ES2346205T3 - Anticuerpo humanizado (h14.18) del anticurpo 14.18 de raton que se enlaza con gd2 y su fusion con la il-2. - Google Patents
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Abstract
Una proteína de fusión de anticuerpo humanizado y de IL-2, designada como hu14.18-IL2, que se enlaza de manera específica con el GD2 y que estimula una inmunofunción, que comprende la cadena ligera de la SEQ ID No. 5 y la cadena pesada de la SEQ ID No. 6.
Description
Anticuerpo humanizado (h14.18) del anticuerpo
14.18 de ratón que se enlaza con GD2 y su fusión con la
IL-2.
Esta invención se refiere, de forma general, a
anticuerpos modificados. De una manera más particular, la invención
se refiere a anticuerpos modificados con una inmunogenicidad
reducida, que se enlazan de manera específica con el
glicoesfingolípico GD2 de la superficie de las células humanas, y a
su uso como agentes terapéuticos.
Durante años ha habido progresos significativos
en el desarrollo de terapias basadas en anticuerpos. Por ejemplo,
los investigadores han identificado, no solamente una variedad de
marcadores específicos del cáncer, sino que, también, han
identificado una variedad de anticuerpos, que se enlazan de manera
específica con dichos marcadores. Los anticuerpos pueden ser usados
para suministrar ciertas moléculas, por ejemplo una toxina o una
mitad inmunoestimulante, por ejemplo, una citocina, a una célula
cancerosa, que exprese el marcador, con el fin de destruir
selectivamente a la célula cancerosa.
El anticuerpo 14.18 es un anticuerpo monoclonal
derivado del ratón, que está dirigido contra el glicoesfingolípido
GD2 de la superficie celular. El GD2 es un disialogangliósido, que
es expresado normalmente solo a un nivel significativo sobre las
membranas de la superficie externa de las células neuronales, en la
que su exposición al sistema inmune está limitada por medio de la
barrera hematoencefálica.
Por el contrario, numerosas células tumorales
tienen niveles anormales de expresión de glicoesfingolípido en la
superficie celular. Por ejemplo, el GD2 es expresado en las
superficies de una gran variedad de células tumorales, con
inclusión de los neuroblastomas, de los blastomas medulares, de los
astrocitomas, de los melanomas, del cáncer pulmonar microcítico, de
los osteosarcomas y de otros sarcomas del tejido blando. De este
modo, el GD2 es un marcador específico de los tumores conveniente
para dirigir a las células tumorales dominios proteicos
inmunoestimulantes, con objeto de provocar una respuesta inmune
efectiva contra las células tumorales para llevar a cabo su
destrucción. Aún cuando el anticuerpo de ratón 14.18 (anticuerpo
m14.18) puede contribuir a dirigir a estos dominios proteicos hacia
las células tumorales, sus secuencias de aminoácido, derivadas del
ratón, pueden menoscabar el deseado efecto terapéutico.
Cuando son administrados a un paciente, los
anticuerpos pueden tener una inmunogenicidad asociada en el mamífero
huésped. Esto es más probable que ocurra cuando los anticuerpos no
son autólogos. Como consecuencia, la eficacia de las terapias
basadas en anticuerpos está frecuentemente limitada por una
respuesta inmunogénica dirigida contra el anticuerpo terapéutico.
Esta respuesta inmunogénica queda acrecentada, de forma típica,
cuando el anticuerpo se derive en su totalidad, o en parte, de un
mamífero diferente del mamífero huésped, por ejemplo cuando el
anticuerpo se derive de un ratón y el receptor sea un ser
humano.
Para el uso clínico en seres humanos podría ser
adecuado llevar a cabo una modificación de los anticuerpos
derivados del ratón para proporcionar anticuerpos que se parezcan
más a los humanos de tal manera, que se reduzca o que se minimice
la inmunogenicidad del anticuerpo derivado del ratón. La
inmunogenicidad del anticuerpo derivado del ratón puede ser
reducida por medio de la generación de un anticuerpo quimérico, en
el que las regiones constantes de un anticuerpo humano estén
fusionadas con los dominios variables del ratón. Sin embargo, los
dominios variables del ratón, remanentes, siguen siendo generalmente
todavía inmunogénicos en los seres humanos y, por consiguiente,
pueden menoscabar la eficacia de una terapia basada en
anticuerpos.
Algunos intentos destinados a reducir la
inmunogenicidad, tales como el "chapeado" y la
"humanización" comprenden la introducción de un gran número de
substituciones de aminoácidos y pueden interrumpir el enlace de un
anticuerpo con un antígeno. El anticuerpo m14.18 se enlaza con el
GD2 con una afinidad moderada. Por consiguiente, se espera que las
mutaciones que disminuyan de manera significativa la afinidad del
m14.18 con respecto al GD2, hagan que este sea menos efectivo para
finalidades terapéuticas en seres humanos. Por lo tanto, existe una
necesidad en el estado de la técnica de anticuerpos terapéuticos,
que puedan hacer blanco de manera efectiva en el GD2 y que tengan
una inmunogenicidad reducida cuando sean administrados a seres
humanos.
La publicación WO 01/23573 y las publicaciones
Derwent AN 2001-266163 XP002280627 (Kyowa Hakko
Kogyo KK) describen un anticuerpo anti-GD2
quimérico recombinante específico con baja inmunoantigenicidad.
La publicación WO 02/066514 (Merck Patent GmbH)
describe numerosas versiones del mAb 14.18, que han sido
desinmunizadas por medio de la eliminación de epitopos de células T
a partir del anticuerpo parental murino, de conformidad con un
método informático específico. La solicitud de patente describe, sin
indicación de datos biológicos, proteínas de fusión respectivas de
anticuerpos 14.18 desinmunizados con la IL-2.
De manera general, la presente invención
proporciona una proteína de fusión, que comprende una forma
modificada del anticuerpo m14.18, que es menos inmunogénica en los
seres humanos pero que todavía mantiene la afinidad de enlace del m
14.18 con el GD2 humano.
De una manera más particular, la invención
proporciona una proteína de fusión, que comprende una forma
humanizada del anticuerpo m14.18 (anticuerpo hu14.18) en el que han
sido substituidos varios aminoácidos específicos del ratón, en una
o en varias regiones marco, por diversos aminoácidos con objeto de
reducir su inmunogenicidad en los seres humanos. La invención
proporciona fusiones del anticuerpo hu14.18 con una o más mitades no
inmunoglobulina, preferentemente con la IL-2 para
reforzar los efectos de la terapia inmune dirigida.
En un aspecto, la presente invención proporciona
una región variable de anticuerpo, que incluye la secuencia de
aminoácidos indicada en la SEQ ID NO: 1, que define una región
variable de la cadena ligera de inmunoglobulina (región V_{L}).
En otro aspecto, la invención se refiere a una región variable de
anticuerpo, que incluye la secuencia de aminoácidos indicada en la
SEQ ID NO: 2, que define una región variable de la cadena pesada de
inmunoglobulina (región V_{H}). En una realización, la invención
proporciona una región variable de anticuerpo, en la que la
secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 está enlazada con la
secuencia de aminoácidos indicada en la SEQ ID NO: 2. Las
secuencias de aminoácidos pueden estar enlazadas, tal como por medio
de un enlace de disulfuro o por medio de un enlace peptídico.
En otro aspecto, la invención se refiere a una
región variable de anticuerpo, se que enlaza de manera específica
con el GD2 y que incluye, al menos, los aminoácidos
1-23 de la SEQ ID NO: 1, los aminoácidos
1-25 de la SEQ ID NO: 2, o los aminoácidos
67-98 de la SEQ ID NO: 2. Estas secuencias definen
regiones marco en las regiones variables de inmunoglobulina del
anticuerpo hu14.18. Las regiones marco están descritas con mayor
detalle más
adelante.
adelante.
Un aspecto de la invención se refiere a un
método para dirigir una célula con GD2 en su superficie e incluye
la administración a un paciente de una región variable de anticuerpo
de la presente invención. En una realización, la célula diana es
una célula tumoral. Otros aspectos de la invención incluyen un ácido
nucleico, que codifica la región variable del anticuerpo o una
célula, que incluye este ácido nucleico, que puede ser administrado
a un paciente o bien que puede ser utilizado para una producción de
proteínas in vitro.
De la misma manera, la invención proporciona un
polipéptido, que incluye una región variable de anticuerpo de la
invención y una porción Fc, que comprende, al menos, un dominio CH2,
ácidos nucleicos, que codifican al polipéptido, células, que
incluyen los ácidos nucleicos, y métodos para dirigir una célula con
GD2 en su superficie por medio de la administración a un paciente
del polipéptido, del ácido nucleico o de la célula. En algunas
realizaciones de la invención, la porción Fc se deriva de la
IgG1.
La región variable del anticuerpo está enlazada,
con o sin una porción Fc interviniente, con una mitad no
inmunoglobulina. De manera específica, la mitad no inmunoglobulina
es una citocina.
Debe entenderse que las características de las
diversas realizaciones aquí descritas no son mutuamente excluyentes
y que pueden existir en diversas combinaciones y permutaciones.
\vskip1.000000\baselineskip
La figura 1A muestra la secuencia de
aminoácidos de una región variable de cadena ligera de
inmunoglobulina, de conformidad con la invención.
La figura 1B muestra la secuencia de
aminoácidos de una región variable de cadena pesada de
inmunoglobulina, de conformidad con la invención.
Las figuras 2A-D muestran la
secuencia de nucleótidos de un vector de expresión, que incluye los
constructos de ácido nucleico, que codifican una proteína de fusión
de una cadena ligera de inmunoglobulina y de una cadena pesada de
inmunoglobulina-IL-2, de conformidad
con la invención.
La figura 3A muestra la secuencia de
aminoácidos de una cadena ligera de inmunoglobulina, de conformidad
con la invención.
La figura 3B muestra la secuencia de
aminoácidos de una cadena pesada de inmunoglobulina, de conformidad
con la invención.
\vskip1.000000\baselineskip
La presente invención proporciona una proteína
de fusión, que comprende una forma modificada del anticuerpo
m14.18, que es menos inmunogénica en seres humanos, pero que todavía
es capaz de enlazarse de forma específica con el GD2 humano. La
inmunogenicidad reducida es proporcionada por uno o varias
secuencias alteradas de aminoácidos en los dominios variables de la
inmunoglobulina. El anticuerpo es adecuado para llevar a cabo el
tratamiento de tumores positivos al GD2, de manera particular
cuando esté fusionado con una citocina o con otro inmuno-
modulador.
modulador.
Se entenderá que los términos "anticuerpo"
e "inmunoglobulina", tal como son usados aquí, quieren indicar
(i) un anticuerpo intacto (por ejemplo, un anticuerpo monoclonal o
un anticuerpo policlonal), (ii) porciones de los mismos que se
enlazan con el antígeno, con inclusión, por ejemplo, de un fragmento
Fab, un fragmento Fab', un fragmento (Fab')_{2}, de un fragmento
Fv, de un locus de enlace del anticuerpo monocatenario, de un sFv,
(iii) anticuerpos biespecíficos y porciones de enlace los antígenos
de los mismos, y (iv) anticuerpos multiespecíficos y porciones de
enlace de los antígenos de los mismos.
Se entenderá que los términos "se enlaza de
manera específica", "enlaza de forma específica" y "de
enlace específico", tal como se utilizan aquí, quieren indicar
que el anticuerpo tiene una afinidad de enlace para un antígeno
particular de, al menos, aproximadamente 10^{6} M^{-1}, de una
manera preferente de, al menos, aproximadamente 10^{7} M^{-1},
de una manera más preferente de, al menos, aproximadamente 10^{8}
M^{-1} y, en el caso más preferente, de, al menos,
aproximadamente 10^{10} M^{-1}.
Se entenderá que los términos "regiones
marco" y "FRs", tal como son usados aquí, quieren indicar
las regiones de una región variable de inmunoglobulina adyacente a
las Regiones que Determinan la Complementaridad
(Complementatity-Determining Regions CDRs). Las
CDRs son las porciones de una región variable de inmunoglobulina,
que interactúa fundamentalmente con un antígeno. Tal como se
muestra en la figura 1, ambas regiones V_{H} y V_{L} contienen
cuatro FRs y están localizadas dentro de las porciones recuadradas
de las secuencias de aminoáci-
dos.
dos.
De forma particular, con referencia a la
secuencia de aminoácidos, que está mostrada en la figura 1A (SEQ ID
NO: 1), las FRs de cadena ligera están definidas por las secuencias
de aminoácidos desde Asp1 hasta Cys23 (huV_{L}FR1), desde His39
hasta His54 (huV_{L}FR2), desde Gly62 hasta Cys93 (huV_{L}FR3),
y desde Phe104 hasta Lys113 (huV_{L}FR4). Con referencia a la
secuencia de aminoácidos, que está mostrada en la figura 1B (SEQ ID
NO: 2), las FRs de cadena pesada están definidas por las secuencias
de aminoácidos desde Glu1 hasta Ser25 (huV_{H}FR1), desde Trp36
hasta Gly49 (huV_{H}FR2), desde Arg67 hasta Ser98 (huV_{H}FR3),
y desde Trp103 hasta Ser113 (huV_{H}
FR4).
FR4).
\vskip1.000000\baselineskip
La presente invención caracteriza anticuerpos
que se enlazan, preferentemente de forma específica, con el
glicoesfingolípido GD2 de la superficie de las células humanas y que
tienen regiones modificadas, que se derivan del anticuerpo m14.18.
Las secuencias de aminoácidos V_{H} o V_{L} (o ambas) están
modificadas o humanizadas con objeto de reducir su inmunogenicidad
cuando son administradas a un ser humano. De conformidad con la
invención, el anticuerpo m14.18 puede ser humanizado, por ejemplo,
por medio de la utilización de métodos de desinmunización en los
que son eliminados los epitopos potenciales de las células T o son
debilitados por medio de la introducción de mutaciones, que
reduzcan el enlace de un epitopo peptídico con una molécula MHC
clase II (véanse, por ejemplo, las publicaciones WO98/52976 y
WO00/34317). De manera alternativa, los epitopos no humanos de las
células T son mutados de manera que correspondan a los epitopos
propios humanos, que están presentes en los anticuerpos humanos
(véase, por ejemplo, la patente norteamericana U.S. No. 5,712,120).
La presente invención proporciona anticuerpos del GD2 que tienen
regiones V_{L} y V_{H}, que incluyen, al menos, una secuencia FR
humanizada, con lo que se reduce la inmunogenicidad cuando son
administrados a un ser humano.
\vskip1.000000\baselineskip
Tal como se ha mencionado precedentemente, el
hu14.18 incluye regiones variables humanizadas, que se derivan del
anticuerpo m14.18, que mantiene el enlace específico con el antígeno
GD2 humano. En algunas realizaciones de la invención, la región
V_{L} del anticuerpo hu14.18 incluye el siguiente polipéptido:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
En realizaciones particulares, el anticuerpo
hu14.18 incluye una FR1 de cadena ligera, que está definida por los
residuos 1 hasta 23 de la SEQ ID NO: 1, concretamente definida por
D-V-V-M-T-Q-T-P-L-S-L-P-V-T-P-G-E-P-A-S-I-S-C(huV_{L}FR1).
\newpage
En otras realizaciones de la invención, la
región V_{H} del anticuerpo hu14.18 incluye el siguiente
polipéptido:
En realizaciones particulares, el anticuerpo
hu14.18 incluye una FR1 de cadena pesada, que está definida por los
residuos 1 hasta 25 de la SEQ ID NO: 2, concretamente definida por
E-V-Q-L-V-Q-S-G-A-E-V-E-K-P-G-A-S-V-K-I-S-C-K-A-S
(huV_{H}FR1).
En otras realizaciones de la invención, el
anticuerpo hu14.18 incluye una FR3 de cadena pesada, que está
representada por los residuos 67 hasta 98 de la SEQ ID NO: 2,
concretamente definida por
R-A-T-L-T-V-D-K-S-T-S-T-A-Y-M-H-L-K-S-L-R-S-E-D-T-A-V-Y-Y-C-V-S
(huV_{H}FR3).
De igual modo, quedan abarcadas en el ámbito de
la presente invención diversas combinaciones de las realizaciones
precedentes. Por ejemplo, el anticuerpo hu14.18 puede incluir la
secuencia V_{L} indicada en la SEQ ID NO: 1 y la secuencia
V_{H} indicada en la SEQ ID NO: 2. Las regiones V_{L} y V_{H}
pueden estar enlazadas por medio de un enlace de disulfuro o por
medio de un enlace peptídico, en función del modo en que estén
construidas sus secuencias de ácidos nucleicos. En general, las
regiones V están enlazadas por medio de un enlace de disulfuro
cuando sus secuencias sean codificadas en constructos de ADN
independientes. Por el contrario, las regiones V están enlazadas de
forma típica por medio de un enlace peptídico cuando sus secuencias
sean codificadas en un constructo de ADN monocatenario.
De la misma manera, la presente invención
propone un anticuerpo, que se enlaza de forma específica con el GD2
y que incluye, al menos, una porción de las regiones V humanizadas.
Por ejemplo, el anticuerpo hu14.18 puede incluir una región
V_{L}, tal como se ha definido por medio de la SEQ ID NO:1 y una
región V_{H}, que tenga, al menos, una FR humanizada, tal como la
huV_{H}FR o la huV_{H}FR2. De manera alternativa, el anticuerpo
de la presente invención puede incluir una región V_{H}, tal como
se ha definido por medio de la SEQ ID NO: 2 y una región V_{L},
que tenga, al menos, una FR humanizada, tal como la huV_{L}FR1.
De la misma manera, el anticuerpo hu14.18 puede incluir una región
V_{H}, que tenga, al menos, una FR humanizada y/o una región
V_{L}, que tenga, al menos, una FR humanizada.
En ciertas realizaciones de la invención, la
región variable de cadena ligera y la región variable de cadena
pesada pueden estar acopladas, respectivamente, con una región
constante de cadena ligera y con una región constante de cadena
pesada de una inmunoglobulina. Las cadenas ligeras de
inmunoglobulina tienen regiones constantes, que se denominan
cadenas kappa o cadenas lambda. En una realización particular de la
invención, la región constante de cadena ligera es una cadena
kappa. Las regiones constantes de cadena pesada, y diversas
modificaciones y combinaciones de las mismas están tratadas en
detalle a continuación
\vskip1.000000\baselineskip
Los dominios variables del anticuerpo de la
presente invención están fusionados, de manera opcional, con una
porción Fc. Tal como se utiliza aquí, la porción Fc comprende
dominios, que se derivan de la región constante de cadena pesada de
una inmunoglobulina, de manera preferente de una inmunoglobulina
humana, que incluye un fragmento, análogo, variante, mutante o
derivado de la región constante. La región constante de una cadena
pesada de inmunoglobulina está definida como un polipéptido, que se
produce de forma natural o que se produce por vía sintética,
homólogo con, al menos, una porción de una región
C-terminal de la cadena pesada, que incluye los
dominios CH1, bisagra, CH2, CH3, y, para algunas clases de cadena
pesada, los dominios CH4. La región "bisagra" une al dominio
CH1 con la región CH2-CH3 de una porción Fc. La
región constante de las cadenas pesadas de todas las
inmunoglobulinas de mamíferos presenta una gran similitud en la
secuencia de aminoácidos. Las secuencias de ADN para estas regiones
de inmunoglobulina son perfectamente conocidas en el estado de la
técnica. (Véase, por ejemplo, la publicación de los autores Gillies
et al. (1989) J. Immunol. Meth. 125:191).
En la presente invención, la porción Fc incluye,
de forma típica, al menos un dominio CH2. Por ejemplo, la porción
Fc puede incluir toda la región constante de cadena pesada de
inmunoglobulina
(CH1-bisagra-CH2-CH3).
De manera alternativa, la porción Fc puede incluir la totalidad o
una porción de la región bisagra, el dominio CH2 y el dominio
CH3.
La región constante de una inmunoglobulina es
responsable de un gran número de importantes funciones efectoras de
anticuerpos, con inclusión del enlace del receptor Fc (FcR) y la
fijación del complemento. Existen cinco clases principales de
regiones constantes de cadena pesada, clasificadas como IgA, IgG,
IgD, IgE, y IgM, cada una de las cuales con funciones efectoras
características designadas por isotipo.
Así por ejemplo, la IgG se subdivide en cuatro
isotipos \gamma: \gamma1, \gamma2, \gamma3 y \gamma4, que
se conocen también como IgGI, IgG2, IgG3, y IgG4, respectivamente.
Las moléculas IgG pueden interactuar con un gran número de clases
de receptores celulares con inclusión de tres clases de receptores
Fc\gamma (Fc\gammaR) específicos de la clase IgG del
anticuerpo, concretamente Fc\gammaRI, Fc\gammaRII, y
Fc\gammaRIII. Se ha descrito que las secuencias importantes para
el enlace de IgG con los receptores Fc\gammaR se encuentran en
los dominios CH2 y CH3.
La semivida en suero de un anticuerpo está
influenciada por la capacidad que tiene de dicho anticuerpo para
enlazarse con un receptor Fc (FcR). De manera similar, la semivida
en suero de las proteínas de fusión de inmunoglobulina está
igualmente influenciada por la capacidad que tienen para enlazarse
con dichos receptores (Gillies et al., Cáncer Research
(1999) 59:2159-66). Los dominios CH2 y CH3 de la
IgG2 y de la IgG4 tienen una afinidad de enlace indetectable o
disminuida con los receptores Fc, en comparación con la afinidad de
enlace de la IgG1. Por lo tanto, la semivida en suero del anticuerpo
considerado puede ser aumentada por medio del uso del dominio CH2
y/o CH3 procedente de los isotipos IgG2 o IgG4. De manera
alternativa, el anticuerpo puede incluir un dominio CH2 y/o CH3
procedente de la IgG1 o de la IgG3 con modificación en uno o varios
aminoácidos en estos dominios, con objeto de reducir la afinidad de
enlace con los receptores Fc (véase, por ejemplo, la solicitud de
patente norteamericana U.S. 09/256,156, publicada como publicación
de solicitud de patente U.S.
2003-0105294-A1).
Normalmente, la región bisagra de la porción Fc
es adyacente al extremo C del dominio CH1 de la región constante de
cadena pesada. Cuando se encuentra incluida en las proteínas de la
presente invención, la bisagra es homóloga de una región de
inmunoglobulina de origen natural y, de forma típica, incluye
residuos de cisteína, que enlazan dos cadenas pesadas por medio de
enlaces de disulfuro, como ocurre en las inmunoglobulinas naturales.
Secuencias representativas de regiones bisagra para inmunoglobulina
humana y de ratón, pueden encontrarse en la publicación INGENIERÍA
DE ANTICUERPOS una GUÍA PRÁCTICA -ANTIBODY ENGINEERING, a PRACTICAL
GUIDE-,
(Borrebaeck, ed., W. H. Freeman and Co., 1992).
(Borrebaeck, ed., W. H. Freeman and Co., 1992).
Las regiones bisagra adecuadas para la presente
invención pueden derivarse de las IgGI, IgG2, IgG3, IgG4, y de
otros isotipos de inmunoglobulina. El isotipo IgG1 tiene dos enlaces
de disulfuro en la región bisagra, que permiten la formación
eficiente y consistente del enlace de disulfuro. Por lo tanto, una
región bisagra preferente de la presente invención se deriva de la
IgG1. De manera opcional, la primera cisteína, en la mayoría de los
casos N-terminal, de una bisagra IgG1 está mutada
con objeto de reforzar la expresión y el ensamblaje de anticuerpos
o de proteínas de fusión de anticuerpos de la invención (véase, por
ejemplo, la solicitud de patente norteamericana U.S. 10/093,958,
publicada como publicación de solicitud de patente U.S.
2003-0044423-A1).
En contra de lo que ocurre en el caso de la
IgG1, se sabe que la región bisagra de la IgG4 forma de manera
ineficiente enlaces de disulfuro intercatenarios (Angal et
al., (1993), Mol. Immunol. 30:105-8). De la
misma manera, la región bisagra de la IgG2 tiene cuatro enlaces de
disulfuro que tienden a favorecer la oligomerización y,
posiblemente, el enlace de disulfuro incorrecto durante la secreción
en sistemas recombinantes. Una región bisagra adecuada para la
presente invención puede derivarse de la región bisagra de la IgG4,
que contiene, de manera preferente, una mutación que refuerza la
formación correcta de los enlaces de disulfuro entre las mitades
derivadas de cadena pesada (Angal et al., (1993), Mol.
Immunol. 30(1):105-8). Otra región bisagra
preferente se deriva de una bisagra de la IgG2, en la que las dos
primeras cisteínas están respectivamente mutadas en otro
aminoácido, tal como, en orden de preferencia general, serina,
alanina, treonina, prolina, ácido glutámico, glutamina, lisina,
histidina, arginina, asparagina, ácido aspártico, glicina,
metionina, valina, isoleucina, leucina, tirosina, fenilalanina,
triptofano o selenocisteína (véase, por ejemplo, la publicación de
la solicitud de patente norteamericana U.S.
2003-0044423-A1).
Una porción Fc fusionada con una región variable
del anticuerpo de la invención puede contener los dominios CH2 y/o
CH3 y una región bisagra, que se derivan de diversos isotipos de
anticuerpos. Por ejemplo, la porción Fc puede contener los dominios
CH2 y/o CH3 de la IgG2 o de la IgG4 y una región bisagra de la IgG1.
El ensamblaje de tales porciones Fc híbridas ha sido descrito en la
publicación de la solicitud de patente norteamericana U.S.
2003-0044423-A1.
Cuando se fusiona con una región variable del
anticuerpo de la invención, la porción Fc contiene, de manera
preferente, una o varias modificaciones de aminoácidos, que
aumentan, por regla general, la semivida en suero de una proteína
de fusión Fc. Tales modificaciones de aminoácidos incluyen
mutaciones que substancialmente disminuyen o eliminan el enlace con
el receptor Fc o la actividad de fijación del complemento. Por
ejemplo, un tipo de dicha mutación elimina el locus de
glicosilación de la porción Fc de una cadena pesada de
inmunoglobulina. En la IgG1, el locus de glicosilación es Asn297
(véase, por ejemplo, la solicitud de patente norteamericana U.S.
10/310,719, publicada como publicación de solicitud de patente
norteamericana U.S.
2003-0166163-A1).
\vskip1.000000\baselineskip
Las regiones variables del anticuerpo de la
presente invención pueden ser opcionalmente enlazadas o fusionadas
con una mitad no inmunoglobulina de forma directa o indirecta, tal
como a través de un péptido enlazante (por ejemplo
(Gly_{4}-Ser)_{3} (SEQ ID NO: 3)). La
inmunogenicidad de las proteínas de fusión descritas puede ser
reducida si se menoscaba la capacidad del acoplamiento por fusión o
del epitopo de acoplamiento para interactuar con el receptor de las
células T, tal como se ha descrito en la publicación de solicitud de
patente norteamericana U.S.
2003-0166877-A1. Precisamente en una
fusión entre dos proteínas humanas, por ejemplo la Fc humana y la
IL-2 humana, la región que rodea al acoplamiento por
fusión o al epitopo de acoplamiento incluye una secuencia peptídica
que normalmente no está presente en el cuerpo humano y que, por
consiguiente, puede ser inmunogénica. La inmunogenicidad del
epitopo de acoplamiento puede se reducida, por ejemplo, por medio de
la introducción de uno o varios locus de glicosilación cerca del
acoplamiento por fusión, o por medio de la identificación de un
epitopo candidato de las células T que puentee al acoplamiento tal
como se ha descrito en la publicación de la solicitud de patente
norteamericana U.S. 2003-0166877-A1
y que cambie un aminoácido cerca del acoplamiento con objeto de
reducir la capacidad que tiene el epitopo candidato de las células T
para interactuar con un receptor de las células T.
Por lo tanto, la semivida en suero de la
proteína puede ser acrecentada por medio de la introducción de
mutaciones en la región de acoplamiento por fusión. Por ejemplo, en
una proteína que incluya un dominio CH3 fusionado con una mitad no
inmunoglobulina, la lisina C-terminal del dominio
CH3 puede ser cambiada por otro aminoácido, tal como por alanina,
que puede proporcionar un aumento substancial de la semivida en
suero de la proteína de fusión resultante.
En ciertas realizaciones, es deseable una
escisión proteolítica del acoplamiento por fusión. Por lo tanto, la
región intergénica puede incluir una secuencia de nucleótido que
codifique un locus de escisión proteolítica. Este locus, que está
interpuesto entre la inmunoglobulina y la citocina, puede estar
diseñado para que proporcione el desprendimiento proteolítico de la
citocina en el locus diana. Por ejemplo, se sabe perfectamente que
la plasmina y la tripsina se escinden después de los residuos de
lisina y de arginina en los loci que son accesibles a las
proteasas. Se conocen perfectamente otras endoproteasas específicas
del locus y las secuencias de aminoácidos que son reconocidas por
las mismas.
\vskip1.000000\baselineskip
Las regiones variables del anticuerpo de la
invención están enlazadas con una citocina. De manera preferente,
la proteína de fusión de anticuerpo y de citocina o el
inmunoconjugado presenta actividad biológica de citocina. En la
realización preferente, el dominio variable del anticuerpo está
fusionado con la IL-2. De manera preferente, varios
aminoácidos están mutados dentro de la mitad IL-2
con objeto de reducir la toxicidad, como se ha descrito en la
publicación de la solicitud de patente norteamericana U.S.
2003-0166163-A1.
Por ejemplo, las figuras 3A y 3B muestran las
secuencias de aminoácidos de una realización particular de una
proteína de fusión del anticuerpo de conformidad con la invención.
De manera específica, la figura 3A muestra la secuencia peptídica
de una cadena ligera de inmunoglobulina humanizada, que incluye una
región variable y una región constante. La figura 3B muestra la
secuencia peptídica de una cadena pesada de inmunoglobulina
humanizada enlazada con la IL-2. Los polipéptidos
proporcionan una proteína de fusión de anticuerpo humanizado, capaz
de enlazarse de manera específica con el GD2 y de estimular al
sistema inmune.
De manera opcional, los complejos proteicos
pueden incluir, así mismo, un segundo agente, tal como una segunda
citocina. En una realización, una proteína de fusión de anticuerpo
hu14.18 incluye la IL-12 y la IL-2.
La construcción de los complejos proteicos, que contienen un
dominio de inmunoglobulina y dos citocinas diferentes, está
descrita en detalle en la patente norteamericana U.S. No.
6,617,135.
Las proteínas de fusión de la presente invención
son adecuadas para el tratamiento de enfermedades en los seres
humanos, tal como el cáncer. Cuando se tratan tumores humanos, es
particularmente adecuado administrar una proteína de fusión de
anticuerpo y de IL-2, que comprenda las regiones V
de la invención, por medio de una infusión o por medio de una
inyección subcutánea, empleándose dosis comprendidas entre 0,1 y 100
miligramos/metro^{2}/paciente. En una realización preferente, es
particularmente adecuado administrar una proteína de fusión de
anticuerpo y de IL-2, que comprenda las regiones V
de la invención, por medio de infusión o de inyección subcutánea,
empleándose dosis comprendidas entre 1 y 10
miligramos/metro^{2}/paciente y, de una manera más preferente,
comprendida entre aproximadamente 3 y 6
miligramos/metro^{2}/paciente.
Se ha puesto de manifiesto por medio de estudios
clínicos que, después de la administración de la
hu14.18-IL-2, la proteína de fusión
conserva su capacidad para llevar a cabo la activación de las
células sensibles a la IL-2 por medio del receptor
de la IL-2 y que conserva su capacidad para
enlazarse con las células tumorales positivas al GD2 y para
suministrar la IL-2 en su superficie. Por otra
parte, la administración de la proteína de fusión
hu14.18-IL-2 a un paciente canceroso
da como resultado la estabilización de la progresión de la
enfermedad en un número sorprendentemente amplio de pacientes (véase
el ejemplo 1).
Las composiciones farmacéuticas de la invención
pueden ser empleadas en formas de dosificación sólidas, semisólidas
o líquidas, tales como, por ejemplo, píldoras, cápsulas, polvos,
líquidos, suspensiones o similares, de manera preferente en formas
de dosificación unitaria, adecuadas para llevar a cabo la
administración de dosis precisas. Las composiciones incluyen un
vehículo o excipiente farmacéuticamente convencional, de manera
adicional pueden incluir otros agentes medicinales, agentes
farmacéuticos, soportes, adyuvantes, etc. Tales excipientes pueden
incluir otras proteínas, tales como, por ejemplo, albúmina de suero
humano o proteínas de plasma. Los métodos actuales para llevar a
cabo la preparación de tales formas de dosificación son conocidos o
son aparentes para los técnicos en la materia. La composición o la
formulación, que debe ser administrada, deberán contener, en
cualquier caso, una cantidad de uno o de varios componentes activos
en una cantidad efectiva con objeto de conseguir el efecto deseado
en el sujeto sometido al tratamiento.
La administración de las composiciones
correspondientes puede efectuarse por vía de cualquier modo aceptado
para llevar a cabo la administración de agentes que muestren dicha
actividad. Estos métodos incluyen la administración oral,
parenteral o tópica y formas sistémicas de otro tipo. La inyección
intravenosa en un vehículo farmacéuticamente aceptable es un método
preferido para llevar a cabo la administración (véase el ejemplo
1).
La cantidad del compuesto activo administrada
dependerá, naturalmente, del sujeto que sometido al tratamiento, de
la gravedad de la aflicción, de la forma de administración, y de la
opinión del médico que lleva a cabo la prescripción.
\vskip1.000000\baselineskip
La invención se refiere, así mismo, a ácidos
nucleicos capaces de expresar cada uno de los tipos de proteínas
precedentes. Estos incluyen, por ejemplo, ácidos nucleicos que
codifican la secuencia de aminoácidos indicada en la SEQ ID NO: 1;
la secuencia de aminoácidos indicada en la SEQ ID NO: 2; una región
V_{L} de anticuerpo hu14.18, que incluye la secuencia de
aminoácidos huV_{L}FR1; una región V_{H} de anticuerpo hu14.18,
que incluye la secuencia de aminoácidos huV_{H}FR1; una región
V_{H} de anticuerpo hu14.18, que incluye la secuencia de
aminoácidos huV_{H}FR3; y proteínas de fusión, que comprenden un
anticuerpo hu14.18, que incluye, al menos, una de las secuencias FR
humanizadas precedentes y uno o varios agentes terapéuticos.
Los anticuerpos hu14.18 de esta invención pueden
ser producidos por medio de técnicas de ingeniería genética; por
ejemplo por medio de la formación de un constructo de ácido
nucleico, que codifique un anticuerpo específico del GD2, que
contenga las FRs deseadas de la presente invención. En una
realización, el constructo génico, que codifica el anticuerpo
considerado, incluye un segmento de ADN, en el sentido 5' hacia 3',
que codifica una región variable de cadena pesada, que incluye en
la misma, al menos, una FR humanizada y un segmento de ADN, que
codifica una región constante de cadena pesada. En otra realización,
otro segmento de ADN, que codifica una citosina, está fusionado con
el extremo 3' del segmento de ADN, que codifica la región constante
de cadena pesada. En una realización diferente, el constructo
génico incluye, en el sentido 5' hacia 3', un segmento de ADN, que
codifica una región variable de cadena pesada, que incluye, al
menos, una FR humanizada y un segmento de ADN, que codifica una
citocina. De manera alternativa, un ácido nucleico de la invención
puede incluir, en el sentido 5' hacia 3', un segmento de ADN, que
codifica una región variable de cadena ligera, que incluye en la
misma, al menos, una FR humanizada y un segmento de ADN, que
codifica una citocina. En algunas realizaciones, un ácido nucleico,
que codifica una citosina, está ensamblado en el marco del extremo
3'de un gen, que codifica una región constante (por ejemplo, exon
CH3), bien directamente o bien a través de una región intergénica
(por ejemplo por medio de segmentos enlazadores apropiados, tales
como por ejemplo el ADN, que codifica (Gly_{4} -Ser)_{3}
(SEQ ID NO: 3)).
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El ácido nucleico, que codifica las proteínas de
la presente invención, puede ser ensamblado con, o puede ser
insertado en, uno o en varios vectores de expresión para llevar a
cabo la introducción en una célula receptora adecuada, en la que es
expresado. La introducción de ácidos nucleicos en vectores de
expresión puede ser llevada a cabo según técnicas estándar de la
biología molecular. Los vectores de expresión preferidos incluyen
aquellos, a partir de los cuales, puede ser expresada la proteína
codificada bien en bacterias o bien en células de mamíferos.
De conformidad con la invención, una cadena
pesada de una región variable de anticuerpo es preferentemente
coexpresada en la misma célula con una cadena ligera
correspondiente. Para las proteínas de fusión, que comprendan
múltiples cadenas polipeptídicas, puede ser empleado más de un
vector de expresión. Los métodos de cotransfección que utilizan,
por ejemplo, dos vectores de expresión, frecuentemente dan como
resultado el que ambos vectores sean suministrados a una célula
diana. De manera alternativa, a veces es conveniente emplear un
vector único, que codifique una pluralidad de polipéptidos para la
coexpresión en la misma célula.
De forma ejemplificativa, las figuras
2A-D muestran la secuencia de ácidos nucleicos de un
vector único, que codifica tanto la cadena pesada así como la
cadenas ligera de una inmunoglobulina de conformidad con la
invención. Por lo tanto, el vector incluye un ácido nucleico, que
codifica la IL-2 fusionada con el extremo 3' de la
cadena pesada de inmunoglobulina. De este modo, cuando se introduce
en una célula, este vector puede proporcionar, por si solo, una
proteína de fusión de anticuerpo humanizado y de
IL-2, que se enlaza de manera específica con el GD2
y que estimula la inmunofunción.
Por otra parte, puede ser conveniente llevar a
cabo la expresión de las proteínas de la presente invención en
forma de moléculas monocatenarias. De manera ejemplificativa, una
región variable de anticuerpo puede ser expresada como un
anticuerpo monocatenario o sFv opcionalmente fusionado con una
proteína no inmunoglobulina. En otra realización, una cadena pesada
(con o sin una citocina fusionada) está combinada con un complemento
de cadena ligera (o pesada) (con o sin citocina fusionada) para
formar inmunoconjugados monovalentes y divalentes.
Las líneas de células receptores son, de manera
preferente, células linfoides, tales como un mieloma (o hibridoma).
Los mielomas pueden sintetizar, ensamblar y secretar
inmunoglobulinas codificadas por genes transfectados y pueden
llevar a cabo la glicosilación de proteínas. Una célula receptora
particularmente preferente es el mieloma Sp2/0, que normalmente no
produce inmunoglobulina endógena. Cuando es transfectada, la célula
produce únicamente inmunoglobulinas codificadas por los constructos
génicos transfectados. Los mielomas transfectados pueden hacerse
crecer en cultivos o en el peritoneo de ratones, del que pueden ser
recuperados los inmunoconjugados secretados a partir del fluido
ascítico. De la misma manera, pueden ser empleadas como células
receptoras otras células linfoides tales como los linfocitos B.
Existen diversos métodos para llevar a cabo la
transfección de las células linfoides con vectores, que contengan
constructos de ácido nucleico, que codifiquen la cadena Ig
quimérica. Una vía preferente para llevar a cabo la introducción de
un vector en las células linfoides consiste en la fusión de
esferoblastos (véase por ejemplo la publicación de los autores
Gillies et al. (1989) Biotechnol. 7:798-804).
Métodos alternativos incluyen la electroporación o la precipitación
con fosfato de calcio. Otros métodos adecuados para llevar a cabo la
producción de los inmunoconjugados incluyen la preparación de una
secuencia de ARN, que codifique el constructo y su traducción en un
sistema apropiado in vivo o in vitro. Una vez
expresadas, las proteínas de la invención pueden ser recogidas por
medio de procedimientos estándar para la purificación de proteínas
(véase, por ejemplo, la patente norteamericana U.S. No.
5,650,150).
\vskip1.000000\baselineskip
Los ácidos nucleicos de la invención pueden ser
empleados como agentes de terapia génica para llevar a cabo el
tratamiento de cáncer o de otras enfermedades en las que sea
deseable dirigir al sistema inmune hacia un tipo celular
específico. Por ejemplo, pueden ser eliminadas células a partir de
un ser humano o de un animal, y pueden ser transfectados en las
células uno o varios ácidos nucleicos, que codifican un anticuerpo
de la presente invención. Las células son reintroducidas a
continuación en el ser humano o en el animal. Las células
transfectadas pueden ser células normales o células cancerosas. De
manera alternativa, puede ser introducido in situ un ácido
nucleico en células. Entonces el ser humano o el animal produce una
respuesta inmune a las células cancerosas, que puede curar o
reducir la gravedad del cáncer. Una región variable del anticuerpo
de la invención, acoplada con elementos reguladores apropiados para
fomentar la expresión en células de mamíferos, puede ser
transfectada en las células por cualquiera de las diversas técnicas,
que incluyen la vía del fosfato de calcio, un cañón génico "gene
gun", vectores de adenovirus, liposomas catiónicos, vectores
retrovirales, o cualquier otro método de transfección
eficiente.
eficiente.
En una realización particular de la invención,
un anticuerpo hu 14.18 es empleado para suministrar de forma
selectiva una citocina a una célula diana in vivo de tal
forma que la citocina pueda ejercer un efecto biológico localizado
tal como una respuesta inflamatoria localizada, una estimulación del
crecimiento y de la activación de las células T, o una actividad
ADCC. Una cantidad terapéuticamente efectiva del anticuerpo es
administrada en el sistema circulatorio de un sujeto que alberga la
célula diana.
La invención está ilustrada con mayor detalle
por medio de los ejemplos no limitativos.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
1
Se llevó a cabo, en un estudio, la expresión de
la hu14.18-IL2 a partir de células NS/0, se recogió
el sobrenadante de cultivo tisular, y la proteína hul
4.18-IL2 se purificó por medio del empleo, en el
orden indicado, de cromatografía en columna con resina Abx Mixed,
cromatografía con proteína A recombinante, y cromatografía en
columna de Q Sepharose, seguido por una diafiltración con flujo
tangencial Pellicon 2 para cambiar el tampón por el tampón de la
formulación. Los detalles de estas etapas de esta purificación están
descritos más adelante. La inactivación de los virus y las etapas
de eliminación fueron interdigitalizadas en estas etapas como se ha
descrito más adelante. La inactivación de los virus y las etapas de
eliminación no eran necesarias para llevar a cabo la purificación
per se, pero se utilizaron para satisfacer consideraciones
reglamentarias.
Se ajustó a 5,9 el pH de dos litros de
sobrenadante de cultivo tisular NS/0, en los que estaba contenida la
hu14.18-IL2, con ácido acético 1M y se cargaron en
una columna Abx (J. T. Baker); se lavaron con MES 10 mM, acetato de
sodio 100 mM a pH 6,2; y se eluyeron con acetato de sodio 500 mM a
pH 7. Este material se cargó en una columna de proteína A
recombinante (Pharmacia); se lavó con fosfato de sodio 100 mM, NaCl
150 mM a pH 7; se lavó con fosfato de sodio 100 mM, NaCl 150 mM a
pH 6; se lavó con fosfato de sodio 10 mM a pH 7; y se eluyó con
fosfato de sodio 100 mM, NaCl 150 mM a pH 3,5. El pH del material
eluido era de 4,2. Para fomentar la inactivación de los virus, este
pH se redujo a 3,8 y la preparación se incubó durante 30 minutos,
después de lo cual se neutralizó el pH a 7 con NaOH 1M. Para
retirar el ácido nucleico, este material se cargó en una columna de
Q sepharose (Pharmacia) y se lavó con fosfato de sodio 100 mM, NaCl
150 mM a pH 7. El ácido nucleico se enlazó con la columna, mientras
que la proteína fue encontrada en la corriente de salida y en los
lavados, que se repitieron hasta que el A280 retornó a la línea de
referencia. Se llevó a cabo una diafiltración Pellicon 2
(Millipore) de conformidad con las instrucciones del fabricante de
tal manera, que el material final, constituido por la
hu14.18-IL2, fue colocado en la siguiente
formulación.
formulación.
El pH del tampón de la formulación se ajustó a 7
con NaOH 1 M.
A modo de etapa final, la preparación fue
filtrada a través de una membrana Viresolve 180 (Millipore), que
tenía un peso molecular redondeado hacia abajo de 180.000 Daltons.
Esto tenía el efecto de "rectificación" del material de tal
manera, que fueron eliminados, como resultado, los dímeros agregados
y los oligómeros de orden superior.
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Ejemplo
2
Para llevar a cabo la evaluación de la seguridad
y de la eficacia del hul4.18-IL-2,
se llevó a cabo un ensayo clínico en fase I. Los pacientes
elegibles tenían melanoma histológicamente confirmado, que estaba
considerado como incurable desde el punto de vista quirúrgico y
médico. Estos pacientes podían tener o bien enfermedades medibles o
evaluables desde el punto de vista metastático o bien podían no
tener evidencia de enfermedad como consecuencia de la resección
quirúrgica bien de metástasis distante o bien de enfermedad
regionalmente recurrente. Los pacientes con recurrencias locales o
regionales múltiples (dos o más) fueron incluidos únicamente si
habían tenido previamente evidencia de implicación de nódulo
linfático y si cada recurrencia estuvo espaciada en el tiempo por,
al menos, 2 meses. Todos los pacientes debían tener una función
adecuada de la médula ósea (definida por el número total en
leucocitos (WBC) > 3.500/ml, o por el total de granulocitos >
2.000/ml, de plaquetas > 100.000/ml, y de hemoglobina > 10,0
g/dl), una función hepática adecuada [definida por una
aspartatoaminotransferasa (AST) < 3 x normal y un total en
bilirrubina < 2,0 mg/dl], y una función renal adecuada (definida
por creatinina en suero < 2,0 mg/dl o un aclaramiento de la
creatinina > 60 ml/minuto). Todos los pacientes tenían un estado
general según la electrocorticografía (ECOG) de 0 o de 1 y tenían
una esperanza de vida 12 semanas como mínimo. Se excluyeron aquellos
pacientes que habían recibido previamente quimioterapia, terapia
por radiación, u otra terapia inmunosupresora dentro de las 4
semanas previas al estudio. Los pacientes podían haber tenido
previamente metástasis en el sistema nervioso central (CNS) si
habían sido tratadas y eran estables durante, al menos, 4 semanas
antes del inicio del estudio. Se obtuvo consentimiento informado de
todos los pacientes.
Este ensayo en fase I se diseñó como un estudio
de ensayo abierto con escalación de la dosis no aleatoria, en el
que grupos de 3 hasta 6 pacientes recibieron la
hu14.18-IL-2 en uno de los niveles
de dosificación siguientes: 0,8, 1,6, 3,2, 4,8, 6,0 o 7,5
mg/m^{2}/día. La hu14.18-IL-2 fue
administrada en una base hospitalaria en forma de una infusión
intravenosa (IV) durante 4 horas (IV), a lo largo de 3 días
consecutivos durante la primera semana de cada sesión. La proteína
de fusión hu14.18-IL-2 fue
administrada a los pacientes en una formulación, que comprendía un
4% de manitol; arginina HCl, 100 mM; citrato, 5 mM; y un 0,01% de
Tween 80, a pH 7. Los pacientes fueron dados de alta del hospital,
si se encontraban estables, aproximadamente 24 horas después de
haberse completado la tercera infusión. Los episodios adversos y las
toxicidades fueron clasificados de conformidad con los criterios de
toxicidad común -NCI Common Toxicity Criteria- (versión 2.0) y de
conformidad con la escala de clasificación de la toxicidad del
centro integral del cáncer de la universidad de Wisconsin
-University of Wisconsin Comprehensive Cáncer Center Toxicity
Grading Scale- para la IL-2 (estado general,
ganancia de peso, y temperatura). La toxicidad limitadora de la
dosis (DLT) se definió como la aparición de toxicidad de grado 3 o
4 distinta de linfopenia, de hiperbilirubinemia, de hipofosfatemia o
de hiperglicemia, de grado 3. La dosis máxima tolerada (MTD) se
definió como el nivel de dosificación con el que dos de seis
pacientes tuvieron DLT durante la primera sesión. Pacientes con
toxicidades relacionadas con el tratamiento de grado 3 fueron
requeridos para recuperar, al menos, el grado 1 antes de que
pudiesen reanudar el tratamiento con una reducción de la dosis del
50% para la segunda sesión. Los pacientes con una progresión de la
enfermedad \geq 25% fueron retirados del estudio. Los pacientes
con enfermedad estable recibieron la administración en la segunda
sesión.
Se evaluaron en los pacientes las propiedades
farmacocinéticas del hu14.18-IL-2.
Cuando los niveles en hu14.18-IL-2
fueron evaluados en series de muestras procedentes del conjunto de
los 33 pacientes inmediatamente después de la primera infusión
durante 4 horas (primer día, primera sesión), se encontró que la
semivida era de 3,7 horas (+/- desviación estándar SD de 0,9 h).
Esta es intermedia entre las semividas de sus 2 componentes
(aproximadamente 45 minutos para la IL-2 y de 3
días para el anticuerpo quimérico m14.18), y es comparable con lo
que se observó con respecto a la semivida de la
m14.18-IL-2 quimérica en ratones.
Como consecuencia del aclaramiento de la
hu14.18-IL-2 a partir del suero de
estos pacientes, no pudieron ser detectados los componentes
correspondientes a la IL-2 ni al anticuerpo
hu14.18. La cresta en suero y el área situada por debajo de la curva
(AUC) durante la primera sesión mostró un aumento
significativamente dependiente de la dosis (p < 0,001).
En este estudio fueron tratados treinta y tres
pacientes en este estudio. La tabla 1 enumera los resultados
clínicos. Únicamente dos pacientes (6%) completaron los 2 primeros
días de los 3 días de la primera sesión. Uno de estos pacientes
(nivel de dosis 3) tenía un grado 3 de hiperbilirubinemia al segundo
día del tratamiento, y el otro paciente (nivel de dosis 6) tenía un
grado 3 de hipoxia y de hipotensión, que requirió tratamiento para
llevar a cabo su contención. Dos de estos pacientes tuvieron
progresión de la enfermedad y no recibieron una segunda sesión de
terapia. Diecinueve pacientes (58%) tenían enfermedad estable
después de la primera sesión de terapia y recibieron una segunda
sesión de terapia. Cinco pacientes (15% de todos los pacientes)
requirieron una reducción de la dosis al 50% para la segunda sesión
como consecuencia de eventos adversos en la primera sesión.
Diecisiete pacientes (52% de todos los pacientes) completaron la
segunda sesión. Un paciente (nivel de dosis 4) declinó recibir la
infusión final durante la segunda sesión y un paciente (nivel de
dosis 6) interrumpió la infusión final durante la segunda sesión
debido a una hipotensión. Ocho pacientes (24% de todos los
pacientes) tenían enfermedad estable después de la segunda sesión de
tratamiento. Los resultados indican que la
hu14.18-IL-2 ha provocado la
estabilización de la progresión de la enfermedad en un número
sorprendentemente elevado de pacientes.
Ocho de los 33 pacientes mantuvieron la
enfermedad estable después de 2 sesiones de terapia, y 4 de estos 8
pacientes siguieron sin tener evidencia de la progresión de la
enfermedad (1 con enfermedad estable y 3 con ausencia de evidencia
de enfermedad) durante 20-52 meses desde que se
completó el protocolo de terapia.
Cinco de los 33 pacientes iniciaron el estudio
con enfermedad no mensurable como consecuencia de una resección
quirúrgica de recurrencias o de metástasis. Dos de estos cinco
pacientes tuvieron progresión de la enfermedad, mientras que los 3
pacientes restantes continuaron sin tener evidencia de la enfermedad
(20-52 meses). Estos hallazgos son consistentes con
la hipótesis de que el beneficio clínico procedente de una
intervención inmunoterapéutica es más probable en un paciente con
una baja carga tumoral. Un paciente adicional tuvo un descenso
objetivo en un nódulo pulmonar después de dos sesiones de terapia,
pero la respuesta global de la enfermedad fue puntuada como
progresión de la enfermedad debido al crecimiento en un nódulo
distante. El nódulo fue extirpado después de la terapia con la
hu14.18-IL-2 y el paciente
permaneció libre de progresión de la enfermedad durante más de 3
años.
\vskip1.000000\baselineskip
Inmunoestimulación in vivo por medio de
la hu14.18-IL-2 en un ensayo clínico
en fase I.
De la misma manera, los pacientes tratados con
la hu14.18-IL-2 fueron examinados
con respecto a las indicaciones de inmunoestimulación. A los
2-4 días se produjo una linfopenia de sangre
periférica, y esto fue seguido por un rebrote de linfocitosis los
días 5-22. Estos dos cambios eran dependientes de la
dosis (p < 0,01 y p < 0,05, respectivamente). Los recuentos
de linfocitos en los días 5, 8, 15 y 22 fueron significativamente
mayores que la línea de referencia de la primera sesión. El recuento
de linfocitos de la línea de referencia para la segunda sesión (día
29 de la primera sesión) creció por encima del recuento de
linfocitos de la línea de referencia para la primera sesión, lo que
indica que efectos de la primera sesión de tratamiento están
presentes todavía en el día 29. De manera adicional, los recuentos
de linfocitos durante la segunda sesión en los días 5, 8 y 15 son
mayores que los valores correspondientes para los días 5, 8 y 15
durante la primera sesión para estos 12 pacientes.
El fenotipo de la superficie celular de los
linfocitos mostró una expansión de CD16+ y de linfocitos CD56+
(marcadores de células asesinas naturales (NK)) después de la
primera semana de terapia con la
hu14.18-IL-2. Este efecto estaba
presente todavía el día 29 de la primera sesión (día 1, segunda
sesión). Se determinó en los días 15 y 22 el fenotipo de la
superficie celular de los linfocitos para los pacientes
19-33 (que recibieron 4,8-7,5
mg/m^{2}/día), además de hacerse en los días 1 y 8. Este análisis
demostró que el aumento de CD56 y de las células de coexpresión
CD56/CD16 permaneció significativamente elevado (p < 0,01) los
días 8, 15 y 22.
A título de una medida de la inmunoactivación,
se obtuvieron niveles de la proteína C-reactiva
(CRP) para los pacientes 13-33 y niveles del
receptor de la IL-2 soluble (sIL-2R)
para los 31 pacientes que completaron la primera sesión. Tanto en
la primera sesión así como en la segunda sesión estaba presente un
aumento significativo en promedio de la CRP en el tratamiento los
días 3-5 en comparación con la línea de referencia
para cada sesión. Este aumento de la CRP retornó a los niveles de
la línea de referencia al 8º día de cada sesión de tratamiento. El
nivel del sIL-2R se encontraba significativamente
acrecentado por encima de la línea de referencia comenzándose a las
24 horas después de la infusión de la
hu14.18-IL-2 tanto durante la
primera sesión así como durante la segunda sesión, que persistió
hasta el 8º día. Se encontró que el aumento del
sIL-2R dependía de la dosis (p = 0,014), los
valores del sIL-2R de la segunda sesión estaban
acrecentados en comparación con los valores correspondientes en la
primera sesión en los días 1-5 para pacientes que
recibieron la misma dosis en ambas sesiones (p < 0,05).
Para llevar a cabo la evaluación de la función
NK activada con la IL-2 y de la citotoxicidad
celular dependiente del anticuerpo (ADCC) en células mononucleares
de sangre periférica (PBMC) procedente de 31 pacientes, que
completaron la primera sesión, se empleó la línea celular de
neuroblastoma LA-N-5, que expresa al
GD2 y que se enlaza con la
hu14.l8-IL-2. Se presentó un aumento
significativo en la destrucción inducida por los linfocitos a
partir del 8º día, en comparación con el 1er día para estos dos
ensayos. Los 12 pacientes que recibieron la segunda sesión con la
misma dosis que en la primera sesión, mostraron resultados de ADCC,
que eran muy similares a los que se obtuvieron durante la primera
sesión. El único parámetro, que se encontró diferente para la
segunda sesión con respecto a la primera sesión, fue la destrucción
acrecentada en presencia de la IL-2 el 1er día, lo
que indica que la destrucción aumentada en este ensayo permanece
elevada en el 29º día (1er día, segunda sesión).
Puesto que la diana
LA-N-5 es relativamente resistente a
las células NK frescas, ésta es adecuada para llevar a cabo la
medición de la destrucción aumentada por la IL-2, y
la ADCC. Sin embargo, la débil destrucción de la
LA-N-5 inducida con ayuda de la PBMC
fresca en medio (sin suplemento de IL-2 in
vitro) no era al 8º día significativamente mayor que la del 1er
día.
Se llevaron a cabo ensayos NK estándar para los
pacientes 19-33 los días 1, 8, 15 y 22, empleándose
la línea celular diana K562 susceptible a la NK. Se observó un
aumento significativo en la lisis por NK de las células diana K562,
cuando fueron ensayadas bien en medio o bien en presencia de la
IL-2, en los días 8º y 22º, en comparación con el
1er día. De la misma manera, se llevaron a cabo evaluaciones de
muestras de suero procedentes de pacientes seleccionados con objeto
de determinar la actividad de la IL-2 funcional y el
anticuerpo anti-GD2 funcional.
La línea celular Tf-1b sensible
a la IL-2 demostró una proliferación inducida por la
IL-2 con suero de pacientes obtenido después de la
infusión de la hu14.18-IL-2. Se
observó un aumento progresivo de la proliferación durante las
primeras 4 horas después de la infusión durante 4 horas. Los valores
volvieron a la línea de referencia al cabo de 16 horas después de
esta infusión, lo que es consistente con la semivida en suero para
la hu14.18-IL-2 de aproximadamente
4 horas. De la misma manera, se examinaron muestras de suero
procedentes de estos períodos de tiempo por medio de citometría de
flujo con respecto a la presencia de la inmunocitocina
hu14.18-IL-2 (IC) intacta, que
conserva su componente IL-2 y su actividad
anticuerpo anti-GD2. La
hu14.18-IL-2 capaz de enlazarse con
la línea celular M21 (positiva al GD2) era detectable en muestras de
suero de pacientes después de una infusión de IC. La cantidad de IC
capaz de enlazarse con la M21 aumentó progresivamente durante las
primeras 4 horas después de la infusión durante 4 horas y disminuyó
después de esto, nuevamente de forma consistente con la semivida de
aproximadamente
4 horas.
4 horas.
Por último, se llevaron a cabo ensayos in
vitro con muestras procedentes de pacientes, con objeto de
determinar si la administración de la
hu14.18-IL-2 daba como resultado
condiciones in vivo consistentes con las que son necesarias
para alcanzar la ADCC. Las PBMCs procedentes del 8º día mostraron un
aumento de la ADCC sobre células diana GD2+ cuando se añadió la
hu14.18-IL-2 al ensayo citotóxico.
Se llevó a cabo este mismo ensayo de ADCC con la PBMC procedente
del 8º día, sin embargo, en lugar de añadirse la
hu14.18-IL-2 al ensayo, se añadió
suero procedente del paciente, obtenido antes o después de la
administración de la hu14.18-IL-2.
Las PBMC obtenidas a partir de pacientes en el 8º día de la segunda
sesión eran capaces de favorecer la destrucción acrecentada de la
línea celular LA-N-5 en presencia de
suero obtenido después de la administración de la
hu14.18-IL-2, en comparación con lo
que se observa con el suero obtenido antes de la infusión. De este
modo, la hu14.18-IL-2, que circula
en los pacientes, después de la administración IV, es capaz de
facilitar la ADCC con las PBMCs activadas in vivo por medio
de la hu14.18-IL-2, procedente del
mismo paciente.
En resumen, estos resultados indican que
existían cambios inmunológicos asociados con esta terapia por medio
de la hu14.18-IL-2 con inclusión de
un aumento en el recuento de linfocitos, de un aumento en el
porcentaje de CD16+ y de CD56+ PBMC, de un aumento en la lisis de
NK y de un aumento en la ADCC. Una prueba adicional de la
inmunoactivación incluía un aumento en niveles en suero de la CRP y
del sIL-2R. Análisis de laboratorio de suero y de
PBMC mostraron que la molécula de
hu14.18-IL-2, que circula en el
suero del paciente después de la administración IV conservaba su
capacidad para activar a las células sensibles a la
IL-2 por medio del receptor de la
IL-2 y que conservaban su capacidad para enlazarse
con las células tumorales positivas al GD2, y para suministrar la
IL-2 en su superficie, como se ha detectado por
medio de citometría de flujo. Las células NK fueron activadas in
vivo en base a su capacidad para favorecer la función NK y ADCC
in vitro. Por otra parte, las células NK activadas in
vivo por medio de la
hu14.18-IL-2 administrada a estos
pacientes, eran capaces de inducir la ADCC facilitada por medio de
la hu14.18-IL-2, que circula en el
suero de estos mismos pacientes. Por lo tanto, se alcanzaron
condiciones para lograr una inmunoactivación en todos los pacientes
en este estudio.
<110> Gillies, Stephen D.
\hskip1cmLo, Kin-Ming
\vskip0.400000\baselineskip
<120> Secuencias de inmunocitocinas y usos
de las mismas
\vskip0.400000\baselineskip
<130> LEX-023
\vskip0.400000\baselineskip
<150> US 60/433,945
\vskip0.400000\baselineskip
<151>
2002-12-17
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 6
\vskip0.400000\baselineskip
<170> PatentIn versión 3.1
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
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<211> 113
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
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<213> Secuencia artificial
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<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Región variable de cadena ligera de
inmunoglobulina humanizada
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<400> 1
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\hskip0,8cm
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<210> 2
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<211> 113
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<212> PRT
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<213> Secuencia artificial
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<220>
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<223> Región variable de cadena pesada de
inmunoglobulina humanizada
\newpage
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<400> 2
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<210> 3
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<211> 15
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<212> PRT
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<213> Secuencia artificial
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<220>
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<223> Secuencia enlazante
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<400> 3
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<210> 4
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<211> 10531
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<212> DNA
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<213> Secuencia artificial
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<220>
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<223> Vector que contiene la cadena ligera
y pesada de inmunoglobulina humanizada y IL-2
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\vskip0.400000\baselineskip
<400> 4
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\hskip0,8cm
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<210> 5
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<211> 220
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<212> PRT
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<213> Secuencia artificial
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<220>
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<223> Cadena ligera de inmunoglobulina
humanizada
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<400> 5
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\hskip0,8cm
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<210> 6
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<211> 575
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<212> PRT
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<213> Secuencia artificial
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<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Cadena pesada de inmunoglobulina
humanizada y IL-2
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 6
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip0,8cm
\hskip0,8cm
\hskip0,8cm
Claims (5)
1. Una proteína de fusión de anticuerpo
humanizado y de IL-2, designada como
hu14.18-IL2, que se enlaza de manera específica con
el GD2 y que estimula una inmunofunción, que comprende la cadena
ligera de la SEQ ID No. 5 y la cadena pesada de la SEQ ID No.
6.
2. Un vector que comprende la secuencia de
nucleótidos de la SEQ ID No. 4, que contiene las secuencias de
ácido nucleico que codifican la proteína de fusión de la
reivindicación 1.
3. Composición farmacéutica que comprende la
proteína de fusión de la reivindicación 1 y un vehículo o excipiente
farmacéutico.
4. Uso de la proteína de fusión de la
reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento destinado a
la estabilización de la progresión de enfermedades en pacientes con
cáncer positivo al GD2.
5. Uso de la proteína de fusión de la
reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento destinado a
acrecentar la actividad ADCC y la lisis de NK en pacientes con
cáncer positivo al GD2.
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|---|---|---|---|---|
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| US20030105294A1 (en) * | 1998-02-25 | 2003-06-05 | Stephen Gillies | Enhancing the circulating half life of antibody-based fusion proteins |
| SK782002A3 (en) | 1999-07-21 | 2003-08-05 | Lexigen Pharm Corp | FC fusion proteins for enhancing the immunogenicity of protein and peptide antigens |
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| US20050202538A1 (en) * | 1999-11-12 | 2005-09-15 | Merck Patent Gmbh | Fc-erythropoietin fusion protein with improved pharmacokinetics |
| JP5179689B2 (ja) | 2000-02-11 | 2013-04-10 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 抗体ベース融合タンパク質の循環系内半減期の増強 |
| JP5390055B2 (ja) * | 2000-06-29 | 2014-01-15 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 免疫サイトカインの取り込み増強剤との併用治療による抗体−サイトカイン融合タンパク質媒介免疫応答の増強 |
| HUP0303428A2 (hu) * | 2001-03-07 | 2004-01-28 | Merck Patent Gmbh. | Expressziós eljárás hibrid izotípusú antitestcsoportot tartalmazó fehérjékhez |
| WO2002079415A2 (en) | 2001-03-30 | 2002-10-10 | Lexigen Pharmaceuticals Corp. | Reducing the immunogenicity of fusion proteins |
| KR100900166B1 (ko) * | 2001-05-03 | 2009-06-02 | 메르크 파텐트 게엠베하 | 재조합 종양 특이적 항체 및 이들의 용도 |
| ATE542137T1 (de) * | 2001-12-04 | 2012-02-15 | Merck Patent Gmbh | Immunocytokine mit modulierter selektivität |
| US9371559B2 (en) | 2002-06-20 | 2016-06-21 | The Regents Of The University Of California | Compositions for detection and analysis of polynucleotides using light harvesting multichromophores |
| US10001475B2 (en) | 2002-06-20 | 2018-06-19 | The Regents Of The University Of California | Light harvesting multichromophore compositions and methods of using the same |
| CN100432105C (zh) * | 2002-12-17 | 2008-11-12 | 默克专利有限公司 | 与gd2结合的小鼠14.18抗体的人源化抗体(h14.18)以及其与il-2的融合 |
| EP2161343B1 (en) * | 2003-02-13 | 2013-10-23 | The Regents Of the University of California | Methods and compositions for detection and analysis of polynucleotide-binding protein interactions using light harvesting multichromophores |
| US20050069521A1 (en) * | 2003-08-28 | 2005-03-31 | Emd Lexigen Research Center Corp. | Enhancing the circulating half-life of interleukin-2 proteins |
| US7642341B2 (en) | 2003-12-18 | 2010-01-05 | Merck Serono S.A. | Angiogenesis inhibiting molecules, their selection, production and their use in the treatment of cancer |
| EP1533617A1 (en) | 2003-11-19 | 2005-05-25 | RMF Dictagene S.A. | Angiogenesis inhibiting molecules, their selection, production and their use in the treatment and diagnosis of cancer |
| PT1699822E (pt) * | 2003-12-30 | 2008-07-30 | Merck Patent Gmbh | Proteínas de fusão de il-7 |
| BRPI0417916A (pt) * | 2003-12-31 | 2007-04-10 | Merck Patent Gmbh | proteìna de fusão de fc-eritropoietina com farmacocinética melhorada |
| AU2005206277B2 (en) * | 2004-01-22 | 2011-06-23 | Merck Patent Gmbh | Anti-cancer antibodies with reduced complement fixation |
| US7670595B2 (en) * | 2004-06-28 | 2010-03-02 | Merck Patent Gmbh | Fc-interferon-beta fusion proteins |
| RU2437893C2 (ru) | 2004-12-09 | 2011-12-27 | Мерк Патент Гмбх | Варианты il-7 со сниженной иммуногенностью |
| US20070104689A1 (en) * | 2005-09-27 | 2007-05-10 | Merck Patent Gmbh | Compositions and methods for treating tumors presenting survivin antigens |
| EP2270050B1 (en) | 2005-12-30 | 2013-06-05 | Merck Patent GmbH | Anti-CD19 antibodies with reduced immunogenicity |
| EP1966238B1 (en) * | 2005-12-30 | 2012-04-25 | Merck Patent GmbH | Interleukin-12p40 variants with improved stability |
| ES2395839T3 (es) * | 2006-03-27 | 2013-02-15 | Medimmune Limited | Miembro de unión para el receptor GM-CSF |
| US7787618B2 (en) | 2006-03-29 | 2010-08-31 | Nokia Corporation | Portable electronic device |
| WO2008003473A2 (en) * | 2006-07-06 | 2008-01-10 | Merck Patent Gmbh | Compositions and methods for enhancing the efficacy of il-2 mediated immune responses |
| JP2010504955A (ja) | 2006-09-28 | 2010-02-18 | メルク セローノ ソシエテ アノニム | 接合部接着分子ｃ（ｊａｍ−ｃ）結合化合物とその利用方法 |
| WO2008045380A2 (en) * | 2006-10-04 | 2008-04-17 | Codon Devices, Inc. | Nucleic acid libraries and their design and assembly |
| FR2906808B1 (fr) * | 2006-10-10 | 2012-10-05 | Univ Nantes | Utilisation d'anticorps monoclonaux specifiques de la forme o-acetylee du ganglioside gd2 dans le traitement de certains cancers |
| WO2009152901A1 (en) * | 2008-05-30 | 2009-12-23 | Merck Patent Gmbh, | Methods for treatment of malignancies |
| WO2009149218A2 (en) * | 2008-06-03 | 2009-12-10 | Codon Devices, Inc. | Novel proteins and methods of designing and using same |
| EP2310416A1 (en) * | 2008-06-30 | 2011-04-20 | Morphotek, Inc. | Anti-gd2 antibodies and methods and uses related thereto |
| WO2010117448A2 (en) * | 2009-04-05 | 2010-10-14 | Provenance Biopharmaceuticals Corp. | Chimeric immunocytokines and methods of use thereof |
| SG175233A1 (en) * | 2009-04-22 | 2011-11-28 | Merck Patent Gmbh | Antibody fusion proteins with modified fcrn binding sites |
| US8829163B2 (en) * | 2010-01-19 | 2014-09-09 | Hanmi Science Co., Ltd | Liquid formulations for long-acting erythropoietin conjugate |
| US10016440B2 (en) * | 2010-04-21 | 2018-07-10 | Ventirx Pharmaceuticals, Inc. | Methods of enhancing antibody-dependent cellular cytotoxicity |
| WO2011141926A2 (en) * | 2010-05-10 | 2011-11-17 | Intas Biopharmaceuticals Limited | Liquid formulation of polypeptides containing an fc domain of an immunoglobulin |
| ES2961381T3 (es) | 2010-06-19 | 2024-03-11 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Anticuerpos anti-GD2 |
| US20120065092A1 (en) * | 2010-09-14 | 2012-03-15 | Wai Hobert | Fusion analyte cytometric bead assay, and systems and kits for performing the same |
| HUE029139T2 (hu) | 2011-02-10 | 2017-02-28 | Roche Glycart Ag | Mutáns interleukin-2 polipeptidek |
| EA201892619A1 (ru) | 2011-04-29 | 2019-04-30 | Роше Гликарт Аг | Иммуноконъюгаты, содержащие мутантные полипептиды интерлейкина-2 |
| EP3626739A1 (en) * | 2011-06-24 | 2020-03-25 | Stephen D. Gillies | Light chain immunoglobulin fusion proteins and methods of use thereof |
| WO2013189516A1 (en) * | 2012-06-18 | 2013-12-27 | Apeiron Biologics Ag | Method for treating a gd2 positive cancer |
| EP2861251A1 (en) | 2012-06-18 | 2015-04-22 | Apeiron Biologics AG | Method for treating a gd2 positive cancer |
| US9458246B2 (en) | 2013-03-13 | 2016-10-04 | Amgen Inc. | Proteins specific for BAFF and B7RP1 |
| PH12022550138A1 (en) | 2013-03-13 | 2023-03-06 | Amgen Inc | Proteins specific for baff and b7rp1 and uses thereof |
| US10167341B2 (en) | 2013-03-15 | 2019-01-01 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | High affinity anti-GD2 antibodies |
| US20160040212A1 (en) * | 2013-03-15 | 2016-02-11 | The Broad Institute, Inc. | Methods for the Detection of DNA-RNA Proximity in Vivo |
| EP3620173A1 (en) | 2013-11-21 | 2020-03-11 | Apeiron Biologics AG | Preparations and methods for treating a gd2 positive cancer |
| US9840566B2 (en) | 2013-11-21 | 2017-12-12 | Apeiron Biologics Ag | Preparations and methods for treating a GD2 positive cancer |
| CA2928952A1 (en) * | 2013-12-16 | 2015-06-25 | Genentech, Inc. | Peptidomimetic compounds and antibody-drug conjugates thereof |
| GB201403775D0 (en) | 2014-03-04 | 2014-04-16 | Kymab Ltd | Antibodies, uses & methods |
| GB201403972D0 (en) * | 2014-03-06 | 2014-04-23 | Ucl Business Plc | Chimeric antigen receptor |
| US9139653B1 (en) | 2015-04-30 | 2015-09-22 | Kymab Limited | Anti-human OX40L antibodies and methods of treatment |
| US10676723B2 (en) | 2015-05-11 | 2020-06-09 | David Gordon Bermudes | Chimeric protein toxins for expression by therapeutic bacteria |
| WO2017055385A1 (en) * | 2015-10-02 | 2017-04-06 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Anti-cd3xgd2 bispecific t cell activating antigen binding molecules |
| EP3359168A4 (en) | 2015-10-06 | 2019-08-07 | Regents of the University of Minnesota | THERAPEUTIC COMPOUNDS AND METHOD |
| JP7461741B2 (ja) | 2016-06-20 | 2024-04-04 | カイマブ・リミテッド | 抗ｐｄ－ｌ１およびｉｌ－２サイトカイン |
| US9567399B1 (en) | 2016-06-20 | 2017-02-14 | Kymab Limited | Antibodies and immunocytokines |
| CA3031776C (en) * | 2016-07-25 | 2024-02-20 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Targeted radiotherapy chelates for in situ immune modulated cancer vaccination |
| US11779604B2 (en) | 2016-11-03 | 2023-10-10 | Kymab Limited | Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses and methods |
| US11129906B1 (en) | 2016-12-07 | 2021-09-28 | David Gordon Bermudes | Chimeric protein toxins for expression by therapeutic bacteria |
| CN108948211B (zh) * | 2018-07-24 | 2021-08-20 | 北京美康基免生物科技有限公司 | 一种基于靶向gd2的嵌合抗原受体及其应用 |
| RU2708136C1 (ru) * | 2019-04-15 | 2019-12-04 | Общество с ограниченной ответственностью "Реал Таргет" | Новые белковые конструкции для диагностики и терапии gd2-позитивных заболеваний |
| US20220411535A1 (en) * | 2019-11-26 | 2022-12-29 | University Of Utah Research Foundation | Compositions and methods for upregulating hla class i on tumor cells |
| JP2024515662A (ja) * | 2021-04-23 | 2024-04-10 | ソレント・セラピューティクス・インコーポレイテッド | Ｇｄ２に結合する二量体抗原受容体（ｄａｒ） |
| WO2024040195A1 (en) | 2022-08-17 | 2024-02-22 | Capstan Therapeutics, Inc. | Conditioning for in vivo immune cell engineering |
| AU2024279278A1 (en) | 2023-05-31 | 2025-12-18 | Capstan Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle formulations and compositions |
| WO2025076113A1 (en) | 2023-10-05 | 2025-04-10 | Capstan Therapeutics, Inc. | Ionizable cationic lipids with conserved spacing and lipid nanoparticles |
| IL327045A (en) | 2023-10-05 | 2026-05-01 | Capstan Therapeutics Inc | Structure-restricted ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles |
| WO2025217454A2 (en) | 2024-04-11 | 2025-10-16 | Capstan Therapeutics, Inc. | Ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles |
| WO2025217452A1 (en) | 2024-04-11 | 2025-10-16 | Capstan Therapeutics, Inc. | Constrained ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles |
Family Cites Families (233)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4196265A (en) | 1977-06-15 | 1980-04-01 | The Wistar Institute | Method of producing antibodies |
| US4522811A (en) | 1982-07-08 | 1985-06-11 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides |
| US4469797A (en) | 1982-09-23 | 1984-09-04 | Miles Laboratories, Inc. | Digoxigenin immunogens, antibodies, labeled conjugates, and related derivatives |
| US4737462A (en) | 1982-10-19 | 1988-04-12 | Cetus Corporation | Structural genes, plasmids and transformed cells for producing cysteine depleted muteins of interferon-β |
| US4966843A (en) | 1982-11-01 | 1990-10-30 | Cetus Corporation | Expression of interferon genes in Chinese hamster ovary cells |
| US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
| KR850004274A (ko) | 1983-12-13 | 1985-07-11 | 원본미기재 | 에리트로포이에틴의 제조방법 |
| NZ210501A (en) | 1983-12-13 | 1991-08-27 | Kirin Amgen Inc | Erythropoietin produced by procaryotic or eucaryotic expression of an exogenous dna sequence |
| US4703008A (en) | 1983-12-13 | 1987-10-27 | Kiren-Amgen, Inc. | DNA sequences encoding erythropoietin |
| US5082658A (en) | 1984-01-16 | 1992-01-21 | Genentech, Inc. | Gamma interferon-interleukin-2 synergism |
| EP0158198A1 (en) | 1984-03-29 | 1985-10-16 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | DNA and use thereof |
| US5807715A (en) | 1984-08-27 | 1998-09-15 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin |
| GB8422238D0 (en) | 1984-09-03 | 1984-10-10 | Neuberger M S | Chimeric proteins |
| US4667016A (en) | 1985-06-20 | 1987-05-19 | Kirin-Amgen, Inc. | Erythropoietin purification |
| US4690915A (en) | 1985-08-08 | 1987-09-01 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Adoptive immunotherapy as a treatment modality in humans |
| US5679543A (en) | 1985-08-29 | 1997-10-21 | Genencor International, Inc. | DNA sequences, vectors and fusion polypeptides to increase secretion of desired polypeptides from filamentous fungi |
| US5643565A (en) | 1985-09-20 | 1997-07-01 | Chiron Corporation | Human IL-2 as a vaccine adjuvant |
| US4676980A (en) | 1985-09-23 | 1987-06-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Target specific cross-linked heteroantibodies |
| US4935233A (en) | 1985-12-02 | 1990-06-19 | G. D. Searle And Company | Covalently linked polypeptide cell modulators |
| DE3712985A1 (de) | 1987-04-16 | 1988-11-03 | Hoechst Ag | Bifunktionelle proteine |
| US5359035A (en) | 1985-12-21 | 1994-10-25 | Hoechst Aktiengesellschaft | Bifunctional proteins including interleukin-2 (IL-2) and granuloctyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) |
| EP0237019A3 (en) | 1986-03-14 | 1988-03-09 | Toray Industries, Inc. | Interferon conjugate and production thereof using recombinant gene |
| JPS63267278A (ja) | 1986-03-14 | 1988-11-04 | Toray Ind Inc | インタ−フエロン結合体を暗号化する塩基配列 |
| GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
| US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
| DK173067B1 (da) | 1986-06-27 | 1999-12-13 | Univ Washington | Humant erythropoietin-gen, fremgangsmåde til ekspression deraf i transficerede cellelinier, de transficerede cellelinier sa |
| US4954617A (en) | 1986-07-07 | 1990-09-04 | Trustees Of Dartmouth College | Monoclonal antibodies to FC receptors for immunoglobulin G on human mononuclear phagocytes |
| US4894227A (en) | 1986-08-01 | 1990-01-16 | Cetus Corporation | Composition of immunotoxins with interleukin-2 |
| US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
| US4844893A (en) * | 1986-10-07 | 1989-07-04 | Scripps Clinic And Research Foundation | EX vivo effector cell activation for target cell killing |
| US5508031A (en) | 1986-11-21 | 1996-04-16 | Cetus Oncology Corporation | Method for treating biological damage using a free-radial scavenger and interleukin-2 |
| US4732683A (en) | 1986-12-02 | 1988-03-22 | Biospectrum, Inc. | Purification method for alpha interferon |
| US5019368A (en) | 1989-02-23 | 1991-05-28 | Cancer Biologics, Inc. | Detection of necrotic malignant tissue and associated therapy |
| EP0307434B2 (en) | 1987-03-18 | 1998-07-29 | Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. | Altered antibodies |
| US5258498A (en) | 1987-05-21 | 1993-11-02 | Creative Biomolecules, Inc. | Polypeptide linkers for production of biosynthetic proteins |
| AU612370B2 (en) | 1987-05-21 | 1991-07-11 | Micromet Ag | Targeted multifunctional proteins |
| US5091513A (en) | 1987-05-21 | 1992-02-25 | Creative Biomolecules, Inc. | Biosynthetic antibody binding sites |
| DE3853740T2 (de) | 1987-06-10 | 1995-11-09 | Dana Farber Cancer Inst Inc | Bifunktionelle Antikörperkonstruktionen und Verfahren zur selektiven Tötung von Zellbeständen. |
| US5064646A (en) | 1988-08-02 | 1991-11-12 | The University Of Maryland | Novel infectious bursal disease virus |
| ATE88900T1 (de) | 1987-09-02 | 1993-05-15 | Ciba Geigy Ag | Konjugate von interferon alpha mit immunglobulinen. |
| DE3850542T2 (de) | 1987-09-23 | 1994-11-24 | Bristol Myers Squibb Co | Antikörper-Heterokonjugate zur Töting von HIV-infizierten Zellen. |
| PT88641B (pt) | 1987-10-02 | 1993-04-30 | Genentech Inc | Metodo para a preparacao de uma variante de adesao |
| AU2635088A (en) | 1987-12-04 | 1989-06-08 | Du Pont Merck Pharmaceutical Company, The | Immobilized interleukin 2 and interleukin 2 containing a carboxyl-terminal extension |
| WO1989006692A1 (en) | 1988-01-12 | 1989-07-27 | Genentech, Inc. | Method of treating tumor cells by inhibiting growth factor receptor function |
| CA1341588C (en) | 1988-01-26 | 2009-01-06 | Michel Revel | Human ifn-beta2/i1-6, its purification and use |
| US5120525A (en) | 1988-03-29 | 1992-06-09 | Immunomedics, Inc. | Radiolabeled antibody cytotoxic therapy of cancer |
| DE3812605A1 (de) | 1988-04-15 | 1990-06-07 | Leskovar Peter Dipl Ing Dr Hab | Immunregulative stoffe und stoffgemische zur aktiven beeinflussung des krankheitsverlaufes |
| US4975369A (en) | 1988-04-21 | 1990-12-04 | Eli Lilly And Company | Recombinant and chimeric KS1/4 antibodies directed against a human adenocarcinoma antigen |
| IE62463B1 (en) | 1988-07-07 | 1995-02-08 | Res Dev Foundation | Immunoconjugates for cancer diagnosis and therapy |
| US5601819A (en) | 1988-08-11 | 1997-02-11 | The General Hospital Corporation | Bispecific antibodies for selective immune regulation and for selective immune cell binding |
| IL91933A (en) | 1988-10-11 | 1994-12-29 | Univ Southern California | Vasoactive immunoconjugates useful for increasing the vascular permeability or the blood supply to neoplastic or otherwise diseased tissues |
| US5457038A (en) | 1988-11-10 | 1995-10-10 | Genetics Institute, Inc. | Natural killer stimulatory factor |
| US5242824A (en) | 1988-12-22 | 1993-09-07 | Oncogen | Monoclonal antibody to human carcinomas |
| US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
| US5225538A (en) | 1989-02-23 | 1993-07-06 | Genentech, Inc. | Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins |
| US5116964A (en) | 1989-02-23 | 1992-05-26 | Genentech, Inc. | Hybrid immunoglobulins |
| US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
| US5166322A (en) | 1989-04-21 | 1992-11-24 | Genetics Institute | Cysteine added variants of interleukin-3 and chemical modifications thereof |
| ZA902949B (en) | 1989-05-05 | 1992-02-26 | Res Dev Foundation | A novel antibody delivery system for biological response modifiers |
| US6291158B1 (en) | 1989-05-16 | 2001-09-18 | Scripps Research Institute | Method for tapping the immunological repertoire |
| US5399346A (en) | 1989-06-14 | 1995-03-21 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Gene therapy |
| EP0479909B1 (en) | 1989-06-29 | 1996-10-30 | Medarex, Inc. | Bispecific reagents for aids therapy |
| EP0406857B1 (en) | 1989-07-07 | 1995-05-24 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Proteins and production thereof |
| US5073627A (en) | 1989-08-22 | 1991-12-17 | Immunex Corporation | Fusion proteins comprising GM-CSF and IL-3 |
| US5196320A (en) * | 1989-09-20 | 1993-03-23 | Abbott Biotech, Inc. | Method of producing engineered binding proteins |
| DE69030579T2 (de) | 1989-09-20 | 1997-11-13 | Abbott Lab | Verfahren zur herstellung von fusionsproteinen |
| US5856298A (en) | 1989-10-13 | 1999-01-05 | Amgen Inc. | Erythropoietin isoforms |
| AU646822B2 (en) | 1989-10-13 | 1994-03-10 | Kirin-Amgen Inc. | Erythropoietin isoforms |
| US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
| DK0790255T3 (da) | 1989-12-22 | 2007-11-26 | Hoffmann La Roche | Monoklonale antistoffer som er rettet mod den cytotoksiske lymfocytmodningsfaktor |
| US5314995A (en) | 1990-01-22 | 1994-05-24 | Oncogen | Therapeutic interleukin-2-antibody based fusion proteins |
| JPH07507440A (ja) | 1990-03-02 | 1995-08-24 | レプリゲン・コーポレーション | 結合親和性を高めた抗体構築物 |
| AU654811B2 (en) | 1990-03-20 | 1994-11-24 | Trustees Of Columbia University In The City Of New York, The | Chimeric antibodies with receptor binding ligands in place of their constant region |
| US5349053A (en) | 1990-06-01 | 1994-09-20 | Protein Design Labs, Inc. | Chimeric ligand/immunoglobulin molecules and their uses |
| US7253264B1 (en) | 1990-06-28 | 2007-08-07 | Sanofi-Arentideutschland GmbH | Immunoglobulin fusion proteins, their production and use |
| WO1992002240A2 (en) | 1990-07-27 | 1992-02-20 | Repligen Corporation | Novel methods and compositions for treatment of angiogenic diseases |
| US5349035A (en) * | 1990-09-18 | 1994-09-20 | Akzo Nobel N.V. | Copolymerization process and optical copolymer produced therefrom |
| WO1992008801A1 (en) | 1990-11-09 | 1992-05-29 | Abbott Laboratories | Bridging antibody fusion constructs |
| US5650150A (en) | 1990-11-09 | 1997-07-22 | Gillies; Stephen D. | Recombinant antibody cytokine fusion proteins |
| FR2670039B1 (fr) * | 1990-11-29 | 1993-12-24 | Commissariat A Energie Atomique | Procede et dispositif de reconstruction d'images tridimentionnelles d'un objet en utilisant deux trajectoires circulaires d'acquisition. |
| CA2095852C (en) | 1990-12-05 | 2001-05-08 | Uffe Lovborg | Proteins with changed epitopes and methods for the production thereof |
| US5709859A (en) | 1991-01-24 | 1998-01-20 | Bristol-Myers Squibb Company | Mixed specificity fusion proteins |
| GB9105245D0 (en) | 1991-03-12 | 1991-04-24 | Lynxvale Ltd | Binding molecules |
| US6072039A (en) | 1991-04-19 | 2000-06-06 | Rohm And Haas Company | Hybrid polypeptide comparing a biotinylated avidin binding polypeptide fused to a polypeptide of interest |
| US6797492B2 (en) * | 1991-05-17 | 2004-09-28 | Merck & Co., Inc. | Method for reducing the immunogenicity of antibody variable domains |
| DE69233482T2 (de) | 1991-05-17 | 2006-01-12 | Merck & Co., Inc. | Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen |
| US5199942A (en) | 1991-06-07 | 1993-04-06 | Immunex Corporation | Method for improving autologous transplantation |
| ATE255131T1 (de) | 1991-06-14 | 2003-12-15 | Genentech Inc | Humanisierter heregulin antikörper |
| WO1994004679A1 (en) | 1991-06-14 | 1994-03-03 | Genentech, Inc. | Method for making humanized antibodies |
| WO1993003157A1 (en) | 1991-07-29 | 1993-02-18 | Dana Farber Cancer Institute | Plasmids for the rapid preparation of modified proteins |
| ATE173763T1 (de) | 1991-08-30 | 1998-12-15 | Hutchinson Fred Cancer Res | Hybride cytokine |
| US20020037558A1 (en) | 1991-10-23 | 2002-03-28 | Kin-Ming Lo | E.coli produced immunoglobulin constructs |
| US5376367A (en) | 1991-11-22 | 1994-12-27 | Immunex Corporation | Fusion proteins comprising MGF and IL-3 |
| DE69219868T2 (de) * | 1991-11-25 | 1998-01-02 | Sharp Kk | Vorrichtung zur Weiterverarbeitung nach der Kopierung |
| US6627615B1 (en) | 1991-12-17 | 2003-09-30 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for in vivo gene therapy |
| SG49597A1 (en) | 1992-02-06 | 1998-06-15 | Schering Corp | Design cloning and expression of humanized monoclonal antibodies against human interleukin-5 |
| US5593874A (en) * | 1992-03-19 | 1997-01-14 | Monsanto Company | Enhanced expression in plants |
| AU687733B2 (en) | 1992-04-01 | 1998-03-05 | Rockefeller University, The | Method for in vitro proliferation of dendritic cell precursors and their use to produce immunogens |
| DE69333433T2 (de) | 1992-04-01 | 2004-12-02 | The Rockefeller University | Verfahren zur in vitro kultivierung dendritischer vorläuferzellen und deren verwendung zur immunogen herstellung |
| DK0615451T3 (da) | 1992-05-26 | 2006-04-24 | Immunex Corp | Hidtil ukendt cytokin der binder til CD30 |
| WO1993024640A2 (en) | 1992-06-04 | 1993-12-09 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for in vivo gene therapy |
| US5614184A (en) | 1992-07-28 | 1997-03-25 | New England Deaconess Hospital | Recombinant human erythropoietin mutants and therapeutic methods employing them |
| CA2142007C (en) | 1992-08-11 | 2007-10-30 | Robert Glen Urban | Immunomodulatory peptides |
| DE4228839A1 (de) | 1992-08-29 | 1994-03-03 | Behringwerke Ag | Verfahren zum Nachweis und zur Bestimmung von Mediatoren |
| WO1994009817A1 (en) | 1992-11-04 | 1994-05-11 | City Of Hope | Novel antibody construct |
| EP1757695A3 (en) | 1992-11-05 | 2008-02-27 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | Prostate-specific membrane antigen |
| US5738849A (en) | 1992-11-24 | 1998-04-14 | G. D. Searle & Co. | Interleukin-3 (IL-3) variant fusion proteins, their recombinant production, and therapeutic compositions comprising them |
| US5543297A (en) | 1992-12-22 | 1996-08-06 | Merck Frosst Canada, Inc. | Human cyclooxygenase-2 cDNA and assays for evaluating cyclooxygenase-2 activity |
| US6096331A (en) | 1993-02-22 | 2000-08-01 | Vivorx Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions useful for administration of chemotherapeutic agents |
| KR960701988A (ko) | 1993-04-20 | 1996-03-28 | 윌리엄 에스. 로빈슨 | 세포내 감염원에 감염된 개체의 치료방법 및 치료물질(methods and materials for treatment of individuals infected with intracellular in-fectious agents) |
| WO1994024160A2 (en) | 1993-04-21 | 1994-10-27 | Brigham And Women's Hospital | Erythropoietin muteins with enhanced activity |
| US5759551A (en) | 1993-04-27 | 1998-06-02 | United Biomedical, Inc. | Immunogenic LHRH peptide constructs and synthetic universal immune stimulators for vaccines |
| WO1994025609A1 (en) | 1993-04-28 | 1994-11-10 | Hybritech Incorporated | Method for creating optimized regulatory regions affecting protein expression and protein trafficking |
| CN1125401A (zh) | 1993-04-29 | 1996-06-26 | 艾博特公司 | 促红细胞生成素类似物组合物和方法 |
| US5554512A (en) | 1993-05-24 | 1996-09-10 | Immunex Corporation | Ligands for flt3 receptors |
| CA2125763C (en) | 1993-07-02 | 2007-08-28 | Maurice Kent Gately | P40 homodimer of interleukin-12 |
| GB2280171B (en) * | 1993-07-22 | 1996-12-18 | Cargo Unit Containers Ltd | Improvments in or relating to freight containers |
| GB9316989D0 (en) | 1993-08-16 | 1993-09-29 | Lynxvale Ltd | Binding molecules |
| IL192290A0 (en) | 1993-08-17 | 2008-12-29 | Kirin Amgen Inc | Erythropoietin analogs |
| DK139193D0 (da) | 1993-09-24 | 1993-12-13 | Hartmann As Brdr | Rektangulaer aegbakke |
| ES2424292T3 (es) * | 1994-01-25 | 2013-09-30 | Biogen Idec Ma Inc. | Anticuerpos humanizados contra la molécula de adhesión leucocitaria VLA-4 |
| WO1995021258A1 (en) | 1994-02-01 | 1995-08-10 | United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Fusion proteins that include antibody and nonantibody portions |
| WO1995028427A1 (en) | 1994-04-15 | 1995-10-26 | Imclone Systems Incorporated | Chimeric interleukin-3/mutein interleukin-6 lymphokine |
| ATE355379T1 (de) | 1994-04-26 | 2006-03-15 | Childrens Medical Center | Angiostatin und verfahren zu seiner nutzung zur vermeidung der angiogenese |
| US5837682A (en) | 1996-03-08 | 1998-11-17 | The Children's Medical Center Corporation | Angiostatin fragments and method of use |
| US5639725A (en) | 1994-04-26 | 1997-06-17 | Children's Hospital Medical Center Corp. | Angiostatin protein |
| CA2190101A1 (en) | 1994-05-13 | 1995-11-23 | Donald Leonard Nicholas Cardy | Improvements in or relating to peptide delivery |
| CU22615A1 (es) | 1994-06-30 | 2000-02-10 | Centro Inmunologia Molecular | Procedimiento de obtención de anticuerpos monoclonales murinos menos inmunogénicos. anticuerpos monoclonales obtenidos |
| US6429199B1 (en) | 1994-07-15 | 2002-08-06 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules for activating dendritic cells |
| HUT76369A (en) | 1994-07-29 | 1997-08-28 | Smithkline Beecham Corp | Novel soluble protein compounds |
| US6309853B1 (en) | 1994-08-17 | 2001-10-30 | The Rockfeller University | Modulators of body weight, corresponding nucleic acids and proteins, and diagnostic and therapeutic uses thereof |
| US5541087A (en) | 1994-09-14 | 1996-07-30 | Fuji Immunopharmaceuticals Corporation | Expression and export technology of proteins as immunofusins |
| US6309636B1 (en) * | 1995-09-14 | 2001-10-30 | Cancer Research Institute Of Contra Costa | Recombinant peptides derived from the Mc3 anti-BA46 antibody, methods of use thereof, and methods of humanizing antibody peptides |
| ES2167391T3 (es) | 1994-09-16 | 2002-05-16 | Merck Patent Gmbh | Inmunoconjugados ii. |
| EP1621206A1 (en) | 1994-12-12 | 2006-02-01 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Chimeric cytokines and uses thereof |
| US6086875A (en) | 1995-01-17 | 2000-07-11 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Receptor specific transepithelial transport of immunogens |
| US6485726B1 (en) | 1995-01-17 | 2002-11-26 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Receptor specific transepithelial transport of therapeutics |
| US5935821A (en) * | 1995-01-17 | 1999-08-10 | Board Of Trustees Of The University Of Kentucky | Polynucleotides related to monoclonal antibody 1A7 and use for the treatment of melanoma and small cell carcinoma |
| US5691309A (en) | 1995-01-31 | 1997-11-25 | Eli Lilly And Company | Anti-obesity proteins |
| US5552524A (en) | 1995-01-31 | 1996-09-03 | Eli Lilly And Company | Anti-obesity proteins |
| US5891680A (en) | 1995-02-08 | 1999-04-06 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Bioactive fusion proteins comprising the p35 and p40 subunits of IL-12 |
| JP3342873B2 (ja) | 1995-03-10 | 2002-11-11 | ジェネンテク・インコーポレイテッド | ｇａｓ６による受容体活性化 |
| US5719266A (en) | 1995-03-17 | 1998-02-17 | Eli Lilly And Company | Anti-obesity proteins |
| WO1996031526A1 (en) | 1995-04-06 | 1996-10-10 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Anti-obesity agents |
| US6281010B1 (en) | 1995-06-05 | 2001-08-28 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Adenovirus gene therapy vehicle and cell line |
| AU5985996A (en) | 1995-06-07 | 1997-01-15 | Osteosa Inc. | Osteoclast growth regulatory factor |
| AU5893796A (en) | 1995-06-07 | 1996-12-30 | Novo Nordisk A/S | Modification of polypeptides |
| GB9511935D0 (en) | 1995-06-13 | 1995-08-09 | Smithkline Beecham Plc | Novel compound |
| IL122718A0 (en) | 1995-06-30 | 1998-08-16 | Lilly Co Eli | Methods for treating diabetes |
| JP3925663B2 (ja) * | 1995-06-30 | 2007-06-06 | 持田製薬株式会社 | 抗Ｆａｓリガンド抗体および該抗体を用いた測定法 |
| US6406689B1 (en) | 1995-10-03 | 2002-06-18 | Frank W. Falkenberg | Compositions and methods for treatment of tumors and metastatic diseases |
| JP3840262B2 (ja) | 1995-10-23 | 2006-11-01 | ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレイション | 治療用の抗血管新生組成物および方法 |
| US5854205A (en) | 1995-10-23 | 1998-12-29 | The Children's Medical Center Corporation | Therapeutic antiangiogenic compositions and methods |
| WO1997020062A1 (en) | 1995-12-01 | 1997-06-05 | University Of Massachusetts | Il-12 p40 subunit fusion polypeptides and uses thereof |
| RU2178307C2 (ru) | 1995-12-27 | 2002-01-20 | Джинентех Инк. | Производные ов-протеина |
| US5723125A (en) | 1995-12-28 | 1998-03-03 | Tanox Biosystems, Inc. | Hybrid with interferon-alpha and an immunoglobulin Fc linked through a non-immunogenic peptide |
| US6080409A (en) | 1995-12-28 | 2000-06-27 | Dendreon Corporation | Immunostimulatory method |
| US7063958B1 (en) | 1996-01-16 | 2006-06-20 | The Rockefeller University | Nucleic acids db, the receptor for leptin |
| US6750334B1 (en) | 1996-02-02 | 2004-06-15 | Repligen Corporation | CTLA4-immunoglobulin fusion proteins having modified effector functions and uses therefor |
| WO1997030089A1 (en) | 1996-02-13 | 1997-08-21 | Regents Of The University Of California | Novel antibody-cytokine fusion protein, and methods of making and using the same |
| US5756541A (en) | 1996-03-11 | 1998-05-26 | Qlt Phototherapeutics Inc | Vision through photodynamic therapy of the eye |
| AU2527397A (en) | 1996-03-13 | 1997-10-01 | Protein Design Labs, Inc. | Fas ligand fusion proteins and their uses |
| ATE279947T1 (de) | 1996-03-18 | 2004-11-15 | Univ Texas | Immunglobulinähnliche domäne mit erhöhten halbwertszeiten |
| WO1997043316A1 (en) | 1996-05-10 | 1997-11-20 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Physiologically active molecules with extended half-lives and methods of using same |
| US5834597A (en) * | 1996-05-20 | 1998-11-10 | Protein Design Labs, Inc. | Mutated nonactivating IgG2 domains and anti CD3 antibodies incorporating the same |
| CA2205757C (en) | 1996-05-30 | 2006-01-24 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Pyridazinone derivatives and their use as inhibitors of prostaglandin g/h synthase i and ii(cox i and ii) |
| US5922685A (en) | 1996-06-05 | 1999-07-13 | Powderject Vaccines, Inc. | IL-12 gene therapy of tumors |
| CA2258593A1 (en) | 1996-07-02 | 1998-01-08 | Abraham Nudelman | Retinoyloxy(substituted)alkylene butyrates useful for the treatment of cancer and other proliferative diseases |
| WO1998006752A1 (en) | 1996-08-16 | 1998-02-19 | The Rockefeller University | A leptin binding protein and its use in methods for diagnosing and treating abnormalities of the endogenous leptin pathway |
| WO1998010070A1 (en) * | 1996-09-02 | 1998-03-12 | Sumitomo Electric Industries, Ltd. | HUMANIZED IMMUNOGLOBULIN REACTING SPECIFICALLY WITH Fas LIGAND OR ACTIVE FRAGMENTS THEREOF AND REGION INDUCING APOPTOSIS ORIGINATING IN Fas LIGAND |
| EP0826696B1 (de) | 1996-09-03 | 2002-05-29 | GSF-Forschungszentrum für Umwelt und Gesundheit GmbH | Verwendung bi-und trispezifischer Antikörper zur Induktion einer Tumorimmunität |
| US6417337B1 (en) | 1996-10-31 | 2002-07-09 | The Dow Chemical Company | High affinity humanized anti-CEA monoclonal antibodies |
| US5994104A (en) | 1996-11-08 | 1999-11-30 | Royal Free Hospital School Of Medicine | Interleukin-12 fusion protein |
| CA2275183A1 (en) | 1996-12-20 | 1998-07-02 | Amgen Inc. | Ob fusion protein compositions and methods |
| US6737057B1 (en) | 1997-01-07 | 2004-05-18 | The University Of Tennessee Research Corporation | Compounds, compositions and methods for the endocytic presentation of immunosuppressive factors |
| US6100387A (en) | 1997-02-28 | 2000-08-08 | Genetics Institute, Inc. | Chimeric polypeptides containing chemokine domains |
| US6277375B1 (en) | 1997-03-03 | 2001-08-21 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immunoglobulin-like domains with increased half-lives |
| JP2001521520A (ja) | 1997-04-11 | 2001-11-06 | ジー．ディー．サール アンド カンパニー | 抗α▲下ｖ▼β▲下３▼インテグリン抗体アンタゴニスト |
| CN1202862C (zh) | 1997-04-17 | 2005-05-25 | 安姆根有限公司 | 包含具有抗体Fc链的稳定、有活性人OB蛋白的结合物的组合物及方法 |
| WO1998052976A1 (en) | 1997-05-21 | 1998-11-26 | Biovation Limited | Method for the production of non-immunogenic proteins |
| DE19721789A1 (de) | 1997-05-24 | 1998-11-26 | Mst Automotive Gmbh | Herstellung einer Lenkradummantelung |
| GB9712892D0 (en) | 1997-06-20 | 1997-08-20 | Eclagen Ltd | Identification of mhc binding peptides |
| AU8182298A (en) | 1997-07-10 | 1999-02-08 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Recombinant erythropoietin / immunoglobulin fusion proteins |
| CN1269805A (zh) | 1997-07-14 | 2000-10-11 | 博尔德生物技术公司 | 生长激素和相关蛋白的衍生物 |
| PT1037927E (pt) | 1997-12-08 | 2004-10-29 | Emd Lexigen Res Ct Corp | Proteinas de fusao heterodimericas uteis para imunoterapia de abordagem selectiva e estimulacao imunologica geral |
| US20030105294A1 (en) | 1998-02-25 | 2003-06-05 | Stephen Gillies | Enhancing the circulating half life of antibody-based fusion proteins |
| CN1204147C (zh) | 1998-02-25 | 2005-06-01 | 利思进药品公司 | 提高以抗体为基础的融合蛋白的循环半衰期的方法 |
| ATE329622T1 (de) | 1998-04-15 | 2006-07-15 | Lexigen Pharm Corp | Steigerung der antikörper-zytokin- fusionsproteinmediierten immunantwort durch mitverabreichung mit einem angiogeneseinhibitor |
| RU2217168C2 (ru) | 1998-04-17 | 2003-11-27 | Лексиген Фармасьютикэлс Корпорейшн | Усиление иммунных ответов, опосредованных белками, слитыми из антитела и цитокина, посредством совместного введения ингибитора простагландина |
| WO1999054484A1 (en) | 1998-04-20 | 1999-10-28 | The Regents Of The University Of California | Modified immunoglobulin molecules and methods for use thereof |
| EP1088888A4 (en) | 1998-05-14 | 2005-03-16 | Merck Patent Gmbh | MERGED PROTEIN |
| DZ2788A1 (fr) | 1998-05-15 | 2003-12-01 | Bayer Ag | Agonistes et antagonistes selectifs à IL-2. |
| US6620382B1 (en) | 1998-05-22 | 2003-09-16 | Biopheresis Technologies, Llc. | Method and compositions for treatment of cancers |
| JP2002517186A (ja) | 1998-06-03 | 2002-06-18 | ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレイション | エンドスタチンタンパク質を含むタンパク質オリゴマー組成物およびその使用方法 |
| DE69933216T2 (de) | 1998-06-15 | 2007-09-20 | GTC Biotherapeutics, Inc., Framingham | Erythropoietin-analog-menschliches serum-albumin fusionsprotein |
| GB9814383D0 (en) | 1998-07-02 | 1998-09-02 | Cambridge Antibody Tech | Improvements relating to antibodies |
| EP1105427A2 (en) | 1998-08-17 | 2001-06-13 | Abgenix, Inc. | Generation of modified molecules with increased serum half-lives |
| ATE462725T1 (de) | 1998-08-25 | 2010-04-15 | Merck Patent Gmbh | Expression und export von angiostatin und endostatin als immunofusins |
| US6646113B1 (en) | 1998-09-17 | 2003-11-11 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Nucleic acid molecule encoding human survival of motor neuron-interacting protein 1 (SIP1) deletion mutants |
| US6335176B1 (en) | 1998-10-16 | 2002-01-01 | Pharmacopeia, Inc. | Incorporation of phosphorylation sites |
| ATE355303T1 (de) | 1998-10-23 | 2006-03-15 | Amgen Inc | Methoden und zusammensetzungen zur prävention und behandlung der anämie |
| EP1051432B1 (en) | 1998-12-08 | 2007-01-24 | Biovation Limited | Method for reducing immunogenicity of proteins |
| BR0007414A (pt) | 1999-01-07 | 2001-10-16 | Lexigen Pharm Corp | Expressão e exportação de proteìnas antiobesidade como proteìnas de fusão fc |
| IL145941A (en) | 1999-04-28 | 2007-08-19 | Univ Texas | Compositions and methods for cancer treatment by selectively inhibiting vegf |
| WO2000067761A1 (en) | 1999-05-06 | 2000-11-16 | Wake Forest University | Compositions and methods for identifying antigens which elicit an immune response |
| AU766507B2 (en) | 1999-05-07 | 2003-10-16 | Genentech Inc. | Novel chimpanzee erythropoietin (CHEPO) polypeptides and nucleic acids encoding the same |
| US6348192B1 (en) | 1999-05-11 | 2002-02-19 | Bayer Corporation | Interleukin-2 mutein expressed from mammalian cells |
| KR20020018197A (ko) | 1999-05-19 | 2002-03-07 | 추후보정 | Ｆｃ 융합 단백질로서의 인터페론-알파 단백질의 발현 및분비 |
| AU5617900A (en) | 1999-06-17 | 2001-01-09 | Robert C. Gallo | Chimeric chemokine-antigen polypeptides and uses therefor |
| JO2291B1 (en) | 1999-07-02 | 2005-09-12 | اف . هوفمان لاروش ايه جي | Erythropoietin derivatives |
| CZ299516B6 (cs) | 1999-07-02 | 2008-08-20 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Konjugát erythropoetinového glykoproteinu, zpusobjeho výroby a použití a farmaceutická kompozice sjeho obsahem |
| SK782002A3 (en) | 1999-07-21 | 2003-08-05 | Lexigen Pharm Corp | FC fusion proteins for enhancing the immunogenicity of protein and peptide antigens |
| BR0013231A (pt) | 1999-08-09 | 2002-07-23 | Lexigen Pharm Corp | Complexos citocina-anticorpo múltiplos |
| AU7449000A (en) * | 1999-09-30 | 2001-04-30 | Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. | Human type complementation-determining domain transplanted antibody against ganglioside gd2 and derivative of this antibody |
| EP1228214A2 (en) | 1999-11-12 | 2002-08-07 | MERCK PATENT GmbH | Erythropoietin forms with improved properties |
| JP5179689B2 (ja) | 2000-02-11 | 2013-04-10 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 抗体ベース融合タンパク質の循環系内半減期の増強 |
| PT1257297E (pt) | 2000-02-24 | 2006-12-29 | Philogen Spa | Composições e método para tratamento da angiogénese em lesões patológicas |
| US6586398B1 (en) | 2000-04-07 | 2003-07-01 | Amgen, Inc. | Chemically modified novel erythropoietin stimulating protein compositions and methods |
| AU2001263149A1 (en) | 2000-05-12 | 2001-11-26 | Neose Technologies, Inc. | In vitro fucosylation recombinant glycopeptides |
| JP5390055B2 (ja) | 2000-06-29 | 2014-01-15 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 免疫サイトカインの取り込み増強剤との併用治療による抗体−サイトカイン融合タンパク質媒介免疫応答の増強 |
| MXPA03006294A (es) | 2001-01-18 | 2003-09-16 | Merck Patent Gmbh | Proteinas de fusion disfuncionales con actividad glucocerebrosidasa. |
| AU2002256624B2 (en) | 2001-02-19 | 2007-12-06 | Merck Patent Gmbh | Method for identification of T-cell epitopes and use for preparing molecules with reduced immunogenicity |
| PL362324A1 (en) * | 2001-02-19 | 2004-10-18 | Merck Patent Gmbh | Artificial fusion proteins with reduced immunogenicity |
| HUP0303428A2 (hu) | 2001-03-07 | 2004-01-28 | Merck Patent Gmbh. | Expressziós eljárás hibrid izotípusú antitestcsoportot tartalmazó fehérjékhez |
| WO2002074783A2 (en) | 2001-03-15 | 2002-09-26 | Merck Patent Gmbh | Modified interferon beta with reduced immunogenicity |
| WO2002079415A2 (en) | 2001-03-30 | 2002-10-10 | Lexigen Pharmaceuticals Corp. | Reducing the immunogenicity of fusion proteins |
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