ES2342944T3 - Inhibidores de ns-3 serina proteasa de vhc. - Google Patents

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ES2342944T3 ES05704764T ES05704764T ES2342944T3 ES 2342944 T3 ES2342944 T3 ES 2342944T3 ES 05704764 T ES05704764 T ES 05704764T ES 05704764 T ES05704764 T ES 05704764T ES 2342944 T3 ES2342944 T3 ES 2342944T3
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Asa c/o Medivir AB ROSENQUIST
Fredrik c/o IFM Faculty THORSTENSSON
Per-Ola c/o IFM Faculty JOHANSSON
Ingemar C/O Ifm Faculty Kvarnstrom
Susana c/o Medivir AB AYESA
Bjorn C/O Medivir Ab Classon
Lazlo c/o Medivir AB RAKOS
Bertil c/o Medivir AB SAMUELSSON
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Abstract

Un compuesto de la fórmula I: **(Ver fórmula)** en la que A es C(=O)OR1 o C(=O)NHSO2R2 en la que; R1 es hidrógeno, alquilo C1-C6, alquilcarbociclilo C0-C3, alquilheterociclilo C0-C3; R2 es alquilo C1-C6, alquilcarbociclilo C0-C3, alquilheterociclilo C0-C3; en la que R2 está opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente entre el grupo constituido por halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C1-C6, alquilcarbociclilo C0-C3, alquilheterociclilo C0-C3, NH2CO-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C(=O)Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSOpRb, Y-S(=O)pRb, Y-S(=O)pNRaRb, Y-C(=O)ORb e Y-NRaC(=O)ORb; Y es independientemente un enlace o alquileno C1-C3; Ra es independientemente H o alquilo C1-C3; Rb es independientemente H, alquilo C1-C6, alquiloarbociclilo C0-C3 o alquilheterociclilo C0-C3; p es independientemente 1 ó 2; M es CR7R7''; R7 es alquilo C1-C6, alquil C0-C3-cicloalquilo C3-C7, o alquenilo C2-C6, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con 1-3 átomos halo, o grupo amino, -SH o alquilcicloalquilo C0-C3; o R7 es J; R7 es H o tomado junto con R7 forma un anillo cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido con R7''a en el que; R7''a es alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C5, alquenilo C2-C6 cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido con halo; o R7''a puede ser J; q es de 0 a 3 y k es de 0 a 3; en la que q+k >=q 1; W es -CH2-, -O-, -OC(=O)NH-, -OC(=O)-, -S-, -NH-, -NRa, -NHSO2-, -NHC(=O)NH- o -NHC(=O)-, -NHC(=S)NH- o un enlace; R8 es un sistema anular que contiene 1 ó 2 anillos saturados, parcialmente insaturados o insaturados cada uno de los cuales tiene 4-7 átomos en el anillo y cada uno de los cuales tiene de 0 a 4 heteroátomos independientemente seleccionados entre S, O y N, estando el sistema anular opcionalmente separado de W por un grupo alquilo C1-C3; cualquiera de dichos grupos R8 pueden estar opcionalmente mono, di o trisustituidos con R9, en el que R9 se selecciona independientemente entre el grupo constituido por halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C1-C6, alquilcarbociclilo C0-C3, alquilheterociclilo C0-C3, NH2C(=O)-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C(=O)Rb, Y-(C=O)NRa''Rb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSOpRb, Y-S(=O)pRb, Y-S(=O)pNRaRb, Y-C(=O)ORb e Y-NRaC(=O)ORb; en el que Ra'' es Ra, con la condición de que cuando W es -S- o -O-, R8 es alquilarilo C0-C3 o alquilheteroarilo C0-C3, Y es un enlace, y Rb es H o alquilo C1-C6, entonces Ra'' sea Ra o alquilo C1-C6; y en el que dicho resto carbociclilo o heterociclilo está opcionalmente sustituido con R10; en el que R10 es alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C7, alcoxi C1-C6, amino, amido, sulfonilo, (alquil C1-C3)sulfonilo, NO2, OH, SH, halo, haloalquilo, carboxilo; E es -C(=O)- X es -NRx-, en la que Rx es H, alquilo C1-C5 o J; o en el caso de que E sea -C(=O), X también puede ser -O- o -NRjNRj-; en la que uno de Rj es H y el otro es H, alquilo C1-C5 o J; R11 es H, alquilo C1-C6, alquilcarbociclilo C0-C3, alquilheterociclilo C0-C3, cualquiera de los cuales puede estar sustituido con halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C1-C6, alquilcarbociclilo C0-C3, alquilheterociclilo C0-C3, NH2C(=O)-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C(=O) Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSOpRb, Y-S(=O)pRb, Y-S(=O)pNRaRb, Y-C(=O)ORb, Y-NRaC(=O) ORb; o R11 es J; J, si está presente, es una cadena alquileno individual de 3 a 10 miembros saturada o parcialmente insaturada que se extiende del cicloalquilo R7/R7'' o desde el átomo de carbono al que R7 está unido a uno de Rj, Rx, Ry o R11 para formar un macrociclo, cuya cadena se interrumpe opcionalmente por uno a tres heteroátomos independientemente seleccionados entre: -O-, -S- o -NR12-, y en el que de 0 a 3 átomos de carbono en la cadena están opcionalmente sustituidos con R14; en la que; R12 es H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C6, o C(=O)R13; R13 es alquilo C1-C6, alquilcarbociclilo C0-C3, alquilheterociclilo C0-C3; R14 se selecciona independientemente entre el grupo constituido por H, alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, hidroxi, halo, amino, oxo, tio y tioalquilo C1-C6; Ru es independientemente H o alquilo C1-C3; m es 0 ó 1; n es 0 ó 1; U es =O o está ausente; R15 es H, alquilo C1-C6, alquilcarbociclilo C0-C3, alquilheterociclilo C0-C3, cualquiera de los cuales pueden estar sustituidos con halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C1-C6, alquilheterociclilo C0-C3, alquilcarbociclilo C0-C3, NH2CO-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C (=O)Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHS(=O)pRb, Y-S(=O)pRb, Y-S(=O)pNRaRb, Y-C(=O)ORb, Y-NRaC (=O)ORb; G es -O-, -NRy-, -NRjNRj-: en el que un Rj es H y el otro es H, alquilo C1-C6 o J; Ry es H, alquilo C1-C3; o Ry es J; R16 es H; o alquilo C1-C6, alquilcarbociclilo C0-C3, alquilheterociclilo C0-C3, cualquiera de los cuales pueden estar sustituidos con halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C1-C6, alquilcarbociclilo C0-C3, alquilheterociclilo C0-C3, NH2CO-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C(=O)Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSOpRb, Y-S (=O)pRb, Y-S(=O)pNRaRb, Y-C(=O)ORb, Y-NRaC (=O)ORb; con la condición de que cuando m = n = 0 y G es O entonces R16 no sea terc-butilo o fenilo; en el que cualquier átomo de C en alquilo C1-C6 y alquilo C1-C3, a menos que se indique otra cosa, puede estar opcionalmente sustituido por uno, dos o cuando la valencia lo permita tres halógenos; cada resto arilo y cicloalquilo en alquilarilo C0-C3 y alquil C0-C3-cicloalquilo C3-C7, a menos que se indique otra cosa, está opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados entre halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxi, alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, alcoxi C1-C6-alquilo C1-C6, alcanoílo C1-C6, amino, azido, oxo, mercapto y alquilheterociclilo C0-C3; cada resto carbociclilo y heterociclilo en alquilcarbociclilo C0-C3 y alquilheterociclilo C0-C3, a menos que se indique otra cosa, está opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados entre halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxi, alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, alcoxi C1-C6-alquilo C1-C6, alcanoílo C1-C6, amino, azido, oxo, mercapto, alquilcarbociclilo C0-C3 y alquilheterociclilo C0-C3; cada grupo amino se selecciona entre NH2, NHalquilo C1-C6 y N(alquilo C1-C6)2; y cada grupo amido se selecciona entre C(=O)NH2, C(=O)NHalquilo C1-C6, C(=O)N(alquilo C1-C6)2 y -NH(C=O)alquilo C1-C6; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

Inhibidores de NS3 serina proteasa de VHC.
Campo técnico
La presente invención se refiere a nuevos inhibidores de NS3 serina proteasa del flavivirus del VHC y a procedimientos para su uso en el tratamiento o profilasis del VHC.
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Técnica anterior
La NS3 serina proteasa del VHC es una proteína multifuncional que contiene un dominio serina proteasa y un dominio helicasa de ARN. El cofactor NS4A de la proteasa, que es una proteína relativamente pequeña, es absolutamente necesario para potenciar la actividad de la serina proteasa. La NS3 serina proteasa es esencial en el ciclo de vida viral. A partir del análisis del sitio de unión al sustrato según lo revelado por la estructura cristalina de rayos x, se ha demostrado que el sitio de unión de la NS3\cdotproteasa es muy superficial y el disolvente expuesto hace que el diseño del inhibidor de molécula pequeña sea un desafío.
Se cree que dos inhibidores de la proteasa del VHC han entrado en ensayos clínicos, concretamente BILN-2061 de Boehringer Ingelheim divulgado en el documento WO 0059929 y VX 950 de Vertex divulgado en el documento WO 0387092. También se han propuesto varios inhibidores peptidomiméticos de la proteasa del VHC en la bibliografía académica y de patentes. Común para la inmensa mayoría de estos peptidomiméticos de la técnica anterior es la presencia de un derivado de L-prolina en la posición P2 del inhibidor y que interacciona con el subsitio S2 de la enzima proteasa del VHC. En el caso de BILN-2061, la L-prolina está 4 sustituida con un éter de quinolina, mientras que VX-950 tiene un anillo carbocíclico fusionado al anillo de la L-prolina. La mayoría de peptidomiméticos comprenden, además, otros péptidos derivados de L-aminoácidos unidos en la posición de P3, con muchos inhibidores propuestos que también incluyen derivados de L-aminoácidos adicionales que se extienden al P4, P5 y P6.
Ya ha quedado patente que la administración sostenida de BILN-2061 o VX-950 selecciona mutantes del VHC que son resistentes al fármaco respectivo, denominados mutantes de escape a fármacos. Estos mutantes de escape a fármacos tienen mutaciones características en el genoma de la proteasa del VHC, especialmente D168V, D168Y y/o A165S. Paradigmas de tratamiento para el VHC tendrán por tanto que parecerse a tratamiento contra el VIH, en el que las mutaciones de escape a fármaco también aparecen rápidamente. Por consiguiente, serán sistemáticamente necesarios fármacos adicionales con patrones de resistencia diferentes para proporcionar a los pacientes en defecto con las opciones de tratamiento, y la terapia de combinación con múltiples fármacos es probable que sea la norma en el futuro, incluso para el tratamiento de primera línea.
La experiencia con fármacos contra el VIH, e inhibidores de la proteasa del VIH, en particular, también ha destacado que la farmacocinética y los regímenes de dosificación complejos sub-óptimos dan como resultado rápidamente fallos de cumplimiento involuntarios. Esto a su vez significa que la concentración en 24 horas (la concentración mínima en plasma) para los fármacos respectivos en un régimen de VIH frecuentemente se incluye por debajo del umbral de la CI_{90} o de la DE_{90} durante gran parte del día. Se considera que un nivel de 24 horas de al menos la CI_{50}, y de manera más realista, la CI_{90} o la DE_{90} es esencial para frenar el desarrollo de mutantes de escape a fármacos y lograr la farmacocinética y el metabolismo de los fármacos necesarios para permitir que a través de dichos niveles se proporcione un desafío riguroso para el diseño de fármacos. La naturaleza fuertemente peptidomimética de los inhibidores de la proteasa del VHC de la técnica anterior, con múltiples enlaces peptídicos en las configuraciones nativas, plantea obstáculos farmacocinéticos para los regímenes de dosificación eficaces.
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Breve descripción de la invención
De acuerdo con un primer aspecto de la invención, se proporcionan compuestos de la fórmula I:
1
en la que
A es C(=O)OR^{1} o C(=O)NHSO_{2}R^{2} en la que;
R^{1} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3};
R^{2} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3};
en la que R^{2} está opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente entre el grupo constituido por halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, NH_{2}CO-, Y-NRaRb, Y-O-R_{b}, Y-C(=O)Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSO_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}NRaRb, Y-C(=O)ORb e Y-NRaC(=O)ORb;
Y es independientemente un enlace o alquileno C_{1}-C_{3};
Ra es independientemente H o alquilo C_{1}-C_{3};
Rb es independientemente H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquiloarbociclilo C_{0}-C_{3} o alquilheterociclilo C_{0}-C_{3};
p es independientemente 1 ó 2;
M es CR^{7}R^{7'};
R^{7} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquil C_{0}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{7}, o alquenilo C_{2}-C_{6}, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con 1-3 átomos halo, o grupo amino, -SH o alquilcicloalquilo C_{0}-C_{3}; o
R^{7} es J;
R^{7'} es H o tomado junto con R^{7} forma un anillo cicloalquilo C_{3}-C_{6} opcionalmente sustituido con R^{7'a} en el que;
R^{7'a} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{6} cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido con halo; o R^{7'a} puede ser J;
q es de 0 a 3 y k es de 0 a 3; en la que q+k \geq 1;
W es -CH_{2}-, -O-, -OC(=O)NH-, -OC(=O)-, -S-, -NH-, -NRa, -NHSO_{2}-, -NHC(=O)NH- o -NHC(=O)-, -NHC(=S)NH- o un enlace;
R^{8} es un sistema anular que contiene 1 ó 2 anillos saturados, parcialmente insaturados o insaturados cada uno de los cuales tiene 4-7 átomos en el anillo y cada uno de los cuales tiene de 0 a 4 heteroátomos independientemente seleccionados entre S, O y N, estando el sistema anular opcionalmente separado de W por un grupo alquilo C_{1}-C_{3}; cualquiera de dichos grupos R^{8} pueden estar opcionalmente mono, di o trisustituidos con R^{9}, en el que
R^{9} se selecciona independientemente entre el grupo constituido por halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, NH_{2}C(=O)-, Y-NRa'Rb, Y-O-Rb, Y-C(=O)Rb, Y-(C=O)NRa'Rb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSO_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}NRaRb, Y-C(=O)ORb e Y-NRaC(=O)ORb; en el que Ra' es Ra, con la condición de que cuando W es -S- o -O-, R^{8} es alquilarilo C_{0}-C_{3} o alquilheteroarilo C_{0}-C_{3}, Y es un enlace, y Rb es H o alquilo C_{1}-C_{6}, entonces Ra' sea Ra o alquilo C_{1}-C_{6}; y en el que dicho resto carbociclilo o heterociclilo está opcionalmente sustituido con R^{10}; en el que
R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, sulfonilo, (alquil C_{1}-C_{3})sulfonilo, NO_{2}, OH, SH, halo, haloalquilo, carboxilo, amido;
E es -C(=O)-
X es -NRx-, en la que Rx es H, alquilo C_{1}-C_{5} o J; o en el caso de que E sea -C(=O), X también puede ser -O- o -NRjNRj-;
en la que uno de Rj es H y el otro es H, alquilo C_{1}-C_{5} o J;
R^{11} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, cualquiera de los cuales puede estar sustituido con halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, NH_{2}CO-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C(=O) Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSO_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}NRaRb, Y-C(=O)ORb, Y-NRaC(=O) ORb; o R^{11} es J;
J, si está presente, es una cadena alquileno individual de 3 miembros saturada o parcialmente insaturada que se extiende del cicloalquilo R^{7}/R^{7'} o desde el átomo de carbono al que R^{7} está unido a uno de Rj, Rx, Ry o R^{11} para formar un macrociclo, cuya cadena se interrumpe opcionalmente por uno a tres heteroátomos independientemente seleccionados entre: -O-, -S- o -NR^{12}-, y en el que de 0 a 3 átomos de carbono en la cadena están opcionalmente sustituidos con R^{14};
en la que;
R^{12} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{6}, o C(=O)R^{13};
R^{13} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3};
R^{14} se selecciona independientemente entre el grupo constituido por H, alquilo C_{1}-C_{6}, haloalquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, hidroxi, halo, amino, oxo, tio y tioalquilo C_{1}-C_{6};
Ru es independientemente H o alquilo C_{1}-C_{3};
m es 0 ó 1; n es 0 ó 1;
U es =O o está ausente;
R^{15} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, cualquiera de los cuales pueden estar sustituidos con halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, NH_{2}CO-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C (=O)Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHS(=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}NRaRb, Y-C(=O)ORb, Y-NRaC (=O)ORb;
G es -O-, -NRy-, -NRjNRj-: en el que un Rj es H y el otro es H, alquilo C_{1}-C_{6} o J; Ry es H, alquilo C_{1}-C_{3}; o Ry es J; R^{16} es H; o alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, cualquiera de los cuales pueden estar sustituidos con halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C0-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, NH_{2}CO-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C(=O)Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSO_{p}Rb, Y-S (=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}NRaRb, Y-C(=O)ORb, Y-NRaC (=O)ORb;
con la condición de que cuando m = n = 0 y G es O entonces R^{16} no sea terc-butilo o fenilo;
en el que cualquier átomo de C en alquilo C_{1}-C_{6} y alquilo C_{1}-C_{3}, a menos que se indique otra cosa, puede estar opcionalmente sustituido por uno, dos o cuando la valencia lo permita tres halógenos;
cada resto arilo y cicloalquilo en alquilarilo C_{0}-C_{3} y alquil C_{0}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{7}, a menos que se indique otra cosa, está opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados entre halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxi, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}-alquilo C_{1}-C_{6}, alcanoílo C_{1}-C_{6}, amino, azido, oxo, mercapto y alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}; cada resto carbociclilo y heterociclilo en alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3} y alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, a menos que se indique otra cosa, está opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados entre halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxi, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}-alquilo C_{1}-C_{6}, alcanoílo C_{1}-C_{6}, amino, azido, oxo, mercapto, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3} y alquilheterociclilo C_{0}-C_{3};
cada grupo amino se selecciona entre NH_{2}, NHalquilo C_{1}-C_{6} y N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}; y
cada grupo amido se selecciona entre C(=O)NH_{2}, C(=O)NHalquilo C_{1}-C_{6}, C(=O)N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2} y -NH(C=O)alquilo C_{1}-C_{6}; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
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Sin desear quedar ligado a teoría alguna, o la atribución de modos de unión tentativos para variables específicas, los conceptos teóricos P1, P2, P3 y P4 como se usan en el presente documento se proporcionan únicamente por conveniencia y tienen sustancialmente sus significados convencionales, como se ilustra en Schechter & Berger, (1976) Biochem Biophys Res Comm 27157-162, y representan las porciones del inhibidor que se cree que ocupan los subsitios S1, S2, S3 y S4, respectivamente, de la enzima, donde S1 es adyacente al sitio de escisión y S4 está muy alejado del sitio de escisión. Independientemente del modo de unión, se cree que los componentes definidos por la Fórmula I están dentro del alcance de la invención. Por ejemplo, se espera que el grupo terminal R^{16}-G pueda interactuar con los subsitios S3 y S4, especialmente cuando m y/o n es 0.
Diversas realizaciones de la presente invención pueden representarse teóricamente como R^{16}-G-P4-P3-enlace-P2-P1, en el que P3 y/o P4 pueden estar ausentes, y cada uno de P1, P3 y P4 representa un componente básico constituido por un derivado de un aminoácido natural o no natural, P2 es un resto heterocíclico y G-R^{16} es un grupo terminal. El enlace es un carbonilo u otra función como se define para E. Por lo tanto, los componentes básicos P1 y P2 y los componentes básicos P3 y P4 están típicamente unidos mediante enlaces amida mientras que los componentes básicos P2 y P3 están unidos mediante el enlace que se ha descrito anteriormente. Por lo tanto, los enlaces amida típicamente están invertidos unos con respecto a otros en cada lado del enlace de los compuestos de la invención.
Los aspectos adicionales de la invención incluyen una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención como se ha definido anteriormente y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable para los mismos.
Los compuestos y composiciones de la invención tienen utilidad en procedimientos de tratamiento médico o profilaxis de infecciones por VHC en seres humanos. Por consiguiente, un aspecto adicional de la invención es el uso de un compuesto como se ha definido anteriormente en terapia, tal como en la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de infecciones por flavivirus en seres humanos o animales. Los flavivirus ejemplares incluyen BVDV, dengue y especialmente VHC.
Los compuestos de la invención tienen una unión no peptídica en el enlace entre los componentes básicos P2 y P3, dando como resultado una orientación invertida de los restos P3 y P4 con respecto a un sustrato nativo. Típicamente, este enlace no peptídico es también más largo que el enlace peptídico correspondiente y significa que los grupos P3 y/o P4 (incluyendo el extremo R16 hasta el punto en que interactúa con S3 o S4) están desplazados aparentemente con respecto a un sustrato peptídico nativo. De esta manera, es de esperar que la inversión y el desplazamiento favorezcan las estereoquímicas D no naturales para los grupos de ocupación de bolsillos (por ejemplo, cadenas laterales) de P3 y/o P4 y/o R16. De hecho, dichos compuestos típicamente son muy activos y están dentro del alcance de la invención. Sin embargo, sorprendentemente se ha descubierto que incluso los compuestos de la invención que tienen cadenas laterales de aminoácidos L en P3 y/o P4 muestran una buena actividad, pese a que la entidad de cadena lateral respectiva debe aproximarse al bolsillo S3 o S4 desde un ángulo diferente relativo a un sustrato peptídico nativo. Por consiguiente, la estereoquímica L en R^{11} y/o R^{15} y/o la configuración correspondiente en R^{16} para imitar la estereoquímica L representa un aspecto favorecido de la invención.
El ángulo diferente de aproximación a los bolsillos S3 y/o S4 también tiene consecuencias para la capacidad de los compuestos de la invención para evitar los patrones de resistencia mostrados por inhibidores de proteasa de VHC de la técnica anterior que hasta ahora tenían una estructura peptídica convencional de restos aminoacídicos L naturales o no naturales. Como con la transcriptasa inversa de VIH que es muy conocida por generar rápidamente mutantes que escapan de fármacos bajo la presión selectiva de la terapia antiviral, la ARN polimerasa dependiente de ARN NS5A de VHC tiene una capacidad de corrección de errores muy pobre. A su vez, esto significa que la polimerasa de VHC es muy propensa al error y es probable que surjan patrones de resistencia característicos cuando se administran antivirales para VHC durante largos periodos de tiempo. Incluso antes de su lanzamiento, es obvio que BILN 2061 con una estructura sustancialmente peptídica (aunque macrociclada) y el inhibidor de proteasa NS3 VX-950 de Vertex con una estructura peptídica lineal en P3 y P4 dan lugar rápidamente a mutaciones de resistencia características en las posiciones 155, 156 ó 168 de la proteasa NS3 (Lin y col. J Biol Chem 2004 279(17): 17808-17).
Las realizaciones preferidas en las que M es CR^{7}R^{7'} en las fórmulas I incluyen las fórmulas IA:
2
Los valores preferidos para q y k en la Fórmula I incluyen 2:1, 2:2, 2:3, 3:2, 3:3, más preferentemente 1:2 y 1:0; y mucho más preferentemente 1:1, en cuyo caso los compuestos preferidos tienen la estructura parcial:
3
En la que E es -C(=O)-
Los compuestos de la invención pueden comprender tanto una función P3 como una función P4, a saber cada uno de m y n es 1. Las realizaciones favoritas de la fórmula I incluyen la fórmula Ida-Idb dadas a continuación:
4 
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Las configuraciones alternativas de los compuestos de la invención comprenden una función P3, pero no función P4, a saber m es 1 y n es cero. Las realizaciones preferidas de la Fórmula I incluyen las fórmulas Iea, Ieb e Iee dadas a continuación:
5 
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Configuraciones alternativas adicionales de los compuestos de la invención incluyen aquellas en las que m y n son cero y por lo tanto los R^{16}-G contiguo a P2, pero como se ha mencionado anteriormente, el grupo de protección R16-G puede interactuar favorablemente con S3 y/o S4.
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Las realizaciones favoritas de la Fórmula I incluyen las fórmulas Ifa, Ifb y Ife dadas a continuación:
6
600
R^{16} en la figura Ifb y en otros sitios es típicamente H, alquilo C_{1}-C_{3}, alquilo C_{5}-C_{6}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, alquilcarbociclilo C_{1}-C_{3} o cicloalquilo C_{3}-C_{7}, estando cualquiera de estos opcionalmente sustituido, como se ha descrito anteriormente. Por ejemplo, R^{16} puede ser fenilo sustituido como se ha descrito anteriormente.
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Los compuestos de la invención pueden comprender moléculas lineales, como se ha representado anteriormente. Como alternativa, en realizaciones en las que R^{7} y R^{7'} juntos definen un grupo espiro cicloalquilo, tal como espiro-ciclopropilo, los compuestos de la invención pueden configurarse como macrociclos, en los que un grupo de unión J se extiende entre uno de Rj, Rx, Ry o R^{11} de fórmula I. Como alternativa el macrociclo J puede extenderse desde el carbono adyacente en R^{7} a uno de Rj, Rx, Ry o R^{11}.
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Las realizaciones favoritas de dichas estructuras macrocíclicas en la fórmula I en la que m es 0 y n es 1 incluyen las de las fórmulas Iga y Igb dadas a continuación:
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También son favoritas las estructuras correspondientes en las que la cadena J se une al carbono adyacente R^{7}.
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Las realizaciones favoritas adicionales de tales estructuras macrocíclicas en la fórmula I en la que me es 0 y n es 1 incluyen las de la Fórmula Ige dada a continuación:
8
También son favoritas las estructuras correspondientes en las que la cadena J se une al carbono adyacente R^{7}.
Las estructuras macrocíclicas favoritas en la Fórmula I, que comprenden una función P3 y una función P4, es decir, en la que cada uno de m y n es 1, incluyen las de las fórmulas Iha y Ihb dadas a continuación.
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También son favoritas las estructuras correspondientes en las que la cadena J se une al carbono adyacente R^{7}.
Las estructuras macrocíclicas de la Fórmula I, en la que tanto las funciones P3 y P4 están ausentes, es decir en las que cada uno m y n es 0, incluyen las de las fórmulas 1he y 1hf dadas a continuación.
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También son favoritas las estructuras correspondientes en las que la cadena J se una al carbono adyacente R^{7}, especialmente las fórmulas Ihe y Ihf:
En general, en las estructuras macrocíclicas opcionalmente tales como las que se han ilustrado anteriormente, el enlazador J es una cadena de 3 a 10 átomos, preferentemente una cadena de 5 a 8 átomos, tales como una cadena de 6 ó 7 átomos, una cadena alquileno saturada o una cadena alquileno parcialmente insaturada, que es una cadena alquileno que tiene de 1 a 3 enlaces insaturados entre los carbonos adyacentes, típicamente una insaturación. La longitud de la cadena dependerá, por supuesto, de si J se extiende desde Rd, Rj, Rx, Ry, R^{11} o el carbono adyacente a R^{7}. Las cadenas adecuadas se describen en detalle en el documento WO 00/59929. Típicamente J se dimensionará para proporcionar un macrociclo de 13 a 16 átomos en el anillo (incluyendo los átomos en los grupos P1, P2 y, si está presente P3 que contribuyen al anillo). Convenientemente J se dimensiona para proporcionar un macrociclo de 14 ó 15 átomos en el anillo.
Convenientemente, la cadena J contiene uno o dos heteroátomos seleccionados entre: O, S, NH, Nalquilo C_{1}-C_{6} o N-C(=O)alquilo C_{1}-C_{6}. Más preferentemente, la cadena J contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre: NH, o N-C(=O)alquilo C_{1}-C_{6}, más preferentemente N(Ac). Más preferentemente, la cadena que contiene un átomo de nitrógeno está saturada. En una realización alternativa, J contiene un heteroátomo seleccionado entre O o S. La cadena puede estar sustituida con R^{14}, tal como H o metilo.
Típicamente, la estructura del enlazador J está saturada. Como alternativa, J contiene de 1 a 3, preferentemente 1 doble enlace, típicamente espaciado de un carbono de la función cicloalquilo R^{7}, si está presente. El doble enlace puede ser cis o trans.
Por tanto, los ejemplos representativos de J incluyen pentileno, hexileno, heptileno, cualquiera de los cuales está sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}, haloalquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, hidroxilo, halo, amino, oxo, tio o tioalquilo C_{1}-C_{6}; penten-3-ilo, hexen-4-ilo, hepten-5-ilo, en el que 3, 4 ó 5 se refiere a un doble enlace entre átomos de carbono 3 y 4, 4 y 5 etc.
Los grupos R^{7} y R^{7'} convenientes incluyen aquellos en los que R^{7'} es H y R^{7} es n-etilo, n-propilo, ciclopropilmetilo, ciclopropilo, ciclobutilmetilo, ciclobutilo, 2,2-difluoroetilo o mercaptometilo. Las realizaciones preferidas incluyen aquellas en las que R^{7} es n-propilo o 2,2-difluoroetilo.
Las configuraciones favoritas alternativas para R^{7} y R^{7'} incluyen aquellas en las que R^{7'} es H y R^{7} es C_{3}-C_{7} cicloalquilo o alquil C_{1}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{7}.
Las configuraciones aún más favoritas para R^{7} y R^{7'} incluyen aquellas en las que R^{7'} es H y R^{7} es J.
Como alternativa, R^{7} y R^{7'} juntos define una función espiro-cicloalquilo, tal como un anillo espiro-ciclobutilo, y más preferentemente un anillo espiro-ciclopropilo. "Espiro" en este contexto simplemente significa que el anillo cicloalquilo comparte un átomo de carbono individual con la estructura peptídica del compuesto. El anillo está sustituido o sin sustituir. Los sustituyentes preferidos incluyen mono o di-sustituciones con R^{7'a}, en los que R^{7'a} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{5} alquenilo o C_{2}-C_{6}, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con halo. Como alternativa el sustituyente puede ser un enlazador J como se ha descrito anteriormente. Ahora, se definen estereoquímicas preferidas para un anillo espiro-ciclopropilo a continuación.
Los sustituyentes particularmente preferidos incluyen R^{7'a} como etilo, vinilo, ciclopropilo (es decir, un sustituyente espiro-ciclopropilo en el anillo "espiro" cicloalquilo de R^{7}/R^{7'}), 1- ó 2-bromoetilo, 1- ó 2-fluoroetilo, 2-bromovinilo o 2-fluoretilo.
Actualmente, una configuración favorita para A es C(=O)OR^{1}, especialmente cuando R^{1} es alquilo C_{1}-C_{6}, tales como metilo, etilo, o terc-butilo y más preferentemente hidrógeno.
Una configuración particularmente preferida para A es C(=O)NHSO_{2}R^{2}, especialmente cuando R^{2} está opcionalmente sustituido alquilo C_{1}-C_{6}, preferentemente metilo, o cicloalquilo C_{3}-C_{7} opcionalmente sustituido, preferentemente ciclopropilo, o alquilarilo C_{0}-C_{6} opcionalmente sustituido, preferentemente fenilo opcionalmente sustituido. Los sustituyentes apropiados aparecen en la sección de definiciones a continuación.
El sustituyente -W-R8 en el grupo cíclico P2 puede emplear cualquiera de los sustituyentes prolina que se describen extensamente en los documentos WO00/59929, WO00/09543, WO00/09558, WO99/07734, WO99/07733, WO02/60926, WO03/35060, WO03/53349, WO03/064416, WO03/66103, WO03/064455, WO03/064456, WO03/62265, WO03/062228, WO03/87092, WO03/99274, WO03/99316, WO03/99274, WO04/03670, WO04/032827, WO04/037855, WO04/43339, WO04/92161 WO04/72243, WO04/93798, WO04/93915, WO04/94452, WO04/101505, WO04/101602, WO04/103996, WO04113365 y similares.
Las funciones W favoritas incluyen W como-OC(=O)NH-, -OC(=O)-, -NH-, -NR^{8'}-, -NHS(O)_{2}- o -NHC(=O)-,
especialmente -OC(=O)NH- o -NH-. Los grupos R^{8} favoritos para tales funciones W incluyen alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3} opcionalmente sustituido o alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, incluyendo los descritos en los documentos WO0009543, WO0009558 y WO 00/174768. Por ejemplo, los sustituyentes éster, -W-R^{8}, en el grupo cíclico P2, incluyen los descritos en WO 01/74768 tales como alcanoiloxi C_{1}-C_{6}, alquilariloiloxi C_{0}-C_{3}, particularmente benzoíloxi (opcionalmente sustituido) o alquilheterocicloiloxi C_{0}-C_{3}, especialmente
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Esta publicación también describe posibilidades alternativas de -W-R^{8} por ejemplo alquilo C_{1}-C_{6}, tal como etilo, isopropilo, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3} tal como ciclohexilo, 2,2-difluoroetilo, -C(=O)NRc, en el que Rc es alquilo C_{1}-C_{6}, alquilciclopropilo C_{0}-C_{3}, alquilarilo C_{0}-C_{3} o alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}.
Las funciones W actualmente preferidas incluyen -S- y especialmente -O-. Los valores convenientes para R^{8} en dichas realizaciones incluyen alquilarilo C_{0}-C_{3}, o alquilheteroarilo C_{0}-C_{3} los cuales están opcionalmente mono, di o trisustituidos con R^{9}, en el que;
R^{9} es alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, NO_{2}, OH, halo, trifluorometilo, amino o amido (por ejemplo amido o amino opcionalmente mono- o di-sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}), alquilarilo C_{0}-C_{3}, alquilheteroarilo C_{0}-C_{3} o carboxilo, en el que el resto arilo o heteroarilo está opcionalmente sustituido con R^{10}; en el que
R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, amido, sulfonil-alquilo C_{1}-C_{3}, NO_{2}, OH, halo, trifluorometilo, carboxilo o heteroarilo.
Típicamente, el componente alquilo C_{0}-C_{3} de R^{8} en forma de alquilarilo C_{0}-C_{3} o alquilheteroarilo C_{0}-C_{3} es metilo y está especialmente ausente, es decir C_{0}. El componente arilo o heteroarilo es como se ilustra extensamente en la sección de definiciones a continuación.
Los R^{9} preferidos incluyen alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, (tal como di-alquilamino C_{1}-C_{3}), amido (tal como -NHC(O)alquilo C_{1}-C_{6} o C(=O)NHalquilo C_{1}-C_{6}), arilo o heteroarilo, estando el arilo o heteroarilo opcionalmente sustituido con R^{10}; en el que
R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino (tal como mono- o di- alquilamino C_{1}-C_{3}), amido (tal como -NHC(O)alquilo C_{1}-C_{3} o C(=O)N H alquilo C_{1}-C_{3}), halo, trifluorometilo o heteroarilo.
Los R^{10} preferidos incluyen alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, amido (tal como -NHC(O)alquilo C_{1}-C_{6} o C(=O)NHalquilo C_{1}-C_{6}), halo, o heteroarilo.
Los R^{10} particularmente preferidos incluyen metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo, metoxi, cloro, amino, amido (tal como, -NHC(O)alquilo C_{1}-C_{6}, por ejemplo -NC(=O)CHC(CH_{3})_{3} o C(=O)NHalquilo C_{1}-C_{3}) o alquilo C_{1}-C_{3} tiazol.
Las realizaciones favoritas de R^{8} incluyen 1-naftilmetilo, 2-naftilmetilo, bencilo, 1-naftilo, 2-naftilo, o quinolinilo, cualquiera de los cuales está sin sustituir, mono o disustituido con R^{9} como se define, en particular 1-naftilmetilo, o quinolinil sin sustituir, mono-, o disustituido con R^{9} como se ha definido.
Un R^{8} actualmente preferido es:
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en la que R^{9a} es alquilo C_{1}-C_{6}; alcoxi C_{1}-C_{6}; tioalquilo C_{1}-C_{3}; amino opcionalmente sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}; alquilarilo C_{0}-C_{3}; o alquilheteroarilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, estando dicho arilo, heteroarilo o heterociclo opcionalmente sustituido con R^{10} en la que
R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, amido, heteroarilo o heterociclilo; y
R^{9b} es alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, amido, NO_{2}, OH, halo, trifluorometilo, carboxilo.
Convenientemente R^{9a} incluye arilo o heteroarilo, todos opcionalmente sustituidos con R^{10} como se define, especialmente cuando R^{9a} se selecciona entre el grupo constituido por:
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en las que R^{10} es H, alquilo C_{1}-C_{6} o alquil C_{0}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{6}, amino opcionalmente mono- o di-sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}, amido (tal como -NHC(O)alquilo C_{1}-C_{6} o C(=O)NHalquilo C_{1}-C_{6}), heteroarilo o heterociclilo.
R^{9a} es convenientemente fenilo y por lo tanto R^{8} es:
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en la que R^{10a} es H, alquilo C_{1}-C_{6}; alcoxi C_{1}-C_{6}; o halo; y R^{9b} es alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino tal como di(alquil C_{1}-C_{3})amina, amido (tal como -NHC(O)alquilo C_{1}-C_{3} o C(=O)NHalquilo C_{1}-C_{3}), NO_{2}, OH, halo, trifluorometilo, carboxilo.
Un R^{8} alternativo preferido es:
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en la que R^{10a} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, o alquil C_{0}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{6}, amina (tal como amina mono- o di-sustituida con alquilo C_{1}-C_{6}), amido (tal como -NHC(O)alquilo C_{1}-C_{6} o C(=O)NHalquilo C_{1}-C_{6}), heteroarilo o heterociclilo; y R^{9b} es alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino (tal como di(alquil C_{1}-C_{3})amino), amido (tal como -NHC(O)alquilo C_{1}-C_{3} o C(=O)NHalquilo C_{1}-C_{3}), NO_{2}, OH, halo, trifluorometilo, o carboxilo.
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En las realizaciones descritas inmediatamente anteriores R^{9b} es convenientemente alcoxi C_{1}-C_{6}, preferentemente metoxi.
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Un R^{8} más conveniente, por ejemplo cuando W es un éter, tiene la fórmula
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en la que W es N o CH, r es 0 ó 1, Ra' es H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcicloalquilo C_{0}-C_{3}, alquiloxi C_{1}-C_{6}, hidroxi o amina y Rb' es H, halo, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcicloalquilo C_{0}-C_{3}, alquiloxi C_{1}-C_{6}, tioalquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquil alquiloxi C_{0}-C_{3}, alquiloxi C_{1}-C_{3}-alquilo C_{1}-C_{3}, alquilarilo C_{0}-C_{3} o alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}. Un sustituyente éter particularmente preferido es 7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi.
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Cuando W es un enlace entonces R^{8} es preferentemente un sistema anular heterocíclico sustituido o sin sustituir como se describe en el documento WO2004/072243 o el documento WO2004/113665.
Los ejemplos representativos de R^{8} cuando W es un enlace incluyen los siguientes aromáticos que pueden estar opcionalmente sustituidos: 1H-pirrol, 1H-imidazol, 1H-pirazol, furano, tiofeno, oxazol, tiazol, isoxazol, isotiazol, piridina, pindazina, pirimidina, pirazina, ftalazina, quinoxalina, quinazolina, quinolina, cinolina, 1H-pirrolo[2,3]-b]piridina, 1H-indol, 1H-benzoimidazol, 1H-indazol, 7H-purina, benzotiazol, benzooxazol, 1H-imidazo[4, 5-c]piridina, 1H-imidazo[4,5-b]piridina, 1,3-dihidro-benzoimidazol-2-ona, 1,3-dihidro-benzoimidazol-2-tiona, 2,3-dihidro-1H-indol, 1,3-dihidro-indol-2-ona, 1H-indolo-2,3-diona, 1,3-dihidro-benzoimidazol-2-ona, 1H,1H-pirrolo[2,3-c]piridina, benzofurano, benzo[b]tiofeno, benzo[d]isoxazol, benzo[d]isotiazol, 1H-quinolin-2-ona, 1H-quinolin-4-ona, 1H-quinazolin-4-ona, 9H-carbazol, 1H-quinazolin-2-ona.
Los ejemplos representativos adicionales de R^{8} cuando W es un enlace, incluyen los siguientes no-aromáticos, que pueden estar opcionalmente sustituidos: aziridina, azetidina, pirrolidina, 4,5-dihidro-1H-pirazol, pirazolidina, imidazolidin-2-ona, imidazolidin-2-tiona, pirrolidin-2-ona, pirolidin-2,5-diona, piperidin-2,6-diona, piperidin-2-ona, piperazin-2,6-diona, piperazin-2-ona, piperazina, morfolina, tiomorfolina-1,1-dióxido, pirazolidin-3-ona, imidazolidin-2,4-diona, piperidina, tetrahidrofurano, tetrahidropirano, [1,4]dioxano, 1,2,3,6-tetrahidropiridina.
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Los valores preferidos para R^{8} cuando W es un enlace, incluyen tetrazol y derivados del mismo. El resto de tetrazol se une a la estructura cíclica P2 y se sustituye opcionalmente como se muestra a continuación:
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en las que Q* está ausente o se selecciona entre el grupo constituido por -CH_{2}-, -O-, -NH-, -N(R^{1*}), -S-, -S(=O)_{2}- y -(C=O)-; Q* está ausente o se selecciona del grupo constituido por: -CH_{2}- y -NH; Y* se selecciona entre el grupo constituido por: H, alquilo C_{1}-C_{6}, arilo C_{0}-C_{3}, heterociclilo C_{0}-C_{3}; R^{1*} se selecciona entre el grupo constituido por: H, alquilo C_{1}-C_{6}, carbociclilo, arilo C_{0}-C_{3}, heterociclilo C_{0}-C_{3}.
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Los ejemplos representativos de tetrazoles sustituidos son como se describe en la tabla 1 del documento WO2004/072243 y en las estructuras inmediatamente a continuación, o en el documento WO2004/113665.
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Además, los valores preferidos para R^{8} cuando W es un enlace, incluyen triazol y derivados del mismo. El resto de triazol se une a la estructura cíclica P2 y se sustituye opcionalmente como se muestra a continuación:
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en las que X* e Y* se seleccionan independientemente entre el grupo constituido por: H, halógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, carbociclilo C_{0}-C_{3}, -CH_{2}-amino, -CH_{2}-arilamino, -CH_{2}-diarilamino, -(C=O)-amino, -(C=O)-arilamino, -(C=O)-diarilamino, arilo C_{0}-C_{3}, heterociclilo C_{0}-C_{3} o como alternativa, X* e Y* tomados junto con los átomos de carbono a los que están unidos, forman un resto cíclico que se selecciona del grupo constituido por arilo y heteroarilo.
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Los ejemplos representativos de los triazoles sustituidos son como se describen en la tabla 2 del documento WO2004/072243 y las estructuras inmediatamente a continuación, y en las tablas del documento WO2004/113365.
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Además, los valores preferidos para R^{8} cuando W es un enlace, incluyen piridazinona y derivados de la misma. El resto de piridazinona se une a la estructura cíclica P2 y se sustituye adicionalmente como se muestra a continuación:
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en la que X*, Y* y Z* se seleccionan independientemente entre el grupo constituido por: H, N_{3}, halógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, carbociclilo, amino, arilo C_{0}-C_{3}, -S-arilo, -O-arilo, -NH-arilo, diarilamino, diheteroarilamino, heterociclilo C_{0}-C_{3}, -S-heteroarilo, -O-heteroarilo, NH-heteroarilo o, como alternativa, X e Y o Y y Z tomados junto con los átomos de carbono a los que están unidos, forman un resto arilo o heteroarilo cíclico.
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Los ejemplos representativos de piridazinonas sustituidas son como se describen en la tabla 3 del documento WO2004/072243 y las estructuras inmediatamente a continuación, y en las tablas del documento WO2004/113365.
Los grupos P3 preferidos, es decir cuando m es 1, parecen aminoácidos naturales o antinaturales, especialmente aminoácidos alifáticos, tales como L-valilo, L-leucilo, L-isoleucilo o L-t-leucilo. Además, los grupos P3 preferidos, como se muestra en el documento WO 02/01898 incluyen alquilcicloalquilanina C_{0}-C_{3}, especialmente ciclohexilalanina, opcionalmente sustituida con CO_{2}Rg, en la que Rg es H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilarilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, alquilcicloalquilo C_{0}-C_{3} o amina; o N-acetilpiperidina o tetrahidropirano. Por tanto, los grupos R^{11} preferidos incluyen alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcabociclilo C_{0}-C_{3} por ejemplo alquil C_{0}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alquilarilo C_{0}-C_{3} o alquilheteroarilo C_{0}-C_{3}, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con hidroxi, halo, amino, alcoxi C_{1}-C_{6}, tioalquilo C_{1}-C_{6}, C(=O)OR^{14}, carboxilo, (alcoxi C_{1}-C_{6})carbonilo, arilo, heteroarilo o heterociclilo, especialmente en los que el sustituyente es hidroxi o C(=O)OR^{14}.
Los R^{11} particularmente preferidos incluyen terc-butilo, iso-butilo, ciclohexilo, feniletilo, 2,2-dimetil-propilo, ciclohexilmetilo, fenilmetilo, 2-piridilmetilo, 4-hidroxi-fenilmetilo, o carboxilpropilo. Los valores más preferidos de R^{11} son actualmente terc-butilo, isobutilo, o ciclohexilo.
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Una realización de la invención incluye compuestos en los que P4 está ausente (es decir n es 0) y en las que la función P3 carece de un carbonilo, es decir U está ausente. Las subestructuras representativas incluyen las de fórmula Ii a continuación:
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en la que
Rx y Ry son como se han definido anteriormente, preferentemente H,
R^{11'} es alquilo C_{1}-C_{6}, preferentemente alquilo C_{3}-C_{5} ramificado tal como las cadenas laterales de L-valilo, L-leucilo, L-isoleucilo, L-t-leucilo; o alquil C_{0}-C_{2}-cicloalquilo C_{3}-C_{7} tal como ciclohexilo o ciclohexilmetilo;
R^{16a} es -Rba, -S(=O)pRba, -C(=O)Rba;
Rba es alquilo C_{1}-C_{6}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}.
Como alternativa, los compuestos de estructura parcial Ii pueden macrociclarse entre un valor apropiado de R^{7} y uno de Rx, Ry o R^{11'}.
Las realizaciones representativas de los grupos P3 que carecen de una función carboxi (es decir, la variable U está ausente) incluyen las de las fórmulas Iia-Iid a continuación:
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en las que Ar es carbociclilo o heterociclilo, especialmente arilo o heteroarilo, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con R^{9}. Aunque las estructuras parciales de las Fórmulas Iia-Iid se han ilustrado en el contexto en la Fórmula I, será evidente que dichas configuraciones de Fórmula Ii también se aplican a otros valores de q y k. De forma análoga, aunque las estructuras parciales de fórmula Iic y Iid muestran un grupo R^{11} que corresponde a leucina, será evidente que estas configuraciones serán aplicables a otros grupos R^{11}, especialmente aquellos que se asemejan a las cadenas laterales de L-aminoácidos naturales o antinaturales, por ejemplo t-butil alanina/t-leucina.
R^{15} en los compuestos de la invención en los que n es 1, es preferentemente alquilo C_{1}-C_{6} o alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3} opcionalmente sustituido, por ejemplo alquil C_{0}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{7}, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido. Los grupos P4 preferidos son típicamente análogos de aminoácidos naturales o antinaturales, especialmente aminoácidos alifáticos tales como L-valilo, L-leucilo, L-isoleucilo, L-t-leucilo o L-ciclohexilalanina y por tanto los grupos R^{15} favoritos incluyen ciclohexilo, ciclohexilmetilo, terc-butilo, iso-propilo, o iso-butilo.
Los valores preferidos de G incluyen -NRy-, especialmente en los que Ry es metilo o preferentemente H o hidrazina.
Un valor adicional de G preferido es O de modo que define un éster con el carbonilo de P4 (si está presente) o el carbonilo de P3 (si está presente) o un éter en el caso de variantes en las que el grupo U está ausente. Los grupos de protección de éteres o ésteres farmacéuticamente aceptables convencionales para R^{16} incluyen alquilo C_{1}-C_{6} (especialmente metilo o t-butilo), alquilheterociclilo C_{0}-C_{3} (especialmente piridilo, benzoimidazolilo, piperidilo, morfolinilo, piperazinilo) o alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3} (especialmente fenilo, bencilo, indanilo) cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con hidroxi, halo, amino, o alcoxi C_{1}-C_{6}.
Será evidente que para los compuestos de fórmula I, cuando m = n = 0, entonces R^{16}G- no es un grupo protector BOC o CBz, pero esta restricción no se aplica a otras permutaciones de m y n. Los intermedios sintéticos de prolina 4-sustituidos protegidos con Boc o CBz descritos por ejemplo en el documento WO 0059929, están por lo tanto fuera del alcance de la invención.
Los compuestos favoritos de la invención pueden comprender una funcionalidad hidrazina, por ejemplo en la que X es -NHNH- y m es 1; siendo n cero o 1. Como alternativa, especialmente cuando m es cero, G puede ser un grupo -NRjNRj- tal como -NHNH-. Los compuestos generalmente no comprenderán una hidrazina en ambos G y X. Las hidrazinas típicas dentro de la Fórmula I, en la que m y n son cero incluyen compuesto de las estructuras parciales Ija-Ijb a continuación:
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R^{16'} en las fórmulas Ija e Ijb pueden considerarse como un alquilo (o alquilheterociclilo C_{1}-C_{3} o alquil C_{1}-C_{3}carbociclilo) en las que el primer carbono de alquilo está sustituido con un grupo oxo para definir la función ceto y R^{16'} es el resto del alquilo, alquilheterociclilo o alquilcarbociclilo. La Fórmula Ijb representa una variante en la que R^{16} es un grupo metileno cuyo carbono está sustituido con un sustituyente oxo y también -ORb, en la que Rb es como se ha definido anteriormente, típicamente, alquilo C_{1}-C_{6}, tal como t-butilo, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3} tal como piridilo o alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, tal como bencilo o fenilo, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido como se ha definido anteriormente. Los compuestos de las estructuras parciales Ija e Ijb pueden ser moléculas lineales como las mostradas (ambos Rj son H), o preferentemente uno de los grupos Rj descritos puede macrociclarse por J para dar un grupo R^{7} apropiado.
Las hidracinas alternativas de Fórmula I, en la que m es 1 incluyen las de estructuras parciales Ijc e Ijd a continuación:
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en las que R^{16}, G, R^{11}, R^{15}, Rj y Ru son como se definen en la fórmula I anterior. Los compuestos de estructuras parciales Ijc e Ijd pueden ser moléculas lineales como se muestra (ambos Rj son H), o preferentemente uno de los grupos Rj representados, o el grupo R^{11} puede macrociclarse con J para dar un grupo R^{7} apropiado.
Aunque las fórmulas Ija-Ijd se representan con un análogo de prolina como P2, será evidente que este aspecto de la invención se adapta igualmente a otras configuraciones de q y k.
Se encuentran configuraciones alternativas similares a hidrazina cuando G es amino, y m y n son 0, y R^{16} es un heterociclo insaturado unido a N como se define a continuación, por ejemplo piridilo o pirimidilo o un heterociclo saturado como se define a continuación, tal como piperazinilo, piperidinilo y especialmente morfolinilo. Los ejemplos de dichas realizaciones incluyen las de la fórmula Ije:
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Los compuestos de estructuras parciales Ije pueden ser moléculas lineales como se muestra o preferentemente Rx puede macrociclarse por J para dar un grupo R^{7} apropiado. Aunque estas estructuras parciales se representan como un anillo cinco miembros para P2, será evidente que esta configuración se extiende a otros valores de q y k. De forma análoga, estas configuraciones serán aplicables a otros heterociclos unidos a N como R^{16}.
Volviendo ahora a la Fórmula I en general, los grupos R^{16} favoritos para los compuestos de la invención incluyen 2-indanol, indanilo, 2-hidroxi-1-fenil-etilo, 2-tiofenometilo, ciclohexilmetilo, 2,3-metilenodioxibencilo, ciclohexilo, fenilo, bencilo, 2-piridilmetilo, ciclobutilo, iso-butilo, n-propilo, metilo o 4-metoxifeniletilo.
Actualmente los grupos R^{16} preferidos incluyen 2-indanol, indano, 2-hidroxi-1-fenil-etilo, 2-tiofenometilo, 2,3-metilenodioxibencilo o ciclohexilmetilo.
Los aminoácidos antinaturales incluyen L-aminoácidos en los que la cadena lateral no es uno de los 20 aminoácidos de origen natural. Los ejemplos de aminoácidos antinaturales incluyen L-beta-metilsulfonilmetilalanina, L-ciclohexilalanina, L-terciarileucina, L-norleucina, L-norvalina, L-ornitina, L-sarcosina, L-citrulina, L-homofenilalanina, L-homoserina, L-beta-(1-naptil)alanina, L-beta-(2-naptil)alanina etc. Los aminoácidos antinaturales también incluyen los D-aminoácidos correspondientes a los 20 aminoácidos naturales y los D-aminoácidos que tienen otras cadenas laterales, tales como los que se que se han enumerado anteriormente.
El término "alquilo C_{1}-C_{6}" (también abreviado como alq C_{1}-C_{6}, o usado en expresiones de compuestos tales como alquiloxi C_{1}-C_{6}, etc) como se aplica en el presente documento tiene la intención de incluir cadenas de carbono alifáticas lineales y ramificadas tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, t-butilo, pentilo, isopentilo, hexilo y cualquier isómero simple de los mismas. Además, cualquier átomo de C en el alquilo C_{1}-C_{6} puede estar opcionalmente sustituido por uno, dos o, cuando la valencia lo permita, tres halógenos. Los términos alquilo C_{1}-C_{4} y alquilo C_{1}-C_{5} tienen el significado correspondiente a alquilo C_{1}-C_{6} ajustado según sea necesario por el número de carbonos.
El término "alquilo C_{1}-C_{3}" como se aplica en el presente documento incluye metilo, etilo, propilo, isopropilo, ciclopropilo, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido como se ha descrito en el párrafo anterior.
El término "alquileno C_{1}-C_{3}" como se aplica en el presente documento describe un resto divalente alquidiilo C_{1}-C_{3}, que incluye propileno, etileno y especialmente metileno.
El término "amino" incluye NH_{2}, NHalquilo C_{1}-C_{6} o N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}, especialmente variantes de alquilo C_{1}-C_{3}.
El término "amido" incluye C(=O)NH_{2}, y alquilamido, tal como C(=O)NHalquilo C_{1}-C_{6}, C(=O)N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}
especialmente C(=O)NHalquilo C_{1}-C_{3}, C(=O)N(alquilo C_{1}-C_{3})_{2} o -NH(C=O)alquilo C_{1}-C_{6}, que incluye -NH(C=O)alquilo C_{1}-C_{3}.
El término "halo" o halógeno como se aplica en el presente documento pretende incluir F, Cl, Br, I, particularmente cloro y preferentemente fluoro.
El término "alquilarilo C_{0}-C_{3}" como se aplica en el presente documento se refiere a que incluye un resto arilo tal como un fenilo, naftilo o fenilo condensado con un cicloalquilo C_{3}-C_{7} (por ejemplo indanilo), al que el arilo se une directamente (es decir C_{0}) o a través de un grupo intermedio metilo, etilo o propilo como se define para el alquileno C_{1}-C_{3} anterior. A menos que se indique otra cosa, el arilo y/o su resto cicloalquilo condensado está opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados entre halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxi, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}-alquilo C_{1}-C_{6}, alcanoílo C_{1}-C_{6}, amino, azido, oxo, mercapto, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}. El término "arilo" tiene el significado correspondiente, es decir en el que la unión alquilo C_{0}-C_{3} está ausente.
El término "alquilo C_{0}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{7}" como se aplica en el presente documento se refiere a que incluye un grupo cicloalquilo C_{3}-C_{7} tal como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo o cicloheptilo, cuyo cicloalquilo está directamente unido (es decir, alquilo C_{0}) o a través de un grupo intermedio metilo, etilo, propilo o isopropilo como se ha definido para el alquileno C_{1}-C_{3} anterior. El grupo cicloalquilo puede tener un enlace insaturado. A menos que se indique otra cosa, el resto cicloalquilo está opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados entre halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxi, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}-alquilo C_{1}-C_{6}, alcanoílo C_{1}-C_{6}, amino, azido, oxo, mercapto, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}.
El término "alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}" como se aplica en el presente documento se refiere a que incluye alquilarilo C_{0}-C_{3} y alquil C_{0}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{7}. A menos que se indique otra cosa, el grupo arilo o cicloalquilo está opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados entre halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxi, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}-alquilo C_{1}-C_{6}, alconoílo C_{1}-C_{6}, amino, azido, oxo, mercapto, nitro, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3} y/o alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}. El término "carbociclilo" tiene el significado correspondiente, es decir, en el que enlace alquilo C_{0}-C_{3} está ausente.
El término "alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}" como se aplica en el presente documento se refiere a que incluye un anillo que contiene un heteroátomo monocíclico saturado o insaturado tal como piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazinolilo, isotiazinolilo, tiazolilo, oxadiazolilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, tetrazolilo, furanilo, tienilo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazolilo, o cualquiera de dichos grupos condensados con un anillo fenilo, tal como quinolinilo, benzoimidazolilo, benzoxazolilo, benzoisoxazolilo, benzotiazinolilo, benzoisotiazinolilo, benzotiazolilo, benzoxadiazolilo, benzo-1,2,3-triazolilo, benzo-1,2,4-triazolilo, benzotetrazolilo, benzofuranilo, benzotienilo, benzopiridilo, benzopirimidilo, benzopiridazinilo, benzopirazolilo, etc, en el que el anillo está unido directamente, es decir (C_{0}), o a través de un grupo intermedio metilo, etilo, propilo, o isopropilo como se define para alquileno C_{1}-C_{3}. Cualquiera de dichos anillos insaturados que tienen un carácter aromático puede mencionarse como heteroarilo en el presente documento. A menos que se indique otra cosa, el anillo hetero y/o su resto fenilo condensado está opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados entre halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxi, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}-alquilo C_{1}-C_{6}, alcaloílo C_{1}-C_{6}, amino, azido, oxo, mercapto, nitro, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}. Los términos "heterociclilo" y "heteroarilo" tienen el significado correspondiente, es decir en el que la unión alquilo C_{0}-C_{3} está ausente.
Típicamente los restos heterociclilo y carbociclilo dentro del alcance de las definiciones anteriores son por lo tanto un anillo monocíclico con 5 o especialmente 6 átomos en el anillo, o una estructura anular bicíclica que comprende un anillo de 6 miembros condensado con un anillo de 4, 5 o 6 miembros.
Tales grupos típicos incluyen cicloalquilo C_{3}-C_{8}, fenilo, bencilo, tetrahidronaftilo, indenilo, indanilo, heterociclilo, por ejemplo, azepanilo, azocanilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, indolinilo, piranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, tiopiranilo, furanilo, tetrahidrofuranoílo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, tetrazolilo, pirazolilo, indolilo, benzofuranilo, benzotienilo, benzoimidazolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, benzoisoxazolilo, quinolinilo, tetrahidroquinolinilo, isoquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, quinazolinilo, tetrahidroquinazolinilo y quinoxalinilo, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido como se define en el presente documento.
Por lo tanto, el resto heterociclo saturado por lo tanto incluye radicales tales como pirrolinilo, pirrolidinilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piranilo, tiopiranilo, piperazinilo, indolinilo, azetidinilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, tetrahidrofuranoílo, hexahidropirimidinilo, hexahidropiridazinilo, 1,4,5,6-tetrahidropirimidinilamina, dihidro-oxazolilo, 1,1-dióxido de 1,2-tiazinanilo, 1,1-dióxido de 1,2,6-tiadiazinanil, 1,1-dióxido de isotiazolidinilo e imidazolidinil-2,4-diona, en los que como los heterociclos insaturados incluyen radicales con un carácter aromático tales como furanilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolizinilo, indolilo, isoindolilo. En cada caso el heterociclo puede condensarse con un anillo fenilo para formar un sistema anular bicíclico.
Síntesis
La síntesis de los compuestos de la presente invención puede realizarse por diferentes estrategias químicas en solución o fase sólida o una combinación de ambas. Los componentes básicos individuales protegidos convenientemente pueden prepararse en primer lugar y posteriormente se acoplan juntos, es decir, P2+P1 \rightarrow P2-P1. Como alternativa, los precursores de los componentes básicos pueden acoplarse juntos y modificarse en una etapa posterior de la síntesis de la secuencia del inhibidor. Después, pueden acoplarse componentes básicos adicionales, precursores de componentes básicos o fragmentos más grandes prefabricados a la cadena creciente, por ejemplo R^{16}-G-P3+E-P2-P1 \rightarrow R^{16}-G-P3-P2-P1 o R^{16}-G-P4-P3+E-P2-P1 \rightarrow R^{16}-G-P4-P3-E-P2-P1.
El acoplamiento entre dos aminoácidos, un aminoácido y un péptido, o dos fragmentos de péptido puede realizarse usando procedimientos de acoplamiento convencionales tales como el procedimiento de azida, el procedimiento de anhídrido de ácido carbónico-carboxílico mixto (cloroformiato de isobutilo), procedimiento de carbodiimida (diciclohexilcarbodiimida, diisopropilcarbodiimida o carbodiimida soluble en agua), procedimiento de éster activo (p-nitrofenil éster, imido éster N-hidroxisuccínico), procedimiento de reactivo K de Woodward, procedimiento de carbonildiimidazol, reactivos de fósforo o procedimientos de oxidación-reducción. Alguno de estos procedimientos (especialmente el procedimiento de carbodiimida) pueden mejorarse añadiendo 1-hidroxibenzotriazol o 4-DMAP. Estas reacciones de acoplamiento pueden realizarse en solución (fase líquida) o fase sólida.
Más explícitamente, la etapa de acoplamiento implica el acoplamiento de deshidratación de un carboxilo libre de uno reactivo con el grupo amino libre del otro reactivo en presencia de un agente de acoplamiento para formar una unión de enlace amida. Las descripciones de tales agentes de acoplamiento se encuentran en libros de texto generales sobre química de péptidos, por ejemplo, M. Bodanszky, "Peptide Chemistry", 2ª ed. rev., Springer-Verlag, Berlin, Alemania, (1993) de ahora en adelante simplemente nombrado como Bodanszky, el contenido de los cuales se incorpora en el presente documento como referencia. Los ejemplos de agentes de acoplamiento adecuados son N,N'-diciclohexilcarbodiimida, 1-hidroxibenzotriazol en presencia de N,N'-diciclohexilcarbodiimida o N-etil-N'-[(3-dimetilamino)propil]carbodiimida. Un agente de acoplamiento útil y práctico es el hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris-(dimetilamino)fosfonio disponible en el mercado, tanto solo o en presencia de 1-hidroxibenzotriazol o 4-DMAP. Otro agente de acoplamiento práctico y útil es tetrafluoroborato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio disponible en el mercado. Otro agente de acoplamiento práctico y útil más es hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotrizol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio disponible en el mercado.
La reacción de acoplamiento se realiza en un disolvente inerte, por ejemplo diclorometano, acetonitrilo o dimetilformamida. Se añade un exceso de una amina terciaria, por ejemplo, diisopropiletilamina, N-metilmorfolina, N-metilpirrolidina o 4-DMAP para mantener la mezcla de reacción en un pH de aproximadamente 8. La temperatura de reacción normalmente varía entre 0ºC y 50ºC y el tiempo de reacción normalmente varía entre 15 min y 24 h.
Generalmente, los grupos funcionales de los aminoácidos constituyentes deben protegerse durante las reacciones de acoplamiento para evitar la formación de enlaces indeseados. Los grupos protectores que pueden usarse se indican en Greene, "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley & Sons, Nueva York (1981) y en "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", Vol. 3, Academic Press, Nueva York (1981), de ahora en adelante nombrados simplemente como Greene, cuyas descripciones se incorporan en el presente documento como referencia.
El grupo \alpha-carboxilo del resto C-terminal se protege normalmente como un éster que puede escindirse para dar el ácido carboxílico. Los grupos protectores que pueden usarse incluyen 1) ésteres de alquilo tales como metilo, trimetilsililo y t-butilo, 2) ésteres de aralquilo tales como bencilo y bencilo sustituido, o 3) ésteres que pueden escindirse por medio de reducción por medio de una base moderada o un agente reductor moderado tal como ésteres de tricloroetilo y fenacilo.
El grupo \alpha-amino de cada aminoácido que se acopla está tipicamente protegido. Puede usarse cualquier grupo protector conocido en la técnica. Los ejemplos de dichos grupos incluyen: 1) grupos acilo tales como formilo, trifluoroacetilo, ftalilo y p-toluenosulfonilo; 2) grupos carbamato aromáticos tales como benciloxicarbonilo (Cbz o Z) y benciloxicarbonilos sustituidos, y 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc); 3) grupos carbamato alifáticos tales como tercbutiloxicarbonilo (Boc), etoxicarbonilo, diisopropilmetoxicarbonilo y aliloxicarbonilo; 4) grupos carbamato de alquilo cíclicos tales como ciclopentiloxicarbonilo y adamantiloxicarbonilo; 5) grupos alquilo tales como trifenilmetilo y bencilo; 6) trialquilsililo tal como trimetilsililo; y 7) grupos que contienen triol tales como asfeniltiocarbonilo y ditiasuccinoílo. El grupo protector \alpha-amino preferido es Boc o Fmoc. Están disponibles en el mercado muchos derivados de aminoácidos adecuadamente protegidos para la síntesis de péptidos.
El grupo protector \alpha-amino se escinde antes de la siguiente etapa de acoplamiento. Cuando se usa el grupo Boc, los métodos de elección son ácido trifluoroacético, puro o en diclorometano, o HCl en dioxano o en acetato de etilo. Después, la sal de amonio resultante se neutraliza antes del acoplamiento o in situ con soluciones básicas tales como tampones acuosos, o aminas terciarias en diclorometano, acetonitrilo o dimetilformamida. Cuando se usa el grupo Fmoc, son agentes reactivos de elección son piperidina o piperidina sustituida en dimetilformamida, pero puede usarse cualquier amina secundaria. La desprotección se realiza a una temperatura entre 0ºC y una temperatura ambiente normalmente a 20-22ºC.
Cualquiera de los aminoácidos naturales o antinaturales que tienen funcionalidades de cadena lateral se protegerán típicamente durante la preparación del péptido usando cualquiera de los grupos descritos anteriormente. Los expertos en la materia apreciarán que la selección y el uso de grupos protectores para estas funcionalidades de cadena lateral apropiadas dependerán del aminoácido y la presencia de otros grupos protectores en el péptido. En la selección de dichos grupos protectores es deseable que el grupo no se retire durante la desprotección y el acoplamiento del grupo \alpha-amino.
Por ejemplo, cuando se usa Boc como grupo protector \alpha-amino, son adecuados los siguientes grupos protectores de cadena lateral: pueden usarse restos de p-toluenosulfonilo (tosilo) para proteger la cadena lateral amino de aminoácidos tales como Lys y Arg; pueden usarse restos de acetamidometilo, bencilo (Bn) o terc-butilsulfonilo para proteger el sulfuro que contiene la cadena lateral de cisteína; pueden usarse bencilo (Bn) éteres para proteger el hidroxi que contiene cadenas laterales de serina, treonina o hidroxiprolina; y pueden usarse bencil ésteres para proteger el carboxi que contiene las cadenas laterales de ácido aspártico y ácido glutámico.
Cuando se elige Fmoc para la protección de \alpha-amina, normalmente son aceptables grupos protectores basados en terc-butilo. Por ejemplo, puede usarse Boc para lisina y arginina, éter terc-butílico para serina, treonina e hidroxiprolina, y éster terc-butílico para ácido aspártico y el ácido glutámico. Puede utilizarse un resto de trifenilmetilo (Tritilo) para proteger el sulfuro que contiene una cadena lateral de cisteína.
Una vez que la secuencia inhibidora se completa se retira cualquiera de los grupos protectores de cualquiera de las maneras impuestas por la selección de los grupos protectores. Estos procedimientos son bien conocidos por los expertos en la materia.
En los compuestos de Fórmula I, la unidad P2 comprende un resto de anillo que contiene nitrógeno que se sustituye con los restos de W y R^{8}.
Síntesis de componentes básicos P2 heterocíclicos
El grupo R^{8} se puede acoplar a la estructura P2 en cualquiera de las etapas convenientes de la síntesis de compuestos de acuerdo con la presente invención. Un enfoque es acoplar en primer lugar el grupo R^{8} a la estructura P2 y posteriormente añadir los otros componentes básicos deseados, es decir P1 y opcionalmente P3 y P4. Otro enfoque es acoplar P1 y, si están presentes P3 y P4 usando una estructura P2 no sustituida y añadir el grupo R^{8} más adelante.
Los compuestos en los que W es O y R^{8} es alquilo, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3} o alquilheterociclilo C_{0}-C_{3} pueden prepararse de acuerdo con el procedimiento descrito por E. M. Smith y col. (J. Med. Chem. (1988), 31, 875-885), como se representa en el Esquema 1, que ilustra la técnica en un resto en el que q y k son 1.
Esquema 1
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La Boc-4-(R)-hidroxiprolina disponible en el mercado, o cualquier análogo de prolina sustituido con hidroxi adecuado, tal como un ácido hidroxipiperidoico se trata con una base tal como hidruro sódico o t-butóxido potásico en un disolvente tal como dimetilformamida y el alcóxido resultante se hace reaccionar con un agente de alquilación, R^{8}-X, en el que X es un grupo saliente adecuado tal como un haluro, mesilato, triflato, tosilato o similares, que proporciona el derivado de prolina sustituido deseado.
Como alternativa, cuando W es O o S y R^{8} es un carbociclilo tal como fenilo o heterociclililo tal como heteroarilo, los componentes básicos de P2 pueden prepararse por una reacción de Mitsunobu (Mitsunobu, 1981, Synthesis, enero, 1-28; Rano y col., Tetrahedron Lett., 1995, 36, 22, 3779-3792; Krchnak y col., Tetrahedron Lett., 1995, 36, 5, 6193-6196; Richter y col., Tetrahedron Lett., 1994, 35, 27, 4705-4706) como se muestra en el Esquema 2, que ilustra la técnica en un resto en el que q y k son 1.
Esquema 2
26
El tratamiento del análogo de prolina sustituido con hidroxi apropiado, tal como un ácido hidroxipiperidoico, aquí mostrado como un éster metílico de Boc-4-hidroxiprolina disponible en el mercado, con el alcohol deseado o tiol (R^{8}-WH) en presencia de trifenilfosfina y un agente de activación tal como azodicarboxilato de dietilo (DEAD), azodicarboxilato de diisopropilo (DIAD) o similares, proporciona el compuesto de éster (2b). La hidrolización del éster en el ácido por procedimientos convencionales proporciona el componente básico de P2 (2c).
El alcohol (2a) puede tratarse como alternativa con fosgeno proporcionando de este modo el cloroformiato correspondiente que tras la reacción con una amina, R^{8}NH_{2}, en presencia de una base tal como carbonato ácido sódico o trietilamina, proporciona carbamatos es decir W es -OC(=O)NH-, mientras que la reacción del alcohol (2a) con un agente de acilación, R8-CO-X, tal como un anhídrido ácido o un haluro ácido por ejemplo el cloruro ácido, para proporcionar ésteres, es decir W es -OC(=O)-.
Se describen diversos alcoholes R^{8}-OH, agentes de alquilación R^{8}-X en los documentos WO 00/09543 y WO 00/59929. Un ejemplo de la síntesis en la que R^{8} es un derivado de quinolona sustituida se muestra en el Esquema 3.
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Esquema 3
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La acilación Friedel-Craft de una anilina sustituida adecuada (3a), disponible en el mercado o en la bibliografía, usando un agente de acilación tal como cloruro de acetilo o similar en presencia de tricloruro de boro y tricloruro de aluminio en un disolvente tal como diclorometano proporciona (3b). El acoplamiento de (3b) a un ácido carboxílico heterocíclico (3c) en condiciones básicas, tal como en piridina, en presencia de un agente de activación para el grupo carboxilato, por ejemplo POCl_{3}, seguido de cierre del anillo y deshidratación en condiciones básicas tal como terc-butóxido potásico en terc-butanol proporciona un derivado de quinolina (3e). El derivado de quinolina (3e) se puede acoplar en una reacción de Mitsunobu a un alcohol como se ha descrito anteriormente, o el grupo hidroxi puede desplazarse mediante un grupo saliente adecuado tal como un haluro como cloruro, bromuro o yoduro, por tratamiento de quinolina (3e) con un agente de halogenación adecuado, por ejemplo cloruro de fosforilo o similar.
Puede usarse una diversidad de ácidos carboxílicos con la estructura general (3c) en el Esquema 3. Estos ácidos están disponibles en el mercado o en la bibliografía. A continuación, se muestra un ejemplo de la preparación de derivados de 2-(sustituido)-amino-carboxi-aminotiazol, siguiendo el procedimiento de Berdikhina y col. Chem. Heterocicl. Compd. (Engl. Transl.) (1991), 427-433.
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Esquema 4
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La tiourea (4c) con diferentes sustituyentes alquilo R' puede formarse por reacción de la amina apropiada (4a) con isotiocianato de terc-butilo en presencia de una base tal como diisopropiletilamina en un disolvente tal como diclorometano seguido de la retirada del grupo terc-butilo en condiciones ácidas. La condensación posterior del derivado de tiourea (4c) con ácido 3-bromopirúvico proporciona el ácido (4d).
Los componentes básicos P2 en los que el sustituyente R^{8} esta unido por una amina, amida, urea o sulfonamida, pueden prepararse a partir de análogos de aminoprolina obtenidos a partir de un derivado de aminoprolina adecuada disponible en el mercado, etc., o transformado el grupo hidroxi del derivado hidroxi correspondiente en un grupo azida, por ejemplo, transformando el grupo hidroxi en un grupo saliente adecuado tal como un mesilato o halógeno tal como cloruro, seguido de la sustitución del grupo saliente con azida o por el uso de un agente de transferencia de azida tal como difenilfosforil azida (DPPA). La reducción de la azida por hidrogenación catalítica o cualquier otro procedimiento de reducción adecuado proporciona la amina. El derivado amino puede hacerse reaccionar en una reacción de desplazamiento con un agente de alquilación de fórmula general R^{8}-X en la que R^{8} y X son como se han descrito para el Esquema 1, para formar componentes básicos P2 para su uso en la preparación de compuestos de fórmula general I, en la que W es -NH-. La reacción del análogo de aminoprilina con un ácido de fórmula general R^{8}-COOH en condiciones de acoplamiento de amida convencionales proporciona compuestos en los que el sustituyente R8 está unido por un enlace amida, mientras que la reacción del análogo de aminoprolina con un derivado apropiado de ácido sulfónico, R^{8}-S(O)_{2}-X en el que X es un grupo saliente por ejemplo cloruro, en presencia de una base, proporciona sulfonamidas. Los compuestos en los que la unión entre la estructura cíclica y el sustituyente R8 se constituye de un grupo urea pueden, por ejemplo, pueden conseguirse por tratamiento de un análogo de amino prolina con fosgeno para producir el clorocarbamato correspondiente seguido de reacción con la amina deseada. Como alternativa, al análogo de amino prolina puede hacerse reaccionar con el cloruro o isocianato de carbamoílo del sustituyente R8 deseado para la formación de la unión de urea. Será evidente que las reacciones correspondientes estarán disponibles para los grupos P2 con otros tamaños de anillo y patrones de sustitución.
Los derivados heterocíclicos 4-sustituidos tales como prolina 4-sustituida para su uso como componentes básicos P2 en los que W es -CH_{2}- se pueden preparar como se muestra en el Esquema 5, que ilustra la técnica en un resto en el que w y k son 1, de acuerdo con los procedimientos descritos en J. Ezquerra y col., Tetrahedron, 1993, 38, 8665-8678 y C. Pedregal y col. Tetrahedron Lett., 1994, 35, 2053-2056.
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Esquema 5
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El tratamiento de pirrolidona o piperidinona convenientemente protegida con ácido tal como el ácido Boc-piro-glutámico (5a) disponible en el mercado con una base fuerte tal como diisopropilamida de litio en un disolvente tal como tetrahidrofurano seguido de la adición de un agente de alquilación R^{8}-CH_{2}-X en el que X es un grupo saliente adecuado en forma de un haluro tal como cloruro o bromuro seguido de la reducción de la amida y la desprotección del éster da el compuesto deseado (5d).
Los compuestos de la presente invención en los que un grupo heterocíclico R^{8} está unido directamente a la estructura P2 cíclica, es decir W es un enlace en la fórmula general I, pueden prepararse por ejemplo usando un reacción de reemplazo en la que un grupo saliente adecuado en la estructura P2 se reemplaza con el grupo R^{8} deseado tal como un grupo heterocíclico.
Como alternativa el grupo R8 puede introducirse por medio de una reacción de Mitsunobu en la que al grupo hidroxi de la estructura P2 se hace reaccionar con un átomo de nitrógeno en el grupo heterocíclico R^{8}.
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Los compuestos en los que un derivado de tetrazol se une a través de un átomo del anillo heterocíclico se preparan convenientemente acumulando el resto tetrazol directamente en el precursor P2. Esto puede conseguirse, por ejemplo, transformando de grupo hidroxi del precursor P2 en un grupo ciano seguido de reacción con un reactivo azida tal como azida sódica. Los derivados de triazol también pueden acumularse directamente en el precursor P2, por ejemplo, transformando el grupo hidroxi del precursor P2 en un grupo azida seguido de reacción de cicloadición 3+2 de la azida producida y un derivado alquino adecuado.
Estructuralmente pueden prepararse diversos tetrazoles para su uso en las sustituciones que se han descrito anteriormente o reacciones Mitsonobu haciendo reaccionar compuestos de nitrilo disponibles en el mercado con azida sódica. Los derivados de triazol pueden prepararse por reacción de un compuesto alquino y una trimetilsilil azida. Los compuestos alquino útiles están disponibles en el mercado o pueden prepararse por ejemplo de acuerdo con la reacción de Sonogashira, es decir, reacción de un alquino primario, un haluro de arilo y trimetilamina en presencia de PdCl_{2}(PPh)_{3} y CuI como se describe por ejemplo en A. Elangovan, Y.-H. Wang, T.-I. Ho, Org. Lett., 2003, 5, 1841-1844. El sustituyente heterocíclico también puede modificarse se une al componente básico P2 antes o después del acoplamiento del componente básico P2 a otros componentes básicos.
Estos procedimientos y alternativas adicionales para la preparación de compuestos en los que W es un enlace y R8 es un heterociclo opcionalmente sustituido se describen extensamente en el documento WO2004/072243.
Los compuestos con tamaño y/o posición del anillo alternativos del sustituyente W-R^{8} de los derivados de prolina en los esquemas 1, 2 y 5 también pueden usarse en la preparación de compuestos de acuerdo con la presente invención. Por ejemplo, la alquilación de 3-hidroxiprolina disponible en el mercado proporciona compuestos de la fórmula general (I) en la que k es O y q es 2. En consecuencia, la alquilación de 5-hidroxiprolina, preparada por ejemplo como se describe en Hallberg y col., J. Med. Chem. (1999), 4524-4537, proporciona compuestos de la fórmula general (I) en la que k es 2 y q es 0.
Se describen diversos procedimientos para la preparación de ácidos 2-piperidin carboxílicos hidroxilados en la bibliografía, véase, por ejemplo, Celestini y col., Org. Lett., (2002), 1367-1370, Hoarau y col., Tetrahedron: Asymmetry, (1996), 2585-2594, Zhu y col., Tetrahedron Lett., 41, (2000), 7033-7036. Por ejemplo, los ácidos piridin-carboxílicos correspondientes pueden reducirse para proporcionar ácidos 2-piperidin-carboxílicos hidroxilados. También pueden usarse procedimientos enzimáticos para la preparación de análogos de prolina hidroxilados. Por ejemplo, un sustituyente 3-hidroxi puede introducirse en ácidos heterocíclicos de 4, 5 y 6 miembros disponibles en el mercado mediante el uso de prolina 3-hidroxilasa como se describe en Ozaki y col., Tet. Letters, 40, (1999), 5227-5230.
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Síntesis e introducción de componentes básicos P1
Los aminoácidos usados en la preparación de fragmentos P1 están disponibles en el mercado o en la bibliografía, véase, por ejemplo los documentos WO 00/09543 y WO00/59929 de Boehringer-Ingelheim o US2004/0048802 de BMS.
El Esquema 6 muestra un ejemplo de la preparación de un derivado de sulfonamida a usar como un fragmento P1, y el posterior acoplamiento a un componente básico P2 protegido con Boc.
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Esquema 6
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El grupo sulfonamida puede introducirse en un aminoácido protegido convenientemente (6a) por tratamiento del aminoácido con un agente de acoplamiento, por ejemplo N,N'-carbonildiimidazol (CDI) o similar, en un disolvente tal como THF seguido de reacción con la sulfonamida (6b) deseada en presencia de una base fuerte tal como 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (DBU). Como alternativa, el aminoácido puede tratarse con la sulfonamida (6b) deseada en presencia de una base tal como diisopropil etilamina seguido de tratamiento con un agente de acoplamiento tal como PyBOP® para efectuar la introducción del grupo sulfonamida. La retirada del grupo protector amino mediante procedimientos convencionales y el posterior acoplamiento al componente básico P2, preparado como se ha descrito anteriormente, usando procedimientos convencionales para la formación del enlace amida, tal como con un agente de acoplamiento en forma de hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU) en presencia de una base tal como diisopropilamina en un disolvente tal como dimetilformamida, proporciona el compuesto P2-P1 protegido con Boc (6e). Como alternativa, el grupo sulfonamida puede introducirse en una etapa posterior de la síntesis, por ejemplo en la última etapa. En este caso, un aminoácido con el patrón de protección inverso, es decir que tiene una función amino desprotegida y una función ácida protegida, se acopla a la función ácida del componente básico P2 usando condiciones de acoplamiento de péptidos convencionales por ejemplo, como se ha descrito anteriormente. La retirada del grupo de protección ácido, usando las condiciones apropiadas para el grupo de protección usado, seguido de acoplamiento de la sulfonamida como se ha descrito anteriormente, produce el compuesto 6e.
Los componentes básicos P1 para la preparación de compuestos de acuerdo con fórmula general I en la que A es un éster o una amida pueden prepararse haciendo reaccionar el aminoácido (6a) con la amina o alcohol apropiados respectivamente en condiciones convencionales para la formación de amida o éster. Los compuestos de acuerdo con fórmula general I en la que A es CR^{4}R^{4'} pueden prepararse por acoplamiento del componente básico apropiado P1 al componente básico P2 como se describe en Oscarsson y col. Bioorg Med Chem 2003 11 (13) 2955-2963 y PCT/EP03/10595 presentado el 23.09.2003, cuyo contenido se incorpora como referencia.
Los compuestos que comprenden un resto azapéptido P1, es decir Q es NRu en la fórmula general I pueden prepararse usando un resto aza-amino acilo P1 adecuado en el acoplamiento al fragmento P2. La preparación de restos aza-amino acilo se describe en M. D. Bailey y col. en J. Med. Chem., 47, (2004), 3788-3799, y se muestra un ejemplo en el esquema 6A.
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Esquema 6A
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La incorporación de la cadena lateral unida a N adecuada, Ru, en terc-butilhidrazina disponible en el mercado puede realizarse, por ejemplo, por una reacción de aminación reductora con el aldehido o cetona apropiados como se describe en el esquema 19 a continuación que produce el carbazato N-alquilado (6Aa). La condensación de 6Aa con un cloroformiato deseado en presencia de una base tal como trietilamina o diisopropiletilamina en un disolvente tal como THF proporciona 6Ab. Después, el resto R1' puede retirarse opcionalmente usando las condiciones apropiadas dependiendo del R1' específico, tal como hidrogenación catalítica cuando R1' es bencilo, que proporciona los ácidos correspondientes. La reacción posterior del ácido producido con un derivado de sulfonamida deseado como se ha descrito en el esquema 6 produce componentes básicos protegidos con sulfonamida. Como alternativa, la reacción del carbazato 6Aa con un isocianato, R3-N=C=O, proporciona componentes básicos para la preparación de compuestos de acuerdo con fórmula general I, en la que M es NRu y A es CONHR^{3}.
Los restos P2 y P3 pueden unirse juntos antes o después de la introducción del componente básico P1.
Síntesis de componentes básicos P3 y P3-P4 protegidos
Los componentes básicos R^{16}-G-P3 y R^{16}-G-P4-P3 pueden prepararse generalmente como se represente en el esquema 7.
Esquema 7
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Un aminoácido N-protegido adecuado (7a) puede acoplarse con un grupo de protección amino (R^{16}-NHRy) usando condiciones de acoplamiento de péptidos convencionales tales como agentes de acoplamiento tales como HATU, DCC, HOBt o similares en presencia de una base tal como DIEA o DMAP en un disolvente como diclorometano, cloroformo o dimetilformamida o una mezcla de los mismos y condiciones de formación de éster tal como la proporción de amidas, es decir, G es NHRy (7b). Como alternativa, la reacción del aminoácido (7a) con un compuesto de general fórmula R^{16}-X en el que R^{16} es como se ha definido anteriormente y X es un grupo saliente tal como un haluro, en presencia de una base como carbonato de cesio u óxido de plata (I) proporciona ésteres, es decir G es O (7b). Por otro lado, el aminoácido (7a) se puede acoplar a un segundo aminoácido (7d) adecuadamente O-protegido usando condiciones de acoplamiento de péptidos convencionales como se ha descrito anteriormente, proporcionando (7e). El desplazamiento del grupo éster con un grupo protector adecuado (7b) proporciona un fragmento (7f) útil para la preparación de compuestos de acuerdo con la presente invención en los que m y n son 1.
Cuando G es N-Ry, el P3 protegido o el componente básico P2 se puede preparar en un soporte sólido como se representa en el Esquema 8.
Esquema 8
34
Un aminoácido N-protegido adecuado (8a), por ejemplo Boc protegido, puede inmovilizarse en un soporte sólido, aquí ilustrado por resina PS-TFP de Agronaut, haciendo reaccionar el aminoácido con el soporte sólido deseado en presencia un agente reactivo de acoplamiento tal como N,N'-diisopropilcarbodiimida y una base tal como DMAP en un disolvente tal como diclorometano y dimetilformamida. Después, el aminoácido inmobilizado puede escindirse del soporte con grupo de protección adecuado (8c) dando de este modo fragmentos útiles para la preparación de compuestos de acuerdo con la presente invención en los que m o n es 1. Opcionalmente el grupo protector amino puede retirarse seguido del acoplamiento un aminoácido apropiado usando procedimientos convencionales proporcionando de este modo fragmentos útiles para la preparación de los compuestos de acuerdo con la presente invención en los que m y n son 1.
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Acoplamiento de un grupo de protección o un componente básico protegido a la estructura P2-P1
El componente básico R^{16}-G, R^{16}-G-P3 o R^{16}-G-P4-P3 unido por una funcionalidad urea a la estructura P2-P1, puede introducirse como se describe en el esquema 9, que ilustra la técnica con una variante en la que la estructura P2 es un anillo de 5 miembros.
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Esquema 9
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Puede formarse un grupo clorocarbamato en la amina del anillo de la estructura P2-P1 (9a) mediante la retirada del grupo protector amina por procedimientos convencionales, tal como tratamiento ácido con, por ejemplo, TFA en diclorometano o como cuando se usa el grupo Boc, seguido de la reacción de la amina libre con fosgeno en tolueno en presencia de una base tal como carbonato ácido sódico o trietilamina en un disolvente tal como tetrahidrofurano. La reacción posterior del centro electrófilo formado con el grupo amido de un componente básico R^{16}-NH_{2}, R^{16}-NH-NH_{2}, R^{16}-G-P3 o R^{16}-G-P4-P3 (9c) en un disolvente tal como diclorometano en presencia de una base tal como carbonato ácido sódico proporciona (9d). Los compuestos de fórmula general (I) en los que E es C=S, S(=O) o S(=O)_{2} pueden prepararse de acuerdo con el procedimiento anterior pero con el uso de reactivos tales como tiocarbonil diimidazol, cloruro de tionilo o cloruro de sulfurilo respectivamente en lugar de fosgeno.
Los compuestos que contienen un grupo hidrazina unido a la unidad P2, es decir X es -NRjNRj- en la fórmula general I, o cuando las unidades P3 y P4 están ausentes y G es NRjNRj, pueden prepararse como se representa a continuación. El Esquema 10 muestra la introducción de un derivado de hidrazina en un componente básico de 5 miembros.
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Esquema 10
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La reacción de carbazato de terc-butilo (10a), opcionalmente alquilo sustituida en uno o ambos nitrógenos, con cloroformiato de p-nitrofenilo en presencia de una base como carbonato ácido sódico seguido de la adición del componente básico P2 (10b) proporciona el derivado de urea 10c. El procedimiento de fosgeno descrito en el esquema 9 puede usarse como alternativa para efectuar la unión de los fragmentos 10a y 10b. La retirada opcional del grupo Boc por procedimientos convencionales tales como tratamiento ácido con por ejemplo TFA en un disolvente adecuado tal como diclorometano, proporciona el derivado que contiene hidrazina (10d). Como alternativa, cualquier derivado de hidrazina apropiado, tal como morfolin-1-ilamina, piperidin-1-ilamina o similares pueden unirse a 9Ab en lugar del derivado de carbazato de terc-butilo.
Después, el compuesto obtenido puede extenderse adicionalmente por acoplamiento de un componente básico P3 o P4-P3 a la amina primaria del compuesto 9Ad por ejemplo como se muestra en el esquema 11.
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Esquema 11
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El tratamiento del compuesto \alpha-amino (11a) con nitrito sódico, bromuro potásico y ácido sulfúrico (Yang y col. J. Org. Chem. (2001), 66, 7303-7312) proporciona el compuesto \alpha-bromo (11b) correspondiente que después de la reacción con el derivado descrito anteriormente (10d) proporciona el derivado que contiene hidrazina (11c).
La unión entre los componentes básicos P2 y P3 también puede constituirse de un grupo carbamato y una ruta general a dichos compuestos se representa en el Esquema 12, que ilustra la técnica con una variante en la que P2 es un derivado de prolina.
Esquema 12
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El grupo de protección amino deseado, opcionalmente protegido (12a) se acopla a un ácido hidroxi (10b) usando técnicas de acoplamiento de péptidos convencionales seguido de reacción con el componente básico electrófilo P2 (12d) que se ha descrito anteriormente y la desprotección opcional proporciona la estructura (12e).
Los compuestos que carecen de un grupo carboxi en la unidad P3 pueden prepararse como se ilustra en el Esquema 13, que ilustra la técnica como se aplica a un compuesto de Fórmula I
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Esquema 13
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El derivado de clorocarbamoílo (13a) puede hacerse reaccionar en una reacción de desplazamiento con un derivado de azida (13b), preparado por procedimientos conocidos de la bibliografía, en presencia de una base tal como carbonato ácido sódico para dar (13c). X es como se describe para la fórmula general (I). La reducción de la función azida por ejemplo por trifenil fosfina unida a polímero en un disolvente tal como metanol o cualquier otro procedimiento de reducción adecuado proporciona el intermedio (13d) que posteriormente se puede hacer reaccionar con un ácido en condiciones de acoplamiento de péptidos o con una amina en una reacción de aminación reductiva que proporciona amidas y aminas secundarias respectivamente.
El Esquema 14 muestra una ruta alternativa hacia los compuestos que carecen de grupo carboxi en la unidad P3.
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Esquema 14
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En lugar de usar el derivado de azida (13b) en el esquema 13 puede usarse el derivado hidroxi opcionalmente protegido (14) correspondiente en la reacción de desplazamiento con clorocarbamato (14a) e introduciendo de este modo un alcohol primario. Después, el alcohol (14c), después de una desprotección opcional, puede oxidarse con un agente de oxidación adecuado tal como por ejemplo peryodinano de Dess-Martin para formar el aldehído correspondiente. La reacción del aldehído con una amina deseada en una reacción de aminación reductora que usa un reactivo tal como por ejemplo cianoborohidruro unido a poliestireno en un disolvente tal como THF proporciona derivados de amina (14e).
Como alternativa, puede hacerse reaccionar el alcohol (14c) con un agente de acilación o de alquilación adecuado en las condiciones apropiadas para proporcionar los compuestos de éster y éter respectivamente, es decir, G es O en la fórmula general (I).
La reacción posterior del alcohol formado con un agente de acilación o alquilación adecuado usando las condiciones apropiadas proporciona los compuestos de éster y éter respectivamente, es decir, G es O en la fórmula general (I).
Como alternativa, la unión entre los componentes básicos P2 y P3 puede ser por medio de un grupo guanidina y se ilustra una ruta general a dichos compuestos en el Esquema 15.
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Esquema 15
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El tratamiento del componente básico P2 (15a) con tiocarbonil diimidazol o similar en un disolvente tal como dimetilformamida seguido de condensación con cianoamida sódica en un disolvente tal como etanol produce el intermedio tiolato (15b). La reacción del intermedio (15b) con el componente básico deseado, aquí se muestra en forma de un componente básico P3 protegido (12c) que proporciona el derivado de cianoguanidina (15b). Otros componentes básicos, R^{16}-G o R^{16}-G-P4-P3, pueden acoplarse alternativamente al intermedio (15b). La hidrólisis del grupo ciano por tratamiento de (15d) con ácido clorhídrico proporciona el derivado de guanilurea (15e).
Cuando R7, R7' y A' contienen grupos funcionales, éstos están convenientemente protegidos por procedimientos reconocidos por expertos en la materia, véase, por ejemplo, el método Bodanzky o Greene citados anteriormente.
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Formación de compuestos macrocíclicos
Los compuestos de acuerdo con la presente invención en los que una cadena de alquileno que se extiende a partir del cicloalquilo R^{7}/R^{7'} hasta Rx o R^{11} formando de este modo un macrociclo, pueden prepararse como se describe a continuación. Los componentes básicos adecuados P1, P2 y P3, o los precursores de los mismos, se acoplan juntos usando las estrategias que se han descrito anteriormente, seguido de una reacción de cierre de anillo (macrociclación). El sustituyente W-R^{8} del componente básico P2 puede incorporarse mediante una reacción de Mitsunobu como se ha descrito anteriormente, antes o después de la formación del macrociclo o los componentes básicos deseados pueden acoplarse juntos usando el componente básico P2 convenientemente sustituido. Para estructuras macrocíclicas que se extienden desde el cicloalquilo R^{7}/R^{7'} hasta R^{11}, pueden prepararse aminoácidos P3 que contienen la cadena lateral apropiada como se describe en el documento WO00/59929.
Se muestra una ruta típica a los compuestos macrocíclicos en el Esquema 18 que ilustra la técnica aplicada a un compuesto que tiene una estructura P2 de 5 miembros y un grupo espiro-ciclopropilo en el resto P1, en el que el macrociclo se extiende desde la cadena lateral P3.
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Esquema 16
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El acoplamiento de un derivado de prolina (16a) con el aminoácido protegido con ácido apropiado (16b) usando por ejemplo las condiciones de fosgeno que se han descrito anteriormente proporciona (16c). Después, la formación del macrociclo puede realizarse por medio de una reacción de metátesis de olefina usando un catalizador basado en Ru tal como el indicado por Miller, S.J., Blackwell, H.E.; Grubbs, R.H. J. Am. Chem. Soc. 118, (1996), 9606-9614, Kingsbury, J. S., Harrity, J. P. A., Bonitatebus, P. J., Hoveyda, A. H., J. Am. Chem. Soc. 121, (1999), 791-799 y Huang y col., J. Am. Chem. Soc. 121, (1999), 2674-2678. También se reconocerá que la catálisis que contiene otros metales de transición tales como Mo puede usarse para esta reacción. Opcionalmente el doble enlace se reduce y/o el éster etílico se hidroliza mediante procedimientos convencionales de hidrogenación y/o hidrolización convencional respectivamente bien conocidos en la técnica. Como alternativa el éster metílico puede hidrolizarse selectivamente seguido de acoplamiento de un componente básico R^{16}-G-P4 por las condiciones de acoplamiento de péptidos convencionales. La etapa de macrociclación descrita en el Esquema 16 también puede aplicarse a los análogos carbocíclicos correspondientes descritos anteriormente. Cuando el enlazador contiene un átomo de nitrógeno el cierre del anillo puede realizarse por aminación reductora como se describe en el documento WO00/59929.
Los compuestos macrocíclicos sin el resto ciclopropílico en la parte P1, es decir el anillo macrocíclico se extiende desde la cadena principal peptídica al carbono adyacente R^{7}, pueden prepararse usando los procedimientos descritos en el presente documento. Un ejemplo en el que un derivado de prolina se usa la estructura P2 cíclica se muestra en el Esquema 17.
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Esquema 17
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El acoplamiento de un derivado de alilglicina (17a) adecuado, a la función ácida del componente básico P2 (17b) usando las condiciones de acoplamiento de péptidos convencionales produce el derivado de amida (17c). La retirada del grupo de protección Boc por tratamiento ácido seguido de la formación de un clorocarbamato por tratamiento con fosgeno en presencia de carbonato ácido sódico y la posterior reacción con el aminoácido sustituido con olefina (17d) proporciona el compuesto de urea (17e). Después, se realiza una reacción de metátesis con cierre del anillo usando por ejemplo el catalizador Hoveyda-Grubbs que proporciona el compuesto macrocíclico (17f).
Aunque el Esquema 17 muestra la secuencia sintética usando un componente básico P2 en el que el sustituyente R8 está unido a la estructura, es evidente que podría usarse una estructura P2 no sustituida y el grupo R8 introducido en cualquier etapa adecuada de la síntesis, usando cualquiera de los procedimientos descritos en el presente documento.
Los componentes básicos que se usan en la preparación de compuestos en los que el macrociclo se extiende desde el nitrógeno en la unión los fragmentos P2 y P3, es decir, X es NRx en la fórmula general I, o en la preparación de compuestos en los que los fragmentos P3 y P4 están ausentes, es decir, m y n son 0 y G es NRj en la fórmula general I, pueden prepararse típicamente como se describe en el Esquema 18B.
Esquema 18
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El carbamato 18a, que está disponible en el mercado o se prepara fácilmente por ejemplo por reacción de la alquil amina deseada con dicarbonato de di-terc-butilo con un alcohol \omega-insaturado apropiado en condiciones de Mitsunobu para proporcionar el carbamato alquilado (18b). La sujeción de 18b a condiciones ácidas tales como por ejemplo tratamiento con ácido trifluoroacético en un disolvente tal como diclorometano proporciona la amina libre (18c) que puede unirse a un fragmento P2 usando cualquiera de las estrategias descritas previamente.
Las estructuras macrocíclicas que contienen un grupo hidrazina, es decir, X es NRjNRj o m y n son 0 y G es NRjNRj, en la fórmula general I, pueden prepararse uniendo un derivado de carbazato N-alquilado adecuado al fragmento P2. Los derivados de carbazato alquilados pueden prepararse, por ejemplo, como se describe en el Esquema 19.
Esquema 19
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La oxidación del alcohol apropiado (19a) efectuada por un procedimiento de oxidación adecuado tal como por ejemplo con óxido de N-metil morfolina y perrutenato de tetrapropilamonio en un disolvente tal como diclorometano proporciona el aldehído (19b). La alquilación reductora de carbazato terc-butilo con el aldehído proporciona el componente básico N-alquilado (19c) deseado. Como alternativa, cualquier derivado de hidrazina deseado tal como morfolin-1-ilamina, piperidin-1-ilamina o similares puede usarse en lugar de carbazato terc-butilo en la reacción con el aldehído 19b.
El Esquema 20 ilustra secuencias sintéticas para componentes básicos adecuados para la preparación de compuestos en los que el nitrógeno "exterior" del grupo hidrazina está alquilado, con un cadena de alquilo \omega-insaturado apropiada para la posterior formación de macrociclo o con otro grupo alquilo adecuado.
Esquema 20
46
La reacción de un derivado de hidrazina convenientemente protegido, por ejemplo éster terc-butílico del ácido (1,3-dioxo-1,3-dihidro-isonidol-2-il)-carbámico (20a), que puede prepararse fácilmente por un experto en la materia, con un alcohol deseado, R-OH, en condiciones de Mitsunobu proporciona el compuesto de hidrazina N-alquilado (20b). La retirada del grupo ftalimido se efectúa por tratamiento con hidrazina o un derivado de la misma tal como hidrazina hidrato o acetato de hidrazina que proporciona el carbazato (20c). Después, la amina primaria producida puede acoplarse a cualquier fragmento P2 deseado usando cualquiera de los procedimientos que se ha descrito anteriormente para dar el derivado de urea (20d) o como alternativa puede alquilarse adicionalmente usando por ejemplo el procedimiento de aminación reductora descrito en el esquema 19 seguido de acoplamiento a un fragmento P2 como se ha descrito previamente para dar 20e.
El esquema 21 ilustra el acoplamiento de una hidrazina que contiene un componente básico P3 a una estructura de ciclopentano seguido de macrociclación.
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Esquema 21
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El acoplamiento del derivado de carbazato (21b) al componente básico P2-P1 (21 a) usando las condiciones de acoplamiento de péptidos convencionales proporciona el intermedio (21c). El cierre del anillo de (21c) por una reacción de metátesis de olefina como se describe en el esquema 18 proporciona el compuesto macrocíclico (21d).
El término "grupo N-protector" o "N-protegido", como se usa en el presente documento, se refiere a aquellos grupos que pretenden proteger los N-extremos de un aminoácido o péptido o proteger un grupo amino frente a reacciones indeseables durante los procedimientos sintéticos. Los grupos N-protectores usados comúnmente se describen en Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis" (John Wiley & Sons, Nueva York, 1981), que se incorpora en el presente documento como referencia. Los grupos N-protectores incluyen grupos acilo tales como formilo, acetilo, propionilo, pivaloílo, t-butilacetilo, 2-cloroacetilo, 2-bromoacetilo, trifluoracetilo, tricloro-acetilo, ftalilo, o-nitrofenoxiacetilo, \alpha-clorobutirilo, benzoílo, 4-clorobenzoílo, 4-bromobenzoílo, 4-nitrobenzoílo, y similares; grupos sulfonilo tales como bencenosulfonilo, p-toluenosulfonilo, y similares, grupos que forman carbamato tales como benciloxicarbonilo, p-clorobenciloxicarbonilo, p-metoxibenciloxicarbonilo, p-nitrobenciloxicarbonilo, 2-nitrobenciloxicarbonilo, p-bromobenciloxicarbonilo, 3,4-dimetoxibenciloxicarbonilo, 4-metoxibenciloxicarbonilo, 2-nitro-4,5-dimetoxibenciloxicarbonilo, 3,4,5-trimetoxibenciloxicarbonilo, 1-(p-bifenilil)-1-metiletoxicarbonilo, \alpha,\alpha-dimetil-3,5-dimetoxibenciloxicarbonilo, benzhidriloxicarbonilo, t-butoxicarbonilo, diisopropilmetoxicarbonilo, isopropiloxicarbonilo, etoxicarbonilo, metoxicarbonilo, aliloxicarbonilo, 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, fenoxicarbonilo, 4-nitrofenoxicarbonilo, fluorenil-9-metoxicarbonilo, ciclopentiloxicarbonilo, adamantiloxicarbonilo, ciclohexiloxicarbonilo, feniltiocarbonilo, y similares; grupos alquilo tales como bencilo, trifenilmetilo, benciloximetilo y similares; y grupos sililo tales como trimetilsililo y similares. Los grupos N-protectores favoritos incluyen formilo, acetilo, benzoílo, pivaloílo, t-butilacetilo, fenilsulfonilo, bencilo, t-butoxicarbonilo (BOC) y benciloxicarbonilo (Cbz).
El grupo protector de hidroxi, como se usa en el presente documento, se refiere a un sustituyente que protege los grupos hidroxilo frente a reacciones indeseables durante los procedimientos de síntesis tales como los grupos O-protectores descritos en Greene, "Protective Groups In Organic Synthesis," (John Wiley & Sons, Nueva York (1981)). Los grupos protectores hidroxi comprenden éteres metílicos sustituidos, por ejemplo, metoximetilo, benciloximetilo, 2-metoxietoximetilo, 2-(trimetilsilil)etoximetilo, t-butilo otros éteres de alquilo inferior, tales como isopropilo, etilo y especialmente metilo, bencilo y trifenilmetilo; éteres de tetrahidropiranilo; éteres etílicos sustituidos, por ejemplo, 2,2,2-tricloroetilo; éteres de sililo, por ejemplo, trimetilsililo, t-butildimetilsililo y t-butildifenilsililo; y ésteres preparados por reacción del grupo hidroxilo con un ácido carboxílico, por ejemplo, acetato, propionato, benzoato y similares.
En el tratamiento de afecciones causadas por flavivirus, tal como el VHC, los compuestos de fórmula I se administran típicamente en una cantidad para alcanzar un nivel en plasma de aproximadamente 100 a 5000 nM, tal como de 300 a 2000 nM. Esto corresponde a una tasa de dosificación, dependiendo de la biodisponibilidad de la formulación, del orden de 0,01 a 10 mg/kg/día, preferiblemente de 0,1 a 2 mg/kg/día. Una tasa de dosificación típica para un adulto normal será de aproximadamente 0,05 a 5 g por día, preferiblemente de 0,1 a 2 g tal como de 500-750 mg, en una a cuatro unidades de dosis por día. Al igual que con todos los fármacos, las tasas de dosificación variarán con el tamaño y el estado metabólico del paciente, así como con la gravedad de la infección y puede ser necesario ajustar las medicaciones concomitantes.
Como es bueno prescribir la práctica con terapia antiviral, los compuestos de fórmula I se coadministran típicamente con otras terapias contra el VHC para evitar la generación de mutantes de escape a fármacos. Los ejemplos de dichas terapias antivirales adicionales contra el VHC incluyen ribavirina, interferones, incluyendo interferones pegilados. Además una serie de análogos de nucleósidos e inhibidores de proteasas se encuentran en desarrollo clínico o preclínico y serán susceptibles de co-administración con los compuestos de la invención.
Por consiguiente un aspecto adicional de la invención proporciona una composición que comprende un compuesto de fórmula I y al menos un antiviral adicional contra el VHC en una unidad de dosificación común, tal como cualquiera de las formas farmacéuticas descritas a continuación, pero especialmente un comprimido administrado por vía oral, o una cápsula o una suspensión o solución líquida para uso oral o inyectable. Otro aspecto de la invención proporciona un procedimiento para el tratamiento o la profilaxis de la infección por flavivirus, tal como el VHC, que comprende la administración secuencial o simultánea de un compuesto de fórmula I y al menos un antiviral adicional contra el VHC. Un aspecto relacionado con la invención proporciona al paciente un envase que comprende una primera composición farmacéutica, preferentemente en forma dosificación unitaria, del compuesto de fórmula I y una segunda composición farmacéutica, típicamente también en forma de dosificación unitaria y generalmente en un recipiente distinto dentro del envase del paciente, de un segundo antiviral contra el VHC. También se proporcionará convenientemente el envase del paciente con las instrucciones impresas en el embalaje o en un envase en el interior, o en un prospecto, para la administración simultánea o secuencial de las composiciones farmacéuticas respectivas.
Muchos pacientes infectados con el VHC se co-infectan, o son propensos a la superinfección con otras enfermedades infecciosas. Por consiguiente, un aspecto adicional de la invención proporciona terapias de combinación que comprenden el compuesto de la invención co-formulado en la misma unidad de dosificación o co-envasado con al menos un compuesto farmacéutico anti-infeccioso adicional. El compuesto de la invención y el al menos un compuesto farmacéutico anti-infeccioso se administran de forma simultánea o secuencial, típicamente en dosis correspondientes a la dosis de monoterapia para el agente en cuestión. Sin embargo, determinados compuestos anti-infecciosos pueden inducir una respuesta sinérgica, permitiendo que uno o los dos ingredientes activos se administren a una dosis más baja que la de la monoterapia correspondiente. Por ejemplo, en fármacos propensos a metabolismo rápido por CYP3A4, la co-dosificación con ritonavir, inhibidor de la proteasa del VIH puede permitir que se administren regímenes de dosificación más bajos.
Las coinfecciones o superinfecciones por el VHC incluyen el virus de la hepatitis B o el VIH. Por consiguiente, el compuesto de la invención se coadministra ventajosamente (tanto en la misma unidad de dosificación, co-envasado o en una unidad de dosificación prescrita por separado) con al menos un antiviral contra el VIH y/o al menos un antiviral contra el VHB.
Los representantes antivirales del VIH incluyen los INTR (inhibidores de nucleósidos de la transcriptasa inversa) como alovudina (FLT), zudovudina (AZT, AZT), estavudina (d4T, Zerit), zalcitabina (ddC), didanosina (ddI, Videx), abacavir (ABC, Ziagen), lamivudina (3TC, Epivir), emtricitabina (FTC, Emtriva), racevir (racémica FTC), adefovir (ADV), entacavir (BMS 200475), alovudina (FLT), tenofovir disoproxil fumarato (TNF, Viread), amdoxavir (DAPD), D-D4FC (DPC-817), -dOTC (Shire SPD754), Elvucitabina (Achillion ACH-126443), BCH 10.681 (Shire) SPD-756, racivir, D-FDOC, GS7340, INK-20 (tioéter fosfolípidos AZT, Kucera), 2'3'-didesoxi-3'-fluoroguanosina (FLG) y su profármacos tales como MIV-210, reverset (RVT, D-D4FC, Pharmasset DPC-817).
Los representantes de los INNTI (inhibidores no nucleósidos de la transcriptasa inversa) incluyen delavirdina (Rescriptor), efavirenz (DMP-266, Sustiva), nevirapina (Birg-587, Viramune), (+) calanolida A y B (Advanced Life Sciences), capravirina (AG1549f S-1153; Pfizer), GW-695.634 (GW-8248, GSK), MIV-150 (Medivir), MV026048 (R-1495; Medivir AB/Roche), NV-05 2 2 (Idenix Pharm) 278474 R-(Johnson y Johnson), RS-1588 (Pharm Idenix.), TMC-120/125 (Johnson y Johnson), TMC-125 (R-165335, Johnson y Johnson), UC-781 (Biosyn Inc.) e YM215389 (Yamanoushi).
Los representantes de inhibidores de la proteasa del VIH incluyen PA-457 (Panacos), la KPC-2 (Kucera Pharm.), HGTV 5-43 (Enzo Biochem), amprenavir (VX-478, Agenerase), atazanavir (Reyataz), sulfato de indinavir (MK-639, Crixivan), Lexiva (fosamprenavir cálcico, GW-433908 o 908, el VX-175), ritonavir (Norvir), lopinavir + ritonavir (ABT-378, Kaletra), tipranavir, mesilato de nelfinavir (Viracept), saquinavir (Invirase, Fortovase), AG1776 (JE-2147, KNI-764; Holdings, Nippon Mining), AG-1859 (Pfizer), DPC-681/684 (BMS), GS224338; Gilead Sciences), KNI-272 (Nippon Mining Holdings), Nar-DG-35 (Narhex), P (PL)-100 (P-1946; Procyon Biopharma), P-1946 (Procyon Biopharma), R-944 (Hoffmann-LaRoche), RO-0334649 (Hoffmann-La Roche), TMC-114 (Johnson & Johnson), VX-385 (GW640385; GSK/Vertex), VX-478 (Vertex/GSK).
Otros antivirales contra el VIH incluyen inhibidores de entrada, incluyendo inhibidores de fusión, inhibidores del receptor CD4, inhibidores del co-receptor CCR5 e inhibidores del co-receptor CXCR4, o una sal o profármaco farmacéuticamente aceptable de los mismos. Ejemplos de inhibidores de entrada son AMD-070 (AMD11070; AnorMed), BlockAide/CR (ADVENTRX Pharm.), BMS 806 (BMS-378806, BMS), Enfurvirtide (T-20, R698, Fuzeon), KRH1636 (Kureha Farmacéutica), ONO-4128 (GW-873140, AK-602, E-913; Farmacéutica ONO), Pro-140 (Pharm Progenics), PRO542 (Pharm Progenics.), SCH-D (SCH-417690, Schering-Plough), T-1249 (R724; Roche/Trimeris), TAK-220 (Chem Takeda. Ind.), TNX-355 (Tanox) y UK-427.857 (Pfizer). Ejemplos de inhibidores de la integrasa son L-870.810 (Merck y Co.), c-2507 (Merck & Co.) y S (RSC)-1838 (shionogi/GSK).
Los ejemplos de antivirales incluyen VHB adefovir dipivoxil (Hepsera), y, especialmente, lamivudina y 2'3'-didesoxi-fluoroguanosina 3'-(FLG) y sus profármacos, tales como MIV-210, el profármaco 5'-O-valil-L-lactil de FLG. Estos últimos antivirales VHB son particularmente convenientes, ya que también son activos contra el VIH.
Aunque es posible que el agente activo se administre solo, es preferible que se presente como parte de una formulación farmacéutica. Tal formulación comprenderá los agentes activos definidos anteriormente junto con uno o más vehículos o excipientes aceptables y opcionalmente otros ingredientes terapéuticos. El vehículo (o vehículos) debe ser aceptable en el sentido de ser compatible con los demás ingredientes de la formulación y no perjudicial para el receptor.
Las formulaciones incluyen las adecuadas para la administración por vía rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal y sublingual), vaginal o parenteral (incluyendo por vía subcutánea, intramuscular, intravenosa e intradérmica), aunque es preferible la formulación en una formulación administrada por vía oral. Las formulaciones pueden presentarse convenientemente en una forma farmacéutica unitaria, por ejemplo, comprimidos y cápsulas de liberación sostenida, y pueden prepararse por cualquier procedimiento bien conocido en la técnica farmacéutica.
Dichos procedimientos incluyen la etapa de poner en contacto el agente activo definido anteriormente con el vehículo. En general, las formulaciones se preparan poniendo en contacto uniforme e íntimamente el agente activo con los vehículos líquidos o vehículos sólidos finamente divididos o ambos, y luego si es necesario dar forma al producto. La invención se amplia a los procedimientos para la preparación de una composición farmacéutica que comprende poner en contacto o en asociación un compuesto de Fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable con un portador o vehículo farmacéuticamente aceptable. Si la fabricación de formulaciones farmacéuticas implica la mezcla íntima de excipientes farmacéuticos y el ingrediente activo está en forma de sal, entonces a menudo se prefiere usar excipientes que no son de naturaleza básica, es decir, ácidos o neutros. Las formulaciones para la administración oral en la presente invención pueden presentarse como unidades separadas, tal como cápsulas, obleas o comprimidos conteniendo cada uno una cantidad predeterminada del agente activo; como un polvo o gránulos; como una solución o una suspensión del agente activo en un líquido acuoso o un líquido no acuoso; o como una emulsión líquida de aceite en agua o una emulsión liquida de agua en aceite y como un bolo, etc.
En cuanto a las composiciones para la administración oral (por ejemplo, comprimidos y cápsulas), la expresión transportador adecuado incluye vehículos tales como excipientes comunes por ejemplo, aglutinantes, por ejemplo, jarabe, acacia, gelatina, sorbitol, tragacanto, polivinilpirrolidona (povidona), metilcelulosa, etilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, hidroxipropilmetilcelulosa, sacarosa y almidón; cargas y transportadores, por ejemplo almidón de maíz, gelatina, lactosa, sacarosa, celulosa microcristalina, caolín, manitol, fosfato dicálcico, cloruro de sodio y ácido algínico y lubricantes tales como estearato de magnesio, estearato de sodio y otros estearatos metálicos, ácido esteárico, estearato de glicerol, líquido de silicona, talco, ceras, aceites y sílice coloidal. También pueden usarse agentes aromatizantes tales como menta, aceite de gaulteria, aroma de cerezas o similar. Puede ser deseable añadir un agente colorante para identificar fácilmente la forma de dosificación. Los comprimidos también pueden revestirse por procedimientos bien conocidos en la técnica.
Un comprimido puede fabricarse por compresión o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes auxiliares. Los comprimidos fabricados por compresión pueden prepararse comprimiendo en una máquina adecuada el agente activo en forma de fluido tal como polvos o gránulos, opcionalmente mezclados con un aglutinante, lubricante, diluyente inerte, conservante, tensioactivo o agente de dispersión. Los comprimidos moldeados pueden fabricarse moldeando en una máquina adecuada una mezcla del compuesto en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte. Los comprimidos pueden, opcionalmente, revestirse o ranurarse y pueden formularse para proporcionar una liberación lenta o controlada del agente activo.
Otras formulaciones adecuadas para la administración oral incluyen pastillas que comprenden el agente activo en una base aromatizada, normalmente sacarosa y acacia o tragacanto; las pastillas comprenden el agente activo en una base inerte tal como gelatina y glicerina, o sacarosa y acacia, y enjuagues bucales que comprenden el agente activo en un transportador líquido adecuado.
Los compuestos de fórmula I pueden formar sales que forman un aspecto adicional de la invención. Las sales farmacéuticamente aceptables apropiadas de los compuestos de fórmula I incluyen sales de ácidos orgánicos, especialmente ácidos carboxílicos, incluyendo pero sin limitación acetato, trifluoroacetato, lactato, gluconato, citrato, tartrato, maleato, malato, pantotenato, isetionato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, butirato, digluconato, ciclopentanato, glucoheptanato, glicerofosfato, oxalato, heptanoato, hexanoato, fumarato, nicotinato, palmoato, pectinato, 3-fenilpropionato, picrato, pivalato, proprionato, tartrato, lactobionato, pivolato, canforato, undecanoato y succinato, ácido sulfónicos orgánicos tales como metanosulfonato, etanosulfonato, sulfonato de 2-hidroxietano, canforsulfonato, 2-naftalenosulfonato, bencenosulfonato, p-clorobencenosulfonato y p-toluenosulfonato; y ácidos inorgánicos, tales como clorhídrico, bromhídrico, yodhidrato, sulfato, bisulfato, hemisulfato, tiocianato, persulfato, ácidos fosfóricos y sulfónicos. La invención incluye adicionalmente sales de los compuestos de fórmula I que pueden o no ser farmacéuticamente aceptables, pero que son útiles como intermedios sintéticos, desplazándose o reemplazándose el resto de sal según sea necesario.
Los compuestos de la invención tienen diversos centros estéricos y la invención incluye racematos y enantiómeros en cada uno de estos centros estéricos.
Típicamente, las estereoquímicas de los grupos que corresponden con las cadenas laterales P3 y P4 (es decir, R^{15} y/o R^{11}) corresponderá a una configuración L-aminoácido, aunque la invención también se extiende a D-isómeros en uno o ambos de estos centros. Es notable que la configuración L es activa a pesar de que la naturaleza del resto E significa que P3 y P4 están típicamente trasladados un átomo en relación con un polipéptido convencional y el hecho de que la inversión de un resto peptídico, como se prevé para P3 y P4 después aparece en la cadena lateral del aminoácido en el lado opuesto en comparación con un sustrato peptídico convencional.
La estereoquímica del componente estructural del grupo P2 cíclico (es decir, dando la vuelta al carbonilo del enlace amida P1 y extendiendo el carbonilo o E de P3 típicamente corresponderá a L-prolina. La estereoquímica del átomo del anillo P2 al que W está unido es típicamente como se muestra:
48
En compuestos de la invención en los que R^{7} y R^{7'} juntos definen un grupo espiroalquilo, tal como un espiro-cicloalquilo típicamente comprenderán un sustituyente R^{7'a} en el anillo espiro-ciclopropilo que está orientado de syn a A:
49
o de anti a A:
50
Convenientemente, el carbono espiro de dicho anillo espiro-ciclopropilo tiene la configuración R:
51
Convenientemente, un sustituyente R^{7'a} en un anillo espiro-ciclopropilo adyacente a A está en una orientación syn en la siguiente configuración absoluta:
52
Particularmente, las variantes preferidas tienen R^{7'a} incluyen etilo, por lo tanto los átomos de carbono asimétricos en la posición 1 y 2 tienen la configuración R, R. Los R^{7'a} alternativos preferidos incluyen vinilo, por lo tanto los átomos de carbono asimétricos en la posición 1 y 2 tienen la configuración R, S.
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Cuando el compuesto de la invención es un macrociclo que comprenden un grupo J, J es preferentemente un diastereómero representado por las estructuras parciales (i) o (ii):
53
especialmente cuando J es syn a A.
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Descripción detallada de las realizaciones
Ahora se describirán diversas realizaciones de la invención únicamente a modo de ilustración con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes.
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Ejemplo 1
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54 
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7-Metoxi-2-fenil-quinolin-4-ol (1)
A un matraz de fondo redondo en agitación con tolueno (100 ml) se le añadieron acetato de etilbenzoílo (18,7 g, 97 mmol) y m-anisidina (12 g, 97 mmol). Se añadió HCl 4 M en dioxano (0,5 ml) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 6 h (140ºC). La mezcla se co-evaporó con tolueno. A la mezcla en bruto se le añadió éter difenílico (50 ml) y la mezcla se calentó a 280ºC durante 2 h. Cuando la cantidad teórica de etanol (6 ml) se recogió en un purgador Dean Stark el calentamiento se detuvo y la mezcla se enfrió a ta. La mezcla en bruto se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (100 ml) y se agitó durante 30 min. El precipitado formado se retiró por filtración y se secó, lo que dio el producto 1 (4,12 g, 16,4 mmol, al 17%): polvo de color amarillo pálido.
^{1}H (300 MHz, DMSO-D_{6}): \delta 3,8 (s, 3H), 6,24 (s, 1H), 6,88-6,96 (dd, 1H, J = 9,07 Hz, J = 2,47 Hz), 7,19 (d, 1H, J = 2,19 Hz), 7,56 (t, 3H, J = 2,19 Hz), 7,8 (dd, 2H, J = 7,14 Hz, J = 2,19 Hz), 8,0 (d, 1H, J = 9,06 Hz); ^{13}C (75,5 MHz, DMSO-D_{6}): \delta 55,3, 99,6, 106,9, 1 13,1, 119,1, 126,4, 127,5, 128,8, 130,2, 134,1, 142,2, 149,4, 161,8, 176,4.
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Ejemplo 2
55
Boc-L-terc-leucina-OH (2)
Se añadió gota a gota trietilamina (890 \mul, 6,40 mmol) a una solución en agitación de L-terc leucina (300 mg, 2,29 mmol) y dicarbonato de di-terc-butilo (599 mg, 2,74 mmol) en 1:1 de dioxano/agua (8 ml) y la solución se agitó durante una noche. La mezcla se extrajo con éter de petróleo (2 x) y la fase acuosa se enfrió a 0ºC y se acidificó cuidadosamente a pH 3 por adición lenta de NaHSO_{4}.H_{2}O 4 M. La fase de agua acidificada se extrajo con EtOAc (3 x) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 x), después se secaron, se filtraron y se concentraron, dando el compuesto del título (522 mg, al 99%) en forma de un polvo incoloro. No se necesitó purificación adicional.
RMN ^{1}H (300 MHz, CD_{3}OD) \delta 0,99 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 3,96 (s, 1H); ^{13}C RMN (75,5 MHz, CD_{3}OD) \delta 27,1, 28,7, 34,9, 68,0, 80,5, 157,8, 174,7.
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Ejemplo 3
56
Éster terc-butílico del ácido ((S)-ciclohexil-metilcarbamoil-metil)-carbámico (3)
Se acopló Boc-Chg-OH (387 mg, 1,50 mmol) a clorhidrato de metilamina (111 mg, 1,65 mmol) usando las mismas condiciones de acoplamiento HATU como en la síntesis del compuesto. El producto en bruto se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera y se concentró. La purificación por cromatografía en columna ultrarrápida (EtOAc) proporcionó el compuesto del título (307 mg, al 76%) en forma de un sólido incoloro.
RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 0,91-1,13 (m, 2H), 1,14-1,31 (m, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,61-1,80 (m, 6H), 2,80 (d, J = 4,7 Hz, 3H), 3,91 (dd, J = 7,1, 9,1 Hz, 1H), 5,23 (a, 1H), 6,52 (s a, 1H); ^{13}C RMN (75,5 MHz, CDCl_{3}) \delta 25,9, 26,0, 26,1, 28,3, 28,5, 29,6, 40,5, 59,5, 79,7, 155,9, 172,4.
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Ejemplo 4
57
Éster terc-butílico del ácido {(S)-1-[((S)-ciclohexil-metilcarbamoil-metil)-carbamoil]-2,2-dimetil-propil}-carbámico (4)
A una solución del compuesto 3 (98 mg, 0,362 mmol) en cloruro de metileno (3 ml) se le añadieron trietilsilano (115 ml, 0,742 mmol) y TFA (3 ml). La mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente y después se evaporó y se coevaporó con tolueno.
La amina desprotegida se disolvió en DMF (5 ml) y se acopló al compuesto 2 (84 mg, 0,363 mmol) usando las condiciones de acoplamiento HATU como en la síntesis de 7. El producto en bruto se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó, se filtró y se concentró. La purificación por cromatografía en columna ultrarrápida (1:1 de tolueno/EtOAc) proporcionó el compuesto del título (128 mg, al 92%) en forma de un sólido incoloro.
RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 0,99 (s, 9H), 1,0-1,30 (m, 5H), 1,44 (s, 9H), 1,58-1,77 (m, 4H), 1,78-1,89 (m, 2H), 2,79 (d, J = 4,7 Hz, 3H), 4,11 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,33 (t ap., J = 8,5 Hz, 1H), 5,65 (a, 1H), 7,25 (a, 1H), 7,39 (a, 1H); ^{13}C RMN (75,5 MHz, CDCl_{3}) \delta 25,9, 25,9, 26,0, 26,2, 26,8, 28,4, 29,0, 29,7, 34,5, 39,7, 58,4, 62,4, 79,4, 156,0, 171,4, 171,8.
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Ejemplo 5
58
Hept-6-enal (5)
A una solución de hept-6-en-1-ol (1 ml, 7,44 mmol) y N-óxido de N-metilmorfolina (1,308 g, 11,17 mmol) en DCM (17 ml) se le añadieron tamices moleculares molidos (3,5 g, 4 \ring{A}). La mezcla se agitó durante 10 min a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno antes de añadir perrutenato de tetrapropilamonio (TPAP) (131 mg, 0,37 mmol). Después de agitar durante 2,5 h más, la solución se filtró a través de celite. Después, el disolvente se evaporó cuidadosamente y el líquido restante se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (DCM), dando el aldehído volátil 5 (620 mg, al 74%) en forma de un aceite.
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Ejemplo 6
59
Éster terc-butílico del ácido N'-hept-6-en-(E)-ilideno-hidrazinacarboxílico (6)
A una solución de 5 (68 mg, 0,610 mmol) y carbazato de terc-butilo (81 mg, 0,613 mmol) en MeOH (5 ml) se le añadieron tamices moleculares molidos (115 mg, 3 \ring{A}). La mezcla se agitó durante 3 h después de que se filtrara a través de celite y se evaporara. El residuo se disolvió en THF seco (3 ml) y AcOH (3 ml). Se añadió NaBH_{3}CN (95 mg, 1,51 mmol) y la solución se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con una solución saturada de NaHCO_{3} (6 ml) y EtOAc (6 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera, NaHCO_{3} saturado y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se evaporó. El aducto de cianoborano se hidrolizó por tratamiento con MeOH (3 ml) y NaOH 2 M (1,9 ml). La mezcla se agitó durante 2 h y el MeOH se evaporó. Se añadieron H_{2}O (5 ml) y DCM (5 ml) y la fase de agua se extrajo tres veces con DCM. Las fases orgánicas combinadas se secaron y se evaporaron. La purificación por cromatografía en columna ultrarrápida (9:1 de tolueno/acetato de etilo con trietilamina al 1% y 6:1 de tolueno/acetato de etilo con trietilamina al 1%) proporcionó el compuesto del título (85 mg, al 61%) en forma de un aceite.
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Ejemplo 7
60
Éster terc-butílico del ácido ((S)-1-ciclopentilcarbamoil-2,2-dimetil-propil)-carbámico (7)
A una solución fría del producto 2 (133 mg, 0,575 mmol), ciclopentilamina (64 \mul, 0,648 mmol) y DIEA (301 \mul, 1,73 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió el reactivo de acoplamiento HATU (240 mg, 0,631 mmol). La mezcla se agitó durante media hora y durante dos horas más a temperatura ambiente. El disolvente se retiró calentando el matraz de reacción en un baño de agua a presión disminuida y el residuo se disolvió en acetato de etilo, después de lo cual la fase orgánica se lavó tres veces con salmuera, se secó, se filtró y se evaporó. La purificación por cromatografía en columna ultrarrápida (4:1 de tolueno/acetato de etilo) proporcionó el compuesto del título (140 mg, al 82%) en forma de cristales incoloros.
RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 0,95 (s, 9H), 1,28-1,48 (m, solapado, 2H), 1,40 (s, 9H), 1,49-1,71 (m, 4H), 1,86-2,01 (m, 2H), 3,76 (a, 1H), 4,09-4,23 (m, 1H), 5,32 (a, 1H), 5,91 (a, 1H); ^{13}C-N MR (75,5 MHz, CDCl_{3}): \delta 23,6, 23,7, 26,5, 28,3, 32,6, 33,1, 34,5, 51,0, 62,2, 79,4, 155,9, 170,3.
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Ejemplo 8
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61 
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Éster metílico del ácido (S)-terc-butoxicarbonilamino-ciclohexil-acético (8)
A una solución de Boc-Chg-OH (53 mg, 0,206 mmol) en acetona (3 ml) se le añadieron yoduro de metilo (195 \mul, 3,1 mmol) y óxido de plata (I) (53 mg, 0,229 mmol). La mezcla se dejó en agitación durante una noche en un matraz de reacción que se cubrió con papel de aluminio. A partir de entonces la solución se filtró a través de celite y se evaporó. La purificación por cromatografía en columna ultrarrápida (15:1 de tolueno/acetato de etilo) proporcionó el éster metílico 8 (56 mg, al 100%) en forma de un aceite incoloro. RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 1,00-1,34 (m, 5H), 1,44 (s, 9H), 1,54-1,82 (m, 6H), 3,73 (s, 3H), 4,20 (dd, J = 2,8, 5,0 Hz, 1H), 5,05 (s a, 1H); ^{13}C RMN (75,5 MHz, CDCl_{3}): \delta 26,0, 28,2, 28,3, 29,5, 41,1, 52,0, 58,3, 79,7, 155,6, 172,9.
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Ejemplo 9
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62 
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Éster metílico del ácido (S)-((S)-2-Benciloxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-ciclohexil-acético (9)
El compuesto 8 (93 mg, 0,343 mmol) se desprotegió y se acopló a Z-Val-OH (95 mg, 0,378 mmol) de acuerdo con el procedimiento para la preparación de 39. La cromatografía en columna ultrarrápida (4:1 de tolueno/acetato de etilo) dio el compuesto del título (131 mg, al 94%) en forma de un sólido incoloro.
RMN ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 0,92-1,30 (m, 11H), 1,54-1,88 (m, 6H), 2,02-2,18 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 4,05-4,18 (m, 1H), 4,52 (dd, J = 3,0, 5,5 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 5,49 (s a, 1H), 6,52 (s a, 1H), 7,34 (s, 5H); ^{13}C RMN (75,5 MHz, CDCl_{3}): \delta 17,8, 19,0, 25,8, 28,2, 29,3, 31,2, 40,5, 51,9, 56,8, 60,0, 66,8, 127,7, 127,9, 128,1, 128,3, 136,2, 156,3, 171,3, 172,2.
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Ejemplo 10
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63
N-Boc-4R-(2-fenil-7-metoxiquinolina-4-oxo)prolina (10)
A una solución en agitación de N-Boc-trans-4-hidroxi-L-prolina (3,9 g, 16,9 mmol) en DMSO (90 ml) se le añadió terc-butóxido potásico (4,5 g, 40,1 mmol). Después de 1 h. se añadió 4-cloro-2-fenil-7-metoxi-quinolina (4,5 g, 16,7 mmol) y se agitó a TA durante 12 h. La mezcla se diluyó con agua (180 ml), se lavó con acetato de etilo (1 x 30 ml) y se neutralizó con HCl 1 N. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó, dando (4,65 g, 10 mmol) del producto. Pureza al >95% por HPLC. M+H^{+} 464,2.
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Ejemplo 11
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64
Éster terc-butílico del ácido 2-(1-etoxicarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolina-4-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico (11)
A una solución de éster etílico del ácido 1-amino-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (41 mg, 0,26 mmol), 10 (11 mg, 0,22 mmol), HATU (204 mg, 0,54 mmol) en DMF (4 ml) se le añadió diisopropietilamina (187 \mul, 1,08 mmol). Después de agitar a TA durante 1 h, se añadió diclorometano (4 ml). La solución se lavó con NaHCO_{3} acuoso (sat.) y con dos porciones de agua. La fase orgánica se secó y se concentró. El producto era lo suficientemente puro (al >95% por HPLC) para usarse en la siguiente etapa. M+H^{+} 602,2.
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Ejemplo 12
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65
Éster etílico del ácido 1-{[4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (12)
El compuesto 11 se mantuvo en 1:2 de TFA-DCM (3 ml) a TA durante 60 min. Se añadió tolueno (3 ml). La muestra se co-evaporó a sequedad. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 502,4.
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Ejemplo 13
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66
Éster etílico del ácido 1-{[1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (13)
A una solución del compuesto 12 (0,13 mmol) en THF (2 ml) se le añadieron un gran exceso de NaHCO_{3} (s) y una solución de fosgeno en tolueno (1,6 M, 600 \mul). Después de 10 min de agitación, la suspensión se filtró y se concentró a sequedad. El sólido se disolvió de nuevo en diclorometano y se añadió un gran exceso de NaHCO_{3} (s) y 2-amino-N-(2-hidroxi-indan-1-il)-3,3-dimetil-butiramida (0,65 mmol). La suspensión se agitó durante 24-40 h a TA. La suspensión se filtró, se concentró y se sometió a cromatografía en columna sobre sílice (gradiente de elución de DCM al 100% a 2:98 de Me-OH/DCM), dando el compuesto del título (89,6 mg, 0,11 mmol). Pureza por HPLC al>95%. M+H^{+} 790,3.
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Ejemplo 14
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67 
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Ácido 1-[1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propil]-4-(6-metoxi-3-fenil-naftalen-1-iloxi)-pirrolidin-2-il]-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (14)
A una solución de 13 (76,7 mg, 0,097 mmol) en 2:3 de THF-MeOH (2 ml) se le añadieron 5 equiv. de LiOH 1 M. La solución se mantuvo a 60ºC durante 60 min. Después de enfriar a TA, se añadieron 15-30 equiv. de HOAc seguido de tolueno (2 ml) y después se concentró a sequedad. El residuo se recogió en DCM y se lavó con agua. La fase orgánica se secó y se concentró, dando el compuesto del título (72 mg, 0,094 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 762,2.
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Ejemplo 15
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68 
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N-(2-Hidroxi-indan-1-il)-2-[4-(6-metoxi-3-fenil-naftalen-1-iloxi)-2-(1-fenilmetanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropil)-pirrolidin-1-il]-3,3-dimetil-butiramida (15)
A una solución del producto 14 (25 mg, 0,033 mmol) en cloroformo (1 ml) se le añadió bencenosulfonamida (10,5 mg, 0,066 mmol) seguido de diisopropiletilamina (34 \mul, 0,197 mmol). La solución se agitó a TA durante 10 min y después a -20ºC durante 30 min. Después, se añadió PyBOP (76 mg, 0,13 mmol) en forma de un sólido. La solución se mantuvo a -20ºC durante 48 horas. Después, la solución se vertió en NaHCO_{3} acuoso (sat.) y se lavó con agua. La fase orgánica se secó, se concentró y se sometió a purificación por HPLC, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco.
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Ejemplo 16
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69
Resina unida a ácido 2-terc-butoxicarbonilamino-3,3-dimetilbutírico (16)
A la resina Argonaut PS-TFP (1,38 mmol/g, 10 g) y ácido 2-terc-butoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butírico (4,5 g, 20,7 mmol) se le añadieron diclorometano (40 ml) y DMF (10 ml). A esta mezcla se le añadió DMAP (1 g, 8,28 mmol) y después DIC (9,5 ml, 60,7 mmol). Después de 3 h de agitación a TA la resina se filtró y se lavó sucesivamente con DMF, THF, DCM, THF, DCM y éter y después se secó al vacío.
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Ejemplo 17
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70
Éster terc-butílico del ácido [1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propil]-carbámico (17)
A una porción del producto 16 (200 mg) en DCM se le añadió aminoindanol (0,14 mmol). La mezcla se agitó durante 2 h. El líquido se retiró por filtración y la resina se lavó 2 veces con DCM. Los líquidos combinados se combinaron y se concentraron a sequedad, produciendo el compuesto del título (20,5 mg, 0,055 mmol) Pureza al >95% por HPLC. M+H^{+} 363,15, ^{13}C RMN \delta_{C} (100 MHz; CDCl_{3}; Me_{4}Si) 27,0, 28,5, 34,2, 39, 8, 50,8, 57,9, 68,2, 73,7, 124,8, 125,6, 127,4, 128,5, 140,4, 171,6, RMN ^{1}H \delta_{H} (400 MHz; CDCl_{3}; Me_{4}Si) 1,07 (9H, s, CCH_{3}), 1,44 (9H, s, OCCH_{3}), 2,93 (1H, dd, J_{gem} 16,4 Hz, J_{3,2} 2,3 Hz, CH_{2}), 3,15 (1H, dd, J_{gem} 16,4 Hz, J_{3,2} 5,2 Hz, CH_{2}).
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Ejemplo 18
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71
2-Amino-N-(2-hidroxi-indan-1-il)-3,3-dimetil butiramida (18)
El compuesto 17 se mantuvo en 2:1 de DCM-TFA (2 ml) durante 60 min a TA. La solución se co-evaporó con tolueno a sequedad.
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Ejemplo 19
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72
Éster metílico del ácido (2-terc-butoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butirilamino)-ciclohexil-acético (19)
A una solución de ácido 2-terc-.butoxicarbonilamino-3,3-dimetil butírico (500 mg, 2,16 mmol), éster metílico del ácido amino-ciclohexil-acético (444 mg, 2,59 mmol) y HATU (2 g, 5,40 mmol) en DMF (20 ml) se le añadió diisopropiletilamina (1,88 ml, 10,8 mmol). La solución se agitó durante 1 h a t.a. y se diluyó con diclorometano (40 ml). Esta solución se lavó con NaHCO_{3} acuoso (sat.) y agua (x 2), se secó y se concentró. El producto era puro al >95%. M+H^{+} 385,4.
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Ejemplo 20
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73
Éster terc-butílico del ácido {1-[(ciclohexil-metilcarbamoil-metil)-carbamoil]-2,2-dimetil-propil}-carbámico (20)
Al compuesto 19 en 1:2 de EtOH-THF se le añadió un gran exceso de metilamina (al 30% en agua) y se dejó a ta durante 2 semanas. La solución se concentró a sequedad y el residuo se sometió a una columna corta de gel de sílice eluyendo con MeOH al 2% en diclorometano, dando un producto puro (al >95%) M+H^{+} 384,5.
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Ejemplo 21
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74
2-Amino-N-(ciclohexil-metilcarbamoil-metil)-3,3-dimetil-butiramida (71)
El compuesto 20 se mantuvo en 2:1 de ácido diclorometano-trifluoroacético durante 1 h a ta y se concentró a sequedad. El residuo se secó al vacío durante 16 h. La HPLC C18 de fase inversa mostró una pureza al >95% M+H^{+} 283,1.
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Ejemplo 22
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75
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-((1S,2R)-2-Hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (22)
El compuesto 12 se trató como se ha descrito para la preparación de 13 pero con el uso de (1S,2R)-cis-1-amino-2-indanol en lugar de 2-amino-N-(2-hidroxiindan-1-il)-3,3-dimetil butiramida seguido de éster hidrólisis como se ha descrito para la preparación del compuesto 14, lo que dio el compuesto del título. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 649,1.
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Ejemplo 23
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76
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-(ciclohexilmetil-carbamoil)-2-metilpropilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (23)
Se unió N-(terc-butoxicarbonil)-L-valina a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con ciclohexilamina como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que dio el compuesto del título. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 712,3.
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Ejemplo 24
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77
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-((1R)-2-hidroxi-1-fenil-etilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (24)
El compuesto 12 se trató como se ha descrito para la preparación de 13 pero con el uso de (R)-2-fenilglicinol en lugar de 2-amino-N-(2-hidroxiindan-1-il)-3,3-dimetil butiramida en lugar de 2-amino-N-(2-hidroxi-indan-1-il)-3,3-dimetil-butiramida seguido de hidrólisis de éster como se ha descrito para la preparación del compuesto 14, lo que dio el compuesto del título. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 637,1.
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Ejemplo 25
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78
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-{[(1S)-ciclohexil-(ciclohexilmetil-carbamoil)-metil]-carbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (25)
Se unió N-(terc-butoxicarbonil)-L-ciclohexilglicina a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con ciclohexanometilamina como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que dio el compuesto del título. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 752,4.
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Ejemplo 26
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79
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-2-ciclohexil-1-(ciclohexilmetil-carbamoil)-etilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (26)
Se unió N-(terc-butoxicarbonil)-L-ciclohexilalanina a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con ciclohexanometilamina como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que dio el compuesto del título. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 766,4.
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Ejemplo 27
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80
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-(ciclohexilmetil-carbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (27)
Se unió N-(terc-butoxicarbonil)-L-terc-butiglicina a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con ciclohexanometilamina como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que dio el compuesto del título. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 726,3.
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Ejemplo 28
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81
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-(ciclohexilmetil-carbamoil)-2-fenil-etilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (28)
Se unió N-(terc-butoxicarbonil)-L-fenilalanina a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con ciclohexanometilamina como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que dio el compuesto del título. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 760,4.
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Ejemplo 29
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82
Ácido (1R,72S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-3-fenil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (29)
Se unió N-(terc-butoxicarbonil)-L-fenetilglicina a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con (1S,2R)-cis-1-amino-2-indanol como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que dio el compuesto del título. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 810,4.
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Ejemplo 30
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83 
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Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-((1S)-1-bencilcarbamoil-2-metil-propilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (30)
Se unió N-(terc-butoxicarbonil)-L-valina a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con bencilamina como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que dio el compuesto del título. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 706,2.
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Ejemplo 31
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84 
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Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1R)-2-hidroxi-1-fenil-etilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (31)
Se unió N-(terc-butoxicarbonil)-L-terc-butiglicina a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con (R)-2-fenilglicinol como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que dio el compuesto del título. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 750,3.
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Ejemplo 32
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85
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1R)-indan-1-ilcarbamoil)-2-metil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (32)
Se unió ácido (2S)-terc-butoxicarbonilamino-3-metilbutírico a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con (1R)-1-aminoindano como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que, después de la purificación por HPLC, dio el compuesto del título (12,5 mg, rendimiento del 28%), Pureza por HPLC >90%. M+H^{+} 732,2.
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Ejemplo 33
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86
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1S)-indan-1-ilcarbamoil)-2-metil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (33)
Se unió ácido (2S)-terc-butoxicarbonilamino-3-metilbutírico a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con (1S)-1-aminoindano como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que, después de la purificación por HPLC, dio el compuesto del título (22 mg, rendimiento del 49%), Pureza por HPLC al >90% M+H^{+} 732,2.
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Ejemplo 34
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87
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-(2-hidroxietilcarbamoil)-2-metil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (34)
Se unió ácido (2S)-terc-butoxicarbonilamino-3-metilbutírico a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con 2-aminoetanol como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que, después de la purificación por HPLC, dio el compuesto del título (3 mg, rendimiento del 8%), Pureza por HPLC al >90% M+H^{+} 660,2.
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Ejemplo 35
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88
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2-metil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (35)
Se unió ácido (2S)-terc-butoxicarbonilamino-3-metilbutírico a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con (1S,2R)-1-amino-2-indanol como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que, después de la purificación por HPLC, dio el compuesto del título (10 mg, rendimiento del 22%), Pureza por HPLC al >90% M+H^{+} 748,2.
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Ejemplo 36
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89
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1R,2S)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2-metil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (36)
Se unió ácido (2S)-terc-butoxicarbonilamino-3-metilbutírico a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con (1R,2S)-1-amino-2-indanol como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que, después de la purificación por HPLC, dio el compuesto del título (11 mg, rendimiento del 24%), Pureza por HPLC al >75% M+H^{+} 748.
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Ejemplo 37
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90
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-{[ciclohexil-(S)-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-metil]-carbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (37)
Se unió ácido (2S)-terc-butoxicarbonilamino-ciclohexilacético a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con (1S,2R)-1-amino-2-indanol como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que, después de la purificación por HPLC, dio el compuesto del título (7,5 mg, rendimiento del 16%), Pureza por HPLC al >95% M+H^{+} 788,3.
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Ejemplo 38
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91
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (38)
Se unió ácido (2S)-terc-butoxicarbonilamino-3,3-dimetilbutírico a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con (1S,2R)-1-amino-2-indanol como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que, después de la purificación por HPLC, dio el compuesto del título (12 mg, rendimiento del 26%), Pureza por HPLC al >95% M+H^{+} 762,3.
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Ejemplo 39
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92
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-3,3-dimetil-butilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (39)
Se unió ácido (2S)-terc-butoxicarbonilamino-4,4-dimetilpentanoico a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con (1S,2R)-1-amino-2-indanol como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que, después de la purificación por HPLC, dio el compuesto del título (14,2 mg, rendimiento del 30%), Pureza por HPLC al >95% M+H^{+} 776,3.
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Ejemplo 40
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93
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1S,2R)-2-Hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2-fenil-etilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (40)
Se unió ácido (2S)-terc-butoxicarbonilamino-3-fenilpropanoico a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con (1S,2R)-1-amino-2-indanol como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que, después de la purificación por HPLC, dio el compuesto del título (2,4 mg, rendimiento del 5%), Pureza por HPLC al >95% M+H^{+} 796,2.
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Ejemplo 41
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94
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-2-ciclohexil-1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-etilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (41)
Se unió ácido (2S)-terc-butoxicarbonilamino-3-ciclohexilpropanoico a la resina como se ha descrito para la preparación del compuesto 16 seguido de reacción con (1S,2R)-1-amino-2-indanol como se ha descrito para la preparación de 17 y la retirada del grupo Boc como se ha descrito para 18. Después, el compuesto producido se hizo reaccionar con el clorocarbamato conseguido a partir de 12 como se ha descrito para la preparación de 13, lo que, después de la purificación por HPLC, dio el compuesto del título (12,3 mg, rendimiento del 25%), Pureza por HPLC al >95% M+H^{+} 802,3.
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Ejemplo 42
95
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-{(1S)-1-[(S)-(ciclohexil-metilcarbamoil-metil)-carbamoil]-2,2-dimetil-propilcarbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (42)
Se trató el compuesto 12 como se ha descrito para la preparación de 13 pero con el uso de 21 en lugar de 2-amino-N-(2-hidroxi-indan-1-il)-3,3-dimetil-butiramida seguido de éster hidrólisis como se ha descrito para la preparación del compuesto 14, lo que, después de la purificación por HPLC, dio el compuesto del título (8,6 mg, rendimiento del 18%). Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 783,3.
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Ejemplo 43
96
1-(2-Amino-4-metoxifenil)etanona (43)
Se disolvió m-anisidina (10,0 g, 82 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (50 ml), y la solución se enfrió a -50ºC. Se añadió lentamente BCl_{3} (1 M en CH_{2}Cl_{2}, 82 ml, 82 mmol) durante 20 min, después de que la mezcla se agitó a -50ºC durante 30 min, seguido de la adición secuencial de AcCl (6,0 ml, 84 mmol) y AlCl_{3} (11 g, 82 mmol). La mezcla se agitó a -50ºC durante 1 h y después se dejó alcanzar la ta. Después de agitar a ta durante una noche, la solución se calentó a 40ºC durante 4 h, después de que la mezcla se vertiera sobre hielo. La mezcla acuosa se hizo alcalina con NaOH al 10% (p/v) y se extrajo con EtOAc (4 x 200 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron, dando un sólido de color negro, que se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (20:80 de éter/CH_{2}Cl_{2}). El sólido resultante se recristalizó en éter/hexano, dando el compuesto 93 en forma de láminas de color castaño brillantes (5,6 g, al 42%).
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Ejemplo 44
N-(terc-Butil)-N'-isopropiltiourea (44)
A una solución de isotiocianato de terc-butilo (5,0 ml, 39 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (200 ml) se le añadieron isopropilamina (4,0 ml, 47 mmol) y diisopropiletilamina (DIEA) (6,8 ml, 39 mmol), y la mezcla se agitó a ta durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con ácido cítrico al 10% (2 x), NaHCO_{3} saturado (2 x), H_{2}O (2 x) y salmuera (1 x). La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se evaporó, produciendo el compuesto 94 (3,3 g, al 52%) en forma de un sólido de color blanco que se usó sin purificación adicional.
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Ejemplo 45
N-Isopropiltiourea (45)
El compuesto 44 (3,3 g, 20 mmol) se disolvió en HCl conc. (45 ml) y la solución se calentó a reflujo durante 40 min. La mezcla se dejó enfriar a ta y después se enfrió en un baño de hielo y se basificó a pH 9,5 con NaHCO_{3} sólido y saturado, después de que el producto se extrajera en EtOAc (3 x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con H_{2}O (2 x) y salmuera (1 x), se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron, produciendo el compuesto 95 en bruto (2,1 g, al 90%) que se usó sin purificación adicional.
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Ejemplo 46
97
Bromhidrato del ácido 2-(isopropilamino)-1,3-tiazol-4-carboxílico (46)
Una suspensión del compuesto 45 (2,1 g, 18 mmol) y ácido 3-bromopirúvico (3,0 g, 18 mmol) en dioxano (180 ml) se calentó a 80ºC. Tras alcanzar 80ºC, la mezcla se volvió transparente y poco después el producto comenzó a precipitar en forma de un sólido de color blanco. Después de 2 h de calor, la mezcla de reacción se enfrió a ta y el precipitado se retiró por filtración y se recogió. Éste produjo el compuesto puro 46 (4,4 g, al 94%).
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Ejemplo 47
98
N-(2-Acetil-5-metoxifenil)-2-(isopropilamino)-1,3-tiazol-4-carboxamida (47)
Una mezcla del compuesto 46 (4,4 g, 16,5 mmol) y el derivado de anilina 93 (2,75 g, 16,5 mmol) en piridina (140 ml) se enfrió a -30ºC (tras la refrigeración, la solución transparente se convirtió parcialmente en una suspensión). Se añadió lentamente POCl_{3} (3,3 ml, 35 mmol) durante un periodo de 5 min. La mezcla se agitó a -30ºC durante 1 h y después se dejó que alcanzara la ta. Después de agitar a ta durante 1,5 h la mezcla de reacción se vertió sobre hielo, y el pH se ajustó a aproximadamente 9-10 usando NaHCO_{3} sólido y saturado. El producto en bruto se extrajo en CH_{2}Cl_{2} (3 x) y las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron. El sólido de color beige oscuro en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (55:45 de hexano/EtOAc), dando el compuesto 47 (5,6 g, al 76%) en forma de un sólido de color amarillo pálido.
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Ejemplo 48
99
2-[2-(Isopropilamino)-1,3-tiazol-4-il]-7-metoxiquinolin-4-ol (48)
Una solución de t-BuOK (2,42 g, 21 mmol) en t-BuOH anhidro (40 ml) se calentó a reflujo. El compuesto 47 (1,8 g, 5,4 mmol) se añadió en porciones durante un periodo de 5 min, y la solución de color rojo oscuro formada se agitó a la temperatura de reflujo durante 20 min más. La mezcla se enfrió a ta y se añadió HCl (4 M en dioxano, 8,0 ml, 32 mmol) después de que la mezcla de reacción se concentrara al vacío. Para asegurar que todo el HCl y el dioxano se retirara, el producto en bruto se disolvió de nuevo dos veces en CH_{2}Cl_{2} y se evaporó vigorosamente, obteniendo la sal HCl ligeramente impura del compuesto 98 (1,62 g) en forma de un sólido de color pardo. El producto se disolvió en CH_{2}Cl_{2} y se lavó con NaHCO_{3} saturado, después de que la fase acuosa se extrajera varias veces con CH_{2}Cl_{2}. Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron, dando el compuesto del título (1,38 g, al 81%) en forma de un sólido de color pardo claro (puro al >95% de acuerdo con los ensayos por HPLC). RMN ^{1}H (MeOH-d_{4}, 400 MHz): \delta 1,30 (d, J = 6,0 Hz, 6H), 3,93 (s, 3H), 3,95-4,07 (m, 1H), 6,73 (s, 1H), 6,99 (dd, J = 2,4, 9,2 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 8,10 (d, J = 9,2 Hz, 1H).
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Ejemplo 49
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100
Éster terc-butílico del ácido (1S)-1-{[(2S,4R)-2-(1-Metoxicarbonil-butilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)]-pirrolidina}-carboxílico (49)
La reacción de 10 con clorhidrato de Nva-OMe de acuerdo con el procedimiento que se ha descrito en el ejemplo 11 proporcionó el compuesto del título. Pureza al >95% por HPLC, M+H^{+} 578,24.
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Ejemplo 50
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101
Éster metílico del ácido (1S)-1-{[(2S,4R)-2-[4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-pentanoico (50)
El compuesto 49 se mantuvo en 1:2 de TFA-DCM (3 ml) a TA durante 60 min. Se añadió tolueno (3 ml). La muestra se co-evaporó a sequedad. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 478,21.
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Ejemplo 51
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102
Éster metílico del ácido (1S)-2-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-(ciclohexilmetil-carbamoil)-2-metil-propil[carbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-pentanoico (51)
A una solución de 50 (0,1 mmol) en THF (4 ml), enfriada a 0ºC, se le añadió un gran exceso de NaHCO_{3} (s) y una solución de fosgeno en tolueno (0,2 mmol, 21 \mul). Después de 10 min de agitación, la suspensión se filtró y se concentró a sequedad. El sólido se disolvió de nuevo en diclorometano y se añadieron un gran exceso de NaHCO_{3} (s) y 2-amino-N-ciclohexil-metil-3-metil-butiramida, descrito en el ejemplo 23 (0,15 mmol). La suspensión se agitó durante 30 h a TA. La suspensión se filtró, se concentró y se sometió a cromatografía en columna sobre sílice (gradiente de elución de DCM al 100% a 2:98 de MeOH/DCM), dando el compuesto del título (30 mg, 0,042 mmol). Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 716,40.
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Ejemplo 52
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103
Ácido (1S)-2-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-(ciclohexilmetil-carbamoil)-2-metil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-pentanoico (52)
A una solución de 51 (26 mg, 0,036 mmol) en 2:3 de THF-MeOH (2 ml) se le añadieron 1,5 equiv. de LiOH 1 M. La solución se mantuvo a 60ºC durante 60 min. Después de enfriar a TA, se añadió HOAc seguido de tolueno (2 ml) y después se concentró a sequedad, dando el compuesto del título (25 mg, 0,035 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 702,34.
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Ejemplo 53
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104
Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[2-(2-metoxi-fenoxi)-etilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (53)
A una solución de 12 (0,06 mmol) en THF (2 ml) se le añadieron un gran exceso de NaHCO_{3} (s) y una solución de fosgeno en tolueno (0,078 mmol). Después de 10 min de agitación, la suspensión se filtró y se concentró a sequedad. El sólido se disolvió de nuevo en diclorometano y se añadieron un gran exceso de NaHCO_{3} (s) y 2-(2-metoxi-fenoxi)-etilamina (15 mg, 0,09 mmol). La suspensión se agitó durante 30 h a TA. La suspensión se filtró, se concentró a sequedad, se disolvió de nuevo en MeOH y se sometió a purificación por HPLC, dando el compuesto del título (10,6 mg, 0,015 mmol). Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 695,17.
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Ejemplo 54
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105
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[2-(2-metoxi-fenoxi)-etilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (54)
A una solución de 53 (10,6 mg, 0,0153 mmol) en 2:3 de THF-MeOH (2 ml) se le añadieron 10 equiv. de LiOH 1 M. La solución se mantuvo a 50ºC durante 60 min. Después de enfriar a TA, se añadieron 25 equiv. de HOAc seguido de tolueno (2 ml) y después se concentró a sequedad. El residuo se recogió en acetato de etilo, se filtró y se concentró a sequedad, dando el compuesto del título (9,4 mg, 0,014 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 667,14.
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Ejemplo 55
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106
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-((1S,2R)-5-hidroxi-4,5,6,7-tetrahidro-benzo[b]tiofen-4-il-carbamoil))-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (55)
Se siguió el procedimiento que se ha descrito en el ejemplo 53 pero con el uso de 2-amino-4,5,6,7-tetrahidro-benzo[b]tiofen-5-ol en lugar de 2-(2-metoxi-fenoxi)-etilamina, seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 54, lo que dio el compuesto del título (7,5 mg, 0,011 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 669.
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Ejemplo 56
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107
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(3R)-3-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil)]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (56)
Se siguió el procedimiento que se ha descrito en el ejemplo 53 pero con el uso de (R)-3-pirrolidinol en lugar de 2-(2-metoxi-fenoxi)-etilamina, seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 54, lo que dio el compuesto del título (4 mg, 0,007 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 587,1.
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Ejemplos 57
108
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-1-[(tiofen-2-il-metil)-carbamoil]-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (57)
Se siguió el procedimiento que se ha descrito en el ejemplo 53 pero con el uso de tiofeno-2-metilamina en lugar de 2-(2-metoxi-fenoxi)-etilamina, seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 54, lo que dio el compuesto del título (8 mg, 0,013 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 613,08.
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Ejemplo 58
109
Ácido (1R,2S)-1-{(25,4R)-1[(1,1-dioxo-tetrahidro-1-\lambda^{6}-tiofen-3-il-carbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (58)
Se siguió el procedimiento que se ha descrito en el ejemplo 53 pero con el uso de 3-aminotetrahidro-1H-1\lambda^{6}-tiofeno-1,1-diona en lugar de 2-(2-metoxi-fenoxi)-etilamina, seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 54, lo que dio el compuesto del título (13 mg, 0,02 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 635,05.
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Ejemplo 59
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110 
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2-Amino-3,3-dimetil-N-tiofen-2-il-metil-butiramida (59)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 17 pero con el uso de tiofeno-2-metilamina en lugar de aminoindanol seguido de la retirada del grupo Boc como se ha descrito en el ejemplo 18.
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Ejemplo 60
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111
2-Amino-N-(6-hidroxi-4,5,6,7-tetrahidro-benzo[b]tiofen-5-il)-3,3-dimetil-butiramida (60)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 17 pero con el uso de 2-amino-4,5,6,7-tetrahidro-benzo[b]tiofen-5-ol en lugar de aminoindanol seguido de la retirada del grupo Boc como se ha descrito en el ejemplo 18.
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Ejemplo 61
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112
2-Amino-N-(2-dietilamino-etil)-3,3-dimetil-butiramida (61)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 17 pero con el uso de N,N-dietiletilendiamina en lugar de aminoindanol seguido de la retirada del grupo Boc como se ha descrito en el ejemplo 18.
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Ejemplo 62
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113
2-Amino-N-[2-(2-metoxi-fenoxi)-etil]-3,3-dimetil-butiramida (62)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 17 pero con el uso de 2-metoxifenoxietilamina en lugar de aminoindanol seguido de la retirada del grupo Boc como se ha descrito en el ejemplo 18.
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Ejemplo 63
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114
2-Amino-1-(3-hidroxi-pirrolidin-1-il)-3,3-dimetil-butan-1-ona (63)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 17 pero con el uso de (R) 3-pirrolidinona en lugar de aminoindanol seguido de la retirada del grupo Boc como se ha descrito en el ejemplo 18.
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Ejemplo 64
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115
2-Amino-N-(1,1-dioxo-tetrahidro-1-l^{6}-tiofen-3-il)-3,3-dimetil-butiramida (64)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 17 pero con el uso de 2-metoxifenoxietilamina en lugar de aminoindanol seguido de la retirada del grupo Boc como se ha descrito en el ejemplo 18.
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Ejemplo 65
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116
Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-(2,2-dimetil-1-[(tiofen-2-il-metil)-carbamoil]-propilcarbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (65)
A una solución de 12 (0,06 mmol) en THF (2 ml) se le añadieron un gran exceso de NaHCO_{3} (s) y una solución de fosgeno en tolueno (0,078 mmol). Después de 10 min de agitación, la suspensión se filtró y se concentró a sequedad. El sólido se disolvió de nuevo en diclorometano y se añadieron un gran exceso de NaHCO_{3} (s) y 59 (0,09 mmol). La suspensión se agitó durante 30 h a TA. La suspensión se filtró, se concentró a sequedad, se disolvió de nuevo en MeOH y se sometió a purificación por HPLC, dando el compuesto del título (15,5 mg, 0,02 mmol). Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 754,2.
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Ejemplo 66
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117
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-(2,2-dimetil-1-[(tiofen-2-ilmetil)-carbamoil]-propilcarbamoil-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (66)
A una solución de 65 (14 mg, 0,017 mmol) en 2:3 de THF-MeOH (2 ml) se le añadieron 10 equiv. de LiOH 1 M. La solución se mantuvo a 50ºC durante 60 min. Después de enfriar a TA, se añadieron 20 equiv. de HOAc seguido de tolueno (2 ml) y después se concentró a sequedad. El residuo se recogió en acetato de etilo, se filtró y se concentró a sequedad, dando el compuesto del título (13 mg, 0,017 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 748,13.
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Ejemplo 67
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118
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-(1S)-1-[(1S,2R)-1-[1-(5-hidroxi-4,5,6,7-tetrahidro-benzo[b]tiofen-4-il-carbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropano-carboxílico (67)
Se siguió el procedimiento que se ha descrito en el ejemplo 65 pero con el uso de 60 en lugar de 59, seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 66, lo que dio el compuesto del título (4 mg, 0,005 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 782,16.
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Ejemplo 68
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119 
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Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-(2-dietilamino-etilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (68)
Se siguió el procedimiento que se ha descrito en el ejemplo 65 pero con el uso de 61 en lugar de 59, seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 66, lo que dio el compuesto del título (6 mg, 0,008 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 729,24.
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Ejemplo 69
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120 
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Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-[2-(2-metoxi-fenoxi)-etilcarbamoil]-2,2-dimetil-propilcarbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (69)
Se siguió el procedimiento que se ha descrito en el ejemplo 65 pero con el uso de 62 en lugar de 59, seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 66, lo que dio el compuesto del título (3 mg, 0,004 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 780,19.
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Ejemplo 70
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121 
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Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-(1S)-1-[(3R)-1-(3-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (70)
Se siguió el procedimiento que se ha descrito en el ejemplo 65 pero con el uso de 63 en lugar de 59, seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 66, lo que dio el compuesto del título (12,4 mg, 0,02 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 700,16.
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Ejemplo 71
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122 
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Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-(1,1-dioxo-tetrahidro-1-l^{6}-tiofen-3-il-carbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (71)
Se siguió el procedimiento que se ha descrito en el ejemplo 65 pero con el uso de 64 en lugar de 59 seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 66, lo que dio el compuesto del título (13 mg, 0,014 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 748,13.
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Ejemplo 72
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123 
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(4R)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-[(7-metoxi-2-fenilquinolin-4-il)oxi]-L-prolil-N^{1}-(fenilsulfonil)-L-norvalinamida (72)
A una solución de 10 (60 mg, 0,13 mmol) en DMF se le añadieron HATU (124 mg, 0,325 mmol) y diisopropiletilamina (114 \mul, 0,65 mmol) y se agitó durante 30 min a TA. Se añadió una solución de 75 (0,157 mmol) en DMF. La suspensión se agitó durante 16 h a TA seguido de concentración a sequedad. El residuo se recogió en DCM y se lavó con NaHCO_{3} (sat.) y agua. La fase orgánica se secó, se concentró y se sometió a cromatografía en columna sobre sílice (gradiente de elución de DMC al 100% a MeOH al 2%/DCM), dando el compuesto del título (61 mg, 0,087 mmol). Pureza al >90% por HPLC. M+H^{+}703,23.
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Ejemplo 73
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124 
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(4R)-4-[(7-metoxi-2-fenilquinolin-4-il)oxi]-L-prolil-N^{1}-(fenilsulfonil)-L-norvalinamida (73)
El compuesto 72 se mantuvo en 2:1 de DCM-TFA (2 ml) durante 2,5 h a TA. La solución se co-evaporó con tolueno a sequedad. Rendimiento del 100%. M+H 603,12.
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Ejemplo 74
125
Ácido carbámico, [(1S)-1-[[(fenilsulfonil)amino]carbonil]butil]-, fenilmetil éster (74)
A una solución en agitación de Z-Nva-OH (150 mg, 0,59 mmol) en THF (6 ml) se le añadió CDI (400 mg, 2,4 mmol). La suspensión se agitó durante 30 min a TA seguido de la adición de DBU (200 \mul, 1,3 mmol) y una solución de bencenosulfonamida (250 mg, 1,59 mmol) en THF (2 ml). La mezcla se agitó a 60ºC durante 48 h seguido de concentración a sequedad. El residuo se disolvió en MeOH y se sometió a purificación por HPLC, dando el compuesto del título (118,5 mg, 0,304 mmol). Pureza al >95% por HPLC. M-H^{+} 389,0, +Na 412,96.
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Ejemplo 75
126
(2S)-2-Amino-N-(fenilsulfonil)pentanamida (75)
El compuesto 74 se disolvió en MeOH (5 ml) seguido de la adición de Pd/C y se sometió a hidrogenación durante 2 h. La suspensión se filtró a través de celite, se lavó con MeOH y se concentró a sequedad, dando el compuesto del título. Rendimiento del 100%. M+H^{+} 257,3.
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Ejemplo 76
127
1-({1-[(Ciclohexil-metilcarbamoil-metil)-carbamoil]-2,2-dimetil-propil}-amida)-2-[(1-fenilmetanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropil)-amida] del ácido 4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (76)
A una solución de 42 (8,7 mg, 0,011 mmol) en cloroformo (1 ml) se le añadió \alpha-toluenosulfonamida (7 mg, 0,04 mmol) seguido de diisopropiletilamina (21 \mul, 0,12 mmol). La solución se agitó a TA durante 10 min y después a -20ºC durante 30 min. Después, se añadió PyBOP (46,5 mg, 0,08 mmol) en forma de un sólido. La solución se mantuvo a -20ºC durante 48 horas. Después, la solución se vertió en NaHCO_{3} acuoso (sat.) y se lavó con agua. La fase orgánica se secó, se concentró y se sometió a purificación por HPLC, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (2,8 mg, 0,0049 mmol), Pureza por HPLC al >95%, M+H^{+} 936,26.
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Ejemplo 77
128
N-(2-Hidroxi-indan-1-il)-2-[4-(6-metoxi-3-fenil-naftalen-1-iloxi)-2-(1-metanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropil)-pirrolidin-1-il]-3,3-dimetil-butiramida (77)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 76, usando 14 en forma de un material de partida de ácido carboxílico y metanosulfonamida en lugar de \alpha-toluenosulfonamida. Rendimiento del 13%, Pureza por HPLC al >95%, M+H^{+} 839,16.
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Ejemplo 78
129
1-{[1-(Ciclohexilmetil-carbamoil)-2-metil-propil]-amida}-2-[(1-fenilmetanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropil)-amida] del ácido 4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (78)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 76, usando 23 en forma de material de partida de ácido carboxílico. Rendimiento del 2%. Pureza al >95% por HPLC. M+H^{+} 865,28.
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Ejemplo 79
130
2-[(1-Fenilmetanosulfonilaminocarbonil-butil)-amida] de 1-{[1-(ciclohexilmetil-carbamoil)-2-metil-propil]-amida} del ácido 4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (79)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 76, usando 52 en forma de material de partida de ácido carboxílico. Rendimiento del 8%. Pureza al >95% por HPLC. M+H^{+} 855,28.
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Ejemplo 80
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131 
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1-{(1-(Ciclohexilmetil-carbamoil)-2-metil-propil]-amida} de 2-[(1-bencenosulfonilaminocarbonil-butil)-amida] del ácido 4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (80)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 76, usando 52 en forma de un material de partida de ácido carboxílico y bencenosulfonamida en lugar de \alpha-toluenosulfonamida. Rendimiento del 21,5%. Pureza al >95% por HPLC. M+H^{+} 841,28.
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Ejemplo 81
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132 
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1-({1-[(Ciclohexil-metilcarbamoil-metil)-carbamoil]-2,2-dimetil-propil}-amida) de 2-[(1-bencenosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropil)-amida] del ácido 4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (81)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 76, usando bencenosulfonamida en lugar de \alpha-toluenosulfonamida. Rendimiento del 26%. Pureza por HPLC al >95%, M+H^{+} 922,23.
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Ejemplo 82
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133 
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1-{[1-(2-Hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2-metil-propil]-amida} de 2-[(1-bencenosulfonilaminocarbonil-butil)-amida] del ácido 4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (82)
A una solución de 73 (24,1 mg, 0,04 mmol) en DCM (2 ml) se le añadieron un gran exceso de NaHCO_{3} (s) y una solución de fosgeno en tolueno (50 \mul, 0,096 mmol). Después de 10 min de agitación, la suspensión se filtró y se concentró a sequedad. El sólido se disolvió de nuevo en DCM y se añadieron un gran exceso de NaHCO_{3} (s) y 2-amino-N-(2-hidroxi-indan-1-il)-3-metil-butiramida, descrita en ejemplo 35 (0,1 mmol). La suspensión se agitó durante 40 h a TA. La suspensión se filtró, se concentró y se sometió a purificación por HPLC, dando el compuesto del título (1,6 mg, 0,0018 mmol). Pureza al >95% por HPLC. M+H^{+} 877,21.
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Ejemplo 83
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134 
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1-({1-[(Ciclohexil-metilcarbamoilmetil)-carbamoil]-2,2-dimetil-propil}-amida) de 2-[(1-bencenosulfonilaminocarbonil-butil)-amida] del ácido 4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (83)
El compuesto del título se preparó como se ha descrito en el ejemplo 82 pero usando 21 en lugar de 2-amino-N-(2-hidroxi-indan-1-il)-3-metil-butiramida. Rendimiento del 2%. Pureza al >95% por HPLC. M+H^{+} 912,25.
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Ejemplo 84
135
Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-{[(4R,2S)1-(1-(1S)-hidroximetil-2,2-dimetil-propilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (84)
El tratamiento del compuesto 12 como se ha descrito para la preparación 13 pero con el uso de (S)-terc-leucinol en lugar de 3,3-dimetil-butiramida de 2-amino-N-(2-hidroxi-indan-1-ilo) proporcionó el producto del título. M+H^{+} 645,2.
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Ejemplo 85
136
Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-{[(4R,2S)1-(1-(1S)-formil-2,2-dimetil-propilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (85)
A una solución en agitación del compuesto 84 (64 mg) en diclorometano se le añadió peryodinano de Dess-Martin (80 mg) a temperatura ambiente. Después de 4 h, la suspensión se filtró a través de alúmina básica y se concentró a sequedad. M+H^{+} 643,2.
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Ejemplo 86
137
Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-{[(4R,2S)1-{1-[((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilamino)-metil]-2,2-dimetil-propilcarbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (86)
A una solución del compuesto 85 en THF (2 ml) y HOAc (0,5 ml) se le añadieron cianoborohidruro unido a poliestireno (2,36 mmol/g, 100 mg) y (1S,2R)-1-aminoindan-2-ol (18 mg) y se agitó durante 4 h. La mezcla se filtró, se concentró y se purificó sobre una HPLC prep. Pureza por HPLC al >90%. M+H^{+} 776,5.
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Ejemplo 87
138
Ácido (1R,2S)-1-{[(4R,2S)1-{1-[((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-il-amino)-metil]-2,2-dimetil-propilcarbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (87)
A una solución del compuesto 86 en THF (2 ml) y MeOH (1 ml) se le añadió LiOH 1 N (0,2 ml) y la solución se mantuvo a 60ºC durante 1,5 h. La suspensión se neutralizó con HCl 1 N a pH 7, se concentró y se purificó por HPLC prep. dando el producto puro por HPLC al >95%. M+H^{+} 748,4.
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Ejemplo 88
139
Ácido (1R,2S)-1-{[(4R,2S)1-(1-{[(S)-(ciclohexil-metilcarbamoil-metil)-amino]-metil}-2,2-dimetil-propilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (88)
El tratamiento del compuesto 85 como se ha descrito para la preparación de 86 pero con el uso de 2-amino-2-ciclohexil-N-metil-acetamida (17 mg) en lugar de (1S,2R)-1-aminoindan-2-ol seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 87 proporcionó el producto del título. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 769,5.
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Ejemplo 89
140
(1S,2R)-1-((2S)-2-Amino-3,3-dimetil-butirilamino)-indan-2-il éster del ácido acético (89)
Una solución del compuesto 17 (4 g) se mantuvo en 2:1 de piridin-anhídrido acético durante 30 min. Se añadió DCM y la solución se lavó con ácido cítrico (ac.) y NaHCO_{3} (ac.). La fase orgánica se concentró a sequedad, lo que dio el producto acetilado puro al >90% por HPLC. Después, el producto producido se mantuvo en una solución al 30% de TFA en DCM durante 1,5 h y después se concentró a sequedad. La co-evaporación dos veces de tolueno dio el producto del título puro al >90% por HPLC.
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Ejemplo 90
141
Éster terc-butílico del ácido (2S,4R)-2-((1S,2R)1-etoxicarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carboxílico (90)
Una solución de HATU (6 g), diisopropiletilamina (6,8 ml), éster etílico del ácido (1R,2S)-1-amino-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (1,5 g) y BOC-L-hidroxiprolina (1,6 g) en diclorometano se agitó durante 1 h. La mezcla se extrajo con DCM-NaHCO_{3} (ac.), se secó y se concentró. Pureza por HPLC de aprox. el 90% M+H^{+} 369,1.
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Ejemplo 91
142
Éster etílico del ácido (1S,2R)-1-[(2S,4R)-(4-hidroxi-pirrolidin-2-carbonil)-amino]-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (91)
El compuesto 90 se mantuvo en ácido trifluoroacético al 30% en diclorometano y MeOH al 1% durante 2 h antes de que se concentrara a sequedad. El residuo se disolvió de nuevo en diclorometano y durante la agitación se añadió NaOH 1 N a pH 10-11. La fase orgánica se separó y se concentró, lo que dio 1,6 g del producto del título. Pureza por HPLC de aprox. el 90% M+H^{+} 269,1.
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Ejemplo 92
143
Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-({(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1S,2R)-2-acetoxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-hidroxi-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (92)
A una solución en agitación del compuesto 89 (1,81 g) en acetonitrilo a 0ºC se le añadieron NaHCO_{3} sólido (800 mg) y clorocarbonato de p-nitrofenilo (1,2 g). La suspensión se recogió a temperatura ambiente y se agitó durante 30 min más. A esta suspensión se le añadió una solución del compuesto 91 (1,6 g) en acetonitrilo (5 ml) y diisopropiletilamina (1 ml). Después de 10 min, la mezcla resultante se concentró, se disolvió de nuevo en acetato de etilo y se lavó con K_{2}CO_{3} (ac.) y después con HCl 0,5 N. Se secó y se concentró, lo que dio un producto puro al >80% por HPLC M+H^{+} 599,6.
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Ejemplo 93
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144 
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Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-({(2S,4R)-1-[(1)-1-((1S,2R)-2-acetoxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-fenilcarbamoiloxi-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (93)
A una solución en agitación del compuesto 92 (20 mg) en DCM y K_{2}CO_{3} sólido (200 mg) se le añadió fosgeno al 20% en tolueno (1 ml). Después de 6 h, la suspensión se filtró y se concentró a sequedad. A este residuo se le añadió una mezcla de anilina (30 mg), DCM (3 ml) y NaHCO_{3} sólido (50 mg) y se agitó durante 10 h. La mezcla se filtró, se concentró y se purificó por HPLC prep., lo que dio el producto del título, puro al >95% M+H^{+} 718,6.
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Ejemplo 94
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145 
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Ácido (1R,2S)-1-({(2S,4R)-1-[1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-fenilcarbamoiloxi-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (94)
A una solución del compuesto 93 en 2:1 de THF-MeOH (3 ml) se le añadió LiOH 1 N (0,2 ml). La solución se calentó a 60ºC durante 2 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadió ácido acético (0,5 ml) y la solución se concentró a sequedad. El residuo restante se purificó por HPLC prep., lo que dio el producto del título puro al >95% M+H+ 648,5.
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Ejemplo 95
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146 
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5-((1R,2S)-1-Carboxi-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-1-[1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-pirrolidin-3-il éster del ácido (5S,3R)-3,4-dihidro-1H-isoquinolina-2-carboxílico (95)
El tratamiento del compuesto 92 como se ha descrito para la preparación de 93 pero con el uso de 1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina en lugar de anilina seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 94 dio el compuesto del título. Pureza al >90%. M+H^{+} 688,6.
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Ejemplo 96
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147 
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5-((1R,2S)-1-Carboxi-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-1-[1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-pirrolidin-3-il éster del ácido (5S,3R)-3,4-dihidro-2H-quinolina-1-carboxílico (96)
El tratamiento del compuesto 92 como se ha descrito para la preparación de 93 pero con el uso de 1,2,3,4-tetrahidro-quinolina en lugar de anilina seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 94 dio el compuesto del título. Pureza al >90%. M+H^{+} 688,6.
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Ejemplo 97
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148 
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Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(piridin-3-ilmetilcarbamoiloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (97)
El tratamiento del compuesto 92 como se ha descrito para la preparación de 93 pero con el uso de 2-piridin-3-il-etilamina en lugar de anilina seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 94 dio el compuesto del título. Pureza al >90%. M+H^{+} 663,5.
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Ejemplo 98
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149 
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Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(metil-fenetil-carbamoiloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (98)
El tratamiento del compuesto 92 como se ha descrito para la preparación de 93 pero con el uso de N-metilfenetilamina en lugar de anilina seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 94 dio el compuesto del título. Pureza al >90%. M+H^{+} 690,6.
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Ejemplo 99
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150
Ácido (1R,2S)-1-({(2S,4R)-4-bencilcarbamoiloxi-1-[(1S)-1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propil-carbamoil]-pirrolidin-2-carbonil}amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (99)
El tratamiento del compuesto 92 como se ha descrito para la preparación de 93 pero con el uso de bencilamina en lugar de anilina seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 94 dio el compuesto del título. Pureza al >90%. M+H^{+} 662,4.
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Ejemplo 100
151
Ácido (1R,2S)-1-({(2S,4R)-1-[(1S)-1-((1S,2R)-2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-fenetil-carbamoiloxi-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (100)
El tratamiento del compuesto 92 como se ha descrito para la preparación de 93 pero con el uso de fentilamina en lugar de anilina seguido de hidrólisis del éster etílico como se ha descrito en el ejemplo 94 dio el compuesto del título. Pureza al >90%. M+H^{+} 676,5.
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Ejemplo 101
152
Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-({(4R)-1-{[2-(terc-butoxicarbonil)hidrazino]carbonil}-4-[(7-metoxi-2-fenilquinolin-4-il)oxi]-L-prolil}amino)-2-vinilciclopropanocarboxílico (101)
A una solución de carbazato de terc-butilo (0,3 mmol) y cloroformiato de p-nitro fenilo (0,3 mmol) en acetonitrilo (6 ml) se le añadió carbonato ácido sódico (0,48 mmol) en forma de un sólido. La solución se agitó a TA durante 5 h y después se enfrió a 0ºC. El compuesto 62 (0,3 mmol) se disolvió en acetonitrilo (10 ml), se mezcló junto con diisopropiletilamina (0,75 mmol) a 0ºC y después se añadió a la solución anterior. La mezcla se agitó a TA durante una noche y después se concentró a sequedad. El residuo se disolvió en DCM y después se lavó con ácido cítrico a pH 4 seguido de NaHCO_{3} (ac.) y agua, se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se concentró a sequedad. El producto en bruto se disolvió en DCM y se purificó por cromatografía en columna eluyendo con MeOH de 0,1 al 0,2%/DCM, produciendo el compuesto del título (101 mg). Pureza al >95% por HPLC, M+H^{+} 660,1.
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Ejemplo 102
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153
Ácido (1R,2S)-1-({(4R)-1-{[2-(terc-butoxicarbonil)hidrazino]carbonil}-4-[(7-metoxi-2-fenilquinolin-4-il)oxi]-L-prolil}amino)-2-vinilciclopropanocarboxílico (159)
Procedimiento A: A una solución del compuesto 101 (0,0115 mmol) en 2:3 de THF-MeOH (2 ml) se le añadió LiOH 1 M (10 equiv.) La solución se mantuvo a 50ºC durante 60 min. Después de enfriar a TA, se añadió HOAc (20 equiv.) seguido de tolueno (2 ml) y después se concentró a sequedad. El residuo se recogió en MeOH y después se purificó por CLEM prep., lo que dio el compuesto del título (0,7 mg). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 732,2.
Procedimiento B: A una solución de carbazato de terc-butilo (0,07 mmol) y cloroformiato de p-nitrofenilo (0,07 mmol) en acetonitrilo (3 ml) se le añadió carbonato ácido sódico (0,112 mmol) en forma de un sólido. La solución se agitó a TA durante 2,5 h y después se enfrió a 0ºC. El compuesto 103 (descrito a continuación) (0,07 mmol) disuelto en acetonitrilo (10 ml) se mezcló junto con diisopropiletilamina (0,175 mmol) a 0ºC y después se añadió a la solución anterior. La mezcla se agitó a TA durante una noche y después se concentró a sequedad. El material en bruto se disolvió en MeOH y se purificó por CLEM prep., lo que dio el compuesto del título (4,8 mg). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 632,2.
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Ejemplo 103
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154
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (103)
A una solución del compuesto 12 (0,067 mmol) en 2:3 de THF-MeOH (2 ml) se le añadieron 10 equiv. de LiOH 1 M. La solución se mantuvo a 50ºC durante 2,5 h. Después de enfriar a TA, se añadieron 20 equiv. de HOAc seguido de tolueno (2 ml) y después se concentró a sequedad. El residuo se recogió en DCM y se filtró de las sales, lo que dio el compuesto del título (0,07 mmol). Pureza al >95% por HPLC M+H^{+} 474.
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Ejemplo 104
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155
Ácido (1R,2S)-1-({(4R)-1-(hidrazinocarbonil)-4-[(7-metoxi-2-fenilquinolin-4-il)oxi]-L-prolil}amino)-2-vinilciclopropanocarboxílico (104)
El compuesto (102) se mantuvo en 1:2 de TFA-DCM (3 ml) a TA durante 60 min. Se añadió tolueno (1 ml). La muestra se co-evaporó a sequedad, lo que dio el compuesto del título (10,5 mg) en forma de la sal del ácido trifluoroacético. Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+}532.
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Ejemplo 105
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156
Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-({(4R)-1-(hidrazinocarbonil)-4-[(7-metoxi-2-fenilquinolin-4-il)oxi]-L-prolil}amino)-2-vinilciclopropanocarboxílico (105)
El compuesto 101 (50 mg) se mantuvo en 1:2 de TFA-DCM (3 ml) a TA durante 60 min. Se añadió tolueno (1 ml). La muestra se co-evaporó a sequedad y después se recogió en DCM, se lavó con K_{2}CO_{3}, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a sequedad, lo que dio el compuesto del título (41,8 mg). Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 560.
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Ejemplo 106
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157
Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-({(4R)-1-[(2-bencilhidrazino)carbonil]-4-[(7-metoxi-2-fenilquinolin-4-il)oxi]-L-prolil}amino)-2-vinilciclopropanocarboxílico (106)
A una solución del compuesto 105 (0,037 mmol) en MeOHTHF (4:1) se le añadió benzaldehído (0,0448 mmol). La solución se agitó a TA durante 18 h. Se añadió complejo de borano-piridina (0,37 mmol) seguido de HCl (al 37%, 400 \mul). La solución se agitó durante 1,5 h, después se filtró y se concentró a sequedad. El material en bruto se disolvió en MeOH y se purificó por CLEM prep., lo que dio el compuesto del título (0,01 mmol). Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 650.
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Ejemplo 107
158
Ácido (1R,2S)-1-({(4R)-1-[(2-bencilhidrazino)carbonil]-4-[(7-metoxi-2-fenilquinolin-4-il)oxi]-L-prolil}amino)-2-vinilciclopropanocarboxílico (164107
A una solución del compuesto 106 (0,0101 mmol) en 2:3 de THF-MeOH (3 ml) se le añadieron 10 equiv. de LiOH 1 M. La solución se mantuvo a 50ºC durante 18 h. Después de enfriar a TA, la muestra se neutralizó con HCl y se concentró a sequedad. El material en bruto se disolvió en DCM (2 ml) y se añadió una solución de 1:1 de TFA:TES (1 ml). La mezcla se agitó durante 3 h a TA y después se concentró a sequedad. El material en bruto se disolvió en MeOH y se purificó por CLEM prep., lo que dio el compuesto del título (0,6 mg). Pureza por HPLC al >95%. M+H^{+} 622.
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Ejemplo 108
159
Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-((1S)-1-azidometil-3-metil-butilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (108)
160
i) 2-terc-Butoxicarbonilamino-4-metil-pentil éster del ácido (2S)-metanosulfónico
A una solución de éster terc-butílico del ácido ((1S)-1-hidroximetil-3-metil-butil)-carbámico (25 g, 115 mmol) en diclorometano (500 ml) enfriado en un baño de hielo-agua se le añadieron sucesivamente diisopropiletilamina (35,7 g, 276 mmol) y cloruro de metanosulfonilo (15,81 g, 138 mmol). La solución resultante se agitó durante una noche tiempo durante el cual la mezcla se dejó calentar gradualmente hasta la temperatura ambiente. La mezcla se lavó sucesivamente con agua, ácido cítrico al 10% (ac.), agua y NaHCO_{3} saturado (ac.), después se secó con Na_{2}SO_{4} y se concentró, dando un sólido de color pardo (32,6 g, al 96%) que se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional.
161
ii) Éster terc-butílico del ácido ((1S)-1-azidometil-3-metil-butil)-carbámico
El mesilato de la etapa i (32,6 g, 110 mmol) se trató con azida sódica (21,45 g, 330 mmol) en DMF a 80ºC durante 24 h. El disolvente se evaporó, el residuo se recogió en DCM, se filtró y se lavó con NaHCO_{3} saturado (ac.). La solución se secó con Na_{2}SO_{4} y se concentró, dando un aceite de color pardo que se purificó por cromatografía ultrarrápida usando un gradiente de acetato de etilo y hexano, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (19,55 g, al 73%).
162
iii) (1S)-1-Azidometil-3-metil-butilamina
Se trató éster terc-butílico del ácido ((1S)-1-azidometil-3-metil-butil)-carbámico (9,64 g, 39,78 mmol) con TFA (30 ml) en DCM (150 ml) durante 3 h, la mezcla se evaporó a presión reducida y el residuo se disolvió en acetato de etilo, se lavó con K_{2}CO_{3} acuoso 1 M, se secó con Na_{2}SO_{4} y se concentró, dando un líquido de color amarillo (4,55 g, al 80%).
El compuesto 12 se trató con fosgeno como se ha descrito en el ejemplo 13, lo que dio el compuesto cloro-carbamato correspondiente. El clorocarbamato producido (568 mg, 1,13 mmol) se disolvió en una solución de DCM-THF (1:1, 10 ml) y (1S)-1-azidometil-3-metil-butilamina (401 mg, 2,82 mmol) y se añadió un gran exceso de NaHCO_{3} (s). La mezcla resultante se agitó durante 18 h, se filtró y se lavó con ácido cítrico diluido (ac., pH 5). La fase orgánica se secó con Na_{2}SO_{4} y se evaporó, produciendo el producto deseado en forma de un aceite de color amarillo claro (837 mg, al 99%) suficientemente puro para usarse en la siguiente etapa. M+H^{+} 670,1.
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Ejemplo 109
163
Éster etílico del ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-((1S)-1-aminometil-3-metil-butilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (109)
Una solución de 108 (717 mg, 1,07 mmol) en THF (25 ml) se agitó junto con resina de PS-trifenilfosfina (difenilfosfino poliestireno) (3,24 g, 1,65 mmol PPh_{3}/g) y metanol (2,5 ml) durante 78 h. La mezcla se filtró y el polímero se lavó repetidamente con DCM y metanol. Los filtrados combinados se evaporaron, produciendo el compuesto del título en forma de una espuma sólida de color beige (685 mg, al 99%) con una pureza mayor del 95% como se determinó por HPLC de fase inversa. M+H^{+} 644,1.
Procedimiento general 1A para la preparación de los compuestos 110-116
A una solución del cloruro de acilo (0,075 mmol) en DCM (0,5 ml) se le añadieron NaHCO_{3} (s) (60 mg, 07 mmol) y una solución de la amina 109 (25 mg, 0,037 mmol) en THF (1 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante una noche, se filtró y después se agitó en presencia de resina de PS-trisamina (tris-(2-aminoetil) aminometil poliestireno) (3,91 mmol/g, 50 mg, 0,2 mmol) durante 5 h. La mezcla se filtró y se evaporó. El residuo sólido resultante se disolvió en MeOH-THF (2:1, 1,5 ml) y se trató con LiOH 1 M (ac.) (170 \mul) a 50ºC entre 2 y 16 h. La reacción se controló por HPLC-EM. La mezcla se acidificó con ácido acético y se evaporó a sequedad. El residuo se disolvió en metanol y se purificó por HPLC de fase inversa.
Procedimiento general 1B para la preparación de los compuestos 110-116
Al ácido (0,039 mmol) se le añadió sucesivamente una solución de HATU (14,7 mg, 0,039 mmol) en DMF (0,5 ml), una solución de la amina 109 (20 mg, 0,031 mmol) en DMF (0,5 ml) y diisopropiletilamina (30 \mul, 0,155 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 16 h, después el disolvente se evaporó, el residuo se disolvió en DCM y se lavó con agua y NaHCO_{3} acuoso saturado. El disolvente se evaporó y el residuo se disolvió en metanol-THF (2:1, 1,5 ml). A éste se le añadió LiOH 1 M (ac.) (155 \mul) y la mezcla se agitó a 60ºC durante 3-5 h. Se añadió ácido acético glacial (50 \mul) y la mezcla se concentró, se disolvió en metanol y se purificó por HPLC de fase inversa.
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Ejemplo 110
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164 
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Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-{(1S)-1-[(3-fluoro-benzoilamino)-metil]-3-metilbutilcarbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (110)
Se siguió el procedimiento general 1A usando cloruro de 3-fluorobenzoílo (12 mg) en forma de cloruro de acilo, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido (13,6 mg, al 50%). M+H^{+} 738,1.
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Ejemplo 111
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165 
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Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-1-((1S)-3-metil-1-{[(piridin-3-carbonil)-amino]-metil}-butilcarbamoil)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (111)
Se siguió el procedimiento general 1A usando cloruro de nicotinoílo (10,5 mg) en forma de cloruro de acilo, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido (10 mg, al 37%). M+H^{+}721,1.
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Ejemplo 112
166
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-4-(7-Metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-1-((1S)-3-metil-1-{[(pirazin-2-carbonil)-amino]-metil}-butilcarbamoil)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (112)
Se siguió el procedimiento general 1B usando ácido pirazin-2-carboxílico (5 mg) en forma del ácido, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido (5,7 mg, al 25%). M+H^{+}722,1.
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Ejemplo 113
167
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-1-((1S)-3-metil-1-([(tiofeno-3-carbonil)-amino]-metilfbutilcarbamoil)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (113)
Se siguió el procedimiento general 1A usando cloruro tiofeno-3-carbonilo (11 mg), lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido (4,3 mg, al 16%). M+H^{+}726,1.
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Ejemplo 114
168
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-1-((1S)-3-metil-1-{[(tetrahidro-furan-2-carbonil)-amino]-metil}-butilcarbamoil)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (114)
Se siguió el procedimiento general 1B usando ácido tetrahidrofurano-2-carboxílico (4,5 mg) como un ácido, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido (7,9 mg, al 36%). M+H^{+}714,1.
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Ejemplo 115
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169
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-1-((1S)-3-metil-1-{[(5-fenil-oxazol-4-carbonil)-amino]-metil}-butilcarbamoil)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (115)
Se siguió el procedimiento general 1B usando ácido 5-fenil-oxazol-4-carboxílico (7,5 mg) como un ácido, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido (7,5 mg, al 31%). M+H^{+}787,1.
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Ejemplo 116
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170
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-((1S)-1-{[(benzofuran-2-carbonil)-amino]-metil}-3-metil-butilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (116)
Se siguió el procedimiento general 1B usando ácido benzofuran-2-carboxílico (6,5 mg) como un ácido, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido (5,4 mg, al 23%). M+H+760,1.
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Procedimiento general 2 para la preparación de los compuestos 117-119
A una solución del cloruro de sulfonilo (0,075 mmol) en DCM (0,5 ml) se le añadieron NaHCO_{3} (s) (60 mg) y una solución de la amina 109 (25 mg, 0,037 mmol) en THF (1 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, se filtró y después se agitó con PS-trisamina (tris-(2-aminoetil)aminometil poliestireno, 3,91 mmol/g, -50 mg) durante 5 h.
La mezcla se filtró y el polímero se lavó sucesivamente con DCM, THF y metanol. El residuo sólido resultante de la evaporación de los filtrados combinados se disolvió en MeOH-THF (2:1, 1,5 ml) y se trató con LiOH 1 M (ac.) (170 \mul) a 50ºC para tiempos de reacción que varían de 18 h a una semana dependiendo de la estructura real. La reacción se controló por HPLC-EM. La mezcla se acidificó con ácido acético y se evaporó a sequedad. El residuo se disolvió en metanol y se purificó por HPLC de fase inversa.
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Ejemplo 117
171
Ácido (1R,2S)-1-({(2S,4R)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-1-[(1S)-3-metil-1-(fenilmetanosulfonilamino-metil)-butilcarbamoil]-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (117)
Se siguió el procedimiento general 2 usando cloruro de \alpha-toluenosulfonilo (14 mg) como cloruro de sulfonilo, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (4,9 mg, al 17%). M+H^{+} 770,1.
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Ejemplo 118
172
Ácido (1R,2S)-1-[((2S,4R)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-1-{(1S)-3-metil-1-[(5-metil-isoxazol-4-sulfonilamino)-metil]-butilcarbamoil}-pirrolidin-2-carbonil)-amino]-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (118)
Se siguió el procedimiento general 2 usando cloruro de 5-metil-isoxazol-4-sulfonilo (14 mg) como cloruro de sulfonilo, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (1,6 mg, al 6%). M+H^{+}761,0.
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Ejemplo 119
173
Ácido (1R,2S)-1-{[(2S,4R)-1-{(1S)-1-[(5-isoxazol-3-il-tiofeno-2-sulfonilamino)-metil]-3-metil-butilcarbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (119)
Se siguió el procedimiento general 2 usando cloruro de 5-isoxazol-3-il-tiofeno-2-sulfonilo (19 mg) como cloruro de sulfonilo, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (3,0 mg, al 10%). M+H^{+} 828,98.
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Ejemplo 120
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174 
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Éster etílico del ácido 1-{[1-(N'-terc-butoxicarbonil-N-hept-6-enil-hidrazinocarbonil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (120)
El compuesto 12 (200 mg, 0,4 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (10 ml). Se añadió una cucharadita de carbonato ácido sódico seguido de fosgeno (1,8 \mul, 1,9 M en tolueno). La mezcla de reacción se agitó durante 30 min y se filtró. El disolvente se evaporó y el cloruro en bruto se disolvió de nuevo en diclorometano (10 ml). Carbonato ácido sódico (1 cucharadita) y éster terc-butílico del ácido N'-hept-6-enil-hidrazinacarboxílico (182 mg, 0,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temp. ambiente durante 40 h, después se filtró y se purificó por cromatografía sobre sílice (metanol al 1% en éter \rightarrow metanol al 2% en éter), dando el producto del título puro (240 mg, al 79%).
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Ejemplo 121
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175 
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Éster etílico del ácido 14-terc-butoxicarbonilamino-18-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,15-dioxo-3,14,16-triaza-triciclo [14,3,0,0*4,6*]nonadec-7-en-4-carboxílico (121)
El compuesto 120 (200 mg, 0,26 mmol) se disolvió en diclorometano desgasificado (30 ml). Después, se añadió el catalizador Hoveyda-Grubbs de generación II (16 mg, 0,026 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo en atmósfera de argón durante una noche. Después, el disolvente se evaporó y el producto en bruto se purificó por cromatografía sobre sílice (metanol al 1% en éter), lo que dio 39 mg (al 20%) del producto del título. EM (M+H^{+}) 728,2.
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Ejemplo 122
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176 
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Ácido 14-terc-butoxicarbonilamino-18-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,15-dioxo-3,14,16-triaza-triciclo[14,3,0,0*4,6*]nonadec-7-en-4-carboxílico (122)
El compuesto 121 (39 mg, 0,054 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (3,5 ml), agua (1,75 ml) y metanol (1,75 ml). Después, se añadió hidróxido de litio (430 \mul, 1 M en agua) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. El volumen se redujo a la mitad y se añadió agua (10 ml). La acidificación (pH = 5) seguido de la extracción con cloroformo dio 34 mg (al 90%) del ácido puro 179, EM (M+H^{+}) 700,2.
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Ejemplo 123
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177 
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Éster etílico del ácido 1-{[1-(N'-terc-butoxicarbonil-N-hex-5-enil-hidrazinocarbonil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanecarboxílico (123)
El compuesto del título se preparó a partir del compuesto 12 (800 mg, 1,6 mmol) y éster terc-butílico del ácido N'-hex-5-enil-hidrazinacarboxílico (620 mg, 2,9 mmol) de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 120, lo que dio 1 g (al 85%). EM (M+H^{+}) 742,37.
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Ejemplo 124
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178 
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Éster etílico del ácido 13-terc-butoxicarbonilamino-17-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.0*4,6*]octadec-7-en-4-carboxílico (124)
El tratamiento del compuesto 123 (400 mg, 0,54 mmol) de acuerdo con el procedimiento descrito en ejemplo 121 dio un producto en bruto. La purificación por cromatografía sobre gel de sílice (metanol al 1% en éter) dio el producto del título (67 mg, al 17%). EM (M+H^{+}) 714,29.
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Ejemplo 125
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179 
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Ácido 13-terc-butoxicarbonilamino-17-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.0*4,6*]octadec-7-en-4-carboxílico (125)
El compuesto del título se preparó a partir del compuesto 124 (67 mg, 0,09 mmol) mediante el mismo procedimiento que se han descrito para 122, lo que dio 46 mg (al 71%) del ácido puro. Se reemplazó cloroformo por 1,2-dicloroetano en la etapa de extracción para la preparación de este compuesto. EM (M+H^{+}) 686,33.
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Ejemplo 126
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180 
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Ácido 13-terc-amino-17-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.0*4,6*]octadec-7-en-4-carboxílico (126)
El compuesto 125 (10 mg) se disolvió en diclorometano (4 ml). Se añadió ácido trifluorometanosulfónico (4 ml) y la mezcla se dejó a 50ºC durante 6 horas. El disolvente se retiró y el residuo se lavó con acetonitrilo, lo que dio 3 mg del producto del título puro (al 35%). EM (M+H^{+}) 586,25.
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Ejemplo 127
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181 
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Éster etílico del ácido 1-{[1-(1-metoxicarbonil-oct-7-enilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (127)
El compuesto del título se preparó a partir del compuesto 12 (380 mg, 0,758 mmol) y éster metílico del ácido 2-aminononan-8-enil-carboxílico (250 mg, 1,89 mmol) usando las condiciones que se han descrito en el Ejemplo 120 que dieron el producto puro (405 mg, al 75%).
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Ejemplo 128
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182 
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14-Metil éster de 4-etil éster del ácido 19-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,16-dioxo-3,15,17-triaza-triciclo[15.3.0.0*4,6*]icos-7-en-4,14-dicarboxílico (128)
El compuesto 127 (170 mg, 0,2385 mmol) se disolvió en diclorometano (40 ml) y se desgasificó por burbujeo de nitrógeno durante 20 min. Después, se añadió un catalizador Hoveyda-Grubbs de II generación (10 mg, 0,016 mmol, al 6,7% en mol) y la mezcla se calentó a reflujo en atmósfera de nitrógeno durante una noche. Después, el disolvente se evaporó, el catalizador, las sales se retiraron por cromatografía ultrarrápida (metanol al 5% en cloroformo) y el producto en bruto (120 mg, rendimiento del 73%, pureza al 85-90%) se usó en la siguiente etapa EM (M+H^{+}) 685.
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Ejemplo 129
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183 
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3-Etil éster del ácido 19-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,16-dioxo-3,15,17-triaza-triciclo[15.3.0.0*4,6*]icos-7-eno-3,14-dicarboxílico (129)
El compuesto 128 (120 mg, 0,175 mmol) se disolvió en dioxano (9 ml) y agua (6 ml). Se añadió hidróxido de litio (12 mg, 0,526 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3,5 h. La mezcla se acidificó con ácido acético a pH = 5, y se co-evaporó con tolueno. El producto en bruto se usó en la siguiente etapa. EM (M+H^{+}) 671.
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Ejemplo 130
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184 
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3-Etil éster del ácido 14-[(ciclohexil-metilcarbamoil-metil)-19-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,16-dioxo-3,15,17-triaza-triciclo[15.3.0.0*4,6*]icos-7-eno-4-carboxílico (130)
El compuesto 129 (en bruto, 100 mg), indanolamina (33 mg, 0,209 mmol) y base de Hunig (DIEA) (0,2 ml) se disolvieron en DMF (14 ml). Después de agitar a 0ºC durante 10 min, se añadió HATU. La reacción se controló por CL-EM. Después de 5 h, la conversión fue del 100%. Se retiraron DMF y DIEA al vacío. El residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó y se concentró al vacío. El rendimiento en bruto fue de 120 mg, la purificación por HPLC prep. dio 21 mg (al 25%) del producto del título. EM (M+H^{+}) 802.
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Ejemplo 131
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185 
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Ácido 14-[(ciclohexil-metilcarbamoil-metil)-19-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,16-dioxo-3,15,17-triaza-triciclo[15.3.0.0*4,6*]icos-7-eno-4-carboxílico (131)
A una solución del éster 130 (19 mg, 0,024 mmol) en la mezcla de THF (0,2 ml) y metanol (0,3 ml) se le añadió una solución de LiOH (6 mg, 0,237 mmol) en 0,15 ml de agua. La mezcla resultante se agitó a 60ºC durante 3,5 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadió ácido acético (30 equiv.). La mezcla se co-evaporó con tolueno. El residuo se distribuyó entre las fases de cloroformo y agua, la de agua se extrajo con cloroformo y acetato de etilo, las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato sódico, se evaporaron, dando 15 mg del producto puro. EM (M+H^{+}) 774.
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Ejemplo 132
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186 
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Éster terc-butílico del ácido [14-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-17-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.0*4,6*]octadec-7-en-13-il]-carbámico (132)
Al ácido 125 (19 mg, 0,028 mmol) en 0,5 ml de DMF se le añadieron 5,5 mg (0,044 mmol) de DMAP y 10,7 mg (0,056 mmol) de EDC. Después de 6,5 h de agitación, se añadieron 20 mg de ciclopropilsulfona amida y 0,04 ml de DBU. La mezcla se agitó durante una noche, se acidificó con ácido cítrico al 5% (en agua) y se extrajo con acetato de etilo. Se secó, se evaporó y se purificó con metanol del 5% al 10% en cloroformo (o CL-EM prep.), lo que dio 8 mg del compuesto del título (al 37%) MS (M+H^{+}) 783.
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Ejemplo 133
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187 
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1-terc-butil éster del ácido 4-[2-(2-isopropilamino-tiazol-4-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (133)
A una solución en agitación de N-Boc-trans-4-hidroxi-L-prolina (221 mg, 0,96 mmol) en DMSO se le añadió terc-butóxido potásico (320 mg, 2,9 mmol). Después de 1 h, se añadió 2-[2-isopropilamino)-1,3-tiazol-4-il]-7-metoxiquinolin-4-ol (319 mg, 0,96 mmol) y la mezcla se agitó a 70ºC durante 72 horas. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. El producto se usó sin purificación adicional. Rendimiento del 429 mg, al 85%.
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Ejemplo 134
188
Éster terc-butílico del ácido 2-(1-etoxicarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-[2-(2-isopropilamino-tiazol-4-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-pirrolidin-1-carboxílico (134)
El compuesto 133 (300 mg, 0,56 mmol) se hizo reaccionar con éster etílico del ácido 1-amino-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (130 mg, 0,84 mmol) como se ha descrito en el Ejemplo 11, lo que dio el compuesto del título (302 mg, al 80%).
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Ejemplo 135
189
Éster etílico del ácido 1-({4-[2-(2-isopropilamino-tiazol-4-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (135)
El compuesto 134 (302 mg, 0,45 mmol) se trató como se ha descrito en el Ejemplo 12, lo que dio el compuesto del título (195 mg, al 76%).
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Ejemplo 136
190
Éster etílico del ácido 1-({1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-[2-(2-isopropilamino-tiazol-4-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-pirrolidin-2-carbonil}-amino-2-vinil-cicloprpoanecarboxílico (136)
El compuesto 135 (80 mg, 0,14 mmol) se trató como se ha descrito en el Ejemplo 13, lo que dio el producto del título (87 mg, al 72%).
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Ejemplo 137
191
Ácido 1-({1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-[2-(2-isopropilamino-tiazol-4-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-pirrolidin-2-carbonil}-amino-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (137)
El éster etílico del compuesto 136 (80 mg, 0,09 mmol) se hidrolizó siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 14, lo que dio el producto del título. Rendimiento después de CL-EM preparativa (7,5 mg, al 10%).
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Ejemplo 138
192
Éster etílico del ácido 1-{[1-Etilcarbamoil-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]amino}-2-vinil-ciclopropano-carboxílico (138)
La reacción del compuesto 12 (330 mg, 0,66 mmol), fosgeno (1,6 ml, 1,9 M en tolueno, 3 mmol) y clorhidrato de hex-5-enilamina (500 mg, 3,68 mmol) siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 120 dio el producto del título puro (328 mg, al 80%), EM (M+H^{+}) 627.
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Ejemplo 139
193
Éster etílico del ácido 17-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.0*4,6*]octadec-7-eno-4-carboxílico (139)
Se disolvió el compuesto 138 (200 mg, mol) en diclorometano seco desgasificado (200 ml) y se burbujeó con nitrógeno. Después, se añadió el catalizador Hoveyda-Grubbs (segunda generación) (5 mg, al 2% en mol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 20 h en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se enfrió a temperatura ambiente y se concentró por evaporación rotatoria. El aceite resultante se purificó por cromatografía en columna sobre sílice YMC (de 1:1 a 9:1 de acetato de etilo-tolueno), dando 55 mg del compuesto del título en forma de un sólido de color beige. Rendimiento del 29%. EM (M+H^{+}) 599.
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Ejemplo 140
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194 
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Ácido 17-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.0*4,6*]octadec-7-en-4-carboxílico (140)
El compuesto 139 (55 mg, mol) se disolvió en 2 ml de metanol y se mezcló con 3 equiv. de NaOH acuoso y se calentó durante 2 h a 60ºC en un vial cerrado. Después, la mezcla reacción se extrajo en acetato de etilo. La solución de agua se recogió y se acidificó con una solución 1 N de HCl a pH 2. La solución resultante se concentró por evaporación rotatoria, se disolvió en metanol y se purificó por HPLC preparativa (acetonitrilo-agua), dando 34 mg del producto del título. Rendimiento del 65%. EM (M+H^{+}) 571.
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Ejemplo 141
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195 
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Ácido 1-{[1-{1-[(ciclohexil-metoxicarbonil-metil)-carbamoil]-2,2-dimetil-propilcarbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (141)
El compuesto 103 se disolvió en diclorometano (3 ml) y bicarbonato sódico sólido (100 mg) y se añadió fosgeno al 20% en tolueno (0,1 ml). Después de 30 min a temperatura ambiente, la mezcla se concentró a sequedad. Se añadió éster metílico del ácido (S)-(2S-2-amino-3,3-dimetil-butirilamino)-ciclohexil-acético (12 mg en diclorometano 2 ml). Después de 3 días de agitación a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró, se concentró a sequedad y se purificó por HPLC preparativa-EM, lo que dio el producto del título (4,4 mg). M+H^{+}784,7.
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Ejemplo 142
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196 
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Éster etílico del ácido 1-{[1-(1-aminometil-2,2-dimetil-propilcarbamoil-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (142)
El compuesto del título se preparó a partir del compuesto 12 (1,22 g, 2,43 mmol) mediante el siguiente procedimiento descrito para la preparación para el compuesto 108 pero usando 2-terc-butoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butil éster del ácido metanosulfónico en lugar de 2-terc-butoxicarbonilamino-4-metil-pentil éster del ácido metanosulfónico, en el Ejemplo 165 etapa i). La reducción de la azida como se ha descrito en el Ejemplo 109 dio el compuesto del título (1,49 g, al 95%). Pureza de acuerdo con HPLC al > 95%, M+H^{+} 644,2.
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Ejemplo 143
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197 
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Ácido 1-{[1-(2,2-dimetil-1-{[tiofeno-3-carbonil)-amino]-metil}-propilcarbamoil)-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (143)
El compuesto 142 (100 mg, 0,155 mmol) se hizo reaccionar de acuerdo con el procedimiento general 1A para la preparación de los compuestos 110-116, usando cloruro de tiofeno-3-carbonilo (28,5 mg, 0,194 mmol) como cloruro de acilo, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (45 mg, al 40%). Pureza de acuerdo con HPLC al >95%, M+H^{+} 726.
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Ejemplo 144
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198 
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Ácido 1-{[1-{1-[(5-isoxazol-3-il-tiofeno-2-sulfonilamino)-metil]-2,2-dimetil-propilcarbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (144)
El compuesto 142 (25 mg, 0,039 mmol) se hizo reaccionar de acuerdo con el procedimiento general 1A para la preparación de los compuestos 110-116, usando cloruro de 5-isoxazol-3-il-tiofeno-2-sulfonilo (14,5 mg, 0,058 mmol) como cloruro de acilo, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (1,8 mg, al 6%). La pureza de acuerdo con HPLC fue del >94%, M+H^{+} 829.
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Ejemplo 145
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199 
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Ácido 1-{[1-(3-fluoro-benzoilamino)-metil]-propilcarbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (145)
El compuesto 142 (25 mg, 0,039 mmol) se hizo reaccionar de acuerdo con el procedimiento general 1A para la preparación de los compuestos 110-116, usando cloruro de 3-fluorobenzoílo (12,3 mg, 0,078 mmol) como cloruro de acilo, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (4,1 mg, al 14%). La pureza de acuerdo con HPLC fue del >94%, M+H^{+} 738.
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Ejemplo 146
200
Ácido 1-{[1-(1{[(-furan-3bcarbonil)-amino]-metil-2,2-dimetil-propilcarbamoil}-4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carbonil]-amino}-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (146)
El compuesto 142 (25 mg, 0,039 mmol) se hizo reaccionar de acuerdo con el procedimiento general 1B para la preparación de los compuestos 110-116, usando ácido 3-furanoico (5,5 mg, 0,049 mmol) como cloruro de acilo, lo que dio el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (4,1 mg, al 14%). La pureza de acuerdo con HPLC fue del > 99%, M+H^{+} 710.
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Ejemplo 147
201
1-[(2,2-Dimetil-1-{[(tiofeno-3-carbonil)amino]-metil}-propil)-amida de 2-[(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropil)-amida] del ácido 4-(7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (147)
A una solución del compuesto 143 (42,2 mg, 0,058 mmol) en cloroformo (3 ml) se le añadió ciclopropilsulfonamida (14 mg, 0,116 mmol) seguido de diisopropiletilamina (60,5 \mul, 0,17 mmol). La solución se agitó a TA durante 10 min y después a -20ºC durante 30 min. Después, se añadió PyBOP (121 mg, 0,116 mmol) en forma de un sólido. La solución se mantuvo a -20ºC durante 10 días. Después, la solución se vertió en NaHCO_{3} acuoso (sat.) y se lavó con agua. La fase orgánica se secó, se concentró y se sometió a purificación por HPLC, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (2,3 mg, 0,0028 mmol), Pureza por HPLC al >95%, M+H^{+} 830.
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Ejemplos 148
202
Éster terc-butílico del ácido Fmoc-4-amino-2-(1-etoxicarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-pirrolidin-1-carbocíclico (148)
Se disolvió ácido (2S,4R) Fmoc-4-amino-1-Boc-pirrolidin-2-carboxílico (5,3 g, 11,8 mmol) en DCM (100 ml) y se añadieron sucesivamente HATU (4,94 g, 12,99 mmol), DIEA (4,63 ml, 26,57 mmol) y vinilciclopropilglicina etil éster (2,26 g, 11,81 mmol). La mezcla se agitó durante 16 h a temperatura ambiente, después se diluyó con DCM (50 ml), se lavó con ácido cítrico (ac. al 10%), agua, NaHCO_{3} (ac. sat.) y agua. La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró, produciendo una espuma sólida de color beige (8,11 g) que se sometió a cromatografía en columna sobre gel de sílice, produciendo el compuesto del título (7,14 g, 12,11 mmol).
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Ejemplo 149
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203
Éster etílico del ácido 1-[(Fmoc-4-amino-pirrolidin-2-carbonil)-amino]-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (149)
El compuesto 148 (3,65 g, 6,04 mmol) se trató con una solución de TFA/DCM (10 ml, TFA, 50 ml de DCM) durante 2,5 h y después se concentró, produciendo el compuesto del título (2,99 g, 6,12 mmol).
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Ejemplo 150
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204
Éster etílico del ácido 1-({Fmoc-4-amino-1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (150)
El derivado de aminoprolina 149 (2,96 g, 6,04 mmol) se agitó junto con fosgeno (1,93 M en tolueno, 4 ml, 7,55 mmol) durante 10 min. Los disolventes y el exceso de fosgeno se evaporaron. El residuo se disolvió en DCM (30 ml) y se añadió t-Bug-aminoindanol (1,9 g, 7,24 mmol) en forma de una solución en DCM (30 ml), seguido de NaHCO_{3} (2 g). La mezcla se agitó durante 48 h y después se diluyó con DCM, se lavó con agua, ácido cítrico al 10% y NaHCO_{3} (ac. sat.), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se evaporó a sequedad. El residuo se sometió a purificación por cromatografía en columna, EtOAc-hexano al 0-30%, produciendo el compuesto del título (1 g, 1,3 mmol).
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Ejemplo 151
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205
Éster etílico del ácido 1-({4-amino-1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (151)
El compuesto 150 (595 mg, 0,765 mmol) se disolvió en DMF (20 ml) y se trató con Si-piperazina (0,08 mmol/g, 4,78 g, 3,82 mmol) durante 48 h. El gel de sílice se filtró y se lavó una vez con DMF y después con varias porciones de DCM. Los disolventes se evaporaron y el residuo se sometió a cromatografía en columna, produciendo el compuesto del título (170 mg, 0,3 mmol).
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Ejemplo 152
206
Ácido 1-({1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-[(piridin-3-carbonil)-amino]-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (152)
A una solución en agitación del compuesto 151 (35 mg, 0,064 mmol) en DCM (1 ml) se le añadieron DIEA (0,12 mmol, 19 \mul) y clorhidrato de cloruro de nicotinoílo (0,12 mmol, 17 mg). La solución se agitó a TA durante 18 h, se añadió PS-trisamina y después se agitó a TA durante 4 h. Después de la filtración, la solución se lavó con ácido cítrico (ac. al 10%) y NaHCO_{3} (ac. sat.), la fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se disolvió en THF:MeOH (2:1, 1,5 ml). Se añadió LiOH (ac. 1 N, 3,2 mmol, 320 \mul). La solución se agitó a 60ºC durante 24 h. Se añadió ácido acético y después se concentró. El residuo se disolvió en MeOH y se sometió a purificación por HPLC, produciendo el compuesto del título (19,5 mg, 0,03 mmol). Pureza por HPLC al >98%, M+H^{+} 633,1.
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Ejemplo 153
207
Ácido 1-({1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-fenilacetamino-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (153)
Se siguió el procedimiento descrito en el Ejemplo 152 pero usando fenilo cloruro de acetilo en lugar de clorhidrato de cloruro de nicotinoílo, lo que dio el compuesto del título (12,7 mg, 0,019 mmol). Pureza por HPLC al >90%, M+H^{+}646,1.
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Ejemplo 154
208
Ácido 1-({1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-[(5-metil-3-fenil-isoxazol-4-carbonil)-amino]-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (154)
Se siguió el procedimiento descrito en el Ejemplo 152 pero usando cloruro de 5-metil-3-fenil-isoxazol-4-carbonilo en lugar de clorhidrato de cloruro de nicotinoílo, lo que dio el compuesto del título (3,6 mg, 00055 mmol). Pureza por HPLC al >98%, M+H^{+}713,1.
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Ejemplo 155
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209
Ácido 1-{[1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(3-fenil-ureido)-pirrolidin-2-carbonil]-amino]-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (155)
A una solución en agitación del compuesto 151 (30 mg, 0,054 mmol) en acetonitrilo:diclorometano (2:1, 3 ml) se le añadieron trietilamina (0,0648 mmol, 9 \mul) y isocianato de fenilo (0,0648 mmol, 7 \mul). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 3 h, se añadió metanol (1 ml) y después se concentró. El residuo se disolvió en metanol y se sometió a purificación por HPLC, produciendo el compuesto de éster en forma de un sólido de color blanco (32,7 mg, 0,047 mmol), Pureza por HPLC al >95%, M+H^{+} 675,31. Se añadió LiOH ac. 1 N (0,47 mmol, 475 \mul) al éster disuelto en THF:MeOH (2:1). La reacción se agitó a 50ºC durante 15 min y después a 8ºC durante 12 h seguido de la adición de ácido acético (0,98 mmol, 53 \mul) antes de la concentración. El residuo se disolvió en MeOH y se sometió a purificación por HPLC, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (3,8 mg, 0,006 mmol), Pureza por HPLC al >98%, M+H^{+} 675,31.
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Ejemplo 156
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210
Ácido 1-({4-bencenosulfonilamino-1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (156)
A una solución en agitación del compuesto 151 (30 mg, 0,054 mmol) en DCM (2 ml) se le añadieron sucesivamente DIEA (0,0648 mmol, 11,5 \mul) y cloruro de fenilsulfonilo (0,0648 mmol, 11,5 \mul). La solución se agitó a TA durante 3 h y después se concentró. El residuo se disolvió en MeOH y sometió a purificación por HPLC, produciendo el compuesto de éster en forma de un sólido de color blanco (17,9 mg, 0,0257 mmol), Pureza por HPLC al >95%, M+H^{+} 696,24. Se añadió LiOH ac. 1 N (0,25 mmol, 257 \mul) al éster disuelto en THF:MeOH (2:1). La reacción se agitó a 50ºC durante 1,5 h antes de la adición de ácido acético (0,98 mmol, 53 \mul). La solución se concentró. El residuo se disolvió en DCM y se lavó con agua; la fase acuosa se acidificó a pH 5 y después se extrajo con diclorometano y acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (7,1 mg, 0,01 mmol), Pureza por HPLC al >98%, M+H^{+} 668,19.
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Ejemplo 157
211
Ácido 1-{[1-[1-(2-hidroxi-indan-1-ilcarbamoil)-2,2-dimetil-propilcarbamoil]-4-(3-fenil-tioureido)-pirrolidin-2-carbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (157)
A una solución en agitación del compuesto 151 (30 mg, 0,054 mmol) en acetonitrilo (3 ml) se le añadieron sucesivamente TEA (0,0648 mmol, 9 \mul) y tioisocianato de fenilo (0,0648 mmol, 7,8 \mul). La solución se agitó a TA durante 16 h y después se concentró. El residuo se disolvió en MeOH y se sometió a purificación por HPLC, produciendo el compuesto éster en forma de un sólido de color blanco (22,7 mg, 0,0328 mmol), Pureza por HPLC al >95%, M+H^{+} 691,2. Se añadió LiOH ac. 1 N (0,33 mmol, 328 \mul) al éster disuelto en THF:MeOH (2:1). La reacción se agitó a 50ºC durante 2,5 h antes de la adición de ácido acético (0,98 mmol, 53 \mul). La solución se concentró. El residuo se disolvió en diclorometano, se lavó con agua y la fase acuosa se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (7,2 mg, 0,01 mmol), Pureza por HPLC al >98%, M+H^{+}663,26.
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Ensayos
Los compuestos de la invención se ensayan convenientemente para determinar la actividad frente a la NS3 proteasa de flavivirus tal como el VHC usando ensayos convencionales in vitro (enzimáticos) o ensayos en cultivos celulares.
Un ensayo útil es el ensayo del replicón Bartenshlager divulgado en el documento EP 1043399. En el documento WO 03064416 se describe un ensayo alternativo del replicón.
Un ensayo enzimático conveniente que implica la inhibición de la NS3 de longitud completa de la hepatitis C es esencialmente como se describe en Poliakov, 2002 Prot Expresión y Purificación de 25 363 371. En resumen, se mide la hidrólisis de un sustrato depsipeptídico, Ac-DED (Edans) EEAbu\Psi[COO]ASK (Dabcyl)-NH_{2} (AnaSpec, San José, EE.UU.), espectrofluorometricamente en presencia de un cofactor peptídico, KKGSVVIVGRIVLSGK, según lo descrito por Landro, 1997 Biochem 9340 a 9.348 36. La enzima (1 nM) se incuba en un tampón tal como HEPES 50 mM, pH 7,5, DTT 10 mM, glicerol al 40%, n-octil-\beta-D-glucósido al 0,1%, con cofactor e inhibidor 25 \muM por ejemplo a 30ºC durante 10 minutos, tras lo cual se inicia la reacción mediante la adición de sustrato, típicamente sustrato 0,5 \muM. Los inhibidores se disuelven típicamente en DMSO, se sonican durante 30 s y se someten a agitación vorticial. Las soluciones se almacenan generalmente a -20ºC entre las mediciones.
En el documento WO 0399316 se describe un ensayo enzimático alternativo y emplea un ensayo peptídico FRET del complejo NS3/4A proteasa del VHC. El propósito de este ensayo in vitro es medir la inhibición de los complejos de la NS3 proteasa del VHC, derivados de las cepas BMS, H77C o J416S, como se describe a continuación, por los compuestos de la presente invención. Este ensayo proporciona una indicación de cómo sería la eficacia de los compuestos de la presente invención inhibiendo la actividad proteolítica del VHC.
Se toma suero de una paciente infectada por VHC. Se construyó un molde de ADNc de longitud completa por ingeniería genética del genoma del VHC (cepa BMS) a partir de fragmentos de ADN obtenidos por PCR de transcripción inversa (RT-PCR) del ARN del suero y usando cebadores seleccionados sobre la base de la homología entre otras cepas de genotipo la. De la determinación de la secuencia del genoma completo, se denominó genotipo I a al aislado del VHC de acuerdo con la clasificación de Simmonds y col., (Ver P Simmonds, KA Rose, S Graham, SW Chan, F McOmish, BC Dow, EA Follett, PL Yap y H Marsden, J. Clin. Microbiol., 31 (6), 1493-1503 (1993)). Se demostró que la secuencia de aminoácidos de la región no estructural, NS2-5B, era > 97% idéntica al genotipo la del VHC (H77C) y el 87% idéntica al genotipo Ib (J4L6S). Los clones infecciosos, H77C (genotipo Ia) y J4L6S (genotipo Ib) pueden obtenerse a partir de R. Purcell (NIH) y las secuencias se publican en el Genbank (AAB67036, veáse Yanagi, M., Purcell, RH, Emerson, SU y Bukh. Proc. Natl. Acad. Sci.. EE.UU. 94 (16) 8738-8743 (1997), AF054247, véase Yanagi, M., St Claire, M., Shapiro, M., Emerson, SU, Purcell, RH y Bukhj, Virology 244 (1), 161 (1998)).
Las cepas BMS, H77C y J4L6S son convencionales para la producción de complejos NS3/4A de proteasa recombinantes. El ADN que codifica el complejo NS3/4A de proteasa recombinante (aminoácidos 1027 a 1711) para estas cepas se manipuló según lo descrito por P. Gallinari y col., (Ver P Gallinari, C Paolini, Brennan D, C Nardi, C Steinkuhler, De Francesco R. Biochemistry 38 (17): 562032, (1999)). En resumen, se añadió una cola solubilizante de tres lisinas en el extremo 3' de la región codificante 3 0 NS4A. La cisteína en la posición P1 del sitio de escisión NS4A-NS4B (aminoácido 1711) se cambió a una glicina para evitar la escisión proteolítica de la marca de la lisina. Adicionalmente, para evitar la escisión autolítica en el dominio NS3 de helicasa puede introducirse por PCR una mutación de cisteína a serina en el aminoácido de posición 1454. El fragmento de ADN variante puede clonarse en el vector de expresión bacteriano pET21b (Novagen) y el complejo NS3/4A puede expresarse en la cepa BL21 de Escherichia coli (DE3) (Invitrogen) siguiendo el protocolo descrito por el P. Gallinari y col., (veáse P Gallinari, Brennan D, C Nardi, Brunetti M, L Tomei, Steinkuhler C, De Francesco R., J Virol. 72 (8):6758-69 (1998)) con modificaciones. En resumen, la expresión de NS3/4A puede inducirse con isopropil beta-D tiogalactopiranósido (IPTG) durante 22 h a 20ºC. Una fermentación típica (l0l) proporciona aproximadamente 80 gramos de pasta celular húmeda. Las células se resuspenden en tampón de lisis (10 mUg) que consiste de 25 mM de N-(2hidroxietil) piperazin-N'-(2-ácido etano sulfónico) (HEPES), pH 7.5, glicerol al 20%, cloruro de sodio (NaCl) 500 mM, Triton-X100 al 0,5%, lisozima 1 ug/ml, cloruro de magnesio (MaCl2) 5 mM, Dnasel 1 ug/ml, beta-mercaptoetanol (BME) 5 mM, inhibidor de
Proteasa - ácido etilendiamina tetraacético (EDTA) libre (Roche), se homogeneizó y se incubó durante 20 minutos al vacío. El homogeneizado se sonicó y aclaró por ultra-centrifugación a 235.000 g durante 1 hora a 4ºC.
Al sobrenadante se le añade imidazol a una concentración final de 15 mM y se ajusta el pH a 8. El extracto de proteína en bruto se carga en una columna de ácido de niquel nitrilotriacético (Ni-NTA) pre-equilibrada con tampón B (HEPES 25 Mm, pH 8, glicerol al 20%, NaCl 500 mM, Triton-XI00 al 0,5%, imidazol 15 mM, BME 5 mM). La muestra se carga a un caudal de 1ml/min. La columna se lava con 15 volúmenes de columna del tampón C (igual que el tampón B, excepto con Triton-X100 al 0,2%). La proteína se eluye con 5 volúmenes de columna del tampón D (como en el tampón C, excepto con imidazol 200 mM).
El complejo 3 NS3/4A proteasa que contiene las fracciones se agrupa y se carga en una columna de desalinización Superdex-S200 pre-equilibrada con tampón D (HEPES 25 mM, pH 7.5, glicerol al 2%, NaCl 300 mM, Tritón XI00 al 0,2%, BME 10 mM). La muestra se carga a un caudal de ImUmin. El complejo NS3/4A proteasa que contiene las fracciones se agrupa y concentra a aproximadamente 0,5 mg/ml. Se considera que la pureza de los complejos NS3/4A proteasa, derivados de las cepas SBA, H77C y J4L6S, es típicamente superior al 90% por análisis SDS-PAGE y espectrometría de masas.
La enzima generalmente se almacena a -80ºC, se descongela en hielo y se diluye antes de usar en tampón de ensayo. El sustrato usado para el ensayo NS3/4A proteasa, es convenientemente RET S1 (sustrato depsipéptido por Transferencia de Energía por Resonancia; AnaSpec, cat nº 22991 Inc.) (péptido FRET), descrito por Taliani y col., en Anal Biochem. 240 (2): 6067 (1996). La secuencia de este péptido se basa ligeramente en el sitio de escisión natural de NS4A/NS4B salvo que haya un ligamiento éster en lugar de un enlace amida en el lugar de escisión. El sustrato peptídico se incuba con uno de los tres complejos NS3/4A recombinantes, en ausencia o presencia de un compuesto de la presente invención, y la formación del producto de reacción fluorescente continuó en tiempo real usando un Cytofluor Serie 4000. Los reactivos útiles son los siguientes: el HEPES y el glicerol (Ultrapure) pueden obtenerse de GIBCO-BRL. El dimetil sulfóxido (DMSO) se obtiene de Sigma. El beta-mercaptoetanol se obtiene de
Bio Rad.
Tampón de ensayo: HEPES 50 mM, pH 7.5; NaCl 15 M; Triton al 0,1%, glicerol al 15%; BME 10 mM. Sustrato: concentración final 2 uM (de una solución 2 0 madre 2 mM en DMSO almacenada a -20ºC). NS3/4A de tipo la (Ib) del VHC, concentración final 2-3 nM (de una solución madre 5 uM en HEPES 25 mM, pH 7,5, glicerol al 20%, NaCl 300 mM, Triton-X100 al 20%, BME 10 mM). Para los compuestos con potencias próximas al límite del ensayo, el ensayo puede hacerse más sensible añadiendo 50 ug/ml de BSA al tampón del ensayo y/o reduciendo la concentración final de la proteasa a 300 pM.
El ensayo se realiza convenientemente en una placa de Falcon negra de poliestireno de 96 pocillos. Cada pocillo contiene 25 ul de complejo NS3/4A proteasa en tampón de ensayo, 50 ul de un compuesto de la presente invención en tampón de ensayo/DMSO al 10% y en tampón de ensayo 25 ul de sustrato. También se preparó un control (sin compuesto) en la misma placa del ensayo. El complejo enzimático se mezcla con el compuesto o con la solución del control, típicamente durante 1 minuto antes de iniciar la reacción enzimática mediante la adición de sustrato. La placa del ensayo generalmente se lee inmediatamente usando un espectrofotómetro tal como un Cytofluor Serie 4000 (Perspective Biosystems). El instrumento está convenientemente ajustado para leer una emisión de 340 nm y una excitación de 490 nm a 25ºC. Las reacciones generalmente continúan durante aproximadamente 15 minutos.
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El porcentaje de inhibición puede calcularse con la siguiente ecuación.
100. - [dF_{inh}/dFc_{on}x100]
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en la que dF es el cambio en la fluorescencia en el rango lineal de la curva. A los datos de concentración de la inhibición se aplica un ajuste de curva no lineal y la concentración eficaz al 50% (CI_{50}) se calcula mediante un programa informático tal como el programa de ajuste Excel XI usando la ecuación:
y = A + ((B-A)/1 + ((C/x^D))).
Los ensayos enzimáticos utilizan convenientemente un principio de transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET) para generar una respuesta espectroscópica para un evento de escisión de NS4A/4B catalizado por la NS3 serina proteasa del VHC. La actividad se mide típicamente en un ensayo fluorométrico continuo usando una longitud de onda de excitación de 355 nm y una longitud de onda de emisión de 500 nm. La velocidad inicial puede determinarse a partir de 10 minutos de lectura continua de la intensidad de la fluorescencia aumentada como resultado del evento de escisión catalizado por la NS3 proteasa.
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Puede realizarse un ensayo enzimático alternativo de la siguiente manera:
Materiales
La enzima de longitud completa NS3 recombinante del VHC puede preparase como se muestra en Poliakov y col Protein Expresión y purification 25 (2002) 363-371.
El cofactor NS4A tiene, convenientemente, una secuencia de aminoácidos KKGSWIVGRIVLSGK (disponible en el mercado), generalmente preparado como una solución madre en DMSO 10 mM.
El sustrato-FRET (Ac-Asp-Glu-Asp(EDANS)-Glu-Glu-Abu-\Psi[COO)Ala-Ser-Lys(DABCYL)-NH2, MW1548,60 puede adquirirse en AnaSpec RET S1, CA. EE.UU.) y se prepara típicamente como una solución madre en DMSO 1,61 mM. Para proteger las alícuotas (50 \mul/tubo) de la luz directa deben envolverse con papel de aluminio y se almacenan a -20ºC.
El compuesto de referencia 1, N-1725 con una secuencia de AcAsp-D-Gla-Leu-Ile-Cha-Cys, PM 830,95 puede adquirirse en BACHEM, Suiza, y generalmente se prepara como una solución madre 2 mM en DMSO y se almacena en alícuotas a -20ºC.
El tampón HEPES 1 M puede adquirirse en Invitrogen Corporation, almacenado a 20ºC.
El glicerol puede adquirirse en Sigma, con una pureza del 99%.
El detergente CHAPS, 3-[(3-Colamidopropil)dimetilamonio]-1-propanosulfonato puede adquirirse en Research Organics, Cleveland, OH44125, EE.UU. MW614,90 DTT, DL-Ditiotreitol (Reactivo de Cleland: DL-DTT) a una pureza del 99%, almacenamiento de MW.154.2: +4ºC.
El DMSO puede adquirirse en SDS, 13124 Peypin, Francia. A una pureza del 99,5%.
Puede adquirirse TRIS, ultra pure (TRIS (hidroximetilaminometano), en el ICN Biomedicals Inc.
El N-dodecil-\beta-D-maltósido, 98% mínimo, pueden adquirirse en Sigma, almacenado a -20ºC
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Equipo
Placas de microtitulación (cliniplate blanco, ThermoLab Systems cat. nº9502890).
Pipetas Eppendorf.
Pipeta Biohit, de dosificación múltiple.
Fluorímetro Ascen, con dos filtros ex 355 nm, em 500 nm.
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Procedimiento
Procedimiento experimental:
Las soluciones madre 10 mM de los compuestos se preparan en DMSO. Las soluciones madre se almacenan a temperatura ambiente durante el ensayo y se colocan a -20ºC para el almacenamiento prolongado.
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Tampón de ensayo A:
Tampón HEPES 50 mM, pH=7,5, glicerol al 40%, CHAPS al 0,1%
Almacenamiento: a temperatura ambiente
DTT 10 Mm (almacenado en alícuotas a -20ºC y añadido reciente en cada experimento):
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Tampón de ensayo B:
Tris 25 mM, pH 7,5, NaCl 0,15 M, glicerol al 10%, n-dodecil-\beta-D-maltósido al 0,05%, DTT 5 mM (almacenado en alícuotas a -20ºC y añadido reciente en cada experimento).
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Secuencia del experimento:
Preparación del tampón de reacción (para una placa, 100 reacciones) (tampón A)
1. Preparar 9500 \mul de tampón de ensayo (HEPES, pH=7,5, glicerol al 40% y CHAPS al 0,1% en agua desionizada. Añadir DTT dando una concentración final de 10 mM (recién preparado para cada ejecución).
2. Descongelar rápidamente la NS3 proteasa
3. Añadir 13,6 \mul de NS3 proteasa y 13,6 \mul de péptido NS4A y mezclar adecuadamente. Dejar reposar la mezcla durante 15 minutos a temperatura ambiente.
4. Colocar de nuevo la solución madre enzimática en nitrógeno líquido o a -80ºC tan pronto como sea posible.
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Preparación del tampón de reacción (para una placa, 100 reacciones) (tampón B)
5. Preparar 9500 \mul de tampón de ensayo (TRIS, pH=7,5, NaCl 0,15 M, EDTA 0,5 mM, glicerol al 10% y n-dodecil-\beta-D-maltósido al 0,05% en agua desionizada. Añadir DTT dando una concentración final de 5 mM (recién preparado para cada ejecución).
6. Descongelar la NS3 proteasa rápidamente.
7. Añadir 27,2 \mul de NS3 proteasa y 13,6 \mul de péptido NS4A y mezclar adecuadamente. Dejar reposar la mezcla durante 15 minutos a temperatura ambiente.
8. Colocar de nuevo la solución madre enzimática en nitrógeno líquido o a -80ºC tan pronto como sea posible.
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Preparación del inhibidor/compuesto de referencia
Realizar una serie de diluciones de los inhibidores en DMSO a 100 veces las concentraciones finales de 10, 1, 0,1, 0,01 y 0,001 \muM. La concentración final de DMSO en 100 \mul del volumen de reacción total es del 1%.
Realizar una serie de diluciones del compuesto de referencia, N-1725 en DMSO a 100 veces las concentraciones finales de 120, 60, 30, 15, 7,5 y 3,75 nM.
Para cada ejecución, se necesitan ocho pocillos de control enzimático.
Los pocillos blancos contienen 95 \mul de tampón (sin NS3 PR), 1 \mul de DMSO y 5 \mul de sustrato.
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Preparación del sustrato FRET
Diluir la solución madre de sustrato (1,61 mM) con tampón de ensayo para una solución de trabajo de 40 \muM. Evitar la exposición a la luz.
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Secuencia del ensayo
Usar placas cliniplate de 96 pocillos, el volumen total del ensayo por pocillo es de 100 \mul.
1. Añadir a cada pocillo 95 \mul de tampón de ensayo.
2. Añadir 1 \mul del compuesto de referencia/inhibidor.
3. Pre-incubar durante 30 minutos a temperatura ambiente.
4. Iniciar la reacción añadiendo 5 \mul de solución de sustrato 40 \muM (concentración final 2 \muM).
5. Leer continuadamente durante 20 minutos a ex=355 nm y em=500 nm, controlando la fluorescencia aumentada por minuto.
6. Representar la curva de progresión (dentro del rango lineal, momentos 8-10) y determinar la pendiente como una velocidad inicial con respecto a cada concentración de inhibidor individual.
7. Calcular el % de inhibición con respecto al control enzimático.
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Tratamiento de los resultados
El resultado se expresa como el % de inhibición a una concentración determinada (selección) o como un valor de Ki en nM o \muM.
Cálculo del % de inhibición.
La velocidad inicial se determina a partir 10 minutos de lectura continua de la intensidad de fluorescencia aumentada como resultado del evento de escisión catalizado por la NS3 proteasa. El cambio en la pendiente para el inhibidor en comparación con el control enzimático proporciona el % de inhibición a una concentración determinada.
Cálculo de la Ki.
Todos los inhibidores se tratan como si siguieran las normas de la inhibición competitiva.
El valor CI_{50} se calcula a partir de los valores de inhibición de una serie de concentraciones del inhibidor. El valor calculado se usa en la siguiente ecuación:
K_{i}=CI_{50}/(1+S/Km)
La representación del gráfico se realiza con la ayuda de dos programas de cálculo: Grafit y Graphpad
Diversos compuestos de la invención ejemplificados anteriormente muestran valores de CI_{50} en el intervalo de 1 nM a 6,9 micromolar y valores de DE_{50} en el intervalo de sub-micromolar a micromolar.
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Patrón y tasa de resistencia de escape a fármacos
Para determinar la tasa del desarrollo a la resistencia y seleccionar mutantes de escape a fármacos pueden usarse cultivos de replicones en placas de microtitulación. Los compuestos a ensayar se añaden a concentraciones en torno a su DE_{50} usando, por ejemplo, 8 duplicados por concentración. Después del período de incubación apropiado del replicón se mide la actividad de la proteasa en el sobrenadante o en las células lisadas.
El siguiente procedimiento continúa con pases posteriores de los cultivos. El virus producido a la concentración del compuesto del ensayo que muestra > 50% de la actividad de la proteasa de las células infectadas sin tratamiento (SIC, concentración inhibitoria de partida) se pasan a cultivos recientes de replicón. Una alícuota, por ejemplo, 15 \mul de sobrenadante de cada uno de los ocho duplicados se transfieren a las células del replicón sin el compuesto del ensayo (control) y a las células con el compuesto del ensayo a la misma concentración, y, adicionalmente, dos concentraciones cinco veces más elevadas respectivamente. (Véase la siguiente tabla a continuación)
Cuando el componente viral de propagación del replicón (por ejemplo, medido por la actividad de la proteasa del VHC) se permite a la mayor concentración no tóxica (5 - 40 \muM), se recogen 2-4 pocillos paralelos y se amplían para proporcionar el material para análisis de las secuencias y la resistencia en forma de cruz.
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Clave:
Crecimiento viral permitido Producción viral inhibida
212
Los procedimientos alternativos para evaluar la actividad en mutantes de escape a fármacos incluyen la preparación de la enzima mutante portadora de la mutación distintiva para su uso en determinaciones de Ki convencionales como se muestra anteriormente. Por ejemplo el documento WO 04/039970 describe construcciones que permiten el acceso a proteasas del VHC que llevan los mutantes de escape a fármacos 155, 156 y/o 168 surgidos de la presión selectiva de BILN-2061 y VX-950. Estas construcciones pueden modificarse por ingeniería genética en vectores de replicón en lugar de la proteasa del tipo silvestre, permitiendo por lo tanto valorar fácilmente en un ensayo celular, o si determinado compuesto es activo frente a un mutante de escape a fármacos.
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Metabolismo del P450
El metabolismo de los compuestos de la invención a través de las isoformas principales del sistema del citocromo P450 humano se determina convenientemente en células de insectos infectadas por baculovirus transfectadas con ADNc de citocromo P450 (supersomas) Gentest Corp. Woburn EE.UU.
Los compuestos del ensayo a concentraciones de 0,5, 5 y 50 \muM se incuban por duplicado en presencia de supersomas que sobreexpresan diferentes isoformas del citocromo P450, que incluyen CYP1A2 + P450 reductasa, CYP2A6 + P450 reductasa, CYP2C9-Arg 144 + P450 reductasa, CYP2C19 + P450 reductasa, CYP2D6-Val 374 + P450 reductasa y CYP3A4 + P450 reductasa. Las incubaciones contienen una concentración fija de citocromo P450 (por ejemplo, 50 pmoles) y se realizan durante 1 hora. La participación de una isoforma determinada en el metabolismo del compuesto del ensayo se determina por cromatografía HPLC UV midiendo la desaparición del precursor.

Claims (64)

1. Un compuesto de la fórmula I:
214
en la que
A es C(=O)OR^{1} o C(=O)NHSO_{2}R^{2} en la que;
R^{1} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3};
R^{2} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3};
en la que R^{2} está opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente entre el grupo constituido por halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, NH_{2}CO-, Y-NRaRb, Y-O-R_{b}, Y-C(=O)Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSO_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}NRaRb, Y-C(=O)ORb e Y-NRaC(=O)ORb;
Y es independientemente un enlace o alquileno C_{1}-C_{3};
Ra es independientemente H o alquilo C_{1}-C_{3};
Rb es independientemente H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquiloarbociclilo C_{0}-C_{3} o alquilheterociclilo C_{0}-C_{3};
p es independientemente 1 ó 2;
M es CR^{7}R^{7'};
R^{7} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquil C_{0}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{7}, o alquenilo C_{2}-C_{6}, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con 1-3 átomos halo, o grupo amino, -SH o alquilcicloalquilo C_{0}-C_{3}; o
R^{7} es J;
R^{7} es H o tomado junto con R^{7} forma un anillo cicloalquilo C_{3}-C_{6} opcionalmente sustituido con R^{7'a} en el que;
R^{7'a} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{5}, alquenilo C_{2}-C_{6} cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido con halo; o R^{7'a} puede ser J;
q es de 0 a 3 y k es de 0 a 3; en la que q+k \geq 1;
W es -CH_{2}-, -O-, -OC(=O)NH-, -OC(=O)-, -S-, -NH-, -NRa, -NHSO_{2}-, -NHC(=O)NH- o -NHC(=O)-, -NHC(=S)NH- o un enlace;
R^{8} es un sistema anular que contiene 1 ó 2 anillos saturados, parcialmente insaturados o insaturados cada uno de los cuales tiene 4-7 átomos en el anillo y cada uno de los cuales tiene de 0 a 4 heteroátomos independientemente seleccionados entre S, O y N, estando el sistema anular opcionalmente separado de W por un grupo alquilo C_{1}-C_{3}; cualquiera de dichos grupos R^{8} pueden estar opcionalmente mono, di o trisustituidos con R^{9}, en el que
R^{9} se selecciona independientemente entre el grupo constituido por halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, NH_{2}C(=O)-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C(=O)Rb, Y-(C=O)NRa'Rb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSO_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}NRaRb, Y-C(=O)ORb e Y-NRaC(=O)ORb; en el que Ra' es Ra, con la condición de que cuando W es -S- o -O-, R^{8} es alquilarilo C_{0}-C_{3} o alquilheteroarilo C_{0}-C_{3}, Y es un enlace, y Rb es H o alquilo C_{1}-C_{6}, entonces Ra' sea Ra o alquilo C_{1}-C_{6}; y en el que dicho resto carbociclilo o heterociclilo está opcionalmente sustituido con R^{10}; en el que
R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, amido, sulfonilo, (alquil C_{1}-C_{3})sulfonilo, NO_{2}, OH, SH, halo, haloalquilo, carboxilo;
E es -C(=O)-
X es -NRx-, en la que Rx es H, alquilo C_{1}-C_{5} o J; o en el caso de que E sea -C(=O), X también puede ser -O- o -NRjNRj-;
en la que uno de Rj es H y el otro es H, alquilo C_{1}-C_{5} o J;
R^{11} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, cualquiera de los cuales puede estar sustituido con halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, NH_{2}C(=O)-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C(=O) Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSO_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}NRaRb, Y-C(=O)ORb, Y-NRaC(=O) ORb; o R^{11} es J;
J, si está presente, es una cadena alquileno individual de 3 a 10 miembros saturada o parcialmente insaturada que se extiende del cicloalquilo R^{7}/R^{7'} o desde el átomo de carbono al que R^{7} está unido a uno de Rj, Rx, Ry o R^{11} para formar un macrociclo, cuya cadena se interrumpe opcionalmente por uno a tres heteroátomos independientemente seleccionados entre: -O-, -S- o -NR^{12}-, y en el que de 0 a 3 átomos de carbono en la cadena están opcionalmente sustituidos con R^{14}; en la que;
R^{12} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{6}, o C(=O)R^{13};
R^{13} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3};
R^{14} se selecciona independientemente entre el grupo constituido por H, alquilo C_{1}-C_{6}, haloalquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, hidroxi, halo, amino, oxo, tio y tioalquilo C_{1}-C_{6};
Ru es independientemente H o alquilo C_{1}-C_{3};
m es 0 ó 1; n es 0 ó 1;
U es =O o está ausente;
R^{15} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, cualquiera de los cuales pueden estar sustituidos con halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, NH_{2}CO-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C (=O)Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHS(=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}NRaRb, Y-C(=O)ORb, Y-NRaC (=O)ORb;
G es -O-, -NRy-, -NRjNRj-: en el que un Rj es H y el otro es H, alquilo C_{1}-C_{6} o J; Ry es H, alquilo C_{1}-C_{3}; o Ry es J; R^{16} es H; o alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, cualquiera de los cuales pueden estar sustituidos con halo, oxo, nitrilo, azido, nitro, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C0-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, NH_{2}CO-, Y-NRaRb, Y-O-Rb, Y-C(=O)Rb, Y-(C=O)NRaRb, Y-NRaC(=O)Rb, Y-NHSO_{p}Rb, Y-S (=O)_{p}Rb, Y-S(=O)_{p}NRaRb, Y-C(=O)ORb, Y-NRaC (=O)ORb;
con la condición de que cuando m = n = 0 y G es O entonces R^{16} no sea terc-butilo o fenilo;
en el que cualquier átomo de C en alquilo C_{1}-C_{6} y alquilo C_{1}-C_{3}, a menos que se indique otra cosa, puede estar opcionalmente sustituido por uno, dos o cuando la valencia lo permita tres halógenos;
cada resto arilo y cicloalquilo en alquilarilo C_{0}-C_{3} y alquil C_{0}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{7}, a menos que se indique otra cosa, está opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados entre halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxi, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}-alquilo C_{1}-C_{6}, alcanoílo C_{1}-C_{6}, amino, azido, oxo, mercapto y alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}; cada resto carbociclilo y heterociclilo en alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3} y alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, a menos que se indique otra cosa, está opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados entre halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxi, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}-alquilo C_{1}-C_{6}, alcanoílo C_{1}-C_{6}, amino, azido, oxo, mercapto, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3} y alquilheterociclilo C_{0}-C_{3};
cada grupo amino se selecciona entre NH_{2}, NHalquilo C_{1}-C_{6} y N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2}; y
cada grupo amido se selecciona entre C(=O)NH_{2}, C(=O)NHalquilo C_{1}-C_{6}, C(=O)N(alquilo C_{1}-C_{6})_{2} y -NH(C=O)alquilo C_{1}-C_{6}; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R^{7'} es H y R^{7} es n-etilo, ciclopropilmetilo, ciclopropilo, ciclobutilmetilo, ciclobutilo o mercaptometilo, preferentemente n-propilo o 2,2-difluoroetilo.
3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R^{7} y R^{7'} juntos definen un anillo espiro-ciclopropilo o espiro-ciclobutilo, los dos opcionalmente mono o di-sustituidos con R^{7'a} en el que;
R^{7'a} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{5} o alquenilo C_{2}-C_{6}, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con halo; o R^{7'a} es J.
4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3 en el que el anillo es un anillo espiro-ciclopropilo sustituido con R^{7'a} en el que;
R^{7'a} es etilo, vinilo, ciclopropilo, 1- o 2-bromoetilo, 1- o 2-fluoroetilo, 2-bromovinilo o 2-fluoretilo.
5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R^{7} es J y R^{7'} es H.
6. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5 con la estructura parcial Ia:
215
7. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que m es 0 y n es 0.
8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 7, en el que G es -NRy- o -NRjNRj-.
9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 8, en el que Ry o uno de los grupos Rj es J, definiendo de esta manera un compuesto macrocíclico.
10. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 9, en el que R^{16} es H, alquilo C_{1}-C_{3} o cicloalquilo C_{3}-C_{6}.
11. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que m es 1.
12. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, en el que X es -NRx-.
13. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, en el que U es O.
14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, en el que R^{11} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, alquilarilo C_{0}-C_{3} o alquilheteroarilo C_{0}-C_{3}, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con halo, alcoxi C_{1}-C_{6}, tioalquilo C_{1}-C_{6}, carboxilo, (alcoxi C_{1}-C_{6})carbonilo, arilo, heteroarilo o heterociclilo, y especialmente en el que el sustituyente es hidroxi o C(=O)OR^{14}.
15. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 14, en el que R^{11} es feniletilo, 2,2-dimetil-propilo, ciclohexilmetilo, fenilmetilo, 2-piridilmetilo, 4-hidroxi-fenilmetilo o carboxilpropilo; o especialmente terc-butilo; iso-butilo o ciclohexilo.
16. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, en el que uno de Rx o R^{11} es J; definiendo de esta manera un compuesto macrocíclico.
17. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, en el que n es 1.
18. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 17, en el que R^{15} es alquilo C_{1}-C_{6} o alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido.
19. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 18, en el que R^{15} es ciclohexilo, ciclohexilmetilo, terc-butilo, iso-propilo o iso-butilo.
20. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, en el que G es NRy o -NRjNRj-, en el que Ry o un Rj es H o metilo, y el otro Rj es H.
21. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 20, en el que R^{16} es H, alquilo C_{1}-C_{6} o un heterociclo de 5 ó 6 miembros, especialmente morfolina, piperidina o piperazina.
22. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, en el que R^{16} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con hidroxi, halo o alcoxi C_{1}-C_{6}.
23. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 22, en el que R^{16} es 2-indanol, indanilo, 2-hidroxi-1-fenil-etilo, 2-tiofenometilo, ciclohexilmetilo, 2,3-metilenodioxibencilo, ciclohexilo, bencilo, 2-piridilmetilo, ciclobutilo, iso-butilo, n-propilo o 4-metoxifeniletilo.
24. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que W es -OC(=O)-, -NRa-, -NHS(O)_{2}- o -NHC(=O)-; o especialmente -OC(=O)NH- o -NH.
25. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que W es -S-, un enlace o especialmente -O-.
26. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 24 ó 25 en el que R^{8} es alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3} opcionalmente sustituido o alquilheterociclilo C_{0}-C_{3} opcionalmente sustituido.
27. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 26, en el que el resto alquilo C_{0}-C_{3} es metileno o preferentemente un enlace.
28. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 27 en el que R^{8} es alquilarilo C_{0}-C_{3} o alquilheteroarilo C_{0}-C_{3}, cualquiera de los cuales está opcionalmente mono, di o trisustituido con R^{9}, en el que;
R^{9} es alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6} NO_{2}, OH, halo, trifluorometilo, amino, amido opcionalmente mono- o di-sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}, alquilarilo C_{0}-C_{3}, alquilheteroarilo C_{0}-C_{3}, carboxilo, estando el arilo o heteroarilo opcionalmente sustituido con R^{10}; en el que R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino opcionalmente mono- o di-sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}, amido, sulfonilalquilo C_{1}-C_{3}, NO_{2}, OH, halo, trifluorometilo, carboxilo o heteroarilo.
29. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 28 en el que R^{9} es alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, di-(alquil C_{1}-C_{3})amino, alquil C_{1}-C_{3}-amida, arilo o heteroarilo, estando el arilo o heteroarilo opcionalmente sustituido con R^{10}; en el que
R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alcoxi C_{1}-C_{6}; amino, mono- o di-alquilamino C_{1}-C_{3}, amido, halo, trifluorometilo o heteroarilo.
30. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 29, en el que R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino opcionalmente mono- o di sustituido con alquilo C_{1}-C_{3}, amido, alquil C_{1}-C_{3}-amida, halo o heteroarilo.
31. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 30 en el que R^{10} es metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo, metoxi, cloro, amino opcionalmente mono- o di sustituido con alquilo C_{1}-C_{3}, amido o alquil C_{1}-C_{3}-tiazolilo.
32. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 31, en el que R^{8} es 1-naftilmetilo, 2-naftilmetilo, bencilo, 1-naftilo, 2-naftilo o quinolinilo, cualquiera de los cuales está sin sustituir, mono o disustituido con R^{9} como se ha definido.
33. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 32 en el que R^{8} es 1-naftilmetilo o quinolinilo, cualquiera de los cuales está sin sustituir, mono o disustituido con R^{9} como se ha definido.
34. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 33 en el que R^{8} es:
216
en la que R^{9a} es alquilo C_{1}-C_{6}; alcoxi C_{1}-C_{6}; tioalquilo C_{1}-C_{3}; amino opcionalmente sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}; alquilarilo C_{0}-C_{3}; o alquilheteroarilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, estando dicho arilo, heteroarilo o heterociclo opcionalmente sustituido con R^{10}, en el que
R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, alquil C_{0}-C_{3}-cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino opcionalmente mono- o di-sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}, amido, alquil C_{1}-C_{3}-amida; y
R^{9b} es alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, di(alquil C_{1}-C_{3})amino, (alquil C_{1}-C_{3})amida, NO_{2}, OH, halo, trifluorometilo, carboxilo.
35. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 34 en el que R^{9a} es arilo o heteroarilo, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido con R^{10} como se ha definido.
36. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 35, en el que R^{9a} se selecciona entre el grupo constituido por:
217
en el que R^{10} es H, alquilo C_{1}-C_{6}; o alquilcicloalquilo C_{0}-C_{3}, amino opcionalmente mono- o di-sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}, amido, (alquil C_{1}-C_{3})amida.
37. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 35, en el que R^{9a} es fenilo opcionalmente sustituido, preferentemente fenilo sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}; alcoxi C_{1}-C_{6}; o halo.
38. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 34, en el que R^{8} es:
218
en la que R^{10a} es H, alquilo C_{1}-C_{6} o alquilcarbociclilo C_{0}-C_{3}, amino opcionalmente mono- o di-sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}, amido, heteroarilo o heterociclilo; y R^{9b} es alquilo C_{1}-C_{8}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, di(alquil C_{1}-C_{3})amino, amido, NO_{2}, OH; hate, trifluorometilo o carboxilo.
39. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 34, en el que R^{9b} es alcoxi C_{1}-C_{6}, preferentemente metoxi.
40. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que A es C(=O)NHSO_{2}R^{2}.
41. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 40, en el que R^{2} es alquilo C_{1}-C_{6} opcionalmente sustituido, preferentemente metilo.
42. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 40, en el que R^{2} es cicloalquilo C_{3}-C_{7} opcionalmente sustituido, preferentemente ciclopropilo.
43. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 40, en el que R^{2} es alquilarilo C_{0}-C_{6} opcionalmente sustituido, preferentemente fenilo opcionalmente sustituido.
44. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que A es C(=O)OR^{1}.
45. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 44, en el que R^{1} es H o alquilo C_{1}-C_{6}, preferentemente hidrógeno, metilo, etilo o terc-butilo.
46. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que J es una cadena alquileno saturada o insaturada de 3 a 8 que contiene opcionalmente de uno a dos heteroátomos seleccionados independientemente entre: -O-, -S- o -NR^{12}-, en el que R^{12} es H, alquilo C_{1}-C_{6}, tal como metilo, o -C(=O)alquilo C_{1}-C_{6}, tal como acetilo.
47. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 46, en el que J es una cadena alquileno saturada o insaturada, de 4 a 7 miembros, todos carbono.
48. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 46, en el que J está saturado o mono-insaturado.
49. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 46, en el que J está dimensionada para proporcionar un macrociclo de 14 ó 15 átomos en el anillo.
50. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 con la fórmula Ihe
219
51. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 50, en el que J es una cadena alquileno de 5 ó 6 átomos en la cadena, saturada o parcialmente insaturada.
52. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 50-51, en el que J tiene una instauración.
53. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 50-52, en el que W es O y R^{8} es arilo o heteroarilo, cualquiera de los cuales está opcionalmente mono, di o trisustituido con R^{9}, en el que R^{9} es alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, NO_{2}, OH, halo, trifluorometilo, amino amido, alquilarilo C_{0}-C_{3}, alquilheteroarilo C_{0}-C_{3} o carboxilo, en el que el resto arilo o heteroarilo está opcionalmente sustituido con R^{10}; en el que
R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, amido, sulfonilalquilo C_{1}-C_{3}, NO_{2}, OH, halo, trifluorometilo, carboxilo o heteroarilo.
54. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 53, en el que R^{9} se selecciona entre alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, amido, arilo o heteroarilo, en el que el arilo o heteroarilo está opcionalmente sustituido con R^{10}; en el que
R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, amido, halo, trifluorometilo o heteroarilo.
55. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 50-54, en el que R^{8} es:
220
en la que R^{9a} es alquilo C_{1}-C_{6}; alcoxi C_{1}-C_{6}; tioalquilo C_{1}-C_{3}; amino opcionalmente sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}; alquilarilo C_{0}-C_{3}; o alquilheteroarilo C_{0}-C_{3}, alquilheterociclilo C_{0}-C_{3}, estando dicho arilo, heteroarilo o heterociclo opcionalmente sustituido con R^{10},
R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{7}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, amido, heteroarilo o heterociclilo; y
R^{9b} es alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, amino, amido, NO_{2}, OH, halo, trifluorometilo o carboxilo.
56. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 55, en el que R^{9a} se selecciona entre el grupo constituido por:
221
en el que R^{10} es alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{6}, amino opcionalmente mono- o di-sustituido con alquilo C_{1}-C_{6}, amido, heteroarilo o heterociclilo.
57. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51-56, en el que A es C(=O)NHSO_{2}R^{2}.
58. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 57, en el que R^{2} es metilo, ciclopropilo, o fenilo opcionalmente sustituido.
59. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1-58, y un vehículo farmacéuticamente aceptable del mismo.
60. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 59, que comprende adicionalmente un antiviral de VHC adicional, seleccionado entre inhibidores de polimerasa análogos de nucleósidos, inhibidores de proteasa, ribavirina e interferón.
61. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-58 para su uso en terapia.
62. Uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-58 en la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de infecciones por flavivirus, incluyendo VHC.
63. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-58 para su uso en la profilaxis o tratamiento de infecciones por flavivirus, incluyendo VHC.
64. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 63 para su uso en el tratamiento de infección por VHC.
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Families Citing this family (124)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY140680A (en) 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
US7176208B2 (en) 2003-04-18 2007-02-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
CL2004001161A1 (es) * 2003-05-21 2005-04-08 Boehringer Ingelheim Int Compuestos describe compuestos derivados de quinolina; composicion farmaceutica; y su uso para tratar una enfermedad causada por el virus de la hepatitis c.
US7491794B2 (en) * 2003-10-14 2009-02-17 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
JP4902361B2 (ja) 2004-01-30 2012-03-21 メディヴィル・アクチエボラーグ Ｈｃｖｎｓ−３セリンプロテアーゼインヒビター
AP2006003763A0 (en) * 2004-03-30 2006-10-31 Intermune Inc Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
US7323447B2 (en) 2005-02-08 2008-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7592336B2 (en) 2005-05-10 2009-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7601686B2 (en) 2005-07-11 2009-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
MX2008001166A (es) 2005-07-25 2008-03-18 Intermune Inc Nuevos inhibidores macrociclicos de la replicacion del virus de hepatitis c.
JP5230416B2 (ja) 2005-07-29 2013-07-10 テイボテク・フアーマシユーチカルズ Ｃ型肝炎ウイルスの大員環状阻害剤
WO2007014922A1 (en) * 2005-07-29 2007-02-08 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
TWI393723B (zh) 2005-07-29 2013-04-21 Tibotec Pharm Ltd Ｃ型肝炎病毒之大環抑制劑（九）
JO2768B1 (en) 2005-07-29 2014-03-15 تيبوتيك فارماسيوتيكالز ليمتد Large cyclic inhibitors of hepatitis C virus
CN101273042B (zh) * 2005-07-29 2013-11-06 泰博特克药品有限公司 丙型肝炎病毒的大环抑制剂
PE20070343A1 (es) * 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
US7700552B2 (en) * 2005-07-29 2010-04-20 Medivir Ab Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus
PE20070211A1 (es) * 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
ES2373685T3 (es) 2005-07-29 2012-02-07 Tibotec Pharmaceuticals Inhibidores macrocíclicos del virus de la hepatitis c.
CA2617099C (en) * 2005-07-29 2014-03-25 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
PE20070210A1 (es) * 2005-07-29 2007-04-16 Tibotec Pharm Ltd Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
UA95239C2 (ru) * 2005-07-29 2011-07-25 Тиботек Фармасьютикелз Лтд. Макроциклические ингибиторы вируса гепатита с
AR055395A1 (es) 2005-08-26 2007-08-22 Vertex Pharma Compuestos inhibidores de la actividad de la serina proteasa ns3-ns4a del virus de la hepatitis c
AU2006301966A1 (en) 2005-10-11 2007-04-19 Array Biopharma, Inc. Compounds and methods for inhibiting hepatitis C viral replication
US7772183B2 (en) 2005-10-12 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2627247C (en) * 2005-10-28 2013-04-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c virus ns2/3 activity assay
US7741281B2 (en) 2005-11-03 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
KR20090024834A (ko) * 2006-07-05 2009-03-09 인터뮨, 인크. Ｃ형 간염 바이러스 복제의 신규 억제제
EP2049474B1 (en) 2006-07-11 2015-11-04 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
NZ574605A (en) 2006-07-13 2011-11-25 Achillion Pharmaceuticals Inc 4-amino-4-oxobutanoyl peptides as inhibitors of viral replication
EP1881001A1 (en) * 2006-07-20 2008-01-23 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. HCV NS-3 serine protease inhibitors
EP1881002A1 (en) * 2006-07-20 2008-01-23 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. HCV NS-3 serine protease inhibitors
EP2056106B1 (en) * 2006-08-09 2017-10-11 Sumitomo Bakelite Company, Ltd. Sugar chain-capturing substance and use thereof
AP2009004812A0 (en) 2006-10-10 2009-04-30 Medivir Ab HCV nucleoside inhibitor
US20120220520A1 (en) * 2006-10-17 2012-08-30 Van T Klooster Gerben Albert Eleutherius Bioavailable combinations for hcv treatment
US8343477B2 (en) 2006-11-01 2013-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
US7772180B2 (en) 2006-11-09 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7763584B2 (en) 2006-11-16 2010-07-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7888464B2 (en) 2006-11-16 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8003604B2 (en) 2006-11-16 2011-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2661338C (en) * 2006-11-17 2015-05-12 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
EP2121681B1 (en) 2007-01-11 2015-04-15 Critical Outcome Technologies, Inc. Compounds and method for treatment of cancer
NZ600947A (en) * 2007-01-26 2012-12-21 Kaneq Pharma Inc Fused Aromatic Difluoromethanephosphonates as Protein Tyrosine Phosphatase 1B (PTP-1B) Inhibitors
AR065137A1 (es) * 2007-02-01 2009-05-20 Tibotec Pharm Ltd Procesos e intermediarios para la preparacion de un inhibidor de proteasa macrociclico del vhc y metodos de obtencion de los mencionados intermediarios.
BRPI0806945A2 (pt) * 2007-02-01 2014-05-06 Tibotec Pharm Ltd Formas polimórficas de um inibidor macrocíclico de hcv
BRPI0807087A2 (pt) * 2007-02-08 2014-06-10 Tibotec Pharm Ltd Inibidores de hcv macrocíclicos substituídos de pirimidina
US8383584B2 (en) * 2007-02-08 2013-02-26 Medivir Ab HCV inhibiting macrocyclic phenylcarbamates
WO2008106130A2 (en) 2007-02-26 2008-09-04 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Tertiary amine substituted peptides useful as inhibitors of hcv replication
MX2009010207A (es) * 2007-03-23 2009-10-19 Schering Corp Peptidos de hidrazido como inhibidores de proteasa ns3 de virus de hepatitis c.
WO2008141227A1 (en) 2007-05-10 2008-11-20 Intermune, Inc. Novel peptide inhibitors of hepatitis c virus replication
WO2009042668A2 (en) 2007-09-24 2009-04-02 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Urea-containing peptides as inhibitors of viral replication
US8419332B2 (en) * 2007-10-19 2013-04-16 Atlas Bolt & Screw Company Llc Non-dimpling fastener
CN102026544A (zh) * 2007-11-14 2011-04-20 益安药业 大环四唑基丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶抑制剂
US8273709B2 (en) 2007-12-14 2012-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Triazole-containing macrocyclic HCV serine protease inhibitors
US8283309B2 (en) * 2007-12-20 2012-10-09 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bridged carbocyclic oxime hepatitis C virus serine protease inhibitors
US8202996B2 (en) 2007-12-21 2012-06-19 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of N-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-N- ((1R,2S)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-L-prolinamide
CA2710039C (en) 2007-12-26 2018-07-03 Critical Outcome Technologies, Inc. Semicarbazones, thiosemicarbazones and related compounds and methods for treatment of cancer
RU2490272C2 (ru) * 2008-02-04 2013-08-20 Айденикс Фармасьютикалз, Инк. Макроциклические ингибиторы серинпротеазы
WO2009117594A1 (en) 2008-03-20 2009-09-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Fluorinated macrocyclic compounds as hepatitis c virus inhibitors
EA201071034A1 (ru) 2008-04-15 2011-06-30 Интермьюн, Инк. Новые макроциклические ингибиторы репликаций вируса гепатита с
US8163921B2 (en) 2008-04-16 2012-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7964560B2 (en) 2008-05-29 2011-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2009148923A1 (en) 2008-05-29 2009-12-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
TWI454476B (zh) 2008-07-08 2014-10-01 Tibotec Pharm Ltd 用作ｃ型肝炎病毒抑制劑之巨環吲哚衍生物
EP2318406B1 (en) 2008-07-17 2016-01-27 Critical Outcome Technologies, Inc. Thiosemicarbazone inhibitor compounds and cancer treatment methods
US8207341B2 (en) 2008-09-04 2012-06-26 Bristol-Myers Squibb Company Process or synthesizing substituted isoquinolines
UY32099A (es) 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
US8044087B2 (en) 2008-09-29 2011-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8563505B2 (en) 2008-09-29 2013-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2010065674A1 (en) 2008-12-03 2010-06-10 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
CA2750577A1 (en) 2008-12-03 2010-06-10 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
EA022134B1 (ru) 2008-12-10 2015-11-30 Ачиллион Фармасьютикалз, Инк. 4-амино-4-оксобутаноил-пептиды как ингибиторы репликации вирусов
US8283310B2 (en) 2008-12-15 2012-10-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
SI2382198T1 (sl) * 2008-12-23 2013-11-29 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Postopek in vmesne spojine za pripravo makrocikličnega inhibitorja HCV proteaze
AR075584A1 (es) 2009-02-27 2011-04-20 Intermune Inc COMPOSICIONES TERAPEUTICAS QUE COMPRENDEN beta-D-2'-DESOXI-2'-FLUORO-2'-C-METILCITIDINA Y UN DERIVADO DE ACIDO ISOINDOL CARBOXILICO Y SUS USOS. COMPUESTO.
PT2401272T (pt) 2009-02-27 2017-02-28 Janssen Pharmaceuticals Inc Sal amorfo de um inibidor macrocíclico de hcv
SG174883A1 (en) 2009-03-27 2011-11-28 Presidio Pharmaceuticals Inc Fused ring inhibitors of hepatitis c
WO2010118078A1 (en) 2009-04-08 2010-10-14 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors
TW201117812A (en) 2009-08-05 2011-06-01 Idenix Pharmaceuticals Inc Macrocyclic serine protease inhibitors
WO2011112516A1 (en) 2010-03-08 2011-09-15 Ico Therapeutics Inc. Treating and preventing hepatitis c virus infection using c-raf kinase antisense oligonucleotides
AU2011229164B2 (en) 2010-03-16 2015-11-26 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Processes and intermediates for preparing a macrocyclic protease inhibitor of HCV
EP2552915B1 (en) 2010-04-01 2017-07-19 Critical Outcome Technologies Inc. Compounds for the treatment of hiv
CA2796243A1 (en) 2010-04-13 2011-10-20 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Combination of a macrocyclic inhibitor of hcv, a non-nucleoside and a nucleoside
WO2011149856A1 (en) 2010-05-24 2011-12-01 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
AR082619A1 (es) 2010-08-13 2012-12-19 Hoffmann La Roche Inhibidores del virus de la hepatitis c
SG189985A1 (en) 2010-10-26 2013-06-28 Presidio Pharmaceuticals Inc Inhibitors of hepatitis c virus
MX2013004906A (es) 2010-11-01 2013-12-06 Genoscience Pharma Nuevos inhibidores especificos de la proteasa ns3 de hcv.
EA201390988A1 (ru) 2010-12-30 2014-04-30 Энанта Фармасьютикалз, Инк. Фенантридиновые макроциклические ингибиторы сериновой протеазы вируса гепатита c
CA2822556A1 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Enanta Pharmaceuticals, Inc Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US9353100B2 (en) 2011-02-10 2016-05-31 Idenix Pharmaceuticals Llc Macrocyclic serine protease inhibitors, pharmaceutical compositions thereof, and their use for treating HCV infections
WO2012123298A1 (en) 2011-03-11 2012-09-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral compounds
US8957203B2 (en) 2011-05-05 2015-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
US8691757B2 (en) 2011-06-15 2014-04-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
BR112013032188A2 (pt) 2011-06-23 2016-12-20 Digna Biotech Sl composição, produto e método para tratar pacientes com hepatite c crônica
US20120328565A1 (en) 2011-06-24 2012-12-27 Brinkman John A Antiviral compounds
CN107011339A (zh) 2011-09-22 2017-08-04 杨森制药公司 用于制备hcv的大环蛋白酶抑制剂的方法和中间体
RU2014117587A (ru) 2011-10-10 2015-11-20 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Противовирусные соединения
KR20140104030A (ko) 2011-12-16 2014-08-27 에프. 호프만-라 로슈 아게 Hcv ns5a의 억제제
AU2012357940B2 (en) 2011-12-20 2017-02-16 Riboscience Llc 2',4'-difluoro-2'-methyl substituted nucleoside derivatives as inhibitors of HCV RNA replication
MX350810B (es) 2011-12-20 2017-09-20 Riboscience Llc Derivados de los nucleosidos sustituidos en 4 '-azido, 3 '-fluoro como inhibidores de la replicacion del rna del vhc.
US9040479B2 (en) 2012-01-12 2015-05-26 Cocrystal Pharma, Inc. HCV NS3 protease inhibitors
JP6092261B2 (ja) 2012-02-24 2017-03-08 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 抗ウイルス化合物
US20140010783A1 (en) 2012-07-06 2014-01-09 Hoffmann-La Roche Inc. Antiviral compounds
EA025560B1 (ru) 2012-10-19 2017-01-30 Бристол-Майерс Сквибб Компани Ингибиторы вируса гепатита с
US9334279B2 (en) 2012-11-02 2016-05-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2914613B1 (en) 2012-11-02 2017-11-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US9643999B2 (en) 2012-11-02 2017-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9409943B2 (en) 2012-11-05 2016-08-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN105073726B (zh) 2013-01-23 2017-05-31 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗病毒三唑衍生物
BR112015021429A2 (pt) 2013-03-05 2017-07-18 Hoffmann La Roche compostos antivirais
JP6342922B2 (ja) 2013-03-07 2018-06-13 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
WO2014152928A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Novel processes for producing sovaprevir
US9085607B2 (en) 2013-03-15 2015-07-21 Achillion Pharmaceuticals, Inc. ACH-0142684 sodium salt polymorph, composition including the same, and method of manufacture thereof
WO2014145507A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Achillion Pharmaceuticals, Inc. A process for making a 4-amino-4-oxobutanoyl peptide cyclic analogue, an inhibitor of viral replication, and intermediates thereof
AU2014227849A1 (en) 2013-03-15 2015-10-01 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Sovaprevir polymorphs and methods of manufacture thereof
JP6366693B2 (ja) 2013-05-16 2018-08-01 リボサイエンス・エルエルシー ４’−フルオロ−２’−メチル置換ヌクレオシド誘導体
US20180200280A1 (en) 2013-05-16 2018-07-19 Riboscience Llc 4'-Fluoro-2'-Methyl Substituted Nucleoside Derivatives as Inhibitors of HCV RNA Replication
MA38678A1 (fr) 2013-05-16 2017-07-31 Riboscience Llc Dérivés nucléosidiques 4'-azido, 3'désoxy-3'-fluoro substitués
WO2015103490A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 Abbvie, Inc. Solid antiviral dosage forms
EP2899207A1 (en) 2014-01-28 2015-07-29 Amikana.Biologics New method for testing HCV protease inhibition
AU2018335411B2 (en) 2017-09-21 2024-06-27 Riboscience Llc 4'-fluoro-2'-methyl substituted nucleoside derivatives as inhibitors of HCV RNA replication
WO2019070979A1 (en) 2017-10-04 2019-04-11 University Of Florida Research Foundation METHODS AND COMPOSITIONS FOR ENHANCED COMFORT CONTACT LENS
US12083099B2 (en) 2020-10-28 2024-09-10 Accencio LLC Methods of treating symptoms of coronavirus infection with viral protease inhibitors

Family Cites Families (68)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5008294A (en) * 1985-02-11 1991-04-16 Chemex Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating tumors with compositions of catecholic butanes
CA1283906C (en) * 1983-05-09 1991-05-07 Makoto Sunagawa .beta.-LACTAM COMPOUNDS AND PRODUCTION THEREOF
GB8929070D0 (en) * 1989-12-22 1990-02-28 Fujisawa Pharmaceutical Co Peptide compounds,processes for preparation thereof and pharmaceutical composition comprising the same
US5340801A (en) * 1991-05-08 1994-08-23 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Compounds having cholecystokinin and gastrin antagonistic properties
US5409690A (en) * 1993-06-23 1995-04-25 Chemex Pharmaceuticals, Inc. Treatment of multidrug resistant diseases in cancer cell by potentiating with masoprocol
US6900238B1 (en) * 1995-12-07 2005-05-31 The Scripps Research Institute HIV protease inhibitors
KR100509388B1 (ko) 1996-10-18 2005-08-23 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 세린 프로테아제, 특히 간염 ｃ 바이러스 ｎｓ３ 프로테아제의 저해제
ES2234144T3 (es) 1997-08-11 2005-06-16 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Analogos de peptidos inhibidores de la hepatitis c.
WO1999007733A2 (en) 1997-08-11 1999-02-18 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor peptides
WO1999051613A1 (en) 1998-04-03 1999-10-14 Medivir Ab Prodrugs of phosphorous-containing pharmaceuticals
JPH11292840A (ja) * 1998-04-06 1999-10-26 Soyaku Gijutsu Kenkyusho:Kk ノルスタチン誘導体又はその塩
US6639053B1 (en) 1998-06-24 2003-10-28 Tetsuya Toyoda HCV-derived RNA polymerase gene
AR022061A1 (es) 1998-08-10 2002-09-04 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Peptidos inhibidores de la hepatitis c, una composicion farmaceutica que los contiene, el uso de los mismos para preparar una composicion farmaceutica, el uso de un producto intermedio para la preparacion de estos peptidos y un procedimiento para la preparacion de un peptido analogo de los mismos.
US6323180B1 (en) * 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
DE19915178A1 (de) 1999-04-03 2000-10-05 Univ Mainz Johannes Gutenberg Hepatitis C Virus Zellkultursystem
UA74546C2 (en) * 1999-04-06 2006-01-16 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Macrocyclic peptides having activity relative to hepatitis c virus, a pharmaceutical composition and use of the pharmaceutical composition
GB9925955D0 (en) * 1999-11-02 1999-12-29 Angeletti P Ist Richerche Bio Hcv n33 protease inhibitors
JP2003526634A (ja) * 1999-12-03 2003-09-09 ブリストル−マイヤーズ スクイブ ファーマ カンパニー Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３プロテアーゼのα−ケトアミド阻害剤
ES2240446T3 (es) 2000-04-03 2005-10-16 Vertex Pharma Inhibidores de serina proteasas, particularmente la proteasa ns3 del virus de la hepatitis c.
AR029903A1 (es) * 2000-04-05 2003-07-23 Schering Corp Inhibidores macrociclicos de la ns3-serina proteasa, del virus de la hepatitis c, que comprenden partes p2 n-ciclicas, composiciones farmaceuticas y utilizacion de los mismos para la manufactura de un medicamento
DK1385870T3 (da) * 2000-07-21 2010-07-05 Schering Corp Peptider som inhibitorer af NS3-serinprotease fra hepatitis C-virus
AR034127A1 (es) 2000-07-21 2004-02-04 Schering Corp Imidazolidinonas como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c, composicion farmaceutica, un metodo para su preparacion, y el uso de las mismas para la manufactura de un medicamento
US7244721B2 (en) 2000-07-21 2007-07-17 Schering Corporation Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
DE60119968T2 (de) 2000-11-20 2007-01-18 Bristol-Myers Squibb Co. Hepatitis c tripeptid inhibitoren
KR20030091946A (ko) * 2000-12-12 2003-12-03 쉐링 코포레이션 Ｃ형 간염 바이러스의 ｎｓ3-세린 프로테아제억제제로서의 디아릴 펩티드
CA2449504A1 (en) * 2001-07-11 2003-01-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Bridged bicyclic serine protease inhibitors
US7241796B2 (en) 2001-10-24 2007-07-10 Vertex Pharmaceuticals Inc. Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease
US6867185B2 (en) 2001-12-20 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
US6894072B2 (en) 2002-01-23 2005-05-17 Schering Corporation Compounds as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
CA2369711A1 (en) 2002-01-30 2003-07-30 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
CA2370396A1 (en) 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
CA2369970A1 (en) 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
US7091184B2 (en) * 2002-02-01 2006-08-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6828301B2 (en) 2002-02-07 2004-12-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for hepatitis C viral protease inhibitors
KR20040099425A (ko) 2002-04-11 2004-11-26 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 세린 프로테아제, 특히 ｃ형 간염 바이러스 ｎｓ3-ｎｓ4프로테아제의 억제제
JP4312711B2 (ja) 2002-05-20 2009-08-12 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー ヘテロ環式スルホンアミドｃ型肝炎ウイルス阻害剤
WO2004032827A2 (en) 2002-05-20 2004-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
MY140680A (en) 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
JP4271148B2 (ja) 2002-05-20 2009-06-03 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー 置換シクロアルキルｐ１’ｃ型肝炎ウイルスインヒビター
JP2005531638A (ja) * 2002-07-01 2005-10-20 ファルマシア・アンド・アップジョン・カンパニー・エルエルシー Ｈｃｖｎｓ５ｂポリメラーゼ阻害剤
US20040033959A1 (en) 2002-07-19 2004-02-19 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions for hepatitis C viral protease inhibitors
WO2004026896A2 (en) 2002-09-23 2004-04-01 Medivir Ab Hcv ns-3 serine protease inhibitors
EP1408031A1 (en) * 2002-10-09 2004-04-14 3 D Gene Pharma Pyrolidine derivatives useful in treatment of hepatitis C virus infection
US20050075279A1 (en) 2002-10-25 2005-04-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
CA2498653C (en) 2002-10-29 2010-12-14 Boehringer Ingelheim International Gmbh Inhibitor-resistant hcv ns3 protease
US20050159345A1 (en) 2002-10-29 2005-07-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Composition for the treatment of infection by Flaviviridae viruses
CA2515216A1 (en) 2003-02-07 2004-08-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US6908901B2 (en) 2003-03-05 2005-06-21 Boehringer Ingelheim International, Gmbh Hepatitis C inhibitor peptide analogs
EP1613353A1 (en) 2003-04-02 2006-01-11 Boehringer Ingelheim International GmbH Pharmaceutical compositions for hepatitis c viral protease inhibitors
WO2004092161A1 (en) 2003-04-11 2004-10-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hcv ns3-ns4a protease
JP4733023B2 (ja) 2003-04-16 2011-07-27 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｃ型肝炎ウイルスの大環状イソキノリンペプチド阻害剤
KR101031825B1 (ko) 2003-04-18 2011-04-29 이난타 파마슈티칼스, 인코포레이티드 거대고리형 퀴녹살리닐 ｃ형 간염 세린 단백질분해효소억제제
CL2004001161A1 (es) 2003-05-21 2005-04-08 Boehringer Ingelheim Int Compuestos describe compuestos derivados de quinolina; composicion farmaceutica; y su uso para tratar una enfermedad causada por el virus de la hepatitis c.
WO2004113365A2 (en) 2003-06-05 2004-12-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c serine protease tri-peptide inhibitors
US7125845B2 (en) * 2003-07-03 2006-10-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Aza-peptide macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
WO2005037826A1 (en) * 2003-10-17 2005-04-28 Incyte Corporation Substituted cyclic hydroxamates as inhibitors of matrix metalloproteinases
JP4902361B2 (ja) 2004-01-30 2012-03-21 メディヴィル・アクチエボラーグ Ｈｃｖｎｓ−３セリンプロテアーゼインヒビター
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
WO2007014922A1 (en) 2005-07-29 2007-02-08 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
JP5230416B2 (ja) 2005-07-29 2013-07-10 テイボテク・フアーマシユーチカルズ Ｃ型肝炎ウイルスの大員環状阻害剤
TWI393723B (zh) 2005-07-29 2013-04-21 Tibotec Pharm Ltd Ｃ型肝炎病毒之大環抑制劑（九）
CN101273042B (zh) 2005-07-29 2013-11-06 泰博特克药品有限公司 丙型肝炎病毒的大环抑制剂
PE20070210A1 (es) 2005-07-29 2007-04-16 Tibotec Pharm Ltd Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
ES2373685T3 (es) 2005-07-29 2012-02-07 Tibotec Pharmaceuticals Inhibidores macrocíclicos del virus de la hepatitis c.
CA2617099C (en) 2005-07-29 2014-03-25 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
JO2768B1 (en) 2005-07-29 2014-03-15 تيبوتيك فارماسيوتيكالز ليمتد Large cyclic inhibitors of hepatitis C virus
US7700552B2 (en) 2005-07-29 2010-04-20 Medivir Ab Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus
PE20070343A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c

Also Published As

Publication number Publication date
JP2007524670A (ja) 2007-08-30
HK1100881A1 (en) 2007-09-28
WO2005073216A2 (en) 2005-08-11
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IL176921A (en) 2012-03-29
NL300703I2 (nl) 2017-07-20
LU92595I2 (fr) 2015-11-02
EP1713823A2 (en) 2006-10-25
AU2005207815A1 (en) 2005-08-11
EP1713822B1 (en) 2010-03-17
HRP20100048T1 (hr) 2010-04-30
EA200601400A1 (ru) 2007-02-27
CA2552317C (en) 2013-12-10
ECSP066725A (es) 2006-12-29
RS51243B (sr) 2010-12-31
IL176848A0 (en) 2006-10-31
KR20120090077A (ko) 2012-08-16
DK1713823T3 (da) 2010-03-08
UA84189C2 (en) 2008-09-25
IL176921A0 (en) 2006-12-10
NZ548740A (en) 2010-06-25
CA2552317A1 (en) 2005-08-11
US20100166706A1 (en) 2010-07-01
TW200538450A (en) 2005-12-01
MY153011A (en) 2014-12-31
US7608590B2 (en) 2009-10-27
CR8540A (es) 2009-01-16
EP1713823B1 (en) 2009-11-11
EA014584B1 (ru) 2010-12-30
JP2007519716A (ja) 2007-07-19
HK1104044A1 (en) 2008-01-04
JP5795619B2 (ja) 2015-10-14
JP2011140488A (ja) 2011-07-21
NI200600168A (es) 2016-02-11
NZ548739A (en) 2010-10-29
ECSP066726A (es) 2006-12-29
EP1713822A2 (en) 2006-10-25
KR20060126567A (ko) 2006-12-07
WO2005073195A2 (en) 2005-08-11
CA2552319A1 (en) 2005-08-11
US20100003216A1 (en) 2010-01-07
BRPI0506948B1 (pt) 2018-09-18
AR047793A1 (es) 2006-02-22
PL1713823T3 (pl) 2010-04-30
DK1713822T3 (da) 2010-07-19
US20170196849A1 (en) 2017-07-13
ZA200607214B (en) 2008-04-30
WO2005073195A3 (en) 2005-09-29
US20070203072A1 (en) 2007-08-30
AU2005207816C1 (en) 2015-05-07
AR048401A1 (es) 2006-04-26
JP4902361B2 (ja) 2012-03-21
JP5248783B2 (ja) 2013-07-31
AU2005207816A1 (en) 2005-08-11
DE602005019979D1 (en) 2010-04-29
ES2336009T8 (es) 2014-11-05
ES2336009T3 (es) 2010-04-07
CY1109779T1 (el) 2014-09-10
TW200538449A (en) 2005-12-01
CR8539A (es) 2009-02-23
MY146349A (en) 2012-08-15
ATE461209T1 (de) 2010-04-15
AU2005207816B2 (en) 2011-04-14
CA2552319C (en) 2012-08-21
NO341392B1 (no) 2017-10-30
IL176848A (en) 2015-07-30
EA200601399A1 (ru) 2006-12-29
DE602005017582D1 (en) 2009-12-24
KR101159575B1 (ko) 2012-07-06
BRPI0506945A (pt) 2007-06-12
KR101217036B1 (ko) 2013-01-02
WO2005073216A3 (en) 2005-10-06
BRPI0506948A (pt) 2007-06-12
PL1713822T3 (pl) 2010-08-31
TWI367211B (en) 2012-07-01
EA012410B1 (ru) 2009-10-30
SI1713823T1 (sl) 2010-04-30
ATE448243T1 (de) 2009-11-15
US10172846B2 (en) 2019-01-08
US20070161574A1 (en) 2007-07-12
US7671032B2 (en) 2010-03-02
JP2014055161A (ja) 2014-03-27
UA84050C2 (en) 2008-09-10

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