ES2323363T3 - Usos terapeuticos de sapogeninas. - Google Patents

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Abstract

Principio activo seleccionado de compuestos de la fórmula general Ia: en la que el grupo R a se selecciona de hidrógeno; alquilcarbonilo; alcoxicarbonilo; alquilcarbamoílo; o arilcarbonilo; o sulfo (HO3S); fosfono ((HO)2P(O)-); o un mono, di o trisacárido; en la que cualquier grupo alquilo está sustituido opcionalmente con arilo, amino, mono o dialquilamino, un residuo de ácido carboxílico (-COOH), o cualquier combinación de los mismos; y todas sus mezclas racémicas, todas sus sales farmacéuticamente aceptables y todas las mezclas y combinaciones de las mismas para su uso en el tratamiento o la prevención de cualquiera de las siguientes enfermedades en un ser humano o animal no humano que padece las mismas o es susceptible a las mismas: depresión, esquizofrenia, distrofia muscular incluyendo distrofia muscular facioescapulohumeral (FSH), distrofia muscular de Duchenne, distrofia muscular de Becker y distrofia muscular de Bruce, distrofia de Fuchs, distrofia miotónica, distrofia corneal, síndrome de distrofia simpática refleja (SDRS), distrofia neurovascular, enfermedad de Huntington, enfermedades de las neuronas motoras incluyendo esclerosis lateral amiotrófica (ELA), neurodegeneración traumática, por ejemplo, tras accidente cerebrovascular o tras un accidente (por ejemplo, traumatismo craneal o lesión de la médula espinal), enfermedad de Batten, síndrome de Cockayne, síndrome de Down, degeneración ganglionar corticobasal, atrofia sistémica múltiple, atrofia cerebral, atrofia olivopontocerebelosa, atrofia dentatorubral, atrofia palidoluisiana, atrofia espinobulbar, neuritis óptica, panencefalitis esclerosante (PEES), trastorno por déficit de atención, encefalitis posviral, síndrome pospoliomielítico, síndrome de Fahr, síndrome de Joubert, síndrome de Guillain-Barre, lisencefalía, enfermedad de Moyamoya, trastornos de la migración neuronal, enfermedad por poliglutamina, enfermedad de Niemann-Pick, leucoencefalopatía multifocal progresiva, seudotumor cerebral, enfermedad de Refsum, síndrome de Zellweger, parálisis supranuclear, ataxia de Friedreich, ataxia espinocerebelosa de tipo 2, síndrome de Rhett, síndrome de Shy-Drager, esclerosis tuberosa, enfermedad de Pick, neuropatías incluyendo neuropatía hereditaria, neuropatía diabética y neuropatía mitótica, neurodegeneración por priones, incluyendo enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (ECJ), variante de ECJ, nueva variante de ECJ, encefalopatía espongiforme bovina (EEB), enfermedad de Gerstmann-Straussler-Scheinker GSS, insomnio familiar fatal IFF, kuru y síndrome de Alper, enfermedad de Joseph, encefalomielitis aguda diseminada, aracnoiditis, lesiones vasculares del sistema nervioso central, pérdida de función neuronal en las extremidades, enfermedad de Charcot-Marie-Tooth, propensión a insuficiencia cardiaca y degeneración macular.

Description

Usos terapéuticos de sapogeninas.
Campo de la invención
La presente invención se refiere a compuestos seleccionados de sapogeninas, compuestos relacionados y sus derivados para su uso en métodos terapéuticos.
Los usos de la sapogeninas, compuestos relacionados y sus derivados consisten en el tratamiento de ciertos estados caracterizados por neurodegeneración no cognitiva, degeneración neuromuscular no cognitiva, neurodegeneración sensitivomotora, o pérdida o disfunción de receptores. En un aspecto adicional, la invención se refiere a composiciones para su uso en tales tratamientos.
Antecedentes de la invención
La disfunción cognitiva es una característica de síndromes y estados de demencia, tales como enfermedad de Alzheimer (EA), demencia senil tipo Alzheimer (DSTA), demencia con cuerpos de Lewy y demencia vascular. Un grado menor de disfunción cognitiva también es una característica de ciertos síndromes y estados que no son de demencia, tales como deterioro cognitivo leve (DCL), deterioro de la memoria asociado con la edad (DMAE), autismo y deterioro neuronal.
La neurodegeneración no cognitiva (es decir, neurodegeneración en ausencia de disfunción cognitiva), la degeneración neuromuscular no cognitiva (es decir, degeneración neuromuscular en ausencia de disfunción cognitiva) y la neurodegeneración sensitivomotora son características de síndromes y estados tales como enfermedad de Parkinson, distrofia muscular incluyendo distrofia muscular facioescapulohumeral (FSH), distrofia muscular de Duchenne, distrofia muscular de Becker y distrofia muscular de Bruce, distrofia de Fuchs, distrofia miotónica, distrofia corneal, síndrome de distrofia simpática refleja (SDRS), distrofia neurovascular, miastenia grave, enfermedad de Lambert Eaton, enfermedad de Huntington, esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y esclerosis múltiple.
La pérdida o disfunción de receptores, particularmente pérdida o disfunción de receptores de acetilcolina nicotínicos y/o muscarínicos y/o receptores de dopamina y/o receptores adrenérgicos, es una característica de algunos o todos de los síndromes y estados anteriores. La pérdida o disfunción de receptores en ausencia de deterioro cognitivo, neuronal y neuromuscular también es una característica de síndromes y estados tales como hipotensión postural, síndrome de fatiga crónica, asma, propensión a insuficiencia cardiaca y degeneración macular.
Los síndromes y estados anteriores son problemas graves y en aumento en todas las sociedades en las que, debido al aumento de la esperanza de vida y al control de enfermedades adquiridas, el perfil demográfico se está extendiendo cada vez más hacia una población de más edad. Se requieren urgentemente agentes que puedan tratar, o ayudar, en el tratamiento o la prevención de tales trastornos.
El documento DE-A-4303214 sugiere en uso de saponinas y sapogeninas en el tratamiento de enfermedades virales, pero sin datos que permitiesen a un experto en la técnica seleccionar un grupo particular de compuestos para cualquier enfermedad viral particular.
El documento WO-A-99/16786 sugiere el uso de ciertas saponinas y sapogeninas en el tratamiento de la demencia.
Los documentos WO-A-99/48482, WO-A-99/48507, WO-A-01/23406, WO-A-01/23407, WO-A-01/23408 se refieren al uso de ciertas saponinas, sapogeninas y derivados de las mismas en el tratamiento de la disfunción cognitiva y estados relacionados.
La solicitud de patente china número CN-A-1096031 sugiere una bioactividad del espirostano, la sapogenina, sarsasapogenina, en la regulación en dos sentidos de receptores \beta-adrenérgicos y M-colinérgicos. No se sugiere actividad farmacéutica específica. Sin embargo, en "Synthesis and Applications of Isotopically Labelled Compounds", 1998, páginas 315-320, Yi et al describen el uso de sarsasapogenina en el tratamiento de la demencia senil.
Existen varios trastornos denominados "espectro", en los que se presentan una amplia gama de combinaciones de síntomas, en una amplia gama de gravedades relativas. La gravedad de cada síntoma y la combinación particular de síntomas variará de individuo a individuo y según el estadio de evolución del trastorno. En los casos de la enfermedad de Parkinson, miastenia grave, enfermedad de Lambert Eaton, hipotensión postural y síndrome de fatiga crónica, por ejemplo, la disfunción cognitiva no es un síntoma primario, aunque puede estar presente como uno de varios síntomas secundarios posibles. Además, estos estados no son enfermedades virales ni demencias. Muchos de estos trastornos se denominan trastornos "espectro", por tanto, en muchas casos, no es necesario un tratamiento para la disfunción cognitiva (por ejemplo, demencia).
La presente invención se basa en el hallazgo de que ciertas sapogeninas y sus derivados, incluyendo saponinas, tienen una actividad de modificación de la enfermedad sorprendente frente a la neurodegeneración no cognitiva, degeneración neuromuscular no cognitiva, neurodegeneración sensitivomotora así como frente a la pérdida o disfunción de receptores en ausencia de deterioro cognitivo, neuronal y neuromuscular, y por tanto previenen y revierten activamente los estados. Tales enfermedades se tratan normalmente con moduladores de receptores colinérgicos muscarínicos tales como los descritos en el documento WO-A-01/03472. Este hallazgo permite mejorar el tratamiento de ciertos trastornos no virales, espectro y no espectro, en los que la disfunción cognitiva no es un síntoma primario.
Breve descripción de la invención
La invención proporciona un principio activo seleccionado de compuestos de la fórmula general Ia:
1
en la que el grupo R^{a} se selecciona de hidrógeno; alquilcarbonilo; alcoxicarbonilo; alquilcarbamoilo; o arilcarbonilo; o sulfo(HO_{3}S); fosfono ((HO)_{2}P(O)-); o un mono, di o trisacárido; en la que cualquier grupo alquilo está sustituido opcionalmente con arilo, amino, mono o dialquilamino, un residuo de ácido carboxílico (-COOH) o cualquier combinación de los mismos; y
todas sus mezclas racémicas, todas sus sales farmacéuticamente aceptables, y todas las mezclas y combinaciones de las mismas para su uso en el tratamiento o la prevención de cualquiera de las siguientes enfermedades en un ser humano o animal no humano que padece las mismas o es susceptible a las mismas: depresión, esquizofrenia, distrofia muscular incluyendo distrofia muscular facioescapulohumeral (FSH), distrofia muscular de Duchenne, distrofia muscular de Becker y distrofia muscular de Bruce, distrofia de Fuchs, distrofia miotónica, distrofia corneal, síndrome de distrofia simpática refleja (SDRS), distrofia neurovascular, enfermedad de Huntington, enfermedades de las neuronas motoras incluyendo esclerosis lateral amiotrófica (ELA), neurodegeneración traumática por ejemplo tras accidente cerebrovascular o tras un accidente (por ejemplo, traumatismo craneal o lesión de la médula espinal), enfermedad de Batten, síndrome de Cockayne, síndrome de Down, degeneración ganglionar corticobasal, atrofia sistémica múltiple, atrofia cerebral, atrofia olivopontocerebelosa, atrofia dentatorubral, atrofia palidoluisiana, atrofia espinobulbar, neuritis óptica, panencefalitis esclerosante (PEES), trastorno por déficit de atención, encefalitis posviral, síndrome pospoliomielítico, síndrome de Fahr, síndrome de Joubert, síndrome de Guillain-Barre, lisencefalía, enfermedad de Moyamoya, trastornos de la migración neuronal, enfermedad por poliglutamina, enfermedad de Niemann-Pick, leucoencefalopatía multifocal progresiva, seudotumor cerebral, enfermedad de Refsum, síndrome de Zellweger, parálisis supranuclear, ataxia de Friedreich, ataxia espinocerebelosa de tipo 2, síndrome de Rhett, síndrome de Shy-Drager, esclerosis tuberosa, enfermedad de Pick, neuropatías incluyendo neuropatía hereditaria, neuropatía diabética y neuropatía mitótica, neurodegeneración por priones, incluyendo enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (ECJ), variante de ECJ, nueva variante de ECJ, encefalopatía espongiforme bovina (EEB), GSS, IFF, kuru y síndrome de Alper, enfermedad de Joseph, encefalomielitis aguda diseminada, aracnoiditis, lesiones vasculares del sistema nervioso central, pérdida de función neuronal en las extremidades, enfermedad de Charcot-Marie-Tooth, propensión a insuficiencia cardiaca y degeneración macular.
Los principios activos (tal como se definen en el presente documento) pueden estar en forma de composiciones (por ejemplo composiciones farmacéuticas, productos alimenticios, complementos alimenticios y bebidas).
La expresión "principios activos" se refiere a compuestos de la fórmula general la anterior, a todos sus estereoisómeros y mezclas racémicas, a todas sus sales farmacéuticamente aceptables y a todas las mezclas y combinaciones de las mismas.
Las formas de derivados que llevan azúcar de principios activos de sapogenina se denominan generalmente en la técnica saponinas. La expresión "hidrato de carbono" usada en el presente documento incluye particularmente tales grupos azúcar.
Los principios activos usados en la presente invención son preferiblemente las sapogeninas esteroideas no estrogénicas, saponinas y derivados de las mismas dentro de los términos de la definición anterior, incluyendo todas las sales fisiológicamente aceptables de las mismas.
Los principios activos pueden producirse de manera natural o producirse de manera no natural. Pueden prepararse adecuadamente principios activos que se producen de manera no natural mediante modificación de grupos laterales y/o átomos laterales de compuestos que se producen de manera natural, tal como se describe a continuación y tal como se conoce en la técnica.
La invención proporciona los usos correspondientes para el tratamiento de seres humanos y animales no humanos, e incluye composiciones que contienen los principios activos para su uso en dichos métodos de tratamiento.
Los principios activos de la invención, si se desea, pueden administrarse conjuntamente con uno o más principios activos adicionales, por ejemplo uno o más agentes seleccionados de, pero que no se limitan a, inhibidores de la colinesterasa, agonistas de la dopamina (por ejemplo L-dopa), inhibidores de la COMT, inhibidores de la MAO-B, anticolinérgicos, agonistas de la acetilcolina, agonistas de la serotonina, agonistas de receptores de AMPA, agonistas de receptores GABA, agonistas de receptores NMDA, agonistas de receptores \beta-adrenérgicos, digoxina, dobutamina, antiinflamatorios, factores neurotróficos, estatinas, antagonistas de receptores de adenosina A2a, inhibidores de la aldosa reductasa, inmunomoduladores, agonistas cannabinoides, interferón \beta o antidepresivos tricíclicos.
Los principios activos pueden aplicarse terapéutica o profilácticamente a seres humanos y animales no humanos que padecen, o son propensos a, los estados y las enfermedades a los que se hizo referencia anteriormente, caracterizándose estos por neurodegeneración no cognitiva, degeneración neuromuscular no cognitiva, neurodegeneración sensitivomotora, o pérdida o disfunción de receptores.
Por tanto, la presente invención proporciona el uso de los principios activos (tal como se definen en el presente documento) en el tratamiento o la prevención de, o en la preparación de composiciones (por ejemplo composiciones farmacéuticas, productos alimenticios, complementos alimenticios y bebidas) para el tratamiento o la prevención de, uno o más de dichos estados y enfermedades en seres humanos y animales no humanos que padecen los mismos o son propensos a los mismos.
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Descripción detallada de la invención Ejemplos de Principios activos
Las siguientes clases de principios activos se mencionan en particular:
1. Compuestos de la fórmula general Ia:
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2
\vskip1.000000\baselineskip
en la que el grupo R^{a} se selecciona de hidrógeno; alquilcarbonilo; alcoxicarbonilo; alquilcarbamoílo; o arilcarbonilo; o sulfo (HO_{3}S); fosfono ((HO)_{2}P(O)-); o un mono, di o trisacárido; en la que cualquier grupo alquilo está sustituido opcionalmente con arilo, amino, mono o dialquilamino, un residuo de ácido carboxilico (-COOH), o cualquier combinación de los mismos;
2. Los compuestos anteriores tal como se definieron en el punto 1, en los que el átomo de carbono en la posición 3 lleva como -OR^{8} un resto de O-azúcar, en el que el grupo azúcar es un mono, di o trisacárido, por ejemplo una mono aldosa o cetosa que tiene 5 ó 6 átomo de carbonos, preferiblemente en forma de piranosa o furanosa ciclada, o bien como el anómero \alpha o bien \beta y que tiene isomerismo óptico D o L, o cualquier combinación de di y trioligosacárido de los mismos; formas aciladas de residuos de azúcar también han de incluirse dentro del término "azúcar"; los ejemplos de azúcares adecuados incluyen glucosa, manosa, fructosa, galactosa, maltosa, celobiosa, sacarosa, ramnosa, xilosa, arabinosa, fucosa, quinovosa, apiosa, lactosa, galactosa-glucosa, glucosa-arabinosa, fucosa-glucosa, ramnosa-glucosa, glucosa-glucosa-glucosa, glucosa-ramnosa, manosa-glucosa, glucosa-(ramnosa)-glucosa, glucosa-(ramnosa)-ramnosa, glucosa-(glucosa)-glucosa, galactosa-(ramnosa)-galactosa y derivados acilados (por ejemplo acetilados) de los mismos.
En las definiciones de compuestos anteriores:
Sustituyentes amino, mono-alquil-amino y di-alquil-amino opcionales de los grupos alquilo, cuando están presentes, son preferiblemente un mono-sustituyente en la posición a del grupo alquilo.
Sustituyentes -COOH opcionales de los grupos alquilo, cuando están presentes, pueden estar en la posiciona terminal o cualquier otra del grupo alquilo.
"Alquilo" significa un grupo hidrocarbonado alifático que puede ser lineal o ramificado que tiene de aproximadamente 1 a aproximadamente 20 átomos de carbono en la cadena. Grupos alquilo preferidos tienen de 1 a aproximadamente 12 átomos de carbono en la cadena. Ramificado significa que uno o más grupos alquilo inferiores tales como metilo, etilo o propilo están unidos a una cadena de alquilo lineal. "Alquilo inferior" significa de aproximadamente 1 a aproximadamente 4 átomos de carbono en la cadena que puede ser lineal o ramificada. Los grupos alquilo a modo de ejemplo incluyen metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, t-butilo, n-pentilo, 3-pentilo.
"Arilo" significa cualquier grupo que comprende un anillo aromático o sistema de anillos condensados, y preferiblemente contiene hasta 12 átomos de carbono. Un grupo arilo a modo de ejemplo es el grupo fenilo. Un grupo arilo puede estar opcionalmente mono o polisustituido, por ejemplo con sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno (por ejemplo cloro o bromo), alquilo, cicloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, amino, nitro, acilamino, carboxilo y alcoxicarbonilo.
"Residuo de ácido carboxílico" significa el grupo -COOH.
"Acilo" significa un grupo H-CO- o alquil-CO- en el que el grupo alquilo es tal como se define a continuación. Los acilos preferidos contienen un alquilo inferior. Los grupos acilo a modo de ejemplo incluyen formilo, acetilo, propanoílo, 2-metilpropanoílo, butanoílo y palmitoílo;
"Opcionalmente sustituido" significa que el dicho grupo puede estar sustituido con uno o más sustituyentes, que pueden ser iguales o diferentes, preferiblemente uno o más sustituyentes que individualmente tiene un tamaño que es pequeño (por ejemplo inferior a aproximadamente el 20% de la dimensión molecular más grande) en relación al grupo original que está sustituyéndose;
"Farmacéuticamente aceptable" significa que es, dentro del alcance del juicio médico y veterinario competente, adecuado para su uso en contacto con las células de seres humanos y animales inferiores sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica y similares, y son acordes con una razón beneficio/riesgo razonable.
"Sales farmacéuticamente aceptables" significa las sales de adición de base y las sales de adición de ácido orgánico e inorgánico, relativamente no tóxicas, de compuestos de la presente invención. Estas sales pueden prepararse in situ durante el aislamiento y la purificación finales de los compuestos. En particular, pueden prepararse sales de adición de ácido haciendo reaccionar por separado el compuesto purificado en su forma de base libre con un ácido orgánico o inorgánico adecuado y aislando la sal así formada. Véase, por ejemplo S.M. Berge, et al., Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sci., 66: págs. 1-19 (1977). También pueden prepararse sales de adición de base haciendo reaccionar por separado el compuesto purificado en su forma ácida con una base orgánica o inorgánica adecuada y aislando la sal así formada. Las sales de adición de base incluyen sales de aminas y metales farmacéuticamente aceptables. Ejemplos de sales de adición de ácido adecuadas son las formadas con ácidos seleccionados de ácidos clorhídrico, sulfúrico, fosfórico y nítrico. Ejemplos de sales de adición de base adecuadas son las formadas con bases seleccionadas de hidróxido de sodio, hidróxido de potasio e hidróxido de amonio.
En algunos de los compuestos de fórmula Ia, el grupo metilo C_{25} está en la configuración S; estos compuestos de la invención son sarsasapogenina y episarsasapogenina o derivados de las mismas. En otros compuestos de fórmula Ia, el grupo metilo C_{25} está en la configuración R; estos compuestos de la invención son esmilagenina y epiesmilagenina o derivados de las mismas.
En la fórmula Ia anterior, -OR puede, por ejemplo, seleccionarse de los siguientes (a menos que se excluya por estipulación): hidroxilo, catilato (etoxicarboniloxilo), acetato, succinato, cinamato, ferulato, propionato, butirato, valerato, isovalerato, caproato, isocaproato, dietilacetato, octanoato, decanoato, laurato, miristato, palmitato, estearato, benzoato, fenilacetato, fenilpropionato, cinamato, p-nitrobenzoiloxilo, 3,5-dinitrobenzoiloxilo, p-clorobenzoiloxilo, 2,4-diclorobenzoiloxilo, p-bromobenzoiloxilo, m-bromobenzoiloxilo, p-metoxibenzoiloxilo, ftalilo, glicinato, alaninato, valinato, fenilalaninato, isoleucinato, metioninato, argininato, asparaginato, aspartato, cisteinato, glutamato, histidinato, lisinato, prolinato, serinato, treoninato, triptofanato, tirosinato, fumarato o maleato.
De los compuestos de fórmula general la y sus sales farmacéuticamente aceptables, se prefieren en particular los siguientes compuestos:
sarsasapogenina
catilato de sarsasapogenina
acetato de sarsasapogenina
succinato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
glicinato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
alaninato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
valinato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
fenilalaninato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
isoleucinato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
metioninato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
episarsasapogenina
catilato de episarsasapogenina
acetato de episarsasapogenina
succinato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
glicinato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
alaninato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
valinato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
fenilalaninato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
isoleucinato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
metioninato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
esmilagenina
catilato de esmilagenina
acetato de esmilagenina
succinato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
glicinato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
alaninato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
valinato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
fenilalaninato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
isoleucinato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
metioninato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
epiesmilagenina
catilato de epiesmilagenina
acetato de epiesmilagenina
succinato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
glicinato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
alaninato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
valinato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
fenilalaninato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
isoleucinato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
metioninato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo.
De los compuestos de saponina (R = azúcar) de fórmula general Ia, se prefieren particularmente los siguientes compuestos: sarsasapogenina, episarsasapogenina, esmilagenina y epiesmilagenina en los que, en cada caso, el átomo de carbono en la posición 3 lleva un resto de O-azúcar en el que el grupo azúcar se selecciona de glucosa, manosa, fructosa, galactosa, maltosa, celobiosa, sacarosa, ramnosa, xilosa, arabinosa, fucosa, quinovosa, apiosa, lactosa, galactosa-glucosa, glucosa-arabinosa, fucosa-glucosa, ramnosa-glucosa, glucosa-glucosa-glucosa, glucosa-ramnosa, manosa-glucosa, glucosa-(ramnosa)-glucosa, glucosa-(ramnosa)-ramnosa, glucosa-(glucosa)-glucosa, galactosa-(ramnosa)-galactosa y derivados acilados (por ejemplo acetilados) de los mismos.
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Composiciones y usos
La presente invención proporciona por tanto un uso para tratar o prevenir los estados patológicos específicos mencionados anteriormente en un ser humano o animal no humano que necesita el mismo, en el que va a administrarse una dosificación eficaz de un principio activo (tal como se define en el presente documento) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo al dicho ser humano o animal no humano.
El principio activo puede administrarse en forma de una composición que comprende el principio activo y cualquier componente adicional adecuado. La composición puede ser, por ejemplo, una composición farmacéutica (medicamento), un producto alimenticio, complemento alimenticio o una bebida. Un composición de este tipo puede contener una mezcla de los compuestos especificados y/o de sus sales farmacéuticamente aceptables.
La presente invención también proporciona una composición que tiene actividad frente a, y para su uso en el tratamiento de, los estados patológicos específicos mencionados anteriormente en un ser humano o animal no humano, que comprende una cantidad eficaz de un compuesto del principio activo.
La expresión "composición farmacéutica" en el contexto de esta invención significa una composición que comprende un principio activo y que comprende adicionalmente vehículos, diluyentes, adyuvantes o excipientes farmacéuticamente aceptables, tales como agentes conservantes, cargas, agentes disgregantes, agentes humectantes, agentes emulsionantes, agentes de suspensión, agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes de perfume, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos, agentes lubricantes y agentes de dispensación, dependiendo de la naturaleza del modo de administración y las formas farmacéuticas.
Las expresiones "producto alimenticio", "complemento alimenticio" y "bebida" usadas en el presente documento tienen los significados normales para estas expresiones, y no se restringen a preparaciones farmacéuticas.
La dosificación del principio activo variará ampliamente, dependiendo de la gravedad de los síntomas que van a tratarse o prevenirse. La selección de las dosificaciones apropiadas está dentro de la capacidad de un experto habitual en esta técnica, sin carga excesiva. La dosificación del principio activo puede ser, por ejemplo, superior a aproximadamente 0,1 mg/kg de peso corporal, por ejemplo superior a aproximadamente 0,3 mg/kg de peso corporal, preferiblemente administrada una vez al día. Más normalmente, la dosificación será de entre aproximadamente 1 y aproximadamente 25 mg/kg, por ejemplo entre aproximadamente 1 y aproximadamente 10 mg/kg, preferiblemente administrada una vez al día. Para su uso en seres humanos, la dosificación puede ser de modo conveniente de entre aproximadamente 70 y aproximadamente 700 mg al día.
"Formas farmacéuticas farmacéuticamente aceptables" significa formas farmacéuticas de los compuestos o composiciones de la invención, e incluye, por ejemplo, comprimidos, comprimidos recubiertos de azúcar, polvos, elixires, jarabes, preparaciones líquidas, incluyendo suspensiones, aerosoles, inhalantes, comprimidos, pastillas, emulsiones, disoluciones, gránulos, cápsulas y supositorios, así como preparaciones líquidas para inyecciones, incluyendo preparaciones de liposomas. Generalmente, pueden encontrarse técnicas y formulaciones en Remington, Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, última edición.
En general, la referencia en el presente documento a la presencia de uno de un grupo especificado de compuestos incluye dentro de su alcance la presencia de una mezcla de dos o más de tales compuestos.
Esta invención proporciona compuestos de fórmula la para su uso en el tratamiento o la prevención de la depresión, esquizofrenia, distrofia muscular incluyendo distrofia muscular facioescapulohumeral (FSH), distrofia muscular de Duchenne, distrofia muscular de Becker y distrofia muscular de Bruce, distrofia de Fuchs, distrofia miotónica, distrofia corneal, síndrome de distrofia simpática refleja (SDRS), distrofia neurovascular, enfermedad de Huntington, enfermedades de las neuronas motoras incluyendo esclerosis lateral amiotrófica (ELA), neurodegeneración traumática por ejemplo tras accidente cerebrovascular o tras un accidente (por ejemplo, traumatismo craneal o lesión de la médula espinal), enfermedad de Batten, síndrome de Cockayne, síndrome de Down, degeneración ganglionar corticobasal, atrofia sistémica múltiple, atrofia cerebral, atrofia olivopontocerebelosa, atrofia dentatorubral, atrofia palidoluisiana, atrofia espinobulbar, neuritis óptica, panencefalitis esclerosante (PEES), trastorno por déficit de atención, encefalitis posviral, síndrome pospoliomielítico, síndrome de Fahr, síndrome de Joubert, síndrome de Guillain-Barre, lisencefalía, enfermedad de Moyamoya, trastornos de la migración neuronal, enfermedad por poliglutamina, enfermedad de Niemann-Pick, leucoencefalopatía multifocal progresiva, seudotumor cerebral, enfermedad de Refsum, síndrome de Zellweger, parálisis supranuclear, ataxia de Friedreich, ataxia espinocerebelosa de tipo 2, síndrome de Rhett, síndrome de Shy-Drager, esclerosis tuberosa, enfermedad de Pick, neuropatías incluyendo neuropatía hereditaria, neuropatía diabética y neuropatía mitótica, neurodegeneración por priones, incluyendo enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (ECJ), variante de ECJ, nueva variante de ECJ, encefalopatía espongiforme bovina (EEB), enfermedad de Gerstmann-Straussler-Scheinker GSS, insomnio familiar fatal IFF, kuru y síndrome de Alper, enfermedad de Joseph, encefalomielitis aguda diseminada, aracnoiditis, lesiones vasculares del sistema nervioso central, pérdida de función neuronal en las extremidades, enfermedad de Charcot-Marie-Tooth, propensión a insuficiencia cardiaca y degeneración macular.
Por tanto, la descripción proporciona métodos de tratamiento o prevención de los estados y las enfermedades anteriores en un ser humano o animal no humano que padece los mismos o es susceptible a los mismos, que comprende administrar a dicho ser humano o dicho animal no humano una cantidad eficaz de un principio activo tal como se define en el presente documento, así como usos de los principios activos en la preparación de composiciones para dicho tratamiento o dicha prevención.
Puede usarse la presente invención frente a estados patológicos en los que o bien están ausentes síntomas de disfunción cognitiva, o bien cualquiera de los síntomas de disfunción cognitiva presentados por un sujeto que va a tratarse son secundarios o auxiliares a síntomas de neurodegeneración no cognitiva, degeneración neuromuscular no cognitiva, neurodegeneración sensitivomotora o pérdida o disfunción de receptores en ausencia de deterioro cognitivo, neuronal y neuromuscular.
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Preparación de compuestos para su uso en la invención
La esmilagenina, epiesmilagenina y sarsasapogenina son materiales comercialmente disponibles. Los proveedores incluyen, por ejemplo, Sigma Aldrich, Research Plus Inc. y Steraloids Inc. Los métodos de preparación para estos materiales también han de encontrarse en la bibliografía (por ejemplo se facilita una preparación de episarsasapogenina en JACS p.5225 (1959)). La episarsasapogenina puede prepararse mediante reducción de sarsasapogenona usando un agente reductor de hidruro de metal. La sarsasapogenona puede prepararse usando el método de Lajis et al, Steroids, 1993, 58, 387-389.
Además, como materiales de partida, pueden producirse de manera natural saponinas y sapogeninas no sustituidas en una gama de especies de plantas, particularmente plantas del género Smilax, Asparagus, Anemarrhena, Yucca o Agave. Cuando se usa esmilagenina o sarsasapogenina según esta invención, la misma puede estar en forma de un extracto vegetal, o material vegetal en polvo seco, derivado de una planta del género Smilax, Asparagus, Anemarrhena, Yucca o Agave.
Los métodos para preparar los principios activos los conocen bien un técnico habitual en esta técnica. Se muestran ejemplos, por ejemplo, en el documento WO-A-021079221 (Ejemplos 5 a 16 en ese documento, que describen la preparación de catilato de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina, succinato de episarsasapogenina, catilato de epiesmilagenina, clorhidrato de glicinato de episarsasapogenina, clorhidrato de glicinato de sarsasapogenina, clorhidrato de glicinato de epiesmilagenina, clorhidrato de L-alaninato de epiesmilagenina, clorhidrato de L-valinato de epiesmilagenina, clorhidrato de L-isoleucinato de epiesmilagenina, clorhidrato de L-fenilalaninato de epiesmilagenina y clorhidrato de L-metioninato de epiesmilagenina). Los compuestos de fórmula Ia, diferentes de aquellos con R = H, pueden prepararse usando técnicas convencionales a partir de compuestos en los que R = H.
La reacción preferida es una reacción de sustitución nucleófila, en la que un compuesto que tiene OH en la posición 3 se hace reaccionar con un compuesto de fórmula
L-R,
en la que R se selecciona de alquilcarbonilo; alcoxicarbonilo; alquilcarbamoílo; o arilcarbonilo; o en la que cualquier grupo alquilo está sustituido opcionalmente con arilo, amino, mono-alquil-amino, di-alquil-amino, un residuo de ácido carboxílico (-COOH) o cualquier combinación de los mismos; y L es un grupo saliente, en condiciones adecuadas para la sustitución nucleófila.
El compuesto L-R puede ser, por ejemplo, un ácido carboxílico o, si es apropiado, un anhídrido, o un haluro de acilo (por ejemplo un cloruro de acilo). Por ejemplo, cuando R es un resto catilato (etoxicarbonilo), el compuesto L-R puede ser adecuadamente cloroformiato de etilo.
La reacción se realiza adecuadamente en una base tal como piridina, opcionalmente en presencia de un ácido tal como ácido clorhídrico.
Los detalles de reacción para reacciones de sustitución nucleófila se conocen bien. Véase, por ejemplo, RC Larock, en Comprehensive Organic Transformations, VCH publishers, 1989.
La dihidrosarsasapogenina puede prepararse usando el método descrito en Marker y Rohrmann (1939), Sterols LIII; The structure of the side chain of sarsasapogenin, J. Am. Chem. Soc. 61, págs. 846-851. El 16,22-epoxicoprostan-3\beta-ol puede prepararse usando el método descrito en Scheer et al, (1955), The C-25 isomerism of smilagenin and sarsasapogenin: J. Am. Chem. Soc. 77, págs. 641-646.
En las reacciones descritas en el presente documento, puede ser necesario proteger los grupos funcionales reactivos, por ejemplo grupos hidroxilo, carboxilo o amino, cuando estos se desean en el producto final, para evitar su participación no deseada en las reacciones. Pueden usarse grupos protectores convencionales según la práctica habitual. Por ejemplos, véase TW Green and PGM Wuts, en "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley&Sons, 1991; JFW McOmie en "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, 1973. Para proteger los sustituyentes amino en compuestos de fórmula L-R en la que R está sustituido con amino, se prefiere usar un grupo protector de alcoxicarbonilo, por lo cual la función amino está presente como un grupo alcoxicarboniloamino (preferiblemente t-butoxicarbonlamino) durante las etapas sintéticas, hasta la desprotección en condiciones ácidas en un disolvente seco.
El compuesto así preparado puede recuperarse de la mezcla de reacción por medios convencionales. Por ejemplo, el compuesto puede recuperarse eliminando por destilación el disolvente de la mezcla de reacción o, si es necesario tras eliminar por destilación el disolvente de la mezcla de reacción, vertiendo el residuo en agua, seguido por extracción con un disolvente miscible en agua y eliminando por destilación el disolvente del extracto. Adicionalmente, si se desea, el producto puede purificarse además mediante diversas técnicas bien conocidas, tales como recristalización, reprecipitación o las diversas técnicas de cromatografía, principalmente cromatografía en columna o cromatografía en capa fina preparativa.
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Discusión de la base para la actividad
Los uso terapéuticos que subyacen a la presente invención surgen de varias observaciones novedosas que se documentan en detalle en los ejemplos a continuación. Para entender el fundamento de la invención, es útil resumir las observaciones y explicar cómo predicen las actividades terapéuticas reivindicadas en esta invención a través de la gama de principios activos definidos anteriormente.
La esmilagenina, epiesmilagenina, sarsasapogenina y episarsasapogenina restituyen la pérdida de receptores de acetilcolina muscarínicos y receptores adrenérgicos en células que expresan tales receptores in vitro. Estos resultados demuestran que estos compuestos restituyen hasta niveles normales la pérdida de receptores celulares (ejemplo 1).
Sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina; episarsasapogenina, epiesmilagenina y esmilagenina previenen la neurodegeneración inducida químicamente en neuronas corticales de rata in vitro. Estos resultados demuestran que estos compuestos son neuroprotectores y previenen la neurodegeneración y el deterioro neuronal in vitro (ejemplo 2).
Sarsasapogenina*, esmilagenina* 16,22-epoxicoprostan-3\beta-ol**, esmilagenona**, clorhidrato de glicinato de esmilagenina* y coprosterol** revierten la neurodegeneración inducida químicamente en neuronas corticales de rata in vitro. Estos resultados demuestran que los compuestos revierten la neurodegeneración sensitiva y el deterioro neuronal in vitro (ejemplo 3).
* Compuestos según la invención.
** Compuestos que ayudan al entendimiento de la invención.
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La esmilagenina revierte la apoptosis inducida químicamente en neuronas, lo que demuestra que este compuesto es antiapoptótico y neuroprotector in vitro (ejemplo 4).
La esmilagenina y sarsasapogenina aumentan el brote de las neuritas (número de neuritas y ramificación de las neuritas) en neuronas corticales de rata in vitro, lo que demuestra sus efectos neurotróficos in vitro (ejemplo 5).
La esmilagenina y sarsasapogenina previenen y revierten la neurodegeneración inducida por neurotoxina (neurotoxina 1-metil-4-fenilpiridinio (MPP^{+}) en neuronas dopaminérgicas mesencefálicas in vitro. Estos resultados demuestran que estos compuestos previenen y revierten la neurodegeneración y el deterioro neuronal in vitro (ejemplos 6 y 7).
La sarsasapogenina y esmilagenina revierten la neurodegeneración inducida químicamente en neuronas motoras espinales de rata in vitro. Estos resultados demuestran que estos compuestos revierten la neurodegeneración y el deterioro neuronal de neuronas motoras in vitro (ejemplo 8). La sarsasapogenina, el catilato de episarsasapogenina y la esmilagenina reducen el número de respuestas erróneas en una prueba de capacidad cognitiva in vivo en ratas ancianas, que se correlaciona con un aumento de la densidad de receptores de acetilcolina muscarínicos en los cerebros de ratas ancianas tras el tratamiento con los compuestos sometidos a prueba. Estos resultados demuestran que los compuestos revierten el deterioro neuronal in vivo (ejemplo 9).
La esmilagenina y sarsasapogenina revierten la disminución de receptores de acetilcolina y dopamina muscarínicos y la disminución de factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) en animales ancianos. Estos resultados demuestran que los compuestos revierten la neurodegeneración sensitivomotora y el deterioro neuronal y son neurotróficos in vivo (ejemplo 9).
El catilato de episarsasapogenina, catilato de sarsasapogenina, la episarsasapogenina y epiesmilagenina reducen el número de respuestas erróneas en una prueba de capacidad cognitiva in vivo en ratas jóvenes expuestas a agentes neurotóxicos (ácido iboténico y amiloide \beta), y aumentan la densidad de receptores de acetilcolina muscarínicos en los cerebros. Estos resultados demuestran que los compuestos revierten el deterioro neuronal in vivo (ejemplo 10).
La esmilagenina y sarsasapogenina mejoran la supervivencia y la neurodegeneración sensitivomotora y el deterioro neuronal en un modelo de ratón de esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y enfermedad de Charcot-Marie-Tooth (ejemplo 11).
En resumen, se ha encontrado que los compuestos ralentizan o revierten ciertos aspectos de la degeneración neuronal. Estos incluyen la reversión de cambios adversos en el cuerpo celular, atrofia de extensiones neuronales (neuritas), reducción de la liberación de factores neurotróficos tales como neurotrofinas (por ejemplo BDNF, NGF, NT-3, NT4/5), factores neurotróficos de la superfamilia de TGF-\beta (por ejemplo GDNF) y neurocinas (por ejemplo CNTF, LIF), y muerte o toxicidad neuronal (apoptosis). Los compuestos son fuertemente neuroprotectores, estimulantes del brote de las neuritas y preventivos de la neurotoxicidad. También se ha encontrado que los compuestos ralentizan o revierten la disminución de la función colinérgica y dopaminérgica, por ejemplo, disminución de la densidad de receptores de acetilcolina y dopamina muscarínicos. Además, se ha encontrado que la neuroprotección y la reversión de la pérdida de receptores son efectos regulados de manera activa, en los que el deterioro anterior se revierte hacia el estado normal o joven con protección frente al deterioro continuado. Todavía adicionalmente, se ha encontrado que la reversión del efecto apoptótico de los compuestos parece estar regulada en el dominio no neoplásico de la vida celular, y no parece probable que desencadenen neoplasia.
Los datos anteriores, tomados juntos, indican actividad frente a estados patológicos ya enumerados en esta solicitud. Además, los datos anteriores indican una probable ausencia de efectos secundarios graves o potencialmente mortales tales como cáncer. Los principios activos son normalmente no estrogénicos.
La técnica anterior reconocida anteriormente muestra la base sólida de predicción de la extensión de las observaciones anteriores y predicciones sólidas de actividad terapéutica para los derivados y las estructuras químicas relacionadas abarcados por la expresión "principios activos" en la presente invención.
Se conoce bien en la técnica y en farmacología que azúcar, éster y otras agrupaciones en ubicaciones adecuadas en moléculas esteroideas, particularmente en las posiciones 3 y/ó 26, puede eliminarse por escisión fácilmente mediante hidrólisis in vivo, y se esperaría observar los mismos efectos en otros átomos de carbono de las moléculas. Además, se sabe bien en la técnica y en farmacología que sales, ácidos libres y bases libres dentro de los términos de la expresión "principios activos" tal como se usa en el presente documento pueden convertirse fácilmente in vivo entre sí según el pH del líquido corporal en el que el principio activo está presente. Además, se sabe bien que sustituyentes de grupos laterales, en un amplio intervalo de formas, pueden estar presentes en un esqueleto de carbono complejo sin afectar sustancialmente de manera adversa a la actividad farmacológica de la estructura, particularmente cuando los grupos laterales son pequeños en comparación con el tamaño global de la molécula.
Por todas estas razones, las reivindicaciones de la actividad farmacológica beneficiosa realizadas en la presente solicitud parecen ser razonables y se basan en la predicción sólida y creíble a partir de los datos de prueba reunidos y presentados en el presente documento.
Sin desear estar limitado por la teoría, se cree que un efecto fisiológico de los principios activos es la capacidad de aumentar la síntesis, o liberación de, o de reducir la tasa de degradación de, factores neurotróficos tales como factor neurotrófico derivado de cerebro y/o factor de crecimiento nervioso o sus receptores. Estos efectos sobre factores de crecimiento podrían deberse a un efecto del compuesto sobre un receptor citosólico o nuclear, o a la unión de un compuesto a una región promotora con un efecto consiguiente directamente sobre la tasa de producción de ARNm para el factor de crecimiento, o como consecuencia del aumento de la producción de otro factor material.
Además, los compuestos parecen regular receptores. Por ejemplo, se ha encontrado que algunos de estos compuestos previenen o revierten la pérdida de receptores de acetilcolina o dopamina muscarínicos en el cerebro. Se cree que los compuestos funcionan rectificando una deficiencia en el número o función o recambio de los receptores.
Breve descripción de los dibujos
Con el fin de ilustrar la invención adicionalmente a modo de ejemplo no limitativo, ahora se hará referencia a los dibujos adjuntos y a los ejemplos que siguen.
En los dibujos:
La figura 1 muestra el efecto del acetato de epiesmilagenina sobre la densidad del receptores adrenérgicos m3 y \beta2 en el día 5 en una línea celular cotransfectada CHO-\beta2/m3;
la figura 2 muestra los efectos de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina y esmilagenina sobre la neurodegeneración inducida por glutamato en neuronas corticales primarias de rata;
la figura 3 muestra los efectos de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina y esmilagenina sobre la capacidad de aprendizaje y memoria de ratas ancianas;
la figura 4 muestra los efectos de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina y esmilagenina sobre el número de receptores muscarínicos;
la figura 5 muestra el perfil de supervivencia de ratones SOD-1 tras la administración oral de esmilagenina; y
la figura 6 muestra el perfil de supervivencia de ratones pmn tras la administración oral de sarsasapogenina.
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Descripción detallada de los dibujos y ejemplos
Ejemplo 1
Restitución de la pérdida de receptores in vitro
Se investigaron los efectos del catilato de epiesmilagenina, catilato de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina, succinato de episarsasapogenina, acetato de epiesmilagenina y sarsasapogenina sobre la expresión del receptor de acetilcolina muscarínico (m) en células CHO o receptores \beta2 y m3 en células CHO o bien transfectadas con un vector para el receptor m o bien cotransfectadas con el vector para los receptores \beta2 y m3.
Los resultados se ilustran en la tabla 1 a continuación y en la figura 1 de los dibujos. A lo largo del periodo de cultivo de las células CHO transfectadas con un vector para el receptor m, el tratamiento con catilato de epiesmilagenina, catilato de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina, succinato de episarsasapogenina y sarsasapogenina previene cada uno la disminución del número de receptores m. A lo largo del periodo de cultivo de las células CHO cotransfectadas con el vector para los receptores \beta2 y m3, la densidad del receptor m3 no se alteró; mientras que la densidad de los receptores adrenérgicos \beta2 disminuyó. La incubación con acetato de epiesmilagenina (figura 1) no alteró significativamente la densidad de receptores m3; pero previno significativamente la disminución de receptores adrenérgicos \beta2.
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(Tabla pasa a página siguiente)
TABLA 1 Efecto del catilato de epiesmilagenina, catilato de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina, succinato de episarsasapogenina y sarsasapogenina sobre la restitución de la densidad de receptores m de acetilcolina
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3
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Por tanto, los experimentos indican que cada uno de catilato de epiesmilagenina, catilato de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina, succinato de episarsasapogenina, acetato de epiesmilagenina y sarsasapogenina pudieron prevenir la disminución del número de receptores con el tiempo y también tendían a restituir el número de receptores hasta niveles normales cuando se administraron a células en las que el nivel de receptores está reducido.
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Ejemplo 2
Efecto neuroprotector de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina, episarsasapogenina, epiesmilagenina y esmilagenina en neuronas
El objetivo de este estudio era examinar los efectos de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina, episarsasapogenina, epiesmilagenina y esmilagenina sobre la supervivencia de neuronas corticales primarias de rata expuestas a glutamato, que se sabe que induce la neurodegeneración.
Se cultivaron neuronas corticales de rata durante 10 días; en el día 10 se cambió el medio por un medio definido libre de suero. El día 12, 24 horas antes de la exposición a glutamato, se lavaron los cultivos y se sustituyó el medio por medio nuevo que contenía control positivo (\beta-estradiol), compuestos de prueba (sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina, episarsasapogenina, epiesmilagenina y esmilagenina) o control de vehículo (DMSO, 0,25%) o diosgenina como control negativo.
El día 13, se expusieron los cultivos a glutamato. Tras el periodo de incubación, se lavaron los cultivos con y se pusieron en medio nuevo, complementado con compuestos relevantes o vehículo para evaluar sus efectos protectores, 24 h tras la exposición a glutamato.
Se evaluó la supervivencia de células neuronales midiendo la actividad lactato deshidrogenasa (LDH) liberada en los medios 24 h tras el tratamiento con compuesto de prueba o exposición a glutamato + compuesto de prueba, usando el kit no radiactivo CytoTox 96 y se cuantificó midiendo la absorbancia a una longitud de onda de 450 nm.
Tras la exposición de cultivos corticales primarios de rata a glutamato, hubo una degeneración significativa de neuronas corticales, 24 h tras el tratamiento, demostrada por un aumento de la liberación de lactato deshidrogenasa en el medio de cultivo.
En cultivos corticales primarios tratados previamente con los compuestos durante 24 h, hubo también una reducción significativa de la neurodegeneración inducida por glutamato (figura 2; tabla 2).
TABLA 2 Efecto de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina, episarsasapogenina, epiesmilagenina y esmilagenina sobre la prevención de la neurodegeneración inducida por glutamato
4
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Sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina, episarsasapogenina, epiesmilagenina y esmilagenina presentaron todos efectos neuroprotectores significativos frente a la neurodegeneración inducida por glutamato en neuronas corticales primarias de rata in vitro.
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Ejemplo 3
Reversión de la neurodegeración por sarsasapogenina* esmilagenina*, 16,22-epoxicoprostan-3\beta-ol**, esmilagenona**, clorhidrato de glicinato de esmilagenina* y coprosterol** en neuronas
Tal como se mencionó anteriormente, la exposición de cultivos corticales primarios de rata a glutamato (100 \muM; 10 min.) provocó un aumento de la actividad lactato deshidrogenasa (LDH) medida tras 24 h, lo que indica una neurodegeneración significativa. El tratamiento con 17\beta-estradiol tras la exposición a glutamato produjo una disminución significativa de la actividad LDH en comparación con neuronas expuestas a glutamato, lo que sugiere un efecto neuroprotector significativo. De manera similar, el tratamiento con sarsasapogenina, esmilagenina, 16,22-epoxicoprostan-3\beta-ol, esmilagenona, clorhidrato de glicinato de esmilagenina y coprosterol produjo una disminución significativa de la actividad LDH en comparación con neuronas expuestas a glutamato, lo que sugiere un efecto neuroprotector significativo (tabla 3).
* Compuestos según la invención
** Compuestos que ayudan al entendimiento de la invención.
TABLA 3 Efecto de diferentes compuestos sobre neuronas corticales expuestas previamente a glutamato
5
En conclusión, en neuronas corticales primarias de rata, sarsasapogenina, esmilagenina, 16,22-epoxicoprostan-3\beta-ol, esmilagenona, clorhidrato de glicinato de esmilagenina y coprosterol revirtieron la neurodegeneración inducida por glutamato, lo que sugiere un potencial terapéutico en trastornos neurodegenerativos.
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Ejemplo 4
Efecto antiapoptótico de esmilagenina en neuronas
El objetivo de este estudio era examinar el efecto antiapoptótico de esmilagenina sobre la actividad caspasa-3, un marcador de la apoptosis, en cultivos corticales primarios de rata expuestos a glutamato.
Cultivos primarios de neuronas corticales
Se cultivaron neuronas corticales de rata durante 6 días. En el día 6, se añadió glutamato (100 microM, 10 min.). Entonces se lavaron los cultivos y se sustituyó el medio por medio nuevo que contenía esmilagenina o control de vehículo (DMSO, 0,25%) durante 6 h. Tras 6 h de tratamiento, se evaluó la apoptosis midiendo la actividad caspasa 3. Se detectó la actividad caspasa 3 mediante la escisión p-nitroanilina a partir de un sustrato de caspasa-3 colorimétrico, acetil-Asp-Glu-Val-Asp-p-nitroanilida. La p-nitroalanina tiene una alta absorbancia a 405 nM. Se midió la actividad caspasa-3 relativa como densidad óptica. Además, se normalizó la actividad relativa de la caspasa-3 frente a la concentración de proteína de la muestra, que se midió también como una densidad óptica (Du et al, J Neurochem., 69, 1382-1388, 1997; Sawada et al, Faseb J., 14, 1202-1214, 2000).
La esmilagenina revierte el aumento de actividad caspasa 3 inducido por glutamato en neuronas corticales primarias de rata, lo que demuestra el efecto antiapoptótico de la esmilagenina (tabla 4).
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TABLA 4 Efecto de la esmilagenina sobre la actividad caspasa 3 inducida por glutamato en neuronas corticales
7
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Ejemplo 5
Los trastornos neurodegenerativos se caracterizan por una pérdida de neuronas progresiva y una degradación de prolongaciones neuronales (neuritas). Agentes que inducen el brote de las neuritas pueden promover la formación de nuevas conexiones entre neuronas y mejorar los síntomas de los estados neurodegenerativos (Katzman et al, Faseb J., 5, 278-286, 1991).
La exposición a 17\beta-estradiol** (0,3, 3, 30 pM) aumentó significativamente la longitud de las neuritas existentes en neuronas corticales primarias de rata (tabla 5). La exposición a 17\beta-estradiol (3, 30 pM) aumentó significativamente el porcentaje de neuronas que presentaban neuritas en neuronas corticales primarias de rata (tabla 6). La exposición a esmilagenina* y sarsasapogenina* (0,3, 3, 30 pM) aumentó significativamente la longitud de las neuritas existentes y el porcentaje de neuronas que presentaban neuritas en neuronas corticales primarias de rata (tablas 5 y 6).
En conclusión, la esmilagenina y sarsasapogenina tienen efectos neurotróficos in vitro.
* Compuestos según la invención
** Compuestos que ayudan al entendimiento de la invención.
TABLA 5 Efecto de 17\beta-estradiol, esmilagenina y sarsasapogenina sobre la longitud de neuritas medida usando micrometría óptica
8
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TABLA 6 Efecto de 17-\beta-estradiol, esmilagenina y sarsasapogenina sobre el número de neuronas que presentan neuritas
9
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Ejemplo 6
La esmilagenina y sarsasapogenina previenen la neurodegeneración provocada por la exposición a la neurotoxina, 1-metil-4-fenilpiridinio (MPP^{+}) en neuronas dopaminérgicas mesencefálicas de rata; un modelo de enfermedad de Parkinson in vitro.
El daño provocado por la neurotoxina, MPP^{+}, un metabolito de 1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridina (MPTP) imita la degeneración de neuronas dopaminérgicas nigroestriatales observada en trastornos neurodegenerativos tales como la enfermedad de Parkinson (Mytinlineou et al, Science, 225, 529-531, 1984). Los cambios bioquímicos mas destacados inducidos por esta toxina incluyen niveles reducidos de dopamina y sus metabolitos en la sustancia negra pars compacta y en el núcleo caudado (Burns et al, Proc Natl Acad Sci U.S.A., 80, 4546-4550, 1983) y una reducción de la captación de dopamina en preparaciones sinaptosómicas nigroestriatales (Heikkila et al, J Neurochem., 44, 310-313, 1985).
El tratamiento previo de neuronas dopaminérgicas con esmilagenina y sarsasapogenina redujo significativamente la muerte neuronal tras la exposición a la neurotoxina dopaminérgica específica MPP^{+} (2 \muM) en comparación con MPP^{+} sola. El factor neurotrófico derivado de la línea de células gliales (GDNF) y el factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF), moléculas que están implicadas en el crecimiento neuronal, se usaron como controles positivos. El tratamiento previo con esmilagenina y sarsasapogenina produjo un aumento significativo de la supervivencia neuronal en comparación con neuronas expuestas a MPP^{+} sola, lo que sugiere un efecto neuroprotector significativo (tabla 7).
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TABLA 7 Efecto del tratamiento previo con BDNF y GDNF, esmilagenina y sarsasapogenina sobre neuronas dopaminérgicas tras la exposición a MPP^{+} (2 \muM)
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En este modelo de la enfermedad de Parkinson in vitro, el tratamiento previo con esmilagenina y sarsasapogenina previno significativamente la degeneración neuronal tras la exposición a la neurotoxina específica dopaminérgica, MPP^{+}, demostrando un efecto neuroprotector.
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Ejemplo 7
La esmilagenina y sarsasapogenina también revirtieron la neurodegeneración provocada por la exposición a la neurotoxina 1-metil-4-fenilpiridinio (MPP^{+}) en neuronas dopaminérgicas mesencefálicas; un modelo de la enfermedad de Parkinson in vitro.
El tratamiento de neuronas dopaminérgicas con esmilagenina y sarsasapogenina redujo significativamente la muerte neuronal tras la exposición a la neurotoxina específica dopaminérgica MPP^{+} (2 mM) en comparación con MPP^{+} sola. Como controles positivos, se usaron el factor neurotrófico derivado de la línea de células gliales (GDNF) y el factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF), moléculas que están implicadas en el crecimiento neuronal, y 17\beta-estradiol. El tratamiento con esmilagenina y sarsasapogenina produjo un aumento significativo en la supervivencia neuronal en comparación con neuronas expuestas a MPP^{+} sola (tabla 8).
TABLA 8 Efecto del tratamiento con BDNF y GDNF, esmilagenina, sarsasapogenina y 17\beta-estradiol sobre neuronas dopaminérgicas tras la exposición a MPP^{+} (2 \muM)
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La exposición a MPP^{+} provocó no sólo una disminución significativa del número dopaminérgico sino también del porcentaje de neuritas. Este estudio muestra que la esmilagenina y sarsasapogenina aumentaron significativamente el número de neuritas de las neuronas in vitro, tabla 9. Estos resultados demuestran que los compuestos revierten la neurodegeneración motora.
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TABLA 9 Efecto de la esmilagenina y sarsasapogenina sobre el porcentaje de neuritas en neuronas dopaminérgicas tras la exposición a MPP^{+} (2 \muM)
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Ejemplo 8
Efecto neuroprotector de la sarsasapogenina y esmilagenina en neuronas motoras espinales
El objetivo de este estudio era examinar los efectos de la sarsasapogenina y esmilagenina sobre la supervivencia de neuronas motoras espinales primarias de rata expuestas a glutamato, que se sabe que induce la neurodegeneración en este modelo de neurodegeneración motora. Se usaron como controles positivos 17\beta-estradiol y BDNF.
Cultivos primarios de neuronas motoras espinales
Se prepararon neuronas motoras de ratas según el método descrito por (Martinou et al, Neuron, 8, 737-744, 1992). El día 10, se retiró el medio y se expusieron los cultivos a glutamato (4 microM) durante 10 min. a 37ºC en medio definido. Tras la exposición a glutamato, se lavaron los cultivos con medio Eagle modificado por Dulbecco a 37ºC, luego se colocaron en medio de cultivo nuevo que contenía compuestos de prueba. Tras 48 h, se determinó el grado de degeneración de neuronas motoras espinales midiendo la cantidad de lactato deshidrogenasa (LDH) liberada en el medio de cultivo tal como anteriormente.
Resultados
Tras la exposición a glutamato, hubo una degeneración significativa de neuronas motoras espinales primarias de rata, 48 h tras el tratamiento, demostrada por un aumento de la liberación de lactato deshidrogenasa en el medio de cultivo.
En neuronas motoras espinales primarias de rata primarias tratadas con sarsasapogenina o esmilagenina durante 48 h, hubo una reducción significativa de la neurodegeneración inducida por glutamato (tabla 10).
TABLA 10 Efecto de la sarsasapogenina y esmilagenina sobre la neurodegeneración inducida por glutamato en neuronas motoras espinales
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La sarsasapogenina y esmilagenina revirtieron la neurodegeneración inducida por glutamato de neuronas motoras espinales de rata en este modelo in vitro de neurodegeneración motora.
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Ejemplo 9
En la segunda mitad de la vida (en seres humanos a partir de la edad de 40 años en adelante) la densidad de neuronas en el cerebro disminuye (Selkoe, D J, Sci. Am. 267, 134-142, 1992). Las alteraciones en la función cortical pueden deberse a una reducción del número de neuronas, sus interconexiones, una disminución de neurotrofinas tales como factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF; Bothwell, M, Funtional interactions of neurotrophins and neurotrophin receptors, Annu. Rev. Neurosci., 18, 223-253, 1995), una disminución de la densidad de receptores de acetilcolina (muscarínicos y nicotínicos) y/o una disminución de su función de acoplamiento en zonas corticales (Rinne et al, Brain Res., 336, 19-25, 1985; Selkoe, D J, Sci. Am. 267, 134-142, 1992). Además, durante el envejecimiento, la unión a receptores de acetilcolina muscarínicos se reduce significativamente en el hipocampo (Narang, N, Mech. Ageing Dev., 78, 221-239, 1995) y cuerpo estriado de ratas (Biegon et al, Neurobiol. Aging., 10, 305-310, 1989) y seres humanos más ancianos (Rinne et al, Brain Res., 336, 19-25, 1985). Además, en la enfermedad de Alzheimer, la disminución de la actividad colinérgica está asociado con la deposición de placas de amiloide (von der Kammer et al, Biochem. Soc. Symp. 131-140, 2001). Otros trastornos neurodegenerativos, tales como la enfermedad de Parkinson, muestran una disminución característica de la actividad dopaminérgica (Drukarch et al, Expert. Opin. Investig. Drugs, 10, 1855-1868, 2001).
La administración oral de sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina o esmilagenina a ratas ancianas (ratas Sprague-Dawley de 20 meses de edad), durante un periodo de dos o tres meses, revierte el deterioro de la capacidad de aprendizaje y memoria, la disminución de los receptores de dopamina y acetilcolina muscarínicos y la disminución de la neurotrofina BDNF, alteraciones que son características del proceso de envejecimiento.
Se dividieron las ratas Sprague-Dawley ancianas en grupos diferentes, uno control y grupos tratados durante 2-3 meses o bien con sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina o bien esmilagenina (18 mg kg^{-1} día^{-1}, n = 10). Se incluyó también un grupo control (n = 14) de ratas jóvenes no tratadas en el estudio. Se mezcló la dosis diaria de fármaco en una cantidad mínima de comida y se administró cada mañana por separado a cada rata.
Se usó un aparato de laberinto Y para la prueba de aprendizaje y memoria. En el suelo de cada rama del laberinto Y hay una serie de varillas de cobre a las que se aplica corriente eléctrica siempre que se necesite, con voltaje ajustable. Cada rama tiene 45 cm de longitud y tiene una lámpara de 15 W en el extremo, que se enciende cuando se necesite. Tras 3 meses de administración del fármaco, se entrenó cada rata durante 7 días consecutivos, tal como sigue. Durante cada sesión de entrenamiento, se puso la rata en una rama del laberinto Y, tras dos minutos de descanso, se aplicó una corriente eléctrica a las varillas de cobre y se iluminó la lámpara en el sentido de las agujas del reloj para indicar la zona de no estimulación. Si la rata se desplazaba hacia la rama, se registró una respuesta correcta, de lo contrario, se registró una respuesta incorrecta. Se repitió la prueba de estimulación-respuesta 20 veces cada día, con una pausa de 5 s entre cada dos pruebas consecutivas. Se usó el número de respuestas correctas tras las veinte pruebas del séptimo día para expresar la capacidad de aprendizaje (cuanto mayor sea el número mejor será la capacidad de aprendizaje). Entonces, se dejaron descansar las ratas durante 30 días y se repitió el procedimiento una vez más. Se usó el número de respuestas correctas de las 20 pruebas tras el periodo de descanso de 30 días para representar la capacidad de memoria.
Se midió la densidad de receptores de acetilcolina muscarínicos en el cerebro. Se preparó el tejido tal como sigue: se extrajeron los cerebros rápidamente tras la decapitación, se congelaron en nieve carbónica y se transfirieron a un congelador. Se homogeneizaron los cerebros y se resuspendió finalmente el sedimento en tampón.
Se usó el ensayo de unión a ligando competitivo de doble sitio para medir la densidad de receptores de acetilcolina muscarínicos.
Los resultados se muestran en las figuras 3 y 4 de los dibujos. Los experimentos con el laberinto Y revelaron que tanto la capacidad de aprendizaje como la memoria están deterioradas en ratas ancianas. Sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina y esmilagenina restituyeron la capacidad de memoria y aprendizaje tras su administración en ratas ancianas. Se redujo notablemente la densidad de receptores de acetilcolina muscarínicos en ratas ancianas. Sarsasapogenina, catilato de episarsasapogenina y esmilagenina restituyeron significativamente la densidad de receptores de acetilcolina muscarínicos.
Las ratas jóvenes mostraron una densidad de receptores de dopamina (D) 1 y 2 significativamente más alta (157,5 \pm 33,2; 200,6 \pm 50,9 fmol/mg de proteína, respectivamente) en comparación con ratas ancianas (129,2 \pm 36,8; 153,8 \pm 40,5 fenol/mg de proteína, D_{1} y D_{2}, respectivamente). En cambio, el tratamiento con esmilagenina y sarsasapogenina en ratas ancianas durante 3 meses restituyó la densidad de receptores D_{1} y D_{2} (esmilagenina 177 \pm 10,9; 217 \pm 45,7 fmol/mg de proteína; sarsasapogenina 172,0 \pm 44,0; 206,4 \pm 60,5 respectivamente).
Las ratas jóvenes mostraron niveles de BDNF significativamente más altos (1,647 \pm 0,277 ng/g de tejido) en comparación con ratas ancianas (1,205 \pm 0,219 ng/g de tejido). En cambio, el tratamiento con esmilagenina y sarsasapogenina en ratas ancianas durante 3 meses restituyó parcialmente los niveles de BDNF (1,342 \pm 0,07; 1,410 \pm 0,232 ng/g de tejido, respectivamente).
Por tanto, los compuestos revirtieron el deterioro neuronal, la disminución de los niveles de BDNF y la disminución de la densidad de receptores de dopamina y acetilcolina muscarínicos que se producen en ratas ancianas.
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Ejemplo 10
Modelo de la enfermedad de Alzheimer como modelo de neurodegeneración
Se usó un modelo in vivo de la enfermedad de Alzheimer para modelar la neurodegeneración. En este modelo, se inyectan los agentes neurotóxicos (amiloide \beta y ácido iboténico) en el cerebro de la rata. Esto conduce a pérdida neuronal, pérdida de receptores y deterioro cognitivo. Estudios previos mostraron que la inyección local de amiloide \beta en el núcleo olivar inferior del cerebro de la rata producía hipofunción colinérgica y deterioro del comportamiento hasta dos meses tras la cirugía (Giovannelli et al., 1995: Neuroscience, 66, 781-792.). Además, la inyección conjunta del amiloide \beta con una pequeña cantidad de ácido iboténico en el hipocampo de la rata produce de manera sinérgica pérdida neuronal con infiltración de células gliales no sólo de manera adyacente sino también lejos del sitio de inyección (Morimoto et al., 1998: Neuroscience, 84, 479-487).
Estos estudios usaron el método de Morimoto (Morimoto et al., 1998: Neuroscience, 84, 479-487) con algunas modificaciones (inyección unilateral en vez de bilateral). Se dividieron aleatoriamente en grupos diferentes ratas Sprague Dawley de tres meses de edad. Se logró la inyección de amiloide \beta_{1-40} y ácido iboténico (ambos de Sigma) por medio de un instrumento estereotáxico (Stoelting Co.) y las coordenadas fueron AP = -0,5 mm (línea derecha a medial), L = -2,8 mm (hacia atrás desde el bregma), H = -7,0 mm (ventral hasta la duramadre). La dosis para cada rata fue amiloide \beta_{1-40} (4 \mug) y ácido iboténico (1 \mug) en 1 ml de solución salina. Se finalizó la inyección en 20 min., y se retiró la aguja 10 min. más tarde. Se suturó entonces la piel.
Los 8 grupos eran:
Control operado al que se le inyectó solución salina normal (control)
Modelo (control al que se le inyectó amiloide \beta + ácido iboténico)
Modelo + catilato de episarsasapogenina (18 mg/kg/día)*
Modelo + catilato de sarsasapogenina (18 mg/kg/día)*
Modelo + etilsuccinato de episarsasapogenina (18 mg/kg/día) (comparación)
Modelo + episarsasapogenina (18 mg/kg/día)*
Modelo + epiesmilagenina (18 mg/kg/día)*
Modelo + Diosgenina (es decir, control negativo, 18 mg/kg/día)
* Compuestos según con la presente invención
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Se administraron catilato de episarsasapogenina, catilato de sarsasapogenina, etilsuccinato de episarsasapogenina (compuesto de comparación), episarsasapogenina, epiesmilagenina y diosgenina (todos a una dosificación de 18 mg/kg/día) a animales como suspensiones estables en CMC-Na (0,5%) una vez al día a través de un tubo gástrico. Al grupo control y al modelo se les administró el mismo volumen de CMC-Na (0,5%) una vez al día. Se administraron los fármacos y vehículos durante un periodo de dos meses, comenzando 20 días antes de la operación.
Se evaluó la densidad de receptores de acetilcolina muscarínicos. Se homogeneizaron las muestras de cerebro, se centrifugaron y volvió a homogeneizarse el sedimento de la centrifugación a 27000xg y se usó para la medición. Se eligió la concentración de ^{3}H-QNB al intervalo de saturación. Tras la incubación y separación, se midió la parte unida mediante recuento de centelleo líquido.
Prueba de evitación inhibitoria ("step-through"): aprendizaje y memoria. Se evaluó el efecto de los compuestos de prueba sobre el aprendizaje y la memoria usando la prueba de evitación inhibitoria. Una caja de 60 x 15 x 15 cm, dividida en 2 espacios de igual tamaño, un espacio oscuro con una base de varillas de cobre, que estaba cargada eléctricamente (CA de 40 V) cuando estaba en uso, mientras que el otro era un espacio con luz pero no cargado eléctricamente. Entre los dos espacios hay una abertura (orificio) para que la rata pase a su través. Se lleva a cabo el experimento para cada rata en dos días consecutivos. El primer día es para entrenamiento; cuando la rata está adaptada en la caja durante los primeros 3 min., se pone entonces en el espacio con luz, con su espalda hacia el orificio, y se cargan las varillas de cobre del espacio oscuro durante 5 min. El segundo día es para las pruebas, cuando se registra el número de cruces en 5 min. Las mejoras en la memoria se señalan por una reducción del número de cruces.
La densidad de receptores de acetilcolina muscarínicos en los cerebros modelo de neurodegeneración era significativamente inferior que en el control. Catilato de episarsasapogenina, catilato de sarsasapogenina, episarsasapogenina y epiesmilagenina produjeron una elevación significativa en la densidad de receptores de acetilcolina muscarínicos del cerebro, mientras que diosgenina y etilsuccinato de episarsasapogenina no cambiaron significativamente la densidad de receptores de acetilcolina muscarínicos. Por tanto, los experimentos indican que los compuestos de esta invención actúan normalizando el número de receptores, es decir, tienden a restituir el número de receptores hasta niveles normales cuando se administran a animales en los que el nivel de receptores está reducido.
El número de respuestas erróneas (número de errores) en 5 min. fue significativamente superior en el grupo modelo de neurodegeneración que en el grupo control, lo que indica un deterioro de la memoria (véase la tabla 11). Epiesmilagenina, catilato de episarsasapogenina, episarsasapogenina y catilato de sarsasapogenina redujeron cada uno significativamente el número de respuestas erróneas, mientras que diosgenina y etilsuccinato de episarsasapogenina fueron ambos ineficaces en la reducción del número de respuestas erróneas.
TABLA 11
16
Análisis estadístico usando la prueba de la t de Student para datos independientes. * indica p<0,05
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Ejemplo 11
La esclerosis lateral amiotrófica (ELA) es un trastorno neurodegenerativo mortal que provoca degeneración de neuronas motoras, atrofia esquelética, parálisis y muerte. La causa de esta enfermedad es heterogénea: mutaciones en el gen de la Cu/Zn superóxido dismutasa (SOD-1) son responsables de algunas formas de ELA en seres humanos. Los modelos animales de esta enfermedad incluyen ratones transgénicos para la SOD-1 que sobreexpresan el gen de la SOD-1 transgénico de ratones y los ratones con neuropatía motora progresiva (pmn, un modelo de Charcot-Marie-Tooth). La esmilagenina y sarsasapogenina aumentan la vida y mejoran los déficits de comportamiento del ratón con superóxido dismutasa (SOD) (figura 5) y el ratón con pmn (figura 6), dos modelos de esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y enfermedad de Charcot-Marie-Tooth.

Claims (6)

1. Principio activo seleccionado de compuestos de la fórmula general Ia:
17
en la que el grupo R^{a} se selecciona de hidrógeno; alquilcarbonilo; alcoxicarbonilo; alquilcarbamoílo; o arilcarbonilo; o sulfo (HO_{3}S); fosfono ((HO)_{2}P(O)-); o un mono, di o trisacárido; en la que cualquier grupo alquilo está sustituido opcionalmente con arilo, amino, mono o dialquilamino, un residuo de ácido carboxílico (-COOH), o cualquier combinación de los mismos; y
todas sus mezclas racémicas, todas sus sales farmacéuticamente aceptables y todas las mezclas y combinaciones de las mismas
para su uso en el tratamiento o la prevención de cualquiera de las siguientes enfermedades en un ser humano o animal no humano que padece las mismas o es susceptible a las mismas: depresión, esquizofrenia, distrofia muscular incluyendo distrofia muscular facioescapulohumeral (FSH), distrofia muscular de Duchenne, distrofia muscular de Becker y distrofia muscular de Bruce, distrofia de Fuchs, distrofia miotónica, distrofia corneal, síndrome de distrofia simpática refleja (SDRS), distrofia neurovascular, enfermedad de Huntington, enfermedades de las neuronas motoras incluyendo esclerosis lateral amiotrófica (ELA), neurodegeneración traumática, por ejemplo, tras accidente cerebrovascular o tras un accidente (por ejemplo, traumatismo craneal o lesión de la médula espinal), enfermedad de Batten, síndrome de Cockayne, síndrome de Down, degeneración ganglionar corticobasal, atrofia sistémica múltiple, atrofia cerebral, atrofia olivopontocerebelosa, atrofia dentatorubral, atrofia palidoluisiana, atrofia espinobulbar, neuritis óptica, panencefalitis esclerosante (PEES), trastorno por déficit de atención, encefalitis posviral, síndrome pospoliomielítico, síndrome de Fahr, síndrome de Joubert, síndrome de Guillain-Barre, lisencefalía, enfermedad de Moyamoya, trastornos de la migración neuronal, enfermedad por poliglutamina, enfermedad de Niemann-Pick, leucoencefalopatía multifocal progresiva, seudotumor cerebral, enfermedad de Refsum, síndrome de Zellweger, parálisis supranuclear, ataxia de Friedreich, ataxia espinocerebelosa de tipo 2, síndrome de Rhett, síndrome de Shy-Drager, esclerosis tuberosa, enfermedad de Pick, neuropatías incluyendo neuropatía hereditaria, neuropatía diabética y neuropatía mitótica, neurodegeneración por priones, incluyendo enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (ECJ), variante de ECJ, nueva variante de ECJ, encefalopatía espongiforme bovina (EEB), enfermedad de Gerstmann-Straussler-Scheinker GSS, insomnio familiar fatal IFF, kuru y síndrome de Alper, enfermedad de Joseph, encefalomielitis aguda diseminada, aracnoiditis, lesiones vasculares del sistema nervioso central, pérdida de función neuronal en las extremidades, enfermedad de Charcot-Marie-Tooth, propensión a insuficiencia cardiaca y degeneración macular.
2. Principio activo según la reivindicación 1, en el que el uno o más compuestos se seleccionan de:
sarsasapogenina
catilato de sarsasapogenina
acetato de sarsasapogenina
succinato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
glicinato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
alaninato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
valinato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
fenilalaninato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
isoleucinato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
metioninato de sarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
episarsasapogenina
catilato de episarsasapogenina
acetato de episarsasapogenina
succinato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
glicinato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
alaninato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
valinato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
fenilalaninato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
isoleucinato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
metioninato de episarsasapogenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
esmilagenina
catilato de esmilagenina
acetato de esmilagenina
succinato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
glicinato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
alaninato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
valinato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
fenilalaninato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
isoleucinato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
metioninato de esmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
epiesmilagenina
catilato de epiesmilagenina
acetato de epiesmilagenina
succinato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
glicinato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
alaninato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
valinato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
fenilalaninato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
isoleucinato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo
metioninato de epiesmilagenina y sales farmacéuticamente aceptables del mismo; y
derivados de saponina de sarsasapogenina, episarsasapogenina, esmilagenina y epiesmilagenina en los que, en cada caso, el átomo de carbono en la posición 3 lleva un resto de O-azúcar en el que el grupo azúcar se selecciona de glucosa, manosa, fructosa, galactosa, maltosa, celobiosa, sacarosa, ramnosa, xilosa, arabinosa, fucosa, quinovosa, apiosa, lactosa, galactosa-glucosa, glucosa-arabinosa, fucosa-glucosa, ramnosa-glucosa, glucosa-glucosa-glucosa, glucosa-ramnosa, manosa-glucosa, glucosa-(ramnosa)-glucosa, glucosa-(ramnosa)-ramnosa, glucosa-(glucosa)-glucosa, galactosa-(ramnosa)-galactosa y derivados acilados de los mismos;
y sales farmacéuticamente aceptables del mismo.
3. Principio activo según la reivindicación 2, en el que el uno o más compuestos se seleccionan de sarsasapogenina y esmilagenina.
4. Principio activo según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el uno o más compuestos están presentes en una composición seleccionada de composiciones farmacéuticas, productos alimenticios, complementos alimenticios y bebidas.
5. Principio activo según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el uno o más compuestos están presentes junto con uno o más principios activos adicionales para la enfermedad.
6. Principio activo según la reivindicación 5, en el que el uno o más principios activos adicionales se seleccionan de, pero no se limitan a, inhibidores de la colinesterasa, agonistas de la dopamina, inhibidores de la COMT, inhibidores de la MAO-B, anticolinérgicos, agonistas de la acetilcolina, agonistas de la serotonina, agonistas de receptores de AMPA, agonistas de receptores de GABA, agonistas de receptores de NMDA, agonistas de receptores \beta-adrenérgicos, digoxina, dobutamina, antiinflamatorios, factores neurotróficos, estatinas, antagonistas de receptores de adenosina A2a, inhibidores de la aldosa reductasa, inmunomoduladores, agonistas cannabinoides, interferón \beta o antidepresivos tricíclicos.
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