ES2322954T3 - Agonistas del adrenoceptor alfa 2b o 2b/2c para el tratamiento de la enfermedad de alzheimer y la enfermedad de parkinson. - Google Patents

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Abstract

Uso de un agonista selectivo del receptor adrenérgico alfa 2B o alfa 2B/2C en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección neurodegenerativa del cerebro que provoca una lesión a las neuronas que se proyectan hacia y desde la sustancia negra, en el que dicha afección neurodegenerativa es la enfermedad de Parkinson o la enfermedad de Alzheimer.

Description

Agonistas del adrenoceptor alfa 2B o 2B/2C para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer y la enfermedad de Parkinson.
Los procedimientos de la presente invención emplean agonistas selectivos del receptor adrenérgico alfa 2 para prevenir la lesión y muerte de las células nerviosas, tal como se observa en la enfermedad de Parkinson y la enfermedad de Alzheimer.
Antecedentes de la invención
Los receptores adrenérgicos humanos son proteínas de membrana integrales que se han clasificado en dos amplias clases, los receptores adrenérgicos alfa y beta. Ambos tipos median la acción del sistema nervioso simpático periférico sobre la unión de catecolaminas, norepinefrina y epinefrina.
La norepinefrina la producen las terminaciones nerviosas adrenérgicas, mientras que la epinefrina la produce la médula adrenal. La afinidad de unión de los receptores adrenérgicos para estos compuestos forma la base de su clasificación: los receptores alfa tienden a unirse a norepinefrina más fuertemente que a epinefrina y mucho más fuertemente de lo que se unen al compuesto isoproterenol sintético. La afinidad de unión preferida de estas hormonas se invierte para los receptores beta. En muchos tejidos, las respuestas funcionales, tales como la contracción del músculo liso, inducidas por la activación del receptor alfa son opuestas a las respuestas inducidas por la unión del receptor beta.
Posteriormente, la distinción funcional entre los receptores alfa y beta se resaltó adicionalmente y se refinó mediante la caracterización farmacológica de estos receptores de diversas fuentes animales y tisulares. Como resultado, los receptores adrenérgicos alfa y beta se subdividieron adicionalmente en los subtipos alfa 1, alfa 2, beta 1, y beta 2.
Adicionalmente, desde entonces se ha reconocido que cada uno de estos receptores tiene un número de subtipos; de esta manera, el receptor alfa 2 humano puede descomponerse adicionalmente en los subtipos de receptor alfa 2A, alfa 2B y alfa 2C.
Las diferencias funcionales entre los receptores alfa 1 y alfa 2 se han reconocido, y se han descrito los compuestos que presentan unión selectiva entre estos dos subtipos.
De esta manera, en el documento WO 92/00073, se informó sobre la capacidad del enantiómero R(+) de terazosina para unirse selectivamente a los receptores adrenérgicos del subtipo alfa 1. La selectividad alfa 1/alfa 2 de este compuesto se describió como significativa porque se dice que la estimulación agonista del receptor alfa 2 inhibe la secreción de epinefrina y norepinefrina, mientras que se dice que el antagonismo del receptor alfa 2 aumenta la secreción de estas hormonas. De esta manera, se dice que el uso de bloqueadores alfa-adrenérgicos no selectivos, tales como fenoxibenzamina y fentolamina, estaba limitado por su inducción mediada por el receptor adrenérgico \alpha_{2} del aumento de la concentración de catecolamina en plasma y las secuelas fisiológicas relacionadas (aumento de la frecuencia cardiaca y de la contracción del músculo liso). Es significativo que la selectividad de los compuestos denominados "selectivo para alfa 1" o "selectivo para alfa 2" se ha basado tradicionalmente en datos de K_{D}, que se limitan a la comparación de las afinidades de unión a los receptores, y no comparan las actividades biológicas reales en los receptores
comparados.
En contraste, un procedimiento para medir la selectividad del agonista del receptor alfa comprende el ensayo RSAT (Tecnología de Selección y Amplificación de Receptores) como se presenta en Messier et al., High Throughput Assays Of Cloned Adrenergic, Muscarinic, Neurokinin And Neurotrofin Receptors In Living Mammalian Cells, Pharmacol. Toxicol. 76: 308-11 (1995) y se ha adaptado para el uso con receptores alfa 2. El ensayo mide una pérdida mediada por el receptor de la inhibición de contacto que da como resultado la proliferación selectiva de las células que contienen el receptor en una población mixta de células confluentes. El aumento del número de células se evalúa con un gen marcador transfectado apropiado tal como b-galactosidasa, cuya actividad puede medirse fácilmente en un formato de 96 pocillos. Los receptores que activan la proteína G, Gq, suscitan esta respuesta. Los receptores alfa 2, que normalmente se acoplan a Gi, activan la respuesta de RSAT cuando se co-expresan con una proteína Gq híbrida que tiene un dominio de reconocimiento del receptor Gi, denominado Gq/i5^{2}. Véase Conklin et al., Substitution Of Three Amino Acids Switches Receptor Specificity Of Gga To That Of Gia, Nature 363: 274-6, (1993).
Se ha informado sobre diversos agonistas del receptor adrenérgico alfa que son útiles para tratar una amplia variedad de afecciones y trastornos. De esta manera, los agonistas del receptor adrenérgico alfa tales como clonidina se han descrito y usado como agentes hipotensores sistémicos y oculares, como agentes útiles en el tratamiento de curación de comportamientos adictivos tales como fumar y abuso de fármacos, y como agentes antidismenorreicos. Otro agonista del receptor adrenérgico alfa, tizanidina, se ha usado para el tratamiento de síntomas de espasticidad en pacientes con esclerosis múltiple disminuyendo el tono muscular. Se ha informado también de que estos agentes tienen ciertas actividades analgésicas.
Estos agentes, aunque útiles, se han visto infestados con efectos secundarios en ocasiones graves que incluyen sedación, efectos cardiovasculares tales como hipotensión y disminución de la frecuencia cardiaca, y mareo que han limitado su aplicabilidad para ciertas indicaciones. En particular, estos agentes tienden a tener curvas de dosis-respuesta solapantes para la actividad terapéutica y la sedación, de manera que la actividad sedante empieza a ser perceptible a las mismas dosis que aparece la actividad terapéutica (por ejemplo, hipotensora o analgésica) in vivo.
Los compuestos tales como, clonidina, tizanidina, y dexmedetomidina se han caracterizado en la bibliografía como "agonistas del receptor adrenérgico alfa 2", basándose en gran parte en estudios de unión. Véase también Hieble et al., J. Med. Chem. 38: 3415 (1 de septiembre de 1995); Ruffolo, et al., J. Med. Chem. 38: 3681 (15 de septiembre de 1995). Aunque es cierto que estos agentes son agonistas del receptor alfa 2, generalmente no se aprecia que estos agentes contengan también cantidades significativas de actividad agonista del receptor alfa 1. Ni se ha conocido o apreciado generalmente el efecto de dicha actividad del receptor alfa 1 sobre la actividad de alfa 2.
En contraste, el compuesto brimonidina y sus derivados funcionalmente similares 2-imidazolin-2-ilimino (como se describe a continuación) son agonistas de alfa 2 que presentan una actividad agonista notablemente mayor hacia los receptores alfa 2 que hacia los subtipos de receptor alfa 1.
Adicionalmente, se sabe ahora que estos compuestos son "agonistas globales" de alfa 2, lo que significa que se observa poca o ninguna selectividad funcional en la estimulación de los subtipos de receptor alfa 2A, alfa 2B y
alfa 2C.
Se han descrito recientemente compuestos selectivos o específicos para los subtipos de receptor alfa 2B y/o alfa 2C, y ciertas ventajas de dichos compuestos. De esta manera, por ejemplo, las Patentes de Estados Unidos Nº 6.329.369 y 6.313.172 y las Solicitudes de Patente de Estados Unidos transmitida legalmente, en trámite junto con la presente, 09/778975, 09/794874 y 10/153328 describen dichos compuestos, y su uso para afecciones que incluyen dolor, espasticidad muscular; dolor; enfermedades neurodegenerativas, isquemia espinal y apoplejía; deficiencias de memoria y cognitivas; psicosis, ansiedad y depresión; hipertensión; insuficiencia cardiaca congestiva; isquemia cardiaca y congestión nasal. En estas patentes, los compuestos se consideran agonistas selectivos de alfa 2B o alfa 2B/2C si la diferencia de eficacia de un compuesto como agonista del subtipo o subtipos del receptor alfa 2B o alfa 2B/2C comparado con el subtipo de receptor alfa 2A es mayor de 0,3 y su eficacia sobre el subtipo de receptor alfa 2A es al menos aproximadamente 10 veces menos potente que sobre el subtipo de receptor alfa 2B y/o alfa 2C.
Los trastornos del SNC son un tipo de trastorno neurológico. Diversos trastornos del SNC pueden atribuirse a una deficiencia colinérgica, una deficiencia dopaminérgica, una deficiencia adrenérgica y/o una deficiencia serotonérgica. Los trastornos del SNC de aparición relativamente frecuente incluyen demencia presenil (comienzo temprano de la enfermedad de Alzheimer), demencia senil (demencia de tipo Alzheimer), y parkinsonismo, incluyendo enfermedad de Parkinson.
El fundamento de la comprensión hoy en día de la enfermedad de Alzheimer se basa en la observación de que ciertas regiones del cerebro de las personas afectadas, tales como el hipocampo y la corteza cerebral, mostraban evidencia de una pérdida de células nerviosas. Desde los años 70 los investigadores saben que algunas de estas neuronas moribundas son colinérgicas, es decir, se comunican usando el neurotransmisor acetilcolina, que finalmente se degrada mediante una enzima denominada acetilcolinesterasa. Véase, Jones, et al., Intern. J. Neurosci. 50:147 (1990); Perry, Br. Med. Bull. 42:63 (1986); y Sitaram, et al., Science 201:274 (1978).
Los fármacos que se hicieron disponibles en la pasada década, tales como tacrina y donepezil, son inhibidores de la acetilcolinesterasa. Evitando la degradación de acetilcolina, estos compuestos ralentizan el desarrollo de las fases tempranas de la enfermedad de Alzheimer. Sin embargo, una vez que las neuronas colinérgicas se degeneran totalmente y ya no pueden producir más el neurotransmisor acetilcolina, estos fármacos se hacen inservibles.
Aparte de observar la pérdida de células nerviosas, los cerebros de los pacientes que padecen la enfermedad de Alzheimer característicamente contienen agrupaciones de proteínas. Estas acumulaciones ocurren en dos formas: aquellas encontradas dentro de las neuronas y aquellas encontradas en el espacio intercelular. Las agrupaciones intracelulares se denominan marañas neurofibrilares, y parecen pares de fibras enrolladas una alrededor de la otra en una hélice. Los análisis han demostrado que las marañas consisten en proteína tau. Tau es significativa porque se une a tubulina, que es sensible a la formación de los microtúbulos. El número de marañas neurofibrilares parece estar correlacionado con la gravedad de la enfermedad.
Las agrupaciones o placas de proteína intercelulares están compuestas por depósitos de proteína \beta-amiloide. Las neuronas cercanas a menudo aparecen hinchadas y deformadas, y las placas amiloides normalmente van acompañadas de inflamación de la microglía. Las microglías, que son parte del sistema inmune del cerebro, pueden estar presentes en un intento de degradar y retirar las neuronas dañadas, o quizás las propias placas.
No queda claro si las neuronas en o cerca de estas placas funcionan normalmente, porque la densidad de las placas está correlacionada sólo débilmente con la gravedad de la demencia. Además, dichas placas están presentes en la mayoría de las personas ancianas, tengan la enfermedad de Alzheimer o no. Independientemente de ello, su presencia extensiva en el hipocampo y la corteza cerebral es específica para pacientes con Alzheimer, y aparecen mucho antes de lo que lo hacen las marañas neurofibrilares.
Las placas de \beta-amiloide contienen un fragmento de 42 aminoácidos de una proteína de membrana integral denominada proteína precursora de \beta-amiloide (BAPP). Este fragmento se genera mediante una escisión en dos etapas de la proteína BAPP, en primer lugar mediante una proteasa denominada \beta secretasa y después mediante gamma secretasa. El producto de escisión normal de \beta secretasa y gamma secretasa es un péptido de 40 aminoácidos que, a diferencia del derivado de 42 aminoácidos, no parece estar implicado en el inicio o progreso de la enfermedad de Alzheimer.
La enfermedad de Parkinson (EP) es una enfermedad neurodegenerativa debilitante, actualmente de etiología desconocida, caracterizada por temblores y rigidez muscular. Una característica de la enfermedad parece implicar la degeneración de las neuronas dopaminérgicas (es decir, las que secretan dopamina), particularmente en la sustancia negra y en la región ventral tegmental del mesencéfalo. Véase, Rinne, et al., Brain Res. 54:167 (1991) y Clark, et al., Br. J. Pharm. 85: 827 (1985). La sustancia negra está implicada en la coordinación de las señales neurales para movimientos y postura. El área ventral tegmental (VTA) del mesencéfalo contiene neuronas que se proyectan a sitios que incluyen la corteza prefrontal, el área del cerebro asociada con las funciones cognitivas superiores.
Se han realizado ciertos intentos para tratar la EP. Un tratamiento propuesto para la EP es SINEMET®, que es un comprimido de liberación sostenida que contiene una mezcla de carbidopa y levodopa, disponible en The DuPont Merck Pharmaceutical Co. Otro tratamiento propuesto para la EP es ELDEPRYL®, que es un comprimido que contiene clorhidrato de selefilina, disponible en Somerset Pharmaceuticals, Inc. Otro tratamiento propuesto para la EP es PARLODEL®, que es un comprimido que contiene mesilato de bromocriptina, disponible en Sandoz Pharmaceuticals Corporation. Otro procedimiento para tratar la EP y otras diversas enfermedades neurodegenerativas mediante terapia con melanina se ha propuesto en la Patente de Estados Unidos Nº 5.210.076 de Berliner et al. Sin embargo, ninguno de estos tratamientos parece proteger a las neuronas de la muerte celular.
Sumario de la invención
Aunque se sabe que ciertos compuestos, incluyendo ciertos agonistas alfa adrenérgicos tales como brimonidina, son capaces de proporcionar actividad neuroprotectora a las células ópticas o retinales y las células nerviosas de la columna vertebral, cuando se aplican por vía tópica o se inyectan en el sitio de la lesión nerviosa, hasta ahora no se ha pensado que dichos agentes fueran agentes eficaces para el tratamiento de afecciones neurodegenerativas del cerebro, tales como la enfermedad de Alzheimer y la enfermedad de Parkinson, ya que anteriormente no se había pensado que los receptores alfa 2B y/o alfa 2C fueran abundantes en estas áreas del cerebro. Adicionalmente, aunque los agonistas del receptor adrenérgico alfa han demostrado tener actividades neuroprotectoras útiles cuando se administran para tratamiento tópico, los efectos sedantes de estos compuestos observados a dosis terapéuticas han limitado profundamente su utilidad en términos prácticos como agentes no tópicos o sistémicos.
Los solicitantes de la presente patente han descubierto sorprendentemente que ciertos agentes alfa adrenérgicos son capaces, cuando se administran por vía sistémica, de proteger las células nerviosas de la sustancia negra y el área ventral tagmental del cerebro. Además, estos agentes tienen un margen terapéutico radicalmente más amplio entre su actividad neuroprotectora y su actividad sedante que la mayoría de los agonistas alfa adrenérgicos caracterizados previamente.
Entre esta clase de fármacos hay diversos derivados de quinoxalina que tienen actividad agonista de alfa 2 que fueron sugeridos originalmente como agentes terapéuticos por Danielewicz, et al. en las Patentes de Estados Unidos Nº 3.890.319 y 4.029.792. Estas patentes describen compuestos como reguladores del sistema cardiovascular que tienen la siguiente fórmula:
1
en la que el grupo 2-imidazolin-2-ilamino puede estar en cualquiera de las posiciones 5, 6, 7 u 8 del núcleo de la quinoxalina; x, y y z pueden estar en cualquiera de las posiciones 5, 6, 7 u 8 restantes y pueden seleccionarse entre hidrógeno, halógeno, alquilo C_{1-5}, alcoxi C_{1-5} o trifluorometilo; y R es un sustituyente opcional en cualquiera de las posiciones 2 ó 3 del núcleo de la quinoxalina y puede ser hidrógeno, alquilo C_{1-5} o alcoxi C_{1-5}. Los compuestos actualmente útiles pueden prepararse de acuerdo con los procedimientos descritos en las Patentes Nº 3.890.319 y 4.029.792.
En Ocular Effects of a Relatively Selective Alfa-2 Agonist (UK-14, 304-18) in Cats, Rabbits and Monkeys. J. A. Burke, et al., Current Eye Rsrch., 5, (9), pág. 665-676 (1986) el derivado de quinoxalina mostrado a continuación y que tiene el nombre genérico brimonidina resultó ser eficaz para reducir la presión intraocular en conejos, gatos y monos. Los compuestos en este estudio se administraron por vía tópica a las córneas de los animales de estudio.
2
Se sabe que el agonista del receptor alfa 2 brimonidina puede proteger las células neurales retinianas, incluyendo fotorreceptores y células de gangliones retinianos, del daño en afecciones tales como glaucoma, retinitis pigmentosa, y degeneración macular relacionada con la edad cuando se administra por vía tópica o por vía sistémica.
En un primer aspecto la presente invención se refiere al uso en procedimientos para tratar la enfermedad de Alzheimer o la enfermedad de Parkinson del cerebro que comprende administrar al cerebro de un mamífero en necesidad de ello una cantidad terapéuticamente eficaz de un agonista selectivo del receptor adrenérgico alfa 2.
Como se usa en este documento, un "agonista selectivo del receptor adrenérgico alfa 2" o un "agonista selectivo de alfa 2" se referirán a un agente que tiene una proporción de eficacia en un receptor alfa 2 a la eficacia en un receptor alfa 1 mayor que la proporcionada por el agente dexmedatomidina. Preferiblemente, la eficacia es al menos 12 veces mayor en un receptor alfa 2 que en un receptor alfa 1; aún más preferiblemente la eficacia en el receptor o receptores alfa 2 es al menos 25 veces mayor que en un receptor alfa 1.
En una realización, el agonista selectivo de alfa 2 es un compuesto de 2-imidazolin-2-ilamino que tiene la estructura mostrada en la Estructura I, anterior. En una realización preferida, el agonista selectivo de alfa 2 es brimonidina o sus sales.
En otra realización el agonista selectivo de alfa 2 es también un agonista selectivo para alfa 2B o selectivo para alfa 2B/2C. Como se usa en este documento, un "agonista selectivo para alfa 2B o 2B/2C", o un "agonista selectivo del receptor adrenérgico alfa 2B o 2B/2C" se refiere a un compuesto que tiene al menos 10 veces (preferiblemente al menos 50 veces, aún más preferiblemente al menos 100 veces) más eficacia en el receptor alfa 2B, o en ambos subtipos de receptor alfa 2B y alfa 2C que en el subtipo de receptor alfa 2A.
Preferiblemente un compuesto "selectivo" es "específico", lo que significa que el compuesto tiene al menos 100 veces (preferiblemente al menos 500 veces, aún más preferiblemente al menos 1000 veces; todavía más preferiblemente al menos 5000 veces) más eficacia en el receptor o receptores o subtipo o subtipos de receptor indicados de la que tienen en el receptor o receptores o subtipo o subtipos de receptor con el que se están comparando.
La eficacia de un receptor o subtipo de receptor dado de acuerdo con la presente invención se determina usando el procedimiento de ensayo RSAT descrito anteriormente.
Los agonistas selectivos para alfa 2B y 2B/2C son de uso particular en los procedimientos de la presente invención. Los agonistas selectivos para alfa 2 presentan un índice terapéutico mejorado debido a la disminución de la CE_{50} de dichos compuestos (que conduce a un efecto terapéutico a una menor concentración de fármaco) comparado con compuestos similares que tienen actividad del receptor alfa 1, sin cambios en la curva de dosis de sedación-respuesta. Los agonistas selectivos para alfa 2B o 2B/2C adicionalmente tienen una menor actividad sedante debido a la menor actividad del receptor alfa 2A, que los inventores han descubierto que es responsable de la sedación y los efectos cardiovasculares tales como una disminución de la frecuencia cardiaca y la tensión sanguínea. Estos efectos se maximizan particularmente cuando los compuestos son específicos en lugar de se simplemente selectivos para su diana especificada.
En otro aspecto, la presente invención se refiere a procedimientos para prevenir la muerte o degeneración de células neurales que se proyectan hacia o desde una región del cerebro seleccionada entre el grupo constituido por la sustancia negra, el locus ceruleus y el área ventral tegmental en la enfermedad de Parkinson o la enfermedad de Alzheimer que comprende administrar un agonista selectivo del receptor adrenérgico alfa 2 a dichas células. En una realización, el agonista selectivo para alfa también es un agonista selectivo para alfa 2B o selectivo para alfa 2B/2C. Preferiblemente, los agentes son específicos para su diana especificada.
En otro aspecto más, la invención se refiere a procedimientos para tratar una afección neurodegenerativa del cerebro que comprende administrar al cerebro de un mamífero en necesidad de ello una cantidad terapéuticamente eficaz de un agonista del receptor adrenérgico alfa 2 y un antagonista del receptor alfa 1. El uso de un antagonista del receptor alfa junto con un agonista del receptor alfa 2 dará como resultado un medicamento combinado que tiene actividad selectiva para alfa 2, consiguiendo de esta manera las ventajas de usar un solo agonista selectivo para alfa 2. Véase la Solicitud de Patente de Estados Unidos 10/152.424.
Este nuevo procedimiento es particularmente eficaz cuando se administra como un tratamiento profiláctico, es decir, antes de que haya tenido lugar la lesión en los nervios, o antes del progreso a largo plazo de la patología, tal como la enfermedad de Alzheimer o Parkinson. Sin desear sostener una teoría particular respecto al papel que desempeñan los compuestos de la presente invención en la neuroprotección, los solicitantes plantean la hipótesis de que los compuestos y procedimientos descritos pueden estimular la producción de ciertos factores de la familia bcl-2; el aumento de la expresión de dichos factores se ha medido mediante el aumento de la expresión del ARNm que codifica su producción; estos factores (bcl-2 y bcl-XL) pueden suprimir el programa apoptótico. Estos factores pueden compensar la presencia o la inducción de factores de apoptosis de bcl-2 tales como bad y bax que pueden producirse como resultado de provocaciones nocivas a las células nerviosas. De esta manera, se contempla adicionalmente que los compuestos de la presente invención que proporcionan señales de supervivencia celular a los nervios pueden usarse ventajosamente en combinación con los compuestos que inhiben la muerte celular. Dichos compuestos inhibidores de la muerte celular incluyen antagonistas de NMDA, especialmente memantina, que bloquean los efectos excitotóxicos del exceso de glutamato; inhibidores de óxido nítrico sintetasa; aceptores de radicales libres y bloqueadores del canal de calcio.
Puede usarse cualquier procedimiento adecuado para administrar el compuesto o compuestos actualmente útiles para el mamífero a tratar. En todos los procedimientos, el mamífero preferido es un ser humano. El procedimiento de administración particular elegido es preferiblemente uno que permite que el compuesto o compuestos actualmente útiles tengan el efecto terapéutico deseado de una manera eficaz, por ejemplo, una baja concentración eficaz y una baja frecuencia de efectos secundarios.
La administración de los compuestos actualmente útiles para usar en los procedimientos de esta invención puede incluir, aunque sin limitación, administración oral, parenteral, intravenosa, subcutánea y otros modos de administración sistémica. Los compuestos se administran en una cantidad terapéuticamente eficaz solos o en combinación con un vehículo o excipiente adecuado farmacéuticamente aceptable.
Dependiendo del modo de administración pretendido, el compuesto o compuestos actualmente útiles pueden incorporarse en cualquier forma de dosificación farmacéuticamente aceptable, tal como, por ejemplo, comprimidos, supositorios, píldoras, cápsulas, polvos, líquidos, soluciones, infusiones, suspensiones, emulsiones, aerosoles o similares, preferiblemente en formas de dosificación adecuadas para administración individual de dosificaciones precisas, o formas de dosificación liberación sostenida para administración controlada continua. Preferiblemente, la forma de dosificación incluirá un excipiente farmacéuticamente aceptable y el compuesto o compuestos actualmente útiles y, además, puede contener otros agentes medicinales, agentes farmacéuticos, vehículos, adyuvantes, etc.
Para las formas de dosificación sólidas, los vehículos sólidos no tóxicos incluyen calidades farmacéuticas de manitol, lactosa, almidón, estearato de magnesio, sacarina sódica, los polialquilenglicoles, talco, celulosa, glucosa, sacarosa y carbonato de magnesio. Un ejemplo de una forma de dosificación sólida para realizar la invención es un supositorio que contiene propilenglicol como el vehículo.
Las formas de dosificación líquidas administrables farmacéuticamente, por ejemplo, pueden comprender una solución o suspensión de uno o más de los compuestos actualmente útiles y adyuvantes farmacéuticos opcionales en un vehículo tal como, por ejemplo, agua, solución salina, dextrosa acuosa, glicerol, etanol y similares, para formar de esta manera una solución o suspensión. Si se desea, la composición farmacéutica a administrar puede contener también cantidades minoritarias de sustancias auxiliares no tóxicas tales como agentes humectantes o de emulsión, agentes tamponadores del pH y similares. Los ejemplos típicos de dichos agentes auxiliares son acetato sódico, monolaurato de sorbitano, trietanolamina, acetato sódico, oleato de trietanolamina, etc. Los procedimientos reales de preparación de dichas formas de dosificación se conocen, o resultarán evidentes para los especialistas en esta técnica; por ejemplo, véase Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 16ª Edición, 1980. La composición de la formulación a administrar, en cualquier caso, contiene una cantidad de uno o más de los compuestos actualmente útiles en una cantidad eficaz que proporciona el efecto terapéutico
deseado.
La administración parenteral generalmente se caracteriza por inyección, bien sea por vía subcutánea, intramuscular o intravenosa. Los inyectables pueden prepararse en formas convencionales, en forma de soluciones o suspensiones líquidas, formas sólidas adecuadas para solución o suspensión en líquido antes de la inyección, o en forma de emulsiones o infusiones. Los excipientes adecuados son, por ejemplo, agua, solución salina, dextrosa, glicerol, etanol y similares. Además, si se desea, las composiciones farmacéuticas inyectables o infundibles a administrar pueden contener también cantidades minoritarias de sustancias auxiliares no tóxicas tales como agentes humectantes o de emulsión, agentes tamponadores del pH y similares.
La cantidad del compuesto o compuestos actualmente útiles administrada, por supuesto, depende del efecto o efectos terapéuticos deseados, del mamífero específico que se está tratando, de la gravedad y naturaleza de la afección del mamífero, del modo de administración, de la potencia y la farmacodinámica del compuesto o compuestos particulares empleados, y del juicio del médico que lo prescribe. Generalmente, la dosificación terapéuticamente eficaz del compuesto o compuestos actualmente útiles está preferiblemente en el intervalo de 0,5 o 1 a 100 mg/kg/día.
Descripción detallada de la invención
En un aspecto la presente invención es refiere a procedimientos para tratar la enfermedad de Alzheimer o la enfermedad de Parkinson que comprenden administrar al cerebro de un mamífero en necesidad de ello una cantidad terapéuticamente eficaz de un agonista selectivo del receptor adrenérgico alfa 2.
En relación con esto los solicitantes han descubierto que los agonistas selectivos o específicos del receptor alfa 2 tienen una eficacia inesperadamente grande sobre los compuestos que tienen actividad agonista del receptor alfa 1. Los solicitantes creen que esta estimulación del receptor adrenérgico alfa 1 da como resultado una interferencia con la actividad neuroprotectora de dichos agentes de manera que cualquier efecto sedante que pueda tener dicho agente puede tener una CE_{50} similar, o dentro de aproximadamente un intervalo de tres veces de la actividad neuroprotectora para dicho compuesto. De esta manera, cualquier actividad neuroprotectora proporcionada por dichos agentes no selectivos se observa a concentraciones que tenderán a sedar o a ser tóxicas para el paciente. En parte por esta razón, los agentes alfa adrenérgicos generalmente no se han usado como agentes neuroprotectores en el pasado, excepto en aplicaciones tópicas o locales (tales como aplicaciones oftálmicas) en las que el agente no se administra generalmente por vía sistémica.
Otros tipos de compuestos que tienen actividad selectiva o específica para alfa 2B o alfa 2B/2C se describen en las Solicitudes de Patente de Estados Unidos transmitida legalmente 09/794.874 y 10/153.328.
Sin querer quedar limitado por teoría alguna, los presentes solicitantes creen que la mayor parte o toda la eficacia neuroprotectora de estos agentes se proporciona por estimulación de los receptores alfa 2B y/o alfa 2C. En general no se creía que el cerebro fuera rico en receptores alfa 2B o 2C. Sin embargo, los solicitantes han descubierto que los agentes y procedimientos de la presente invención pueden proporcionar efectos neuroprotectores a las neuronas que se proyectan desde o hacia la sustancia negra y el área ventral tegmental del cerebro, y creen que estos efectos pueden observarse también en neuronas del locus coruleus, que se proyectan hacia la corteza. De esta manera, los agentes descritos en este documento son útiles en el tratamiento de afecciones tales como la enfermedad de Alzheimer y la enfermedad de Parkinson.
Ejemplo 1
Procedimientos Ensayo de Campo Abierto
Cada animal se pone en una caja de campo abierto de plástico transparente con dos filas de foto-travesaños montados en los lados para distinguir entre los movimientos horizontal (es decir, la distancia recorrida) y vertical (es decir, los "retrocesos"). Las condiciones ambientales son un ruido bajo e iluminación tenue. Los movimientos del animal dentro de la caja se miden durante 5 minutos, y se calculan a partir de los registros del número y tipo de "travesaños rotos" o cruces de foto-travesaños. En el último ensayo de Campo Abierto, solo se cuentan los retrocesos, y se clasifican como "soportados" o "no soportados". Los retrocesos soportados son cuando un animal pone al menos una pata delantera en la pared lateral de la caja cuando se registra un retroceso. En un retroceso no soportado el ratón se soporta únicamente mediante las patas traseras. Estos retrocesos se distinguen por videoregistro. El número de retrocesos no soportados es la medida más fiable de pérdida neuronal de dopamina en este ensayo.
Ensayo de Colgado por la Cola
Los ratones se cuelgan por la cola 3 veces cada uno, durante aproximadamente 10 segundos cada vez. Cada ratón se cuelga por la base de su cola a aproximadamente 30 cm por encima de la superficie de una mesa hasta que el ratón gira a izquierda o derecha. A un giro a la izquierda se le da una puntuación de 0 y a un giro a la derecha se le da una puntuación de 1.
La colocación de las patas delanteras se observa también durante el colgado por la cola. A la colocación de las patas se le da una puntuación en una escala de 4 puntos. A las patas extendidas, o a aquellas situadas sobre la cabeza se les da una puntuación de 0. A las patas que se aprietan o mantienen contra el cuerpo se les da una puntuación de 3. Las puntuaciones de 1 ó 2 se asignan para fases relativas entre los dos extremos. La colocación de las patas traseras se puntúa igual que en el caso anterior.
Construcción de una Ratonera
4 ratones del mismo género de un grupo se ponen en un tubo de plástico. Se ponen ocho tiras de toallitas de papel en una pila ordenada en la parte delantera del tubo. Las ratoneras construidas a partir de las toallitas de papel se puntúan a las 24 horas, 48 horas, 72 horas y 96 horas después del tratamiento. Las puntuaciones se asignan de la siguiente manera: 0 = papel hecho trizas y formando una ratonera completa con techo; 1 = papel hecho trizas y formando una ratonera completa sin techo; 2 = papel ligeramente hecho trizas o masticado y reunido de forma suelta en un área; 3 = papel ligeramente masticado sin reunión evidente; y 4 = sin reunión evidente.
Recuento de Neuronas
Entre 55 y 60 días después de la inyección de MPTP, los ratones se sacrifican usando nembutol sódico. Los cerebros de los ratones se prefunden con solución salina tamponada con fosfato seguido de fijador de Lana (paraformaldehído y ácido pícrico). Los cerebros se retiran y se ponen en el fijador de Lana durante 7 a 10 días. Los cerebros se seccionan después coronalmente a 50 micrómetros usando un vibratome. Y las secciones se tiñen con un anticuerpo para tirosina hidroxilasa, la enzima limitadora de la velocidad en la síntesis de dopamina. La sección se examinó después con un microscopio a un aumento de 100X. Se seleccionaron cortes tisulares (\sim2,9 mm y \sim3,6 mm posterior al bregma) para el recuento celular en SN y VTA. Estas secciones están en el punto medio de la mitad rostral y el punto medio de la mitad caudal de la SN, respectivamente. Cada célula marcada con TH que es claramente visible que tiene entre 2 y 6 neuritas se considera una neurona. Se calcula un recuento promedio global para cada animal a partir de las cuatro secciones (rostral y caudal, izquierda y derecha). Se obtiene un promedio para las cuatro secciones. Se realizan análisis diferentes sobre los recuentos de neuronas a partir de SN y VTA. Estos recuentos se analizan usando una medición ANOVA repetida, seguida de ensayos del efecto entre grupos usando el procedimiento HSD de Fisher.
Procedimiento Experimental
Los ratones que recibieron inyecciones sistémicas de la toxina de piridina 1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridina (MPTP) perdieron selectivamente grandes números de neuronas dopaminérgicas en la sustancia negra (SN) y en el área ventral tegmental (VTA). La pérdida de células de dopamina en la SN mimetiza el estado clínico observado en la enfermedad de Parkinson. La pérdida de dichas células en la VTA puede contribuir a las deficiencias cognitivas observadas en la enfermedad de Parkinson y la enfermedad de Alzheimer, debido a estas proyecciones de neuronas hacia la corteza frontal.
Se permite que 50 ratones de tipo C57B1/B6 (de 8-12 semanas de edad) se aclimaten durante 12-14 días antes de su uso experimental. Los ratones se asignan entonces aleatoriamente a los siguientes grupos: MPTP más DMSO como vehículo; vehículo solo, MPTP más brimonidina (3 mg/kg/día), MPTP más AGN 197075 (3 mg/kg/día), y MPTP más AGN 196923 (3 mg/kg/día)).
La estructura de 197075 es la siguiente:
3
y la información de la síntesis para este compuesto puede encontrarse en la Patente de Estados Unidos Nº 6.313.172.
La estructura de 196923 es la siguiente:
4
y la información de la síntesis para este compuesto puede encontrarse en la Solicitud de Patente de Estados Unidos con Número de Serie 09/815.362, que comparte propiedad con la presente Solicitud de Patente.
En los ensayos descritos en la presente memoria, cada ratón se somete a un ensayo de Campo Abierto inicial y a un ensayo de Colgado por la Cola. El ensayo de Campo Abierto es el ensayo conductual usado más frecuentemente para ratones tratados con MPTP, y parece ser sensible a la pérdida de entrada dopaminérgica desde la sustancia negra. El ensayo de Colgado por la Cola es sensible a una lesión estriada directa; el ensayo de Construcción de Ratonera es sensible a la pérdida de entrada estriada desde la corteza frontal.
Cuatro de los 5 grupos de ratones recibieron una infusión de un compuesto de ensayo (o de un vehículo que no contiene el compuesto). Estas infusiones se administran mediante una mini-bomba osmótica implantada subcutáneamente durante un periodo de 14 días a un flujo de 0,25 microlitros/hora. Tres días después del implante de las bombas, se somete a los ratones a los ensayos de Campo Abierto y Colgado por la Cola, junto con los ratones del grupo de control, a los que no se han implantado las mini-bombas. Inmediatamente después de los ensayos, a los ratones que poseen una bomba se les dio una inyección de 40 mg/kg de MPTP por vía subcutánea. Todos los grupos se someten a los ensayos de Campo Abierto y Colgado por la Cola a los 10-12 días y 30-40 días después del tratamiento con MPTP. Los ensayos de Campo Abierto y Colgado por la Cola se realizan a los 50-55 días después del tratamiento con MPTP.
Para todos los ensayos conductuales, los resultados se analizan en primer lugar usando una medición ANOVA repetida, seguida de ensayos del efecto entre grupos usando el procedimiento HSD de Fisher.
Resultados Ensayo de Campo Abierto
Antes del tratamiento con MPTP no hay una diferencia significativa entre los 5 grupos en la distancia recorrida o en el número de retrocesos.
El grupo del vehículo es significativamente más activo que los controles en los días 10 y 30 después del tratamiento con MPTP. Los ratones tratados con brimonidina no muestran alteración en este aumento de actividad; de esta manera, no hay una diferencia significativa entre este grupo y el grupo del vehículo. AGN 196923 reduce significativamente la cantidad de actividad (comparado con el vehículo), y estos ratones son indistinguibles de los del grupo de control. El grupo tratado con AGN 197075 muestra una tendencia similar en la misma dirección. Ningún compuesto de AGN es significativamente diferente del vehículo a los 30 días después del tratamiento con MPTP, pareciendo que MPTP causa una reducción en el número total de retrocesos a los 10 días después de MPTP. A los 30 días no hay efecto del MPTP sobre el retroceso total (comparado con el grupo del vehículo), y sólo una ligera reducción en el retroceso frente al grupo de control.
A los 50-60 días después del tratamiento con MPTP, los ratones que recibieron AGN 197075 realizaron retrocesos significativamente menos soportado que los ratones que recibieron el vehículo. El grupo del vehículo realizó menos retrocesos no soportados que los ratones normales. No hay un efecto de MPTP o de los compuestos sobre el retroceso soportado.
Ensayo de Colgado por la Cola
No se observan diferencias significativas entre los grupos en el ensayo de colgado por la cola antes del tratamiento con MPTP, y no se observa ninguna después del tratamiento con MPTP en las patas traseras. MPTPO afecta significativamente a las extensiones de la pata delantera en los tres puntos temporales tras la lesión. De esta manera, este deterioro no se invierte con el tiempo. AGN 197075 reduce significativamente este deterioro durante el periodo en el que se administra el compuesto. AGN 196923 y brimonidina no muestran dicha tendencia. Sin embargo, los tres compuestos tienden a reducir el deterioro cuando se miden después de la dosificación (es decir, después de 14 días de la administración del compuesto).
Recuento de Neuronas
En la sustancia negra, los animales tratados con MPTP tienen un 58% menos neuronas que los animales no tratados. Sin embargo, aquéllos que reciben brimonidina, AGN 196923, o AGN 197075 tienen una pérdida significativamente menor de neuronas.
5
En el área Ventral Tegmental, se encontró que MPTP daba como resultado una disminución promedio del 28% menor de neuronas que en el grupo de control. Cada uno de los compuestos de ensayo (AGN 197075, AGN 196923 y brimonidina) redujo esta pérdida en un promedio de aproximadamente el 10%.

Claims (13)

1. Uso de un agonista selectivo del receptor adrenérgico alfa 2B o alfa 2B/2C en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección neurodegenerativa del cerebro que provoca una lesión a las neuronas que se proyectan hacia y desde la sustancia negra, en el que dicha afección neurodegenerativa es la enfermedad de Parkinson o la enfermedad de Alzheimer.
2. El uso de la reivindicación 1 en el que dicho medicamento que contiene dicho agonista selectivo del receptor adrenérgico alfa 2B o alfa 2B/2C se administra al cerebro de dicho mamífero mediante administración sistémica.
3. El uso de la reivindicación 2 en el que la administración de dicho medicamento es eficaz para prevenir la muerte o degeneración de las neuronas que se proyectan hacia o desde el área ventral tegmental.
4. El uso de una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 en el que dicho compuesto es un compuesto opcionalmente sustituido seleccionado entre el grupo constituido por una imidazolina, una tiourea, una tiona, una quinoxalina y una imidazolona.
5. El uso de la reivindicación 1 en el que dicho compuesto agonista selectivo del receptor adrenérgico alfa 2B o 2B/2C es un agonista específico del receptor adrenérgico alfa 2B o alfa 2B/2C.
6. El uso de la reivindicación 5 en el que dicho compuesto es un compuesto opcionalmente sustituido seleccionado entre el grupo constituido por una imidazolina, una tiourea, una tiona, una quinoxalina y una imidazolona.
7. El uso de la reivindicación 1 en el que la cantidad de sedación asociada con la administración de dicho fármaco a un grado dado de eficacia terapéutica es menor que la administración asociada con una dosis dexmedetomidina al mismo grado de eficacia terapéutica.
8. Uso de un agonista selectivo del receptor adrenérgico alfa 2B o 2B/2C en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección que implica la neurodegeneración del tejido cerebral, en el que dicha afección es la enfermad de Parkinson o la enfermad de Alzheimer.
9. El uso de la reivindicación 8, en el que el agonista selectivo del receptor adrenérgico alfa 2 es al menos aproximadamente 12 veces más selectivo para un receptor adrenérgico 2B o 2B/2C, en comparación con un receptor alfa 1, que la dexmedatomidina.
10. El uso de la reivindicación 9 en el que dicho agonista selectivo del receptor alfa 2 es un compuesto seleccionado entre el grupo de compuestos constituido por una imidazolina, una tiourea, una tiona, una quinoxalina y una imidazolona.
11. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 8-10 en el que dicho agonista selectivo del receptor alfa 2B o alfa 2B/2C es un agonista específico del receptor alfa 2.
12. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 8-10 en el que dicho agonista selectivo del receptor alfa 2B o alfa 2B/2C es un agonista específico del receptor alfa 2B o alfa 2B/2C.
13. El uso de la reivindicación 12 en el que dicho agonista específico del receptor alfa 2B o alfa 2B/2C es un agonista específico del receptor alfa 2.
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