ES2363131T3 - Inhibidores del virus de la hepatitis c. - Google Patents

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ES2363131T3 ES03731248T ES03731248T ES2363131T3 ES 2363131 T3 ES2363131 T3 ES 2363131T3 ES 03731248 T ES03731248 T ES 03731248T ES 03731248 T ES03731248 T ES 03731248T ES 2363131 T3 ES2363131 T3 ES 2363131T3
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Li-Quang Sun
Sing-Yuen Sit
Ny Sin
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Andrew Charles Good
Yan Chen
Jeffrey Allen Campbell
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Abstract

Un compuesto que tiene la fórmula en la que: (a) R1 es alquilo C1-8, cicloalquilo C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10; (b) m es 1 ó 2; (c) n es 1 ó 2; (d) R2 es H, alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o cicloalquilo C3-7, cada uno opcionalmente sustituido con halógeno; (e) R3 es alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con halo, ciano, amino, dialquilamino C1-6, arilo C6-10, alquilarilo C7- 14, alcoxi C1-6, carboxi, hidroxi, ariloxi, alquilariloxi C7-14, alquil C2-6-éster, alquilaril C8-15-éster; alquenilo C3-12, cicloalquilo C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10, en los que el cicloalquilo o alquilcicloalquilo está opcionalmente sustituido con hidroxi, alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o alcoxi C1-6; o R3 junto con el átomo de carbono al que está unido forma un grupo cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido con alquenilo C2-6; (f) Y es H, fenilo sustituido con nitro, piridilo sustituido con nitro o alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con ciano, OH o cicloalquilo C3-7; con la condición de que si R4 o R5 es H entonces Y sea H; (g) B es H, alquilo C1-6, R4-(C=O)-, R4O(C=O)-, R4-N(R5)-C(=O)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2- o R4-N(R5)-SO2-; (h) R4 es (i) alquilo C1-10 opcionalmente sustituido con fenilo, carboxilo, alcanoílo C1-6, 1-3 halógenos, hidroxi, - Oalquilo C(O) C1-6, alcoxi C1-6, amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, amido o (alquil inferior)amido; (ii) cicloalquilo C3-7, cicloalcoxi C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10, cada uno opcionalmente sustituido con hidroxi, carboxilo, (alcoxi C1-6)carbonilo, amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, amido o (alquil inferior)amido; (iii) arilo C6-10 o arilalquilo C7-16, cada uno opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, halógeno, nitro, hidroxi, amido, (alquil inferior)amido o amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6; (iv) Het; (v) biciclo(1.1.1)pentano; o (vi) -C(O)Oalquilo C1-6, alquenilo C2-6 o alquinilo C2-6; (i) R5 es H; alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con 1-3 halógenos; o alcoxi C1-6 con la condición de que R4 sea alquilo C1-10; (j) X es O, S, SO, SO2, OCH2, CH2O o NH; (k) R' es Het; o arilo C6-10 o alquilarilo C7-14, opcionalmente sustituido con Ra; y (l) Ra es alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, cicloalcoxi C3-7, halo-alquilo C1-6, CF3, mono- o di-halo-alcoxi C1- 6, ciano, halo, tioalquilo, hidroxi, alcanoílo, NO2, SH, amino, alquil C1-6-amino, dialquil (C1-6)-amino, dialquil (C1-6)- amida, carboxilo, carboxi (C1-6)-éster, alquil C1-6-sulfona, alquil C1-6-sulfonamida, dialquil (C1-6)(alcoxi)amina, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros; con la condición de que cuando el término "heterociclo" o "Her" se refiere a heterociclos bicíclicos de 7-12 miembros y a heterociclos monocíclicos de 5-7 miembros; en la que el heterociclo bicíclico puede contener de uno a tres sustituyentes en cualquiera de los átomos de carbono del anillo seleccionados entre alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, cicloalcoxi C3-7, halo-alquilo C1-6, CF3, mono- o di-halo-alcoxi C1-6, ciano, halo, tioalquilo, hidroxi, alcanoílo, NO2, SH, amino, alquil C1-6-amino, dialquil (C1-6)-amino, dialquil (C1-6)-amida, carboxilo, carboxi (C1-6)- éster, alquil C1-6-sulfona, alquil C1-6-sulfonamida, alquil C1-6-sulfóxido, dialquil (C1-6)(alcoxi)amina, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros, en la que cuando dos sustituyentes están unidos a átomos de carbono vecinos del heterociclo bicíclico, pueden unirse para formar un anillo que contiene hasta dos heteroátomos seleccionados entre oxígeno y nitrógeno; en la que el heterociclo monocíclico puede contener de uno a tres sustituyentes en cualquiera de los átomos del anillo seleccionados entre alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, cicloalcoxi C3-7, halo-alquilo C1-6, CF3, mono- o dihalo- alcoxi C1-6, ciano, halo, tioalquilo, hidroxi, alcanoílo, NO2, SH, amino, alquil C1-6-amino, dialquil (C1-6)-amino, dialquil (C1-6)-amida, carboxilo, carboxi (C1-6)-éster, alquil C1-6-sulfona, alquil C1-6-sulfóxido, alquil C1-6-sulfonamida, dialquil (C1-6)(alcoxi)amina, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros; el X- R' no sea **Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo.

Description

Campo de la invención
La presente invención se refiere, en general, a compuestos antivirales y, más específicamente, se refiere a compuestos que inhiben el funcionamiento de la NS3 proteasa que codifica el Virus de la Hepatitis C (VHC), a composiciones que comprenden dichos compuestos y a los compuestos para su uso en procedimientos para inhibir el funcionamiento de la NS3 proteasa.
Antecedentes de la invención
El VHC es un patógeno humano principal, que se calcula que infecta a 170 millones de personas en todo el mundo, aproximadamente cinco veces el número de infectados por el virus de la inmunodeficiencia humana de tipo 1. Una fracción sustancial de estos individuos infectados por el VHC desarrolla graves enfermedades hepáticas progresivas, que incluyen cirrosis y carcinoma hepatocelular. (Lauer, G. M.; Walker, B. D. N. Engl. J. Med. (2001), 345, 41-52).
Actualmente, la terapia más eficaz contra el VHC emplea una combinación de interferón alfa y ribavirina, lo que conduce a una eficacia duradera en el 40% de los pacientes. (Poynard, T. y col. Lancet (1998), 352, 1426-1432). Recientes resultados clínicos demuestran que el interferón alfa pegilado es superior al alfa interferón no modificado como monoterapia (Zeuzem, S. y col. N. Engl. J. Med. (2000), 343, 1666-1672). Sin embargo, incluso con regímenes terapéuticos experimentales que implican combinaciones de interferón alfa pegilado y ribavirina, una fracción sustancial de pacientes no tienen una reducción duradera en la carga viral. Por tanto, existe una clara y fuerte necesidad de desarrollar terapias eficaces para el tratamiento de infección por el VHC.
El VHC es un virus de ARN de cadena positiva. En base a una comparación de la secuencia de aminoácidos deducida y en la gran similitud en la región 5’ no traducida, el VHC se ha clasificado como un género individual en la familia Flaviviridae. Todos los miembros de la familia Flaviviridae presentan viriones con cubierta que contienen un genoma de ARN de cadena positiva que codifica todas las proteínas específicas de virus conocidas mediante la traducción de una sola fase de lectura abierta sencilla, ininterrumpida.
Dentro de la secuencia de nucleótidos y de aminoácidos codificada a lo largo del genoma del VHC se encuentra una considerable heterogeneidad. Se han caracterizado al menos 6 genotipos principales, y se han descrito más de 50 subtipos. Los principales genotipos del VHC difieren en su distribución en todo el mundo y el significado clínico de la heterogeneidad genética del VHC sigue siendo difícil de encontrar a pesar de numerosos estudios del posible efecto de genotipos sobre la patogénesis y terapia.
El genoma de ARN monocatenario del VHC tiene una longitud de aproximadamente 9500 nucleótidos y presenta una sola fase de lectura abierta (ORF) que codifica una sola poliproteína grande de aproximadamente 3000 aminoácidos. En células infectadas, proteasas celulares y virales escinden esta poliproteína en sitios múltiples para producir las proteínas estructurales y no estructurales (NS). En el caso del VHC, la generación de proteínas no estructurales maduras (NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A, y NS5B) se efectúa mediante dos proteasas virales. La primera de ellas, hasta ahora poco caracterizada, escinde la unión NS2-NS3; la segunda es una serina proteasa contenida dentro de la región N-terminal de NS3 (en lo sucesivo en el presente documento denominada NS3 proteasa) y media todas las escisiones posteriores aguas abajo de NS3, tanto en cis, en el sitio de escisión NS3NS4A, como en trans, para los restantes sitios NS4A-NS4B, NS4B-NS5A, NS5A-NS5B. La proteína NS4A parece realizar funciones múltiples, actuando como un cofactor para la NS3 proteasa y posiblemente ayudando a localizar NS3 en la membrana y otros componentes de replicasa virales. La formación del complejo de la proteína NS3 con NS4A parece necesaria para el procesamiento de sucesos, mejorando la eficacia proteolítica en todos los sitios. La proteína NS3 también muestra actividades nucleósido tirofosfatasa y ARN helicasa. NS5B es una ARN polimerasa dependiente de ARN que está implicada en la replicación del VHC.
Entre los compuestos que han demostrado eficacia inhibiendo la replicación del VHC, como inhibidores selectivos de serina proteasa del VHC, están los compuestos peptídicos divulgados en la patente de EEUU Nº 6.323.180.
Sumario de la invención
La presente invención proporciona un compuesto de fórmula I, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables o solvatos del mismo,
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en la que:
(b) mes1ó2: 5 (c) nes1ó2;
(d)
R2 es H alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o cicloalquilo C3-7, cada uno opcionalmente sustituido con halógeno;
(e)
R3 es alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con halo, ciano, amino, dialquilamino C1-6, arilo C6-10, alquilarilo C7-14, alcoxi C1-6, carboxi, hidroxi, ariloxi, alquilariloxi C7-14, alquil C2-6-éster, alquilaril C8-15-éster; alquenilo C3-12, cicloalquilo C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10, en los que el cicloalquilo o alquilcicloalquilo está opcionalmente
10 sustituido con hidroxi, alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o alcoxi C1-6; o R3 junto con el átomo de carbono al que está unido forma un grupo cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido con alquenilo C2-6;
(f)
Y es H, fenilo sustituido con nitro, piridilo sustituido con nitro o alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con ciano, OH o cicloalquilo C3-7; con la condición de que si R4 o R5 es H entonces Y sea H;
(g)
B es H, alquilo C1-6, R4-(C=O)-, R4O(C=O)-, R4-N(R5)-C(=O)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2-o R4-N(R5)-SO2-;
15 (h) R4 es (i) alquilo C1-10 opcionalmente sustituido con fenilo, carboxilo, alcanoílo C1-6, 1-3 halógenos, hidroxi, -Oalquilo C(O) C1-6, alcoxi C1-6, amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, amido o (alquil inferior)amido;
(ii) cicloalquilo C3-7, cicloalcoxi C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10, cada uno opcionalmente sustituido con hidroxi, carboxilo, (alcoxi C1-6)carbonilo, amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, amido o (alquil inferior)amido;
(iii) arilo C6-10 o arilalquilo C7-10, cada uno opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, halógeno, nitro, hidroxi,
20 amido, (alquil inferior)amido o amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6; (iv) Het; (v) biciclo(1.1.1)pentano; o (vi) -C(O)Oalquilo C1-6, alquenilo C2-6 o alquinilo C2-6;
(i) R5 es H; alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con 1-3 halógenos; o alcoxi C1-6 con la condición de que R4 sea alquilo C1-10;
(j) X es O, S, SO, SO2, OCH2, CH2O o NH; 25 (k) R' es Het; o arilo C6-10 o alquilarilo C7-14, opcionalmente sustituido con Ra; y
(l) Ra es alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, cicloalcoxi C3-7, halo-alquilo C1-6, CF3, mono-o di-halo-alcoxi C1-6, ciano, halo, tioalquilo, hidroxi, alcanoílo, NO2, SH, amino, alquil C1-6-amino, dialquil (C1-6)-amino, dialquil (C1-6)amida, carboxilo, carboxi (C1-6)-éster, alquil C1-6-sulfona, alquil C1-6-sulfonamida, dialquil (C1-6)-(alcoxi)amina, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros;
30 con la condición de que X-R' no sea
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o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo.
El significado del término 'Het' se explica en la página 5.
La presente invención también proporciona composiciones que comprenden los compuestos o sales
35 farmacéuticamente aceptables, solvatos o profármacos de los mismos y un vehículo farmacéuticamente aceptable. En particular, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas útiles para inhibir NS3 de VHC que comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también proporciona los compuestos para su uso en procedimientos de tratamiento de pacientes infectados con VHC, comprendiendo dichos procedimientos administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo. Además, la presente invención proporciona los compuestos para su uso en procedimientos para inhibir la proteasa NS3 de VHC, comprendiendo dichos procedimientos administrar a un paciente una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención.
En virtud de la presente invención, ahora es posible proporcionar fármacos mejorados que comprenden los compuestos de la invención, que pueden ser eficaces en el tratamiento de pacientes infectados con VHC. Específicamente, la presente invención proporciona compuestos peptídicos que pueden inhibir el funcionamiento de la proteasa NS3, por ejemplo, junto con la proteasa NS4A.
Descripción detallada de la invención
Las definiciones estereoquímicas y convenciones usadas en el presente documento siguen el McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms. S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Book Company, Nueva York (1984) y Stereochemistry of Organic Compounds, Eliel, E. y Wilen, S., John Wiley y Sons, Inc., Nueva York (1994). Muchos compuestos orgánicos existen en formas ópticamente activas, es decir, tienen la capacidad de rotar el plano de luz polarizada en el plano. A la hora de describir un compuesto ópticamente activo, se usan los prefijos D y L o R y S para indicar la configuración absoluta de la molécula alrededor de su centro o centros quirales. Los prefijos d y l o (+) y (-) se emplean para designar el signo de rotación de luz polarizada en el plano por el compuesto, donde (-) o l significa que el compuesto es levogiro y (+) o d significa que el compuesto es dextrogiro. Para una estructura química dada, estos compuestos, denominados estereoisómeros, son idénticos, con la excepción de que son imágenes especulares uno del otro. Un estereoisómero específico de un par que es imagen especular también puede denominarse enantiómero, y una mezcla de dichos isómeros normalmente se denomina mezcla enantiomérica.
La nomenclatura usada para describir radicales orgánicos, por ejemplo, hidrocarburos e hidrocarburos sustituidos, generalmente sigue la nomenclatura convencional conocida en la técnica, a menos que se defina específicamente otra cosa. Las combinaciones de grupos, por ejemplo, alquilalcoxiamina, incluyen todas las configuraciones estables posibles, a menos que se indique específicamente otra cosa. Ciertos radicales y combinaciones se definen a continuación con fines de ilustración.
Los términos "mezcla racémica" y "racemato" se refieren a una mezcla equimolar de dos especies enantioméricas, desprovista de actividad óptica.
El término "quiral" se refiere a moléculas que tienen la propiedad de no superposición del compañero de imagen especular, mientras que el término "aquiral" se refiere a moléculas que están superpuestos sobre su compañero de imagen especular.
El término "estereoisómeros" se refiere a compuestos que tienen idéntica composición química, pero se diferencian con respecto a la disposición de los átomos o grupos en el espacio.
El término "diastereómero" se refiere a un estereoisómero que no es un enantiómero, por ejemplo, un estereoisómero con dos o más centros de quiralidad y cuyas moléculas no son imágenes especulares una de otra. Los diastereómeros tienen propiedades físicas diferentes, por ejemplo, puntos de fusión, puntos de ebullición, propiedades espectrales y reactividades. Las mezclas de diastereómeros pueden separarse en procedimientos analíticos de alta resolución tales como electroforesis y cromatografía.
El término "enantiómeros" se refiere a dos estereoisómeros de un compuesto que son imágenes especulares que no pueden superponerse entre sí.
La expresión "sal farmacéuticamente aceptable" pretende incluir sales no tóxicas sintetizadas a partir de un compuesto que contiene un resto básico o ácido por procedimientos químicos convencionales. En general, dichas sales pueden prepararse haciendo reaccionar las formas de ácido o base libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido apropiado en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de los dos; en general, se prefieren medios no acuosos tales como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Se encuentran listas de sales adecuadas en Remington's Pharmaceutical Sciences, 18ª ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1990, pág. 1445. Los compuestos de la presente invención son útiles en la forma de la base
o ácido libre o en forma de una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Todas las formas están dentro del alcance de la invención.
La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a la cantidad total de cada componente activo que es suficiente para mostrar un beneficio significativo para el paciente, por ejemplo, una reducción sostenida en la carga viral. Cuando se aplica a un principio activo individual, administrado solo, la expresión se refiere a ese ingrediente solo. Cuando se aplica a una combinación, la expresión se refiere a cantidades combinadas de los principios activos que dan como resultado el efecto terapéutico, tanto si se administran en combinación como si se administran en serie o simultáneamente.
La expresión "compuestos de la invención", y expresiones equivalentes, pretende incluir compuestos de Fórmula 1, y sales farmacéuticamente aceptables y solvatos, por ejemplo hidratos. De forma análoga, la referencia a intermedios pretende incluir sus sales y solvatos, siempre que el contexto así lo permita. Las referencias al compuesto de la invención también incluyen los compuestos preferidos de Fórmula II y III.
El término "derivado" se refiere a un compuesto modificado químicamente en el que la modificación se considera rutinaria por químico experto, tal como un éster o una amida de un ácido, grupos protectores, tales como un grupo bencilo para un alcohol o tiol, y un grupo terc-butoxicarbonilo para una amina.
El término "solvato" se refiere a una asociación física de un compuesto de la presente invención con una o más moléculas disolventes, orgánicas o inorgánicas. Esta asociación física incluye unión de hidrógeno. En ciertos casos, el solvato podrá aislarse, por ejemplo, cuando se incorporan una o más moléculas disolventes en la estructura reticular cristalina del sólido cristalino. "Solvato" incluye solvatos en fase de solución y solvatos aislables. Los solvatos ejemplares incluyen hidratos, etanolatos, metanolatos y similares.
El término "paciente" incluye tanto seres humanos como otros mamíferos.
La expresión "composición farmacéutica" se refiere a una composición que comprende un compuesto de la invención junto con al menos un soporte farmacéutico adicional, es decir, adyuvante, excipiente o vehículo, tales como diluyentes, agentes conservantes, cargas, agentes reguladores de la fluidez, agentes disgregantes, agentes humectantes, agentes emulsionantes, agentes de suspensión, agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes perfumantes, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos, agentes lubricantes y agentes dispersantes, dependiendo de la naturaleza de la vía de administración y de las formas de dosificación. Por ejemplo, pueden usarse los ingredientes indicados en Remington's Pharmaceutical Sciences, 18ª ed., Mack Publishing Company, Easton, PA (1999).
La expresión "farmacéuticamente aceptable" se emplea en el presente documento para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que, dentro del alcance del juicio médico, son adecuados para su uso en contacto con los tejidos de pacientes sin inducir una toxicidad, irritación o respuesta alérgica excesivas u otro problema o complicación en proporción con una relación riesgo/beneficio razonable.
El término "tratar" se refiere a: (i) prevenir la aparición de una enfermedad, trastorno o afección en un paciente que puede estar predispuesto a la enfermedad, trastorno y/o afección pero que aún no se ha diagnosticado que la tenga;
(ii) inhibir la enfermedad, trastorno o afección, es decir, detener su desarrollo; y (iii) aliviar la enfermedad, trastorno o afección, es decir, provocar la regresión de la enfermedad, trastorno y/o afección. El término "sustituido", como se usa en el presente documento, incluye sustitución desde uno hasta el número máximo de sitios de unión posibles en el núcleo, por ejemplo, radical orgánico, al que está unido el sustituyente, por ejemplo, mono-, di-, tri-o tetrasustituido, a menos que se indique específicamente otra cosa.
El término "halo", como se usa en el presente documento, se refiere a un sustituyente halógeno seleccionado entre bromo, cloro, flúor o yodo. El término "haloalquilo" se refiere a un grupo alquilo que está sustituido con uno o más sustituyentes halo.
El término "alquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a sustituyentes alquilo de cadena lineal o ramificada, acíclica, e incluye, por ejemplo, metilo, etilo, propilo, butilo, terc-butilo, hexilo, 1-metiletilo, 1-metilpropilo, 2-metilpropilo, 1,1-dimetiletilo. Por lo tanto, alquilo C1-6 se refiere a un grupo alquilo que tiene de uno a seis átomos de carbono. El término "alquilo inferior" se refiere a un grupo alquilo que tiene de uno a seis, preferentemente de uno a cuatro, átomos de carbono. El término "alquiléster" se refiere a un grupo alquilo que contiene adicionalmente un grupo éster. En general, un intervalo numérico de carbonos indicado, por ejemplo, alquil C2-6-éster, incluye todos los átomos de carbono del radical.
El término "alquenilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un radical alquilo que contiene al menos un doble enlace, por ejemplo, etenil(vinilo) y alquilo.
El término "alcoxi", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo con el número indicado de átomos de carbono unidos a un átomo de oxígeno. Alcoxi incluye, por ejemplo, metoxi, etoxi, propoxi, 1-metiletoxi, butoxi y 1,1-dimetil-etoxi. El último radical se denomina en la técnica terc-butoxi. El término "alcoxicarbonilo" se refiere a un grupo alcoxi que contiene adicionalmente un grupo carbonilo.
El término "cicloalquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un sustituyente cicloalquilo que contiene el número indicado de átomos de carbono e incluye, por ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y grupos espirocíclicos tales como espirociclopropilo y espirociclobutilo. El término "cicloalcoxi", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo cicloalquilo unido a un átomo de oxígeno, tal como, por ejemplo, ciclobutiloxi o ciclopropiloxi. El término "alquilcicloalquilo" se refiere a un grupo cicloalquilo unido a un grupo alquilo. El intervalo numérico de carbonos indicado incluye el número total de carbonos en el radical, a menos que se indique específicamente otra cosa. Este alquil C4-10-cicloalquilo puede contener 1-7 átomos de carbono en el grupo alquilo y 3-9 átomos de carbono en el anillo, por ejemplo, ciclopropilmetilo o ciclohexiletilo.
5
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30
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40
El término "arilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un resto aromático que contiene el número indicado de átomos de carbono, tal como, pero sin limitación, fenilo, indanilo o naftilo. Por ejemplo, arilo C6-10 se refiere a un resto aromático que tiene de seis a diez átomos de carbono y que puede estar en forma de una estructura monocíclica o bicíclica. El término "haloarilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un arilo mono, di o tri-sustituido con uno o más átomos de halógeno. Los términos "alquilarilo", "arilalquilo" y "aralalquilo" se refieren a un grupo arilo sustituido con uno o más grupos alquilo. Por lo tanto, un grupo alquilarilo C7-14 puede tener 1-8 átomos de carbono en el grupo alquilo para un aromático monocíclico y de 1-4 átomos de carbono en el grupo alquilo para un aromático condensado. Los radicales arilo incluyen los que están sustituidos con sustituyentes típicos conocidos por los expertos en la materia, por ejemplo, halógeno, hidroxi, carboxi, carbonilo, nitro, sulfo, amino, ciano, dialquilamino haloalquilo, CF3, haloalcoxi, tioalquilo, alcanoílo, SH, alquilamino, alquilamida, dialquilamida, carboxiéster, alquilsulfona, alquilsulfonamida y alquil(alcoxi)amina. Los ejemplos de grupos alquilarilo incluyen bencilo, butilfenilo y 1-naftilmetilo. Los términos "alquilariloxi" y "alquilariléster" se refieren a grupos alquilarilo que contienen un átomo de oxígeno y un grupo éster, respectivamente.
El término "carboxialquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo carboxilo (COOH) unido a través de un grupo alquilo como se ha definido anteriormente e incluye, por ejemplo, ácido butírico.
El término "alcanoílo", como se usa en el presente documento, se refiere a radicales 1-oxoalquilo lineales o ramificados que contienen el número indicado de átomos de carbono e incluye, por ejemplo, formilo, acetilo, 1oxopropilo (propionilo), 2-metil-1-oxopropilo, 1-oxohexilo y similares.
El término "aminoaralquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo amino sustituido con un grupo aralquilo, tal como el siguiente amino aralquilo
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El término "alquilamida", como se usa en el presente documento, se refiere a una amida mono-sustituida con un alquilo, tal como
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El término "carboxialquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo carboxilo (COOH) unido a través de un grupo alquilo como se ha definido anteriormente e incluye, por ejemplo, ácido butírico.
El término "heterociclo", también denominado "Het", como se usa en el presente documento, se refiere a heterociclos bicíclicos de 7-12 miembros y a heterociclos monocíclicos de 5-7 miembros.
Son heterociclos bicíclicos preferidos sistemas de anillos bicíclicos condensados de 7-12 miembros (los dos anillos comparten un par adyacente de átomos) que contienen de uno a cuatro heteroátomos seleccionados entre nitrógeno, oxígeno y azufre, en los que los dos anillos del heterociclo están completamente insaturados. Los átomos que son heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados. El heterociclo bicíclico puede contener los heteroátomos en uno o los dos anillos. El heterociclo bicíclico también puede contener sustituyentes en cualquiera de los átomos de carbono del anillo, por ejemplo, de uno a tres sustituyentes. Los ejemplos de sustituyentes adecuados incluyen alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, cicloalcoxi C3-7, halo-alquilo C1-6, CF3, mono-o di-halo-alcoxi C1-6, ciano, halo, tioalquilo, hidroxi, alcanoílo, NO2, SH, amino, alquil C1-6-amino, dialquil (C1-6)amino, dialquil (C1-6)-amida, carboxilo, carboxi (C1-6)-éster, alquil C1-6-sulfona, alquil C1-6-sulfonamida, alquil C1-6sulfóxido, dialquil (C1-6)(alcoxi)amina, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 y un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros. Cuando dos sustituyentes están unidos a átomos de carbono vecinos del heterociclo bicíclico, pueden unirse para formar un anillo, por ejemplo, un sistema de anillos de cinco, seis o siete miembros que contiene hasta dos heteroátomos seleccionados entre oxígeno y nitrógeno. El heterociclo bicíclico puede estar unido a su grupo colgante, por ejemplo X en la Fórmula I, a cualquier átomo del anillo y preferentemente carbono.
Los ejemplos de heterociclos bicíclicos incluyen los siguientes sistemas de anillos:
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Los heterociclos monocíclicos preferidos son sistemas de anillos saturados, parcialmente saturados o totalmente insaturados de 5-7 miembros (este último subconjunto del presente documento se denominan heteroaromáticos insaturados) que contienen en el anillo de uno a cuatro heteroátomos seleccionados entre nitrógeno, oxígeno y 5 azufre, en los que los heteroátomos de azufre y nitrógeno pueden estar opcionalmente oxidados. El heterociclo monocíclico también puede contener sustituyentes en cualquiera de los átomos en el anillo, por ejemplo, de uno a tres sustituyentes. Los ejemplos de sustituyentes adecuados incluyen alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, cicloalcoxi C3-7, halo-alquilo C1-6, CF3, mono-o di-halo-alcoxi C1-6, ciano, halo, tioalquilo, hidroxi, alcanoílo, NO2, SH, amino, alquil C1-6-amino, dialquil (C1-6)-amino, dialquil (C1-6)-amida, carboxilo, carboxi (C1-6)-éster, alquil C1-6-sulfona,
10 alquil C1-6-sulfóxido, alquil C1-6-sulfonamida, dialquil (C1-6)(alcoxi)amina, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 y heterociclo monocíclico de 5-7 miembros. El heterociclo monocíclico puede estar unido a su grupo colgante, por ejemplo X en la Fórmula I, en cualquier átomo del anillo.
Los ejemplos de heterociclos monocíclicos incluyen los siguientes:
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15 Los expertos en la materia reconocerán que los heterociclos usados en los compuestos de la presente invención deben ser estables. En general, los compuestos estables son aquellos que pueden sintetizarse, aislarse y formularse usando técnicas bien conocidas por los expertos en la materia sin degradación del compuesto.
Cuando se usan al nombrar los compuestos de la presente invención, las designaciones "P1', P1, P2, P3 y P4", como se usan en el presente documento, mapean las posiciones relativas de los restos de aminoácidos de una 20 unión de inhibidor de proteasa con respecto a la unión del sustrato de escisión de péptidos naturales. La escisión se produce en el sustrato natural entre P1 y P1' donde las posiciones no primas designan aminoácidos partiendo del extremo terminal C del sitio de escisión natural de los péptidos extendiéndose hacia el extremo N; mientras, las posiciones primas proceden del extremo terminal N de la designación del sitio de escisión y se extienden hacia el extremo C. Por ejemplo, P1' se refiere a la primera posición más alejada del lado derecho del extremo C del sitio de
25 escisión (es decir, primera posición del extremo N); mientras que P1 inicia la numeración desde el lado izquierdo del sitio de escisión del extremo C, P2: segunda posición del extremo C, etc.) (véase Berger A. & Schechter 1, Transactions of the Royal Society London series (1970), B257, 249-264].
Por lo tanto, en los compuestos de fórmula 1, las porciones "P1' a P4" de la molécula se indican como sigue:
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Como se usa en el presente documento, la expresión "ácido 1-aminociclopropil-carboxílico" (Acca) se refiere a un compuesto de fórmula:
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Como se usa en el presente documento, la expresión "terc-butilglicina" se refiere a un compuesto de fórmula:
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El término "resto" con respecto a un aminoácido o derivado de aminoácido se refiere a un radical obtenido a partir del α-aminoácido correspondiente por eliminación del hidroxilo del grupo carboxi y un hidrógeno del grupo αaminoácido. Por ejemplo, los términos Gln, Ala, Gly, Ile, Arg, Asp, Phe, Ser, Leu, Cys, Asn, Sar y Tyr representan los
10 "restos" de L-glutamina, L-alanina, glicina, L-isoleucina, L-arginina, L-ácido aspártico, L-fenilalanina, L-serina, Lleucina, L-cisteína, L-asparagina, sarcosina y L-tirosina, respectivamente.
La expresión "cadena lateral" con respecto a un aminoácido o resto de aminoácido se refiere a un grupo unido al átomo de carbono α del α-aminoácido. Por ejemplo, la cadena lateral o grupo R para glicina es hidrógeno, para alanina es metilo, para valina es isopropilo. Para los grupos o cadenas laterales R específicas de los α-aminoácidos
15 se hace referencia a A.L. Lehninger's text on Biochemistry (véase el capítulo 4).
Los compuestos de la presente invención tienen la estructura de Fórmula I: en la que:
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(b) mes1ó2; 5 (c) nes1ó2;
(d)
R2 es H alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o cicloalquilo C3-7, cada uno opcionalmente sustituido con halógeno;
(e)
R3 es alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con halo, ciano, amino, dialquilamino arilo C1-6, C6-10, alquilarilo C7-14, alcoxi C1-6, carboxi, hidroxi, ariloxi, alquilariloxi C7-14, alquil C2-6-éster, alquilaril C8-15-éster; alquenilo C3-12, cicloalquilo C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10, en los que el cicloalquilo o alquilcicloalquilo está opcionalmente
10 sustituido con hidroxi, alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o alcoxi C1-6; o R3 junto con el átomo de carbono al que está unido forma un grupo cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido con alquenilo C2-6;
(f)
Y es H, fenilo sustituido con nitro, piridilo sustituido con nitro o alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con ciano, OH o cicloalquilo C3-7; con la condición de que si R4 o R5 es H entonces Y sea H;
(g)
B es H, alquilo C1-6, R4-(C=O)-, R4O(C=O)-, R4-N(R5)-C(=O)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2-o R4-N(R5)-SO2-;
15 (h) R4 es (i) alquilo C1-10 opcionalmente sustituido con fenilo, carboxilo, alcanoílo C1-6, 1-3 halógenos, hidroxi, -Oalquilo C(O) C1-6, alcoxi C1-6, amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, amido o (alquil inferior)amido; (ii) cicloalquilo C3-7, cicloalcoxi C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10, cada uno opcionalmente sustituido con hidroxi, carboxilo, (alcoxi C1-6)carbonilo, amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, amido o (alquil inferior)amido;
(iii) arilo C6-10 o arilalquilo C7-16, cada uno opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, halógeno, nitro, hidroxi, 20 amido, (alquil inferior)amido o amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6; (iv) Het; (v) biciclo(1.1.1)pentano;
o (vi) -C(O)Oalquilo C1-6, alquenilo C2-6 o alquinilo C2-6;
(i) R5 es H; alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con 1-3 halógenos; o alcoxi C1-6 con la condición de que R4 sea alquilo C1-10;
(j) X es O, S, SO, SO2, OCH2, CH2O o NH; 25 (k) R' es Het; o arilo C6-10 o alquilarilo C7-14, opcionalmente sustituido con Ra; y
(l) R3 es alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, cicloalcoxi C3-7, halo-alquilo C1-6, CF3, mono-o di-halo-alcoxi C1-6, ciano, halo, tioalquilo, hidroxi, alcanoílo, NO2, SH, amino, alquil C1-6-amino, dialquil (C1-6)-amino, dialquil (C1-6)amida, carboxilo, carboxi (C1-6)-éster, alquil C1-6-sulfona, alquil C1-6-sulfonamida, dialquil (C1-6)(alcoxi)amina, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros;
30 con la condición de que X-R' no sea
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o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato de los mismos.
Preferentemente, R2 es alquenilo C2-6; R3 es alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con alcoxi C1-6 o cicloalquilo C3-7; Y es H; B es R4-(C=O)-, R4O(C=O)-o R4-N(R5)-C(=O)-; R4 es alquilo C1-10 opcionalmente sustituido con 1-3 halógeno 35 o alcoxi C1-6; o cicloalquilo C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10; R5 es H; X es O o NH; y R' es Het.
Los sustituyentes de cada agrupación pueden seleccionarse individualmente y combinarse en cualquier combinación que proporcione un compuesto estable de acuerdo con la presente invención. Además, más de un sustituyente de
10
15
20
25
30
cada grupo puede estar sustituido en el grupo núcleo con la condición de que haya suficientes sitios de unión disponibles. Por ejemplo, cada uno de los siguientes sustituyentes Ra, alcoxi C1-6, arilo C6 y un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros, puede estar sustituido en un heterociclo bicíclico R'.
En un aspecto preferido, los compuestos de la presente invención tienen la estructura de Fórmula II:
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en la que:
(b)
R2 es alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o cicloalquilo C3-7;
(c)
R3 es alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con arilo C6, alcoxi C1-6, carboxi, hidroxi, ariloxi, alquilariloxi C7-14, alquil C2-6-éster; alquilaril C8-15-éster; alquenilo C3-12, cicloalquilo C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10;
(d)
YesH;
(e)
B es H, alquilo C1-6, R4-(C=O)-, R4O(C=O)-, R4-N(R5)-C(=O)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2-o R4-N(R5)-SO2-;
(f)
R4 es (i) alquilo C1-10 opcionalmente sustituido con fenilo, carboxilo, alcanoílo C1-6, 1-3 halógenos, hidroxi, alcoxi C1-6; (ii) cicloalquilo C3-7, cicloalcoxi C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10; o (iii) arilo C6-10 o C7-16 arilalquilo; cada uno opcionalmente sustituido con alquilo C1-6 o halógeno;
(g)
R5 es H o alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con 1-3 halógenos;
(h)
XesOoNH:
(i)
R' es Het; o arilo C6-10 opcionalmente sustituido con Ra; y
(j)
Ra es alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, halo-alquilo C1-6, halo, amino, arilo C6 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros;
con la condición de que Xa-R' no sea
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o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato de los mismos.
En un aspecto preferido de la invención, R' es un heterociclo bicíclico. Preferentemente, el heterociclo bicíclico contiene 1 ó 2 átomos de nitrógeno y opcionalmente un átomo de azufre o un átomo de oxígeno en el anillo. Preferentemente, el heterociclo está sustituido con al menos uno de alquilo C1-6, alcoxi C1-6, halo, arilo C6 y un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros. Más preferentemente, R' es un heterociclo bicíclico que contiene 1 átomo de nitrógeno y está sustituido con metoxi y al menos uno de un arilo C6 y un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros.
En otro aspecto preferido de la invención, R' es un heterociclo monocíclico. Preferentemente, el heterociclo contiene 1 ó 2 átomos de nitrógeno y opcionalmente un átomo de azufre o un átomo de oxígeno en el anillo. Preferentemente, el heterociclo está sustituido con al menos uno de alquilo C1-6, alcoxi C1-6, halo, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros.
Más preferentemente, R' es un heterociclo monocíclico que contiene 1 ó 2 átomos de nitrógeno y está sustituido con metoxi y al menos uno de un arilo C6 y un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros. En un aspecto más preferido de la invención, los compuestos tienen la estructura de Fórmula III
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en la que:
5 (a) R1 es cicloalquilo C3-7;
(c)
R3 es alquilo C1-8;
(d)
YesH;
(e) B es R4O(C=O)-o R4-N(R5)-C(=O)-; 10 (f) R4 es alquilo C1-10;
(g)
R5esH;
(h)
R' es un heterociclo bicíclico opcionalmente sustituido con R3; y
(i)
Ra es alquilo C1-6, alcoxi C1-6, halo, arilo C6 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros; con la condición de que O-R' no sea
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15
o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato de los mismos.
Preferentemente, R1 es ciclopropilo o ciclobutilo, R2 es vinilo, R3 es t-butilo, R4 es t-butilo y R' es quinolina o isoquinolina opcionalmente sustituida con Ra. Preferentemente, Ra incluye al menos uno de alcoxi C1-6, arilo C6 y un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros. En un aspecto preferido de la invención, R1 es ciclopropilo, R2 es vinilo, R3
20 es t-butilo; R4 es 1-butilo, y R' es isoquinolina sustituida con alcoxi C1-6 y al menos uno de arilo C6 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros.
Los compuestos de la presente invención, en virtud de sus restos básicos, pueden formar sales mediante la adición de un ácido farmacéuticamente aceptable. Las sales de adición de ácidos se forman a partir de un compuesto de Fórmula I y un ácido inorgánico farmacéuticamente aceptable incluyendo ácido clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico,
25 sulfúrico, fosfórico, o un ácido orgánico tal como ácido p-toluenosulfónico, metanosulfónico, acético, benzoico, cítrico, malónico, fumárico, maleico, oxálico, succínico, sulfámico o tartárico. Por lo tanto, los ejemplos de dichas sales farmacéuticamente aceptables incluyen cloruro, bromuro, yoduro, sulfato, fosfato, metanosulfonato, citrato, acetato, malonato, fumarato, sulfamato y tartrato.
Las sales de un grupo amina también pueden comprender sales de amonio cuaternario en las que el nitrógeno del 30 amino porta un grupo orgánico adecuado tal como un resto alquilo, alquenilo, alquinilo o aralquilo.
Los compuestos de la presente invención, que están sustituidos con un grupo ácido, pueden existir como sales
formadas a través de adición de bases. Dichas sales de adición de bases incluyen las obtenidas a partir de bases inorgánicas que incluyen, por ejemplo, sales de metales alcalinos (por ejemplo, sodio y potasio), sales de metales alcalinotérreos (por ejemplo, calcio y magnesio), sales de aluminio y sales de amonio. Además, las sales de adición de bases adecuadas incluyen sales de bases orgánicas fisiológicamente aceptables tales como trimetilamina, 5 trietilamina, morfolina, piridina, piperidina, picolina, diciclohexilamina, N,N'-dibenciletilendiamina, 2-hidroxietilamina, bis-(2-hidroxietil)amina, tri-(2-hidroxietil)amina, procaína, dibencilpiperidina, N-bencil-p-fenetilamina, dehidroabietilamina, N,N'-bishidroabietilamina, glucamina, N-metilglucamina, colidina, quinina; quinolina, etilendiamina, ornitina, colina, N,N'-bencilfenetilamina, cloroprocaína, dietanolamina, dietilamina, piperazina, tris(hidroximetil)aminometano e hidróxido de tetrametilamonio y aminoácidos básicos tales como lisina, arginina y N
10 metilglutamina. Estas sales pueden prepararse por procedimientos conocidos por los expertos en la materia.
Ciertos compuestos de la presente invención, y sus sales, también pueden existir en forma de solvatos con agua, por ejemplo hidratos o con disolventes orgánicos tales como metanol, etanol o acetonitrilo para formar, respectivamente, un metanolato, etanolato o acetonitrilato. La presente invención incluye cada solvato y mezclas de los mismos.
15 Además, los compuestos de la presente invención, o una sal o solvato de los mismos, puede mostrar polimorfismo. La presente invención también incluye cualquiera de dichas formas polimórficas.
Los compuestos de la presente invención también contienen dos o más centros quirales. Por ejemplo, los compuestos pueden incluir el elemento de ciclopropilo P1 de fórmula
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20 en la que cada uno de C1 y C2 representa un átomo de carbono asimétrico en las posiciones 1 y 2 del anillo de ciclopropilo. A pesar de otros centros asimétricos posibles en otros segmentos de los compuestos, la presencia de estos dos centros asimétricos significa que los compuestos pueden existir en forma de mezclas racémicas de diastereómeros, tales como los diastereómeros en los que R2 está configurado sin con respecto a la amida o sin con respecto al carbonilo, como se muestra a continuación.
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La presente invención incluye los dos enantiómeros y mezclas de enantiómeros tales como mezclas racémicas.
Los enantiómeros pueden resolverse por procedimientos conocidos por los expertos en la materia, por ejemplo, por formación de sales diastereoméricas que pueden separarse por cristalización, cromatografía líquida o de gas-líquido, reacción selectiva de un enantiómero con un reactivo específico de enantiómero. Se apreciará que cuando el enantiómero deseado se convierte en otra entidad química por una técnica de separación, entonces se requiere una etapa adicional para formar la forma enantiomérica deseada. Como alternativa, los enantiómeros específicos pueden sintetizarse por síntesis asimétrica usando reactivos, sustratos, catalizadores o disolventes ópticamente activos, o convirtiendo un enantiómero en el otro por transformación asimétrica.
Ciertos compuestos de la presente invención también pueden existir en diferentes formas conformacionales estables que pueden ser separables. La asimetría torsional debida a la rotación restringida alrededor de un enlace sencillo asimétrico, por ejemplo, debida al impedimento estérico o a la tensión del anillo, puede permitir la separación de diferentes confórmeros. La presente invención incluye cada isómero conformacional de estos compuestos y mezclas de los mismos.
Ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en forma zwiteriónica y la presente invención incluye cada forma zwiteriónica de estos compuestos y mezclas de los mismos.
Los materiales de partida útiles para sintetizar los compuestos de la presente invención son conocidos por los expertos en la materia y pueden fabricarse fácilmente o están disponibles en el mercado.
Los compuestos de la presente invención pueden fabricarse por procedimientos conocidos por los expertos en la materia, véase, por ejemplo, la Patente de Estados Unidos Nº 6.323.180 y la Sol. de Patente de Estados Unidos 20020111313 A1. Los siguientes procedimientos expuestos a continuación se proporcionan con fines ilustrativos. Se apreciará que puede preferirse o ser necesario preparar dicho compuesto en el que un grupo funcional se protege usando un grupo protector convencional y después retirar el grupo protector para proporcionar un compuesto de la presente invención. Los detalles concernientes al uso de grupos protectores de acuerdo con la presente invención son conocidos por los expertos en la materia.
Los compuestos de la presente invención pueden sintetizarse, por ejemplo, de acuerdo con un procedimiento general como el que se ilustra en el Esquema 1 (en el que CPG es un grupo protector de carboxilo y APG es un grupo protector de amino):
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En resumen, los P1, P2 y P3 pueden unirse por técnicas de acoplamiento de péptidos bien conocidas. Los grupos P1, P2 y P3 pueden unirse en cualquier orden siempre que el compuesto final se corresponda con los péptidos de la invención. Por ejemplo, P3 puede estar unido a P2-P1; o P1 unido a P3-P2.
En general, los péptidos se alargan por desprotección del grupo α-amino del resto N-terminal y acoplamiento del grupo carboxilo no protegido del siguiente aminoácido N-protegido adecuadamente a través de un engarce peptídico usando los procedimientos descritos. Este procedimiento de desprotección y acoplamiento se repite hasta que se obtiene la secuencia deseada. Este acoplamiento puede realizarse con los aminoácidos constituyentes por etapas, como se representa en el Esquema 1.
El acoplamiento entre dos aminoácidos, un aminoácido y un péptido, o dos fragmentos peptídicos, puede realizarse usando procedimientos de acoplamiento convencionales tales como el procedimiento de azida, el procedimiento de anhídrido del ácido carbónico-carboxílico mixto (cloroformiato de isobutilo), el procedimiento de carbodiimida (diciclohexilcarbodiimida, diisopropilcarbodiimida o carbodiimida soluble en agua), procedimiento de éster activo (pnitrofenil éster, imido éster N-hidroxisuccínico), procedimiento K de reactivo de Woodward, procedimiento de carbonildiimidazol, reactivos de fósforo o procedimientos de oxidación-reducción. Algunos de estos procedimientos (especialmente el procedimiento de carbodiimida) pueden mejorarse mediante la adición de 1-hidroxibenzotriazol o 4-DMAP. Estas reacciones de acoplamiento pueden realizarse en fase de solución (fase líquida) o en fase sólida.
De forma más explícita, la etapa de acoplamiento implica el acoplamiento deshidratante de un carboxilo libre de un reactivo con el grupo amino libre del otro reactivo en presencia de un agente de acoplamiento para formar un enlace de unión amida. Las descripciones de dichos agentes de acoplamiento se encuentran en libros de texto generales sobre química de péptidos, por ejemplo, M. Bodanszky, "Peptide Chemistry", 2ª ed. rev., Springer-Verlag, Berlin, Alemania, (1993). Son ejemplos de agentes de acoplamiento adecuados N,N'-diciclohexilcarbodiimida, 1hidroxibenzotriazol en presencia de N,N'-diciclohexilcarbodiimida o N-etil-N'-[(3-dimetilamino)propil]carbodiimida. Un agente de acoplamiento práctico y útil es el hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris-(dimetilamino)fosfonio disponible en el mercado, por sí solo o en presencia de 1-hidroxibenzotriazol o 4-DMAP. Otro agente de acoplamiento práctico y útil es tetrafluoroborato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio disponible en el mercado. Otro agente de acoplamiento práctico y útil más es hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotrizol-1-il)N,N,N',N'-tetrametiluronio disponible en el mercado. La reacción de acoplamiento se realiza en un disolvente inerte, por ejemplo diclorometano, acetonitrilo o dimetilformamida. Se añade un exceso de una amina terciaria, por ejemplo diisopropiletilamina, N-metilmorfolina, N-metilpirrolidina o 4-DMAP para mantener la mezcla de reacción a un pH de aproximadamente 8. La temperatura de reacción normalmente varía entre 0 ºC y 50 ºC y el tiempo de reacción normalmente varía entre 15 min y 24 h.
Los grupos funcionales de los aminoácidos constituyentes generalmente deben protegerse durante las reacciones de acoplamiento para evitar la formación de enlaces indeseados. Los grupos protectores que pueden usarse se indican, por ejemplo, en Greene, "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley y Sons, Nueva York (1981) y "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", Vol. 3, Academic Press, Nueva York (1981).
El grupo α-amino de cada aminoácido que va a acoplarse con la cadena de péptidos creciente debe estar protegido (APG). Puede usarse cualquier grupo protector conocido en la técnica. Los ejemplos de dichos grupos incluyen: 1) grupos acilo tales como formilo, trifluoroacetilo, ftalilo y p-toluenosulfonilo; 2) grupos carbamato aromáticos tales como benciloxicarbonilo (Cbz o Z) y benciloxicarbonilos sustituidos, y 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc); 3) grupos carbamato alifáticos como terc-butiloxicarbonilo (Boc), etoxicarbonilo, diisopropilmetoxicarbonilo y aliloxicarbonilo; 4) grupos alquil carbamato cíclicos tales como ciclopentiloxicarbonilo y adamantiloxicarbonilo; 5) grupos alquilo tales como trifenilmetilo y bencilo; 6) trialquilsililo tal como trimetilsililo; y 7) grupos que contienen tiol tales como feniltiocarbonilo y ditiasuccinoílo. El grupo protector de α-amino preferido es Boc o Fmoc. Muchos derivados de aminoácidos adecuadamente protegidos para la síntesis de péptidos están disponibles en el mercado.
El grupo protector de α-amino del resto de aminoácidos que se acaba de añadir se escinde antes del acoplamiento del siguiente aminoácido. Cuando se usa el grupo Boc, los procedimientos de elección son ácido trifluoroacético, puro o en diclorometano, o HCl en dioxano o en acetato de etilo. Después, la sal de amonio resultante se neutraliza antes del acoplamiento o in situ con soluciones básicas tales como tampones acuosos, o aminas terciarias en diclorometano o acetonitrilo o dimetilformamida. Cuando se usa el grupo Fmoc, los reactivos de elección son piperidina o piperidina sustituida en dimetilformamida, aunque puede usarse cualquier amina secundaria. La desprotección se realiza a una temperatura comprendida entre 0 ºC y la temperatura ambiente (ta o TA) normalmente 20-22 ºC.
Cualquiera de los aminoácidos que tienen funcionalidades de cadena lateral deben estar protegidos durante la preparación del péptido usando cualquiera de los grupos descritos anteriormente. Los expertos en la materia apreciarán que la selección y uso de grupos protectores apropiados para estas funcionalidades de cadena lateral dependen del aminoácido y de la presencia de otros grupos protectores en el péptido. La selección de dichos grupos protectores es importante ya que el grupo no debe retirarse durante la desprotección y acoplamiento del grupo αamino.
Por ejemplo, cuando se usa Boc como grupo protector de α-amino, son adecuados los siguientes grupos protectores de cadena lateral: pueden usarse restos p-toluenosulfonilo (tosilo) para proteger la cadena lateral amino de aminoácidos tales como Lys y Arg; pueden usarse restos acetamidometilo, bencilo (Bn) o terc-butilsulfonilo para proteger la cadena lateral que contiene sulfuro de cisteína; pueden usarse éteres de bencilo (Bn) para proteger las cadenas laterales que contienen hidroxi de serina, treonina o hidroxiprolina; y pueden usarse ésteres bencílicos para proteger las cadenas laterales que contienen carboxi de ácido aspártico y ácido glutámico.
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Cuando se elige Fmoc para la protección de α-amina, normalmente son aceptables grupos protectores basados en terc-butilo. Por ejemplo, puede usarse Boc para lisina y arginina, éter terc-butílico para serina, treonina e hidroxiprolina, y éster terc-butílico para ácido aspártico y ácido glutámico. Puede usarse un resto trifenilmetilo (Tritilo) para proteger la cadena lateral que contiene sulfuro de cisteína.
Cuando se completa el alargamiento del péptido, todos los grupos protectores se retiran. Cuando se usa una síntesis en fase líquida, los grupos protectores se retiran de cualquier manera que vendrá determinada por la elección de los grupos protectores. Estos procedimientos son bien conocidos por los expertos en la materia.
Además, pueden seguirse las siguientes directrices en la preparación de compuestos de la presente invención. Por ejemplo, para formar un compuesto en el que R4-C(O)-, R4-S(O)2, un P3 protegido o todo el péptido o un segmento del péptido está acoplado con un cloruro de acilo o cloruro de sulfonilo apropiado, respectivamente, que está disponible en el mercado o cuya síntesis es bien conocida en la técnica.
En la preparación de un compuesto en el que R4O-C(O)-, un P3 protegido o todo el péptido o un segmento del péptido se acopla con un cloroformiato apropiado que está disponible en el mercado o cuya síntesis es bien conocida en la técnica. Para derivados de Boc se usa (Boc)2O.
Por ejemplo:
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Se trata ciclopentanol con fosgeno para formar el cloroformiato correspondiente.
El cloroformiato se trata con el NH2-tripéptido deseado en presencia de una base tal como trietilamina para proporcionar el carbamato de ciclopentilo.
En la preparación de un compuesto en el que R4-N(R5)-C(O)-o R4-NH-C(S)-, un P3 protegido o todo el péptido o un segmento del péptido se trata con fosgeno seguido de amina como se describe en SynLett. Feb 1995; (2); 142-144 o se hace reaccionar con el isocianato disponible en el mercado y una base adecuada tal como trietilamina.
En la preparación de un compuesto en el que R4-N(R5)-S(O2), un P3 protegido o todo el péptido o un segmento del péptido se trata con un cloruro de sulfamilo recién preparado o disponible en el mercado seguido de amina como se describe en la patente Ger. Offen. (1998), 84 págs. DE 19802350 o en el documento WO 98/32748.
El grupo α-carboxilo del resto C-terminal normalmente se protege en forma de un éster (CPG) que puede escindirse para dar el ácido carboxílico. Los grupos protectores que pueden usarse incluyen: 1) alquil ésteres tales como metilo, trimetilsililetilo y t-butilo, 2) aralquil ésteres tales como bencilo y bencilo sustituido, o 3) ésteres que pueden escindirse por tratamiento con una base suave o por medios reductores suaves tales como tricloroetil y fenacil ésteres.
El ácido α-carboxílico resultante (resultante de la escisión por tratamiento con un ácido suave o con una base suave
o por medios reductores suaves) se acopla con un R1SO2NH2 [preparado por tratamiento de R1SO2Cl en solución de tetrahidrofurano saturada con amoniaco] en presencia de agentes de acoplamiento de péptidos tales como CDI o EDAC en presencia de una base tal como 4-dimetilaminopiridina (4-DMAP) y/o 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) para incorporar el resto P1', conformando de forma eficaz el tripéptido P1'-P1-P2-P3-APG. Típicamente, en este procedimiento, se usan 1-5 equivalentes de agentes de acoplamiento P1'.
Además, si el grupo protector de P3 APG se retira y se reemplaza por un resto B mediante los procedimientos descritos anteriormente, y el ácido α-carboxílico resultante que se produce por la escisión (resultante de la escisión por tratamiento con un ácido suave, con una base suave o por medios reductores suaves) se acopla con un R1SO2NH2 [preparado por tratamiento de R1SO2Cl en solución de tetrahidrofurano saturada con amoniaco o procedimientos alternativos descritos en el presente documento] en presencia de un agente de acoplamiento de péptidos tal como CDI o EDAC en presencia de una base tal como 4-dimetilaminopiridina (4-DMAP) y/o 1,8diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) para incorporar el resto P1', se prepara el tripéptido P1'-P1-P2-P3-B. Típicamente, en este procedimiento, se usan 1-5 equivalentes de agentes de acoplamiento P1'.
Los compuestos de la presente invención pueden prepararse por numerosos procedimientos incluyendo los descritos en los ejemplos, a continuación, y como se describe en la Patente de Estados Unidos Nº 6.323.180 en la 5 Solicitud de Patente de Estados Unidos Nº 10/001,850 presentada el 20 de noviembre de 2001.
El Esquema II muestra adicionalmente el procedimiento general en el que compuestos de Fórmula I se construyen mediante el acoplamiento del tripéptido intermedio de ácido carboxílico (1) con una P1' sulfonamida. (Debe apreciarse que los grupos R6, R7, R8, R9, R10, R11 que se muestran a continuación representan sustituyentes del sistema heterocíclico.) Dicha reacción de acoplamiento requiere el tratamiento del ácido carboxílico (1) con un
10 reactivo de acoplamiento tal como carbonildiimidazol en un disolvente tal como THF, que puede calentarse a reflujo, seguido de la adición del derivado formado de (1) a la P1' sulfonamida, en un disolvente tal como THF o cloruro de metileno en presencia de una base tal como DBU.
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Un procedimiento alternativo para la construcción de compuestos de Fórmula I se muestra en el Esquema III. En él,
15 el elemento P1' sulfonamida se acopla con el elemento P1 usando el procedimiento empleado en el Esquema 1. El resto P1-P1' resultante puede desprotegerse después en su extremo amino. En este ejemplo general, se emplea un grupo protector de Boc, pero un experto en la materia reconocerá que podrían emplearse numerosos grupos protectores de amino adecuados en este procedimiento. Dicho grupo protector de Boc puede retirarse usando un ácido tal como ácido trifluoroacético en un disolvente tal como dicloroetano para proporcionar la amina desprotegida
20 en forma de la sal TFA. Dicha sal TFA de amina puede emplearse directamente en la reacción de acoplamiento posterior o, como alternativa, la sal TFA de amina puede convertirse primero en la sal HCl de amina, y después la sal HCl de amina usarse en dicha reacción de acoplamiento que se muestra en el Esquema III. El acoplamiento de dicha sal HCl de amina (3) con el extremo carboxilo del intermedio P4-P3-P2 puede conseguirse usando reactivos de acoplamiento, tales como HATU, en disolventes tales como diclorometano para proporcionar compuestos de
25 Fórmula I (4).
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Un procedimiento alternativo para la construcción de compuestos de Fórmula I se muestra en el Esquema IV. En el presente documento, la sal clorhidrato de la amina terminal P1-P1' (1) se acopla con el grupo carboxilo libre del elemento P2 usando agentes de acoplamiento tales como PyBOP, en presencia de una base tal como 5 diisopropilamina, y en un disolvente tal como cloruro de metileno. El intermedio P2-P1-P1' resultante puede convertirse en compuestos de Fórmula I en un procedimiento en dos etapas en el que la primera etapa es la desprotección del extremo amina P2 usando un ácido tal como TFA en un disolvente tal como cloruro de metileno. La sal del ácido trifluoroacético resultante puede acoplarse con el extremo carboxilo del elemento P4-P3 usando agentes de acoplamiento convencionales tales como PyBop en presencia de una base tal como diisopropilamina, y
10 usando disolventes tales como cloruro de metileno para proporcionar compuestos de Fórmula I (4).
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El intermedio P4-P3-P2 usado en los esquemas anteriores puede construirse como se ha descrito previamente con una descripción adicional de este procedimiento mostrado en el Esquema general V. En él, el extremo carboxilo libre del intermedio P4-P3 (1) puede acoplarse con el extremo amino del elemento P2 para proporcionar el dipéptido P415 P3-P2 (2). El extremo carboxilo del intermedio P4-P3-P2 puede desprotegerse por saponificación del grupo éster
para proporcionar P4-P3-P2 en forma del ácido carboxílico libre (3). Los intermedios de tipo (3) pueden convertirse en compuestos de Fórmula I usando los procedimientos descritos en el presente documento.
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Los compuestos de Fórmula I también pueden convertirse en otros compuestos de Fórmula I como se describe en el
5 presente documento. Un ejemplo de dicho procedimiento se muestra en el Esquema VI en el que un compuesto de Fórmula I (1) que tiene un grupo Boc en la posición P4 se convierte en un compuesto de Fórmula I (3) en el que dicho compuesto tiene un grupo urea en la posición P4. La conversión de (1) en (3) puede realizarse en un procedimiento en dos etapas cuya primera etapa es la conversión de (1) en la amina (2) por tratamiento de (1) con un ácido tal como TFA en un disolvente tal como cloruro de metileno. La sal TFA de amina resultante puede tratarse
10 con un isocianato en presencia de un equivalente de base para proporcionar un compuesto de Fórmula 1 (3) en la que el resto P3 está tapado con una urea. Como se ha indicado previamente, un experto en la materia reconocerá que el intermedio (2) puede usarse como material de partida para la preparación de compuestos de Fórmula I en la que el grupo P3 está tapado con una amida o una sulfonamida, o tiourea, o una sulfamida. La construcción de dichos compuestos de Fórmula I puede conseguirse usando condiciones convencionales para la formación de
15 dichas funcionalidades P4 a partir de aminas.
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En la construcción de compuestos de Fórmula I, el extremo P1' se incorpora en las moléculas usando uno de los procedimientos generales resumidos anteriormente y que se describen con más detalle a continuación. En algunos
ejemplos, los elementos P1', que son las cicloalquil-o alquil sulfonamidas, están disponibles en el mercado o pueden prepararse a partir del cloruro de alquil-o cicloalquil-sulfonilo correspondiente por tratamiento de dicho cloruro de sulfonilo con amoniaco. Como alternativa, estas sulfonamidas pueden sintetizarse usando el procedimiento general resumido en el Esquema VII. En él, el cloruro de 3-cloropropilsulfonilo (1) disponible en el mercado se convierte en una sulfonamida protegida adecuada, por ejemplo, por tratamiento con terc-butil amina. Después, la sulfonamida obtenida (2) se convierte en la cicloalquilsulfonamida correspondiente por tratamiento con dos equivalentes de una base tal como butil litio en un disolvente tal como THF a baja temperatura. La cicloalquilsulfonamida resultante puede desprotegerse por tratamiento con un ácido para proporcionar la cicloalquilsulfoamida desprotegida deseada.
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Los elementos P1 usados en la generación de compuestos de Fórmula I están disponibles, en algunos casos, en el mercado, pero se sintetizan usando los procedimientos descritos en el presente documento y posteriormente se incorporan en los compuestos de Fórmula I usando los procedimientos descritos en el presente documento. Los ciclopropilaminoácidos P1 sustituidos pueden sintetizarse siguiendo el procedimiento general resumido en el
15 Esquema VIII.
El tratamiento de la imina (1) disponible en el mercado o fácilmente sintetizada con 1,4-dihalobuteno (2) en presencia de una base produce, proporciona, la imina resultante (3). La hidrólisis ácida de 3 proporciona después 4, que tiene un sustituyente alilo sin con respecto al grupo carboxilo como un producto principal. El resto amina de 4 puede protegerse usando un grupo Boc para proporcionar el aminoácido totalmente protegido 5. Este intermedio es 20 un racemato que puede resolverse por un proceso enzimático en el que el resto éster de 5 se escinde con una proteasa para proporcionar el ácido carboxílico correspondiente. Sin desear quedar ligado a ninguna teoría particular, se cree que esta reacción es selectiva en que uno de los enantiómeros experimenta la reacción a una velocidad mucho mayor que su imagen especular, lo que proporciona una resolución cinética del racemato intermedio. En los ejemplos citados en el presente documento, el estereoisómero más preferido para su integración 25 en compuestos de Fórmula I es 5a que alberga la estereoquímica (1R,2S). En presencia de la enzima, este enantiómero no experimenta escisión del éster y, por lo tanto, este enantiómero 5a se recupera de la mezcla de reacción. Sin embargo, el enantiómero menos preferido, 5b que alberga la estereoquímica (1S,2R), experimenta escisión del éster, es decir, hidrólisis, para proporcionar el ácido libre 6. Después de que se complete esta reacción, el éster 5a puede separarse del producto ácido 6 por procedimientos convencionales tales como, por ejemplo,
30 procedimientos de extracción acuosa o cromatografía.
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Los procedimientos par fabricar intermedios P2 y compuestos de Fórmula I se muestran en los siguientes
Esquemas. Debe apreciarse que, en muchos casos, las reacciones se representan para una sola posición de un
intermedio. Sin embargo, debe entenderse que dichas reacciones pueden usarse para realizar modificaciones en
5 otras posiciones dentro de este intermedio. Además, dichos intermedios, condiciones de reacción y procedimientos
dados en los ejemplos específicos se aplican ampliamente a compuestos con otros patrones de sustitución. Los
Esquemas generales que se muestran a continuación están seguidos de ejemplos en el presente documento. Tanto
los ejemplos generales como los específicos no son limitantes, como, por ejemplo, el núcleo de isoquinolina que se
muestra como parte del esquema general, Esquema IX, sin embargo, esta ruta representa un procedimiento viable 10 para la construcción de sustituyentes de heterociclos alternativos como reemplazos para el elemento de isoquinolina,
tales como quinolinas, o piridinas.
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El Esquema IX muestra el acoplamiento de un resto de C4-hidroxiprolina N-protegido con un heterociclo para formar el intermedio (4) y la modificación posterior de dicho intermedio (4) para dar un compuesto de Fórmula I por el 15 procedimiento de alargamiento de péptidos como se describe en el presente documento. Debe apreciarse que en la primera etapa, que es el acoplamiento del grupo C4-hidroxi prolina con el elemento heteroarilo, se emplea una base. Un experto en la materia reconocerá que este acoplamiento puede realizarse usando bases tales como terc-butóxido potásico, o hidruro sódico, en un disolvente tal como DMF o DMSO o THF. Este acoplamiento con el sistema de anillos de isoquinolina se produce en la posición Cl (numeración para el sistema de anillos de isoquinolina mostrada
en el intermedio 2 del Esquema IX) y se dirige por el grupo cloro que está desplazado en este procedimiento. Debe apreciarse que pueden usarse grupos salientes alternativos en esta posición, tales como flúor, como se muestra en el Esquema. Dichos intermedios de flúor (3) están disponibles a partir del compuesto de cloro correspondiente usando procedimientos bibliográficos descritos en el presente documento. También debe apreciarse que la posición del grupo saliente (cloro o flúor) en un sistema de anillos dado puede variar, como se muestra en el Esquema X, en el que el grupo saliente (flúor en este ejemplo) está en la posición C6 del sistema de anillos de isoquinolina del intermedio (2).
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Debe apreciarse además que la posición del heteroátomo o heteroátomos del anillo en intermedios de tipo (2) del
10 Esquema IX y el Esquema X también es variable, como se define por el término heterociclo descrito en el presente documento. En el Esquema X, el intermedio (2) puede acoplarse con un derivado de C4 hidroxi prolina para proporcionar el elemento P2 (3). Este derivado de isoquinolina C6-sustituido puede convertirse en compuestos de Fórmula I usando los procedimientos descritos en el presente documento.
Una alternativa al procedimiento descrito anteriormente para el acoplamiento de la C4-hidroxiprolina a aromáticos y 15 heteroaromáticos se proporciona en la reacción de Mitsunobu que se representa en la
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etapa I del Esquema XI. En este Esquema de reacción general, un derivado de C4-hidroxi prolina se acopla con un sistema de anillos de quinazolina. Esta reacción hace uso de reactivos tales como trifenilfosfina y DEAD (dietilazodicarboxilato) en disolventes apróticos tales como THF o dioxano y puede usarse para la formación de
20 éteres de arilo y heteroarilo. Debe apreciarse que, durante el transcurso de esta reacción de acoplamiento, la estereoquímica del centro quiral C4 en el derivado de C4-hidroxiprolina se invierte y, por lo tanto, es necesario usar el derivado de C4-hidroxiprolina que alberga la estereoquímica (S) en la posición C4 como material de partida. (como se muestra en el Esquema XI). Debe apreciarse que se han descrito en la bibliografía numerosas modificaciones y mejoras de la reacción de Mitsunobu.
25 En un subconjunto de ejemplos del presente documento, se incorporan isoquinolinas en los compuestos finales y específicamente en la región P2 de dichos compuestos. Un experto en la materia reconocerá que están disponibles diversos procedimientos generales para la síntesis de isoquinolinas. Además, dichas isoquinolinas generadas por estos procedimientos pueden incorporarse fácilmente en los compuestos finales de Fórmula I usando los procedimientos descritos en el presente documento. Una metodología general para la síntesis de isoquinolinas se
30 muestra en el Esquema XII, en el que los derivados de ácido cinnámico, mostrados en la forma general que tiene la estructura (2), se convierten
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en 1-cloroisoquinolinas en un procedimiento de cuatro etapas. Dichas cloroisoquinolinas pueden usarse posteriormente en reacciones de acoplamiento para derivados de C4-hidroxiprolina como se describe en el presente documento. La conversión de ácido cinnámicos en cloroquinolinas comienza con el tratamiento de ácido cinnámico 5 con un cloroformiato de alquilo en presencia de una base. Después, el anhídrido resultante se trata con azida sódica, lo que da como resultado la formación de una acilazida (3) como se muestra en el Esquema. Están disponibles procedimientos alternativos para la formación de acilazidas a partir de ácidos carboxílicos tales como, por ejemplo, uno en el que dicho ácido carboxílico puede tratarse con difenilfosforilazida (DPPA) en un disolvente aprótico tal como cloruro de metileno en presencia de una base. En la siguiente etapa de la secuencia de reacción, la acilazida 10 (3) se convierte en la isoquinolona correspondiente (4) como se muestra en el Esquema. En este caso, la acilazida se calienta a una temperatura de aproximadamente 190 ºC en un disolvente con alto punto de ebullición, tal como un difenilmetano. Esta reacción es general y proporciona rendimientos de moderados a buenos de la isoquinolona sustituida a partir de los derivados de ácido cinnámico correspondientes. Debe apreciarse que dichos derivados de ácido cinnámico están disponibles en el mercado o pueden obtenerse a partir del derivado de benzaldehído 15 correspondiente (1) por condensación directa con ácido malónico o derivados del mismo, y también empleando una reacción de Wittig. Las isoquinolonas intermedias (4) del Esquema XII pueden convertirse en la 1-cloroisoquinolina correspondiente por tratamiento con oxicloruro de fósforo. Esta reacción es general y puede aplicarse a cualquiera de las isoquinolonas, quinolonas o heterociclos adicionales que se muestran en el presente documento para convertir un sustituyente hidroxi en el compuesto de cloro correspondiente cuando dicho hidroxi está en conjugación
20 con un átomo de nitrógeno en dichos sistemas de anillos heterocíclicos.
Un procedimiento alternativo para la síntesis del sistema de anillos de isoquinolina es el procedimiento de Pomeranz-Fritsh. Este procedimiento general se resume en el Esquema XIII. El procedimiento comienza con la conversión de un derivado de benzaldehído (1) en una imina funcionalizada (2). Después, dicha imina se convierte en el sistema de anillos de isoquinolina por tratamiento con ácido a temperatura elevada.
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Esta síntesis de isoquinolina del Esquema XIII es general, y debe apreciarse que este procedimiento es particularmente útil en la obtención de intermedios de isoquinolina que están sustituidos en la posición C8 (nota: en
el intermedio (3) del Esquema XIII, la posición C8 del anillo de isoquinolina está sustituida con el sustituyente R11). Las isoquinolinas intermedias (3) pueden convertirse en las 1-cloroquinolinas correspondientes (5) en un procedimiento en dos etapas como el mostrado. La primera etapa de esta secuencia es la formación del N-óxido de isoquinolina (4) por tratamiento de la isoquinolina (3) con ácido meta-cloroperbenzoico en un disolvente aprótico tal
5 como diclorometano. El intermedio (4) puede convertirse en la 1-cloroquinolina correspondiente por tratamiento con oxicloruro de fósforo en cloroformo a la temperatura de reflujo. Debe apreciarse que este procedimiento en dos etapas es general y puede emplearse para obtener cloroisoquinolinas y cloroquinolinas a partir de las isoquinolinas y quinolinas correspondientes, respectivamente.
Otro procedimiento para la síntesis del anillo de isoquinolina se muestra en el Esquema XIV. En este procedimiento, 10 un derivado de orto-alquilbenzamida (1) se trata con una base fuerte,
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tal como terc-butil litio, en un disolvente, tal como, THF a baja temperatura. Después, a esta mezcla de reacción se le añade un derivado de nitrilo, que experimenta una reacción adicional con el anión obtenido a partir de la desprotonación de (1), dando como resultado la formación de (2). Esta reacción es general y puede usarse para la
15 formación de isoquinolinas sustituidas. El intermedio (2) del Esquema XIV puede convertirse en la 1-cloroquinolina correspondiente por los procedimientos descritos en el presente documento.
Un procedimiento adicional para la síntesis de isoquinolinas se muestra en el Esquema XV. La desprotonación del intermedio (1) usando terc-butil litio se ha descrito anteriormente. En el presente procedimiento, sin embargo, dicho anión intermedio se atrapa con un éster, dando como resultado la formación del intermedio (2) que se muestra a
20 continuación. En una reacción posterior, la cetona (2) se condensa con acetato de amonio a temperatura elevada, proporcionando la formación de la quinolona (3). Esta reacción es general y puede aplicarse a la construcción de isoquinolonas sustituidas que después pueden convertirse en las 1-cloroisoquinolinas correspondientes como se describe en el presente documento.
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25 Otro método adicional para la construcción de isoquinolinas se encuentra en el Esquema XVI. En la primera etapa de este procedimiento, un derivado de orto-alquilarilimina tal como (1) se somete a condiciones de desprotonación (sec-butil litio, THF) y el anión resultante se inactiva mediante
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la adición de un derivado de ácido carboxílico activado tal como una amida de Weinreb. La ceto imina resultante (2) 30 puede convertirse en la isoquinolina correspondiente por condensación con acetato de amonio a temperaturas elevadas. Este procedimiento es general y puede usarse para la síntesis de isoquinolinas sustituidas. Dichas
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isoquinolinas pueden convertirse en la 1-cloroquinolina correspondiente por los procedimientos descritos en el presente documento.
Los heterociclos descritos en el presente documento, y que se incorporan en los compuestos de Fórmula I, pueden funcionalizarse adicionalmente. Es obvio para un experto en la materia que la funcionalización adicional de dichos heterociclos puede realizarse antes o después de la incorporación de estas funcionalidades en los compuestos de Fórmula I. Los siguientes Esquemas ilustran este punto. Por ejemplo, el Esquema XVII muestra la conversión de una 1-cloro-6-fluoro-isoquinolina
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en la especie de 1-cloro-6-alcoxi-isoquinolina correspondiente, por tratamiento de (1) de (ec. 1) con una especie de alcóxico sódico o potásico en el disolvente alcohólico a partir del cual se obtiene el alcóxido a temperatura ambiente. En algunos casos, puede ser necesario calentar la reacción para que se complete. Dicha cloroquinolina puede incorporarse en un compuesto de Fórmula I usando la técnica descrita en el presente documento. También pueden realizarse modificaciones de un elemento heterocíclico P2 después de su incorporación en compuestos de Fórmula I como se muestra en la (ec. 2) del Esquema VXII. Específicamente, los compuestos tales como (1) en la (ec. 2) que contienen un grupo saliente en el núcleo de ftalazina pueden desplazarse por un nucleófilo tal como un alcóxido en disolventes tales como el alcohol correspondiente a partir del cual se obtiene el alcóxido. Esta reacción puede realizarse a temperatura ambiente, pero en algunos casos puede ser necesario calentar la reacción para que se complete.
El Esquema XVIII proporciona un ejemplo general para la modificación de heterociclos como se define en el presente documento empleando reacciones de acoplamiento mediadas con paladio. Dichos acoplamientos pueden emplearse para funcionalizar un heterociclo en cada posición del sistema de anillos siempre que dicho anillo se active o funcionalice adecuadamente, tal como, por ejemplo, con un cloruro como se muestra en el Esquema. Esta secuencia comienza con la 1-cloroisoquinolina (1) que, después del tratamiento con ácido metacloroperbenzoico, puede convertirse en el N-óxido correspondiente (2). Dicho intermedio (2) puede convertirse en la 1,3dicloroisoquinolina correspondiente (3) por tratamiento con oxicloruro de fósforo en cloroformo a la temperatura de reflujo. El intermedio (3) puede acoplarse con N-Boc-4-hidroxiprolina por los procedimientos descritos en el presente documento para proporcionar el intermedio (5) como se muestra en el Esquema. El intermedio (5) puede experimentar un acoplamiento de Suzuki con un ácido arilborónico, en presencia de un reactivo de paladio y una base, y en un disolvente tal como THF o tolueno o DMF para proporcionar el intermedio de C3-arilisoquinolina (6). También pueden usarse ácidos heteroarilborónicos en este procedimiento de acoplamiento mediado por Pd para proporcionar C3-heteroarilisoquinolinas. El intermedio (6) puede convertirse en los compuestos finales de Fórmula I por los procedimientos descritos en el presente documento.
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Los acoplamientos mediados por paladio de sistemas de heteroarilo con elementos arilo o heteroarilo también pueden emplearse en una etapa sintética posterior en la construcción de compuestos de Fórmula I como se muestra en el Esquema IXX. En él, el intermedio de acilsulfonamida tripeptídico (1) se acopla con una 1-cloro-35 bromoisoquinolina (2) usando el procedimiento descrito anteriormente de desplazamiento de alcóxido de un resto heteroarilhalo para proporcionar el intermedio (3). El acoplamiento de (1) y (2) es más eficaz en presencia de un catalizador tal como cloruro de lantano como se describe en el presente documento. El sistema de anillos de isoquinolina del intermedio (3) puede funcionalizarse adicionalmente empleando acoplamientos de Suzuki (Procedimiento 1: someter (3) a ácidos heteroaril o arilborónicos en presencia de un catalizador de paladio tal como
10 tetra(trifenilfosfina)paladio y una base tal como carbonato de cesio en disolventes tales como DMF) o acoplamientos de Stille (Procedimiento 2: someter (3) a derivados de heteraril o aril estaño en presencia de un catalizador de paladio tal como tetraquis(trifenilfosfina)paladio en disolventes tales como tolueno).
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También pueden emplearse reacciones de paladio para acoplar elementos de C4-aminoprolina con heterociclos
15 funcionalizados. El Esquema XX muestra el acoplamiento del intermedio (1) con una isoquinolina funcionalizada en presencia de un catalizador de paladio y una base en un disolvente tal como tolueno. Los intermedios de tipo (3) pueden convertirse en compuestos de Fórmula I usando los procedimientos descritos en el presente documento.
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La construcción de sistemas de anillos de isoquinolina funcionalizados también es posible empleando reacciones de ciclación [4+2]. Por ejemplo (Esquema XXI), el uso de isociantos de vinilo (1) en reacciones de cicloadición con precursores de bencino (2) proporciona isoquinolonas funcionalizadas (3). Dichas isoquinolinas pueden incorporarse en compuestos de Fórmula I usando los procedimientos descritos en el presente documento.
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La presente invención también proporciona composiciones que comprenden un compuesto de la presente invención
o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable, con un vehículo farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, excipiente o diluyente vehículo.
En dichas composiciones, el principio activo, es decir, compuesto, comprende típicamente del 0,1 por ciento en peso al 99,9 por ciento en peso de la composición y a menudo comprende de aproximadamente del 5 al 9 por ciento en peso.
Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden administrarse por vía oral, parenteral o mediante un depósito implantado. Se prefiere la administración oral o por inyección. En algunos casos, el pH de la formulación puede ajustarse con ácidos, bases o tampones farmacéuticamente aceptables para mejorar la estabilidad del compuesto formulado o su forma de administración. El termino parenteral, como se usa en el presente documento, incluye inyección subcutánea, intracutánea, intravenosa, intramuscular, intraarticular, intrasinovial, intraesternal, intratecal e intralesional o técnicas de infusión.
Las composiciones farmacéuticas pueden ser en forma de una preparación estéril inyectable, por ejemplo, como una suspensión acuosa u oleaginosa estéril inyectable. Esta suspensión puede formularse de acuerdo con técnicas conocidas en el campo técnico usando agentes de dispersión o humectantes y agentes de suspensión adecuados. Los expertos en la técnica conocen los detalles con respecto a la preparación de dichos compuestos.
Cuando se administran por vía oral, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden administrarse en cualquier forma de dosificación oralmente aceptable que incluye capsulas, comprimidos y suspensiones y soluciones acuosas. En el caso de comprimidos para el uso oral, los vehículos que se usan normalmente incluyen lactosa y almidón de maíz. También se añaden, típicamente, agentes lubricantes, tales como estearato de magnesio. Para la administración oral en forma de capsula, los diluyentes útiles incluyen lactosa y almidón de maíz seco. Cuando las suspensiones acuosas se administran por vía oral, el principio activo se combina con agentes de emulsión y de suspensión. Si se desea, pueden añadirse algunos agentes edulcorantes y/o saporíferos y/o colorantes.
En textos farmacéuticos convencionales pueden encontrarse otros vehículos adecuados para las composiciones indicadas anteriormente, por ejemplo, en “Remington’s Pharmaceutical Sciences", 19ª edición, Mack Publishing Company, Easton, Penn., 1995. Los expertos en la técnica conocen detalles adicionales con respecto al diseño y preparación de formas de administración adecuadas de las composiciones farmacéuticas de la presente invención.
Los niveles de dosificación de entre aproximadamente 0,01 y aproximadamente 1.000 miligramos por kilogramo. ("mg/kg") de peso corporal por día, preferentemente entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 250 mg/kg de peso corporal por día de los compuestos de la invención son típicos en una monoterapia para la prevención y tratamiento de enfermedades mediadas por el VHC. Típicamente, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se administrarían de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 veces al día o, de manera alternativa, como una infusión continua. Dicha administración puede usarse como una terapia crónica o aguda. La cantidad del principio activo que puede combinarse con los materiales vehículo para producir una forma de dosificación sencilla variará dependiendo del huésped tratado y del modo de administración particular.
Como el experto en la materia apreciará, pueden necesitarse menores o mayores dosis que las indicadas anteriormente. La dosificación y regímenes de tratamiento específicos para cualquier paciente particular dependerá de diversos factores, incluyendo la actividad del compuesto específico empleado, la edad, peso corporal, estado de salud general, sexo, dieta, tiempo de administración, velocidad de excreción, combinación farmacológica, la gravedad y transcurso de la infección, disposición del paciente contra la infección y el criterio del médico tratante. Generalmente, el tratamiento comienza con pequeñas dosis sustancialmente menores que la dosis optima del péptido. Después de eso, la dosificación aumenta mediante pequeños incrementos hasta alcanzar el efecto óptimo según las circunstancias. En general, los compuestos se administran más deseablemente a un nivel de concentración que generalmente proporcionará los resultados eficaces antivirales sin causar ningún efecto secundario dañino o perjudicial.
Cuando las composiciones de la presente invención comprenden una combinación de un compuesto de la invención y uno o más agentes adicionales terapéuticos o profilácticos, el compuesto y el agente adicional están normalmente presentes a niveles de dosificación de entre aproximadamente el 10 al 100%, y más preferentemente entre aproximadamente el 10 y el 80% de la dosificación normalmente administrada en un régimen de monoterapia.
Cuando estos compuestos o sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables se formulan junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable, la composición resultante puede administrarse in vivo a mamíferos, tales como seres humanos, para inhibir la NS3 proteasa del VHC o para tratar o impedir la infección por el virus VHC. Dicho tratamiento también puede conseguirse usando los compuestos de la presente invención en combinación con agentes que incluyen: agentes inmunomoduladores, tales como interferones; otros agentes antivirales tales como ribavirina, amantadina; otros inhibidores de NS3 proteasa del VHC; inhibidores de otras dianas en el ciclo de vida del VHC tales como helicasa, polimerasa, metaloproteasa o sitios de entrada a ribosoma internos; o combinaciones de los mismos. Los agentes adicionales pueden combinarse con los compuestos en la presente invención para crear una forma de dosificación sencilla. Como alternativa estos agentes adicionales pueden administrarse por separado a un mamífero como parte de una forma de dosificación múltiple.
Por consiguiente, otro aspecto de la presente invención proporciona los compuestos para su uso en procedimientos para inhibir la actividad de la NS3 proteasa del VHC en pacientes, comprendiendo dichos métodos administrar un compuesto de la presente invención o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de los mismos, en el que los sustituyentes son como se ha definido anteriormente.
Preferentemente estos procedimientos son útiles disminuyendo la actividad de la NS3 proteasa del VHC en el paciente. Si la composición farmacéutica comprende solamente un compuesto de la presente invención como el componente activo, dichos procedimientos pueden comprender adicionalmente la etapa de administrar a dicho paciente un agente seleccionado de un agente inmunomodulador, un agente antiviral, un inhibidor de proteasa del VHC o un inhibidor de otras dianas en el ciclo de vida del VHC, tales como, por ejemplo, helicasa, polimerasa o metaloproteasa. Dicho agente adicional puede administrarse al paciente antes, simultáneamente o después de la administración de los compuestos de la presente invención.
En un aspecto preferido alternativo, estos procedimientos son útiles para inhibir la replicación viral en un paciente. Dichos procedimientos pueden ser útiles en el tratamiento o prevención de la enfermedad por el VHC.
Los compuestos de la presente invención también pueden usarse como reactivos de laboratorio. Los compuestos pueden ser útiles proporcionando herramientas de investigación para diseñar ensayos de replicación viral, validación de sistemas de ensayo en animales y estudios biológicos estructurales para potenciar más el conocimiento de los mecanismos de enfermedad del VHC.
Los compuestos de la presente invención también pueden usarse para tratar o prevenir contaminación viral de materiales y por lo tanto reducir el riesgo de infección viral de personal de laboratorio o médicos o pacientes que se ponen en contacto con dichos materiales, por ejemplo, sangre, tejido, instrumentos y prendas quirúrgicas, instrumentos y prendas de laboratorio y aparatos y materiales de extracción o transfusión de sangre.
Ejemplos
Los ejemplos específicos que se muestran a continuación ilustran la síntesis de los compuestos de la presente invención. Los procedimientos pueden adaptarse a variaciones con el fin de producir compuestos incluidos por la presente invención, pero no desvelados de forma específica. Además, también serán evidentes para un experto en la materia variaciones de los procedimientos para producir los mismos compuestos de una manera algo diferente.
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Los porcentajes de las soluciones expresan una relación peso a volumen, y las proporciones de soluciones expresan una relación volumen a volumen, a menos que se indique otra cosa. Los espectros de resonancia magnética nuclear (RMN) se registraron en un espectrómetro Bruker de 300, 400 ó 500 MHz; los desplazamientos químicos (δ) se informan en partes por millón. La cromatografía ultrarrápida se realizó sobre gel de sílice (SiO2) de acuerdo con la técnica de cromatografía ultrarrápida de Still (W.C. Still y col., J. Org. Chem., (1978), 43, 2923).
Todos los datos de Cromatografía Líquida (CL) se registraron en un cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS usando un detector SPD-10AV UV-Vis y los datos de Espectrometría de Masas (EM) se determinaron con una Plataforma Micromass para CL en modo de electronebulización (EN+).
A menos que se indique otra cosa, en los siguientes ejemplos, cada compuesto se analizó por CL/EM, usando una de siete metodologías, que tienen las siguientes condiciones.
Columnas:
(Procedimiento A) -YMC ODS S7 C18 3,0 x 50 mm
(Procedimiento B) -YMC ODS-A S7 C18 3,0 x 50 mm
(Procedimiento C) -YMC S7 C18 3,0 x 50 mm
(Procedimiento D) -YMC Xterra ODS S7 3,0 x 50 mm
(Procedimiento E) -YMC Xterra ODS S7 3,0 x 50 mm
(Procedimiento F) -YMC ODS-A S7 C18 3,0 x 50 mm
(Procedimiento G) -YMC C18 S5 4,6 x 50 mm]
Gradiente: 100% de Disolvente A/0% de Disolvente B a 0% de Disolvente A/100% de Disolvente B
Tiempo de gradiente: 2 min. (A, B, D, F, G); 8 min. (C, E)
Tiempo de mantenimiento: 1 min. (A, B, D, F, G); 2 min. (C, E)
Caudal: 5 ml/min
Longitud de onda del Detector: 220 nm
Disolvente A: 10% de MeOH/90% de H2O/0,1% de TFA
Las abreviaturas usadas en la presente solicitud, incluyendo particularmente en los ejemplos que se muestran a continuación, son bien conocidas por los expertos en la materia. Algunas de las abreviaturas usadas son las

Disolvente B: 10% de H2O/90% de MeOH/0,1% de TFA.
siguientes:
ta
temperatura ambiente
Boc
terc-butiloxicarbonilo
DMSO
dimetilsulfóxido
EtOAc
acetato de etilo
t-BuOK
t-butóxido potásico
Et2O
éter dietílico
TBME
terc-butilmetil éter
THF
tetrahidrofurano
CDI
carbonildiimidazol
DBU
1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno
TFA
ácido trifluoroacético
NMM
N-metilmorfolina
HATU
O-7-azabenzotriazol-1-ilo
HBTU
hexafluorofosfato de O-(1H-benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio
HOBT
N-hidroxibenzotriazol
PyBrop
hexafluorofosfato de bromo-bis-pirrolidin-fosfonio
DMF
dimetilformamida
MeOH
metanol
EDTA
ácido etilendiaminatetraacético
EMAR
espectrometría de masas de alta resolución
DMAP
4-dimetilaminopiridina
DIPEA
diisopropiletilamina
DCM
diclorometano
DCE
dicloroetano
Los compuestos e intermedios químicos de la presente invención, descritos en los siguientes ejemplos, se prepararon de acuerdo con los siguientes procedimientos. Debe apreciarse que la siguiente sección de ejemplificación se presenta en secciones. Las secciones se titulan Sección A a K. Los números de los ejemplos y los números de compuestos no son contiguos a lo largo de toda la parte de Ejemplos de la solicitud y, de hecho, cada sección indica un "cambio" en la numeración. En general, la numeración dentro de cada sección es continua. La Sección L describe la actividad biológica de los compuestos. La Sección M describe un subconjunto de compuestos adicionales que podrían fabricarse made usando los procedimientos descritos en el presente documento.
Sección A:
Preparación de intermedios:
Preparación de Intermedios P1:
Los intermedios P1 descritos en esta sección pueden usarse para preparar compuestos de Fórmula I por los procedimientos descritos en el presente documento.
I Elementos P1:
1. Preparación de éster etílico del ácido (1R,2S)/(1S,2R)-1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico racémico
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10 Procedimiento A Etapa 1
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Se suspendió clorhidrato de éster etílico de glicina (303,8 g, 2,16 mol) en terc-butil metil éter (1,6 l). Se añadieron
benzaldehído (231 g, 2,16 mol) y sulfato sódico anhidro (154,6 g, 1,09 mol) y la mezcla se enfrió a 0 ºC usando un 15 baño de hielo-agua. Se añadió gota a gota trietilamina (455 ml, 3,26 mol) durante 30 min y la mezcla se agitó
durante 48 h a ta. Después, la reacción se interrumpió mediante la adición de agua enfriada con hielo (1 l) y la fase
orgánica se separó. La fase acuosa se extrajo con terc-butil metil éter (0,5 l) y la fase orgánica combinada se lavó
con una mezcla de NaHCO3 acuoso saturado (1 l) y salmuera (1 l). La solución se secó sobre MgSO4 y se concentró
al vacío, proporcionando 392,4 g del producto de N-bencilimina en forma de un aceite espeso de color amarillo que 20 se usó directamente en la siguiente etapa. RMN 1H (CDCl3, 300 MHz) δ 1,32 (t, J= 7,1 Hz, 3H), 4,24 (c, J= 7,1 Hz,
2H), 4,41 (d, J= 1,1 Hz, 2H), 7,39-7,47 (m, 3H), 7,78-7,81 (m, 2H), 8,31 (s, 1H).
Etapa 2
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A una suspensión de terc-butóxido de litio (84,06 g, 1,05 mol) en tolueno seco (1,2 l) se le añadió gota a gota una
25 mezcla de la N-bencilimina de éster etílico de glicina (100,4 g, 0,526 mol) y trans-1,4-dibromo-2-buteno (107,0 g, 0,500 mol) en tolueno seco (0,6 l) durante 60 min. Después de que se completara la adición, la mezcla de color rojo oscuro se inactivó mediante la adición de agua (1 l) y terc-butil metil éter (TBME, 1 l). La fase acuosa se separó y se extrajo una segunda vez con TBME (1 l). Las fases orgánicas se combinaron, se añadió HCl 1 N (1 l) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La fase orgánica se separó y se extrajo con agua (0,8 l). Después, las
30 fases acuosas se combinaron, se saturaron con sal (700 g), se añadió TBME (1 l) y la mezcla se enfrió a 0 ºC. Después, la mezcla agitada se basificó a pH 14 mediante la adición gota a gota de NaOH 10 N, la fase orgánica se
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separó y la fase acuosa se extrajo con TBME (2 x 500 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4) y se concentraron hasta un volumen de 1 l. A esta solución de amina libre se le añadió BOC2O o dicarbonato de di-terc-butilo (131,0 g, 0,6 mol) y la mezcla se agitó 4 días a ta. A la reacción se le añadió más cantidad de dicarbonato de di-terc-butilo (50 g, 0,23 mol), la mezcla se calentó a reflujo durante 3 h y después se dejó enfriar a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío, proporcionando 80 g de material en bruto. Este residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (2,5 kg de SiO2, eluyendo con 1% a 2% de MeOH/CH2Cl2), proporcionando 57 g (53%) de éster etílico del ácido N-Boc-(1R,2S)/(1S,2R)-1-amino-2vinilciclopropanocarboxílico racémico en forma de un aceite de color amarillo que solidificó mientras reposaba en el frigorífico: RMN 1H (CDCl3, 300 MHz) δ 1,26 (t, J= 7,1 Hz, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,43-1,49 (m, 1H), 1,76-1,82 (m a, 1H), 2,14 (c, J= 8,6 Hz, 1H), 4,18 (c, J= 7,2 Hz, 2H), 5,12 (dd J= 10,3, 1,7 Hz, 1H), 5,25 (s a, 1H), 5,29 (dd, J= 17,6, 1,7 Hz, 1H), 5,77 (ddd, J= 17,6, 10,3, 8,9 Hz, 1H); EM m/z 254,16 (M-1)
Etapa 3 Preparación de clorhidrato de éster etílico del ácido (1R,2S)/(1S,2R)-1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico racémico
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Se disolvió éster etílico del ácido N-Boc-(1R,2S)/(1S,2R)-1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico (9,39 g, 36,8 mmol) en HCl 4 N/dioxano (90 ml, 360 mmol) y se agitó durante 2 h a ta. La mezcla de reacción se concentró, proporcionando clorhidrato de éster etílico del ácido (1R,2S)/(1S,2R)-1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico con rendimiento cuantitativo (7 g, 100%). RMN 1H (metanol-d4) δ 1,32 (t, J= 7,1, 3H), 1,72 (dd, J= 10,2, 6,6 Hz, 1H), 1,81 (dd, J= 8,3, 6,6 Hz, 1H), 2,38 (c, J= 8,3 Hz, 1H), 4,26-4,34 (m, 2H), 5,24 (dd, 10,3, 1,3 Hz, 1H) 5,40 (d, J= 17,2, 1H), 5,69-5,81 (m, 1H).
Ruta alternativa para la preparación de clorhidrato de éster etílico del ácido N-Boc-1-amino-2vinilciclopropanocarboxílico racémico
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A una solución de terc-butóxido potásico (11,55 g, 102,9 mmol) en THF (450 ml) a -78 ºC se le añadió la N,Ndibencilimina de éster etílico de glicina disponible en el mercado (25,0 g, 93,53 mmol) en THF (112 ml). La mezcla de reacción se calentó a 0 ºC, se agitó durante 40 min y después se enfrió de nuevo a -78 ºC. A esta solución se le añadió trans-1,4-dibromo-2-buteno (20,0 g, 93,50 mmol), la mezcla se agitó durante 1 h a 0 ºC y se enfrió de nuevo a -78 ºC. Se añadió terc-butóxido potásico (11,55 g, 102,9 mmol), la mezcla se calentó inmediatamente a 0 ºC y se agitó durante una hora más antes de concentrarse al vacío. El producto en bruto se recogió en Et2O (530 ml), se añadió una solución ac. 1 N de HCl (106 ml, 106 mmol) y la mezcla bifásica resultante se agitó durante 3,5 h a ta. Las fases se separaron y la fase acuosa se lavó con Et2O (2 x) y se basificó con una solución ac. saturada de NaHCO3. La amina deseada se extrajo con Et2O (3 x) y el extracto orgánico combinado se lavó con salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró al vacío, obteniendo la amina libre. Este material se trató con una solución 4 N de HCl en dioxano (100 ml, 400 mmol) y se concentró, proporcionando clorhidrato de éster etílico del ácido (1R,2S)/(1S,2R)1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico en forma de un semisólido de color pardo (5,3 g, rendimiento del 34%) idéntico al material obtenido en el procedimiento A, excepto por la presencia de una pequeña impureza aromática no identificada (8%).
Resolución de éster etílico del ácido N-Boc-(1R,2S)/(1S,2R)-1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico
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Resolución A
A una solución acuosa de tampón fosfato sódico (0,1 M, 4,25 litro ("l"), pH 8) alojada en un reactor con camisa calefactora de 12 l, mantenida a 39 ºC y agitada a 300 rpm se le añadieron 511 gramos de Acalasa 2,4L 5 (aproximadamente 425 ml) (Novozymes North America Inc.). Cuando la temperatura de la mezcla alcanzó 39 ºC, el pH se ajustó a 8,0 mediante la adición de NaOH al 50% en agua. Después, se añadió una solución del éster etílico del ácido N-Boc-(1R,2S)/(1S,2R)-1-amino-1-vinilciclopropanocarboxílico racémico (85 g) en 850 ml de DMSO durante un periodo de 40 min. Después, la temperatura de reacción se mantuvo a 40 ºC durante 24,5 h, tiempo durante el cual el pH de la mezcla se ajustó a 8,0 en los puntos temporales 1,5 h y 19,5 h usando NaOH al 50% en 10 agua. Después de 24,5 h, se determinó que el enantio-exceso del éster era del 97,2% y la reacción se enfrió a temperatura ambiente (26 ºC) y se agitó durante una noche (16 h), después de lo cual se determinó que el enantioexceso del éster era del 100%. después, el pH de la mezcla de reacción se ajustó a 8,5 con NaOH al 50% y la mezcla resultante se extrajo con MTBE (2 x 2 l). Después, el extracto de MTBE combinado se lavó con NaHCO3 al 5% (3 x 100 ml) y agua (3 x 100 ml) y se evaporó al vacío, dando el éster etílico del ácido N-Boc-(1R,2S)/-1-amino-2
15 vinil-ciclopropanocarboxílico enantioméricamente puro en forma de un sólido de color amarillo claro (42,55 g; pureza: 97% a 210 nm, sin contener ácido; exceso enantiomérico ("ee") del 100%.
Después, la fase acuosa del procedimiento de extracción se acidificó a pH 2 con H2SO4 al 50% y se extrajo con MTBE (2 x 2 l). El extracto de MTBE se lavó con agua (3 x 100 ml) y se evaporó para dar el ácido en forma de un sólido de color amarillo claro (42,74 g; pureza: 99% a 210 nm, sin contener éster).
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éster
ácido
Espec. de Masas de Alta Resolución
IEN (+), C13H22NO4, [M+H]+, cal. 256,1549, encontrado 256,1542 IEN (-), C11H16NO4, [M-H]-, cal. 226,1079, encontrado 226,1089
Desplazamiento químico observado en RMN Disolvente: CDCl3 (protón δ 7,24 ppm, C-13 δ 77,0 ppm) Bruker DRX-500C: protón 500,032 MHz, carbono 125,746 MHz
Posición
Protón (patrón) ppm C-13 ppm Protón (patrón) ppm C-13 ppm
1
--- 40,9 --- 40,7
2
2,10 (c, J = 9,0 Hz) 34,1 2,17 (c, J = 9,0 35,0 Hz)
(cont.)
3a
1,76 (a) 23,2 1,79 (a) 23,4
3b
1,46 (a) 1,51, (a)
4
--- 170,8 --- 175,8
5
5,74 (ddd, J = 9,0, 10,0, 17,0 Hz) 133,7 5,75 (m) 133,4
6a
5,25 (d, J = 17,0 Hz) 117,6 5,28 (d, J = 17,0 Hz) 118,1
6b
5,08 (dd, J = 10,0, 1,5 Hz) 5,12 (d, J = 10,5 Hz)
7
--- 155,8 --- 156,2
8
--- 80,0 --- 80,6
9
1,43 (s) 28,3 1,43 (s) 28,3
10
4,16 (m) 61,3 --- ---
11
1,23 (t, J = 7,5 Hz) 14,2 --- ---
Resolución B
A 0,5 ml de tampón Heps·Na 100 mM (pH 8,5) en un pocillo de una placa de 24 pocillos (capacidad: 10 ml/pocillo) se
5 le añadieron 0,1 ml de Savinasa 16,0L (proteasa de Bacillus clausii) (Novozymes Nonh America Inc.) y una solución del éster etílico del ácido N-Boc-(1R,2S)/(1S,2R)-1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico racémico (10 mg) en 0,1 ml de DMSO. La placa se cerró herméticamente y se incubó a 250 rpm a 40 ºC. Después de 18 h, se determinó que el enantio-exceso del éster era del 44,3% como se indica a continuación: se retiraron 0,1 ml de la mezcla de reacción y se mezclaron bien con 1 ml de etanol; después de la centrifugación, se analizaron 10 microlitros ("µl") del
10 sobrenadante con la HPLC quiral. A la mezcla de reacción restante se le añadieron 0,1 ml de DMSO y la placa se incubó durante 3 días más a 250 rpm a 40 ºC, después de lo cual al pocillo se le añadieron 4 ml de etanol. Después de la centrifugación, se analizaron 10 µl del sobenadante con la HPLC quiral y se determinó que el enantio-exceso del éster era del 100%.
Resolución C
15 A 0,5 ml de tampón Heps·Na 100 mM (pH 8,5) en un pocillo de una placa de 24 pocillos (capacidad: 10 ml/pocillo) se le añadieron 0,1 ml de Esperasa 8,0L (proteasa de Bacillus halodurans) (Novozymes North America Inc.) y una solución del éster etílico del ácido N-Boc-(1R,2S)/(1S,2R)-1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico racémico (10 mg) en 0,1 ml de DMSO. La placa se cerró herméticamente y se incubó a 250 rpm a 40 ºC. Después de 18 horas, se determinó que el enantio-exceso del éster era del 39,6% como se indica a continuación: se retiraron 0,1 ml de la
20 mezcla de reacción y se mezclaron bien con 1 ml de etanol; después de la centrifugación, se analizaron 10 µl del sobrenadante con la HPLC quiral. A la mezcla de reacción restante se le añadieron 0,1 ml de DMSO y la placa se incubó durante 3 días más a 250 rpm a 40 ºC, después de lo cual a cada pocillo se le añadieron 4 ml de etanol. Después de la centrifugación, se analizaron 10 µl del sobrenadante con la HPLC quiral y se determinó que el enantio-exceso del éster era del 100%.
25 El análisis de las muestras se realizó de la siguiente manera:
1) Preparación de las muestras: Se mezclaron bien aproximadamente 0,5 ml de la mezcla de reacción con 10 volúmenes de EtOH. Después de la centrifugación, se inyectaron 10 µl del sobrenadante en la columna de HPLC. 2) Determinación de la conversión:
30 Columna: YMC ODS A, 4,6 x 50 mm, S-5 µm Disolvente: A, 1 mM HCl en agua; B, MeCN Gradiente: 30% de B durante 1 min; de 30% a 45% de B durante 0,5 min; 45% de B durante 1,5 min; de 45% a 30% de B durante 0,5 min. Caudal: 2 ml/min
Detección UV: 210 nm Tiempo de retención: ácido, 1,2 min; éster, 2,8 min.
3) Determinación del exceso enantiomérico para el éster:
Columna: CHIRACEL OD-RH, 4,6 x 150 mm, S-5 µm
5 Fase móvil: MeCN/HClO4 50 mM en agua (67/33)
Caudal: 0,75 ml/min.
Detección UV: 210 nm.
Tiempo de retención:
isómero (1S, 2R) en forma de ácido: 5,2 min; 10 Racemato: 18,5 min y 20,0 min;
isómero (1R, 2S) en forma de éster: 18,5 min.
2. Preparación de éster etílico del ácido N-Boc-(1R,2S)-1-amino-2-ciclopropilciclopropanocarboxílico
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Una solución de ácido N-Boc-(1R,2S)-1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico (255 mg, 1,0 mmol) en éter (10 ml) se
15 trató con acetato de paladio (5 mg, 0,022 mmol). La solución de color naranja/rojo se puso en una atmósfera de N2. Se añadió gota a gota un exceso de diazometano en éter durante el transcurso de 1, h. La solución resultante se agitó a ta durante 18 h. El exceso de diazometano se retiró usando una corriente de nitrógeno. La solución resultante se concentró por evaporación rotatoria para dar el producto en bruto. La cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 10%/hexano) proporcionó 210 mg (78%) de éster etílico del ácido N-Boc-(1R,2S)-1-amino-2
20 ciclopropilciclopropanocarboxílico en forma de un aceite incoloro. CL-EM (tiempo de retención: 2,13, similar al procedimiento A con la excepción de: tiempo de gradiente 3 min, columna Xterra EM C18 S7 3,0 x 50 mm), EM m/e 270 (M++1).
3. El ácido 1-terc-butoxicarbonilamino-ciclopropano-carboxílico está disponible en el mercado
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25 4. Preparación de clorhidrato de éster metílico del ácido 1-aminociclobutanocarboxílico
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Se disolvió ácido 1-aminociclobutanocarboxílico (100 mg, 0,869 mmol) (Tocris) en 10 ml de MeOH y se burbujeó gas HCl durante 2 h. La mezcla de reacción se agitó durante 18 h y después se concentró al vacío, dando 144 mg de un aceite de color amarillo. La trituración con 10 ml de éter proporcionó 100 mg del producto del título en forma de un
30 sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) δ 2,10-2,25 (m, 1H), 2,28-2,42 (m, 1H), 2,64-2,82 (m, 4H), 3,87 (s, 3H), 9,21 (s a, 3H).
5. Preparación de éster terc-butílico del ácido(1R,2R)/(1S,2S) 1-Amino-2-etilciclopropanocarboxílico racémico, que se muestra a continuación.
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Etapa 1: Preparación de di-terc-butil éster del ácido 2-etilciclopropano-1,1-dicarboxílico, que se muestra a continuación.
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5 A una suspensión de cloruro de benciltrietilamonio (21,0 g, 92,2 mmol) en una solución acuosa al 50% de NaOH (92,4 g en 185 ml de H2O) se le añadieron 1,2-dibromobutano (30,0 g, 138,9 mmol) y malonato de di-terc-butilo (20,0 g, 92,5 mmol). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente 18 h a ta, una mezcla de hielo y después se añadió agua. El producto en bruto se extrajo con CH2Cl2 (3 x) y se lavó secuencialmente con agua (3 x) y salmuera y los extractos orgánicos se combinaron. La fase orgánica se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo
10 resultante se sometió a cromatografía ultrarrápida (100 g de SiO2, Et2O al 3% en hexano), proporcionando el producto del título (18,3 g, 67,8 mmol, rendimiento del 73%) que se usó directamente en la siguiente reacción.
Etapa 2: Preparación de éster terc-butílico del ácido 2-etilciclopropano-1,1-dicarboxílico racémico, que se muestra a continuación.
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15 El producto de la Etapa 1 (18,3 g, 67,8 mmol) se añadió a una suspensión de terc-butóxido potásico (33,55 g, 299,0 mmol) en éter seco (500 ml) a 0 ºC, seguido de H2O (1,35 ml, 75,0 mmol) y se agitó vigorosamente durante una noche a ta. La mezcla de reacción se vertió en una mezcla de hielo y agua y se lavó con éter (3 x). La fase acuosa se acidificó con una solución ac. al 10% de ácido cítrico a 0 ºC y se extrajo con EtOAc (3 x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 x) y salmuera, se secaron (MgSO4) y se concentraron al vacío, proporcionando
20 el producto del título en forma de un aceite de color amarillo pálido (10 g, 46,8 mmol, rendimiento del 69%).
Etapa 3: Preparación de éster terc-butílico del ácido (1R,2R)/(1S,2S)-2-etil-1-(2trimetilsilaniletoxicarbonilamino)ciclopropanocarboxílico, que se muestra a continuación.
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A una suspensión del producto de la Etapa 2 (10 g, 46,8 mmol) y 3 g de tamices moleculares de 4 A recién activados
25 en benceno seco (160 ml) se le añadieron Et3N (7,50 ml, 53,8 mmol) y DPPA (11 ml, 10,21 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 3,5 h, después se añadió 2-trimetilsilil-etanol (13,5 ml, 94,2 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante una noche. La mezcla de reacción se filtró, se diluyó con Et2O, se lavó con una solución acuosa al 10% de ácido cítrico, agua, NaHCO3 acuoso saturado, agua (2 x) y salmuera (2 x), se secó (MgSO4) y se concentró al vacío. El residuo se suspendió con 10 g de resina eliminadora de poliisocianato Aldrich en 120 ml de CH2Cl2, se agitó a ta durante una noche y se filtró, proporcionando el producto del título (8 g, 24,3 mmol; 52%) en forma de un aceite de color amarillo pálido: RMN 1H (CDCl3) δ 0,03 (s, 9H), 0,97 (m, 5H), 1,20 (m a, 1H), 1,45 (s, 9H), 1,40-1,70 (m, 4H), 4,16 (m, 2H), 5,30 (s a, 1H).
Etapa 4: Preparación de éster terc-butílico del ácido (1R,2R)/(1S,2S)-1-Amino-2-etilciclopropanocarboxílico racémico, que se muestra a continuación.
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Al producto de la Etapa 3 (3 g, 9 mmol) se le añadió una solución 1,0 M de TBAF en THF (9,3 ml, 9,3 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo durante 1,5 h, se enfrió a ta y después se diluyó con 500 ml de EtOAc. La solución se lavó sucesivamente con agua (2 x 100 ml) y salmuera (2 x 100 ml), se secó (MgSO4) y se concentró al vacío,
10 proporcionando el intermedio del título
II Elementos P1':
Los elementos P1' preparados a continuación puede usarse para preparar compuestos de Fórmula I usando los procedimientos descritos en el presente documento.
1. Preparación de ciclopropilsulfonamida:
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Etapa 1: Preparación de N-terc-Butil-(3-cloro)propilsulfonamida
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Se disolvió terc-butilamina (3,0 mol, 315,3 ml) en THF (2,5 l). La solución se enfrió a -20 ºC. Se añadió lentamente cloruro de 3-cloropropanosulfonilo (1,5 mol, 182,4 ml). La mezcla de reacción se dejó calentar a ta y se agitó durante
20 24 h. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se disolvió en CH2Cl2 (2,0 l). La solución resultante se lavó con HCl 1 N (1,0 l), agua (1,0 l) y salmuera (1,0 l) y se secó sobre Na2SO4. Se filtró y se concentró al vacío, dando un sólido de color ligeramente amarillo, que se cristalizó en hexano, proporcionando el producto en forma de un sólido de color blanco (316,0 g, 99%). RMN 1H (CDCl3) δ 1,38 (s, 9H), 2,30-2,27 (m, 2H), 3,22 (t, J= 7,35 Hz, 2H), 3,68 (t, J= 6,2 Hz, 2H), 4,35 (a, 1H).
25 Etapa 2: Preparación de terc-butilamida del ácido ciclopropanosulfónico
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A una solución de N-terc-butil-(3-cloro)propilsulfonamida (2,14 g, 10,0 mmol) en THF (100 ml) se le añadió n-BuLi (2,5 M en hexano, 8,0 ml, 20,0 mmol) a -78 ºC. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente durante un periodo de 1 h. Los volátiles se retiraron al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc y agua (200 ml, 200
30 ml). La fase orgánica separada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se recristalizó en hexano para producir el producto deseado en forma de un sólido de color blanco (1,0 g, 56%). RMN 1H (CDCl3) δ 0,98-1,00 (m, 2H), 1,18-1,19 (m, 2H), 1,39 (s, 9H), 2,48-2,51 (m, 1H), 4,19 (a, 1H).
Etapa 3: preparación de ciclopropilsulfonamida
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Una solución de terc-butilamida del ácido ciclopropanosulfónico (110,0 g, 0,62 mol) en TFA (500 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. El volátil se retiró al vacío. El residuo se recristalizó en EtOAc/hexano (60 ml/240 ml) para producir el producto deseado en forma de un sólido de color blanco (68,5 g, 91%). RMN 1H (DMSOd6) δ 0,84-0,88 (m, 2H), 0,95-0,98 (m, 2H), 2,41-2,58 (m, 1H), 6,56 (a, 2H).
2. Procedimiento alternativo para la preparación de ciclopropilsulfonamida
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Una solución de 100 ml de THF enfriada a 0 ºC se burbujeó en amoniaco gaseoso hasta que se alcanzó la saturación. A esta solución se le añadió una solución de 5 g (28,45 mmol) de cloruro de ciclopropilsulfonilo (adquirido en Array Biopharma) en 50 ml de THF y la solución se calentó a ta durante una noche y se agitó durante un día más. La mezcla se concentró hasta que quedaron 1-2 ml de disolvente y se aplicó sobre un lecho de 30 g de SiO2 (eluyendo con EtOAc del 30% al 60%/Hexanos), proporcionando 3,45 g (100%) de ciclopropilsulfonamida en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (Metanol-d4) δ 0,94-1,07 (m, 4H), 2,52-2,60 (m, 1H); RMN 13C (metanol-d4) δ 5,92, 33,01.
3. Preparación de ciclobutilsulfonamida
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A una solución de 5,0 g (37,0 mmol) de bromuro de ciclobutilo en 30 ml de éter dietílico anhidro (Et2O) enfriada a -78 ºC se le añadieron 44 ml (74,8 mmol) de terc-butil litio 1,7 M en pentanos y la solución se calentó lentamente a -35 ºC durante 1,5 h. Esta mezcla se canuló lentamente en una solución de 5,0 g (37,0 mmol) de cloruro sulfurilo recién destilado en 100 ml de hexanos enfriados a -40 ºC, se calentó a 0 ºC durante 1 h y se concentró cuidadosamente al vacío. Esta mezcla se disolvió de nuevo en Et2O, se lavó una vez con un poco de agua enfriada con hielo, se secó (MgSO4) y se concentró cuidadosamente. Esta mezcla se disolvió de nuevo en 20 ml de THF, se añadió gota a gota a 500 ml de NH3 saturado en THF y se dejó en agitación durante una noche. La mezcla se concentró al vacío, dando un sólido en bruto de color amarillo y se recristalizó en la cantidad mínima de CH2Cl2 en hexanos con 1-2 gotas de MeOH, proporcionando 1,90 g (38%) de ciclobutilsulfonamida en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) δ 1,95-2,06 (m, 2H), 2,30-2,54 (m, 4H), 3,86 (p, J= 8 Hz, 1H), 4,75 (s a, 2H); RMN 13C (CDCl3) δ 16,43, 23,93, 56,29. EMAR m/z (M-H)-calc. para C4H4NSO2: 134,0276, encontrado 134,0282.
4. Preparación de ciclopentilsulfonamida
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Una solución de 18,5 ml (37,0 mmol) de cloruro de ciclopentil-magnesio 2 M en éter se añadió gota a gota a una solución de 3,0 ml (37,0 mmol) de cloruro de sulfurilo recién destilado (obtenido en Aldrich) en 100 ml de hexanos enfriados a -78 ºC. La mezcla se calentó a 0 ºC durante 1 h y después se concentró cuidadosamente al vacío. Esta mezcla se disolvió de nuevo en Et2O (200 ml), se lavó una vez con un poco de agua enfriada con hielo (200 ml), se secó (MgSO4) y se concentró cuidadosamente. Esta mezcla se disolvió de nuevo en 35 ml de THF, se añadió gota a gota a 500 ml de NH3 saturado en THF y se dejó en agitación durante una noche. La mezcla se concentró al vacío, dando un sólido en bruto de color amarillo, el residuo se filtró a través de 50 g de gel de sílice usando EtOAc al 70%hexanos como eluyente y después la solución se concentró. El residuo se recristalizó en la cantidad mínima de CH2Cl2 en hexanos con 1-2 gotas de MeOH, proporcionando 2,49 g (41%) de ciclopentilsulfonamida en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) δ 1,58-1,72 (m, 2H), 1,74-1,88 (m, 2H), 1,94-2,14 (m, 4H), 3,48-3,59 (m, 1H), 4,80 (s a, 2H); RMN 13C (CDCl3) δ 25,90, 28,33, 63,54, EM m/e 148 (M-H)-.
5. Preparación de ciclohexilsulfonamida
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Una solución de 18,5 ml (37,0 mmol) de cloruro de ciclohexilmagnesio 2 M (TCI Americas) en éter se añadió gota a gota a una solución de 3,0 ml (37,0 mmol) de cloruro de sulfurilo recién destilado en 100 ml de hexanos enfriados a 78 ºC. La mezcla se calentó a 0 ºC durante 1 h y después se concentró cuidadosamente al vacío. Esta mezcla se disolvió de nuevo en Et2O (200 ml), se lavó una vez con un poco de agua enfriada con hielo (200 ml), se secó (MgSO4) y se concentró cuidadosamente. Esta mezcla se disolvió de nuevo en 35 ml de THF, se añadió gota a gota a 500 ml de NH3 saturado en THF y se dejó en agitación durante una noche. La mezcla se concentró al vacío, dando un sólido en bruto de color amarillo y el residuo se filtró a través de 50 g de gel de sílice usando EtOAc al 70%hexanos como eluyente y se concentró. El residuo se recristalizó en la cantidad mínima de CH2Cl2 en hexanos con 1-2 gotas de MeOH, proporcionando 1,66 g (30%) de ciclohexilsulfonamida en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (CDCl3) δ 1,11-1,37 (m, 3H), 1,43-1,56 (m, 2H), 1,67-1,76 (m, 1H), 1,86-1,96 (m, 2H), 2,18-2,28 (m, 2H), 2,91 (tt, J= 12, 3,5 Hz, 1H), 4,70 (s a, 2H); RMN 13C (CDCl3) δ 25,04, 25,04, 26,56, 62,74; EM m/e 162 (M-1)-.
6. Preparación de neopentilsulfonamida
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Siguiendo el procedimiento para la preparación de ciclohexilsulfonamida, 49 ml (37 mmol) de cloruro de neopentilmagnesio 0,75 M (Alfa) en éter se convirtieron en 1,52 g (27%) de neopentilsulfonamida en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) δ 1,17 (s, 9H), 3,12 (s, 2H), 4,74 (s a, 2H); RMN 13C (CDCl3) δ 29,46, 31,51, 67,38: EM m/e 150 (M-1)-.
7. Preparación de ciclobutilcarbinil-sulfonamida
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Una solución de 12,3 g (83 mmol) de bromuro de ciclobutilcarbinilo (Aldrich) y 13,7 g (91 mmol) de yoduro sódico en 150 ml de acetona se calentó a reflujo durante una noche y después se enfrió a ta. Los sólidos inorgánicos se retiraron por filtración y la acetona el yoduro de ciclopropilcarbinilo (8,41 g, 46%) se retiraron por destilación a temperatura ambiente y a 0,02 MPa a 80 ºC, respectivamente. Se canuló una solución de 4,0 g (21,98 mmol) de yoduro de ciclobutilcarbinilo en 30 ml de éter dietílico anhidro (Et2O) enfriada a -78 ºC en una solución de 17 ml (21,98 mmol) de sec-butil litio 1,3 M en ciclohexanos y la solución se agitó durante 5 min. En esta mezcla se canuló una solución de 3,0 g (21,98 mmol) de cloruro de sulfurilo recién destilado en 110 ml de hexanos enfriados a -78 ºC, la mezcla se calentó a ta durante 1 h y después se concentró cuidadosamente al vacío. Esta mezcla se disolvió de nuevo en Et2O, se lavó una vez con un poco de agua enfriada con hielo, se secó (MgSO4) y se concentró cuidadosamente. Esta mezcla se disolvió de nuevo en 30 ml de THF, se añadió gota a gota a 500 ml de NH3 saturado en THF y se dejó en agitación durante una noche. La mezcla se concentró al vacío, dando un sólido en bruto de color amarillo y se recristalizó en la cantidad mínima de CH2Cl2 en hexanos con 1-2 gotas de MeOH, proporcionando 1,39 g (42%) de ciclobutilcarbinilsulfonamida en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) δ 1,81-2,03 (m, 4H), 2,14-2,28 (m, 2H), 2,81-2,92 (m, 1H), 3,22 (d, J= 7 Hz, 2H), 4,74 (s a, 2H); RMN 13C (CDCl3) δ 19,10, 28,21, 30,64, 60,93; EM m/e 148 (M-1)-. tiempo: 1,73, procedimiento B), 818 (M++H)
8: Preparación de ciclopropilcarbinil-sulfonamida
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Usando el procedimiento empleado para la preparación de ciclobutilcarbinil-sulfonamida, se preparó ciclopropilcarbinilsulfonamida a partir de bromuro de ciclopropilcarbinilo (Aldrich) (véase también JACS 1981, pág. 442-445). RMN 1H (CDCl3) δ 0,39-0,44 (m, 2H), 0,67-0,76 (m, 2H), 1,13-1,27 (m, 1H), 3,03 (d, J= 7,3 Hz, 2H), 4,74 (s a, 2H); RMN 13C (CDCl3) δ 4,33, 5,61, 59,93; EM m/e 134 (M-1).
III Heterociclos a usar como material de partida en la construcción de elementos P2 para su incorporación posterior en compuestos de Fórmula I.
1. Isoquinolinas
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La isoquinolina (I) y análogos sustituidos de la misma, puede incorporarse en elementos P2 usando los dos procedimientos resumidos anteriormente y descritos con detalle en el presente documento. Dichos elementos P2 (3) pueden convertirse después en compuestos de Fórmula I usando procedimientos análogos a los descritos en el presente documento para análogos de isoquinolina similares.
2. Isoxazolepiridina y Oxazolepiridina (1)
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Pueden prepararse isoxazol y oxazol heterociclo (1) y análogos de los mismos usando química conocida e incorporarse en compuestos de Fórmula I usando la química descrita en el presente documento para intermedios de isoxazolopiridina similares como se muestra en la sección B.
Sección B:
En la Sección B, se usaron las siguientes condiciones para el análisis CL/EM.
Columnas: Procedimiento A: YMC ODS-A C18S7 (4,6 x 33 mm) Procedimiento B: YMC Xterra ODS S7 (3,0 x 50 mm) 5 Procedimiento C: Xterra ms C18 (4,6 x 33 mm) Procedimiento D:YMCODS-A C18S3 (4,6 x 33 mm)
Gradiente: 100% de disolvente A/0% de disolvente B a 0% de disolvente A/100% de disolvente B Tiempo de gradiente: 3 min. Tiempo de Mantenimiento: 1 min.
10 Caudal: 5 ml/min. Longitud de onda del Detector: 220 nm. Disolventes: Disolvente A: 10% de MeOH/90% de agua/0,1% de TFA. Disolvente B: 90% de MeOH/10% de agua/0,1% de TFA.
Se usaron las siguientes condiciones para la separación por HPLC prep.
15 Columnas: Phenomenex-Luna 30 x 100 mm, S5 Gradiente: 60% de disolvente A/40% de disolvente B a 0% de disolvente A/100% de disolvente B Tiempo de gradiente: 15 min. Tiempo de Parada: 20 min. Caudal: 30 ml/min.
20 Longitud de onda del Detector: 220 nm. Disolventes: Disolvente A: 10% de MeOH/90% de agua/0,1% de TFA. Disolvente B: 90% de MESH/10% de agua/0,1% de TFA.
Ejemplo 1: Preparación del Compuesto 1.
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25 Etapa 1:
Una mezcla de 3,5-dimetil-4-nitro-isoxazol (1,42 g, 10,0 mmol) y fenilacetaldehído (1,32 g, 11,0 mmol) en piperidina (1 ml) y etanol (10 ml) se calentó a reflujo durante 16 h. Después de enfriar a la temperatura ambiente, el producto precipitado se recogió por filtración. La torta se lavó minuciosamente con etanol frío, proporcionando 1,20 g (53%) del producto deseado en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) δ 2,87 (s, 3H), 7,46-7,50 (m, 3H), 7,56
30 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 7,7-7,80 (m, 2H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,19 min, procedimiento B), EM m/z 227 (M++H).
Etapa 2:
Una solución de 4-óxido de 3-metil-5-fenil-isoxazolo[4,5-b]piridina (1,00 g, 4,40 mmol) y POCl3 (2,71 g, 17,7 mmol) en cloroformo (10 ml) se calentó a reflujo durante 1 h. Después de enfriar a la temperatura ambiente, la solución final se diluyó con cloroformo (50 ml) y se lavó con NaHCO3 (ac.) (dos porciones de 50 ml) y salmuera, se secó sobre
5 MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (4:1 de hexano-EtOAc), proporcionando 790 mg (73%) del producto deseado en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H (CDCl3) δ 2,72 (s, 3H), 7,46-7,54 (m, 3H), 7,91 (s, 1H), 8,00-8,03 (m, 2H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,76 min, procedimiento B), EM m/z 245, 247 (M++H).
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10 Etapa 3:
A una mezcla de éster metílico del ácido 4-hidroxi-pirrolidin-2-carboxílico (H-Hyp-OMe HCl) (1,81 g, 10,0 mmol), HATU (5,70 g, 15,0 mmol) y N-BOC-t-butil-L-glicina (2,42 g, 10,5 mmol) en CH2Cl2 (100 ml) se le añadió DIPEA (3,47 g, 31,0 mmol) a 0 ºC. Después de agitar a la temperatura ambiente durante 12 h, la solución formada se diluyó con CH2Cl2 (100 ml), se lavó con ácido cítrico al 5% enfriado con hielo (ac.). La fase orgánica se lavó con ácido cítrico al
15 5%, NaOH 1 M y salmuera respectivamente, se secó sobre MhSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó al vacío, proporcionando 3,55 g (99%) del producto deseado en forma de una espuma de color blanquecino. Este producto se usó para la siguiente reacción en bruto sin purificación adicional.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,04 (s, 9H), 1,43 (s, 9H), 1,99-2,03 (m, 1H), 2,20-2,30 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,70-3,79 (m, 2H), 4,28 (a, 1H), 4,46 (a, 1H), 4,74-4,80 (m, 1H);
20 CL-EM (tiempo de retención: 1,28 min, procedimiento B), EM m/z 359 (M++H).
Etapa 4:
Una mezcla del producto de la Etapa 3 (3,55 g, 9,9 mmol) en THF ( 50 ml), MeOH ( 50 ml) y LiOH monohidrato (0,83 g, 19,9 mmol en 50 ml de H2O) se agitó a la temperatura ambiente durante una noche. Después de la retirada de los volátiles al vacío, el residuo se disolvió en NaOH 0,1 M (100 ml). Esta solución acuosa se lavó con éter (50 ml), se
25 acidificó con HCl 1 M a pH 4 y se extrajo con EtOAc (100 ml). La fase orgánica se lavó con ácido cítrico al 5% y salmuera, se secó sobre MgSO4 y se evaporó a sequedad para dar 3,20 g (95%) del producto deseado en forma de una espuma de color blanco. Este producto se usó en bruto sin purificación adicional.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,02 (s, 9H), 1,43 (s, 9H), 2,01-2,09 (m, 1H), 2,25-2,32 (m, 1H), 3,70-3,85 (m, 2H), 4,26-4,30 (m, 1H), 4,46-4,51 (m, 2H), 6,37-6,41 (m, 1H);
30 CL-EM (tiempo de retención: 1,14 min, procedimiento B), EM m/z 345 (M++H).
Etapa 5:
A una solución del producto de la Etapa 4 (1,01 g, 2,93 mmol) en DMSO (30 ml) se le añadió terc-butóxido potásico (1,02 g, 9,08 mmol). La solución formada se agitó a la temperatura ambiente durante 1 h antes de la adición de 7cloro-3-metil-5-fenil-isoxazolo[4,5-b]piridina (0,75 g, 3,08 mmol). La solución final se agitó durante 12 h. Después, se
5 inactivó con agua enfriada con hielo, se acidificó con HCl 1 M a pH 4 y se extrajo con EtOAc (dos porciones de 200 ml). Las fases orgánicas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó por HPLC prep. (60% de B-100% de B, gradiente de 15 min), proporcionando 305 mg (19%) del producto deseado en forma de un sólido de color amarillo pálido.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,02 (s, 9H), 1,17 (s, 9H), 2,37-2,47 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,85-2,93 (m, 1H), 4,00-4,08 (m, 10 1H),4,14(a, 1H), 4,49-4,55 (m, 1H), 4,62-4,71(m, 1H),5,70 (m, 1H),7,45-7,53(m, 3H),7,56(s, 1H), 8,03-8,06 (m,2H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,89 min, procedimiento B), EM m/z 553 (M++H).
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Etapa 6a
Como se ha descrito en la sección A.
15 Etapa 6b:
A una solución de éster etílico del ácido 1(R)-terc-butoxicarbonilamino-2(S)-vinilciclopropanocarboxílico, el producto de la Etapa 6a (3,28 g, 13,2 mmol) en THF (7 ml) y metanol (7 ml) se le añadió una suspensión de LiOH (1,27 g, 53,0 mmol) en agua (14 ml). La mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente y se inactivó con NaOH 1 N (15 ml) y agua (20 ml). La mezcla resultante se lavó con EtOAc (20 ml) y la fase orgánica se extrajo con 20 ml
20 de NaOH 0,5 N. Las fases acuosas combinadas se acidificaron con HCl 1 N hasta pH 4 y se extrajeron con EtOAc (3 x 40 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron (MgSO4), produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (2,62 g, 87%).
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 1,22-1,26 (m, 1H), 1,37 (s, 9H), 1,50-1,52 (m, 1H), 2,05 (c, J= 9 Hz, 1H), 5,04 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,22 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,64-5,71 (m, 1H), 7,18, 7,53 (s, NH (rotámeros), 12,4 (s a, 1H) );
25 CL-EM (tiempo de retención: 1,67 min, procedimiento B), EM m/z 228 (M++H).
5
10
15
20
25
30
35
Etapa 7:
Una solución del producto de la Etapa 6 (2,62 g, 11,5 mmol) y CDI (2,43 g, 15,0 mmol) en THF (40 ml) se calentó a reflujo durante 50 min en una atmósfera de nitrógeno. La solución se enfrió a temperatura ambiente y se transfirió mediante una cánula a una solución de ciclopropilsulfonamida (1,82 g, 15,0 mmol) en THF (10 ml). A la solución resultante se le añadió DBU (2,40 ml, 16,1 mmol) y la agitación se continuó durante 20 h. La mezcla se inactivó con HCl 1 N a pH 1 y el THF se evaporó al vacío. La suspensión se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron (Na2SO4). La purificación por recristalización en hexanos-EtOAc (1:1) proporcionó el compuesto del título (2,4 g) en forma de un sólido de color blanco. Las aguas madre se purificó mediante una columna Biotage 40S (eluyendo con acetona al 9% en DCM), dando un segundo lote del compuesto del título (1,1 g). Los dos lotes se combinaron (rendimiento total del 92%).
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,96-1,10 (m, 4H), 1,22 (dd, J= 5,5, 9,5 Hz, 1H), 1,39 (s, 9H), 1,70 (t, J= 5,5 Hz, 1H), 2,192,24 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 5,08 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,23 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,45 (m, 1H), 6,85, 7,22 (s, NH (rotámeros);
CL-EM (tiempo de retención: 1,70 min, procedimiento B), EM m/z 331 (M++H).
Etapa 8:
Una solución del producto de la Etapa 7 (3,5 g, 10,6 mmol) en DCM (35 ml) y TFA (32 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. Los volátiles se retiraron al vacío y el residuo se suspendió en HCl 1 N en éter dietílico (20 ml) y se concentró al vacío. Este procedimiento se repitió una vez. La mezcla resultante se trituró en pentano y se filtró, dando el compuesto del título en forma de un sólido higroscópico de color blanquecino (2,60 g, 92%).
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 1,01-1,15 (m, 4H), 1,69-1,73 (m, 1H), 1,99-2,02 (m, 1H), 2,38 (c, J= 9 Hz, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 5,20 (d, J= 11 Hz, 1H), 5,33 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,52-5,59 (m, 1H), 9,17 (s a, 3H);
CL-EM (tiempo de retención: 0,24 min, procedimiento B), EM m/z 231 (M++H).
Etapa 9:
A una mezcla enfriada con hielo del producto de la Etapa 5 (70 mg, 0,13 mmol), clorhidrato de (1-amino-2-vinilciclopropanocarbonil)amida del ácido (1R,2S)-ciclopropanosulfónico, el producto de la Etapa 8 (37 mg, 0,14 mmol) y HATU (72 mg, 0,19 mmol) en DCM (2 ml) se le añadió diisopropiletilamina (50 mg, 0,39 mmol). La solución formada se dejó calentar a la temperatura ambiente durante 12 h y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por HPLC prep. (gradiente de 60% de B-100% de B, 15 min), proporcionando 52 mg (54%) del Compuesto 1 en forma de un sólido de color grisáceo.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,96-1,09 (m, 12H), 1,16-1,25 (m, 10H), 1,44-1,48 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,63-2,65 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 4,08-4,20 (m, 2H), 4,44-4,65 (m, 2H), 5,13 (d, J= 11,7 Hz, 1H), 5,32 (d, J= 15 Hz, 1H), 5,72-5,85 (a, 2H), 6,62 (d, J= 15,0 Hz, 1H), 7,46-7,53 (m, 3H), 7,58 (s, 1H), 8,04-8,07 (m, 2H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,92 min, procedimiento B), EM m/z 765 (M++H).
Ejemplo 2: Preparación del Compuesto 2.
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Etapa 1:
Una mezcla de 2-amino-6-metilpiridina (1,08 g, 10,0 mmol), acetato de etilbenzoílo (2,30 g, 12,0 mmol) y ácido polifosfórico (6,00 g, 61,2 mmol) se calentó a 110 ºC durante 5 h. Después de enfriar a la temperatura ambiente, la mezcla se vertió en agua enfriada con hielo (20 ml) y se neutralizó a pH 7 con NaOH 10 M. Se extrajo con CHCl3. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (1:1 de hexano-EtOAc), proporcionando 510 mg (22%) del producto deseado en forma de un sólido de color amarillo pálido.
RMN 1H (CDCl3) δ 3,08 (s, 3H), 6,64 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 6,71 (s, 1H), 7,42-7,52 (m, 5H), 8,04-8,06 (m, 2H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,21 min, procedimiento B), EM m/z 237 (M++H).
Etapa 2:
Una solución de 6-metil-2-fenil-pirido[1,2a]pirimidin-4-ona (489 mg, 2,07 mmol) en éter difenílico fundido (5 ml) se calentó a suave reflujo durante 5 h. Después de enfriar a la temperatura ambiente, la suspensión formada se diluyó con éter dietílico (10 ml) y se filtró. La torta se lavó minuciosamente con éter dietílico, proporcionando 450 mg (92%) del producto deseado en forma de un sólido de color parduzco. CL-EM (tiempo de retención: 1,25 min, procedimiento B), EM m/z 237 (M++H).
Etapa 3:
Una suspensión de 7-metil-2-fenil-1H-[1,8]naftiridin-4-ona (450 mg, 1,91 mmol) en POCl3 (10 ml) se calentó a suave reflujo durante 3 h. Se evaporó al vacío. El residuo se vertió en agua enfriada con hielo (20 ml) y se neutralizó a pH 10 con NaOH 10 M. Se extrajo con CHCl3. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (2:1 de hexano-EtOAc), proporcionando 450 mg (92%) del producto deseado en forma de un sólido de color rosa.
RMN 1H (CD3OD) δ 2,80 (s, 3H), 7,54-7,56 (m, 3H), 7,61 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 8,25-8,30 (m, 3H), 8,58 (d, J= 8,4 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,39 min, procedimiento B), EM m/z 255, 257 (M++H).
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Etapa 4:
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 5, con la excepción de que se usó 4-cloro-7-metil-2-fenil-[1,8]naftiridina del Ejemplo 2, Etapa 3. CL-EM (tiempo de retención: 1,55 min, 5 procedimiento B), EM m/z 563 (M++H).
Etapa 5:
El Compuesto 2 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 9, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 2, Etapa 4.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,01-1,10 (m, 12H), 1,21-1,26 (m, 10H), 1,40-1,45 (m, 1H), 1,86-1,91 (m, 1H), 2,20-2,29 (m, 1H),
10 2,39-2,49 (m, 1H), 2,72-2,81 (m, 1H), 2,92-2,95 (m, 4H), 4,10-4,16 (m, 2H), 4,55-4,65 (m, 2H), 5,14 (d, J= 12,0 Hz, 1H), 5,30 (d, J= 15,0 Hz, 1H), 5,67-5,82 (m, 2H), 7,60-7,80 (m, 3H), 7,78 (d, J= 8,6 Hz, 1H), 7,87 (s, 1H), 8,26-8,29 (m, 2H), 8,95 (d, J= 8,4 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,62 min, procedimiento B), EM m/z 775 (M++H).
Ejemplo 3: Preparación del Compuesto 3.
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Etapa 1:
A una solución de alcohol 4-metoxifenetílico (1,52 g, 10,0 mmol) en CH2Cl2 (50 ml) a 0 ºC se le añadió en una porción reactivo de Dess-Martin (4,45 g, 10,5 mmol). La mezcla formada se dejó calentar a la temperatura ambiente
5 durante 1 h. Se lavó con Na2S2O3 sat. (ac.), NaOH 1 M y salmuera, respectivamente. Se secó sobre MgSO4 y se evaporó al vacío, dando 1,50 g (100%) del aldehído deseado en forma de un aceite viscoso. Este producto se usó en bruto sin purificación adicional.
Etapa 2:
Una solución de 3,5-dimetil-4-nitro-isoxazol (142 mg, 1,0 mmol), 4-metoxifenilacetaldehído del Ejemplo 3, Etapa 1
10 (180 mg, 1:1 mmol) en piperidina (0,1 ml) y etanol (2 ml) se calentó a reflujo durante 12 h. Después de enfriar a la temperatura ambiente, el producto precipitado se recogió por filtración. La torta se lavó minuciosamente con etanol frío, proporcionando 130 mg (51%) del producto deseado en forma de un sólido de color grisáceo.
RMN 1H (CDCl3) δ 2,88 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 7,02 (d, J= 8,5 Hz, 2H), 7,50 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 7,57 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 7,81 (d, J= 8,5 Hz. 2H);
15 CL-EM (tiempo de retención: 1,24 min, procedimiento B), EM m/z 257 (M++H).
Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 2, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 3, Etapa 2. 20 RMN 1H (CDCl3) δ 2,70 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 7,00-7,03 (m, 2H), 7,84 (s, 1H), 7,96-7,98 (m, 2H); CL-EM (tiempo de retención: 1,96 min, procedimiento B), EM m/z 275, 277 (M++H). Etapa 4:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 5, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 3, Etapa 3. RMN 1H (CD3OD) δ 1,02 (s, 9H), 1,18 (s, 9H), 2,39-2,43 (m, 1H), 2,63 (s, 3H), 2,75-2,80 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 4,005 4,08 (m, 1H), 4,17 (a, 1H), 4,49-4,55 (m, 1H), 4,62-4,71 (m, 1H), 5,68 (a, 1H), 7,05 (d, J= 8,5 Hz, 2H), 7,49 (s, 1H), 8,00 (d, J= 8,5 Hz, 2H); CL-EM (tiempo de retención: 1,89 min, procedimiento B), EM m/z 583 (M+ +H). Etapa 5: El Compuesto 3 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 9, con la
10 excepción de que se usó el producto del Ejemplo 3, Etapa 4. RMN 1H (CD3OD) δ 1,01-1,09 (m, 12H), 1,17-16 (m, 10), 1,44-1,47 (m, 1), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,632,65 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 4,08-4,20 (m, 2H), 4,44-4,65 (m, 2H), 5,13 (d, J= 11,7 Hz, 1H), 5,32 (d, J= 15,0 Hz, 1H), 5,72-5,85 (m, 2H), 7,05 (d, J= 8,5 Hz, 2H), 7,06 (s, 1H), 8,01 (d, J= 8,5 Hz, 2H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,96 min, procedimiento B), EM m/z 795 (M++H). 15 Ejemplo 4: Preparación del Compuesto 4.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 3, Etapa 1&2, con la 20 excepción de que se usó alcohol 4-fluorofenetílico. CL-EM (tiempo de retención: 1,18 min, procedimiento B), EM m/z 245 (M++H).
Etapa 2:
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Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 2, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 4, Etapa 1. RMN 1H (CDCl3) δ 2,71 (s, 3H), 7,17-7,20 (m, 2H), 7,86 (s, 1H), 8,00-8,02 (m, 2H); CL-EM (tiempo de retención: 1,71 min, procedimiento B), EM m/z 263, 265 (M++H). Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 5, con la excepción 10 de que se usó el producto del Ejemplo 4, Etapa 2. CL-EM (tiempo de retención: 1,91 min, procedimiento B), EM m/z 571 (M++H).
Etapa 4: El Compuesto 4 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 9, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 4, Etapa 3.
15 RMN 1H (CD3OD) δ 1,01-1,09 (m, 12H), 1,17-1,26 (m, 10H), 1,44-1,47 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,63-2,65 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 4,08-4,20 (m, 2H), 4,44-4,65 (m, 2H), 5,13 (d, J= 11,7 Hz, 1H), 5,32 (d, J= 15,0 Hz, 1H), 5,72-5,85 (m, 2H), 7,20-7,26 (m, 2H), 7,60 (s, 1H), 8,09-8,14 (m, 2H), 9,26 (a, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,91 min, procedimiento B), EM m/z 783 (M++H).
Ejemplo 5: Preparación del Compuesto 5.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 3, Etapa 1&2, con la excepción de que se usó alcohol 3-metoxi-fenetílico. CL-EM (tiempo de retención: 1,03 min, procedimiento B), EM m/z 257 (M++H). Etapa 2:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 2, con la excepción
10 de que se usó el producto del Ejemplo 5, Etapa 1. RMN 1H (CDCl3) δ 2,72 (s, 3H), 3,90 (s, 3H), 7,00-7,02 (m, 1H), 7,41 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 7,55 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,59 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 7,89 (s, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,89 min, procedimiento B), EM m/z 275, 277 (M++H). Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 5, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 5, Etapa 2. RMN 1H (CD3OD) δ 1,02 (s, 9 H), 1,18 (s, 9H), 2,37-2,47 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,85-2,93 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 4,005 4,08 (m, 1H), 4,14 (b. 1H), 4,49-4,55 (m, 1H), 4,62-4,71 (m, 1H), 5,71 (a, 1H), 7,02-7,04 (m, 1H), 7,40 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 7,58-7,62 (m, 3H); CL-EM (tiempo de retención: 1,90 min, procedimiento B), EM m/z 583 (M++H). Etapa 4: El Compuesto 5 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 9, con la
10 excepción de que se usó el producto del Ejemplo 5, Etapa 3. RMN 1H (CD3OD) δ 1,01-1,09 (m, 12H), 1,17-1,29 (m, 10H), 1,44-1,47 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,63-2,65 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 4,08-4,20 (m, 2H), 4,44-4,65 (m, 2H), 5,13 (d, J= 11,7 Hz, 1H), 5,32 (d, J= 15,0 Hz, 1H), 5,72-5,85 (m, 2H), 7,02-7,05 (m, 1H), 7,41 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 7,55-7,61 (m, 3H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,96 min, procedimiento B), EM m/z 795 (M++H). 15 Ejemplo 6: Preparación del Compuesto 6.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 3, Etapa 1&2, con la
excepción de que se usó alcohol 2-metoxi-fenetílico. CL-EM (tiempo de retención: 1,10 min, procedimiento B), EM m/z 257 (M++H). Etapa 2:
imagen2
5 Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 2, con la excepción
de que se usó el producto del Ejemplo 6, Etapa 1. RMN 1H (CDCl3) δ 2,721 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 7,03 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 7,11 (t, J= 7,5 Hz, 1H), 7,41-7,44 (m, 1H), 7,79-7,81 (m, 1H), 8,04 (s. 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,92 min, procedimiento B), EM m/z 275, 277 (M++H). 10 Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 5, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 6, Etapa 2.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,02 (s, 9 H), 1,20 (s, 9H), 2,37-2,47 (m, 1H), 2,63 (s, 3H), 2,85-2,93 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 4,0015 4,08 (m, 1H), 4,14 (a, 1H), 4,49-4,55 (m, 1H), 4,62-4,71 (m, 1H), 5,56 (a, 1H), 7,09 (t, J= 7,5 Hz, 1H), 7,15 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 7,41-7,44 (m, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,67 (d, J= 8,0 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,76 min, procedimiento B), EM m/z 583 (M++H).
Etapa 4:
El Compuesto 6 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 9, con la 20 excepción de que se usó el producto del Ejemplo 6, Etapa 3.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,01-1,08 (m, 12H), 1,17-1,26 (m, 10H), 1,44-1,47 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,63-2,65 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 4,08-4,12 (m, 1H), 4,19 (a, 1H), 4,44-4,65 (m, 2H), 5,13 (d, J= 11,7 Hz, 1H), 5,32 (d, J= 15,0 Hz, 1H), 5,59 (a, 1H), 5,72-5,80 (m, 1H), 7,09 (t, J= 7,5 Hz, 1H), 7,15 (d. J= 8,5 Hz, 7H), 7,41-7,45 (m, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,66-7,67 (m, 1H);
25 CL-EM (tiempo de retención: 1,93 min, procedimiento B), EM m/z 795 (M++H).
Ejemplo 7: Preparación del Compuesto 7.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 5, con la excepción 5 de que se usó 2-cloro-quinolina. CL-EM (tiempo de retención: 1,73 min, procedimiento B), EM m/z 472 (M++H).
Etapa 2: El Compuesto 7 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 9, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 7, Etapa 1.
10 RMN 1H (CD3OD) δ 1,01-1,08 (m, 12H), 1,17-1,26 (m, 10H), 1,44-1,47 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,23-2,30 (m, 2H), 2,52-2,57 (m, 1H), 2,89-2,98 (m, 1H), 4,10-4,14 (m, 1H), 4,09-4,15 (m, 2H), 4,47-4,51 (m, 1H), 5,13 (d, J= 10,0 Hz, 1H), 5,32 (d, J= 17,0 Hz, 1H), 5,73-5,78 (m, 1H), 5,92 (a, 1H), 6,90-6,92 (m, 1H), 7,42 (t, J= 7,5 Hz, 1H), 7,64 (t, J= 7,5 Hz, 1H), 7,78-7,82 (m, 2H), 8,13 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 9,18 (d, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,75 min, procedimiento B), EM m/z 684 (M++H). 15 Ejemplo 8: Preparación del Compuesto 8, Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 6b a 8, sin usar la Etapa 6a, una etapa de resolución enzimática. CL-EM (tiempo de retención: 0,24 min, procedimiento B), EM m/z 231 (M++H).
imagen2
Etapa 2:
A una mezcla enfriada con hielo de N-BOC-4-trans-hidroxi-L-prolina (1,58 g, 6,83 mmol), clorhidrato de (1-amino-2vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (Ejemplo 8, Etapa 1) (2,00 g, 7,52 mmol) y HATU
10 (3,89 g, 10,2 mmol) en CH2Cl2 (100 ml) se añadió diisopropiletilamina (4,41 g, 34,2 mmol). La solución formada se dejó calentar a la temperatura ambiente durante 12 h. Se diluyó con EtOAc (200 ml), se lavó con 5% de H3PO4 y salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (gradiente, 2:1-1:1 de hexano-acetona), produciendo 1,25 g (41%) del producto deseado.
RMN 1H (DMSO-d6) δ 1,00-1,08 (m, 4H), 1,34-1,40 (m, 1:2, 10H), 1,62-1,70 (m, 1H), 1,76-1,87 (m, 1H), 2,02-2,21 (m,
15 2H), 2,81-2,95 (m, 1H), 3,20-3,45 (m, 2H), 4,04-4,09 (m, 1H), 4,26 (a, 1H), 5,08-5,12 (m, 1H), 5,26 (d, J = 17,1 Hz, 1H), 5,59-5,69 (m, 1H), 8,59, 8,87 (rotámeros, 1:2, 1H), 10,48-11,15 (rotámeros, 2:1, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,25 min, procedimiento B), EM m/e 444 (M++H).
Etapa 3: Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 8, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 8, Etapa 2.
CL-EM (tiempo de retención: 1,02 min, procedimiento B), EM m/e 344 (M++H).
Etapa 4:
5 A una mezcla enfriada con hielo de N-BOC-4-trans-hidroxi-L-prolina (1,58 g, 6,83 mmol), clorhidrato de (1-amino-2vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (Ejemplo 8, Etapa 3) (2,00 g, 7,52 mmol) y HATU (3,89 g, 10,2 mmol) en CH2Cl2 (100 ml) se le añadió diisopropiletilamina (4,41 g, 34,2 mmol). La solución formada se dejó calentar a la temperatura ambiente durante 12 h. Se diluyó con EtOAc (200 ml), se lavó con 5% de H3PO4 y salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida
10 (gradiente, 2:1-1:1 de hexano-acetona), produciendo 1,25 g (41%) del producto deseado.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,99-1,07 (m, 11H), 1,35-1,44 (m, 13H), 1,75-1,87 (m, 1H), 2,09-2,22 (m, 2H), 2,88-2,94 (m, 1 H), 3,74-3,82 (m, 2H), 4,28-4,30 (m, 1H), 4,33-4,38 (m, 1H), 4,48 (a, 1H), 5,11-5,13 (m, 1H), 5,30 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 5,70-5,78 (m, 1H), 6,51-6,61 (m, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,26 min, procedimiento B), EM m/e 557 (M++H).
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15 Etapa 5:
A una solución del producto del Ejemplo 8, Etapa 4 (56 mg, 0,1 mmol) en DMSO (2 ml) se le añadió terc-butóxido potásico (49 mg, 0,44 mmol). La solución formada se agitó a la temperatura ambiente durante 1 h antes de la adición de 4-cloro-7-metil-2-trifluorometil-[1.8]naftiridina (P. Ferrarini y col., J Heterociclic Chem, 1983, p 1053) (30 mg, 0,12 mmol). La solución final se agitó durante 12 h. Se inactivó con agua enfriada con hielo, se acidificó con HCl 1 M a pH
20 4, se extrajo con EtOAc (20 ml, X 2). Las fases orgánicas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MSO4, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó por HPLC prep., produciendo 16 mg (21%) del Compuesto 8 en forma de un sólido de color rosa.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,92-0,99 (m, 11H), 1,01-1,04 (m, 11H), 1,22-1,45 (m, 2H), 1,76-1,85 (m, 1H), 2,18-2,40 (m, 2H), 2,76 (s, 3H), 2,86-2,97 (m, 1H), 4,00-4,11 (m, 2H), 4,48-4,58 (m, 2H), 5,09-5,12 (m, 1H), 5,28-5,31 (m, 1H), 5,59 (a,
25 1H), 5,69-5,78 (m, 1H), 6,39-6,48 (m, 1H), 7,58-7,64 (m, 2H), 8,08 (s, 1H), 8,64-8,68 (m, 1H), 8,85-8,91 (m, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,89 min, procedimiento B), EM m/e 767 (M++H).
Ejemplo 9: Preparación del Compuesto 9.
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El Compuesto 9 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 8, Etapa 5, con la excepción de que se usó en su lugar 7-cloro-5-etil-3-metil-isoxazolo[4,5-b]piridina (R. Nesi y col., Synth Comm. 1992, 22(16), 2349). RMN 1H (CD3OD) δ 1,01-1,09 (m, 11H), 1,21-1,25 (m, 11H), 1,36 (t, J = 7,8 Hz, 3H), 1,38-1,47 (m, 2H), 1,80-1,90 (m, 1H), 2,20-2,3 (m, 2H), 2,59 (s, 3H), 2,90-3,00 (m, 3H), 4,01-4,18 (m, 2H), 4,41-4,51 (m, 2H), 5,115,15 (m, 1H), 5,27-5,32 (m, 1H), 5,58 (a, 1H), 5,70-5,80 (m, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,72, 7,98 (1:1, 1H), 9,00, 9,22 (1:1, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,75 min, procedimiento B), EM m/e 717 (M++H).
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El Compuesto 10 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 8, Etapa 5, con la 10 excepción de que se usó en su lugar 7-cloro-5-fenil-3-metil-isoxazolo{4,5-b]piridina (Ejemplo 1, Etapa 2).
RMN 1H (CD3OD) δ 1,00-1,09 (m, 12H), 1,16-1,25 (m, 10H), 1,44-1,48 (m, 1H), 1,79-1,89 (m, 1H), 2,20-2,40 (m, 2H), 2,64-2,66 (m, 4H), 2,89-2,98 (m, 1H), 4,08-4,20 (m, 2H), 4,44-4,55 (m, 2H), 5,11-5,16 (m, 1H), 5,27-5,31 (m, 1H), 5,72-5,74 (m, 2H), 7,20-7,35 (m, 1H), 7,46-7,51 (m, 2H), 7,55-7,68 (m, 1H), 8,05-8,06 (m, 2H); CL-EM (tiempo de retención: 1,97 min, procedimiento B), EM mlz 765 (M+H)+.
15 Ejemplo 11: Preparación del Compuesto 11.
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Etapa 1:
A una solución de ácido 3-metoxi cinámico (11,04 g, 62 mmol) y trietilamina (12,52 g, 124 mmol) en acetona (80 ml) se le añadió gota a gota cloroformiato de etilo (aproximadamente 1,5 equivalentes) a 0 ºC. Después de agitar a esta 20 temperatura durante 1 h, se añadió gota a gota NaN3 acuoso (6,40 g, 100 mmol en 35 ml de H2O) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 h a la temperatura ambiente. Se añadió agua (100 ml) a la mezcla y los volátiles se retiraron al vacío. La suspensión resultante se extrajo con tolueno (3 X 50 ml) y las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre MgSO4. Esta solución seca se añadió gota a gota a una solución calentada de difenilmetano (50 ml) y tributilamina (30 ml) a 190 ºC. El tolueno se retiró por destilación según se añadió. Después de que se completara la adición, la temperatura de reacción se aumentó a 210 ºC durante 2 h. Después de un periodo de refrigeración, el producto precipitado se recogió por filtración, se lavó con hexano (2 X 50 ml) y se secó, produciendo el producto
5 deseado en forma de un sólido de color blanco (5,53 g, 51%) (Nicolas Briet y col, Tetrahedron, 2002, 5761-5766). CL-EM (tiempo de retención: 0,82 min, procedimiento B), EM m/z 176 (M++H).
Etapa 2:
Se calentó a suave reflujo 6-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona (5,0 g, 28,4 mmol) en POCl3 (10 ml) durante 3 h y después se evaporó al vacío (Nicolas Briet y col, Tetrahedron, 2002, 5761-5766). El residuo se vertió en agua enfriada con
10 hielo (20 ml) y se neutralizó a pH 10 con NaOH 10 M. Se extrajo con CHCl3. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (1:1 de hexano-EtOAc), proporcionando 4,41 g (80%) del producto deseado en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H (CD3OD) δ 3,98 (s, 3H), 7,34-7,38 (m, 2H), 7,69 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,10 (d, J =6,0 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 9,5 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,42 min, procedimiento B), EM m/z 194 (M++H).
imagen10
Etapa 3:
A una solución de N-BOC-3-(R)-hidroxi-L-prolina (892 mg, 3,89 mmol) en DMSO (40 ml) a la temperatura ambiente se le añadió en una porción terc-butóxido potásico (1,34 g, 12,0 mmol). La suspensión formada se agitó a esta temperatura durante 30 min antes de enfriarse a 10 ºC. Se añadió en una porción 1-cloro-6-metoxi-isoquinolina 20 (ejemplo 11, Etapa 2) (785 mg. 4,05 mmol) en forma de un ácido y la mezcla final se agitó a la temperatura ambiente durante 12 h. Se inactivó con ácido cítrico al 5% enfriado con hielo (ac.), se extrajo con EtOAC (100 ml). La fase acuosa se extrajo de nuevo con EtOAC. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con ácido cítrico al 5% (ac.) y salmuera respectivamente, se secaron sobre MgSO4 y se filtraron. El filtrado se evaporó a sequedad al vacío, produciendo 1,49 g (99%) del producto deseado en forma de una espuma de color blanquecino. Este material se usó 25 en la siguiente etapa reacción en forma de un producto en bruto sin purificación adicional. RMN 1H: (CD3OD) δ 1,42,
5
10
15
20
25
30
35
40
1,44 (rotámeros, 9H), 2,38-2,43 (m, 1H), 2,66-2,72 (m, 1H), 3,80-3,87 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,44-4,52 (m, 1H), 5,73 (a, 1H), 7,16-7,18 (m, 2H), 7,24-7,25 (m, 1H), 7,87-7,88 (m, 1H), 8,07 (d, J = 8,5 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,62 min, procedimiento B), EM m/z 389 (M++H).
Etapa 4:
A una mezcla del producto del Ejemplo 11, Etapa 3 (1,49 g, 3,84 mmol), HATU (2,19 g, 5,76 mmol) y sal HCl de (1(R)-amino-2-(S)-vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (Ejemplo 1, Etapa 8) (1,12 g, 4,22 mmol) en CH2Cl2 (50 ml) se le añadió DIPEA (1,29 g, 11,5 mmol) a 0 ºC. Después de agitar a la temperatura ambiente durante 12 h, la solución formada se diluyó con CH2Cl2 (50 ml), se lavó con ácido cítrico al 5% enfriado con hielo (ac.). La fase orgánica se lavó con ácido cítrico al 5% (ac.) y salmuera respectivamente, se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó a sequedad al vacío. El residuo se recristalizó en metanol, produciendo 1,60 g (70%) del producto deseado en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,05-1,08 (m, 2H), 1:16-1,20 (m, 1H), 1,24-1,27 (m, 1H), 1,42-1,45 (m, 10H), 1,88 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1H), 2,24-2,30 (m, 2H), 2,53-2,57 (m, 1H), 2,94-2,98 (m, 1H), 3,80 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 3,86-3,89 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 4,40-4,42 (m, 1H), 5,13 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,72-5,81 (m, 2H), 7,17-7,20 (m, 2 H), 7,26 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,74 min, procedimiento B), EM m/z 601 (M++H).
Etapa 5:
A una solución enfriada con hielo del producto del Ejemplo 11, Etapa 4 (1,50 g, 2,50 mmol) en CH2Cl2 (10 ml) se le añadió TFA (10 ml). La solución formada se dejó calentar a la temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiró al vacío. El residuo se trituró con HCl 1 M en éter. Se filtró, se lavó con éter, produciendo 1,43 g (99,8%) del producto deseado en forma de un sólido higroscópico de color blanco.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,03-1,208 (m, 4H), 1,26-1,31 (m, 1H), 1,37-1,40 (m, 1H), J.95-1,97 (m, 1H), 2,32-2,37 (m, 1H), 2,42-2,48 (m, 1H), 2,95-2,99 (m, 1H), 3,88 (d, J = 12,5 Hz, 2H), 3,98 (s, 3H), 4,40-4,42 (m, 1H), 5,16 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,33 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,62-5,69 (m, 1H), 5,97 (a, 1H), 7,30-7,34 (m, 2H), 7,47 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 9,14 (a, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,12 min, procedimiento B), EM m/z 501 (M++H).
Etapa 6:
A una mezcla del producto del Ejemplo 11, Etapa 5 (1,49 g, 3,84 mmol), HATU (2,19 g, 5,76 mmol) y N-BOC-t-butilL-glicina (1,12 g, 4,22 mmol) en CH2Cl2 (50 ml) se le añadió DIPEA (1,29 g, 11,5 mmol) a 0 ºC. Después de agitar a la temperatura ambiente durante 12 h, la solución formada se diluyó con CH2Cl2 (50 ml), se lavó con ácido cítrico al 5% enfriado con hielo (ac.). La fase orgánica se lavó con ácido cítrico al 5% (ac.) y salmuera respectivamente, se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó a sequedad al vacío. El residuo se purificó por HPLC prep. (del 40% de B al 100% de B, tiempo de gradiente de 15 min), produciendo 1,60 g (70%) del Compuesto 11 en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,00-1,08 (m, 12H), 1,23-1,25 (m, 1H), 1,27 (s, 9H), 1,40-1,45 (m, 1H), 1,85-1,88 (m, 1H), 2,202,30 (m, 2H), 2,55-2,61 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,02-4,06 (m, 1H), 4,21-4,24 (m, 1H), 4,40-4,42 (m, 1H), 4,49-4,51 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,69-5,74 (m, 1H), 5,81 (a, 1H), 6,60 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,08-7,10 (m, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,25 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,75 min, procedimiento B), EM m/z 714 (M++H); Calc. anal. para C35H47N5O9S·0,5 H2O: C, 58,16: H, 6,69; N, 9,69. Encontrado: C, 58,01; H, 6,46; N, 9,55.
Etapa 7:
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A una solución del Compuesto 11 (71 mg, 0,1 mmol) en CH2Cl2 (5 ml) a -78 ºC se le añadió NCl 1 M en éter (0,2 ml, 5
10
15
20
25
30
0,2 mmol). Después de agitar a esta temperatura durante 10 min, los volátiles se retiraron al vacío sin baño de calentamiento. El residuo se trituró con éter, se filtró, se lavó con éter y se secó, produciendo 61 mg (85%) de la sal NCl deseada del Compuesto 11 en forma de un sólido muy fino.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,00-1,08 (m, 12H), 1,19 (s, 9H), 1,23-1,25 (m, 1 H), 1,40-1,45 (m, 1H), 1,85-1,91 (m, 1H), 2,202,26 (m, 1H), 2,31-2,42 (m, 1 H), 2,65-2,78 (m, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 4,10-4,16 (m, 2H), 4,51-4,64 (m, 2H), 5,13 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 18 Hz, 1H), 5,69-5,79 (m, 1H), 5,84 (a, 1H), 7,28 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,55 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 7,89-7,92 (m, 1H), 8,29 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 9,21 (a, 1 H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,75 min, procedimiento B), EM m/z 714 (M++H).
Calc. anal. para C35H47N5O9S·1,0 HCl: C, 56,02; H, 6,44; N, 9,33; Cl, 4,72: S, 4,27. Encontrado: C, 55,80; H, 6,42; N, 9,15; Cl, 4,56: S, 4,09.
Etapa 8:
En un matraz de 2 bocas de 25 ml se añadió una barra de agitación, un tapón de goma y un adaptador de para gas N2. El Compuesto 11 (99,7 mg, 0,140 mmol) se pesó y se añadió al matraz de reacción. El matraz de reacción se purgó y se puso en una atmósfera de N2. Se añadieron 850 µl de acetona al matraz, proporcionando una solución transparente. A esta solución a temperatura ambiente, se le añadieron 780 µl de una solución 179 M de KOH (ac.) preparado mediante la disolución de KOH sólido (502,8 mg, 8,97 mmol) en 50 ml de H2O. La solución se calentó ligeramente después de la adición del KOH pero permaneció transparente. La solución transparente se dejó en agitación a TA durante 2 horas. El producto se retiró por cristalización de la solución y se aisló por filtración. La torta se lavó con acetona fría, proporcionando 42 mg (rendimiento del 40%) del producto deseado en forma de agujas finas de color blanco. Análisis elemental para C35H46KN5O9S·H2O; Calc. C, 54,60; H, 6,28; K, 5,08; N, 9,10, C real, 54,88; H, 6,23; K, 5,05; N, 9,01; MS m/e 714 (MH+);
imagen11
El Compuesto 12 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6, con la excepción de que se usó en su lugar N-BOC-L-valina.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,94-0,98 (m, 6H), 1,07-1,09 (m, 3H), 1,21-1,25 (m, 10H), 1,40-1,43 (m, 1H), 1,88-1,89 (m, 1H), 2,05-2,09 (m, 1H), 2,22-2,35 (m, 2H), 2,57-2,61 (m, 1H), 2,94-2,97 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,03-4,06 (m, 2H), 4,47-4,55 (m, 2H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 18,1 H2, 1H), 5,74-5,81 (m, 1H), 5,86 (a, 1H), 7,10 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,25 (d, J = 6,0 Hz, 1H ), 7,88 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,71 min, procedimiento B), EM m/z 700 (M++H).
Ejemplo 13: Preparación del Compuesto 13.
imagen2
El Compuesto 13 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6, con la excepción de que se usó en su lugar N-BOC-L-aloisoleucina.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,89-0,96 (m, 6H), 1,07-1,18 (m, 5H), 1,28 (s, 9H), 1,42-1,45 (m, 1H), 1,50-1,54 (m, 1H), 1,871,89 (m, 2H), 2,23-2,34 (m, 2H), 2,57-2,61 (m, 1H), 2,92-2,95 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,05-4,07 (m, 1H), 4,22-4,24 (m, 1H), 4,37-4,40 (m, 1H), 4,54-4,56 (m, 1H), 5,13 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,75-5,82 (m, 1H), 5,86 (a, 1H), 7,12 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,24 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,77 min, procedimiento B), EM m/z 714 (M++H).
imagen12
Etapa 1:
Una mezcla del Compuesto 11 (150 mg, 0,21 mmol) y catalizador de Pearlmann (Pd(OH)2, 15 mg) en EtOAc (10 ml) se puso en un agitador Parr durante 20 min en una atmósfera de H2 de 0,07 MPa (10 psi). Se filtró a través de celite. El filtrado se evaporó al vacío. El residuo se purificó por HPLC prep., proporcionando 67 mg (45%) del Compuesto
15 14 en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H(CD3OD) δ 0,96-0,99 (m, 4H), 1,04 (s, 9H), 1,07-1,09 (m, 2H), 1,21-1,24 (m, 2H), 1,27 (s, 9H), 1,51-1,65 (m, 4H), 2,25-2,27 (m, 1H), 2,55-2,61 (m, 1H), 2,94-2,98 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,02-4,06 (m, 1H), 4,21-4,24 (m, 1H), 4,40-4,42 (m, 1H), 4,49-4,51 (m, 1H), 5,81 (a, 1H), 6,59 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,08-7,10 (m, 1H), 7,18 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,76 min, procedimiento B), EM m/z 716 (M++H).
imagen13
5
El Compuesto 15 se aisló a partir de la misma reacción de fabricación del Compuesto 14 con un tiempo de retención ligeramente superior en forma de un subproducto con un 15% de rendimiento.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,92-1,10 (m, 17H), 1,26-1,36 (m, 13H), 1,64-1,72 (m, 1H), 1,90-1,96 (m, 1H), 2,30-2,40 (m, 1H), 2,63-2,67 (m, 1H), 2,96-3,00 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,03-4,07 (m, 1H), 4,24 (a, 1H), 4,40-4,42 (m, 1H), 4,49-4,51 (m,
10 1H), 5,83 (a, 1H), 7,08-7,11 (m, 1H), 7,19 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,51 (a, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,83 min, procedimiento B), EM m/z 718 (M++H).
imagen14
imagen2
Etapa 1:
A una solución del Compuesto 11 (420 mg, 0,59 mmol) en DCM (5 ml) a 0 ºC se añadió TFA (5 ml). Después de agitar a esta temperatura durante 2 h, los volátiles se retiraron al vacío. El residuo se trituró con HCl 1 M en éter (5 5 ml), se filtró y se lavó con éter y se secó, produciendo 360 mg (89%) de la sal de HCl deseada en forma de un sólido muy fino. CL-EM (tiempo de retención: 1,28 min, procedimiento B), EM m/z 614 (M++H).
Etapa 2:
A una suspensión del producto del Ejemplo 16, Etapa 1 (39 mg, 0,06 mmol) y DIPEA (20 mg, 0,18 mmol) en DCM (1 ml) a 0 ºC se le añadió cloroformiato de metilo (6,8 mg, 0,072 mmol). Después de agitar a esta temperatura durante 10 2 h, los volátiles se retiraron al vacío. El residuo se purificó por HPLC prep., dando 21 mg (58%) del Compuesto 16 en forma de un cristal de color blanco.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,05-1,09 (m, 11H), 1,22-1,25 (m, 2H), 1,41-1,44 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,22-2,32 (m, 2H), 2,59-2,63 (m, 1H), 2,89-2,93 (m, 1H), 3,48 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 4,06-4,10 (m, 1H), 4,31-4,33 (m, 1H), 4,38-4,40 (m, 1H), 4,50-4,52 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,71-5,80 (m, 1H), 5,85 (a, 1H), 6,95 (d, J
15 = 10,0 Hz, 1H), 7,13-7,16 (m, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,25 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,54 min, procedimiento B), EM m/z 672 (M++H).
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El Compuesto 17 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 16, Etapa 2, con la 20 excepción de que se usó en su lugar cloroformiato de isopropilo.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,00-1,09 (m, 15H), 1,13-1,16 (m, 2H), 1,24-1,26 (m, 2H), 1,40-1,45 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,21-2,31 (m, 2H), 2,55-2,61 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,04-4,08 (m, 1H), 4,30 (a, 1H), 4,40 (d, J = 10 Hz, 1H), 4,49-4,54 (m, 2H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,71-5,77 (m, 1H), 5,84 (a, 1H), 6,80 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1H), 7,25 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,74 min, procedimiento B), EM m/z 700 (M++H).
imagen16
El Compuesto 18 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 16. Etapa 2, con la excepción de que se usó en su lugar cloroformiato de neopentilo.
10 RMN 1H (CD3OD) δ 0,61 (a, 1H), 0,84 (s, 8H), 1,05-1,09 (m, 11H), 1,23-1,25 (m, 2H), 1,39-1,44 (m, 1H), 1,85-1,88 (m, 1H), 2,20-2,30 (m, 2H), 2,56-2,62 (m, 1H), 2-91-2,97 (m, 1H), 3,38 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 3,55 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,02-4,06 (m, 1H), 4,32 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,41 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 4,49-4,51 (m, 1), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,69-5,74 (m, 1H), 5,81 (a, 1H), 6,90 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,08-7,10 (m, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,26 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 9,0 Hz, 1H);
15 CL-EM (tiempo de retención: 1,84 min, procedimiento B), EM m/z 728 (M++H).
imagen17
El Compuesto 19 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 16, Etapa 2, con la excepción de que se usó en su lugar cloroformiato de (S)-3-furano (J. Campbell, A. Good, WO 20020808).
20 RMN 1H (CD3OD) δ 1,03-1,08 (m, 11H), 1,23-1,26 (m, 2H), 1,38-1,46 (m, 1H), 1,64-1,71 (m, 1H), 1,85-1,90 (m, 2H), 2,20-2,30 (m, 2H), 2,55-2,61 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 3,66-3,72 (m, 4H), 3,93 (s, 3H), 4,05-4,09 (m, 1H), 4,27-4,29 (m, 1H), 4,40-4,42 (m, 1H), 4,55-4,59 (m, 1H), 4,75-4,77 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 18 Hz, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 5,85 (a, 1H), 7,06 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,20 (s, 1H), 7,25 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,52 min, procedimiento B), EM
25 m/z 728 (M++H).
Ejemplo 20: Preparación del Compuesto 20.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2, con la excepción de que se usó 6-cloro-2H-isoquinolin-1-ona (en su lugar (Nicolas Briet y col, Tetrahedron, 2002, 5761-5766). CL-EM (tiempo de retención: 1,07 min, procedimiento B), EM m/z 180 (M++H).
Etapa 2:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 5, con la excepción 10 de que se usó el producto del Ejemplo 20, Etapa 1.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,04 (s, 9H), 1,20 (s, 9H), 2,36-2,41 (m, 1H), 2,74-2,78 (m, 1H), 4,01-4,04 (m, 1H), 4,19-4,21 (m, 1H), 4,47-4,49 (m, 1H), 4,67-4,70 (m, 1H), 5,84 (a, 1H), 7,28 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 8,00 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 9,0 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,88 min, procedimiento B), EM m/z 506 (M++H).
15 Etapa 3:
El compuesto 20 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 9, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 20, Etapa 2.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,99-1,11 (m, 12H), 1,20-1,26 (m, 10H), 1,43-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,22-2,31 (m, 2H), 2,60-2,64 (m, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 4,06-4,08 (m, 1H), 4,21-4,23 (m, 1H), 4,45-4,47 (m, 1H), 4,53-4,56 (m, 1H), 20 5,13 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,72-5,80 (m, 1H), 5,88 (a, 1H), 6,58 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,29(d, J = 6,0 Hz, 1 H), 7,47 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 8,01 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 9,0 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,94 min, procedimiento B), EM m/z 718 (M++H).
Ejemplo 21: Preparación del Compuesto 21.
imagen2
Etapa 1:
A una mezcla del producto del Ejemplo 1, Etapa 4 (3,00 g, 8,72 mmol), HATU (4,97 g, 13,1 mmol) y el producto del
5 Ejemplo 1, Etapa 8 (2,55 g, 9,59 mmol) en CH2Cl2 (100 ml) se le añadió DIPEA (3,02 g, 27,0 mmol) a 0 ºC. Después de agitar a la temperatura ambiente durante 12 h, la solución formada se diluyó con CH2Cl2 (100 ml), se lavó con ácido cítrico al 5% enfriado con hielo (ac.). La fase orgánica se lavó con ácido cítrico al 5% (ac.) y salmuera respectivamente, se secó sobre MgSO4 y se filtró. El filtrado se evaporó a sequedad al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (1:1 de hexano:acetona ), produciendo 3,64 g (75%) del producto deseado en forma
10 de una espuma. CL-EM (tiempo de retención: 1,41 min, procedimiento B), EM m/z 557 (M++H).
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Etapa 2:
5
10
15
20
25
30
35
A una solución enfriada con hielo de 6-bromoisoquinolina (4,16 g, 20 mmol) en CH2Cl2 (100 ml) se le añadió en una porción mCPBA (9,38 g, pureza 77%, 42 mmol) en forma de un sólido. Después de agitar a la temperatura ambiente durante 12 h, se diluyó con CH2Cl2 (100 ml) y se lavó con NAOH 1M (100 ml, X 2) y salmuera. La fase orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó a sequedad, produciendo 3,83 g (86%) del producto deseado en forma de un sólido de color blanco. Este material se usó en bruto sin purificación adicional. CL-EM (tiempo de retención: 0,77 min, procedimiento B), EM m/z 224, 226(M++H).
Etapa 3:
Una mezcla de 6-bromo-isoquinolina 2-óxido (88 mg, 0,2 mmol), pirazol (68 mg, 1,0 mmol), CuBr (57 mg, 0,4 mmol) y carbonato de cesio (130 mg, 0,4 mmol) en DMF (2 ml) se calentó a 140 ºC durante 4 h en un tubo cerrado herméticamente. Después de la filtración, el filtrado se purificó por HPLC prep., produciendo 41 mg (98%) del producto deseado en forma de un sólido de color blanquecino.
RMN 1H (CDCl3) δ 6,58-6,59 (m, 1H), 7,82 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,18-8,22 (m, 2H), 8,29 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 9,07 (a, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 0,77 min, procedimiento B), EM m/z 212 (M++H).
Etapa 4:
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2 en forma de un sólido de color blanquecino, con la excepción de que se usó en su lugar 2-óxido de 6-pirazol-isoquinolina. RMN 1H (CD3OD) δ 7,82-7,83 (m, 2H), 8,23-8,32 (m, 4H), 8,44-8,49 (m, 2H); CL-EM (tiempo de retención: 1,35 min, procedimiento B), EM m/z 230, (M++H).
Etapa 5:
A una solución del producto del Ejemplo 21, Etapa 1 (45 mg, 0,08 mmol) en DMSO (2 ml) se le añadió terc-butóxido potásico (41 mg, 0,37 mmol). La solución formada se agitó a la temperatura ambiente durante 30 min antes de la adición de 1-cloro-6-pirazol-1-il-isoquinolina (17 mg, 0,07 mmol). La solución final se agitó durante 12 h. Se inactivó con agua enfriada con hielo, se acidificó con HCl 1 M a pH 4 y se extrajo con EtOAc (20 ml, X 2). Las fases orgánicas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó por HPLC prep., produciendo 10 mg (16%) del Compuesto 21 en forma de un sólido de color rosa.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,04-1,10 (m, 12H), 1,23-1,27 (m, 10H), 1,43-1,47 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,22-2,29 (m, 2H), 2,61-2,68 (m, 1H), 2,92-2,98 (m, 1H), 4,07-4,11 (m, 1H), 4,24 (a, 1H), 4,46-4,60 (m, 2H), 5,13 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 18 Hz, 1H), 5,70-5,83 (m, 1H), 5,89 (a, 1H), 6,59-6,61 (m, 1H), 7,40 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 10,0 Hz, 2H), 8,15 (s, 1H), 8,31 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 8,42 (d, J = 4,5 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,77 min, procedimiento B), EM m/z 750 (M++H).
Etapa 1:
imagen18
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2 en forma de un
sólido de color blanquecino, con la excepción de que se usó en su lugar 6-bromo-isoquinolina 2-óxido. RMN 1H (CD3OD) δ 7,73 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,85-7,91 (m, 1H), 8,22-8,31 (m, 3H); CL-EM (tiempo de retención: 1,53 min, procedimiento B), EM m/z 241, 243, 245 (M++H).
Etapa 2:
5 El Compuesto 22 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 21, Etapa 5 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 1-cloro-6-bromo-isoquinolina.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,99-1,09 (m, 12H), 1,22-1,27 (m, 10H), 1,40-1,47 (m, 1H), 1,86-1,91 (m, 1H), 2,20-2,34 (m, 2H), 2,57-2,66 (m, 1H), 2,90-2,97 (m, 1H), 4,05-4,09 (m, 1H), 4,21 (b 1H), 4,44-4,57 (m, 2H), 5,13 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,70-5,82 (m, 1H), 5,88 (a, 1H), 7,29 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 7,60-7,63 (m, 1H), 8,00-8,12 (m,
10 3H): CL-EM (tiempo de retención: 1,90 min, procedimiento B), EM m/z 762, 764 (M++H).
Etapa 1:
imagen19
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 3 en forma de un 15 sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 1-cloro-isoquinolina.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,42, 1,44 (rotámeros, 9H), 2,39-2,44 (m, 1H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,80-3,87 (m, 2H), 4,44-4,52 (m, 1H), 5,78 (a, 1H), 7,32-7,33 (m, 1H), 7,58 (t, J = 7,8 Hz, 1H), ), 7,71 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,0 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,61 min, procedimiento B), EM m/z 359 (M++H).
20 Etapa 2:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 4, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 23, Etapa 1.
RMN 1H (DMSO-d6) δ 1,00-1,09 (m, 4H), 1,35-1,38 (m, 10H), 1,69-1,84 (m, 1H), 2,11-2,66 (m, 3H), 2,89-2,93 (m,
25 1H), 3,62-3,89 (m, 2H), 4,31 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 5,12 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,27 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,58-5,70 (m, 1H), 5,76 (a, 1H), 7,43 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 8,02 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 9,02 (a, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,72 min, procedimiento B), EM m/z 571 (M++H).
Etapa 3: Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 5, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 23, Etapa 2.
imagen2
CL-EM (tiempo de retención: 1,16 min, procedimiento B), EM m/z 471 (M++H).
5 Etapa 4:
El Compuesto 23 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 23, Etapa 3. RMN 1H (CD3OD) δ 1,00-1,09 (m, 12H), 1,25-1,27 (m, 10H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,86-1,90 (m, 1H), 2,22-2,34 (m, 2H), 2,60-2,67 (m, 1H), 2,92-2,99 (m, 1H), 4,06-4,11 (m, 1H), 4,26 (a, 1H), 4,45-4,57 (m, 2H), 5,12 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 5,27 (d, J = 16,8 Hz,
10 1H), 5,70-5,82 (m, 1H), 5,88 (a, 1H), 7,32 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,70 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 6 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 9,18 (a, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,80 min, procedimiento B), EM m/z 684 (M++H).
imagen20
Etapa 1:
A una solución de N-BOC-3-(R)-hidroxi-L-prolina (6,22 g, 26,9 mmol) en DMF (250 ml) a 0 ºC se le añadió mediante varias porciones NaH (60%, 3,23 g, 80,8 mmol). La suspensión formada se agitó a esta temperatura durante 30 min., se añadió en una porción 1,3-dicloro-isoquinolina (5,33 g, 26,9 mmol) en forma de un sólido y la mezcla final se agitó 20 a la temperatura ambiente durante 12 h. Se inactivó con ácido cítrico al 5% enfriado con hielo (ac.) y se extrajo con EtOAC (300 ml). La fase acuosa se extrajo con de nuevo con EtOAC. Las fases orgánicas combinadas se lavaron
con ácido cítrico al 5% (ac.) y salmuera respectivamente, se secaron sobre MgSO4 y se filtraron. El filtrado se evaporó a sequedad al vacío, produciendo 10,53 g (99,8%) de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(6-metoxi-isoquinolin1-iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico en forma de una espuma de color blanquecino. Este material se usó en la siguiente etapa de reacción en forma de un producto en bruto sin purificación adicional.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,43, 1,44 (rotámeros, 9H), 2,39-2,44 (m, 1H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,80-3,90 (m, 2H), 4,44-4,52 (m, 1H), 5,77 (a, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,58 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,71-7,78 (m, 2H), 8,16 (d, J = 7,5 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,80 min, procedimiento B), EM m/z 392 (M++H).
Etapa 2:
imagen2
10 Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 4, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 24, Etapa 1.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,02-1,08 (m, 2H), 1,18-1,26 (m, 2H), 1,44-1,48 (m, 10H), 1,84-1,91 (m, 1H), 2,22-2,36 (m, 2H), 2,57-2,60 (m, 1H), 2,95-2,99 (m, 1H), 3,81-3,93 (m, 2H), 4,38-4,41 (m, 1H), 5,13 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,31 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 5,75-5,82 (m, 2H), 7,41 (s, 1H), 7,59 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,74-7,79 (m, 2H), 8,16 (d, J = 8,0 Hz, 1H);
15 CL-EM (tiempo de retención: 1,82 min, procedimiento B), EM m/z 605 (M++H).
Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 5, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 24, Etapa 2.
20 CL-EM (tiempo de retención: 1,30 min, procedimiento B), EM m/z 505 (M++H).
Etapa 4:
El Compuesto 24 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 24, Etapa 3. RMN 1H (CD3OD) δ 0,99-1,09 (m, 12H), 1,22-1,29 (m, 10H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,86-1,90 (m, 1H), 2,21-2,34 (m, 2H), 2,62-2,66 (m, 1H),
25 2,92-2,99 (m, 1H), 4,06-4,11 (m, 1H), 4,26 (a, 1H), 4,46-4,56 (m, 2H), 5,13 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,29 (d. J = 17,2 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 5,89 (a, 1H), 7,40 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,72-7,76 (m, 2H), 8,18 (d, J = 8,5 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,95 min, procedimiento B), EM m/z 718(M++H).
Ejemplo 25, Compuesto 25.
imagen2
Etapa 1:
Una mezcla de Ejemplo 24, Etapa 1 (39 mg, 0,10 mmol), ácido fenilborónico (14,6 mg, 0,12 mmol), terc-butóxido
5 sódico (38 mg, 0,40 mmol) y ((t-Bu)2POH)2PdCl2 (POPd) (5 mg, 0,01 mmol) en THF (2 ml) se calentó a reflujo durante 4 h. Después del enfriamiento, la mezcla formada se inactivó con ácido cítrico al 5% (ac.) y se extrajo con EtOAc (20 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por HPLC prep., produciendo 36 mg (83%) del producto deseado en forma de una espuma de color blanquecino.
10 RMN 1H (CD3OD) δ 1,43, 1,45 (rotámeros, 9H), 2,51-2,56 (m, 1H), 2,74-2,82 (m, 1H), 3,88-3,92 (m, 1H), 3,98-4,01 (m, 1H), 4,50-4,57 (m, 1H), 5,95 (a, 1H), 7,36-7,39 (m, 1H), 7,45-7,48 (m, 2H), 7,55 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,70 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,84-7,89 (m, 2H), 8,14-8,17 (m, 3H), 9,05 (a, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,97 min, procedimiento B), EM m/z 435 (M++H).
Etapa 2:
15 Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 4, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 25, Etapa 1. RMN 1H (DMSO-d6) δ 0,98-1,10 (m, 4H), 1,38-1,41 (m, 10H), 1,74-1,81 (m, 1H), 2,18-2,34 (m, 2H), 2,47-2,49 (m, 1H), 2,95-2,99 (m, 1H), 3,74-3,96 (m, 2H), 4,34-4,37 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,26 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 5,75-5,82 (m, 1H), 5,95 (a, 1H), 7,41-7,45 (m, 1H), 7,51-7,54 (m, 2H), 7,61-7,64 (m, 1H), 7,78-7,82 (m, 1 H), 7,98 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,06 (s, 1H). 8,13-8,14 (m, 1H), 8,18-8,20 (m,
2H), 9,05 (a, 1H), 10,34 (a, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,99 min, procedimiento B), EM m/z 647 (M++H).
Etapa 3:
Este producto, se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 5 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 25, Etapa 2. CL-EM (tiempo de 5 retención: 1,55 min, procedimiento B), EM m/z 547 (M++H).
Etapa 4:
El Compuesto 25 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 25, Etapa 3. RMN 1H (CD3OD) δ 0,92-1,09 (m. 12H), 1,26-1,30 (m, 10H), 1,43-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,36-2,41 (m, 1H),
10 2,70-2,75 (m, 1H), 2,93-2,97 (m, 1H), 4,18-4,30 (m, 2H), 4,46-4,48 (m, 1H), 4,55-4,58 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 6,10 (a, 1H), 7,37-7,40 (m, 1H), 7,46-7,49 (m, 3H), 7,70 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,85-7,89 (m, 2H), 8,16-8,20 (m, 3H);
CL-EM (tiempo de retención: 2,08 min, procedimiento B), EM m/z 760 (M++H).
Etapa 1:
imagen21
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 25, Etapa 1, con la excepción de que se usó en su lugar ácido 4-metoxifenilborónico.
20 RMN 1H (CD3OD) δ 1,40, 1,45 (rotámeros, 9H), 2,50-2,55 (m, 1H), 2,73-2,81 (m, 1H), 3,81-3,89 (m, 4H), 3,98-4,01 (m, 1H), 4,50-4,57 (m, 1H), 5,93 (a, 1H), 7,02 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,50 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,67 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,83 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 8,15 (d, J = 8,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 2,00 min, procedimiento B), EM m/z 465 (M++H).
Etapa 2: Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 4, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 26, Etapa 1.
imagen2
RMN 1H (CD3OD) δ 1,06-1,09 (m, 2H), 1,17-1,27 (m, 2H), 1,42-1,47 (m, 10H), 1,88-1,90 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,33-2,39 (m, 1H), 2,61-2,65 (m, 1H), 2,95-2,99 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,86-3,90 (m, 1H), 3,99-4,00 (m, 1H), 4,43-4,45 (m, 1H), 5,13 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,31 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,77-5,80 (m, 1H), 5,99 (a, 1H), 7,02 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,51 (t, J =7,3 Hz, 1H), 7,68 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,84 (d, J =8,5 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 8,15 (d, J = 8,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 2,02 min, procedimiento B), EM m/z 677 (M++H).
Etapa 3:
imagen2
10
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 5 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 26, Etapa 2.
CL-EM (tiempo de retención: 1,53 min, procedimiento B), EM m/z 577 (M++H).
Etapa 4:
15 El Compuesto 26 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 26, Etapa 3.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,93-1,09 (m, 12H), 1,26-1,30 (m, 10H), 1,44-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,36-2,41 (m, 1H), 2,70-2,75 (m, 1H), 2,93-2,97 (m, 1 H), 3,86 (s, 3H), 4,18-4,25 (m, 1H), 4,30 (a, 1H), 4,46-4,48 (m, 1H), 4,55-4,58 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 6,08 (a, 1H), 7,02 (d, J
20 = 9,0 Hz, 2H), 7,44 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,83 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 8,15 (d, J = 8,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 2,03 min, procedimiento B), EM m/z 790 (M++H).
Ejemplo 27: Preparación del Compuesto 27.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 25, Etapa 1, con la excepción 5 de que se usó en su lugar 4-piridil-borónico.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,43, 1,46 (rotámeros, 9H), 2,53-2,56 (m, 1H), 2,80-2,89 (m, 1H), 3,90-3,93 (m, 1H), 4,00-4,05 (m, 1H), 4,50-4,57 (m, 1H), 6,00, 6,05 (rotámeros, 1H), 7,80 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,87 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,32 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,84 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 8,84 (d, J = 6,5 Hz, 2H); CL-EM (tiempo de retención: 1,39 min, procedimiento B), EM m/z 436 (M++H).
10 Etapa 2:
imagen2
El producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 4, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 27, Etapa 1.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,06-1,09 (m, 2H), 1,17-1,27 (m, 2H), 1,42-1,46 (m, 10H), 1,88-1,90 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H),
15 2,33-2,39 (m, 1H), 2,61-2,65 (m, 1H), 2,95-2,99 (m, 1H), 3,88-3,90 (m, 1H), 4,01-4,08 (m, 1H), 4,43-4,45 (m, 1H), 5,15 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,77-5,80 (m, 1H), 6,10 (a, 1H), 7,79 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,88 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,31 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,47 (s, 1H), 8,79 (d, J = 7,0 Hz, 2H). 8,86 (d, J = 6,5 Hz, 2H); CL-EM (tiempo de retención: 1,49 min, procedimiento B), EM m/z 648 (M++H).
Etapa 3:
imagen2
5 Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 5 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 27, Etapa 2.
CL-EM (tiempo de retención: 0,96 min, procedimiento B), EM m/z 548 (M++H).
Etapa 4:
El Compuesto 27 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6, con la 10 excepción de que se usó el producto del Ejemplo 27, Etapa 3.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,94-1,09 (m, 12H), 1,22-1,26 (m, 10H), 1,44-1,49 (m, 1H), 1,88-1,92 (m, 1H), 2,22-2,25 (m, 1H), 2,41-2,44 (m, 1H), 2,70-2,75 (m, 1H), 2,93-2,98 (m, 1H), 4,18-4,21 (m, 1H), 4,25 (a, 1H), 4,53-4,62 (m, 2H), 5,12 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 20,0 Hz, 1H), 5,72-5,77 (m, 1H), 6,12 (a, 1H), 7,67 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,82 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,55 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 8,76 (d, J = 6,5 Hz, 2H);
15 CL-EM (tiempo de retención: 1,49 min, procedimiento B), EM m/z 761 (M++H).
imagen22
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 25, Etapa 1, con la excepción de que se usó en su lugar ácido 4-N,N-dimetilamino-fenilborónico. CL-EM (tiempo de retención: 1,64 min, procedimiento B), EM m/z 478 (M++H).
Etapa 2:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 4, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 28, Etapa 1. 10 CL-EM (tiempo de retención: 1,70 min, procedimiento B). MS m/z 690 (M++H). Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 5 en forma de un
sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 28, Etapa 2. CL-EM (tiempo de retención: 1,20 min, procedimiento B), EM m/z 590 (M++H). Etapa 4: El Compuesto 28 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6, con la
5 excepción de que se usó el producto del Ejemplo 28, Etapa 3. RMN 1H (d6-DMSO) δ 0,92-1,10 (m, 13H), 1, 30 (s, 9H), 1,35-1,38 (m, 1H), 1,68-1,71 (m, 1H), 2,12-3,00 (m, 2H), 2,59-2,62 (m, 1H), 2,91-2,95 (m, 1H), 2,99 (s, 6H), 3,93-4,10 (m, 2H), 4,32-4,40 (m, 2H), 5,09 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 5,23 (d, J = 19,0 Hz, 1H), 5,54-5,64 (m, 1H), 5,92 (a, 1H), 6,83 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,42 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,70 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 8,15 (d, J = 8,0 Hz, 1H); 10 CL-EM (tiempo de retención: 1,72 min, procedimiento B), EM m/z 803 (M++H).
Etapa 1:
imagen23
15 Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 25, Etapa 1, con la excepción de que se usó en su lugar ácido 4-ciano-fenilborónico. CL-EM (tiempo de retención: 1,87 min, procedimiento B), EM m/z 460 (M++H).
Etapa 2:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 4, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 29, Etapa 1. CL-EM (tiempo de retención: 1,88 min, procedimiento B), EM m/z 672 (M++H). Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 5 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 29, Etapa 2.
10 CL-EM (tiempo de retención: 1,41 min, procedimiento B), EM m/z 572 (M++H).
Etapa 4:
El Compuesto 29 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 29, Etapa 3. RMN 1H (CD3OD) δ 0,92-1,09 (m, 12H), 1,25-1,26 (m, 10H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,20-2,22 (m, 1H), 2,33-2,34 (m, 1H),
15 2,68-2,71 (m, 1H), 2,93-2,95 (m, 1H), 4,13-4,28 (m, 2H), 4,49-4,60 (m, 2H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,71-5,80 (m, 1H), 6,09 (a, 1H), 7,56 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,74 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 10,5 Hz, 2H), 7,93 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H), 8,22 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,37 (d, J = 10,5 Hz, 2H); CL-EM (tiempo de retención: 1,87 min, procedimiento B), EM m/z 785 (M++H).
Ejemplo 30. Preparación del Compuesto 30.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 25, Etapa 1, con la excepción de que se usó en su lugar ácido 3-furanoborónico. CL-EM (tiempo de retención: 1,85 min, procedimiento B), EM m/z 425 (M++H).
Etapa 2:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 4, con la excepción 10 de que se usó el producto del Ejemplo 30, Etapa 1.
CL-EM (tiempo de retención: 1,88 min, procedimiento B), EM m/z 637 (M++H).
Etapa 3: Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 5, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 30, Etapa 2.
imagen2
CL-EM (tiempo de retención: 1,38 min, procedimiento B), EM m/z 537 (M++H).
5 Etapa 4:
El Compuesto 30 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 30, Etapa 3.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,95-1,09 (m, 12H), 1, 23-1,30 (m, 10H), 1,43-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,21-2,23 (m, 1H), 2,30-2,34 (m, 1H), 2,64-2,70 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 4,11-4,29 (m, 2H), 4,41-4,44 (m, 1H), 4,54-4,56 (m, 1H),
10 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 5,71-5,80 (m, 1H), 6,02 (a, 1H), 7,00 (s, 1H), 7,44 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,66 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,14-8,17 (m, 2H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,93 min, procedimiento B), EM m/z 750 (M++H).
imagen24
imagen2
Etapa 1: Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en la fabricación de Ejemplo 21, Etapa 2 en
forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 3-bromo-isoquinolina (Atkins y col., JOC, 1973, 400). RMN 1H (CDCl3) δ 7,60-7,62 (m, 2H), 7,71-7,73 (m, 2H), 8,12 (s, 1H), 8,99 (s, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 0,78 min, procedimiento B), EM m/z 224, 226 (M++H). Etapa 2: Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2 en forma de un
sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 2-óxido de 3-bromo-isoquinolina. RMN 1H (CDCl3) δ 7,66-7,71 (m, 1H), 7,74-7,76 (m, 2H), 7,83 (s, 1H), 8,29 (d, J = 8,5 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,55 min, procedimiento B), EM m/z 242, 244 (M++H). Etapa 3: Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 3 en forma de una
espuma, con la excepción de que se usó en su lugar 3-bromo-1-cloro-isoquinolina.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,43, 1,44 (rotámeros, 9H), 2,41-2,47 (m, 1H), 2,69-2,72 (m, 1H), 3,80-3,84 (m, 1H), 3,88-3,90 (m, 1H), 4,46-4,52 (m, 1H), 5,76 (a, 1H), 7,57-7,61 (m, 2H), 7,73-7,75 (m, 2H), 8,15 (d, J = 8,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,79 min, procedimiento B), EM m/z 437, 439 (M++H). Etapa 4: Una mezcla de 2-tributilstannanil-pirazina (44 mg, 0,12 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0) (12 mg, 0,01 mmol)
y el producto del Ejemplo 31, Etapa 3 (44 mg, 0,1 mmol) en tolueno (1 ml) se calentó a reflujo durante 3 h. Después de retirar los volátiles al vacío, el residuo se purificó por HPLC prep., produciendo 35 mg (80%) del producto deseado en forma de un sólido de color amarillo. CL-EM (tiempo de retención: 1,77 min, procedimiento B), EM m/z 437 (M++H).
Etapa 5:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 4, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 31, Etapa 4. CL-EM (tiempo de retención: 1,78 min, procedimiento B), EM m/z 649 (M++H). Etapa 6:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 5 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 31, Etapa 5.
CL-EM (tiempo de retención: 1,26 min, procedimiento B), EM m/z 549 (M++H).
10 Etapa 7:
El Compuesto 31 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 31, Etapa 6.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,95-1,10 (m, 12H), 1,24-1,27 (m, 10H), 1,44-1,47 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,19-2,22 (m, 1H), 2,38-2,44 (m, 1H), 2,71-2,76 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 4,18-4,28 (m, 2H), 4,50-4,61 (m, 2H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz,
15 1H), 5,29 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 5,71-5,80 (m, 1H), 6,12 (a, 1H), 7,60 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,77 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 9,61 (s, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,84 min, procedimiento B), EM m/z 762 (M++H).
Ejemplo 32: Preparación del Compuesto 32.
Etapa 1:
imagen2
Este producto, 2-oxi-isoquinolin-3-carbonitrilo, se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el 5 Ejemplo 21, Etapa 2 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 3-cianoisoquinolina.
RMN 1H (DMSO-d6) δ 7,74 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,84 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,85 (s, 1H), 9,17 (s, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 0,48 min, procedimiento B), EM m/z 171 (M++H).
10 Etapa 2:
imagen2
Este producto, 1-cloro-isoquinolin-3-carbonitrilo se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2, en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 3-cianoisoquinolina 2-óxido.
15 RMN 1H (CDCl3) δ 7,87-7,91 (m, 2H), 7,92-7,94 (m, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,42-8,44 (m, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,22 min, procedimiento B), EM m/z 189 (M++H). Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 5, con la excepción 20 de que se usó en su lugar 1-cloro-isoquinolin-3-carbonitrilo.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,05 (s. 9H), 1,17 (s, 9H), 2,34-2,40 (m, 1H), 2,71-2,78 (m, 1H), 4,09-4,11 (m, 1H), 4,21 (a, 1H), 4,48-4,52 (m, 1H), 4,68-4,72 (m, 1H), 5,89 (a, 1H), 7,74 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,94-7,97 (m, 2H), 8,31 (d, J = 8,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,66 min, procedimiento B), EM m/z 497 (M++H).
Etapa 4:
5 El Compuesto 32 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 9 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 32, Etapa 3.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,04-1,09 (m, 12H), 1,20-1,27 (m, 10H), 1,39-1,45 (m, 1H), 1,85-1,88 (m, 1H), 2,20-2,30 (m, 2H), 2,63-2,71 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 4,09-4,13 (m, 1H), 4,23 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,49-4,58 (m, 2H), 5,13 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,69-5,81 (m, 1H), 5,92 (a, 1H), 6,60 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,72 (t, J = 7,5 Hz, 1H),
10 7,86 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,96-7,99 (m, 2H), 8,29 (d, J = 8,0 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,75 min, procedimiento B), EM m/z 714 (M++H).
imagen25
Etapa 1:
15 Este producto, 2-óxido de 3-metil-isoquinolina, se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el
Ejemplo 21, Etapa 2, en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 3-metilisoquinolina. RMN 1H (CD3OD) δ 2,64 (s, 3H), 7,64-7,72 (m, 2H), 7,88-7,95 (m, 2H), 9,05 (s, 1H);
20 CL-EM (tiempo de retención: 0,61 min, procedimiento B), EM m/z 160 (M++H). Etapa 2:
imagen2
Este producto, 1-cloro-3-metil-isoquinolina se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 2-óxido de 3-metil25 isoquinolina.
RMN 1H (CDCl3) δ 2,65 (s, 3H), 7,25 (s, 1H), 7,61 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,69 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,27 (d, J = 8,5 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,47 min, procedimiento B), EM m/z 178 (M++H).
Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 5 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 1-cloro-3-metil-isoquinolina.
5 RMN 1H (CD3OD) δ 1,05 (s, 9H), 1,23 (s, 9H), 2,51 (s, 3H), 2,34-2,40 (m, 1H), 2,72-2,78 (m, 1H), 4,05-4,12 (m, 1H), 4,26 (a, 1H), 4,41 (d, J = 10 Hz, 1H), 4,62-4,67 (m, 1H), 5,90 (a, 1H), 7,14 (s, 1H), 7,38 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,62 ( t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 8,0 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,84 min, procedimiento B), EM m/z 486 (M++H).
Etapa 4:
10 El Compuesto 33 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 9 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 33, Etapa 3.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,99-1,09 (m, 12H), 1,23-1,25 (m, 10H), 1,41-1,45 (m, 1H), 1,86-1,90 (m, 1H), 2,21-2,31 (m, 2H), 2,52 (s, 3H), 2,58-2,61 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 4,08-4,12 (m, 1H), 4,28 (a, 1H), 4,40 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,504,55 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,71-5,81 (m, 1H), 5,93 (a, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,38
15 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 9,12 (a, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,85 min, procedimiento B), EM m/z 698 (M++H).
Etapa 1:
imagen26
Este producto, 2-óxido de 3-ciclopropil-isoquinolina se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 21, Etapa 2 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 3-ciclopropilisoquinolina (L. Flippin, J. Muchowski, J. O. C, 1993, 2631-2632). CL-EM (tiempo de retención: 0,95 min,
procedimiento B), EM m/z 186 (M++H). Etapa 2:
imagen2
Este producto, 1-cloro-3-ciclopropil-isoquinolina se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el 5 Ejemplo 11, Etapa 2 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 2-óxido de 3ciclopropil-isoquinolina.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,00-1,04 (m, 4H), 2,11-2,18 (m, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,61 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,72 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 8,27 (d, J = 14,5 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,70 min, procedimiento B), EM m/z 204 (M++H).
10 Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 5 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 1-cloro-3-ciclopropil-isoquinolina.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,93-1,05 (m, 13H), 1,29 (s, 9H), 2,06-2,10 (m, 1H), 2,39-2,44 (m, 1H), 2,70-2,76 (m, 1H), 4,0515 4,12 (m, 1H), 4,27 (a, 1H), 4,35 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,62-4,67 (m, 1H), 5,78 (a, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,38 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 8,0 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,96 min, procedimiento B), EM m/z 512 (M++H).
Etapa 4:
El Compuesto 34 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 9 en forma de un 20 sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 34, Etapa 3.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,93-1,09 (m, 16H), 1,24-1,30 (m, 10H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,06-2,11 (m, 1H), 2,21-2,32 (m, 2H), 2,56-2,61 (m, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 4,08-4,12 (m, 1H), 4,28 (a, 1H), 4,32 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,48-4,53 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,30 (d. J = 17,5 Hz, 1H), 5,72-5,77 (m, 1H), 5,82 (a, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,36 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,60 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,0 Hz, 1H);
25 CL-EM (tiempo de retención: 2,00 min, procedimiento B), EM m/z 724 (M++H).
Ejemplo 35: Preparación del Compuesto 35,
imagen2
Etapa 1:
Una mezcla de 3-hidroxi-isoquinolina (725 mg, 5,0 mmol), carbonato de cesio (4,89 g, 15,0 mmol), MeI (781 mg, 5,5 mmol) en DMF (50 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 12 h. La mezcla se diluyó con EtOAc (200 ml), se
5 filtró y se lavó con agua (200 ml, X 2) y NaOH 1 M (ac.) y salmuera respectivamente. La fase orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por HPLC prep., produciendo 120 mg (15%) del producto deseado en forma de un sólido de color .
RMN 1H (CDCl3) δ 4,03 (s, 3H), 6,99 (s, 1H), 7,36 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,56 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,87 (J = 8,5 Hz, 1H);
10 CL-EM (tiempo de retención: 0,54 min, procedimiento B), EM m/z 160 (M++H).
Etapa 2:
imagen2
Este producto, 3-metoxi-isoquinolina 2-óxido, se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 21, Etapa 2 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 3-metoxi15 isoquinolina. CL-EM (tiempo de retención: 0,83 min, procedimiento B), EM m/z 176 (M++H).
Etapa 3:
imagen2
Este producto, 1-cloro-3-metoxi-isoquinolina se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 2-óxido de 3-metoxi20 isoquinolina. CL-EM (tiempo de retención: 1,62 min, procedimiento B), EM m/z 194 (M++H).
Etapa 4: Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 5 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 1-cloro-3-metoxi-isoquinolina.
imagen2
RMN 1H (CD3OD) δ 1,05 (s, 9H), 1,23 (s, 9H), 2,35-2,43 (m, 1H), 2,72-2,79 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 4,01-4,11 (m, 1H), 5 4,26 (a, 1H), 4,48 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,62-4,67 (m, 1H), 5,83 (a, 1H), 6,61 (s, 1H), 7,25 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,54 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,4 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,82 min, procedimiento B), EM m/z 502 (M++H).
Etapa 5:
El Compuesto 35 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 9 en forma de un 10 sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 35, Etapa 4.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,04-1,08 (m, 12H), 1,24-1,27 (m, 10H), 1,43-1,45 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,30-2,34 (m, 1H), 2,62-2,66 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 3,99 (s, 3H), 4,09-4,12 (m, 1H), 4,27-4,28 (m, 1H), 4,46 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,51-4,58 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,72-5,76 (m, 1H), 5,88 (a, 1H), 6,62 (s, 1H), 7,26 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,55 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 8,5 Hz, 1H);
15 CL-EM (tiempo de retención: 1,85 min, procedimiento B), EM m/z 714 (M++H).
Ejemplo 36: Preparación del Compuesto 36.
imagen2
Etapa 1:
Una mezcla de ácido 4-metoxi-2-metil-benzoico (5,00 g, 30,1 mmol) y cloruro de tionilo (20,0 g, 0,17 mol) se calentó a reflujo durante 30 min. El volátil se retiró al vacío. Después de bombear durante una noche, el cloruro de ácido 5 viscoso oleoso se usó en bruto para la siguiente reacción sin ninguna purificación.
A una solución de 4-metoxi-2-metil-benzoílo cloruro en CH2Cl2 (60 ml) a 0 ºC se añadió gota a gota dietilamina. La mezcla formada se dejó calentar con agitación a la temperatura ambiente durante 2 h. Los vólatiles se retiraron al vacío. El residuo se trituró con EtOAc (100 ml) y se filtró. El filtrado se lavó con HCl 1 M, NaOH 1 M y salmuera, se secó sobre MgSO4. La evaporación del disolvente produjo 6,51 g (98%) del producto deseado en forma de un aceite
10 viscoso. CL-EM (tiempo de retención: 1,20 min, procedimiento B), EM m/z 222 (M++H).
Etapa 2:
A una solución de N,N-dietil-4-metoxi-2-metil-benzamida (221 mg, 1,0 mmol) en THF (2 ml) a -78 ºC se le añadió gota a gota n-BuLi (0,84 ml de 2,5 M en hexano, 2,10 mmol). La solución de color naranja formada se mantuvo a esta temperatura durante 30 min más antes de la adición gota a gota de benzonitrilo (103 mg, 1,0 mmol). La solución
15 final se dejó calentar hasta la temperatura ambiente con agitación durante una noche. Se inactivó con ácido cítrico al 5% enfriado con hielo. Se filtró, se lavó con agua y se secó. La trituración con 2:1 de hexano-EtOAc (5 ml) produjo 205 mg (82%) del producto deseado en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H (d6-DMSO) δ 3,89 (s, 3H), 6,84 (s, 1H), 7,05-7,07 (m, 1H), 7,18 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,44-7,51 (m, 3H), 7,78 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 9,0 Hz, 1H);
20 CL-EM (tiempo de retención: 1,20 min, procedimiento B), EM m/z 252 (M++H).
Etapa 3:
Este producto, 1-cloro-6-metoxi-3-fenil-isoquinolina, se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 6-metoxi-3fenil-2H-isoquinolin-1-ona.
RMN 1H (CDCl3) δ 3,97 (s, 3H), 7,12 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,23-7,26 (m, 1H), 7,40-7,42 (m, 1H ), 7,46-7,50 (m, 2H), 7,89 (s, 1H), 8,08 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 8,21 (d, J = 9,0 Hz. 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,90 min, procedimiento B), EM m/z 270, 271 (M++H).
Etapa 4:
5 A una solución del producto del Ejemplo 21, Etapa 1 (320 mg, 0,57 mmol) en DMSO (5 ml) se le añadió terc-butóxido potásico (321 mg, 2,87 mmol). La solución formada se agitó a la temperatura ambiente durante 30 min antes de la adición de 1-cloro-6-metoxi-3-fenil-isoquinolina (Ejemplo 36, Etapa 3) (155 mg, 0,57 mmol). La solución final se agitó durante 12 h. Se inactivó con agua enfriada con hielo, se acidificó con HCl 1 M a pH 4, se extrajo con EtOAc (20 ml, X 2). Las fases orgánicas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se evaporaron. El residuo
10 se purificó por HPLC prep. (del 40% de B al 100% de B, gradiente de 15 min), produciendo 289 mg (64%) del Compuesto 36 en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,95-1,05 (m, 12H), 1,24-1,32 (m, 10H), 1,44-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,30-2,36 (m. 1H), 2,65-2,71 (m, 1H), 2,93-2,97 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 4,12-4,28 (m, 2H), 4,38-4,52 (m, 2H), 5,12 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 17,0 Hz, 1H), 5,69-5,74 (m, 1H), 6,05 (a, 1H), 7,06-7,07 (m, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,37-7,39
15 (m, 1H), 7,44-7,48 (m, 2H), 7,77 (s, 1H), 8,07 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 8,5 Hz, 2H); CL-EM (tiempo de retención: 2,02 min. procedimiento B), EM m/z 790 (M++H).
imagen27
20 Etapa 1:
A una solución de N,N-dietil-4-metoxi-2-metil-benzamida (633 mg, 2,9 mmol) en THF (15 ml) a -78 ºC se le añadió gota a gota n-BuLi (2,3 ml de 2,5 M en hexano, 5,74 mmol). La solución de color rojo formada se mantuvo a esta temperatura durante 30 min más antes de añadirla por medio de una cánula a una solución de éster etílico del ácido tiazol-2-carboxílico (A. Medici y col., Tetrahedron Lett. 1983, pág. 2901) (450 mg, 2,9 mmol) en THF (5 ml) a -78 ºC. 25 La solución final de color verde oscuro se mantuvo a esta temperatura durante 2 h con agitación. Se inactivó con NH4Cl (ac.) sat. y se extrajo con EtOAc (50 ml). La fase orgánica se lavó con NH4Cl (ac.) sat. y salmuera, se secó,
se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida, eluyendo con 2:1 de EtOAc:hexano, proporcionando 405 mg (45%) del producto deseado en forma de un aceite viscoso de color blanquecino.
RMN 1H (CDCl3) δ 1,08 (t, J = 7,0 Hz, 6H), 3,22 (a, 2H), 3,44 (a, 2H), 3,79 (s, 3H), 4,59 (s, 2H), 6,79-6,81 (m, 1H), 6,86 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 8,00 (d, J-3,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,30 min, procedimiento B), EM m/z 333 (M++H).
Etapa 2:
Una mezcla de N,N-dietil-4-metoxi-2-(2-oxo-2-tiazol-2-il-etil)-benzamida (405 mg, 1,22 mmol) y NH4OAc (3,0 g, 38,9 mmol) se calentó a 140 ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 1 h. La solución fundida se vertió en agua enfriada con hielo, se filtró, se lavó la torta minuciosamente con agua. El sólido seco de color parduzco (240 mg, 76%) se usó en bruto para la siguiente reacción sin purificación adicional. CL-EM (tiempo de retención: 1,24 min, procedimiento B), EM m/z 259 (M++H).
Etapa 3:
Este producto, 1-cloro-6-metoxi-3-tiazol-2-il-isoquinolina, se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 6metoxi-3-tiazol-2-il-2H-isoquinolin-1-ona.
RMN 1H (CDCl3) δ 3,97 (s, 3H), 7,16 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,27-7,31 (m, 1H), 7,46 (d, J = 5,0 Hz, 1H ), 7,93 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 15,5 Hz, 1H), 8,39 (s, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,66 min, procedimiento B), EM m/z 277 (M++H).
Etapa 4:
El Compuesto37 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 36, Etapa 4, con la excepción de que se usó en su lugar 1-cloro-6-metoxi-3-tiazol-2-il-isoquinolina.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,97-1,09 (m, 12H), 1,24-1,29 (m, 10H), 1,44-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,30-2,36 (m. 1H), 2,65-2,71 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 4,12-4,27 (m, 2H), 4,38-4,52 (m, 2H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 5,69-5,74 (m, 1H), 5,99 (a, 1H), 7,14 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,66 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H), 8,11 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 9,14 (a, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,89 min, procedimiento B), EM m/z 797 (M++H).
imagen28
Etapa 1:
Una mezcla de éster metílico del ácido 3-hidroxi-isoxazol-5-carboxílico (5,72 g, 0,04 mol), yoduro de metilo (6,82 g, 0,044 mol) y carbonato de cesio (39,1 g, 0,12 mol) en DMF (200 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante una noche. Se diluyó con EtOAc (1 l) y se filtró. El filtrado se lavó con agua (1 l, X 2), NaOH 1 M y salmuera respectivamente, se secó sobre MgSO4, se evaporó al vacío, proporcionando 4,80 g (76%) del producto deseado en forma de un sólido de color blanco. El producto obtenido aquí se usó en bruto sin purificación adicional.
RMN 1H (CDCl3) δ 3,92 (s, 3H), 4,00 (s, 3H), 6,51 (s, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 0,69 min, procedimiento B), EM m/z 158 (M++H).
Etapa 2:
imagen2
10 Este producto, N,N-dietil-4-metoxi-2-[2-(3-metoxi-isoxazol-5-il)-2-oxo-etil]-benzamida, se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 37, Etapa 1, con la excepción de que se usó en su lugar éster metílico del ácido 3-metoxi-isoxazol-5-carboxílico. CL-EM (tiempo de retención: 1,28 min, procedimiento B), EM m/z 347 (M++H). 15 Etapa 3:
imagen2
Este producto, 6-metoxi-3-(3-metoxi-isoxazol-5-il)-2H-isoquinolin-1-ona, se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 37, Etapa 2, con la excepción de que se usó en su lugar N,N-dietil-4-metoxi-2-[2-(3metoxi-isoxazol-5-il)-2-oxo-etil]-benzamida.
20 RMN 1H (DMSO-d6) δ 3,89 (s, 3H), 3,97 (s, 3H), 7,01 (s. 1H), 7,14-7,16 (m, 2H), 7,43 (s, 1H), 8,13 (d, J = 8,5 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,31 min, procedimiento B), EM m/z 273 (M++H).
Etapa 4:
imagen2
Este producto, 1-cloro-6-metoxi-3-(3-metoxi-isoxazol-5-il)-isoquinolina, se preparó por el mismo procedimiento que 25 se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar 6-metoxi-3-(3-metoxi-isoxazol-5-il)-2H-isoquinolin-1-ona.
RMN 1H (CDCl3) δ 3,97 (s, 3H), 4,04 (s, 3H), 6,60 (s, 1H), 7,17 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,31-7,33 (m, 1H), 8,02 (s, 1H), 8,23 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,73 min, procedimiento B), EM m/z 291, 293 (M++H).
Etapa 5:
El Compuesto 38 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 36, Etapa 4, con la excepción de que se usó en su lugar 1-cloro-6-metoxi-3-(3-metoxi-isoxazol-5-il)-isoquinolina.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,99-1,09 (m, 12H), 1,23-1,28 (m, 10H), 1,44-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,65-2,71 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 4,13-4,14 (m, 1H), 4,24-4,26 (m, 1H), 4,41-4,42 (m, 1H), 4,52-4,55 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 17,0 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 5,96 (a, 1H), 6,60 (s, 1H), 7,15-7,17 (m, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,10 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,95 min, procedimiento B), EM m/z 811 (M++H).
Etapa 1:
imagen29
Este producto, N,N-dietil-4-metoxi-2-[2-(5-metoxi-oxazol-2-il)-2-oxo-etil]-benzamida, se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 37, Etapa 1, con la excepción de que se usó en su lugar éster etílico 15 del ácido 5-metoxi-oxazol-2-carboxílico.
CL-EM (tiempo de retención: 1,24 min, procedimiento B), EM m/z 347 (M++H).
Etapa 2:
imagen2
Este producto, 6-metoxi-3-(5-metoxi-oxazol-2-il)-2H-isoquinolin-1-ona, se preparó por el mismo procedimiento que se 20 ha descrito en el Ejemplo 37, Etapa 2, con la excepción de que se usó en su lugar N,N-dietil-4-metoxi-2-[2-(5-metoxioxazol-2-il)-2-oxo-etil]-benzamida.
RMN 1H (DMSO-d6) δ 3,94 (s, 3H), 4,01 (s, 3H), 6,34 (s, 1H), 6,99 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,12-7,14 (m, 1H), 7,25 (s, 1H), 8,32 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,22 min, procedimiento B), EM m/z 274 (M++H).
Etapa 3:
imagen2
Este producto, 1-cloro-6-metoxi-3-(5-metoxi-oxazol-2-il)-isoquinolina, se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su 5 lugar 6-metoxi-3-(5-metoxi-oxazol-2-il)-2H-isoquinolin-1-ona.
RMN 1H (CDCl3) δ 3,96 (s, 3H), 4,00 (s, 3H), 6,34 (s, 1H), 7,12 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,28-7,31 (m, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,23 (d, J = 9,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,58 min, procedimiento B), EM m/z 291, 293 (M++H).
Etapa 4:
El Compuesto 39 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 36, Etapa 4, con la 10 excepción de que se usó en su lugar 1-cloro-6-metoxi-3-(3-metoxi-isoxazol-5-il)-isoquinolina.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,99-1,09 (m, 12H), 1,23-1,28 (m, 10H), 1,44-1,46 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,65-2,71 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 4,13-4,14 (m, 1H), 4,25 (a, 1H), 4,41-4,42 (m, 1H), 4,52-4,55 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 17,0 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 6,07 (a, 1H), 6,45 (s, 1H), 7,15-7,16 (m, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 8,10 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 9,11 (a, 1H); CL-EM (tiempo
15 de retención: 1,75 min, procedimiento B), EM m/z 811 (M++H).
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Etapa 1: Este producto, se preparó 2-óxido de 1-cloro-6-metoxi-isoquinolina por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 21, Etapa 2, con la excepción de que se usó en su lugar 1-cloro-6-metoxi-isoquinolina (el producto del 5 Ejemplo 11, Etapa 2).
RMN 1H (CDCl3) δ 4,00 (s, 3H), 7,14 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,41-7,43 (m, 1H), 7,62 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 8,36 (d, J = 7,0 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 0,85 min, procedimiento B), EM m/z 210 (M++H). Etapa 2:
10 Este producto, se preparó 1,3-dicloro-6-metoxi-isoquinolina por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 2, con la excepción de que se usó en su lugar 2-óxido 1-cloro-6-metoxi-isoquinolina. RMN 1H (CDCl3) δ 3,94 (s, 3H), 6,98 (s, 1H), 7,25-7,26 (m, 1H), 7,52 9s, 1H), 8,16 (d, J = 9,5 Hz, 1H); CL-EM (tiempo de retención: 1,54 min, procedimiento B), EM m/z 228, 230 (M++H). Etapa 3: 15 Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 24, Etapa 1 en forma de una
espuma, con la excepción de que se usó en su lugar 1,3-dicloro-6-metoxi-isoquinolina. RMN 1H (CD3OD) δ 1,43, 1,44 (rotámeros, 9H), 2,39-2,44 (m, 1H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,80-3,90 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 4,79-4,82 (m, 1H), 5,71 (a, 1H), 7,10-7,14 (m, 2H), 7,26 (s, 1H), 7,99-8,01 (m, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: procedimiento B 1,79 min), EM m/z 422 (M++H). 20 Etapa 4:
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Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 4, con la excepción
de que se usó el producto del Ejemplo 40, Etapa 3. CL-EM (tiempo de retención: 1,83 min, procedimiento B), EM m/z 635 (M++H). Etapa 5:
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5 Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 5 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 40, Etapa 4.
CL-EM (tiempo de retención: 1,36 min, procedimiento B), EM m/z 535 (M++H).
Etapa 6:
El Compuesto 40 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6 en forma de 10 un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 40, Etapa 5.
RMN 1H (CD3OD) δ 1,07-1,11 (m, 12H). 1,26-1,30 (m, 10H), 1,46-1,48 (m, 1H), 1,87-1,91 (m, 1H), 2,21-2,34 (m, 2H), 2,62-2,66 (m, 1H), 2,94-2,99 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 4,06-4,11 (m, 1H), 4,26-4,28 (m, 1H), 4,46-4,56 (m, 2H), 5,15 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 17,0 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 5,89 (a, 1H), 6,63 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,08-7,09 (m, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 8,08 (d, J = 9,5 Hz, 1H);
15 CL-EM (tiempo de retención: 1,99 min, procedimiento B), EM m/z 748 (M++H).
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Etapa 1:
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Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 30, Etapa 1, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 40, Etapa 3. CL-EM (tiempo de retención: 1,85 min, procedimiento B), EM m/z 455 (M++H). Etapa 2:
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Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 4 en forma de una espuma, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 41, Etapa 1. 10 CL-EM (tiempo de retención: 1,88 min, procedimiento B), EM m/z 667 (M++H). Etapa 3:
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Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 5 en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 41, Etapa 2. 15 CL-EM (tiempo de retención: 1,38 min, procedimiento B), EM m/z 567 (M++H). Etapa 4: El Compuesto 41 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 11, Etapa 6 en forma de
un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó en su lugar el producto del Ejemplo 41, Etapa 3.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,99-1,04 (m, 12H), 1,22-1,31 (m, 10H), 1,43-1,45 (m, 1H), 1,87-1,89 (m, 1H), 2,22-2,24 (m, 1H), 2,30-2,34 (m, 1H), 2,65-2,68 (m, 1H), 2,93-2,96 (m, 1H), 3,92 (s, 3H). 4,11-4,14 (m, 1H), 4,28-4,30 (m, 1H), 4,38-4,42 (m, 1H), 4,53-4,55 (m, 1H), 5,12 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,72-5,77 (m, 1H), 5,99 (a, 1H), 6,61
5 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H). 6,99-7,02 (m, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,57 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 8,03 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,92 min, procedimiento B), EM m/z 780 (M++H).
Ejemplo 42: Preparación del Compuesto 42.
Se preparó siguiendo los procedimientos usados en la preparación del Ejemplo 11, Compuesto 11, con la excepción 10 de que se usó ácido 6-etoxi cinámico en lugar de ácido 6-metoxi cinámico como material de parida para el elemento P2.
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RMN 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 0,98-1,09 (m, 15H), 1,24-1,31 (m, 10H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,85-1,90 (m, 1H), 2,19-2,32 (m, 2H), 2,57-2,63 (m, 1H), 2,91-2,97 (m, 1H), 4,03-4,09 (m, 1H), 4,17 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 4,42 (d, J = 11,3 15 Hz, 1H), 4,49-4,54 (m, 1H), 5,12 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,72-5,78 (m, 1H), 5,83 (s, 1H), 7,07-7,10 (M, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,22 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,8 Hz, 1H); EM: (M+H)+ 728.
Sección C:
Ejemplo 45: Preparación del Compuesto 45
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Etapa 1:
A una solución de ácido 2-bromo-5-metoxibenzoico (1,68 g, 7,27 mmol) en DMF (50 ml) en un matraz a presión media (Chemglass) se le añadió benzamidina (1,25 g, 8,00 mmol), K2CO3 (6,0 g, 43,6 mmol) y polvo de cobre (336
5 mg, 1,45 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 180 ºC durante 1 h. Se retiraron el cobre y el exceso de K2CO3 por filtración al vacío y se lavó con MeOH. El filtrado se concentró y el producto en bruto resultante se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2, 5% de MeOH en DCM), dando un sólido de color verde claro (1,55 g, rendimiento del 84%): RMN 1H (DMSO-d6) δ 3,84 (s, 3H), 7,26 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,46 (s a, 5H), 7,57 (s, 1H), 8,38 (s a, 1H); MS m/z (MH+) 253.
10 Etapa 2:
A una suspensión a 0 ºC de Boc-cis-Hidroxiprolin-OMe (2,0 g, 8,15 mmol) y el producto del Ejemplo 45, Etapa 1 (2,26 g, 8,97 mmol) en THF (82 ml) se le añadió Ph3P y azocarboxilato de diisopropilo (1,98 g, 8,97 mmol). Después de agitar a ta durante 17 h, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (100 ml) y se lavó con H2O (50 ml). La fase acuosa se separó y se extrajo de nuevo con EtOAc (2 x 50 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, 15 se secó sobre MgSO4 y se concentró, dando un aceite viscoso que se disolvió de nuevo en una cantidad mínima de EtOAc y se añadieron hexanos para realizar la precipitación de la mayoría del subproducto de Ph3PO. El Ph3PO se retiró por filtración al vacío y el filtrado líquido se concentró. El aceite viscoso resultante se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2, 4:1 de hex:EtOAc), dando un producto sólido de color blanco (1,76 g, rendimiento del 45%): RMN 1H (60/40 de rotómeros, CDCl3) δ 1,47 (s, 9H), 2,49-2,55 (m, 1H), 2,73-2,83 (m, 1H), 3,80 (s, 1,8H), 3,81 20 (s, 1,2H). 3,96 (s, 3H), 4,03-4,09 (m, 1H), 4,54 (t, J = 8,0 Hz, 0,6H), 4,66 (t, J = 7,8 Hz), 4,96-5,06 (m, 1H), 5,97 (s a,
0,6H), 6,04 (s a, 0,4H), 7,33 (dd, J = 6,1, 2,7 Hz, 1H), 7,46-7,51 (m, 4H), 7,91 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,49 (t, J = 8,5 Hz, 2H): RMN 13C (rotómero, CDCl3) δ 21,7, 22,0, 28,3, 28,4, 35,8, 36,8, 52,3, 52,4, 52,6, 55,8, 55,9, 57,9, 58,3, 74,5, 74,9, 80,6, 101,2, 101,3, 115,7, 125,8, 126,0, 128,1, 128,5, 129,7, 130,2, 137,9, 147,8, 153,8, 157,7, 158,0, 158,0, 164,8, 173,1, 173,3; MS m/z (MH+) 480.
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Etapa 3:
El producto del Ejemplo 45, Etapa 2 (760,0 mg, 1,59 mmol) se disolvió en TFA al 50% en DCM y se agitó a ta durante 2 h. El disolvente se concentró y el aceite viscoso de color pardo resultante se secó al vacío durante una noche. El producto se usó directamente para la siguiente reacción.
10 Etapa 4:
A una solución del producto de aceite viscoso de color pardo del Ejemplo 45, Etapa 3 (963 mg, 1,59 mmol) y DIPEA (1,23 g, 9,54 mmol) en DCM (11 ml) se le añadieron N-BOC L-tBuGly (440 mg, 1,90 mmol), HBTU (902 mg, 2,38 mmol) y HOBt (364 mg, 2,38 mmol). Después de agitar a ta durante 14 h, el disolvente el exceso de DIPEA se concentraron y el aceite viscoso de color pardo resultante de purificó por cromatografía ultrarrápida (SiO2, 4:1 de 15 hex:EtOAc), dando un sólido de color blanco (0,922 mg, rendimiento del 98% para las dos etapas): RMN 1H
5
10
15
20
25
30
(CDCl3/MeOD) δ 0,94 (s, 9H), 1,15 (s, 9H), 2,38-2,42 (m, 1H), 2,60-2,73 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 4,08-4,17 (m, 2H), 4,25 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 4,69 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,99 (s a, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,38 (s, 5H), 7,80 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,32 (d, J = 5,5 Hz, 1H); RMN 13C (CDCl3/MeOD) δ 29,6, 31,4, 31,6, 33,04, 38,2, 39,0, 55,8, 56,9, 59,2, 61,5, 62,1, 78,3, 83,1, 105,0, 119,0, 129,4, 131,5, 131,9, 132,6 133,8, 141,2, 151,0, 161,4, 161,6, 168,2, 175,2, 175,7; MS m/z H(M+) 593.
Etapa 5:
A una solución del producto del Ejemplo 45, Etapa 4 (409 mg, 0,69 mmol) en THF (10 ml) se le añadió NaOH 1 N (2 ml). Después de agitar a ta durante 19 h, la reacción se acidificó con HCl concentrado a aproximadamente pH 5 y se extrajo con DCM (3 x 50 ml). La fase orgánica combinada se secó sobre MgSO4 y se concentró, dando un producto sólido de color amarillo (370 mg, rendimiento del 92%) que se usó directamente en la siguiente reacción después de secar al vacío: RMN 1H (CDCl3) δ 1,05 (s, 9H), 1,25 (s, 9H), 2,76-2,83 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,23-4,27 (m, 2H), 4,41 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,92 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,08 (s a, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,46-7,50 (m, 5H), 7,93 (d, J = 9,15 Hz, 1H), 8,51 (d, J = 7,3 Hz, 2H); MS m/z (MH+) 579,
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Etapa 6:
A una solución de ácido N-Boc-vinilciclopropanocarboxílico (mezcla 1:1 de 1R,2S/1S,2R) (1,01 g, 4,46 mmol) en THF (20 ml) y DMSO (2 ml) se le añadió CDI (1,08 g, 6,69 mmol) y DMAP (817 mg, 6,69 mmol). Después de agitar a 70 ºC durante 1 h, la mezcla de reacción se dejó enfriar a ta y se trató con isopropilsulfonamida (1,1 g, 8,92 mmol) y DBU (1,36 g, 8,92 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 16 h y se concentró y se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2, 5% de MeOH en DCM), dando un aceite viscoso de color pardo (1,4 g, rendimiento del 98%): RMN 1H (Metanol-d4) 1,25 (m, 1H), 1,33 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,36 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,84 (dd, J = 7,6, 5,2 Hz, 1H), 2,16 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 3,58 (s a, 1H), 5,08 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 5,27 (d. J = 15,6 Hz, 1H), 5,58-5,66 (m, 1H): MS m/z (MH+) 332.
Etapa 7:
El producto del Ejemplo 45, Etapa 6 (113 mg, 0,34 mmol) se trató con una solución al 50% de ácido trifluoroacético en DCM (10 ml) y se agitó a ta durante 1,4 h. El disolvente y el exceso de ácido trifluoroacético se retiraron al vacío. El aceite viscoso de color pardo resultante se secó al vacío (1,3 g, rendimiento del 99%) y se usó sin purificación adicional: RMN 1H (DMSO-d6) δ 1,24 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,26 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,54 (dd, J = 9,6, 6,6 Hz, 1H), 1,99 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 2,24 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 3,58-3,63 (m, 1H), 5,18 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,33 (d, J = 17,1 Hz, 1H), 5,61-5,69 (m, 1H), 8,83 (s a, 3H); RMN 13C (DMSO-d6) δ 15,2, 15,9, 16,5, 29,9, 41,6, 52,1, 116,0, 118,9, 132,0, 158,2, 167,3; MS m/z (MH+) 233.
Etapa 8:
A una mezcla del producto del Ejemplo 45, Etapa 5 (117 mg, 0,338 mmol) y DIPEA (174 mg, 1,35 mmol) en DCM (5
ml) se le añadió HBTU (128 mg, 0,338 mmol), HOBt (52 mg, 0,338 mmol) y el producto del Ejemplo 45, Etapa 7 (130 mg, 0,225 mmol) Después de agitar a ta durante 16 h, la mezcla se concentró y el aceite viscoso de color pardo resultante se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2, 1:3 de hex:EtOAc después 95:5 DCM:MeOH), dando un producto sólido de color blanquecino (150 mg, rendimiento del 84%). El producto final, Compuesto 45, es 5 una mezcla de isómeros; la variación que aparece en la porción vinilciclpropil P1de la molécula (mezcla 1:1 de 1R,2S/1S,2R): RMN 1H (Metanol-d4) δ 0,92 (s a, 2H), 1,03 (s, 9H), 1,17 (s, 9H), 1,27-1,38 (m, 9H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,83 (dd, J = 8,1, 5,3 Hz, 0,4H), 1,90 (dd, J = 7,9, 5,5 Hz, 0,6H), 2,24-2,31 (m, 1H), 2,37-2,45 (m, 1H), 2,67-2,75 (m, 1H), 3,73-3,79 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 4,21 (dd, J = 9,3, 6,0 Hz, 2H), 4,48 (d, J =11,3 Hz, 1H), 4,61 (c, J = 8,9 Hz, 1H), 5,14 (t, J = 9,0 Hz, 1H). 5,33 (t, J = 17,9 Hz, 1H), 5,70-5,76 (m, 1H), 6,06 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 8,9 Hz,
10 1H), 7,34 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,49 (s a, 5H), 7,87 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 8,46 (d, J = 4,3 Hz, 2H); RMN 13C (Metanol-d4) δ 15,7, 16,1, 16,5, 16,8, 23,9, 27,1, 28,6, 35,8, 36,0, 36,2, 36,3, 36,4, 42,6, 42,8, 54,7, 54,8, 55,5, 56,4, 61,1, 61,2, 80,5, 102,9, 117,0, 118,8, 118,9, 126,8, 129,4, 129,6, 130,2, 131,5, 134,4, 139,2, 148,8, 158,0, 159,3, 159,8, 166,3, 171,1, 175,1, 184,3; MS m/z (MH+) 793.
imagen33
15
El Compuesto 46 se preparó siguiendo las Etapas 1 a 5 y la Etapa 8 del Ejemplo 45 con la excepción de que se
hicieron las siguientes modificaciones:
Etapa 1:
Modificaciones: se utilizaron ácido 2-bromo-4,5-dimetoxibenzoico y clorhidrato de ciclopropilcarbamidina como 20 materiales de partida.
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (DMSO-d6) δ 0,97-1,01 (m, 2H), 1,03-1,06 (m, 2H), 1,90-1,94 (m, 1H).3,84 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 6,93 (s, 1H), 7,37 (s, 3H), 12,28 (s, 1H); RMN 13C (DMSO-d6) δ 9,03, 13,17,55,47, 55,73, 104,81, 107,27, 113,26, 25 145,16, 147,48, 154,44, 157,21, 160,89; MS m/z (MH+) 247.
Etapa 2:
Modificaciones: El producto del Ejemplo 46, Etapa 1 se usó como material de partida en lugar del producto del Ejemplo 45, Etapa 1.
Producto: Datos: RMN 1H (CDCl3) δ 1,00-1,04 (m, 2H), 1,07-1,11 (m, 2H), 1,43 (s, 5,4H), 1,46 (s, 3,6H), 2,17-2,21 (m, 1H), 2,37-2,43 (m, 1H), 2,62-2,69 (m, 1H), 3,75 (s, 1,8H), 3,78 (s, 1,2H), 3,92 (d, J = 2,8 Hz, 1H). 4,00 (s. 3,6H), 4,01 (s, 2,4H), 4,48 (t, J = 8,0 Hz, 0,6H), 4,59 (t, J = 7,6 Hz, 0,4H), 5,7 (s a, 0,6H), 5,74 (s a, 0,4H), 7,18 (s, 1H), 7,20 (s, 1H);
imagen2
5 RMN 13C (CDCl3) δ 9,6, 9,7, 18,1, 28,3, 28,4, 35,8, 36,7, 52,2, 52,4, 56,3, 57,8, 58,2, 74,0, 74,5, 80,5, 80,6, 101,0, 101,1, 106,3, 108,6, 148,8, 149,1, 153,8, 155,4, 164,4, 165,9, 172,9, 173,2, CL-EM m/z (MH+) 474.
Etapas 3 y 4:
El producto del Ejemplo 46, Etapa 2 se usó como material de partida en lugar del producto del Ejemplo 45, Etapa 2,
Producto:
10
imagen2
Datos: RMN 1H (Metanol-d4) δ 1,04 (s, 9H), 1,08-1,21 (m, 4H), 1,14 (s, 9H), 2,17-2,21 (m, 1H), 2,39-2,41 (m, 1H), 2,74-2,77 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 3,98 (m, 3H), 4,09 (dd, J = 11,4, 3,8 Hz, 1H), 4,17 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 4,42 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 4,76 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 5,81 (s a, 1H), 6,43 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 5,8 Hz, 1H); RMN 13C (Metanol-d4) δ 10,0, 10,3, 18,6, 26,9, 28,5, 28,8, 35,8, 36,1, 38,9, 52,8, 54,9, 15 56,7, 59,6, 60,5, 76,6, 80,4, 102,7, 106,2, 109,9, 149,8, 150,7, 157,6, 166,0, 167,3, 173,5, 173,6; MS m/z (MH+) 587.
Etapa 5:
El producto del Ejemplo 46, Etapa 4 se usó como material de partida en lugar del producto del Ejemplo 45, Etapa 4.
Producto: Datos: RMN 1H (Metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,13 (s, 9H), 1,20-1,23 (m, 4H), 2,15-2,19 (m, 1H), 2,40-2,45 (m, 1H), 2,70-2,76 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 4,08 (dd, J = 11,4, 3,8 Hz, 1H), 4,17 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 4,37 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 4,71 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 5,77 (s a, 1H), 7,09 (s, 1H), 7,20 (s, 1H); RMN 13C (Metanol-d4) δ 10,2, 10,5, 18,6, 26,9, 28,5, 28,8, 36,0, 36,3, 54,9, 56,8, 59,7, 60,4, 76,8, 80,4, 102,6, 105,9, 109,9, 126,9, 127,9, 149,3, 150,8,
imagen2
5 157,65, 157,8, 166,1, 167,3, 173,3, 175,1: MS m/z (MH+) 573.
Etapa 8:
El producto del Ejemplo 46, Etapa 5 se usó como material de partida en lugar del producto del Ejemplo 45, Etapa 5. El producto final, Compuesto 46, es una mezcla de isómeros; la variación que aparece en la porción vinilciclopropilo de P1 de la molécula (mezcla 1:1 de 1R,2S/1S,2R).
10 Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (Metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,05-1,09 (m, 4H), 1,16 (s, 4,5H), 1,17 (s, 4,5H), 1,19-1,22 (m, 1H), 1,31 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,33-1,38 (m, 7H), 1,18-1,89 (m, 1H), 2,15-2,20 (m, 2H), 2,35-2,44 (m, 1H), 3,23 (c, J = 7,4 Hz, 1H), 3,70-3,75 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,98 (s, 3H), 4,08-4,13 (m, 2H), 4,16 (dd, J = 8,9, 3,1 Hz, 1H), 4,38 (t, J = 13,1
15 Hz, 1H), 4,58-4,62 (m, 1H), 4,06 (m, 1H), 5,29 (t, J = 15,2 Hz, 1H). 5,83 (s a, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,27 (d, J = 4,3 Hz, 1H); MS m/z (MH+) 787,
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El Compuesto 47 se preparó por las siguientes etapas análogas a las que se han usado para obtener el
20 Compuesto 45 del Ejemplo 45. Se usó ácido orto-bromobenzoico como material de partida para obtener sal clorhidrato de (1R-amino-2S-vinil-ciclopropano-carbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico. Compuesto 47: MH+ = 761
Ejemplo 48: Preparación del Compuesto 48
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El Compuesto 48 se preparó siguiendo las Etapas 1 a 5 y Etapa 8 del Ejemplo 45 con la excepción de que se hicieron las siguientes modificaciones:
Etapa 1: Modificaciones: Se utilizaron clorhidrato de acetamidina y ácido 2-bromo-5-metoxibenzoico como materiales de partida.
Producto:
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Datos: RMN 1H (DMSO) δ 2,31 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 7,36 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,51 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 10 12,15 (s, 1H); RMN 13C (DMSO) δ 21,11, 55,41, 105,57, 121,22, 123,59, 128,12, 143,34, 151,68, 157,00, 161,45; CL-EM m/e (MH+) 191.
Etapa 2:
Modificaciones: El producto del Ejemplo 48, Etapa 1 se usó como material de partida en lugar del producto del Ejemplo 45, Etapa 1.
15 Producto:
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Datos: RMN 1H: (CDCl3) δ 1,43 (s, 5,4H), 1,45 (s, 3,6H), 2,38-2,45 (m, 1H), 2,62-2,71 (m, 1H), 2,66 (s, 1,8H), 2,68 (s, 7,2H), 3,77 (1,8H), 3,79 (s, 1,2H), 3,92 (s, 3H), 3,93-3,98 (m, 2H), 4,49 (t, J = 8,0 Hz. 0,6H), 4,61 (t, J = 7,8 Hz, 0,4H), 5,82 (t, J = 2,1 Hz, 0,6H), 5,89 (t, J = 2,3 Hz, 0,4H), 7,26 (dd, J = 4,7, 3,2 Hz, 1H), 7,42 (dd, J = 6,3, 2,8 Hz,
20 1H), 7,75 (d, J = 9,15 Hz, 1H); RMN 13C (CDCl3) δ 26,1,28,3,28,4, 35,8, 36,7, 52,2, 52,2, 52,4, 52,5, 55,755,8, 57,9, 58,2, 74,1, 74,7, 80,6, 101,0, 101,2, 114,9, 125,6, 125,9, 128,6, 147,3, 153,8, 154,5, 157,6, 157,6, 161,2, 164,6, 173,0, 173,3; CL-EM m/e (MH+) 418.
Etapas 3 y 4:
Modificaciones: El producto del Ejemplo 48, Etapa 2 se usó como material de partida en lugar del producto del 25 Ejemplo 45, Etapa 2.
Producto: Datos: RMN 1H (MeOD) δ 1,03 (s, 9H), 1,07 (s, 9H), 2,38-2,42 (m, 1H), 2,68 (s, 3H), 2,80 (c, J = 7,8 Hz, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 4,07 (dd, J = 11,9, 3,4 Hz, 1H), 4,13 (s a, 1H), 4,55 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 4,78 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 5,93 (s, 1H), 7,37 (d, J = 2,75 Hz, 1H), 7,48-7,51 (m, 2H), 7,70 (d, J = 5,7 Hz, 1H); RMN 13C (MeOD) δ 25,6, 26,9,
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5 28,4, 28,8, 35,9, 52,8, 55,0, 56,4, 59,7, 60,6, 77,2, 80,4, 102,9, 111,6, 116,5, 127,0, 128,4, 147,5, 162,7, 166,4, 173,6; CL-EM m/e (MH+) 531.
Etapa 5:
Modificaciones: El producto del Ejemplo 48, Etapa 4 se usó como material de partida en lugar del producto del Ejemplo 45, Etapa 4.
10 Producto:
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Datos: RMN 1H (MeOD) δ 1,03 (s, 9H), 1,08 (s, 9H), 2,41-2,46 (m, 1H), 2,68 (s, 3H), 2,81 (c, J = 8,1 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 4,07 (dd, J = 11,8,3,2 Hz, 1H), 4,18 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 4,52 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,74 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 5,93 (s a, 1H), 7,37 (d, J = 2,81 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 9,2, 2,4 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 9,2 Hz, 1H); RMN 13C (MeOD) δ 25,7,
15 26,9, 28,5, 36,1, 55,0, 56,4, 59,7, 60,5, 77,1, 80,4, 103,0, 116,5, 127,0, 128,5, 147,7, 157,8, 159,6, J62,7, 166,4, 173,5, 174,9; CL-EM m/e (MH+) 517.
imagen35
Etapa 8:
A una solución del producto del Ejemplo 48, Etapa 5 (45,8 mg, 0,089 mmol), sal clorhidrato de (1R-amino-2S-vinilciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (21,0 mg, 0,089 mmol) y DIEA (34,5 mg, 0,267 mmol) en DCM (1 ml) se le añadió HATU (44,0 mg, 0,116 mmol). Después de agitar a ta durante una noche, la mezcla de 5 reacción se lavó con NaHCO3 acuoso al 5% (1 ml). La fase acuosa se extrajo con 2 x 2 ml de DCM. La fase orgánica se lavó con ácido cítrico acuoso 5% (1 ml) y salmuera, se secó sobre MgSO4, se concentró y se purificó por HPLC prep. de fase inversa. Esta etapa de purificación dio como resultado la pérdida del grupo protector N-BOC en la porción de terc-leucina P3 de la molécula: RMN 1H (MeOD) δ 1,07-1,12 (m, 2 H) 1,14 (s, 2 H) 1,14-1,16 (m, 2 H) 1,17 (s, 9 H) 1,20-1,30 (m, 3 H) 1,45 (dd, J = 9,46, 5,49,Hz, 1H) 1,56 (s, 1H) 1,92 (dd, J = 8,20, 5,60 Hz. 1H) 2,25-2,31 (m,
10 1 H) 2,39-2,45 (m, 1 H) 2,73 (m, 1H) 2,76 (s, 3 H) 2,93-2,97 (m, 1H) 3,94 (s, 1H) 3,96 (s, 3 H) 4,07 (s, 1H) 4,21 (d, J = 3,97 Hz, 0,4 H) 4,23 (d, J = 3,97 Hz, 0,6 H) 4,31 (m, 1H) 4,73 (dd, J = 10,38, 7,02 Hz, 1H) 5,15 (dd, J = 10,38, 1,52 Hz, 1H) 5,32 (dd, J = 17,1, 1,52 Hz, 1H), 5,71-5,78 (m, 1H) 6,1 (t, J = 3,51 Hz, 1H) 7,46 (d, J = 2,75 Hz, 1H) 7,67 (d, J = 3,06 Hz, 0,4 H) 7,69 (d, J = 3,05 Hz, 0,6 H) 7,82 (s, 0,6 H) 7,84 (s, 0,4 H).
imagen36
15 El Compuesto 49 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito para la preparación del Compuesto 48, con la excepción de que se usaron el producto del Ejemplo 46, Etapa 5 y sal clorhidrato de (1R-amino-2S-vinilciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico como materiales de partida. La etapa de purificación de HPLC preparativa dio como resultado la pérdida del grupo protector N-BOC en la porción terc-leucina P3 de la
20 molécula: RMN 1H (MeOD) δ 1,09 (m, 2 H) 1,14 (d, J = 3,97 Hz, 2 H) 1,17 (s, 9 H) 1,25 (m, 3 H) 1,37 (m, 3 H) 1,44 (dd, J = 9,31, 5,65 Hz, 2 H) 1,57 (s, 1H) 1,92 (dd, J = 8,09, 5,65 Hz, 1H) 2,28 (dd, J = 17,70, 8,55 Hz, 1H) 2,32 (m, 1H) 2,68 (dd, J = 14,19, 7,78 Hz, 1H) 2,95 (m, 1H) 3,98 (s, 3 H) 4,06 (s, 3 H) 4,08 (s. 1H) 4,22 (d, J = 2,75 Hz, 1H) 4,70 (dd, J = 9,77, 7,32 Hz. 1H) 5,15 (dd, J = 10,38, 1,53 Hz, 1 H) 5,32 (dd, J = 17,40, 1,22 Hz, 1H) 5,74 (m, 1H) 6,04 (m, 1H) 7,24 (s, 1H) 7,37 (s, 1 H)
25 Ejemplo 50: Preparación del Compuesto 50
imagen2
El Compuesto 50 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito para la preparación del Compuesto 48, con la excepción de que se usaron el producto del Ejemplo 45, Etapa 5 y sal clorhidrato de (1R-amino-2S-vinil
ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico como material de partida. La etapa de purificación por HPLC preparativa dio como resultado la pérdida del grupo protector N-BOC en la porción terc-leucina P3 de la molécula: RMN 1H (MeOD) δ 1, 10 (m, 2 H) 1,14 (s, 1 H) 1,15 (d, J = 3,36 Hz, 1H) 1,17 (d, J = 3,05 Hz, 9 H) 1,22 (m, 1H) 1,27 (m, 2 H) 1,46 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1H) 1,56 (s, 1H) 1,93 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz, 1H) 2,29 (c, J = 8,55 Hz, 1H) 2,48 (m, 1 H) 2,78 (dd, J = 13,89, 8,09 Hz, 1H) 2,97 (m, 1H) 3,96 (s, 2 H) 4,07 (s, 1H) 4,32 (d, J = 2,14 Hz, 2 H) 4,76 (d, J = 7,02 Hz, 1H) 4,78 (m, 1H) 4,86 (d, J = 3,05 Hz, 1H) 5,32 (dd, J = 17,09, 1,22 Hz, 1H) 5,75 (m, 1H) 6,24 (d, J = 2,44 Hz, 1H) 7,45 (d, J = 2,75 Hz, 1H) 7,52 (m, 3 H) 7,61 (dd, J = 9,16, 2,75 Hz, 1H) 7,96 (d, J = 9,16 Hz, 1H).
imagen37
10 El Compuesto 51 se preparó mediante las siguientes Etapas 1a 5 y Etapa 8 del Ejemplo 45 con la excepción de que se hicieron las siguientes modificaciones: Etapa 1 Modificaciones: se utilizaron ácido 2-bromo-4,5-dimetoxibenzoico y trifluoroamidina como materiales de partida. Producto:
imagen2
15
Datos: RMN 1H (DMSO) δ 3,92 (s, 3H), 3,94 (s, 3H), 7,33 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 13,40 (s a, 1H); RMN 13C (DMSO) δ
55,8, 56,1, 104,9, 108,7, 150,2, 755,0; CL-EM m/e (MH+) 275.
Etapa 2:
Modificaciones: El producto del Ejemplo 51, Etapa 1 se usó como material de partida en lugar del producto del 20 Ejemplo 45, Etapa 1.
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (CDCl3) δ 1,42 (s, 3,6H), 1,44 (s, 5,4H), 2,42-2,49 (m, 1H), 2,67-2,73 (m, 1H), 3,37 (s, 1,2H), 3,78 (s,
1,8H), 3,97 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 4,02 (s, 2,4H), 4,04 (s, 3,6H), 4,48 (t, J = 7,9 Hz, 0,6H). 4,60 (t, J = 7,7 Hz, 0,4H), 5,86 (s a, 0,6H), 5,90 (s a, 0,4H), 7,27-7,29 (m, 1H), 7,38-7,44 (m, 1H); RMN 13C (CDCl3) δ 8,2, 28,3, 35,7, 36,7, 52,1, 52,2, 52,4, 56,5, 57,8, 58,2, 75,5, 76,0, 80,7, 100,8, 107,6, 111,0, 119,7, 148,2, 150,2, 151,4, 153,8, 154,5, 156,4, 165,1, 172,7, 173,0; CL-EM m/e (MH+) 502.
Etapas 3 y 4:
Modificaciones: El producto del Ejemplo 51, Etapa 2 se usó como material de partida en lugar del producto del Ejemplo 45, Etapa 2.
Producto:
imagen2
10 Datos: RMN 1H (MeOD) δ 1,03 (s, 9H), 1,08 (s, 9H), 2,41-2,45 (m, 1H), 2,80-2,84 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 4,00 (s, 3H), 4,10-4,14 (m, 2H), 4,52 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,80 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 5,92 (s a, 1H), 7,35 (s a, 2H); RMN 13C (MeOD) δ 26,9, 28,4, 28,8, 35,7, 36,0, 52,8, 54,8, 56,9, 59,6, 60,7, 77,9, 80,3, 102,2, 107,9, 112,4, 120,3, 149,3, 153,2, 157,8, 158,3, 173,5; CL-EM m/e (MH+) 615.
Etapa 5:
15 Modificaciones: El producto del Ejemplo 51, Etapa 4 se usó como material de partida en lugar del producto del Ejemplo 45, Etapa 4.
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (MeOD) δ 1,03 (s, 9H), 1,09 (s. 9H), 2,44-2,49 (m, 1H), 2,80-2,84 (m,1H),3,97 (s, 3H), 4,01 (s, 3H),
20 4,10-4,24 (m, 3H), 4,50 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,76 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 5,93 (s a, 1H), 7,36 (s a, 2H); RMN 13C (MeOD) δ 26,9, 28,4, 28,8, 36,0, 36,1, 54,8, 56,9, 57,0, 60,6, 77,9, 80,3, 102,3, 108,0, 112,5, 120,3, 149,3, 151,3, 153,2, 158,2, 158,3, 166,7, 173,5; CL-EM m/e (MH+) 601.
Etapa 8:
Modificaciones: El producto del Ejemplo 51, Etapa 5 se usó como material de partida en lugar del producto del
25 Ejemplo 45, Etapa 5. El producto final, Compuesto 51, es una mezcla de isómeros; apareciendo la variación en la porción vinil-ciclopropil P1 de la molécula (mezcla 1:1 de 1R,2S/1S,2R).
Producto: Datos: RMN 1H (DMSO) δ 0,23 (s, 4,.5H), 0,23 (s, 4,5H), 0,35 (s, 4,5H), 0,36 (s, 4,5H), 0,45-0,59 (m, 8H), 0,63-0,66 (m, 1H), 1,04 (dd, J = 8,2, 5,2 Hz, 1H), 1,10 (dd, J = 8,2, 5,5 Hz, 1H), 1,47-1,53 (m, 1H), 1,58-1,61 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,95-3,01 (m, 1H), 3,17 (s, 1,5H), 3,18 (s, 1,5H), 3,22 (s, 3H), 3,37 (s a, 2H), 3,68 (c, J = 5,9 Hz, 1H), 3,82
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5 (c, J = 8,6 Hz, 1H), 4,33-4,37 (m, 1H), 4,54 (t, J = 16,5 Hz. 1H), 4,93 (c, J = 8,9 Hz, 1H), 5,17 (d, J = 15,9 Hz, 1H), 6,53 (s, 1H), 6,58 (s, 1H); RMN 13C (DMSO) δ 12,8, 13,2, 13,7, 13,9, 19,5, 20,6, 21,1, 24,3, 25,6, 32,9, 33,1, 33,4, 33,6, 36,1, 39,7, 39,9, 51,8, 51,9, 52,4, 54,0, 54,2, 57,7, 57,7, 58,1, 58,3, 75,1, 75,3, 77,5, 84,1, 99,2, 105,2, 107,9, 109,5, 116,0, 116,1,118,7, 123,9, 127,4, 131,5, 146,5, 148,6, 150,3, 155,1, 155,5, 163,7, 164,7, 168,2, 168,3, 170,7, 172,2; CL-EM m/e (MH+) 815.
10 Ejemplo 52: Preparación del Compuesto 52
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El Compuesto 52 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito para la preparación del Compuesto 48, con la excepción de que se usaron el producto del Ejemplo 51, Etapa 5 y sal clorhidrato de (1R-amino-2S-vinilciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico como material de partida. La etapa de purificación por
15 HPLC preparativa dio como resultado la pérdida del grupo protector N-BOC en la porción terc-leucina P3 de la molécula: RMN 1H (MeOD) δ 1,11 (m, 3 H) 1,17 (s, 9H) 1,25 (m, 3 H) 1,46 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1H) 1,92 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz, 1H) 2,28 (c, J = 8,95 Hz, 1H) 2,42 (m, 1H) 2,72 (dd, J = 14,19, 7,17 Hz, 1H) 2,96 (m, 1H) 4,01 (s, 3 H) 4,04 (m, 5 H) 4,24 (m, 2 H) 4,73 (dd, J = 10,22, 7,17 Hz, 1H) 5,15 (dd, J = 10,53, 1,37 Hz, 1H) 5,32 (d, J = 17,09 Hz, 1H) 5,75 (m, 1H) 6,07 (s, 1H) 7,41 (s, 1H) 7,47 (s, 1H).
20 Ejemplo 53: Preparación del Compuesto 53
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Etapa 1:
A una solución de (mezcla 1:1 de 1R,2S/1S,2R) sal de ácido trifluoroacético de (1-amino-2-vinil
5 ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (626 mg, 1,82 mmol) en DCM (17 ml) se le añadió DIEA (555 mg, 4,29 mmol) en DCM (17 ml), HATU (754 mg, 1,98 mmol) y ácido (2S, 4R)Fmoc-4-amino-1-boc-pirrolidin-2carboxílico (747 mg, 1,65 mmol). Después de agitar a ta durante 24 h, la mezcla se lavó con HCl 1 N (10 ml), NaHCO3 acuoso al 5% (4 ml). Cada fase acuosa extrajo con DCM (25 ml). El DMC combinado se secó sobre MgSO4 y se concentró. El aceite viscoso de color pardo resultante se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida
10 (SiO2, 95:5 de DCM:MeOH), dando un sólido de color amarillo (22 mg, rendimiento del 75%): RMN 1H (DMSO-d6) δ 1,04-1,09 (m, 3H), 1,15-1,27 (m, 4H), 1,38-1,44 (m, 7H), 1,47 (s, 9H), 1,84 (dd, J = 8,2, 5,2 Hz, 1H), 2,01-2,30 (m, 4H), 2,90-2,98 (m, 1H), 3,64-3,71 (m, 1H), 4,16-4,22 (m, 4H), 4,39 (s a, 2H), 5,13 (dd, J = 10,7, 0,9 Hz. 1H), 3,31 (d, J = 17,1 Hz, 1H), 5,72-5,79 (m, 1H), 7,31 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 7,38 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 7,64 (d, J = 7,02 Hz, 3H), 7,79 (d, J = 7,63 Hz, 3H); CL-EM m/e (Na+MH+) 687.
15 Etapa 2:
El producto del Ejemplo 53, Etapa 1 (500 mg, 0,752 mmol) se trató con TFA al 50% en DCM (10 ml). Después de agitar a ta durante 0,5 h, la mezcla de reacción de color pardo resultante se concentró, dando un sólido de color pardo (489 mg, rendimiento del 84%): RMN 1H (DMSO-d6) δ 1,03-1,19 (m, 4H), 1,24-1,26 (m, 1H), 1,35 (dd, J = 9,5, 5,5 Hz, 1H), 1,91-1,96 (m, 1H), 2,22-2,30 (m, 1H), 2,40 (s a, 1H), 2,93-2,98 (m, 1H), 3,60 (s a, 1H), 4,21 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 4,47 (s a, 3H), 5,17 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 17,1 Hz, 1H), 5,64-5,67 (m, 1H), 7,31 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 7,39 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 7,63 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,80 (d, J = 7,3 Hz, 2H); (CL-EM m/e (MH+) 565.
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5 Etapa 3:
A una solución del producto del Ejemplo 53, Etapa 2 (260 mg, 0,383 mmol) en DCM (4 ml) se añadió DIPEA (218 mg. 1,69 mmol), HATU (165 mg, 0,422 mmol) y N-BOC L-tBuGly (100 mg, 0,422 mmol). Después de agitar a ta durante 16 h, la mezcla de reacción se diluyó con H2O (3 ml), se acidificó con HCl 1 N a pH= 1 La fase acuosa se extrajo con DCM (2x 15 ml). La fase orgánica combinada se lavó con NaHCO3 al 5% (3 ml) y salmuera (5 ml), se 10 secó sobre MgSO4 y se concentró. El aceite viscoso de color pardo resultante se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2, 95:5 de DCM:MeOH), dando sólido espumoso de color pardo (281 mg. rendimiento del 94%): RMN 1H (DMSO-d6) δ 0,96-1,08 (m, 4H), 1,05 (s, 9H), 1,15-1,26 (m, 2H), 1,35-1,38 (m, 5H), 1,42 (s, 9H), 1,85 (dd, J = 9,5, 5,5 Hz, 1H), 2,07 (s a, 1H), 2,22 (c, J = 8,7 Hz, 1H), 2,92-2,95 (m, 1H), 3,90 (s a, 1H), 4,20 (d, J =6,4 Hz, 3H), 4,29-4,39 (m, 5H), 5,13 (d, J = 10,7, 1H), 5,31 (dd, J = 18,0,5,8 Hz, 1H), 5,70-5,77 (m, 1H), 7,30 (t, J = 7,3 Hz,
15 3H), 7,39 (t, J = 7,3 Hz, 4H), 7,63 (dd, J = 6,7, 2,8 Hz, 3H), 8,80 (d, J = 7,63 Hz, 3H); CL-EM m/z (MH+) 678.
Etapa 4:
El producto del Ejemplo 53, Etapa 3 se trató con piperidina al 10% en DMF (3,3 ml). Después de agitar a ta durante 14 h, el disolvente se retiro y el aceite viscoso de color pardo resultante se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2, 95:5 de DCM:MeOH) para aislar el diastereómero puro 1R,2S P1 de mayor Fr en forma de un
20 sólido de color amarillo pálido (31 mg). El otro isómero se aisló en una mezcla y no se usó: CL-EM m/z (MH+) 556.
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Etapas 5 y 6:
A una solución del producto del Ejemplo 53, Etapa 4 en DMF (2 ml) se le añadió polivinilpiridina (13 mg) y Fmocisotiocianato. Después de agitar a ta durante 14 h, la mezcla de reacción se trató con piperidina (172 mg, 2,02 5 mmol). La reacción se agitó a ta durante 6 h más después de lo cual se concentró y se secó al vacío durante una noche. El residuo en bruto se re-disolvió en DMF (2 ml), se trató con 2-bromoacetofenona y se agitó a ta durante 14 h más. La mezcla de reacción se concentró y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2 95:5 de DCM:MeOH), dando el Compuesto 53 en forma de un sólido de color amarillo claro (21,9 mg, rendimiento del 50%): RMN 1H (DMSO-d6) δ 0,87-0,92 (m, 1H), 1,05 (s a, 13H). 1,16-1,25 (m, 4H), 1,34-1,38 (m,
10 2H), 1,42 (s. 9H), 1,87 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 2,22-2,25 (m, 2H), 2,48 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 2,93 (s a, 1H), 3,04 (c, J = 7,3 Hz, 1H) 3,30-3,31 (m, 2H), 3,43-3,49 (m, 1H), 4,01 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,07-4,12 (m, 1H), 4,27 (t, J = 9,5 Hz, 1H), 4,44 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 4,58 (s a, 1H), 5,11 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 5,30 (dd, J = 16,8, 9,6 Hz, 1H), 5,73-5,78 (m, 1H), 6,69 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,86 (s, 1H), 7,25 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,35 (t, J = 7,63 Hz, 2H), 7,82 (d, J = 8,2 Hz, 2H); CLEM m/z (MH+) 715.
15 Condiciones de HPLC Prep. de Fase Inversa para el Compuesto 55 a 155 como se indican:
Columna Waters Xterra Prep MS C18, 5 mm (esto significa un tamaño de partícula de 5 micras), 30 mm x 100 mm Disolvente A: 10% de MeOH. 90% de H2O, 10 mM NH4OAc Disolvente B: 90% de MeOH. 10% de H2O, 10 mM NH4OAc
20 caudal 50 ml/min Gradiente: 0% de B a 100% de B durante 10 min, mantenido a 100% de B durante 4 min
Ejemplo 55: Preparación del Compuesto 55
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Etapa 1:
A una solución de Compuesto 11 (1,5 g, 2,10 mmol) en DCE (25 ml) se añadió TFA (25 ml). Después de agitar a ta durante 15 min, la mezcla de reacción se concentró. El aceite viscoso de color rojo resultante se re-disolvió en DCE (50 ml) y se concentró de nuevo. Después, se re-disolvió en DCM (15 ml) y se trató con una solución de HCl 1 N en Et2O (25 ml). La suspensión resultante se enfrió a 0 ºC, se filtró al vacío, se lavó con Et2O y se secó en horno de vacío, dando el producto de la etapa 1 en forma de un sólido de color blanco (1,4 g, rendimiento del 97%): RMN1H(CD3OD, 500 MHz) δ 1,07-11,2 (m, 3 H) 1,14 (t, J = 4,12 Hz, 1 H) 1,17 (s, 9 H) 1,22 (dd, J = 10,53, 4,43 Hz, 1 H) 1,21-1,27 (m, 2 H) 1,42 (dd, J = 9,61, 5,34 Hz, 1 H) 1,91 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H) 2,27 (q. J = 8,85 Hz, 1 H) 2,322,38 (m, 1 H) 2,70 (dd, J = 13,43, 6,71 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H) 3,96 (s, 3 H) 4,09 (s, 1 H) 4,14 (dd, J = 12,21, 3,66 Hz, 1 H) 4,32-4,35 (m, 1 H) 4,69 (dd, J = 10,53, 6,87 Hz, 1 H) 5,14 (dd, J = 10,38, 1,53 Bz, 1 H) 5,31 (dd, J = 17,40, 1,22 Hz. 1 H) 5,70-5,77 (m, 1 H) 5,90 (t, J = 3,51 Hz, 1 H) 7,24-7,27 (m, 1 H) 7,29 (d, J = 4,27 Hz, 1 H) 7,39 (t, J = 4,88 Hz, 1 H) 7,90 (d. J = 6,10 Hz, 1 H) 8,19 (m, 1 H) 9,22 (s, 1 H).
Etapa 2:
A una mezcla de solución del producto de la etapa 1 del Ejemplo 55 (70,0 mg, 0,108 mmol) y DIEA (41,8 mg, 0,323 mmol) en DCM (2 ml) se le añadió anhídrido acético (33,0 mg, 0,323 mmol). Después de agitar a ta durante 14 h, el disolvente se retiró y el producto se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el Compuesto 55 (39,1 mg, rendimiento del 14%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,00-1,03 (m, 1 H), 1,06 (s, 9 H), 1,07-1,10 (m, 1 H), 1,21-1,28 (m, 2 H), 1,43 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 8,55, 5,49 Hz, 1 H), 2,23 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,27-2,32 (m, 1 H), 2,59 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 3,93 (s, 3 H), 4,12 (dd, J = 11,90, 3,97 Hz, 1 H), 4,35 (d, J = 1 1,60 Hz, 1 H), 4,51 (dd, J = 10,38, 7,02 Hz, 1H), 4,61 (dd, J = 5,80, 3,05 Hz, 1 H), 4,80 (d, J = 4,27 Hz, 1 H), 4,88 (d, J = 3,96 Hz, 1 H), 5,12 (dd, J = 10,38, 1,83 Hz, 1 H), 5,29 (dd, J = 17,24, 1,37 Hz, 1 H), 5,73-5,78 (m, 1 H), 5,84 (t, J = 3,66 Hz, 1 H), 7,15 (dd, J = 8,85, 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 8,06 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,49 min.), EM m/z 656 (NH+).
Ejemplo 56: Preparación del Compuesto 56
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El Compuesto 56 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 55 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó cloruro de ciclopentanocarbonilo como material de partida, dando el Compuesto 56 (18,0 mg, rendimiento del 24%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 1,00-1,03 (m, 1 H), 1,05 (s, 9 H), 1,06-1,10 (m, 2 5 H), 1,24-1,27 (m, 2 H), 1,25-1,61 (m, 9 H), 1,80-1,83 (m, 1 H), 1,88 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz, 1H), 2,22-2,31 (m, 2 H), 2,58-2,65 (m, 2 H). 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,10 (dd, J = 11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,35 (d, J = 11,91 Hz, 1 H), 4,52 (dd, J = 10,38, 7,02 Hz, 1 H), 4,65 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 4,80 (d, J = 5,49 Hz, 1 H), 4,88 (d, J = 5,19 Hz, 1 H), 5,13 (dd, J = 10,37, 1,83 Hz, 1 H), 5,30 (dd, J = 16,80, 1,22 Hz, 1 H), 5,73-5,78 (m, 1 H), 5,84 (t, J = 4,27 Hz, 1 H), 7,11(dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d,
10 J = 6,10 Hz, 1 H), 8,05 (d, J = 9,16 Hz, 1 H)); CL-EM (tiempo de retención: 1,71 min.), EM m/z 710 (MH+).
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El Compuesto 57 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 55 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó cloruro de 2-etilbutirilo como material de partida, dando el Compuesto 57 (20,7 mg,
15 rendimiento del 27%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,66 (t, J = 7,32 Hz, 3 H), 0,85 (t, J = 7,32 Hz, 3 H), 1,021,05 (m, 1 H), 1,07 (s, 9 H), 1,10-1,12 (m. 1 H), 1,24-1,33 (m, 4 H), 1,36-1,39 (m, 1 H), 1,43 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,48-1,51 (m, 1 H), 1,88 (dd, J = 8,24, 5,19 Hz, 1 H), 2,12-2,14 (m, 1 H), 2,22 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,26-2,30 (m, 1 H), 2,59 (dd, J = 13,73, 6,71 Hz, 1 H), 2,94-2,97 (m, 1 H), 3,92 (s, 3H), 4,11 (dd, J = 1 1,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,40 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,50 (dd, J = 10,68, 7,02 Hz, 1 H), 4,75 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 4,81 (d,
20 J = 9,16 Hz, 1 H), 4,89 (d, J = 9,16 Hz, 1 H), 5,12 (dd, J = 10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,29 (dd, J = 17,09, 1,22 Hz, 1 H), 5,72-5,79 (m, 1 H), 5,85 (t, J = 3,66 Hz, 1 H), 7,08 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d. J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 6,10 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 9,16 Hz, 1 H), 8,02 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CLEM (tiempo de retención: 1,73 min.), EM m/z 712 (MN+).
Ejemplo 58: Preparación del Compuesto 58
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A una mezcla de solución del producto de la etapa 1 del ejemplo 55 (70,0 mg, 0,108 mmol), DIEA (41,8 mg, 0,323 mmol) y ácido ciclopropanoacético (16,2 mg, 0,162 mmol) en DCM (2 ml) se le añadió HATU (61,6 mg, 0,162 mmol). Después de agitar la mezcla de reacción a ta durante una noche, se lavó con NaHCO3 acuoso al 5% (1 ml). La fase 5 acuosa se extrajo con 2 x 2 ml de DCM. La fase orgánica combinada se lavó con ácido cítrico acuoso al 5% (2 ml) y salmuera, se secó sobre MgSO4 y se concentró. El producto se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el Compuesto 58 (21,9 mg, rendimiento del 29%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,11-0,14 (m, 2 H), 0,43-0,47 (m, 2 H), 0,87-0,09 (m, 1 H), 1,01-1,04 (m, 1 H), 1,07 (s, 9 H), 1,09-1,12 (m, 1 H), 1,23-1,27 (m, 2 H), 1,45 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz, 1 H), 2,03 (d, J = 7,32 Hz, 2 H), 2,23 (c, J = 8,75 Hz, 1 H), 2,27-2,31 (m, 1 H),
10 2,59 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,93 (m, 3 H), 4,13 (dd, J = 11,90, 3,97 Hz, 1 H), 4,34 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,53 (dd, J = 10,38, 7,02 Hz, 1 H), 4,66 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 4,81 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 4,89 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 5,12 (dd, J = 10,37, 1,52 Hz, J H), 5,30 (dd, J = 17,09, 1,22 Hz, 1 H), 5,75-5,81 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,12 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,81 (d, J =9,46 Hz,1H),7,89(d, J =5,80 Hz,1H),8,06 (d, J =9,16 Hz, 1H);CL-EM (tiempo de retención:1,63 min.), MS m/z 696 (MH+).
15 Ejemplo 59: Preparación del Compuesto 59
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El Compuesto 59 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 58 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó ácido metoxiacético como material de partida, dando el Compuesto 59 (23,5 mg,
rendimiento del 32%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 10,99-1,04 (m, 2 H), 1,06 (s, 9 H), 1,09-1,12 (m, 1 H), 1,2220 1,27 (m, 2 H), 1,45 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz, 1 H). 2,22 (c, J = 8,85 Hz, 1 H),
2,29-2,32 (m, 1 H), 2,60 (dd, J = 13,89, 6,87 Hz, 1 H), 2,92-2,97 (m, 1 H), 3,35 (s, 3 H), 3,70 (d, J = 15,26 Hz, 1
H), 3,84 (d, J = 15,26 Hz, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,13 (dd, J = 11,90, 3,97 Hz, 1 H), 4,32 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,54
(dd, J = 10,38, 7,02 Hz, 1 H), 4,65 (s, 1 H), 4,8 (d, J = 7,32 Hz, 1 H), 4,89 (d, J = 7,32 Hz, 1 H), 5,12 (d, J =
10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 16,79 Hz, 1 H), 5,74-5,81 (m, 1 H), 5,86 (t, J = 3,36 Hz, 1 H), 7,14 (dd, J = 9,00, 25 2,59 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,26 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 8,04 (d, J = 9,16
Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,54 min.), EM m/z 686 (MH+).
Ejemplo 60: Preparación del Compuesto 60
imagen2
El Compuesto 60 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 58 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó ácido (+)-metoxiacético como material de partida, dando el Compuesto 60 (23,8 mg, rendimiento del 27%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,78 (d, J = 7,02 Hz, 3 H), 0,83-0,88 (m, 2 H), 0,92 (t, J = 5 7,17 Hz, 6 H), 0,94-0,98 (m, 1 H), 1,00-1,03 (m, 2 H), 1,06 (s, 9 H), 1,07-1,11(m, 1 H), 1,22-1,26 (m, 2 H), 1,311,36 (m, 2 H), 1,45 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,63-1,68 (m, 2 H), 1,89 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,01-2,04 (m, 1 H), 2,17-2,21 (m, 1 H), 2,24 (c, J = 9,00 Hz, 2 H), 2,28-2,33 (m, 1 H), 2,60 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,15-3,20 (m, 1 H), 3,77 (d, J = 15,26 Hz, 1 H), 3,87 (d, J = 15,26 Hz, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,12 (dd, J = 11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,32 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,56 (dd, J = 10,38, 7,02 Hz, 1 H), 4,65 (d, J =
10 9,77 Hz, 1 H), 4,81 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 4,89 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 5,13 (dd, J = 10,22, 1,68 Hz, 1 H), 5,30 (dd, J = 17,09, 1,53 Hz, 1 H), 5,75-5,79 (m, 1 H), 5,85 (t, J = 3,66 Hz, 1 H), 7,14 (dd. J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,26 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,52 (d, J = 9,77 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,03 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 2,043 min.), EM m/z 810 (MH+).
imagen39
El Compuesto 61 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 58 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó ácido (-)-metoxiacético como material de partida, dando el Compuesto 61 (26,4 mg, rendimiento del 30%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,78 (d, J = 7,02 Hz, 3 H), 0,82-084 (m, 1 H), 0,88 (dd, J = 8,39, 3,81 Hz, 1 H), 0,91 (d, J = 7,01 Hz, 3 H), 0,92 (d, J = 6,41 Hz, 3 H), 0,94-0,99 (m, 2 H), 1,00-1,03 (m, 2 H), 20 1,06 (s, 9 H), 1,08-1,10 (m, 1 H), 1,23-1,26 (m, 2 H), 1,30-1,37 (m, 2 H), 1,44 (dd, J = 9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,621,68 (m, 2 H), 1,89 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz. 1 H), 1,98-2,02 (m, 1 H), 2,13-2,16 (m, 1 H), 2,24 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,28-2,32 (m, 1 H), 2,60 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,94-2,98 (m, 1 H), 3,08-3,13 (m, 1 H), 3,63 (d, J = 15,56 Hz, 1 H), 3,93 (S, 3H), 4,11 (dd, J = 12,05, 3,81 Hz, 1 H), 4,32 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,56 (dd, J = 10,38, 7,02 Hz, 1 H), 4,62 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 4,81 (d, J = 6,41 Hz, 1 H), 4,89 (d, J = 6,72 Hz, 1 H), 5,13 (dd, J =
25 10,38, 1,83 Hz, 1 H), 5,30 (dd, J = 17,09, 1,23 Hz, 1 H), 5,76-5,80 (m, 1 H), 5,85 (t, J = 3,51 Hz, 1 H), 7,14 (dd, J = 9,00, 2,59 Hz, 1 H), 7,20 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,26 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,52 (d, J = 9,77 Hz, 1 H), 7,8,9 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 8,04 (d, J = 9,16 H, 1 H): CL-EM (tiempo de retención: 2,05 min.), EM m/z 810 (MH+).
Ejemplo 62: Preparación del Compuesto 62
imagen2
El Compuesto 62 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 58 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó ácido biciclo[1.1.1]pentano-2-carboxílico como material de partida, dando el Compuesto 62 (35,1, rendimiento del 45%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 1,03 (d, J = 5,49 Hz, 1 H), 1,06 (s. 9 5 H), 1,08-1,11 (m, 3 H), 1,23-1,29 (m, 3 H), 1,37 (dd, J = 7,02, 3,36 Hz, 13 H), 1,46 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,65 (dd, J = 9,77, 2,14 Hz, 1 H), 1,69 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 1,72 (dd, J = 7,32, 3,05 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,12 (dd, J = 9,77, 3,05 Hz, 1 H), 2,23 (d, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,27-2,31 (m, 1 H), 2,60 (t, J = 6,87 Hz, 1 H), 2,63 (d, J = 1,83 Hz, 2 H), 2,68 (d, J = 7,63 Hz, 1 H), 2,93-2,96 (m, 1 H), 3,23 (c, J = 7,43 Hz, 2 H), 3,70-3,75 (m, 2 H), 3,93 (s, 3 H), 4,11 (dd, J = 11,90, 3,66 Hz, 1 H). 4,35 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,53 (dd, J =
10 10,53, 6,87 Hz, 1 H), 4,71 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 4,79 (d, J = 5,80 Hz, 2 H), 4,87 (d, J = 5,49 Hz; 2 H), 5,13 (dd, J = 10,38, 1,83 Hz, 1 H), 5,30 (dd, J = 17,24, 1,37 Hz, 1 H), 5,74-5,79 (m, 1 H). 5,86 (t, J = 3,20 Hz, 1 H), 7,12 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz. 1 H), 7,19 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,72 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,05 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,16 min.), EM m/z 708 (NH+).
15 Ejemplo 63: Preparación del Compuesto 63
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El Compuesto 63 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 58 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó ácido pirazin-2-carboxílico como material de partida, dando el Compuesto 63 (42,3,
rendimiento del 54%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,00-1,04 (m, 3 H), 1,05-1,09 (m, 1 H), 1,10 (s, 9 H), 1,15 20 (s, 1 H), 1,18-1,22 (m, 2 H), 1,43 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,17 (c, J = 8,65
Hz, 1 H), 2,37-2,42 (m, 1 H), 2,64 (dd, J = 13,73, 7,32 Hz, 1 H), 2,91-2,95 (m, 1 H), 3,88 (s, 3 H), 3,93 (d, J =
3,35 Hz, 1 H), 4,13 (dd, J = 11,90, 3,36 Hz, 1 H), 4,46 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,61 (dd, J = 10,07, 7,32 Hz, 1 H),
4,76 (s, 1 H), 4,80 (d, J = 7,63 Hz, 1 H), 4,88 (d, J = 7,93 Hz, 1 H), 5,09 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,27 (d, J =
17,09 Hz, 1 H), 5,77-5,83 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 6,85 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,08 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 25 7,23 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 8,85 Hz, 1 H), 7,90 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 8,57 (d, J = 1,53 Hz, 1 H), 8,73
(d, J = 2,44 Hz, 1 H), 8,81 (s, 1 H).
Ejemplo 64: Preparación del Compuesto 64
imagen2
A una mezcla de solución del producto de la etapa I del ejemplo 55 (70,0 mg, 0,108 mmol) y DIEA (41,8 mg, 0,323 mmol) en DCM (2 ml) se le añadió cloroformiato de bencilo (55,1 mg, 0,323 mmol). Después de agitar a ta durante 14 h, el disolvente se retiró y el producto se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el Compuesto 64 (26,9 5 mg, rendimiento del 31%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,00 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 1,02 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 1,04 (s, 9 H), 1,08-1,14 (m, 1 H), 1,16 (d, J = 6,71 Hz, 1 H), 1,18-1,22 (m, 2 H), 1,43 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,87 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,17-2,22 (m, 1 H), 2,30-2,35 (m, 1 H), 2,62 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,90-2,95 (m, 1 H), 3,88 (s, 3 H), 4,08 (dd, J = 11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,31 (s, 1 H), 4,43 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,55 (dd, J = 10,07, 7,32 Hz, 1 H), 4,74 (d, J = 12,21 Hz, 1 H), 4,81 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 4,89 (d, J = 5,79 Hz, 1 H), 5,10 (d, J = 9,16 Hz, 1 H),
10 5,16 (s, 1 H), 5,28 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,81 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,07 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,17 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,20 (d, J = 7,32 Hz, 2 H), 7,25 (t, J = 5,65 Hz, 3 H), 7,30-7,33 (m, 1 H), 7,34-7,37 (m, 2 H), 7,89 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,07 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,79 min.), EM m/z 748 (MH+).
imagen40
15 El Compuesto 65 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 64 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó cloroformiato de (+)-metilo como material de partida, dando el Compuesto 65 (28,8 mg, rendimiento del 36%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,72 (d, J = 6,71 Hz, 3 H), 0,80 (t, J = 5,80 Hz, 6H), 0,87 (d, J = 7,02 Hz, 4 H), 0,90-0,95 (m, 6 H), 0,98-1,02 (m, S H), 1,05 (s, 9 H), 1,07-1,12 (m, 2 H), 1,18-1,23 (m, 2 H), 1,32-1,38 (m, 3 H), 1,41 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,46-1,48 (m, 1 H), 1,63-1,71 (m, 5 H), 1,85 (dd, J = 7,93, 20 5,49 Hz, 1 H), 1,89-1,93 (m, 1 H), 2,00-2,03 (m, 1 H), 2,15 (c, J = 8,70 Hz, 1 H), 2,34-2,38 (m, 1 H), 2,61 (dd, J = 13,73, 7,33 Hz, 1 H), 2,89-2,93 (m, 1 H), 3,73 (s, 2 H), 3,92 (s, 3 H), 4,10 (dd, J = 11,60, 3,36 Hz, 1 H), 4,33 (s, 1 H), 4,41 (d, J = 11,29 Hz, 1 H), 4,46-4,52 (m, 1 H), 4,54 (dd, J = 9,76, 7,90 Hz, 1 H), 4,81 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 4,89 (m, 1 H), 5,08 (d, J = 1 1,60 Hz, 1 H), 5,26 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,77-5,81 (m, 1 H), 5,83 (d, J = 3,97 Hz, 1 H), 7,11 (dd, J = 11,29, 1,83 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 1,83 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J =
25 6,10 Hz, 1 H), 8,08 (d, J = 8,85 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 2,06 min.), EM m/z 796 (MH+).
Ejemplo 66: Preparación del Compuesto 66
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El Compuesto 66 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 64 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó cloroformiato de (-)-metilo como material de partida, dando el Compuesto 66 (26,9 mg, rendimiento del 31%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,35 (d, J = 6,41 Hz, 1 H), 0,51 (d, J = 6,71 Hz, 2 H), 0,68 5 (d, J = 6,71 Hz, 1,H), 0,73 (d, J = 7,02 Hz, 2 H), 0,77-0,82 (m, 4 H), 0,88-0,98 (m, 10 H), 1,0-1,03 (m, 2H), 1,05 (s, 9 H), 1,09-1,18 (m, 3H), 1,25-1,29 (m, 1 H), 1,3-1,41 (m, 3 H), 1,60-1,71 (m, 3 H), 1,82-1,89 (m, 3 H), 2,002,04 (m, J = 2,14 Hz, 1 H), 2,10 (c, J = 8,24 Hz, 1 H), 2,39-2,43 (m, 1 H), 2,61 (dd, J = 14,04, 7,32 Hz, 1 H), 2,87-2,91 (m, 1 H), 3,73 (s, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,13 (dd, J = 11,75, 3,51 Hz, 1 H), 4,22-4,27 (m, 2 H), 4,30 (s, 1 H), 4,39 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,48-4,55 (m, 1 H), 4,79 (d, J = 5,19 Hz, 1 H), 4,87 (d, J = 4,27 Hz, 1 H), 5,05 (d,
10 J = 10,07 Hz, 1 H), 5,22 (d, J = 16,79 Hz, 1 H), 5,78-5,85 (m, 2 H), 7,09 (dd, J = 9,16, 1,83 Hz, 1 H), 7,17 (d, J = 1,83 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H) 8,09 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 2,05 min.), EM m/z 796 (MH+).
imagen41
15 El Compuesto 67 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 64 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó dicarbonato de di-terc-amilo, dando el Compuesto 67 (35,3 mg, rendimiento del 41%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,78 (t, J = 7,17 Hz, 3 H), 0,89-0,95 (m, 6 H), 1,04 (s, 9 H), 1,005-1,09 (m, 3 H), 1,15 (s, 1 H), 1,22 (d, J = 12,51 Hz, 6 H), 1,40 (s, 2 H), 1,42-1,46 (m, 1 H), 1,48 (s, 3 H), 1,56-1,66 (m, 2 H), 1,78 (c, J = 7,63 Hz, 1 H), 1,84 (c, J = 7,53 Hz, 1 H), 1,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 2,22 (d, J = 8,55 Hz, 1 H), 2,27
20 2,31 (in, 1 H), 2,61 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,91-2,96 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,08 (d, J = 12,21 Hz, 1 H), 4,26 (d, J = 9,16 Hz, 1 H), 4,42 (d, J = 11,29 Hz, 1 H), 4,52 (t, J = 7,93 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 10,07 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,73-5,80 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 6,57 (d, J = 8,85 Hz, 1 H), 7,09 (d, J = 8,54 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,25 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,08 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,82 min.), EM m/z 728 (MH+)
25 Ejemplo 68: Preparación del Compuesto 68
imagen2
El Compuesto 68 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 64 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó cloroformiato de 2,2,2-tricloro-1,1-dimetilo como material de partida, dando el Compuesto 68 (30,5 mg, rendimiento del 37%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,99 (s, 9 H), 1,04 (s, 6 H), 1,085 1,09 (m, 3H), 1,23-1,26 (m, 3 H), 1,44 (s, 2 H), 1,46 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 1,71 (s, 2 H), 2,23-2,33 (m, 2 H), 2,602,64 (m, 1 H), 2,93-2,96 (m, 1 H), 3,70 (m, 1 H), 3,71 (s, 3 H), 3,93 (s, 3 H), 4,04-4,06 (m, 2 H), 4,27 (d. J = 9,16 Hz, 1 H), 4,41 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,57 (d, J = 10,98, 6,11 Hz, 1 H), 5,14 (d, J = 12,21 Hz, 1 H), 5,32 (d, J = 17,70 Hz, 1 H), 5,75-5,80 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,10 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,26 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 7,90 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,07 (d, J = 9,16 Hz, 1 H)); CL-EM (tiempo de retención:
10 1,95 min.), EM m/z 816 (MH+).
imagen42
A una mezcla de solución del producto de la etapa 1 del ejemplo 55 (102 mg, 0,149 mmol) y DIEA (48,2, 0,373
mmol) en THF (2 ml) se le añadió carbonato de N,N'-disucinimidilo (57,1 mg, 0,223 mmol). La suspensión resultante 15 se irradió en un microondas a 80 ºC durante 15 min. Después, se añadió una solución en suspensión de 1-metil
ciclopentóxido sódico que se preparó tratando una solución a 0 ºC de 1-metil ciclopentanol (149,2 mg, 1,49 mmol) en
THF (1 ml) con NaH (al 60% en aceite, 59,6 mg, 1,49 mmol) durante 15 min a ta. Después de agitar a ta durante 15
min, la reacción se inactivó con cloruro de amonio acuoso saturado (3 ml) y se extrajo con EtOAc (10 ml). Después,
la fase orgánica se pasó a través de una columna de celite Hydromatrix, se concentró y se purificó por HPLC prep. 20 de fase inversa, dando el Compuesto 69 (49,0 mg, 44%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,95-0,98 (m, 3 H), 0,99-1,01
(m, J = 12,51 Hz, 1 H), 1,03 (s, 9 H), 1,14-1,18 (m, 2 H), 1,30 (s, 3 H), 1,40-1,47 (m, 3 H), 1,50-1,56 (m, 3 H), 1,60
1,64 (m, 1 H), 1,76-1,81 (m, 1 H), 1,83-1,85 (m, 1 H), 2,10-2,19 (m, 1 H), 2,36-2,43 (m, 1 H), 2,63 (dd, J = 14,50, 7,17
Hz, 1 H), 2,86-2,90 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,09 (d, J = 12,51 Hz, 1 H), 4,25 (d, J = 1,53 Hz, 1 H), 4,43 (d, J = 10,99
Hz, 1 H), 4,51-4,55 (m, 1 H), 5,06 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 5,23 (d, J = 16,78 Hz, 1 H), 5,80-5,85 (m, J = 12,67, 12,67 25 Hz, 2 H), 7,09 (d, J = 8,55 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,24 (d, J = 5,49 Hz, 1 H), 8,07 (d, J = 9,16 Hz, 1 H)); CL-EM
(tiempo de retención: 1,87 min.), EM m/z 740 (MH+).
Ejemplo 70: Preparación del Compuesto 70
imagen2
El Compuesto 70 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 69 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó ciclopentanol como material de partida, dando el Compuesto 70 (85,1 mg, rendimiento
del 40%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,98 (s, 1 H), 1,00 (d, J = 4,88 Hz, 1 H), 1,03 (s, 9 H), 1,06-110 (m, 2
5 H), 1,24-1,29 (m, 3 H), 1,36-1,40 (m, 2 H), 1,44 (dd, J = 9,31, 5,04 Hz, 2 H), 1,57-1,62 (m, 5 H), 1,69-1,73 (m, 2
H), 1,88 (dd, J = 8,09, 5,65 Hz, 1 H), 2,22-29 (m, 2 H), 2,59-2,62 (m, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,07
(dd. J = 10,99, 2,44 Hz, 1 H), 4,29 (s, 1 H), 4,42 (dd, J = 12,51, 1,53 Hz, 1 H), 4,55 (dd, J = 9,77, 7,93 Hz, 1 H),
4,68-4,71 (m, 1 H), 4,81 (d, J = 8,55 Hz, 1 H), 4,89 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 5,13 (d, J = 10,68 Hz, 1 H), 5,30 (d, J =
16,48 Hz, 1 H), 5,73-5,78 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,12 (dd, J = 9,15, 1,83 Hz, 1 H), 7,20 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 10 7,27 (d, J = 5,80 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, J = 8,85 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención:
1,81 min.), EM m/z 726 (MH+).
imagen43
El Compuesto 71 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 69 con las siguientes modificaciones:
15 Modificaciones: Se usó ciclobutanol como material de partida, dando el Compuesto 71 (16,2 mg, rendimiento del 39%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,97 (s, 3 H), 1,03 (s, 9 H), 1,06-1,08 (m, 2 H), 1,17-1,22 (m, 3 H), 1,371,44 (m, 1 H), 1,82-1,85 (m, 1 H), 2,02-2,08 (m, 1 H), 2,15-2,21 (m, 1 H), 2,30-2,36 (m, 1 H), 2,49-2,54 (m, 0,4 H), 2,59-2,67 (m, 0,6 H), 2,90-2,94 (m, 1 H), 3,93 (s, 3H), 4,09 (dd, J = 8,09, 4,73 Hz, 1 H), 4,20 (d, J = 10,68 Hz, 0,4 H), 4,38 (d, J = 10,68 Hz, 0,6 H), 4,46 (dd, J = 10,22, 7,17 Hz, 0,4 H), 4,48-4,56 (m, 1 H), 5,07-5,11 (m,
20 1 H), 5,26 (d, J = 17,24 Hz, 0,4 H), 5,28 (d, J = 17,24 Hz, 0,6 H), 5,71-5,79 (m, 1 H),5,84 (s, 1H), 7,07 (dd, J = 8,39, 2,90 Hz, 1 H), 7,14 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 7,20 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (m, 1 H), 8,00 (d, J = 9,16 Hz, 0,4 H), 8,07 (d. J = 8,85 Hz, 0,6 H)); CL-EM (tiempo de retención: 1,25 min.), EM m/z 712 (MH+).
Ejemplo 72: Preparación del Compuesto 72
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El Compuesto 72 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 69 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó 2-fenil-2-propanol como material de partida, dando el Compuesto 72 (19,0 mg, rendimiento del 42%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,97 (m, 1 H), 1,03 (s, 9 H), 1,06-1,09 (m, 3 H), 1,16-1,22 5 (m, 4 H), 1,41-1,44 (m, 1 H), 1,57 (s, 3 H), 1,86 (t, J = 7,80 Hz, 1H), 2,14-2,18 (m, 1 H), 2,30-2,35 (m, 1 H), 2,572,61 (m, 1 H), 2,90-2,94 (m, 1 H), 3,92 (d, J = 4,27 Hz, 1 H), 3,94 (s, 3 H), 4,04 (dd, J = 10,99, 3,66 Hz, 1 H), 4,18 (s, 1 H), 4,24 (d, J = 10,99 Hz, 1 H), 4,52 (s, 1 H), 5,09 (d, J = 10,07 Hz, 1 H), 5,26 (d, J = 14,95 Hz, 1 H), 5,78-5,82 (m, 2 H), 7,07-7,12 (m, 2 H), 7,16-7,20 (m, 3 H), 7,23 (d, J = 5,19 Hz, 1 H), 7,29 (d, J = 7,02 Hz, 2 H), 7,84 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,03 (d, J = 9,46 Hz, 1 H)); CL-EM (tiempo de retención: 1,84 min.), EM m/z 776
10 (MH+).
imagen44
El Compuesto 73 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 69 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó 4-(trifluorometil)fenil dimetil carbinol como material de partida, dando el Compuesto 73
15 (22,1 mg, rendimiento del 45%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,91 (s, 1 H), 0,97-1,00 (m, J = 15,56 Hz, 4 H), 1,04 (s, 9 H), 1,07-1,10 (m, 2 H), 1,16-1,20 (m, 3 H), 1,30-1,31 (m, 1 H), 1,41 (dd, J = 9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,55 (d, J = 7,32 Hz, 6 H), 1,83-1,87 (m, 1 H), 2,11-2,14 (m, 1 H), 2,34-2,39 (m, 1 H), 2,57-2,62 (m, 1 H), 2,89-2,92 (m, J = 11,60, 4,27 Hz, 1 H), 3,92 (s, 2 H), 3,94 (s, 3 H), 4,02-4,05 (m, 1 H), 4,17 (s, 1 H), 4,26 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,53 (t, J = 8,85 Hz, 1 H), 5,07 (d, J = 10,07 Hz, 1 H), 5,24 (d, J = 18,01 Hz, 1 H), 5,78-5,83 (m, 2 H), 7,08
20 (d, J = 7,02 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,22 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,45 (dd, J = 13,74, 7,63 Hz, 3 H), 7,60 (d, J = 6,41 Hz, 1 H), 7,67 (d, J = 7,63 Hz, 1 H), 7,84 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,02 (d, J = 8,54 Hz, 1 H)); CL-EM (tiempo de retención: 1,92 min.), EM m/z 844 (MH+).
Ejemplo 74: Preparación del Compuesto 74
imagen2
A una mezcla de solución del producto de la etapa 1 del ejemplo 55 (70,0 mg, 0,108 mmol) y DIEA (41,8 mg, 0,323
mmol) en DCM (2 ml) se le añadió isocianato de t-butilo (32,0, 0,323 mmol). Después de agitar a ta durante una
noche, la reacción se concentró y se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el Compuesto 74 (42,3 mg,
5 rendimiento del 55%): RMN 1H (CD3OD, 500 Hz) δ 0,96-1,00 (m, 1 H) 1,04 (s, 9 H) 1,08-1,10 (m, 3 H) 1,19 (s, 9 H)
1,22-1,31 (m, 2 H) 1,30 (m, 1 H) 1,41 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H) 1,87 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz, 1 H) 2,20-2,29 (m, 2 H)
2,61 (dd, J = 14,04, 6,72 Hz, 1 H) 2,92-2,97 (m, 1 H) 3,92 (s, 3 H) 4,08 (dd, J = 11,60, 3,97 Hz, 1 H) 4,36 (s, 1 H)
4,47-4,52 (m, 2 H) 4,81 (d, J = 3,36 Hz, 1 H) 4,88 (d, J = 8,85 Hz, 1 H) 5,11 (dd, J = 10,22, 1,68 Hz, 1 H) 5,28 (dd, J
= 17,09, 1,53 Hz, 1 H) 5,72-5,76 (m, 1 H) 5,85 (s, 1 H) 7,08 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H) 7,18 (d, J = 2,14 Hz, 1 H) 10 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H) 7,88 (d, J = 6,10 Hz, 1 H) 8,12 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,70
min.), EM m/z 713 (MH+).
imagen45
El Compuesto 75 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 74 con las siguientes modificaciones:
15 Modificaciones: Se usó isocianato de cilopentilo como material de partida, dando el Compuesto 75 (38,5 mg, 49%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,92 (d, J = 7,63 Hz, 1 H) 0,96 (s, 9 H) 0,98-1,02 (m, 1 H) 1,05 (s, 9 H) 1,07-1,10 (m, 2 H) 1,21-1,25 (m, 3 H) 1,28-1,34 (m, 1H) 1,36-1,55 (m, 8 H) 1,58-1,65 (m, 13 H) 1,81 (m, 1 H) 1,88 (m, 6 H) 2,23 (dd, J = 18,01, 8,85 Hz, 1 H) 2,29 (m, 1 H) 2,59 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H) 2,94 (m, 1 H) 3,27 (d, J = 1,83 Hz, 1 H) 3,35 (d, J = 1,53 Hz, 1 H) 3,75 (m, 1 H) 3,92 (s, 3 H) 3,95 (d, J = 6,41 Hz, 1 H) 3,97 (s,
20 1 H) 4,09 (m, 2 H) 4,40 (s, 1 H) 4,45 (d, J = 11,90 Hz, 1 H) 4,52 (dd, J = 10,07, 7,02 Hz, 1 H) 4,81 (d, J = 7,02 Hz, 1 H) 4,89 (d, J = 7,02 Hz, H) 5,11 (m, 1 H) 5,29 (d, J = 17,40 Hz, 1 H) 5,75 (m, 1 H) 5,85 (s, 1 H) 7,11 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H) 7,18 (d, J = 2,44 Hz, 1 H) 7,25 (d, J = 5,80 Hz, 1 H) 7,88 (d, J = 6,10 Hz, 1 H) 7,95 (m, 1 H) 8,12 (d, J = 9,16 Hz, 1 H)); CL-EM (tiempo de retención: 1,67 min.), EM m/z 725 (MH+).
Ejemplo 76: Preparación del Compuesto 76
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A una mezcla de solución del producto de la etapa 1 del ejemplo 55 (70 mg, 0,102 mmol) y DIEA (33,0 mg, 0,255 mmol) en THF (2 ml) se le añadió carbonato de N,N'-disuccinimidilo (39,2 mg, 0,153 mmol). La suspensión resultante se irradió en un microondas a 80 ºC durante 15 min. Después, se trató con terc-amilamina (88,9 mg, 1,02 5 mmol). Después de agitar a ta 15 min, la reacción se concentró y se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el Compuesto 76 (51 mg, 69%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,76 (t, J = 7,48 Hz, 4 H), 0,97 (s, 1 H), 1,04 (s, 9 H), 1,13 (s, 6 H), 1,22-1,25 (m, 2 H), 1,41 (dd, J = 9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,53 (dd, J = 13,89, 7,48 Hz, 1 H), 1,58-1,62 (m, 1 H), 1,87 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,20 (c, J = 8,65 Hz, 1 H), 2,27-2,31 (m, 1 H), 2,60 (dd, J = 13,73, 7,32 Hz, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,08 (dd, J = 11,75, 3,81 Hz, 1 H), 4,36 (s, 1 H), 4,46 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,50
10 (dd, J = 10,22, 7,17 Hz, 1 H), 5,10 (dd, J = 10,22, 1,37 Hz, 1 H), 5,27 (dd, J = 16,94, 1,07 Hz, 1 H), 5,73-5,77 (m, 1 H), 5,84 (t, J = 3,51 Hz, 1 H), 7,09 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 8,11 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,753 min.), EM m/z 727 (MH+).
imagen46
15 El Compuesto 77 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 76 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó terc-butil metilamina como material de partida, dando el Compuesto 77 (160,7 mg, rendimiento del 74%): RMN 1H(CD3OD, 500 Hz) δ 0,96-1,10 (m, 1 H), 1,06 (s, 9 H), 1,08-1,12 (m, J = 5,80 Hz, 3 H), 1,26 (s, 9 H), 1,46 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,87 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,21 (c, J = 8,75 Hz, 1 H), 2,26-2,31 (m, 1 H), 2,57-2,62 (m, 1 H), 2,86 (s, 3 H), 2,91-2,95 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,09 (dd, J = 11,90, 3,66
20 Hz, 1 H), 4,43 (s, 1 H), 4,46 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,52 (dd, J = 10,68, 7,02 Hz, 1 H), 5,11 (dd, J = 10,22, 1,37 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,82 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,09 (dd, 7=9,16, 2,14 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, J = 8,85 Hz, 1 H)); CL-EM (tiempo de retención: 1,76 min.), EM m/z 727 (MH+).
Ejemplo 78: Preparación del Compuesto 78
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El Compuesto 78 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 76 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó clorhidrato de N,O-dimetilhidroxilamina como material de partida, dando el Compuesto
78 (62,1 mg, rendimiento del 60%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,99 (t, J = 6,10 Hz, 1 H), 1,07 (s, 1 H), 1,22
5 1,26 (m, J = 3,97 Hz, 2 H), 1,47 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz, 1 H), 2,22 (d, J = 8,54
Hz, 1 H), 2,3-30-2,33 (m, 1 H), 2,60 (dd, J = 13,43, 7,02 Hz, 1 H), 2,92 (s, 3 H), 2,93-2,96 (m, 1 H), 3,66 (s, 3 H),
3,92 (s, 3 H), 4,12 (dd, J = 11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,34 (d, J = 12,21 Hz, 1 H), 4,44 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 4,54 (dd,
J = 10,53, 6,87 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,83 (m, 1 H), 5,86 (t, J =
3,97 Hz, 1 H), 6,70 (d, J = 9,77 Hz, 1 H), 7,13 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, J 10 = 6,10 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,07 (d, J = 9,16 Hz, 1 H) ); CL-EM (tiempo de retención: 1,59 min.),
EM m/z 701 (MH+).
imagen47
El Compuesto 79 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 76 con las siguientes modificaciones:
15 Modificaciones: Se usó dietilamina como material de partida, dando el Compuesto 79 (56,5 mg, rendimiento del 54%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,03 (c, J = 15,6 Hz, 4 H), 1,06 (d, J = 1,53 Hz, 9 H), 1,05-1,10 (m, 3 H), 1,13-1,23 (m, 4 H), 1,46 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,86 (dd, J = 7,93, 5,30 Hz, 1 H), 2,17 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,32-2,36 (m, 1 H), 2,60 (dd, J = 14,04. 7,32 Hz, 1 H), 2,89-2,93 (m, 1 H), 3,16-3,24 (m, 4 H), 3,92 (s, 3 H), 4,14 (dd, J = 11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,37 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,51-4,55 (m, 2 H), 5,09 (d, J = 10,07 Hz, 1 H),
20 5,27 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,55 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 5,79-5,84 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,11 (dd, J = 8,85, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,08 (d, J = 9,16 Hz, 1 H) ); CL-EM (tiempo de retención: 1,68 min.), EM m/z 713 (MH+).
Ejemplo 80: Preparación del Compuesto 80
imagen2
El Compuesto 80 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 76 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó cloruro de amonio acuoso saturado como material de partida, dando el Compuesto 76 (12,2 mg, rendimiento del 32%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,00-1,03 (m, 3 H), 1,06 (s, 9 H), 1,20-1,25 (m, 2
5 H), 1,42 (dd, J = 9,31, 5,34 Hz, 1 H), 2,22 (d, J = 9,77 Hz, 1 H), 2,29-2,35 (m, 1 H), 2,59 (dd, J = 13,28, 6,87 Hz, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,14 (dd, J = 11,75, 4,12 Hz, 1 H), 4,38-4,43 (m, 1 H), 4,51 (dd, J = 9,92, 6,87 Hz, 1 H), 5,11 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 5,28 (d, J = 17,70 Hz, 1 H), 5,72-5,79 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,15 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,17 (d, J = 2,75 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 7,87 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 8,85 Hz, 1 H)); CL-EM (tiempo de retención: 1,43 min.), MS m/z 657 (MH+).
10 Ejemplo 81: Preparación del Compuesto 81
imagen2
El Compuesto 81 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 76 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó terc-octilamina como material de partida, dando el Compuesto 81 (16,1 mg,
rendimiento del 48%): RMN 1H (CD3OD, 500 Hz) δ 0,88 (s, 9 H), 1,00 (d, J = 9,77 Hz, 5 H), 1,04 (s, 9 H), 1,17 15 (s, 3 H), 1,18-1,20 (m, 1 H), 1,21 (s, 3 H), 1,35 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 1,40-1,43 (m, 1 H), 1,57 (d, J = 14,95 Hz, 1
H), 1,67 (d, J = 14,65 Hz, 1 H), 1,85 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,15 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 2,34-2,43 (m, 1 H),
2,60 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,89-2,93 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,13 (dd, J = 11,60, 3,97 Hz, 1 H), 4,38 (s, 1
H), 4,43 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,50 (dd, J = 9,77, 7,32 Hz, 1 H), 5,07 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,24 (d, J = 17,09
Hz, 1 H), 5,75-5,81 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,09 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,17 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,23 (d, J 20 = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 9,16 Hz, 1 H) ); CL-EM (tiempo de retención: 1,92 min.),
EM m/z 769 (MH+).
Ejemplo 82: Preparación del Compuesto 82
imagen2
El Compuesto 82 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 76 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó 1-(4-fluorofenil)-2-metil-2-propilamina como material de partida, dando el Compuesto 82 (14,8 mg, rendimiento del 42%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,88 (s, 9 H), 1,00 (d, J = 9,46 Hz, 6 H), 1,04 5 (s, 9 H), 1,17 (s, 3 H), 1,21 (s, 3 H), 1,32-1,37 (m, 2 H), 1,39-1,43 (m, 1 H), 1,57 (d, J = 14,65 Hz, 1 H), 1,67 (d, J = 14,96 Hz, 1 H), 1,82-1,86 (m, 1 H), 2,15 (t, J = 9,46 Hz, 1 H), 2,33-2,43 (m, 2 H), 2,58-2,62 (dd, J = 14,50, 7,78 Hz, 1 H), 2,89-2,93 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,12 (dd, J = 11,90, 3,97 Hz, 1 H), 4,38 (s, 1 H), 4,43 (d, J = 12,82 Hz, 1 H), 4,49-4,52 (m, 1 H), 5,24 (d, J = 16,48 Hz, 1 H), 5,76-5,82 (m, 1 H), 5,83-5,85 (m, 1 H), 7,09 (dd, J = 9,00, 2,59 Hz, 1 H), 7,17 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d,
10 J = 9,16 Hz, 1 H)); CL-EM (tiempo de retención: 1,40 min.), EM m/z 807 (MH+).
imagen48
El Compuesto 83 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 76 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó cumilamina como material de partida, dando el Compuesto 83 (64,6 mg, rendimiento
15 del 57%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,87-0,91 (m, 1 H), 0,98 (d, J = 9,46 Hz, 2 H), 1,01 (s, 9 H), 1,02-1,05 (m, 1 H), 1,17-1,21 (m, 3 H), 1,29 (s, 2 H), 1,40 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,51 (d, J = 3,05 Hz, 5 H), 1,85 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,17 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,30-2,33 (m, 1 H), 2,58 (dd, J = 13,58, 7,48 Hz, 1 H), 2,912,94 (m, 1 H), 3,92 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,05 (dd, J = 11,60, 3,66 Hz, 1 H), 4,32 (d, J = 9,77 Hz, 1 H), 4,51 (dd, J = 9,92, 7,17 Hz, 1 H), 5,09 (dd, J = 11,59, 1,52 Hz, 1 H), 5,27 (dd, J = 16,71, 1,22 Hz, 1 H), 5,74
20 5,78 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,05-7,09 (m, 1 H), 7,18 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 7,33 Hz, 1 H), 7,22 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,33 (d, J = 7,63 Hz, 1 H), 7,84 (d, J = 5,80 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,76 min.), EM m/z 775 (MH+).
Ejemplo 84: Preparación del Compuesto 84
imagen2
A una solución del producto de la etapa 5 del ejemplo 11 (77,0 mg, 0,136 mmol), DIEA (70,4 mg, 0,544 mmol) y HATU (77,5 mg, 0,204 mmol) se le añadió Boc-Melle-OH (43,4 mg, 0,177 mmol). Después de agitar a ta durante 14 h, la mezcla de reacción se lavó con NaHCO3 acuoso al 5% (1 ml). La fase acuosa se extrajo con 2 x 2 ml de DCM. 5 La fase orgánica combinada se lavó con ácido cítrico acuoso al 5% (2 ml) y salmuera, se secó sobre MgO4 se concentró y se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2 97:3 de DCM:MeOH), dando el Compuesto 84 (68,4 mg, rendimiento del 69%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,89 (t, J = 7,32 Hz, 3 H) 0,94 (dd, J = 5,95, 4,43 Hz, 3 H) 1,07 (d, J = 7,.63 Hz, 3 H) 1,13 (s, 5 H) 1,16-1,20 (m, J = 4,88 Hz. 2 H) 1,23 (s, 3 H) 1,28 (m, 1 H) 1,34-1,38 (m, 1 H) 1,41-1,47 (m, 1 H) 1,55-1,60 (m, J = 7,63 Hz, 1 H) 1,87-1,91 (m, 1 H) 2,22-2,26 (m, 2 H) 2,36-2,38 (m, 1 H)
10 2,56-2,62 (m, 1 H) 2,81 (d, J = 11,30 Hz, 2 H) 2,94-2,99 (m, 1 H) 3,92 (s, 3 H) 4,05-4,12(m, 2 H) 4,48-4,57 (m, 2 H) 5,12 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 5,32 (m, 1 H) 5,75-5,82 (m, 1 H) 5,84-5,88 (m, 1 H) 7,09-7,13 (m, 1 H) 7,16-7,20 (m, 1 H) 7,23-7,27 (m, 1 H) 7,88 (dd, J = 5,95, 2,29 Hz, 1 H) 8,04 (d, J = 9,16 Hz, 0,6 H) 8,09 (d, J = 9,46 Hz, 0,4 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,83 min.), EM m/z 728 (MH+).
15
imagen49
El Compuesto 85 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 84 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó Boc-MeVal-OH como material de partida, dando el Compuesto 84 (72,1 mg, rendimiento del 74%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,84 (t, J = 5,80 Hz, 3 H), 0,96 (d, J = 6,41 Hz, 3 H), 1,08 (d, J = 7,32 Hz, 2 H), 1,13 (s, 6 H), 1,16 (s, 4 H), 1,18-1,21 (m, 1 H), 1,23-1,29 (m, 1 H), 1,44 (dd, J = 9,61, 5,34 20 Hz, 1 H), 1,88-1,92 (m, 1 H), 2,24 (d, J = 10,07 Hz, 1 H), 2,32-2,39 (m, 2 H), 2,58 (dd, J = 13,89, 6,26 Hz, 1 H), 2,80 (s, 3 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,01 (dd, J = 11,90, 3,36 Hz, 0,6 H), 4,12 (dd, 7=1 1,90, 3,66 Hz, 0,4 H), 4,16 (d, J = 11,29 Hz, 0,6 H), 4,38 (d, J = 10,99 Hz, 0,4 H), 4,45 (d, J = 10,68 Hz, 1 H), 4,47 (d, J = 10,69 Hz, 0,6 H), 4,53 (dd, J = 10,38, 7,02 Hz, 0,4 H), 4,58 (dd, J = 10,07, 7,02 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 4,28, 0,6 H), 5,14 (d, J = 4,27 Hz, 0,4 H), 5,30 (d, J = 7,32 Hz, 0,6 H), 5,34 (d, J = 7,32 Hz, 0,4 H), 5,78-5,85 (m, 1 H), 5,88 (t, J =
25 3,05 Hz, 0,6 H), 5,96 (t, J = 3,97 Hz, 0,4 H), 7,13 (dd, J = 9,00, 2,29 Hz, 0,6 H), 7,16 (dd, J = 9,46, 2,44 Hz, 0,4 H), 7,19 (m, 1 H), 7,24 (d, J = 6,10 Hz, 0,6 H), 7,26 (d, J = 6,10 Hz, 0,4 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,02 (d, J = 9,16 Hz, 0,6 H) 8,05 (d, J = 9,16 Hz, 0,4 H).
Ejemplo 86: Preparación del Compuesto 86
imagen2
Se preparó el Compuesto 86 por el mismo procedimiento que el Compuesto 84 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó Boc-MeLeu-OH como material de partida, dando el Compuesto 85 (56,5 mg,
rendimiento del 57%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,94-0,96 (m, 6 H), 1,04-1,13 (m, 2 H), 1,17 (s,4,5 H), 1,18
5 (s, 4,5 H), 1,26-1,31 (m, 1 H), 1,42 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,46-1,51 (m, 2 H), 1,56-1,60 (m, 0,5 H), 1,69
1,72 (m, 0,5 H), 1,75-1,81 (m, 0,5 H), 1,90 (c, J = 7,50 Hz, 1 H), 2,27 (dd, J = 13,89, 7,78 Hz, 1 H), 2,32-2,38 (m,
1 H), 2,58 (dd, J = 14,80, 7,48 Hz, 1 H), 2,75 (s, 3 H), 2,95-2,99 (m, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,03 (d, J = 12,21 Hz, 1
H), 4,11-15 (m, 0,5 H), 4,28 (d, J = 12,21 Hz, 1 H), 4,53 (t, J = 8,50 Hz, 0,5 H), 4,59 (t, J = 8,55 Hz, 0,5 H), 4,83
4,87 (m, J = 6,41 Hz, 0,5 H), 4,96 (m, 0,5 H), 5,14 (dd, J = 11,14, 4,73 Hz, 1 H), 5,32 (dd, J = 17,70, 6,41 Hz, 1 10 H), 5,75-5,82 (m, 1 H), 5,90 (s, 0,5 H), 5,92 (s, 0,5 H), 7,13-7,18 m, 1 H), 7,20 (s, 1 H), 7,25-7,27 (m, 1 H), 7,87
(t, J = 4,40 Hz, 1 H) 8,05 (d, J = 8,85 Hz, 1 H).
imagen50
El Compuesto 87 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 84 con las siguientes modificaciones:
15 Modificaciones: Se usó Boc-MeNle-OH como material de partida, dando el Compuesto 87 (82,3 mg, rendimiento del 83%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,90-0,96 (c, J = 7,63 Hz, 3 H) 1,05-1,10 (m, 2 H) 1,18 (s, 4,5 H) 1,20 (s, 4,5 H) 1,24-1,30 (m, 3 H) 1,31-1,38 (m, 1 H) 1,42 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 2 H) 1,72-1,81 (m, 2 H) 1,88-1,92 (m, 1 H) 2,22-2,29 (m, 1 H) 2,32-2,38 (m, 1 H) 2,58 (dd, J = 13,89, 7,17 Hz, 1 H) 2,72 (s, 3 H) 2,942,99 (m, 1 H) 3,93 (s, 3 H) 4,02 (dd, J = 9,77, 4,27 Hz, 1 H) 4,12 (dd, J = 11,90, 3,35 Hz, 0,5 H) 4,24 (dd, J =
20 11,90, 0,6 Hz, 0,5 H) 4,51-4,60 (m, 1 H) 5,14 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) 5,33 (dd, J = 17,24, 4,73 Hz, 1 H) 5,75-5,82 (m, 1 H) 5,91 (s, 1 H) 7,15 (dd, J = 14,34, 7,63 Hz, 1 H) 7,20 (d, J = 2,44 Hz, 1 H) 7,25 (d, J = 5,80 Hz, 1 H) 7,87 (t, J = 4,37 Hz, 1 H) 8,05 (d, J = 8,85 Hz, 1 H).
Ejemplo 88: Preparación del Compuesto 88
imagen2
El Compuesto 88 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 84 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó Boc-N-Me-NVa-OH como material de partida, dando el Compuesto 88 (70,5 mg, rendimiento del 73%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,96 (d, J = 6,41 Hz, 3 H) 1,06-1,10 (m. 2 H) 1,18 (s, 9 H)
5 1,27-1,30 (m, 4 H) 1,42 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H) 1,66-1,80 (m, 2 H) 1,88-1,92 (m, 1 H) 2,23-2,29 (m, 1 H) 2,30-2,37 (m, 1 H) 2,58 (dd, J = 13,58, 7,17 Hz, 1 H) 2,73 (s, 3 H) 2,94-2,98 (m, 1 H) 3,93 (s. 3 H) 4,00-4,04 (m, 1 H) 4,12 (d, J = 12,82 Hz, 0,5 H) 4,25 (d, J = 12,21 Hz, 0,5 N) 4,51-4,60 (m, 1 H) 5,13 (d, J = 10,68 Hz, 1 H) 5,32 (d, J = 17,09 Hz, 1 H) 5,75-5,81 (m, 1 H) 5,90 (s, 1 H) 7,13-7,18 (m, 1 H) 7,20 (d, J = 2,14 Hz, 1 H) 7,25 (d, J = 5,80 Hz, 1 H) 7,87 (s, 1 H) 8,05 (d, J = 9,16 Hz, 1 H).
10 Ejemplo 89: Preparación del Compuesto 89
imagen2
A una solución del producto de la 5 del ejemplo 11 (66,0 mg, 0,123 mmol), DIEA (63,7 mg, 0,492 mmol) y HATU (70,0, 0,184 mmol) se añadió ácido 2S-terc-butoxicarbonilamino-3-hidroxi-3-metil-butírico (34,0 mg, 0,147 mmol). Después de agitar a ta durante 14 h, la mezcla de reacción se lavó con NaHCO3 acuoso al 5% (1 ml). La fase 15 acuosa se extrajo con 2 x 2 ml de DCM. La fase orgánica combinada se lavó con ácido cítrico acuoso al 5% (2 ml) y salmuera, se secó sobre MgO4, se concentró y se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el Compuesto 89 (36,1 mg, rendimiento del 41%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 1,07 (d, J = 7,93 Hz, 2 H), 1,18 (s, 1 H), 1,20 (s. 9 H), 1,24-1,27 (m. J = 11,60 Hz, 3 H), 1,30 (s, 3 H), 1,43-1,48 (m, 10 H), 1,59 (s, 1 H), 1,65 (s, 1 H), 1,87 (dd, J = 8,24, 5,19 Hz, 1 H), 2,24 (c, J = 9,16 Hz, 1 H), 2,33-2,36 (m, 1 H), 2,63 (dd, J = 12,97, 6,56 Hz, 1 H), 2,94-2,99 (m, 1 H),
20 3,92 (s, 3 H), 3,93 (s, 1 H), 4,12 (dd. J = 11,60, 3,05 Hz, 1 H), 4,27-4,31 (m, 1 H), 4,54 (t, J = 9,77 Hz, 1 H), 5,12 (dd, J = 10,53, 1,37 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,79-5,83 (m. 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,11 (dd, J = 8,55, 1,83 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,24 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,49 Hz, 1 H), 7,88 (m, 1 H), 8,10 (d, J = 8,85 Hz, 1 H)); CL-EM (tiempo de retención: 1,637 min.), EM m/z 716 (MH+).
Ejemplo 91: Preparación del Compuesto 91
imagen2
El Compuesto 91 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 89 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó Boc-L-Thr-OH se usó como material de partida, dando el Compuesto 91 (80,5 mg, rendimiento del 66%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,93 (dd, J = 8,24, 2,14 Hz, 2 H), 1,08-1,18 (m, 4 H), 1,20 5 (d, J = 6,10 Hz, 3 H), 1,29 (s, 9 H), 1,32 (dd, J = 9,61, 5,04 Hz, 1 H), 1,45 (d, J = 4,27 Hz, 1 H), 1,84 (dd, J = 7,63, 5,19 Hz, 1 H), 2,15 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,42-2,48 (m, 1 H), 2,64 (dd, J = 14,04, 7,63 Hz, 1 H), 2,85-2,89 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,1-4,14 (m, 2 H). 4,30 (d, J = 4,88 Hz, 1 H), 4,38 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,60 (t, J = 8,55 Hz, 1 H), 5,04 (dd, J = 10,22, 1,68 Hz, 1 H), 5,80-5,84 (m, 2 H), 7,11 (d, J = 9,16 Hz, 1 H), 7,17 (d, J = 1,83 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 8,85 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de
10 retención: 1,560 min.), EM m/z 702 (MH+).
imagen51
El Compuesto 92 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 89 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó Boc-L-Thr(Me)-OH como material de partida, dando el Compuesto 92 (47,1 mg,
15 rendimiento del 69%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,95 (d, J = 4,27 Hz, 2 H), 1,11-1,16 (m, 3 H), 1,18 (d, J = 6,10 Hz, 6 H), 1,32 (s, 9 H), 1,38 (dd, J = 9,31, 5,04 Hz, 1 H), 1,45 (s, 1 H), 1,85 (dd, J = 7,78, 5,04 Hz, 1 H), 2,13 (d, J = 9,15 Hz, 1 H), 2,46-2,51 (m, 1 H), 2,63 (dd, J = 14,19, 7,78 Hz, 1 H), 2,81-2,91 (m, 1 H), 3,68-3,73 (m, 1 H), 3,92 (s, 4 H), 4,14 (d, J = 12,21 Hz, 1 H), 4,35 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 4,42 (d, J = 11,29 Hz, 1 H), 4,60 (t, J = 8,70 Hz, 1 H), 5,05 (d, J = 10,68 Hz, 1 H), 5,24 (dd, J = 16,79, 0,92 Hz, 1 H), 5,81-5,85 (m, 2 H), 7,11 (dd, J
20 = 9,16, 0,92 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,11 (d, J = 8,55 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,660 min.), EM m/z 716 (MH+).
Ejemplo 93: Preparación del Compuesto 93
imagen2
El Compuesto 93 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 89 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó Boc-L-Thr(tBu)-OH como material de partida, dando el Compuesto 93 (52,7 mg, rendimiento del 53%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 1,09 (dd, J = 8,24, 2,44 Hz, 2 H), 1,201,24,(m, 3 H), 1,28 (s, 5 9 H), 1,45 (s, 9 H), 1,89 (dd, J = 7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,25 (c, J = 8,34 Hz, 1 H), 2,32-2,36 (m, 1 H), 2,59 (dd, J = 12,82, 6,41 Hz, 1 H), 2,95-3,00 (m, 1 H), 3,71 (s, 2 H), 3,92 (s, 3 H), 3,93-3,99 (m, 1 H), 4,10 (d, J = 7,02 Hz, 1 H), 4,15 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,22 (dd, J = 6,10, 2,44 Hz, 2 H), 4,40 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,54 (dd, J = 10,01, 6,71 Hz, 1 H), 5,13 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,31 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,76-5,83 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 6,06 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 6,36 (d, J = 7,02 Hz, 1 H), 7,11 (d, J = 8,85 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,24 (d, J = 5,49 Hz, 1 H),
10 7,88 (m, 1 H), 8,08 (d, J = 9,16 Hz, 1 H).
imagen52
El Compuesto 94 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 89 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó ácido Boc-(2S,3S)-2-amino-3-metoxibutanoico como material de partida, dando el
15 Compuesto 94 (150,2 mg, rendimiento del 80%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ1,04-1,13 (m, 3 H), 1,17 (d, J = 6,10 Hz, 3 H), 1,20-1,24 (m, 2 H), 1,27 (s, 9 H). 1,44-1,48 (m, 2 H), 1,86 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,24 (c, J = 8,65 Hz, 1 H), 2,34-2,37 (m, 1 H), 2,61 (dd, J = 14,19, 7,17 Hz, 1 H), 2,94-2,99 (m, 1 H), 3,66 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,13 (dd, J = 12,36, 3,81 Hz, 1 H), 4,37 (dd, J = 22,58, 10,99 Hz, 2 H), 4,54 (dd, J = 10,38, 7,63 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 10,68 Hz, 1 H), 5,31 (d, J = 17,40 Hz, 1 H), 5,77-5,82 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,12 (d, J = 9,16 Hz, 1
20 H), 7,18 (s, 1 H), 7,25 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 8,85 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,673 min.), EM m/z 716 (MH+).
Ejemplo 95: Preparación del Compuesto 95
imagen2
Etapa 1
A una mezcla de H-allo-THr-OH (5,0 g, 41,98 mmol) y DIEA (10,9 g, 83,96 mmol) en DCM (150 ml) se le añadió dicarbonato de di-terc-butilo (13,7 g, 62,97 mmol). Después de agitar a ta durante 14 h, la mezcla de reacción se
5 lavó con 3 x 100 ml de DCM. La fase orgánica combinada se secó sobre MgSO4 y se concentró. El análisis por CL/EM que la mayor parte del producto permaneció en la fase de H2O. Por lo tanto, la fase de agua se concentró. El producto se purificó por a cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2, 90:10 de DCM:MeOH), dando Boc-allo-THr-OH; CL-EM (tiempo de retención: 0,727 min.), EM m/z 242 (MNa+).
Etapa 2
10 A una solución del producto de la etapa 5 del ejemplo 11 (100,0 mg, 0,174 mmol), DIEA (67,6 mg, 0,522 mmol) y HATU (106,0 mg, 0,278 mmol) se añadió el producto de la etapa 1 anterior (57,3 mg, 0,262 mmol). Después de agitar a ta durante 3 h, la mezcla de reacción se lavó con NaHCO3 acuoso al 5% (1 ml). La fase acuosa se extrajo con 2 x 2 ml de DCM. La fase orgánica combinada se lavó con ácido cítrico acuoso al 5% (2 ml) y salmuera, se secó sobre MgO4, se concentró y se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el Compuesto 95 (39,1 mg,
15 rendimiento del 32%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 1,02 (d, J = 8,55 Hz, 1 H), 1,18-1,23 (m, 3 H), 1,25 (s, 9 H), 1,38 (dd, J = 9,15, 6,30 Hz 1 H), 1,84 (dd, J = 7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,19-2,24 (m, 1 H), 2,38-2,43 (m, 1 H), 2,65 (dd, J = 14,19, 6,87 Hz, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 3,93 (s, 2 H), 4,16-4,19 (m, 1 H), 4,23 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 4,44 (d, J = 12,21 Hz, 1 H), 4,57-5,81 (m, 1 H), 5,09 (d, J = 10,68 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,81 (m, 1 H), 5,83-5,85 (m, 1 H), 7,11 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 1,83 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 6,41 Hz, 1 H), 7,88 (d, J =
20 5,80 Hz, 1 H), 8,11 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,583 min.), EM m/z 702 (MH+).
imagen53
El Compuesto 96 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 95 con las siguientes modificaciones: Modificaciones:
Etapa 1
Se usó clorhidrato del ácido (2S,3S)-2-amino-3-etoxibutanoico como material de partida en la etapa 1, dando ácido Boc-(2S,3S)-2-amino-3-etoxibutanoico; CL-EM (tiempo de retención: 1,067 min.), EM m/z 270 (M+Na+).
Etapa 2
5 Después, el producto de la etapa 1 se acopló de la misma manera con el producto de la etapa 5 del ejemplo 11, dando el Compuesto96 (55,3 mg, rendimiento del 44%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,94 (t, J = 6,87 Hz, 1 H), 0,97-1,03 (m, 2 H), 1,08-1,11 (m, 2 H), 1,13-1,15 (m, 2 H), 1,17 (d, J = 6,10 Hz, 6 H), 1,29 (s, 9 H), 1,41-1,45 (m, 3 H), 1,85 (dd, J = 7,48, 5,34 Hz, 1 H), 2,12-2,19 (m, 1 H), 2,43-2,49 (m, 1 H), 2,60 (dd, J = 13,73, 6,80 Hz, 1 H), 2,892,93 (m, 1 H), 3,50-3,57 (m, 2 H), 3,73-3,78 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,18 (d, J = 8,85 Hz, 1 H), 4,35 (d, J = 12,21 Hz, 1
10 H), 4,39 (d, J = 8,55 Hz, 1 H), 4,53 (t, J = 7,78 Hz, 1 H), 5,07 (d, J = 9,16 Hz, 1 H), 5,25 (d, J = 18,01 Hz, 1 H), 5,82 (t, J = 9,85 Hz, 1 H), 5,88 (t, J = 9,80 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 5,19 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,49 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 8,85 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,743 min.), EM m/z 730 (MH+).
imagen54
El Compuesto 97 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 95 con las siguientes modificaciones: Modificaciones: Etapa 1 Se usó H-allo-Thr(t-Bu)-OH como material de partida en la etapa I, dando ácido Boc-(2S,3S)-2-Amino-3
20 etoxibutanoico; CL-EM (tiempo de retención: 1,363 min.), EM m/z 298 (M+Na+). Etapa 2 Después, el producto de la etapa 1 se acopló de la misma manera con el producto de la etapa 5 del ejemplo 11,
dando el Compuesto 97 (48,2 mg, rendimiento del 37%): CL-EM (tiempo de retención: 1,820 min.), EM m/z 758 (MH+). 25 Ejemplo 99: Preparación del Compuesto 99
imagen2
El Compuesto 99 se preparó por el mismo procedimiento que la etapa 1 del Ejemplo 55 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: El Compuesto 84 se usó como material de partida, dando el Compuesto 99 (60,3 mg,
5 rendimiento del 98%): RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,00 (c, J = 7,12 Hz, 3 H) 1,10-113 (m, 5H) 1,20-1,31 (m, 3 H) 1,41 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H) 1,61-1,68 (m, 1 H) 1,92 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz, 1 H) 2,04-2,09 (m, 1 H) 2,28 (c, J = 8,55 Hz, 1 H) 2,34-2,39 (m, 1 H) 2,57 (s, 3 H) 2,64-2,70 (m, 1 H) 2,94-2,97 (m, 1 H) 3,93 (s, 3 H) 4,074,14 (dd, J = 12,05, 3,81 Hz, 1 H) 4,13 (d, J = 6,10 Hz, 1 H) 4,18 (d, J = 5,80 Hz, 1 H) 4,25 (d, J = 12,21 Hz, 1 H) 4,66-4,73 (m, 1 H) 5,15 (d, J = 10,68 Hz, 1 H) 5,32 (d, J = 17,09 Hz, 1 H) 5,70-5,79 (m, 1 H) 5,92 (t, J = 3,66
10 Hz, 0,4 H) 5,95 (t, J = 3,66 Hz, 0,6 H) 7,17 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H) 7,22 (d, J = 2,14 Hz, 1 H) 7,28 (dd, J = 5,80, 3,36 Hz, 1 H) 7,91 (dd, J = 5,80, 4,27 Hz, 1 H) 8,03 (d, J = 8,85 Hz, 0,6 H) 8,07 (d, J = 9,16 Hz, 0,4 H), CLEM (tiempo de retención: 1,33 min.), EM m/z 6,28 (MH+).
Ejemplo 100: Preparación del Compuesto 100
imagen2
15 A una solución del Compuesto 94 (0,600 g, 0,838 mmol) en DCE (3 ml) se le añadió TFA (3 ml). Después de agitar a ta durante 15 min, la mezcla de reacción se concentró. El aceite viscoso resultante se re-disolvió en DCE (5 ml) y se reconcentró. Después, se disolvió de nuevo en DCM (2 ml) y se trató con una solución de HCl 1 N en Et2O (10 ml). La suspensión resultante se enfrió a 0 ºC, se filtró al vacío, se lavó con Et2O y se secó en un horno de vacío, dando el producto en forma de una sal bis-clorhidrato como un sólido de color blanco (527,1 g, rendimiento del 91%):
20 RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,08-1,15 (m, 2 H), 1,21 (d, J = 6,71 Hz, 4 H), 1,28-1,33 (m, 1 H), 1,41 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,91 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz, 1 H), 2,28 (c, J = 8,65 Hz, 1 H), 2,34-2,37 (m, 1 H), 2,68 (dd, J = 13,12, 7,02 Hz, 1 H), 2,81 (s,3 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,45 (s, 3 H), 3,94 (s, 3 H), 3,96-4,00 (m, 1 H), 4,16 (dd, J = 11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,27 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,59 (d, J = 4,58 Hz, 1 H), 4,69 (dd, J = 10,07, 7,02 Hz, 1 H), 5,14 (dd, J = 10,53, 1,37 Hz, 1 H), 5,32 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,70-5,77 (m, 1 H), 5,94 (t, J = 3,66 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 9,16 Hz, 1
25 H), 7,24 (s, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,91 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,213 min.), EM m/z 616 (MH+).
Ejemplo 101: Preparación del Compuesto 101
imagen2
A una mezcla de solución del Compuesto 100 (80 mg, 0,116 mmol) y DIEA (31,5 mg, 0,244 mmol) en THF (2 ml) se le añadió carbonato de N,N'-disuccinimidilo (44,6 mg, 0,174 mmol). La suspensión resultante se irradió en un microondas a 80 ºC durante 15 min. Después, se trató con terc-amilamina (84,8 mg, 1,16 mmol). Después de agitar 5 a ta durante 15 min, la reacción se concentró y se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el Compuesto101 (65,1 mg, 79%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 1,03-1,08 (m, 3 H), 1,16 (d, J = 6,41 Hz, 3 H), 1,19 (s, 9 H), 1,21-1,25 (m, 2 H), 1,27 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 1,45 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,85 (dd, J = 8,24, 5,19 Hz, 1 H), 2,23 (c, J = 9,46 Hz, 1 H), 2,34-2,41, (m, 1 H), 2,61 (dd, J = 14,34, 7,32 Hz, 1 H), 2,94-2,97 (m, 1 H), 3,58-3,63 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,15 (dd, J = 12,05, 3,81 Hz, 1 H), 4,39 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,55 (dd, J = 9,92, 7,48 Hz, 1 H), 5,11 (d, J =
10 10,68 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 17,40 Hz, 1 H), 5,77-5,83 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,12 (dd, J = 9,00, 2,29 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,617 min.), EM m/z 715 (MH+).
Ejemplo 102: Preparación del Compuesto 102
imagen2
15 El Compuesto 102 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 101 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó terc-amilamina como material de partida, dando el Compuesto 102 (62,5 mg,
rendimiento del 74%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,77 (t, J = 7,48 Hz, 2 H), 0,84 (t, J = 7,48 Hz, 1 H), 1,04
1,08 (m, 2 H), 1,13 (d, J = 1,22 Hz, 9 H), 1,16 (d, J = 6,41 Hz, 3 H), 1,21 (s, 1 H), 1,22-1,28 (m, 2 H), 1,44 (dd, J 20 = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,52-1,57 (m, 1 H), 1,58-1,62 (m, 1 H), 1,85 (dd. J = 7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,21-2,25 (m, 1
H), 2,34-2,39 (m, 1 H), 2,61 (dd, J = 13,58, 7,17 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,59-3,64 (m, 1 H), 4,15 (dd, J =
11,75, 3,81 Hz, 1 H), 4,38 (d, J = 12,51 Hz, 1 H), 4,50 (d, J = 7,63 Hz, 1 H), 4,55 (dd, J = 9,92, 7,78 Hz, 1 H),
5,11 (d, J = 9,77 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 16,79 Hz, 1 H), 5,77-5,83 (m, 1 H), 5,86 (t, J = 4,73 Hz, 1 H), 7,12 (dd, J
= 8,85, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, J 25 = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,690 min.), EM m/z 729 (MH+).
Ejemplo 103: Preparación del Compuesto 103
imagen2
El Compuesto 103 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 101 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó ciclopentilamina como material de partida, dando el Compuesto 103 (56,4 mg,
5 rendimiento del 67%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 1,01-1,08 (m, 2 H), 1,07 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 1,16 (d. J = 6,10 Hz, 3 H), 1,21-1,25 (m, 3 H), 1,30-1,33 (m, 1 H), 1,44 (dd, J = 9,77, 5,19 Hz, 1 H), 1,51-1,56 (m, 2 H), 1,601,65 (m, 2 H), 1,71-1,75 (m, 1 H), 1,80-1,84 (m, 1 H), 1,86 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,20-2,25 (m, 1 H), 2,372,41 (m, 1 H), 2,61 (dd, J = 14,04, 7,32 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,60-3,65 (m, 1 H), 3,75-3,80 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,17 (dd, J = 12,05, 3,81 Hz, 1 H), 4,37 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,55-4,59 (m, 2 H), 5,10 (d, J = 11,60
10 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 16,48 Hz, 1 H), 5,78-5,83 (m, 1 H), 5,85 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,13 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,607 min.), EM m/z 727 (MH+).
Ejemplo 104: Preparación del Compuesto 104
imagen2
15 A una mezcla de solución del Compuesto 100 (80 mg, 0,116 mmol) y DIEA (31,5 mg, 0,244 mmol) en THF (2 ml) se le añadió carbonato de N,N'-disuccinimidilo (44,6 mg, 0,174 mmol). La suspensión resultante se irradió en un microondas a 80 ºC durante 15 min. Después, se añadió una solución en suspensión de ciclopentóxido sódico que se preparó tratando una solución a 0 ºC de ciclopentanol (110 mg, 1,28 mmol) en THF (1 ml) con NaH (al 60% en aceite, 46,4 mg, 1,16 mmol) a ta durante 15 min. Después de agitar a ta durante 15 min, la reacción se inactivó con
20 cloruro de amonio acuoso saturado (1 ml) y se extrajo con EtOAc (5 ml). Después, la fase orgánica se pasó a través de una columna de celite de Hydromatrix, se concentró y se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el Compuesto 104 (38,2 mg, 45%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 1,03-1,09 (m, 3 H), 1,16 (d, J = 6,10 Hz, 3 H), 1,201,25 (m, 1 H), 1,25-1,30 (m, J = 10,22, 5,34 Hz, 1 H), 1,40-1,45 (m, J = 10,83, 3,81 Hz, 1 H), 1,46 (dd, J = 9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,58-1,63 (m, 3 H), 1,70-1,75 (m, 2 H), 1,86 (dd, J = 7,63, 5,49 Hz, 1 H), 2,22-2,26 (m, 1 H), 2,34-2,39
25 (m. 1 H), 2,59-2,64 (m, 1 H), 2,94-2,98 (m, 1 H), 3,67 (dd, J = 7,78, 6,56 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,13 (dd. J = 10,83, 4,12 Hz, 1 H), 4,37-4,42 (m, 1 H), 4,56 (dd, J = 10,07, 7,32 Hz, 1 H), 4,71-4,76 (m, 1 H), 5,12 (d, J = 10,68 Hz, 1 H), 5,31 (d, J = 16,79 Hz, 1 H), 5,80 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,13 (d, J = 10,68 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 1,83 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, J = 9,16 Hz, 1 H),; CL-EM (tiempo de retención: 1,697 min.), EM m/z 728 (MH+).
30 Ejemplo 105: Preparación del Compuesto 105
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A una mezcla de solución del Compuesto 100 (80,0 mg, 0,116 mmol) y DIEA (31,5 mg, 0,244 mmol) en DCM (2 ml)
se le añadió dicarbonato de di-terc-amilo (57,1 mg, 0,232 mmol). Después de agitar a ta durante 14 h, el disolvente
se retiró y el producto se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el Compuesto 105 (62,5 mg, rendimiento
5 del 74%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,79 (t, J = 7,48 Hz, 3 H), 1,04-1,08 (m, 3 H), 1,17 (d, J = 6,10 Hz, 3 H), 1,19
1,23 (s, 3 H), 1,24 (s, 3 H), 1,39-1,43 (m, 1 H), 1,46 (dd, J = 9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,60-1,65 (m, 2 H), 1,86 (dd, J =
7,93, 5,49 Hz. 1 H), 2,22 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,35-2,40 (m, 1 H), 2,61 (dd, J = 14,04, 7,15 Hz, 1 H), 2,94-3,00 (m, 1
H), 3,64-4,00 (m, 1 H), 3,92 (s, 4 H), 4,14 (dd, J = 11,90, 3,05 Hz, 1 H), 4,35 (d, J = 7,93 Hz, 1 H), 4,40 (d, J = 11,90
Hz, 1 H), 4,55 (dd, 7=9,31,7,78 Hz, 1 H), 5,11 (d, J = 10,68 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 16,79 Hz, 1 H), 5,79-5,83 (m, 1 H), 10 5,85 (s, 1 H), 7,12 (d, J = 9,16 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,25 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,86-7,90 (m, 1 H), 8,09 (d, J = 9,16
Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,740 min.), EM m/z 730 (MH+).
Ejemplo 106: Preparación del Compuesto 106
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El Compuesto 106 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 105 con las siguientes 15 modificaciones:
Modificaciones: Se usó 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetil-etil éster de piridin-2-il éster del ácido como material de partida, dando el Compuesto 106 (58,1 mg, rendimiento del 65%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 1,04-1,08 (m, 3 H), 1,17 (d, J = 6,10 Hz, 3 H), 1,19,1,23 (m, 1 H), 1,23-1,27 (m, 1 H), 1,28 (s, 3 H), 1,46 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 2 H), 1,49 (s, 2 H), 1,86 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,21 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,36-2,40 (m, 1 H), 2,62 (dd, J =
20 13,74, 7,32 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,65-3,70 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,12 (dd, 7=11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,31 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 4,42 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,57 (dd, J = 10,07, 7,32 Hz, 1 H), 5,11 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 16,79 Hz, 1 H), 5,78-5,83 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,12 (dd, J = 9,00, 2,29 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 8,09 (d, J = 8,85 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,770 min.), EM m/z 770 (MH+).
25 Ejemplo 107: Preparación del Compuesto 107
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A una solución del producto de la etapa 3 del Ejemplo 25 (100,0 mg, 0,116 mmol), DIEA (62,5 mg, 0,483 mmol) y HATU (92,0 mg, 0,242 mmol) se le añadió Boc-allo-Thr-OH (43,5 mg, 0,177 mmol). Después de agitar a ta durante 3 h, la mezcla de reacción se lavó con NaHO3 acuoso al 5% (1 ml). La fase acuosa se extrajo con 2 x 2 ml de DCM. La 5 fase orgánica combinada se lavó con ácido cítrico acuoso al 5% (1 ml) y salmuera, se secó sobre MgO4 se concentró y se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el Compuesto 107 (62,5 mg, rendimiento del 52%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) 50,8-1,02 (m, 1 H), 1,04-1,08 (m, 2 H), 1,23-1,27 (m, 12 H), 1,42 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,86 (t. J = 6,26 Hz. 1 H), 2,23-2,27 (m, 1 H), 2,46-2,50 (m, 1H), 2,76 (dd, J = 14,04, 6,71 Hz, 1 H), 2,95-2,99 (m, 1 H), 3,94-3,98 (m, 1 H), 4,28 (d, J = 7,32 Hz, 2 H), 4,52 (d, J = 12,51 Hz, 1 H), 4,63 (t, J = 9,00 Hz, 1 H), 5,12 (d, J =
10 10,07 Hz, 1 H), 5,31 (d, J = 16,79 Hz, 1 H), 5,77-5,83 (m, 1 H), 6,09 (s, 1 H), 7,36-7-41 (m, 1 H), 7,47 (t, J = 7,17 Hz, 3 H), 7,52 (d, J = 7,63 Hz, 1 H), 7,70 (t, J = 7,17 Hz, 1 H), 7,85 (s, 1 H), 7,88 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 8,17 (d, J = 7,93 Hz, 2 H), 8,22 (d, J = 7,63 Hz, 1 H); CL-EM (tiempo de retención: 1,937 min.), EM m/z 748 (MH+).
Ejemplo 108: Preparación del Compuesto 108
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15 El Compuesto 108 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 107 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó ácido Boc-(2S,3S)-amino-3-metoxibutanoico como material de partida, dando el Compuesto 108 (75,1 mg, rendimiento del 51%): RMN 1H(CD3OD, 500 MHz) δ 0,80-1,02 (m, 4 H), 1,18 (d, J = 6,10 Hz, 3 H), 1,28 (s, 9 H), 1,44 (dd, J = 9,77, 1,30 Hz, 1 H), 1,45-1,50 (m, 1 H), 1,85-1,90 (m, 1 H), 2,14-2,18 (m, 1 H), 2,55-2,59 (m, 1 H), 2,72-2,76 (m, 1 H), 2,91-2,95,(m, 1 H), 3,34 (s, 3 H), 3,65-3,69 (m, 1 H), 4,32 (d, J
20 = 10,68 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 7,93 Hz, 1 H), 4,46 (d, J = 13,12 Hz, 1 H), 4,60 (t, J = 8,24 Hz, 1 H), 5,07 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 5,26 (d, J = 17,40 Hz, 1 H), 5,82-5,86 (m, 1 H), 6,08 (s, 1 H), 7,38 (dd, J = 7,32, 6,10 Hz, 1 H), 7,47 (t, J = 7,02 Hz, 3 H), 7,51 (d, 7=5,80 Hz, 1 H), 7,69 (t, J = 6,56 Hz, 1 H), 7,69 (t, J = 6,56 Hz, 1 H), 7,85 (s, 1 H), 7,88 (d, J = 7,63 Hz, 1 H), 8,18 (d, J = 8,24 Hz, 3 H), 8,21 (d, J = 9,16 Hz, 1 H): CL-EM (tiempo de retención: 1,973 min.), EM m/z 762 (MH+).
25 Ejemplo 109: Preparación del Compuesto 109
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El Compuesto 109 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 107 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó ácido Boc-(2S,3S)-amino-3-etoxibutanoico como material de partida, dando el
5 6,10 Hz, 6 H), 1,19 (s, 1 H), 1,19-1,24 (m, 1 H), 1,23-1,27 (m, J = 3,97 Hz, 1 H), 1,30 (s, 9 H), 1,44 (dd, J = 9,77,
5,50 Hz, 1 H), 1,46 (s, 1 H), 1,88 (dd, J = 7,78, 5,95 Hz, 1 H), 2,20-1,25 (m, 1 H), 2,49-2,54 (m, 1 H), 2,69-2,73
(m, 1 H), 2,93-2,97 (m, 1 H), 3,53-3,57 (m, 2 H), 3,75-3,80 (m, 1 H), 4,34 (dd, J = 11,75, 3,20 Hz, 1 H), 4,42 (t, J
= 8,30 Hz, 2 H), 4,57 (t, J = 8,09 Hz, 1 H), 5,11 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 17,40 Hz, 1 H), 5,78-5,83 (m,
1 H), 6,09 (s, 1 H), 7,38 (t, J = 7,32 Hz, 1 H), 7,47 (t, J = 7,63 Hz, 2 H), 7,52 (d, J = 7,02 Hz, 1 H), 7,70 (t, J = 10 7,93 Hz, 1 H), 7,86 (s, 1 H), 7,88 (d, J = 7,93 Hz, 1 H), 8,18 (d, J = 7,32 Hz, 2 H), 8,22 (d, J = 8,24 Hz, 1 H); CL
EM (tiempo de retención: 2,030 min.), EM m/z 776 (MH+).
Ejemplo 110: Preparación del Compuesto 110
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El Compuesto 110 se preparó por el mismo procedimiento que el Compuesto 89 con las siguientes modificaciones:
Modificaciones: Se usó Boc-L-Thr(Bn)-OH como material de partida, dando el Compuesto 110 (49,8 mg, rendimiento del 48%) ); CL-EM (tiempo de retención: 1,857 min.), EM m/z 792 (MH+).
Sección D: Ejemplo 120: Preparación del Compuesto 120
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Etapa 1:
Una solución del Compuesto 23 (véase Ejemplo 23) (1,50 g, 2,19 mmol) en DCM (50 ml) y ácido trifluoroacético (50
5 ml) se agitó durante 3 h a ta. La mezcla se concentró al vacío, dando un residuo viscoso y después se disolvió en 1,2-dicloroetano y se concentró de nuevo al vacío, dando el producto de sal de ácido bis-trifluoroacético en forma de un sólido vítreo de color blanquecino (cuantitativo). El material se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación.
Etapa 2:
10 A una solución del producto del Ejemplo 120, Etapa 1 (118 mg, 0,146 mmol) en 1,2-dicloroetano (3 ml) se añadió cloroformiato de p-tolilo (32,4 mg, 0,190 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (94,5 mg, 0,731 mmol). La mezcla se agitó a ta durante 72 h. La mezcla de reacción se lavó con una solución tampón de pH = 4 (3 x 3 ml) y los lavados se extrajeron de nuevo con 1,2-dicloroetano (3 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se concentraron al vacío. Después, el producto en bruto se disolvió en MeOH y se purificó por HPLC prep. de fase inversa, dando el compuesto del título (Compuesto 120) en forma de un sólido vítreo de color amarillo (64,2 mg, rendimiento del 61,1%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,06-1:10 (m, 3 H), 1,12 (s, 9 H), 1,24-1,28 (m, 2 H), 1,44 (dd, J = 9,31, 5,34 Hz, 1 H),
5 1,89 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,21-2,28 (m, 2 H), 2,31 (s, 3 H), 2,62-2,66 (m, 1 H), 2,93-2,99 (m, 1 H), 4,12 (dd, J = 11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,42 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,57 (dd, J = 10,22, 7,17 Hz, 1 H), 5,13 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,76 (ddd, J = 17,09, 9,77, 9,46 Hz, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 6,79 (d, J = 8,24 Hz, 2 H), 7,07 (d, J = 8,24 Hz, 2 H), 7,30 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 7,40 (t, J = 7,63 Hz, 1 H), 7,68 (t, J = 7,63 Hz, 1 H), 7,79 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 7,93 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,17 (d, J = 8,24 Hz, 1 H); MS m/z 718 (MH+).
10 Ejemplo 121: Preparación del Compuesto 121
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El Compuesto 121 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 120 con la excepción de que se usó cloroformiato de fenilo se usó en lugar de cloroformiato de p-tolilo en la etapa 2.
Etapa 2:
15 Modificaciones: Se usaron 30 mg (0,19 mmol) de cloroformiato de fenilo, se obtuvieron 89,0 mg del producto en forma de un sólido vítreo de color amarillo (rendimiento del 50%): MS m/z .704 (MH+).
Ejemplo 122: Preparación del Compuesto 122
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El Compuesto 122 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 120 con la excepción de que se usó 20 cloroformiato de 4-fluorofenilo en lugar de cloroformiato de p-tolilo en al etapa 2.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 33 mg (0,19 mmol) de cloroformiato de 4-fluorofenilo, se obtuvieron 83,1 mg del producto en forma de un aceite pegajoso amarillo (rendimiento del 78,8%): MS m/z 722 (MH+).
Ejemplo 123: Preparación del Compuesto 123
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El Compuesto 123 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 120 con la excepción de que se usó cloroformiato de 4-metoxifenilo en lugar de cloroformiato de p-tolilo en la etapa 2.
Etapa 2:
5 Modificaciones: Se usaron 35 mg (0,19 mmol) de cloroformiato de 4-metoxifenilo, se obtuvieron 70,2 mg del producto en forma de un sólido vítreo de color amarillo (rendimiento del 65,4%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,06-1,10 (m, 3 H), 1,11 (s, 9 H), 1,24-1,28 (m, 2 H), 1,44 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,89 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,24 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,31 (ddd, J = 13,81, 10,30, 3,97 Hz, 1 H), 2,62-2,66 (m, 1 H), 2,94-2,98 (m, 1 H), 3,77 (s, 3 H), 4,12 (dd, J = 11,60, 3,66 Hz, 1 H), 4,42 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,57 (dd, J = 10,07, 7,32 Hz, 1 H), 5,13 (d, J = 10,68 Hz, 1 H), 5,30
10 (d, 7=16,79 Hz, 1 H), 5,72-5,80 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 6,80 (d, J = 2,44 Hz, 4 H), 7,30 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,42 (t, J = 7,48 Hz, 1 H), 7,69 (t, J = 7,63 Hz, 1 H), 7,80 (d, J = 7,93 Hz, 1 H), 7,93 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,18 (d, J = 8,24 Hz, 1 H); MS m/z 734 (MH+).
Ejemplo 124: Preparación del Compuesto 124
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15 El Compuesto 124 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 120 con la excepción de que se usó 2-metoxietil éster del ácido clorofórmico en lugar de cloroformiato de p-tolilo la etapa 2.
Etapa 2:
Modificaciones: se usaron 26 mg (0,19 mmol) 2-metoxietil éster del ácido clorofórmico, se obtuvieron 87,4 mg de
producto en forma de un sólido pegajoso de color amarillo (rendimiento del 87,2%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,96-1,02 20 (m, 3 H), 1,05 (s, 9 H), 1,16-1,18 (m, 2 H). 1,40 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,85 (dd, J = 7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,15 (c,
J = 8,75 Hz, 1 H), 2,40 (ddd, J = 13,89, 10,07, 4,12 Hz, 1 H), 2,65 (dd, J = 13,58, 7,17 Hz, 1 H), 2,90 (ddd, J = 12,89,
8,16, 4,88 Hz, 1 H), 3,27 (s, 3 H), 3,36-3,44 (m, 2 H), 3,81-3,84 (m, 1 H), 3,92-3,96 (m, 1 H), 4,12 (dd, J = 1,60, 3,36
Hz, 1 H), 4,44 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,57 (dd, J = 9,46, 7,93 Hz, 1 H), 5,07 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,25 (d, J = 17,09
Hz, 1 H), 5,80 (ddd, J = 17,32, 9,77, 9,54 Hz, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 7,32 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,55 (t, J = 7,32 Hz, 1 H), 25 7,70 (t, J = 7,48 Hz, 1 H), 7,80 (d, J = 7,93 Hz, 1 H), 7,96 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,19 (d, J = 8,24 Hz, 1 H); MS m/z
686 (MH+).
Ejemplo 125: Preparación del Compuesto 125
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El Compuesto 125 se preparó siguiendo Esquema del Ejemplo 120 con la excepción de que se usó cloroformiato de neopentilo en lugar de cloroformiato de p-tolilo en la etapa 2.
5 Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 29 mg (0,19 mmol) de cloroformiato de neopentilo, se obtuvieron 57,4 mg de producto en forma de un sólido vítreo de color amarillo (rendimiento del 56,2%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,83 (s, 9 H), 1,05 (d, J = 2,44 Hz, 9 H), 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,23-1,27 (m, 2 H), 1,43-1,46 (m, 1 H), 1,87-1,90 (m, 1 H), 2,21-2,25 (m, 1 H), 2,29-2,33 (m, 1 H), 2,61-2,65 (m, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,42 (d, J = 10,07 Hz, 1 H), 3,56 (d, J = 10,07 Hz, 1 H),
10 4,09-4,11 (m, 1 H), 4,33 (d, J = 9,16 Hz, 1 H), 4,43 (d, J = 11,29 Hz, 1 H), 4,54-4,57 (m, 1 H), 5,12 (d, J = 10,07 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 17,40 Hz, 1 H), 5,73-5,80 (m, 1 H), 5,88 (s, 1 H), 7,33 (d, J = 5,49 Hz, 1 H), 7,53 (m, 1 H), 7,71 (t, J = 6,87 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 7,93 Hz, 1 H), 7,97 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,19 (d, J = 7,63 Hz, 1 H); MS m/z 698 (MH+).
Ejemplo 126: Preparación del Compuesto 126
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15 El Compuesto 126 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 120 con la excepción de que se usó cloroformiato de 2-fluoroetilo en lugar de cloroformiato de p-tolilo en la etapa 2.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 24 mg (0,19 mmol) de cloroformiato de 2-fluoroetilo, se obtuvieron 58,9 mg de producto en forma de sólido vítreo de color amarillo (rendimiento del 59,8%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,05 (d, J = 2,14 Hz, 9 H),
20 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,22-1,27 (m, 2 H). 1,42-1,45 (m, 1 H), 1,87-1,90 (m, 1 H), 2,24 (c, J = 8,75 Hz, 1 H), 2,28-2,33 (m, 1 H), 2,63 (dd, J = 13,43, 6,41 Hz, 1 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,92-4,10 (m, 3 H), 4,31-4,37 (m, 2 H), 4,42-4,46 (m, 2 H), 4,54-4,57 (m, 1 H), 5,12 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 17,09 Hz, 1 H). 5,71-5,79 (m, 1 H), 5,88 (s, 1 H), 7,33 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,55 (t, J = 7,17 Hz, 1 H), 7,71 (m, 1 H), 7,81 (d, J = 7,93 Hz, 1 H), 7,96 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,19 (d, J = 7,63 Hz, 1 H); MS m/z 674 (MH+).
25 Ejemplo 127: Preparación del Compuesto 127
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El Compuesto 127 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 120 con la excepción de que se usó 2cloroformiato de metoxifenilo en lugar de cloroformiato de p-tolilo en la etapa 2.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 35 mg (0,19 mmol) de cloroformiato de 2-metoxifenilo, se obtuvieron 97,6 mg de producto en forma de un aceite pegajoso de color amarillo (rendimiento del 91,0%): MS m/z 734 (MH+).
Ejemplo 128: Preparación del Compuesto 128
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El Compuesto 128 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 120 con la excepción de que se usó 10 cloroformiato de 2-(-)-(1R)-metilo en lugar de cloroformiato de p-tolil en la etapa 2.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 42 mg (0,19 mmol) de cloroformiato de (-)-(1R)-metilo, se obtuvieron 69,1 mg del producto en forma de un aceite vítreo de color amarillo (rendimiento del 61,7%): MS m/z 766 (MH+).
Ejemplo 129: Preparación del Compuesto 129
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El Compuesto 129 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 120 con la excepción de que se usó cloroformiato de hexilo en lugar de cloroformiato de p-tolilo en la etapa 2.
Etapa 2:
5 Modificaciones: Se usaron 31 mg (0,19 mmol) de cloroformiato de hexilo, se obtuvieron 66,7 mg del producto obtenido en forma de un aceite vítreo del color amarillo (rendimiento del 64,1%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,87-0,99 (m, 5 H), 1,05 (s, 9 H), 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,22-1,28 (m, 6 H), 1,43-1,48 (m, 3 H), 1,88 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz, 1 H), 2,24 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,28-2,33 (m, 1 H), 2,63 (dd, J = 14,34, 7,63 Hz, 1 H), 2,92-2,97 (m, 1 H), 3,72 (dt, J = 10,61, 6,60 Hz, 1 H), 3,81-3,86 (m, 1 H), 4,10 (dd, J = 11,60, 3,36 Hz, 1 H), 4,32 (d, J = 8,85 Hz, 1 H), 4,43 (d, J = 11,90 Hz, 1
10 H), 4,55 (dd, J = 9,77, 7,32 Hz, 1 H), 5,13 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,76 (ddd, J = 17,09, 10,07, 9,16 Hz, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 7,33 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,54 (t, J = 7,48 Hz, 1 H), 7,69-7,72 (m, 1 H), 7,81 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 7,97 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 8,20 (d, J = 8,24 Hz, 1 H); MS m/z 712 (MH+).
Ejemplo 130: Preparación del Compuesto 130 Etapa 1:
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Una solución del Compuesto 23 (véase Ejemplo 23) (1,50 g, 2,19 mmol) en DCM (50 ml) y ácido trifluoroacético (50 ml) se agitó durante 3 h a ta. La mezcla se concentró al vacío, dando un residuo viscoso y después se disolvió en
5 1,2-dicloroetano y se concentró de nuevo al vacío, dando el producto de sal de ácido bis-trifluoroacético deseado en forma de un sólido vítreo de color blanquecino (cuantitativo). El material se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación.
Etapa 2:
Una mezcla del producto de la etapa 1 (118 mg, 0,146 mmol), ácido terc-butil acético (22 mg, 0,19 mmol), HATU (72
10 mg, 0,19 mmol) y N-metilmorfolina (59 mg, 0,58 mmol) en 1,2-dicloroetano se agitó durante 24 h a ta. La mezcla de reacción se lavó con solución tampón a pH = 4 (3 x 3 ml) y los lavados se extrajeron de nuevo con 1,2-dicloroetano (3 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se concentraron al vacío. Después, el producto en bruto se disolvió en MeOH y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa, dando el compuesto del título (Compuesto 130) en forma de un sólido vítreo de color ligeramente amarillo (43,4 mg, rendimiento del 43,5%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,82 (d, J =
15 1,83 Hz, 9 H), 1,06 (d, J = 2,14 Hz, 9 H), 1,07-1,10 (m, 2 H), 1,22-1,28 (m, 2 H), 1,43-1,46 (m, 1 H), 1,87-1,90 (m, 1 H), 1,99 (d, J = 1,83 Hz, 2 H), 2,20-2,26 (m, 1 H), 2,27-2,33 (m, 1 H), 2,59-2,64 (m, 1 H), 2,93-2,97 (m, 1 H), 4,124,14 (m, 1 H), 4,42 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,51-4,55 (m, 1 H), 4,67 (dd, J = 9,31, 1,98 Hz, 1 H), 5,11-5,14 (m, 1 H), 5,29 (d, J = 17,40 Hz, 1 H), 5,72-5,80 (m, 1 H), 5,89 (d, J = 1,83 Hz, 1 H), 7,32 (dd, J = 5,80, 2,14 Hz, 1 H), 7,52-7,55 (m, 1 H), 7,69-7,72 (m, 1 H), 7,81 (d, J = 8,24 Hz. 1 H), 7,96 (dd, J = 5,80, 1,83 Hz, 1 H), 8,17 (d, J = 8,24 Hz, 1 H);
20 MS m/z 682 (MH+).
Ejemplos 131: Preparación del Compuesto 131
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El Compuesto 131 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 130 con la excepción de que se usó ácido metoxiacético en lugar de ácido terc-butil acético en la etapa 2.
Etapa 2:
5 Modificaciones: Se usaron 17 mg (0,19 mmol) de ácido metoxiacético, se obtuvieron 49,9 mg de producto en forma de un sólido vítreo de color ligeramente amarillo (rendimiento del 52,0%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,05-1,08 (m, 11 H), 1,24-1,26 (m, 2 H), 1,45 (ddd, J = 9,31, 5,34, 3,66 Hz, 1 H), 1,88 (ddd, J = 8,39, 5,19, 3,81 Hz, 1 H), 2,21-2,27 (m, 1 H), 2,29-2,35 (m, 1 H), 2,60-2,64 (m, 1 H), 2,91-2,97 (m, 1 H), 3,34 (d, J = 3,66 Hz, 3 H), 3,69 (dd, J = 15,26, 3,66 Hz, 1 H), 3,81-3,85 (m, 1 H), 4,15 (dt, J = 11,67, 3,62 Hz, 1 H), 4,35 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,55 (ddd, J = 10,30,
10 6,94, 3,20 Hz, 1 H), 4,66 (dd, J = 9,61, 3,5 Hz, 1 H), 5,11-5,14 (m, 1 H), 5,28-5,32 (m, 1 H), 5,73-5,81 (m, 1 H), 5,90 (d, J = 3,36 Hz, 1 H), 7,33 (dd, J = 5,65, 3,20 Hz, 1 H), 7,54-7,58 (m, 1 H), 7,69-7,73 (m, 1 H), 7,80-7,82 (m, 1 H), 7,95-7,97 (m, 1 H), 8,15 (dd, J = 8,39, 2,59 Hz, 1 H); MS m/z 656 (MH+).
Ejemplo 132: Preparación del Compuesto 132
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15 El Compuesto 132 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 130 con la excepción de que se usó ácido metoxipropiónico en lugar de ácido terc-butil acético en la etapa 2.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 20 mg (0,19 mmol) de ácido metoxipropiónico, se obtuvieron 50,0 mg de producto en
forma de un sólido vítreo de color amarillo (rendimiento del 51,1%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,06 (d, J = 1,83 Hz, 9 H), 20 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,23-1,27 (m, 2 H), 1,44 (ddd, J = 9,38, 5,26, 1,83 Hz, 1 H), 1,87-1,90 (m, 1 H), 2,21-2,27 (m, 1
H), 2,29-2,33 (m, 2 H), 2,40-2,46 (m, 1 H), 2,59-2,64 (m, 1 H), 2,92-2,97 (m, 1 H), 3,25 (d, J = 1,83 Hz. 3 H), 3,45
3,54 (m, 2 H), 4,12-4,16 (m, 1 H), 4,37 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,52-4,55 (m, 1 H), 4,65 (dd, J = 9,16, 1,83 Hz, 1 H),
5,12 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 17,40 Hz, 1 H), 5,72-5,80 (m, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 7,33 (dd, J = 5,65, 1,98 Hz,
1 H), 7,54-7,58 (m, 1 H), 7,69-7,73 (m, 1 H), 7,81 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 7,96 (dd, J = 6,10, 1,83 Hz, 1 H), 8,18 (d, J = 25 8,24 Hz, 1 H); MS m/z 670 (MH+).
Ejemplo 133: Preparación del Compuesto 133
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El Compuesto 133 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 130 con la excepción de que se usó ácido (S)1,4-benzodioxano-2-carboxílico en lugar de ácido terc-butil acético en la etapa 2.
Etapa 2:
5 Modificaciones: Se usaron 35 mg (0,19 mmol) de ácido (S)-1,4-benzodioxano-2-carboxílico, se obtuvieron 54,0 mg de producto en forma de un sólido vítreo de color ligeramente amarillo (rendimiento del 49,5%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,83 (d, J = 3,36 Hz, 9 H), 1,05-1,08 (m, 2 H), 1,20-1,25 (m, 1 H), 1,26-1,31 (m, 1 H), 1,45-1,49 (m; 1 H), 1,86-1,90 (m, 1 H), 2,21-2,25 (m, 1 H), 2,28-2,34 (m, 1 H), 2,59-2,65 (m, 1 H), 2,90-2,94 (m, 1 H), 4,12-4,17 (m, 2 H), 4,32 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,35-4,39 (m, 1 H), 4,55-4,61 (m, 3 H), 5,11-5,14 (m, 1 H), 5,28-5,32 (m, 1 H), 5,75-5,83 (m, 1 H),
10 5,90 (d, J = 3,66 Hz, 1 H), 6,80-6,89 (m, 3 H), 7,03-7,07 (m, 1 H), 7,32-7,34 (m, 1 H), 7,55-7,58 (m, 1 H), 7,68-7,72 (m, 1 H), 7,80-7,82 (m, 1 H), 7,96-7,98 (m, 1 H), 8,15-8,18 (m, 1 H); MS m/z 746 (MH+).
Ejemplo 134: Preparación del Compuesto 134
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Etapa 1:
Una mezcla del producto del Ejemplo 11, Etapa 5 (100 mg. 0,172 mmol), N-α-terc-butoxicarbonil-L-fenilglicina (45,3
mg, 0,180 mmol), HATU (84,9 mg, 0,223 mmol) y N-metilmorfolina (87,0 mg, 0,859 mmol) en DMF (1,0 ml) se agitó a
5 ta durante 18 h. La mezcla se purificó directamente por HPLC preparativa de fase inversa, dando 29,7 mg
(rendimiento del 23,6%) del Compuesto 134 en forma de un polvo de color blanco: RMN 1H (CD3OD) δ 0,97-1,07
(m,2 H), 1,12-1,17 (m, 1H), 1,22-1,32 (m, 2 H), 1,38 (s, 9 H), 1,90 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,20-2,28 (m, 2 H),
2,54 (dd, J = 13,58, 6,56 Hz, 1 H), 2,85-2,89 (m, J = 8,24 Hz, 1 H), 3,50 (d, J = 10,99 Hz, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,11 (d,
J = 11,60 Hz, 1 H), 4,63 (dd, J = 9,46, 7,32 Hz, 1 H), 5,13 (dd, J = 10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,32 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 10 5,47 (s, 1 H), 5,74-5,84 (m, 2 H), 7,16-7,19 (m, 1 H), 7,25 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,32-7,43 (m, 6 H), 7,86 (d, J = 5,80
Hz, 1 H), 8,13 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); MS m/z 734 (MH+).
Ejemplo 135: Preparación del Compuesto 135
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El Compuesto 135 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 134 con la excepción de que se usó N-α-tercbutoxicarbonil-eritro-DL-β-metilfenilalanina en lugar de N-α-terc-butoxicarbonil-L-fenilglicina la etapa 1. El Compuesto 135 se preparó a partir de una mezcla de N-a-terc-butoxicarbonil-eritro DL β-metilfenilalanina y los dos
5 diastereómeros resultantes se separaron por HPLC preparativa de fase inversa. Este compuesto es el isómero sencillo que se eluyó en primer lugar de la columna de HPLC preparativa. La estereoquímica exacta en la porción βmetil fenilalanina de la molécula se desconoce.
Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 50,4 mg (0,180 mmol) N-α-terc-butoxicarbonil-eritro-DL-β-metilfenilalanina, se obtuvieron
10 29,7 mg de producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 22,7%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,11 (d, J = 7,93 Hz, 2 H), 1,15 (d, J = 6,10 Hz, 3 H), 1,24-1,32 (m, 11 H), 1,44 (dd, J = 9,16, 5,19 Hz, 1 H), 1,90-1,94 (m, 1 H), 2,25-2,29 (m, 1 H), 2,36 (t, J = 13,28 Hz, 1 H), 2,62 (dd, J = 13,58, 7,17 Hz, 1 H), 2,98-3,02 (m, 1 H), 3,20-3,24 (m, 1 H), 3,91 (s, 3 H), 4,11 (dd, J = 11,60, 3,05 Hz, 1 H), 4,51 (d, J = 10,68 Hz, 1 H), 4,57 (dd, J = 10,07, 7,32 Hz, 1 H), 4,63 (d, J = 12,21 Hz, 1 H), 5,14 (d, J = 10,07 Hz, 1 H), 5,32 (d, J = 16,79 Hz, 1 H), 5,76-5,84 (m, 1 H), 5,88 (s, 1 H),
15 7,08 (dd, J = 8,70, 1,68 Hz, 1 H), 7,16-7,18 (m, 2 H), 7,.23-7,27 (m, 5 H), 7,89 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, J = 9,46 Hz, 1 H); MS m/z 762 (MH+).
Ejemplo 136: Preparación del Compuesto 136
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El Compuesto 136 se preparó siguiendo el Esquema del Ejemplo 134 con la excepción de que se usó N-α-terc
20 butoxicarbonil-eritro-DL-β-metilfenilalanina en lugar de N-α-terc-butoxicarbonil-L-fenilglicina en la etapa 1. El Compuesto 136 se preparó a partir de una mezcla de N-terc-butoxicarbonil-eritro DL β-metilfenilalanina y los dos diastereómeros se separaron por HPLC preparativa de fase inversa. Este compuesto es el isómero sencillo que se eluyó en segundo lugar de la columna de HPLC preparativa. La estereoquímica exacta en la porción de β-metil fenilalanina de la molécula se desconoce.
Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 50,4 mg (0,180 mmol) de N-α-terc-butoxicarbonil-eritro-DL-P-metilfenilalanina, se
5 obtuvieron 26,3 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 20,1%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,04 (s, 1 H), 1,13 (d, J = 6,71 Hz, 3 H), 1,12-1,17 (m, 2 H), 1,30 (s, 9 H), 1,33-1,36 (m, 1 H), 1,41 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,87 (dd, J = 7,78, 5,34 Hz, 1 H), 2,29 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,36 (ddd, J = 13,81, 9,99, 4,27 Hz, 1 H), 2,54 (dd, J = 13,58, 7,17 Hz, 1 H), 3,00-3,04 (m, 1 H), 3,05-3,08 (m, 1 H), 3,80 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 3,94 (s, 3 H), 4,10 (dd, J = 12,05, 3,81 Hz, 1 H), 4,53-4,57 (m, 1 H), 4,59 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 5,14 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,34 (d, J =
10 17,09 Hz, 1 H), 5,78-5,85 (m, 2 H), 6,75 (t, J = 7,32 Hz, 1 H), 7,03 (t, J = 7,48 Hz, 2 H), 7,12 (s, 1 H), 7,14 (s, 1 H), 7,19 (dd, J = 9,31, 1,68 Hz, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 7,28 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,03 (d, J = 8,85 Hz, 1 H); MS m/z 762 (MH+).
Ejemplo 137: Preparación del Compuesto 137
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15 Etapa 1:
Una mezcla del producto del Ejemplo 11, Etapa 5 (100 mg, 0,172 mmol), 4-bencilo éster del ácido N-α-tercbutoxicarbonil-L-aspártico (59,5 mg, 0,180 mmol), HATU (84,9 mg, 0,223 mmol) y N-metilmorfolina (87,0 mg, 0,859 mmol) en DCM (3,0 ml) se agitó a ta durante 18 h. La mezcla de reacción se lavó con solución tampón a pH = 4 (3 x 3 ml) y los lavados se extrajeron de nuevo con DCM (3 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se concentraron al 5 vacío. Después, el producto en bruto se disolvió en MeOH y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa, dando el Compuesto 137 en forma de un sólido vítreo de color ligeramente blanquecino (26,0 mg, rendimiento del 18,8%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,95-1,01 (m, 2 H), 1,16 (s, 9H), 1,22-1,29 (m, 2 H), 1,44 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,86 (dd, J = 7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,26 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,32-2,37 (m, 1 H), 2,61 (dd, J = 13,73, 7,32 Hz, 1 H). 2,66 (dd, J = 16,48, 6,10 Hz, 1 H), 2,89 (ddd, J = 12,67, 8,09, 4,88 Hz, 1 H), 3,05 (dd, J = 16,63, 8,39 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,04
10 4,07 (m, 1 H), 4,47 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,52-4,56 (m, 1 H), 4,75 (dd, J = 8,24, 6,41 Hz, 1 H), 5,12-5,14 (m, 1 H), 5,14 (s, 2 H), 5,31 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,82 (m, 2 H), 7,12 (d, J = 9,16 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,31-7,33 (m, 1 H), 7,36 (t, J = 7,32 Hz, 2 H), 7,39 (s, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,88 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); MS m/z 806 (MH+).
Ejemplo 138: Preparación del Compuesto 138
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15
El Compuesto 138 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 137 con la excepción de que se usó 4-metil éster del ácido N-terc-butoxicarbonil-L-aspártico se usó en lugar de 4-bencil éster del ácido N-α-terc-butoxicarbonilL-aspártico en la etapa 1.
Etapa 1:
20 Modificaciones: Se usaron 45,5 mg (0, 180 mmol) de 4-metil éster del ácido N-terc-butoxicarbonil-L-aspártico, se obtuvieron 93,5 mg del producto en forma de un sólido vítreo de color blanquecino (rendimiento del 74,6%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,17 (s, 9 H), 1,20-1,29 (m, 2 H), 1,41-1,44 (m, 1 H), 1,84-1,86 (m, 1 H), 2,26 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,33-2,38 (m, 1 H), 2,58-2,64 (m, 2 H), 2,92-3,02 (m, 2 H), 3,69 (s, 3 H), 3,92 (s, 3 H), 4,15 (dd, J = 11,44, 2,29 Hz, 1 H), 4,49-4,56 (m, 2 H), 4,72-4,76 (m, 1 H), 5,13 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,32 (d, J = 17,09 Hz, 1 H),
25 5,74-5,82 (m, 1 H), 5,87 (s, 1H), 7,12 (d, J = 9,16 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (dd, J = 5,80, 0,92 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 8,85 Hz, 1 H); MS m/z 730 (MH+).
Ejemplo 139: Preparación del Compuesto 139
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El Compuesto 139 se preparó siguiendo el Esquema I del Ejemplo 137 con la excepción de que se usó 4-éster terc-butílico del ácido N-terc-butoxicarbonil-L-aspártico en lugar de 4-bencil éster del ácido N-α-terc-butoxicarbonil-Laspártico en la etapa 1.
5 Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 52,2 mg (0,180 mmol) de 4-terc-butil éster del ácido N-terc-butoxicarbonil-L-aspártico, se obtuvieron 125 mg del producto en forma de un sólido vítreo de color blanquecino (rendimiento del 99,8%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,08-1,10 (m, 2 H), 1,17 (s, 9 H), 1,21-1,29 (m, 2 H), 1,46 (s, 10 H), 1,82 (dd, J = 7,78, 5,34 Hz, 1 H), 2,26 (c, J = 8,75 Hz, 1 H), 2,32-2,38 (m, 1 H), 2,51 (dd, J = 16,33, 7,17 Hz, 1 H), 2,63 (dd, J = 14,04, 7,02 Hz, 1 H), 2,89
10 (dd, J = 16,48, 7,63 Hz, 1 H), 2,92-2,98 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,15 (dd, J = 11,60, 3,05 Hz, 1 H), 4,50-4,57 (m. 2 H), 4,70-4,75 (m, 1 H), 5,13 (dd, J = 10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,32 (d, J = 17,40 Hz, 1 H), 5,76-5,83 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 7,13 (dd, J = 8,85, 1,53 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 9,16 Hz, 1H); MS m/z 772 (MH+).
Ejemplo 140: Preparación del Compuesto 140
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El Compuesto 138 (50,0 mg, 0,0685 mmol) se disolvió en una mezcla de THF (1 ml), MeOH (1 ml) y NaOH acuoso 1,0 M (0,137 ml, 0,137 mmol). Después de 3 h, la mezcla de reacción se neutralizó mediante la adición de HCl acuoso 1,0 M (0,137 ml, 0,137 mmol). La mezcla en bruto se concentró al vacío, después se añadieron solución 5 tampón a pH = 4 (3 ml) y DCM (3 ml) y la mezcla se agitó. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo además con DCM (2 x 1 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío, dando 48,0 mg (rendimiento del 97,9%) del Compuesto 140 en forma de un sólido vítreo de color blanquecino: RMN 1H (CD3OD) δ 1,04-1,07 (m, 2 H), 1,17 (s, 9 H), 1,22-1,25 (m, 2 H), 1,38 (dd, J = 9,31, 5,34 Hz, 1 H), 1,78 (dd, J = 7,78, 5,34 Hz, 1 H), 2,30 (c, J = 8,75 Hz, 1 H), 2,37-2,42 (m, 1 H), 2,48 (dd, J = 15,87, 4,58
10 Hz, 1 H), 2,72 (dd, J = 13,12, 7,63 Hz, 1 H), 2,88 (dd, J = 15,72, 10,53 Hz, 1 H), 2,90-2,95 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,21 (dd, J = 11,44, 2,90 Hz, 1 H), 4,57 (t, J = 8,70 Hz, 1 H), 4,62-4,65 (m, 2 H), 5,10 (d, J = 10,68 Hz, 1 H), 5,34 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,69-5,76 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,10 (d, J = 9,16 Hz,1H),7,17 (s,1H), 7,23(d, J =6,10 Hz,1H),7,88 (d, J =6,10 Hz,1H), 8,12(d, J =8,85 Hz,1H); EM m/z 716(MH+).
Ejemplo 141: Preparación del Compuesto 141
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Etapa 1:
El producto del Ejemplo 55, Etapa 1 (65 mg, 0,0947 mmol), carbonato de N,N'-disuccinimidilo (41,0 mg, 0,142 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (30,6 mg. 0,237 mmol) se combinaron con THF anhidro (1 ml) y la suspensión resultante 5 se calentó a 80 ºC en un reactor de microondas durante 15 min. Después de la refrigeración a ta, esta mezcla en bruto se usó directamente en la siguiente etapa.
Etapa 2:
La mezcla de reacción en bruto de la etapa 1 se trató con una mezcla de clorhidrato de éster metílico de L-valina (159 mg, 0,947 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (122 mg, 0,947 mmol) en THF anhidro (2 ml). La mezcla resultante 10 se agitó durante 18 h a ta. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se recogió en DCM (2 ml) y se lavó con solución tampón a pH = 4 (3 x 2 ml). Los lavados de tampón se combinaron y se extrajeron de nuevo con DCM (2 ml). Las fases combinadas de DCM se concentraron al vacío y el residuo resultante se disolvió en MeOH y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa, dando 38,1 mg (rendimiento del 52,2%) del Compuesto 141 en forma de un polvo de color blanco: RMN 1H (CD3OD) δ 0,83 (dd, J = 6,87, 3,81 Hz, 6 H), 1,06 (s, 11 H), 1,21-1,26 (m, 2 H), 15 1,41 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,87 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 1,95-2,02 (m, 1 H), 2,21 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,29 (ddd, J = 13,89, 9,92, 4,27 Hz, 1 H), 2,60 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,91-2,97 (m, 1 H), 3,67 (s, 3 H), 3,93 (s, 3 H), 4,00 (d, J = 5,49 Hz, 1 H), 4,09 (dd, J = 11,90, 3,97 Hz, 1 H), 4,40-4,43 (m, 2 H), 4,52 (dd, J = 10,07, 7,02 Hz, 1 H), 5,1 (dd, J = 10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,28 (dd, J = 17,09, 1,22 Hz. 1 H), 5,75 (ddd, J = 17,17, 10,15, 9,00 Hz, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,11 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 6,10
20 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 8,85 Hz, 1 H); MS m/z 771 (MH+).
Ejemplo 142: Preparación del Compuesto 142
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El Compuesto 142 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 141 con la excepción de que se usó metil éster clorhidrato de D-valina en lugar de metil éster clorhidrato de L-valina en la etapa 2.
Etapa 2:
5 Modificaciones: se usaron 159 mg (0,947 mmol) de metil éster clorhidrato de D-valina, se obtuvieron 23,0 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 31,5%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,88 (dd, J = 13,89, 6,87 Hz, 6 H), 1,06 (s, 9 H), 1,07-1,09 (m, 2 H), 1,23-1,27 (m, 2 H), 1,41 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,01-2,07 (m, 1 H), 2,23 (c, J = 9,05 Hz, 1 H), 2,31 (ddd, J = 14,11, 9,99, 4,27 Hz, 1 H), 2,63 (dd, J = 13,89, 7,17 Hz, 1 H), 2,93-2,98 (m, 1 H), 3,62 (s, 3 H), 3,96 (s, 3 H), 4,03 (d, J = 5,19 Hz, 1 H), 4,09 (dd, J = 11,75,
10 3,81 Hz, 1 H), 4,38 (s, 1 H), 4,48-4,54 (m, 2 H), 5,12 (dd, J = 10,38, 1,22 Hz, 1 H), 5,29 (dd, J = 17,24, 1,07 Hz, 1 H), 5,70-5,77 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,22 (dd, J = 9,00, 2,59 Hz, 1 H), 7,25 (d, J =2,44 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 6,10 Hz,1 H), 7,87 (d, J =6,10 Hz,1H), 8,16 (d, J =9,16 Hz,1H); EM m/z 771 (MH+).
Ejemplo 143: Preparación del Compuesto 143
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15 El Compuesto 143 se preparó siguiendo Esquema 1 del Ejemplo 137 con la excepción de que se usó N-tercbutoxicarbonil-L-ciclohexilglicina en lugar de 4-bencil éster del ácido N-α-terc-butoxicarbonil-L-aspártico en la etapa
1.
Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 46,2 mg (0,180 mmol) N-terc-butoxicarbonil-L-ciclohexilglicina, se obtuvieron 93,9 mg del
20 producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 73,8%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,04-1,08 (dd, J = 7,78, 2,29 Hz, 4 H), 1,19-1,26 (m, 4 H), 1,25 (s, 9 H), 1,41 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,63-1,82 (m, 7 H), 1,88 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,22 (c, J = 9,05 Hz, 1 H), 2,32-2,37 (m, 1 H), 2,59 (dd, J = 13,58, 6,87 Hz, 1 H), 2,91-2,96 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,05 (dd, J = 11,75, 3,20 Hz, 1 H), 4,09 (d, J = 8,85 Hz. 1 H), 4,47 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,53 (dd, J = 10,22, 7,17 Hz, 1 H), 5,11 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 16,79 Hz, 1 H), 5,79 (ddd, J = 16,86, 9,92, 9,54 Hz, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,10 (d, J = 8,85 Hz, 1 H), 7,17 (d, J = 1,53 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 8,09 (d, J = 8,85 Hz, 1 H); MS m/z 740 (MH+).
Ejemplo 144: Preparación del Compuesto 144
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El Compuesto 144 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 14,1 con la excepción de que se aumentó la escala y se usó clorhidrato de éster metílico en lugar de metil éster clorhidrato de L-valina en la etapa 2.
Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 100 mg (0,146 mmol) del producto del Ejemplo 55, Etapa 1; 62,2 mg (0,219 mmol) 10 carbonato de N,N'-disuccinimidilo y 47,0 mg (0,364 mmol) N,N-diisopropiletilamina.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 183 mg (1,46 mmol) de metil éster clorhidrato de glicina, 188 mg (1,46 mmol) N.Ndiisopropiletilamina, se obtuvieron 56,3 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 52,9%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,01-1,04 (m, 2 H), 1,05 (s, 9 H), 1,17-1,21 (m, 2 H), 1,40 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H),
15 1,85 (dd, J = 7,78, 5,34 Hz, 1 H), 2,18 (c, J = 8,55 Hz, 1 H), 2,33 (ddd, J = 13,89, 9,92, 4,27 Hz, 1 H), 2,61 (dd, J = 13,73, 7,32 Hz, 1 H), 2,89-2,94 (m, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 3,69-3,77 (m, 2 H), 3,92 (s, 3 H), 4,10 (dd, J = 11,75, 3,81 Hz, 1 H), 4,40-4,42 (m, 2 H), 4,53 (dd, J = 9,92, 7,17 Hz, 1 H), 5,08 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,26 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,77 (ddd, J = 17,09, 10,22, 9,00 Hz, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,13 (dd, J = 8,85, 2,44 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,23 (d, J =5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, J =5,80 Hz, 1 H), 8,09 (d, J = 8,85 Hz, 1 H); MS m/z 729 (MH+).
20 Ejemplo 145: Preparación del Compuesto 145
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El Compuesto 145 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 141 con la excepción de que se aumentó la 5
10
15
20
25
30
escala y de que se usó metil éster clorhidrato de L-alanina en lugar de metil éster clorhidrato de L-valina en la etapa
2.
Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 100 mg (0,146 mmol) del producto del Ejemplo 55, Etapa 1; 62,2 mg (0,219 mmol) N,N'disuccinimidilo carbonato y 47,0 mg (0,364 mmol) N,N-diisopropiletilamina.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 203 mg (1,46 mmol) metil éster clorhidrato de L-alanina, se obtuvieron 188 mg (1,46 mmol) N,N-diisopropil-etilamina, se obtuvieron 64,3 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 59,3%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,97-1,02 (m, 2 H), 1,05 (s, 9 H), 1,19 (d, J = 7,02 Hz, 3 H), 1,18-1,22 (m, 2 H), 1,41 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,86 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,19 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,32 (ddd, J = 13,81, 9,84, 4,43 Hz, 1 H), 2,61 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,93 (ddd, J = 12,82, 8,09, 4,73 Hz, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 3,93 (s, 3 H), 3,99 (c, J = 7,22 Hz, 1 H), 4,08 (dd, J = 11,75, 3,81 Hz, 1 H), 4,38 (s, 1 H), 4,42 .(d, J = 11,60 H2, 1 H), 4,53 (dd, J = 10,07, 7,32 Hz, 1 H), 5,09 (dd, J = 10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,27 (dd, J = 17,09, 1,22 Hz, 1 H), 5,77 (ddd, J = 17,09, 10,07, 9,16 Hz, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,13 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); MS m/z 743 (MH+).
Ejemplo 146: Preparación del Compuesto 146
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El Compuesto 147 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 141 con la excepción de que se aumentó la escala y de que se usó metil éster clorhidrato de L-terc-leucina en lugar de metil éster clorhidrato de L-valina en la etapa 2.
Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 100 mg (0,146 mmol) del producto del Ejemplo 55, Etapa 1; 62,2 mg (0,219 mmol) carbonato de N,N'-disuccinimidilo y 47,0 mg (0,364 mmol) N,N-diisopropiletilamina.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 265 mg (1,46 mmol) metil éster clorhidrato de L-terc-leucina, 188 mg (1,46 mmol) N,Ndiisopropiletilamina, se obtuvieron 68,3 mg de producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 59,6%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,88 (s, 9 H), 0,97-1,03 (m, 2 H), 1,06 (s, 9 H), 1,18-1,24 (m, 2 H), 1,41 (dd, J = 9,46, 5,49 Hz, 1 H), 1,86 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,19 (c, J = 8,75 Hz, 1 H), 2,30 (ddd, J = 13,89, 10,07, 4,43 Hz, 1 H), 2,60 (dd, J = 13,73, 7,32 Hz, 1 H), 2,91-2,96 (m, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 3,91 (s, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,09 (dd, J = 11,60, 3,97 Hz, 1 H), 4,38 (s, 1 H), 4,43 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,51 (dd, J = 10,07, 7,32 Hz, 1 H), 5,10 (dd, J = 10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,27 (dd, J = 17,24, 1,37 Hz, 1 H), 5,76 (ddd, J = 17,09, 10,07, 9,16 Hz, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,12 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, J H), 7,18 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,11 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); MS m/z 785 (MH+).
Ejemplo 147: Preparación del Compuesto 147
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El Compuesto 147 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 141 con la excepción de que se aumentó la escala y de que se usó metil éster clorhidrato de L-histidina en lugar de metil éster clorhidrato de L-valina en la etapa 2 y de que se dobló la cantidad de N,N-diisopropiletilamina en la etapa 2.
5 Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 100 mg (0,146 mmol) del producto del Ejemplo 55, Etapa 1; 62,2 mg (0,219 mmol) carbonato de N,N'-disuccinimidilo y 47,0 mg (0,364 mmol) N,N-diisopropiletilamina.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 352 mg (1,46 mmol) de metil éster clorhidrato de L-histidina, 377 mg (2,91 mmol) N,N
10 diisopropiletilamina, se obtuvieron 51,0 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 43,2%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,04 (s, 11 H), 1,20-1,22 (m, 2 H), 1,41 (ddd, J = 9,46, 5,34, 1,07 Hz, 1 H), 1,86-1,88 (m, 1 H), 2,23 (c, J = 8,75 Bz, 1 H), 2,28-2,33 (m, 1 H). 2,60 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,92 (d, J = 6,41 Hz, 2 H), 2,92-2,96 (m, 1 H), 3,64 (s, 3 H), 3,91 (d, J = 1,53 Hz, 3 H), 4,04 (dd, J = 11,90, 3,66 Hz, 1 H), 4,35 (s, 1 H), 4,364,41 (m, 2 H), 4,53 (dd, J = 9,77, 7,63 Hz, 1 H), 5,10 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,28 (d, J = 17,40 Hz, 1 H), 5,73-5,78 (m,
15 1 H), 5,81 (s, 1 H), 6,82 (s, 1 H), 7,06-7,09 (m, 1 H), 7,15 (s, 1 H), 7,23 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,63 (s, 1 H), 7,87 (dd, J = 5,80, 1,22 Hz, 1 H), 8,08 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); MS m/z 809 (MH+).
Ejemplo 148: Preparación del Compuesto 148
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El Compuesto 148 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 141 con la excepción de que se aumentó la 20 escala y de que se usó etil éster clorhidrato de L-valina en lugar de metil éster clorhidrato de L-valina en la etapa 2.
Etapa 1: Modificaciones: Se usaron 100 mg (0,146 mmol) del producto del Ejemplo 55, Etapa 1; 62,2 mg (0,219 mmol) carbonato de N,N'-disuccinimidilo y 47,0 mg (0,364 mmol) N,N-diisopropiletilamina.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 265 mg (1,46 mmol) de etil éster clorhidrato de L-valina, 188 mg (1,46 mmol) de N,N
5 diisopropil-etilamina, se obtuvieron 69,2 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 60,4%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,83 (dd, J = 6,71, 5,19 Hz, 6 H), 1,01-1,03 (m, 2 H), 1,06 (s, 9 H), 1,17-1,22 (m, 2 H), 1,23 (t, J = 7,17 Hz, 3 H), 1,40 (dd, J = 9,46, 5,19 Hz, 1 H), 1,86 (dd, J = 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 1,95-2,02 (m, 1 H), 2,18 (c, J = 9,05 Hz, 1 H), 2,33 (ddd, J = 13,89, 9,92, 4,27 Hz, 1 H), 2,60 (dd, J = 13,89, 7,17 Hz. 1 H), 2,92 (ddd, J = 12,82, 8,09, 4,73 Hz, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 3,98 (d, J = 5,19 Hz, 1 H), 4,08-4,17 (m, 3 H), 4,41 (s, 1 H), 4,41-4,43 (m, 1
10 H), 4,52 (dd, J = 10,07, 7,32 Hz, 1 H), 5,09 (dd, J = 10,38, 1,53 Hz, 1 H), 5,26 (dd, J = 17,09, 1,22 Hz, 1 H), 5,77 (ddd, J = 17,09, 10,07, 9,16 Hz, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,12 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, J =2,44 Hz,1H), 7,23 (d, J =6,10 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 6,10 Hz,1 H), 8,10 (d, J =9,16 Hz,1H); EM m/z 785 (MH+).
Ejemplo 149: Preparación del Compuesto 149
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15 El Compuesto 149 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 137 con la excepción de que se usó sal diciclohexilamina de N-terc-butoxicarbonil-L-ciclopentilglicina en lugar de 4-bencil éster del ácido N-α-tercbutoxicarbonil-L-aspártico en la etapa 1.
Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 76,2 mg (0,180 mmol) de sal diciclohexilamina de N-terc-butoxicarbonil-L
20 ciclopentilglicina, se obtuvieron 111 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 89,3%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,98 (d, J = 8,24 Hz, 2 H), 1,15-1,18 (m, 2 H), 1,24 (s, 9 H), 1,29-1,32 (m, J = 18,01 Hz, 2 H), 1,38-1,40 (m, 1 H), 1,44 (dd, J = 4,88, 1,53 Hz, 1 H), 1,49-1,55 (m, 2 H), 1,62-1,67 (m, 2 H), 1,74-1,80 (m, 1 H), 1,851,88 (m, 1 H), 2,16 (c, J = 8,75 Hz, 1 H), 2,21-2,26 (m, 1 H), 2,42 (t, J = 11,90 Hz, 1 H), 2,60-2,64 (m, 1 H), 2,89-2,93 (m, 1 H), 3,92 (d, J = 1,53 Hz, 3 H), 4,06-4,11 (m, 2 H), 4,51-4,57 (m, 2 H), 5,07 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,25 (d, J =
25 17,09 Hz, 1 H), 5,78-5,85 (m, 2 H), 7,10 (d, J = 8,85 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,23 (d, J = 4,27 Hz, 1 H), 7,88 (dd, J = 5,95, 1,68 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); MS m/z 726 (MH+).
Ejemplo 150: Preparación del Compuesto 150
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El Compuesto 150 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 141 con la excepción de que se aumentó la escala y de que se usó bencil éster clorhidrato de L-valina en lugar de metil éster clorhidrato de L-valina en la etapa
2. 5 Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 100 mg (0,146 mmol) del producto del Ejemplo 55, Etapa 1; 62,2 mg (0,219 mmol) de N,N'-disuccinimidilo carbonato y 47,0 mg (0,364 mmol) de N,N-diisopropiletilamina. Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 356 mg (1,46 mmol) bencil éster clorhidrato de L-valina, 188 mg (1,46 mmol) de N,N
10 diisopropiletilamina, se obtuvieron 41,0 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 33,2%): MS m/z 848 (MH+).
Ejemplo 151: Preparación del Compuesto 151
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El Compuesto 151 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 141 con la excepción de que se aumentó la 15 escala y de que se usó metil éster clorhidrato de L-isoleucina en lugar de metil éster clorhidrato de L-valina en la etapa 2.
Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 100 mg (0,146 mmol) del producto del Ejemplo 55, Etapa 1; 62,2 mg (0,219 mmol) de carbonato de N,N'-disuccinimidilo y 47,0 mg (0,364 mmol) N,N-diisopropiletilamina.
20 Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 265 mg (1,46 mmol) de metil éster clorhidrato de L-isoleucina, 188 mg (1,46 mmol) de N,N-diisopropiletilamina, se obtuvieron 75,5 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 65,9%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,78-0,80 (m, 3 H), 0,83-0,84 (m, 3 H), 0,90-0,95 (m, 1 H), 1,01-1,03 (m, 2 H), 1,06 (d, J = 3,05 Hz, 9 H), 1,17-1,21 (m, 2 H), 1,32-1,42 (m, 2 H), 1,68-1,72 (m, 1 H), 1,84-1,87 (m, 1 H), 2,14-2,20 (m, 1 H), 2,30-2,36 (m, 1 H), 2,57-2,62 (m, 1 H), 2,90-2,95 (m, 1 H), 3,66 (d, J = 2,75 Hz, 3 H), 3,92 (d, J = 2,75 Hz, 3 H), 4,054,12 (m, 2 H), 4,39-4,42 (m, 2 H), 4,50-4,53 (m, 1 H), 5,07-5,10 (m, 1 H), 5,23-5,28 (m, 1 H), 5,73-5,79 (m, 1 H), 5,81-5,83 (m, 1 H), 7,10-7,13 (m, 1 H), 7,17 (t, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,22-7,24 (m, 1 H), 7,85-7,87 (m, 1 H), 8,10 (dd, J = 9,16, 2,75 Hz, 1 H); MS m/z 785 (MH+).
Ejemplo 152: Preparación del Compuesto 152
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El Compuesto 152 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 141 con la excepción de que se aumentó la escala y de que se usó terc-butil éster clorhidrato de L-valina en lugar de metil éster clorhidrato de L-valina en la etapa 2.
Etapa 1:
15 Modificaciones: Se usaron 100 mg (0,146 mmol) del producto del Ejemplo 55, Etapa 1; 62,2 mg (0,219 mmol) de carbonato de N,N'-disuccinimidilo, 47,0 mg (0,364 mmol) N,N-diisopropiletilamina.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 306 mg (1,46 mmol) terc-butil éster clorhidrato de L-valina, 188 mg (1,46 mmol) N,Ndiisopropiletilamina, se obtuvieron 93,5 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 20 78,8%): MS m/z 814 (MH+).
Ejemplo 153: Preparación del Compuesto 153
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El Compuesto 153 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 141 con la excepción de que se aumentó la escala y de que se usó (S)-(+)-1-metoxi-2-propilamina en lugar de metil éster clorhidrato de L-valina en la etapa 2.
Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 100 mg (0,146 mmol) del producto del Ejemplo 55, Etapa 1; 62,2 mg (0,219 mmol) de carbonato de N,N'-disuccinimidilo y 47,0 mg (0,364 mmol) N,N-diisopropiletilamina.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 130 mg (1,46 mmol) (S)-(+)-1-metoxi-2-propilamina y 188 mg (1,46 mmol) N,N-diisopropiletilamina, se obtuvieron 50,3 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 47,3%): RMN1H (CD3OD) δ 0,96 (d, J = 7,02 Hz, 3 H), 0,99-1,01 (m, 2 H), 1,04 (s, 9 H), 1,15-1,18 (m, 2 H), 1,39 (dd, J = 9,61, 5,34 Hz, 1 H), 1,84 (dd, J = 7,93, 5,19 Hz, 1 H), 1,93 (s, 3 H), 2,15 (c, J = 9,05 Hz, 1 H), 2,37 (ddd, J = 13,96, 9,84, 4,58 Hz, 1 H), 2,61 (dd, J = 14,04, 7,32 Hz, 1 H), 2,90 (ddd, J = 12,89, 8,16, 4,88 Hz, 1 H), 3,19-3,28 (m, 2 H), 3,64-3,67 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,12 (dd, J = 11,60, 3,97 Hz, 1 H), 4,40 (s, 1 H), 4,44 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 4,53 (dd, J = 9,77, 7,32 Hz, 1 H), 5,07 (dd, J = 10,22, 1,68 Hz, 1 H), 5,24 (dd, J = 17,24, 1,37 Hz, 1 H), 5,76-5,81 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,10 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,17 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,10 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); MS m/z 729 (MH+).
Ejemplo 154: Preparación del Compuesto 154
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El Compuesto 154 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 141 con la excepción de que se aumentó la escala y de que se usó metil éster clorhidrato de N-metil-L-valina en lugar de metil éster clorhidrato de L-valina en la etapa 2.
Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 100 mg (0,146 mmol) del producto del Ejemplo 55, Etapa 1; 62,2 mg (0,219 mmol) de carbonato de N,N'-disuccinimidilo y 47,0 mg (0,364 mmol) de N,N-diisopropiletilamina.
Etapa 2:
Modificaciones: Se usaron 265 mg (1,46 mmol) de metil éster clorhidrato de N-metil-L-valina y 188 mg (1,46 mmol) de N,N-diisopropiletilamina, se obtuvieron 68,2 mg del producto en forma de un polvo de color blanco (rendimiento del 59,5%): RMN 1H (CD3OD) δ 0,70 (dd, J = 6,71, 2,14 Hz, 3 H), 0,89 (dd, J = 6,41, 2,44 Hz, 3 H), 0,96-0,98 (m, 1 H), 1,02-1,04 (m, 2 H), 1,07 (d, J = 2,14 Hz, 9 H), 1,18-1,22 (m, 2 H), 1,43-1,47 (m, 1 H), 1,84-1,87 (m, 1 H), 2,112,19 (m, 2 H), 2,31-2,37 (m, 1 H), 2,58-2,63 (m, 1 H), 2,87 (d, J = 2,44 Hz, 3 H), 2,90-2,94 (m, 1 H), 3,65 (d, J = 2,14 Hz, 3 H), 3,92 (d, J = 2,14 Hz, 3 H), 4,10-4,14 (m, 1 H), 4,25 (dd, J = 10,07, 1,22 Hz, 1 H), 4,48 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 4,50-4,54 (m, 1 H), 5,08-5,10 (m, 1 H), 5,25-5,28 (dd, J = 17,09, 1,53 Hz, 1 H), 5,78-5,85 (m, 2 H), 7,10-7,13 (m, 1 H), 7,18-7,19 (m, 1 H), 7,24 (dd, J = 5,95, 2,59 Hz, 1 H), 7,87-7,89 (m, 1 H), 8,10 (dd, J = 9,00, 2,59 Hz, 1 H); MS m/z 785 (MH+).
Ejemplo 155: Preparación del Compuesto 155
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Etapa 1:
A una solución del producto del Ejemplo 55, Etapa 1 (100 mg, 0,146 mmol) en THF anhidro (2 ml) se le añadió piridin-2-il éster 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetil-etil éster del ácido carbónico (44,0 mg, 0,175 mmol) y N-metilmorfolina (59 5 mg, 0,58 mmol). La mezcla se agitó a ta durante 24 h. La mezcla de reacción se lavó, se concentró al vacío y el residuo se disolvió en DCM (2 ml). La solución se lavó con solución tampón a pH = 4 (3 x 3 ml) y los lavados se extrajeron de nuevo con DCM (3 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se concentraron al vacío. Después, el producto en bruto se disolvió en MeOH y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa, dando el Compuesto 155 en forma de un polvo de color blanco (38,5 mg, rendimiento del 34,3%): RMN 1H (CD3OD) δ 1,04 (s, 11 H), 1,1910 1,22 (m, 2 H), 1,23 (s, 3 H), 1,43 (dd, J = 9,31, 5,34 Hz, 1 H), 1,46 (s, 3 H), 1,87 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H), 2,19 (c, J = 8,85 Hz, 1 H), 2,34 (m, 1 H), 2,62 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,92 (ddd, J = 12,67, 8,09, 4,88 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,06 (dd, J = 11,90, 3,36 Hz, 1 H), 4,23 (s, 1 H), 4,43 (d, J = 11,60 Hz, 1 H), 4,56 (dd, J = 10,38, 7,32 Hz, 1 H), 5,10 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 5,27 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,75-5,80 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,10 (dd, J = 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 6,10 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 5,80 Hz, 1 H), 8,07 (d, J = 9,16 Hz, 1 H); MS
15 m/z 768 (MH+).
Sección E:
condiciones de CL-EM para la sección E
"procedimiento A" es 3,0 X 50 mm Xterra @ gradiente de 4 min y flujo de 4 ml/min "procedimiento B" es 3,0 X 50 mm Xterra @ gradiente de 3 min y flujo de 4 ml/min 20 "procedimiento C" es 4,6 X 50 mm Xterra @ gradiente de 4 min y flujo de 4 ml/min "procedimiento D" es 4,6 X 50 mm Xterra @ gradiente de 3 min y flujo de 4 ml/min
Ejemplo 180: Preparación del Compuesto 180
Esquema Sintético General
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Los Compuesto 180 a 183 se prepararon por el esquema sintético general como se ilustrado anteriormente. Estas reacciones individuales se describen con mayor detalle en cualquier otra parte. Con la excepción de que la primera etapa de alquilación para terc-butóxico potásico en THF (como el que se suministra por Aldrich Chemicals) en DMF ofrecieron un procedimiento de tratamiento más conveniente: la mayoría del disolvente de DMF se retiró por lavado con agua después de que se completara de alquilación.
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Por lo tanto el Compuesto 180: BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(2-trifluorometil-quinolin-4-oxo)-S-prolina]P1(1R,2S Ac. de Vinil.)-CONHSO2-ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 61%. CL/EM R1-min (MNa+) [procedimiento A]: 3,35 (774). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 13 H) 1,21 (s, 9 H) 1,42 (dd, J = 9,17, 5,26 Hz, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,21 (m, 1 H) 2,33 (m, 1 1H) 2,64 (dd, J = 13,94, 6,60 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,09 (dd, J = 11,49, 2,69 Hz, 1 H) 4,21 (s, 1 H) 4,52 (m, 1 H) 4,56 (d, J = 12,23 Hz, 1 H) 5,10 (dd, J = 10,39, 1,59 Hz, 1 H) 5,27 (d, J = 16,87 Hz, 1 H) 5,58 (s, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 7,36 (s, 1 H) 7,61 (t, J = 7,70 Hz, 1 H) 7,83 (t, J = 7,34 Hz, 1 H) 8,07 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 8,26 (d, J = 8,56 Hz, 1 H).
Ejemplo 181: Preparación del Compuesto 181
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10 BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(2,8-bistrifluorometil quinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Acad. de Vinilo)CONNSO2-ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 52%. CL/EM R1-min (MNa+) [procedimiento A]: 3,60 (843). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 11 H) 1,16 (s, 9 H) 1,22 (m, 2 H) 1,42 (dd, J = 9,29, 5,38 Hz, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,21 (c, J = 8,97 Hz, 1 H) 2,33 (m, 1 H) 2,65 (dd, J = 13,94, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,07 (dd, J = 11,98, 2,69 Hz, 1 H) 4,17 (s, 1 H) 4,52 (dd, J =
15 10,52, 6,85 Hz, 1 H) 4,58 (d, J = 11,98 Hz, 1 H) 5,10 (d, J = 10,27 Hz, 1 H) 5,27 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,60 (s, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 7,46 (s, 1 H) 7,69 (t, J = 7,83 Hz, 1 H) 8,18 (d, J = 7,34 Hz, 1 H) 8,50 (d, J = 8,31 Hz, 1 H).
Ejemplo 182: Preparación del Compuesto 182
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(2-trifluorometilo,8-trifluorometoxi-quinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S VinilAcca)
20 CONHSO2-ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 99%. CL/EM R1-min (MNa+) [procedimiento A]: 3,62 (858). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 11 H) 1,21 (m, 11 H) 1,42 (dd, J = 9,05, 5,14 Hz, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,21 (c, J = 8,64 Hz, 1 H) 2,33 (m, 1 H) 2,64 (dd, J = 13,94, 6,60 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,08 (dd, J = 11,98, 2,69 Hz, 1 H) 4,18 (s, 1 H) 4,51 (dd, J = 10,52, 6,85 Hz, 1 H) 4,57 (d, J = 12,23 Hz, 1 H) 5,10 (dd, J = 10,52, 1,22 Hz, 1 H) 5,27 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,59 (s, 1 H) 5,72 (m, 1
25 H) 7,44 (s, 1 H) 7,63 (t, J = 8,07 Hz, 1 H) 7,78 (d, J = 7,58 H2, 1 H) 8,24 (d, J = 8,56 Hz, 1 H).
Ejemplo 183: Preparación del Compuesto 183
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(2-trifluorometilo, 8-cloro quinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcca)CONHSO2-Ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 64%. CL/EM Fr-min (NNa+) [procedimiento A]: 3,52 (808). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04 (m, 11 H) 1,21 (m,
5 11 H) 1,41 (dd, J = 9,41, 5,50 Hz, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,20 (c, J = 8,80 Hz, 1 H) 2,32 (m, 1 H) 2,63 (dd, J = 13,82, 6,72 Hz, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,07 (dd, J = 12,10, 2,81 Hz, 1 H) 4,19 (s, 1 H) 4,50 (dd, J = 10,52, 6,85 Hz, 1 H) 4,56 (d, J = 11,98 Hz, 1 H) 5,10 (dd, J = 10,27, 1,47 Hz, 1 H) 5,26 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,57 (s, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 7,41 (s, 1 H) 7,52 (t, J = 8,07 Hz, 1 H) 7,93 (d, J = 7,58 Hz, 1 H) 8,19 (d, J = 8,56 Hz, 1 H).
Ejemplo 184: Procedimiento general para la alquilación con el tripéptido (Compuesto 184) y P2*
10 General Esquema -Preparación del Ejemplo 184 (Compuesto 184)
La preparación del componente tripeptídico, Ejemplo 184 se consiguió mediante un acoplamiento secuencial de amida usando HATU como agente de acoplamiento. Se en tiende que podrían usarse muchos agente de acoplamiento convencionales para el siguiente esquema.
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15 Preparación de intermedio Ejemplo 184a:
A una mezcla de HATU (820 mg, 2,2 mmol), Ejemplo 180a (Boc-4R-hidroxiprolina, 417 mg, 1,8 mmol) y Ejemplo 180c (sal clorhidrato de (1R)-amino-2(S)-vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico, 490 mg, 1,8 mmol) en un matraz de secado a la llama a temperatura ambiente se le añadió CH2Cl2 seco (8 ml). La mezcla se mantuvo en una atmósfera seca de N2 antes de enfriarla a -78 ºC. Se añadió base de Hunig (diisopropiletilamina, 20 625 µl 3,6 mmol) se añadió lentamente durante un periodo de 5 min y la mezcla se transformó en una suspensión de color naranja pálido. La agitación se continuó durante una hora mientras se dejó que la temperatura alcanzara la temperatura ambiente. En análisis por CL/EM mostró la conversión completa del producto en el producto deseado 184a. La reacción en bruto se trató de la manera habitual, se lavó con tres porciones de de agua (5 ml), los residuos orgánicos se extrajeron en acetato de etilo (3 x 5 ml). El producto en bruto se obtuvo por la retirada de los
25 disolventes orgánicos al vacío. El material se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Preparación de intermedio Ejemplo 184b:
El sólido seco de la etapa anterior se recogió en 9 ml de CH2Cl2 a temperatura ambiente. A esta solución se le
5
10
15
20
25
30
35
40
añadieron 3 ml de ácido trifluoroacético formando una solución de color amarillo pálido. La agitación se continuó durante 2 horas a temperatura ambiente. El análisis por CL/EM mostró que no había más material de partida 184a mientras que el producto deseado 184b fue la señal mayor junto con una señal que se correspondía con un subproducto heredado de HATU en la etapa anterior. Los disolventes se evaporaron y el residuo sólido se usó inmediatamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Preparación del tripéptido, Compuesto 184:
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-hidroxi-S-prolina]-P1(1R,2S VinilAcca)-CONHSO2-Ciclopropano [Cuaderno 46877-128]
El producto en bruto de la etapa anterior (Ejemplo 184b, 1,8 mmol) se mezcló con HATU (700 mg, 1,8 mmol) y BOC-L-terc-leucina (Ejemplo 180f, Fluka Chemicals, 420 mg, 1,8 mmol) en CH2Cl2 (10 ml) a temperatura ambiente. Esta suspensión se trató base de Hünig (1 ml, exceso) formando una suspensión de color naranja un poco más espesa. El análisis por CL/EM mostró algo de conversión del compuesto 184. Se observó la conversión completa en el producto deseado 184 después de continuar agitando durante dos días a temperatura ambiente. La mezcla de reacción en bruto se concentró a sequedad. El residuo se recogió en acetato de etilo. La mayoría del residuo de HATU se retiró por extracciones con una solución semisaturada de bicarbonato sódico recién preparada. Los últimos restos del residuo de HATU (1-hidroxi-7-azabenzotriazol) se retiraron lavando con agua desionizada. La evaporación de los disolventes dio 990 mg (98%) del producto deseado en forma de una espuma de color blanco. Este material fue adecuado para la alquilación posterior con electrófilos, tales como quinolinas e isoquinolinas directamente sin purificación adicional. CL/EM R1-min (MNa+) [procedimiento A]: 2,65 (579). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,95 (s, 2 H) 0,99 (s, 9 H) 1,05 (m, 2 H) 1,21 (m, 1 H) 1,39 (m, 9 H) 1,84 (dd, J = 8,31, 5,38 Hz, 1 H) 1,96 (m, 1 H) 2,11 (m, 1 H) 2,20 (m, 1 H) 2,91 (m, 1 H) 3,80 (m, 2 H) 4,28 (d, J = 9,78 Hz, 1 H) 4,35 (dd, J = 9,90, 6,97 Hz, 1 H) 4,47 (s, 1 H) 5,11 (m, 1 H) 5,29 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,75 (m, 1 H).
Alquilación del tripéptido (compuesto 184) con electrófilos:
Un matraz de fondo redondo de 25 ml secado a la llama se cargó con el Compuesto 184, (0,5 -1,0 mmol), 4cloroquinolina sustituida (1,0 equivalente) y cloruro de lantano (lechos anhidros de LaCl3, usados según se suministran por Aldrich, M.W. 245 g/mol; 1,0 equivalente. Nota: la inclusión de dichos aditivos se encontró que era útil en algunos casos especialmente con aquellos electrófilos menos reactivos. Este reactivo puede, en ocasiones, omitirse si los electrófilos son suficientemente reactivos para la alquilación aniónica) en 2 ml de DMF seca. La sal inorgánica fue sólo ligeramente soluble en DMF a temperatura ambiente. La mezcla se enfrió a -78 ºC (baño de hielo seco/acetona) con agitación en atmósfera de nitrógeno. A esta mezcla enfriada se le añadió una solución en THF de terc-butóxido potásico (1,0 M, usadas según se suministran por Aldrich, 5,5 equivalentes) y el color de la mezcla cambió de incoloro a amarillento pálido o verdoso. Se agitó a -78 ºC durante un periodo dependiente de la reactividad de 4-cloro-quinolina (de unas pocas h. a -78 ºC a durante una noche a temperatura ambiente). También se encontró que la sal inorgánica cambia a una emulsión fina al final. Se inactivó con una solución acuosa semisaturada de NH4Cl (2 ml). Los materiales orgánicos se extrajeron en acetato de etilo (10 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua desionizada (10 ml x 2). La evaporación de la fracción orgánica dio una mezcla en bruto rica en el producto deseado como se determinó por análisis CL/EM. El producto deseado se aisló por HPLC preparativa usando parámetros de separación convencionales (típicamente: columna Xterra de 3,0 x 50 mm @ gradiente de 4 min y caudal de 4 ml/min), dando el producto deseado analíticamente puro. La alquilación de las series de 1-halo isoquinolina se realizó exactamente de la misma manera.
Ejemplo 185: Preparación del Compuesto 185
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Siguiendo el procedimiento general de alquilación de tripéptido que se ha descrito en el Ejemplo 184, se obtuvo BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(74-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcc)-CONHSO2-ciclopropano en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 50%. CL/EM R1-min (MH+) [procedimiento B]: 2,32 (752). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,02 (s, 9 H) 1,06 (m, 11 H) 1,22 (m, 2 H) 1,43 (dd, J = 9,41, 5,26 Hz, 1 H) 1,88 (dd, J = 8,19, 5,50 H2, 1 H) 2,23 (c, J = 8,80 Hz, 1 H) 2,42 (m, 1 H) 2,75 (dd, J = 14,06, 6,48 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,10 (m, 2 H) 4,61 (m, 2 H) 5,12 (dd, J = 10,39, 1,59 Hz, 1 H) 5,29 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,72 (m, 2 H) 7,61 (d, J = 6,36 Hz, 1 H) 7,96 (d, J = 8,80 Hz, 1 H) 8,38 (s, 1 H) 8,59 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 9,14 (d, J = 6,36 Hz, 1 H),
Ejemplo 186: Preparación del Compuesto 186
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Siguiendo el procedimiento general de alquilación de tripéptido que se ha descrito en el Ejemplo 184, se obtuvo BOCNH-P3(L-terc-BuG-ly)-P2[(4R)-(8-trifluorometil-quinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcc)-CONHSO2ciclopropano, el producto deseado, en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 50%. CL/EM R1-min (MH+) [procedimiento B]: 2,48 (752). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,02 (s, 9 H) 1,05 (m, 2 H) 1,13 (s, 9
15 H) 1,23 (m, 2 H) 1,42 (dd, J = 8,68, 5,50 Hz, 1 H) 1,87 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,21 (c, J = 8,80 Hz, 1 H) 2,36 (m, 1 H) 2,69 (dd, J = 14,06, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,08 (dd, J = 11,98, 2,93 Hz, 1 H) 4,15 (s, 1 H) 4,54 (dd, J = 10,52, 7,09 Hz, 1 H) 4,60 (d, J = 12,47 Hz, 1 H) 5,11 (dd, J = 10,52, 1,71 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 15,90 Hz, 1 H) 5,58 (s, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 7,32 (d, J = 5,87 Hz, 1 H) 7,69 (t, J = 7,95 Hz, 1 H) 8,22 (d, J = 7,09 Hz, 1 H) 8,55 (d, J = 8,07 Hz, 1 H) 8,88 (d, J = 5,62 Hz, 1 H).
20 Preparación de intermedios de isoquinolina para 6-F, 6-Etilo, 6-isopropilo y 6-terc-butil isoquinolina P2* componentes básicos.
En general, las 6-fluoro y 6-alquilo isoquinolinas que se usan en los siguientes experimentos se prepararon mediante una síntesis Pomeranz-Fritsch (Procedimiento Típico: Preparación de 1,1-biisoquinolina 8,8-disustituida ópticamente activa, K. Hirao, R. Tsuchiya, Y. Yano, H. Tsue, Heterocicles 42(1) 1996, 415-422) como se indica a continuación.
25 Los productos se convirtieron en los derivados 1-cloro mediante intermedios de N-óxido como se ha descrito alguna otra parte.
Esquema Sintético General Reactivos y condiciones de reacción: (a) reflujo en benceno, eliminación azeotrópica de agua; (b) primera etapa: cloroformiato de etilo, trimetil fosfito en THF, segunda etapa: tetracloruro de titanio en cloroformo; (c) MCPBA en CH2Cl2; (d) POCl3 en benceno
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R
Isoquinolina, Rendimiento 1-Cloruro, rendimiento combinado
F
20 43
Et
76 65
i-Pr
14 18
t-Bu
47 55
Ejemplo 187: Preparación del Compuesto 187
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(6-fluoroisoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcca)-CONHSO2ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 12%. CL/EM Fr
10 min (MNa+) [procedimiento C]: 3,81 (724). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 13 H) 1,22 (s, 9 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (m, 1 H) 2,21 (m, 2 H) 2,61 (dd, J = 13,69, 6,60 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,05 (d, J = 13,69 Hz, 1 H) 4,21 (s, 1 H) 4,49 (m, 2 H) 5,11 (d, J = 10,03 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,61 Hz, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 5,86 (d, J = 4,40 Hz, 1 H) 7,31 (m, 2 H) 7,48 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 7,97 (d, J = 6,36 Hz, 1 H) 8,26 (d, J = 6,11 Hz, 1 H).
Ejemplo 188: Preparación del Compuesto 188
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La alquilación descrita anteriormente produjo la 1-cloroisoquinolina en forma del producto principal: BOCNH-P3(Lterc-BuG-ly)-P2[(4R)-(1-cloro isoquinolin-6-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcc)-CONHSO2-ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 40,2%. CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento
10 Ejemplo 189: Preparación del Compuesto 189
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(6-etil isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcc)-CONBSO2-Ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco en 4,6 mg en forma de un sólido de color amarillo (4,2%). CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento B]: 2,70 (712).RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (s, 9 H) 1,07 (m,
15 2 H) 1,22 (m, 11 H) 1,28 (t, J = 7,91 Hz, 3 H) 1,41 (m, 1 H) 1,85 (m, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,60 (dd, J = 13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,80 (c, J = 7,66 Hz, 2 H) 2,93 (m, 1 H) 4,02 (d, J = 31,06 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,42 (m, 1 H) 4,54 (m, 1 H) 5,10 (d, J = 10,27 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,84 (s, 1 H) 7,25 (d, J = 5,87 Hz, 1 H) 7,38 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 7,59 (s, 1 H) 7,90 (d, J = 6,24 Hz, 1 H) 8,09 (d, J = 8,56 Hz, 1 H).
Ejemplo 190: Preparación del Compuesto 190
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(6-isopropil isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcc)-CON-HSO2Ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 69%. CL/EM R,-min (MNa+) [procedimiento B]: 2,76 (749). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 13 H) 1,20 (m, 9 H) 1,31 (d,
5 J = 6,85 Hz, 6 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,26 (m, 2 H) 2,62 (dd, J = 13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,07 (m, 1 H) 4,06 (m, 1 H) 4,21 (s, 1 H) 4,52 (m, 2 H) 5,11 (d. J = 10,27 Hz. 1 H) 5,28 (d. J = 17,12 Hz. 1 H) 5,74 (m. 1 H) 5,84 (s, 1 H) 7,32 (d. J = 6,11 1 Hz, 1 H) 7,46 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 7,64 (s, 1 H) 7,90 (d, J = 6,11 Hz, 1 H) 8,13 (d, J = 8,56 Hz, 1 H).
Ejemplo 191: Preparación del Compuesto 191
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(6-terc-butil isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-PJ(1R,2SVinilAcc)-CON-HSO2Ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 81%. CL/EM Frmin (R4H+) [procedimiento B]: 2,84 (740). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,18 (s, 9 H) 1,22 (m, 2 H) 1,39 (s, 9 H) 1,43 (m, 1 H) 1,87 (dd, J = 8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,27 (m, 2 H) 2,63 (dd, J = 13,57, 6,97 13z,
15 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,06 (m, 1 H) 4,20 (s, 1 H) 4,52 (m, 2 H) 5,10 (d, J = 11,49 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,84 (s, 1 H) 7,36 (d, J = 6,11 1 Hz, 1 H) 7,66 (dd, J = 8,80, 1,22 Hz, 1 H) 7,78 (s, 1 H) 7,91 (d, J = 5,87 Hz, 1 H) 8,1 5 (d, J = 8,80 Hz, 1 H).
Preparación de intermedios 6-isopropoxil y 6-terc-butoxil isoquinolina:
Se prepararon algunas 6-alcoxi-1-cloro isoquinolinas por un desplazamiento ipso directo de la 6-fluoro-1
20 cloroisoquinolina con los iones metálicos de alcóxido correspondientes, tales como terc-butóxido potásico (53%) e isopropóxido sódico (54%).
Esquema Sintético General
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La 6-fluoro-1-cloroisoquinolina se sometió a un desplazamiento nucleófilo aromático con isopropóxido sódico y tercbutóxido potásico en DMF, dando el 6-isopropoxilo correspondiente (54%): RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) δ ppm 1,43 (d, J = 6,11 Hz, 6 H) 4,76 (m, J = 6,11 Hz, 1 H) 7,08 (d, J = 2,45 Hz, 1 H) 7,29 (dd, J = 9,29, 2,45 Hz,1H)
5 7,50 (d, J =5,62 Hz, 1 H) 8,18 (d, J =5,87 Hz,1H)8,24 (d, J = 9,29 Hz, 1 H) y 6-terc-butoxil-1-cloro isoquinolinas (55%): RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) δ ppm 1,48 (s, 9 H) 7,31 (m, 2 H) 7,47 (d, J = 5,62 Hz, 1 H) 8,18 (d, J = 5,62 Hz, 1 H) 8,21 (d, J = 9,78 Hz, 1 H) como el producto principal respectivamente. Estas 6-alcoxil-1-cloro isoquinolinas se alquilaron con el tripéptido como se ha descrito en el Ejemplo 184, dando los productos deseados que se muestra a continuación.
10 Ejemplo 192: Preparación del Compuesto 192
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(6-isopropoxi isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcc)-CON-HSO2Ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 59%. CL/EM Frmin (MH+) [procedimiento C]: 3,87 (742). RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 0,99 (s, 1 H) 1,06 (m, 2 H) 1,21 (s, 9 H)
15 1,37 (d, J = 5,87 Hz. 6 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,61 (dd, J = 1 3,69,6,85 Hz, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,04 (dd, J = 11,86, 3,30 Hz, 1 H) 4,21 (s a, 1 H) 4,49 (m, 2 H) 4,78 (h, J = 5,87 Hz, 1 H) 5,10 (dd, J = 10,39, 1,35 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 16,87 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,79 (d, J = 11,25 Hz, 1 H) 7,07 (dd, J = 9,05, 1,96 Hz, 1 H) 7,18 (d, J = 2,20 Hz, 1 H) 7,26 (d. J = 6,11 Hz, 1 H) 7,85 (d, J = 6,11 Hz, 1 H) 8,10 (d, J = 9,05 Hz, 1 H).
Ejemplo 193: Preparación del Compuesto 193
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(6-terc-butoxi-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S-VinilAcc)-CON-HSO2Ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 39%. CL/EM Frmin (MH+) [procedimiento C]: 3,99 (756). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,03 (s a, 13 H) 1,19 (s, 9 H) 1,42 (m, 10 H) 1,86 (dd, J = 7,83, 5,62 Hz, 1 H) 2,24 (m. 2 H) 2,60 (dd, J = 13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,04 (dd, J = 11,49, 2,93 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,49 (m, 2 H) 5,10 (d, J = 11,25 Hz, 1 H) 5,27 (d, J = 16,87 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,81 (s, 1 H) 7,13 (dd, J = 8,80, 1,47 Hz, 1 H) 7,25 (d. J = 5,87 Hz, 1 H) 7,33 (d, J = 2,20 Hz, 1 H) 7,87 (d, J = 6,11 Hz, 1 H) 8,10 (d, J = 9,05 Hz, 1 H).
5 Preparación de derivados de ftalazina P2*:
En general, 1-cloroftalacinc y 1,4-dicloroftalazina se sometió a alquilación suave, dando los productos deseados. Sin embargo, la 1-cloroftalazina y la 1,4-dicloroftalazina disponibles en el mercado se contaminan normalmente con algunos materiales hidrolizados. Un pretratamiento con POCl3 seguido inmediatamente de alquilación proporciona resultados más consistentes.
10 Esquema Sintético General
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Condiciones de Reacción: (a) POCl3 en DCE; (b) alquilación con tripéptido; (c) derivados de sodio de imidazol (R = CH), triazol (R = N)
Ejemplo 194: Preparación Compuesto 194
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(ftalazin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcca)-CONHSO2-Ciclopropano: el
material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 41%. CL/EM Fr-min (MNa+) [procedimiento B]: 2,07 (707). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,03 (m, 9 H) 1,06 (m, 4 H) 1,14 (s, 9 H) 1,20 (m, 1 H) 1,43 (m, 1 H) 1,87 (dd, J = 8,07, 5,62 Hz, J H) 2,24 (c, J = 8,80 Hz, 1 H) 2,38 (m, 1 H) 2,76 (dd, J = 14,18, 7,09 Hz, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,11 (m, 2 H) 4,62 (m, 1 H) 5,11 (dd, J = 10,27, 1,71 Hz, 1 H) 5,29 (dd, J = 17,12, 1,22 Hz, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 5,96 (s, 1 H) 8,26 (m, 2H) 8,46 (m, 2 H) 9,84 (s, 1 H).
Ejemplo 195: Preparación del Compuesto 195
imagen2
BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(4-cloroftalazin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S-VinilAcc)-CON-HSO2-Ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 23%. CL/EM Fr-min (MNa+)
10 [procedimiento C]: 3,52 (742). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (s, 1 H) 1,06 (m, 2 H) 1,14 (s, 9 H) 1,22 (m, 1 H) 1,43 (m, 1 H) 1,87 (m, 1 H) 2,21 (m, 1 H) 2,35 (m, J = 10,27 Hz, 1 H) 2,70 (m, 1 H). 2,93 (m, 1 H) 4,05 (d, J = 3,42 Hz, J H) 4,58 (m, 2 H) 5,11 (dd, J = 10,39, 1,10 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,36 Hz, 1 H) 5,7 (m, 1 H) 5,93 (s, 1 H) 7,99 (m, 1 H) 8,07 (t, J = 7,70 Hz, 1 H) 8,26 (dd, J = 8,19, 2,32 Hz, 2 H).
Preparación de derivados de 4-(imidazo-1-il)ftalazina y 4-(1,2,4-triazo-1-il)ftalazina P2*:
15 El producto, compuesto 195 de antes, BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(4-cloro ftalazin-1-oxo)-S-prolina]P1(1R,2S-VinilAcc)-CONHSO2-ciclopropano, se sometió a desplazamiento por los aniones de azoles típicos, tales como imidazol y triazol, dando derivados de ftalazina sustituida con 4-azol que se muestran a continuación:
Ejemplo 196: Preparación del Compuesto 196
Éste se fabricó desplazando la 4-cloro ftalazina (Compuesto 195) con la sal sódica de imidazol en DMF a 55-65 ºC.
imagen2
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(4-(imidazo-1-il)ftalazin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S-VinilAcc)-CONHSO2ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 23%. CL/EM Frmin (MNa+) [procedimiento B]: 1,94 (773). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,03 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,20 (m, 9 H) 1,24 (m, 1 H) 1,41 (m, 2 H) 1,88 (dd, J = 8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,23 (m, 1 H) 2,41 (m, 1 H) 2,75 (m, J = 14,92 Hz, J
25 H) 2,93 (m, 1 H) 4,14 (m, 2 H) 4,60 (dd, J = 10,15, 6,97 Hz; 2 H) 5,12 (dd, J = 10,27, 1,47 Hz, 1 H) 5,29 (dd, J = 17,24, 1,35 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 6,09 (s, 1 H) 7,85 (s, 1 H) 7,94 (m, 1 H) 8,10 (m, 2 H) 8,43 (m, 1 H) 9,17 (s, 1 H) 9,46 (5, 1 H).
Durante la reacción de desplazamiento, también se aisló una pequeña cantidad del subproducto de de-BOC (Compuesto 197):
imagen2
NH2-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(4-(imidazo-1-il)ftalazin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcc)-CON-HSO2
5 Ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 17%. CL/EM Frmin (MS) [procedimiento B]: 1,22 (651). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,16 (s, 9 H) 1,23 (m, 2 H) 1,42 (dd, J = 9,41, 5,50 Hz, 1 H) 1,89 (m, 1 H) 2,26 (c, J = 8,97 Hz, 1 H) 2,43 (m, 1 H) 2,78 (dd, J = 14,06, 7,21 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,74 (m, 1 H) 4,11 (s, 1 H) 4,22 (dd, J = 12,23, 3,91 Hz, 1 H) 4,47 (m, 2 H) 4,71 (dd. J = 10,27, 7,09 Hz, 1 H) 5,12 (m, 1 H) 5,29 (d, J = 17,36 Hz, 1 H) 5,71 (m, 1 H) 6,13 (t, J = 3,67 Hz, 1 H) 7,87 (s, 1 H) 7,97 (m, 1 H) 8,14 (m, 3 H)
10 8,41 (m, 1 H) 9,47 (s, 1 H).
Ejemplo 198: Preparación Compuesto 198
Éste se fabricó desplazando la 4-cloro ftalazina (Compuesto 195) con la sal sódica de 1,2,4-triazol en DMF a 55-65 ºC.
imagen2
15 BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(4-(1,2,4-triazo-1-il)ftalazin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S-VinilAcc)-CON-HSO2Ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 62%. CL/EM Frmin (MNa+) [procedimiento C]: 3,35 (774). RMN 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 0,97 (s, 9 H) 1,01 (m, 2 H) 1,10 (s, 9 H) 1,16 (m, 1 H) 1,37 (m, 2 H) 1,82 (m, 1 H) 2,18 (d, J = 8,55 Hz, 1 H) 2,32 (m, 1 H) 2,69 (dd, J = 13,58, 6,87 Hz, 1 H) 2,88 (s a, 1 H) 4,06 (d, J = 11,60 Hz, 1 H) 4,13 (s, 1 H) 4,53 (m, J = 9,16 Hz, 1 H) 4,61 (d, J = 11,90 Hz, 1 H) 5,06 (d,
20 J = 10,07 Hz, 1 H) 5,23 (d, J = 17,40 Hz, 1 H) 5,68 (m, 1 H) 5,98 (s, 1 H) 7,97 (m, 2 H) 8,30 (m, J = 11,90 Hz, 2 H) 8,44 (d, J = 7,63 Hz, 1 H) 9,14 (s, 1 H).
Preparación de derivados de 4-hidroxi y 4-alcoxi ftalazina P2*
imagen2
Condiciones de Reacción: (a) alcóxidos sódicos, tales como metóxido, etóxido e isopropóxido
Ejemplo 199: Preparación del Compuesto 199
imagen2
5 La 4-cloro ftalazina (Ejemplo 195) se disolvió en alcohol isopropílico seco a temperatura ambiente y se añadió 1,0 equiv. de isopropóxido sódico se añadió, la suspensión resultante se llevó a reflujo. Se obtuvo el producto deseado, 4,5 mg de un sólido de color amarillo (20,0%) CL/EM Fr-min (MH+): 2,68 (743) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,02 (m, 11 H) 1,20 (m, 11 H) 1,42 (m, 1 H) 1,49 (d,1=6 Hz, 6 Hz) 1,87 (dd, J = 7,95, 5,50 Hz, 1 H) 2,21 (m, 1 H) 2,23 (m, 1 H) 2,66 (m, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,08 (c, J = 7,09 Hz, 1 H) 4,19 (s, 1 H) 4,55 (m, 2 H) 5,11 (d, J
10 = 10,27 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,61 Hz, 1 H) 5,48 (m, 1 H) 5,70 (d, J = 10,03 Hz, 1 H) 5,81 (m, 1 H) 7,90 (m, 2 H) 8,16 (m, 2 H).
Ejemplo 200: Preparación del Compuesto 200
De forma análoga, se preparó el derivado 4-etoxi: BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(4-etoxiftalazina-1-oxo)-S-prolina]P1(1R,2S-VinilAcc)-CONHSO2-ciclopropano.
imagen2
Se obtuvieron 4,0 mg del sólido de color amarillo (16,0%).CL/EM Fr-min (MH+): 2,52 (729) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,16 (s, 9 H) 1,24 (m, 2 H) 1,43 (dd, J = 9,78, 5,14 Hz, 1 H) 1,53 (t, J = 6,97 Hz, 3 H) 1,87 (dd, J = 8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,22 (c, J = 8,97 Hz, 1 H) 2,32 (m, 1 H) 2,67 (m, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,06 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 4,19 (s, 1 H) 4,56 (m, 4 H) 5,10 (m, 1 H) 5,30 (m, 1 H). 5,74 (m, 1 H) 5,82 (s, 1 H) 7,94 (m, 2 H) 8,16 (d, J = 7,83 Hz, 1 H) 8,21 (m, 1 H).
Ejemplo 201: Preparación del Compuesto 201
imagen2
Se preparó BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(4-metoxiftalazin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcca)-CONHSO2
10 ciclopropano con un rendimiento del 30,2%. CL/EM Fr-min (MH+): 2,42 (715) [procedimiento B] RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,96 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,20 (m, 11H) 1,43 (dd, J = 9,29, 5,38 Hz, 1 H) 1,87 (dd, J = 8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,22 (c, J = 8,80 Hz, 1 H) 2,31 (m, 1 H) 2,66 (d, J = 8,07 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,06 (dd, J = 11,98, 3,18 Hz, 1 H) 4,19 (d, J = 3,42 Hz, 4 H) 4,54 (m, 2 H) 5,11 (m, 1 H) 5,28 (d, J = 17,36 Hz, 1H) 5,73 (m, 1 H) 5,83 (s, 1 H) 7,95 (m, 2 H) 8,19 (m, 2 H).
15 Ejemplo 202: Preparación del Compuesto 202
Se hizo un intento para desplazar BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(4-cloroftalazin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcc)-CONHSO2-ciclopropano (Ejemplo 195) con la sal sódica de tetrazol, en su mayor parte en material hidrolizado, 4-hidroxi.
imagen2
Se obtuvo BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(4-hidroxiftalazina-1-oxo)-S-prolina]P1(1R,2S-vinilAcca)-CONHSO2 Ciclopropano (44,2%) en forma de sólido de color crema pálida. CL/EM Fr-min (MH+): 2,18 (701) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (s, 9 H) 1,05 (m, 2 H) 1,23 (m, 1 H) 1,42 (dd, J = 9,29, 5,38 Hz, 1 H) 1,87 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1H) 2,21 (m, 2 H) 2,63 (m, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,00 (s, 1 H) 4,20 (s, 1 H) 4,50 (m, 2 H) 5,11 (dd, J = 10,27, 1,47 Hz, 1 H) 5,29 (d, J = 16,87 Hz, 1 H) 5,59 (s, 1 H) 5,73 (m, 1H) 7,86 (dd, J = 5,75, 3,30 Hz, 2 H) 8,01 (dd, J = 5,87, 3,42 Hz, 1 H) 8,29 (dd, J = 5,87, 3,42 Hz, 1 H).
Preparación de derivados de isoquinolina 5,6-disustituida P2* mediante un protocolo de alquilación.
Esquema Sintético General
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Condiciones de Reacción: (a) LDA en THF; (b) Disulfuro de alquilo, tal como (n-PrS)2; (c) Alcóxido sódico, tal como MeONa; (d) Tiofeno 2-carboxaldehído; (e) MnO2 en benceno
Ejemplo 203: Preparación de 1-cloro-5 propiltio-6-fluoro isoquinolina:
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15 A una solución enfriada (-78 ºC) de 1-cloro-6-fluoro isoquinolina (59 mg, 0,32 mmol) en 2 ml de THF se le añadió una solución de LDA en ciclohexano (1,5 Molar, 0,23 ml, 0,35 mmol). La solución de color naranja se agitó durante 2 h antes de tratarla con disulfuro de n-propilo (60 µl, material puro, en exceso). La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente durante 30 min. Se interrumpió con una solución semisaturada de NH4Cl, los residuos orgánicos se extrajeron en acetato de etilo. El análisis CL-EM indicó aproximadamente el 50% de conversión en el
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producto deseado junto con el material de partida principal. El producto deseado se purificó mediante una columna corta (4 cm x 2 cm, tipos de gel de sílice eluidos con éter al 5% en hexanos, 29 mg (rendimiento del 36%) se obtuvo el producto deseado. CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento C]: 3,79 (256). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 0,96 (t, J = 7,34 Hz, 3 H) 1,52 (m, 2 H) 2,86 (m, 2 H) 7,45 (dd, J = 9,29, 8,56 Hz, 1 H) 8,34 (d, J = 0,73 Hz, 2 H) 8,37 (m, 1 H). Este compuesto se alquiló con el tripéptido por medio del procedimiento descrito en el Ejemplo 184, dando el siguiente compuesto:
Ejemplo 204: Preparación del Compuesto 204
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(1-Cloro-5-propiltio-isoquinolin-6-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcca)CONHSO2ciclopropano, Mostrado a continuación
imagen2
Siguiendo el procedimiento general, se obtuvieron 4,6 mg del sólido de color amarillo (3,2%) CL/EM Fr-min (MH+): 2,73 (792) (procedimiento B). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,93 (t, J = 7,34 Hz, 3 H) 0,97 (s, 9 H) 1,08 (m, 2 H) 1,24 (m, 11 H) 1,43 (m, 3 H) 1,86 (m, 1 H) 2,24 (m, 2 H) 2,56 (m, 1 H) 2,78 (c, J = 7,09 Hz, 2 H) 2,92 (m, 1 H) 4,01 (d, J = 9,29 Hz, 1 H) 4,22 (s, 1 H) 4,29 (s, 1 H) 4,59 (d, J = 6,85 Hz, 1 H) 5,11 (d, J = 10,76 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,36 Hz, 1 H) 5,49 (s, 1 H) 5,74 (m, 1 N) 7,66 (d, J = 9,29 Hz, 1 H) 8,18 (d, J = 6,11 Hz, 1 H) 8,41 (m, 2 H).
Ejemplo 205: Preparación de derivados de 5-propiltio-6-etoxi isoquinolina P2*.
imagen2
El siguiente procedimiento puede aplicarse por igual a otras 5-alquiltio-6-alcoxi isoquinolinas cambiando los reactivos que se muestran en el presente documento. A una solución de 1-cloro-6-fluoro isoquinolina (88 mg, 0,48 mmol) en 2,0 ml de THF en una atmósfera de nitrógeno a -78 ºC se le añadió LDA (1,5 Molar en ciclohexano, 0,42 ml, 0,63 mmol) formando una solución de color parduzco oscuro. Se introdujo disulfuro de n-propilo puro (85 µl, en exceso) y después se agitó a -78 ºC durante 30 min. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente durante un periodo de 30 min. Se interrumpió con una solución semisaturada de NH4Cl, los residuos orgánicos se extrajeron en acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron y se secaron al vacío a 50 micras(Hg). El producto en bruto se recogió en 2 ml de THF, se enfrió a -78 ºC, se añadió con exceso de etóxido potásico (60 mg). El intermedio de isoquinolina se purificó finalmente por una columna de gel de sílice (tipo-H, Merck) eluyendo con una mezcla de éter-hexanos, se obtuvieron 32,2 mg (24%) del compuesto puro. El análisis por CL-EM mostró 1-cloro-5-propiltio-6-etoxil isoquinolina en n-min (MH+) [procedimiento C]: 3,77 (282). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 0,94 (t, J = 7,34 Hz, 3 H) 1,46 (m, 2 H) 1,55 (t, J = 6,97 Hz, 3 H) 2,83 (t, J = 7,21 Hz. 2 H) 4,32 (c, J = 6,85 Hz, 2 H) 7,36 (d, J = 9,29 Hz, 1 H) 8,22 (d, J = 6,11 Hz.1 H) 8,32 (d, J = 9,29 Hz, 1 H) 8,35 (d, J = 6,11 Hz, 1 H). Siguiendo el procedimiento de alquilación de tripéptido general (Ejemplo 184), esta 1-cloro-5-propiltio-6-etoxi isoquinolina se alquiló con el tripéptido (compuesto 184), dando 40,7 mg (44,8%) del producto deseado que se muestra a continuación.
Ejemplo 206: Preparación del Compuesto 206
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BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(6-etoxi-5-propiltio-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1-(1R,2S-vinilAcca)CONHSO2Ciclopropano. CL/EM Fr-min (mew): 2,93 (803) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,93 (t, J = 7,34 Hz, 3 H) 1,01 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,21 (m, 11 H) 1,41 (m, 3 H) 1,48 (t, J = 6,85 Hz, 3 H) 1,86 (dd, J =
5 8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,60 (dd, J = 13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,81 (c, J = 6,97 Hz, 2 H) 2,93 (m, 1 H) 4,05 (m, 1 H) 4,21 (s, 1 H) 4,27 (c, J = 7,09 Hz, 2 H) 4,43 (d, J = 11,74 Hz, 1 H) 4,52 (m, 1 H) 5,10 (d, J = 10,76 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,82 (s, 1 H) 7,30 (d, J = 9,05 Hz, 1 H) 7,92 (d, J = 6,36 Hz, 1 H) 7,97 (m, 1 H) 8,22 (d, J = 9,05 Hz, 1 H).
Ejemplo 207: Preparación del Compuesto 207
10 De forma análoga se aplicó el mismo procedimiento a la preparación de BOCNH-P3(L-tBuGly)-P2[(4R)-(6-metoxi-5metiltio-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S VinilAcca)-CONHSO2Ciclopropano.
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A la solución de 100 mg 1-cloro-6-fluoro-isoquinolina (0,55 mmol) en 2 ml de THF seco a -78 ºC se le añadió LDA en THF (1,3 equiv.). Se formó una solución de color pardo oscuro, después se añadió disulfuro y el color de la solución 15 cambió a verdoso, después a pardo claro. La reacción se interrumpió con 2 ml de agua y 2 ml de NN4Cl, se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre sulfato sódico. El disolvente se evaporó al vacío y el residuo resultante se usó en bruto. CL/EM Fr-min (MH+): 2,23 (228) [procedimiento B]. El material en bruto se disolvió de nuevo en 2 ml de THF seco a -78 ºC y se añadieron 1,3 equiv. de KOMe, después la mezcla de reacción se dejó hasta TA y se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con salmuera, se secó sobre 20 sulfato sódico. Se obtuvieron 104 mg (79%). CL/EM Fr-min (MH+): 2,04 (240) [procedimiento B]. El intermedio, 1cloro-5-metiltio-6-metoxi isoquinolina, se sometió al protocolo de alquilación de tripéptido descrito anteriormente. Siguiendo el procedimiento general, se obtuvieron 70,0 mg de un sólido de color amarillo (42,7%). CL/EM Fr-min (MH+): 2,65 (760) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 0,94 (m, 1,1 H) 1,17 (s, 9 H) 1,26 (m, 2 H) 1,39 (m, 1 H) 1,83 (dd, J = 8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,01 (m, 2 H) 2,23 (s, 3 H) 2,45 (m, 1 H) 2,79 (m, 1 H) 3,94
25 (s, 3 H) 3,97 (d, J = 3,91 Hz, 1 H) 4,15 (s, 1 H) 4,25 (d, J = 11,74 Hz, 1 H) 4,36 (dd, J = 9,66, 7,21 Hz, 1 H) 4,99 (d, J = 10,27 Hz, 1 H) 5,12 (d, J = 16,87 Hz, 1 H) 5,69 (m, 1 H) 5,74 (s, 1 H) 7,08 (d, J = 9,05 Hz, 1 H) 7,83 (m, 2 H) 8,06 (d, J = 9,05 Hz, 1 H).
Ejemplo 208: Preparación de 1-cloro-6-metoxi-isoquinolin-5-il-tiofen-2-il-metanona
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Siguiendo el mismo protocolo de desprotección de LDA (preparación del Ejemplo 203) de 1-cloro-6-fluoro
isoquinolina descrito anteriormente, al anión inicial se inactivó con en su lugar con 2-tiofenocarboxaldehído, dando 1
cloro-6-fluoro isoquinolin-5-il-tiofen-2-il-metanol. El material se oxidó para dar 1-cloro-6-fluoro-isoquinolin-5-il-tiofen-2
5 il-metanona usando MnO2 en benceno con un rendimiento toral del 49,6% después de la purificación por
cromatografía. CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento C]: 2,98 (292). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm
7,12 (dd, J = 4,89, 3,91 Hz, 1 H) 7,40 (m, 1 H) 7,53 (m, 1 H) 7,56 (dd, J = 5,87, 0,73 Hz, 1 H) 7,82 (dd, J = 5,01, 1,10
Hz, 1 H) 8,27 (d, J = 5,87 Hz, 1 H) 8,54 (ddd, J = 9,29, 5,38, 0,73 Hz, 1 H). Desplazamiento aromático nucleófilo ipso
del átomo de flúor se realizó en una solución de exceso de metóxido potásico para dar, principalmente 1-cloro-610 metoxi-isoquinolin-5-il-tiofen-2-il-metanona junto con 25-33% de 1,6-dimetoxi-isoquinolin-5-il-tiofen-2-il-metanona. El
material en bruto (77 mg) se usó en la etapa de alquilación con el tripéptido sin purificación adicional.
Ejemplo 209: Preparación del Compuesto 209
imagen2
Siguiendo el procedimiento general de alquilación de tripéptido (Ejemplo 184), se obtuvieron 35,3 mg de BOCNH
15 P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-6-metoxi-5-(tiofeno-2-carbonil)-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SvinilAcca)CONHSO2ciclopropano en forma de un sólido de color pálido (26,5%). CL/EM Fr-min (MH+): 2,54 (825) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,02 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,22 (m, 2 H) 1,26 (s, 9 H) 1,43 (m, 1 H) 1,87 (dd, J = 7,95, 5,50 Hz, 1 H) 2,28 (m, 2 H) 2,62 (dd, J = 13,82, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,90 (s, 3 H) 4,07 (dd, J = 11,62, 3,06 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,43 (m, 1 H) 4,55 (dd, J = 9,78, 7,34 Hz, 1 H) 5,09 (m, 1 H) 5,29 (d, J =
20 17,12 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,86 (s, 1 H) 6,93 (d, J = 6,11 Hz, 1 H) 7,11 (m, 1 H) 7,32 (dd, J = 3,91, 0,98 Hz, 1 H) 7,46 (d, J = 9,29 Hz, 1 H) 7,86 (t, J = 6,72 Hz, 1 H) 7,91 (dd, J = 4,89, 1,22 Hz, 1 H) 8,39 (d, J = 9,29 Hz, 1 H).
Preparación de P2* por medio de derivados de ácido cinámico. El procedimiento general descrito a continuación extensamente en otra parte.
Esquema Sintético General
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Ejemplo 210: Preparación del Compuesto 210
Se suspendieron 10,0 g de ácido meta-tolil-acrílico (61,7 mmol) en 50 ml de benceno, se añadieron 12,6 ml de DPPA (0,95 equiv.) seguido de 10,3 ml de trietilamina (1,2 equiv.). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente 5 durante 1 h. El volátil se retiró al vacío y la acida meta-tolil-acriloilo se purificó por cromatografía ultrarrápida, produciendo 11,5 g del compuesto puro (cuantitativo). Este material, en 100 ml de difenilmetano, se introdujo gota a gota en 100 ml de difenilmetano calentado previamente a 200 ºC durante un periodo de una h. La solución resultante se mantuvo a esta temperatura durante 4 h más y después se enfrió a temperatura ambiente. Se formó un precipitado de color blanco, se retiró por filtración. El sólido se lavó tres veces con hexanos y se secó. El filtrado se 10 diluyó con 200 ml de hexanos, la solución se dejó en reposo durante una noche para permitir la separación del segundo cultivo. Los materiales se combinaron, dando 4,2 g de 6-metil-isoquinolin-1-ol (50%). CL/EM Fr-min (MH+): 1,31 (160) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 2,49 (s, 3 H) 6,61 (d, J = 7,32 Hz, 1 H) 7,13 (d, J = 7,02 Hz, 1 H) 7,36 (d, J = 8,24 Hz, 1 H) 7,45 (s, 1 H) 8,18 (d, J = 8,24 Hz, 1 H). El material se suspendió en 15 ml de POCl3 y se llevó a reflujo durante 3 horas. Después de la retirada del POCl3 al vacío, el residuo se repartió entre 15 EtOAc (1 l) y NaOH acuoso frío (generado a partir de 200 ml de NaOH 1,0 N y 20 ml de NaOH 10,0 N) y se agitó durante 15 min. La fase orgánica se lavó con agua (2 x 200 ml) y salmuera (200 ml), se secó (MgSO4) y se concentró al vacío, proporcionando 1-cloro-6-metil-isoquinolina (67,4%). CL/EM Fr-min (MH+): 1,92 (178) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 2,53 (s, 3 H) 7,47 (d, J = 6,11 Hz, 2 H) 7,56 (s, 1 H) 8,18 (m, 2 H). La alquilación final de 1-cloro-6-metil-isoquinolina con el tripéptido se realizó usando el protocolo
20 descrito anteriormente (Ejemplo 184).
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BOCNH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(6-metil isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S-VinilAcc)-CONHSO2Ciclopropano: el material se obtuvo en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 18%. CL/EM Frmin (MNa+) [procedimiento B]: 2,64 (720). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 13 H) 1,23 (m. 9 H) 1,42 (m, 1
25 H) 1,86 (dd. J = 7,95, 5,50 Hz, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,49 (s, 3 H) 2,61 (dd, J = 13,82, 6,48 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,05 (dd, J = 11,86, 3,30 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,43 (d, J = 11,49 Hz, 1 H) 4,52 (m, 1 H) 5,10 (d, J = 11,49 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,83 (s, 1 H) 7,24 (d, J = 5,87 Hz, 1 H) 7,35 (d, J = 8,07 Hz, 1 H) 7,58 (s, 1 H) 7,89 (d. J = 5,87 Hz, 1 H) 8,07 (d, J = 8,56 Hz, 1 H).
Ejemplo 211: Preparación del Compuesto 211
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Siguiendo el procedimiento general descrito anteriormente, se obtuvieron 51,0 mg de BOCNH-P3(L-t-BuGly)P2[(4R)-(1,3-Dioxa-7-aza-ciclopenta[a]naftalen-6-ol)-S-prolina]-P1(1R,2S-VinilAcca)-CONHSO2Ciclopropano, en forma de un sólido de color pálido (64,9%). CL/EM n-min (MH+): 2,57 (728) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,99 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,18 (m, 11 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,23 (m, 2 H) 2,59 (dd, J = 13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,04 (dd, J = 11,74, 2,20 Hz, 1 H) 4,22 (s, 1 H) 4,43 (d, J = 11,74 Hz, 1 H) 4,51 (m, 1 H) 5,10 (d, J = 10,27 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 5,82 (s, 1 H) 6,18 (s, 2 H) 7,13 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 7,19 (d, J = 6,11 Hz, 1 H) 7,81 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 7,85 (d, J = 6,11 Hz, 1 H).
Preparación de derivados de isoquinolina P2* 5,6,7 trisustituida:
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Condiciones de Reacción: (a) LDA en THF; (b) N-fluorobencenosulfonimida (NFSI) para R = F o sulfuro de dimetilo (MeS)2 para R = SMe.
La 5,6-metilenodioxi-1-cloroisoquinolina preparada anteriormente se desprotonó directamente en presencia de una base fuerte, tal como LDA, proporcionando el 7-anion correspondiente sin interferir con la funcionalidad 1-cloro. El 7
15 anion se inactivó con electrófilos, tales como NFSI (N-fluorobencenosulfonimida) y sulfuro de dimetilo, produciendo el sistema de anillo de isoquinolina 7-sustituida.
Ejemplo 212: Preparación del Compuesto 212
Etapa 1:
Preparación de 5,6-metilenodioxi-7-fluoro-1-cloro isoquinolina. A una solución de 5,6-metilenodioxi-1-cloro
20 isoquinolina (126 mg, 0,61 mmol) en 4 ml de THF en una atmósfera de nitrógeno a -78 ºC se le añadió una solución de LDA en ciclohexano (1,5 Molar, 0,65 ml, 0,98 mmol). La solución de color parduzco claro se agitó durante 15 min antes de tratarla con N-fluorobencenosulfonimida (NFSI, 0,3 g, 1,5 equivalentes). El análisis por TLC mostró la formación de un nuevo punto, además del análisis de partida sin cambiar. El tratamiento acuoso seguido de extracciones con acetato de etilo produzco un producto en bruto oleoso que se purificó por HPLC preparativa, dando
25 52 mg (38%). CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento C]: 3,09 (226). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 6,33 (s, 2 H) 7,52 (d, J = 5,87 Hz, 1 H) 7,71 (d, J = 10,51 Hz, 1 H) 8,16 (d, J = 5,87 Hz, 1 H). Etapa 2: La alquilación de 5,6-metilenodioxi-7-fluoro-1-cloro isoquinolina con el tripéptido se realizó como se ha descrito anteriormente (Ejemplo 184), proporcionando el producto principal como resultado del desplazamiento de flúor.
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(6-Cloro-1,3-dioxa-7-aza-ciclopenta[a]naftalen-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S 30 VinilAcca)-CONHSO2Ciclopropano, mostrado a continuación
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Siguiendo el procedimiento general, se obtuvieron 24,3 mg del sólido de color amarillo (24,3%). CL/EM Fr-min (MH+): 2,54 (763) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,00 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,20 (m, 2 H) 1,29 (s, 9 H) 1,42 (dd, J = 9,41, 5,26 Hz, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,24 (m, 2 H) 2,54 (dd, J = 13,57, 6,48 Hz, 1 H)
5 2,92 (m, 1 H) 4,04 (dd, J = 12,10, 2,81 Hz, 1 H) 4,20 (d, J = 7,34 Hz, 1 H) 4,33 (d, J = 12,23 Hz, 1 H) 4,47 (dd, J = 10,52, 6,85 Hz, 1 H) 5,10 (dd, J = 10,39, 1,59 Hz, 1 H) 5,28 (dd, J = 17,12, 1,22 Hz. 1 H) 5,46 (d, J = 5,87 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 6,29 (m, 2 H) 7,40 (s, 1 H) 7,56 (m, 1 H) 8,01 (d, J = 5,62 Hz, 1 H).
Ejemplo 213: Preparación del Compuesto 213
A una solución de 5,6-metilenodioxi-1-cloro isoquinolina (84 mg, 0,41 mmol) en 4 ml de THF en una atmósfera de
10 nitrógeno a -78 ºC se le añadió una solución de LDA en ciclohexano (1,5 Molar, 0,60 ml, 0,9 mmol). La solución de color parduzco transparente se agitó durante 15 min a -78 ºC antes de tratarla con sulfuro de metilo (50 µl de reactivo puro, 1,4 equivalentes). El análisis por TLC mostró la formación de un nuevo punto, además del material de partida sin cambiar. El tratamiento acuoso seguido de extracciones con acetato de etilo produjo un producto en bruto oleoso que se purificó por HPLC preparativa, dando 51 mg (49%). CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento C]: 3,39 (254).
15 RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 2,64 (s, 3 H) 6,29 (s, 2 H) 7,49 (d, J = 4,89 Hz, 1 H) 7,71 (s, 1 H) 8,11 (d, J = 5,87 Hz, 1 H). La alquilación de 5,6-metilenodioxi-7-metiltio-1-cloro isoquinolina con el tripéptido se realizó como se ha descrito anteriormente (Ejemplo 184), proporcionando el producto deseado que se muestra a continuación:
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(4-metiltio-1,3-dioxa-7-aza-ciclopenta[a]naftalen-6-iloxi)-S-prolina]20 P1(1R,2SVinilAcca)-CONHSO2Ciclopropano
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Siguiendo el procedimiento general, se obtuvieron 59,6 mg del sólido de color amarillo (42,2%).CL/EM Fr-min (MH+): 2,70 (774) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 1,02 (m, 11 H) 1,16 (s, 9 H) 1,32 (s, 2 H) 1,45 (m, 1 H) 1,94 (m, 1 H) 2,12 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 2,56 (s, 3 H) 2,62 (m, 2 H) 2,90 (d, J = 4,40 Hz. 1 H) 4,15 (d, J
25 = 7,83 Hz, 2 H) 4,48 (d, J = 12,47 Hz, 1 H) 4,62 (t, J = 7,83 Hz, 1 H) 5,13 (d, J = 10,52 Hz, 1H) 5,26 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,74 (d, J = 16,38 Hz, 1 H) 5,95 (s, 1 H) 6,28 (s, 2 H) 7,41 (s, 1 H) 7,59 (s, 1 H) 7,85 (d, J = 6,11 Hz, 1 H).
Preparación de derivados de isoquinolina 3,4-disustituida P2*
Ejemplo 215: Preparación del Compuesto 215
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BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(1R)-(2,3-dihidro-1H-4-aza-ciclopenta[a]naftalen-5-iloxi)-S-protin]-P1(1R,2SVinilAcca)CONHSO2Ciclopropano, mostrad a continuación se preparó como se representa en el siguiente esquema:
Esquema Sintético General del compuesto 214 de componente de isoquinolina
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Notas: La síntesis del nuevo 1-fluoro P2* se realizó con éxito mediante las tecnologías que se citan a continuación:
(1)
Rigby, James H.; Holsworth, Daniel D.; James, Kelly Vinil Isocianatos In Synthesis. [4 + 2] Cicloaddition Reactions With Benzyne Addends. Journal Of Organic Chemistry (1989), 54(17), 4019-20
(2)
Uchibori, Y.; Umeno, M.; Yoshiokai, H.; Heterocicles, 1992, 34 (8), 1507-1510
Ejemplo 214: Preparación de Compuestos 214, 5-cloro-2,3-dihidro-1H-4-aza-ciclopenta[a]naftaleno y Compuesto 215 del Ejemplo 215
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Se preparó 2,3-dihidro-1H-4-aza-ciclopenta[a]naftalen-5-ol se preparó de acuerdo con el procedimiento de Rigby 5
10
20
25
30
35
descrito en (referencia 1) citada anteriormente. Usando POCl3 como se ha descrito en cualquier otra parte, Compuesto 214, se sintetizó en 59,8% (430 mg). CL/EM Fr-min (MH+): 2,29 (204) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 2,28 (m, 2 H) 3,19 (c, J = 7,74 Hz, 4 H) 7,58 (m, 1 H) 7,71 (m, 2 H) 8,32 (d, J = 8,56 Hz, 1 H). El cloro es suficientemente reactivo para alquilarse con el tripéptido de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 184, dando el producto deseado Compuesto 215. Sin embargo, el rendimiento total podría ser el doble si el cloro se intercambia por flúor en el fluoruro por el procedimiento de Uchibori descrito en (referencia 2). De esta manera, se aislaron 17,0 mg del Compuesto 215, en forma de un sólido de color amarillo pálido (23,6%). CL/EM Frmin (MH+): 2,80 (724) [procedimiento B]. RMN 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 1,03 (s, 9 H) 1,09 (m, 2 H) 1,24 (m, 11 H) 1,44 (dd, J = 8,24, 5,49 Hz, 1 H) 1,88 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 1 H) 2,25 (m, 4 H) 2,63 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H) 2,94 (m, 1 H) 3,05 (m, 2 H) 3,10 (m, 2 H) 4,08 (dd, J = 11,60, 2,75 Hz, 1 H) 4,24 (d, J = 20,45 Hz, 1 H) 4,45 (d, J = 11,90 Hz, 1 H) 4,54 (dd, J = 9,46, 7,63 Hz, 1 H) 5,11 (m, 1 H) 5,30 (d, J = 17,09 Hz, 1 H) 5,75 (m, 1 H) 5,87 (s, 1 H) 7,44 (t, J = 7,02 Hz, 1 H) 7,69 (m, 2 H) 8,18 (d, J = 8,24 Hz, 1 H).
Preparación de componentes de 3,4-dihidrofuranilo y furanil isoquinolina P2*, Ejemplos 217 y 218,
Esquema Sintético General
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Ejemplo 217: Preparación del Compuesto 217, 5-cloro-2,3-dihidro-1-oxa-4-aza-ciclopenta[a]naftaleno y el Compuesto 218, 5-cloro-1-oxa-4-aza-ciclopenta[a]naftaleno.
La síntesis hizo uso de las tecnologías descritas, en parte, en las siguientes referencias:
(1)
Hojo, Masaru; Masuda, Ryoichi; Sakaguchi, Syuhei; Takagawa, Makoto, Synthesis (1986), (12), 1016-17
(2)
Rigby, James H.; Hotsworth, Daniel D.; James, Kelly. Vinil Isocianatos In Synthesis. [4 + 2] Cicloaddition Reactions With Benzyne Addends. Journal Of Organic Chemistry (1989), 54(17), 4019-20
(3)
Uchibori, Y.; Umeno, M.; Yoshiokai, H.; Hererocicles, 1992, 34 (8), 1507-1510
Se produjeron juntos 2,3-dihidro-1-oxa-4-aza-ciclopenta[a]naftalen-5-ol y 1-oxa-4-aza ciclopenta[a]naftalen-5-ol cuando se siguieron los procedimientos (referencias 1 y 2) citados anteriormente. La conversión del par en sus derivados de cloro se realizó mediante POCl3 de manera habitual: Los productos hidroxi en bruto (aproximadamente 2 g, aceite de color amarillo pálido) se trataron con 15 ml de POCl3 y la mezcla se llevó a reflujo durante 3 horas. Después de la retirada del POCl3 al vacío, el residuo se agitó con EtOAc (1 l) y NaOH acuoso frío (220 ml, 1,0 N) durante 15 min. La fase orgánica se separó, se lavó con agua (2 x 200 ml) y salmuera (200 ml), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío, proporcionando 300 mg de Ejemplo 217, 5-cloro-2,3-dihidro-1-oxa-4-azaciclopenta[a]naftaleno (13,2%) y 100 mg de Ejemplo 218, 5-cloro-1-oxa-4-aza ciclopenta[a]naftaleno (4,4%) en formas de sólidos de color pardo claro después de la separación por cromatografía sobre gel de sílice. Compuesto
217: CL/EM Fr-min (MH+): 2,05 (206) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 3,46 (t, J = 9,05 Hz, 2 H) 4,82 (t, J = 9,17 Hz, 2 H) 7,58 (m, 1 H) 7,66 (m, 1 H) 7,85 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 8,21 (d, J = 8,56 Hz, 1 H). Compuesto 218: CL/EM Fr-min (MH+): 2,16 (204) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 7,15 (d, J = 2,20 Hz, 1 H) 7,70 (m, 1 H) 7,89 (m, 2 H) 8,27 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 8,44 (d, J = 8,80 Hz, 1 H).
Preparación de 5-fluoro-2,3-dihidro-1-oxa-4-aza-ciclopenta[a]naftaleno y productos de acoplamiento de P2* finales.
El intercambio cloro/flúor se alcanzó mediante el procedimiento (referencia 3) citado anteriormente. De esta manera se suspendieron 90 mg de 5-cloro-2,3-dihidro-1-oxa-4-aza-ciclopenta[a]naftaleno (Ejemplo 217) se suspendió en 1,5 ml de Bu4PHF2 y se irradiaron mediante un microondas (Smith Reactor) a aproximadamente 120 ºC durante 2 horas. Después de tratamiento acuoso y purificación en columna, se obtuvieron 22 mg de producto de flúor (26,9%). CL/EM Fr-min (MH+): 1,91 (190) [procedimiento B]. El derivado de furano (Ejemplo 218), 5-cloro-1-oxa-4-azaciclopenta[a]naftaleno fue lo suficientemente reactivo para alquilarse directamente con el tripéptido sin activación de flúor.
Ejemplo 219: Preparación del Compuesto 219
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10 BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(2,3-dihidro-1-oxa-4-aza-ciclopenta[a]naftalen-5-iloxi)-S-prolina]-P1(1R,2S VinilAcca)-CONHSO2Ciclopropano. Siguiendo el procedimiento general de alquilación, se obtuvieron 22,0 mg un sólido de color amarillo (26,3%).CL/EM Fr-min (MH+): 2,65 (726) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD30D) δ ppm 0,99 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,20 (m, 11 H) 1,40 (m, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,21 (dd, J = 17,48, 8,93 Hz, 2 H) 2,60 (dd, J = 13,45, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,34 (m, 2 H) 4,04 (dd, J = 11,74, 3,18 Hz, 1 H) 4,24 (s,
15 1 H) 4,41 (d, J = 11,49 Hz, 1 H) 4,51 (m, 1 H) 4,74 (t, J = 9,05 Hz, 2 H) 5,11 (d, J = 10,27 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,36 Hz, 1 H) 5,73 (m. I H) 5,78 (s, 1 H) 7,43 (m, 1 H) 7,65 (t, J = 7,46 Hz, 1 H) 7,74 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 8,12 (d, J = 8,56 Hz, 1 H).
Ejemplo 220: Preparación del Compuesto 220
imagen2
20 BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(1-oxa-4-aza-ciclopenta[a]naftalen-5-iloxi)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcca)CONHSO2Ciclopropano. Siguiendo el procedimiento general de alquilación, se obtuvieron 13,0 mg de de un sólido de color amarillo (20%). CL/EM Fr-min (MH+): 2,70 (724) [procedimiento B]. RMN 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (S, 9 H) 1,09 (m, 2 H) 1,22 (s, 9 H) 1,27 (m, 2 H) 1,46 (m, 1 H) 1,89 (dd, J = 7,78, 5,65 Hz, 1 H) 2,24 (d, J = 8,55 Hz, 1 H) 2,33 (t, J = 9,92 Hz, 1 H) 2,68 (dd, J = 13,73, 7,02 Hz, 1 H) 2,95 (m, 1 H) 4,14 (m, 1 H) 4,26 (s, 1 H) 4,50 (d, J =
25 11,90 Hz, 1 H) 4,57 (d, J = 17,09 Hz, 1 H) 5,12 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 5,30 (d, J = 17,40 Hz, 1 H) 5,75 (m, 1 H) 5,93 (s, 1 H) 6,97 (d, J = 2,14 Hz, 1 H) 7,51 (t, J = 7,32 Hz, 1 H) 7,81 (t, J = 7,48 Hz, 1 H) 7,92 (s, 1 H) 8,13 (d, J = 7,94 Hz, 1 H) 8,28 (d, J = 8,24 Hz, 1 H).
Preparación de derivados 3-halo, 3-heteroarilo 4-alcoxi y 4-hidroxi isoquinolina P2*
Esquema Sintético General Condiciones de Reacción: (1) MeOK en DMPU; (2) NBS en dicloroetano; (3) MCPBA en CH2Cl2; (4) POCl3 en dicloroetano; (5) BBr3 en CH2Cl2; (6) SEM-Cloruro y base de Hunig en CH2Cl2
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Se preparó 4-metoxi isoquinolina (Ejemplo 222a) a partir de 4-bromo isoquinolina por un procedimiento nuevo y conveniente usando equipos y reactivos de laboratorio convencionales. Una bromación de NBS dio 3-bromo-4metoxi isoquinolina (Ejemplo 222b) con buen rendimiento. Se realizó sin problemas la oxidación de MCPBA para formar el N-óxido correspondiente (Ejemplo 222c), que se isomerizó en 1-cloro-3-bromo-4-metoxi isoquinolina (Ejemplo 222d) usando el procedimiento habitual de POCl3. La 4-metoxi isoquinolina se alquiló con el tripéptido, dando el derivado de 3-bromo-4-metoxi P2* adecuado para el acoplamiento de Stille y Suzuki. Como alternativa la 4metoxi iso-quinolina se desmetiló en BBr3, dando la 4-hidroxi-3-bromo-1-cloro isoquinolina (Ejemplo 222e). El grupo 4-hidroxi se protegió de nuevo con SEM-cloruro, dando el 4-SEM protegido intermedio Ejemplo 222. El compuesto de 4-hidroxi se regeneró después de que se alcanzara el acoplamiento por un protocolo de desprotección inducido por un ácido o inducido por flúor.
Ejemplo 222d: Preparación de 1-cloro-3-bromo-4-metoxi-isoquinolina
Etapa 1:
Una solución de 4-bromo isoquinolina (15 g, 73 mmol, material comercial) en 200 ml de dimetil-3,4,5,6-tetrahidro2(1H)-pirimidinona (DMPU, Aldrich) se añadió a metóxido potásico sólido (5,6 g, 80 mmol). El recipiente de reacción se sumergió en un baño de aceite a 105 ºC durante 20 min. El color de la mezcla cambió rápidamente de su color inicial muy pálido a pardo verdoso inmediatamente después de calentamiento. El recipiente de reacción se retiró del baño de aceite y se diluyó con agua, los residuos orgánicos se repartieron en éter por extracción múltiple con porciones de éter. El análisis TLC dos nuevos puntos (mezcla 1:1 en v/v de hexanos y acetato de etilo comoeluyente) de aproximadamente el mismo tamaño. Éstos se separaron en una columna de gel de sílice (Merck, tipo H) eluyendo con directamente con hexanos, seguido de adición gradual de éter en la fase móvil. El producto deseado, 4-metoxi isoquinolina (4,1 g, 35,3%) se aisló después de la evaporación de los disolventes. El otros producto también se aisló como la reducción de isoquinolina subproducto. La identidad del subproducto se confirmó por comparación de RMN con el material auténtico. Ejemplo 222a: CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento C]: 1,16 (160). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ 4,07 (s, 3 H) 7,61 (m, 1 H) 7,69 (m, 1 H) 7,93 (d, J = 8,07 Hz, 1 H) 8,08 (s, 1 H) 8,19 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 8,89 (s, 1 H). [Nota: este compuesto se ha preparado previamente en Zoltewicz, John A.; Oestreich, Terence M.; Sale, Alan A, Journal of the American Chemical Society (1975), 97(20), 5889-96 en un "Monel Bomb", y después por "focused microwave" procedimiento iniciado en Cherng, Yie-Jia, Tetrahedron (2002), 58(6), 1125-1129, El procedimiento de la presente invención no necesita aparatos de alta presión especiales ni equipo de microondas a escala preparativa].
Etapa 2:
El material (Ejemplo222a) se sometió a bromación NBS, por tanto se trató 4-metoxi isoquinolina (Ejemplo 222a, 2,1 g, 13,2 mmol) en 1,2-dicloroetano (DCE, 150 ml) con N-bromosuccinimida (NBS, 1,5 g, 8,4 mmol, 0,6X) a 70 ºC durante una h seguido de la adición de una segunda porción de 1,5 g de NBS. La mezcla de color parduzco se agitó
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durante una h más antes de la adición de una tercera porción de 1,0 g de NBS. La bromación se controló por CL-EM hasta que no quedó material de partida. La mezcla en bruto se evaporó a sequedad y el producto deseado se filtró sobre un lecho corto de gel de sílice (Tipo-H, Merck, diámetro 3 cm por altura de 1,5 cm) eluyendo directamente con hexanos en primer lugar seguido de aumento gradual de la cantidad de éter. El producto deseado, (Ejemplo 222b), se aisló en forma de un material oleoso (1,7 g, 54%). CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento C]: 2,65 (238). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 4,04 (s, 3 H) 7,64 (t, J = 7,58 Hz, 1 H) 7,76 (t, J = 7,09 Hz, 1 H) 7,99 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 8,11 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 8,85 (s, 1 H). [se preparó previamente 3-bromo-4-metoxi isoquinolina mediante un procedimiento diferente: Finkentey, Christel; Langhals, Elke; Langhals, Heinz. Chemische Berichte (1983), 116(6), 2394-7. La RMN del producto fue idéntica a la relacionada].
Etapa 3:
El producto de bromación de NBS se sometió a oxidación MCPBA en cloruro de metileno a temperatura ambiente. De esta forma se añadió MCPBA (1,80 g, pureza del 77%, 8,0 mmol) en una solución de 3-bromo-4-metoxi isoquinolina (Ejemplo 222b, 1,65 g, 6,9 mmol) en 35 ml de CH2Cl2. La solución se agitó durante 4 h formando una suspensión de color blanco. Se añadió una solución de bicarbonato sódico (5%, recién preparada, 20 ml) se añadió a la mezcla y los residuos orgánicos se extrajeron en CH2Cl2 (10 x 25 ml). Fue necesaria extracción múltiple en disolvente orgánico para recuperar un poco del producto N-óxido de solución acuosa. El material en bruto obtenido después de la evaporación de los disolventes se purificó adicionalmente mediante una filtración sobre gel de sílice, dando 1,36 g (5,4 mmol, 78%) del N-óxido (Ejemplo 222c) en forma de un sólido ceroso. CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento C]: 1,79 (254). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 4,07 (s, 3 H) 7,63 (m, 2 H) 7,72 (m, 1 H) 8,00 (m, 1 H) 8,86 (s, 1 H).
Etapa 4:
El reordenamiento final de N-óxido se hizo de manera habitual en POCl3, usando procedimientos descritos en otra parte. El rendimiento del Ejemplo 222d fue esencialmente cuantitativo. CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento D]: 2,69 (272). RMN 1H como sal de HCl, (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 4,07 (s, 3 H) 7,81 (m, 1 H) 7,92 (m, 1 H) 8,17 (d, J = 8,3 Hz, 1 H) 8,34 (d, J = 8,31 Hz, 1 H). RMN 1H en forma de la base libre, (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 4,03 (s, 3 H) 7,72 (m, 1 H) 7,81 (m, 1 H) 8,12 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 8,28 (d, J = 8,56 Hz, 1 H).
Ejemplo 223: Preparación del Compuesto 223
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La base libre (Ejemplo 222d) obtenida en la etapa anterior se alquiló con el fragmento de tripéptido usando el protocolo de alquilación (Ejemplo 184) descrito en otra parte, dando el 79% del producto deseado en forma de un sólido blanco papel. CL/EM Fr-min (MNa+) [procedimiento C]: 3,91 (814). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1:02 (s, 9 H) 1,06 (dd, J = 8,07, 1,47 Hz, 2 H) 1,22 (m, 11 H) 1,42 (dd, J = 9,78, 5,14, Hz, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,22 (dd, J = 18,10, 9,29 Hz, 1 H) 2,28 (m, 1 H) 2,61 (dd, J = 13,57, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,92 (s, 3 H) 4,06 (dd, J = 11,86, 2,81 Hz, 1 H) 4,22 (s, 1 H) 4,43 (d, J = 11,49 Hz, 1 H) 4,51 (m, 1 H) 5,10 (d, J = 10,52 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,81 (s. 1 H) 7,56 (t, J = 7,58 Hz, 1 H) 7,78 (t, J = 7,58 Hz, 1 H) 8,00 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 8,16 (d, J = 8,56 Hz, 1 H).
Ejemplo 224 y 225: Preparación de Compuestos 224 y Compuesto 225
El grupo 4-metoxi en 1-cloro-3-bromo-4-metoxi isoquinolina (Ejemplo 222d) descrito anteriormente se convirtió en un resto α-trimetilsilil etoxi metil (SEM) mediante el procedimiento. Se desmetiló 1-cloro-3-bromo-4-metoxi isoquinolina (Ejemplo 222d) usando BBr3 (la concentración final de la reacción ajustada fue 0,2-0,3 Molar BBr3) a temperatura ambiente durante 12 h. La alta concentración de BBr3 para dichas desmetilación se encontró que era necesaria y eficiente. La mezcla de reacción en bruto se diluyó con 50 volúmenes de metanol anhidro antes de la evaporación a sequedad. La desmetilación fue esencialmente cuantitativa. Ejemplo222e: CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento D]: 2,32 (258). RMN 1H de la sal libre de HCl (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 5,83 (s a, 1 H) 7,73 (t, J = 7,70 Hz, 1 H) 7,79 (t, J = 7,58 Hz, 1 H) 8,22 (m, 2 H). La 4-hidroxi-3-bromo-1-cloro isoquinolina (Ejemplo
222e) se protegió de nuevo con cloruro 2-(trimetilsilil)etoximetilo (SEM-CI). La base libre en bruto de la preparación anterior se secó a 40 micras(Hg) a temperatura ambiente antes de proteger de nuevo con cloruro de SEM. A una solución de del compuesto de 4-hidroxi (Ejemplo 222e, 1,33 g, 5,2 mmol) en cloruro de metileno (50 ml) a 0 ºC se le añadió secuencialmente diisopropiletil amina (2 ml, 11,5 mmol) y cloruro de SEM (1,8 ml, 10 mmol). La mezcla se 5 agitó durante 10 min antes de lavarla con una solución recién preparada de NaHCO3 (5%, 100 ml). Los residuos orgánicos se extrajeron en varias porciones de cloruro de metileno, las fases orgánicas combinadas se lavaron de nuevo con 20 ml de agua desionizada antes de concentrarlas al vacío. La protección SEM fue esencialmente cuantitativa. Ejemplo 222: CL/EM Fr-min (MH+) [procedimiento D]: 3,40 (410) RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMOD) δ ppm 0,03 (s, 9 H) 0,99 (m, 2 H) 3,98 (m, 2 H) 5,33 (s, 2 H) 7,72 (m, 1 H) 7,80 (m, 1 H) 8,17 (d, J = 8,56 Hz, 1 H)
10 8,27 (d, J = 8,07 Hz, 1 H). La alquilación de isoquinolina protegida con 4-SEM con tripéptido: Compuesto 224 y Compuesto 225 se generó a partir de la reacción de alquilación del mismo tripéptido. El compuesto de 4-hidroxi (Compuesto 224) se produjo más probablemente como resultado de la presencia de TFA durante la purificación por HPLC preparativa.
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15 Ejemplo 224 (15,4%): CL/EM Fr-min (MNa+) [procedimiento D]: 2,87 (800). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,02 (s, 9 H) 1,06 (d, J = 8,31 Hz, 2 H) 1,25 (s, 9 H) 1,42 (s, 2 H) 1,86 (m, 1 H) 2,23 (m, 2 H) 2,60 (dd, J = 13,21, 7,34 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,06 (d, J = 11,00 Hz, 1 H) 4,24 (m, 2 H) 4,38 (d, J = 11,98 Hz, 1 H) 4,49 (dd, J = 9,78, 7,09 Hz, 1 H) 5,10 (d, J = 10,03 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,36 Hz, 1 H) 5,72 (m, 1 H) 5,76 (s, 1 H) 7,52 (t, J = 7,46 Hz, 1 H) 7,71 (t, J = 7,09 Hz, 1 H) 8,09 (d, J = 4,40 Hz, 1 H) 8,11 (d, J = 4,16 Hz, 1 H).
20 Ejemplo 225 (8,0%): CL/EM Fr-min ([M-BOC]+ [procedimiento D]: 3,46 (808). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,01 (s, 9 H) 0,96 (m, 2 H) 1,02 (s, 11 H) 1,06 (d, J = 6,60 Hz, 2 H) 1,24 (s, 9 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, J = 7,83, 5,38 Hz, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,62 (dd, J = 13,69, 7,34 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 3,97 (m, 2 H) 4,07 (dd, J = 10,88, 3,55 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,43 (d, J = 11,25 Hz, 1 H) 4,50 (m, 1 H) 5,10 (d, J = 10,76 Hz, 1 H) 5,25 (m, 3 H) 5,74 (m. I H) 5,82 (s, 1 H) 7,57 (m, 1 H) 7,77 (t, J = 7,83 Hz, 1 H) 8,06 (d, J = 8,56 Hz. 1 H) 8,16 (d, J = 8,31 Hz, 1 H).
25 Preparación de derivados de 4H-[1,3]dioxino[5,4-c]isoquinolin P2*
Esquema Sintético General Condiciones de Reacción: (1) MeOK en DMPU; (2) MCPBA en CB2Cl2; (3) POCl3 en DCE; (4) BBr3 en CH2Cl2; (5) solución de HCHO en 40% de H2SO4 por el procedimiento de Síntesis de 1,3-oxazino[5,6-c]isoquinolinas y compuestos relacionados. Miyoko Toyama y Hirotaka Otomasu, Chem. Pharm. Bull. 33(12),5543-5546,1985; (6) Fluororination procedure by Uchibori, Y.; Umeno. M.; Yoshiokai, H.; Heterocicles, 1992, 34 (8), 1507-1510
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Ejemplo 227: Preparación del Compuesto 227
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Se preparó 6-cloro-1,3-oxazino[5,6-c]isoquinolina por el procedimiento de Miyoko Toyama e Hirotaka Otomasu partiendo de 1-cloro-4-hidroxi isoquinolina. El material de partida: 1-cloro-4-hidroxi isoquinolina (Ejemplo 226c) se 10 preparó mediante la secuencia sintética descrita anteriormente. Se realizó la oxidación en MCPBA de 4-metoxi isoquinolina (Ejemplo 222a), dando 79,1% del N-óxido correspondiente (Ejemplo 226a). El material se convirtió inmediatamente después en el derivado de 1-cloro en POCl3, dando el cloruro (Ejemplo226b) en rendimiento cuantitativo esencialmente. La 1-cloro-4-metoxi isoquinolina en bruto se desmetiló en BBr3 a temperatura ambiente, dando la 1-cloro-4-hidroxi isoquinolina correspondiente (Ejemplo226c) después de tratar la mezcla de BBr3 en bruto
15 con metanol anhidro a temperatura ambiente, seguido de evaporación para deshacerse del exceso de residuos de borato. La reacción de Miyoko Toyama e Hirotaka Otomasu dio 266 mg de 6-cloro-1,3-oxazino[5,6-c]isoquinolina (Ejemplo 226d, 62,3%) rendimiento toral de 300 mg de 4-metoxi isoquinolina en 4 etapas. CL/EM Fr-min ([MHCHO]H+) [procedimiento D]: 2,45 (192). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-D) δ ppm 5,02 (s, 2 H) 5,41 (s, 2 H) 7,68 (m, 1 H) 7,77 (ddd, J = 8,25, 6,91, 1,22 Hz, 1 H) 8,10 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 8,26 (d, J = 8,56 Hz, 1 H).
20 Se encontró que el cloruro no era reactivo en el protocolo de alquilación del Ejemplo 184. La 6-fluoro-1,3oxazino[5,6-c]isoquinolina correspondiente (Ejemplo226) se preparó mediante el procedimiento de [Uchibori, Y.; Umeno, M.; Yoshiokai, H.; Heterocicles, 1992, 34 (8), 1507-1510] citado anteriormente. No se dejó que la reacción se completara y la mezcla de reacción en bruto se recuperó en forma de una mezcla de proporción 1:2,4 (C1 : F). Sin purificación adicional, la mezcla de cloro/flúor se alquiló con el tripéptido usando el procedimiento del Ejemplo
25 184, para dar 66 mg (50,0%) de BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(1,3-oxazino[5,6-c]isoquinolin-6-oxo)-S-prolina]
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P1(1R,2S VinilAcca)-CONHSO2Ciclopropano después de purificación por HPLC. CL/EM Fr-min (MNa+) [procedimiento D]: 3,03 (764). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (s, 9 H) 1,06 (dd, J = 8,07, 1,96 Hz, 2 H) 1,22 (s, 10 H) 1,34 (d, J = 6,11 Hz, 1 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,23 (m, 2 H) 2,59 (dd, J = 13,82, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,03 (dd, J = 11,86, 3,06 Hz, 1 H) 4,23 (s, 1 H) 4,41 (d, J = 11,98 Hz, 1 H) 4,50 (dd, J = 9,66, 6,97 Hz, 1 H) 4,87 (m, 2 H) 5,11 (d, J = 10,52 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,34 (s,2 H) 5,74 (m, 2 H)7,51 (t, J = 7,46 Hz, 1H) 7,70 (t, J =7,58 Hz, 1H) 7,95 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 8,12 (d, J = 8,31 Hz, 1 H).
Preparación de derivados de 4-metoxi-3-heteroarilo y 3-azolil isoquinolina P2* mediante reacciones de acoplamiento de Suzuki y Stille
Las reacciones de acoplamiento que se muestran a continuación demostraron la utilidad general con el derivado de bromo del Ejemplo 223. Se entenderá que puede aplicarse un protocolo general a otras combinaciones de catalizadores y reactivos de acoplamiento diferentes de boro y estaño.
Ejemplo 229: Preparación del Compuesto 229
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(3-furan-3-il-4-metoxi-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcca)CONHSO2ciclopropano mediante un acoplamiento de Suzuki que se muestra a continuación:
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Se disolvieron 22 mg (0,028 mmol) del Ejemplo 223 en 1 ml de DMF, 9,4 mg del ácido borónico disponible en el mercado (3 equiv.), 3 mg de catalizador (10% mmol) y se añadieron 18 mg de carbonato de cesio. La mezcla se desgasificó dos veces y después se calentó a 110 ºC durante 3 horas. El producto final se purificó por HPLC prep., se obtuvieron 13,6 mg del sólido de color amarillo (64,0%). CL/EM Fr-min (MH+): 2,85 (780) [procedimiento B]. RMN 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 1,09 (m, 11 H) 1,26 (m, 12 H) 1,68 (m, 1 H) 2,27 (s, 1 H) 2,64 (m, 2 H) 2,97 (m, 1 H) 3,86 (s, 3 H) 4,15 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) 4,28 (s, 1 H) 4,43 (d, J = 10,99 Hz, 1 H) 4,56 (m, 1 H) 5,11 (m, 2 H) 5,63 (m, 1 H) 5,99 (s, 1 H) 7,20 (s, 1 H) 7,51 (m, 1 H) 7,61 (m, 1 H) 7,75 (t, J = 7,17 Hz, 1 H) 8,03 (d, J = 8,24 Hz, 1 H) 8,16 (d, J = 8,24 Hz, 1 H) 8,27 (s, 1 H).
Ejemplo 230: Preparación del Compuesto 230
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(3-furan-2-il-4-metoxi-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S-VinilAcca)CONHSO2ciclopropano se sintetizó mediante una reacción de acoplamiento de Stille que se muestra a continuación:
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Se disolvieron 40 mg (0,05 mmol) del Ejemplo 223, 4 mg de catalizador (5% mmol) y 100 µl (4 equiv.) del reactivo de estaño en 1 ml de tolueno, la mezcla se desgasificó dos veces y después se calentó hasta 90 ºC durante una noche. Después de la separación por HPLC prep., se obtuvieron 19,6 mg de un sólido de color verdoso (50,0%). CL/EM Frmin (MH+): 2,76 (780) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,94 (m, 2 H) 0,98 (s, 9 H) 1,09 (m, 2 H) 1,25 (s, 9 H) 1,39 (m, 1 H) 1,60 (m, 1 H) 2,35 (m, 1 H) 2,48 (m, 1 H) 2,74 (m, 1 H) 2,95 (m, 1 H) 3,87 (s, 3 H) 4,14 (m. 1 H) 4,22 (d, J = 4,16 Hz, 1 H) 4,41 (s, 1 H) 4,69 (m, 1 H) 5,26 (m, 1 H) 5,35 (m, 1 H) 5,93 (s, 1 H) 6,03 (m, 1 H) 6,61 (m, 1 H) 7,16 (d, J = 3,18 Hz, 1 H) 7,50 (d, J = 7,58 Hz, 1 H) 7,67 (s, 1 H) 7,73 (t, J = 7,34 Hz, 1 H) 8,04 (m, 1 H) 8,17 (d, J = 8,31 Hz, 1 H).
Ejemplo 231: Preparación del Compuesto 231
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Se preparó de manera similar BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(3-pirazin-2-il-4-metoxi-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]P1(1R,2S-VinilAcca)-CONHSO2Ciclopropano mediante una reacción de acoplamiento de Stille con un 7,1% de
5 rendimiento. CL/EM Fr-min (MH+): 2,51 (792) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,98 (m, 9 H) 1,11 (m, 2 H) 1,19 (s, 9 H) 1,27 (m, 2 H) 1,42 (m, 1 H) 2,37 (m, 1 H) 2,48 (m, 2 H) 2,81 (m, 1 H) 2,97 (m, 1 H) 3,83 (s, 3 H) 4,07 (s, 1 H) 4,20 (d, J = 4,16 Hz, 1 H) 4,54 (d, J = 11,49 Hz, 1 H) 4,72 (m, 1 H) 5,27 (m, 1 H) 5,39 (m, 1 H) 5,96 (s, 1 H) 6,04 (m, 1 H) 7,63 (s, 1 H) 7,83 (s, 1 H) 8,17 (s, 1 H) 8,26 (s, 1 H) 8,60 (d, J = 2,20 Hz, 1 H) 8,76 (d, J = 2,20 Hz, 1 H) 9,33 (s, 1 H).
10 Ejemplo 232: Preparación del Compuesto 232
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Se preparó de manera similar BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(4-metoxi-3-tiazol-2-il-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]P1(1R,2SVinilAcca)-CONHSO2ciclopropano mediante una reacción de acoplamiento de Stille con un rendimiento del 32,2%. CL/EM Fr-min (MH+): 2,42 (797) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,03 (S, 9 H) 1,07 (m,
15 2 H) 1,13 (S, 9 H) 1,22 (m, 2 H) 1,43 (dd, J = 9,78, 5,14 Hz, 1 H) 1,88 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,23 (c, J = 8,97 Hz, 1 H) 2,36 (m, 1 H) 2,67 (m, 1 H) 2,94 (m, 1 H) 4,10 (s, 3 H) 4,15 (m, 1 H) 4,18 (s, 1 H) 4,53 (d, J = 25,92 Hz, 1 H) 4,59 (dd, J = 10,27, 7,09 Hz, 1 H) 5,12 (m, 1 H) 5,29 (d, J = 17,36 Hz, 1 H) 5,73 (m, 1 H) 6,09 (s, 1 H) 7,74 (t, J = 7,58 Hz, 1 H) 7,91 (t, J = 7,70 Hz, 1 H) 8,00 (d, J = 3,42 Hz, 1 H) 8,18 (d, J = 3,18 Hz, 1 H) 8,22 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 8,29 (d, J = 8,31 Hz, 1 H).
20 Ejemplo 233: Preparación del Compuesto 233
imagen2
Siguiendo el procedimiento general de alquilación de tripéptido con la 4-clorofuro[3,2-c]piridina disponible en el mercado, se obtuvieron 5,7 mg de un sólido de color amarillo (8,2%). CL/EM Fr-min (MH+): 2,32 (674) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,00 (s, 9 H) 1,07 (m, 2 H) 1,21 (m, 11 H) 1,41 (m, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,22 (dd, J = 17,61, 9,05 Hz, 2 H) 2,54 (dd, J = 13,69, 7,09 Hz, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,06 (m, 1 H) 4,21 (m, 1 H) 4,32 (s, 1 H) 4,49 (m, 1 H) 5,11 (dd, J = 10,27, 1,47 Hz, 1 H) 5,29 (dd, J = 17,36, 1,22 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,81 (s, 1 H) 6,83 (d, J = 1,22 Hz, 1 H) 7,19 (d, J = 5,87 Hz, 1 H) 7,76 (d. J = 1,22 Hz. 1 H) 7,97 (d, J = 5,87 Hz, 1 H).
Ejemplo 235: Preparación del Compuesto 235
imagen2
10 Siguiendo el procedimiento general de alquilación de tripéptido con la 4-clorotieno[3,2-c]piridina disponible en el mercado, se obtuvieron 20,0 mg de un sólido (28,1%). CL/EM Fr-min (MH+): 2,50 (690) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,21 (m, 11 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,24 (m, 2 N) 2,57 (dd, J = 13,69, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,05 (dd, J = 11,98, 3,18 Hz, 1 H) 4,22 (s, 1 H) 4,39 (d, J = 11,74 Hz, 1 H) 4,50 (dd, J = 9,90, 7,21 Hz, 1 H) 5,10 (dd, J = 10,39, 1,34 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,73
15 (m, 1 H) 5,81 (s, 1 H) 7,45 (d, J = 5,62 Hz, 1 H) 7,53 (m, 2 H) 7,94 (d, J = 5,87 Hz, 1 H).
Ejemplo 236: Preparación del Compuesto 236
imagen2
Siguiendo el procedimiento general de alquilación de tripéptido con el 3,5-dicloro-1,2,4-tiadiazol disponible en el mercado, se obtuvieron 8,0 mg de un sólido de color amarillo (11,9%). CL/EM Fr-min (MNa+): 2,37 (697)
[procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,00 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,22 (m, 2 H) 1,36 (s, 9 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,25 (m, 2 H) 2,60 (dd, J = 14,18, 6,85 Hz, J H) 2,92 (m, 1 H) 4,03 (dd, J = 12,47, 3,18 Hz, 1 H) 4,17 (s, 1 H) 4,42 (m, 2 H) 5,11 (dd, J = 10,27, 1,71 Hz, 1 H) 5,29 (dd, J = 17,12, 1,47 Hz, 1 H) 5,68 (s, 1 H) 5,74 (m, 1 H).
Ejemplo 237: Preparación del Compuesto 237
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(quinoxalin-2-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcca)-CONHSO2ciclopropano, mostrado a continuación
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Siguiendo el procedimiento general de alquilación del tripéptido con 2-cloroquinoxalina disponible en el mercado, se
10 obtuvieron 113,0 mg de un sólido de color amarillo (19,2%). CL/EM Fr-min (MNa+): 2,48 (707) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,22 (m, 11 H) 1,42 (m, 1 H) 1,87 (dd, J = 8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,24 (m, 1 H) 2,31 (m, 1 H) 2,57 (dd, J = 13,57, 6,97 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,09 (dd, J = 11,98, 3,18 Hz, 1 H) 4,17 (s, 1 H) 4,38 (d, J = 11,74 Hz, 1 H) 4,50 (dd, J = 10,27, 7,09 Hz, 1 H) 5,11 (dd, J = 10,27, 1,71 Hz, 1 H) 5,29 (dd, J = 17,12, 1,47 Hz, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 5,87 (s. 1 H) 7,62 (t, J = 7,46 Hz, 1 H) 7,73 (t, J = 7,70 Hz, 1 H) 7,87 (m, 1
15 H) 7,96 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 8,42 (s, 1 H).
Ejemplo 238: Preparación del Compuesto 238
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(2-trifluoro-6-fluoroquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcca)-CON
HSO2ciclopropano, Mostrado a continuación
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20 Siguiendo el procedimiento general de alquilación de tripéptido con la 2-trifluorometil-4-cloro-6-fluoro quinolina disponible en el mercado, se obtuvieron 17,0 mg un sólido de color amarillo (23,2%). CL/EM Fr-min (MNa+): 2,66
(792) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,02 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,17 (s, 9 H) 1,23 (m, 2 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,21 (c, J = 8,64 Hz, 1 H) 2,32 (m, 1 H) 2,63 (dd, J = 13,94, 6,85 Hz, 1 N) 2,93 (m, 1 H) 4,08 (m, 1 H) 4,18 (s, 1 H) 4,53 (m, 2 H) 5,10 (m, 1 H) 5,27 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,58 (s, 1 H) 5,72
25 (m, 1 H) 7,39 (s, 1 H) 7,65 (m, 1 H) 7,83 (dd, J = 9,29, 2,69 Hz, 1 H) 8,12 (dd, J = 9,29, 5,14 Hz, 1 H).
Ejemplo 239: Preparación del Compuesto 239
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(6-fluoroquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcca)-CONHSO2ciclopropano, Que se muestra a continuación
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Siguiendo el procedimiento general de alquilación de tripéptido con la 4-cloro-6-fluoro quinolina disponible en el mercado, se obtuvieron 26,0 mg de un sólido de color amarillo (39,0%). CL/EM Fr-min (MH+): 1,98 (702) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04 (m, 11 H) 1, 14 (s, 9 H) 1,23 (m, 2 H) 1,42 (m, 1 H) 1,87
5 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H) 2,23 (c, J = 8,80 Hz, 1 H) 2,41 (m, 1 H) 2,75 (dd, J = 14,43, 6,85 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,09 (s, 1 H) 4,12 (d, J = 2,69 Hz, 1 H) 4,61 (m, 2 H) 5,11 (dd, J = 10,39, 1,59 Hz, 1 H) 5,28 (dd, J = 17,24, 1,34 Hz, 1 H) 5,70 (m, 1 H) 5,75 (s, 1 H) 7,62 (d. J = 6,60 Hz, 1 H) 7,93 (m, 1 H) 8,06 (dd, J = 8,68, 2,57 Hz, 1 H) 8,20 (dd, J = 9,29, 4,40 Hz, 1 H) 9,06 (d, J = 6,60 Hz, 1 H). También se aisló una pequeña cantidad de subproducto debido al desplazamiento de F de la misma reacción y se separó por HPLC preparativa.
10 Ejemplo 240, Aislamiento del Compuesto 240
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(4-cloroquinolin-6-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S-VinilAcca)-CONHSO2Ciclopropano. Que
se muestra a continuación.
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Subproducto, se obtuvieron 8,0 mg de un sólido de color amarillo (11,7%). CL/EM Fr-min (MN+): 2,240 (740)
15 [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,00 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1 .23 (m, 11 H) 1,42 (m, 1 H) 1,86 (dd, J = 8,19,5,50 Hz, 1 H) 2,22 (m, 1 H) 2,29 (m, 1 H) 2,55 (m, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,09 (m, 1 H) 4,21 (s, 1 H) 4,30 (m, 1 H) 4,46 (dd, J = 10,27, 6,85 Hz, 1 H) 5,11 (dd, J = 10,27, 1,47 Hz, 1 H) 5,28 (dd, J = 17,36, 1,47 Hz, 1 H) 5,43 (s, 1 H) 5,74 (m, 1 H) 7,60 (dd, J = 9,29, 2,45 Hz, 1 H) 7,64 (d, J = 2,45 Hz, 1 H) 7,81 (d, J = 4,89 Hz, 1 H) 8,06 (d, J = 9,29 Hz, 1 H) 8,72 (d, J = 5,14 Hz, 1 H).
20 Ejemplo 241: Preparación del Compuesto 241
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(8-fluoroquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1 (1R,2S VinilAcca)-CONHSO2Ciclo-propano,
Mostrado a continuación Siguiendo el procedimiento general de alquilación de tripéptido con la 4-cloro-8-fluoro quinolina disponible en el mercado, se obtuvieron 10,3 mg de un sólido de color amarillo se obtuvo (14,7%). CL/EM Fr-min (MH+): 1,95 (702) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,98 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,14 (s, 9 H) 1,22 (m, 2 H) 1,42 (m, 1 H) 1,87 (dd, J = 8,07, 5,62 Hz, 1 H) 2,22 (c, J = 8,72 Hz, 1 H) 2,41 (m, 1 H) 2,74 (dd, J = 14,06, 6,97 Hz, 1 H) 2,93
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5 (m, 1 H) 4,11 (m, 2 H) 4,57 (dd, J = 10,39, 6,97 Hz, 1 H) 4,66 (d, J = 12,23 Hz, 1 H) 5,11 (dd, J = 10,27, 1,22 Hz, 1 H) 5,28 (d, J = 17,12 Hz, 1 H) 5,71 (m, 2 H) 7,59 (d, J = 6,36 Hz, 1 H) 7,75 (m, 1 H) 7,86 (m, 1 H) 8,23 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 9,02 (d, J = 6,36 Hz, 1 H). Durante la purificación por HPLC preparativa, también se aisló un subproducto. El derivado de 4-cloroquinolin-8-oxo-quinolina se formó como resultado del desplazamiento del átomo de flúor en lugar del grupo saliente de cloro.
10 Ejemplo 242, Aislamiento del Compuesto 242
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(4-cloroquinolin-8-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S VinilAcca)-CONHSO2Ciclo-propano,
Mostrado a continuación
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Des esta manera, se obtuvieron 9,0 mg de un sólido de color amarillo (13,2%). CL/EM Fr-min (MH+): 2,37 (718)
15 [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,00 (s, 9 H) 1,06 (m, 2 H) 1,12 (s, 9 H) 1,23 (m, 2 H) 1,43 (dd, J = 9,41, 5,50 Hz, 1 H) 1,87 (dd, J = 8,19, 5,50 Hz, 1 H) 2,25 (m, 1 H) 2,35 (m, 1 H) 2,67 (dd, J = 13,94, 7,09 Hz, 1 H) 2,93 (m, 1 H) 4,10 (m, 1 H) 4,13 (s, 1 H) 4,43 (d, J = 11,98 Hz, 1 H) 4,65 (dd, J = 10,03, 7,09 Hz, 1 H) 5,12 (dd, J = 10,27, 1,47 Hz, 1 H) 5,30 (dd, J = 17,12, 1,22 Hz, 1 H) 5,51 (s, 1 H) 5,75 (m, 1 H) 7,61 (d, J = 7,83 Hz, 1 H) 7,88 (t, J = 8,19 Hz, 1 H) 8,04 (m, 2 H) 8,91 (d, J = 5,38 Hz, 1 H).
20 Ejemplo 243: Preparación del Compuesto 243
BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(3-hidroxiquinoxalin-2-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2SVinilAcca)-CONHSO2-Ciclopropano,
Mostrado a continuación
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Siguiendo el procedimiento general de alquilación de tripéptido con 2,3-dicloroquinoxalina disponible en el mercado,
25 el producto de monoalquilación se hidrolizó espontáneamente, dando 8,0 mg de un sólido de color amarillo pálido (11,4%). CL/EM Fr-min (MNa+): 2,42 (723) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,99 (s, 9 H) 1,05 (m, 2 H) 1,24 (s, 9 H) 1,40 (m, 3 H) 1,86 (m, 1 H) 2,24 (m, 2 H) 2,53 (m, 1 H) 2,92 (m, 1 H) 4,06 (m, 1 H) 4,16(s, 1 H) 4,40 (m, 1 H) 4,55 (dd, J = 10,39, 6,97 Hz, 1 H) 5,11 (m, 1 H) 5,29 (m,1 H) 5,73 (m, 1 H)5,78 (s,1 H) 7,15 (s, 1 H) 7,26 (m,2 H)7,36 (t, J = 7,83 Hz,1 H) 7,61 (d, J = 8,07 Hz, 1 H).
30 Ejemplo 244: Preparación del Compuesto 244
Usando una combinación de esquema de acoplamiento de Pd y un procedimiento por etapas partiendo de 6-bromo1-cloro isoquinolina, se preparó BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(ácido dimetilamidaisoquinolin-1-oxo-6-carboxílico)S-prolina]-P1(1R,2S VinilAcca)-CONHSO2ciclopropano.
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5 CL/EM n-min (MNa+): 2,34 (777) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,98 (m, 11 H) 1,23 (m, 11 H) 1,35 (m, 1 H) 1,91 (m, 1 H) 2,29 (m, 2 H) 2,47 (m, 1 H) 2,58 (m, 1 H) 2,97 (s, 3 H) 3,11 (s, 3 H) 4,09 (m, 1 H) 4,24 (s, 1 H) 4,44 (m, 1 H) 4,61 (m, 1 H) 5,16 (m, 2 H) 5,57 (m, 1 H) 5,90 (s, 1 H) 7,38 (d, J = 5,87 Hz, 1 H) 7,50 (d, J = 8,07 Hz, 1 H) 7,86 (s, 1 H) 8,03 (d, J = 5,87 Hz, 1 H) 8,27 (d, J = 8,56 Hz. 1 H),
Ejemplo 245: Preparación del Compuesto 245
10 Durante una de las preparaciones de acoplamiento de Stille catalizadas por Pd0 (Ejemplo 230), se aisló un producto secundario como un producto menos que se identificó posteriormente como: BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(3cloro-4-metoxilsoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S VinilAcca)-CONBSO2ciclopropano, mostrado a continuación
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CL/EM Fr-min (MNa+): 2,62 (770) [procedimiento B]. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (s, 9 H) 1,08 (m, 2 H)
15 1,18 (s, 9 H) 1,27 (m, 2 H) 1,37 (m, 1 H) 1,62 (m, 1 H) 2,36 (m, 2 H) 2,73 (m, 1 H) 2,97 (m, 1 H) 3,92 (s, 3 H) 4,02 (m, 1 H) 4,18 (s, 1 H) 4,48 (m, 1 H) 4,66 (m, 1 H) 5,30 (m, 2 H) 5,78 (s, 1 H) 6,04 (m. 1 H) 7,53 (t, J = 7,70 Hz, 1 H) 7,77 (t, J = 7,58 Hz, 1 H) 8,00 (d, J = 8,56 Hz, 1 H) 8,19 (d, J = 8,07 Hz, 1 H).
Sección F: Ejemplo 250: Preparación del Compuesto 250
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Etapa 1:
Una solución de ácido 3-fenil-but-2-enoico (16,2 g), difenilfosforil azida (27,5 g) y trietilamina (10,1 g) en benceno
5 (100 ml) se agitó durante 1 h. Después de la filtración a través de un lecho de gel de sílice lavando con benceno y de concentración, el residuo se disolvió en difenilmetano (80 ml) y se calentó a reflujo durante 3 h. Después de enfriar a ta los sólidos se recogieron a través de un lavado del lecho con benceno y se secaron, dando 10 g (63%) del producto deseado en forma de un sólido. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 2,30 (s. 3 H), 7,00 (s, 1 H). 7,54 (m, 1 H), 7,77 (m, 2 H), 8,33 (d, J = 7,34 Hz, 1 H).
10 Etapa 2
Una solución de 4-metil-2H-isoquinolin-1-ona (4,8 g) en POCl3 (50 ml) se calentó a reflujo durante 3 h. Después de
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enfriamiento y concentración, el residuo se basificó con NaOH 5 N y se extrajo con CH2Cl2. La fase orgánica se lavó con salmuera y se secó sobre MgSO4. Después de concentración, la purificación por cromatografía ultrarrápida de Biotage con acetato de etilo al 5% en hexanos dio 4,8 g (90%) del producto deseado en forma de un sólido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,59 (s, 3 H), 7,68 (t, J = 7,70 Hz, 1 H), 7,78 (m, 1 H), 7,94 (d, J = 8,31 Hz, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 8,35 (d, J = 8,31 Hz, 1 H).
Etapa 3:
Una solución de Boc-Hyp-OH (231 mg) y terc-BuOK (336 mg) en DMSO (10 ml) se agitó durante 0,5 h. A la solución se le añadió 1-cloro-4-metil-isoquinolina (178 mg) y la mezcla resultante se agitó durante 1 día. La reacción se interrumpió con ácido cítrico al 5% y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con salmuera y se secó sobre MgSO4. La concentración dio 350 mg (94%) del producto deseado en forma de un sólido que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,39,1,43 (2s, 9 H, rotámeros), 2,40 (dd, J = 17,97, 4,52 Hz, 1 H), 2,48 (s, 3 H), 2,68 (m, 1 H), 3,84 (m, 2 H), 4,46 (m, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 7,58 (t, J = 7,70 Hz, 1 H), 7,75 (m, 2 H), 7,91 (d, J = 8,31 Hz, 1 H), 8,19 (m, 1 H); EM: (M+Na)+ 396.
Etapa 4:
Una solución de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(4-metil-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico) (74 mg), clorhidrato de (1(R)-amino-2(S)-vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (59 mg), PyBOP (114 mg) y i-Pr2NEt (0,2 ml) en CH2Cl2 (2 ml) se agitó durante 2 h. La purificación por cromatografía ultrarrápida de Biotage con 5% de MeOH en acetato de etilo dio 105 mg (90%) del producto deseado. RMN 1H (400 MH2, MetanolD4) δ ppm 1,18 (m, 5 H), 1,39 (s, 9 H), 1,87 (dd, J = 8,2, 5,3 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,54 (m, 4 H), 2,95 (m, 1 H), 3,86 (m, 2 H), 4,40 (dd, J = 9,8, 6,9 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1 H), 5,31 (d, J = 17,6 Hz, 1 H), 5,79 (m, 2 H), 7,60 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,78 (m, 2 H), 7,93 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 8,20 (d, J = 8,1 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 607,
Etapa 5:
Una solución de terc-butil éster del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-(4metil-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico (100 mg) y TFA (3 ml) en CH2Cl2 (3 ml) se agitó durante 1 h. Después de la concentración, el residuo se disolvió en CH2Cl2 (2 ml) y se añadieron Boc-L-terc-leucina (40 mg), PyBOP (104 mg) y i-Pr2NEt (0,2 ml). La mezcla se agitó durante 1 h. Después de tratamiento, la purificación por HPLC Prep. dio 60 mg (52%) del producto deseado, compuesto 250, en forma de un sólido. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04 (m, 12H), 1,26 (m, 10 H), 1,44 (dd, J = 9,5, 5,1 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 8,1, 5,4 Hz, 1 H), 2,26 (m, 2 H), 2,49 (s, 3 H), 2,62 (dd, J = 13,7, 7,1 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,06 (dd, J = 12,0, 3,4 Hz, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 4,45 (d, J = 11,3 Hz, 1 H), 4,53 (dd, J = 10,3, 6,6 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 17,1 Hz, 1 H), 5,77 (m, 2 H), 6,63 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,53 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,76 (t, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,91 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 8,22 (d, J = 8,3 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 720,
Ejemplo 251: Preparación del Compuesto 251
imagen2
El Compuesto 251 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó ácido 3metoxi-3-fenil-acrílico se usó en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: se usaron 15 g de ácido 3-metoxi-3-fenil-acrílico, se obtuvieron 250 mg del producto (rendimiento del 2%).
Producto:
imagen2
RMN 1H (400 MHz, CD3COCD3) δ ppm 3,85 (s, 3 H), 6,96 (s, 1 H), 7,54 (m, 1 H), 7,71 (m, 1 H), 7,86 (d, J = 8,07 Hz, 1 H), 8,31 (d, J = 8,07 Hz, 1 H).
Etapa 2: Modificaciones: se usaron 200 mg de 4-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 150 mg de producto (rendimiento del 68%).
Producto:
imagen2
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 4,05 (s, 2 H), 7,71 (m, 1 H), 7,72 (m, 2 H), 7,80 (s, 1 H), 8,23 (dd, J = 18,71, 7,70 10 Hz,2H).
Etapa 3: Modificaciones: se usaron 122 mg de 1-cloro-4-metoxi-isoquinolina, se obtuvieron 218 mg del producto (rendimiento del 89%).
Producto:
15 MS: (M+Na)+ 411. Etapa 4: Modificaciones: se usaron 194 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(4-metoxi-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2dicarboxílico, se obtuvieron 298 mg del producto (rendimiento del 99%). Producto:
imagen2
imagen2
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,17 (m, 5 H), 1,42 (s, 9 H), 1,87 (dd, J = 8,2, 5,5 Hz, 1 H), 2,27 (m, 2 H), 2,54 (dd, J = 13,3, 6,2 Hz, 1 H), 2,95 (m, 1 H), 3,85 (m, 2 H), 4,00 (s, 3 H), 4,39 (dd, J = 9,8, 6,9 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1 H), 5,31 (d, J = 17,1 Hz, 1 H), 5,76 (m, 2 H), 7,52 (s, 1 H), 7,62 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,74 (t, J = 7,2 Hz, 1 H),
5 8,12 (t, J = 8,3 Hz, 2 H).
Etapa 5:
Modificaciones: Se usaron 190 mg de éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(4-metoxi-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 270 mg del producto (rendimiento del 51%).
10 Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12 H), 1,26 (m, 10 H), 1,43 (dd, J = 8,6, 4,6 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 7,9, 5,5 Hz, 1 H), 2,24 (m, 2 H), 2,61 (dd, J = 13,6, 6,9 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,00 (s, 3 H), 4,06 (dd, J = 11,3, 3,1 Hz, 1 H), 4,25 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 4,43 (d, J = 11,3 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,12 (d, J = 10,1 Hz, 1 H), 5,29 (d, J =
15 17,1 Hz, 1 H), 5,75 (m, 2 H), 6,60 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,55 (m, 2 H), 7,71 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 8,09 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 8,14 (d, J = 8,2 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 736,
Ejemplo 252: Preparación del Compuesto 252
imagen2
El Compuesto 252 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó ácido 2metilcinámico en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1. Etapa 1: Modificaciones: Se usaron 20 g de ácido 2-metilcinámico, se obtuvieron 14,3 g de producto (rendimiento del 72%) Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 2,54 (s, 1 H), 6,69 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,39 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,50 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 8,30 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 11,62 (s, 1 H); EM: (M+H)+ 160.
10 Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 14,4 g de 5-metil-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 10,6 g de producto (rendimiento del 66%).
Producto:
imagen2
15 Datos: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,67 (s, 3 H), 7,55 (m, 2 H), 7,70 (dd, J = 5,9, 1,0 Hz, 1 H), 8,19 (m, 1 H), 8,28 (d, J = 5,9 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 178.
Etapa 3: Modificaciones: Se usaron 533 mg de 1-cloro-5-metil-isoquinolina, se obtuvieron 1116 mg de producto (rendimiento del 100%).
20 Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+H)+ 373. Etapa 4: Modificaciones: Se obtuvieron 372 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(5-metil-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2
dicarboxílico, se obtuvieron 551 mg del producto (rendimiento del 94%). Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+Na)+ 607. Etapa 5: Modificaciones: Se usaron 551 mg de éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil
10 ciclopropilcarbamoil)-4-(5-metil-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 274 mg de producto
(rendimiento del 44%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,00 (m, 12 H,) 1,23 (m, 10 H), 1,44 (m, 1 H), 1,87 (dd, J = 8,1, 5,4 Hz, 1
15 H), 2,26 (m, 2 H), 2,62 (m, 4 H), 2,94 (m, 1 H), 4,07 (dd, J = 11,9, 3,3 Hz, 1 H), 4,25 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 4,46 (d, J = 11,5 Hz, 1 H), 4,53 (dd, J = 10,3, 7,1 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 16,9 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 6,62 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 7,39 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,44 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,53 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 8,00 (d, J = 6,1 Hz, 1 H), 8,06 (d, J = 8,3 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 698.
Ejemplo 253: Preparación del Compuesto 253
imagen2
El Compuesto 253 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó ácido 2metoxi cinámico en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1. Etapa 1: Modificaciones: Se usaron 10 g de ácido 2-metoxi cinámico, se obtuvieron 5,3 g de producto (rendimiento 53%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,95 (s, 3 H), 6,94 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,08 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,14 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,43 (t, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,99 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 10,92 (s, 1 H); EM: (M+H)+ 176.
10 Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 5,3 g de 5-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 5,38 g de producto (rendimiento del 92%).
Producto:
imagen2
15 Datos: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 4,01 (s, 3 H), 7,04 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,57 (t, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,97 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 8,25 (d, J = 5,9 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 194.
Etapa 3: Modificaciones: Se usaron 581 mg de 1-cloro-5-metoxi-isoquinolina, se obtuvieron 1163 mg de producto (rendimiento del 100%).
20 Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+H)+ 389. Etapa 4: Modificaciones: Se usaron 117 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(5-metoxi-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2
dicarboxílico, se obtuvieron 180 mg de producto (rendimiento del 100%). Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+N)+ 601. Etapa 5: Modificaciones: Se usaron 177 mg éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil
10 ciclopropilcarbamoil)-4-(5-metoxi-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 63 mg de producto
(rendimiento del 44%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,00 (m, 12 H), 1,21 (m, 10 H), 1,38 (m, 1 H), 1,82 (dd, J = 8,1, 5,6 Hz, 1
15 H), 2,20 (m, 2 H), 2,56 (dd, J = 13,6, 6,7 Hz, 1 H), 2,88 (m, 1 H), 3,08 (m, 2 H), 3,93 (s, 3 H), 4,01 (dd, J = 11,9, 3,3 Hz, 1 H), 4,20 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 4,39 (d, J = 12,2 Hz, 1 H), 4,47 (dd, J = 9,7, 7,0 Hz, 1 H), 5,06 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 5,23 (d, J = 16,9 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 5,79 (s, 1 H), 6,55 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 7,08 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,37 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,54 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,68 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), EM: (M+H)+ 714.
Ejemplo 254: Preparación del Compuesto 254
imagen2
El Compuesto 254 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó ácido 2clorocinámico en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1. Etapa 1: Modificaciones: Ácido 25 g ácido 2-clorocinámico, se obtuvieron 14,6 g de producto (rendimiento del 59%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,22 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,42 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,73 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 10 8,34 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 10,61 (s, 1 H); EM: (M+H)+ 180.
Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 14,2 g de 5-cloro-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 8,28 g de producto (rendimiento del 53%).
Producto:
imagen2
15
Datos: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,60 (dd, J = 8, 6, 7,6 Hz, 1 H), 7,83 (m, 1 H), 8,00 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 8,29
(dt, J = 8,9, 1,0 Hz, 1 H), 8,38 (d, J = 5,9 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 198.
Etapa 3:
Modificaciones: Se usaron 594 mg de 1,5-dicloro-isoquinolina, se obtuvieron 1174 mg de producto (rendimiento del 20 100%).
Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+H)+ 393. Etapa 4: Modificaciones: Se usaron 118 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(5-cloro-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2
dicarboxílico, se obtuvieron 154 mg de producto (rendimiento del 85%). Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+H)+ 605. Etapa 5: 10 Modificaciones: Se usaron 150 mg de éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil
ciclopropilcarbamoil)-4-(5-cloro-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 91 mg de producto (rendimiento del 51%). Producto:
imagen2
15 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,97 (m, 12 H), 1,17 (m, 10 H), 1,38 (dd, J = 9,4, 5,3 Hz, 1 H), 1,82 (dd, J = 8,0, 5,5 Hz, 1 H), 2,21 (m, 2 H), 2,58 (dd, J = 13,8, 7,0 Hz, 1 H), 2,88 (m, 1 H), 4,01 (dd, J = 11,9, 2,8 Hz, 1 H, 4,16 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 4,47 (m, 2 H), 5,06 (d, J = 10,3 Hz, 1 H), 5,24 (d, J = 16,9 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 6,52 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 7,42 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,57 (d, J = 6,1 Hz, 1 H), 7,76 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 8,05 (d, J = 6,1
Hz, 1 H), 8,13 (d, J = 8,3 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 718.
Ejemplo 255: Preparación del Compuesto 255
imagen2
El Compuesto 255 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó 2-ácido fluorocinámico se usó en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1. Etapa 1: Modificaciones: Se usaron 16,6 g de ácido 2-fluorocinámico, se obtuvieron 8,55 g de producto (rendimiento del 51%). Producto:
imagen2
10 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3COCD3) δ ppm 6,62 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,32 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,47 (m, 2 H), 8,09 (m, 1 H).
Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 8,4 g de 5-fluoro-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 7,5 g de producto (rendimiento del 80%).
15 Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz. CDCl3) δ ppm 7,43 (ddd, J = 9,7, 7,8, 0,9 Hz, 1 H), 7,62 (td, J = 8,2, 5,4 Hz, 1 H), 7,84 (d, J = 5,6 Hz, 1 H), 8,14 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 8,33 (d, J = 5,9 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 182. Etapa 3: 20 Modificaciones: Se usaron 203 mg de 1-cloro-5-fluoro-isoquinolina, se obtuvieron 384 mg de producto (rendimiento del 90%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3SOCD3) δ ppm 1,34, 1,36 (2s, 9 H, rotámeros), 2,35 (m, 1 H), 2,61 (m, 1 H), 3,65 (d, J = 12,23 Hz, 1 H), 3,80 (m, 1 H), 4,35 (m, 1 H), 5,70 (s, 1 H), 7,48 (d, J = 6,11 Hz, 1 H), 7,63 (m, 2 H), 7,99 (m, 1 H), 8,10 (d, J = 5,87 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 399.
Etapa 4:
Modificaciones: Se usaron 76 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(5-fluoro-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2dicarboxílico, se obtuvieron 116 mg de producto (rendimiento del 99%).
Producto:
imagen2
10 Etapa 5:
Modificaciones: Se usaron 110 mg de éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(5-fluoro-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 39 mg de producto (rendimiento del 30%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,44 (dd, J = 9,5, 5,4 Hz, 1 H), 1,88 (dd. J = 8,1, 5,4 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,63 (dd, J = 13,8, 7,0 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,07 (dd, J = 11,9, 3,1 Hz, 1 H), 4,23 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 4,52 (m, 2 H), 5,12 (dd, J = 10,3, 1,5 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 17,4 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,89 (s, 1
H), 6,59 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 7,47 (m, 3 H), 8,02 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 8,06 (d, J = 6,1 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 724.
Ejemplo 256: Preparación del Compuesto 256
imagen2
El Compuesto 256 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó ácido 25 difluormetoxicinámico en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: Se usaron 10,7 g de ácido 2-difluormetoxicinámico, se obtuvieron 2 g de producto (rendimiento del 18%).
Producto:
10 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3SOCD3) δ ppm 6,06 (m, 2 H), 6,42 (m, 2 H), 6,71 (s, 2 H), 7,35 (s, 1 H); EM: (M+H)+
imagen2
212. Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 300 mg de 5-difluorometoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 300 mg de producto
15 (rendimiento del 92%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6,70 (t, J = 72,87 Hz, 1 H), 7,48 (m, 1H), 7,64 (m, 1 H), 7,92 (d, J = 5,87 Hz, 1 H), 8,21 (d, J = 8,56 Hz, 1 H), 8,35 (d, J = 5,62 Hz, 1 H).
20 Etapa 3: Modificaciones: Se usaron 230 mg de 1-cloro-5-difluorometoxi-isoquinolina, se obtuvieron 360 mg de producto (rendimiento del 96%).
Producto:
imagen2
Etapa 4:
Modificaciones: Se usaron 37 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(5-hidroxi-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2dicarboxílico, se obtuvieron 57 mg de producto (rendimiento del 99%). Producto:
imagen2
Etapa 5:
10 Modificaciones: Se usaron 57 mg de éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(5-hidroxi-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 10 mg de producto (rendimiento del 15%).
Producto:
imagen2
15 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,93 (m, 4 H), 1,13 (s, 9 H), 1,31 (m, 1 H), 1,49 (s, 9H), 1,89 (dd, J = 7,8, 5,4 Hz, 1 H), 2,16 (c, J = 8,8 Hz, 1 H), 2,40 (m, 1 H). 2,81 (m, 1 H), 2,90 (m, 1 H), 3,76 (m, 2 H), 4,30 (m, 1 H), 4,59 (dd, J = 10,2, 7,7 Hz, 1 H), 5,07 (dd, J = 10,3, 1,7 Hz, 1 H), 5,26 (dd, J = 17,2, 1,3 Hz, 1 H), 5,77 (dt, J = 17,2, 9,6 Hz, 1 H), 5,93 (s, 1 H), 7,24 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,51 (m, 2 H), 7,63 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,98 (d, J = 6,1 Hz, 1 H), 8,24 (d, J = 8,3 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 700.
Ejemplo 257: Preparación del Compuesto 257
imagen2
El Compuesto 257 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó ácido 4fluorocinámico se usó en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1. Etapa 1: Modificaciones: Se usaron 16,6 g de ácido 4-fluorocinámico, se obtuvieron 8,2 g de producto (rendimiento del 49%). Producto:
imagen2
10 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3COCD3) δ ppm 6,57 (d, J = 7,09 Hz, 1 H), 7,21 (d, J = 7,09 Hz, 1 H), 7,50 (m, 1 H), 7,72 (dd, J = 8,68, 5,26 Hz, 1 H), 7,90 (dd, J = 9,54, 2,93 Hz, 1 H).
Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 8,15 g de 7-fluoro-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 7,6 g de producto (rendimiento del 84%).
15 Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,52 (td, J = 8,6, 2,6 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 5,6 Hz, 1 H), 7,86 (dd, J = 9,1, 5,4 Hz, 1 H), 7,95 (dd, J = 9,5, 2,5 Hz, 1 H), 8,26 (d, J = 5,6 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 182. Etapa 3: 20 Modificaciones: Se usaron 191 mg de 1-cloro-7-fluoro-isoquinolina, se obtuvieron 350 mg de producto (rendimiento del 93%). Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+Na)+ 399. Etapa 4: Modificaciones: Se usaron 75 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(7-fluoro-isoquinolin-l-iloxi)-pirrolidin-1,2
dicarboxílico, se obtuvieron 100 mg de producto (rendimiento del 85%) Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,16 (m, 4 H), 1,41 (m, 10 H) 1,88 (dd, J = 8,1, 5,4 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,56 (m, 1 H,) 2,94 (m, 1 H), 3,87 (m, 2 H), 4,41 (dd, J = 9,7, 7,0 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 10,8 Hz, 1 H), 5,31 (d, J = 17,1 10 Hz, 1 H), 5,78 (m, 2 H), 7,36 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,54 (m, 1 H), 7,78 (dd, J = 9,3, 2,5 Hz, 1 H), 7,90 (dd, J = 9,1, 5,1 Hz, 1 H), 7,96 (d, J = 5,9 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 611.
Etapa 5:
Modificaciones: Se usaron 95 mg de éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(7-fluoro-iso-quinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 55 mg de producto 15 (rendimiento del 44%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 12 H), 1,22 (m, 10 H), 1,44 (dd, J = 9,3, 5,4 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 8,2, 5,5 Hz, 1 H), 2,27 (m, 2 H), 2,63 (dd, J = 13,8, 7,0 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,07 (dd, J = 11,5, 3,2 Hz, 1 H), 4,22
20 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 4,47 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,55 (dd, J = 10,6, 7,5 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 10,3 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 17,1 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 6,61 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 7,36 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,52 (td, J = 8,9, 2,5 Hz, 1 H), 7,79 (dd, J = 9,4, 2,6 Hz, 1 H), 7,88 (dd, J = 8,7, 5,5 Hz, 1 H), 7,96 (d, J = 5,9 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 724.
Ejemplo 258: Preparación del Compuesto 258
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El Compuesto 258 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó ácido 4clorocinámico en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1. Etapa 1: Modificaciones: Se usaron 9,13 g de ácido 4-clorocinámico, se obtuvieron 4 g de producto (rendimiento del 44%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3SOCD3) δ ppm 6,58 (d, J = 7,1 H2, 1 H), 7,20 (dd, J = 7,1, 5,9 Hz, 1 H), 7,72 (m, 2 H), 10 8,10 (m, 1 H).
Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 3,5 g de 7-cloro-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 2,8 g de producto (rendimiento del 72%).
Producto:
15
imagen2
Datos: RMN 1H (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7,59 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 8,9, 2,1 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,6 Hz,
1H), 8,29 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,34 (s, 1 H); EM: (M+H)+ 198.
Etapa 3:
Modificaciones: Se usaron 208 mg de 1,7-dicloro-isoquinolina, se obtuvieron 350 mg de producto (rendimiento del 20 89%).
Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+Na)+ 415. Etapa 4: Modificaciones: Se usaron 79 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(7-cloro-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2
dicarboxílico, se obtuvieron 119 mg de producto (rendimiento del 99%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,17 (m, 4H), 1,43 (m, 10H), 1,88 (dd, J = 8,31 5,4 Hz, 1H), 2,29 (m, 2 H), 2,57 (dd, J = 13,7, 6,9 Hz, 1H), 2,95 (m, 1H), 3,87 (m, 2 H), 4,42 (dd, J = 9,9, 6,9 Hz, 1H), 5,13 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 10 5,31 (dd, J = 17,1, 1,2 Hz, 1H), 5,78 (m, 2H), 7,35 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,69 (dd, J = 8,7, 2,1 Hz, 1 H), 7,84 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 1,7 Hz, 1H); EM: (M+Na)+ 627.
Etapa 5:
Modificaciones: Se usaron 115 mg de éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(7-cloro-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 36 mg de producto 15 (rendimiento del 25%).
Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+Na)+ 740.
Ejemplo 259: Preparación del Compuesto 259
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El Compuesto 259 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó ácido 4metilcinámico en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1. Etapa 1: Modificaciones: Se usaron 25 g de ácido 4-metilcinámico, se obtuvieron 15,3 g de producto (rendimiento del 62%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 2,50 (s, 3 H), 6,54 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,13 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,49 (m, 2H), 8,22 (s, 1H), 11,49 (s, 1 H); EM: (M+H)+ 160.
10 Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 15,3 g 7-metil-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 5,15 g de producto (rendimiento del 30%).
Producto:
imagen2
15 Datos: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,58 (s, 3 H), 7,56 (m, 2 H), 7,73 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,20 (d, J = 5,6 Hz, 1H); EM: (M+H)+ 178.
Etapa 3: Modificaciones: Se usaron 205 mg de 1-cloro-7-metil-isoquinolina, se obtuvieron 350 mg de producto (rendimiento del 89%).
20 Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+H)+ 373. Etapa 4: Modificaciones: Se usaron 75 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(7-metil-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2
dicarboxílico, se obtuvieron 107 mg de producto (rendimiento del 95%). Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+Na)+ 607. Etapa 5: Modificaciones: Se usaron 107 mg de éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil
10 ciclopropilcarbamoil)-4-(7-metil-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 53 mg (rendimiento del
41%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,02 (m, 12 H), 1,18 (s, 9 H), 1,24 (m, 1 H), 1,45 (dd. J = 9,4, 5,5 Hz, 1H),
15 1,88 (dd, J = 8,2, 5,5 Hz, 1H), 2,28 (m, 2 H), 2,50 (s, 3H), 2,61 (dd, J = 13,8, 6,7 Hz, 1 H), 3,34 (s, 1H), 4,09 (dd, J = 11,7, 3,2 Hz, 1H), 4,23 (s, 1H), 4,42 (d, J = 12,0 Hz, 1 H), 4,57 (dd, J = 10,0, 7,1 Hz, 1H), 5,12 (dd, J = 10,3, 1,5 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 17,1 Hz, 1H), 5,76 (m, 1H), 5,87 (s, 1H), 7,28 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,55 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,93 (s, 1H); EM: (M+H)+ 698.
Ejemplo 260: Preparación del Compuesto 260
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El Compuesto 260 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó ácido 4metoxicinámico en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1. Etapa 1: Modificaciones: Se usaron 33 g de ácido 4-metoxicinámico, se obtuvieron 7 g de producto (rendimiento del 33%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (500 MHz, CD3COCD3) δ ppm 3,90 (s, 3 H), 6,49 (d, J = 7,0 Hz, 1 H), 7,10 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,28 (dd, J = 8,6, 2,8 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 2,8 Hz, 1H).
10 Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 4 g de 7-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 3 g de producto (rendimiento del 68%).
Producto:
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15 Datos: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,98 (s, 3 H), 7,38 (dd, J = 8,9, 2,6 Hz, 1 H), 7,52 (m, 2 H), 7,73 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 5,4 Hz, 1 H).
Etapa 3: Modificaciones: Se usaron 533 mg de 1-cloro-7-metoxi-isoquinolina, se obtuvieron 1115 mg de producto (rendimiento del 100%).
20 Producto: Etapa 4:
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Modificaciones: Se usaron 78 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(7-metoxi-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2dicarboxílico, se obtuvieron 108 mg de producto (rendimiento del 99%). Producto:
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5 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,17 (m, 4H), 1,40 (m, 1 H), 1,43 (s, 9 H), 1,85 (dd, J = 8,1, 5,4 Hz, 1H), 2,21 (m, 2 H), 2,51 (dd, J = 13,7, 6,6 Hz, 1 H), 2,93 (s, 1 H), 3,80 (m, 2 H), 3,94 (s, 3 H), 4,41 (dd, J = 10,0, 6,6 Hz, 1H), 4,57 (s, 1H), 5,11 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 17,1 Hz, 1H), 5,77 (m, 2 H), 7,01 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 5,9 Hz, 1H); EM: (M+H)+ 601.
Etapa 5:
10 Modificaciones: Se usaron 100 mg de éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(7-metoxi-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 30 mg de producto (rendimiento del 25%).
Producto:
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15 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3SOCD3) δ ppm 0,90 (m, 2 H), 0,95 (s, 9H), 1,05 (m, 1 H), 1,12 (s, 9 H), 1,35 (m, 2 H), 1,70 (m, 1 H), 2,18 (m, 1 H), 2,92 (m, 1 H), 3,86 (s, 3 H), 4,00 (m, 2 H), 4,27 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,45 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 5,09 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,23 (d, J = 16,9 Hz, 1H), 5,62 (m, 1H), 5,79 (s, 1H), 6,55 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 6,6 Hz, 1 H), 7,39 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 7,43 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 1 H), 7,84 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 5,9 Hz, 1H); EM: (M+H)+ 714.
20 Ejemplo 261 y 262: Preparación de Compuestos 261 y 262
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Los Compuestos 261 y 262 se prepararon siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó ácido 4-fluoro-3-metoxicinámico en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: Se usaron 19,6 g de ácido 4-fluoro-3-metoxicinámico, se obtuvieron 9,5 g de producto (rendimiento del 48%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3COCD3) δ ppm 4,00 (s, 1 H), 6,49 (d, J = 7,34 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 7,09 Hz, 1 H), 10 7,29 (d, J = 8,07 Hz, 1 H), 7,86 (d, J = 11,74 Hz, 1H).
Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 9 g se 7-fluoro-6-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 7 g de producto (rendimiento del 70%).
Producto:
15 Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 4,04 (s, 3 H), 7,17 (d, J = 8,07 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 5,62 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 11,49 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 5,62 Hz, 1H). Etapa 3: Modificaciones: Se usaron 222 mg de 1-cloro-7-fluoro-6-metoxi-isoquinolina, se obtuvieron 406 mg de productos. 20 Productos:
imagen2
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Etapa 4:
Modificaciones: Se usaron 400 mg de una mezcla de éster 1-terc-butílico del ácido 4-(7-fluoro-6-metoxi-isoquinolin-1iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico y éster 1-terc-butílico del ácido 4-(1-cloro-6-metoxi-isoquinolin-7-iloxi)-pirrolidin-1,2dicarboxílico, se obtuvieron 700 mg de los productos.
Producto:
imagen2
Etapa 5:
Modificaciones: Se usaron 700 mg de una mezcla de éster terc-butílico del ácido 2-(1
10 ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-(7-fluoro-6-metoxi-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1carboxílico y éster terc-butílico del ácido 4-(1-cloro-6-metoxi-isoquinolin-7-iloxi)-2-(1ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-pirrolidin-1-carboxílico, Se obtuvieron 79 mg del compuesto 261 y 80 mg del compuesto 262.
Producto:
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Datos del compuesto 261: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,07 (m, 12H), 1,25 (m, 10H), 1,44 (m, 1 H), 1,88 (dd, J = 8,1, 5,6 Hz, 1 H), 2,25 (m, 2 H), 2,60 (dd, J = 13,7, 6,9 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,02 (m, 4 H), 4,22 (s, 1 H), 4,43
(d, J = 12,2 Hz, 1H), 4,53 (dd, J = 10,3, 6,6 Hz, 1H), 5,12 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 16,6 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 7,28 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,37 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,75 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 5,9 Hz, 1H); EM: (M+Na)+ 754.
Datos del compuesto 262: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,07 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,44 (m, J = 9,41, 5,26 Hz, 1H), 1,87 (dd, J = 8,31, 5,38 Hz, 1H), 2,24 (c, J = 8,72 Hz, 2 H), 2,57 (dd, J = 13,82, 7,21 Hz, 1H), 2,94 (m, 1H), 3,97 (d, J = 5,14 Hz, 3 H), 4,09 (m, J = 11,00 Hz, 1H), 4,24 (s, 1 H), 4,32 (m, 1 H), 4,50 (m, J = 16,87 Hz, 1 H), 5,12 (dd, J = 10,52, 1,71 Hz, 1H), 5,30 (dd, J = 17,12, 1,47 Hz, 1H), 5,38 (s, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,63 (s, 1H), 7,66 (d, J = 5,87 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 5,62 Hz, 1H); EM: (M+H)+ 732.
Ejemplo 263: Preparación del Compuesto 263
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10 El Compuesto 263 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de la etapa 1 y la etapa 2. Etapa 3: Modificaciones: Se usaron 176 mg de 1-cloro-8-metil-isoquinolina, se obtuvieron 370 mg de producto (rendimiento del 100%). 15 Producto:
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Etapa 4: Modificaciones: Se usaron 149 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 8-metil-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2dicarboxílico, se obtuvieron 230 mg de producto (rendimiento del 99%) 20 Producto:
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Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,13 (m, 4H), 1,42 (m, 10H), 1,87 (dd, J = 8,2, 5,3 Hz, 1 H), 2,25 (m, 2 H), 2,58 (dd, J = 13,9,6,9 Hz, 1H), 2,83 (s, 3 H),2,96 (m, 1H), 3,85 (m, 2 H), 4,38 (dd, J = 10,2, 6,7 Hz, 1H), 5,12 (dd, J = 10,4, 1,6 Hz, 1 H), 5,30 (dd, J = 17,1, 1,2 Hz, 1 H), 5,76 (m, 2 H), 7,28 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,36 (d, J = 6,9 Hz, 1 H), 7,53 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,62 (m, 1 H), 7,88 (d, J = 5,6 Hz, 1H); EM: (M+Na)+ 607.
Etapa 5:
Modificaciones: Se usaron 220 mg de éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(8-metil-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 90 mg de producto (rendimiento del 35%).
Producto:
imagen2
10 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,44 (dd, J = 9,3, 5,4 Hz, 1H), 1,87 (dd, J = 8,1, 5,4 Hz, 1H), 2,25 (m, 2 H), 2,60 (dd, J = 13,9, 7,3 Hz, 1H), 2,77 (s, 3 H), 2,94 (m, 1H), 4,04 (dd, J = 11,9, 3,1 Hz, 1H), 4,27 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,42 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,54 (dd, J = 10,8, 7,1 Hz, 1H), 5,12 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 17,1 Hz, 1H), 5,75 (m, 1H), 5,95 (s, 1H), 6,63 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,28 (m, 2 H), 7,50 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,60
15 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 5,6 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 720.
Ejemplo 264: Preparación del Compuesto 264
imagen2
El Compuesto 264 se preparó siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de la etapa 1 y la etapa 2. Etapa 3:
20 Modificaciones: Se usaron 203 mg de 1-cloro-8-metoxi-isoquinolina, se obtuvieron 340 mg de producto (rendimiento del 85%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3SOCD3) δ ppm 1,34, 1,36 (2s, 9 H, rotámeros), 2,26 (m, 1H), 2,49 (m, 1H), 3,67 (m, 2 H), 3,86 (s, 3 H), 4,31 (m, 1H), 5,67 (s a, 1 H), 7,04 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 5,6 Hz, 1 H), 12,64 (s, 1H); EM: (M+Na)+ 411.
Etapa 4:
Modificaciones: Se usaron 78 mg de éster 1-terc-butílico del ácido 8-metoxi-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1,2dicarboxílico, se obtuvieron 115 mg de producto (rendimiento del 96%).
Producto:
imagen2
10 Etapa 5:
Modificaciones: Se usaron 110 mg de éster terc-butílico del ácido2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(8-metoxi-isoquinolin-1-iloxi)-pirrolidin-1-carboxílico, se obtuvieron 45 mg de producto (rendimiento del 34%).
Producto:
imagen57
Datos: EM: (M+H)+ 714,
imagen2
Los Compuestos 265 y 266 se prepararon siguiendo el Esquema I del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó ácido 3-(2,3-dihidro-benzofuran-7-il)-acrílico en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: Se usaron 3,8 g de ácido 3-(2,3-dihidro-benzofuran-7-il)-acrílico, se obtuvieron 2 g de producto (rendimiento del 53%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,37 (t, J = 9,05 Hz, 1H), 4,73 (t, J = 9,05 Hz, 2 H), 6,67 (d, J = 7,09 Hz, 1 10 H), 7,10 (d, J = 7,09 Hz, 1 H), 7,37 (d, J = 8,07 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 8,07 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 188.
Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 1,87 g de 2,3-dihidro-7H-furo[2,3-f]isoquinolin-6-ona, se obtuvieron 1,84 g de producto (rendimiento del 90%).
Producto:
imagen2
15
Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 3,43 (t, J = 9,05 Hz, 2 H), 4,82 (t, J = 9,05 Hz, 2 H), 7,52 (d, J = 8,56 Hz, 1H),
7,66 (d, J = 5,62 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 8,31 Hz, 1 H), 8,19 (d, J = 5,62 Hz, 1H); EM: (M+H)+ 206.
Etapa 3:
Modificaciones: Se usaron 206 mg de 6-cloro-2,3-dihidro-furo[2,3-f]isoquinolina, Se obtuvieron 300 mg de una 20 mezcla de productos.
Productos:
imagen2
Etapa 4:
Modificaciones: Se usaron 240 mg de la mezcla de productos de la etapa 3, se obtuvieron 350 mg de una mezcla de productos. Productos:
imagen2
Etapa 5: Modificaciones: Se usaron 331 mg de la mezcla de productos de la etapa 4, se obtuvieron 240 mg de del compuesto 265 y 24 mg del compuesto 266. 10 Productos:
imagen2
Datos del compuesto 265: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 0,99 (m, 12 H), 1,16 (m, 10H), 1,36 (m, 1 H), 1,81 (dd, J = 8,07, 5,62 Hz, 1H), 2,18 (m, 2 H), 2,54 (dd, J = 13,69, 6,85 Hz, 1 H), 2,87 (m, 1H), 3,31 (t, J = 9,05 Hz, 2H), 4,01 (m, 1H), 4,18 (s, 1 H), 4,36 (d, J = 11,74 Hz, 1 H), 4,46 (dd, J = 10,15, 7,21 Hz, 1H), 4,70 (m, 2 H), 5,05 (d, J = 10,27
15 Hz, 1 H), 5,23 (d, J = 16,87 Hz, 1H), 5,70 (m, 2 H), 7,23 (d, J = 5,87 Hz, 1 H), 7,31 (d, J = 8,31 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,31 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 5,87 Hz, 1 H); MS (M+H)+ 726.
Datos del compuesto 266: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,44 (dd, J = 10,03, 5,14 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 7,83, 5,38 Hz, 1H), 2,27 (m, 2 H), 2,65 (dd, J = 12,96, 6,36 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,08 (dd, J = 12,35, 3,30 Hz, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,54 (m, 2 H), 5,12 (d, J = 10,27 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 17,12 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,91 (s, 1H), 7,05 (d, J = 1,96 Hz, 1H), 7,72 (m, 2 H), 8,02 (m, 2 H), 8,11 (d, J = 5,87 Hz, 1H), 9,19 (s, 1H); EM: (M+H)+ 724.
imagen58
Los Compuestos 267 y 268 se prepararon siguiendo el Esquema 1 del Ejemplo 250 con la excepción de que se usó
ácido 3-(2,3-dihidro-benzofuran-4-il)-acrílico en lugar de ácido 3-fenil-but-2-enoico en la etapa 1.
Etapa 1:
Modificaciones: Se usaron 1,14 g de ácido 3-(2,3-dihidro-benzofuran-4-il)-acrílico, se obtuvieron 600 mg de producto 10 (rendimiento del 52%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,35 (t, J = 8,93 Hz, 2 H), 4,74 (t, J = 8,93 Hz, 2 H), 6,49 (d, J = 7,09 Hz, 1 H), 6,95 (d, J = 8,56 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 7,09 Hz, 1 H), 8,13 (d, J = 8,80 Hz, 1 H); MS (M+H)+ 188.
15 Etapa 2: Modificaciones: Se usaron 560 mg de 1,7-dihidro-2H-furo[3,2-f]isoquinolin-6-ona, se obtuvieron 380 mg de producto (rendimiento del 48%).
Producto:
imagen2
20 Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 3,47 (t, J = 9,05 Hz, 2 H), 4,84 (t, J = 9,05 Hz, 2 H), 7,24 (d, J = 8,56 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 5,87 Hz, 1H), 8,20 (m, 2 H); MS (M+H)+ 206.
Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 105 mg de 6-cloro-1,2-dihidro-furo[3,2-f]isoquinolina, se obtuvieron 390 mg de mezcla de productos
Productos:
imagen2
Etapa 4:
Modificaciones: se usaron 216 mg de la mezcla de productos de la etapa 3, se obtuvieron 330 mg de mezcla de productos Productos:
imagen2
Etapa 5:
Modificaciones: se usaron 330 mg de la mezcla de productos de la etapa 4, se obtuvieron 140 mg del compuesto 10 267 y 25 mg del compuesto 268.
Productos:
imagen2
Datos del compuesto 267: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,07 (m, 12H), 1,24 (m, 10 H), 1,43 (m, J H), 1,88 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1H), 2,26 (m, 2 H), 2,61 (dd, J= 13,69, 7,09 Hz, 1H), 2,94 (m, 1H), 3,42 (t, J= 9,05 Hz, 2 H), 4,05
15 (dd, J= 11,86, 3,55 Hz, 1 H), 4,24 (s, 1 H), 4,50 (m, 2 H), 4,77 (t, J= 8,93 Hz, 2 H), 5,12 (m, 1H), 5,29 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,76 (m, 2 H), 7,03 (d, J= 8,80 Hz, 1H), 7,12 (d, J= 6,11 Hz, 1H), 7,91 (d, J= 5,87 Hz, 1H), 8,06 (d, J= 8,80 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 726,
Datos del compuesto 268: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12 H), 1,19 (s, 9 H) 1,26 (m, 1H), 1,44 (m, 1 H), 1,88 (dd, J= 8,07, 5,62 Hz, 1H), 2,24 (d, J= 8,56 Hz, 2 H), 2,64 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 4,07 (m, J= 3,42 Hz, I H), 4,24 (s, 1H), 4,54 (m, 2 H), 5,12 (d, J= 10,52 Hz, 1 H), 5,30 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1H), 5,91 (s, 1H), 7,39 (d, J= 1,47 Hz, I H), 7,68 (m, 2 H), 7,96 (d, J= 1,96 Hz, 1H), 8,12 (m, 2 H); EM: (M+H)+724,
Ejemplo 269: Preparación del Compuesto 269
imagen32
Etapa 1:
Una solución de ácido 2-trifluorometoxicinnámico (11,6 g), difenilfosforil azida (13,75 g) y trietilamina (7,07 g) en benceno (50 ml) se agitó durante 1 h. Después de la filtración a través de un lecho corto de gel de sílice lavando con
10 benceno y de la concentración, el residuo se disolvió en difenilmetano (80 ml) y se calentó a reflujo durante 3 h. Después de enfriar a ta, los sólidos se recogieron a través de un lecho corto lavando con benceno y se secaron, dando 5,1 g (44%) del producto deseado en forma de un sólido. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 6,79 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,29 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,57 (t, J= 8,1 Hz, 1H), 7,70 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 8,30 (d, J= 8,1 Hz, 1H); EM: (M+H)+ 230.
15 Etapa 2:
Una solución de 5-trifluorometoxi-2H-isoquinolin-1-ona (4,58 g) en POCl3 (50 ml) se calentó a reflujo durante 3 h. Después de la refrigeración y la concentración, el residuo se basificó con NaOH 5 N y se extrajo con CH2Cl2. La fase orgánica se lavó con salmuera y se secó sobre MgSO4. Después de la concentración, la purificación por cromatografía ultrarrápida de Biotage con acetato de etilo al 5% en hexanos dio 4,347 g (88%) del producto deseado 20 en forma de un sólido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,66 (m, 2 H), 7,87 (d, J= 5,9 Hz, 1H), 8,31 (m, 1 H), 8,37
(d, J= 5,9 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 248.
Etapa 3:
A una suspensión de éster terc-butílico del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}-carbámico (56 mg), 1-cloro-5-trifluorometoxi5 isoquinolina (25 mg) y LaCl3 (25 mg) en DMF (1 ml) a -78 ºC se le añadió terc-BuOK (0,5 ml, 1 M en THF) y se calentó a ta. Después de agitar durante 30 min, la reacción se interrumpió con una solución saturada de NH4Cl y se extrajo con acetato de etilo. Después de la concentración, la purificación por HPLC prep. dio 35 mg (46%) del compuesto deseado 269 en forma de un sólido. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,03 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H),1,44 (dd, J= 9,7, 5,3 Hz, 1H), 1,88 (dd, J= 8,1, 5,6 Hz, 1H,) 2,28 (m, 2 H), 2,64 (dd, J= 13,7, 7,1 Hz, 1H), 2,94
10 (m, 1H), 4,09 (m, 1 H), 4,21 (d, J= 9,3 Hz, 1H), 4,53 (m, 2 H), 5,12 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 5,30 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 5,75 (m, 1H), 5,92 (m, 1H), 6,60 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 7,49 (d, J= 6,1 Hz, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,69 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 8,11 (d, J= 6,1 Hz, 1 H), 8,22 (d, J= 8,3 Hz, 1H); EM: (M+Na)+ 790.
Ejemplo 270: Preparación del Compuesto 270
imagen2
15 El Compuesto 270 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 2trifluorometilcinnámico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: se usaron 10 g de ácido 2-trifluorometilcinnámico, se obtuvieron 5 g de producto (rendimiento del 50%).
20 Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 6,83 (m, 1 H), 7,33 (d, J= 7,58 Hz, 1 H), 7,63 (t, J= 7,83 Hz, 1H), 8,09 (d, J= 7,58 Hz, 1H), 8,57 (d, J= 8,07 Hz, 1 H). Etapa 2: 25 Modificaciones: se usaron 4,4 g de 5-trifluorometil-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 3,5 g de producto (rendimiento del 73%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,75 (t, J= 7,95 Hz, 1H), 7,90 (m, 1H), 8,12 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 8,41 (d, J = 6,11 Hz, 1H), 8,60 (d, J= 8,56 Hz, 1H).
Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 46 mg de 1-cloro-5-trifluorometil-isoquinolina y 111 mg de éster terc-butílico del ácido {1[2-(1-ciclopropanosulfonilamino-carbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}carbámico, se obtuvieron 70 mg de producto (rendimiento del 47%).
Producto:
imagen2
10 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12 H), 1,23 (m, 10H), 1,44 (dd, J= 9,54, 5,38 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J= 8,07, 5,38 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,65 (dd, J= 13,82, 6,97 Hz, 1H), 2,94 (m, 1H), 4,07 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,56 (m, 2 H), 5,12 (m, 1H), 5,30 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1H), 5,90 (s, 1H), 6,59 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 7,53 (d, J= 4,40 Hz, 1 H), 7,65 (t, J= 7,83 Hz, 1 H), 8,12 (d, J= 7,09 Hz, 1 H), 8,15 (d, J= 6,36 Hz, 1 H), 8,50 (d, J= 8,31 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 774.
15 Ejemplo 271: Preparación del Compuesto 271
imagen2
El Compuesto 271 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 2clorocinnámico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: se usaron 7 g de ácido 2-clorocinnámico, se obtuvieron 5 g de producto (rendimiento del 71%). Producto:
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5 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,02 (m, 4 H), 3,91 (m, 4 H), 6,97 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 7,18 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 7,44 (m, 2 H), 8,02 (d, J= 7,83 Hz, 1 H); EM (M+H)+ 231. Etapa 2: Modificaciones: se usaron 2,2 g de 5-morfolin-4-il-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 2,1 g de producto (rendimiento 10 del 87%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CCl3D) δ ppm 3,09 (m, 4 H), 3,97 (m, 4 H), 7,32 (d, J= 7,58 Hz, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,91 (d, J= 5,87 Hz, 1H), 8,06 (d, J= 8,56 Hz, 1H), 8,26 (d, J= 5,87 Hz, 1H).
15 Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 50 mg de 1-cloro-5-morfolin-4-il-isoquinolina y 111 mg de éster terc-butílico del ácido {1[2-(1-ciclopropanosulfonilamino-carbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil]carbámico, se obtuvieron 40 mg de producto (rendimiento del 26%).
Producto: Datos: RMN 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 1,07 (m, 12 H), 1,26 (m, 10H), 1,44 (d, J= 7,93 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J= 7,93, 5,19 Hz, 1 H), 2,25 (m, 2 H), 2,62 (dd, J= 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,06 (d, J= 3,97 Hz, 4 H), 3,94 (m, 4 H), 4,07 (d, J= 14.04 Hz, 1 H), 4,25 (s, 1 H), 4,45 (d, J= 12,21 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,12 (d, J= 9,46 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 16,79 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,34 (d, J= 7,32 Hz, 1 H), 7,45 (t, J= 7,78 Hz, 1 H), 7,59 (d, J= 6,10 Hz, 1 H), 7,91 (d, J= 7,63 Hz, 1 H), 7,97 (d, J= 5,80 Hz, 1H).
imagen2
Ejemplo 272: Preparación del Compuesto 272
imagen2
El Compuesto 272 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 2,310 dimetoxicinnámico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: se usaron 10,4 g de ácido 2,3-dimetoxicinnámico, se obtuvieron 4,1 g de producto (rendimiento del 40%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 3,86 (s, 3 H), 3,96 (s, 3 H), 6,82 (d, J= 7,2 Hz, 1 H), 7,10 (d, J= 7,2 Hz, 1 H), 7,28 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 8,07 (d, J= 8,8 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 206.
Etapa 2: Modificaciones: se usaron 4,1 g de 5,6-dimetoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 4,03 g de producto (rendimiento del 90%).
Producto:
imagen2
5 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,97 (s, 3 H), 4,05 (s, 3 H), 7,65 (d, J= 9,29 Hz, 1 H), 7,90 (dd, J= 5,87, 0,98 Hz, 1H), 8,12 (m, 2 H).
Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 22 mg de 1-cloro-5,6-dimetoxi-isoquinolina y 56 mg de éster terc-butílico del ácido {1-[2(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}10 carbámico, se obtuvieron 31 mg de producto (rendimiento del 42%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12 H), 1,26 (m, 10 H), 1,44 (s, I H), 1,88 (d, J= 7,32 Hz, 1 H), 2,24 (s, 2 H), 2,60 (m, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 3,99 (s, 3 H), 4,06 (d, J= 11,90 Hz, 1 H), 4,23 (s, 1 H), 4,43 15 (d, J= 10,68 Hz, 1 H), 4,53 (m, 1 H), 5,12 (d, J= 10,38 Hz, 1 H), 5,30 (d, J= 17,40 Hz, 1 H), 5,77 (m, 2 H), 7,35 (d, J = 9,16 Hz, 1 H), 7,46 (d, J= 5,80 Hz, 1 H), 7,89 (d, J= 5,80 Hz, 1 H), 7,97 (d, J= 8,85 Hz, 1 H).
Ejemplo 273: Preparación del Compuesto 273
imagen2
El Compuesto 273 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 420 cloro-3-metoxicinnámico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
Etapa 1:
Modificaciones: se usaron 2,5 g de ácido 4-cloro-3-metoxicinnámico, se obtuvieron 1,2 g de producto (rendimiento del 48%). Producto:
imagen2
5 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 4,00(s, 3 H), 6,64(d, J= 7,09 Hz, 1 H), 7,15 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 7,21 (s, 1 H), 8,22 (s, 1 H). Etapa 2: Modificaciones: se usaron 1,05 g de 7-Cloro-6-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 0,8 g de producto 10 (rendimiento del 70%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 4,05 (s, 3 H), 7,13 (s, 1 H), 7,48 (d, J= 5,38 Hz, 1 H), 8,21 (d, J= 5,62 Hz, 1 H), 8,34 (s, 1 H); EM: (M+H)+ 229.
15 Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 44 mg de 1,7-dicloro-6-metoxi-isoquinolina y 113 mg de éster terc-butílico del ácido {1-[2(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}carbámico, se obtuvieron 25 mg de producto (rendimiento del 17%)
Producto:
imagen2
20
Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,07 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,44 (dd, J= 9,54, 5,38 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 8,07, 5,38 Hz, 1 H), 2,26 (m, 1 H,) 2,60 (m, J= 13,69, 6,85 Hz, 1 H), 2,94 (m, 2 H), 3,98 (s, 3 H), 4,06 (m, 1 H), 4,20 (m, 1 H), 4,42 (d, J= 12,23 Hz, 1 H), 4,57 (m, 1 H), 5,12 (d, J= 11,74 Hz, 1 H), 5,30 (d, J= 17,36 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1H), 5,86 (s, 1 H), 7,28 (d, J= 5,62 Hz, 1 H), 7,33 (s, 1 H), 7,92 (d, J= 5,87 Hz, 1 H), 8,09 (s, 1 H); EM: (M+H)+
25 749.
Ejemplo 274: Preparación del Compuesto 274
imagen2
El Compuesto 274 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 2fluoro-3-cinnámico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: se usaron 3,92 g de ácido 2-fluoro-3-cinnámico, se obtuvieron 2,4 g de producto (rendimiento del 61%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 4,00 (s, 3 H), 6,72 (m, 1 H), 7,16 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 7,35 (t, J= 8,44 Hz, 10 1H), 8,09 (d, J= 8,80 Hz, 1 H).
Etapa 2: Modificaciones: se usaron 1,93 g de 5-fluoro-6-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 1,688 g de producto (rendimiento del 80%).
Producto:
imagen2
15 Datos: RMN 1H (CDCl3) δ ppm 4,08 (s, 3 H), 7,44 (dd, J= 9,29, 7,83 Hz, 1H), 7,75 (d, J= 5,87 Hz, 1H), 8,12 (d, J= 9,29 Hz, 1H), 8,22 (d, J= 5,87 Hz, 1H); EM: (M+H)+ 212. Etapa 3: Modificaciones: se usaron 41 mg de 1-cloro-5-fluoro-6-metoxi-isoquinolina y 133 mg de éster terc-butílico del ácido 20 {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetilpropil}-carbámico, se obtuvieron 70 mg de producto (rendimiento del 48%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 13 H), 1,21 (s, 9 H), 1,44 (dd. J= 9,78, 5,38 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J= 8,19, 5,50 Hz, 1 H), 2,24 (d, J= 9,29 Hz, 2 H), 2,62 (d, J= 13,94 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,05 (m, 4 H), 4,22 (d, J= 9,29 Hz, 1 H), 4,45 (m, 1 H), 4,54 (dd, J= 9,66, 7,21 Hz, 1 H), 5,12 (d, J= 10,52 Hz, 1 H), 5,30 (d, J= 16,87 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,39 (m, 2 H), 7,95 (d, J= 6,11 Hz, 1 H), 8,00 (d, J= 9,29 Hz, 1 H).
Ejemplo 275: Preparación del Compuesto 275
imagen2
El Compuesto 2 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 2-cloro3-metoxicinnámico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
10 Etapa 1: Modificaciones: se usaron 658 mg de ácido 2-cloro-3-metoxicinnámico, se obtuvieron 360 mg de producto (rendimiento del 54%).
Producto:
imagen2
15 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 4,02 (s, 3 H), 6,91 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 7,23 (d, J= 7,58 Hz, 1 H), 7,35 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 8,27 (d, J= 9,05 Hz, 1 H).
Etapa 2:
Modificaciones: se usaron 350 mg de ácido 5-cloro-6-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 300 mg de producto (rendimiento del 80%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 4,09 (s, 3 H), 7,43 (d, J= 9,29 Hz, 1 H), 7,93 (d, J= 6,11 Hz, 1 H), 8,30 (m, 2 H); 5 EM (M+H)+ 229.
Etapa 3: Modificaciones: se usaron 68 mg de 1,5-dicloro-6-metoxi-isoquinolina y 167 mg de éster terc-butílico del ácido {1-[2(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}carbámico, se obtuvieron 130 mg de producto (rendimiento del 60%).
10 Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12H), 1,25 (m, 10 H), 1,46 (d, J= 5,62 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J= 8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,2 7 (m, 2 H), 2,62 (m, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,05 (m, 4 H), 4,22 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 4,46 (d, J= 11,49 Hz, 1 H), 4,54 (dd, J= 9,78, 6,36 Hz, 1 H), 5,13 (d, J= 10,52 Hz, 1 H), 5,30 (d, J= 15,89 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1
15 H), 5,86 (s, 1 H), 7,40 (d, J= 9,29 Hz, 1 H), 7,55 (d, J= 6,36 Hz, 1 H), 8,01 (d, J= 6,36 Hz, 1 H), 8,20 (d, J= 9,29 Hz, 1 H): EM: (M+H)+ 749.
Ejemplo 276: Preparación del Compuesto 276
imagen2
El Compuesto 276 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 3
cloro-2-metoxicinnámico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1. Etapa 1: Modificaciones: se usaron 4,24 g de ácido 3-cloro-2-metoxicinnámico, se obtuvieron 2,4 g de producto (rendimiento
del 57%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,93 (s, 1H), 6,85 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 7,24 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 7,52 (d, J= 8,80 Hz, 1 H), 8,03 (d, J= 8,80 Hz, 1 H): EM: (M+H)+ 210. Etapa 2: 10 Modificaciones: se usaron 2,09 g de 6-cloro-5-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 1,9 g de producto (rendimiento del 83%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 4,03 (s, 2 H), 7,63 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 7,86 (d, J= 5,14 Hz, 1 H), 8,06 (d, J 15 = 9,05 Hz, 1 H), 8,32 (d, J= 5,62 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 229.
Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 91 mg de 1,6-dicloro-5-metoxi-isoquinolina y 226 mg de éster terc-butílico del ácido {1-[2(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil]carbámico, se obtuvieron 114 mg de producto (rendimiento del 38%).
20 Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12H), 1,23 (m, 10 H), 1,44 (t, J= 6,72 Hz, 1H), 1,88 (dd, J= 7,95, 5,26 Hz, 1H), 2,25 (m, 2 H), 2,62 (dd, J= 13,33, 6,48 Hz, I H), 2,94 (m, I H), 3,98 (s, 3 H), 4,03 (m, I H), 4,20 (m, I H), 4,51 (m, 2 H), 5,12 (d, J= 10,52 Hz, 1 H), 5,32 (s, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 7,50 (m, 2 H), 7,95 (d, J= 8,80
Hz, 1 H), 8,06 (d, J= 5,87 Hz, 1 H); EM (MH+) 749.
Ejemplo 277: Preparación del Compuesto 277
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5 El Compuesto 277 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 3-(4cloro-fenil)-3-metoxi-acrílico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: se usaron 4,24 g de ácido 3-(4-cloro-fenil)-3-metoxi-acrílico, se obtuvieron 130 mg de producto (rendimiento del 3%)
10 Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,96 (s, 3 H), 7,19 (dd, J= 8,80, 2,45 Hz, 1 H), 7,28 (d, J= 2,45 Hz, 1H), 7,34 (s, 1 H), 8,25 (d, J= 9,05 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 210. Etapa 2: 15 Modificaciones: se usaron 105 mg de 7-cloro-4-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 60 mg de producto (rendimiento del 71%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 4,05 (s, 3H), 7,67 (dd, J= 8,80, 1,96 Hz, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,16 (d, J= 9,05 20 Hz, 1 H), 8,24 (d, J= 1,96 Hz, 1H); EM: (M+H)+ 229.
Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 46 mg de 1,7-dicloro-4-metoxi-isoquinolina y 113 mg de éster terc-butílico del ácido {1-[2(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}
carbámico, se obtuvieron 50 mg de producto (rendimiento del 31%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 11H), 1,16 (s, 9 H), 1,24 (m, 2 H), 1,44 (dd, J= 9,54, 5,38 Hz, 1 H),
5 1,88 (dd, J= 8,07, 5,62 Hz, 1H), 2,28 (m, 2 H), 2,59 (dd, J= 13,69, 6,85 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,00 (s, 3 H), 4,05 (d, J= 11,74 Hz, 1 H), 4,19 (s, 1 H), 4,43 (d, J= 11,49 Hz, 1 H), 4,56 (dd, J= 10,03, 6,85 Hz, 1 H), 5,12 (d, J= 11,49 Hz, 1 H), 5,30 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,76 (m, 2 H), 7,57 (s, 1 H), 7,67 (d, J= 8,56 Hz, 1 H), 8,04 (s, 1 H), 8,08 (d, J= 8,80 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 748.
Ejemplo 278: Preparación del Compuesto 278
10 El Compuesto 278 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 excepto la etapa 1. Etapa 1: Modificaciones: Una mezcla de 6-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona (700 mg) y NCS (532 mg) en MeCN (10 ml) se calentó a reflujo durante 3 h. La filtración dio 600 mg (72%) del producto deseado en forma de un sólido. 15 Producto:
imagen2
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,96 (s, 1 H), 7,19 (dd, J= 8,80, 2,45 Hz, 1 H), 7,28 (d, J= 2,45 Hz, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 8,25 (d, J= 9,05 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 210.
Etapa 2: Modificaciones: se usaron 500 mg de 4-cloro-6-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 400 mg de producto. Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 4,01 (s, 3 H), 7,35 (d, J= 2,45 Hz, 1 H), 7,41 (d, J= 2,45 Hz, 1 H), 8,24 (d, J 5 = 9,29 Hz, 1 H), 8,27 (s, 1 H); EM: (M+H)+ 229.
Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 42 mg de 1,4-dicloro-6-metoxi-isoquinolina y 1 17 mg de éster terc-butílico del ácido {1-[2(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}carbámico, se obtuvieron 70 mg de producto (rendimiento del 47%).
10 Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,44 (m, 1 H), 1,88 (dd, J= 8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,24 (m, 2 H), 2,61 (dd, J= 13,82, 6,72 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,97 (s, 3 H), 4,04 (dd, J= 11,74, 2,69 Hz, 1 H), 4,21 (s, 1 H), 4,49 (m, 2 H), 5,12 (d, J= 10,52 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,75 (m, 2 H), 7,19 (d, J= 8,80
15 Hz, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 8,00 (s, 1 H), 8,13 (d, J= 9,05 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 749.
Ejemplo 279: Preparación del Compuesto 279
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El Compuesto 279 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 3metoxi-3-(3-metoxi-fenil)-acrílico se usó en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
Etapa 1:
Modificaciones: se usaron 4,24 g de ácido 3-metoxi-3-(3-metoxi-fenil)-acrílico, se obtuvieron 400 mg de producto (rendimiento del 10%). Producto:
imagen2
Etapa 2:
Modificaciones: se usaron 400 mg de 4,6-dimetoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 300 mg de producto (rendimiento del 69%). Producto:
imagen2
10 Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 3,97 (s, 3 H), 4,05 (s, 3 H), 7,31 (dd, J= 9,17, 2,57 Hz, 1 H), 7,45 (d, J= 2,69 Hz, 1 H), 7,75 (s, 1 H), 8,16 (d, J= 9,29 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 224. Etapa 3: Modificaciones: se usaron 89 mg de 1-cloro-4,6-dimetoxi-isoquinolina y 223 mg de éster terc-butílico del ácido {1-{215 (1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}carbámico, se obtuvieron 160 mg de producto (rendimiento del 54%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,07 (m, 12 H), 1,21 (m, 10 H), 1,43 (m, 1 H), 1,87 (dd, J= 8,07, 5,62 Hz, 1
20 H), 2,24 (m, 2 H), 2,58 (dd, J= 13,57, 6,97 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 3,99 (s, 3 H), 4,04 (dd, J= 11,74, 2,93 Hz, 1 H), 4,24 (s, 1 H), 4,39 (d, J= 11,98 Hz, 1 H), 4,50 (m, 1 H), 5,12 (d, J= 10,52 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 16,87 Hz, 1H), 5,75(m,2H),7,12(d, J= 9,05 Hz, 1H), 7,40(d, J= 2,20 Hz, 1H),7,48(s, 1H),8,04(d, J= 9,05 Hz,1H);MS:(M+H)+744.
Ejemplo 280: Preparación del Compuesto 280
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El Compuesto 280 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 3-(3difluorometoxi-fenil)-acrílico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: se usaron 4,28 g de ácido 3-(3-difluorometoxi-fenil)-acrílico, se obtuvieron 3,1 g de producto (rendimiento del 72%).
Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+H)+ 212. 10 Etapa 2:
Modificaciones: se usaron 2 g de 6-difluorometoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 1,5 g de producto (rendimiento del 61%). Producto:
imagen2
15 Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 6,69 (t, J= 72,75 Hz, 1 H), 7,49 (m, 2 H), 8,28 (d, J= 5,62 Hz, 1 H), 8,36 (d, J = 9,05 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 230.
Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 46 mg de 1-cloro-6-difluorometoxi-isoquinolina y 113 mg de éster terc-butílico del ácido {1[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}20 carbámico, se obtuvieron 8 mg de producto (rendimiento del 5%).
Producto: Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 12 H), 1,23 (m, 10 H), 1,44 (m, 2 H), 1,88 (dd, J= 8,19, 5,50 Hz, 1 H), 2,30 (m, 2 H), 2,67 (d, J= 13,94 Hz, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,07 (d, J= 10,27 Hz, 1 H), 4,21 (s, 1 H), 4,53 (d, J= 6,85 Hz, 2 H), 5,13 (m, 1 H), 5,31 (s, 1 H), 5,76 (d, J= 47,93 Hz, 2 H), 7,11 (m, 2 H), 7,26 (d, J= 6,11 Hz, 1 H), 7,81 (d, J= 6,11 Hz, 1H), 8,16 (m, 1 H); EM: (M+H)+ 700.
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Ejemplo 281: Preparación del Compuesto 281
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El Compuesto 281 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 3cloro-3-fenil-acrílico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
10 Etapa 1: Modificaciones: se usaron 11 g de ácido 3-cloro-3-fenil-acrílico, se obtuvieron 3,1 g de producto (rendimiento del 29%).
Producto:
imagen2
15 Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 7,34 (s, 1 H), 7,52 (t, J= 7,58 Hz, 1 H), 7,77 (t, J= 7,46 Hz, 1 H), 7,90 (d, J = 8,07 Hz, 1 H), 8,39 (d, J= 8,07 Hz, 1 H), 11,37 (s, 1 H): EM: EM: (M+H)+ 180.
Etapa 2: Modificaciones: se usaron 3,1 g de 4-cloro-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 2,3 g de producto (rendimiento del 66%)
20 Producto: Datos: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,77 (ddd, J= 8,31, 7,09, 1,22 Hz, 1H), 7,88 (ddd, J= 8,31, 7,09, 7,22 Hz, 1 H), 8,23 (d, J= 8,31 Hz, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 8,36 (d, J= 8,56 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 198.
imagen2
Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 20 mg de 1,4-dicloro-isoquinolina y 56 mg de éster terc-butílico del ácido {1-[2-(1ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}carbámico, se obtuvieron 33 mg de producto (rendimiento del 30%).
Producto:
imagen2
10 Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,44 (dd, J= 9,41, 5,26 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J= 7,83, 5,62 Hz, 1 H), 2,27 (m, 2 H), 2,63 (dd, J= 13,82, 6,97 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,06 (dd, J= 11,49, 2,45 Hz, 1 H), 4,22 (d, J= 9,29 Hz, 1 H), 4,53 (m, 2 H), 5,12 (d, J= 10,76 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 6,60 (d, J= 8,80 Hz, 1 H), 7,63 (t, J= 7,58 Hz, 1 H), 7,86 (t, J= 7,70 Hz, 1 H), 8,06 (s, 1 H), 8,11 (d, J= 8,56 Hz, 1 H), 8,25 (d, J= 8,31 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 718.
15 Ejemplo 282: Preparación del Compuesto 282
imagen2
El Compuesto 2 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 3-cloro3-fenil-acrílico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1. Etapa 1:
20 Modificaciones: se usaron 20 g de ácido 3-cloro-3-fenil-acrílico, se obtuvieron 2 g de producto (rendimiento del 8%). Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+H)+ 230. Etapa 2: Modificaciones: se usaron 2 g de 6-trifluorometoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 0,7 de producto (rendimiento
del 33%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,51 (d, J= 9,29 Hz, 1 H), 7,59 (d, J= 5,62 Hz, 1 H), 7,64 (s, 1 H), 8,31 (d, J= 5,62 Hz, 1 H), 8,40 (d, J= 9,05 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 248.
10 Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 50 mg de 1-cloro-6-trifluorometoxi-isoquinolina y 113 mg de éster terc-butílico del ácido {1[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}carbámico, se obtuvieron 42 mg de producto (rendimiento del 27%).
Producto:
15
imagen2
Datos:. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,44 (dd, J= 9,17, 5,50 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J= 8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,63 (dd, J= 13,45, 7,09 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,06 (dd, J= 11,25, 2,45 Hz, 1 H), 4,21 (s, 1 H), 4,53 (m, 2 H), 5,13 (d, J= 10,52 Hz, 1 H), 5,30 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 7,39 (m, 2 H), 7,72 (s, 1 H), 8,05 (d, J= 5,87 Hz, 1 H), 8,31 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 9,18 (s, 1 H); EM: (M+H)+ 768.
20 Ejemplo 283: Preparación del Compuesto 283
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El Compuesto 283 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 3-(4fluoro-fenil)-3-metoxi-acrílico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: se usaron 3,82 g de ácido 3-(4-fluoro-fenil)-3-metoxi-acrílico, se obtuvieron 198 mg de producto (rendimiento del 5%);
Producto:
imagen2
Datos: EM: (M+H)+ 194. 10 Etapa 2:
Modificaciones: se usaron 193 mg de 7-fluoro-4-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 199 mg de producto (rendimiento del 94%). Producto:
imagen2
15 Datos: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 4,05 (s, 3 H), 7,49 (m, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,86 (dd, J= 9,66, 2,57 Hz, 1 H), 8,23 (dd, J= 9,29, 5,38 Hz, 1 H): EM: (M+H)+ 212.
Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 42 mg de 1-cloro-7-fluoro-4-metoxi-isoquinolina y 112 mg de éster terc-butílico del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil20 propil}-carbámico, se obtuvieron 40 mg de producto (rendimiento del 14%).
Producto: Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,42 (m, 1 H), 1,87 (dd, J= 7,95, 5,50 Hz, 1 H), 2,23 (m, 2 H), 2,55 (dd, J= 13,08, 6,48 Hz, I H), 2,93 (m, 1 H), 4,06 (s, 3 H), 4,09 (m, 1 H), 4,23 (s, 1 H), 4,30 (d, J= 11,49 Hz, 1 H), 4,46 (m, 1 H), 5,12 (d, J= 10,27 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 17,36 Hz, 1 H), 5,40 (s, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 7,46 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 7,56 (d, J= 2,20 Hz, 1 H), 7,75 (s, 1 H), 8,18 (d, J= 9,05 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 749.
imagen2
Ejemplo 284: Preparación del Compuesto 284
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El Compuesto 284 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 excepto la etapa 1. Etapa 1:
10 Modificaciones: Una mezcla de 7-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona (876 mg) y NCS (665 mg) en MeCN (10 ml) se calentó a reflujo durante 3 h. La filtración dio 500 mg (47%) del producto deseado en forma de un sólido. Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 4,00 (s, 3 H), 7,58 (m, 2 H), 8,14 (d, J= 10,03 Hz, 1 H), 8,17 (s, 1 H). 15 Etapa 2:
Modificaciones: se usaron 418 mg de 4-cloro-7-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona, se obtuvieron 410 mg de producto (rendimiento del 90%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 4,00 (s, 3 H), 7,49 (dd, J= 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,55 (d, J= 2,44 Hz, 1 H), 8,12 (d, J= 9,16 Hz, 1 H), 8,21 (s, 1 H); EM: (M+H)+ 229.
Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 42 mg de 1,4-dicloro-7-metoxi-isoquinolina y 117 mg de éster terc-butílico del ácido {1-[2(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}carbámico, se obtuvieron 50 mg de producto (rendimiento del 33%).
Producto:
imagen2
10 Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,05 (m, 20 H), 1,24 (m, 2 H), 1,44 (m, 1 H), 1,89 (dd, J= 8,19, 5,50 Hz, 1 H), 2,28 (m, 2 H), 2,62 (dd, J= 13,69, 6,85 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,07 (dd, J= 11,98, 3,42 Hz, 1 H), 4,19 (m, 1 H), 4,44 (d, J= 11,74 Hz, 1 H), 4,58 (dd, J= 10,27, 7,09 Hz, 1 H), 5,12 (m, 1 H), 5,31 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,78 (m, 2 H), 7,49 (m, 2 H), 7,91 (s, 1 H), 8,02 (m, 1 H); EM: (M+H)+ 749.
Ejemplo 285: Preparación del Compuesto 285
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15 El Compuesto 285 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó en lugar de ácido 2-difluorometoxicinnámico en la etapa 1. Etapa 1 y etapa 2: Véase el compuesto 256 20 Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 46 mg de 1-cloro-5-difluorometoxi-isoquinolina y 111 mg de éster terc-butílico del ácido {1[2-(1-ciclopropanosulfonilamino-carbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}carbámico, se obtuvieron 40 mg de producto (rendimiento del 27%).
Producto:
imagen2
5
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,44 (m, 1 H, 1,89 (m, 1 H), 2,22 (m, 2 H), 2,62 (m, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,08 (m, 1 H), 4,23 (d, J= 9,54 Hz, 1 H), 4,52 (m, 2 H), 5,12 (d, J= 10,76 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 17,61 Hz, 1 H), 5,75 (m, J= 10,03 Hz, 1 H), 5,88 (s, 1 H), 6,60 (s, 1 H), 7,02 (t, J= 73,48 Hz, 1 H), 7,52 (m, 3 H), 8,07 (m, J= 5,75, 5,75 Hz, 2 H); EM: (M+Na)+ 772.
10 Ejemplo 286: Preparación del Compuesto 286
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El Compuesto 286 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 3(2,3-dihidro-benzo[1.4]dioxin-5-il)-acrílico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1. Etapa 1: 15 Modificaciones: se usaron 4,12 g de ácido 3-(2,3-dihidro-benzo[1.4]dioxin-5-il)-acrílico, se obtuvieron 2,2 g de producto (rendimiento del 53%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 4,37 (m, 4 H), 6,83 (d, J= 7,09 Hz, 1 H), 7,02 (d, J= 8,80 Hz, 1 H), 7,12 20 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 7,79 (d, J= 8,80 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 204.
Etapa 2:
Modificaciones: se usaron 2,05 g de 2,3-dihidro-7H-1,4-dioxa-7-aza-fenantren-8-ona, se obtuvieron 1,5 g de producto (rendimiento del 68%). Producto:
imagen2
5 Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ ppm 4,42 (m, 4 H), 7,24 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 7,77 (d, J= 5,87 Hz, 1 H), 7,84 (d, J = 9,05 Hz, 1 H), 8,18 (d, J= 5,87 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 222. Etapa 3: Modificaciones: se usaron 88 mg de 8-cloro-2,3-dihidro-1,4-dioxa-7-aza-fenantreno y 223 mg de éster terc-butílico 10 del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2dimetil-propil}-carbámico, se obtuvieron 140 mg de producto (rendimiento del 47%). Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,43 (dd, J= 9,05, 5,14 Hz, 1 H), 1,87 (m, 1
15 H), 2,22 (d, J= 9,29 Hz, 2 H), 2,60 (dd, J= 13,45, 7,09 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 4,05 (dd, J= 11,62, 2,81 Hz, 1 H), 4,24 (s, 1 H), 4,44 (m, 6 H), 5,13 (d, J= 17,36 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 17,36 Hz, 1 H), 5,75 (m, 2 H), 7,04 (d, J= 9,29 Hz, 1 H), 7,44 (d, J= 5,87 Hz, 1 H), 7,69 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 7,88 (d, J= 6,11 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 742.
Ejemplo 287: Preparación del Compuesto 287
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El Compuesto 287 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ácido 3(2,2-difluoro-benzo[1,3]dioxol-4-il)-acrílico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1.
Etapa 1: Modificaciones: se usaron 4,56 g de ácido 3-(2,2-difluoro-benzo[1,3]dioxol-4-il)-acrílico, se obtuvieron 2,2 g de producto (rendimiento del 55%).
Producto:
imagen2
Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 6,63 (d, J= 7,09 Hz, 1 H), 7,29 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 7,40 (d, J= 8,80 Hz, 1 H), 8,19 (d, J= 8,80 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 226.
10 Etapa 2: Modificaciones: se usaron 2,2 g de 2,2-difluoro-7H-1,3-dioxa-7-aza-ciclopenta[a]naftalen-6-ona, se obtuvieron 2,1 de producto (rendimiento del 87%).
Producto:
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15 Datos: RMN 1H (500 Hz, CDCl3) ppm 7,51 (d, J= 9,29 Hz, 1 H), 7,65 (d, J= 5,87 Hz, 1 H), 8,22 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 8,32 (d, J= 5,87 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 244.
Etapa 3:
Modificaciones: se usaron 48 mg de 6-cloro-2,2-difluoro-1,3-dioxa-7-aza-ciclopenta[a]naftaleno y 113 mg de éster terc-butílico del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-120 carbonil]-2,2-dimetilpropil}-carbámico, se obtuvieron 40 mg de producto (rendimiento del 27%).
Producto: Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,02 (s, 12 H), 1,24 (m, 10 H), 1,43 (m, 1 H), 1,88 (dd, J= 8,07, 5,38 Hz, 1 H), 2,32 (d, J= 3,67 Hz, 2 H), 2,64 (d, J= 13,45 Hz, 1 H), 2,95 (m, 1 H), 4,05 (d, J= 11,49 Hz, 1 H), 4,19 (d, J= 9,29 Hz, 1 H), 4,53 (m, 2 H), 5,12 (d, J= 9,78 Hz, 1 H), 5,32 (s, 1 H), 5,77 (m, 2 H), 7,34 (d, J= 5,87 Hz, 1 H), 7,46 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 8,11 (m, 2 H); EM: (M+H)+ 764.
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Ejemplo 288: Preparación del Compuesto 288
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El Compuesto 288 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 269 con la excepción de que se usó ÁCIDO 3(2,2-difluoro-benzo[1,3]dioxol-5-il)-acrílico en lugar de ácido 2-trifluorometoxicinnámico en la etapa 1. Etapa 1: 10 Modificaciones: se usaron 1 g de ácido 3-(2,2-difluoro-benzo[1,3]dioxol-5-il)-acrílico, se obtuvieron 0,55 g de producto. Producto:
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Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3DOD) δ ppm 6,69 (d, J= 7,09 Hz, 1 H), 7,19 (d, J= 7,09 Hz, 1 H), 7,47 (s, 1 H) 7,98 15 (s, 1 H); EM: (M+H)+ 226.
Etapa 2: Modificaciones: se usaron 0,5 g de 2,2-difluoro-6H-[1,3]dioxolo[4,5-g]isoquinolin-5-ona, se obtuvieron 0,4 de producto.
Producto:
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20 Datos: RMN 1H (400 Hz, CDCl3) δ 7,41 (s, 1 H), 7,57 (d, J= 5,49 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 8,27 (d, J= 5,80 Hz, 1 H); EM (M+H)+ 244. Etapa 3: Modificaciones: se usaron 48 mg 5-cloro-2,2-difluoro-[1,3]dioxolo[4,5-g]isoquinolina y 112 mg de éster terc-butílico 25 del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2dimetil-propil}-carbámico, se obtuvieron 30 mg de producto. Producto:
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Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,06 (m, 12 H), 1,25 (m, 10 H), 1,42 (m, 1 H), 1,87 (dd, J= 8,07, 5,62 Hz, 1 H), 2,26 (m, 2 H), 2,61 (dd, J= 13,57, 6,97 Hz, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,07 (dd, J= 11,86, 2,8 Hz, 1 H), 4,22 (m, 1 H), 4,40 (d, J= 11,98 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,11 (d, J= 10,52 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,37 (s, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,56 (s, 1 H), 7,63 (d, J= 5,62 Hz, 1 H), 7,99 (d, J= 5,62 Hz, 1 H).
Ejemplo 289: Preparación del Compuesto 289
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Una suspensión de compuesto 287 (15 mg) y Pt(S)/C (5%, 5 mg) en acetato de etilo (5 ml) se hidrogenó a 68,95
10 kPa (10 psi) durante 30 min. Después de la filtración, al concentración cuantitativamente dio 15 mg de compuesto 289 en forma de un sólido. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,09 (m, 26 H), 1,57 (m, 4 H), 2,30 (m, 1 H), 2,61 (m, J = 13,82, 7,21 Hz, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 4,05 (m, J= 13,94 Hz, 1 H), 4,19 (d, J= 9,54 Hz, 1 H), 4,53 (m, 2 H), 5,89 (s, 1 H), 7,34 (d, J= 5,87 Hz, 1 H), 7,46 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 8,09 (d, J= 5,87 Hz, 1 H), 8,12 (d, J= 8,80 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 766.
15 Ejemplo 290: Preparación del Compuesto 290
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El Compuesto 290 (15 mg, 100%) se preparó siguiendo el Esquema 3 del Ejemplo 289 usando 15 mg de compuesto 286. Datos: RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ ppm 1,02 (m, 14 H), 1,23 (m, 12 H), 1,58 (m, 4 H), 2,25 (m, 1 H), 2,58 (dd, J= 13,82, 7,21 Hz, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 4,05 (m, J= 11,25, 2,93 Hz, 1 H), 4,25 (d, J= 9,54 Hz, 1 H), 4,39 (m, 5 H), 4,52 (m, J= 10,03, 7,34 Hz, 1 H), 5,81 (s, 1 H), 7,03 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 7,43 (d, J= 6,11 Hz, 1 H), 7,69 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 7,88 (d, J= 6,11 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 744.
Ejemplo 291: Preparación del Compuesto 291
imagen2
El Compuesto 291 (28 mg, 100%) se preparó siguiendo el Esquema 3 del Ejemplo 289 usando 28 mg de
10 compuesto 251. Datos: RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (m, 15 H), 1,26 (m, 11 H), 1,37 (m, 1 H), 1,58 (m, 3 H), 2,25 (m, 1 H), 2,58 (dd, J= 13,6, 7,0 Hz, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 3,99 (s, 3 H), 4,06 (m, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 4,44 (m, 1 H), 4,53 (dd, J= 10,3, 7,6 Hz, 1 H), 5,78 (s, 1 H), 6,64 (d, J= 9,8 Hz, 1 H), 7,55 (m, 2 H), 7,71 (t, J= 7,3 Hz, 1 H), 8,09 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 8,14 (d, J= 8,1 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 738.
Ejemplo 292: Preparación del Compuesto 292
imagen2
El Compuesto 292 (16 mg, 84%) se preparó siguiendo el Esquema 3 del Ejemplo 289 usando 19 mg de
Compuesto 253. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,90 (m, 15 H), 1,15 (m, 12 H), 1,48 (m, 3 H), 2,18 (m, 1 H), 2,51 (dd, J= 13,7, 6,9 Hz, 1 H), 2,88 (m, 1 H), 3,90 (s, 3 H), 3,98 (dd, J= 11,6, 3,1 Hz, 1 H), 4,18 (d, J= 9,5 Hz, 1 H), 4,36 (d, J= 11,0 Hz, 1 H), 4,45 (dd, J= 10,2, 7,2 Hz, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 6,56 (d, J= 9,3 Hz, I H), 7,05 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,34 (t, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,51 (d, J= 5,9 Hz, 1 H), 7,65 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,86 (d, J= 6,1 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 738.
Ejemplo 293: Preparación del Compuesto 293
imagen2
El Compuesto 293 (7 mg, 35%) se preparó siguiendo el Esquema 3 del Ejemplo 289 pero usando 20 mg de compuesto 252. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04 (m, 15 H), 1,27 (m, 12 H), 1,58 (m, 3 H), 2,27 (m, 1 H),
10 2,60 (m, 4 H), 2,96 (m, 1 H), 4,07 (dd, J= 11,7, 2,9 Hz, 1 H), 4,25 (s, 1 H), 4,46 (d, J= 12,0 Hz, 1 H), 4,54 (dd, J= 10,0, 7,6 Hz, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,39 (t, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,44 (d, J= 5,9 Hz, 1 H), 7,53 (d, J= 6,9 Hz, 1 H), 8,00 (d, J = 6,1 Hz, 1 H), 8,06 (d, J= 8,6 Hz, 1 H); EM: (M+H)+ 700.
Ejemplo 294: Preparación del Compuesto 294
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15 El Compuesto 294 (14 mg, 78%) se preparó siguiendo el Esquema 3 del Ejemplo 289 usando 18 mg de Compuesto 254. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,94 (m, 15 H), 1,13 (m, 10 H), 1,20 (m, 2 H), 1,50 (m, 3 H), 2,21 (m, 1 H), 2,53 (dd, J= 13,8, 7,0 Hz, 1 H), 2,88 (m, 1 H), 3,99 (dd, J= 11,4, 2,6 Hz, 1 H), 4,14 (d, J= 9,3 Hz, 1 H), 4,45 (m, 2 H), 5,79 (s, 1 H), 6,53 (d, J= 9,1 Hz, 1 H), 7,40 (t, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,54 (d, J= 5,9 Hz, 1 H), 7,73 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 8,02 (d, J= 6,1 Hz, 1 H), 8,10 (d, J= 8,6 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 742.
20 Ejemplo 295: Preparación del Compuesto 295
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El Compuesto 295 (30 mg, 100%) se preparó siguiendo el Esquema 3 del Ejemplo 289 usando 30 mg de compuesto 270. EM: (M+Na)+ 776.
Ejemplo 296: Preparación del Compuesto 296
5 El Compuesto 296 (6,3 mg, 33%) se preparó siguiendo el Esquema 3 del Ejemplo 289 usando 20 mg de compuesto 259. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04 (m, 15 H), 1,24 (m, 12 H), 1,59 (m, 3 H), 2,29 (m, 1 H), 2,50 (s, 3 H), 2,60 (dd, J= 13,69, 6,85 Hz, 1 H), 2,97 (m, 1 H), 4,09 (dd, J= 11,74, 2,93 Hz, 1 H) 4,22 (s, 1 H) 4,43 (d, J= 11,74 Hz, 1 H), 4,59 (dd, J= 10,27, 6,85 Hz, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 7,30 (d, J= 5,87 Hz, 1 H), 7,57 (dd, J= 8,31,
imagen2
10 1,47 Hz, 1 H), 7,72 (d, J= 8,31 Hz, 1 H), 7,89 (d, J= 5,87 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H); EM: (M+H)+ 700.
Ejemplo 297: Preparación del Compuesto 297
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El Compuesto 297 (40 mg, 100%) se preparó siguiendo el Esquema 3 del Ejemplo 289 usando 40 mg de compuesto 263. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,98 (m, 13 H) 1,07 (m, 2 H) 1,27 (m, 12 H) 1,57 (m, 3 H) 2,27
15 (m, 1 H) 2,58 (dd, J= 14,7, 7,1 Hz, 1 H) 2,77 (s, 3 H) 2,96 (m, 1 H) 4,04 (m, 1 H) 4,27 (m, 1 H) 4,42 (d, J= 11,5 Hz, 1 H) 4,55 (dd, J= 10,6, 7,0 Hz, 1 H) 5,94 (s, 1 H) 6,65 (d, J= 9,5 Hz, 1 H) 7,28 (m, 2 H) 7,50 (t, J= 7,6 Hz, 1 H) 7,60 (d, J= 7,6 Hz, 1 H) 7,89 (d, J= 5,6 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 722.
Ejemplo 298: Preparación del Compuesto 298
imagen2
El Compuesto 298 (29 mg, 100%) se preparó siguiendo el Esquema 3 del Ejemplo 289 usando 29 mg de compuesto 261. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,99 (m, 15 H), 1,25 (m, 12 H), 1,60 (m, 3 H), 2,28 (m, 1 H), 2,58 (m, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 4,02 (m, 4 H), 4,22 (dd, J= 8,8, 4,4 Hz, 1 H), 4,48 (m, 2 H), 5,83 (s, 1 H), 7,27 (d, J= 5,6 Hz, 1 H), 7,36 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 7,75 (d, J= 11,3 Hz, 1 H), 7,90 (d, J= 5,9 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 756.
Ejemplo 299: Preparación del Compuesto 299
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El Compuesto 299 (34 mg, 97%) se preparó siguiendo el Esquema 3 del Ejemplo 289 usando 35 mg de compuesto
274. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,01 (m, 16 H), 1,28 (m, 12 H), 1,58 (m, 2 H), 2,27 (s, 1 H), 2,59 (dd, J=
10 13,82, 6,97 Hz, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 4,02 (s, 3 H), 4,07 (m, 1 H), 4,21 (m, 1 H), 4,44 (m, J= 11,98 Hz, 1 H), 4,55 (d, J = 10,27 Hz, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 7,39 (m, 2 H), 7,95 (d, J= 6,11 Hz, 1 H), 8,00 (d, J= 9,29 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 756.
Ejemplo 300: Preparación del Compuesto 300
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El Compuesto 300 (30 mg, 100%) se preparó siguiendo el Esquema 3 del Ejemplo 289 usando 30 mg de
15 compuesto 262. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,27 (m, 30 H), 2,25 (s, 1 H), 2,54 (s, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 3,97 (s, 3 H), 4,20 (m, 3 H), 4,51 (m, J= 10,52, 6,85 Hz, 1 H), 5,37 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,62 (s, 1 H), 7,65 (d, J= 5,38 Hz, 1 H) 8,06 (d, J= 5,62 Hz, 1 H); EM: (M+Na)+ 773.
Sección G:
El procedimiento de CL/EM usado en la sección G es el siguiente: gradiente Xterra 4,6 x 50 mm @ 3 min y flujo 4 ml/min
Esquema 1: (Esquema General)
imagen32
Esquema 2: (Esquema General)
imagen2
Esquema 3: (Esquema General)
imagen2
10 Esquema 4: (Esquema General)
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Ejemplo 320: Preparación del Compuesto 320
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El Compuesto 320 se preparó siguiendo el Esquema 1 y el Esquema 3 de antes. Etapa 1 (Esquema 1):
imagen2
5
A una solución de N,N-Dietil-4-metoxi-2-metil-benzamida (332 mg, 1,5 mmol) en THF (15 ml) a -78 ºC se le añadió t-BuLi (solución 1,7 M en pentano, 1,3 ml, 2,25 mmol). La solución de color rojo resultante se agitó a -78 ºC durante 10 min y después se añadió 2-cianopiridina (156 mg, 1,5 mmol). Después, la mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante una noche. La reacción se interrumpió con una solución saturada de NH4Cl y se extrajo dos veces con
10 acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron. El producto en bruto se purificó por HPLC Prep., dando un sólido de color amarillento en forma de la sal TFA. (85 mg, rendimiento del 15%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 3,91 (m, 3 H), 7,09 (dd, J= 9,05, 2,45 Hz, I H), 7,17 (d, J= 2,45 Hz, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,42 (m, 1 H), 7,92 (m, 1 H), 8,08 (d, J= 8,07 Hz, 1 H), 8,18 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 8,65 (d, J= 4,89 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,14 min), EM m/z 253 (MH+).
Etapa 2 (Esquema 3, Etapa 1):
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Se calentó a reflujo sal TFA de 6-metoxi-3-piridin-2-il-2H-isoquinolin-1-ona (85 mg, 0,232 mmol) con POCl2 (3,0 ml) durante 2 días. Después, el POCl3 se retiró por destilación y el residuo se inactivó con hielo. Después, se neutralizó con una solución 10 N de NaOH y el sólido de color pardo se recogió como producto puro. (62 mg, rendimiento del 99%) CL-EM (tiempo de retención: 2,063 min), EM m/z 271 (MN+).
Etapa 3 (Esquema 3, Etapa 2):
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A una solución de éster terc-butílico del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropil
10 carbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin]-carbonil]-2,2-dimetil-propil}-carbámico (82 mg, 0,148 mmol) y LaCl3 (36 mg, 0,148 mmol) en DMF (1,5 ml) se le añadió t-butóxido potásico (solución 1,0 M en THF, 0,74 ml, 0,74 mmol) a -78 ºC. La mezcla de reacción se agitó durante 1 h y después se añadió 1-cloro-6-metoxi-3-piridin-2-il-isoquinolina (40 mg, 0,148 mmol). Se calentó a ta y se agitó durante una noche. Después, se inactivó con agua y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un sólido de color blanquecino como producto
15 (Compuesto 320). (23 mg, rendimiento del 20%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 0,87-1,08 (m, 11 H), 1,20-1,30 (m, 11 H), 1,43 (m, 1 H), 1,87 (m, 1 H), 2,22 (m, 1 H), 2,35 (m, 1 H), 2,69 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 3,94 (s, 3 H), 4,16 (m, 1 H), 4,27 (m, 1 H), 4,45 (m, 1 H), 4,56 (m, 1 H), 5,10 (d, J= 11,3 Hz, 1 H), 5,27 (d, J= 15,9 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 6,07 (s, 1 H), 7,12 (d, J= 7,33 Hz, 1 H), 7,31 (d, J = 1,96 Hz, 1 H), 7,40 (m. 1 H), 7,94 (dd, J= 7,8 Hz. 1,5 Hz, 1 H), 8,11 (d. J= 9,29 Hz, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 8,45 (d, J=
20 8,07 Hz, 1 H), 8,62 (m, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,393 min), EM m/z 791 (MH+).
Ejemplo 321: Preparación del Compuesto 321
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La condensación de bromopiruvato de etilo con etil tiourea en dioxano a reflujo proporcionó el monoalquilamino tiazol en forma de la sal HBr con rendimiento cuantitativo. La alquilación de éster etílico del ácido 2-etilamino-tiazol-4carboxílico con EtI en DMF proporcionó éster etílico del ácido 2-dietilamino-tiazol-4-carboxílico. CL/EM m/z 229 (MH)+
imagen2
El Compuesto 321 se preparó siguiendo el Esquema 2 y el Esquema 3 anteriores con la excepción de que se usó éster etílico del ácido 2-dietilamino-tiazol-4-carboxílico en la etapa 1 del Esquema 2. CL/EM (Tiempo de retención 2,76 min): m/z 868 (MH+).
10 Ejemplo 322: Preparación del Compuesto 322
imagen2
El Compuesto 322 se preparó siguiendo el Ejemplo 321, con la excepción de que se usó éster etílico del ácido 2
dimetilamino-tiazol-4-carboxílico (preparado de acuerdo con el Esquema 5, con la excepción de que se usaron metil tiourea y yoduro de metilo en lugar de etil tiourea y yoduro de etilo) se usó en lugar de éster etílico del ácido 2dimetilamino-tiazol-4-carboxílico en la etapa 1 del Esquema 2. CL/EM (Tiempo de retención 2,56 min): m/z 840 (MH+)
Ejemplo 323: Preparación del Compuesto 323
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El Compuesto 323 se preparó siguiendo el Etapa 3 del Ejemplo 324, con la excepción de que se usó 3-cloro-6metoxi-benzo[d]isoxazol en lugar de 1-cloro-6-metoxi-3-piridin-2-il-isoquinolina. EM m/z 702 (M-H)
Ejemplo 324: Preparación del Compuesto 324
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El Compuesto 324 se preparó siguiendo el Etapa 3 del Ejemplo 324, con la excepción de que se usó 3-clorobenzo[d]isotiazol en lugar de 1-cloro-6-metoxi-3-piridin-2-il-isoquinolina. CL/EM (Tiempo de retención 1,83 min): m/z 688 (M-H)
Ejemplo 325: Preparación del Compuesto 325
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El Compuesto 325 se preparó siguiendo el Esquema 1 y el Esquema 3 de antes. Etapa 1 (Esquema 1):
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A una solución de N,N-Dietil-4-metoxi-2-metil-benzamida (332 mg, 1,5 mmol) en THF (15 ml) a -78 ºC se le añadió t
5 BuLi (solución 1,7 M en pentano, 1,3 ml, 2,25 mmol). La solución de color rojo resultante se agitó a -78 ºC durante 10 min y después se añadió 4-cianopiridina (164 mg, 1,575 mmol). Después, la mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante una noche. La reacción se interrumpió con una solución saturada de NH4Cl y el precipitado de color amarillo se recogió como producto puro. (145 mg, rendimiento del 38%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 3,91 (s, 3 H), 7,18 (dd, J= 8,8 Hz, 2,8 Hz, 1 H), 7,26 (m, 2 H), 8,06 (d, J= 6,0 Hz, 2H), 10 8,16 (d, J= 8,8 Hz, 1H), 8,84 (d, J= 6,0 Hz, 2H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,300 min), EM m/z 253 (MH+).
Etapa 2 (Esquema 3, etapa 1):
imagen2
Se calentó a reflujo 6-metoxi-3-piridin-4-il-2H-isoquinolin-1-ona (134 mg, 0,531 mmol) con POCl3 (6,0 ml) durante 5
15 días. Después, el POCl3 se retiró por destilación y el residuo se inactivó con hielo. Después, se neutralizó con una solución saturada de NaHCO3 y el sólido de color pardo se recogió como producto puro. (125 mg, rendimiento del 87%)
RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 3,99 (s, 3 H), 7,53 (dd, J= 9,04 Hz, 2,44 Hz, 1 H), 7,59 (d, J= 2,69 Hz, 1 H), 8,26 (d. J= 9,05 Hz, 1 H), 8,30 (d, J= 5,38 Hz, 2 H), 8,73 (s, 1 H), 8,85 (d, J= 6,36 Hz, 2 H).
20 CL-EM (tiempo de retención: 2,027 min), EM m/z 271 (MH+).
Etapa 3 (Esquema 3, Etapa 2):
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A una solución de éster terc-butílico del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}-carbámico (83,5 mg, 0,15 mmol) y LaCl3 (36,8 mg, 0,15 mmol) en DMF (1,5 ml) se le añadió t-butóxido potásico (solución 1,0 M en THF, 0,75 ml, 0,75 mmol) a -78 ºC. La mezcla de
5 reacción se agitó durante 1 h y después se añadió 1-cloro-6-metoxi-3-piridin-4-il-isoquinolina (40,6 mg, 0,15 mmol). Se calentó a ta y se agitó durante una noche. Después, se inactivó con agua y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un sólido de color blanquecino como producto (Compuesto 325). (1,6 mg, rendimiento del 1,3%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 0,90(m, 2 H), 1,02 (s, 9 H), 1,17-1,31 (m, 11 H), 1,42 (m, 1 H), 1,87 (m, 1 H), 2,23 (m,
10 1 H), 2,35 (m, 1 H), 2,68 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 3,95 (s, 3 H), 4,15 (m, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 4,45 (m, 1 H), 4,56 (m, 1 H), 5,10 (d, J= 10,76 Hz, 1 H), 5,27 (d, J= 17,61 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 6,06 (s, 1 H), 7,14 (d, J= 8,07 Hz, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 8,12 (d, J= 8,81 Hz, 1 H), 8,19 (d, J= 6,12 Hz, 2 H), 8,61 (d, J= 5,63 Hz, 2 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,523 min), EM m/z 791 (MH+).
Ejemplo 326: Preparación del Compuesto 326
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El Compuesto 326 se preparó siguiendo el Esquema 1 y el Esquema 4 de antes. Etapa 1 (Esquema 1):
imagen2
A una solución de N,N-Dietil-4-metoxi-2-metil-benzamida (332 mg, 1,5 mmol) en THF (15 ml) a -78 ºC se le añadió t
BuLi (solución 1,7 M en pentano, 1,3 ml, 2,25 mmol). La solución de color rojo resultante se agitó a -78 ºC durante 10 min y después se añadió 4-dimetilamino benzonitrilo (219 mg, 1,5 mmol). Después, la mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante una noche. La reacción se interrumpió con una solución saturada de NH4Cl y el precipitado de color amarillo se recogió y se trituró con éter, dando un sólido de color blanquecino como producto puro. (247 mg, rendimiento del 56%)
RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 2,97 (s, 6 H), 3,87 (s, 3 H), 6,72 (s, 1 H), 6,78 (d, J= 8,80 Hz, 2 H), 6,97 (dd, J= 8,80, 2,45 Hz, 1 H), 7,10 (d, J= 2,45 Hz, 1 H), 7,65 (d, J= 8,80 Hz. 2 H), 8,05 (d, J= 8,80 Hz, 1 H), 11,11 (s, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,023 min), EM m/z 295 (MH+).
Etapa 2 (Esquema 4, Etapa 1):
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10
Se calentó a reflujo 3-(4-dimetilamino-fenil)-6-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona (245 mg, 0,83 mmol) con POCl3 (10,0 ml) durante 2 días. Después, el POCl3 se retiró por destilación y el residuo se inactivó con hielo. Después, se neutralizó con una solución 10 N de NaOH y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un sólido de color naranja como producto (215 mg, rendimiento
15 del 83%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 3,01 (s, 6 H), 3,96 (s, 3 H), 6,88 (d, J= 9,05 Hz, 2 H), 7,20 (dd, J= 9,17, 2,57 Hz, 1 H), 7,28 (d, J= 2,45 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,96 (d, J= 9,05 Hz, 2 H), 8,13 (d, J= 9,29 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,543 min), EM m/z 313 (MH+).
Etapa 3 (Esquema 4, Etapa 2):
imagen2
20 Una mezcla de [4-(1-cloro-6-metoxi-isoquinolin-3-il)-fenil]-dimetil-amina (110 mg, 0,35 mmol) e hidrogenodifluoruro de tetrabutilfosfonio (0,5 g) se calentó a 140 ºC en un reactor de microondas Smith durante 20 min. Después, se añadió agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se separó, se lavó con agua y se secó (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un sólido de color parduzco como producto. (85 mg, rendimiento del 82%) CL-EM
25 (tiempo de retención: 2,320 min), EM m/z 297 (MH+).
Etapa 4 (Esquema 4, Etapa 3):
imagen2
A una solución de éster terc-butílico del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}-carbámico (111 mg, 0,2 mmol) y LaCl3 (49 mg, 0,2 mmol) en DMF (2,0 ml) se le añadió t-butóxido potásico (solución 1,0 M en THF, 1,0 ml, 1,0 mmol) a -78 ºC. La mezcla de reacción
5 se agitó durante 1 h y después se añadió [4-(1-fluoro-6-metoxi-isoquinolin-3-il)-fenil]-dimetilamina (59 mg, 0,2 mmol). Se calentó a ta y se agitó durante una noche. Después, se inactivó con agua y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un sólido de color amarillento como producto (Compuesto 326). (17,5 mg, rendimiento del 11%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 0,97-1,08 (m, 11 H), 1,23 (m, 2 H), 1,31 (s, 9 H), 1,44 (m, 1 H), 1,87 (m, 1 H), 2,22 (m,
10 1 H), 2,34 (m, 1 H), 2,68 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 2,99 (m, 6 H), 3,91 (s, 3 H), 4,17 (m, 1 H), 4,29 (m, 1 H), 4,39 (m, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,10 (d, J= 10,76 Hz, 1 H), 5,27 (d, J= 17,11 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 6,03 (s, 1 H), 6,83 (m, 2 H), 6,95 (m, 1 H), 7,16 (s, 1 H), 7,59 (s, 1 H), 8,01 (m, 3 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,850 min), EM m/z 834 (MH+).
Ejemplo 327: Preparación del Compuesto 327
imagen2
El Compuesto 327 se preparó siguiendo el Esquema 1 y el Esquema 4 de antes. Etapa 1 (Esquema 1):
imagen2
A una solución de N,N-Dietil-4-metoxi-2-metil-benzamida (332 mg, 1,5 mmol) en THF (15 ml) a -78 ºC se le añadió t-BuLi (solución 1,7 M en pentano, 1,3 ml, 2,25 mmol). La solución de color rojo resultante se agitó a -78 ºC durante 10 min y después se añadió 4-dietilamino benzonitrilo (261 mg, 1,5 mmol). Después, la mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante una noche. La reacción se interrumpió con una solución saturada de NH4Cl y el
5 precipitado de color amarillo se recogió como producto puro. (215 mg, rendimiento del 44%)
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,12 (m, 6 H), 3,39 (m, 4H), 3,87 (s, 3 H), 6,69 (s, 1 H), 6,72 (d, J= 9,05 Hz, 2 H), 6,96 (dd, J= 8,80, 2,45 Hz, 1 H), 7,09 (d, J= 2,45 Hz, 1 H), 7,61 (d, J= 9,05 Hz, 2 H), 8,04 (d, J= 8,80 Hz, 1H), 11,06 (s, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,883 min), EM m/z 323 (MH+).
10 Etapa 2 (Esquema 4, Etapa 1):
imagen2
Se calentó a reflujo 3-(4-dietilamino-fenil)-6-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona (207 mg, 0,642 mmol) con POCl3 (8,0 ml) durante un día. Después, el POCl3 se retiró por destilación y el residuo se inactivó con hielo. Después, se neutralizó con una solución saturada de NaHCO3 y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se
15 combinaron y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un sólido de color parduzco como producto. (180 mg, rendimiento del 82%) CL-EM (tiempo de retención: 2,397 min), EM m/z 341 (MH+).
Etapa 3 (Esquema 4, Etapa 2):
imagen2
Una mezcla de [4-(1-Cloro-6-metoxi-isoquinolin-3-il)-fenil]-dietilamina (90 mg, 0,264 mmol) e hidrogenodifluoruro de
20 tetrabutilfosfonio (0,5 g) se calentó a 140 ºC en un reactor de microondas Smith durante 20 min. Después, se añadió agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se separó, se lavó con agua y se secó (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite de color amarillento como producto. (70 mg, rendimiento del 82%)
CL-EM (tiempo de retención: 2,253 min), EM m/z 325 (MH+).
Etapa 4 (Esquema 4, Etapa 3):
imagen2
A una solución de éster terc-butílico del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}-carbámico (100 mg, 0,18 mmol) y LaCl3 (66 mg, 0,27 mmol) en DMF (2,0 ml) se le añadió t-butóxido potásico (solución 1,0 M en THF, 0,9 ml, 0,9 mmol) a -78 ºC. La
5 mezcla de reacción se agitó durante 1 h y después se añadió [4-(1-Fluoro-6-metoxi-isoquinolin-3-il)-fenil]-dietilamina (70 mg, 0,216 mmol). Se calentó a ta y se agitó durante una noche. Después, se inactivó con agua y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un sólido de color blanco como producto (Compuesto 327). (18 mg, rendimiento del 12%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 0,95-1,07 (m, 11H), 1,18 (m, 6 H), 1,25-1,38 (m, 11 H), 1,58 (m, 1 H), 1,85 (m, 1 H),
10 2,19 (m, 1 H), 2,34 (m, 1 H), 2,68 (m, 1 H), 2,92 (m, 1 H), 3,42 (m, 4 H), 3,90 (s, 3 H), 4,16 (m, 1 H), 4,28 (m, 1 H), 4,37 (m. 1 H), 4,53 (m, 1 H), 5,07 (d, J= 11,0 Hz, 1 H), 5,25 (d, J= 17,36 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 5,99 (s, 1 H), 6,77 (d, J= 8,8 Hz. 2 H), 6,94 (d. J= 9,05 Hz, 1 H), 7,14 (s, 1 H), 7,56 (s, 1H), 7,95-8,02 (m, 3 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,690 min), EM m/z 862 (MH+).
Ejemplo 328: Preparación del Compuesto 328
imagen2
El Compuesto 328 se preparó siguiendo el Esquema 2 y el Esquema 3 de antes. Etapa 1 (Esquema 2, Etapa 1):
imagen2
A una solución de N,N-Dietil-4-metoxi-2-metil-benzamida (332 mg, 1,5 mmol) en THF (15 ml) a -78 ºC se le añadió t-BuLi (solución 1,7 M en pentano, 2,12 ml, 3,6 mmol). La solución de color rojo resultante se agitó a -78 ºC durante 10 min y después se añadió nicotinato de metilo (206 mg, 1,5 mmol). La mezcla de reacción se agitó a -78 ºC durante 2 h. Después, la reacción se interrumpió con una solución saturada de NH4Cl y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron. El producto en bruto se purificó por HPLC Prep., dando un aceite espeso de color amarillento en forma de la sal TFA. (124 mg, rendimiento del 19%) CL-EM (tiempo de retención: 1,740 min), EM m/z 349 (M+Na+).
Etapa 2 (Esquema 2, Etapa 2):
imagen2
10 Se calentó N,N-Dietil-4-metoxi-2-(2-oxo-2-piridin-3-il-etil)-benzamida (120 mg, 0,272 mmol) con acetato de amonio (1 g) durante 3 h. Después, se enfrió y se añadió agua. Se extrajo con acetato de etilo y la fase orgánica se separó. Después, se secó (MgSO4) y se concentró, dando un sólido de color parduzco como producto. (65 mg, rendimiento del 95%) RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,89 (s, 3 H), 6,93 (s, 1 H), 7,10 (dd, J= 8,80, 2,45 Hz, 1H), 7,19 (d, J= 2,45 Hz, 1 H), 7,52 (dd, J= 7,46, 4,77 Hz, 1 H), 8,15 (m, 2 H), 8,64 (dd, J= 4,89, 1,47 Hz, 1 H), 8,96 (d, J= 1,71 Hz,
15 1 H), 11,51 (s, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,377 min), EM m/z 253 (MH+).
Etapa 3 (Esquema 3, Etapa 1):
imagen2
Se calentó a reflujo 6-Metoxi-3-piridin-3-il-2H-isoquinolin-1-ona (65 mg, 0,258 mmol) con POCl3 (2,5 ml) durante 7
20 días. Después, el POCl3 se retiró por destilación y el residuo se inactivó con hielo. Después, se neutralizó con una solución 10 N de NaOH y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron, dando un sólido de color amarillo como producto. (27 mg, rendimiento del 39%) CL-EM (tiempo de retención: 2,090 min), EM m/z 271 (MH+).
Etapa 4 (Esquema 3, Etapa 2):
imagen2
A una solución de éster terc-butílico del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)
4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}-carbámico (56 mg, 0,10 mmol) y LaCl3 (25 mg, 0,10 mmol) en DMF (1,5 ml) se le añadió t-butóxido potásico (solución 1,0 M en THF, 0,5 ml, 0,5 mmol) a -78 ºC. La mezcla de reacción se agitó durante 1 h y después se añadió 1-cloro-6-metoxi-3-piridin-3-il-isoquinolina (27 mg, 0,10 mmol). Se calentó a ta y se agitó durante una noche. Después, se inactivó con agua y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se 5 purificó por HPLC Prep., dando un sólido de color blanco como producto (Compuesto 328). (17 mg, rendimiento del 21%) RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 0,95 (m, 2 H), 1,02 (s, 9 H), 1,20-1,30 (m, 11 H), 1,41 (m, 1 H), 1,86 (m, 1 H), 2,21 (m, 1 H), 2,35 (m, 1 H), 2,67 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 3,93 (s, 3 H), 4,14 (m, 1 H), 4,26 (m, 1 H), 4,47 (d, J= 11,99 Hz, 1 H), 4,55 (m, 1 H), 5,09 (d, J= 10,02 Hz, 1H), 5,26 (d, J= 17,85 Hz, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 6,07 (s, 1 H), 7,09 (m, 1 H), 7,29 (d, J= 1,96 Hz, 1H), 7,53 (m, 1 H), 7,86 (s, 1H), 8,09 (d, J= 9,05 Hz, 1 H), 8,50-8,58 (m, 2 H),
10 9,28 (s, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,453 min), EM m/z 791 (MH+).
Ejemplo 329: Preparación del Compuesto 329
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El Compuesto 329 se preparó siguiendo el Esquema 2 y el Esquema 4 de antes. 15 Etapa 1 (Esquema 2, Etapa 1):
imagen2
A una solución de N,N-Dietil-4-metoxi-2-metil-benzamida (332 mg, 1,5 mmol) en THF (15 ml) a -78 ºC se le añadió t-BuLi (solución 1,7 M en pentano, 2,2 ml, 3,75 mmol). La solución de color rojo resultante se agitó a -78 ºC durante 10 min y después se añadió éster metílico del ácido N,N-dimetilantranílico (269 mg, 1,5 mmol). La mezcla de
20 reacción se agitó a -78 ºC durante 2 h. Después, la reacción se interrumpió con una solución saturada de NH4Cl y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron. El producto en bruto se purificó por HPLC Prep., dando un aceite espeso de color amarillento como producto. (256 mg, rendimiento del 46%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 0,99-1,13 (m, 6 H), 3,23-3,31 (m, 8 H), 3,39 (m, 2 H), 3,82 (s, 3 H), 4,35 (s, 2 H), 6,91
25 (dd, J= 8,44, 2,57 Hz, 1 H), 6,99 (d, J= 2,45 Hz, 1 H), 7,22 (d, J= 8,56 Hz, 1 H), 7,69 (t, J= 7,70 Hz, 1H), 7,84 (m, 1 H), 7,96 (d, J= 8,31 Hz, 1 H), 8,18 (d, J= 7,83 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,557 min), EM m/z 369(MH+).
Etapa 2 (Esquema 2, Etapa 2):
imagen2
Se calentó 2-[2-(2-Dimetilamino-fenil)-2-oxo-etil]-N,N-dietil-4-metoxi-benzamida (250 mg, 0,678 mmol) con acetato de amonio (1,5 g) durante 2 h. Después, se enfrió y se añadió agua. Se extrajo con acetato de etilo y la fase orgánica se separó. Después, se secó (MgSO4) y se concentró, dando un sólido de color amarillento como producto. (125 mg, rendimiento del 63%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 2,95 (s, 6 H), 3,92 (s, 3 H), 6,92 (s, 1 H), 7,12 (dd, J= 8,80, 2,45 Hz, 1 H), 7,16 (d, J= 2,45 Hz, 1 H), 7,35 (m, 1 H), 7,55 (m, 2 H), 7,63 (d, J= 7,83 Hz, 1 H), 8,20 (d, J= 9,05 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,097 min), EM m/z 295 (MH+).
Etapa 3 (Esquema 4, Etapa 1):
imagen2
10 Se calentó a reflujo 3-(2-Dimetilamino-fenil)-6-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona (125 mg, 0,425 mmol) con POCl3 (4,0 ml) durante un día. Después, el POCl3 se retiró por destilación y el residuo se inactivó con hielo. Después, se neutralizó con una solución 10 N de NaOH y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un sólido de color parduzco como producto (82 mg, rendimiento
15 del 62%) CL-EM (tiempo de retención: 2,040 min), EM m/z 313 (MH+).
Etapa 4 (Esquema 4, Etapa 2):
imagen2
Una mezcla de [2-(1-Cloro-6-metoxi-isoquinolin-3-il)-fenil]-dimetil-amina (82 mg, 0,262 mmol) e hidrogenodifluoruro de tetrabutilfosfonio (1,0 g) se calentó a 140 ºC en un reactor de microondas Smith durante 20 min. Después, se
20 añadió agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se separó, se lavó con agua y se secó (MgSO4). La evaporación del disolvente dio el producto en bruto que se purificó por HPLC Prep., proporcionando un aceite de color amarillento como producto. (85 mg)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 3,41 (s, 6 H), 4,00 (s, 3 H), 7,42 (dd, J= 9,05, 2,45 Hz, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,71 (m, 2 H), 7,99 (m, 1 H), 8,16 (m, 2 H), 8,31 (s, 1 H).
25 CL-EM (tiempo de retención: 1,873 min), EM m/z 297 (MH+).
Etapa 5 (Esquema 4, Etapa 3):
imagen2
A una solución de éster terc-butílico del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}-carbámico (56 mg, 0,1 mmol) y LaCl3 (25 mg, 0,1 mmol) en DMF (1,0 ml) se le añadió t-butóxido potásico (solución 1,0 M en THF, 0,5 ml, 0,5 mmol) a -78 ºC. La mezcla de
5 reacción se agitó durante 1 h y después se añadió [2-(1-Fluoro-6-metoxi-isoquinolin-3-il)-fenil]-dimetil-amina (30 mg, 0,1 mmol). Se calentó a ta y se agitó durante una noche. Después, se inactivó con agua y se filtró.
El filtrado se concentró y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un sólido de color blanco como producto (Compuesto 329). (4,0 mg, rendimiento del 5%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 0,98-1,08 (m, 11 H), 1,16-1,32 (m, 11 H), 1,40 (m, 1 H), 1,85 (m, 1 H), 2,16-2,32 (m, 2
10 H), 2,60-2,71 (m, 7 H), 2,92 (m, 1 H), 3,91 (s, 3 H), 4,08 (m, 1 H), 4,26 (m, 1H), 4,45 (m, 1 H), 4,55 (m, 1 H), 5,10 (d, J= 10,27 Hz, 1 H), 5,28 (d, J= 18,09 Hz, 1H), 5,74 (m, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 7,05 (d, J= 6,85 Hz, 1 H), 7,10-7,20 (m, 2 H), 7,29 (m, 1 H), 7,63 (d, J= 7,58 Hz, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 8,07 (d, J= 8,56 Hz, 1H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,550 min), EM m/z 834 (MH+).
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El Compuesto 330 se preparó siguiendo el Esquema 2 y el Esquema 4 de antes. Etapa 1 (Esquema 2, Etapa 1):
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A una solución de N,N-Dietil-4-metoxi-2-metil-benzamida (332 mg, 1,5 mmol) en THF (15 ml) a -78 ºC se le añadió t-BuLi (solución 1,7 M en pentano, 2,2 ml, 3,75 mmol). La solución de color rojo resultante se agitó a -78 ºC durante 10 min y después se añadió éster metílico del ácido (3-dimetilamino)benzoico (269 mg, 1,5 mmol). La mezcla de reacción se agitó a -78 ºC durante 2 h. Después, la reacción se interrumpió con una solución saturada de NH4Cl y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron. El producto en bruto se purificó por HPLC Prep., dando un aceite espeso de color amarillento en forma de la sal TFA. (245 mg, rendimiento del 33%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 1,01 (t, J= 6,85 Hz, 3 H), 1,09 (m, 3 H), 3,11 (s, 6H), 3,21 (m, 2 H), 3,40 (m, 2 H), 3,79 (s,3H), 4,39 (s, 2H), 6,84-6,91 (m, 2H), 7,19 (d, J= 8,32 Hz, 1H), 7,35 (m, 1H), 7,49 (t, J= 8,07 Hz, 1H), 7,66-7,71 (m,2H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,930 min), EM m/z 369(MH+).
Etapa 2 (Esquema 2, Etapa 2):
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Se calentó 2-[2-(3-Dimetilamino-fenil)-2-oxo-etil]-N,N-dietil-4-metoxi-benzamida (240 mg, 0,497 mmol) con acetato de amonio (2,0 g) durante 2,5 h. Después, se enfrió y se añadió agua. Se recogió un sólido de color parduzco como producto puro. (95 mg, rendimiento del 65%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 2,98 (s, 6 H), 3,88 (s, 3 H), 6,74-6,87 (m, 2 H), 7,01-7,07 (m, 3 H), 7,18 (d, J= 2,44 Hz. 1 H), 7,28 (t, J= 7,82 Hz, 1 H), 8,10 (d, J= 8,80 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,773 min), EM m/z 295 (MH+).
Etapa 3 (Esquema 4, Etapa 1):
imagen2
Se calentó a reflujo 3-(3-Dimetilamino-fenil)-6-metoxi-2H-isoquinolin-1-ona (92 mg, 0,312 mmol) con POCl3 (3,0 ml) durante 2 días. Después, el POCl3 se retiró por destilación y el residuo se inactivó con hielo. Después, se neutralizó con una solución saturada de NaHCO3 y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite espeso de color parduzco como producto. (72 mg, rendimiento del 74%) CL-EM (tiempo de retención: 2,297 min), EM m/z 313 (MH+).
Etapa 4 (Esquema 4, Etapa 2):
imagen2
Una mezcla de [3-(1-Cloro-6-metoxi-isoquinolin-3-il)-fenil]-dimetilamina (72 mg, 0,23 mmol) e hidrogenodifluoruro de tetrabutilfosfonio (0,5 g) se calentó a 140 ºC en un reactor de microondas Smith durante 20 min. Después, se añadió agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se separó, se lavó con agua y se secó (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite de color parduzco como producto. (58 mg, rendimiento del 85%) CL-EM (tiempo de retención: 2,193 min), EM m/z 297 (MH+).
Etapa 5 (Esquema 4, Etapa 3):
imagen2
A una solución de éster terc-butílico del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)4-hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}-carbámico (86 mg, 0,155 mmol) y LaCl3 (57 mg, 0,233 mmol) en DMF (1,5 ml) se le añadió t-butóxido potásico (solución 1,0 M en THF, 0,5 ml, 0,5 mmol) a -78 ºC. La mezcla de
5 reacción se agitó durante 1 h y después se añadió [3-(1-Fluoro-6-metoxi-isoquinolin-3-il)-fenil]-dimetilamina (55 mg, 0,185 mmol). Se calentó a ta y se agitó durante una noche. Después, se inactivó con agua y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un sólido de color blanquecino como producto (Compuesto 330). (8,0 mg, rendimiento del 6%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 0,99-1,09 (m, 11 H), 1,23 (m, 2 H), 1,29 (s, 9 H), 1,42 (m, 1 H), 1,86 (m, 1 H), 2,21 (m. 10 1 H), 2,33 (m, 1 H), 2,70 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 3,00 (s, 6 H), 3,92 (s, 3 H), 4,14 (m, 1 H), 4,29 (m, 1 H), 4,44-4,57
(m. 2 H), 5,10 (d, J= 11,00 Hz, 1 H), 5,27 (d, J= 16,87 Hz, 1H), 5,74 (m, 1 H), 6,01 (s, 1 H), 6,63 (d, J= 8,80 Hz, 1 H), 7,03 (d, J= 6,85 Hz, 1 H), 7,24 (s, 1 H), 7,28 (t, J= 8,07 Hz, 1 H), 7,45 (d, J= 7,82 Hz, 1 H), 7,59 (s, 1 H), 7,72 (s, 1 H), 8,05 (d, J= 8,80 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,707 min), EM m/z 834 (MH+).
15 Ejemplo 331: Preparación del Compuesto 331
imagen2
El Compuesto 331 se preparó por los procedimientos descritos en el presente documento. Ejemplo 334: Preparación del Compuesto 334
imagen2
El Compuesto 334 se preparó de la siguiente manera: Etapa 1:
imagen2
5 A una solución de Boc-cis-HYP-OMe (122,6 mg, 0,5 mmol) en THF (15 ml) a 0 ºC se le añadieron trifenilfosfina (196,7 mg, 0,75 mmol) y benzo[d]isoxazol-3-ol (81 mg, 0,6 mmol). Después, se añadió DEAD (0,118 ml, 0,75 mmol). La mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante 3 h. Después, el disolvente se evaporó y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un aceite espeso incoloro. (117 mg, rendimiento del 54%) RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 1,41 (m, 9 H), 2,38 (m, 1 H), 2,75 (m, 1 H), 3,75 (m, 3 H), 3,81 (m, 1 H), 3,90 (m, 1 H), 4,47 (m, 1 H), 5,44
10 (m, 1 H), 7,31 (t, J= 7,46 Hz, 1 H), 7,47 (d, J= 8,56 Hz, 1 H), 7,59 (t, J= 7,83 Hz, 1 H), 7,66 (d, J= 8,07 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,65 min), EM m/z 363 (MH+).
Después, parte del acoplamiento del producto (85 mg, 0,235 mmol) se disolvió en HCl 4 N en dioxano (1,5 ml) y se agitó durante 3 h. La evaporación del disolvente dio un aceite de color amarillento en forma de la sal HCl. (85 mg, rendimiento >100%) CL-EM (tiempo de retención: 1,327 min), EM m/z 263 (MH+).
15 Etapa 2:
imagen2
A una solución de sal clorhidrato de éster metílico del ácido 4-(benzo[d]isoxazol-3-iloxi)-pirrolidin-2-carboxílico (85 mg, 0,285 mmol) en CH3CN (10 ml) se le añadieron N-boc-L-t-leucina (99 mg, 0,427 mmol), DIEA (0,25 ml, 1,425 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (65 mg, 0,427 mmol) y HBTU (162 mg, 0,427 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite espeso incoloro como producto. (63 mg, rendimiento del 46%)
RMN 1H (400 Hz, CD3OD) δ 1,01 (s, 9 H), 1,17 (s, 9 H), 2,34 (m, 1 H), 2,78 (dd, J= 14,13, 7,83 Hz, 1 H), 3,72 (s, 3 H), 4,00 (dd, J= 12,22, 3,42 Hz, 1 H), 4,19 (s, 1 H), 4,57 (d, J= 12,23 Hz, 1 H), 4,68 (m, 1 H), 5,51 (m, 1 H), 7,27 (m, 1 H), 7,47 (d, J= 8,56 Hz. 1 H), 7,57 (m, 1 H), 7,63 (d, J= 8,07 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,737 min), EM m/z 498 (M+Na+).
Etapa 3:
imagen2
10 A una solución de éster metílico del ácido 4-(benzo[d]isoxazol-3-iloxi)-1-(2-terc-butoxicarbonilamino-3,3-dimetilbutiril)-pirrolidin-2-carboxílico (63 mg, 0,132 mmol) en THF (3,5 ml), mezcla de metanol (2,0 ml) y agua (0,5 ml) se le añadió hidróxido de litio monohidrato (83 mg, 1,89 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche. Después, se acidificó con una solución 1 N de HCl a pH = 3 a 5 y se concentró. Se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 ml) y las fases orgánicas se combinaron y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite de
15 color amarillento que se usó a continuación. (61 mg, rendimiento del 100%)
A una solución del compuesto anterior (61 mg, 0,132 mmol) en CH3CN (8 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1-ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (42 mg, 0,158 mmol), DIEA (0,115 ml, 0,66 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (30 mg, 0,198 mmol) y HBTU (75 mg, 0,198 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo.
20 Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando una película de color amarillo como producto final (Compuesto 334). (24 mg, rendimiento del 27%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 1,01 (s, 9 H), 1,05 (m, 2 H), 1,12-1,26 (m, 11 H), 1,43 (m, 1 H), 1,86 (dd, J= 8,07, 5,38 Hz, 1 H), 2,17-2,33 (m, 2 H), 2,67 (dd, J= 12,96, 5,87 Hz, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,05 (m, 1 H), 4,22 (m, 1 H), 4,49 (m, 2
25 H), 5,11 (d, J= 10,21 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,55 (s, 1 H), 5,74 (m, 1 H), 7,29 (m, 1 H), 7,48 (d, J= 8,32 Hz, 1 H), 7,54-7,64 (m, 2 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,767 min), EM m/z 696 (M+Na+).
Ejemplo 335: Preparación del Compuesto 335
Esquema 1:
imagen60
Etapa 1: (Esquema 1, etapa 1)
A una solución de 1-terc-butil éster del ácido (2S,4R)-4-hidroxi-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (0,25 g, 1,08 mmol) en CH3CN (10 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1-ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclopropil)-carbámico (0,346 g, 1,30 mmol), DIEA (0,94 ml, 5,41 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (0,248 g, 1,62 mmol) y HBTU (0,615 mg, 1,62 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando un aceite de color amarillo. Se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite espeso incoloro que después se disolvió en HCl 4 N en dioxano (5 ml). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche. La evaporación del disolvente dio un sólido de color blanco como producto que se usó a continuación. (200 mg, rendimiento del 49%) CL-EM (tiempo de retención: 0,647 min), EM m/z 344 (MH+).
Etapa 2: (Esquema 1, etapa 2)
A una solución del compuesto anterior (200 mg, 0,527 mmol) en CH3CN (10 ml) se le añadieron ácido 2metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butírico (0,15 g, 0,79 mmol), DIEA (0,46 ml, 2,63 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (0,121 g, 0,79 mmol) y HBTU (0,30 g, 0,79 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando un aceite de color amarillento. Se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un sólido de color blanco como producto final (intermedio 2). (145 mg, rendimiento del 54%)
RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,99-1,10 (m, 11 H), 1,24(m, 2 H), 1,41 (dd, J= 9,5, 5,5 Hz, 1 H), 1,87 (dd, J= 7,9, 5,5 Hz, 1 H), 1,97 (m, 1 H), 2,13 (m, 1 H), 2,24 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 3,77-3,88 (m, 2 H), 4,33-4,39 (m, 2 H), 4,49 (m, a, 1 H), 5,13 (d, J= 10,4 Hz, 1 H), 5,31 (d, J= 17,1 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,590 min), EM m/z 515 (MH+).
Etapa 3: (Esquema 2)
A una solución de 2,4-dicloropirimidina (149 mg, 1 mmol) en THF (5 ml) se le añadieron tetraquis(trifenilfosfina)paladio (23 mg, 2% en moles) y una solución 0,5 M de bromuro de fenilcinc (2,1 ml, 1,05 mmol) en THF. La mezcla de reacción se agitó a 50 ºC durante una noche. Después, se añadió una solución saturada de cloruro de amonio y se extrajo dos veces con EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un residuo de color amarillo que se purificó por HPLC Prep., proporcionando un aceite de color amarillento como 2-cloro-4-fenil-pirimidina que se usó a continuación.
A una solución del intermedio 2 (20 mg, 0,039 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió NaH (3,9 mg de dispersión al 60% en aceite mineral, 0,0975 mmol) a 0 ºC. Después, la mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante 1 h. Después, se añadió 2-cloro-4-fenil-pirimidina preparada anteriormente (18 mg en bruto). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche. Después, se inactivó con agua y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera y se secó (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite de color amarillento que después se purificó por HPLC Prep., dando un aceite espeso incoloro como producto final (Compuesto 335) en forma de la sal TFA. (5,5 mg, rendimiento del 18%)
RMN 1H (CD3OD, 300 MHz) δ 0,92-1,12 (m, 11 H), 1,25 (m, 2 H), 1,44 (dd, J= 9,2, 5,5 Hz, 1 H), 1,89 (dd, J= 8,1, 5,5 Hz. 1H), 2,17-2,37 (m, 2 H), 2,57 (m, 1 H), 2,95 (m, 1 H), 3,52 (s, 3 H), 4,14 (m, 1 H), 4,24-4,38 (m, 2 H), 4,51 (m, 1 H), 5,13 (d, J= 10,2 Hz, 1 H), 5,31 (d, J= 17,2 Hz, 1 H), 5,77 (m, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 7,48-7,60 (m, 3 H), 7,66 (d, J= 5,3 Hz, 1 H), 8,18 (m, 2 H), 8,60 (d, J= 5,1 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,947 min), EM m/z 669 (MH+).
Ejemplo 336: Preparación del Compuesto 336 Etapa 1:
imagen2
A una solución de 2,4-dicloropirimidina (149 mg, 1 mmol) en THF (5 ml) se le añadieron tetraquis(trifenilfosfina)paladio (58 mg, 5% en moles) y una solución 0,5 M de bromuro de 2-piridinilcinc (2,4 ml, 1,2 mmol) en THF. La mezcla de reacción se agitó a 50 ºC durante una noche. Después, se añadió una solución saturada de cloruro de amonio y se extrajo dos veces con EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con agua y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un residuo de color amarillo que se purificó por HPLC Prep., proporcionando un aceite de color amarillento como producto. (11 mg, rendimiento del 3,6%) RMN 1H (500 MHz, CD3OD) δ 7,61 (m, 1 H), 8,07 (m, 1 H), 8,36 (d, J= 5,19 Hz, 1 H), 8,50 (d, J= 7,94 Hz, 1 H), 8,75 (d, J= 3,97 Hz, 1 H), 8,82 (d, J= 5,19 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,440 min), EM m/z 192 (MH+).
Etapa 2:
A una solución del intermedio 2 del Ejemplo 335 (15 mg, 0,029 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió NaH (1,75 mg de dispersión al 60% en aceite mineral, 0,0728 mmol) a 0 ºC. Después, la mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante 1 h. Después, se añadió 2-Cloro-4-piridin-2-il-pirimidina (9,5 mg, 0,031 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche. Después, se inactivó con agua y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera y se secó (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite de color amarillento que después se purificó por HPLC Prep., dando una película de color amarillento como producto final (Compuesto 336) en forma de la sal TFA. (3,5 mg, rendimiento del 15%)
RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,03 (s, 9 H), 1,08 (m, 2 H), 1,24 (m, 2 H), 1,43 (dd, J= 9,77, 5,50 Hz, 1 H), 1,89 (m, 1 H), 2,24 (m, 1 H), 2,31 (m, 1 H), 2,57 (m, 1 H), 2,95 (m, 1 H), 3,50 (s, 3 H), 4,13 (m, 1 H), 4,29 (s, 1 H), 4,36 (d, J= 11,91 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,13 (d, J= 10,08 Hz, 1 H), 5,31 (d, J= 16,79 Hz, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 5,88 (m, 1 H), 7,64 (m, 1 H), 8,06-8,13 (m, 2 H), 8,54 (d, J= 7,93 Hz, 1 H), 8,73-8,76 (m, 2 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,787 min), EM m/z 670 (MH+).
Ejemplo 337: Preparación del Compuesto 337 Etapa 1:
imagen2
A una solución de 2,4-dicloropirimidina (149 mg, 1 mmol) en DMF (5 ml) se le añadieron dicloro bis(trifenilfosfina)paladio (11) (35 mg, 5% en moles) y 2-(tributilestannil)tiofeno (0,38 ml, 1,2 mmol). La mezcla de
5 reacción se calentó a 70 ºC durante 3 h. Después, se añadió una solución saturada de KF en metanol (20 ml) y se agitó a ta durante 4 h. La mezcla de reacción se concentró con una pequeña cantidad de gel de sílice y el residuo se filtró a través de papel de filtro y se lavó con EtOAc. Después, el filtrado se concentró y el residuo se purificó por HPLC Prep., proporcionando un sólido de color blanquecino como producto. (110 mg, rendimiento del 35%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 7,20 (dd, J= 5,01, 3,79 Hz, 1 H), 7,74 (dd, J= 5,01, 1,10 Hz, 1 H), 7,77 (d, J= 5,38 10 Hz, 1 H), 7,98 (dd, J= 3,79, 1,10 Hz, 1 H), 8,55 (d, J= 5,38 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,453 min), EM m/z 197 (MH+).
Etapa 2:
A una solución del intermedio 2 del Ejemplo 335 (20 mg, 0,039 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió NaH (7,8 mg de una dispersión al 60% en aceite mineral, 0,195 mmol) a 0 ºC. Después, la mezcla de reacción se calentó a ta y se
15 agitó durante 1 h. Después, se añadió 2-Cloro-4-tiofen-2-il-pirimidina (16,9 mg, 0,0544 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche. Después, se inactivó con agua y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera y se secó (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite de color amarillento que después se purificó por HPLC Prep., dando dos productos (Compuesto 337 e intermedio 3).
Compuesto 337: (película de color amarillo, 3,0 mg, rendimiento del 11%)) RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,98-1,07 (m, 11 H), 1,22 (m, 2 H), 1,41 (dd, J= 9,54, 5,62 Hz, 1H), 1,86 (dd, J= 8,32, 5,63 Hz, 1 H), 2,19-2,31 (m, 2 H), 2,52 (m, 1 H), 2,92 (m, 1 H), 3,50 (s, 3 H), 4,09 (m, 1 H), 4,25-4,32 (m, 2 H), 4,47 (dd. J= 10,03, 7,34 Hz, 1 H), 5,11 (dd, J= 10,27, 1,71 Hz, 1 H), 5,28 (dd, J= 17,11, 1,46 Hz, 1 H), 5,69-5,79 (m, 2 H), 7,20 (dd. J= 4,89, 3,66 Hz, 1 H), 7,51 (d, J= 5,38 Hz, 1H), 7,70 (d, J= 4,89 Hz, 1 H), 7,95 (d, J= 3,67 Hz, 1 H), 8,54 (d, J= 5,14 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,787 min), EM m/z 696 (M+Na+).
Intermedio 3: (10 mg, rendimiento del 35%)
CL-EM (tiempo de retención: 1,477 min), EM m/z 617(MH+).
Ejemplo 338: Preparación del Compuesto 338
imagen7
A una solución de (1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropil)-amida del ácido 1-(2-amino-3,3-dimetilbutiril)-4-(4-tiofen-2-il-pirimidin-2-iloxi)-pirrolidin-2-carboxílico (10 mg, 0,0137 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron ácido ciclopropilacético (2,1 mg, 0,0205 mmol), DIEA (0,012 ml, 0,742 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (3,1 g, 0,0205 mmol) y HBTU (7,8 mg, 0,0205 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se 15 concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando un aceite de color amarillo. Se purificó por HPLC Prep. en columna, dando una película de color amarillento en forma de la sal TFA (Compuesto 338). (4,6 mg, rendimiento del 41%) RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 0,12 (m, 2 H), 0,48 (m, 2 H), 0,90 (m, 1 H), 1,01-1,09 (m, 11 H), 1,23 (m, 2 H), 1,43 (dd, J= 9,29, 5,38 Hz, 1 H), 1,87 (dd, J= 8,31, 5,62 Hz, 1 H), 2,06 (m, 2 H), 2,19-2,31 (m, 2 H),
20 2,52 (dd, J= 13,45, 6,85 Hz, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,12(dd, J= 11,98, 3,91 Hz, 1 H), 4,27 (d, J= 11,74 Hz, 1 H), 4,47 (dd, J= 10,27, 6,85 Hz, 1 H), 4,63 (s, 1 H), 5,11 (dd, J= 10,27, 1,47 Hz, 1 H), 5,28 (dd, J= 17,12, 1,47 Hz, 1 H), 5,71-5,80 (m, 2 H), 7,20 (dd, J= 4,89, 3,67 Hz, 1 H), 7,51 (d, J= 5,38 Hz, 1 H), 7,70 (d, J= 5,20 Hz, 1 H), 7,95 (d, J = 3,67 Hz, 1 H), 8,48 (d, J= 5,13 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,833 min), EM m/z 699 (MH+).
25 Ejemplo 339: Preparación del Compuesto 339
imagen2
El Compuesto 342 se preparó siguiendo los Esquemas del Ejemplo 337 y el Ejemplo 338, con la excepción de que se usó 2-(tributilestannil)furano se usó en lugar de 2-(tributilestannil)tiofeno en la Etapa 1 del Ejemplo 337.
Etapa 1:
imagen2
5 A una solución de 2,4-dicloropirimidina (149 mg, 1 mmol) en DMF (5 ml) se le añadieron dicloro bis(trifenilfosfina)paladio (II) (35 mg, 5% en moles) y 2-(tributilestannil)furano (0,35 ml, 1,1 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 70 ºC durante 3 h. Después, se añadió una solución saturada de KF en metanol (20 ml) y se agitó a ta durante 4 h. La mezcla de reacción se concentró con una pequeña cantidad de gel de sílice y el residuo se filtró a través de papel de filtro y se lavó con EtOAc. Después, el filtrado se concentró y el residuo se purificó por
10 HPLC Prep., proporcionando un sólido de color parduzco como producto. (80 mg, rendimiento del 27%)
RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 6,68 (dd, J= 3,67, 1,71 Hz, 1 H), 7,42 (d, J= 3,67 Hz, 1 H), 7,67 (d, J= 5,13 Hz, 1 H), 7,30 (d, J= 1,71 Hz, 1 H), 8,62 (d, J= 5,14 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,233 min), EM m/z 181 (MH+).
Etapa 2:
15
imagen2
A una solución de éster metílico del ácido {1-[2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropil-carbamoil)-4hidroxi-pirrolidin-1-carbonil]-2,2-dimetil-propil}-carbámico (20 mg, 0,039 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió NaH (7,8 mg de dispersión al 60% en aceite mineral, 0,195 mmol) a 0 ºC. Después, la mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante 1 h. Después, se añadió 2-Cloro-4-tiofen-2-il-pirimidina (16,0 mg, 0,0544 mmol). La mezcla de reacción
20 se agitó a ta durante una noche. Después, se inactivó con agua y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera y se secó (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite de color amarillento que después se purificó por HPLC Prep., dando el producto de acoplamiento. (3 mg, rendimiento del 11%) CL-EM (tiempo de retención: 1,420 min), EM m/z 601 (MH+).
Etapa 3:
imagen2
A una solución de (1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropil)-amida del ácido 1-(2-amino-3,3-dimetilbutiril)-4-(4-furan-2-il-pirimidin-2-iloxi)-pirrolidin-2-carboxílico (3 mg, 0,0042 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron ácido ciclopropilacético (0,6 mg, 0,0063 mmol), DIEA (0,004 ml, 0,021 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt
5 (1,0 g, 0,0063 mmol) y HBTU (2,4 mg, 0,0063 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando un aceite de color amarillo. Se purificó por HPLC Prep. en columna, dando una película de color amarillento en forma de la sal TFA (Compuesto 339). (1,0 mg, rendimiento del 30%)
10 RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 0,12 (m, 2 H), 0,48 (m, 2 H), 0,90 (m, 1 H), 0,99-1,09 (m, 11 H), 1,23 (m, 2 H), 1,43 (dd, J= 9,05, 5,31 Hz, 1 H), 1,87 (m, 1 H), 2,05 (m, 2 H), 2,19-2,29 (m, 2 H), 2,50 (m, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,10 (dd, J = 12,23, 3,91 Hz, 1 H), 4,25 (d, J= 11,99 Hz, 1 H), 4,47 (dd, J= 10,52, 7,09 Hz, 1 H), 4,63 (s, 1 H), 5,11 (dd, J= 10,52, 1,71 Hz, 1 H), 5,29 (dd, J= 17,12, 1,47 Hz, 1 H), 5,71-5,79 (m, 2 H), 6,65 (dd, J= 3,67, 1,96 Hz, 1 H), 7,38 (d, J= 3,67 Hz, 1 H), 7,40 (d, J= 5,38 Hz, 1 H), 7,76 (m, 1 H), 8,54 (d, J= 5,38 Hz, 1 H).
15 CL-EM (tiempo de retención: 1,790 min), EM m/z 683 (MH+).
Ejemplo 340: Preparación del Compuesto 340 Etapa 1:
imagen2
A una solución de 2,4-dicloropirimidina (149 mg, 1 mmol) en DMF (5 ml) se le añadieron dicloro bis(trifenilfosfina)paladio (II) (35 mg, 5% en moles) y 2-(tributilestannil)tiazol (412 mg, 1,1 mmol). La mezcla de
5 reacción se calentó a 80 ºC durante 3 h. Después, se añadió una solución saturada de KF en metanol (20 ml) y se agitó a ta durante 4 h. La mezcla de reacción se concentró con una pequeña cantidad de gel de sílice y el residuo se filtró a través de papel de filtro y se lavó con EtOAc. Después, el filtrado se concentró y el residuo se purificó por HPLC Prep., proporcionando un sólido de color parduzco como producto. (9 mg, rendimiento del 3%)
CL-EM (tiempo de retención: 1,320 min), EM m/z 198 (MH+).
10 Etapa 2:
A una solución de (1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropil)-amida del ácido 1-[2-(2-ciclopropilacetilamino)-3,3-dimetil-butiril]-4-hidroxi-pirrolidin-2-carboxílico (12,5 mg, 0,0232 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió NaH (3,7 mg de dispersión al 60% en aceite mineral, 0,0,0928 mmol) a 0 ºC. Después, la mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante 1 h. Después, se añadió 2-Cloro-4-tiazol-2-il-pirimidina (9,0 mg, 0,0289 mmol). La
15 mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche. Después, se inactivó con agua y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera y se secó (MgSO4). La evaporación del disolvente dio el producto en bruto que después se purificó por HPLC Prep., dando un sólido de color blanco como producto final (Compuesto 340). (2,8 mg, rendimiento del 17%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 0,12 (m, 2 H), 0,47 (m, 2 H), 0,89 (m, 1 H), 1,00-1,09 (m, 11 H), 1,22 (m, 2 H), 1,44 (dd, J= 9,54, 5,38 Hz, 1 H), 1,87 (dd, J= 8,07, 5,38 Hz, 1 H), 2,06 (m, 2 H), 2,20-2,32 (m, 2 H), 2,52 (dd, J= 13,70, 6,85 Hz, 1 H), 2,93 (m, 1 H), 4,13 (dd, J= 11,98, 3,91 Hz, 1 H), 4,30 (d, J= 11,98 Hz, 1 H), 4,48 (dd, J= 10,51, 7,09 Hz, 1 H), 4,63 (d, J= 9,54 Hz, 1 H), 5,11 (d, J= 10,51 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,73-5,80 (m, 2 H), 7,81 (d, J= 5,14 Hz, 1 H), 7,84 (d, J= 3,18 Hz, 1 H), 8,03 (d, J= 2,93 Hz, 1 H), 8,68 (d, J= 5,13 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,710 min), EM m/z 700 (MH+).
Ejemplo 341: Preparación del Compuesto 341 Etapa 1 (Esquema 1, etapa 1):
imagen2
imagen2
A una solución de Boc-HYP-OH (1,0 g, 4,324 mmol) en DMF (20 ml) se le añadió NaH (0,38 g de dispersión al 60% en aceite mineral, 9,513 mmol) a 0 ºC. La mezcla de reacción se agitó durante 1 h. Después, se añadió 2,4dicloropirimidina (0,709 g, 0,0289 mmol). La mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante una noche. Después, se inactivó con una solución 1 N de HCl y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera y se secó (MgSO4). La evaporación del disolvente dio el producto en bruto que después se purificó por HPLC Prep., dando un aceite incoloro como producto. (0,4 g, rendimiento del 27%)
RMN 1H (CD3OD, 300 MHz) δ 1,13 (m, 9 H), 2,37 (m, 1 H), 2,62 (m, 1 H), 3,70-3,84 (m, 2 H), 4,38 (m, 1 H), 5,65 (m, 1 H), 6,88 (d, J= 5,86 Hz, 1 H), 8,37 (d, J= 5,86 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,370 min), EM m/z 344(MH+).
Etapa 2: (Esquema 1, etapa 2)
A una solución de 1-terc-butil éster del ácido (2S,4R)-4-(2-cloro-pirimidin-4-iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (0,34 g, 0,99 mmol) en CH3CN (20 ml) se le añadieron ácido (1R,2S)/(1S,2R)-(1-ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinilciclo-propil)-carbámico (0,51 g, 1,48 mmol), DIEA (0,86 ml, 4,95 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (0,226 g, 1,48 mmol) y HBTU (0,561 g, 1,48 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un sólido de color amarillo (intermedio 4). (0,33 g, rendimiento del 41%) RMN 1H (CD3OD, 300 MHz) δ mezcla de diastereómeros. CL-EM (tiempo de retención: 2,907 min), EM m/z 655 (MH+).
Etapa 3: (Esquema 2, etapa 1)
A una solución del intermedio 4 (50 mg, 0,061 mmol) en CH2Cl2 (2,5 ml) se le añadieron 1,2,3,4tetrahidroisoquinolina (0,011 ml, 0,0915 mmol) y Et3N (0,021 ml, 0,153 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche y a 40 ºC durante 1 día. El disolvente se destiló y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un aceite incoloro. Después, se disolvió en HCl 4 N en dioxano (1 ml) y se agitó durante una noche. La evaporación del disolvente dio un aceite incoloro en forma de la sal clorhidrato. (20 mg, rendimiento del 52%)
CL-EM (tiempo de retención: 1,160 min), EM m/z 553 (MH+).
Etapa 4: (Esquema 2, etapa 2)
A una solución de clorhidrato de (1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropil)-amida del ácido 4-[2-(3,4dihidro-1H-isoquinolin-2-il)-pirimidin-4-iloxi]-pirrolidin-2-carboxílico (20 mg, 0,032 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron ácido 2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butírico (9,1 mg, 0,048 mmol), DIEA (0,028 ml, 0,16 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (7,3 mg, 0,048 mmol) y HBTU (18,2 mg, 0,048 mmol). La solución se agitó a ta
5 durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando un aceite de color amarillento. Se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite incoloro en forma de la sal TFA (Compuesto 341). (16 mg, rendimiento del 60%)
RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 0,98-1,06 (m, 13 H), 1,13 (m, 1 H), 1,22-1,32 (m, 1 H), 1,35-1,44 (m, 1 H), 1,82 (dd, J
10 = 8,24, 5,19 Hz, 0,5 H), 1,90 (dd, J= 8,24, 5,49 Hz, 0,5 H), 2,26 (m, 1 H), 2,32-2,43 (m, 1 H), 2,56 (m, 1 H), 2,96 (m, 1 H), 3,11 (m, a, 2 H), 3,56 (s, 3 H), 4,14 (m, 1 H), 4,21 (m, 1 H), 4,38 (m, 1 H), 4,47 (m, 1 H), 5,15 (m, 1 H), 5,31 (m, 1 H), 5,75 (m, 1 H), 5,94 (s, 1 H), 6,47 (d, J= 7,02 Hz, 1 H), 7,29 (s, 4 H), 7,49 (m, 1 H), 7,56 (m, 1 H), 7,74 (d, J= 8,24 Hz, 1 H), 7,88 (d, J= 8,24 Hz, 1 H), 8,11 (d, J= 7,02 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,517 min), EM m/z 724 (MH+).
15 Ejemplo 342: Preparación del Compuesto 342
imagen2
El Compuesto 342 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 341, con la excepción de que se usó isoindolina en lugar de 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina en la etapa 1 del esquema 2.
Etapa 1:
imagen2
20
A una solución del intermedio 4 del Ejemplo 341 (50 mg, 0,061 mmol) en CH2Cl2 (2,5 ml) se le añadieron isoindolina (0,013 ml, 0,115 mmol) y Et3N (0,026 ml, 0,19 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 días. El disolvente se destiló y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un aceite incoloro. Después, se disolvió en HCl 4 N en dioxano (1 ml) y se agitó durante una noche. La evaporación del disolvente dio el producto en bruto que
25 se purificó de nuevo por HPLC Prep., proporcionando un sólido de color amarillento en forma de la sal TFA. (8,5 mg, rendimiento del 14%) CL-EM (tiempo de retención: 1,860 min), EM m/z 539 (MH+).
Etapa 2:
imagen2
A una solución de clorhidrato de (1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropil)-amida del ácido 4-[2-(1,3dihidro-isoindol-2-il)-pirimidin-4-iloxi]-pirrolidin-2-carboxílico (8,5 mg, 0,0104 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron ácido 2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butírico (3,0 mg, 0,0156 mmol), DIEA (0,009 ml, 0,052 mmol) y el reactivo 5 de acoplamiento HOBt (2,4 mg, 0,0156 mmol) y HBTU (5,9 mg, 0,0156 mmol). La solución se agitó a ta. durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando un aceite de color amarillento. Se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite incoloro en forma de la sal TFA (Compuesto 342). (3 mg, rendimiento del 35%) RMN 1H (CD3OD, 300 MHz) δ mezcla de diastereómeros. CL-EM (tiempo de
10 retención: 2,547 min), EM m/z 710 (MH+).
Ejemplo 343: Preparación del Compuesto 343
imagen2
El Compuesto 342 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 341, con la excepción de que se usó morfolina en lugar de 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina en la etapa 1 del esquema 2.
15 Etapa 1:
imagen2
A una solución del intermedio 4 del Ejemplo 341 (50 mg, 0,061 mmol) en CH2Cl2 (2,5 ml) se le añadieron morfolina (0,008 ml, 0,0915 mmol) y Et3N (0,021 ml, 0,153 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche y a 40 ºC durante 1 día. El disolvente se destiló y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un aceite incoloro.
20 Después, se disolvió en HCl 4 N en dioxano (1 ml) y se agitó durante una noche. La evaporación del disolvente dio un aceite incoloro en forma de la sal clorhidrato. (12,6 mg, rendimiento del 36%) CL-EM (tiempo de retención: 0,810 min), EM m/z 507 (MH+).
Etapa 2:
imagen2
A una solución de clorhidrato de (1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinil-ciclopropil)-amida del ácido 4-(2
morfolin-4-il-pirimidin-4-iloxi)-pirrolidin-2-carboxílico (12,6 mg, 0,0217 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron ácido
5 2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butírico (6,2 mg, 0,0326 mmol), DIEA (0,019 ml, 0,1085 mmol) y el reactivo de
acoplamiento HOBt (5,0 mg, 0,0326 mmol) y HBTU (12,4 mg, 0,0326 mmol). La solución se agitó a ta durante una
noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas
combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando un aceite de color
amarillento. Se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite incoloro en forma de la sal TFA (Compuesto 10 343). (7 mg, rendimiento del 41%) RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ mezcla de diastereómeros. CL-EM (tiempo de
retención: 1,280 min), EM m/z 678 (MH+).
Ejemplo 344: Preparación del Compuesto 344
Esquema 1: Etapa 1: (Esquema 1)
imagen2
imagen2
A una solución de 2-metil éster de 1-terc-butil éster del ácido 4-p-tolilsulfanilcarbonil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (3,0 g, 7,91 mmol) en mezcla de etanol (15 ml) y THF (30 ml) se le añadió borohidruro sódico (0,6 g, 15,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con una solución 1 N de HCl y se extrajo tres veces con EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con una solución saturada de NaHCO3 y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite de color amarillento que se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (gel de sílice, 3:1 de EtOAc:Hexanos), proporcionando un aceite incoloro como producto (intermedio 5). (1,77 g, rendimiento del 86%)
RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,43 (m, 9 H), 2,00-2,13 (m, 2 H), 2,46 (m, 1 H), 3,19 (m, 1 H), 3,47-3,53 (m, 2 H), 3,61 (m, 1 H), 3,73 (m, 3 H), 4,31 (m, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,240 min), EM m/z 282 (M+Na+).
Etapa 2: (Esquema 2, etapa 1)
A una solución del intermedio 5 (80 mg, 0,309 mmol) en THF (10 ml) a 0 ºC se le añadieron trifenilfosfina (121,4 mg, 0,4153 mmol) y 4-hidroxiquinolina (67,2 mg, 0,463 mmol). Después, se añadió DEAD (80,6 mg, 0,463 mmol). La mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante 2 días. Después, el disolvente se evaporó y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un aceite incoloro. Después, se disolvió en HCl 4 N en dioxano (3 ml) y se agitó durante 2 h. La evaporación del disolvente dio un aceite espeso incoloro en forma de la sal bis HCl. (110 mg, rendimiento del 99%)
RMN 1H (500 MHz, CD3OD) δ 2,52 (m, 1 H), 2,60 (m, 1 H), 3,19 (m, 1 H), 3,45 (m, 1 H), 3,66 (s, 3 H), 3,86 (m, 1 H), 4,61-4,75 (m, 3 H), 7,56 (d, J= 6,7 Hz, 1 H), 7,94 (t, J= 7,3 Hz, 1 H), 8,10-8,20 (m. 2 H), 8,55 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 9,07 (d, J= 6,7 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 0,570 min), EM m/z 287 (MH+).
Etapa 3: (Esquema 2, etapa 2)
A una solución de sal bis clorhidrato de éster metílico del ácido 4-(quinolin-4-iloximetil)-pirrolidin-2-carboxílico (110 mg, 0,306 mmol) en CH3CN (10 ml) se le añadieron ácido 2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butírico (87 mg, 0,46 mmol), DIEA (0,27 ml, 1,53 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (70 mg, 0,46 mmol) y HBTU (174 mg, 0,46 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando un aceite de color amarillento. Se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite incoloro en forma de la sal TFA. (105 mg, rendimiento del 60%)
RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,07 (s, 9 H), 2,34 (m, 1 H), 2,45 (m, 1 H), 3,14 (m, 1 H), 3,27 (s, 3 H), 3,75 (s, 3 H), 4,05 (m, 1 H), 4,20 (m, 1 H), 4,31 (s, 1 H), 4,57-4,63 (m, 2 H), 4,73 (m, 1 H), 7,53 (d, J= 6,7 Hz, 1 H), 7,91 (t, J= 7,6 Hz, 1 H), 8,06-8,16 (m, 2 H), 8,43 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 9,02 (d, J= 6,4 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,250 min), EM m/z 458 (MH+).
Etapa 4: (Esquema 2, etapa 3)
A una solución de éster metílico del ácido 1-(2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(quinolin-4-iloximetil)pirrolidin-2-carboxílico (100 mg, 0,175 mmol) en mezcla de THF (6 ml), metanol (3,25 ml) y agua (7,0 ml) se le añadió hidróxido de litio monohidrato (110 mg, 2,62 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche. Después, se acidificó con una solución 1 N de HCl a pH = 3 a 5 y se concentró. Se extrajo con acetato de etilo (3 x 40 ml) y las fases orgánicas se combinaron y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite espeso incoloro que se llevó a continuación (25 mg, rendimiento del 32%).
A una solución del compuesto anterior (25 mg, 0,056 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1-ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (22,5 mg, 0,085 mmol), DIEA (0,05 ml, 0,28 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (12,9 mg, 0,085 mmol) y HBTU (32 mg, 0,085 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando un aceite de color amarillo. Se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite espeso incoloro en forma de la sal TFA (Compuesto 344). (20 mg, rendimiento del 46%)
RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,02-1,10 (m, 11 H), 1,24 (m, 2 H), 1,40 (dd, J= 9,2, 5,5 Hz, 1 H), 1,90 (dd, J= 7,9, 5,5 Hz, 1 H), 2,19-2,38 (m, 3 H), 2,95 (m, 1 H), 3,19 (m, 1 H), 3,28 (s, 3 H), 4,10 (m, 1 H), 4,15 (m, 1 H), 4,34 (s, 1 H), 4,55 (m, 1 H), 4,62 (d, J= 4,6 Hz, 2 H), 5,15 (d, J= 10,7 Hz, 1 H), 5,30 (d, J= 17,1 Hz, 1 H), 5,72 (m, 1 H), 7,54 (d, J = 6,7 Hz, 1 H), 7,93 (m, 1 H), 8,07-8,18 (m, 2 H), 8,41 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 9,03 (d, J= 6,7 Hz, 1 H), 9,09 (s, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,617 min), EM m/z 656 (MH+).
Ejemplo 345: Preparación del Compuesto 345
imagen2
El Compuesto 345 se preparó siguiendo el Esquema 2 del Ejemplo 344, con la excepción de que se usó 3bromofenol en lugar de 4-hidroxiquinolina en la etapa 1 del esquema 2.
Etapa 1:
5 A una solución del Intermedio 5 del Ejemplo 344 (150 mg, 0,578 mmol) en THF (15 ml) a 0 ºC se le añadieron trifenil-fosfina (228 mg, 0,868 mmol) y 3-bromofenol (150 mg, 0,868 mmol). Después, se añadió DEAD (0,14 ml, 0,868 mmol). La mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante 2 días. Después, el disolvente se evaporó y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un aceite incoloro como producto. (105 mg, rendimiento del 44%) CL-EM
imagen2
10 (tiempo de retención: 2,023 min), EM m/z 436 (M+Na+).
Etapa 2:
imagen2
Se disolvió 2-metil éster de 1-terc-butil éster del ácido 4-(3-bromo-fenoximetil)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (35 mg, 0,085 mmol) en HCl 4 N en dioxano (1,5 ml) y se agitó durante 2 h. La evaporación del disolvente dio un aceite 15 espeso incoloro. A una solución de este aceite en CH3CN (10 ml) se le añadieron ácido 2-metoxicarbonilamino-3,3dimetil-butírico (21,9 mg, 0,1155 mmol), DIEA (0,067 ml, 0,385 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (17,7 mg,
0,1155 mmol) y HBTU (43,8 mg, 0,1155 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite incoloro como producto. (20 mg, rendimiento del 49%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,03 (s, 9 H), 2,15 (m, 1 H), 2,24 (m, 1 H), 2,83 (m, 1 H), 3,54 (s, 3 H), 3,70 (s, 3 H), 3,87 (m, 1 H), 3,91-3,98 (m, 3 H), 4,31(s, 1 H), 4,59 (dd, J= 8,80, 5,38 Hz, 1 H), 6,89 (d, J= 8,32 Hz, 1 H), 7,03-7,10 (m, 2 H), 7,15 (t, J= 8,07 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,943 min), EM m/z 485 (MH+).
Etapa 3:
imagen2
10
A una solución de éster metílico del ácido 4-(3-bromo-fenoximetil)-1-(2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)pirrolidin-2-carboxílico (17 mg, 0,035 mmol) en THF (1,5 ml) y una mezcla de metanol (0,8 ml) y agua (0,25 ml) se le añadió hidróxido de litio monohidrato (22 mg, 0,525 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 3 días. Después, se acidificó con una solución 1 N de HCl a pH = 3 a 5 y se concentró. Se extrajo con acetato de etilo (2 x
15 20 ml) y las fases orgánicas se combinaron y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite espeso incoloro que se llevó a continuación (15 mg, rendimiento del 91%).
A una solución del ácido anterior (15 mg, 0,0318 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1-ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (12,7 mg, 0,0477 mmol), DIEA (0,028 ml, 0,159 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (7,3 mg, 0,0477 mmol) y HBTU (18,1 mg, 0,0477 mmol). La
20 solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite espeso incoloro como producto final (Compuesto 345). (14 mg, rendimiento del 64%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,00-1,06 (m, 11 H), 1,21 (m, 2 H), 1,37 (dd, J= 9,53 Hz, 5,62 Hz, 1 H), 1,86 (dd, J=
25 8,07 Hz, 5,62 Hz, 1 H), 2,06 (m, 1 H), 2,14-2,24 (m, 2 H), 2,81-2,94 (m, 2 H), 3,53 (s, 3 H), 3,91-3,97 (m, 4 H), 4,33 (s, 1 H), 4,38 (m, 1 H), 5,11 (dd, J= 10,27, 1,47 Hz, 1 H), 5,28 (dd, J= 17,12, 1,22 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 7,05-7,11 (m, 2 H), 7,16 (t, J= 8,07 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 3,500 min), EM m/z 683 (MH+).
Ejemplo 346: Preparación del Compuesto 346
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Etapa 1: (Esquema 1, etapa 1)
A una solución de 2-metil éster de 1-terc-butil éster del ácido 4-hidroximetil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (300 mg, 1,157 mmol) en THF (15 ml) a 0 ºC se le añadieron trifenilfosfina (455 mg, 1,735 mmol) y 5-bromo-piridin-3-ol (preparado de acuerdo con F. E. Ziegler y col., J. Am. Chem. Soc., (1973), 95, 7458) (302 mg, 1,735 mmol). Después, se añadió DEAD (0,273 ml, 1,735 mmol). La mezcla de reacción se calentó a ta. y se agitó durante 2 días. Después, el disolvente se evaporó y el residuo se purificó por HPLC Prep., dando un aceite de color amarillento. Después, se disolvió en solución 4 N de HCl en dioxano (3,0 ml) y se agitó durante 4 h. La evaporación del disolvente dio el producto en bruto que se purificó adicionalmente por HPLC Prep., proporcionando un aceite de color amarillento en forma de la sal TFA. (70 mg, rendimiento del 11%) CL-EM (tiempo de retención: 0,890 min), EM m/z 315 (MH+).
Etapa 2: (Esquema 1, etapa 2)
A una solución de éster metílico del ácido 4-(5-bromo-piridin-3-iloximetil)-pirrolidin-2-carboxílico (70 mg, 0,129 mmol) en CH3CN (10 ml) se le añadieron ácido 2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butírico (36,5 mg, 0,193 mmol), DIEA (0,135 ml, 0,744 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (30 mg, 0,193 mmol) y HBTU (73 mg, 0,193 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite incoloro como producto. (80 mg, rendimiento del 100%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,04 (s, 9 H), 2,17 (m, 1 H), 2,26 (m, 1 H), 2,87 (m, 1 H), 3,50 (s, 3 H), 3,70 (s, 3 H), 3,88-3,98 (m, 2 H), 4,04-4,12 (m, 2 H), 4,28 (s, 1 H), 4,60 (dd, J= 9,05, 5,87 Hz, 1 H), 7,86 (m, 1 H) 8,31-8,35 (m, 2 H) CL-EM (tiempo de retención: 1,697 min), EM m/z 486 (MH+).
Etapa 3: (Esquema 1, etapa 3)
A una solución de éster metílico del ácido 4-(5-bromo-piridin-3-iloximetil)-1-(2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetilbutiril)-pirrolidin-2-carboxílico (80 mg, 0,133 mmol) en mezcla de THF (5,6 ml), metanol (3 ml) y agua (1 ml) se le añadió hidróxido de litio monohidrato (84 mg, 2,0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 3 días. Después, se acidificó con una solución 1 N de HCl a pH = 3 a 5. Se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 ml) y las fases orgánicas se combinaron y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite espeso incoloro como producto (intermedio 6) (50 mg, rendimiento del 80%).
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,04 (s, 9 H), 2,16-2,30 (m, 2 H), 2,88 (m, 1 H), 3,51 (s, 3 H), 3,92 (m, 2 H), 4,07 (m, 2 H), 4,29 (s, 1 H), 4,57 (dd, J= 8,56, 5,87 Hz, 1 H), 7,79 (m, 1 H) 8,29 (m, 2 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,590 min), EM m/z 472 (MH+).
Etapa 4: (Esquema 2)
A una solución de ácido 4-(5-bromo-piridin-3-iloximetil)-1-(2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-pirrolidin-2carboxílico (5 mg, 0,0106 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (4,2 mg, 0,0159 mmol), DIEA (0,009 ml, 0,053 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (2,4 mg, 0,0159 mmol) y HBTU (6,0 mg, 0,0159 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite espeso incoloro como producto final (Compuesto 346). (2 mg, rendimiento del 24%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,00-1,07 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,37 (dd, J= 9,29 Hz, 5,14 Hz, 1 H), 1,86 (dd, J= 8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,08 (m, I H), 2,15-2,25 (m, 2 H), 2,87-2,94 (m, 2 H), 3,51 (s, 3 H), 3,92-3,97 (m, 2 H), 4,024,07 (m, 2 H), 4,31 (s, 1 H), 4,39 (m, 1 H), 5,10 (dd, J= 10,27, 1,47 Hz, 1 H), 5,28 (dd, J= 17,12, 1,46 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1H), 7,68 (m, 1 H), 8,24 (m, 2 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,727 min), EM m/z 684 (MH+).
Ejemplo 347: Preparación del Compuesto 347
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10 Etapa 1:
A una solución del intermedio 6 del Ejemplo 346 (16 mg, 0,0339 mmol) en DMF (1 ml) se le añadieron ácido 3tiofenoborónico (5,6 mg, 0,044 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (2,0 mg, 0,0017 mmol) y una solución 2 M de Na2CO3 (0,051 ml, 0,1017 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 110 ºC durante 4 h. Después, se filtró y se lavó con metanol. El filtrado se concentró y se purificó por HPLC Prep., dando un aceite de color parduzco como
15 producto. (6 mg, rendimiento del 37%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,05 (s, 9 H), 2,21-2,30 (m, 2 H), 2,95 (m, 1 H), 3,42 (s, 3 H), 3,93 (m, 1 H), 4,01 (m, 1 H), 4,20-4,30 (m,3H), 4,60 (dd, J= 8,56, 5,87 Hz, 1H), 7,64 (m, 2H), 8,12 (m, 1H), 8,37 (m, 1H), 8,45 (m, 1H), 8,75 (s,1H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,353 min), EM m/z 476 (MN+).
20 Etapa 2:
A una solución de ácido 1-(2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(5-tiofen-3-il-piridin-3-iloximetil)-pirrolidin-2carboxílico (6 mg, 0,0126 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (5,0 mg, 0,0189 mmol), DIEA (0,011 ml, 0,063 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (2,9 mg, 0,0189 mmol) y HBTU (7,2 mg, 0,0189 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando película de color amarillo en forma de la sal TFA (Compuesto 347). (2,2 mg, rendimiento del 22%)
5 RMN 1H (CD3OD, 400 Hz) δ 1,01-1,07 (m, 11 H), 1,19 (m, 2 H), 1,36 (m, 1 H), 1,88 (dd, J= 8,07 Hz, 5,62 Hz, 1 H), 2,09-2,24 (m, 3 H), 2,91 (m, 1 H), 3,00 (m, 1 H), 3,45 (s, 3 H), 3,98 (d, J= 5,86 Hz, 2 H), 4,20-4,31 (m, 3 H), 4,43 (m, 1 H), 5,12 (dd, J= 10,27, 1,71 Hz, 1 H), 5,29 (dd, J= 17,12, 1,22 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 7,64 (m, 2 H), 8,11 (m, 1 H), 8,31 (m, 1 H), 8,43 (m, 1 H), 8,75 (s, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,540 min), EM m/z 688 (MH+).
10 Ejemplo 348: Preparación del Compuesto 348
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Etapa 1: (Esquema 1) A una solución del intermedio 5 del Ejemplo 344 (700 mg, 2,7 mmol) en THF (90 ml) y mezcla de metanol (50 ml) y
agua (12 ml) se le añadió hidróxido de litio monohidrato (1700 mg, 2,0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche Después, se acidificó con una solución 1 N de HCl a pH = 3 a 5. Se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 ml) y las fases orgánicas se combinaron y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite espeso incoloro como producto (intermedio 7) (0,58, rendimiento del 88%).
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1, 42 (m, 9 H), 2,00-2,09 (m, 2 H), 2,45 (m, 1 H), 3,17 (m, 1 H), 3,49 (m, 2 H), 3,59 (m, 1 H), 4,24 (m, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,08 min), EM m/z 268 (M+Na+).
Etapa 2: (Esquema 2, etapa 1)
A una solución del intermedio 7 (270 mg, 1,1 mmol) en DMSO (10 ml) se le añadió t-butóxido potásico (309 mg, 2,75 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. Después, se añadió 2-bromo-4-cloro-piridina (254 mg, 1,32 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche. Después, se inactivó con agua y se lavó con acetato de etilo. La fase acuosa se separó y se acidificó con una solución 1 N de HCl a pH = 3. Se extrajo dos veces con acetato de etilo y las fases orgánicas se combinaron y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite de color naranja. Después, se disolvió en metanol y se burbujeó HCl (gas) a través de durante 2 min a -78 ºC. Después, la mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante una noche. La evaporación del disolvente dio un aceite de color naranja en bruto que se usó a continuación. CL-EM (tiempo de retención: 0,65 min), EM m/z 315 (MH+).
Etapa 3: (Esquema 2, etapa 2)
A una solución de éster metílico del ácido 4-(2-bromo-piridin-4-iloximetil)-pirrolidin-2-carboxílico en bruto en CH3CN (20 ml) se le añadieron ácido 2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butírico (312 mg, 1,65 mmol), DIEA (1,15 ml, 6,6 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (252 mg, 1,65 mmol) y HBTU (626 mg, 1,65 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite incoloro como producto. (270 mg, rendimiento del 41% en dos etapas)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,03 (s, 9 H), 2,13-2,19 (m, 2 H), 2,87 (m, 1 H), 3,51 (s, 3 H), 3,70 (s, 3 H), 3,93 (d, J= 6,36 Hz, 2 H), 4,11 (m, 2 H), 4,27 (s, 1 H), 4,60 (dd, J= 8,80, 5,87 Hz, 1 H), 7,06 (d, J= 5,87, 2,20 Hz, 1 H) 7,32 (d, J = 2,20 Hz, 1 H), 8,18 (d, J= 6,11 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,657 min), EM m/z 486 (MH+).
Etapa 4: (Esquema 2, etapa 3)
A una solución de éster metílico del ácido 4-(2-bromo-piridin-4-iloximetil)-1-(2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetilbutiril)-pirrolidin-2-carboxílico (270 mg, 0,45 mmol) en THF (18 ml) y una mezcla de metanol (10 ml) y agua (3,3 ml) se le añadió hidróxido de litio monohidrato (283 mg, 6,75 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta. durante una noche. Después, se concentró y se acidificó con una solución 1 N de HCl a pH = 3 a 5. El sólido de color blanquecino se recogió como producto (intermedio 8) (180 mg, rendimiento del 85%).
RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,06 (s, 9 H), 2,20-2,29 (m, 2 H), 2,89 (m, 1 H), 3,54 (s, 3 H), 3,92 (d, J= 6,4 Hz, 2 H), 4,06-4,13 (m, 2 H), 4,31 (d, J= 8,85 Hz, 1 H), 4,59 (dd, J= 8,85, 5,50 Hz, 1 H), 7,00 (dd, J= 6,10, 2,24 Hz, 1 H), 7,22 (d, J= 1,83 Hz, 1 H), 8,12 (d, J= 5,80 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,113 min), EM m/z 472 (MH+).
Etapa 5: (Esquema 3)
A una solución del intermedio 8 (10 mg, 0,0212 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1-ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinilciclopropil)-carbámico (8,5 mg, 0,00318 mmol), DIEA (0,018 ml, 0,106 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (4,9 mg, 0,0318 mmol) y HBTU (12,1 mg, 0,0318 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite espeso incoloro como producto final (Compuesto 348). (9 mg, rendimiento del 53%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,00-1,06 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,36 (dd, J= 9,54 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 1,87 (dd, J= 8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,04-2,24 (m, 3 H), 2,88-2,94 (m, 2 H), 3,52 (s, 3 H), 3,93 (d, J= 5,87 Hz, 2 H), 4,09 (m, 2 H), 4,30 (s, 1 H), 4,38 (t, J= 7,58 Hz, 1 H), 5,11 (dd, J= 10,27, 1,47 Hz, 1 H), 5,28 (dd, J= 17,12, 1,47 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 7,00 (dd, J= 5,87, 2,20 Hz, 1 H), 7,24 (d, J= 2,20 Hz, 1 H), 8,14 (d, J= 5,87 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,670 min), EM m/z 684 (MH+).
Ejemplo 349: Preparación del Compuesto 349
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El Compuesto 349 se preparó siguiendo el esquema del Ejemplo 347,con la excepción de que se usó el intermedio 8 del Ejemplo 348 en lugar del intermedio 6 del Ejemplo 346 en la etapa 1.
Etapa 1:
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A una solución del intermedio 8 (20 mg, 0,0423 mmol) en DMF (1 ml) se le añadieron ácido 3-tiofenoborónico (7,0 mg, 0,055 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (2,4 mg, 0,00212 mmol) y solución 2 M de Na2CO3 (0,063 ml, 0,127 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 110 ºC durante 30 h. Después, se filtró y se lavó con metanol. El filtrado
10 se concentró y se purificó por HPLC Prep., dando u aceite de color parduzco como producto. (10,5 mg, rendimiento del 42%) (50177-165) CL-EM (tiempo de retención: 1,690 min), EM m/z 476 (MH+).
Etapa 2: A una solución de ácido 1-(2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(2-tiofen-3-il-piridin-4-iloximetil)-pirrolidin-2carboxílico (10 mg, 0,017 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (6,8 mg, 0,0254 mmol), DIEA (0,015 ml, 0,085
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5 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (3,9 mg, 0,0254 mmol) y HBTU (9,6 mg, 0,0254 mmol). La solución se agitó a ta. durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando una película de color parduzco en forma de la sal TFA (Compuesto 349). (2,2 mg, rendimiento del 16%). (50177-172)
10 RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,00-1,07 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,37 (dd, J= 9,04, 5,38 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J= 8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,10-2,25 (m, 3 H), 2,90 (m, 1 H), 3,04 (m, 1 H), 3,47 (s, 3 H), 3,93-4,02 (m, 2 H), 4,29 (s, 1 H), 4,35-4,45 (m, 3 H), 5,32 (d, J= 10,51 Hz, 1 H), 5,28 (d, J= 17,61 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 7,40 (dd, J= 6,84, 2,44 Hz, 1 H), 7,71-7,80 (m, 3 H), 8,38 (m, 1 H), 8,51 (d, J= 7,09 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,443 min), EM m/z 688 (MH+).
15 Ejemplo 350: Preparación del Compuesto 350 Etapa 1:
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A una solución del intermedio 8 del Ejemplo 348 (20 mg, 0,0423 mmol) en DMF (2 ml) se le añadieron ácido 2tiofenoborónico (7,0 mg, 0,055 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (2,4 mg, 0,00212 mmol) e hidróxido de bario
5 (40 mg, 0,127 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 150 ºC en un reactor de microondas Smith durante 110 min. Después, se filtró y se lavó con metanol. El filtrado se concentró y se purificó por HPLC Prep., dando un aceite de color amarillento como producto. (5,0 mg, rendimiento del 20%) CL-EM (tiempo de retención: 2,137 min), EM m/z 476 (MH+).
Etapa 2:
10 A una solución del ácido carboxílico anterior (5,0 mg, 0,0085 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1-ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (3,4 mg, 0,0127 mmol), DIEA (0,007 ml, 0,0424 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (1,9 mg, 0,0127 mmol) y HBTU (4,8 mg, 0,0127 mmol). La solución se agitó a ta. durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se
15 concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite de color amarillento en forma de la sal TFA (Compuesto 350). (2,6 mg, rendimiento del 38%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 0,99-1,07 (m, 11 H), 1,19 (m, 2 H), 1,37 (dd, J= 9,54, 5,63 Hz, 1 H), 1,87 (dd, J= 8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,10-2,25 (m, 3 H), 2,91 (m, 1 H), 3,03 (m, 1 H), 3,48 (s, 3 H), 3,92-4,02 (m, 2 H), 4,30 (s, 1 H), 4,32-4,45 (m, 3 H), 5,11 (dd, J= 10,27, 1,22 Hz, 1 H), 5,28 (d, J= 17,11 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 7,30-7,38 (m, 2 H),
20 7,66 (d, J= 2,45 Hz, 1 H), 7,92 (m, 1 H), 7,95 (m, 1 H), 8,48 (d, J= 6,85 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,067 min), EM m/z 688 (MH+).
Ejemplo 351: Preparación del Compuesto 351
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El Compuesto 351 se preparó siguiendo el esquema del Ejemplo 350, con la excepción de que se usó ácido 3furanborónico en lugar de ácido 2-tiofenoborónico en la etapa 1.
Etapa 1:
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5
A una solución del intermedio 8 del Ejemplo 348 (20 mg, 0,0423 mmol) en DMF (2 ml) se le añadieron ácido 3furanborónico (6,2 mg, 0,055 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (2,4 mg, 0,00212 mmol) e hidróxido de bario (40 mg, 0,127 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 150 ºC en un reactor de microondas Smith durante 30 min. Después, se filtró y se lavó con metanol. El filtrado se concentró y se purificó por HPLC Prep., dando un aceite de
10 color amarillento como producto. (12 mg, rendimiento del 49%)
CL-EM (tiempo de retención: 1,937 min), EM m/z 460 (MH+).
Etapa 2: A una solución del ácido carboxílico anterior (5,0 mg, 0,0209 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1-ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (8,4 mg, 0,0314 mmol), DIEA (0,018 ml, 0,1046 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (4,8 mg, 0,0314 mmol) y HBTU (11,9 mg, 0,0314
imagen2
5 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un aceite de color amarillento en forma de la sal TFA (Compuesto 351). (4,0 mg, rendimiento del 24%).
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,00-1,08 (m, 11 H), 1,21 (m, 2 H), 1,37 (dd, J= 8,80, 5,62 Hz, 1 H), 1,87 (dd, J= 8,32
10 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,11-2,24 (m, 3 H), 2,91 (m, 1 H), 3,03 (m, 1 H), 3,49 (s, 3 H), 3,91-4,03 (m, 2 H), 4,29 (s, 1 H), 4,35-4,46 (m, 3 H), 5,12 (dd, J= 10,27, 1,47 Hz, 1 H), 5,28 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 7,11 (m, 1 H), 7,38 (dd, J= 7,10, 2,69 Hz, 1 H), 7,71 (d, J= 2,69 Hz. 1 H), 7,81 (m, 1 H), 8,48 (s, 1 H), 8,50 (d, J= 7,09 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,410 min), EM m/z 672 (MH+).
Ejemplo 352: Preparación del Compuesto 352
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El Compuesto 352 se preparó siguiendo el esquema 2 y el esquema 3 del Ejemplo 348, con la excepción de que se usó 2,6-dibromopiridina en lugar de 2-bromo-4-cloropiridina en la etapa 1 del esquema 2.
Etapa 1: (Esquema 2, etapa 1)
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A una solución del intermedio 7 del Ejemplo 348 (270 mg, 1,1 mmol) en DMSO (10 ml) se le añadió t-butóxido potásico (309 mg, 2,75 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. Después, se añadió 2,6dibromopiridina (313 mg, 1,32 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche. Después, se inactivó 5 con agua y se lavó con acetato de etilo. La fase acuosa se separó y se acidificó con una solución 1 N de HCl a pH =
3. Se extrajo dos veces con acetato de etilo y las fases orgánicas se combinaron y se secaron (MgSO4). La evaporación del disolvente dio un aceite de color naranja. Después, se disolvió en metanol y se burbujeó HCl (gas) a su través durante 2 min a -78 ºC. Después, la mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante una noche. La evaporación del disolvente dio un aceite de color naranja en bruto que se usó a continuación. CL-EM (tiempo de
10 retención: 1,480 min), EM m/z 315 (MH+).
Etapa 2: (Esquema 2, etapa 2)
imagen2
A una solución de éster metílico del ácido 4-(6-bromo-piridin-2-iloximetil)-pirrolidin-2-carboxílico en bruto en CH3CN (20 ml) se le añadieron ácido 2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butírico (312 mg, 1,65 mmol), DIEA (1,15 ml, 6,6
15 mmol) y el reactivo de acoplamiento 1-30Bt (252 mg, 1,65 mmol) y HBTU (626 mg, 1,65 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (gel de sílice, 1:1 de hexanos:acetato de etilo), dando un aceite incoloro como producto. (340 mg, rendimiento del 63% en dos etapas)
20 RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,03 (s, 9 H), 2,10-2,24 (m, 2 H), 2,84 (m, 1 H), 3,55 (s, 3 H), 3,70 (s, 3 H), 3,83 (m, 1 H), 3,94 (m, 1 H), 4,20-4,29 (m, 2 H), 4,31 (s, 1 H), 4,59 (dd, J= 8,80, 5,13 Hz, 1 H), 6,76 (d, J= 8,07 Hz, 1 H) 7,11 (d, J= 7,58 Hz, 1 H), 7,53 (t, J= 7,83 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,820 min), EM m/z 486 (MH+).
Etapa 3: (Esquema 2, etapa 3) A una solución de éster metílico del ácido 4-(6-bromo-piridin-2-iloximetil)-1-(2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetilbutiril)-pirrolidin-2-carboxílico (330 mg, 0,679 mmol) en THF (28 ml) y una mezcla de metanol (15 ml) y agua (5 ml) se le añadió hidróxido de litio monohidrato (427 mg, 10,18 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2
imagen2
5 días. Después, se concentró y se acidificó con una solución 1 N de HCl a pH = 3 a 5. El sólido de color blanco se recogió como producto (intermedio 9) (310 mg, rendimiento del 97%).
RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,06 (s, 9 H), 2,18-2,25 (m, 2 H), 2,88 (m, 1 H), 3,57 (s, 3 H), 3,84 (m, 1 H), 3,96 (m, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 4,28-4,35 (m, 2 H), 4,58 (m, 1 H), 6,79 (d, J= 7,94 Hz, 1 H), 7,13 (d, J= 7,32 Hz, 1 H), 7,55 (m, 1 H).
10 CL-EM (tiempo de retención: 3,030 min), EM m/z 472 (MH+).
Etapa 4: (Esquema 3)
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A una solución del intermedio 9 (10 mg, 0,0212 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1-ciclo-propanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (8,5 mg, 0,00318 mmol), DIEA (0,018
15 ml, 0,106 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (4,9 mg, 0,0318 mmol) y HBTU (12,1 mg, 0,0318 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando película de color amarillo en forma de la sal TFA (Compuesto 352). (10,2 mg, rendimiento del 60%).
20 RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,00-1,06 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,37 (dd, J= 9,54 Hz, 5,63 Hz, 1 H), 1,86 (dd, J= 8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,05 (m, 1 H), 2,12-2,25 (m, 2 H), 2,86-2,94 (m, 2 H), 3,54 (s, 3 H), 3,87 (m, 1 H), 3,94 (m, 1 H), 4,18-4,27 (m, 2 H), 4,33 (s, 1 H), 4,37 (m, 1 H), 5,11 (dd, J= 10,27, 1,72 Hz, 1 H), 5,28 (dd, J= 17,12, 1,47 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 6,76 (d, J= 8,32 Hz, 1 H), 7,11 (d, J= 7,33 Hz, 1 H), 7,53 (t, J= 7,82 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,837 min), EM m/z 684 (MH+).
25 Ejemplo 353: Preparación del Compuesto 353
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El Compuesto 353 se preparó siguiendo el esquema del Ejemplo 347, con la excepción de que se usó el intermedio 9 del Ejemplo 352 en lugar del intermedio 6 del Ejemplo 346 en la etapa 1.
Etapa 1:
5
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A una solución del intermedio 9 (25 mg, 0,053 mmol) en DMF (1 ml) se le añadieron ácido 3-tiofenoborónico (8,8 mg, 0,0688 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (3,1 mg, 0,00265 mmol) y una solución 2 M de Na2CO3 (0,080 ml, 0,159 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 110 ºC durante una noche. Después, se filtró y se lavó con metanol. El filtrado se concentró y se purificó por HPLC Prep., dando un aceite de color parduzco como producto.
10 (15 mg, rendimiento del 48%)
RMN 1H (CD3OD, 500 MHz) δ 1,06 (s, 9 H), 2,20-2,31 (m, 2 H), 2,94 (m, 1 H), 3,55 (s, 3 H), 3,91 (m, 1 H), 3,98 (m, 1 H), 4,34 (s, 1 H), 4,37-4,46 (m, 2 H), 4,61 (dd, J= 8,85, 5,19 Hz, 1 H), 6,77 (d, J= 8,24 Hz, 1 H), 7,39 (d, J= 7,32 Hz, 1 H), 7,48 (dd, J= 5,19, 3,05 Hz, 1 H), 7,68 (dd, J= 4,88, 1,22 Hz, 1 H), 7,77(t, J= 7,93 Hz, 1H), 8,04 (m, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,857 min), EM m/z 476 (MH+).
15 Etapa 2: A una solución de ácido 1-(2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(6-tiofen-3-il-piridin-2-iloximetil)-pirrolidin-2carboxílico (15 mg, 0,0254 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (10,2 mg, 0,0382 mmol), DIEA (0,022 ml, 0,127
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5 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (5,8 mg, 0,0382 mmol) y HBTU (14,5 mg, 0,0382 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando película de color amarillo en forma de la sal TFA (Compuesto 353). (6 mg, rendimiento del 29%)
10 RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,00-1,06 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,36 (dd, J= 9,29, 5,38 Hz, 1 H), 1,86 (dd, J= 8,07 Hz, 5,38 Hz, 1 H), 2,07 (m, 1 H), 2,16-2,25 (m, 2 H), 2,87-2,99 (m, 2 H), 3,54 (s, 3 H), 3,87-3,99 (m, 2 H), 4,31-4,44 (m, 4 H), 5,11 (dd, J= 10,27, 1,46 Hz, 1 H), 5,28 (d, J= 17,12 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 6,67 (d, J= 8,31 Hz, 1 H), 7,33 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 7,44 (dd, J= 4,89, 2,93 Hz, 1 H), 7,63-7,70 (m, 2 H), 7,99 (m, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,770 min), EM m/z 688 (MH+).
15 Ejemplo 354: Preparación del Compuesto 354
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El Compuesto 354 se preparó siguiendo el esquema del Ejemplo 347, con la excepción de que se usó el intermedio 9 del Ejemplo 352 en lugar del intermedio 6 del Ejemplo 346 y se usó ácido fenilborónico en lugar de ácido 3-tiofenoborónico en la etapa 1.
20 Etapa 1:
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A una solución del intermedio 9 (20 mg, 0,0423 mmol) en DMF (1 ml) se le añadieron ácido fenilborónico (6,7 mg, 0,0688 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (2,4 mg, 0,00212 mmol) y Cs2CO3 (41 mg, 0,127 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 110 ºC durante una noche. Después, se filtró y se lavó con metanol. El filtrado se concentró y se purificó por HPLC Prep., dando un aceite de color amarillento como producto. (12 mg, rendimiento del 49%)
CL-EM (tiempo de retención: 2,733 min), EM m/z 470 (MH+)
Etapa 2:
imagen2
A una solución de ácido 1-(2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(6-fenil-piridin-2-iloximetil)-pirrolidin-2
10 carboxílico (12 mg, 0,0206 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (8,2 mg, 0,0308 mmol), DIEA (0,018 ml, 0,1028 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (4,7 mg, 0,0308 mmol) y HBTU (11,7 mg, 0,0308 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se
15 purificó por HPLC Prep. en columna, dando un sólido de color blanco en forma de la sal TFA (Compuesto 354). (1,5 mg, rendimiento del 9%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,00-1,07 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,36 (m, 1 H), 1,85 (m, 1 H), 2,09 (m, 1 H), 2,172,25 (m, 2 H), 2,87-3,00 (m, 2 H), 3,52 (s, 3 H), 3,84-4,00 (m, 2 H), 4,33-4,44 (m, 4 H), 5,11 (dd, J= 10,27, 1,71 Hz, 1 H), 5,28 (d, J= 17,12, 1,22 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 6,71 (d, J= 8,31 Hz, 1 H), 6,78 (m, 1 H), 7,34-7,44 (m, 3 H), 7,74
20 (m, 1 H), 7,95 (m, 1 H), 8,01 (d, J= 8,31 Hz, 1H).
CL-EM (tiempo de retención: 3,553 min), EM m/z 682 (MH+).
Ejemplo 355: Preparación del Compuesto 355
imagen2
El Compuesto 354 se preparó siguiendo el esquema del Ejemplo 347, con la excepción de que se usó el intermedio 9 del Ejemplo 352 se usó en lugar del intermedio 6 del Ejemplo 346 y se usó ácido 3-furano borónico en lugar de ácido 3-tiofenoborónico en la etapa 1.
Etapa 1:
imagen2
A una solución del intermedio 9 (20 mg, 0,0423 mmol) en DMF (1 ml) se le añadieron ácido 3-furanoborónico (6,2 mg, 0,055 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (2,4 mg, 0,002115 mmol) y una solución 2 M de Na2CO3 (0,064 ml, 0,127 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 110 ºC durante 2 días. Después, se filtró y se lavó con metanol. El
10 filtrado se concentró y se purificó por HPLC Prep., dando un aceite de color amarillento como producto. (7,0 mg, rendimiento del 29%)
Etapa 2: A una solución del ácido carboxílico anterior (6,0 mg, 0,0109 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1-ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (4,4 mg, 0,0163 mmol), DIEA (0,0095 ml, 0,0544 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (2,5 mg, 0,0163 mmol) y HBTU (6,2 mg, 0,0163
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5 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando película de color amarillo en forma de la sal TFA (Compuesto 355). (1,5 mg, rendimiento del 18%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 0,98-1,07 (m, 11 H), 1,20 (m, 2 H), 1,35 (dd, J= 9,54, 5,87 Hz, 1 H), 1,86 (dd, J= 8,07
10 Hz, 5,62 Hz, 1 H), 2,06 (m, 1 H), 2,15-2,25 (m, 2 H), 2,85-2,98 (m, 2 H), 3,55 (s, 3 H), 3,89 (m, 1 H), 3,95 (m, 1 H), 4,28-4,42 (m, 4 H), 5,11 (dd, J= 10,27, 1,71 Hz, 1 H), 5,28 (dd, J= 17,12, 1,22 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 6,63 (d, J= 8,07 Hz, 1 H), 6,90 (m, 1 H), 7,16 (d, J= 7,33 Hz, 1 H), 7,53 (m, 1 H), 7,63 (m, 1 H), 8,08 (s, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 3,340 min), EM m/z 672 (MH+).
Ejemplo 356: Preparación del Compuesto 356
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El Compuesto 356 se preparó siguiendo el esquema del Ejemplo 350, con la excepción de que se usó el intermedio 9 del Ejemplo 352 en lugar del intermedio 8 del Ejemplo 348 en la etapa 1.
Etapa 1:
imagen2
A una solución del intermedio 9 (20 mg, 0,0423 mmol) en DMF (2 ml) se le añadieron ácido 2-tiofenoborónico (7,0 mg, 0,055 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (2,4 mg, 0,00212 mmol) e hidróxido de bario (40 mg, 0,127 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 150 ºC en un reactor de microondas Smith durante 30 min. Después, se filtró y
5 se lavó con metanol. El filtrado se concentró y se purificó por HPLC Prep., dando un aceite de color parduzco como producto. (13,0 mg, rendimiento del 52%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,03 (s, 9 H), 2,18-2,25 (m, 2 H), 2,93 (m, 1 H), 3,55 (s, 3 H), 3,83 (m, 1 H), 3,98 (m, 1 H), 4,34 (s, 1 H), 4,38 (m, 2 H), 4,58 (dd, J= 8,05, 5,14 Hz, 1 H), 6,63 (d, J= 8,07 Hz, 1 H), 7,07 (dd, J= 4,89, 3,67 Hz, 1 H), 7,33 (d, J= 7,34 Hz, 1 H), 7,42 (d, J= 5,14 Hz, 1 H), 7,60-7,66 (m, 2 H).
10 CL-EM (tiempo de retención: 3,393 min), EM m/z 476 (MH+).
Etapa 2:
imagen2
A una solución de ácido 1-(2-metoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(6-tiofen-2-il-piridin-2-iloximetil)-pirrolidin-2carboxílico (11,5 mg, 0,0195 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(115 ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinil-ciclo-propil)-carbámico (7,8 mg, 0,0293 mmol), DIEA (0,017 ml, 0,0975 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (4,5 mg, 0,0293 mmol) y HBTU (11,1 mg, 0,0293 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Después, se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un sólido de color blanquecino en forma de la sal TFA (Compuesto
20 356). (8,5 mg, rendimiento del 54%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 0,99-1,06 (m, 11 H), 1,21 (m, 2 H), 1,36 (dd, J= 9,54, 5,38 Hz, 1 H), 1,86 (dd, J= 8,07 Hz, 5,62 Hz, 1 H), 2,06 (m, 1 H), 2,15-2,25 (m, 2 H), 2,87-2,99 (m, 2 H), 3,54 (s, 3 H), 3,89 (m, 1 H), 3,96 (m, 1 H), 4,30-4,44 (m, 4 H), 5,11 (dd, J= 10,51, 1,71 Hz, 1 H), 5,28 (dd, J= 17,11, 1,22 Hz, 1 H), 5,70 (m, 1 H), 6,62 (d, J= 8,07 Hz, 1 H), 7,07 (dd, J= 4,89, 3,66 Hz, 1 H), 7,33 (d, J= 7,59 Hz, 1 H), 7,42 (d, J= 4,89 Hz, 1 H), 7,60-7,66 (m, 2
25 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,967 min), EM m/z 688 (MH+). Ejemplo 357: Preparación del Compuesto 357
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Etapa 1:
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A una solución de ácido (2S,4R)-Fmoc-4-amino-1-boc-pirrolidin-2-carboxílico (400 mg, 0,884 mmol) en acetonitrilo (15 ml) se le añadieron cinco gotas de pirrolidina. La mezcla de reacción se agitó a ta durante 3 h. Después, se concentró y se puso a alto vacío, dando ácido 4-amino-1-boc-pirrolidin-2-carboxílico en bruto. En otro matraz de 5 fondo redondo, se agitó una solución de Pd2dba3 (40 mg, 5% en mol) y BINAP racémico (56 mg, 10% en mol) en una atmósfera de nitrógeno en tolueno desgasificado (8 ml) a ta durante 1 h. Después, se añadieron 1cloroisoquinolina (216 mg, 1,326 mmol) y t-butóxido sódico (340 mg, 3,536 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 min. Después, se añadió ácido 4-amino-1-boc-pirrolidin-2-carboxílico y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 h. Se añadió agua para interrumpir la reacción y la fase acuosa se separó y se filtró a través de
10 papel de filtro. Después, se concentró y se purificó por HPLC Prep., dando el producto acoplado en forma de la sal TFA. (165 mg, rendimiento del 40%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,44 (m, 9H), 2,51-2,74 (m, 2H), 3,64 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 4,49 (m, 1H), 4,64 (m, 1H), 7,30 (d, J= 6,85 Hz, 1H), 7,58 (d, J= 6,85 Hz, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,91-7,99 (m, 2H), 8,56 (d, J= 8,56 Hz, 1H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,707 min), EM m/z 358 (MH+).
15 Etapa 2:
imagen2
A una solución de 1-terc-butil éster del ácido 4-(isoquinolin-1-ilamino)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (115 mg, 0,244 mmol) en CH3CN (10 ml) se le añadieron clorhidrato del ácido (1R,2S)-(1-ciclopropanosulfonil-aminocarbonil-2-vinilciclo-propil)-carbámico (97 mg, 0,366 mmol), DIEA (0,255 ml, 1,464 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (56
20 mg, 0,366 mmol) y HBTU (139 mg, 0,366 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando un aceite de color amarillo. Se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un sólido de color amarillento en forma de la sal TFA (112 mg, rendimiento del 67%).
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 1,05 (m, 2H), 1,20 (m, 2H), 1,40-1,48 (m, 10H), 1,87 (dd, J= 8,19, 5,50 Hz, 1H), 2,23
25 (m, 1H), 2,39 (m, 1H), 2,50 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 3,65 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 4,33 (t, J= 7,09 Hz, 1H), 4,69 (m, 1H), 5,12 (d, J= 10,27 Hz, 1H), 5,29 (d, J= 17,12 Hz, 1H), 5,74 (m, 1H), 7,31 (d, J= 6,85 Hz, 1H), 7,60 (d, J= 7,09 Hz, 1H), 7,80(m, 1H), 7,93-8,00 (m, 2H), 8,56 (d, 1=8,19 Hz, 1H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,023 min). EM m/z 570 (MH+).
Etapa 3:
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Se disolvió éster terc-butílico del ácido 2-(1-ciclopropanosulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropil-carbamoil)-4(isoquinolin-1-ilamino)-pirrolidin-1-carboxílico (31 mg, 0,0453 mmol) en HCl 4 N en dioxano (1,5 ml) y se agitó a ta durante 2 h. La evaporación del disolvente dio un aceite de color amarillento en forma de la sal bis clorhidrato. A una solución de la sal bis clorhidrato en CH3CN (5 ml) se le añadieron N-boc-L-t-leucina (11,5 mg, 0,0498 mmol), DIEA (0,047 ml, 0,272 mmol) y el reactivo de acoplamiento HOBt (10,4 mg, 0,068 mmol) y HBTU (25,8 mg, 0,068 mmol). La solución se agitó a ta durante una noche. Después, se concentró, se lavó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando un aceite de color amarillento. Se purificó por HPLC Prep. en columna, dando un sólido de color blanquecino como producto final (Compuesto 357).(9 mg, rendimiento del 29%)
RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 0,98 (m, 2H), 1,05 (s, 9H), 1,20 (m, 2H), 1,36-1,43 (m, 10H), 1,84 (m, 1H), 2,10-2,30 (m, 2H), 2,52 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 4,07 (m, 1H), 4,17-4,27 (m, 2H), 4,47 (m, 1H), 4,79 (m, 1H), 5,07 (d, J= 9,29 Hz, 1H), 5,24 (d, J= 16,87 Hz, 1H), 5,72 (m, 1H), 6,62 (m, 1H), 6,98 (d, J= 6,11 Hz, 1H), 7,47 (m, 1H), 7,62(m, 1H), 7,69 (d, J= 8,07 Hz, 1H), 7,84 (d, J= 5,87 Hz, 1H), 8,20 (d, J= 8,56 Hz, 1H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,043 min), EM m/z 683 (MH+).
Sección H:
Condiciones de CL-EM para la sección H
Columnas:
(Procedimiento A) -YMC ODS S7 C18 3,0 x 50 mm (Procedimiento B) -YMC ODS-A S7 C 18 3,0 x 50 mm (Procedimiento C) -YMC S7 C 18 3,0 x 50 mm (Procedimiento D) -YMC Xterra ODS S7 3,0 x 50 mm (Procedimiento E) -YMC Xterra ODS S7 3,0 x 50 mm (Procedimiento F) -YMC ODS-A S7 C18 3,0 x 50 mm (Procedimiento H) -Xterra S7 3,0 x 50 mm (Procedimiento 1) -Xterra S7 C18 30 x 50 mm (Procedimiento G) -YMC C18 S5 4,6 x 50 mm (Procedimiento J) -Xterra ODS S7 3,0 x 50 mm (Procedimiento K) -YMC ODS-A S7 C18 3,0 x 50 mm
Gradiente: 100% de Disolvente A/0% de Disolvente B a 0% de Disolvente A/100% de Disolvente B Tiempo de gradiente: 2 min. (A, B, D, F, G, H, I); 8 min. (C, E): 4 min (J); 3 min (K) Tiempo de mantenimiento: 1 min. (A, B, D, F, G, H, I, J, K); 2 min. (C, E) Caudal: 5 ml/min (A, B, C, D, E, F, G) Caudal: 4 ml/min (J, K) Longitud de onda del Detector: 220 nm Disolvente A: 10% de MeOH/90% de H2O/0,1% de TFA Disolvente B: 10% de H2O/90% de MeOH/0,1% de TFA.
Ejemplo 370: Preparación del Compuesto 370
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Etapa 1:
Una solución de clorhidrato de éster etílico del ácido (1R,2S)/(1S,2R)-1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico (2,54 g, 12 mmol) en CH3CN (70 ml) se trató con una solución de diisopropiletilamina (9,5 ml, 67 mmol), [(4R)-(25 metoxicarbonil-7-metoxilquinolin-4-oxo)-S-prolina] (5,9 g, 13,2 mmol) y TBTU (3,89 g, 12,21 mmol) en CH3CN (50 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 14 h y se concentró. El residuo disuelto en EtOAc se lavó repetidamente con NaHCO3 (ac.) y salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó sobre una columna Biotage 65M (EtOAc/hexano: 45-100%), proporcionando el estereoisómero de mayor Fr (Boc-P2[(4R)-(2-metoxicarbonil-7metoxilquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(Éster etílico del ácido 1R,2S Vinil Acca) 2,0 g (52%) en forma de un sólido de
10 color blanco: RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 1,24 (t, J= 7,02 Hz, 3 H), 1,38 (m, 11 H), 1,76 (m, 1 H), 2,21 (m, 1 H), 2,45 (m, 1 H), 2,71 (m, 1 H), 3,92 (m, 2 H), 3,96 (s, 3 H), 4,03 (s, 3 H), 4,16 (c, J= 7,22 Hz, 2 H), 4,42 (m, 1 H), 5,10 (m, 1 H), 5,30 (m, 1 H), 5,44 (s, 1 H), 5,77 (m, 1 H), 7,27 (d, J= 9,16 Hz, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 8,05 (s, 1 H).
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Etapa 2:
Una solución del producto con mayor Fr (3,16 g, 5,40 mmol) de la Etapa 1 del Ejemplo 370 {Boc-P2[(4R)-(2metoxicarbonil-7-metoxilquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca) COOEt} a 0 ºC disuelto en MeOH/THF (1/1, 13,2 ml) se trató con NAOH acuoso 1,0 N (5,5 ml, 5,5 mmol), se agitó durante 1 h y se neutralizó mediante la adición de AcOH. El disolvente se retiró al vacío. El residuo se disolvió de nuevo en THF/CH2Cl2 (1/1,150 ml), se secó (MgSO4) y se concentró al vacío, proporcionando el producto que se usó directamente en la siguiente etapa: CL-EM (tiempo de retención: 1,53 Procedimiento D), EM m/z 570 (M++1).
Etapa 3:
A una solución del producto (supuestamente a 5,4 mmol) de la etapa 2 del ejemplo 370 a 0 ºC disuelto en THF (35 ml) se le añadió una solución de CH2N2 recién preparado (30 mmol) en Et2O (80 ml). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura durante 0,5 h y se agitó a ta durante 18,5 h. Después de burbujear nitrógeno durante 1 h en la mezcla de reacción, la solución se retiró al vacío. El residuo se disolvió de nuevo en EtOAc (1 l) se lavó con NaHCO3 saturado (ac.) (2 x 200 ml) y salmuera (100 ml) y se secó (MgSO4). El disolvente se retiró al vacío, proporcionando el producto 3,10 g (97% en dos etapas): CL-EM (tiempo de retención: 3,06, Procedimiento J), EM m/z 594 (M++1).
Etapa 4:
A una solución del producto (3,03 g, 5,10 mmol) de la etapa 3 del ejemplo 370 {Boc-P2[(4R)-(2-diazoacetil-7metoxilquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca) COOEt} a 0 ºC disuelto en THF (110 ml) se le añadieron 2 ml de HBr al 48%. La mezcla se agitó durante 1 h y se repartió entre EtOAc (500 ml) y NaHCO3 saturado (ac.) (100 ml). La fase de EtOAc se separó y se secó (MgSO4). El disolvente se retiró, proporcionando el producto (3,12 g, 95%): CL-EM (tiempo de retención: 1,56 Procedimiento D). EM m/z 648 (M++1), EM m/z 646 (M--1).
Etapa 5:
El producto (1,0 g, 1,54 mmol) de la etapa 4 del ejemplo 370 {Boc-P2[(4R)-(2-bromoacetil-7-metoxilquinolin-4-oxo)S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca) COOEt} se trató con isopropiltiourea (0,365 g, 3,09 mmol) en alcohol isopropílico (57 ml) durante 2 h y después el disolvente se retiró. El residuo disuelto en HCl acuoso 1,0 N (30 ml) y EtOAc (200 ml) se ajustó a pH 7 mediante la adición de NaOH 1,0 N (ac.). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 100 ml) y el extracto combinado se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó sobre una columna Biotage 40+M (EtOAc-hexanos: 30-100%), proporcionando el producto 870 mg (84%) y quedó listo para la siguiente etapa.
Etapa 6:
El producto (0,250 g, 0,375 mmol) de la etapa 5 del ejemplo 370 {Boc-P2{(4R)-[2-(2-isopropilaminotiazol-4-il)-7metoxilquinolin-4-oxo]-S-prolina}-P1(1R,2S Vinil Acca) COOEt} se trató con HCl 4 N/dioxano (2,5 ml, 10 mmol) durante 2,5 h y se concentró al vacío. Al residuo se le añadieron N-metilmorfolina (0,206 ml, 1,875 mmol) en DMF (3 ml), N-Boc-L-terc-leucina (0,117 g, 0,506 mmol) y HATU (0,192 g, 0,506 mmol). La mezcla se agitó durante una noche y se repartió entre EtOAc y tampón pH 4,0. La fase de EtOAc se lavó con agua, NaHCO3 (ac.), se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó sobre una columna Biotage 40M (MeOH-CH2Cl2: 0-8%), proporcionando el producto 0,289 g (99%): CL-EM (tiempo de retención: 2,53, Procedimiento K), EM m/z 779 (M++1).
Etapa 7:
A una suspensión del producto de la Etapa 6 (274 mg, 0,352 mmol) del Ejemplo 370 {BOCNH-P3(L-t-BuGly) {[2-(2isopropilaminotiazol-4-il)-7-metoxilquinolin-4-oxo]-S-prolina}-P1(1R,2S Vinil Acca)-COOEt} en THF (10,6 ml) se le añadieron CH3OH (2,6 ml) y H2O (5,3 ml) LiOH (0,068 g, 2,86 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 24, se ajustó a pH 6 y los disolventes orgánicos se retiraron al vacío. El residuo acuoso se acidificó a pH 4 y se extrajo repetidamente con CH2Cl2. El disolvente orgánico combinado se secó (MgSO4) y se concentró al vacío, proporcionando el producto deseado 255 mg (95%): CL-EM (tiempo de retención: 2,58, Procedimiento K), EM m/z 751 (M++1).
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Etapa 8:
Una solución de CDI (0,024 g, 0,15 mmol) y el producto de la Etapa 7 del Ejemplo 370 (0,0683 g, 0,09 mmol) {BOCNH-P3(L-t-BuGly){[2-(2-isopropilaminotiazol-4-il)-7-metoxilquinolin-4-oxo]-S-prolina}-PI(1R,2S Vinil Acca)COOH} en THF (2 ml) se calentó a reflujo durante 60 min y se dejó enfriar a ta. Se añadió ciclopropanosulfonamida (0,022 g, 0,18 mmol) seguido de la adición de DBU puro (0,027 ml, 0,18 mmol). La reacción se agitó durante una noche, se trató por dilución con EtOAc y se lavó con tampón pH 4,0, se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó repetidamente por HPLC preparativa (0-100% de disolvente B) y sobre una placa de TLC preparativa de 1000 µM de Analtech (20 x 40 cM), proporcionando 0,0032 g (4%) el producto deseado (Compuesto 370) en forma de una espuma de color amarillo pálido: CL-EM (Tiempo de retención: 1,71, procedimiento 1) EM m/z 854 (M++1).
Ejemplo 371: Preparación del Compuesto 371
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Etapa 1:
A una suspensión de éster metílico de N-Boc-cis-L-4-Hidroxiprolina (10 g, 40,7 mmol) y 7-cloroquinolin-4-ol (8,73 g, 49,0 mmol) en THF (200 ml) enfriada a 0 ºC se le añadieron PPh3 (12,82 g, 48,9 mmol) y DIAD (8,80 g, 42,13 mmol). La mezcla se dejó calentar lentamente a ta durante una noche y se agitó durante un total de 30 h. La mezcla se disolvió en EtOAc (800 ml), se lavó con HCl acuoso 1 N, K2CO3 acuoso al 5% (3 x 100 ml) y salmuera (2 X 100 ml), se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó varias veces sobre una columna Biotage 65M (MeOH-CH2Cl2: 0-10%), proporcionando acumulativamente 10,57 g (68%) del producto deseado en forma de un vidrio: RMN 1H (CDCl3) δ 1,40 (s, 9H), 2,33-2,42 (m, 1H), 2,61-2,72 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,91 (m, 2H), 4,45-4,59 (m, 1 H), 5,13 (m, 1 H), 6,61-6,64 (m, 1H), 7,41 (dd, J= 9, 2 Hz, 1H), 7,98 (d, J= 2 Hz, 1H), 8,03 (d, J= 9 Hz, 1H), 8,67-8,71 (m, 1H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,39, procedimiento D), EM m/e 407 (M++1).
Etapa 2:
A una solución del producto (10,57 g, 26,0 mmol) de la Etapa 1 del Ejemplo 371 {BOC-N-P2[(4R)-(7-cloroquinolin-4oxo) éster metílico de prolina} disuelto en MeOH (800 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió una solución acuosa 1 N de NaOH (44,5 ml, 44,5 mmol). La mezcla se calentó a ta después de 6 h, se agitó durante una noche y el pH se ajustó a pH 7 usando HCl acuoso 1,0 N. La solución se concentró hasta que sólo quedó la fase de agua, el pH se ajustó a 4 usando HCl acuoso 6 N y la mezcla se repartió repetidamente con EtOAc (3 x 500 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron, proporcionando 10,16 g (100%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6) δ 1,32, 1,34 (dos s (rotámeros) 9H), 2,31-2,40 (m, 1H), 2,58-2,69 (m, 1H), 3,65-3,81 (m, 2H), 4,33-4,40 (m, 1H), 5,34 (m, 1H) 7,10-7,11 (m, 1H), 7,57 (d, J= 9 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 8,09-8,14 (m, 1H), 8,75 (d, J= 5 Hz, 1H), 12,88 (s a, 1H). RMN 13C (DMSO-d6) δ 27,82, 35,84, 51,52, 57,75, 76,03, 79,33, 102-95, 119,54,
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123,86, 126,34, 127,24, 134-49, 149,32, 152,88, 153,25, 159,08, 173,74. CL-EM (tiempo de retención: 1,48, procedimiento D), EM m/e 393 (M++1)
Etapa 3:
A una solución del producto (5,11 g, 13 mmol) de la Etapa 2 del Ejemplo 371 {Boc-4(R)-(7-cloroquinolin-4-oxo) prolina}, la sal HCl (3,48 g, 18,2 mmol) de vinil Acca (existente en forma de una mezcla 1:1 de diaestereoisómeros (1R,2S/1S,2R donde el grupo ciclopropilcarboxietilo es syn con respecto al resto vinilo) y NMM (7,1 ml 65 mmol) en DMF (30 ml) se le añadió HATU (6,92 g, 18,2 mmol). La mezcla se agitó durante 3 días. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (180 ml) y se repartió con tampón pH 4,0 (3 x 100 ml). La fase orgánica se lavó con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 50 ml), agua (2 x 50 ml) y salmuera (2 x 50 ml). La solución orgánica se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó sobre una columna Biotage 40M (EtOAc-Hexanos: del 50% al 100%), proporcionando 2,88 g del producto existente en forma de una mezcla diastereomérica. Esta mezcla se separó parcialmente usando una columna Biotage 65M (MeOH-EtOAc: del 0% al 9%), proporcionando BOC-NH-P2[(4R)-(7cloroquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S)vinilacca resto P1)-COOEt en forma del isómero con mayor Fr que eluyó primero (1,20 g, 17,4%). RMN 1H (CDCl3/Metanol-d4) δ 1,16 (t, J= 7 Hz, 3H), 1,35 (s, 9H), 1,37-1,43 (m, 1H), 1,761,84 (m, 1H), 2,06-2,11 (m, 1H), 2,35-2,45 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 3,72-3,93 (m, 2H), 4,02-4,15 (m, 1H), 4,33-4,40 (m, 1H), 5,06 (d, J= 9 Hz, 1H), 5,16 (m, 1H), 5,24 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,63-5,70 (m, 1H), 6,74 (m, 1H), 7,39 (dd, J= 9, 2 Hz, 1H), 7,74-7,78 (m, 1H), 7,89 (d, J= 2 Hz, 1H), 7,97 (d, J= 9 Hz 1H), 8,60 (d, J= 5 Hz, 1H). RMN 1H (metanol-d4, Rotámeros 60/40) δ 1,24 (t, J= 7 Hz, 3H), 1,39, 1,43 (2s, 9H, proporción 4:6), 1,71-1,74 (m, 0,4H), 178-1,81 (m, 0,6H), 2,18-2,23 (m, 1H), 2,65-2,69 (m, 0,4H), 2,71-2,76 (m, 0,6H), 3,88-3,96 (m, 2H), 4,11-4,18 (m, 2H), 4,39-4,45 (m, 1H), 5,09-5,13 (m, 1H), 5,28-5,33 (m, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,73-5,81 (m, 1H), 7,05 (d, J= 5 Hz, 1H), 7,53 (d, J= 8,9 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 8,12 (d, J= 8,9 Hz, 1H), 8,70 (d, J= 5 Hz, 1H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,54, procedimiento A) EM m/z 530 (M++1). El resto del material (~1,66 g, 24%) eran fracciones mixtas muy enriquecidas en el isómero de menor Fr.
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Etapa 4:
El producto (0,65 g, 1,22 mmol) de la etapa 3 del Ejemplo 371 {BOC-P2 [(4R)-(7-cloroquinolin-4-oxo)-S-prolina]P1(1R,2S Vinil Acca-CO2Et} se disolvió en HCl 4 N/dioxano (4,5 ml, 18 mmol) y se agitó durante 1 h a ta. La mezcla de reacción se concentró y el producto en bruto se usó directamente en la siguiente etapa: CL-EM (tiempo de retención: 0,94, procedimiento A) CL-EM m/z 430 (M++1).
Etapa 5:
A una suspensión del producto 1(.22 mmol) de la etapa 4 Ejemplo 371 {Sal Bis HCl de NH2-P2[(4R)-(7-cloroquinolin4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S-Vinil Acca)-COOEt), N-BOC-L-terc-leucina (BOC L-tBuGly) (0,34 g, 1,47 mmol), DIPEA (1,0 ml, 5,74 mmol), HOBT·H2O (0,22 g, 1,47 mmol) en CH2Cl2 (15 ml) se le añadió HBTU (0,56 g, 1,47 mmol) a ta. La mezcla de reacción se agitó durante una noche, se diluyó con CH2Cl2 (50 ml), se lavó con tampón pH 4,0 (2 x 20 ml), NaHCO3 acuoso saturado (50 ml) y salmuera (50 ml), se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó sobre una columna Biotage 40M (EtOAc-Hexanos: del 15% al 60%), proporcionando 607 mg(77%) del producto en forma de una espuma. RMN 1H (CDCl3-metanol-d4) δ 1,00 (s, 9H), 1,19 (t, J= 7 Hz, 1H), 1,30 (s, 9H), 1,38 (m, 1H), 1,78-1,83 (m, 1H), 2,01-2,46 (m, 2H), 2,73-2,82 (m 1H), 3,96-4,03 (m, 1H), 4,04 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,11 (c, J= 7 Hz, 2H), 4,42 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,68-4,73 (m, 1H), 5,09-5,13 (m, 1H), 5,23-5,31 (m, 2H), 5,67-5,79 (m, 1H), 6,78 (d, J= 9 Hz, 1H), 7,38 (d, J= 9 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 8,08 (d, J= 9 Hz, 1H), 8,68 (d, J= 5 Hz,1H)-CL-EM (tiempo de retención: 1,64, procedimiento A), EM m/z 643 (M++).
Etapa 6:
A una suspensión del producto (207 mg, 0,32 mmol) de la Etapa 5 del Ejemplo 371 {BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[ (4R)7-cloroquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CO2Et} en THF (14 ml), CH3OH (2 ml) y H2O (8 ml) se le añadió LiOH (62 mg, 2,60 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante un día, se ajustó a pH neutro y se concentró al vacío hasta que sólo quedó la fase acuosa. El residuo acuoso resultante se acidificó a pH 4,0 mediante la adición de HCl acuoso 1,0 N y después se saturó con NaCl sólido. Esta mezcla acuosa se extrajo repetidamente con EtOAc (3 x 60 ml) y el disolvente orgánico combinado se secó (Mg2SO4) y se concentró al vacío, proporcionando 107 mg (54%) del producto {BOCNH-P3(L-tBuGly)-P2[(4R)-(7-cloroquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)CO2H} en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3) δ 1,06 (s, 9H), 1,23 (2s, 9H), 1,31-1,43 (m 1H), 1,631,70 (m, 1H), 1,85-1,89 (m, 1H), 2,19 (m, 1H), 2,65-2,78 (m, 1H), 4,03-4,10 (m, 1H), 4,18-4,21 (m, 1H), 4,55-4,62 (m, 1H), 5,03-5-12 (m, 1H), 5,23-5,31 (m, 1H), 5,51 (m, 1H), 5,88-5,95 (m, 1H), 7,12 (m, 1H), 7,47-7,50 (m, 1H), 7,96 (m, 1H), 8,26 (d, J= 9 Hz, 1H), 8,75 (d, J= 5 Hz, 1H), CL-EM (tiempo de retención: 1,46, procedimiento A), EM m/z 615 (M++1).
Etapa 7:
A una solución del ácido tripeptídico (0,0453 g, 0,074 mmol) de la Etapa 6 del Ejemplo 371 {BOCNH-P3(L-t-BuGly)P2 [(4R)-(7-cloroquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CO2H) en THF (4 ml) se le añadió CDI (17 mg, 0,10 mmol) y la solución resultante se calentó a reflujo durante 45 min y se dejó enfriar a ta. Se añadió en una porción ciclopropilsulfonamida (0,013 g, 0,10 mmol) antes de la adición de DBU puro (0,015 ml, 0,10 mmol). La reacción se agitó durante 18 h, se diluyó con EtOAc (200 ml) y se lavó con tampón pH 4,0 (3 x 30 ml), agua (2 x 30 ml) y salmuera (30 ml), se secó (MgSO4) y se purificó usando una placa de PTLC Analtech de 20 x 40 cM 1000 µ (MeOH CH2Cl2: del 0 al 2%), proporcionando el producto deseado (Compuesto 371) en forma de una espuma (0,040 g, 76%): RMN 1H δ 0,95-1,23 (m, 4H), 1,03 (s, 9H), 1,19 (s, 9H), 1,40-1,43 (m, 1H), 1,85 (dd, J= 8, 5 Hz, 1H), 2,12-2,20 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 2,82 (m, 1H), 4,07-4,19 (m, 2H), 4,51-4,57 (m, 2H), 5,07 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,25 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,85 (m, 1H), 5,48 (s, 1H), 7,09 (d, J= 5 Hz, 1H), 7,45 (d, J= 9 Hz, 1H), 7,92 (m, 1H), 8,20 (d, J= 9 Hz, 1H), 8,72 (d, J= 5 Hz, Hz CL-EM (tiempo de retención: 1,52, procedimiento B), EM m/z 718 (M++1). EMAR m/z (M+H)+ calc. para C41H51N5SO9: 718,2677 encontrado 718,2674.
Ejemplo 372: Preparación del Compuesto 372.
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Etapa 1:
A una solución de L-terc-leucina (2 g, 15,25 mmol) disuelta en CH3CN (50 ml) se le añadió TMSCN (7,06 ml, 56,41 mmol) y se agitó durante 15 min. La mezcla de reacción se calentó a 75 ºC durante 30 min. A la mezcla de reacción se le añadió cloroformiato de ciclopentilo (2,83 g, 19,06 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80 ºC durante una noche y se concentró al vacío. El residuo se trató con MeOH (40 ml), se agitó durante 10 min y se concentró al vacío. El residuo se ajustó a pH 8,5 y se extrajo con Et2O (2 x 200 ml). La fase acuosa se acidificó a pH 3 y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 200 ml). El extracto combinado se secó (MgSO4) y se concentró al vacío. El residuo se recristalizó en la cantidad mínima de Et2O/hexanos, proporcionando el producto 3,48 g (94%): RMN 1H (500 MHz, metanol-d4) δ ppm 1,00 (s, 9 H), 1,59 (m, 2 H), 1,73 (m, 4 H), 1,84 (dd, J= 5,95, 3,20 Hz, 2 H), 3,98 (s, 1H), 5,02 (m, 1H).
Etapa 2:
A una solución del producto (530,1 mg, 1,04 mmol) de la Etapa 4 del Ejemplo 371 {sal HCl de P2[(4R)-7cloroquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca) COOEt, el producto (328 mg, 1,35 mmol) de la Etapa 1 del Ejemplo 372 {ácido (L)-2-ciclopentiloxicarbonilamino-3,3-dimetil-butírico}, HOBT (146 mg, 1,08 mmol) y diisopropiletilamina (0,755 ml, 4,32 mmol) en CH2Cl2 (7 ml) se le añadió HBTU (512 mg, 1,35 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante una noche y se repartió entre CH2Cl2 y tampón pH 4,0. La fase de CH2Cl2 se lavó con agua y NaHCO3 saturado (ac.), se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó sobre una columna Biotage 40M (EtOAc-Hexanos: 35-100%), proporcionando el producto 640 mg (92%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 1,02 (s, 9 H), 1,26 (m, 4 H), 1,56 (m, 10 H), 2,19 (c, J= 8,75 Hz, 1H), 2,41 (m, 1H), 2,70 (dd, J= 14,19, 8,09 Hz, 1H), 4,01 (dd, J= 11,90, 3,05 Hz, 1H), 4,13 (m, 2H), 4,20 (s, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,62 (m, 1 H), 5,09 (d, J= 10,38 Hz, 1 H), 5,26 (d, J = 17,09 Hz, 1 H), 5,47 (m, 1 H), 5,77 (m, 1 H), 7,07 (d, J= 5,49 Hz, 1 H), 7,47 (m, 1 H), 7,94 (m, 1 H), 8,20 (d, J= 8,85 Hz, 1H), 8,72 (d, J= 5,49 Hz, 1H).
CL-EM (tiempo de retención:1,71, Procedimiento B), EM m/z 655 (M++1).
Etapa 3:
El ácido tripeptídico se preparó siguiendo la Etapa 7 del Esquema 2 del Ejemplo 370,con la excepción de que se usó ciclopentoxicarbonilo -NH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(7-cloroquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-COOEt en lugar del producto de la Etapa 6 del Ejemplo 370.
Modificación: se usaron 0,636 g (0,97 mmol) del producto de la Etapa 2 del Ejemplo 372, se obtuvieron 0,424 g (rendimiento del 69%).
Producto: Datos: RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 1,02 (s, 9 H), 1,57 (m, 11 H), 2,14 (c, J= 9,03 Hz, 1 H), 2,46 (m, 1 H), 2,68 (m, 1 H), 4,02 (dd, J= 11,89, 3,11 Hz, 1 H), 4,19 (m, 1 H), 4,50 (d, J= 26,35 Hz, 1 H), 4,64 (t, J= 8,42 Hz, 1 H), 5,04 (m, 1 H), 5,24 (d, J= 17,20 Hz, 1 H), 5,44 (s, 1 H), 5,87 (m, 1 H), 7,05 (d, J= 5,12 Hz, 1 H), 7,48 (m, 1 H), 7,92 (m, 1 H), 8,18 (d, J= 8,78 Hz, 1 H), 8,71 (d, J= 5,49 Hz, 1 H).
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CL-EM (tiempo de retención: 2,32, Procedimiento A), EM m/z 627 (M++1).
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Etapa 4:
Una solución de CDI (0,021 g, 0,13 mmol) y el producto de la Etapa 3 del Ejemplo 372 (0,058 g, 0,09 mmol)
10 {BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[4R)-7-cloroquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CO2H) en THF (2 ml) se calentó a reflujo durante 40 min y se dejó enfriar a ta. Se añadieron un total de 0,016 g (0,13 mmol) de ciclopropanosulfonamida, seguido de la adición de una solución de DBU puro (0,019 ml, 0,13 mmol). La reacción se agitó durante una noche y después se diluyó con EtOAc (100 ml) y se lavó con tampón pH 4,0 (2 x), se secó (MgSO4), se concentró y se purificó sobre tres placas de TLC preparativa de 1000 µM de Analtech (20 x 40 cM,
15 eluyendo secuencialmente con 50% a 0% a 2% de MeOH en CH2Cl2), proporcionando el producto (Compuesto 372) 27,3 mg (40%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 0,94 (m, 2 H), 1,02 (s, 9 H), 1,14 (m, 1 H), 1,49 (m, 11 H), 1,86 (m, 1 H), 2,14 (m, 1 H), 249 (m, 1 H), 2,68 (dd, J= 13,89, 7,48 Hz, 1 H), 2,78 (m, 1 H), 4,08 (m, 1 H), 4,22 (s, 1 H), 4,55 (m, 2 H), 5,05 (d, J= 10,07 Hz, 1 H), 5,22 (d, J= 17,09 Hz, 1 H), 5,46 (m, 1 H), 5,86 (m, 1 H), 7,07 (d, J= 5,19 Hz, 1 H), 7,46 (d, J= 8,55 Hz, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 8,18 (d, J= 8,85 Hz, 1 H), 8,72 (d, J= 5,19 Hz, 1 H): CL-EM (tiempo de
20 retención: 1,52 Procedimiento 1), EM m/z 730 (M++1).
Ejemplo 373: Preparación del Compuesto 373.
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Etapa 1:
Una solución de 2-amino-4-metoxilacetofenona (4,45 g, 26,94 mmol) a 0 ºC disuelta en CH2Cl2 (100 ml) se trató con cloruro de ciclopropanocarbonilo (3,1 ml, 33,68 mmol), diisopropiletilamina (19 ml, 107,8 mmol) y DMAP (0,780 g, 6,4 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche y se concentró al vacío. El residuo disuelto en CH2Cl2 (500 ml) se lavó con HCl acuoso 1 N, agua y NaHCO3 (ac.) y se secó (MgSO4). El disolvente se retiró al vacío y el residuo sólido se trató con EtOAc/hexanos (1/1), proporcionando el producto (5,35 g, 85%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 0,94 (m, 4 H), 1,69 (m, J= 3,97 Hz, 1 H), 2,60 (s, 3 H), 3,84 (s, 3 H), 6,69 (d, J= 7,93 Hz, 1 H), 7,98 (d, J= 8,85 Hz, 1 H), 8,23 (s, 1 H).
Etapa 2:
Una solución del producto (5,35 g, 22,72 mmol) de la Etapa 1 ejemplo 373 {(2-acetil-5-metoxi-fenil)-amida del ácido ciclopropanocarboxílico } y terc-BuOK (5,45 g, 48,6 mmol) en terc-butanol (130 g) se calentó a reflujo durante 6 h. La mezcla de reacción se enfrió, se vertió en tampón enfriado con hielo, se ajustó a pH 7 y se filtró. El sólido recogido se recristalizó en MeOH/Et2O, proporcionando el producto (1 g, 20%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 0,96 (m, 2 H), 1,15 (m, 2 H), 1,94 (m, 1 H), 3,87 (s, 3 H), 5,86 (m, 1 H), 6,93 (m, 2 H), 8,04 (d, J= 8,85 Hz, 1 H).
Etapa 3:
A una solución de N-Boc-L-3-hidroxiprolina (1,06 g, 4,32 mmol) y trifenilfosfina (2,27 g, 8,64 mmol) a 0 ºC disuelta en THF (25 ml) se le añadió una solución del producto (0,93 g, 4,32 mmol) de la Etapa 2 Ejemplo 373 {2-Ciclopropil-7metoxi-quinolin-4-ol y DEAD (1,50 g, 8,64 mmol) en THF (25 ml) durante 30 min. La mezcla de reacción se agitó durante una noche y se concentraron. El residuo se purificó dos veces con una columna Biotage 40+M (EtOAc-Hexanos: 20-65%), proporcionando el producto 1,74 g (90%): CL-EM (tiempo de retención: 2,56, Procedimiento J), EM m/z 443 (M++1).
Etapa 4:
A una suspensión de (1,70 g,3,86 mmol) del producto de la Etapa 3 del Ejemplo 373 (éster metílico de Boc-(4R)-(2ciclopropil-7-metoxi-quinolin-4-oxo)-S-prolina} en THF (91 ml), CH3OH (18,2 ml) y H2O (27 ml) se le añadió LiOH (0,73 g, 30 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 16 h, se ajustó a pH 6 y el disolvente orgánico se retiró al vacío. El residuo se acidificó a pH 4 y se extrajo con EtOAc (4 x 100 ml). El extracto orgánico combinado se secó (MgSO4) y se concentró al vacío, proporcionando el producto 1,64 g (100%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 1,32 (m, 13 H), 2,37 (m, 2H), 2,71 (m, 1H), 3,86 (m, 1 H), 3,95 (s, 3 H), 4,14 (m, 1 H), 4,43 (m, 1 H), 5,41 (s, 1 H), 6,65 (s, 1 H), 7,19 (m, 1 H), 7,30 (m, 1 H), 8,02 (dd, J= 12,63, 9,33 Hz, 1 H).
Etapa 5:
El producto (1,61 g, 2,79 mmol) de la Etapa 4 del Ejemplo 373 {Boc-P2{(4R)-[2-ciclopropil-7-metoxilquinolin-4-oxo]S-prolina}-P1(1R,2S Vinil Acca) COOEt} se disolvió en HCl/dioxano (15 ml; 60 mmol) y se agitó durante 3 h a ta. La
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mezcla de reacción se concentró y se destiló azeotrópicamente con THF seco, proporcionando el producto (1,58 g. 100%): CL-EM (tiempo de retención: 2,12, Procedimiento K), EM m/z 566 (M++1 ).
ciclopropil-7-metoxilquinolin-4-oxo]-S-prolina}-P1(1R,2S Vinil Acca)COOEt}, diisopropiletilamina (1,65 ml, 9,25 mmol), N-Boc-L-terc-leucina (0,775 g, 3,35 mmol) y HOBT·H2O (0,515 g, 3,36 mmol) en CH2Cl2 (13 ml) se le añadió HBTU (1,28 g, 3,36 mmol). La mezcla se agitó durante 14 h y se repartió entre EtOAc y tampón pH 4,0. La fase de EtOAc se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó sobre una columna Biotage 40+M (EtOAc-hexanos: 20-100%, seguido de MeOH) y se purificó adicionalmente con una placa de PTLC Analtech 20 x 40 cM 10000 (MeOH-CH2Cl2 2%), proporcionando el producto 1,4 g (63%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 1,04 (s, 9 H), 1,20 (m, 5 H), 1,28 (s, 9 H), 1,39 (m, 2 H), 1,69 (m, 1 H), 2,19 (m, 2 H), 2,36 (m, 1 H), 2,63 (dd, J= 13,54, 7,68 Hz, 1 H), 3,90 (s, 3 H), 4,08 (m, 4 H), 4,19 (d, J= 11,34 Hz, 1 H), 4,47 (d, J= 11,71 Hz, 1 H), 4,56 (t, J= 8,60 Hz, 1 H), 5,08 (m, 1 H), 5,24 (m, 1 H), 5,39 (s, 1 H), 5,78 (m, 1 H), 6,56 (s, 1 H), 6,96 (dd, J= 9,15, 2,20 Hz, 1 H), 7,21 (d, J= 2,56 Hz, 1 H), 7,97 (d, J= 9,15 Hz, I H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,34, Procedimiento K), EM m/z 679 (M++1).
Etapa 7:
A una suspensión del producto de la Etapa 6 del Ejemplo 373 (1,28 g, 1,89 mmol), Boc-NH-P3(L-terc-BuGly)-P2[ (4R)-(2-ciclopropil-7-metoxilquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-COOEt, en THF (93 ml), CH3OH (23 ml) y H2O (45 ml) se le añadió LiOH (0,491 g, 20,4 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 18,5 h, se ajustó a pH 4 y el disolvente orgánico se retiró al vacío. El residuo se extrajo con EtOAc (5 x 100 ml). El disolvente orgánico combinado se secó (MgSO4) y se concentró al vacío, proporcionando el producto deseado 1,17 g (97%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 1,04 (s. 9 H), 1,24 (s, 9 H), 1,27 (m, 3 H), 1,42 (m, 2 H), 1,68 (dd, J= 8,05, 5,12 Hz, 1 H), 2,17 (m, 1 H), 2,33 (m, 1 H), 2,47 (m, 1 H), 2,66 (m, 1 H), 3,95 (s, 3 H), 4,09 (m, 2 H), 4,51 (d, J= 11,71 Hz, 1 H), 4,59 (t, J = 8,60 Hz, 1 H), 5,07 (m, 1 H), 5,26 (m, 1 H), 5,52 (s, 1 H), 5,85 (m, 1 H), 6,69 (s, 1 H), 7,10 (dd, J= 9,15, 2,20 Hz, 1 H), 7,27 (d, J= 2,20 Hz, 1 H), 8,10 (d, J= 9,15 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 2,21, Procedimiento K), EM m/z 651 (M++1).
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Etapa 8:
Una solución de CDI (0,058 g, 0,344 mmol) y el producto de la Etapa 7 del Ejemplo 373 (0,160 g, 0,246 mmol) {Boc NH-P3(L-terc-BuGly)-P2[(4R)-(2-ciclopropil-7-metoxiquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-COOH) en THF (2 ml) se calentó a reflujo durante 60 min y se dejó enfriar a ta. Se añadió ciclopropanosulfonamida (0,041 g, 0,344 mmol) seguido de la adición de DBU puro (0,051 ml, 0,344 mmol). La reacción se agitó durante 24 h y se trató por repartición de la mezcla de reacción entre tampón pH 4,0 y EtOAc. La fase orgánica se secó (MgSO4), se concentró y se purificó por HPLC preparativa (0-100% de disolvente B), proporcionando el producto (Compuesto 373) 0,086 g (46%): RMN 1H (ÁCIDO TRIFLUOROACÉTICO-D) δ ppm 1,04 (s, 9 H), 1,21 (m, 16 H), 1,41 (m, 1 H), 1,87 (dd. J= 8,05, 5,49 Hz, 1 H), 2,26 (m, 3 H), 2,61 (dd, J= 12,99, 6,77 Hz, 1 H), 2,93 (m, I H), 3,92 (s, 3 H), 4,09 (m, 1 H), 4,21 (m, 1 H), 4,49 (m, 2 H), 5,11 (d, J= 11,71 Hz, 1 H), 5,27 (d, J= 17,20 Hz, 1 H), 5,46 (s, 1 H), 5,76 (m, 1 H), 6,62 (m, 2 H), 7,01 (dd, J= 8,97, 2,01 Hz, 1 H), 7,23 (d, J= 2,56 Hz, 1 H), 8,00 (d, J= 8,78 Hz, 1 H).
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Ejemplo 374: Preparación del Compuesto 374.
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Etapa 1:
A una solución de m-anisidina (58 g, 471 mmol) en 800 ml de CH3CN se le añadieron ácido de Meldrum (75 g, 518 mmol) y formiato de trimetilo (60 g, 565 mmol). La mezcla heterogénea se calentó a reflujo durante 2 h. El disolvente se retiró al vacío, se añadió MeOH (30 ml) y el precipitado resultante se filtró y se lavó con 10-15 ml de MeOH. El
10 procedimiento de adición/filtración de MeOH se repitió en las aguas madre concentradas. El sólido combinado resultante se secó (-2,67 kPa, 45 ºC durante una noche), proporcionando 17,6 g (90%) del intermedio 5-[(3Metoxifenilamino)metileno]-2,2-dimetil-[1,3]dioxano-4,6-diona.
Etapa 2:
A una solución de Ph2O (500 g) calentada a 250 ºC se le añadieron en porciones 108,7 g (392 mmol) de 5-(3
15 Metoxifenil-amino)metileno]-2,2-dimetil-[1,3]dioxano-4,6-diona durante un periodo de 30 min. La mezcla se calentó durante 15 min más, se enfrió a ta, se diluyó con hexanos (800 ml) y la suspensión resultante se agitó durante una noche. Los hexanos se retiraron por decantación, el residuo sólido se disolvió en 600 ml de MeOH a reflujo, se enfrió a ta y el sólido resultante se filtró y se lavó con la cantidad mínima de CH2Cl2. Se siguió el procedimiento de recristalización análogo, proporcionando un total de 20,73 g (30%) de 7-metoxiquinolin-4-ol en forma de un sólido de
20 color pardo claro. RMN 1H (metanol-d4) δ 3,87 (s, 3H), 6,23 d, J= 7,3 Hz, 1H), 6,68 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 6,96 (dd, J= 9,0, 2,4 Hz, 1H), 8,11 (d, J= 9 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 0,77, procedimiento D), EM m/z 176 (M++1).
Etapa 3:
A una solución de de éster metílico de N-Boc-cis-L-4-Hidroxiprolina (12,24 g, 49,8 mmol) y PPh3 (26,14 g, 99,7 mmol) en THF (200 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió una solución de DEAD (17,36 g, 99,7 mmol) y 7-metoxiquinolin4-ol (8,73 g, 49,8 mmol) en THF (700 ml) durante un periodo de 45 min. La mezcla se dejó calentar lentamente a ta durante una noche y se concentró al vacío. El residuo se purificó sobre una columna Biotage 65M (MeOH-EtOAc: 010%), proporcionando 12,78 g (64%) del producto en forma de un vidrio incoloro: RMN 1H (CDCl3) δ 1,36 (s, 9H), 2,26-2,35 (m, 1H), 2,57-2,68 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,75-3,92 (m, 2H), 3,86, 3,87 (dos s (rotámeros) 3H), 4,41-4,53 (m, 1H), 5,09 (m, 1H), 6,52 (d, J= 5,5 Hz, 1H), 7,06-7,09 (m, 1H), 7,24-7,26 (m, 1H), 7,94 (d, J= 9,1 Hz. 1H), 8,508,56 (m, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,34, procedimiento D), EM m/e 403 (M++1).
Etapa 4:
A una solución del producto (8,54 g, 21,2 mmol) de la etapa 3 del Ejemplo 374 {éster metílico de BOC-N-P2[(4R)-(7metoxiquinolin-4-oxo)prolina} en 600 ml de 5:1 de THF/MeOH se le añadió una solución de LiOH (4,0 g, 167 mmol) en 150 ml de agua. La mezcla se agitó durante una noche, el pH se ajustó a pH 7 usando HCl acuoso 6 N y la solución se concentró hasta que sólo quedó la fase de agua. El residuo se ajustó a pH 4 usando HCl acuoso 1 N, se añadió NaCl para saturar la mezcla y se repartió repetidamente primero con EtOAc y después con THF a medida que el producto se hacía soluble en agua. Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron, proporcionando el producto 8,18 g (99%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3-Metanol-d4) δ 1,42 (s, 9H), 2,40-2,49 (m, 1H), 2,68-2,77 (m, 1H), 3,88 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,41-4,53 (m, 1H), 5,32 (m, 1H), 6,86-6,92 (m, 1H), 7,21 (dd, J= 9, 2 Hz, 1H), 7,30 (d, J= 2 Hz, 1H), 8,05-8,10 (m, 1H), 8,62 (d, J= 6 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención 1,20, procedimiento A), EM m/z 389 (M++1).
Etapa 5:
A una solución del producto (4,50 g, 11,60 mmol) de la Etapa 4 del Ejemplo 374 {Boc-4(R)-(7-metoxiquinolin-4oxo)prolina) se le añadieron 2,66 g (13,9 mmol) de la sal HCl de vinil Acca (existente en forma de una mezcla 1:1 de diaestereoisómeros (1R,2S/1S,2R donde el grupo ciclopropilcarboxietilo es syn con respecto al resto vinilo), 10 ml (57,4 mmol) de DIPEA y 2,13 g (13,9 mmol) de HOBT·H2O en 150 ml de CH2Cl2 se le añadieron 5,27 g (13,9 mmol) de HBTU y la mezcla se agitó durante una noche. La solución se diluyó con 200 ml de CH2Cl2 y se repartió con tampón pH 4,0 (2 x 50 ml). La fase orgánica se lavó con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 50 ml), agua (2 x 50 ml) y salmuera (2 x 50 ml). La solución orgánica se secó (MgSO4), se concentró y se purificó usando una columna Biotage 65M (eluyendo con 0-9% de MeOH/EtOAc), proporcionando BOC-NH-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4-oxo)-S-prolina]P1(resto 1R,2S vinil acca P1)-COOEt como el isómero que eluyó primero (2,21 g, 36% en total), seguido de 1,13 g (19%) del isómero con menor Fr puro BOC-NH-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(resto 1S,2R Vinil Acca P1)-CO2Et. También se obtuvieron fracciones mixtas. Datos para BOCN-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4-oxo)-Sprolina]-P1(1R,2S)-(VinilAcca)-COOEt: RMN 1H (CDCl3) δ 1,16 (t, J= 7 Hz,3H), 1,35 (s, 9H), 1,37-1,47 (m, 1H), 1,741,88 (m, 1H), 2,04-2,13(m, 1H), 2,32-2,46(m, 1H), 2,58-2,69 (m, 1H), 3,76 (m, 1H), 3,87 (s,3H), 4,02-4,13 (m, 2H), 4,30-4,44 (m, 1H), 5,05-5,19 (m, 2H), 5,24 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,63-5,7 (m, 1H), 6,61 (m, 1H), 7,07 (dd, J= 9, 2 Hz, 1H), 7,22 (d, J= 2 Hz, 1H), 7,76-7,83 (m, 1H), 7,92 (d, J= 9 Hz, 1H), 8,50 (d, J= 5 Hz, 1H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,38, procedimiento A), EM m/z 526 (M++1).
imagen2
Etapa 6:
Un total del producto (1,35 g,2,90 mmol) de la Etapa 5 del Ejemplo 374 {BOC-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4-oxo)-Sprolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-COOEt} se disolvió en HCl 4 N/dioxano (15 µl, 60 mmol) y se agitó durante 2,5 h a ta. La mezcla de reacción se concentró al vacío, proporcionando 1,3 g (100%) del producto en forma de un sólido de color castaño que se usó directamente en la siguiente etapa. RMN 1H (metanol-d4) δ 1,25 (t, J= 7 Hz, 1H), 1,47-1,52 (m, 1H), 1,78 (dd, J= 8, 5 Hz, 1H), 2,21-2,32 (m, 1H), 2,55-2,64 (m, 1H), 2,99 (dd, J= 15, 7 Hz, 1H), 3,96 (s, 2H), 4,06 (s, 3H), 4,14 (c, J= 7 Hz, 2H), 4,69-4,75 (m, 1H), 5,13 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,33 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,71-5,83 (m, 1H), 5,89 (m, H), 7,44 (m, 1H), 7,49-7,52 (m, 1H), 8,51-8,55 (m, 1H), 8,94-8,96 (m, 1H); RMN 13C (metanol-d4) δ 14,62, 23,08, 30,89, 34,73, 36,97, 41,03, 52,42, 57,11, 60,17, 62,70, 81,13, 100,06, 103,07, 117,02, 118,53, 122,70, 126,86, 134,74, 143,15, 146,75, 166,62, 167,71, 169,37, 171,18. CL-EM (tiempo de retención: 0,94, procedimiento D), EM m/z 426 (M++1)
Etapa 7:
A una suspensión del producto (1,3 g, 2,61 mmol) de la Etapa 6 del Ejemplo 374 {NH2-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S-VinilAcca)-COOEt, Sal Bis HCl}, N-BOC-L-terc-leucina (BOC L-tBuGly) (0,94 g, 4,25 mmol), NMM (1,7 ml, 15,5 mmol) en DMF (20 ml) se le añadió HATU (1,55 g, 3,40 mmol) a ta. La mezcla de reacción se agitó durante una noche, se diluyó con EtOAc al 75%-THF (300 ml), se lavó con tampón pH 4,0 (2 x 50 ml), NaHCO3 acuoso saturado (50 ml) y salmuera (50 ml), se secó (MgSO4) y se purificó mediante una columna Biotage 40 M (eluyendo con EtOAc del 15% al 100% en Hexanos), proporcionando el producto 0,702 g (42%) {BOCNH-P3(LtBuGly)-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1-CO2Et en forma de una espuma. RMN 1H (Metanol-d4) δ 1,06 (s, 9H), 1,22-1,32 (m, 3H), 1,28 (s, 9H), 1,42-1,46 (m, 1H), 1,73 (dd, J= 8, 5 Hz, 1H), 2,19-2,25 (m, 1H), 2,67-2,72(m, 1H), 3,95 (s, 3H), 4,03-4,07(m, 1H), 4,10-4,18 (m, 2H), 4,20-4,24 (m, 1H), 4,54 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,60-4,63 (m, 1H), 5,11 (dd, J= 10, 2 Hz, 1H), 5,28-5,30 (m, 1H),5,43(m, 1H), 5,76-5,83 (m, 1H), 6,50 (d, J= 9 Hz, NH), 6,93 (d, J= 5 Hz, 1H), 7,10 (dd, J= 9, 2 Hz, 1H), 7,28 (m, 1H), 7,99 (m, 1H), 8,11 (d, J= 9 Hz, 1H), 8,62 (d, J= 5H);
CL-EM m/z 639 (tiempo de retención: 1,53 procedimiento D).
Etapa 8:
A una suspensión del producto (702 mg, 1,1 mmol) de la Etapa 7 del Ejemplo 374 {BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-7metoxiquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-COOEt} en THF (50 ml), CH3OH (7 ml) y H2O (22 ml) se le añadió LiOH (211 mg. 8,80 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante un día, se acidificó a pH neutro y se concentró al vacío hasta que sólo quedó la fase acuosa. El residuo acuoso resultante se acidificó a pH 4,0 mediante la adición de HCl acuoso 1,0 N y después se saturó con NaCl sólido. Esta mezcla acuosa se extrajo repetidamente con EtOAc y THF y el disolvente orgánico combinado se lavó con salmuera (50 ml), se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío, proporcionando el producto 631 mg (92%), BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4oxo)-S-prolina]-P1 (1R,2S Vinil Acca)-CO2H, en forma de un sólido. RMN 1H (Metanol-d4) δ 1,04 (s, 9H), 1,22 (s, 9H) 1,34-1,39 (m, 1H), 1,67 (dd, J= 8,5 Hz, 1H), 2,03-2,13 (m, 1H), 2,43-2,49 (m, 1H), 2,67-2,73 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 4,00-4,05 (m, 1H), 4,15-4,21 (m, 1H), 4,56-4,62 (m, 2H), 5,02 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,20 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,52 (m, 1H), 5,87-5,99 (m, 1H), 6,47 (d, J= 8 Hz, 1H), 6,91 (s, 1H), 7,12 (d, J= 5 Hz, 1H), 7,19 (dd, J= 9,2 Hz, 1H), 7,31 (d, J= 2 Hz, 1H), 8,22 (d, J= 9 Hz, 1H), 8,72 (d, J= 5 Hz, 1H). CL-EM (tiempo de retención: 1,44, procedimiento D), EM m/z 611 (M++1).
Etapa 9:
A una solución del ácido tripeptídico (0,120 g, 0,195 mmol) de la Etapa 8 del Ejemplo 374 en THF (2 ml) se le añadió
5 CDl (44,3 mg, 0,27 mmol) y la solución resultante se calentó a reflujo durante 60 min y se dejó enfriar a ta. Se añadió en una porción ciclobutilsulfonamida (0,037 g, 0,273 mmol) antes de la adición de DBU puro (0,041 ml. 0,273 mmol). La reacción se agitó durante 24 h, se añadió otro equivalente de CDI y ciclobutilsulfonamida y la mezcla se agitó 48 h more. La mezcla se diluyó con THF al 50%/EtOAc (200 ml) y se lavó con salmuera saturada y tampón pH 4,0 (30 ml), se secó (MgSO4) y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en 2 ml de THF al 50%-CH2Cl2, se añadieron 75
10 mg (0,39 mmol) de EDAC, 48 mg (0,39 mmol) de 4-DMAP, 58 µl (0,39 mmol) de DBU y 53 mg (0,39 mmol) de ciclobutilsulfonamida y la mezcla se agitó durante 4 días. La mezcla se purificó mediante una placa de PTLC Analtech 1000 µ (20 x 40 cM, eluyendo con 2% de MeOH en CH2Cl2), proporcionando el producto deseado Compuesto 374, BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-(7-metoxi-quinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)CONHSO2-Ciclobutano, en forma de una espuma 2 mg (2%): RMN 1H (metanol-d4) δ 1,07, 1,08 (dos s (rotámeros)
15 9H), 1,20, 1,21 (dos s (rotámeros) 9H), 1,41-1,48 (m, 1H), 1,64-1,70 (m, 1H), 1,72-1,91 (m, 2H), 1,95-2,11 (m, 2H), 2,23-2,37 (m, 2H), 2,40-2,58 (m, 2H), 2,72-2,75 (m, 1H), 4,06 (s, 3H), 4,12-4,17 (m, 2H), 4,35-4,38 (m, 1H), 4,58-4,62 (m, 1H), 4,65-4,70 (m, 1H), 5,16-5,18 (m, 1H), 5,24-5,37 (m, 1H), 5,69-5,76 (m, 2H), 7,40-7,46 (m, 3H), 8,35-8,40 (m, 1H), 8,92 (d, J= 7 Hz, 1H). CL-EM (tiempo de retención: 1,58 procedimiento B). EM m/z 728 (M++1).
Ejemplo 375: Preparación del Compuesto 375.
imagen8
Etapa 1:
A una solución del producto (794 mg, 1,51 mmol) de la Etapa 5 del Ejemplo 374 {N-BOC-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S VinilAcca)-CO2Et} en 68 ml de 12% de MeOH/THF se le añadió una solución de 218 mg (9,08 mmol) de hidróxido de litio en 30 ml de agua y la mezcla se agitó 16 h. El pH se ajustó a neutro mediante la 25 adición de HCl acuoso 6 N, se concentró hasta que sólo quedó agua y la solución se ajustó a pH 4 usando HCl acuoso 1 N y después se extrajo con THF al 50%-EtOAc (porciones de 5 x 200 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron, proporcionando el producto 752 mg (100%) {N-BOC-P2 [(4R)-(7
metoxiquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1 (1R,2S VinilAcca)-CO2H}: RMN 1H (Metanol-d4) δ 1,37-1,43 (m, 1H), 1,39 (s, 9H), 1,69-1,78 (m, 1H), 2,16-2,24 (m, 1H), 2,44-2,54 (m, 1H), 2,64-2,74 (m, 1H), 3,89-3,94 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 4,40-4,43 (m, 1H), 5,11 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,31 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,40 (m, 1H), 5,79-5,87 (m, 1H), 6,91 (s. 1H), 7,04 (d, J= 6 Hz, 1H), 7,25 (dd, J= 9,1, 2 Hz. 1H), 7,29 (m, 1H), 8,09 (d, J= 9,1 Hz, 1H), 8,66 (d, J= 6 Hz, 1H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,05, procedimiento H). EM m/z 498 (M++1).
Etapa 2:
Una solución del producto (399,5 mg, 0,668 mmol) de la Etapa J del Ejemplo 375 {N-BOC-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S VinilAcca)-CO2H} en THF (4 ml) y CDI (434 mg, 2,68 mmol) se calentó a reflujo durante 60 min y se dejó enfriar a ta. Se añadió en una porción ciclopropilsulfonamida (406 mg, 3,35 mmol) antes de la adición de DBU puro (0,50 ml, 3,35 mmol). La reacción se agitó durante 16 h, se diluyó con THF al 50%-EtOAc (200 ml) y se lavó con tampón saturado con salmuera a pH 4,0 (2 x 40 ml). La fase orgánica se secó (MgSO4), se concentró y se purificó sobre una columna Biotage 25M (MeOH en CH2Cl2, 0% a 15%), proporcionando 217 mg (54%) del producto deseado {N-BOC-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S vinilAcca)CONHSO2Ciclopropano}: RMN 1H (Metanol-d4) δ 1,01-1,10 (m, 2H), 1,11-1,18 (m, 1H), 1,20-1,27 (m, 1H), 1,39-1,48 (m, 1H), 1,44 (s, 9H), 1,87 (dd, J= 8, 5 Hz, 1H), 2,01-2,38 (m, 2H), 2,57 (dd, J= 14, 7 Hz, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 3,83-3,92 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,36-4,39 (m, 1H), 5,11 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,29 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,38 (m, 1H), 5,74-5,81 (m, 1H), 6,91 (d, J= 5,5 HZ., 1H), 7,20 (dd, J= 9,2, 2,4 Hz, 1H), 7,29 (m, 1H), 8,07 (d, J= 9,2 Hz, 1H), 8,60 (d, J= 5,5 Hz, 1H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,28, procedimiento I). EM m/z 601 (M++1)
Etapa 3:
Un total del producto (198 mg, 0,33 mmol) de la Etapa 2 del Ejemplo 375 {BOC.P2 [(4R)-(7-metoxiquinolin-4-oxo)-Sprolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CONHSO2Ciclopropano} se disolvió en HCl 4 N/dioxano (4 ml, 16 mmol) y se agitó durante 2 h a ta. La mezcla de reacción se concentró, proporcionando el producto en bruto en forma de un sólido de color castaño que se usó inmediatamente en la siguiente reacción.
Etapa 4:
El producto en bruto de la Etapa 3 del Ejemplo 375 {HN-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CONHSO2Ciclopropano, Sal Bis HCl} se suspendió en 10 ml de diclorometano. A esta mezcla se le añadieron N-BOC-L-terc-leucina (BOC L-tBuGly) [120 mg, 0,52 mmol], HOAT (30 mg, 0,20 mmol), DIPEA (0,29 ml, 1,65 mmol) y HATU (160 mg, 0,43 mmol) a ta. La mezcla de reacción se agitó durante 16 h, se diluyó con 50% EtOAc-THF (300 ml), se lavó con tampón saturado con salmuera a pH 4,0 (3 x 50 ml), se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó mediante una columna Isco de 35 g (eluyendo con MeOH del 0% al 15% en CH2Cl2), proporcionando el producto (130,1 mg, 47%) en forma de una sal de base de Hünning (Compuesto 375): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 1,00-1,48 (m, 29 H), 7,47 (s, 9 H), 1,89 (m, 1 H), 2,26 (m, 1 H), 2,36 (m, 1 H), 2,69 (m, 1 H), 2,97 (m, 1 H), 3,25 (c, J = 7,43 Hz), 2 H), 3,74 (m, 2 H), 3,97 (s, 3 H), 4,10 (m, 1 H), 4,23 (dd, J= 19,68, 9,92 Hz, 1 H), 4,57 (m, 2 H), 5,15 (m, 1 H), 5,31 (m, 1 H), 5,50 (s, 1 H), 5,77 (m, 1 H), 7,01 (t, J= 5,34 Hz, 1 H), 7,16 (d, J= 9,16 Hz, 1 H), 7,31 (d, J= 1,83 Hz, 1 H), 8,14 (m, 1 H), 8,67 (d, J= 5,49 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,49 Procedimiento d), EM m/z 714 (M++1).
Ejemplo 376: Preparación del Compuesto 376.
imagen2
Etapa 1:
El Compuesto 375 (130 mg) se disolvió en EtOAc, se lavó una vez más con tampón pH 4 y salmuera y después se
secó (MgSO4). La mezcla en bruto se purificó sobre dos placas de PTLC de 1000 µ de Analtech (20 x 40 cm,
5 eluyendo con MeOH al 3% en CH2Cl2), proporcionando el producto (Compuesto 376) 54 mg (rendimiento del 23% a
partir del ácido tripeptídico): RMN 1H (Metanol-d4) δ 0,88-1,00(m, 2H), 1,0 1 --1,14 (m, 2H), 1,03 (s, 9H), 1,25 (s, 9H),
1,34 (dd, J= 9, 5 Hz, 1 H), 1,81-1,89 (m, 1H), 2,06-2,13 (m, 1H), 2,45-2,50 (m, 1H), 2,65-2,75 (m, 1H), 3,91 (s, 3H),
3,98-4,11 (m, 1H), 4,21-4,22 (m, 1H), 4,46-4,50 (m, 1H), 4,54-4,57 (m, 1H), 4,97-5,02 (m, 1H), 5,14-5,22 (m, 1H),
5,33-5,41 (m, 1H), 5,81-5,99 (m, 1H), 6,87-6,95 (m, 1H), 7,06-7,09 (m, 1H),7,25 (m. 1H),8,07-8,10(m, 1H), 8,59(d, J 10 = 5,2 Hz, 1H), EMAR m/z (M-H)-calc. para C35H46N5O9S: 712,3016, encontrado: 712,3024; CL-EM m/e 714 (tiempo
de retención: 1,42, procedimiento 1).
Ejemplo 377: Preparación del Compuesto 377.
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Etapa 1:
15 Un total de 1,0 mmol el producto de la Etapa 2 del Ejemplo 375 {La Sal Bis HCl de HN-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CONHSO2Ciclopropano} suspendido en 20 ml de diclorometano se le añadieron 352 mg (1,30 mmol) de ácido 2-(S)-terc-butoxicarbonilamino-8-nonenoico adquirido en RSP Amino Acids, HOAT (82 mg, 0,60 mmol), DIPEA (0,74 ml, 5,0 mmol) y HATU (494 mg, 1,30 mmol) a ta. La mezcla de reacción se agitó 16 h y la mayor parte del CH2Cl2 se retiró al vacío. La mezcla se diluyó con tampón saturado a pH 4,0 (150 ml) y se extrajo en EtOAc (4 x 200 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se purificó sobre una columna Biotage 40M (eluyendo con MeOH del 0% al 15% en CH2Cl2), proporcionando el producto (Compuesto 377) 574 mg (76%): CL-EM m/z 754 (tiempo de retención: 1,64, procedimiento I).
Ejemplo 378: Preparación del Compuesto 378.
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Etapa 1:
10 Un total de 0,34 mmol del producto de la Etapa 2 del Ejemplo 375 {La Sal Bis HCl de HN-P2[(4R)-(7-metoxiquinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CONHSO2Ciclopropano} se suspendió en 3 ml de diclorometano. A esta mezcla se le añadieron N-BOC-L-Valina (L-Val) (120 mg, 0,55 mmol), HOAT (30 mg, 0,20 mmol), DIPEA (0,29 ml, 1,65 mmol) y HATU (160 mg, 0,43 mmol) a ta. La mezcla de reacción se agitó 16 h, se diluyó con tampón saturado a pH 4,0 (150 ml) y se extrajo en EtOAc (3 x 200 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se
15 secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se purificó sobre una columna Isco de 35 g (MeOH en CH2Cl2: del 0% al 15%). Este material se purificó adicionalmente sobre dos placas de PTLC δ de Analtech (20 x 40 cm, eluyendo con MeOH al de en CH2Cl2), proporcionando el producto 104,1 mg (44%), Compuesto 378: EMAR m/z (M-H)-calc. para C34H44N5O9S: 698,2860, encontrado: 698,2865, CL-EM m/e 700 (tiempo de retención: 1,60, procedimiento D).
Ejemplo 379: Preparación del Compuesto 379
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Etapa 1:
A una suspensión de ácido 2-picólico (3,73 g, 30,3 mmol) y 2-amino-4-metoxibenzofenona (5,0 g, 30,3 mmol) a -30 ºC disuelta en piridina (150 ml) se le añadió POCl3 (3,7 ml, 45,4 mmol) en 5 min. la mezcla de reacción se agitó durante 3 h a esa temperatura y se agitó a ta durante una noche. La mezcla de reacción se vertió en agua fría y se extrajo con EtOAc (3 x). El extracto combinado se secó, proporcionando el producto (7,67 g, 93%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 2,65 (s, 3 H), 3,92 (s, 3 H), 6,78 (m, 1 H), 7,60 (m, 1 H), 8,00 (m, 1 H), 8,06 (m, 1 H), 8,21 (d, J= 7,63 Hz, 1 H), 8,59 (t, J= 2,29 Hz, 1 H), 8,76 (d, J= 3,97 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,56, Procedimiento D), EM m/z 271 (M++1).
Etapa 2:
A una suspensión de (2-acetil-5-metoxifenil)-amida del ácido piridina-2-carboxílico (2,90 g, 10,7 mmol) en THF (50 ml) se le añadió t-BuOK/THF (1 M, 24 ml, 24 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 70 ºC durante 3 h y se agitó durante una noche. El disolvente se retiró al vacío. Al residuo se le añadió agua fría y se ajustó a pH 4,6 con HCl acuoso 1,0 N y se filtró. El residuo sólido se purificó sobre una columna Biotage 65M (MeOH/CH2Cl2: 0-15%), proporcionando el producto (2,26 g, 84%): CL-EM (tiempo de retención: 1,19, Procedimiento D). EM m/z 253 (M++1).
Etapa 3:
Una mezcla de 7-Metoxi-2-piridin-2-il-quinolin-4-ol (2,2 g, 8,71 mmol) en POCl3 (92 ml) se calentó a reflujo durante 3 h y después el disolvente se retiró al vacío. Al residuo se le añadió agua enfriada con hielo, se ajustó a pH >10 con NaOH 1,0 N y se extrajo con EtOAc (2 x). El extracto combinado se lavó con agua y salmuera, se secó (MgSO4) y el disolvente se retiró, proporcionando el producto en forma de un sólido de color amarillo (89%, 2,1 g): DMSO-D6) δ ppm 3,97 (s, 3 H), 7,40 (dd, J= 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,53 (m, 1 H), 8,01 (m, 1 H), 8,09 (d, J= 9,16 Hz. 1 H), 8,46 (s, 1 H), 8,56 (d, J= 7,93 Hz, 1 H), 8,74 (d, J= 3,97 Hz, 1 H).
CL-EM (tiempo de retención: 1,50, Procedimiento D), EM m/z 271 (M++1).
Etapa 4:
A una solución de N-Boc-4-hidroxiprolina (1,6 g, 6,7 mmol) en DMSO (20 ml) se le añadió i-BuOK (1,9 g, 16,8 mmol). La mezcla generada se agitó durante 1,5 h y se añadieron 4-Cloro-7-metoxi-2-piridin-2-il-quinolina (2,0 g, 7,4 mmol) y DMSO (10 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 38 h, se diluyó con agua fría y se extrajo con EtOAc/éter (1/4, 2 x), la fase acuosa se acidificó a pH 4 y se extrajo con EtOAc/THF (5 x), el extracto combinado se secó (Na2SO4/MgSO4), el disolvente se retiró al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa (0-80% de disolvente B), proporcionando el producto (1,6 g, 50%): CL-EM (tiempo de retención: 1,23, Procedimiento I), EM m/z 466 (M++1).
Etapa 5:
Una solución del producto (0,21 g, 0,65 mmol)de la Etapa 4 del Ejemplo 379 {éster etílico del ácido N-boc-(1R,2S)-1amino-2-vinilciclopropanocarboxílico} en HCl/dioxano (4 M, 5 ml, 20 mmol) se agitó durante 3 h y el disolvente se retiró al vacío. Al residuo se le añadieron CH2Cl2 (10 ml), diisopropiletilamina (0,4 ml, 3,23 mmol), HOBT (0,20 g, 5 1,35 mmol), Boc-(4R)-(2-ciclopropil-7-metoxi-quinolin-4-oxo)-S-prolina (0,20 g, 0,5 mmol) y HATU (0,415 g, 1,07 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante una noche, se diluyó con tampón pH 4,0 y se extrajo con EtOAc. El extracto se secó (MgSO4) y se purificó mediante una columna Biotage 40 M usando MeOH/CH2Cl2 (del 0 al 15%) como eluyente, proporcionando el producto (204,7 mg, 70%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 0,64 (m, 1 H), 0,96 (m, 2 H), 1,33 (m, 8 H), 1,39 (m, 9 H), 1,90 (m, 2 H), 2,18 (m, 1 H), 2,54 (m, 1 H), 2,81 (m, 1 H), 4,01 (m, 5 H), 4,44 (d, J=
10 28,99 Hz, 1 H), 5,08 (m, 1 H), 5,31 (m, 1 H), 5,57 (s, 1 H), 6,03 (m, 1 H), 6,94 (s, 1 H), 7,27 (d, J= 8,24 Hz, 1 H), 7,64 (m, 1 H), 7,92 (m, 1 H), 8,14 (m, 2 H), 8,66 (s, 1 H), 8,74 (s, 1 H).
Etapa 6:
Una suspensión de P2 Boc-(4R)-(7-metoxi-2-Piridin-2-il-quinolin-4-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)CONHSO2(1-ciclopropilmetilciclopropan-1-ilo) (Etapa 5, Ejemplo 379) (203 mg, 0,3 mmol) en HCl 4 M/dioxano (3,5 15 ml, 14 mmol) se agitó durante 2 h y el disolvente se retiró al vacío. Al residuo se le añadieron CH2Cl2 (2 ml), diisopropiletilamina (0,63 ml, 3,6 mmol), Boc-L-terc-leucina (83 mg, 0,36 mmol), HOAt (41 mg, 0,3 mmol) y HATU (148 mg, 0,39 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 7 h y el disolvente se retiró al vacío. El residuo se purificó por HPLC preparativa (35-85% de disolvente B), proporcionando el producto deseado (Compuesto 379) 25,1 mg (11%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm -0,05 (m, 1 H), 0,30 (m, 1 H), 0,66 (m, 1 H), 0,91 (m, 2 H), 1,05 (s, 9 H),
20 1,28 (s, 9 H), 1,67 (m, 8 H), 2,15 (m, 1 H), 2,58 (m, 1 H), 2,77 (m, 1 H), 3,96 (s, 3 H), 4,19 (d, J= 40,25 Hz, 2 H), 4,51 (d, J= 16,47 Hz, 2 H), 4,95 (m, 1 H), 5,15 (m, 1 H), 5,53 (s, 1 H), 5,89 (dd, J= 16,65, 9,33 Hz, 1 H), 7,09 (d, J= 8,42 Hz, 1 H), 7,43 (d, J= 1,83 Hz, 1 H), 7,50 (m, 1 H), 7,82 (s, 1 H), 7,99 (m, 1 H), 8,10 (d, J= 9,15 Hz, 1 H), 8,48 (d, J= 7,68 Hz, 1 H), 8,72 (s, 1 H). Tiempo de retención de CL-EM: 1,59, Procedimiento I), EM m/z 791 (M++1).
Ejemplo 380: Preparación del Compuesto 380.
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Etapa 1:
El material de partida del Esquema 1 del presente ejemplo se preparó por acoplamiento del producto de la etapa 3 del Ejemplo 11 de la sección B con el extremo amino de P1(1R,2S Vinil Acca)-COOEt. Una suspensión de dicho 30 producto de acoplamiento, P2 Boc-(4R)-(6-metoxi-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-COOEt (7,88 g,
5
10
15
20
25
30
35
14,99 mmol) en HCl 4 M/dioxano (120 ml, 480 mmol) se agitó durante 2 h, el disolvente se retiró al vacío y se destiló azeotrópicamente con dioxano seco. Al residuo se le añadieron DMF (75 ml), N-metilmorfolina (6,27 ml, 57,07 mmol), Boc-L-terc-leucina (5,20 g, 22,49 mmol) y HATU (8,53 g, 22,49 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche y se trató vertiendo la mezcla de reacción en agua enfriada con hielo y ajustando el pH a 5 con HCl acuoso 1,0 N y se extrajo con EtOAc. El extracto se lavó con NaHCO3 (ac.) y salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó sobre una columna Biotage 65M (EtOAc-hexanos: 5-100%), proporcionando el producto (8,07 g, 84%.): Tiempo de retención: 1,88 procedimiento 1) EM m/z 639 (M++1).
Etapa 2:
A una suspensión del producto (4,0 g, 6,26 mmol) de la Etapa 1 del Ejemplo 384 {Boc -NH-P3(L-terc-BuGly)-P2[ (4R)-(6-metoxil-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-COOEt} en THF (250 ml), CH3OH (31 ml) y H2O (125 ml) se le añadió LiOH (2,4 g, 100,2 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante una noche y después se ajustó a pH 7 con HCl acuoso 1,0 N. Los disolventes orgánicos se retiraron al vacío. El residuo acuoso se acidificó a pH 4 y se extrajo con EtOAc (2 x). El disolvente orgánico combinado se secó (Na2SO4/MgSO4) y se concentró al vacío, proporcionando el producto (3,79 g, 99%): RMN 1H (metanol-d4) h ppm 1,05 (s, 9 H), 1,25 (m, 1 H), 1,29 (s, 9 H), 1,46 (m, 1 H), 1,72 (dd, J= 8,24, 5,19 Hz, 1 H), 2,23 (c, J= 8,55 Hz, 1 H), 2,68 (dd, J= 13,89, 7,78 Hz, 1 H), 3,94 (s, 3 H), 4,05 (dd, J= 11,60, 3,05 Hz, 1 H), 4,23 (d. J= 8,85 Hz, 1 H), 4,46 (d, J= 1,1,60 Hz, 1 H), 4,63 (t, J= 8,39 Hz, 1 H), 5,10 (d, J= 10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 17,40 Hz, 1 H), 5,85 (m, 2 H), 7,10 (d, J= 9,16 Hz, 1H), 7,19 (s, 1 H), 7,26 (d, J= 5,49 Hz, 1 H), 7,91 (d, J= 5,80 Hz, 1 H), 8,12 (d, J= 9,16 Hz, 1 H). Tiempo de retención: 1,81 procedimiento 1) EM m/z 611 (M++1 ).
Etapa 3:
Una solución de CDI (0,052 g, 0,32 mmol) y el producto (0,130 g, 0,21 mmol) de la Etapa 2 del Ejemplo 384 {BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4R)-6-metoxi-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1 (1R,2S Vinil Acca)-CO2H} en THF (2 ml) se calentó a reflujo durante 60 min y se dejó enfriar a ta. Se añadió ciclobutanosulfonamida (0,043 g, 0,32 mmol) seguido de la adición de una solución de DBU puro (0,048 ml, 0,32 mmol). La reacción se agitó durante una noche y después se filtró a través de un filtro de jeringa y se purificó por HPLC preparativa (del 30% al 100% de disolvente B), proporcionando el producto deseado 0,1422 mg (92%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 1,04 (s, 9 H), 1,26 (d, J= 13,43 Hz, 9 H), 1,39 (m, 1 H), 1,85 (dd, J= 7,63, 5,19 Hz. 1 H), 1,98 (m, 2 H), 2,26 (m, 4 H), 2,50 (m, 2 H), 2,61 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,05 (m, 1 H), 4,24 (m, 1 H), 4,33 (m, 1 H), 4,43 (d, J= 11,60 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,13 (m, 1 H), 5,30 (m, 1 H), 5,71 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,08 (d, J= 8,85 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,24 (d, J= 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (m, 1 H), 8,08 (d, J= 9,16 Hz, 1 H). Tiempo de retención: 1,89 procedimiento 1) EM m/z 728 (M++1).
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Etapa 4:
El Ejemplo 380, Etapa 3 (0,196 mg, 0,27 mmol) {(BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2-(4R)-(6-metoxi-isoquinolin-1-oxo)-Sprolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CONHSO2 Ciclobutilo se disolvió en HCl/dioxano (5 ml; 20 mmol) y se agitó durante 2 h a ta. El disolvente se retiró al vacío para proporcionar el producto del título 100%(0,1887 g) que estaba listo para la siguiente etapa.
Etapa 5:
A una mezcla del producto (0,037 g, 0,053 mmol) de la Etapa 4 del Ejemplo 380 {sal HCl de NH2-P3(L-t-BuGly)-P2(4R)-(6-metoxi-)isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CONHSO2 Ciclobutilo} y diisopropil-etilamina (0,046 ml), 0,26 mmol) en CH2Cl2 (2 ml) se le añadió cloroformiato de ciclopentilo (0,7 M. 0,151 ml, 0,069 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante una noche y se purificó por HPLC preparativa (del 30% al 100% de disolvente B), proporcionando el producto deseado (Compuesto 380) (0,0303 g, 77%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 1,03 (s, 9
5 H), 1,48 (m, 9 H), 1,86 (dd, J= 8,24, 5,49 Hz, 1 H), 1,99 (m, 2 H), 2,27 (m, 4 H), 2,51 (m, 2 H), 2,60 (dd, J= 13,89, 6,87 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,05 (dd, J= 12,21, 3,97 Hz, 1 H), 4,32 (m, 2 H), 4,41 (d, J= 11,90 Hz, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,69 (m, 1 H), 5,12 (d, J= 10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 17,09 Hz, 1 H), 5,71 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,11 (d, J= 9,46 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,25 (d, J= 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J= 5,80 Hz, 1 H), 8,08 (d, J= 9,16 Hz, 1 H). tiempo de retención: 1,85 procedimiento H), EM m/z 740 (M++1)
10 Ejemplo 381: Preparación del Compuesto 381.
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Etapa 1:
A una mezcla del producto (0,037 g, 0,053 mmol) de la Etapa 4 del Ejemplo 380 {sal HCl de NH2-P3(L-t-BuGly)-P2 (4R)-(6-metoxi-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CONHSO2 Ciclobutilo} y diisopropiletil-amina 15 (0,046 ml), 0,26 mmol) en CH2Cl2 (2 ml) se le añadió cloroformiato de neo-pentilo (0,012 ml, 0,069 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante una noche y se purificó directamente por HPLC preparativa (del 30% al 100% de disolvente B), proporcionando el producto deseado (Compuesto 381) (0,0252 g, 64%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 0,84 (s, 9 H), 1,05 (s, 9 H), 1,40 (m, 1 H), 1,86 (m, 1 H), 2,00 (m, 2 H), 2,28 (m, 4 H), 2,51 (m, 2 H), 2,57 (m, 1 H), 3,39 (d, J= 10,07 Hz, 1 H), 3,55 (d, J= 10,38 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,05 (m, 1 H), 4,33 (m, 2 H), 4,41 (d, J= 11,29
20 Hz, 1 H), 4,53 (m, 1 H), 5,12 (d, J= 10,07 Hz, 1 H), 5,29 (d, J= 17,09 Hz. 1 H), 5,71 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,10 (d, J = 9,16 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,25 (d, J= 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J= 5,80 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 8,07 (d, J= 8,85 Hz, 1 H). tiempo de retención: 1,89 procedimiento H), EM m/z 742 (M++1).
Ejemplo 382: Preparación del Compuesto 382.
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Etapa 1:
A una mezcla del producto (0,037 g, 0,053 mmol) de la Etapa 4 del Ejemplo 380 {sal HCl de NH2-P3(L-t-BuGly)-P2 (4R)-(6-metoxi-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CONHSO2 Ciclobutilo} y diisopropiletil-amina 5 (0,046 ml), 0,26 mmol) en CH2Cl2 (2 ml) se le añadió dicarbonato de di-t-amilo (0,0169 g, 0,069 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante una noche y se purificó directamente por HPLC (del 30% al 100% de disolvente B), proporcionando el producto deseado (Compuesto 382) (0,0175 g, 44%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 0,79 (t, J= 6,87 Hz, 3 H), 1,04 (s, 8 H), 1,21 (s, 3 H), 1,23 (s, 3 H), 1,41 (m, 2 H), 1,64 (m, 2 H), 1,83 (m, 1 H), 2,00 (m, 2 H), 2,26 (m, 4 H), 2,51 (m, 2 H), 2,60 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,07 (m, 1 H), 4,24 (m, 1 H), 4,33 (m, 1 H), 4,43 (d, J=
10 11,60 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,13 (m, 1 H), 5,29 (m, 1 H), 5,71 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,09 (d, J= 8,85 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,25 (d, J= 5,49 Hz, 1 H), 7,88 (d, J= 5,80 Hz. 1 H), 8,08 (d, J= 8,85 Hz, 1 H). tiempo de retención: 1,90, procedimiento H), EM m/z 742 (M++1).
Ejemplo 383: Preparación del Compuesto 383.
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15 Etapa 1
A una mezcla del producto (0,037 g, 0,053 mmol) de la Etapa 4 del Ejemplo 380 {sal HCl de NH2-P3(L-t-BuG-ly)-P2(4R)-(6-metoxi-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(R,2S Vinil Acca)-CONHSO2 Ciclobutilo} y diisopropiletil-amina (0,046 ml), 0,26 mmol) en CH2Cl2 (2 ml) se le añadió isocianato de t-butilo (0,008 ml, 0,069 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante una noche y se purificó directamente por HPLC preparativa (del 30% al 100% de disolvente B), proporcionando el producto deseado (Compuesto 383) (0,024 g, 62%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 1,05 (s, 9 H), 1,19 (s, 9 H), 1,37 (m, 1 H), 1,85 (dd, J= 8,09, 5,34 Hz, 1 H), 2,00 (m, 2 H), 2,26 (m, 4 H), 2,50 (m, 2 H), 2,58 (m, 1 H), 3,92 (s, 3 H), 4,06 (m, 1 H), 4,32 (m, 2 H), 4,49 (m, 2 H), 5,11 (d, J= 10,38 Hz, 1 H), 5,27 (d, J= 17,40 Hz, 1 H), 5,69 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 7,08 (dd, J= 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,17 (d, J= 2,44 Hz, 1 H), 7,24 (d, J= 5,80 Hz, 1 H), 7,87 (d, J= 6,10 Hz, 1 H), 8,12 (d, J= 8,85 Hz, 1 H). tiempo de retención: 1,77, procedimiento H), EM m/z 727 (M++1).
Ejemplo 384: Preparación del Compuesto 384.
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Etapa 1:
Una suspensión de diisopropiletilamina (0,031 ml, 0,018 mmol), carbonato de N,N'-disuccinimidilo (0,0274 g, 0,107 mmol) y el producto (0,050 g, 0,0714 mmol) de la Etapa 4 del Ejemplo 380 {sal HCl de NH2-P3(L-t-BuGly)-P2 -(4R)(6-metoxi-isoquinolin-1-oxo)-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)-CONHSO2 Ciclobutilo} en THF (2 ml) se sonicó a 80 ºC 15 durante 15 min. Se añadieron KH (0,046 g, 1,14 mmol) y 1-metilciclopentanol (0,079 ml, 0,714 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 20 min y se trató por dilución con agua fría, se ajustó a pH 4 y se extrajo con EtOAc. El extracto se secó (MgSO4) y el residuo se purificó por HPLC preparativa (del 30% al 100% de disolvente B), proporcionando el producto deseado (Compuesto 384) (0,018 g, 33%): (metanol-d4) δ ppm 1,04 (s, 9 H), 1,29-1,79 (m, 10 H), 1,84 (m, 2 H), 1,99 (m, 3 H), 2,26 (m, 4 H), 2,49 (m, 2 H), 2,60 (dd, J= 13,73, 7,02 Hz, 1 H), 3,92 (s, 3 H),
20 4,05 (dd, J= 11,29, 2,44 Hz, 1 H), 4,26 (s, 1 H), 4,32 (m, 1 H), 4,44 (d, J= 11,90 Hz, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 5,12 (d, J= 10,07 Hz, 1 H), 5,28 (d, J= 16,79 Hz, 1 H), 5,71 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 7,10 (d, J= 8,85 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,26 (d, J= 5,80 Hz, 1 H), 7,88 (d, J= 5,80 Hz, 1 H), 8,08 (d, J= 9,16 Hz, 1 H). Tiempo de retención de CL-EM: 1,91 procedimiento H), EM m/z 754 (M++1).
Ejemplo 385: Preparación del Compuesto 385.
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Etapa 1:
Una suspensión de éster metílico del ácido 2-cianometil-4-metoxi-benzoico (1,9 g) y TsOH·H2O (0,15 g, mmol) en morfolina (5 ml) se calentó a reflujo durante 4 h y el disolvente se retiró al vacío. El residuo se recristalizó en EtOAc/hexanos con gotas de MeOH, proporcionando el producto (0,43 g, 17%): Tiempo de retención de CL-EM: 1,07 procedimiento H), EM m/z 266 (M++1).
Etapa 2:
Una mezcla de 6-metoxi-3-morfolin-4-il-isoquinolin-1-ol (0,298 g, 1,15 mmol) en POCl3 (20 ml) se calentó a reflujo durante 2 h, el disolvente se retiró al vacío y se añadió agua fría. El pH se ajustó a >11 mediante la adición de NaOH 1,0 N. La fase acuosa se extrajo con EtOAc. El extracto se secó (MgSO4) y el disolvente se retiró al vacío, proporcionando el producto (0,299 g, 94%): Tiempo de retención de CL-EM: 1,68 procedimiento H), EM m/z 279 (M++1).
Etapa 3:
Una mezcla de 1-Cloro-6-metoxi-3-morfolin-4-il-isoquinolina (0,050 g, 0,18 mmol) e hidrogenodifluoruro de tetrabutilfosfonio (0,8 g, 2,8 mmol) [Synlett 1992, (4), 345-6] se calentó a 140 ºC con microondas durante 10 min. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se filtró a través de una precolumna ISCO de 25 g con una capa de gel de silicio en la parte superior y el disolvente se retiró, proporcionando el producto (0,037 mg, 77%): RMN 1H (CLOROFORMO-D) δ ppm 3,48 (m, 4 H), 3,84 (m, 4 H), 3,89 (s, 3 H), 6,46 (d, J= 1,22 Hz, 1 H), 6,85 (s, 1 H), 6,90 (dd, J= 9,16, 2,44 Hz, 1 H), 7,82 (d, J= 8,85 Hz, 1 H). Tiempo de retención de CL-EM: 1,56 procedimiento H), EM m/z 263 (M++1).
Etapa 4:
Una mezcla de 1-floro-6-metoxi-3-morfolin-4-il-isoquinolina (0,037 g, 0,14 mmol) LaCl3 (0,020 g, 0,8 mmol), t-BuOK (1 M/THF, 0,32 ml, 0,32 mmol) y Boc -NH-P3(L-terc-BuGly)-P2 [(4R)-4-hidroxil-S-prolina]-P1(1R,2S Vinil Acca)CONHSO2Ciclopropano (0,045 g, 0,08 mmol) en THF (3 ml) se agitó durante 3 días. La mezcla de reacción se diluyó con metanol, se filtró a través de un filtro de jeringa y se purificó por HPLC preparativa, proporcionando el producto en forma de una espuma de color amarillo pálido (0,0158 g, 24%): RMN 1H (metanol-d4) δ ppm 1,03 (s, 9 H), 1,24 (m, 4 H), 1,31 (s, 9 H), 1,43 (m, 2 H), 1,88 (m, 1 H), 2,24 (m, 2 H), 2,59 (dd, J= 13,43, 6,71 Hz, 1 H), 2,94 (m, 1 H), 3,47 (m, 4 H), 3,83 (m, 4 H), 3,86 (s, 3 H), 4,08 (m, 1 H), 4,28 (s, 1 H), 4,48 (m, 1 H), 5,12 (d, J= 10,38 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 16,48 Hz, 1 H), 5,76 (m, 2 H), 6,74 (d, J= 9,16 Hz, 1 H), 6,94 (s, 1 H), 7,85 (d, J= 8,85 Hz, 1 H), 9,19 (s, 1 H). tiempo de retención: 1,86 procedimiento H), EM m/z 799 (M++1).
Ejemplo 386: Preparación del Compuesto 386.
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El Compuesto 386 se preparó usando los procedimientos descritos en el presente documento.
Sección 1:
Todos los compuestos de la sección 1 se analizaron por la metodología CL/EM, que tiene las siguientes condiciones.
5 Procedimiento A: Xterra C18 S7 3,0 x 50 mm Gradiente: 100% de disolvente A/0% de disolvente B a 0% de disolvente A/100% de disolvente B Tiempo de gradiente: 3 min. Tiempo de mantenimiento: I min. Caudal: 4 ml/min.
10 Longitud de onda del Detector: 220 nm Disolvente A: 10% de MeOH/90% de H2O/0,1% de TFA Disolvente B: 10% de H2O/90% de MeOH/0,1% de TFA
Ejemplo 410: Preparación del Compuesto 410
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Etapa 1:
A una solución de Boc-L-hidroxiprolina (0,723 g, 3,13 mmol) en DMSO se le añadió KOtBu (0,808 g, 7,2 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas y se añadió en dos porciones 4-cloro-6-metil-2-(trifluorometil)quinolina (0,916 g, 3,75 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante tres horas y se usaron 1,3 equivalentes de HCl (1 N) para neutralizar la reacción. Se añadió solución tampón pH 4,0 y el pH se ajustó a pH 4-5. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 ml) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml) y se secaron sobre MgSO4, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (rendimiento en bruto no calculado). El producto en bruto se recogió en la siguiente etapa.
tr de CL/EM min (MH+): 2,48 (441,5) (procedimiento A).
Etapa 2:
Una solución del producto en bruto de la Etapa 1, 1-terc-butil éster del ácido 4-(6-metil-2-trifluorometil-quinolin-4iloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (suponiendo 3,13 mmol) en THF (10 ml) y metanol (10 ml) se enfrió a 0 ºC. A la solución en agitación se le añadió lentamente TMSCN2 2 M en hexanos (~1,3 equiv.) en una atmósfera de nitrógeno hasta que dejó de emitirse gas de la solución. Después, la solución que había reaccionado completamente se concentró al vacío y la purificación mediante una columna Biotage 40M (eluyendo con acetato de etilo al 10% -30% en hexanos) proporcionó el compuesto del título puro en forma de una espuma de color blanco (976 mg, 69% en las Etapas 1 y 2) tr de CL/EM min (MH+): 2,60 (477) (procedimiento A).
Etapa 3:
Una solución del producto de la Etapa 2 (0,976 g, 2,15 mmol) en DCM (7 ml) y TFA (6,62 ml) se agitó a temperatura ambiente durante una hora. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se suspendió en HCl 1 N en éter dietílico (8 ml), se agitó suavemente y se concentró al vacío. Este procedimiento se repitió y el producto resultante se puso en una bomba de aceite durante una noche, produciendo un sólido de color blanco con rendimiento cuantitativo.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 2,50 (s, 3H), 2,57-2,6 (m, 1H), 2,66-2,71 (m, 1H), 3,62-3,65 (d a, J= 15 Hz, 1H), 3,80-3,81 (m, 4H), 4,8 (s a, 1H), 5,7 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,72-7,75 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,98-7,8 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 8,24 (s, 1H), 9,54 (s a, 1H); tr de CL/EM min (MH+): 1,61 (355) (procedimiento A).
Etapa 4:
El producto de la Etapa 3 (suponiendo rendimiento cuantitativo, 2,746 mmol) se añadió a una solución de BOC-tButil-L-glicina (0,635 g, 2,746 mmol) en DCM (20 ml) en una atmósfera de nitrógeno. Esta etapa se siguió de la adición de HOBt (0,408 g, 3,02 mmol), DIPEA (3,35 ml, 19,2 mmol) y HBTU (1,56 g, 4,12 mmol). Se produjo inmediatamente una solución de color melocotón y la reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante una noche. A la reacción completada se le añadieron en orden 10 ml de DCM para aumentar el volumen y la reacción se interrumpió con solución tampón pH 4,00 (25 ml). La mezcla se acidificó a un pH de 4,5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 20 ml). La fase orgánica se lavó dos veces con solución tampón pH 4,00 (20 ml), NaOH saturado (25 ml) y salmuera (20 ml) y después se secó con MgSO4. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó mediante una columna Biotage 40M (eluyendo con acetato de etilo al 10% -40% en hexanos). Esta purificación proporcionó el compuesto del título puro en forma de un sólido de color blanco (1,11 g, 89%).
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,96-1,02 (rotámeros, 3:2, s, 18H), 2,27-2,33 (m, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 4,02-4,04 (m, 1H), 4,43-4,45 (d a, J= 15 Hz, 2H), 4,58-4,61 (t, 1H), 5,60 (s a, 1H), 6,72-6,74 (d a, J= 15 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,68-7,73 (m, 1H), 7,95-7,97 (m, 2H); tr de CL/EM min (MH+): 2,61 (590) (procedimiento A).
Etapa 5:
Se disolvió LiOH (0,138 g, 5,78 mmol) en agua (10 ml) por calentamiento y sonicación. Se añadieron solución de LiOH y MeOH (10 ml) a una solución del material puro de la Etapa 4 (1,09 g, 1,93 mmol) en THF (10 ml). La mezcla se volvió inmediatamente de color azul intenso. La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 3 horas y después se acidificó con HCl 1 N (5,78 ml, 5,78 mmol). La reacción se interrumpió con solución tampón pH 4,00 y el pH se ajustó a pH 4,5 usando NaOH acuoso 1 N. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml), se lavó con salmuera (20 ml) y se secó sobre MgSO4. La solución filtrada se concentró al vacío y se dejó en una línea de vacío durante una noche. El producto en bruto (957 mg, rendimiento del 90%) se recogió en la siguiente etapa.
tr de CL/EM min (MH+): 2,51 (577) (procedimiento A).
Etapa 6:
El producto en bruto de la Etapa 5 (60 mg, 0,11 mmol) se disolvió en DCM (5 ml) y se añadió sal clorhidrato de (1(R)-amino-2 (S)-vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (Ejemplo 1, Etapa 8) (0,029 g, 0,11 mmol). Se añadieron DIPEA (0,094 ml, 0,54] mmol) y después HATU (0,0575, 0,151 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante aproximadamente 8 horas. A la solución se le añadieron en orden 10 ml de DCM para aumentar el volumen y la reacción se interrumpió con solución tampón pH 4,00 (10 ml). La mezcla se acidificó usando HCl 1 N a un pH de 4-5 y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 20 ml). La fase orgánica se lavó dos veces con solución tampón pH 4,00 (10 ml) y salmuera (10 ml) y después se secó sobre MgSO4. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó mediante una columna Biotage 12M (eluyendo con acetona al 10% -40% en hexanos). Esta purificación proporcionó el Compuesto 410 en forma de un polvo de color blanco (29 mg, 35%).
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,976-1,12 (m, 24 H), 1,36-1,39 (m, 1H), 1,70-1,72 (m, 1H), 2,15-2,25 (m, 2H), 2,50-2,52 (m, 4H), 2,91-2,96 (m, 1H), 3,97-4,01 (m, 2H), 4,40-4,47 (m, 2H), 5,09-5,11 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,21-5,24 (d, J= 15 Hz, 1H), 5,59-5,66 (m, 2H), 6,65-6,67 (d, NH), 7,43 (s, 1H), 7,72-7,74 (d, J= 10 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,98-8,0 (d, J= 10 Hz, 1H), 8,87 (s, NH), 10,35 (s, NH); tr de CL/EM min (MH+): 2,65 (789,61) (procedimiento A).
Ejemplo 411: Preparación del Compuesto 411.
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Etapa 1:
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A una solución de Boc-L-hidroxiprolina (2,00 g, 8,65 mmol) en THF (25 ml) se le añadió NaH (0,795 g, 19,87 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos y se añadió en
5 dos porciones 4,6-dicloropirimidina (2,58 g, 17,30 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una hora y se usaron 1,3 equivalentes de HCl (1 N) para neutralizar la reacción. Se añadió solución tampón pH 4,0 y el pH se ajustó a pH 5. Se usó acetato de etilo para extraer la fase acuosa (3 x 25 ml) y las fases orgánicas se lavaron con salmuera (20 ml) y se secaron sobre MgSO4, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (rendimiento en bruto no calculado). El producto en bruto se recogió en la siguiente etapa.
10 tr de CL/EM min (MH+): 1,91 (366,2) (procedimiento A).
Etapa 2:
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Una solución del producto en bruto de la Etapa 1, (suponiendo 8,65 mmol) en THF (40 ml) y metanol (40 ml) se enfrió a 0 ºC. A la solución en agitación se le añadió lentamente TMSCN2 2 M en hexanos (-1,3 equiv.) en una
15 atmósfera de nitrógeno hasta que dejó de emitirse gas de la solución. Después, la solución que había reaccionado completamente se concentró al vacío y la purificación mediante una columna Biotage 40M (eluyendo con acetato de etilo al 20% -40% en hexanos) proporcionó el compuesto del título puro en forma de una espuma de color blanco (497 mg, 16% en las etapas 2a -2b).
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 1,34-1,38 (rotámeros, 2:1, 9H), 2,25-2,29 (m, 1H), 2,53-2,56 (m, 1H), 3,58-3,75 (m, 2H), 3,69 20 (s, 3H), 4,28-4,33 (m, 1H), 5,59 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 8,69 (s, 1H);
tr de CL/EM -min (MH+): 2,08 (380,14) (procedimiento A).
Etapa 3:
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Una solución del producto puro de la Etapa 2 (472 mg, 1,83 mmol) en DCM (3 ml) y TFA (5,65 ml) se agitó a
25 temperatura ambiente durante una hora. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se suspendió en HCl 1 N en éter dietílico (7,33 ml), se agitó suavemente y se concentró al vacío. Este procedimiento se repitió y el producto resultante se puso en una bomba de aceite durante una noche, produciendo un sólido de color blanco con rendimiento cuantitativo.
tr de CL/EM min (MH+): 0,55 (258,35) (procedimiento A). Etapa 4:
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El producto de la Etapa 3 (suponiendo rendimiento cuantitativo, 1,83 mmol) se añadió a una solución de BOC-t-Butil
5 L-glicina (0,424 g, 1,83 mmol) en DCM (11 ml) en una atmósfera de nitrógeno. Esta etapa se siguió de la adición de HOBt (0,272 g, 2,02 mmol), DIPEA (2,23 ml, 12,82 mmol) y HBTU (1,04 g, 2,75 mmol). La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 15 horas. A la solución se le añadieron en orden 15 ml de DCM para aumentar el volumen y la reacción se interrumpió con solución tampón pH 4,00 (15 ml). La mezcla se acidificó a un pH de 4,5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 20 ml). La fase orgánica se lavó dos veces con
10 solución tampón pH 4,00 (20 ml), NaOH saturado (25 ml) y salmuera (20 ml) y se secó sobre MgSO4. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó mediante una columna Biotage 40S (eluyendo con acetato de etilo al 20% -50% en hexanos). Esta purificación proporcionó el compuesto del título puro en forma de un sólido de color blanco (454 mg, 53%).
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,94 (s, 9H), 1,25 (s, 9H), 2,21-2,27 (m, 1H), 2,48-2,55 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,86-4,02 (m,
15 2H), 4,29-4,31 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,46-4,49 (t, 1H), 5,75 (s a, 1H), 6,72-6,74 (d, NH), 7,12 (s, 1H), 8,71 (s, 1H); tr de CL/EM min (MH+): 2,27 (493,5) (procedimiento A).
Etapa 5:
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Se disolvió LiOH (0,0141 g, 0,589 mmol) en agua (7,5 ml) por calentamiento y sonicación. La solución de LiOH se
20 añadió a una solución del material puro de la Etapa 4 (252 mg, 0,535 mmol) en THF (7,5 ml) y se dejó en agitación a temperatura ambiente. La reacción se completó después de 3 horas. Se interrumpió con tampón pH 4,0 y se acidificó a un pH de aproximadamente 4,5 con HCl 1 N. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml) y la fase orgánica se lavó con salmuera (20 ml) y se secó sobre MgSO4. La solución filtrada se concentró al vacío y se dejó en una línea de vacío durante una noche. El producto en bruto (231 mg, rendimiento del 95%) se recogió en la
25 siguiente etapa.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,94 (s, 9H), 1,25 (s, 9H), 2,14-2,22 (m, 1 H), 2,50-2,54 (m, 1H), 3,84-3,876 (d, J= 150 Hz, 1H), 3,97-3,99 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,27-4,30 (d, J= 15 Hz, 1H), 4,37-4,40 (t, 1H), 5,63 (s a, 1H), 6,69-6,71 (d, NH), 7,12 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 12,56 (s a, OH);
tr de CL/EM -min (MH+): 2,24 (479,5) (procedimiento A).
30 Etapa 6: El material puro de la Etapa 5 (80 mg, 0,146 mmol) y ácido fenilborónico (0,0178 g, 0,146 mmol) se disolvieron en DMF (2 ml). La solución se puso en una atmósfera de nitrógeno y se añadió Na2CO3 acuoso 2 M (0,146 ml, 0,292 mmol). Se añadieron 5% en moles de tetraquis(trifenil)fosfina)-paladio (0) (8,44 mg, 0,0073 mmol) y la mezcla se calentó con microondas usando el Personal Chemistry Emrys Optimizer durante 50 minutos a 140 ºC. Precipitó negro de paladio de la reacción después de que se completara. La mezcla se acidificó con un equivalente de HCl 1 N y se filtró a través de una jeringa, usando MeOH para extraer el producto. El producto se purificó por HPLC prep. (columna -4 Xterra 55 30 x 75 mm, disolvente -70% de A/30% de B -30% de A/70% de B (donde el disolvente A es 10% de MeOH, 90% de H2O, 0,1% de TFA y el disolvente B es 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), tiempo de gradiente -15 min, tiempo de mantenimiento -1 min, caudal -40 ml/min, tiempo de retención del producto puro 10,45-11,37). Las fracciones que contenían el producto deseado se neutralizaron con NaOH 1 N y se pusieron en el speed vac durante aproximadamente 4 horas. Las fracciones se combinaron y se añadió tampón pH 4,0 (15 ml). El pH se ajustó a pH 4-5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío. El producto se puso en una bomba de aceite para secar durante una noche y se obtuvo un aceite viscoso (37 mg, 50%). CL/EM n-min (MH+): 2,37 (499,3) (procedimiento A).
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Etapa 7:
El producto del Ejemplo 411, Etapa 6 (36,7 mg, 0,061 mmol) se disolvió en DCM (4 ml) y se añadió sal clorhidrato de (1 (R)-amino-2 (S)-vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (Ejemplo 1, Etapa 8) (0,0164 g, 0,161 mmol). Se añadieron DIPEA (0,0534 ml, 0,307 mmol) y después HATU (0,0326, 0,0858 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 3 horas. A la solución se le añadieron en orden 10 ml de DCM para aumentar el volumen y la reacción se interrumpió con solución tampón pH 4,00 (10 ml). La mezcla se acidificó a un pH de 4-5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 15 ml). La fase orgánica se lavó dos veces con solución tampón pH 4,00 (10 ml) y salmuera (10 ml) y después se secó sobre MgSO4. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó mediante una columna Biotage 12M (eluyendo con acetona al 20% -40% en hexanos). Esta purificación proporcionó el Compuesto puro 411 en forma de un polvo de color blanco (7 mg, 15%).
RMN 1H: δ 1,07-1,46 (m, 24 H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,22-2,32 (m, 2H), 2,51-2,55 (m, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 4,04-4,07 (d, J= 15 Hz, 1H), 4,20-4,22 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,36-4,38 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,47-4,50 (t, 1H), 5,12-5,14 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,29-5,33 (d, J= 20 Hz, 1H), 5,73-5,82 (m, 2H), 6,59-6,60 (d, NH), 7,29 (s, 1H), 7,50-7,51 (m, 3H), 8,03-8,05 (m, 2H), 8,81 (s, 1H); tr de CL/EM min (MH+): 2,50 (711,4) (procedimiento A).
Ejemplo 412: Preparación del Compuesto 412.
Etapa 1:
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El producto del Ejemplo 411, Etapa 5 (80 mg, 0,146 mmol) se disolvió en DMF (2 ml) y a la solución se le añadió ácido 2-tiofenoborónico (0,028 g, 0,219 mmol). La reacción se puso en una atmósfera de nitrógeno y se añadieron Na2CO3 acuoso 2 M (0,146 ml, 0,292 mmol) y 5% en moles de tetraquis(trifenil)fosfina)-paladio (0) (8,44 mg, 0,0073 mmol). La reacción se calentó con microondas usando el Personal Chemistry Emrys Optimizer durante 30 minutos a 150 ºC. Precipitó negro de paladio de la reacción después de que se completara. La mezcla se acidificó con un equivalente de HCl 1 N y se filtró a través de una jeringa, usando MeOH para extraer el producto. El producto se purificó por HPLC prep. (columna -4 Xterra S5 30 x 75 mm, disolvente -70% de A/30% de B -30% de A/70% de B (donde el disolvente A es 10% de MeOH, 90% de H2O, 0,1% de TFA y el disolvente B es 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), tiempo de gradiente -15 min, tiempo de mantenimiento -1 min, caudal -40 ml/min, tiempo de retención del producto puro -10,45-11,37). Las fracciones que contiene el producto deseado se neutralizaron con NaOH 1 N y se pusieron en el speed vac durante aproximadamente 4 horas. Después, las fracciones se combinaron y se añadió tampón pH 4,0 (15 ml). El pH se ajustó a pH 4-5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío. El producto se puso en una bomba de aceite para secar durante una noche y se obtuvo un líquido oleoso (37 mg, 50%).
tr de CL/EM min (MH+): 2,37 (499,3) (procedimiento A).
Etapa 2:
El producto del Ejemplo 412, Etapa 1 (39 mg, 0,0773 mmol) se disolvió en DCM (4 ml) y se añadió sal clorhidrato de (1(R)-amino-2 (S)-vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (Ejemplo 1, Etapa 8) (0,0206 g, 0,0773 mmol). Se añadieron DIPEA (0,015 ml, 0,387 mmol) y después HATU ( 0,0411 g, 0,108 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 15 horas. A la solución se le añadieron en orden 10 ml de DCM para aumentar el volumen y la reacción se interrumpió con solución tampón pH 4,00 (10 ml). La mezcla se acidificó a un pH de 4-5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 15 ml). La fase orgánica se lavó dos veces con solución tampón pH 4,00 (10 ml) y salmuera (10 ml) y después se secó sobre MgSO4. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó mediante una columna Biotage 12M (eluyendo con acetona al 20% -50% en hexanos). Esta purificación proporcionó el Compuesto puro 412 en forma de un polvo de color blanco (4 mg, 7%).
RMN 1H: δ 1,04-1,29 (m, 24H), 1,45-1,47 (m, 1H), 1,89-1,91 (m, 1H), 2,26-2,31 (m, 2H), 2,51-2,53 (m, 1H), 2,92-2,95 (m, 1H), 4,05-4,07 (d, J= 10 Hz, 2H), 4,22-4,24 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,38-4,40 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,48-4,52 (m, 1H), 5,15-5,17 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,32-5,36 (d, J= 20 Hz, 1H), 5,76-5,83 (m, 2H), 6,65-6,67 (d, NH), 7,19-7,21 (m, 2H), 7,66-7,67 (d, J= 5 Hz, 1H), 7,86-7,87 (d, J= 5 Hz, 1H), 8,69 (s, 1H); tr de CL/EM min (MH+): 2,45 (739,4) (procedimiento A).
Ejemplo 413: Preparación del Compuesto 413
Etapa 1:
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Se disolvieron 2-bromo-6-cloropiridina (3,0 g, 15,55 mmol) y ácido fenilborónico (1,896 g, 15,55 mmol) en una
10 mezcla de EtOH, tolueno y agua (2:1:1; 120 ml). Se añadieron Na2CO3 acuoso 1 M (15,55 ml, 31,10 mmol) y 5% en moles de tetraquis(trifenil)fosfina)-paladio (0) (0,896 g, 0,775 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La reacción se calentó a reflujo a 90 ºC durante una hora. Se añadió agua (20 ml) para interrumpir la reacción y la fase acuosa se extrajo con éter dietílico (4 x 25 ml). Después, la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío. La mezcla en bruto se purificó mediante una columna Biotage 40S (eluyendo con 2% -10%
15 acetato de etilo en hexanos), proporcionando el compuesto del título puro (1,45 g, 74%).
RMN 1H: δ 7,24-7,26 (m, 1H), 7,42-7,48 (m, 3H), 7,63-7,70 (m, 2H), 7,98-8,00 (m, 2H); tr de CL/EM min (MH+): 2,04 (190,18) (procedimiento A)
Etapa 2:
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20 Se añadió TFA (20 ml) al sólido puro obtenido en la Etapa 1 (3,27 g, 17,24 mmol). A la solución en agitación se le añadió lentamente gota a gota una solución al 30% de H2O2 (5,55 ml, 48,9 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La reacción se calentó a reflujo a 100 ºC durante 3 horas y a la solución se le añadieron 0,5 equivalentes más de H2O2 (2,27 ml, 25 mmol). La reacción continuó en agitación a 100 ºC durante 2 horas. El matraz se dejó enfriar a temperatura ambiente antes de concentrar la solución al vacío hasta aproximadamente la mitad del volumen original.
25 Se añadió agua (40 ml) para interrumpir la reacción y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (5 x 30 ml). La fase orgánica se lavó una vez con salmuera (20 ml), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante una columna Biotage 40M (eluyendo con acetato de etilo al 10% -75% en hexanos), produciendo un líquido de color amarillo pálido (0,81 g, 23%). El material de partida puro también se recuperó para el futuro uso (1,895 g, 58%).
30 RMN 1H: δ 7,40-7,42 (t, 1H), 7,49-7,50 (m, 3H), 7,59-7,61 (d, J= 10 Hz, 1H), 7,77-7,82 (m, 3H); tr de CL/EM min (MH+): 1,12 (206,37) (procedimiento A).
Etapa 3:
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El producto purificado de la Etapa 2 (0,81 g, 3,94 mmol) se añadió a una solución de SOCl2 (25 ml) y se agitó a 60 ºC durante 2 horas. Después, la temperatura se aumentó hasta 80 ºC con el fin de forzar que la reacción se
5 completara, y se calentó durante 30 min más. La solución se concentró al vacío y se inactivó cuidadosamente con hielo. El pH se ajustó a un pH de 4-5 usando NaOH 10 N, manteniendo el matraz en un baño de hielo. La fase acuosa se extrajo con éter (4 x 25 ml) y la fase orgánica se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío. El sólido en bruto de color amarillo se purificó mediante una columna Biotage 40S (eluyendo con acetato de etilo al 2%-10% en hexanos). Se obtuvo un líquido viscoso de color ligeramente amarillo (538 mg, 61%).
10 RMN 1H: δ 7,52-7,55 (m, 3H), 7,73 (s, 1H), 8,10-8,1 1 (m, 2H), 8,17 (s, 1H); tr de CL/EM min (MN+): 2,62 (225,33) (procedimiento A).
Etapa 4:
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A una solución de Boc-L-hidroxiprolina (555 mg, 2,40 mmol) en DMSO (4 ml) se le añadió KOtBu (0,619 g, 5,52
15 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 45 min y se añadió en dos porciones 2,4-dicloro-6-fenilpiridina (purificadas en la Etapa 3) (538 mg, 2,40 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante dos horas y se usaron 1,3 equivalentes de HCl (1 N) para neutralizar la reacción. Se añadió solución tampón de pH 4,0 y el pH se ajustó a pH 4-5. Se usó acetato de etilo para extraer la fase acuosa (3 x 25 ml) y la fase orgánica se lavó con salmuera (20 ml) y se secó sobre MgSO4, produciendo el compuesto del título
20 en forma de un sólido de color blanco (rendimiento en bruto = 962 mg). El producto en bruto se recogió en la siguiente etapa.
tr de CL/EM min (MH+): 2,55 (419,27) (procedimiento A).
Etapa 5:
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25 Una solución del producto en bruto de la Etapa 4 (suponiendo 2,4 mmol) en THF (10 ml) y metanol (10 ml) se enfrió a 0 ºC. A la solución en agitación se le añadió lentamente TMSCN2 2 M en hexanos (~1,3 equiv.) en una atmósfera de nitrógeno hasta que dejó de emitirse gas de la solución. Después, la solución que había reaccionado completamente se concentró al vacío y la purificación mediante una columna Biotage 25S (eluyendo con acetato de etilo al 10% -50% en hexanos) proporcionó el compuesto del título puro en forma de una espuma de color blanco (503 mg, 48% en las etapas 4d -4e).
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 1,35-1,38 (rotámeros, 3:2, 9H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,50-2,58 (m, 1H), 3,67-3,70 (m, 5H), 4,264,34 (m, 1H), 5,35 (s a, 1H), 7,14-7,15 (m, 1H), 7,47-7,55 (m, 4H), 8,05-8,09 (m, 2H); CL/EM n-min (MH+): 2,69 (455,52) (procedimiento A).
Etapa 6:
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Una solución del producto puro de la Etapa 5 (503 mg, 1,16 mmol) en DCM (2,5 ml) y TFA (3,58 ml) se agitó a temperatura ambiente durante una hora. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se suspendió en HCl 1 N en éter dietílico (6 ml), se agitó suavemente y se concentró al vacío. Este procedimiento se repitió y el producto resultante se
10 puso en una bomba de aceite, produciendo un sólido de color blanco con rendimiento cuantitativo. El producto en bruto se llevó a la siguiente etapa.
Etapa 7:
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El producto de la Etapa 6 (suponiendo rendimiento cuantitativo, 1,83 mmol) se añadió a una solución de BOC-t-Butil
15 L-glicina (0,424 g, 1,83 mmol) en DCM (11 ml) en una atmósfera de nitrógeno. Esta etapa se siguió de la adición de HOBt (0,272 g, 2,02 mmol), DIPEA (2,23 ml, 12,82 mmol) y HBTU (1,04 g, 2,75 mmol). La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 15 horas. A la solución se le añadieron en orden 15 ml de DCM para aumentar el volumen y la reacción se interrumpió con solución tampón pH 4,00 (15 ml). La mezcla se acidificó a un pH de 4,5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 20 ml). La fase orgánica se lavó dos veces con
20 solución tampón pH 4,00 (20 ml), NaOH saturado (25 ml) y salmuera (20 ml) y se secó sobre MgSO4. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó mediante una columna Biotage 40S (eluyendo con acetato de etilo al 20% -50% en hexanos). Esta purificación proporcionó el compuesto del título puro en forma de un sólido de color blanco (454 mg, 53%).
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,96 (s, 9H), 1,19 (s, 9H), 2,17-2,29 (m, 1H), 2,48-2,58 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,81-3,89 (m,
25 1H), 4,05-4,08 (m, 1H), 4,21-4,26 (m, 1H), 4,44-4,50 (t, 1H), 5,45 (s a, 1H), 6,72-6,75 (d, J= 15 Hz, 1H), 7,09 (s, 1H), 7,46-7,51 (m, 4H), 8,02-8,06 (m, 2H); CL/EM n-min (MH+): 2,27 (493,5) (procedimiento A).
Etapa 8:
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Se disolvió LiOH (0,0233 g, 0,973 mmol) en agua (10 ml) por calentamiento y sonicación. La solución de LiOH se añadió a una solución del material puro de la Etapa 7 (483 mg, 0,885 mmol) en THF (10 ml) y la mezcla se volvió inmediatamente de color melocotón pálido. La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 1 hora y se acidificó con HCl 1 N (0,973 ml, 0,974 mmol). La reacción se interrumpió con solución tampón pH 4,00 y el pH se ajustó a un pH entre 4 y 5. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml), se lavó con salmuera (15 ml) y se secó sobre MgSO4. La solución filtrada se concentró al vacío y se dejó en una línea de vacío durante una noche. El producto en bruto (480 mg, rendimiento del >95%) se recogió en la siguiente etapa.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,94 (s, 9H), 1,20 (s, 9H), 1,32-1,34 (m, 1H), 2,12-2,4 (m, 1H), 2,51-2,55 (m, 1H), 3,81-3,83 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,21-4,23 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,32-4,35 (t, 1H), 5,4 (s a, 1H), 6,63-6,65 (d, NH), 7,09 (s, 1H), 7,477,49 (m, 4H), 8,03-8,06 (m, 2H), 12,56 (s, 1H).
Etapa 9:
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El dipéptido de la Etapa 8 (100 mg, 0,188 mmol) y ácido 2-tiofenoborónico (0,0481 g, 0,376 mmol) se disolvieron en DMF (2 ml). La solución se puso en una atmósfera de nitrógeno y se añadió KF acuoso 2 M (0,282 ml, 0,376 mmol). Se añadieron 5% en moles de tetraquis(trifenil)fosfina)-paladio (0) (0,011 mg, 0,0094 mmol) y la mezcla se calentó con microondas usando el Personal Chemistry Emrys Optimizer durante 30 minutos a 150 ºC. Precipitó negro de paladio de la reacción después de que se completara. La mezcla se acidificó con un equivalente de HCl 1 N y se filtró a través de una jeringa, usando MeOH para extraer el producto. El producto se purificó por HPLC prep. (columna -4 Xterra S5 5 um 30 x 75 mm, disolvente -85% de A/15% de B -10% de A/90% de B (donde el disolvente A es 10% de MeOH, 90% de H2O, 0,1% de TFA y el disolvente B es 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), tiempo de gradiente -15 min, tiempo de mantenimiento -1 min, caudal -40 ml/min, tiempo de retención del producto puro -16,23). Las fracciones que contenían el producto deseado se neutralizaron con NaOH 1 N y se pusieron en el speed vac durante aproximadamente 2 horas. Las fracciones se combinaron y se añadió tampón pH 4,0 (15 ml). El pH se ajustó a pH 4-5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío. El producto se puso en una bomba de aceite para secar durante una noche y se obtuvo un aceite de color amarillo pálido (44 mg, 40%). CL/EM n-min (MH+): 2,7 (580,54) (procedimiento A).
Etapa 10:
El producto del Ejemplo 413, Etapa 9 (43 mg, 0,0742 mmol) se disolvió en DCM (2 ml) y se añadió sal clorhidrato de (1(R)-amino-2(S)-vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (Ejemplo 1, Etapa 8) (0,0198 g, 0,0742 mmol). Se añadieron DIPEA (0,0646 ml, 0,371 mmol) y después HATU (0,039 g, 0,0104 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 4,5 horas. A la solución se le añadieron en orden 10 ml de DCM para aumentar el volumen y la reacción se interrumpió con solución tampón pH 4,00 (10 ml). La mezcla se acidificó a un pH de 4-5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 15 ml). La fase orgánica se lavó dos veces con solución tampón pH 4,00 (10 ml) y salmuera (10 ml) y después se secó
sobre MgSO4. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó mediante una columna Biotage 12S (eluyendo con acetona al 10% -50% en hexanos). El compuesto se aisló y se purificó de nuevo por HPLC prep. (columna -YMC ODS-A 20 x 50 mm s5, disolvente -60% de A/40% de B -10% de A/90% de B (donde el disolvente A es 10% de MeOH, 90% de H2O, 0,1% de TFA y el disolvente B es 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), 5 tiempo de gradiente -8 min, tiempo de mantenimiento -2 min, caudal -25 ml/min, tiempo de retención del producto puro -8,702). Esta purificación proporcionó el Compuesto puro 413 en forma de un aceite de color naranja pálido (22,3 mg, 38%). RMN 1H: δ 1,02-1,29 (m, 24H), 1,42-1,45 (m, 1H), 1,87-1,89 (m, 1H), 2,24-2,30 (m, 2H), 2,53-2,57 (m, 1H), 2,92-2,97 (m, 1H), 4,06-4,08 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,31-4,33 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,45-4,49 (t, 1H), 5,12-5,14 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,29-5,32 (d, J= 15 Hz, 1H), 5,46 (s a, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 7,13-7,15 (m, 1H), 7,29
10 7,30 (d, J= 5 Hz, 2H), 7,42-7,53 (m, 4H), 7,75-7,56 (d, J= 5 Hz, 1H), 8,07-8,09 (d, J= 10 Hz, 2H).
tr de CL/EM min (MH+): 2,79 (792,72) (procedimiento A).
Ejemplo 414: Preparación del Compuesto 414.
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Etapa 1:
15
El material puro del Ejemplo 413, Etapa 8 (100 mg, 0,188 mmol) y ácido 4-metoxifenilborónico (0,0429 g, 0,282 mmol) se disolvieron en DMF (2,5 ml). La solución se puso en una atmósfera de nitrógeno y se añadió Na2CO3 acuoso 2 M (0,188 ml, 0,376 mmol). Se añadieron 5% en moles de tetraquis(trifenil)fosfina)-paladio (0) (0,011 mg, 0,0094 mmol) y la mezcla se calentó con microondas usando el Personal Chemistry Emrys Optimizer durante 30 20 minutos a 150 ºC. Precipitó negro de paladio de la reacción después de que se completara. La mezcla se acidificó con un equivalente de HCl 1 N y se filtró a través de una jeringa, usando MeOH para extraer el producto. El producto se purificó por HPLC prep. (columna -Xterra EM C18 5 um 30 x 50 mm, disolvente -90% de A/10% de B -10% de A/90% de B (donde el disolvente A es 10% de MeOH, 90% de H2O, 0,1% de TFA y el disolvente B es 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), tiempo de gradiente -15 min, tiempo de mantenimiento -1 min, caudal -45 25 ml/min, tiempo de retención del producto puro -13,72). Las fracciones que contenían el producto deseado se neutralizaron con NaOH 1 N y se pusieron en el speed vac durante aproximadamente 2 horas. Las fracciones se combinaron y se añadió tampón pH 4,0 (15 ml). El pH se ajustó a pH 4-5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío. El producto se puso en una bomba de aceite para secar durante una noche y se obtuvo un aceite viscoso
30 (44 mg, 50%).
tr de CL/EM min (MH+): 2,23 (604,61) (procedimiento A).
5
10
15
20
25
30
Etapa 2:
El producto del Ejemplo 414, Etapa 1 (43 mg, 0,0712 mmol) se disolvió en DCM (2 ml) y se añadió sal clorhidrato de (1(R)-amino-2(S)-vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (Ejemplo 1, Etapa 8) (0,01899 g, 0,0712 mmol). Se añadieron DIPEA (0,062 ml, 0,356 mmol) y después HATU ( 0,038 g, 0,0997 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 4,5 horas. A la solución se le añadieron en orden 10 ml de DCM para aumentar el volumen y la reacción se interrumpió con solución tampón pH 4,00 (10 ml). La mezcla se acidificó a un pH de 4-5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 15 ml). La fase orgánica se lavó dos veces con solución tampón pH 4,00 (10 ml) y salmuera (10 ml) y después se secó sobre MgSO4. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó mediante una columna Biotage 12S (eluyendo con acetona al 20% -50% en hexanos). El compuesto se aisló y se purificó de nuevo por HPLC prep. (columna -YMC ODS-A 20 x 50 mm s5, disolvente -60% de A/40% de B -10% de A/90% de B (donde el disolvente A es 10% de MeOH, 90% de H2O, 0,1% de TFA y el disolvente B es 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), tiempo de gradiente -10 min, tiempo de mantenimiento -2 min, caudal -25 ml/min, tiempo de retención del producto puro -7,43-8,24). Esta purificación proporcionó el Compuesto puro 414 en forma de un aceite de color naranja pálido (19,4 mg, 34%). RMN 1H: δ 1,02-1,23 (m, 24H), 1,29-1,44 (m, 1H), 1,89-1,95 (m, 1H), 2,24-2,30 (c, 1H), 2,32-2,40 (m, 1H), 2,59-2,62 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 4,10-4,12 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,21 (s, 1H), 4,42-4,56 (m, 2H), 5,12-5,14 (d, J = 10 Hz, 1H), 5,28-5,31 (d, J= 15 Hz, 1H), 5,61 (s a, 1H), 5,72-5,80 (m, 1H), 7,14-7,16 (d, J= 10 Hz, 2H), 7,52-7,54 (d, J= 10 Hz, 2H), 7,61-7,62 (m, 2H), 7,95-7,98 (m, 4H); tr de CL/EM min (MH+): 2,35 (816,76) (procedimiento A).
Ejemplo 415: Preparación del Compuesto 415.
Etapa 1:
imagen2
El dipéptido del Ejemplo 413, Etapa 8 (174 mg, 0,327 mmol) y ácido fenilborónico (0,06 g, 0,491 mmol) se disolvieron en DMF (4 ml). La solución se puso en una atmósfera de nitrógeno y se añadió NaCO3 acuoso 2 M (0,33 ml, 0,654 mmol). Se añadieron 5% en moles de tetraquis(trifenil)fosfina)-paladio (0) (0,019 mg, 0,0164 mmol) y la mezcla se calentó con microondas usando el Personal Chemistry Emrys Optimizer durante 30 minutos a 150 ºC. Precipitó negro de paladio de la reacción después de que se completara. La mezcla se acidificó con un equivalente de HCl 1 N y se filtró a través de una jeringa, usando MeOH para extraer el producto. El producto se purificó por HPLC prep. (columna -5 Xterra c-18 5 um 30 x 100 mm, disolvente -80% de A/20% de B -0% de A/B al 100% (donde el disolvente A es 10% de MeOH, 90% de H2O, 0,1% de TFA y el disolvente B es 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), tiempo de gradiente -20 min, tiempo de mantenimiento -1 min, caudal -40 ml/min, tiempo de retención del producto puro -11,28-11,72). Las fracciones que contenían el producto deseado se neutralizaron con NaOH 1 N y se pusieron en el speed vac durante aproximadamente 2 horas. Las fracciones se combinaron y se añadió tampón pH 4,0 (15 ml). El pH se ajustó a pH 4-5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (4 x 15 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera (15 ml), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío. El producto se puso en una bomba de aceite para secar durante una noche. (31,5 mg, 17%).
tr de CL/EM min (MH+): 2,54 (574,37) (procedimiento A).
Etapa 2:
El producto del Ejemplo 415, Etapa 1 (31,5 mg, 0,055 mmol) se disolvió en DCM (3 ml) y se añadió sal clorhidrato de (1(R)-amino-2(S)-vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico (Ejemplo 1, Etapa 8) (0,0147 g, 0,055 mmol). Se añadieron DIPEA (0,048 ml, 0,275 mmol) y después HATU ( 0,029 g, 0,077 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 3,5 horas y se añadieron 0,3 equivalentes más de sal clorhidrato de (1(R)-amino-2(S)-vinil-ciclopropanocarbonil)-amida del ácido ciclopropanosulfónico. La reacción se dejó en agitación durante 8 horas más. A la solución se le añadieron en orden 10 ml de DCM para aumentar el volumen y la reacción se interrumpió con solución tampón pH 4,00 (10 ml). La mezcla se acidificó a un pH de 4-5 usando HCl 1 N y la fase acuosa se extrajo con DCM (4 x 10 ml). La fase orgánica se lavó dos veces con solución tampón pH 4,00 (10 ml) y salmuera (10 ml) y después se secó sobre MgSO4. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó por HPLC prep. (columna -YMC ODS-A 30 x 50 mm, disolvente -80% de A/20% de B -10% de A/90% de B (donde el disolvente A es 10% de MeOH, 90% de H2O, 0,1% de TFA y el disolvente B es 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), tiempo de gradiente -20 min, tiempo de mantenimiento -3 min, caudal -30 ml/min, tiempo de retención del producto puro -19,6). Esta purificación no proporcionó un compuesto puro, así que se purificó de nuevo mediante una columna Biotage 12 S (eluyendo con acetona al 10%-50% en hexanos). Esta purificación proporcionó el compuesto del título puro en forma de un aceite de color naranja pálido (22,3 mg, 38%).
RMN 1H: δ 1,02-1,45 (m, 24H), 1,85-1,86 (m, 1H), 2,03-2,11 (m, 2H), 2,42-2,46 (m, 1H), 2,77-2,85 (m, 1H), 4,10-4,12 (m, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,31-4,33 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,49-4,54 (m, 1H), 5,03-5,05 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,20-5,24 (d, J= 20 Hz, 1H), 5,44 (s a, 1H), 5,82-5,94 (m, 1H), 7,33 (s, 2H), 7,43-7,50 (m, 6 H), 8,09-8,10 (d, J= 5 Hz, 4 H);
tr de CL/EM min (MH+): 2,37 (786,37) (procedimiento A).
Sección J:
En la sección J el procedimiento de CL/EM utilizado fue el siguiente:
Columnas:
Procedimiento A: YMC ODS-A C18 S7 (4,6 x 33 mm) Procedimiento B: YMC Xterra ODS S7 (3,0 x 50 mm) Procedimiento C: Xterra ms C18 (4,6 x 33 mm) Procedimiento D: YMC ODS-A C18 S3 (4,6 x 33 mm) Gradiente: 100% de disolvente A/0% de disolvente B a 0% de disolvente A/100% de disolvente B Tiempo de gradiente: 3 min. Tiempo de Mantenimiento: 1 min. Caudal: 5 ml/min. Longitud de onda del Detector: 220 nm. Disolventes: Disolvente A: 10% de MeOH/90% de agua/0,1% de TFA. Disolvente B: 90% de MeOH/10% de agua/0,1% de TFA.
Ejemplo 420: Preparación del Compuesto 420
imagen2
Etapa 1:
A una solución de PPh3 (16,8 g, 63,9 mmol) en THF (150 ml) se le añadió gota a gota DEAD (10,1 ml, 63,9 mmol) y la solución se agitó durante 30 min a temperatura ambiente. Se añadió lentamente una solución de Boc-cis-(L)-Hyp5 OMe (10,5 g, 42,6 mmol) en THF (50 ml), seguido en porciones de 5-bromo-piridin-3-ol (preparado de acuerdo con
F.E. Ziegler y col., J. Am. Chem. Soc., (1973), 95, 7458) (8,90 g, 51,1 mmol). La solución resultante se agitó a 45 ºC durante 18 h. La solución se concentró al vacío y el residuo se repartió entre éter dietílico (200 ml) y NaOH 1 N (50 ml). La fase orgánica se secó (MgSO4) y después la solución etérea se concentró por filtración a la mitad de su volumen. Se formó un precipitado que se retiró por filtración. El filtrado se concentró al vacío y se purificó mediante
10 una columna Biotage 65 M (eluyendo con hexanos -EtOAc 2:1, 3:2, 1:1), proporcionando el compuesto del título (11,9 g, 69%) en forma de un aceite de color rojo. RMN 1H: (CDCl3) δ 1,42, 1,45 (s, 9H (rotámeros)), 2,25-2,30 (m, 1H), 2,49-2,58 (m, 1H), 3,75, 3,81 (s, 3H (rotámeros)), 3,66-3,81 (m, 2H (oculto)), 4,42, 4,50 (t, J= 8 Hz, 1H (rotámeros)), 4,92 (m, 1H), 7,36 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,32 (s, 1H). CL/EM n-min (MH+): 2,26 (401, 403) (procedimiento B).
15 Etapa 2:
El producto de la Etapa 1 (2,34 g, 5,83 mmol) se disolvió en DCM (20 ml) y TFA (18 ml, 0,23 mol) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Los volátiles se retiraron al vacío y el residuo se repartió entre EtOAc y agua. La fase orgánica se extrajo con HCl 1 N (25 ml) y los extractos acuosos combinados se neutralizaron con NaHCO3 sat. (40 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (dos veces) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con 20 salmuera y se secaron (MgSO4), dando el compuesto del título (1,02 g, 58%, base libre) en forma de un aceite
incoloro. RMN 1H: (DMSO-d6) δ 2,12-2,20 (m, 2H), 2,94 (d, J= 12 Hz, 1H), 3,19 (dd, J= 4,5, 12 Hz, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,90 (t, J= 8 Hz, 1H), 5,07 (m, 1H), 7,69 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,29 (s, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 0,78 (301, 302) (procedimiento B).
Etapa 3:
A una suspensión del producto de la Etapa 2 (1,02 g, 3,39 mmol), N-BOC-L-terc-leucina (862 mg, 3,73 mmol) y HOBt (458 mg, 3,39 mmol) en DCM (15 ml) se le añadió DIPEA (2,36 ml, 13,6 mmol) seguido de HBTU (1,61 g, 4,24 mmol). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 h y se inactivó con DCM y se añadió tampón pH 4 y algo de HCl 1 N para ajustar el pH a 4-5. La fase orgánica se lavó con tampón pH 4, NaHCO3 sat. (dos veces) y salmuera y se secó (MgSO4). La purificación usando una columna Biotage 40 M (eluyendo con hexano -EtOAc 3:2, 1:1) proporcionó el compuesto del título (1,48 g, 85%) en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,94 (s, 9H), 1,17 (s, 9H), 2,16-2,21 (m, 1H), 2,50 (m, (oculto), 1H), 3,64 (s, 3H), 3,82 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,06 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,16 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,45 (dd, J= 8, 9,5 Hz, 1H), 5,26 (m, 1H), 6,7 (d, J= 9 Hz, NH), 7,75 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,32 (s, 1H).
tr de CL/EM -min (MH+): 2,35 (514, 516) (procedimiento B).
Etapa 4:
A una mezcla del producto de la Etapa 3 (98 mg, 0,19 mmol), Pd(PPh4)4 (6,6 mg, 0,00573 mmol) y Na2CO3 acuoso 2 M (0,191 ml, 0,381 mmol) en tolueno (2 ml) se le añadió una solución de ácido fenilborónico (29 mg, 0,24 mmol) en metanol (0,1 ml). La solución se calentó a 85 ºC durante 6 h en una atmósfera de nitrógeno. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se inactivó con tampón pH 4 y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y se secó (Na2SO4). La purificación usando una columna Biotage 12M (eluyendo con hexano-EtOAc 2:3) proporcionó el compuesto del título (72 mg, 74%) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,05 (s, 9H), 1,31 (s, 9H), 2,29-2,35 (m, 1H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 4,00 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,24 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,41 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,67 (dd, J= 7,5, 10 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 6,51 (d, J= 9,5 Hz, NH), 7,79-7,85 (m, 3H), 8,39 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,67-8,68 (m, 2H).
tr de CL/EM min (MH+): 2,16 (512) (procedimiento B).
Etapa 5:
A una solución del producto de la Etapa 4 (150 mg, 0,293 mmol) en THF (2 ml) y metanol (2 ml) se le añadió LiOH (14 mg, 0,59 mmol) en agua (2 ml). La mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente y se inactivó con HCl 1 N hasta pH neutro. Los volátiles orgánicos se retiraron al vacío y al residuo se le añadió tampón pH 4. El producto se extrajo en EtOAc (3 x 10 ml), se lavó con salmuera/tampón pH 4 y se secó (MgSO4), produciendo el compuesto del título con rendimiento cuantitativo en forma de un sólido de color blanco después de la trituración en pentano.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,05 (s, 9H), 1,32 (s, 9H), 2,32-2,38 (m, 1H), 2,69-2,74 (m, 1H), 3,99 (dd, J= 3, 12 Hz, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,40 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,64 (dd, J= 7,5, 9,5 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 7,85-7,87 (m, 3H), 8,40 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,69-8,70 (m, 2H).
tr de CL/EM -min (MH+): 2,03 (499) (procedimiento B).
Etapa 6:
A una suspensión del producto de la Etapa 5 (93 mg, 0,19 mmol) y el producto del Ejemplo 1, Etapa 8 (50 mg, 0,19 mmol) en DCM (2 ml) se le añadió DIPEA (0,163 ml, 0,935 mmol), seguido de HATU (92 mg, 0,243 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 h y se inactivó con DCM y tampón pH 4 y algo de HCl 1 N para ajustar el pH a 4-5. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (10 ml) y se secó (Na2SO4). La purificación usando una columna Biotage 12 M (eluyendo con un gradiente de hexano -acetona al 2060%) proporcionó el compuesto del título (65 mg, 49%) en forma de un polvo de color blanco.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,95 (s, 9H), 1,03-1,05 (m, 2H), 1,08-1,10 (m, 2H), 1,26 (s, 9H), 1,36-1,39 (m, 1H), 1,69-1,72 (m, 1H), 2,09-2,21 (m, 2H), 2,41-2,45 (m, 1H), 2,92-2,94 (m, 1H), 3,91 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,08 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 4,16 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,36 (t, J= 8,5 Hz, 1H), 5,10 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,23 (d, J= 17,5 Hz, 1H), 5,38 (m, 1H), 5,59-5,67 (m, 1H), 6,54 (s. NH), 7,41-7,46 (m, 1H), 7,50-7,53 (m, 2H), 7,65 (s, 1H), 7,74-7,75 (m, 2H), 8,28 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,92 (s, NH).
tr de CL/EM min (MH+): 2,08 (710) (procedimiento B).
Ejemplo 421: Preparación del Compuesto 421.
imagen2
Etapa 1:
A una solución enfriada (-5 ºC) de HBr acuoso al 48% (35 ml) se le añadió 4-cloro-piridin-2-ilamina (4,18 g, 32,5
5 mmol; preparada de acuerdo con K.S. Gudmundsson y col.; Synth. Commun. (1997), 27, 861), seguido de la lenta adición de bromo (6,7 ml, 0,13 mol). Después de 20 min, se añadió nitrito sódico (8,63 g, 0,125 mol) en agua (40 ml) a la misma temperatura y la agitación se continuó durante 30 min. La reacción se interrumpió con refrigeración con hielo con NaOH 10 N (aprox. 40 ml) a pH alcalino. El producto se extrajo en EtOAc (2 x 100 ml) y se secó (Na2SO4). El material en bruto se purificó usando una columna Biotage 40 M (eluyendo con EtOAc al 10% en hexanos),
10 proporcionando el compuesto del título (2,50 g, 40%) en forma de un aceite incoloro que solidificó después de un periodo de reposo.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 7,64 (dd, J= 1,5, 5,5 Hz, 1H), 7,94 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 8,40 (d, J= 5,5 Hz, 1H);
tr de CL/EM min (MH+): 1,65 (192, 194, 196) (procedimiento B).
Etapa 2: A una solución de N-BOC-trans-L-Hyp-OH (3,22 g, 13,9 mmol) en DMSO (30 ml) se le añadió en porciones tercbutóxido potásico (3,90 g, 34,8 mmol) a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno. Después de 1,5 h, se añadió el producto de la Etapa 1 en DMSO (5 ml). La mezcla se agitó durante una noche y se inactivó con agua (150 ml). La solución se lavó con EtOAc (100 ml). La fase acuosa se acidificó a pH 4 con HCl 1 N. El ácido carboxílico en bruto se extrajo en EtOAc (tres veces) y se secó (MgSO4). El residuo, en forma de un sólido de color pardo, se suspendió en THF (20 ml) y MeOH (20 ml) y se enfrió a 0 ºC. Se añadió gota a gota una solución de trimetilsilildiazometano (2 M en hexano, 12 ml) y la solución se concentró al vacío después de 15 min. La purificación usando una columna Biotage 40 M (eluyendo con hexanos -EtOAc, 2:1, 1:1), dando el compuesto del título (3,47 g, 62%) en forma de un polvo blanquecino.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 1,34, 1,38 (s, 9H (rotámeros)), 2,24-2,29 (m, 1H), 2,43-2,50 (m, 1H), 3,57 (d, J= 12,5 Hz, 1H), 3,64-3,68 (m, 1H), 3,66, 3,69 (s, 3H (rotámeros)), 4,27-4,34 (m, 1H), 5,21 (m, 1H), 7,06 (d, J= 6 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 8,20 (d, J= 6 Hz, 1H);
tr de CL/EM min (MH+): 2,59 (401, 403) (procedimiento B).
Etapa 3:
El producto de la Etapa 2 (2,00 g, 4,98 mmol) se suspendió en HCl 4 N en dioxano (10 ml) y HCl 1 N en éter dietílico (40 ml) y se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La suspensión resultante se concentró al vacío y el residuo se trituró en pentano, dando el compuesto del título con rendimiento cuantitativo en forma de un polvo de color blanco.
tr de CL/EM min (MH+): 0,24 (301, 303) (procedimiento B).
Etapa 4:
A una suspensión del producto de la Etapa 3 (suponiendo 4,98 mmol), N-ciclopentiloxicarbonil-L-terc-leucina (1,24 g, 5,10 mmol) y HOBt (673 mg, 4,98 mmol) en DCM (25 ml) se le añadió DIPEA (4,34 ml, 24,9 mmol) seguido de HBTU (2,36 g, 6,23 mmol). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 h y se inactivó con DCM y tampón pH 4 y 10 ml de HCl 1 N para ajustar el pH a 4. La fase acuosa se extrajo con DCM (dos veces). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaHCO3 sat. (dos veces) y salmuera y se secó (MgSO4). La purificación usando una columna Biotage 40 M (eluyendo con hexano -EtOAc 3:2, 1:1) proporcionó el compuesto del título (2,09 g, 80%) en forma de una espuma de color blanco. RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,94 (s, 9H), 1,43-1,74 (m, 8H), 2,18-2,23 (m, 1H), 2,46-2,49 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,87 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,08-4,13 (m, 1H), 4,42 (dd, J= 7,5, 9,5 Hz, 1H), 4,78 (m, 1H), 5,30 (m, 1H), 7,03-7,05 (m, 1H), 7,24 (s, 1H), 8,120 (d, J= 6 Hz, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 2,34 (526, 528) (procedimiento C).
Etapa 5:
A una solución del producto de la Etapa 4 (206 mg, 0,391 mmol) en THF (2 ml) y metanol (2 ml) se le añadió LiOH (28 mg, 1,2 mmol) en agua (2 ml). La mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente y se inactivó con HCl 1 N hasta pH neutro. Los volátiles orgánicos se retiraron al vacío y al residuo se le añadió tampón pH 4. El producto se extrajo en EtOAc (2 x 20 ml) y se secó (MgSO4), produciendo el compuesto del título (196 mg, 100%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,05 (s, 9H), 1,60-1,85 (m, 8H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,62-2,67 (m, 1H), 3,97 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,26 (s, 1H), 4,32 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,58 (dd, J= 7,5, 9,5 Hz, 1H), 4,89 (m (oculto), 1H), 5,29 (m, 1H), 7,03-7,05 (m, 1H), 7,26 (s, 1H), 8,19 (d, J= 6 Hz, 1H); tr de CL/EM min (MH+): 2,17 (512, 514) (procedimiento B).
Etapa 6:
Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 4 (tiempo de reacción 20 h) con un rendimiento del 20% partiendo del producto del Ejemplo 421, Etapa 5.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,45-1,74 (m, 8H), 2,31-2,37 (m, 1H), 2,65-2,69 (m, 1H), 3,99 (dd, J= 12, 3,0 Hz, 1H), 4,26 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,33 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,60 (dd, J= 8,0, 9,5 Hz, 1H), 4,80 (m, 1H), 5,35 (m, 1H), 6,721 (d, J= 9,0 Hz, NH), 7,02 (dd, J= 2,5, 6,0 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,50 (m, 3H (oculto)), 7,91 (d, J= 6,5 Hz, 1H), 8,46 (d, J= 6,0 Hz, 1H).
CL/EM n-min (MH+): 2,03 (510) (procedimiento A).
Etapa 7:
El Compuesto 421 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 68%, partiendo del producto del Ejemplo 421, Etapa 6.
RMN 1H: (metanol-d4) δ J.03 (s, 9H), 1,06-1,09 (m, 2H), 1,23-1,26 (m, 2H), 1,43 (dd, J= 5,5, 9,5 Hz, 1H), 1,47-1,77 (m, 8H), 1,88 (dd, J= 5,5, 8,5 Hz, 1H), 2,21-2,29 (m, 2H), 2,50-2,54 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 4,06 (dd, J= 3,0, 11,5 Hz, 1H), 4,28-4,30 (m, 2H), 4,44 (dd, J= 7,0, 10,5 Hz, 1H), 4,82 (m, 1H (oculto)), 5,12 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,30 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 6,92 (d, J= 9,5 Hz, NH), 6,98 (dd, J= 5,5, 2,0 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,43-7,50 (m, 3H), 7,90 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 8,45 (d, J= 5,5 Hz, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 2,37 (723) (procedimiento A).
Ejemplo 422: Preparación del Compuesto 422.
Etapa 1:
imagen2
A una mezcla del producto del Ejemplo 420, Etapa 3 (102 mg, 0,198 mmol) y Pd(PPh3)4 (23 mg, 0,0198 mmol) en
10 tolueno (2 ml) se le añadió 4-tributilestannanil-piridina (87 mg, 0,24 mmol). La solución se calentó a 105 ºC durante 20 h en una atmósfera de nitrógeno. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se inactivó con NaHCO3 sat. y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y se secó (Na2SO4). La purificación usando una columna Biotage 12 M (eluyendo con un gradiente de hexano-acetona al 20-60%) proporcionó el compuesto del título (49 mg, 49%) en forma de un sólido de color blanco.
15 RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,05 (s, 9H), 1,31 (s, 9H), 2,29-2,35 (m, 1H), 2,68-2,72 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 4,00 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,24 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,41 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,67 (dd, J= 7,5, 10 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 6,51 (d, J= 9,5 Hz, NH), 7,79-7,85 (m, 3H), 8,39 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,67-8,68 (m, 2H).
tr de CL/EM min (MH+): 1,77 (514) (procedimiento C).
Etapa 2: Este producto se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 420, Etapa 5 con rendimiento cuantitativo, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 422, Etapa 1. RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,05 (s, 9H), 1,32 (s, 9H), 2,32-2,38 (m, 1H), 2,69-2,74 (m, 1H), 3,99 (dd, J= 3, 12 Hz, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,40 (d, J= 12 Hz,
imagen2
5 1H), 4,64 (dd, J= 7,5, 9,5 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 7,85-7,87 (m, 3H), 8,40 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,69-8,70 (m, 2H).
tr de CL/EM min (MH+): 1,57 (500) (procedimiento B).
Etapa 3:
El Compuesto 422 se preparó por el mismo procedimiento que se ha descrito en el Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 51% en forma de un sólido de color blanco, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo
10 422, Etapa 2.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,95 (s, 9H), 1,03 (m, 1H), 1,08 (m, 1H), 1,23 (s, 9H), 1,34-1,37 (m, 1H), 1,68-1,70 (m, 1H), 2,12-2,18 (m, 2H), 2,41-2,45 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 3,90 (d, J= 11 Hz, 1H), 4,06 (d, J= 9 Hz, 1H), 4,17 (d, J= 11 Hz, 1H), 4,36 (dd, J= 7, 10 Hz, 1H), 5,10 (d, J= 12 Hz, 1H), 5,23 (d, J= 16,5 Hz, 1H), 5,40 (m, 1H), 5,59-5,66 (m, 1H), 6,60 (d, J= 9 Hz, NH), 7,81-7,82 (m, 3H), 8,38 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,68-8,70 (m, 2H), 8,93 (s, NH), 10,4 (s, NH).
15 tr de CL/EM min (MH+): 2,14 (711) (procedimiento D).
Ejemplo 423: Preparación del Compuesto 423.
imagen2
Etapa 1:
imagen2
A una solución del producto del Ejemplo 420, Etapa 3 (1,00 g, 1,94 mmol) en THF (5 ml) y metanol (5 ml) se le añadió LiOH (140 mg, 5,83 mmol) en agua (5 ml). La mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente y se inactivó con HCl 1 N hasta pH neutro. Los volátiles orgánicos se retiraron al vacío, se añadió tampón pH 4 y el
5 producto se extrajo en EtOAc (3 x 25 ml) y se secó (MgSO4), produciendo el compuesto del título (1,0 g, 100%) en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,95 (s, 9H), 1,27 (s, 9H), 2,14-2,19 (m, 1H), 2,47-2,50 (m, 1H), 3,80 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 3,99-4,07 (m, 2H), 4,15 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,36 (dd, J= 8, 10 Hz, 1H), 5,25 (m, 1H), 6,66 (d, J= 9 Hz, NH), 7,75 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 12,5 (s, 1H).
10 tr de CL/EM -min (MH+): 2,47 (500, 502) (procedimiento A).
Etapa 2:
El Compuesto 423 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 52%, partiendo de los productos del Ejemplo 423, Etapa 1 y Ejemplo 8, Etapa 3 (P1 racémico, (1R,2S) y (1S,2R)).
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,93, 0,95 (s, 9H), 1,00-1,09 (m, 4H), 1,28, 1,29 (s, 9H), 1,37-1,39 (m, 1H), 1,69-1,72 (m, 1H),
15 2,09-2,22 (m, 2H), 2,36-2,46 (m, 1H), 2,88-2,94 (m, 1H), 3,82-3,87 (m, 1H), 4,02-4,04 (m, 1H), 4,10-4,15 (m, 1H), 4,31-4,34 (m, 1H), 5,10 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 5,22-5,28 (m, 1H), 5,54-5,66 (m, 1H), 6,56, 6,60 (d, J= 9,5 Hz, NH), 7,74, 7,76 (s, 1H), 8,28-8,29 (m, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,79, 8,89 (s, 1H).
tr de CL/EM -min (MH+): 2,42 (712, 714) (procedimiento B).
Ejemplo 424: Preparación del Compuesto 424.
imagen2
Etapa 1:
imagen2
A una solución del producto del Ejemplo 423, Etapa 1 (91 mg, 0,18 mmol), Pd(PPh3)4 (10,5 mg, 0,0091 mmol) y ácido 3-furilborónico (25,4 mg, 0,227 mmol) en DMF (2 ml) se le añadió Na2CO3 acuoso 2 M (0,273 ml, 0,546 mmol). La mezcla se calentó a 110 ºC durante 2,5 h en una atmósfera de nitrógeno. Después de enfriar a temperatura
5 ambiente, el sólido se retiró por filtración y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó por HPLC preparativa (gradiente B al 30-80%), proporcionando el compuesto del título (64 mg, 72%) en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,95 (s, 9H), 1,25 (s, 9H), 2,17-2,21 (m, 1H), 2,50 (m (oculto), 1H), 3,84-3,86 (m, 1H), 4,094,15 (m, 2H), 4,37 (t, J= 9 Hz, 1H), 5,28 (m, 1H), 6,67 (d, J= 9 Hz, NH), 7,08 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 8,17
10 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 12,6 (s, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 1,60 (488) (procedimiento B).
Etapa 2:
El Compuesto 424 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 55%, partiendo del producto del Ejemplo 424, Etapa 1.
15 RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,02 (s, 9H), 1,05-1,09 (m, 2H), 1,22-1,25 (m, 2H), 1,34 (s, 9H), 1,42-1,45 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 2,48-2,52 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 4,02 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,24-4,29 (m, 2H), 4,434,47 (dd, J= 7,5, 10,5 Hz, 1H), 5,12 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 5,28-5,32 (m, 1H), 5,73-5,81 (m, 1H), 6,63 (d, J= 9 Hz, NH), 6,90 (s, 1H), 7,60-7,62 (m, 2H), 8,07 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 8,39 (s, NH).
tr de CL/EM -min (MH+): 2,30 (700) (procedimiento E).
20 Ejemplo 425: Preparación del Compuesto 425.
imagen2
El Compuesto 425 se preparó de acuerdo con Ejemplo 421, Etapa 7 con un rendimiento del 45%, partiendo del producto del Ejemplo 421, Etapa 5.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,95 (s, 9H), 1,03-1,04 (m, 1H), 1,08-1,09 (m, 1H), 1,33-1,36 (m, 1H), 1,46-1,75 (m, 9H), 2,08
25 2,12 (m, 1H), 2,17 (c, J= 9 Hz, 1H), 2,35-2,38 (m, 1H), 2,88-2,93 (m, 1H), 3,91 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,05-4,10 (m, 2H), 4,27 (dd, J= 10, 7 Hz, 1H), 4,80 (m, 1H), 5,10 (d, J= 12 Hz, 1H), 5,23 (d, J= 16,5 Hz, 1H), 5,32 (m, 1H), 5,58-5,66 (m, 1H), 6,94 (d, J= 9 Hz, NH), 7,03-7,05 (m, 1H), 7,26 (s, 1H), 8,21 (d, J= 6 Hz, 1H), 8,86 (s, NH), 10,4 (s, NH).
tr de CL/EM -min (MH+): 2,56 (724, 726) (procedimiento D).
Ejemplo 426: Preparación del Compuesto 426.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 421, Etapa 6 con un rendimiento del 65%, con la excepción de 5 que se usó ácido 3-furanoborónico.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,49-1,76 (m, 8H), 2,30-2,35 (m, 1H), 2,63-2,67 (m, 1H), 3,98 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,26 (t, J= 9 Hz, 1H), 4,31 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,58 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 5,32 (m, 1H), 6,71 (d, J= 9,5 Hz, NH), 6,92 (dd, J= 2,5, 6,0 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 7,25 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,35 (d, J= 5,5 Hz, 1H).
10 tr de CL/EM min (MH+): 1,94 (500) (procedimiento D).
Etapa 2:
El Compuesto 426 se preparó de acuerdo con Ejemplo 421, Etapa 7 con un rendimiento del 57%, partiendo del producto del Ejemplo 426, Etapa 1.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,95 (s, 9H), 1,03-1,04 (m, 2H), 1,08-1,09 (m, 2H), 1,34-1,71 (m, 8H), 2,09-2,20 (m, 2H), 2,37
15 2,41 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 3,96 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,07-4,11 (m, 2H), 4,29 (m, 1H), 4,78 (m, 1H), 5,10 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 5,23 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,34 (m, 1H), 5,59-5,66 (m, 2H), 6,87-6,91 (m, 2H), 7,08 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,39 (d, J= 6 Hz, 1H), 8,90 (s, NH), 10,4 (s, 1H).
tr de CL/EM -min (MH+): 2,38 (712) (procedimiento D).
Ejemplo 427: Preparación del Compuesto 427.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 421, Etapa 6 con un rendimiento del 86%, con la excepción de 5 que se usó ácido 4-fluorofenilborónico.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,44-1,75 (m, 8H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,64-2,69 (m, 1H), 3,99 (dd, J= 12, 3,5 Hz, 1H), 4,26 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,32 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,59 (dd, J= 8,0, 9,5 Hz, 1H), 4,81 (m, 1H), 5,34 (m, 1H), 6,73 (d, J= 9,5 Hz, NH), 6,99 (dd, J= 2,5, 6,0 Hz, 1H), 7,20 (t, 2H (oculto)), 7,36 (s, 1H (oculto)), 7,94-7,97 (m, 2H), 8,44 (d, J= 6,0 Hz, 1H).
10 tr de CL/EM -min (MH+): 2,22 (528) (procedimiento A).
Etapa 2:
El Compuesto 427 se preparó de acuerdo con Ejemplo 421, Etapa 7 con un rendimiento del 53%, partiendo del producto del Ejemplo 427, Etapa 1.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,06-1,09 (m, 2H), 1,23-1,26 (m, 2H), 1,43 (dd, J= 5,0, 9,5 Hz, 1H), 1,47-1,78
15 (m, 8H), 1,88 (dd, J= 5,5, 8,0 Hz, 1H), 2,21-2,29 (m, 2H), 2,49-2,53 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 4,05 (dd, J= 3,0, 11,5 Hz, 1H), 4,27-4,29 (m, 2H), 4,44 (dd, J= 7,0, 10,5 Hz, 1H), 4,83 (m, 1H (oculto)), 5,12 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,29 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 6,93 (d, J= 9,5 Hz, NH), 6,98 (m, 1H), 7,21 (t, J= 9,0 Hz, 2H), 7,36 (s, 1H), 7,94-7,97 (m, 2H), 8,44 (d, J= 6,0 Hz, 1H).
tr de CL/EM -min (MH+): 2,42 (741) (procedimiento A).
20 Ejemplo 428: Preparación del Compuesto 428.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 421, Etapa 6 con un rendimiento del 37%, con la excepción de 5 que se usó ácido 4-metoxifenilborónico.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,45-1,74 (m, 8H), 2,31-2,36 (m, 1H), 2,64-2,68 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,98 (dd, J= 12, 3,5 Hz, 1H), 4,25 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 4,33 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,59 (dd, J= 8,0, 10 Hz, 1H), 4,77 (m, 1H), 5,36 (m, 1H), 6,72 (d, J= 9,0 Hz, NH), 7,01 (m, 1H), 7,04 (d, J= 9,0 Hz, 2H), 7,37 (d, J= 2,0 Hz), 7,86 (d, J= 9,0 Hz, 2H), 8,42 (d, J= 6,0 Hz, 1H).
10 tr de CL/EM min (MH+): 2,09 (540) (procedimiento A).
Etapa 2:
El Compuesto 428 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 72%, partiendo del producto del Ejemplo 428, Etapa 1.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,06-1,09 (m, 2H), 1,23-1,25 (m, 2H), 1,43 (dd, J= 5,5, 9,5 Hz, 1H), 1,48-1,77
15 (m, 8H), 1,88 (dd, J= 5,0, 8,0 Hz, 1H), 2,21-2,28 (m, 2H), 2,50-2,54 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 4,05 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,27-4,29 (m, 2H), 4,44 (dd, J= 7,0, 10,5 Hz, 1H), 4,84 (m, 1H (oculto)), 5,12 (d, J= 10 Hz, 1H), 5,30 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,72-5,80 (m, 1H), 6,89 (d, J= 9,5 Hz, NH), 6,95 (dd, J= 2,5, 6,0 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,33 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 7,86 (d, J= 9,0 Hz, 2H), 8,41 (d, J= 6,0 Hz, 1H).
CL/EM n-min (MH+): 2,40 (753) (procedimiento A).
20 Ejemplo 429: Preparación del Compuesto 429.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 421, Etapa 6 con un rendimiento del 22%, con la excepción de 5 que se usó ácido 2-tiofenoborónico.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,46-1,74 (m, 8H), 2,29-2,35 (m, 1H), 2,63-2,67 (m, 1H), 3,97 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,26 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 4,31 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,60 (t, J= 8,5 Hz, 1H), 4,81 (m, 1H (oculto)), 5,31 (m, 1H), 6,87-6,89 (m, 2H), 7,13 (d, J= 5,0 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H (oculto)), 7,70 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 8,32 (d, J= 6,0 Hz, 1H).
tr de CL/EM -min (MH+): 1,96 (516) (procedimiento A).
10 Etapa 2:
El Compuesto 429 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 57%, partiendo del producto del Ejemplo 429, Etapa 1.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,02 (s, 9H), 1,07 (m, 2H), 1,24 (m, 2H), 1,43 (dd, J= 5,5, 9,5 Hz, 1H), 1,53-1,78 (m, 8H), 1,88 (dd, J= 5,5, 8,0 Hz, 1H), 2,21-2,28 (m, 2H), 2,49-2,53 (m, 1H), 2,92-2,96 (m, 1H), 4,04 (d, J= 10 Hz, 1H), 4,26
15 4,29 (m, 2H), 4,43 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 4,82 (m, 1H (oculto)), 5,12 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J= 17,5 Hz, 1H), 5,35 (m, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 6,89 (d, J= 4,5 Hz, 1H), 6,92 (d, J= 4,5 Hz, NH), 7,13 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,51 (d, J= 4,5 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 8,32 (d, J= 5,5 Hz, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 2,37 (728) (procedimiento A).
Ejemplo 430: Preparación del Compuesto 430.
Etapa 1:
imagen2
Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 421, Etapa 6 con un rendimiento del 17%, con la excepción de 5 que se usó ácido 3-tiofenoborónico.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,43-1,74 (m, 8H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,64-2,68 (m, 1H), 3,98 (dd, J= 11,5, 3,0 Hz, 1H), 4,25 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 4,32 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,60 (dd, J= 8,0, 9,5 Hz, 1H), 4,80 (m, 1H (oculto)), 5,33 (m, 1H), 6,96 (dd, J= 2,5, 6,0 Hz, 1 H), 7,36 (s, 1 H (oculto)), 7,51 (s, 1H (oculto)), 7,67 (d, J= 5,0 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 8,39 (d, J= 6,0 Hz, 1H).
10 CL/EM n-min (MH+): 1,94 (516) (procedimiento A).
Etapa 2:
El Compuesto 430 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 45%, partiendo del producto del Ejemplo 430, Etapa 1.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,02 (s, 9H), 1,06 (m, 2H), 1,29 (m, 2H), 1,43 (dd, J= 5,5, 9,5 Hz, 1H), 7,43-1,75 (m, 8H),
15 1,87 (dd, J= 6,0, 7,5 Hz, 1H), 2,20-2,27 (m, 2H), 2,49-2,53 (m, 1H), 2,93-2,95 (m, 1H), 4,05 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 4,274,29 (m, 2H), 4,42-4,45 (m, 1H), 4,85 (m, 1H (oculto)), 5,12 (d, J= 10,0 Hz, 1H), 5,29 (d, J= 17,5 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 5,73-5,80 (m. 1H), 6,92-6,94 (m, 2H), 7,35 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,66 (d, J= 4,5 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 8,38 (d, J = 5,5 Hz, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 2,36 (728) (procedimiento A).
20 Ejemplo 431: Preparación del Compuesto 431.
Etapa 1:
imagen2
A una mezcla del producto del Ejemplo 421, Etapa 5 (100 mg, 0,195 mmol) y Pd(PPh3)4 (23 mg, 0,0195 mmol) en
5 dioxano (3 ml) se le añadieron 2-tributilestanniltiazol (95 mg, 0,254 mmol) y trietilamina (82 µl, 0,585 mmol). La solución se calentó a 95 ºC durante 5 h en una atmósfera de nitrógeno y después a 105 ºC durante 15 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y se concentró. El residuo se purificó por HPLC preparativa (gradiente B al 30-80%). Las fracciones combinadas se repartieron entre tampón pH 4 y diclorometano. La fase acuosa se extrajo con diclorometano y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron
10 (MgSO4). El compuesto del título (31 mg) se obtuvo en forma de un aceite incoloro, significativamente contaminado con el residuo de tributilestannilo.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,4 (m, 8H (oculto)), 2,32-2,36 (m, 1H), 2,64-2,68 (m, 1H), 4,00 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,33 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,60 (t, J= 8,5 Hz, 1H), 4,80 (m, 1H (oculto)), 5,33 (m, 1H), 7,03 (s a, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 8,41 (d, J= 5,5 Hz, 1H).
15 tr de CL/EM min (MH+): 2,25 (517) (procedimiento A).
Etapa 2:
El Compuesto 431 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 41%, partiendo del producto del Ejemplo 431, Etapa 1.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,02 (s, 9H), 1,06-1,70 (m, 13H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,22-2,31 (m, 2H), 2,51-2,55 (m, 1H).
20 2,92-2,94 (m, 1H), 4,06 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,23-4,32 (m, 2H), 4,44-4,47 (m, 1H), 4,82 (m, 1H (oculto)), 5,12 (d, J= 11 Hz, 1H), 5,30 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 5,73-5,81 (m, 1H), 6,90 (d, J= 9,0 Hz, NH), 7,04 (m, 1H), 7,71 (m, 2H), 7,93 (s, 1H), 8,42 (d, J= 5,5 Hz, 1H).
tr de CL/EM -min (MH+): 2,46 (729) (procedimiento A).
Ejemplo 432: Preparación del Compuesto 432.
Etapa 1:
imagen2
A una mezcla del producto del Ejemplo 423, Etapa 1 (102 mg, 0,204 mmol) y Pd(PPh3)4 (24 mg, 0,0204 mmol) en
5 dioxano (3 ml) se le añadieron 2-tributilestanniltiazol (99 mg, 0,265 mmol) y trietilamina (85 µl, 0,612 mmol). La solución se calentó a 95 ºC durante 5 h en una atmósfera de nitrógeno y después a 105 ºC durante 15 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y se concentró. El residuo se purificó por HPLC preparativa (gradiente B al 30-80%). Las fracciones combinadas se neutralizaron con amoniaco conc. y se concentraron. El residuo se repartió entre tampón pH 4 y diclorometano. La fase acuosa se extrajo con diclorometano y los extractos
10 orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron (MgSO4). El compuesto del título (33 mg) se obtuvo en forma de un aceite incoloro, significativamente contaminado con el residuo que contiene tributilestannilo.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,30 (s, 9H), 2,28-2,32 (m, 1H), 2,62-2,67 (m, 1H), 3,98 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,21 (s, 1H), 4,34 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,58 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 5,31 (m, 1H), 7,71 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 7,94-7,96 (m, 2H), 8,33 (s, 1H), 8,73 (s, 1H).
15 tr de CL/EM min (MH+-Boc): 2,21 (405) (procedimiento A).
Etapa 2:
El Compuesto 432 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 42%, partiendo del producto del Ejemplo 432, Etapa 1.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,02 (s, 9H), 1,07-1,08 (m, 2H), 1,24 (m, 2H), 1,32 (s, 9H), 1,44 (m, 1H (oculto)), 1,86-1,89
20 (m, 1H), 2,21-2,29 (m, 2H), 2,51-2,55 (m, 1H), 2,93-2,95 (m, 1H), 4,04 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,23 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,33 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,47 (t, J= 9,5 Hz, 1H), 5,12 (d, J= 10,0 Hz, 1H), 5,30 (d, J= 18 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 5,725,81 (m, 1H), 6,62 (d, J= 8,5 Hz, NH), 7,73 (s, 1H), 7,96 (m, 1), 8,34 (s, 1H), 8,74 (s, 1H).
tr de CL/EM -min (MH+): 2,42 (717) (procedimiento A).
Ejemplo 433: Preparación del Compuesto 433.
Etapa 1:
imagen2
A una mezcla del producto del Ejemplo 420, Etapa 3 (1,00 g, 1,94 mmol) y Pd(PPh3)4 (112 mg, 0,097 mmol) en
5 dioxano (15 ml) se le añadió tributil(1-etoxivinil)estaño (876 mg, 2,43 mmol. La solución se calentó a 105 ºC durante 6 h en una atmósfera de nitrógeno. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y se concentró. El residuo se repartió entre NaHCO3 sat. y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo y los extractos orgánicos combinados se lavaron con KF ac. al 5% y salmuera y se secaron (MgSO4). La purificación usando una columna Biotage 40 M (eluyendo con un gradiente de hexano -EtOAc al 40-70%) proporcionó el
10 compuesto del título (624 mg, 64%) en forma de un aceite de color amarillo.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,95 (s, 9H), 1,27 (s, 9H), 1,35 (t, J= 7,0 Hz, 3H), 2,16-2,21 (m, 1H), 2,50 (m, 1H (oculto)), 3,64 (s, 3H), 3,85 (d, J= 11 Hz, 1H), 3,90 (c, J= 7,0 Hz, 2H), 4,09 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 4,13 (d, J= 11 Hz, 1H), 4,40 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 4,45 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 4,91 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 5,27 (m, 1H), 6,69 (d, J= 9,0 Hz, NH), 7,48 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,46 (s, 1H).
15 tr de CL/EM -min (MH+): 2,14 (507) (procedimiento B).
Etapa 2: A una solución del producto del Ejemplo 433, Etapa 1 (125 mg, 0,247) en THF (3 ml) y agua (111 µl, 6,18 mmol) se le añadió NBS (44 mg, 0,247 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 20 min, la mezcla se concentró y se repartió entre acetato de etilo y salmuera. La fase orgánica se secó (MgSO4), dando el intermedio bromometil cetona. Este intermedio se disolvió en DMF y se trató con tioacetamida (24 mg, 0,321 mmol) y NaHCO3
imagen2
5 (31 mg, 0,371 mmol). La mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente, se concentró y se suspendió en NaHO3 sat. El producto se extrajo con acetato de etilo (2 x), se lavó con salmuera y se secó (MgSO4). La purificación usando una columna Biotage 12 M (eluyendo con un gradiente de hexano -EtOAc 50-70%) proporcionó el compuesto del título (50 mg, 38%) en forma de un aceite pálido.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,02 (s, 9H), 1,31 (s, 9H), 2,27-2,31 (m, 1H), 2,63-2,67 (m, 1H), 2,77 (s, 3H), 3,74 (s, 3H),
10 3,98 (d, J= 10,0 Hz, 1H), 4,22 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,34 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 4,64 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 5,29 (m, 1H), 6,38 (s, NH), 7,87 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,71 (s, 1H). CL/EM n-min (MH+): 1,96 (533) (procedimiento B).
Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 5, con la excepción de que se usó el producto del 15 Ejemplo 433, Etapa 2.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,96 (s, 9H), 1,25 (s, 9H), 2,18-2,23 (m, 1H), 2,50 (m, 1H (oculto)), 2,73 (s, 3H), 3,86 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,10 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 4,14 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,39 (t, J= 8,5 Hz, 1H), 5,30 (m, 1H), 6,60 (s a, NH), 7,84 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,78 (s, 1H).
tr de CL/EM -min (MH+): 1,84 (519) (procedimiento B).
20 Etapa 4:
El Compuesto 433 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 46%, partiendo del producto del Ejemplo 433, Etapa 3.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,05 (s, 9H), 1,09-1,11 (m, 2H), 1,26-1,29 (m, 2H), 1,36 (s, 9H), 1,45-1,48 (m, 1H), 1,89-1,92 (m, 1H), 2,25-2,30 (m, 2H), 2,53-2,57 (m, 1H), 2,80 (s, 3H), 2,94-3,00 (m, 1H), 4,06 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 4,27 (s. 1H), 25 4,32 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,48 (dd, J= 10,5, 7,0 Hz, 1H), 5,15 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 5,33 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,35 (m, 1H), 5,76-5,83 (m, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,95 (m, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,74 (s, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 2,21 (732) (procedimiento B).
Ejemplo 434: Preparación del Compuesto 434.
Etapa 1:
imagen2
A una solución del producto del Ejemplo 421, Etapa 1 (300 mg, 1,56 mmol) y Pd(PPh3)4 (90 mg, 0,078 mmol) en
5 DMF (6 ml) se le añadieron 1-metil-2-(tributilestannil)-1H-pirrol (750 mg, 2,03 mmol) y trietilamina (0,435 ml, 3,12 mmol). La solución se calentó a 150 ºC durante 30 min en una atmósfera de nitrógeno en un horno microondas (Emrys, Personal Chemistry). Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con éter dietílico y se KF ac. al 5% y se filtró. La fase acuosa se extrajo con éter dietílico (2 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con KF ac. al 5%, agua y salmuera y se secaron (MgSO4). La purificación usando una columna Biotage 25 S
10 (eluyendo con un gradiente de hexano -éter dietílico 0-5%) proporcionó el compuesto del título (169 mg, 56%) en forma de un aceite incoloro.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 3,94 (s, 3H), 6,10 (s, 1H), 6,77 (d, J= 2,0 Hz, 1H, 6,93 (s, 1H), 7,27 (d, J= 4,0 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 8,49 (d, J= 5,0 Hz, 1H), CL/EM n-min (MH+): 1,15 (193, 195) (procedimiento B).
Etapa 2:
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15
Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 421, Etapa 2 con un rendimiento del 39%, partiendo del producto del Ejemplo 434, Etapa 1.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,42, 1,43 (s, 9H (rotámeros)), 2,27-2,34 (m, 1H), 2,55-2,62 (m, 1H), 3,75 (m, 2H), 3,76, 3,74 (s, 3H (rotámeros)), 3,84 (s, 3H), 4,39-4,45 (m, 1H), 5,19 (m, 1H), 6,10 (m, 1H), 6,49 (m, 1H), 6,78 (s, 1H), 6,80-6,82 20 (m, 1H), 7,07 (s, 1H), 8,35 (d, J= 6,0 Hz, 1H).
tr de CL/EM -min (MH+, ácido carboxílico): 1,49 (389) (procedimiento B).
Etapa 3:
imagen2
El producto del Ejemplo 434, Etapa 2 (90 mg, 0,22 mmol) se disolvió en diclorometano (1,5 ml) y TFA (1,0 ml. 9,0 mmol). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 45 min, y se concentró. El residuo se trató con HCl 1 N en éter dietílico (5 ml) y se concentró. El compuesto del título se obtuvo con rendimiento cuantitativo en forma de un aceite pálido.
tr de CL/EM min (MH+): 0,32 (302) (procedimiento B).
Etapa 4:
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10 Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 3 con un rendimiento del 80%, partiendo del producto del Ejemplo 434, Etapa 3.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,02 (s, 9H), 1,31 (s, 9H), 2,25-2,31 (m, 1H), 2,61-2,64 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 3,97-3,99 (m, 1H), 4,22 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,32 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,61 (t, J= 7,5 Hz, 1H), 5,27 (m, 1H), 6,10 (m, 1H), 6,42 (d a, J= 9,0 Hz, NH), 6,49 (m, 1H), 6,78 (m, 1H), 6,81 (m, 1H), 7,07 (s, 1H), 8,34 (d, J= 5,5 Hz, 1H).
15 tr de CL/EM -min (MH+): 1,81 (516) (procedimiento B).
Etapa 5: A una solución del producto del Ejemplo 434, Etapa 4 (92 mg, 0,179 mmol) en THF (1 ml) y metanol (1 ml) se le añadió LiOH (13 mg, 0,536 mmol) en agua (1 ml). La mezcla se agitó durante 1,5 h a temperatura ambiente y se inactivó con HCl 1 N hasta pH neutro. Los volátiles orgánicos se retiraron al vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa (gradiente B al 10-80%). Las fracciones combinadas se neutralizaron con amoniaco conc. y se
imagen2
5 concentraron. El residuo se repartió entre tampón pH 4 y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron (MgSO4). El compuesto del título (56 mg, 62%) se obtuvo en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,03 (s, 9H), 1,32 (s, 9H), 2,31-2,35 (m, 1H), 2,62-2,67 (m, 1H), 3,85 (s. 3H), 3,98 (d, J= 11,5 Hz, 1H, 4,21-4,23 (m, 1H), 4,33 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,58 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 5,31 (m, 1H), 6,12 (m, 1H), 6,40 (d
10 a, J= 8,0 Hz, NH), 6,52 (m, 1H), 6,82 (m, 1H), 6,87 (m, 1H), 7,12 (s, 1H), 8,36 (d, J= 5,5 Hz, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 1,73 (502) (procedimiento B).
Etapa 6:
El Compuesto 434 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 68%, partiendo de los productos del Ejemplo 434, Etapa 5.
15 RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,02 (s, 9H), 1,06-1,09 (m, 2H), 1,23-1,26 (m, 2H), 1,33 (s, 9H), 1,42-1,45 (m, 1H), 1,86-1,89 (m, 1H), 2,21-2,27 (m, 2H), 2,47-2,51 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 4,04 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,24 (d, J= 10,0 Hz, 1H), 4,28 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,43 (dd, J= 10,0, 7,0 Hz, 1H), 5,12 (d, J= 10,0 Hz, 1H), 5,30 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,32 (m, 1H), 5,73-5,80 (m, 1H), 6,10 (m, 1H), 6,49 (m, 1H), 6,64 (d a, J= 9,0 Hz, NH), 6,79 (m, 1H), 6,82 (m, 1H), 7,08 (s, 1H), 8,35 (d, J= 5,5 Hz, 1H).
20 tr de CL/EM min (MH+): 2,08 (714) (procedimiento B).
Ejemplo 435: Preparación del Compuesto 435.
Etapa 1:
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25 Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 421, Etapa 2 con un rendimiento del 74%, partiendo de 2,6dibromopiridina.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 1,34, 1,38 (s, 9H (rotámeros)), 2,23-2,31 (m, 1H), 2,43-2,47 (m, 1H (oculto)), 3,53 (d, J= 12 Hz, 1H), 3,66, 3,69 (s, 3H (rotámeros)), 3,72-3,75 (m, 1H), 4,29-4,34 (m, 1H), 5,42 (m, 1H), 6,89 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,26 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,68 (t, J= 7,5 Hz, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 2,62 (523, 425) (procedimiento A). Etapa 2:
imagen2
Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 2 con rendimiento cuantitativo, partiendo del producto del Ejemplo 435, Etapa 1. tr de CL/EM -min (MH+): 1,42 (301, 303) (procedimiento B). Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 3 con un rendimiento del 96%, partiendo del producto 10 del Ejemplo 435, Etapa 2.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,95 (s, 9H), 1,28 (s, 9H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,45-2,48 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,94 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,01-4,08 (m, 2H), 4,45 (t, J= 8,5 Hz, 1H), 5,53 (m, 1H), 6,66 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 6,82 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 7,25 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 7,64-7,69 (m, 1H).
tr de CL/EM -min (MH+): 2,73 (514, 516) (procedimiento A).
15 Etapa 3:
imagen2
Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 5 con rendimiento cuantitativo, partiendo del producto del Ejemplo 435, Etapa 2.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,95 (s, 9H), 1,28 (s, 9H), 2,19-2,25 (m, 1H), 2,43-2,47 (m, 1H), 3,94 (m, 1H), 4,01-4,08 (m, 20 2H), 4,36 (t, J= 8,5 Hz, 1H), 5,52 (m, 1H), 6,65 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 6,82 (d. J= 7,5 Hz, 1H), 7,25 (d, J= 7,5 Hz, 1H),
7,67 (t, J= 7,5 Hz, 1H), 12,6 (s, 1H). tr de CL/EM -min (MNa+): 2,51 (522, 524) (procedimiento B).. Etapa 4:
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5 A una solución del producto del Ejemplo 435, Etapa 3 (125 mg, 0,250 mmol), Pd(PPh3)4 (14,4 mg, 0,0125 mmol) y ácido 3-furilborónico (35 mg, 0,313 mmol) en DMF (2 ml) y agua (0,025 ml) se le añadió Cs2CO3 (244 mg, 0,750 mmol). La mezcla se calentó a 105 ºC durante 3 h en una atmósfera de nitrógeno. Después de enfriar a temperatura ambiente, el sólido se retiró por filtración y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó por HPLC preparativa (gradiente B al 30-100%). Las fracciones combinadas se neutralizaron con amoniaco conc. y se
10 concentraron. El residuo se repartió entre tampón pH 4 y diclorometano. La fase acuosa se extrajo con diclorometano y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron (MgSO4). El compuesto del título (90 mg, 76%) se obtuvo en forma de una espuma de color blanco. RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,06 (s, 9H), 1,39 (s, 9H), 2,36-2,42 (m, 1H), 2,61-2,65 (m, 1H), 4,12 (dd, J= 4,0, 11 Hz, 1H), 4,19 (d, J= 11 Hz, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,62 (t, J= 8,5 Hz, 1H), 5,79 (m, 1H), 6,64 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 7,22 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 7,58 (m, 1H),
15 7,66 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 8,13 (s, 1H).
tr de CL/EM min (MNa+): 2,53 (51 1) (procedimiento B).
Etapa 5:
El Compuesto 435 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 57%, partiendo del producto del Ejemplo 435, Etapa 4.
20 RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,96 (s, 9H), 1,02-1,05 (m, 2H), 1,09-1,11 (m, 2H), 1,19 (s, 9H), 1,35-1,38 (m, 1H), 1,71 (dd, J = 5,5, 8,0 Hz. 1H), 2,15-2,22 (m, 2H), 2,37-2,4 1 (m, 1H), 2,93 (m a, 1H), 4,03-4,08 (m, 3H), 4,35 (t a, 1H), 5,10 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,24 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,60-5,67 (m, 1H), 5,73 (m, 1H), 6,47 (s a, 1H), 6,64 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,31 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,72 (t, J= 7,5 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 8,32 (s. 1H), 8,92 (s, NH), 10,4 (s, NH).
CL/EM n-min (MNa+): 2,64 (723) (procedimiento B).
25 Ejemplo 436: Preparación del Compuesto 436.
imagen2
Etapa 1: Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 435, Etapa 4 con un rendimiento del 73%, con la excepción de que se usó ácido fenilborónico.
imagen2
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,06 (s, 9H), 1,39 (s, 9H), 2,39-2,45 (m, 1H), 2,65-2,77 (m, 1H), 4,18-4,30 (m, 3H), 4,64 (t, J 5 = 8,0 Hz, 1H), 5,72 (m, 1H), 6,74 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 7,44-7,55 (m, 4H), 7,75 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 8,07 (d, J= 7,5 Hz, 2H).
tr de CL/EM -min (MNa+): 2,72 (521) (procedimiento B).
Etapa 2:
El Compuesto 436 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 66%, partiendo del 10 producto del Ejemplo 436, Etapa 1.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,96 (s, 9H), 1,04-1,05 (m, 2H), 1,09 (m, 2H), 1,30 (s, 9H), 1,36-1,39 (m, 1H), 1,71 (t, J= 7,5 Hz, 1H), 2,16-2,24 (m, 2H), 2,41-2,45 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 4,06-4,09 (m, 3H), 4,38 (t a, 1H), 5,10 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 5,30 (d, J= 17 Hz, 1H), 5,60-5,67 (m, 1H), 5,80 (m, 1H), 6,49 (s a, 1H), 6,75 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,43-7,51 (m, 3H), 7,59 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,81 (t, J= 7,5 Hz, 1H), 8,09 (d, J= 7,0 Hz, 2H), 8,91 (s, NH), 10,4 (s, NH).
15 tr de CL/EM -min (MH+): 2,77 (71 1) (procedimiento B).
Ejemplo 437: Preparación del Compuesto 437.
Etapa 1:
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20 A una solución de 2-bromo-6-metil-piridina (7,65 g, 44,4 mmol) en diclorometano (50 ml) se le añadió una solución de mCPBA (77%, 12,9 g. 57,7 mmol) en diclorometano (100 ml). La solución se agitó durante 18 h a temperatura ambiente. La mezcla se neutralizó con Na2CO3 sólido y se añadió agua. La fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 x). Las fracciones orgánicas combinadas se lavaron con Na2S2O3 al 5%, Na2CO3 al 5% y salmuera y se secó (MgSO4). La purificación usando una columna Biotage 40 M (eluyendo con un gradiente de hexano acetato de etilo al 40-70%) proporcionó el compuesto del título (5,0 g, 60%) en forma de un aceite incoloro que solidificó después de un periodo de reposo. RMN 1H: (DMSO-d6) δ 2,43 (s, 3H), 7,15 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,78 (s, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 0,32 (188, 190) (procedimiento B).
Etapa 2:
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10 A una solución del producto del Ejemplo 437, Etapa 1 (4,5 g, 24 mmol) en DMF (20 ml) se le añadió en porciones POBr3 (8,2 g, 29 mmol). Se produjo una fuerte reacción exotérmica y se formó un precipitado. La mezcla se dejó durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla se inactivó con agua y NaHCO3 sat. hasta pH neutro. La fase acuosa se extrajo con éter dietílico (2 x). Las fracciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera y se secaron (MgSO4). La purificación usando una columna Biotage 40 M (eluyendo con un gradiente de hexano -éter
15 dietílico 0-10%) proporcionó el compuesto del título (1,78 g, 30%) en forma de un aceite incoloro.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 2,45 (s, 3H), 7,64 (s, 1H), 7,80 (s, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 1,85 (250, 252, 254) (procedimiento B).
Etapa 3:
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20 Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 421, Etapa 2 con un rendimiento del 46%, partiendo del producto del Ejemplo 437, Etapa 1.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 1,34, 1,38(s, 9H (rotámeros)), 2,20-2,27 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,43-2,50 (m, 1H), 3,55 (d, J= 12,5 Hz, 1H), 3,64-3,67 (m, 1H), 3,66, 3,69 (s, 3H (rotámeros)), 4,26-4,32 (m, 1H), 5,17 (m, 1H), 6,93 (s, 1H), 7,08 (s, 1H).
25 tr de CL/EM min (MH+): 2,17 (415, 417) (procedimiento B).
Etapa 4: Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 3 con rendimiento cuantitativo, partiendo del producto del Ejemplo 437, Etapa 3.
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Etapa 4:
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5 Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 3 con un rendimiento del 75%, partiendo del producto del Ejemplo 437, Etapa 3.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,94 (s, 9H), 1,27 (s, 9H), 2,16-2,21 (m, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,48 (m, 1H (oculto)), 3,64 (s, 3H). 3,83 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 4,06 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 4,14 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 4,42 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 5,27 (m, 1H), 6,68 (s a, NH), 6,88 (s, 1H), 7,03 (s, 1H).
10 tr de CL/EM -min (MH+): 2,19 (528, 530) (procedimiento B). Etapa 5:
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Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 5 con rendimiento cuantitativo, partiendo del producto del Ejemplo 437, Etapa 4.
15 RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,95 (s, 9H), 1,27 (s, 9H), 2,15-2,19 (m, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,44-2,48 (m, 1H), 3,81 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 4,04-4,06 (m, 1H), 4,13 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 4,33 (t, J= 8,5 Hz, I H), 5,26 (m, 1H), 6,66 (d a, J= 9,0 Hz, NH), 6,88 (s, 1H), 7,03 (s, 1H).
tr de CL/EM -min (MNa+): 2,14 (536, 538) (procedimiento B).
Etapa 6:
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A una solución del producto del Ejemplo 437, Etapa 5 (101 mg, 0,196 mmol), Pd(PPh3)4 (11,3 mg, 0,0098 mmol) y ácido fenilborónico (34 mg, 0,275 mmol) en DMF (2 ml) se le añadió Na2CO3 acuoso 2 M (0,294 ml, 0,588 mmol). El tubo se cerró herméticamente y se calentó en un horno microondas (Emrys, Personal Chemistry) a 150 ºC durante 5 15 min. en una atmósfera de nitrógeno. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se acidificó con HCl 1 N (0,5 ml). El sólido se retiró por filtración y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó por HPLC preparativa (gradiente B al 20-80%). Las fracciones combinadas se neutralizaron con amoniaco conc. y se concentraron. El residuo se repartió entre tampón pH 4 y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y se secaron (MgSO4). El compuesto del
10 título (115 mg, >100%) se obtuvo en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,06 (s, 9H), 1,30 (s, 9H), 2,36-2,41 (m, 1H), 2,69 (s, 3H), 2,65-2,76 (m, 1H), 4,01 (dd, J= 3,0, 12 Hz, 1H), 4,21 (s, 1H), 4,44 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,64 (dd, J= 8,0, 10 Hz, 1H), 5,46 (m, 1H), 6,91 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,39 (m, 3H), 7,57 (d, J= 7,5 Hz, 2H).
tr de CL/EM min (MH+): 1,84 (513) (procedimiento B).
15 Etapa 7:
El Compuesto 437 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 31%, partiendo del producto del Ejemplo 437, Etapa 6.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,93 (s, 9H), 0,99-1,04 (m, 4H), 1,25 (s, 9H), 1,34-1,37 (m, 1H), 1,69-1,71 (m, 1H), 2,11-2,20 (m, 2H), 2,39-2,43 (m, 1H), 2,48 (s, 3H), 2,93 (m, 1H), 3,92 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 4,07 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 4,11 (d, J=
20 12 Hz, 1H), 4,32 (t, J= 7,0 Hz, 1H), 5,10 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 5,23 (d, J= 17,5 Hz, 1H), 5,39 (m, 1H), 5,60-5,67 (m, 1H), 6,58 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 6,83 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,40-7,48 (m, 3H), 8,04-8,06 (m, 2H), 8,92 (s, NH), 10,4 (s, NH).
tr de CL/EM -min (MH+): 2,10 (725) (procedimiento B).
Ejemplo 438: Preparación del Compuesto 438.
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Etapa 1:
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Este producto se preparó de acuerdo con Ejemplo 437, Etapa 6 con rendimiento cuantitativo, partiendo de ácido 2tiofenoborónico.
RMN 1H: (metanol-d4) δ 1,05 (s, 9H), 1,32 (s, 9H), 2,32-2,38 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,66-2,70 (m, 1H), 3,99 (dd, J= 5 3,0, 12 Hz, 1H), 4,23 (s, 1H), 4,36 (d, J= 12 Hz, 1H), 4,61 (t, J= 8,5 Hz, 1H), 5,35 (m, 1H), 5,86 (s, 1H), 7,16-7,18 (m, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,56 (m, 1H), 7,72 (d, J= 3,0 Hz, 1H).
tr de CL/EM min (MH+): 1,80 (519) (procedimiento B).
Etapa 2:
El Compuesto 438 se preparó de acuerdo con Ejemplo 420, Etapa 6 con un rendimiento del 41%, partiendo del 10 producto del Ejemplo 438, Etapa 1.
RMN 1H: (DMSO-d6) δ 0,91 (s, 9H), 0,99-1,04 (m, 4H), 1,20 (s, 9H), 1,35-1,37 (m, 1H), 1,69-1,71 (m, 1H), 2,09-2,20 (m, 2H), 2,33 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,93 (m, 1H), 3,92 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 4,07-4,11 (m, 2H), 4,29-4,32 (m, 1H), 5,10 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 5,23 (d, J= 17,0 Hz, 1H), 5,36 (m, 1H), 5,60-5,67 (m, 1H), 6,58 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 6,75 (s, 1H), 7,14 (t, J= 4,5 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,59 (d, J= 5,5 Hz, 1H), 7,80 (d. J= 3,5 Hz, 1H), 8,92 (s, NH), 10,4 (s, NH).
15 tr de CL/EM -min (MH+): 2,06 (731) (procedimiento B).
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El Compuesto 450 se preparó de acuerdo con Ejemplo 8, Etapa 5, con la excepción de que se usó 4-cloro-6-fluoro20 2-trifluorometilquinolina.
RMN 1H (CD3OD) δ 0,97-1,04 (m, 12H), 1,17-1,24 (m, 10H), 1,39-1,46 (m, 1H), 1,82-1,87 (m, 1H), 2,20-2,23 (m, 1H), 2,35-2,39 (m, 1H), 2,55-2,65 (m, 1H), 2,91-2,96 (m, 1H), 4,09-4,11 (m, 1H), 4,18-4,2 (m, 1H), 4,56 (a, 2H), 5,10-5,14 (m, 1H), 5,28-5,31 (m, 1H), 5,60 (a, 1H), 5,70-5,80 (m, 1H), 7,41(s, 1H), 7,65-7,68 (m, 1H), 7,86 (s, 1H), 8,13-8,15 (m, 1H).
25 Ejemplo 451: Preparación del Compuesto 451.
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Etapa 1:
El tosilato se preparó como se describe en la bibliografía (Patchett, A. A.; Witkof, B. J. Am. Chem. Soc. 1957. 185
5 192) y se usó sin purificación adicional. A una suspensión de NaH (76 mg, 1,90 mmol) en DMF (20 ml) se le añadió 1-tionaftol (0,29 mg, 1,80 mmol) y la mezcla se agitó durante 30 minutos. Se añadió una solución del tosilato (0,61 g, 1,80 mmol) y la mezcla se agitó durante 12 h a 23 ºC. La mezcla se concentró y el residuo se repartió entre EtOAc/H2O. Los extractos orgánicos se secan (MgSO4) y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (elución con EtOAc al 5%/hexanos a EtOAc al 30%/hexanos, dando 261 mg (38%) del producto en
10 forma de un aceite de color amarillo.
RMN 1H (CDCl3, 3:2 mezcla de rotámeros) δ 1,41 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 2,25-2,29 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,35-3,42 (m, 1H), 3,51-3,53 (m, 1H), 3,80-3,86 (m, 2H), 4,38-4,39 (m, 1H), 4,46-4,48 (m, 1H), 7,41-7,46 (m, 1H), 7,42-7-54 (m, 1H), 7,57-7,59 (m, 1H), 7,58 (d, J= 4 Hz, 1H), 7,82-7,88 (m, 2H), 8,46 (d, J= 5 Hz, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,93), EM m/z 388 (M++1).
Etapa 2:
Una mezcla de 2-metil éster de 1-terc-butil éster del ácido 4-(naftalen-1-ilsulfanil)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (0,38 g, 0,98 mmol) y HCl 4 N (1,0 ml) se agitó a 23 ºC durante 2 h. El disolvente se retiró y el residuo se disolvió en CH3CN (20 ml) y se trató con ácido (0,37 g, 2,16 mmol), TBTU (0,23 g, 0,98 mmol) y DIPEA (0,37 g, 2,16 mmol) y se agitó durante 12 h. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con HCl 1 N y NaHCO3 saturado, después se secó sobre MgSO4 y se concentró. El residuo se usó sin purificación adicional.
RMN 1H (CDCl3. mezcla 1:1 de rotámeros) δ 0,99 (s, 9H), 1,02 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 1,46 (s, 9H)2,2-2,25(m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,82-3,86 (m, 1H), 3,89-3,92 (m, 2H)4,26 (s, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,70-4,75 (m, J), 7,40-7,48 (m, 1H), 7,54-7,55 (m, 1H), 7,59-7,62 (m, 1H), 7,72-7,74 (m, 1H), 7,86-7,89 (m, 2H), 8,48-8,50 (m, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,59), EM m/z 523 (M+Na).
Etapa 3:
A una mezcla de éster metílico del ácido 1-(2-terc-butoxicarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(naftalen-1-ilsulfanil)pirrolidin-2-carboxílico (Ejemplo 451, Etapa 2) (0,49 g, 0,98 mmol) en THF/H2O (2:1) se le añadió LiOH hidrato (0,20 g, 4,9 mmol) y la mezcla se agitó durante 12 h. La solución se concentró y se lavó con EtOAc. La fase acuosa se acidifica con HCl 1 N y se extrajo con EtOAc. El producto se observó en el primer extracto de EtOAc. el primer extracto orgánico se secó sobre MgSO4 y se concentró, dando 328 mg (71%) de un sólido de color castaño.
RMN 1H (DMSO-d6, mezcla 2:1 de rotámeros) δ 0,88 (s, 9H), 0,92 (s, 9H), 1,34 (s, 9H), 1,38 (s, 9H), 2,18-2,25(m, 2H), 3,66-3,75 (m, 1H), 3,89-4,00 (m, 2H), 4,10-4,13 (m, 1H), 4,25-4,32 (m, 1H), 7,45-7,7,51 (m, 1H), 7,56-7,61 (m, 2H), 7,65-7,7,69 (m, 1H), 7,88-7,91 (m, 1H), 7,97 (d, J= 4,8 Hz, 1H), 8,27-8,35 (m, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,52), EM m/z 486 (M+1).
Etapa 4:
A una solución del ácido (Ejemplo 451, Etapa 3) (0,32 g, 0,87 mmol) en CH3CN (10 ml) y DMF (2 ml) se le añadió la mezcla diastereomérica de clorhidrato de éster etílico del ácido 1(R)-2(S) y 1-(S)-2(R) 1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico (240 mg, 0,87 mmol) y TBTU (201 mg, 0,87 mmol) y DIPEA (0,32 ml, 0,742 mmol) y la mezcla se agitó a 23 ºC durante 12 h. La mezcla se concentró y el residuo se repartió entre EtOAc y agua. La fase orgánica se separó, se secó sobre MgSO4 y se concentró. El residuo se cromatografió con EtOAc al 30%/hexanos como eluyente, dando 240 mg (38%) de un sólido de color amarillo claro.
RMN 1H: (DMSO-d6, mezcla de rotámeros y diastereómeros) δ 0,87 (s, 9H), 0,88 (s, 9H), 0,97-1,04 (m, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,38(s, 9H), 2,11-2,20 (m, 2H), 3,74-3,85 (m, 1H), 3,89-3,96 (m, 2H), 3,98-4,03 (m. 4H), 4,00-4,09 (m, 1H), 4,404,42 (m, 1H), 5,04-5,09 (m, 1H), 5,17-5,29 (m, 2H), 5,50-5,70 (m, 1H), 6,60-6,62 (m, 1H), 6,72-6,75 (m, 1H), 7,507,56 (m, 1H), 7,56-7,72 (m, 2H), 7,70-7,80 (m, 1H), 7,92-8,00 (m. 1H), 8,00-8,06 (m, 1H), 8,29-8,40 (m, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,79 (s, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,59), EM m/z 623 (M+1).
Etapa 5:
El ácido se preparó como se ha descrito previamente usando LiOH en THF/MeOH/H2O (4/2/1) en el Ejemplo 451, Etapa 3, con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 451, Etapa 4.
RMN 1H (DMSO-d6, mezcla de rotámeros y diastereómeros) δ 0,90 (s, 9H), 1,17-1,23 (m, 2H), 1,32-1,37 (m, 9H), 2,10-2,12 (m, 1H), 2,20-2,31 (m, 2H), 3,97-4,05 (m, 2H), 4,10-4,12(m, 1H), 4,32-4,40 (m, 1H), 4,55-4,61 (m, 1H), 4,80-4,98 (m, 2H), 5,03-5,08 (m, 1H), 5,10-5,20 (m, 1H), 5,75-5,90 (m, 1H), 6,55-6,70 (m, 1H), 7,42-7,57 (m, 1H), 7,60-7,64 (m, 2H), 7,70-7,72 (m, 1H), 7,80-7,97 (m, 1H), 7,96-7,99 (m, 1H), 8,20-8,50 (m, 2H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,52), EM m/z 595 (M+1).
Etapa 6:
Una mezcla del ácido (Ejemplo 451, Etapa 5) (172 mg, 0,29 mmol), metanosulfonamida (110 mg, 1,16 mmol). EDAC (110 mg, 0,58 mmol) y DMAP (71 mg, 0,58 mmol) se disolvió en THF (10 ml) y se agitó durante 12 h. Se añadió DBU (0,087 ml, 0,58 mmol) y la mezcla se agitó durante 48 h. El disolvente se retira y el residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con agua y HCl 1 N, se secó sobre MgSO4 y se concentró. El residuos e purificó por cromatografía preparativa de capa fina, dando 15 mg (8%) del Compuesto 451 en forma de un sólido de color castaño.
RMN 1H (DMSO-d6, mezcla de rotámeros y diastereómeros) δ 0,98 (s, 9H), 1,27-1,42 (m, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,761,79 (m. 1H), 1,83-1,86 (m, 1H), 1,92-2,10 (m, 1H), 2,16-2,25 (m, 2H), 3,01-3,10 (m, 1H), 3,80-3,83 (m, 1H), 3,863,89 (m, 1H), 3,98-3,99 (m, 1H), 3,99-4,05 (m, 1H), 4,24-4-29 (m, 1H), 4,44-4,53 (m, 1H), 4,86 (s, 3H), 5,08-5,15 (m, 1H), 5,25-5,29 (m, 1H), 5,65-5,85 (m, 1H), 6,5-6,8 (m, 1H), 7,48 (t, J= 7,7 Hz, 1H), 7,54 (t, J= 7,1 Hz, 1H), 7,59 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 7,75-7,77 (m, 1H), 7,88-7,91 (m, 2H), 8,46 (d, J= 8,25 Hz, 1H):
CL-EM (tiempo de retención: 1,52), EM m/z 672 (M+1 secundario), m/z 693 (M+Na Principal).
Ejemplo 452: Preparación del Compuesto 452
Etapa 1:
imagen2
A una suspensión de NaH (76 mg, 1,90 mmol) en DMF (20 ml) se le añadió 2-tionaftol (0,29 g, 1,80 mmol) y la
10 mezcla se agitó durante 30 minutos. Se añadió una solución del tosilato (Ejemplo 451, Etapa 1) (0,61 g, 1,79 mmol) en DMF (2 ml) y la mezcla se agitó durante 12 h a 23 ºC. La mezcla se concentró y después se repartió entre EtOAc/H2O. La fase orgánica se lavó con NaHCO3 saturado, se secó (MgSO4) y se concentró. El residuo se cromatografió con EtOAc al 5%/hexanos seguido de EtOAc al 30%/hexanos, dando 261 mg (38%) del producto en forma de un aceite transparente. RMN 1H (DMSO-d6) δ 1,32 (s, 9H), 2,29-2,35 (m, 2H), 3,33-3,47 (m, 2H), 3,66 (s,
15 3H), 3,71-3,81 (m, 1H), 4,29-4,32 (s, 1H), 7,49-7,55 (m, 3H), 7,70-7,80 (m, 1H), 7,81-7,97 (m, 3H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,54), EM m/z 387 (M+1).
Etapa 2:
imagen2
5
10
15
20
25
30
Una mezcla de 2-metil éster de 1-terc-butil éster del ácido 4-(naftalen-2-ilsulfanil)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (310 mg, 0,80 mmol) y HCl 4 N en dioxano (1,49 ml, 2,69 mmol) se agitó durante 2 h a 23 ºC y después se concentró. El residuo se disolvió en CH3CN (10 ml), se añadieron N-Boc-t-butilglicina (196 mg, 0,85 mmol). TBTU (0,27 g, 0,85 mmol) y DIPEA (0,32 ml, 1,85 mmol) y la mezcla se agitó durante una noche. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con HCl 1 N y NaHCO3 saturado, se secó y se concentró, dando 300 mg (90%) del producto en forma de un aceite de color amarillo.
RMN 1H (Metanol-d4) δ 0,99 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 2,20-2,35 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,92-4,08 (m, 2H), 4,26 (d, J= 9,4 Hz, 1H), 4,57 (t, J= 9,5 Hz, 1H)6,46 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 7,48-7,60 (m, 3H), 7,83-7,90 (m, 3H), 8,02 (s, 1H) CL-EM (tiempo de retención: 1,98), EM m/z 523 (M+Na).
Etapa 3:
imagen2
Una solución de 2-metil éster de 1-terc-butil éster del ácido 4-(naftalen-2-ilsulfanil)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico (0,48 g, 0,96 mmol) se disolvió en MeOH (20 ml) y se agitó con LiOH (0,2 g, 4,8 mmol) durante 12 h. la solución se concentró, se acidificó y se extrajo con EtOAc. El extracto orgánico se secó sobre MgSO4 y se concentró, dando 418 mg (91%) de un sólido de color amarillo.
RMN 1H (DMSO-d6, 1:2 mezcla de rotámeros) δ 0,86, 0,93 (s, 9H) (1:2 mezcla de rotámeros), 1,35, 1,38 (s, 9H) (1:2 mezcla de rotámeros), 2,01-2,18, 2,25-2,35 (m, 2H), 3,25-3,40 (m, 2H), 3,70-3,80 (m, 1H), 4,00-4,20 (m, J= 9,4 Hz, 2H), 4,30-4,40 (s, 1H), 5,61-5,70, 6,42-6,50 (m, 1H) (1:2 mezcla de rotámeros), 7,50-7,54 (m, 3H), 7,87-7,89 (m, 3H), 7,98 (s, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,93), EM m/z 487 (M+1).
Etapa 4:
imagen2
Una solución de éster etílico del ácido 1-terc-butoxicarbonilamino-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (4,3 g, 17,8 mmol) en MeOH (50 ml) se trató con LiOH (0,84 g, 20,0 mmol) y agua (5 ml) y la mezcla se agitó durante 12 h. El disolvente se retiró y el residuo se acidificó y se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron, dando el ácido 2,1 g (52%) en forma de un aceite de color amarillo. El ácido (2,1 g, 9,25 mmol) se disolvió en THF, se trató con CDI (7,25 g, 13,8 mmol), se calentó a reflujo durante 3 h y después se enfrió a 23 ºC. Se añadió metanosulfonamida (1,76 g, 18,5 mmol) seguido de DBU (2,77 ml, 18,5 mmol) y se agitó durante 72 h a 23 ºC. La mezcla se concentró y el residuo se acidificó a pH 4 (1 N HCl) y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando 1,99 g (71%) de un aceite de color amarillo que solidificó después de un periodo de reposo.
RMN 1H (DMSO-d6) δ 1,16-1,23 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 1,65-1,75 (m, 1H), 2,15-2,25 (m, 2H), 3,16 (s, 3H), 5,08 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 5,22 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 5,40-5,52 (m, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,14), EM m/z 304 (M+1).
Etapa 5:
Una solución del producto del Ejemplo 452, Etapa 4 en dioxano/HCl 4 N (2 ml) se agitó durante 2 h y después se concentró. El residuo se disolvió en CH3CN (5 ml) y se añadió a una mezcla del ácido (Ejemplo 452, Etapa 3) (120 mg, 0,25 mmol). Se añadieron TBTU (58 mg, 0,25 mmol) y DIPEA (0,06 ml, 0,35 mmol) y la mezcla se agitó durante
5 12 h. El disolvente se retiró y el residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con HCl 1 N, NaHCO3 saturado, se secó sobre MgSO4 y se concentró. El residuo se purificó por TLC preparativa (Analtech 20 x 40 cM, 1000 µ SiO2), dando 128 mg (70%) del Compuesto 452 en forma de un sólido de color castaño.
RMN 1H (DMSO-d6, mezcla de diastereómeros) δ 0,97, 0,99 (s, 9H), 1,23-1,43 (m, 2H), 1,45 (s, 9 H), 1,82-1,83 (m, 1H), 2,00-2,51 (m, 2H), 2,90-2,99 (m, 1H), 3,33 (s, 3H), 3,90-3,99 (m, 1H), 4,01-4,20 (m, 2H), 4,25-4,30 (m, 1H),
10 4,45-4,55 (m, 1H), 4,95-5,10(m, 1H), 5,12-5,25 (m, 1H), 5,71-5,85 (m, 1H), 6,4-6,8 (m a, 1H), 7,46-7,53 (m. 3H), 7,80-7,86 (m, 3H), 7,98-7,99 (m, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,95), EM m/z 672 (M+1).
Ejemplo 453: Preparación del Compuesto 453.
15 Etapa 1:
imagen2
Una mezcla de Ejemplo 452, Etapa 3 (110 mg, 0,23 mmol) en DCM (20 ml), ácido 3-cloroperbenzoico (121,6 mg, 0,57 mmol, perácido al 85%), KHPO4 (0,13 g, 0,94 mmol) y K2HPO4 (0,18 g, 1,05 mmol) se agitó a 23 ºC durante 12
h. La solución se diluyó con DCM, se lavó con agua y NaHCO3 saturado, se secó sobre MgSO4 y se concentró, 20 dando el producto 110 mg, (92%) en forma de un aceite transparente.
RMN 1H (DMSO-d6) δ 0,91 (s, 9H), 1,48 (s, 9H), 2,23-2,28 (m, 1H), 2,65-2,80 (m, 1H), 3,88-3,90 (m, 1H), 4,12 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 4,20 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,27 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 6,76 (d, J= 9,3 Hz, 1H), 7,70-7,80 (m, 2H), 7,88-7,95 (m, JH), 8,11 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 8,17 (d, J= 8,6 Hz, 1H), 8,26 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 8,71 (s, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,72), EM m/z 519 (M+1).
25 Etapa 2:
Una mezcla del producto del Ejemplo 453, Etapa 1(110 mg, 0,212 mmol), amina (Ejemplo 452, Etapa 5a) (0,65 mg, 0,212 mmol), TBTU (48,5 mg, 0,21 mmol) seguido de DIPEA (60,8 ml, 0,35 mmol) y se agitó durante 12 h a 23 ºC. El disolvente se retiró y el residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con HCl 1 N y NaHCO3 saturado, se secó sobre MgSO4 y se concentró. El residuo se purificó por TLC preparativa (eluyendo con MeOH al 10%/CH2Cl2), dando 25 mg (17%) del Compuesto 453 en forma de un sólido de color blanco.
RMN 1H (DMSO-d6, mezcla de diastereómeros) δ 0,93, 0,96 (s,9H), 1,38-1,45 (m, 2H), 1,53, 1,55 (m, 9H), 1,76-1,85 (m, 1H), 2,21-2,40 (m, 2H), 3,13-3,15 (m, 2H), 3,34 (s,3H), 3,91-3,99 (m, 1H), 4,15 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 5,09-5,12 (m, 1H), 5,26-5,31 (m, 1H), 5,72-5,76 (m, 1H), 6,65-6,68 (m, 1H), 6,71-6,76 (m, 1H), 7,67-7,76 (m, 2H), 7,91-7,95 (m, 1H), 8,03 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 8,13 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 8,20 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 8,7 (s, 1H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,76), EM m/z 705 (M+1).
Ejemplo 454: Preparación del Compuesto 454.
Etapa 1:
imagen2
A una suspensión de hidruro sódico (0,91 g, 22,7 mmol) en THF(50 ml) se le añadió N-BOC-trans-4(R)-hidroxi-Lprolina (2,5 g, 10,8 mmol) y la mezcla se agitó a 23 ºC durante 1 h. Se añadió 2-clorometilnaftaleno (1,9 g, 10,8 15 mmol) y la mezcla se agitó durante 12 h a temperatura ambiente. El disolvente se retiró y el residuo se vertió en agua y se lavó con hexanos. La fase acuosa se acidificó (1 N HCl) y se extrajo con EtOAc. La fase de EtOAc se separó, se secó (MgSO4) y se concentró, dando un residuo de color amarillo claro. El aceite se purificó por cromatografía ultrarrápida con 1:1 de EtOAc/hexanos con ácido acético al 1% añadido, dando 1,56 g (39%) del producto deseado en forma de un aceite espeso. RMN 1H: (DMSO-d6, mezcla 3:1 de rotámeros) δ 1,35, 1,37 (s, 9H,
20 principal y secundario, respectivamente), 1,92-2,02, 2,15-2,20 (m, 2H, principal y secundario, respectivamente), 2,35-2,50 (m, 2H), 3,41-3,49 (m, 2H), 4,12-4,16, 4,20-4,21 (m, 2H), 4,65-4,68 (m, 2H), 7,46-7,52 (m, 3H), 7,74-7,91 (m, 4H), (Ácido OH no observado);
CL-EM (tiempo de retención: 1,44, YMC ODS-A C18 S7 3,0 x 50 mm, gradiente MeOH al 10%/H2O, TFA al 0,1% a MeOH al 90%/H2O, TFA al 0,1%), EM m/z 394 (M++1+Na).
25 Etapa 2: A una solución de la sal HCl de una mezcla 1:1 de diaestereoisómeros (1R,2S/1S,2R donde el grupo carboxi es syn con respecto al resto vinilo) de terc-butil éster del 2-(1-etoxicarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-(naftalen-2ilmetoxi)-pirrolidin-1-carboxílico (0,54 g, 1,3 mmol) [preparado por agitación de la N-Boc amina con HCl (4 N) en
imagen2
5 dioxano durante 1 h y después retirada del disolvente al vacío] en CH3CN (50 ml) se le añadieron Boc-4(R)-(2metilnaftil)prolina (0,5 g, 1,3 mmol), TBTU (0,45 g, 1,4 mmol) seguido de DIPEA (0,78 ml, 4,5 mmol). La mezcla se agita durante 12 h y se concentró. El residuo se disolvió en EtOAc/H2O y se lavó con NaHCO3 saturado y NaCl saturado, se secó (MgSO4) y se concentró, dando un aceite espeso de color amarillo (0,6 g, 91%) del producto en forma de una mezcla de diastereómeros.
10 RMN 1H (DMSO-d6) δ: 1,08-1,22 (m, 7 H), 1,23-1,39 (m, 9 H), 2,02-2,18 (m, 1H), 2,25-2,35 (m, 1H), 3,33-3,53 (m, 2H), 3,90-4,14 (m, 4H), 4,45-4,70 (m, 2H), 5,07-5,11 (m, 1H), 5,24-5,30 (m, 1H), 5,58-5,63 (m, 1H), 7,43-7,51 (m, 4H), 7,84-7,96 (m, 3H); EM m/z 531 (M++1+Na).
Etapa 3:
imagen2
15 Una solución del producto del Ejemplo 454, Etapa 2 (600 mg, 1,18 mmol) se agitó con HCl (4 N, 3 ml, 11,8 mmol) en dioxano durante 1 h y después el disolvente se retiró al vacío. El residuo se disolvió en CH3CN (10 ml) se trató con Boc-L-t-Bu-Gly (0,42 g, 1,38 mmol) y TBTU (0,27 g, 1,18 mmol) seguido de DIPEA (0,71 ml, 4,1 mmol). La mezcla se agita durante 12 h y se concentró. El residuo se disolvió en EtOAc/H2O y se lavó con HCl 1 N, NaHCO3 saturado NaCl saturado, se secó (MgSO4) y se concentró, dando un aceite espeso de color amarillo. El producto se purificó
20 por cromatografía ultrarrápida usando como eluyente un gradiente de elución de EtOAc al 5%/Hexanos a EtOAc al 10%/Hexanos, y finalmente EtOAc al 30%/Hexanos, dando el producto en forma de un aceite espeso (0,243 g, 33%) del producto en forma de una mezcla de diastereómeros y rotámeros.
1RMN (DMSO-d6) δ: 0,83-1,00 (m, 10H), 1,34 (s, 9H), 1,58-1,59, 1,65-1,67 (m, 2H), 1,95-1,99, 2,04-2,06, 2,10-2,19, 2,24-2,56 (m, 2H), 3,97-4,04 (m,3H), 4,08-4,17 (m, 3H), 4,29-4,31 (m, 2H), 4,59-4,72 (m, 3H), 5,06-5,10 (m, 1H),
25 5,18-5,30 (m, 1H), 5,60-5,63 (m, 1H), 6,59-6,65,6,70,6,74 (m, 1H), 7,43-7,51 (m, 4H), 7,84-7,96 (m,3H), 8,66, 8,76 (s, 1H);
EM m/z 531 (M++1+Na).
Etapa 4: A una suspensión del producto del Ejemplo 454, Etapa 3 (240 mg, 0,39 mmol) en THF (15 ml) y H2O (2 ml) se le añadió LiOH (82 mg, 1,95 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 12 h y después se concentró hasta que sólo quedó la fase acuosa. El residuo acuoso resultante se acidificó a pH 3,0 mediante la adición de HCl acuoso 1,0 N y se extrajo con EtOAc (2 x 80 ml). Los extractos orgánicos combinados se secó (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío, dando el producto en forma de un sólido de color castaño (200 mg, 0,33 mmol, 85%):
imagen2
RMN 1H (DMSO-d6) δ: 0,86,0,94 (s, 9H principal y secundario, respectivamente), 1,23-1,42 (m, 2H), 1,34 (s, 9H), 1,82,1 (m, 2H), 2,18-2,30 (m, 1H), 3,59-3,73 (m, 3H), 4,0-4,09 (m, 1H), 4,18-4,34 (m,3H), 4,56-4,62 (m, 1H), 4,66-4,67 (m, 1H), 4,82-4,92 (m, 1H), 5,0-5,20 (m, 1H), 5,91-6,08 (m, 1 H), 6,5-6,7 (m, 1H), 7,45-7,59 (m, 3H), 7,82-7,97 (m. 4H), 8,2-8,3, 8,3-F,4 (s, 1H):
CL-EM (tiempo de retención: 1,50), EM m/z 593 (M++1).
Etapa 5:
A una solución del producto del Ejemplo 454, Etapa 4 (190 mg, 0,32 mmol), EDAC (122 mg, 0,64 mmol) y 4-DMAP (78 mg, 0,64 mmol) en THF (20 ml) se le añadió metanosulfonamida disponible en el mercado (122 mg, 1,28 mmol). La solución resultante se agitó durante 2 días y después se añadió DBU (95 µl, 0,64 mmol). La reacción se agitó durante 24 h y después se concentró. El residuo se repartió entre EtOAc (80 ml) y agua y se lavó con HCl (1 N) y NaHCO3 acuoso (2 x 30 ml), se secó (MgSO4) y se purificó por HPLC preparativa (MeOH al 65-90%/Agua/TFA al 0,1%) que dio 56 mg de una mezcla del producto y material de la que se retiró el grupo BOC. El material se purificó adicionalmente por TLC preparativa (eluyendo con MeOH al 10%/CH2Cl2 usando placas de 20 x 40 cM de Analtech), dando el Compuesto 454 en forma de un sólido de color castaño (12 mg, 6%).
RMN 1H (MeOD-d4 mezcla 50/50 de diastereómeros de P1) δ 0,88-0,99 (m, 2H), 1,01, 1,02 (s, 9H diastereómeros principal y secundario, respectivamente), 1,23-1,42 (m, 2H), 1,38 (s, 9H), 1,72-1,79 (m, 1H), 1,86-1,88 (m, 1H), 2,002,10 (m, 2H), 2,10-2,23 (m, 1H), 2,3-2,5 (m, 1H), 3,12, 3,17 (s, 3H), 3,72-3,79 (m, 1H), 4,26-4,41 (m, 3H), 4,72 (d, J= 8,2 Hz, I H), 4,76 (d, J= 8,2 Hz, 1H), 5,09-5,12 (t, J= 9,3 Hz, 1H), 5,28 (dd, J= 3,5, 17,6 Hz, 1H) 5,7-5,8 (m, 1H), 6,55-6,80 (m, 1H), 7,45-7,47 (m, 3H), 7,79-7,83 (m, 4H);
CL-EM (tiempo de retención: 1,48), EM m/z 670 (M++1).
Ejemplo 470: Preparación del Compuesto 470.
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Etapa 1:
A una solución de N-Boc-(4S)-(cis)-Hidroxiprolina-OMe disponible en el mercado (200 mg, 0,82 mmol), trifenilfosfina (320 mg, 1,22 mmol) y 1-naftol (176 mg, 1,22 mmol) en 2,5 ml de tetrahidrofurano se le añadió gota a gota una solución de diazodicarboxilato de dietilo (190 µl, 1,22 mmol) en 1,0 ml de THF durante 10 minutos. Después de agitar durante 5,5 días, la reacción se concentró al vacío. El aceite en bruto de color amarillo se cromatografió sobre una placa de TLC preparativa de 20 x 40 cM (Analtech SiO2) eluyendo con 6:1 de hexanos-acetato de etilo, produciendo el producto deseado en forma de un aceite de color amarillo pálido (150 mg. 33%).
RMN 1H (CDCl3, 500 MHz) δ 1,44 (s, 9H) 2,33 (1H, m), 2,72 (1H, m), 3,77 y 3,38 (2s, 3H, rotámeros), 3,88 (dd, 1H, J = 4,3, 12,4 Hz), 3,97 (d a, 1H), 4,53 y 4,62 (2t, 1H, J= 7,8 Hz, rotámeros), 5,10 (d a, 1H), 6,76 (t, 1H, J= 9,5 Hz), 7,37 (m, 1H), 7,46 (m, 3H), 7,80 (d, 1H, J= 7,7 Hz), 8,18 (m, 1H);
CL-EM A (tiempo de retención: 1,86; EM m/z 394 (M+Na)+
Etapa 2:
A una solución agitada de Boc-(4R)-naftal-1-oxo)-Pro-OEt (150 mg, 0,40 mmol) en 1,5 ml de THF y 0,5 ml de agua se le añadió hidróxido de litio (10 mg). La solución se agitó durante 21 horas a temperatura ambiente y después se diluyó con NaHCO3 0,5 N. La solución básica se extrajo con acetato de etilo y después la fase acuosa se acidificó a pH 2 con la adición gota a gota de HCl conc. Después, esta fase acidificada se extrajo de nuevo con acetato de etilo. Esta segunda fase de acetato de etilo se secó con sulfato de magnesio, se filtró y después se concentró al vacío, produciendo Boc-(4R)-naftal-1-oxo)-Pro-OH en forma de cristales de color rosa pálido (147 mg, 100%).
RMN 1H (CDCl3, 500 MHz) δ 1,47 y 1,48 (2s, 9H, rotámeros), 2,40 y 2,52 (2m, 1H), 2,68 y 2,78 (2m, 1H), 3,78-4,07 (m, 2H), 4,57 y 4,69 (2t, 1H, J= 7,6 y 8,0 Hz, rotámeros), 5,12 (d a, 1H), 6,77 (dd, 1H, J= 7,6, 21,2 Hz), 7,37 (m, 1H), 7,46 (m, 3H), 7,81 (t, 1H, J= 5,8 Hz), 8,19 (m, 1H);
CL-EM A (tiempo de retención: 1,79; EM m/z 358 (M+H)+
Etapa 3:
A una solución de Boc-((4R)-naftal-1-oxo)-Pro-OH (147 mg, 0,41 mmol) y sal clorhidrato de éster etílico del ácido (1R/25)/(1S/2R)-1-amino-2-vinilciclopropanocarboxílico racémico (79 mg, 0,41 mmol) en 2,8 ml de cloruro de metileno se le añadieron DIPEA (250 µl, 1,44 mmol) y TBTU (158 mg, 0,49 mol). La solución resultante se agitó en una atmósfera de nitrógeno durante 20 horas y después se diluyó con 40 ml de cloruro de metileno. La fase orgánica se lavó con agua, NaHCO3 1 N, HCl 1 N, agua y salmuera. Después, la solución se secó con sulfato sódico y se concentró al vacío. La purificación por TLC preparativa produjo dos diastereómeros separados, el diastereómero A con mayor Fr (P2[Boc(4R)-(naftal-1-oxo)prolina]-P1(1R, 2S Vinil Acca)-OEt. 78 mg, 38%) y el diastereómero B con menor Fr (P2[Boc(4R)·(naftal-1-oxo) prolina]-P1(1S, 2R Vinil Acca)-OEt. 91 mg, 45%) en forma de sólidos de color
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blanquecino:
Diastereómero A: P2[Boc(4R)-(naftal-1-oxo)prolina]-P1(1R,2S-Vinil Acca)-OEt: RMN 1H (CDCl3, 500 MHz) δ 1,24 (t, 3H), 1,43 (s, 9H), 1,52 (m, 1H), 1,84 (m, 1H), 2,02 (m, 1H), 2,14 (m, 1H), 2,81 (m, 1H), 3,88 (m, 2H), 4,11 (c, 1H, J= 7,15), 4,19 (m, 1H), 4,54 (m, 1H), 5,15 (m, 1H), 5,31 (dd, 1H, J= 17,0,8 Hz), 5,77 (m, 1H), 6,83 (m, 1H), 7,36 (t, 1H, J= 7,8 Hz), 7,46 (m, 3H), 7,78 (d, 1H, J= 7,6 Hz), 8,14 (d, 1H, J= 8,15 Hz); CL-EM B (tiempo de retención: 1,85; EM m/z 495 (M+H)+ Diastereómero B, Ejemplo 10B: P2[Boc(4R)-(naftal-1-oxo)prolina]-P1(1S, 2R Vinil Acca)-OEt: RMN 1H (d1-CHCl3, 500 MHz) δ 1,24 (t, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,85 (m, 1H), 2,15 (c, 1H, J= 8,9 Hz), 2,40 (m, 1H), 2,78 (m, 1H), 3,78 (m, 1H), 4,12 (m, 2H), 4,52 (m, 1H), 5,15 (m, 1H), 5,31 (m, 1H), 5,79 (m, 1H), 6,80 (m, 1H), 7,35 (t, 1H, J= 7,6 Hz), 7,46 (m, 3H), 7,78 (d, 1H, J= 7,6 Hz), 8,14 (d, 1H, J= 8,10 Hz). CL-EM B (tiempo de retención: 1,85; EM m/z 495 (M+H)+
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Etapa 4:
A P2[Boc(4R)-(naftal-1-oxo)prolina]-P1(1R, 2S Vinil Acca)-OEt (A, mayor Fr) (78 mg, 0,16 mmol) se le añadió HCl 4 N en dioxano (2,0 ml) y la solución se dejó en agitación durante 30 minutos. La concentración al vacío produjo la sal HCl de P2[(4R)-(naftal-4-oxo) prolina)]-P1(1R,2S Vinil Acca)-OEt en forma de un aceite de color amarillo que se tomó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional. A una solución de BOC L-tBuGly (73 mg, 0,32 mmol) y la sal HCl de P2[(4R)-(naftal-4-oxo) prolina)]-P1(1R,2S)Vinil Acca)-OEt (0,16 mmol) en 11 ml de acetonitrilo se le añadieron DIPEA (140 µl, 0,79 mmol) y HATU (132 mg, 0,35 mmol). La solución resultante se agitó en una atmósfera de nitrógeno durante 17 horas y después se diluyó con 100 ml de acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, NaHCO3 1 N, HCl 1 N, agua y salmuera. Después, la solución se secó con sulfato sódico y se concentró al vacío, produciendo el compuesto del título en forma de una película oleosa de color amarillo pálido (92 mg, 96%).
RMN 1H (CDCl3, 500 MHz) δ 1,06 (s, 9H), 1,22 (t, 3H, J= 7,1), 1,38 (s, 9H), 1,41 (m, 1H), 1,82 (m, 1H), 2,13 (m, 1H), 2,42 (m, 1H), 2,79 (m, 1H), 3,92-4,2 (m, 1H), 4,12 (c, 2H, J= 6,6 Hz), 4,38 (t a, 1H), 5,12 (d, 1H, J= 10,3 Hz) 5,25,39 (m, 3H), 5,75 (m, 1H), 6,82 (d, 1H, J= 7,5 Hz), 7,34-7,46 (m, 4H), 7,59 (s a, 1H, NH), 7,76 (d, 1H, J= 7,9 Hz), 8,13 (d, 1H, J= 8,3 Hz):
CL-EM C (tiempo de retención: 2,82; EM m/z 608 (M+H)+
Etapa 5:
A una solución del producto del Ejemplo 470, Etapa 4 (92 mg, 0,15 mmol) en 750 ml de tetrahidrofurano y 250 ml de agua se le añadió hidróxido de litio (4 mg). La solución resultante se agitó durante 28,5 horas, se trató de manera convencional y después se sometió de nuevo a las mismas condiciones, con la excepción de que se añadieron dos veces la misma cantidad de hidróxido de litio (8 mg). Después de 24 horas, la reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua. La fase orgánica se secó con sulfato sódico y se concentró al vacío. El semisólido resultante se purificó por cromatografía ultrarrápida eluyendo con 3:1 de hexanos-acetato de etilo, produciendo BocNH-P3(tBuGly)-P2[(Boc (4R)-(naftal-1-oxo) prolina)]-P1(1R,2S Vinil Acca)-OH en forma de un semisólido transparente (30
5 mg, 34%).
RMN 1H (d4-MeOH, 500 MHz) δ 1,04 (s, 9H), 1,24 (t, 1H, J= 3,9 Hz), 1,32 (s, 9H), 1,66 (m, 1H), 2,07 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 2,71 (m, 1H), 4,04-4,07 (m, 1H), 4,28 (m, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,55 (m, 1H), 5,02 (m, 1H), 5,18-5,29 (m, 2H), 5,90 (m, 1H), 6,54 (m, 1H), 6,92 (m, 1H), 4,26 (m, 4H), 7,77 (m, 1H), 8,15 (m, 1H);
CL-EM C (tiempo de retención: 2,65; EM m/z 580 (M+H)+
10 Etapa 6:
A una solución de BocNH-P3(t-BuGly)-P2[(Boc (4R)-(naftal-1-oxo) prolina)]-P1(1R,2S Vinil Acca)-OH (Ejemplo 470, Etapa 5) (65 mg, 0,11 mmol) en 3,7 ml de tetrahidrofurano se le añadió 1,1'-carbonildiimidazol (22 mg, 0,135 mmol). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 30 minutos y después se enfrió a temperatura ambiente. En este punto, se añadieron metanosulfonamida (27 mg, 0,28 mmol) y DBU (34 µl, 0,224 mmol). La reacción se agitó
15 durante 2 días y después se añadieron más DBU (10 � l) y metanosulfonamida (9 mg). Después de 24 horas, la reacción se diluyó con 50 ml de acetato de etilo y se lavó con 50 ml de HCI 0,25 N y 50 ml de salmuera. La solución se secó con sulfato sódico y se concentró al vacío. El material en bruto se purificó por TLC preparativa (3:2 de acetato de etilo-hexanos), dando el Compuesto 470 (21 mg, 28%) en forma de un sólido de tipo película de color blanco.
20 RMN 1H (d4-MeOH, 500 MHz) δ 1,04 (s, 9H), 1,36 (s, 9H), 1,88 (t, 1H), 2,18 (m, 1H), 2,31 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 3,11 (s a, 3H), 4,076 (m, 1H), 4,30 (d a, 1H), 4,41 (d a, 1H), 4,52 (t aparente, 1H), 5,07 (m, 1H), 5,24-5,30 (m, 2H), 5,80 (m, 1H), 6,92 (d, 1H, J= 7,45 Hz), 7,35-7,46 (m, 4H), 7,76 (d, 1H, J= 8,1 Hz), 8,13 (d, 1H, J= 8,3 Hz);
CL-EM C (tiempo de retención: 2,57; EM m/z 657 (M+H)+
Ejemplo 471: Preparación del Compuesto 471.
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Etapa 1:
A P2[Boc(4R)-(naftal-1-oxo)prolina]-P1(1S, 2R Vinil Acca)-OEt (Ejemplo 470, Etapa 3, menor Fr) (91 mg, 0,18 mmol) se le añadió HCl 4 N en dioxano (2,0 ml) y la solución se dejó en agitación durante 30 minutos. La concentración al vacío produjo la sal HCl de P2[(4R)-(naftal-1-oxo) prolina)]-P1(1S,2R Vinil Acca)-OEt en forma de un aceite de color amarillo que se tomó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.
A una solución de N-Boc-L-terc-leucina-OH o BOC L-tBuGly (85 mg, 0,37 mmol) y la sal HCl de P2[(4R)-(naftal-1oxo)prolina)]-P1(1S,2R Vinil Acca)-OEt (producto obtenido de la reacción mencionada anteriormente) (0,18 mmol) en 13 ml de acetonitrilo se le añadieron DIPEA (160 µl, 0,92 mmol) y HATU (154 mg,0,41 mmol). La solución resultante se agitó en una atmósfera de nitrógeno durante 17 horas y después se diluyó con 100 ml de acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua, NaNCO3 1 N, HCl 1 N, agua y salmuera. Después, la solución se secó con sulfato sódico y se concentró al vacío, produciendo el compuesto del título en forma de una película transparente (53 mg, 47%).
RMN 1H (d1 -CHCl3, 500 MHz) δ 1,02 (s, 9H), 1,22 (t, 3H, J= 7,0 Hz), 1,39 (s, 9H), 1,47 (m, 1H), 1,88 (dd, 1H, J= 8,0, 5,5 Hz), 2,07 (m, 1H), 2,42 (m, 1H), 2,80 (dt, J= 13,8, 6,0 Hz, 1H), 3,96 -(m, 1H), 4,14 (m, 2H), 4,34 (m, 2H), 4,77 (t, 1H, J= 7,2 Hz), 5,09-5,33 (m, 3H), 5,72 (m, 1H), 6,82 (d, 1H, J= 7,6 Hz), 7,34-7,50 (m, 4H), 7,77 (d, 1H, J= 8,0 Hz), 8,15 (d, 1H, J= 8,25 Hz);
CL-EM C (tiempo de retención: 2,81: EM m/z 608 (M+H)+
Etapa 2:
Este producto se preparó de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 470, Etapa 5 (5 mg, 10%), con la excepción de que se usó el producto del Ejemplo 471, Etapa 1.
RMN 1H (d4-MeOH, 500 MHz) δ 0,99 (s, 9H), 1,28 (m, 1H), 1,37 (s, 9H), 1,60 (m, 1H), 2,06 (m, 1H), 2,28 (m, 1H), 2,66 (m, 1H), 3,91 (m, 1H), 4,33 (m, 2H), 4,61 (t a, 1H), 4,97 (d, 1H, J= 11,0 Hz), 5,19 (m 2H), 6,09 (m, 1H), 6,88 (d, 1H, J= 7,1 Hz), 7,35-7,46 (m, 4H), 7,78 (d, 1H, J= 8,2 Hz), 8,12 (d, 1H, J= 8,3 Hz);
CL-EM C (tiempo de retención: 2,60; EM m/z 580 (M+H)+
Etapa 3:
A una solución de BocN-P3(L-tBuGly)-P2[(Boc (4R)-(naftal-1-oxo) prolina)]-P1(1S,2R Vinil Acca)-COOH (38 mg, 0,066 mmol) (Ejemplo 471, Etapa 2) en 2,2 ml de tetrahidrofurano se le añadió 1,1'-carbonildiimidazol (13 mg, 0,079 mmol). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 30 minutos y después se enfrió a temperatura ambiente. En este punto, se añadieron metanosulfonamida (16 mg, 0,16 mmol) y DBU (20 µl, 0,13 mmol). La reacción se agitó durante 2 días y después se añadieron más DBU (10 µl) y metanosulfonamida (9 mg). Después de 24 horas, la reacción se diluyó con 50 ml de acetato de etilo y se lavó con 50 ml de HCI 0,25 N y 50 ml de salmuera. La solución se secó con sulfato sódico y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó usando una placa de TLC preparativa de 20 x 40 cM de Analtech (eluyente 3:2 de acetato de etilo-hexanos), dando el Compuesto 471 (25 mg, 58%) en forma de un sólido de tipo película de color blanco.
RMN 1H (d4-MeOH, 500 MHz) δ 1,03 (s, 9H), 1,34 (s. 9H), 1,80 (m, 1H), 2,18 (m, 1H), 2,31 (m, 1H), 2,68 (m, 1H), 3,09 (s a, 3H), 4,04 (m, 1H), 4,20-4,44 (m, 2H), 4,51 (t aparente, 1H), 5,08 (m, 1H), 5,25-5,31 (m, 2H), 5,77 (m, 1H), 6,93 (d, 1H, 3=7,6 Hz), 7,36-7,45 (m, 4H), 7,77 (d, 1H, J= 8,0 Hz), 8,15 m, 1H);
CL-EM C (tiempo de retención: 2,57; EM m/z 657 (M+H)+
Sección L:
Ejemplo 472: Estudios Biológicos:
Ensayo peptídico por FRET del complejo NS3/A4 proteasa del VHC recombinante.
El propósito de este ensayo in vitro era medir la inhibición de los complejos NS3 proteasa del VHC, derivados de las cepas BMS, H77C o J416S, como se describe a continuación, por los compuestos de la presente invención. Este ensayo proporciona indicios de cómo serian de eficaces los compuestos de la presente invención inhibiendo la actividad proteolítica del VHC.
El Dr. T. Wright, Hospital de San Francisco, proporcionó suero de un paciente infectado por el VHC. Se construyó un molde de ADNc (acido desoxirribonucleico complementario) de longitud completa, modificado por ingeniería genética, del genoma del VHC (cepa BMS) procedente de fragmentos de ADN obtenidos por PCR de transcripción inversa (RT-PCR) de ARN (acido ribonucleico) de suero y usando cebadores seleccionados basándose en la homología entre otras cepas de genotipo 1a. A partir de la determinación de la secuencia de genoma completo, se asignó un genotipo 1a para el aislado del VHC de acuerdo con la clasificación de Simmonds y col. (véase P Simmonds, KA Rose, S Graham, SW chain, F McOmish, BC Dow, EA Follett, PL Yap y H Marsden, J. Clin. Microbiol.31 (6), 1493-1503 (1993)). Se demostró que la secuencia de aminoácidos de la región no estructural, NS25B, era >97% idéntica al genotipo 1a del VHC (H77C) y 87% idéntica al genotipo 1b (J4L6S). Los clones infecciosos, H77C (genotipo 1 a) y J4L6S (genotipo1 b) se obtuvieron de R. Purcell (NIH) y las secuencias se publicaron en Genbank (AAB67036, véase Yanagi, M., Purcell, R.H., Emerson, S.U. y Bukh, J. Proc. Natl. Acad. Sci. EEUU. 94(16) ,8738-8743(1997); AF054247, véase Yanagi, M., St Claire, M., Shapiro, M., Emerson, S.U., Purcell, R. H. y Bukh, J, Virology 244 (1), 161-172 1998)).
Las cepas de BMS, H77C y J4L6S se usaron para la producción de complejos NS3/4A proteasa recombinante El ADN que codifica el complejo (aminoácidos 1027 a 1711) NS3/4A proteasa recombinante del VHC para estas cepas se manipuló como describen P. Gallinari y col. (véase Gallinari P, Paolini C, Brennan D, Nardi C, Steinkuhler C, De Francesco R. Biochemistry. 38(17):5620-32, (1999)). En resumen, en el extremo 3´ de la región codificante de NS4A se añadió una cola solubilizante de tres lisinas. Para impedir la escisión proteolítica de la etiqueta de lisina, se cambió la cisteína en la posición P1 del sitio de escisión NS4A-NS4B (aminoácido 1711) por una glicina. Además, por PCR, se introdujo una mutación de cisteína a serina, en la posición del aminoácido 1454 para impedir la escisión autolítica en el dominio helicasa de NS3. El fragmento de ADN variante se clonó en el vector de expresión bacteriano pET21b (Novagen) y el complejo NS3/4A se expresó en la cepa BL21 de Escherichia coli (DE3) (Invitrogen) siguiendo del protocolo descrito por P. Gallinari y col. (véase Gallinari P. Brennan D, Nardi C, Brunetti M, Tomei L, Steinkuhler C, De Francesco R., J Virol. 72(8):6758-69 (1998)) con modificaciones. En resumen, se indujo la expresión de NS3/4A con isopropil β-D-1-tiogalactopiranósido (IPTG) 0,5 mM durante 22 horas a 20 º C. Una fermentación típica (10 l) proporcionó aproximadamente 80 g de pasta celular húmeda. Las células se resuspendieron en tampón de lisis (10 ml/g) que consistía en N-(2-hidroxietil) piperazina-N’-(2-ácido etano sulfónico) (HEPES) 25 mM, pH 7,5, glicerol al 20%, cloruro de sodio (NaCl) 500 mM, Triton-X100 al 0,5%, 1 µg/ml de lisozima, cloruro de magnesio (MgCl2) 5 mM, 1 µg/ml de Dnasa l, β-Mercaptoetanol (βME) 5 mM, inhibidor proteasa-sin ácido etilendiamina tetraacético (EDTA) (Roche), se homogeneizó y se incubó durante 20 minutos a 4º C. El homogeneizado se expuso a ultrasonidos y se depuró por ultracentrifugación a 235000 g durante 1 hora a 4 ºC. Se añadió imidazol al sobrenadante a una concentración final de 15 mM y el pH se ajustó a 8,0. El extracto de proteína en bruto se cargó en una columna de Níquel -ácido nitrilotriacético (Ni-NTA) previamente equilibrada con tampón B (HEPES 25mM, pH8.0, glicerol al 20%, NaCl 500mM, Triton-X100 al 0.5%, Imidazol 15mM, βME 5 mM). La muestra se cargó a un caudal de 1 ml/min. La columna se lavó con volúmenes de 15 columnas de tampón C (el mismo que el tampón B pero con Triton-X 100 al 0,2 %). La proteína se eluyó con volúmenes de 5 columnas de tampón D (el mismo que el tampón C pero con Imidazol 200 mM).
Las fracciones que contenían complejo NS3/4A proteasa se agruparon y se cargaron en una columna desalinizada Superdex-S 200 previamente equilibrada con tampón D (HEPES 25 mM, pH 7.5, glicerol al 20 %, NaCl 300mM, Triton-X100 al 0.2%, βME 10 mM). La muestra se cargó a un caudal de 1mL/ min. Las fracciones que contenían el complejo NS3/4A proteasa se agruparon y se concentraron a aproximadamente 0,5 mg/ml. Se consideró que la pureza de los complejos NS3/4A proteasa, derivados de las cepas de BMS, H77C y J4L6S, era superior al 90% mediante SDS-PAGE y análisis de espectrometría de masas.
La enzima se conservó a -80º C, se descongeló en hielo y se diluyó antes de su uso en tampón de ensayo. El sustrato usado para el ensayo NS3/A4 proteasa fue RET S 1 (Sustrato depsipeptídico por Transferencia de Energía por Resonancia; AnaSpec, Inc. Cat Nº 22991) (péptido FRET), descrito por Taliani et col. en Anal. Biochem. 240(2):60-67 (1996). La secuencia de este péptido se basa en líneas generales en el sitio de escisión nativo NS4/NS4B con la diferencia que existe un engarce éster en lugar de un enlace amina en el sitio de escisión. El sustrato peptídico se incubó con uno de los tres complejos recombinantes NS3/A4, en ausencia o presencia de un compuesto de la presente invención y la formación del producto de reacción fluorescente se siguió en tiempo real usando un Cytofluor de serie 4000.
Los reactivos fueron los siguientes: el HEPES y el Glicerol (Ultra puro) se obtuvieron de GIBCO-BRL. El dimetil sulfóxido (DMSO) se obtuvo de Sigma. El β-mercaptotanol se obtuvo de Bio Rad.
Tampón de ensayo: HEPES 50mM, pH 7.5; NaCl 0,15 M, Triton al 0,1 %; glicerol al 15 %; βME 10 mM. Sustrato: concentración final 2 µM (de una solución madre 2mM en DMSO conservada a -20°C). NS3/4A del VHC de tipo 1a (1b), concentración final 2-3 nM (de una solución madre 5µM en HEPES 25 mM, pH 7.5, glicerol al 20%, NaCI 300 mM, Triton-X 100 al 0,2%, βME 10 mM).
El ensayo se realizó en una placa negra de poliestireno de 96 pocillos de Falcon. Cada pocillo contenía 25 µl de complejo NS3/4A proteasa en tampón de ensayo, 5 µl de un compuesto de la presente invención en DMSO al 10 %/ tapón de ensayo y 25 µl de sustrato en tampón de ensayo. También se preparó un control (sin compuesto) en la misma placa de ensayo. El complejo enzimático se mezcló con el compuesto o la solución control durante 1 minuto antes de iniciar la reacción enzimática por la adicción de sustrato. La placa de ensayo se leyó inmediatamente usando el Cytofluor de la serie 4000 (Perspective Biosystems). El instrumento se ajustó para leer una emisión de 340 nm y una excitación de 490 nm a 25 ºC. Las reacciones continuaron generalmente durante aproximadamente 15 minutos.
El porcentaje de inhibición se calculó con la siguiente ecuación:
imagen2
En la que δF es el cambio en fluorescencia durante el intervalo lineal de la curva. Se aplicó un ajuste de curva no lineal a los datos de concentración de inhibición y se calculó la concentración eficaz al 50 % (CI50) usando el programa informático de ajuste Excel Xl usando la ecuación, y=A+ ((B-A)/ (1+ ((C/x) ^D))).
Se encontró que todos los compuestos ensayados tenían valores CI50 de 10 µM o menores. Además, se encontró que los compuestos de la presente invención, ensayados frente a más de un tipo de complejo NS3/A4, tenían propiedades inhibidoras similares sin embargo los compuestos demostraron uniformemente mayor potencia contra las cepas 1b en comparación con las cepas 1a.
Ensayos de especificidad
Se realizaron ensayos de especificidad para demostrar la selectividad de los compuestos de la presente invención inhibiendo NS3/4A proteasa del VHC en comparación con otras serina o cisteína proteasas.
Las especificidades de los compuestos de la presente invención se determinaron frente a una diversidad de serina proteasas: elastasa leucocitaria humana (ELH), elastasa pancreática porcina (EPP) y quimiotripsina pancreática humana y una cisteína proteasa: catepsina B hepática humana. En todos los casos, se usó un protocolo de formato de placa de 96 pocillos usando sustrato colorimétrico de p-nitroanilina (pNA) especifico para cada enzima, como se ha descrito anteriormente (Patente WO 00/09543) con algunas modificaciones con respecto a los ensayos de serina proteasa. Todas las enzimas se adquirieron en Sigma mientras que los sustratos se adquirieron en Bachem.
Cada ensayo incluyó una preincubación inhibidora enzimática de 2 horas a TA seguido de la adición de sustrato e hidrólisis a ~30% de conversión según se mide en un lector de microplaca Spectramax Pro. Las concentraciones de los compuestos variaron de 100 a 0,4 µM dependiendo de su potencia.
Las condiciones finales para cada ensayo fueron las siguientes:
Clorhidrato de Tris(hidroximetil) aminometano (Tris-HCI) 50mM, pH 8, sulfato de sodio (Na2SO4) 0,5M, NaCl
50mM, EDTA 0,1 mM, DMSO al 3 %, Tween-20 al 0,01 % con:
Succ-AAA-pNA 133 µM y HNE 20nM o PPE 8nM; succ-AAV-pNA 133 µM y HLE 15 nM; succ-AAPF-pNA 100 µM y Quimiotripsina 250pM.
NaHPO4 (fosfato de hidrogeno de sodio) 1000mM, pH 6, EDTA 0,1mM, DMSO al 3%, TCEP (clorhidrato de Tris
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
(2-carboxietil) fosfina) 1mM, Tween-20 al 0,01 %, Z-FR-pNA 30 µM y Catepsina B (reserva enzimática activada en tampón que contiene TCEP 20 mM antes del uso) 5 nM.
El porcentaje de inhibición se calculó usando la formula:
imagen2
A los datos de concentración-inhibición se les aplicó un ajuste de curva no lineal y la concentración eficaz al 50 % (CI50) se calculó usando el programa informático de ajuste Excel XI.
Ensayo del replicón del VHC basado en células
Se estableció un sistema de célula completa del replicón del VHC como describen Lohmann V, Korner F, Koch J, Herian U Theilmann L, Bartenschlager R., Science 285(5424):110-3 (1999). Este sistema permitió a los autores de la presente invención evaluar los efectos de los compuestos proteasa del VHC en la replicación del ARN del VHC. En resumen, usando la secuencia 1 B de la cepa del VHC descrita en el trabajo de Lohmann (Nº de acceso: AJ238799) se generó un ADNc del VHC codificando el sitio interno de entrada al ribosoma (IRES, siglas en inglés) en 5’, el gen de resistencia a neomicina, el IRES-VEMC (virus de la encefalomiocarditis) y las proteínas no estructurales del VHC, NS3-NS5B y la región no traducida (RNT) 3’. Se transfectaron in vitro transcritos de ADNc en la estirpe celular del hepatoma humano, Huh7. Se consiguió seleccionar células que expresaban de manera constitutiva el replicón del VHC en presencia del marcador de selección, neomicina (G 418). Las estirpes celulares resultantes se caracterizaron para la producción de ARN de cadena positiva y negativa y la producción de proteína a lo largo del tiempo.
Se cultivaron células Huh7, que expresaban de manera constitutiva el replicón del VHC, en medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) que contenía suero fetal de ternero (SFT) al 10 % y 1 mg/ml de G418 (Gibco-BRL). Las células se sembraron la noche anterior (1,5 x 104 células/pocillo) en placas estériles de cultivo de tejido de 96 pocillos. Los controles con compuesto y sin compuesto se prepararon en DMEM que contenía SFT al 4 %, penicilina/estreptomicina 1:100, L-glutamina 1:100 y DMSO al 50 % en la placa de dilución (concentración final de DMSO al 0,5 % en el ensayo). Se añadieron mezclas de compuesto/DMSO a las células y se incubó durante 4 días a 37 ºC. Después de 4 días, las placas se aclararon cuidadosamente con solución salina tamponada con fosfato (PBS) (((3 veces 150 µl). Se realizó la lisis de las células con 25 µl de un reactivo de ensayo de lisis que contenía el péptido FRET (RET S1, como se ha descrito en el ensayo enzimático in vitro). El reactivo de ensayo de lisis se preparó a partir de reactivo de lisis de cultivo celular Luciferasa 5X (Promega Nº E153A) diluido a 1X con agua destilada, se añadió NaCl a una concentración final de 150 mM, el péptido FRET se diluyó a una concentración final de 10 µM de una reserva de 2 mM en DMSO al 100%. Después la placa se colocó en el instrumento Cytofluor 4000 que se había ajustado a una excitación de 340 nm/emisión 490, modo automático durante 21 ciclos y la placa se leyó de modo cinético. Las determinaciones de CE50 se realizaron como se describe para las determinaciones de CI50.
Como un ensayo secundario, las determinaciones de CE50 del ensayo FRET del replicón se confirmaron en un ensayo de ARN cuantitativo. Se realizó la lisis de las células usando el kit Rneasy (Qiagen). El ARN total purificado de normalizó usando RiboGreen (Jones LJ, Yue ST, Cheung CY, Singer VL, Anal. Chem., 265(2):368-74 (1998)) y la cuantificación relativa de la expresión del ARN del VHC se evaluó usando el procedimiento Taqman (Kolykhalov AA, Mihalik K, Feinstone SM, Rice CM, Journal de Virology 74, 2046-2051 (2000)) y el kit de una etapa Platinum Quantitative RT-PCR Thermoscript (Invitrogen Nº de cat. 11731-015). Brevemente, se añadió ARN preparado a un volumen de 5 µl(≤ 1ng) a una mezcla Ready de 20 µl que contenía lo siguiente: Mezcla de reacción Thermoscrip 1,25 X (que contenía sulfato de magnesio y 2-dexosinucleosido 5` trifosfatos (dNTP), dNTP 3 mM, cebador directo 200 nM (secuencia: 5’-gggagagccatagtggtctgc-3’), cebador inverso 600nM (5’-cccaaatctccaggcattga-3’), sonda 100 nM (5’-6-FAM-cggaattgccaggacgaccgg-BHQ-1-3’)(FAM: amidina aminohexil fluoresceína; BHQ: Inactivador Black Hole), colorante de referencia Rox 1 µM (Invitrogen cat Nº 12223-012) y los cebadores AII de mezcla Taq polimerasa Thermoscript Plus Platinum se diseñaron con el programa informático AB1 Prism 7700 y se obtuvieron procedentes de Biosearch Technologies, Novato, CA. Las muestran que contenían concentraciones conocidas de transcripto de ARN del VHC se procesaron como patrones. La expresión del ARN del VHC se cuantificó usando el siguiente protocolo de ciclación (50 ºC, 30 min, 95 ºC, 5 min, 40 ciclos de 95 ºC, 15 sec, 60 ºC, 1 min) como se describe en el manual de Perkin Elmer usando el detector de secuencia AB1 Prism 7700.
Ejemplos Biológicos
Los compuestos representativos de la invención se evaluaron en el ensayo celular de replicón del VHC y/o en los diversos ensayos de especificidad descritos. Por ejemplo, se encontró que el compuesto 34 tenía un valor de CI50 de 23 nanomolar (nM) frente a NS3/A4 de la cepa BMS en el ensayo enzimático. Se obtuvieron valores de potencia similares con las cepas H77C (CI50 de 3 nM) y J4L6S (CI50 de 2,9 nM) publicadas. El valor de CE50 en el ensayo de replicón fue de 166 nM.
En los ensayos específicos, se encontró que el mismo compuesto tenia la siguiente actividad: HLE > 100 µM; PPE >200 µM; Quimiotripsina > 200 µM; Catepsina B > 200 µM. Estos resultados indican que esta familia de compuestos es muy específica para la NS3 proteasa y que muchos de estos miembros inhiben la replicación del replicón del VHC.
5 Los compuestos de la presente invención se ensayaron y se encontró que tenían actividades en los siguientes intervalos:
Intervalos de actividad de CI50 (cepa BMS NS3/4A): A es 10-100 micromolar (µM); B es 1-10 µM; C es 0,1-1 µM; D es <0,1 µM
Intervalos de actividad de CE50 (para los compuestos ensayados): A es 10-100 µM; B es 1-10 µM; C es 0,1-1 µM; D 10 es<0,1 µM.
Obsérvese que usando el número de ejemplo de Patente y el número de compuesto de Patente mostrado en la tabla pueden encontrarse las estructuras de los compuestos en este documento.
De acuerdo con la presente invención, preferentemente los compuestos tienen una actividad biológica (CE50) de 10 µM o menor, más preferentemente 1 µM o menor y más preferentemente 100 nM o menor.
15
TABLA 1 (continuación)
imagen63
Actividad Biológica
Número de
Intervalo de CI50
Intervalo de CE50
Número de compuesto de Patente
ejemplo de Patente
D
D
29
29
D
D
30
30
D
D
31
31
D
D
32
32
D
D
33
33
D
C
34
34
D
D
35
35
D
D
36
36
D
D
37
37
D
D
38
38
D
D
39
39
D
C
40
40
D
D
41
41
D
D
42
42
C
B
45
45
C
B
46
46
D
C
47
47
B
48
48
B
49
49
C
B
50
50
B
52
52
C
B
53
53
D
C
55
55
D
D
56
56
D
C
57
57
D
D
58
58
D
C
59
59
D
B
60
60
(continuación)
Actividad Biológica
Número de
Intervalo de CI50
Intervalo de CE50
Número de compuesto de Patente
ejemplo de Patente
C
B
61
61
D
D
62
62
D
B
63
63
D
D
64
64
D
C
65
65
D
C
66
66
D
D
67
67
D
D
68
68
D
D
69
69
D
D
70
70
D
D
71
71
D
C
72
72
D
C
73
73
D
D
74
74
D
D
75
75
D
D
76
76
D
C
77
77
D
B
78
78
D
C
79
79
D
B
80
80
D
C
81
81
D
C
82
82
D
C
83
83
D
C
84
84
C
B
85
85
B
A
86
86
B
A
87
87
B
A
88
88
D
D
89
89
D
C
91
91
D
D
92
92
(continuación)
Actividad Biológica
Número de
Intervalo de CI50
Intervalo de CE50
Número de compuesto de Patente
ejemplo de Patente
C
C
93
93
D
D
94
94
D
C
95
95
D
D
96
96
D
D
97
97
B
99
99
C
B
100
100
D
D
101
101
D
D
102
102
D
D
103
103
D
D
104
104
D
D
105
105
D
D
106
106
D
C
107
107
D
D
108
108
D
D
109
109
D
C
110
110
D
C
120
120
D
C
121
121
D
C
122
122
D
C
123
123
C
B
124
124
D
D
125
125
D
C
126
126
D
C
127
127
D
C
128
128
C
C
129
129
D
C
130
130
C
B
13J
131
D
B
132
132
C
B
133
133
(continuación)
Actividad Biológica
Número de
Intervalo de CI50
Intervalo de CE50
Número de compuesto de Patente
ejemplo de Patente
D
C
134
134
D
C
135
135
D
C
136
136
D
D
137
137
D
D
138
138
D
C
139
139
D
B
140
140
D
D
141
141
D
D
142
142
D
D
143
143
D
C
144
144
D
C
145
145
D
D
146
146
D
B
147
147
D
D
148
148
D
D
149
149
D
D
150
150
D
D
151
151
D
D
152
152
D
D
153
153
D
C
154
154
D
D
155
155
D
C
180
180
D
C
181
181
D
C
182
182
D
D
183
183
D
D
185
185
D
D
186
186
D
C
187
187
D
C
188
188
(continuación)
Actividad Biológica
Número de
Intervalo de CI50
Intervalo de CE50
Número de compuesto de Patente
ejemplo de Patente
D
C
189
189
D
C
190
190
D
C
191
191
D
D
192
192
D
C
193
193
D
C
194
194
D
D
195
195
D
B
196
196
C
A
197
197
D
C
198
198
D
C
199
199
D
D
200
200
D
D
201
201
D
B
202
202
D
C
204
204
D
D
206
206
D
D
207
207
D
C
209
209
D
D
210
210
D
D
211
211
D
D
212
212
D
D
213
213
D
D
215
215
D
D
219
219
D
D
220
220
D
D
223
223
D
C
224
224
D
C
225
225
D
D
227
227
D
D
229
229
C
C
230
230
(continuación)
Actividad Biológica
Número de
Intervalo de CI50
Intervalo de CE50
Número de compuesto de Patente
ejemplo de Patente
B
231
231
D
D
232
232
C
C
233
233
D
C
235
235
D
C
237
237
D
C
238
238
D
D
239
239
D
D
240
240
D
D
241
241
D
B
242
242
C
A
243
243
D
A
244
244
C
245
245
D
D
250
250
D
D
251
251
D
D
252
252
D
D
253
253
D
D
254
254
D
C
255
255
A
256
256
D
D
257
257
D
D
258
258
D
D
259
259
D
C
260
260
D
D
261
261
D
D
262
262
C
C
263
263
C
B
264
264
D
D
265
265
(continuación)
Actividad Biológica
Número de
Intervalo de CI50
Intervalo de CE50
Número de compuesto de Patente
ejemplo de Patente
D
D
266
266
D
D
267
267
D
D
268
268
D
C
269
269
D
C
270
270
D
C
271
271
D
D
272
272
D
D
273
273
D
C
274
274
D
D
275
275
D
D
276
276
D
D
277
277
D
D
278
278
D
D
279
279
D
D
280
280
D
D
281
281
D
C
282
282
D
C
283
283
C
A
284
284
D
D
285
285
D
D
286
286
D
C
287
287
D
B
288
288
D
C
289
289
D
D
290
290
D
D
291
291
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C
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292
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C
293
293
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C
294
294
C
B
295
295
D
C
296
296
(continuación)
Actividad Biológica
Número de
Intervalo de CI50
Intervalo de CE50
Número de compuesto de Patente
ejemplo de Patente
C
B
297
297
D
D
298
298
D
C
299
299
D
C
300
300
D
D
320
320
D
C
321
321
D
D
322
322
D
C
323
323
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C
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324
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D
325
325
D
D
326
326
D
D
327
327
D
D
328
328
D
D
329
329
D
D
330
330
D
331
331
C
C
334
334
D
B
335
335
C
B
336
336
C
B
337
337
D
B
338
338
D
B
339
339
D
A
340
340
B
341
341
B
342
342
B
343
343
C
344
344
B
A
345
345
B
346
346
(continuación)
Actividad Biológica
Número de
Intervalo de CI50
Intervalo de CE50
Número de compuesto de Patente
ejemplo de Patente
C
A
347
347
A
348
348
B
349
349
C
A
350
350
B
351
351
A
352
352
A
353
353
B
354
354
C
A
355
355
C
B
356
356
D
C
357
357
C
B
370
370
D
D
371
371
D
D
372
372
D
D
373
373
D
C
374
374
D
D
375
375
D
D
376
376
D
C
377
377
D
D
378
378
D
D
379
379
D
C
380
380
D
C
381
381
D
C
382
382
D
D
383
383
D
D
384
384
D
D
385
385
C
B
386
386
(continuación)
Actividad Biológica
Número de
Intervalo de CI50
Intervalo de CE50
Número de compuesto de Patente
ejemplo de Patente
D
D
410
410
D
C
411
411
D
D
412
412
D
D
413
413
D
D
414
414
D
D
415
415
D
C
420
420
D
C
421
421
D
B
422
422
C
423
423
D
C
424
424
C
B
425
425
D
C
426
426
D
C
427
427
D
C
428
428
D
D
429
429
D
C
430
430
D
C
431
431
D
C
432
432
C
B
433
433
D
C
434
434
D
C
435
435
D
C
436
436
D
C
437
437
D
C
438
438
D
C
450
450
B
451
451
B
452
452
(continuación)
Actividad Biológica
Número de
Intervalo de CI50 Intervalo de CE50 Número de compuesto de Patente
ejemplo de Patente 453
453 C
B
454
454 C
470
470 B
471
471
imagen2
Sección M:
Tabla 2
Los siguientes compuestos pueden fabricarse usando los procedimientos descritos en el presente documento y
5 específicamente en las secciones A a K de la sección de ejemplificación y más específicamente en las secciones B, E, F y G. Además, debe quedar claro que cada uno de los grupos B, R3, R2 y R1 que se muestran a continuación puede reemplazarse por cualquiera de los grupos ejemplificados en las secciones A a K y en cualquier otra parte del presente documento o designado en la Fórmula 1. Por ejemplo, el grupo R3 en la Tabla 2 se muestra como un grupo t-butilo, pero un experto en la materia reconocerá que para cada una de las entradas que se citan a continuación
10 este grupo podría reemplazarse por un grupo isopropilo o un alquilo C1-6 sustituido con un alcoxi. O el grupo B que se muestra a continuación podría reemplazarse por un resto terc-butil urea para cada una de las entradas que se citan a continuación.
imagen2
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5
10
15
20
25
30
35
40
45

Claims (48)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto que tiene la fórmula
    imagen1
    en la que:
    (b)
    m es 1ó 2;
    (c)
    n es 1ó 2;
    (d)
    R2 es H, alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o cicloalquilo C3-7, cada uno opcionalmente sustituido con halógeno;
    (e)
    R3 es alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con halo, ciano, amino, dialquilamino C1-6, arilo C6-10, alquilarilo C714, alcoxi C1-6, carboxi, hidroxi, ariloxi, alquilariloxi C7-14, alquil C2-6-éster, alquilaril C8-15-éster; alquenilo C3-12, cicloalquilo C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10, en los que el cicloalquilo o alquilcicloalquilo está opcionalmente sustituido con hidroxi, alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o alcoxi C1-6; o R3 junto con el átomo de carbono al que está unido forma un grupo cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido con alquenilo C2-6;
    (f)
    Y es H, fenilo sustituido con nitro, piridilo sustituido con nitro o alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con ciano, OH o cicloalquilo C3-7; con la condición de que si R4 o R5 es H entonces Y sea H;
    (g)
    B es H, alquilo C1-6, R4-(C=O)-, R4O(C=O)-, R4-N(R5)-C(=O)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2-o R4-N(R5)-SO2-;
    (h)
    R4 es (i) alquilo C1-10 opcionalmente sustituido con fenilo, carboxilo, alcanoílo C1-6, 1-3 halógenos, hidroxi, -Oalquilo C(O) C1-6, alcoxi C1-6, amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, amido o (alquil inferior)amido; (ii) cicloalquilo C3-7, cicloalcoxi C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10, cada uno opcionalmente sustituido con hidroxi, carboxilo, (alcoxi C1-6)carbonilo, amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, amido o (alquil inferior)amido;
    (iii) arilo C6-10 o arilalquilo C7-16, cada uno opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, halógeno, nitro, hidroxi, amido, (alquil inferior)amido o amino opcionalmente sustituido con alquilo C1-6; (iv) Het; (v) biciclo(1.1.1)pentano;
    o (vi) -C(O)Oalquilo C1-6, alquenilo C2-6 o alquinilo C2-6;
    (i)
    R5 es H; alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con 1-3 halógenos; o alcoxi C1-6 con la condición de que R4 sea alquilo C1-10;
    (j)
    X es O, S, SO, SO2, OCH2, CH2O o NH;
    (k)
    R' es Het; o arilo C6-10 o alquilarilo C7-14, opcionalmente sustituido con Ra; y
    (l)
    Ra es alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, cicloalcoxi C3-7, halo-alquilo C1-6, CF3, mono-o di-halo-alcoxi C16, ciano, halo, tioalquilo, hidroxi, alcanoílo, NO2, SH, amino, alquil C1-6-amino, dialquil (C1-6)-amino, dialquil (C1-6)amida, carboxilo, carboxi (C1-6)-éster, alquil C1-6-sulfona, alquil C1-6-sulfonamida, dialquil (C1-6)(alcoxi)amina, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros;
    con la condición de que cuando el término "heterociclo" o "Her" se refiere a heterociclos bicíclicos de 7-12 miembros y a heterociclos monocíclicos de 5-7 miembros; en la que el heterociclo bicíclico puede contener de uno a tres sustituyentes en cualquiera de los átomos de carbono del anillo seleccionados entre alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, cicloalcoxi C3-7, halo-alquilo C1-6, CF3, mono-o di-halo-alcoxi C1-6, ciano, halo, tioalquilo, hidroxi, alcanoílo, NO2, SH, amino, alquil C1-6-amino, dialquil (C1-6)-amino, dialquil (C1-6)-amida, carboxilo, carboxi (C1-6)éster, alquil C1-6-sulfona, alquil C1-6-sulfonamida, alquil C1-6-sulfóxido, dialquil (C1-6)(alcoxi)amina, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros, en la que cuando dos sustituyentes están unidos a átomos de carbono vecinos del heterociclo bicíclico, pueden unirse para formar un anillo que contiene hasta dos heteroátomos seleccionados entre oxígeno y nitrógeno;
    en la que el heterociclo monocíclico puede contener de uno a tres sustituyentes en cualquiera de los átomos del anillo seleccionados entre alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, cicloalcoxi C3-7, halo-alquilo C1-6, CF3, mono-o dihalo-alcoxi C1-6, ciano, halo, tioalquilo, hidroxi, alcanoílo, NO2, SH, amino, alquil C1-6-amino, dialquil (C1-6)-amino, dialquil (C1-6)-amida, carboxilo, carboxi (C1-6)-éster, alquil C1-6-sulfona, alquil C1-6-sulfóxido, alquil C1-6-sulfonamida, dialquil (C1-6)(alcoxi)amina, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros; el X-R' no sea o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo.
    imagen2
  2. 2.
    El compuesto de la reivindicación 1 en el que R1 es cicloalquilo C3-7.
  3. 3.
    El compuesto de la reivindicación 1 en el que R2 es alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o cicloalquilo C3-7.
  4. 4.
    El compuesto de la reivindicación 3 en el que R2 es alquenilo C2-6.
  5. 5.
    El compuesto de la reivindicación 1 en el que R3 es alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con arilo C6, alcoxi C1-6, carboxi, hidroxi, ariloxi, alquilariloxi C7-14, alquil C2-6-éster, C8-15 alquilariléster, alquenilo C3-12, cicloalquilo C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10.
  6. 6.
    El compuesto de la reivindicación 5 en el que R3 es alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con alcoxi C1-6; o cicloalquilo C3-7.
  7. 7.
    El compuesto de la reivindicación 1 en el que Y es H.
  8. 8.
    El compuesto de la reivindicación 1 en el que B es H, alquilo C1-6, R4-(C=O)-, R4O(C=O)-, R4-N(R5)-C(=O)-, R4N(R5)-C(=S)-, R4SO2-o R4-N(R5)-SO2-.
  9. 9.
    El compuesto de la reivindicación 8 en el que B es R4-(C=O)-, R4O(C=O)-o R4-N(R5)-C(=O)-.
  10. 10.
    El compuesto de la reivindicación 9 en el que B es R4O(C=O)-y R4 es alquilo C1-6.
  11. 11.
    El compuesto de la reivindicación 1 en el que R4 es (i) alquilo C1-10 opcionalmente sustituido con fenilo, carboxilo, alcanoílo C1-6, 1-3 halógenos, hidroxi, alcoxi C1-6; (ii) cicloalquilo C3-7, cicloalcoxi C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10; o (iii) arilo C6-10 o arilalquilo C7-16, cada uno opcionalmente sustituido con alquilo C1-6 o halógeno.
  12. 12.
    El compuesto de la reivindicación 11 en el que R4 es (i) alquilo C1-10 opcionalmente sustituido con 1-3 halógeno o alcoxi C1-6; o (ii) cicloalquilo C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10.
  13. 13.
    El compuesto de la reivindicación 1 en el que R5 es H o alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con 1-3 halógenos.
  14. 14.
    El compuesto de la reivindicación 13 en el que R5 es H.
  15. 15.
    El compuesto de la reivindicación 1 en el que X es O o NH.
  16. 16.
    El compuesto de la reivindicación 1 en el que R' es Het; o arilo C6-10 opcionalmente sustituido con Ra.
  17. 17.
    El compuesto de la reivindicación 16 en el que R' es Het.
  18. 18.
    El compuesto de la reivindicación 1 en el que el heterociclo contiene 1 ó 2 átomos de nitrógeno y opcionalmente un átomo de azufre o un átomo de oxígeno en el anillo.
  19. 19.
    El compuesto de la reivindicación 18 en el que el heterociclo está sustituido con al menos uno de alquilo C1-6, alcoxi C1-6, halo, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros.
  20. 20.
    El compuesto de la reivindicación 1 en el que Ra es alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, halo-alquilo C1-6, halo, amino, arilo C6 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros.
  21. 21.
    Un compuesto de la reivindicación 1 que tiene la fórmula
    imagen3
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    en la que:
    (b)
    R2 es alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o cicloalquilo C3-7;
    (c)
    R3 es alquilo C1-8 opcionalmente sustituido con arilo C6, alcoxi C1-6, carboxi, hidroxi, ariloxi, alquilariloxi C7-14, alquil C2-6-éster, alquilaril C8-15-éster; alquenilo C3-12, cicloalquilo C3-7 o alquilcicloalquilo C4-10;
    (d)
    Yes H;
    (e)
    B es H, alquilo C1-6, R4-(C=O)-, R4O(C=O)-, R4-N(R5)-C(=O)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4SO2-o R4-N(R5)-SO2-;
    (f)
    R4 es (i) alquilo C1-10 opcionalmente sustituido con fenilo, carboxilo, alcanoílo C1-6, 1-3 halógenos, hidroxi, alcoxi C1-6; (ii) cicloalquilo C3-7, C3-7 cicloalcoxi o alquilcicloalquilo C4-10; o (iii) arilo C6-10 o arilalquilo C7-16, cada uno opcionalmente sustituido con alquilo C1-6 o halógeno;
    (g)
    R5 es H o alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con 1-3 halógenos;
    (h)
    Xes O o NH;
    (i)
    R' es Het; o arilo C6-10 opcionalmente sustituido con Ra; y
    (j)
    Ra es alquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, alcoxi C1-6, halo-alquilo C1-6, halo, amino, C6 arilo o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros;
    con la condición de que Xa-R' no sea
    imagen2
    o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo.
  22. 22.
    El compuesto de la reivindicación 21 en el que R' es un heterociclo bicíclico.
  23. 23.
    El compuesto de la reivindicación 22 en el que el heterociclo contiene 1 ó 2 átomos de nitrógeno y opcionalmente un átomo de azufre o un átomo de oxígeno en el anillo.
  24. 24.
    El compuesto de la reivindicación 22 en el que el heterociclo está sustituido con al menos uno de alquilo C1-6, alcoxi C1-6, halo, arilo C6 y un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros.
  25. 25.
    El compuesto de la reivindicación 21 en el que R' es un heterociclo bicíclico que contiene 1 átomo de nitrógeno y está sustituido con metoxi y al menos uno de un arilo C6 y un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros.
  26. 26.
    El compuesto de la reivindicación 21 en el que R' es un heterociclo monocíclico.
  27. 27.
    El compuesto de la reivindicación 26 en el que el heterociclo contiene 1 ó 2 átomos de nitrógeno y opcionalmente un átomo de azufre o un átomo de oxígeno en el anillo.
  28. 28.
    El compuesto de la reivindicación 26 en el que el heterociclo está sustituido con al menos uno de alquilo C1-6, alcoxi C1-6, halo, arilo C6-10, alquilarilo C7-14 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros.
  29. 29.
    El compuesto de la reivindicación 21 en el que R' es un heterociclo monocíclico que contiene 1 ó 2 átomos de nitrógeno y está sustituido con metoxi y al menos uno de un arilo C6 y un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros.
  30. 30. Un compuesto de la reivindicación 1 que tiene la fórmula
    imagen4
    en la que:
    (c)
    R3 es alquilo C1-8;
    (d)
    Yes H;
    (e)
    B es R4O(C=O)-o R4-N(R5)-C(=O).;
    (f) R4 es alquilo C1-10; 10 (g)R5esH;
    (h)
    R' es un heterociclo bicíclico opcionalmente sustituido con Ra; y
    (i)
    Ra es alquilo C1-6, alcoxi C1-6, halo, arilo C6 o un heterociclo monocíclico de 5-7 miembros; con la condición de que O-R' no sea
    imagen2
    15 o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo.
  31. 31.
    El compuesto de la reivindicación 30 en el que R1 es ciclopropilo o ciclobutilo.
  32. 32.
    El compuesto de la reivindicación 30 en el que R2 es vinilo.
  33. 33.
    El compuesto de la reivindicación 30 en el que R3 es t-butilo.
  34. 34.
    El compuesto de la reivindicación 30 en el que R4 es t-butilo. 20 35. El compuesto de la reivindicación 30 en el que R' es quinolina o isoquinolina opcionalmente sustituida con Ra.
  35. 36.
    El compuesto de la reivindicación 30 en el que R1 es ciclopropilo, R2 es vinilo, R3 es t-butilo, R4 es t-butilo, y R' es isoquinolina sustituida con Ra.
  36. 37.
    El compuesto de la reivindicación 36 en el que Ra es alcoxi C1-6.
  37. 38.
    El compuesto de la reivindicación 37 en el que Ra incluye además al menos uno de arilo C6 o un heterociclo 25 monocíclico de 5-7 miembros.
  38. 39. Un compuesto de la reivindicación 1 seleccionado entre
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  39. 40. Un compuesto de la reivindicación 1 que es
    imagen2
  40. 41.
    Un compuesto de la reivindicación 1 seleccionado entre
  41. 42.
    Uso del compuesto de la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una infección por VHC en un paciente o para inhibir la proteasa NS3 de VHC.
    imagen2
    imagen5
  42. 44.
    La composición de la reivindicación 43 que comprende además un agente inmunomodulador adicional.
  43. 45.
    La composición de la reivindicación 44 en la que el agente inmunomodulador adicional se selecciona entre el grupo que consiste en α-, β-y δ-interferones.
    10 46. La composición de la reivindicación 43 que comprende además un agente antiviral.
  44. 47.
    La composición de la reivindicación 46 en la que el agente antiviral se selecciona entre el grupo que consiste en ribavirina y amantadina.
  45. 48.
    La composición de la reivindicación 43 que comprende además un inhibidor de la proteasa de VHC distinto del compuesto de la reivindicación 1.
    15 49. La composición de la reivindicación 48 que comprende además un inhibidor de una diana en el ciclo de vida del VHC distinto de la proteasa NS3 de VHC.
  46. 50. La composición de la reivindicación 49 en la que la otra diana se selecciona entre el grupo que consiste en helicasa, polimerasa, metaloproteasa y mezclas de las mismas.
  47. 51. Uso de la composición de la reivindicación 43 para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una 20 infección viral por hepatitis C en un paciente.
  48. 52. Una composición como se ha definido en la reivindicación 43 para su uso en el tratamiento de una infección viral por hepatitis C en un paciente.
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