ES2359416T3 - Compuestos de primidindiamina-3-aminocarbonilo o biciclohepteno enriquecidos estereoisoméricamente y sus usos. - Google Patents

Compuestos de primidindiamina-3-aminocarbonilo o biciclohepteno enriquecidos estereoisoméricamente y sus usos. Download PDF

Info

Publication number
ES2359416T3
ES2359416T3 ES05844183T ES05844183T ES2359416T3 ES 2359416 T3 ES2359416 T3 ES 2359416T3 ES 05844183 T ES05844183 T ES 05844183T ES 05844183 T ES05844183 T ES 05844183T ES 2359416 T3 ES2359416 T3 ES 2359416T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
acid
hydrogen
compound according
cancer
cell
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES05844183T
Other languages
English (en)
Inventor
Ankush Argade
Rajinder Singh
Hui Li
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Rigel Pharmaceuticals Inc
Original Assignee
Rigel Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Rigel Pharmaceuticals Inc filed Critical Rigel Pharmaceuticals Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES2359416T3 publication Critical patent/ES2359416T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/48—Two nitrogen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B53/00—Asymmetric syntheses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B57/00—Separation of optically-active compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/08—Bridged systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Compuesto según la fórmula estructural (I): o una sal, hidrato, solvato o N-óxido de esta, que está enriquecido en el correspondiente diastereómero de fórmula estructural (Ia): en la que: R 1 se selecciona de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo C1-6, -(CH2)n-OH, - OR a , -O(CH2)n-R a , -O(CH2)n-R b , -C(O)OR a , halo, -CF3, y -OCF3; cada R 2 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo C1-6, -OR a , -O(CH2)n-R a , -O(CH2)n-R b , -NHC(O)OR a , halo, -CF3, -OCF3, y R 3 ; se selecciona de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo C1-6, -(CH2)n-OH, ­ OR a , -O(CH2)n-R a , -O(CH2)n-R b , halo, -CF3, -OCF3, R 4 se selecciona de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo C1-6, arilalquilo, -OR a , ­ NR c R c , -C(O)R 3 , -C(O)OR 4 y -C(O)NR c R c ; R 5 es hidrógeno, halo, -CN, -NO2, CO2Ra o -CF3; cada n es independientemente un número entero de 1 a 3; cada R 1 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo C1-6 y cicloalquilo C3-6; cada R b se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por -OR a , -CF3, - OCF3,-NR c R c , -C(O)R a , -C(O)OR a , -C(O)NR c R c y -C(O)NR a R d ; cada R c se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno y alquilo inferior, o, alternativamente, dos sustituyentes R c pueden considerarse junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos para formar un anillo saturado de 5 a 7 elementos que comprende opcionalmente de 1 a 2 grupos heteroatómicos adicionales seleccionados de entre O, NR a , NR a -C(O)R a , NR a -C(O)OR a y NR a -C(O)NR a ; y cada R d es independientemente monohidroxialquilo C1-6 o dihidroxialquilo C1-6.

Description

2. CAMPO
La presente descripción se refiere a composiciones enriquecidas estereoisoméricamente de compuestos de fenil-2,4-pirimidindiamina 4N-(3-aminocarbonilbiciclo-[2.2.1]hept-5-en-2-il)-N2sustituidos que presentan actividad antiproliferante, a los profármacos de los compuestos, a los productos intermedios y a los métodos de síntesis para la preparación de los compuestos y/o profármacos, a las composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos y/o a los profármacos y a la utilización de los compuestos y/o profármacos en una variedad de contextos, que incluyen, por ejemplo, el tratamiento de tumores y cánceres.
3. ANTECEDENTES
El cáncer es un grupo de enfermedades variadas caracterizadas por el crecimiento incontrolado y extendido de células anormales. Generalmente, todos los tipos de cánceres conllevan alguna anomalía en el control del crecimiento y división celulares. La serie de procesos que regulan la división celular y/o la comunicación celular llega a alterarse en las células cancerosas de modo que los efectos de estos mecanismos reguladores no pueden controlar ni limitar el crecimiento celular o son desviados. Mediante sucesivas rondas de mutación y selección natural, un grupo de células anormales, que se originan generalmente a partir de una sola célula mutante, acumulan otras mutaciones que proporcionan la ventaja del crecimiento selectivo sobre otras células, y de este modo evolucionan en un tipo de célula que predomina en la masa celular. Este proceso de mutación y selección natural está potenciado por la inestabilidad genética presentada por muchos tipos de células cancerosas, inestabilidad que se adquiere en las mutaciones somáticas o por herencia a partir de la línea germinal. El aumento de mutabilidad de las células cancerosas aumenta la probabilidad de su evolución hacia la formación de células malignas. A medida que las células cancerosas evolucionan más, algunas se vuelven localmente invasoras y entonces se metastatizan para colonizar otros tejidos aparte del tejido de la célula cancerosa de origen. Esta propiedad junto con la heterogeneidad de la población de las células tumorales convierte al cáncer en una enfermedad particularmente difícil de tratar y erradicar.
Los tratamientos tradicionales del cáncer se benefician de la mayor capacidad proliferante de las células cancerosas y de su aumento de sensibilidad a las alteraciones del ADN. La radiación ionizante, incluyendo los rayos γ y los rayos X, y los agentes citotóxicos, tales como bleomicina, cis-platino, vinblastina, ciclofosfamida, 5’-fluorouracilo y metotrexato, se basan en la alteración generalizada del ADN y en la desestabilización de la estructura cromosómica que conduce finalmente a la destrucción de las células cancerosas. Estos tratamientos son particularmente eficaces para aquellos tipos de cánceres que presentan defectos en el punto de control del ciclo celular, lo que limita la capacidad de estas células para reparar el ADN alterado antes de experimentar la división celular. La naturaleza no selectiva de estos tratamientos, sin embargo, produce con frecuencia efectos secundarios graves y debilitadores. La utilización generalizada de estos fármacos puede producir daños a los órganos y tejidos normalmente sanos y afectar la salud a largo plazo del paciente.
Aunque se han desarrollado tratamientos quimioterapéuticos más selectivos basados en el conocimiento de cómo el cáncer desarrolla, por ejemplo, el compuesto antiestrógeno tamoxifeno, la eficacia de todos los tratamientos quimioterapéuticos está sometida al desarrollo de resistencia a los fármacos. El aumento de expresión de los transportadores unidos a la membrana celular, tales como MdrI, produce un fenotipo con multiresistencia a fármacos caracterizado por el aumento de la salida de fármacos de la célula. Estos tipos de adaptación de la célula cancerosa limitan seriamente la eficacia de determinadas clases de agentes quimioterapéuticos. Por consiguiente, la identificación de otros agentes quimioterapéuticos, particularmente los estereoisómeros activos y/o las mezclas estereoisoméricas es crítica para crear terapias eficaces destinadas a atacar la naturaleza heterogénea de la enfermedad proliferante y para superar cualquier resistencia que pueda desarrollarse durante el transcurso de la terapia con otros compuestos. Además, la utilización de combinaciones de agentes quimioterapéuticos, incluyendo diferentes estereoisómeros y/o las mezclas estereoisoméricas de un determinado agente quimioterapéutico, que pueden presentar propiedades y dianas celulares diferentes, aumenta la eficacia de la quimioterapia y limita la generación de resistencia al fármaco.
5 4. SUMARIO En un aspecto, se proporcionan compuestos de fenil-2,4-pirimidindiamina 4N-(3aminocarbonilbiciclo-[2.2.1]hept-5-en-2-il)-2N-sustituidos enriquecidos en diastereoisómeros especificados los cuales presentan actividad antiproliferante contra varios tipos diferentes de
células tumorales. En algunas formas de realización, se proporcionan compuestos según la 10 fórmula estructural (I):
imagen1
que comprenden, sales, hidratos, solvatos y N-óxidos de esta, que están enriquecidos en el correspondiente diastereómero de fórmula estructural (Ia), denominado diastereómero (1R,2R,3S,4S):
imagen1
15
en la que:
cada R1 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno,
alquilo inferior, -(CH2)n-OH, -ORa, -O(CH2)n-Ra, -O(CH2)n-Rb, -C(O)ORa, halo, -CF3, y -OCF3; cada R2 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, 20 alquilo inferior, -ORa, -O(CH2)n-Ra, -O(CH2)n-Rb, -NHC(O)ORa, halo, -CF3, -OCF3
imagen2
cada R3 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo inferior, -(CH2)n-OH, -ORa, -O(CH2)n-Ra, -O(CH2)n-Rb, halo, -CF3, -OCF3,
imagen3
25 cada R4 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo inferior, arilalquilo, -ORa, -NRcRc, -C(O)Ra, -C(O)ORa y -C(O)NRcRc; R5 es hidrógeno, halo, fluoro, -CN, -NO2, -C(O)ORa o -CF3; cada n es independientemente un número entero de 1 a 3; cada Ra se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, 30 alquilo inferior y cicloalquilo inferior; cada Rb se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por -ORa, -CF3, -OCF3,-NRcRc, -C(O)Ra, -C(O)ORa y -C(O)NRcRc y -C(O)NRaRd;
5
10
15
20
25
30
35
40
45
cada Rc se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno y alquilo inferior, o, alternativamente, dos sustituyentes Rc pueden considerarse junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos para formar un anillo saturado de 4 a 9 elementos que comprende opcionalmente 1 a 2 grupos heteroatómicos adicionales seleccionados de entre O, NRa, NRa-C(O)Ra, NRa-C(O)ORa y NRa-C(O)NRa; y
cada Rd es independientemente monohidroxialquilo inferior o dihidroxialquilo inferior.
En algunas formas de realización, el compuesto de fórmula estructural (I) es una mezcla racémica de isómeros cis (2-exo-3-exo) según la fórmula estructural (IIa):
imagen1
que comprenden sales, hidratos, solvatos y N-óxidos de esta, en la que R1, R2 R3 y R5 son tal como se definieron para la fórmula estructural (I), supra.
En algunas formas de realización, el compuesto es un diasteroisómero enriquecido en estereoisómeros según la fórmula estructural (Ia), supra, que comprende sales, hidratos, solvatos y N-óxidos de esta, que está sustancialmente exento de su enantiómero y de cualquier otro de sus diastereómeros.
Se describen profármacos de los compuestos enriquecidos en estereoisómeros. Dichos profármacos pueden ser activos en su forma de profármaco o pueden ser inactivos hasta que se convierten, en condiciones de utilización fisiológicas o en otras, en una forma de fármaco activo. En los profármacos, uno o más grupos funcionales de los compuestos enriquecidos en estereoisómeros están incluidos en prorrestos que se escinden de la molécula en las condiciones de utilización, típicamente por hidrólisis, escisión enzimática o algún otro mecanismo de escisión, para proporcionar los grupos funcionales. Por ejemplo, los grupos amino primario o secundario pueden estar incluidos en un prorresto amida que se escinde en condiciones de utilización para generar el grupo amino primario o secundario. Por este motivo, los profármacos incluyen tipos especiales de grupos protectores, denominados “progrupos”, que enmascaran uno o más grupos funcionales de los compuestos que escinden en las condiciones de utilización para proporcionar un compuesto de fármaco activo. Los grupos funcionales dentro de los compuestos enriquecidos en estereoisómeros que pueden enmascararse con progrupos para la inclusión en un progrupo comprenden, pero no se limitan a, aminas (primarias y secundarias), hidroxilos, sulfanilos (tioles), carboxilos, carbonilos, etc. Una infinidad de progrupos adecuados para enmascarar dichos grupos funcionales para proporcionar prorrestos que son escindibles en las condiciones deseadas de utilización son conocidos en la técnica. Todos estos progrupos, solos o combinados, pueden estar incluidos en los profármacos. Ejemplos específicos de progrupos que proporcionan grupos amino primario o secundario que pueden estar incluidos en los profármacos comprenden, pero no se limitan a, amidas, carbamatos, iminas, ureas, fosfenilos, fosforilos y sulfenilos. Ejemplos específicos de prorrestos que proporcionan grupos sulfanilo que pueden estar incluidos en los profármacos comprenden, pero no se limitan a, tioéteres, por ejemplo, derivados de S-metilo (acetales monotío, ditío, oxitío, aminotío), tioéteres de sililo, tioésteres, tiocarbonatos, tiocarbamatos, disulfuros asimétricos, etc. Ejemplos específicos de prorrestos que se escinden para proporcionar grupos hidroxilo que pueden estar incluidos en los profármacos comprenden, pero no se limitan a, sulfonatos, ésteres y carbonatos. Ejemplos específicos de prorrestos que proporcionan grupos carboxilo que pueden estar incluidos en los profármacos comprenden, pero no se limitan a, ésteres (incluyendo ésteres de sililo, ésteres del ácido oxámico y tioésteres), amidas e hidrazidas.
En otro aspecto todavía, se proporcionan composiciones que comprenden uno o más compuestos enriquecidos en estereoisómeros. Las composiciones comprenden generalmente el o los compuestos y/o profármacos, sales, hidratos, solvatos y/o N-óxidos de estos, y un vehículo, excipiente y/o diluyente apropiado. La naturaleza exacta del vehículo, excipiente y/o diluyente dependerá de la utilización deseada de la composición, y puede variar entre ser adecuada o aceptable para utilizaciones in vitro, ser adecuada o aceptable para utilizaciones veterinarias y ser adecuada o aceptable para utilizaciones en seres humanos.
Los compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria son inhibidores potentes de la proliferación de células anormales, tales como las células tumorales, en ensayos in vitro. Por este motivo, en otro aspecto todavía, se proporcionan usos en métodos de inhibición de la proliferación de células anormales, en particular células tumorales. Los usos implican generalmente poner en contacto una célula anormal, tal como una célula tumoral, con una cantidad de uno o más compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria y/o profármacos, sales, hidratos, solvatos y/o N-óxidos de estos, eficaces para inhibir la proliferación de las células. Las células pueden ponerse en contacto con el compuesto por sí mismas o puede formularse el compuesto en una composición. Los métodos pueden ponerse en práctica en contextos in vitro. En contextos in vivo, la inhibición de la proliferación de células anormales es un método terapéutico destinado al tratamiento o la prevención de trastornos proliferantes, tales como los cánceres tumorígenos.
Se describe el uso en métodos de tratamiento de trastornos proliferantes. Los usos pueden ponerse en práctica en animales en contextos veterinarios o en seres humanos. Los usos implican generalmente la administración a un paciente animal o humano de una cantidad de uno o más compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria y/o profármacos, sales, hidratos, solvatos y/o N-óxidos de estos, eficaces para tratar o prevenir el trastorno proliferante. El o los compuestos pueden administrarse solos a un paciente, o el o los compuestos pueden administrarse en forma de composición. Los trastornos proliferantes que pueden ser tratados según los métodos comprenden, pero no se limitan a, cánceres tumorígenos.
Los compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria son potentes inhibidores de las Aurora cinasas. Las Aurora cinasas son una familia de enzimas conocidas por ser reguladoras clave de la división celular. Se han encontrado concentraciones elevadas de Aurora cinasas en varios tipos de células cancerosas humanas, tales como en tumores de mama, de colon, renal, cervical, neuroblastómeros, melanoma, linfoma, pancreático, de próstata y otros tumores sólidos (véase, p. ej., Brischott et al., 1998, EMBO J. 17:3052-3065; Geopfert y Brinkley, 2000, Curr. Top. Dev. Biol. 49:331-342; Sakakura et al., 2001, Br. J. Cancer 84:824-831), y se ha demostrado que la sobreexpresión de las Aurora cinasas provoca la transformación celular, un proceso mediante el cual las células normales se vuelven cancerosas. Aunque no se pretende estar ligado a ninguna teoría particular sobre el modo de actuación, se cree que los compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria, así como sus profármacos, sales, hidratos, solvatos y/o N-óxidos, ejercen su actividad antiproliferante inhibiendo una o más Aurora cinasas.
Por este motivo, en otro aspecto todavía, se proporcionan usos en métodos de inhibición de una actividad de una Aurora cinasa. Los métodos comportan generalmente poner en contacto una Aurora cinasa con una cantidad de uno o más compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria y/o de sales, hidratos, solvatos y/o N-óxidos de estos, eficaces para la inhibición de su actividad. Los usos pueden ponerse en práctica en contextos in vitro con enzimas de Aurora cinasa purificadas o parcialmente purificadas (p. ej., con extractos de células que expresen una base de Aurora), en contextos in vitro con células intactas que expresen una Aurora cinasa. En contextos in vivo, la inhibición de una actividad de una Aurora cinasa sirve para inhibir un proceso mediado por Aurora cinasa (por ejemplo, la mitosis celular) y/o como método terapéutico destinado al tratamiento o a la prevención de enfermedades o trastornos que están mediados, por lo menos en parte, por la actividad de la Aurora cinasa.
Se describen usos en métodos de tratamiento o prevención de enfermedades o trastornos mediados por Aurora cinasa. Los usos comportan generalmente la administración a un paciente animal o humano de una cantidad de uno o más compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria y/o de sales, hidratos, solvatos y/o N-óxidos activos de estos, eficaces para tratar o prevenir la enfermedad o trastorno mediado por Aurora cinasa. Las enfermedades y trastornos mediados por Aurora cinasa comprenden cualquier enfermedad, trastorno u otra afección nociva en la que un miembro de la familia de enzimas Aurora cinasa desempeña una función. Ejemplos específicos de dichas enfermedades o trastornos mediados por Aurora cinasa comprenden, pero no se limitan a, melanoma, leucemia y cánceres de tumores sólidos, tales como, por ejemplo, cánceres de colon, de mama, gástrico, de ovario, cervical, melanoma, renal, de próstata, linfoma, neuroblastoma, pancreático y de vejiga.
Otros aspectos comprenden, pero no se limitan a, productos intermedios y métodos útiles para sintetizar los compuestos enriquecidos en estereoisómeros, tal como se describirán con más detalle en la presente memoria a continuación.
5. BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS
Las FIGs. 1 a 4 ilustran el efecto inhibidor de la sal bisclorhídrica de (1R,2R,3S,4S)-N4-(3aminocarbonilbiciclo-[2.2.1]hept-5-en-2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]-2,4pirimidindiamina (compuesto 60a-2HCl) sobre el crecimiento de varios tipos diferentes de tumores en el tratamiento del xenotrasplante normal y en modelos de regresión.
6. DESCRIPCIÓN DETALLADA 6.1 Definiciones
Tal como se utilizan en la presente memoria, se propone que los términos siguientes tengan los significados siguientes:
“Alquilo” solo o como parte de otro sustituyente se refiere a un radical hidrocarbonado monovalente de cadena lineal, ramificada, saturado o insaturado o cíclico que tiene el número indicado de átomos de carbono (es decir, C1-C6 significa de uno a seis átomos de carbono) que procede de la eliminación de un átomo de hidrógeno de un solo átomo de carbono de un alcano, alqueno o alquino precursor. Los grupos alquilo típicos comprenden, pero no se limitan a, metilo; etilos tales como etanilo, etenilo y etinilo; propilos tales como propan-1-ilo, propan-2-ilo, ciclopropan-1-ilo, prop-1-en-1-ilo, prop-1-en-2-ilo, prop-2-en-1-ilo, cicloprop-1-en-1-ilo, cicloprop-2en-1-ilo, prop-1-in-1-ilo, prop-2-in-1-ilo, etc.; butilos tales como butan-1-ilo, butan-2-ilo, 2-metilpropan-1-ilo, 2-metil-propan-2-ilo, ciclobutan-1-ilo, but-1-en-1-ilo, but-1-en-2-ilo, 2-metil-prop-1-en1-ilo, but-2-en-1-ilo, but-2-en-2-ilo, buta-1,3-dien-1-ilo, buta-1,3-dien-2-ilo, ciclobut-1-en-1-ilo, ciclobut-1-en-3-ilo, ciclobuta-1,3-dien-1-ilo, but-1-in-1-ilo, but-1-in-3-ilo, but-3-in-1-ilo, etc.; y similares. Cuando se desean niveles de saturación específicos, se utiliza la nomenclatura específica “alcanilo”, “alquenilo” y/o “alquinilo”, como se define a continuación. “Alquilo inferior” se refiere a un grupo alquilo que contiene de 1 a 6 átomos de carbono.
“Alcanilo” solo o como parte de otro sustituyente se refiere a un alquilo de cadena lineal, ramificada saturado o cíclico que procede de la eliminación de un átomo de hidrógeno de un solo átomo de carbono de un alcano precursor. Los grupos alcanilo típicos comprenden, pero no se limitan a, metanilo; etanilo; propanilos tales como propan-1-ilo, propan-2-ilo (isopropilo), ciclopropan-1-ilo, etc.; butanilos tales como butan-1-ilo, butan-2-ilo (sec-butilo), 2-metil-propan-1ilo (isobutilo), 2-metil-propan-2-ilo (t-butilo), ciclobutan-1-ilo, etc.; y similares.
“Alquenilo” solo o como parte de otro sustituyente se refiere a un alquilo de cadena lineal, ramificada insaturado o cíclico con por lo menos un doble enlace carbono-carbono que procede de la eliminación de un átomo de hidrógeno de un solo átomo de carbono de un alqueno precursor. El grupo puede estar en la conformación cis o trans respecto al doble o dobles enlaces. Los grupos alquenilo típicos comprenden, pero no se limitan a, etenilo; propenilos tales como prop-1-en-1-ilo, prop-1-en-2-ilo, prop-2-en-1-ilo, prop-2-en-2-ilo, cicloprop-1-en-1-ilo, cicloprop-2-en-1-ilo; butenilos tales como but-1-en-1-ilo, but-1-en-2-ilo, 2-metil-prop-1-en-1-ilo, but-2-en-1-ilo, but-2-en-2-ilo, buta-1,3-dien-1-ilo, buta-1,3-dien-2-ilo, ciclobut-1-en-1-ilo, clclobut-1-en-3-ilo, ciclobuta-1,3-dien-1ilo, etc.; y similares.
“Alquinilo” solo o como parte de otro sustituyente se refiere a un alquilo de cadena lineal, ramificada insaturado o cíclico con por lo menos un triple enlace carbono-carbono que procede de la eliminación de un átomo de hidrógeno de un solo átomo de carbono de un alquino precursor. Los grupos alquinilo típicos comprenden, pero no se limitan a, etinilo; propinilos tales como prop-1in-1-ilo, prop-2-in-1-ilo, etc.; butinilos tales como but-1-in-1-ilo, but-1-in-3-ilo, but-3-in-1-ilo, etc.; y similares.
“Alquildiilo” solo o como parte de otro sustituyente se refiere a un grupo hidrocarbonado divalente de cadena lineal, ramificada, saturado o insaturado o cíclico que tiene el número indicado de átomos de carbono (es decir, C1-C6 significa de uno a seis átomos de carbono) que procede de la eliminación de un átomo de hidrógeno de cada uno de dos átomos de carbono diferentes de un alcano, alqueno o alquino precursor, o de la eliminación de dos átomos de un solo átomo de carbono de un alcano, alqueno o alquino precursor. Los dos centros del radical monovalente o cada valencia del centro del radical divalente pueden formar enlaces con el mismo
o diferentes átomos. Los grupos alquildiilo típicos comprenden, pero no se limitan a, metandiilo; etildiilos tales como etan-1,1-diilo, etan-1,2-diilo, eten-1,1-diilo, eten-1,2-diilo; propildiilos tales como propan-1,1-diilo, propan-1,2-diilo, propan-2,2-diilo, propan-1,3-diilo, ciclopropan-1,1-diilo, ciclopropan-1,2-diilo, prop-1-en-1,1-diilo, prop-1-en-1,2-diilo, prop-2-en-1,2-diilo, prop-1-en-1,3diilo, cicloprop-1-en-1,2-diilo, cicloprop-2-en-1,2-diilo, cicloprop-2-en-1,1-diilo, prop-1-in-1,3-diilo, etc.; butildiilos tales como butan-1,1-diilo, butan-1,2-diilo, butan-1,3-diilo, butan-1,4-diilo, butan-2,2diilo, 2-metil-propan-1,1-diilo, 2-metil-propan-1,2-diilo, ciclobutan-1,1-diilo, ciclobutan-1,2-diilo, ciclobutan-1,3-diilo, but-1-en-1,1-diilo, but-1-en-1,2-diilo, but-1-en-1,3-diilo, but-1-en-1,4-diilo, 2metil-prop-1-en-1,1-diilo, 2-metaniliden-propan-1,1-diilo, buta-1,3-dien-1,1-diilo, buta-1,3-dien-1,2diilo, buta-1,3-dien-1,3-diilo, buta-1,3-dien-1,4-diilo, ciclobut-1-en-1,2-diilo, ciclobut-1-en-1,3-diilo, ciclobut-2-en-1,2-diilo, ciclobuta-1,3-dien-1,2-diilo, ciclobuta-1,3-dien-1,3-diilo, but-1-in-1,3-diilo, but-1-in-1,4-diilo, buta-1,3-diin-1,4-diilo, etc.; y similares. Cuando se pretenden niveles específicos de saturación, se utiliza la nomenclatura alcanildiilo, alquenildiilo y/o alquinildiilo. Cuando se pretende específicamente que las dos valencias estén en el mismo átomo de carbono, se utiliza la nomenclatura “alquilideno”. Un “alquildiilo inferior” es un grupo alquildiilo que contiene de 1 a 6 átomos de carbono. En algunas formas de realización, los grupos alquildiilo son grupos alcanidiilo acíclicos saturados en los que los centros del radical están en los carbonos terminales, p. ej., metandiilo (metano); etan-1,2-diilo (etano); propan-1,3-diilo (propano); butan-1,4-diilo (butano); y similares (también denominados alquilenos, definidos a continuación).
“Alquileno” solo o como parte de otro sustituyente se refiere a un grupo alquildiilo saturado
o insaturado de cadena lineal con dos centros de radicales monovalentes terminales procedentes de la eliminación de un átomo de hidrógeno de cada uno de los dos átomos de carbono terminales de un alcano, alqueno o alquino precursor de cadena lineal. La posición de un doble o triple enlace, si está presente, en un alquileno determinado se indica entre corchetes. Los grupos alquileno típicos comprenden, pero no se limitan a, metileno (metano); etilenos tales como etano, eteno y etino; propilenos tales como propano, prop[1]eno, propa[1,2]dieno, prop[1]ino, etc.; butilenos tales como butano, but[1]eno, but[2]eno, buta[1,3]dieno, but[1]ino, but[2]ino, buta[1,3]diino, etc.; y similares. Cuando se pretenden niveles de saturación específicos, se utiliza la nomenclatura alcano, alqueno y/o alquino.
En algunas formas de realización, el grupo alquileno es alquileno (C1-C6) o (C1-C3). En algunas formas de realización, el grupo alquileno es un grupo alcano saturado de cadena lineal, p. ej., metano, etano, propano, butano y similares.
“Cicloalquilo” solo o como parte de otro sustituyente se refiere a una versión cíclica de un grupo “alquilo”. Los grupos cicloalquilo típicos comprenden, pero no se limitan a, ciclopropilo; ciclobutilos tales como ciclobutanilo y ciclobutenilo; ciclopentilos tales como ciclopentanilo y ciclopentenilo; ciclohexilos tales como ciclohexanilo y ciclohexenilo; y similares.
“Sistema precursor de anillo aromático” se refiere a un sistema de anillo cíclico o policíclico insaturado con un sistema de electrones π conjugados. En la definición de “sistema precursor de anillo aromático” están incluidos particularmente los sistemas con anillos fusionados en los que uno o más de los anillos son aromáticos y uno o más de los anillos están saturados o insaturados, tales como, por ejemplo, fluoreno, indano, indeno, fenaleno, tetrahidronaftaleno, etc. Los sistemas precursores de anillo aromático típicos comprenden, pero no se limitan a, aceantrileno, acenaftileno, acefenantrileno, antraceno, azuleno, benceno, criseno, coroneno, fluoranteno, fluoreno, hexaceno, hexafeno, hexaleno, indaceno, s-indaceno, indano, indeno, naftaleno, octaceno, octafeno, octaleno, ovaleno, penta-2,4-dieno, pentaceno, pentaleno, pentafeno, perileno, fenaleno, fenantreno, piceno, pleyadeno, pireno, pirantreno, rubiceno, tetrahidronaftaleno, trifenileno, trinaftaleno y similares.
“Arilo” solo o como parte de otro sustituyente se refiere a un grupo hidrocarbonado aromático monovalente que tiene el número indicado de átomos de carbono (es decir, C5-C15 significa de 5 a 15 átomos de carbono) que procede de la eliminación de un átomo de hidrógeno de un solo átomo de carbono de un sistema precursor de anillo aromático. Los grupos arilo típicos comprenden, pero no se limitan a, grupos derivados del aceantrileno, acenaftileno, acefenantrileno, antraceno, azuleno, benceno, criseno, coroneno, fluoranteno, fluoreno, hexaceno, hexafeno, hexaleno, as-indaceno, s-indaceno, indano, indeno, naftaleno, octaceno, octafeno, octaleno, ovaleno, penta-2,4-dieno, pentaceno, pentaleno, pentafeno, perileno, fenaleno, fenantreno, piceno, pleyadeno, pireno, pirantreno, rubiceno, trifenileno, trinaftaleno y similares, así como sus diversos hidro-isómeros. En algunas formas de realización, el grupo arilo es arilo (C5C15), siendo más típico (C5-C10). Ejemplos específicos son fenilo y naftilo.
“Halógeno” o “halo” solos o como parte de otro sustituyente, a menos que se indique de otro modo, se refieren a flúor, cloro, bromo y yodo.
“Haloalquilo” solo o como parte de otro sustituyente se refiere a un grupo alquilo en el que uno o más de los átomos de hidrógeno están sustituidos por un halógeno. Por lo tanto, el término “haloalquilo” da a entender que comprende monohaloalquilos, dihaloalquilos, trihaloalquilos, etc. hasta perhaloalquilos. Por ejemplo, la expresión “haloalquilo (C1-C2)” comprende fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, 1-fluoroetilo, 1,1-difluoroetilo, 1,2-difluoroetilo, 1,1,1-trifluoroetilo, perfluoroetilo, etc.
“Hidroxialquilo” solo o como parte de otro sustituyente se refiere a un grupo alquilo en el que uno o más de los átomos de hidrógeno están sustituidos por un sustituyente hidroxilo. Por lo tanto, el término “hidroxialquilo” da a entender que comprende monohidroxialquilos, dihidroxialquilos, trihidroxialquilos, etc.
Los grupos definidos anteriormente pueden incluir prefijos y/o sufijos que se utilizan habitualmente en la técnica para crear grupos sustituyentes adicionales muy reconocidos. A título de ejemplo, “alquiloxi” o “alcoxi” se refiere a un grupo de fórmula –OR, “alquilamina” se refiere a un grupo de fórmula –NHR y “dialquilamina” se refiere a un grupo de fórmula -NRR, en la que cada R es independientemente un alquilo. Como otro ejemplo, “haloalcoxi” o “haloalquiloxi” se refiere a un grupo de fórmula –OR’, en la que R’ es un haloalquilo.
“Profármaco” se refiere a un derivado de un compuesto activo (fármaco) que puede necesitar una transformación en las condiciones de utilización, como por ejemplo en el interior del cuerpo, para liberar el fármaco activo. Los profármacos son frecuentemente, pero no necesariamente, farmacológicamente inactivos hasta que se transforman en el fármaco activo. Los profármacos se obtienen típicamente enmascarando un grupo funcional en el compuesto del fármaco que se considera en parte necesario para la actividad con un progrupo (definido a continuación) para formar un prorresto que experimenta una transformación, tal como una escisión, en condiciones específicas de utilización para liberar el grupo funcional, y por consiguiente el fármaco activo. La escisión del progrupo puede proceder espontáneamente, tal como mediante una reacción de hidrólisis, o puede estar catalizada o inducida por otro agente, tal como por una enzima, por la luz, por un ácido o una base o por un cambio de un parámetro físico
o medioambiental, tal como un cambio de temperatura, o por exposición al mismo. El agente puede ser endógeno en las condiciones de utilización, tal como una enzima presente en las células a las que se administra el profármaco o en las condiciones ácidas del estómago o puede suministrarse de modo exógeno.
Son bien conocidos en la técnica una amplia variedad de progrupos, así como los prorrestos resultantes, adecuados para enmascarar los grupos funcionales en los compuestos activos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria para producir profármacos. Por ejemplo, un grupo funcional hidroxilo puede enmascararse como prorresto sulfonato, éster o carbonato, el cual puede hidrolizarse in vivo para proporcionar el grupo hidroxilo.
Un grupo funcional amino puede enmascararse como prorresto amida, carbamato, imina, urea, fosfenilo, fosforilo o sulfenilo, el cual puede hidrolizarse in vivo para proporcionar el grupo amino. Un grupo carboxilo puede enmascararse como prorresto éster (incluyendo los ésteres de sililo y los tioésteres), amida o hidrazida, el cual puede hidrolizarse in vivo para proporcionar el grupo carboxilo. Otros ejemplos específicos de prorrestos adecuados y sus respectivos prorrestos son evidentes para los expertos en la materia.
“Progrupo” se refiere a un tipo de grupo protector que, cuando se utiliza para enmascarar un grupo funcional en un compuesto de fármaco activo enriquecido en estereoisómeros para formar un prorresto, convierte el fármaco en un profármaco. Los progrupos están típicamente unidos al grupo funcional del fármaco mediante enlaces que pueden escindirse en las condiciones específicas de utilización. De este modo, un progrupo es la parte de un prorresto que se escinde para liberar el grupo funcional en las condiciones especificadas de utilización. A título de ejemplo específico, un prorresto amida de fórmula –NH-C(O)CH3 comprende el progrupo -C(O)CH3.
“Trastorno proliferante” se refiere a una enfermedad o trastorno caracterizado por la proliferación de células anormales, por ejemplo, cuando las células se dividen más que sus células normales homólogas. La proliferación anormal puede producirse por cualquier mecanismo
o combinación de mecanismos de actuación. Por ejemplo, el ciclo celular de una o más células puede estar afectado de modo que la célula o células se dividan con más frecuencia que sus células normales homólogas, o como otro ejemplo, una o más células pueden desviar las señales inhibidoras, que limitarían normalmente su número de divisiones. Las enfermedades proliferantes comprenden, pero no se limitan a, los tumores y cánceres de desarrollo lento o rápido.
“Compuesto antiproliferante” se refiere a un compuesto que inhibe la proliferación de una célula en comparación con una célula de referencia no tratada de un tipo similar. La inhibición puede ser ocasionada por cualquier mecanismo o combinación de mecanismos y puede operar para inhibir la proliferación citostática o citotóxicamente. Como ejemplo específico, la inhibición tal como se emplea en la presente memoria comprende, pero no se limita a, la interrupción de la división celular, una reducción de la frecuencia de la división celular, la proliferación y/o el crecimiento y/o la provocación de la muerte celular, por cualquier mecanismo de actuación, incluyendo, por ejemplo la apoptosis.
“Aurora cinasa” se refiere a un miembro de la familia de las serina/treonina proteína cinasas que se denominan generalmente “Aurora” cinasas. La familia “Aurora” de las serina/treonina proteína cinasas es esencial para la proliferación celular (véase, p. ej., Bischoff y Plowman, 1999, Trends Cell Biol. 9:454-459; Giet y Prigent, 1999, J. Cell Science 112:3591-3601; Nigg, 2001, Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2:21-32; Adams et al., 2001, Trends Cell Biol. 11:49-54). Actualmente, existen tres miembros conocidos de la familia de mamíferos: Aurora-A (“2”), Aurora-B (“1”) y Aurora-C (“3”) (véase, p. ej., Giet y Prigent, 1999, J. Cell. Sci. 112:3591-3601; Bischoff y Plowman, 1999, Trends Cell Biol. 9:454-459). Tal como se utiliza en la presente memoria, “Aurora cinasa” comprende no solamente estos tres miembros conocidos de la familia de mamíferos, sino también los miembros de la familia de los mamíferos descubiertos posteriormente y las proteínas homólogas de otras especies y organismos (para ejemplos no limitativos de miembros homólogos de la familia Aurora cinasa de otras especies y organismos, véase Schumacher et al., 1998, J. Cell Biol. 143:1635-1646; Kimura et al., 1997, J. Biol. Chem. 272:13766-13771).
“Proceso mediado por Aurora cinasa” o “enfermedad o trastorno mediado por Aurora cinasa” se refiere a un proceso, enfermedad o trastorno celular en el que una Aurora cinasa desempeña una función. Se cree que las Aurora cinasas desempeñan una función clave en los casos de fosforilación proteica que regulan la fase mitótica del ciclo celular. Las Aurora cinasas humanas presentan distintas posiciones subcelulares durante la mitosis. Por ejemplo, la Aurora-A está regulada por aumento durante la fase M del ciclo celular y se localiza en el polo del huso durante la mitosis, lo que sugiere su implicación en las funciones del centrosoma. Aunque la actividad de la Aurora-A se maximiza durante la profase, se cree que la Aurora-B desempeña una función importante durante la separación de la cromátide y la formación del surco de escisión en la anafase y telofase. La función de la Aurora-C está menos clara, pero se ha demostrado que se localiza en los centrosomas durante la mitosis desde la anafase hasta la citocinesis. Además, la inhibición de la actividad de la Aurora cinasa en las células de los mamíferos conduce al crecimiento celular anormal y a la poliploidia (Terada et al., 1998, EMBO J. 17:667-676). Por este motivo, se cree que las Aurora cinasas regulan la división celular, la segregación de los cromosomas, la formación del huso mitótico y la citocinesis. Tal como se utilizan en la presente memoria, todos estos procesos están comprendidos en el alcance del “proceso mediado por las Aurora cinasa”.
Además, desde su descubrimiento en 1997, la familia de la Aurora cinasa de mamíferos ha estado estrechamente ligada a la tumorigénesis. La prueba más convincente de esto es que la sobreexpresión de la Aurora-A transforma los fibroblastos de roedores (Bischoff et al., 1998, EMBO J. 17:3052-3065). Las células con elevadas concentraciones de esta cinasa contienen múltiples centrosomas y husos multipolares y se vuelven rápidamente aneuploides. La actividad oncógena de las Aurora cinasas probablemente debe relacionarse con la generación de dicha inestabilidad genética. De hecho, se ha observado una correlación entre la ampliación del locus de Aurora-A y la inestabilidad cromosómica en los tumores de mama y de estómago (Miyoshi et al., 2001, Int. J. Cancer 92:370-373; Sakakura et al., 2001, Brit. J. Cancer 84:824-831).
Se ha descrito que las Aurora cinasas se sobreexpresan en una amplia gama de tumores humanos. Se ha detectado expresión elevada de Aurora-A en más del 50% de los tumores colorrectales (Bischoff et al., 1998, EMBO J. 17:3052-3065; Takahashi et al., 2000, Jpn. J. Cancer Res. 91:1007-1014), de ovario (Gritsko et al., 2003, Clinical Cancer Research 9:1420-1426), y gástricos (Sakakura et al., 2001, Brit. J. Cancer 84:824-831), y en el 94% de los adenocarnicomas canaliculares infiltrantes de mama (Tanaka, 1999, Cancer Research. 59:2041-2044). Se han descrito asimismo altas concentraciones de Aurora-A en lineas celulares de tumor renal, cervical, neuroblastoma, melanoma, linfoma, pancreático y de próstata (Bischoff et al.,1998, EMBO J. 17:3052-3065; Kimura et al., 1999, J. Biol. Chem. 274: 7334-7340; Zhou et al., 1998, Nature Genetics 20:189-193; Li et al., 2003, Clin. Cancer Res. 9(3):991-7). Se observa ampliación/sobreexpresión de Aurora-A en los cánceres de vejiga humanos y la ampliación de Aurora-A está relacionada con la aneuploidia y con el comportamiento clínico agresivo (Sen et al., 2002, J. Natl. Cancer Inst. 94(17):1320-9. Además, la ampliación del locus (20q13) de Aurora-A se correlaciona con el escaso pronóstico en pacientes de cáncer de mama negativo en los ganglios (Isola et al., 1995, American Journal of Pathology 147:905-911). La Aurora-B se expresa en gran medida en múltiples líneas celulares tumorales humanas, incluyendo las líneas leucémicas (Katayama et al., 1998, Gene 244:1-7). Las concentraciones de esta enzima aumentan en función de la etapa de Duke en los cánceres colorrectales primarios (Katayama et al., 1999, J. Na’l. Cancer Inst. 91:1160-1162). La Aurora-C, que se encuentra normalmente sólo en células germinales, se sobreexpresa también en un gran porcentaje de cánceres colorrectales primarios y en una variedad de líneas celulares tumorales incluyendo las células de adenocarcinoma cervical y de carcinoma de mama (Kimura et al., 1999, J. Biol. Chem. 274: 7334-7340; Takahashi et al., 2000, Jpn. J. Cancer Res. 91:1007-1014).
En cambio, la familia Aurora se expresa a baja concentración en la mayoría de los tejidos normales, siendo excepciones los tejidos con una gran proporción de células en división, tales como las del timo y de los testículos (Bischoff et al.,1998, EMBO J. 17:3052-3065).
Para un estudio adicional de la función o funciones que las Aurora cinasas desempeñan en los trastornos proliferantes, véase Bischoff y Plowman, 1999, Trends Cell Biol. 9:454-459; Giet y Prigent, 1999, J. Cell Science 112:3591-3601; Nigg, 2001, Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2:21-32; Adams et al., 2001, Trends Cell Biol. 11:49-54 y Dutertre et al., 2002, Oncogene 21:6175-6183.
Aunque la sobreexpresión de las proteínas por las células cancerosas no siempre es indicadora de que la inhibición de la actividad proteica proporcione un efecto antitumoral, se ha confirmado en ensayos funcionales que por lo menos los siguientes tipos de células tumorales son sensibles a la inhibición de la actividad de la Aurora cinasa: próstata (DU145), cervicales (Hela), pancreáticas (Mia-Paca2, BX-PC3), leucemia histológica (U937), adenocarcinoma pulmonar, epidermoide pulmonar, carcinoma pulmonar microcítico, mama, carcinoma renal, MoIT3 (todas) y Molt4 (todas).
5
10
15
20
25
30
35
40
Basándose en la función demostrada de las Aurora cinasas en una variedad de cánceres, los ejemplos de “enfermedades y trastornos mediados por Aurora cinasas” comprenden, pero no se limitan a, melanoma, leucemia y cánceres de tumor sólido, tales como, por ejemplo, cánceres de colon, mama, estómago, ovario, cervicales, melanomas, renales, de próstata, linfomas, neuroblastomas, de páncreas y de vejiga.
“Cantidad terapéuticamente eficaz” se refiere a una cantidad de un compuesto suficiente para tratar un trastorno especificado, una enfermedad o uno o más de sus síntomas. En referencia a los trastornos tumorígenos proliferantes, una cantidad terapéuticamente eficaz comprende una cantidad suficiente para, entre otras cosas, dar lugar a que el tumor se reduzca o disminuya el ritmo de crecimiento del tumor.
En muchas situaciones, los tratamientos normales para el trastorno proliferante tumorígeno comportan la intervención quirúrgica para eliminar el o los tumores, ya sea sola o en combinación con farmacoterapia (quimio) y/o terapia de radiación. Tal como se utiliza en la presente memoria, una “cantidad terapéuticamente eficaz” de un compuesto se pretende que incluya una cantidad de un compuesto que impida la recidiva de tumores en pacientes a los que se les ha extirpado el o los tumor(es) quirúrgicamente o disminuya la frecuencia de recidiva del o de los tumores en dichos pacientes.
Por consiguiente, tal como se utilizan en la presente memoria, las cantidades de los compuestos que proporcionan utilidad terapéutica complementaria con otro tipo de terapia, tal como intervención quirúrgica y/o tratamiento con otros agentes antiproliferantes, incluyendo, por ejemplo, 5-fluorouracilo, vinorelbina, taxol, vinblastina, cisplatino, topotecán, etc., están incluidas en el significado de “cantidad terapéuticamente eficaz”.
“Cantidad profilácticamente eficaz” se refiere a una cantidad de un compuesto suficiente para impedir que un paciente desarrolle un trastorno o enfermedad especificado. Típicamente, los pacientes en los que se practica profilaxis no padecen el trastorno o enfermedad especificado, pero se reconoce que están en situación de riesgo elevado de desarrollar esta enfermedad o trastorno basándose en factores tales como, pero sin limitarse a, marcadores de diagnóstico y antecedentes familiares.
6.2 Compuestos enriquecidos en estereoisómeros y estereoisoméricamente puros
Se ha descubierto recientemente que determinados compuestos de fenil-2,4pirimidindiamina N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]hept-5-en-2-il)-N2-sustituidos, re-presentados por la fórmula estructural (I) a continuación, son potentes inhibidores de la actividad de la Aurora cinasa y de la proliferación de células tumorales en ensayos in vitro (véanse, p. ej., US 2006/0035891-A, US 2006/0166308-A, WO 2005/118544 y las solicitudes de prioridad citadas en estos documentos):
imagen1
Los expertos en la materia apreciarán que en la fórmula estructural (I), la estereoquímica en los carbonos 1, 2, 3 y 4 no esté especificada, de modo que los compuestos según la fórmula estructural (I) incluyan ocho diastereoisómeros, ilustrados por la fórmula estructural (Ia)-(Ih), a continuación:
imagen1
Los compuestos de fórmula estructural (I) comprenden también dos racematos cis, representados por las dos fórmulas estructurales (IIa) y (IIb), y dos racematos trans, representados por las fórmulas estructurales (IIIa) y (IIIb) a continuación:
imagen4
El racemato cis de fórmula estructural (IIa) puede denominarse racemato 2-exo-3-exo e incluye los diastereoisómeros (1R,2R,3S,4S) y (1S,2S,3R,4R) de fórmulas estructurales (Ia) y (Ib), respectivamente. El racemato cis de fórmula estructural (IIb) puede denominarse racemato 2endo-3-endo e incluye los diastereoisómeros (1R,2S,3R,4S) y (1S,2R,3S,4R) de fórmulas
estructurales (Ic) y (Id), respectivamente. Como se describe con más detalle en el apartado Ejemplos, para los compuestos en los que R5 es flúor, R1 es hidrógeno, R2 es 4-metilpiperazin-1ilo y R3 es metilo, estos dos racematos cis presentan actividad antiproliferante contra una variedad de diferentes líneas celulares tumorales en ensayos de antiproliferación in vitro. Sin embargo, este 5 racemato 2-exo-3-exo (racemato r1) es aproximadamente veinte veces más potente que el correspondiente racemato 2-endo-3-endo (racemato r2) en todas las líneas celulares probadas con ambos racematos. Además, se ha descubierto que el diastereoisómero (1R,2R,3S,4S) del racemato r1 es en gran parte responsable de la potencia del racemato r1. Cuando se probaban como estereoisómeros aislados, este diastereoisómero (1R,2R,3S,4S) (denominado 10 diastereoisómero “a”) presentaba generalmente unas IC50 de orden nanomolar, mientras que el diastereoisómero (1S,2S,3R,4R) (denominado enantiómero “b”) presentaba generalmente unas IC50 de orden micromolar frente a las mismas líneas celulares. Por lo tanto, en general, el diastereoisómero (1R,2R,3S,4S) de este compuesto es generalmente 1.000 veces más potente que su correspondiente enantiómero (1S,2S,3R,4R). También es aproximadamente 20 a 50 veces 15 más potente que el correspondiente racemato 2-endo-3-endo r2 en las líneas celulares probadas. El diastereoisómero (1R,2R,3S,4S) presentó de igual forma resultados superiores en comparación con su enantiómero (1S,2S,3R,4R) en los ensayos de inhibición basados en células frente a Aurora cinasa B. Basándose en la potencia observada de este diastereoisómero (1R,2R,3S,4S), es de esperar que la gama completa de diastereoisómeros (1R,2R,3S,4S) según la fórmula
20 estructural (Ia) presente potencias de igual forma superiores en comparación con sus correspondientes enantiómeros (1S,2S,3R,4R), racematos 2-exo-3-exo, racematos 2-endo-3-endo y otros diastereoisómeros correspondientes.
Por consiguiente, en la presente memoria se proporcionan compuestos que están enriquecidos en este diastereoisómero (1R,2R,3S,4S) particularmente potente. En una forma de 25 realización, dichos compuestos enriquecidos en diastereoisómeros incluyen los compuestos
según la fórmula estructural (I):
imagen1
que están enriquecidos en el correspondiente diastereoisómero de fórmula estructural (Ia):
imagen1
30 en la que: cada R1 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo inferior, -(CH2)n-OH, -ORa, -O(CH2)n-Ra, -O(CH2)n-Rb, -C(O)ORa, halo, -CF3, y -OCF3; cada R2 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo inferior, -ORa, -O(CH2)n-Ra, -O(CH2)n-Rb, NHC(O)Ra, halo, -CF3, -OCF3,
imagen5
5
10
15
20
25
30
35
40
45
imagen3
cada R3 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo inferior, -(CH2)n-OH, -ORa, -O(CH2)n-Ra, -O(CH2)n-Rb, halo, -CF3, -OCF3,
cada R4 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo inferior, arilalquilo, -ORa, -NRcRc, -C(O)Ra, -C(O)ORa y -C(O)NRcRc; R5 es hidrógeno, halo, fluoro, -CN, -NO2, -C(O)ORa o -CF3; cada n es independientemente un número entero de 1 a 3; cada Ra se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo inferior y cicloalquilo inferior; cada Rb se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por -ORa, -CF3, OCF3, -NRcRc, -C(O)Ra, -C(O)ORa -C(O)NRcRc y -C(O)NRaRd;
cada Rc se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno y alquilo inferior, o, alternativamente, dos sustituyentes Rc pueden considerarse junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos para formar un anillo saturado de 4 a 9 elementos que comprende opcionalmente 1 a 2 grupos heteroatómicos adicionales seleccionados de entre O, NRa, NRa-C(O)Ra, NRa-C(O)ORa y NRa-C(O)NRa; y
cada Rd es independientemente monohidroxialquilo inferior o dihidroxialquilo inferior.
En otra forma de realización, dichos compuestos enriquecidos en estereoisómeros comprenden racematos cis 2-exo-3-exo según la fórmula estructural (IIa), en la que R1, R2, R3, R4 y R5 son tal como se definieron anteriormente para la fórmula estructural (I), que están enriquecidos en el diastereoisómero de fórmula estructural (Ia), supra.
Tal como se utiliza en la presente memoria, un compuesto esta “enriquecido” en un diasteroisómero determinado cuando este diastereoisómero está presente en exceso sobre cualquier otro diastereoisómero presente en el compuesto. El porcentaje existente del diastereoisómero determinado que comprende el compuesto dependerá del número de los demás diastereoisómeros presentes. Como ejemplo específico, una mezcla racémica está “enriquecida” en un enantiómero especificado cuando este enantiómero constituye más del 50% de la muestra. Independientemente del número de diastereoisómeros presentes, un compuesto que está enriquecido en un diastereoisómero determinado comprenderá típicamente por lo menos aproximadamente el 60%, 70%, 80%, 90%, o aún más, de los diastereoisómeros especificados. La cantidad de enriquecimiento de un determinado diastereoisómero puede confirmarse utilizando métodos analíticos convencionales utilizados rutinariamente por los expertos en la materia, como se expondrá con más detalle a continuación.
En otra forma de realización, los compuestos enriquecidos en estereoisómeros comprenden compuestos según la fórmula estructural (Ia), supra, en la que R1, R2, R3, R4 y R5 son tal como se definieron anteriormente para la fórmula estructural (I), que están sustancialmente exentos del enantiómero correspondiente y/o de cualquier otro diastereoisómero correspondiente. Por “sustancialmente exento de” se entiende que el compuesto comprende menos de aproximadamente el 10% de los diastereoisómeros y/o enantiómeros no deseados establecido utilizando métodos analíticos convencionales utilizados rutinariamente por los expertos en la materia (expuestos con más detalle a continuación). En algunas formas de realización, la cantidad de estereoisómeros no deseados puede ser inferior al 10%, por ejemplo, el 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% o aún menos. Los compuestos enriquecidos en estereoisómeros que contienen aproximadamente el 95% o más del estereoisómero deseado se denominan en la presente memoria estereoisómeros “sustancialmente puros”. Los compuestos enriquecidos en estereoisómeros que contienen aproximadamente el 99% o más del estereoisómero deseado se denominan en la presente memoria estereoisómeros “puros”. La pureza de cualquier compuesto enriquecido en estereoisómeros (% de pureza diastereoisomérica) puede confirmarse utilizando los métodos analíticos convencionales, como se describirá con más detalle a continuación.
En algunas formas de realización de los diversos compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria, R1 es hidrógeno; R2 es
de realización de los diversos compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la 5 presente memoria, R3 es hidrógeno, metilo, metoxi, trifluorometilo o cloro. En otras formas de realización todavía, R4 es metilo, -C(O)CH3, -C(O)OCH3 o -C(O)OCH2CH3.
En otras formas de realización todavía de los diversos compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria, Rimagen1 1 es hidrógeno, R2 es distinto de
imagen1 y R3 es
En otras formas de 10 realización todavía, R2 es hidrógeno, metilo, metoxi, trifluorometilo o cloro. Preferentemente, R4 es metilo, -C(O)CH3, -C(O)OCH3 o -C(O)CH2CH3.
En otras formas de realización todavía de los diversos compuestos enriquecidos en imagen1
estereoisómeros descritos en la presente memoria, Rimagen1 2 es distinto de y R3
es distinto de . En otras formas de realización todavía, R1 y
15 R2 son cada uno hidrógeno y R3 es -OCH2NHRa. En otras formas de realización, R1, R2 y R3 cada uno, independientemente uno del otro se seleccionan de entre el grupo constituido por hidrógeno, metilo, metoxi, trifluorometilo o cloro, con la condición de que por lo menos dos de entre R1, R2 y R3 sean distintos de hidrógeno.
selecciona de entre el grupo constituido por hidrógeno, metilo, cloro, -CF3,
metilo, -CORa o –CO(O)Ra, donde Ra es metilo o etilo.
, R4 es -CORa, donde Ra es metilo; y R3 es hidrógeno. En otras formas de realización, R2 es imagen1 , R4imagen1 es –CO(O)Ra, donde Ra es etilo; y R3 es hidrógeno. En otra forma de realización todavía, R2 es y R3 es hidrógeno.
imagen6
imagen7
imagen8
imagen9
Todavía en otra forma de realización, R2 es hidrógeno; R3 es imagen1 o imagen1 imagen1 y R4
es metilo, -CORa o –CO(O)Ra, donde Ra es metilo o etilo. Preferentemente, R2 es , R4 5 es metilo y R3 se selecciona de entre el grupo constituido por hidrógeno, metilo, cloro y –CF3. Más preferentemente, R3 es metilo.
Todavía en otras formas de realización de los compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria, R5 es flúor.
Todavía en otras formas de realización, el compuesto enriquecido en estereoisómeros es
10 sustancialmente puro en estereoisómeros o puro en estereoisómeros (1R,2R,3S,4S)-N4-(3aminocarbonilbiciclo[2.2.1]hept-5-en-2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]-2,4pirimidindiamina.
Las formas de realización ejemplares adicionales de los compuestos según la fórmula estructural (I) que pueden estar enriquecidos en estereoisómeros en el diastereoisómero
15 correspondiente de fórmula estructural (Ia), supra, sustancialmente exentos de cualquiera de sus enantiómeros y/o diastereoisómeros, y/o sustancialmente puros o puros en el diastereoisómero de la fórmula estructural (Ia), supra, se ilustran en la TABLA I, a continuación:
imagen10
imagen11
Cuando se proponen diastereoisómeros específicos y/o mezclas racémicas de los compuestos específicos descritos en la presente memoria, tales como los compuestos descritos 5 en la TABLA 1, el número de compuesto va seguido de una letra que especifica el
diastereoisómero específico o la mezcla racémica de la forma siguiente:
a = (1R,2R,3S,4S) b = (1S,2S,3R,4R) c = (1R,2S,3R,4S)
10 d = (1S,2R,3S,4R) e = (1R,2R,3R,4S) f = (1S,2S,3S,4R) g = (1R,2S,3S,4S) h = (1S,2R,3R,4R)
15 r1 = racemato cis 2-exo-3-exo
r2 = racemato cis 2-endo-3-endo r3 = racemato trans 2-exo-3-endo r4 = racemato trans 2-endo-3-exo De este modo, como ejemplo específico, el diastereoisómero (1R,2R,3S,4S) del
20 compuesto 60 se denomina 60a. Los expertos en la materia apreciarán que los compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria pueden incluir grupos funcionales que pueden enmascararse con progrupos para crear profármacos. Dichos profármacos normalmente son, pero no necesariamente, farmacológicamente inactivos hasta que se convierten en su forma
farmacéutica activa. Por ejemplo, los grupos éster experimentan generalmente hidrólisis catalizada por ácido para producir el ácido carboxílico precursor cuando se exponen a las condiciones ácidas del estómago, o hidrólisis catalizada por base cuando se exponen a las condiciones básicas del intestino o de la sangre. Por este motivo, cuando se administran a un paciente por vía oral, los compuestos enriquecidos en estereoisómeros que incluyen restos ésteres pueden considerarse profármacos de su correspondiente ácido carboxílico, independientemente de si la forma éster es farmacológicamente activa.
En la presente invención se describen los profármacos de los diversos compuestos enriquecidos en estereoisómeros. En dichos profármacos, cualquier resto funcional disponible puede estar enmascarado con un progrupo para proporcionar un profármaco. Los grupos funcionales de los compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria que pueden estar enmascarados con progrupos para la inclusión en un prorresto incluyen, pero no se limitan a, aminas (primarias y secundarias), hidroxilos, sulfanilos (tioles), carboxilos, etc. Una infinidad de progrupos adecuados para enmascarar dichos grupos funcionales para proporcionar prorrestos que pueden escindirse en las condiciones de utilización deseadas son conocidos en la técnica. Todos estos progrupos, solos o combinados, pueden estar incluidos en los profármacos enriquecidos con estereoisómeros.
En los profármacos enriquecidos con estereoisómeros se incluyen los compuestos según la fórmula estructural (I), supra, en la que Ra, Rb y Rc pueden ser, además de sus alternativas definidas anteriormente, progrupos, que están enriquecidos en el correspondiente diastereoisómero de fórmula estructural (Ia), supra.
Los expertos en la materia apreciarán que muchos de los compuestos y profármacos descritos en la presente memoria, así como las diversas especies de compuestos descritos de manera específica y/o ilustrados en la presente memoria, pueden presentar el fenómeno de la tautomería y de la isomería conformacional. Por ejemplo, los compuestos y los profármacos pueden existir en varias formas tautómeras, incluyendo la forma enol, la forma ceto y mezclas de estas. Ya que las diversas denominaciones de compuestos, fórmulas y dibujos de los compuestos en la memoria y las reivindicaciones pueden representar únicamente una de las posibles formas tautómeras o conformacionales, debería entenderse que la invención abarca algunos tautómeros
o isómeros conformacionales, de los compuestos que presentan una o más de las utilidades descritas en la presente memoria, así como mezclas de estas diversas formas isoméricas diferentes. En los casos de rotación limitada alrededor de la estructura del núcleo de 2,4pirimidindiamina, también son posibles atropisómeros y están también específicamente incluidos en los compuestos de la invención.
Dependiendo de la naturaleza de los diversos sustituyentes, los compuestos y profármacos enriquecidos en estereoisómeros pueden estar en forma de sales. Dichas sales comprenden las sales adecuadas para utilizaciones farmacéuticas (“sales farmacéuticamente aceptables”), sales adecuadas para utilizaciones veterinarias, etc. Dichas sales pueden proceder de ácidos o bases, como es bien conocido en la técnica.
En algunas formas de realización, la sal es una sal farmacéuticamente aceptable. Generalmente, las sales farmacéuticamente aceptables son aquellas que conservan una o más de las actividades farmacológicas deseadas del compuesto precursor y que son adecuadas para su administración a seres humanos. Las sales farmacéuticamente aceptables comprenden las sales de adición de ácido formadas por ácidos inorgánicos o ácidos orgánicos. Los ácidos inorgánicos adecuados para formar sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables comprenden, a título de ejemplo no limitativo, ácidos de hidrohaluro (p. ej., ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, yodhídrico, etc.), ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares. Los ácidos orgánicos adecuados para formar sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables comprenden, a título de ejemplo no limitativo, ácido acético, ácido trifuoroacético, ácido propiónico, ácido hexanoico, ácido ciclopentanopropiónico, ácido glicólico, ácido oxálico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido palmítico, ácido benzoico, ácido 3-(4-hidroxibenzoil) benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácidos alquilsulfónicos (p. ej., ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido 1,2-etandisulfónico, ácido 2-hidroxietansulfónico, etc.), ácidos arilsulfónicos
(p. ej., ácido bencensulfónico, ácido 4-clorobencensulfónico, ácido 2-naftalensulfónico, ácido 4-toluensulfónico, ácido alcanforsulfónico, etc.), ácido 4-metilbiciclo[2.2.2]-oct-2-en-1-carboxílico, ácido glucoheptónico, ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetilacético, ácido butilacético terciario, ácido laurilsulfúrico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido hidroxinaftoico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido mucónico y similares.
Las sales farmacéuticamente aceptables comprenden también las sales formadas cuando un protón de un ácido presente en el compuesto precursor se sustituye por un ion metálico (p. ej., un ion de un metal alcalino, un ion de un metal alcalinotérreo o un ion de aluminio) o se coordina con una base orgánica (p. ej., etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, N-metilglucamina, morfolina, piperidina, dimetilamina, dietilamina, etc.).
Los compuestos y profármacos enriquecidos en estereoisómeros, así como las sales de estos, pueden estar también en forma de hidratos, solvatos y/o N-óxidos, como es bien conocido en la técnica.
El enriquecimiento estereoisomérico y/o la pureza de los compuestos y profármacos descritos en la presente memoria pueden demostrarse por métodos analíticos convencionales conocidos por los expertos en la materia. Por ejemplo, la utilización de reactivos de desplazamiento de RMN quiral, análisis cromatográfico de gases que utiliza columnas quirales, el análisis cromatográfico de líquidos a alta presión que utiliza columnas quirales, la formación de derivados diastereoméricos mediante reacción con reactivos quirales y el análisis convencional pueden utilizarse para demostrar el enriquecimiento estereoisomérico y/o la pureza de un estereoisómero específico. Como alternativa, puede utilizarse la síntesis que utiliza materiales de partida de enriquecimiento estereoisomérico y/o pureza conocidos para demostrar el enriquecimiento estereoisomérico y/o la pureza de los compuestos descritos en la presente memoria. Otros métodos analíticos para demostrar la homogeneidad estereoisomérica están dentro del ámbito de los expertos en la materia.
6.3 Métodos de síntesis
Los compuestos y profármacos enriquecidos en estereoisómeros pueden sintetizarse por una variedad de vías de síntesis diferentes utilizando materiales de partida disponibles en el mercado y/o materiales de partida preparados mediante métodos de síntesis convencionales. Una variedad de vías de síntesis a título de ejemplo que pueden utilizarse para sintetizar los compuestos y profármacos enriquecidos en estereoisómeros se describen en los documentos WO 03/063794 y US 2004/0029902.
A título de ilustración, un ejemplo de esquema sintético que puede utilizarse para sintetizar la gama completa de compuestos descritos en la presente memoria se ilustra en el Esquema (I) a continuación:
5
10
15
20
25
30
Esquema (I)
imagen12
En el Esquema (I), R1, R2, R3 y R5 son tal como se definieron anteriormente para la fórmula estructural (I), supra, X es un halógeno (p. ej., F, Cl, Br o I), y cada G, independientemente del otro, se selecciona de entre O y S. Debe observarse que un “*” en la aminocarboxamida 6 indica que el estereocentro concreto no está especificado. Por consiguiente, los expertos en la materia apreciarán que el Esquema (I) puede utilizarse para preparar mezclas diastereoisómeras racémicas, mezclas de compuestos enriquecidos en diastereoisómeros según la fórmula estructural (I), así como los estereoisómeros de los compuestos de fórmula estructural (I) que están exentos sustancialmente de otros diastereoisómeros especificados.
Haciendo referencia al Esquema (I), el uracilo o tiouracilo 2 está dihalogenado en las posiciones 2 y 4 utilizando el agente halogenante habitual POX3 (u otros agentes halogenantes) en condiciones normales para proporcionar 2,4-bis-halopirimidina 4. El haluro en la posición C4 es más reactivo con los nucleófilos que el haluro en la posición C2 en pirimidina 4. Esta reactividad diferencial puede explotarse para sintetizar los compuestos y profármacos descritos en la presente memoria haciendo reaccionar en primer lugar 2,4-bis-halopirimidina 4 con un equivalente de 2aminobiciclo[2.2.1]hept-5-en-3-carboxamida 6, para obtener 8, seguido de reacción con anilina 10 para obtener compuestos según la fórmula estructural (I). Los expertos en la materia apreciarán que la configuración estereoisomérica y la pureza óptica de la aminocarboxamida 6 determinen, en muchas circunstancias, la configuración estereoisomérica y la pureza óptica de los compuestos de la fórmula estructural (I).
En la mayoría de las situaciones, el haluro C4 es más reactivo con los nucleófilos, como se ilustra en el Esquema. Sin embargo, como reconocen los expertos en la materia, la identidad del sustituyente R5 puede alterar esta reactividad. Por ejemplo, cuando R5 es trifluorometilo, se obtiene una mezcla 50:50 de 4N-pirimidinamina-4-sustituida 8 y la correspondiente 2Npirimidinamina-2-sustituida. Independientemente de la identidad del sustituyente R5, la regioselectividad de la reacción puede controlarse ajustando el disolvente y otras condiciones de la síntesis (tal como la temperatura), como es bien conocido en la técnica.
Las reacciones descritas en el Esquema (I) pueden proceder más rápidamente cuando las mezclas de reacción se calientan mediante microondas. Cuando se calientan de este modo, pueden utilizarse las siguientes condiciones: se calienta a 175 ºC en etanol durante 5 a 20 min en un reactor Smith (Personal Chemistry, Biotage AB, Suecia) en un tubo sellado (a 20 bar de presión).
Los materiales de partida uracilo o tiouracilo 2 pueden adquirirse de los proveedores comerciales o prepararse utilizando las técnicas habituales de la química orgánica. Los uracilos y tiouracilos disponibles en el mercado que pueden utilizarse como materiales de partida en el Esquema (I) comprenden, a título de ejemplo no limitativo, uracilo (Aldrich nº 13.078-8; Registro CAS 66-22-8); 2-tiouracilo (Aldrich nº 11.558-4; Registro CAS 141-90-2); 2,4-ditiouracilo (Aldrich nº 15.846-1; Registro CAS 2001-93-6); 5-bromouracilo (Aldrich nº 85.247-3; Registro CAS 51-20-7); 5-fluorouracilo (Aldrich nº 85.847-1; Registro CAS 51-21-8); 5-yodouracilo (Aldrich nº 85.785-8; Registro CAS 696-07-1); 5-nitrouracilo (Aldrich nº 85.276-7; Registro CAS 611-08-5); 5(trifluorometil)-uracilo (Aldrich nº 22.327-1; Registro CAS 54-20-6). Los uracilos y/o tiouracilos 5sustituidos adicionales están disponibles de General Intermediates of Canada, Inc., Edmonton, CA (http://www.generalintermediates.com) y/o en Interchim, Cedex, Francia (http://www.interchim.com) o pueden prepararse utilizando las técnicas habituales. A continuación se proporcionan numerosas referencias en libros de texto que dan a conocer métodos de síntesis adecuados.
Las anilinas 10 pueden adquirirse de proveedores comerciales o, como alternativa, pueden sintetizarse utilizando las técnicas habituales. Por ejemplo, pueden sintetizarse anilinas adecuadas a partir de precursores nitro utilizando la química habitual. En el apartado Ejemplos se proporcionan ejemplos de reacciones específicas. Véase también Vogel, 1989, Practical Organic Chemistry, Addison Wesley Longman, Ltd. y John Wiley & Sons, Inc.
Los expertos en la materia reconocerán que en algunos casos las anilinas 10 pueden incluir grupos funcionales que requieren protección durante la síntesis. La identidad exacta de cualquier o cualesquiera grupos protectores utilizados dependerá de la identidad del grupo funcional que esté protegido y será evidente para los expertos en la materia. Las directrices para la selección de los grupos protectores adecuados, así como estrategias de síntesis para su acoplamiento y eliminación pueden encontrarse, por ejemplo, en Greene y Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3ª edición, John Wiley & Sons, Inc., Nueva York (1999) y en las referencias citadas en este documento (en lo sucesivo “Greene y Wuts”).
Profármacos como los descritos en la presente memoria pueden prepararse mediante la modificación rutinaria de los métodos descritos anteriormente.
Tal como apreciarán los expertos en la materia, el diastereoisómero deseado (1R,2R,3S,4S) correspondiente a la fórmula estructural (Ia), supra, puede aislarse por separación quiral u otras técnicas habituales. Los métodos para resolver quiralmente diastereoisómeros específicos se describen con más detalle en el apartado Ejemplos.
Los compuestos enriquecidos en estereoisómeros y/o sustancialmente puros y/o los diastereoisómeros puros pueden sintetizarse también a partir de los materiales de partida 2-amino-3-carboxamida 6 con la estereoquímica especificada o con la ayuda de auxiliares quirales.
En una forma de realización ejemplar, ilustrada en el Esquema (II) a continuación, el diastereoisómero deseado se resuelve químicamente utilizando (R)-metil-p-metoxibencilamina 18 como auxiliar quiral.
Esquema (II)
imagen13
En el esquema (II), la β-lactama 2-exo-3-exo racémica 14r1 (preparada como se describe en Stajar et al., 1984, Tetrahedron 40(12):2385) está protegida con un grupo Boc, para proporcionar la correspondiente β-lactama 16r1 racémica protegida con Boc. El racemato 16r1 protegido con Boc se hace reaccionar a continuación con (R)-metil-para-metoxibencilamina 18, que proporciona una mezcla de diastereoisómeros 20a y 20b. Esta mezcla diastereomérica se trata con un ácido tal como el TFA para escindir el grupo Boc, que proporciona una mezcla de diastereoisómeros 22a y 22b, que pueden hacerse reaccionar con 2,4-dihalopirimidina 4 para proporcionar una mezcla racémica de compuestos 24a y 24b. En esta etapa, los compuestos 24a y 24b pueden separarse por cristalización y hacerlos reaccionar con anilina 10 para proporcionar los diastereoisómeros aislados 25a y 25b. Los auxiliares quirales procedentes de los diastereoisómeros aislados 25a y 25b pueden escindirse a continuación para dar diastereoisómeros aislados según las fórmulas estructurales (Ia) y (Ib), respectivamente.
En los compuestos 25a y 25b en los que R1 es hidrógeno, R2 es 4-metil-piperazin-1-ilo, R3 es metilo y R5 es flúor, la escisión del auxiliar quiral resulta difícil. Para estos y otros compuestos en los que dicha escisión resulta difícil, el auxiliar quiral puede escindirse de los compuestos 24a y 24b y los compuestos aislados resultantes pueden reaccionar con anilina 10 para proporcionar diastereoisómeros aislados según las fórmulas estructurales (Ia) y (Ib). Los ejemplos específicos de dichas reacciones se describen en el apartado Ejemplos.
Los compuestos que están enriquecidos en estereoisómeros, sustancialmente estereoisoméricamente puros y/o estereoisoméricamente puros en diastereoisómeros especificados pueden sintetizarse también a partir de β-lactamas enriquecidas en estereoisómeros, sustancialmente estereoisoméricamente puras y/o estereoisomérica-mente puras. Dichas β-lactamas enriquecidas en estereoisómeros y/o (sustancialmente) estereoisoméricamente puras pueden resolverse enzimáticamente y aislarse. En una forma de realización ejemplar, las β-lactamas (sustancialmente) estereoisoméricamente puras pueden resolverse y aislarse a partir de una mezcla racémica de β-lactama 2-exo-3-exo 14r1 utilizando una lipolasa inmovilizada (disponible de Sigma Chemical Co., nº de catálogo L4777) descrita en Eniko et al., 2004, Tetrahedron Asymmetry 15:573-575. En otra forma de realización ejemplar, las β-lactamas (sustancialmente) estereoisoméricamente puras pueden resolverse y aislarse a partir de β-lactama racémica 2-exo-3-exo protegida con Boc 16r1 utilizando quirazima L-2-tipo B inmovilizada, unida con resina, c.f. enzima (Candida antarctica Tipo B, c-f, disponible de Biocatalytics, Inc., Pasadena, CA) tal como se describe en los documentos US 2006/0035891-A, WO 2005/118544 y US 2006/0166308-A. Un ejemplo específico de la utilización de esta enzima para resolver los diastereoisómeros especificados de β-lactamas se describe en el apartado Ejemplos, así como también un método de síntesis de β-lactama 2-exo-3-exo racémica 16r1.
En los Esquemas (III) y (IV), a continuación, se ilustran ejemplos de síntesis de diastereoisómeros especificados según la fórmula estructural (Ia) que utilizan reacciones enzimáticas. En el apartado Ejemplos se describe un ejemplo específico de la utilización de la enzima Novozima 435 tal como se ilustra en el Esquema (IV), la cual, como la enzima Quirazima descrita anteriormente e ilustrada en el Esquema (III), puede utilizarse para resolver enantiómeros a partir de β-lactamas racémicas.
Esquema (III)
Quirazima L-2, tipo B, c.f.
imagen14
5
10
15
20
25
30
35
Esquema (IV)
imagen15
6.4 Actividad de los compuestos antiproliferantes
Los compuestos activos enriquecidos en estereoisómeros inhiben de manera típica la proliferación de las células deseadas, tales como las células tumorales con una CI50 comprendida en el intervalo de aproximadamente 20 μM o menos medida en un ensayo de proliferación celular normalizado in vitro. Desde luego, los expertos en la materia apreciarán que los compuestos que presentan unas CI50 inferiores, por ejemplo del orden de 10 μM, 1 μM, 100 nM, 10 nM, 1 nM, o aún inferiores, pueden ser particularmente útiles en aplicaciones terapéuticas. La actividad antiproliferante puede ser citostática o citotóxica. En los casos en los que se desea actividad antiproliferante específica para un tipo celular determinado, puede analizarse la actividad del compuesto con el tipo celular deseado e identificar por contraste una carencia de actividad frente a otros tipos celulares. El grado deseado de “inactividad” en dichas identificaciones por contraste o la relación de actividad frente a inactividad deseada puede variar en diferentes situaciones, y puede ser seleccionada por el usuario.
Los compuestos activos también inhiben de manera típica una actividad de una Aurora cinasa, con una CI50 comprendida en el intervalo de aproximadamente 20 μM o menos, típicamente en el intervalo de aproximadamente 10 μM, 1 μM, 100 nM, 10 mM, 1 mM, o aún inferiores. La CI50 frente a una Aurora cinasa puede determinarse en un ensayo normalizado in vitro con una Aurora cinasa aislada o en una matriz celular funcional. Un ensayo de una enzima acoplada adecuado que puede utilizarse para determinar el grado de actividad de Aurora cinasa se describe en Fox et al., 1998, Protein Sci., 7:2249-2255. La secuencia LRRASLG del péptido kemptida (Bochern Ltd., UK) puede utilizarse como sustrato para Aurora cinasa-A, Aurora cinasa-B y/o Aurora cinasa-C, y las reacciones pueden realizarse a 30 ºC en una solución que contiene HEPES 100 mM (pH 7,5), MgCl2 10 mM, NaCl 25 mM y DTT 1 mM. Los valores de CI50 pueden determinarse utilizando regresión no lineal informatizada con un programa informático disponible en el mercado (p. ej., Prism 3.0, GraphPed Software, San Diego, CA). Un ensayo funcional adecuado basado en células se describe en el apartado Ejemplos.
6.5 Utilizaciones de los compuestos antiproliferantes
Los compuestos activos enriquecidos en estereoisómeros, incluyendo las diversas formas de sales, hidratos y/o N-óxidos de estos, pueden utilizarse para inhibir Aurora cinasas, procesos mediados por Aurora cinasas y/o la proliferación celular en varios contextos. Según algunas formas de realización, una célula o población de células se pone en contacto con una cantidad de dicho compuesto eficaz para inhibir una actividad de una Aurora cinasa, un proceso mediado por Aurora cinasa y/o la proliferación de una célula o población de células. Cuando se utiliza para inhibir la proliferación celular, el compuesto puede actuar citotóxicamente para matar la célula o citostáticamente para inhibir la proliferación sin matar la célula.
Los métodos pueden ponerse en práctica in vivo como metodología terapéutica destinada al tratamiento o prevención de las enfermedades o trastornos mediados por Aurora cinasa y en particular de los trastornos proliferantes. Por lo tanto, en una forma de realización específica, los compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria (así como las diversas formas descritas en la presente memoria) pueden utilizarse en un método para tratar o prevenir trastornos proliferantes en pacientes animales, incluyendo los seres humanos. El método comprende generalmente la administración a un individuo de una cantidad eficaz de un compuesto enriquecido en estereoisómeros, o de una sal, hidrato o N-óxido de este, para tratar o prevenir el trastorno. En una forma de realización, el individuo es un mamífero, incluyendo, pero sin limitarse a, bovino, equino, felino, canino, roedor o primate. En otra forma de realización, el individuo es un ser humano.
Con los compuestos descritos en la presente memoria pueden tratarse o prevenirse una variedad de trastornos celulares proliferantes. En algunas formas de realización, los compuestos se utilizan para tratar varios cánceres en pacientes afectados. Los cánceres se clasifican tradicionalmente basándose en el tipo de tejido y de célula en los que se originan las células cancerosas. Se consideran carcinomas los cánceres que se originan en células epiteliales, mientras que se consideran sarcomas los cánceres que se originan en tejidos conectivos o en los músculos. Otros tipos de cáncer comprenden las leucemias, que se originan en las células hematopoyéticas y los cánceres de las células del sistema nervioso, que se originan en el tejido nervioso. Los adenomas, tumores no invasores, se consideran tumores epiteliales benignos con organización glandular, mientras que los condomas son tumores benignos que se originan en los cartílagos. En la presente invención, los compuestos descritos pueden utilizarse para tratar trastornos proliferantes comprendidos por carcinomas, sarcomas, leucemias, tumores de células nerviosas y tumores no invasores.
En una forma de realización específica, los compuestos se utilizan para tratar tumores sólidos que se originan en varios tipos de tejido, incluyendo, a título no limitativo, cánceres óseos, de mama, del sistema respiratorio, del cerebro, de los órganos reproductores, del aparato digestivo, del aparato urinario, de vejiga, de ojos, de hígado, de piel, de cabeza, de cuello, de tiroides, de paratiroides, de riñón, de páncreas, de sangre, de ovario, de colon, de células reproductoras/próstata y las formas metastásicas de estos.
Los trastornos proliferantes específicos comprenden los siguientes: a) los trastornos proliferantes de mama comprenden, pero no se limitan a, carcinoma canalicular invasor, carcinoma lobular invasor, carcinoma canalicular, carcinoma lobular in situ y cáncer metastásico de mama; b) los trastornos proliferantes de piel comprenden, pero no se limitan a, carcinoma basocelular, carcinoma espino-celular, melanoma maligno y sarcoma de Karposi; c) los trastornos proliferantes del sistema respiratorio comprenden, pero no se limitan a, carcinoma pulmonar microcítico y amicrocítico, edema bronquial, blastoma pleuropulmonar y mesotelioma maligno; d) los trastornos proliferantes del cerebro comprenden, pero no se limitan a, glioma de las células madre cerebrales e hipotalámico, astrocitoma cerebelar y cerebral, bulboblastoma, tumores ependimarios, tumores de oligodendroglia, meningiomas y tumores neuroectodérmicos y pineales; e) los trastornos proliferantes de los órganos reproductores masculinos comprenden, pero no se limitan a, cáncer de próstata, cáncer de testículos y cáncer de pene; f) los trastornos proliferantes de los órganos reproductores femeninos comprenden, pero no se limitan a, cáncer de útero (de endometrio), cervical, de ovario, vaginal, cánceres de vulva, sarcoma uterino, tumor de las células reproductoras del ovario; g) los trastornos proliferantes del aparato digestivo comprenden, pero no se limitan a, cánceres de ano, de colon, colorrectal, de esófago, de vesícula biliar, de estómago (gástrico), cáncer pancreático, cáncer pancreático de las células de los islotes, rectal, de intestino delgado y de glándulas salivales; h) los trastornos proliferantes de hígado comprenden, pero no se limitan a, carcinoma hepatocelular, colangiocarcinoma, colangiocarcinoma hepatocelular mixto y cáncer de hígado primario; i) los trastornos proliferantes oculares comprenden, pero no se limitan a, melanoma intraocular, retinoblastoma y rabdomiosarcoma; j) los trastornos proliferantes y cánceres de cabeza comprenden, pero no se limitan a, cánceres de laringe, de hipofaringe, de nasofaringe, de bucofaringe y cáncer de labios y bucal, cáncer epidermoide de cuello, cáncer metastásico de seno paranasal; k) los trastornos proliferantes de linfomas comprenden, pero no se limitan a, varios linfomas de linfocitos T y linfocitos B, linfoma no hodgkiniano, linfoma de linfocitos T cutáneos, enfermedad de Hodgkins y linfoma del sistema nervioso central; l) las leucemias comprenden, pero no se limitan a, leucemia mieloide aguda, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielógena crónica y tricoleucemia; m) los trastornos proliferantes del tiroides comprenden el cáncer de tiroides, timoma y timoma maligno; n) los sarcomas comprenden, pero no se limitan a, sarcoma de tejido blando, osteosarcoma, histiocitoma fibroso maligno, linfosarcoma y rabdomiosarcoma.
Debe entenderse que las descripciones de los trastornos proliferantes no se limitan a las afecciones descritas anteriormente, sino que abarcan otros trastornos caracterizados por el crecimiento incontrolado y el cáncer. Debe entenderse además que los trastornos proliferantes comprenden varias formas metastásicas de los tipos de tumor y de cáncer descritos en la presente memoria. Puede probarse la eficacia de los compuestos de la presente invención frente a los trastornos descritos en la presente memoria, y puede establecerse un régimen terapéuticamente eficaz. La eficacia, tal como se describe con más detalle a continuación, comprende la reducción o remisión del tumor, la disminución del ritmo de proliferación celular o un efecto citostático o citotóxico en el crecimiento celular.
6.6 Terapias de combinación
Los compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria pueden utilizarse solos, combinados, adjuntos a, o junto con otras terapias antiproliferantes demostradas. Por lo tanto, los compuestos pueden utilizarse en las terapias tradicionales contra el cáncer, tales como la radiación de ionización en forma de rayos γ y rayos X, administrarse externa
o internamente por implantación de compuestos radioactivos, así como usarse en el seguimiento de la eliminación quirúrgica de tumores.
Los compuestos pueden utilizarse con otros agentes quimioterapéuticos útiles contra el trastorno o afección en tratamiento. Estos compuestos pueden administrarse simultánea o sucesivamente, por la misma o diferentes vías de administración.
En algunas formas de realización, los presentes compuestos se utilizan con otros agentes anticancerosos o citotóxicos. Varias clases de compuestos anticancerosos y antineoplásicos comprenden, pero no se limitan a, agentes alquilantes, antimetabolitos, alquiloides de las vincas, taxanos, antibióticos, enzimas, citocinas, complejos de coordinación del platino, ureas sustituidas, inhibidores de tirosina cinasa, hormonas y antagonistas hormonales. Algunos ejemplos de agentes alquilantes comprenden, a título de ejemplo no limitativo, meclorotamina, ciclofosfamida, ifosfamida, melfalán, clorambucilo, etileniminas, metilmelaminas, sulfonatos de alquilo (p. ej., busulfán) y carmustina. Algunos ejemplos de antimetabolitos comprenden, a título de ejemplo no limitativo, metotrexato análogo del ácido fólico; fluorouracilo análogo de pirimidina, arabinósido de citosina; mercaptopurina, tioguanina y azatioprina análogas de purina. Algunos ejemplos de alquiloides de las vincas comprenden, a título de ejemplo no limitativo, vinblastina, vincristina, paclitaxel y colchicina. Algunos ejemplos de antibióticos comprenden, a título de ejemplo no limitativo, actinomicina D, daunorrubicina y bleomicina. Un ejemplo de enzima eficaz como agente antineoplásico comprende la L-asparaginasa. Algunos ejemplos de compuestos de coordinación comprenden, a título de ejemplo no limitativo, cisplatino y carboplatino. Algunos ejemplos de hormonas y de compuestos asociados a hormonas comprenden, a título de ejemplo no limitativo, los adrenocorticosteroides prednisona y dexametasona; amino glutetimida, formestano y anastrozol inhibidores de aromatasa; los compuestos de progestina caproato de hidroxiprogesterona y medroxiprogesterona; y el compuesto antiestrógeno tamoxifeno.
Estos y otros compuestos anticancerosos útiles están descritos en el Merck Index, 13ª ed. (O’Neil M.J. et al., ed.) Merck Publishing Group (2001) y en The Pharmacological Basis of Therapeutics de Goodman y Gilman, 10ª edición, Hardman J.G. y Limbird, L.E. eds., págs. 13811287, McGraw Hill (1996).
Los compuestos antiproliferantes adicionales útiles en combinación con los compuestos enriquecidos en estereoisómeros descritos en la presente memoria comprenden, a título de ejemplo no limitativo, anticuerpos dirigidos contra receptores del factor de crecimiento (p. ej., antiHer2); anticuerpos para activar linfocitos T (p. ej., anticuerpos anti-CTLA-4); y citocinas tales como el interferón-α y el interferón-γ, interleucina-2 y GM-CSF.
6.7 Formulaciones y administración
Cuando se utilizan para tratar o prevenir dichas enfermedades, los compuestos activos pueden administrarse solos, como mezclas de uno o más compuestos activos o mezclados o combinados con otros agentes útiles para tratar dichas enfermedades y/o los síntomas asociados con dichas enfermedades. Los compuestos activos también pueden administrarse mezclados o combinados con agentes útiles para tratar otros trastornos o enfermedades, tales como esteroides y estabilizantes de membranas. Los compuestos activos pueden administrarse solos o como composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto activo.
Las composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos activos pueden prepararse mediante los procesos de mezclado, disolución, granulado, molienda para la preparación de grageas, emulsificación, encapsulación, oclusión o liofilización. Las composiciones pueden formularse de manera convencional utilizando uno o más vehículos, diluyentes, excipientes o auxiliares fisiológicamente aceptables que facilitan el procesado de los compuestos activos en forma de preparaciones que pueden utilizarse farmacéuticamente (véase Remington’s Pharmaceutical Sciences, 15ª ed., Hoover, J.E. ed., Mack Publishing Co. (2003)).
El compuesto activo puede formularse en las composiciones farmacéuticas solo, o en forma de hidrato, solvato, N-óxido o sal farmacéuticamente aceptable como se describió anteriormente. Dichas sales, típicamente, son más solubles en soluciones acuosas que los correspondientes ácidos y bases libres, pero también pueden formarse sales que tengan una solubilidad inferior a los correspondientes ácidos y bases libres.
Las composiciones farmacéuticas pueden tomar una forma adecuada prácticamente para cualquier modo de administración, incluyendo, por ejemplo, la administración tópica, ocular, oral, bucal, sistémica, nasal, por inyecciones, transdérmica, rectal, vaginal, etc., o una forma adecuada para su administración por inhalación o insuflación.
Para la administración tópica, el/los compuesto(s) activo(s) puede(n) formularse como soluciones, geles, pomadas, cremas, suspensiones, etc. tal como son conocidos en la técnica. Las formulaciones sistémicas incluyen las diseñadas para la administración por inyección,
p. ej., inyección subcutánea, intravenosa, intramuscular, intratecal o intraperitoneal, así como las diseñadas para la administración transdérmica, oral transmucósica o pulmonar.
Las preparaciones inyectables útiles incluyen suspensiones, soluciones o emulsiones esterilizadas del o de los compuestos activos en vehículos acuosos u oleosos. Las composiciones pueden contener también agentes de formulación tales como agentes de suspensión, estabilización y/o dispersión. Las formulaciones inyectables pueden presentarse en forma farmacéutica unitaria, p. ej., en ampollas, o en recipientes multidosis y pueden contener conservantes añadidos.
Como alternativa, la formulación inyectable puede proporcionarse en forma de polvo para su reconstitución antes de su utilización con un vehículo adecuado que comprende pero no se limita a agua esterilizada exenta de pirógeno, tampón, solución de dextrosa, etc. Con esta finalidad, el o los compuesto(s) activo(s) puede(n) secarse por cualquier técnica conocida en la materia, tal como liofilización, y reconstituirse antes de su utilización.
Para la administración transmucósica, se utilizan en la formulación penetrantes apropiados para la barrera que debe penetrarse. Dichos penetrantes son conocidos en la técnica.
Para la administración oral, las composiciones farmacéuticas pueden tomar la forma, por ejemplo, de pastillas, comprimidos o cápsulas preparadas por medios convencionales con excipientes farmacéuticamente aceptables tales como agentes aglutinantes (p. ej., almidón de maíz pregelatinizado, polivinilpirrolidona o hidroxipropilmetilcelulosa); rellenos (p. ej., lactosa, celulosa microcristalina o fosfato monobásico de calcio); lubricantes (p. ej., estearato de magnesio, talco o sílice); disgregadores (p. ej., almidón de patata o almidón glicolato de sodio); agentes humectantes (p. ej., laurilsulfato de sodio y lecitina). Los comprimidos pueden recubrirse por métodos bien conocidos en la técnica, por ejemplo, con azúcares, películas o recubrimientos entéricos.
Las preparaciones líquidas para la administración oral pueden tomar la forma, por ejemplo, de elixires, soluciones, jarabes o suspensiones, o pueden prepararse como un producto seco para reconstitución en agua o en otros vehículos adecuados antes de su utilización. Dichas preparaciones líquidas pueden prepararse por medios convencionales con aditivos farmacéuticamente aceptables tales como agentes de suspensión (p. ej., jarabe de sorbitol, derivados de celulosa o grasas hidrogenadas comestibles); agentes emulsionantes (p. ej., lecitina
o acacia); vehículos no acuosos (p. ej., aceite de almendras, ésteres oleosos, alcohol etílico, cremophoreTM o aceites vegetales fraccionados); y conservantes (p. ej., metil o propil-phidroxibenzoatos o ácido sórbico). Las preparaciones pueden contener además sales de tampones, agentes conservantes, potenciadores de sabor, colorantes y edulcorantes cuando proceda.
Las preparaciones para la administración oral pueden formularse de manera adecuada para proporcionar una liberación controlada del compuesto activo, tal como es bien conocido en la técnica.
Para la administración bucal, las composiciones pueden tomar la forma de comprimidos o pastillas formuladas de manera convencional.
Para las vías de administración rectal y vaginal, el o los compuesto(s) activo(s) pueden formularse como soluciones (para enemas de retención) supositorios o pomadas que contienen bases de supositorio convencionales tales como manteca de cacao u otros glicéridos.
Para la administración nasal o administración por inhalación o insuflación el o los compuesto(s) activo(s) puede(n) administrarse de manera conveniente en forma de pulverizador de aerosol desde envases presurizados o desde un nebulizador con la utilización de un propelente adecuado, p. ej., diclorodifluormetano, triclorofluormetano, diclorotetrafluoretano, fluorocarbonos, dióxido de carbono u otro gas adecuado. En caso de un aerosol presurizado la unidad de dosificación puede determinarse proporcionando una válvula para administrar una cantidad medida. Las cápsulas y cartuchos para su utilización en un inhalador o insuflador (por ejemplo, cápsulas y cartuchos compuestos de gelatina) pueden formularse conteniendo una mezcla en polvo del compuesto y una base en polvo adecuada tal como lactosa o almidón.
Para la administración ocular, el o los compuesto(s) activo(s) puede(n) formularse en forma de una solución, emulsión, suspensión, etc. adecuadas para su administración a los ojos. Se conoce en la técnica una variedad de vehículos adecuados para administrar los compuestos a los ojos. Algunos ejemplos específicos no limitativos se describen en la patente U.S. nº 6.261.547; patente U.S. nº 6.197.934; patente U.S. nº 6.056.950; patente U.S. nº 5.800.807; patente U.S. nº 5.776.445; patente U.S. nº 5.698.219; patente U.S. nº 5.521.222; patente U.S. nº 5.403.841; patente U.S. nº 5.077.033; patente U.S. nº 4.882.150 y patente U.S. nº 4.738.851.
Para la administración prolongada, el o los compuesto(s) activo(s) puede(n) formularse en forma de preparación de liberación lenta para su administración por implantación o inyección intramuscular. El principio activo puede formularse con materiales poliméricos o hidrófobos adecuados (p. ej., en forma de emulsión en un aceite aceptable) o en resinas de intercambio, o como derivados muy poco solubles, p. ej., en forma de sal muy poco soluble. Como alternativa, pueden utilizarse sistemas de administración transdérmica preparados en forma de disco o parche adhesivo que liberan lentamente el o los compuesto(s) activo(s) para su absorción percutánea. Con esta finalidad, pueden utilizarse potenciadores de la permeación para facilitar la penetración transdérmica del o de los compuesto(s) activo(s). Algunos parches transdérmicos adecuados se describen, por ejemplo, en la patente U.S. nº 5.407.713; patente U.S. nº 5.352.456; patente U.S. nº 5.332.213; patente U.S. nº 5.336.168; patente U.S. nº 5.290.561; patente U.S. nº 5.254.346; patente U.S. nº 5.164.189; patente U.S. nº 5.163.899; patente U.S. nº 5.088.977; patente U.S. nº 5.087.240; patente U.S. nº 5.008.110 y patente U.S. nº 4.921.475.
Como alternativa, pueden emplearse otros sistemas de administración farmacéutica. Los liposomas y las emulsiones son ejemplos bien conocidos de vehículos para administración que pueden utilizarse para administrar compuesto(s) o profármaco(s) activo(s). También pueden emplearse determinados disolventes orgánicos, tales como el sulfóxido de dimetilo (DMSO), aunque normalmente a costa de mayor toxicidad.
Si se desea, las composiciones farmacéuticas pueden presentarse en un envase o dispositivo dispensador que puede contener una o más formas farmacéuticas unitarias que contiene(n) el o los compuesto(s) activo(s). El envase puede estar compuesto, por ejemplo, de metal u hoja de plástico, como por ejemplo un envase blíster. El envase o dispositivo dispensador puede ir acompañado de instrucciones para su administración.
6.8 Dosis eficaces
El o los compuesto(s) activo(s), o las composiciones de estos, se utilizarán generalmente en una cantidad eficaz para conseguir el resultado pretendido, por ejemplo en una cantidad eficaz para tratar o prevenir la enfermedad concreta que se está tratando. El o los compuesto(s) puede(n) administrarse terapéuticamente para conseguir una utilidad terapéutica. Por utilidad terapéutica se entiende la erradicación o mejora del trastorno subyacente que se esté tratando de modo que el paciente refiere una mejoría en la sensación o en la afección, a pesar de que el paciente todavía puede estar afectado por el trastorno subyacente. La utilidad terapéutica comprende también la interrupción o ralentización de la evolución de la enfermedad, independientemente de si se realiza la mejoría.
La cantidad de compuesto administrado dependerá de una variedad de factores, que incluyen, por ejemplo, la indicación que se está tratando, el modo de administración, la gravedad de la indicación en tratamiento y la edad y el peso del paciente, la biodisponibilidad del compuesto activo concreto, etc. La determinación de una dosis eficaz entra dentro de las facultades de los expertos en la materia.
Las dosis eficaces pueden estimarse inicialmente en ensayos in vitro. Por ejemplo una dosis inicial para su utilización en animales puede formularse para conseguir una concentración de compuesto activo en la sangre o suero en circulación que es igual o superior a la CI50 del compuesto en concreto medida en un ensayo in vitro, tal como en los ensayos in vitro descritos en el apartado Ejemplos. El cálculo de las dosis para conseguir dichas concentraciones en sangre o suero en circulación teniendo en cuenta la biodisponibilidad del compuesto en concreto entra dentro de las facultades de los expertos en la materia. Para orientación, se refiere al lector a Fingl & Woodbury, “General Principles”, en Goodman and Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics, capítulo 1, págs. 1-46, última edición, Pergamon Press y a las referencias citadas en ésta.
Las dosis iniciales pueden estimarse también a partir de datos in vivo, tal como en modelos animales. Los modelos animales útiles para probar la eficacia de los compuestos para tratar o prevenir las diversas enfermedades descritas anteriormente son bien conocidos en la técnica. Las cantidades de la dosis estarán comprendidas en el intervalo entre aproximadamente 0,0001, 0,001 ó 0,01 mg/kg/día y aproximadamente 100 mg/kg/día, pero pueden ser superiores o inferiores, dependiendo, entre otros factores, de la actividad del compuesto, de su biodisponibilidad, del modo de administración y de varios factores expuestos anteriormente. La cantidad de dosis y el intervalo pueden ajustarse individualmente para proporcionar concentraciones de plasma del o de los compuesto(s) que sean suficientes para mantener el efecto terapéutico o profiláctico. Por ejemplo, los compuestos pueden administrarse una vez a la semana, varias veces a la semana (p. ej., cada dos días), una vez al día o varias veces al día, dependiendo, entre otras cosas, del modo de administración, de la indicación específica que se esté tratando y del dictamen del médico recetador. En los casos de administración local o de asimilación selectiva tal como en la administración tópica local, la concentración local eficaz del o de los compuesto(s) activo(s) puede no estar relacionada con la concentración en el plasma. Los expertos en la materia podrán optimizar las dosis locales eficaces sin exceso de experimentación.
5
10
15
20
25
30
35
40
Preferentemente, el o los compuesto(s) proporcionarán utilidad terapéutica o profiláctica sin producir toxicidad importante. La toxicidad del o de los compuesto(s) puede determinarse utilizando los procedimientos farmacéuticos habituales. La relación de la dosis entre el efecto tóxico y terapéutico (o profiláctico) LD50/ED50 es el índice terapéutico (LD50 es la dosis letal para el 50% de la población y ED50 es la dosis terapéuticamente eficaz en el 50% de la población). Se prefiere(n) el o los compuesto(s) que presenta(n) altos índices terapéuticos.
6.9 Kits
Los compuestos descritos en la presente memoria pueden disponerse en forma de kits. En algunas formas de realización, el kit proporciona el o los compuesto(s) y reactivos para preparar una composición destinada a su administración. La composición puede estar en forma anhidra o liofilizada, o en solución, particularmente en solución esterilizada. Cuando la composición está en forma anhidra, el reactivo puede comprender un diluyente farmacéuticamente aceptable para la preparación de una formulación líquida. El kit puede contener un dispositivo para la administración
o para la dispersión de las composiciones, que incluye, pero no se limita a, jeringuilla, pipeta, parche transdérmico o inhalador.
Los kits pueden incluir otros compuestos terapéuticos para su utilización junto con los compuestos descritos en la presente memoria. En algunas formas de realización, los agentes terapéuticos son otros compuestos anticancerosos y antineoplásicos. Estos compuestos pueden proporcionarse por separado o mezclados con los compuestos de la presente invención.
Los kits incluirán instrucciones apropiadas para la preparación y administración de la composición, efectos secundarios de las composiciones y cualquier otra información relevante. Las instrucciones pueden estar en cualquier formato apropiado, incluyendo, pero sin limitarse a, material impreso, cinta de vídeo, disco legible por ordenador o disco óptico.
7. EJEMPLOS
Las invenciones están definidas además haciendo referencia a los siguientes ejemplos que describen la preparación de varios compuestos descritos en la presente memoria, a los métodos de ensayo de su actividad biológica y a los métodos de utilización. Es evidente para los expertos en la materia que pueden ponerse en práctica muchas modificaciones tanto de los materiales como de los métodos sin apartarse del alcance de las invenciones.
7.1 Preparación de 4-(4-metilpiperazin-1-il)-3-metilnitrobenceno
Reacción:
imagen16
Procedimiento: Se calentó a reflujo (120 ºC) con N2 durante 24 horas una mezcla homogénea de 4-fluoro-3-metilnitrobenceno 1 (20 g, 129 mmoles) y N-metilpiperazina 3 (25,82 g, 258 mmoles) en N-metilpirrolidona (NMP) (10 ml). La mezcla de reacción, tras el enfriamiento hasta temperatura ambiente, se vertió sobre una solución saturada de NaCl (100 ml). El sólido resultante se sometió a ultrasonidos durante aprox. 30 segundos, se filtró, se lavó con agua enfriada en hielo (2 × 10 ml) y se secó a alto vacío para obtener 4-(4-metilpiperazin-1-il)-3metilnitrobenceno 5 (28 g, 92%). 1H RMN (CD3OD): δ 8,02 (m, 2H), 7,13 (d, 1H, J=9,3 Hz), 3,08 (m, 4H), 2,66 (m, 4H), 2,38 (s, 6H); LCMS: pureza: 99%, MS (m/e): 236 (MH+).
7.2 Preparación de 4-(4-metilpiperazin-1-il)-3-metilanilina
Reacción:
imagen17
-1-il)-3-metilanilina 7 (15 g, 86%). 1H RMN (CD3OD): δ 6,83 (d, 1H, J=8,7 Hz), 6,59 (d, 1H, 5 J=2,7 Hz), 6,54 (dd, 1H, J=8,4 Hz y 2,7 Hz), 2,84 (t, 4 H, J=4,8 Hz), 2,60 (bm, 4H), 2,34 (s, 3H), 2,20 (s, 3H); LCMS: pureza: 99,9%, MS (m/e): 206 (MH+).
7.3 Preparación de 3-aza-4-oxo-triciclo[4.2.1.0(2,5)]non-7-eno Reacción: Procedimiento: Se hidrogenó [H2] a 40 PSI durante 3 horas una mezcla heterogénea de 4-(4-metilpiperazinil)-3-metilnitrobenceno 5 (20 g, 85 mmoles), Pd al 10%/C (1,3
10 g) en metanol (1,2 litros). Se filtró el catalizador de paladio a través de un lecho de celite, se lavó con metanol (3 × 50 ml) y se concentró el filtrado combinado para dar 4-(4-metilpiperazin
imagen1
(2-exo-3-exo racémico)
Procedimiento: Parte 1: Una solución de 2,5-norbornadieno 47 (25,0 ml, 0,246 moles) en
15 CH2Cl2 (110 ml, botella fresca) se enfrió en un baño de NaCl con hielo (-10 ºC). A esto se añadió gota a gota una solución de CSI (21,4 ml, 0,246 moles) en CH2Cl2 (45 ml, botella fresca) a un ritmo para mantener la temperatura por debajo de 5 ºC (la adición tardó aprox. 1,25 h). Una vez terminada la adición, se agitó la mezcla de reacción durante 1 hora entre 0 y 5 ºC y a continuación se sacó del baño de refrigeración y se dejó calentar hasta 20 ºC. Se detuvo la mezcla de reacción
20 con agua (60 ml) y se agitó intensamente durante varios minutos. Se separó la capa orgánica, se lavó con salmuera y se secó con Na2SO4. La concentración dio un aceite marrón claro.
Parte 2: Se enfrió en un baño de NaCl con hielo una mezcla de Na2SO3 (24,5 g), agua (70 ml) y CH2Cl2 (30 ml). Se diluyó el aceite de la Parte 1 a 100 ml con CH2Cl2 y se añadió gota a gota a la mezcla anterior a un ritmo para mantener la temperatura por debajo de 15 ºC (la adición tardó
25 aprox. 1,75 h). Se controló el pH de la mezcla de reacción con un pH-metro y se mantuvo básico (pH 7 a 10) ajustando con NaOH al 10% (p/v) (a medida que se necesitaba). Una vez terminada la adición, se agitó la mezcla de reacción durante 1 hora entre 5 y 10 ºC (el pH final fue 8,5). Se vertió la mezcla de reacción en un embudo de separación y se separó la capa de CH2Cl2. Esta fase orgánica era una suspensión sólida espesa y gelatinosa. Se diluyó con agua (aprox. 400 ml)
30 para preparar una solución más fluida. Se extrajo de nuevo la capa acuosa con CH2Cl2 (4 × 100 ml).
(Como alternativa, pueden separarse los sólidos del CH2Cl2 por centrifugación. Los sólidos pueden diluirse a continuación con agua (hasta que se disuelvan casi completamente) y extraerse con CH2Cl2). Se extrajo de nuevo la capa acuosa con CH2Cl2 (10 × 100 ml). Se controló por TLC la
35 presencia del producto en los extractos en CH2Cl2. Se lavaron con salmuera los extractos orgánicos combinados, se secaron con MgSO4 y se filtraron a través de celite. La eliminación del disolvente dio el producto deseado, 3-aza-4-oxo-triciclo[4.2.1.0(2,5)]non-7-eno 2-exo-3-endo racémico 14r1 en forma de sólido blanco (20,5 g, 62%). 1H RMN (DMSO-d6): δ 8,01 (s a, 1H), 6,22 (dd, J=3,3 y 5,4 Hz, 1H), 6,12 (dd, J=3,3 y 5,4 Hz, 1H), 2,88 (dd, J=1,5 Hz y 3,3 Hz, 1H), 2,79 (s a,
40 1H), 2,74 (s a, 1H), 1,58 (d, J=9,3 Hz, 1H) y 1,47 (d, J=9,3 Hz, 1H).
7.4 Preparación de 4-oxo-3-terc-butoxicarbonilaza-triciclo[4.2.1.0(2,5)]non-7-eno
Reacción:
imagen18
(2-exo-3-exo racémico) (2-exo-3-exo racémico)
5 Procedimiento: Se agitó con N2 a temperatura ambiente durante 24 horas una mezcla homogénea de 3-aza-4-oxo-triciclo[4.2.1.0(2,5)]non-7-eno (14r1; racémico-2-exo-3-exo; 10,0 g, 74 mmoles), (BOC)2O (16,1 g, 74 mmoles) y DMAP (1,1 g) en CH2Cl2. A esta mezcla de reacción se añadieron EtOAc (100 ml) seguido de H2O (100 ml) y se agitó durante 1 hora más. Se separó la capa orgánica y se lavó con H2O (2 × 100 ml). Se secó la capa orgánica con Na2SO4 anhidro y se
10 eliminó el disolvente a presión reducida para dar 4-oxo-3-terc-butoxicarbonilazatriciclo[4.2.1.0(2,5)]non-7-eno (16r1; racémico-2-exo-3-exo) (16,5 g, 70%); 1H RMN (DMSO-d6): δ 6,29 (dd, J=3,3 y 5,4 Hz, 1H), 6,19 (dd, J=3,3 y 5,4 Hz, 1H), 3,77 (d, J=4,5 Hz, 1H), 3,13 (s a, 1H), 3,08-3,04 (m, 1H), 2,93 (s a, 1H) y 1,45 (s, 9H). LCMS: 95%.
7.5 Preparación y aislamiento de diastereoisómeros estereoisoméricamente puros a partir
15 de (4:) (2-exo-3-exo)-N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]hept-5-en-2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4(4-metilpiperazin-1-il)fenil]-2,4-pirimidindiamina racémica
Se preparó una mezcla racémica del compuesto del título a partir del 2-exo-3-exo racemato de 2-aminobiciclo[2.2.1]hept-5-en-3-carboxamida de la forma siguiente. Reacción:
20 (2-exo-3-exo racémico) (2-exo-3-exo racémico)
imagen19
Procedimiento: Un matraz de fondo redondo equipado con un diafragma de caucho y una varilla de agitación magnética se cargó con N-BOC-β-lactama racémica 16r1 (2,0 g) con una presión positiva de nitrógeno. Se añadió a esto acetato de etilo (25 ml) seguido de amoniaco al
25 30% en agua (25 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Se separó la capa de acetato de etilo y se lavó con solución acuosa de NaHCO3 al 5% (20 ml), se secó con Na2SO4 anhidro y se evaporó el disolvente para dar 1,10 g de N-BOC carboxamida racémica 28r1.
Reacción:
imagen20
30 (2-exo-3-exo racémico) (2-exo-3-exo racémico) (2-exo-3-exo racémico)
Procedimiento: Un matraz de fondo redondo equipado con entrada de N2 y una varilla de agitación magnética se cargó con N-BOC lactama racémica 28r1 (2,00 g, 7,9 mmoles) y a continuación se trató con TFA al 20% en CH2Cl2 a temperatura ambiente durante 2 horas. La
5
10
15
20
25
30
35
solución resultante se concentró a presión reducida. Se eliminaron las trazas de TFA a alto vacío durante varias horas para dar el producto intermedio, sal de TFA (30r1, racémica). La sal de TFA 30r1 racémica resultante se trató con 2,4-dicloro-5-fluoropirimidina 10 (1,58 g, 9,51 mmoles) en MeOH:H2O (20:10 ml) en presencia de NaHCO3 (1,33 g, 15,84 mmoles) a temperatura ambiente durante 48 horas. Se diluyó la mezcla de reacción con H2O (25 ml), se saturó con NaCl y se extrajo con EtOAc (3 × 50 ml). Tras el secado con Na2SO4 anhidro, se evaporó el disolvente y se cromatografió el residuo (gel de sílice, CH2Cl2 y a continuación 2 a 4% de NH3 2 N/MeOH en CH2Cl2) para dar 1,3 g de producto mono-SNAr racémico 36r1.
Reacción:
imagen21
(2-exo-3-exo racémico) (2-exo-3-exo racémico)
Procedimiento: Se agitó a 100 ºC durante 24 horas un tubo sellado cargado con producto mono-SNAr racémico 36r1 (1,1 g, 8 mmoles), anilina 7 (0,90 g, 4,4 mmoles), TFA (0,6 ml) y metanol (9 ml). Se concentró la solución homogénea viscosa resultante y se cromatografió el residuo (gel de sílice, CH2Cl2 y a continuación 2 a 5% de NH3 2N/MeOH en CH2Cl2) para dar el derivado 2-exo-3-exo racémico 2,4-pirimidindiamina 60r1 esperado (1,12 g; pureza: 95%).
Aislamiento de enantiómeros: Se resolvieron los diastereoisómeros y se aislaron del racemato 60r1 por cromatografía quiral HPLC preparativa (columna Phenomenex Chirex 3020 250 × 10 mm), eluyendo con una mezcla de hexano:diclorometano:metanol 35:63:2 (vol:vol:vol) a un caudal de 6 ml/min. El enantiómero que eluyó a los 9,44 min se denominó enantiómero E1 y el enantiómero que eluyó a los 12,74 min se denominó enantiómero E2.
7.6 Preparación enzimática de (1R,2R,3S,4S)-N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-en2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]2,4-pirimidindia-mina estereoisoméricamente pura utilizando quirazima
7.6.1 Preparación de N-Boc-β-lactama estereoisoméricamente pura
Reacción:
imagen22
(2-exo-3-exo racémico) Ácido N-Boc carboxílico
Procedimiento: Un tubo sellado seco cargado con 4-oxo-3-tercbutoxicarbonilazatriciclo[4.2.1.0(2,5)]non-7-eno (16r1; 2-exo-3-exo racémico) (4,0 g, 17,02 mmoles), quirazima L-2 inmovilizada unida a la resina, tipo B, c.f. (8,0 g, adquirida de BioCatalytics Inc., Pasadena, CA) y éter diisopropílico (80 ml) se agitó suavemente en una incubadora a 60 ºC durante 60 horas. (La resolución enzimática de la N-BOC β-lactama racémica 16r1 fue seguida por RMN de protones. La integración del grupo terc-butilo de la N-BOC lactama 16a enantioméricamente pura y del ácido N-BOC carboxílico 26b se observó en proporción 1:1). Se filtró la mezcla de reacción resultante y se lavó la resina sólida con éter diisopropílico (2 × 40 ml). Se concentró el filtrado para dar una mezcla de N-BOC -lactama 16a enantioméricamente pura y del ácido N-BOC carboxílico 26b (masa total: 4,0 g).
5
10
15
20
25
30
Reacción:
imagen19
ácido N-BOC carboxílico
(permanece en fase N-Boc amino carboxilato
orgánica)
(permanece en solución
acuosa)
Procedimiento: Un matraz de fondo redondo equipado con un diafragma de caucho y una varilla de agitación magnética se cargó con una mezcla de N-BOC-lactama 16a enantioméricamente pura y ácido N-BOC carboxílico 26b (4,0 g) con una presión positiva de nitrógeno. Se añadió a esto acetato de etilo (50 ml) seguido de hidróxido de amonio acuoso al 25% (50 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Se controló la evolución de la reacción por TLC. Se separó la capa de acetato de etilo y se lavó con solución acuosa de NaHCO3 al 5% (40 ml), se secó con Na2SO4 anhidro y se evaporó el disolvente para dar 2,00 g (7,93 mmoles por 8,51 mmoles teóricos; 93% de rendimiento) de la N-BOC carboxamida 28a enantioméricamente pura deseada con más del 99% de exceso enantiomérico, determinada por HPLC quiral. La solución acuosa que contenía el N-BOC carboxilato de amonio tras la acidificación con HCl 1 N frío seguida de la extracción con CH2Cl2 regeneró el ácido N-BOC carboxílico 26b (1,8 g, 7,11 mmoles por 8,151 mmoles teóricos; 84% de rendimiento). 1H RMN (DMSO-d6): 7,26 (s a, 1H), 6,66 (s a, 1H), 6,13 (m, 2H), 3,59 (t, 1H, J=6,9 Hz), 2,80 (s, 1H), 2,54 (s, 1H), 2,31 (d, 1H, J=8,1 Hz), 2,00 (d, 1H, J=8,7 Hz), 1,36 (s, 9H), 1,30 (d, 1H, J=8,1 Hz); LCMS: MS (m/z): 254 (MH+); [α]D -76,78º (c 1,0, MeOH).
7.6.2 Preparación del producto mono SNAr estereoisoméricamente puro
Reacción:
imagen20
Procedimiento: Un matraz de fondo redondo equipado con entrada de N2 y una varilla de agitación magnética se cargó con N-BOC carboxamida 28a enantioméricamente pura (2,00 g, 7,93 mmoles) y a continuación se trató con TFA al 20% en CH2Cl2 a temperatura ambiente durante 2 horas. El progreso de la reacción se controló mediante TLC. La solución resultante se concentró a presión reducida. Se eliminaron las trazas de TFA a alto vacío durante varias horas para dar el producto intermedio enantioméricamente puro, sal de TFA 30a, con rendimiento cuantitativo. 1H RMN (DMSO-d6): 8,10 (s a, 2H), 7,92 (s, 1H), 7,25 (s, 1H), 6,29 (m, 1H), 6,18 (m, 1H), 4,38 (s a, 1H), 3,06 (d, 1H, J=7,2 Hz), 2,97 (s, 1H), 2,87 (s, 1H), 2,43 (d, 1H, J=7,5 Hz), 2,10 (d, 1H, J=6,0 Hz), 1,36 (d, 1H, J=8,7 Hz); LCMS: MS (m/z): 152 (MH+).
La sal de TFA 30a resultante se trató con 2,4-dicloro-5-fluoropirimidina 34 (1,58 g, 9,51 mmoles) en MeOH:H2O (20:10 ml) en presencia de NaHCO3 (1,33 g, 15,84 mmoles) a temperatura ambiente durante 48 horas. Se diluyó la mezcla de reacción con H2O (25 ml), se saturó con NaCl y se extrajo con EtOAc (3 × 50 ml). Tras el secado con Na2SO4 anhidro, se
5
10
15
20
25
30
35
40
evaporó el disolvente y se cromatografió el residuo (gel de sílice, CH2Cl2 y a continuación 2 a 4% de NH3 2 N/MeOH en CH2Cl2) para dar 2,02 g (91%) del producto mono-SNAr 36a deseado. 1H RMN (DMSO-d6): 8,25 (d, 1H, J=7,2 Hz), 8,07 (d, 1H, J=3,3 Hz), 7,71 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,29 (m, 2H), 3,99 (t, 1H, J=7,8 Hz), 2,85 (s, 1H), 2,75 (s, 1H), 2,49 (d, 1H, J=0,9 Hz), 2,11 (d, 1H, J=8,7 Hz), 1,39 (d, 1H, J=8,7 Hz); LCMS: pureza: 95%, MS (m/z): 283 (MH+). La pureza enantiomérica fue superior al 99% según se determinó por HPLC quiral; [α]D +61,10º (c 1,0, MeOH).
7.6.3 Preparación de (1R,2R,3S,4S)-N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-en-2-il)-5fluoro-N2-[3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]2,4-pirimidindiamina estereoisoméricamente pura
Reacción:
imagen23
Procedimiento: Un matraz de reacción seco equipado con una varilla de agitación, condensador de reflujo y entrada de N2 se cargó con producto mono-SNAr 36a enantioméricamente puro (2,25 g, 8 mmoles), anilina 7 (1,80 g, 8,8 mmoles), TFA (1,12 ml) e isopropanol (18 ml) y la mezcla de reacción resultante se agitó a la temperatura de reflujo durante 8 a 10 horas. Tras enfriar la mezcla de reacción hasta temperatura ambiente, se añadió acetato de etilo (20 ml). Se filtró el sólido obtenido y se lavó con acetato de etilo (2 × 5 ml) para dar el compuesto 60a en forma de sal ácida. El sólido resultante se colocó a continuación en agua y la mezcla acuosa se ajustó a pH 9 con NaHCO3 acuoso, que produjo la precipitación de un sólido. Se filtró el sólido de la mezcla, se lavó con agua y se secó para dar 3,3 g (93%) del derivado de 2,4-pirimidindiamina 60a. 1H RMN (DMSO-d6): 8,85 (s, 1H), 7,83 (d, 1H, J=2,7 Hz), 7,68 (s, 1H), 7,47 (s, 2H), 7,36 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,18 (s, 1H), 6,89 (d, 1H, J=8,7 Hz), 6,32 (m, 1H), 6,25 (m, 1H), 4,11 (t, 1H, J=7,8 Hz), 3,32 (s, 3H), 2,86 (s, 1H), 2,76 (m, 4H), 2,49 (m, 4H), 2,46 (m, 2H), 2,21 (s, 3H), 2,11 (d, 1H, J=8,4 Hz), 1,39 (d, 1H, J=9 Hz); LCMS: pureza: 100%, MS (m/z): 452 (M+); >99% ee según se determinó por HPLC quiral; [α]DTA +101,2º (c 1,0, MeOH). Se descubrió que los datos analíticos quirales, 1H RMN y LCMS eran idénticos a los del enantiómero denominado E1.
7.7 Preparación enzimática de (1R,2R,3S,4S)-N4-(3-aminocarbonil-biciclo[2.2.1]hept-5-en2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]-2,4-pirimidindiamina estereoisoméricamente pura utilizando la enzima Novazima 435
7.7.1 Preparación de β-lactama estereoisoméricamente pura
Reacción:
imagen24
Procedimiento: Lipolasa inmovilizada (8,0 g, de Sigma, número de orden L4777), βlactama 14r1 (racémico: 2-exo-3-exo) (4,0 g, 7,4 mmoles) y agua (0,13 ml, 7,4 mmoles) se añadieron a 250 ml de éter isopropílico en un matraz a presión. Se desgasificó la mezcla con nitrógeno durante 20 minutos y se selló el matraz y se incubó durante 14 días a 70 ºC. Se enfrió la mezcla hasta temperatura ambiente, se filtró a través de celite y se lavó con 300 ml de éter diisopropílico. El filtrado combinado se concentró a sequedad y se cristalizó el residuo en éter diisopropílico para dar la β-lactama 14a enantioméricamente pura en forma de agujas incoloras (1,22 g, 61%). La pureza enantiomérica fue superior al 99% según se determinó por HPLC quiral.
7.7.2 Preparación de 2-N-Boc-amino-3-aminocarbonilbiciclo-[2.2.1]hept-5-eno estereoisoméricamente puro
Reacción:
imagen25
Procedimiento: Una mezcla homogénea de 3-aza-4-oxo-triciclo[4.2.1.0(2,5)]non-7-eno 14a enantioméricamente puro (1,1 g, 8,2 mmoles), (BOC)2O (2,76 g, 12,3 mmoles) y DMAP (100 mg) en CH2Cl2 se agitó con N2 a temperatura ambiente durante 3 horas para dar N-BOC lactama
10 16a enantioméricamente pura, que se utilizó más adelante sin aislamiento. A esta mezcla de reacción se le añadieron 20 ml de hidróxido de amonio acuoso al 25% y se continuó agitando durante otras 4 horas. Se añadió agua y la mezcla de reacción se extrajo con diclorometano (2 × 50 ml). Se lavó la fase orgánica combinada con HCl acuoso (5%), se secó con sulfato de sodio y se redujo a sequedad a presión reducida para dar N-BOC carboxamida 28a enantioméricamente
15 pura (2,51 g) como un sólido blanco, la cual se utilizó en la etapa siguiente sin purificación adicional.
7.7.3 Preparación del producto mono SNAr estereoisoméricamente puro (1R,2R,3S,4S)-N4(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]hept-5-en-2-il)-2-cloro-5-fluoro-4-aminopiridina
Reacción:
20
imagen26
Procedimiento: La N-BOC carboxamida 28a enantioméricamente pura (2,51 g) se disolvió en 10 ml de diclorometano y se trató con 10 ml de TFA. Se agitó la mezcla durante 1 hora a temperatura ambiente y se concentró a sequedad a presión reducida. El residuo se suspendió en tolueno y se volvió a concentrar a sequedad. Se disolvió el sólido resultante en metanol:agua (30
25 ml:3 ml) y se trató con 1,5 g de bicarbonato de sodio. Se añadió 5-fluoro-2,4-dicloropirimidina 34 (3 g, 17,9 mmoles) y se agitó la mezcla durante 2 días a temperatura ambiente. Se eliminaron los volátiles al vacío y se suspendió el residuo en salmuera. Se filtró el precipitado, se secó y se sometió a cromatografía en columna (gel de sílice, diclorometanometanol, 20:1) para dar el producto mono SNAr 36a enantioméricamente puro deseado como un sólido blanco (1,7 g, 74%).
30 7.7.4 Preparación de (1R,2R,3S,4S)-N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-en-2-il)-5fluoro-N2-[3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]-2,4-pirimidindiamina estereoisoméricamente pura
Reacción:
imagen27
Procedimiento: Una mezcla homogénea de anilina 7 (400 mg, 1,95 mmoles), producto
5 mono SNAr 36a enantioméricamente puro (400 mg, 1,41 mmoles) y 0,2 ml de TFA en 4 ml de isopropanol en un tubo sellado se agitó a 100 ºC durante 20 horas. Se enfrió la mezcla a temperatura ambiente, se diluyó con 2 ml de éter dietílico y el precipitado resultante se filtró y se lavó con éter dietílico. Los sólidos restantes se disolvieron en agua y se trataron son solución acuosa de hidróxido de amonio al 25%. Se filtró el precipitado resultante, se lavó con agua y se
10 secó para dar 527 mg (83%) del producto deseado, derivado de 2,4-pirimidindiamina 60a como un sólido blanco desvaído. Se determinó la pureza por LCMS, que resultó ser superior al 97% y se determinó la pureza enantiomérica por HPLC quiral, que resultó ser superior al 99%. Los datos analíticos quirales y los análisis de 1H RMN y LCMS eran idénticos a los del enantiómero que se denominó E1.
15 7.8 Preparación de compuestos estereoisoméricamente puros que utilizan (R)-metil-pmetoxibencilamina como auxiliar quiral
7.8.1 Preparación de aminas racémicas 2-exo-3-exo
Reacción:
imagen28
20 (2-exo-3-exo racémico)
Procedimiento: Se agitó a temperatura ambiente durante 48 horas una mezcla homogénea de 4-oxo-3-terc-butoxicarbonilaza-triciclo[4.2.1.0(2,5)]non-7-eno (16r1; racémico-2exo-3-exo) (9,2 g, 40 mmol) y (R)-metil-4-metoxilbencilamina 13 (18, 24 g, 48 mmoles) en THF anhidro (75 ml). La mezcla de reacción se concentró, se suspendió en hexanos (5 ml), se sometió
25 a ultrasonidos y se separó el sólido por filtración para dar una mezcla de diastereoisómeros 20a y 20b (12 mg). Como alternativa, la purificación puede realizarse utilizando cromatografía en columna (gel de sílice, hexanos, y a continuación 5%, 10%, 20% y 50% de EtOAc en hexanos).
7.8.2 Preparación de productos mono-SNAr 2-exo-3-exo racémicos seguida de separación de compuestos isoméricamente puros por cristalización
Reacción:
imagen29
separado por cristalización
Procedimiento: Se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas una mezcla
5 heterogénea de diastereoisómeros 20a y 20b (6,0 g, 17 mmoles), TFA (20 ml) en CH2Cl2. Se utilizó TLC para controlar la evolución de la reacción. La reacción resultante se concentró a sequedad y se secó a alto vacío durante varias horas para dar una mezcla diastereoisomérica de productos intermedios 22a y 22b. La mezcla de reacción se hizo reaccionar a continuación con 2,4-dicloro-5-fluoropirimidina 34 (3,4 g, 20 mmoles) en presencia de NaHCO3 (5,7 g, 68 mmoles)
10 en MeOH: H2O (50 ml de cada uno) a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla de reacción se disolvió entonces con agua saturada con NaCl (50 ml) y se extrajo con CH2Cl2. El extracto, tras ser secado con Na2SO4, seguido de eliminación del disolvente a presión reducida, dio un residuo que se cromatografió (gel de sílice, CH2Cl2 y a continuación 2% de NH3 2N/MeOH en CH2Cl2). La purificación cromatográfica dio una mezcla de diastereoisómeros 38a y 38b (4,0 g)
15 (la relación 1:1 puede observarse con una separación clara en LCMS en fase inversa). Los 4,0 gramos resultantes de la cristalización utilizando EtOAc:hexanos (30:150 ml; v/v) dieron el material cristalino del producto intermedio 38a, que se confirmó por estructura cristalina por rayos X; pureza química: 96% y % de: 96%. [α]D –36,7º (c, 0,18 MeOH). Las aguas madres que contenían el otro isómero tenían poco % de (70 a 80%), que se supuso que era diastereoisómero 38b.
20 7.8.3 Preparación de producto estereoisoméricamente puro que incluye el auxiliar quiral
Reacción:
imagen30
Procedimiento: Se calentó en un tubo sellado a 100 ºC durante 24 horas una mezcla del diastereoisómero 38a (1,42 g, 3,4 mmoles), anilina 7 (0,834 g, 4,0 mmoles) y TFA (700 mg) en
25 MeOH (10 ml). Se cromatografió el residuo resultante (gel de sílice, CH2Cl2 y a continuación 2% de NH3 2N/MeOH en CH2Cl2) para dar el producto 40a como un sólido incoloro, pureza química: 96%.
7.8.4 Escisión del auxiliar quiral Se observó que la escisión del auxiliar quiral procedente de 40a era difícil, por consiguiente
30 la escisión del auxiliar quiral procedente de los compuestos intermedios 38a y 38b seguida de la segunda reacción de SNAr con anilina 7 se realizó de la forma siguiente:
5
10
15
20
25
30
35
40
7.8.5 Escisión del auxiliar quiral procedente del compuesto intermedio 38a estereoisoméricamente puro y preparación de (1R,2R,3S,4S)-N4-(3aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-en-2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4-(4-metilpipera-zin-1il)fenil]2,4-pirimidindiamina estereoisoméricamente pura
Reacción:
imagen31
Procedimiento: El producto mono-SNAr con el auxiliar quiral 38a se dejó reaccionar con DDQ (3 equivalentes) en CH2Cl2:H2O a temperatura ambiente para obtener el producto mono-SNAr 36a deseado. Se purificó el producto mono-SNAr por cromatografía en columna y se descubrió que era el mismo compuesto 36a obtenido por vía enzimática, lo cual se confirmó por HPLC analítica quiral, LCMS y 1H RMN. Además, la reacción del producto mono-SNAr 36a con anilina 7 en MeOH:TFA a 100 ºC en un tubo sellado durante 24 h dio el producto 60a deseado. Se purificó por cromatografía en columna y se analizó por 1H RMN, LCMS y HPLC analítica quiral. Los análisis por HPLC analítica quiral, LCMS y 1H RMN indicaron que los datos del producto 60a eran iguales a los del enantiómero denominado E1.
7.8.6 Escisión del auxiliar quiral procedente del compuesto intermedio 38b y preparación de (1S,2S,3R,4R)-N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-en-2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4-(4metilpiperazin-1-il)fenil]2,4-pirimidindiamina estereoiso-méricamente pura
Reacción:
imagen31
Procedimiento: El producto mono-SNAr 38b se dejó reaccionar con DDQ (3 equivalentes) en CH2Cl2:H2O a temperatura ambiente para obtener el producto mono-SNAr 36b deseado (tras la escisión del auxiliar quiral). Se purificó el producto mono-SNAr por cromatografía en columna y se descubrió que era un diastereoisómero diferente al que se obtuvo por vía enzimática, y esto se confirmó por HPLC analítica quiral. Además, la reacción del producto mono-SNAr 36b con anilina 7 en MeOH:TFA a 100 ºC en un tubo sellado durante 24 h dio el producto 60b deseado. Se purificó por cromatografía en columna y se analizó por 1H RMN, LCMS y HPLC analítica quiral. Los análisis por HPLC analítica quiral, LCMS y 1H RMN indicaron que los datos del producto 60b eran idénticos a los del enantiómero denominado E2. [α]DTA –102,00º (c, 1,0 MeOH).
7.9 Preparación de sales de HCl
Las sales de HCl del racemato 60r1 y de 60a estereoisoméricamente puro se prepararon como se describe a continuación.
7.9.1 Preparación de la sal del cloruro de hidrógeno de N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]hept-5-en-2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]2,4-pirimidindiamina racémica
A una solución de N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-en-2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4(4-metilpiperazin-1-il)fenil]2,4-pirimidindiamina 2-exo-3-exo racémica (60r1) (0,140 g, 0,3 mmoles) en MeOH (3 ml) a 0 ºC se añadió HCl (4 M, en dioxano, 0,170 ml, 0,681 mmoles) gota a gota y a continuación se agitó a 0 ºC durante 1 h y a temperatura ambiente durante 15 minutos. La solución transparente y homogénea se filtró, se concentró y se redisolvió en EtOH. Se añadió acetato de etilo a la solución etanólica para precipitar el producto deseado, que se aisló para dar la sal bis de cloruro de hidrógeno de N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-eno-2-il)-5-fluoroN2-[3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]2,4-pirimidindiamina 2-exo-3-exo racémica (compuesto 60r1-2HCl). LCMS: pureza: 98%; MS (m/e): 453 (MH+).
7.9.2 Preparación de la sal de cloruro de hidrógeno de (1R,2R,3S,4S)-N4-(3aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-en-2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4-(4-metilpipera-zin-1il)fenil]2,4-pirimidindiamina estereoisoméricamente pura
De manera similar, supra, la interacción de 2 equivalentes de HCl (4 M, en dioxano) con (1R,2R,3S,4S)-N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-en-2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4-(4metilpiperazin-1-il)fenil]2,4-pirimidindiamina (60a) estereoisoméricamente pura dio la sal bis de cloruro de hidrógeno de (1R,2R,3S,4S)-N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-eno-2-il)-5-fluoroN2-[3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]2,4-pirimidindiamina estereoisoméricamente pura (compuesto 60a-2HCl). LCMS: pureza: 97%; MS (m/e): 453 (MH+); [α]D +46,3º (c, 0,04 MeOH).
7.10 Preparación de (1R,2R,3S,4S)-N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-eno-2-il)-5fluoro-N2-[3-(1,3-oxazol-2-il)fenil]2,4-pirimidindiamina
imagen1
Se preparó (1R,2R,3S,4S)-N4-(3-aminocarbonilbiciclo[2.2.1]-hept-5-eno-2-il)-5-fluoro-N2[3-(1,3-oxazol-2-il)fenil]2,4-pirimidindiamina (Compuesto 90a) tal como se describió anteriormente. 1H RMN (DMSO-d6): 9,36 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 9,92 (d, 1H, J=3 Hz), 7,79 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,68 (s, 1H), 7,42 (m, 4H), 7,18 (s, 1H), 6,29 (m, 1H), 6,13 (m, 1H), 4,21 (t, 1H, J=4,8 Hz), 2,86 (s, 1H), 2,77(s, 1H), 2,55 (d, 1H, J=8,1 Hz), 2,14 (d, 1H, J=8,4 Hz), 1,39 (d, 1H, J=8,7 Hz); LCMS: pureza: 98%, MS (m/e): 407 (MH+).
7.11 Inhibición de la proliferación celular in vitro Se determinó la capacidad de inhibir la proliferación de los compuestos 60r1, 60r2, 60r1·2HCl, 60a, 60b y 60a·HCl frente a una variedad de células tumorales diferentes utilizando ensayos de antiproliferación in vitro normalizados. Las diversas líneas celulares analizadas incluían: A549 (carcinoma pulmonar); ASPC-1 (adenocarcinoma pancreático); BXPC-3 (adenocarcinoma pancreático); CaOV-3 (adenocarcinoma de ovario); COLO 205 (adenocarcinoma colorrectal); DU145 (carcinoma de próstata); ES-2 (carcinoma de células claras de ovario); H1299 (carcinoma pulmonar amicrocítico); H1155 (carcinoma pulmonar amicrocítico); H460 (carcinoma pulmonar macrocítico); HELA (adenocarcinoma cervical); HL160 (leucemia de promieloblastos promielocítica); K562 (leucemia mielógena crónica de médula ósea); L1210 (leucemia linfocítica de ratón); MiaPaCa-2 (carcinoma pancreático); MOLT4 (leucemia linfoblástica aguda de linfoblastos T); OVCAR-3 (adenocarcinoma de ovario); MOLT3 (leucemia linfoblástica aguda de linfoblastos T); OVCAR-8 (carcinoma de ovario); PC3 (adenocarcinoma de próstata); SK-OV-3 (adenocarcinoma de ovario); SU86.86 (carcinoma pancreático); SW620 (adenocarcinoma colorrectal); THP-1 (leucemia de monocitos monocítica aguda); TOV-21G (carcinoma de células claras de ovario); U2OS (osteosarcoma óseo) y U937 (linfoma histiocítico). En la TABLA 2, a continuación, se proporcionan los valores de CI50 obtenidos con los compuestos. En la TABLA 2, un “+” indica un valor de CI50 ≤ 1 μM, un “++” indica un valor de CI50
≤ 20 nM, “+++” indica un valor de CI50 ≤ 10 nM y un “―” indica un valor de CI50 > 1 μM. Un espacio en blanco indica que no se evaluó el compuesto frente a la línea celular específica.
imagen32
7. 12 Inhibición de Aurora cinasas en ensayos celulares funcionales Se determinó la capacidad de los compuestos 60a y 60b para inhibir la Aurora cinasa-B en un ensayo celular funcional que comporta la fosforilación de su sustrato, histona H3. Para el ensayo, se sembraron células A549 en los pocillos de una placa de microvaloración (5000 células por pocillo en 100 μl de medio F12K) a última hora de la tarde del día 1. Se cultivaron las células durante la noche (37 ºC, CO2 al 5%). El día 2 se les añadieron a cada pocillo 50 μl de nocodazol (en medio 1 μM) dando una concentración final de 333 nM. Se cultivaron las células durante 18 h más en las mismas condiciones. El día 3, se añadieron a los pocillos alícuotas de 50 ml de varias concentraciones del compuesto de ensayo. Los compuestos de ensayo se prepararon mediante diluciones 2 veces en serie de un patrón 2 mM (en DMSO). Los compuestos diluidos en DMSO se diluyeron 1:50 con medio una vez más a continuación para dar una solución final que contenía el compuesto de ensayo 4X, 98% de medio y 2% de DMSO. Tras la incubación, se lavó el medio/compuesto de ensayo y las células se fijaron con 2% de paraformaldehído (en solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco “DPBS”; 25 μl por pocillo; > 20 mm de incubación). Las células fijadas se lavaron una vez con DPBS (200 μl/pocillo), se tiñeron con fosfohistona H3 (Cell Signaling Technology; 1:500 en DPS A, suero de cabra normal “NGS” al 10%, Triton-X-100 al 0,05%; 1 a 2 horas a temperatura ambiente) y se lavó dos veces con DPBS (200 μl/pocillo). Las células se tiñeron a continuación con un anticuerpo secundario marcado con un colorante fluorescente (anticuerpo secundario de burro anti-ratón AlexFluor 488 (Invitrogen Molecular Probes; 1:2000)) y DAPI (1:15.000 de 1mg/ml de patrón), durante 1 h a temperatura ambiente, se lavaron tres veces con DPBS (200 μl/pocillo) y se almacenaron bajo DPBS (100 μl/pocillo) a 4 ºC hasta estar preparadas para el análisis. Para la recogida de todos los datos se utilizó un microscopio fluorescente invertido Zeiss Axiovert S100 con un objetivo Plan-NEOFLUAR 10×, un foco de luz de mercurio-xenón Hamamatsu Lightningcure 200 y un filtro cuadrangular Omega Optical XF57. El sistema estaba equipado con una plataforma motorizada con control X/Y/Z Ludl Mac2000, un filtro circular Ludl, un brazo de robot Zymark Twister y una cámara digital Quantix de Roper Scientific. Todo el equipo informático fue controlado con ImagePro 4.5 con el módulo ScopePro/StagePro 4.1 (Media Cybernetics) en un PC que utilizaba Win2000. Las instrucciones informáticas básicas fueron escritas para ImagePro para el control automático del equipo informático y para la recogida de imágenes. El enfocado se realizó con un programa informático de enfoque automático de rutina contenido en StagePro que utilizaba el contraste máximo local para determinar el mejor plano del foco de una serie Z capturada una vez en cada pocillo. Una vez conseguido el enfoque apropiado, se capturaron imágenes en un formato de cuadrícula 3×3, de imágenes adyacentes a la posición de enfoque, pero sin incluirla. Se capturaron las imágenes y se analizaron en un formato de 12 bits utilizando segmentación y rutinas morfológicas contenidas en el paquete informático Image
Pro. Se hizo el recuento de los núcleos identificados y los datos de los píxels de cada celda junto con las condiciones experimentales se almacenaron en una base de datos utilizando MySQL
4.0.14. El análisis ulterior de los resultados experimentales y la creación del gráfico se realizaron utilizando Matlab 6.5.
Para los análisis de fosfohistona H3, los datos se transforman en archivos Facs y se analizan utilizando FlowJo. El porcentaje de células con Fosfo-H3 se representa para cada concentración del compuesto para determinar una IC50 para la inhibición de Aurora B.
Resultados. El compuesto 60a inhibió la Aurora cinasa-B con una CI50 de aproximadamente 7 nM en este ensayo. En cambio, la CI50 de su enantiómero, compuesto 60b, fue de 2,49 μM, aprox. 350 veces mayor.
7.13 Farmacocinética del compuesto E1 en monos Se administró el compuesto 60a a monos por vía intravenosa (1 mg/kg en solución salina) y por vía oral (5 mg/kg en solución salina) y se controlaron las concentraciones en el plasma a lo
largo del tiempo. Cuando se administró por vía i.v., la concentración en el plasma del compuesto permaneció por encima de la CI50 de 7 nM 11 h después de la administración; cuando se administró por vía oral, la concentración en el plasma del compuesto se mantuvo por encima de la CI50 durante más de 20 h.
7.14 El compuesto 60a reduce de tamaño los tumores in vivo Se determinó la capacidad del compuesto 60a·2HCl para reducir el tamaño de los tumores 5 A549 y Colo205 en un modelo terapéutico de xenotrasplante normal en ratones SCID, y de los tumores Colo205 y MiaPaCa en un modelo de regresión de xenotrasplante normal en ratones SCID. Cuando aparecían tumores palpables de un volumen preseleccionado (aprox. de 100 mm3 para el modelo de tratamiento; >300 mm3 para el modelo de regresión), se administraron compuestos de ensayo a los ratones en las cantidades y según los regímenes de dosificación
10 especificados en la TABLA 3 (protocolo de tratamiento) y la TABLA 4 (protocolo de regresión), a continuación.
TABLA 3 Sumario de experimentos del modelo de tratamiento (Tamaño medio del tumor: 100 mm3)
Línea celular
Dosis (mg/kg/día) Programa (día sí/día no) Vía
Colo205
2 4/3 oral
Colo205
10 4/3 oral
Colo205
10 2/1 oral
Colo205
10 5/2 oral
Colo205
10 7/7 oral
Colo205
10 3/11 oral
Colo205
10 1/6 oral
Colo205
10 diario oral
A549
10 5/2 oral
A549
10 2/1 oral
A549
10 7/7 oral
A549
10 diario (13 días) i.p.
A549
20 diario (5 días) i.p.
TABLA 4 Sumario de experimentos del modelo de evolución (Tamaño medio del tumor > 300 mm3)
Línea celular
Dosis (mg/kg/día) Programa Vía
Colo205
10 diario (13 días) oral
MiaPaCa
10 diario (3 ciclos) oral
MiaPaCa
10 diario (3 ciclos) i.p.
Resultados. En las FIGs. 1 y 2 se ilustran los efectos inhibidores del Compuesto 60a-2HCl
5 en el crecimiento del tumor Colo205 en el modelo de tratamiento. En la FIG. 1 se ilustran los resultados del régimen de dosificación diario; en la FIG. 2 los resultados de los regímenes de dosificación pulsada. Ambos regímenes de dosificación proporcionaron reducciones significativas (p<0,050) en el ritmo de crecimiento tumoral en comparación con un vehículo de referencia para todos los niveles de dosificación ensayados. Los tumores A549 fueron menos sensibles al
10 tratamiento, con una reducción aproximada del 40% en el volumen medio del tumor tras un régimen de dosificación de 5 días sí/2 días no y una concentración de la dosis de 10 mg/kg cada día (p>0,05).
En la FIG. 3 se ilustran los efectos inhibidores del Compuesto 60a-2HCl en el crecimiento del tumor Colo205 en el modelo de regresión. En la FIG. 4 se ilustran los efectos del Compuesto 60a-2HCl en los tumores MiaPaCa en el modelo de regresión. Se observaron reducciones significativas del ritmo de crecimiento del tumor en ambas líneas tumorales. Estas reducciones fueron independientes del modo de administración. Además, las reducciones observadas en los tumores MiaPaCa fueron similares a las observadas con taxol (véase la FIG. 4).

Claims (16)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Compuesto según la fórmula estructural (I):
    imagen1
    o una sal, hidrato, solvato o N-óxido de esta, que está enriquecido en el correspondiente diastereómero de fórmula estructural (Ia):
    imagen1
    5 en la que: R1 se selecciona de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo C1-6, -(CH2)n-OH, -ORa, -O(CH2)n-Ra, -O(CH2)n-Rb, -C(O)ORa, halo, -CF3, y -OCF3; cada R2 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno, imagen1
    10 alquilo Cimagen1 1-6, -ORa, -O(CH2)n-Ra, -O(CH2)n-Rb, -NHC(O)ORa, halo, -CF3, -OCF3, y
    ; R3
    ORa, -O(CH2)n-Ra, -O(CH2)n-Rb, halo, -CF3, -OCF3, R4 se selecciona de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo C1-6, arilalquilo, -ORa,
    15 NRcRc, -C(O)R3, -C(O)OR4 y -C(O)NRcRc; R5 es hidrógeno, halo, -CN, -NO2, CO2Ra o -CF3; cada n es independientemente un número entero de 1 a 3; cada R1 se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno,
    alquilo C1-6 y cicloalquilo C3-6; 20 cada Rb se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por -ORa, -CF3, -OCF3,-NRcRc, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRcRc y -C(O)NRaRd; cada Rc se selecciona independientemente de entre el grupo constituido por hidrógeno y alquilo inferior, o, alternativamente, dos sustituyentes Rc pueden considerarse junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos para formar un anillo saturado de 5 a 7 elementos que 25 comprende opcionalmente de 1 a 2 grupos heteroatómicos adicionales seleccionados de entre O, NRa, NRa-C(O)Ra, NRa-C(O)ORa y NRa-C(O)NRa; y cada Rd es independientemente monohidroxialquilo C1-6 o dihidroxialquilo C1-6.
  2. 2. Compuesto según la reivindicación 1, que contiene aproximadamente el 60% o más
    del diastereoisómero de fórmula estructural (Ia),
    imagen2
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    o que contiene aproximadamente el 90% o más del diastereoisómero de fórmula estructural (Ia),
    o que contiene aproximadamente el 99% o más del diastereoisómero de fórmula estructural (Ia).
  3. 3.
    Compuesto según las reivindicaciones 1 ó 2, en el que R5 es flúor.
    imagen1 4. Compuesto según la reivindicación 3, en el que R1 es hidrógeno; R2 es imagen1 o
    ; y R3 es hidrógeno, metilo, metoxi, trifluorometilo o cloro; y R4 es metilo, -C(O)CH3, -C(O)OCH3 o -C(O)OCH2CH3.
  4. 5.
    Compuesto según la reivindicación 3, en el que R1 es hidrógeno; R2 es hidrógeno, metilo, metoxi, trifluorometilo o cloro; y R4 es metilo, -C(O)CH3, -C(O)OCH3 o -C(O)OCH2CH3.
  5. 6.
    Compuesto según la reivindicación 1,
    imagen3
    en el que R1 es hidrógeno; R2 es R4 es metilo; y R3 se selecciona de entre el grupo constituido por hidrógeno, metilo, cloro y -CF3, y R5 es flúor.
  6. 7.
    Compuesto según la reivindicación 1, el cual es N4-(3-aminocarbonilbiciclo-[2.2.1]hept5-en-2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]-2,4-pirimidindiamina.
  7. 8.
    Compuesto según la reivindicación 7, que contiene el 95% o más del diastereoisómero (1R, 2R, 3S, 4S).
  8. 9.
    Compuesto según la reivindicación 1, el cual es (1R,2R,3S,4S)-N4-(3aminocarbonilbiciclo-[2.2.1]hept-5-en-2-il)-5-fluoro-N2-[3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]-2,4pirimidindiamina pura.
  9. 10.
    Compuesto según la reivindicación 8, que está en forma de una sal farmacéuticamente aceptable.
  10. 11.
    Compuesto según la reivindicación 10, en el que la sal es de un ácido orgánico que se selecciona de entre ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido propiónico, ácido hexanoico, ácido ciclopentanpropiónico, ácido glicólico, ácido oxálico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido palmítico, ácido benzoico, ácido 3-(4-hidroxibenzoil)benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido 1,2-etandisulfónico, ácido 2-hidroxietansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido 4-clorobencensulfónico, ácido 2-naftalensulfónico, ácido 4toluensulfónico, ácido camforsulfónico, ácido 4-metilbiciclo[2.2.2]-oct-2-en-1-carboxílico, ácido glucoheptónico, ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetilacético, ácido tert-butilacético, ácido laurilsulfúrico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido hidroxinaftoico, ácido salicílico, ácido esteárico y ácido mucónico.
  11. 12.
    Composición que comprende un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, y un vehículo, excipiente y/o diluyente, donde opcionalmente el vehículo, excipiente y/o diluyente es aceptable para utilizaciones farmacéuticas.
  12. 13.
    Un método in vitro para inhibir la proliferación de una célula, que comprende poner en contacto la célula con una cantidad de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 111, eficaz para inhibir su proliferación, donde opcionalmente la célula es una célula tumoral, donde opcionalmente la célula tumoral es una célula de tumor pulmonar, de colon, de mama, gástrico, de ovario, cervical, melanoma, renal, de próstata, leucemia, linfoma, neuroblastoma, pancreático, de vejiga o hepático.
  13. 14.
    Método de inhibición in vitro de una actividad de una Aurora cinasa que comprende poner en contacto la Aurora cinasa con una cantidad de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-11, eficaz para inhibir su actividad, siendo realizado opcionalmente in vitro donde la Aurora cinasa está aislada o parcialmente aislada, o siendo realizado dicho método in
    5 vitro con una célula que expresa una Aurora cinasa.
  14. 15. Método de inhibición de un proceso mediado por Aurora cinasa, que comprende poner en contacto in vitro una célula que expresa una Aurora cinasa con una cantidad de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-11, eficaz para inhibir el proceso mediado por Aurora cinasa, opcionalmente en el que el proceso inhibido mediado por Aurora cinasa es la mitosis, o en
    10 el que la célula es una célula tumoral, en el que la célula se pone en contacto con una concentración del compuesto que es igual o superior a su CI50 medida en un ensayo in vitro.
  15. 16. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-11 para su uso en un método para tratar el cáncer en un ser humano que lo necesite, donde el método comprende administrar al ser humano una cantidad de dicho compuesto eficaz para tratar el cáncer.
    15 17. Compuesto según la reivindicación 16, en la que el cáncer es un tumor metastásico.
  16. 18. Compuesto según la reivindicación 16, en la que el cáncer se selecciona de entre cáncer de pulmón, cáncer de mama, cáncer gástrico, cáncer de ovario, cáncer cervical, melanoma, cáncer renal, cáncer de próstata, linfoma, neuroblastoma, cáncer pancreático, cáncer de vejiga y cáncer de hígado.
    20 19. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 18 para su uso en un método en el que el compuesto se administra en forma de composición farmacéutica, adaptada para la administración por vía oral o intravenosa a un humano, en el que el compuesto se administra en una cantidad eficaz para conseguir una concentración en el suero que es igual o superior a la CI50 del compuesto, medida en un ensayo in vitro.
ES05844183T 2004-11-15 2005-11-15 Compuestos de primidindiamina-3-aminocarbonilo o biciclohepteno enriquecidos estereoisoméricamente y sus usos. Expired - Lifetime ES2359416T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US62819904P 2004-11-15 2004-11-15
US628199P 2004-11-15

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2359416T3 true ES2359416T3 (es) 2011-05-23

Family

ID=35516756

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES200502771A Expired - Fee Related ES2296477B2 (es) 2004-11-15 2005-11-14 Compuestos de pirimidindiamina 3-aminocarbonilo biciclohepteno, composiciones que los comprenden y metodos correspondientes.
ES05844183T Expired - Lifetime ES2359416T3 (es) 2004-11-15 2005-11-15 Compuestos de primidindiamina-3-aminocarbonilo o biciclohepteno enriquecidos estereoisoméricamente y sus usos.

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES200502771A Expired - Fee Related ES2296477B2 (es) 2004-11-15 2005-11-14 Compuestos de pirimidindiamina 3-aminocarbonilo biciclohepteno, composiciones que los comprenden y metodos correspondientes.

Country Status (26)

Country Link
US (4) US7863286B2 (es)
EP (1) EP1824489B1 (es)
JP (1) JP4812770B2 (es)
KR (1) KR101335917B1 (es)
CN (1) CN101171012B (es)
AT (1) ATE494280T1 (es)
AU (1) AU2005307849B2 (es)
BR (1) BRPI0516795A (es)
CA (1) CA2580150C (es)
CY (1) CY1112743T1 (es)
DE (2) DE102005054092A1 (es)
DK (1) DK1824489T3 (es)
ES (2) ES2296477B2 (es)
FR (1) FR2877944A1 (es)
GB (1) GB2420559B (es)
IL (1) IL181923A (es)
IT (1) ITMI20052171A1 (es)
MX (1) MX2007005807A (es)
NO (1) NO20073068L (es)
NZ (1) NZ554419A (es)
PL (1) PL1824489T3 (es)
RU (1) RU2416604C2 (es)
SI (1) SI1824489T1 (es)
UA (1) UA88660C2 (es)
WO (1) WO2006055561A2 (es)
ZA (1) ZA200702180B (es)

Families Citing this family (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1763514A2 (en) * 2004-05-18 2007-03-21 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Cycloalkyl substituted pyrimidinediamine compounds and their uses
GB2420559B (en) * 2004-11-15 2008-08-06 Rigel Pharmaceuticals Inc Stereoisomerically enriched 3-aminocarbonyl bicycloheptene pyrimidinediamine compounds and their uses
US20070032514A1 (en) * 2005-07-01 2007-02-08 Zahn Stephan K 2,4-diamino-pyrimidines as aurora inhibitors
JP5400388B2 (ja) 2005-12-15 2014-01-29 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド キナーゼインヒビターおよびその利用
CN101535276B (zh) 2006-10-23 2013-08-28 赛福伦公司 作为ALK和c-MET抑制剂的2,4-二氨基嘧啶稠合双环衍生物
WO2009050143A1 (en) * 2007-10-19 2009-04-23 Merck Serono S.A. Combinations of (1r, 2r, 3s, 4s) -n4- (3-aminocarbonylbicyclo [2. 2. 1] hept-5-ene-2-yl) - 5-fluoro-n2- [ ( 3 - methyl-4- (4 -methylpiperazin-1-yl] phenyl-2, 4-pyrimidineamine
US9273077B2 (en) 2008-05-21 2016-03-01 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Phosphorus derivatives as kinase inhibitors
PT2300013T (pt) 2008-05-21 2017-10-31 Ariad Pharma Inc Derivados de fósforo como inibidores de cinases
TWI546290B (zh) 2008-06-27 2016-08-21 賽基艾維洛米斯研究股份有限公司 雜芳基化合物及其用途
US8338439B2 (en) 2008-06-27 2012-12-25 Celgene Avilomics Research, Inc. 2,4-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
US11351168B1 (en) 2008-06-27 2022-06-07 Celgene Car Llc 2,4-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
RU2535032C2 (ru) 2008-12-22 2014-12-10 Милленниум Фармасьютикалз, Инк. Сочетание ингибиторов аврора киназы и анти-cd 20 антител
WO2010144468A1 (en) 2009-06-10 2010-12-16 Abbott Laboratories 2- ( lh-pyrazol-4 -ylamino ) -pyrimidine as kinase inhibitors
KR101726444B1 (ko) * 2009-08-31 2017-04-12 스미또모 가가꾸 가부시키가이샤 수지, 레지스트 조성물 및 레지스트 패턴의 제조 방법
US8927547B2 (en) 2010-05-21 2015-01-06 Noviga Research Ab Pyrimidine derivatives
KR101841000B1 (ko) 2010-07-28 2018-03-22 스미또모 가가꾸 가부시키가이샤 포토레지스트 조성물
CN105566229A (zh) 2010-08-10 2016-05-11 西建阿维拉米斯研究公司 Btk抑制剂的苯磺酸盐及其用途和制备方法
JP6195692B2 (ja) 2010-08-30 2017-09-13 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法並びに新規化合物及び樹脂
MX382354B (es) 2010-11-01 2025-03-13 Celgene Car Llc Compuestos heterocíclicos y usos de los mismos.
EP2635285B1 (en) 2010-11-01 2017-05-03 Celgene Avilomics Research, Inc. Heteroaryl compounds and uses thereof
JP5957003B2 (ja) 2010-11-10 2016-07-27 セルジーン アヴィロミクス リサーチ， インコーポレイテッド 変異体選択的ｅｇｆｒ阻害剤およびその使用
EP2489663A1 (en) 2011-02-16 2012-08-22 Almirall, S.A. Compounds as syk kinase inhibitors
JP6034026B2 (ja) 2011-02-25 2016-11-30 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP5898520B2 (ja) 2011-02-25 2016-04-06 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP5947051B2 (ja) 2011-02-25 2016-07-06 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP5829940B2 (ja) 2011-02-25 2015-12-09 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP5898521B2 (ja) 2011-02-25 2016-04-06 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP5829939B2 (ja) 2011-02-25 2015-12-09 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP5829941B2 (ja) 2011-02-25 2015-12-09 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP6034025B2 (ja) 2011-02-25 2016-11-30 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP5947053B2 (ja) 2011-02-25 2016-07-06 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
DK2688883T3 (en) 2011-03-24 2016-09-05 Noviga Res Ab pyrimidine
US9834518B2 (en) 2011-05-04 2017-12-05 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Compounds for inhibiting cell proliferation in EGFR-driven cancers
JP5886696B2 (ja) 2011-07-19 2016-03-16 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP5912912B2 (ja) 2011-07-19 2016-04-27 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP6013799B2 (ja) 2011-07-19 2016-10-25 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP6013797B2 (ja) 2011-07-19 2016-10-25 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
JP6189020B2 (ja) 2011-07-19 2017-08-30 住友化学株式会社 レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
AR088570A1 (es) 2011-10-28 2014-06-18 Celgene Avilomics Res Inc Metodos para tratar una enfermedad o trastorno relacionado con la tirosina quinasa de bruton
PL2825042T3 (pl) 2012-03-15 2019-02-28 Celgene Car Llc Sole inhibitora kinazy receptora czynnika wzrostu naskórka
KR102081042B1 (ko) 2012-03-15 2020-02-26 셀젠 카르 엘엘씨 상피 성장 인자 수용체 키나제 억제제의 고체 형태
US20150166591A1 (en) 2012-05-05 2015-06-18 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for raf kinase mediated diseases
US9126950B2 (en) 2012-12-21 2015-09-08 Celgene Avilomics Research, Inc. Heteroaryl compounds and uses thereof
AU2014214846A1 (en) 2013-02-08 2015-07-23 Celgene Avilomics Research, Inc. ERK inhibitors and uses thereof
US9611283B1 (en) 2013-04-10 2017-04-04 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Methods for inhibiting cell proliferation in ALK-driven cancers
US9492471B2 (en) 2013-08-27 2016-11-15 Celgene Avilomics Research, Inc. Methods of treating a disease or disorder associated with Bruton'S Tyrosine Kinase
EP3076963A4 (en) 2013-12-06 2017-09-13 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Combination of aurora kinase inhibitors and anti-cd30 antibodies
US9415049B2 (en) 2013-12-20 2016-08-16 Celgene Avilomics Research, Inc. Heteroaryl compounds and uses thereof
MX2016012574A (es) 2014-03-28 2017-09-26 Calitor Sciences Llc Compuestos heteroarilo sustituidos y metodos de uso.
US10005760B2 (en) 2014-08-13 2018-06-26 Celgene Car Llc Forms and compositions of an ERK inhibitor
EP3206691B1 (en) 2014-10-14 2018-09-19 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Substituted heteroaryl compounds and methods of use
JP2018524292A (ja) 2015-07-21 2018-08-30 ミレニアム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＭｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． オーロラキナーゼインヒビターと化学療法剤の投与
WO2017044434A1 (en) 2015-09-11 2017-03-16 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Substituted heteroaryl compounds and methods of use
JP7065840B2 (ja) 2016-06-27 2022-05-12 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ２，４－ジアミノ－ピリミジン化合物ならびに該化合物の作製法および使用法
US10683297B2 (en) 2017-11-19 2020-06-16 Calitor Sciences, Llc Substituted heteroaryl compounds and methods of use
US11874276B2 (en) 2018-04-05 2024-01-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. STING levels as a biomarker for cancer immunotherapy
US20220305048A1 (en) 2019-08-26 2022-09-29 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Use of heparin to promote type 1 interferon signaling
CN112225703B (zh) * 2020-09-28 2022-03-11 广州智睿医药科技有限公司 一种治疗或预防与lrrk2激酶或异常lrrk2突变激酶活性相关疾病的药物
KR102939283B1 (ko) * 2022-05-03 2026-03-13 한국화학연구원 5-클로로-2,4-다이아미노피리미딘을 포함하는 키나아제 억제 화합물, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Family Cites Families (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2153494C2 (ru) 1993-10-12 2000-07-27 Дзе Дюпон Мерк Фармасьютикал Компани 1-n-алкил-n-арилпиримидинамины, способ лечения заболеваний, фармацевтическая композиция
PL313973A1 (en) 1993-10-12 1996-08-05 Du Pont Merck Pharma 1 n-alkyl-n-arylopyrimidin amines and their derivatives
US6716575B2 (en) 1995-12-18 2004-04-06 Sugen, Inc. Diagnosis and treatment of AUR1 and/or AUR2 related disorders
EP1655369A1 (en) 1995-12-18 2006-05-10 Sugen, Inc. Diagnosis and treatment of AUR-1 and/or AUR-2 related disorders
US7119174B2 (en) 1995-12-18 2006-10-10 Sugen, Inc. Diagnosis and treatment of AUR1 and/or AUR2 related disorders
TW440563B (en) * 1996-05-23 2001-06-16 Hoffmann La Roche Aryl pyrimidine derivatives and a pharmaceutical composition thereof
JP2002520027A (ja) 1998-07-09 2002-07-09 ロンザ ア−ゲ− （１ｒ，４ｓ）−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタ−５−エン−３−オン誘導体の製造方法
GB9828511D0 (en) * 1998-12-24 1999-02-17 Zeneca Ltd Chemical compounds
EP1257546A1 (en) 2000-02-17 2002-11-20 Amgen Inc. Kinase inhibitors
GB0016877D0 (en) 2000-07-11 2000-08-30 Astrazeneca Ab Chemical compounds
EP1343782B1 (en) * 2000-12-21 2009-05-06 SmithKline Beecham Corporation Pyrimidineamines as angiogenesis modulators
KR100874791B1 (ko) 2001-05-29 2008-12-18 바이엘 쉐링 파마 악티엔게젤샤프트 Ｃｄｋ-억제 피리미딘, 그의 제조방법 및 약제로서의 용도
JP2005500294A (ja) 2001-06-19 2005-01-06 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー ホスホジエステラーゼ７に対するピリミジン阻害剤
US20030139435A1 (en) 2001-06-26 2003-07-24 Gulzar Ahmed N-heterocyclic inhibitors of TNF-alpha expression
WO2003030909A1 (en) * 2001-09-25 2003-04-17 Bayer Pharmaceuticals Corporation 2- and 4-aminopyrimidines n-substtituded by a bicyclic ring for use as kinase inhibitors in the treatment of cancer
WO2003026664A1 (en) * 2001-09-26 2003-04-03 Bayer Corporation 2-phenylamino-4- (5-pyrazolylamino) -pyramidine derivatives as kinase inhibitors, in particular, src kinase inhibitors
WO2003040141A1 (en) * 2001-09-28 2003-05-15 Bayer Pharmaceuticals Corporation Oxazolyl-phenyl-2,4-diamino-pyrimidine compounds and methods for treating hyperproliferative disorders
ATE407678T1 (de) 2001-10-17 2008-09-15 Boehringer Ingelheim Pharma Pyrimidinderivate, arzneimittel enthaltend diese verbindungen, deren verwendung und verfahren zu ihrer herstellung
AU2002367172A1 (en) 2001-12-21 2003-07-15 Bayer Pharmaceuticals Corporation 2,4-diamino-pyrimidine derivative compounds as inhibitors of prolylpeptidase, inducers of apoptosis and cancer treatment agents
TWI329105B (en) 2002-02-01 2010-08-21 Rigel Pharmaceuticals Inc 2,4-pyrimidinediamine compounds and their uses
AU2003244098A1 (en) * 2002-06-28 2004-01-19 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Diaminopyrimidinecarboxa mide derivative
ES2445208T3 (es) 2002-07-29 2014-02-28 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compuestos de 2,4-pirimidindiamina para uso en métodos para tratar o prevenir enfermedades autoinmunitarias
US7220775B2 (en) * 2002-08-07 2007-05-22 H. Lundbeck A/S Compound useful for the treatment of neuropathic pain
BRPI0413018B8 (pt) 2003-07-30 2021-05-25 Rigel Pharmaceuticals Inc composto, e, uso de um composto
WO2005013996A2 (en) 2003-08-07 2005-02-17 Rigel Pharmaceuticals, Inc. 2,4-pyrimidinediamine compounds and uses as anti-proliferative agents
EP1689722A2 (en) 2003-10-10 2006-08-16 Bayer Pharmaceuticals Corporation 4-aminopyrimidine derivatives for treatment of hyperproliferative disorders
DE10349423A1 (de) 2003-10-16 2005-06-16 Schering Ag Sulfoximinsubstituierte Parimidine als CDK- und/oder VEGF-Inhibitoren, deren Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
JP2007514775A (ja) 2003-12-19 2007-06-07 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド １−（２，４−ピリミジンジアミノ）−２−シクロペンタンカルボキサイミド合成中間体の立体異性体および立体異性体混合物
EP1763514A2 (en) * 2004-05-18 2007-03-21 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Cycloalkyl substituted pyrimidinediamine compounds and their uses
WO2006004776A1 (en) 2004-06-29 2006-01-12 Rigel Pharmaceuticals, Inc. 4-pyrimidineamine compounds and their uses as anti-proliferative agents
JP2008511659A (ja) 2004-09-01 2008-04-17 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ２，４−ピリミジンジアミン化合物の合成
GB2420559B (en) 2004-11-15 2008-08-06 Rigel Pharmaceuticals Inc Stereoisomerically enriched 3-aminocarbonyl bicycloheptene pyrimidinediamine compounds and their uses
ATE421996T1 (de) 2004-11-15 2009-02-15 Rigel Pharmaceuticals Inc Verfahren zur herstellung optisch aktiver n- carbamat-geschützter beta-lactame durch optische auflösung unter verwendung einer candida antarctica lipase
EP1814878B1 (en) 2004-11-24 2012-01-04 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Spiro-2, 4-pyrimidinediamine compounds and their uses
DE602006010979D1 (de) 2005-01-19 2010-01-21 Rigel Pharmaceuticals Inc Prodrugs aus 2,4-pyrimidindiamin-verbindungen und ihre verwendungen
EP1883302A4 (en) 2005-05-03 2009-05-20 Rigel Pharmaceuticals Inc JAK KINASE HEMMER AND ITS USE
US20070032514A1 (en) 2005-07-01 2007-02-08 Zahn Stephan K 2,4-diamino-pyrimidines as aurora inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
AU2005307849B2 (en) 2012-11-15
IL181923A0 (en) 2007-07-04
CY1112743T1 (el) 2016-02-10
AU2005307849A1 (en) 2006-05-26
RU2007122381A (ru) 2008-12-20
BRPI0516795A (pt) 2008-09-23
JP2008520580A (ja) 2008-06-19
US8044054B2 (en) 2011-10-25
DE602005025803D1 (de) 2011-02-17
JP4812770B2 (ja) 2011-11-09
US20090137589A1 (en) 2009-05-28
NZ554419A (en) 2010-09-30
GB0523012D0 (en) 2005-12-21
EP1824489B1 (en) 2011-01-05
ES2296477B2 (es) 2011-09-28
CN101171012A (zh) 2008-04-30
ES2296477A1 (es) 2008-04-16
FR2877944A1 (fr) 2006-05-19
CA2580150A1 (en) 2006-05-26
RU2416604C2 (ru) 2011-04-20
WO2006055561A2 (en) 2006-05-26
US20080051412A1 (en) 2008-02-28
HK1114338A1 (en) 2008-10-31
IL181923A (en) 2012-03-29
GB2420559A (en) 2006-05-31
GB2420559B (en) 2008-08-06
ITMI20052171A1 (it) 2006-05-16
US7863286B2 (en) 2011-01-04
UA88660C2 (ru) 2009-11-10
MX2007005807A (es) 2007-10-18
US8101627B2 (en) 2012-01-24
ATE494280T1 (de) 2011-01-15
US20070179140A1 (en) 2007-08-02
WO2006055561A3 (en) 2008-05-22
ZA200702180B (en) 2008-09-25
SI1824489T1 (sl) 2011-05-31
CN101171012B (zh) 2013-04-17
KR101335917B1 (ko) 2013-12-03
NO20073068L (no) 2007-06-15
CA2580150C (en) 2013-10-22
DE102005054092A1 (de) 2006-07-06
KR20070085571A (ko) 2007-08-27
US20090176981A1 (en) 2009-07-09
US8030483B2 (en) 2011-10-04
PL1824489T3 (pl) 2011-09-30
DK1824489T3 (da) 2011-04-26
EP1824489A2 (en) 2007-08-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2359416T3 (es) Compuestos de primidindiamina-3-aminocarbonilo o biciclohepteno enriquecidos estereoisoméricamente y sus usos.
US8546398B2 (en) Stereoisomerically enriched 3-aminocarbonyl bicycloheptene pyrimidinediamine compounds and their uses
HK1114338B (en) Stereoisomerically enriched 3-aminocarbonyl bicycloheptene pyrimidinediamine compounds and their uses