ES2305253T3 - Combinacion de docetaxel y flavopiridol. - Google Patents

Abstract

Una composición farmacéutica que tiene sinergia terapéutica en el tratamiento de enfermedades neoplásicas que comprende Taxotere ® y flavopiridol.

Description

Combinación de docetaxel y flavopiridol.

La presente invención se refiere a combinaciones de Taxotere® y flavopiridol que son terapéuticamente eficaces en el tratamiento de las enfermedades neoplásicas.

Los taxanos y taxoides constituyen una familia de compuestos de diterpeno naturales que incluye un fármaco antitumoral potente, el paclitaxel. El paclitaxel (Taxol®), originalmente aislado de la corteza del árbol del tejo del Pacífico (Taxus brevifolia), se ha mostrado que es muy eficaz en terapias adyuvantes y neoadyuvantes para pacientes con cánceres de mama y ovarios. Mas recientemente, su análogo semisintético, docetaxel (Taxotere®), se ha encontrado también eficaz en quimioterapia de cáncer de mama, lo que ha expandido el número de enfermedades sensibles a esta clase de fármacos antitumorales, que incluye cánceres de pulmón y colon. Ambos Taxol® (paclitaxel) y Taxotere® (docetaxel) se unen a la tubulina, que inhibe el desamblaje del microtúbulo, e impide la mitosis, de modo que bloquea la progresión a través de la fase M del ciclo celular y facilita la apoptosis.

A pesar del indudable éxito clínico general de los taxoides, algunos tumores muestran resistencia a estos fármacos. Esta resistencia al fármaco puede ser una característica innata de un tumor, o puede desarrollarse en el tumor a lo largo del tiempo. Se han descrito tres mecanismos principales de resistencia a fármacos: (i) mutaciones en puntos del gen de la tubulina, (ii) selección de isoformas de tubulina con baja unión a los taxanos, y (iii) expresión del fenotipo (MDR) de la resistencia a multifármacos mediada por la bomba de flujo de la glicoproteína P (P-gp) codificada por el gen mdr1. El mecanismo (iii) puede explicar la resistencia innata a Taxol® y Taxotere® en tumores que a menudo inherentemente expresan P-gp, tal como los cánceres de colon y riñón.

Las combinaciones o asociaciones de acuerdo con la invención permiten que los fenómenos de la resistencia pleiotrópica o "la resistencia a multifármacos" puedan evitarse o retardarse.

La preparación de Taxol®, Taxotere® y sus derivados constituyen el objeto, por ejemplo, de los documentos de patentes europeas EP 0 253 738 y EP 0 253 739 y del documento de solicitud de patente internacional PCT WO 92/09 589.

Se ha encontrado ahora, y esto forma el objeto de la presente invención, que la eficacia de Taxotere® puede ser considerablemente mejorada cuando se administra en combinación con al menos una sustancia que sea terapéuticamente útil en los tratamientos anticancerosos y tenga un mecanismo idéntico o diferente al de estos taxanos.

Mas especialmente, la invención se refiere a combinaciones de Taxotere® con la quinasa dependiente de ciclina, flavopiridol.

Las quinasas dependientes de ciclina (CDKs) son importantes reguladores que controlan el ritmo y la coordinación del ciclo celular. Las CDKs forman complejos reversibles con sus socios obligados de ciclina para controlar la transición a través de las uniones clave en el ciclo celular. Por ejemplo, el complejo activado de D1 de CDK4-ciclina controla la progresión a través de la fase G1 mientras que el complejo de B1 de CDK1-ciclina controla la entrada en la fase mitótica del ciclo celular. Las proteínas inhibitorias de quinasa dependientes de ciclina endógenas (CDKls) se sabe que se unen tanto a la CDK como al componente de ciclina e inhiben la actividad de la quinasa. En muchos tumores tales como melanomas, cánceres pancreáticos y esofágicos, estas CDKls naturales están o ausentes o mutadas. De modo que, los inhibidores de CDK selectivos pueden probarse como agentes quimo terapéuticos eficaces.

El flavopiridol (cis-5,7-dihidroxi-2-(2-clorofenil)-8-[4-(3-hidroxi-1-metil)-piperidinil]-1-benzopiran-4-ona) es una flavona sintética que se ha mostrado que tiene actividad antitumoral frente a varias líneas de células tumorales tales como carcinoma de pulmón humano, carcinoma de mama, y también inhibe el crecimiento tumoral en modelos de xenotransplante. Se ha mostrado que induce la parada en ambas fases la G1 y la G2 del ciclo celular. El flavopiridol es un inhibidor potente y selectivo de las CDKs, y su actividad antitumoral se relaciona con su actividad inhibitoria de CDK. Los estudios han mostrado que su actividad inhibidora del crecimiento de la célula tumoral ocurre en un ciclo celular de una manera específica. Véase Bioorg. & Med. Chem. Letters 10:1037-1041(2000).

Taxotere® y flavopiridol tienen mecanismos que difieren lo que puede mejorar la eficacia de cada uno. La eficacia mejorada de una combinación de acuerdo con la invención puede demostrarse mediante determinación de la sinergia terapéutica. Una combinación manifiesta sinergia terapéutica si es superior terapéuticamente a uno u otro de los constituyentes usados en sus dosis óptimas (T.H. Corbett et al., Cancer Treatment Reports, 66: 1187 (1982)).

Para demostrar la eficacia de una combinación, es necesario comparar la máxima dosis tolerada de la combinación con la máxima dosis tolerada de cada uno de los constituyentes por separado en el estudio en cuestión. Esta eficacia puede ser cuantificada, por ejemplo, mediante el log_{10} del número de células muertas, que se determina de acuerdo con la siguiente fórmula:

Log_{10} de células muertas = T-C (días)/3,32 x T_{d}

en la que T - C representa el tiempo transcurrido para que las células crezcan, que es el tiempo medio en días para que los tumores del grupo (T) y los tumores del grupo tratado (C) hayan alcanzado un valor predeterminado (1 g por ejemplo), y Td representa el tiempo en días necesitado para que el volumen del tumor haya alcanzado el doble en los animales de control (T.H. Corbett et al., Cancer, 40, 2660-2680 (1977); F.M. Schabel et al., Cancer Drug Development, Part B, Methods in Cancer Research, 17, 3-51, Nueva York, Academic Press Inc. (1979)). Un producto se considera que es activo si el log_{10} de células muertas es mayor o igual a 0,7. Un producto se considera que es muy activo si el log_{10} de células muertas es mayor de 2,8.

La combinación usada a su dosis máxima tolerada, en la que cada uno de los constituyentes estará presente a una dosis que generalmente no excede su dosis máxima tolerada, manifestará sinergia terapéutica cuando el log_{10} de células muertas es mayor que el valor log_{10} de células muertas del mejor constituyente cuando se administra solo.

La eficacia de las combinaciones en tumores sólidos puede determinarse experimentalmente de la siguiente manera:

Los animales usados para el experimento, generalmente ratones, son injertados subcutáneamente bilateralmente con de 30 a 60 mg de un fragmento de tumor en el día cero. Los animales que tienen tumores se mezclan antes de ser sometidos a los diversos tratamientos y controles. En el caso del tratamiento de tumores avanzados, se dejan desarrollar los tumores hasta el tamaño deseado, eliminándose los animales que tienen tumores desarrollados insuficientemente. Los animales elegidos se distribuyen aleatoriamente para ser sometidos a tratamientos y controles. Los animales que no presentan tumores pueden también ser sometidos a los mismos tratamientos que los animales que presentan tumores a fin de poder disociar el efecto tóxico del efecto específico sobre el tumor. La quimioterapia generalmente comienza de 3 a 22 días después del trasplante, dependiendo del tipo de tumor, y los animales se observan cada día. Los diferentes grupos de animales se pesan 3 o 4 veces a la semana hasta que se alcanza la máxima pérdida de peso, y los grupos se pesan a continuación al menos una vez a la semana hasta el final de la prueba.

Los tumores se miden 2 o 3 veces a la semana hasta que el tumor alcanza aproximadamente 2 g, o hasta que el animal muere si esto ocurre antes de que el tumor alcance 2 g. Se hace la autopsia a los animales cuando se sacrifican.

La actividad antitumoral se determina según los diferentes parámetros registrados en las tablas I y II.

Para un estudio de las combinaciones en leucemias, los animales son injertados con un número determinado de células, y la actividad antitumoral se determina mediante el aumento en el tiempo de supervivencia de los ratones tratados en relación con los controles. El producto se considera activo si el incremento en el tiempo de supervivencia es mayor que 27%, y se considera muy activo si es mayor que 75% en el caso de leucemias P388.

En los ejemplos a continuación, los ratones fueron injertados con adenocarcinoma mamario MA 13/C y tratados con combinaciones de Taxotere® y flavopiridol que tienen diferentes regimenes de administración y diferentes modos de administración. Ambos el Taxol y el Taxotere, así como el flavopiridol pueden administrarse por vía oral así como por vía intravenosa. Algunas de estos regimenes muestran sinergia terapéutica clara.

Los objetos y ventajas adicionales de la invención se mostrarán en parte en la descripción que sigue y en parte serán obvios a partir de la descripción o pueden apreciarse mediante la práctica de la invención. Los objetos y ventajas de la invención se llevarán a cabo y se conseguirán mediante los elementos y combinaciones indicados particularmente en las reivindicaciones adjuntas.

Se entenderá que ambas, la descripción general precedente y la descripción detallada a continuación son ejemplarizantes y explicativas solamente.

Ejemplo 1

Para determinar la actividad de cada constituyente de la combinación, se administraron Taxotere® y flavopiridol solos a ratones con MA 13/C. Se administró Taxotere® por vía intravenosa en los días 15 y 21; la dosis fue de 30 mg/kg cada día con una dosis total de 60 mg/kg. Cuando se usó sola, esta dosis produjo un log_{10} de células muertas de 4,7 y una respuesta completa en todos los 5 ratones así tratados. La administración de flavopiridol solo en los días 15 y 21 en una dosis de 6 mg/kg cada día, o una dosis total de 12 mg/kg, no produjo una respuesta completa en los 5 ratones de la prueba.

A continuación se combinaron los compuestos de dos maneras y se probaron en un régimen intermitente. En la primera combinación, se administró primero flavopiridol en los días 15 y 20 (dosis total 9 mg/kg) y se administró Taxotere® en los días 16 y 21 siguientes (dosis total 45 mg/kg). Cuando se administró de esta manera, el log_{10} de células muertas fue 5.5 y resultó en 5 respuestas completas de 5 en los ratones tratados. En este régimen intermitente, el log_{10} de células muertas fue mejor que cuando se administró Taxotere® solo y resultó también en 5 respuestas completas de 5 a pesar del hecho de que se administró un 25% menos de Taxotere® y un 25% menos de flavopiridol con esta combinación que con los controles.

Cuando se invirtieron los constituyentes de la combinación y se administró el Taxotere® primero en los días 15 y 20 y el flavopiridol en los días 16 y 21 en las mismas cantidades, el log_{10} de células muertas fue ligeramente menos que cuando se administró Taxotere® solo, pero de nuevo hubo 5 respuestas completas de 5. La Tabla 1 ilustra estos resultados y muestra que la combinación de flavopiridol y Taxotere® administrados en cantidades de menos del 25% tuvo una eficacia similar a la del Taxotere® solo.

TABLA I Combinación del flavopiridol y Taxotere® en ratones con MA13/C: separados 24 horas

1

Ejemplo 2

Se aumentaron el número de días en los que se administró flavopiridol, y se descubrió que hubo sinergia clara cuando se administró a ratones con MA 13/C con dosis similares de flavopiridol administradas durante 8 días de un ciclo de 10 días en el que se administró Taxotere® en el primero y el último día del ciclo de diez días.

La Tabla 2 a continuación da la dosis más alta no tóxica de cada componente solo: 96.8 mg/kg de Taxotere® y 23.2 mg/kg de flavopiridol. Cuando se administraron los constituyentes en combinación, administrándose Taxotere® en los días 14 y 23 y flavopiridol en los días 14-17 y 20-23, tres combinaciones fueron claramente sinérgicas y una cuarta fue igual en eficacia al Taxotere® solo. Todas las cuatro combinaciones resultaron en 6 respuestas completas de 6; o sea, 100% respuestas completas.

Se realizó un estudio de tres ramas en ratones C3H/HeN con tumores mesurables al principio de la terapia (230 mg). El modelo escogido fue un adenocarcinoma mamario murino MA13/C, seleccionado en base a su quimo sensibilidad al docetaxel. Se trataron los ratones o con flavopiridol (una vez al día en los días 14 a 17, y en los días 20 - 23 después de la implantación del tumor), o docetaxel (en los días 14 y 23), o su combinación. Resultados: flavopiridol administrado IV como compuesto único a la dosis no tóxica más alta (HNTD, 2,9 mg/kg/dosis, dosis total de 23.2 mg/kg), fue inactivo con un logaritmo de células muertas neto de - 0,4 (logaritmo de células muertas neto = retraso del crecimiento tumoral - duración de tratamiento/3,32 x tiempo de doblamiento del tumor), y no hubo regresión completa (CR). Se encontró que la HNTD de docetaxel solo (48,1 mg/kg/inyección, dosis total de 96.8 mg/kg) fue muy activa (logaritmo de células muertas neto 3, CR 6/6). Se obtuvo clara sinergia con la combinación no tóxica más alta (flavopiridol a 1.93 mg/kg/dosis y docetaxel a 53.2 mg/kg/inyección) con un logaritmo de células muertas neto de 7.6 y CR 6/6. Esta combinación fue tolerada bien e indujo una pérdida de peso corporal de 13% en el punto más bajo que ocurrió a los 6 días después del último tratamiento. La sinergia se mantuvo en 2 niveles de dosificación más bajos comparados con la HNTD de docetaxel. Esta sinergia se observó también cuando se administró flavopiridol por vía oral.

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TABLA II Combinación de Flavopiridol - Taxotere®

Adenocarcinoma mamario MA13/C "exposición repetida"

2

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Ejemplo 3

Se inyectó Taxotere IV en los días 14 y 25 después de la implantación del tumor. Flavopiridol se administró por vía oral una vez al día desde el día 14 al 18 y desde el día 21 al 25.

Flavopiridol (po) - Docetaxel (iv)

Exposición prolongada MA13/C

3

Como en el Ejemplo 2, se encontró que la combinación de docetaxel y flavopiridol repetida diariamente fue más activa que cualquiera de los compuestos por si solos, a dosis con la misma toxicidad. La sinergia se muestra por el aumento de log 4 de células muertas.

Otras realizaciones de la invención serán aparentes a aquellos versados en la técnica considerando la solicitud y práctica de la invención descrita aquí. Se intenta que la solicitud y los ejemplos sean considerados solo como ejemplarizantes.

Claims (5)

1. Una composición farmacéutica que tiene sinergia terapéutica en el tratamiento de enfermedades neoplásicas que comprende Taxotere® y flavopiridol.

2. La composición farmacéutica de la reivindicación 1, en donde los constituyentes de la composición se administran por separado y se espacian en el tiempo.

3. La composición farmacéutica de la reivindicación 1, en donde la enfermedad neoplásica es el cáncer de mama.

4. La composición farmacéutica de la reivindicación 1, en donde la enfermedad neoplásica es el cáncer de pulmón.

5. La composición farmacéutica de la reivindicación 1, en donde el flavopiridol se administra por vía oral.