ES2343697T3 - Muestreador automatico de semillas libre de contaminacion y procedimientos de muestreo, evaluacion y reagrupamiento de semillas. - Google Patents
Muestreador automatico de semillas libre de contaminacion y procedimientos de muestreo, evaluacion y reagrupamiento de semillas. Download PDFInfo
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Abstract
Un sistema automático muestreador de semillas (10), que comprende: una estación de molturación (400) para retirar de una semilla al menos una porción de material de envoltura seminal; una estación de muestreo (500) para extraer una muestra de material de semilla de la semilla de la que la envoltura seminal ha sido retirada; un subsistema de transporte de semillas (300) para transportar la semilla entre la estación de molturación (400) y la estación de muestreo (500); y un subsistema de depósito de semillas (1000) para transportar la semilla desde el subsistema de transporte de semillas (300) hasta un pocillo seleccionado de una bandeja de semillas (18) después de que la semilla ha sido muestreada.
Description
Muestreador automático de semillas libre de
contaminación y procedimientos de muestreo, evaluación y
reagrupamiento de semillas.
La presente divulgación se refiere al campo de
los sistemas y procedimientos para la toma de muestras de
materiales biológicos, como por ejemplo semillas.
Las manifestaciones vertidas en la presente
sección simplemente proporcionan información acerca de los
antecedentes relacionados con la presente divulgación y pueden no
formar parte de la técnica anterior.
En el desarrollo y mejora de las plantas, se
llevan a cabo mejoras genéticas de la planta, ya sea mediante
reproducción selectiva o manipulación genética, y cuando se obtiene
una mejora deseable, se produce un aumento cuantitativo rentable
mediante la plantación y recolección de semillas a lo largo de
varias generaciones. No todas las semillas expresan los rasgos
deseados y, por tanto, estas semillas necesitan ser retiradas de la
población de cultivo. Para acelerar el proceso de engrosamiento de
la población vegetal, se toman y evalúan muestras estadísticas de
la población que no expresan de manera satisfactoria el rasgo
deseado. Sin embargo, este muestreo estadístico necesariamente
permite que algunas semillas sin el rasgo deseable permanezcan en
la población de cultivo y, del mismo modo, puede excluir, de modo
inadvertido algunas semillas con el rasgo deseable, de la población
deseada, puede excluir, de modo inadvertido, algunas semillas con el
rasgo deseable, de la población deseada.
El documento WO 03/100381A; la Solicitud de
Patente estadounidense con el número de serie 11/213,430 (depositada
el 26 de agosto de 2005); la Solicitud de Patente estadounidense
con el número de serie 11/213,431 (depositada el 26 de agosto de
2005); la Solicitud de Patente estadounidense número 11/213,432
(depositada el 26 de agosto de 2005); la Solicitud de Patente
estadounidense con el número de serie 11/213,434 (depositada el 26
de agosto de 2005); y la Solicitud de Patente estadounidense con el
número de serie 11/213,435 (depositada el 26 de agosto de 2005)
divulgan unos aparatos y unos sistemas para el muestreo automático
de semillas así como unos procedimientos de muestreo, evaluación y
reagrupamiento de semillas.
Sin embargo, algunos sistemas de muestreo
automático y de evaluación conocidos introducen un margen para que
diversos tipos de contaminación corrompan las muestras recogidas y
distorsionen los resultados. Por consiguiente, existe la necesidad
del muestreo automático de semillas de una forma que permita la
sustancial inexistencia de contaminación.
La presente divulgación se refiere a unos
sistemas y unos procedimientos de muestreo no destructivo de
material de muestreo a partir de semillas. Los procedimientos están
especialmente adaptados para su desarrollo automático, lo que
permite un muestreo mayor del que la práctica anterior permitía.
Con el muestreo no destructivo, automático, que permiten, al menos,
algunas de las formas de realización de la presente divulgación, es
posible evaluar cada semilla de la población de cultivo, y desechar
las semillas que no expresen un rasgo deseado. Esto acelera en
gran medida el proceso de engrosamiento de una población de semillas
determinada, y puede traducirse en una mejora de la población de
cultivo final.
Diversas formas de realización de la presente
divulgación facilitan la evaluación de la mayoría o de todas de las
semillas de una población de cultivo antes de la plantación para que
el tiempo y los recursos no se dilapiden en el cultivo de plantas
sin los deseados rasgos. Así mismo, diversas formas de realización
ofrecen la posibilidad de un muestreo automático de las semillas
sin riesgo de contaminación, eliminando de esta forma, de manera
sustancial el entrecruzamiento entre muestras.
La presente invención proporciona un sistema
muestreador de semillas automático que incluye una estación de
molturación para la retirada de al menos una porción del material de
la envoltura seminal de una semilla y una estación de muestreo para
la extracción de una muestra del material de semilla de la semilla
de la que la envoltura seminal ha sido retirada. Un subsistema de
transporte de semillas transporta la semilla entre la estación de
molturación y la estación de muestreo y un subsistema de depósito de
semillas transporta la semilla desde el subsistema de transporte
de semillas hasta un pocillo seleccionado de una bandeja de semillas
después de que la semilla ha sido muestreada.
En otras formas de realización adicionales
distintas, la presente divulgación ofrece un procedimiento de
extracción del material de muestra de una semilla para su
evaluación de acuerdo con la reivindicación 11. El procedimiento
incluye la carga de una semilla en un portasemillas de un sistema
muestreador automático de semillas y la retirada de la semilla de
al menos una porción del material de envoltura seminal en una
estación de molturación del sistema muestreador de semillas. Una
muestra del material de semilla es entonces extraída de la semilla
donde la envoltura seminal ha sido retirada en una estación de
muestreo del sistema muestreador de semillas. La semilla muestreada
es entonces transportada hasta una cavidad seleccionada de una
bandeja de semillas utilizando un subsistema de depósito de
semillas del sistema muestreador de semillas. La muestre extraída es
transportada simultáneamente hasta un pocillo seleccionado de una
bandeja de muestras utilizando un susbsistema de muestreo de
muestras del sistema muestreador de semillas. La muestra depositada
puede entonces ser evaluada respecto de al menos una característica
deseada de la semilla.
Los sistemas y procedimientos de la presente
divulgación facilitan el muestreo automático no destructivo de
semillas de una manera sustancialmente libre de contaminación.
Dichos sistemas y procedimientos permiten la evaluación y
clasificación de grandes cantidades de semillas, facilitando con
ello la reagrupación de poblaciones de semillas con rasgos
deseables. Estas y otras características distintivas y ventajas
resultarán en parte evidentes, y en parte se pondrán de manifiesto
a lo largo de la presente memoria.
Otras áreas de aplicabilidad de las enseñanzas
contenidas en la presente memoria se pondrán de manifiesto a partir
de la descripción ofrecida en la presente memoria. Debe entenderse
que la descripción y los ejemplos específicos se ofrecen únicamente
con fines ilustrativos y no pretenden limitar el alcance de las
enseñanzas contenidas en la presente memoria.
\vskip1.000000\baselineskip
Los dibujos descritos en la presente memoria
tienen solo fines ilustrativos y no pretenden limitar en modo
alguno el alcance de las enseñanzas contenidas en la presente
memoria.
La Figura 1 es una vista en perspectiva de un
sistema muestreador de semillas de acuerdo con diversas formas de
realización de la presente divulgación.
La Figura 2 es una vista en perspectiva de
tamaño ampliado de una estación de carga de semillas del sistema
muestreador de semillas mostrado en la Figura 1, de acuerdo con
diversas formas de realización de la presente divulgación.
La Figura 3 es una vista en perspectiva de
tamaño ampliado de un sistema de orientación de semillas del sistema
muestreador de semillas mostrado en la Figura 1, de acuerdo con
diversas formas de realización de la presente divulgación.
La Figura 4 es una vista en alzado lateral del
sistema de orientación de semillas mostrado en la Figura 3, de
acuerdo con diversas formas de realización de la presente
divulgación.
La Figura 5 es una vista en perspectiva del
sistema de orientación de semillas mostrado en la Figura 3 que
describe un portasemillas, de acuerdo con diversas formas de
realización de la presente divulgación.
La Figura 6 es una vista en perspectiva de
tamaño ampliado del portasemillas mostrado en la Figura 5 de
acuerdo con diversas formas de realización de la presente
divulgación.
La Figura 7 es una vista en alzado lateral de
tamaño ampliado del portasemillas mostrado en la Figura 6 de
acuerdo con diversas formas de realización de la presente
divulgación.
La Figura 8 es una vista en perspectiva de una
estación de molturación y de un subsistema de transporte de
semillas del sistema muestreador de semillas mostrado en la Figura
1, de acuerdo con diversas formas de realización de la presente
divulgación.
La Figura 9 es una vista en perspectiva de una
estación de muestreo del sistema muestreador de semillas mostrado
en la Figura 1, de acuerdo con diversas formas de realización de la
presente divulgación.
La Figura 10 es una vista en alzado lateral de
tamaño ampliado de la estación de muestreo de semillas, mostrado en
la Figura 9, durante el funcionamiento del sistema muestreador de
semillas mostrado en la Figura 1, de acuerdo con diversas formas de
realización de la presente divulgación.
La Figura 11 es una vista en alzado lateral de
un aparato de suministro de líquido del sistema de muestreo de
semillas, mostrado en la Figura 1, en posición retraída, de acuerdo
con diversas formas de realización de la presente divulgación.
La Figura 12 es una vista en alzado lateral del
aparato de suministro de líquido mostrado en la Figura 11, en
posición extendida, de acuerdo con diversas formas de realización de
la presente divulgación.
La Figura 13 es una vista en perspectiva de una
plataforma de bandejas de muestras del sistema muestreador de
semillas mostrado en la Figura 1, de acuerdo con diversas formas de
realización de la presente divulgación.
La Figura 14 es una vista en perspectiva de una
estación de tratamiento de semillas del sistema muestreador de
semillas mostrado en la Figura 1, de acuerdo con diversas formas de
realización de la presente divulgación.
La Figura 15 es una vista en alzado lateral de
un transportador de semillas del sistema muestreador de semillas
mostrado en la Figura 1, de acuerdo con diversas formas de
realización de la presente divulgación.
La Figura 16 es una vista en perspectiva de una
plataforma de bandejas de semillas del sistema muestreador de
semillas de la Figura 1, de acuerdo con diversas formas de
realización de la presente divulgación.
La Figura 17 es una vista en alzado lateral de
una estación de carga de los tubos de recogida del sistema
muestreador de semillas mostrado en la Figura 1, de acuerdo con
diversas formas de realización de la presente divulgación.
La Figura 18 es una vista en perspectiva de un
subsistema de preparación de los tubos de recogida del sistema
muestreador de semillas mostrado en la Figura 1, de acuerdo con
diversas formas de realización de la presente invención.
La Figura 19 es una vista en perspectiva de una
estación de limpieza del sistema muestreador de semillas de la
Figura 1, de acuerdo con diversas formas de realización de la
presente divulgación.
Los números de referencia correspondientes
indican las correspondientes partes a lo largo de las distintas
vistas de los dibujos.
\vskip1.000000\baselineskip
A lo largo de la presente memoria descriptiva,
las mismas referencias numerales serán utilizadas para referirse a
los mismos elementos.
La Figura 1 ilustra un sistema muestreador
automático de semillas 10, de acuerdo con diversas formas de
realización de la presente divulgación.
Como elementos a destacar, el sistema
muestreador de semillas 10 incluye una estación de carga de semillas
100, un sistema de orientación de semillas 200, un subsistema de
transporte de semillas 300, una estación de molturación 400, una
estación de muestreo 500, un subsistema de transporte y recogida de
muestras 600, un subsistema de suministro de líquido 700, un
subsistema de depósito de muestras 800, una estación de tratamiento
de semillas 900, y un subsistema de depósito de semillas 1000.
El sistema muestredaor de semillas 10 está
estructurado y puede ponerse en funcionamiento para aislar una
semilla de un cuenco de semillas 104 de la estación de carga de
semillas 100, orientar la semilla en la estación de orientación de
semillas 200 y transferir la semilla hasta la estación de
molturación 400, por medio del subsistema de transporte 300. El
sistema muestreador de semillas 10 está, así mismo, estructurado y
puede accionarse para retirar una porción del material de envoltura
seminal en la estación de molturación 400, transferir la semilla
hasta la estación de muestreo 500, por medio del susbsistema de
transporte de semillas 300, donde el material de la muestra es
extraído de la semilla en el punto donde el material de envoltura
seminal ha sido retirado. El sistema muestreador de semillas 10
está también estructurado y puede ser accionado para transportar la
muestra extraída hasta el subsistema de depósito de muestras 800,
por medio del subsistema de transporte de muestras 700 y depositar
la muestra extraída dentro de la bandeja de muestras 14 utilizando
un líquido, de acuerdo con lo descrito con mayor detenimiento más
adelante. Así mismo, el sistema muestreador de semillas 10 está
estructurado y puede ser accionado para tratar, por ejemplo, aplicar
un revestimiento protector a la porción al descubierto de la
semilla en la estación de tratamiento de semillas 900 y transportar
la semilla hasta el subsistema de depósito de semillas 1000, donde
la semilla es depositada dentro de una bandeja de semillas 18
situada sobre una plataforma del subsistema de depósito de semillas
1000.
Debe entenderse que el sistema muestreador de
semillas 10, tal y como se muestra y describe en la presente
memoria, incluye diversas abrazaderas fijas, vigas, plataformas,
pedestales, pies, etc. a los o a las cuales los componentes,
dispositivos, mecanismos, sistemas, subsistemas, montajes y
submontajes descritos en la presente memoria están acoplados,
conectados y/o montados. Aunque dichas abrazaderas, vigas,
plataformas, pedestales, pies, etc. son necesarios para la
construcción del sistema muestreador de semillas 10, la descripción
de su colocación, orientación e interconexiones no es necesaria
para que el experto en la materia aprehenda fácilmente y de manera
acabada la estructura, la función y el manejo del sistema
muestreador de semillas 10. En particular, dichas abrazaderas,
vigas, plataformas, pedestales, pies, etc. se ilustran con claridad
a lo largo de las figuras y, en cuanto tales, su emplazamiento,
orientación e interconexiones resultan fácilmente comprendidas por
parte del experto en la materia. Por consiguiente, por razones de
sencillez, dichas abrazaderas, vigas, plataformas, pedestales,
pies, etc. se designarán en la presente memoria simplemente como
estructuras de soporte del sistema, sin hacer ulterior referencia a
su colocación, orientación e interconexiones.
Con referencia ahora a las Figuras 2 y 3, en
diversas formas de realización, la estación de carga de semillas
incluye el cuenco de recogida de semillas 104, y una rueda de
separación 108. La rueda de separación 108 está montada para su
rotación en un plano vertical, de tal manera que una porción de la
rueda de separación 108 desciende por dentro de un depósito
interior del cuenco de recogida de semillas 104. Otra porción de la
rueda de separación 108 se extiende por fuera del cuenco de
recogida de semillas 104, de tal manera que una cara 120 de la
rueda de separación 108 está situada en posición adyacente a un
colector de semillas 124. La rueda de separación de semillas 108
incluye una pluralidad de orificios rebajados separados 128 que se
extienden a través de la cara 120 y están acoplados y comunicados
con el sistema de vacío (no mostrado) de forma que un vacío pueda
disponerse en cada uno de los orificios separados 128.
Para poner en marcha el funcionamiento del
sistema muestredaor de semillas 10, las semillas que van a ser
muestreadas y evaluadas son situadas en el depósito interior del
cuenco de semillas 104, aplicándose un vacío sobre al menos alguno
de los orificios rebajados 128, por ejemplo, los orificios rebajados
128 situados en la cara 120 de la porción de la rueda de separación
108 que se extiende por dentro del depósito interior del cuenco de
semillas 104. La rueda de separación de semillas 108 se hace
entonces girar de forma progresiva, mediante un motor de indización
132, de tal manera que los orificios rebajados 128 roten
secuencialmente a través del depósito interior del cuenco de
semillas 104 salgan de la cubeta de recogida de semillas 104 y
pasen por el colector de semillas 124 antes de volver a entrar en el
depósito interior del cuenco de semillas 104. Cuando la rueda de
separación rueda de forma progresiva y los orificios rebajados 128
pasan progresivamente a través del depósito interior del cuenco de
semillas 104, las semillas individuales son recogidas y retenidas
en cada orificio rebajado 128 mediante el vacío aplicado en los
orificios rebajados respectivos 128. Cuando la rueda de separación
108 gira progresivamente, las semillas son conducidas fuera del
cuenco de semillas 104 hasta el colector de semillas 124, donde
cada semilla es retirada de la cara 120 de la rueda de separación
108. Después de que cada semilla es retirada de la rueda de
separación 108, la semilla es canalizada hasta un tubo de
transferencia 136 de la estación de carga. La semilla, a
continuación, se hace pasar a través del tubo de transferencia 136
de la estación de carga por medio de la gravedad, el vacío o un
aire impulsado, hasta el interior de un aparato de formación de
imágenes 204 de la semilla del sistema de orientación de semillas
200. El tubo de transferencia 136 de la estación de carga, tiene el
tamaño preciso para que ofrezca un diámetro interior que solo
permite el paso de la semilla a través del tubo de transferencia 136
de la estación de carga en una orientación longitudinal. Esto es,
la semilla solo puede pasar a través del tubo de transferencia 136
de la estación de carga en una orientación de punta hacia arriba o
de punta hacia abajo y el diámetro interior solo admitirá la
semilla para que se voltee o bascule cuando pase a través del tubo
de transferencia 136 de la estación de carga.
En diversas formas de realización, el colector
de semillas 124 incluye un limpiador (no mostrado) que físicamente
desaloja cada semilla del respectivo orificio rebajado 128 cuando la
rueda de separación 108 rota progresivamente más allá del colector
de semillas 124. A continuación, la semilla desalojada pasa a través
del tubo de transferencia 136 de la estación de carga hasta el
aparato de formación de imágenes 204. Como alternativa, en diversas
formas de realización, cada semilla puede ser liberada de su
orificio rebajado respectivo 128 mediante la retirada temporal del
vacío sobre cada orificio rebajado individual 128 cuando el orificio
rebajado individual 128 esté situado en posición adyacente al
colector de semillas 124. A continuación, la semilla desalojada es
transferida al aparato de formación de imágenes 204, a través del
tubo de transferencia 136 de la estación de carga. En otras formas
de realización adicionales, cada semilla puede ser propulsada desde
el orificio rebajado respectivo 128 mediante la provisión temporal
de aire a presión sobre cada orificio rebajado individual 128 cuando
el orificio rebajado individual 128 esté situado en posición
adyacente al colector de semillas 124. A continuación, la semilla
desalojada es transferida hasta el aparato de formación de imágenes
204, a través del tubo de transferencia 136 de la estación de
carga.
Así mismo, en diversas formas de realización la
estación de carga de semillas 100 puede incluir una tolva de
semillas a granel 140 que presenta una superficie perfilada y un
mecanismo alimentador vibratorio 144. Grandes cantidades de
semillas pueden ser situadas en la tolva 140 en la que la semilla es
canalizada sobre el mecanismo de alimentación vibratorio 144. El
mecanismo alimentador vibratorio 144 puede ser controlado para
calibrar las semillas que son introducidas en el cuenco de semillas
104 donde las semillas son separadas y transferidas al aparato de
formación de imágenes 204 del sistema de orientación de semillas
200, de acuerdo con lo descrito con anterioridad.
Con referencia ahora a las Figuras 3 y 4 , el
sistema de orientación de semillas 200 comprende un aparato de
formación de imágenes de semillas 204, un dispositivo de formación
de imágenes 208, y un dispositivo de orientación de semillas 212
montado sobre una plataforma central fija 214 del sistema
muestreador de semillas 10. El aparato de formación de imágenes 204
de la semilla incluye una ventana 216 y un área de orientación
interna de la semilla que puede apreciarse a través de la ventana
216. El dispositivo de orientación 212 incluye un dispositivo de
basculación 220 que puede accionar para hacer rotar la semilla
mientras que la semilla está suspendida en el área de orientación
de la semilla. El aparato de formación de imágenes 204 está
conectado a un extremo del tubo de transferencia 136 de la estación
de carga y el dispositivo de formación de imágenes 208 está montado
sobre una estructura de soporte del sistema adyacente al aparato de
formación de imágenes, de manera que el dispositivo de formación
de imágenes 208 quede situado para visualizar una semilla suspendida
en el área de orientación de la semilla a través de la ventana
216.
Cuando una semilla es transferida al aparato de
formación de imágenes 204, a través del tubo de transferencia 136
de la estación de carga, la semilla queda suspendida dentro del área
de orientación de la semilla, en posición adyacente a la ventana
216, y es visualizada por el dispositivo de formación de imágenes
208 a través de la ventana 216. En otras formas de realización
distintas, la semilla es levitada por dentro del área de
orientación de semillas mediante el empleo de aire aplicado a través
de un tubo de transferencia 224 del sistema de orientación
conectado a la parte inferior del aparato de formación de imágenes
204, opuesta al tubo de transferencia 136 de la estación de carga.
O, en diversas formas de realización, la semilla puede quedar
físicamente retenida dentro del área de orientación de las semillas
utilizando cualquier medio de retención mecánica apropiado.
Cuando la semilla queda suspendida en posición
adyacente a la ventana 216, una imagen de la semilla situada dentro
del aparato de formación de imágenes 204 es recogida por el
dispositivo de formación de imágenes 208. El dispositivo de
formación de imágenes 208 puede ser cualquier dispositivo de
formación de imágenes apropiado para recoger imágenes a través de
la ventana 216 de las semillas suspendidas dentro del área de
orientación de las semillas. Por ejemplo, en diversas formas de
realización, el dispositivo de formación de imágenes 208 comprende
una cámara digital de alta resolución, de alta velocidad, como por
ejemplo una cámara de visión mecánica de tecnología visual
disruptiva (DVT). La imagen es comunicada a un controlador de un
sistema basado en computadora (no mostrado), donde se determina una
orientación de la semilla, a saber, con la punta hacia arriba o con
la punta hacia abajo. En diversas formas de realización, el
dispositivo de formación de imágenes 208 de las semillas
adicionalmente sitúa un centroide de la semilla o identifica el
punto más alejado del centroide como la punta.
Si se determina que la semilla está con la punta
hacia abajo, la semilla es transportada en la orientación de punta
hacia abajo, a través del tubo de transferencia 224 del sistema de
orientación, hasta un portasemillas de una pluralidad de
portasemillas 304. Si se determina que la semilla está con la punta
hacia arriba, el accionador de basculación 220 es comandado por el
controlador del sistema para hacer rotar la semilla 180º para
situar la semilla en la orientación con la punta hacia abajo. Por
ejemplo, el accionador de basculación 220 puede ser accionado por
aire comprimido, de tal manera que el aire sea utilizado para hacer
rotar la semilla hasta que se detecte la orientación con la punta
hacia abajo por parte de dispositivo de formación de imágenes 208.
O, el accionador de basculación puede ser un accionador mecánico que
haga rotar la semilla retenida por un dispositivo de retención
mecánico apropiado para colocar la semilla en la orientación con la
punta hacia abajo. Una vez en la orientación con la punta hacia
abajo, la semilla es transportada en la orientación con punta hacia
abajo, por medio del tubo de transferencia 224 del sistema de
orientación, hasta una de las portasemillas 304. La orientación de
las semillas en la posición con la punta hacia abajo reduce al
mínimo el impacto respecto a la viabilidad de la semilla cuando una
muestra es retirada de la semilla, de acuerdo con lo descrito más
adelante. En diversas formas de realización, las semillas son
transportadas por medio del tubo de transferencia 224 del sistema
de orientación utilizando la fuerza de la gravedad, esto es, las
semillas caen desde el aparato de formación de imágenes 204, a
través del tubo de transferencia 224 dentro de uno de los
portasemillas 304. Así mismo, cada semilla es mantenida con la
orientación adecuada, esto es, con la punta hacia abajo, durante
el transporte hasta el respectivo portasemillas 304 al dotar al tubo
de transferencia 224 del sistema de orientación de un diámetro
interior con el tamaño preciso para que las semillas no puedan rotar
hasta la posición de la punta hacia arriba.
Tal como se utiliza en la presente memoria, el
controlador del sistema puede ser un solo sistema basado en una
computadora, o una pluralidad de subsistemas conectados en red entre
sí para coordinar las operaciones simultáneas del sistema de
muestras de semillas 10, descrito en la presente memoria. Por
ejemplo el controlador del sistema puede incluir una pluralidad de
subsistemas del controlador, por ejemplo un subsistema de
controlador para cada estación descrita en la presente memoria.
Cada subsistema del controlador podría incluir uno o más
procesadores o microprocesadores que comunicaran con diversos
sensores, dispositivos, mecanismos, motores, instrumentos, etc.
del sistema muestreador de semillas, y estuvieran conectados en red
conjuntamente con un sistema de computadora central para accionar
en cooperación todas las estaciones, sistemas y subsistemas del
sistema muestreador de semillas 10. O, como alternativa, el
controlador del sistema podría comprender una sola computadora
conectada en comunicación con todos los diversos sensores,
dispositivos, mecanismos, motores, instrumentos, etc., para
accionar en cooperación todas las estaciones, sistemas y subsistemas
del sistema muestreador de semillas 10.
Los portasemillas 304 están montados en, y
separados a intervalos regulares alrededor de, un área de perímetro
de una placa giratoria 308 accionada por motor del subsitema de
transporte de semillas 300. El tubo de transferencia 224 del
sistema de orientación está conectado en un primer extremo al
aparato de formación de imágenes de semillas 204, de tal manera que
un segundo extremo del tubo de transferencia 224 del sistema de
orientación esté situado a una específica distancia por encima de
una porción de perímetro de la placa giratoria 308. Más
concretamente, el segundo extremo del tubo de transferencia 224 del
sistema de orientación está situado por encima de la placa
giratoria 308 a una distancia suficiente para permitir que los
portasemillas 304 pasen por debajo del segundo extremo del tubo de
transferencia del sistema de orientación. Sin embargo, el segundo
extremo del tubo de transferencia 224 del sistema de orientación
está, así mismo, situado por encima de la placa giratoria 308, de
tal manera que hay solo una pequeña cantidad de espacio libre entre
el segundo extremo y los portasemillas 304. Por consiguiente, cada
semilla permanecerá en la orientación con la punta hacia abajo
cuando pase del tubo de transferencia 224 del sistema de orientación
a uno de los portasemillas 304.
Con referencia ahora a las Figuras 5, 6 y 7,
cada portasemillas 304 está estructurado y se utiliza para retener
rígidamente una semilla respectiva en la orientación con la punta
hacia abajo. Cada portasemillas 304 incluye un par de cabezales de
sujeción opuestos 312 situados por deslizamiento dentro de unos
receptáculos de sujeción opuestos 316. Los receptáculos de sujeción
opuestos 316 están separados por un canal para semillas 318
lateralmente constituido a lo largo de una línea central C del
portasemillas 304. Cada cabezal de sujeción 312 está sujetado a un
respectivo pistón de sujeción 320 por medio de un árbol de sujeción
respectivo 324. Cada pistón de sujeción 320 está alojado por
deslizamiento en el interior de un respectivo cilindro de pistón
interno longitudinal 328 del portasemillas 304. Un muelle de
compresión 332 está situado dentro de cada cilindro 328 del pistón
entre una base del respectivo pistón y un fondo del respectivo
cilindro 328 del pistón. De acuerdo con ello, cada cabezal 312 es
presionado hacia la línea central C del portasemillas 304. Cuando un
portasemillas 304 está en reposo, esto es, cuando el respectivo
portasemillas no está reteniendo una semilla o no está siendo
manipulado para retener una semilla, los cabezales de sujeción
opuestos 312 serán presionados por los muelles 332 hasta una
posición completamente extendida, o desplegada. Cuando los cabezales
de sujeción 312 estén en la posición desplegada, y una parte
superior de cada pistón respectivo 320 se extenderá por el interior
de una respectiva vía de paso de horquilla 336 que se extiende
lateralmente a través del portasemilla 324 sobre lados opuestos del
canal para semillas 318.
Cada cabezal de sujeción 312 está hecho de un
material ligeramente blando, resiliente, como por ejemplo neopreno,
de tal manera que un portasemillas situado entre los cabezales de
sujeción opuestos 312, de acuerdo con lo descrito más adelante, no
resulte dañado.
De acuerdo con lo descrito con anterioridad, los
portasemillas 304 están montados sobre y separados a intervalos
regulares alrededor de un área de perímetro de la placa giratoria
308. Antes de, después de, o sustancialmente de forma simultánea
con el proceso de orientación de las semillas descrito con
anterioridad, la placa giratoria 308 es rotada para situar un
portasemillas 308 vacío, esto es, carente de semilla, bajo el tubo
de transferencia 224 del sistema de orientación. Más concretamente,
el canal para semillas 308 está situado por debajo del tubo de
transferencia 224 del sistema de orientación. Cuando un
portasemillas 304 es situado por debajo del tubo de transferencia
224 del sistema de orientación, un dispersador 340 de los cabezales
de sujeción es activado para dispersar los cabezales de sujeción
312 de tal manera que una semilla pueda ser recibida entre los
cabezales de sujeción 312. El dispersador 340 de los cabezales de
sujeción está montado sobre la estructura de soporte del sistema
adyacente al dispositivo de orientación de semillas 212 e incluye un
par de lengüetas de horquilla 344 acopladas a una base 344 de la
horquilla. El dispersador 340 de los cabezales de sujeción puede ser
accionado para extender la base 348 de la horquilla y las lengüetas
344 hacia el portasemillas 304. Por ejemplo, el dispersador 340 de
los cabezales de sujeción puede ser un dispositivo neumático que
puede ser accionado para extender y retraer la base 348 de la
horquilla. Cada lengüeta 344 de la horquilla tiene una porción
proximal distal achaflanada y tiene el tamaño preciso para
acoplarse dentro de las vías de paso 336 de la horquilla.
Tras la activación del dispersador 340 de los
cabezales de sujeción, la base 348 de la horquilla es extendida
hacia el portasemillas 304, de tal manera que las lengüetas 344
queden insertadas dentro de las vías de paso 336 de la horquilla.
Cuando cada lengüeta 344 se desliza por dentro de la respectiva vía
de paso 336 de la horquilla las porciones terminales distales
achaflanadas se deslizan entre la parte superior del respectivo
pistón 320 y de una pared interior de la vía de paso 336 de la
horquilla. Cuando las lengüetas 344 siguen extendiéndose por dentro
de cada vía de paso 336 de la horquilla, el chaflán de cada lengüeta
fuerza el respectivo pistón 320 hacia fuera y lejos de la línea
central C del portasemillas. En consecuencia, los pistones 320 son
desplazados hacia fuera y lejos de la línea central C, los cabezales
de sujeción 312 son, así mismo, desplazados hacia fuera y alejados
unos de otros y de la línea central C. De esta manera, los
cabezales de sujeción 312 son desplazados hasta una posición
retraída en la que una semilla puede ser colocada entre ellos.
Una vez que los cabezales de sujeción 312 han
sido retraídos, una semilla adecuadamente orientada puede ser
transportada a través del tubo de transferencia 224 del sistema de
orientación y situada en la orientación con la punta hacia abajo
entre los cabezales de sujeción 312. En diversas formas de
realización, el sistema muestreador de semillas 10 incluye así
mismo un subsistema 360 de colocación de la altura de las semillas
para situar la semilla a una altura específica dentro del respectivo
portasemillas 304. El subsitema de colocación de la altura de las
semillas incluye un regulador de posición vertical 364 montado sobre
la estructura del soporte del sistema por debajo del área de
perímetro de la placa giratoria 308, directamente opuesto al tubo
de transferencia 224 del sistema de orientación, y un accionador de
placa de datos 368 montado sobre la plataforma central 214
directamente opuestos al dispersador 340 de los cabezales de
sujeción. El regulador de posición vertical 364 incluye un émbolo
cargado por resorte 372 montado sobre un cabezal 376 del regulador
de posición y el accionador de placa de datos 368 incluye una
placa de datos 380 montada sobre un cabezal 384 del accionador de
la placa de datos. El regulador de posición vertical 364 puede ser
accionado para extender el cabezal 376 del regulador de posición y
el émbolo 372 hacia un fondo de la placa giratoria 308 directamente
opuesta a la línea central C del portasemillas. Por ejemplo, el
regulador de posición vertical 364 puede ser un dispositivo
neumático que puede ser accionado para extender y retraer el émbolo
372. De modo similar, el accionador de placa de datos 368 puede ser
accionado para extender el cabezal accionador 384 y la placa de
datos 380 sobre la parte superior del canal para semillas 318 del
portasemillas. Por ejemplo, el accionador de placa de datos 368
puede ser un dispositivo neumático que puede ser accionado para
extender y retraer la placa de datos 380.
Una vez que la semilla ha sido colocada entre
los cabezales de sujeción retraídos 312, el cabezal 376 del
regulador de posición es extendido hacia arriba para soportar un
árbol de émbolo 388 a través de un agujero (no mostrado) existente
en el fondo de la placa giratoria 308 y un agujero coaxialmente
alineado (no mostrado) existente en el fondo del canal para
semillas 318 del portasemillas. Sustancialmente, de manera
simultánea, el accionador de placa de datos 368 extiende el cabezal
accionador 384 para situar la placa de datos 380 a una específica
distancia por encima del portasemillas 304, directamente por encima
del agujero existente en el fondo del canal para semillas 318 del
portasemillas. Más concretamente, cuando el cabezal 376 del
regulador de posición es desplazado hacia arriba, el árbol de
émbolo 388 es extendido hacia el interior de los agujeros
coaxialmente alineados y contacta con la punta de la semilla. La
semilla es entonces empujada hacia arriba entre los cabezales de
sujeción 312 hasta que la corona de la semilla contacta con la placa
de datos 380. La estructura cargada por resorte del émbolo 372
permite que el árbol 388 se retraiga por dentro del émbolo 372
cuando la corona de la semilla contacta con la placa de datos 380
para que la semilla quede sujeta en posición sin dañar la semilla.
De acuerdo con ello, la corona de la semilla queda situada en una
altura específica con respecto a la parte superior de la placa
giratoria 308.
Con la corona de la semilla retenida contra la
placa de datos 380 mediante el émbolo cargado por resorte 372 el
dispersador 340 de los cabezales de sujeción es accionado para
retraer la base 348 de la horquilla y retirar las lengüetas 344 de
las respectivas vías de paso 336. Tras la retirada de las lengüetas
344, los muelles 332 presionan los cabezales de sujeción 312 hacia
la posición desplegada y firmemente sujetan la semilla entre los
cabezales de sujeción 312. La placa de datos 380 y el árbol de
émbolo 388 son a continuación retraídos dejando la semilla
adecuadamente situada, o "cargada", en el respectivo
portasemillas 304. El controlador del sistema a continuación hace
rotar la placa giratoria 308 hasta situar el portasemillas
"cargado" 304 por debajo de la estación de molturación 400 y
el siguiente portasemillas vacío 304 por debajo del dispositivo de
orientación de semillas 212.
Con referencia ahora a la Figura 8, de acuerdo
con lo descrito con anterioridad, el sistema muestreador de
semillas 10 incluye un subsistema de transporte de semillas 300,
para transportar las semillas entre estaciones individuales del
sistema muestreador, por ejemplo la estación de carga de semillas
100, la estación de molturación 400, la estación de muestreo 500,
etc. En términos generales el subsistema de transporte de semillas
300 puede ser cualquier medio de transporte apropiado, como por
ejemplo una cinta transportadora, un transportador de rodillos, y
similares. En diversas formas de realización, sin embargo, el
subsistema de transporte 300 comprende la placa giratoria 308 que
está montada sobre pivote en su centro de rotación. La placa
giratoria 308 está virtualmente dividida en una pluralidad de
sectores, conteniendo cada sector un portasemillas 304. El número
de sectores disponible sobre la placa giratoria 308 puede ser par o
impar con un número escogido que depende en gran parte del diámetro
de la placa giratoria 308, del tamaño de los portasemillas 304 y de
las necesidades de la modalidad de transporte.
La placa giratoria circular 308 está montada
sobre pivote en su centro sobre un árbol de un sistema de cojinetes
390. En diversas formas de realización, un árbol (no mostrado) del
sistema de árbol de cojinetes 390 puede estar directamente
acoplado a un motor de accionamiento 392. Como alternativa, el árbol
puede estar separado del motor de accionamiento 392 y accionado
para su rotación mediante una transmisión por cadena, una
transmisión por polea, una transmisión por engranajes. En diversas
aplicaciones, el motor de accionamiento 392 puede ser un motor paso
a paso de elevado par de torsión.
En funcionamiento, el motor de accionamiento 392
de la placa giratoria 308 es accionado para avanzar (lo que puede
llevarse a cabo o bien en sentido dextrorso o en sentido
sinistrorso, dependiendo de la configuración), para desplazar en
rotación la placa giratoria 308 de estación a estación del sistema
muestreador 10. Por consiguiente, los portasemillas 304 están
alineados con dispositivos auxiliares, como por ejemplo la estación
de carga 100, la estación de molturación 400, la estación de
muestreo 500. En esta configuración, el dispositivo auxiliar puede
estar situado alrededor de la placa giratoria 308 en estaciones que
estén en alineación con cada posición y, por tanto, tengan acceso
preciso a las semillas y a los portasemillas 304. Hasta el extremo
necesario, los bordes periféricos de la placa giratoria 308 pueden
ser transportados por rodillos, guías, correderas o elementos
similares, para contribuir a la suave rotación del transportador de
la placa giratoria.
Con referencia, así mismo, a la Figura 8, de
acuerdo con lo descrito con anterioridad, una vez que cada
portasemillas 304 es "cargado" con una semilla, el controlador
del sistema hace girar la placa giratoria 308 hasta la posición del
portasemillas "cargado" 304 por debajo de la estación de
molturación 400. La estación de molturación 400 incluye al menos
una herramienta de molturación 404 montada sobre la estructura de
soporte del sistema por encima del área de perímetro de la placa
giratoria 308. Las una o más herramientas de molturación 404 son
utilizadas para retirar una porción de la envoltura seminal de cada
semilla cuando el respectivo portasemillas 304 está situado por
debajo de la estación de molturación 400. Cada herramienta de
molturación 404 incluye un accionador de eje Z 408 que puede ser
accionado para bajar y subir al menos una porción de la herramienta
de molturación respectiva 404 a lo largo del eje Z. Cada herramienta
de molturación 404 es controlada por el controlador del sistema y
puede ser accionado eléctrica, neumática o hidráulicamente.
La(s) herramienta(s) de
molturación 404 puede(n) ser cualquier mecanismo apropiado
para retirar una porción de material de envoltura seminal de cada
semilla. Por ejemplo, en diversas formas de realización, cada
herramienta de molturación 404 es un dispositivo rotatorio que
incluye el accionador de eje Z 408 y una transmisión rotatoria 412
operativamente acoplada a un portataladro 416. Cada accionador del
eje Z 408 puede ser accionado para subir o bajar el respectivo
manguito de broca 416 y una broca de herramienta de molturación 420
sujeta dentro del manguito de broca 416 a lo largo del eje Z. La
broca de la herramienta de molturación 420 puede ser cualquier
instrumento apropiado para retirar el material de envoltura seminal,
por ejemplo una broca de fresa, una broca de barrena, una broca
buriladora, un escariador, o una herramienta de raspado. Por
ejemplo, en diversas formas de realización, la broca 420 de la
herramienta de molturación comprende una broca de fresa terminal.
Cada accionador de eje Z 408 es controlado por el controlador del
sistema para bajar el respectivo accionador de eje Z 408 hasta una
distancia predeterminada. La transmisión rotatoria 412 de cada
herramienta de molturación rotatoria 404 funciona para hacer rotar,
o girar, el respectivo manguito de broca 416 y cualquier broca 420
de la herramienta de molturación sujeta dentro del manguito de broca
416.
En funcionamiento, cuando el portasemillas 304
es situado por debajo de una herramienta de molturación rotatoria
404 la transmisión rotatoria 412 es activada para comenzar el giro
del manguito de broca 416 y de la broca 420 de la herramienta de
molturación. El accionador de eje Z 408 es a continuación comandado
para bajar el respectivo manguito de broca 416 y la broca 420 de la
herramienta de molturación hasta una distancia específica
predeterminada. Cuando la broca 420 de la herramienta de molturación
giratoria es bajada, contacta con la corona de la semilla y retira
la envoltura seminal de al menos una porción de la corona. Esto deja
al descubierto una porción del material de semilla interno que
puede ser extraído y utilizado para analizar y evaluar los diversos
rasgos de la semilla respectiva, de acuerdo con lo descrito más
adelante.
En diversas formas de realización, la estación
de molturación 400 comprende al menos dos herramientas de
molturación 404 montadas sobre una plataforma de movimiento
horizontal 424 de la estación de molturación que está montada
sobre la estructura de soporte del sistema. La plataforma de
movimiento horizontal 424 de la estación de molturación es
controlada por el controlador del sistema para situar una
herramienta seleccionada entre las herramientas de molturación 404
por encima de un portasemillas 304 situado por debajo de la estación
de molturación 400. La herramienta de molturación seleccionada 404
es a continuación accionada de acuerdo con lo descrito con
anterioridad para retirar la envoltura seminal de al menos una
porción de la corona de la semilla respectiva. A continuación, el
controlador del sistema puede situar una segunda herramienta entre
las herramientas de molturación 404 por encima de un portasemillas
subsecuente 304 situado por debajo de la estación de molturación
400. La segunda herramienta de molturación seleccionada 404 es a
continuación accionada de acuerdo con lo descrito con anterioridad
para retirar la envoltura seminal de al menos una porción de la
respectiva corona de semilla. En dichas formas de realización, la
estación de molturación 400 puede así mismo incluir al menos un
montaje de limpieza 428 de la broca de molturación para limpiar la
broca 416 de la herramienta de molturación en reposo 404, esto es,
no en uso. Esto es, mientras la herramienta de molturación 404 puede
actuar para retirar la envoltura seminal de una semilla respectiva,
la broca 420 de una segunda herramienta de molturación en reposo
404 puede ser limpiada mediante un montaje de limpieza 428 en
preparación para la siguiente operación de molturación. En diversas
formas de realización, los montajes de limpieza 428 de la broca de
molturación utilizan una presión neumática o una presión de vacío
para retirar y/o recoger cualquier residuo de la envoltura seminal
que pueda congregarse sobre las brocas 420 de las herramientas de
molturación
404.
404.
Con referencia ahora a la Figura 9, una vez que
la envoltura seminal ha sido retirada de una semilla, el controlador
del sistema hace rotar la placa giratoria 308 para situar el
respectivo portasemillas 304 por debajo de la estación de muestreo
500. La estación de muestreo 500 incluye al menos una herramienta de
muestreo 504 situada sobre la estructura de soporte del sistema
anclada a la plataforma central 214 por encima de la placa giratoria
308. Las una o más herramientas de muestreo 504 son utilizadas para
retirar una porción , esto es, una muestra, del material de semilla
interno al descubierto cuando el respectivo portasemillas 304 es
situado por debajo de la estación de muestreo 500. Cada herramienta
de muestro 504 incluye un accionador de eje Z 508 que puede ser
accionado para subir o bajar al menos una porción de la respectiva
herramienta de muestreo 504 a lo largo del eje Z. Cada herramienta
de muestreo 504 es controlada por el controlador del sistema y puede
ser accionada eléctrica, neumática o hidráulicamente.
La(s) herramienta(s) de muestreo
504 puede(n) consistir en cualquier mecanismo apropiado para
retirar de cada semilla una muestra del material de semilla
interno al descubierto. Por ejemplo, en diversas formas de
realización, cada herramienta de muestreo 504 es un dispositivo
rotatorio que incluye el accionador de eje Z 508 y una transmisión
rotatoria 512 operativamente acoplada con un manguito de broca 516.
Cada accionador de eje Z 508 puede ser accionado para subir o bajar
el respectivo manguito de broca 516 y una broca 520 de la
herramienta de muestreo sujeta dentro del manguito de broca 516 a
lo largo del eje Z. La broca 520 de la herramienta de muestreo
puede ser cualquier instrumento que tenga un diámetro exterior más
pequeño que la circunferencia del área de la semilla interior al
descubierto, y apropiado para retirar una muestra del material de
la semilla interior al descubierto, como por ejemplo, una broca de
taladro, una broca buriladora, un escariador, o un tubo para la
extracción de testigos. Es importante que la broca 520 de la
herramienta de muestreo tenga un diámetro más pequeño que la broca
420 de la herramienta de molturación para asegurar que el material
de muestra se obtenga desde un área en el que el material de la
envoltura seminal ha sido retirado, eliminando sustancialmente con
ello que cualquier material de la envoltura seminal se contamine con
el material de la mezcla recogido.
Por ejemplo, en diversas formas de realización
la broca 520 de la herramienta de muestreo comprende una broca de
taladro con punta de pala con un diámetro exterior mayor que un
diámetro exterior que la broca 420 de la herramienta de
molturación. Cada accionador de eje Z 508 es controlado por el
controlador del sistema para bajar el respectivo accionador de eje
Z 508 hasta una distancia específica predeterminada. La transmisión
rotatoria 512 de cada herramienta de muestreo rotatorio 454 funciona
para hacer rotar o girar, el manguito de broca respectivo 516 y
cualquier broca 520 de la herramienta de muestreo sujeta dentro del
manguito de broca 516.
En funcionamiento, cuando el portasemillas 304
está situado pro debajo de una herramienta de muestreo rotatoria
504, la transmisión rotatoria 312 es activada para comenzar la
rotación del manguito de broca 516 y de la broca 520 de la
herramienta de muestreo. El accionador de eje Z 508 es, a
continuación, comandado para bajar el respectivo manguito de broca
516 y la broca 520 de la herramienta de muestreo hasta una distancia
específica predeterminada. Cuando la broca 520 de la herramienta de
muestreo giratoria es bajada, contacta con el material interior al
descubierto de la semilla y porta una muestra del material interno.
La muestra es a continuación retirada o extraída para ser evaluada
y analizada en cuanto a los diversos rasgos y/o características de
la respectiva semilla, de acuerdo con lo descrito más adelante.
En diversas formas de realización, la estación
de muestreo 500 comprende al menos dos herramientas de muestreo 504
montadas sobre bastidor de movimiento horizontal 524 de la estación
de muestreo que está montada sobre la estructura de soporte del
sistema. El bastidor de movimiento horizontal 524 de la estación de
muestreo es controlada por el controlador del sistema para situar
una herramienta seleccionada entre las herramientas de muestreo 504
por encima del portasemillas 304 situado por debajo de le estación
de muestreo 500. La herramienta de muestreo seleccionada 504 es a
continuación accionada, de acuerdo con lo descrito con anterioridad,
para retirar de la respectiva semilla el material interior al
descubierto. A continuación, el controlador del sistema puede
controlar una segunda herramienta de las herramientas de muestreo
504 por encima de un portasemillas subsecuente 304 situado por
debajo de la estación de muestreo 500. La segunda herramienta de
muestreo seleccionada 504 es a continuación accionada de acuerdo
con lo descrito con anterioridad para retirar la muestra de la
respectiva semilla del material interno al descubierto. En dichas
formas de realización, la estación de muestreo 500 puede así mismo
incluir al menos un montaje de limpieza 528 de la broca de muestreo
para limpiar la broca de muestreo 520 de la herramienta de muestreo
en reposo 504, esto es, no en uso. Es decir, mientras una
herramienta de muestreo 504 puede ser accionada para retirar la
muestra de una respectiva semilla, la herramienta de muestreo 520
de una segunda herramienta de muestreo en reposo 504 puede ser
limpiada mediante un montaje de limpieza 528 de la broca de
muestreo, en preparación para la segunda operación de muestreo. En
diversas formas de realización, los montajes de limpieza 528 de la
broca de muestreo utilizan la presión neumática o la presión de
vacío para retirar y/o recoger cualquier residuo del material
interior de la semilla que pueda congregarse en las brocas de
muestreo 520 de las herramientas de muestreo 504.
Con referencia ahora a las Figuras 9 y 10, el
subsistema de transporte y recogida de muestras (SCT) 600 es
controlado por el controlador del sistema para actuar en
coordinación sincronizada con la estación de muestreo 500 para
recoger cada muestra a medida que es retirada de cada semilla. El
subsistema de SCT 600 incluye una plataforma rotatoria motorizada
604 accionada por un motor de accionamiento (no mostrado) similar al
motor de accionamiento 392 (mostrado en la Figura 8) de la placa
giratoria 308. El subsistema de SCT incluye así mismo una
pluralidad de dispositivos 608 de colocación del tubo de recogida
(CTP) separados uniformemente alrededor de, y montados sobre, un
área de perímetro de la plataforma rotatoria 604. Cada dispositivo
de CTP 608 incluye una barra de pivote 612 que presenta un soporte
hueco 616 del tubo montado a través de un calibre transversal (no
mostrado) dentro de una barra de pivote 612. El soporte 616 del tubo
incluye un extremo distal 618 estructurado para aceptar una base
620 y un tubo de recogida 624 y un extremo proximal 628 adaptado
para recibir una tubería neumática (no mostrada).
Cada dispositivo de CTP 608 incluye así mismo un
accionador 632 de la barra de pivote que puede ser controlado por
el controlador del sistema para hacer rotar la barra de pivote 612
hasta las distintas posiciones alrededor de un eje geométrico
longitudinal de la barra de pivote 612. En diversas formas de
realización, el accionador 632 de la barra de pivote puede ser
accionado para hacer bascular el soporte 616 del tubo entre una
posición de purga, tal y como se ilustra en la Figura 11, una
posición de recogida, tal y como se ilustra en la Figura 10, y una
posición de carga y depósito tal y como se ilustra en las Figuras 13
y 17. El dispositivo de CTP 608 incluye así mismo un brazo de tope
636 conectado a la barra de pivote 612 y a un tope ajustable 640,
por ejemplo un tornillo prisionero, encajado de forma ajustable
con el brazo de tope 636. El brazo de tope 636 y el tope ajustado
640 basculan con el brazo de pivote 612 y funcionan para detener
con precisión la rotación del brazo de pivote 612 para que el
soporte 616 del tubo esté en la posición de recogida.
Simultáneamente con el funcionamiento de la
estación de carga de semillas 100, la estación de molturación 400 y
la estación de muestreo 500, el subsistema de SCT 600 actúa para
cargar el tubo de recogida 624 sobre los soportes 616 del tubo de
cada dispositivo de CTP 608, recoger las muestras dentro de los
tubos de recogida 624 a medida que cada muestra está siendo
depositada y recoger las muestras recogidas en las bandejas de
muestras 14. La carga de los tubos de recogida 624 sobre los
montajes 616 de tubo y el depósito de la muestra recogida en las
bandejas de muestras 14, se describirá con mayor detalle más
adelante con referencia a la Figura 17 y a las Figuras 12 y 13,
respectivamente. Los tubos de recogida 624 pueden ser cualquier
recipiente o dispositivo apropiado para soportar sobre ellos los
soportes 616 del tubo y recoger las muestras de acuerdo con lo
descrito más adelante. Por ejemplo, en diversas formas de
realización, los tubos de recogida 624 son desechables, de tal
manera que cada muestra es recogida en un tubo de recogida limpio
624. Un ejemplo de dicho tubo de recogida desechable 624 es una
pipeta filtrada.
De acuerdo con lo descrito con anterioridad, el
sistema SCT 600 es controlado por el controlador del sistema para
actuar en coordinación sincronizada con la estación de muestreo 500
para recoger cada muestra a medida que es retirada de cada semilla.
Más concretamente, antes de la retirada de la muestra de la
semilla, el controlador del sistema hace rotar la plataforma 604
hasta situar un dispositivo de CTP 608 en posición adyacente a la
estación de muestreo 500. En particular, un dispositivo de CTP 608
es situado en posición adyacente a la estación de muestreo 500, de
tal manera que el soporte 616 del tubo esté alineado con la semilla
retenida dentro de un portasemillas adyacente 304 que ha sido
colocado por debajo del dispositivo de muestreo 504, por medio de
la rotación controlada de la placa giratoria 308. Antes de colocar
el dispositivo de CTP 608 en posición adyacente al portasemillas
304 situado en la estación de muestreo 500, el sistema de SCT 600 ha
cargado un tubo de recogida 624 sobre el respectivo extremo distal
618 del soporte del tubo y el respectivo accionador 632 de la barra
de pivote ha elevado el tubo de recogida 624 hasta una posición
situada por encima de la posición de recogida, por ejemplo la
posición de purga. Una vez que el dispositivo de CTP 608 está
situado en posición adyacente al respectivo portasemillas 304, el
accionador 632 de la barra de pivote baja el tubo de recogida
cargada 624 hasta que el tope ajustable 640 contacta con una placa
de tope 648 montada sobre la estructura del soporte del sistema
entre la placa 308 y la plataforma 604 adyacente a la estación de
muestreo 500. El tope ajustable 640 es regulado de antemano, esto
es, preajustado, de tal manera que la rotación de la barra de
pivote 612 es detenida para situar con precisión una punta 672 del
tubo de recogida 624 en una proximidad muy íntima, o en contacto,
con la corona de la semilla retenida en el portasemillas
adyacente
304.
304.
La broca de muestreo 620 de una herramienta de
muestreo 504 es a continuación bajada para comenzar la retirada de
la muestra, de acuerdo con lo descrito con anterioridad. Cuando la
broca de muestreo 620 es bajada, se aplica un vacío en la punta 672
del tubo de recogida. El vacío es aplicado por medio de un tubo de
vacío (no mostrado) conectado al extremo proximal 628 del soporte
616 del tubo. El tubo de vacío está, así mismo, conectado a una
fuente de vacío (no mostrada), de tal manera que el vacío se aplique
atravesando el tubo de vacío, el soporte 616 del tubo hueco y el
tubo de recogida 624. De acuerdo con ello, cuando la broca de
muestreo 620 retira el material de muestra, la muestra es
arrastrada hasta el interior del tubo de recogida 624, donde la
muestra es recogida. En diversas formas de realización, la estación
de muestreo 500 puede incluir un dispositivo de presión positiva
(no mostrado) para asistir al vacío aplicado a la semilla respectiva
para recoger sustancialmente toda la muestra retirada en el
respectivo tubo de recogida 624.
Cada tubo de recogida incluye un filtro 676 que
impide que la muestra sea arrastrada hasta el interior del soporte
616 del tubo y del tubo de vacío. Una vez que la muestra ha sido
recogida, el accionador 632 de la barra de pivote eleva el tubo de
recogida 624 hasta la posición de purga y el respectivo dispositivo
de CTP 608 es avanzado hasta una posición adyacente al subsistema
de suministro de líquido 700. A continuación, otro dispositivo de
CTP 608 y otro tubo de recogida vacío 624 son situados en posición
adyacente a un portasemillas subsecuente 304 y a una semilla no
muestreada que ha sido desplazada hasta la estación de
muestreo.
Con referencia ahora a las Figuras 11 y 12, el
subsistema de muestreo de líquidos 700 incluye un dispositivo de
inyección de líquido 704 montado sobre un accionador lineal 708 que
puede ser accionado para extraer y retraer el dispositivo de
inyección de líquido 704 a lo largo de un eje geométrico lineal M.
Más concretamente el accionador lineal 708 puede ser accionado para
insertar y retirar una aguja de inyección 712, fijada al
dispositivo de inyección de líquidos 704 que entra y sale de la
punta 672 del respectivo tubo de recogida 624. Cuando un tubo de
recogida 624 con una muestra recogida ha sido elevado hasta la
posición de purga y adaptado hasta quedar en posición adyacente al
subsistema de suministro de líquido 700, el accionador lineal 708 y
la aguja de inyección 712 están en la posición retraída, tal y como
se ilustra en la Figura 11. El accionador 632 de la barra de pivote
y la plataforma rotatoria 604 son controlados por el controlador del
sistema, de tal manera que, cuando el dispositivo de CTP 608 está
en posición adyacente al subsistema de suministro de líquidos 700 y
el tubo de recogida 624 es elevado hasta la posición de purga, un
eje geométrico lineal del tubo de recogida 624 es sustancialmente
coaxial con el eje lineal M del dispositivo de inyección de líquidos
724, tal y como se muestra en la Figura 11.
Una vez que el eje lineal del tubo de recogida
624 está situado para colocarse en posición coaxial con el eje
geométrico M, el accionador lineal 708 se extiende para insertar la
aguja de inyección 712 dentro de la punta 672 del tubo de recogida
624. El dispositivo de inyección de líquido 704 está conectado a una
fuente de suministro de fluido de extracción (no mostrada) por
medio de un orificio de fluido 716 acoplado a una válvula de medida
720 del dispositivo de inyección de líquido 704. Por consiguiente,
una vez que la aguja de inyección 712 es insertada dentro de la
punta 672 del tubo de recogida, el dispositivo de inyección de
fluido 704 inyecta una cantidad medida de fluido de extracción
dentro del tubo de recogida 624. El fluido de extracción inyectado
purga, o lava, los lados interiores del tubo de recogida 624 y crea
una solución acuosa con la respectiva muestra, designada en la
presente memoria como muestra acuosa. De esta manera, cualquiera de
las muestras recogidas que pueda haberse agrupado sobre las paredes
interiores del tubo de recogida 624 es expulsada con una descarga
de agua para que sustancialmente toda la muestra recogida quede
suspendida en la solución acuosa resultante. El líquido de
extracción puede ser cualquier líquido apropiado para suministrar
sustancialmente todo el material de muestra recogido en cada tubo
respectivo 624, sin interferir con el análisis deseado, por
ejemplo, un análisis químico y genético del material de muestra.
Por ejemplo, en diversas formas de realización, el líquido de
extracción puede comprender agua destilada o cualquier disolvente
apropiado compatible con el análisis deseado de la muestra.
Una vez que la muestra recogida ha sido mezclada
con el líquido de extracción, el accionador lineal 708 se retrae
para retirar la aguja de inyección 712 de la punta 672 del tubo de
recogida. A continuación, el controlador del sistema avanza la
plataforma rotatoria 604 para situar el dispositivo de CTP 608 por
encima del susbsistema del depósito de muestras 800. El controlador
del sistema, así mismo, envía una orden al accionador respectivo
632 de la barra de pivote para situar el tubo de recogida en la
posición de carga y depósito. La posición de carga y depósito
apunta el soporte 616 del tubo y el tubo de recogida soportado 624
hacia abajo en una orientación sustancialmente vertical.
Con referencia ahora a la Figura 13, el
subsistema de depósito de muestras 800 incluye una plataforma 804
para las bandejas de las muestras adaptadas para retener firmemente
una pluralidad de bandejas de muestras 14 en posiciones y
orientaciones fijas. Cada bandeja de muestras 14 incluye una
pluralidad de pocillos de muestras 22, cada uno de los cuales está
adaptado para recibir una muestra acuosa respectiva. La plataforma
804 de las bandejas de muestras está montada sobre un bastidor X -
Y 808. El bastidor X - Y 808 es un mecanismo de traslación de dos
dimensiones que incluye una primera pista de traslación 812 y una
segunda pista de traslación 816. El bastidor X - Y 808 incluye así
mismo un primera accionador lineal 818 que puede ser accionado para
desplazar en dos direcciones un primer carro (no mostrado) a lo
largo de la extensión de la primera pista de traslación 812. El
bastidor X - Y 808 incluye así mismo un segundo accionador lineal
820 que puede ser accionado para desplazar en dos direcciones un
segundo carro (no mostrado) a lo largo de la extensión de la
segunda pista de traslación 816. La segunda pista de traslación 816
está montada sobre el primer carro, y la plataforma 804 de la
bandeja de muestras está montada sobre el segundo
carro.
carro.
Los primero y segundo accionadores lineales 818
y 820 son controlados por el controlador del sistema para desplazar
con precisión la plataforma 804 de las bandejas de muestras en dos
dimensiones. Más concretamente, los primero y segundo accionadores
818 y 820 desplazan la plataforma 804 de las bandejas de muestras
dentro de un sistema de coordenadas X - Y para situar con precisión
cualquier pocillo seleccionado 22 de cualquier bandeja de muestras
seleccionada 14 situada en un emplazamiento elegido como objetivo
situado por debajo del dispositivo de CTP 608 que retiene el tubo
de recogida 624 que contiene la muestra acuosa recogida. El
emplazamiento escogido como objetivo es el emplazamiento existente
en el sistema de coordenadas X - Y que está directamente por debajo
de la punta 672 del tubo de recogida cuando el tubo de recogida 624
está en la posición de carga del depósito por encima de la
plataforma 804 de las bandejas de muestras. De esta manera, una vez
que el dispositivo de CTP 608 es situado por encima de la
plataforma 804 de las bandejas de muestras, y que el tubo de
recogida respectivo 624 es situado en la posición de carga y
depósito con la punta 672 señalando hacia el emplazamiento elegido
como objetivo, el controlador del sistema sitúa un pocillo
seleccionado 22, de una bandeja de muestras seleccionada 14 en el
emplazamiento escogido como objetivo. La muestra acuosa es a
continuación depositada dentro del pocillo seleccionado 22 mediante
la aplicación de una presión positiva sobre el extremo proximal 628
del soporte 616 del tubo.
Cuando las bandejas de muestras 14 están
situadas sobre la plataforma 804 de las bandejas de muestras, se
registra un número de identificación de la bandeja, por ejemplo un
código de barras, para cada bandeja de muestras 14 y el
emplazamiento de cada bandeja de muestras 14 sobre la plataforma
804. Así mismo, cuando cada solución acuosa es depositada sobre un
pocillo 22, puede registrarse un emplazamiento X - Y del pocillo,
esto es, el emplazamiento elegido como objetivo, en la plataforma
804 de las bandejas de muestras. Las posiciones de la bandeja y el
pocillo registrados situados sobre la plataforma 804 de las bandejas
de muestras, pueden a continuación ser comparadas con los
emplazamientos X - Y de cada muestra acuosa depositada, para
identificar la muestra acuosa específica existente en cada pocillo
22 de cada bandeja de muestras 14.
Una vez que cada muestra acuosa es depositada
dentro del pocillo seleccionado 22, el controlador del sistema
avanza la plataforma rotatoria 604 hasta situar un dispositivo de
CTP subsecuente 608, reteniendo un tubo de recogida 624 que
contiene una subsecuente muestra acuosa, por encima del subsistema
de depósito de muestras 800. Así mismo, el dispositivo de CTP 608
que tiene el tubo de recogida usado, vacío, 624 es avanzado hasta
una estación de descartes 850 de tubos de recogida (mostrada en la
Figura 1) donde el tubo de recogida usado 624 puede ser retirado o
expulsado del soporte respectivo 616 del tubo y desechado. Con
referencia brevemente a la Figura 1, en diversas formas de
realización, la estación de descarte 850 de los tubos de recogida
incluye un dispositivo de retirada 854 de los tubos de recogida
montado sobre un accionador lineal 858 que puede ser accionado para
extender y retraer un dispositivo de agarre automático 862. Cuando
un dispositivo de CTP 608 que retiene un tubo de recogida usado 624
es situado en posición adyacente al dispositivo de retirada 854 de
los tubos de recogida, el controlador del sistema envía una orden al
accionador lineal 858 para extender el dispositivo de agarre 862
para agarrar el tubo de recogida usado 624. El controlador del
sistema a continuación envía una orden de retracción al accionador
lineal 858, retirando de esta forma el tubo de recogida usado 624
del respectivo soporte 616 del tubo. El dispositivo de agarre 862
puede a continuación recibir la orden de liberar el tubo de
recogida usado 624 permitiendo que caiga dentro de un recipiente de
descartes (no mostrado).
Con referencia ahora a la Figura 14, en diversas
formas de realización, después de que se ha extraído una muestra de
semilla situándola en la estación de muestreo 500, el controlador
del sistema puede avanzar la placa giratoria 308 para situar el
respectivo portasemillas 304 en posición adyacente a una estación de
tratamiento de semillas 900. La estación de tratamiento de
semillas 900 incluye un dispensador de tratamiento 904 montado
sobre una estructura de soporte del sistema por encima del área de
perímetro de la placa giratoria 308. El dispensador de tratamiento
904 incluye un aplicador 908 configurado para aplicar un tratamiento
a la semilla, como por ejemplo un compuesto obturador a la porción
al descubierto de la respectiva semilla, esto es, el área de la
corona de la semilla donde la envoltura seminal ha sido retirada y
extraída la muestra. El tratamiento a la semilla puede ser
cualquier sustancia diseñada para potenciar una o más propiedades de
la semilla para proteger la semilla de bacterias u otros elementos
dañinos que podrían dañar la semilla y destruir la viabilidad de
germinación de la semilla. Por ejemplo, en diversas formas de
realización, el tratamiento a la semilla es un compuesto obturador
que comprende un fungicida y/o un polímero administrado a la semilla
mediante el dispensador de tratamiento 904 por medio del aplicador
908. El aplicador 908 puede ser cualquier dispositivo apropiado
para aplicar el tratamiento a la semilla deseado, por ejemplo un
cepillo, una aguja o una boquilla. En diversas formas de
realización, el aplicador 908 comprende una boquilla de
pulverización y el dispensador de tratamiento, incluye un orificio
de fluido 912 acoplado a una válvula de medida 916. En dichas formas
de realización, el dispensador de tratamiento 904 está conectado a
una fuente de suministro de líquido para tratamiento de semillas
(no mostrada) a través del orificio de fluido 912. De acuerdo con
ello, cuando un portasemillas 904 es situado en la estación de
tratamiento de semillas 900, por debajo del dispensador de
tratamiento 900, el controlador del sistema envía una orden al
dispensador de tratamiento 904 para que pulverice una cantidad
medida de tratamiento a la semilla sobre la respectiva semilla.
Con referencia ahora a las Figuras 15 y 16,
después del muestreo y del tratamiento de la semilla opcional, el
controlador avanza la placa giratoria 308 hasta que el respectivo
portasemillas 304 es situado en posición adyacente a un segundo
dispersador 1004 de los cabezales de sujeción del subsistema de
depósito de semillas 1000. El dispersador 1004 de los cabezales de
sujeción está montado sobre la estructura de soporte del sistema e
incluye un par de lengüetas de horquilla 1008 acopladas a una base
1012 de la horquilla. El dispersador 1004 de los cabezales de
sujeción tienen una forma y una función sustancialmente idénticas al
dispersador 340 de los cabezales de sujeción descritos con
anterioridad con referencia a la Figura 5. De acuerdo con ello,
tras la activación del dispersador 1004 de los cabezales de
sujeción, la base 1012 de la horquilla es extendida hasta el
portasemillas 304 de tal manera que las lengüetas 1008 queden
insertadas dentro de las vías de paso 336 de la horquilla. Cuando
las lengüetas 1008 se deslizan por dentro de las respectivas vías
de paso 336 de la horquilla, los cabezales de sujeción 312 del
respectivo portasemillas 304 son retraídos, de forma similar a la
descrita con anterioridad. Cuando los cabezales de sujeción 312 se
retraen, la respectiva semilla se deja caer a través de los
agujeros coaxialmente alineados existentes en el fondo del canal 318
para las semillas del portasemillas y de la placa giratoria 308
dentro de un embudo 1016 de un transportador de semillas 1020.
El transportador de semillas 1020 comprende una
primera sección de tubo 1024 acoplada a un primer extremo del
embudo 1016 y a una entrada de un primer dispositivo venturi 1028 y
un segundo extremo a una entrada de un segundo dispositivo venturi
1036. Una salida del segundo dispositivo venturi 1036 está conectada
a un dispensador de semillas 1040 que está montado sobre la
estructura del soporte del sistema por encima de una plataforma
1044 de bandejas de semillas. El dispositivo venturi 1028 puede ser
accionado para inducir un flujo de aire dentro de las primera y
segunda secciones de tubo 1024 y 1032 hacia el dispensador de
semillas 1040. Al mismo tiempo, el segundo dispositivo venturi 1036
puede ser accionado para inducir un flujo de aire hacia el embudo
1016. De esta manera, el flujo de aire inducido por el primer
dispositivo venturi 1028 arrastrará la semilla hasta el interior
del primer embudo 1016 y de la primera sección de tubo 1020. Así
mismo, cuando la semilla entre en la primera sección de tubo 1024
es propulsada hacia el dispensador de semillas 1040 mediante el
flujo de aire suministrado por el primer dispositivo venturi 1028.
A continuación, cuando la semilla se acerca al dispensador de
semillas 1040, la semilla es ralentizada por el flujo de aire
suministrado por el segundo dispositivo venturi 1036 para que la
semilla sea suavemente dispensada en el dispensador de semillas
1040, dentro de una bandeja de semillas 18 sin dañar la semilla. En
diversas formas de realización, el flujo de aire suministrado por
el segundo venturi 1036 detiene efectivamente el desplazamiento de
la semilla, permitiendo que la semilla caiga, por la acción de la
gravedad, dentro de una bandeja de semillas 18. Diversos sensores
de la posición (no mostrados) pueden disponerse sobre las primera y
segunda secciones de tubo 1024 y 1032 para detectar la presencia
de la semilla, y proporcionar una entrada de datos al controlador
del sistema para controlar el funcionamiento del controlador de
semillas 1020.
Con referencia en particular a la Figura 16, el
subsistema de depósito de semillas 1000 incluye así mismo una
plataforma 1044 para las bandejas de semillas, adaptada para retener
firmemente una pluralidad de bandejas de semillas 18 en posiciones
y orientaciones fijas. Cada bandeja de semillas 18 incluye una
pluralidad de pocillos de semillas 26, cada uno de los cuales está
adaptado para recibir una semilla dispensada desde el dispensador
de semillas 1040. El dispensador de semillas 1040 está montado sobre
la estructura de soporte del sistema por encima de la plataforma
1044 de las bandejas de semillas, de tal manera que las semillas
puedan ser dispensadas desde el dispensador de semillas 1040 hasta
el interior de los pocillos 26 de las semillas seleccionadas de las
bandejas 18 de la semillas seleccionadas.
La plataforma 1044 de las bandejas de semillas
está montada sobre un bastidor X - Y 1048. El bastidor X - Y 1048
es un mecanismo de traslación de dos dimensione que incluye una
primera pista de traslación 1052 y una segunda pista de traslación
1056. El bastidor X - Y 1048 incluye así mismo un primer accionador
lineal 1060 que puede ser accionado para desplazar en dos
direcciones un primer carro (no mostrado) a lo largo de la
extensión de la primera pista de traslación 1052. El bastidor X - Y
1048 incluye así mismo un segundo accionador lineal 1064 que puede
ser accionado para desplazar en dos direcciones un segundo carro
(no mostrado) a lo largo de la extensión de la segunda pista de
traslación 1056. La segunda pista de traslación 1056 está montada
sobre el primer carro y la plataforma 1044 de las bandejas de
semillas está montada sobre el segundo carro.
Los primero y segundo accionadores lineales 1060
y 1064 son controlados por el controlador del sistema para
desplazar con precisión la plataforma 1044 de las bandejas de
semillas en dos dimensiones. Más concretamente, los primero y
segundo accionadores 1060 y 1064 desplazan la plataforma 1044 de las
bandejas de semillas dentro de un sistema de coordenadas X - Y para
situar con precisión cualquier pocillo seleccionado 26 de cualquier
bandeja de semillas seleccionada 18 en un emplazamiento escogido
como objetivo situado por debajo del dispensador de semillas 1040.
El emplazamiento escogido como objetivo es el emplazamiento situado
en el sistema de coordenadas X - Y que está directamente por
debajo de una punta 1068 del dispensador de semillas 1040. Una vez
que el portasemillas 304 es situado por encima del embudo 1016, el
controlador del sistema sitúa un pocillo 26 de una bandeja de
semillas seleccionada, en el emplazamiento escogido como objetivo.
La semilla existente en el portasemillas 304 es liberada dentro del
embudo 1016 y transportada hasta el dispensador de semillas 1040,
de acuerdo con lo descrito con anterioridad, y depositada suavemente
dentro del pocillo seleccionado.
Cuando las bandejas de semillas 18 están
situadas sobre la plataforma 1044 de las bandejas de semillas, se
registra un número de identificación de la bandeja, por ejemplo un
código de barras, para cada bandeja de semillas 18 y es registrado
el emplazamiento de cada bandeja de semillas 18 situada sobre la
plataforma 1044 de las bandejas de semillas. Así mismo, cuando cada
semilla está depositada en un pocillo 26, puede ser registrada una
plataforma 1044 de las bandejas de semillas. Las posiciones de las
bandejas y de los pocillos registradas situadas sobre la plataforma
1044 de las bandejas de muestras pueden a continuación ser
comparadas con los emplazamientos X - Y de cada semilla
depositada, para identificar la semilla específica dentro de cada
pocillo 26 de cada bandeja de semillas 18.
De acuerdo con lo descrito con anterioridad,
cada una de las bandejas de semillas 18 y cada una de las bandejas
de muestras 14 incluye una pluralidad de pocillos 26 y 22,
respectivamente. En diversas formas de realización, el número y
disposición de los pocillos 26 existentes en las bandejas de
semillas 18 se corresponde con el número y disposición de los
pocillos 22 existentes en las bandejas de muestras 14. Esto facilita
una correspondencia individualizada entre una semilla y su muestra
extraída. Sin embargo, en algunas formas de realización, puede ser
deseable disponer múltiples pocillos 22 dentro de las bandejas de
muestras 14 para cada pocillo 26 de las bandejas de semillas 18,
por ejemplo, cuando puedan llevarse a cabo múltiples pruebas sobre
las muestras, o cuando puedan tomarse diferentes muestras de la
misma semilla (por ejemplo, muestras de diferentes
profundidades).
Con referencia ahora a la Figura 17, en diversas
formas de realización, el sistema muestreador de semillas 10
incluye así mismo una estación de carga 1100 de los tubos de
recogida para el montaje de los tubos de recogida 624 sobre los
soportes 616 de los tubos de cada dispositivo de CTP 608. La
estación de carga 1100 de los tubos incluye una tolva 1104 que
presenta una superficie perfilada y una rampa de alimentación
vibratoria 1108 que se extiende desde un fondo abierto de la tolva
1104. Grandes cantidades de tubos de recogida 624 pueden ser
depositadas dentro de la tolva 1104 donde la rampa de alimentación
vibratoria 1108 alimenta los tubos de recogida 624 hasta el
interior de un alimentador vibratorio de tazón 1112. Una pista de
alimentación 1116 basada en la fuerza de la gravedad está
conectada a una salida 1118 del alimentador vibratorio de tazón
1112 situado en el primer extremo 1116A. Un segundo extremo de la
pista de alimentación 1116 termina en un dispositivo de martillo
hidráulico 1120 de los tubos de recogida. El dispositivo de martillo
hidráulico 1120 se extiende ortogonalmente hacia abajo desde el
segundo extremo 1116B de la pista de alimentación e incluye un canal
de elevación longitudinal 1124 que se extiende a lo largo de la
extensión del dispositivo del martillo hidráulico 1120. El
dispositivo de martillo hidráulico 1120 adicionalmente incluye un
mecanismo de empuje (no mostrado) en posición interna respecto del
dispositivo de martillo hidráulico 1120. El mecanismo de empuje
puede ser cualquier mecanismo que pueda ser accionado para empujar
un tubo de recogida 624, longitudinalmente situado por dentro del
canal de elevación 1124, por fuera de un extremo superior 1120A del
dispositivo de martillo hidráulico 1120. Por ejemplo, un mecanismo
de empuje puede incluir un accionador lineal que impulse un martillo
hidráulico conformado para recibir al menos una porción de un tubo
de recogida
624.
624.
Cuando el tazón de alimentación vibratorio 1112.
vibra, los tubos de recogida 624 migran hacia la salida 1118 del
alimentador de tazón vibratorio 1112. En la salida 1118, los tubos
de recogida 624 caen dentro del primer extremo 1116A de la pista
de alimentación y está conformada para provocar que los tubos de
recogida 624 caigan dentro de una ranura de los tubos (no mostrada)
que se extiende a lo largo de la pista de alimentación 1116. Más
concretamente, los tubos de recogida 624 son forzados a caer con la
punta hacia abajo dentro de la ranura de los tubos y cuelgan dentro
de la ranura de los tubos por un labio 620A de la base 620 de los
tubos de recogida (mostrada en la Figura 10). La fuerza de la
gravedad y la vibración procedente del tazón de alimentación
vibratorio 1112 provocan que los tubos de recogida 624 se desplacen
a lo largo de la pista de alimentación 1116 y se acumulen, en fila
india, en el segundo extremo 1116B de la pista de alimentación.
Cuando los tubos de recogida 624 se acumulan, en fila india, el
segundo extremo 1116 el tubo de recogida delantero 624 quedará
longitudinalmente orientado por dentro del canal longitudinal. El
dispositivo de martillo hidráulico 1120 es a continuación accionado
de manera que el mecanismo de empuje empuje el tubo de recogida
delantero 624 hacia fuera del extremo superior 1124A del canal de
elevación 1124 del dispositivo de martillo hidráulico.
Antes del accionamiento del dispositivo del
martillo hidráulico 1120, el controlador del sistema hará avanzar
la plataforma giratoria 604 para situar un dispositivo de CTP 608
por encima del segundo extremo 1116B de la pista de alimentación
1116. El controlador del sistema enviará así mismo entonces una
orden al accionador 632 del brazo del pivote para situar el soporte
616 de los tubos en la posición de carga y depósito, de tal manera
que el extremo distal 618 del soporte de los tubos quede
directamente por encima del extremo superior 1124A del canal de
elevación. Por consiguiente, cuando el tubo de recogida delantero es
empujado, o elevado, fuera del extremo superior 1124A del canal de
elevación la base 620 del tubo de recogida es empujada sobre el
extremo distal 618 del soporte de los tubos. El extremo distal 618
del soporte de los tubos tiene el tamaño preciso para que se
produzca un encaje de fricción entre la base 620 de los tubos de
recogida y el extremo distal 18 del soporte de los tubos. De
acuerdo con ello, el tubo de recogida 624 es levando fuera del
dispositivo de martillo hidráulico 1120 y montado sobre el
respectivo soporte del tubo. El siguiente tubo de recogida 624
situado en la pista de alimentación 1116 será a continuación
colocado dentro del canal de alimentación 1124 y un extremo distal
618 de soporte de tubos subsecuente quedará situado para recibir el
tubo de recogida 624.
Con referencia ahora a la Figura 18, en diversas
formas de realización, los tubos de recogida 624 pueden comprender
unas pipetas comercialmente disponibles, designadas en la presente
memoria como las pipetas 624'. En dichas formas de realización, las
pipetas 624' pueden requerir que una porción de la purga 672' sea
retirada hasta permitir la oportuna extracción de la muestra, la
punta de la pipeta y el depósito de la muestra acuosa dentro de las
bandejas de muestras 14. Por consiguiente, en dichas formas de
realización, el sistema muestreador de semillas 10 puede incluir un
subsistema de preparación 1150 de los tubos de recogida que puede
ser accionado para cortar una porción de cada punta de pipeta 672'
después de que cada pipeta 624' haya sido montada sobre un soporte
respectivo 616 de los tubos. El subsistema de preparación 1150 de
los tubos de recogida incluye un accionador lineal 1154 que puede
ser operado para extender o retraer una base 1158A de un cortador
1158 a lo largo de un eje geométrico lineal P. El accionador lineal
1154 está montado sobre la estructura de soporte del sistema por
debajo de la plataforma rotatoria 604, de tal manera que, cuando una
nueva pipeta montada 624', esto es, la pipeta 624' acaba de ser
montada sobre el respectivo montaje 616 de los tubos, sea avanzada
hasta el subsistema de preparación 1150 de los tubos de recogida, la
punta de pipeta 672' quede situada dentro de una cámara de corte
1162.
La cámara de corte 1162 está constituida entre
la base 1158A del cortador y un rebajo de corte 1166 constituido en
un cabezal 1158B del cortador 1158. Tal como se ilustra en la Figura
18, cuando la nueva pipeta montada 624' es avanzada desde la
estación de carga 1100 de los tubos de recogida, la base 1158A del
cortador está en la posición retraída y la punta 672' está situada
dentro del rebajo de corte 1166. A continuación el controlador del
sistema envía una orden al accionador lineal 1154 para extender la
base 1158A del cortador. El cortador 1158 incluye un instrumento de
corte 1170, por ejemplo, una cuchilla, acoplada de manera fija con,
o sujeta a, la base 1158A del cortador mediante una pieza de
fijación 1174 del instrumento de corte. El instrumento de corte
está situado de manera fija de tal manera que, cuando el accionador
lineal 1154 extiende la base 1158A del cortador, el instrumento de
corte seccionará la punta de pipeta 672' retirando de esta forma una
porción de la punta 672'.
Con referencia ahora a la Figura 19, en
diversas formas de realización, después de que la semilla muestreada
ha sido depositada en un pocillo seleccionado 26 de una bandeja de
semillas seleccionada 18, el controlador del sistema avanza la
placa giratoria 308 y sitúa el portasemillas 304 ahora vacío en una
estación de limpieza 1200. La estación de limpieza 1120 puede ser
accionada para limpiar y retirar cualquier muestra de semillas
residual y/o de tratamiento de la semilla, como por ejemplo, un
compuesto obturante, del respectivo portasemillas 304 después de
que la semilla muestreada ha sido conducida hasta una bandeja de
semillas 18 y antes de que una nueva semilla esté orientada y
situada dentro del portasemillas 304. La estación de limpieza
comprende un cepillo rotatorio 1204 y un vacío 1208. El vacío 1208
está conectado a una fuente de vacío (no mostrada) para
proporcionar un vacío en la boquilla de vacío 1212 situada en
íntima proximidad con el canal 318 para semillas del portasemillas
cuando el respectivo portasemillas 304 es avanzado hasta la estación
de limpieza 1200. El vacío aplicado retirará cualquier material de
muestra residual y/o cualquier tratamiento de la semilla que pueda
haberse congregado sobre el portasemillas 304. Así mismos, el
cepillo rotatorio 1204 es accionado, por ejemplo, eléctrica o
reumáticamente, para rotar sobre o con un árbol rotatorio 1216. De
manera simultánea con la aplicación del vacío sobre la boquilla de
vacío 1212, el controlador del sistema hace rotar el cepillo
rotatorio 1204 para retirar cualquier material de muestra residual
y/o de tratamiento de la semilla que pueda haberse congregado sobre
el portasemillas 304.
La presente divulgación proporciona unos
procedimientos para el análisis de semillas que presenten un rasgo
deseado, un marcador o un genotipo. En un aspecto de la divulgación,
procedimientos analíticos permiten que sean analizadas las semillas
concretas existentes en una tanda o en una población de semillas a
granel, de tal manera que puedan determinarse las características
químicas y/o genéticas de las semillas individuales.
Las muestras preparadas por la presente
divulgación pueden ser utilizadas para determinar una amplia
variedad de rasgos físicos, morfológicos, químicos y/o genéticos.
En términos generales, dichos rasgos se determinan mediante el
cribado de las muestras con respecto a una o más características
químicas o genéticas de los rasgos. Ejemplos no limitativos de
características químicas incluyen proteínas, aceites, almidones,
ácidos grasos y metabolitos. De acuerdo con ello, ejemplos no
limitativos de rasgos químicos incluyen un contenido en proteínas,
un contenido en almidón, un contenido en aceite, la determinación
de perfiles de ácidos grasos, la determinación de perfiles de
metabolitos, etc. Las características genéticas pueden incluir, por
ejemplo, marcadores genéticos, alelos de marcadores genéticos,
genes, secuencias derivadas del ADN, secuencias derivadas del ARN,
promotores, locus de rasgos cuantitativos (QTL) 5'UTR, 3'UTR,
marcadores satélite, transgenes, ARNm, ARNnb, perfiles
transcripcionales y patrones de metilación.
En algunas formas de realización, los
procedimientos y dispositivos de la presente divulgación, pueden ser
utilizados en un programa de cultivo para seleccionar plantas o
semillas que tengan un rasgo o genotipo marcador deseado. Los
procedimientos de la presente divulgación pueden ser utilizados en
combinación con cualquier procedimiento metodológico de cultivo y
pueden ser utilizados para seleccionar una sola generación o para
seleccionar múltiples generaciones. El dispositivo del procedimiento
de cultivo depende del modo de reproducción de la planta, de la
heredabilidad del (de los) rasgo(s) que está(n) siendo
mejorado(s), y del tipo de variedad cultivada utilizada
comercialmente (por ejemplo, variedad cultivada híbrida F_{1},
variedad cultivada en línea pura, etc.). Sistemas no limitativos,
seleccionados, para el cultivo de las plantas de la presente
divulgación se exponen en las líneas que siguen. Se entiende así
mismo que cualquier variedad cultivada comercial y no comercial
puede ser utilizada en el programa de cultivo. Factores tales, como
por ejemplo el vigor de emergencia, el vigor vegetativo, la
tolerancia al estrés, la resistencia a las enfermedades, la potencia
a la ramificación, la fluorescencia, el agarre de las semillas, el
tamaño de las semillas, la densidad de las semillas, la verticalidad
y trillabilidad, etc., generalmente dictarán la elección.
En diversas formas de realización, los
procedimientos de la presente divulgación son utilizados para
determinar las características genéticas de semillas en un programa
de cultivo asistido por marcadores. Dichos procedimientos
posibilitan unos programas de cultivo mejorados asistidos por
marcadores en los que pueda llevarse a cabo el muestreo de semillas
directo no destructivo manteniendo al tiempo la identidad de los
individuos desde el muestreador de semillas hasta el campo. Como
resultado de ello, el programa de cultivo asistido por marcadores
se traduce en una plataforma de "alto rendimiento" en la que
una población de semillas que tienen un rasgo deseado, un marcador
o genotipo pueden ser más eficazmente aumentados en un periodo de
tiempo más corto requiriéndose menos recursos de campo y trabajo.
Dichas ventajas se describirán con mayor detalle más adelante.
En otras formas de realización, la presente
divulgación proporciona un procedimiento para analizar semillas
individuales dentro de una población de semillas con diferencias
genéticas. El procedimiento comprende la retirada de una muestra
que comprenda células con ADN procedente de semillas de la población
sin afectara la viabilidad de la germinación de las semillas; el
cribado del ADN extraído de la muestra para constatar la presencia
o ausencia de al menos un marcador genético, la selección de
semillas a partir de la población en base a los resultados del
cribado del ADN; y el cultivo de plantas a partir de las semillas
seleccionadas.
De acuerdo con lo descrito con anterioridad, los
sistemas y procedimientos de muestreo de la presente divulgación
protegen la viabilidad de germinación de las semillas para que no
sea destructiva. La viabilidad de germinación significa que un
número dominante de las semillas muestreadas (esto es mayor del 50%
de las semillas muestreadas) permanece viable después del muestreo.
En algunas formas de realización particulares, al menos, de modo
aproximado, el 75% de las semillas muestreadas y, en algunas formas
de realización, al menos, de modo aproximado, el 85% de las
semillas muestreadas, permanece viable. Debe destacarse que pueden
ser tolerables tasas menores de viabilidad de germinación para
ciertas circunstancias o para ciertas aplicaciones, por ejemplo,
cuando los costes genotípicos se reducen con el tiempo debido a que
un mayor número de muestras podrían ser muestreadas para el mismo
coste genotípico.
En otras formas de realización adicionales, la
viabilidad de la germinación se mantiene durante al menos, de modo
aproximado, seis meses después del muestreo para asegurar que la
semilla muestreada sea viable hasta que llegue al campo de
plantación. En algunas formas de realización concretas, los
procedimientos de la presente divulgación comprenden así mismo el
tratamiento de las semillas muestreadas para mantener la viabilidad
de la germinación. Dicho tratamiento puede genéricamente incluir
cualquier medio conocido en la técnica para proteger una semilla de
las condiciones medioambientales mientras se produce el almacenaje o
el transporte. Por ejemplo, en algunas formas de realización, las
semillas muestreadas pueden ser tratadas con un polímero y/o un
fungicida para proteger la semilla muestreada mientras se encuentra
almacenada o en transporte hasta el campo antes de su
plantación.
En diversas formas de realización, las muestras
de la presente divulgación se utilizan en un procedimiento no
destructivo de alto rendimiento para analizar semillas individuales
dentro de una población de semillas. El procedimiento comprende la
retirada de una muestra de la semilla preservando al tiempo la
viabilidad de germinación de la semilla; y el cribado de la
muestra para constatar la presencia o ausencia de una o más
características indicativas de un rasgo genético o químico. El
procedimiento, puede, así mismo, comprender la selección de
semillas de la población en base a los resultados del cribado; y el
cultivo de las plantas a partir de la semilla seleccionada.
El ADN puede ser extraído de la muestra
utilizando cualquier procedimiento de extracción del ADN conocido
por los expertos en la materia que proporcione suficiente
producción de ADN, calidad del ADN y respuesta a la RCP. Un ejemplo
no limitativo de procedimiento de extracción del ADN apropiado es la
extracción en base al SDS con centrifugación. Así mismo, el ADN
extraído puede ser amplificado después de la extracción utilizando
cualquier procedimiento de amplificación conocido por los expertos
en la materia. Por ejemplo, un ejemplo de amplificación apropiado
es el prep de aplicación del ADN GenomiPhi® de Amersham
Biosciences.
El ADN extraído es cribado para constatar la
presencia o ausencia de un marcador genérico apropiado. Los expertos
en la materia conocen una amplia variedad de marcadores genéticos
disponibles. El cribado del ADN para constatar la presencia o
ausencia del marcador genético puede ser utilizado para la
selección de semillas en una población de cultivo. El cribado puede
ser utilizado para seleccionar el QTL, alelos, o regiones genómicas
(haplotipos). Los alelos, el QTL, los haplotipos que van a ser
utilizados pueden ser seleccionados utilizando nuevas técnicas de
biología molecular con modificaciones de las estrategias de cultivo
clásicas.
En otras diversas formas de realización, la
semilla es seleccionada en base a la presencia o ausencia de un
marcador genético que esté genéticamente vinculado con un QTL.
Ejemplos de QTLs que a menudo son de interés incluyen, pero no se
limitan a, el rendimiento, la resistencia a encamarse, la altura, la
madurez, la resistencia a las enfermedades, la resistencia a los
parásitos, la resistencia a la deficiencia de nutrientes, la
composición del grano, la tolerancia a los herbicidas, el contenido
en ácidos grasos, el metabolismo de las proteínas o carbohidratos,
el contenido incrementado de aceite, el contenido incrementado
nutricional, la tolerancia al estrés, las propiedades
organolépticas, las características morfológicas, otros rasgos
agronómicos, los rasgos destinados a usos industriales, los rasgos
que ofrecen un mayor atractivo para el consumidor, y una
combinación de rasgos que pudiera incluir un índice múltiple de
dichos rasgos. Como alternativa, la semilla puede ser seleccionada
en base a la presencia o ausencia de un marcador que esté
genéticamente vinculado a un haplotipo asociado con un QTL.
Ejemplos de dicho QTL pueden, de nuevo, incluir, sin limitación, el
rendimiento, la resistencia a encamarse, la madurez, la resistencia
a las enfermedades, la resistencia a los parásitos, la resistencia
a la deficiencia de nutrientes, la composición de los granos, la
tolerancia a los herbicidas, el contenido en ácidos grasos, el
metabolismo de las proteínas o de los ácidos grasos, el contenido
incrementado de aceites, el contenido incrementado nutricional, la
tolerancia al estrés, las propiedades organolépticas, las
características morfológicas, otros rasgos agronómicos, otros rasgos
destinados a usos industriales, rasgos que ofrecen un mayor
atractivo para el consumidor, y una combinación de rasgos de acuerdo
con un índice múltiple de rasgos.
La selección de una población de cultivo podría
iniciarse en un nivel tan temprano como el del cultivo de F_{2},
si se utilizan padres endógamos homocigóticos en el cruce de cultivo
inicial. Una generación de F_{1} podría, así mismo, ser
muestreada y avanzada si uno o más de los padres del cruce son
heterocigóticos para los alelos o marcadores de interés. El
cultivador puede cribar una población de F_{2} para recuperar el
genotipo de marcador de cada individuo de la población. Los tamaños
de población iniciales, limitados solo por el número de las
semillas disponibles para el cribado, pueden ser ajustados para
satisfacer la probabilidad deseada de identificación con éxito del
número deseado de individuos. Véase Sedcole, J. R. "Número
de plantas necesario para recuperar un rasgo" ["Number of
plants necessary to recover a trat"] Crop Sci. 17: 667 - 68
(1977). De acuerdo con ello, la probabilidad de encontrar el
genotipo deseado, el tamaño de población inicial y el tamaño de
población resultante elegida como objetivo pueden ser modificados
mediante diversos procedimientos metodológicos de cultivo y
mediante el nivel endogámico de las poblaciones muestreadas.
Las semillas seleccionadas pueden ser dispuestas
a granel o mantenerse separadas dependiendo del procedimiento
metodológico de cultivo y del objetivo escogido. Por ejemplo, cuando
un cultivador está cribando una población de F_{2} con la
finalidad de apreciar la resistencia a las enfermedades, todos los
individuos con el genotipo deseado pueden ser dispuestos a granel y
plantados en el plantel de cultivo. Al contrario, si están siendo
seleccionados múltiples QTL con efectos variables para un rasgo,
como por ejemplo el rendimiento del grano, a partir de una
población determinada, el cultivador puede mantener preservada la
identidad individual, centrándose su actuación en la diferencia de
los individuos con diferentes combinaciones del QTL perseguido.
Pueden utilizarse diversos procedimientos para
preservar la identidad de la semilla específica mientras se
transfiere la semilla desde el laboratorio de astillado hasta el
campo. Los procedimientos incluyen, pero no se limitan a, la
transferencia de los individuos seleccionados a una cinta de
semillas, una bandeja de cajas, o una bandeja de indización, el
trasplante con macetas de turba, y la plantación a mano a partir de
los paquetes de semillas individuales. Pueden ser utilizados
múltiples ciclos de selección dependiendo de los objetivos de
cultivo y de la complejidad genética.
Los procedimientos de cribado de la divulgación
pueden, así mismo, ser utilizados en un programa de cultivo para la
introgresión de un rasgo dentro de una planta. Estos procedimientos
comprenden la retirada de una muestra que comprende células con
ADN de semillas de una población, cribando el ADN extraído de cada
semilla para constatar la presencia o ausencia de al menos un
marcador genético, seleccionando semillas entre la población en
base a los resultados del cribado del ADN; el cultivo de una planta
fértil a partir de la semilla; y la utilización de una planta
fértil ya sea como padre hembra o padre macho en un cruce con otra
planta.
Ejemplos de cribado genético para seleccionar
semillas para la integración de rasgos, incluyen, sin limitación,
la identificación de altas frecuencias de los alelos padre
recurrentes, el seguimiento de transgenes de interés o el cribado
para constatar la ausencia de transgenes no deseados, la selección
de la semilla de evaluación híbrida, y la evaluación de la
cigosidad.
La identificación de las altas frecuencias de
alelos de pares recurrentes por medio de procedimientos de cribado
de la presente divulgación permite que un número reducido de filas
por población y un número incrementado de poblaciones o de líneas
endogámicas, sea plantado en una unidad de campo determinada. De
esta manera, los procedimientos de cribado de la presente
divulgación pueden, así mismo, reducir efectivamente los recursos
requeridos para completar la conversión de líneas endogámicas.
Los procedimientos de la presente divulgación
proporcionan, así mismo, la garantía de calidad (QA) y el control
de calidad asegurando que los transgenes regulados o no deseados
sean identificados y descartados antes de la plantación.
Los procedimientos de la presente divulgación
pueden, así mismo, ser aplicados para identificar la semilla
híbrida para la evaluación transgénica. Por ejemplo, en una
conversión de una línea endogámica en la etapa BCnF_{1}, un
cultivador podría efectivamente crear un lote de semillas híbridas
(impidiendo la selección de gametos) que fuera un 50% homocigótico
para el rasgo de interés y un 50% o homocigótico para la falta del
rasgo con el fin de generar una semilla híbrida con fines de
evaluación. El cultivador podría entonces cribar todas las semillas
F_{1} producidas en el cruce de la prueba e identificar y
seleccionar aquellas semillas que eran homocigóticas. Dicho
procedimiento es ventajoso en el sentido de que las interferencias
procedentes de las pruebas híbridas representarían una genética
híbrida comercial con respecto a la cigosidad de los rasgos.
Otras aplicaciones de los procedimientos de
cribado de la presente divulgación para identificar y efectuar el
seguimiento de los rasgos de interés conllevan las mismas ventajas
identificadas con anterioridad con respecto a los recursos de campo
y trabajo requeridos. En términos generales, los programas de
conversión transgénica son ejecutados en emplazamientos
multiestacionales que comportan una estructura de costes de gestión
y de tierra mucho más altas. En cuanto tal, el impacto, ya sea de
la reducción de las necesidades de filas por población o ya sea del
incremento del número de poblaciones dentro de una unidad de campo
determinada, son considerablemente más radicales en cuanto al coste
con respecto a aplicaciones templadas.
Así mismo, los procedimientos de cribado de la
presente divulgación son utilizados para mejorar la eficiencia del
programa haploide doblado mediante la creación de los genotipos
deseados en la etapa haploide y la identificación del nivel de
ploidia para eliminar las semillas no haploides de su procesamiento
y avance en el campo. Ambas aplicaciones de nuevo se traducen en la
reducción de los recursos de campo por población y en la capacidad
para evaluar un número mayor de poblaciones dentro de una unidad de
campo determinada.
En diversas formas de realización, la
divulgación, así mismo, proporciona un ensayo para predecir la
cigosidad del embrión para un gen de interés (GOI) concreto. El
ensayo predice la cigosidad del embrión en base a la relación del
número de copias relativos de un GOI y de un gen de control interno
(IC) por célula o por genoma. En general, este ensayo utiliza un
gen de IC que tiene una cigosidad conocida, por ejemplo, una
cigosidad en el locus (dos copias de IC por célula diploide), para
normalizar la medición del GOI. La relación de los números de
copias relativos del IC con respecto al GOI, predice el número de
copias del GOI de la célula. En una célula homocigótica, para
cualquier gen determinado, (o secuencia genética única), el número
de copias de genes es igual al nivel de ploidia de la célula dado
que la secuencia está presente en el mismo locus en todos los
cromosomas homólogos. Cuando una célula es heterocigótica para un
gen determinado, el número de copias de genes será más bajo que el
nivel de ploidia de la célula. La cigosidad de una célula en
cualquier locus puede, de esta forma, ser determinada mediante el
número de copias de genes de la célula.
En algunas formas de realización concretas, la
divulgación proporciona un ensayo para predecir la cigosidad del
embrión del maíz. En la semilla de maíz, el tejido del endosperma es
triploide, mientras que el tejido del embrión es diploide. El
endosperma que es homocigótico para el IC contendrá tres copias del
IC. El número de copias del GOI del endosperma puede oscilar entre
0 (negativo homocigótico) a 3 (positivo a homocigótico); y el
número de copias del GOI del endosperma de 1 a 2 se encuentra en la
semilla heterocigótica para el GOI (o hemocigótico para el GOI si
el GOI es un transgen). El número de copias del endosperma es
reflejo de la cigosidad del embrión: un endosperma homocigótico
(positivo o negativo) acompaña un embrión homocigótico, el
endosperma heterocigótico (ya sea el número de copias del GOI de 1 y
2) refleja un embrión heterocigótico (número de copias del GOI de
1). El número de copias del GOI del endosperma (el cual puede
oscilar entre 0 y 3 copias) puede ser determinado a partir de la
relación del número de copias del IC del endosperma con respecto al
numero de copias del GOI del endosperma (que puede oscilar entre 0/3
a 3/3, esto es, de 0 a 1), lo cual puede a continuación ser
utilizado para predecir la cigosidad del embrión.
Los números de copias del GOI o del IC puede ser
determinado mediante cualquier técnica de ensayo conveniente para
la cuantificación de los números de copias, como es sabido en la
técnica. Ejemplos de ensayos apropiados incluyen, pero no se
limitan a, ensayos a la RCP en Tiempo Real (TaqMan®) (Applied
Biosystems, Foster City, CA) e Invaider® (Third Wave Technologies,
Madison, WI). De modo preferente, dichos ensayos se desarrollan de
tal manera que la eficiencia de amplificación tanto de las
secuencias del IC como del GOI son iguales o muy similares. Por
ejemplo, en el ensayo a la RCP en Tiempo Real TaqMan®, la señal
procedente del GOI de una sola copia (la célula fuente se determina
que sea heterocigótica para el GOI) se detectará un ciclo de
amplificación más tarde que la señal procedente del IC de dos
copias, porque la cantidad del GOI es la mitad que la del IC. Para
la misma muestra heterocigótica, un ensayo Invader® mediría una
relación del GOI, de modo aproximado, de 1:2 o 0,5. Para una
muestra que es heterocigótica tanto para el GOI como para el IC, la
señal del GOI se detectaría al mismo tiempo que la señal del IC
(TaqMan®), y el ensayo Invader® mediría una relación de GOI / IC,
de modo aproximado, de 2:2 o 1).
Estas líneas maestras se aplican a cualquier
célula poliploide, o a células haploides (como por ejemplo las
células del polen), dado que el número de copias del GOI o del IC
permanecen proporcionales al número de copias del genoma (o nivel
de ploidia de la célula). De esta manera, estos ensayos de la
cigosidad pueden llevarse a cabo en tejidos triploides como, por
ejemplo el endosperma del maíz.
Claims (18)
1. Un sistema automático muestreador de
semillas (10), que comprende:
- una estación de molturación (400) para retirar de una semilla al menos una porción de material de envoltura seminal;
- una estación de muestreo (500) para extraer una muestra de material de semilla de la semilla de la que la envoltura seminal ha sido retirada;
- un subsistema de transporte de semillas (300) para transportar la semilla entre la estación de molturación (400) y la estación de muestreo (500); y
- un subsistema de depósito de semillas (1000) para transportar la semilla desde el subsistema de transporte de semillas (300) hasta un pocillo seleccionado de una bandeja de semillas (18) después de que la semilla ha sido muestreada.
2. El sistema de la Reivindicación 1 que
comprende así mismo un subsistema de recogida y transporte de
muestras (600) para capturar la muestra extraída dentro de un tubo
de recogida montado sobre un dispositivo de emplazamiento de tubos
de recogida del subsistema de recogida y transporte de muestras
(600).
3. El sistema de la Reivindicación 2 que
comprende así mismo una estación de carga de los tubos de recogida
para separar el tubo de recogida (624) de una pluralidad de tubos de
recogida similares y montar el tubo de recogida (624) sobre el
dispositivo de colocación de tubos de recogida.
4. El sistema de la Reivindicación 2 que
comprende así mismo un subsistema de suministro de líquido (700)
para suministrar líquido al tubo de recogida (624) para mezclar con
la mezcla capturada.
5. El sistema de la Reivindicación 4 que
comprende así mismo un subsistema de depósito de muestras (800) para
transportar la muestra mezclada desde el subsistema de recogida y
transporte de muestras (600) hasta un pocillo seleccionado de una
bandeja de muestras (14).
6. El sistema de la Reivindicación 1 que
comprende así mismo una estación de carga de semillas (100) para
separar la semilla de una pluralidad de semillas similares de una
tolva de semillas a granel (104).
7. El sistema de la Reivindicación 6 que
comprende así mismo un sistema de orientación (200) para recibir la
semilla de la estación de carga de semillas (100), orientar la
semilla en una orientación con la punta hacia abajo y transportar
la semilla orientada hasta un portasemillas montado sobre una placa
giratoria del subsistema de transporte de semillas (300).
8. El sistema de la Reivindicación 1 que
comprende así mismo una estación de tratamiento de semillas (900)
para aplicar un tratamiento de la semilla a al menos la porción de
la semilla muestreada que presenta la envoltura seminal
retirada.
9. El sistema de la Reivindicación 8 en el que
el tratamiento de la semilla comprende uno de entre un polímero y
un dispositivo de estanqueidad fungicida.
10. El sistema de la Reivindicación 1 que
comprende así mismo una estación de limpieza (1120) para retirar el
material de muestra residual de un portasemillas montado sobre una
placa giratoria del subsistema de transporte de semillas (300)
después de que la muestra ha sido retirada de la semilla y que la
semilla muestreada ha sido transportada al pocillo seleccionado de
la bandeja de semillas (18).
11. Un procedimiento automático de alto
rendimiento para extraer el material de muestra para su evaluación a
partir de las semillas individuales de una población de semillas,
comprendiendo el procedimiento:
- la carga de una semilla en un portasemillas de un sistema automático muestreador de semillas (10);
- la retirada de la semilla de al menos una porción del material de la envoltura seminal;
- la extracción de una muestra del material de semilla de la semilla de la que la envoltura seminal ha sido retirada;
- el transporte de la semilla hasta un pocillo seleccionado de una bandeja de semillas (18) después de que la semilla ha sido muestreada;
- el transporte de la muestra extraída hasta un pocillo de una bandeja de muestras (14) utilizando un subsistema de depósito de muestras (600) del sistema muestreador de semillas (10); y
- el análisis de la muestra extraída para constatar una o más características indicativas de al menos un rasgo químico genético.
12. El procedimiento de la Reivindicación 11 en
el que la extracción de la muestra comprende la captura de la
muestra extraída dentro de un tubo de recogida.
13. El procedimiento de la Reivindicación 12 en
el que la extracción de la muestra comprende así mismo el suministro
de liquido sobre el tubo de recogida para mezclarlo con la muestra
capturada.
14. El procedimiento de la Reivindicación 13, en
el que el transporte de la muestra extraída comprende el transporte
de la muestra mezclada hasta el pocillo seleccionado de una bandeja
de muestras (14).
15. El procedimiento de la Reivindicación 11, en
el que la carga de la semilla comprende la separación de la semilla
de una pluralidad de semillas similares dentro de una tolva de
semillas a granel (104).
16. El procedimiento de la Reivindicación 15, en
el que la carga de la semilla comprende así mismo:
- la orientación de la semilla en una orientación con la punta hacia abajo; y
- el transporte de la semilla orientada hasta el portasemillas.
17. El procedimiento de la Reivindicación 11,
que comprende así mismo la aplicación de un tratamiento de la
semilla a al menos la porción de la semilla muestreada de la que se
ha retirado la envoltura seminal.
18. El procedimiento de la Reivindicación 17,
que comprende así mismo la retirada del portasemillas del material
de muestra residual después de que la muestra ha sido retirada de la
semilla y de que la semilla muestreada ha sido transportada hasta el
pocillo seleccionado de la bandeja de semillas (18).
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