto deseado sobre el sueño). Dicha cantidad o dosis da generalmente como resultado una concentración del compuesto en fluido cerebroespinal que es suficiente para inhibir la fijación del ligando del receptor GABA_{A} al receptor GABA_{A} in vitro, como se determina utilizando el ensayo descrito en el Ejemplo 6. Será evidente que la cantidad terapéuticamente eficaz para un compuesto dependerá de la indicación para la que se administra el compuesto, así como de cualquier coadministración de otro u otros agentes del CNS.

Un "paciente" es cualquier individuo tratado con un compuesto proporcionado en esta memoria. Los pacientes incluyen humanos, así como otros animales vertebrados tales como animales de compañía y ganado. Los pacientes pueden verse afligidos con un trastorno del CNS, o pueden exentos de una afección de este tipo (es decir, el tratamiento puede ser profiláctico o soporífero).

Imidazopirimidinas y triazolopirimidinas

Como se ha indicado arriba, la presente invención proporciona compuestos de Fórmula I, con las variables que se han descrito arriba, así como sales farmacéuticamente aceptables de tales compuestos.

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En ciertos compuestos proporcionados en esta memoria, R_{8} representa 0 sustituyentes o 1 sustituyente seleccionado de halógeno, alquilo C_{1}-C_{2} y alcoxi C_{1}-C_{2}.

En ciertos compuestos de Fórmula I, Ar está sustituido con 0, 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, amino, ciano, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, mono- o di-alquilamino C_{1}-C_{4}, alcanoílo C_{2}-C_{4}, (cicloalquil C_{3}-C_{7})-alquilo C_{0}-C_{2}, haloalquilo C_{1}-C_{2} y haloalcoxi C_{1}-C_{2}.

En ciertas realizaciones, Ar es fenilo, piridilo, tiazolilo, tienilo, piridazinilo o pirimidinilo, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 4 constituyentes como se ha descrito arriba, o sustituido con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de cloro, fluoro, hidroxi, ciano, amino, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, alquilamino C_{1}-C_{2}, haloalquilo C_{1}-C_{2} y haloalcoxi C_{1}-C_{2}. Grupos Ar representativos incluyen fenilo, piridilo (v.g., piridin-2-ilo), tiazolilo (v.g., 1,3-tiazol-2-ilo), tienilo (v.g., tienil-2-ilo) o piridazinilo (v.g., piridazin-3-ilo), cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de cloro, fluoro, hidroxi, ciano, amino, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, mono- o di-(alquilamino C_{1}-C_{2}), alquilo C_{1}-C_{2} y alcoxi C_{1}-C_{2}; cada uno de los cuales está sustituido preferiblemente con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de fluoro, cloro, hidroxi, alquilo C_{1}-C_{2}, ciano y alcoxi C_{1}-C_{2}. Por ejemplo, grupos Ar incluyen, pero sin carácter limitante, 2,6-difluoro-fenilo, 2,5-difluoro-fenilo, 5-fluoro-2-metil-fenilo, piridina-2-ilo, 3-fluoro-piridin-2-ilo, 3-ciano-piridin-2-ilo, 3-trifluorometil-piridin-2-ilo, 3-hidroxi-piridin-2-ilo, 3-metoxi-piridin-2-ilo, 6-fluoro-piridin-2-ilo, 6-ciano-piridin-2-ilo, 6-trifluorometil-piridin-2-ilo, 6-hidroxi-piridin-2-ilo y 6-metoxi-piridin-2-ilo.

En ciertos compuestos, R_{1}, R_{2}, R_{3} y R_{4} se seleccionan independientemente de:

(a) hidrógeno, halógeno o ciano; y

(b) grupos de la fórmula:

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en donde

(i): L es un enlace;

(ii): G es un enlace, NH, N(R_{B}), O, C(=O)O o C(=O); y

(iii): R_{A} y R_{B} se seleccionan independientemente de (1) hidrógeno y (2) alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, (cicloalquil C_{3}-C_{7})-alquilo C_{0}-C_{2}, (heterocicloalquil de 3 a 7 miembros)-alquilo C_{0}-C_{2}, fenilo, tienilo, piridilo, pirimidinilo, tiazolilo y pirazinilo, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 4 sustituyentes seleccionados independientemente de hidroxi, halógeno, ciano, amino, alquilo C_{1}-C_{2} y alcoxi C_{1}-C_{2}.

Por ejemplo, R_{1}, R_{2}, R_{3} y R_{4} se seleccionan independientemente, en ciertos compuestos, de hidrógeno, hidroxi, halógeno, ciano, carboxamido, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, alquil-éter C_{2}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, hidroxialquilo C_{1}-C_{4}, haloalquilo C_{1}-C_{2}, haloalcoxi C_{1}-C_{2}, alcoxicarbonilo C_{1}-C_{6}, mono- y di-(alquil C_{1}-C_{4})amino, fenilo y piridilo. Grupos R_{1} y R_{4} representativos incluyen hidrógeno, metilo y etilo. Grupos R_{2} representativos incluyen hidrógeno, ciano, carboxamido, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, alcoxicarbonilo C_{1}-C_{4}, alquiléter C_{2}-C_{4}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, hidroxialquilo C_{1}-C_{2}, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, fenilo y piridilo.

En ciertos compuestos de Fórmula I, R_{5} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4} o mono- o di-alquilamino C_{1}-C_{4}, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{2}, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, fenilo y fenil-alcoxi C_{1}-C_{2}. Grupos R_{5} representativos incluyen etilo, propilo, butilo, etoxi y metoximetilo.

En ciertas realizaciones, R_{6} y R_{7} son ambos hidrógeno.

Ciertos compuestos de Fórmula I satisfacen adicionalmente la Fórmula II, en la cual Z_{1} es nitrógeno, Z_{2} es CR_{2} y Z_{3} es CR_{3}:

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En algunos de tales compuestos, R_{2} y R_{3} se seleccionan independientemente de hidrógeno, ciano, carboxamido, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, trifluorometilo, fenilo, piridilo, metilcarboxilato y etilcarboxilato. En otros de tales compuestos:

: R_{2} y R_{3} se seleccionan independientemente de hidrógeno, hidroxi, halógeno, ciano, carboxamido, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alquiléter C_{2}-C_{6}, hidroxialquilo C_{1}-C_{4}, haloalquilo C_{1}-C_{2}, haloalcoxi C_{1}-C_{2}, alcoxicarbonilo C_{1}-C_{4}, mono- y di-(alquil C_{1}-C_{4})amino, fenilo y piridilo;

: R_{4} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4};

: R_{5} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, o mono- o di-alquilamino C_{1}-C_{4}, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{2}, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, fenilo y fenil-alcoxi C_{1}-C_{2};

: R_{8} representa 0 ó 1 sustituyente seleccionado de halógeno, alquilo C_{1}-C_{2} y alcoxi C_{1}-C_{2}; y/o

: Ar representa fenilo, 2-piridilo, 1,3-tiazol-2-ilo, 2-tienilo o 3-piridazinilo, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de fluoro, hidroxi, alquilo C_{1}-C_{2}, haloalquilo C_{1}-C_{2}, ciano y alcoxi C_{1}-C_{2}.

Ciertos compuestos de Fórmula I satisfacen adicionalmente la Fórmula III, en la cual Z_{1} y Z_{3} son nitrógeno, y Z_{2} es CR_{2}:

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En algunos de tales compuestos, R_{2} se selecciona de hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alquiléter C_{2}-C_{4}, hidroxialquilo C_{1}-C_{2}, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, fenilo y piridilo. En otros de tales compuestos:

: R_{2} se selecciona de hidrógeno, hidroxi, halógeno, ciano, carboxamido, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alquiléter C_{2}-C_{6}, hidroxialquilo C_{1}-C_{4}, haloalquilo C_{1}-C_{2}, haloalcoxi C_{1}-C_{2}, alcoxicarbonilo C_{1}-C_{4}, mono- y di-(alquil C_{1}-C_{4})amino, fenilo y piridilo;

: R_{4} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4};

: R_{8} representa 0 o 1 sustituyente seleccionado de halógeno, alquilo C_{1}-C_{2} y alcoxi C_{1}-C_{2}; y/o Ar representa fenilo, 2-piridilo, 1,3-tiazol-2-ilo, 2-tienilo o 3-piridazinilo, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de fluoro, hidroxi, alquilo C_{1}-C_{2}, haloalquilo C_{1}-C_{2}, ciano y alcoxi C_{1}-C_{2}.

Ciertos compuestos de Fórmula I satisfacen adicionalmente la Fórmula IV, en la cual Z_{1} es CR_{1}, Z_{2} es nitrógeno y Z_{3} es CR_{3}:

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En algunos de tales compuestos, R_{3} es hidrógeno o metilo. En otros de tales compuestos:

: R_{1} es hidrógeno, halógeno o alquilo C_{1}-C_{6};

: R_{3} se selecciona de hidrógeno, hidroxi, halógeno, ciano, carboxamido, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alquiléter_{ }C_{2}-C_{6}, hidroxialquilo C_{1}-C_{4}, haloalquilo C_{1}-C_{2}, haloalcoxi C_{1}-C_{2}, alcoxicarbonilo C_{1}-C_{4}, mono- y di-(alquil C_{1}-C_{4})amino, fenilo y piridilo;

: R_{4} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4};

Ciertos compuestos de Fórmula I satisfacen adicionalmente la Fórmula V, en la cual Z_{1} y Z_{2} son nitrógeno, y Z_{3} es CR_{3}:

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En algunos de tales compuestos, R_{3} es hidrógeno, ciano, alquilo C_{1}-C_{6}, hidroxialquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alquiléter C_{2}-C_{6}, haloalquilo C_{1}-C_{6}, alcanoílo C_{1}-C_{6}, piridilo o carboxamido. En otros de tales compuestos:

: R_{4} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4};

: R_{8} representa 0 ó 1 sustituyente seleccionado de halógeno, alquilo C_{1}-C_{2} y alcoxi C_{1}-C_{2}; y/o Ar representa fenilo, 2-piridilo, 1,3-tiazol-2-ilo, 2-tienilo o 3-piridazinilo, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de fluoro, hidroxi, alquilo C_{1}-C_{2}, haloalquilo C_{1}-C_{2}, ciano y alcoxi C_{1}-C_{2}.

Los compuestos proporcionados en esta memoria alteran (modulan) detectablemente la fijación de ligandos al receptor GABA_{A}, como se determina utilizando un ensayo estándar de fijación de receptores in vitro. Las referencias en esta memoria a un "ensayo de fijación de ligandos al receptor GABA_{A}" tienen por objeto hacer referencia al ensayo estándar de fijación de receptores in vitro proporcionado en el Ejemplo 6. Resumidamente, puede realizarse un ensayo de competición en el cual una preparación de receptor GABA_{A} se incuba con un ligando marcado (v.g., ^{3}H), tal como Flumazenil, y el compuesto de ensayo sin marcar. La incubación con un compuesto que modula detectablemente la fijación del ligando al receptor GABA_{A} dará como resultado una disminución o un aumento en la cantidad de marcador fijada a la preparación del receptor GABA_{A}, con relación a la cantidad de marcador fijada en ausencia del compuesto. Preferiblemente, un compuesto de este tipo exhibirá un K_{1} en el receptor GABA_{A} menor que 1 micromolar, más preferentemente menor que 500 nM, 100 nM, 20 nM o 10 nM. El receptor GABA_{A} utilizado para determinar la fijación in vitro puede obtenerse de una diversidad de fuentes, por ejemplo a partir de preparaciones de córtex de rata o de células que expresan receptores GABA_{A} humanos clonados.

En ciertas realizaciones, los compuestos preferidos tienen propiedades farmacológicas favorables, con inclusión de biodisponibilidad oral (tal que una dosis oral sub-letal o preferiblemente una dosis oral farmacéuticamente aceptable, preferiblemente menor que 2 gramos, más preferiblemente menor que o igual a 1 gramo o 200 mg, puede proporcionar un efecto detectable in vivo), toxicidad baja (un compuesto preferido es no tóxico cuando se administra a un individuo una cantidad terapéuticamente eficaz), efectos secundarios mínimos (un compuesto preferido produce efectos secundarios comparables al placebo cuando se administra una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto a un individuo), baja fijación de proteínas del suero, y una semi-vida adecuada in vitro e in vivo (un compuesto preferido exhibe una semi-vida in vivo que permite dosificación Q.I.D., preferiblemente dosificación T.I.D., más preferiblemente dosificación B.I.D. y muy preferiblemente dosificación una sola vez al día). La distribución en el cuerpo a sitios de actividad del complemento es también deseable (v.g., los compuestos utilizados para tratar trastornos del CNS atravesarán preferiblemente la barrera hematoencefálica, si bien se prefieren típicamente niveles bajos en cerebro de los compuestos utilizados para tratar trastornos periféricos).

Pueden utilizarse ensayos de rutina que son bien conocidos en la técnica para evaluar estas propiedades e identificar los compuestos superiores para un uso particular. Por ejemplo, ensayos utilizados para predecir la biodisponibilidad incluyen el transporte a través de las monocapas de células intestinales humanas, tales como monocapas de células Caco-2. La penetración de la barrera hematoencefálica por un compuesto en humanos puede predecirse a partir de los niveles en cerebro del compuesto en animales de laboratorio a los que se ha administrado el compuesto (v.g., por vía intravenosa). La fijación de las proteínas del suero puede predecirse a partir de ensayos de fijación de albúmina, tales como los descritos por Oravcová, et al. (1996) Journal of Chromatography B 677:1-27. La semi-vida de un compuesto es inversamente proporcional a la frecuencia de dosificación requerida. Las semi-vidas in vitro de los compuestos pueden predecirse a partir de ensayos de semi-vida microsómica como ha sido descrito por Kuhnz y Gieschen (1998) Drug Metabolism y Disposition 26: 1120-27.

Como se ha indicado arriba, los compuestos preferidos proporcionados en esta invención son no tóxicos. En general, el término "no tóxico" como se utiliza en esta memoria debe entenderse en un sentido relativo y tiene por finalidad hacer referencia a cualquier sustancia que ha sido aprobada por la Administración de Alimentos y Fármacos de los Estos Unidos ("FDA") para administración a mamíferos (preferiblemente humanos) o que, en conformidad con criterios establecidos, es susceptible de aprobación por la FDA para administración a mamíferos (preferiblemente humanos). Adicionalmente, un compuesto no tóxico muy preferido satisface generalmente uno o más de los criterios siguientes cuando se administra en una cantidad mínima terapéuticamente eficaz o cuando se pone en contacto con células a una concentración que es suficiente para inhibir la fijación de un ligando de receptor GABA_{A} al receptor GABA_{A} in vitro: (1) no inhibe sustancialmente la producción celular de ATP; (2) no prolonga significativamente los intervalos QT cardiacos; (3) no causa un engrosamiento sustancial del hígado o (4) no causa una liberación sustancial de enzimas hepáticas.

Como se utiliza en esta memoria, un compuesto que no inhibe sustancialmente la producción celular de ATP es un compuesto que, cuando se ensaya como se describe en el Ejemplo 8, no disminuye los niveles celulares de ATP en más de 50%. Preferiblemente, las células tratadas como se describe en el Ejemplo 8 exhiben niveles de ATP que son al menos 80% de los niveles de ATP detectados en las células sin tratar. Compuestos muy preferidos son aquéllos que no inhiben sustancialmente la producción celular de ATP cuando la concentración del compuesto es al menos 10 veces, 100 veces o 1000 veces mayor que el valor CE_{50} o CI_{50} para el compuesto.

Un compuesto que no prolonga significativamente los intervalos QT cardiacos es un compuesto que no da como resultado una prolongación estadísticamente significativa de los intervalos QT cardiacos (como se determina por electrocardiografía) en cobayos, lechones o perros después de administración de una dosis que produce una concentración en suero igual al valor CE_{50} o CI_{50} para el compuesto. En ciertas realizaciones preferidas, una dosis de 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1, 5, 10, 40 ó 50 mg/kg administrada por vía parenteral u oral no da como resultado una prolongación estadísticamente significativa de los intervalos QT cardiacos. Por "estadísticamente significativa" deben entenderse resultados que varían con respecto al control al nivel p < 0,1 o, más preferiblemente, al nivel p < 0,05 de significación tal como se mide utilizando un ensayo paramétrico estándar de significación estadística tal como un ensayo T de Student.

Un compuesto no causa engrosamiento sustancial del hígado si el tratamiento diario de roedores de laboratorio (v.g., ratones o ratas) durante 5-10 días con una dosis que produce una concentración en suero igual al valor CE_{50} o CI_{50} para el compuesto da como resultado un aumento en la relación de peso de hígado a cuerpo que no es mayor que 100% con respecto a controles equiparables. En realizaciones más preferidas, dichas dosis no causan un engrosamiento del hígado mayor que 75% o 50% con respecto a los controles equiparables. Si se utilizan mamíferos distintos de roedores (v.g., perros), tales dosis no deben dar como resultado un aumento de la relación en peso de hígado a cuerpo mayor que 50%, preferiblemente no mayor que 25%, y más preferiblemente no mayor que 10% con respecto a controles equiparables sin tratar. Dosis preferidas en tales ensayos incluyen 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1, 5, 10, 40 ó 50 mg/kg administrados por vía parenteral u oral.

Análogamente, un compuesto no promueve liberación sustancial de enzimas hepáticas si la administración de una dosis que produce una concentración en suero igual al valor CE_{50} o CI_{50} para el compuesto no eleva los niveles en suero de ALT, LDH o AST en roedores de laboratorio en más de 3 veces (preferiblemente no más de 2 veces) con respecto a controles equiparables falsamente tratados. En realizaciones más preferidas, dichas dosis no elevan tales niveles en suero en más de 75% o 50% con respecto a controles equiparables. Alternativamente, un compuesto no promueve una liberación sustancial de enzimas hepáticas si, en un ensayo de hepatocitos in vitro, las concentraciones (en medios de cultivo u otras soluciones de este tipo que se ponen en contacto y se incuban con hepatocitos in vitro), concentraciones que son iguales al valor CE_{50} o CI_{50} para el compuesto no causan una liberación detectable de cualquiera de dichas enzimas hepáticas en el medio de cultivo por encima de los niveles de la línea base observados en medios de células de control equiparables tratadas falsamente. En realizaciones más preferidas no existe liberación detectable alguna de cualquiera de dichas enzimas hepáticas en el medio de cultivo por encima de los niveles de la línea base cuando las concentraciones de dicho compuesto son 2 veces, 5 veces, y preferiblemente 10 veces mayores que el valor CE_{50} o CI_{50} para el compuesto.

En otras realizaciones, ciertos compuestos preferidos no inhiben o inducen actividades de la enzima microsómica citocromo P450, tales como actividad de CYP1A2, actividad de CYP2A6, actividad de CYP2C9, actividad de CYP2C19, actividad de CYP2D6, actividad de CYP2E1 o actividad de CYP3A4 a una concentración igual al valor CE_{50} o CI_{50} para el compuesto.

Ciertos compuestos preferidos son clastogénicos o mutagénicos (v.g., como se determina utilizando ensayos estándar tales como el ensayo de micronúcleos in vitro de las células de ovario de hámster chino, el ensayo de linfoma de ratón, el ensayo de aberración cromosómica de los linfocitos humanos, el ensayo de micronúcleos de médula ósea de roedores, el ensayo de Ames o análogos) a una concentración igual al valor CE_{50} o CI_{50} para el compuesto. En otras realizaciones, ciertos compuestos preferidos no inducen intercambio de cromátidas hermanas (v.g., en las células de ovario de hámster chino) a dichas concentraciones.

Para propósitos de detección, como se expone con mayor detalle más adelante, los compuestos proporcionados en esta memoria pueden estar marcados isotópicamente o radiomarcados. Dichos compuestos son idénticos a los descritos arriba, excepto por el hecho de que uno o más átomos están reemplazados por un átomo que tiene una masa atómica o número másico diferente de la masa atómica o número másico encontrado usualmente en la naturaleza. Ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en los compuestos proporcionados en esta memoria incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tales como ^{2}H, ^{3}H, ^{11}C, ^{13}C, ^{14}C, ^{15}N¸ ^{18}O, ^{17}O, ^{31}P, ^{32}P, ^{35}S, ^{18}F y ^{36}Cl. Adicionalmente, la sustitución con isótopos pesados tales como deuterio (es decir, ^{2}H) puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas resultantes de la mayor estabilidad metabólica, tales como semi-vida incrementada in vivo o requerimientos reducidos de dosificación y, por tanto, pueden ser preferidos en algunas circunstancias.

Como se ha indicado arriba, diferentes formas estereoisómeras, tales como racematos y formas ópticamente activas, están abarcadas por la presente invención. En ciertas realizaciones, puede ser deseable obtener enantiómeros simples (es decir, formas ópticamente activas). Métodos estándar para preparación de enantiómeros simples incluyen síntesis asimétrica y resolución de los racematos. La resolución de los racematos puede realizarse por métodos convencionales tales como cristalización en presencia de un agente de resolución, o cromatografía utilizando, por ejemplo, una columna HPLC quiral.

Composiciones farmacéuticas

La presente invención proporciona también composiciones farmacéuticas que comprenden al menos un compuesto proporcionado en esta memoria, junto con al menos un vehículo o excipiente fisiológicamente aceptable. Tales compuestos pueden utilizarse para tratar pacientes en los cuales es deseable la modulación de los receptores GABA_{A} (v.g., pacientes que sufren procesos dolorosos que se beneficiarían de la inducción de amnesia, o aquéllos que sufren ansiedad, depresión, trastornos del sueño o deterioro cognitivo). Las composiciones farmacéuticas pueden comprender, por ejemplo, agua; tampones (v.g., solución salina tamponada neutra o solución salina tamponada con fosfato), etanol, aceite mineral, aceite vegetal, dimetilsulfóxido, carbohidratos (v.g., glucosa, manosa, sacarosa o dextranos), manitol, proteínas, adyuvantes, polipéptidos o aminoácidos tales como glicina, antioxidantes, agentes quelantes tales como EDTA o glutatión y/o conservantes. Composiciones farmacéuticas preferidas se formulan para suministro oral a humanos u otros animales (v.g., animales de compañía tales como perros o gatos). Si se desea, pueden incluirse también otros ingredientes activos, tales como agentes activos sobre el CNS adicionales.

Las composiciones farmacéuticas pueden formularse para cualquier modo de administración apropiado, con inclusión, por ejemplo, de administración tópica, oral, nasal, rectal o parenteral. El término parenteral, tal como se utiliza en esta memoria, incluye inyección subcutánea, intradérmica, intravascular (v.g., intravenosa), intramuscular, espinal, intracraneal, intratecal e intraperitoneal, así como cualquier técnica similar de inyección o infusión. En ciertas realizaciones, se prefieren composiciones en una forma adecuada para uso oral. Dichas formas incluyen, por ejemplo, tabletas, trociscos, pastillas, suspensiones acuosas o aceitosas, polvos o gránulos dispersables, emulsión, cápsulas duras o blandas, o jarabes o elixires. En otras realizaciones adicionales, las composiciones de la presente invención pueden formularse como un liofilizado.

Las composiciones destinadas a uso oral pueden comprender adicionalmente uno o más componentes tales como agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y agentes conservantes a fin de proporcionar preparaciones atractivas y agradables al paladar. Las tabletas contienen el ingrediente activo en mezcla con excipientes fisiológicamente aceptables que son adecuados para la fabricación de tabletas. Tales excipientes incluyen, por ejemplo, diluyentes inertes (v.g., carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio), agentes de granulación y desintegrantes (v.g., almidón de maíz o ácido algínico), agentes aglomerantes (v.g., almidón, gelatina o goma arábiga) y agentes lubricantes (v.g., estearato de magnesio, ácido esteárico o talco). Las tabletas pueden carecer de recubrimiento o pueden recubrirse por técnicas conocidas para retardar la desintegración y absorción en el tracto gastrointestinal y proporcionar con ello una acción sostenida durante un periodo de tiempo más largo. Por ejemplo, puede emplearse un material de retardo temporal tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo.

Las formulaciones para uso oral pueden presentarse también como cápsulas de gelatina dura en las cuales el ingrediente activo está mezclado con un diluyente sólido inerte (v.g., carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín), o como cápsulas de gelatina blanda en las cuales el ingrediente activo está mezclado con agua o un medio aceitoso (v.g., aceite de cacahuete, aceite de parafina o aceite de oliva).

Las suspensiones acuosas comprenden los materiales activos en mezcla con uno o más excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Tales excipientes incluyen agentes de suspensión (v.g., carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto y goma arábiga); y agentes dispersantes o humectantes (v.g., fosfátidos existentes naturalmente tales como lecitina, productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos tales como poli(estearato de oxietileno), productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga tales como heptadecaetilenooxicetanol, productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol tales como monooleato de poli(oxietilen-sorbitol), o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol tales como monooleato de poli(etilensorbitán)). Las suspensiones acuosas pueden contener también uno o más conservantes, por ejemplo p-hidroxibenzoato de etilo o de n-propilo, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes saborizantes y/o uno o más agentes edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina.

Las suspensiones aceitosas pueden formularse suspendiendo los ingredientes activos en un aceite vegetal (v.g., aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco), o en un aceite mineral tal como aceite de parafina. Las suspensiones aceitosas pueden contener un agente espesante tal como cera de abejas, parafina dura o alcohol cetílico. Pueden añadirse uno o más agentes edulcorantes y/o agentes saborizantes para proporcionar preparaciones orales agradables al paladar. Una suspensión de este tipo puede conservarse por la adición de un anti-oxidante tal como ácido ascórbico.

Los polvos y gránulos dispersables adecuados para preparación de una suspensión acuosa por adición de agua proporcionan el ingrediente activo en mezcla con un agente dispersante o humectante, agente de suspensión y uno o más conservantes. Agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados se ilustran por los ya mencionados anteriormente. Pueden estar presentes también excipientes adicionales, tales como agentes edulcorantes, saborizantes y colorantes.

Las composiciones farmacéuticas pueden encontrarse también en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase de aceite puede ser un aceite vegetal (v.g., aceite de oliva o aceite de cacahuete) o un aceite mineral (v.g., aceite de parafina) o mezclas de los mismos. Agentes emulsionantes adecuados pueden ser gomas existentes naturalmente (v.g., goma arábiga o goma tragacanto), fosfátidos existentes naturalmente (v.g., haba de soja, lecitina, y ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos y hexitol), anhídridos (v.g., monooleato de sorbitán) y productos de condensación de ésteres parciales derivados de ácidos grasos y hexitol con óxido de etileno (v.g., monooleato de poli(oxietilen-sorbitán)). Las emulsiones pueden contener también agentes edulcorantes y/o saborizantes.

Los jarabes y elixires pueden formularse con agentes edulcorantes, tales como glicerol, propilenglicol, sorbitol o sacarosa. Tales formulaciones pueden comprender también uno o más demulcentes, conservantes, agentes saborizantes y/o agentes colorantes.

Una composición farmacéutica puede prepararse como una suspensión estéril inyectable acuosa u oleaginosa. El compuesto, dependiendo del vehículo y la concentración utilizada, puede estar suspendido o disuelto en el vehículo. Una composición de este tipo puede formularse de acuerdo con la técnica conocida utilizando agentes dispersantes o humectantes y/o agentes de suspensión adecuados tales como los mencionados anteriormente. Entre los vehículos y disolventes aceptables que pueden emplearse se encuentran agua, 1,3-butanodiol, solución de Ringer y solución isotónica de cloruro de sodio. Adicionalmente, pueden emplearse como disolvente o medio de suspensión aceites fijos estériles. Para este propósito se puede emplear cualquier aceite fijo no irritante, con inclusión de mono- o diglicéridos sintéticos. Adicionalmente, ácidos grasos tales como el ácido oleico encuentran uso en la preparación de composiciones inyectables, y pueden estar disueltos en el vehículo adyuvantes tales como anestésicos locales, conservantes y/o agentes tampón.

Las composiciones farmacéuticas pueden prepararse también en la forma de supositorios (v.g., para administración rectal). Tales composiciones pueden prepararse por mezcla del fármaco con un excipiente no irritante adecuado que es sólido a las temperaturas ordinarias pero líquido a la temperatura rectal y por consiguiente fundirá en el recto para liberar el fármaco. Excipientes adecuados incluyen, por ejemplo, manteca de cacao y polietilenglicoles.

Para administración a animales no humanos, la composición puede añadirse también a la comida o el agua de bebida del animal. Puede ser conveniente formular composiciones de comida y agua de bebida para animales a fin de que el animal ingiera una cantidad apropiada de la composición junto con su dieta. Puede ser también conveniente presentar la composición como una premezcla para adición a la comida o el agua de bebida.

Las composiciones farmacéuticas pueden formularse como formulaciones de liberación sostenida (es decir, una formulación tal como una cápsula que efectúa una liberación lenta del compuesto después de su administración). Tales formulaciones pueden prepararse generalmente utilizando tecnología bien conocida y administrarse, por ejemplo, por vía oral, rectal o de implantación subcutánea, o por implantación en el sitio diana deseado. Los vehículos para uso con tales formulaciones son biocompatibles, y pueden ser también biodegradables; preferiblemente, la formulación proporciona un nivel relativamente constante de liberación del compuesto activo. La cantidad de compuesto contenida en una formulación de liberación sostenida depende del sitio de implantación, la tasa y duración esperada de liberación y la naturaleza de la afección a tratar o prevenir.

Los compuestos proporcionados en esta invención están presentes generalmente en una composición farmacéutica en una cantidad terapéuticamente eficaz, como se ha descrito arriba. Se prefieren composiciones que proporcionan niveles de dosificación que varían desde aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 140 mg por kilogramo de peso corporal por día (aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 7 g para un paciente humano por día). La cantidad de ingrediente activo que puede combinarse con los materiales vehículo para producir una forma de dosificación simple variará dependiendo del hospedador tratado y el modo de administración particular. Las formas unitarias de dosificación contendrán por lo general una cantidad comprendida entre aproximadamente 1 mg y aproximadamente 500 mg de un ingrediente activo. Se comprenderá, sin embargo, que la dosis óptima para cualquier paciente particular dependerá de una diversidad de factores, que incluyen la actividad del compuesto específico empleado; la edad, el peso corporal, el estado general de salud, el sexo y la dieta del paciente; el tiempo y la ruta de administración; la tasa de excreción; cualquier tratamiento simultáneo, tal como una combinación de fármacos; y el tipo y gravedad de la enfermedad particular sometida a tratamiento. Las dosis óptimas pueden ser establecidas utilizando ensayos y procedimientos de rutina que son bien conocidos en la técnica.

Las composiciones farmacéuticas pueden envasarse para tratamiento de un trastorno del CNS tal como ansiedad, depresión, un trastorno del sueño, trastorno de déficit de atención o un trastorno cognitivo tal como una pérdida de memoria inmediata o demencia de Alzheimer. Las preparaciones farmacéuticas empaquetadas incluyen un envase que contiene una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto como se describe en esta memoria e instrucciones (v.g., etiquetado) que indican que la composición contenida debe utilizarse para tratamiento del trastorno del CNS.

Métodos de uso

En ciertos aspectos, la presente invención proporciona métodos para inhibir el desarrollo de un trastorno del CNS. Dicho de otro modo, los métodos terapéuticos proporcionados en esta invención pueden utilizarse para tratar cualquier trastorno existente, o pueden utilizarse para prevenir, disminuir la gravedad de, o retardar la aparición de un trastorno de este tipo en un paciente que no sufre ningún trastorno detectable del CNS. Los trastornos del CNS se exponen con más detalle más adelante, y pueden ser diagnosticados y monitorizados utilizando criterios que han sido establecidos en la técnica. Alternativamente, o además, los compuestos proporcionados en esta invención pueden administrarse a un paciente para mejorar la memoria inmediata o inducir el sueño en un paciente sano. Los pacientes incluyen humanos, animales domésticos de compañía (mascotas, tales como perros) y cabezas de ganado, con dosis y regímenes de tratamiento como se ha descrito arriba.

La frecuencia de dosificación puede variar, dependiendo del compuesto utilizado y la enfermedad particular a tratar o prevenir. En general, para tratamiento de la mayoría de los trastornos, se prefiere un régimen de dosificación de 4 veces al día o menos. Para tratamiento soporífero, es deseable una sola dosis que alcanza rápidamente una concentración en fluido cerebroespinal que es suficiente para inhibir la fijación del ligando del receptor GABA_{A} al receptor GABA_{A} in vitro. Los pacientes pueden ser monitorizados generalmente respecto a eficacia terapéutica utilizando ensayos adecuados para la afección que se trata o se previene, que serán familiares para las personas con experiencia ordinaria en la técnica.

En realizaciones preferidas, los compuestos proporcionados en esta invención se utilizan para tratar pacientes que se encuentran en necesidad de dicho tratamiento. En general, tales pacientes se tratan con una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula I (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo); preferiblemente, la cantidad es suficiente para alterar uno o más síntomas de un trastorno del CNS. Compuestos que actúan como agonistas en subtipos de receptores \alpha_{2}\beta_{3}\gamma_{2} y \alpha_{3}\beta_{3}\gamma_{2} son particularmente útiles en el tratamiento de trastornos de ansiedad tales como trastorno de pánico, trastorno obsesivo-compulsivo y trastorno de ansiedad generalizado; trastornos de estrés con inclusión de estrés post-traumático y trastornos de estrés agudos. Los compuestos que actúan como agonistas en los subtipos de receptores \alpha_{2}\beta_{3}\gamma_{2} y \alpha_{3}\beta_{3}\gamma_{2} son también útiles en el tratamiento de trastornos depresivos o bipolares, esquizofrenia y trastornos del sueño, y pueden ser utilizados en el tratamiento de la decadencia cognitiva relacionada con la edad y la enfermedad de Alzheimer. Los compuestos que actúan como agonistas inversos en el subtipo de receptor \alpha_{5}\beta_{3}\gamma_{2} o los subtipos de receptores \alpha_{1}\beta_{2}\gamma_{2} y \alpha_{5}\beta_{3}\gamma_{2} son particularmente útiles en el tratamiento de trastornos cognitivos, con inclusión de los resultantes del Síndrome de Down, enfermedades neurodegenerativas tales como la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson y demencia relacionada con derrame cerebral. Los compuestos que actúan como agonistas inversos en el subtipo de receptor \alpha_{5}\beta_{3}\gamma_{2} son particularmente útiles en el tratamiento de trastornos cognitivos por el mejoramiento de la memoria, particularmente la memoria inmediata, en pacientes con memoria deteriorada; mientras que aquéllos que actúan como agonistas en el subtipo de receptor \alpha_{5}\beta_{3}\gamma_{2} son particularmente útiles para la inducción de amnesia. Los compuestos que actúan como agonistas en el subtipo de receptor \alpha_{1}\beta_{2}\gamma_{2} son útiles en el tratamiento de trastornos del sueño y trastornos convulsivos tales como la epilepsia. Los compuestos que actúan como antagonistas en el sitio de las benzodiazepinas son útiles en la inversión del efecto de una sobredosis de benzodiazepina y en el tratamiento de la adicción a drogas y alcohol.

Trastornos del CNS que pueden tratarse utilizando compuestos y composiciones proporcionados en esta invención incluyen:

: Depresión, v.g., depresión mayor, trastorno distímico, depresión atípica, trastorno bipolar, fase depresiva de trastorno bipolar.

: Ansiedad, v.g., trastorno de ansiedad general (GAD), agorafobia, trastorno de pánico +/agorafobia, fobia social, fobia específica, trastorno de estrés post-traumático, trastorno obsesivo-compulsivo (OCD), distimia, trastornos de ajuste con alteración del estado de ánimo y ansiedad, trastorno de ansiedad por separación, trastorno de estrés agudo por ansiedad anticipativa, trastornos de ajuste, ciclotimia.

: Trastornos del sueño, v.g., insomnio primario, trastorno del sueño de ritmo circadiano, disomnia NOS, parasomnias, con inclusión de trastorno de pesadillas, trastorno de terror durante el sueño, trastornos del sueño secundarios a depresión y/o ansiedad u otros trastornos mentales, y trastorno del sueño inducido por sustancias. Síntomas tratables representativos de trastornos del sueño incluyen, por ejemplo, dificultad en quedarse dormido, desvelo excesivo durante la noche, despertar demasiado temprano y despertar con sensación de no haber descansado.

: Deterioro de la cognición, v.g., enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, trastorno cognitivo ligero (MCI), decadencia cognitiva relacionada con la edad (ARCD), derrame cerebral, lesión cerebral traumática, demencia asociada al SIDA, y demencia asociada con depresión, ansiedad y psicosis (con inclusión de esquizofrenia y trastornos de alucinación).

: Trastornos de Déficit de Atención, v.g., trastorno de déficit de atención (ADD) y trastorno de déficit de atención e hiperactividad (ADHD).

: Trastornos del habla, v.g., tic motor, tartamudeo clónico, disfluencia, bloqueo del habla, disartria, Síndrome de Tourette y logoespasmo.

Los compuestos y composiciones proporcionados en esta memoria pueden utilizarse también para mejorar la memoria inmediata (memoria de trabajo) en un paciente. Una cantidad terapéuticamente eficaz preferida de un compuesto para mejora de la pérdida de memoria inmediata es una cantidad suficiente para dar como resultado una mejora estadísticamente significativa en cualquier ensayo estándar de función de la memoria inmediata, con inclusión de recuento directo de dígitos a saltos y aprendizaje de series de memoria. Por ejemplo, puede diseñarse un ensayo de este tipo para evaluar la capacidad de un paciente para recordar palabras o letras. Alternativamente, puede utilizarse una evaluación neurofísica más completa para evaluar la función de la memoria inmediata. Los pacientes tratados con objeto de mejorar la memoria inmediata pueden, pero no necesariamente, haber sido diagnosticados de deterioro de la memoria o considerarse predispuestos para el desarrollo de dicho deterioro.

En un aspecto separado, la presente invención proporciona métodos para potenciar la acción (o el efecto terapéutico) de otro u otros agentes del CNS. Tales métodos comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto proporcionado en esta invención en combinación con una cantidad terapéuticamente eficaz de otro agente del CNS. Tales otros agentes del CNS incluyen, pero sin carácter limitante, los siguientes: para ansiedad, agonistas y antagonistas de los receptores de serotonina (v.g., 5-HT_{1A}); para ansiedad y depresión, antagonistas de receptores de neuroquinina o antagonistas de los receptores del factor liberador de corticotropina (CRF_{1}); para trastornos del sueño, agonistas de los receptores de melatonina; y para trastornos neurodegenerativos, tales como demencia de Alzheimer, agonistas nicotínicos, agentes muscarínicos, inhibidores de la acetilcolinesterasa y agonistas de los receptores de dopamina. En ciertas realizaciones, la presente invención proporciona un método de potenciación de la actividad antidepresiva de los inhibidores selectivos de la reabsorción de serotonina (SSRIs) por co-administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto agonista de GABA_{A} proporcionado en esta invención en combinación con un SSRI. Una cantidad terapéuticamente eficaz de compuesto, cuando se co-administra con otro agente del CNS, es una cantidad suficiente para dar como resultado un cambio detectable en los síntomas del paciente, cuando se compara con un paciente tratado con el otro agente del CNS solo.

La presente invención se refiere también a métodos de inhibición de la fijación de compuestos de benzodiazepina (es decir, compuestos que contienen la estructura del anillo de benzodiazepina) tales como RO15-1788 o GABA, al receptor GABA_{A}. Tales métodos implican poner en contacto células que expresan el receptor GABA_{A} con una concentración del compuesto proporcionado en esta invención que es suficiente para inhibir la fijación del ligando del receptor GABA_{A} al receptor GABA_{A} in vitro, como se determina utilizando el ensayo descrito en el Ejemplo 6. Este método incluye, pero sin carácter limitante, inhibición de la fijación de los compuestos de benzodiazepina a los receptores GABA_{A} in vivo (v.g., en un paciente al que se ha administrado una cantidad de un modulador del receptor GABA_{A} proporcionado en esta invención que da como resultado una concentración del compuesto en el fluido cerebroespinal que es suficiente para inhibir la fijación de los compuestos de benzodiazepina o GABA al receptor GABA_{A} in vitro). En una realización, tales métodos son útiles para tratar la sobredosis de un fármaco de benzodiazepina. La cantidad de modulador del receptor GABA_{A} que es suficiente para inhibir la fijación de un compuesto de benzodiazepina al receptor GABA_{A} puede ser determinada fácilmente por un ensayo de fijación de receptores GABA_{A} como se describe en el Ejemplo 6.

En aspectos separados, la presente invención proporciona una diversidad de usos in vitro para los moduladores del receptor GABA_{A} proporcionados en esta memoria. Por ejemplo, tales compuestos pueden utilizarse como sondas para la detección y localización de receptores GABA_{A}, en muestras tales como secciones de tejidos, como controles positivos en ensayos para actividad de receptores, como patrones y reactivos para determinar la capacidad de un agente candidato para fijarse al receptor GABA_{A}, o como radiotrazadores para formación de imágenes por tomografía de emisión de positrones (PET) o para tomografía computerizada de emisión de fotones simples (SPECT). Dichos ensayos pueden utilizarse para caracterizar receptores GABA_{A} en individuos vivos. Tales compuestos son útiles también como patrones y reactivos en la determinación de la capacidad de un producto farmacéutico potencial para fijarse al receptor GABA_{A}.

En métodos para determinación de la presencia o ausencia de un receptor GABA_{A} en una muestra, puede incubarse una muestra con un compuesto como los proporcionados en esta memoria en condiciones que permiten la fijación del compuesto al receptor GABA_{A}. Se detecta luego la cantidad de compuesto fijada al receptor GABA_{A} en la muestra. Por ejemplo, el compuesto puede marcarse utilizando cualquiera de una diversidad de técnicas bien conocidas (v.g., radiomarcación con un radionucleido tal como tritio, como se describe en esta memoria), e incubarse con la muestra (la cual puede ser, por ejemplo, una preparación de células cultivadas, una preparación de tejido o una fracción de la misma). Un tiempo de incubación adecuado puede ser determinado generalmente por ensayo del nivel de fijación que se produce a lo largo de un periodo de tiempo. Después de la incubación, el compuesto no fijado se separa, y el compuesto fijado se detecta utilizando cualquier método adecuado para el marcador empleado (v.g., autorradiografía o recuento de centelleo para compuestos radiomarcados; pueden utilizarse métodos espectroscópicos para detectar grupos luminiscentes y grupos fluorescentes). Como control, una muestra equiparable puede ponerse en contacto simultáneamente con el compuesto radiomarcado y una cantidad mayor de compuesto sin marcar. El compuesto marcado y sin marcar no fijado se separa luego del mismo modo, y se detecta el marcador fijado. Una cantidad mayor de marcador detectable en la muestra de ensayo que en el control indica la presencia del receptor GABA_{A} en la muestra. Ensayos de detección, que incluyen autorradiografía de receptores (mapeado de receptores) de receptores GABA_{A} en células cultivadas o muestras de tejido puede realizarse como ha sido descrito por Kuhar en las secciones 8.1.1 a 8.1.9 de Current Protocols in Pharmacology (1998), John Wiley & Sons, Nueva York.

Por ejemplo, los compuestos proporcionados en esta memoria pueden utilizarse para detectar receptores GABA_{A} en muestras de células o tejidos. Esto puede hacerse utilizando muestras equiparables de células o tejidos que no se han puesto en contacto previamente con un modulador del receptor GABA_{A}, al menos una de las cuales se prepara como una muestra experimental y al menos una de las cuales se prepara como una muestra de control. Se prepara una muestra experimental poniendo en contacto (en condiciones que permiten la fijación de RO15-1788 a los receptores GABA_{A} en muestras de células o tejidos) una muestra con un compuesto de Fórmula I marcado detectablemente. Se prepara una muestra de control de la misma manera que la muestra experimental, excepto que la misma se pone en contacto también con un compuesto sin marcar a una concentración molar que es mayor que la concentración del modulador marcado.

Las muestras experimental y de control se lavan luego para eliminar el compuesto no fijado marcado detectablemente. Se mide luego la cantidad de compuesto remanente fijado marcado detectablemente y se compara la cantidad de compuesto marcado detectablemente en las muestras experimentales y de control. La detección de una mayor cantidad de marcador detectable en la o las muestras experimentales lavadas que en la o las muestras de control lavadas demuestra la presencia del receptor GABA_{A} en la muestra experimental.

El modulador del receptor GABA_{A} marcado detectablemente utilizado en este procedimiento puede marcarse con un marcador radiactivo o un marcador directa o indirectamente luminiscente. Cuando se utilizan secciones de tejidos en este procedimiento y el marcador es un radiomarcador, el compuesto marcado fijado puede detectarse por autorradiografía.

Los compuestos proporcionados en esta memoria pueden utilizarse también en una diversidad de métodos bien conocidos de cultivo de células y separación de células. Por ejemplo, los compuestos pueden fijarse a la superficie interior de una placa de cultivo de tejidos u otro soporte de cultivo de células, para uso en inmovilización de células que expresan receptores GABA_{A} para escrutinios, ensayos y crecimiento en cultivo. Dicha fijación puede realizarse por cualquier técnica adecuada, tal como los métodos arriba descritos, así como otras técnicas estándar. Los compuestos pueden utilizarse también para facilitar la identificación y clasificación de células in vitro, permitiendo la selección de células que expresan un receptor GABA_{A}. Preferiblemente, el o los compuestos para uso en tales métodos se marcan como se ha descrito en esta memoria. En una realización preferida, un compuesto enlazado a un marcador fluorescente, tal como fluoresceína, se pone en contacto con las células, que se analizan luego por clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS).

En otros aspectos, se proporcionan métodos para modulación de la fijación de ligandos a un receptor GABA_{A} in vitro o in vivo, que comprenden poner en contacto un receptor GABA_{A} con una cantidad suficiente de un modulador del receptor GABA_{A} proporcionado en esta memoria, en condiciones adecuadas para la fijación del ligando al receptor. El receptor GABA_{A} puede estar presente en solución, en una preparación de células cultivadas o aisladas o en el cuerpo de un paciente. Preferiblemente, el receptor GABA_{A} está presente en el cerebro de un mamífero. En general, la cantidad de compuesto puesta en contacto con el receptor debe ser suficiente para modular la fijación de ligandos al receptor GABA_{A} in vitro en, por ejemplo, un ensayo de fijación como se describe en el Ejemplo 6.

Se proporcionan también en esta memoria métodos para alterar la actividad de transducción de señales del receptor celular GABA_{A} (particularmente la conductancia del ion cloruro), poniendo en contacto el receptor GABA_{A}, sea in vitro o in vivo, con una cantidad suficiente de un compuesto como se ha descrito arriba, en condiciones adecuadas para la fijación de Flumazenil al receptor. El receptor GABA_{A} puede estar presente en solución, en una célula cultivada o aislada o preparación de membrana celular o en el cuerpo de un paciente, y la cantidad de compuesto puede ser una cantidad que sería suficiente para alterar la actividad de transducción de señales del receptor GABA_{A} in vitro. En ciertas realizaciones, la cantidad o concentración de compuesto puesta en contacto con el receptor debería ser suficiente para modular la fijación de Flumazenil a un receptor GABA_{A} in vitro en, por ejemplo, un ensayo de fijación como se describe en el Ejemplo 6. Un efecto sobre la actividad de transducción de señales puede ser detectado como una alteración en la electrofisiología de las células, utilizando técnicas estándar. La cantidad o concentración de un compuesto que es suficiente para alterar la actividad de transducción de señales de los receptores GABA_{A} puede ser determinada por un ensayo de transducción de señales de receptores GABA_{A}, tal como el ensayo descrito en el Ejemplo 7. Las células que expresan los receptores de GABA in vivo pueden ser, pero sin carácter limitante, células neuronales o células cerebrales. Tales células pueden ponerse en contacto con uno o más compuestos proporcionados en esta invención por contacto con un fluido corporal que contiene el compuesto, por ejemplo por contacto con fluido cerebroespinal. La alteración de la actividad de transducción de señales de los receptores GABA_{A} en células in vitro puede determinarse por un cambio detectable en la electrofisiología de las células que expresan receptores GABA_{A}, cuando dichas células se ponen en contacto con un compuesto de la invención en presencia de GABA.

Puede utilizarse el registro intracelular o registro "patch-clamp" para cuantificar los cambios en la electrofisiología de las células. Un cambio reproducible en el comportamiento de un animal al que se ha administrado un compuesto de la invención puede tomarse también para indicar que ha ocurrido un cambio en la electrofisiología de las células del animal que expresan los receptores GABA_{A}.

Preparación de los compuestos

Los compuestos proporcionados en esta invención pueden prepararse generalmente utilizando métodos de síntesis estándar. Los materiales de partida están por regla general fácilmente disponibles de fuentes comerciales, tales como Sigma-Aldrich Corp. (St. Louis, MO), o pueden prepararse como se describe en esta memoria. Procedimientos representativos adecuados para la preparación de compuestos de Fórmula I se reseñan en los esquemas siguientes, que no deben interpretarse como limitantes de la invención en alcance o espíritu a los reactivos y condiciones específi-
cos(as) que se indican en ellos. Las personas con experiencia en la técnica reconocerán que los reactivos y condiciones pueden modificarse y emplearse pasos adicionales para producir los compuestos abarcados por la presente invención. En algunos casos, puede ser necesaria protección de grupos funcionales reactivos para conseguir las transformaciones deseadas. En general, dicha necesidad de compuestos protectores, así como las condiciones necesarias para fijar y eliminar tales grupos, serán evidentes para los expertos en la técnica de la síntesis orgánica. Cada variable de los esquemas que siguen hace referencia a cualquier grupo coherente con la descripción de los compuestos proporcionados en esta memoria.

Las abreviaturas utilizadas en los Esquemas que siguen y los Ejemplos que se acompañan son como sigue:

Abreviaturas utilizadas

Bu: butilo

Bu_{3}Sn: tributil-estaño

CDCl_{3}: deuterocloroformo

CNBr: bromuro de cianógeno

\delta: desplazamiento químico

DCM: diclorometano

DME: etilenglicol-dimetil-éter

DMF: N,N-dimetilformamida

DPPF: 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno

EtOAc: acetato de etilo

EtOH: etanol

Eq.: equivalente(s)

HOAc: ácido acético

HPLC: cromatografía líquida de alta presión

^{1}H NMR: resonancia magnética nuclear del protón

Hz: hertzio

LC/MS: cromatografía líquida/espectrometría de masas

MeOH: metanol

MS: espectrometría de masas

M+1: masa + 1

NaOEt: etóxido de sodio

NMP: 1-metil-2-pirrolidinona

n-BuLi: n-butil-litio

Pd/C: catalizador de paladio sobre carbono

Pd(PPh_{3})_{4}: tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0)

Pd(Ph_{3}P)_{2}Cl_{2}: diclorobis(trifenilfosfina)paladio(II)

Pd_{2}(dba)_{3}: tris(dibencilidinoacetona)dipaladio(0)

Ph_{3}P (o PPh_{3}): trifenilfosfina

Py: piridina

PTLC: cromatografía preparativa en capa fina

THF: tetrahidrofurano

TLC: cromatografía en capa fina

Esquemas de reacción

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Esquema 1

10

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Los compuestos intermedios de 6-cloro-pirimidina 13 se preparan a partir de compuestos de bromometilo o clorometilo 5 y 9 como se ilustra en el Esquema 1. La condensación del éster 1 con la amidina 2 se realiza por tratamiento con un exceso de metóxido de sodio en MeOH. El tratamiento de 3 con POCl_{3} da la cloro-pirimidina 4, que puede convertirse en bromometil-pirimidina 5 por bromación con Br_{2} en HOAc a 85ºC. Análogamente, la condensación del etil-éster 10 y oxalato de dietilo 11 se realiza fácilmente por tratamiento con etóxido de sodio en EtOH. El diéster resultante 6 se hace reaccionar con la amidina correspondiente 2 y un exceso de K_{2}CO_{3} en EtOH a reflujo, para proporcionar la pirimidinona 7. La transformación de 7 en el éster de 6-cloropirimidina 8 se efectúa por tratamiento con POCl_{3} a 85ºC. El compuesto 8 se convierte luego en clorometil-pirimidina 9 por reducción con NaBH_{4} seguida por tratamiento con cloruro de tionilo. El bromuro 5 o cloruro 9 se hace reaccionar luego con imidazol 12 en DMF en presencia de un exceso de K_{2}CO_{3} para proporcionar el compuesto 13.

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Esquema 2

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11

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El Esquema 2 ilustra la síntesis de compuestos de fórmula 17 a partir de compuestos 13. El tratamiento de 13 con NaN_{3} en DMF a 70ºC durante una noche proporciona el compuesto correspondiente de 4-azidopirimidina 14, que puede convertirse en la amino-pirimidina 15 por hidrogenación. Finalmente, el compuesto 15 reacciona con diversos \alpha-bromo(cloro)-aldehídos o cetonas 16 en DMF para dar el compuesto de pirimidina 17 condensado con imidazol deseado.

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Esquema 3

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12

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Los compuestos sustituidos con ciano en posición 2 ó 3 se preparan a partir de los ésteres correspondientes como se ilustra en el Esquema 3. El tratamiento de los ésteres 18 o 19 (producidos de acuerdo con el Esquema 2) con exceso de amoníaco en EtOH da la amida 20 y 21, que puede convertirse en cianocompuestos 22 y 23 por agitación con un exceso de POCl_{3} en piridina.

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Esquema 4

13

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El Esquema 4 ilustra la síntesis de [1,2,4]triazolo-[1,5-c]pirimidinas 27. El tratamiento de los compuestos 13 con hidrazina da los compuestos intermedios 24. La conversión del compuesto 24 en el compuesto 27 se realiza en las condiciones A-E por la vía de los compuestos intermedios 25 (compuesto que no ha sufrido transposición, 1,2,4-triazolo[4,3-c]pirimidinas) y 26 por transposición de Dimroth. Pueden utilizarse una diversidad de condiciones dependiendo de la naturaleza de R_{2}. En general, se aplica la condición A cuando R_{2} es un grupo alifático no impedido; se aplica la condición B cuando R_{2} es un grupo arilo; y se aplica la condición C cuando R_{2} es un grupo alifático impedido. Mientras que la condición D da [1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidinas sustituidas con amino (27, R_{2} = NH_{2}), se obtienen [1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidinas sustituidas con hidroxilo (27, R_{2} = OH) cuando se aplica la condición E. En todas estas condiciones, las reacciones de transposición son esencialmente completas para dar los productos transpuestos 27. El grupo R_{2} en 27 puede elaborarse ulteriormente en caso necesario como se demuestra en los ejemplos.

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Esquema 5

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14

Para sintetizar los productos no transpuestos, 1,2,4-triazolo[1,5-c]pirimidinas 25, se utilizan condiciones más suaves para efectuar la ciclación como se ilustra por el Esquema 5. Así, los compuestos 25 se preparan a partir de 24 por una diversidad de condiciones (condiciones A-C en el Esquema 5) dependiendo de la naturaleza de las sustituciones (R_{3}, R_{4} y R_{5}) y de la disponibilidad de materias primas. En general, las hidrazinas 24 se tratan con una cantidad en exceso del compuesto R_{3}C(OR)_{3} o anhídrido correspondiente sin disolvente (Condiciones A y C). La temperatura de reacción oscila desde 50ºC a 100ºC dependiendo de la naturaleza de R_{3}, R_{4} y R_{5}. En el caso de R_{3} = H, la ciclación se efectúa con acetato de dietoximetilo a la temperatura ambiente durante 5 a 10 minutos (Condición B). Las condiciones variables para la formación de las 1,2,4-triazolo[1,5-c]pirimidinas diferentemente sustituidas 25 se ilustran adicionalmente en los ejemplos que siguen.

El tratamiento extendido de las hidrazinas 24 con los reactivos de ciclación descritos en el Esquema 5 pueden producir también 1,2,4-triazolo[1,5-c]pirimidinas 27 (por transposición de Dimroth). De modo consistente con los informes de la bibliografía (Brown y Nagamatsu (1977) Australian J. Chem. 30: 2515; y Brown y Nagamatsu (1978) Australian J. Chem. 31: 2505 y las referencias citadas en dichos lugares) la transposición de 1,2,4-triazolo[4,3-c]pirimidinas 25 para dar 1,2,4-triazolo[1,5-c]-pirimidinas 27 se efectúa en una diversidad de condiciones, que incluyen tratamiento con ácido o base, e incluso tratamiento extendido con R_{3}C(OR)_{3}. Adicionalmente, como se ilustra en el Esquema 4, otras condiciones que dan lugar a la transposición son (1) calentamiento en un ácido carboxílico; (2) tratamiento de las hidrazinas 24 con un aldehído, seguido por reacción de bromo en ácido acético; (3) acilación de las hidrazinas 24 con un anhídrido, seguida por tratamiento con POCl_{3}; (4) calentamiento de la hidrazina 24 con bromuro de cianógeno; y (5) calentamiento de la hidrazina 24 con urea en NMP.

Los puntos isómeros 1,2,4-triazolo[1,5-c]pirimidinas 25 y 1,2,4-triazolo[1,5-c]pirimidinas 27 pueden separarse fácilmente por PTLC o cromatografía en columna. Las 1,2,4-triazolo[1,5-c]pirimidinas 25 descritas en esta memoria son más polares que sus isómeros 27 correspondientes. La totalidad de las 1,2,4-triazolo[4,3-c]pirimidinas 25 descritas en esta memoria pueden diferenciarse también fácilmente de sus isómeros 27 por sus espectros ^{1}H NMR. Las estructuras de las 1,2,4-triazolo[4,3-c]pirimidinas 25 descritas en esta memoria se confirman ulteriormente por conversión de las mismas en sus isómeros correspondientes 27 por tratamiento con HCl 0,1 N a la temperatura ambiente.

Esquema 6

15

El Esquema 6 ilustra la síntesis de las pirimidinas 30 condensadas con imidazol. El compuesto intermedio 13 se acopla con tributilestaño-viniletilo en condiciones de acoplamiento con Pd(Ph_{3}P)_{2}Cl_{2}, seguido por hidrólisis para dar la cetona 28. El tratamiento de la cetona 28 con formamida y ácido fórmico, seguido por POCl_{3} produce la ciclación para dar el compuesto 30.

Los compuestos pueden radiomarcarse por realización de sus síntesis utilizando precursores que comprenden al menos un átomo que es un radioisótopo. Cada radioisótopo es preferiblemente carbono (v.g., ^{14}C), hidrógeno (v.g., ^{3}H), azufre (v.g., ^{35}S), o yodo (v.g., ^{125}I). Pueden prepararse también catalíticamente compuestos marcados con tritio por intercambio catalizado con platino en ácido acético tritiado, intercambio catalizado por ácidos en ácido trifluoroacético tritiado, o intercambio catalizado heterogéneamente con tritio gaseoso utilizando el compuesto como sustrato. Adicionalmente, ciertos precursores pueden someterse a intercambio tritio-halógeno con tritio gaseoso, reducción con tritio gaseoso de los enlaces insaturados, o reducción utilizando borotritiuro de sodio, en caso apropiado. La preparación de compuestos radiomarcados puede ser realizada convenientemente por un suministrador de radioisótopos especializado en síntesis por encargo de compuestos sonda radiomarcados.

Los ejemplos que siguen se ofrecen a modo de ilustración y no a modo de limitación. A no ser que se especifique otra cosa, todos los radiactivos y disolventes son de calidad comercial estándar y se utilizan sin purificación ulterior. Los materiales de partida y compuestos intermedios descritos en esta memoria pueden obtenerse generalmente de fuentes comerciales, prepararse a partir de compuestos orgánicos disponibles comercialmente o prepararse utilizando métodos de síntesis bien conocidos.

Ejemplos

Los materiales de partida y diversos compuesto intermedios descritos en los ejemplos que siguen pueden obtenerse de fuentes comerciales, prepararse a partir de compuestos orgánicos disponibles comercialmente, o prepararse utilizando métodos de síntesis conocidos. Ejemplos representativos de métodos adecuados para preparación de compuestos intermedios de la invención se indican también a continuación.

En los ejemplos que siguen, las condiciones de LC-MS para la caracterización de los compuestos de esta invención son:

1.: Instrumentación de la HPLC/MS analítica: Los análisis se realizan utilizando una bomba de serie Waters 600 (Waters Corporation, Milford, MA), un Detector de Red de Diodos Waters 996 y un auto-muestreador Gilson 215 (Gilson Inc, Middleton, WI), analizador de ionización de masas por electropulverización con tiempo de vuelo Micromass® LCT. Los datos se adquieren utilizando el soporte lógico MassLynx™ 4.0, con procesamiento OpenLynx Global Server™, OpenLynx™ y AutoLynx™.

2.: Condiciones de la HPLC analítica: columna Chromolith™ SpeedROD RP-18e de 4,6 x 50 mm (Merck KGaA, Darmstadt, Alemania); UV 10 spectra/sec, 220-340 nm sumado; caudal 6,0 ml/min; volumen de inyección 1 \mul; condiciones de gradiente - la fase móvil A es 95% agua, 5% MeOH con 0,05% TFA; la fase móvil B es 95% MeOH, 5% agua con 0,025% TFA, y el gradiente es 0-0,5 minutos 10-100% B, mantenimiento a 100% B durante 1,2 minutos, retorno a 10% B a los 1,21 minutos, y el tiempo del ciclo de inyección a inyección es 2,15 minutos.

3.: Condiciones de la MS analítica: Voltaje de capilar 3,5 kV, voltaje de cono 30 V; la temperaturas de desolvatación y de la fuente son 350ºC y 120ºC, respectivamente; intervalo de masas 181-750 con un tiempo de barrido de 0,22 segundos y un retardo entre barridos de 0,05 minutos.

Ejemplo 1 Síntesis de imidazo[1,2-c]pirimidinas A. 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina (106)

16

Paso 1

Preparación de 5-propil-6-metil-pirimidin-4-ona (100)

17

Se añade NaOMe (1,30 g, 24 mmol) a una solución agitada de formamidina (12 mmol) en MeOH (75 ml) a la temperatura ambiente. La mezcla se agita durante 15 minutos. Se añade éster metílico del ácido 2-acetil-pentanoico (10 mmol) y la mezcla se agita a la temperatura ambiente durante una noche. Se añade ácido acético (0,72 g, 12 mmol) y se elimina el disolvente a vacío. Se añade agua (30 ml) al residuo y se extrae con 2-butanona (3 x 30 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (40 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan, para proporcionar un sólido amarillo (100), que se utiliza en el paso siguiente sin purificación ulterior.

Paso 2

Preparación de 5-propil-4-cloro-6-metil-pirimidina (101)

18

Una mezcla de 100 (10 mmol) y POCl_{3} (25 ml) se calienta a 85ºC durante 4 horas. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo EtOAc (30 ml) y agua (30 ml). Se añade cuidadosamente NaHCO_{3} hasta que el pH de la capa acuosa es mayor que 7. Se separan las capas y se extrae la capa acuosa con EtOAc (2 x 30 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (50 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan. La purificación en columna de vaporización súbita del residuo con EtOAc:hexano 6:1 proporciona en producto 101 como un aceite amarillo claro.

Paso 3

Preparación de 5-propil-6-bromometil-4-cloro-pirimidina (102)

19

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Se añade gota a gota Br_{2} (1,28 g, 8 mmol) a una solución agitada 101 en HOAc (20 ml) calentada a 85ºC. Después de la adición, la mezcla se agita a 85ºC durante una hora. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo EtOAc (25 ml) y NaHCO_{3} (25 ml). Se separan las capas y la capa orgánica se lava con solución de Na_{2}S_{2}O_{3} (sat. 15 ml) seguido por salmuera (20 ml). La fase orgánica se seca (Na_{2}SO_{4}) y se evapora. El aceite amarillo resultante se purifica en una columna de vaporización súbita (EtOAc:hexano 6:1) para proporcionar el producto (102) como un sólido amarillo claro.

Paso 4

Preparación de 6-cloro-4-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-propilpirimidina (103)

20

Se prepara 6-fluoro-2-(1H-imidazol-2-il)-piridina como se describe en el Ejemplo 16 de la Solicitud de Patente U.S. 10/038069, presentada el 12 de Diciembre de 2001 y publicada como US 2003/0069257 en 10 de Abril de 2003, que se incorpora en esta memoria por referencia en la página 31 por su doctrina con relación a la síntesis de este compuesto. Una mezcla de 102 o 5-propil-6-clorometil-4-cloro-pirimidina (1 mmol de cualquiera), 6-fluoro-2-(1H-imidazol-2-il)-piridina (163 mg, 1 mmol) y K_{2}CO_{3} (452 mg, 4 mmol) en DMF (6 ml) se agita a la temperatura ambiente durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo EtOAc (10 ml) y agua (10 ml). Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con EtOAc (10 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (10 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan. La separación por PTLC del residuo con 5% de MeOH en CH_{2}Cl_{2} proporciona el producto 103 como un sólido blanco.

Paso 5

Preparación de 6-azido-4-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-propil-pirimidina (104)

21

Una solución de 103 (2,25 mmol) y NaN_{3} (731 mg, 11,25 mmol) en DMF (15 ml) se calienta a 70ºC en un tubo herméticamente cerrado durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo agua (10 ml) y EtOAc (10 ml). Se separan las capas y la capa acuosa se extrae con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (15 ml) y se secan con Na_{2}SO_{4}. Se elimina el disolvente a vacío y el aceite amarillo resultante (104) se utiliza en el paso siguiente sin purificación ulterior.

Paso 6

Preparación de 6-amino-4-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-propil-pirimidina (105)

22

Se añade Pd/C (1,0%, 10 mg) a una solución de 104 (2 mmol) en MeOH (20 ml). La mezcla se agita bajo H_{2} a 30 psi (2,11 kg/cm^{2}) durante 4 horas. Se separa el catalizador por filtración y el filtrado se evapora a vacío. El sólido amarillo claro resultante (105) se utiliza en el paso siguiente sin purificación ulterior.

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Paso 7

Preparación de 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina (106)

23

Una solución de 105 (1,2 mmol) y cloroacetaldehído (1 ml) en DMF (10 ml) se calienta durante una noche a 70ºC en un tubo herméticamente cerrado. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo EtOAc (15 ml) y agua (15 ml). Se separan las capas y la capa acuosa se extrae con EtOAc (15 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (15 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan. La separación por PTLC del residuo con 10% de MeOH en CH_{2}Cl_{2} proporciona el compuesto del título como un sólido blanco (106). ^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,78, (s, 1H), 8,11 (dd, 1H), 7,83 (q, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,18 (d, 1H), 7,15 (d, 1H), 6,83 (dd, 1H), 6,04 (s, 2H), 3,07-3,13 (m, 2H), 1,62-1,72 (m, 2H), 0,99 (t, 3H).

B. Síntesis de imidazo[1,2-c]pirimidinas adicionales

Los compuestos que se muestran en la Tabla 1 se sintetizan por los métodos proporcionados en los Esquemas 1 y 2 y se ilustran adicionalmente por el Ejemplo 1A. Todos los compuestos de la Tabla 1 exhiben un valor K_{i} menor que 1 micromolar en el ensayo de fijación de ligandos del Ejemplo 6, como lo hacen los compuestos 106 (anterior) y 119, 127, y 129 (más adelante).

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TABLA 1

24

25

26

C. 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-metil-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina (119)

27

Paso 1

Preparación del éster dietílico del ácido 2-oxo-3-propil-succinico (120)

28

A la temperatura ambiente, se añade una mezcla de éster etílico del ácido pentanoico (0,4 mol) y oxalato de dietilo (compuesto 11 en el Esquema 1) (73,1 g, 0,5 mol) a una solución de NaOEt (32,7 g, 0,48 mol) en EtOH (250 ml). La mezcla se agita a la temperatura ambiente durante 30 minutos y el EtOH se elimina por destilación. El residuo se purifica luego por destilación a vacío, lo que proporciona el producto (120) como un aceite claro.

Paso 2

Preparación del éster etílico del ácido 2-metil-5-propil-6-hidroxi-pirimidina-4-carboxílico (121)

29

Una mezcla de 120 (20 mmol), hidrocloruro de acetamidina (40 mmol) y K_{2}CO_{3} (6,9 g, 50 mmol) en EtOH (50 ml) se calienta a 70ºC durante una noche. Se filtra el sólido y el residuo se disuelve en agua (30 ml). Se añade ácido acético para ajustar el pH a 4. Se extrae luego la mezcla con CH_{2}CH_{2} (4 x 50 ml) y los extractos reunidos se lavan con salmuera (100 ml). La solución se seca (Na_{2}SO_{4}) y se evapora a vacío para dar un sólido amarillo claro (121), que se utiliza directamente en el paso siguiente.

Paso 3

Preparación de éster etílico del ácido 2-metil-5-propil-6-cloro-pirimidina-4-carboxílico (122)

30

\newpage

Una mezcla de 121 (10 mmol) y POCl_{3} (25 ml) se calienta a 85ºC durante 4 horas. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo EtOAc (40 ml) y agua (30 ml). Se añade cuidadosamente NaHCO_{3} hasta que el pH de la capa acuosa es mayor que 7. Se separan las capas y la capa acuosa se extrae con EtOAc (2 x 30 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (50 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan. La purificación en columna de vaporización súbita del residuo con EtOAc:hexano 3:1 proporciona el producto (122) como un aceite amarillo claro.

Paso 4

Preparación de 2-metil-5-propil-4-clorometil-6-cloro-pirimidina (123)

31

Se añade NaBH_{4} (91 mg, 2,4 mmol) a una solución de 122 (0,48 mmol) en MeOH (10 ml), se enfría a 0ºC, y la mezcla se agita a la temperatura ambiente durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo agua (10 ml) y EtOAc (10 ml). Se separan las capas y la capa acuosa se extrae con EtOAc (10 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (20 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan. El aceite claro resultante se disuelve luego en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se añade cloruro de tionilo (1 ml). La mezcla se agita a la temperatura ambiente durante 4 horas. Se separa luego el disolvente. Se añade EtOAc (15 ml) al residuo y se lava éste con NaHCO_{3} (15 ml) y salmuera (15 ml), se seca luego (Na_{2}SO_{4}) y se evapora. La cromatografía en columna de vaporización súbita del residuo proporciona el producto (123) como un aceite amarillento.

Paso 5

Preparación de 4-cloro-6-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-5-propil-pirimidina (124)

32

Una mezcla de 123 (1 mmol), 6-fluoro-2-(1H-imidazol-2-il)piridina preparada como se describe arriba (163 mg, 1 mmol) y K_{2}CO_{3} (552 mg, 4 mmol) en DMF (6 ml) se agita a la temperatura ambiente durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo EtOAc (10 ml) y agua (10 ml). Se separan las capas y la capa acuosa se extrae con EtOAc (10 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (10 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan. La separación por PTLC del residuo con 5% MeOH en CH_{2}Cl_{2} proporciona el producto (124) como un sólido blanco.

Paso 6

Preparación de 4-azido-6-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-5-propil-pirimidina (125)

33

Una solución de 124 (2,25 mmol) y NaN_{3} (731 mg, 11,25 mmol) en DMF (15 ml) se calienta a 70ºC en un tubo herméticamente cerrado durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo agua (10 ml) y EtOAc (10 ml). Se separan las capas y la capa acuosa se extrae con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (15 ml) y se secan con Na_{2}SO_{4}. El disolvente se separa a vacío y el aceite amarillo resultante (125) se utiliza en el paso siguiente sin purificación ulterior.

Paso 7

Preparación de 4-amino-6-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-5-propil-pirimidina (126)

34

Se añade Pd/C (10%, 10 mg) a una solución de 4-azido-6-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-5-propil-pirimidina (2 mmol) (125) en MeOH (20 ml) y la mezcla se agita bajo H_{2} a 30 psi (2,11 kg/cm^{2}) durante 4 horas. El catalizador se separa por filtración y el filtrado se evapora a vacío. El sólido amarillo claro resultante (126) se utiliza en el paso siguiente sin purificación ulterior.

Paso 8

Preparación de 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-metil-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina (119)

35

Una solución de 126 (1,2 mmol) y cloroacetaldehído (1 ml) en DMF (10 ml) se calienta a 70ºC en un tubo herméticamente cerrado durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo agua (15 ml) y EtOAc (15 ml). Se separan las capas y la capa acuosa se extrae con EtOAc (15 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (15 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan. La separación por PTLC del residuo con 10% MeOH en CH_{2}Cl_{2} proporciona el compuesto del título (119) como un sólido blanco: LC-MS, M+1 351,1; ^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta 8,10 (dd, 1H), 7,85 (q, 1H), 7,66 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,20 (d, 1H), 7,12 (d, 1H), 6,86 (dd, 1H), 6,02 (s, 2H), 3,01-3,07 (m, 2H), 2,69 (s, 3H), 1,60-1,67 (m, 2H), 0,94 (t, 3H).

D. Síntesis de 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina-2-carbonitrilo (127)

36

Paso 1

Preparación de la amida del ácido 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina-2-carboxílico (128)

37

\newpage

Se hace pasar amoniaco gaseoso a través de una solución agitada de éster etílico del ácido 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina-2-carboxílico (110, anterior) (1 mmol) en EtOH (7 ml) en un tubo herméticamente cerrado durante 20 minutos a 0ºC. Se sella luego el tubo y se calienta a 90ºC durante 2 días. Se evapora el disolvente y el residuo (128) se utiliza directamente en el paso siguiente sin purificación ulterior.

Paso 2

Preparación de 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina-2-carbonitrilo (127)

Se añade POCl_{3} (0,5 ml) a una solución de 128 (0,75 mmol) en piridina (3 ml) y la mezcla se agita a la temperatura ambiente durante una noche. Se evapora el disolvente y el residuo se purifica por PTLC (5% MeOH en CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar el producto (127); LC-MS, M+1 362,1; ^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta 8,77 (s, 1H), 8,11 (dd, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,82 (q, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 6,82 (dd, 1H), 6,03 (s, 2H), 3,11-3,17 (m, 2H), 1,67-1,75 (m, 2H), 1,01 (t, 3H).

E. 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina-3-carbonitrilo (129)

Este compuesto se sintetiza como se describe en los Esquemas 1 y 3 anteriores y como se ilustra ulteriormente en el Ejemplo 1D.

38

LC-MS, M+1 362,1; ^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta 8,95 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,14 (dd, 1H), 7,83 (q, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,20 (s, 1H), 6,82 (dd, 1H), 6,09 (s, 2H), 3,17-3,22 (m, 2H), 1,68-1,75 (m, 2H), 1,01 (t, 3H).

Ejemplo 2 Síntesis de [1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidinas A. 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina (130)

39

Paso 1

Preparación de 3-fluoro-2-(1H-imidazol-2-il)-piridina

40

La 3-fluoro-2-(1H-imidazol-2-il)-piridina, que se utiliza como material de partida (v.g., en lugar de 6-fluoro-2-(1H-imidazol-2-il)-piridina en el procedimiento dado anteriormente) en la síntesis de ciertos compuestos, se prepara como sigue: Se añade gota a gota n-BuLi (2,5 M en hexano, 86 ml, 1,05 eq.) a lo largo de un intervalo de 90 minutos a una solución de 3-fluoropiridina (20 g, 0,206 mol) y N,N,N',N'-tetrametiletilenodiamina (31,3 ml, 0,206 mol) en éter etílico (350 ml) a -78ºC bajo nitrógeno. La mezcla se agita a esta temperatura durante 3 horas más. Se añade luego DMF anhidra (45 ml) a la misma temperatura. Se deja calentar la mezcla a la temperatura ambiente durante una noche. Se añade agua (170 ml) y se separa la capa orgánica. La capa acuosa se extrae con éter (3 x 200 ml), y luego con acetato de etilo (2 x 200 ml). Las capas orgánicas reunidas se secan (MgSO_{4}) y se evapora el disolvente a vacío. El producto bruto se purifica por cromatografía en columna (hexano:éter 2:1) para dar 3-fluoro-piridina-2-carbaldehído como un aceite amarillento.

Se añaden glioxal (4% p/p H_{2}O, 16,0 g, 0,110 mol) e hidróxido de amonio (concentrado, 29 ml) a una solución de 3-fluoro-piridina-2-carbaldehído (11,5 g, 0,092 mol) en MeOH (450 ml) a 0ºC. La mezcla se deja calentar gradualmente a la temperatura ambiente durante un periodo de 18 horas. Se elimina el disolvente. Se añade agua (100 ml) al residuo y la mezcla se extrae con cloruro de metileno (5 x 150 ml). Las capas orgánicas reunidas se lavan con salmuera (2 x 100 ml), se secan y se elimina el disolvente. El producto se tritura con éter etílico (200 ml) para dar 3-fluoro-2-(1H-imidazol-2-il)-piridina como un sólido.

Paso 2

Preparación de {6-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-propil-pirimidin-4-il}-hidrazina (131)

41

Una mezcla de 4-cloro-6-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-propil-pirimidina (preparada a partir de 5-propil-6-bromometil-4-cloro-pirimidina y 3-fluoro-2-(1H-imidazol-2-il)-piridina esencialmente como se describe en el Ejemplo 1) (2,5 g, 7,5 mmol) y monohidrato de hidrazina (1,37 g, 27,4 mmol) en EtOH (15 ml) se calienta en un tubo herméticamente cerrado a 70ºC durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío y el residuo se tritura con acetato de etilo y éter etílico. La filtración da un sólido blanco (131) que se utiliza en el paso siguiente sin purificación ulterior.

Paso 3

Preparación de 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-il-metil]-2-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo-[1,5-c]-pirimidina (130)

Una solución de 131 (2,5 g) en ácido acético (25 ml) se calienta en un tubo herméticamente cerrado a 110ºC durante una noche. Se elimina el exceso de ácido acético a vacío y se añaden al residuo NaHCO_{3} (aq.) (50 ml) y diclorometano (150 ml). Se separa la capa orgánica y la capa acuosa se extrae con diclorometano (2 x 40 ml). Las capas orgánicas reunidas se secan (Na_{2}SO_{4}) y se elimina el disolvente. El producto bruto (130) se separa por cromatografía en columna (5% MeOH en diclorometano); LC-MS, M+1 352,1; ^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 9,03 (s, 1H), 8,38 (dt, 1H), 7,53 (td, 1H), 7,31-7,25 (m, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,20 (d, 1H), 5,83 (s, 2H), 2,93 (t, 2H), 2,60 (s, 3H), 1,70-1,58 (m, 2H), 0,958 (t, 3H).

B. Síntesis de [1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidinas adicionales

Los compuestos que se muestran en la Tabla 2 se sintetizan por métodos proporcionados en los Esquemas 1 y 4 e ilustrados adicionalmente por el Ejemplo 2A. Todos los compuestos de la Tabla 2 exhiben un valor K_{i} menor que 1 micromolar en el ensayo de fijación de ligandos proporcionado en el Ejemplo 6, como lo hacen los compuestos 130 (anterior) y los compuestos 155-158, 167, 171, 173-177 y 186-189 (siguientes).

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TABLA 2

42

43

44

45

C. 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-fenil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina (155)

46

Una mezcla de {6-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-propil-pirimidin-4-il}-hidrazina (131) (60 mg, 0,18 mmol), benzaldehído (21 mg, 0,2 mmol) en EtOH se calienta a reflujo durante 4 horas. Se elimina el disolvente a vacío. Se añade al residuo HOAc (2 ml), y se añade luego lentamente bromo (0,3 mmol). La mezcla se agita a la temperatura ambiente durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío y el residuo se trata con NaHCO_{3} (aq) y DCM. Se separa la capa orgánica y la capa acuosa se extrae con DCM (2 x 0 ml). Las capas orgánicas reunidas se secan (MgSO_{4}), se elimina el disolvente, y el producto bruto se purifica por PTLC (MeOH al 10% en DCM) para dar un sólido blanco; ^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,93 (s, 1H), 8,44 (dd, 1H), 7,78-7,88 (m, 2H), 7,51-7,63 (m, 4H), 7,22-7,36 (m, 3H), 5,82 (s, 2H), 3,05 (q, 2H), 1,70-1,80 (m, 2H), 1,02 (t, 3H).

D. 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-isopropil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina (156)

47

Se añade anhídrido isobutírico (0,5 ml) a una mezcla de 131 (45 mg) en cloruro de metileno (10 ml). La mezcla se agita a la temperatura ambiente durante una hora. Se elimina el disolvente para obtener un residuo, LC-MS (M+1) 398,17. El residuo se disuelve en POCl_{3} (1 ml), y la mezcla se calienta a 85ºC durante una hora. Se elimina el exceso de POCl_{3}. El residuo se disuelve en cloruro de metileno, y se lava con NaHCO_{3} sat. se seca, y se purifica por TLC con 5% de MeOH en cloruro de metileno para dar el producto del título (156). ^{1}H-NMR \delta (CDCl_{3}) 1,02 (t, 3H, J = 5,4 Hz), 1,43 (d, 6H, J = 6,0 Hz), 1,71 (p, 2H, J = 5,4 Hz), 2,93 (m, 2H), 3,29 (sep, 1H, J = 6,0 Hz), 5,57 (s, 2H), 7,22-7,36 (m, 2H), 7,70-7,82 (m, 2H), 8,82 (d, 1H, J = 3,3 Hz), 9,04 (s, 1H). LC-MS (M+1) 380,17.

E. 2-fluorometil-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)imidazol-1-ilmetil]-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina (157)

48

A una solución de {7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-2-il}-metanol (compuesto 223, más adelante) (31 mg, 0,08 mmol) en diclorometano (5 ml) se añade trifluoruro de bis(2-metoxietil)aminoazufre (0,2 ml, 50% en THF) a la temperatura ambiente bajo N_{2}. La mezcla se agita durante 2 horas y se vierte en NaHCO_{3} saturado (10 ml) y, después que cesa el desprendimiento de CO_{2}, se extrae en diclorometano, se seca (MgSO_{4}), se filtra y se evapora a vacío. La PTLC con 5% MeOH/diclorometano da el producto puro (157). ^{1}H-NMR: 0,98 (3H, t, J = 5,4 Hz), 1,67 (2H, m), 2,99 (2H, m), 5,69 (2H, d, J = 35,1 Hz), 5,88 (2H, s), 7,22 (1H, s), 7,22-7,31 (2H, m), 7,54 (1H, t, J = 6,0 Hz), 8,39 (1H, s), 9,13 (1H, s). LCMS (M+1) 370,20.

F. 8-(2,2-difluoro-etil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina (158)

49

Paso 1

Preparación del éster metílico del ácido 2-(2-benciloxi-etil)-3-oxo-butírico (159)

50

A una suspensión de NaH (2,0 g, 60% en aceite mineral) en DME (50 ml) a 0ºC se añade gota a gota una solución de acetoacetato de metilo (5,8 g, 50 mmol) en DME (10 ml). Se agita la solución a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se añade NaI (7,5 g) en una sola porción y a continuación éter bencil-bromoetílico (10,75 g, 50 mmol). La mezcla se agita a 70-80ºC durante una noche. Después de separar el sólido formado, se elimina el disolvente. El residuo se purifica en columna con 4:1 de hexano a acetato de etilo para dar un aceite incoloro (159).

Paso 2

Preparación de 5-(2-benciloxi-etil)-6-metil-pirimidin-4-ol (160)

51

Se añade NaOMe (2,75 g, 50 mmol) a una solución agitada de acetato de formamidina (25 mmol) en MeOH (75 ml) a la temperatura ambiente. La mezcla se agita durante 15 minutos. Se añade éster metílico del ácido 2-(2-benciloxi-etil)-3-oxo-butírico (20 mmol) y la mezcla se agita a la temperatura ambiente durante una noche. Se añade ácido acético (1,5 g, 20 mmol) y se elimina el disolvente a vacío. Se añade agua (30 ml) al residuo y la mezcla se extrae con 2-butanona (3 x 30 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (40 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan, para proporcionar un sólido amarillo (160).

Paso 3

Preparación de 5-(2-benciloxi-etil)-4-cloro-6-metil-pirimidina (161)

52

Una mezcla de 160 (4,1 g, 17 mmol) y POCl_{3} (10 ml) se calienta a 100ºC durante 3 horas. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo EtOAc (30 ml) y agua (30 ml). Se añade cuidadosamente NaHCO_{3} (aq.) hasta que el pH de la capa acuosa es mayor que 7. Se separan las capas y la capa acuosa se extrae con EtOAc (2 x 30 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (50 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evapora el disolvente. La purificación en columna de vaporización súbita del residuo (EtOAc:hexano = 1:2) proporciona el producto (161) como un aceite amarillo claro.

Paso 4

Preparación del éster 2-(4-bromometil-6-cloro-pirimidin-5-il)-etílico del ácido acético (162) y 5-(2-benciloxi-etil)-4-bromometil-6-cloro-pirimidina

53

Se añade gota a gota Br_{2} (1,4 g, 8 mmol) a una solución agitada de 5-(2-benciloxi-etil)-4-cloro-6-etil-pirimidina (2,1 g, 8 mmol) en HOAc (20 ml) a 85ºC. Después de la adición, se agita la mezcla a 85ºC durante una hora más. Se elimina el disolvente a vacío y se añaden al residuo EtOAc (25 ml) y NaHCO_{3} (25 ml). Se separan las capas y la capa orgánica se lava con solución de Na_{2}S_{2}O_{3} (sat. 15 ml) seguida por salmuera (20 ml). La fase orgánica se seca (Na_{2}SO_{4}) y se evapora el disolvente. El aceite amarillo resultante se purifica en una columna de vaporización súbita (EtOAc:hexano = 6:1) para proporcionar 5-(2-benciloxi-etil)-4-bromometil-6-cloro-pirimidina como un sólido amarillo claro y éster 2-(4-bromometil-6-cloro-pirimidin-5-il)-etílico del ácido acético (162).

Paso 5

Preparación de éster 2-{4-cloro-6-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-pirimidin-5-il}-etílico del ácido acético (163)

54

Una mezcla de 162 (8,4 mmol), 3-fluoro-2-(1H-imidazol-2-il)-piridina (arriba descrita) (1,38 g, 8,4 mmol) y K_{2}CO_{3} (1,17 g, 8,4 mmol) en DMF (6 ml) se agita a la temperatura ambiente durante una noche. Se añaden a la mezcla EtOAc (20 ml) y agua (10 ml). Se separa la capa orgánica y la capa acuosa se extrae con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (10 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evapora el disolvente. La separación por PTLC del residuo (5% MeOH en CH_{2}Cl_{2}) da el producto (163) como un sólido blanco.

Paso 6

Preparación de 2-{4-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-6-hidrazinopirimidin-5-il}-etanol (164)

55

Una mezcla de 163 (1,72 g, 4,6 mmol) y monohidrato de hidrazina (0,95 g, 19 mmol) en EtOH (20 ml) se calienta a 70ºC durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío y el residuo se tritura con acetato de etilo y dietil-éter. La filtración da el producto (164) como un sólido blanco.

Paso 7

Preparación de 2-{7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-8-il}- etanol (165)

56

Una suspensión de 164 en ácido acético (15 mmol) se agita a 100ºC durante una noche. Se separa el ácido acético a vacío y se añaden al residuo NaHCO_{3} (aq.) (50 ml) y diclorometano (150 ml). Se separa la capa orgánica y la capa acuosa se extrae con diclorometano (2 x 40 ml). Las capas orgánicas reunidas se secan (Na_{2}SO_{4})y se elimina el disolvente. El producto bruto se agita con 10% de HCl durante una hora. La mezcla se neutraliza con NaHCO_{3} saturado, se extrae con diclorometano, se seca y se elimina el disolvente. El producto bruto se separa por cromatografía en columna (5% MeOH en diclorometano) para dar el producto (165).

Paso 8

Preparación de {7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-8-il}-ace- taldehído (166)

57

Una solución de Dess-Martin (1,56 g, 3,67 mmol) en cloruro de metileno (8 ml) se añade a una solución de 165 (1,3 g, 3,67 mmol) en cloruro de metileno (10 ml). Después de 2 horas, la mezcla de reacción homogénea se diluye con éter. Se lava la mezcla con solución 1,3 M de NaOH y se seca (MgSO_{4}). La TLC con 5% MeOH/cloruro de metileno da el producto 166.

\newpage

Paso 9

Preparación de 8-(2,2-difluoro-etil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]-triazolo[1,5-c]pirimidina (158)

58

A una solución de 166 (30 mg, 0,085 mmol) en diclorometano (5 ml) a 0ºC se añade trifluoruro de bis(2-metoxietil)aminoazufre (0,5 ml, 50% en THF) bajo N_{2}. La mezcla se calienta a 60ºC durante 2 horas y se vierte en NaHCO_{3} saturado (10 ml). Después de cesar el desprendimiento de CO_{2}, se extrae la mezcla en diclorometano, se seca (MgSO_{4}), se filtra y se evapora a vacío. La PTLC en 5% MeOH/diclorometano da el producto del título puro (158). ^{1}H-NMR: 2,59 (3H, s), 1,67 (2H, m), 3,72 (2H, m), 5,88 (2H, s), 6,25 (1H, tt, J = 42,3, 3,3 Hz), 7,26-7,3 (3H, m), 7,543 (1H, t, J = 6,0 Hz), 8,35 (1H, s), 9,10 (1H, s). LC-MS (M+1) 374,07.

G. 2-[1-(8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-il-metil)-1H-imidazol-2-il]-nicotinonitrilo (167)

59

Paso 1

Preparación de 7-etil-8-propil-[1,2,4]triazolo-[1,5-c]pirimidina (168)

60

Una mezcla de 4-cloro-6-metil-5-propil-pirimidina (101) (500 mg, 2,93 mmol) y monohidrato de hidrazina (880 mg, 17,6 mmol) en EtOH (15 ml) se calienta en un tubo herméticamente cerrado a 100ºC durante una noche. Al enfriar, se elimina el disolvente y se añade agua al residuo (15 ml). Se filtra el sólido y se lava con agua (5 ml) y éter (10 ml). Se calienta luego el sólido en ácido acético (10 ml) en un tubo herméticamente cerrado a 110ºC durante una noche. Se elimina el exceso de ácido acético a vacío. El residuo se neutraliza con bicarbonato de sodio acuoso y se extrae luego con acetato de etilo. Se elimina el disolvente por secado para dar el producto (168).

Paso 2

Preparación de 7-bromometil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina (169)

61

\newpage

Una mezcla de 168 (523 mg, 2,75 mmol) y bromo (1,12 g, 7 mmol) en ácido acético (15 ml) se calienta en un tubo herméticamente cerrado a 110ºC durante el fin de semana. Se elimina el disolvente y el residuo se neutraliza con bicarbonato de sodio acuoso y se extrae con acetato de etilo. Se elimina el disolvente por secado y el producto bruto se purifica por PTLC (acetato de etilo:hexanos 1:1) para dar el producto (169).

Paso 3

Preparación de 2-(1H-imidazol-2-il)-nicotino-nitrilo (170)

62

Una mezcla de 3-bromo-2-(1H-imidazol-2-il)-piridina (preparada a partir de 3-bromopiridina-2-carbonitrilo esencialmente como ha sido descrito por Clews et al., Síntesis (2001:1549) (675 mg, 3 mmol), cianuro de cinc (223 mg, 1,9 mmol), Pd_{2}(dba)_{3} (137 mg, 0,15 mmol), DPPF (160 mg, 0,3 mmol) y agua (0,2 ml) en DMF (15 ml) se desgasifica con argón durante 15 minutos. Se calienta luego la mezcla a 40ºC durante una noche en un tubo herméticamente cerrado. Se elimina el disolvente, se añade agua (30 ml) y la mezcla se extrae con cloruro de metileno. Se elimina el disolvente por secado (MgSO_{4}), y el sólido resultante se lava con éter (5 x 10 ml) para dar el producto (170).

Paso 4

Preparación de 2-[1-(8-propil-1,2,4)triazolo[1,5-c]pirimidin-7-ilmetil]-1H-imidazol-2-il)-nicotinonitrilo (167)

63

Una mezcla de 169 (56 mg, 0,22 mmol), 170 (42 mg, 0,25 mmol) y K_{2}CO_{3} (132 mg) en TMF (4 ml) se agita a la temperatura ambiente durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío. Se añade agua (10 ml) y la mezcla se extrae con acetato de etilo (3 x 25 ml). Las capas orgánicas reunidas se secan y se elimina el disolvente. El producto bruto se purifica por PTLC (5% MeOH en cloruro de metileno) para dar el producto del título (167) como un sólido. ^{1}H-NMR: 9,13 (s, 1H), 8,64-8,66 (m, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,07-8,10 (m, 1H), 7,29-7,34 (m, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,23 (s, 1H), 5,94 (s, 2H), 3,02-3,08 (m, 2H), 1,66-1,74 (m, 2H), 1,00 (t, 3H).

H. 6-[1-(8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-il-metil)-1H-imidazol-2-il]-piridina-2-carbonitrilo (171)

64

Paso 1

Preparación de 6-(1H-imidazol-2-il)-piridina-2-carbonitrilo (172)

65

Se añaden glioxal (40% p/p H_{2}O, 20 ml) e hidróxido de amonio (con. 40 ml) a una solución de 6-cloropiridina-2-carbaldehído (0,127 mol; preparado a partir de 2-cloro-6-metilpiridina esencialmente como ha sido descrito por Vacher et al. (1998) J. Med. Chem. 41: 5080) en MeOH (620 ml) a 0ºC. Se deja calentar La mezcla gradualmente a la temperatura ambiente durante un periodo de 18 horas. Se elimina el disolvente. Se añade agua (125 ml) al residuo y la mezcla se extrae con cloruro de metileno (5 x 150 ml). Las capas orgánicas reunidas se lavan con salmuera (2 x 100 ml), se secan y se elimina el disolvente. El producto bruto se tritura con etil-éter (200 ml) para dar 2-cloro-6-(1H-imidazol-2-il)-piridina como un sólido.

Una mezcla de 2-cloro-6-(1H-imidazol-2-il)-piridina (800 mg, 4,45 mmol), cianuro de cinc (313 mg, 2,68 mmol) Pd_{2}(dba)_{3} (122 mg, 0,133 mmol), DPPF ((144 mg, 0,27 mmol) y agua (0,1 ml) en DMF se desgasifica con argón durante 15 minutos. La mezcla se calienta luego a 40ºC durante una noche en un tubo herméticamente cerrado. Se elimina el disolvente y se añade agua (30 ml) y la mezcla se extrae con cloruro de metileno. Se elimina el disolvente por secado (MgSO_{4}). La separación en columna da el producto (172).

Paso 2

Preparación de 6-[1-(8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-ilmetil)-1H-imidazol-2-il]-piridina-2-carbonitrilo (171)

66

Una mezcla de 169 (97 mg, 0,38 mmol), 172 (64 mg, 0,38 mmol) y K_{2}CO_{3} (160 mg) en DMF (4 ml) se agita a la temperatura ambiente durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío. Se añade agua (10 ml) y la mezcla se extrae con acetato de etilo (3 x 25 ml). Las capas orgánicas reunidas se secan y se elimina el disolvente. El producto bruto se purifica por PTLC (5% MeOH en cloruro de metileno) para dar el producto del título (171) como un sólido. ^{1}H-NMR: 9,12 (s, 1H), 8,49 (q, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,87 (t, 1H), 7,56 (q, 1H), 7,21 (s, 2H), 6,11 (s, 2H), 3,13-3,19 (m, 2H), 1,71-1,79 (m, 2H), 1,02 (t, 3H).

I. 7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil-2-pirrolidin-1-il[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidina (173)

67

Paso 1

Preparación de 7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidin-2-amina (174)

68

Una solución de 131 (2,46 g, 7,52 mmol) y bromuro de cianógeno (879 mg, 8,3 mmol) en EtOH (18 ml) se calienta a reflujo durante 4 horas. Se elimina el disolvente a vacío y el residuo se reparte entre solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (20 ml) y EtOAc (20 ml). Se separan las capas y la capa acuosa se extrae con EtOAc (2 x 30 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (15 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan. El sólido así obtenido se lava con éter (10 ml), lo que proporciona un sólido amarillo claro 174.

Paso 2

Preparación de 2-bromo-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidina (175)

69

A una solución de 174 (788 mg, 2,24 mmol) en HBr acuoso (48%, 8 ml) enfriada a 0ºC se añade gota a gota una solución de NaNO_{2} (232 mg, 3,36 mmol) en agua (2 ml). La mezcla se agita a 0ºC durante 30 minutos y se añade CuBr (482 mg, 3,36 mmol) en 3 porciones. La mezcla se agita a 0ºC durante 30 minutos y se deja calentar luego a la temperatura ambiente en 2 horas. Se añade gota a gota NH_{4}OH concentrado a la solución hasta pH \geq 7. La mezcla se extrae luego con EtOAc (3 x 15 ml) y los extractos reunidos se lavan con salmuera (15 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan. El sólido pardo obtenido se lava con éter (4 ml) y a continuación con hexano (6 ml) lo que da 175 como un sólido pardo claro.

Paso 3

Preparación de 7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil-2-pirrolidin-1-il[1,2,4]-triazolo[1,5-c]pirimidina (173)

70

Una mezcla de 175 (77 mg, 0,185 mmol) y pirrolidina (0,5 ml) se agita a la temperatura ambiente durante 4 horas. Se elimina el disolvente a vacío y el residuo se reparte entre agua (5 ml) y EtOAc (5 ml). Se separan las capas y la capa acuosa se extrae con EtOAc (2 x 5 ml). Los extractos reunidos se lavan con salmuera (5 ml), se secan (Na_{2}SO_{4}) y se evaporan. La separación por PTLC del residuo con 5% MeOH en CH_{2}Cl_{2} da el compuesto del título 173 como un sólido blanco. H^{1} NMR (\delta, CDCl_{3}): 8,84 (s, 1H), 8,40 (m, 1H), 7,51-7,56 (m, 1H), 7,21-7,31 (m, 2H), 7,18 (s, 1H), 5,76 (s, 2H), 3,53-3,57 (m, 4H), 2,80-2,84 (m, 2H), 1,99-2,02 (m, 4H), 1,58-1,64 (m, 2H), 0,93 (t, 3H). LC-MS (M+1), 406,10.

J. 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-isopropoxi-8-propil-[1,2,4]-triazolo-[1,5-c]pirimidina (176)

71

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Paso 1

Preparación de 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-2-ol (177)

72

A la solución de 131 (3,27, 10 mmol) en NMP anhidra (3,6 ml) bajo nitrógeno se añade urea (1,60 g, 26 mmol). La mezcla resultante se calienta a 160ºC y se agita durante 6 horas. Después de enfriar, la mezcla de reacción se vierte en agua (80 ml), se ajusta el pH a 7 con ácido clorhídrico, y se extrae la solución con diclorometano (50 ml x 4). La solución orgánica se seca con sulfato de sodio anhidro y se concentra para dar el producto bruto 177 como un aceite que se utiliza directamente en el paso de reacción siguiente.

Paso 2

Preparación de 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-isopropoxi-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina (176)

73

A la solución del compuesto 177 en DMF (10 ml) se añaden carbonato de potasio anhidro (2 eq.) y 2-yodopropano (2 eq.). La mezcla resultante se agita a 60ºC durante una noche. Después de enfriar, la mezcla de reacción se vierte en agua (50 ml), se extrae la mezcla con diclorometano, y se seca sobre sulfato de sodio. La solución orgánica se concentra y se purifica por PTLC para dar el producto 176 como un aceite pegajoso. LC-MS (M+1) 396,3.

K. Síntesis de [1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidinas adicionales

Los compuestos que se muestran en la Tabla 3 se sintetizan como se ha ilustrado arriba.

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(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA 3

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Ejemplo 3 Síntesis de [1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidinas A. 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-il-metil]-3-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina (186)

76

Una suspensión de 131 (620 mg, 0,7 mmol) y anhídrido acético (2 ml) se agita a 110ºC durante una hora. Se añaden NaHCO_{3} (aq.) (10 ml) y diclorometano (10 ml). Se separa la capa orgánica y la capa acuosa se extrae con diclorometano (2 x 10 ml). Las capas orgánicas reunidas se secan (Na_{2}SO_{4}) y se elimina el disolvente. El producto bruto se separa por PTLC (5% de metanol en diclorometano) para dar 186; LC-MS, M+1 352,18; ^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,59 (s, 1H), 8,42 (d, 1H), 7,54 (t, 1H), 7,23-7,35 (m, 2H), 7,21 (s, 1H), 5,77 (s, 2H), 2,98 (t, 2H), 2,78 (s, 3H), 1,62-1,74 (m, 2H), 0,97 (t, 3H).

B. 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina (187)

77

Una suspensión de 131 (30 mg, 0,09 mmol) y acetato de dietoximetilo (1 ml) se agita a la temperatura ambiente durante 10 minutos. Se añaden NaHCO_{3} (aq.) (10 ml) y diclorometano (10 ml). Se separa la capa orgánica y la capa acuosa se extrae con diclorometano (2 x 10 ml). Las capas orgánicas reunidas se secan (Na_{2}SO_{4}) y se elimina el disolvente. El producto bruto se separa por PTLC (10% metanol en diclorometano) para dar 187; LC-MS, M+1 338,15; ^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,87 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,54 (t, 1H), 7,23-7,34 (m, 3H), 5,79 (s, 2H), 3,02 (t, 2H), 1,66-1,76 (m, 2H), 0,99 (t, 3H).

C. 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-fenil-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina (188)

78

Una suspensión de 131 (0,5 g, 1,5 mmol) y ortobenzoato de trimetilo (2 ml) se agita a 110ºC durante 2 horas. Se añaden NaHCO_{3} (aq.) (10 ml) y diclorometano (10 ml). Se separa la capa orgánica y la capa acuosa se extrae con diclorometano (2 x 10 ml). Las capas orgánicas reunidas se secan (Na_{2}SO_{4}) y se elimina el disolvente. El producto bruto se separa por PTLC (2:1 acetona:acetato de etilo) para dar 188; LC-MS, M+1 414,15; ^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,93 (s, 1H), 8,42 (d, 1H), 7,79-7,81 (m, 2H), 7,52-7,59 (m, 4H), 7,23-7,34 (m, 3H), 5,82 (s, 2H), 3,06 (t, 2H), 1,70-1,80 (m, 2H), 1,02 (t, 3H).

D. Difluorometil-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo-[4,3-c]pirimidina (198)

79

Una suspensión de 131 (230 mg, 0,7 mmol) y anhídrido difluoroacético (2 ml) se agita a 50ºC durante una hora. Se añaden NaHCO_{3} (aq.) (10 ml) y diclorometano (10 ml). Se separa la capa orgánica y la capa acuosa se extrae con diclorometano (2 x 10 ml). Las capas orgánicas reunidas se secan (Na_{2}SO_{4}) y se elimina el disolvente. El producto bruto se separa por PTLC (12:1 acetato de etilo:acetona) para dar 189; LC-MS, M+1 388,13; ^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,95 (s, 1H), 8,34 (d, 1H), 7,51 (t, 1H), 7,02-7,37 (m, 4H), 5,81 (s, 2H), 3,01 (t, 2H), 1,62-1,73 (m, 2H), 0,96 (t, 3H).

E. 8-etil-7-[2-(3-trifluorometil-fenil)-imidazol-1-il-metil]-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina (190) se sintetiza como se ha ilustrado arriba. LC-MS (M+1) 373,34.

80

F. Síntesis de [1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidinas adicionales

Los compuestos que se muestran en la Tabla 4 se sintetizan como se ha ilustrado arriba, y como se muestra en los Ejemplos 3A-D.

TABLA 4

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Ejemplo 4 Síntesis de imidazo[1,5-c]pirimidinas A. 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-1-metil-8-propil-imidazo[1,5-c]pirimidina (213)

84

Paso 1

Preparación de 1-{6-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-propil-pirimidin-4-il}-etanona (214)

85

Se añaden tributilestaño-viniletiléter (0,27 g) y Pd(Ph_{3}P)_{2}Cl_{2} (30 mg) a una solución de 4-cloro-6-[2-(6-fluoropiridin-2-il)imidazol-1-ilmetil]-5-propil-pirimidina (103) (0,168 g) en tolueno (30 ml). La mezcla se desgasifica durante 10 minutos, y se calienta luego a 110ºC durante una noche. Se elimina el disolvente a vacío para obtener un producto bruto. LC-MS: M+1 368,13. El producto bruto anterior se disuelve en MeOH (15 ml). Se añade HCl 6 N (10 ml) y la mezcla se agita a la temperatura ambiente durante 3 horas. Se elimina el disolvente, se neutraliza con NaHCO_{3} saturado, y se extrae con acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se secan, se elimina el disolvente para dar un producto bruto, que se purifica por TLC con 5% MeOH en diclorometano para dar el producto (214). ^{1}H-NMR \delta (CDCl_{3}) 1,01 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 1,67 (p, 2H, J = 7,2 Hz), 2,66 (s, 3H), 2,94 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 6,05 (s, 2H), 6,74 (dd, 1H, J = 6,0, 2,7 Hz), 7,10 (s, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,83 (q, 1H, J = 6,0 Hz), 6,13 (d, 1H, J = 6,0 Hz), 8,90 (s, 1H). LC-MS, (M+1) 340,14.

Paso 2

Preparación de N-(1-{6-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-propil-pirimidin-4-il}-etil)-formamida (215)

86

Se añaden 214 (0,1 g) y ácido fórmico (0,1 ml) a 2 ml de formamida a 160-180ºC. La mezcla se calienta a 160-180ºC durante 3 horas más. durante este periodo, se añade ácido fórmico adicional (0,2 ml). La mezcla se enfría a la temperatura ambiente y se vierte en agua (10 ml). La solución se alcaliniza a al menos pH 11 con hidróxido de sodio concentrado. La solución se extrae con acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se secan sobre MgSO_{4}, y se elimina el disolvente para dar el producto bruto. La separación por PTLC con 10% MeOH en cloruro de metileno da el producto del título (215). ^{1}H-NMR \delta (CDCl_{3}) 1,06 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 1,43 (dd, 2H, J = 5,1 Hz), 1,55-1,72 (m, 2H), 2,72-2,80 (m, 1H), 2,86-2,95 (m, 1H), 5,52 (p, 1H, J = 5,4 Hz), 5,81 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,08 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,73 (dd, 1H, J = 6, 2,1 Hz), 6,99 (d, 1H, J = 5,7 Hz), 7,12 (d, 1H, J = 7,0 Hz), 7,23 (d, 1H, J = 2,7 Hz), 7,78 (q, 1H, J = 6,0 Hz), 8,12 (dd, 1H, J = 6,0, 2,1 Hz), 8,18 (s, 1H), 8,79 (s, 1H). LC-MS, (M+1) 369,13.

Paso 3

Preparación de 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-1-metil-8-propil-imidazo[1,5-c]pirimidina (213)

87

Una mezcla de 215 (20 mg) y POCl_{3} (2 ml) se calienta a reflujo durante 3 horas. Se retira el exceso de POCl_{3}. Se añade acetato de etilo (10 ml), y la mezcla se lava con NaHCO_{3} saturado (5 ml), salmuera (5 ml), y se seca sobre MgSO_{4}. Después de evaporación del disolvente, el residuo se purifica por PTLC con 5% MeOH en diclorometano para dar el producto del título (213). ^{1}H-NMR \delta (CDCl_{3}) 0,99 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 1,55 (p, 2H, J = 7,2 Hz), 2,62 (s, 3H), 2,92 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 5,92 (s, 2H), 6,87 (dd, 1H, J = 8,1, 3 Hz), 7,15 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,85 (q, 1H, J = 8,1 Hz), 8,06 (s, 1H), 8,14 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 8,57 (s, 1H). LC-MS, (M+1) 351,12.

B. 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-1-metil-8-propil-imidazo[1,5,c]pirimidina (216)

88

^{1}H-NMR \delta (CDCl_{3}) 0,94 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 1,48 (p, 2H, J = 7,2 Hz), 2,58 (s, 3H), 2,72 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 5,61 (s, 2H), 7,18 (d, 1H, J = 2,7 Hz), 7,20 (s, 1H), 7,33 (m, 1H), 7,55 (t, 1H, J = 9,6 Hz), 8,05 (s, 1H), 8,47 (d, 1H, J = 4,5 Hz), 8,54 (s, 1H). LC-MS, (M+1) 351,14.

Ejemplo 5 Imidazopirimidinas y triazolopirimidinas adicionales

Los compuestos que se muestran en las Tablas 5 y 6, siguientes, se sintetizan por los métodos ilustrados en los Esquemas anteriores y los Ejemplos previos. En algunos casos, para producir los compuestos se emplean pasos adicionales de transformación de grupos funcionales bien conocidos por quienes poseen una experiencia ordinaria en la técnica. Un asterisco en la columna titulada "K_{i}" indica que el compuesto exhibe un valor K_{i} menor que 1 micromolar en el ensayo de fijación de ligandos proporcionado en el Ejemplo 6. Los compuestos 213 y 216, anteriores, exhiben también un valor K_{i} menor que 1 micromolar. Los datos de LCMS, donde se indican, se obtuvieron como se ha descrito arriba y se dan como M+1.

TABLA 5

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TABLA 6

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Ejemplo 6 Ensayo de fijación de ligandos A. Membranas corticales de rata purificadas

Se preparan membranas corticales de rata purificadas de acuerdo con el Procedimiento 1 o el Procedimiento 2:

: Procedimiento 1: Se homogeneíza córtex congelado de rata en Tris 7,4 50 mM enfriado en hielo (1 g córtex/150 ml tampón) utilizando un homogeneizador POLYTRON (ajuste 5 durante 30 segundos). Se vierte la suspensión en tubos de centrífuga, y se centrifuga luego durante 15 minutos a 20.000 rpm en un rotor SS34 (48.000 x g). Se desechan los sobrenadantes y los pelets se lavan dos veces con el mismo tampón y la misma velocidad de centrífuga. Los pelets finales se guardan en tubos de centrífuga tapados a -80ºC. Antes de su utilización, la membrana cortical de rata lavada se descongela y se resuspende en Tris 50 mM 7,4 enfriado en hielo (6,7 mg, peso de córtex congelado/ml tampón).

: Procedimiento 2: Se diseca y homogeneíza tejido cortical de rata en 25 volúmenes (p/v) de Tampón A (tampón Tris-HCl 0,05 M, pH 7,4 a 4ºC). El homogeneizado de tejido se centrifuga a baja temperatura (4ºC) a 20.000 x g durante 20 minutos). Se desecha el sobrenadante, se homogeneíza de nuevo el pelet en el mismo volumen de tampón, y se centrifuga nuevamente a 20.000 x g. El sobrenadante de este paso de centrifugación se decanta y el pelet se guarda a -20ºC durante una noche. Se descongela de nuevo el pelet y se resuspende en 25 volúmenes de Tampón A (peso/volumen original), se centrifuga a 20.000 x g y se decanta el sobrenadante. Este paso de lavado se repite una vez más. El pelet se resuspende finalmente en 50 volúmenes de Tampón A.

B. Ensayos de fijación de radioligandos

La afinidad de los compuestos de esta invención para el sitio de las benzodiazepinas del receptor GABA_{A} se confirma utilizando un ensayo de fijación descrito esencialmente por Thomas y Tallman (J. Bio. Chem. (1981) 156:9838-9842, y J. Neurosci. (1983) 3:433-440). Las membranas preparadas por el Procedimiento 1 se ensayan de acuerdo con el Método 1, y las membranas preparadas por el Procedimiento 2 se ensayan de acuerdo con el Método 2.

Método 1: Se llevan a cabo incubaciones a 1,2 mg de membrana/pocillo. Muestras duplicadas que contienen 180 \mul de suspensión de membrana, 20 \mul de ^{3}H-Ro15-1788 (Flumazenil ^{3}H (Perkin Elmer Life Sciences, Boston, MA) y 2 \mul de Compuesto de Ensayo o control en DMSO (volumen total de 202 \mul) se incuban a 4ºC durante 60 minutos. La incubación se termina por filtración rápida a través de esterillas de filtro sin tratar de 102 x 258 mm en el colector de filtración Tomtec (Hamden, CT) y los filtros se lavan 3 veces con Tris 7,4 50 mM enfriado en hielo. Se secan al aire los filtros y se someten a recuento en un Contador de Centelleo de Líquidos Wallac 1205 Betaplate: Se determina la fijación inespecífica (control) por desplazamiento de ^{3}H-RO15-1788 con ácido 4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indol-3-carboxílico-[4-(2-propilamino-etoxi)-fenil]-amida 10^{-6} M. Se calcula para cada compuesto la inhibición porcentual de la fijación específica total (Fijación Específica Total = Total - Inespecífica).

Método 2: Las incubaciones contienen 100 \mul de homogeneizado de tejido, 100 \mul de radioligando (0,5 nM ^{3}H-RO15-1788, actividad específica 80 Ci/mmol) y el compuesto de ensayo o control (véase más adelante) y se llevan a un volumen total de 500 \mul con Tampón A. las incubaciones se llevan a cabo durante 30 minutos a 4ºC y se filtran luego rápidamente a través de filtros Whatman GFB para separar el ligando libre del combinado. Los filtros se lavan dos veces con Tampón A nuevo y se someten a recuento en un contador de centelleo de líquidos. Se determina la fijación inespecífica (control) por desplazamiento de ^{3}H RO15-1788 con Diazepam 10 \muM (Research Biochemicals International, Natick, MA). Los datos se recogen por triplicado, se promedian, y se calcula para cada compuesto la inhibición porcentual de la fijación específica total (Fijación Específica Total = Total - Inespecífica).

Análisis: Se obtiene una curva de fijación de competición con hasta 11 puntos (v.g., 7 puntos) que abarcan el intervalo de concentraciones del compuesto de ensayo que va desde 10^{-12} M o 10^{-11} M a 10^{-5} M. Se determinan el valor CI_{50} y el coeficiente de Hill ("nH"), por adaptación de los datos de fijación de desplazamiento con ayuda del soporte lógico SIGMAPLOT (SPSS Inc. Chicago, IL). Se calcula el valor K_{i} utilizando la ecuación de Cheng-Prusoff (Biochemical Pharmacology 22:3099-3108 (1973)): K_{i} = CI_{50}/(1+[L]/K_{d}), donde CI_{50} se determina de acuerdo con SIGMAPLOT como la concentración de compuesto que desplaza ½ de la fijación máxima de ^{3}H-Ro15-1788, [L] es la concentración de ^{3}H-Ro15-1788 utilizada para marcar la diana, y K_{d} es la constante de disociación de la fijación de ^{3}H-Ro15-1788, determinada previamente como 1,0 nM. Los compuestos preferidos de la invención exhiben valores K_{i} menores que 100 nM y compuestos más preferidos de la invención exhiben valores de K_{i} menores que 10 nM.

Ejemplo 7 Electrofisiología

Se utiliza el ensayo siguiente para determinar si un compuesto de la invención altera las propiedades eléctricas de una célula y si el mismo actúa como agonista, antagonista o agonista inverso en el sitio de las benzodiazepinas del receptor GABA_{A}.

Los ensayos se llevan a cabo esencialmente como ha sido descrito en White y Gurley (NeuroReport 6: 1313-1316, 1995) y White, Gurley, Hartnett, Stirling y Gregory (Receptors and Channels 3:1-5, 1995) con modificaciones. Los registros electrofisiológicos se llevan a cabo utilizando la técnica "voltage-clamp" de dos electrodos para un potencial de retención de membrana de -70 mV. Se aíslan enzimáticamente oocitos de Xenopus laevis y se inyectan con cRNA no poliadenilado mezclado en una relación de 4:1:4 para las subunidades \alpha, \beta y \gamma, respectivamente. De las nueve combinaciones de subunidades \alpha, \beta y \gamma descritas en las publicaciones de White et al., combinaciones preferidas son \alpha_{1}\beta_{2}\gamma_{2}, \alpha_{2}\beta_{3}\gamma_{2}, \alpha_{3}\beta_{3}\gamma_{2} y \alpha_{5}\beta_{3}\gamma_{2}. Preferiblemente, todas las subunidades de cRNAs en cada combinación son clones humanos o son todas ellas clones de rata. Cada una de estas subunidades clonadas se describe en GENBANK, v.g., \alpha_{1} humana, núm. de acceso a GENBANK X14766, \alpha_{2} humana, núm. de acceso a GENBANK A28100; \alpha_{3} humana, núm. de acceso a GENBANK A28102; \alpha_{5} humana, núm. de acceso a GENBANK A28104; \beta_{2} humana, núm. de acceso a GENBANK M82919; \beta_{3} humana, núm. de acceso a GENBANK Z20136; \gamma_{2} humana, núm. de acceso a GENBANK X15376; \alpha_{1} de rata, núm. de acceso a GENBANK L08490; \alpha_{2} de rata, núm. de acceso a GENBANK L08491; \alpha_{3} de rata, núm. de acceso a GENBANK L08492, \alpha_{5} de rata, núm. de acceso a GENBANK L08494; \beta_{2} de rata, núm. de acceso a GENBANK X15467; \beta_{3} de rata, núm. de acceso a GENBANK X15468; y \gamma_{2} de rata, núm. de acceso a GENBANK L08497. Para cada combinación de subunidades, se inyecta un mensaje suficiente para cada subunidad constituyente a fin de proporcionar amplitudes de corriente de > 10 nA cuando se aplica GABA 1 \muM.

Los compuestos se evalúan contra una concentración de GABA que suscita < 10% de la intensidad de GABA suscitable máxima (v.g., 1 \muM-9 \muM). Cada oocito se expone a concentraciones crecientes de un compuesto a evaluar (compuesto de ensayo) a fin de evaluar una relación concentración/efecto. La eficacia del compuesto de ensayo se calcula como cambio porcentual en la amplitud de corriente: 100*((Ic/I)-1), donde Ic es la amplitud de la corriente suscitada por GABA observada en presencia del compuesto de ensayo e I es la amplitud de la corriente suscitada por GABA observada en ausencia del compuesto de ensayo.

La especificidad de un compuesto de ensayo para el sitio de las benzodiazepinas se determina después que se ha completado una curva concentración/efecto. Después de evaluar el oocito suficientemente para eliminar el compuesto de ensayo aplicado previamente, se expone el oocito a GABA+1 \muM RO15-1788, seguido por exposición a GABA+1 \muM RO15-1788 + compuesto de ensayo. El cambio porcentual debido a la adición del compuesto se calcula como se ha descrito arriba. Cualquier cambio porcentual observado en presencia de RO15-1788 se sustrae de los cambios porcentuales en la amplitud de corriente observados en ausencia de 1 \muM RO15-1788. Estos valores netos se utilizan para el cálculo de la eficacia media y los valores CE_{50} por métodos estándar. A fin de evaluar la eficacia media y los valores CE_{50}, se promedian los datos concentración/efecto a través de las células y se adaptan a la ecuación logística.

Ejemplo 8 Ensayo de toxicidad MDCK

Este ejemplo ilustra la evaluación de la toxicidad de los compuestos utilizando un ensayo de citotoxicidad para células de riñón de canino Madin Darby (MDCK).

Se añade 1 ml de compuesto de ensayo a cada pocillo de una placa de 96 pocillos con fondo claro (PACKARD, Meriden, CT) para dar la concentración de compuesto en el ensayo de 10 micromolar, 100 micromolar o 200 micromolar. Se añade a los pocillos de control disolvente sin compuesto de ensayo.

Se mantienen células MDCK, ATCC No. CCL-34 (American Type Culture Collection, Manassas, VA), en condiciones estériles siguiendo las instrucciones contenidas en la hoja de información de producción de la ATCC. Las células MDCK confluentes se tripsinizan, se cosechan y se diluyen a una concentración de 0,1 x 10^{6} células/ml con medio moderadamente caliente (37ºC) (VITACELL Minimum Essential Medium Eagle, Catálogo ATCC #30-2003). Se añaden 100 \mul de células diluidas a cada pocillo, excepto cinco pocillos de control de la curva estándar que contienen 100 \mul de medio moderadamente caliente sin células. La placa se incuba luego a 37ºC bajo 95% O_{2}, 5% CO_{2} durante 2 horas con agitación constante mediante sacudidas. Después de la incubación, se añaden 50 \mul de solución de lisis de células de mamífero por pocillo, se cubren los pocillos con pegatinas PACKARD TOPSEAL, y se agitan las placas mediante sacudidas a aproximadamente 700 rpm en una máquina de sacudidas adecuada durante 2 minutos.

Los compuestos que causan toxicidad disminuirán la producción de ATP, con relación a las células sin tratar. El estuche de detección de ATP PACKARD, (Meriden CT) ATP-LITE-M Luminiscent, producto No. 6016941, se utiliza generalmente de acuerdo con las instrucciones del fabricante para medir la producción de ATP en células MDCK tratadas y sin tratar. Se deja que los reactivos PACKARD ATP-LITE-M alcancen el equilibrio a la temperatura ambiente. Una vez equilibrada, la solución sustrato liofilizada se reconstituye en 5,5 ml de solución tampón de sustrato (del kit). Se reconstituye la solución estándar liofilizada de ATP en agua desionizada para dar un stock 10 mM. Para los cinco pocillos de control, se añaden a cada uno de los pocillos de control de la curva estándar 10 \mul de estándar PACKARD diluido serialmente para dar una concentración final en cada pocillo subsiguiente de 200 nM, 100 nM, 50 nM, 25 nM y 12,5 nM. Se añade solución sustrato PACKARD (50 ml) a todos los pocillos, que se tapan luego y se agitan las placas a aproximadamente 700 rpm en un agitador de sacudidas adecuado durante 2 minutos. Se fija una pegatina PACKARD blanca al fondo de cada placa y se adaptan las muestras a la oscuridad envolviendo las placas en papel metalizado y dejándolas en la oscuridad durante 10 minutos. Se mide luego la luminiscencia a 22ºC utilizando un contador de luminiscencia (v.g., Contador de Centelleo y Luminiscencia de Microplacas PACKARD TOPCOUNT, o TECAN SPECTRAFLUOR PLUS), y se calculan los niveles de ATP a partir de la curva estándar. Los niveles de ATP en las células tratadas con el o los compuestos de ensayo se comparan con los niveles determinados para las células sin tratar. Las células tratadas con 10 \muM de un compuesto de ensayo preferido exhiben niveles de ATP que son al menos 80%, preferiblemente al menos 90%, de las células sin tratar. Cuando se utiliza una concentración de 100 \muM del compuesto de ensayo, las células tratadas con los compuestos de ensayo preferidos exhiben niveles de ATP que son al menos 50%, preferiblemente al menos 80%, de los niveles de ATP detectados en las células sin tratar.

Claims

1. Un compuesto de la fórmula

101

o una sal farmacéuticamente aceptables del mismo, en donde:

: Z_{1} es nitrógeno o CR_{1},

: Z_{2} es nitrógeno o CR_{2}, y

: Z_{3} es nitrógeno o CR_{3}, tal que al menos uno, pero no más de dos, de Z_{1}, Z_{2} y Z_{3} son nitrógeno;

: R_{1}, R_{2}, R_{3} y R_{4} se seleccionan cada uno independientemente de:

(a): hidrógeno, halógeno, nitro y ciano; y

(b): grupos de la fórmula:

102

: en donde:

: L es un enlace o alquileno C_{1}-C_{8};

: G es un enlace, N(R_{B}), O, C(=O), C(=O)O, C(=O)N(R_{B}), N(R_{B})C(=O), S(O)_{m}, CH_{2}C(=O), S(O)_{m}N(R_{B}) o N(R_{B})S(O)_{m}; en donde m es 0, 1 ó 2; y

: R_{A} y cada R_{B} se seleccionan independientemente de:

(i): hidrógeno; y

(ii): alquilo C_{1}-C_{8}, alquenilo C_{2}-C_{8}, alquinilo C_{2}-C_{8}, (cicloalquil C_{3}-C_{8})alquilo C_{0}-C_{4}, (heterocicloalquil de 3 a 7 miembros)alquilo C_{0}-C_{4}, (aril C_{6}-C_{10})alquilo C_{0}-C_{2} o (heteroaril de 5 a 10 miembros)-alquilo C_{0}-C_{2}, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 4 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, alcanoílo C_{1}-C_{4}, mono- y di(alquil C_{1}-C_{4})amino, haloalquilo C_{1}-C_{4} y haloalcoxi C_{1}-C_{4};

: R_{5} es:

(a): hidrógeno, halógeno o ciano; o

(b): alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, o mono- o di-(alquil C_{1}-C_{4})-amino, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, alcoxi C_{1}-C_{4}, haloalquilo C_{1}-C_{2}, haloalcoxi C_{1}-C_{2}, mono- y di-(alquil C_{1}-C_{4})amino, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, fenilo, fenil-alcoxi C_{1}-C_{4} y heteroarilo de 5 ó 6 miembros;

\newpage

: Ar representa fenilo, naftilo o heteroarilo de 5 a 10 miembros, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 4 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, alquilo C_{1}-C_{8}, alquenilo C_{2}-C_{8}, alquinilo C_{2}-C_{8}, alcoxi C_{1}-C_{8}, (cicloalquil C_{3}-C_{7})alquilo C_{0}-C_{4}, (cicloalquil C_{3}-C_{7})alcoxi C_{1}-C_{4}, alquil C_{2}-C_{8}-éter, alcanona C_{1}-C_{8}, alcanoílo C_{1}-C_{8}, (heterocicloalquil de 3 a 7 miembros) alquilo C_{0}-C_{4}, haloalquilo C_{1}-C_{8}, haloalcoxi C_{1}-C_{8}, oxo, hidroxialquilo C_{1}-C_{8}, aminoalquilo C_{1}-C_{8}, y mono- y di-(alquil C_{1}-C_{8})amino-alquilo C_{0}-C_{8}.

2. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R_{8} representa 0 sustituyentes o 1 sustituyente seleccionado de halógeno, alquilo C_{1}-C_{2}, y alcoxi C_{1}-C_{2}.

3. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1, en donde Ar representa fenilo, piridilo, tiazolilo, tienilo o piridazinilo, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de cloro, fluoro, hidroxi, ciano, amino, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, mono- o di-(alquil C_{1}-C_{2})amino, haloalquilo C_{1}-C_{2} y haloalcoxi C_{1}-C_{2}.

4. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 3, en donde Ar representa fenilo, piridina-2-ilo, 1,3-tiazol-2-ilo, tien-2-ilo o piridazin-3-ilo, cada uno de los cuales están sustituido con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de fluoro, cloro, hidroxi, alquilo C_{1}-C_{2}, ciano y alcoxi C_{1}-C_{2}.

5. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 3, en donde Ar representa 2,6-difluorofenilo, 2,5-difluorofenilo, 5-fluoro-2-metil-fenilo, piridina-2-ilo, 3-fluoro-piridin-2-ilo, 3-ciano-piridin-2-ilo, 3-trifluorometil-piridin-2-ilo, 3-hidroxi-piridin-2-ilo, 3-metoxipiridin-2-ilo, 6-fluoro-piridin-2-ilo, 6-ciano-piridin-2-ilo, 6-trifluorometil-piridin-2-ilo, 6-hidroxipiridin-2-ilo o 6-metoxi-piridin-2-ilo.

6. Un compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en donde R_{1}, R_{2}, R_{3} y R_{4} se seleccionan independientemente de:

(a) hidrógeno, halógeno o ciano; y

(b) grupos de la fórmula:

103

en donde

(i): L es un enlace;

(ii): G es un enlace, NH, N(R_{B}), O, C(=O)O o C(=O); y

7. Un compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde Z_{1} y Z_{3} son nitrógeno y Z_{2} es CR_{2}.

8. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 7, en donde R_{2} se selecciona de hidrógeno, ciano, carboxamido, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, alcoxicarbonilo C_{1}-C_{4}, alquiléter C_{2}-C_{4}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, hidroxialquilo C_{1}-C_{2}, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, fenilo y piridilo.

9. Un compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde Z_{1} y Z_{2} son nitrógeno y Z_{3} es CR_{3}.

10. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 9, en donde R_{3} es hidrógeno, ciano, alquilo C_{1}-C_{6}, hidroxialquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alquiléter C_{2}-C_{6}, haloalquilo C_{1}-C_{6}, alcanoílo C_{1}-C_{6}, piridilo o carboxamido.

11. Un compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en donde R_{5} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, o mono- o di-alquilamino C_{1}-C_{4}, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{2}, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, fenilo y fenil-alcoxi C_{1}-C_{2}.

\newpage

12. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 11, en donde R_{5} es etilo, propilo, butilo, etoxi o metoximetilo.

13. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el compuesto tiene la fórmula:

104

en donde:

: R_{4} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4};

: R_{8} representa 0 ó 1 sustituyente seleccionado de halógeno, alquilo C_{1}-C_{2} y alcoxi C_{1}-C_{2}; y

: Ar representa fenilo, 2-piridilo, 1,3-tiazol-2-ilo, 2-tienilo o 3-piridazinilo, cada uno de los cuales está sustituido con 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de fluoro, cloro, hidroxi, alquilo C_{1}-C_{2}, haloalquilo C_{1}-C_{2}, ciano y alcoxi C_{1}-C_{2}.

14. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el compuesto tiene la fórmula:

105

en donde

: R_{4} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4};

: R_{8} representa 0 o 1 sustituyente seleccionado de halógeno, alquilo C_{1}-C_{2} y alcoxi C_{1}-C_{2}; y

15. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el compuesto tiene la fórmula:

106

en donde

: R_{1} es hidrógeno, halógeno o alquilo C_{1}-C_{6};

: R_{4} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4};

16. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el compuesto tiene la fórmula:

107

en donde:

: R_{4} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4};

\newpage

17. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-16 en combinación con un vehículo o excipiente fisiológicamente aceptable.

18. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 17, en donde la composición farmacéutica se formula como un fluido inyectable, un aerosol, una crema, un gel, una píldora, una cápsula, un jarabe o un parche transdérmico.

19. Una preparación farmacéutica envasada que comprende una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 17 en un envase e instrucciones para utilizar la composición a fin de tratar un paciente que sufre ansiedad, depresión, un trastorno del sueño, un trastorno de déficit de atención, demencia de Alzheimer o pérdida de memoria inmediata.

20. El uso de un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección seleccionada de ansiedad, depresión, un trastorno del sueño, un trastorno de déficit de atención, demencia de Alzheimer y pérdida de memoria inmediata.

21. Un compuesto o sal de acuerdo con la reivindicación 1, en el cual el compuesto es

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2,3-dimetil-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina;

2-etil-7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina;

ácido 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina-3-carboxílico, éster etílico;

ácido 7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina-2-carboxílico, éster etílico;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-2-trifluorometil-imidazo[1,2-c]pirimidina;

8-propil-7-(2-piridin-2-il-imidazol-1-ilmetil)-imidazo-[1,2-c]pirimidina;

8-propil-7-(2-piridin-2-il-imidazol-1-ilmetil)-2-trifluorometil-imidazo[1,2-c]pirimidina;

7-[2-(2,6-difluoro-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina;

7-[2-(2,6-difluoro-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-2-trifluorometil-imidazo[1,2-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina;

7-[(piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-fenil-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-metil-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina-2-carbonitrilo;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-imidazo[1,2-c]pirimidina-3-carbonitrilo;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

1-{7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-2-il}-etanol;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-2-trifluorometil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metoximetil-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metoximetil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-ciclobutil-7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-propil-7-(2-piridin-2-il-imidazol-1-ilmetil)-[1,2,4]-triazolo[1,5-c]pirimidina

7-[2-(2,5-difluoro-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(6-metoxi-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-metil-8-propil-7-(2-tiazol-2-il-imidazol-1-ilmetil)-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-metil-8-propil-7-(2-piridin-2-il-imidazol-1-ilmetil)-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

6-[1-(8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-il-metil)-1H-imidazol-2-il]-piridin-2-ol;

7-[2-(2,6-difluoro-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-propil-7-(2-tiofen-2-il-imidazol-1-ilmetil)-[1,2,4]-triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-metil-8-propil-7-(2-piridazin-3-il-imidazol-1-ilmetil)-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(2,5-difluoro-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-8-etil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(2,5-difluoro-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-8-etil-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-etil-7-[2-(5-fluoro-2-metil-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-etil-7-[2-(5-fluoro-2-metil-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-etil-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-difluorometil-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-fenil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-iso-propil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-fluorometil-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-(2,2-difluoro-etil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidina;

2-[1-(8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-il-metil)-1H-imidazol-2-il]-nicotinonitrilo;

6-[1-(8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-il-metil)-1H-imidazol-2-il]-piridina-2-carbonitrilo;

7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil-2-pirrolidin-1-il[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-iso-propoxi-8-propil-[1,2,4]-triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2,5-dimetil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-etil-7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2,8-dietil-7-[2-(5-fluoro-2-metil-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-metoximetil-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

1-{7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-8-il}-propan-1-ol;

1-{7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-8-il}-propan-1-ol;

{7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-2-il}-metanol;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-8-propenil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-2-piridin-3-il-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-(3-benziloxi-propil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidina;

8-(2-benziloxi-etil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidina;

3-{7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-8-il}-propan-1-ol;

8-(2-fluoro-etil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-(3-cloro-propil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-{7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-8-il}-etanol;

8-(3-fluoro-propil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidina;

8-(3-fluoro-propil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-etil-7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-propil-7-[2-(6-trifluorometil-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-{1-[8-(3-fluoro-propil)-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-ilmetil]-1H-imidazol-2-il}-nicotinonitrilo;

6-{1-[8-(3-fluoro-propil)-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-ilmetil]-1H-imidazol-2-il}-piridina-2-carbonitrilo;

ácido 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina-2-carboxílico, éster etílico;

amida del ácido 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina-2-carboxílico;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina-2-carbonitrilo;

7-[4-cloro-2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-[1-(2-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-ilmetil)-1H-imidazol-2-il]-nicotinonitrilo;

7-[2-(3-fluoropiridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-2-metil-8-etoxi-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-etil-7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]-metil}-2-metil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-etoxi-7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]-metil}[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-2-metoxi-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

2-etoxi-7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]-metil}-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-2-amina;

2-(7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-2-il)propan-2-ol;

2-(etoximetil)-7-{[2-(6-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina-2-carboxilato de metilo;

2-(7-{[2-(6-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-2-il)propan-2-ol;

6-(1-{[2-(metoximetil)-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidin-7-il]metil}-1H-imidazol-2-il)piridina-2-carboni-
trilo;

7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil-2-(tetrahidrofuran-2-il)[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidina;

7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil-2-[(2,2,2-trifluoroetoxi)metil][1,2,4]triazolo-[1,5-c]pirimidina;

2-cloro-7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]-metil}-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil-2-(2,2,2-trifluoroetil)[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidina;

7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil-2-(1,3-tiazol-2-il)[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-N,N,8-tripropil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-2-amina;

6-(1-{[2-(etoximetil)-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidin-7-il]metil}-1H-imidazol-2-il)piridina-2-carbonitrilo;

2-(etoximetil)-7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

6-{1-[(2-metil-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-il)metil]-1H-imidazol-2-il}piridina-2-carbonitrilo;

7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-2-(isopropoximetil)-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pirimidina;

6-(1-{[2-(isopropoximetil)-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-il]metil}-1H-imidazol-2-il)piridina-2-carbonitrilo;

2-[(ciclopentiloxi)metil]-7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]-pi-
rimidina;

7-{[2-(5-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-2-metil-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

3-{1-[(8-etil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-il)metil]-1H-imidazol-2-il}benzonitrilo;

8-etil-7-{[2-(5-fluoro-2-metoxifenil)-1H-imidazol-1-il]-metil}[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

8-etil-7-{[2-(3-fluorofenil)-1H-imidazol-1-il]metil}-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-{[2-(6-cloropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-etil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

7-{[2-(2-clorofenil)-1H-imidazol-1-il]metil}-8-etil-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina;

ácido 7-{[2-(3-fluoropiridin-2-il)-1H-imidazol-1-il]-metil}-8-propil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina-2-carboxílico;

6-{1-[(8-etil[1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidin-7-il)metil]-1H-imidazol-2-il}piridina-2-carbonitrilo;

8-etil-7-[2-(3-trifluorometil-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-il-metil]-3-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]-pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-fenil-8-propil-[1,2,4]-triazolo[4,3-c]pirimidina;

3-difluorometil-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]-pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

1-{7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidin-3-il}-etanol;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-3-trifluorometil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-metoximetil-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-metoximetil-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

3-ciclobutil-7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

8-propil-7-(2-piridin-2-il-imidazol-1-ilmetil)-[1,2,4]-triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(2,5-difluoro-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-3-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(6-metoxi-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

3-metil-8-propil-7-(2-tiazol-2-il-imidazol-1-ilmetil)-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

3-metil-8-propil-7-(2-piridin-2-il-imidazol-1-ilmetil)-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

6-[1-(8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidin-7-il-metil)-1H-imidazol-2-il]-piridin-2-ol;

7-[2-(2,6-difluoro-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

8-propil-7-(2-tiofen-2-il-imidazol-1-ilmetil)-[1,2,4]-triazolo[4,3-c]pirimidina;

3-metil-8-propil-7-(2-piridazin-3-il-imidazol-1-ilmetil)-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(2,5-difluoro-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-8-etil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(2,5-difluoro-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-8-etil-3-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

8-etil-7-[2-(5-fluoro-2-metil-fenil)-imidazol-1-ilmetil]-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

8-etil-7-[2-(5-fluoro-2-metil-fenil)-imidazol-1-il-metil]-3-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

3-etil-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3,5-dimetil-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

3-etil-7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-5-metil-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

3,8-dietil-7-[2-(5-fluoro-2-metil-fenil)-imidazol-1-il-metil]-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-metoximetil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-isopropil-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

1-{7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidin-8-il}-propan-1-ol;

1-{7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidin-8-il}-propan-1-ol;

{7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidin-3-il}-metanol;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-metil-8-propenil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-3-piridin-3-il-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-metoximetil-3-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

3-{7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidin-8-il}-propan-1-ol;

8-(2-fluoro-etil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

2-{7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidin-8-il}-etanol;

8-(3-fluoro-propil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-3-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

8-(3-fluoro-propil)-7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

8-propil-7-[2-(6-trifluorometil-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

2-{1-[8-(3-fluoro-propil)-[1,2,4]triazolo[4,3-c]-pirimidin-7-ilmetil]-1H-imidazol-2-il}-nicotinonitrilo;

6-{1-[8-(3-fluoro-propil)-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidin-7-ilmetil]-1H-imidazol-2-il}-piridina-2-carbonitrilo;

ácido 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina-3-carboxílico, éster etílico;

amida del ácido 7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina-3-carboxílico;

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina-3-carbonitrilo;

7-[4-cloro-2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-8-propil-[1,2,4]triazolo[4,3-c]pirimidina;

2-[1-(3-metil-8-propil)-[1,2,4]triazolo[4,3-c]-pirimidin-7-il-metil)-1H-imidazol-2-il]-nicotinonitrilo;

7-[2-(6-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-1-metil-8-propil-imidazo[1,5-c]pirimidina; o

7-[2-(3-fluoro-piridin-2-il)-imidazol-1-ilmetil]-1-metil-8-propil-imidazo[1,5-c]pirimidina.