RS100504A - Inhibitori virusa hepatitis c - Google Patents

Inhibitori virusa hepatitis c

Info

Publication number
RS100504A
RS100504A YUP-1005/04A YUP100504A RS100504A RS 100504 A RS100504 A RS 100504A YU P100504 A YUP100504 A YU P100504A RS 100504 A RS100504 A RS 100504A
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
alkyl
product
procedure
optionally substituted
Prior art date
Application number
YUP-1005/04A
Other languages
English (en)
Inventor
Xiangdong Alan Wang
Li Quang Sun
Sing-Yuen Sit
Ny Sin
Paul Michael Scola
Piyasena Hewawasam
Andrew Charles Good
Yan Chen
Jeffrey Allen Campbell
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Company,
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=29584353&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS100504(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol Myers Squibb Company, filed Critical Bristol Myers Squibb Company,
Publication of RS100504A publication Critical patent/RS100504A/sr
Publication of RS52407B publication Critical patent/RS52407B/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/005—Enzyme inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/22—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C07D217/24—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06052—Val-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0827—Tripeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Izloženi su inhibitori hepatitis C virusa, koji imaju opštu formulu (I), u kojoj su: R1, R2, R3, R', B, Y i X opisani u opisu patenta. Takodje, izložene su i smeše koje sadrže jedinjenja, kao i postupci za korišćenje jedinjenja u inhibiciji HCV.

Description

INHIBITORI HEPATITIS C VIRUSA
OBLAST TEHNIKE
Ovaj pronalazak je generalno usmeren na antivirusna jedinjenja i, preciznije, usmeren je na jedinjenja koja inhibiraju funkcionisanje NS3 proteaze, koju kodira virus hepatitisa C (HCV), na smeše koje sadrže takva jedinjenja i postupke za inhibisanje funkcionisanja NS3 proteaze.
STANJE TEHNIKE
HCV je glavni humani patogen koji, procenjeno je, zaražava 170 miliona osoba širom sveta - prema gruboj proceni petostruko od broja inficiranih virusom humane imunodeficijencije tip 1. Značajan deo ovih osoba inficiranih HCV-om razvija ozbiljnu progresivnu bolest jetre, uključujući cirozu i hepatocelularni karcinom. (Lauer, G.M.; VValker, B.D.N. Engl. J. Med.(2001), 345, 41-52).
Trenutno, najdelotvornija HCV terapija obuhvata kombinaciju alfa-interferona i ribavirina, što vodi održavanoj efikasnosti kod 40% pacijenata. (Povnard, T. et al.Lancet(1998), 352, 1426-1432). Nedavni klinički rezultati pokazuju da je pegilovani alfa-interferon moćniji u odnosu na nemodifikovani alfa-interferon, kada se primenjuju kao monoterapija (Zeuzem, S. et al.N. Engl. J. Med.(2000), 343, 1666-1672). Međutim, čak i sa probnim terapeutskim režimima, koji uključuju kombinacije pegilovanog alfa-interferona i ribavirina, značajan deo pacijenata nema održavano sniženje količine virusa. Zato, postoji jasna i davno uočena potreba za razvojem efektivnih terapeutika za lečenje infekcije HCV-om.
HCV je pozitivno-uvijeni RNK virus. Na osnovu poređenja izvedene amino kiselinske sekvence i znatne sličnosti u 5' netranslatovanom regionu, HCV je klasifikovan kao zasebni rod u Flaviviridae familiji. Svi članovi Flaviviridae familije imaju obmotane virione koji sadrže pozitivno uvijeni RNK genom, koji kodira sve poznate virusno-specifične proteine putem translacije jedne, neprekinute, građe (sekvence) otvorene za čitanje (ORF).
Nađena je prilična heterogenost u okviru nukleotidne i kodirane amino kiselinske sekvence kroz HCV genom,. Najmanje šest glavnih genotipova je okarakterisano, a više od 50 podtipova je opisano. Glavni genotipovi HCV-a se razlikuju po svojoj rasprostranjenosti širom sveta, a klinički značaj genetske heterogenosti HCV-a i dalje izmiče, uprkos brojnim istraživanjima mogućeg dejstva genotipova na patogenezu i terapiju.
Jedan lanac HCV-nog RNK genoma je otprilike 9500 nukleotida po dužini i ima jednu sekvencu otvorenu za čitanje (ORF) koja kodira jedan veliki poliprotein od otprilike 3000 amino kiselina. U inficiranim ćelijama, ovaj poliprotein se odcepljuje na višestrukim mestima ćelijskim i virusnim proteazama da bi proizveo strukturne i ne-strukturne (NS) proteine. U slučaju HCV, stvaranje zrelih ne-strukturnih proteina (NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A i NS5B) se postiže dvema virusnim proteazama. Prva, kako je još uvek slabo okarakterisana, čepa na NS2-NS3 spojnici; druga je serinska proteaza sadržana u sklopu N-terminalnog regiona NS3 (od sada kao NS3 proteaza) i posreduje sva kasnija cepanja nishodno od NS3, i u cis, na NS3-NS4A mestu otcepljivanja i, i u trans, za zaostalim NS4A-NS4B, NS4B-NS5A, NS5A-NS5B položajima. NS4A protein izgleda služi višestrukim funkcijama, delujući kao kofaktor za NS3 proteazu i moguće, pomažući u membranskoj lokalizaciji NS3 i drugih komponenti virusne replikacije. Čini se da je obrazovanje kompleksa NS3 proteina sa NS4A neophodno za događaj zrenja (processing), uvećavajući proteolitičku efikasnost na svim položajima. NS3 protein, takođe, ispoljava aktivnosti nukleozid trifosfataze i RNK helikaze. NS5B je RNK-zavisna RNK polimeraza koja je upletena u replikaciju HCV-a.
Među jedinjenjima, koja su pokazala efikasnost u inhibisanju replikacije HCV-a, kao selektivni inhibitori HCV serin proteaze su peptidna jedinjenja izložena u U.S.Patentu Br. 6,323,180.
IZLAGANJE SUŠTINE PRONALASKA
Ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule I, uključujući njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvate ili prolekove,
gde:
(a) F? je: C^alkil, C3.7cikloalkil ili C4.10alkilcikloalkil; (b) m je 1 ili 2; (c) n je 1 ili 2; (d) R2je: H, C^alkil, C2.6alkenil ili C3.7cikloalkil, svaki opciono supstituisan sa halogenom; (e) R3je C,.8alkil, opciono supstituisan sa: halo, cijano, amino, C^gdialkilamino, C6.10aril, C7.14alkilaril, C^alkoksi, karboksi, hidroksi, ariloksi, C7.14alkilariloksi, C26alkilestar, C8.15alkilarilestar, C3.12alkenil, C3.7cikloalkil ili C4.10alkilcikloalkil, gde su cikloalkil ili alkilcikloalkil opciono supstituisani sa hidroksi, C,.6alkilom, C2.6alkenilom ili C,.6alkoksi; ili R3zajedno sa atomom ugljenika za koji je vezan obrazuje C3.7cikloalkilnu grupu, opciono supstituisanu sa C2.6alkenilom; (f) Y je: H, fenil, supstituisan sa nitro, piridil, supstituisan sa nitro ili C,.6alkil opciono supstituisan sa cijano, OH ili C3.7cikloalkilom; uz uslov da ukoliko su R4ili R5H, onda je Y H; (g) B je: H, C^alki, Rr(C=0)-, R40(C=0)-, R4-N(R5)-C(=0)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4SOy ili R4-N(R5)-S02-; (h) R4je (i) C1.10alkil, opciono supstituisan sa fenilom, karboksilom, C^alkanoilom, 1-3 halogena, hidroksi, -OC(0)C.|.6alkilom, C^alkoksi, amino, opciono supstituisan sa C,.6alkilom, amido ili (niži alkil) amido; (ii) C37cikloalkil, C3.7cikloalkoksi ili C4.10alkilcikloalkil, svaki opciono supstituisan sa hidroksi, karboksilom, (C^alkoksOkarbonilom, amino, opciono supstituisan sa C.,.6alkilom, amido ili (niži alkil) amido; (iii) C6.10aril ili C7.16arilalkil, svaki opciono supstituisan sa Cv6alkilom, halogenom, nitro, hidroksi, amido, (niži alkil) amido ili amino, opciono supstituisan sa C^alkilom; (iv) Het; (v) biciklo(1.1.1)pentan; ili (vi) -C^OC^alkil, C2.6alkenil ili C2.6alkinil; (i) R5je H; C,.6alkil, opciono supstituisan sa 1-3 halogena; ili C^alkoksi, uz uslov da je R4C110alkil;
(j) X je: O, S, SO, S02, OCH2, CH20 ili NH;
(k) R' je Het; ili C6.10-aril ili C7.14alkilaril, opciono supstituisan sa R<a>;i
(I) R<a>je: C^alkil, C3.7cikloalkil, C^alkoksi, C3.7cikloalkoksi, halo-C,.6alkil, CF3, mono-ili di-halo-C,.6alkoksi, cijano, halo, tioalkil, hidroksi, alkanoil, NOz, SH, amino, C^alkilamino, di(C1.6)alkilamino, d^C^) alkilamid, karboksil, (C^karboksiestar, C^alkilsulfon, C,.6alkilsulfonamid, di(C1.6)alkil(alkoksi)amin, C6.10aril, C7.14alkilaril ili 5-7 člani monociklični heterocikl;
uz uslov da X-R' nije
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili prolek.
Ovaj pronalazak, takođe, obezbeđuje smeše koje obuhvataju jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvate ili prolekove i farmaceutski prihvatljiv nosač. Posebno, ovaj pronalazak obezbeđuje farmaceutske smeše korisne za inhibisanje NS3 HCV-a, koje obuhvataju terapeutski delotvornu količinu jedinjenja ovog pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili prolek i farmaceutski prihvatljiv nosač.
Ovaj pronalazak dalje obezbeđuje postupke za lečenje pacijenata inficiranih HCV-om, koji obuhvataju primenjivanje pacijentu terapeutski efektivne količine jedinjenja ovog pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvata ili proleka. Osim toga, ovaj pronalazak obezbeđuje postupke inhibisanja NS3 proteaze HCV-a primenjivanjem pacijentu delotvorne količine jedinjenja ovog pronalaska.
Na osnovu ovog pronalaska, danas je moguće obezbediti savršenije lekove koji uključuju jedinjenja pronalaska, a koji mogu biti delotvorni u tretmanu pacijenata zaraženih HCV-om. Posebno, ovaj pronalazak obezbeđuje peptidna jedinjenja koja mogu da inhibišu funkcionisanje NS3 proteaze, npr., u kombinaciji sa NS4A proteazom.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
Stereohemijske definicije i pravila, koja su ovde korišćena, generalno prate McGravv-Hillov Rečnik hemijskih izraza, S.P. Parker, Ed., McGraw-Hill Book Companv, New York (1984) i Stereohemiju organskih jedinjenja, Eliel, E. i VVilen, S., John Wiley&Sons, Inc., New York (1994). Mnoga organska jedinjenja postoje u optički aktivnim oblicima, t.j., imaju mogućnost da okreću ravan ravno-polarizovanog svetla. U opisivanju optički aktivnog jedinjenja, prefiksi D i L ili R i S se koriste da označe apsolutnu konfiguraciju molekula oko svog hiralnog centra(centara). Prefiksi d i I ili (+) i (-) se koriste da označe znak okretanja ravni-polarizovane svetlosti koje vrši jedinjenje, pri čemu (-) ili I znači da je jedinjenje levorotirajuće, a (+) ili d znači da je jedinjenje desnorotirajuće. Za datu hemijsku strukturu, ova su jedinjenja, nazvana stereoizomeri, identična osim što su lik i odraz u ogledalu jedan drugog. Enantiomer se, isto tako, odnosi na specifični stereoizomer para lika i odraza u ogledalu, a mešavina takvih izomera se često naziva enantiomerna smeša.
Nomenklatura, korišćena za opis organskih radikala, npr. ugljovodonika i supstituisanih ugljovodonika, ukoliko nije drugačije definisano, generalno prati standardnu nomenklaturu, poznatu u struci. Ukoliko nije drugačije posebno navedeno, kombinacije grupa, npr., alkilalkoksiamin, uključuju sve moguće stabilne konfiguracije. Izvesni radikali i kombinacije su definisani u nastavku u cilju ilustracije.
Izrazi "racemska smeša" i "racemat" se odnose na ekvimolarnu mešavinu dve enantiomerne vrste, a lišeni su optičke aktivnosti.
Izraz "hiralni" se odnosi na molekule, koji imaju svojstvo dodavanja partnerskog molekula koji bi ovome bio lik u ogledalu, dok izraz "ahiralni" se odnosi na molekule koji nemaju mogućnost nadogradnje partnerskog molekula, lika iz ogledala.
Izraz "stereoizomeri" se odnosi na jedinjenja, koja imaju isti hemijski sastav ali se razlikuju u odnosu na uređenje atoma ili grupa u prostoru.
Izraz "dijastereomer" se odnosi na stereoizomer, koji nije enantiomer, npr., stereoizomer sa dva ili više hiralna centra i, čiji molekuli nisu jedni u odnosu na druge likovi i slike iz ogledala. Dijastereomeri imaju različite fizičke osobine, npr., tačke topljenja, tačke ključanja, spektralna svojstva i rektivnosti. Mešavine dijastereomera se mogu razdvojiti analitičkim procedurama visoke rezolucije, kao što su elektroforeza i hromatografija.
Izraz "enentiomeri" se odnosi na dva stereoizomera onog jedinjenja koje može da nadogradi partnerski molekul, kao sliku svog lika u ogledalu.
Izrazom "farmaceutski prihvatljiva so" treba da se obuhvate neotrovne soli, sintetisane konvencionalnim hemijskim postupcima od jedinjenja koja sadrže bazne ili kisele delove. Uopšteno, takve soli mogu da se pripreme reakcijom slobodnih kiselih ili baznih oblika ovih jedinjenja sa stehiometrijskom količinom odgovarajuće baze ili kiseline u vodi ili u organskom rastvaraču ili u njihovoj mešavini; generalno, prednost kao nevodena sredina imaju: etar, etil acetat, etanol, izopropanol ili acetonitril. Liste prikladnih soli mogu da se nađu uRemington' sPharmaceutical Sciences,18<th>ed., Mack Publishing Companv, Easton, PA, 1990, p. 1445. Jedinjenja ovog pronalska su korisna u obliku slobodne baze ili kiseline ili u obliku njihove farmaceutski prihvatljive soli. Svi oblici su u okviru smisla pronalaska.
Izraz "terapeutski efektivna količina" označava ukupnu količinu svake aktivne komponente koja je dovoljna da ispolji značajnu korist za pacijenta, npr., održavano sniženje količine virusa. Kada je primenjen na zaseban aktivni sastojak, koji je primenjen sam, izraz se odnosi na sam taj sastojak. Kada je primenjen na kombinaciju, izraz se odnosi na kombinovane količine aktivnih sastojaka koje dovode do terapeutskog efekta, bilo da se primenjuju u kombinaciji, redom ili istovremeno.
Izraz "jedinjenja pronalaska" i ekvivalentni izrazi, treba da obuhvate jedinjenja Formule I i farmaceutski prihvatljive soli i solvate, npr., hidrate. Slično, referenca intermedijera treba da obuhvati njihove soli i solvate u kojima i dalje opstaje celina. Reference jedinjenja pronalaska, isto tako, uključuju poželjna jedinjenja Formule II i III.
Izraz "derivat" označava hemijski modifikovano jedinjenje, gde se modifikacija od strane prosečno stručnog hemičara smatra rutinskom, kao što su zaštitne grupe estra ili amida kiseline, kao što je benzil grupa za alkohol ili tiol i terc-butoksikarbonil grupa za amin.
Izraz "solvat" označava fizičko udruživanje jedinjenja ovog pronalaska sa jednim ili više molekula rastvarača, bilo da je organski, bilo da je neorganski. Ovo fizičko udruživanje obuhvata vezivanje vodonika. U nekim slučajevima solvat će moći da se izoluje, na primer, kada su jedan ili više molekula rastvarača ugrađeni u kristalnu rešetku kristalne čvrste materije. "Solvat" obuhvata i solvate sa fazom rastvora i one koji mogu da se izoluju. Primeri solvata uključuju hidrate, etanolate, metanolate i slične.
Izraz "prolek", kako je ovde korišćen, označava derivate jedinjenja pronalaska, koji imaju grupe, koje mogu da se hemijski ili metabolički otcepljuju i, koji postaju, solvolizom ili pod fiziološkim uslovima, jedinjenja pronalaska koja su farmaceutski aktivna in vivo. Prolek jedinjenja može da se stvori na konvencionalan način sa funkcionalnom grupom jedinjenja, kao kada su prisutne: amino, hidroksi ili karboksi grupa. Oblik derivata proleka često nudi prednost u rastvorljivosti, tkivnoj kompatibilnosti ili odloženom oslobađanju u organizmu sisara (vidi, Bundgard, H., Design of Prodrugs, pp. 7-9, 21-24, Elsevier, Amsterdam 1985). Prolekovi uključuju kisele derivate dobro poznate praktičarima struke, kao što su, na primer, estri, pripremljeni reakcijom matičnog kiselog jedinjenja sa prikladnim alkoholom ili amidi, pripremljeni reakcijom matičnog kiselog jedinjenja sa prikladnim aminom.
Izraz "pacijent" uključuje i čoveka i druge sisare.
Izraz "farmaceutska smeša" označava smešu koja obuhvata jedinjenje pronalaska u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim farmaceutskim nosačem, t.j., adjuvansom, podlogom ili vehikulumom, kao što su: diluenti, sredstva za konzerviranje, punjači, sredstva za regulisanje protoka, dezintegrišuća sredstva, vlažeća sredstva, emulzifikujuća sredstva, sredstva za suspendovanje, sredstva za zaslađivanje, sredstva za boju, mirisna sredstva, antibakterijska sredstva, antigljivična sredstva, lubrikansi i sredstva za razdvajanje, zavisno od prirode puta primenjivanja i oblika doziranja. Mogu se koristiti, na primer, sastojci nabrojani u Remington's Pharmaceuticals Sciences, 18<th>ed., Mack Publishing Companv, Easton, PA (1999).
Izraz "farmaceutski prihvatljiv" se ovde koristi da se odnosi na ona jedinjenja, materijale, smeše i/ili dozne oblike, koja su, u okviru glasa medicinske procene, pogodna za upotrebu u kontaktu sa tkivima pacijenata bez prekomerne otrovnosti, iritacije, alergijskog odgovora ili drugog problema ili komplikacije, merljivih sa prihvatljivim odnosom rizik/korist.
Izraz "lečenje" se odnosi na: (i) prevenciju bolesti, poremećaja ili stanja koja se javljaju kod pacijenata, koji je možda predisponiran za bolest, poremećaj i/ili stanje ali još nije dijagnostikovano da ga ima; (ii) inhibisanje bolesti, poremećaja ili stanja, t.j., zaustavljanje njegovog razvoja; i (iii) ublažavanje bolesti, poremećaja ili stanja, t.j., izazivanje regresije bolesti, poremećaja i/ili stanja. Izraz "supstituisan", kako je ovde korišćen, obuhvata zamenjivanje na vezujućim položajima, od jednog do najvećeg mogućeg broja na jezgru, npr., organski radikal na koji je vezan supstituent, npr., mono-, di-, tri- ili tetra-supstituisan, ukoliko nije drugačije posebno navedeno.
Izraz "halo", kako je ovde korišćen, označava halogeni supstituent, odabran od: bromo, hloro, fluoro ili jodo. Izraz "haloalkil" označava alkil grupu koja je supstituisana sa jednim ili više halo supstituenata.
Izraz "alkil", kako je ovde korišćen, označava aciklične, ravne ili razgranate lance alkil supstituenata i uključuje, na primer: metil, etil, propil, butil, terc-butil, heksil, 1 -metiletil, 1-metilpropil, 2-metilpropil, 1,1-dimetiletil. Na taj način, C,.6alkil se odnosi na alkil grupu, koja ima od jedan do šest atoma ugljenika. Izraz "niži alkil" označava alkil grupu, koja ima od jedan do šest, poželjno, od jedan do četiri atoma ugljenika. Izraz "alkilestar" označava alkil grupu, koja dodatno još sadrži estarsku grupu. Generalno, navedeni raspon broja ugljenika, npr., C2.6alkilestar, obuhvata sve atome ugljenika u radikalu.
Izraz "alkenil", kako je ovde korišćen, označava alkil radikal koji sadrži najmanje jednu dvostruku vezu, npr., etenil (vinil) i alkil.
Izraz "alkoksi", kako je ovde korišćen, označava alkil grupu sa naznačenim brojem atoma ugljenika koji su vezani za atom kiseonika. Alkoksi uključuje, na primer: metoksi, etoksi, propoksi, 1-metiletoksi, butoksi i 1,1-dimetiletoksi. Poslednji navedeni radikal se u struci označava kao terc-butoksi. Izraz "alkoksikarbonil" označava alkoksi grupu, koja još dodatno sadrži karbonil grupu.
Izraz "cikloalkil", kako je ovde korišćen, označava cikloalkilni supstituent, koji sadrži naznačen broj atoma ugljenika, a uključuje, primera radi: ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil i spiro ciklične grupe, kao što su spirociklopropil i spirociklobutil. Izraz "cikloalkoksi", kako je ovde korišćen, označava cikloalkil grupu, koja je spojena sa atomom kiseonika, kao što je, na primer, ciklobutiloksi ili ciklopropiloksi. Izraz "alkilcikloalkil" označava cikloalkil grupu spojenu na alkil grupu. Navedeni raspon broja atoma ugljenika uključuje, ukoliko nije drugačije naznačeno, ukupan broj ugljenika u radikalu. Tako, C4.10alkilcikloalkil može da sadrži od 1 do 7 atoma ugljenika u alkil grupi i od 3-9 atoma ugljenika u prstenu, npr., ciklopropilmetil ili cikloheksiletil.
Izraz "aril", kako je ovde korišćen, označava aromatični deo koji sadrži navedeni broj atoma ugljenika, kao što su, ali nisu njima ograničeni: fenil, indanil ili naftil. Na primer, C6.10aril se odnosi na aromatični deo koji ima od šest do deset atoma ugljenika, koji mogu biti u formi monociklične ili biciklične strukture. Izraz "habani", kao što je ovde korišćen se odnosi na aril, koji je mono-, di- ili tri-supstituisan sa jednim ili više atoma halogena. Izrazi "alkilaril", "arilalkil" i "aralkil" označavaju aril grupu, koja je supstituisana sa jednom ili više alkil grupa. Tako C7.14alkilaril grupa može imati 1-8 atoma ugljenika u alkil grupi za monociklični aromatik i od 1-4 atoma ugljenika u alkil grupi za spojeni aromatik. Aril radikali uključuju one, koji su supstituisani sa uobičajenim supstituentima poznatim stručnjacima u ovoj oblasti, npr.: halogen, hidroksi, karboksi, karbonil, nitro, sulfo, amino, cijano, dialkilamino, haloalkil, CF3, haloalkoksi, tioalkil, alkanoil, SH, alkilamino, alkilamid, dialkilamid, karboksiestar, alkilsulfon, alkilsulfonamid i alkil(alkoksi)amin. Primeri alkilaril grupa uključuju: benzil, butilfenil i 1-naftilmetil. Izrazi "alkilariloksi" i "alkilarilestar" označavaju alkilaril grupe, koje sadrže atom kiseonika, odnosno estarsku grupu.
Izraz "karboksialkil", kako je ovde korišćen, označava karboksilnu grupu (COOH) spojenu preko alkil grupe, kako je gore definisana, a uključuje, npr., buternu kiselinu.
Izraz "alkanoil", kako je ovde korišćen, označava ravne ili razgranate 1-oksoalkil radikale, koji sadrže naznačen broj atoma ugljenika, a uključuju, na primer: formil, acetil, 1-oksopropil (propionil), 2-metil-1-oksopropil, 1-oksoheksil i si.
Izraz "amino aralkil", kako je ovde korišćen, označava amino grupu supstituisanu aralkil grupom, kao što je sledeći amino aralkil
Izraz "alkilamid", kako je ovde korišćen, označava amid koji je mono-supstituisan sa alkilom, kao što je
Izraz "karboksialkil", kako je ovde korišćen, označava karboksilnu grupu (COOH) spojenu preko alkil grupe, kako je gore definisana, a uključuje, npr., buternu kiselinu.
Izraz "heterocikl", takođe označen kao "Het", kako je ovde korišćen, označava 7-12-člane biciklične heterocikle i 5-7-člane monociklične heterocikle.
Poželjni biciklični heterocikli su 7-12-člani spojeni biciklični sistemi prstena (oba prstena dele susedni par atoma) koji sadrže od jednog do četiri heteroatoma, odabranih od: azota, kiseonika i sumpora, pri čemu su oba prstena heterocikla potpuno nezasićena. Heteroatomi, atomi azota i sumpora mogu opciono biti oksidovani. Biciklični heterocikl može sadržavati heteroatome u jednom ili oba prstena. Biciklični heterocikl može, takođe, sadržavati supstituente na bilo kom od ugljenikovih atoma prstena, npr. jedan do tri supstituenta. Primeri pogodnih supstituenata uključuju: C,.6alkil, C3.7cikloalkil, C^alkoksi, C3.7cikloalkoksi, halo-C^alkil, CF3, mono- ili di-halo-C,.6alkoksi, cijano, halo, tioalkil, hidroksi, alkanoil, NOs, SH, amino, C.,.6alkilamino, di(C1.6)alkilamino, di(C,.6)alkilamid, karboksil(C1.6)karboksiestar, C^alkilsulfon, C^alkilsulfonamid, CLgalkilsulfoksid, di(C1.6)alkil(alkoksi)amin, C6.10aril, C7.14alkilaril i 5-7-člani monociklični heterocikl. Kada su dva supstituenta vezana za susedne atome ugljenika bicikličnog heterocikla mogu se udružiti da bi obrazovali prsten, npr., pet, šest ili sedmočlani sistem prstena, koji sadrži do dva heteroatoma, odabrana dd kiseonika i azota. Biciklični heterocikl može biti vezan na svoju viseću grupu, na primer, X u Formuli I, na bilo kom atomu u prstenu, a poželjno na ugljeniku.
Primeri bicikličnih heterocikala uključuju, ali se njima ne ograničavaju, sledeće sisteme prstena:
Poželjni monociklični heterocikli su 7-12-člani zasićeni, delimično zasićeni ili potpuno nezasićeni sistemi prstena (ova poslednja podgrupa je ovde označena kao nezasićeni heteroaromatik) koji sadrže u prstenu od jednog do četiri heteroatoma, odabranih od: azota, kiseonika i sumpora, pri čemu heteroatomi sumpora i azota mogu opciono biti oksidovani. Monociklični heterocikl može, takođe, sadržavati supstituente na bilo kom od atoma prstena, npr. jedan do tri supstituenta. Primeri pogodnih supstituenata uključuju: C^alkil, C3.7cikloalkil, C.,.6alkoksi, C3.7cikloalkoksi, halo-C^alkil, CF3, mono- ili di-halo-C,.6alkoksi, cijano, halo, tioalkil, hidroksi, alkanoil, N02, SH, amino, C^alkilamino, di(C,_6)alkilamino, di(C1.6)alkilamid, karboksil(C,.6)karboksiestar, C16alkilsulfon, C^alkilsulfoksid, C,.6alkilsulfonamid, di(C16)alkil(alkoksi)amin, C5.10aril, C7.14alkilaril i 5-7-člani monociklični heterocikl. Monociklični heterocikl može biti vezan na svoju viseću grupu, na primer, X u Formuli I, na bilo kom atomu u prstenu.
Primeri monocikličnih heterocikala uključuju, ali se njima ne ograničavaju, sledeće:
Stručnjaci u ovoj oblasti će prepoznati da bi heterocikli, korišćeni u jedinjenjima ovog pronalaska trebalo da budu stabilni. Uopšteno, stabilna jedinjenja su ona, koja mogu da se sintetišu i izoluju i formulišu, korišćenjem tehnika, koje su stručnim licima u ovoj oblasti dobro poznate, a bez degradacije jedinjenja.
Kada su korišćene, u imenovanju jedinjenja ovog pronalaska, oznake "P1', P1, P2, P3 i P4", kako su ovde korišćene, lociraju relativne položaje amino-kiselinskih ostataka vezivanja inhibitora proteaze u odnosu na vezivanje supstrata prirodnog peptidnog otcepljivanja. Otcepljivanje se dešava u prirodnom supstratu između P1 i P1' gde ne-prim položaji označavaju amino kiseline polazeći od C-završnog kraja položaja peptidnog prirodnog otcepljivanja pružajući se prema N-završecima; dok, prim-položaji polaze od N-završnog kraja oznake položaja otcepljivanja i pružaju se prema C-završecima. Na primer, P1' se odnosi na prvi položaj s desnog kraja na C-završetku položaja otcepljivanja (t.j., prvi položaj N-završetka); dok P1 položaj polazi od numeracije s leve strane C-završetka položaja otcepljivanja, P2: drugi položaj od C-završetka, itd) (vidi Berger A. & Schechter I., Transactions of the Royal Societv London series (1970), B257, 249-264].
Tako u jedinjenjima sa formulom I, "P1' do P4" delovi molekula su naznačeni ispod:
Kao što je ovde korišćen izraz "1-aminociklopropil-karboksilna kiselina" (acca) se odnosi na jedinjenje sa formulom:
Kao što je ovde korišćen izraz "rerc-butilglicin" se odnosi na jedinjenje sa formulom:
Izraz "ostatak" u odnosu na amino kiselinu ili derivat amino kiseline označava radikal izveden iz odgovarajuće a-amino kiseline uklanjanjem hidroksila iz karboksilne grupe i jednog vodonika a-amino-kiselinske grupe. Na primer, izrazi: Gln, Ala, Gly, Me, Arg, Asp, Phe, Ser, Leu, Cys, Asn, Sar i Tyr predstavljaju ostatke: L-glutamina, L-alanina, glicina, L-izoleucina, L-arginina, L-asparaginske kiseline, L-fenilalanina, L-serina, L-leucina, L-cisteina, L-asparagina, sarkozina i L-tirozina.
Izraz "bočni lanac" u odnosu na aminokiselinu ili aminokiselinski ostatak označava grupu, koja je vezana za oc-ugljenikov atom a-aminokiseline. Na primer, R-grupa bočni lanac za glicin je vodonik, za alanin je metil, za valin je izopropil. Kao referenca za specifične R-grupe ili bočne lance a-aminokiselina poslužila je Biohemija A.L. Lehningera (vidi poglavlje 4).
Jedinjenje ovog pronalaska ima strukturu Formule I:
gde:
(a) R, je: C^alkil, C3.7cikloalkil ili C4.10alkilcikloalkil; (b) m je 1 ili 2; (c) n je 1 ili 2; (d) R2je: H, C,.6alkil, C2.6alkenil ili C3.7cikloalkil, svaki opciono supstituisan sa halogenom; (e) R3je C,.8alkil, opciono supstituisan sa: halo, cijano, amino, C,.6dialkilamino, C6. 10arilom, C7.14alkilarilom, C,.6alkoksi, karboksi, hidroksi, ariloksi, C7.14alkilariloksi, C2.6alkilestrom, C8_15alkilarilestrom, C3.12alkenilom, C3.7cikloalkilom ili C4.10alkilcikloalkilom, gde su cikloalkil ili alkilcikloalkil opciono supstituisani sa hidroksi, C^alkilom, C2.6alkenilom ili C^alkoksi; ili R3zajedno sa atomom ugljenika za koji je vezan obrazuje C3.7cikloalkilnu grupu, opciono supstituisanu sa C2.6alkenilom; (f) Y je: H, fenil, supstituisan sa nitro, piridil, supstituisan sa nitro ili C^alkil opciono supstituisan sa cijano, OH ili C3.7cikloalkilom; uz uslov da ukoliko su R4ili R5H, onda je Y H; (g) B je: H, C^alki, R4-(C=0)-, R40(C=0)-, R4-N(R5)-C(=0)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4S02- ili R4-N(R5)-S02-; (h) R4je (i) C^^alkil, opciono supstituisan sa fenilom, karboksilom, C.,.6alkanoilom, 1-3 halogena, hidroksi, -OC(0)C,.6alkilom, C.,.6alkoksi, amino, opciono supstituisan sa C^alkilom, amido ili (niži alkil) amido; (ii) C3.7cikloalkil, C3.7cikloalkoksi ili C4.10alkilcikloalkil, svaki opciono supstituisan sa hidroksi, karboksilom, (C^alkoksOkarbonilom, amino, opciono supstituisan sa O,.6alkilom, amido ili (niži alkil) amido; (iii) C6.10aril ili C7.16arilalkil, svaki opciono supstituisan sa C?.6alkilom, halogenom, nitro, hidroksi, amido, (niži alkil) amido ili amino, opciono supstituisan sa C^a^ilom; (iv) Het; (v) biciklo(1.1.1)pentan; ili (vi) -CfOJOCLealkil, C2.6alkenil ili C2.6alkinil; (i) Rsje H; C,_6alkil, opciono supstituisan sa 1-3 halogena; ili C16alkoksi, uz uslov da je R4C110alkil;
(j) X je: O, S, SO, S02, OCH2, CH20 ili NH;
(k) R' je Het; ili C6.10-aril ili C7.14alkilaril, opciono supstituisan sa R<a>;i
(I) R<a>je: C^alkil, C3.7cikloalkil, C^alkoksi, C3.7cikloalkoksi, halo-C,.6alkil, CF3, mono-ili di-halo-C^alkoksi, cijano, halo, tioalkil, hidroksi, alkanoil, N02, SH, amino, O,.6alkilamino, di(C1.6)alkilamino, di(C16) alkilamid, karboksil,( C: 6)karboksiestar,C16alkilsulfon, 6alkilsulfonamid, di(Cn_6)alkil(alkoksi)amin, C6.10aril, C7.14alkilaril ili 5-7 člani monociklični heterocikl;
uz uslov da X-R' nije
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili prolek.
Poželjno, R2je C2.6alkenil, R3je C^lkN, opciono supstituisan sa C,.6alkoksi ili C3.7cikloalkilom; Y je H; B je R4-(C=0)-, R40(C=0)- ili R4-N(R5)-C(=0)-; R4je C^^alkil, opciono supstituisan sa 1-3 halogena ili C1.6alkoksi; ili C3.7cikloalkil ili C4.10alkilcikloalkil; R5je H; X je O ili NH i R' je Het.
Supstituenti iz svakog grupisanja mogu biti odabrani pojedinačno i kombinovani u bilo kojoj kombinaciji, koja obezbeđuje stabilno jedinjenje u skladu sa ovim pronalaskom. Isto tako, više od jednog supstituenta iz svake grupe može biti supstituisano na jezgrenoj grupi, pod uslovom da ima dovoljno raspoloživih veznih mesta. Na primer, svaki od sledećih Rasupstituenata, C^alkoksi, C6aril i 5-7-člani monociklični heterocikl, mogu biti supstituisani na bicikličnom heterociklu R'.
U poželjnom aspektu, jedinjenja ovog pronalaska imaju strukturu Formule II:
u kojoj:
(a) R1 je C3.7cikloalkil; (b) R2je C^alkil, C2.6alkenil ili C3.7cikloalkil; (c) R3je C,.8alkil, opciono supstituisan sa: C6arilom, C,.6alkoksi, karboksi, hidroksi, ariloksi, C7.ualkilariloksi, C2.6alkilestrom, C8.15alkilaril-estrom, C3.12alkenilom, C3.7cikloalkilom ili C4.10alkilcikloalkilom; (d) Y je H; (e) B je: H, C^alki, R4-(C=0)-, R40(C=0)-, R4-N(R5)-C(=0)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4S02- ili R4-N(R5)-SCy; (f) R4je (i) C1.10alkil, opciono supstituisan sa fenilom, karboksilom, C^alkanoilom, 1-3 halogena, hidroksi, C^alkoksi; (ii) C3.7cikloalkil, C3.7cikloalkoksi ili C4.10alkilcikloalkil; ili (iii) C6.10aril ili C7.16arilalkil, svaki opciono supstituisan sa C,_6alkilom ili halogenom; (9) R5ie H i'i C,.6alkil, opciono supstituisan sa 1-3 halogena; (h) X je O ili NH;
(i) R' je Het; ili Cg^-aril, opciono supstituisan sa R<a>; i
(j) R<a>je: C16alkil, C3.7cikloalkil, C^alkoksi, halo-C^alkil, halo, amino, C6aril ili 5-7 člani monociklični heterocikl;
uz uslov da Xa-R' nije
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili prolek.
U jednom poželjnom aspektu pronalaska, F<T>je biciklični heterocikl. Poželjno, biciklični heterocikl sadrži 1 ili 2 atoma azota i opciono atom sumpora ili atom kiseonika u prstenu. Poželjno, heterocikl je supstituisan sa najmanje jednim od: C,.6alkil, C,.6alkoksi, halo, C6aril i 5-7 člani monociklični heterocikl. Poželjnije, R' je biciklični heterocikl koji sadrži 1 atom azota i supstituisan je sa metoksi i sa najmanje jednim od C6arila i 5-7 članog monocikličnog heterocikla.
U drugom poželjnom aspektu pronalaska, R' je monociklični heterocikl. Poželjno, heterocikl sadrži 1 ili 2 atoma azota i opciono atom sumpora ili atom kiseonika u prstenu. Poželjno, heterocikl je supstituisan sa najmanje jednim od: C^alkil, C^alkoksi, halo, C6.10aril, C7.14alkilaril ili 5-7 člani monociklični heterocikl. Poželjnije, R' je monociklični heterocikl koji sadrži 1 atom azota i supstituisan je sa metoksi i sa najmanje jednim od C6arila i 5-7 članog monocikličnog heterocikla.
U poželjnom aspektu pronalaska, jedinjenja imaju strukturu Formule III:
u kojoj:
(a) R., je C3.7cikloalkil; (b)<R>2je C2.6alkenil; (c) R3 je C^alkil; (d) Y je H; (e) B je R40(C=0)- ili R4-N(R5)-C(=0)-; (f) R4 je C110alkil; (9) R5je H;
(h) F<T>je biciklični heterocikl opciono supstituisan sa R<a>; i
(i) R<a>je C16alkil, C,.6alkoksi, halo, C6aril ili 5-7 člani monociklični heterocikl; uz uslov da O-R' nije
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili prolek.
Poželjno, R:je ciklopropil ili ciklobutil, R2je vinil, R3je t-butil, R4je t-butil, a R' je hinolin ili izohinolin, opciono supstituisan sa R<a.>Poželjno, R<a>uključuje najmanje jedan od: C,.6alkoksi, C6aril i 5-7 člani monociklični heterocikl. U poželjnom aspektu pronalaska, R, je ciklopropil, R2je vinil, R3je t-butil, R4je t-butil, a R' je izohinolin, supstituisan sa C^alkoksi i najmanje jednim od C6arila i 5-7 članog monocikličnog heterocikla.
Jedinjenja ovog pronalaska, na osnovu svoje bazne funkcionalne grupe mogu da obrazuju soli dodatkom farmaceutski prihvatljive kiseline. Soli nastale dodatkom kiseline se formiraju od jedinjenja sa Formulom I i farmaceutski prihvatljive neorganske kiseline, koja uključuje ali se ne ograničava na: hlorovodoničnu, bromovodoničnu, jodovodoničnu, sumpornu, fosfornu; ili organske kiseline, kao: p-toluensulfonska, metansulfonska, sirćetna, benzojeva, limunska, malonska, fumarna, maleinska, oksalna, ćilibarna, sulfaminska ili vinska. Zato, primeri takvih farmaceutski prihvatljivih soli obuhvataju: hlorid, bromid, jodid, sulfat, fosfat, metansulfonat, citrat, acetat, malonat, fumarat, sulfamat i tartarat.
Soli amino grupe mogu, isto tako, da obuhvate i kvaternerne amonijum soli u kojima amino azot nosi pogodnu organsku grupu, kao: alkilni, alkenilni, alkinilni ili aralkilni deo.
Jedinjenja ovog pronalaska, koja su supstituisana sa kiselom grupom, mogu da postoje kao soli, obrazovane putem dodavanja baze. Takve soli nastale dodavanjem baze uključuju one, izvedene od neorganskih baza koje obuhvataju, na primer: soli alkalnih metala (npr., natrijum i kalijum), soli zemno-alkalnih metala (npr., kalcijum i magnezijum), aluminijumove soli i amonijum soli. Osim toga, prikladne soli nastale dodavanjem baze obuhvataju soli fiziloški prihvatljivih organskih baza, kao što su: trimetilamin, trietilamin, morfolin, piridin, piperidin, pikolin, dicikloheksilamin, N,N'-dibenziletilendiamin, 2-hidroksietilamin, bis-(2-hidroksietil)amin, tri-(2-hidroksietil)amin, prokain, dibenzilpiperidin, N-benzil-(3-fenetilamin, dehidroabietilamin, N,N'-bishidroabietilamin, glukamin, N-metilglukamin, kolidin (trimetilpiridin, prim prev.), hinin, hinolin, etilendiamin, ornitin, holin, N,N'-benzilfenetilamin, hloroprokain, dietanolamin, dietilamin, piperazin, tris(hidroksimetil) aminometan i tetrametilamonijum hidroksid, kao i bazne amino kiseline, kao: lizin, arginin i N-metilglutamin. Ove soli mogu da se pripreme postupcima poznatim stručnim licima.
Izvesna jedinjenja ovog pronalaska i njihove soli mogu, isto tako, da postoje u obliku solvata sa vodom, na primer, hidrata ili sa organskim rastvaračima, kao što su metanol, etanol ili acetonitril, kako bi obrazovali, redom: metanolat, etanolat ili acetonitrilat. Ovaj pronalazak obuhvata svaki solvat i njihove mešavine.
Osim toga, jedinjenja ovog pronalaska ili njihova so ili solvat mogu da ispolje polimorfizam. Ovaj pronalazak, isto tako, obuhvata svaki takav polimorfni oblik.
Jedinjenja ovog pronalaska, takođe, sadrže dva ili više hiralnih centara. Na primer, jedinjenja mogu da uključe P1 ciklopropilni element formule
u kojoj C? i C2, svaki, predstavljaju asimetrični atom ugljenika na položajima 1 i 2 ciklopropilnog prstena. Neprotiveći se drugim mogućim asimetričnim centrima na drugim segmentima jedinjenja, prisustvo ova dva asimetrična centra znači da jedinjenja mogu da postoje kao racemske smeše dijastereomera, kao što su dijastereomeri u kojima je R2smešten bilo syn prema amidu bilo syn prema karbonilu, kao što je prikazano u nastavku.
Ovaj pronalazak obuhvata i enantiomere i mešavine enantiomera, kao što su racemske smeše.
Enantiomeri mogu da se razdvoje postupcima, poznatim stručnim licima, primera radi, obrazovanjem dijastereoizomernih soli, koje mogu da se razdvoje kristalizacijom, gas-tečnom ili tečnom hromatografijom, selektivnom reakcijom jednog enantiomera sa enantiomer-specifičnim reagensom. Biće jasno da kada se željeni enantiomer prevede u drugi hemijski entitet separacionom tehnikom, onda je potreban dodatni korak za formiranje željenog oblika enantiomera. Alternativno, specifični enantiomeri mogu da se sintetišu asimetričnom sintezom, upotrebom optički aktivnih reagenasa, supstrata, katalizatora ili rastvarača ili, prevođenjem jednog enantiomera u drugi asimetričnom transformacijom.
Jedinjenja ovog pronalaska mogu biti u obliku proleka. Prolekovi, koji imaju prednost su jednostavni alifatični ili aromatični estri, koji su izvedeni od, kada su prisutne, kiselih grupa na jedinjenjima ovog pronalaska. U nekim slučajevima, poželjno je da se pripreme prolekovi tipa dvostrukog estra, kao što su (aciloksi)alkil estri ili (alkoksikarbonil)oksi)alkil estri.
Izvesna jedinjenja ovog pronalaska mogu, isto tako, da postoje u konformacionim oblicima različite stabilnosti, koji se mogu razdvojiti. Torziona asimetrija, posledica ograničene rotacije oko asimetrične jedne veze, na primer, zbog steme smetnje ili napona prstena, može omogućiti razdvajanje različitih konformera. Ovaj pronalazak obuhvata svaki konformacioni izomer ovih jedinjenja, kao i njihove mešavine.
Izvesna jedinjenja ovog pronalaska mogu da postoje u obliku cviter-jona i ovaj pronalazak obuhvata svaki cviterjonski oblik ovih jedinjenja, kao i njihovu mešavinu.
Polazni materijali, upotrebljivi za sintezu jedinjenja ovog pronalaska su poznati stručnim licima i mogu jednostavno da se proizvedu ili su komercijalno dostupni.
Jedinjenja ovog pronalaska mogu da se proizvedu postupcima, poznatim stručnim licima, vidi, npr., US Patent No. 6,323,180 i US Patentnu prijavu 20020111313A1. Sledeći postupci, objašnjeni u nastavku su obezbeđeni u ilustrativne svrhe i nemaju cilj da ograniče smisao pronalaska koji se zahteva. Shvatiće se da je poželjno ili neophodno da se pripremi takvo jedinjenje u kome je funkcionalna grupa zaštićena upotrebom konvencionalne zaštitne grupe zatim, da se ukloni zaštitna grupa kako bi se obezbedilo jedinjenje ovog pronalaska. Detalji, koji se tiču upotrebe zaštitnih grupa u skladu sa ovim pronalaskom su poznati stručnim licima.
Jedinjenja ovog pronalaska mogu, primera radi, da se sintetišu prema opštem načinu, kao što je prikazano u Šemi I (u kojoj je CPG karboksilna zaštitna grupa, a APG je amino zaštitna grupa):
Ukratko, P1, P2 i P3 mogu biti spojeni dobro poznatim tehnikama
peptidnog kuplovanja. P1, P2 i P3 grupe mogu biti spojene zajedno bilo kojim redom u tolikoj meri koliko konačno jedinjenje odgovara peptidima pronalaska. Na primer, P3 može biti spojen na P2-P1; ili je P1 vezan na P3-P2.
Uopšteno, peptidi su produženi pomoću uklanjanja zaštite a-amino grupe N-terminalnog ostatka i kuplovanjem nezaštićene karboksilne grupe sledeće pogodne N-zaštićene amino kiseline preko peptidnog spoja, koristeći opisane postupke. Ovo uklanjanje zaštite i procedura kuplovanja su ponavljani dok se ne dobije željena sekvenca. Ovo kuplovanje može biti izvedeno sa konstituentnim amino kiselinama postepenim načinom, kao što je prikazano u Šemi I.
Kuplovanje između dve aminokiseline, aminokiseline i peptida, ili dva peptidna fragmenta, može biti izvedeno korišćenjem standardnih procedura kuplovanja, kao što su postupak sa azidom, postupak sa mešanim anhidridom karbonske-karboksilne kiseline (izobutil hloroformat), postupak sa karbodiimidom (dicikloheksilkarbodiimid, diizopropilkarbodiimid ili karbodiimid, rastvorljiv u vodi), postupak sa aktivnim estrom (p-nitrofenil estar, N-hidroksisukcin imido estar), Woodward reagens K-postupak, postupak sa karbonildiimidazolom, postupci sa fosfornim reagensom ili oksidaciono-reduktivni postupci. Neki od ovih postupaka (posebno postupak sa karbodiimidom) mogu biti pojačani dodavanjem 1-hidroksibenzotriazola ili 4-DMAP-a. Ove reakcije kuplovanja mogu biti izvedene ili u rastvoru (tečna faza) ili u čvrstoj fazi.
Podrobnije, korak kuplovanja obuhvata dehidrativno kuplovanje slobodnog karboksila jednog reaktanta sa slobodnom amino grupom drugog reaktanta, u prisustvu sredstva za kuplovanje, da bi se obrazovala vezna amidna veza. Opisi takvih sredstava za kuplovanje nađeni su u opšem udžbeniku peptidne hernije, na primer, M. Bodanszkv, "Peptide Chemistrv", drugo revijalno izdanje, Springer-Verlag, Berlin, Nemačka (1993). Primeri pogodnih sredstava za kuplovanje su: N,N'-dicikloheksilkarbodiimid, 1-hidroksibenzotriazol, u prisustvu N,N'-dicikloheksilkarbodiimida ili N-etil-N'-Š(3-dimetilamino)propilĆkarbodiimid. Praktično i korisno sredstvo za kuplovanje je komercijalno raspoloživi (benzotriazol-1-iloksi)tris-(dimetilamino)fosfonijum heksafluorofosfat, ili sam ili u prisustvu 1-hidroksibenzotriazola ili 4-DMAP-a. Drugi praktični i korisni agens za kuplovanje je komercijalno raspoloživi 2-(1 H-benzotriazol-1-iloksi)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum tetrafluoroborat. Još jedan praktični i korisni agens za kuplovanje je komercijalno raspoloživi 0-(7-azabenzotriazol-1 -il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat. Reakcija kuplovanja se izvodi u inertnom rastvaraču, npr., dihlorometanu, acetonitrilu ili dimetilformamidu. Višak tercijernog amina, npr, diizopropiletilamina, N-metilmorfolina, N-metilpirolidina ili 4-DMAP-a se dodaje da održi reakcionu mešavinu na pH oko 8. Temperatura reakcije se uglavnom kreće između 0°C i 50°C, a reakciono vreme se uglavnom kreće između 15 minuta i 24 h.
Funkcionalne grupe konstituentnih aminokiselina generalno moraju biti zaštićene tokom reakcija kuplovanja, kako bi se sprečilo obrazovanje neželjenih veza. Zaštitne grupe, koje se mogu upotrebiti, navedene su, primera radi, u Greene, "Protective Groups in Organic Chemistrv", John Wiley & Sons, New York (1981) i 'The Peptides: Analvsis, Svnthesis, Biologv", Vol. 3, Academic Press, New York (1981), izlaganja koja su ovde obuhvaćena kao referenca.
oc-amino grupa svake aminokiseline koja se kupluje na peptidni lanac, koji raste, mora biti zaštićena (APG). Može da se upotrebi svaka zaštitna grupa, poznata u ovoj oblast. Primeri takvih grupa uključuju: 1) acil grupe, kao što su: formil, trifluoroacetil, ftalil i p-toluensulfonil; 2) aromatične karbamat grupe, kao što su beziloksikarbonil (Cbz ili Z) i supstituisani benziloksikarbonili i 9-fluorenilmetiloksikarbonil (Fmoc); 3) alifatične karbamatne grupe, kao što su terc-butiloksikarbonil (Boe), etoksikarbonil, diizopropilmetoksikarbonil i aliloksiarbonil; 4) ciklične alkilne karbamat grupe, kao što su ciklopentiloksikarbonil i adamantiloksikarbonil; 5) alkil grupe, kao što su trifenilmetil i benzil; 6) trialkilsilil, kao što je trimetilsilil i 7) grupe, koje sadrže tiol, kao što su feniltiokarbonil i ditiasukcinoil.
Poželjna a-amino zaštitna grupa je ili Boe ili Fmoc. Mnogi derivati aminokiselina, koji su prikladno zaštićeni za sintezu peptida su komercijalno dostupni, a-amino zaštitna grupa novo dodatog aminokiselinskog ostatka je otcepljena pre kuplovanja sledeće aminokiseline. Kada se upotrebljava Boe grupa, postupci izbora su: trifluorosirćetna kiselina, čista ili u dihlorometanu, ili HCI u dioksanu ili etil acetatu. Nastala amonijum so se zatim neutrališe ili pre kuplovanja ili in situ, sa baznim rastvorima, kao što su vodeni puferi, ili tercijerni aminini u dihlorometanu, acetonitrilu ili dimetilformamidu. Kada se koristi Fmoc grupa, reagensi izbora su piperidin ili supstituisani piperidin u dimetilformamidu ali, može biti upotrebljen bilo koji sekundarni amin. Uklanjanje zaštite se izvodi na temperaturi između 0°C i sobne temperature (rt ili RT), uglavnom na 20-22°C.
Svaka od aminokiselina koja ima funkcionalne grupe bočnog lanca mora da bude zaštićena tokom izrade peptida, korišćenjem bilo koje od gore opisanih grupa. Stručna lica u ovoj oblasti proceniće da izbor i upotreba pogodnih zaštitnih grupa za ove funkcionalne grupe bočnog lanca zavisi od aminokiseline i prisustva drugih zaštitnih grupa u peptidu. Izbor takvih zaštitnih grupa važan je utoliko što grupa ne srne biti odstranjena tokom uklanjanja zaštite i kuplovanja a-amino grupe.
Na primer, kada je Boe upotrebljen kao a-amino zaštitna grupa, pogodne su sledeće zaštitne grupe bočog lanca: p-toluensulfonil (tosil) delovi mogu biti korišćeni da zaštite amino stranu lanca aminokiselina, kao što su Lys i Arg; acetamidometil; benzil (Bn) ili ferc-butilsulfonil delovi mogu biti upotrebljeni da bi zaštitili bočni lanac cisteina, koji sadrži sulfid; benzil (Bn) etri mogu biti upotrebljeni da bi zaštitili bočne lance serina, treonina ili hidroksiprolina, koji sadrže hidroksi, a benzil estri mogu biti upotrebljeni da bi zaštitili bočne lance asparaginske kiseline i glutaminske kiseline, koji sadrže karboksi.
Kada je Fmoc izabran za a-amino zaštitu, uglavnom su prihvatljive zaštitne grupe, zasnovane na rerc-butilu. Na primer, Boe može biti upotrebljen za lizin i arginin, terc-butil etar za serin, treonin i hidroksiprolin, a ferc-butil estar za asparaginsku kiselinu i glutaminsku kiselinu. Za zaštitu bočnog lanca cisteina, koji sadrži sulfid, može biti upotrebljen trifenilmetil (tritil).
Jednom kada je elongacija peptida završena, sve zaštitne grupe se odstranjuju. Kada se koristi sinteza u tečnoj fazi, zaštitne grupe se uklanjaju na bilo koji način, koji je diktiran izborom zaštitnih grupa. Ove procedure su dobro poznate stručnim licima u ovoj oblasti.
Dalje, u izradi jedinjenja ovog pronalaska mogu se pratiti uputstva, koja slede. Primera radi, da bi se obrazovala jedinjenja u kojima je R4-C(0)-, R4-S(0)2, zaštićeni P3 ili ceo peptid ili peptidni segment se kupluje na odgovarajući acil hlorid, odnosno sulfonil hlorid, koji je ili komercijalno dostupan ili, za koji je sinteza dobro poznata u struci. U izradi jedinjenja u kojima je R40-C(0)-, zaštićeni P3 ili ceo peptid ili peptidni segment se kupluje na odgovarajući hloroformat, koji je ili komercijalno dostupan ili je njegova sinteza u struci dobro poznata. Za Boc-derivate upotrebljava se (Boc)20.
Na primer:
Ciklopentanol je obrađen sa fozgenom, da bi se proizveo odgovarajući hloroformat.
Hloroformat je obrađen željenim NH2-tripeptidom, u prisustvu baze, kao što je trietilamin, kako bi se dobio ciklopentilkarbamat.
U izradi jedinjenja gde je R4-N(R5)-C(0)- ili R4-NH-C(S)-, zaštićeni P3 ili ceo peptid ili peptidni segment je obrađen fozgenom, a zatim aminom, kao što je opisano u SvnLett. Feb 1995; (2); 142-144, ili je reagovao sa komercijalno raspoloživim izocijanatom i pogodnom bazom, kao što je trietilamin.
U izradi jedinjenja gde je R4-N(R5)-S(0)2-, zaštićeni P3 ili ceo peptid ili peptidni segment je obrađen ili sveže pripremljenim ili komercijalno dostupnim sulfamil hloridom, a zatim aminom, kao što je opisano u patentu Ger. Offen. (1998), 84 pp. DE 19802350 ili WO 98/32748.
a-karboksilna grupa C-terminalnog ostatka je uglavnom zaštićena kao estar (CPG), koji može biti otcepljen, kako bi se dobila karboksilna kiselina. Zaštitne grupe, koje se mogu upotrebiti, uključuju: 1) alkil estre, kao što su: metil, trimetilsililetil i f-butil, 2) aralkil estre, kao što su benzil i supstituisani benzil ili 3) estre, koji mogu biti otcepljeni blagim tretmanom ili blagim reduktivnim sredstvima, kao što su trihloroetil i fenacil estri.
Nastala a-karboksilna kiselina (nastala otcepljivanjem blagom kiselinom, tretmanom blagom bazom ili blagim reduktivnim sredstvima) je kuplovana sa R1S02NH2Špripremljen obradom sa R1S02CI u rastvoru tetrahidrofurana koji je zasićen amonijakomć u prisustvu agensa za peptidno kuplovanje, kao što je CDI ili EDAC, u prisustvu baze, kao što je 4-dimetilaminopiridin (4-DMAP) i/ili 1,8-diazabicikloŠ5.4.0Ćundek-7-en (DBU), da bi se uključio P1' deo, efikasno zaokružujući tripeptid P1'-P1-P2-P3-APG. U ovom procesu, obično se upotrebi 1.5 ekvivalenata P1' kuplujućih sredstava.
Dalje, ukoliko je P3 zaštitna grupa APG uklonjena i zamenjena sa B delom, gore opisanim postupcima, a nastala a-karboksilna kiselina koja je proistekla iz otcepljivanja (nastala otcepljivanjem blagom kiselinom, tretmanom blagom bazom ili blagim reduktivnim sredstvima) je kuplovana sa R^C^NK, Špripremljen obradom sa R1S02CI, u rastvoru tetrahidrofurana, zasićenim amonijakom ili ovde opisanim alternativnim postupcimać u prisustvu sredstava za peptidno kuplovanje, kao što je CDI ili EDAC, u prisustvu baze, kao što je 4-dimetilaminopiridin (4-DMAP) i/ili 1,8-diazabicikloŠ5.4.0Ćundek-7-en (DBU), da bi se uključio P1' deo, a pripremljen je tripeptid P1'-P1-P2-P3-B. U ovom procesu obično se upotrebi 1.5 ekvivalenata P1' kuplujućih agenasa.
Jedinjenja ovog pronalaska mogu biti pripremljena brojnim postupcima, koji uključuju one, koji su opisani u primerima ispod i, kao što su opisana u U.S Patentu Br. 6,323,180 i U.S. patentnoj prijavi Br. 10/001,850, koja je podnesena 20. novembra 2001. Pouke iz U.S Patenta Br. 6,323,180 i U.S. patentne aplikacije Br. 10/001,850 su ovde obuhvaćene kao reference u celini.
Šema II dalje pokazuje opšti postupak, u kome su jedinjenja sa Formulom I izgrađena kuplovanjem tripeptidnog intermedijera karboksilne kiseline (I) sa P1' sulfonamidom. (Treba napomenuti da grupe R6, R7, R8, R9, R10i R„ kako su dole prikazane predstavljaju supstituente heterocikličnog sistema). Navedene reakcije kuplovanja zahtevaju obradu karboksilne kiseline (1) sa kuplujućim reagensom, kao što je karbonil diimidazol, u rastvaraču, kao što je THF, koji može biti zagrejan do refuksa, a nakon toga sledi dodavanje obrazovanog derivata (1) P1' sulfonamidu, u rastvaraču, kao što je THF ili metilen hlorid, u prisustvu baze, kao što je DBU.
Alternativni postupak za izgradnju jedinjenja sa Formulom I prikazan je u Šemi III. U njoj je P1' sulfonamidni element kuplovan na P1 element upotrebom postupka koji je sadržan u Šemi I. Nastalom P1-P1' delu može zatim biti uklonjena zaštita na njegovom amino kraju. U ovom opštem primeru upotrebljena je Boe zaštitna grupa, ali stručna lica u ovoj oblasti mogu prepoznati da brojne pogodne zaštitne amino grupe mogu biti upotrebljene u ovom postupku. Navedena Boe zaštitna grupa može biti uklonjena korišćenjem kiseline, kao što je trifluorosirćetna kiselina u rastvaraču, kao što je dihloroetan, da bi se dobio amin sa uklonjenom zaštitom u vidu TFA soli. Navedena TFA so amina može direktno biti upotrebljena u sledećoj reakciji kuplovanja ili kao alternativa, TFA so amina može prvo biti konvertovana u HCI so amina, a ova HCI so amina je korišćena u navedenoj reakciji kuplovanja, kao što je prikazano u Šemi III. Kuplovanje navedene HCI soli amina (3) sa karboksilnim krajevima P4-P3-P2 intermedijera se može postići korišćenjem reagenasa za kuplovanje, kao što je HATU, u rastvaračima kao što je dihlorometan, da bi se dobila jedinjenja sa Formulom I (4).
Alternativni postupak za izgradnju jedinjenja sa Formulom I prikazan je u Šemi IV. Ovde je hlorovodonična so P1-P1' terminalnog amina (1) kuplovana na slobodnu karboksilnu grupu P2 elementa, korišćenjem agenasa za kuplovanje, kao što je PyBOP, u prisustvu baze, kao što je diizopropil amin i u rastvaraču, kao što je metilen hlorid. Nastali P2-P1-P1' intermedijer može bi preveden u jedinjenja sa Formulom I u postupku od dva koraka, u kome je prvu korak uklanjanje zaštite aminskog kraja P2, korišćenjem kiseline, kao što je TFA, u rastvaraču, kao što je metilen hlorid. Nastala so trifluorosirćetne kiseline može biti kuplovana sa karboksilnim krajem P4-P3 elementa upotrebom standardnih kuplujućih agenasa, kao što je PyBop, u prisustvu baze, kao što je diizopropil amin i koristeći rastvarače, kao što je metilen hlorid, da bi se dobila jedinjenja sa Formulom I (4).
P4-P3-P2 inermedijer, korišćen u gornjim šemama, može biti izgrađen kao što je prethodno opisano, sa daljim opisom postupka, prikazanim u Šemi V. U njoj, slobodni karboksilni kraj P4-P3 intermedijera (1) može biti kuplovan na amino kraj P2 elementa, kako bi se dobio P4-P3-P2 dipeptid (2). Karboksilnom kraju P4-P3-P2 intermedijera može biti uklonjena zaštita saponifikacijom estarske grupe, da bi se dobio P4-P3-P2 u vidu slobodne karboksilne kiseline (3). Intermedijeri, kao što je jedinjenje (3), mogu biti prevedeni u jedinjenja sa Formulom I upotrebom ovde opisanih postupaka.
Jedinjenja sa Formulom I, takođe, mogu biti konvertovana u druga jedinjenja sa Formulom I, kao što je ovde opisano. Primer takvog postupka prikazan je u Šemi VI, u kojoj je jedinjenje sa Formulom I (1), koje nosi Boe grupu na P4 položaju, konvertovano u jedinjenje sa Formulom I (3), pri čemu navedeno jedinjenje nosi urea grupu na P4 položaju. Konverzija (1) u (3) može biti izvedena postupkom u dva koraka, čiji je prvi korak konverzija (1) u amin (2), obradom (1) sa kiselinom, kao što je TFA, u rastvaraču kao što je metilen hlorid. Nastala so amina može biti obrađena izocijanatom, u prisustvu jednog ekvivalenta baze, da bi se dobilo jedinjenje sa Formulom I (3), u kome je P3 deo pokriven ureom. Kao što je prethodno napomenuto, stručnjak u ovoj oblasti prepoznaće da intermedijer (2) može biti upotrebljen kao polazni materijal za izradu jedinjenja sa Formulom I, u kojima je P3 grupa pokrivena amidom ili sulfonamidom, ili tioureom ili sulfamidom. Izgradnja navedenih jedinjenja sa Formulom I može se postići korišćenjem standardnih uslova za obrazovanje navedenih P4 funkcionalnosti iz amina.
U izgradnji jedinjenja sa Formulom I, P1' kraj je ugrađen u molekule upotrebom jednog od opštih postupaka, prikazanih gore i detaljnije opisanih ispod. U nekoliko primera P1' elementi, koji su cikloalkil- ili alkil sulfonamidi i koji su ili komercijalno dostupni ili mogu biti pripremljeni iz odgovarajućeg alkil- ili cikloalkil-sulfonil hlorida, obradom navedenog sulfonil hlorida sa amonijakom. Alternativno, ovi sulfonamidi mogu biti sintetisani korišćenjem opšteg postupka prikazanog u Šemi VII. U njoj, komercijalno raspoloživi 3-hloro-propilsulfonil hlorid (1) je konvertovan u pogodni zaštićeni sulfonamid, kao na primer, obradom sa terc-butil aminom. Dobijeni sulfonamid (2) je zatim, konvertovan u odgovarajući cikloalkilsulfonamid obradom sa dva ekvivalenta baze, kao što je butil litijum u rastvaraču, kao što je THF na niskoj temperaturi. Nastalom cikloalkilsulfonamidu može biti uklonjena zaštita obradom sa kiselinom kako bi se dobio željeni nezaštićeni cikloalkilsulfonamid.
P1 elementi, koji su korišćeni u proizvođenju jedinjenja sa Formulom I su u nekim slučajevima komercijalno raspoloživi ili su na drugi način sintetisani korišćenjem ovde opisanih postupaka i kasnije su ugrađeni u jedinjenja sa Formulom I upotrebom ovde opisanih postupaka. Supstituisane P1 ciklopropilamino kiseline mogu biti sintetisane prema opštem postupku u Šemi
VIII.
Obrada komercijalno raspoloživog ili jednostavno sintetisanog imina (1) sa 1,4-dihalobutenom (2) u prisustvu baznih proizvoda, daje rezultirajući imin (3). Kisela hidroliza 3 daje 4, koje ima alil supstituent syn od karboksilne grupe, kao glavni proizvod. Aminski deo 4 može biti zaštićen korišćenjem Boe grupe kako bi se obezbedila potpuno zaštićena amino kiselina 5. Ovaj intermedijer je racemat, koji može biti razdvojen enzimskim postupkom u kome je estarski deo 5 otcepljen pomoću proteaze da bi se obezbedila odgovarajuća karboksilna kiselina. Bez vezivanja za bilo koju posebnu teoriju, veruje se da je ova reakcija selektivna utoliko što se jedan od enantiomera podvrgava reakciji mnogo većom brzinom nego njegov lik u ogledalu obezbeđujući kinetičko razdvajanje racemata intermedijera. U ovde navedenim primerima, poželjniji stereoizomer za ugrađivanje u jedinjenja sa Formulom I je 5a koje ima (1R,2S) stereohemiju. U prisustvu enzima ovaj enantiomer ne podleže otcepljivanju estra i prema tome ovaj enantiomer 5a je obnovljen iz reakcione smeše. Međutim, manje poželjan enantiomer 5b, koji ima (1S,2R) stereohemiju podleže otcepljivanju estra, t.j., hidrolizi kako se dobija slobodna kiselina 6. Sa završetkom ove reakcije, estar 5a može biti razdvojen od kiselog proizvoda 6 rutinskim postupcima, kao što su na primer, postupci vodene ekstrakcije ili hromatografije.
Postupci za izradu P2 intermedijera i Jedinjenja sa Formulom I prikazani su u šemama ispod. Trebalo bi napomenuti da su u mnogim slučajevima reakcije prikazane za samo jedan položaj intermedijera. Međutim, treba shvatiti da takve reakcije mogu biti korišćene kako bi dozvolile modifikacije na drugim položajima u okviru ovog intermedijera. Pored toga, navedeni intermedijeri, dati reakcioni uslovi i postupci u specifičnim primerima, široko su primenjivi na jedinjenja sa drugim obrascima supstitucije. Dole prikazane opšte šeme su praćene ovdašnjim primerima. I opšti i specifični primeri nisu ograničavajući kao na primer, izohinolinsko jezgro je prikazano kao deo opšte Šeme 9, međutim ovaj put predstavlja održiv proces za izgradnju alternativnih heterocikličnih supstituenata, kao zamena za izohinolinski element, kao što su hinolini i piridini.
Šema IX prikazuje kuplovanje N-zaštićenog C4-hidroksiprolinskog dela sa heterociklom da bi se obrazovao intermedijer (4) i kasniju modifikaciju navedenog intermedijera (4) u jedinjenje sa Formulom I postupkom produžavanja peptida, kao što je ovde opisano. Trebalo bi naglasiti da je u prvom koraku, koji predstavlja kuplovanje C4-hidroksi prolinske grupe sa heteroarilnim elementom uključena baza. Stručnjak u ovoj oblasti prepoznao bi da ovo kuplovanje može biti izvedeno korišćenjem baza, kao što su kalijum-terc-butoksid ili natrijum hidrid u rastvaraču, kao što je: DMF, DMSO ili THF. Ovo kuplovanje na sistem prstena izohinolina se odvija na C1 položaju (numeracija izohinolinskog sistema prstena je prikazana u intermedijeru 2, iz Šeme 9), a usmereno je hloro grupom, koja je zamenjena u ovom postupku. Trebalo bi napomenuti da na ovom položaju mogu biti upotrebljene alternativne odlazeće grupe, kao što je fluoro, a kao što je prikazano u Šemi. Navedeni fluoro intermedijeri (3) su dostupni iz odgovarajućeg hloro jedinjenja, korišćenjem ovde opisanih procedura iz literature. Takođe, treba napomenuti da položaj odlazeće grupe (hloro ili fluoro) u datom sistemu prstena može varirati, kao što je prikazano u Šemi X u kojoj je odlazeće grupa (fluoro u ovom primeru) na C6 položaju izohinolinskog sistema prstena intermedijera (2). Dalje, treba da se napomene, da je položaj heteroatom(heteroatoma) u intermedijerima, kao što je (2) u Šemi IX i Šemi X, takođe, varijabilan, kao što je definisano ovde opisanim izrazom heterocikl. U Šemi X, intermedijer (2) može biti kuplovan na derivat C4 hidroksi prolina da bi se dobio P2 element (3). Ovaj C6-supstituisani derivat izohinolina može biti konvertovan u jedinjenje sa Formulom I korišćenjem ovde opisanih postupaka. Alternativa gore opisanom postupku za kuplovanje C4-hidroksiprolina na aromatike i heteroaromatike data je u Mitsunobu reakciji, kao što je prikazana
u Koraku 1, Šeme XI. U ovoj opštoj reakciji šeme, derivat C4-hidroksi prolina je kuplovan na hinazolinski sistem prstena. Ova reakcija koristi reagense, kao što su trifenilfosfin i DEAD (dietilazodikarboksilat) u neprotonskim rastvaračima, kao što su THF ili dioksan i može biti upotrebljena za obrazovanje aril i heteroaril etara. Zapaziti da je tokom ove reakcije kuplovanja stereohemija C4-hiralnog centra u derivatu C4-hidroksi prolina invertovana pa je prema tome neophodna upotreba derivata C4-hidroksiprolina koji ima (S) stereohemiju na C4 položaju kao
polazni materijal, kao što je prikazan u Šemi XI. Trebalo bi napomenuti da su u literaturi opisane brojne modifikacije i poboljšanja Mitsunobu reakcije čije su pouke ovde uključene.
U podgrupi ovdašnjih primera izohinolini su uključeni u konačna jedinjenja i, posebno u P2 region navedenih jedinjenja. Stručna lica u ovoj oblasti bi prepoznala da su brojni opšti postupci raspoloživi za sintezu izohinolina. Pored toga, navedeni izohinolini, proizvedeni ovim postupcima mogu biti jednostavno uključeni u konačna jedinjenja sa Formulom I, korišćenjem ovde opisanih postupaka. Jedna opšta metodologija za sintezu izohinolina je prikazana u Šemi XII u kojoj su derivati cinamske kiseline (3-fenilpropenska kiselina, prim. prev.) koji su prikazani u opštoj formi kao struktura (2)
Referenca: N. Briet et al, Tetrahedron, 2002, 5761
konvertovani u 1-hloroizohinoline u postupku sa 4 koraka. Navedeni hloroizohinolini mogu kasnije biti korišćeni u reakcijama kuplovanja na derivate C4-hidroksi prolina, kao što su ovde opisane. Konverzija cinamskih kiselina u hlorohinoline počinje obradom cinamske kiseline sa alkilhloroformatom u prisustvu baze. Nastali anhidrid je zatim obrađen sa natrijum azidom, što dovodi do obrazovanja acil azida (3), kao što je prikazan u Šemi. Za obrazovanje acil azida iz karboksilnih kiselina raspoloživi su alternativni postupci, kao na primer, oni u kojima navedena karboksilna kiselina može biti obrađena difenilfosforilazidom (DPPA) u neprotonskom rastvaraču, kao što je metilen hlorid u prisustvu baze. U narednom koraku sleda reakcija acil azid (3) je konvertovan u odgovarajući izohinolon (4), kao što je prikazano u Šemi. U ovom toku acil azid je zagrevan do temperature od približno 190 stepeni Celzijusa u visoko ključalom rastvaraču kao što je difenilmetan. Ova reakcija je opšta i obezbeđuje osrednje do značajnih prinosa supstituisanog izohinolona iz odgovarajućih derivata cinamske kiseline. Trebalo bi napomenuti da su navedeni
derivati cinamske kiseline komercijalno dostupni ili mogu biti dobijeni iz odgovarajućeg derivata benzaldehida (1) direktnom kondenzacijom sa malonskom kiselinom ili njenim derivatima, a takođe i korišćenjem VVittigove reakcije. Intermedijeri izohinolona (4) iz Šeme XII mogu biti konvertovani u odgovarajući 1-hloro izohinolin obradom sa fosfornim oksihloridom. Ova reakcija je opšta i može biti primenjena na bilo koji od izohinolona, hinolona ili dodatnih heterocikala kao što je ovde prikazano da bi konvertovali hidroksi supstituent u odgovarajuće hloro jedinjenje kada je navedeni hidroksi u konjugaciji sa atomom azota u navedenim heterocikličnim sistemima prstena.
Alternativni postupak za sintezu izohinolinskog sistema prstena jeste Pomeranz-Fritsh procedura. Ovaj opšti postupak je prikazan u Šemi XIII. Postupak započinje konverzijom derivata benzaldehida (1) u funkcionalizovani imin (2). Navedeni imin je zatim konvertovan u izohinolinski sistem prstena obradom sa kiselinom na povišenoj temperaturi
ova sinteza izohinolina iz Šeme XIII je opšta i treba naglasti da je ovaj postupak posebno koristan u obezbeđivanju izohinolinskih intermedijera koji su supstituisani na C8 položaju (napomena: u intermedijer (3) iz Šeme XIII C8 položaj izohinolinskog prstena je supstituisan sa supstituentom R11). Intermedijeri izohinolina (3) mogu biti konvertovani u odgovarajuće 1-hloro hinoline (5) u postupku od dva koraka, kao što je prikazano. Prvi korak u ovom sledu je obrazovanje N-oksida izohinolina (4) obradom izohinolina (3) sa meta-hloro per benzojevom kiselinom u neprotonskom rastvaraču kao što je dihlorometan. Intermedijer (4) može biti konvertovan u 1-hloro hinolin obradom sa fosfornim oksihloridom u refluksujućem hloroformu.
Zapaziti da je ovaj postupak od dva koraka opšti i može biti primenjen kako bi se pribavili hloroizohinolini i hlorohinolini iz odgovarajućih izohinolina, odnosno hinolina.
Drugi postupak za sintezu izohinolinskog sistema prstena je prikazan u Šemi XIV. U ovom postupku derivat orto-alkilbenzamida (1) je obrađen jakom
bazom, kao što je terc-butil litijum u rastvaraču, kao što je THF, na niskoj temperaturi. U ovu reakcionu smešu je zatim dodat derivat nitrila koji je podvrgnut reakciji adicije sa anjonom dobijenim deprotonovanjem jedinjenja (1) što vodi obrazovanju jedinjenja (2). Ova reakcija je opšta i može biti upotrebljena za obrazovanje supstituisanih izohinolina. Intermedijer (2) iz Šeme XIV može biti konvertovan u odgovarajući 1-hlorohinolin, ovde opisanim postupcima.
Dodatni postupak za sintezu izohinolina je prikazan u Šemi XV. Deprotonovanje intermedijera (1) korišćenjem terc-butil litijuma je opisano gore. Međutim, u ovom postupku estar je obuhvatio navedeni anjon intermedijera što dovodi do obrazovanja intermedijera (2), kao što je prikazano ispod. U sledećoj reakciji je keton (2) kondenzovan sa amonijum acetatom na povišenoj temperaturi obezbeđujući obrazovanje hinolona (3). Ova reakcija je opšta i može biti primenjena na izgradnju supstituisanih izohinolona, koji zatim mogu biti konvertovani u odgovarajuće 1-hloroizohinoline, kao što je ovde opisano.
Još jedan dodatni postupak za izgradnju izohinolina je utvrđen u Šemi XVI. U prvom koraku ovog postupka, derivat orto-alkilarilimina, kao što je (1) podvrgnuto je uslovima deprotonovanja (sec-butil litijum, THF), a nastali anjon je ugašen
L. Flippin, J. Muchovvski, JOC, 1993, 2631-2632
dodatkom aktiviranih derivata karboksilne kiseline kao što je VVeinrebov amid. Nastali keto imin (2) može biti konvertovan u odgovarajući izohinolin, kondenzacijom sa amonijum acetatom na povišenim temperaturama. Ovaj postupak je opšti i može biti korišćen za sintezu supstituisanih izohinolina. Navedeni izohinolini mogu biti konvertovani u odgovarajući 1-hlorohinolin, ovde opisanim postupcima.
Ovde opisani heterocikli, koji su ugrađeni u jedinjenja sa Formulom (1) mogu biti dalje funkcionalizovani. Stručnjaku u ovoj oblasti je jasno da dodatna funkcionalizacija navedenih heterocikala može da se izvede ili pre ili posle ugradnje ovih funkcionalnih grupa u jedinjenje sa Formulom I. Sledeće Šeme ilustruju ovaj momenat. Na primer, Šema XVII pokazuje konverziju
1-hloro-6-fluoro-izohinolina u odgovarajuće vrste 1-hloro-6-alkoksi-izohinolina, obradom (1) od (ekv.1) sa vrstama natrijum ili kalijum alkoksida u alkoholnom rastvaraču iz kog se izvodi alkoksid na sobnoj temperaturi. U nekim slučajevima može biti neophodno da se reakcija zagreje da bi se
dovela do završetka. Navedeni hlorohinolin može biti uključen u jedinjenje sa Formulom I korišćenjem ovde opisanog stručnog znanja. Modifikacije P2 heterocikličnog elementa mogu biti, isto tako, izvedene po njgovoj ugradnji u jedinjenja sa Formulom I, kao što je prikazano u (ekv. 2) Šeme XVII. Specifično jedinjenja, kao što je (1) u (ekv.2) koje sadrži odlazeću grupu u ftalazinskom jezgru može biti zamenjeno nukleofilom kao što je alkoksid u rastvaračima, kao što je odgovarajući alkohol iz kog je dobijen alkoksid. Ove reakcije se mogu izvesti na sobnoj temperaturi ali je u nekim slučajevima neophodno da se reakcija zagreje da bi se dovela do završetka. Šema XVIII daje opšti primer za modifikaciju heterocikala, kao što su ovde definisani korišćenjem reakcija kuplovanja, koje su posredovane paladijumom. Navedena kuplovanja se mogu koristiti da se funkcionalizuje heterocikl na svakom položaju sistema prstena obezbeđujući da je takav prsten pogodno aktiviran ili funkcionalizovan, kao na primer, sa hloridom, kao što je prikazano u Šemi. Ovaj sled započinje 1-hloroizohinolinom (1), koji obradom sa metahloroperbenzojevom kiselinom može biti konvertovan u odgovarajući N-oksid (2). Navedeni intermedijer (2) može biti preveden u odgovarajući 1,3-dihloroizohinolin (3) obradom sa fosfornim oksihloridom u refluksujućem hloroformom. Intermedijer (3) može biti kuplovan sa N-Boc-4-hidroksiprolinom ovde opisanim postupcima da bi se obezbedio intermedijer (5), kao što je prikazano u Šemi. Intermedijer (5) može biti podvrgnut Suzuki kuplovanju sa aril bornom kiselinom u prisustvu paladijumovog reagensa i baze i u rastvaraču kao što je THF, toluen ili DMF, kako bi se dobio C3-arilizohinolinski intermedijer (6). Heteroarilborne kiseline mogu, takođe, biti uključene u ovaj postupak kuplovanja posredovan Pd-om da bi se dobili C3-heteroarilizohinolini. Intermedijer (6) može biti konvertovan u konačna jedinjenja sa Formulom I ovde opisanim postupcima
Paladijumom posredovana kuplovanja heteroarilnih sistema sa arilnim ili heteroarilnim elementima, takođe, mogu biti uključena u kasniji stepen u izgradnji jedinjenja sa Formulom I, kao što je prikazano u Šemi IXX. U njoj je tripeptid acilsulfonamid intermedijer (1) kuplovan na 1-hloro-3-bromoizohinolin (2), koristeći prethodono opisani postupak zamene alkoksida heteroarilhalo dela da bi se dobio intermedijer (3). Kuplovanje (1) i (2) je najefikasnije u prisustvu katalizatora, kao što je lantan hlorid, kao što je ovde opisano. Izohinolinski sistem prstena intermedijera (3) može dalje biti funkcionalizovan korišćenjem ili Suzuki kuplovanja (Postupak 1: podvrgavanje (3) heteroaril ili aril bornim kiselinama u prisustvu paladijumskog katalizatora, kao što je paladijum tetra(trifenilfosfin) i baze, kao što je cezijum karbonat, u rastvaračima, kao što je DMF) ili Stille kuplovanja (Postupak 2: podvrgavanje (3) heteroaril ili aril derivatima kalaja, u prisustvu paladijumskog katalizatora, kao što je paladijum tetra(trifenilfosfin), u rastvaračima, kao što toluen).
Paldijumove reakcije, takođe, mogu biti korišćene da bi se kuplovali C4-amino prolinski elementi sa funkcionalizovanim heterociklima. Šema XX pokazuje kuplovanje intermedijera (1) sa funkcionalizovanim izohinolinom, u prisustvu paladijumovog katalizatora i baze, u rastvaraču, kao što je toluen. Intermedijeri kao što je jedinjenje (3), mogu biti konvertovani u jedinjenja sa Formulom I, koristeći ovde opisane postupke.
Izgradnja funkcionalizovanih izohinolinskih sistema prstena, takođe je moguća korišćenjem [4+2] cikloadicionih reakcija. Na primer (Šema XXI), korišćenje vinil izocijanata (1) u cikloadicionim reakcijama sa prekursorima benzina (2) daje funkcionalizovane izohinoline (3). Navedeni izohinolini mogu biti ugrađeni u jedinjenja sa Formulom I, korišćenjem ovde opisanih postupaka.
Ovaj pronalazak, takođe, obezbeđuje smeše, koje sadrže jedinjenje ovog pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili prolek i farmaceutski prihvatljiv nosač. Farmaceutske smeše ovog pronalaska sadrže terapeutski efikasnu količinu jedinjenja pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvata ili proleka i farmaceutski prihvatljiv nosač, sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, npr., ekscipijentom ili vehikulumskim razblaživačem.
Aktivni sastojak, t.j. jedinjenje, u ovim smešama je obično u od 0.1 težinskih procenata do 99.9 procenata po težini smeše, a često je od oko 5 do 95 težinskih procenata.
Farmaceutske smeše ovog pronalaska mogu da se primene oralno, parenteralno ili preko implantiranog rezervoara. Oralna primena ili primena putem injekcija ima prednost. U nekim slučajevima, pH formulacije može biti doteran sa farmaceutski prihvatljivim kiselinama, bazama ili puferima, da bi se povećala stabilnost formulisanog jedinjenja ili njegovog oblika oslobađanja. Izraz parenteralan, kako je ovde korišćen, uključuje: subkutane, intrakutane, inravenske, intramuskulame, intra-artikularne, intrasinovijalne, intrasternalne, intratekalne ili intralezijske injekcije ili infuzione tehnike.
Farmaceutske smeše mogu biti u obliku sterilnih preparta za injiciranje, na primer, u vidu sterilnih vodenih ili uljanih suspenzija za injiciranje. Ova suspenzija može biti formulisana u skladu sa tehnikama, poznatim u struci, korišćenjem pogodnih disperzivnih ili vlažećih agenasa ili suspendujućih agenasa. Detalji koji se odnose na izradu takvih jedinjenja poznati su stručnim licima u ovoj oblasti.
Kada su primenjene oralno, farmaceutske smeše ovog pronalaska mogu biti primenjene u bilo kojoj oralno prihvatljivoj doznoj formi, uključujući, ali bez ograničenja, kapsule, tablete i vodene suspenzije i rastvore. U slučaju tableta za oralnu primenu, nosači koji su obično korišćeni uključuju laktozu i kukuruzni škrob. Obično su, isto tako, dodata lubrikantna sredstva, kao što je magnezijum stearat. Za oralnu primenu u formi kapsule, korisni razblaživači obuhvataju laktozu i osušeni kukuruzni škrob. Kada su vodene suspenzije primenjene oralno, aktivni sastojak je kombinovan sa agensima za emulgovanje i suspendovanje. Ukoliko se želi, mogu biti dodati određeni agensi za zaslađivanje i/ili ukus i/ili agensi za boju.
Drugi pogodni nosači za gore navedene smeše, mogu biti nađeni u standardnim farmaceustkim tekstovima, npr., u "Remington's Pharmaceutical Sciences", 19. izdanje, Mack Publishing Companv, Easton, Penn., 1995. Drugi detalji, koji se odnose na dizajn i izradu pogodnih oblika oslobađanja farmaceutskih smeša pronalaska, poznati su stručnjacima u ovoj oblasti.
Dozni nivoi od oko 0.01 i oko 1000 miligrama po kilogramu ("mg/kg") telesne težine dnevno, poželjno između oko 0.5 i oko 250 mg/kg telesne težine dnevno, jedinjenja pronalaska, uobičajeni su u monoterapiji za prevenciju i lečenju bolesti posredovanih HCV-om. Uobičajeno, farmaceutske smeše pronalaska biće primenjene od oko 1 do oko 5 puta dnevno, ili alternativno, kao kontinuirana infuzija. Takva primena može biti upotrebljena kao hronična ili akutna terapija. Količina aktivnog sastojka, koja može biti sjedinjena sa nosivim materijalima, da bi se proizvela dozna forma, variraće u zavisnosti od domaćina koji se leči i posebnog načina primene.
Kao što će oceniti obučeni stručnjak, mogu biti zahtevane niže ili više doze, u odnosu na one, koje su gore navedene. Specifični režimi doziranja i lečenja zavisiće od širokog spektra faktora, uključujući: aktivnost specifičnog jedinjenja koje je upotrebljeno, godine, telesnu težinu, opšte zdravstveno stanje, pol, ishranu, vreme primene, brzinu izlučivanje, kombinovanje lekova, ozbiljnost i tok infekcije, izloženost pacijenta infekciji i procenu lekara, koji ga leči. Generalno, lečenje se započinje malim dozama suštinski manjim od optimalne doze peptida. Posle toga, doza se povećava polaganim porastom sve dok se ne dostigne optimalno dejstvo pod okolnostima. Uopšteno, najpoželjnije se jedinjenje primenjuje pri nivou koncentracije koja će generalno omogućiti rezultate antivirusnog dejstva, a da ne prouzrokuje nikakve štetne niti opasne sporedne efekte.
Kada smeše ovog pronalaska sadrže kombinaciju jedinjenja pronalaska i jedan ili više dodatnih terapeutskih ili profilaktičkih agenasa i jedinjenje i dodatni agens su obično prisutni u doznim nivoima između oko 10 do 100%, a poželjnije između 10 i 80% dozaže, uobičajeno primenjene u monoterapijskom režimu.
Kada su ova jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati ili prolekovi formulisani zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, nastala smeša može biti primenjena in vivo sisarima, kao što je čovek, kako bi se inhibirala NS3 proteaza HCV-a ili lečila ili sprečila infekcija HCV-om. Takvo lečenje može, takođe, biti postignuto korišćenjem jedinjenja ovog pronalaska u kombinaciji sa agensima, koji uključuju, ali bez ograničenja: imunomodulatorne agense, kao što su interferoni; druge antivirusne agense, kao što je ribavirin i amantadin; druge inhibitore NS3 proteaze HCV-a; inhibitore drugih ciljeva u životnom ciklusu HCV-a, kao što su: helikaza, polimeraza, metaloproteaza ili ulazno mesto unutrašnjeg ribosoma; ili njihove kombinacije. Dodatni agensi mogu biti sjedinjeni sa jedinjenjima ovog pronalaska da bi se načinio oblik jedne doze. Alternativno, ovi dodatni agensi mogu biti primenjeni sisarima zasebno, kao deo višestruke dozne forme.
U skladu s tim, drugi aspekt ovog pronalaska obezbeđuje postupke inhibiranja aktivnosti NS3 proteaze HCV-a kod pacijenta, putem primene jedinjenja ovog pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, u kome su supstituenti, kao što su prethodno opisani.
U poželjnim ostvarenjima, ovi postupci su korisni za povećavanje aktivnosti proteaze kod pacijenta. Ako farmaceutska smeša sadrži samo jedinjenje ovog pronalaska, kao aktivni sastojak, takvi postupci mogu dodatno uključiti korak primene navedenom pacijentu agensa, koji je odabran od: imunomodulatornog agensa, antivirusnog agensa, inhibitora proteaze HCV-a, inhibitora drugih ciljeva u životnom ciklusu HCV-a, kao što su, primera radi, helikaza, polimeraza ili metaloproteaza. Takav dodatni agens može biti primenjen pacijentu, pre, istovremeno ili posle primene jedinjenja ovog pronalaska.
U alternativnom poželjnom aspektu, ovi postupci su korisni za inhibiranje replikacije virusa kod pacijenta. Takvi postupci mogu biti korisni u lečenju ili prevenciji HCV bolesti.
Jedinjenja ovog pronalaska mogu, takođe, biti korišćena kao laboratorijski reagensi. Jedinjenja mogu biti instrumenti za pribavljanje istraživačkih sredstava za dizajniranje testova virusne replikacije, za validaciju test sistema na životinjama i strukturnih bioloških studija, kako bi se dalje povećalo poznavanje mehanizama HCV bolesti.
Jedinjenja ovog pronalaska mogu, takođe, biti upotrebljena za lečenje ili prevenciju virusne kontaminacije materijala i usled toga, za smanjivanje rizika od virusnih infekcija kod laboratorijskog ili medicinskog osoblja ili pacijenata, koji dolaze u kontakt sa takvim materijalom, npr., krv, tkivo, himrški instrumenti i odeća, laboratorijski instrumenti i materijali za pokrivanje, i aparati i materijali za sakupljanje krvi ili trasfuziju.
PRIMERI
Specifični primeri, koji slede, ilustruju sintezu jedinjenja tekućeg pronalaska i ne treba ih shvatiti kao ograničenje okvira i smisla pronalaska. Postupci mogu biti prilagođeni varijacijama sa ciljem da se proizvedu jedinjenja, obuhvaćena ovim pronalaskom međutim, koja nisu posebno izložena. Dalje, varijacije postupaka za proizvodnju istih jedinjenja na nešto drugačiji način, takođe, će biti očigledne stručnjacima u ovoj oblasti.
Postoci rastvora izražavaju odnos težine prema zapremini, a odnosi rastvora izražavaju odnos zapremine prema zapremini, ukoliko nije drugačije naznačeno. Spektri nuklearne magnetne rezonance (NMR) su beleženi Bruker na 300, 400 ili 500 MHz spektrometru; hemijski pomaci (S) su izraženi u delovima na milion. Flash hromatografija je izvedena na silika gelu (Si02), u skladu sa Stillovom tehnikom flash hromatografije (W.C. Still et al., J. Org. Chem.,
(1978), 43, 2923).
Svi podaci tečne hromatografije (LC) su zabeleženi na Shimadzu LC-10AS tečnom hromatografu, koristeći SPD-10AV UV-Vis detektor, a podaci masene spektrometrije (MS) su određeni sa Micromass Platform za LC na elektrosprej način (ES+).
Ukoliko nije drugačije navedeno, u sledećim primerima, svako jedinjenje je analizirano pomoću LC/MS, koristeći jednu od sedam metodologija, koje imaju sledeće uslove.
Kolone: (Postupak A) - YMC ODS S7 C18 3.0x50 mm
(Postupak B) - YMC ODS-A S7 C18 3.0x50 mm
(Postupak C) - YMC S7 C18 3.0x50 mm
(Postupak D) - YMC Xterra ODS S7 3.0x50 mm
(Postupak E) - YMC Xterra ODS S7 3.0x50 mm
(Postupak F) - YMC ODS-A S7 C18 3.0x50 mm
(Postupak G) - YMC C18 S5 4.6x50 mmĆ
Gradijent: 100% rastvarač A / 0% rastvarač B do
0% rastvarač A / 100% rastvarač B Gradijent vreme: 2 min. (A, B, D, F, G); 8 min. (C, E) Vreme zadržavanja: 1 min. (A, B, D, F, G); 2 min. (C, E) Brzina protoka: 5 mL/min
Talasna dužina detektora: 220 nm
Skraćenice, korišćene u ovoj prijavi, obuhvatajući posebno one u ilustrativnim primerima, koji slede su dobro poznate stručnjacima u ovoj oblasti. Neke od korišćenih skraćenica su, kao što slede: rt sobna temperatura Boe terc-butiloksikarbonil
DMSO dimetilsulfoksid
EtOAc etil acetat
t-BuOK kalijum terc-butoksid Et20 dietil etar
TBME terc-butilmetil etar
THF tetrahidrofuran
CDI karbonildiimidazol
DBU 1,8-diazabicikloŠ5.4.0Ćundek-7-en TFA trifluorosirćetna kiselina
NMM N-metilmorfolin
HATU O-7-azabenzotriazol-l-il
HBTU O-šl H-benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat
HOBT N-hidroksibenzotriazol PvBrop bromo-bis-pirolidin-fosfonijum heksafluorofosfat DMF dimetilformamid
MeOH metanol
EDTA etilendiamintetrasirćetna kiselina HRMS masena spektroskopija visoke rezolucije DMAP 4-dimetilaminopiridin
DIPEA diizopropiletilamin
DCM dihlorometan
DCE dihloroetan
Jedinjenja i hemijski intermedijeri ovog pronalaska, opisani u primerima koji slede, pripremljeni su u skladu sa sledećim postupcima. Treba napomenuti da je sledeći, primerima ilustrovani odeljak, prikazan u delovima. Delovi su označeni kao Deo A do K. Brojevi primera i brojevi jedinjenja nisu kontinuirani kroz celinu dela Primeri ove aplikacije i iz tih razloga, svaki deo označava "prekid" u numeraciji. Numeracija u okviru svakog dela je generalno bliska. Deo L opisuje biološku aktivnost jedinjenja. Deo M opisuje podgrupu dodatnih jedinjenja koja bi mogla biti proizvedena korišćenjem ovde opisanih postupaka.
Deo A:
Izrada intermedijera
Izrada P1 intermedijera:
P1 intermedijeri, opisani u ovom delu mogu biti upotrebljeni za izradu jedinjenja sa Formulom I, ovde opisanim postupcima.
I P1 elementi:
1. Izrada etil estra racemske (1fl,2S)/(1S,2fl)-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline
Hidrohlorid glicin etil estra (303.8 g, 2.16 mol) je suspendovan u terc-butilmetil etru (1.6L). Dodati su benzaldehid (231 g, 2.16mol) i anhidrovani natrijum sulfat (154.6g, 1.09mol), a smeša je ohlađena do 0°C korišćenjem led-voda kupatila. Tokom 30 minuta dodavan je, kap po kap, trietilamin (455ml_, 3.26mol) i smeša je mešana tokom 48 h na rt. Reakcija je zatim ugašena dodatkom ledeno hladne vode (1L) i izdvojen je organski sloj. Vodena faza je ekstrahovanaterc-butilmetil etrom (0.5L), a sjedinjene organske faze su isprane smešom zasićenog vodenog NaHC03(1L) i slanog rastvora (1L). Rastvor je osušen preko MgS04i ukoncentrisan in vacuo da bi se dobilo 392.4g A/-benzil imin proizvoda u vidu gustog žutog ulja koje je direktno korišćeno u sledećem koraku.
<1>H NMR (CDCI3, 300 MHz) 5 1.32 (t,J =7.1 Hz, 3H), 4.24 (q,J =7.1 Hz, 2H), 4.41 (d,J =1.1 Hz, 2H), 7.39-7.47 (m, 3H), 7.78-7.81 (m, 2H), 8.31 (s, 1H).
U suspenziju litijum ferc-butoksida (84.06g, 1.05mol) u suvom toluenu (1.2L) dodata je, kap po kap, mešavina A/-benzil imina glicin etil estra (100.4g, 0.526mol) ifrans-1,4-dibromo-2-butena (107.0g, 0.500mol) u suvom toluenu (0.6L) tokom 60 min. Posle završetka dodavanja, tamno crvena smeša je ugašena dodatkom vode (1L) i ferc-butilmetil etra (TBME, 1L). Vodena faza je odvojena i ekstrahovana drugi put sa TBME (1L). Organske faze su sjedinjene, dodata je 1N HCI (1L) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Organska faza je izdvojena i ekstrahovana vodom (0.8L). Vodene faze su zatim sjedinjene i zasićene solju (700g), dodat je TBME (1L) i smeša je ohlađena do 0°C. Izmešana smeša je zatim alkalizovana do pH 14 dodavanjem, kap po kap, 10N NaOH, izdvojen je organski sloj, a vodena faza je ekstrahovana sa TBME (2x500mL). Sjedinjeni organski ekstrakti su osušeni (MgS04) i ukoncentrisani do zapremine od 1L. Ovom rastvoru slobodnog amina je dodat BOC20 ili di-ferc-butildikarbonat (131.Og, 0.6mol) i smeša je mešana 4 dana na rt. Reakcionoj mešavini je dodat dodatni di-ferc-butildikarbonat (50g, 0.23mol) i smeša je podvrgnuta refluksu tokom 3 h, a zatim je ostavljena da se preko noći ohladi do sobne temperature. Reakciona smeša je osušena preko MgS04i ukoncentrisana in vacuo da bi se dobilo 80g sirovog materijala. Ovaj ostatak je prečišćen flash hromatografijom (2.5kg Si02, uz eluaciju sa 1% do 2% MeOH/CH2CI2) da bi se dobilo 57g (53%) etil estra racemske N-Boc-(1f?,2S)/(1S,2R)-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline u vidu žutog ulja, koje očvrsne tokom stajanja u frižideru.<1>H NMR (CDCI3, 300 MHz) § 1.26 (t,J =7.1 Hz, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.43-1.49 (m, 1H), 1.76-1.82 (br m, 1H), 2.14 (q,J =8.6 Hz, 1H), 4.18 (q,J =7.2 Hz, 2H), 5.12 (dd,J =10.3, 1.7 Hz, 1H), 5.25 (br s, 1H), 5.29 (dd, J = 17.6, 1.7 Hz, 1H), 5.77 (ddd,J=17.6, 10.3, 8.9 Hz, 1H); MSm/ z 254.16(M-1).
Korak 3: Izrada hidrohlorida etil estra racemske (1fl,2S)/(1S,2/?)-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline
Etil estarN-Boc-(1 f?,2S)/(1 S,2fi)-1-amino-2-vinilciklopropankarboksilne kiseline (9.39g, 36.8mmol) je rastvoren u 4N HCI/dioksan (90ml_, 360mmol) i mešan je tokom 2 h na rt. Reakciona smeša je ukoncentrisana da bi se dobio hidrohlorid etil estra (1/?,2S)/(1S,2/^-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline, u kvantitativnom prinosu (7g, 100%).<1>H NMR (metanol-d4) § 1.32 (t,J =7.1, 3H), 1.72 (dd,J =10.2, 6.6 Hz, 1H), 1.81 (dd,J =8.3, 6.6 Hz, 1H), 2.38 (q,J=8.3 Hz, 1H), 4.26-4.34 (m, 2H), 5.24 (dd, 10.3, 1.3 Hz, 1H), 5.40 (d,J =17.2, 1H), 5.69-5.81 (m, 1H).
Alternativni put za izradu hidrohlorida etil estra racemske N-Boc-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline
U rastvor kalijum ferc-butoksida (11.55g, 102.9mmol) u THF-u (450ml_), na -78°C dodat je komercijalno raspoloživi /V,A/-dibenzil imin glicin etil estra (25.0g, 93.53mmol) u THF-u (112mL). Reakciona smeša je zagrejana do 0°C, mešana je tokom 40 min, a zatim je ponovo ohlađena na -78°C. Ovom rastvoru je dodattrans- 1,4-dibromo-2-buten(20.Og, 93.50mmol), smeša je mešana tokom 1 h na 0°C, a zatim je ponovo ohlađena na -78°C. Dodat je kalijumterc-butoksid (11.55g, 102.9mmol), smeša je odmah zagrejana do 0°C i mešana je još 1 sat pre koncentrisanja in vacuo. Sirovi proizvod je pokupljen u Et20 (530mL), dodat je 1N vodeni rastvor HCI (106ml_, 106mmol), a nastala dvofazna smeša je mešana na rt tokom 3.5 h. Izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je ispran sa Et20 (2x) i zaalkalizovan sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03. Željeni amin je ekstrahovan sa Et20 (3x), a sjedinjeni organski ekstrakt je ispran slanim rastvorom, osušen (MgS04) i ukoncentrisan in vacuo kako bi se dobio slobodan amin. Ovaj materijal je obrađen 4N rastvorom HCI u dioksanu (100ml_, 400mmol) i ukoncentrisan da bi se dobio hidrohlorid etil estra (1 fi,2S)/(1 S,2ft)-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline, u vidu smeđe polučvrste mase (5.3g, 34% prinos), koji je identičan materijalu, dobijenom postupkom A, uz izuzetak prisustva male količine neidentifikovanog aromatičnog onečišćenja (8%).
Razdvajanje etil estraA/-Boc-(1f?,2S)/(1S,2f?)-1-amino-2-vinilciklopropankarboksilne kiseline
Razdvajanje A
U vodeni rastvor pufera natrijum fosfata (0.1M, 4.25 litara ("L"), pH 8) smeštenom u 12L-skom zaštićenom reaktoru održavanom na 39°C i mešanom na 300 rpm. Dodato je 511 grama Acalase 2.4L (oko 425ml_) (Novozvmes North America Inc.). Kada je temperatura smeše postigla 39°C, pH je doteran do 8.0 dodavanjem 50%-tnog NaOH u vodi. Zatim je tokom perioda od 40 min dodavan etil estar racemske N-Boc-(1 fl,2S)/(1 S,2fi)-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline (85g) u 850ml_ DMSO. Temperatura rekcije je zatim održavana na 40°C, tokom 24.5 h, tokom kog vremena je u vremenskim tačkama 1.5 h i 19.5 h pH smeše doteran do 8.0 korišćenjem 50%-tnog NaOH u vodi. Posle 24.5 h utvrđeno je da je enantio-višak estra 97.2% i reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature (26°C) i mešana preko noći (16 h), posle čega je utvrđeno da je enantio-višak estra 100%. pH reakcione smeše je zatim doteran do 8.5 sa 50%-tnim NaOH, a nastala mešavina je ekstrahovana sa MTBE (2x2L). Sjedinjeni MTBE ekstrakt je zatim ispran 5%-tnim NaHC03(3x100mL) i vodom (3x100mL) i uparen je in vacuo da bi se dobio enantiomerno čisti etil estar N-Boc-(1/?,2S)/-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline, u vidu svetio žute čvrste mase (42.55g, čistoća 97% Ž 210nm koji ne sadrži kiselinu; 100%-tni enantiomerni višak ("ee")).
Vodeni sloj iz postupka ekstrakcije je zatim zakiseljen do pH 2 sa 50% H2S04i ekstrahovan sa MTBE (2x2L). MTBE ekstrakt je ispran vodom (3x100ml_) i uparen da bi se dobila kiselina u vidu svetio žute čvrste mase (42.74g, čistoća 99% Ž 210nm ne sadrži estar).
Razdvajanje B
U 0.5ml_ 100mM Heps»Na pufera (pH 8.5) u reakcionoj čašici ploče sa 24 reakcione čašice (kapacitet: 10 ml/reakcionoj čašici), dodati su 0.1 mL Savinase 16.0L (proteaza izBacillus clausii)(Novozvmes North America Inc.) i rastvor etil estra racemske N-Boc-(1fl,2S)/(1S,2f?)-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline (10mg) u 0.1 mL DMSO. Ploča je zapečaćena i inkubirana na 250 rpm na 40°C. Posle 18 h, utvrđeno je da je enantio-višak estra 44.3%, kao što sledi: 0.1 mL reakcione smeše je uklonjen i dobro izmešan sa 1mL etanola; posle centrifugiranja, 10 mikrolitara ("fiL") supernatanta je analizirano hiralnom HPLC, preostaloj reakcionoj smeši je dodat 0.1 mL DMSO, a ploča je inkubirana tokom još 3 dana na 250 rpm, na 40°C, posle čega je u svaku reakcionu čašicu dodato četiri mL etanola. Posle centrifugiranja 10pL supernatanta je analizirano hiralnom HPLC i utvrđeno je da je enantio-višak estra 100%.
Razdvajanje C
U 0.5mL lOOmM Heps*Na pufera (pH 8.5) u reakcionoj čašici ploče sa 24 reakcione čašice (kapacitet: 10 ml/reakcionoj čašici), dodati su 0.1 mL Esperase 8.0L (proteaza izBacillus halodurans)(Novozvmes North America Inc.) i rastvor etil estra racemskeN-Boc-(1 f?,2S)/(1 S, 2R}-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline (10mg) u 0.1 mL DMSO. Ploča je zapečaćena i inkubirana na 250 rpm na 40°C. Posle 18 h, na sledeći način je utvrđeno da je enantio-višak estra 39.6%: 0.1 mL reakcione smeše je uklonjen i dobro izmešan sa 1mL etanola; posle centrifugiranja, 10|iL supernatanta je analizirano hiralnom HPLC. Preostaloj reakcionoj smeši je dodat 0.1 mL DMSO i ploča je inkubirana tokom još 3 dana na 250 rpm, na 40°C, posle čega je u svaku reakcionu čašicu dodato četiri mL etanola. Posle centrifugiranja 10u.L supernatanta je analizirano hiralnom HPLC i utvrđeno je da je enantio-višak estra 100%.
Analiza uzoraka je izvedena na sledeći način:
1) Priprema uzorka: oko 0.5mL reakcione smeše je dobro izmešano sa 10 zapremina EtOH. Posle centrifugiranja 10p.L supernatanta je injicirano na HPLC kolonu.
2) Određivanja konverzije:
Kolona: YMC ODS A, 4.6 x 50 mm, S-5 ?m
Rastvarač: A, 1 mM HCI u vodi; B, MeCN
Gradijent: 30% B za 1 min; 30% do 45% B tokom 0.5 min; 45% B za 1.5 min; 45% do 30% B tokom 0.5 min.
Brzina protoka: 2 ml/min
UV detekcija: 210 nm
Retenciono vreme: kiselina, 1.2 min; estar, 2.8 min.
3) Određivanje enantio-viška za estar:
Kolona: CHIRACEL OD-RH, 4.6 x 150 mm, S-5 |xm
Mobilna faza: MeCN/50mM HCI04u vodi (67/33)
Brzina protoka: 0.75 ml/min
UV detekcija: 210 nm
Retenciono vreme:
(1S,2R) izomer u vidu kiseline: 5.2 min;
Racemat: 18.5 min i 20.0 min;
(1R.2S) izomer kao estar: 18.5 min.
2. Izrada etil estra /V-Boc-(1/?,2S)-1-amino-2-ciklopropilciklopropan karboksilne kiseline
Rastvor /V-Boc-(1lf,2S)-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline (255mg, I.Ommol) u etru (10ml_) je obrađen paladijum acetatom (5mg, 0.022mmol). Narandžasto/crveni rastvor je stavljen pod atmosferu N2. Višak dijazometana u etru je dodat kap po kap u toku 1 h. Nastali rastvor je mešan na rt tokom 18 h. Višak dijazometana je uklonjen korišćenjem struje azota. Nastali rastvor je ukoncentrisan rotacionim uparavanjem da bi se dobio sirovi proizvod. Podvrgavanjem flash hromatografiji (10% EtOAc/heksan) dobijeno je 210mg (78%) etil estraN-Boc-(1fl,2S)-1-amino-2-ciklopropilciklopropan karboksilne kiseline u vidu bezbojnog ulja. LC-MS (retenciono vreme: 2.13, slično postupku A, osim: vreme gradijenta 3 min, Xterra MS C18 S7 3.0x50mm kolona), MS m/e 270 (M<+>+1).
3. 1-terc-butoksikarbonilamino-ciklopropan-karboksilna kiselina je
komercijalno dostupna
4. Izrada hidrohlorida metil estra 1-aminociklobutankarboksilne kiseline 1-aminociklobutankarboksilna kiselina (100mg, 0.869mmol) (Tocris) je rastvorena u 10mL MeOH, tokom 2 h provođen je gas HCI. Reakciona smeša je mešana tokom 18 h, a zatim je ukoncentrisana in vacuo da bi se dobilo 144mg žutog ulja. Trituracijom sa 10ml_ etra je dobijeno 100mg proizvoda iz naslova u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CDCI3) 5 2.10-2.25 (m, 1H), 2.28-2.42 (m, 1H), 2.64-2.82 (m, 4H), 3.87 (s, 3H), 9.21 (br s, 3H). 5. Izrada ferc-butil estra racemske(1 f?,2fl)/(1 S, 2S)1-amino-2-etil-ciklopropankarboksilne kiseline, prikazanog ispod. Korak 1: Izrada di-terc-butil estra 2-etilciklopropan-1,1-dikarboksilne kiseline, prikazanog ispod
U suspenziju benziltrietilamonijum hlorida (21.0g, 92.2mmol) u 50%-tnom vodenom rastvoru NaOH (92.4g, u 180ml_ HzO) dodat je 1,2-dibromobutan (30.0g, 138.9mmol) i di-terc-butilmalonat (20.Og, 92.5mmol). Reakciona smeša je snažno mešana tokom 18 h na rt, a zatim je dodata mešavina leda i vode. Sirovi proizvod je ekstrahovan sa CH2CI2(3x) sekvencijalno ispran vodom (3x) i slanim rastvorom, a organski ekstrakti su sjedinjeni. Organski sloj je osušen (MgS04), filtriran i ukoncentrisan in vacuo. Nastali ostatak je podvrgnut flash hromatografiji (100g Si02, 3% Et20 u heksanu) da bi se dobio proizvod iz naslova (18.3g, 67.8mmol, 73% prinos), koji je korišćen direktno u sledećoj reakciji.
Korak 2: Izrada terc-butil estra racemske 2-etilciklopropan-1,1-dikarboksilne kiseline, prikazan ispod
Proizvod iz Koraka 1 (18.3g, 67.8mmol) je dodat u suspenziju kalijum terc-butoksida (33.55g, 299.0mmol) u suvom etru (500mL) na 0°C, posle čega je usledilo dodavanje H20 (1.35mL, 75.0mmol) i snažno je mešano preko noći na rt. Reakciona smeša je ulivena u mešavinu leda i vode i isprana je etrom (3x). Vodeni sloj je zakiseljen 10%-tnim vodenim rastvorom limunske kiseline na 0°C i ekstrahovan je sa EtOAc (3x). Sjedinjeni organski slojevi su isprani vodom (2x) i slanim rastvorom, osušeni su (MgS04) i ukoncentrisani in vacuo da bi se dobio naslovljeni proizvod u vidu bledo-žutog ulja (10g, 46.8mmol, 69% prinos).
Korak 3: Izrada terc-butil estra(1 ft,2f?)/(1 S, 2S)2-etil-1-(2-trimetilsilanil-etoksikarbonilamino)ciklopropan-karboksilne kiseline, prikazan ispod
U suspenziju proizvoda iz Koraka 2 (10g, 46.8mmol) i 3g sveže aktiviranih molekularnih sita 4A u suvom benzenu (160mL) dodati su Et3N (7.50mL, 53.8mmol) i DPPA (11mL, 10.21mmol). Reakciona smeša je podvrgnuta refluksu tokom 3.5 h, a zatim je dodat 2-trimetilsilil-etanol (13.5ml_, 94.2mmol) i reakciona smeša je podvrgnuta refluksu tokom noći. Reakciona smeša je filtrirana, razblažena sa EtzO isprana sa 10%-tnim vodenim rastvorom limunske kiseline, vodom, zasićenim vodenim NaHC03, vodom (2x) i slanim rastvorom (2x), osušena (MgS04) i ukoncentrisana in vacuo. Ostatak je suspendovan sa 10g Aldrich-ove poliizocijanatne smole za čišćenje u 120ml_ CH2CI2, mešan na rt preko noći i filtriran da bi se dobio naslovljeni proizvod (8g, 24.3mmol; 52%) u vidu bledo-žutog ulja.<1>H NMR (CDCI3) 8 0.03 (s, 9H), 0.97 (m, 5H), 1.20 (bm, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.40-1.70 (m, 4H), 4.16 (m, 2H), 5.30 (bs, 1H).
Korak 4: Izrada ferc-butil estra racemske(1 R, 2R)/( 1 S, 2S)1-aminoetilciklopropankarboksilne kiseline, prikazan ispod
U proizvod iz Koraka 3 (3g, 9mmol) dodat je 1.0M rastvor TBAF u THF-u (9.3ml_, 9.3mmol) i smeša je zagrevana do refluksa tokom 1.5 h i ohlađena do rt, a zatim je razblažena sa 500ml_ EtOAc. Rastvor je redom ispran vodom (2x100mL) i slanim rastvorom (2x100ml_), osušen (MgS04) i ukoncentrisan in vacuo da bi se dobio intermedijer iz naslova.
II P1'elementi:
P1' elementi, pripremljeni u nastavku, mogu se koristiti za izradu jedinjenja sa Formulom I korišćenjem ovde opisanih postupaka. 1. Izrada ciklopropilsulfonamida: Korak 1: Izrada N-terc-butil-(3-hloro)propilsulfonamida
Terc-butilamin (3.0mol, 315.3mL) je rastvoren u THF-u (2.5L). Rastvor je ohlađen do - 20°C. Polako je dodat 3-hloropropansulfonil hlorid (1.5mol, 182.4ml_). Reakciona smeša je ostavljena da se greje do rt i mešana je tokom 24 h. Smeša je filtrirana, a filtrat je ukoncentrisan in vacuo. Ostatak je rastvoren u CH2CI2(2.0L). Nastali rastvor je ispran sa 1N HCI (1.0L), vodom (1.0L) i slanim rastvorom (1.0L) i osušen preko Na2S04. Filtriran je i ukoncentrisan in vacuo da bi se dobila bledo-žuta čvrsta masa, koja je kristalisana iz heksana da bi se dobio proizvod u vidu bele čvrste mase (316.0g, 99%).<1>H NMR (CDCI3) 5 1.38 (s, 9H), 2.30-2.27 (m, 2H), 3.22 (t,J= 7.35 Hz, 2H), 3.68 (t,J =6.2 Hz, 2H), 4.35 (b, 1H).
Korak 2: Izrada terc-butilamida ciklopropansulfonske kiseline
U rastvor N-terc-butil-(3-hloro)propilsulfonamida (2.14g, lO.Ommol) u THF-u (100mL) dodat je N-BuLi (2.5M u heksanu, 8.0ml_, 20.0mmol) na -78°C. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature tokom perioda od 1 h. Isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo. Ostatak je raspodeljen između EtOAc i vode (200ml_, 200mL). Izdvojena organska faza je isprana slanim rastvorom, osušena preko Na2S04, filtrirana i ukoncentrisana in vacuo. Ostatak je rekristalisan iz heksana da bi se dobio željeni proizvod u vidu bele čvrste mase (1.0g, 56%).<1>H NMR (CDCI3) 5 0.98-1.00 (m, 2H), 1.18-1.19 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 2.48-2.51 (m, 1H), 4.19 (b, H).
Korak 3: Izrada ciklopropilsulfonamida
Rastvor terc-butilamida ciklopropansulfonske kiseline (110.0 g, 0.62mol) u TFA (500ml_) je mešan na sobnoj temperaturi, tokom 16 h. Isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo. Ostatak je rekristalisan iz EtOAc/heksana (60ml_/240ml_) da bi se dobio željeni proizvod u vidu bele čvrste mase (68.5g, 91%).<1>H NMR (DMSO-d6) 8 0.84-0.88 (m, 2H), 0.95-0.98 (m, 2H), 2.41-2.58 (m, 1H), 6.56 (b, 2H).
2. Alternativni postupak za izradu ciklopropil sulfonamida
U rastvoru od 100ml_ THF, koji je ohlađen do 0°C provođen je gasoviti amonijak dok se nije postiglo zasićenje. Ovom rastvoru je dodat rastvor od 5g (28.45mmol) ciklopropilsulfonil hlorida (nabavljen od Aray Biopharma) u 50ml_ THF, rastvor je zagrejan do rt preko noći i mešan je tokom još jednog dana. Smeša je ukoncentrisana sve dok ne preostane 1-2ml_ rastvarača i aplikovana je na 30g podloge SiOz(uz eluaciju sa 30% do 60% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 3.45g (100%) ciklopropil sulfonamida u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (metanol-d4) 8 0.94-1.07 (m, 4H), 2.52-2.60 (m, 1H);<13>C NMR (metanol-d4) 8 5.92, 33.01.
3. Izrada ciklobutil sulfonamida
U rastvor 5.0g (37.0mmol) ciklobutil bromida u 30ml_ anhidrovanog dietil etra (Et20) ohlađenog do -78°C dodata su 44mL (74.8mmol) 1.7M ferc-butil litijuma u pentanima i rastvor je polako zagrejan do -35°C tokom 1.5 h. Ova smeša je polako ukapana preko kanile u rastvor od 5.0g (37.0mmol) sveže destilovanog sulfuril hlorida u 100mL heksana ohlađenog do -40°C, smeša je zagrevana do 0°C tokom 1h i pažljivo je ukoncentrisana in vacuo. Ova smeša je ponovo rastvorena u Et20, isprana jednom sa nešto ledeno hladne vode, osušena (MgS04) i pažljivo ukoncentrisana. Ova smeša je ponovo rastvorena u 20mL THF, dodata je kap po kap u 500ml_ zasićenog NH3u THF-u i ostavljena je da se meša preko noći. Smeša je ukoncentrisana in vacuo do sirove žute čvrste mase i rekristalisana je iz minimalne količine CH2CI2u heksanima sa 1-2 kapi MeOH da bi se dobilo 1.90g (38%) ciklobutilsulfonamida u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CDCI3) 8 1.95-2.06 (m, 2H), 2.30-2.54 (m, 4H), 3.86 (p,J =8 Hz, 1H), 4.75 (brs, 2H);<13>C NMR
(CDCI3) 5 16.43, 23.93, 56.29. HRMS m/z (M-H) izračunat za C4H8NS02: 134.0276, nađeno: 134.0282.
4. Izrada ciklopentil sulfonamida
Rastvor od 18.5ml_ (37.0mmol) 2M ciklopentil-magnezijum hlorida u etru dodat je, kap po kap, u rastvor 3.0ml_ (37.0mmol) sveže destilovanog sulfuril hlorida (dobijen od Aldrich-a) u 100mL heksana ohlađenog do -78°C. Smeša je zagrevana do 0°C tokom 1 h i pažljivo je ukoncentrisana in vacuo. Ova smeša je ponovo rastvorena u Et20 (200ml_), isprana jednom sa nešto ledeno hladne vode (200mL), osušena (MgS04) i pažljivo ukoncentrisana. Ova smeša je ponovo rastvorena u 35mL THF, dodata je, kap po kap, u 500ml_ zasićenog NH3u THF-u i ostavljena je da se meša preko noći. Smeša je ukoncentrisana in vacuo do sirove žute čvrste mase, ostatak je filtriran kroz 50g silika gela, korišćenjem kao eluenta 70% EtOAc-heksana i rastvor je zatim ukoncentrisan. Ostatak je rekristalisan iz minimalne količine CH2CI2u heksanima sa 1-2 kapi MeOH da bi se dobilo 2.49g (41%) ciklopentil sulfonamida u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CDCI3) 5 1.58-1.72 (m, 2H), 1.74-1.88 (m, 2H), 1.94-2.14 (m, 4H), 3.48-3.59 (m, 1H), 4.80 (bs, 2H);<13>C NMR (CDCI3) 5 25.90, 28.33, 63.54. MS m/e 148 (M-H)".
5. Izrada cikloheksil sulfonamida
Rastvor od 18.5ml_ (37.0mmol) 2M cikloheksilmagnezijum hlorida (TCI Americas) u etru dodat je, kap po kap, u rastvor 3.0ml_ (37.0mmol) sveže destilovanog sulfuril hlorida u 100ml_ heksana ohlađenog do -78°C. Smeša je zagrevana do 0°C tokom 1 h i pažljivo je ukoncentrisana in vacuo. Ova smeša je ponovo rastvorena u Et20 (200ml_), isprana jednom sa nešto ledeno hladne vode (200ml_), osušena (MgS04) i pažljivo ukoncentrisana. Ova smeša je ponovo rastvorena u 35ml_ THF dodata je, kap po kap, u 500ml_ zasićenog NH3u THF-u i ostavljena je da se meša preko noći. Smeša je ukoncentrisana in vacuo do sirove žute čvrste mase, ostatak je filtriran kroz 50g silika gela, korišćenjem kao eluenta 70% EtOAc-heksana i rastvor je zatim ukoncentrisan. Ostatak je rekristalisan iz minimalne količine CH2CI2u heksanima sa 1-2 kapi MeOH da bi se dobilo 1.66g (30%) cikloheksil sulfonamida u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR
(CDCI3) S 1.11-1.37 (m, 3H), 1.43-1.56 (m, 2H), 1.67-1.76 (m, 1H), 1.86-1.96 (m, 2H), 2.18-2.28 (m, 2H), 2.91 (tt, J = 12, 3.5 Hz, 1H), 4.70 (bs, 2H);13CH NMR (CDCI3) 5 25.04, 25.04, 26.56, 62.74. MS m/e 162 (M-1)".
6. Izrada neopentilsulfonamida
Sledeći postupak za izradu cikloheksil sulfonamida, 49ml_ (37mmol) 0.75M neopentilmagnezijum hlorida (Alfa) u etru je konvertovano u 1.52 g (27%) neopentilsulfonamida u vidu bele čvrste mase.1H NMR (CDCI3) 8 1.17 (s, 9H), 3.12 (s, 2H), 4.74 (brs, 2H);<13>C NMR (CDCI3) 8 29.46, 31.51, 67.38. MS m/e 150 (M-1)'.
7. Izrada ciklobutilkarbinil-sulfonamida
Rastvor od 12.3g (83mmol) ciklobutilkarbinil bromida (Aldrich) i 13.7g (91mmol) natrijum jodida u 150ml_ acetona podvrgnut je refluksu preko noći, a zatim je ohlađen do rt. Neorganski čvrsti delovi su odfiltrirani, a aceton i ciklopropilkarbinil jodid (8.41 g, 46%) su izdestilisani na temperaturi sredine i 150 torr odnosno, na 180°C.
Rastvor od 4.0g (21.98mmol) ciklobutil karbinil jodida 30ml_ anhidrovanog dietil etra ( EfO), ohlađenog do -78°C, ukapan je preko kanile u rastvor od 17mL (21.98mmol) 1.3M sec-butil litijuma u cikloheksanima i rastvor je mešan tokom 5 min. U ovu mešavinu je preko kanile ukapan rastvor od 3.0g (21.98mmol) sveže destilovanog sulfuril hlorida u 110ml_ heksana, koji je ohlađen na -78°C, smeša je zagrevana do rt tokom 1 h, a zatim je pažljivo ukoncentrisana in vacuo. Ova smeša je ponovo rastvorena u Et20, isprana jednom sa nešto ledeno hladne vode, osušena (MgSOJ i pažljivo ukoncentrisana. Ova smeša je ponovo rastvorena u 30ml_ THF, dodata je, kap po kap, u 500ml_ zasićenog NH3u THF-u i ostavljena je da se meša preko noći. Smeša je ukoncentrisana in vacuo do sirove žute čvrste mase i rekristalisana je iz minimalne količine CH2CI2u heksanima sa 1-2 kapi MeOH da bi se dobilo 1.39g (42%) ciklobutil karbinil sulfonamida u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CDCI3) 8 1.81-2.03 (m, 4H), 2.14-2.28 (m, 2H), 2.81-2.92 (m, 1H), 3.22 (d,J = 7Hz, 2H), 4.74 (brs, 2H);<13>C NMR (CDCI3) 5 19.10, 28.21, 30.64, 60.93; MS m/e 148 (M-1)". Vreme: 1.73, postupak B), 818 (M<+>+H).
8.Izrada ciklopropilkarbinil-sulfonamida
Korišćenjem procedure, upotrebljene za izradu ciklobutilkarbinil- sulfonamida, ciklopropilkarbinil sulfonamid je pripremljen iz ciklopropilkarbinil bromida (Aldrich) (vidi, takođe, JACS 1981, p.442-445).
<1>H NMR (CDCI3) § 0.39-0.44 (m, 2H), 0.67-0.76 (m, 2H), 1.13-1.27 (m, 1H), 3.03 (d,J= 7.3 Hz, 2H), 4.74 (brs, 2H);<13>C NMR (CDCI3) S 4.33, 5.61, 59.93; MS m/e 134 (M-1).
III Heterocikli, koji će se upotrebiti kao polazni materijal za sledeću ugradnju u jedinjenja sa Formulom I, u izgradnji P2 elemenata
1. Izohinolini
Izohinolin (1) i njegovi supstituisani analozi mogu biti ugrađeni u P2 elemente, korišćenjem dva postupka, koja su izložena gore i ovde detaljno opisana. Navedeni P2 elementi (3) mogu zatim, biti konvertovani u jedinjenja sa Formulom I, korišćenjem procedura koje su analogne onima koje su ovde opisane za slične analoge izohinolina.
2. Izoksazolpiridin i oksazolpiridin (1)
Izoksazol i oksazol heterocikl (1) i njegovi analozi mogu biti proizvedeni korišćenjem poznate hernije i ugrađeni u jedinjenja sa Formulom I korišćenjem hernije, ovde opisane za slične izoksazolpiridinske intermedijere, kao što je prikazano u delu B.
Deo B:
U delu B, za LC/MS analize su korišćeni sledeći uslovi.
Kolone: Postupak A: YMC ODS-A C18 S7 (4.6x33mm)
Postupak B: YMC Xterra ODS S7 (3.0x50mm) Postupak C: Xterra ms C18 (4.6x33mm)
Postupak D: YMC ODS-A C18 S3 (4.6x33mm) Gradijent: 100% rastvarač A / 0% rastvarač B do 0% rastvarač A / 100% rastvarač B Vreme gradijenta: 3 min.
Hold vreme (vreme zadržavanja): 1 min.
Brzina protoka: 5 mL/min.
Talasna dužina detektora: 220 nm
Rastvarači: Rastvarač A: 10% MeOH / 90% voda / 0.1% TFA.
Rastvarač B: 90% MeOH / 10% voda / 0.1% TFA.
Sledeći uslovi su korišćeni za prep-HPLC razdvajanje.
Kolone: Phenomenex-Luna 30X100 mm, S5
Gradijent: 60% rastvarač A / 40% rastvarač B do 0% rastvarač A / 100% rastvarač B Vreme gradijenta: 15 min.
Vreme zaustavljanja: 20 min.
Brzina protoka: 30 mL/min.
Talasna dužina detektora: 220 nm
Rastvarači: Rastvarač A: 10% MeOH / 90% voda / 0.1% TFA.
Rastvarač B: 90% MeOH / 10% voda / 0.1% TFA.
Primer 1: Izrada Jedinjenja 1.
Korak 1:
Smeša 3,5-dimetil-4-nitro-izoksazola (1.42g, 10.0mmol), fenilacetaldehida (1.32g, 11.0mmol) u piperidinu (1mL) i etanolu (10ml_) je zagrevana do refluksa tokom 16 h. Posle hlađenja do temperature sredine istaložen je proizvod koji je sakupljen filtracijom. Grudva je temeljno isprana hladnim etanolom da bi se dobilo 1.20g (53%) željenog proizvoda u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CDCI3) 8 2.87 (s, 3H), 7.46-7.50 (m, 3H), 7.56 (d,J =8.5 Hz, 1H), 7.7-7.80 (m, 2H); LC/MS (retenciono vreme: 1.19 min, postupak B) MSm/ z227 (M<+>+H).
Korak 2:
Rastvor 4-oksida 3-metil-5-fenil-izoksazoloŠ4,5-bĆpiridina (1.00g, 4.40mmol) i POCI3(2.71 g, 17.7mmol) u hloroformu (10ml_) je zagrevan do refluksa tokom 1 h. Posle hlađenja do temperature sredine, konačni rastvor je razblažen hloroformom (50ml_) i ispran sa NaHC03(vodeni) (dve 50ml_-ske porcije) i slanim rastvorom, osušen preko MgS04, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen flash hromatografijom (4:1 heksan-EtOAc) da bi se dobilo 790mg (73%) željenog proizvoda u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CDCI3) 8 2.72 (s, 3H), 7.46-7.54 (m, 3H), 7.91 (s, 1H) 8.00-8.03 (m, 2H); LC-MS (retenciono vreme: 1.76 min, postupak B) MSm/ z245, 247 (M<+>+H).
Korak 3:
U smešu metil estra 4-hidroksi-pirolidin-2-karboksilne kiseline (H-Hyp-OMe HCI) (1.81 g, lO.Ommol), HATU (5.70g, 15.0mmol) i N-BOC-t-butil-L-glicina (2.42g, 10.5mmol) u CH2CI2 (100mL) dodat je DIPEA (3.47g, 31.0mmol) na 0°C. Posle mešanja na temperaturi sredine tokom 12 h, obrazovani rastvor je razblažen sa CH2CI2(100ml_) i ispran je sa ledenom 5% limunskom kiselinom (vod.). Organski sloj je ispran 5%-tnom limunskom kiselinom, 1M NaOH, odnosno slanim rastvorom, osušen preko MgS04i filtriran. Filtrat je uparen in vacuo da bi se dobilo 3.55g (99%) željenog proizvoda u vidu zatvoreno bele pene. Ovaj proizvod je korišćen kao sirov u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (CD3OD) § 1.04 (s, 9H), 1.43 (s, 9H), 1.99-2.03 (m, 1H), 2.20-2.30 (m, 1H) 3.69 (s, 3H), 3.70-3.79 (m, 2H), 4.28 (b, 1H), 4.46 (b, 1H), 4.74-4.80 (m, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.28 min, postupak B) MSm/ z 359(M<+>+H).
Korak 4:
Smeša proizvoda iz Koraka 3 (3.55g, 9.9mmol) u THF-u (50ml_), MeOH (50ml_) i LiOH monohidrata (0.83g, 19.9mmol u 50ml_ H20) je mešana na temperaturi sredine preko noći. Posle uklanjanja isparljivih delova in vacuo, ostatak je rastvoren u 0.1 M NaOH (100ml_). Ovaj vodeni rastvor je ispran etrom (50mL) i zakiseljen pomoću 1M HCI do pH 4. Ekstrahovan je sa EtOAc
(100mL). Organski sloj je ispran 5% limunskom kiselinom i slanim rastvorom, osušen je preko MgS04i uparen do suva da bi se dobilo 3.20g (95%) željenog proizvoda u vidu bele pene. Ovaj proizvod je korišćen kao sirov bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (CD3OD) 8 1.02 (s, 9H), 1.43 (s, 9H), 2.01-2.09 (m, 1H), 2.25-2.32 (m, 1H) 3.70-3.85 (m, 2H), 4.26-4.30 (m, 1H), 4.46-4.51 (m, 2H), 6.37-6.41 (m, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.14 min, postupak B) MSm/ z345 (M<*>+H).
Korak 5:
U rastvor proizvoda iz Koraka 4 (1.01 g, 2.93mmol) u DMSO (30ml_) dodat je kalijum ferc-butoksid (1.02g, 9.08mmol). Obrazovani rastvor je mešan na temperaturi sredine tokom 1 h pre dodavanja 7-hloro-3-metil-5-fenil-izoksazoloŠ4,5-bĆpiridina (0.75g, 3.08mmol). Konačni rastvor je mešan tokom 12 h. Zatim je ugašen ledenom vodom, zakiseljen sa 1M HCI do pH 4 i ekstrahovan sa EtOAc (dve 200mL-ske porcije). Organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04, filtrirani i upareni. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (60%B-100%B, 15 min gradijent) da bi se dobilo 305 mg (19% željenog proizvoda) u vidu bledo-žute čvrste mase.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.02 (s, 9H), 1.17 (s, 9H), 2.37-2.47 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.85-2.93 (m, 1H) 4.00-4.08 (m, 1H), 4.14 (b, 1H), 4.49-4.55 (m, 1H), 4.62-4.71 (m, 1H), 5.70 (m, 1H), 7.45-7.53 (m, 3H), 7.56 (s, 1H), 8.03-8.06 (m, 2H); LC-MS (retenciono vreme: 1.89 min, postupak B) MSm/ z553 (M<+>+H).
Korak 6a:
Kao što je opisano u delu A.
Korak 6b:
U rastvor etil estra 1 (R)-terc-butoksikarbonilamino-2(S)-vinil-ciklopropan-karboksilne kiseline, proizvoda iz Koraka 6a (3.28g, 13.2mmol) u THF-u (7ml_) i metanolu (7ml_) dodata je suspenzija LiOH (1.27g, 53.0mmol) u vodi (14mL). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i ugašena je sa 1N NaOH (15mL) i vodom (20ml_). Nastala smeša je isprana sa EtOAc (20ml_), a organska faza je ekstrahovana sa 20ml_ 0.5N NaOH. Sjedinjene vodene faze su zakiseljene sa 1N HCI do pH 4 i ekstrahovane sa EtOAc (3x40ml_). Sjedinjeni organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom i osušeni (MgS04) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova u vidu bele čvrste mase (2.62g, 87%).<1>H NMR (DMSO-d6) 8 1.22-1.26 (m, 1H), 1.37 (s, 9H), 1.50-1.52 (m, 1H), 2.05 (q,J =9 Hz, 1H), 5.04 (d,J =10 Hz, 1H) 5.22 (d,J =17 Hz, 1H), 5.64-5.71 (m, 1H), 7.18, 7.53 (s, NH(rotameri), 12.4 (br s, 1H)); LC-MS (retenciono vreme: 1.67 min, postupak B) MSm/ z228 (M<+>+H).
Korak 7:
Rastvor proizvoda iz Koraka 6 (2.62g, 11.5mmol) i CDI (2.43g, 15.0mmol) u THF-u (40mL) je zagrevan na refluksu tokom 50 min pod azotom. Rastvor je ohlađen do sobne temperature i prenesen pomoću kanile u rastvor ciklopropilsulfonamida (1.82g, 15.0mmol) u THF-u (10mL). Nastalom rastvoru je dodat DBU (2.40mL, 16.1mmol), a mešanje je nastavljeno tokom 20 h. Smeša je ugašena sa 1N HCI do pH 1, a THF je uparen in vacuo. Suspenzija je ekstrahovana sa EtOAc (2x50mL), a sjedinjeni organski ekstrakti su osušeni (Na2S04). Prečišćavanjem, rekristalizacijom iz heksani-EtOAc (1:1) dobijeno je jedinjenje iz naslova (2.4g) u vidu bele čvrste mase. Matična tečnost je prečišćena pomoću Biotage 40S kolone (uz eluaciju sa 9% acetonom u DCM) da bi se dobila druga serija naslovljenog jedinjenja (1.1 g). Obe serije su sjedinjene (ukupan prinos 92%).<1>H NMR (DMSO-d6) 8 0.96-1.10 (m, 4H), 1.22 (dd,J= 5.5, 9.5 Hz, 1H), 1.39 (s, 9H), 1.70 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 2.19-2.24 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 5.08 (d,J =10 Hz, 1H) 5.23 (d,J =17 Hz, 1H), 5.45 (m, 1H), 6.85, 7.22 (s, NH(rotameri); LC-MS (retenciono vreme: 1.70 min, postupak B) MSm/ z331 (M<+>+H).
Korak 8:
Rastvor proizvoda iz Koraka 7 (3.5g, 10.6mmol) u DCM (35mL) i TFA (32mL) mešan je na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. Isparljivi delovi su uklonjeni in vacuo, a ostatak je suspendovan u 1N HCI u dietil etru (20mL) i ukoncentrisan in vacuo. Ovaj postupak je ponovljen još jednom. Nastala smeša je triturirana iz pentana i filtrirana da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje u vidu higroskopne zatvoreno-bele čvrste mase (2.60g, 92%).<1>H NMR (DMSO-d6) 8 1.01-1.15 (m, 4H), 1.69-1.73 (m, 1H), 1.99-2.02 (m, 1H), 2.38 (q,J =9 Hz, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 5.20 (d,J =11 Hz, 1H) 5.33 (d,J= 17 Hz, 1H), 5.52-5.59 (m, 1H), 9.17 (br s, 3H); LC-MS (retenciono vreme: 0.24 min, postupak B) MSm/ z231 (M<+>+H).
Korak 9:
U zaleđenu smešu proizvoda iz Koraka 5 (70mg, 0.13mmol), hidrohlorida (1-amino-2-vinil-ciklopropankarbonil)amida (1 R,2S)-ciklopropan-sulfonske kiseline proizvoda iz Koraka 8 (37mg, 0.14mmol) i HATU (72mg, 0.19mmol) u DCM (2mL) dodat je diizopropiletilamin (50mg, 0.39mmol). Obrazovani rastvor je ostavljen da se zagreje do temperature prostora u toku 12 h i uparen jein vacuo.Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (60%B-100%B, 15 min gradijent), da bi se dobilo 52 mg (54%) Jedinjenja 1, u vidu sivkaste čvrste mase.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.96-1.09 (m, 12H), 1.16-1.25 (m, 10H), 1.44-1.48 (m, 1H), 1.87-1.91 (m, 1H), 2.20-2.40 (m, 2H), 2.63-2.65 (m, 4H), 2.89-2.98 (m, 1H), 4.08-4.20 (m, 2H), 4.44-4.65 (m, 2H), 5.13 (d,J =11.7 Hz, 1H), 5.32 (d,J =15 Hz, 1H), 5.72-5.85 (b, 2H), 6.62 (d,J =15.0 Hz, 1H), 7.46-7.53 (m, 3H), 7.58 (s, 1H), 8.04-8.07 (m, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.92 min, postupak B) MSm/ z765 (M<+>+H).
Primer 2: Izrada Jedinjenja 2.
Korak 1:
Smeša 2-amino-6-metilpiridna (1.08g, 10.0mmol), etil benzoilacetata (2.30 g, 12.0mmol) i polifosforne kiseline (6.00g, 61.2mmol) je zagrevana do 110°C, tokom 5 h. Posle hlađenja do temperature sredine, smeša je ulivena u ledenu vodu (20ml_) i neutralisana do pH 7 sa 10M NaOH. Ekstrahovana je sa CHCI3. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko MgS04, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen flash hromatografijom (1:1 heksan-EtOAc) da bi se dobilo 510 mg (22%) željenog proizvoda u vidu bledo žute čvrste mase.<1>H NMR (CDCI3) 5 3.08 (s, 3H), 6.64 (d,J=7.0 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 7.42-7.52 (m, 5H), 8.04-8.06 (m, 2H); LC-MS (retenciono vreme: 1.21 min, postupak B), MSm/ z237 (M<+>+H).
Korak 2:
Rastvor 6-metil-2-fenil-piridoŠ1,2aĆpirimidin-4-ona (489mg, 2.07mmol) u rastopljenom difenil etru (5mL) je zgrevan do blagog refluksa tokom 5 h. Posle hlađenja do temperature sredine obrazovana suspenzija je razblažena dietil etrom (10mL) i filtrirana. Grudva je temeljno isprana dietil etrom da bi se dobilo 450mg (92%) željenog proizvoda u vidu smeđe čvrste mase. LC-MS (retenciono vreme: 1.25 min, postupak B), MSm/ z237 (M<+>+H).
Korak 3:
Suspenzija 7-metil-2-fenil-1H-Š1,8Ćnaftiridin-4-ona (450mg, 1.91mmol) u POCI3(10mL) je grejana do blagog refluksa, tokom 3 h. Uparena je in vacuo. Ostatak je izručen u ledenu vodu (20mL) i neutralisan do pH 10 sa 10M NaOH. Ekstrahovan je sa CHCI3. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko MgS04, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen flash hromatografijom (2:1 heksan-EtOAc) da bi se dobilo 450mg (92%) željenog proizvoda u vidu ružičaste čvrste mase.<1>H NMR (CD3OD) 8 2.80 (s, 3H), 7.54-7.56 (m, 3H), 7.61 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.25-8.30 (m, 3H), 8.58 (d,J= 8.4 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.39 min, postupak B), MSm/ z255, 257 (M<+>+H).
Korak 4:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 5, osim što je korišćen 4-hloro-7-metil-2-fenil-Š1,8Ćnaftiridin iz Primera 2, Korak 3.
LC-MS (retenciono vreme: 1.55 min, postupak B), MSm/ z563 (M<+>+H).
Korak 5:
Jedinjenje 2 je pripremljeno istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 9 s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 2, Korak 4.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.01-1.10 (m, 12H), 1.21-1.26 (m, 10H), 1.40-1.45 (m, 1H), 1.86-1.91 (m, 1H), 2.20-2.29 (m, 1H), 2.39-2.49 (m, 1H), 2.72-2.81 (m, 1H), 2.92-2.95 (m, 4H), 4.10-4.16 (m, 2H), 4.55-4.65 (m, 2H), 5.14 (d, JM2.0 Hz, 1H), 5.30 (d,J =15.0 Hz, 1H), 5.67-5.82 (m, 2H), 7.60-7.80 (m, 3H), 7.78 (d,J= 8.6 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 8.26-8.29 (m, 2H), 8.95 (d,J =8.4 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.62 min, postupak B), MSm/ z775 (M<+>+H).
Primer 3: Izrada Jedinjenja 3.
Korak 1:
U rastvor 4-metoksifenetil alkohola (1.52g, lO.Ommol) u CH2CI2(50mL) na 0°C je dodat Dess-Martin reagens (4.45g, 10.5mmol) iz jednog dela. Formirana smeša je ostavljena da se tokom 1 h zagreje do temperature sredine. Isprana je zasićenim Na2S203(vod.), odnosno 1M NaOH i slanim rastvorom. Osušena je preko MgS04i uparena in vacuo da bi se dobilo 1.50g (100%) željenog aldehida u vidu viskoznog ulja. Ovaj proizvod je korišćen kao sirov bez bilo kakvog daljeg prečišćavanja.
Korak 2:
Rastvor 3,5-dimetil-4-nitro-izoksazola (142mg, I.Ommol) i 4-metoksi-fenilacetaldehida iz Primera 3, Korak 1 (180mg, 1.1mmol) u piperidinu (0.1 mL) i etanolu (2mL) zagrevan je do refluksa tokom 12 h. Posle hlađenja do temperature sredine proizvod je istaložen i sakupljen filtracijom. Grudva je temeljno isprana hladnim etanolom da bi se dobilo 130mg (51%) željenog proizvoda u vidu sivkaste čvrste mase.<1>H NMR (CDCI3) 8 2.88 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 7.02 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.50 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.57 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.81 (d,J =8.5 Hz, 2H); LC-MS (retenciono vreme: 1.24 min, postupak B), MSm/ z257, (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 2 s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 3, Korak 2.<1>H NMR (CDCI3) 8 2.70 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 7.00-7.03 (m, 2H), 7.84 (s, 1H), 7.96-7.98 (m, 2H); LC-MS (retenciono vreme: 1.96 min, postupak B), MSm/z275, 277 (M<+>+H).
Korak 4:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 5, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 3, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.02 (s, 9H), 1.18 (s, 9H), 2.39-2.43 (m, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.75-2.80 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 4.00-4.08 (m, 1H), 4.17 (b, 1H), 4.49-4.55 (m, 1H), 4.62-4.71 (m, 1H), 5.68 (b, 1H), 7.05 (d,J =8.5 Hz, 2H), 7.49 (s, 1H), 8.00 (d,J =8.5 Hz, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.89 min, postupak B), MSm/ z583 (M<+>+H).
Korak 5:
Jedinjenje 3 je pripremljeno istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 9, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 3, Korak 4.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.01-1.09 (m, 12H), 1.17-1.26 (m, 10H), 1.44-1.47 (m, 1H), 1.87-1.91 (m, 1H), 2.20-2.40 (m, 2H), 2.63-2.65 (m, 4H), 2.89-2.98 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 4.08-4.20 (m, 2H), 4.44-4.65 (m, 2H), 5.13 (d,J =11.7 Hz, 1H), 5.32 (d,J =15.0 Hz, 1H), 5.72-5.85 (m, 2H), 7.05 (d,J= 8.5 Hz, 2H), 7.06 (s, 1H), 8.01 (d,J =8.5 Hz, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.96 min, postupak B), MSm/ z795 (M<+>+H).
Primer 4: Izrada Jedinjenja 4.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 3, Korak 1&2, s izuzetkom korišćenja 4-fluorofenetil alkohola.
LC-MS (retenciono vreme: 1.18 min, postupak B), MSm/ z 245(M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 2, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 4, Korak 1.<1>H NMR (CDCI3) 5 2.71 (s, 3H), 7.17-7.20 (m, 2H), 7.86 (s, 1H), 8.00-8.02 (m, 2H); LC-MS (retenciono vreme: 1.71 min, postupak B), MSm/ z263, 265 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 5, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 4, Korak 2.
LC-MS (retenciono vreme: 1.91 min, postupak B), MSm/ z571 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 4 je pripremljeno istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 9, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 4, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.01-1.09 (m, 12H), 1.17-1.26 (m, 10H), 1.44-1.47 (m, 1H), 1.87-1.91 (m, 1H), 2.20-2.40 (m, 2H), 2.63-2.65 (m, 4H), 2.89-2.98 (m, 1H), 4.08-4.20 (m, 2H), 4.44-4.65 (m, 2H), 5.13 (d,J=11.7 Hz, 1H), 5.32 (d,J=15.0 Hz, 1H), 5.72-5.85 (m, 2H), 7.20-7.26 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 8.09-8.14 (m, 2H), 9.26 (b, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.91 min, postupak B), MSm/ z783 (M<+>+H).
Primer 5: Izrada Jedinjenja 5.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 3, Korak 1&2, s izuzetkom korišćenja 3-metoksifenetil alkohola.
LC-MS (retenciono vreme: 1.03 min, postupak B), MSm/ z257 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 2, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 5, Korak 1.<1>H NMR (CDCI3) 8 2.72 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 7.00-7.02 (m, 1H), 7.41 (t,J =8.0 Hz, 1H), 7.55 (d,J =7.5 Hz, 1H), 7.59 (d,J= 2.0 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.89 min, postupak B), MSm/ z275, 277
(M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 5, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 5, Korak 2.<1>H NMR (CD3OD) § 1.02 (s, 9H), 1.18 (s, 9H), 2.37-2.47 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.85-2.93 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 4.00-4.08 (m, 1H), 4.14 (b, 1H), 4.49-4.55 (m, 1H), 4.62-4.71 (m, 1H), 5.71 (b, 1H), 7.02-7.04 (m, 1H), 7.40 (t,J =8.0 Hz, 1H), 7.58-7.62 (m, 3H); LC-MS (retenciono vreme: 1.90 min, postupak B), MSm/ z583
(M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 5 je pripremljeno istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 9, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 5, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.01-1.09 (m, 12H), 1.17-1.29 (m, 10H), 1.44-1.47 (m, 1H), 1.87-1.91 (m, 1H), 2.20-2.40 (m, 2H), 2.63-2.65 (m, 4H), 2.89-2.98 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 4.08-4.20 (m, 2H), 4.44-4.65 (m, 2H), 5.13 (d,J =11.7 Hz, 1H), 5.32 (d,J =15.0 Hz, 1H), 5.72-5.85 (m, 2H), 7.02-7.05 (m, 1H), 7.41 (t,J =8.0 Hz, 1H), 7.55-7.61 (m, 3H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.96 min, postupak B), MSm/ z795 (M<+>+H).
Primer 6: Izrada Jedinjenja 6.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 3, Korak 1&2, s izuzetkom korišćenja 2-metoksifenetil alkohola.
LC-MS (retenciono vreme: 1.10 min, postupak B), MSm/ z 257(M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 2, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 6, Korak 1.<1>H NMR (CDCI3) 8 2.721 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 7.03 (d,J =8.0 Hz, 1H), 7.11 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.41-7.44 (m, 1H), 7.79-7.81 (m, 1H), 8.04 (s, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.92 min, postupak B), MSm/ z275, 277 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 5, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 6, Korak 2.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.02 (s, 9H), 1.20 (s, 9H), 2.37-2.47 (m, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.85-2.93 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 4.00-4.08 (m, 1H), 4.14 (b, 1H), 4.49-4.55 (m, 1H), 4.62-4.71 (m, 1H), 5.56 (b, 1H), 7.09 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.15 (d,J =8.5 Hz, 1H), 7.41-7.44 (m, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.67 (d,J =8.0 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.76 min, postupak B), MSm/ z583 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 6 je pripremljeno istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 9, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 6, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.01-1.08 (m, 12H), 1.17-1.26 (m, 10H), 1.44-1.47 (m, 1H), 1.87-1.91 (m, 1H), 2.20-2.40 (m, 2H), 2.63-2.65 (m, 4H), 2.89-2.98 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 4.08-4.12 (m, 1H), 4.19 (b, 1H), 4.44-4.65 (m, 2H), 5.13 (d,J =11.7 Hz, 1H), 5.32 (d,J =15.0 Hz, 1H), 5.59 (b, 1H), 5.72-5.80 (m, 1H), 7.09 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.15 (d,J =8.5 Hz, 1H), 7.41-7.45 (m, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.66-7.67 (m, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.93 min, postupak B), MSm/ z795 (M<+>+H).
Primer 7: Izrada Jedinjenja 7.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 5, s izuzetkom korišćenja 2-hloro hinolina.
LC-MS (retenciono vreme: 1.73 min, postupak B), MSm/ z472 (M<+>+H).
Korak 2:
Jedinjenje 7 je pripremljeno istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 9, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 7, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.01-1.08 (m, 12H), 1.17-1.26 (m, 10H), 1.44-1.47 (m, 1H), 1.87-1.91 (m, 1H), 2.23-2.30 (m, 2H), 2.52-2.57 (m, 1H), 2.89-2.98 (m, 1H), 4.10-4.14 (m, 1H), 4.09-4.15 (m, 2H), 4.47-4.51 (m, 1H), 5.13 (d,J =10.0 Hz, 1H), 5.32 (d, J= 17.0 Hz, 1H), 5.73-5.78 (m, 1H), 5.92 (b, 1H), 6.90-6.92 (m, 1H), 7.42 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.64 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.78-7.82 (m, 2H), 8.13 (d,J =7.5 Hz, 1H), 9.18 (d, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.75 min, postupak B), MSm/ z684 (M<+>+H).
Primer 8: Izrada Jedinjenja 8.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 6b do 8, bez korišćenja koraka 6a, koraka enzimskog razdvajanja.
LC-MS (retenciono vreme: 0.24 min, postupak B), MSm/ z231 (M<+>+H).
Korak 2:
U ledenu smešu N-BOC-4-trans-hidroksi-L-prolina (1.58g, 6.83mmol), hidrohlorida (1-amino-2-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropan-sulfonske kiseline (Primer 8, Korak 1) (2.00g, 7.52mmol) i HATU (3.89g, 10.2mmol) u CH2CI2(100mL) dodat je diizopropiletilamin (4.41 g, 34.2mmol). Obrazovani rastvor je ostavljen da se zagreje do temperature sredine tokom 12 h. Razblažen je sa EtOAc (200mL) ispran sa 5% H3P04i slanim rastvorom, osušen preko MgS04, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen flash hromatografijom (gradijent 2:1-1:1 heksan-aceton) da bi se dobilo 1.25g (41%) željenog proizvoda.<1>H NMR (DMSO-d6) 5 1.00-1.08 (m, 4H), 1.34-1.40 (m, 1:2, 10H), 1.62-1.70 (m, 1H), 1.76-1.87 (m, 1H), 2.02-2.21 (m, 2H), 2.81-2.95 (m, 1H), 3.20-3.45 (m, 2H), 4.04-4.09 (m, 1H), 4.26 (b, 1H), 5.08-5.12 (m, 1H), 5.26 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.59-5.69 (m, 1H), 8.59, 8.87 (rotameri, 1:2, 1H), 10.48-11.15 (rotameri, 2:1, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.25 min, postupak B), MSm/ e444 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 8, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 8, Korak 2.
LC-MS (retenciono vreme: 1.02 min, postupak B), MSm/ e344 (M<+>+H).
Korak 4:
U ledenu smešu N-BOC-4-trans-hidroksi-L-prolina (1.58g, 6.83mmol), hidrohlorida (1-amino-2-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropan-sulfonske kiseline (Primer 8, Korak 3) (2.00g, 7.52 mmol) i HATU (3.89g, 10.2mmol) u CH2CI2(100mL) dodat je diizopropiletilamin (4.41 g, 34.2mmol). Obrazovani rastvor je ostavljen da se zagreje do temperature sredine tokom 12 h. Razblažen je sa EtOAc (200mL) ispran sa 5% H3P04i slanim rastvorom, osušen preko MgS04, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen flash hromatografijom (gradijent 2:1-1:1 heksan-aceton) da bi se dobilo 1.25g (41%) željenog proizvoda.<1>H NMR (CD3OD) 5 0.99-1.07 (m, 11H), 1.35-1.44 (m, 13H), 1.75-1.87 (m, 1H), 2.09-2.22 (m, 2H), 2.88-2.94 (m, 1H), 3.74-3.82 (m, 2H), 4.28-4.30 (m, 1H), 4.33-4.38 (m, 1H), 4.48 (b, 1H), 5.11-5.13 (m, 1H), 5.30 (d,J =15.0 Hz, 1H), 5.70-5.78 (m, 1H), 6.51-6.61 (m, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.26 min, postupak B), MSm/ e557 (M<+>+H).
Korak 5:
U rastvor proizvoda iz Primera 8, Korak 4 (56mg, 0.1 mmol) u DMSO (2mL) dodat je kalijum terc-butoksid (49mg, 0.44mmol). Obrazovani rastvor je mešan na temperaturi sredine tokom 1 h pre dodavanja 4-hloro-7-metil-2-trifluorometil-Š1,8Ćnaftiridina (P.Ferrarini et al, J Heterocvclic Chem, 1983, p1053) (30mg, 0.12mmol). Konačni rastvor je mešan tokom 12 h. Ugašen je ledenom vodom, zakiseljen sa 1M HCI do pH 4 i ekstrahovan sa EtOAc (20mLX2). Organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04, filtrirani i upareni. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobilo 16 mg (21%) Jedinjenja 8 u vidu ružičaste čvrste mase.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.92-0.99 (m, 11H), 1.01-1.04 (m, 11H), 1.22-1.45 (m, 2H), 1.76-1.85 (m, 1H), 2.18-2.40 (m, 2H), 2.76 (s, 3H), 2.86-2.97 (m, 1H), 4.00-4.11 (m, 2H), 4.48-4.58 (m, 2H), 5.09-5.12 (m, 1H), 5.28-5.31 (m, 1H), 5.59 (b, 1H), 5.69-5.78 (m, 1H), 6.39-6.48 (m, 1H), 7.58-7.64 (m, 2H), 8.08 (s, 1H), 8.64-8.68 (m, 1H), 8.85-8.91 (m, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.89 min, postupak B), MSm/ e767 (M<+>+H).
Primer 9: Izrada Jedinjenja 9.
Jedinjenje 9 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisano u primeru 8, Korak 5, sa izuzetkom korišćenja 7-hloro-5-etil-3-metil-izoksazoloŠ4,5-bĆpiridina (R. Nesi et al, Synth Comm 1992 22(16), 2349).
<1>H NMR (CD3OD) S 1.01-1.09 (m, 11H), 1.21-1.25 (m, 11H), 1.36 (t,J =7.8 Hz, 3H), 1.38-1.47 (m, 2H), 1.80-1.90 (m, 1H), 2.20-2.31 (m, 2H), 2.59 (s, 3H), 2.90-3.00 (m, 3H), 4.01-4.18 (m, 2H), 4.41-4.51 (m, 2H), 5.11-5.15 (m, 1H), 5.27-5.32 (m, 1H), 5.58 (b, 1H), 5.70-5.80 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.72, 7.98 (1:1, 1H), 9.00, 9.22 (1:1, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.75 min, postupak B), MSm/ e717 (M<+>+H).
Primer10: Izrada Jedinjenja 10.
Jedinjenje 10 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisano u primeru 8, Korak 5, sa izuzetkom korišćenja 7-hloro-5-fenil-3-metil-izoksazoloŠ4,5-bĆpiridina (Primer 1, Korak 2).<1>H NMR (CD3OD) 5 1.00-1.09 (m, 12H), 1.16-1.25 (m, 10H), 1.44-1.48 (m, 1H), 1.79-1.89 (m, 1H), 2.20-2.40 (m, 2H), 2.64-2.66 (m, 4H), 2.89-2.98 (m, 1H), 4.08-4.20 (m, 2H), 4.44-4.55 (m, 2H), 5.11-5.16 (m, 1H), 5.27-5.31 (m, 1H), 5.72-5.74 (m, 2H), 7.20-7.35 (m, 1H), 7.46-7.51 (m, 2H), 7.55-7.68 (m, 1H), 8.05-8.06 (m, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.97 min, postupak B), MSm/ z765 (M<+>+H).
Primer 11: Izrada Jedinjenja 11.
Korak 1:
U rastvor 3-metoksi-cinamske kiseline (11.04g, 62mmol) i trietilamina (12.52g, 124mmol) u acetonu (80ml_) dodat je etil hloroformat (približno 1.5 ekvivalenata), kap po kap, na 0°C. Posle mešanja na ovoj temperaturi tokom 1 h, dodat je, kap po kap, vodeni NaN3(6.40g, lOOmmol u 35ml_ H20) i reakciona smeša je mešana tokom 16 h na temperaturi sredine. Smeši je dodata voda 100 mL, a isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo. Nastala žitka masa je ekstrahovana toluenom (3x50mL), a sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko MgS04. Ovaj osušeni rastvor je dodat, kap po kap, u zagrejani rastvor difenilmetana (50mL) i tributilamina (30mL) na 190°C. Toluen je izdestilovan kako je dodat, posle završetka dodavanja, reakciona temperatura se podigla tokom 2 h do 210°C. Posle hlađenja, istaloženi proizvod je sakupljen filtracijom, ispran heksanom (2x50mL) i osušen da bi se dobio željeni proizvod u vidu bele čvrste mase (5.53g, 51%) (Nicolas Brietef al,Tetrahedron, 2002, 5761-5766). LC-MS (retenciono vreme: 0.82 min, postupak B), MSm/ z176 (M<+>+H).
Korak 2:
6-metoksi-2H-izohinolin-1-on (5.0g, 28.4mmol) u POCI3(10mL) je zagrevan do blagog refluksa tokom 3 h i uparen je in vacuo. (Nicolas Brietef al,Tetrahedron, 2002, 5761-5766). Ostatak je uliven u ledenu vodu (20mL) i neutralisan do pH 10 sa 10M NaOH. Ekstrahovan je sa CHCI3. Organski sloj je ispran slanim rastvorom osušen preko MgS04, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen flash hromatografijom (1:1 heksan-EtOAc) da bi se dobilo 4.41g (80%) željenog proizvoda u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CD3OD) 5 3.98 (s, 3H), 7.34-7.38 (m, 2H), 7.69 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.10 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.23 (d, J=9. 5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.42 min, postupak B), MSm/ z194 (M<+>+H).
Korak 3:
U rastvor N-BOC-S-^-hidroksi-L-prolina (892mg, 3.89mmol) u DMSO (40mL) na temperaturi sredine dodat je kalijum terc-butoksid (1.34g, 12.0mmol) iz jednog dela. Obrazovana suspenzija je mešan na ovoj temperaturi tokom 30 min pre nego što je ohlađena do 10°C. Dodat je 1-hloro-6-metoksi-izohinolin (Primer 11, Korak 2) (785mg, 4.05mmol) kao čvrsta masa u jednoj porciji, a konačna smeša je mešana na temperaturi sredine tokom 12 h. Ugašena je ledenom 5% limunskom kiselinom (vod.) i ekstrahovana sa EtOAc (100ml_). Vodena faza je ponovo ekstrahovana sa EtOAc. Sjedinjeni organski slojevi su isprani 5% limunskom kiselinom (vod.), odnosno slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i filtrirani. Filtrat je uparen in vacuo do suva da bi se dobilo 1.49g (99%) željenog proizvoda u vidu zatvoreno bele pene. Ovaj materijal je korišćen u reakciji narednog koraka kao sirov, bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.42, 1.44 (rotameri, 9H), 2.38-2.43 (m, 1H), 2.66-2.72 (m, 1H), 3.80-3.87 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 4.44-4.52 (m, 1H), 5.73 (b, 1H), 7.16-7.18 (m, 2H), 7.24-7.25 (m, 1H), 7.87-7.88 (m, 1H), 8.07 (d, J=8.5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.62 min, postupak B), MSm/ z389 (M<+>+H).
Korak 4:
U smešu proizvoda iz Primera 11, Korak 3 (1.49g, 3.84mmol), HATU (2.19g, 5.76mmol) i HCI soli (1-(R)-amino-2-(S)-vinil-ciklopropan-karbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline (Primer 1, Korak 8) (1.12g, 4.22 mmol) u CH2CI2(50mL) dodat je DIPEA (1.29g, 11.5mmol) na 0°C. Posle mešanja na temperaturi sredine tokom 12 h, obrazovani rastvor je razblažen sa CH2CI2(50mL) ispran sa ledenom 5% limunskom kiselinom (vod.). Organski sloj je ispran sa 5% limunskom kiselinom (vod.), odnosno slanim rastvorom, osušen preko MgS04i filtriran. Filtrat je uparen in vacuo do suva. Ostatak je rekristalisan iz metanola da bi se dobilo 1.60g (70%) željenog proizvoda u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CD3OD) § 1.05-1.08 (m, 2H), I. 16-1.20 (m, 1H), 1.24-1.27 (m, 1H), 1.42-1.45 (m, 10H), 1.88 (dd,J =8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.24-2.30 (m, 2H), 2.53-2.57 (m, 1H), 2.94-2.98 (m, 1H), 3.80 (d,J= 12.5 Hz, 1H), 3.86-3.89 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.40-4.42 (m, 1H), 5.13 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.32 (d,J= 18.0 Hz, 1H), 5.72-5.81 (m, 2H), 7.17-7.20 (m, 2H), 7.26 (d,J= 6.0 Hz, 1H), 7.88 (d,J =6.0 Hz, 1H), 8.07 (d,J= 9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.74 min, postupak B), MSm/ z601 (M<+>+H).
Korak 5:
U ledeni rastvor proizvoda iz Primera 11, Korak 4 (1.50g, 2.50mmol) u CH2CI2(10mL) dodata je TFA (10mL). Obrazovani rastvor je ostavljen da se zagreje do temperature sredine tokom 2 h. Rastvarač je odstranjen in vacuo. Ostatak je trituriran sa 1M HCI u etru, filtriran je i ispran etrom da bi se dobilo 1.43g (99.8%) željenog proizvoda u vidu higroskopne bele čvrste mase.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.03-1.208 (m, 4H), 1.26-1.31 (m, 1H), 1.37-1.40 (m, 1H), 1.95-1.97 (m, 1H), 2.32-2.37 (m, 1H), 2.42-2.48 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.88 (d,J=12.5 Hz, 2H), 3.98 (s, 3H), 4.40-4.42 (m, 1H), 5.16 (d,J= 10.5 Hz, 1H), 5.33 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.62-5.69 (m, 1H), 5.97 (b, 1H), 7.30-7.34 (m, 2H), 7.47 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.90 (d,J =6.5 Hz, 1H), 8.34 (d,J =9.0 Hz, 1H), 9.14 (b, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.12 min, postupak B), MSm/ z 501(M<+>+H).
Korak 6:
U smešu proizvoda iz Primera 11, Korak 5 (1.49g, 3.84mmol), HATU (2.19g, 5.76mmol) i N-BOC-t-butil-L-glicina (1.12g, 4.22 mmol) u CH2CI2(50mL) dodat je DIPEA (1.29g, II. 5mmol) na 0°C. Posle mešanja na temperaturi sredine tokom 12 h, obrazovani rastvor je razblažen sa CH2CI2(50mL) ispran sa ledenom 5% limunskom kiselinom (vod.). Organski sloj je ispran sa 5% limunskom kiselinom (vod.), odnosno slanim rastvorom, osušen preko MgS04i filtriran. Filtrat je uparen in vacuo do suva. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (40%B do 100%B, 15 min gradijent vreme) da bi se dobilo 1.60g (70%) Jedinjenja 11 u vidu bele čvrste mase.
<1>H NMR (CD3OD) 5 1.00-1.08 (m, 12H), 1.23-1.25 (m, 1H), 1.27 (s, 9H), 1.40-1.45 (m, 1H), 1.85-1.88 (m, 1H), 2.20-2.30 (m, 2H), 2.55-2.61 (m, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.02-4.06 (m, 1H), 4.21-4.24 (m, 1H), 4.40-4.42 (m, 1H), 4.49-4.51 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.28 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.69-5.74 (m, 1H), 5.81 (b, 1H), 6.60 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 7.08-7.10 (m, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.25 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.88 (d,J =6.0 Hz, 1H), 8.09 (d,J =9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.75 min, postupak B), MSm/ z714 (M<+>+H).
Analitički izrač. za: C35H47N5O9S»0.5H2O: C, 58.16; H, 6.69; N, 9.69; nađeno: C, 58.01; H, 6.46; N, 9.55.
U rastvor Jedinjenja 11 (71 mg, 0.1 mmol) u CH2CI2(5mL) na -78°C je dodata 1M HCI u etru (0.2mL, 0.2mmol). Posle mešanja na ovoj temperaturi tokom 10 min isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo bez kupatila za zagrevanje. Ostatak je usitnjen etrom, filtriran, ispran etrom i osušen da bi se dobio 61 mg (85%) željene HCI soli Jedinjenja 11 u vidu vrlo fine čvrste mase.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.00-1.08 (m, 12H), 1.19 (s, 9H), 1.23-1.25 (m, 1H), 1.40-1.45 (m, 1H), 1.85-1.91 (m, 1H), 2.20-2.26 (m, 1H), 2.31-2.42 (m, 1H), 2.65-2.78 (m, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 4.00 (s, 3H), 4.10-4.16 (m, 2H), 4.51-4.64 (m, 2H), 5.13 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.30 (d,J =18 Hz, 1H), 5.69-5.79 (m, 1H), 5.84 (b, 1H), 7.28 (d,J= 9.3 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.55 (d,J =6.3 Hz, 1H), 7.89-7.92 (m, 1H), 8.29 (d,J =9.0 Hz, 1H), 9.21 (b, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.75 min, postupak B), MSm/ z714 (M<+>+H).
Analitički izrač. za: C35H47N509S«1 .OHCI: C, 56.02; H, 6.44; N, 9.33; Cl, 4.72; S, 4.27; nađeno: C, 55.80; H, 6.42; N, 9.15; Cl, 4.56; S, 4.09.
Korak 8:
U posudu sa dva grlića, zapremine 25 ml, dodata je šipka za mešanje, pregrada i adapter za gasoviti N2. Jedinjenje 11 (99.7 mg, 0.140 mmol) je odmereno i dodato u reakcionu posudu. Reakciona posuda je pročišćena i postavljena pod atmosferu N2. U posudu je dodato 850 ul acetona da bi se dobio bistar rastvor. Ovom rastvoru je na sobnoj temperaturi dodato 780 ul .179 M rastvora KOH (vodeni) koji je pripremljen rastvaranjem čvrstog KOH (502.8 mg, 8.97 mmol) u 50 ml HzO. Posle dodavanja KOH rastvor je neznatno zagrejan, ali je ostao bistar. Bistar rastvor je ostavljen da se meša na sobnoj temperaturi 2 časa. Proizvod se iskristalisao iz rastvora i izolovan je filtracijom. Ostatak sa filtra je ispran hladnim acetonom da bi se dobilo 42 mg (40% prinos) željenog proizvoda u obliku finih belih iglica:<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 0.52-0.65 (m, 2H), 0.66-0.82 (m, 2H), 0.96 (s, 9H), 1.21-1.24 (m, 10H), 1.44-1.63 (m, 1H), 1.72-1.92 (m, 1H), 2.30-2.42 (m, 1H), 2.46 (d,J=7. 93Hz, 1H), 2.60-2.85 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.93-4.05 (m, 1H), 4.07-4.24 (m, 1H), 4.41 (t,^8.39Hz, 1H), 4.79-4.95 (m, 1H), 4.97-5.17 (m, 1H), 5.71 (b, 1H), 5.80-6.10 (m, 1H), 6.64 (d, ^8.54 Hz, 1H), 7.10 (d, J=8.85 Hz, 1H), 7.24-7.37 (m, 2H), 7.90-7.96 (m, 1H), 7.99-8.04 (b, 1H), 8.06 (d, ^9.15 Hz, 1H). Elementarna analiza za C35H46KN5OgS«H20; izrač. C, 54.60; H, 6.28; K, 5.08; N, 9.10. stvarno C, 54.88; H, 6.23; K, 5.05; N, 9.01; MS m/e 714 (MH<+>);
Primer 12: Izrada Jedinjenja 12.
Jedinjenje 12 je pripremljeno istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 11, Korak 6, s izuzetkom korišćenja N-BOC-L-valina.
<1>H NMR (CD3OD) 5 0.94-0.98 (m, 6H), 1.07-1.09 (m, 3H), 1.21-1.25 (m, 10H), 1.40-1.43 (m, 1H), 1.88-1.89 (m, 1H), 2.05-2.09 (m, 1H), 2.22-2.35 (m, 2H), 2.57-2.61 (m, 1H), 2.94-2.97 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.03-4.06 (m, 2H), 4.47-4.55 (m, 2H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.32 (d, J = 18.1 Hz, 1H), 5.74-5.81 (m, 1H), 5.86 (b, 1H), 7.10 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.25 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 6.0 Hz, 1H), 8.10 (d,J= 9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.71 min, postupak B), MSm/ z700 (M<+>+H).
Primer 13: Izrada Jedinjenja 13.
Jedinjenje 13 je pripremljeno istom procedurom, kao što je opisano u Primeru 11, Korak 6, s izuzetkom korišćenja N-BOC-L-aloizoleucina.<1>H NMR (CD3OD) 5 0.89-0.96 (m, 6H), 1.07-1.18 (m, 5H), 1.28 (s, 9H), 1.42-1.45 (m, 1H), 1.50-1.54 (m, 1H), 1.87-1.89 (m, 2H), 2.23-2.34 (m, 2H), 2.57-2.61 (m, 1H), 2.92-2.95 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.05-4.07 (m, 1H), 4.22-4.24
(m, 1H), 4.37-4.40 (m, 1H), 4.54-4.56 (m, 1H), 5.13 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.32 (d,J=18.0 Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 5.86 (b, 1H), 7.12 (d,J= 9.0 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.24 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 6.0 Hz, 1H), 8.10 (d,J =9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.77 min, postupak B), MSm/ z714 (M<+>+H).
Primer 14: Izrada Jedinjenja 14.
Korak 1:
Smeša Jedinjenja 11 (150mg, 0.21 mmol) i Pearlmannovog kattalizatora (Pd(OH)215mg) u EtOAc (10mL) je stavljena na Parr šejker tokom 20 min pod 10 Psi H2. Filtrirana je kroz celit. Filtrat je uparen in vacuo. Ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo 67mg (45%) Jedinjenja 14 u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CD3OD) 5 0.96-0.99 (m, 4H), 1.04 (s, 9H), 1.07-1.09 (m, 2H), 1.21-1.24 (m, 2H), 1.27 (s, 9H), 1.51-1.65 (m, 4H), 2.25-2.27 (m, 1H), 2.55-2.61 (m, 1H), 2.94-2.98 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.02-4.06 (m, 1H), 4.21-4.24 (m, 1H), 4.40-4.42 (m, 1H), 4.49-4.51 (m, 1H), 5.81 (b, 1H), 6.59 (d,J=10.0 Hz, 1H), 7.08-7.10 (m, 1H), 7.18 (d,J =1.5 Hz, 1H), 7.24 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.88 (d,J =6.0 Hz, 1H), 8.08 (d,J =9.0 Hz, 1H): LC-MS (retenciono vreme: 1.76 min, postupak B), MSm/ z716 (M<+>+H).
Primer 15: Izrada Jedinjenja 15.
Jedinjenje 15 je izolovano iz iste reakcije proizvodnje Jedinjenja 14 sa blago produženim retencionim vremenom, kao nuz proizvod u 15%-tnom prinosu.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.92-1.10 (m, 17H), 1.26-1.36 (m, 13H), 1.64-1.72 (m, 1H), 1.90-1.96 (m, 1H), 2.30-2.40 (m, 1H), 2.63-2.67 (m, 1H), 2.96-3.00 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.03-4.07 (m, 1H), 4.24 (b, 1H), 4.40-4.42 (m, 1H), 4.49-4.51 (m, 1H), 5.83 (b, 1H), 7.08-7.11 (m, 1H), 7.19 (d,J= 2.0 Hz, 1H), 7.25 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.89 (d,J =6.0 Hz, 1H), 8.10 (d,J =9.0 Hz, 1H), 8.51 (b, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.83 min, postupak B), MSm/ z718 (M<+>+H).
Korak 1:
U rastvor Jedinjenja 11 (420mg, 0.59mmol) u DCM (5mL) na 0°C je dodat TFA (5ml_). Posle mešanja na ovoj temperaturi tokom 2 h isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo. Ostatak je usitnjen sa 1M HCI u etru (5ml_), filtriran, ispran etrom i osušen da bi se dobilo 360mg (89%) željene HCI soli u vidu vrlo fine čvrste mase.
LC-MS (retenciono vreme: 1.28 min, postupak B), MSm/ z614 (M<+>+H).
Korak 2:
U suspenziju proizvoda iz Primera 16, Korak 1 (39mg, 0.06mmol) i DIPEA (20mg, 0.18mmol) u DCM (1mL) na 0°C je dodat metil hloroformat (6.8mg, 0.072mmol). Posle mešanja na ovoj temperaturi tokom 2 h isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo. Ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobio 21 mg (58%) Jedinjenja 16 u vidu belog kristala.<1>H NMR (CD3OD) S 1.05-1.09 (m, 11H), 1.22-1.25 (m, 2H), 1.41-1.44 (m, 1H), 1.86-1.89 (m, 1H), 2.22-2.32 (m, 2H), 2.59-2.63 (m, 1H), 2.89-2.93 (m, 1H), 3.48 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 4.06-4.10 (m, 1H), 4.31-4.33 (m, 1H), 4.38-4.40 (m, 1H), 4.50-4.52 (m, 1H), 5.12 (d,J=10.5 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 18.0 Hz, 1H), 5.71-5.80 (m, 1H), 5.85 (b, 1H), 6.95 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 7.13-7.16 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.25 (d,J= 6.0 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 6.0 Hz, 1H), 8.09 (d,J =9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.54 min, postupak B), MSm/ z672 (M<+>+H).
Primer 17: Izrada Jedinjenja 17.
Jedinjenje 17 je pripremljeno istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 16, Korak 2 sa izuzetkom korišćenja izopropil hloroformata.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.00-1.09 (m, 15H), 1.13-1.16 (m, 2H), 1.24-1.26 (m, 2H), 1.40-1.45 (m, 1H), 1.86-1.89 (m, 1H), 2.21-2.31 (m, 2H), 2.55-2.61 (m, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.04-4.08 (m, 1H), 4.30 (b, 1H), 4.40 (d,J= 10 Hz, 1H), 4.49-4.54 (m, 2H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.71-5.77 (m, 1H), 5.84 (b, 1H), 6.80 (d,J =10.0 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.25 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 6.0 Hz, 1H), 8.08 (d,J =9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.74 min, postupak B), MSm/ z700 (M<+>+H).
Primer 18: Izrada Jedinjenja 18.
Jedinjenje 18 je pripremljeno istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 16, Korak 2 sa izuzetkom korišćenja neopentil hloroformata.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.61 (b, 1H), 0.84 (s, 8H), 1.05-1.09 (m, 11H), 1.23-1.25 (m, 2H), 1.39-1.44 (m, 1H), 1.85-1.88 (m, 1H), 2.20-2.30 (m, 2H), 2.56-2.62 (m, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 3.38 (d,J=9.0 Hz, 1H), 3.55 (d,J=9.0 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.02-4.06 (m, 1H), 4.32 (d,J =9.5 H, 1H), 4.41 (d,J =9.0 Hz, 1H), 4.49-4.51 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.28 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.69-5.74 (m, 1H), 5.81 (b, 1H), 6.90 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 7.08-7.10 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.26 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 6.0 Hz, 1H), 8.07 (d,J =9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.84 min, postupak B), MSm/ z728 (M<+>+H).
Primer 19: Izrada Jedinjenja 19.
Jedinjenje 19 je pripremljeno istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 16, Korak 2 sa izuzetkom korišćenja (S)-3-furanohloroformata (J. Campbell A. Good WO 20020808).<1>H NMR (CD3OD) 8 1.03-1.08 (m, 11H), 1.23-1.26 (m, 2H), 1.38-1.46 (m, 1H), 1.64-1.71 (m, 1H), 1.85-1.90 (m, 2H), 2.20-2.30 (m, 2H), 2.55-2.61 (m, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 3.66-3.72 (m, 4H), 3.93 (s, 3H), 4.05-4.09 (m, 1H), 4.27-4.29 (m, 1H), 4.40-4.42 (m, 1H), 4.55-4.59 (m, 1H), 4.75-4.77 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.28 (d,J= 18 Hz, 1H), 5.73-5.80 (m, 1H), 5.81 (b, 1H), 7.06 (d,J =10.0 Hz, 1H), 7.13 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.25 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.89 (d,J= 6.0 Hz, 1H), 8.07 (d,J= 9.0 Hz, 1H); -
LC-MS (retenciono vreme: 1.52 min, postupak B), MSm/ z728 (M<+>+H).
Primer 20: Izrada Jedinjenja 20.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 11, Korak 2 sa izuzetkom korišćenja 6-hloro-2H-izohinolin-1-ona (Nicolas Brietet al,Tetrahedron, 2002, 5761-5766).
LC-MS (retenciono vreme: 1.07 min, postupak B), MSm/ z180 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 5 sa izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 20, Korak 1.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.04 (s, 9H), 1.20 (s, 9H), 2.36-2.41 (m, 1H), 2.74-2.78 (m, 1H), 4.01-4.04 (m, 1H), 4.19-4.21 (m, 1H), 4.47-4.49 (m, 1H), 4.67-4.70 (m, 1H), 5.84 (b, 1H), 7.28 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.47 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 8.00 (d,J =6.0 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.88 min, postupak B), MSm/ z506 (M<+>+H).
Korak 3
Jedinjenje 20 je pripremljeno istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 1, Korak 9 sa izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 20, Korak 2.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.99-1.11 (m, 12H), 1.20-1.26 (m, 10H), 1.43-1.46 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.22-2.31 (m, 2H), 2.60-2.64 (m, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 4.06-4.08 (m, 1H), 4.21-4.23 (m, 1H), 4.45-4.47 (m, 1H), 4.53-4.56 (m, 1H), 5.13 (d,J= 10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.72-5.80 (m, 1H), 5.88 (b, 1H), 6.58 (d,J =10.0 Hz, 1H), 7.29 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.47 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 8.01 (d,J= 6.0 Hz, 1H), 8.18 (d,J= 9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.94 min, postupak B), MSm/ z718 (M<+>+H).
Primer 21:IzradaJedinjenja 21.
Korak 1:
U smešu proizvoda iz Primera 1, Korak 4 (3.00g, 8.72mmol), HATU (4.97g, 13.1 mmol) i proizvoda Primer 1, Korak 8 (2.55g, 9.59 mmol) u CH2CI2(100mL), dodat je DIPEA (3.02g, 27.0mmol) na 0°C. Posle mešanja na temperaturi sredine tokom 12 h, obrazovani rastvor je razblažen sa CH2CI2(100mL), ispran sa ledenom 5%-tnom limunskom kiselinom (vod.). Organski sloj je ispran sa 5%-tnom limunskom kiselinom (vod.) odnosno, slanim rastvorom, osušen preko MgS04i filtriran. Filtrat je uparen in vacuo do suva. Ostatak je prečišćen pomoću flash kolone (1:1 heksan : aceton) da bi se dobilo 3.64g (75%) željenog proizvoda u vidu pene.
LC-MS (retenciono vreme: 1.41 min, postupak B), MSm/ z557 (M<+>+H).
Korak 2:
U ledeni rastvor 6-bromoizohinolina (4.16g, 20mmol) u CH2CI2(100mL) dodat je, iz jednog dela, mCPBA (9.38g, 77% čist, 42mmol) u vidu čvrste mase. Posle mešanja na temperaturi sredine tokom 12 h razblažen je sa CH2CI2(100ml_) i ispran sa 1M NaOH (100ml_x2) i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko MgS04, filtriran i uparen do suva da bi se dobilo 3.83g (86%) željenog proizvoda u vidu bele čvrste mase. Ovaj materijal je korišćen u sirovom stanju bez daljeg prečišćavanja.
LC-MS (retenciono vreme: 0.77 min, postupak B), MSm/ z224, 226 (M<+>+H).
Korak 3:
Smeša 6-bromo-izohinolin 2-oksida (88mg, 0.2mmol), pirazola (68mg, I.Ommol), CuBr (57mg, 0.4mmol) i cezijum karbonata (130mg, 0.4mmol) u DMF-u (2mL) je zagrevana do 140°C tokom 4 h u zapečaćenoj epruveti. Posle filtracije, filtrat je prečišćen prep-HPLC da bi se dobio 41 mg (98%) željenog proizvoda u vidu zatvoreno bele čvrste mase.<1>H NMR (CDCI3) 8 6.58-6.59
(m, 1H), 7.82 (d,J =1.0 Hz, 1H), 7.89 (d,J =7.0 Hz, 1H), 8.02 (d,J =9.0 Hz, 1H), 8.11 (d,J =2.5 Hz, 1H), 8.18-8.22 (m, 2H), 8.29 (d,J= 7.0 Hz, 1H), 9.07 (b, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 0.77 min, postupak B), MSm/ z212 (M<+>+H).
Korak 4:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 11, Korak 2 u vidu zatvoreno bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 6-pirazol-izohinolin 2-oksida.<1>H NMR (CD3OD) 5 7.82-7.83 (m, 2H), 8.23-8.32 (m, 4H), 8.44-8.49 (m, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.35 min, postupak B), MSm/ z230 (M<+>+H).
Korak 5:
U rastvor proizvoda iz Primera 21, Korak 1 (45mg, 0.08mmol) u DMSO (2mL) dodat je kalijum terc-butoksid (41 mg, 0.37mmol). Obrazovani rastvor je mešan na temperaturi sredine tokom 30 min pre nego što je dodat je 1 -hloro-6-pirazol-1 -il-izohinolin (17mg, 0.07mmol). Konačni rastvor je mešan tokom 12 h. Ugašen je ledenom vodom, zakiseljen sa 1M HCI do pH 4 i ekstrahovan sa EtOAc (20mLx2). Organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04, filtrirani i upareni. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobilo 10mg (16%) Jedinjenja 21 u vidu ružičaste čvrste mase.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.04-1.10 (m, 12H), 1.23-1.27 (m, 10H), 1.43-1.47 (m, 1H), 1.87-1.91 (m, 1H), 2.22-2.29 (m, 2H), 2.61-2.68 (m, 1H), 2.92-2.98 (m, 1H), 4.07-4.11 (m, 1H), 4.24 (b, 1H), 4.46-4.60 (m, 2H), 5.13 (d,J=10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J =18 Hz, 1H), 5.70-5.83 (m, 1H), 5.89 (b, 1H), 6.59-6.61 (m, 1H), 7.40 (d,J =10.0 Hz, 1H), 7.80 (d,J =2.5 Hz, 1H), 8.01 (d,J= 10.0 Hz, 2H), 8.15 (s, 1H), 8.31 (d,J =15.0 Hz, 1H), 8.42 (d,J =4.5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.77 min, postupak B), MSm/ z750 (M<+>+H).
Primer 22: Izrada Jedinjenja 22.
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 11, Korak 2 u vidu zatvoreno bele čvrste mase, sa izuzetkom korišćenja 6-bromo-izohinolin 2-oksida.<1>H NMR (CDgOD) 5 7.73 (d,J =5.5 Hz, 1H), 7.85-7.91 (m, 1H), 8.22-8.31 (m, 3H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.53 min, postupak B), MSm/ z241, 243, 245 (M<+>+H).
Korak 2:
Jedinjenje 22 je pripremljeno istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 21, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, sa izuzetkom korišćenja 1-hloro-6-bromo-izohinolina.<1>H NMR (CD3OD) 6 0.99-1.09 (m, 12H), 1.22-1.27 (m, 10H), 1.40-1.47 (m, 1H), 1.86-1.91 (m, 1H), 2.20-2.34 (m, 2H), 2.57-2.66 (m, 1H), 2.90-2.97 (m, 1H), 4.05-4.09 (m, 1H), 4.21 (b, 1H), 4.44-4.57 (m, 2H), 5.13 (d,J= 10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.70-5.82 (m, 1H), 5.88 (b, 1H), 7.29 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.60-7.63 (m, 1H), 8.00-8.12 (m, 3H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.90 min, postupak B), MSm/ z762, 764 (M<+>+H).
Primer 23: Izrada Jedinjenja 23.
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 11, Korak 3 u vidu bele čvrste mase, sa izuzetkom korišćenja 1-hloro-izohinolina.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.42, 1.44 (rotameri, 9H), 2.39-2.44 (m, 1H), 2.68-2.72 (m, 1H), 3.80-3.87 (m, 2H), 4.44-4.52 (m, 1H), 5.78 (b, 1H), 7.32-7.33 (m, 1H), 7.58 (t,J =7.8 Hz, 1H), 7.71 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.81 (d,J =8.0 Hz, 1H), 7.95 (d,J =6.0 Hz, 1H), 8.19 (d,J =8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.61 min, postupak B), MSm/ z359 (M<+>+H).
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 11, Korak 4 sa izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 23, Korak 1.<1>H NMR (DMSO-d6) 8 1.00-1.09 (m, 4H), 1.35-1.38 (m, 10H), 1.69-1.84 (m, 1H), 2.11-2.66 (m, 3H), 2.89-2.93 (m, 1H), 3.62-3.89 (m, 2H), 4.31 (t,J =8.1 Hz, 1H), 5.12 (d,J= 10.8 Hz, 1H), 5.27 (d,J =16.8 Hz, 1H), 5.58-5.70 (m, 1H), 5.76 (b, 1H), 7.43 (d,J= 5.7 Hz, 1H), 7.66 (t,J =7.4 Hz, 1H), 7.79 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.92 (d,J= 8.1 Hz, 1H), 8.02 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 8.13 (d,J =8.1 Hz, 1H), 9.02 (b, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.72 min, postupak B), MSm/ z571 (M<+>+H).
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 11, Korak 5 sa izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 23, Korak 2.
LC-MS (retenciono vreme: 1.16 min, postupak B), MSm/ z471 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 23 je pripremljeno istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 11, Korak 6 u vidu bele čvrste mase, sa izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 23, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.00-1.09 (m, 12H), 1.25-1.27 (m, 10H), 1.42-1.46 (m, 1H), 1.86-1.90 (m, 1H), 2.22-2.34 (m, 2H), 2.60-2.67 (m, 1H), 2.92-2.99 (m, 1H), 4.06-4.11 (m, 1H), 4.26 (b, 1H), 4.45-4.57 (m, 2H), 5.12 (d,J= 10.2 Hz, 1H), 5.27 (d,J =16.8 Hz, 1H), 5.70-5.82 (m, 1H), 5.88 (b, 1H), 7.32 (d,J= 6.0 Hz, 1H), 7.52 (t,J =7.4 Hz, 1H), 7.70 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.80 (d,J= 8.1 Hz, 1H), 7.97 (d,J =6 Hz, 1H), 8.20 (d,J =8.4 Hz, 1H), 9.18 (b, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.80 min, postupak B), MSm/ z684 (M<+>+H).
Primer 24: Izrada Jedinjenja 24.
Korak 1:
U rastvor N-BOC-3-(fl)-hidroksi-L-prolina (6.22g, 26.9mmol) u DMF (250mL), na 0°C je dodat NaH (60%, 3.23g, 80.8mmol) iz nekoliko delova. Obrazovana suspenzija je mešana na ovoj temperaturi tokom 30 min. Dodat je iz jednog dela 1,3-dihloro-izohinolin (5.33g, 26.9mmol), u vidu čvrste mase, a konačna smeša je mešana na temperaturi sredine tokom 12 h. Ugašena je sa ledenom 5%-tnom limunskom kiselinom (vod.) i ekstrahovana sa EtOAc (300mL). Vodena faza je ponovo ekstrahovana sa EtOAc. Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa 5% limunskom kiselinom (vod.), odnosno slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i filtrirani. Filtrat je uparen in vacuo do suva da bi se dobilo 10.53g (99.8%) 1-terc-butil estra 4-(6-metoksi-izohinolin-1-iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, u vidu zatvoreno bele pene. Ovaj materijal je korišćen u reakciji sledećeg koraka u sirovom stanju bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.43, 1.44 (rotameri, 9H), 2.39-2.44 (m, 1H), 2.68-2.72 (m, 1H), 3.80-3.90 (m, 2H), 4.44-4.52 (m, 1H), 5.77 (b, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.58 (t,J =7.3 Hz, 1H), 7.71-7.78 (m, 2H), 8.16 (d,J =7.5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.80 min, postupak B), MSm/ z392 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 4, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 24, Korak 1.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.02-1.08 (m, 2H), 1.18-1.26 (m, 2H), 1.44-1.48 (m, 10H), 1.84-1.91 (m, 1H), 2.22-2.36 (m, 2H), 2.57-2.60 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.81-3.93 (m, 2H), 4.38-4.41 (m, 1H), 5.13 (d,J =10.8 Hz, 1H), 5.31 (d,J =16.8 Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.59 (t,J= 7.4 Hz, 1H), 7.74-7.79 (m, 2H), 8.16 (d,J= 8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.82 min, postupak B), MSm/ z605 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 5, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 24, Korak 2.
LC-MS (retenciono vreme: 1.30 min, postupak B), MSm/ z505 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 24 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 6 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 24, Korak 3.<1>H NMR
(CD3OD) 5 0.99-1.09 (m, 12H), 1.22-1.29 (m, 10H), 1.42-1.46 (m, 1H), 1.86-1.90 (m, 1H), 2.21-2.34 (m, 2H), 2.62-2.66 (m, 1H), 2.92-2.99 (m, 1H), 4.06-4.11 (m, 1H), 4.26 (b, 1H), 4.46-4.56 (m, 2H), 5.13 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 17.2 Hz, 1H), 5.72-5.79 (m, 1H), 5.89 (b, 1H), 7.40 (d,J =6.0 Hz, 1H), 7.52 (t,J =7.4 Hz, 1H), 7.72-7.76 (m, 2H), 8.18 (d,J =8.5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.95 min, postupak B), MSm/ z718 (M<+>+H).
Primer 25, Jedinjenje 25.
Korak 1:
Smeša Jedinjenja iz Primera 24, Korak 1 (39mg, O.IOmmol), fenilborne kiseline (14.6mg, 0.12mmol), natrijum terc-butoksida (38mg, 0.40mmol) i ((t-Bu)2POH)2PdCI2(POPd) (5mg, 0.01 mmol) u THF-u (2ml_) je zagrevana do refluksa tokom 4 h. Posle hlađenja, obrazovana smeša je ugašena sa 5%-tnom limunskom kiselinom (vod.) i ekstrahovana sa EtOAc (20mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko MgS04, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo 36mg (83%) željenog proizvoda u vidu zatvoreno bele pene.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.43, 1.45 (rotameri, 9H), 2.51-2.56 (m, 1H), 2.74-2.82 (m, 1H), 3.88-3.92 (m, 1H), 3.94-4.01 (m, 1H), 4.50-4.57 (m, 1H), 5.95 (b, 1H), 7.36-7.39 (m, 1H), 7.45-7.48 (m, 2H), 7.55 (t,J =7.3 Hz, 1H), 7.70 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.84-7.89 (m, 2H), 8.14-8.17 (m, 3H), 9.05 (b, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.97 min, postupak B), MSm/ z435 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 4, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 25, Korak 1.<1>H NMR (DMSO-d6) 8 0.98-1.10 (m, 4H), 1.38-1.41 (m, 10H), 1.74-1.81 (m, 1H), 2.18-2.34 (m, 2H), 2.47-2.49 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.74-3.96 (m, 2H), 4.34-4.37 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.26 (d,J= 17.8 Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 5.95 (b, 1H), 7.41-7.45 (m, 1H), 7.51-7.54 (m, 2H), 7.61-7.64 (m, 1H), 7.78-7.82 (m, 1H), 7.98 (d,J=9.0 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.13-8.14 (m, 1H), 8.18-8.20 (m, 2H), 9.05 (b, 1H), 10.34 (b, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.99 min, postupak B), MSm/ z647 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 25, Korak 2.
LC-MS (retenciono vreme: 1.55 min, postupak B), MSm/ z547 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 25 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 6 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 25, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.92-1.09 (m, 12H), 1.26-1.30 (m, 10H), 1.43-1.46 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.21-2.26 (m, 1H), 2.36-2.41 (m, 1H), 2.70-2.75 (m, 1H), 2.93-2.97 (m, 1H), 4.18-4.30 (m, 2H), 4.46-4.48 (m, 1H), 4.55-4.58 (m, 1H), 5.12 (d,J= 10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.72-5.79 (m, 1H), 6.10 (b, 1H), 7.37-7.40 (m, 1H), 7.46-7.49 (m, 3H), 7.70 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.85-7.89 (m, 2H), 8.16-8.20 (m, 3H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.08 min, postupak B), MSm/ z760 (M<+>+H).
Primer26:Izrada Jedinjenja26.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 25, Korak 1, s izuzetkom korišćenja 4-metoksifenilborne kiseline.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.40, 1.45 (rotameri, 9H), 2.50-2.55 (m, 1H), 2.73-2.81 (m, 1H), 3.81-3.89 (m, 4H), 3.98-4.01 (m, 1H), 4.50-4.57 (m, 1H), 5.93 (b, 1H), 7.02 (d,J= 9.0 Hz, 2H), 7.50 (t,J =7.3 Hz, 1H), 7.67 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.83 (d,J= 8.5 Hz, 1H), 8.09 (d,J =8.5 Hz, 2H), 8.15 (d,J =8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.00 min, postupak B), MSm/ z465 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 4, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 26, Korak 1.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.06-1.09 (m, 2H), 1.17-1.27 (m, 2H), 1.42-1.47 (m, 10H), 1.88-1.90 (m, 1H), 2.21-2.26 (m, 1H), 2.33-2.39 (m, 1H), 2.61-2.65 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.86-3.90 (m, 1H), 3.99-4.00 (m, 1H), 4.43-4.45 (m, 1H), 5.13 (d,J= 10.8 Hz, 1H), 5.31 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.77-5.80 (m, 1H), 5.99 (b, 1H), 7.02 (d,J= 9.0 Hz, 2H), 7.51 (t,J =7.3 Hz, 1H), 7.68 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.09 (d,J =8.5 Hz, 2H), 8.15 (d,J =8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.02 min, postupak B), MSm/ z677 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 26, Korak 2. LC-MS (retenciono vreme: 1.53 min, postupak B), MSm/ z577 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 26 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 6 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 26, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 5 0.93-1.09 (m, 12H), 1.26-1.30 (m, 10H), 1.44-1.46 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.21-2.26 (m, 1H), 2.36-2.41 (m, 1H), 2.70-2.75 (m, 1H), 2.93-2.97 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 4.18-4.25 (m, 1H), 4.30 (b, 1H), 4.46-4.48 (m, 1H), 4.55-4.58 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.72-5.79 (m, 1H), 6.08 (b, 1H), 7.02 (d,J =9.0 Hz, 2H), 7.44 (t,J= 7.3 Hz, 1H), 7.66 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.83 (d,J =8.5 Hz, 1H), 8.09 (d,J =8.5 Hz, 2H), 8.15 (d,J =8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.03 min, postupak B), MSm/z790 (M<+>+H).
Primer 27: Izrada Jedinjenja 27.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 25, Korak 1, s izuzetkom korišćenja 4-piridilborne kiseline.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.43, 1.46 (rotameri, 9H), 2.53-2.56 (m, 1H), 2.80-2.89 (m, 1H), 3.90-3.93 (m, 1H), 4.00-4.05 (m, 1H), 4.50-4.57 (m, 1H), 6.00, 6.05 (rotameri, 1H), 7.80 (t,J =7.3 Hz, 1H), 7.87 (t,J= 7.5 Hz, 1H), 8.08 (d,J= 8.5 Hz, 1H), 8.32 (d,J= 8.0 Hz, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.84 (d,J= 6.0 Hz, 2H), 8.84 (d,J= 6.5 Hz, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.39 min, postupak B), MSm/ z436 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 4, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 27, Korak 1.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.06-1.09 (m, 2H), 1.17-1.27 (m, 2H), 1.42-1.46 (m, 10H), 1.88-1.90 (m, 1H), 2.21-2.26 (m, 1H), 2.33-2.39 (m, 1H), 2.61-2.65 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.88-3.90 (m, 1H), 4.01-4.08 (m, 1H), 4.43-4.45 (m, 1H), 5.15 (d,J =10.8 Hz, 1H), 5.32 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.77-5.80 (m, 1H), 6.10 (b, 1H), 7.79 (t,J =7.3 Hz, 1H), 7.88 (t,J =7.5 Hz, 1H), 8.08 (d,J =8.5 Hz, 1H), 8.31 (d,J =8.0 Hz, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.79 (d,J =7.0 Hz, 2H), 8.86 (d,J =6.5 Hz, 2H); LC-MS (retenciono vreme: 1.49 min, postupak B), MSm/ z648 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 27, Korak 2.
LC-MS (retenciono vreme: 0.96 min, postupak B), MSm/ z548 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 27 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 6, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 27, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.94-1.09 (m, 12H), 1.22-1.26 (m, 10H), 1.44-1.49 (m, 1H), 1.88-1.92 (m, 1H), 2.22-2.25 (m, 1H), 2.41-2.44 (m, 1H), 2.70-2.75 (m, 1H), 2.93-2.98 (m, 1H), 4.18-4.21 (m, 1H), 4.25 (b, 1H), 4.53-4.62 (m, 2H), 5.12 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 5.29 (d,J =20.0 Hz, 1H), 5.72-5.77 (m, 1H), 6.12 (b, 1H), 7.67 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.82 (t,J =7.5 Hz, 1H), 8.02 (d,J =8.5 Hz, 1H), 8.29 (d,J =8.0 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.55 (d,J =7.0 Hz, 2H), 8.76 (d,J =6.5 Hz, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.49 min, postupak B), MSm/ z761 (M<+>+H).
Primer 28: Izrada Jedinjenja 28.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 25, Korak 1, s izuzetkom korišćenja 4-N,N-dimetilamino-fenilborne kiseline.
LC-MS (retenciono vreme: 1.64 min, postupak B), MSm/ z478 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 4, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 28, Korak 1.
LC-MS (retenciono vreme: 1.70 min, postupak B), MSm/ z690 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 28, Korak 2.
LC-MS (retenciono vreme: 1.20 min, postupak B), MSm/ z590 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 28 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 6, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 28, Korak 3.<1>H NMR (d6-DMSO) 8 0.92-1.10 (m, 13H), 1.30 (s, 9H), 1.35-1.38 (m, 1H), 1.68-1.71 (m, 1H), 2.12-3.00 (m, 2H), 2.59-2.62 (m, 1H), 2.91-2.95 (m, 1H), 2.99 (s, 6H), 3.93-4.10 (m, 2H), 4.32-4.40 (m, 2H), 5.09 (d,J =11.5 Hz, 1H), 5.23 (d,J=19.0 Hz, 1H), 5.54-5.64 (m, 1H), 5.92 (b, 1H), 6.83 (d,J =9.0 Hz, 2H), 7.42 (t,J =7.3 Hz, 1H), 7.70 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.87 (d,J =8.5 Hz, 1H), 8.04 (d,J =9.0 Hz, 2H), 8.15 (d,J =8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.72 min, postupak B), MSm/ z803 (M<+>+H).
Primer 29: Izrada Jedinjenja 29.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 25, Korak 1, s izuzetkom korišćenja 4-cijano-fenilborne kiseline.
LC-MS (retenciono vreme: 1.87 min, postupak B), MSm/ z 460(M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 4, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 29, Korak 1.
LC-MS (retenciono vreme: 1.88 min, postupak B), MSm/ z672 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 29, Korak 2. LC-MS (retenciono vreme: 1.41 min, postupak B), MSm/ z572 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 29 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 6 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 29, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) § 0.92-1.09 (m, 12H), 1.25-1.26 (m, 10H), 1.42-1.46 (m, 1H), 1.86-1.89 (m, 1H), 2.20-2.22 (m, 1H), 2.33-2.34 (m, 1H), 2.68-2.71 (m, 1H), 2.93-2.95 (m, 1H), 4.13-4.28 (m, 2H), 4.49-4.60 (m, 2H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.28 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.71-5.80 (m, 1H), 6.09 (b, 1H), 7.56 (t,J =7.3 Hz, 1H), 7.74 (t,J= 7.5 Hz, 1H), 7.83 (d,J =10.5 Hz, 2H), 7.93 (d,J =7.5 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 8.22 (d,J= 7.5 Hz, 1H), 8.37 (d,J =10.5 Hz, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.87 min, postupak B), MSm/ z785 (M<+>+H).
Primer 30: Izrada Jedinjenja 30.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 25, Korak 1, s izuzetkom korišćenja 3-furanoborne kiseline.
LC-MS (retenciono vreme: 1.85 min, postupak B), MSm/ z425 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 4, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 30, Korak 1.
LC-MS (retenciono vreme: 1.88 min, postupak B), MSm/ z637 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 5, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 30, Korak 2.
LC-MS (retenciono vreme: 1.38 min, postupak B), MSm/ z537 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 30 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 6 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 30, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.95-1.09 (m, 12H), 1.23-1.30 (m, 10H), 1.43-1.46 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.21-2.23 (m, 1H), 2.30-2.34 (m, 1H), 2.64-2.70 (m, 1H), 2.93-2.96 (m, 1H), 4.11-4.29 (m, 2H), 4.41-4.44 (m, 1H), 4.54-4.56 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 17.5 Hz, 1H), 5.71-5.80 (m, 1H), 6.02 (b, 1H), 7.00 (s, 1H), 7.44 (t,J =7.2 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.66 (t,J =7.0 Hz, 1H), 7.79 (d,J =8.0 Hz, 1H), 814-8.17 (m, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.93 min, postupak B), MSm/ z750 (M<+>+H).
Primer31: IzradaJedinjenja 31.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u izradi Jedinjenja 21, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 3-bromo-izohinolina (Atkins et al, JOC, 1973, 400).<1>H NMR (CDCI3) 5 7.60-7.62 (m, 2H), 7.71-7.73 (m, 2H), 8.12 (s, 1H), 8.99 (s, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 0.78 min, postupak B), MSm/ z224, 226 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 2-oksida 3-bromo-izohinolina.<1>H NMR (CDCI3) 5 7.66-7.71 (m, 1H), 7.74-7.76 (m, 2H), 7.83 (s, 1H), 8.29 (d,J =8.5 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.55 min, postupak B), MSm/ z242, 244 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 3 u vidu pene, s izuzetkom korišćenja 3-bromo-1-hloro-izohinolina.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.43, 1.44 (rotameri, 9H), 2.41-2.47 (m, 1H), 2.69-2.70 (m, 1H), 3.80-3.84 (m, 1H), 3.88-3.90 (m, 1H), 4.46-4.52 (m, 1H), 5.76 (b, 1H), 7.57-7.61 (m, 2H), 7.73-7.75 (m, 2H), 8.15 (d,J= 8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.79 min, postupak B), MSm/ z437, 432 (M<+>+H).
Korak 4:
Smeša 2-tributilstananil-pirazina (44mg, 0.12mmol), tetrakis(tri-fenilfosfin)paladijuma(0)
(12mg, 0.01 mmol) i proizvoda iz Primera 31, Korak 3 (44mg, 0.1 mmol) u toluenu (1mL) je zagrevana do refluksa tokom 3 h. Posle uklanjanja isparljivih delova in vacuo, ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo 35mg (80%) željenog proizvoda u vidu žute čvrste mase.
LC-MS (retenciono vreme: 1.77 min, postupak B), MSm/ z437 (M<+>+H).
Korak 5:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 4, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 31, Korak 4.
LC-MS (retenciono vreme: 1.78 min, postupak B), MSm/ z649 (M<+>+H).
Korak 6:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 31, Korak 5.
LC-MS (retenciono vreme: 1.26 min, postupak B), MSm/ z549 (M<+>+H).
Korak 7:
Jedinjenje 31 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 6, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 31, Korak 6.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.95-1.10 (m, 12H), 1.24-1.27 (m, 10H), 1.44-1.47 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.19-2.22 (m, 1H), 2.38-2.44 (m, 1H), 2.71-2.76 (m, 1H), 2.93-2.96 (m, 1H), 4.18-4.28 (m, 2H), 4.50-4.61 (m, 2H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 17.5 Hz, 1H), 5.71-5.80 (m, 1H), 6.12 (b, 1H), 7.60 (t,J= 7.2 Hz, 1H), 7.77 (t,J =7.0 Hz, 1H), 7.97 (d,J =8.5 Hz, 1H), 8.26 (d,J =8.5 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 9.61 (s, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.84 min, postupak B), MSm/ z762 (M<+>+H).
Primer 32: Izrada Jedinjenja 32.
Korak 1:
Ovaj proizvod, 2-oksi-izohinolin-3-karbonitril je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u izradi Jedinjenja 21, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 3-cijano-izohinolina.<1>H NMR (DMSO-d6) 8 7.74 (t,J =8.0 Hz, 1H), 7.84 (t,J =8.2 1H), 7.97 (d,J =8.5 Hz, 1H), 8.03 (d,J= 8.5 Hz, 1H), 8.85 (s, 1H), 9.17 (s, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 0.48 min, postupak B), MSm/ z171 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod 1-hloro-izohinolin-3-karbonitril je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 2-oksida 3-cijano-izohinolina.<1>H NMR (CDCI3) 6 7.87-7.91 (m, 2H), 7.92-7.94 (m, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.42-8.44 (m, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.22 min, postupak B), MSm/ z189 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 1, Korak 5, s izuzetkom korišćenja 1-hloro-izohinolin-3-karbonitrila.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.05 (s, 9H), 1.17 (s, 9H), 2.34-2.40 (m, 1H), 2.71-2.78 (m, 1H), 4.09-4.11 (m, 1H), 4.21 (b, 1H), 4.48-4.52 (m, 1H), 4.68-4.72 (m, 1H), 5.89 (b, 1H), 7.74 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.86 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.94-7.97 (m, 2H), 8.31 (d,J =8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.66 min, postupak B), MSm/ z497 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 32 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisan u Primeru 1, Korak 9 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 32, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.04-1.09 (m, 12H), 1.20-1.27 (m, 10H), 1.39-1.45 (m, 1H), 1.85-1.88 (m, 1H), 2.20-2.30 (m, 2H), 2.63-2.71 (m, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 4.09-4.13 (m, 1H), 4.23 (d,J =9.3 Hz, 1H), 4.49-4.58 (m, 2H), 5.13 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.28 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.69-5.81 (m, 1H), 5.92 (b, 1H), 6.60 (d,J =10.0 Hz, 1H), 7.72 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.86 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.96-7.99 (m, 2H), 8.29 (d,J =8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.75 min, postupak B), MSm/ z 714(M<+>+H).
Primer 33: Izrada Jedinjenja 33.
Korak 1:
Ovaj proizvod 2-oksid 3-metil-izohinolina je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 21, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 3-metil-izohinolina.<1>H NMR (CD3OD) 8 2.64 (s, 3H), 7.64-7.72 (m, 2H), 7.88-7.95 (m, 2H), 9.05 (s, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 0.61 min, postupak B), MSm/ z160 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod 1-hloro-3-metil-izohinolin je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 2-oksida 3-metil-izohinolina.<1>H NMR (CDCI3) 8 2.65 (s, 3H), 7.25 (s, 1H), 7.61 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.69 (t,J =7.5 1H), 7.74 (d,J =8.0 Hz, 1H), 8.27 (d,J =8.5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.47 min, postupak B), MSm/ z178 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 1, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 1-hloro-3-metil-izohinolina.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.05 (s, 9H), 1.23 (s, 9H), 2.51 (s, 3H), 2.34-2.40 (m, 1H), 2.72-2.78 (m, 1H), 4.05-4.12 (m, 1H), 4.26 (b, 1H), 4.41 (d,J =10 Hz, 1H), 4.62-4.67 (m, 1H), 5.90 (b, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.38 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.62 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.14 (d,J=8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.84 min, postupak B), MSm/ z 486(M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 33 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisan u Primeru 1, Korak 9 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 33, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.99-1.09 (m, 12H), 1.23-1.25 (m, 10H), 1.41-1.45 (m, 1H), 1.86-1.90 (m, 1H), 2.21-2.31 (m, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.58-2.61 (m, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 4.08-4.12 (m, 1H), 4.28 (b, 1H), 4.40 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 4.50-4.55 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.0 Hz, 1H), 5.30 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.71-5.81 (m, 1H), 5.93 (b, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.38 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.62 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.68 (d,J =8.0 Hz, 1H), 8.12 (d,J= 8.0 Hz, 1H), 9.12 (b, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.85 min, postupak B), MSm/ z698 (M<+>+H).
Primer 34: Izrada Jedinjenja 34.
Korak 1:
Ovaj proizvod 2-oksid 3-ciklopropil-izohinolina je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 21, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 3-ciklopropil-izohinolina (L. Flippin, J. Muchovvski, J.O.C., 1993, 2631-2632).
LC-MS (retenciono vreme: 0.95 min, postupak B), MSm/ z186 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod 1-hloro-3-ciklopropil-izohinolin je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 11, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 2-oksida 3-ciklopropil-izohinolina.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.00-1.04 (m, 4H), 2.11-2.18 (m, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.61 (t,J =8.0 Hz, 1H), 7.72 (t,J =8.0 1H), 7.83 (d,J =13.5 Hz, 1H), 8.27 (d,J =14.5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.70 min, postupak B), MSm/ z204 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 1, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 1-hloro-3-ciklopropil-izohinolina.<1>H NMR (CD3OD) 5 0.93-1.05 (m, 13H), 1.29 (s, 9H), 2.06-2.10 (m, 1H), 2.39-2.44 (m, 1H), 2.70-2.76 (m, 1H), 4.05-4.12 (m, 1H), 4.27 (b, 1H), 4.35 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 4.62-4.67 (m, 1H), 5.78 (b, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.38 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.61 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.66 (d,J =8.0 Hz, 1H), 8.09 (d,J =8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.96 min, postupak B), MSm/ z512 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 34 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisan u Primeru 1, Korak 9 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 34, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 5 0.93-1.09 (m, 16H), 1.24-1.30 (m, 10H), 1.42-1.46 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.06-2.11 (m, 1H), 2.21-2.32 (m, 2H), 2.56-2.61 (m, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 4.08-4.12 (m, 1H), 4.28 (b, 1H), 4.32 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 4.48-4.53 (m, 1H), 5.12 (d,J= 10.5 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.5 Hz, 1H), 5.72-5.77 (m, 1H), 5.82 (b, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.36 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.60 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.67 (d,J =8.0 Hz, 1H), 8.07 (d,J =8.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.00 min, postupak B), MSm/ z724 (M<+>+H).
Primer35:Izrada Jedinjenja35.
Korak 1:
Smeša 3-hidroksi-izohinolina (725mg, 5.0mmol), cezijum karbonata (4.89g, 15.0mmol), MeJ (781 mg, 5.5mmol) u DMF-u (50mL) je mešana tokom 12 h na temperaturi sredine. Smeša je razblažena sa EtOAc (200ml_), filtrirana, isprana vodom (200ml_,x2) i 1M NaOH (vod.), odnosno slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko MgS04, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo 120mg (15%) željenog proizvoda u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CDCI3) 5 4.03 (s, 3H), 6.99 (s, 1H), 7.36 (t,J =8.0 Hz, 1H), 7.56 (t,J =8.2 Hz, 1H), 7.68 (d,J =8.5 Hz, 1H), 7.87( J =8.5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 0.54 min, postupak B), MSm/ z160 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod, 2-oksid 3-metoksi-izohinolin je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 21, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 3-metoksi-izohinolina.
LC-MS (retenciono vreme: 0.83 min, postupak B), MSm/ z176 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod, 1-hloro-3-metoksi-izohinolin je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 11, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 2-oksida 3-metoksi-izohinolina.
LC-MS (retenciono vreme: 1.62 min, postupak B), MSm/z194 (M<+>+H).
Korak 4:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 1, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 1-hloro-3-metoksi-izohinolina.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.05 (s, 9H), 1.23 (s, 9H), 2.35-2.43 (m, 1H), 2.72-2.79 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 4.01-4.11 (m, 1H), 4.26 (b, 1H), 4.48 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 4.62-4.67 (m, 1H), 5.83 (b, 1H), 6.61 (s, 1H), 7.25 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.54 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.63 (d,J =8.1 Hz, 1H), 8.08 (d,J =8.4 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.82 min, postupak B), MSm/ z502 (M<+>+H).
Korak 5:
Jedinjenje 35 je pripremljeno istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 1, Korak 9 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 35, Korak 4.<1>H NMR (CD3OD) 5 1.04-1.08 (m, 12H), 1.24-1.27 (m, 10H), 1.43-1.45 (m, 1H), 1.86-1.89 (m, 1H), 2.21-2.26 (m, 1H), 2.30-2.34 (m, 1H), 2.62-2.66 (m, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 4.09-4.12 (m, 1H), 4.27-4.28 (m, 1H), 4.46 (d,J =10.0 Hz, 1H), 4.51-4.58 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.30 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.72-5.76 (m, 1H), 5.88 (b, 1H), 6.62 (s, 1H), 7.26 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.55 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.65 (d,J =8.0 Hz, 1H), 8.06 (d,J =8.5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.85 min, postupak B), MSm/ z714 (M<+>+H).
Primer 36: Izrada Jedinjenja 36.
Korak 1:
Smeša 4-metoksi-2-metil-benzojeve kiseline (5.00g, 30.1 mmol) i tionil hlorida (20.Og, 0.17mmol) je zagrevana do refluksa tokom 30 min. Isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo. Posle isisavanja preko noći, viskozni uljasti kiseli hlorid je korišćen u sirovom stanju u sledećoj reakciji bez bilo kakvog prečišćavanja.
U rastvor 4-metoksi-2-metil-benzoil hlorida u CH2CI2(60mL), na 0°C je dodat, kap po kap, dietilamin. Obrazovana smeša je ostavljena da se zagreje do temperature sredine u toku 2 h uz mešanje. Isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo. Ostatak je usitnjen sa EtOAc (100ml_) i filtriran. Filtrat je ispran 1M HCI, 1M NaOH i slanim rastvorom i osušen preko MgS04. Uparavanjem rastvarača je dobijeno 6.51 g (98%) željenog proizvoda u vidu viskoznog ulja.
LC-MS (retenciono vreme: 1.20 min, postupak B), MSm/ z222 (M<+>+H).
Korak 2:
U rastvor N,N-dietil-4-metoksi-2-metil-benzamida (221 mg, I.Ommol) u THF-u (2mL) na - 78°C dodat je, kap po kap, n-BuLi (0.84mL, 2.5M u heksanu, 2.10mmol). Stvoreni narandžasti rastvor je ostavljen na ovoj temperaturi tokom dodatnih 30 min, pre nego što je, kap po kap, dodat benzonitril (103mg, I.Ommol). Konačni rastvor je ostavljen da se zagreje do temperature sredine, preko noći uz mešanje. Ugašen je ledenom 5%-tnom limunskom kiselinom. Filtriran je, ispran vodom i osušen. Usitnjavanjem sa 2:1 heksan/EtOAc (5ml_) dobijeno je 205mg (82%) željenog proizvoda u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (d6-DMSO) 5 3.89 (s, 3H), 6.84 (s, 1H), 7.05-7.07 (m, 1H), 7.18 (d,J= 2.5 Hz, 1H), 7.44-7.51 (m, 3H), 7.78 (d,J =7.0 Hz, 1H), 8.11 (d,J =9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.20 min, postupak B), MSm/ z252 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod 1-hloro-6-metoksi-3-fenil-izohinolin je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 6-metoksi-3-fenil-2H-izohinolin-1 -ona.
<1>H NMR (CDCI3) 5 3.97 (s, 3H), 7.12 (d,J =2.5 Hz, 1H), 7.23-7.26 (m, 1H), 7.40-7.42 (m, 1H), 7.46-7.50 (m, 2H), 7.89 (s, 1H), 8.08 (d,J =7.0 Hz, 2H), 8.21 (d,J =9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.90 min, postupak B), MSm/ z270, 271 (M<+>+H).
Korak 4:
U rastvor proizvoda iz Primera 21, Korak 1 (320mg, 0.57mmol) u DMSO (5mL) dodat je kalijum terc-butoksid (321 mg, 2.87mmol). Obrazovani rastvor je mešan na temperaturi sredine tokom 30 min pre nego što je dodat 1-hloro-6-metoksi-3-fenil-izohinolin (Primer 36, Korak 3)
(155mg, 0.57mmol). Konačni rastvor je mešan tokom 12 h. Ugašen je ledenom vodom, zakiseljen sa 1M HCI do pH 4 i ekstrahovan sa EtOAc (20mL,x2). Organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04, filtrirani i upareni. Ostatak je prečišćen prep-HPLC (40%B do 100%B, 15 min gradijent) da bi se dobilo 289mg (64%) Jedinjenja 36 u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CD3OD) 5 0.95-1.05 (m, 12H), 1.24-1.32 (m, 10H), 1.44-1.46 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.20-2.26 (m, 1H), 2.30-2.36 (m, 1H), 2.65-2.71 (m, 1H), 2.93-2.97 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 4.12-4.28 (m, 2H), 4.38-4.52 (m, 2H), 5.12 (d,J =10.0 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.0 Hz, 1H), 5.69-5.74 (m, 1H), 6.05 (b, 1H), 7.06-7.07 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.37-7.39 (m, 1H), 7.44-7.48 (m, 2H), 7.77 (s, 1H), 8.07 (d,J =9.0 Hz, 1H), 8.15 (d,J =8.5 Hz, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.02 min, postupak B), MSm/ z790 (M<+>+H).
Primer37:Izrada Jedinjenja37.
Korak 1:
U rastvor N,N-dietil-4-metoksi-2-metil-benzamida (633mg, 2.9mmol) u THF-u (15ml_) na -78°C, dodat je, kap po kap, n-BuLi (2.3mL, 2.5M u heksanu, 5.74mmol). Stvoreni crveni rastvor je ostavljen na ovoj temperaturi tokom dodatnih 30 min pre nego što je, preko kanile, ukapan u etil estar tiazol-2-karboksilne kiseline (A. Medici et al, Tetrahedron Lett. 1983, p2901) (450mg, 2.9mmol) u THF-u (5ml_) na -78°C. Konačni tamnozeleni rastvor je čuvan na ovoj temperaturi tokom 2 h uz mešanje. Ugašen je zasićenim NH4CI (vod.) i ekstrahovan sa EtOAc (50ml_). Organski sloj je ispran zasićenim NH4CI (vod) i slanim rastvorom, osušen i prečišćen flash hromatografijom na koloni uz eluaciju 2:1 EtOAc:heksan da bi se dobilo 405mg (45%) željenog proizvoda u vidu zatvoreno-belog viskoznog ulja.<1>H NMR (CDCI3) 5 1.08 (t,J =7.0 Hz, 6H), 3.22 (b, 2H), 3.44 (b, 2H), 3.79 (s, 3H), 4.59 (s, 2H), 6.79-6.81 (m, 1H), 6.86 (d,J= 2.5 Hz, 1H), 7.16 (d,J =8.5 Hz, 1H), 7.66 (d,J= 3.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 3.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.30 min, postupak B), MSm/ z333 (M<+>+H).
Korak 2:
Smeša N,N-dietil-4-metoksi-2-(2-okso-2-tiazol-2-il-etil)-benzamida (405mg, 1.22mmol) i NH4OAc (3.0g, 38.9mmol) je zagrevana do 140°C u zapečaćenoj epruveti tokom 1 h. Rastopljeni rastvor je uliven u ledenu vodu i filtriran, a grudva je temeljno isprana vodom. Osušena smeđa čvrsta masa (240mg, 76%) je korišćena u sirovom stanju u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.
LC-MS (retenciono vreme: 1.24 min, postupak B), MSm/ z259 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod 1-hloro-6-metoksi-3-tiazol-2-il-izohinolin je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 11, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 6-metoksi-3-tiazol-2-il-2H-izohinolin-1-ona.<1>H NMR (CDCI3) 5 3.97 (s, 3H), 7.16 (d,J=4.0 Hz, 1H), 7.27-7.31 (m, 1H), 7.46 (d,J =5.0 Hz, 1H), 7.93 (d,J= 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d,J =15.5 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.66 min, postupak B), MSm/ z277 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 37 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisano u Primeru 36, Korak 4, s izuzetkom korišćenja 1-hloro-6-metoksi-3-tiazol-2-il-izohinolina.<1>H NMR (CD3OD) 5 0.97-1.09 (m, 12H), 1.24-1.29 (m, 10H), 1.44-1.46 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.20-2.26 (m, 1H), 2.30-2.36 (m, 1H), 2.65-2.71 (m, 1H), 2.93-2.96 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 4.12-4.27 (m, 2H), 4.38-4.52 (m, 2H), 5.12 (d,J= 10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.5 Hz, 1H), 5.69-5.74 (m, 1H), 5.99 (b, 1H), 7.14 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.66 (d,J =3.5 Hz, 1H), 7.93 (d,J =3.0 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 8.11 (d,J =9.0 Hz, 1H), 9.14 (b, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.89 min, postupak B), MSm/ z797 (M<+>+H).
Primer 38: Izrada Jedinjenja 38.
Korak 1:
Smeša metil estra 3-hidroksi-izoksazol-5-karboksilne kiseline (5.72g, 0.04mol), metil jodida (6.82g, 0.044mol) i cezijum karbonata (39.1g, 0.12mol) u DMF-u (200mL) je mešana na temperaturi sredine preko noći. Razblažena je sa EtOAc (1L) i filtrirana. Filtrat je ispran vodom (1L,x2) i 1M NaOH, odnosno slanim rastvorom, osušen preko MgS04i uparen in vacuo da bi se dobilo 4.80g (76%) željenog proizvoda u vidu bele čvrste mase. Ovde dobijeni proizvod je korišćen kao sirov, bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (CDCI3) 8 3.92 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 6.51 (s, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 0.69 min, postupak B), MSm/ z158 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod, N,N-dietil-4-metoksi-2-Š2-(3-metoksi-izoksazol-5-il)-2-okso-etilĆ-benzamid je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 37, Korak 1, s izuzetkom korišćenja metil estra 3-metoksi-izoksazol-5-karboksilne kiseline.
LC-MS (retenciono vreme: 1.28 min, postupak B), MSm/ z347 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod 6-metoksi-3-(3-metoksi-izoksazol-5-il)-2H-izohinolin-1-on je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 37, Korak 2, s izuzetkom korišćenja N,N-dietil-4-metoksi-2-Š2-(3-metoksi-izoksazol-5-il)-2-okso-etilĆ-benzamida.<1>H NMR (DMSO-d6) 8 3.89 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 7.01 (s, 1H), 7.14-7.16 (m, 2H), 7.43 (s, 1H), 8.13 (d,J =8.5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.31 min, postupak B), MSm/ z273 (M<+>+H).
Korak 4:
Ovaj proizvod, 1-hloro-6-metoksi-3-(3-metoksi-izoksazol-5-il)-izohinolin je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 11, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 6-metoksi-3-(3-metoksi-izoksazol-5-il)-2H-izohinolin-1-ona.<1>H NMR (CDCI3) 8 3.97 (s, 3H), 4.04 (s, 3H), 6.60 (s, 1H), 7.17 (d,J =2.5 Hz, 1H), 7.31-7.33 (m, 1H), 8.02 (s, 1H), 8.23 (d,J =9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.73 min, postupak B), MSm/ z291, 293 (M<+>+H).
Korak 5:
Jedinjenje 38 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisano u Primeru 36, Korak 4, s izuzetkom korišćenja 1-hloro-6-metoksi-3-(3-metoksi-izoksazol-5-il)-izohinolina.<1>H NMR
(CD3OD) 5 0.99-1.09 (m, 12H), 1.23-1.28 (m, 10H), 1.44-1.46 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.20-2.26 (m, 1H), 2.30-2.36 fm, 1H), 2.65-2.71 (m, 1H), 2.93-2.96 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 4.02 (s, 3H), 4.13-4.14 (m, 1H), 4.24-4.26 (m, 1H), 4.41-4.42 (m, 1H), 4.52-4.55 (m, 1H), 5.12 (d,J=10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.0 Hz, 1H), 5.72-5.79 (m, 1H), 5.96 (b, 1H), 6.60 (s, 1H), 7.15-7.17 (m, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 8.10 (d, J = 9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.95 min, postupak B), MSm/ z811 (M<+>+H).
Primer 39: Izrada Jedinjenja 39.
Korak 1:
Ovaj proizvod, N,N-dietil-4-metoksi-2-Š2-(5-metoksi-izoksazol-2-il)-2-okso-etilĆ-benzamid je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 37, Korak 1, s izuzetkom korišćenja etil estra 5-metoksi-oksazol-2-karboksilne kiseline.
LC-MS (retenciono vreme: 1.24 min, postupak B), MSm/ z347 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod, 6-metoksi-3-(5-metoksi-oksazol-2-il)-2H-izohinolin-1-on je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 37, Korak 2, s izuzetkom korišćenja N,N-dietil-4-metoksi-2-Š2-(5-metoksi-oksazol-2-il)-2-okso-etilĆ-benzamida.<1>H NMR (DMSO-dB) 5 3.94 (s, 3H), 4.01 (s, 3H), 6.34 (s, 1H), 6.99 (d,J =2.0 Hz, 1H), 7.12-7.14 (m, 1H), 7.25 (s, 1H), 8.32 (d,J =9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.22 min, postupak B), MSm/ z274 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod, 1-hloro-6-metoksi-3-(5-metoksi-oksazol-2-il)-izohinolin je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 11, Korak 2 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja 6-metoksi-3-(5-metoksi-oksazol-2-il)-2H-izohinolin-1-ona.<1>H NMR (CDCI3) 5 3.96 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 6.34 (s, 1H), 7.12 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.28-7.31 (m, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.23 (d,J =9.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.58 min, postupak B), MSm/ z291, 293 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 39 je pripremljeno istim postupkom, kao što je opisano u Primeru 36, Korak 4, s izuzetkom korišćenja 1-hloro-6-metoksi-3-(3-metoksi-izoksazol-5-il)-izohinolina.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.99-1.09 (m, 12H), 1.23-1.28 (m, 10H), 1.44-1.46 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.20-2.26 (m, 1H), 2.30-2.36 (m, 1H), 2.65-2.71 (m, 1H), 2.93-2.96 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 4.02 (s, 3H), 4.13-4.14 (m, 1H), 4.25 (b, 1H), 4.41-4.42 (m, 1H), 4.52-4.55 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.0 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.0 Hz, 1H), 5.72-5.79 (m, 1H), 6.07 (b, 1H), 6.45 (s, 1H), 7.15-7.16 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.10 (d,J =9.0 Hz, 1H), 9.11 (b, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.75 min, postupak B), MSm/ z811 (M<+>+H).
Primer40:Izrada Jedinjenja40.
Korak 1:
Ovaj proizvod, 2-oksid 1-hloro-6-metoksi-izohinolina je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 21, Korak 2, s izuzetkom korišćenja 1-hloro-6-metoksi-izohinolina (Proizvod iz Primera 11, Korak 2).<1>H NMR (CDCI3) 5 4.00 (s, 3H), 7.14 (d,J =2.5 Hz, 1H), 7.41-7.43 (m, 1H), 7.62 (d,J =7.0 Hz, 1H), 8.15 (d,J =9.5 Hz, 1H), 8.36 (d,J= 7.0 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 0.85 min, postupak B), MSm/ z 210(M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod, 1,3-dihloro-6-metoksi-izohinolin je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 11, Korak 2, s izuzetkom korišćenja 2-oksida 1-hloro-6-metoksi-izohinolina.<1>H NMR (CDCI3) 8 3.94 (s, 3H), 6.98 (s, 1H), 7.25-7.26 (m, 1H), 7.52 (s, 1H), 8.16 (d,J =9.5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.54 min, postupak B), MSm/ z228, 230 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisan u Primeru 24, Korak 1 u vidu pene, s izuzetkom korišćenja 1,3-dihloro-6-metoksi-izohinolina.<1>H NMR (CD3OD) 8 1.43, 1.44 (rotameri, 9H), 2.39-2.44 (m, 1H), 2.68-2.72 (m, 1H), 3.80-3.90 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 4.79-4.82 (m, 1H), 5.71 (b, 1H), 7.10-7.14 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.99-8.01 (m, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.79 min, postupak B), MSm/z422 (M<+>+H).
Korak 4:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 11, Korak 4, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 40, Korak 3.
LC-MS (retenciono vreme: 1.83 min, postupak B), MSm/ z635 (M<+>+H).
Korak 5:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 11, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 40, Korak 4. LC-MS (retenciono vreme: 1.36 min, postupak B), MSm/ z535 (M<+>+H).
Korak 6:
Jedinjenje 40 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisano u Primeru 11, Korak 6 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 40, Korak 5.<1>H NMR (CD3OD) § 1.07-1.11 (m, 12H), 1.26-1.30 (m, 10H), 1.46-1.48 (m, 1H), 1.87-1.91 (m, 1H), 2.21-2.34 (m, 2H), 2.62-2.66 (m, 1H), 2.94-2.99 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 4.06-4.11 (m, 1H), 4.26-4.28 (m, 1H), 4.46-4.56 (m, 2H), 5.15 (d,J =10.0 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 17.0 Hz, 1H), 5.72-5.79 (m, 1H), 5.89 (b, 1H), 6.63 (d,J= 9.0 Hz, 1H), 7.08-7.09 (m, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 8.08 (d,J =9.5 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.99 min, postupak B), MSm/ z748 (M<+>+H).
Primer41:Izrada Jedinjenja 41.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 30, Korak 1, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 40, Korak 3.
LC-MS (retenciono vreme: 1.85 min, postupak B), MSm/ z455 (M<+>+H).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 11, Korak 4 u vidu pene, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 41, Korak 1.
LC-MS (retenciono vreme: 1.88 min, postupak B), MSm/ z667 (M<+>+H).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom, kao što je opisan u Primeru 11, Korak 5 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 41, Korak 2.
LC-MS (retenciono vreme: 1.38 min, postupak B), MSm/ z567 (M<+>+H).
Korak 4:
Jedinjenje 41 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisano u Primeru 11, Korak 6 u vidu bele čvrste mase, s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 41, Korak 3.<1>H NMR (CD3OD) 8 0.99-1.04 (m, 12H), 1.22-1.31 (m, 10H), 1.43-1.45 (m, 1H), 1.87-1.89 (m, 1H), 2.22-2.24 (m, 1H), 2.30-2.34 (m, 1H), 2.65-2.68 (m, 1H), 2.93-2.96 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.11-4.14 (m, 1H), 4.28-4.30 (m, 1H), 4.38-4.42 (m, 1H), 4.53-4.55 (m, 1H), 5.12 (d,J=10.0 Hz, 1H), 5.29 (d,J =18.0 Hz, 1H), 5.72-5.77 (m, 1H), 5.99 (b, 1H), 6.61 (d,J =5.0 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.99-7.02 (m, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.57 (d,J =5.0 Hz, 1H), 8.03 (d,J =10.0 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.92 min, postupak B), MSm/ z780 (M<+>+H).
Primer 42: Izrada 42.
Pripremljeno je sledeći proceduru, korišćenu za izradu Primera 11, Jedinjenja 11, s izuzetkom što je umesto 6-metoksicinamske kiseline, kao polazni materijal za P2 element korišćena 6-etoksi cinamska kiselina.
<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) 5 ppm 0.98-1.09 (m, 15H), 1.24-1.31 (m, 10H), 1.42-1.46 (m, 1H), 1.85-1.90 (m, 1H), 2.19-2.32 (m, 2H), 2.57-2.63 (m, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 4.03-4.09 (m, 1H), 4.17 (q,J =7.0 Hz, 2H), 4.42 (d,J =11.3 Hz, 1H), 4.49-4.54 (m, 1H), 5.12 (d,J =17.4 Hz, 1H), 5.72-5.78 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.07-7.10 (M, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.22 (d,J=5.8 Hz, 1H), 7.87 (d,J =5.8 Hz, 1H), 8.08 (d,J =8.8 Hz, 1H);
MS: (M+H)<+>728.
DEO C:
Primer 45: Izrada Jedinjenja 45.
Korak 1:
U rastvor 2-bromo-5-metoksi benzojeve kiseline (1.68g, 7.27mmol) u DMF-u (50mL) u balonu pod srednjim pritiskom (Chemglass) dodat je benzamidin (1.25g, 8.00mmol), K2C03(6.0g, 43.6mmol) i prašak bakra (336mg, 1.45mmol). Reakciona smeša je zagrevana tokom 1 h do 180°C. Bakar i višak K2C03su odstranjeni vakuumskom filtracijom i isprani sa MeOH. Filtrat je ukoncentrisan a nastala sirova masa je prečišćena flash hromatografijom na koloni (Si02, 5% MeOH u DCM) da bi se dobila svetlozelena čvrsta masa (1.55g, 84% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) 5 3.84 (s, 3H), 7.26 (d,J =7.8 Hz, 1H), 7.46 (br s, 5H), 7.57 (s, 1H), 8.38 (br s, 1H); MSm/ z(MH<+>) 253.
Korak 2:
U žitku masu Boc-c/s-hidroksiprolin-OMe (2.0g, 8.15mmol) na 0°C i proizvoda iz Primera 45, Korak 1 (2.26g, 8.97mmol) u THF-u (82ml_) dodati su Ph3P i dizopropil azokarboksilat
(1.98g, 8.97mmol). Posle mešanja na rt tokom 17 h reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (100mL) i isprana sa HzO (50mL). Vodeni sloj je odvojen i ponovo ekstrahovan sa EtOAc (2x50mL). Sjedinjeni organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko MgS04i ukoncentrisan da bi se dobilo viskozno ulje koje je rastvoreno u minimalnoj količini EtOAc i dodati su heksani da bi se izazvalo taloženje najvećeg dela Ph3PO, nuzprodukta. Ph3PO je odstranjen vakuumskom filtracijom, a tečni filtrat je ukoncentrisan. Nastalo viskozno ulje je prečišćeno flash hromatografijom na koloni (Si02, 4:1 heks : EtOAc) da bi se dobio proizvod kao bela čvrsta masa (1.76g, 45% prinos):<1>H NMR (60/40 rotameri, CDCI3) 8 1.47 (s, 9H), 2.49-2.55 (m, 1H), 2.73-2.83 (m, 1H), 3.80 (s, 1.8H), 3.81 (s, 1.2H), 3.96 (s, 3H), 4.03-4.09 (m, 1H), 4.54 (t,J =8.0 Hz, 0.6H), 4.66 (t,J =7.8 Hz), 4.96-5.06 (m, 1H), 5.97 (br s, 0.6H), 6.04 (br s, 0.4H), 7.33 (dd,J =6.1, 2.7 Hz, 1H), 7.46-7.51 (m, 4H), 7.91 (d,J= 9.2 Hz, 1H), 8.49 (t,J =8.5 Hz, 2H);<13>C NMR (rotameri, CDCI3) 5 21.7, 22.0, 28.3, 28.4, 35.8, 36.8, 52.3, 52.4, 52.6, 55.8, 55.9, 57.9, 58.3, 74.5, 74.9, 80.6, 101.2, 101.3, 115.7, 125.8, 126.0, 128.1, 128.5, 129.7, 130.2, 137.9, 147.8, 153.8, 157.7, 158.0, 158.0, 164.8, 173.1, 173.3: MSm/ z (MH+)480.
Korak 3:
Proizvod iz Primera 45, Korak 2 (760.0mg, 1.59mmol) je rastvoren u 50% TFA u DCM i mešan je na rt tokom 2 h. Rastvarač je ukoncentrisan, a nastalo smeđe viskozno ulje je osušenoin vacuopreko noći. Proizvod je direktno korišćen u sledećoj reakciji.
Korak 4:
U rastvor smeđeg viskoznog ulja, proizvoda iz Primera 45, Korak 3 (963mg, 1.59mmol) i DIPEA (1.23g, 9.54mmol) u DCM (11 mL) dodati su: A/-BOCL-tBuGly (440mg, 1.90mmol), HBTU (902mg, 2.38mmol) i HOBt (364mg, 2.38mmol). Posle mešanja na rt tokom 14 h rastvarač i višak DIPEA su ukoncentrisani, a nastalo smeđe viskozno ulje je prečišćeno na flash koloni (SiOz, 4:1 heks:EtOAc) da bi se dobila bela čvrsta masa (0.922mg, 98% prinos tokom dva koraka):<1>H NMR (CDCL/MeOD) 5 0.94 (s, 9H), 1.15 (s, 9H), 2.38-2.42 (m, 1H), 2.60-2.73 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 4.08-4.17 (m, 2H), 4.25 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.69 (t,J =8.0 Hz, 1H), 5.99 (br s, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.38 (s, 5H), 7.80 (d,J= 9.0 Hz, 1H), 8.32 (d,J =5.5 Hz, 1H);<13>C NMR (CDCL/MeOD) 5 29.6, 31.4, 31.6, 33.04, 38.2, 39.0, 55.8, 56.9, 59.2, 61.5, 62.1, 78.3, 83.1, 105.0, 119.0, 129.4, 131.5, 131.9, 132.6, 133.8, 141.2, 151.0, 161.4, 161.6, 168.2, 175.2, 175.7: MSm/ z(MH<+>) 593.
Korak 5:
U rastvor proizvoda iz Primera 45, Korak 4 (409mg, 0.69mmol) u THF-u (10mL) dodat je 1N NaOH (2mL). Posle mešanja na rt tokom 19 h reakciona smeša je zakiseljena koncentrovanom HCI do oko pH 5 i ekstrahovana je sa DCM (3x50mL). Sjedinjeni organski sloj je osušen preko MgS04i ukoncentrisan da bi se dobio proizvod u vidu žute čvrste mase (370mg, 92% prinos), koji je direktno korišćen u sledećoj reakciji posle sušenjain vacuo:<1>H NMR (CDCI3) 5 1.05 (s, 9H), 1.25 (s, 9H), 2.76-2.83 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 4.23-4.27 (m, 2H), 4.41 (d,J =11.6 Hz, 1H), 4.92 (t,J =7.6 Hz, 1H), 5.20 (d,J =8.9 Hz, 1H), 6.08 (br s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.46-7.50 (m, 5H), 7.93 (d,J =9.15 Hz, 1H), 8.51 (d,J =7.3 Hz, 2H); MSm/ z(MH<+>) 579.
Korak 6:
U rastvor /V-Boc-vinilciklopropankarboksilne kiseline (1R,2S/~\ S, 2R1:1 smeša) (1.01g, 4.46mmol) u THF-u (20mL) i DMSO (2mL) dodati su CDI (1.08g, 6.69mmol) i DMAP (817mg, 6.69mmol). Posle mešanja na 70°C tokom 1 h reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature i obrađena je sa izopropilsulfonamidom (1.1 g, 8.92mmol) i DBU (1.36g, 8.92mmol). Reakciona smeša je mešana na rt tokom 16 h a zatim je ukoncentrisana i prečišćena flash hromatografijom na koloni (Si02, 5% MeOH u DCM) da bi se dobilo smeđe viskozno ulje (1.4g, 98% prinos):<1>H NMR (metanol-d4) 5 1.25 (m, 1H), 1.33 (d,J =6.7 Hz, 3H), 1.36 (d,J= 6.7 Hz, 3H) 1.45 (s, 9H), 1.84 (dd,J =7.6, 5.2 Hz, 1H), 2.16 (d,J= 7.6 Hz, 1H), 3.58 (br s, 1H), 5.08 (d,J =11.6 Hz, 1H), 5.27 (d,J =15.6 Hz, 1H), 5.58-5.66 (m, 1H); MSm/ z(MH<+>) 332.
Korak 7:
Proizvod iz Primera 45, Korak 6 (113mg, 0.34mmol) je obrađen 50%-tnim rastvorom trifluorosirćetne kiseline u DCM (10mL) i mešan je na rt tokom 1.4 h. Rastvarač i višak trifluorosirćetne kiseline su uklonjeniin vacuo.Nastalo smeđe viskozno ulje je osušenoin vacuo(1.3g, 99% prinos) i korišćeno je bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (DMSO-d6) 8 1.24 (d,J =6.7 Hz, 3H), 1.26 (d,J =6.7 Hz, 3H) 1.54 (dd,J =9.6, 6.6 Hz, 1H), 1.99 (t,J =6.9 Hz, 1H), 2.24
(d,J =8.5 Hz, 1H), 3.58-3.63 (m, 1H), 5.18 (d,J =10.4 Hz, 1H), 5.33 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.61-5.69 (m, 1H), 8.83 (br s, 3H);<13>C NMR (DMSO-d6): 5 15.2, 15.9, 16.5, 29.9, 41.6, 52.1, 116.0, 118.9, 132.0, 158.2, 167.3; MSm/ z(MH<+>) 233.
Korak 8:
U smešu proizvoda iz Primera 45, Korak 5 (117mg, 0.338mmol) i DIPEA (174mg, 1.35mmol) u DCM (5mL) dodati su: HBTU (128mg, 0.338mmol), HOBt (52mg, 0.338mmo!) i proizvod iz Primera 45, Korak 7 (130mg, 0.225mmol). Posle mešanja na rt tokom 16 h smeša je ukoncentrisana, a nastalo smeđe viskozno ulje je prečišćeno flash hromatografijom na koloni (Si02, 1:3 heks:EtOAc, a zatim, 95:5 DCM:MeOH) da bi se dobio proizvod u vidu zatvorenobele čvrste mase (150mg, 84% prinos). Konačni proizvod, Jedinjenje 45, jeste smeša izomera; varijacija postoji na P1 vinilciklopropilnom delu molekula (1 fl,2S/1 S.2F? 1:1 smeša):<1>H NMR (metanol-d4) 8 0.92 (br s, 2H), 1.03 (s, 9H), 1.17 (s, 9H), 1.27-1.38 (m, 9H), 1.42-1.46 (m, 1H), 1.83 (dd,J =8.1, 5.3 Hz, 0.4H), 1.90 (dd,J =7.9, 5.5 Hz, 0.6H), 2.24-2.31 (m, 1H), 2.37-2.45 (m, 1H), 2.67-2.75 (m, 1H), 3.73-3.79 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 4.21 (dd,J= 9.3, 6.0 Hz, 2H), 4.48 (d,J =11.3 Hz, 1H), 4.61 (q,J =8.9 Hz, 1H), 5.14 (t,J =9.0 Hz, 1H), 5.33 (t,J =17.9 Hz, 1H), 5.70-5.76 (m, 1H), 6.06 (d,J= 11.9 Hz, 1H), 6.61 (d,J =8.9 Hz, 1H), 7.34 (d,J =2.8 Hz, 1H), 7.49 (br s, 5H), 7.87 (d,J =8.9 Hz, 1H), 8.46 (d,J =4.3 Hz, 2H);<13>C NMR (metanol-d4): 8 15.7, 16.1, 16.5, 16.8, 23.9, 27.1, 28.6, 35.8, 36.0, 36.2, 36.3, 36.4, 42.6, 42.8, 54.7, 54.8, 55.5, 56.4, 61.1, 61.2, 80.5, 102.9, 117.0, 118.8, 118.9, 126.8, 129.4, 129.6, 130.2, 131.5, 134.4, 139.2, 148.8, 158.0, 159.3, 159.8, 166.3, 171.1, 175.1, 184.3; MSm/ z(MH<+>) 793.
Primer 46: Izrada Jedinjenja 46.
Jedinjenje 46 je pripremljeno sledeći Korake 1 do 5 i Korak 8 iz Primera 45 osim što su napravljene sledeće modifikacije:
Korak 1:
Modifikacije: 2-bromo-4,5-dimetoksibenzojeva kiselina i ciklopropilkarbamidin hidrohlorid su upotrebljeni kao polazni materijali.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (DMSO-d6) § 0.97-1.01 (m, 2H), 1.03-1.06 (m, 2H), 1.90-1.94 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 6.93 (s, 1H), 7.37 (s, 3H), 12.28 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO-d6): 8 9.03, 13.17, 55.47, 55.73, 104.81, 107.27, 113.26, 145.16, 147.48, 154.44, 157.21, 160.89; MSm/ z(MH<+>) 247.
Korak 2:
Modifikacije: proizvod iz Primera 46, Korak 1 je upotrebljen kao polazni materijal, umesto proizvoda iz Primera 45, Korak 1.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (CDCI3) 8 1.00-1.04 (m, 2H), 1.07-1.11 (m, 2H), 1.43 (s, 5.4H), 1.46 (s, 3.6H), 2.17-2.21 (m, 1H), 2.37-2.43 (m, 1H), 2.62-2.69 (m, 1H), 3.75 (s, 1.8H), 3.78 (s, 1.2H), 3.92 (d,J =2.8 Hz, 1H), 4.00 (s, 3.6H), 4.01 (s, 2.4H), 4.48 (t,J =8.0 Hz, 0.6H), 4.59 (t,J =7.6 Hz, 0.4H), 5.7 (br s, 0.6H), 5.74 (br s, 0.4H), 7.18 (s, 1H), 7.20 (s, 1H);<13>C NMR (CDCI3): 8 9.6, 9.7, 18.1, 28.3, 28.4, 35.8, 36.7, 52.2, 52.4, 56.3, 57.8, 58.2, 74.0, 74.5, 80.5, 80.6, 101.0, 101.1, 106.3, 108.6, 148.8, 149.1, 153.8, 155.4, 164.4, 165.9, 172.9, 173.2; LC-MSm/ z(MH<+>) 474.
Koraci 3 i 4:
Proizvod iz Primera 46, Korak 2 je upotrebljen kao polazni materijal, umesto proizvoda iz Primera 45, Korak 2.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (metanol-d4) 5 1.04 (s, 9H), 1.08-1.21 (m, 4H), 1.14 (s, 9H), 2.17-2.21 (m, 1H), 2.39-2.41 (m, 1H), 2.74-2.77 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 3.98 (m, 3H), 4.09 (dd,J =11.4, 3.8 Hz, 1H), 4.17 (d,J= 8.9 Hz, 1H), 4.42 (d,J =11.3 Hz, 1H), 4.76 (t,J =8.2 Hz, 1H), 5.81 (br s, 1H), 6.43 (d,J =8.6 Hz, 1H), 7.14 (d,J =6.1 Hz, 1H), 7.27 (d,J =5.8 Hz,1H);<13>C NMR (metanol-d4): 5 10.0, 10.3, 18.6, 26.9, 28.5, 28.8, 35.8, 36.1, 38.9, 52.8, 54.9, 56.7, 59.6, 60.5, 76.6, 80.4, 102.7, 106.2, 109.9, 149.8, 150.7, 157.6, 166.0, 167.3, 173.5, 173.6; MSm/ z(MH<+>) 587.
Korak 5:
Proizvod iz Primera 46, Korak 4 je upotrebljen kao polazni materijal, umesto proizvoda iz Primera 45, Korak 4.
Proizvod:
Podaci: 1H NMR (metanol-d4) S 1.03 (s, 9H), 1.13 (s, 9H), 1.20-1.23 (m, 4H), 2.15-2.19 (m, 1H), 2.40-2.45 (m, 1H), 2.70-2.76 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 4.08 (dd,J =11.4, 3.8 Hz, 1H), 4.17 (d,J= 5.8 Hz, 1H), 4.37 (d,J= 11.3 Hz, 1H), 4.71 (t,J =8.1 Hz, 1H), 5.77 (br s, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.20 (s, 1H);<13>C NMR (metanol-d4) 8 10.2, 10.5, 18.6, 26.9, 28.5, 28.8, 36.0, 36.3, 54.9, 56.8, 59.7, 60.4, 76.8, 80.4, 102.6, 105.9, 109.9, 126.9, 127.9, 149.3, 150.8, 157.65, 157.8, 166.1, 167.3, 173.3, 175.1; MSm/ z(MhT) 573.
Korak 8:
Proizvod iz Primera 46, Korak 5 je upotrebljen kao polazni materijal, umesto proizvoda iz Primera 45, Korak 5. Konačni proizvod, Jedinjenje 46, je smeša izomera; varijacije postoje na P1 vinilciklopropilnom delu molekula(1 F?,2S/1 S, 2R1:1 mešavina).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (metanokLJ 5 1.03 (s, 9H), 1.05-1.09 (m, 4H), 1.16 (s, 4.5H), 1.17 (s, 4.5H), 1.19-1.22 (m, 1H), 1.31 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 1.33-1.38 (m, 7H), 1.18-1.89 (m, 1H), 2.15-2.20 (m, 2H), 2.35-2.44 (m, 1H), 3.23 (q,J= 7.4 Hz, 1H), 3.70-3.75 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 4.08-4.13 (m, 2H), 4.16 (dd,J =8.9, 3.1 Hz, 1H), 4.38 (t,J =13.1 Hz, 1H), 4.58-4.62 (m, 1H), 4.06 (m, 1H), 5.29 (t,J= 15.2 Hz, 1H), 5.83 (br s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.27 (d,J =4.3 Hz, 1H); MSm/ z(MH<+>) 787.
Primer 47: Izrada Jedinjenja 47.
Jedinjenje 47 je pripremljeno sledeći analogne korake, koji su upotrebljeni da bi se dobilo Jedinjenje 45 iz Primera 45. Orto-bromobenzojeva kiselina, koja je upotrebljena kao polazni materijal bila je hidrohloridna so (1R-amino-2S-vinilciklopropankarbonil)-amida ciklopropan-sulfonske kiseline. Jedinjenje 47: MH+ = 761.
Primer 48: Izrada Jedinjenja 48.
Jedinjenje 48 je pripremljeno sledeći Korake 1 do 5 i Korak 8 iz Primera 45, s izuzetkom sledećih modifikacija koje su urađene:
Korak 1:
Modifikacije: kao polazni materijali su upotrebljeni acetamidin hidrohlorid i 2-bromo-5-metoksibenzojeva kiselina.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (DMSO) 8 2.31 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 7.36 (d,J =6.2 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.51 (d,J =7.8 Hz, 1H), 12.15 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO) 5 21.11, 55.41, 105.57, 121.22, 123.59, 128.12, 143.34, 151.68, 157.00, 161.45; LC-MS m/e (MH<+>) 191.
Korak 2:
Modifikacije: Proizvod iz Primera 48, Korak 1 je korišćen kao polazni materijal umesto proizvoda iz Primera 45, Korak 1.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (CDCI3) 5 1.43 (s, 5.4H), 1.45 (s, 3.6H), 2.38-2.45 (m, 1H), 2.62-2.71 (m, 1H), 2.66 (S, 1.8H), 2.68 (s, 1.2H), 3.77 (1.8H), 3.79 (s, 1.2H), 3.92 (s, 3H), 3.93-3.98 (m, 2H), 4.49 (t,J =8.0 Hz, 0.6H), 4.61 (t,J =7.8 Hz, 0.4H), 5.82 (t,J= 2.1 Hz, 0.6H), 5.89 (t,J =2.3 Hz, 0.4H), 7.26 (dd, J = 4.7, 3.2 Hz, 1H), 7.42 (dd,J =6.3, 2.8 Hz, 1H), 7.75 (d,J =9.15 Hz, 1H);<13>C NMR (CDCI3) 5 26.1, 28.3, 28.4, 35.8, 36.7, 52.2, 52.2, 52.4, 52.5, 55.755.8, 57.9, 58.2, 74.1, 74.7, 80.6, 101.0, 101.2, 114.9, 125.6, 125.9, 128.6, 147.3, 153.8, 154.5, 157.6, 157.6, 161.2, 164.6, 173.0, 173.3; LC-MS m/e (MH<+>) 418.
Koraci 3 i 4:
Modifikacije: Proizvod iz Primera 48, Korak 2 je upotrebljen kao polazni materijal umesto proizvoda iz Primera 45, Korak 2.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (MeOD) 5 1.03 (s, 9H), 1.07 (s, 9H), 2.38-2.42 (m, 1H), 2.68 (s, 3H), 2.80 (q,J= 7.8 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 4.07 (dd,J =11.9, 3.4 Hz, 1H), 4.13 (br s, 1H), 4.55 (d,J =12.2 Hz, 1H), 4.78 (t,J =8.7 Hz, 1H), 5.93 (s, 1H), 7.37 (d, J = 2.75 Hz, 1H), 7.48-7.51 (m, 2H), 7.70 (d,J =5.7 Hz, 1H);<13>C NMR (MeOD) 8 25.6, 26.9, 28.4, 28.8, 35.9, 52.8, 55.0, 56.4, 59.7, 60.6, 77.2, 80.4, 102.9, 111.6, 116.5, 127.0, 128.4, 147.5, 162.7, 166.4, 173.6; LC-MS m/e (MH<+>) 531.
Korak 5:
Modifikacije: Proizvod iz Primera 48, Korak 4 je upotrebljen kao polazni materijal umesto proizvoda iz Primera 45, Korak 4.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (MeOD) 8 1.03 (s, 9H), 1.08 (s, 9H), 2.41-2.46 (m, 1H), 2.68 (s, 3H), 2.81 (q,J =8.1 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 4.07 (dd,J =11.8, 3.2 Hz, 1H), 4.18 (d,J =5.5 Hz, 1H), 4.52 (d,J= 11.9 Hz, 1H), 4.74 (t,J =8.7 Hz, 1H), 5.93 (br s, 1H), 7.37 (d,J =2.81 Hz, 1H), 7.49 (dd,J =9.2, 2.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 9.2 Hz, 1H);<13>C NMR (MeOD) 8 25.7, 26.9, 28.5, 36.1, 55.0, 56.4, 59.7, 60.5, 77.1, 80.4, 103.0, 116.5, 127.0, 128.5, 147.7, 157.8, 159.6, 162.7, 166.4, 173.5, 174.9; LC-MS m/e (MH<+>) 517.
Primer48: Izrada Jedinjenja 48
Korak 8:
U rastvor proizvoda iz Primera 48, Korak 5 (45.8mg, 0.089mmol), hidrohloridne soli (1R-amino-2S-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline (21.0mg, 0.089mmol) i DIEA (34.5mg, 0.267mmol) u DCM (1ml_), dodat je HATU (44.0mg, 0.116mmol). Posle mešanja na rt preko noći, reakciona smeša je isprana sa 5%-tnim vodenim NaHC03(1mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa 2x2ml_ DCM. Organski sloj je ispran sa 5%-tnom vodenom limunskom kiselinom (1ml_), slanim rastvorom, osušen je preko MgS04, ukoncentrisan i prečišćen reverznom prep-HPLC. Ovaj korak prečišćavanja dovodi do gubitka N-BOC zaštitne grupe na P3 ferc-leucinskom delu molekula:<1>H NMR (MeOD) § 1.07-1.12 (m, 2H), 1.14 (s, 2H), 1.14-1.16 (m, 2H), 1.17 (s, 9H), 1.20-1.30 (m, 3H), 1.45 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.56 (s, 1H), 1.92 (dd,J =8.20, 5.60 Hz, 1H), 2.25-2.31 (m, 1H), 2.39-2.45 (m, 1H), 2.73 (m, 1H), 2.76 (s, 3H), 2.93-2.97 (m, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 4.07 (s, 1H), 4.21 (d,J =3.97 Hz, 0.4H), 4.23 (d,J= 3.97 Hz, 0.6H), 4.31 (m, 1H), 4.73 (dd,J =10.38, 7.02 Hz, 1H), 5.15 (dd,J= 10.38, 1.52 Hz, 1H), 5.32 (dd, J = 17.1, 1.52 Hz, 1H), 5.71-5.78 (m, 1H), 6.11 (t,J= 3.51 Hz, 1H), 7.46 (d,J =2.75 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 3.06 Hz, 0.4 H), 7.69 (d, J = 3.05 Hz, 0.6H), 7.82 (s, 0.6H), 7.84 (s, 0.4H).
Primer 49: Izrada Jedinjenja 49.
Jedinjenje 49 je pripremljeno istim postupkom, kao što je opisan za izradu Jedinjenja 48, osim što su kao polazni materijal upotrebljeni hidrohloridna so (1 R-amino-2S-vinilciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline i proizvod iz Primera 46, Korak 5. Korak prečišćavanja preparativnom HPLC doveo je do gubitka N-BOC zaštitne grupe na P3terc-leucinskom delu molekula.<1>H NMR (MeOD) 5 1.09 (m, 2H), 1.14 (d, J = 3.97 Hz, 2H), 1.17 (s, 9H), 1.25 (m, 3H), 1.37 (m, 3H), 1.44 (dd,J =9.31, 5.65 Hz, 2H), 1.57 (s, 1H), 1.92 (dd,J =8.09, 5.65 Hz, 1H), 2.28 (dd,J =17.70, 8.55 Hz, 1H), 2.32 (m, 1H), 2.68 (dd,J= 14.19, 7.78 Hz, 1H), 2.95 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 4.06 (s, 3H), 4.08 (s, 1H), 4.22 (d,J= 2.75 Hz, 1H), 4.70 (dd, J = 9.77, 7.32 Hz, 1H), 5.15 (dd,J= 10.38, 1.53 Hz, 1H), 5.32 (dd,J= 17.40, 1.22 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 6.04 (m, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.37 (s, 1H).
Primer 50: Izrada Jedinjenja 50.
Jedinjenje 50 je pripremljeno istim postupkom, kao što je opisan za izradu Jedinjenja 48, osim što su kao polazni materijal upotrebljeni hidrohloridna so (1 R-amino-2S-vinilciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline i proizvod iz Primera 45, Korak 5. Korak prečišćavanja preparativnom HPLC doveo je do gubitka N-BOC zaštitne grupe na P3terc-leucinskom delu molekula:<1>H NMR (MeOD) 5 1.10 (m, 2H), 1.14 (s, 1H), 1.15 (d,J=3.36 Hz, 1H), 1.17 (d,J =3.05 Hz, 9H), 1.22 (m, 1H), 1.27 (m, 2H), 1.46 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.56 (s, 1H), 1.93 (dd,J= 8.24, 5.49 Hz, 1H), 2.29 (q,J =8.55 Hz, 1H), 2.48 (m, 1H), 2.78 (dd,J =13.89, 8.09 Hz, 1H), 2.97 (m, 1H), 3.96 (s, 2H), 4.07 (s, 1H), 4.32 (d,J =2.14 Hz, 2H), 4.76 (d,J =7.02 Hz, 1H), 4.78 (m, 1H), 4.86 (d,J =3.05 Hz, 1H), 5.32 (dd,J= 17.09, 1.22 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 6.24 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.45 (d,J =2.75 Hz, 1H), 7.52 (m, 3H), 7.61 (dd,J =9.16, 2.75 Hz, 1H), 7.96 (d,J =9.16 Hz, 1H).
Primer 51: Izrada Jedinjenja 51.
Jedinjenje 51 je pripremljeno sledeći Korake 1 do 5 i Korak 8 iz Primera 45, s izuzetkom što su urađene sledeće modifikacije:
Korak 1:
Modifikacije: kao polazni materijali su upotrebljeni 2-bromo-4,5-dimetoksibenzojeva kiselina i trifluoroamidin.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (DMSO) 8 3.92 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 7.33 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 13.40 (br s, 1H);<13>C NMR (DMSO) 5 55.8, 56.1, 104.9, 108.7, 150.2, 155.0; LC-MS m/e (MH<+>) 275.
Korak 2:
Modifikacije: proizvod iz Primera 51, Korak 1 je upotrebljen kao polazni materijal, umesto proizvoda iz Primera 45, Korak 1.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (CDCI3) 5 1.42 (s, 3.6H), 1.44 (s, 5.4H), 2.42-2.49 (m, 1H), 2.67-2.73 (m, 1H), 3.37 (s, 1.2H), 3.78 (s, 1.8H), 3.97 (t,J =6.5 Hz, 1H), 4.02 (s, 2.4H), 4.04 (s, 3.6H), 4.48 (t,J= 7.9 Hz, 0.6H), 4.60 (t,J =7.7 Hz, 0.4H), 5.86 (br s, 0.6H), 5.90 (br s, 0.4H), 7.27-7.29 (m, 1H), 7.38-7.44 (m, 1H);<13>C NMR (CDCI3): 5 8.2, 28.3, 35.7, 36.7, 52.1, 52.2, 52.4, 56.5, 57.8, 58.2, 75.5, 76.0, 80.7, 100.8, 107.6, 111.0, 119.7, 148.2, 150.2, 151.4, 153.8, 154.5, 156.4, 165.1, 172.7, 173.0; LC-MS m/e (MH<+>) 502.
Koraci 3 i 4:
Modifikacije: Proizvod iz Primera 51, Korak 2 je upotrebljen kao polazni materijal, umesto proizvoda iz Primera 45, Korak 2.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (MeOD) 5 1.03 (s, 9H), 1.08 (s, 9H), 2.41-2.45 (m, 1H), 2.80-2.84 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 4.10-4.14 (m, 2H), 4.52 (d,J =11.6 Hz, 1H), 4.80 (t,J= 8.7 Hz, 1H), 5.92 (br s, 1H), 7.35 (br s, 2H);<13>C NMR (MeOD): 8 26.9, 28.4, 28.8, 35.7, 36.0, 52.8, 54.8, 56.9, 59.6, 60.7, 77.9, 80.3, 102.2, 107.9, 112.4, 120.3, 149.3, 153.2, 157.8, 158.3, 173.5; LC-MS m/e (MH<+>) 615.
Korak 5:
Modifikacija: Proizvod iz Primera 51, Korak 4 je upotrebljen kao polazni materijal, umesto proizvoda iz Primera 45, Korak 4.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (MeOD) 5 1.03 (s, 9H), 1.09 (s, 9H), 2.44-2.49 (m, 1H), 2.80-2.84 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 4.01 (s, 3H), 4.10-4.24 (m, 3H), 4.50 (d,J =11.9 Hz, 1H), 4.76 (t,J =7.9 Hz, 1H), 5.93 (br s, 1H), 7.36 (br s, 2H); 13C NMR (MeOD): 5 26.9, 28.4, 28.8, 36.0, 36.1, 54.8, 56.9, 57.0, 60.6, 77.9, 80.3, 102.3, 108.0, 112.5, 120.3, 149.3, 151.3, 153.2, 158.2, 158.3, 166.7, 173.5; LC-MS m/e (MH<+>) 601.
Korak 8:
Modifikacija: Proizvod iz Primera 51, Korak 5 je upotrebljen kao polazni materijal, umesto proizvoda iz Primera 45, Korak 5. Konačni proizvod, Jedinjenje 51 je smeša izomera; varijacije postoje na P1 vinilciklopropilnom delu molekula (1 ft,2S/1S,2R 1:1 mešavina).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (DMSO) 5 0.23 (s, 4.5H), 0.23 (s, 4.5H), 0.35 (s, 4.5H), 0.36 (s, 4.5H), 0.45-0.59 (m, 8H), 0.63-0.66 (m, 1H), 1.04 (dd, J = 8.2, 5.2 Hz, 1H), 1.10 (dd, J = 8.2, 5.5 Hz, 1H), 1.47-1.53 (m, 1H), 1.58-1.61 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.95-3.01 (m, 1H), 3.17 (s, 1.5H), 3.18 (s, 1.5H), 3.22 (s, 3H), 3.37 (br s, 2H), 3.68 (q,J =5.9 Hz, 1H), 3.82 (q,J =8.6 Hz, 1H), 4.33-4.37 (m, 1H), 4.54 (t,J =16.5 Hz, 1H), 4.93 (q,J =8.9 Hz, 1H), 5.17 (d,J= 15.9 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.58 (s, 1H);<13>C NMR (DMSO) 5 12.8, 13.2, 13.7, 13.9, 19.5, 20.6, 21.1, 24.3, 25.6, 32.9, 33.1, 33.4, 33.6, 36.1, 39.7, 39.9, 51.8, 51.9, 52.4, 54.0, 54.2, 57.7, 57.7, 58.1, 58.3, 75.1, 75.3, 77.5, 84.1, 99.2, 105.2, 107.9, 109.5, 116.0, 116.1, 118.7, 123.9, 127.4, 131.5, 146.5, 148.6, 150.3, 155.1, 155.5, 163.7, 164.7, 168.2, 168.3, 170.7, 172.2; LC-MS m/e (MH<+>) 815.
Primer 52: Izrada Jedinjenja 52.
Jedinjenje 52 je pripremljeno istim postupkom, kao što je opisan za izradu Jedinjenja 48, osim što su kao polazni materijal upotrebljeni hidrohloridna so (1R-amino-2S-vinilciklopropankarbonil)-amida ciklopropan-sulfonske kiseline i proizvod iz Primera 51, Korak 5. Korak prečišćavanja preparativnom HPLC doveo je do gubitka N-BOC zaštitne grupe na P3terc-leucinskom delu molekula.<1>H NMR (MeOD) 5 1.11 (m, 3H), 1.17 (s, 9H), 1.25 (m, 3H), 1.46 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.92 (dd,J =8.24, 5.49 Hz, 1H), 2.28 (q,J =8.95 Hz, 1H), 2.42 (m, 1H), 2.72 (dd,J =14.19, 7.17 Hz, 1H), 2.96 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 4.04 (m, 5H), 4.24 (m, 2H), 4.73 (dd,J =10.22, 7.17 Hz, 1H), 5.15 (dd,J =10.53, 1.37 Hz, 1H), 5.32 (d,J= 17.09 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 6.07 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.47 (s, 1H).
Primer 53: Izrada Jedinjenja 53.
Korak 1:
U rastvor trifluorosirćetne soli (1ft,2S/1S,2ft 1:1 mešavine) (1-amino-2-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline (626mg, 1.82mmol) u DCM (17mL) dodati su: DIEA (555mg, 4.29mmol) u DCM (17mL), HATU (754mg, 1.98mmol) i (2S,4R)Fmoc-4-amino-1-boc-pirolidin-2-karboksilna kiselina (747mg, 1.65mmol). Posle mešanja na rt tokom 24 h, smeša je isprana sa 1N HCI (10mL), 5%-tnim vodenim NaHC03(4ml_). Svaki vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (25ml_). Sjedinjeni DCM je osušen nad MgS04i ukoncentrisan. Nastalo smeđe viskozno ulje je prečišćeno flash hromatografijom na koloni (SiOz, 95:5 DCM:MeOH) da bi se dobila žuta čvrsta masa (822mg, 75% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) 5 1.04-1.09 (m, 3H), 1.15-1.27 (m, 4H), 1.38-1.44 (m, 7H), 1.47 (s, 9H), 1.84 (dd,J= 8.2, 5.2 Hz, 1H), 2.01-2.30 (m, 4H), 2.90-2.98 (m, 1H), 3.64-3.71 (m, 1H), 4.16-4.22 (m, 4H), 4.39 (bs, 2H), 5.13 (dd,J= 10.7, 0.9 Hz, 1H), 3.31 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.72-5.79 (m, 1H), 7.31 (t,J =7.3 Hz, 3H), 7.38 (t,J =7.5 Hz, 3H), 7.64 (d,J =7.02 Hz, 3H), 7.79 (d,J =7.63 Hz, 3H); LC-MS m/e (Na+MH<+>) 687.
Korak 2:
Proizvod iz Primera 53, Korak 1 (500mg, 0.752mmol) je obrađen sa 50% TFA u DCM (10mL). Posle mešanja na rt tokom 0.5 h stvorena smeđa reakciona smeša je ukoncentrisana da bi se dobila smeđa čvrsta masa (489mg, 84% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) 5 1.03-1.19 (m, 4H), 1.24-1.26 (m, 1H), 1.35 (dd,J =9.5, 5.5 Hz, 1H), 1.91-1.96 (m, 1H), 2.22-2.30 (m, 1H), 2.40 (bs, 1H), 2.93-2.98 (m, 1H), 3.60 (bs, 1H), 4.21 (t,J =5.6 Hz, 2H), 4.47 (bs, 3H), 5.17 (d,J= 9.2 Hz, 1H), 5.32 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.64-5.67 (m, 1H), 7.31 (t,J =7.3 Hz, 3H), 7.39 (t,J =7.5 Hz, 3H), 7.63 (d,J =7.3 Hz, 2H), 7.80 (d,J =7.3 Hz, 2H); LC-MS m/e (MH<+>) 565.
Korak 3: U rastvor proizvoda iz Primera 53, Korak 2 (260mg, 0.383mmol) u DCM (4mL) dodati su DIPEA (218mg, 1.69mmol), HATU (165mg, 0.422mmol) i N-BOC L-tBuGly (100mg, 0.422mmol). Posle mešanja na rt tokom 16 h, reakciona smeša je razblažena sa H20 (3ml_), zakiseljena sa 1N HCI do pH=1. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2x15mL). Sjedinjeni organski sloj je ispran sa 5% NaHC03(3mL) i slanim rastvorom (5mL), osušen preko MgS04i ukoncentrisan. Nastalo smeđe viskozno ulje je prečišćeno flash hromatografijom na koloni (Si02, 95:5 DCM:MeOH) da bi se dobila smeđa penasta čvrsta masa (281 mg, 94% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) 5 0.96-1.08 (m, 4H), 1.05 (s, 9H), 1.15-1.26 (m, 2H), 1.35-1.38 (m, 5H), 1.42 (s, 9H), 1.85 (dd,J= 9.5, 5.5 Hz, 1H), 2.07 (bs, 1H), 2.22 (q,J =8.7 Hz, 1H), 2.92-2.95 (m, 1H), 3.90 (bs, 1H), 4.20 (d,J =6.4 Hz, 3H), 4.29-4.39 (m, 5H), 5.13 (d,J =10.7, 1H), 5.31 (dd,J= 18.0, 5.8 Hz, 1H), 5.70-5.77 (m, 1H), 7.30 (t,J =7.3 Hz, 3H), 7.39 (t,J= 7.3 Hz, 4H), 7.63 (dd,J =6.7, 2.8 Hz, 3H), 8.80 (d,J =7.63 Hz, 3H); LC-MSm/ z(MH<+>) 678.
Korak 4:
Proizvod iz Primera 53, Korak 3 je obrađen sa 10% piperidinom u DMF (3.3mL). Posle mešanja na rt tokom 14 h odstranjen je rastvarač, a stvoreno smeđe viskozno ulje je prečišćeno flash hromatografijom na koloni (Si02, 95:5 DCM:MeOH) da bi se izolovao čisti (1f?,2S P1 dijastereomer sa najvećim Rf) u vidu bledo žute čvrste mase (31 mg). Drugi izomer je izdvojen u smeši i nije korišćen: LC-MSm/ z(MH<+>) 556.
Koraci 5 i 6:
U rastvor proizvoda iz Primera 53, Korak 4 u DMF-u (2ml_) dodat je polivinilpiridin (13mg) i Fmoc-izotiocijanat. Posle mešanja na rt tokom 14 h reakciona smeša je obrađena piperidinom (172mg, 2.02mmol). Reakciona smeša je mešana na rt tokom dodatnih 6 h posle čega je ukoncentrisana i osušena pod vakuumom preko noći. Sirovi ostatak je ponovo rastvoren u DMF-u (2ml_), obrađen sa 2-bromoacetofenonom i mešan na rt tokom dodatnih 14 h. Reakciona smeša je ukoncentrisana, a stvoreni ostatak je prečišćen flash hromatografijom na koloni (Si02, 95:5 DCM:MeOH) da bi se dobilo Jedinjenje 53 u vidu svetio žute čvrste mase (21.9mg, 50% prinos).<1>H NMR (DMSO-d6) 5 0.87-0.92 (m, 1H), 1.05 (bs, 13H), 1.16-1.25 (m, 4H), 1.34-1.38 (m, 2H), 1.42 (s, 9H), 1.87 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 2.22-2.25 (m, 2H), 2.48 (t,J= 10.7 Hz, 1H), 2.93 (bs, 1H), 3.04 (q,J =7.3 Hz, 1H), 3.30-3.31 (m, 2H), 3.43-3.49 (m, 1H), 4.01 (d,J =10.4 Hz, 1H), 4.07-4.12 (m, 1H), 4.27 (t,J =9.5 Hz, 1H), 4.44 (t,J =7.0 Hz, 1H), 4.58 (bs, 1H), 5.11 (d,J=10.1 Hz, 1H), 5.30 (dd,J= 16.8, 9.6 Hz, 1H), 5.73-5.78 (m, 1H), 6.69 (d,J =8.2 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 7.25 (t,J =7.3 Hz, 1H), 7.35 (t,J =7.63 Hz, 2H), 7.82 (d,J =8.2 Hz, 2H); LC-MSm/ z(MH<+>) 715.
Uslovi reverzno fazne preparativne HPLC za Jedinjenje 55 do 155, kao što su naznačeni:
VVaters Xterra Prep MS C18 kolona, 5mm (ovo označava veličinu čestica od 5 mikrona), 30mmx100mm
Rastvarač A: 10% MeOH, 90% H20, 10mM NH4OAc
Rastvarač B: 90% MeOH, 10% H20, 10mM NH4OAc
50mL/min brzina protoka
Gradijent: 0% B do 100% B tokom 10 min, hold na 100% B posle 4 min
Primer 55: Izrada Jedinjenja 55.
Korak 1:
U rastvor Jedinjenja 11 (1.5g, 2.10mmol) u DCE (25ml_) dodata je TFA (25ml_). Posle mešanja na rt tokom 15 min reakciona smeša je ukoncentrisana. Nastalo crveno viskozno ulje je ponovo rastvoreno u DCE (50ml_) i ponovo ukoncentrisano. Zatim je ponovo rastvoreno u DCM (15ml_) i obrađeno sa rastvorom 1N HCI u Et20 (25ml_). Nastala suspenzija je smrznuta na 0°C, vakuumski filtrirana, isprana sa Et20 i osušena u vakuumskoj sušnici da bi se dobio proizvod iz Koraka 1 u vidu bele čvrste mase (1.4g, 97% prinos)<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1.07-11.2 (m, 3H), 1.14 (t,J =4.12 Hz, 1H), 1.17 (s, 9H), 1.22 (dd,J =10.53, 4.43 Hz, 1H), 1.21-1.27 (m, 2H), 1.42 (dd,J =9.61, 5.34 Hz, 1H), 1.91 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.27 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.32-2.38 (m, 1H), 2.70 (dd,J=13.43, 6.71 Hz, 1H), 2.93-2.98 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 4.09 (s, 1H), 4.14 (dd,J= 12.21, 3.66 Hz, 1H), 4.32-4.35 (m, 1H), 4.69 (dd,J= 10.53, 6.87 Hz, 1H), 5.14 (dd,J= 10.38, 1.53 Hz, 1H), 5.31 (dd,J =17.40, 1.22 Hz, 1H), 5.70-5.77 (m, 1H), 5.90 (t,J =3.51 Hz, 1H), 7.24-7.27 (m, 1H), 7.29 (d,J =4.27 Hz, 1H), 7.39 (t,J= 4.88 Hz, 1H), 7.90 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.19 (m, 1H), 9.22 (s, 1H).
Korak 2:
U rastvor mešavine proizvoda iz Koraka 1, Primera 55 (70.0mg, 0.108mmol) i DIEA (41.8mg, 0.323mmol) u DCM (2ml_) dodat je sirćetni anhidrid (33.0mg, 0.323mmol). Posle mešanja na rt tokom 14 h odstranjen je rastvarač, a proizvod je prečišćen reverzno-faznom prep-HPLC da bi se dobilo Jedinjenje 55 (39.1 mg, 14% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1.00-1.03 (m, 1H), 1.06 (s, 9H), 1.07-1.10 (m, 1H), 1.21-1.28 (m, 2H), 1.43 (dd,J= 9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.88 (dd,J- 8.55, 5.49 Hz, 1H), 2.23 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.27-2.32 (m, 1H), 2.59 (dd,J = 13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.12 (dd,J= 11.90, 3.97 Hz, 1H), 4.35 (d,J=11.60 Hz, 1H), 4.51 (dd,J= 10.38, 7.02 Hz, 1H), 4.61 (dd,J =5.80, 3.05 Hz, 1H), 4.80 (d,J =4.27 Hz, 1H), 4.88 (d,J= 3.96 Hz, 1H), 5.12 (dd,J= 10.38, 1.83 Hz, 1H), 5.29 (dd,J =17.24, 1.37 Hz, 1H), 5.73-5.78 (m, 1H), 5.84 (t,J= 3.66 Hz, 1H), 7.15 (dd,J= 8.85, 2.44 Hz, 1H), 7.19 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.25 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 6.10 Hz, 1H), 8.06 (d,J= 9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.49 min) MSm/ z656 (MH<*>).
Primer56:IzradaJedinjenja 56.
Jedinjenje 56 je pripremljeno istim postupkom, kao i Jedinjenje 55, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: ciklopentankarbonil hlorid je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 56 (18.0mg, 24% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1.00-1.03 (m, 1H), 1.05 (s, 9H), 1.06-1.10 (m, 2H), 1.24-1.27 (m, 2H), 1.25-1.61 (m, 9H), 1.80-1.83 (m, 1H), 1.88 (dd,J =8.24, 5.49 Hz, 1H), 2.22-2.31 (m, 2H), 2.58-2.65 (m, 2H), 2.93-2.98 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.10 (dd,J= 11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.35 (d,J= 11.91 Hz, 1H), 4.52 (dd,J =10.38, 7.02 Hz, 1H), 4.65 (d,J= 9.46 Hz, 1H), 4.80 (d,J= 5.49 Hz, 1H), 4.88 (d,J= 5.19 Hz, 1H), 5.13 (dd,J= 10.37, 1.83 Hz, 1H), 5.30 (dd,J =16.80, 1.22 Hz, 1H), 5.73-5.78 (m, 1H), 5.84 (t,J =4.27 Hz, 1H), 7.11 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.19 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.25 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 6.10 Hz, 1H), 8.05 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.71 min) MSm/ z710 (MH<+>).
Primer 57: Izrada Jedinjenja 57.
Jedinjenje 57 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 55, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: 2-etilbutiril hlorid je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 57 (20.7mg, 27% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) § 0.66 (t,J =7.32 Hz, 3H), 0.85 (t,J=7.32 Hz, 3H), 1.02-1.05 (m, 1H), 1.07 (s, 9H), 1.10-1.12 (m, 1H), 1.24-1.33 (m, 4H), I. 36-1.39 (m, 1H), 1.43 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.48-1.51 (m, 1H), 1.88 (dd,J =8.24, 5.19 Hz, 1H), 2.12-2.14 (m, 1H), 2.22 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.26-2.30 (m, 1H), 2.59 (dd,J= 13.73, 6.71 Hz, 1H), 2.94-2.97 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.11 (dd,J =11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.40 (d,J =II. 90 Hz, 1H), 4.50 (dd,J =10.68, 7.02 Hz, 1H), 4.75 (d,J =9.46 Hz, 1H), 4.81 (d,J =9.16 Hz, 1H), 4.89 (d,J= 9.16 Hz, 1H), 5.12 (dd,J =10.38, 1.53 Hz, 1H), 5.29 (dd,J =17.09, 1.22 Hz, 1H), 5.72-5.79 (m, 1H), 5.85 (t,J =3.66 Hz, 1H), 7.08 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.19 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.25 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.98 (d,J =9.16 Hz, 1H), 8.02 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.73 min) MSm/ z712 (MH<+>).
Primer 58: Izrada Jedinjenja 58.
U rastvor smeše proizvoda iz Koraka 1, Primera 55 (70.0mg, 0.108mmol), DIEA (41.8mg, 0.323mmol) i ciklopropansirćetne kiseline (16.2mg, 0.162mmol) u DCM (2mL) dodat je HATU (61.6mg, 0.162mmol). Posle mešanja reakcione smeše na rt preko noći, isprana je sa 5% vodenim NaHC03(1mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa 2x2ml_ DCM. Sjedinjeni organski sloj je ispran 5%-tnom vodenom limunskom kiselinom (2ml_) i slanim rastvorom, osušen preko MgS04i ukoncentrisan. Proizvod je prečišćen reverzno-faznom prep-HPLC da bi se dobilo Jedinjenje 58 (21.9mg, 29% prinos). 'H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0.11-0.14 (m, 2H), 0.43-0.47 (m, 2H), 0.87-0.09 (m, 1H), 1.01-1.04 (m, 1H), 1.07 (s, 9H), 1.09-1.12 (m, 1H), 1.23-1.27 (m, 2H), 1.45 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =8.24, 5.49 Hz, 1H), 2.03 (d,J =7.32 Hz, 2H), 2.23 (q,J =8.75 Hz, 1H), 2.27-2.31 (m, 1H), 2.59 (dd,J= 13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.92-2.96 (m, 1H), 3.93 (m, 3H), 4.13 (dd,J =11.90, 3.97 Hz, 1H), 4.34 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.53 (dd,J =10.38, 7.02 Hz, 1H), 4.66 (d,J =9.46 Hz, 1H), 4.81 (d,J =6.10 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 6.10 Hz, 1H), 5.12 (dd,J =10.37, 1.52 Hz, 1H), 5.30 (dd,J= 17.09, 1.22 Hz, 1H), 5.75-5.81 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 7.12 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.19 (d,J= 2.44 Hz, 1H), 7.81 (d,J =9.46 Hz, 1H), 7.89 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.63 min) MS m/z 696
(MH<+>).
Primer 59: Izrada Jedinjenja 59.
Jedinjenje 59 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 58, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: metoksisirćetna kiselina je upotrebljena kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 59 (23.5mg, 32% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 10.99-1.04 (m, 2H), 1.06 (s, 9H), 1.09-1.12 (m, 1H), 1.22-1.27 (m, 2H), 1.45 (dd,J=9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =8.24, 5.49 Hz, 1H), 2.22 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.29-2.32 (m, 1H), 2.60 (dd,J= 13.89, 6.87 Hz, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 3.35 (s, 3H), 3.70 (d,J= 15.26 Hz, 1H), 3.84 (d,J= 15.26 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.13 (dd,J =11.90, 3.97 Hz, 1H), 4.32 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.54 (dd,J =10.38, 7.02 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.81 (d,J= 7.32 Hz, 1H), 4.89 (d,J =7.32 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.30 (d,J =16.79 Hz, 1H), 5.74-5.81 (m, 1H), 5.86 (t,J =3.36 Hz, 1H), 7.14 (dd,J =9.00, 2.59 Hz, 1H), 7.19 (d,J= 2.44 Hz, 1H), 7.26 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.89 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.04 (d,J =9.16 Hz, 1H): LC-MS (retenciono vreme: 1.54 min) MSm/ z 686(MH<+>).
Primer 60: Izrada Jedinjenja 60.
Jedinjenje 60 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 58, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: (+)-metoksisirćetna kiselina je upotrebljena kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 60 (23.8mg, 27% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.78 (d,J =7.02 Hz, 3H), 0.83-0.88 (m, 2H), 0.92 (t,J =7.17 Hz, 6H), 0.94-0.98 (m, 1H), 1.00-1.03 (m, 2H), 1.06 (s, 9H), 1.07-1.11 (m, 1H), 1.22-1.26 (m, 2H), 1.31-1.36 (m, 2H), 1.45 (dd, J = 9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.63-1.68 (m, 2H), 1.89 (dd,J= 8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.01-2.04 (m, 1H), 2.17-2.21 (m, 1H), 2.24 (q,J= 9.00 Hz, 2H), 2.28-2.33 (m, 1H), 2.60 (dd,J =13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.93-2.98 (m, 1H), 3.15-3.20 (m, 1H), 3.77 (d,J =15.26 Hz, 1H), 3.87 (d,J =15.26 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.12 (dd,J =11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.32 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.56 (dd,J =10.38, 7.02 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 9.77 Hz, 1H), 4.81 (d,J =5.80 Hz, 1H), 4.89 (d,J =5.80 Hz, 1H), 5.13 (dd,J =10.22, 1.68 Hz, 1H), 5.30 (dd,J =17.09, 1.53 Hz, 1H), 5.75-5.79 (m, 1H), 5.85 (t,J =3.66 Hz, 1H), 7.14 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.19 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.26 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 7.52 (d,J= 9.77 Hz, 1H), 7.89 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.03 (d,J= 9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 2.043 min) MSm/ z810 (MH<+>).
Primer 61: Izrada Jedinjenja 61.
Jedinjenje 61 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 58, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: (-)-metoksisirćetna kiselina je upotrebljena kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 61 (26.4mg, 30% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) § 0.78 (d,J= 7.02 Hz, 3H), 0.82-0.84 (m, 1H), 0.88 (dd,J= 8.39, 3.81 Hz, 1H), 0.91 (d,J =7.01 Hz, 3H), 0.92 (d,J =6.41 Hz, 3H), 0.94-0.99 (m, 2H), 1.00-1.03 (m, 2H), 1.06 (s, 9H), 1.08-1.10 (m, 1H), 1.23-1.26 (m, 2H), 1.30-1.37 (m, 2H), 1.44 (dd, J = 9.61, 5.34 Hz, 1H), 1.62-1.68 (m, 2H), 1.89 (dd,J =8.24, 5.49 Hz, 1H), 1.98-2.02 (m, 1H), 2.13-2.16 (m, 1H), 2.24 (q,J= 8.85 Hz, 1H), 2.28-2.32 (m, 1H), 2.60 (dd,J =13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.94-2.98 (m, 1H), 3.08-3.13 (m, 1H), 3.63 (d,J =15.56 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.11 (dd,J =12.05, 3.81 Hz, 1H), 4.32 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 10.38, 7.02 Hz, 1H), 4.62 (d,J =9.46 Hz, 1H), 4.81 (d,J =6.41 Hz, 1H), 4.89 (d,J =6.72 Hz, 1H), 5.13 (dd,J =10.38, 1.83 Hz, 1H), 5.30 (dd,J =17.09, 1.23 Hz, 1H), 5.76-5.80 (m, 1H), 5.85 (t,J =3.51 Hz, 1H), 7.14 (dd,J= 9.00, 2.59 Hz, 1H), 7.20 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.26 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.52 (d,J= 9.77 Hz, 1H), 7.89 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.04 (d,J= 9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 2.05 min) MSm/ z810 (MH<+>).
Primer 62: Izrada Jedinjenja 62.
Jedinjenje 62 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 58, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: bicikloŠ1.1.1Ćpentan-2-karboksilna kiselina je upotrebljena kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 62 (35.1, 45% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1.03 (d,J= 5.49 Hz, 1H), 1.06 (s, 9H), 1.08-1.11 (m, 3H), 1.23-1.29 (m, 3H), 1.37 (dd,J= 7.02, 3.36 Hz, 13H), 1.46 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.65 (dd,J =9.77, 2.14 Hz, 1H), 1.69 (d,J =2.14 Hz, 1H), 1.72 (dd,J =7.32, 3.05 Hz, 1H), 1.88 (dd,J= 8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.12 (dd,J =9.77, 3.05 Hz, 1H), 2.23 (d,J =8.85 Hz, 1H), 2.27-2.31 (m, 1H), 2.60 (t,J =6.87 Hz, 1H), 2.63 (d,J =1.83 Hz, 2H), 2.68 (d,J =7.63 Hz, 1H), 2.93-2.96 (m, 1H), 3.23 (q, J = 7.43 Hz, 2H), 3.70-3.75 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 4.11 (dd,J =11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.35 (d,J= 11.90 Hz, 1H), 4.53 (dd,J= 10.53, 6.87 Hz, 1H), 4.71 (d,J= 9.46 Hz, 1H), 4.79 (d,J =5.80 Hz, 2H), 4.87 (d,J =5.49 Hz, 2H), 5.13 (dd,J =10.38, 1.83 Hz, 1H), 5.30 (dd,J =17.24, 1.37 Hz, 1H), 5.74-5.79 (m, 1H), 5.86 (t,J =3.20 Hz, 1H), 7.12 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.19 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.25 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.72 (d,J =9.46 Hz, 1H), 7.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.05 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.16 min) MS m/z 708 (MH<+>).
Primer 63: Izrada Jedinjenja 63.
Jedinjenje 63 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 58, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: pirazin-2-karboksilna kiselina je upotrebljena kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 63 (42.3, 54% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1.00-1.04 (m, 3H), 1.05-1.09 (m, 1H), 1.10 (s, 9H), 1.15 (s, 1H), 1.18-1.22 (m, 2H), 1.43 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), I. 88 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.17 (q,J= 8.65 Hz, 1H), 2.37-2.42 (m, 1H), 2.64 (dd,J =13.73, 7.32 Hz, 1H), 2.91-2.95 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.93 (d,J =3.35 Hz, 1H), 4.13 (dd,J =II. 90, 3.36 Hz, 1H), 4.46 (d,J= 11.90 Hz, 1H), 4.61 (dd,J =10.07, 7.32 Hz, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.80 (d, J = 7.63 Hz, 1H), 4.88 (d,J =7.93 Hz, 1H), 5.09 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.27 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.77-5.83 (m, 1H), 5.85 (s, 1H), 6.85 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.08 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.23 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.87 (d,J =8.85 Hz, 1H), 7.90 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.57 (d,J =1.53 Hz, 1H), 8.73 (d,J =2.44 Hz, 1H), 8.81 (s, 1H).
Primer 64: Izrada Jedinjenja 64.
U rastvor mešavine proizvoda iz Koraka 1, Primera 55 (70.0mg, 0.108mmol) i DIEA (41.8mg, 0.323mmol) u DCM (2mL) dodat je benzil hloroformat (55.1 mg, 0.323mmol). Posle mešanja na rt tokom 14 h odstranjen je rastvarač, a proizvod je prečišćen reverzno-faznom prep-HPLC da bi se dobilo Jedinjenje 64 (26.9mg, 31% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1.00 (d,J =2.14 Hz, 1H), 1.02 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 1.04 (s, 9H), 1.08-1.14 (m, 1H), 1.16 (d,J =6.71 Hz, 1H), 1.18-1.22 (m, 2H), 1.43 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.87 (dd,J =8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.17-2.22 (m, 1H), 2.30-2.35 (m, 1H), 2.62 (dd,J=13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.90-2.95 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 4.08 (dd, J = 11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.31 (s, 1H), 4.43 (d,J= 11.60 Hz, 1H), 4.55 (dd,J =10.07, 7.32 Hz, 1H), 4.74 (d,J =12.21 Hz, 1H), 4.81 (d,J =6.10 Hz, 1H), 4.89 (d,J =5.79 Hz, 1H), 5.10 (d,J =9.16 Hz, 1H), 5.16 (s, 1H), 5.28 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.75-5.81 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.07 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.17 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.20 (d,J =7.32 Hz, 2H), 7.25 (t,J =5.65 Hz, 3H), 7.30-7.33 (m, 1H), 7.34-7.37 (m, 2H), 7.89 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.07 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.79 min) MSm/ z748 (MH<+>).
Primer 65: Izrada Jedinjenja 65.
Jedinjenje 65 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 64, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: (+)-metil hloroformat je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 65 (28.8mg, 36% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0.72 (d,J =6.71 Hz, 3H), 0.80 (t,J =5.80 Hz, 6H), 0.87 (d,J =7.02 Hz, 4H), 0.90-0.95 (m, 6H), 0.98-1.02 (m, 5H), 1.05 (s, 9H), 1.07-1.12 (m, 2H), 1.18-1.23 (m, 2H), 1.32-1.38 (m, 3H), 1.41 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.46-1.48 (m, 1H), 1.63-1.71 (m, 5H), 1.85 (dd,J=7.93, 5.49 Hz, 1H), 1.89-1.93 (m, 1H), 2.00-2.03 (m, 1H), 2.15 (q,J =8.70 Hz, 1H), 2.34-2.38 (m, 1H), 2.61 (dd, J = 13.73, 7.33 Hz, 1H), 2.89-2.93 (m, 1H), 3.73 (s, 2H), 3.92 (s, 3H), 4.10 (dd,J= 11.60, 3.36 Hz, 1H), 4.33 (s, 1H), 4.41 (d,J =11.29 Hz, 1H), 4.46-4.52 (m, 1H), 4.54 (dd,J= 9.76, 7.90 Hz, 1H), 4.81 (d,J =5.80 Hz, 1H), 4.89 (m, 1H), 5.08 (d,J =11.60 Hz, 1H), 5.26 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.77-5.81 (m, 1H), 5.83 (d,J=3.97 Hz, 1H), 7.11 (dd,J=11.29, 1.83 Hz, 1H), 7.18 (d,J =1.83 Hz, 1H), 7.24 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 6.10 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.85 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 2.06 min) MSm/ z796 (MH<+>).
Primer 66: Izrada Jedinjenja 66.
Jedinjenje 66 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 64, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: (-)-metil hloroformat je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 66 (26.9mg, 31% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.35 (d,J =6.41 Hz, 1H), 0.51 (d, J = 6.71 Hz, 2H), 0.68 (d,J =6.71 Hz, 1H), 0.73 (d,J =7.02 Hz, 2H), 0.77-0.82 (m, 4H), 0.88-0.98 (m, 10H), 1.0-1.03 (m, 2H), 1.05 (s, 9H), 1.09-1.18 (m, 3H), 1.25-1.29 (m, 1H), 1.3-1.41 (m, 3H), 1.60-1.71 (m, 3H), 1.82-1.89 (m, 3H), 2.00-2.04 (m,J =2.14 1H), 2.10 (q, J = 8.24 Hz, 1H), 2.39-2.43 (m, 1H), 2.61 (dd,J =14.04, 7.32 Hz, 1H), 2.87-2.91 (m, 1H), 3.73 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.13 (dd,J =11.75, 3.51 Hz, 1H), 4.22-4.27 (m, 2H), 4.30 (s, 1H), 4.39 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.48-4.55 (m, 1H), 4.79 (d,J =5.19 Hz, 1H), 4.87 (d,J =4.27 Hz, 1H), 5.05 (d,J =10.07 Hz, 1H), 5.22 (d,J= 16.79 Hz, 1H), 5.78-5.85 (m, 2H), 7.09 (dd,J= 9.16, 1.83 Hz, 1H), 7.17 (d,J =1.83 Hz, 1H), 7.23 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.09 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 2.05 min) MS m/z 796 (MH<+>).
Primer 67: Izrada Jedinjenja 67.
Jedinjenje 67 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 64, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: di-terc-amil dikarbonat je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 67 (35.3mg, 41% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.78 (t,J =7.17 Hz, 3H), 0.89-0.95 (m, 6H), 1.04 (s, 9H), 1.005-1.09 (m, 3H), 1.15 (s, 1H), 1.22 (d,J =12.51 Hz, 6H), 1.40 (s, 2H), 1.42-1.46 (m, 1H), 1.48 (s, 3H), 1.56-1.66 (m, 2H), 1.78 (q,J =7.63 Hz, 1H), 1.84 (q,J =7.53 Hz, 1H), 1.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 2.22 (d,J =8.55 Hz, 1H), 2.27-2.31 (m, 1H), 2.61 (dd,J =13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.08 (d,J= 12.21 Hz, 1H), 4.26 (d,J =9.16 Hz, 1H), 4.42 (d,J =11.29 Hz, 1H), 4.52 (t,J= 7.93 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.07 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.73-5.80 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 6.57 (d,J =8.85 Hz, 1H), 7.09 (d,J =8.54 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.25 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 7.89 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.08 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.82 min) MS m/z 728 (MH<+>).
Primer 68: Izrada Jedinjenja 68.
Jedinjenje 68 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 64, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: 2,2,2-trihloro-1,1 -dimetil hloroformat je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 68 (30.5mg, 37% prinos)
<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.99 (s, 9H), 1.04 (s, 6H), 1.08-1.09 (m, 3H), 1.23-1.26 (m, 3H), 1.44 (s, 2H), 1.46 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 1.71 (s, 2H), 2.23-2.33 (m, 2H), 2.60-2.64 (m, 1H), 2.93-2.96 (m, 1H), 3.70 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 4.04-4.06 (m, 2H), 4.27 (d,J =9.16 Hz, 1H), 4.41 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.57 (d,J =10.98, 6.11 Hz, 1H), 5.14 (d,J =12.21 Hz, 1H), 5.32 (d,J =17.70 Hz, 1H), 5.75-5.80 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 7.10 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 2.44 Hz, 1H), 7.26 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.90 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.07 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.95 min) MS m/z 816 (MH<+>).
Primer 69: Izrada Jedinjenja 69.
U rastvor mešavine proizvoda iz Koraka 1, Primera 55 (102mg, 0.149mmol) i DIEA (48.2, 0.373mmol) u THF-u (2mL) dodat je N,N'-disukcinimidil karbonat (57.1 mg, 0.223mmol). Nastala suspenzija je zračena u mikrotalasnoj do 80°C tokom 15 min. Zatim je dodat žitki rastvor natrijum 1-metil ciklopentoksida, koji je pripremljen obradom rastvora 1-metil ciklopentanola (149.2mg, 1.49mmol) na 0°C, u THF-u (1mL) sa NaH (60% u ulju, 59.6mg, 1.49mmol) tokom 15 min na rt. Posle mešanja na rt tokom 15 min reakcija je ugašena zasićenim vodenim amonijum hloridom (3mL) i ekstrahovana je sa EtOAc (10mL). Organski sloj je zatim propušten kroz celitnu hidromatriks kolonu, ukoncentrisan i prečišćen reverzno-faznom prep-HPLC da bi se dobilo Jedinjenje 69 (49.0mg, 44% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.95-0.98 (m, 3H), 0.99-1.01 (m,J=12.51 Hz, 1H), 1.03 (s, 9H), 1.14-1.18 (m, 2H), 1.30 (s, 3H), 1.40-1.47 (m, 3H), 1.50-1.56 (m, 3H), 1.60-1.64 (m, 1H), 1.76-1.81 (m, 1H), 1.83-1.85 (m, 1H), 2.10-2.19 (m, 1H), 2.36-2.43 (m, 1H), 2.63 (dd,J =14.50, 7.17 Hz, 1H), 2.86-2.90 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.09 (d,J =12.51 Hz, 1H), 4.25 (d,J=1.53 Hz, 1H), 4.43 (d,J=10.99 Hz, 1H), 4.51-4.55 (m, 1H), 5.06 (d,J =11.60 Hz, 1H), 5.23 (d,J =16.78 Hz, 1H), 5.80-5.85 (m,J =12.67, 12.67 Hz, 2H), 7.09 (d,J =8.55 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.24 (d,J= 5.49 Hz, 1H), 8.07 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.87 min) MSm/ z740 (MH<+>).
Primer 70: Izrada Jedinjenja 70.
Jedinjenje 70 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 69, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: ciklopentanol je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 70 (85.1 mg, 40% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.98 (s, 1H), 1.00 (d,J =4.88 Hz, 1H), 1.03 (s, 9H), 1.06-100.10 (m, 2H), 1.24-1.29 (m, 3H), 1.36-1.40 (m, 2H), 1.44 (dd,J= 9.31, 5.04 Hz, 2H), 1.57-1.62 (m, 5H), 1.69-1.73 (m, 2H), 1.88 (dd,J= 8.09, 5.65 Hz, 1H), 2.22-29 (m, 2H), 2.59-2.62 (m, 1H), 2.92-2.96 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.07 (dd,J =10.99, 2.44 Hz, 1H), 4.29 (s, 1H), 4.42 (dd,J =12.51, 1.53 Hz, 1H), 4.55 (dd,J =9.77, 7.93 Hz, 1H), 4.68-4.71 (m, 1H), 4.81 (d,J =8.55 Hz, 1H), 4.89 (d,J= 9.46 Hz, 1H), 5.13 (d,J =10.68 Hz, 1H), 5.30 (d,J =16.48 Hz, 1H), 5.73-5.78 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 7.12 (dd,J= 9.15, 1.83 Hz, 1H), 7.20 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.27 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.89 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.09 (d,J =8.85 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.81 min) MSm/ z 726(MH<+>).
Primer 71: Izrada Jedinjenja 71.
Jedinjenje 71 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 69, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: ciklobutanol je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 71 (16.2mg, 39% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.97 (s, 3H), 1.03 (s, 9H), 1.06-1.08 (m, 2H), 1.17-1.22 (m, 3H), 1.37-1.44 (m, 1H), 1.82-1.85 (m, 1H), 2.02-2.08 (m, 1H), 2.15-2.21 (m, 1H), 2.30-2.36 (m, 1H), 2.49-2.54 (m, 0.4H), 2.59-2.67 (m, 0.6H), 2.90-2.94 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.09 (dd,J =8.09, 4.73 Hz, 1H), 4.20 (d,J =10.68 Hz, 0.4H), 4.38 (d,J =10.68 Hz, 0.6H), 4.46 (dd,J= 10.22, 7.17 Hz, 0.4H), 4.48-4.56 (m, 1H), 5.07-5.11 (m, 1H), 5.26 (d,J =17.24 Hz, 0.4H), 5.28 (d,J= 17.24 Hz, 0.6H), 5.71-5.79 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 7.07 (dd,J =8.39, 2.90 Hz, 1H), 7.14 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.20 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.25 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.59 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (m, 1H), 8.00 (d,J =9.16 Hz, 0.4H), 8.07 (d,J =8.85 Hz, 0.6H); LC-MS (retenciono vreme: 1.25 min) MSm/ z712 (MH<+>).
Primer 72: Izrada Jedinjenja 72.
Jedinjenje 72 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 69, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: 2-fenil-2-propanol je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 72 (19.0mg, 42% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.97 (m, 1H), 1.03 (s, 9H), 1.06-1.09 (m, 3H), 1.16-1.22 (m, 4H), 1.41-1.44 (m, 1H), 1.57 (s, 3H), 1.86 (t, J = 7.80 Hz, 1H), 2.14-2.18 (m, 1H), 2.30-2.35 (m, 1H), 2.57-2.61 (m, 1H), 2.90-2.94 (m, 1H), 3.92 (d,J=4.27 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 4.04 (dd,J= 10.99, 3.66 Hz, 1H), 4.18 (s, 1H), 4.24 (d,J =10.99 Hz, 1H), 4.52 (s, 1H), 5.09 (d,J =10.07 Hz, 1H), 5.26 (d,J= 14.95 Hz, 1H), 5.78-5.82 (m, 2H), 7.07-7.12 (m, 2H), 7.16-7.20 (m, 3H), 7.23 (d,J =5.19 Hz, 1H), 7.29 (d,J =7.02 Hz, 2H), 7.84 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.03 (d,J= 9.46 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.84 min) MSm/ z776
(MH<+>).
Primer 73: Izrada Jedinjenja 73.
Jedinjenje 73 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 69, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: 4-(trifluorometil)fenil dimetil karbinol je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 73 (22.1mg, 45% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) S 0.91 (s, 1H), 0.97-1.00 (m,J =15.56 Hz, 4H), 1.04 (s, 9H), 1.07-1.10 (m, 2H), 1.16-1.20 (m, 3H), 1.30-1.31 (m, 1H), 1.41 (dd, J= 9.61, 5.34 Hz, 1H), 1.55 (d,J=7.32 Hz, 6H), 1.83-1.87 (m, 1H), 2.11-2.14 (m, 1H), 2.34-2.39 (m, 1H), 2.57-2.62 (m, 1H), 2.89-2.92 (m,J =11.60, 4.27 Hz, 1H), 3.92 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 4.02-4.05 (m, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.26 (d,J= 11.90 Hz, 1H), 4.53 (t,J =8.85 Hz, 1H), 5.07 (d,J =10.07 Hz, 1H), 5.24 (d,J= 18.01 Hz, 1H), 5.78-5.83 (m, 2H), 7.08 (d, J = 7.02 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.22 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.45 (dd,J =13.74, 7.63 Hz, 3H), 7.60 (d,J =6.41 Hz, 1H), 7.67 (d,J =7.63 Hz, 1H), 7.84 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.02 (d,J =8.54 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.92 min) MS m/z 844 (MH<+>).
Primer 74: Izrada Jedinjenja 74.
U rastvor mešavine proizvoda iz Koraka 1, Primera 55 (70.0mg, 0.108mmol) i DIEA (41.8mg, 0.323mmol) u DCM (2mL) dodat je t-butilizocijanat (32.0, 0.323mmol). Posle mešanja na rt preko noći reakciona smeša je ukoncentrisana i prečišćena reverzno-faznom prep-HPLC da bi se dobilo Jedinjenje 74 (42.3mg, 55% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.96-1.00 (m, 1H), 1.04 (s, 9H), 1.08-1.10 (m, 3H), 1.19 (s, 9H), 1.22-1.31 (m, 2H), 1.30 (m, 1H), 1.41 (dd,J= 9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.87 (dd,J= 8.24, 5.49 Hz, 1H), 2.20-2.29 (m, 2H), 2.61 (dd,J =14.04, 6.72 Hz, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.08 (dd,J =11.60, 3.97 Hz, 1H), 4.36 (s, 1H), 4.47-4.52 (m, 2H), 4.81 (d,J =3.36 Hz, 1H), 4.88 (d,J= 8.85 Hz, 1H), 5.11 (dd,J= 10.22, 1.68 Hz, 1H), 5.28 (dd,J =17.09, 1.53 Hz, 1H), 5.72-5.76 (m, 1H), 5.85 (s, 1H), 7.08 (dd,J= 9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.24 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.12 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.70 min) MS m/z 713 (MH<+>).
Primer 75: Izrada Jedinjenja 75.
Jedinjenje 75 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 74, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: ciklopentil izocijanat je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 75 (38.5mg, 49% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0.92 (d,J =7.63 Hz, 1H), 0.96 (s, 9H), 0.98-1.02 (m, 1H), 1.05 (s, 9H), 1.07-1.10 (m, 2H), 1.21-1.25 (m, 3H), 1.28-1.34 (m, 1H), 1.36-1.55 (m, 8H), 1.58-1.65 (m, 13H), 1.81 (m, 1H), 1.88 (m, 6H), 2.23 (dd,J= 18.01, 8.85 Hz, 1H), 2.29 (m, 1H), 2.59 (dd,J= 13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.27 (d, J = 1.83 Hz, 1H), 3.35 (d,J =1.53 Hz, 1H), 3.75 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.95 (d,J =6.41 Hz, 1H), 3.97 (s, 1H), 4.09 (m, 2H), 4.40 (s, 1H), 4.45 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.52 (dd,J =10.07, 7.02 Hz, 1H), 4.81 (d,J =7.02 Hz, 1H), 4.89 (d,J =7.02 Hz, 1H), 5.11 (m, 1H), 5.29 (d,J =17.40 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.85 (s, 1H), 7.11 (dd,J= 9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.18 (d,J= 2.44 Hz, 1H), 7.25 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.95 (m, 1H), 8.12 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.67 min) MS m/z 725 (MH<+>).
Primer76:IzradaJedinjenja 76.
U rastvor mešavine proizvoda iz Koraka 1, Primera 55 (70mg, 0.102mmol) i DIEA (33.0mg, 0.255mmol) u THF-u (2mL) dodat je N,N'-disukcinimidil karbonat (39.2mg, 0.153mmol). Nastala suspenzija je zračena u mikrotalasnoj do 80°C tokom 15 min. Zatim je obrađena terc-amil aminom (88.9mg, 1.02mmol). Posle mešanja na rt tokom 15 min reakciona smeša je ukoncentrisana i prečišćena reverzno-faznom prep- HPLC da bi se dobilo Jedinjenje 76 (51 mg, 69% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0.76 (t,J =7.48 Hz, 4H), 0.97 (s, 1H), 1.04 (s, 9H), 1.13 (s, 6H), 1.22-1.25 (m, 2H), 1.41 (dd,J =9.61, 5.34 Hz, 1H), 1.53 (dd,J =13.89, 7.48 Hz, 1H), 1.58-1.62 (m, 1H), 1.87 (dd,J= 7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.20 (q,J =8.65 Hz, 1H), 2.27-2.31 (m, 1H), 2.60 (dd,J=13.73, 7.32 Hz, 1H), 2.92-2.96 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.08 (dd,J=11.75, 3.81 Hz, 1H), 4.36 (s, 1H), 4.46 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.50 (dd,J= 10.22, 7.17 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 10.22, 1.37 Hz, 1H), 5.27 (dd,J =16.94, 1.07 Hz, 1H), 5.73-5.77 (m, 1H), 5.84 (t,J =3.51 Hz, 1H), 7.09 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.18 (d,J= 2.44 Hz, 1H), 7.24 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.11 (d,J= 9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.753 min) MS m/z 727 (MH<+>).
Primer 77: Izrada Jedinjenja 77.
Jedinjenje 77 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 76, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: terc-butil metilamin je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 77 (160.7mg, 74% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.96-1.10 (m, 1H), 1.06 (s, 9H), 1.08-1.12 (m,J =5.80 Hz, 3H), 1.26 (s, 9H), 1.46 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.87 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.21 (q,J =8.75 Hz, 1H), 2.26-2.31 (m, 1H), 2.57-2.62 (m, 1H), 2.86 (s, 3H), 2.91-2.95 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.09 (dd,J =11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.43 (s, 1H), 4.46 (d,J= 11.90 Hz, 1H), 4.52 (dd,J =10.68, 7.02 Hz, 1H), 5.11 (dd,J =10.22, 1.37 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 17.09 Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 7.09 (dd,J =9.16, 2.14 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.24 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.09 (d,J= 8.85 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.76 min) MSm/ z727 (MH<+>).
Primer 78: Izrada Jedinjenja 78.
Jedinjenje 78 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 76, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: A/,0-dimetilhidroksilamin hidrohlorid je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 78 (62.1 mg, 60% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.99 (t, J = 6.10 Hz, 1H), 1.07 (s, 11H), 1.22-1.26 (m,J =3.97 Hz, 2H), 1.47 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.88 (dd,J= 8.24, 5.49 Hz, 1H), 2.22 (d,J =8.54 Hz, 1H), 2.3-30-2.33 (m, 1H), 2.60 (dd,J =13.43, 7.02 Hz, 1H), 2.92 (s, 3H), 2.93-2.96 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 4.12 (dd,J= 11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.34 (d,J =12.21 Hz, 1H), 4.44 (d, J = 9.46 Hz, 1H), 4.54 (dd,J =10.53, 6.87 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 10.38 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.75-5.83 (m, 1H), 5.86 (t,J= 3.97 Hz, 1H), 6.70 (d,J =9.77 Hz, 1H), 7.13 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.19 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.25 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 5.80 Hz, 1H), 8.07 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.59 min) MSm/ z701 (MH<+>).
Primer 79: Izrada Jedinjenja 79.
Jedinjenje 79 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 76, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: dietilamin je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 79 (56.5mg, 54% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1.03 (q,J= 15.6 Hz, 4H), 1.06 (d,J =1.53 Hz, 9H), 1.05-1.10 (m, 3H), 1.13-1.23 (m, 4H), 1.46 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.86 (dd,J= 7.93, 5.30 Hz, 1H), 2.17 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.32-2.36 (m, 1H), 2.60 (dd,J =14.04, 7.32 Hz, 1H), 2.89-2.93 (m, 1H), 3.16-3.24 (m, 4H), 3.92 (s, 3H), 4.14 (dd,J= 11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.37 (d,J= 11.60 Hz, 1H), 4.51-4.55 (m, 2H), 5.09 (d,J =10.07 Hz, 1H), 5.27 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.55 (d,J =9.46 Hz, 1H), 5.79-5.84 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 7.11 (dd,J =8.85, 2.44 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.24 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.08 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.68 min) MSm/ z 713(MH<+>).
Primer 80: Izrada Jedinjenja 80.
Jedinjenje 80 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 76, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: Zasićeni vodeni amonijum hlorid je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 76 (12.2mg, 32% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1.00-1.03 (m, 3H), 1.06 (s, 9H), 1.20-1.25 (m, 2H), 1.42 (dd,J =9.31, 5.34 Hz, 1H), 2.22 (d,J =9.77 Hz, 1H), 2.29-2.35 (m, 1H), 2.59 (dd,J =13.28, 6.87 Hz, 1H), 2.92-2.96 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.14 (dd,J =11.75, 4.12 Hz, 1H), 4.38-4.43 (m, 1H), 4.51 (dd, J = 9.92, 6.87 Hz, 1H), 5.11 (d,J =11.90 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.70 Hz, 1H), 5.72-5.79 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 7.15 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.17 (d,J =2.75 Hz, 1H), 7.23 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.87 (d,J =7.87 Hz, 1H), 8.10 (d,J =8.85 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.43 min) MSm/ z657 (MH<+>).
Primer 81: Izrada Jedinjenja 81.
Jedinjenje 81 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 76, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: terc-oktilamin je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 81 (16.1 mg, 48% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.88 (s, 9H), 1.00 (d,J =9.77 Hz, 5H), 1.04 (s, 9H), 1.17 (s, 3H), 1.18-1.20 (m, 1H), 1.21 (s, 3H), 1.35 (d,J =2.44 Hz, 1H), 1.40-1.43 (m, 1H), 1.57 (d,J= 14.95 Hz, 1H), 1.67 (d,J =14.65 Hz, 1H), 1.85 (dd,J =8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.15 (d,J= 8.24 Hz, 1H), 2.34-2.43 (m, 1H), 2.60 (dd,J= 13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.89-2.93 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.13 (dd,J =11.60, 3.97 Hz, 1H), 4.38 (s, 1H), 4.43 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.50 (dd,J= 9.77, 7.32 Hz, 1H), 5.07 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.24 (d,J= 17.09 Hz, 1H), 5.75-5.81 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 7.09 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.17 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.23 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.10 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.92 min) MSm/ z769 (MH<+>).
Primer 82: Izrada Jedinjenja 82.
Jedinjenje 82 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 76, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: 1-(4-fluorofenil)-2-metil-2-propilamin je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 82 (14.8mg, 42% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.88 (s, 9H), 1.00 (d,J= 9.46 Hz, 6H), 1.04 (s, 9H), 1.17 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.32-1.37 (m, 2H), 1.39-1.43 (m, 1H), 1.57 (d,J =14.65 Hz, 1H), 1.67 (d,J =14.96 Hz, 1H), 1.82-1.86 (m, 1H), 2.15 (t,J =9.46 Hz, 1H), 2.33-2.43 (m, 2H), 2.58-2.62 (dd,J =14.50, 7.78 Hz, 1H), 2.89-2.93 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.12 (dd,J= 11.90, 3.97 Hz, 1H), 4.38 (s, 1H), 4.43 (d,J =12.82 Hz, 1H), 4.49-4.52 (m, 1H), 5.24 (d,J =16.48 Hz, 1H), 5.76-5.82 (m, 1H), 5.83-5.85 (m, 1H), 7.09 (dd,J =9.00, 2.59 Hz, 1H), 7.17 (d,J= 2.14 Hz, 1H), 7.23 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.10 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.40 min) MSm/ z 807(MH<+>).
Primer 83: Izrada Jedinjenja 83.
Jedinjenje 83 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 76, sa sledećim modifikacijama: Modifikacija: Kumilamin je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 83 (64.6mg, 57% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.87-0.91 (m, 1H), 0.98 (d, J = 9.46 Hz, 2H), 1.01 (s, 9H), 1.02-1.05 (m, 1H), 1.17-1.21 (m, 3H), 1.29 (s, 2H), 1.40 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.51 (d,J= 3.05 Hz, 5H), 1.85 (dd,J =8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.17 (q,J= 8.85 Hz, 1H), 2.30-2.33 (m, 1H), 2.58 (dd,J =13.58, 7.48 Hz, 1H), 2.91-2.94 (m, 1H), 3.92 (d,J =2AA Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.05 (dd,J =11.60, 3.66 Hz, 1H), 4.32 (d,J =9.77 Hz, 1H), 4.51 (dd,J =9.92, 7.17 Hz, 1H), 5.09 (dd,J =11.59, 1.52 Hz, 1H), 5.27 (dd,J =16.71, 1.22 Hz, 1H), 5.74-5.78 (m, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.05-7.09 (m, 1H), 7.18 (d,J= 2.44 Hz, 1H), 7.19 (d,J= 7.33 Hz, 1H), 7.22 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.33 (d,J =7.63 Hz, 1H), 7.84 (d,J =5.80 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.76 min) MSm/ z775 (MH<*>).
Primer 84: Izrada Jedinjenja 84.
U rastvor proizvoda iz Koraka 5, Primera 11 (77.0mg, 0.136mmol), DIEA (70.4mg, 0.544mmol) i HATU (77.5mg, 0.204mmol) dodat je Boc-Melle-OH (43.4mg, 0.177mmol). Posle mešanja na rt tokom 14 h reakciona smeša je isprana 5%-tnim vodenim NaHCOs(1mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa 2x2mL DCM. Sakupljeni organski sloj je ispran 5%-tnom vodenom limunskom kiselinom (2mL) i slanim rastvorom, osušen preko MgS04, ukoncentrisan i prečišćen flash hromatografijom na koloni (Si02, 97:3 DCM:MeOH) da bi se dobilo Jedinjenje 84 (68.4mg, 69% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0.89 (t,J= 7.32 Hz, 3H), 0.94 (dd,J =5.95, 4.43 Hz, 3H), 1.07 (d,J =7,.63 Hz, 3H), 1.13 (s, 5H), 1.16-1.20 (m,J =4.88 Hz, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.28 (m, 1H), 1.34-1.38 (m, 1H), 1.41-1.47 (m, 1H), 1.55-1.60 (m,J=7.63 Hz, 1H), 1.87-1.91 (m, 1H), 2.22-2.26 (m, 2H), 2.36-2.38 (m, 1H), 2.56-2.62 (m, 1H), 2.81 (d,J =11.30 Hz, 2H), 2.94-2.99 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.05-4.12 (m, 2H), 4.48-4.57 (m, 2H), 5.12 (d,J =10.07 Hz, 1H), 5.32 (m, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 5.84-5.88 (m, 1H), 7.09-7.13 (m, 1H), 7.16-7.20 (m, 1H), 7.23-7.27 (m, 1H), 7.88 (dd,J =5.95, 2.29 Hz, 1H), 8.04 (d,J =9.16 Hz, 0.6H), 8.09 (d,J =9.46 Hz, 0.4H); LC-MS (retenciono vreme: 1.83 min) MSm/ z728 (MH<+>).
Primer 85: Izrada Jedinjenja 85.
Jedinjenje 85 je pripremljeno istim postupkom, kao i Jedinjenje 84, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Boc-MeVal-OH je korišćen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 84 (72.1 mg, 74% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0.84 (t,J= 5.80 Hz, 3H), 0.96 (d,J =6.41 Hz, 3H), 1.08 (d,J =7.32 Hz, 2H), 1.13 (s, 6H), 1.16 (s, 4H), 1.18-1.21 (m, 1H), 1.23-1.29 (m, 1H), 1.44 (dd,J= 9.61, 5.34 Hz, 1H), 1.88-1.92 (m, 1H), 2.24 (d,J =10.07 Hz, 1H), 2.32-2.39 (m, 2H), 2.58 (dd,J =13.89, 6.26 Hz, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.93-2.98 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.01 (dd,J= 11.90, 3.36 Hz, 0.6H), 4.12 (dd,J= 11.90, 3.66 Hz, 0.4H), 4.16 (d,J =11.29 Hz, 0.6H), 4.38 (d,J= 10.99 Hz, 0.4H), 4.45 (d,J= 10.68 Hz, 1H), 4.47 (d,J =10.69 Hz, 0.6H), 4.53 (dd,J =10.38, 7.02 Hz, 0.4H), 4.58 (dd,J =10.07, 7.02 Hz, 1H), 5.12 (d,J =4.28 Hz, 0.6H), 5.14 (d, J = 4.27 Hz, 0.4H), 5.30 (d,J =7.32 Hz, 0.6H), 5.34 (d,J =7.32 Hz, 0.4H), 5.78-5.85 (m, 1H), 5.88 (t,J= 3.05 Hz, 0.6H), 5.96 (t,J =3.97 Hz, 0.4H), 7.13 (dd,J =9.00, 2.29 Hz, 0.6H), 7.16 (dd,J =9.46, 2.44 Hz, 0.4H), 7.19 (m, 1H), 7.24 (d,J =6.10 Hz, 0.6H), 7.26 (d,J= 6.10 Hz, 0.4 H), 7.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.02 (d,J =9.16 Hz, 0.6H), 8.05 (d,J= 9.16 Hz, 0.4H).
Primer 86: Izrada Jedinjenja 86.
Jedinjenje 86 je pripremljeno istim postupkom, kao i Jedinjenje 84, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Boc-MeLeu-OH je korišćen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 85 (56.5mg, 57% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.94-0.96 (m, 6H), 1.04-1.13 (m, 2H), 1.17 (s, 4.5H), 1.18 (s, 4.5H), 1.26-1.31 (m, 1H), 1.42 (dd, J= 9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.46-1.51 (m, 2H), 1.56-1.60 (m, 0.5H), 1.69-1.72 (m, 0.5H), 1.75-1.81 (m, 0.5H), 1.90 (q,J =7.50 Hz, 1H), 2.27 (dd,J =13.89, 7.78 Hz, 1H), 2.32-2.38 (m, 1H), 2.58 (dd,J =14.80, 7.48 Hz, 1H), 2.75 (s, 3H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.03 (d,J =12.21 Hz, 1H), 4.11-15 (m, 0.5H), 4.28 (d,J =12.21 Hz, 1H), 4.53 (t,J =8.50 Hz, 0.5H), 4.59 (t,J= 8.55 Hz, 0.5H), 4.83-4.87 (m,J =6.41 Hz, 0.5H), 4.96 (m, 0.5H), 5.14 (dd,J= 11.14, 4.73 Hz, 1H), 5.32 (dd,J =17.70, 6.41 Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 5.90 (s, 0.5H), 5.92 (s, 0.5H), 7.13-7.18 (m, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.25-7.27 (m, 1H), 7.87 (t,J =4.40 Hz, 1H), 8.05 (d,J =8.85 Hz, 1H).
Primer 87: Izrada Jedinjenja 87.
Jedinjenje 87 je pripremljeno istim postupkom, kao i Jedinjenje 84, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Boc-MeNle-OH je korišćen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 87 (82.3mg, 83% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0.90-0.96 (q,J= 7.63 Hz, 3H), 1.05-1.10 (m, 2H), 1.18 (s, 4.5H), 1.20 (s, 4.5H), 1.24-1.30 (m, 3H), 1.31-1.38 (m, 1H), 1.42 (dd,J= 9.46, 5.19 Hz, 2H), 1.72-1.81 (m, 2H), 1.88-1.92 (m, 1H), 2.22-2.29 (m, 1H), 2.32-2.38 (m, 1H), 2.58 (dd,J =13.89, 7.17 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.94-2.99 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.02 (dd,J =9.77, 4.27 Hz, 1H), 4.12 (dd,J= 11.90, 3.35 Hz, 0.5H), 4.24 (dd,J =11.90, 0.6 Hz, 0.5H), 4.51-4.60 (m, 1H), 5.14 (d,J= 10.38 Hz, 1H), 5.33 (dd,J= 17.24, 4.73 Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 5.91 (s, 1H), 7.15 (dd,J =14.34, 7.63 Hz, 1H), 7.20 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.25 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.87 (t,J =4.37 Hz, 1H), 8.05 (d,J =8.85 Hz, 1H).
Primer 88: Izrada Jedinjenja 88.
Jedinjenje 88 je pripremljeno istim postupkom, kao i Jedinjenje 84, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Boc-N-MeNVa-OH je korišćen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 88 (70.5mg, 73% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 0.96 (d,J =6.41 Hz, 3H), 1.06-1.10 (m, 2H), 1.18 (s, 9H), 1.27-1.30 (m, 4H), 1.42 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.66-1.80 (m, 2H), 1.88-1.92 (m, 1H), 2.23-2.29 (m, 1H), 2.30-2.37 (m, 1H), 2.58 (dd, J = 13.58, 7.17 Hz, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.94-2.98 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.00-4.04 (m, 1H), 4.12 (d,J =12.82 Hz, 0.5H), 4.25 (d,J =12.21 Hz, 0.5H), 4.51-4.60 (m, 1H), 5.13 (d,J =10.68 Hz, 1H), 5.32 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.75-5.81 (m, 1H), 5.90 (s, 1H), 7.13-7.18 (m, 1H), 7.20 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.25 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 8.05 (d,J =9.16 Hz, 1H).
Primer 89: Izrada Jedinjenja 89.
U rastvor proizvoda iz Koraka 5, Primera 11 (66.0mg, 0.123mmol), DIEA (63.7mg, 0.492mmol) i HATU (70.0, 0.184mmol) dodata je 2S-terc-butoksikarbonilamino-3-hidroksi-3-metilbuterna kiselina (34.0mg, 0.147mmol). Posle mešanja na rt tokom 14 h reakciona smeša je isprana 5%-tnim vodenim NaHC03(1ml_). Vodeni sloj je ekstrahovan sa 2x2ml_ DCM. Sakupljeni organski sloj je ispran 5%-tnom vodenom limunskom kiselinom (2ml_) i slanim rastvorom, osušen preko MgS04, ukoncentrisan i prečišćen reverzno-faznom prep-HPLC da bi se dobilo Jedinjenje 89 (36.1 mg, 41% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1.07 (d,J= 7.93 Hz, 2H), 1.18 (s, 1H), 1.20 (s, 9H), 1.24-1.27 (m,J =11.60 Hz, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.43-1.48 (m, 10H), 1.59 (s, 1H), I. 65 (s, 1H), 1.87 (dd,J =8.24, 5.19 Hz, 1H), 2.24 (q,J =9.16 Hz, 1H), 2.33-2.36 (m, 1H), 2.63 (dd,J =12.97, 6.56 Hz, 1H), 2.94-2.99 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.93 (s, 1H), 4.12 (dd,J =II. 60, 3.05 Hz, 1H), 4.27-4.31 (m, 1H), 4.54 (t,J= 9.77 Hz, 1H), 5.12 (dd,J =10.53, 1.37 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.79-5.83 (m, 1H), 5.85 (s, 1H), 7.11 (dd,J =8.55, 1.83 Hz, 1H), 7.18 (d,J= 2.24 Hz, 1H), 7.24 (d,J= 5.49 Hz, 1H), 7.88 (m, 1H), 8.10 (d,J= 8.85 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.637 min) MSm/ z716 (MH<+>).
Primer 91: Izrada Jedinjenja 91.
Jedinjenje 91 je pripremljeno istim postupkom, kao i Jedinjenje 89, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Boc-L-Thr-OH je korišćen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 91 (80.5mg, 66% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.93 (dd,J =8.24, 2.14 Hz, 2H), 1.08-1.18 (m, 4H), 1.20 (d,J =6.10 Hz, 3H), 1.29 (s, 9H), 1.32 (dd,J =9.61, 5.04 Hz, 1H), 1.45 (d,J =4.27 Hz, 1H), 1.84 (dd,J =7.63, 5.19 Hz, 1H), 2.15 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.42-2.48 (m, 1H), 2.64 (dd,J =14.04, 7.63 Hz, 1H), 2.85-2.89 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.1-4.14 (m, 2H), 4.30 (d,J= 4.88 Hz, 1H), 4.38 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.60 (t,J =8.55 Hz, 1H), 5.04 (dd,J =10.22, 1.68 Hz, 1H), 5.80-5.84 (m, 2H), 7.11 (d,J =9.16 Hz, 1H), 7.17 (d,J =1.83 Hz, 1H), 7.23 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 7.87 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.10 (d,J =8.85 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.560 min) MSm/ z702 (MH<+>).
Primer 92: Izrada Jedinjenja 92.
Jedinjenje 92 je pripremljeno istim postupkom, kao i Jedinjenje 89, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Boc-L-Thr(Me)-OH je korišćen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 92 (47.1 mg, 69% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.95 (d,J =4.27 Hz, 2H), 1.11-1.16 (m, 3H), 1.18 (d,J= 6.10 Hz, 6H), 1.32 (s, 9H), 1.38 (dd,J =9.31, 5.04 Hz, 1H), 1.45 (s, 1H), 1.85 (dd,J =7.78, 5.04 Hz, 1H), 2.13 (d,J =9.15 Hz, 1H), 2.46-2.51 (m, 1H), 2.63 (dd,J =14.19, 7.78 Hz, 1H), 2.81-2.91 (m, 1H), 3.68-3.73 (m, 1H), 3.92 (s, 4H), 4.14 (d,J =12.21 Hz, 1H), 4.35 (d,J =5.80 Hz, 1H), 4.42 (d,J =11.29 Hz, 1H), 4.60 (t,J =8.70 Hz, 1H), 5.05 (d,J =10.68 Hz, 1H), 5.24 (dd,J =16.79, 0.92 Hz, 1H), 5.81-5.85 (m, 2H), 7.11 (dd,J =9.16, 0.92 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.24 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.11 (d,J =8.55 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.660 min) MSm/ z716 (MH<+>).
Primer93:Izrada Jedinjenja93.
Jedinjenje 93 je pripremljeno istim postupkom, kao i Jedinjenje 89, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Boc-L-Thr(tBu)-OH je korišćen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 93 (52.7mg, 53% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1.09 (dd,J =8.24, 2.44 Hz, 2H), 1.201.24 (m, 3H), 1.28 (s, 9H), 1.45 (s, 9H), 1.89 (dd,J =7.93, 5.19 Hz, 1H), 2.25 (q,J= 8.34 Hz, 1H), 2.32-2.36 (m, 1H), 2.59 (dd,J= 12.82, 6.41 Hz, 1H), 2.95-3.00 (m, 1H), 3.71 (s, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.93-3.99 (m, 1H), 4.10 (d,J =7.02 Hz, 1H), 4.15 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.22 (dd,J =6.10, 2.44 Hz, 2H), 4.40 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.54 (dd,J =10.01, 6.71 Hz, 1H), 5.13 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.31 (d,J= 17.09 Hz, 1H), 5.76-5.83 (m, 1H), 5.87 (s, 1H), 6.06 (d,J =9.46 Hz, 1H), 6.36 (d,J =7.02 Hz, 1H), 7.11 (d,J =8.85 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.24 (d,J =5.49 Hz, 1H), 7.88 (m, 1H), 8.08 (d,J =9.16 Hz, 1H).
Primer 94: Izrada Jedinjenja 94.
Jedinjenje 94 je pripremljeno istim postupkom, kao i Jedinjenje 89, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Boc-(2S,3S)-2-amino-3-metoksibutanska kiselina je korišćena kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 94 (150.2mg, 80% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1.04-1.13 (m, 3H), 1.17 (d,J =6.10 Hz, 3H), 1.20-1.24 (m, 2H), 1.27 (s, 9H), 1.44-1.48 (m, 2H), 1.86 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.24 (q,J =8.65 Hz, 1H), 2.34-2.37 (m, 1H), 2.61 (dd,J =14.19, 7.17 Hz, 1H), 2.94-2.99 (m, 1H), 3.66 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.13 (dd, J= 12.36, 3.81 Hz, 1H), 4.37 (dd,J= 22.58, 10.99 Hz, 2H), 4.54 (dd,J =10.38, 7.63 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.68 Hz, 1H), 5.31 (d,J =17.40 Hz, 1H), 5.77-5.82 (m, 1H), 5.85 (s, 1H), 7.12 (d,J =9.16 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.25 (d,J= 6.10 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 5.80 Hz, 1H), 8.10 (d,J =8.85 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.673 min) MSm/ z716 (MH<+>).
Primer 95: Izrada Jedinjenja 95.
U mešavinu H-alo-THr-OH (5.0g, 41.98mmol) i DIEA (10.9g, 83.96mmol) u DCM (150mL) dodat je di-terc-butil dikarbonat (13.7mg, 62.97mmol). Posle mešanja na rt tokom 14 h reakciona smeša je isprana sa 3x100ml_ DCM. Sjedinjenji organski sloj je osušen preko MgS04i ukoncentrisan. LC/MS je pokazala da je najveći deo proizvoda ostao u H20 sloju. Zato je vodeni sloj ukoncentrisan. Proizvod je prečišćen flash hromatografijom na koloni (Si02, 90:10 DCM:MeOH) da bi se dobio Boc-alo-THr-OH; LC-MS (retenciono vreme: 0.727 min) MSm/ z242 (MNa<+>).
Korak 2:
U rastvor proizvoda iz Koraka 5, Primera 11 (100.Omg, 0.174mmol), DIEA (67.6mg, 0.522mmol) i HATU (106.0, 0.278mmol) dodat je proizvod iz gornjeg Koraka 1 (57.3mg, 0.262mmol). Posle mešanja na rt tokom 3 h reakciona smeša je isprana 5%-tnim vodenim NaHC03(1mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa 2x2mL DCM. Sjedinjeni organski sloj je ispran 5%-tnom vodenom limunskom kiselinom (2mL) i slanim rastvorom, osušen preko MgS04, ukoncentrisan i prečišćen reverzno-faznom prep-HPLC da bi se dobilo Jedinjenje 95 (39.1 mg, 32% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1.02 (d, J = 8.55 Hz, 1H), 1.18-1.23 (m, 3H), 1.25 (s, 9H), 1.38 (dd,J =9.15, 6.30 Hz, 1H), 1.84 (dd,J =7.93, 5.19 Hz, 1H), 2.19-2.24 (m, 1H), 2.38-2.43 (m, 1H), 2.65 (dd,J= 14.19, 6.87 Hz, 1H), 2.92-2.96 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.93 (s, 2H), 4.16-4.19 (m, 1H), 4.23 (d,J =8.24 Hz, 1H), 4.44 (d,J =12.21 Hz, 1H), 4.57-5.81 (m, 1H), 5.09 (d,J =10.68 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 17.09 Hz, 1H), 5.75-5.81 (m, 1H), 5.83-5.85 (m, 1H), 7.11 (d,J= 10.38 Hz, 1H), 7.18 (d,J= 1.83 Hz, 1H), 7.24 (d,J =6.41 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.11 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.583 min) MSm/z702
(MH<+>).
Primer 96: Izrada Jedinjenja 96.
Jedinjenje 96 je pripremljeno istim postupkom, kao i Jedinjenje 95, sa sledećim modifikacijama:
Modifikacije:
Korak 1:
Hidrohlorid (2S,3S)-2-amino-3-etoksibutanske kiseline je korišćen kao polazni materijal u koraku 1, da bi se dobila Boc-(2S,3S)-2-amino-3-etoksibutanska kiselina; LC-MS (retenciono vreme: 1.067 min) MS m/z 270 (M+Na<+>).
Korak 2:
Proizvod iz koraka 1 je zatim kuplovan na isti način sa proizvodom iz koraka 5 primera 11, da bi se dobilo Jedinjenje 96 (55.3 mg, 44% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.94 (t,J =6.87 Hz, 1H), 0.97-1.03 (m, 2H), 1.08-1.11 (m, 2H), 1.13-1.15 (m, 2H), 1.17 (d,J =6.10 Hz, 6H), 1.29 (s, 9H), 1.41-1.45 (m, 3H), 1.85 (dd,J =7.48, 5.34 Hz, 1H), 2.12-2.19 (m, 1H), 2.43-2.49 (m, 1H), 2.60 (dd,J =13.73, 6.80 Hz, 1H), 2.89-2.93 (m, 1H), 3.50-3.57 (m, 2H), 3.73-3.78 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.18 (d,J=8.85 Hz, 1H), 4.35 (d,J= 12.21 Hz, 1H), 4.39 (d,J =8.55 Hz, 1H), 4.53 (t,J= 7.78 Hz, 1H), 5.07 (d,J= 9.16 Hz, 1H), 5.25 (d,J =18.01 Hz, 1H), 5.82 (t,J= 9.85 Hz, 1H), 5.88 (t,J= 9.80 Hz, 1H), 7.11 (d,J =5.19 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.24 (d,J =5.49 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 6.10 Hz, 1H), 8.10 (d,J =8.85 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.743 min) MSm/ z730 (MH<+>).
Primer 97: Izrada Jedinjenja 97.
Jedinjenje 97 je pripremljeno istim postupkom, kao i Jedinjenje 95, sa sledećim modifikacijama:
Modifikacije:
Korak 1:
H-alo-Thr(t-Bu)-OH je korišćen kao polazni materijal u koraku 1, da bi se dobila Boc-(2S,3S)-2-amino-3-etoksibutanska kiselina; LC-MS (retenciono vreme: 1.363 min) MSm/ z298 (M+Na<+>).
Korak 2:
Proizvod iz koraka 1 je zatim kuplovan na isti način sa proizvodom iz koraka 5 primera 11, da bi se dobilo Jedinjenje 97 (48.2 mg, 37% prinos): LC-MS (retenciono vreme: 1.820 min) MSm/ z758 (MH<+>).
Primer 99: Izrada Jedinjenja 99.
Jedinjenje 99 je pripremljeno istim postupkom, kao u koraku 1 Primera 55, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Jedinjenje 84 je korišćeno kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 99 (60.3mg, 98% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1.00 (q,J =7.12 Hz, 3H), 1.10-1.13 (m, 5H), 1.20-1.31 (m, 3H), 1.41 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.61-1.68 (m, 1H), 1.92 (dd,J=8.24, 5.49 Hz, 1H), 2.04-2.09 (m, 1H), 2.28 (q,J =8.55 Hz, 1H), 2.34-2.39 (m, 1H), 2.57 (s, 3H), 2.64-2.70 (m, 1H), 2.94-2.97 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.07-4.14 (dd,J= 12.05, 3.81 Hz, 1H), 4.13 (d,J= 6.10 Hz, 1H), 4.18 (d,J =5.80 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 12.21 Hz, 1H), 4.66-4.73 (m, 1H), 5.15 (d,J =10.68 Hz, 1H), 5.32 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.70-5.79 (m, 1H), 5.92 (t,J =3.66 Hz, 0.4H), 5.95 (t,J =3.66 Hz, 0.6H), 7.17 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.22 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.28 (dd,J =5.80, 3.36 Hz, 1H), 7.91 (dd,J =5.80, 4.27 Hz, 1H), 8.03 (d,J =8.85 Hz, 0.6H), 8.07 (d,J =9.16 Hz, 0.4H); LC-MS (retenciono vreme: 1.33 min) MSm/ z6.28 (MH<+>).
Primer 100: Izrada Jedinjenja 100.
U rastvor Jedinjenja 94 (0.600g, 0.838mmol) u DCE (3mL) je dodata TFA (3mL). Posle mešanja na rt, tokom 15 minuta, reakciona smeša je ukoncentrisana. Nastalo viskozno ulje je ponovo rastvoreno u DCE (5mL) i ponovo ukoncentrisano. Zatim je rastvoreno u DCM (2mL) i obrađeno rastvorom 1N HCI u Et20 (10mL). Nastala suspenzija je smrznuta na 0°C, vakuumski je filtrirana, isprana sa Et20 i osušena u vakuumskoj sušnici, da bi se dobio proizvod kao bis-hlorovodonična so, u vidu bele čvrste mase (527.1 g, 91% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1.08-1.15 (m, 2H), 1.21 (d,J =6.71 Hz, 4H), 1.28-1.33 (m, 1H), 1.41 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.91 (dd,J =8.24, 5.49 Hz, 1H), 2.28 (q,J =8.65 Hz, 1H), 2.34-2.37 (m, 1H), 2.68 (dd,J= 13.12, 7.02 Hz, 1H), 2.81 (s, 3H), 2.93-2.98 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.96-4.00 (m, 1H), 4.16 (dd,J =11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.27 (d,J= 11.60 Hz, 1H), 4.59 (d,J= 4.58 Hz, 1H), 4.69 (dd,J =10.07, 7.02 Hz, 1H), 5.14 (dd,J= 10.53, 1.37 Hz, 1H), 5.32 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.70-5.78 (m, 1H), 5.94 (t,J =3.66 Hz, 1H), 7.19 (d,J =9.16 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.32
(s, 1H), 7.91 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.09 (d,J= 9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.213 min), MS m/z 616 (MH<+>).
Primer 101: Izrada Jedinjenja 101.
U rastvor mešavine Jedinjenja 100 (80mg, 0.116mmol) i DIEA (31.5mg, 0.244mmol) u THF (2mL) dodat je N,N'-disukcinimidil karbonat (44.6mg, 0.174mmol). Nastala suspenzija je zračena u mikrotalasnoj do 80°C, u toku 15 minuta. Zatim je obrađena terc-amilaminom (84.8mg, I. 16mmol). Posle mešanja na rt, tokom 15 minuta, reakciona smeša je ukoncentrisana i prečišćena reverzno faznom prep-HPLC, da bi se dobilo Jedinjenje 101 (65.1 mg, 79% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 8 1.03-1.08 (m, 3H), 1.16 (d,J =6.41 Hz, 3H), 1.19 (s, 9H), 1.21-1.25 (m, 2H), 1.27 (d,J =6.10 Hz, 1H), 1.45 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.85 (dd,J =8.24, 5.19 Hz, 1H), 2.23 (q,J =9.46 Hz, 1H), 2.34-2.41 (m, 1H), 2.61 (dd,J =14.34, 7.32 Hz, 1H), 2.94-2.97 (m, 1H), 3.58-3.63 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.15 (dd,J =12.05, 3.81 Hz, 1H), 4.39 (d,JII. 60 Hz, 1H), 4.55 (dd,J =9.92, 7.48 Hz, 1H), 5.11 (d,J =10.68 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.40 Hz, 1H), 5.77-5.83 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 7.12 (dd,J =9.00, 2.29 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.24 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.10 (d,J= 9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.617 min), MSm/ z715 (MH<+>).
Primer 102: Izrada Jedinjenja 102.
Jedinjenje 102 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 101, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Terc-amilamin je upotrebljen kao polazni materijal, da bi se dobilo Jedinjenje 102 (62.5 mg, 74% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.77 (t,J =7.48 Hz, 2H), 0.84 (t,J =7.48 Hz, 1H), 1.04-1.08 (m, 2H), 1.13 (d,J =1.22 Hz, 9H), 1.16 (d,J= 6.41 Hz, 3H), 1.21 (s, 1H), 1.22-1.28 (m, 2H), 1.44 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.52-1.57 (m, 1H), 1.58-1.62 (m, 1H), 1.85 (dd,J =7.93, 5.19 Hz, 1H), 2.21-2.25 (m, 1H), 2.31-2.39 (m, 1H), 2.61 (dd,J =13.58, 7.17 Hz, 1H), 2.93-2.98 (m, 1H), 3.59-3.64 (m, 1H), 4.15 (dd,J=11.75, 3.81 Hz, 1H), 4.38 (d,J= 12.51 Hz, 1H), 4.50 (d,J =7.63 Hz, 1H), 4.55 (dd,J= 9.92, 7.78 Hz, 1H), 5.11 (d,J= 9.77 Hz, 1H), 5.29 (d,J =16.79 Hz, 1H), 5.77-5.83 (m, 1H), 5.86 (t,J =4.73 Hz, 1H), 7.12 (dd,J =8.85, 2.44 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.24 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.10 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.690 min), MSm/ z729
(MH<+>).
Primer 103: Izrada Jedinjenja 103.
Jedinjenje 103 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 101, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Ciklopentilamin je upotrebljen kao polazni materijal, da bi se dobilo Jedinjenje 103 (56.4 mg, 67% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1.01-1.08 (m, 2H), 1.07 (d,J=6.10 Hz, 1H), 1.16 (d,J=6.10 Hz, 3H), 1.21-1.25 (m, 3H), 1.30-1.33 (m, 1H), 1.44 (dd,J =9.77, 5.19 Hz, 1H), 1.51-1.56 (m, 2H), 1.60-1.65 (m, 2H), 1.71-1.75 (m, 1H), 1.80-1.84 (m, 1H), 1.86 (dd,J =8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.20-2.25 (m, 1H), 2.37-2.41 (m, 1H), 2.61 (dd,J= 14.04, 7.32 Hz, 1H), 2.93-2.98 (m, 1H), 3.60-3.65 (m, 1H), 3.75-3.80 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.17 (dd,J =12.05, 3.81 Hz, 1H), 4.37 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.55-4.59 (m, 2H), 5.10 (d,J =11.60 Hz, 1H), 5.29 (d,J =16.48 Hz, 1H), 5.78-5.83 (m, 1H), 5.85 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.13 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.24 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.607 min), MSm/ z727 (MH<+>).
Primer 104: Izrada Jedinjenja 104.
U rastvor mešavine Jedinjenja 100 (80mg, 0.116mmol) i DIEA (31.5mg, 0.244mmol) u THF (2mL) dodat je N,N'-disukcinimidil karbonat (44.6mg, 0.174mmol). Nastala suspenzija je zračena u mikrotalasnoj do 80°C, u toku 15 minuta. Zatim je dodat žitki rastvor natrijum ciklopentoksida, koji je pripremljen obradom rastvora ciklopentanola (110mg, 1.28mmol) u THF (1mL), na 0°C, sa NaH (60% u ulju, 46.4 mg, 1.16 mmol), na rt, tokom 15 minuta. Posle mešanja na rt, tokom 15 minuta, reakcija je ugašena zasićenim vodenim amonijum hloridom (1mL) i ekstrahovana sa EtOAc (5mL). Organski sloj je, zatim, propušten kroz celitnu hidromatriks kolonu, ukoncentrisan i prečišćen reverzno faznom prep-HPLC, da bi se dobilo Jedinjenje 104 (38.2 mg, 45%).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1.03-1.09 (m, 3H), 1.16 (d,J =6.10 Hz, 3H), 1.201.25 (m, 1H), 1.25-1.30 (m,J= 10.22, 5.34 Hz, 1H), 1.40-1.45 (m,J =10.83, 3.81 Hz, 1H), 1.46 (dd,J= 9.61, 5.34 Hz, 1H), 1.58-1.63 (m, 3H), 1.70-1.75 (m, 2H), 1.86 (dd,J =7.63, 5.49 Hz, 1H), 2.22-2.26 (m, 1H), 2.34-2.39 (m, 1H), 2.59-2.64 (m, 1H), 2.94-2.98 (m, 1H), 3.67 (dd,J= 7.78, 6.56 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.13 (dd,J =10.83, 4.12 Hz, 1H), 4.37-4.42 (m, 1H), 4.56 (dd,J =10.07, 7.32 Hz, 1H), 4.71-4.76 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.68 Hz, 1H), 5.31 (d,J =16.79 Hz, 1H), 5.80 (m, 1H), 5.85 (s, 1H), 7.13 (d,J =10.68 Hz, 1H), 7.19 (d,J= 1.83 Hz, 1H), 7.25 ( d,J =6.10 Hz, 1H), 7.89 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.09 (d,J= 9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.697 min), MSm/ z728 (MH<+>).
Primer 105: Izrada Jedinjenja 105.
U rastvor mešavine Jedinjenja 100 (80.0mg, 0.116mmol) i DIEA (31.5mg, 0.244mmol) u DCM (2mL) dodat je di-terc-amil dikarbonat (57.1 mg, 0.232mmol). Posle mešanja na rt, tokom 14 h, rastvarač je odstranjen, a proizvod je prečišćen reverzno faznom prep-HPLC, da bi se dobilo Jedinjenje 105 (62.5 mg, 74% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.79 (t,J =7.48 Hz, 3H), 1.04-1.08 (m, 3H), 1.17 (d,J=6.10 Hz, 3H), 1.19-1.23 (s, 3H), 1.24 (s, 3H), 1.39-1.43 (m, 1H), 1.46 (dd,J =9.61, 5.34 Hz, 1H), 1.60-1.65 (m, 2H), 1.86 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.22 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.35-2.40 (m, 1H), 2.61 (dd,J =14.04, 7.15 Hz, 1H), 2.94-3.00 (m, 1H), 3.64-4.00 (m, 1H), 3.92 (s, 4H), 4.14 (dd,J= 11.90, 3.05 Hz, 1H), 4.35 (d,J =7.93 Hz, 1H), 4.40 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.55 (dd,J= 9.31, 7.78 Hz, 1H), 5.11 (d,J =10.68 Hz, 1H), 5.30 (d,J =16.79 Hz, 1H), 5.79-5.83 (m, 1H), 5.85 (s, 1H), 7.12 (d,J =9.16 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.25 (d, J = 5.80 Hz, 1H), 7.86-7.90 (m, 1H), 8.09 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.740 min), MSm/ z730 (MH<+>).
Primer 106: Izrada Jedinjenja 106.
Jedinjenje 106 je pripremljeno istim postupkom kao i Jedinjenje 105, sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetil-etil estar piridin-2-il estra karbonske kiseline je upotrebljen kao polazni materijal, da bi se dobilo Jedinjenje 106 (58.1mg, 65% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 6* 1.04-1.08 (m, 3H), 1.17 (d,J=6.10 Hz, 3H), 1.19-1.23 (m, 1H), 1.23-1.27 (m, 1H), 1.28 (s, 3H), 1.46 (dd,J= 9.46, 5.19 Hz, 2H), 1.49 (s, 2H), 1.86 (dd,J =8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.21 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.36-2.40 (m, 1H), 2.62 (dd,J =13.74, 7.32 Hz, 1H), 2.93-2.98 (m, 1H), 3.65-3.70 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.12 (dd,J =11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.31 (d,J =8.24 Hz, 1H), 4.42 (d,J=11.90 Hz, 1 H), 4.57 (dd,J=10.07, 7.32 Hz, 1H), 5.11 (d,J=10.38 Hz, 1H), 5.30 (d,J= 16.79 Hz, 1H), 5.78-5.83 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 7.12 (dd,J =9.00, 2.29 Hz, 1H), 7.19 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.25 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.89 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.09 (d,J =8.85 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.770 min), MSm/ z770 (MH<+>).
Primer 107: Izrada Jedinjenja 107.
U rastvor proizvoda iz koraka 3 Primera 25 (100.Omg, 0.116 mmol), DIEA (62.5mg, 0.483mmol) i HATU (92.0mg, 0.242mmol) dodat je Boc-alo-Thr-OH (43.5mg, 0.177mmol). Posle mešanja na rt, tokom 3 h, reakciona smeša je isprana 5% vodenim NaHC03(1mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa 2x2mL DCM. Sakupljeni organski sloj je ispran 5% vodenom limunskom kiselinom (1ml_) i slanim rastvorom, osušen preko MgS04, ukoncentrisan i prečišćen reverzno faznom prep-HPLC, da bi se dobilo Jedinjenje 107 (62.5mg, 52% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.8-1.02 (m, 1H), 1.04-1.08 (m, 2H), 1.23-1.27 (m, 12H), 1.42 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.86 (t,J =6.26 Hz, 1H), 2.23-2.27 (m, 1H), 2.46-2.50 (m, 1H), 2.76 (dd,J =14.04, 6.71 Hz, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.94-3.98 (m, 1H), 4.28 (d,J =7.32 Hz, 2H), 4.52 (d,J =12.51 Hz, 1H), 4.63 (t,J= 9.00 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.07 Hz, 1H), 5.31 (d,J =16.79 Hz, 1H), 5.77-5.83 (m, 1H), 6.09 (s, 1H), 7.36-7.41 (m, 1H), 7.47 (t,J =7.17 Hz, 3H), 7.52 (d,J =7.63 Hz, 1H), 7.70 (t,J =7.17 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.88 (d,J =8.24 Hz, 1H), 8.17 (d,J= 7.93 Hz, 2H), 8.22 (d,J= 7.63 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.937 min), MSm/ z748 (MH<4>).
Primer 108: Izrada Jedinjenja 108.
Jedinjenje 108 je pripremljeno istim postupkom kao Jedinjenje 107 sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Boc-(2S,3S)-amino-3-metoksibutanska kiselina je upotrebljena kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 108 (75.1 mg, 51% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 0.80-1.02 (m, 4H), 1.18 (d,J =6.10 Hz, 3H), 1.28 (s, 9H), 1.44 (dd,J =9.77, 1.30 Hz, 1H), 1.45-1.50 (m, 1H), 1.85-1.90 (m, 1H), 2.14-2.18 (m, 1H), 2.55-2.59 (m, 1H), 2.72-2.76 (m, 1H), 2.91-2.95 (m, 1H), 3.34 (s, 3H), 3.65-3.69 (m, 1H), 4.32 (d,J= 10.68 Hz, 1H), 4.40 (d,J =7.93 Hz, 1H), 4.46 (d,J =13.12 Hz, 1H), 4.60 (t,J =8.24 Hz, 1H), 5.07 (d,J =9.46 Hz, 1H), 5.26 (d,J =17.40 Hz, 1H), 5.82-5.86 (m, 1H), 6.08 (s, 1H), 7.38 (dd,J =7.32, 6.10 Hz, 1H), 7.47 (t,J =7.02 Hz, 3H), 7.51 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.69 (t,J =6.56 Hz, 1H), 7.69 (t,J =6.56 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.88 (d,J =7.63 Hz, 1H), 8.18 (d,J =8.24 Hz, 3H), 8.21 (d,J =9.16 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.973 min), MSm/ z 762(MH<+>).
Primer 109: Izrada Jedinjenja 109.
Jedinjenje 109 je pripremljeno istim postupkom kao Jedinjenje 107 sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Boc-(2S,3S)-amino-3-etoksibutanska kiselina je upotrebljena kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 109 (57.2 mg, 47% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500 MHz) 5 1.02-1.08 (m, 4H), 1.17 (d,J =6.10 Hz, 6H), 1.19 (s, 1H), 1.19-1.24 (m, 1H), 1.23-1.27 (m,J =3.97 Hz, 1H), 1.30 (s, 9H), 1.44 (dd,J=9.77, 5.50 Hz, 1H), 1.46 (s, 1H), 1.88 (dd,J =7.78, 5.95 Hz, 1H), 2.20-1.25 (m, 1H), 2.49-2.54 (m, 1H), 2.69-2.73 (m, 1H), 2.93-2.97 (m, 1H), 3.53-3.57 (m, 2H), 3.75-3.80 (m, 1H), 4.34 (dd,J =11.75, 3.20 Hz, 1H), 4.42 (t,J =8.30 Hz, 2H), 4.57 (t,J= 8.09 Hz, 1H), 5.11 (d,J= 10.38 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.40 Hz, 1H), 5.78-5.83 (m, 1H), 6.09 (s, 1H), 7.38 (t,J= 7.32 Hz, 1H), 7.47 (t,J =7.63 Hz, 2H), 7.52 (d,J =7.02 Hz, 1H), 7.70 (t,J =7.93 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.88 (d,J= 7.93 Hz, 1H), 8.18 (d,J =7.32 Hz, 2H), 8.22 (d,J =8.24 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 2.030 min), MSm/ z776 (MH<+>).
Primer 110: Izrada Jedinjenja 110.
Jedinjenje 110 je pripremljeno istim postupkom kao Jedinjenje 89 sa sledećim modifikacijama: Modifikacije: Boc-L-Thr(Bn)-OH je upotrebljen kao polazni materijal da bi se dobilo Jedinjenje 110 (49.8mg, 48% prinos);
LC-MS (retenciono vreme: 1.850 min), MS m/z 792 (MH<+>).
Deo D:
Primer 120:IzradaJedinjenja 120.
Korak 1:
Rastvor Jedinjenja 23 (vidi Primer 23) (1.50g, 2.19mmol) u DCM (50mL) i trifluorosirćetnoj kiselini (50ml_) je mešan tokom 3 h na rt. Smeša je in vacuo ukoncentrisana do viskoznog ostatka, a zatim je rastvorena u 1,2-dihloroetanu i ponovo ukoncentrisana in vacuo da bi se dobio željeni proizvod bis-trifluorosirćetna so u vidu zatvoreno-bele staklaste čvrste mase (kvantitativno). Materijal je korišćen direktno u sledećem koraku, bez prečišćavanja.
Korak 2:
U rastvor Proizvoda iz Primera 120, Korak 1 (118mg, 0.146mmol) u 1,2-dihloroetanu (3mL) dodat je p-tolil hloroformat (32.4mg, 0.190mmol) i N,N-diizopropiletilamin (94.5mg, 0.731 mmol). Smeša je osavljena da zri tokom 72 h na rt. Reakciona smeša je isprana puferskim rastvorom pH = 4 (3x3ml_), a ispirci su ponovo ekstrahovani sa 1,2-dihloroetanom (3mL). Organske faze su sjedinjene i ukoncentrisane in vacuo. Sirovi proizvod je zatim rastvoren u MeOH i prečišćen reverzno-faznom preparativnom HPLC da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (Jedinjenje 120) u vidu žute staklaste čvrste mase (64.2mg, 61.1% prinos).<1>H NMR (CD3OD) 8 1.06-1.10 (m, 3H), 1.12 (s, 9H), 1.24-1.28 (m, 2H), 1.44 (dd,J =9.31, 5.34 Hz, 1H), 1.89 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.21-2.28 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.62-2.66 (m, 1H), 2.93-2.99 (m, 1H), 4.12 (dd,J =11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.42 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.57 (dd,J =10.22, 7.17 Hz, 1H), 5.13 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.76 (ddd,J =17.09, 9.77, 9.46 Hz, 1H), 5.87 (s, 1H), 6.79 (d,J =8.24 Hz, 2H), 7.07 (d,J =8.24 Hz, 2H), 7.30 (d,J= 6.10 Hz, 1H), 7.40 (t,J= 7.63 Hz, 1H), 7.68 (t,J =7.63 Hz, 1H), 7.79 (d,J =8.24 Hz, 1H), 7.39 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.17 (d,J=8.24 Hz, 1H); MSm/ z718 (MH<+>).
Primer 121:IzradaJedinjenja 121.
Jedinjenje 121 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 120 s izuzetkom što je umesto p-tolil hloroformata u Koraku 2 korišćen fenil hloroformat.
Korak 2:
Modifikacije: 30mg (0.19mmol) fenil hloroformata je upotrebljeno, dobijeno je 89.0mg proizvoda u vidu žute staklaste čvrste mase (50% prinos): MSm/ z704 (MH<+>).
Primer 122: Izrada Jedinjenja 122.
Jedinjenje 122 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 120 s izuzetkom što je umesto p-tolil hloroformata u Koraku 2 korišćen 4-fluorofenil hloroformat.
Korak 2:
Modifikacije: 33mg (0.19mmol) 4-fluorofenil hloroformata je upotrebljeno, dobijeno je 83.1 mg proizvoda u vidu lepljivog žutog ulja (78.8% prinos): MSm/ z722 (MH<+>).
Primer 123: Izrada Jedinjenja 123.
Jedinjenje 123 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 120 s izuzetkom što je umesto p-tolil hloroformata u Koraku 2 korišćen 4-metoksifenil hloroformat.
Korak 2:
Modifikacije: 35mg (0.19mmol) 4-metoksifenil hloroformata je upotrebljeno, dobijeno je 70.2mg proizvoda u vidu žute staklaste čvrste mase (65.4% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 8 1.06-I. 10 (m, 3H), 1.11 (s, 9H), 1.24-1.28 (m, 2H), 1.44 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.89 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.24 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.31 (ddd,J =13.81, 10.30, 3.97 Hz, 1H), 2.62-2.66 (m, 1H), 2.94-2.98 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 4.12 (dd,J= 11.60, 3.66 Hz, 1H), 4.42 (d,J =II. 60 Hz, 1H), 4.57 (dd,J =10.07, 7.32 Hz, 1H), 5.13 (d,J= 10.68 Hz, 1H), 5.30 (d,J=16.79 Hz, 1H), 5.72-5.80 (m, 1H), 5.87 (s, 1H), 6.80 (d,J =2.44 Hz, 4H), 7.30 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.42 (t,J =7.48 Hz, 1H), 7.69 (t,J =7.63 Hz, 1H), 7.80 (d,J =7.93 Hz, 1H), 7.93 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.18 (d,J =8.24 Hz, 1H); MSm/ z734 (MH<+>).
Primer 124: Izrada Jedinjenja 124.
Jedinjenje 124 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 120 s izuzetkom što je umesto p-tolil hloroformata u Koraku 2 korišćen 2-metoksietil estar hloroformne kiseline.
Korak 2:
Modifikacije: 26mg (0.19mmol) 2-metoksietil estra hloroformne kiseline je upotrebljeno, dobijeno je 87.4mg proizvoda u vidu lepljivog žutog ulja (87.2% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 8 0.96-1.02 (m, 3H), 1.05 (s, 9H), 1.16-1.18 (m, 2H), 1.40 (dd, J = 9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.85 (dd,J= 7.93, 5.19 Hz, 1H), 2.15 (q,J =8.75 Hz, 1H), 2.40 (ddd,J =13.89, 10.07, 4.12 Hz, 1H), 2.65 (dd,J= 13.58, 7.17 Hz, 1H), 2.90 (ddd,J =12.89, 8.16, 4.88 Hz, 1H), 3.27 (s, 3H), 3.36-3.44 (m, 2H), 3.81-3.84 (m, 1H), 3.92-3.96 (m, 1H), 4.12 (dd,J =11.60, 3.36 Hz, 1H), 4.44 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.57 (dd,J =9.46, 7.93 Hz, 1H), 5.07 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.25 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.80 (ddd,J= 17.32, 9.77, 9.54 Hz, 1H), 5.87 (s, 1H), 7.32 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.55 (t,J =7.32 Hz, 1H), 7.70 (t,J= 7.48 Hz, 1H), 7.80 (d,J =7.93 Hz, 1H), 7.96 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.19 (d,J= 8.24 Hz, 1H); MSm/ z686 (MH<+>).
Primer 125: Izrada Jedinjenja 125.
Jedinjenje 125 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 120 s izuzetkom što je umesto p-tolil hloroformata u Koraku 2 korišćen neopentil hloroformat.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 29mg (0.19mmol) neopentil hloroformata, dobijeno je 57.4mg proizvoda u vidu žute staklaste čvrste mase (56.2% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 8 0.83 (s, 9H), 1.05 (d,J =2.44 Hz, 9H), 1.07-1.09 (m, 2H), 1.23-1.27 (m, 2H), 1.43-1.46 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.21-2.25 (m, 1H), 2.29-2.33 (m, 1H), 2.61-2.65 (m, 1H), 2.92-2.96 (m, 1H), 3.42 (d,J =10.07 Hz, 1H), 3.56 (d,J =10.07 Hz, 1H), 4.09-4.11 (m, 1H), 4.33 (d,J =9.16 Hz, 1H), 4.43 (d,J =11.29 Hz, 1H), 4.54-4.57 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.07 Hz, 1H), 5.30 (d,J= 17.40 Hz, 1H), 5.73-5.80 (m, 1H), 5.88 (s, 1H), 7.33 (d,J =5.49 Hz, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.71 (t,J =6.87 Hz, 1H), 7.81 (d,J =7.93 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 5.80 Hz, 1H), 8.19 (d,J =7.63 Hz, 1H); MSm/ z698 (MH<+>).
Primer 126: Izrada Jedinjenja 126.
Jedinjenje 126 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 120 s izuzetkom što je umesto p-tolil hloroformata u Koraku 2 korišćen 2-fluoroetil hloroformat.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 24mg (0.19mmol) 2-fluoroetil hloroformata, dobijeno je 58.9mg proizvoda u vidu žute staklaste čvrste mase (59.8% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 8 1.05 (d,J =2.14 Hz, 9H), 1.07-1.09 (m, 2H), 1.22-1.27 (m, 2H), 1.42-1.45 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.24 (q,J= 8.75 Hz, 1H), 2.28-2.33 (m, 1H), 2.63 (dd,J =13.43, 6.41 Hz, 1H), 2.92-2.96 (m, 1H), 3.92-4.10 (m, 3H), 4.31-4.37 (m, 2H), 4.42-4.46 (m, 2H), 4.54-4.57 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.71-5.79 (m, 1H), 5.88 (s, 1H), 7.33 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.55 (t,J =7.17 Hz, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.81 (d,J= 7.93 Hz, 1H), 7.96 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.19 (d,J =7.63 Hz, 1H); MSm/ z674 (MH<+>).
Primer 127: Izrada Jedinjenja 127.
Jedinjenje 127 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 120 s izuzetkom što je umesto p-tolil hloroformata u Koraku 2 korišćen 2-metoksifenil hloroformat.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 35mg (0.19mmol) 2-metoksifenil hloroformata, dobijeno je 97.6mg proizvoda u vidu lepljivog žutog ulja (91.0% prinos). MSm/ z734 (MH<+>).
Primer 128: Izrada Jedinjenja 128.
Jedinjenje 128 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 120 s izuzetkom što je umesto p-tolil hloroformata u Koraku 2 korišćen 2-(-)-(1 F?)-mentil hloroformat.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 42mg (0.19mmol) (-)-(1ff)-mentil hloroformata, dobijeno je 69.1 mg proizvoda u vidu bele staklaste čvrste mase (61.7% prinos): MSm/ z766 (MH<+>).
Primer 129: Izrada Jedinjenja 129.
Jedinjenje 129 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 120 s izuzetkom što je umesto p-tolil hloroformata u Koraku 2 korišćen heksil hloroformat.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 31 mg (0.19mmol) heksil hloroformata, dobijeno je 66.7mg proizvoda u vidu žute staklaste čvrste mase (64.1% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 5 0.87-0.99 (m, 5H), 1.05 (s, 9H), 1.07-1.09 (m, 2H), 1.22-1.28 (m, 6H), 1.43-1.48 (m, 3H), 1.88 (dd,J =8.24, 5.49 Hz, 1H), 2.24 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.28-2.33 (m, 1H), 2.63 (dd,J= 14.34, 7.63 Hz, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 3.72 (dt,J =10.61, 6.60 Hz, 1H), 3.81-3.86 (m, 1H), 4.10 (dd,J= 11.60, 3.36 Hz, 1H), 4.32 (d,J =8.85 Hz, 1H), 4.43 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.55 (dd,J =9.77, 7.32 Hz, 1H), 5.13 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.76 (ddd,J =17.09, 10.07, 9.16 Hz, 1H), 5.89 (s, 1H), 7.33 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.54 (t,J =7.48 Hz, 1H), 7.69-7.72 (m, 1H), 7.81 (d,J =8.24 Hz, 1H), 7.97 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.20 (d,J =8.24 Hz, 1H); MSm/ z712 (MH<+>).
Primer 130: Izrada Jedinjenja 130.
Korak 1:
Rastvor Jedinjenja 23 (vidi Primer 23) (1.50g, 2.19mmol) u DCM (50mL) i trifluorosirćetnoj kiselini (50mL) je mešan tokom 3 h na rt. Smeša jein vacuoukoncentrisana do viskoznog ostatka, a zatim je rastvorena u 1,2-dihloroetanu i ponovo ukoncentrisanain vacuoda bi se dobio željeni proizvod bis-trifluorosirćetna so u vidu zatvoreno-bele staklaste čvrste mase (kvantitativno). Materijal je korišćen direktno u sledećem koraku, bez prečišćavanja.
Korak 2:
Smeša proizvoda iz Koraka 1 (118mg, 0.146mmol), ferc-butil sirćetne kiseline (22mg, 0.19mmol), HATU (72mg, 0.19mmol) i /V-metil morfolina (59mg, 0.58mmol) u 1,2-dihloroetanu je mešana tokom 24 h na rt. Reakciona smeša je isprana puferskim rastvorom pH = 4 (3x3ml_), a ispirci su ponovo ekstrahovani sa 1,2-dihloroetanom (3ml_). Organske faze su sjedinjene i ukoncentrisane in vacuo. Sirovi proizvod je zatim rastvoren u MeOH i prečišćen reverzno-faznom preparativnom HPLC da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (Jedinjenje 130) u vidu bledo žute staklaste čvrste mase (43.4mg, 43.5% prinos).<1>H NMR (CD3OD) 8 0.82 (d,J =1.83 Hz, 9H), 1.06 (d,J =2.14 Hz, 9H), 1.07-1.10 (m, 2H), 1.22-1.28 (m, 2H), 1.43-1.46 (m, 1H), 1.87-1.90 (m, 1H), 1.99 (d,J= 1.83 Hz, 2H), 2.20-2.26 (m, 1H), 2.27-2.33 (m, 1H), 2.59-2.64 (m, 1H), 2.93-2.97 (m, 1H), 4.12-4.14 (m, 1H), 4.42 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.51-4.55 (m, 1H), 4.67 (dd, J = 9.31, 1.98 Hz, 1H), 5.11-5.14 (m, 1H), 5.29 (d,J =17.40 Hz, 1H), 5.72-5.80 (m, 1H), 5.89 (d,J=1.83 Hz, 1H), 7.32 (dd,J =5.80, 2.14 Hz, 1H), 7.52-7.55 (m, 1H), 7.69-7.72 (m, 1H), 7.81 (d,J =8.24 Hz, 1H), 7.96 (dd,J =5.80, 1.83 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 8.24 Hz, 1H); MSm/ z682
(MH<+>).
Primer 131: Izrada Jedinjenja 131.
Jedinjenje 131 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 130 s izuzetkom što je umesto rerc-butil sirćetne kiseline u Koraku 2 korišćena metoksisirćetna kiselina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 17mg (0.19mmol) metoksisirćetne kiseline, dobijeno je 49.9mg proizvoda u vidu bledo žute staklaste čvrste mase (52.0% prinos):<1>H NMR (CD3OD) § 1.05-1.08 (m, 11H), 1.24-1.26 (m, 2H), 1.45 (ddd,J =9.31, 5.34, 3.66 Hz, 1H), 1.88 (ddd,J =8.39, 5.19, 3.81 Hz, 1H), 2.21-2.27 (m, 1H), 2.29-2.35 (m, 1H), 2.60-2.64 (m, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 3.34 (d,J =3.66 Hz, 3H), 3.69 (dd,J =15.26, 3.66 Hz, 1H), 3.81-3.85 (m, 1H), 4.15 (dt,J =11.67, 3.62 Hz, 1H), 4.35 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.55 (ddd,J =10.30, 6.94, 3.20 Hz, 1H), 4.66 (dd,J =9.61, 3.51 Hz, 1H), 5.11-5.14 (m, 1H), 5.28-5.32 (m, 1H), 5.73-5.81 (m, 1H), 5.90 (d,J= 3.36 Hz, 1H), 7.33 (dd,J =5.65, 3.20 Hz, 1H), 7.54-7.58 (m, 1H), 7.69-7.73 (m, 1H), 7.80-7.82 (m, 1H), 7.95-7.97 (m, 1H), 8.15 (dd,J= 8.39, 2.59 Hz, 1H); MSm/ z656 (MH<+>).
Primer 132: Izrada Jedinjenja 132.
Jedinjenje 132 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 130 s izuzetkom što je umesto ferc-butil sirćetne kiseline u Koraku 2 korišćena metoksipropionska kiselina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 20mg (0.19mmol) metoksi propionske kiseline, dobijeno je 50.0mg proizvoda u vidu žute staklaste čvrste mase (51.1% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 6 1.06 (d,J =1.83 Hz, 9H), 1.07-1.09 (m, 2H), 1.23-1.27 (m, 2H), 1.44 (ddd,J =9.38, 5.26, 1.83 Hz, 1H), I. 87-1.90 (m, 1H), 2.21-2.27 (m, 1H), 2.29-2.33 (m, 2H), 2.40-2.46 (m, 1H), 2.59-2.64 (m, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 3.25 (d,J =1.83 Hz, 3H), 3.45-3.54 (m, 2H), 4.12-4.16 (m, 1H), 4.37 (d,J =II. 60 Hz, 1H), 4.52-4.55 (m, 1H), 4.65 (dd,J =9.16, 1.83 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.30 (d,J= 17.40 Hz, 1H), 5.72-5.80 (m, 1H), 5.89 (s, 1H), 7.33 (dd, J = 5.65, 1.98 Hz, 1H), 7.54-7.58 (m, 1H), 7.69-7.73 (m, 1H), 7.81 (d,J= 8.24 Hz, 1H), 7.96 (dd,J =6.10, 1.83 Hz, 1H), 8.18 (d,J =8.24 Hz, 1H); MSm/ z670 (MH<+>).
Primer 133: Izrada Jedinjenja 133.
Jedinjenje 133 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 130 s izuzetkom što je umesto ferc-butil sirćetne kiseline u Koraku 2 korišćena (S)-1,4-benzodioksan-2-karboksilna kiselina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 35mg (0.19mmol) (S)-1,4-benzodioksan-2-karboksilna kiselina, dobijeno je 54.0mg proizvoda u vidu bledo žute staklaste čvrste mase (49.5% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 5 0.83 (d,J =3.36 Hz, 9H), 1.05-1.08 (m, 2H), 1.20-1.25 (m, 1H), 1.26-1.31 (m, 1H), 1.45-1.49 (m, 1H), 1.86-1.90 (m, 1H), 2.21-2.25 (m, 1H), 2.28-2.34 (m, 1H), 2.59-2.65 (m, 1H), 2.90-2.94 (m, 1H), 4.12-4.17 (m, 2H), 4.32 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.35-4.39 (m, 1H), 4.55-4.61 (m, 3H), 5.11-5.14 (m, 1H), 5.28-5.32 (m, 1H), 5.75-5.83 (m, 1H), 5.90 (d,J=3.66 Hz, 1H), 6.80-6.89 (m, 3), 7.03-7.07 (m, 1H), 7.32-7.34 (m, 1H), 7.55-7.58 (m, 1H), 7.68-7.72 (m, 1H), 7.80-7.82 (m, 1H), 7.96-7.98 (m, 1H), 8.15-8.18 (m, 1H); MSm/ z746 (MH<+>).
Primer 134: Izrada Jedinjenja 134.
Korak 1:
Smeša proizvoda iz Primera 11, Koraka 5 (100mg, 0.172mmol),N- a- terc-butoksikarbonil-L-fenilglicina (45.3mg, 0.180mmol), HATU (84.9mg, 0.223mmol) i /V-metilmorfolina (87.0mg, 0.859mmol) u DMF-u (1.0ml_) je mešana tokom 18 h na rt. Smeša je prečišćena direktno reverzno-faznom preparativnom HPLC da bi se dobilo 29.7mg (23.6% prinos) Jedinjenja 134 u vidu belog praška.<1>H NMR (CD3OD) 5 0.97-1.07 (m, 2H), 1.12-1.17 (m, 1H), 1.22-1.32 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.90 (dd,J =8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.20-2.28 (m, 2H), 2.54 (dd,J =13.58, 6.56 Hz, 1H), 2.85-2.89 (m,J =8.24 Hz, 1H), 3.50 (d,J =10.99 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.11 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.63 (dd,J =9.46, 7.32 Hz, 1H), 5.13 (dd,J =10.38, 1.53 Hz, 1H), 5.32 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.74-5.84 (m, 2H), 7.16-7.19 (m, 1H), 7.25 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.32-7.43 (m, 6H), 7.86 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.13 (d,J =9.16 Hz, 1H); MSm/ z734 (MH<+>).
Primer 135: Izrada Jedinjenja 135.
Jedinjenje 135 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 134 s izuzetkom što je umesto /V-a-ferc-butoksikarbonil-L-fenilglicina u Koraku 1 korišćen /V-a-ferc-butoksikarbonil-eritro-DL-p-metilfenilalanin. Jedinjenje 135 je pripremljeno iz smeše fV-a-ferc-butoksikarbonil-eritro-DL-p-metilfenilalanina, a nastala dva dijastereomera su odvojena reverzno-faznom preparativnom HPLC. Ovo jedinjenje je jedan izomer koji se prvi eluira sa kolone preparativne HPLC. Egzaktna stereohemija na (3-met.il fenilalaninskom delu molekula je nepoznata.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 50.4mg (0.180mmol) /V-a-ferc-butoksikarbonil-eritro-DL-p-metilfenilalanin, dobijeno je 29.7mg proizvoda u vidu belog praška (22.7% prinos):<1>H NMR (CD3OD) § 1.11 (d, J = 7.93 Hz, 2H), 1.15 (d,J =6.10 Hz, 3H), 1.24-1.32 (m, 11H), 1.44 (dd,J =9.16, 5.19 Hz, 1H), 1.90-1.94 (m, 1H), 2.25-2.29 (m, 1H), 2.36 (t,J =13.28 Hz, 1H), 2.62 (dd,J=13.58, 7.17 Hz, 1H), 2.98-3.02 (m, 1H), 3.20-3.24 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 4.11 (dd,J=11.60, 3.05 Hz, 1H), 4.51 (d,J =10.68 Hz, 1H), 4.57 (dd,J =10.07, 7.32 Hz, 1H), 4.63 (d,J =12.21 Hz, 1H), 5.14 (d,J= 10.07 Hz, 1H), 5.32 (d,J= 16.79 Hz, 1H), 5.76-5.84 (m, 1H), 5.88 (s, 1H), 7.08 (dd,J= 8.70, 1.68 Hz, 1H), 7.16-7.18 (m, 2H), 7.23-7.27 (m, 5H), 7.89 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.09 (d,J= 9.46 Hz, 1H); MSm/ z762 (MH<+>).
Primer 136: Izrada Jedinjenja 136.
Jedinjenje 136 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 134 s izuzetkom što je umesto /V-a-ferc-butoksikarbonil-L-fenilglicina u Koraku 1 korišćen /V-a-ferc-butoksikarbonil-eritro-DL-p-metilfenilalanin. Jedinjenje 136 je pripremljeno iz smeše /V-ferc-butoksikarbonil-eritro-DL-p-metilfenilalanina, a nastala dva dijastereomera su odvojena reverzno-faznom preparativnom HPLC. Ovo jedinjenje je jedan izomer koji se kao drugi eluira sa kolone preparativne HPLC. Egzaktna stereohemija na P-metilfenilalaninskom delu molekula je nepoznata.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 50.4mg (0.180mmol) /V-a-rerc-butoksikarbonil-eritro-DL-P-metilfenilalanina, dobijeno je 26.3mg proizvoda u vidu belog praška (20.1% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 5 1.04 (s, 1H), 1.13 (d,J =6.71 Hz, 3H), 1.12-1.17 (m, 2H), 1.30 (s, 9H), 1.33-1.36 (m, 1H), 1.41 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.87 (dd,J= 7.78, 5.34 Hz, 1H), 2.29 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.36 (ddd,J =13.81, 9.99, 4.27 Hz, 1H), 2.54 (dd,J =13.58, 7.17 Hz, 1H), 3.00-3.04 (m, 1H), 3.05-3.08 (m, 1H), 3.80 (d,J =11.90 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 4.10 (dd, J = 12.05, 3.81 Hz, 1H), 4.53-4.57 (m, 1H), 4.59 (d,J =8.24 Hz, 1H), 5.14 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.34 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.78-5.85 (m, 2H), 6.75 (t,J =7.32 Hz, 1H), 7.03 (t,J =7.48 Hz, 2H), 7.12 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.19 (dd,J =9.31, 1.68 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.28 (d,J= 6.10 Hz, 1H), 7.89 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.03 (d,J =8.85 Hz, 1H); MSm/ z762 (MH<+>).
Primer 137: Izrada Jedinjenja 137.
Korak 1:
Smeša proizvoda iz Primera 11, Koraka 5 (100mg, 0.172mmol), 4-benzil estraN- a-ferc-butoksikarbonil-L-asparaginske kiseline (59.5mg, 0.180mmol), HATU (84.9mg, 0.223mmol) iN-metilmorfolina (87.0mg, 0.859mmol) u DCM (3.0mL) je mešana tokom 18 h na rt. Reakciona smeša je isprana puferskim rastvorom pH = 4 (3x3ml_), a ispirci su ponovo ekstrahovani sa DCM (3ml_). Organske faze su sjedinjene i ukoncentrisanein vacuo.Sirovi proizvod je zatim rastvoren u MeOH i prečišćen reverzno-faznom preparativnom HPLC da bi se dobilo Jedinjenje 137 u vidu bledo zatvoreno-bele staklaste čvrste mase (26.0mg, 18.8% prinos).<1>H NMR (CD3OD) 5 0.95-1.01 (m, 2H), 1.16 (s, 9H), 1.22-1.29 (m, 2H), 1.44 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =7.93, 5.19 Hz, 1H), 2.26 (q,J=8.85 Hz, 1H), 2.32-2.37 (m, 1H), 2.61 (dd,J=13.73, 7.32 Hz, 1H), 2.66 (dd,J =16.48, 6.10 Hz, 1H), 2.89 (ddd,J =12.67, 8.09, 4.88 Hz, 1H), 3.05 (dd,J =16.63, 8.39 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.04-4.07 (m, 1H), 4.47 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.52-4.56 (m, 1H), 4.75 (dd,J =8.24, 6.41 Hz, 1H), 5.12-5.14 (m, 1H), 5.14 (s, 2H), 5.31 (d,J= 17.09 Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 2H), 7.12 (d,J =9.16 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.24 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.31-7.33 (m, 1H), 7.36 (t,J= 7.32 Hz, 2H), 7.39 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.88 (d,J= 6.10 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 9.16 Hz, 1H); MSm/ z806 (MH<+>).
Primer 138: Izrada Jedinjenja 138.
Jedinjenje 138 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 137 s izuzetkom što je umesto 4-benzil estra /V-a-ferc-butoksikarbonil-L-asparaginske kiseline u Koraku 1 korišćen 4-metil estar /V-terc-butoksikarbonil-L-asparaginske kiseline.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 45.5mg (0.180mmol) 4-metil estra /V-terc-butoksikarbonil-L-asparaginske kiseline, dobijeno je 93.5mg proizvoda u vidu zatvoreno-bele staklaste čvrste mase (74.6% prinos):<1>H NMR (CD3OD) § 1.07-1.09 (m, 2H), 1.17 (s, 9H), 1.20-1.29 (m, 2H), 1.41-1.44 (m, 1H), 1.84-1.86 (m, 1H), 2.26 (q,J= 8.85 Hz, 1H), 2.33-2.38 (m, 1H), 2.58-2.64 (m, 2H), 2.92-3.02 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 4.15 (dd,J =11.44, 2.29 Hz, 1H), 4.49-4.56 (m, 2H), 4.72-4.76 (m, 1H), 5.13 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.32 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.74-5.82 (m, 1H), 5.87 (s, 1H), 7.12 (d,J =9.16 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.24 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.87 (dd,J= 5.80, 0.92 Hz, 1H), 8.10 (d,J =8.85 Hz, 1H); MSm/ z730 (MH<+>).
Primer 139: Izrada Jedinjenja 139.
Jedinjenje 139 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 137 s izuzetkom što je umesto 4-benzil estra /V-a-ferc-butoksikarbonil-L-asparaginske kiseline u Koraku 1 korišćen4- terc-butil estar A/-terc-butoksikarbonil-L-asparaginske kiseline.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 52.2mg (0.180mmol) 4-terc-butil estra /V-terc-butoksikarbonil-L-asparaginske kiseline, dobijeno je 125mg proizvoda u vidu zatvoreno-bele staklaste čvrste mase (99.8% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 5 1.08-1.10 (m, 2H), 1.17 (s, 9H), 1.21-1.29 (m, 2H), 1.46 (s, 10H), 1.82 (dd,J= 7.78, 5.34 Hz, 1H), 2.26 (q,J =8.75 Hz, 1H), 2.32-2.38 (m, 1H), 2.51 (dd,J= 16.33, 7.17 Hz, 1H), 2.63 (dd,J =14.04, 7.02 Hz, 1H), 2.89 (dd,J =16.48, 7.63 Hz, 1H), 2.92-2.98 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.15 (dd,J =11.60, 3.05 Hz, 1H), 4.50-4.57 (m, 2H), 4.70-4.75 (m, 1H), 5.13 (dd,J =10.38, 1.53 Hz, 1H), 5.32 (d,J =17.40 Hz, 1H), 5.76-5.83 (m, 1H), 5.87 (s, 1H), 7.13 (dd,J =8.85, 1.53 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.25 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 8.10 (d,J= 9.16 Hz, 1H); MSm/ z772
(MH<+>).
Primer 140: Izrada Jedinjenja 140.
Jedinjenje 138 (50.0mg, 0.0685mmol) je rastvoreno u mešavini THF-a (1ml_), MeOH (1mL) i 1.0M vodenom NaOH (0.137mL, 0.137mmol). Posle 3 h, reakciona smeša je neutralisana dodatkom 1M vodene HCI (0.137ml_, 0.137mmol). Sirova smeša je ukoncentrisanain vacuo,zatim su dodati puferski rastvor pH = 4 (3mL) i DCM (3mL) i smeša je mućkana. Izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je dalje ekstrahovan sa DCM (2x1 mL). Organske faze su sjedinjene, osušene preko anhidrovanog MgS04, filtrirane i ukoncentrisanein vacuoda bi se dobilo 48.0mg (97.9% prinos) Jedinjenja 140 u vidu zatvoreno-bele staklaste čvrste mase:<1>H NMR (CD3OD) 5 1.04-1.07 (m, 2H), 1.17 (s, 9H), 1.22-1.25 (m, 2H), 1.38 (dd,J =9.31, 5.34 Hz, 1H), 1.78 (dd,J =7.78, 5.34 Hz, 1H), 2.30 (q,J =8.75 Hz, 1H), 2.37-2.42 (m, 1H), 2.48 (dd,J =15.87, 4.58 Hz, 1H), 2.72 (dd,J =13.12, 7.63 Hz, 1H), 2.88 (dd,J =15.72, 10.53 Hz, 1H), 2.90-2.95 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.21 (dd,J =11.44, 2.90 Hz, 1H), 4.57 (t,J =8.70 Hz, 1H), 4.62-4.65 (m, 2H), 5.10 (d,J= 10.68 Hz, 1H), 5.34 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.69-5.76 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.10 (d,J =9.16 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.23 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.88 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.12 (d,J =8.85 H-71WV MQ m/7 71« /MWn
Primer 141: Izrada Jedinjenja 141.
Korak 1:
Proizvod iz Primera 55, Korak 1 (65mg, 0.0947mmol), A/,/V-disukcinimidil karbonat (41.0mg, 0.142mmol) i /V,/V-diizopropiletilamin (30.6mg, 0.237mmol) su sjedinjeni sa anhidrovanim THF (1mL), a nastala suspenzija je zagrevana do 80°C u mikrotalasnom reaktoru tokom 15 min. Posle hlađenja do rt, ova sirova smeša je korišćena direktno u sledećem koraku.
Korak 2:
Sirova reakciona smeša iz Koraka 1 je obrađena mešavinom hidrohlorida metil estra L-valina (159mg, 0.947mmol) i /V,A/-diizopropietilamina (122mg, 0.947mmol) u anhidrovanom THF (2ml_). Nastala smeša je mešana tokom 18 h na rt. Rastvarač je odstranjenin vacuo,a ostatak je pokupljen u DCM (2ml_) i ispran puferskim rastvorom pH = 4 (3x2ml_). Puferski ispirci su sjedinjeni i ponovo ekstrahovani sa DCM (2ml_). Sjedinjene DCM faze su ukoncentrisanein vacuo,a nastali ostatak je rastvoren u MeOH i prečišćen reverzno-faznom preparativnom HPLC da bi se dobilo 38.1 mg (52.2% prinos) Jedinjenja 141 u vidu belog praška:<1>H NMR (CD3OD) 5 0.83 (dd,J =6.87, 3.81 Hz, 6H), 1.06 (s, 11H), 1.21-1.26 (m, 2H), 1.41 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.87 (dd,J= 8.09, 5.34 Hz, 1H), 1.95-2.02 (m, 1H), 2.21 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.29 (ddd,J =13.89, 9.92, 4.27 Hz, 1H), 2.60 (dd,J =13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 4.00 (d,J =5.49 Hz, 1H), 4.09 (dd,J =11.90, 3.97 Hz, 1H), 4.40-4.43 (m, 2H), 4.52 (dd,J= 10.07, 7.02 Hz, 1H), 5.11 (dd,J =10.38, 1.53 Hz, 1H), 5.28 (dd, J = 17.09, 1.22 Hz, 1H), 5.75 (ddd,J= 17.17, 10.15, 9.00 Hz, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.11 (dd,J= 9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.24 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 7.87 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.10 (d,J =8.85 Hz, 1H); MSm/ z 771(MH<+>).
Primer 142: Izrada Jedinjenja 142.
Jedinjenje 142 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 141 s izuzetkom što je umesto hidrohlorida metil estra L-valina u Koraku 2 korišćen hidrohlorid metil estra D-valina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 159mg (0.947mmol) hidrohlorida metil estra D-valina, dobijeno je 23.0mg proizvoda u vidu belog praška (31.5% prinos):<1>H NMR (CD3OD) S 0.88 (dd,J=13.89, 6.87 Hz, 6H), 1.06 (s, 9H), 1.07-1.09 (m, 2H), 1.23-1.27 (m, 2H), 1.41 (dd, J= 9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.01-2.07 (m, 1H), 2.23 (q,J= 9.05 Hz, 1H), 2.31 (ddd,J =14.11, 9.99, 4.27 Hz, 1H), 2.63 (dd,J =13.89, 7.17 Hz, 1H), 2.93-2.98 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 4.03 (d,J =5.19 Hz, 1H), 4.09 (dd,J =11.75, 3.81 Hz, 1H), 4.38 (s, 1H), 4.48-4.54 (m, 2H), 5.12 (dd,J =10.38, 1.22 Hz, 1H), 5.29 (dd,J =17.24, 1.07 Hz, 1H), 5.70-5.77 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.22 (dd,J =9.00, 2.59 Hz, 1H), 7.25 (d,J= 2.44 Hz, 1H), 7.35 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.87 (d,J= 6.10 Hz, 1H), 8.16 (d,J =9.16 Hz, 1H); MSm/ z771
(MH<+>).
Primer 143: Izrada Jedinjenja 143.
Jedinjenje 143 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 137 s izuzetkom što je umesto 4-benzil estra A/-a-ferc-butoksikarbonil-L-asparaginske kiseline u Koraku 1 korišćen AMerc-butoksikarbonil-L-cikloheksilglicin.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 46.2mg (0.180mmol) /V-terc-butoksikarbonil-L-cikloheksilglicina, dobijeno je 93.9mg proizvoda u vidu belog praška (73.8% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 5 1.04-1.08 (dd,J =7.78, 2.29 Hz, 4H), 1.19-1.26 (m, 4H), 1.25 (s, 9H), 1.41 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.63-1.82 (m, 7H), 1.88 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.22 (q,J =9.05 Hz, 1H), 2.32-2.37 (m, 1H), 2.59 (dd,J=13.58, 6.87 Hz, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.05 (dd,J =11.75, 3.20 Hz, 1H), 4.09 (d,J =8.85 Hz, 1H), 4.47 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.53 (dd,J =10.22, 7.17 Hz, 1H), 5.11 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.29 (d,J =16.79 Hz, 1H), 5.79 (ddd,J =16.86, 9.92, 9.54 Hz, 1H), 5.84 (s, 1H), 7.10 (d,J =8.85 Hz, 1H), 7.17 (d,J =1.53 Hz, 1H), 7.24 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J = 6.10 Hz,1H), 8.09 (d,J = 8.85 Hz, 1H); MS m/ z 740
(MH<+>).
Primer 144: Izrada Jedinjenja 144.
Jedinjenje 144 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 141 s izuzetkom što je pojačana skala i, umesto hidrohlorida metil estra L-valina u Koraku 2 korišćen je hidrohlorid metil estra glicina.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 100mg (0.146mmol) proizvoda iz Primera 55, Korak 1, 62.2mg (0.219mmol) /V,/V-disukcinimidil karbonata i 47.0mg (0.364mmol) /V,/V-diizopropiletilamina.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 183mg (1.46mmol) hidrohlorida metil estra glicina i 188mg (1.46mmol) A/,/V-diizopropiletilamina, dobijeno je 56.3mg proizvoda u vidu belog praška (52.9% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 8 1.01-1.04 (m, 2H), 1.05 (s, 9H), 1.17-1.21 (m, 2H), 1.40 (dd,J =9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.85 (dd,J= 7.78, 5.34 Hz, 1H), 2.18 (q,J =8.55 Hz, 1H), 2.33 (ddd,J =13.89, 9.92, 4.27 Hz, 1H), 2.61 (dd,J =13.73, 7.32 Hz, 1H), 2.89-2.94 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.69-3.77 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 4.10 (dd,J=11.75, 3.81 Hz, 1H), 4.40-4.42 (m, 2H), 4.53 (dd,J= 9.92, 7.17 Hz, 1H), 5.08 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.26 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.77 (ddd,J =17.09, 10.22, 9.00 Hz, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.13 (dd,J =8.85, 2.44 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.23 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.87 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.09 (d,J =8.85 Hz, 1H); MSm/ z729 (MH<+>).
Primer 145: Izrada Jedinjenja 145.
Jedinjenje 145 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 141 s izuzetkom što je pojačana skala i, umesto hidrohlorida metil estra L-valina u Koraku 2 korišćen hidrohlorid metil estra L-alanina.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 100mg (0.146mmol) proizvoda iz Primera 55, Korak 1, 62.2mg (0.219mmol) A/,/V-disukcinimidil karbonata i 47.0mg (0.364mmol) N,N-diizopropiletilamina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 203mg (1.46mmol) hidrohlorida metil estra L-alanina i 188mg (1.46mmol) /V,/V-diizopropiletilamina, dobijeno je 64.3mg proizvoda u vidu belog praška (59.3% prinos):<1>H NMR (CD3OD) § 0.97-1.02 (m, 2H), 1.05 (s, 9H), 1.19 (d,J =7.02 Hz, 3H), 1.18-1.22 (m, 2H), 1.41 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.19 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.32 (ddd,J =13.81, 9.84, 4.43 Hz, 1H), 2.61 (dd,J =13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.93 (ddd,J= 12.82, 8.09, 4.73 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 3.99 (q,J= 7.22 Hz, 1H), 4.08 (dd,J =11.75, 3.81 Hz, 1H), 4.38 (s, 1H), 4.42 (d,J= 11.60 Hz, 1H), 4.53 (dd,J= 10.07, 7.32 Hz, 1H), 5.09 (dd,J =10.38, 1.53 Hz, 1H), 5.27 (dd,J =17.09, 1.22 Hz, 1H), 5.77 (ddd,J =17.09, 10.07, 9.16 Hz, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.13 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.18 (d,J= 2.44 Hz, 1H), 7.24 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.87 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.10 (d,J =9.16 Hz, 1H); MSm/ z743 (MH<+>).
Primer 146: Izrada Jedinjenja 146.
Jedinjenje 147 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 141 s izuzetkom što je pojačana skala i, umesto hidrohlorida metil estra L-valina u Koraku 2 korišćen je hidrohlorid metil estra L-ferc-leucina.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 100mg (0.146mmol) proizvoda iz Primera 55, Korak 1, 62.2mg (0.219mmol) A/,/V-disukcinimidil karbonata i 47.0mg (0.364mmol) /V,/V-diizopropiletilamina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 265mg (1.46mmol) hidrohlorida metil estra L-ferc-leucina i 188mg (1.46mmol) /V,/V-diizopropiletilamina, dobijeno je 68.3mg proizvoda u vidu belog praška (59.6% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 8 0.88 (s, 9H), 0.97-1.03 (m, 2H), 1.06 (s, 9H), 1.18-1.24 (m, 2H), 1.41 (dd,J= 9.46, 5.49 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.19 (q,J= 8.75 Hz, 1H), 2.30 (ddd,J =13.89, 10.07, 4.43 Hz, 1H), 2.60 (dd,J =13.73, 7.32 Hz, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.91 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.09 (dd,J =11.60, 3.97 Hz, 1H), 4.38 (s, 1H), 4.43 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.51 (dd,J =10.07, 7.32 Hz, 1H), 5.10 (dd,J= 10.38, 1.53 Hz, 1H), 5.27 (dd,J= 17.24, 1.37 Hz, 1H), 5.76 (ddd,J= 17.09, 10.07, 9.16 Hz, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.12 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.18 (d,J= 2.14 Hz, 1H), 7.24 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.87 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.11 (d,J =9.16 Hz, 1H); MSm/ z785 (MH<+>).
Primer 147: Izrada Jedinjenja 147.
Jedinjenje 147 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 141 s izuzetkom što je pojačana skala i, umesto hidrohlorida metil estra L-valina u Koraku 2 korišćen je hidrohlorid metil estra L-histidina, a količina N,N-diizopropiletilamina upotrebljena u Koraku 2 je udvostručena.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 100mg (0.146mmol) proizvoda iz Primera 55, Korak 1, 62.2mg (0.219mmol) A/./V-disukcinimidil karbonata i 47.0mg (0.364mmol) /V,/V-diizopropiletilamina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 352mg (1.46mmol) hidrohlorida metil estra L-histidina i 377mg (2.91 mmol) /V,/V-diizopropiletilamina, dobijeno je 51.0mg proizvoda u vidu belog praška (43.2% prinos):<1>H NMR (CD3OD) S 1.04 (s, 11H), 1.20-1.22 (m, 2H), 1.41 (ddd,J =9.46, 5.34, 1.07 Hz, 1H), 1.86-1.88 (m, 1H), 2.23 (q,J =8.75 Hz, 1H), 2.28-2.33 (m, 1H), 2.60 (dd,J= 13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.92 (d,J =6.41 Hz, 2H), 2.92-2.96 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.91 (d,J =1.53 Hz, 3H), 4.04 (dd,J =11.90, 3.66 Hz, 1H), 4.35 (s, 1H), 4.36-4.41 (m, 2H), 4.53 (dd,J =9.77, 7.63 Hz, 1H), 5.10 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.40 Hz, 1H), 5.73-5.78 (m, 1H), 5.81 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 7.06-7.09 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.23 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.87 (dd,J= 5.80, 1.22 Hz, 1H), 8.08 (d,J =9.16 Hz, 1H); MSm/ z809 (MH<+>).
Primer 148: Izrada Jedinjenja 148.
Jedinjenje 148 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 141 s izuzetkom što je pojačana skala i, umesto hidrohlorida metil estra L-valina u Koraku 2 korišćen je hidrohlorid etil estra L-valina.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 100mg (0.146mmol) proizvoda iz Primera 55, Korak 1, 62.2mg (0.219mmol) /V./V-disukcinimidil karbonata i 47.0mg (0.364mmol) /V,A/-diizopropiletilamina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 265mg (1.46mmol) hidrohlorida etil estra L-valina i 188mg (1.46mmol) /V,/V-diizopropiletilamina, dobijeno je 69.2mg proizvoda u vidu belog praška (60.4% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 5 0.83 (dd,J =6.71, 5.19 Hz, 6H), 1.01-1.03 (m, 2H), 1.06 (s, 9H), 1.17-1.22 (m, 2H), 1.23 (t,J =7.17 Hz, 3H), 1.40 (dd,J =9.46, 5.19 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.09, 5.34 Hz, 1H), 1.95-2.02 (m, 1H), 2.18 (q,J= 9.05 Hz, 1H), 2.33 (ddd,J =13.89, 9.92, 4.27 Hz, 1H), 2.60 (dd,J =13.89, 7.17 Hz, 1H), 2.92 (ddd,J =12.82, 8.09, 4.73 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.98 (d,J= 5.19 Hz, 1H), 4.08-4.17 (m, 3H), 4.41 (s, 1H), 4.41-4.43 (m, 1H), 4.52 (dd,J =10.07, 7.32 Hz, 1H), 5.09 (dd,J =10.38, 1.53 Hz, 1H), 5.26 (dd,J =17.09, 1.22 Hz, 1H), 5.77 (ddd,J =17.09, 10.07, 9.16 Hz, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.12 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.23 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.87 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.10 (d,J =9.16 Hz, 1H); MSm/ z 785(MH<+>).
Primer 149: Izrada Jedinjenja 149.
Jedinjenje 149 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 137 s izuzetkom što je umesto 4-benzil estra /V-a-ferc-butoksikarbonil-L-asparaginske kiseline u Koraku 1 korišćena dicikloheksilaminska so /V-terc-butoksikarbonil-L-ciklopentilglicina.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 76.2mg (0.180mmol) dicikloheksilaminske soli /V-terc-butoksikarbonil-L-ciklopentilglicina, dobijeno je 111mg proizvoda u vidu belog praška (89.3% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 5 0.98 (d,J =8.24 Hz, 2H), 1.15-1.18 (m, 2H), 1.24 (s, 9H), 1.29-1.32 (m,J=18.01 Hz, 2H), 1.38-1.40 (m, 1H), 1.44 (dd,J =4.88, 1.53 Hz, 1H), 1.49-1.55 (m, 2H), 1.62-1.67 (m, 2H), 1.74-1.80 (m, 1H), 1.85-1.88 (m, 1H), 2.16 (q,J=8.75 Hz, 1H), 2.21-2.26 (m, 1H), 2.42 (t,J=11.90 Hz, 1H), 2.60-2.64 (m, 1H), 2.89-2.93 (m, 1H), 3.92 (d,J =1.53 Hz, 3H), 4.06-4.11 (m, 2H), 4.51-4.57 (m, 2H), 5.07 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.25 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.78-5.85 (m, 2H), 7.10 (d,J =8.85 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.23 (d,J =4.27 Hz, 1H), 7.88 (dd,J =5.95, 1.68 Hz, 1H), 8.10 (d,J =9.16 Hz, 1H); MSm/ z726 (MH<+>).
Primer 150: Izrada Jedinjenja 150.
Jedinjenje 150 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 141 s izuzetkom što je pojačana skala i, umesto hidrohlorida metil estra L-valina u Koraku 2 korišćen je hidrohlorid benzil estra L-valina.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 100mg (0.146mmol) proizvoda iz Primera 55, Korak 1, 62.2mg (0.219mmol) /V,/V-disukcinimidil karbonata i 47.0mg (0.364mmol) /V,/V-diizopropiletilamina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 356mg (1.46mmol) hidrohlorida benzil estra L-valina i 188mg (1.46mmol) /V,/V-diizopropiletilamina, dobijeno je 41.0mg proizvoda u vidu belog praška (33.2% prinos):
MSm/ z848 (Mh<T>).
Primer 151: Izrada Jedinjenja 151.
Jedinjenje 151 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 141 s izuzetkom što je pojačana skala i, umesto hidrohlorida metil estra L-valina u Koraku 2 korišćen je hidrohlorid metil estra L-izoleucina.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 100mg (0.146mmol) proizvoda iz Primera 55, Korak 1, 62.2mg (0.219mmol) /V./V-disukcinimidil karbonata i 47.0mg (0.364mmol) /V,A/-diizopropiletilamina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 265mg (1.46mmol) hidrohlorida metil estra L-izoleucina i 188mg (1.46mmol) /V,/V-diizopropiletilamina, dobijeno je 75.5mg proizvoda u vidu belog praška (65.9% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 5 0.78-0.80 (m, 3H), 0.83-0.84 (m, 3H), 0.90-0.95 (m, 1H), 1.01-1.03 (m, 2H), 1.06 (d,J =3.05 Hz, 9H), 1.17-1.21 (m, 2H), 1.32-1.42 (m, 2H), 1.68-1.72 (m, 1H), 1.84-1.87 (m, 1H), 2.14-2.20 (m, 1H), 2.30-2.36 (m, 1H), 2.57-2.62 (m, 1H), 2.90-2.95 (m, 1H), 3.66 (d,J =2.75 Hz, 3H), 3.92 (d,J =2.75 Hz, 3H), 4.05-4.12 (m, 2H), 4.39-4.42 (m, 2H), 4.50-4.53 (m, 1H), 5.07-5.10 (m, 1H), 5.23-5.28 (m, 1H), 5.73-5.79 (m, 1H), 5.81-5.83 (m, 1H), 7.10-7.13 (m, 1H), 7.17 (t,J =2.44 Hz, 1H), 7.22-7.24 (m, 1H), 7.85-7.87 (m, 1H), 8.10 (dd,J =9.16, 2.75 Hz, 1H); MSm/ z 785(MH<+>).
Primer 152: Izrada Jedinjenja 152.
Jedinjenje 152 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 141 s izuzetkom što je pojačana skala i, umesto hidrohlorida metil estra L-valina u Koraku 2 korišćen je hidrohloridterc-butil estra L-valina.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je"lOOmg (0.146mmol) proizvoda iz Primera 55, Korak 1, 62.2mg (0.219mmol) /V,/V-disukcinimidil karbonata i 47.0mg (0.364mmol) /V./V-diizopropiletilamina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 306mg (1.46mmol) hidrohlorida rerc-butil estra L-valina i 188mg (1.46mmol) /V,/V-diizopropiletilamina, dobijeno je 93.5mg proizvoda u vidu belog praška (78.8% prinos):
MSm/ z814 (Mh<T>).
Primer 153: Izrada Jedinjenja 153.
Jedinjenje 153 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 141 s izuzetkom što je pojačana skala i, umesto hidrohlorida metil estra L-valina u Koraku 2 korišćen (S)-(+)-1-metoksi-2-propilamin.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 100mg (0.146mmol) proizvoda iz Primera 55, Korak 1, 62.2mg (0.219mmol) /V,/V-disukcinimidil karbonata i 47.0mg (0.364mmol) /V,/V-diizopropiletilamina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 130mg (1.46mmol) (S)-(+)-1-metoksi-2-propilamina i 188mg (1.46mmol) /V,/V-diizopropiletilamina, dobijeno je 50.3mg proizvoda u vidu belog praška (47.3% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 8 0.96 (d,J =7.02 Hz, 3H), 0.99-1.01 (m, 2H), 1.04 (s, 9H), 1.15-1.18 (m, 2H), 1.39 (dd,J =9.61, 5.34 Hz, 1H), 1.84 (dd,J =7.93, 5.19 Hz, 1H), 1.93 (s, 3H), 2.15 (q,J =9.05 Hz, 1H), 2.37 (ddd,J =13.96, 9.84, 4.58 Hz, 1H), 2.61 (dd,J =14.04, 7.32 Hz, 1H), 2.90 (ddd,J= 12.89, 8.16, 4.88 Hz, 1H), 3.19-3.28 (m, 2H), 3.64-3.67 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.12 (dd,J= 11.60, 3.97 Hz, 1H), 4.40 (s, 1H), 4.44 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 9.77, 7.32 Hz, 1H), 5.07 (dd,J =10.22, 1.68 Hz, 1H), 5.24 (dd,J =17.24, 1.37 Hz, 1H), 5.76-5.81 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.10 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.17 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.23 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.87 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.10 (d,J =9.16 Hz, 1H); MSm/ z729 (MH<+>).
Primer 154: Izrada Jedinjenja 154.
Jedinjenje 154 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 141 s izuzetkom što je pojačana skala i, umesto hidrohlorida metil estra L-valina u Koraku 2 korišćen je hidrohlorid metil estra A/-metil L-valina.
Korak 1:
Modifikacije: Upotrebljeno je 100mg (0.146mmol) proizvoda iz Primera 55, Korak 1, 62.2mg (0.219mmol) /V./V-disukcinimidil karbonata i 47.0mg (0.364mmol) A/,/V-diizopropiletilamina.
Korak 2:
Modifikacije: Upotrebljeno je 265mg (1.46mmol) hidrohlorida metil estra /V-metil L-valina i 188mg (1.46mmol) /V,/V-diizopropiletilamina, dobijeno je 68.2mg proizvoda u vidu belog praška (59.5% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 8 0.70 (dd,J =6.71, 2.14 Hz, 3H), 0.89 (dd,J =6.41, 2.44 Hz, 3H), 0.96-0.98 (m, 1H), 1.02-1.04 (m, 2H), 1.07 (d,J =2.14 Hz, 9H), 1.18-1.22 (m, 2H), 1.43-1.47 (m, 1H), 1.84-1.87 (m, 1H), 2.11-2.19 (m, 2H), 2.31-2.37 (m, 1H), 2.58-2.63 (m, 1H), 2.87 (d,J= 2.44 Hz, 3H), 2.90-2.94 (m, 1H), 3.65 (d,J =2.14 Hz, 3H), 3.92 (d,J =2.14 Hz, 3H), 4.10-4.14 (m, 1H), 4.25 (dd,J=10.07, 1.22 Hz, 1H), 4.48 (d,J=2.44 Hz, 1H), 4.50-4.54 (m, 1H), 5.08-5.10 (m, 1H), 5.25-5.28 (dd,J=17.09, 1.53 Hz, 1H), 5.78-5.85 (m, 2H), 7.10-7.13
(m, 1H), 7.18-7.19 (m, 1H), 7.24 (dd,J= 5.95, 2.59 Hz, 1H), 7.87-7.89 (m, 1H), 8.10 (dd,J =9.00, 2.59 Hz, 1H); MSm/ z785 (MH<+>).
Primer 155: Izrada Jedinjenja 155.
Korak 1:
U rastvor proizvoda iz Primera 55, Korak 1 (100mg, 0.146mmol) u anhidrovanom THF-u (2ml_) daodat je 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetil-etil estar piridin-2-il estra karbonske kiseline (44.0mg, 0.175mmol) i /V-metilmorfolin (59mg, 0.58mmol). Smeša je sazrevala na rt tokom 24 h. Reakciona smeša je isprana i ukoncentrovanain vacuo,a ostatak je rastvoren u DCM (2ml_). Rastvor je ispran puferskim rastvorom pH 4 (3x3ml_), a ispirci su ponovo ekstrahovani sa DCM (3mL). Organske faze su sjedinjene i ukoncentrisanein vacuo.Sirovi proizvod je zatim rastvoren u MeOH i prečišćen reverzno-faznom preparativnom HPLC da bi se dobilo Jedinjenje 155 u vidu belog praška (38.5mg, 34.3% prinos):<1>H NMR (CD3OD) 5 1.04 (s, 11H), 1.19-1.22 (m, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.43 (dd,J =9.31, 5.34 Hz, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.87 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.19 (q,J =8.85 Hz, 1H), 2.34 (m, 1H), 2.62 (dd,J= 13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.92 (ddd,J =12.67, 8.09, 4.88 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.06 (dd,J =11.90, 3.36 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.43 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.56 (dd,J =10.38, 7.32 Hz, 1H), 5.10 (d,J=10.38 Hz, 1H), 5.27 (d,J=17.09 Hz, 1H), 5.75-5.80 (m, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.10 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.25 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.89 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.07 (d,J =9.16 Hz, 1H); MSm/ z768 (MH<+>).
Deo E:
LC-MS uslovi za deo E
"postupak A" je 3.0x50mm Xterra Ž4min gradijent i 4mL/min protok
"postupak B" je 3.0x50mm Xterra Ž3min gradijent i 4mL/min protok
"postupak C" je 4.6x50mm Xterra Ž4min gradijent i 4ml_/min protok
"postupak D" je 4.6x50mm Xterra Ž3min gradijent i 4mL/min protok
Primer 180: Izrada Jedinjenja 180.
Opšta sintetska šema
Jedinjenja 180 do 183 su pripremljena prema opštoj sintetskoj šemi, kao što je gore prikazana. Ove pojedinačne reakcije su detaljno opisane na drugom mestu. S izuzetkom prvog koraka alkilacije, za koji kalijum terc-butoksid u THF-u (nabavljen posredstvom Aldrich Chemicals) u DMF-u nudi mnogo pogodniju proceduru izrade: najveći deo DMF rastvarača je dalje izapran vodom, čim je alkilacija završena.
Tako Jedinjenje 180: BOCNH-P3(L-/erc-BuGly)-P2Š(4R)-(2-trifluorometil hinolin-4-okso)-S-prolinĆ-P1(1 R,2S-vinil acca)-CONHS02-
ciklopropan: materijal je dobijen u vidu bele pene u 61% prinosu. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak AĆ : 3.35 (774).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.05 (m, 13H), 1.21 (s, 9H), 1.42
(dd, J = 9.17, 5.26 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.21 (m, 1H), 2.33 (m, 1H), 2.64 (dd, J = 13.94, 6.60 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.09 (dd,J =11.49, 2.69 Hz, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.52 (m, 1H), 4.56 (d,J =12.23 Hz, 1H), 5.10 (dd,J =10.39, 1.59 Hz, 1H), 5.27 (d,J= 16.87 Hz, 1H), 5.58 (s, 1H), 5.72 (m, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.61 (t,J =7.70 Hz, 1H), 7.83 (t,J =7.34 Hz, 1H), 8.07 (d,J= 8.56 Hz, 1H), 8.26 (d,J= 8.56 Hz, 1H).
Primer 181: Izrada Jedinjenja 181.
BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4f?)-(2,8-bistrifluorometil hinolin-4-okso)-S-prolinĆ-P1(1F?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen u vidu bele pene u 52% prinosu. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak AĆ : 3.60 (843).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.05 (m, 11H), 1.16 (s, 9H), 1.22 (m, 2H), 1.42 (dd,J =9.29, 5.38 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.21 (q,J =8.97 Hz, 1H), 2.33 (m, 1H), 2.65 (dd,J =13.94, 6.85 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.07 (dd,J =11.98, 2.69 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.52 (dd, J = 10.52, 6.85 1H), 4.58 (d,J =11.98 Hz, 1H), 5.10 (d,J =10.27 Hz, 1H), 5.27 (d,J= 17.12 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 5.72 (m, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.69 (t,J =7.83 Hz, 1H), 8.18 (d,J =7.34 Hz, 1H), 8.50 (d,J =8.31 Hz, 1H).
Primer 182: Izrada Jedinjenja 182.
BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4R)-(2-trifluorometil,8-trifluoro-metoksi hinolin-4-okso)-S-prolinĆ-P1 (1 fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen u vidu bele pene u 99% prinosu. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak AĆ : 3.62 (858).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) § ppm 1.05 (m, 11H), 1.21 (m, 11H), 1.42 (dd,J =9.05, 5.14 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.21 (q,J =8.64 Hz, 1H), 2.33 (m, 1H), 2.64 (dd,J =13.94, 6.60 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.08 (dd,J =11.98, 2.69 Hz, 1H), 4.18 (s, 1H), 4.51 (dd,J =10.52, 6.85 Hz, 1H), 4.57 (d,J =12.23 Hz, 1H), 5.10 (dd,J =10.52, 1.22 Hz, 1H), 5.27 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 5.72 (m, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.63 (t,J =8.07 Hz, 1H), 7.78 (d,J =7.58 Hz, 1H), 8.24 (d,J =8.56 Hz, 1H). rimer 183: Izrada Jedinjenja 183.
BOCNH-P3(/.-ferc-BuGly)-P2Š(4R)-(2-trifluorometil, 8-hloro hinolin-4-okso)-S-prolinĆ-P1(1fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen u vidu bele pene u 64% prinosu. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak AĆ : 3.52 (808).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 6 ppm 1.04 (m, 11H), 1.21 (m, 11H), 1.41 (dd,J=9.41, 5.50 Hz, 1H), 1.86 (dd,J=8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.20 (q,J =8.80 Hz, 1H), 2.32 (m, 1H), 2.63 (dd,J =13.82, 6.72 Hz, 1H), 2.92 (m, 1H), 4.07 (dd,J =12.10, 2.81 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 4.50 (dd,J =10.52, 6.85 Hz, 1H), 4.56 (d,J =11.98 Hz, 1H), 5.10 (dd,J =10.27, 1.47 Hz, 1H), 5.26 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.57 (s, 1H), 5.72 (m, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.52 (t,J =8.07 Hz, 1H), 7.93 (d,J =7.58 Hz, 1H), 8.19 (d,J =8.56 Hz, 1H).
Primer 184: Opšta procedura za alkilaciju sa tripeptidom (Jedinjenje 184) i P2<*>
Opšta šema - Izrada Primera 184 (Jedinjenja 184)
Izrada tripeptidne komponente, Primer 184 je izvedena sekvencijalnim kuplovanjem amida, korišćenjem HATU kao kuplujućeg agensa. Podrazumeva se da mnogi standardni agensi za kuplovanje mogu biti upotrebljeni u sledećoj šemi.
Izrada intermedijera, Primer 184a:
U mešavinu HATU (820mg, 2.2mmol), Primera 180a (Boc-4-R-hidroksiprolin (417mg, 1.8mmol) i Primera 180c (hidrohloridna so (1(ft)-amino-2-(S)-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline (490mg, 1.8mmol) u balonu osušenom na plamenu na sobnoj temperaturi je dodat suvi CH2CI2(8ml_). Smeša je držana pod suvim N2pre nego što je smrznuta do -78°C. Polako je dodata Hunigova baza (diizopropiletilamin, 625uL, 3.6mmol) tokom perioda od 5 min, a smeša je prešla u bledo narandžastu suspenziju. Mešanje je nastavljeno tokom sat vremena, dok je temperatura ostavljena da poraste do temperature sredine. LC/MS je pokazala kompletnu konverziju u željeni proizvod 184a. Sirova reakciona smeša je prerađena kao obično, isprana je sa 3 porcije (5ml_) vode, a organski ostaci su ekstrahovani u etil acetat (3x5mL). Sirovi proizvod je dobijen odstranjivanjem organskih rastvarača in vacuo. Materijal je korišćen u narednom koraku bez daljeg prečišćavanja.
Izrada intermedijera,Primer184b:
Osušena čvrsta masa iz prethodnog koraka je pokupljena u 9mL CH2CI2na sobnoj temperaturi. Ovom rastvoru je dodato 3ml_ trifluorosirćetne kiseline, obrazujući bledo-žućkasti rastvor. Mešanje je nastavljeno tokom 2 sata, na sobnoj temperaturi. LC/MS je pokazala da nema polaznog materijala 184a, dok je željeni proizvod, 184b, bio glavni signal zajedno sa signalom, koji odgovara nuz produktu, koji je prenesen iz HATU u ranijem koraku. Rastvarači su upareni, a čvrsti ostatak je odmah korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Izrada tripeptida, Jedinjenje 184:
BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4fl)-hidroksi-S-prolinĆ-P1 (1 f?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan ŠNotebook 46877-128Ć
Sirovi proizvod iz prethodnog koraka, (Primer 184b, 1.8mmol) je pomešan sa HATU (700mg, 1.8mmol) i BOC-L-ferc-leucinom (Primer 180f, Fluka Chemicals, 420mg, 1.8mmol) u CH2CI2(10mL) na sobnoj temperaturi. Ova suspenzija je obrađena sa Hunigovom bazom (1ml_ višak), obrazujući nešto redu narandžastu suspenziju. LC/MS je pokazala nešto konverzije u Jedinjenje 184. Kompletna konverzija u željeni proizvod 184 je zapažena pošto je mešanje nastavljeno tokom dva dana na sobnoj temperaturi. Sirova reakciona smeša je uparena do suva. Ostatak je pokupljen u etil acetatu. Najveći deo HATU ostataka je uklonjen ekstrakcijama sa polovično zasićenim, sveže pripremljenim rastvorom natrijum bikarbonata. Poslednji tragovi HATU ostatka (1-hidroksi 7-azabenzotriazol) su uklonjeni ispiranjem sa dejonizovanom vodom. Uparavanjem rastvarača dobijeno je 990mg (98%) željenog proizvoda u vidu bele pene. Ovaj materijal je pogodan za sledeću alkilaciju sa elektrofilima, kao što su hinolini i izohinolini, direktno bez daljeg prečišćavanja. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak AĆ : 2.65 (579).
<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.95 (s, 2H), 0.99 (s, 9H), 1.05 (m, 2H), 1.21 (m, 1H), 1.39 (m, 9H), 1.84 (dd,J=8.31, 5.38 Hz, 1H), 1.96 (m, 1H), 2.11 (m, 1H), 2.20 (m, 1H), 2.91 (m, 1H), 3.80 (m, 2H), 4.28 (d,J =9.78 Hz, 1H), 4.35 (dd,J =9.90, 6.97 Hz, 1H), 4.47 (s, 1H), 5.11 (m, 1H), 5.29 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H).
Alkilacija tripeptida (Jedinjenje 184) sa elektrofilima:
25mL-ska tikvica okruglog dna osušena na plamenu napunjena je sa Jedinjenjem 184 (0.5-1 .Ommol) supstituisanim 4-hlorohinolinom (1.0ekv.) i lantan hloridom (anhidrovana zrnca LaCI3, korišćena kako su nabavljena od Aldrich, MTež. 245g/mol; 0.1 ekvivalent. Napomena: utvrđeno je da uključivanje takvog aditiva može biti od pomoći u nekim slučajevima, posebno sa onim elektrofilima koji su manje reaktivni. Ovaj reagens može ponekad biti izostavljen ukoliko elektrofili pokazuju dovoljnu reaktivnost prema anjonskoj alkilaciji) u 2mL suvog DMF-a. Neorganska so je bila slabo rastvorljiva u DMF na sobnoj temperaturi. Smeša je smrznuta do -78°C (suvi led/aceton kupatilo) uz mešanje pod azotom. Ovoj smrznutoj mešavini je dodat THF rastvor kalijumterc-butoksida (1.0M, korišćen kako je nabavljen od Aldrich, 5.5 ekvivalenata), a boja smeše se promenila od bezbojne do bledo žućkaste ili zelenkaste. Mešana je na -78°C tokom vremenskog perioda koji zavisi od reaktivnosti 4-hlorohinolina (nekoliko sati na -78°C, do preko noći na sobnoj temperaturi). Utvrđeno je da na kraju neorganska so, iso tako, prelazi u finu emulziju. Ugašena je polovično zasićenim vodenim rastvorom NH4CI (2ml_). Organski materijali su ekstrahovani u etil acetat (10ml_x3). Organski slojevi su sjedinjeni i ponovo isprani dejonizovanom vodom (10ml_x2). Uparavanjem organske frakcije dobijena je sirova smeša bogata željenim proizvodom kako je utvrđeno prema LC/MS. Željeni proizvod je izolovan preparativnom HPLC korišćenjem standarnih separacionih parametara (obično: 3.0x50mm Xterra kolona Ž4min gradijent i 4mL/brzina protoka) da bi se dobio analitički čist željeni proizvod. Alkilacija serija 1-halo izohinolina je izvedena na potpuno isti način.
Primer 185: Izrada Jedinjenja 185.
Sledeći opštu proceduru tripeptidne alkilacije, kao što je opisano u Primeru 184, BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4ft)-(7-trifluorometil hinolin-4-okso)-S-prolinĆ-P1 (1 ft,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan je dobijen u vidu bele pene u 50% prinosu. LC/MS Ftt-min (MH<+>) Špostupak BĆ : 2.32 (752).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) S ppm 1.02 (s, 9H), 1.06 (m, 11H), 1.22 (m, 2H), 1.43 (dd,J =9.41, 5.26 Hz, 1H), 1.88 (dd, J = 8.19, 5.50 Hz, 1H), 2.23 (q,J =8.80 Hz, 1H), 2.42 (m, 1H), 2.75 (dd,J =14.06, 6.48 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.10 (m, 2H), 4.61 (m, 2H), 5.12 (dd,J =10.39, 1.59 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.72 (m, 2H), 7.61 (d,J =6.36 Hz, 1H), 7.96 (d,J =8.80 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.59 (d,J= 8.56 Hz, 1H), 9.14 (d,J =6.36 Hz, 1H).
Primer 186: Izrada Jedinjenja 186.
Sledeći opštu proceduru tripeptidne alkilacije, kao što je opisano u Primeru 184, BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4R)-(8-trifluorometil hinolin-4-okso)-S-prolinĆ-P1 (1 ft,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: željeni proizvod je dobijen u vidu bele pene u 50% prinosu. LC/MS R,-min (MH<+>) Špostupak BĆ : 2.48 (752).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.02 (s, 9H), 1.05 (m, 2H), 1.13 (s, 9H), 1.23 (m, 2H), 1.42 (dd,J =8.68, 5.50 Hz, 1H), 1.87 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.21 (q,J =8.80 Hz, 1H), 2.36 (m, 1H), 2.69 (dd,J= 14.06, 6.97 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.08 (dd,J =11.98, 2.93 Hz, 1H), 4.15 (s, 1H), 4.54 (dd,J =10.52, 7.09 Hz, 1H), 4.60 (d,J =12.47 Hz, 1H), 5.11 (dd,J =10.52, 1.71 Hz, 1H), 5.28 (d,J= 15.90 Hz, 1H), 5.58 (s, 1H), 5.72 (m, 1H), 7.32 (d,J= 5.87 Hz, 1H), 7.69 (t,J =7.95 Hz, 1H), 8.22 (d,J =7.09 Hz, 1H), 8.55 (d,J =8.07 Hz, 1H), 8.88 (d,J =5.62 Hz, 1H).
Izrada izohinolinskih intermedijera za P2<*>gradivne delove: 6-F, 6-etil, 6-izopropil i 6-terc-butil izohinolin.
Uopšteno, 6-hloro i 6-alkil izohinolini, korišćeni u sledećim eksperimentima pripremljeni su preko Pomeranz-Fritsch sinteze (uobičajena procedura: izrada optički aktivnog 8,8-disupstituisanog 1,1-bi izohinolina, K. Hirao, R. Tsuchiva, Y. Yano, H. Tsue,Heterocycles42(1) 1996, 415-422), kao što je opisano u nastavku. Proizvodi su konvertovani u 1-hloro derivate preko N-oksid intermedijera, kao što je opisano na drugom mestu.
Opšta sintetska šema
Reagensi i reakcioni uslovi: (a) refluks u benzenu, azeotropsko uklanjanje vode; (b) prvi korak: etil hloroformat, trimetil fosfit u THF-u, drugi korak: titan tetrahlorid u hloroformu; (c) MCPBA u CH2CI2; (d) POCI3u benzenu
Primer 187: Izrada Jedinjenja 187.
BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4/<:>?)-(6-fluoro izohinolin-4-okso)-S-prolinĆ-P1 (1 f?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan, materijal je dobijen u vidu bele pene u 12% prinosu. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak CĆ : 3.81 (724).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) § ppm 1.05 (m, 13H), 1.22 (s, 9H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (m, 1H), 2.21 (m, 2H), 2.61 (dd,J =13.69, 6.60 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.05 (d, J = 13.69 Hz, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.49 (m, 2H), 5.11 (d,J =10.03 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.61 Hz, 1H), 5.72 (m, 1H), 5.86 (d,J =4.40 Hz, 1H), 7.31 (m, 2H), 7.48 (d,J =8.31 Hz, 1H), 7.97 (d,J =6.36 Hz, 1H), 8.26 (d,J =6.11 Hz, 1H).
Primer 188: Izrada Jedinjenja 188.
Gore opisanom alkilacijom dobijen je kao glavni proizvod 1-hloro izohinolin: BOCNH-P3(L-fecr-BuGly)-P2Š(4f?)-(1 -hloro izohinolin-6-okso)-S-prolinĆ-P1 (1 f?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen u vidu bele pene u 40.2% prinosu. LC/MS Rt-min (MH<+>) Špostupak CĆ : 3.81 (718).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.00 (s, 9H), 1.06 (m, 2H), 1.25 (s, 11H), 1.41 (m, 1H), 1.86 (dd,J= 8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.54 (dd,J =12.96, 6.60 Hz, 1H), 2.92 (m, 1H), 4.06 (dd,J =11.98, 2.69 Hz, 1H), 4.20 (s, 1H), 4.31 (d,J =11.74 Hz, 1H), 4.45 (dd,J= 9.78, 7.58 Hz, 1H), 5.11 (dd,J =10.27, 1.71 Hz, 1H), 5.28 (dd,J =17.36, 1.47 Hz, 1H), 5.36 (s, 1H), 5.74 (m, 1H), 7.35 (d,J =9.29 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.70 (d,J =5.87 Hz, 1H), 8.13 (d,J=5.87 Hz, 1H), 8.25 (d,J=9.29 Hz, 1H).
Primer 189: Izrada Jedinjenja 189.
BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4f?)-(6-etil izohinolin-1-okso)-S-prolinĆ-P1(1lf,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen u vidu bele pene, dobijeno je 4.6mg žute čvrste mase (4.2%). LC/MS rt-min (Mh<T>) Špostupak BĆ : 2.70 (712).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.01 (s, 9H), 1.07 (m, 2H), 1.22 (m, 11H), 1.28 (t,J =7.91 Hz, 3H), 1.41 (m, 1H), 1.85 (m, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.60 (dd,J= 13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.80 (q,J =7.66 Hz, 2H), 2.93 (m, 1H), 4.02 (d,J= 31.06 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 5.10 (d,J= 10.27 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 7.25 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.38 (d,J =8.56 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.90 (d,J= 6.24 Hz, 1H), 8.09 (d,J =8.56 Hz, 1H).
Primer 190: Izrada Jedinjenja 190.
BOCNH-P3(/_-ferc-BuGly)-P2Š(4fl)-(6-izopropil izohinolin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1 F?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen kao bela pena u 69% prinosu. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak BĆ : 2.76 (749).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.05 (m, 13H), 1.20 (m, 9H), 1.31 (d,J =6.85 Hz, 6H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (dd,J= 8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.26 (m, 2H), 2.62 (dd,J= 13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.07 (m, 1H), 4.06 (m, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.52 (m, 2H), 5.11 (d,J =10.27 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 7.32 (d,J =6.11 Hz, 1H), 7.46 (d,J =8.56 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.90 (d,J =6.11 Hz, 1H), 8.13 (d,J =8.56 Hz, 1H).
Primer 191: Izrada Jedinjenja 191.
BOCNH-P3(/.-ferc-BuGly)-P2Š(4R)-(6-ferc-butil izohinolin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1 fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen u vidu bele pene u 81%-tnom prinosu. LC/MS R,-min (MH<+>) Špostupak BĆ : 2.84 (740).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.01 (s, 9H), 1.06 (m, 2H), 1.18 (s, 9H), 1.22 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 1.43 (m, 1H), 1.87 (dd,J =8.19, 5.50 Hz, 1H), 2.27 (m, 2H), 2.63 (dd,J =13.57, 6.97 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.06 (m, 1H), 4.20 (s, 1H), 4.52 (m, 2H), 5.10 (d,J=11.49 Hz, 1H), 5.28 (d,J=17.12 Hz, 1H), 5.73 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 7.36 (d,J =6.11 Hz, 1H), 7.66 (dd,J =8.80, 1.22 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.91 (d,J =5.87 Hz, 1H), 8.15 (d,J= 8.80 Hz, 1H).
Izrada 6-izopropoksil i 6-ferobutoksil izohinolinskih intermedijera:
Neki 6-alkoksi-1-hloro izohinolini su pripremljeni direktnom ipso zamenom 6-fluoro-1-hloroizohinolina sa odgovarajućim metalnim jonima alkoksida, kao što su kalijum ferc-butoksid (53%) i natrijum izopropoksid (54%).
Opšta sintetska šema
R = alkoksidni anjoni, kao što jeferc-Bu,/zo-Pr
6-fluoro-1 -hloroizohinolin je podvrgnut aromatičnoj nukleofilnoj zameni sa natrijum izopropoksidom i kalijum ferc-butoksidom u DMF da bi se dobio odgovarajući 6-izopropoksil (54%).<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 ppm 1.43 (d,J= 6.11 Hz, 6H), 4.76 (m,J =6.11 Hz, 1H), 7.08 (d,J =2.45 Hz, 1H), 7.29 (dd,J =9.29, 2.45 Hz, 1H), 7.50 (d,J =5.62 Hz, 1H), 8.18 (d,J =5.87 Hz, 1H), 8.24 (d,J= 9.29 Hz, 1H) odnosno, 6-/erc-butoksil-1-hloro izohinolini (55%):<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) 5 ppm 1.48 (s, 9H), 7.31 (m, 2H), 7.47 (d,J= 5.62 Hz, 1H), 8.18 (d,J= 5.62 Hz, 1H), 8.21 (d,J =9.78 Hz, 1H) kao glavni proizvod. Ovi 6-alkoksil-1-hloro izohinolini su alkilovani sa tripeptidom, kao što je opisano u Primeru 184 da bi se dobili željeni proizvodi, prikazani ispod.
Primer 192: Izrada Jedinjenja 192.
BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4f?)-(6-izopropoksi izohinolin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1R, 2S-vinil acca)-CONHSOz-ciklopropan: materijal je dobijen kao bela pena u 59% prinosu. LC/MS Rt-min (MH<+>) Špostupak CĆ : 3.87 (742).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.99 (s, 11H), 1.06 (m, 2H), 1.21 (s, 9H), 1.37 (d,J= 5.87 Hz, 6H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.61 (dd,J =13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.92 (m, 1H), 4.04 (dd,J =11.86, 3.30 Hz, 1H), 4.21 (br s, 1H), 4.49 (m, 2H), 4.78 (h,J =5.87 Hz, 1H), 5.10 (dd,J =10.39, 1.35 Hz, 1H), 5.28 (d,J =16.87 Hz, 1H), 5.73 (m, 1H), 5.79 (d,J =11.25 Hz, 1H), 7.07 (dd,J =9.05, 1.96 Hz, 1H), 7.18 (d,J =2.20 Hz, 1H), 7.26 (d,J =6.11 Hz, 1H), 7.85 (d,J =6.11 Hz, 1H), 8.10 (d,J =9.05 Hz, 1H).
Primer 193: Izrada Jedinjenja 193.
BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4fi)-(6-ferc-butoksi izohinolin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1R, 2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen kao bela pena u 39% prinosu. LC/MS Rt-min (MH<+>) Špostupak CĆ : 3.99 (756).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.03 (br s, 13H), 1.19 (s, 9H), 1.42 (m, 10H), 1.86 (dd,J= 7.83, 5.62 Hz, 1H), 2.24 (m, 2H), 2.60 (dd,J= 13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.04 (dd,J =11.49, 2.93 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.49 (m, 2H), 5.10 (d,J= 11.25 Hz, 1H), 5.27 (d,J= 16.87 Hz, 1H), 5.73 (m, 1H), 5.81 (s, 1H), 7.13 (dd,J =8.80, 1.47 Hz, 1H), 7.25 (d,J= 5.87 Hz, 1H), 7.33 (d,J =2.20 Hz, 1H), 7.87 (d,J =6.11 Hz, 1H), 8.10 (d,J =9.05 Hz, 1H).
Izrada ftalazin P2<*>derivata:
Uopšteno, i 1-hloroftalazin i 1,4-dihloroftalazin su podvrgnuti alkilaciji glatko, da bi se dobili željeni proizvodi. Međutim, komercijalno dostupni 1-hloroftalazin i 1,4-dihloroftalazin su često kontaminirani sa nešto hidrolizovanih materijala. Prethodna obrada sa POCI3, a zatim, alkilacija odmah posle toga, dali su mnogo konzistentnije rezultate.
Opšta sintetska šema
Reakcioni uslovi: (a) POCI3u DCE; (b) alkilacija sa tripeptidom; (c) natrijumovi derivati imidazola (R=CH), triazola (R=N).
Primer 194: Izrada Jedinjenja 194.
BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4H)-(ftalazin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1 fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen kao bela pena u 41% prinosu. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak BĆ : 2.07 (707).
<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.03 (m, 9H), 1.06 (m, 4H), 1.14 (s, 9H), 1.20 (m, 1H), 1.43 (m, 1H), 1.87 (dd,J= 8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.24 (q,J =8.80 Hz, 1H), 2.38 (m, 1H), 2.76 (dd,J =14.18, 7.09 Hz, 1H), 2.92 (m, 1H), 4.11 (m, 2H), 4.62 (m, 1H), 5.11 (dd,J= 10.27, 1.71 Hz, 1H), 5.29 (dd,J =17.12, 1.22 Hz, 1H), 5.72 (m, 1H), 5.96 (s, 1H), 8.26 (m, 2H), 8.46 (m, 2H), 9.84 (s, 1H).
Primer 195: Izrada Jedinjenja 195.
BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4f?)-(4-hloro ftalazin-1 -okso)-S-
prolinĆ- P1(1f?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen kao bela pena u 23% prinosu. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak CĆ : 3.52 (742).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.01 (s, 11H), 1.06 (m, 2H), 1.14 (s, 9H), 1.22 (m, 1H), 1.43 (m, 1H), 1.87 (m, 1H), 2.21 (m, 1H), 2.35 (m,J =10.27 Hz, 1H), 2.70 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.05 (d,J =3.42 Hz, 1H), 4.58 (m, 2H), 5.11 (dd,J =10.39, 1.10 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.36 Hz, 1H), 5.73 (m, 1H), 5.93 (s, 1H), 7.99 (m, 1H), 8.07 (t,J= 7.70 Hz, 1H), 8.26 (dd,J =8.19, 2.32 Hz, 2H).
Izrada 4-(imidazo-1-il)ftalazin i 4-(1,2,4-triazo-1-il)ftalazin P2<*>derivata:
Proizvod, prethodno Jedinjenje 195, BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4R)-(4-hloro ftalazin-1-okso)-S-prolinĆ-P1(1f?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan je podvrgnut zameni anjona tipičnih azola, kao što su imidazol i triazol da bi se dobili u nastavku prikazani 4-azol supstituisani derivati ftalazina:
Primer 196: Izrada Jedinjenja 196.
Ovo je proizvedeno zamenom 4-hloroftalazina (Jedinjenje 195) natrijumovom soli imidazola u DMF-u na 55-65°C.
BOCNH-P3(L-ferc-BuGly)-P2Š(4f?)-(4-(imidazo-1 -il)ftalazin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1 fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen kao bela pena u 23% prinosu. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak BĆ : 1.94 (793).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.03 (s, 9H), 1.07 (m, 2H), 1.20 (m, 9H), 1.24 (m, 1H), 1.41 (m, 2H), 1.88 (dd,J =8.19, 5.50 Hz, 1H), 2.23 (m, 1H), 2.41 (m, 1H), 2.75 (m,J =14.92 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.14 (m, 2H), 4.60 (dd,J =10.15, 6.97 Hz, 2H), 5.12 (dd,J =10.27, 1.47 Hz, 1H), 5.29 (dd,J =17.24, 1.35 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 6.09 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.94 (m, 1H), 8.10 (m, 2H), 8.43 (m, 1H), 9.17 (s, 1H), 9.46 (s, 1H).
Tokom reakcije zamene, isto tako je izolovana i mala količina de-BOC nuz proizvoda (Jedinjenje 197):
NH2-P3(L-fecr-BuGly)-P2Š(4fl)-(4-(imidazo-1 -il)ftalazin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1 R,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen kao bela pena u 17% prinosu. LC/MS Rt-min (Mh<T>) Špostupak BĆ : 1.22 (651).
<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.16 (s, 9H), 1.23 (m, 2H), 1.42 (dd,J =9.41, 5.50 Hz, 1H), 1.89 (m, 1H), 2.26 (q,J =8.97 Hz, 1H), 2.43 (m, 1H), 2.78 (dd,J =14.06, 7.21 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.74 (m, 1H), 4.11 (s, 1H), 4.22 (dd,J=12.23, 3.91 Hz, 1H), 4.47 (m, 2H), 4.71 (dd,J =10.27, 7.09 Hz, 1H), 5.12 (m, 1H), 5.29 (d, J = 17.36 Hz, 1H), 5.71 (m, 1H), 6.13 (t,J= 3.67 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.97 (m, 1H), 8.14 (m, 3H), 8.41 (m, 1H), 9.47 (s, 1H).
Primer 198: Izrada Jedinjenja 198.
Ovo je proizvedeno zamenom 4-hloroftalazina (Jedinjenje 195) natrijumovom soli 1,2,4-triazola u DMF-u na 55-65°C. BOCNH-P3(Z.-/erc-BuGly)-P2Š(4fl)-(4-(1,2,4-triazo-1 -il)ftalazin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1 fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen kao bela pena u 62% prinosu. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak CĆ : 3.35 (774).<1>H NMR (500MHz, CD3OD) 8 ppm 0.97 (s, 9H), 1.01 (m, 2H), 1.10 (s, 9H), 1.16 (m, 1H), 1.37 (m, 2H), 1.82 (m, 1H), 2.18 (d,J =8.55 Hz, 1H), 2.32 (m, 1H), 2.69 (dd,J =13.58, 6.87 Hz, 1H), 2.88 (br s, 1H), 4.06 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.13 (s, 1H), 4.53 (m,J= 9.16 Hz, 1H), 4.61 (d,J =11.90 Hz, 1H), 5.06 (d,J= 10.07 Hz, 1H), 5.23 (d,J =17.40 Hz, 1H), 5.68 (m, 1H), 5.98 (s, 1H), 7.97 (m, 2H), 8.30 (m,J =11.90 Hz, 2H), 8.44 (d,J =7.63 Hz, 1H), 9.14 (s, 1H).
Izrada 4- hidroksi i 4- alkoksi ftalazin P2<*>derivata
Reakcioni uslovi: (a) natrijum alkoksidi, kao što su metoksid, etoksid i izopropoksid Primer 199: Izrada Jedinjenja 199.
4-hloroftalazin (Primer 195) je rastvoren u suvom izopropil alkoholu na sobnoj temperaturi i dodat je 1.0 ekv. natrijum izopropoksida, a nastala suspenzija je dovedena do refluksa. Dobijen je željeni proizvod, 4.5mg žute čvrste mase (20.0%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.68
(743) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.02 (m, 11H), 1.20 (m, 11H), 1.42 (m, 1H), 1.49 (d,J =6 Hz, 6H), 1.87 (dd,J =7.95, 5.50 Hz, 1H), 2.21 (m, 1H), 2.23 (m, 1H), 2.66 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.08 (q,J =7.09 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 4.55 (m, 2H), 5.11 (d,J =10.27 Hz, 1H), 5.28 (d,J= 17.61 Hz, 1H), 5.48 (m, 1H), 5.70 (d,J= 10.03 Hz, 1H), 5.81 (m, 1H), 7.90 (m, 2H), 8.16 (m, 2H).
Primer 200: Izrada Jedinjenja 200.
Na sličan način je pripremljen 4-etoksi derivat: BOCNH-P3(Z_-f-BuGly)-P2Š(4fl)-(4-etoksiftalazin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1 fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan.
Dobijeno je 4.0mg žute čvrste mase (16.0%). LC/MS rt-min (MH<+>) 2.52 (729) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.01 (s, 9H), 1.06 (m, 2H), 1.16 (s, 9H), 1.24 (m, 2H), 1.43 (dd,J =9.78, 5.14 Hz, 1H), 1.53 (t,J =6.97 Hz, 3H), 1.87 (dd,J =8.19, 5.50 Hz, 1H), 2.22 (q,J =8.97 Hz, 1H), 2.32 (m, 1H), 2.67 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.06 (d, J = 8.56 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 4.56 (m, 4H), 5.10 (m, 1H), 5.30 (m, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.94 (m, 2H), 8.16 (d,J =7.83 Hz, 1H), 8.21 (m, 1H).
Primer 201: Izrada Jedinjenja 201.
BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2Š(4R)-(4-metoksiftalazin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1 f?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan je pripremljen u 30.2%-tnom prinosu. LC/MS Rt-min (MH<+>) 2.42 (715) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.96 (s, 9H), 1.07 (m, 2H), 1.20 (m, 11H), 1.43 (dd,J =9.29, 5.38 Hz, 1H), 1.87 (dd,J= 8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.22 (q,J= 8.80 Hz, 1H), 2.31 (m, 1H), 2.66 (d,J =8.07 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.06 (dd,J =11.98, 3.18 Hz, 1H), 4.19 (d,J =3.42 Hz, 4H), 4.54 (m, 2H), 5.11 (m, 1H), 5.28 (d,J =17.36 Hz, 1H), 5.73 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.95 (m, 2H), 8.19 (m, 2H).
Primer 202: Izrada Jedinjenja 202.
Napravljen je pokušaj da se zamenom BOCNH-P3(L-rerc-BuGly)-P2Š(4R)-(4-hloro ftalazin-1-okso)-S-prolinĆ-P1(1tf,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropana (Primer 195) sa natrijumovom soli tetrazola dobije najviše 4-hidroksi hidrolizovanog materijala.
BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2Š(4ff)-(4-hidroksiftalazin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1 fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan je dobijen (44.2%) u vidu blede kremaste čvrste mase. LC/MS rt-min (MH<+>) 2.18 (701) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.01 (s, 9H), 1.05 (m, 2H), 1.23 (m, 11H), 1.42 (dd,J =9.29, 5.38 Hz, 1H), 1.87 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.21 (m, 2H), 2.63 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.00 (s, 1H), 4.20 (s, 1H), 4.50 (m, 2H), 5.11 (dd,J =10.27, 1.47 Hz, 1H), 5.29 (d,J =16.87 Hz, 1H), 5.59 (s, 1H), 5.73 (m, 1H), 7.86 (dd,J =5.75, 3.30 Hz, 2H), 8.01 (dd,J =5.87, 3.42 Hz, 1H), 8.29 (dd,J =5.87, 3.42 Hz, 1H).
Izrada 5,6-disupstituisanih izohinolin P2<*>derivata putem protokola alkilacije Opšta sintetska šema:
Reakcioni uslovi: (a) LDA u THF; (b) alkildisulfid, kao što je (n-PrS)2; (c) natrijum alkoksid, kao što je MeONa; (d) tiofen 2-karboksaldehid; (e) MnCv, u benzenu.
Primer 203: Izrada 1-hloro-5-propiltio-6-fluoro izohinolina:
U smrznuti (-78°C) rastvor 1-hloro-6-fluoro izohinolina (59mg, 0.32mmol) u 2mL THF-a dodat je rastvor LDA u cikloheksanu (1.5molarni, 0.23mL, 0.35mmol). Narandžasti rastvor je mešan tokom 2 sata pre nego što je obrađen sa n-propil disulfidom (60uL, čistog materijala, višak). Reakciona smeša je ostavljena da se tokom 30 min zagreje do sobne temperature. Ugašena je rastvorom polovično zasićenog NH4CI, a organski ostaci su ekstrahovani u etil acetat. LC-MS analiza je pokazala otprilike 50%-tnu konverziju u željeni proizvod zajedno sa glavninom polaznog mateijala. Željeni proizvod je prečišćen pomoću kratke kolone (4cmx2cm, silika gel tip-H) uz eluaciju sa 5% etrom u heksanima, dobijeno je 29mg (36% prinos) željenog proizvoda. LC/MS Rt-min (MH<+>) Špostupak CĆ : 3.79 (256).<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 8 ppm 0.96 (t,J =7.34 Hz, 3H), 1.52 (m, 2H), 2.86 (m, 2H), 7.45 (dd,J =9.29, 8.56 Hz, 1H), 8.34 (d,J= 0.73 Hz, 2H), 8.37 (m, 1H). Ovo jedinjenje je alkilovano sa tripeptidom putem procedure opisane u Primeru 184 da bi se dobilo sledeće jedinjenje: Primer 204: Izrada Jedinjenja 204.
BOCNH-P3(/.-f-BuGly)-P2Š(4fl)-(1-hloro-5-propiltio-izohinolin-6-okso)-S-prolinĆ-P1(1R,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan, prikazan ispod
Sledeći opštu proceduru, dobijeno je 4.6mg žute čvrste mase (3.2%). LC/MS rt-min (Mh<T>) 2.73 (792) (postupak B).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.93 (t,J =7.34 Hz, 3H), 0.97 (s, 9H), 1.08 (m, 2H), 1.24 (m, 11H), 1.43 (m, 3H), 1.86 (m, 1H), 2.24 (m, 2H), 2.56 (m, 1H), 2.78 (q,J =7.09 Hz, 2H), 2.92 (m, 1H), 4.01 (d,J= 9.29 Hz, 1H), 4.22 (s, 1H), 4.29 (s, 1H), 4.59 (d,J =6.85 Hz, 1H), 5.11 (d,J= 10.76 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.36 Hz, 1H), 5.49 (s, 1H), 5.74 (m, 1H), 7.66 (d,J=9.29 Hz, 1H), 8.18 (d,J=6.11 Hz, 1H), 8.41 (m, 2H).
Primer 205: Izrada 5-propiltio-6-etoksi izohinolin P2<*>derivata.
Sledeća procedura je jednako primenjiva na druge 5-alkiltio-6-alkoksi izohinoline zamenom ovde prikazanih reagenasa. U rastvor 1-hloro-6-fluoro izohinolina (88mg, 0.48mmol) u 2.0mL THF-a pod azotom na -78°C je dodat LDA (1.5molarni u cikloheksanu, 0.42mL, 0.63mmol) obrazujući tamno smeđi rastvor. Uveden je čisti n-propil disulfid (85uL, višak), posle čega je mešan na -78°C tokom 30 min. Reakciona smeša je ostavljena da se tokom 30 min zagreje do sobne temperature. Ugašena je rastvorom polovično zasićenog NH4CI, a organski ostaci su ekstrahovani u etil acetat. Organski slojevi su sjedinjeni osušeni pod vakuumom do 50mikrona (Hg). Sirovi proizvod je pokupljen u 2mL THF-a i ohlađen do -78°C, dodat je u višku kalijum etoksid (60mg). Izohinolinski intermedijer je na kraju prečišćen pomoću silika gel kolone (tip-H, Merck) uz eluaciju sa mešavinom etar-heksani, dobijeno je 32.2mg (24%) čistog jedinjenja. LC-MS je pokazala 1-hloro-5-propiltio-6-etoksil izohinolin na rt-min (MH<+>) Špostupak CĆ : 3.77 (282).<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 5 ppm 0.94 (t,J =7.34 Hz, 3H), 1.46 (m, 2H), 1.55 (t,J =6.97 Hz, 3H), 2.83 (t,J =7.21 Hz, 2H), 4.32 (q,J= 6.85 Hz, 2H), 7.36 (d,J= 9.29 Hz, 1H), 8.22 (d,J =6.11 Hz, 1H), 8.32 (d,J= 9.29 Hz, 1H), 8.35 (d,J =6.11 Hz, 1H).
Sledeći opštu proceduru tripeptidne alkilacije (Primer 184) ovaj 1-hloro-5-propiltio-6-etoksi izohinolin je alkilovan sa tripeptidom (Jedinjenje 184) da bi se dobilo 40.7mg (44.8%) željenog proizvoda, koji je prikazan ispod.
Primer 206: Izrada Jedinjenja 206.
BOCNH-P3(/.-f-BuGly)-P2Š(4fl)-(6-etoksi-5-propiltio-izohinolin-1-okso)-S-prolinĆ-P1(1/?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan. LC/MS rt-min (MH<+>) 2.93 (803) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.93 (t,J= 7.34 Hz, 3H), 1.01 (s, 9H), 1.07 (m, 2H), 1.21 (m, 11H), 1.41 (m, 3H), 1.48 (t,J =6.85 Hz, 3H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.60 (dd,J =13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.81 (q,J =6.97 Hz, 2H), 2.93 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.27 (q,J =7.09 Hz, 2H), 4.43 (d,J =11.74 Hz, 1H), 4.52 (m, 1H), 5.10 (d,J =10.76 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.30 (d,J =9.05 Hz, 1H), 7.92 (d,J =6.36 Hz, 1H), 7.97 (m, 1H), 8.22 (d,J =9.05 Hz, 1H).
Primer 207: Izrada Jedinjenja 207.
Na sličan način, ista procedura je primenjena za izradu BOCNH-P3(/_-f-BuGly)-P2Š(4fl)-(6-metoksi-5-metiltio-izohinolin-1 -okso)-S-prolinĆ-P1 (1 ft,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropana.
U rastvor od 100mg 1-hloro-6-fluoro-izohinolina (0.55mmol) u 2mL suvog THF-a na - 78°C je dodat LDA u THF-u (1.3 ekv.). Obrazovan je tamno smeđi rastvor zatim, je dodat disulfid a boja rastvora se izmenila do zelenkaste, a zatim, svetio smeđe. Reakcija je ugašena sa 2mL vode i 2mL NH4CI, ekstrahovana je etil acetatom i osušena preko natrijum sulfata. Rastvarač je uparen pod vakuumom, a nastali ostatak je korišćen kao sirov. LC/MS rt-min (MH<+>) 2.23 (228) Špostupak BĆ. Sirovi materijal je ponovo rastvoren u 2mL suvog THF-a na -78°C i dodat je I. 3ekv. KOMe, a zatim je reakciona smeša ostavljena da se zagreje do rt i meša preko noći. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom, isprana slanim rastvorom i osušena preko natrijum sulfata, Dpobijena su 104mg (79%). LC/MS rt-min (MH<+>) 2.04 (240) Špostupak BĆ. Intermedijer, 1-hloro-5-metiltio-6-metoksi izohinolin je podvrgnut protokolu tripeptidne alkilacije, koji je prethodno opisan. Sledeći opštu proceduru dobijeno je 70.0mg žute čvrste mase (42.7%). LC/MS rt-min (MH<+>) 2.65 (760) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 5 ppm 0.94 (m, 11H), 1.17 (s, 9H), 1.26 (m, 2H), 1.39 (m, 1H), 1.83 (dd,J =8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.01 (m, 2H), 2.23 (s, 3H), 2.45 (m, 1H), 2.79 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.97 (d,J =3.91 Hz, 1H), 4.15 (s, 1H), 4.25 (d,J =II. 74 Hz, 1H), 4.36 (dd,J =9.66, 7.21 Hz, 1H), 4.99 (d,J =10.27 Hz, 1H), 5.12 (d,J =16.87 Hz, 1H), 5.69 (m, 1H), 5.74 (s, 1H), 7.08 (d,J =9.05 Hz, 1H), 7.83 (m, 2H), 8.06 (d,J =9.05 Hz, 1H).
Primer208:Izrada 1-hloro-6-metoksi-izohinolin-5-il-tiofen-2-il-metanona
Sledeći isti protokol LDA deprotonovanja (izrada Jedinjenja 203) 1-hloro-6-fluoro izohinolina, koji je prethodno opisan, sa razlikom što je početni anjon ugašen sa 2-tiofenkarboksaldehidom, da bi se dobio 1-hloro-6-fluoro izohinolin-5-il-tiofen-2-il-metanol. Materijal je oksidovan u 1-hloro-6-fluoro-izohinolin-5-il-tiofen-2-il-metanon korišćenjem Mn02u benzenu sa 49.6% ukupnim prinosom posle hromatografskog prečišćavanja. LC/MS rt-min (MH<+>) Špostupak CĆ : 2.98 (292).
<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 5 ppm 7.12 (dd,J= 4.89, 3.91 Hz, 1H), 7.40 (m, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.56 (dd,J =5.87, 0.73 Hz, 1H), 7.82 (dd,J =5.01, 1.10 Hz, 1H), 8.27 (d,J= 5.87 Hz, 1H), 8.54 (ddd,J=9.29, 5.38, 0.73 Hz, 1H).
Ipso nukleofilna aromatična zamena atoma fluora je izvedena u rastvoru viška kalijum metoksida da bi se dobio najvećim delom 1-hloro-6-metoksi-izohinolin-5-il-tiofen-2-il-metanon zajedno sa 25-33% 1,6-dimetoksi-izohinolin-5-il-tiofen-2-il-metanona. Sirovi materijal (77mg) je korišćen u koraku alkilacije sa tripeptidom bez daljeg prečišćavanja.
Primer 209: Izrada Jedinjenja 209.
Sledeći opštu proceduru tripeptidne alkilacije (Primer 184) dobijeno je 35.3mg BOCNH-P3(L^BuGly)-P2Š(4fO-6-metoksi-5-(tiofen^
acca)-CONHS02-ciklopropana u vidu blede čvrste mase (26.5%). LC/MS rt-min (MH<+>) 2.54 (825) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.02 (s, 9H), 1.06 (m, 2H), 1.22 (m, 2H), 1.26 (s, 9H), 1.43 (m, 1H), 1.87 (dd,J= 7.95, 5.50 Hz, 1H), 2.28 (m, 2H), 2.62 (dd,J =13.82, 6.97 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 4.07 (dd,J =11.62, 3.06 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.43 (m, 1H), 4.55 (dd,J= 9.78, 7.34 Hz, 1H), 5.09 (m, 1H), 5.29 (d,J= 17.12 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 6.93 (d,J =6.11 Hz, 1H), 7.11 (m, 1H), 7.32 (dd,J =3.91, 0.98 Hz, 1H), 7.46 (d,J =9.29 Hz, 1H), 7.86 (t,J =6.72 Hz, 1H), 7.91 (dd,J= 4.89, 1.22 Hz, 1H), 8.39 (d,J= 9.29 Hz, 1H).
Izrada P2<*>pomoću derivata cinamske kiseline.
Dole oslikana opšta procedura opširnije je opisana na drugom mestu.
Opšta sintetska šema
Primer 210: Izrada Jedinjenja 210.
10.Og meta-tolil-akrilne kiseline (61.7mmol) je suspendovano u 50ml_ benzena. Dodato je 12.6ml_ DPPA (0.95ekviv.) a zatim 10.3ml_ trietilamina (1.2ekviv.). Nastali rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Isparljivi delovi su odstranjeni pod vakuumom, a meta-tolil-akriloil azid je prečišćen flash hromatografijom da bi se dobilo 11.5g čistog jedinjenja (kvantitativno). Ovaj materijal u 100mL difenilmetana je uveden, kap po kap, u 100ml_ difenilmetana koji je prethodno zagrejan do 200°C tokom perioda od 1 h. Nastali rastvor je ostavljen na ovoj temperaturi tokom dodatna 4 h, a zatim je ohlađen do sobne temperature. Obrazovan je beli talog koji je odfiltriran. Čvrsta masa je isprana tri puta heksanima i osušena. Filtrat je razblažen sa 200ml_ heksana a rastvor je ostavljen da stoji preko noći kako bi se omogućilo razdvajanje drugog prinosa. Materijali su sjedinjeni da bi se dobilo 4.2g 6-metil-izohinolin-1-ola (50%). LC/MS rt-min (MH<+>) 1.31 (160) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 2.49 (s, 3H), 6.61 (d,J =7.32 Hz, 1H), 7.13 (d,J =7.02 Hz, 1H), 7.36 (d,J =8.24 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 8.18 (d,J =8.24 Hz, 1H). Materijal je suspendovan u 15mL POCI3i doveden do refluksa tokom 3 sata. Posle uklanjanja POCI3in vacuo ostatak je raspodeljen između EtOAc (1L) i hladnog vodenog NaOH (proizveden iz 1.0N 200mL NaOH i 20mL 10.ON NaOH) i mešan je tokom 15 min. Organski sloj je ispran vodom (2x200mL) i slanim rastvorom (200mL), osušen (MgS04) i ukoncentrisan in vacuo da bi se dobio 1-fluoro-6-metil-izohinolin (67.4%). LC/MS rt-min (MH<+>) 1.92 (178) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 6 ppm 2.53 (s, 3H), 7.47 (d,J =6.11 Hz, 2H), 7.56 (s, 1H), 8.18 (m, 2H). Konačno alkilovanje 1-hloro-6-metil-izohinolina sa tripeptidom je izvedeno korišćenjem prethodno opisanog protokola (Primer 184).
BOCNH-P3(L-fero-BuGly)-P2Š(4fl)-(6-metil-izohinolin-1-okso)-S-prolinĆ-P1 (1 fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan: materijal je dobijen u vidu bele pene u 18% prinosu. LC/MS Rt-min (MNa<+>) Špostupak BĆ : 2.64 (720).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.05 (m, 13H), 1.23 (m, 9H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (dd,J =7.95, 5.50 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.61 (dd,J =13.82, 6.48 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.05 (dd,J =11.86, 3.30 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.43 (d,J =11.49 Hz, 1H), 4.52 (m, 1H), 5.10 (d,J =11.49 Hz, 1H), 5.28 (d,J= 17.12 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.24 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.35 (d,J =8.07 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.89 (d,J= 5.87 Hz, 1H), 8.07 (d,J =8.56 Hz, 1H).
Primer 211: Izrada Jedinjenja 211.
Sledeći prethodno opisanu opštu proceduru dobijeno je 51.0mg BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2Š(4fl)-(1,3-dioksa-7-aza-ciklopentaŠaĆnaftalen-6-ol)-S-prolinĆ-P1 (1 f?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropana u vidu blede čvrste mase (64.9%). LC/MS rt-min (MH<+>) 2.57 (728) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.99 (s, 9H), 1.07 (m, 2H), 1.18 (m, 11H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.23 (m, 2H), 2.59 (dd,J =13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.04 (dd,J =11.74, 2.20 Hz, 1H), 4.22 (s, 1H), 4.43 (d,J =11.74 Hz, 1H), 4.51 (m, 1H), 5.10 (d, J = 10.27 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.73 (m, 1H), 5.82 (s, 1H), 6.18 (s, 2H), 7.13 (d, J = 8.56 Hz, 1H), 7.19 (d,J= 6.11 Hz, 1H), 7.81 (d,J= 8.56 Hz, 1H), 7.85 (d,J =6.11 Hz, 1H).
Izrada 5,6,7-trisupstituisanih izohinolin P2<*>derivata:
Reakcioni uslovi: (a) LDA u THF-u; (b) N-fluorobenzensulfonimid (NFSI) za R=F ili dimetilsulfid (MeS)2za R=SMe.
Gore pripremljeni 5,6-metilendioksi-1-hloroizohinolin je deprotonovan direktno u prisustvu jake baze, kao što je LDA da bi se dobio odgovarajući 7-anjon bez interferencije sa 1-hloro funkcionalnom grupom. 7-anjon je ugašen sa elektrofilima, kao što su NFSI (N-fluorobenzensulfonimid) i dimetilsulfid kako bi se proizveo odgovarajući sistem prstena 7-supstituisanog izohinolina.
Primer 212: Izrada Jedinjenja 212.
Korak 1:
Izrada 5,6-metilendioksi-7-fluoro-1-hloro izohinolina. U rastvor 5,6-metilendioksi-1-hloro izohinolina (126mg, 0.61 mmol) u 4mL THF, pod azotom, na -78°C je dodat LDA rastvor u cikloheksanu (1.5 molarni, 0.65 mL, 0.98mmol). Svetio smeđi rastvor je mešan tokom 15 min pre nego što je obrađen sa N-fluorobenzensulfonimidom (NFSI, 0.3g, 1.5ekviv.). TLC analiza je pokazala formiranje nove mrlje pored neizmenjenog polaznog materijala. Vodena prerada, posle koje su sledile ekstrakcije etil acetatom, proizvela je uljasti sirovi proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobilo 52mg (38%) LC/MS rt-min (MH<+>) Špostupak CĆ : 3.09
(226).<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 5 ppm 6.33 (s, 2H), 7.52 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.71 (d,J =10.51 Hz, 1H), 8.16 (d,J =5.87 Hz, 1H). Korak 2: Alkilovanje 5,6-metilendioksi-7-fluoro-1-hloro izohinolina sa tripeptidom je izvedeno, kao što je prethodno opisano (Jedinjenje 184) da bi se dobio glavni proizvod kao rezultat zamene fluora.
BOCNH-P3(/.-f-BuGly)-P2Š(4f?)-(6-hloro-1,3-dioksa-7-aza-ciklopenta ŠaĆnaftalen-4-okso)-S-prolinĆ-P1(1f?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan, prikazan ispod
Sledeći opštu proceduru dobijeno je 24.3mg žute čvrste mase (24.3%) LC/MS rt-min (MH<+>); 2.54 (763) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.00 (s, 9H), 1.06 (m, 2H), 1.20 (m, 2H), 1.29 (s, 9H), 1.42 (dd,J= 9.41, 5.26 Hz, 1H), 1.86 (dd,J= 8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.24 (m, 2H), 2.54 (dd,J =13.57, 6.48 Hz, 1H), 2.92 (m, 1H), 4.04 (dd,J =12.10, 2.81 Hz, 1H), 4.20 (d,J =7.34 Hz, 1H), 4.33 (d,J =12.23 Hz, 1H), 4.47 (dd,J= 10.52, 6.85 Hz, 1H), 5.10 (dd,J =10.39, 1.59 Hz, 1H), 5.28 (dd,J =17.12, 1.22 Hz, 1H), 5.46 (d,J= 5.87 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 6.29 (m, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.56 (m, 1H), 8.01 (d,J=5.62 Hz, 1H).
Primer 213: Izrada Jedinjenja 213.
U rastvor 5,6-metilendioksi-1 -hloro izohinolina (84mg, 0.41 mmol) u 4mL THF-a, pod azotom, na -78°C je dodat LDA rastvor u cikloheksanu (1.5 molarni, 0.60mL, 0.9mmol). Svetio smeđi rastvor je mešan tokom 15 min -78°C pre nego što je obrađen sa metil disulfidom (50uL čistog reagensa, 1.4ekviv.). TLC analiza je pokazala formiranje nove mrlje pored neizmenjenog polaznog materijala. Vodena prerada, posle koje su sledile ekstrakcije etil acetatom, proizvela je uljasti sirovi proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobilo 51 mg (49%) LC/MS rt-min (MH<+>) Špostupak CĆ : 3.39 (254).<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 5 ppm 2.64 (s, 3H), 6.29 (s, 2H), 7.49 (d,J= 4.89 Hz, 1H), 7.71 (s,1H), 8.11 (d,J= 5.87 Hz, 1H). Alkilovanje 5,6-metilendioksi-7-metiltio-1-hloro izohinolina sa tripeptidom je izvedeno, kao što je prethodno opisano (Primer 184) da bi se dobio željeni proizvod, prikazan ispod:BOCNH-P3(/--f-BuGly)-P2Š(4fl)-(4-metiltio-1,3-dioksa-7-aza-ciklopenta ŠaĆnaftalen-6-iloksi)-S-prolinĆ-P1 (1 fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan
Sledeći opštu proceduru dobijeno je 59.6mg žute čvrste mase (42.2%) LC/MS rt-min (MH<+>): 2.70 (774) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 5 ppm 1.02 (m, 11H), 1.16 (s, 9H), 1.32 (s, 2H), 1.45 (m, 1H), 1.94 (m, 1H), 2.12 (d,J =8.56 Hz, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.62 (m, 2H), 2.90 (d,J =4.40 Hz, 1H), 4.15 (d,J =7.83 Hz, 2H), 4.48 (d,J =12.47 Hz, 1H), 4.62 (t,J =7.83 Hz, 1H), 5.13 (d,J= 10.52 Hz, 1H), 5.26 (d,J= 17.12 Hz, 1H), 5.74 (d,J =16.38 Hz, 1H), 5.95 (s, 1H), 6.28 (s, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.85 (d,J =6.11 Hz, 1H).
Izrada 3, 4- disupstituisanih izohinolin P2<*>derivata
Primer 215: Izrada Jedinjenja 215.
BOCNH-P3(L^BuGly)-P2Š(1ft)-(2,3-dihidro-1H-4-aza-ciklopen^ P1 (1 fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan, prikazan ispod je pripremljen, kao što je prikazano u sledećoj šemi:
Opšta sintetska šema izohinolinske komponente Jedinjenja 214
Napomene: Sinteza novog 1-fluoroP2<*>je uspešno izvedena pomoću dole navedenih tehnologija: (1) Rigby, James H.; Holsvvorth, Daniel D.; James, Kelly. Vinvl lsocyanates In Synthesis. Š4+2Ć Cycloaddition Reactions With Benzyne Addends.Journal Of Organic Chemistry(1989), 54(17), 4019-20
(2) Uchibori, Y.; Umeno, M.; Yoshiokai, H.;Heterocycles,1992, 34(8), 1507-1510
Primer 214: Izrada Jedinjenja 214, 5-hloro-2,3-dihidro-1 H-4-aza-ciklopentaŠaĆnaftalena i Jedinjenja 215 iz Primera 215
2,3-dihidro-1H-4-aza-ciklopentaŠaĆnaftalen-5-ol je pripremljen u skladu sa postupkom Rigby-ja, koji je opisan u ovde navedenoj (referenci 1). Korišćenjem POCI3, kao što je opisano na drugom mestu, sintetisano je Jedinjenje 214 u 59.8% (430mg). LC/MS rt-min (Mh<T>): 2.29 (204) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 5 ppm 2.28 (m, 2H), 3.19 (q,J= 7.74 Hz, 4H), 7.58 (m, 1H), 7.71 (m, 2H), 8.32 (d, J = 8.56 Hz, 1H). Hlorid je dovoljno reaktivan da bi bio alkilovan sa tripeptidom u skladu sa procedurom iz Primera 184, da bi se dobio željeni proizvod, Jedinjenje 215. Međutim, ukupan prinos bi mogao biti udvostručen ukoliko je hlorid zamenjen fluoridom, postupkom Uchiborija opisanom u (referenci 2). Tako je dobijeno 17.0mg Jedinjenja 215, izolovanog u vidu bledo žute čvrste mase (23.6%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.80 (724) Špostupak BĆ.<1>H NMR (500MHz, CD3OD) 5 ppm 1.03 (s, 9H), 1.09 (m, 2H), 1.24 (m, 11H), 1.44 (dd,J =8.24, 5.49 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =7.93, 5.49 Hz, 1H), 2.25 (m, 4H), 2.63 (dd,J =13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.05 (m, 2H), 3.10 (m, 2H), 4.08 (dd,J =11.60, 2.75 Hz, 1H), 4.24 (d,J =20.45 Hz, 1H), 4.45 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.54 (dd,J= 9.46, 7.63 Hz, 1H), 5.11 (m, 1H), 5.30 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.87 (s, 1H), 7.44 (t,J =7.02 Hz, 1H), 7.69 (m, 2H), 8.18 (d,J =8.24 Hz, 1H).
Izrada 3,4-dihidrofuranil i furanil izohinolina P2<*>komponenti, Primeri 217 i 218
Opšta sintetska šema
Samo je Primer 217 preveden u 1-fluoro derivat za alkilaciju.
Primer 218 je bio dovoljno reaktivan za direktno alkilovanje, bez aktivacije fluorom.
Primer 217: Izrada Jedinjenja 217, 5-hloro-2,3-dihidro-1-oksa-4-aza-ciklopentaŠaĆnaftalena i Jedinjenja 218, 5-hloro-1-oksa-4-aza-ciklopenta ŠaĆnaftalena.
Ovu sintezu omogućava upotreba opisanih tehnologija, posebno u sledećim referencama: (1) Hojo, Masaru; Masuda, Rvoichi; Sakaguchi, Svuhei; Takagawa, Makoto,Synthesis(1986), (12), 1016-17 (2) Rigbv, James H.; Holsvvorth, Daniel D.; James, Kellv. Vinvl Isocvanates In Synthesis. Š4+2Ć Cvcloaddition Reactions With Benzyne Addends.Journal Of Organic Chemistry(1989), 54(17), 4019-20 (3) Uchibori, Y.; Umeno, M.; Yoshiokai, H.;Heterocycles,1992, 34(8), 1507-1510
2,3-dihidro-1 -oksa-4-aza-ciklopentaŠaĆnaftalen-5-ol i 1 -oksa-4-aza-ciklopentaŠaĆnaftalen-5-ol su proizvedeni zajedno kada se prate ovde navedene procedure (Reference 1 i 2). Konverzija para u njihove hloro derivate je izvedena pomoću POCI3, kao i obično: sirovi hidroksi proizvodi (oko 2g, bledo žuto ulje) su obrađeni sa 15ml_ POCI3i smeša je dovedena do refluksa tokom 3 h. Posle uklanjanja POCI3in vacuo, ostatak je mešan sa EtOAc
(1L) i hladnim vodenim NaOH (220ml_, 1.0N) tokom 15 min. Organski sloj je izdvojen, ispran vodom 2x200ml_ i slanim rastvorom (200mL), osušen preko MgS04i ukoncentrisan in vacuo da bi se dobilo 300mg Primera 217, 5-hloro-2,3-dihidro-1-oksa-4-aza-ciklopentaŠaĆnaftalena (13.2%) i 100mg Primera 218, 5-hloro-1-oksa-4-aza-ciklopentaŠaĆnaftalena (4.4%) u vidu svetio smeđih čvrstih masa po hromatografskom razdvajanju na silika gelu. Jedinjenje 217: LC/MS rt-min (MH<+>): 2.05 (206) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 8 ppm 3.46 (t,J =9.05 Hz, 2H), 4.82 (t,J =9.17 Hz, 2H), 7.58 (m, 1H), 7.66 (m, 1H), 7.85 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.21 (d,J =8.56 Hz, 1H). Jedinjenje 218: LC/MS rt-min (MH<+>): 2.16 (204) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 5 ppm 7.15 (d,J =2.20 Hz, 1H), 7.70 (m, 1H), 7.89 (m, 2H), 8.27 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.44 (d,J =8.80 Hz, 1H).
Izrada 5-fluoro-2,3-dihidro-1-oksa-4-aza-ciklopentaŠaĆnaftalena i konačnih P2<*>proizvoda kuplovanja
Izmena hlorid/fluorid je postignuta gore navedenim postupkom (Referenca 3). Tako je 90mg 5-hloro-2,3-dihidro-1-oksa-4-aza-ciklopentaŠaĆnaftalena (Primer 217) suspendovano u 1.5mL Bu4PHF2i zračeno pod mikrotalasom (Smith reaktor) do otprilike 120°C tokom 2 h. Posle vodene prerade i prečišćavanja na koloni dobijeno je 22mg proizvoda, fluorida (26.9%). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.91 (190) Špostupak BĆ. Derivat furana (Primer 218), 5-hloro-1-oksa-4-aza-ciklopentaŠaĆnaftalen je dovoljno reaktivan da bi bio alkilovan sa tripeptidom direktno bez aktivacije fluorida.
Primer 219: Izrada Jedinjenja 219.
BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2Š(4R)-(2,3-dihidro-1-oksa-4-aza-ciklopentaŠaĆ naftalen-5-iloksi)-S-prolinĆ-P1(1fi,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan. Sledeći opštu proceduru alkilovanja dobijeno je 22.0mg žute čvrste mase (26.3%). LC/MS rt-min (MH<+>) 2.65 (726) Špostupak BĆ.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.99 (s, 9H), 1.07 (m, 2H), 1.20 (m, 11H), 1.40 (m, 1H), 1.86 (dd,J= 8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.21 (dd,J =17.48, 8.93 Hz, 2H), 2.60 (dd,J= 13.45, 6.85 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.34 (m, 2H), 4.04 (dd,J= 11.74, 3.18 Hz, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.41 (d,J =11.49 Hz, 1H), 4.51 (m, 1H), 4.74 (t,J =9.05 Hz, 2H), 5.11 (d,J= 10.27 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.36 Hz, 1H), 5.73 (m, 1H), 5.78 (s, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.65 (t,J =7.46 Hz, 1H), 7.74 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.12 (d,J =8.56 Hz, 1H).
Primer 220: Izrada Jedinjenja 220.
BOCNH-P3(/_-f-BuGly)-P2Š(4fl)-(1-oksa-4-aza-ciklopentaŠaĆ naftalen-5-iloksi)-S-prolinĆ-P1 (1ft,2S-vinil acca)-CONHS02ciklopropan. Sledeći opštu proceduru alkilovanja dobijeno je 13.0mg žute čvrste mase (20%). LC/MS rt-min (MH<+>) 2.70 (724) Špostupak BĆ.<1>H NMR (500MHz, CD3OD) 5 ppm 1.01 (s, 9H), 1.09 (m, 2H), 1.22 (s, 9H), 1.27 (m, 2H), 1.46 (m, 1H), 1.89 (dd,J =7.78, 5.65 Hz, 1H), 2.24 (d,J =8.55 Hz, 1H), 2.33 (t,J =9.92 Hz, 1H), 2.68 (dd,J= 13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.95 (m, 1H), 4.14 (m, 1H), 4.26 (s, 1H), 4.50 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.57 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.12 (d,J=10.07 Hz, 1H), 5.30 (d,J=17.40 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.93 (s, 1H), 6.97 (d,J =2.14 Hz, 1H), 7.51 (t,J =7.32 Hz, 1H), 7.81 (t,J =7.48 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 8.13 (d,J =7.94 Hz, 1H), 8.28 (d,J =8.24 Hz, 1H).
Izrada 3-halo, 3-heteroaril 4-alkoksi i 4-hidroksi izohinolin P2<*>derivata.
Opšta sintetska šema
Reakcioni uslovi: (1) MeOK u DMPU; (2) NBS u dihloroetanu; (3) MCPBA u CH2CI2;
(4) POCI3u dihloroetanu; (5) BBr3u CH2CI2; (6) SEM-hlorid i Hunigova baza u CH2CI2
4-metoksi izohinolin (Primer 222a) je pripremljen iz 4-bromo izohinolina novom i pogodnom procedurom, korišćenjem uobičajene laboratorijske opreme i reagenasa. Regioselektivnom NBS bromovanjem dobijen je 3-bromo-4-metoksi izohinolin (Primer 222b) u dobrim prinosima. MCPBA oksidacija je protekla mirno da bi se izgradio odgovarajući N-oksid (Primer 222c) koji je izomerizovan u 1 -hloro-3-bromo-4-metoksi izohinolin (Primer 222d) korišćenjem uobičajene POCI3procedure. 4-metoksi izohinolin je alkilovan sa tripeptidom da bi se dobio odgovarajući 3-bromo-4-metoksi P2<*>derivat, pogodan za Stille i Suzuki kuplovanje. Alternativno, 4-metoksi izohinolin je demetilovan u BBr3da bi se dobio 4-hidroksi-3-bromo-1-hloro izohinolin (Primer 222e). 4-hidroksi grupa je ponovo zaštićena SEM-hloridom kako bi se dobio 4-SEM zaštićeni intermedijer, Primer 222. 4-hidroksi jedinjenje je ponovo stvoreno čim je izvršeno kuplovanje bilo protokolom uklanjanja zaštite, indukovanom kiselinom, bilo protokolom uklanjanja zaštite indukovanom fluoridom.
Primer (222d): izrada 1 -hloro-3-bromo-4-metoksi izohinolina
Korak 1:
Rastvoru 4-bromo izohinolina (15g, 73mmol, komercijalni materijal) u 200ml_ dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinona (DMPU, Aldrich) je dodat čvrsti kalijum metoksid (5.6gm, 800mmol). Reakcioni sud je potopljen u uljano kupatilo na 105°C u toku 20 min. Boja mešavine se brzo izmenila od početne, veoma blede do tamne zelenkasto smeđe, odmah po zagrevanju. Reakcioni sud je uklonjen iz uljanog kupatila i razblažen vodom, a organski ostaci su raspodeljeni u etru višestrukom ekstrakcijom sa porcijama etra. TLC analiza je pokazala dve nove mrlje (1:1 v/v smeša heksana i etil acetata kao eluanta) približno iste veličine. One su razdvojene na silika gel koloni (Merck tip-H) uz eluaciju sa ravnolančanim heksanima, posle čega sledi postepeno dodavanje etra u mobilnu fazu. Željeni proizvod 4-metoksi izohinolin (4.1 gm, 35.3%) je izolovan po uparavanju rastvarača. Drugi proizvod je, takođe, izolovan kao reduktivni nuz-produkt izohinolina. Identitet nuz-produkta je potvrđen poređenjem NMR sa autentičnim materijalom. Primer 222a: LC/MS rt-min (MH<+>) Špostupak CĆ : 1.16 (160).<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 8 4.07 (s, 3H), 7.61 (m, 1H), 7.69 (m, 1H), 7.93 (d,J= 8.07 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.19 (d,J= 8.56 Hz, 1H), 8.89 (s, 1H). ŠNapomena: ovo jedinjenje je prethodno pripremljeno u Zoltevvicz, John A.; Oestreich, Terence M.; Sale, Alan A,Journal of the American Chemical Society(1975), 97(20), 5889-96 u: "Monel Bomb", i kasnije procedurom, započetom "fokusiranim mikrotalasima" u: Cherng, Yie-Jia,Tetrahedron(2002), 58(6), 1125-1129. Ova procedura ne zahteva ni posebne aparate pod visokim pritiskom, niti mikrotalasnu opremu sa preparativnom skalom.Ć
Korak 2:
Materijal (Primer 222a) je podvrgnut NBS bromovanju, zato je 4-metoksi izohinolin (Primer 222a, 2.1gm, 13.2mmol) u 1,2-dihloroetanu (DCE) 150mL obrađen sa N-bromo-sukcinimidom (NBS) (1.5gm, 8.4mmol, 0.6x) na 70°C tokom sat vremena, posle čega sledi dodavanje druge porcije od 1.5gm NBS. Tamna smeđa smeša je mešana još sat vremena pre dodavanja treće porcije od 1.0gm NBS. Bromovanje je praćeno pomoću LC-MS sve dok više ne preostane polaznog materijala. Sirova smeša je uparena do suva, željeni proizvod je filtriran preko kratke podloge od silika gela (tip-H, Merck, 3cm dijametar sa 1.5cm visine) uz eluaciju prvo sa ravnolančanim heksanima a zatim, postepenim povećanjem količine etra. Željeni proizvod (Primer 222b) je izolovan kao uljasti materijal (1.7gm, 54%); LC/MS rt-min (MH<+>) Špostupak CĆ : 2.65
(238).<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 8 ppm 4.04 (s, 3H), 7.64 (t,J =7.58 Hz, 1H), 7.76 (t,J =7.09 Hz, 1H), 7.99(d, J =8.31 Hz, 1H), 8.11 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.85 (s, 1H). Š3-bromo-4-metoksi izohinolin je prethodno pripremljen drugačijom procedurom: Finkentev, Christel; Langhals, Elke; Langhals, Heinz.Chemische Berichte(1983), 116(6), 2394-7. NMR proizvoda bio je identičan ovom koji je izloženć.
Korak 3:
Proizvod NBS bromovanja je podvrgnut MCPBA oksidaciji u metilen hloridu na sobnoj temperaturi. MCPBA (1.80gm, 77% čist, 8.0mmol) je dodat u rastvor 3-bromo-4-metoksi izohinolina (Primer 222b) 1.65gm, 6.9mmol) u 35mL CH2CI2. Rastvor je mešan tokom 4 h obrazujući belu suspenziju. U smešu je dodat rastvor natrijum bikarbonata (5%, sveže pripremljen, 20mL), a organski ostaci su ekstrahovani u CH2CI2(10x25mL). Višestruka ekstrakcija u organski rastvarač je bila neophodna da bi se obnovilo nešto vodenog rastvora N-oksid proizvoda. Sirovi materijal, dobijen po uparavanju rastvarača dalje je prečišćen filtracijom preko silika gela da bi se dobilo 1.36gm (5.4mmol, 78%) N-oksida (Primer 222c) u vidu voskaste čvrste mase. LC/MS rt-min (MH<+>) Špostupak CĆ : 1.79 (254).<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 6 ppm 4.07 (s, 3H), 7.63 (m, 2H), 7.72 (m, 1H), 8.00 (m, 1H), 8.86 (s, 1H).
Korak 4:
Konačni rearanžman N-oksida izveden je kao i obično u POCI3korišćenjem procedure opisane na drugom mestu. Prinos Primera 222d bio je suštinski kvantitativan. LC/MS rt-min (MH<+>) Špostupak DĆ : 2.69 (272).<1>H NMR, kao HCI so (400MHz, hloroform-D) 5 ppm 4.07 (s, 3H), 7.81 (m, 1H), 7.92 (m, 1H), 8.17 (d,J= 8.31 Hz, 1H), 8.34 (d,J =8.31 Hz, 1H).<1>H NMR, kao slobodna baza (400MHz, hloroform-D) 5 ppm 4.03 (s, 3H), 7.72 (m, 1H), 7.81 (m, 1H), 8.12 (d,J =8.56 Hz, 1H), 8.28 (d,J= 8.56 Hz, 1H).
Primer 223: Izrada Jedinjenja 223.
Slobodna baza (Primer 222d), dobijena u prethodnom koraku, alkilovana je sa tripeptidnim fragmentom, korišćenjem protokola alkilacije (Primer 184), koji je opisan na drugom mestu, da bi se dobilo 79% željenog proizvoda u vidu papirno bele čvrste mase. LC/MS rt-min (MNa<+>) Špostupak CĆ : 3.91 (814).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.02 (s, 9H), 1.06 (dd,J =8.07, 1.47 Hz, 2H), 1.22 (m, 11H), 1.42 (dd,J =9.78, 5.14 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.22 (dd,J =18.10, 9.29 Hz, 1H), 2.28 (m, 1H), 2.61 (dd,J= 13.57, 6.97 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.06 (dd,J =11.86, 2.81 Hz, 1H), 4.22 (s, 1H), 4.43 (d,J= 11.49 Hz, 1H), 4.51 (m, 1H), 5.10 (d,J =10.52 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.81 (s, 1H), 7.56 (t,J =7.58 Hz, 1H), 7.78 (t,J =7.58 Hz, 1H), 8.00 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.16 (d,J =8.56 Hz, 1H).
Primer 224 i 225: Izrada Jedinjenja 224 i Jedinjenja 225.
4-metoksi grupa u 1-hloro-3-bromo-4-metoksi izohinolinu (Primer 222d), koji je opisan prethodno konvertovan je u oc-trimetilsilil etoksi metil (SEM) deo sledećom procedurom. 1-hloro-3-bromo-4-metoksi izohinolin (Primer 222d) je demetilovan korišćenjem BBr3(konačna doterana reakciona koncentracija je bila 0.2-0.3 molarna BBr3) na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Utvrđeno je da je visoka koncentracija BBr3za takvu demetilaciju bila neophodna i efikasna. Sirova reakciona smeša je razblažena sa 50 volumena anhidrovanog metanola pre uparavanja do suva. Demetilacija je bila suštinski kvantitativna (Primer 222e): LC/MS rt-min (MH<+>) Špostupak DĆ : 2.32
(258).<1>H NMR slobodne HCI soli (400MHz, hloroform-D) 8 ppm 5.83 (br s, 1H), 7.73 (t,J =7.70 Hz, 1H), 7.79 (t,J =7.58 Hz, 1H), 8.22 (m, 2H). 4-hidroksi-3-bromo-1-hloro izohinolin (Primer 222e) je ponovo zaštićen sa 2-(trimetilsilil) etoksi metil hloridom (SEM-CI). Sirova slobodna baza iz prethodne izrade osušena je do 40mikrona (Hg) na sobnoj temperaturi pre ponovne zaštite sa SEM-hloridom. U rastvor 4-hidroksi jedinjenja (Primer 222e, 1.33gm, 5.2mmol) u metilen hloridu (50mL) na 0°C, uzastopno je dodat diizopropil etil amin (2mL, 11.5mmol) i SEM-hlorid (1.8mL, 10mmol). Smeša je mešana tokom 10 min pre nego što je isprana sa sveže pripremljenim rastvorom NaHC03(5%, 100mL). Organski ostaci su ekstrahovani u nekoliko porcija metilen hlorida a sjedinjeni organski slojevi su ponovo isprani sa 20mL dejonizovane vode pre nego što su ukoncentrisani in vacuo. SEM zaštita je bila suštinski kvantitativna. Primer 222: LC/MS rt-min (MH<+>) Špostupak DĆ : 3.40 (410).<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 8 ppm 0.03 (s, 9H), 0.99 (m, 2H), 3.98 (m, 2H), 5.33 (s, 2H), 7.72 (m, 1H), 7.80 (m, 1H), 8.17 (d,J =8.56 Hz, 1H), 8.27 (d,J =8.07 Hz, 1H). Alkilovanje 4-SEM zaštićenog izohinolina sa tripeptidom: Jedinjenje 224 i Jedinjenje 225 su proizvedena iz iste reakcije tripeptidne alkilacije. 4-hidroksi jedinjenje (Jedinjenje 224) proizvedeno je najverovatnije kao rezultat prisustva TFA tokom prečišćavanja preparativnom HPLC. Primer 224 (15.4%): LC/MS rt-min (MNa<+>) Špostupak DĆ : 2.87 (800).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.02 (s, 9H), 1.06 (d, J = 8.31 Hz, 2H), 1.25 (s, 9H), 1.42 (s, 2H), 1.86 (m, 1H), 2.23 (m, 2H), 2.60 (dd, J = 13.21, 7.34 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.06 (d, J = 11.00 Hz, 1H), 4.24 (m, 2H), 4.38 (d, J = 11.98 Hz, 1H), 4.49 (dd, J = 9.78, 7.09 Hz, 1H), 5.10
(d, J = 10.03 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 17.36 Hz, 1H), 5.72 (m, 1H), 5.76 (s, 1H), 7.52 (t, J = 7.46 Hz, 1H), 7.71 (t, J = 7.09 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 4.40 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 4.16 Hz, 1H).
Primer 225 (8.0%): LC/MS Rt-min ([M-BOC]<+>) [postupak D] : 3.46 (808).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 0.01 (s, 9H), 0.96 (m, 2H), 1.02 (s, 11H), 1.06 (d,J =6.60 Hz, 2H), 1.24 (s, 9H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (dd,J =7.83, 5.38 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.62 (dd,J= 13.69, 7.34 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.97 (m, 2H), 4.07 (dd,J =10.87, 3.55 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.43 (d,J =11.25 Hz, 1H), 4.50 (m, 1H), 5.10 (d,J= 10.76 Hz, 1H), 5.25 (m, 3H), 5.74 (m, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.57 (m, 1H), 7.77 (t,J =7.83 Hz, 1H), 8.06 (d,J =8.56 Hz, 1H), 8.16 (d,J= 8.31 Hz, 1H).
Izrada 4/-/-[1,3] dioksino[5,4-c] izohinolin P2<*>derivata
Opšta sintetska šema
Reakcioni uslovi: (1) MeOK u DMP-u; (2) MCPBA u CH2CI2; (3) POCI3u DCE; (4) BBr3u CH2CI2; (5) HCHO rastvor u 40% H2S04postupkom sinteze 1,3-oksazino[5,6-c]izohinolina i srodnih jedinjenja. Miyoko Toyama and Hirotaka Otomasu,Chem. Pharm. Buli.33(12), 5543-5546, 1985; (6) procedura fluorovanja prema: Uchibori, Y.; Umeno, M.; Yoshiokai, H.;Heterocycles,1992, 34(8), 1507-1510.
Primer 227: Izrada Jedinjenja 227.
6-hloro-1,3-oksazino[5,6-c]izohinolin je pripremljen procedurom Miyoko Toyama i Hirotaka Otomasu polazeći od 1-hloro-4-hidroksi izohinolina. Polazni materijal: 1-hloro-4-hidroksi-izohinolin (Primer 226c) je pripremljen gore prikazanim sintetskim sledom. MCPBA oksidacija 4-metoksi izohinolina (Primer 222a) je izvedena kao obično, da bi se dobilo 79.1% odgovarajućeg N-oksida (Primer 226a). Odmah posle toga, materijal je preveden u 1-hloro derivat u POCI3da bi se dobio hlorid (Primer 226b) u suštinski kvantitativnom prinosu. Sirovi 1 -hloro-4-metoksi izohinolin je demetilovan u BBr3na sobnoj temperaturi da bi se dobio odgovarajući 1-hloro-4-hidroksi izohinolin (Primer 226c) po obradi sirove BBr3smeše sa anhidrovanim metanolom na sobnoj temperaturi, posle čega je usledilo uparavanje da bi se oslobodili viška boratnih ostataka. Reakcijom Miyoko Toyama i Hirotaka Otomasu dobijeno je 266mg, 6-hloro1,3-oksazino[5,6-c]izohinolina (Primer 226d, 62.3%)
ukupnog prinosa iz 300mg 4-metoksi izohinolina u 4 koraka. LC/MS Rt-min ([M-HCHO]H<+>)
[postupak D] : 2.45 (192).<1>H NMR (400MHz, hloroform-D) 5 ppm 5.02 (s, 2H), 5.41 (s, 2H), 7.68 (m, 1H), 7.77 (ddd,J =8.25, 6.91, 1.22 Hz, 1H), 8.10 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.26 (d,J =8.56 Hz, 1H).
Utvrđeno je da je hlorid nereaktivan u uslovima alkilacionog protokola iz Primera 184. Odgovarajući 6-fluoro-1,3-oksazino[5,6-c]izohinolin (Primer 226) pripremljen je ranije navedenim postupkom [Uchibori, Y.; Umeno, M.; Yoshiokai, H.; Heterocvcles, 1992, 34(8), 1507-1510]. Reakcija nije ostavljena da se završi, a sirova reakciona smeša je obnovljena kao smeša sa odnosom 1 : 2.4 (Cl : F). Bez daljeg prečišćavanja, smeša hlorid/fluorid je alkilovana sa tripeptidom korišćenjem procedure iz Primera 184 da bi se dobilo 66mg (50.0%) BOCNH-P3(/.-f-BuGly)-P2[(4R)-(1,3-oksazino[5,6-c]izohinolin-6-okso)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinilacca)-CONHS02ciklopropana, nakon prečišćavanja preparativnom HPLC. LC/MS R,-min (MNa<+>)
[postupak D] : 3.03 (764).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.01 (s, 9H), 1.06 (dd,J =8.07, 1.96 Hz, 2H), 1.22 (s, 10H), 1.34 (d,J =6.11 Hz, 1H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.23 (m, 2H), 2.59 (dd,J= 13.82, 6.97 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.03 (dd,J =11.86, 3.06 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.41 (d,J= 11.98 Hz, 1H), 4.50 (dd,J= 9.66, 6.97 Hz, 1H), 4.87 (m, 2H), 5.11 (d,J =10.52 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.34 (s, 2H), 5.74 (m, 2H), 7.51 (t,J =7.46 Hz, 1H), 7.70 (t,J =7.58 Hz, 1H), 7.95 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.12 (d,J =8.31 Hz, 1H).
Izrada 4-metoksi-3-heteroaril i 3-azoil izohinolin P2<*>derivata putem Suzuki i Stille reakcija kuplovanja
Dole prikazane tehnologije kuplovanja, pokazuju opštu iskoristivost sa bromo derivatima Primera 223. Razumljivo je da je sličan protokol jednako primenjiv na druge kombinacije kuplujućih reagenasa i katalizatora, koji nisu bor i kalaj.
Primer 229: Izrada Jedinjenja 229
BOCNH-P3(/.-f-BuGly)-P2[(4R)-(3-furan-3-il-4-metoksi-izohinolin-1 -okso)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)-CONHS02ciklopropan, putem dole prikazanog Suzuki kuplovanja:
22 mg (0.028 mmol) Primera 223 je rastvoreno u 1 mL DMF-a i dodato je 9.4mg komercijalne borne kiseline (3eq), 3mg katalizatora (10% mmol) i 18mg cezijum karbonata. Smeša je dva puta oslobođena gasa, a zatim je zagrejana do 110°C, tokom 3 sata. Konačni proizvod je prečišćen preparativnom HPLC, dobijeno je 13.6mg žute čvrste mase (64.0%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.85
(780) [postupak B].<1>H NMR (500MHz, CD3OD) 8 ppm 1.09 (m, 11H), 1.26 (m, 12H), 1.68 (m, 1H), 2.27 (s, 1H), 2.64 (m, 2H), 2.97 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 4.15 (d,J= 10.38 Hz, 2H), 4.28 (s, 1H), 4.43 (d,J =10.99 Hz, 1H), 4.56 (m, 1H), 5.11 (m, 2H), 5.63 (m, 1H), 5.99 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.51 (m, 1H), 7.61 (m, 1H), 7.75 (t,J =7.17 Hz, 1H), 8.03 (d,J =8.24 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 8.24 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H).
Primer 230: Izrada Jedinjenja 230
BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2[(4R)-(3-furan-2-il-4-metoksi-izohinolin-1 -okso)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)-CONHS02ciklopropan je sintetisan putem dole prikazane reakcije Stide kuplovanja:
40mg (0.05mmol) Primera 223, 4mg katalizatora (5%mmol) i 100uJ (4eq) komercijalnog kalajevog reagensa su rastvoreni u 1mL toluena, a smeša je oslobođena gasa dva puta, a zatim je grejana do 90°C preko noći. Posle razdvajanja prep HPLC, dobijeno je 19.6mg zelenkaste čvrste mase
(50.0%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.76 (780) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.94 (m, 2H), 0.98 (s, 9H), 1.09 (m, 2H), 1.25 (s, 9H), 1.39 (m, 1H), 1.60 (m, 1H), 2.35 (m, 1H), 2.48 (m, 1H), 2.74 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 4.14 (m, 1H), 4.22 (d,J =4.16 Hz, 1H), 4.41 (s, 1H), 4.69 (m, 1H), 5.26 (m, 1H), 5.35 (m, 1H), 5.93 (s, 1H), 6.03 (m, 1H), 6.61 (m, 1H), 7.16 (d,J= 3.18 Hz, 1H), 7.50 (d,J= 7.58 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.73 (t,J =7.34 Hz, 1H), 8.04 (m, 1H), 8.17 (d,J =8.31 Hz, 1H).
Primer 231: Izrada Jedinjenja 231
BOCNH-P3(/.-f-BuGly)-P2[(4R)-(3-pirazin-2-il-4-metoksi-izohinolin-1 -okso)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)-CONHS02ciklopropan je na sličan način pripremljen reakcijom Stille kuplovanja, u 7.1% prinosu. LC/MS rt-min (MH<+>): 2.51 (792) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.98 (m, 9H), 1.11 (m, 2H), 1.19 (s, 9H), 1.27 (m, 2H), 1.42 (m, 1H), 2.37 (m, 1H), 2.48 (m, 2H), 2.81 (m, 1H), 2.97 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 4.07 (s, 1H), 4.20 (d,J =4.16 Hz, 1H), 4.54 (d,J =11.49 Hz, 1H), 4.72 (m, 1H), 5.27 (m, 1H), 5.39 (m, 1H), 5.96 (s, 1H), 6.04 (m, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.60 (d,J= 2.20 Hz, 1H), 8.76 (d,J =2.20 Hz, 1H), 9.33 (s, 1H).
Primer 232: Izrada Jedinjenja 232
BOCNH-P3(^BuGly)-P2[(4R)-(4-metoksi-3-tiazol-2-il-4-meto^^
vinil acca)-CONHSOzciklopropan je na sličan način pripremljen reakcijom Stille kuplovanja, u 32.2% prinosu. LC/MS rt-min (MH<+>): 2.42 (797) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) S ppm 1.03 (s, 9H), 1.07 (m, 2H), 1.13 (s, 9H), 1.22 (m, 2H), 1.43 (dd,J= 9.78, 5.14 Hz, 1H), 1.88 (dd,J= 8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.23 (q,J =8.97 Hz, 1H), 2.36 (m, 1H), 2.67 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.10 (s, 3H), 4.15 (m, 1H), 4.18 (s, 1H), 4.53 (d,J =25.92 Hz, 1H), 4.59 (dd,J= 10.27, 7.09 Hz, 1H), 5.12 (m, 1H), 5.29 (d,J =17.36 Hz, 1H), 5.73 (m, 1H), 6.09 (s, 1H), 7.74 (t,J =7.58 Hz, 1H), 7.91 (t,J =7.70 Hz, 1H), 8.00 (d,J= 3.42 Hz, 1H), 8.18 (d,J= 3.18 Hz, 1H), 8.22 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.29 (d,J =8.31 Hz, 1H).
Primer 233: Izrada Jedinjenja 233
Sledeći opštu proceduru alkilovanja tripeptidima sa komercijalnim 4-hlorofuro[3,2-c]piridinom, dobijeno je 5.7mg žute čvrste mase (8.2%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.32 (674) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.00 (s, 9H), 1.07 (m, 2H), 1.21 (m, 11H), 1.41 (m, 1H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.22 (dd,J= 17.61, 9.05 Hz, 2H), 2.54 (dd,J =13.69, 7.09 Hz, 1H), 2.92 (m, 1H), 4.06 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.32 (s, 1H), 4.49 (m, 1H), 5.11 (dd,J =10.27, 1.47 Hz, 1H), 5.29 (dd,J= 17.36, 1.22 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.81 (s, 1H), 6.83 (d,J =1.22 Hz, 1H), 7.19 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.76 (d,J =1.22 Hz, 1H), 7.97 (d,J =5.87 Hz, 1H).
Primer 235: Izrada Jedinjenja 235
Sledeći opštu proceduru alkilovanja tripeptidima sa komercijalnim 4-hlorotieno[3,2-c]piridinom, dobijeno je 20.0mg žute čvrste mase (28.1%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.50 (690) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.01 (s, 9H), 1.06 (m, 2H), 1.21 (m, 11H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (dd,J= 8.19, 5.50 Hz, 1H), 2.24 (m, 2H), 2.57 (dd,J =13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.05 (dd,J =11.98, 3.18 Hz, 1H), 4.22 (s, 1H), 4.39 (d,J =11.74 Hz, 1H), 4.50 (dd,J =9.90, 7.21 Hz, 1H), 5.10 (dd,J= 10.39, 1.34 Hz, 1H), 5.28 (d,J= 17.12 Hz, 1H), 5.73 (m, 1H), 5.81 (s, 1H), 7.45 (d,J =5.62 Hz, 1H), 7.53 (m, 2H), 7.94 (d,J =5.87 Hz, 1H).
Primer 236: Izrada Jedinjenja 236
Sledeći opštu proceduru tripeptidnog alkilovanja sa komercijalnim 3,5-dihloro-1,2,4-tiadiazolom, dobijeno je 8.0mg žute čvrste mase (11.9%). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.37 (697) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.00 (s, 9H), 1.06 (m, 2H), 1.22 (m, 11H), 1.36 (s, 9H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.60 (dd,J =14.18, 6.85 Hz, 1H), 2.92 (m, 1H), 4.03 (dd,J =12.47, 3.18 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.42 (m, 2H), 5.11 (dd, J = 10.27, 1.71 Hz, 1H), 5.29 (dd,J= 17.12, 1.47 Hz, 1H), 5.68 (s, 1H), 5.74 (m, 1H).
Primer 237: Izrada Jedinjenja 237
BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2[(4R)-(hinoksalin-2-okso-)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)-CONHS02ciklopropan, prikazan ispod:
Sledeći opštu proceduru tripeptidnog alkilovanja sa komercijalnim 2-hlorohinoksalinom, dobijeno je 113.0mg žute čvrste mase (19.2%). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.48 (707) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) S ppm 1.01 (s, 9H), 1.06 (m, 2H), 1.22 (m, 11H), 1.42 (m, 1H), 1.87 (dd,J=8.19, 5.50 Hz, 1H), 2.24 (m, 1H), 2.31 (m, 1H), 2.57 (dd,J =13.57, 6.97 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.09 (dd,J =11.98, 3.18 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.38 (d,J= 11.74 Hz, 1H), 4.50 (dd,J =10.27, 7.09 Hz, 1H), 5.11 (dd,J =10.27, 1.71 Hz, 1H), 5.29 (dd,J =17.12, 1.47 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.87 (s, 1H), 7.62 (t,J =7.46 Hz, 1H), 7.73 (t,J =7.70 Hz, 1H), 7.87 (m, 1H), 7.96 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H).
Primer 238: Izrada Jedinjenja 238
BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2[(4R)-(2-trifluoro-6-fluorohinolin-4-okso-)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)-CONHS02ciklopropan, prikazan ispod:
Sledeći opštu proceduru tripeptidnog alkilovanja sa komercijalnim 2-trifluorometil-4-hloro-6-fluoro hinolinom, dobijeno je 17.0 mg žute čvrste mase (23.2%). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.66 (792)
[postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.02 (s, 9H), 1.06 (m, 2H), 1.17 (s, 9H), 1.23 (m, 2H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.21 (q,J= 8.64 Hz, 1H), 2.32 (m, 1H), 2.63 (dd,J =13.94, 6.85 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.08 (m, 1H), 4.18 (s, 1H), 4.53 (m, 2H), 5.10 (m, 1H), 5.27 (d,J=17.12 Hz, 1H), 5.58 (s, 1H), 5.72 (m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.65 (m, 1H), 7.83 (dd,J= 9.29, 2.69 Hz, 1H), 8.12 (dd,J =9.29, 5.14 Hz, 1H).
Primer 239: Izrada Jedinjenja 239
BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2[(4R)-(6-fluorohinolin-4-okso-)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)-CONHS02ciklopropan, prikazan ispod:
Sledeći opštu proceduru tripeptidnog alkilovanja sa komercijalnim 4-hloro-6-fluoro hinolinom, dobijeno je 26.0mg žute čvrste mase (39.0%). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.98 (702) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.04 (m, 11H), 1.14 (s, 9H), 1.23 (m, 2H), 1.42 (m, 1H), 1.87 (dd, J = 8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.23 (q,J =8.80 Hz, 1H), 2.41 (m, 1H), 2.75 (dd,J= 14.43, 6.85 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.09 (s, 1H), 4.12 (d,J= 2.69 Hz, 1H), 4.61 (m, 2H), 5.11 (dd,J =10.39, 1.59 Hz, 1H), 5.28 (dd,J= 17.24, 1.34 Hz, 1H), 5.70 (m, 1H), 5.75 (s, 1H), 7.62 (d,J =6.60 Hz, 1H), 7.93 (m, 1H), 8.06 (dd,J =8.68, 2.57 Hz, 1H), 8.20 (dd,J =9.29, 4.40 Hz, 1H), 9.06 (d,J =6.60 Hz, 1H). Takođe je, iz iste reakcije, izolovana mala količina nuz-proizvoda zbog F-zamene, a razdvojena je preparativnom HPLC.
Primer 240: Izrada Jedinjenja 240
BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2[(4R)-(4-hlorohinolin-6-okso)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)-CONHS02ciklopropan, prikazan ispod:
Dobijeno je 8.0mg nuz-proizvoda, žute čvrste mase (11.7%). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.240 (740)
[postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.00 (s 9H), 1.06 (m, 2H), 1.23 (m, 11H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (dd,J =8.19, 5.50 Hz, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.29 (m, 1H), 2.55 (m, 1H), 2.92 (m, 1H), 4.09 (m, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.46 (dd,J =10.27, 6.85 Hz, 1H), 5.11 (dd,J =10.27, 1.47 Hz, 1H), 5.28 (dd,J= 17.36, 1.47 Hz, 1H), 5.43 (s, 1H), 5.74 (m, 1H), 7.60 (dd, J = 9.29, 2.45 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 2.45 Hz, 1H), 7.81 (d,J =4.89 Hz, 1H), 8.06 (d,J =9.29 Hz, 1H), 8.72 (d,J =5.14 Hz, 1H).
Primer 241: Izrada Jedinjenja 241
BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2[(4R)-(8-fluorohinolin-4-okso)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)-CONHS02ciklopropan, prikazan ispod:
Sledeći opštu proceduru tripeptidnog alkilovanja sa komercijalnim 4-hloro-8-fluoro hinolinom, dobijeno je 10.3 mg žute čvrste mase (14.7%). LC/MS rt-min (MhT): 1.95 (702) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.98 (s, 9H), 1.06 (m, 2H), 1.14 (s, 9H), 1.22 (m, 2H), 1.42 (m, 1H), 1.87 (dd,J =8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.22 (q,J =8.72 Hz, 1H), 2.41 (m, 1H), 2.74 (dd,J =14.06, 6.97 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.11 (m, 2H), 4.57 (dd,J= 10.39, 6.97 Hz, 1H), 4.66 (d,J =12.23 Hz, 1H), 5.11 (dd,J= 10.27, 1.22 Hz, 1H), 5.28 (d,J= 17.12 Hz, 1H), 5.71 (m, 2H), 7.59 (d,J= 6.36 Hz, 1H), 7.75 (m, 1H), 7.86 (m, 1H), 8.23 (d,J =8.56 Hz, 1H), 9.02 (d,J =6.36 Hz, 1H). Tokom prečišćavanja preparativnom HPLC, takođe je izolovan nuz-proizvod. Derivat 4-hlorohinolin-8-okso-hinolina je obrazovan kao rezulat zamene odlazeće grupe hlora atomom fluora.
Primer 242: Izrada Jedinjenja 242
BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2[(4R)-(4-hlorohinolin-8-okso)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)-CONHS02ciklopropan, prikazan ispod:
Tako je dobijen nuz-proizvod, 9.0mg žute čvrste mase (13.2%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.37 (718)
[postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.00 (s 9H), 1.06 (m, 2H), 1.12 (s, 9H), 1.23 (m, 2H), 1.43 (dd,J =9.41, 5.50 Hz, 1H), 1.87 (dd,J= 8.19, 5.50 Hz, 1H), 2.25 (m, 1H), 2.35 (m, 1H), 2.67 (dd,J=13.94, 7.09 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 4.13 (s, 1H), 4.43 (d,J= 11.98 Hz, 1H), 4.65 (dd,J =10.03, 7.09 Hz, 1H) 5.12 (dd,J= 10.27, 1.47 Hz, 1H), 5.30 (dd,J =17.12, 1.22 Hz, 1H), 5.51 (s, 1H), 5.75 (m, 1H), 7.61 (d,J= 7.83 Hz, 1H), 7.88 (t,J =8.19 Hz, 1H), 8.04 (m, 2H), 8.91 (d,J =5.38 Hz, 1H).
Primer 243: Izrada Jedinjenja 243
BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2[(4R)-(3-hidroksihinoksalin-2-okso)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)-CONHS02ciklopropan, prikazan ispod:
Sledeći opštu proceduru tripeptidnog alkilovanja sa komercijalnim 2,3-dihlorohinoksalinom, mono alkilovani proizvod je spontano hidrolizovan da bi se dobilo 8.0mg bledo žute čvrste mase (11.4%). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.42 (723) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.99 (s, 9H), 1.05 (m, 2H), 1.24 (s, 9H), 1.40 (m, 3H), 1.86 (m, 1H), 2.24 (m, 2H), 2.53 (m, 1H), 2.92 (m, 1H), 4.06 (m, 1H), 4.16 (s, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.55 (dd,J =10.39, 6.97 Hz, 1H), 5.11 (m, 1H), 5.29 (m, 1H), 5.73 (m, 1H), 5.78 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.26 (m, 2H), 7.36 (t,J =7.83 Hz, 1H), 7.61 (d,J =8.07 Hz, 1H).
Primer 244: Izrada Jedinjenja 244
Koristeći kombinaciju Pd° šeme kuplovanja i proceduru korak po korak, a polazeći od 6-bromo-1-hloro izohinolina, pripremljen je BOCNH-P3(L-f-BuGly)-P2[(4R)-(6-karboksilna kiselina dimetilamidizohinolin-1-okso)-S-prolin]-P1(1/?,2S vinil acca)-CONHS02ciklopropan.
LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.34 (777) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 0.98 (m, 11H), 1.23 (m, 11H), 1.35 (m, 1H), 1.91 (m, 1H), 2.29 (m, 2H), 2.47 (m, 1H), 2.58 (m, 1H), 2.97 (s, 3H), 3.11 (s, 3H), 4.09 (m, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.61 (m, 1H), 5.16 (m, 2H), 5.57 (m, 1H), 5.90 (s, 1H), 7.38 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.50 (d,J =8.07 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 8.03 (d,J =5.87 Hz, 1H), 8.27 (d,J =8.56 Hz, 1H).
Primer 245: Izrada Jedinjenja 245
Tokom jedne od izrada Stillovim kuplovanjem, katalizovanim sa Pd° (Primer 230) izolovan je sporedni proizvod kao minorni proizvod, koji je kasnije identifikovan kao: BOCNH-P3(Z_-f-BuGly)-P2[(4R)-(3-hloro-4-metoksiizohinolin-1 -okso)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)-CONHS02
ciklopropan, prikazan ispod
LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.62 (770) [postupak B].<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.01 (s, 9H), 1.08 (m, 2H), 1.18 (s, 9H), 1.27 (m, 2H), 1.37 (m, 1H), 1.62 (m, 1H), 2.36 (m, 2H), 2.73 (m, 1H), 2.97 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.02 (m, 1H), 4.18 (s, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.66 (m, 1H), 5.30 (m, 2H), 5.78 (s, 1H), 6.04 (m, 1H), 7.53 (t,J =7.70 Hz, 1H), 7.77 (t,J= 7.58 Hz, 1H), 8.00 (d,J =8.56 Hz, 1H), 8.19 (d,J =8.07 Hz, 1H).
Deo F:
Primer 250: Izrada Jedinjenja 250.
Korak 1: Rastvor 3-fenil-but-2-enske kiseline (16.2g) difenilfosforil azida (27.5g) i trietilamina (10.1 g) u benzenu (100ml_) je mešan tokom 1 h. Posle filtracije kroz podlogu od silika gela, ispiranja sa benzenom i koncentrisanja, ostatak je rastvoren u difenilmetanu (80mL) i podvrgnut refluksu tokom 3 h. Posle hlađenja do rt čvrsti delovi su sakupljeni kroz podlogu uz ispiranje sa benzenom i osušeni da bi se dobilo 10g (63%) željenog proizvoda u vidu čvrste mase.<1>H NMR (400MHz, CD3OD)8 ppm 2.30 (s, 3H), 7.00 (s, 1H), 7.54 (m, 1H), 7.77 (m, 2H), 8.33 (d,J =7.34 Hz, 1H).
Korak 2:
Rastvor 4-metil-2AV-izohinolin-1-ona (4.8g) u POCI3(50mL) je podvrgnut refluksu tokom 3 h. Posle hlađenja i koncentrisanja ostatak je alkalizovan sa 5N NaOH i ekstrahovan sa CH2CI2. Organski sloj je ispran slanim rastvorom i osušen preko MgS04. Posle koncentrisanja, prečišćavanjem flash hromatografijom Biotage sa 5% etilacetatom u heksanima je dobijeno 4.8g (90%) željenog proizvoda u vidu čvrste mase.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 2.59 (s, 3H), 7.68 (t,J= 7.70 Hz, 1H), 7.78 (m, 1H), 7.94 (d,J= 8.31 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.35 (d, J = 8.31 Hz, 1H).
Korak 3:
Rastvor Boc-Hyp-OH (231 mg) i ferc-BuOK (336mg) u DMSO (10ml_) je mešan tokom 0.5h. U rastvor je dodat 1-hloro-4-metil-izohinolin (178mg), a nastala mešavina je mešana tokom 1 dana. Reakcija je ugašena 5%-tnom limunskom kiselinom i ekstrahovana etil acetatom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom i osušen preko MgS04. Koncentrisanjem je dobijeno 350mg (94%) željenog proizvoda u vidu čvrste mase, koji je u sledećem koraku upotrebljen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.39, 1.43 (2s, 9H, rotameri), 2.40 (dd,J= 17.97, 4.52 Hz, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.68 (m, 1H), 3.84 (m, 2H), 4.46 (m, 1H), 5.71 (s, 1H), 7.58 (t,J =7.70 Hz, 1H), 7.75 (m, 2H), 7.91 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.19 (m, 1H); MS: (M+Na)<+>396.
Korak 4:
Rastvor 1-rerc-butil estra 4-(4-metil-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (74mg) hidrohlorida (1(R)-amino-2(S)-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline (59mg) PyBOP (114mg) i i-Pr2NEt (0.2mL) u CH2CI2(2ml_) je mešan tokom 2 h. Prečišćavanjem Biotage flash hromatografom sa 5% MeOH u etil acetatu, dobijeno je 105mg (90%) željenog proizvoda.<1>H NMR (400MHz, metanol-D4) 8 ppm 1.18 (m, 5H), 1.39 (s, 9H), 1.87 (dd,J =8.2, 5.3 Hz, 1H), 2.28 (m, 2H), 2.54 (m, 4H), 2.95 (m, 1H), 3.86 (m, 2H), 4.40 (dd,J =9.8, 6.9 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.31 (d,J =17.6 Hz, 1H), 5.79 (m, 2H), 7.60 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.78 (m, 2H), 7.93 (d,J =8.3 Hz, 1H), 8.20 (d,J =8.1 Hz, 1H); MS (M+Na)<+>607.
Korak 5:
Rastvor terc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(4-metil-izohinolin-1-iloksi)-pirolidin-1-karboksilne kiseline (100mg) i TFA (3mL) u CH2CI2(2mL) je mešan tokom 1 h. Posle koncentrisanja, ostatak je rastvoren u CH2CI2(2mL) i dodati su: Boc-L-terc-leucin (40mg), PyBOP (104mg) i /-Pr2NEt (0.2mL). Smeša je mešana tokom 1 h. Posle prerade, prečišćavanjem prep-HPLC dibijeno 60mg (52%) željenog proizvoda, jedinjenja 250 u vidu čvrste mase.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.04 (m, 12H), 1.26 (m, 10H), 1.44 (dd,J= 9.5, 5.1 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =8.1, 5.4 Hz, 1H), 2.26 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.62 (dd,J =13.7, 7.1 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.06 (dd,J =12.0, 3.4 Hz, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.45 (d,J= 11.3 Hz, 1H), 4.53 (dd,J =10.3, 6.6 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.0 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.77 (m, 2H), 6.63 (d,J =8.6 Hz, 1H), 7.53 (t,J =7.8 Hz, 1H), 7.76 (t,J =8.1 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.91 (d,J =8.1 Hz, 1H), 8.22 (d,J =8.3 Hz, 1H); MS (M+Na)<+>720.
Primer 251: Izrada Jedinjenja 251.
Jedinjenje 251 je pripremljeno sledeći Šemu iz Primera 250 s izuzetkom što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-metoksi-3-fenil-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 15g 3-metoksi-3-fenil-akrilne kiseline, dobijeno je 250mg proizvoda (2% prinosa).
Proizvod:
<1>H NMR (400MHz, CD3COCD3) § ppm 3.85 (s, 3H), 6.96 (s, 1H), 7.54 (m, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.86 (d,J =8.07 Hz, 1H), 8.31 (d,J =8.01 Hz, 1H).
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 200mg 4-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 150mg proizvoda (68% prinosa).
Proizvod:
<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 8 ppm 4.05 (s, 2H), 7.71 (m, 1H), 7.72 (m, 2H), 7.80 (s, 1H), 8.23 (dd,J =18.71, 7.70 Hz, 2H).
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 122mg 1-hloro-4-metoksi-izohinolina, dobijeno je 218mg proizvoda (89% prinosa).
Proizvod:
MS: (M+Na)<+>411.
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 194mg 1-terc-butil estra 4-(4-metoksi-izohinolin-1-iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 298mg proizvoda (99% prinosa). Proizvod:
<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.17 (m, 5H), 1.42 (s, 9H), 1.87 (dd,J= 8.2, 5.5 Hz, 1H), 2.27 (m, 2H), 2.54 (dd,J =13.3, 6.2 Hz, 1H), 2.95 (m, 1H), 3.85 (m, 2H), 4.00 (s, 3H), 4.39 (dd,J =9.8, 6.9 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.31 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.76 (m, 2H), 7.52 (s, 1H), 7.62 (t,J =7.6 Hz, 1H), 7.74 (t,J =7.2 Hz, 1H), 8.12 (t,J =8.3 Hz, 2H).
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 190mg terc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(4-metoksi-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 270mg proizvoda (51% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (500MHz, CD3OD) 5 ppm 1.06 (m, 12H), 1.26 (m, 10H), 1.43 (dd,J =8.6, 4.6 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =7.9, 5.5 Hz, 1H), 2.24 (m, 2H), 2.61 (dd,J= 13.6, 6.9 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.00 (s, 3H), 4.06 (dd,J =11.3, 3.1 Hz, 1H), 4.25 (d,J =8.9 Hz, 1H), 4.43 (d,J= 11.3 Hz, 1H), 4.52 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.1 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.75 (m, 2H), 6.60 (d,J =8.6 Hz, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.71 (t,J =7.3 Hz, 1H), 8.09 (d,J =8.2 Hz, 1H), 8.14 (d,J =8.2 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>736.
Primer 252: Izrada Jedinjenja 252.
Jedinjenje 252 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 250 s izuzetkom što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 2-metilcinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 20g 2-metilcinamske kiseline, dobijeno je 14.3g proizvoda (72% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 2.54 (s, 1H), 6.69 (d,J= 7.3 Hz, 1H), 7.23 (d,J =7.3 Hz, 1H), 7.39 (t,J =7.8 Hz, 1H), 7.50 (d,J =7.1 Hz, 1H), 8.30 (d,J =8.1 Hz, 1H), 11.62 (s, 1H); MS: (M+H<+>) 160.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 14.4g 5-metil-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 10.6g proizvoda (66% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 6 ppm 2.67 (s, 3H), 7.55 (m, 2H), 7.70 (dd,J =5.9, 1.0 Hz, 1H), 8.19 (m, 1H), 8.28 (d,J =5.9 Hz, 1H); Ms: (M+H)<+>178.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 533mg 1-hloro-5-metil-izohinolina, dobijeno je 1116mg proizvoda (100% prinosa).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+H)<+>373.
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 372mg 1-ferc-butil estra 4-(5-metil-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 551 mg proizvoda (94% prinosa).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+Na<+>) 607.
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 551 mg ferc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(5-metil-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 274mg proizvoda (44% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.00 (m, 12H), 1.23 (m, 10H), 1.44 (m, 1H), 1.87 (dd,J =8.1, 5.4 Hz, 1H), 2.26 (m, 2H), 2.62 (m, 4H), 2.94 (m, 1H), 4.07 (dd,J =11.9, 3.3 Hz, 1H), 4.25 (d,J =9.5 Hz, 1H), 4.46 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.53 (dd,J= 10.3, 7.1 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 16.9 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 6.62 (d,J =9.3 Hz, 1H), 7.39 (t,J =7. 7 Hz, 1H), 7.44 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.53 (d,J =7.1 Hz, 1H), 8.00 (d,J =6.1 Hz, 1H), 8.06 (d,J =8.3 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>698.
Primer253:Izrada Jedinjenja253.
Jedinjenje 253 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 250 s izuzetkom što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 2-metoksi cinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 10g 2-metoksi cinamske kiseline, dobijeno je 5.3g proizvoda (53% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 3.95 (s, 3H), 6.94 (d,J =7.3 Hz, 1H), 7.08 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.14 (d,J =7.3 Hz, 1H), 7.43 (t,J =8.1 Hz, 1H), 7.99 (d,J =8.1 Hz, 1H), 10.92 (s, 1H); MS: (M+H<+>) 176.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 5.3g 5-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 5.38g proizvoda (92% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 5 ppm 4.01 (s, 3H), 7.04 (d,J= 7.8 Hz, 1H), 7.57 (t,J =8.1 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 8.6 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 8.25 (d,J =5.9 Hz, 1H); MS: (M+H)+ 194.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 581 mg 1-hloro-5-metoksi-izohinolina, dobijeno je 1163mg proizvoda (100% prinosa).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+H)<+>389.
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 117mg 1-ferc-butil estra 4-(5-metoksi-izohinolin-1-iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 180mg proizvoda (100% prinosa). Proizvod:
Podaci: MS: (M+H)<+>601.
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 177mg ferc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(5-metoksi-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 63mg proizvoda (44% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.00 (m, 12H), 1.21 (m, 10H), 1.38 (m, 1H), 1.82 (dd,J= 8.1, 5.6 Hz, 1H), 2.20 (m, 2H), 2.56 (dd,J= 13.6, 6.7 Hz, 1H), 2.88 (m, 1H), 3.08 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 4.01 (dd,J =11.9, 3.3 Hz, 1H), 4.20 (d,J =9.1 Hz, 1H), 4.39 (d,J =12.2 Hz, 1H), 4.47 (dd,J= 9.7, 7.0 Hz, 1H), 5.06 (d,J =10.0 Hz, 1H), 5.23 (d,J =16.9 Hz, 1H), 5.70 (m, 1H), 5.79 (s, 1H), 6.55 (d,J =9.5 Hz, 1H), 7.08 (d,J =7.6 Hz, 1H), 7.37 (t,J =8.0 Hz, 1H), 7.54 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.68 (d,J =8.3 Hz, 1H), 7.89 (d,J= 5.9 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>714.
Primer 254: Izrada Jedinjenja 254.
Jedinjenje 254 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 250 s izuzetkom što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 2-hlorocinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 25g 2-hlorocinamske kiseline, dobijeno je 14.6g proizvoda (59% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 7.22 (d,J= 7.3 Hz, 1H), 7.42 (t,J =7.8 Hz, 1H), 7.73 (d,J =7.8 Hz, 1H), 8.34 (d,J =8.1 Hz, 1H), 10.61 (s, 1H); MS: (M+H)<+>180.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 14.2g 5-hloro-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 8.28g proizvoda (53% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 5 ppm 7.60 (dd,J= 8.6, 7.6 Hz, 1H), 7.83 (m, 1H), 8.00 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 8.29 (dt,J =8.9, 1.0 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 5.9 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>198.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 594mg 1,5-dihloro-izohinolina, dobijeno je 1174mg proizvoda (100% prinosa).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+H)<+>393.
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 118mg 1-ferc-butil estra 4-(5-hloro-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 154mg proizvoda (85% prinosa). Proizvod:
Podaci: MS: (M+H)<+>605.
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 150mg ferc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(5-hloro-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 91 mg proizvoda (51% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.97 (m, 12H), 1.17 (m, 10H), 1.38 (dd,J =9.4, 5.3 Hz, 1H), 1.82 (dd,J=8.0, 5.5 Hz, 1H), 2.21 (m, 2H), 2.58 (dd,J =13.8, 7.0 Hz, 1H), 2.88 (m, 1H), 4.01 (dd,J= 11.9, 2.8 Hz, 1H), 4.16 (d,J =9.3 Hz, 1H), 4.47 (m, 2H), 5.06 (d,J =10.3 Hz, 1H), 5.24 (d,J =16.9 Hz, 1H), 5.70 (m, 1H), 5.82 (s, 1H), 6.52 (d,J= 9.3 Hz, 1H), 7.42 (t,J =8.0 Hz, 1H), 7.57 (d,J =6.1 Hz, 1H), 7.76 (d,J =7.6 Hz, 1H), 8.05 (d,J =6.1 Hz, 1H), 8.13 (d,J =8.3 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>718.
Primer 255: Izrada Jedinjenja 255.
Jedinjenje 255 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 250 s izuzetkom što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 2-fluorocinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 16.6g 2-fluorocinamske kiseline, dobijeno je 8.55g proizvoda (51% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3COCD3) § ppm 6.62 (d,J =7.3 Hz, 1H), 7.32 (d,J =7.3 Hz, 1H), 7.47 (m, 2H), 8.09 (m, 1H).
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 8.4g 5-fluoro-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 7.5g proizvoda (80% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 8 ppm 7.43 (ddd,J =9.7, 7.8, 0.9 Hz, 1H), 7.62 (td,J =8.2, 5.4 Hz, 1H), 7.84 (d,J =5.6 Hz, 1H), 8.14 (d,J= 8.6 Hz, 1H), 8.33 (d,J =5.9 Hz, 1H); MS: (M+H)+ 182.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 203mg 1-hloro-5-fluoro-izohinolina, dobijeno je 384mg proizvoda (90% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3SOCD3) 5 ppm 1.34, 1.36 (2s, 9H, rotameri), 2.61 (m, 1H), 3.65 (d,J =12.23 Hz, 1H), 3.80 (m, 1H), 4.35 (m, 1H), 5.70 (s, 1H), 7.48 (d,J =6.11 Hz, 1H), 7.63 (m, 2H), 7.99 (m, 1H), 8.10 (d,J =5.87 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>399.
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 76mg 1-ferc-butil estra 4-(5-fluoro-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 116mg proizvoda (99% prinosa).
Proizvod:
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 110mg ferc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(5-fluoro-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 39mg proizvoda (30% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.05 (m, 12H), 1.25 (m, 10H), 1.44 (dd,J =9.5, 5.4 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =8.1, 5.4 Hz, 1H), 2.28 (m, 2H), 2.63 (dd,J= 13.8, 7.0 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.07 (dd,J =11.9, 3.1 Hz, 1H), 4.23 (d,J =9.3 Hz, 1H), 4.52 (m, 2H), 5.12 (dd,J =10.3, 1.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.4 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.89 (s, 1H), 6.59 (d,J =9.1 Hz, 1H), 7.47 (m, 3H), 8.02 (d,J= 8.1 Hz, 1H), 8.06 (d,J= 6.1 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>724.
Primer 256: Izrada Jedinjenja 256.
Jedinjenje 256 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 250 s izuzetkom što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 2-difluorometoksicinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 10.7g 2-difluorometoksicinamske kiseline, dobijeno je 2g proizvoda (18% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3SOCD3) 5 ppm 6.06 (m, 2H), 6.42 (m, 2H), 6.71 (s, 2H), 7.35 (s, 1H); MS: (M+H)<+>212.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 300mg 5-difluorometoksi-2W-izohinolin-1-ona, dobijeno je 300mg proizvoda (92% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) S ppm 6.70 (t,J=72.87 Hz, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.64 (m, 1H), 7.92 (d, J = 5.87 Hz, 1H), 8.21 (d,J =8.56 Hz, 1H), 8.35 (d,J= 5.62 Hz, 1H).
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 230mg 1-hloro-5-difluorometoksi-izohinolina, dobijeno je 360mg proizvoda (96% prinosa).
Proizvod:
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 37mg 1-ferc-butil estra 4-(5-hidroksi-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 57mg proizvoda (99% prinosa).
Proizvod:
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 57mg terc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(5-hidroksi-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 10mg proizvoda (15% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.93 (m, 4H), 1.13 (s, 9H), 1.31 (m, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.89 (dd,J =7.8, 5.4 Hz, 1H), 2.16 (q,J =8.8 Hz, 1H), 2.40 (m, 1H), 2.81 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 3.76 (m, 2H), 4.30 (m, 1H), 4.59 (dd,J =10.2, 7.7 Hz, 1H), 5.07 (dd,J =10.3, 1.7 Hz, 1H), 5.26 (dd,J =17.2, 1.3 Hz, 1H), 5.77 (dt,J =17.2, 9.6 Hz, 1H), 5.93 (s, 1H), 7.24 (d,J =8.6 Hz, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.63 (t,J= 8.0 Hz, 1H), 7.98 (d,J =6.1 Hz, 1H), 8.24 (d,J =8.3 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>700.
Primer 257: Izrada Jedinjenja 257.
Jedinjenje 257 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 250 s izuzetkom što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 4-fluorocinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 16.6g 4-fluorocinamske kiseline, dobijeno je 8.2g proizvoda (49% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3COCD3) 5 ppm 6.57 (d,J= 7.09 Hz, 1H), 7.21 (d,J= 7.09 Hz, 1H), 7.50 (m, 1H), 7.72 (dd,J =8.68, 5.26 Hz, 1H), 7.90 (dd,J =9.54, 2.93 Hz, 1H).
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 8.15g 7-fluoro-2H-izohinolin-1-ona, dobijeno je 7.6g proizvoda (84% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 5 ppm 7.52 (td,J= 8.6, 2.6 Hz, 1H), 7.59 (d,J =5.6 Hz, 1H), 7.86 (dd,J =9.1, 5.4 Hz, 1H), 7.95 (dd,J =9.5, 2.5 Hz, 1H), 8.26 (d,J =5.6 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>182.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 191 mg 1-hloro-7-fluoro-izohinolina, dobijeno je 350mg proizvoda (93% prinosa).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+Na)<+>399.
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 75mg 1-ferc-butil estra 4-(7-fluoro-izohinolin-1-iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 100mg proizvoda (85% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.16 (m, 4H), 1.41 (m, 10H), 1.88 (dd,J= 8.1, 5.4 Hz, 1H), 2.28 (m, 2H), 2.56 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.87 (m, 2H), 4.41 (dd,J =9.7, 7.0 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.8 Hz, 1H), 5.31 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.78 (m, 2H), 7.36 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.54 (m, 1H), 7.78 (dd,J= 9.3, 2.5 Hz, 1H), 7.90 (dd,J= 9.1, 5.1 Hz, 1H), 7.96 (d,J =5.9 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>611.
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 95mg ferc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(7-fluoro-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 55mg proizvoda (44% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 1.05 (m, 12H), 1.22 (m, 10H), 1.44 (dd,J =9.3, 5.4 Hz, 1H), 1.88 (dd,J= 8.2, 5.5 Hz, 1H), 2.27 (m, 2H), 2.63 (dd,J =13.8, 7.0 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.07 (dd,J =11.5, 3.2 Hz, 1H), 4.22 (d,J =9.5 Hz, 1H), 4.47 (d,J =11.7 Hz, 1H), 4.55 (dd,J= 10.6, 7.5 Hz, 1H), 5.12 (d,J= 10.3 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 17.1 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.87 (s, 1H), 6.61 (d,J =9.5 Hz, 1H), 7.36 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.52 (td,J =8.9, 2.5 Hz, 1H), 7.79 (dd,J =9.4, 2.6 Hz, 1H), 7.88 (dd,J =8.7, 5.5 Hz, 1H), 7.96 (d,J =5.9 Hz, 1H); MS:
(M+Na)<+>724.
Primer 258: Izrada Jedinjenja 258.
Jedinjenje 258 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 250 osim što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 4-hlorocinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 9.13g 4-hlorocinamske kiseline, dobijeno je 4g proizvoda (44% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3SOCD3) 5 ppm 6.58 (d,J =7.1 Hz, 1H), 7.20 (dd,J =7.1, 5.9 Hz, 1H), 7.72 (m, 2H), 8.10 (m, 1H).
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 3.5g 7-hloro-2H-izohinolin-1-ona, dobijeno je 2.8g proizvoda (72% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (500MHz, CDCI3) 5 ppm 7.59 (d,J =5.5 Hz, 1H), 7.69 (dd,J =8.9, 2.1 Hz, 1H), 7.80 (d,J =8.6 Hz, 1H), 8.29 (d,J= 5.5 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H); MS: (M+H)<+>198.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 208mg 1,7-dihloro-izohinolina, dobijeno je 350mg proizvoda (89% prinosa).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+Na)<+>415.
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 79mg 1-rerc-butil estra 4-(7-hloro-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 119mg proizvoda (99% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.17 (m, 4H), 1.43 (m, 10H), 1.88 (dd,J =8.31, 5.4 Hz, 1H), 2.29 (m, 2H), 2.57 (dd,J =13.7, 6.9 Hz, 1H), 2.95 (m, 1H), 3.87 (m, 2H), 4.42 (dd,J =9.9, 6.9 Hz, 1H), 5.13 (d,J =10.3 Hz, 1H), 5.31 (dd,J =17.1, 1.2 Hz, 1H), 5.78 (m, 2H), 7.35 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.69 (dd,J =8.7, 2.1 Hz, 1H), 7.84 (d,J =8.8 Hz, 1H), 7.99 (d,J =5.9 Hz, 1H), 8.12 (d,J =1.7 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>627.
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 115mg rerc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(7-hloro-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 36mg proizvoda (25% prinosa).
Proizvod:
MS: (M+Na)<+>740.
Primer 259:IzradaJedinjenja 259.
Jedinjenje 259 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 250 osim što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 4-metilcinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 25g 4-metilcinamske kiseline, dobijeno je 15.3g proizvoda (62% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 2.50 (s, 3H), 6.54 (d,J= 7.1 Hz, 1H), 7.13 (d,J= 7.1 Hz, 1H), 7.49 (m, 2H), 8.22 (s, 1H), 11.49 (s, 1H). MS: (M+H)<+>160.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 15.3g 7-metil-2H-izohinolin-1-ona, dobijeno je 5.15g proizvoda (30% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 8 ppm 2.58 (s, 3H), 7.56 (m, 2H), 7.73 (d,J =8.3 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.20 (d,J =5.6 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>178.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 205mg 1-hloro-7-metil-izohinolina, dobijeno je 350mg proizvoda (89% prinosa).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+H)<+>373.
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 75mg 1-ferc-butil estra 4-(7-metil-izohinolin-1-iloksi)-piroiidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 107mg proizvoda (95% prinosa).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+Na)<+>607.
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 107mg terc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(7-metil-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 53mg proizvoda (41% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.02 (m, 12H), 1.18 (s, 9H), 1.24 (m, 1H), 1.45 (dd,J =9.4, 5.5 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =8.2, 5.5 Hz, 1H), 2.28 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.61 (dd,J =13.8, 6.7 Hz, 1H), 3.34 (s, 1H), 4.09 (dd, J= 11.7, 3.2 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.42 (d,J =12.0 Hz, 1H), 4.57 (dd,J =10.0, 7.1 Hz, 1H), 5.12 (dd,J =10.3, 1.5 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.76 (m, 1H), 5.87 (s, 1H), 7.28 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.55 (d,J =8.3 Hz, 1H), 7.71 (d,J =8.3 Hz, 1H), 7.89 (d,J= 5.9 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H); MS: (M+H)<+>698.
Primer260:Izrada Jedinjenja260.
Jedinjenje 260 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 250 osim što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 4-metoksicinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 33g 4-metoksicinamske kiseline, dobijeno je 7g proizvoda (33% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (500MHz, CD3COCD3) § ppm 3.90 (s, 3H), 6.49 (d,J =7.0 Hz, 1H), 7.10 (d,J= 7.3 Hz, 1H), 7.28 (dd,J =8.6, 2.8 Hz, 1H), 7.57 (d,J =8.9 Hz, 1H), 7.71 (d,J= 2.8 Hz, 1H).
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 4g 7-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 3g proizvoda (68% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 8 ppm 3.98 (s, 3H), 7.38 (dd,J =8.9, 2.6 Hz, 1H), 7.52 (m, 2H), 7.73 (d,J =8.8 Hz, 1H), 8.16 (d,J =5.4 Hz, 1H).
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 533mg 1-hloro-7-metoksi-izohinolina, dobijeno je 1115mg proizvoda (100% prinosa).
Proizvod:
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 78mg 1-ferc-butil estra 4-(7-metoksi-izohinolin-1-iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 108mg proizvoda (99% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.17 (m, 4H), 1.40 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.85 (dd,J =8.1, 5.4 Hz, 1H), 2.21 (m, 2H), 2.51 (dd,J =13.7, 6.6 Hz, 1H), 2.93 (s, 1H), 3.80 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 4.41 (dd, J= 10.0, 6.6 Hz, 1H), 4.57 (s, 1H), 5.11 (d,J=11.3 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.77 (m, 2H), 7.01 (d,J =7.8 Hz, 1H), 7.22 (d,J =5.6 Hz, 1H), 7.32 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.58 (t,J =8.0 Hz, 1H), 7.87 (d,J =5.9 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>601.
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 100mg ferc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(7-metoksi-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 30mg proizvoda (25% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3SOCD3) 5 ppm 0.90 (m, 2H), 0.95 (s, 9H), 1.05 (m, 1H), 1.12 (s, 9H), 1.35 (m, 2H), 1.70 (m, 1H), 2.18 (m, 1H), 2.92 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 4.00 (m, 2H), 4.27 (d,J =12.0 Hz, 1H), 4.45 (t,J =8.6 Hz, 1H), 5.09 (d,J =10.8 Hz, 1H), 5.23 (d,J =16.9 Hz, 1H), 5.62 (m, 1H), 5.79 (s, 1H), 6.55 (d,J= 8.1 Hz, 1H), 7.35 (d,J =6.6 Hz, 1H), 7.39 (d,J =2.5 Hz, 1H), 7.43 (dd,J =8.8, 2.2 Hz, 1H), 7.84 (d,J =8.8 Hz, 1H), 7.88 (d,J =5.9 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>714.
Primer 261 i 262: Izrada Jedinjenja 261 i 262
Jedinjenja 261 i 262 su pripremljena sledeći Šemu 1 iz Primera 250 osim što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 4-fluoro-3-metoksicinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 19.6g 4-fluoro-3-metoksicinamske kiseline, dobijeno je 9.5g proizvoda (48% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3COCD3) 5 ppm 4.00 (s, 1H), 6.49 (d,J =7.34 Hz, 1H), 7.19 (d,J= 7.09 Hz, 1H), 7.29 (d,J =8.07 Hz, 1H), 7.86 (d,J =11.74 Hz, 1H).
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 9g 7-fluoro-6-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 7g proizvoda (70% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 8 ppm 4.00 (s, 3H), 7.17 (d,J= 8.07 Hz, 1H), 7.48 (d,J =5.62 Hz, 1H), 7.94 (d,J=11.49 Hz, 1H), 8.20 (d,J=5.62 Hz, 1H).
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 222mg 1-hloro-7-fluoro-6-metoksi-izohinolina, dobijeno je 406mg proizvoda.
Proizvodi:
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 400mg smeše 1-ferc-butil estra 4-(7-fluoro-6-metoksi-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline i 1-terc-butil estra 4-(1-hloro-6-metoksi-izohinolin-7-iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline dobijeno je 700mg proizvoda.
Proizvod:
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 700mg smeše rerc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(7-fluoro-6-metoksi-izohinolin-1-iloksi)-pirolidin-1-karboksilne kiseline i terc-butil estra 4-(1-hloro-6-metoksi-izohinolin-7-iloksi)-2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil -2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 79mg Jedinjenja 261 i 80mg Jedinjenja 262.
Proizvod:
Podaci za Jedinjenje 261:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.07 (m, 12H), 1.25 (m, 10H), 1.44 (m, 1H), 1.88 (dd,J =8.1, 5.6 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.60 (dd,J =13.7, 6.9 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.02 (m, 4H), 4.22 (s, 1H), 4.43 (d,J =12.2 Hz, 1H), 4.53 (dd,J =10.3, 6.6 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 5.30 (d,J =16.6 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 7.28 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.37 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.75 (d,J =11.7 Hz, 1H), 7.91 (d,J =5.9 Hz, 1H); MS:
(M+Na)<+>754.
Podaci za Jedinjenje 262:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) S ppm 1.07 (m, 12H), 1.25 (m, 10H), 1.44 (m,J= 9.41, 5.20 Hz, 1H), 1.87 (dd,J= 8.31, 5.38 Hz, 1H), 2.24 (q,J= 8.72 Hz, 2H), 2.57
(dd,J= 13.82, 7.21 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.97 (d,J =5.14 Hz, 3H), 4.09 (m,J =11.00 Hz, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.32 (m, 1H), 4.50 (m, J = 16.87 Hz, 1H), 5.12 (dd,J =10.52, 1.71 Hz, 1H), 5.30 (dd,J =17.12, 1.47 Hz, 1H), 5.38 (s, 1H), 5.76 (m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.66 (d,J =5.87 Hz, 1H), 8.07 (d,J =5.62 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>732.
Primer 263: Izrada Jedinjenja 263.
Jedinjenje 263 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 250 osim Koraka 1 i Koraka 2.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 176mg 1-hloro-8-metil-izohinolina, dobijeno je 370mg proizvoda (100mg% prinosa).
Proizvod:
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 149mg 1-rerc-butil estra 8-metil-izohinolin-1-iloksi-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 230mg proizvoda (99% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.13 (m, 4H), 1.42 (m, 10H), 1.87 (dd, J = 8.2, 5.3 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.58 (dd,J =13.9, 6.9 Hz, 1H), 2.83 (s, 3H), 2.96 (m, 1H), 3.85 (m, 2H), 4.38 (dd,J=10.2, 6.7 Hz, 1H), 5.12 (dd,J=10.4, 1.6 Hz, 1H), 5.30 (dd,J =17.1, 1.2 Hz, 1H), 5.76 (m, 2H), 7.28 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.36 (d,J =6.9 Hz, 1H), 7.53 (t,J =7. 7 Hz, 1H), 7.62 (m, 1H), 7.87 (d,J =5.6 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>607.
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 220mg ferc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(8-metil-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 90mg proizvoda (35% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 6 ppm 1.05 (m, 12H), 1.24 (m, 10H), 1.44 (dd,J =9.3, 5.4 Hz, 1H), 1.87 (dd,J =8.1, 5.4 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.60 (dd,J =13.9, 7.3 Hz, 1H), 2.77 (s, 3H), 2.94 (m, 1H), 4.04 (dd,J =11.9, 3.1 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.42 (d,J =12.0 Hz, 1H), 4.51 (dd,J= 10.8, 7.1 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.3 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.95 (s, 1H), 6.63 (d,J =9.1 Hz, 1H), 7.28 (m, 2H), 7.50 (t,J =7. 7 Hz, 1H), 7.60 (d,J =7.8 Hz, 1H), 7.89 (d,J =5.6 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>720.
Primer 264: Izrada Jedinjenja 264.
Jedinjenje 264 je pripremljeno sledeći Šemu 1 iz Primera 250 s izuzetkom Koraka 1 i Koraka 2.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 203mg 1-hloro-8-metoksi-izohinolina, dobijeno je 340mg proizvoda (85% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3SOCD3) 5 ppm 1.34, 1.36 (2s, 9H, rotameri), 2.26 (m, 1H), 2.49 (m, 1H), 3.67 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 4.31 (m, 1H), 5.67 (br s, 1H), 7.04 (d,J= 7.8 Hz, 1H), 7.30 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.38 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.62 (t,J= 8.0 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 12.64 (s, 1H); MS: (M+Na)<+>411.
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 78mg 1 terc-butil estra 8-metoksi-izohinolin-1-iloksi-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline, dobijeno je 115mg proizvoda (96% prinosa).
Proizvod:
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 110mg rerc-butil estra 2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(8-metoksi-izohinolin-1 -iloksi)-pirolidin-1 -karboksilne kiseline, dobijeno je 45mg proizvoda (34% prinosa).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+H)<+>714.
Primer 265 i 266: Izrada Jedinjenja 265 i 266.
Jedinjenja 265 i 266 su pripremljena sledeći Šemu 1 iz Primera 250 osim što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-(2,3-dihidro-benzofuran-7-il)-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 3.8g 3-(2,3-dihidro-benzofuran-7-il)-akrilne kiseline, dobijeno je 2g proizvoda (53% prinos).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) § ppm 3.37 (t,J =9.05 Hz, 1H), 4.73 (t,J =9.05 Hz, 2H), 6.67 (d, J = 7.09 Hz, 1H), 7.10 (d,J =7.09 Hz, 1H), 7.37 (d,J =8.07 Hz, 1H), 7.81 (d,J =8.7 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>188.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 1.87g 2,3-dihidro-7rffuro[2,3-f]izohinolin-6-ona, dobijeno je 1.84g proizvoda (90% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCI3) 5 ppm 3.43 (t,J =9.05 Hz, 2H), 4.82 (t,J= 9.05 Hz, 2H), 7.52 (d,J =8.56 Hz, 1H), 7.66 (d,J= 5.62 Hz, 1H), 7.84 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.19 (d,J =5.62 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>206.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 206mg 6-hloro-2,3-dihidro-furo[2,3-f]-izohinolina, dobijeno je 300mg smeše proizvoda.
Proizvodi:
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 240mg smeše proizvoda iz Koraka 3, dobijeno je 350mg smeše proizvoda.
Proizvodi:
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 331 mg smeše proizvoda iz Koraka 4, dobijeno je 240mg Jedinjenja 265 i 24mg Jedinjenja 266.
Podaci za Jedinjenje 265:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 5 ppm 0.99 (m, 12H), 1.16 (m, 10H), 1.36 (m, 1H), 1.81 (dd,J =8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.18 (m, 2H), 2.54 (dd,J =13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.87 (m, 1H), 3.31 (t,J =9.05 Hz, 2H), 4.01 (m, 1H), 4.18 (s, 1H), 4.36 (d,J =11.74 Hz, 1H), 4.46 (dd,J= 10.15, 7.21 Hz, 1H), 4.70 (m, 2H), 5.05 (d,J =10.27 Hz, 1H), 5.23 (d,J =16.87 Hz, 1H), 5.70 (m, 2H), 7.23 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.31 (d,J =8.31 Hz, 1H), 7.63 (d,J= 8.31 Hz, 1H), 7.82 (d,J =5.87 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>726.
Podaci za Jedinjenje 266:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.06 (m, 12H), 1.24 (m, 10H), 1.44 (dd,J =10.03, 5.14 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =7.83, 5.38 Hz, 1H), 2.27 (m, 2H), 2.65 (dd,J= 12.96, 6.36 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.08 (dd,J =12.35, 3.30 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.54 (m, 2H), 5.12 (d,J =10.27 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.91 (s, 1H), 7.05 (d,J =1.96 Hz, 1H), 7.72 (m, 2H), 8.02 (m, 2H), 8.11 (d,J =5.87 Hz, 1H), 9.19 (s, 1H); MS: (M+H)<+>724.
Primer 267 i 268: Izrada Jedinjenja 267 i 268.
Jedinjenja 267 i 268 su pripremljena sledeći Šemu 1 iz Primera 250 osim što je umesto 3-fenil-but-2-enske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-(2,3-dihidro-benzofuran-4-il)-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 1.14g 3-(2,3-dihidro-benzofuran-4-il)-akrilne kiseline, dobijeno je 600mg proizvoda (52% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 3.35 (t,J =8.93 Hz, 2H), 4.74 (t,J =8.93 Hz, 2H), 6.49 (d,J= 7.09 Hz, 1H), 6.95 (d,J =8.56 Hz, 1H), 7.25 (d,J =7.09 Hz, 1H), 8.13 (d,J =8.80 Hz, 1H); MS: (M+H)+ 188.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 560mg 1,7-dihidro-2H-furo[3,2-f]izohinolin-6-ona, dobijeno je 380mg proizvoda (48% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCI3) 5 ppm 3.47 (t,J =9.05 Hz, 2H), 4.84 (t,J =9.05 Hz, 2H), 7.24 (d,J =8.56 Hz, 1H), 7.33 (d,J =5.87 Hz, 1H), 8.20 (m, 2H); MS: (M+H)<+>206.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 105mg 6-hloro-1,2-dihidro-furo[3,2-f]-izohinolina, dobijeno je 390mg smeše proizvoda.
Proizvodi:
Korak 4:
Modifikacije: upotrebljeno je 216mg smeše proizvoda iz Koraka 3, dobijeno je 330mg smeše proizvoda.
Proizvodi:
Korak 5:
Modifikacije: upotrebljeno je 330mg smeše proizvoda iz Koraka 4, dobijeno je 140mg Jedinjenja 267 i 25mg Jedinjenja 268.
Proizvodi:
Podaci za Jedinjenje 267:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 5 ppm 1.07 (m, 12H), 1.24 (m, 10H), 1.43 (m, 1H), 1.88 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.26 (m, 2H), 2.61 (dd,J =13.69, 7.09 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.42 (t,J= 9.05 Hz, 2H), 4.05 (dd,J= 11.86, 3.55 Hz, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.50 (m, 2H), 4.77 (t,J =8.93 Hz, 2H), 5.12 (m, 1H), 5.29 (d,J= 17.12 Hz, 1H), 5.76 (m, 2H), 7.03 (d,J =8.80 Hz, 1H), 7.12 (d,J =6.11 Hz, 1H), 7.91 (d,J =5.87 Hz, 1H), 8.06 (d,J =8.80 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>726.
Podaci za Jedinjenje 268:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 6 ppm 1.06 (m, 12H), 1.19 (s, 9H), 1.26 (m, 1H), 1.44 (m, 1H), 1.88 (dd,J= 8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.24 (d,J= 8.56 Hz, 2H), 2.64 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 4.07 (m,J =3.42 Hz, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.54 (m, 2H), 5.12 (d,J =10.52 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.76 (m, 1H), 5.91 (s, 1H), 7.39 (d,J =1.47 Hz, 1H), 7.68 (m, 2H), 7.96 (d, J - 1.96 Hz, 1H), 8.12 (m, 2H); MS: (M+H)<+>724.
Primer 269: Izrada Jedinjenja 269.
Korak 1:
Rastvor 2-trifluorometoksicinamske kiseline (11.6g), difenilfosforil azida (13.75g) i trietilamina (7.07g) u benzenu (50ml_) je mešan tokom 1 h. Posle filtracije kroz podlogu od silika gela uz ispiranje sa benzenom i koncentrisanja, ostatak je rastvoren u difenilmetanu (80ml_) i podvrgnut je refluksu tokom 3 h. Posle hlađenja do rt, čvrsti delovi su sakupljeni kroz podlogu uz ispiranje sa benzenom i osušeni da bi se dobilo 5.1 g (44% željenog proizvoda) u vidu čvrste mase.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 6.79 (d,J =7.3 Hz, 1H), 7.29 (d,J =7.3 Hz, 1H), 7.57 (t,J =8.1 Hz, 1H), 7.70 (d,J= 7.8 Hz, 1H), 8.30 (d,J =8.1 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>230.
Korak 2:
Rastvor 5-trifluorometoksi-2/-/-izohinolin-1-ona (4.58g) u POCI3(50mL) je podvrgnut refluksu tokom 3 h. Posle hlađenja i koncentrisanja ostatak je alkalizovan sa 5N NaOH i ekstrahovan sa CH2CI2. Organski sloj je ispran slanim rastvorom i osušen preko MgS04. Posle koncentrisanja, prečišćavanjem flash hromatografijom Biotage sa 5% etilacetatom u heksanima je dobijeno 4.347g (88%) željenog proizvoda u vidu čvrste mase.<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 5 ppm 7.66 (m, 2H), 7.87 (d,J =5.9 Hz, 1H), 8.31 (m, 1H), 8.37 (d,J =5.9 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>248.
Korak 3:
U suspenziju ferc-butil estra {l-[2-(1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 -karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline (56mg), 1 - hloro-5-trifluorometoksi-izohinolina (25mg) i LaCI3(25mg) u DMF (1ml_), na -78°C je dodatterc-BuOK (0.5ml_, 1M u THF) i ista je zagrejana do rt. Posle mešanja tokom 30 min, reakcija je ugašena zasićenim rastvorom NH4CI i ekstrahovana etil acetatom. Posle koncentrisanja, prečišćavanjem prep-HPLC dibijeno 35mg (46%) željenog Jedinjenja 269 u vidu čvrste mase.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.03 (m, 12H), 1.24 (m, 10H), 1.44 (dd,J =9.7, 5.3 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =8.1, 5.6 Hz, 1H), 2.28 (m, 2H), 2.64 (dd,J =13.7, 7.1 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.09 (m, 1H), 4.21 (d,J =9.3 Hz, 1H), 4.53 (m, 2H), 5.12 (d,J =11.5 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.92 (m, 1H), 6.60 (d,J =9.5 Hz, 1H), 7.49 (d,J =6.1 Hz, 1H), 7.60 (m, 1H), 7.69 (d,J= 7.3 Hz, 1H), 8.11 (d,J= 6.1 Hz, 1H), 8.22 (d,J =8.3 Hz, 1H); MS (M+Na)<+>790.
Primer 270: Izrada Jedinjenja 270.
Jedinjenje 270 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 2-trifluorometilcinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 10g 2-trifluorometilcinamske kiseline, dobijeno je 5g proizvoda (50% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 6.83 (m, 1H), 7.33 (d,J =7.58 Hz, 1H), 7.63 (t,J =7.83 Hz, 1H), 8.09 (d,J =7.58 Hz, 1H), 8.57 (d,J =8.07 Hz, 1H).
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 4.4g 5-trifluorometil-2H-izohinolin-1-ona, dobijeno je 3.5g proizvoda (73% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 8 ppm 7.75 (t,J =7.95 Hz, 1H), 7.90 (m, 1H), 8.12 (d,J =7.34 Hz, 1H), 8.41 (d,J=6.11 Hz, 1H), 8.60 (d,J=8.56 Hz, 1H).
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 46mg 1-hloro-5-trifluorometil-izohinolina i 111mg rerc-butil estra {1-[2-(1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 70mg proizvoda (47% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.06 (m, 12H), 1.23 (m, 10H), 1.44 (dd,J =9.54, 5.38 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.28 (m, 2H), 2.65 (dd,J=13.82, 6.97 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.56 (m, 2H), 5.12 (m, 1H), 5.30 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.90 (s, 1H), 6.59 (d,J= 9.05 Hz, 1H), 7.53 (d,J= 4.40 Hz, 1H), 7.65 (t,J =7.83 Hz, 1H), 8.12 (d,J =7.09 Hz, 1H), 8.15 (d,J =6.36 Hz, 1H), 8.50 (d,J =8.31 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>774.
Primer 271: Izrada Jedinjenja 271.
Jedinjenje 271 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 2-hlorocinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 7g 2-hlorocinamske kiseline, dobijeno je 5g proizvoda (71% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 3.02 (m, 4H), 3.91 (m, 4H), 6.97 (d,J =7.34 Hz, 1H), 7.18 (d,J =7.34 Hz, 1H), 7.44 (m, 2H), 8.02 (d,J= 7.83 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>231.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 2.2g 5-morfolin-4-il-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 2.1g proizvoda (87% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CCI3D) 5 ppm 3.09 (m, 4H), 3.97 (m, 4H), 7.32 (d,J =7.58 Hz, 1H), 7.60 (m, 1H), 7.91 (d,J =5.87 Hz, 1H), 8.06 (d,J =8.56 Hz, 1H), 8.26 (d,J =5.87 Hz, 1H).
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 50mg 1-hloro-5-morfolin-4-il-izohinolina i 111 mg terc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 40mg proizvoda (26% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (500MHz, CD3OD) § ppm 1.07 (m, 12H), 1.26 (m, 10H), 1.44 (d,J=7.93 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =7.93, 5.19 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.62 (dd,J= 13.73, 7.02 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.06 (d,J= 3.97 Hz, 4H), 3.94 (m, 4H), 4.07 (d,J =14.04 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.45 (d,J=12.21 Hz, 1H), 4.52 (m, 1H), 5.12 (d,J=9.46 Hz, 1H), 5.29 (d,J=16.79 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.85 (s, 1H), 7.34 (d,J =7.32 Hz, 1H), 7.45 (t,J =7.78 Hz, 1H), 7.59 (d,J =6.10 Hz, 1H), 7.91 (d,J =7.63 Hz, 1H), 7.97 (d,J =5.80 Hz, 1H).
Primer 272: Izrada Jedinjenja 272.
Jedinjenje 272 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 2,3-dimetoksicinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 10.4g 2,3-dimetoksicinamske kiseline, dobijeno je 4.1g proizvoda (40% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 3.86 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 6.82 (d,J =7.2 Hz, 1H), 7.10 (d,J =7.2 Hz, 1H), 7.28 (d,J =8.8 Hz, 1H), 8.07 (d,J =8.8 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>206.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 4.1g 5,6-dimetoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 4.03g proizvoda (90% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 3.97 (s, 3H), 4.05 (s, 3H), 7.65 (d,J =9.29 Hz, 1H), 7.90 (dd,J =5.87, 0.98 Hz, 1H), 8.12 (m, 2H).
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 22mg 1-hloro-5,6-dimetoksi-izohinolina i 56mg terc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 31 mg proizvoda (42% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (500MHz, CD3OD) 6 ppm 1.06 (m, 12H), 1.26 (m, 10H), 1.44 (s, 1H), 1.88 (d,J =7.32 Hz, 1H), 2.24 (s, 2H), 2.60 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 4.06 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.43 (d,J =10.68 Hz, 1H), 4.53 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.40 Hz, 1H), 5.77 (m, 2H), 7.35 (d,J =9.16 Hz, 1H), 7.46 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.89 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.97 (d,J =8.85 Hz, 1H).
Primer 273: Izrada Jedinjenja 273.
Jedinjenje 273 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 s izuzetkom što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 4-hloro-3-metoksicinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 2.5g 4-hloro-3-metoksicinamske kiseline, dobijeno je 1.2g proizvoda (48% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 4.00 (s, 3H), 6.64 (d,J =7.09 Hz, 1H), 7.15 (d,J =7.34 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 8.22 (s, 1H).
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 1.05g 7-hloro-6-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 0.8g proizvoda (70% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCLJ S ppm 4.05 (s, 3H), 7.13 (s, 1H), 7.48 (d,J= 5.38 Hz, 1H), 8.21 (d,J= 5.62 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H); MS: (M+H)<+>229.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 44mg 1,7-dihloro-6-metoksi-izohinolina i 113mg terc-butil estra {1-[2-(1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 25mg proizvoda (17% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 5 ppm 1.07 (m, 12H), 1.24 (m, 10H), 1.44 (dd,J= 9.54, 5.38 Hz, 1H), 1.88 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.26 (m, 1H), 2.60 (m,J =13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.94 (m, 2H), 3.98 (s, 3H), 4.06 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.42 (d,J =12.23 Hz, 1H), 4.57 (m, 1H), 5.12 (d,J =11.74 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.36 Hz, 1H), 5.76 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 7.28 (d, J = 5.62 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.92 (d,J=5.87 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H); MS (M+H)<+>749.
Primer 274: Izrada Jedinjenja 274.
Jedinjenje 274 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 s izuzetkom što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 2-fluoro-3-cinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 3.92g 2-fluoro-3-cinamske kiseline, dobijeno je 2.4g proizvoda (61% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 4.00 (s, 3H), 6.72 (m, 1H), 7.16 (d,J =7.34 Hz, 1H), 7.35 (t,J =8.44 Hz, 1H), 8.09 (d,J =8.80 Hz, 1H).
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 1.93g 5-fluoro-6-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 1.688g proizvoda (80% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (CDCI3) 8 ppm 4.08 (s, 3H), 7.44 (dd,J =9.29, 7.83 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 5.87 Hz, 1H), 8.12 (d,J =9.29 Hz, 1H), 8.22 (d,J =5.87 Hz, 1H); MS (M+H)<+>212.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 41 mg 1-hloro-5-fluoro-6-metoksi-izohinolina i 133mgterc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 70mg proizvoda (48% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (CD3OD) 8 ppm 1.06 (m, 13H), 1.21 (s, 9H), 1.44 (dd,J =9.78, 5.38 Hz, 1H), 1.88 (dd,J= 8.19, 5.50 Hz, 1H), 2.24 (d,J =9.29 Hz, 2H), 2.62 (d,J =13.94 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.05 (m, 4H), 4.22 (d, J = 9.29 Hz, 1H), 4.45 (m, 1H), 4.54 (dd,J =9.66, 7.21 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.52 Hz, 1H), 5.30 (d,J =16.87 Hz, 1H), 5.76 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 7.39 (m, 2H), 7.95 (d, J = 6.11 Hz, 1H), 8.00 (d,J =9.29 Hz, 1H).
Primer275:IzradaJedinjenja 275.
Jedinjenje 2 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 s izuzetkom što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 2-hloro-3-metoksicinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 658mg 2-hloro-3-metoksicinamske kiseline, dobijeno je 360mg proizvoda (54% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) § ppm 4.02 (s, 3H), 6.91 (d,J =7.34 Hz, 1H), 7.23 (d,J =7.58 Hz, 1H), 7.35 (d,J =9.05 Hz, 1H), 8.27 (d,J =9.05 Hz, 1H).
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 350mg 5-hloro-6-metoksi-2rV-izohinolin-1-ona, dobijeno je 300mg proizvoda (80% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCI3) 5 ppm 4.09 (s, 3H), 7.43 (d,J =9.29 Hz, 1H), 7.93 (d,J= 6.11 Hz, 1H), 8.30 (m, 2H); MS (M+H)<+>229.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 68mg 1,5-dihloro-6-metoksi-izohinolina i 167mg terc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 130mg proizvoda (60% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.06 (m, 12H), 1.25 (m, 10H), 1.46 (d,J=5.62 Hz, 1H), 1.88 (dd,J= 8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.27 (m, 2H), 2.62 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.05 (m, 4H), 4.22 (d,J= 9.05 Hz, 1H), 4.46 (d,J =11.49 Hz, 1H), 4.54 (dd,J =9.78, 6.36 Hz, 1H), 5.13 (d,J =10.52 Hz, 1H), 5.30 (d,J =15.89 Hz, 1H), 5.76 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 7.40 (d,J =9.29 Hz, 1H), 7.55 (d,J =6.36 Hz, 1H), 8.01 (d,J =6.36 Hz, 1H), 8.20 (d,J =9.29 Hz, 1H); MS (M+H)<+>749.
Primer276:Izrada Jedinjenja276.
Jedinjenje 276 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-hloro-2-metoksicinamska kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 4.24g 3-hloro-2-metoksicinamske kiseline, dobijeno je 2.4g proizvoda (57% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 3.93 (s, 1H), 6.85 (d,J= 7.34 Hz, 1H), 7.24 (d,J= 7.34 Hz, 1H), 7.52 (d,J =8.80 Hz, 1H), 8.03 (d,J =8.80 Hz, 1H); MS (M+H)<+>210.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 2.09g 6-hloro-5-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 1.9g proizvoda (83% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCI3) 5 ppm 4.03 (s, 2H), 7.63 (d,J =9.05 Hz, 1H), 7.86 (d,J =5.14 Hz, 1H), 8.06 (d,J= 9.05 Hz, 1H), 8.32 (d,J =5.62 Hz, 1H); MS (M+H)<+>229.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 91 mg 1,6-dihloro-5-metoksi-izohinolina i 226mg terc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 114mg proizvoda (38% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 6 ppm 1.06 (m, 12H), 1.23 (m, 10H), 1.44 (t,J= 6.72 Hz, 1H), 1.88 (dd,J= 7.95, 5.26 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.62 (dd,J =13.33, 6.48 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 4.03 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.51 (m, 2H), 5.12 (d, J = 10.52 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.87 (s, 1H), 7.50 (m, 2H), 7.95 (d,J= 8.80 Hz, 1H), 8.06 (d,J =5.87 Hz, 1H); MS (MH<+>) 749.
Primer 277: Izrada Jedinjenja 277.
Jedinjenje 277 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-(4-hloro-fenil)-3-metoksi-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 4.24g 3-(4-hloro-fenil)-3-metoksi-akrilne kiseline, dobijeno je 130mg proizvoda (3% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) S ppm 3.96 (s, 3H), 7.19 (dd,J =8.80, 2.45 Hz, 1H), 7.28 (d,J =2.45 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 8.25 (d,J =9.05 Hz, 1H); MS (M+H)<+>210.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 105mg 7-hloro-4-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 60mg proizvoda (71% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCI3) 5 ppm 4.05 (s, 3H), 7.67 (dd,J=8.80, 1.96 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 8.16 (d,J=9.05 Hz, 1H), 8.24 (d,J= 1.96Hz, 1H); MS (M+H)<+>229.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 46mg 1,7-dihloro-4-metoksi-izohinolina i 113mg terc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 50mg proizvoda (31% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 5 ppm 1.06 (m, 11H), 1.16 (s, 9H), 1.24 (m, 2H), 1.44 (dd,J= 9.54, 5.38 Hz, 1H), 1.88 (dd,J=8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.28 (m, 2H), 2.59 (dd,J =13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.00 (s, 3H), 4.05 (d,J =11.74 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 4.43 (d,J =11.49 Hz, 1H), 4.56 (dd,J =10.03, 6.85 Hz, 1H), 5.12 (d,J =11.49 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.76 (m, 2H), 7.57 (s, 1H), 7.67 (d,J =8.56 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 8.08 (d,J =8.80 Hz, 1H); MS (M+H)<+>748.
Primer 278: Izrada Jedinjenja 278.
Jedinjenje 278 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim Koraka 1.
Korak 1:
Modifikacije: smeša 6-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona (700mg) i NCS (532mg) u MeCN (10mL) je podvrgnuta refluksu tokom 3 h. Filtriranjem je dobijeno 600mg (72%) željenog proizvoda u vidu čvrste mase.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 3.96 (s, 1H), 7.19 (dd,J =8.80, 2.45 Hz, 1H), 7.28 (d,J =2.45 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 8.25 (d, J = 9.05 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>210.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 500mg 4-hloro-6-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 400mg proizvoda.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCI3) S ppm 4.01 (s, 3H), 7.35 (d,J= 2.45 Hz, 1H), 7.41 (d,J =2.45 Hz, 1H), 8.24 (d,J=9.29 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H); MS (M+H)<+>229.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 42mg 1,4-dihloro-6-metoksi-izohinolina i 117mg terc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 70mg proizvoda (47% prinos). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 5 ppm 1.05 (m, 12H), 1.25 (m, 10H), 1.44 (m, 1H), 1.88 (dd,J =8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.24 (m, 2H), 2.61 (dd,J= 13.82, 6.72 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 4.04 (dd,J= 11.74, 2.69 Hz, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.49 (m, 2H), 5.12 (d, J = 10.52 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.75 (m, 2H), 7.19 (d,J =8.80 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 8.13 (d,J =9.05 Hz, 1H); MS (M+H)<+>749.
Primer279:Izrada Jedinjenja279.
Jedinjenje 279 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-metoksi-3-(3-metoksi-fenil)-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 4.24g 3-metoksi-3-(3-metoksi-fenil)-akrilne kiseline, dobijeno je 400mg proizvoda (10% prinos).
Proizvod:
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 400mg 4,6-dimetoksi-2H-izohinolin-1-ona, dobijeno je 300mg proizvoda (69% prinos).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCI3) 5 ppm 3.97 (s, 3H), 4.05 (s, 3H), 7.31 (dd,J= 9.17, 2.57 Hz, 1H), 7.45 (d,J= 2.69 Hz, 1H), 7.7 (s, 1H), 8.16 (d,J =9.29 Hz, 1H); MS (M+H)<+>224.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 89mg 1-hloro-4,6-dimetoksi-izohinolina i 223mg terc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 160mg proizvoda (54% prinos). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 5 ppm 1.07 (m, 12H), 1.21 (m, 10H), 1.43 (m, 1H), 1.87 (dd,J =8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.24 (m, 2H), 2.58 (dd,J =13.57, 6.97 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 4.04 (dd,J =11.74, 2.93 Hz, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.39 (d,J= 11.98 Hz, 1H), 4.50 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.52 Hz, 1H), 5.29 (d,J =16.87 Hz, 1H), 5.75 (m, 2H), 7.12 (d,J =9.05 Hz, 1H), 7.40 (d,J =2.20 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 8.04 (d,J =9.05 Hz, 1H); MS (M+H)<+>744.
Primer 280: Izrada Jedinjenja 280.
Jedinjenje 280 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-(3-difluorometoksi-fenil)-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 4.28g 3-(3-difluorometoksi-fenil)-akrilne kiseline, dobijeno je 3.1 g proizvoda (72% prinosa).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+H)<+>212.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 2g 6-difluorometoksi-2H-izohinolin-1-ona, dobijeno je 1.5g proizvoda (61% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCI3) 5 ppm 6.69 (t,J =72.75 Hz, 1H), 7.49 (m, 2H), 8.28 (d,J =5.62 Hz, 1H), 8.36 (d,J =9.05 Hz, 1H); MS (M+H)<+>230.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 46mg 1-hloro-6-difluorometoksi-izohinolina i 113mg terc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 8mg proizvoda (5% prinos).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) § ppm 1.05 (m, 12H), 1.23 (m, 10H), 1.44 (m, 2H), 1.88 (dd,J =8.19, 5.50 Hz, 1H), 2.30 (m, 2H), 2.67 (d,J =13.94 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.07 (d,J =10.27
Hz, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.53 (d, J = 6.85 Hz, 2H), 5.13 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 5.76 (d,J =47.93 Hz, 2H), 7.11 (m, 2H), 7.26 (d,J= 6.11 Hz, 1H), 7.81 (d,J= 6.11 Hz, 1H), 8.16 (m, 1H); MS (M+H)<+>700.
Primer 281:IzradaJedinjenja 281.
Jedinjenje 281 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-hloro-3-fenil-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 11 g 3-hloro-3-fenil-akrilne kiseline, dobijeno je 3.1g proizvoda (29% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 7.34 (s, 1H), 7.52 (t,J =7.58 Hz, 1H), 7.77 (t,J =7.46 Hz, 1H), 7.90 (d,J =8.07 Hz, 1H), 8.39 (d,J =8.07 Hz, 1H), 11.37 (s, 1H); MS: (M+H)<+>180.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 3.1g 4-hloro-2/7-izohinolin-1-ona, dobijeno je 2.3g proizvoda (66% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 5 ppm 7.77 (ddd,J =8.31, 7.09, 1.22 Hz, 1H), 7.88 (ddd,J =8.31, 7.09, 1.22 Hz, 1H), 8.23 (d,J =8.31 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.36 (d,J =8.56 Hz, 1H); MS (M+H)+ 198.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 20mg 1,4-dihloro-izohinolina i 56mg ferc-butil estra {1-[2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropil-karbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propilj-karbaminske kiseline, dobijeno je 33mg proizvoda (30% prinos).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.06 (m, 12H), 1.24 (m, 10H), 1.44 (dd,J =9.41, 5.26 Hz, 1H), 1.88 (dd, J = 7.83, 5.62 Hz, 1H), 2.27 (m, 2H), 2.63 (dd,J =13.82, 6.97 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.06 (dd,J =11.49, 2.45 Hz, 1H), 4.22 (d,J =9.29 Hz, 1H), 4.53 (m, 2H), 5.12 (d, J = 10.76 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.85 (s, 1H), 6.60 (d,J =8.80 Hz, 1H), 7.63 (t,J =7.58 Hz, 1H), 7.86 (t,J =7.70 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.11 (d,J =8.56 Hz, 1H), 8.25 (d,J =8.31 Hz, 1H); MS (M+H)<+>718.
Primer 282: Izrada Jedinjenja 282.
Jedinjenje 2 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 s izuzetkom što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-hloro-3-fenil-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 20g 3-hloro-3-fenil-akrilne kiseline, dobijeno je 2g proizvoda (8% prinos).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+H)<+>230.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 2g 6-fluorometoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 0.7 proizvoda (33% prinos).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 8 ppm 7.51 (d,J =9.29 Hz, 1H), 7.59 (d,J =5.62 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 8.31 (d,J =5.62 Hz, 1H), 8.40 (d,J= 9.05 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>248.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 50mg 1-hloro-6-trifluorometoksi-izohinolina i 113mgterc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 42mg proizvoda (27% prinosa). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.05 (m, 12H), 1.24 (m, 10H), 1.44 (dd,J =9.17, 5.50 Hz, 1H), 1.88 (dd,J= 8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.28 (m, 2H), 2.63 (dd,J =13.45, 7.09 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.06 (dd,J= 11.25, 2.45 Hz, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.53 (m, 2H), 5.13 (d,J =10.52 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.89 (s, 1H), 7.39 (m, 2H), 7.72 (s, 1H), 8.05 (d,J= 5.87 Hz, 1H), 8.31 (d,J =9.05 Hz, 1H), 9.18 (s, 1H); MS (M+H)<+>768.
Primer 283: Izrada Jedinjenja 283.
Jedinjenje 283 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-(4-fluoro-fenil)-3-metoksi-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 3.82g 3-(4-fluoro-fenil)-3-metoksi-akrilne kiseline, dobijeno je 198mg proizvoda (5% prinos).
Proizvod:
Podaci: MS: (M+H)<+>194.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 193mg 7-fluoro-4-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 199mg proizvoda (94% prinos).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CDCI3) 5 ppm 4.05 (s, 3H), 7.49 (m, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.86 (dd,J =9.66, 2.57 Hz, 1H), 8.23 (dd,J =9.29, 5.38 Hz, 1H); MS (M+H)<+>212.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 42mg 1-hloro-7-fluoro-4-metoksi-izohinolina i 112mg terc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 40mg proizvoda (14% prinos). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.06 (m, 12H), 1.24 (m, 10H), 1.42 (m, 1H), 1.87 (dd,J =7.95, 5.50 Hz, 1H), 2.23 (m, 2H), 2.55 (dd,J =13.08, 6.48 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 4.09 (m, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.30 (d,J =11.49 Hz, 1H), 4.46 (m, 1H), 5.12 (d,J= 10.27 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 17.36 Hz, 1H), 5.40 (s, 1H), 5.76 (m, 1H), 7.46 (d,J =9.05 Hz, 1H), 7.56 (d,J =2.20 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 8.18 (d,J =9.05 Hz, 1H); MS (M+H)<+>749.
Primer 284: Izrada Jedinjenja 284.
Jedinjenje 284 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 s izuzetkom Koraka 1.
Korak 1:
Modifikacije: smeša 7-metoksi-2H-izohinolin-1-ona (876mg) i NCS (665mg) u MeCN (10ml_) je podvrgnuta refluksu tokom 3 h. Filtriranjem je dobijeno 500mg (47%) željenog proizvoda u vidu čvrste mase.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 4.00 (s, 3H), 7.58 (m, 2H), 8.14 (d,J =10.03 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H).
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 418mg 4-hloro-7-metoksi-2/-/-izohinolin-1-ona, dobijeno je 410mg proizvoda (90% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCI3) 5 ppm 4.00 (s, 3H), 7.49 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.55 (d,J= 2.44 Hz, 1H), 8.12 (d,J =9.16 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H); MS (M+H)<+>229.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 42mg 1,4-dihloro-7-metoksi-izohinolina i 117mg terc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 50mg proizvoda (33% prinos). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 6 ppm 1.05 (m, 20H), 1.24 (m, 2H), 1.44 (m, 1H), 1.89 (dd,J =8.19, 5.50 Hz, 1H), 2.28 (m, 2H), 2.62 (dd,J =13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.07 (dd,J =11.98, 3.42 Hz, 1H), 4.19 (m, 1H), 4.44 (d,J =11.74 Hz, 1H), 4.58 (dd,J =10.27, 7.09 Hz, 1H), 5.12 (m, 1H), 5.31 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.78 (m, 2H), 7.49 (m, 2H), 7.91 (s, 1H), 8.02 (m, 1H); MS (M+H)<+>749.
Primer 285: Izrada Jedinjenja 285.
Jedinjenje 285 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-difluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena.
Korak 1 i Korak 2:
Vidi Jedinjenje 256.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 46mg 1-hloro-5-difluorometoksi-izohinolina i 111mgterc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1 - karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 40mg proizvoda (27% prinos). Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) § ppm 1.06 (m, 12H), 1.25 (m, 10H), 1.44 (m, 1H), 1.89 (m, 1H), 2.22 (m, 2H), 2.62 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.08 (m, 1H), 4.23 (d,J =9.54 Hz, 1H), 4.52 (m, 2H), 5.12 (d,J =10.76 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 17.61 Hz, 1H), 5.75 (m,J =10.03 Hz, 1H), 5.88
(s, 1H), 6.60 (s, 1H), 7.02 (t,J =73.48 Hz, 1H), 7.52 (m, 3H), 8.07 (m, J = 5.75, 5.75 Hz, 2H); MS (M+Na)+ 772.
Primer 286: Izrada Jedinjenja 286.
Jedinjenje 286 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-(2,3-dihidro-benzo[1,4]dioksin-5-il)-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 4.12g 3-(2,3-dihidro-benzo[1,4]dioksin-5-il)-akrilne kiseline, dobijeno je 2.2g proizvoda (53% prinos).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 4.37 (m, 4H), 6.83 (d,J =7.09 Hz, 1H), 7.02 (d,J =8.80 Hz, 1H), 7.12 (d,J =7.34 Hz, 1H), 7.79 (d,J =8.80 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>204.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 2.05g 2,3-dihidro-7/-/-1,4-dioksa-7-aza-fenantren-8-ona, dobijeno je 1.5g proizvoda (68% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCI3) 5 ppm 4.42 (m, 4H), 7.24 (d,J =9.05 Hz, 1H), 7.77 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.84 (d,J =9.05 Hz, 1H), 8.18 (d,J =5.87 Hz, 1H); MS (M+H)<+>222.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 88mg 8-hloro-2,3-dihidro-1,4-dioksa-7-aza-fenantrena i 223mg ferc-butil estra {1 -[2-(1 -ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 140mg proizvoda (47% prinos).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 5 ppm 1.06 (m, 12H), 1.24 (m, 10H), 1.43 (dd, J = 9.05, 5.14 Hz, 1H), 1.87 (m, 1H), 2.22 (d,J =9.29 Hz, 2H), 2.60 (dd, J = 13.45, 7.09 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 4.05 (dd,J= 11.62, 2.81 Hz, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.44 (m, 6H), 5.13 (d,J =17.36 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.36 Hz, 1H), 5.75 (m, 2H), 7.04 (d,J =9.29 Hz, 1H), 7.44 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.69 (d,J =9.05 Hz, 1H), 7.88 (d,J =6.11 Hz, 1H); MS (M+H)<+>742.
Primer 287. Izrada Jedinjenja 287.
Jedinjenje 287 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-(2,2-difluoro-benzo[1,3]dioksol-4-il)-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 4.56g 3-(2,2-difluoro-benzo[1,3]dioksol-4-il)-akrilne kiseline, dobijeno je 2.2g proizvoda (55% prinos).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3DOD) 5 ppm 6.63 (d,J =7.09 Hz, 1H), 7.29 (d,J =7.34 Hz, 1H), 7.40 (d,J =8.80 Hz, 1H), 8.19 (d,J =8.80 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>226.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 2.2g 2,2-difluoro-7/-/-1,3-dioksa-7-aza-ciklopenta[a]naftalen-6-ona, dobijeno je 2.1g proizvoda (87% prinosa).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (500Hz, CDCI3) 5 ppm 7.51 (d,J= 9.29 Hz, 1H), 7.65 (d,J =5.87 Hz, 1H), 8.22 (d,J =9.05 Hz, 1H), 8.32 (d,J =5.87 Hz, 1H); MS (M+H)<+>244.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 48mg 6-hloro-2,2-difluoro-1,3-dioksa-7-aza-ciklopenta[a]naftalena i 113mg ferc-butil estra {l-[2-(1-ciklopropan-sulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 40mg proizvoda (27% prinos).
Proizvod:
Podaci: 'H NMR (400Hz, CD3OD) 5 ppm 1.02 (s, 12H), 1.24 (m, 10H), 1.43 (m, 1H), 1.88 (dd,J= 8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.32 (d,J =3.67 Hz, 2H), 2.64 (d,J =13.45 Hz, 1H), 2.95 (m, 1H), 4.05 (d,J =11.49 Hz, 1H), 4.19 (d,J =9.29 Hz, 1H), 4.53 (m, 2H), 5.12 (d, J = 9.78 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 5.77 (m, 2H), 7.34 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.46 (d,J =9.05 Hz, 1H), 8.11 (m, 2H); MS (M+H)<+>764.
Primer 288. Izrada Jedinjenja 288.
Jedinjenje 288 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 269 osim što je umesto 2-trifluorometoksicinamske kiseline u Koraku 1 korišćena 3-(2,2-difluoro-benzo[1,3]dioksol-5-il)-akrilna kiselina.
Korak 1:
Modifikacije: upotrebljeno je 1g 3-(2,2-difluoro-benzo[1,3]dioksol-5-il)-akrilne kiseline, dobijeno je 0.55g proizvoda.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400 MHz, CD3DOD) S ppm 6.69 (d,J =7.09 Hz, 1H), 7.19 (d,J =7.09 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.98 (s, 1H); MS: (M+H)<+>226.
Korak 2:
Modifikacije: upotrebljeno je 0.5g 2,2-difluoro-6H-[1,3] dioksolo[4,5-g]-izohinolin-5-ona, dobijeno je 0.4g proizvoda.
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CDCI3) 5 7.41 (s, 1H), 7.57 (d,J= 5.49 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 8.27 (d,J =5.80 Hz, 1H); MS (M+H)<+>244.
Korak 3:
Modifikacije: upotrebljeno je 48mg 5-hloro-2,2-difluoro-[1,3] dioksolo[4,5-g]izohinolina i 112mg ferc-butil estra {1-[2-(1-ciklopropan-sulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline, dobijeno je 30mg proizvoda. Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 5 ppm 1.06 (m, 12H), 1.25 (m, 10H), 1.42 (m, 1H), 1.87 (dd,J =8.07, 5.62 Hz, 1H), 2.26 (m, 2H), 2.61 (dd,J =13.57, 6.97 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.07 (dd,J =11.86, 2.81 Hz, 1H), 4.22 (m, 1H), 4.40 (d,J =11.98 Hz, 1H), 4.52 (m, 1H), 5.11 (d,J =10.52 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 17.12 Hz, 1H), 5.37 (s, 1H), 5.74 (m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.63 (d,J =5.62 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 5.62 Hz, 1H).
Primer 289: Izrada Jedinjenja 289.
Suspenzija jedinjenja 287 (15mg) i Pt(S)/C (5%, 5mg) u etil acetatu (5mL) je hidrogenizovana na 10 psi tokom 30 min. Posle filtriranja, koncentrisanjem je kvantitativno dobijeno 15mg Jedinjenja 289 u vidu čvrste mase.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 1.09 (m, 26H), 1.57 (m, 4H), 2.30 (m, 1H), 2.61 (m,J= 13.82, 7.21 Hz, 1H), 2.96 (m, 1H), 4.05 (m,J =13.94 Hz, 1H), 4.19 (d,J= 9.54 Hz, 1H), 4.53 (m, 2H), 5.89 (s, 1H), 7.34 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.46 (d,J= 9.05 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 5.87 Hz, 1H), 8.12 (d,J =8.80 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>766.
Primer 290: Izrada Jedinjenja 290.
Jedinjenje 290 (15mg, 100%) je pripremljeno sledeći Šemu 3 iz Primera 289 korišćenjem 15 mg Jedinjenja 286. Podaci:<1>H NMR (400Hz, CD3OD) 8 ppm 1.02 (m, 14H), 1.23 (m, 12H), 1.58 (m, 4H), 2.25 (m, 1H), 2.58 (dd,J =13.82, 7.21 Hz, 1H), 2.96 (m, 1H), 4.05 (m,J= 11.25, 2.93 Hz, 1H), 4.25 (d,J= 9.54 Hz, 1H), 4.39 (m, 5H), 4.52 (m, J = 10.03, 7.34 Hz, 1H), 5.81 (s, 1H), 7.03 (d,J= 9.05 Hz, 1H), 7.43 (d,J =6.11 Hz, 1H), 7.69 (d,J =9.05 Hz, 1H), 7.88 (d,J =6.11 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>744.
Primer 291: Izrada Jedinjenja 291.
Jedinjenje 291 (28mg, 100%) je pripremljeno sledeći Šemu 3 iz Primera 289 korišćenjem 28 mg Jedinjenja 251. Podaci:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.01 (m, 15H), 1.26 (m, 11H), 1.37 (m, 1H), 1.58 (m, 3H), 2.25 (m, 1H), 2.58 (dd,J =13.6, 7.0 Hz, 1H), 2.96 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 4.06 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.53 (dd,J =10.3, 7.6 Hz, 1H), 5.78 (s, 1H), 6.64 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.71 (t,J =7.3 Hz, 1H), 8.09 (d,J =8.6 Hz, 1H), 8.14 (d,J =8.1 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>738.
Primer 292: Izrada Jedinjenja 292.
Jedinjenje 292 (16mg, 84%) je pripremljeno sledeći Šemu 3 iz Primera 289, korišćenjem 19mg Jedinjenja 253.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 0.90 (m, 15H), 1.15 (m, 12H), 1.48 (m, 3H), 2.18 (m, 1H), 2.51 (dd,J =13.7, 6.9 Hz, 1H), 2.88 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.98 (dd,J =11.6, 3.1 Hz, 1H), 4.18 (d,J= 9.5 Hz, 1H), 4.36 (d,J= 11.0 Hz, 1H), 4.45 (dd,J =10.2, 7.2 Hz, 1H), 5.76 (s, 1H), 6.56 (d,J =9.3 Hz, 1H), 7.05 (d,J =7.6 Hz, 1H), 7.34 (t,J =8.1 Hz, 1H), 7.51 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.65 (d,J =8.3 Hz, 1H), 7.86 (d,J =6.1 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>738.
Primer 293: Izrada Jedinjenja 293.
Jedinjenje 293 (7mg, 35%) je pripremljeno sledeći Šemu 3 iz Primera 289, korišćenjem 20 mg Jedinjenja 252.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) § ppm 1.04 (m, 15H), 1.27 (m, 12H), 1.58 (m, 3H), 2.27 (m, 1H), 2.60 (m, 4H), 2.96 (m, 1H), 4.07 (dd,J =11.7, 2.9 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.46 (d,J =12.0 Hz, 1H), 4.54 (dd,J =10.0, 7.6 Hz, 1H), 5.85 (s, 1H), 7.39 (t,J =7.7 Hz, 1H), 7.44 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.53 (d,J =6.9 Hz, 1H), 8.00 (d,J =6.1 Hz, 1H), 8.06 (d,J =8.6 Hz, 1H); MS: (M+H)<+>700.
Primer 294: Izrada Jedinjenja 294.
Jedinjenje 294 (14mg, 78%) je pripremljeno sledeći Šemu 3 iz Primera 289, korišćenjem 18 mg Jedinjenja 254.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.94 (m, 15H), 1.13 (m, 10H), 1.20 (m, 2H), 1.50 (m, 3H), 2.21 (m, 1H), 2.53 (dd,J =13.8, 7.0 Hz, 1H), 2.88 (m, 1H), 3.99 (dd,J =11.4, 2.6 Hz, 1H), 4.14 (d,J =9.3 Hz, 1H), 4.45 (m, 2H), 5.79 (s, 1H), 6.53 (d,J =9.1 Hz, 1H), 7.40 (t,J= 8.0 Hz, 1H), 7.54 (d,J =5.9 Hz, 1H), 7.73 (d,J =7.3 Hz, 1H), 8.02 (d,J =6.1 Hz, 1H), 8.10 (d,J =8.6 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>742.
Primer 295: Izrada Jedinjenja 295.
Jedinjenje 295 (30mg, 100%) je pripremljeno sledeći Šemu 3 iz Primera 289, korišćenjem 30 mg Jedinjenja 270. MS: (M+Na)<+>776.
Primer 296: Izrada Jedinjenja 296.
Jedinjenje 296 (6.3mg, 33%) je pripremljeno sledeći Šemu 3 iz Primera 289, korišćenjem 20 mg Jedinjenja 259.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.04 (m, 15H), 1.24 (m, 12H), 1.59 (m, 3H), 2.29 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.60 (dd,J= 13.69, 6.85 Hz, 1H), 2.97 (m, 1H), 4.09 (dd,J =11.74, 2.93 Hz, 1H), 4.22 (s, 1H), 4.43 (d,J =11.74 Hz, 1H), 4.59 (dd,J =10.27, 6.85 Hz, 1H), 5.87 (s, 1H), 7.30 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.57 (dd,J =8.31, 1.47 Hz, 1H), 7.72 (d,J =8.31 Hz, 1H), 7.89 (d,J =5.87 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H); MS: (M+H)<+>700.
Primer 297: Izrada Jedinjenja 297.
Jedinjenje 297 (40mg, 100%) je pripremljeno sledeći Šemu 3 iz Primera 289, korišćenjem 40 mg Jedinjenja 263.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 0.98 (m, 13H), 1.07 (m, 2H), 1.27 (m, 12H), 1.57 (m, 3H), 2.27 (m, 1H), 2.58 (dd,J=14.7, 7.1 Hz, 1H), 2.77 (s, 3H), 2.96 (m, 1H), 4.04 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 4.42 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.55 (dd,J =10.6, 7.0 Hz, 1H), 5.94 (s, 1H), 6.65 (d,J =9.5 Hz, 1H), 7.28 (m, 2H), 7.50 (t,J =7.6 Hz, 1H), 7.60 (d,J =7.6 Hz, 1H), 7.89 (d,J =5.6 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>722.
Primer 298: Izrada Jedinjenja 298.
Jedinjenje 298 (29mg, 100%) je pripremljeno sledeći Šemu 3 iz Primera 289, korišćenjem 29 mg Jedinjenja 261.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 8 ppm 0.99 (m, 15H), 1.25 (m, 12H), 1.60 (m, 3H), 2.28 (m, 1H), 2.58 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 4.02 (m, 4H), 4.22 (dd,J =8.8, 4.4 Hz, 1H), 4.48 (m, 2H), 5.83 (s, 1H), 7.27 (d,J= 5.6 Hz, 1H), 7.36 (t,J =8.8 Hz, 1H), 7.75 (d,J =11.3 Hz, 1H), 7.90 (d,J =5.9 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>756.
Primer 299: Izrada Jedinjenja 299.
Jedinjenje 299 (34mg, 97%) je pripremljeno sledeći Šemu 3 iz Primera 289, korišćenjem 35 mg Jedinjenja 274.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.01 (m, 16H), 1.28 (m, 12H), 1.58 (m, 2H), 2.27 (s, 1H), 2.59 (dd,J =13.82, 6.97 Hz, 1H), 2.96 (m, 1H), 4.02 (s, 3H), 4.07 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.44 (m,J =11.98 Hz, 1H), 4.55 (d,J =10.27 Hz, 1H), 5.85 (s, 1H), 7.39 (m, 2H), 7.95 (d, J = 6.11 Hz, 1H), 8.00 (d,J =9.29 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>756.
Primer 300: Izrada Jedinjenja 300.
Jedinjenje 300 (30mg, 100%) je pripremljeno sledeći Šemu 3 iz Primera 289, korišćenjem 30 mg Jedinjenja 262. 'H NMR (400MHz, CD3OD) 5 ppm 1.27 (m, 30H), 2.25 (s, 1H), 2.54 (s, 1H), 2.96 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 4.20 (m, 3H), 4.51 (m,J=10.52, 6.85 Hz, 1H), 5.37 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.65 (d,J =5.38 Hz, 1H), 8.06 (d,J =5.62 Hz, 1H); MS: (M+Na)<+>773.
Deo G:
LC/MS postupak, korišćen u delu G, je sledeći:
4.6X50 mm Xterra @3 min gradijent i 4 mL/min protok Primer 320: Izrada Jedinjenja 320
Jedinjenje 320 je pripremljeno sledeći prethodnu Šemu 1 i Šemu 3.
Korak 1 (Šema 1):
U rastvor N,N-dietil-4-metoksi-2-metil-benzamida (332mg, 1.5 mmol) u THF (15ml_), na
-78°C je dodat t-BuLi (1.7M rastvor u pentanu, 1.3mL, 2.25mmol). Nastali crveni rastvor je mešan na -78°C tokom 10 minuta, a zatim je dodat 2-cijanopiridin (156mg, 1.5mmol). Reakciona smeša je, zatim, zagrejana do rt i mešana preko noći. Reakcija je ugašena zasićenim rastvorom NH4CI i
ekstrahovana je dva puta etil acetatom. Sjedinjeni organski slojevi su osušeni (MgS04) i ukoncentrisani. Sirovi proizvod je prečišćen prep HPLC, da bi se dobila žućkasta čvrsta masa kao TFA so (85mg, 15% prinos)
<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 3.91 (m, 3H), 7.09 (dd,J =9.05, 2.45 Hz, 1H), 7.17 (d,J= 2.45 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.42 (m, 1H), 7.92 (m, 1H), 8.08 (d,J =8.07 Hz, 1H), 8.18 (d,J= 9.05 Hz, 1H), 8.65 (d,J =4.89 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 2.14 min.), MS m/z 253 (MH<+>).
Korak 2 (Šema 3, Korak 1):
TFA so 6-metoksi-3-piridin-2-il-2H-izohinolin-1-ona (85mg, 0.232 mmol) je zagrevana pod refluksom sa POCI3(30mL), tokom 2 dana. Zatim je POCI3izdestilisan, a ostatak je ugašen pomoću leda. Nakon toga je izvedena neutralizacija sa 10N rastvorom NaOH, a smeđa čvrsta masa je sakupljena kao čisti proizvod. (62mg, 99% prinos)
LC-MS (retenciono vreme: 2.063 min.), MS m/z 271 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 3, Korak 2):
U rastvor ferc-butil estra {1-[2-(1-ciklopropansulfonilamino-karbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline (82mg, 0.148mmol) i LaCI3(36mg, 0.148mmol) u DMF (1.5mL) je dodat, na -78°C kalijum t-butoksid (1.0M rastvor u THF, 0.74mL, 0.74mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h, a zatim je dodat 1-hloro-6-metoksi-3-piridin-2-il-izohinolin (40mg, 0.148mmol). Zagrejana je do rt i mešana preko noći. Zatim je ugašena vodom i filtrirana. Filtrirani deo je ukoncentrisan, a ostatak je prečišćen prep-HPLC-om da bi se dobila zatvoreno-bela čvrsta masa kao proizvod (Jedinjenje 320) (23mg, 20% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 0.97-1.08 (m, 11H), 1.20-1.30 (m, 11H), 1.43 (m, 1H), 1.87 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.35 (m, 1H), 2.69 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 4.16 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 4.45 (m, 1H), 4.56 (m, 1H), 5.10 (d,J =11.3 Hz, 1H), 5.27 (d,J= 15.9 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 6.07 (s, 1H), 7.12 (d,J =7.33 Hz, 1H), 7.31 (d,J =1.96 Hz, 1H), 7.40 (m, 1H), 7.94 (dd,J =7.8 Hz, 1.5 Hz, 1H), 8.11 (d,J =9.29 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.45 (d,J =8.07 Hz, 1H), 8.62 (m, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 2.393 min.), MS m/z 791 (MH<+>).
Primer 321: Izrada Jedinjenja 321.
Kondenzacijom etil bromopiruvata sa etil tiourejom u dioksanu pri refluksu dobijen je monoalkilamino tiazol, kao HBr so u kvantitativnom prinosu. Alkilovanjem etil estra 2-etilamino-tiazol-4-karboksilne kiseline sa EtJ u DMF-u, dobijen je etil estar 2-dietilamino-tiazol-4-karboksilne kiseline. LC-MS m/z 229 (MH)<+>.
Jedinjenje 321 je pripremljeno sledeći prethodnu Šemu 2 i Šemu 3, s tim što je u Koraku 1 Šeme 2 upotrebljen etil estar 2-dietilamino-tiazol-4-karboksilne kiseline.
LC-MS (retenciono vreme: 2.76 min.) m/z 868 (MH<+>).
Primer 322: Izrada Jedinjenja 322.
Jedinjenje 322 je proizvedeno sledeći Primer 321, osim što je etil estar 2-dimetilamino-tiazol-4-karboksilne kiseline (pripremljen u skladu sa Šemom 5, osim što su metil tiourea i metil jodid upotrebljeni umesto etil tioureje i etil jodida) upotrebljen umesto etil estra 2-dimetilamino-tiazol-4-karboksilne kiseline u Koraku 1 iz Šeme 2.
LC/MS (retenciono vreme: 2.56 min.): m/z 840 (MH<+>).
Primer 323: Izrada Jedinjenja 323.
Jedinjenje 323 je pripremljeno sledeći Korak 3 iz Primera 324 osim što je umesto 1-hloro-6-metoksi-3-piridin-2-il-izohinolina upotrebljen 3-hloro-6-metoksi-benzo[d]izoksazol.
MS m/z 702 (M-H)".
Primer 324: Izrada Jedinjenja 324.
Jedinjenje 324 je pripremljeno sledeći Korak 3 iz Primera 324 osim što je umesto 1-hloro-6-metoksi-3-piridin-2-il-izohinolina upotrebljen 3-hloro-benzo[d]izotiazol.
LC-MS (retenciono vreme: 1.83 min.): m/z 688 (M-H)".
Primer 325: Izrada Jedinjenja 325.
Jedinjenje 325 je pripremljeno sledeći prethodnu Šemu 1 i Šemu 3.
Korak 1 (Šema 1):
U rastvor N,N-dietil-4-metoksi-2-metil-benzamida (332mg, 1.5mmol) u THF (15mL), na -78°C je dodat t-BuLi (1.7M rastvor u pentanu, 1.3mL, 2.25 mmol). Nastali crveni rastvor je mešan na - 78°C tokom 10 minuta, a zatim je dodat 4-cijanopiridin (164mg, 1.575mmol). Reakciona smeša je, zatim, zagrejana do rt i mešana preko noći. Reakcija je ugašena zasićenim rastvorom NH4CI, a žuti talog je sakupljen kao čisti proizvod (145 mg, 38% prinos)
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 8 3.91 (s, 3H), 7.18 (dd,J =8.8 Hz, 2.8 Hz, 1H), 7.26 (m, 2H), 8.06 (d,J =6.0 Hz, 2H), 8.16 (d,J =8.8 Hz, 1H), 8.84 (d,J= 6.0 Hz, 2H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.300 min.), MS m/z 253 (MH<+>).
Korak 2 (Šema 3, Korak 1):
6-metoksi-3-piridin-4-il-2H-izohinolin-1-on (134mg, 0.531 mmol) je zagrevan pod refluksom sa POCI3(6.0mL), tokom 5 dana. Zatim je POCI3izdestilisan, a ostatak je ugašen pomoću leda. Posle toga je izvedena neutralizacija sa zasićenim rastvorom NaHC03, a smeđa čvrsta masa je sakupljena kao čist proizvod. (125mg, 87% prinos).<1>H NMR (DMSO-d<6>, 400MHz) 8 3.99 (s, 3H), 7.53 (dd,J= 9.04 Hz, 2.44 Hz, 1H), 7.59 (d,J= 2.69 Hz, 1H), 8.26 (d,J =9.05 Hz, 1H), 8.30 (d,J= 5.38 Hz, 2H), 8.73 (s, 1H), 8.85 (d,J =6.36 Hz, 2H).
LC-MS (retenciono vreme: 2.027 min.), MS m/z 271 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 3, Korak 2):
U rastvor terc-butil estra {1-[2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline (83.5mg, 0.15mmol) i LaCI3(36.8mg, 0.15mmol) u DMF (1.5mL) je dodat, na -78°C kalijum t-butoksid (1.0M rastvor u THF, 0.75mL, 0.75mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h, a zatim je dodat 1-hloro-6-metoksi-3-piridin-4-il-izohinolin (40.6mg, 0.15mmol). Zagrejana je do rt i mešana preko noći. Zatim je ugašena vodom i filtrirana. Filtrirani deo je ukoncentrisan, a ostatak je prečišćen prep-HPLC-om da bi se dobila zatvoreno-bela čvrsta masa kao proizvod (Jedinjenje 325) (1.6mg, 1.5% prinos).
<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 0.90 (m, 2H), 1.02 (s, 9H), 1.17-1.31 (m, 11H), 1.42 (m, 1H), 1.87 (m, 1H), 2.23 (m, 1H), 2.35 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 4.15 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.45 (m, 1H), 4.56 (m, 1H), 5.10 (d,J= 10.76 Hz, 1H), 5.27 (d,J =17.61 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 6.06 (s, 1H), 7.14 (d,J =8.07 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 8.12 (d,J =8.81 Hz 1H), 8.19 (d,J =6.12 Hz, 2H), 8.61 (d,J =5.63 Hz, 2H); LC-MS (retenciono vreme: 2.523 min.), MS m/z 791 (MH<+>).
Primer 326: Izrada Jedinjenja 326.
Jedinjenje 326 je pripremljeno sledeći prethodnu Šemu 1 i Šemu 4.
Korak 1 (Šema 1):
U rastvor N,N-dietil-4-metoksi-2-metil-benzamida (332mg, 1.5mmol) u THF (15mL), na -78°C je dodat t-BuLi (1.7M rastvor u pentanu, 1.3mL, 2.25 mmol). Nastali crveni rastvor je mešan na - 78°C tokom 10 minuta, a zatim je dodat 4-dimetilamino benzonitril (219mg, 1.5mmol). Reakciona smeša je, zatim, zagrejana do rt i mešana preko noći. Reakcija je ugašena zasićenim rastvorom NH4CI a žuti talog je sakupljen i trituriran sa etrom da bi se dobila zatvoreno-bela čvrsta masa kao čist proizvod (247mg, 56% prinos)
<1>H NMR (DMSO-d<6>, 400MHz) 8 2.97 (s, 6H), 3.87 (s, 3H), 6.72 (s, 1H), 6.78 (d,J =8.80 Hz, 2H), 6.97 (dd,J =8.80, 2.45 Hz, 1H), 7.10 (d,J =2.45 Hz, 1H), 7.65 (d,J =8.80 Hz, 2H), 8.05 (d,J =8.80 Hz, 1H), 11.11 (s, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 2.023 min.), MS m/z 295 (MH<+>).
Korak 2 (Šema 4, Korak 1):
3-(4-dimetilamino-fenil)-6-metoksi-2H-izohinolin-1-on (245mg, 0.83mmol) je zagrevan pod refluksom sa POCI3(10.0mL), tokom 2 dana. Zatim je POCI3izdestilisan, a ostatak je ugašen pomoću leda. Posle toga je izvedena neutralizacija sa 10N rastvorom NaOH i ekstrahovan je dva puta etil acetatom. Organski slojevi su sjedinjeni i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijena narandžasta čvrsta masa kao proizvod. (215mg, 83% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) § 3.01 (s, 6H), 3.96 (s, 3H), 6.88 (d,J= 9.05 Hz, 2H), 7.20 (dd,J= 9.17, 2.57 Hz, 1H), 7.28 (d,J =2.45 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.96 (d,J =9.05 Hz, 2H), 8.13 (d,J= 9.29 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 2.543 min.), MS m/z 313 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 4, Korak 2):
Smeša [4-(1-hloro-6-metoksi-izohinolin-3-il)-fenil]-dimetil-amina (110mg, 0.35mmol) i tetrabutil fosfonijum hidrogen difluorida (0.5g) je zagrevana na 140°C u Smith mikrotalasnom reaktoru tokom 20min, zatim je dodata voda i izvedena ekstrakcija etil acetatom. Organski sloj je izdvojen, ispran vodom i osušen (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijena smeđa čvrsta masa kao proizvod (85mg, 82% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 2.320 min) MS m/z 297 (MH<+>).
Korak 4 (Šema 4, Korak 3):
U rastvor terc-butil estra {1-[2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline (111 mg, 0.2mmol) i LaCI3(49mg, 0.2mmol) u DMF (2.0mL) je dodat, na -78°C kalijum t-butoksid (1.0M rastvor u THF, 1.0ml_, I.Ommol). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h, a zatim je dodat [4-(1 -fluoro-6-metoksi-izohinolin-3-il)-fenil]-dimetilamin (59mg, 0.2 mmol). Zagrejana je do rt i mešana preko noći. Zatim je ugašena vodom i filtrirana. Filtrirani deo je ukoncentrisan, a ostatak je prečišćen prep-HPLC-om da bi se dobila žućkasta čvrsta masa kao proizvod (Jedinjenje 326) (17.5mg, 11% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 0.97-1.08 (m, 11H), 1.23 (m, 2H), 1.31 (s, 9H), 1.44 (m, 1H), 1.87 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.34 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 2.99 (m, 6H), 3.91 (s, 3H), 4.17 (m, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.39 (m, 1H), 4.52 (m, 1H), 5.10 (d,J =10.76 Hz, 1H), 5.27 (d,J =17.11 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 6.03 (s, 1H), 6.83 (m, 2H), 6.95 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 8.01 (m, 3H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.850 min.), MS m/z 834 (MH<+>).
Primer 327: Izrada Jedinjenja 327.
Jedinjenje 327 je pripremljeno sledeći prethodnu Šemu 1 i Šemu 4.
Korak 1 (Šema 1):
U rastvor N,N-dietil-4-metoksi-2-metil-benzamida (332mg, 1.5mmol) u THF (15ml_), na -78°C je dodat t-BuLi (1.7M rastvor u pentanu, 1.3ml_, 2.25 mmol). Nastali crveni rastvor je mešan na - 78°C tokom 10 minuta, a zatim je dodat 4-dietilamino benzonitril (261 mg, 1.5mmol). Reakciona smeša je, zatim, zagrejana do rt i mešana preko noći. Reakcija je ugašena zasićenim rastvorom NH4CI a žuti talog je sakupljen kao čist proizvod (215mg, 44% prinos).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d<6>) 5 1.12 (m, 6H), 3.39 (m, 4H), 3.87 (s, 3H), 6.69 (s, 1H), 6.72 (d,J= 9.05 Hz, 2H), 6.96 (dd,J =8.80, 2.45 Hz, 1H), 7.09 (d,J= 2.45 Hz, 1H), 7.61 (d,J =9.05 Hz, 2H), 8.04 (d,J= 8.80 Hz, 1H), 11.06 (s, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.883 min.), MS m/z 323 (MH<+>).
Korak 2 (Šema 4, Korak 1):
3-(4-dietilamino-fenil)-6-metoksi-2H-izohinolin-1-on (207mg, 0.642mmol) je zagrevan pod refluksom sa POCI3(8.0mL), tokom jednog dana. Zatim je POCI3izdestilisan, a ostatak je ugašen pomoću leda. Nakon toga je izvedena neutralizacija sa zasićenim rastvorom NaHC03i ekstrahovan je dva puta etil acetatom. Organski slojevi su sjedinjeni i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijena smeđa čvrsta masa kao proizvod. (180mg, 82% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 2.397 min.), MS m/z 341 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 4, Korak 2):
Smeša [4-(1-hloro-6-metoksi-izohinolin-3-il)-fenil]-dietilamina (90mg, 0.264mmol) i tetrabutil fosfonijum hidrogen difluorida (0.5g) je zagrevana na 140°C u Smith mikrotalasnom reaktoru tokom 20min, zatim je dodata voda i izvedena ekstrakcija etil acetatom. Organski sloj je izdvojen, ispran vodom i osušen (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno žućkasto ulje kao proizvod (70mg, 82% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 2.253 min) MS m/z 325 (MH<+>).
Korak 4 (Šema 4, Korak 3):
U rastvor terc-butil estra {1-[2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline (100mg, 0.18mol) i LaCI3(66mg, 0.27mmol) u DMF (2.0mL) je dodat, na -78°C kalijum t-butoksid (1.0M rastvor u THF, 0.9mL, 0.9mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h, a zatim je dodat [4-(1 -fluoro-6-metoksi-izohinolin-3-il)-fenil]-dietilamin (70mg, 0.216 mmol). Zagrejana je do rt i mešana preko noći. Zatim je ugašena vodom i filtrirana. Filtrirani deo je ukoncentrisan, a ostatak je prečišćen prep-HPLC-om da bi se dobila bela čvrsta masa kao proizvod (Jedinjenje 327) (18mg, 12% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 0.95-1.07 (m, 11H), 1.18 (m, 6H), 1.25-1.38 (m, 11H), 1.58 (m, 1H), 1.85 (m, 1H), 2.19 (m, 1H), 2.34 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 2.92 (m, 1H), 3.42 (m, 4H), 3.90 (s, 3H), 4.16 (m, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.37 (m, 1H), 4.53 (m, 1H), 5.07 (d,J =11.0 Hz, 1H), 5.25 (d,J =17.36 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.99 (s, 1H), 6.77 (d,J =8.8 Hz, 2H), 6.94 (d,J =9.05 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.95-8.02 (m, 3H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.690 min.), MS m/z 862 (MH<+>).
Primer328:IzradaJedinjenja 328.
Jedinjenje 328 je pripremljeno sledeći prethodnu Šemu 2 i Šemu 3.
Korak 1 (Šema 2, Korak 1):
U rastvor N,N-dietil-4-metoksi-2-metil-benzamida (332mg, 1.5mmol) u THF (15mL), na -78°C je dodat t-BuLi (1.7M rastvor u pentanu, 2.12mL, 3.6 mmol). Nastali crveni rastvor je mešan na - 78°C tokom 10 minuta, a zatim je dodat metil nikotinat (206mg, 1.5mmol). Reakciona smeša je mešana na -78°C, tokom 2 h. Zatim je reakcija ugašena zasićenim rastvorom NH4CI i ekstrahovana etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su osušeni (MgS04) i ukoncentrisani. Sirovi proizvod je prečišćen prep HPLC-om, da bi se dobilo žućkasto gusto ulje kao so TFA (124 mg, 19% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 1.740 min.), MS m/z 349 (M+Na<+>).
Korak 2 (Šema 2, Korak 2):
N,N-dietil-4-metoksi-2-(2-okso-2-piridin-3-il-etil)-benzamid (120mg, 0.272 mmol) je zagrevan sa amonijum acetatom (1g) tokom 3 h. Zatim je ohlađen i dodata je voda. Ekstrahovan je etil acetatom i izdvojen je organski sloj. Zatim je osušen (MgS04) i ukoncentrisan da bi se dobila smeđa čvrsta masa kao proizvod (65mg, 95% prinos).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d<6>) 8 3.89 (s, 3H), 6.93 (s, 1H), 7.10 (dd,J =8.80, 2.45 Hz, 1H), 7.19 (d,J =2.45 Hz, 1H), 7.52 (dd,J =7.46, 4.77 Hz, 1H), 8.15 (m, 2H), 8.64 (dd,J =4.89, 1.47 Hz, 1H), 8.96 (d,J= 1.71 Hz, 1H), 11.51 (s, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.377 min.), MS m/z 253 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 3, Korak 1):
6-metoksi-3-piridin-3-il-2H-izohinolin-1-on (65mg, 0.258mmol) je zagrevan pod refluksom sa POCI3(2.5mL), tokom sedam dana. Zatim je POCI3izdestilisan, a ostatak je ugašen pomoću leda. Posle toga je izvedena neutralizacija sa 10N rastvorom NaOH i ekstrahovan je dva puta etil acetatom. Sjedinjeni organski slojevi su osušeni (MgS04) i ukoncentrisani da bi se dobila žuta čvrsta masa kao proizvod (27mg, 39% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 2.090 min.), MS m/z 271 (MH<+>).
Korak 4 (Šema 3, Korak 2):
U rastvor terc-butil estra {1-[2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline (56mg, O.IOmmol) i LaCI3(25mg, O.IOmmol) u DMF (1.5mL) je dodat, na -78°C kalijum t-butoksid (1.0M rastvor u THF, 0.5mL, 0.5mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h, a zatim je dodat 1-hloro-6-metoksi-3-piridin-3-il-izohinolin (27mg, O.IOmmol). Zagrejana je do rt i mešana preko noći. Zatim je ugašena vodom i filtrirana. Filtrirani deo je ukoncentrisan, a ostatak je prečišćen prep-HPLC-om da bi se dobila bela čvrsta masa kao proizvod (Jedinjenje 328) (17mg, 21% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD30D) 8 0.95 (m, 2H), 1.02 (s, 9H), 1.20-1.30 (m, 11H), 1.41 (m, 1H), 1.86 (m, 1H), 2.21 (m, 1H), 2.35 (m, 1H), 2.67 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.14 (m, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.47 (d,J= 11.99 Hz, 1H), 4.55 (m, 1H), 5.09 (d,J =10.09 Hz, 2H), 5.26 (d,J =17.85 Hz, 1H), 5.74
(m, 1H), 6.07 (s, 1H), 7.09 (m, 9H), 7.29 (d,J =1.96 Hz, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.86 (s, 1H), 8.09 (d,J =9.05 Hz, 1H), 8.50-8.58 (m, 2H), 9.28 (s, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.453 min.), MS m/z 791 (MH<+>).
✓
Primer 329: Izrada Jedinjenja 329.
Jedinjenje 329 je pripremljeno sledeći prethodnu Šemu 2 i Šemu 4.
Korak 1 (Šema 2, Korak 1):
U rastvor N,N-dietil-4-metoksi-2-metil-benzamida (332mg, 1.5mmol) u THF (15mL), na -78°C je dodat t-BuLi (1.7M rastvor u pentanu, 2.2mL, 3.75 mmol). Nastali crveni rastvor je mešan na - 78°C tokom 10 minuta, a zatim je dodat metil estar N,N-dimetilantranilna kiselina (269mg, 1.5mmol). Reakciona smeša je mešana na -78°C tokom 2 h. Zatim je reakcija je ugašena zasićenim rastvorom NH4CI i ekstrahovana etil acetatom dva puta. Sakupljeni organski slojevi su osušeni (MgS04) i ukoncentrisani. Sirovi proizvod je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto gusto ulje kao proizvod (256mg, 46% prinos)
<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 0.99-1.13 (m, 6H), 3.23-3.31 (m, 8H), 3.39 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 4.35 (s, 2H), 6.91 (dd,J =8.44, 2.57 Hz, 1H), 6.99 (d,J =2.45 Hz, 1H), 7.22 (d,J =8.56 Hz, 1H), 7.69 (t,J =7.70 Hz, 1H), 7.84 (m, 1H), 7.96 (d,J =8.31 Hz, 1 H), 8.18 (d,J =7.83 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.557 min.), MS m/z 369 (MH<+>).
Korak 2 (Šema 2, Korak 2):
2-[2-(2-dimetilamino-fenil)-2-okso-etil]-N,N-dietil-4-metoksi-benzamid (250 mg, 0.678mmol) je zagrevan sa amonijum acetatom (1.5g) tokom 2 h. Zatim je ohlađen i dodata je voda. Ekstrahovan je etil acetatom i izdvojen je organski sloj. Zatim je osušen (MgS04) i ukoncentrisan da bi se dobila žućkasta čvrsta masa kao proizvod (125mg, 63% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) § 2.95 (s, 6H), 3.92 (s, 3H), 6.92 (s, 1H), 7.12 (dd,J =8.80, 2.45 Hz, 1H), 7.16 (d,J =2.45 Hz, 1H), 7.35 (m, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.63 (d,J= 7.83 Hz, 1H), 8.20 (d,J =9.05 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 2.097 min.), MS m/z 295 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 4, Korak 1):
3-(2-dimetilamino-fenil)-6-metoksi-2H-izohinolin-1-on (125mg, 0.425mmol) je zagrevan pod refluksom sa POCI3(4.0mL), tokom jednog dana. Zatim je POCI3izdestilisan, a ostatak je ugašen pomoću leda. Posle toga je izvedena neutralizacija sa zasićenim rastvorom NaHC03i ekstrahovan je dva puta etil acetatom. Organski slojevi su sjedinjeni i osušeni (MgSOJ. Uparavanjem rastvarača je dobijena smeđa čvrsta masa kao proizvod. (82mg, 62% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 2.040 min.), MS m/z 313 (MH<+>).
Korak 4 (Šema 4, Korak 2):
Smeša [2-(1-hloro-6-metoksi-izohinolin-3-il)-fenil]-dimetil-amina (82mg, 0.262mmol) i tetrabutil fosfonijum hidrogen difluorida (1.0g) je zagrevana na 140°C u Smith mikrotalasnom reaktoru tokom 20min, zatim je dodata voda i izvedena ekstrakcija etil acetatom. Organski sloj je izdvojen, ispran vodom i osušen (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijen sirovi proizvod, koji je prečišćen prep-HPLC-om da bi se dobilo žućkasto ulje kao proizvod (85mg).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 3.41 (s, 6H), 4.00 (s, 3H), 7.42 (dd,J= 9.05, 2.45 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.71 (m, 2H), 7.99 (m, 1H), 8.16 (m, 2H), 8.31 (s, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.873 min) MS m/z 297 (MH<+>).
Korak 5 (Šema 4, Korak 3):
U rastvor terc-butil estra {1-[2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline (56mg, 0.1 mmol) i LaCI3(25mg, 0.1 mmol) u DMF (1.0mL) je dodat, na -78°C kalijum t-butoksid (1.0M rastvor u THF, 0.5mL, 0.5mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h, a zatim je dodat [2-(1-fluoro-6-metoksi-izohinolin-3-il)-fenil]-dimetil-amin (30mg, 0.1 mmol). Zagrejana je do rt i mešana preko noći. Zatim je ugašena vodom i filtrirana. Filtrirani deo je ukoncentrisan, a ostatak je prečišćen prep-HPLC-om da bi se dobila bela čvrsta masa kao proizvod (Jedinjenje 329) (4.0mg, 5% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 0.98-1.08 (m, 11H), 1.16-1.32 (m, 11H), 1.40 (m, 1H), 1.85 (m, 1H), 2.16-2.32 (m, 2H), 2.60-2.71 (m, 7H), 2.92 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 4.08 (m, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.45 (m, 1H), 4.55 (m, 1H), 5.10 (d,J =10.27 Hz, 1H), 5.28 (d,J =18.09 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.89 (s, 1H), 7.05 (d,J =6.85 Hz, 1H), 7.10-7.20 (m, 2H), 7.29 (m, 1H), 7.63 (d,J= 7.58 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 80.7 (d,J= 8.56 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.550 min.), MS m/z 834 (MH<+>).
Primer 330: Izrada Jedinjenja 330.
Jedinjenje 330 je pripremljeno sledeći prethodnu Šemu 2 i Šemu 4.
Korak 1 (Šema 2, Korak 1):
U rastvor N,N-dietil-4-metoksi-2-metil-benzamida (332mg, 1.5mmol) u THF (15ml_), na -78°C je dodat t-BuLi (1.7M rastvor u pentanu, 2.2mL, 3.75 mmol). Nastali crveni rastvor je mešan na - 78°C tokom 10 minuta, a zatim je dodat metil estar (3-dimetilamino)benzojeve kiseline (269mg, 1.5mmol). Reakciona smeša je mešana na -78°C tokom 2 h. Zatim je reakcija je ugašena zasićenim rastvorom NH4CI i ekstrahovana etil acetatom dva puta. Sakupljeni organski slojevi su osušeni (MgS04) i ukoncentrisani. Sirovi proizvod je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto gusto ulje kao TFA so (245mg, 33% prinos)
<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 1.01 (t,J =6.85 Hz, 3H), 1.09 (m, 3H), 3.11 (s, 6H), 3.21 (m, 2H), 3.40 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 4.39 (s, 2H), 6.84-6.91 (m, 2H), 7.19 (d,J =8.32 Hz, 1H), 7.35 (m, 1H), 7.49 (t,J =8.07 Hz, 1H), 7.66-7.71 (m, 2H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.930 min.), MS m/z 369 (MH<+>).
Korak 2 (Šema 2, Korak 2):
2-[2-(3-dimetilamino-fenil)-2-okso-etil]-N,N-dietil-4-metoksi-benzamid (240 mg, 0.497mmol) je zagrevan sa amonijum acetatom (2.0g) tokom 2.5 h. Zatim je ohlađen i dodata je voda.
Smeđkasta čvrsta masa je sakupljena kao čist proizvod (95mg, 65% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 2.98 (s, 6H), 3.88 (s, 3H), 6.74-6.87 (m, 2H), 7.01-7.07 (m, 3H), 7.18 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.28 (t, J = 7.82 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 8.80 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.773 min.), MS m/z 295 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 4, Korak 1):
3-(3-dimetilamino-fenil)-6-metoksi-2H-izohinolin-1-on (92mg, 0.312mmol) je zagrevan pod refluksom sa POCI3(3.0mL), tokom dva dana. Zatim je POCI3izdestilisan, a ostatak je ugašen pomoću leda. Posle toga je izvedena neutralizacija sa zasićenim rastvorom NaHC03i ekstrahovan je dva puta etil acetatom. Organski slojevi su sjedinjeni i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno smeđkasto gusto ulje kao proizvod. (72mg, 74% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 2.297 min.), MS m/z 313 (MH<+>).
Korak 4 (Šema 4, Korak 2):
Smeša [3-(1-hloro-6-metoksi-izohinolin-3-il)-fenil]-dimetil-amina (72mg, 0.23mmol) i tetrabutil fosfonijum hidrogen difluorida (0.5g) je zagrevana na 140°C u Smith mikrotalasnom reaktoru tokom 20min, zatim je dodata voda i izvedena ekstrakcija etil acetatom. Organski sloj je izdvojen, ispran vodom i osušen (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno smeđkasto ulje kao proizvod (58mg, 85% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 2.193 min) MS m/z 297 (MH<+>).
Korak 5 (Šema 4, Korak 3):
U rastvor terc-butil estra {l-[2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline (86mg, 0.155mmol) i LaCI3(57mg, 0.233mmol) u DMF (1.5mL) je dodat, na -78°C kalijum t-butoksid (1.0M rastvor u THF, 0.5ml_, 0.5mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h, a zatim je dodat [3-(1-fluoro-6-metoksi-izohinolin-3-il)-fenil]-dimetil-amin (55mg, 0.185mmol). Zagrejana je do rt i mešana preko noći. Zatim je ugašena vodom i filtrirana. Filtrirani deo je ukoncentrisan, a ostatak je prečišćen prep-HPLC-om da bi se dobila zatvoreno-bela čvrsta masa kao proizvod (Jedinjenje 330) (8.0mg, 6% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 0.99-1.09 (m, 11H), 1.23 (m, 2H), 1.29 (s, 9H), 1.42 (m, 1H), 1.86 (m, 1H), 2.21 (m, 1H), 2.33 (m, 1H), 2.70 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.00 (s, 6H), 3.92 (s, 3H), 4.14 (m, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.44-4.57 (m, 2H), 5.10 (d,J =11.00 Hz, 1H), 5.27 (d,J =16.87 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 6.01 (s, 1H), 6.63 (d,J =8.80 Hz, 1H), 7.03 (d,J =6.85 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.28 (t,J =8.07 Hz, 1H), 7.45 (d,J =7.82 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 8.05 (d,J =8.80 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.707 min.), MS m/z 834 (MH<+>).
Primer 331: Izrada Jedinjenja 331
Jedinjenje 331 je pripremljeno ovde opisanim postupcima.
Primer 334: Izrada Jedinjenja 334
Jedinjenje 334 je pripremljeno na sledeći način:
Korak 1:
U rastvor Boc-cis-HYP-OMe (122.6mg, 0.5mmol) u THF-u (15ml_) na 0°C su dodati trifenilfosfin (196.7mg, 0.75mmol) i benzo[d]izoksazol-3-ol (81 mg, 0.6mmol). Zatim je dodat DEAD (0.118ml_, 0.75mmol). Reakciona smeša je zagrejana do rt i mešana tokom 3 h. Zatim je uparen rastvarač, a ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno gusto ulje (117mg, 54% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 1.41 (m, 9H), 2.38 (m, 1H), 2.75 (m, 1H), 3.75 (m, 3H), 3.81 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 4.47 (m, 1H), 5.44 (m, 1H), 7.31 (t,J =7.46 Hz, 1H), 7.47 (d,J =8.56 Hz, 1H), 7.59 (t,J =7.83 Hz, 1H), 7.66 (d,J= 8.07 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.65 min.), MS m/z 363 (MH<+>).
Nešto kuplujućeg proizvoda (85mg, 0.235mmol) je zatim rastvoreno u 4N HCI u dioksanu (1.5mL) i mešano tokom 3 h. Uparavanjem rastvarača je dobijeno ožutelo ulje kao HCI so (85mg, >100% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 1.327 min.), MS m/z 263 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor hidrohloridne soli metil estra 4-(benzo[d]izoksazol-3-iloksi)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (85mg, 0.285mmol) u CH3CN-u (10mL) je dodat N-boc-L-t-leucin (99mg, 0.427mmol), DIEA (0.25mL, 1.425mmol) i kuplujući reagens HOBt (65mg, 0.427mmol) i HBTU (162mg, 0.247mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno gusto ulje kao proizvod (63mg, 46% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 1.01 (s, 9H), 1.17 (s, 9H), 2.34 (m, 1H), 2.78 (dd, J = 14.13, 7.83 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 4.00 (dd,J =12.22, 3.42 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 4.57 (d,J =12.23 Hz, 1H), 4.68 (m, 1H), 5.51 (m, 1H), 7.27 (m, 1H), 7.47 (d,J= 8.56 Hz, 1H), 7.57 (m, 1H), 7.63 (d,J =8.07 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.737 min.), MS m/z 498 (M+Na<+>).
Korak 3:
U rastvor metil estra 4-(benzo[d]izoksazol-3-iloksi-1-(2-terc-butoksikarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (63mg, 0.132mmol) u mešavini THF-a (3.5mL), metanola (2.0mL) i vode (0.5mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (83mg, 1.89mmo). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći, zatim je zakiseljena sa 1N rastvorom HCI do pH = 3 do 5 i ukoncenrisana. Ekstrahovana je etil acetatom (2x30mL), a organski slojevi su sjedinjeni i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno žućkasto ulje za nastavak (61 mg, 100% prinos).
U rastvor prethodnog jedinjenja (61 mg, 0.132mmol) u CH3CN-u (8mL) je dodat hidrohlorid (1 R,2S)(1 -ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklopropil)-karbaminske kiseline (42mg, 0.158mmol), DIEA (0.115ml_, 0.66mmol) i kuplujući reagens HOBt (30mg, 0.198mmol) i HBTU (75mg, 0.198mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobio žuti film kao konačni proizvod (Jedinjenje 334) (24mg, 27% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 1.01 (s, 9H), 1.05 (m, 2H), 1.12-1.26 (m, 11H), 1.43 (m, 1H), 1.86 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.17-2.33 (m, 2H), 2.67 (dd,J =12.96, 5.87 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 4.22 (m, 1H), 4.49 (m, 2H), 5.11 (d,J= 10.21 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 17.12 Hz, 1H), 5.55 (s, 1H), 5.74 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 7.48 (d,J =8.32 Hz, 1H), 7.54-7.64 (m, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 2.767 min.), MS m/z 696 (M+Na<+>).
Primer 335: Izrada Jedinjenja 335.
Korak 1: (Šema 1, Korak 1)
U rastvor 1-terc-butil estra (2S,4R) 4-hidroksi-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (0.25g, 1.08mmol) u CH3CN-u (10ml_) je dodat hidrohlorid (1R,2S)(1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklopropil)-karbaminske kiseline (0.346g, 1.30mmol), DIEA (0.94mL, 5.41 mmol) i kuplujući reagens HOBt (0.248g, 1.62mmol) i HBTU (0.615mg, 1.62mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo žuto ulje. Prečišćeno je pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno gusto ulje, koje je zatim rastvoreno u 4N HCI u dioksanu (5ml_). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Uparavanjem rastvarača je dobijena bela čvrsta masa kao proizvod za prenošenje (200mg, 49% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 0.647 min.), MS m/z 344 (MH<+>).
Korak 2: (Šema 1, Korak 2)
U rastvor prethodnog jedinjenja (200mg, 0.527mmol) u CH3CN-u (10mL) je dodata 2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (0.15g, 0.79mmol), DIEA (0.46mL, 2.63mmol) i kuplujući reagens HOBt (0.121g, 0.79mmol) i HBTU (0.30g, 0.79mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo žućkasto ulje. Prečišćeno je pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobila bela čvrsta masa kao konačan proizvod (Intermedijer 2) (145mg, 54% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500MHz) S 0.99-1.10 (m, 11H), 1.24 (m, 2H), 1.41 (dd,J =9.5, 5.5 Hz, 1H), 1.87 (dd,J =7.9, 5.5 Hz, 1H), 1.97 (m, 1H), 2.13 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.77-3.88 (m, 2H), 4.33-4.39 (m, 2H), 4.49 (m,br 1H), 5.13 (d,J =10.4 Hz, 1H), 5.31 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.76 (m, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.590 min.), MS m/z 515 (MH<+>).
Korak 3: (Šema 2)
U rastvor 2,4-dihloropirimidina (149mg, 1mmol) u THF. (5ml_) dodati su tetrakis (trifenilfosfin) paladijum (23mg, 2mol%) i 0.5 M rastvor fenilcink bromida (2.1mL, 1.05mmol) u THF. Reakciona smeša je mešana na 50°C preko noći. Zatim je dodat zasićeni rastvor amonijum hlorida i ekstrahovan je dva puta sa EtOAc. Organski slojevi su sjedinjeni, isprani vodom i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijen žuti ostatak koji je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto ulje, kao 2-hloro-4-fenil-pirimidin za nastavak.
U rastvor intermedijera 2 (20mg, 0.039mmol) u DMF (3mL) dodat je na 0°C NaH (3.9mg, 60% disperzije u mineralnom ulju, 0.0975mmol). Reakciona smeša je zatim zagrejana do rt i mešana tokom 1 h. Zatim je dodat prethodno pripremljeni 2-hloro-4-fenil-pirimidin (18mg, kao sirov). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Zatim je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je izdvojen, ispran slanim rastvorom i osušen (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno žućkasto ulje, koje je zatim prečišćeno prep-HPLC-om da bi se dobilo gusto bezbojno ulje, kao konačan proizvod (Jedinjenje 335) kao TFA so (5.5mg, 18% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 300MHz) 8 0.92-1.12 (m, 11H), 1.25 (m, 2H), 1.44 (dd,J =9.2, 5.5 Hz, 1H), 1.89 (dd,J =8.1, 5.5 Hz, 1H), 2.17-2.37 (m, 2H), 2.57 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 4.14 (m, 1H), 4.24-4.38 (m, 2H), 4.51 (m, 1H), 5.13 (d,J =10.2 Hz, 1H), 5.31 (d,J =17.2 Hz, 1H), 5.77 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 7.48-7.60 (m, 3H), 7.66 (d,J =5.3 Hz, 1H), 8.18 (m, 2H), 8.60 (d,J =5.1 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.947 min.), MS m/z 669 (MH<+>).
Primer 336: Izrada Jedinjenja 336.
Korak 1:
U rastvor 2,4-dihloropirimidina (149mg, 1mmol) u THF (5mL) dodati su tetrakis (trifenilfosfin) paladijum (58mg, 5mol%) i 0.5 M rastvor 2-piridilcink bromida (2.4mL, 1.2mmol) u THF. Reakciona smeša je mešana na 50°C preko noći. Zatim je dodat zasićeni rastvor amonijum hlorida i ekstrahovan je dva puta sa EtOAc. Organski slojevi su sjedinjeni, isprani vodom i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijen žuti ostatak koji je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto ulje, kao proizvod (11 mg, 3.6% prinos).
<1>H NMR (500MHz, CD3OD) 5 7.61 (m, 1H), 8.07 (m, 1H), 8.36 (d,J =5.19 Hz, 1H), 8.50 (d,J =7.94 Hz, 1H), 8.75 (d,J =3.97 Hz, 1H), 8.82 (d,J =5.19 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.440 min.), MS m/z 192 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor intermedijera 2 iz Primera 335 (15mg, 0.029mmol) u DMF (3mL) dodat je na 0°C NaH (1.75mg, 60% disperzije u mineralnom ulju, 0.0728mmol). Reakciona smeša je zatim zagrejana do rt i mešana tokom 1 h. Zatim je dodat 2-hloro-4-piridin-2-il-pirimidin (9.5mg, 0.0311 mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Zatim je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je izdvojen, ispran slanim rastvorom i osušen (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno žućkasto ulje, koje je zatim prečišćeno prep-HPLC-om da bi se dobio žućkasti film, kao konačan proizvod (Jedinjenje 336) kao TFA so (3.5mg, 15% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500MHz) 5 1.03 (s, 9H), 1.08 (m, 2H), 1.24 (m, 2H), 1.43 (dd,J =9.77, 5.50 Hz, 1H), 1.89 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 2.31 (m, 1H), 2.57 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 3.50 (s, 3H), 4.13 (m, 1H), 4.29 (s, 1H), 4.36 (d,J= 11.91 Hz, 1H), 4.52 (m, 1H), 5.13 (d,J =10.08 Hz, 1H), 5.31 (d,J= 16.79 Hz, 1H), 5.76 (m, 1H), 5.88 (m, 1H), 7.64 (m, 1H), 8.06-8.13 (m, 2H), 8.54 (d,J =7.93 Hz, 1H), 8.73-8.76 (m, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.787 min.), MS m/z 670 (MH<+>).
Primer 337: Izrada Jedinjenja 337.
Korak 1:
U rastvor 2,4-dihloropirimidina (149mg, 1mmol) u DMF (5mL) dodati su dihloro bis (trifenilfosfin) paladijum (II) (35mg, 5mol%) i 2-(tributilstanil)tiofen (0.38mL, 1.2mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 70°C tokom 3 h. Zatim je dodat zasićeni rastvor KF u metanolu (20mL) i mešan je na rt tokom 4 h. Reakciona smeša je ukoncentrisana sa malom količinom silika gela, a ostatak je filtriran kroz filter papir i ispran sa EtOAc. Filtrat je zatim ukoncentrisan, a ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobila zatvoreno-bela čvrsta masa, kao proizvod (110mg, 35% prinos).
<1>H NMR (400MHz, CD3OD) S 7.20 (dd,J =5.01, 3.79 Hz, 1H), 7.74 (dd,J =5.01, 1.10 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 5.38 Hz, 1H), 7.98 (dd,J =3.79 ,1.10 Hz, 1H), 8.55 (d,J =5.38 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.453 min.), MS m/z 197 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor intermedijera 2 iz Primera 335 (20mg, 0.039mmol) u DMF (3mL) dodat je na 0°C NaH (7.8mg, 60% disperzije u mineralnom ulju 0.195mmol). Reakciona smeša je zatim zagrejana do rt i mešana tokom 1 h. Zatim je dodat 2-hloro-4-tiofen-2-il-pirimidin (16.9mg, 0.0544mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Zatim je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je izdvojen, ispran slanim rastvorom i osušen (MgSOJ. Uparavanjem rastvarača je dobijeno žućkasto ulje, koje je zatim prečišćeno prep-HPLC-om da bi se dobila dva proizvoda (Jedinjenje 337 i Intermedijer 3).
Jedinjenje 337: (žućkasti film, 3.0mg, 11% prinos)
<1>H NMR (CD3OD, 500MHz) 8 0.98-1.07 (m, 11H), 1.22 (m, 2H), 1.41 (dd,J =9.54, 5.62 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.32, 5.63 Hz, 1H), 2.19-2.31 (m, 2H), 2.52 (m, 1H), 2.92 (m, 1H), 3.50 (s, 3H), 4.09 (m, 1H), 4.25-4.32 (m, 2H), 4.47 (dd,J =10.03, 7.34 Hz, 1H), 5.11 (dd,J =10.27, 1.71 Hz, 1H), 5.28 (dd,J =17.11, 1.46 Hz, 1H), 5.69-5.79 (m, 2H), 7.20 (dd,J =4.89, 3.66 Hz, 1H), 7.51 (d,J =5.38 Hz, 1H), 7.70 (d,J =4.89 Hz, 1H), 7.95 (d,J =3.67 Hz, 1H), 8.54 (d,J =5.14 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.787 min.), MS m/z 696 (M+Na<+>).
Intermedijer 3: (10mg, 35% prinos)
LC-MS (retenciono vreme: 1.477 min.), MS m/z 617 (MH<+>).
Primer 338: Izrada Jedinjenja 338.
U rastvor (1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropil)-amida 1-(2-amino-3,3-dimetil-butiril)-4-(4-tiofen-2-il-pirimidin-2-iloksi)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (10mg, 0.0137mmol) u CH3CN-u (5ml_) je dodata ciklopropilsirćetna kiselina (2.1mg, 0.0205mmol), DIEA (0.012mL, 0.742mmol) i kuplujući reagens HOBt (3.1g, 0.0205mmol) i HBTU (7.8mg, 0.0205mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo žuto ulje. Prečišćeno je pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobio žućkasti film kao TFA so (Jedinjenje 338) (4.6mg, 41% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 0.12 (m, 2H), 0.48 (m, 2H), 0.90 (m, 1H), 1.01-1.09 (m, 11H), 1.23 (m, 2H), 1.43 (dd,J=9.29, 5.38 Hz, 1H), 1.87 (dd,J=8.31, 5.62 Hz, 1H), 2.06 (m, 2H), 2.19-2.31 (m, 2H), 2.52 (dd,J =13.45, 6.85 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.12 (dd,J =11.98, 3.91 Hz, 1H), 4.27 (d,J =11.74 Hz, 1H), 4.47 (dd,J =10.27, 6.85 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 5.11 (dd,J =10.27, 1.47 Hz, 1H), 5.28 (dd,J =17.12, 1.47 Hz, 1H), 5.71-5.80 (m, 2H), 7.20 (dd,J= 4.89, 3.67 Hz, 1H), 7.51 (d,J =5.38 Hz, 1H), 7.70 (d,J= 5.20 Hz, 1H), 7.95 (d,J= 3.67 Hz, 1H), 8.48 (d,J =5.13 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.833 min.), MS m/z 699 (MH<+>).
Primer 339: Izrada Jedinjenja 339
Jedinjenje 342 je pripremljeno sledeći Šeme iz Primera 337 i Primera 338, s izuzetkom što je umesto 2-(tributilstanil)tiofena u Koraku 1 Primera 337 korišćen 2-(tributilstanil)furan.
Korak 1:
U rastvor 2,4-dihloropirimidina (149mg, 1mmol) u DMF (5ml_) dodati su dihloro bis(trifenilfosfin) paladijum (II) (35mg, 5mol%) i 2-(tributilstanil)furan (0.35mL, 1.1 mmol). Reakciona smeša je grejana na 70°C tokom 3 h. Zatim je dodat zasićeni rastvor KF u metanolu (20ml_) i mešan je na rt tokom 4 h. Reakciona smeša je ukoncentrisana sa malom količinom silika gela, a ostatak je filtriran kroz filter papir i ispran sa EtOAc. Filtrat je zatim, ukoncentrisan, a ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobila smeđkasta čvrsta masa kao proizvod (80mg, 27% prinos).
<1>H NMR (400MHz, CD3OD) 5 6.68 (dd,J =3.67, 1.71 Hz, 1H), 7.42 (d,J =3.67 Hz, 1H), 7.67 (d,J= 5.13 Hz, 1H), 7.30 (d,J= 1.71 Hz, 1H), 8.62 (d,J= 5.14 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.233 min.), MS m/z 181 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor metil estra {1-[2-(1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-hidroksi-pirolidin-1-karbonil]-2,2-dimetil-propil}-karbaminske kiseline (20mg, 0.039mmol) u DMF (3mL) dodat je na 0°C NaH (7.8mg, 60% disperzije u mineralnom ulju, 0.195mmol). Reakciona smeša je zatim zagrejana do rt i mešana tokom 1 h. Zatim je dodat 2-hloro-4-tiofen-2-il-pirimidin (16.0mg, 0.0544mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Zatim je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je izdvojen, ispran slanim rastvorom i osušen (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno žućkasto ulje, koje je zatim prečišćeno prep-HPLC-om da bi se dobio kuplovani proizvod sa uklonjenom zaštitom Boe (3mg, 11% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 1.420 min.), MS m/z 601 (Mh<T>).
Korak 3:
U rastvor (1 -ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropil)-amida 1 -(2-amino-3,3-dimetil-butiril)-4-(4-furan-2-il-pirimidin-2-iloksi)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (3mg, 0.0042mmol) u CH3CN-u (5mL) je dodata ciklopropilsirćetna kiselina (0.6mg, 0.063mmol), DIEA (0.004mL, 0.21 mmol) i kuplujući reagens HOBt (1.0g, 0.063mmol) i HBTU (2.4mg, 0.0063mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo žuto ulje. Prečišćeno je pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobio žućkasti film kao TFA so (Jedinjenje 339) (1.0mg, 30% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 0.12 (m, 2H), 0.48 (m, 2H), 0.90 (m, 1H), 0.99-1.09 (m, 11H), 1.23 (m, 2H), 1.43 (dd,J =9.05, 5.31 Hz, 1H), 1.87 (m, 1H), 2.05 (m, 2H), 2.19-2.29 (m, 2H), 2.50 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.10 (dd,J =12.23, 3.91 Hz, 1H), 4.25 (d,J= 11.99 Hz, 1H), 4.47 (dd,J =10.52, 7.09 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 5.11 (dd, J= 10.52, 1.71 Hz, 1H), 5.29 (dd,J=17.12, 1.47 Hz, 1H), 5.71-5.79 (m, 2H), 6.65 (dd,J= 3.67, 1.96 Hz, 1H), 7.38 (d,J =3.67 Hz, 1H), 7.40 (d,J= 5.38 Hz, 1H), 7.76 (m, 1H), 8.54 (d,J= 5.38 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.790 min.), MS m/z 683 (Mh<T>).
Primer 340: Izrada Jedinjenja 340
Korak 1:
U rastvor 2,4-dihloropirimidina (149mg, 1mmol) u DMF (5mL) dodati su dihloro bis(trifenilfosfin) paladijum (II) (35mg, 5mol%) i 2-(tri bu ti Istan i I) ti azo I (412mg, 1.1 mmol). Reakciona smeša je grejana na 80°C tokom 3 h. Zatim je dodat zasićeni rastvor KF u metanolu (20mL) i mešan je na rt tokom 4 h. Reakciona smeša je ukoncentrisana sa malom količinom silika gela, a ostatak je filtriran kroz filter papir i ispran sa EtOAc. Filtrat je zatim, ukoncentrisan, a ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobila smeđkasta čvrsta masa kao proizvod (9mg, 3% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 1.320 min.), MS m/z 198 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor (1 -ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropil)-amida 1 -[2-(2-ciklopropil-acetilamino)-3,3-dimetil-butiril]-4-hidroksi-pirolidin-2-karboksilne kiseline (12.5mg, 0.0232mmol) u DMF (3mL) dodat je na 0°C NaH (3.7mg, 60% disperzije u mineralnom ulju 0.0.0928mmol). Reakciona smeša je zatim zagrejana do rt i mešana tokom 1 h. Zatim je dodat 2-hloro-4-tiazol-2-il-pirimidin (9.0mg, 0.0289mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Zatim je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je izdvojen, ispran slanim rastvorom i osušen (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno žućkasto ulje, koje je zatim prečišćeno prep-HPLC-om da bi se dobila bela čvrsta masa, kao konačni proizvod (Jedinjenje 340) (2.8mg, 17% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 0.12 (m, 2H), 0.47 (m, 2H), 0.89 (m, 1H), 1.00-1.09 (m, 11H), 1.22 (m, 2H), 1.44 (dd,J =9.54, 5.38 Hz, 1H), 1.87 (dd,J =8.07, 5.38 Hz, 1H), 2.06 (m, 2H), 2.20-2.32 (m, 2H), 2.52 (dd,J =13.70, 6.85 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.13 (dd,J =11.98, 3.91 Hz, 1H), 4.30 (d,J =11.98 Hz, 1H), 4.48 (dd,J =10.51, 7.09 Hz, 1H), 4.63 (d,J= 9.54 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 10.51 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.73-5.80 (m, 2H), 7.81 (d,J= 5.14 Hz, 1H), 7.84 (d,J= 3.18 Hz, 1H), 8.03 (d,J= 2.93 Hz, 1H), 8.68 (d,J= 5.13 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.710 min.), MS m/z 700 (MH<+>).
Primer 341: Izrada Jedinjenja 341
Korak 1 (Šema 1, Korak 1):
U rastvor Boc-HYP-OH (1.0g, 4.324mmol) u DMF (20mL) dodat je na 0°C NaH (0.38g, 60% disperzije u mineralnom ulju 9.513mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h. Zatim je dodat 2,4-dihloro-pirimidin (0.709g, 0.0289mmol). Reakciona smeša je zagrejana do rt i mešana preko noći. Zatim je ugašena 1N rastvorom HCI i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je izdvojen, ispran slanim rastvorom i osušen (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijen sirovi proizvod, koji je zatim prečišćen prep-HPLC-om da bi se dobilo bezbojno ulje, kao proizvod (0.4g, 27% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 300MHz) 5 1.13 (m, 9H), 2.37 (m, 1H), 2.62 (m, 1H), 3.70-3.84 (m, 2H), 4.38 (m, 1H), 5.65 (m, 1H), 6.88 (d,J =5.86 Hz, 1H), 8.37 (d,J= 5.86 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.370 min.), MS m/z 344 (MH<+>).
Korak 2 (Šema 1, Korak 2):
U rastvor 1-terc-butil estra(2S,4fi)4-(2-hloro-pirimidin-4-iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (0.34g, 0.99mmol) u CH3CN-u (20mL) dodati su (1 R,2S)/(1S,2R) (1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklopropil)-karbaminska kiselina (0.511 g, 1.48mmol), DIEA (0.86mL, 4.95mmol) i kuplujući reagens HOBt (0.226g, 1.48mmol) i HBTU (0.561 g, 1.48mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobila čvrsta žuta masa (Intermedijer 4) (0.33g, 44% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 300MHz) 8 smeša dijastereomera.
LC-MS (retenciono vreme: 2.907 min.), MS m/z 655 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 2, korak 1):
U rastvor Intermedijera 4 (50mg, 0.061 mmol) u CH2CI2(2.5mL) dodati su 1,2,3,4-tetrahidroizohinolin (0.011mL, 0.0915mmol) i Et3N (0.021mL, 0.153mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći i na 40°C tokom 1 dana. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje. Ono je zatim, rastvoreno u 4N HCI u dioksanu (1mL) i mešano je preko noći. Uparavanjem rastvarača je dobijeno bezbojno ulje, kao hlorovodonična so (20mg, 52% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 1.160 min.), MS m/z 553 (MH<+>).
Korak 4 (Šema 2, korak 2)
U rastvor hidrohlorida (1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropil)-amida 4-[2-(3,4-dihidro-1H-izohinolin-2-il)-pirimidin-4-iloksi]-pirolidin-2-karboksilne kiseline (20mg, 0.032mmol) u CH3CN-u (5mL) je dodata 2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (9.1 mg, 0.048mmol), DIEA (0.028mL, 0.16mmol) i kuplujući reagens HOBt (7.3g, 0.048mmol) i HBTU (18.2mg, 0.048mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo žuđkasto ulje. Prečišćeno je pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje kao TFA so (Jedinjenje 341) (16mg, 60% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500MHz) 8 0.98-1.06 (m, 13H), 1.13 (m, 1H), 1.22-1.32 (m, 1H), 1.35-1.44 (m, 1H), 1.82 (dd,J =8.24, 5.19 Hz, 0.5H), 1.90 (dd,J =8.24, 5.49 Hz, 0.5H), 2.26 (m, 1H), 2.32-2.43 (m, 1H), 2.26 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 3.11 (m, br, 2H), 3.56 (s, 3H), 4.14 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.47 (m, 1H), 5.15 (m, 1H), 5.31 (m, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.94 (s, 1H), 6.47 (d,J= 7.02 Hz, 1H), 7.29 (s, 4H), 7.49 (m, 1H), 7.56 (m, 1H), 7.74 (d,J= 8.24 Hz, 1H), 7.88 (d,J =8.24 Hz, 1H), 8.11 (d,J =7.02 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.517 min.), MS m/z 724 (MH<+>).
Primer 342: Izrada Jedinjenja 342.
Jedinjenje 342 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 341 osim što je umesto 1,2,3,4-tetrahidroizohinolina u Koraku 1, Šeme 2 upotrebljen izoindolin.
Korak 1:
U rastvor Intermedijera 4 iz Primera 341 (50mg, 0.061 mmol) u CH2CI2(2.5ml_) dodati su izoindolin (0.013mL, 0.115mmol) i Et3N (0.026ml_, 0.19mmol). Reakciona smeša je mešana na rt tokom 2 dana. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje. Ono je zatim, rastvoreno u 4N HCI u dioksanu (1mL) i mešano je preko noći. Uparavanjem rastvarača je dobijen sirovi proizvod, koji je ponovo prečišćen prep-HPLC da bi se dobila žućkasta čvrsta masa, kao TFA so (8.5mg, 14% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 1.860 min.), MS m/z 539 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor hidrohlorida (1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropil)-amida 4-[2-(1,3-dihidro-izoindol-2-il)-pirimidin-4-iloksi]-pirolidin-2-karboksilne kiseline (8.5mg, 0.0104mmol) u CH3CN-u (5mL) je dodata 2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (3.0mg, 0.0156mmol), DIEA (0.009mL, 0.052mmol) i kuplujući reagens HOBt (2.4g, 0.0156mmol) i HBTU (5.9mg, 0.0156mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo žućkasto ulje. Prečišćeno je pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje kao TFA so (Jedinjenje 342) (3mg, 35% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 300MHz) 8 smeša dijastereoizomera;
LC-MS (retenciono vreme: 2.547 min.), MS m/z 710 (MH<+>).
Primer 343: Izrada Jedinjenja 343.
Jedinjenje 342 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 341 sa izuzetkom što je umesto 1,2,3,4-tetrahidroizohinolina u Koraku 1, Šeme 2 upotrebljen morfolin.
Korak 1:
U rastvor Intermedijera 4 iz Primera 341 (50mg, 0.061 mmol) u CH2CI2(2.5mL) dodati su morfolin (0.08mL, 0.0915mmol) i Et3N (0.021 mL, 0.153mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći i na 40°C tokom 1 dana. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje. Ono je zatim, rastvoreno u 4N HCI u dioksanu (1mL) i mešano je preko noći. Uparavanjem rastvarača je dobijeno bezbojno ulje, kao hlorovodonična so (12.6mg, 36% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 0.810 min.), MS m/z 507 (Mh<T>).
Korak 2:
U rastvor hidrohlorida (1-ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinil-ciklopropil)-amida 4-(2-morfolin-4-il-pirimidin-4-iloksi)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (12.6mg, 0.0217mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati 2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (6.2mg, 0.0326mmol), DIEA (0.019mL, 0.1085mmol) i kuplujući reagens HOBt (5.0mg, 0.0326mmol) i HBTU (12.4mg, 0.0326mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo žućkasto ulje. Prečišćeno je pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje kao TFA so (Jedinjenje 343) (7mg, 41% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500MHz) 5 smeša dijastereoizomera;
LC-MS (retenciono vreme: 1.280 min.), MS m/z 678 (MH<+>).
Primer 344: Izrada Jedinjenja 344.
Korak 1 (Šema 1):
U rastvor 2-metil estra 1-terc-butil estra 4-p-tolilsulfanilkarbonil-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (3.0g, 7.91 mmol) u smeši etanola (15mL) i THF (30ml_) dodat je natrijum borohidrid (0.6g, 15.8mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisana, isprana 1N rastvorom HCI i ekstrahovana sa EtOAc tri puta. Organski slojevi su sjedinjeni, isprani zasićenim rastvorom NaHC03i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno žućkasto ulje, koje je prečišćeno flash hromatografijom na koloni (silika gel, 3:1 EtOAc : heksanima) da bi se dobilo bezbojno ulje kao proizvod (Intermedijer 5) (1.77g, 86% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500MHz) 8 1.43 (m, 9H), 2.00-2.13 (m, 2H), 2.46 (m, 1H), 3.19 (m, 1H), 3.47-3.53 (m, 2H), 3.61 (m, 1H), 3.73 (m, 3H), 4.31 (m, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.240 min.), MS m/z 282 (M+Na<+>).
Korak 2 (Šema 2, korak 1):
U rastvor Intermedijera 5 (80mg, 0.309mmol) u THF (10ml_), na 0°C su dodati trifenilfosfin (121.4 mg, 0.463 mmol) i 4-hidroksihinolin (67.2mL, 0.463mmol). Zatim je dodat DEAD (80.6 mg, 0.463 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do rt i mešana tokom 2 dana. Zatim je uparen rastvarač, a ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje. Ono je zatim, rastvoreno u 4N HCI u dioksanu (3mL) i mešano je tokom 2 h. Uparavanjem rastvarača je dobijeno gusto, bezbojno ulje, kao bis HCI so (110mg, 99% prinos).
<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) 5 2.52 (m, 1H), 2.60 (m, 1H), 3.19 (m, 1H), 3.45 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.86 (m, 1H), 4.61-4.75 (m, 3H), 7.56 (d,J =6.7 Hz, 1H), 7.94 (t,J =7.3 Hz, 1H), 8.10-8.20 (m, 2H), 8.55 (d,J=8.2 Hz, 1H), 9.07 (d,J =6.7 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 0.570 min.), MS m/z 287 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 2, korak 2):
U rastvor bishidrohloridne soli metil estra 4-(hinolin-4-iloksimetil)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (110mg, 0.306mmol) u CH3CN-u (10mL) su dodati 2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (87mg, 0.46mmol), DIEA (0.27mL, 0.53mmol) i kuplujući reagens HOBt (70mg, 0.46mmol) . i HBTU (174mg, 0.46mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo žućkasto ulje. Prečišćeno je pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje kao TFA so (105mg, 60% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500MHz) 5 1.07 (s, 9H), 2.34 (m, 1H), 2.45 (m, 1H), 3.14 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 4.05 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.31 (s, 1H), 4.57-4.63 (m, 2H), 4.73 (m, 1H), 7.53 (d,J =6.7 Hz, 1H), 7.91 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 8.06-8.16 (m, 2H), 8.43 (d,J =8.6 Hz, 1H), 9.02 (d,J =6.4 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.250 min.), MS m/z 458 (MH<+>).
Korak 4 (Šema 2, Korak 3):
U rastvor metil estra 1-(2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetilbutiril)-4-(hinolin-4-iloksimetil)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (100mg, 0.175mmol) u smeši THF (6mL), metanola (3.25mL) i vode (1.0mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (110mg, 2.62mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Zatim je zakiseljena sa 1N rastvorom HCI do pH = 3 do 5 i ukoncentrisana. Ekstrahovana je etil acetatom (3x40mL), a organski slojevi su sjedinjeni i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno gusto bezbojno ulje za nastavak (25mg, 32% prinos).
U rastvor gornjeg jedinjenja (25mg, 0.056mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1R,2S)
(1 -ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (22.5mg, 0.085mmol),
DIEA (0.05mL, 0.28mmol) i kuplujući reagens HOBt (12.9mg, 0.085mmol) i HBTU (32mg, 0.085mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo žuto ulje. Prečišćeno je pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno gusto ulje kao TFA so (Jedinjenje 344) (20mg, 46% prinos).<1>H NMR (CD3OD, 500MHz) 6 1.02-1.10 (m, 11H), 1.24 (m, 2H), 1.40 (dd,J =9.2, 5.5 Hz, 1H), 1.90 (dd,J= 7.9, 5.5 Hz, 1H), 2.19-2.38 (m, 3H), 2.95 (m, 1H), 3.19 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 4.10 (m, 1H), 4.15 (m, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.62 (d,J =4.6 Hz, 2H), 5.15 (d,J =10.7 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17.1 Hz, 1H), 5.72 (m, 1H), 7.54 (d,J =6.7 Hz, 1H), 7.93 (m, 1H), 8.07-8.18 (m, 2H), 8.41 (d,J =8.6 Hz, 1H), 9.03 (d,J =6.7 Hz, 1H), 9.09 (s, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.617 min.), MS m/z 656 (MH<+>).
Primer 345: Izrada Jedinjenja 345.
Jedinjenje 345 je pripremljeno sledeći Šemu 2 iz Primera 344, sa izuzetkom što je umesto 4-hidroksihinolina u koraku 1 Šeme 2 korišćen 3-bromofenol.
Korak 1:
U rastvor Intermedijera 5 iz Primera 344 (150mg, 0.578mmol) u THF (15mL), na 0°C su dodati trifenilfosfin (228mg, 0.868 mmol) i 3-bromofenol (150mg, 0.868mmol). Zatim je dodat DEAD (0.14mL, 0.868 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do rt i mešana tokom 2 dana. Zatim je uparen rastvarač, a ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje, kao proizvod (105mg, 44% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 2.023 min.), MS m/z 436 (M+Na<+>).
Korak 2:
2-metil estar 1-terc-butil estar 4-(3-bromo-fenoksimetil)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (35mg, 0.085mmol) je rastvoren u 4N HCI u dioksanu (1.5mL) i mešan tokom 2 h. Uparavanjem rastvarača je dobijeno gusto bezbojno ulje. U rastvor ovog ulja u CH3CN-u (10mL) su dodati 2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (21.9mg, 0.1155mmol), DIEA (0.067mL, 0.385mmol) i kuplujući reagens HOBt (17.7mg, 0.1155mmol) i HBTU (43.8mg, 0.1155mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim suprečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje kao proizvod (20mg, 49% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 1.03 (s, 9H), 2.15 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 2.83 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.87 (m, 1H), 3.91-3.98 (m, 3H), 4.31 (s, 1H), 4.59 (dd,J =8.80, 5.38 Hz, 1H), 6.89 (d,J= 8.32 Hz, 1H), 7.03-7.10 (m, 2H), 7.15 (t,J =8.07 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.943 min.), MS m/z 485 (MH<+>).
Korak 3:
U rastvor metil estra 4-(3-bromo-fenoksimetil)-1-(2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetilbutiril)-4-(hinolin-4-iloksimetil)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (17mg, 0.035mmol) u smeši THF (1.5ml_), metanola (0.8mL) i vode (0.25ml_) dodat je litijum hidroksid monohidrat (22mg, 0.525mmol). Reakciona smeša je mešana na rt tokom 3 dana. Zatim je zakiseljena sa 1N rastvorom HCI do pH = 3 do 5 i ukoncentrisana. Ekstrahovana je etil acetatom (2x20ml_), a organski slojevi su sjedinjeni i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno gusto bezbojno ulje za nastavak (15mg, 91% prinos).
U rastvor gornje kiseline (15mg, 0.0318mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1R,2S) (1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (12.7mg, 0.0477mmol), DIEA (0.028mL, 0.159mmol) i kuplujući reagens HOBt (7.3mg, 0.0477mmol) i HBTU (18.1 mg, 0.0477mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno gusto ulje kao konačni proizvod (Jedinjenje 345) (14mg, 64% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 8 1.00-1.106 (m, 11H), 1.21 (m, 2H), 1.37 (dd,J =9.53 Hz, 5.62 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.07 Hz, 5.62 Hz, 1H), 2.06 (m, 1H), 2.14-2.24 (m, 2H), 2.81-2.94 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 3.91-3.97 (m, 4H), 4.33 (s, 1H), 4.38 (m, 1H), 5.11 (dd,J=10.27, 1.47 Hz, 2H), 5.28 (dd,J =17.12, 1.22 Hz, 1H), 5.70 (m, 1H), 6.89 (m, 1H), 7.05-7.11 (m, 2H), 7.16 (t,J =8.016 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 3.500 min.), MS m/z 683 (MH<+>).
Primer 346: Izrada Jedinjenja 346.
Korak 1 (Šema 1, Korak 1):
U rastvor 2-metil estra 1-terc-butil estra 4-hidroksimetil-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (300mg, 1.157mmol) u THF (15mL), na 0°C su dodati trifenilfosfin (455mg, 1.735mmol) i 5-bromo-piridin-3-ol (pripremljen u skladu sa F.E.Ziegler et al., J. Am. Chem. Soc, (1973), 95, 7458) (302mg, 1.735mmol). Zatim je dodat DEAD (0.273mL, 1.735mmol). Reakciona smeša je zagrejana do rt i mešana tokom 2 dana. Zatim je uparen rastvarač, a ostatak je prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto ulje. Zatim je rastvoreno u 4N rastvoru HCI u dioksanu (3.0mL) i mešano je tokom 4 h. Uparavanjem rastvarača je dobijen sirovi proiozvod koji je dalje prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto ulje, kao TFA so (70mg, 11% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 0.890 min.), MS m/z 315 (MH<+>).
Korak 2 (Šema 1, Korak 2):
U rastvor metil estar 4-(5-bromo-piridin-3-iloksimetil)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (70mg, 0.129mmol) u CH3CN-u (10mL) su dodati 2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (36.5mg, 0.193mmol), DIEA (0.135mL, 0.744mmol) i kuplujući reagens HOBt (30mg, 0.193mmol) i HBTU (73mg, 0.193mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje kao proizvod (80mg, 100% prinos).
'H NMR (CD3OD, 400MHz) 8 1.04 (s, 9H), 2.17 (m, 1H),.2.26 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 3.50 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.88-3.98 (m, 2H), 4.04-4.12 (m, 2H), 4.28 (s, 1H), 4.60 (dd,J =9.05, 5.87 Hz, 1H), 7.86 (m, 1H), 8.31-8.35 (m, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.697 min.), MS m/z 486 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 1, Korak 3):
U rastvor metil estra 4-(5-bromo-piridin-3-iloksimetil)-1-(2-metoksikarbonil-amino-3,3-dimetilbutiril)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (80mg, 0.133mmol) u smeši THF (5.6mL), metanola (3mL) i vode (1mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (84mg, 2.0mol). Reakciona smeša je mešana na rt tokom 3 dana. Zatim je zakiseljena sa 1N rastvorom HCI do pH = 3 do 5. Ekstrahovana je etil acetatom (2x20mL), a organski slojevi su sjedinjeni i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno gusto bezbojno ulje, kao proizvod (Intermedijer 6) (50mg, 80% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 1.04 (s, 9H), 2.16-2.30 (m, 2H), 2.88 (m, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.92 (m, 2H), 4.07 (m, 2H), 4.29 (s, 1H), 4.57 (dd,J =8.56, 5.87 Hz, 1H), 7.79 (m, 1H), 8.29 (m, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.590 min.), MS m/z 472 (MH<+>).
Korak 4 (Šema 2):
U rastvor 4-(5-bromo-piridin-3-iloksimetil)-1-(2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (5mg, 0.0106mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1R,2S) (1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (4.2mg, 0.0159mmol), DIEA (0.009mL, 0.053mmol) i kuplujući reagens HOBt (2.4mg, 0.0159mmol) i HBTU (6.0mg, 0.0159mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno gusto ulje kao konačni proizvod (Jedinjenje 346) (2mg, 24% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 8 1.00-1.07 (m, 11H), 1.20 (m, 2H), 1.37 (dd,J =9.29 Hz, 5.14 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.07 Hz, 5.38 Hz, 1H), 2.08 (m, 1H), 2.15-2.25 (m, 2H), 2.87-2.94 (m, 2H), 3.51 (s, 3H), 3.92-3.97 (m, 2H), 4.02-4.07 (m, 2H), 4.31 (s, 1H), 4.39 (m, 1H), 5.10 (dd,J =10.27, 1.47 Hz, 1H), 5.28 (dd,J= 17.12, 1.46 Hz, 1H), 5.70 (m, 1H), 7.68 (m, 1H), 8.24 (m, 2H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.727 min.), MS m/z 684 (MH<+>).
Primer 347: Izrada Jedinjenja 347.
Korak 1:
U rastvor Intermedijera 6 iz Primera 346 (16mg, 0.0339mmol) u DMF (1ml_), dodati su 3-tiofenborna kiselina (5.6mg, 0.044mol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (2.0mg, 0.0017mmol) i 2M rastvor Na2C03(0.051 mL, 0.1017mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 110oC tokom 4 h. Zatim je filtrirana, isprana metanolom. Filtrat je ukoncentrisan i prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo smeđkasto ulje, kao proizvod (6mg, 37% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 8 1.05 (s, 9H), 2.21-2.30 (m, 2H), 2.95 (m, 1H), 3.42 (s, 3H), 3.93 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 4.20-4.30 (m, 3H), 4.60 (dd, J = 8.56, 5.87 Hz, 1H), 7.64 (m, 2H), 8.12 (m, 1H), 8.37 (m, 1H), 8.45 (m, 1H), 8.75 (s, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.353 min.), MS m/z 476 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor 1-(2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(5-tiofen-3-il-piridin-3-iloksimetil)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (6mg, 0.0126mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1R,2S) (1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (5.0mg, 0.0189mmol), DIEA (0.011 mL, 0.063mmol) i kuplujući reagens HOBt (2.9mg, 0.0189mmol) i HBTU (7.2mg, 0.0189mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobio žućkasti film kao TFA so (Jedinjenje 347) (2.2mg, 22% prinos).
<1>H NMR (CDgOD, 400MHz) 5 1.01-1.07 (m, 11H), 1.19 (m, 2H), 1.36 (m, 1H), 1.88 (dd,J=8.07 Hz, 5.62 Hz, 1H), 2.09-2.24 (m, 3H), 2.91 (m, 1H), 3.00 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.98 (d, J = 5.86 Hz, 2H), 4.20-4.31 (m, 3H), 4.43 (m, 1H), 5.12 (dd,J= 10.27, 1.71 Hz, 1H), 5.29 (dd,J =17.12, 1.22 Hz, 1H), 5.69 (m, 1H), 7.64 (m, 2H), 8.11 (m, 1H), 8.31 (m, 1H), 8.43 (m, 1H), 8.75 (s, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.540 min.), MS m/z 688 (MH<+>).
Primer 348: Izrada Jedinjenja 348.
Korak 1 (Šema 1):
U rastvor Intermedijera 5 iz Primera 344 (700mg, 2.7mmol) u mešavini THF (90ml_), metanola (50ml_) i vode (12ml_) dodat je litijum hidroksid monohidrat (1700mg, 2.0mmol). Reakciona smeša je mešana na rtpreko noći. Zatim je zakiseljena sa 1N rastvorom HCI do pH = 3 do 5. Ekstrahovana je etil acetatom (2x20mL), a organski slojevi su sjedinjeni i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača dobijeno je gusto bezbojno ulje, kao proizvod (Intermedijer 7) (0.58, 88% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 1.42 (m, 9H), 2.00-2.09 (m, 2H), 2.45 (m, 1H), 3.17 (m, 1H), 3.49 (m, 2H), 3.59 (m, 1H), 4.24 (m, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.08 min.), MS m/z 268 (M+Na<+>).
Korak 2 (Šema 2, Korak 1):
U rastvor Intermedijera 7 (270mg, 1.1 mmol) u DMSO (10mL) dodat je kalijum t-butoksid (309mg, 2.75mmol). Reakciona smeša je mešana na rt tokom 1 h. Zatim je dodat 2-bromo-4-hloro-piridin (254mg, 1.32mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Zatim je ugašena vodom i isprana etil acetatom. Vodeni sloj je izdvojen i zakiseljen sa 1N rastvorom HCI do pH = 3. Ekstrahovan je etil acetatom dva puta, a organski slojevi su sjedinjeni i osušeni (MgS04). Uparavanjem rastvarača je dobijeno narandžasto ulje. Ono je zatim rastvoreno u metanolu i kroz njega je propušten HCI (gas) tokom 2 min na -78°C. Zatim je reakciona smeša zagrejana na rt i mešana preko noći. Uparavanjem rastvarača je dobijeno narandžasto ulje, kao sirovo za nastavak. LC-MS (retenciono vreme: 0.65 min.), MS m/z 315 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 2, Korak 2):
U rastvor sirovog metil estra 4-(2-bromo-piridin-4-iloksimetil)-pirolidin-2-karboksilne kiseline u CH3CN-u (20mL) su dodati 2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (312mg, 1.65mmol), DIEA (1.15mL, 6.6mmol) i kuplujući reagens HOBt (252mg, 1.65mmol) i HBTU (626mg, 1.65mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje kao proizvod (270mg, 41% prinos, dva koraka).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 1.03 (s, 9H), 2.13-2.19 (m, 2H), 2.87 (m, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.93 (d,J =6.36 Hz, 2H), 4.11 (m, 2H), 4.27 (s, 1H), 4.60 (dd,J =8.80, 5.87 Hz, 1H), 7.06 (d,J =5.87, 2.20 Hz, 1H), 7.32 (d,J =2.20 Hz, 1H), 8.18 (d,J =6.11 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.657 min.), MS m/z 486 (MH<+>).
Korak 4 (Šema 2, Korak 3):
U rastvor metil estra 4-(2-bromo-piridin-4-iloksimetil)-1-(2-metoksi-karbonilamino-3,3-dimetilbutiril)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (270mg, 0.45mmol) u smeši THF (18mL), metanola (10mL) i vode (3.3mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (283mg, 6.75mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisana i zakiseljena sa 1N rastvorom HCI do pH = 3 do 5. Zatvoreno-bela čvrsta masa je sakupljena kao proizvod (Intermedijer 8) (180mg, 85% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500MHz) 5 1.06 (s, 9H), 2.20-2.29 (m, 2H), 2.89 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.92 (d,J= 6.4 Hz, 2H), 4.06-4.13 (m, 2H), 4.31 (d,J= 8.85 Hz, 1H), 4.59 (dd,J =8.85, 5.50 Hz, 1H), 7.00 (dd,J =6.10, 2.24 Hz, 1H), 7.22 (d,J =1.83 Hz, 1H), 8.12 (d,J =5.80 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 2.113 min.), MS m/z 472 (MH<+>).
Korak 5 (Šema 3):
U rastvor Intermedijera 8 (10mg, 0.0212mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1R,2S) (1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (8.5mg, 0.0318mmol), DIEA (0.018mL, 0.106mmol) i kuplujući reagens HOBt (4.9mg, 0.0318mmol) i HBTU (12.1mg, 0.0318mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo bezbojno gusto ulje kao konačni proizvod (Jedinjenje 348) (9mg, 53% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 8 1.00-1.06 (m, 11H), 1.20 (m, 2H), 1.36 (dd,J =9.54 Hz, 5.38 Hz, 1H), 1.87 (dd,J =8.07 Hz, 5.38 Hz, 1H), 2.04-2.24 (m, 3H), 2.88-2.94 (m, 2H), 3.52 (s, 3H), 3.93 (d,J =5.87 Hz, 2H), 4.09 (m, 2H), 4.30 (s, 1H), 4.38 (t,J= 7.58 Hz, 1H), 5.11 (dd,J =
10.27, 1.47 Hz, 1H), 5.28 (dd,J =17.12, 1.47 Hz, 1H), 5.70 (m, 1H), 7.00 (dd,J= 5.87, 2.20 Hz, 1H), 7.24 (d,J =2.20 Hz, 1H), 8.14 (d,J =5.87 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.670 min.), MS m/z 684 (MH<+>).
Primer 349: Izrada Jedinjenja 349.
Jedinjenje 349 je pripremljeno sledeći Šemu iz Primera 347 s izuzetkom što je umesto Intermedijera 6 iz Primera 346 u Koraku 1 upotrebljen Intermedijer 8 iz Primera 348.
Korak 1:
U rastvor Intermedijera 8 (20mg, 0.0423mmol) u DMF (1mL), dodati su 3-tiofenborna kiselina (7.0mg, 0.055mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (2.4mg, 0.00212mmol) i 2M rastvor Na2C03(0.063mL, 0.127mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 110°C tokom 30 h. Zatim je filtrirana, isprana metanolom. Filtrat je ukoncentrisan i prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo smeđkasto ulje, kao proizvod (10.5mg, 42% prinos) (50177-165).
LC-MS (retenciono vreme: 1.690 min.), MS m/z 476 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor 1-(2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(2-tiofen-3-il-piridin-4-iloksime^ karboksilne kiseline (10mg, 0.017mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1R,2S) (1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (6.8mg, 0.0254 mmol), DIEA (0.015ml_, 0.085mmol) i kuplujući reagens HOBt (3.9mg, 0.0254mmol) i HBTU (9.6mg, 0.0254mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobio smeđkasti film kao TFA so (Jedinjenje 349) (2.2mg, 16% prinos) (50177-172).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 1.00-1.07 (m, 11H), 1.20 (m, 2H), 1.37 (dd,J =9.04, 5.37 Hz, 1H), 1.88 (dd,J= 8.07 Hz, 5.38 Hz, 1H), 2.10-2.25 (m, 3H), 2.90 (m, 1H), 3.04 (m, 1H), 3.47 (s, 3H), 3.93-4.02 (m, 2H), 4.29 (s, 1H), 4.35-4.45 (m, 3H), 5.12 (d,J =10.51 Hz, 1H), 5.28 (d,J= 17.61 Hz, 1H), 5.69 (m, 1H), 7.40 (dd,J =6.84, 2.44 Hz, 1H), 7.71-7.80 (m, 3H), 8.38 (m, 1H), 8.51 (d,J =7.09 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.443 min.), MS m/z 688 (MH<+>).
Primer 350: Izrada Jedinjenja 350.
Korak 1:
U rastvor Intermedijera 8 iz Primera 348 (20mg, 0.0423mmol) u DMF (2ml_), dodati su 2-tiofenborna kiselina (7.0mg, 0.055mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (2.4mg, 0.00212mmol) i barijum hidroksid (40mg, 0.127mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 150°C u Smith mikrotalasnom reaktoru tokom 110 min. Zatim je filtrirana, isprana metanolom. Filtrat je ukoncentrisan i prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto ulje, kao proizvod (5.0mg, 20% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 2.137 min.), MS m/z 476 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor gornje karboksilne kiseline (5.0mg, 0.0085mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1 R,2S) (1 -ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (3.4mg, 0.0127mmol), DIEA (0.007mL, 0.0424mmol) i kuplujući reagens HOBt (1.9mg, 0.0127mmol) i HBTU (4.8mg, 0.0127mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto ulje kao TFA so (Jedinjenje 350) (2.6mg, 38% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 0.99-1.07 (m, 11H), 1.19 (m, 2H), 1.37 (dd, J= 9.54, 5.63 Hz, 1H), 1.87 (dd,J =8.07 Hz, 5.38 Hz, 1H), 2.10-2.25 (m, 3H), 2.91 (m, 1H), 3.03 (m, 1H), 3.48 (s, 3H), 3.92-4.02 (m, 2H), 4.30 (s, 1H), 4.32-4.45 (m, 3H), 5.11 (dd,J= 10.27, 1.22 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.11 Hz, 1H), 5.69 (m, 1H), 7.30-7.38 (m, 2H), 7.66 (d,J= 2.45 Hz, 1H), 7.92 (m, 1H), 7.95 (m, 1H), 8.48 (d,J =6.85 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 2.067 min.), MS m/z 688 (MH<+>).
Primer 351: Izrada Jedinjenja 351.
Jedinjenje 351 je pripremljeno sledeći Šemu iz Primera 350 s izuzetkom što je umesto 2-tiofenborne kiseline u Koraku 1 upotrebljena 3-furanborna kiselina.
Korak 1:
U rastvor Intermedijera 8 iz Primera 348 (20mg, 0.0423mmol) u DMF (2mL), dodati su 3-furanborna kiselina (6.2mg, 0.055mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (2.4mg, 0.00212mmol) i barijum hidroksid (40mg, 0.127mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 150°C u Smith mikrotalsnom reaktoru tokom 30 min. Zatim je filtrirana, isprana metanolom. Filtrat je ukoncentrisan i prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto ulje, kao proizvod (12mg, 49% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 1.937 min.), MS m/z 460 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor gornje karboksilne kiseline (5.0mg, 0.0209mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1 R,2S) (1 -ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (8.4mg, 0.0314mmol), DIEA (0.018mL, 0.1046mmol) i kuplujući reagens HOBt (4.8mg, 0.0314mmol) i HBTU (11.9mg, 0.0314mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto ulje kao TFA so (Jedinjenje 351) (4.0mg, 24% prinos).
<1>H NMR (CDgOD, 400MHz) 8 1.00-1.08 (m, 11H), 1.21 (m, 2H), 1.37 (dd,J =8.80, 5.62 Hz, 1H), 1.87 (dd,J =8.32 Hz, 5.38 Hz, 1H), 2.11-2.24 (m, 3H), 2.91 (m, 1H), 3.03 (m, 1H), 3.49 (s, 3H), 3.91-4.03 (m, 2H), 4.29 (s, 1H), 4.35-4.46 (m, 3H), 5.12 (dd,J =10.27, 1.47 Hz, 1H), 5.28 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.69 (m, 1H), 7.11 (m, 1H), 7.38 (dd,J= 7.10, 2.69 Hz, 1H), 7.71 (d,J =2.69 Hz, 1H), 7.81 (m, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.50 (d,J =7.09 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.410 min.), MS m/z 672 (MH<+>).
Primer 352: Izrada Jedinjenja 352.
Jedinjenje 352 je pripremljeno sledeći Šemu 2 i Šemu 3 iz Primera 348, s izuzetkom što je 2,6-dibromopiridin upotrebljen umesto 2-bromo-4-hloro-piridina u Koraku 1, Šeme 2.
Korak 1 (Šema 2, Korak 1):
U rastvor Intermedijera 7 iz Primera 348 (270mg, 1.1mmol) u DMSO (10mL) dodat je kalijum t-butoksid (309mg, 2.75mmol). Reakciona smeša je mešana na rt tokom 1 h. Zatim je dodat 2,6-dibromopiridin (313mg, 1.32mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Zatim je ugašena vodom i isprana etil acetatom. Vodeni sloj je izdvojen i zakiseljen sa 1N rastvorom HCI do pH = 3. Ekstrahovan je etil acetatom dva puta, a organski slojevi su sjedinjeni i osušeni (MgSOJ. Uparavanjem rastvarača je dobijeno narandžasto ulje. Ono je zatim rastvoreno u metanolu i kroz njega je propušten HCI (gas) tokom 2 min na -78°C. Zatim je reakciona smeša zagrejana na rt i mešana preko noći. Uparavanjem rastvarača je dobijeno narandžasto ulje, kao sirovo, za nastavak.
LC-MS (retenciono vreme: 1.480 min.), MS m/z 315 (MH<+>).
Korak 2 (Šema 2, Korak 2):
U rastvor sirovog metil estra 4-(6-bromo-piridin-2-iloksimetil)-pirolidin-2-karboksilne kiseline u CH3CN-u (20mL) su dodati 2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina (312mg, 1.65mmol), DIEA (1.15mL, 6.6mmol) i kuplujući reagens HOBt (252mg, 1.65mmol) i HBTU (626mg, 1.65mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni flash hromatografijom na koloni (silika gel, 1:1, heksani: etil acetat) da bi se dobilo bezbojno ulje kao proizvod (340mg, 63% prinos, dva koraka).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 8 1.03 (s, 9H), 2.10-2.24 (m, 2H), 2.84 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.83 (m, 1H), 3.94 (m, 1H), 4.20-4.29 (m, 2H), 4.31 (s, 1H), 4.59 (dd,J =8.80, 5.13 Hz, 1H), 6.76 (d,J= 8.07 Hz, 1H), 7.11 (d,J= 7.58 Hz, 1H), 7.53 (t,J= 7.83 Hz, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.820 min.), MS m/z 486 (MH<+>).
Korak 3 (Šema 2, Korak 3):
U rastvor metil estra 4-(6-bromo-piridin-2-iloksimetil)-1-(2-metoksi-karbonilamino-3,3-dimetilbutiril)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (330mg, 0.679mmol) u smeši THF (28mL), metanola (15mL) i vode (5mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (427mg, 10.18mmol). Reakciona smeša je mešana na rt tokom 2 dana. Zatim je ukoncentrisana i zakiseljena sa 1N rastvorom HCI do pH = 3 do 5. Bela čvrsta masa je sakupljena kao proizvod (Intermedijer 9) (310mg, 97% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500MHz) 8 1.06 (s, 9H), 2.18-2.25 (m, 2H), 2.88 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.84 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.28-4.35 (m, 2H), 4.58 (m, 1H), 6.79 (d,J= 7.94 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.32 Hz, 1H), 7.55 (m, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 3.030 min.), MS m/z 472 (MH<+>).
Korak 4 (Šema 3):
U rastvor Intermedijera 9 (10mg, 0.0212mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1R,2S) (1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (8.5mg, 0.00318mmol), DIEA (0.018mL, 0.106mmol) i kuplujući reagens HOBt (4.9mg, 0.0318mmol) i HBTU (12.1mg, 0.0318mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobio žućkasti film kao TFA so (Jedinjenje 352) (10.2mg, 60% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 1.00-1.06 (m, 11H), 1.20 (m, 2H), 1.37 (dd,J =9.54 Hz, 5.63 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.07 Hz, 5.38 Hz, 1H), 2.05 (m, 1H), 2.12-2.25 (m, 2H), 2.86-2.94 (m, 2H), 3.54 (s, 3H), 3.87 (m, 1H), 3.94 (m, 1H), 4.18-4.27 (m, 2H), 4.33 (s, 1H), 4.37 (m, 1H), 5.11 (dd,J =10.27, 1.72 Hz, 1H), 5.28 (dd,J =17.12, 1.47 Hz, 1H), 5.70 (m, 1H), 6.76 (d,J =8.32 Hz, 1H), 7.11 (d,J =7.33 Hz, 1H), 7.53 (t,J =7.82 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.837 min.), MS m/z 684 (MH<+>).
Primer 353: Izrada Jedinjenja 353.
Jedinjenje 353 je pripremljeno sledeći Šemu iz Primera 347 s izuzetkom što je umesto Intermedijera 6 iz Primera 346 u Koraku 1 upotrebljen Intermedijer 9 iz Primera 352.
Korak 1:
U rastvor Intermedijera 9 (25mg, 0.053mmol) u DMF (1ml_), dodati su 3-tiofenborna kiselina (8.8mg, 0.0688mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (3.1 mg, 0.00265mmol) i 2M rastvor Na2C03(0.080mL, 0.159mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 110°C preko noći. Zatim je filtrirana, isprana metanolom. Filtrat je ukoncentrisan i prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo smeđkasto ulje, kao proizvod (15mg, 48% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 500MHz) 5 1.06 (s, 9H), 2.20-2.31 (m, 2H), 2.94 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.91 (m, 1H), 3.98 (m, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.37-4.46 (m, 2H), 4.61 (dd,J =8.85, 5.19 Hz, 1H), 6.77 (d,J =8.24 Hz, 1H), 7.39 (d,J =7.32 Hz, 1H), 7.48 (dd,J =5.19, 3.05 Hz, 1H), 7.68 (dd,J =4.88, 1.22 Hz, 1H), 7.77 (t,J =7.93 Hz, 1H), 8.04 (m, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.857 min.), MS m/z 476 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor 1-(2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(6-tiofen-3-il-piridin-2-iloksimetil)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (15mg, 0.0254mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1R.2S) (1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (10.2mg, 0.0382 mmol), DIEA (0.022mL, 0.127mmol) i kuplujući reagens HOBt (5.8mg, 0.0382mmol) i HBTU (14.5mg, 0.0382mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobio žućkasti film kao TFA so (Jedinjenje 353) (6mg, 29% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 1.00-1.06 (m, 11H), 1.20 (m, 2H), 1.36 (dd,J =9.29, 5.38 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.07 Hz, 5.38 Hz, 1H), 2.07 (m, 1H), 2.16-2.25 (m, 2H), 2.87-2.99 (m, 2H), 3.54 (s, 3H), 3.87-3.99 (m, 2H), 4.31-4.44 (m, 4H), 5.11 (dd,J=10.27, 1.46 Hz, 1H), 5.28 (d,J=17.12 Hz, 1H), 5.70 (m, 1H), 6.67 (d,J =8.31 Hz, 1H), 7.33 (d,J =7.34 Hz, 1H), 7.44 (dd,J =4.89, 2.93 Hz, 1H), 7.63-7.70 (m, 2H), 7.99 (m, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 2.770 min.), MS m/z 688 (MH<+>).
Primer 354: Izrada Jedinjenja 354.
Jedinjenje 354 je pripremljeno sledeći Šemu iz Primera 347 osim što je umesto Intermedijera 6 iz Primera 346 upotrebljen Intermedijer 9 iz Primera 352, a umesto 3-tiofenborne kiseline u Koraku 1, upotrebljena je fenil borna kiselina.
Korak 1:
U rastvor Intermedijera 9 (20mg, 0.0423mmol) u DMF (1mL) dodati su fenil borna kiselina (6.7mg, 0.0688mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (2.4mg, 0.00212mmol) i Cs2C03(41 mg, 0.127mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 110°C preko noći. Zatim je filtrirana, isprana metanolom. Filtrat je ukoncentrisan i prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto ulje, kao proizvod (12mg, 49% prinos).
LC-MS (retenciono vreme: 2.733 min.), MS m/z 470 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor 1-(2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(6-fenil-piridin-2-iloksimetil)-pirolid karboksilne kiseline (12mg, 0.0206mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1R.2S) (1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (8.2mg, 0.0308mmol), DIEA (0.018mL, 0.1028mmol) i kuplujući reagens HOBt (4.7mg, 0.0308mmol) i HBTU (11.7mg, 0.0308mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobila bela čvrsta masa kao TFA so (Jedinjenje 354) (1.5mg, 9% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 1.00-1.07 (m, 11H), 1.20 (m, 2H), 1.36 (m, 1H), 1.85 (m, 1H), 2.09 (m, 1H), 2.17-2.25 (m, 2H), 2.87-3.00 (m, 2H), 3.52 (s, 3H), 3.84-4.00 (m, 2H), 4.33-4.44 (m, 4H), 5.11 (dd,J=10.27, 1.71 Hz, 1H), 5.28 (d,J=17.12, 1.22 Hz, 1H), 5.70 (m, 1H), 6.71 (d,J= 8.31 Hz, 1H), 6.78 (m, 1H), 7.34-7.44 (m, 3H), 7.74 (m, 1H), 7.95 (m, 1H), 8.01 (d,J =8.31 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 3.553 min.), MS m/z 682 (MH<+>).
Primer 355: Izrada Jedinjenja 355.
Jedinjenje 354 je pripremljeno sledeći Šemu iz Primera 347 osim što je umesto Intermedijera 6 iz Primera 346 upotrebljen Intermedijer 9 iz Primera 352 i umesto 3-tiofenborne kiseline, upotrebljena je 3-furan borna kiselina u Koraku 1.
Korak 1:
U rastvor Intermedijera 9 (20mg, 0.0423mmol) u DMF (1ml_), dodati su 3-furan borna kiselina (6.2mg, 0.055mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (2.4mg, 0.002115mmol) i 2M rastvor Na2C03(0.064mL, 0.127mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 110°C tokom 2 dana. Zatim je filtrirana, isprana metanolom. Filtrat je ukoncentrisan i prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo žućkasto ulje, kao proizvod (7.0mg, 29% prinos).
Korak 2:
U rastvor gornje karboksilne kiseline (6.0mg, 0.0109mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1 R,2S) (1 -ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (4.4mg, 0.0163mmol), DIEA (0.0095mL, 0.0544mmol) i kuplujući reagens HOBt (2.5mg, 0.0163mmol) i HBTU (6.2mg, 0.0163mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobio žućkasti film kao TFA so (Jedinjenje 355) (1.5mg, 18% prinos).
<1>H NMR (CDgOD, 400MHz) 8 0.98-1.07 (m, 11H), 1.20 (m, 2H), 1.35 (dd,J=9.54, 5.87 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.07 Hz, 5.62 Hz, 1H), 2.06 (m, 1H), 2.15-2.25 (m, 2H), 2.85-2.98 (m, 2H), 3.55 (s, 3H), 3.89 (m, 1H), 3.95 (m, 1H), 4.28-4.42 (m, 4H), 5.11 (dd,J= 10.27, 1.71 Hz, 1H), 5.28 (dd,J =17.12, 1.22 Hz, 1H), 5.69 (m, 1H), 6.63 (d,J =8.07 Hz, 1H), 6.90 (m, 1H), 7.16 (d,J =7.33 Hz, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.63 (m, 1H), 8.08 (s, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 3.340 min.), MS m/z 672 (MH<+>).
Primer 356: Izrada Jedinjenja 356.
Jedinjenje 356 je pripremljeno sledeći Šemu iz Primera 350 s izuzetkom što je umesto Intermedijera 8 iz Primera 348 upotrebljen Intermedijer 9 iz Primera 352 u Koraku 1.
Korak 1:
U rastvor Intermedijera 9 (20mg, 0.0423mmol) u DMF (2mL), dodati su 2-tiofenborna kiselina (7.0mg, 0.055mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (2.4mg, 0.00212mmol) i barijum hidroksid (40mg, 0.127mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 150°C u Smith mikrotalasnom reaktoru tokom 30 min. Zatim je filtrirana, isprana metanolom. Filtrat je ukoncentrisan i prečišćen prep-HPLC da bi se dobilo smeđkasto ulje, kao proizvod (13.0mg, 52% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 1.03 (s, 9H), 2.18-2.25 (m, 2H), 2.93 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.83 (m, 1H), 3.98 (m, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.38 (m, 2H), 4.58 (dd,J =8.05, 5.14 Hz, 1H), 6.63 (d,J =8.07 Hz, 1H), 7.07 (dd,J= 4.89, 3.67 Hz, 1H), 7.33 (d,J= 7.34 Hz, 1H), 7.42 (d,J =5.14 Hz, 1H), 7.60-7.66 (m, 2H);
LC-MS (retenciono vreme: 3.393 min.), MS m/z 476 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor 1-(2-metoksikarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(6-tiofen-2-il-piridin-2-iloksimetil)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (11.5mg, 0.0195mmol) u CH3CN-u (5mL) su dodati hidrohlorid (1R,2S) (1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (7.8mg, 0.0293 mmol), DIEA (0.017mL, 0.0975mmol) i kuplujući reagens HOBt (4.5mg, 0.0293mmol) i HBTU (11.1 mg, 0.0293mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani. Zatim su prečišćeni pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobila zatvoreno-bela čvrsta masa, kao TFA so (Jedinjenje 356) (8.5mg, 54% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 5 0.99-1.06 (m, 11H), 1.21 (m, 2H), 1.36 (dd,J =9.54, 5.38 Hz, 1H), 1.86 (dd,J =8.07 Hz, 5.62 Hz, 1H), 2.06 (m, 1H), 2.15-2.25 (m, 2H), 2.87-2.99 (m, 2H), 3.54 (s, 3H), 3.89 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 4.30-4.44 (m, 4H), 5.11 (dd,J= 10.51, 1.71 Hz, 1H), 5.28 (dd,J =17.11, 1.22 Hz, 1H), 5.70 (m, 1H), 6.62 (d,J =8.07 Hz, 1H), 7.07 (dd,J =4.89, 3.66 Hz, 1H), 7.33 (d,J =7.59 Hz, 1H), 7.42 (d,J =4.89 Hz, 1H), 7.60-7.66 (m, 2H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.967 min.), MS m/z 688 (MH<+>).
Primer 357: Izrada Jedinjenja 357.
Korak 1:
U rastvor (2S,4fl) Fmoc-4-amino-1-boc-pirolidin-2-karboksilne kiseline (400 mg, 0.884mmol) u acetonitrilu (15ml_) dodato je pet kapi pirolidina. Reakciona smeša je mešana na rt tokom 3 h. Zatim je ukoncentrisana i stavljena na visoki vakuum, da bi se dobila sirova 4-amino-1-boc-pirolidin-2-karboksilna kiselina. U drugoj tikvici okruglog dna mešani su, pod azotom, rastvor Pd2dba3(40mg, 5% mol) i racemski BINAP (56mg, 10% mol) u toluenu, oslobođenom gasa (8mL), na rt tokom 1 h. Zatim su dodati 1-hloroizohinolin (216mg, 1.326mmol) i natrijum t-butoksid (340 mg, 3.536 mmol), a reakciona smeša je mešana tokom 30 minuta. Zatim je dodata 4-amino-1 -boc-piroiidin-2-karboksilna kiselina, a reakciona smeša je zagrevana pod refluksom tokom 1 h. Dodata je voda da bi se ugasila reakcija, a vodeni sloj je izdvojen i filtriran kroz filter papir. Zatim je ukoncentrisan i prečišćen prep HPLC-om, kako bi se dobio kuplovani proizvod kao TFA so.
(165mg, 40% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 6 1.44 (m, 9H), 2.51-2.74 (m, 2H), 3.64 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 4.64 (m, 1H), 7.30 (d,J =6.85 Hz, 1H), 7.58 (d,J= 6.85 Hz, 1H), 7.79 (m, 1H), 7.91-7.99 (m, 2H), 8.56 (d,J =8.56 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 1.707 min.), MS m/z 358 (MH<+>).
Korak 2:
U rastvor 1-terc-butil estra 4-(izohinolin-1-ilamino)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (115mg, 0.244mmol) u CH3CN-u (10mL) su dodati hidrohlorid (1R,2S) (1-ciklopropansulfonil-aminokarbonil-2-vinil-ciklo-propil)-karbaminske kiseline (97mg, 0.366mmol), DIEA (0.255mL, 1.464mmol) i kuplujući reagens HOBt (56mg, 0.366mmol) i HBTU (139mg, 0.366mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo žuto ulje. Prečišćeni su pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobila žućkasta čvrsta masa, kao TFA so (112mg, 67% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) § 1.05 (m, 2H), 1.20 (m, 2H), 1.40-1.48 (m, 1H), 1.87 (dd,J= 8.19 Hz, 5.50 Hz, 1H), 2.23 (m, 1H), 2.39 (m, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.65 (m, 1H), 4.08 (m, 1H), 4.33 (t,J =7.09 Hz, 1H), 4.69 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.27 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.12 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 7.31 (d,J =6.85 Hz, 1H), 7.60 (d,J =7.09 Hz, 1H), 7.80 (m, 1H), 7.93-8.00 (m, 2H), 8.56 (d,J =8.19 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 2.023 min.), MS m/z 570 (MH<+>).
Korak 3:
Terc-butil estar 2-(1 -ciklopropansulfonilaminokarbonil-2-vinilciklopropil-karbarnoil)-4-(izohinolin-1 - ilamino)-pirolidin-1-karboksilne kiseline (31 mg, 0.0453mmol) je rastvoren u 4N HCI u dioksanu (1.5 mL) i mešan je na rt tokom 2 h. Uparavanjem rastvarača je dobijeno žućkasto ulje kao bis hlorovodonična so. U rastvor bis hlorovodonične soli u CH3CN-u (5mL) su dodati N-Boc-L-t-leucin (11.5mg, 0.0498mmol), DIEA (0.047mL, 0.272mmol) i kuplujući reagens HOBt (10.4mg, 0.068mmol) i HBTU (25.8mg, 0.068mmol). Rastvor je mešan na rt preko noći. Zatim je ukoncentrisan, ispran vodom i ekstrahovan etil acetatom dva puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo žućkasto ulje. Prečišćeni su pomoću kolone prep-HPLC da bi se dobila zatvoreno-bela čvrsta masa, kao konačni proizvod (Jedinjenje 357) (9mg, 29% prinos).
<1>H NMR (CD3OD, 400MHz) 6 0.98 (m, 2H), 1.05 (s, 9H), 1.20 (m, 2H), 1.36-1.43 (m, 10H), 1.84 (m, 1H), 2.10-2.30 (m, 2H), 2.52 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 4.17-4.27 (m, 2H), 4.47 (m, 1H), 4.79 (m, 1H), 5.07 (d,J =9.29 Hz, 1H), 5.24 (d,J =16.87 Hz, 1H), 5.72 (m, 1H), 6.62 (m, 1H), 6.98 (d,J =6.11 Hz, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.62 (m, 1H), 7.69 (d,J= 8.07 Hz, 1H), 7.84 (d,J =5.87 Hz, 1H), 8.20 (d,J =8.56 Hz, 1H).
LC-MS (retenciono vreme: 2.043 min.), MS m/z 683 (MH<+>).
Deo H:
LC-MS uslovi za deo H
Kolone: (Postupak A) -YMC ODS S7 C18 3.0x50 mm
(Postupak B) -YMC ODS-A S7 C18 3.0x50 mm
(Postupak C) -YMC S7 C18 3.0x50 mm
(Postupak D) -YMC Xterra ODS S7 3.0x50 mm
(Postupak E) -YMC Xterra ODS S7 3.0x50 mm
(Postupak F) -YMC ODS-A S7 C18 3.0x50 mm
(Postupak H) -Xterra S7 3.0x50 mm
(Postupak I) -Xterra S7 C18 3.0x50 mm
(Postupak G) -YMC C18 S5 4.6x50 mm
(Postupak J) -Xterra ODS S7 3.0x50 mm
(Postupak K) -YMC ODS-A S7 C18 3.0x50 mm
Gradijent: 100% rastvarač A / 0% rastvarač B do 0% rastvarač A / 100% rastvarač B Gradijent vreme: 2 min. (A, B, D, F, G, H, I); 8 min (C, E); 4 min (J); 3 min (K) Vreme zadržavanja: 1 min (A,B,D,F,G,H,I,J,K); 2 min (C,E)
Brzina protoka: 5 mL/min (A,B,C,D,E,F,G)
Brzina protoka 4 mL/min (J,K)
Talasna dužina detektora: 220 nm
Rastvarač A: 10% MeOH / 90% H20 / 0.1% TFA
Rastvarač B: 10% H20 / 90% MeOH / 0.1% TFA
Primer 370: Izrada Jedinjenja 370.
Korak 1:
Rastvor hidrohlorida etil estra (1R,2S)/(1S,2R)-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline (2.54g, 12mmol) u CH3CN (70mL) je obrađen rastvorom diizopropiletilamina (9.5mL, 67mmol), [(4R)-(2-metoksikarbonil-7-metoksilhinolin-4-okso)-S-prolin] (5.9 g, 13.2 mmol) i TBTU (3.89 g, 12.21 mmol) u CH3CN (50 mL). Reakciona smeša je mešana tokom 14 h i ukoncentrisana. Ostatak, rastvoren u EtOAc ponovljeno je ispran sa NaHC03(vod.) i slanim rastvorom, osušen je (MgS04) i ukoncentrisan. Ostatak je prečišćen preko Biotage 65M kolone (EtOAc;heksan: 45-100%), da bi se dobilo 2.0 g (52%) stereo izomera etil estra (Boc-P2[(4f?)-(2-metoksikarbonii-7-metoksilhinolin-4-okso)-S-prolin]-P1 (1 R,2S vinil acca) kiseline sa visokim Rf, u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1.24 (t,J= 7.02 Hz, 3H), 1.38 (m, 11H), 1.76 (m, 1H), 2.21 (m, 1H), 2.45 (m, 1H), 2.71 (m, 1H), 3.92 (m, 2H), 3.96 (s, 3H)m 4.03 (s, 3H), 4.16 (q,J =7.22 Hz, 2H), 4.42 (m, 1H), 5.10 (m, 1H), 5.30 (m, 1H), 5.44 (s, 1H), 5.77 (m, 1H), 7.27 (d,J =9.16 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 8.05 (s, 1H).
Korak 2:
Rastvor proizvoda sa visokim Rf (3.16g, 5.40mmol) iz Koraka 1, Primera 370, {Boc-P2[(4/?)-(2-metoksikarbonil-7-metoksilhinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1R,2S vinil acca)COOEt}, na 0°C, rastvoren je u MeOH/THF (1/1, 13.2mL) je tretiran vodenim 1.0N NaOH (5.5mL, 5.5mmol), mešan tokom 1 h, neutralisan dodatkom AcOH. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Ostatak je ponovo rastvoren u THF/CH2CI2(1/1, 150mL), osušen (MgS04) i ukoncentrisan in vacuo kako bi se obezbedio proizvod koji je direktno korišćen u sledećem koraku: LC-MS (retenciono vreme: 1.53 Postupak D), MS m/z 570 (M<+>+1).
Korak 3:
U rastvor proizvoda (uzeto kao 5.4 mmol) iz koraka 2 primera 370, na 0°C rastvorenog u THF (35 mL), dodat je rastvor sveže pripremljenog CH2N2(30 mmol) u Et20 (80 mL). Reakciona smeša je mešana na temeraturi tokom 0.5 h i mešana je na rt tokom 18.5 h. Posle puštanja azota u reakcionu smešu tokom 1 h, rastvor je uklonjen in vacuo. Ostatak je ponovo rastvoren u EtOAc (1 L) i ispran zasićenim NaHC03(vod.) (2x200 mL) i slanim rastvorom (100 mL) i osušen (MgSOJ. Rastvarač je odstranjen in vacuo kako bi se dobilo 3.10 g proizvoda (97% dva koraka): LC-MS (retenciono vreme: 3.06, Postupak J), MS m/z 594 (M<+>+1).
Korak 4:
U rastvor proizvoda (3.03g, 5.10mmol) iz Koraka 3, Primera 370, {Boc-P2[(4F?)-(2-diazoacetil-7-metoksilhinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1R,2S vinil acca)COOEt}, na 0°C, rastvorenom u THF (110mL) dodato je 2mL 48% HBr. Smeša je mešana tokom 1 h i raspodeljena između EtOAc (500mL) i zasićenog NaHC03(vod.) (100mL). EtOAc sloj je izdvojen i osušen (MgSOJ. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio proizvod (3.12g, 95%):
LC-MS (retenciono vreme: 1.56, Postupak D), MSm/ z648 (M<+>+1), MSm/ z646 (M -1).
Korak 5:
Proizvod (1.0g, 1.54mmol) iz Koraka 4, Primera 370, {Boc-P2[(4f?)-(2-bromoacetil-7-metoksilhinolin-4-okso)-S-prolin]-P1 (1 R,2S vinil acca) COOEt} je obrađen izopropiltioureom (0.365g, 3.09mmol) u izopropilnom alkoholu (57mL, tokom 2 h, a zatim je uklonjen rastvarač. Ostatak, rastvoren u vodenoj 1.0N HCI (30mL) i EtOAc (200mL) je podešen na pH 7 dodatkom 1.0N NaOH (vod.). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2x100mL), a sjedinjeni ekstrakt je osušen (MgS04) i ukoncentrisan. Ostatak je prečišćen preko Biotage 40+M kolone (EtOAc-heksani: 30- 100%) da bi se dobilo 870mg proizvoda (84%) spremnog za sledeći korak.
Korak 6:
Proizvod (0.250g, 0.375mmol) iz Koraka 5, Primera 370, {Boc-P2[(4tf)-(2-(2-izopropilaminotiazol-4-il)-7-metoksilhinolin-4-okso)-S-prolin]-P1 (1 R,2S vinil acca) COOEt} je obrađen sa 4N HCI/dioksanom (2.5mL, 10mmol) tokom 2.5 h i ukoncentrisan je in vacuo. Ostatku je dodat N-metilmorfolin (0.206mL, 1.875mmol) u DMF (3mL), N-boc-L-ferc-leucin (0.117g, 0.506mmol) i HATU (0.192g, 0.506mmol). Smeša je mešana preko noći i raspodeljena je između EtOAc i pufera pH 4.0. EtOAc sloj je ispran vodom i sa NaHC03(vod.), osušen (MgS04) i ukoncentrisan. Ostatak je prečišćen preko Biotage 40M kolone (MeOH-CH2CI2: 0-8%) da bi se dobilo 0.289g proizvoda (99%).
LC-MS (retenciono vreme: 2.53, Postupak K), MSm/ z779 (M<+>+1).
Korak 7:
U suspenziju proizvoda iz Koraka 6 (274mg, 0.352mmol) iz Primera 370, {BOCNH-P3(L-f-BuGly)-{[2-(2-izopropilaminotiazol-4-il)-7-metoksilhinolin-4-okso]-S-prolin}-P1(1R,2S vinil acca)-COOEt} u THF (10.6 mL), CH3OH (2.6 mL) i H20 (5.3 mL) je dodat LiOH (0.068 g, 2.86 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 24 h, pH je doteran do 6, a organski rastvarači su uklonjeni in vacuo. Vodeni ostatak je zakiseljen do pH 4 i ekstrahovan je ponovljeno sa CH2CI2. Sakupljeni organski rastvarač je osušen (MgS04) i ukoncentrisan in vacuo, da bi se dobilo 255 mg željenog proizvoda (95%):
LC-MS (retenciono vreme: 2.58, Postupak K), MSm/ z751 (M<+>+1).
Korak 8:
Rastvor CDI (0.024 g, 0.15 mmol) i proizvoda iz Koraka 7 Primera 370 (0.0683, 0.09 mmol) {BOCNH-P3(/_-f-BuGly)-{[2-(2-izopropilaminotiazol-4-il)-7-metoksilhinolin-4-okso]-S-prolin}-P1(1R,2S vinil acca)-COOH} u THF (2 mL) su podvrgnuti refluksu tokom 60 minuta i ostavljeni da se ohlade do rt. Dodat je ciklopropansulfonamid (0.022 g, 0.18 mmol), a zatim je usledilo dodavanje čistog DBU (0.027 mL, 0.18 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći i prerađena razblaživanjem sa EtOAc i ispran sa puferom pH 4.0, osušena (MgSOJ i ukoncentrisana. Ostatak je prečišćen ponovljenim prečišćavanjem pomoću prepaprativne HPLC (0-100% rastvarač B) i preko 1000 (iM preparativne TLC ploče od Analtecha (20x40 cM) kako bi se dobilo 0.0032 g (4%) željenog proizvoda (Jedinjenje 370) u vidu bledo žute pene: LC-MS (retenciono vreme: 1.71, postupak I) MSm/ z854 (M<+>+1).
Korak 1:
U suspenziju /V-Boc-c/s-/_-4-hidroksiproiln metil estra (10g, 40.7mmol) i 7-hlorohinolin-4-ol (8.73g, 49.0mmol) u THF-u (200ml_), ohlađenoj na 0°C je dodat PPh3(12.82g, 48.9mmol) i DIAD (8.80g, 42.13mmol). Smeša je ostavljena da se polako, preko noći, ugreje do rt i je mešana u ukupnom trajanju od 30 h. Smeša je rastvorena u EtOAc (800mL), isprana sa 1N vodenom HCI, 5%-tnim vodenim K2C03(3x100mL), slanim rastvorom (2x100ml_) i, osušena je (MgS04) i ukoncentrisana. Ostatak je prečišćen nekoliko puta preko Biotage 65M (MeOH-CH2CI2: 0-10%) da bi se dobilo kumulativnih 10.57g (68%) željenog proizvoda u vidu stakla:<1>H NMR (CDCI3) § 1.40 (s, 9H), 2.33-2.42 (m, 1H), 2.61-2.72 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.91 (m, 2H), 4.45-4.59 (m, 1H), 5.13 (m, 1H), 6.61-6.64 (m, 1H), 7.41 (dd,J =9, 2 Hz, 1H), 7.98 (d,J =2 Hz, 1H), 8.03 (d,J= 9 Hz, 1H), 8.67-8.71 (m, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.39, postupak D), MS m/e 407 (M<+>+1).
Korak 2:
U rastvor proizvoda (10.57g, 26.0mmol) iz Koraka 1 Primera 371 {BOC-/V-P2[(4fl)-(7-hlorohinolin-4-okso)prolin metil estar} rastvorenog u MeOH (800ml_), ohlađenom na 0°C, dodat je 1N vodeni rastvor NaOH (44.5ml_, 44.5mmol). Posle 6 h, smeša je zagrejana do rt, mešana preko noći i, pH je podešen na pH 7 upotrebom 1.0N vodene HCI. Rastvor je ukoncentrisan sve dok nije ostao vodeni sloj, pH je podešen na 4 upotrebom 6N vodene HCI i mešavina je ponavljanjem raspodeljena sa EtOAc (3x500ml_). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni (MgS04) i ukoncentrisani da bi se dobilo 10.16g (100%) bele čvrste materije.
<1>H NMR (DMSO-d6) 5 1.32, 1.34 (dve s (rotameri) 9H), 2.31-2.40 (m, 1H), 2.58-2.69 (m, 1H), 3.65-3.81 (m, 2H), 4.33-4.40 (m, 1H), 5.34 (m, 1H), 7.10-7.11 (m, 1H), 7.57 (d,J =9 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 8.09-8.14 (m, 1H), 8.75 (d,J= 5 Hz, 1H), 12.88 (brs, 1H).<13>C NMR (DMSO-d6) 5 27.82,, 35.84, 51.52, 57.75, 76.03, 79.33, 102.95, 119.54, 123.86, 126.34, 127.24, 134.49, 149.32, 152.88, 153.25, 159.08, 173.74. LC-MS (retenciono vreme: 1.48, postupak D), MS m/e 393 (M<+>+1).
Korak 3:
U rastvor proizvoda (5.11g, 13mmol) iz Koraka 2 Primera 371 {Boc-(4R)-(7-hlorohinolin-4-okso) prolin}, HCI so (3.48g, 18.2mmol) vinil acca (postoji kao 1:1 mešavina dijastereoizomera (1fl,2S/1 S,2fl gde je ciklopropil karboksietil grupa syn prema vinilnom delu) i NMM (7.1 mL, 65 mmol) u DMF-u (30mL) je dodat HATU (6.92g, 18.2mmol). Mešavina je mešana tokom 3 dana. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (180 mL) i raspodeljena je sa puferom pH 4.0 (3x100mL). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim NaHC03(2x50mL), vodom (2x50mL) i slanim rastvorom (2x50mL). Organski rastvor je osušen (MgSOJ i ukoncentrisan. Ostatak je prečišćen preko Biotage 40M kolone (EtOAc-heksani: 50% do 100%) da bi se dobilo 2.88 g proizvoda kao dijastereomerne mešavine. Ova mešavina je delimično razdvojena upotrebom Biotage 65M kolone (MeOH-EtOAc: 0% do 9%) da bi se dobio BOC-NH-P2[(4f?)-(7-hlorohinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1R,2S vinil acca P1 deo)-COOEt kao inicijalno eluirani izomer sa visokim Rf (1.20g, 17.4%).
<1>H NMR (CDCI3/metanol-d4) 5 1.16 (t,J = 7Hz, 3H), 1.35 (s, 9H), 1.37-1.43 (m, 1H), 1.76-1.84 (m, 1H), 2.06-2.11 (m, 1H), 2.35-2.45 (m, 1H), 2.63 (m, 1H), 3.72-3.93 (m, 2H), 4.02-4.15 (m, 1H), 4.33-4.40 (m, 1H), 5.06 (d,J =9 Hz, 1H), 5.16 (m, 1H), 5.24 (d,J= 17 Hz, 1H), 5.63-5.70 (m, 1H), 6.74 (m, 1H), 7.39 (dd,J =9, 2 Hz, 1H), 7.74-7.78 (m, 1H), 7.89 (d,J =2 Hz, 1H), 7.97 (d,J =9 Hz, 1H), 8.60 (d,J= 5 Hz, 1H).<1>H NMR (metanol-d4, 60/40 rotameri) 8 1.24 (t,J =7 Hz, 3H), 1.39, 1.43 (2s, 9H, odnos 4:6), 1.71-1.74 (m, 0.4H), 1.78-1.81 (m, 0.6H), 2.18-2.23
(m, 1H), 2.65-2.69 (m, 0.4H), 2.71-2.76 (m, 0.6H), 3.88-3.96 (m, 2H), 4.11-4.18 (m, 2H), 4.39-4.45 (m, 1H), 5.09-5.13 (m, 1H), 5.28-5.33 (m, 1H), 5.37 (m, 1H), 5.73-5.81 (m, 1H), 7.05 (d,J =5 Hz, 1H), 7.53 (d,J =8.9 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 8.12 (d,J =8.9 Hz, 1H), 8.70 (d,J =5 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.54, postupak A) MSm/ z530 (M<+>+1). Ostatak materijala (~1.66g, 24%) su bile pomešane frakcije sa pretežno_preovladavajućim izomerom niže Rf.
Korak 4:
Proizvod (0.65g, 1.22mmol) iz koraka 3, Primera 371 {BOC-P2[(4R)-(7-hlorohinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1fl,2S vinilacca-C02Et} je rastvoren u 4N HCI/dioksanu (4.5mL, 18mmol) i mešan je u toku 1 h na rt. Reakciona smeša je ukoncentrisana i sirovi proizvod je direktno korišćen u sledećem koraku: LC-MS (retenciono vreme: 0.94, postupak A) LC-MSm/ z430 (M<+>+1).
Korak 5:
U suspenziju proizvoda 1(.22mmol) iz koraka 4, Primera 371 {Bis HCI so NH2-P2[(4fl)-(7-hlorohinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1ft,2S-vinil acca)-COOEt), N-BOC-Z_-ferc-leucin (BOC MBuGlv)
(0.34g, 1.47mmol), DIPEA (1.0mL, 5.74mmol), HOBT.H20 (0.22g, 1.47mmol) u CH2CI2(15mL) je
dodat HBTU (0.56g, 1.47mmol) na rt. Reakciona smeša je mešana preko noći, razblažena sa CH2CI2(50ml_), isprana sa puferom pH 4.0 (2x20ml_), zasićenim vodenim NaHC03(50mL), slanim rastvorom (50mL), osušena je (MgS04) i ukoncentrisana. Ostatak je prečišćen preko Biotage 40M kolone (EtOAc-heksani: 15% do 60%) da bi se proizvelo 607mg (77%) proizvoda u vidu pene.<1>H NMR (CDCI3/metanol-d4) 5 1.00 (s, 9H), 1.19 (t,J = 7Hz, 1H), 1.30 (s, 9H), 1.38 (m, 1H), 1.78-1.83 (m, 1H), 2.01-2.46 (m, 2H), 2.73-2.82 (m, 1H), 3.96-4.03 (m, 1H), 4.04 (d,J =10 Hz, 1H), 4.11 (q,J =7 Hz, 2H), 4.42 (d,J =12 Hz, 1H), 4.68-4.73 (m, 1H), 5.09-5.13 (m, 1H), 5.23-5.31 (m, 2H), 5.67-5.79 (m, 1H), 6.78 (d,J =9 Hz, 1H), 7.38 (d,J =9 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 8.08 (d,J =9 Hz, 1H), 8.68 (d, J = 5 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.64, postupak A), MSm/ z 643(M<+>+1).
Korak 6:
U suspenziju proizvoda (207mg, 0.32mmol) iz Koraka 5, Primera 371 {BOCNHP3( Lt BuGly)-P2[(4R)-(7-hlorohinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1fl,2S-vinil Acca)-C02Et}, u THF-u (14mL), CH3OH (2mL) i H20 (8mL) je dodat LiOH (62mg, 2.60mmol). Reakciona smeša je mešana tokom jednog dana, podešen je pH do neutralnog i ukoncentrisana jein vacuosve dok nije preostao samo vodeni sloj. Nastali vodeni ostatak je zakiseljen do pH 4.0 dodatkom 1.0N vodene HCI, a zatim je zasićen čvrstim NaCI-om. Ova vodena mešavina je ponavljano ekstrahovana sa EtOAc (3x60mL), a sjedinjeni organski rastvarač je osušen (MgS04) i ukoncentrisanain vacuoda bi se proizvelo 107mg (54%) proizvoda {BOCNH P3(MBuGly)-P2[(4R)-(7-hlorohinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1/<:>?,2S-vinil acca)-C02H} u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (CDCI3) 5 1.06 (s, 9H), 1.23 (2s, 9H), 1.31-1.43 (m, 1H), 1.63-1.70 (m, 1H), 1.85-1.89 (m, 1H), 2.19 (m, 1H), 2.65-2.78 (m, 1H), 4.03-4.10 (m, 1H), 4.18-4.21 (m, 1H), 4.55-4.62 (m, 1H), 5.03-5.12 (m, 1H), 5.23-5.31 (m, 1H), 5.50 (m, 1H), 5.88-5.95 (m, 1H), 7.12 (m, 1H), 7.47-7.50 (m, 1H), 7.96 (m, 1H), 8.26 (d,J =9 Hz, 1H), 8.75 (d, J = 5 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.46, postupak A), MSm/ z615 (M<+>+1).
Korak 7:
U rastvor tripeptidne kiseline (0.0453g, 0.074mmol) iz Koraka 6, Primera 371 {BOCNH P3(L-tBuGly)-P2[(4R)-(7-hlorohinolin-4-okso)-S-prolin]-P1 (1fl,2S-vinil acca)-C02H} u THF-u (4mL) je dodat CDI (17mg, 0.10 mmol), a nastali rastvor je podvrgnut refluksu tokom 45 minuta i ostavljen da se ohladi do rt. Iz jednog dela je dodat ciklopropilsulfonamid (0.013g, O.IOmmol) pre nego što je dodat čisti DBU (0.015mL, 0.10 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 18 h, razblažena sa EtOAc (200mL), isprana sa puferom pH 4.0 (3x30mL), vodom (2x30mL) i slanim rastvorom (30mL), osušena je (MgS04) i prečišćena, korišćenjem jedne 20x40 cM 1000 Analtech PTLC ploče (MeOH-CH2CI2: 0-2%) da bi se dobio željeni proizvod (Jedinjenje 371) u vidu pene (0.040g, 76%):<1>H NMR 5 0.95-1.23 (m, 4H), 1.03 (s, 9H), 1.19 (s, 9H), 1.40-1.43 (m, 1H), 1.85 (dd, J = 8, 5 Hz, 1H), 2.12-2.20 (m, 1H), 2.43 (m, 1H), 2.82 (m, 1H), 4.07-4.19 (m, 2H), 4.51-4.57 (m, 2H), 5.07 (d,J =10 Hz, 1H), 5.25 (d,J =17 Hz, 1H), 5.85 (m, 1H), 5.48 (s, 1H), 7.09 (d,J =5 Hz, 1H), 7.45 (d,J =9 Hz, 1H), 7.92 (m, 1H), 8.20 (d,J= 9 Hz, 1H), 8.72 (d,J =5 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.52, postupak B), MSm/ z718 (M<+>+1). HRMSm/ z(M+H)<+>izrač. za C41H51N5S09: 718.2677, nađeno 718.2674.
Primer 372: Izrada Jedinjenja 372.
Korak 1:
U rastvor L-ferc-leucina (2g, 15.25mmol) rastvorenog u CH3CN-u (50ml_) je dodat TMSCN (7.06mL, 56.41 mmol) i mešan je tokom 15 min. Reakciona mešavina je zagrevana do 75°C tokom 30 minuta. Reakcionoj smeši je dodat ciklopentil hloroformat (2.83g, 19.06mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 80°C preko noći i, ukoncentrisana in vacuo. Ostatak je obrađen sa MeOH (40mL), mešan je tokom 10 min i ukoncentrisan in vacuo. Ostatku je pH doteran do 8.5 i izvedena je ekstrakcija sa Et20 (2x200ml_). Vodeni sloj je zakiseljen do pH 3 i ekstrahovan sa CH2CI2(2x200mL). Sakupljeni ekstrakt je osušen (MgS04) i ukoncentrisan in vacuo. Ostatak je rekristalisan iz minimalne količine Et20/heksana kako bi se dobilo 3.48g proizvoda (94%):<1>H NMR (500 MHz, metanol-d4) 8 ppm 1.00 (s, 9H), 1.59 (m, 2H), 1.73 (m, 4H), 1.84 (dd,J =5.95, 3.20 Hz, 2H), 3.98 (s, 1H), 5.02 (m, 1H).
Korak 2:
Rastvoru proizvoda (530.1 mg, 1.04mmol) iz Koraka 4, Primera 371 {HCI so P2[(4fl)-7-hlorohinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1ff,2S vinil acca)COOEt, proizvoda (328mg, 1.35mmol) iz Koraka 1, Primera 372 {(L)-2-ciklopentil-oksikarbonilamino-3,3-dimetil-buterna kiselina}, HOBT (146mg, 1.08mmol) i diizopropiletilamina (0.755mL, 4.32mmol) u CH2CI2(7ml_) je dodat HBTU (512mg, 1.35mmol). Reakciona smeša je mešana tokom noći i raspodeljena je između CH2CI2i pufera pH 4.0. CH2CI2sloj je ispran vodom, zasićenim NaHC03(vod.), osušen (MgS04) i ukoncentrisan. Ostatak je prečišćen preko Biotage 40M kolone (EtOAc-heksani: 35-100%) da bi se dobilo 640mg proizvoda (92%):<1>H NMR (metanol-d4) 8 ppm 1.02 (s, 9H), 1.26 (m, 4H), 1.56 (m, 10H), 2.19 (q,J =8.75 Hz, 1H), 2.41 (m, 1H), 2.70 (dd,J =14.19, 8.09 Hz, 1H), 4.01 (dd,J =11.90, 3.05 Hz, 1H), 4.13 (m, 2H), 4.20 (s, 1H), 4.53 (m, 1H), 4.62 (m, 1H), 5.09 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.26 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.47 (m, 1H), 5.77 (m, 1H), 7.07 (d,J =5.49 Hz, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.94 (m, 1H), 8.20 (d,J =8.85 Hz, 1H), 8.72 (d,J =5.49 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.71, postupak B), MSm/ z655 (M<+>+1).
Korak 3:
Tripeptidna kiselina je pripremljena sledeći Korak 7, Šeme 2 iz Primera 370, izuzev što je ciklopentoksikarbonil-NH-P3 (L-ferc-BuGly)-P2[(4R)-7-hlorohinolin-4-okso)-S-prolin]-P1 (1R, 2Svinil acca)COOEt korišćen umesto proizvoda iz Koraka 6, Primera 370.
Modifikacija: upotrebljeno je 0.636g (0.97mmol) proizvoda iz Koraka 2 Primera 372 dobijeno je 0.424g (69% prinos).
Proizvod:
Podaci:<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1.02 (s, 9H), 1.57 (m, 11H), 2.14 (q,J =9.03 Hz, 1H), 2.46 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 4.02 (dd,J =11.89, 3.11 Hz, 1H), 4.19 (m, 1H), 4.50 (d,J =26.35 Hz, 1H), 4.64 (t,J =8.42 Hz, 1H), 5.04 (m, 1H), 5.24 (d,J =17.20 Hz, 1H), 5.44 (s, 1H), 5.87 (m, 1H), 7.05 (d,J =5.12 Hz, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.92 (m, 1H), 8.18 (d,J =8.78 Hz, 1H), 8.71 (d,J =5.49 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 2.32, postupak A), MSm/ z627 (M<+>+1).
Korak 4:
Rastvor CDI (0.021 g, 0.13mmol) i proizvoda iz Koraka 3, Primera 372 (0.058g, 0.09mmol)
{BOCNH-P3(/.-rerc-BuGly)-P2[(4fl)-7-hlorohinolin-4-okso)-S-<p>rolin]-P1(1R,2S vinil acca)-C02H} u THF-u (2mL) je podvrgnut refluksu tokom 40 min i ostavljen da se ohladi do rt. Ukupno 0.016g (0.013mmol) ciklopropan sulfonamida, posle čega sledi dodavanje rastvora čistog DBU (0.019mL, 0.13mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći, a zatim je razblažena sa EtOAc (100mL), isprana puferom pH 4.0 (2x), osušena (MgS04), ukoncentrisana preko tri 1000u. Mpreparativne TLC ploče od Analtech (20x40 cM, isprana sekvencijalno sa 50% do 0% do 2% MeOH u CH2CI2) kako bi se obezbedio proizvod (Jedinjenje 372) 27.3mg (40%):<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 0.94 (m, 2H), 1.02 (s, 9H), 1.14 (m, 1H), 1.49 (m, 11H), 1.86 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.49 (m, 1H), 2.68 (dd,J= 13.89, 7.48 Hz, 1H), 2.78 (m, 1H), 4.08 (m, 1H), 4.22 (s, 1H), 4.55 (m, 2H), 5.05 (d,J =10.07 Hz, 1H), 5.22 (d,J =17.09 Hz, 1H), 5.46 (m, 1H), 5.86 (m, 1H), 7.07 (d,J =5.19
Hz, 1H), 7.46 (d,J =8.55 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 8.18 (d,J= 8.85 Hz, 1H), 8.72 (d, J = 5.19 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.52, postupak I), MSm/ z 730(M<+>+1).
Primer 373: Izrada Jedinjenja 373.
Korak 1:
Rastvor 2-amino-4-metoksilacetofenona (4.45g, 26.94mmol), na 0°C rastvoren u CH2CI2(100mL), je obrađen sa ciklopropankarbonil hloridom (3.1mL, 33.68mmol), diizopropiletilaminom (19mL, 107.8mmol) i DMAP-om (0.780g, 6.4mmol). Reakciona smeša je preko noći mešana na rt i ukoncentrisana in vacuo. Ostatak, rastvoren u CH2CI2(500ml_) je ispran vodenom 1N HCI, vodom i NaHC03(vod.) i osušen (MgS04). Rastvarač je uklonjen in vacuo, a čvrsti ostatak je obrađen sa EtOAc/heksanima (1/1) da bi se dobio proizvod (5.35g, 85%):<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 0.94 (m, 4H), 1.69 (m,J =3.97 Hz, 1H), 2.60 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 6.69 (d,J =7.93 Hz, 1H), 7.98 (d,J =8.85 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H).
Korak 2:
Rastvor proizvoda (5.35g, 22.72mmol) iz Koraka 1, primera 373 {(2-acetil-5-metoksi-fenil)-amid ciklopropankarboksilne kiseline} i ferc-BuOK (5.45g, 48.6mmol) u rerc-butanolu (130g) je podvrgnut refluksu tokom 6 h. Reakciona smeša je ohlađena, izručena u ledeno hladni pufer i podešena na pH 7, filtrirana. Sakupljena čvrsta materija je rekristalisana iz MeOH/Et20, da bi se dobio proizvod (1g, 20%):<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 0.96 (m, 2H), 1.15 (m, 2H), 1.94 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 5.86 (m, 1H), 6.93 (m, 2H), 8.04 (d,J =8.85 Hz, 1H).
Korak 3:
Rastvoru N-Boc-Z.-3-hidroksiprolina (1.06g, 4.32mmol) i trifenilfosfina (2.27 g, 8.64mmol) rastvorenom na 0°C u THF-u (25mL) je dodat rastvor proizvoda (0.93g, 4.32mmol) iz Koraka 2, Primera 373 {2-ciklopropil-7-metoksi-hinolin-4-ol} i DEAD (1.50g, 8.64mmol) u THF-u (25ml_), tokom 30 min. Reakciona smeša je mešana tokom noći i ukoncentrisana. Ostatak je prečišćen dva puta pomoću Biotage 40+M kolone (EtOAc/heksani: 20-65%) da bi se dobilo 1.74g proizvoda (90%): LC-MS (retenciono vreme: 2.56, postupak J) MSm/ z443 (M<+>+1).
Korak 4:
Suspenziji (1.70g, 3.86mmol) proizvoda iz koraka 3, Primera 373 (Boc-(4R)-(2-ciklopropil-7-metoksi-hinolin-4-okso)-S-prolin metil estar} u THF-u (91 mL), CH3OH (18.2mL) i H20 (27mL) je dodat LiOH (0.73g, 30mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 16 h i doterana do pH 6, a organski rastvarač je odstranjen in vacuo. Ostatak je zakiseljen do pH 4 i ekstrahovan sa EtOAc (4x100mL). Sjedinjeni organski ekstrakt je osušen (MgS04) i ukoncentrisan in vacuo da bi se dobilo 1.64g proizvoda (100%):<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1.32 (m, 13H), 2.37 (m, 2H), 2.71 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 4.14 (m, 1H), 4.43 (m, 1H), 5.41 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 7.19 (m, 1H), 7.30 (m, 1H), 8.02 (dd,J= 12.63, 9.33 Hz, 1H).
Korak 5:
Proizvod (1.61g, 2.79mmol) iz Koraka 4, Primera 373 {Boc-P2{(4lf)-[2-ciklopropil-7-metoksilhinolin-4-okso]-S-prolin}-P1(1R,2S vinil Acca) COOEt} je rastvoren u HCI/dioksanu (15mL, 60mmol) i mešan je u toku 3 h na rt. Reakciona smeša je ukoncentrisana i podvrgnuta azeotropnom postupku sa suvim THF da bi se dobio proizvod (1.58g, 100%): LC-MS (retenciono vreme: 2.12, postupak K), MSm/ z566 (M<+>+1).
Korak 6:
U suspenziju proizvoda (1.58g, 2.79mmol) iz Koraka 5, Primera 373 {Bis HCI so P2 {(4F?)-[2-ciklopropil-7-metoksihinolin-4-okso]-S-prolin}-P1 (1R, 2Svinil Acca)COOEt}, diizopropiletilamina (1.65mL, 9.25mmol), N-Boc-L-ferc-leucina (0.775g, 3.35mmol), HOBT.H20 (0.515g, 3.36mmol) u CH2CI2(13 mL) je dodat HBTU (1.28g, 3.36mmol). Smeša je mešana tokom 14 h i raspodeljena između EtOAc i pufera pH 4.0. EtOAc sloj je osušen (MgS04) i ukoncentrisan. Ostatak je prečišćen preko Biotage 40+M kolone (EtOAc-heksani: 20% do 100%, a zatim, MeOH) i dalje prečišćen pomoću 20x40 cM 1000 Analtech PTLC ploče (MeOH-CH2CI22%) da bi se proizvelo 1.4g (63%) proizvoda:<1>H NMR (metanol-d4) 8 ppm 1.04 (s, 9H), 1.20 (m, 5H), 1.28 (m, 9H), 1.39 (m, 2H), 1.69 (m, 1H), 2.19 (m, 2H), 2.36 (m, 1H), 2.63 (dd,J =13.54, 7.68 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 4.08 (m, 4H), 4.19 (d,J =11.34 Hz, 1H), 4.47 (d,J =11.71 Hz, 1H), 4.56 (t,J =8.60 Hz, 1H), 5.08 (m, 1H), 5.24 (m, 1H), 5.39 (s, 1H), 5.78 (m, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.96 (dd,J =9.15, 2.20 Hz, 1H), 7.21 (d,J =2.56 Hz, 1H), 7.97 (d,J= 9.15 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 2.34, postupak K), MSm/ z679 (M<+>+1).
Korak 7:
U suspenziju proizvoda iz Koraka 6, Primera 373 (1.28g, 1.89mmol) {Boc-NHP3(L-rerc-BuGly)-P2[(4R)-(2-ciklopropil-7-metoksilhinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1lf,2S-vinil Acca)-COOEt u THF-u (93mL), CH3OH (23mL) i H20 (45mL) je dodat LiOH (0.491 g, 20.4mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 18.5 h, podešen je pH do 4, a organski rastvarač je uklonjen in vacuo. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (5x100ml_). Sjedinjeni organski rastvarač je osušen (MgS04) i ukoncentrisana in vacuo da bi se proizvelo 1.17g (97%) željenog proizvoda:<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1.04 (s, 9H), 1.24 (s, 9H), 1.27 (m, 3H), 1.42 (m, 2H), 1.68 (dd,J= 8.05, 5.12 Hz, 1H), 2.17 (m, 1H), 2.33 (m, 1H), 2.47 (m, 1H), 2.66 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 4.09 (m, 2H), 4.51 (d,J =11.71 Hz, 1H), 4.59 (t,J=8.60 Hz, 1H), 5.07 (m, 1H), 5.26 (m, 1H), 5.52 (s, 1H), 5.85 (m, 1H), 6.69 (s, 1H), 7.10 (dd,J= 9.15, 2.20 Hz, 1H), 7.27 (d,J =2.20 Hz, 1H), 8.10 (d,J= 9.15 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 2.21, postupak K), MSm/ z 651(M<+>+1).
Korak 8:
Rastvor CDI (0.058g, 0.344mmol) i proizvoda iz Koraka 7, Primera 373 (0.160g, 0.246mmol)
{Boc-NH-P3(L-ferc-BuGly)-P2[(4f?)-(2-ciklopropil-7-metoksilhinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1fl,2S-vinil
acca)-COOH} u THF-u (2mL) je podvrgnut refluksu tokom 60 minuta i ostavljen da se ohladi do rt. Dodat je ciklopropansulfonamid (0.041 g, 0.344mmol), a zatim je dodat čisti DBU (0.051 mL, 0.344mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 24 h i prerađena raspodeljivanjem između pufera pH 4.0 i EtOAc. Organski sloj je osušen (MgS04), ukoncentrisan i prečišćen preparativnom HPLC (0-100% rastvarača B) da bi se dobilo 0.086g (46%) proizvoda (Jedinjenje 373):<1>H NMR (trifluorosirćetna kiselina-D) 5 ppm 1.04 (s, 9H), 1.21 (m, 16H), 1.41 (m, 1H), 1.87 (dd,J-8.05, 5.49 Hz, 1H), 2.26 (m, 3H), 2.61 (dd, J = 12.99, 6.77 Hz, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.09 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.49 (m, 2H), 5.11 (d,J =11.71 Hz, 1H), 5.27 (d,J =17.20 Hz, 1H), 5.46 (s, 1H), 5.76 (m, 1H), 6.62 (m, 2H), 7.01 (dd,J =8.97, 2.01 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 2.56 Hz, 1H), 8.00 (d,J =8.78 Hz, 1H).
Primer 374. Izrada Jedinjenja 374.
Korak 1:
Rastvoru m-anizidina (58g, 471 mmol) u 800ml_ CH3CN su dodati Meldrumova kiselina (75g, 518mmol) i trimetilformijat (60g, 565mmol). Heterogena smeša je podvrgnuta refluksu u toku 2 h. Rastvarač je odstranjen in vacuo, dodat je MeOH (30ml_), a nastali talog je filtriran i ispran sa 10-15mL MeOH. Postupak dodavanja MeOH/filtracije je ponovljen na koncentrovanoj matičnoj tečnosti. Nastala sjedinjena čvrsta masa je osušena (~20tora, 45°C, preko noći) da bi se dobilo 117.6g (90%) intermedijera 5-[(3-metoksifenilamino)metilen]-2,2-dimetil-[1,3] dioksan-4,6-diona.
Korak 2:
Rastvoru Ph20 (500g), zagrejanom do 250°C je dodato 108.7g (392 mmol) 5-[(3-metoksifenil-amino)metilen]-2,2-dimetil-[l ,3-]dioksan-4,6-diona u delovima, tokom perioda od 30 minuta. Smeša je zagrevana tokom dodatnih 15 min, ohlađena je do rt i razblažena heksanima (800ml_), a nastala žitka masa je mešana tokom noći. Heksani su oddekantovani, a čvrsti ostatak je rastvoren u 600ml_ MeOH pod refluksom i ohlađen do rt, a nastala čvrsta masa je filtrirana i isprana minimalnom količinom CH2CI2. Usledio je analogni postupak rekristalizacije kako bi se dobilo ukupno 20.73g (30%) 7-metoksihinolin-4-ola, u vidu svetlosmeđe čvrste mase.<1>H NMR (metanol-d4) 5 3.87 (s, 3H), 6.23 (d,J= 7.3 Hz, 1H), 6.68 (d,J= 2.4 Hz, 1H), 6.96 (dd,J =9.0, 2.4 Hz, 1H), 8.11 (d,J =9 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 0.77, postupak D), MSm/ z176 (M<+>+1).
Korak 3:
U rastvor metil estra /V-Boc-c/s-/_-4-hidroksiproilna (12.24g, 49.8mmol) i PPh3(26.14g, 99.7mmol) u THF-u (200mL), ohlađenoj na 0°C, je dodat rastvor DEAD (17.36g, 99.7mmol) i 7-metoksihinolin-4-ol (8.73g, 49.8 mmol) u THF-u (700mL) tokom perioda od 45 min. Smeša je ostavljena da se polako, preko noći, ugreje do rt i ukoncentrisana je in vacuo. Ostatak je prečišćen preko Biotage 65M kolone (MeOH-EtOAc: 0-10%) da bi se dobilo 12.78g (64%) proizvoda u vidu bezbojnog stakla:<1>H NMR (CDCI3) 8 1.36 (s, 9H), 2.26-2.35 (m, 1H), 2.57-2.68 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.75-3.92 (m, 2H), 3.86, 3.87 (2s, rotameri) 3H), 4.41-4.53 (m, 1H), 5.09 (m, 1H), 6.52 (d,J =5.5 Hz, 1H), 7.06-7.09 (m, 1H), 7.24-7.26 (m, 1H), 7.94 (d,J =9.1 Hz, 1H), 8.50-8.56 (m, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.34, postupak D), MS m/e 403 (M<+>+1).
Korak 4:
U rastvor proizvoda (8.54g, 21.2mmol) iz Koraka 3, Primera 374 {BOC-/V-P2[(4f?)-(7-metoksihinolin-4-okso)prolin metil estar} u 600mL mešavine 5:1 THF/MeOH dodat je rastvor LiOH (4.0g, 167mmol) u 150mL vode. Smeša je mešana preko noći i, pH je podešen na pH 7 upotrebom 6N vodene HCI i rastvor je ukoncentrisan sve dok nije ostao vodeni sloj. Ostatku je pH je podešen na 4 upotrebom 1N vodene HCI i dodat je NaCI da bi se zasitila mešavina i ponavljanjem je raspodeljena sa EtOAc, a zatim THF, tako da je proizvod rastvorljiv u vodi. Sjedinjeni organski slojevi su osušeni (MgS04) i ukoncentrisani da bi se dobilo 8.18 g (99%) proizvoda u vidu bele čvrste materije.<1>H NMR (CDCI3-metanol-d4) 8 1.42, (s, 9H), 2.40-2.49 (m, 1H), 2.68-2.77 (m, 1H), 3.88 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 4.41-4.53 (m, 1H), 5.32 (m, 1H), 6.86-6.92 (m, 1H), 7.21 (dd,J= 9, 2 Hz, 1H), 7.30 (d,J= 2 Hz, 1H), 8.05-8.10 (m, 1H), 8.62 (d,J =6 Hz, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.20, postupak A), MSm/ z 389(M<+>+1).
Korak 5:
U rastvor proizvoda (4.50g, 11.60mmol) iz Koraka 4, Primera 374 {Boc-(4fl)-(7-metoksihinolin-4-okso)prolin}, (2.66g, 13.9mmol) HCI so vinil acca (postoji kao 1:1 mešavina dijastereoizomera
(1 fi,2S/1 S, 2Rgde je ciklopropil karboksietil grupa syn prema vinilnom delu) (10ml_, 57.4mmol) DIPEA i (2.13g, 13.9mmol) HOBT.H20 u 150ml_ CH2CI2je dodato 5.27g (13.9mmol) HBTU i mešavina je mešana preko noći. Rastvor je razblažen sa 200mL CH2CI2i raspodeljen je sa puferom pH 4.0 (2x50mL). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim NaHC03(2x50ml_), vodom (2x50ml_) i slanim rastvorom (2x50ml_). Organski rastvor je osušen (MgS04) i ukoncentrisan i prečišćen preko Biotage 65M kolone (eluiran sa 0-9% MeOH/EtOAc) da bi se dobio BOC-NH-P2[(4R)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1F?,2S vinil acca P1 deo)-COOEt, kao inicijalno eluirani izomer (2.21g, ukupno 36%), a zatim, 1.13g (19%) čistog izomera sa nižim Rf BOC-NH-P2[(4f?)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1S,2R vinil acca P1 deo)-C02Et. Takođe su dobijene izmešane farkcije.
Podaci za BOCN-P2[(4R)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1/?,2S-(vinil acca)-COOEt:<1>H NMR (CDCI3) 5 1.16 (t,J= 7 Hz, 3H), 1.35 (s, 9H), 1.37-1.47 (m, 1H), 1.74-1.88 (m, 1H), 2.04-2.13 (m, 1H), 2.32-2.46 (m, 1H), 2.58-2.69 (m, 1H), 3.76 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 4.02-4.13 (m, 2H), 4.30-4.44 (m, 1H), 5.05-5.19 (m, 2H), 5.24 (d,J =17 Hz, 1H), 5.63-5.71 (m, 1H), 6.61 (m, 1H), 7.07 (dd,J= 9, 2 Hz, 1H), 7.22 (d,J =2 Hz, 1H), 7.76-7.83 (m, 1H), 7.92 (d,J =9 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 5 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.38, postupak A) MSm/ z526 (M<+>+1).
Korak 6:
Ukupni proizvod (1.35g, 2.90mmol) iz koraka 5, Primera 374 {BOC-P2[(4/<I>f)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1f?,2Svinil acca)-COOEt} je rastvoren u 4N HCI/dioksanu (15mL, 60mmol) i mešan je u toku 2.5 h na rt. Reakciona smeša je ukoncentrisana in vacuo da bi se dobilo 1.3g
(100%) proizvoda u vidu žutosmeđe čvrste mase, koja je direktno korišćena u sledećem koraku.<1>H NMR (metanol-d4) 5 1.25 (t,J = 7Hz, 1H), 1.47-1.52 (m, 1H), 1.78 (dd,J =8, 5 Hz, 1H), 2.21-2.32 (m, 1H), 2.55-2.64 (m, 1H), 2.99 (dd,J= 15, 7 Hz, 1H), 3.96 (s, 2H), 4.06 (s, 3H), 4.14 (q,J = 7Hz, 2H), 4.69-4.75 (m, 1H), 5.13 (d,J =10 Hz, 1H), 5.33 (d, J = 17 Hz, 1H), 5.71-5.83 (m, 1H), 5.89 (m, 1H), 7.44 (m, 1H), 7.49-7.52 (m, 1H), 8.51-8.55 (m, 1H), 8.94-8.96 (m, 1H);<13>C NMR (metanol-d4) 8 14.62, 23.08, 30.89, 34.73, 36.97, 41.03, 52.42, 57.11, 60.17, 62.70, 81.13, 100.06, 103.07, 117.02, 118.53, 122.70, 126.86, 134.74, 143.15, 146.75, 166.62, 167.71, 169.37, 171.18. LC-MS (retenciono vreme: 0.94, postupak D), MSm/ z 426(M<+>+1).
Korak 7:
U suspenziju proizvoda (1.3g, 2.61 mmol) iz koraka 6, Primera 374 {Bis HCI so NH2-P2[(4ft)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1fl,2S-vinil acca)-COOEt}, N-BOC-L-ferc-leucin (BOC MBuGly)
(0.94g, 4.25mmol), NMM (1.7mL, 15.5mmol) u DMF-u (20mL) je dodat HATU (1.55g, 3.40 mmol) na rt. Reakciona smeša je mešana preko noći, razblažena sa 75% EtOAc-THF (300mL), isprana sa puferom pH 4.0 (2x50mL), zasićenim vodenim NaHC03(50mL), slanim rastvorom (50mL), osušena je (MgS04) i prečišćena preko Biotage 40M kolone (eluirana sa 15% do 100% EtOAc u heksanima) da bi se proizvelo 0.702g (42%) proizvoda {BOCNH-P3(/_-tBuGly)-P2[(4f?)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1-C02Et u vidu pene.<1>H NMR (metanol-d4) § 1.06 (s, 9H), 1.22-1.32 (m, 3H), 1.28 (s, 9H), 1.42-1.46 (m, 1H), 1.73 (dd,J =8, 5 Hz, 1H), 2.19-2.25 (m, 1H), 2.67-2.72 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 4.03-4.07 (m, 1H), 4.10-4.18 (m, 2H), 4.20-4.24 (m, 1H), 4.54 (d,J=12 Hz, 1H), 4.60-4.63 (m, 1H), 5.11 (dd,J =10, 2 Hz, 1H), 5.28-5.30 (m, 1H), 5.43 (m, 1H), 5.76-5.83 (m, 1H), 6.50 (d,J =9 Hz, NH), 6.93 (d,J =5 Hz, 1H), 7.10 (dd,J= 9, 2 Hz, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.99 (m, 1H), 8.11 (d,J =9 Hz, 1H), 8.62 (d,J= 5 H): LC-MSm/ z639 (retenciono vreme: 1.53, postupak D).
Korak 8:
U suspenziju proizvoda (702mg, 1.1 mmol) iz Koraka 7, Primera 374 {BOCNH-P3(/_-t-BuGly)-P2[(4ff)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1 (1 f?,2S-vinil acca)-COOEt}, u THF-u (50mL), CH3OH (7mL) i H20 (22mL) je dodat LiOH (211 mg, 8.80mmol). Reakciona smeša je mešana tokom jednog dana, zakiseljena je do neutralnog pH i ukoncentrisana jein vacuosve dok nije preostao samo vodeni sloj. Nastali vodeni ostatak je zakiseljen do pH 4.0 dodatkom 1.0N vodene HCI, a zatim je zasićen čvrstim NaCI-om. Ova vodena mešavina je ponavljano ekstrahovana sa EtOAc i THF, a sjedinjeni organski rastvarač je ispran slanim rastvorom (50mL), osušen (MgS04), filtriran i ukoncentrisanin vacuoda bi se proizvelo 631 mg (92%) proizvoda {BOCNH-P3(L-t-BuGly)-P2[(4ff)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1f?,2S-vinil acca)-C02H} u vidu čvrste mase.<1>H NMR (metanol-d4) 5 1.04 (s, 9H), 1.22 (s, 9H), 1.34-1.39 (m, 1H), 1.67 (dd,J= 8, 5 Hz, 1H), 2.03-2.13 (m, 1H), 2.43-2.49 (m, 1H), 2.67-2.73 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 4.00-4.05 (m, 1H), 4.15-4.21 (m, 1H), 4.56-4.62 (m, 2H), 5.02 (d,J =10 Hz, 1H), 5.20 (d,J =17 Hz, 1H), 5.52 (m, 1H), 5.87-5.99 (m, 1H), 6.47 (d,J= 8 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 7.12 (d,J= 5 Hz, 1H), 7.19 (dd,J =9, 2 Hz, 1H), 7.31 (d,J =2 Hz, 1H), 8.22 (d,J =9 Hz, 1H), 8.72 (d,J= 5 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.44, postupak D), MSm/ z611 (M<+>+1).
Korak 9:
U rastvor tripeptidne kiseline (0.120g, 0.195mmol) iz Koraka 8, Primera 374 u THF-u (2mL) je dodat CDI (44.3mg, 0.27mmol), a nastali rastvor je podvrgnut refluksu tokom 60 minuta i ostavljen da se ohladi do rt. Iz jednog dela je dodat ciklobutilsulfonamid (0.037g, 0.273mmol) pre nego što je dodat čisti DBU (0.041 mL, 0.273mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 24 h, dodat je još jedan ekvivalent CDI i ciklobutilsulfonamida i smeša je mešana još 48 h. Smeša je razblažena sa 50% THF/EtOAc (200mL) i isprana slanim rastvorom zasićenim puferom pH 4.0 (30 mL), osušena je (MgS04) i ukoncentrisana in vacuo. Ostatak je rastvoren u 2mL 50% THF-CH2CI2, dodati su 75mg (0.39mmol) EDAC, 48mg (0.39mmol) 4-DMAP, 58nL (0.39mmol) DBU i 53mg (0.39mmol) ciklobutilsulfonamida i smeša je mešana 4 dana. Mešavina je prečišćena korišćenjem jedne 1000dAnaltech PTLC ploče (20x40 cM, eluiran sa 2% MeOH u CH2CI2) da bi se dobio željeni proizvod (Jedinjenje 374) BOCNH-P3(/--t-BuGly)-P2[(4fl)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1f?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklobutan u vidu pene (2mg, 2%):<1>H NMR (metanol-d4) § 1.07, 1.08 (dve s (rotameri) 9H), 1.20, 1.21 (dve s (rotameri) 9H), 1.41-4.48 (m, 1H), 1.64-1.70 (m, 1H), 1.72-1.91 (m, 2H), 1.95-2.11 (m, 2H), 2.23-2.37 (m, 2H), 2.40-2.58 (m, 2H), 2.72-2.75 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 4.12-4.17 (m, 2H), 4.35-4.38 (m, 1H), 4.58-4.62 (m, 1H), 4.65-4.70 (m, 1H), 5.16-5.18 (m, 1H), 5.24-5.37 (m, 1H), 5.69-5.76 (m, 2H), 7.40-7.46 (m, 3H), 8.35-8.40 (m, 1H), 8.92 (d,J =7 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.58, postupak B), MSm/ z728 (M<+>+1).
Primer 375: Izrada Jedinjenja 375.
U rastvor proizvoda (794mg, 1.51 mmol) iz Koraka 5, Primera 374 {N-BOC-P2[(4fl)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1fl,2S-vinil acca)-C02Et} u 68mL 12% MeOH/THF je dodat rastvor od 218mg (9.08 mmol) litijum hidroksida u 30ml_ vode i smeša je mešana tokom 16 h. pH je doteran do neutralnog dodavanjem 6N vodene HCI, ukoncentrisan je sve dok nije preostao samo vodeni sloj, rastvor je doteran do pH 4.0 korišćenjem 1N vodene HCI, a zatim je ekstrahovan sa 50% THF-EtOAc (5x200ml_, delovi). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni (MgS04) i ukoncentrisani da bi se proizvelo 752mg (100%) proizvoda {N-BOC-P2[(4F?)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1F?,2S-vinil acca)-C02H}:<1>H NMR (metanol-d4) 8 1.37-1.43 (m, 1H), 1.39 (s, 9H), 1.69-1.78 (m, 1H), 2.16-2.24 (m, 1H), 2.44-2.54 (m, 1H), 2.64-2.74 (m, 1H), 3.89-3.94 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 4.40-4.43 (m, 1H), 5.11 (d,J =10 Hz, 1H), 5.31 (d,J =17 Hz, 1H), 5.40 (m, 1H), 5.79-5.87 (m, 1H), 6.91 (s, 1H), 7.04 (d,J =6 Hz, 1H), 7.25 (dd,J =9, 1.2 Hz, 1H), 7.29 (m, 1H), 8.09 (d,J =9.1 Hz, 1H), 8.66 (d,J =6 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.05, postupak H), MSm/ z 498(M<+>+1).
Korak 2:
U rastvor proizvoda (399.5mg, 0.668mmol) iz Koraka 1, Primera 375 {N-BOC-P2[(4fl)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1 (1 f?,2S-vinilacca)-C02H} u THF-u (4ml_) i CDI (434mg, 2.68mmol) je podvrgnut refluksu tokom 60 minuta i ostavljen da se ohladi do rt. Iz jednog dela je dodat ciklopropilsulfonamid (406mg, 3.35mmol) pre nego što je dodat čisti DBU (0.50ml_, 3.35mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 16 h, razblažena sa 50% THF-EtOAc (200mL) i isprana slanim rastvorom zasićenim puferom pH 4.0 (2x40mL). Organski sloj je osušen (MgSOJ i ukoncentrisan i prečišćen preko Biotage 25M kolone (MeOH u CH2CI2, 0% do 15%) da bi se dobilo 217mg (54%) željenog proizvoda {N-BOC-P2[(4R)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1fl,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan}: 1H NMR (metanol-d4) 5 1.01-1.10 (m, 2H), 1.11-1.18 (m, 1H), 1.20-1.27 (m, 1H), 1.39-1.48 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.87 (dd,J =8, 5 Hz, 1H), 2.01-2.38 (m, 2H), 2.57 (dd,J =14, 7 Hz, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 3.83-3.92 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 4.36-4.39 (m, 1H), 5.11 (d,J=10 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17 Hz, 1H), 5.38 (m, 1H), 5.74-5.81 (m, 1H), 6.91 (d,J =5.5 Hz, 1H), 7.20 (dd,J =9.2, 2.4 Hz, 1H), 7.29 (m, 1H), 8.07 (d,J= 9.2 Hz, 1H), 8.60 (d,J =5.5 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.28, postupak I), MSm/ z601 (M<+>+1).
Korak 3:
Ukupno proizvoda (198mg, 0.33mmol) iz Koraka 2, Primera 375 {BOC-P2[(4F?)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1f?,2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan} je rastvoren u 4N HCI/dioksanu (4mL, 16mmol) i mešan je tokom 2 h na rt. Reakciona smeša je ukoncentrisana da bi se dobio sirovi proizvod u vidu žućkastosmeđe sirove mase, koji je odmah korišćen u sledećoj reakciji.
Korak 4:
Sirovi proizvod iz koraka 3, Primera 375 {HN-P2[(4/7)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1 (1R, 2S-vinil acca)-CONHS02-ciklopropan, bis HCI so} je suspendovan u 10mL dihlorometana. Ovoj smeši je dodat N-BOC-L-ferc-leucin (BOC /_-tBuGly) (120mg, 0.52mmol), HOAT (30mg, 0.20mmol), DIPEA (0.29mL, 1.65mmol) i HATU (160mg, 0.43mmol) na rt. Reakciona smeša je mešana tokom 16 h, razblažena sa 50% EtOAc-THF (300mL), isprana slanim rastvorom zasićenim puferom pH 4.0 (3x50mL), osušena je (MgS04) i ukoncentrisana. Ostatak je prečišćen pomoću Isco 35g kolone (eluiran sa 0% do 15% MeOH u CH2CI2) da bi se dobio proizvod (130.1 mg, 47%) u vidu soli Hunningove baze (Jedinjenje 375):<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1.00-1.48 (m, 29H), 1.47 (s, 9H), 1.89 (m, 1H), 2.26 (m, 1H), 2.36 (m, 1H), 2.69 (m, 1H), 2.97 (m, 1H), 3.25 (q,J =7.43 Hz, 2H), 3.74 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 4.10 (m, 1H), 4.23 (dd,J =19.68, 9.92 Hz, 1H), 4.57 (m, 2H), 5.15 (m, 1H), 5.31 (m, 1H), 5.50 (s, 1H), 5.77 (m, 1H), 7.01 (t,J= 5.34 Hz, 1H), 7.16 (d,J =9.16 Hz, 1H), 7.31 (d,J =1.83 Hz, 1H), 8.14 (m, 1H), 8.67 (d,J =5.49 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.49, postupak D), MSm/ z714 (M<+>+1)..
Primer 376: Izrada Jedinjenja 376.
Korak 1:
Jedinjenje 375 (130mg) je rastvoreno u EtOAc, isprano još jednom sa puferom pH 4, slanim rastvorom i onda osušeno (MgSOJ. Sirova mešavina je prečišćena preko dve 1000n PTLC ploče od Analtech (20x40cm, eluiran sa 3% MeOH u CH2CI2) da bi se dobio proizvod (Jedinjenje 376) 54mg (23% prinos od tripeptidne kiseline):<1>H NMR (metanol-d4) 5 0.88-1.00 (m, 2H), 1.01-1.14 (m, 2H), 1.03 (s, 9H), 1.25 (s, 9H), 1.34 (dd,J =9, 5 Hz, 1H), 1.81-1.89 (m, 1H), 2.06-2.13 (m, 1H), 2.45-2.50 (m, 1H), 2.65-2.75 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.98-4.11 (m, 1H), 4.21-4.22 (m, 1H), 4.46-4.50 (m, 1H), 4.54-4.57 (m, 1H), 4.97-5.02 (m, 1H), 5.14-5.22 (m, 1H), 5.33-5.41 (m, 1H), 5.81-5.99 (m, 1H), 6.87-6.95 (m, 1H), 7.06-709 (m, 1H), 7.25 (m, 1H), 8.07-8.10 (m, 1H), 8.59 (d,J =5.2 Hz, 1H), HRMSm/ z(M-H)" izrač. za: C35H46N509S: 712.3016, nađeno: 712.3024; LC-MSm/ e714 (retenciono vreme: 1.42, postupak I).
Primer 377: Izrada Jedinjenja 377.
Korak 1:
Ukupno I.Ommol proizvoda iz Koraka 2, Primera 375 {bis HCI so HN-P2[(4f?)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1f?,2S-vinil acca)-CONHS02ciklopropana} suspendovanom u 20mL dihlorometana je dodato 352mg (1.30mmol) 2-(S)-rerc-butoksikarbonilamino-8-nejonske kiseline nabavljene od RSP Amino Acids, HOAT (82mg, 0.60mmol), DIPEA (0.74ml_, 5.0 mmol) i HATU (494mg, 1.30mmol) na rt. Reakciona smeša je mešana 16 h a glavnina CH2CI2je uklonjena in vacuo. Smeša je razblažena zasićenim puferom pH 4.0 (150ml_) i ekstrahovana u EtOAc (4x200ml_). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni (MgS04) i ukoncentrisani. Ostatak je prečišćen preko Biotage 40M kolone (eluiran sa 0% do 15% MeOH u CH2CI2) da bi se dobilo 574mg (76%) proizvoda (Jedinjenje 377):
LC-MSm/ z754 (retenciono vreme: 1.64, postupak I).
Primer 378: Izrada Jedinjenja 378.
Korak 1:
Ukupno 0.34mmol proizvoda iz Koraka 2, Primera 375 {bis HCI so HN-P2[(4f?)-(7-metoksihinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1/:?,2S-vinil acca)-CONHS02ciklopropana} je suspendovano u 3ml_ dihlorometana. Ovoj smeši je dodat N-BOC-/.-valin (/.-val) (120mg, 0.55mmol), HOAT (30mg, 0.20mmol), DIPEA (0.29mL, 1.65mmol) i HATU (160mg, 0.43mmol) na rt. Reakciona smeša je mešana 16 h, razblažena zasićenim puferom pH 4.0 (150mL) i ekstrahovana u EtOAc (3x200ml_). Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (MgS04) i ukoncentrisani. Ostatak je prečišćen preko Isco 35g kolone (MeOH u CH2CI2: 0%-15%). Ovaj materijal je dalje prečišćen preko dve 5 PTLC ploče od Analtecha (20x40 cm, eluiran sa 3% MeOH u CH2CI2) da bi se dobilo 104.1 mg (44%) proizvoda (Jedinjenje 378): HRMSm/ z(M-H)" izrač. za: C34H44N509S: 698.2860, nađeno: 698.2865. LC-MSm/ e700 (retenciono vreme: 1.60, postupak D).
Primer 379: Izrada Jedinjenja 379.
Korak 1:
U suspenziju 2-pikolne kiseline (3.73g, 30.3mmol) i 2-amino-4-metoksibenzofenona (5.0g, 30.3mmol), rastvorenoj na -30°C u piridinu (150mL) je dovan POCI3(3.7mL, 45.4mmol) tokom 5 min i reakciona smeša je mešana tokom 3 h na temperaturi i mešana na rt preko noći. Reakciona smeša je ulivena u hladnu vodu i ekstrahovana sa EtOAc (3x). Sjedinjeni ekstrakt je osušen da bi se dobio proizvod (7.67g, 93%):<1>H NMR (metanol-d4) 8 ppm 2.65 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 6.78 (m, 1H), 7.60 (m, 1H), 8.00 (m, 1H), 8.06 (m, 1H), 8.21 (d,J= 7.63 Hz, 1H), 8.59 (t,J =2.29 Hz, 1H), 8.76 (d,J =3.97 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.56, postupak D), MSm/ z 271(M<+>+1).
Korak 2:
U suspenziju (2-acetil-5-metoksi-fenil)-amida piridin-2-karboksilne kiseline (2.90g, 10.7mmol) u THF-u (50mL) je dodat t-BuOK/THF (1M, 24mL, 24 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 70°C tokom 3 h i mešana preko noći. Rastvarač je odstranjen in vacuo. Ostatku je dodata hladna voda, pH je doteran do 4.6 sa vodenom 1.0N HCI i filtriran je. Čvrsti ostatak je prečišćen preko Biotage 65M kolone (MeOH/CH2CI2: 0-15%) da bi se dobio proizvod (2.26g, 84%): LC-MS (retenciono vreme: 1.19, postupak D), MSm/ z 253(M<+>+1).
Korak 3:
Smeša 7-metoksi-2-piridin-2-il-hinolin-4-ola (2.2g, 8.71 mmol) u POCI3(92 mL) je podvrgnuta refluksu tokom 3 h, a zatim je in vacuo uklonjen rastvarač. Ostatku je dodata ledena voda, doteran je do pH>10 sa 1.0N NaOH i izvedena je ekstrakcija sa EtOAc (2x). Sjedinjeni ekstrakt je ispran vodom i slanim rastvorom, osušen je (MgS04) i uklonjen je rastvarač kako bi se dobio proizvod, u vidu žute čvrste mase (89%, 2.1g): DMSO-dB) 5 ppm 3.97 (s, 3H), 7.40 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.53 (m, 1H), 8.01 (m, 1H), 8.09 (d,J=9.16 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.56 (d,J= 7.93 Hz, 1H), 8.74 (d,J= 3.97 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.50, postupak D), MSm/ z 271(M<+>+1).
Korak 4:
Rastvoru N-Boc-4-hidroksiprolina (1.6g, 6.7mmol) u DMSO (20mL) je dodat f-BuOK (1.9g, 16.8mmol). Proizvedena mešavina je mešana tokom 1.5 h i dodati su 4-hloro-7-metoksi-2-piridin-2-il-hinolin (2.0g, 7.4mmol) i DMSO (10mL). Reakciona smeša je mešana tokom 38 h razblažena je hladnom vodom i ekstrahovana sa EtOAc/etar (1/4, 2x). Vodeni sloj je zakiseljen do pH 4 i ekstrahovan sa EtOAc/THF (5x). Sjedinjeni ekstrakt je osušen (Na2S04/MgS04), rastvarač je uklonjen in vacuo, a ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (0-80% rastvarač B) da bi se dobio proizvod (1.6g, 50%): LC-MS (retenciono vreme: 1.23, postupak I), MS m/z 466 (M<+>+1).
Korak 5:
Rastvor proizvoda (0.21g, 0.65mmol) iz Koraka 4, Primera 379 {etil estar N-boc-(1 f?,2S)-1-amino-2-vinilciklopropankarboksilne kiseline} u HCI/ dioksanu (4M, 5mL, 20mmol) je mešan tokom 3 h, a rastvarač je odstranjen in vacuo. Ostatku je dodat CH2CI2(10mL), diizopropiletilamin (0.4mL, 3.23mmol), HOBT (0.20g, 1.35mmol), Boc-(4R)-(2-ciklopropil-2-metoksi-hinolin-4-okso)-S-prolin
(0.20g, 0.5mmol) i HATU (0.415g, 1.07 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći razblažena puferom pH 4.0 i ekstrahovana sa EtOAc. Ekstrakt je osušen (MgS04) i prečišćen pomoću Biotage 40M kolone korišćenjem MeOH/CH2CI2(0 do 15%) kao eluenta da bi se dobio proizvod (204.7mg, 70%).<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 0.64 (m, 1H), 0.96 (m, 2H), 1.33 (m, 8H), 1.39 (m, 9H), 1.90 (m, 2H), 2.18 (m, 1H), 2.54 (m, 1H), 2.81 (m, 1H), 4.01 (m, 5H), 4.44 (d,J =28.99 Hz, 1H), 5.08 (m, 1H), 5.31 (m, 1H), 5.57 (s, 1H), 6.03 (m, 1H), 6.94 (s, 1H), 7.27 (d,J= 8.24 Hz, 1H), 7.64 (m, 1H), 7.92 (m, 1H), 8.14 (m, 2H), 8.66 (s, 1H), 8.74 (s, 1H).
Korak 6:
Žitka masa P2 Boc-(4R)-(7-metoksi-2-piridin-2-il-hinolin-4-okso)-S-prolin]-P1(1/:?,2S vinil acca)-CONHS02(1-ciklopropilmetilciklopropan-1-il)(korak 5, Primer 379) (203mg, 0.3mmol) u 4M HCI/dioksanu (3.5ml_, 14mmol) je mešana tokom 2 h, a rastvarač je odstranjen in vacuo. Ostatku je dodat CH2CI2(2ml_), diizopropiletilamin (0.63ml_, 3.6mmol), Boc-L-ferc-leucin (83 mg, 0.36mmol), HOAt (41 mg, 0.3mmol) i HATU (148mg, 0.39mmol). Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (35-85% rastvarač B) da bi se dobilo 25.1 mg (11%) željenog proizvoda (Jedinjenje 379):<1>H NMR (metanol-d4) 8 ppm -0.05 (m, 1H), 0.30 (m, 1H), 0.66 (m, 1H), 0.91 (m, 2H), 1.05 (s, 9H), 1.28 (s, 9H), 1.67 (m, 8H), 2.15 (m, 1H), 2.58 (m, 1H), 2.77 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 4.19 (d,J =40.25 Hz, 2H), 4.51 (d,J =16.47 Hz, 2H), 4.95 (m, 1H), 5.15 (m, 1H), 5.53 (s, 1H), 5.89 (dd,J= 16.65, 9.33 Hz, 1H), 7.09 (d,J=8.42 Hz, 1H), 7.43 (d,J =1.83 Hz, 1H), 7.50 (m, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.99 (m, 1H), 8.10 (d,J =9.15 Hz, 1H), 8.48 (d,J =7.68 Hz, 1H), 8.72 (s, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.59, postupak I), MSm/ z 791(M<+>+1).
Primer 380: Izrada Jedinjenja 380.
Korak 1:
Polazni materijal u Šemi 1 ovog primera je pripremljen kuplovanjem proizvoda iz Koraka 3, Primera 11, dela B sa amino krajem P1(1ft,2S vinil acca)-COOEt. Žitka masa navedenog proizvoda kuplovanja, P2 Boc-(4R)-(6-metoksi-izohinolin-1-okso)-S-prolin]-P1(1R,2S vinil acca)-COOEt (7.88g, 14.99mmol) u 4M HCI/dioksanu (120mL, 480mmol) je mešana tokom 2 h, rastvarač je uklonjen in vacuo i podvrgnuta je azeotropnom postupku sa suvim dioksanom. Ostatku je dodat DMF (75ml_), N-metilmorfolin (6.27mL, 57.07mmol), BOC-/.-terc-leucin (5.20g, 22.49 mmol) i HATU (8.53g, 22.49mmol). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći prerađena je ulivanjem u ledenu vodu, doteran je pH do 5 sa vodenom 1.0N HCI i ekstrahovana sa EtOAc Ekstrakt je ispran sa NaHC03(vod.) i slanim rastvorom, osušen (MgS04) i ukoncentrisan. Ostatak je prečišćen preko Biotage 65M kolone (EtOAc-heksani: 5-100%) da bi se dobio proizvod 8.07g, 84%): retenciono vreme: 1.88 postupak I) MSm/ z639 (M<+>+1).
Korak 2:
U suspenziju proizvoda (4.0g, 6.26mmol) iz Koraka 1, Primera 384 {Boc-NH-P3(/_-rerc-BuGly)-P2[(4fi)-(6-metoksil-izohinolin-1-okso)-S-prolin]-P1(1/<:>?,2S-vinil acca)-COOEt} u THF-u (250mL), CH3OH (31 mL) i H20 (125mL) je dodat LiOH (2.4g, 100.2mmol). Reakciona smeša je mešana tokom noći, a zatim je podešen pH do 7 sa vodenom 1.0N HCI. Organski rastvarači su uklonjeni in vacuo. Vodeni ostatak je zakiseljen do pH 4 i ekstrahovan sa EtOAc (2x). Sjedinjeni organski rastvarač je osušen (Na2S04/MgS04) i ukoncentrisan in vacuo da bi se dobio proizvod (3.79g, 99%):<1>H NMR (metanol-d4) □ ppm 1.05 (s, 9H), 1.25 (m, 1H), 1.29 (s, 9H), 1.46 (m, 1H), 1.72 (dd,J= 8.24, 5.19 Hz, 1H), 2.23 (q,J= 8.55 Hz, 1H), 2.68 (dd,J= 13.89, 7.78 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 4.05 (dd,J= 11.60, 3.05 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 8.85 Hz, 1H), 4.46 (d,J= 11.60 Hz, 1H), 4.63 (t,J= 8.39 Hz, 1H), 5.10 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 17.40 Hz, 1H), 5.85 (m, 2H), 7.10 (d,J= 9.16 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.26 (d,J=5.49 Hz, 1H), 7.91 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.12 (d,J= 9.16 Hz, 1H). Retenciono vreme: 1.81, postupak I) MSm/ z611 (M<+>+1).
Korak 3:
Rastvor CDI (0.052g, 0.32mmol) i proizvoda (0.130g, 0.21 mmol) iz Koraka 2, Primera 384 {BOCNH-P3(/_-f-BuGly)-P2[(4/:?)-(6-metoksi-izohinolin-1 -okso)-S-prolin]-P1 (1 F?,2S-vinil acca)-C02H} u THF-u (2ml_) je podvrgnut refluksu tokom 60 minuta i ostavljen da se ohladi do rt. Dodat je ciklobutansulfonamid (0.043g, 0.32mmol), a zatim je dodat rastvor čistog DBU (0.048ml_, 0.32mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći i onda filtrirana kroz špric filter i prečišćena preparativnom HPLC (30% do 100% rastvarača B) da bi se dobio željeni proizvod 0.1422mg (92%):<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1.04 (s, 9H), 1.26 (d,J= 13.43 Hz, 9H), 1.39 (m, 1H), 1.85 (dd,J= 7.63, 5.19 Hz, 1H), 1.98 (m, 2H), 2.26 (m, 4H), 2.50 (m, 2H), 2.61 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.05 (m, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.33 (m, 1H), 4.43 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.52 (m, 1H), 5.13 (m, 1H), 5.30 (m, 1H), 5.71 (m, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.08 (d,J =8.85 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.24 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (m, 1H), 8.08 (d,J= 9.16 Hz, 1H). Retenciono vreme: 1.89, postupak I) MSm/ z728 (M<+>+1).
Korak 4:
Primer 380, Korak 3 (0.196mg, 0.27mmol) {(BOCNH-P3(L^BuGl<y>)-P2-(4lf)-(6-metoksi-izohinolin-1-okso)-S-prolin]-P1(1f?,2S-vinil acca)-CONHS02ciklobutil} je rastvoren u HCI/dioksanu (5mL, 20mmol) i mešan je na rt tokom 2 h. Rastvarač je odtranjen in vacuo da bi se dobilo 100% naslovljenog proizvoda (0.1887g), koji je spreman za sledeći korak.
Korak 5:
U mešavinu proizvoda (0.037g, 0.053mmol) iz Koraka 4, Primer 380 {HCI so NH2-(/_-f-BuGly)-P2-(4fl)-(6-metoksi-izohinolin-1-okso)-S-prolin]-P1(1R, 2S-vinil acca)-CONHS02ciklobutila} i diizopropiletilamina (0.046ml_, 0.26mmol) u CH2CI2(2mL) je dodat ciklopentil hloroformat (0.7M , 0.151 mL, 0.069mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći i prečišćena je preparativnom HPLC (30% do 100% rastvarač B) da bi se dobio željeni proizvod (Jedinjenje 380) (0.0303g, 77%):<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1.03 (s, 9H), 1.48 (m, 9H), 1.86 (dd,J= 8.24, 5.49 Hz, 1H), 1.99 (m, 2H), 2.27 (m, 4H), 2.51 (m, 2H), 2.60 (dd,J= 13.89, 6.87 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.05 (dd,J =12.21, 3.97 Hz, 1H), 4.32 (m, 2H), 4.41 (d,J =11.90 Hz, 1H), 4.53 (m, 1H), 4.69 (m, 1H), 5.12 (d,J= 10.38 Hz, 1H), 5.29 (d,J=17.09 Hz, 1H), 5.71 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.11 (d,J =9.46 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.25 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.08 (d,J= 9.16 Hz, 1H). retenciono vreme: 1.85, postupak H) MSm/ z740 (M<+>+1).
Korak 1:
U mešavinu proizvoda (0.037g, 0.053mmol) iz Koraka 4, Primer 380 {HCI so NH2-P3(Z.-f-BuGly)-P2-(4R)-(6-metoksi-izohinolin-1-okso)-S-prolin]-P1 (1fl,2S-vinil acca)-CONHS02ciklobutila} i iizopropiletilamina (0.046ml_, 0.26mmol) u CH2CI2(2ml_) je dodat novi-pentil hloroformat (0.012ml_, 0.069mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći i direktno prečišćena preparativnom HPLC (30% do 100% rastvarač B) da bi se dobio željeni proizvod (Jedinjenje 381) (0.0252g, 64%):<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 0.84 (s, 9H), 1.05 (s, 9H), 1.40 (m, 1H), 1.86 (m, 1H), 2.00 (m, 2H), 2.28 (m, 4H), 2.51 (m, 2H), 2.57 (m, 1H), 3.39 (d,J =10.07 Hz, 1H), 3.55 (d, J = 10.38 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.05 (m, 1H), 4.33 (m, 2H), 4.41 (d,J =11.29 Hz, 1H), 4.53 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.07 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 17.09 Hz, 1H), 5.71 (m, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.10 (d,J =9.16 Hz, 1H), 7.19 (S, 1H), 7.25 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 8.07 (d,J
- 8.85 Hz, 1H). retenciono vreme: 1.89, postupak H), MSm/ z742 (M<+>+1).
Korak 1:
U mešavinu proizvoda (0.037g, 0.053mmol) iz Koraka 4, Primer 380 {HCI so NH2-P3-(/_-f-BuGly)-P2-(4f?)-(6-metoksi-izohinolin-1-okso)-S-prolin]-P1 (1ft,2S-vinil acca)-CONHS02ciklobutila} i diizopropiletilamina (0.046ml_, 0.26mmol) u CH2CI2(2ml_) je dodat di-t-amil dikarbonat (0.0169g, 0.069 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći i direktno prečišćena HPLC-om (30% do 100% rastvarač B) da bi se dobio željeni proizvod (Jedinjenje 382) (0.0175g, 44%):<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 0.79 (t,J =6.87 Hz, 3H), 1.04 (s, 8H), 1.21 (s, 3H), 1.23 (s, 3H), 1.41 (m, 2H), 1.64 (m, 2H), 1.83 (m, 1H), 2.00 (m, 2H), 2.26 (m, 4H), 2.51 (m, 2H), 2.60 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.07 (m, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.33 (m, 1H), 4.43 (d,J =11.60 Hz, 1H), 4.52 (m, 1H), 5.13 (m, 1H), 5.29 (m, 1H), 5.70 (m, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.09 (d,J =8.85 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.25 (d,J =5.49 Hz, 1H), 7.88 (d,J =5.80 Hz, 1H), 8.08 (d,J =8.85 Hz, 1H). retenciono vreme: 1.90, postupak H), MSm/ z742 (M<+>+1).
Korak 1:
U mešavinu proizvoda (0.037g, 0.053mmol) iz Koraka 4, Primer 380 {HCI so NH2-P3-(L-f-BuGly)-P2-(4f?)-(6-metoksi-izohinolin-1-okso)-S-prolin]-P1 (1 F?,2S-vinil acca)-CONHS02ciklobutila} i iizopropiletilamina (0.046ml_, 0.26mmol) u CH2CI2(2ml_) je dodat t-butil-izocijanat (0.008mL, 0.069 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći i direktno prečišćena preparativnom HPLC (30% do 100% rastvarač B) da bi se dobio željeni proizvod (Jedinjenje 383) (0.024g, 62%):<1>H NMR (metanol-d4) 8 ppm 1.05 (s, 9H), 1.19 (s, 9H), 1.37 (m, 1H), 1.85 (dd,J =8.09, 5.34 Hz, 1H), 2.00 (m, 2H), 2.26 (m, 4H), 2.50 (m, 2H), 2.58 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.06 (m, 1H), 4.32 (m, 2H), 4.49 (m, 2H), 5.11 (d,J =10.38 Hz, 1H), 5.27 (d,J =17.40 Hz, 1H), 5.69 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.08 (dd,J= 9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.17 (d,J =2.44 Hz, 1H), 7.24 (d,J =5.80 Hz, 1H), 7.87 (d,J =6.10 Hz, 1H), 8.12 (d,J =8.85 Hz, 1H). retenciono vreme: 1.77, postupak H) MSm/ z 727(M<+>+1).
Korak 1:
Suspenzija diizopropiletilamina (0.031 mL, 0.018mmol), N,N'-disukcinimidil karbonata (0.0274g, 0.107mmol) i proizvoda (0.050g, 0.0714mmol) iz Koraka 4, Primera 380 {HCI so NH2-P3-(/_-f-BuGly)-P2(4ft)-(6-metoksi-izohinolin-1 -okso)-S-prolin]-P1 (1 F?,2S-vinil acca)-CONHS02ciklobutila} u THF-u (2mL) je ozvučena na 80°C tokom 15 minuta. Dodati su KH (0.046g, 1.14mmol) i 1-metilciklopentanol (0.079mL, 0.714mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 20 min i prerađena razblaživanjem sa hladnom vodom, pH je doteran do 4 i ekstrahovana je sa EtOAc. Ekstrakt je osušen (MgS04), a ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (30% do 100% rastvarač B) da bi se dobio željeni proizvod (Jedinjenje 384) (0.018g, 33%): (metanol-d4) 6 ppm 1.04 (s, 9H), 1.29-I. 79 (m, 10H), 1.84 (m, 2H), 1.99 (m, 3H), 2.26 (m, 4H), 2.49 (m, 2H), 2.60 (dd,J =13.73, 7.02 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 4.05 (dd,J =1.29, 2.44 Hz, 1H), 4.26 (s, 1H), 4.32 (m, 1H), 4.44 (d,J =II. 90 Hz, 1H), 4.52 (m, 1H), 5.12 (d,J =10.07 Hz, 1H), 5.28 (d,J= 16.79 Hz, 1H), 5.71 (m, 1H), 5.82 (s, 1H), 7.10 (d,J= 8.85 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.26 (d,J= 5.80 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 5.80 Hz, 1H), 8.08 (d,J =9.16 Hz, 1H). LC-MS retenciono vreme: 1.91, postupak H). MSm/ z754 (M<+>+1).
Primer 385: Izrada Jedinjenja 385.
Korak 1:
Suspenzija metil estra 2-cijanometil-4-metoksi-benzojeve kiseline (1.9g) i TsOH.H20 (0.15g, mmol) u morfolinu (5ml_) je podvrgnuta refluksu tokom 4 h, a rastvarač je uklonjen in vacuo. Ostatak je rekristalisan iz EtOAc/heksana sa kapima MeOH da bi se dobio proizvod (0.43g, 17%): LC-MS retenciono vreme: 1.07, postupak H). MSm/ z266 (M<+>+1).
Korak 2:
Smeša 6-metoksi-3-morfolin-4-il-izohinolin-1-ola (0.298g, 1.15mmol) u POCI3(20mL) je podvrgnuta refluksu tokom 2 h rastvarač je uklonjen in vacuo i dodata je hladna voda. pH je doteran na >11 dodavanjem 1.0N NaOH. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc. Ekstrakt je osušen (MgS04), a rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobio proizvod (0.299 g, 94%) LC-MS retenciono vreme: 1.68, postupak H). MSm/ z 279(M<+>+1).
Korak 3:
Mešavina 1-hloro-6-metoksi-3-mofrolin-4-il-izohinolina (0.050g, 0.18mmol) i tetrabutil fosforijum hidrogen difluorida (0.8g, 2.8mmol) [Synlett1992,(4), 345-6] je zagrevana na 140°C u mikrotalsnoj tokom 10 min. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz ISCO 25g predkolonu sa slojem silikon gela na vrhu, a rastvarač je uklonjen da bi se dobio proizvod (0.037mg, 77%):<1>H NMR (hloroform-D) 5 ppm 3.48 (m, 4H), 3.84 (m, 4H), 3.89 (s, 3H), 6.46 (d,J =1.22 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.90 (dd,J =9.16, 2.44 Hz, 1H), 7.82 (d,J =8.85 Hz, 1H). LC-MS retenciono vreme: 1.56, postupak H). MSm/ z263 (M<+>+1).
Korak 4:
Smeša 1-fluoro-6-metoksi-3-morfolin-4-il-izohinolina (0.037g, 0.14mmol) LaCI3(0.020g, 0.8mmol), t-BuOK (1M/THF, 0.32mL, 0.32mmol) iBoc-NH-P3-(L-f-BuGly)-P2[(4fi)-4-hidroksil-S-prolin]-P1(1 R, 2S-vinil acca)-CONHS02ciklopropana (0.045g, 0.08mmol) u THF-u (3mL) je mešana tokom 3 dana. Reakciona smeša je razblažena metanolom, filtrirana preko špric filtera i prečišćena preparativnom HPLC da bi se dobio proizvod u vidu bledo-žute pene (0.0158g, 24%):<1>H NMR (metanol-d4) 5 ppm 1.03 (s, 9H), 1.24 (m, 4H), 1.31 (s, 9H), 1.43 (m, 2H), 1.88 (m, 1H), 2.24 (m, 2H), 2.59 (dd,J= 13.43, 6.71 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.47 (m, 4H), 3.83 (m, 4H), 3.86 (s, 3H), 4.08 (m, 1H), 4.28 (s, 1H), 4.48 (m, 1H), 5.12 (d,J= 10.38 Hz, 1H), 5.29 (d,J= 16.48 Hz, 1H), 5.76 (m, 2H), 6.74 (d,J =9.16 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 7.85 (d,J= 8.85 Hz, 1H), 9.19 (s, 1H). retenciono vreme: 1.86, postupak H), MSm/ z799 (M<+>+1).
Primer 386: Izrada Jedinjenja 386.
Jedinjenje 386 je pripremljeno korišćenjem ovde opisanih postupaka.
Deo I:
Sva jedinjenja u delu I su analizirana pomoću LC/MS metodologije, koja ima sledeće uslove.
Postupak A: Xterra C18 S7 3.0 x 50 mm
Gradient: 100% rastvarač A / 0% rastvarač B do 0% rastvarač A / 100% rastvarač B Vreme gradijenta: 3 min
Hold vreme: 1 min
Brzina protoka: 4 mL/min
Detektorna talasna dužina: 220 nm
Rastvarač A: 10% MeOH / 90% H20 / 0.1% TFA
Rastvarač B: 10% H20 / 90% MeOH / 0.1% TFA
Primer 410: Izrada Jedinjenja 410
Korak 1:
Rastvoru Boc-L-hidroksiprolina (0.723g, 3.13mmol) u DMSO dodat je KO'Bu (0.808g, 7.2mmol) pod atmosferom azota. Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h i dodat je iz dva dela 4-hloro-6-metil-2-(trifluorometil)hinolin (0.916g, 3.75mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom tri sata, a za neutralizaciju reakcije korišćena su 1.3 ekvivalenta HCI (1N). Dodat je puferski rastvor pH 4.0 i pH je podešen na pH 4-5. Vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (3x25ml_), a sjedinjeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20mL) i osušeni preko MgS04da bi se dobilo jedinjenje iz naslova u vidu bele čvrste mase (sirovi prinos nije izračunat). Sirovi proizvod je prenesen u naredni korak. LC/MS rt-min (MH<+>): 2.48 (441.5)
(postupak A).
Korak 2:
Rastvor sirovog proizvoda iz Koraka 1, 1-terc-butil estar 4-(6-metil-2-trifluorometil-hinolin-4-iloksi)-pirolidin-1,2-dikarboksilna kiselina (uzet 3.13mmol) u THF-u (10mL) i metanolu (10mL) je ohlađen do 0°C. Izmešanom rastvoru je polako dodat TMSCN22M u heksanima (~1.3 ekv) pod atmosferom azota sve dok se gas više ne emituje iz rastvora. Potpuno izreagovani rastvor je zatim ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 40M kolone (eluiran sa 10%-30% etilacetat u heksanima da bi se dobilo čisto jedinjenje iz naslova u vidu bele pene 976mg, 69% tokom Koraka 1&2). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.60 (477) (postupak A).
Korak 3:
Rastvor proizvoda iz Koraka 2 (0.976g, 2.15mmol) u DCM-u (7mL) i TFA (6.62mL) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Rastvarač je uklonjen in vacuo a ostatak je suspendovan u 1N HCI u dietiletru (8mL), pažljivo je mešan i ukoncentrisan in vacuo. Ovaj postupak je ponovljen a nastali proizvod je stavljen na uljnu pumpu preko noći da bi se dobila bela čvrsta masa u kvantitativnom prinosu.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 2.50 (s, 3H), 2.57-2.6 (m, 1H), 2.66-2.71 (m, 1H), 3.62-3.65 (br d,J =15 Hz, 1H), 3.80-3.81 (m, 4H), 4.8 (br s, 1H), 5.7 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.72-7.75 (d,J= 7.5 Hz, 1H), 7.98-7.8 (d,J =8.5 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 9.54 (br s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.61 (355)
(postupak A).
Korak 4:
Proizvod iz Koraka 3 (uzet kvantitativni prinos, 2.746mmol) je dodat u rastvor BOC-t-butil-L-glicina (0.635g, 2.746mmol) u DCM (20mL), pod atmosferom azota. Posle ovog koraka je usledilo dodavanje HOBt (0.408g, 3.02mmol), DIPEA (3.35mL, 19.2mmol) i HBTU (1.56g, 4.12 mmol). Odmah je nastao rastvor boje breskve, a reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom noći. Završenoj reakciji je dodato 10mL DCM da bi se povećao volumen i reakcija je ugašena rastvorom pufera pH 4.0 (25mL). Smeša je zakiseljena do pH 4.5 korišćenjem 1N HCI, a vodena faza je ekstrahovana sa DCM (3x20mL). Organska faza je dva puta isprana sa rastvorom pufera pH 4.00 (20mL), zasićenim NaOH (25mL) i slanim rastvorom (20mL), a zatim je osušena sa MgS04. Nastali rastvor je ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 40M kolone (eluiran sa 10%-40% etil acetata u heksanima). Ovim prečišćavanjem je proizvedeno čisto jedinjenje iz naslova u vidu bele čvrste mase (1.11g, 89%).<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.96-1.02 (rotameri, 3:2, s, 18H), 2.27-2.33 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.68-2.72 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 4.02-4.04 (m, 1H), 4.43-4.45 (br d,J =15 Hz, 2H), 4.58-4.61 (t, 1H), 5.60 (br s, 1H), 6.72-6.74 (br d,J= 15 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.68-7.73 (m, 1H) 7.95-7.97 (m, 2H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.61 (590) (postupak A).
Korak 5:
LiOH (0.138g, 5.78mmol) je rastvoren u vodi (10mL) zagrevanjem i ozvučavanjem. Rastvor LiOH i MeOH (10mL) su dodati rastvoru čistog materijala iz Koraka 4 (1.09g, 1.93mmol) u THF-u (10mL). Mešavina je odmah dobila jasno plavu boju. Reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 3 h, a zatim je zakiseljena sa 1N HCI (5.78ml_, 5.78mmol) Reakciona smeša je ugašena sa puferskim rastvorom pH 4.00, a pH je doteran do pH 4.5 korišćenjem 1N vodenog NaOH. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x25ml_) ispran slanim rastvorom (20ml_) i osušen preko MgS04. Filtrirani rastvor je ukoncentrisan in vacuo i ostavljen na vakuumu preko noći. Sirovi proizvod (957mg, 90% prinos) je prenesen u naredni korak. LC/MS rt-min (MH<+>): 2.51 (577) (postupak A).
Korak 6:
Sirovi proizvod iz Koraka 5 (60mg, 0.11 mmol) je rastvoren u DCM (5mL) i dodata je hlorovodonična so (1(fl)-amino-2(S)-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline (Primer 1, Korak 8) (0.029g, 0.11 mmol). Pod atmosferom azota su dodati DIPEA (0.094 mL, 0.541 mmol), a zatim i HATU (0.0575g, 0.151 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom oko 8 h. Rastvoru je dodato 10mL DCM da bi se povećao volumen i reakcija je ugašena rastvorom pufera pH 4.00 (10mL). Smeša je zakiseljena do pH 4-5 korišćenjem 1N HCI, a vodena faza je ekstrahovana sa DCM (3x20mL). Organska faza je dva puta isprana sa rastvorom pufera pH 4.00 (10mL) i slanim rastvorom (10mL), a zatim je osušena preko MgS04. Nastali rastvor je ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 12M kolone (eluiran sa 10%-40% etil acetona u heksanima). Ovim prečišćavanjem je proizvedeno Jedinjenje 410 u vidu belog praška (29mg, 35%).
<1>H NMR (DMSO-d6): d 0.976-1.12 (m, 24H), 1.36-1.39 (m, 1H), 1.70-1.72 (m, 1H), 2.15-2.25 (m, 2H), 2.50-2.52 (m, 4H), 2.91-2.96 (m, 1H), 3.97-4.01 (m, 2H), 4.40-4.47 (m, 2H), 5.09-5.11 (d,J =10 Hz, 1H), 5.21-5.24 (d,J =15 Hz, 1H), 5.59-5.66 (m, 2H), 6.65-6.67 (d, NH), 7.43 (s, 1H), 7.72-7.7'4 (d,J= 10 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.98-8.0 (d,J =10 Hz, 1H), 8.87 (s, NH), 10.35 (s, NH); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.65 (789.61) (postupak A).
Primer 411: Izrada Jedinjenja 411.
Korak 1:
Rastvoru Boc-L-hidroksiprolina (2.00g, 8.65mmol) u THF-u (25mL) dodat je NaH (0.795g, 19.87mmol) pod atmosferom azota. Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 min i dodat je iz dva dela 4,6-dihloropirimidin (2.58g, 17.30mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom jednog sata, a za neutralizaciju reakcije korišćena su 1.3 ekvivalenta HCI (1N). Dodat je puferski rastvor pH 4.0 i pH je doteran do pH 5. Etil acetat je korišćen da bi se ekstrahovala vodena faza (3x25mL), a organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20mL) i osušeni preko MgS04da bi se dobilo jedinjenje iz naslova u vidu bele čvrste mase (sirovi prinos nije izračunat). Sirovi proizvod je prenesen u naredni korak. LC/MS rt-min (MH<+>): 1.91 (366.2)
(postupak A).
Korak 2:
Rastvor sirovog proizvoda iz Koraka 1 (uzeto 8.65 mmol) u THF-u (40 mL) i metanolu (40mL) je ohlađen do 0°C. Izmešanom rastvoru je polako dodat TMSCN22M u heksanima (~1.3 ekv), pod atmosferom azota sve dok se gas više ne emituje iz rastvora. Potpuno izreagovani rastvor je zatim ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 40M kolone (eluiran sa 20%-40% etilacetatom u heksanima) da bi se dobilo čisto jedinjenje iz naslova u vidu bele pene (497mg, 16% tokom koraka 2a-2b).<1>H NMR (DMSO-d6): 5 1.34-1.38 (rotameri, 2:1, 9H), 2.25-2.29 (m, 1H), 2.53-2.56 (m, 1H), 3.58-3.75 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 4.28-4.33 (m, 1H), 5.59 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 8.69 (s, 1H): LC/MS rt-min (MH<+>): 2.08 (380.14) (postupak A).
Korak 3:
Rastvor čistog proizvoda iz Koraka 2 (472mg, 1.83mmol) u DCM (3ml_) i TFA (5.65ml_) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Rastvarač je uklonjen in vacuo a ostatak je suspendovan u 1N HCI u dietiletru (7.33 mL) pažljivo je mešan i ukoncentrisan in vacuo. Ovaj postupak je ponovljen a nastali proizvod je stavljen na uljnu pumpu preko noći da bi se dobila bela čvrsta masa u kvantitativnom prinosu.
LC/MS rt-min (MH<+>): 0.55 (258.35) (postupak A).
Korak 4:
Proizvod iz Koraka 3 (uzet kvantitativni prinos, 1.83mmol) je dodat u rastvor BOC-t-butil-L-glicina (0.424g, 1.83mmol) u DCM (11mL), pod atmosferom azota. Posle ovog koraka je usledilo dodavanje HOBt (0.272 g, 2.02mmol), DIPEA (2.23mL, 12.82mmol) i HBTU (1.04g, 2.75mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 15 h. Rastvoru je dodato 15mL DCM da bi se povećao volumen i reakcija je ugašena rastvorom pufera pH 4.00 (15mL). Smeša je zakiseljena do pH 4.5 korišćenjem 1N HCI, a vodena faza je ekstrahovana sa DCM (3x20mL). Organska faza je dva puta isprana sa rastvorom pufera pH 4.00 (20mL), zasićenim NaOH (25mL) i slanim rastvorom (20mL) i osušena je preko MgS04. Nastali rastvor je ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 40S kolone (eluiran sa 20%-50% etil acetata u heksanima). Ovim prečišćavanjem je proizvedeno čisto jedinjenje iz naslova u vidu bele čvrste mase (454mg, 53%).<1>H NMR (DMSO-d6): § 0.94 (s, 9H), 1.25 (s, 9H), 2.21-2.27 (m, 1H), 2.48-2.55 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.86-4.02 (m, 2H), 4.29-4.31 (d,J =10 Hz, 1H), 4.46-4.49 (t, 1H), 5.75 (br s, 1H), 6.72-6.74 (d, NH), 7.12 (s, 1H), 8.71 (s, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.27 (493.5)
(postupak A).
Korak 5:
LiOH (0.0141 g, 0.589mmol) je rastvoren u vodi (7.5mL) zagrevanjem i ozvučavanjem. Rastvor LiOH je dodat rastvoru čistog materijala iz Koraka 4 (252mg, 0.535mmol) u THF-u (7.5mL) i ostavljen da se meša na sobnoj temperaturi. Reakcija je završena posle 3 sata. Ugašena je sa puferom pH 4.0 i zakiseljena do pH približno 4.5 sa 1N HCI. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x25mL), a organska faza je isprana slanim rastvorom (20mL) i osušena preko MgS04. Filtrirani rastvor je ukoncentrisan in vacuo i ostavljen na vakuumu preko noći. Sirovi proizvod (231 mg, 95% prinos) je prenesen u naredni korak.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.94 (s, 9H), 1.25 (s, 9H), 2.14-2.22 (m, 1H), 2.50-2.54 (m, 1H), 3.84-3.876 (d,J =150 Hz, 1H), 3.97-3.99 (d,J =10 Hz, 1H), 4.27-4.30 (d,J =15 Hz, 1H), 4.37-4.40 (t, 1H), 5.63 (br s, 1H), 6.69-6.71 (d, NH), 7.12 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 12.56 (br s, OH); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.24 (479.5) (postupak A).
Korak 6:
Čisti materijal iz Koraka 5 (80mg, 0.146mmol) i fenilborna kiselina (0.0178g, 0.146mmol) su podvrgnuti solvatizaciji u DMF-u (2mL). Rastvor je smešten pod atmosferu azota i dodat je 2M vodeni Na2C03(0.146 mL, 0.292mmol). Dodat je pet mol procentni tetrakis(trifenil) fosfin)paladijum(O) (8.44mg, 0.0073mmol), a smeša je zagrevana mikrotalasno upotrebom Personal Chemistrv Emrys Optimizer tokom 50 min na 140°C. Tokom završavanja reakcije istaloži se paladijumsko crnilo. Mešavina je zakiseljena sa jednim ekvivalentom 1N HCI i filtrirana preko šprica korišćenjem MeOH da bi se proizvod ekstrahovao. Proizvod je prečišćen pomoću prep
HPLC (kolona - 4 Xterra S5 30 x 75 mm, rastvarač - 70% A / 30% B - 30% A / 70% B (gde je rastvarač A 10% MeOH, 90% H20, 0.1% TFA i rastvarač B je 90% MeOH, 10% H20, 0.1% TFA), gradijent vreme - 15 min, hold vreme - 1 min, brzina protoka - 40 mL/min, retenciono vreme čistog proizvoda - 10.45-11.37). Frakcije, koje sadrže željeni proizvod su neutralisane sa 1N NaOH i stavljene su u brzi vakuum tokom približno 4 sata. Frakcije su sjedinjene i dodat je pufer pH 4.0 (15mL). pH je podešen do pH 4-5 korišćenjem 1N HCI a vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (3x20mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (15mL) osušen preko MgS04i ukoncentrisan in vacuo. Proizvod je stavljen na uljnu pumpu da se suši tokom noći i dobijeno je viskozno ulje (37mg, 50%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.37 (499.3) (postupak A).
Korak 7:
Proizvod iz Primera 411, Koraka 6 (36.7mg, 0.061 mmol) je rastvoren u DCM (4mL) i dodata je hlorovodonična so (1(f?)-amino-2(S)-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline (Primer 1, Korak 8) (0.0164g, 0.161 mmol). Pod atmosferom azota su dodati DIPEA (0.0534mL, 0.307mmol), a zatim i HATU (0.0326, 0.0858mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Rastvoru je dodato 10mL DCM da bi se povećao volumen i reakcija je ugašena rastvorom pufera pH 4.00 (10mL). Smeša je zakiseljena do pH 4-5 korišćenjem 1N HCI, a vodena faza je ekstrahovana sa DCM (3x15mL). Organska faza je dva puta isprana sa rastvorom pufera pH 4.00 (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL), a zatim je osušena preko MgS04. Nastali rastvor je ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 12M kolone (eluiran sa 20%-40% acetona u heksanima). Ovim prečišćavanjem je proizvedeno čisto Jedinjenje 411 u vidu belog praška (7mg, 15%).<1>H NMR: 5 1.07-1.46 (m, 24H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.22-2.32 (m, 2H), 2.51-2.55 (m, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 4.04-4.07 (d,J= 15 Hz, 1H), 4.20-4.22 (d,J= 10 Hz, 1H), 4.36-4.38 (d,J =10 Hz, 1H), 4.47-4.50 (t, 1H), 5.12-5.14 (d,J= 10 Hz, 1H), 5.29-5.33 (d,J =20 Hz, 1H), 5.73-5.82 (m, 2H), 6.59-6.60 (d, NH), 7.29 (s, 1H), 7.50-7.51 (m, 3H), 8.03-8.05 (m, 2H), 8.81 (s, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.50 (711.4) (postupak A).
Primer 412: Izrada Jedinjenja 412.
Korak 1:
Proizvod iz Primera 411, Korak 5 (80mg, 0.146mmol) je podvrgnut solvatizaciji u DMF-u (2ml_) i rastvoru je dodata 2-tiofenborna kiselina (0.028g, 0.219mmol). Reakciona mešavina je smeštena pod atmosferu azota i dodati su 2M vodeni Na2C03(0.146ml_, 0.292mmol) i 5 mol procentni tetr aki s (t rif e n i I )f osf i n) pa lad i j u m (0) (8.44mg, 0.0073mmol). Reakciona smeša je zagrevana mikrotalasno upotrebom Personal Chemistrv Emrys Optimizer-a tokom 30 min na 150°C. Tokom završavanja reakcije, istaloži se paladijumsko crnilo. Mešavina je zakiseljena sa jednim ekvivalentom 1N HCI i filtrirana preko šprica korišćenjem MeOH da bi se proizvod ekstrahovao. Proizvod je prečišćen pomoću prep HPLC (kolona - 4 Xterra S5 30 x 75 mm, rastvarač - 70% A / 30% B - 30% A / 70% B (gde je rastvarač A 10% MeOH, 90% H20, 0.1% TFA i rastvarač B je 90% MeOH, 10% H20, 0.1% TFA), gradijent vreme - 15 min, hold vreme - 1 min, brzina protoka - 40 mL/min, retenciono vreme čistog proizvoda - 10.45-11.37). Frakcije, koje sadrže željeni proizvod su neutralisane sa 1N NaOH i stavljene su u brzi vakuum tokom približno 4 sata. Frakcije su sjedinjene i dodat je pufer pH 4.0 (15mL). pH je doteran do pH 4-5 korišćenjem 1N HCI a vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (3x20mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (15mL) osušen preko MgS04i ukoncentrisan in vacuo. Proizvod je stavljen na uljnu pumpu da se suši tokom noći i dobijena je uljasta tečnost (37mg, 50%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.37 (499.3)
(postupak A).
Korak 2:
Proizvod iz Primera 412, Koraka 1 (39mg, 0.0773mmol) je rastvoren u DCM (4ml_) i dodata je hlorovodonična so (1 (f?)-amino-2(S)-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline (Primer 1, Korak 8) (0.0206g, 0.0773mmol). Pod atmosferom azota su dodati DIPEA (0.015ml_, 0.387mmol), a zatim i HATU (0.0411g, 0.108mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 15 sati. Rastvoru je dodato 10ml_ DCM da bi se povećao volumen i reakcija je ugašena rastvorom pufera pH 4.00 (10ml_). Smeša je zakiseljena do pH 4-5 korišćenjem 1N HCI, a vodena faza je ekstrahovana sa DCM (3x15ml_). Organska faza je dva puta isprana sa rastvorom pufera pH 4.00 (10ml_) i slanim rastvorom (10ml_), a zatim je osušena preko MgS04. Nastali rastvor je ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 12M kolone (eluiran sa 20%-50% acetona u heksanima). Ovim prečišćavanjem je proizvedeno čisto Jedinjenje 412 u vidu belog praška (4mg, 7%).<1>H NMR: 8 1.04-1.29 (m, 24H), 1.45-1.47 (m, 1H), 1.89-1.91 (m, 1H), 2.26-2.31 (m, 1H), 2.51-2.53 (m, 1H), 2.92-2.95 (m, 1H), 4.05-4.07 (d, J = 10 Hz, 1H), 4.22-4.24 (d,J= 10 Hz, 1H), 4.38-4.40 (d,J =10 Hz, 1H), 4.48-4.52 (m, 1H), 5.15-5.17 (d, J = 10 Hz, 1H), 5.32-5.36 (d,J =20 Hz, 1H), 5.76-5.83 (m, 2H), 6.65-6.67 (d, NH), 7.19-7.21 (m, 2H), 7.66-7.67 (d,J =5 Hz, 1H), 7.86-7.87 (d,J =5 Hz, 1H), 8.69 (s, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.45 (739.4) (postupak A).
Primer 413: Izrada Jedinjenja 413.
Korak 1:
2-bromo-6-hloropiridin (3.0g, 15.55mmol) i fenilborna kiselina (1.896g, 15.55mmol) su podvrgnuti solvatizaciji u mešavini EtOH, toluena i vode (2:1:1; 120mL). Pod atmosferom azota dodati su tetrakis(trifenil)fosfin)-paladijum(0) (0.896g, 0.775mmol). Reakciona smeša je podvrgnuta refluksu na 90°C tokom jednog sata. Da bi se ugasila reakcija, dodata je voda (20mL) a vodeni sloj je
ekstrahovan dietiletrom (4x25ml_). Organski sloj je zatim ispran slanim rastvorom, osušen preko MgS04i ukoncentrisan in vacuo. Sirova smeša je prečišćena pomoću Biotage 40S kolone (eluiran sa 2%-10% etil acetatom u heksanima) kako bi se dobilo čisto jedinjenje iz naslova (1.45g, 74%).<1>H NMR: 8 7.24-7.26 (m, 1H), 7.42-7.48 (m, 3H), 7.63-7.70 (m, 2H), 7.98-8.00 (m, 2H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.04 (190.18) (postupak A).
Korak 2:
Čistoj čvrstoj masi dobijenoj u Koraku 1 (3.27g, 17.24mmol) dodata je TFA (20mL). Izmešanom rastvoru pod atmosferom azota polako je dodavan, kap po kap, 30% rastvor H202(5.55mL, 48.9mmol). Reakciona smeša je zagrevana do refluksa na 100°C tokom 3h, a rastvoru je dodato 0.5 dodatnih ekvivalenata H202(2.27mL, 25mmol). Nastavljeno je mešanje reakcione smeše na 100°C tokom 2 h. Balon je ostavljen da se hladi do sobne temperature, pre nego što je rastvor ukoncentrisan in vacuo do približno polovine originalne zapremine. Da bi se ugasila reakcija, dodata je voda (40mL), a vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (5x30mL). Organski sloj je zatim ispran jednom slanim rastvorom (20mL), osušen preko MgS04i ukoncentrisan in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Biotage 40M kolone (eluiran sa 10%-75% etil acetat u heksanima) kako bi se dobila bledožuta tečnost (0.81 g, 23%). Čisti polazni materijal je, takođe, obnovljen za buduću upotrebu (1.895g, 58%).<1>H NMR: 8 7.40-7.42 (t, 1H), 7.49-7.50 (m, 3H), 7.59-7.61 (d,J= 10 Hz, 1H), 7.77-7.82 (m, 3H); LC/MS rt-min (MH<+>): 1.12 (206.37) (postupak A).
Korak 3:
Prečišćeni proizvod iz Koraka 2 (0.81 g, 3.94mmol) je dodat rastvoru SOCI2(25mL) i mešan je na 60°C tokom 2 h. Temperatura je zatim povećana na 80°C da bi se ubrzalo završavanje reakcije i reakciona smeša je grejana tokom dodatnih 30 min. Rastvor je ukoncentrisan in vacuo, pažljivo ugašen ledom. pH je doteran do pH 4-5 korišćenjem 10N NaOH uz držanje balona u ledenom kupatilu. Vodena faza je ekstrahovana etrom (4x25mL), a organski sloj je ispran slanim rastvorom (20mL), osušen preko MgS04i ukoncentrisan in vacuo. Sirova žuta tečnost je prečišćena pomoću Biotage 40S kolone (eluirana sa 2%-10% etil acetatom u heksanima) Dobijena je tečnost bledo žute boje (538mg, 61%).<1>H NMR: 5 7.52-7.55 (m, 3H), 7.73 (s, 1H), 8.10-8.11 (m, 2H), 8.17 (s, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.62 (225.33) (postupak A).
Korak 4:
Rastvoru Boc-L-hidroksiprolina (555mg, 2.40mmol) u DMSO (4mL) dodat je KO'Bu (0.619g, 5.52mmol) pod atmosferom azota. Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 45 min i dodat je iz dva dela 2,4-dihloro-6-fenil-piridin (prečišćen u Koraku 3) (538mg, 2.40mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom dva sata a za neutralizaciju reakcije korišćena su 1.3 ekvivalenta HCI (1N). Dodat je puferski rastvor pH 4.0 i pH je doteran do pH 4-5. Da bi se ekstrahovala vodena faza korišćen je etil acetat (3x25mL), a organska faza je isprana slanim rastvorom (20mL) i osušena preko MgS04da bi se dobilo jedinjenje iz naslova u vidu bele čvrste mase (sirovi prinos=962mg). Sirovi proizvod je prenesen u naredni korak. LC/MS rt-min (MH<+>): 2.55 (419.27) (postupak A).
Korak 5:
Rastvor sirovog proizvoda iz Koraka 4 (uzet 2.4mmol) u THF-u (10mL) i metanolu (10mL) je ohlađen do 0°C. Mešanom rastvoru je polako dodat TMSCN22M u heksanima (-1.3 ekv) pod atmosferom azota sve dok se gas više ne emituje iz rastvora. Potpuno izreagovani rastvor je zatim ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 25S kolone (eluiran sa 10%-50% etil acetatom u heksanima) da bi se dobilo čisto jedinjenje iz naslova u vidu bele pene (503 mg, 48% tokom koraka 4d-4e).
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 1.35-1.38 (rotameri, 3:2, 9H), 2.21-2.26 (m, 1H), 2.50-2.58 (m, 1H), 3.67-3.70 (m, 5H), 4.26-4.34 (m, 1H), 5.35 (br s, 1H), 7.14-7.15 (m, 1H), 7.47-7.55 (m, 4H), 8.05-8.09 (m, 2H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.69 (455.52) (postupak A).
Korak 6:
Rastvor čistog proizvoda iz Koraka 5 (503mg, 1.16mmol) u DCM (2.5 mL) i TFA (3.58mL) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Rastvarač je uklonjen in vacuo, a ostatak je suspendovan u 1N HCI u dietil etru (6mL) uz pažljivo mešanje i ukoncentrisan in vacuo. Ovaj postupak je ponovljen, a nastali proizvod je stavljen na uljnu pumpu da bi se dobila bela čvrsta masa u kvantitativnom prinosu. Sirovi proizvod je prenesen u sledeći korak.
Korak 7:
Proizvod iz Koraka 6 (uzet kvantitativni prinos, 1.83mmol) je dodat u rastvor BOC-t-butil-L-glicina (0.424g, 1.83mmol) u DCM (11mL), pod atmosferom azota. Posle ovog koraka je usledilo dodavanje HOBt (0.272 g, 2.02mmol), DIPEA (2.23mL, 12.82mmol) i HBTU (1.04g, 2.75mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 15 h. Rastvoru je dodato 15 mL DCM da bi se povećao volumen i reakcija je ugašena rastvorom pufera pH 4.00 (15mL). Smeša je zakiseljena do pH 4.5 korišćenjem 1N HCI, a vodena faza je ekstrahovana sa DCM (3x20mL). Organska faza je dva puta isprana sa rastvorom pufera pH 4.00 (20mL), zasićenim NaOH (25mL) i slanim rastvorom (20mL) i osušena je preko MgS04. Nastali rastvor je ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 40S kolone (eluiran sa 20%-50% etil acetatom u heksanima). Ovim prečišćavanjem je proizvedeno čisto jedinjenje iz naslova u vidu bele čvrste mase (454mg, 53%).<1>H NMR (DMSO-dB): § 0.96 (s, 9H), 1.19 (s, 9H), 2.17-2.29 (m, 1H), 2.48-2.58 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.81-3.89 (m, 1H), 4.05-4.08 (m, 1H), 4.21-4.26 (m, 1H), 4.44-4.50 (t, 1H), 5.45 (br s, 1H), 6.72-6.75 (d,J =15 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.46-7.51 (m, 4H), 8.02-8.06 (m, 2H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.27 (493.5) (postupak A).
Korak 8:
LiOH (0.0233g, 0.973mmol) je rastvoren u vodi (10mL) zagrevanjem i ozvučavanjem. Rastvor LiOH je dodat rastvoru čistog materijala iz Koraka 7 (483mg, 0.885mmol) u THF-u (10mL) i smeša je odmah prešla u boju blede breskve. Reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 1 h i zakiseljena je sa 1N HCI (0.973mL, 0.974 mmol). Reakcija je ugašena sa puferskim rastvorom pH 4.00, a pH je podešen do pH između 4 i 5. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x20mL), ispran slanim rastvorom (15mL) i osušen preko MgS04. Filtrirani rastvor je ukoncentrisan in vacuo i ostavljen na vakuumu preko noći. Sirovi proizvod (480mg,
>95% prinos) je prenesen u naredni korak.
<1>H NMR (DMSO-d6): 8 0.94 (s, 9H), 1.20 (s, 9H), 1.32-1.34 (m, 1H), 2.12-2.4 (m, 1H), 2.51-2.55 (m, 1H), 3.81-3.83 (d,J =10 Hz, 1H), 4.21-4.23 (d,J =10 Hz, 1H), 4.32-4.35 (t, 1H), 5.4 (br s, 1H), 6.63-6.65 (d, NH), 7.09 (s, 1H), 7.47-7.49 (m, 4H), 8.03-8.06 (m, 2H), 12.56 (s, 1H).
Korak 9:
Dipeptid iz Koraka 8 (100mg, 0.188mmo!) i 2-tiofenborna kiselina (0.0481 g, 0.376mmol) su podvrgnuti solvatizaciji u DMF-u (2mL). Rastvor je smešten pod atmosferu azota i dodat je 2M vodeni KF (0.282mL, 0.376 mmol). Dodat je pet mol procentni tetrakis(trifenil)fosfin)paladijum(0)
(0.011 mg, 0.0094mmol), a smeša je zagrevana mikrotalasno upotrebom Personal Chemistrv
Emrvs Optimizer-a tokom 30 min na 150°C. Tokom završavanja reakcije istaloži se paladijumsko crnilo. Mešavina je zakiseljena sa jednim ekvivalentom 1N HCI i filtrirana preko šprica korišćenjem MeOH da bi se proizvod ekstrahovao. Proizvod je prečišćen pomoću prep HPLC (kolona - 4 Xterra S5 5um 30 x 75 mm, rastvarač - 85% A / 15% B - 10% A / 90% B (gde je rastvarač A 10% MeOH, 90% H20, 0.1% TFA i rastvarač B je 90% MeOH, 10% H20, 0.1% TFA), gradijent vreme - 15 min, hold vreme - 1 min, brzina protoka - 40 mL/min, retenciono vreme čistog proizvoda - 16.23). Frakcije, koje sadrže željeni proizvod su neutralisane sa 1N NaOH i stavljene su u brzi vakuum tokom približno 2 sata. Frakcije su sjedinjene i dodat je pufer pH 4.0 (15mL). pH je doteran do pH 4-5 korišćenjem 1N HCI, a vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (3x20mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (15mL) osušen preko MgS04i ukoncentrisan in vacuo. Proizvod je stavljen na uljnu pumpu da se suši tokom noći i dobijeno je bledo žuto ulje (44mg, 40%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.7 (580.54) (postupak A).
Korak 10:
Proizvod iz Primera 413, Koraka 9 (43mg, 0.0742mmol) je rastvoren u DCM (2mL) i dodata je hlorovodonična so (1 (f?)-amino-2(S)-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline (Primer 1, Korak 8) (0.0198g, 0.0742mmol). Pod atmosferom azota su dodati DIPEA (0.0646mL, 0.371 mmol), a zatim i HATU (0.039g, 0.0104mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 4.5 sati. Rastvoru je dodato 10mL DCM da bi se povećao volumen i reakcija je ugašena rastvorom pufera pH 4.00 (10mL). Smeša je zakiseljena do pH 4-5 korišćenjem 1N HCI, a vodena faza je ekstrahovana sa DCM (3x15mL). Organska faza je dva puta isprana sa rastvorom pufera pH 4.00 (10mL) i slanim rastvorom (10mL), a zatim je osušena preko MgS04. Nastali rastvor je ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 12S kolone (eluiran sa 10%-50% acetonom u heksanima). Jedinjenje je izolovano i ponovo prečišćeno pomoću prep HPLC (kolona - YMC ODS-A 20 x 50 mm s5, rastvarač - 60% A / 40% B - 10% A / 90% B (gde je rastvarač A 10% MeOH, 90% H20, 0.1% TFA i rastvarač B je 90% MeOH, 10% H20, 0.1% TFA), gradijent vreme - 8 min, hold vreme - 2 min, brzina protoka - 25 mL/min, retenciono vreme čistog proizvoda - 8.702). Ovim prečišćavanjem je proizvedeno čisto Jedinjenje 413 u vidu bledo narandžastog ulja (22.3mg, 38%).
<1>H NMR: 5 1.02-1.29 (m, 24H), 1.42-1.45 (m, 1H), 1.87-1.89 (m, 1H), 2.24-2.30 (m, 2H), 2.53-2.57 (m, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 4.06-4.08 (d,J =10 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.31-4.33 (d,J =10 Hz, 1H), 4.45-4.49 (t, 1H), 5.12-5.14 (d,J =10 Hz, 1H), 5.29-5.32 (d,J =15 Hz, 1H), 5.46 (br s, 1H), 5.73-5.80 (m, 1H), 7.13-7.15 (m, 1H), 7.29-7.30 (d,J =5 Hz, 2H), 7.42-7.53 (m, 4H),
7.75-7.56 (d,J =5Hz, 1H), 8.07-8.09 (d,J= 10 Hz, 2H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.79 (792.72)
(postupak A).
Primer 414: Izrada Jedinjenja 414.
Korak 1:
Čisti materijal iz Primera 413, Korak 8 (100mg, 0.188mmol) i 4-metoksifenilborna kiselina (0.0429g, 0.282mmol) su solvatizovani u DMF-u (2.5mL). Rastvor je smešten pod atmosferu azota i dodat je 2M vodeni Na2C03(0.188mL, 0.376mmol). Dodat je pet mol procentni tetrakis(trifenil)fosfin)paladijum (0) (0.011 mg, 0.0094mmol) i smeša je zagrevana mikrotalasno upotrebom Personal Chemistrv Emrys Optimizer-a tokom 30 min na 150°C. Tokom završavanja reakcije istaloži se paladijumsko crnilo. Mešavina je zakiseljena sa jednim ekvivalentom 1N HCI i filtrirana preko šprica korišćenjem MeOH da bi se proizvod ekstrahovao. Proizvod je prečišćen pomoću prep. HPLC (kolona - Xterra MS C18 5um 30x50 mm, rastvarač - 90% A / 10% B - 10% A / 90% B (gde je rastvarač A 10% MeOH, 90% HzO, 0.1% TFA i rastvarač B je 90% MeOH, 10% H20, 0.1% TFA), gradijent vreme - 15 min, hold vreme - 1 min, brzina protoka - 45 mL/min, retenciono vreme čistog proizvoda - 13.72). Frakcije, koje sadrže željeni proizvod su neutralisane sa 1N NaOH i stavljene su u brzi vakuum tokom približno 2 sata. Frakcije su sjedinjene i dodat je pufer pH 4.0 (15mL). pH je doteran do pH 4-5 korišćenjem 1N HCI a vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (3x20mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (15mL) osušen preko MgS04i ukoncentrisan in vacuo. Proizvod je stavljen na uljnu pumpu da se suši
tokom noći i dobijeno je viskozno ulje (44mg, 50%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.23 (604.61) (postupak
A).
Korak 2:
Proizvod iz Primera 414, Koraka 1 (43mg, 0.0712mmol) je rastvoren u DCM (2mL) i dodata je hlorovodonična so (1(/?)-amino-2(S)-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline (Primer 1, Korak 8) (0.01899g, 0.0712mmol). Pod atmosferom azota su dodati DIPEA (0.062mL, 0.356mmol), a zatim i HATU (0.038g, 0.0997mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 4.5 sati. Rastvoru je dodato 10mL DCM da bi se povećao volumen i reakcija je ugašena rastvorom pufera pH 4.00 (10mL). Smeša je zakiseljena do pH 4-5 korišćenjem 1N HCI, a vodena faza je ekstrahovana sa DCM (3x15mL). Organska faza je dva puta isprana sa rastvorom pufera pH 4.00 (10mL) i slanim rastvorom (10mL), a zatim je osušena preko MgS04. Nastali rastvor je ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 12S kolone (eluiran sa 20%-50% acetonom u heksanima). Jedinjenje je izolovano i ponovo prečišćeno pomoću prep HPLC (kolona - YMC ODS-A 20x50 mm s5, rastvarač - 60% A / 40% B - 10% A / 90% B (gde je rastvarač A 10% MeOH, 90% H20, 0.1% TFA i rastvarač B je 90% MeOH, 10% H20, 0.1% TFA), gradijent vreme - 10 min, hold vreme - 2 min, brzina protoka - 25 mL/min, retenciono vreme čistog proizvoda - 7.43-8.24). Ovim prečišćavanjem je proizvedeno čisto Jedinjenje 414 u vidu bledo narandžastog ulja (19.4mg, 34%).<1>H NMR: 5 1.02-1.23 (m, 24H), 1.29-1.44 (m, 1H), 1.89-1.95 (m, 1H), 2.24-2.30 (q, 1H), 2.32-2.40 (m, 1H), 2.59-2.62 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 4.10-4.12 (d,J =10 Hz, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.42-4.56 (m, 2H), 5.12-5.14 (d,J =10 Hz, 1H), 5.28-5.31 (d,J= 15 Hz, 1H), 5.61 (br s, 1H), 5.72-5.80 (m, 1H), 7.14-7.16 (d,J =10 Hz, 2H), 7.52-7.54 (d,J= 10 Hz, 2H), 7.61-7.62 (m, 2H), 7.95-7.98 (m, 4H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.35 (816.76) (postupak A).
Primer 415:IzradaJedinjenja 415.
Korak 1:
Dipeptid iz Primera 413, Korak 8 (174mg, 0.327mmol) i fenilborna kiselina (0.06g, 0.491 mmol) su solvatizovani u DMF-u (4ml_). Rastvor je smešten pod atmosferu azota i dodat je 2M vodeni Na2C03(0.33ml_, 0.654mmol). Dodat je pet mol procentni tetrakis(trifenil)fosfin)paladijum (0)
(0.019mg, 0.0164mmol) i smeša je zagrevana mikrotalasno upotrebom Personal Chemistrv Emrys Optimizer-a tokom 30 min na 150°C. Tokom završavanja reakcije istaloži se paladijumsko crnilo. Mešavina je zakiseljena sa jednim ekvivalentom 1N HCI i filtrirana preko šprica korišćenjem MeOH da bi se proizvod ekstrahovao. Proizvod je prečišćen pomoću prep HPLC (kolona - 5 Xterra C-18 5um 30x100 mm, rastvarač - 80% A / 20% B - 0% A / 100% B (gde je rastvarač A 10% MeOH, 90% H20, 0.1% TFA i rastvarač B je 90% MeOH, 10% H20, 0.1% TFA), gradijent vreme - 20 min, hold vreme - 1 min, brzina protoka - 40 mL/min, retenciono vreme čistog proizvoda - 11.28-11.72). Frakcije, koje sadrže željeni proizvod su neutralisane sa 1N NaOH i stavljene su u brzi vakuum tokom približno 2 sata. Frakcije su sjedinjene i dodat je pufer pH 4.0 (15mL). pH je doteran do pH 4-5 korišćenjem 1N HCI a vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (4x15mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (15mL) osušen preko MgS04i ukoncentrisan in vacuo. Proizvod je stavljen na uljnu pumpu da se suši tokom noći. (31.5mg, 17%). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.54 (574.37) (postupak A).
Korak 2:
Proizvod iz Primera 415, Koraka 1 (31.5mg, 0.055mmol) je rastvoren u DCM (3mL) i dodata je hlorovodonična so (1 (fl)-amino-2(S)-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline (Primer 1, Korak 8) (0.0147g, 0.055mmol). Pod atmosferom azota su dodati DIPEA (0.048 mL, 0.275mmol), a zatim i HATU (0.029g, 0.077mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 3.5 sati, i dodato je dodatnih 0.3 ekvivalenta hlorovodonične soli (1(R)-amino-2(S)-vinil-ciklopropankarbonil)-amida ciklopropansulfonske kiseline. Reakciona smeša je ostavljena da se meša još 8 h. Rastvoru je dodato 10mL DCM da bi se povećao volumen i reakcija je ugašena rastvorom pufera pH 4.00 (10ml_). Smeša je zakiseljena do pH 4-5 korišćenjem 1N HCI, a vodena faza je ekstrahovana sa DCM (4x1 OmL). Organska faza je dva puta isprana sa rastvorom pufera pH 4.00 (10mL) i slanim rastvorom (10 mL), a zatim je osušena preko MgS04. Nastali rastvor je ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću prep HPLC (kolona - YMC ODS-A 30x50 mm, rastvarač - 80% A / 20% B - 10% A / 90% B (gde je rastvarač A 10% MeOH, 90% H20, 0.1% TFA i rastvarač B je 90% MeOH, 10% H20, 0.1% TFA), gradijent vreme - 20 min, hold vreme - 3 min, brzina protoka - 30 mL/min, retenciono vreme čistog proizvoda - 19.6). Ovim prečišćavanjem nije proizvedeno čisto jedinjenje, tako da je ono ponovo prečišćeno pomoću Biotage 12S kolone (eluiran sa 10%-15% acetonom u heksanima). Ovim prečišćavanjem je dobijeno čisto jedinjenje iz naslova u vidu bledo narandžastog ulja (22.3mg, 38%).<1>H NMR: 5 1.02-1.45 (m, 24H), 1.85-1.86 (m, 1H), 2.03-2.11 (m, 2H), 2.42-2.46 (m, 1H), 2.77-2.85 (m, 1H), 4.10-4.12 (m, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.31-4.33 (d,J =10 Hz, 1H), 4.49-4.54 (m, 1H), 5.03-5.05 (d,J =10 Hz, 1H), 5.20-5.24 (d,J =20 Hz, 1H), 5.44 (br s, 1H), 5.82-5.94 (m, 1H), 7.33 (s, 2H), 7.43-7.50 (m, 6H), 8.09-8.10 (d,J= 5 Hz, 4H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.37 (786.37) (postupak A).
Deo J:
U delu J, korišćeni LC/MS postupak je bio kako sledi:
Kolone: Postupak A: YMC ODS-A C18 S7 (4.6x33 mm)
Postupak B: YMC Xterra ODS S7 (3.0x50 mm)
Postupak C: Xterra ms C18 (4.6x33 mm)
Postupak D: YMC ODS-A C18 S3 (4.6x33 mm)
Gradient: 100% rastvarač A / 0% rastvarač B do 0% rastvarač A / 100% rastvarač B
Vreme gradijenta: 3 min
Hold vreme: 1 min
Brzina protoka: 5 mL/min
Detektorna talasna dužina: 220 nm
Rastvarači: Rastvarač A: 10% MeOH / 90% voda / 0.1% TFA. Rastvarač B: 90% MeOH / 10% voda / 0.1% TFA.
Primer 420: Izrada Jedinjenja 420.
Korak 1:
Rastvoru PPh3(16.8g, 63.9mmol) u THF-u (150mL) je dodat, kap po kap, DEAD (10.1mL, 63.9mmol) i rastvor je mešan tokom 30 min na sobnoj temperaturi. Polako je dodat rastvor Boc-cis(/.)-Hyp-OMe (10.5g, 42.6mmol) u THF-u (50ml_), a zatim 5-bromo-piridin-3-ol (pripremljen u skladu sa F.E. Ziegler et al., J. Am. Chem. Soc, (1973), 95, 7458) (8.90 g, 51.1 mmol), deo po deo. Nastali rastvor je mešan na 45°C tokom 18 h. Rastvor je ukoncentrisan in vacuo, a ostatak je raspodeljen između dietil etra (200ml_) i 1N NaOH (50ml_). Organska faza je osušena (MgSOJ i etarski rastvor je posle filtracije ukoncentrisan na polovinu svoje zapremine. Tako formirani talog je uklonjen filtracijom. Filtrirani deo je ukoncentrisan in vacuo i prečišćen pomoću Biotage 65M kolone (eluiran sa heksani/EtOAc 2:1, 3:2, 1:1) da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje (11.9g, 69%) u vidu crvenog ulja.<1>H NMR (CDCI3): 8 1.42-1.45 (s, 9H(rotameri)), 2.25-2.30 (m, 1H), 2.49-2.58 (m, 1H), 3.75, 3.81 (s, 3H(rotameri)), 3.66-3.81 (m, 2H(sakriven)), 4.42, 4.50 (t,J =8 Hz, IH(rotameri)), 4.92 (m, 1H), 7.36 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.32 (s, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.26 (401, 403) (postupak B).
Korak 2:
Proizvod iz Koraka 1 (2.34g, 5.83mmol) je rastvoren u DCM (20mL) i TFA (18ml_, 0.23mol) i mešan je na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo, a ostatak je raspodeljen između EtOAc i vode. Organska faza je ekstrahovana sa 1N HCI (25mL), a sjedinjeni vodeni ekstrakti su neutralisani zasićenim NaHC03(40ml_). Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (2x), a sjedinjeni organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom i osušeni (MgS04) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.02 g, 58%, slobodna baza) u vidu bezbojnog ulja.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 2.12-2.20 (m, 2H), 2.94 (d,J =12 Hz, 1H), 3.19 (dd,J= 4.5, 12 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.90 (t,J =8 Hz, 1H), 5.07 (m, 1H), 7.69 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.29 (s, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 0.78 (301, 302) (postupak B).
Korak 3:
U suspenziju proizvoda iz Koraka 2 (1.02g, 3.39mmol), /V-BOC-L-terc-leucina (862mg, 3.73mmol) i HOBt (458mg, 3.39mmol) u DCM (15mL) je dodata DIPEA (2.36mL, 13.6mmol), a zatim i HBTU (1.61 g, 4.24mmol). Nastali rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 15 sati, i ugašen je sa DCM i puferom pH 4 i nešto 1N HCI da bi se doterao pH do 4-5. Organska faza je isprana sa puferom pH 4, zasićenim NaHC03(dva puta) i slanim rastvorom i osušena je (MgS04). Prečišćavanjem, korišćenjem Biotage 40M kolone (eluiran sa heksan/EtOAc 3:2, 1:1) je dobijeno jedinjenje iz naslova (1.48g, 85%) u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.94 (s, 9H), 1.17 (s, 9H), 2.16-2.21 (m, 1H), 2.50 (m, (sakriven) 1H), 3.64 (s, 3H), 3.82 (d,J= 12 Hz, 1H), 4.06 (d,J =9.5, 1H), 4.16 (d,J =12 Hz, 1H), 4.45 (dd,J= 8, 9.5 Hz, 1H), 5.26 (m, 1H), 6.71 (d, J = 9 Hz, NH), 7.75 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.32 (s, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.35 (514, 516)
(postupak B).
Korak 4:
U mešavinu proizvoda iz Koraka 3 (98mg, 0.19mmol), Pd(PPh3)4(6.6 mg, 0.00573mmol), 2M vodenog Na2C03(0.191 mL, 0.381 mmol) u toluenu (2mL) dodat je rastvor fenil borne kiseline (29mg, 0.24mmol) u metanolu (0.1 mL). Rastvor je zagrevan pod azotom tokom 6 h, na 85°C. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je ugašena sa puferom pH 4 i ekstrahovana je sa EtOAc (2x1 OmL) i osušena (Na2S04). Prečišćavanjem, korišćenjem Biotage 12M kolone (eluiran sa heksan-EtOAc 2:3) je dobijeno jedinjenje iz naslova (72mg, 74%) u vidu bezbojnog ulja.<1>H NMR (metanol-d4): 8 1.05 (s, 9H), 1.31 (s, 9H), 2.29-2.35 (m, 1H), 2.68-2.72 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 4.00 (d,J= 12 Hz, 1H), 4.24 (d,J =9.5, 1H), 4.41 (d,J =12 Hz, 1H), 4.67 (dd,J =7.5, 10 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 6.51 (d,J= 9 Hz, NH), 7.79-7.85 (m, 3H), 8.39 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.67-8.68 (m, 2H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.16 (512) (postupak B).
Korak 5:
Rastvoru proizvoda iz Koraka 4 (150mg, 0.293mmol) u THF-u (2mL) i metanolu (2mL) je dodat LiOH (14mg, 0.59mmol) u vodi (2mL). Smeša je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi i ugašena sa 1N HCI do neutralnog pH. Organski isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo, a ostatku je dodat pufer pH 4. Proizvod je ekstrahovan u EtOAc (3x1 OmL) ispran sa slanim rastvorom / puferom pH 4 i osušen (MgS04) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova u kvantitativnom prinosu, kao bela čvrsta masa, posle trituracije iz pentana.<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.05 (s, 9H), 1.32 (s, 9H), 2.32-2.38 (m, 1H), 2.69-2.74 (m, 1H), 3.99 (dd,J =3, 12 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.40 (d,J =12, 1H), 4.64 (dd,J =7.5, 9.5 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 7.85-7.87 (m, 3H), 8.40 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.69-8.70 (m, 2H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.03 (499) (postupak B).
Korak 6:
U suspenziju proizvoda iz Koraka 5 (93mg, 0.19mmol) i proizvoda iz Primera 1, Koraka 8 (50mg, 0.19mmol) u DCM (2mL) je dodata DIPEA (0.163mL, 0.935mmol), a zatim i HBTU (92mg, 0.243mmol). Nastala mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 h i ugašena je sa DCM i puferom pH 4 i nešto 1N HCI da bi se doterao pH do 4-5. Slojevi su izdvojeni, a vodena faza je ekstrahovana sa DCM (10mL) i osušena (Na2S04). Prečišćavanjem, korišćenjem Biotage 12M kolone (eluiran gradijentom heksan-aceton 20-60%) je dobijeno jedinjenje iz naslova (65mg, 49%) u vidu belog praška.<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.95 (s, 9H), 1.03-1.05 (m, 2H), 1.08-1.10 (m, 2H), 1.26 (s, 9H), 1.36-1.39 (m, 1H), 1.69-1.72 (m, 1H), 2.09-2.21 (m, 2H), 2.41-2.45 (m, 1H), 2.92-2.94 (m, 1H), 3.91 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.08 (d,J= 7.5, 1H), 4.16 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.36 (t,J =8.5 Hz, 1H), 5.10 (d,J =10 Hz, 1H), 5.23 (d,J =17.5 Hz, 1H), 5.38 (m, 1H), 5.59-5.67 (m, 1H), 6.54 (s, NH), 7.41-7.46 (m, 1H), 7.50-7.53 (m, 2H), 7.65 (s, 1H), 7.74-7.75 (m, 2H), 8.28 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.92 (s, NH); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.08 (710) (postupak B).
Primer421:Izrada Jedinjenja 421.
Korak 1:
U hladni (-5°C) 48% vodeni rastvor HBr (35mL) je dodat 4-hloro-piridin-2-ilamin (4.18g, 32.5mmol; pripremljen u skladu sa K.S. Gudmundsson i sar.; Svnth. Commun (1997), 27, 861), a zatim je usledilo polagano dodavanje broma (6.7ml_, 0.13mol). Posle 20 min na istoj temperaturi je dodat natrijum nitrit (8.63g, 0.125mol) u vodi (40mL), a mešanje je nastavljeno tokom 30 min. Reakcija je ugašena, uz hlađenje ledom, sa 10N NaOH (ca 40mL) do alkalnog pH. Proizvod je ekstrahovan u EtOAc (2x100mL) i osušen (Na2S04). Sirovi materijal je prečišćen korišćenjem Biotage 40M kolone (eluiran sa 10% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.50g, 40%) u vidu bezbojnog ulja, koje je očvrslo stajanjem.<1>H NMR (DMSO-d6): 5 7.64 (dd,J = 1.5, 5.5 Hz, 1H), 7.94 (d,J= 1.5, 1H), 8.40 (d,J =5.5 Hz, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 1.65 (192, 194, 196) (postupak B).
Korak 2:
U rastvor A/-BOC-trans-L-Hyp-OH (3.22g, 13.9mmol) u DMSO (30mL) dodat je kalijum terc butoksid (3.90g, 34.8mmol), deo po deo, na sobnoj temperaturi pod atmosferom azota. Posle 1.5 h, proizvod iz Koraka 1 je dodat u DMSO (5mL). Smeša je mešana preko noći i ugašena vodom (150mL). Rastvor je ispran u EtOAc (100mL). Vodena faza je zakiseljena do pH 4 sa 1N HCI. Sirova karboksilna kiselina je ekstrahovana u EtOAc (tri puta) i osušena (MgS04). Ostatak u vidu smeđe čvrste mase je suspendovan u THF (20mL) i MeOH (20mL) i ohlađen do 0°C. Dodat je, kap po kap, rastvor trimetil silil diazometana (2M u heksanu, 12mL), rastvor je ukoncentrisan in vacuo posle 15 min. Prečišćavanje korišćenjem Biotage 40M kolone (eluiran sa heksani-EtOAc 2:1. 1:1) dobijeno jedinjenje iz naslova (3.47g, 62%) u vidu praška zatvoreno bele boje.<1>H NMR (DMSO-d6): 8 1.34, 1.38 (s, 9H(rotameri)), 2.24-2.29 (m, 1H), 2.43-2.50 (m, 1H), 3.57 (d,J =12.5, 1H), 3.64-3.68 (m, 1H), 3.66, 3.69 (s, 3H(rotameri)), 4.27-4.34 (m, 1H), 5.21 (m, 1H), 7.06 (d,J =6 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 8.20 (d,J =6 Hz, 1H); LC/MS rt-min (MH<4>): 2.59 (401, 403)
(postupak B).
Korak 3:
Proizvod iz Koraka 2 (2.00g, 4.98mmol) je suspendovan u 4N HCI u dioksanu (10mL) i 1N HCI u dietil etru (40mL) i mešan je preko noći na sobnoj temperaturi. Nastala suspenzija je ukoncentrisana in vacuo a ostatak je usitnjen iz pentana da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje u kvantitativnom prinosu u vidu belog praška. LC/MS rt-min (MH<+>): 0.24 (301, 303) (postupak B).
Korak 4:
Suspenziji proizvoda iz Koraka 3 (uzeto 4.98mmol), /V-ciklopentiloksi-karbonil-Merc-leucina (1.24g, 5.10mmol) i HOBT (673mg, 4.98mmol) u DCM (25mL) je dodat DIPEA (4.34mL, 24.9mmol), a zatim HBTU (2.36 g, 6.23mmol). Nastali rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 15 h i ugašen sa DCM i puferom pH 4 i 10mL 1N HCI kako bi se podesio pH na 4. Vodena faza je ekstrahovana DCM (dva puta). Sjedinjeni organski ekstrakti su isprani sa zasićenim NaHC03(dva puta) i slanim rastvorom i osušeni (MgS04). Prečišćavanjem, korišćenjem Biotage 40M kolone (eluiran sa heksan-EtOAc 3;2, 1;1) dobijeno je jedinjenjenje iz naslova (2.09g, 80%) u vidu bele pene.<1>H NMR (DMSO-d6): 8 0.94 (s, 9H), 1.43-1.74 (m, 8H), 2.18-2.23 (m, 1H), 2.46-2.49 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.87 (d,J =12 Hz, 1H), 4.08-4.13 (m, 1H), 4.42 (dd,J= 7.5, 9.5 Hz, 1H), 4.78 (m, 1H), 5.30 (m, 1H), 7.03-7.05 (m, 1H), 7.24 (s, 1H), 8.120 (d,J= 6 Hz, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.34 (526, 528) (postupak C).
Korak 5:
U rastvor proizvoda iz Koraka 4 (206mg, 0.391 mmol) u THF-u (2mL) i metanolu (2mL) dodat je LiOH (28mg, 1.2mmol) u vodi (2mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, a zatim je ugašena sa 1N HCI do neutralnog pH. Organski isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo, a ostatku je dodat pufer pH 4. Proizvod je ekstrahovan u EtOAc (2x20mL) i osušen (MgSOJ da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje (196 mg, 100%) u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (metanol-d4): 8 1.05 (s, 9H), 1.60-1.85 (m, 8H), 2.30-2.36 (m, 1H), 2.62-2.67 (m, 1H), 3.97 (d,J =12 Hz, 1H), 4.26 (s, 1H), 4.32 (d,J= 12 Hz, 1H), 4.58 (dd,J =7.5, 9.5 Hz, 1H), 4.89 (m, (sakriven) 1H), 5.29 (m, 1H), 7.03-7.05 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 8.19 (d,J =6 Hz, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.17 (512, 514) (postupak B).
Korak 6:
Ovaj proizvod je pripremljen u skladu sa Primerom 420, Korak 4 (reakciono vreme 20 h), u 20%-tnom prinosu, polazeći od proizvoda iz primera 421, Korak 5.<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.03 (s, 9H), 1.45-1.74 (m, 8H), 2.31-2.37 (m, 1H), 2.65-2.69 (m, 1H), 3.99 (dd,J =12, 3.0 Hz, 1H), 4.26 (d,J =9.5 Hz, 1H), 4.33 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.60 (dd,J =8.0, 9.5 Hz, 1H), 4.80 (m, 1H), 5.35 (m, 1H), 6.72 (d,J =9.0 Hz, NH), 7.02 (dd, J = 2.5, 6.0 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.5 (m, 3H (sakriven)), 7.91 (d,J =6.5 Hz, 1H), 8.46 (d,J =6.0 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.03 (510)
(postupak A).
Korak 7:
Jedinjenje 421 je pripremljeno u skladu sa Primerom 420, Korak 6 u 68%-tnom prinosu, polazeći od proizvoda iz primera 421, Korak 6.<1>H NMR (metanol-d4): 8 1.03 (s, 9H), 1.06-1.09 (m, 2H), 1.23-1.26 (m, 1H), 1.43 (dd,J =5.5, 9.5 Hz, 1H), 1.47-1.77 (m, 8H), 1.88 (dd,J =5.5, 8.5 Hz, 1H), 2.21-2.29 (m, 2H), 2.50-2.54 (m, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 4.06 (dd,J =3.0, 11.5 Hz, 1H), 4.28-4.30 (m, 2H), 4.44 (dd,J =7.0, 10.5 Hz, 1H), 4.82 (m, 1 H(sakriven)), 5.12 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 5.30 (d,J= 17 Hz, 1H), 5.37 (m, 1H), 5.73-5.80 (m, 1H), 6.92 (d,J =9.5, Hz, NH), 6.98 (dd,J =5.5, 2.0 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.43-7.50 (m, 3H), 7.90 (d,J= 7.0 Hz, 1H), 8.45 (d,J =5.5 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.37 (723) (postupak A).
Primer 422: Izrada Jedinjenja 422.
Korak 1:
U smešu proizvoda iz Primera 420, Korak 3 (102mg, 0.198mmol) i Pd(PPh3)4(23mg, 0.0198mmol) u toluenu (2ml_) dodat je 4-tributilstananilpiridin (87mg, 0.24mmol). Rastvor je zagrevan na 105°C, tokom 20 h pod azotom. Posle hlađenja do sobne temperature smeša je ugašena zasićenim NaHCOg i ekstrahovana sa EtOAc (2x100ml_) i osušena (Na2S04). Prečišćavanjem, korišćenjem Biotage 12M kolone (uz eluaciju gradijentom heksan-acetona 20-60%) dobijeno je naslovljeno jedinjenje (49mg, 49%) u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (metanol-d4): § 1.05 (s, 9H), 1.31 (s, 9H), 2.29-2.35 (m, 1H), 2.68-2.72 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 4.00 (d,J =12 Hz, 1H), 4.24 (d,J =9.5 Hz, 1H), 4.41 (d,J =12 Hz, 1H), 4.67 (dd,J =7.5, 10 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 6.51 (d,J =9.5 Hz, NH), 7.79-7.85 (m, 3H), 8.39 (s, 1H), 8.59 (m, 1H), 8.67-8.68 (m, 2H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.77 (514) (postupak C).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen istim postupkom kao što je opisano u Primeru 420, Korak 5 u kvantitativnom prinosu, osim što se koristi proizvod iz Primera 422, Korak 1.<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.05 (s, 9H), 1.32 (s, 9H), 2.32-2.38 (m, 1H), 2.69-2.74 (m, 1H), 3.99 (dd,J =3, 12 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.40 (d, J = 12 Hz, 1H), 4.64 (dd,J =7.5, 9.5 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 7.85-7.87 (m, 3H), 8.40 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.69-8.70 (m, 2H); LC/MS rt-min (MH<+>): 1.57 (500)
(postupak B).
Korak 3:
Jedinjenje 422 je pripremljeno istim postupkom kao što je opisano u Primeru 420, Korak 6 u 51%-tnom prinosu, u vidu bele čvrste mase, osim što je umesto navedenog korišćen proizvod iz Primera 422, Korak 2.<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.95 (s, 9H), 1.03 (m, 1H), 1.08 (m, 1H), 1.23 (s, 9H), 1.34-1.37 (m, 1H), 1.68-1.70 (m, 1H), 2.12-2.18 (m, 1H), 2.41-2.45 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.90 (d,J =11 Hz, 1H), 4.06 (d,J =9 Hz, 1H), 4.17 (d,J =11 Hz, 1H), 4.36 (dd,J =7, 10 Hz, 1H), 5.10 (d,J =12 Hz, 1H), 5.23 (d,J =16.5 Hz, 1H), 5.40 (m, 1H), 5.59-5.66 (m, 1H), 6.60 (d,J= 9 Hz, NH), 7.81-7.82 (m, 3H), 8.38 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.68-8.70 (m, 2H), 8.93 (s, NH), 10.4 (s, NH).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2.14 (711) (postupak D).
Primer 423: Izrada Jedinjenja 423.
Korak 1:
U rastvor proizvoda iz Primera 420, Koraka 3 (1.00g, 1.94mmol) u THF-u (5mL) i metanolu (5ml_) dodat je LiOH (140mg, 5.83mmol) u vodi (5mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h i ugašena je sa 1N HCI do neutralnog pH. Organski isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo i dodat je pufer pH 4, a proizvod je ekstrahovan u EtOAc (3x25mL) i osušen (MgS04) da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje (1.0g, 100%) u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.95 (s, 9H), 1.27 (s, 9H), 2.14-2.19 (m, 1H), 2.47-2.50 (m, 1H), 3.80 (d,J=11.5 Hz, 1H), 3.99-4.07 (m, 2H), 4.15 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.36 (dd,J =8, 10 Hz, 1H), 5.25 (m, 1H), 6.66 (d,J =9 Hz, NH), 7.75 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 12.5 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.47 (500, 502) (postupak A).
Korak 2:
Jedinjenje 423 je proizvedeno u skladu sa Primerom 420, Korak 6 u 52%-tnom prinosu, polazeći od proizvoda iz Primera 423, Korak 1 i Primera 8, Korak 3 (racemski P^ (1/?, 2S) i (1S,2R)).
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.93, 0.95 (s, 9H), 1.00-1.09 (m, 4H), 1.28, 1.29 (s, 1H), 1.37-1.39 (m, 1H), 1.69-1.72 (m, 1H), 2.09-2.22 (m, 2H), 2.36-2.46 (m, 1H), 2.88-2.94 (m, 1H), 3.82-3.87 (m, 1H), 4.02-4.04 (m, 1H), 4.10-4.15 (m, 1H), 4.31-4.34 (m, 1H), 5.10 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.22-5.28 (m, 1H), 5.54-5.66 (m, 1H), 6.56, 6.60 (d,J =9.5 Hz, NH), 7.74, 7.76 (s, 1H), 8.28-8.29 (m, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.79, 8.89 (s, 1H).
LC/MS rt-min (MH<+>): 2.42 (712, 714) (postupak B).
Primer 424: Izrada Jedinjenja 424.
Korak 1:
U rastvor proizvoda iz Primera 423, Korak 1 (91 mg, 0.18mmol) i Pd(PPh3)4(10.5mg, 0.0091mmol) i 3-furil borne kiseline (25.4mg, 0.227 mmol) u DMF-u (2mL) dodat je 2M vodeni Na2C03(0.273mL, 0.546 mmol). Smeša je zagrevana na 110°C, tokom 2.5 h pod azotom. Posle hlađenja do sobne temperature čvrsti delovi su odstranjeni filtracijom, a filtrat je ukoncentrisan in vacuo. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (gradijent 30-80% B) da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje (64mg, 72%) u vidu bele čvrste mase.<1>H NMR (DMSO-d6): 6 0.95 (s, 9H), 1.25 (s, 9H), 2.17-2.21 (m, 1H), 2.50 (m, (sakriven)IH), 3.84-3.86 (m, 1H), 4.09-4.15 (m, 2H), 4.37 (t,J =9 Hz, 1H), 5.28 (m, 1H), 6.67 (d,J =9 Hz, NH), 7.08 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 12.6 (s, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 1.60 (488) (postupak B).
Korak 2:
Jedinjenje 424 je pripremljeno u skladu sa Primerom 420, Korak 6 u 55%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 424, Korak 1.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.02 (s, 9H), 1.05-1.09 (m, 2H), 1.22-1.25 (m, 2H), 1.34 (s, 9H), 1.42-1.45 (m, 1H), 1.86-1.89 (m, 1H), 2.21-2.26 (m, 1H), 2.48-2.52 (m, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 4.02 (d,J =12 Hz, 1H), 4.24-4.29 (m, 2H), 4.43-4.47 (dd,J =7.5, 10.5 Hz, 1H), 5.12 (d,J= 10.5 Hz, 1H), 5.28-5.32 (m, 1H), 5.73-5.81 (m, 1H), 6.63 (d,J =9 Hz, NH), 6.90 (s, 1H), 7.60-7.62 (m, 2H), 8.07 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.39 (s, NH). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.30 (700) (postupak E).
Primer 425: Izrada Jedinjenja 425.
Jedinjenje 425 je pripremljeno u skladu sa Primerom 421, Korak 7 u 45%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 421, Korak 5.
<1>H NMR (DMSO-d6): S 0.95 (s, 9H), 1.03-1.04 (m, 1H), 1.08-1.09 (m, 1H), 1.33-1.36 (m, 1H), 1.46-1.75 (m, 9H), 2.08-2.12 (m, 1H), 2.17 (q,J =9 Hz, 1H), 2.35-2.38 (m, 1H), 2.88-2.93 (m, 1H), 3.91 (d,J =9.5 Hz, 1H), 4.05-4.10 (m, 2H), 4.27 (dd,J =10.7, 10.5 Hz, 1H), 4.80 (m, 1H), 5.10 (d, J = 12 Hz, 1H), 5.23 (d,J =16.5 Hz, 1H), 5.32 (m, 1H), 5.58-5.66 (m, 1H), 6.94 (d,J =9 Hz, NH), 7.03-7.05 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 8.21 (d,J =6 Hz, 1H), 8.86 (s, NH), 10.4 (s, NH); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.56 (724, 726) (postupak D).
Primer 426: Izrada Jedinjenja 426.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen u skladu sa Primerom 421, Korak 6 u 65%-tnom prinosu, osim što se koristi 3-furanoborna kiselina.<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.03 (s, 9H), 1.49-1.76 (m, 8H), 2.30-2.35 (m, 1H), 2.63-2.67 (m, 1H), 3.98 (d,J =12 Hz, 1H), 4.26 (t,J =9 Hz, 1H), 4.31 (d,J =12 Hz, 1H), 4.58 (t,J =8.0 Hz, 1H), 5.32 (m, 1H), 6.71 (d,J =9.5 Hz, 1H), 6.92 (d,J =2.5, 6.0 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 7.25 (d,J= 2.5 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.35 (d,J =5.5 Hz, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 1.94 (500) (postupak D).
Korak 2:
Jedinjenje 426 je pripremljeno u skladu sa Primerom 421, Korak 7 u 57%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 426, Korak 1.
<1>H NMR (DMSO-d6): 8 0.95 (s, 9H), 1.03-1.04 (m, 2H), 1.08-1.09 (m, 2H), 1.34-1.71 (m, 8H), 2.09-2.20 (m, 2H), 2.37-2.41 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 3.96 (d,J =9.5 Hz, 1H), 4.07-4.11 (m, 2H), 4.29 (m, 1H), 4.78 (m, 1H), 5.10 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.23 (d,J =17 Hz, 1H), 5.34 (m, 1H), 5.59-5.66 (m, 1H), 6.87-6.91 (m, 2H), 7.08 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.39 (d,J =6 Hz, 1H), 8.90 (s, NH), 10.4 (s, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.38 (712) (postupak D).
Primer 427: Izrada Jedinjenja 427.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen u skladu sa Primerom 421, Korak 6 u 86%-tnom prinosu, osim što se koristi 4-fluorofenilborna kiselina.<1>H NMR (metanol-d4): § 1.03 (s, 9H), 1.44-1.75 (m, 8H), 2.30-2.36 (m, 1H), 2.64-2.69 (m, 9H), 3.99 (dd,J =12, 3.5 Hz, 1H), 4.26 (d,J =9.5 Hz, 1H), 4.32 (d,J =12 Hz, 1H), 4.59 (dd,J =8.0, 9.5 Hz, 1H), 4.81 (m, 1H), 5.34 (m, 1H), 6.73 (d,J =9.5 Hz, NH), 6.99 (dd,J =2.5, 6.0 Hz, 1H), 7.20 (t, 2H(sakriven)), 7.36 (s, 1 H(sakriven)), 7.94-7.99 (m, 2H), 8.44 (d,J =6.0 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.22 (528) (postupak A).
Korak 2:
Jedinjenje 427 je pripremljeno u skladu sa Primerom 421, Korak 7 u 53%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 427, Korak 1.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.03 (s, 9H), 1.06-1.09 (m, 2H), 1.23-1.26 (m, 2H), 1.43 (dd,J =5.0, 9.5 Hz, 1H), 1.47-1.78 (m, 8H), 1.88 (dd,J =5.5, 8.0 Hz, 1H), 2.21-2.29 (m, 2H), 2.49-2.53 (m, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 4.05 (dd,J =3.0, 11.5 Hz, 1H), 4.27-4.29 (m, 2H), 4.44 (dd,J =7.0, 10.5 Hz, 1H), 4.83 (m, 1 H(sakriven)), 5.12 (d,J =10 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17 Hz, 1H), 5.37 (m, 1H), 5.73-5.80 (m, 1H), 6.93 (d,J =9.5 Hz, NH), 6.98 (m, 1H), 7.21 (t,J= 9.0 Hz, 2H), 7.36 (s, 1H), 7.94-7.97 (m, 2H), 8.44 (d,J =6.0 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.42 (741) (postupak A).
Primer 428: Izrada Jedinjenja 428.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen u skladu sa Primerom 421, Korak 6 u 37%-tnom prinosu, osim što se koristi 4-metoksifenilborna kiselina.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.03 (s, 9H), 1.45-1.74 (m, 8H), 2.31-2.36 (m, 1H), 2.64-2.68 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.98 (dd,J= 12, 3.5 Hz, 1H), 4.25 (d,J =9.0 Hz, 1H), 4.33 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.59 (dd,J =8.0, 10 Hz, 1H), 4.77 (m, 1H), 5.36 (m, 1H), 6.72 (d,J =9.0 Hz, NH), 7.01 (m, 1H), 7.04 (d,J= 9.0 Hz, 2H), 7.37 (d,J= 2.0 Hz), 7.86 (d,J =9.0 Hz, 2H), 8.42 (d,J =6.0 Hz, 1H); LC/MS rt-min (MH<+>): 2.09 (540) (postupak A).
Korak 2:
Jedinjenje 428 je pripremljeno u skladu sa Primerom 420, Korak 6 u 72%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 428, Korak 1.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.03 (s, 9H), 1.06-1.09 (m, 2H), 1.23-1.25 (m, 2H), 1.43 (dd,J= 5.5, 9.5 Hz, 1H), 1.48-1.77 (m, 8H), 1.88 (dd,J=5.0, 8.0 Hz, 1H), 2.21-2.28 (m, 2H), 2.50-2.54 (m, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 4.05 (d,J =12 Hz, 1H), 4.27-4.29 (m, 2H), 4.44 (dd,J =7.0, 10.5 Hz, 1H), 4.84 (m, 1H(sakriven)), 5.12 (d,J =10 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17 Hz, 1H), 5.37 (m, 1H), 5.72-5.80 (m, 1H), 6.89 (d,J =9.5 Hz, NH), 6.95 (dd, J = 2.5, 6.0 Hz, 1H), 7.03 (d,J =9.0 Hz, 1H), 7.33 (d,J= 2.5 Hz, 1H), 7.86 (d,J =9.0 Hz, 2H), 8.41 (d, J = 6.0 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.40 (753) (postupak A).
Primer 429: Izrada Jedinjenja 429.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen u skladu sa Primerom 421, Korak 6 u 22%-tnom prinosu, osim što se koristi 2-tiofenborna kiselina.
<1>H NMR (metanol-d4): 8 1.03 (s, 9H), 1.46-1.74 (m, 8H), 2.29-2.35 (m, 1H), 2.63-2.67 (m, 1H), 3.97 (d,J =12 Hz, 1H), 4.26 (d,J =8.5 Hz, 1H), 4.31 (d,J =12 Hz, 1H), 4.60 (t,J= 8.5 Hz, 1H), 4.81 (m, 1 H(sakriven)), 5.31 (m, 1H), 6.87-6.89 (m, 2H), 7.13 (d,J =5.0 Hz, 1H), 7.52 (s, 1 H(sakriven)), 7.70 (d,J=2.5 Hz, 1H), 8.32 (d, J = 6.0 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.96 (516)
(postupak A).
Korak 2:
Jedinjenje 429 je pripremljeno u skladu sa Primerom 420, Korak 6 u 57%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 429, Korak 1.
<1>H NMR (metanol-d4): 8 1.02 (s, 9H), 1.07 (m, 2H), 1.24 (m, 2H), 1.43 (dd,J=5.5, 9.5 Hz, 1H), 1.53-1.78 (m, 8H), 1.88 (dd,J =5.5, 8.0 Hz, 1H), 2.21-2.28 (m, 2H), 2.49-2.53 (m, 1H), 2.92-2.96 (m, 1H), 4.04 (d,J =10 Hz, 1H), 4.26-4.29 (m, 2H), 4.43 (t,J =9.0 Hz, 1H), 4.82 (m, IH(sakriven)), 5.12 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.29 (d,J =17.5 Hz, 1H), 5.35 (m, 1H), 5.73-5.80 (m, 1H), 6.89 (d,J =4.5 Hz, 1H), 6.92 (d,J =4.5 Hz, NH), 7.13 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.51 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 8.32 (d, J = 5.5 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.37 (728) (postupak A).
Primer 430: Izrada Jedinjenja 430.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen u skladu sa Primerom 421, Korak 6 u 17%-tnom prinosu, osim što se koristi 3-tiofenborna kiselina.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.03 (s, 9H), 1.43-1.74 (m, 8H), 2.30-2.36 (m, 1H), 2.64-2.68 (m, 1H), 3.98 (dd,J= 11.5, 3.0 Hz, 1H), 4.25 (d,J= 9.0 Hz, 1H), 4.32 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.60 (dd,J= 8.0, 9.5 Hz, 1H), 4.80 (m, 1 H(sakriven)), 5.33 (m, 1H), 6.96 (d,J =2.5, 6.0 Hz, 1H), 7.36 (s, 1 H(sakriven)), 7.51 (s, 1 H(sakriven), 7.67 (d,J =5.0 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 8.39 (d,J =6.0 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.94 (516) (postupak A).
Korak 2:
Jedinjenje 430 je pripremljeno u skladu sa Primerom 420, Korak 6 u 45%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 430, Korak 1.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.02 (s, 9H), 1.06 (m, 2H), 1.29 (m, 2H), 1.43 (dd,J=5.5, 9.5 Hz, 1H), 1.43-1.75 (m, 8H), 1.87 (dd,J =6.0, 7.5 Hz, 1H), 2.20-2.27 (m, 2H), 2.49-2.53 (m, 1H), 2.93-2.95 (m, 1H), 4.05 (d,J =9.0 Hz, 1H), 4.27-4.29 (m, 2H), 4.42-4.45 (m, 1H), 4.85 (m, 1 H(sakriven)), 5.12 (d,J=10.0 Hz, 1H), 5.29 (d,J=17.5 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 5.73-5.80 (m, 1H), 6.92-6.94 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.66 (d,J =4.5 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 8.38 (d,J= 5.5 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.36 (728) (postupak A).
Primer 431: Izrada Jedinjenja 431.
Korak 1:
U smešu proizvoda iz Primera 421, Korak 5 (100mg, 0.195mmol) i Pd(PPh3)4(23mg, 0.0195mmol) u dioksanu (3ml_) dodat je 2-tributilstananiltiazol (95mg, 0.254mmol) i trietilamin (82jjL, 0.585mmol). Rastvor je zagrevan na 95°C, tokom 5 h pod azotom, a zatim, na 105°C, tokom 15 h. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je filtrirana i ukoncentrisana. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC ( gradijent 30-80% B). Sjedinjene frakcije su raspodeljene između pufera pH 4 i dihlorometana. Vodena faza je ekstrahovana sa dihlorometanom, a sjedinjeni organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom i osušeni (MgS04). Naslovljeno jedinjenje (31 mg) je dobijeno u vidu bezbojnog ulja, koje je značajno kontaminirano ostatkom tributilstanila.
'H NMR (metanol-d4): 5 1.03 (s, 9H), 1.4 (m, 8H(sakriven)), 2.32-2.36 (m, 1H), 2.64-2.68 (m, 1H), 4.00 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.33 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.60 (t,J= 8.5 Hz, 1H), 4.80 (m, 1 H(sakriven)), 5.33 (m, 1H), 7.03 (br s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 8.41 (d,J =5.5 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.25 (517) (postupak A).
Korak 2:
Jedinjenje 431 je pripremljeno u skladu sa Primerom 420, Korak 6 u 41%-tnom prinosu, polazeći od proizvoda iz Primera 431, Korak 1.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.02 (s, 9H), 1.06-1.70 (m, 13H), 1.86-1.89 (m, 1H), 2.22-2.31 (m, 2H), 2.51-2.55 (m, 1H), 2.92-2.94 (m, 1H), 4.06 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.23-4.32 (m, 2H), 4.44-4.47 (m, 1H), 4.82 (m, IH(sakriven)), 5.12 (d,J =11 Hz, 1H), 5.30 (d,J= 17 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 5.73-5.81 (m, 1H), 6.90 (d,J =9.0 Hz, NH), 7.04 (m, 1H), 7.71 (m, 2H), 7.93 (s, 1H), 8.42 (d, J = 5.5 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.46 (729) (postupak A).
Primer 432: Izrada Jedinjenja 432.
Korak 1:
U smešu proizvoda iz Primera 423, Korak 1 (102mg, 0.204mmol) i Pd(PPh3)4(24mg, 0.0204mmol) u dioksanu (3mL) dodat je 2-tributilstananiltiazol (99mg, 0.265mmol) i trietilamin (85u,L, 0.612mmol). Rastvor je zagrevan na 95°C, tokom 5 h pod azotom, a zatim, na 105°C, tokom 15 h. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je filtrirana i ukoncentrisana. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (gradijent 30-80% B). Sjedinjene frakcije su neutralisane koncentrovanim amonijakom i ukoncentrisane. Ostatak je raspodeljen između pufera pH 4 i dihlorometana. Vodena faza je ekstrahovana sa dihlorometanom, a sjedinjeni organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom i osušeni (MgS04). Naslovljeno jedinjenje (33mg) je dobijeno u vidu bezbojnog ulja, koje je značajno kontaminirano ostatkom, koji sadrži tributilstanil.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.03 (s, 9H), 1.30 (s, 9H), 2.28-2.32 (m, 1H), 2.62-2.67 (m, 1H), 3.98 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.34 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.58 (t,J =9.0 Hz, 1H), 5.31 (m, 1H), 7.71 (d,J =2.5 Hz, 1H), 7.94-7.96 (m, 2H), 8.33 (s, 1H), 8.73 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+->Boc): 2.21 (405) (postupak A).
Korak 2:
Jedinjenje 432 je pripremljeno u skladu sa Primerom 420, Korak 6 u 42%-tnom prinosu, polazeći od proizvoda iz Primera 432, Korak 1.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.02 (s, 9H), 1.07-1.08 (m, 2H), 1.24 (m, 2H), 1.32 (s, 9H), 1.44 (m, 1 H(sakriven)), 1.86-1.89 (m, 1H), 2.21-2.29 (m, 2H), 2.51-2.55 (m, 1H), 2.93-2.95 (m, 1H), 4.04 (d,J =12 Hz, 1H), 4.23 (d,J =9.5 Hz, 1H), 4.33 (d,J =12 Hz, 1H), 4.47 (t,J= 9.5 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.0 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 18 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 5.72-5.81 (m, 1H), 6.62 (d,J =8.5 Hz, NH), 7.73 (s, 1H), 7.96 (m, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.74 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.42
(717) (postupak A).
Primer 433: Izrada Jedinjenja 433.
Korak 1:
U smešu proizvoda iz Primera 420, Korak 3 (1.00g, 1.94mmol) i Pd(PPh3)4(112mg, 0.097mmol) u dioksanu (15mL) dodat je tributil(1-etoksivinil)kalaj (876mg, 2.43mmol). Rastvor je zagrevan na 105°C, tokom 6 h pod azotom. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je filtrirana i ukoncentrisana. Ostatak je raspodeljen između zasićenog NaHC03i etil acetata. Vodena faza je ekstrahovana sa etilacetatom, a sjedinjeni organski ekstrakti su isprani 5%-tnim vodenim KF i slanim rastvorom i osušeni (MgS04). Prečišćavanjem, korišćenjem Biotage 40M kolone (uz eluaciju sa gradijentom heksan-EtOAc 40-70%) dobijeno je naslovljeno jedinjenje (624mg, 64%) u vidu žutog ulja.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.95 (s, 9H), 1.27(s, 9H), 1.35 (t,J =7.0 Hz, 3H), 2.16-2.21 (m, 1H), 2.50 (m, 1 H(sakriven)), 3.64 (s, 3H), 3.85 (d,J =11 Hz, 1H), 3.90 (q,J =7.0 Hz, 2H), 4.09 (d,J =9.0 Hz, 1H), 4.13 (d,J =11 Hz, 1H), 4.40 (d,J =2.5 Hz, 1H), 4.45 (t,J =8.0 Hz, 1H), 4.91 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.27 (m, 1H), 6.69 (d,J =9.0 Hz, NH), 7.48 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.46 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.14 (507) (postupak B).
Korak 2:
U rastvor proizvoda iz Primera 433, Korak 1 (125mg, 0.247) u THF-u (3mL) i vodi (111 u,L, 6.18mmol) dodat je NBS (44mg, 0.247mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 20 min, smeša je ukoncentrisana i raspodeljena između etil acetata i slanog rastvora. Organska faza je osušena (MgS04) da bi se dobio intermedijerni bromometil keton. Ovaj intermedijer je rastvoren u DMF-u i obrađen je sa tioacetamidom (24mg, 0.321 mmol) i NaHC03(51 mg, 0.371 mmol). Smeša je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi, ukoncentrisana je i suspendovana u zasićenom NaHC03. Proizvod je ekstrahovan sa etil acetatom (2x), ispran slanim rastvorom i osušen (MgS04). Prečišćavanjem, korišćenjem Biotage 12M kolone (uz eluaciju sa gradijentom heksan-EtOAc 50-70%) dobijeno je naslovljeno jedinjenje (50mg, 38%) u vidu bledog ulja.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.02 (s, 9H), 1.31 (s, 9H), 2.27-2.31 (m, 1H), 2.63-2.67 (m, 1H), 2.77 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.98 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 4.22 (d,J =9.5 Hz, 1H), 4.34 (d,J= 10.5 Hz, 1H), 4.64 (t,J =9.0 Hz, 1H), 5.29 (m, 1H), 6.38 (s, NH), 7.87 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.71 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.96 (533) (postupak B).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 420, Korak 5, osim što je korišćen proizvod iz Primera 433, Korak 2.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.96 (s, 9H), 1.25 (s, 9H), 2.18-2.23 (m, 1H), 2.50 (m, 1 H(sakriven)), 2.73 (s, 3H), 3.86 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.10 (d,J =9.0 Hz, 1H), 4.14 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.39 (t,J =8.5 Hz, 1H), 5.30 (m, 1H), 6.60 (br s, NH), 7.84 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.78 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.84 (519) (postupak B).
Korak 4:
Jedinjenje 433 je pripremljeno prema Primeru 420, Korak 6, u 46%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 433, Korak 3.
<1>H NMR (metanol-d4): 6 1.05 (s, 9H), 1.09-1.11 (m, 2H), 1.26-1.29 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.45-1.48 (m, 1H), 1.89-1.92 (m, 1H), 2.25-2.30 (m, 2H), 2.53-2.57 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.94-3.00 (m, 1H), 4.06 (d,J =10.5 Hz, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.32 (d,J =12 Hz, 1H), 4.48 (dd,J =10.5, 7.0 Hz, 1H), 5.15 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.33 (d,J =17 Hz, 1H), 5.35 (m, 1H), 5.76-5.83 (m, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.95 (m, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.74 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.21 (732)
(postupak B).
Primer434: Izrada Jedinjenja 434.
Korak 1:
U rastvor proizvoda iz Primera 421, Korak 1 (300mg, 1.56mmol) i Pd(PPh3)4(90mg, 0.078mmol) u DMF-u (6ml_) dodati su 1-metil-2-(tributilstanil)-1 H-pirol (750mg, 2.03mmol) i trietilamin (0.435ml_, 3.12 mmol). Rastvor je zagrevan na 150°C, tokom 30 min pod azotom u mikrotalasnoj sušnici (Emrvs, Personal Chemistrv). Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena dietil etrom i 5% vodenim KF i filtrirana. Vodena faza je ekstrahovana sa dietil etrom (2x). Sjedinjeni organski ekstrakti su isprani 5% vodenim KF, vodom i slanim rastvorom i osušeni (MgS04). Prečišćavanjem, korišćenjem Biotage 25S kolone (uz eluaciju sa gradijentom heksan-dietil etar 0-5%) dobijeno je naslovljeno jedinjenje (169mg, 56%) u vidu bezbojnog ulja.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 3.94 (s, 3H), 6.10 (s, 1H), 6.77 (d,J =2.0 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 7.27 (d,J= 4.0 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 8.49 (d,J =5.0 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.15 (193, 195)
(postupak B).
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 421, Korak 2, u 39%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 434, Korak 1.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.42, 1.43 (s, 9H(rotameri)), 2.27-2.34 (m, 1H), 2.55-2.62 (m, 1H), 3.75 (m, 2H), 3.76, 3.74 (s, 3H(rotameri)), 3.84 (s, 3H), 4.39-4.45 (m, 1H), 5.19 (m, 1H), 6.10 (m, 1H), 6.49 (m, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.80-6.82 (m, 1H), 7.07 (s, 1H), 8.35 (d,J= 6.0 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>, karboksilna kiselina): 1.49 (389) (postupak B).
Korak 3:
Proizvod iz Primera 434, Korak 2 (90mg, 0.22mmol) je rastvoren u dihlorometanu (1.5mL) i TFA (1.0mL, 9.0mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi, tokom 45 min i ukoncentrisan je. Ostatak je obrađen sa 1N HCI u dietil etru (5mL) i ukoncentrisan je. Jedinjenje iz naslova je dobijeno u kvantitativnom prinosu u vidu bledog ulja.
LC/MS rt-min (MH<+>): 0.32 (302) (postupak B).
Korak 4:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 420, Korak 3, u 80%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 434, Korak 3.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.02 (s, 9H), 1.31 (s, 9H), 2.25-2.31 (m, 1H), 2.61-2.64 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.97-3.99 (m, 1H), 4.22 (d,J =9.5 Hz, 1H), 4.32 (d,J= 11.5 Hz, 1H), 4.61 (t,J =7.5 Hz, 1H), 5.27 (m, 1H), 6.10 (m, 1H), 6.42 (br d,J =9.0 Hz, NH), 6.40 (m, 1H), 6.78 (m, 1H), 6.81 (m, 1H), 7.07 (s, 1H) 8.34 (d,J =5.5 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.81 (516)
(postupak B).
Korak 5:
U rastvor proizvoda iz Primera 434, Korak 4 (92mg, 0.179mmol) u THF-u (1mL) i metanolu (1mL) dodat je LiOH (13mg, 0.536mmol) u vodi (1mL). Smeša je mešana tokom 1.5 h na sobnoj temperaturi i ugašena sa 1N HCI do neutralnog pH. Organski isparljivi delovi su odstranjeni in vacuo, a ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (gradijent 10-80% B). Sjedinjene frakcije su neutralisane koncentrovanim amonijakom i ukoncentrisane. Ostatak je raspodeljen između pufera pH 4 i etil acetata. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom, a sjedinjeni organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom i osušeni (MgS04). Jedinjenje iz naslova (56 mg, 62%) je dobijeno u vidu bele čvrste mase.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.03 (s, 9H), 1.32 (s, 9H), 2.31-2.35 (m, 1H), 2.62-2.67 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.98 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.21-4.23 (m, 1H), 4.33 (d,J =11.5 Hz, 1H), 4.58 (t,J =8.0 Hz, 1H), 5.31 (m, 1H), 6.12 (m, 1H), 6.40 (br d, J = 8.0 Hz, NH), 6.52 (m, 1H), 6.82 (m, 1H), 6.87 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 8.36 (d,J= 5.5 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.73 (502) (postupak
B).
Korak 6:
Jedinjenje 434 je pripremljeno prema Primeru 420, Korak 6, u 68%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 434, Korak 5.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.02 (s, 9H), 1.06-1.09 (m, 2H), 1.23-1.26 (m, 2H), 1.33 (s, 9H), 1.42-1.45 (m, 1H), 1.86-1.89 (m, 1H), 2.21-2.27 (m, 2H), 2.47-2.51 (m, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 4.04 (d,J =12 Hz, 1H), 4.24 (d,J =10.0 Hz, 1H), 4.28 (d,J =12 Hz, 1H), 4.43 (dd, J
= 10.0, 7.0 Hz, 1H), 5.12 (d,J =10.0 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17 Hz, 1H), 5.32 (m, 1H), 5.73-5.80 (m, 1H), 6.10 (m, 1H), 6.49 (m, 1H), 6.64 (br d, J = 9.0 Hz, NH), 6.79 (m, 1H), 6.82 (m, 1H), 7.08 (s, 1H), 8.35 (d,J=5.5 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.08 (714) (postupak B).
Primer 435: Izrada Jedinjenja 435.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 421, Korak 2, u 74%-tnom prinosu polazeći od 2,6-dibromopiridina.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 1.34, 1.38 (s, 9H(rotameri)), 2.23-2.31 (m, 1H), 2.43-2.47 (m, 1 H(sakriven)), 3.53 (d,J=12 Hz, 1H), 3.66, 3.69 (s, 3H(rotameri)), 3.72-3.75 (m, 1H), 4.29-4.34 (m, 1H), 5.42 (m, 1H), 6.89 (d,J= 7.5 Hz, 1H), 7.26 (d,J= 7.5 Hz, 1H), 7.68 (t,J =7.5 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.62 (523, 425) (postupak A).
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 420, Korak 2, u kvantitativnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 435, Korak 1.
LC/MS rt-min (MH<+>): 1.42 (301, 303) (postupak B).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 420, Korak 3, u 96%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 435, Korak 2.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.95 (s, 9H), 1.28 (s, 9H), 2.20-2.26 (m, 1H), 2.45-2.48 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.94 (d,J =9.5 Hz, 1H), 4.01-4.08 (m, 2H), 4.45 (t,J =8.5 Hz, 1H), 5.53 (m, 1H), 6.66 (d,J= 7.0 Hz, 1H), 6.82 (d,J =7.0 Hz, 1H), 7.25 (d,J =7.0 Hz, 1H), 7.64-7.69 (m, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.73 (514, 516) (postupak A).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 420, Korak 5, u kvantitativnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 435, Korak 2.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.95 (s, 9H), 1.28 (s, 9H), 2.19-2.25 (m, 1H), 2.43-2.47 (m, 1H), 3.94 (m, 1H), 4.01-4.08 (m, 2H), 4.36 (t,J =8.5 Hz, 1H), 5.52 (m, 1H), 6.65 (d,J =8.0 Hz, 1H), 6.82 (d,J =7.5 Hz, 1H), 7.25 (d,J =7.5 Hz, 1H), 7.67 (t,J =7.5 Hz, 1H), 12.6 (s, 1H). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.51 (522, 524) (postupak B).
Korak 4:
U rastvor proizvoda iz Primera 435, Korak 3 (125mg, 0.250mmol) i Pd(PPh3)4(14.4mg, 0.0125mmol) i 3-furil borne kiseline (35mg, 0.313 mmol) u DMF-u (2ml_) i vodi (0.025mL) dodat je Cs2C03(244mg, 0.750 mmol). Smeša je zagrevana na 105°C, tokom 3 h pod azotom. Posle hlađenja do sobne temperature čvrsta masa je uklonjena filtracijom, a filtrat je ukoncentrisan in vacuo. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (gradijent 30-100% B). Sakupljene frakcije su neutralisane koncentrovanim amonijakom i ukoncentrisane. Ostatak je raspodeljen između pufera pH 4 i dihlorometana. Vodena faza je ekstrahovana sa dihlorometanom, a sjedinjeni organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom i osušeni (MgS04). Naslovljeno jedinjenje (90mg, 76%) je dobijeno u vidu bele pene.
<1>H NMR (metanol-d4): § 1.06 (s, 9H), 1.39 (s, 9H), 2.36-2.42 (m, 1H), 2.61-2.65 (m, 1H), 4.12 (dd,J =4.5, 11 Hz, 1H), 4.19 (d,J= 11 Hz, 1H), 4.28 (s, 1H), 4.62 (t,J =8.5 Hz, 1H), 5.79 (m, 1H), 6.64 (d,J =8.0 Hz, 1H), 6.96 (s, 1H), 7.22 (d,J= 8.0 Hz, 1H), 7.58 (m, 1H), 7.66 (t,J=8.0 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.53 (511) (postupak B).
Korak 5:
Jedinjenje 435 je pripremljeno prema Primeru 420, Korak 6, u 57%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 435, Korak 4.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.96 (s, 9H), 1.02-1.05 (m, 2H), 1.09-1.11 (m, 2H), 1.19 (s, 9H), 1.35-1.38 (m, 1H), 1.71 (dd,J =5.5, 8.0 Hz, 1H), 2.15-2.22 (m, 2H), 2.37-2.41 (m, 1H), 2.93 (br m, 1H), 4.03-4.08 (m, 3H), 4.35 (br t, 1H), 5.10 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.24 (d,J =17 Hz, 1H), 5.60-5.67 (m, 1H), 5.73 (m, 1H), 6.47 (br s, 1H), 6.64 (d,J =7.5 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 7.31 (d,J =7.5 Hz, 1H), 7.72 (t,J =7.5 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.92 (s, NH), 10.4 (s, NH). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.64 (723) (postupak B).
Primer 436: Izrada Jedinjenja 436.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 435, Korak 4, u 73%-tnom prinosu, osim što je korišćena fenilborna kiselina.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.06 (s, 9H), 1.39 (s, 9H), 2.39-2.45 (m, 1H), 2.65-2.77 (m, 1H), 4.18-4.30 (m, 3H), 4.64 (t,J= 8.0 Hz, 1H), 5.72 (m, 1H), 6.74 (d,J= 8.0 Hz, 1H), 7.44-7.55 (m, 4H), 7.75 (t,J =8.0 Hz, 1H), 8.07 (d,J =7.5 Hz, 2H). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.72 (521)
(postupak B).
Korak 2:
Jedinjenje 436 je pripremljeno prema Primeru 420, Korak 6, u 66%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 436, Korak 1.
<1>H NMR (DMSO-d6): 8 0.96 (s, 9H), 1.04-1.05 (m, 2H), 1.09 (m, 2H), 1.30 (s, 9H), 1.36-1.39 (m, 1H), 1.71 (t,J =7.5 Hz, 1H), 2.16-2.24 (m, 2H), 2.41-2.45 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 4.06-4.09 (m, 3H), 4.38 (br t, 1H), 5.10 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.30 (d,J =17 Hz, 1H), 5.60-5.67 (m, 1H), 5.80 (m, 1H), 6.49 (br s, 1H), 6.75 (d,J =7.5 Hz, 1H), 7.43-7.51 (m, 3H), 7.59 (d,J =7.5 Hz, 1H), 7.81 (t,J =7.5 Hz, 1H), 8.09 (d,J= 7.0 Hz, 2H), 8.91 (s, NH), 10.4 (s, NH). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.77 (711) (postupak B).
Primer 437: Izrada Jedinjenja 437.
Korak 1:
U rastvor 2-bromo-6-metilpiridina (7.65g, 44.4mmol) u dihlorometanu (50ml_) dodat je rastvor mCPBA (77%, 12.9g, 57.7mmol) u dihlorometanu (100ml_). Rastvor je mešan tokom 18 h na temperaturi sredine. Smeša je neutralisana čvrstim Na2C03i dodata je voda. Vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (2x). Sjedinjene organske frakcije su isprane 5%-tnim Na2S203, 5%-tnim Na2C03i slanim rastvorom i osušene (MgSOJ. Prečišćavanjem, korišćenjem Biotage 40M kolone (uz eluaciju gradijentom heksan-etil acetat 40-70%) dobijeno je naslovljeno jedinjenje (5.0g, 60%) u vidu bezbojnog ulja koje stajanjem očvrsne.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 2.43 (s, 3H), 7.15 (t,J =8.0 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.78 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 0.32 (188, 190) (postupak B).
Korak 2:
U rastvor proizvoda iz Primera 437, Korak 1 (4.5g, 24mmol) u DMF-u (20mL) dodavan je POBr3(8.2g, 29mmol), deo po deo. Javlja se jaka egzotermna reakcija i obrazovan je talog. Smeša je ostavljena na temperaturi sredine 2 h. Mešavina je ugašena vodom i zasićenim NaHC03do neutralnog pH. Vodena faza je ekstrahovana dietil etrom (2x). Sjedinjene organske frakcije su isprane slanim rastvorom i osušene (MgS04). Prečišćavanjem, korišćenjem Biotage 40M kolone (uz eluaciju gradijentom heksan-dietil etar 0-10%) dobijeno je naslovljeno jedinjenje (1.78g, 30%) u vidu bezbojnog ulja.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 2.45 (s, 3H), 7.64 (s, 1H), 7.80 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.85 (250, 252, 254) (postupak B).
Korak 3:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 421, Korak 2, u 46%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 437, Korak 1.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 1.34, 1.38 (s, 9H(rotameri)), 2.20-2.27 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.43-2.50 (m, 1H), 3.55 (d,J=12.5 Hz, 1H), 3.64-3.67 (m, 1H), 3.66, 3.69 (s, 3H(rotameri)), 4.26-4.32 (m, 1H), 5.17 (m, 1H), 6.93 (s, 1H), 7.08 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.17 (415, 417) (postupak B).
Korak 4:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 420, Korak 3 u kvantitativnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 437, Korak 3.
Korak 4:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 420, Korak 3 u 75%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 437, Korak 3.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.94 (s, 9H), 1.27 (s, 9H), 2.16-2.21 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.48 (m, 1 H(sakriven)), 3.64 (s, 3H), 3.83 (d,J =10.5 Hz, 1H), 4.06 (d,J =8.5 Hz, 1H), 4.14 (d,J =10.5 Hz, 1H), 4.42 (t,J =9.0 Hz, 1H), 5.27 (m, 1H), 6.68 (br s, NH), 6.88 (s, 1H), 7.03 (s, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.19 (528, 530) (postupak B).
Korak 5:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 420, Korak 5 u kvantitativnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 437, Korak 4.
<1>H NMR (DMSO-d6): 8 0.95 (s, 9H), 1.27 (s, 9H), 2.15-2.19 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.44-2.48 (m, 1H), 3.81 (d,J= 10.5 Hz, 1H), 4.04-4.06 (m, 1H), 4.13 (d,J =10.5 Hz, 1H), 4.33 (t,J =8.5 Hz, 1H), 5.26 (m, 1H), 6.66 (br d,J =9.0 Hz, NH), 6.88 (s, 1H), 7.03 (s, 1H). LC/MS rt-min (MNa<+>): 2.14 (536, 538) (postupak B).
Korak 6:
U rastvor proizvoda iz Primera 437, Korak 5 (101 mg, 0.196mmol) i Pd(PPh3)4(11.3mg, 0.0098mmol) i fenil borne kiseline (34mg, 0.275 mmol) u DMF-u (2mL) dodat je 2M vodeni Na2C03(0.294mL, 0.588 mmol). Epruveta je zapušena i zagrevana u mikrotalasnoj sušnici (Emrys, Personal Chemistrv) na 150°C, tokom 15 min pod azotom. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je zakiseljena sa 1N HCI (0.5mL) Čvrsta masa je uklonjena filtracijom, a filtrat je ukoncentrisan in vacuo. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (gradijent 20-80% B). Sakupljene frakcije su neutralisane koncentrovanim amonijakom i ukoncentrisane. Ostatak je raspodeljen između pufera pH 4 i etil acetata. Vodena faza je ekstrahovana sa etil acetatom (2x), a sjedinjeni organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom i osušeni (MgS04). Naslovljeno jedinjenje (115mg, >100%) je dobijeno u vidu bele čvrste mase.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.06 (s, 9H), 1.30 (s, 9H), 2.36-2.41 (m, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.65-2.76 (m, 1H), 4.01 (dd,J =3.0, 12 Hz, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.44 (d,J =12 Hz, 1H), 4.64 (dd,J =8.0, 10 Hz, 1H), 5.46 (m, 1H), 6.91 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.39 (m, 3H), 7.57 (d,J =7.5 Hz, 2H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.84 (513) (postupak B).
Korak 7:
Jedinjenje 437 je pripremljeno prema Primeru 420, Korak 6, u 31%-tnom prinosu polazeći od proizvoda iz Primera 437, Korak 6.
<1>H NMR (DMSO-d6): 8 0.93 (s, 9H), 0.99-1.04 (m, 4H), 1.25 (s, 9H), 1.34-1.57 (m, 1H), 1.69-1.71 (m, 1H), 2.11-2.20 (m, 2H), 2.39-2.43 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 293 (m, 1H), 3.92 (d,J =8.5 Hz, 1H), 4.07 (d,J =9.0 Hz, 1H), 4.11 (d,J =12 Hz, 1H), 4.32 (t,J =7.0 Hz, 1H), 5.10 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.23 (d,J =17.5 Hz, 1H), 5.39 (m, 1H), 5.60-5.67 (m, 1H), 6.58 (d,J= 8.5 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.40-7.48 (m, 3H), 8.04-8.06 (m, 2H), 8.92 (s, NH), 10.4 (s, NH). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.10 (725) (postupak B).
Primer 438: Izrada Jedinjenja 438.
Korak 1:
Ovaj proizvod je pripremljen prema Primeru 437, Korak 6, u kvantitativnom prinosu, polazeći od 2-tiofenborne kiseline.
<1>H NMR (metanol-d4): 5 1.05 (s, 9H), 1.32 (s, 9H), 2.32-2.38 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.66-2.70 (m, 1H), 3.99 (dd,J= 3.0, 12 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.36 (d,J= 12 Hz, 1H), 4.61 (t,J =8.5 Hz, 1H), 5.35 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 7.16-7.18 (m, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.56 (m, 1H), 7.72 (d,J= 3.0 Hz, 1H). LC/MS rt-min (MH<+>): 1.80 (519) (postupak B).
Korak 2:
Jedinjenje 438 je pripremljeno prema Primeru 420, Korak 6 u 41%-tnom prinosu, polazeći od proizvoda iz Primera 438, Korak 1.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.91 (s, 9H), 0.99-1.04 (m, 4H), 1.20 (s, 9H), 1.35-1.37 (m, 1H), 1.69-1.71 (m, 1H), 2.09-2.20 (m, 2H), 2.33 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.93 (m, 1H), 3.92 (d,J= 8.5 Hz, 1H), 4.07-4.11 (m, 2H), 4.29-4.32 (m, 1H), 5.10 (d,J =10.5 Hz, 1H), 5.23 (d,J =17.0 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 5.605.67 (m, 1H), 6.58 (d,J= 8.5 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 7.14 (t,J =4.5 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.59 (d,J= 5.5 Hz, 1H), 7.80 (d,J= 3.5 Hz, 1H), 8.92 (s, NH), 10.4 (s, NH). LC/MS rt-min (MH<+>): 2.06 (731) (postupak B).
Deo K:
Primer 450: Izrada Jedinjenja 450.
Jedinjenje 450 je pripremljeno prema Primeru 8, Korak 5 osim što se koristi 4-hloro-6-fluoro-2-trifluorometilhinolin.
<1>H NMR (CD3OD): 5 0.97-1.04 (m, 12H), 1.17-1.24 (m, 10H), 1.39-1.46 (m, 1H), 1.82-1.87 (m, 1H), 2.20-2.23 (m, 1H), 2.35-2.39 (m, 1H), 2.55-2.65 (m, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 4.09-4.11 (m, 1H), 4.18-4.21 (m, 1H), 4.56 (b, 2H), 5.10-5.14 (m, 1H), 5.28-5.31 (m, 1H), 5.60 (b, 1H), 5.70-5.80 (m, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.65-7.68 (m, 1H), 7.86 (s, 1H), 8.13-8.15 (m, 1H).
Primer 451: Izrada Jedinjenja 451.
Korak 1:
Tozilat je pripremljen, kao što je opisano u literaturi (Patchett, AA; VVitkof, B. J. Am. Chem. Soc. 1957, 185-192), a korišćen je bez daljeg prečišćavanja.
Žitkoj masi NaH (76mg, 1.90mmol) DMF (20mL) dodat je 1-tionaftol (0.29mg, 1.80mmol) i smeša je mešana tokom 30 min. Dodat je rastvor tozilata (0.61 g, 1.80mmol) i smeša je mešana tokom 12 h na 23°C. Smeša je ukoncentrisana, a ostatak je raspodeljen između EtOAc/H20. Organski ekstrakti su osušeni (MgS04) i ukoncentrisani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (uz eluaciju sa 5% EtOAc/heksani do 30% EtOAc/heksani da bi se dobio 261 mg (38%) proizvoda u vidu žutog ulja.
<1>H NMR (CDCI3, 3:2 mešavina rotamera): 8 1.41 (s, 9H), 1.44 (s, 9H), 2.25-2.29 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.35-3.42 (m, 1H), 3.51-3.53 (m, 1H), 3.80-3.86 (m, 2H), 4.38-4.39 (m, 1H), 4.46-4.48 (m, 1H), 7.41-7.46 (m, 1H), 7.42-7.54 (m, 1H), 7.57-7.59 (m, 1H), 7.58 (d,J= 4 Hz, 1H), 7.82-7.88 (m, 2H), 8.46 (d,J= 5 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.93), MS m/z 388 (MVI)
Korak 2:
Smeša 2-metil estra 1-terc-butil estra 4-(naftalen-1-il-sulfanil)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (0.38g, 0.98mmol) i 4N HCI (1 .OmL) je mešana 23°C, tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je rastvoren u CH3CN (20mL) i obrađen je sa kiselinom (0.37g, 2.16mmol), TBTU (0.23g, 0.98mmol) i DIPEA (0.37g, 2.16mmol) i mešan je tokom 12 h. Smeša je ukoncentrisana, a ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran 1N HCI i zasićenim NaHC03, a zatim je osušen preko MgS04i ukoncentrisan. Ostatak je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (CDCI3, 1:1 mešavina rotamera): 8 0.99 (s, 9H), 1.02 (s, 9H), 1.44 (s, 9H), 1.46 (s, 9H), 2.2-2.25 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.82-3.86 (m, 1H), 3.89-3.92 (m, 2H), 4.26 (s, 1H), 4.28 (s, 1H), 4.70-4.75 (m, 1H), 7.40-7.48 (m, 1H), 7.54-7.55 (m, 1H), 7.59-7.62 (m, 1H), 7.72-7.74 (m, 1H), 7.86-7.89 (m, 2H), 8.48-8.50 (m, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.59), MS m/z 523 (M+Na).
Korak 3:
U smešu metil estra 1-(2-terc-butoksikarbonilamino-3,3-dimetil-butiril)-4-(naftalen-1-ilsulfanil)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (Primer 451, Korak 2) (0.49g, 0.98mmol) u THF/H20 (2:1) dodat je LiOH hidrat (0.20g, 4.9mmol) smeša je mešana tokom 12 h. Rastvor je ukoncentrisan i ispran sa EtOAc. Vodeni sloj je zakiseljen sa 1N HCI i ekstrahovan sa EtOAc. Proizvod je zapažen u prvom EtOAc ekstraktu. Prvi organski ekstrakt je osušen preko MgS04i ukoncentrisan do 328mg (71%) žutosmeđe čvrste mase.
<1>H NMR (DMSO-d6, 2:1 mešavina rotamera): 8 0.88 (s, 9H), 0.92 (s, 9H), 1.34 (s, 9H), 1.38 (s, 9H), 2.18-2.25 (m, 2H), 3.66-3.75 (m, 1H), 3.89-4.00 (m, 2H), 4.10-4.13 (m, 1H), 4.25-4.32 (m, 1H), 7.45-7.7.51 (m, 1H), 7.56-7.61 (m, 2H), 7.65-7.7.69 (m, 1H), 7.88-7.91 (m, 1H), 7.97 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.27-8.35 (m, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.52), MS m/z 486 (M+1).
Korak 4:
U rastvor kiseline (Primer 451, Korak 3) (0.32g, 0.87mmol) u CH3CN (10mL) i DMF (2mL) dodata je dijastereomerna smeša hidrohlorida etil estra 1(R)-2(S) i 1-(S)-2(R) 1-amino-2-vinilciklopropankarboksilne kiseline (240mg, 0.87mmol), TBTU (201 mg, 0.87mmol) i DIPEA (0.32mL, 0.742mmol) i smeša je mešana je tokom 12 h na 23°C. Smeša je ukoncentrisana, a ostatak je raspodeljen između EtOAc i vode. Organski sloj je izdvojen, osušen preko MgS04i ukoncentrisan. Ostatak je podvrgnut hromatografiji sa 30% EtOAc/heksanima kao eluentom da bi se dobilo 240mg (38%) svetio žute čvrste mase.
<1>H NMR (DMSO-d6, mešavina rotamera i dijastereomera): 5 0.87 (s, 9H), 0.88 (s, 9H), 0.97-1.04 (m, 3H), 1.33 (s, 9H), 1.38 (s, 9H), 2.11-2.20 (m, 2H), 3.74-3.85 (m, 1H), 3.89-3.96 (m, 2H), 3.98-4.03 (m, 4H), 4.00-4.09 (m, 1H), 4.40-4.42 (m, 1H), 5.04-5.09 (m, 1H), 5.17-5.29 (m, 2H), 5.50-5.70 (m, 1H), 6.60-6.62 (m, 1H), 6.72-6.75 (m, 1H), 7.50-7.56 (m, 1H), 7.56-7.72 (m, 2H), 7.70-7.80 (m, 1H), 7.92-8.00 (m, 1H), 8.00-8.06 (m, 1H), 8.29-8.40 (m, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.79 (s, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.59), MS m/z 623 (M+1).
Korak 5:
Kiselina je pripremljena, kao što je prethodno opisano korišćenjem LiOH u THF/MeOH/H20 (4/2/1) u Primeru 451, Korak 3 s izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 451, Korak 4.
<1>H NMR (DMSO-d6, mešavina rotamera i dijastereomera): 8 0.90 (s, 9H), 1.17-1.23 (m, 2H), 1.32-1.37 (m, 9H), 2.10-2.12 (m, 1H), 2.20-2.31 (m, 2H), 3.97-4.05 (m, 2H), 4.10-4.12 (m, 1H), 4.32-4.40 (m, 1H), 4.55-4.61 (m, 1H), 4.80-4.98 (m, 2H), 5.03-5.08 (m, 1H), 5.10-5.20 (m, 1H), 5.75-5.90 (m, 1H), 6.55-6.70 (m, 1H), 7.42-7.57 (m, 1H), 7.60-7.64 (m, 2H), 7.70-7.72 (m, 1H), 7.80-7.97 (m, 1H), 7.96-7.99 (m, 1H), 8.20-8.50 (m, 2H). LC-MS (retenciono vreme: 1.52), MS m/z 595 (M+1).
Korak 6:
Smeša kiseline (Primer 451, Korak 5) (172mg, 0.29mmol), metansulfonamida (110mg, 1.16mmol), EDAC (110mg, 0.58mmol) i DMAP (71 mg, 0.58mmol) je rastvorena u THF (10mL) i mešana je tokom 12 h. Dodat je DBU (0.087mL, 0.58mmol) i smeša je mešana tokom 48 h. Rastvarač je uklonjen a ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran vodom i 1N HCI, osušen preko MgS04i ukoncentrisan. Ostatak je prečišćen preparativnom tankoslojnom hromatografijom da bi se dobilo 15mg (8%) Jedinjenja 451 u vidu žuto smeđe čvrste mase.
<1>H NMR (DMSO-d6, mešavina rotamera i dijastereomera): 5 0.98 (s, 9H), 1.27-1.42 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.76-1.79 (m, 1H), 1.83-1.86 (m, 1H), 1.92-2.10 (m, 1H), 2.16-2.25 (m, 2H), 3.01-3.10 (m, 1H), 3.80-3.83 (m, 1H), 3.86-3.89 (m, 1H), 3.98-3.99 (m, 1H), 3.99-4.05 (m, 1H), 4.24-4.29 (m, 1H), 4.44-4.53 (m, 1H), 4.86 (s, 3H), 5.08-5.15 (m, 1H), 5.25-5.29 (m, 1H), 5.65-5.85 (m, 1H), 6.5-6.8 (m, 1H), 7.48 (t,J =7.7 Hz, 1H), 7.54 (t,J =7.1 Hz, 1H), 7.59 (t,J =7.1 Hz, 1H), 7.73-7.77 (m, 1H), 7.88-7.91 (m, 2H), 8.46 (d,J=8.25 Hz, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.52), MS m/z 672 (M+1 sporedni), m/z 693 (M+Na glavni).
Primer 452: Izrada Jedinjenja 452.
Korak 1:
Žitkoj masi NaH (76mg, 1.90mmol) u DMF (20mL) dodat je 1-tionaftol (0.29g, 1.80mmol) i smeša je mešana tokom 30 min. Dodat je rastvor tozilata (Primer 451, Korak 1) (0.61 g, 1.79mmol) u DMF-u (2mL) i smeša je mešana tokom 12 h na 23°C. Smeša je ukoncentrisana, a zatim raspodeljena između EtOAc/HzO. Organski sloj je ispran zasićenim NaHC03, osušen (MgS04) i ukoncentrisan. Ostatak je podvrgnut hromatografiji sa 5% EtOAc/heksani, a zatim sa 30% EtOAc/heksani da bi se dobio 261 mg (38%) proizvoda u vidu bistrog ulja.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 1.32 (s, 9H), 2.29-2.35 (m, 2H), 3.33-3.47 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.71-3.81 (m, 1H), 4.29-4.32 (s, 1H), 7.49-7.55 (m, 3H), 7.70-7.80 (m, 1H), 7.81-7.97 (m, 3H). LC-MS (retenciono vreme: 1.54), MS m/z 387 (M+1).
Korak 2:
Smeša 2-metil estra 1-terc-butil estra 4-(naftalen-2-ilsulfanil)-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (310mg, 0.80mmol) i 4N HCI u dioksanu (1.49mL, 2.69mmol) je mešana na 23°C, tokom 2 h, a zatim je ukoncentrisana. Ostatak je rastvoren u CH3CN (10mL) i dodati su N-Boc-t-butilglicin (196mg, 0.85mmol), TBTU (0.27g, 0.85mmol) i DIPEA (0.32mL, 1.85mmol) i smeša je mešana preko noći. Smeša je ukoncentrisana, a ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran 1N HCI i zasićenim NaHC03, a zatim je osušen i ukoncentrisan da bi se dobilo 300mg (90%) proizvoda u vidu žutog ulja.
<1>H NMR (metanol-d4): 8 0.99 (s, 9H), 1.44 (s, 9H), 2.20-2.35 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.92-4.08 (m, 2H), 4.26 (d,J =9.4 Hz, 1H), 4.57 (t,J =9.5 Hz, 1H), 6.46 (d,J= 9.5 Hz, 1H), 7.48-7.60 (m, 3H), 7.83-7.90 (m, 3H), 8.02 (s, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.98), MS m/z 523 (M+Na).
Korak 3:
Rastvor 2-metil estra 1-terc-butil estra 4-naftalen-2-ilsulfanil-pirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (0.48g, 0.96mmol) je rastvoren u MeOH (20mL) i mešan sa LiOH (0.2g, 4.8mmol) tokom 12 h. Rastvor je ukoncentrisan, zakiseljen i ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakt je osušen preko MgS04i ukoncentrisan da bi se dobilo 418mg (91%) žute čvrste mase.
<1>H NMR (DMSO-d6, 1:2 mešavina rotamera): S 0.86, 0.93 (s, 9H) (1:2 mešavina rotamera), 1.35, 1.38 (s, 9H) (1:2 mešavina rotamera), 2.01-2.18, 2.25-3.35 (m, 2H), 3.25-3.40 (m, 2H), 3.70-3.80 (m, 1H), 4.00-4.20 (m,J =9.4 Hz, 2H), 4.30-4.40 (s, 1H), 5.61-5.70, 6.42-6.50 (m, 1H) (1:2 mešavina rotamera), 7.50-7.54 (m, 3H), 7.87-7.89 (m, 3H), 7.98 (s, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.93), MS m/z 487 (M+1).
Korak 4:
Rastvor etil estra 1-terc-butoksikarbonilamino-2-vinil-ciklopropankarboksilne kiseline (4.3g, 17.8mmol) u MeOH (50mL) je obrađen sa LiOH (0.84g, 20.0mmol) i vodom (5mL) i smeša je mešana tokom 12 h. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je zakiseljen i ekstrahovan sa EtOAc. Organski slojevi su osušeni preko MgS04, filtrirani i ukoncentrisani da bi se dobilo 2.1g (52%) kiseline u vidu žutog ulja. Kiselina (2.1 g, 9.25mmol) je rastvorena u THF-u i obrađena sa CDI (7.25g, 13.8mmol) i zagrevan do refluksa tokom 3 h, a zatim je ohlađen do 23°C. Dodat je metansulfonamid (1.76g, 18.5mmol), a zatim DBU (2.77mL, 18.5mmol) i mešan je tokom 72 h na 23°C. Smeša je ukoncentrisana, a ostatak zakiseljen do pH 4 (1N HCI) i ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakti su osušeni preko MgS04i ukoncentrisani da bi se dobilo 1.99 g (71%) žutog ulja, koje je tokom stajanja očvrslo.
<1>H NMR (DMSO-d6): 5 1.16-1.23 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.65-1.75 (m, 1H), 2.15-2.25 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 5.08 (d,J =9.9 Hz, 1H), 5.22 (d,J= 17.1 Hz, 1H), 5.40-5.52 (m, 1H). LC-MS (retenciono vreme: 1.14), MS m/z 304 (M+1).
Korak 5:
Rastvor proizvoda iz Primera 452, Korak 4, u dioksan/4N HCI (2ml) je mešan tokom 2 h, a zatim je ukoncentrisan. Ostatak je rastvoren u CH3CN (5mL) i dodat u smešu kiseline (Primer 452, Korak 3) (120mg, 0.25mmol), TBTU (58mg, 0.25mmol) i DIPEA (0.06mL, 0.35mmol) i smeša je mešana tokom 12 h. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran 1N HCI i zasićenim NaHC03, a zatim je osušen preko MgS04i ukoncentrisan. Ostatak je prečišćen preparativnom TLC (Analtech 20X40 cM, 1000D Si02), da bi se dobilo 128mg (70%) Jedinjenja 452 u vidu žutosmeđe čvrste mase.<1>H NMR (DMSO-d6, smeša dijastereomera): 8 0.97, 0.99 (s, 9H), 1.23-1.43 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.82-1.83 (m, 1H), 2.00-2.51 (m, 2H), 2.90-2.99 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.90-3.99 (m, 1H), 4.01-4.20 (m, 2H), 4.25-4.30 (m, 1H), 4.45-4.55 (m, 1H), 4.95-5.10 (m, 1H), 5.12-5.25 (m, 1H), 5.71-5.85 (m, 1H), 6.4-6.8 (br m, 1H), 7.46-7.53 (m, 3H), 7.80-7.86 (m, 3H), 7.98-7.99 (m, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.95), MS m/z 672 (M+1).
Primer 453: Izrada Jedinjenja 453.
Korak 1:
Smeša iz Primera 452, Korak 3 (110mg, 0.23mmol) u DCM (20mL), 3-hloroperbenzojeve kiseline (121.6mg, 0.57mmol, 85% perkiseline), KHP04(0.13g, 0.94mmol) i K2HP04(0.18g, 1.05mmol) su mešani na 23°C tokom 12 h. Rastvor je razblažen sa DCM, ispran je vodom i zasićenim NaHC03, osušen preko MgS04i ukoncentrisan da bi se dobilo 110mg (92%) proizvoda u vidu bistrog ulja.<1>H NMR (DMSO-d6): 5 0.91 (s, 9H), 1.48 (s, 9H), 2.23-2.28 (m, 1H), 2.65-2.80 (m, 1H), 3.88-3.90 (m, 1H), 4.12 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.20 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.70-7.80 (m, 2H), 7.88-7.95 (m, 1H), 8.11 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.71 (s, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.72), MS m/z 519 (M+1).
Korak 2:
Smeša proizvoda iz Primera 453, Korak 1 (110mg, 0.212mmol), amina (Primer 452, Korak 5a)
(0.65mg, 0.212mmol), TBTU (48.5mg, 0.21 mmol), a zatim, DIPEA (60.8mL, 0.35mmol) je mešana na 23°C tokom 12 h. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je rastvoren u EtOAc, ispran 1N HCI i
zasićenim NaHC03, osušen preko MgS04i ukoncentrisan. Ostatak je prečišćen preparativnom TLC (uz eluaciju sa 10% MeOH/CH2CI2), da bi se dobilo 25mg (17%) Jedinjenja 453, u vidu bele čvrste mase.
<1>H NMR (DMSO-d6, smeša dijastereomera): 5 0.93, 0.96 (s, 9H), 1.35-1.45 (m, 2H), 1.53, 155 (m, 9H), 1.76-1.85 (m, 1H), 2.21-2.40 (m, 2H), 3.13-3.15 (m, 2H), 3.34 (s, 3H), 3.91-3.99 (m, 1H), 4.15 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 5.09-5.12 (m, 1H), 5.26-5.31 (m, 1H), 5.72-5.76 (m, 1H), 6.65-6.68 (m, 1H), 6.71-6.76 (m, 1H), 7.67-7.76 (m, 2H), 7.91-7.95 (m, 1H), 8.03 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.7 (s, 1H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.76), MS m/z 705 (M+1).
Primer 454: Izrada Jedinjenja 454.
Korak 1:
Žitkoj masi natrijum hidrida (0.91 g, 22.7 mmol) u THF (50mL) je dodat N-BOC-trans-4(R)-hidroksi-L-prolin (2.5g, 10.8mmol) i smeša je mešana na 23°C, tokom 1 h. Dodat je 2-hlorometilnaftalen (19g, 10.8mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je uliven u vodu i ispran heksanima. Vodeni sloj je zakiseljen (1N HCI) i ekstrahovan sa EtOAc. EtOAc sloj je izdvojen, osušen (MgS04) i ukoncentrisan, da bi se dobio svetio žuti ostatak. Ulje je prečišćeno flash hromatografijom sa 1:1 EtOAc/heksani, sa dodatom 1%-tnom sirćetnom kiselinom, da bi se dobilo 1.56g (59%) željenog poizvoda, u vidu gustog ulja.
<1>H NMR (DMSO-d6, 3:1 smeša rotamera): 5 1.35, 1.37 (s, 9H, glavni, odnosno minorni), 1.92-2.02, 2.15-2.20 (m, 2H, glavni, odnosno minorni), 2.35-2.50 (m, 2H), 3.41-3.49 (m, 2H), 4.12-4.16,
4.20-4.21 (m, 2H), 4.65-4.68 (m, 2H), 7.46-752 (m, 3H), 7.74-7.91 (m, 4H) (kiseli OH nije zapažen); LC-MS (retenciono vreme: 1.44, YMC ODS-A C18 S7 3.0x50 mm, gradijent 10% MeOH/H20 0.1% TFA do 90% MeOH/H20 0.1% TFA), MS m/z 394 (M++1+Na).
Korak 2:
U rastvor HCI soli 1:1 smeše dijasteromera (1R,2S/1S,2R, gde je karboksi grupa sin prema vinilnom delu) terc-butil estra 2-(1-etoksikarbonil-2-vinil-ciklopropilkarbamoil)-4-(naftalen-2ilmetoksi)-pirolidin-1-karboksilne kiseline (0.54g, 1.3mmol) [pripremljen mešanjem N-Boc amina sa HCI (4N) u dioksanu tokom 1 h, a zatim uklanjanjem rastvarača in vacuo] u CH3CN (50mL) dodat je Boc-4(R)-(2-metilnaftil)prolin (0.5g, 1.3mmol), TBTU (0.45g, 1.4mmol), a zatim DIPEA (0.78mL, 4.5mmol). Smeša je mešana tokom 12 h i ukoncentrisana. Ostatak je rastvoren u EtOAc/HzO, ispran zasićenim NaHC03i zasićenim NaCI, osušen (MgS04) i ukoncentrisan da bi se dobilo gusto žuto ulje (0.6 g, 91%) proizvoda kao smeša dijastereomera.
<1>H NMR (DMSO-d6): 8 1.08-1.22 (m, 7H), 1.23-1.39 (m, 9H), 2.02-2.18 (m, 1H), 2.25-2.35 (m, 1H), 3.33-3.53 (m, 2H), 3.90-4.14 (m, 4H), 4.45-4.70 (m, 2H), 5.07-5.11 (m, 1H), 5.24-5.30 (m, 1H), 5.58-5.63 (m, 1H), 7.43-7.51 (m, 4H), 7.84-7.96 (m, 3H)
MS m/z 531 (M++1+Na).
Korak 3:
Rastvor proizvoda iz Primera 454, Korak 2 (600mg, 1.18mmol) je mešan sa HCI (4N, 3mL, 11.8mmol) u dioksanu tokom 1 h, a zatim je rastvarač uklonjen in vacuo. Ostatak je rastvoren u CH3CN (10mL) i obrađen sa Boc-L-t-Bu-Gly (0.42g, 1.38mmol), TBTU (0.27g, 1.18mmol), a zatim sa DIPEA (0.71 mL, 4.1 mmol). Smeša je mešana tokom 12 h i ukoncentrisana. Ostatak je rastvoren u EtOAc/H20, ispran 1N HCI, zasićenim NaHC03i zasićenim NaCI, osušen (MgS04) i ukoncentrisan da bi se dobilo gusto žuto ulje. Proizvod je prečišćen flash hromatografijom, koristeći gradijent eluaciju 5% EtOAc/heksani 10% EtOAc/heksani, 30% EtOAc/heksani i konačno kao eluent da bi se dobio proizvod, u vidu gustog ulja (0.243g, 33%) proizvoda, kao smeša dijastereomera i rotamera.<1>H NMR (DMSO-d6): 8 0.83-1.00 (m, 10H), 1.34 (s, 9H), 1.58-1.59, 1.65-1.67 (m, 2H), 1.95-1.99, 2.04-2.06, 2.10-2.19, 2.24-2.56 (m, 2H), 3.97-4.04 (m, 3H), 4.08-4.17 (m, 3H), 4.29-4.31 (m, 2H), 4.59-4.72 (m, 3H), 5.06-5.10 (m, 1H), 5.18-5.30 (m, 1H), 5.60-5.63 (m, 1H), 6.59-6.65, 6.70-6.74 (m, 1H), 7.43-7.51 (m, 4H), 7.84-7.96 (m, 3H), 8.66, 876 (s, 1H); MS m/z 531 (MVl+Na).
Korak 4:
U suspenziju proizvoda iz Primera 454, Korak 3 (240mg, 0.39mmol), u THF (15ml_) i H20 (2ml_) dodat je LiOH (82mg, 1.85mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 12 h, a zatim je koncentrisana in vacuo sve dok nije preostao samo vodeni sloj. Nastali vodeni ostatak je zakiseljen do pH 3.0 dodavanjem 1.0N vodene HCI i ekstrahovan je sa EtOAc (2x80mL). Sjedinjeni organski ekstrakti su osušeni (MgSOJ filtrirani i ukoncentrisani in vacuo da bi se dobio proizvod kao žuto-smeđa čvrsta masa (200mg, 0.33mmol, 85%):<1>H NMR (DMSO-d6): 8 0.86, 094 (s, 9H, minorni, glavni), 1.23-1.42 (m, 2H), 1.34 (s, 9H), 1.8-2.1, (m, 2H), 2.18-2.30 (m, 1H), 3.59-3.73 (m, 3H), 4.0-4.09 (m, 1H), 4.18-4.34 (m, 3H), 4.56-4.62 (m, 1H), 4.66-4.67 (m, 1H), 4.82-4.92 (m, 1H), 5.0-5.20 (m, 1H), 5.91-6.08 (m, 1H), 6.5-6.7 (m, 1H), 7.45-7.59 (m, 3H), 7.82-7.97 (m, 4H), 8.2-8.3, 8.3-8.4 (s, 1H); LC-MS (retenciono vreme: 1.50) MS m/z 593 (M<+>+1).
Korak 5:
U rastvor proizvoda iz Primera 454, Korak 4 (190mg, 0.32mmol), EDAC (122mg, 0.64mmol) i 4-DMAP (78mg, 0.64mmol) u THF (20mL) dodat je komercijalno raspoloživi metansulfonamid (122mg, 1.28mmol). Nastali rastvor je mešan tokom 2 dana, a zatim je dodat DBU (95u,L, 0.64mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 24 h, a zatim je ukoncentrisana. Ostatak je raspodeljen između EtOAc (80mL) i vode, ispran je sa 1N HCI i vodenim NaHC03(2x30mL), osušen (MgS04) i prečišćen preparativnom HPLC (65-90% MeOH/voda/0.1%TFA) čime je dobijeno 56mg smeše proizvoda i materijala u kome je BOC grupa odstranjena. Materijal je dalje prečišćen preparativnom TLC (uz eluaciju sa 10% MeOH/CH2CI2, koristeći 20x40cM ploče od Analtecha) da bi se dobilo Jedinjenje 454 u vidu žutosmeđe čvrste mase (12mg, 6%).<1>H NMR (MeOD-d450/50 smeša P1 dijastereomera): 5 0.88-0.89 (m, 2H), 1.10, 1.02 (s, 9H, minorni, glavni dijastereomer), 1.23-1.42 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.72-1.79, (m, 1H), 1.86-1.88 (m, 1H), 2.00-2.10 (m, 2H), 2.10-2.23 (m, 1H), 2.3-2.5 (m, 1H), 3.12, 3.17 (s, 3H), 3.72-3.79 (m, 1H), 4.26-4.41 (m, 3H), 4.72 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.09-5.12 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 5.28 (dd, J = 3.5, 17.6 Hz, 1H), 5.7-5.8 (m, 1H), 6.55-6.80 (m, 1H), 7.45-7.47 (m, 3H), 7.79-7.83 (m, 4H);
LC-MS (retenciono vreme: 1.48) MS m/z 670 (M<+>+1).
Primer 470: Izrada Jedinjenja 470.
Korak 1:
U rastvor komercijalno raspoloživog N-Boc-(4S)-(cis)-hidroksiprolin-OMe (200mg, 0.82mmol), trifenilfosfina (320mg, 1.22mmol) i 1-naftola (176mg, 1.22mmol) u 2.5mL tetrahidrofurana je dodat, kap po kap, tokom 10 min rastvor dietildiazodikarboksilata (190u.L, 1.22mmol) u 1.0mL THF. Posle mešanja tokom 5.5 dana reakciona smeša je ukoncentrisana in vacuo. Sirovo žuto ulje je podvrgnuto hromatografiji na 20x40cM ploči preparativne TLC (Analtec SiOz) uz eluaciju 6-1 heksan-etil acetat da bi se dobio željeni proizvod u vidu bledo žutog ulja (150mg, 33%).<1>H NMR (CDCIg, 500MHz): 8 1.44 (s, 9H), 2.33 (1H, m), 2.72 (1H, m), 3.77 i 3.38 (2s, 3H, rotameri), 3.88 (dd, 1H, J = 4.3, 12.4 Hz), 3.97 (bd, 1H), 4.53 i 4.62 (2t, 1H, J = 7.8 Hz, rotameri), 5.10 (bd, 1H), 6.76 (t, 1H, J = 9.5 Hz), 7.37 (m, 1H), 7.46 (m, 3H), 7.80 (d, 1H, J = 7.7 Hz), 8.18 (m, 1H);
LC-MS A (retenciono vreme: 1.86) MS m/z 394 (M+Na)<+>.
Korak 2:
U izmešani rastvor Boc-(4R)-naftal-1-okso)-Pro-OEt (150mg, 0.40mmol) u 1.5mL THF i 0.5mL vode dodat je litijum hidroksid (10mg). Rastvor je mešan tokom 21 sat na sobnoj temperaturi, a zatim je razblažen sa 0.5N NaHC03. Bazni rastvor je ekstrahovan etil acetatom, a zatim je vodeni sloj zakiseljen do pH 2 dodavanjem, kap po kap, koncentrovane HCI. Ovaj zakiseljeni sloj je zatim ponovo ekstrahovan etil acetatom. Ovaj drugi etilacetatni sloj je osušen sa magnezijum sulfatom i filtriran, a zatim je ukoncentrisan in vacuo da bi se dobio BOC-(4R)-naftal-1-okso)-Pro-OH u vidu bledo ružičastih kristala (147mg, 100%).<1>H NMR (CDCI3, 500MHz): 5 1.47 i 1.48 (2s, 9H, rotameri), 2.40 i 2.52 (2m, 1H), 2.68 i 2.78 (2m, 1H), 3.78-4.07 (m, 2H), 4.57 i 4.69 (2t, 1H, J = 7.6, 8.0Hz, rotameri), 5.12 (bd, 1H), 6.77 (dd, 1H, J = 7.6, 21.2 Hz), 7.37 (m, 1H), 7.46 (m, 3H), 7.81 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 8.19 (m, 1H);
LC-MS A (retenciono vreme: 1.79) MS m/z 358 (M+H)<+>.
Korak 3:
U rastvor Boc-((4R)-naftal-1-okso)-Pro-OH (147mg, 0.41 mmol) i hlorovodonične soli etil estra racemske (1 R/2S)(1S/2R)-1-amino-2-vinilciklopropan karboksilne kiseline (79mg, 0.41 mmol) u 2.8mL metilen hlorida dodati su DIPEA (250(aL, 1.44mmol) i TBTU (158mg, 0.49mmol). Nastali rastvor je mešan pod azotom tokom 20 sati, a zatim je razblažen sa 40mL metilen hlorida. Organski sloj je ispran vodom, 1N NaHC03i 1N HCI, vodom i slanim rastvorom. Rastvor je zatim osušen sa natrijum sulfatom i ukoncentrisan in vacuo. Prečišćavanjem preparativnom TLC su dobijena dva zasebna dijastereomera, dijastereomer A sa višim Rf (P2[Boc(4R)-(naftal-1-okso)prolin]-P1(1R,2S vinil acca)-OEt, 78mg, 38%) i dijastereomer B sa nižim Rf (P2[Boc(4R)-(naftal-1-okso)prolin]-P1(1S,2R vinil acca)-OEt, 91 mg, 45%) u vidu zatvoreno-belih čvrstih masa: Dijastereomer A: P2[Boc(4R)-(naftal-1-okso)prolin]-P1(1R,2S vinil acca)-OEt:<1>H NMR (CDCI3, 500MHz): 8 1.24 (t, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.52 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 2.02 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.81 (m, 1H), 3.88 (m, 2H), 4.11 (q, 1H, J = 7.15), 4.19 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 5.15 (m, 1H), 5.31 (dd, 1H, J = 17, 0.8 Hz), 5.77 (m, 1H), 6.83 (m, 1H), 7.36 (t, 1H, J = 7.8 Hz), 7.46 (m, 3H), 7.78 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 8.14 (d, 1H, J = 8.15 Hz); LC-MS B (retenciono vreme: 1.85) MS m/z 495 (M+H)<+>.
Dijastereomer B: Primer 10B: P2[Boc(4R)-(naftal-1-okso)prolin]-P1 (1S,2R vinil acca)-OEt:<1>H NMR (d1-CHCI3, 500MHz): 5 1.24 (t, 3H), 1.42 (s, 9H), 1.85 (m, 1H), 2.15 (q, 1H, J = 8.9 Hz), 2.40 (m, 1H), 2.78 (m, 1H), 3.78 (m, 1H), 4.12 (m, 2H), 4.52 (m, 1H), 5.15 (m, 1H), 5.31 (m, 1H), 5.79 (m, 1H), 6.80 (m, 1H), 7.35 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 7.46 (m, 3H), 7.78 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 8.14 (d, 1H, J = 8.10 Hz); LC-MS B (retenciono vreme: 1.85) MS m/z 495 (M+H)<+>.
Korak 4:
U P2[Boc(4R)-(naftal-1-okso)prolin]-P1(1R,2S vinil acca)-OEt (A, viši Rf) (78mg, 0.16mmol) je dodata 4N HCI u dioksanu (2.0mL), a rastvor je ostavljen da se meša tokom 30 minuta. Koncentrisanjem in vacuo dobijena je HCI so P2[(4R)-(naftal-4-okso)prolin]-P1(1R,2S vinil acca)-OEt, u vidu žutog ulja, koje je preuzeto u sledećem koraku, direktno, bez daljeg prečišćavanja. U rastvor BOC L-tBuGly (73mg, 0.32mmol) i HCI soli P2[(4R)-(naftal-4-okso)prolin]-P1(1R,2S vinil acca)-OEt (0.16mmol) u 11 mL acetonitrila dodat je DIPEA (140|aL, 0.79mmol) i HATU (132mg, 0.35mmol). Nastali rastvor je mešan pod azotom tokom 17 sati, a zatim je razblažen sa 100ml_ etil acetata. Organski sloj je ispran vodom, sa 1N NaHC03, 1N HCI, vodom i slanim rastvorom. Rastvor je, zatim, osušen sa natrijum sulfatom i ukoncentrisan in vacuo, da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje, u vidu bledo žutog uljastog filma (92mg, 96%).
<1>H NMR (CDCIg, 500 MHz) 8 1.06 (s, 9H), 1.22 (t, 3H,J =7.1), 1.38 (s, 9H), 1.41 (m, 1H), 1.82 (m, 1H), 2.13 (m, 1H), 2.42 (m, 1H), 2.79 (m, 1H), 3.92-4.2 (m, 1H), 4.12 (q, 2H,J=6.6 Hz), 4.38 (bt, 1H), 5.12 (d, 1H,J =10.3 Hz), 5.2-5.39 (m, 3H), 5.75 (m, 1H), 6.82 (d, 1H,J =7.5 Hz), 7.34-7.46 (m, 4H), 7.59 (bs, 1H, NH), 7.76 (d, 1H,J =7.9 Hz), 8.13 (d, 1H,J= 8.3 Hz). LC-MS C (retenciono vreme: 2.82); MS m/z 608 (M+H)<+>.
Korak 5:
U rastvor proizvoda iz Primera 470, Korak 4 (92mg, 0.15mmol) u 750 mL tetrahidrofurana i 250 mL vode dodat je litijum hidroksid (4mg). Nastali rastvor je mešan tokom 28.5 sati i prerađen kao obično, a zatim je ponovo podvrgnut istim uslovima osim dodavanja dva puta toliko litijum hidroksida (8mg). Posle 24 sata, reakciona smeša je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organski sloj je osušen sa natrijum sulfatom i ukoncentrisan in vacuo. Nastala polučvrsta masa je prečišćena flash hromatografijom, uz eluaciju 3-1 heksani-etil acetatom, da bi se dobio BocNH-P3(t-BuGly)-P2[(Boc(4R)-(naftal-1-okso)prolin]-P1(1R,2S vinil acca)-OH, u vidu bistre polučvrste mase (30mg, 34%).
<1>H NMR (d4-MeOH, 500 MHz) 8 1.04 (s, 9H), 1.24 (t, 1H,J= 3.9 Hz), 1.32 (s, 9H), 1.66 (m, 1H), 2.07 (m, 1H), 2.40 (m, 1H), 2.71 (m, 1H), 4.04-4.07 (m, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.55 (m, 1H), 5.02 (m, 1H), 5.18-5.29 (m, 2H), 5.90 (m, 1H), 6.54 (m, 1H), 6.92 (m, 1H), 4.26 (m, 4H), 7.77 (m, 1H), 8.15 (m, 1H); LC-MS C (retenciono vreme: 2.65); MS m/z 580 (M+H)<+>.
Korak 6:
U rastvor BocNH-P3(t-BuGly)-P2[(Boc(4R)-(naftal-1-okso)prolin]-P1(1R,2S vinil acca)-OH (Primer 470, Korak 5) (65mg, 0.11 mmol) u 3.7mL tetrahidrofurana dodat je 1,1'-karbonil diimidazol (22mg, 0.135mmol). Nastala smeša je podvrgnuta refluksu tokom 30 minuta, a zatim je ohlađena do sobne temperature. U tom momentu su dodati metansulfonamid (27mg, 0.28 mmol) i DBU (34DL, 0.224mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 2 dana, a zatim je dodato još DBU (10CL) i metansulfonamida (9mg). Posle 24 sata, reakciona smeša je razblažena sa 50 mL etil acetata i isprana sa 50 mL 0.25N HCI i 50 ml slanog rastvora. Rastvor je osušen sa natrijum sulfatom i ukoncentrisan in vacuo. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom TLC (3-2 etil acetat-heksani), da bi se dobilo Jedinjenje 470 (21 mg, 28%), u vidu bele čvrste mase nalik filmu.
<1>H NMR (d4-MeOH, 500 MHz) 8 1.04 (s, 9H), 1.36 (s, 9H), 1.88 (t, 1H), 2.18 (m, 1H), 2.31 (m, 1H), 2.63 (m, 1H), 3.11 (bs, 3H), 4.076 (m, 1H), 4.30 (bd, 1H), 4.41 (bd, 1H), 4.52 (?jasno t, 1H), 5.07 (m, 1H), 5.24-5.30 (m, 2H), 5.80 (m, 1H), 6.92 (d, 1H,J= 7.45 Hz), 7.35-7.46 (m, 4H), 7.76 (d, 1H,J =8.1 Hz), 8.13 (d, 1H,J =8.3 Hz); LC-MS C (retenciono vreme: 2.57); MS m/z 657 (M+H)<+>.
Primer 471: Izrada Jedinjenja 471.
Korak 1:
U P2[Boc(4R)-(naftal-1-okso)prolin]-P1(1S,2R vinil acca)-OEt (Primer 470, Korak 3, niži Rf) (91 mg, 0.18mmol) je dodata 4N HCI u dioksanu (2.0mL), a rastvor je ostavljen da se meša tokom 30 minuta. Koncentrisanjem in vacuo dobijena je HCI so P2[(4R)-(naftal-4-okso)prolin]-P1(1S,2R vinil acca)-OEt, u vidu žutog ulja, koje je preuzeto u sledećem koraku, direktno, bez daljeg prečišćavanja.
U rastvor N-BOC-L-terc-leucin-OH ili BOC L-tBuGly (85mg, 0.37 mmol) i HCI soli P2[(4R)-(naftal-1-okso)prolin]-P1(1S,2R vinil acca)-OEt (proizvod dobijen gore pomenutom reakcijom) (0.18mmol) u 13 mL acetonitrila dodat je DIPEA (160u.L, 0.92mmol) i HATU (154mg, 0.41 mmol). Nastali rastvor je mešan pod azotom tokom 17 sati, a zatim je razblažen sa 100 mL etil acetata. Organski sloj je ispran vodom, sa 1N NaHC03, 1N HCI, vodom i slanim rastvorom. Rastvor je, zatim, osušen sa natrijum sulfatom i ukoncentrisan in vacuo, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, u vidu svetlog filma (53mg, 47%).
<1>H NMR (d1-CHCI3, 500MHz) 5 1.02 (s, 9H), 1.22 (t, 3H,J=7.0 Hz), 1.39 (s, 9H), 1.47 (m, 1H), 1.88 (dd, 1H,J= 8.0, 5.5 Hz), 2.07 (m, 1H), 2.42 (m, 1H), 2.80 (dt,J=13.8, 6.0 Hz, 1H), 3.96 (m, 1H), 4.14 (m, 2H), 4.34 (m, 2H), 4.77 (t, 1H,J =7.2 Hz), 5.09-5.33 (m, 3H), 5.72 (m, 1H), 6.82 (d, 1H,J=7.6 Hz), 7.34-7.50 (m, 4H), 7.77 (d, 1H, J= 8.0 Hz), 8.15 (d, 1H, J= 8.25 Hz); LC-MS C (retenciono vreme: 2.81); MS m/z 608 (M+H)<+>.
Korak 2:
Ovaj proizvod je pripremljen u skladu sa procedurom, koja je opisana u Primeru 470, Korak 5 (5 mg, 10%), sa izuzetkom korišćenja proizvoda iz Primera 471, Korak 1.
'H NMR (d4-MeOH, 500MHz) 5 0.99 (s, 9H), 1.28 (m, 1H), 1.37 (s, 9H), 1.60 (m, 1H), 2.06 (m, 1H), 2.28 (m, 1H), 2.66 (m, 1H), 3.91 (m, 1H), 4.33 (m, 2H), 4.61 (bt, 1H), 4.97 (d, 1H,J=11.0 Hz), 5.19 (m, 2H), 6.09 (m, 1H), 6.88 (d, 1H, J = 7.1 Hz), 7.35-7.46 (m, 4H), 7.78 (d, 1H,J =8.2 Hz), 8.12 (d, 1H,J= 8.3 Hz); LC-MS C (retenciono vreme: 2.60); MS m/z 580 (M+H)<+>.
Korak 3:
U rastvor BocN-P3(L-tBuGly)-P2[(Boc(4R)-(naftal-1-okso)prolin]-P1 (1S,2R vinil acca)-COOH (38mg, 0.066mmol) (Primer 471, Korak 5) u 2.2mL tetrahidrofurana dodat je 1,1'-karbonil diimidazol (13mg, 0.079 mmol). Nastala smeša je podvrgnuta refluksu tokom 30 minuta, a zatim je ohlađena do sobne temperature. U tom momentu su dodati metansulfonamid (16mg, 0.16mmol) i DBU (20u,L, 0.13mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 2 dana, a zatim je dodato još DBU (10|iL) i metansulfonamida (9mg). Posle 24 sata, reakciona smeša je razblažena sa 50mL etil acetata i isprana sa 50mL 0.25 N HCI i 50ml slanog rastvora. Rastvor je osušen sa natrijum sulfatom i ukoncentrisan in vacuo. Sirovi materijal je prečišćen korišćenjem 20X40cM ploče preparativne TLC, od Analtecha (eluent 3-2 etil acetat-heksani), da bi se dobilo Jedinjenje 471 (25mg, 58%), u vidu bele čvrste mase nalik filmu.
<1>H NMR (d4-MeOH, 500 MHz) 5 1.03 (s, 9H), 1.34 (s, 9H), 1.80 (m, 1H), 2.18 (m, 1H), 2.31 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 3.09 (bs, 3H), 4.04 (m, 1H), 4.20-4.44 (m, 2H), 4.51 (?jasno t, 1H), 5.08 (m, 1H), 5.25-5.31 (m, 2H), 5.77 (m, 1H), 6.93 (d, 1H,J=7.6 Hz), 7.36-7.45 (m, 4H), 7.77 (d, 1H,J =8.0 Hz), 8.15 (m, 1H); LC-MS C (retenciono vreme: 2.57); MS m/z 657 (M+H)<+>.
Deo L:
Primer 472: Biološke studije
FRET peptidni test rekombinantnog NS3/4A proteaza kompleksa HCV-a
Svrha ovog in vitro testa bila je da se izmeri inhibicija NS3 proteaza kompleksa HCV-a, koji su dobijeni iz BMS, H77C ili J416S sojeva, kao što su opisani u nastavku, pomoću jedinjenja ovog pronalaska. Ovaj test predstavlja pokazatelj koliko bi bila efikasna jedinjenja ovog pronalaska u inhibiranju proteolitičke aktivnosti HCV-a.
Serum pacijenta inficiranog HCV-om dobijen je od dr T. VVrighta, San Francisco Hospital.
Konstruisani templat cDNK pune dužine (kompliment DNK, ver. komplementarna, prim. prev.)
HCV genoma (BMS soj) je izgrađen od DNK fragmenata, dobijenih reverznom transkripcijom-PCR (RT-PCR) serumske RNK (ribonukleinska kiselina) i upotrebom prajmera, odabranih na osnovu homologije između drugih sojeva genotipa 1a. Određivanjem potpune sekvence genoma, genotip 1a je pripisan HCV izolatu, u skladu sa klasifikacijom Simmondsa i saradnika (Vidi P Simmonds, KA Rose, S Graham, SW Chan, F McOmsh, BC Dow, EA Follettt, PL Yap i H Marsden, J. Clin. Microbiol., 31(6), 1493-1503 (1993)). Pokazano je da je aminokiselinska sekvenca nestrukturalnog regiona, NS2-5B, bila >97% identična sa genotipom 1a HCV-a (H77C) i 87% identična sa genotipom 1b (J4L6S). Infektivni klonovi, H77C (1a genotip) i J4L6S (1b genotip) su dobijeni od R. Purcella (NIH), a sekvence su publikovane u Genbank (AAB67036, vidi Yanagi, M., Purcell, R.H., Emerson, S.U. i Bukh, J. Proc. Natl. Acad. Sci.
U.S.A. 94 (16), 8738-8743 (1997); AF054247, vidi Yanagi, M., St Claire, M., Shapiro, M.,
Emerson, S.U., Purcell, R.H. i Bukh, J. Virology 244 (1), 161-172. (1998)).
BMS, H77C i J4L6S sojevi su korišćeni za proizvodnju rekombinantnog proteaza kompleksa NS3/4A. DNK, koja kodira rekombinantni proteaza kompleks NS3/4A (aminokiseline 1027 do 1711) za ove sojeve obrađeni su kako su opisali P. Gallinari i saradnici (vidi Gallinari P,
Paolini C, Brennan D, Nardi C, Steinkuhler C, De Francesco R, Biochemistry. 38(17):5620-32,
(1999)). Ukratko, tri-lizinski solubilizirajući rep je dodat 3'-kraju NS4A kodirajućeg regiona.
Cistein na P1 položaju NS4A-NS4B otcepljujućeg položaja (aminokiselina 1711) je promenjen u glicin kako bi se izbeglo proteolitičko otcepljivanje lizinskog taga. Pored toga, mutacija cisteina u serin je uvedena putem PCR-a na aminokiselinski položaj 1454, da bi se sprečilo autolitičko cepanje u NS3 helikaza domenu. Varijanta DNK fragmenta je klonirana u pET21b bakterijski ekspresioni vektor (Novagen), a NS3/4A kompleks je ekspresovan u sojuEscherichia coliBL21 (DE3) (Invitrogen) prema protokolu, koji su opisali P. Gallinari i saradnici (vidi Gallinari P, Brennan D, Nardi C.Brunetti M, Tomei L, Steinkuhler C, De Francesco R., J. Virol. 72(8):6758-69 (1998)) sa modifikacijama. Ukratko, NS3/4A ekspresija je indukovana sa 0.5 mM izopropil P-D-1-tiogalaktopiranozidom (IPTG), tokom 22 h, na 20°C. Uobičajena fermentacija (10L) je proizvela približno 80 g vlažne ćelijske paste. Ćelije su resusupendovane u puferu za liziranje (10 mLVg), koji se sastoji od 25 mM N-(2-hidroksietil)piperazin-N'-(2-etan sulfonske kiseline) (HEPES), pH 7.5, 20% glicerola, 500 mM natrijum hlorida (NaCI), 0.5% Tritona-X100, 1 u.g/ml lizozima, 5 mM magezijum hlorida (MgCI2), 1 jag/ml Dnasel-a, 5 mM p-merkaptoetanola (PME), proteaznog inhibitora - slobodne etilendiamin tetrasirćetne iseline (EDTA) (Roche), homogenizovane su i inkubirane tokom 20 minuta na 4°C. Homogenat je ozvučen i izbistren ultracentrifugiranjem na 235000 g tokom 1 h, na 4°C. Supernatantu je dodat imidazol do konačne koncentracije od 15 mM, a pH je doteran do 8.0. Sirovi proteinski ekstrakt je napunjen na nikal-nitrilotrisirćetna kiselina (Ni-NTA) kolonu, prethodno uravnoteženu sa puferom B (25 mM HEPES, pH 8.0., 20% glicerol, 500 mM NaCI, 0.5% Triton-X100, 15 mM imidazol, 5 mM (3ME). Uzorak je punjen brzinom protoka od 1 mL/min. Kolona je isprana sa 15 zapremina kolone pufera C (isti kao pufer B, sa izuzetkom 0.2% Tritona-X100). Protein je eluiran sa 5 zapremina kolone pufera D (isti kao pufer C, uz izuzetak 200 mM imidazola).
Frakcije koje sadrže NS3/4A kompleks proteaza pulovane su i punjene na kolonu za desalinaciju Superdex-S200, koje je prethodno uravnotežena puferom D (25 mM HEPES,
pH7.5, 20% glicerol, 300 mM NaCI, 0.2% Triton-X100, 10 mM |3ME). Uzorak je punjen pri brzini protoka od 1 mL/min. Frakcije koje sadrže NS3/4A kompleks proteaza pulovane su i ukoncentrisane do približno 0.5 mg/ml. Prema analizama SDS-PAGE i masene spektrometrije procenjeno je da je čistoća NS3/4A kompleksa proteaza, dobijenih iz BMS, H77C i J4L6S
sojeva, veća od 90%.
Enzim je čuvan na -80°C, rastopljen na ledu i razblažen pre upotrebe u test puferu. Supstrat koji je korišćen za test NS3/4A proteaze, bio je RET S1 (Resonanace Energv Transfer Depsipeptide Substrate; AnaSpec, Inc. cat # 22991 )(FRET peptid), koji su opisali Taliani i saradnici u Anal. Biochem. 240(2):60-67 (1996). Sekvenca ovog peptida je slobodno bazirana na prirodnom otceplujućem položaju NS4A/NS4B osim što je ne položaju otcepljivanja pre estarska spojnica nego amidna veza. Peptidni supstrat je inkubiran sa jednim od tri rekombinantna kompleksa NS3/4A, u odsustvu ili prisustvu jedinjenja ovog pronalaska, a obrazovanje fluorescentnog reakcionog proizvoda je praćeno u realnom vremenu, koristeći Cvtofluor Series 4000.
Reagensi su bili sledeći: HEPES i glicerol (Ultrapure) su dobijeni od GIBCO-BRL. Dimetil sulfoksid (DMSO) je dobijen od Sigme. P-merkaptoetanol je dobijen od Bio Rada.
Test pufer: 50 mM HEPES, pH 7.5; 0.15M NaCI; 0.1% Triton; 15% glicerol; 10 mM [3ME.
Supstrat: 2 u, M konačna koncentracija (od 2 mM štok rastvora u DMSO, čuvanog na -20°C).
HCV NS3/4A tip 1a (1b), 2-3 nM konačna koncentracija (od 5 u, M štok rastvora u 25 mM
HEPES-a, pH 7.5, 20% glicerol, 300 mM NaCI, 0.2% Triton-X100, 10 mM pME).
Test je izveden u polistirenskoj crnoj ploči sa 96 čašica -reakcionih položja, od Falcona.
Svaka reakciona čašica je sadržavala 25 u,\ proteaznog kompleksa NS3/4A u test puferu, 50
u.\ jedinjenja ovog pronalaska u 10% DMSO/test pufera i 25 uJ supstrata u test puferu. Na istoj test ploči je, takođe, pripremljena kontrola (bez jedinjenja). Enzimski kompleks je izmešan sa jedinjenjem ili kontrolnim rastvorom tokom 1 minuta pre započinjanja enzimske reakcije dodatkom supstrata. Test ploča je odmah očitana korišćenjem Cvtofluor Series 4000
(Perspective Biosvstem). Instrument je podešen da čita emisiju na 340 nm i ekscitaciju na 490
nm na 25°C. Reakcije su generalno praćene tokom približno 15 minuta.
Procenat inhibicije je izračunat sledećom jednačinom:
100 - [(5Finh</>5Fcon) x 100]
gde je §F pramena u fluorescenciji tokom linearnog raspona krive. Nelinearna kriva je primenjena na podatke inhibicija-koncentracija, a 50% efektivna koncentracija (IC50) je izračunata korišćenjem Excel Xl-fit softvera, upotrebom jednačine y=A+((B-A)/(1+((C/x)<A>D))).
Utvrđeno je da sva testirana jedinjenja imaju IC50 od 10 u. M ili manji. Pored toga, utvrđeno je da jedinjenja ovog pronalaska, koja su ispitana protiv više od jednog tipa NS3/4A kompleksa,
imaju slične inhibitorne karakteristike, iako jedinjenja uniformno demostriraju veću moć prema 1b sojevima u poređenju sa 1a sojevima.
Testovi specifičnosti
Testovi specifičnosti su izvedeni da bi pokazali selektivnost jedinjenja ovog pronalaska u inhibiranju NS3/4A proteaza HCV-a u poređenju sa drugim serinskim ili cisteinskim proteazama.
Specifičnost jedinjenja ovog pronalaska je određena prema različitim serinskim proteazama: humanoj leukocitnoj elastazi (HLE), svinjskoj pankreasnoj elastazi (PPE) i humanom pankreasnom himotripsinu i, cisteinskoj proteazi: humanom jetrenom katepsinu B. U svim slučajevima je upotrebljen protokol formata ploče sa 96 reakcionih čašica, koristeći kolorimetrijski p-nitroanilin (pNA) supstrat, specifičan za svaki enzim, kao što je prethodno opisan (Patent WO 00/09543), sa nekim modifikacijama na testove serinskih proteaza. Svi enzimi su nabavljeni preko Sigme, dok su supstrati od Bachema.
Svaki test uključuje pre-inkubaciju enzim-inhibitor na RT, od 2 h, nakon koje je sledilo dodavanje supstrata i hidroliza do -30% koverzije, što je mereno na Spectromax Pro čitaču mikroploča. Koncentracije jedinjenja su varirale od 100 do 0.4 u.M, u zavisnosti od njihove aktivnosti.
Konačni uslovi za svaki test bili su:
50 mM Tris(hidroksimetil)aminometan hidrohlorid (Tris-HCI) pH 8, 0.5 M natrijum sulfat (Na2S04), 50 mM NaCI, 0.1 mM EDTA, 3% DMSO, 0.01% Tween-20, sa: 133 \ M succ-AAA-pNA i 20 nM HNE ili 8nM PPE; 133 \ M succ-AAV-pNA i 15 nM HLE; 100
(J.M succ-AAPF-pNA i 250 pM himotripsina.
100 mM NaHP04(natrijum hidrogen fosfat), pH 6, 0.1 mM EDTA, 3% DMSO, 1mM TCEP
(Tris(2-karboksietil)fosfin hidrohlorid), 0.01% Tween-20, 30 uM Z-FR-pNA i 5 nM katepsina B
(enzimski štok, aktiviran u puferu, koji sadrži 20 mM TCEP, pre upotrebe).
Procenat inhibicije je izračunat korišćenjem formule:
[1-((UVlnh-UVblaJ/(UVcS-UVbtank))] x<100>
Ne-linearna kriva je primenjena na podatke inhibibija-koncentracija, a 50% efektivna koncentracija (ICS0) je izračunata korišćenjem Excel Xl-fit softvera.
Test zasnovan na replikon ćeliji HCV- a
Kompletan replikon ćelijski sistem HCV-a ustanovljen je kao što su opisali Lohmann V, Korner F, Koch J, Herian U, Theilmann L, Bartenschlager R., Science 285(5424): 110-3 (1999). Ovaj sistem nam omogućava da ispitamo efekte naših HCV proteaznih jedinjenja na RNK
replikaciju HCV-a. Ukratko, koristeći sekvencu 1B soja HCV-a, opisanu u Lohmann papiru (Assession broj: AJ238799), cDNK HCV-a je proizvedena kodiranjem 5' položaja unutrašnjeg ribozomskog ulaza (IRES), gena rezistencije na neomicin, EMCV (virus encefalomiokarditisa)-IRES i nestrukturnih proteina HCV-a, NS3-NS5B i 3' ne-translacionog regiona (NTR). In vitro transkripti cDNK su transfektovani u ćelijski niz humanog hepatoma, Huh7. Izbor ćelija koje konstituitivno ekspresuju HCV replikon, izvršen je u prisustvu sektabilnog markera, neomicina (G418). Nastali ćelijski nizovi, opisani su i u proizvodnji pozitivnog i negativnog lanca RNK i proizvodnji proteina tokom vremena.
Huh7 ćelije, koje konstituitivno ekspresuju replikon HCV-a, rasle su u Dulbecco Modified Eagle Medijumu (DMEM), koji sadrži 10% telećeg fetalnog seruma (FCS) i 1 mg/ml G418 (Gibco-BRL). Ćelije su zasejane noć pre (1.5 x 10<4>ćelija/reakciona čašica) u sterilnim pločama od 96
reakcionih položaja sa kulturom tkiva. Kontrole sa i bez jedinjenja su pripremljene u DMEM-u,
koji sadrži 4% FCS, 1:100 penicilin/streptomicin, 1:100 L-glutamin i 5% DMSO u dilucionoj ploči (konačna koncentracija u testu je 0.5% DMSO). Izmešani jedinjenje/DMSO su dodati ćelijama i inkubirani tokom 4 dana na 37°C. Posle 4 dana, ploče su temeljno isprane slanim rastvorom puferisanim fosfatnim puferom (PBS) (3 puta 150 \ x\). Ćelije su lizirane sa 25 u.\
test reagensa za liziranje, koji sadrži FRET peptid (RET S1, kao što je opisan u in vitro
enzimskom testu). Test reagens za liziranje je izrađen iz 5X ćelijskog luciferaza reagensa za liziranje ćelijske kulture (Promega #E153A), razblaženog 1X sa destilovanom vodom, NaCI,
dodatog do konačno 150 mM, FRET peptida, razblaženog do završno 10 u. M iz 2 mM štoka u 100% DMSO. Ploča je zatim, stavljena u instrument Cvtofluor 4000, koji je namešten na 340 nm ekscitacija/490 nm emisija, automatski mod je za 21 ciklus, a ploča je čitana u kinetičkom modu. Određivanja EC50su izvedena kao što je opisano za određivanja IC50.
Kao drugi test, određivanja EC50iz replikon FRET testa su potvrđena u kvantitativnom RNK
testu. Ćelije su lizirane korišćenjem Rneasv kompleta (Oiagen). Prečišćena ukupna RNK je normalizovana korišćenjem RiboGreen (Jones LJ, Yue ST, Cheung CY, Singer VL, Anal.
Chem, 265(2):368-74 (1998)), relativno kvantitativno određivanje ekspresije RNK HCV-a je ustanovljeno korišćenjem Taqman procedure (Kolvkhalov AA, Mihalik K, Feinstone SM, Rice CM, Journal of Virologv 74, 2046-2051 (2000)) i Platinum Ouantiative RT-PCR Thermoscript One-Step kompleta (Invitrogen cat # 11731-015). Ukratko, RNK dovedena do zapremine od 5
jal (< 1 ng) je dodata u 20 u.l Ready-Mix, koji sadrži sledeće: 1.25X Thermoscript reakciona mešavina (koja sadrži magnezijum sulfat i 2-deoksinukleozid 5'-triofosfate (dNTP-e)), 3 mM
dNTP-e, 200 nM prednji prajmer (sekvenca: 5'-gggagagccatagtggtctgc-3'), 600nM reverzni prajmer (sekvenca: 5'-cccaaatctccaggcattga-3'), 100 nM probe (5'-6-FAM-cggaattgccaggacgaccgg-BHQ-1-3')(FAM: fluorescein aminoheksil amidit; BHQ: Black Hole Ouencher), 1 u.M Rox referentne boje (Invitrogen cat # 12223-012) i Thermoscript Plus Platinum Taq polimerazne mešavine. Svi prajmeri su oblikovani sa ABI Prism 7700 softverom i dobijeni posredstvom Biosearch Technologies, Novato, CA, Uzorci, koji sadrže poznate koncentracije RNK transkripta HCV-a su odrađeni kao i standardi. Koristeći sledeći ciklični protokol (50°C, 30 minuta; 95°C, 5 minuta; 40 ciklusa od 95°C, 15 sekundi, 60°C, 1 minut),
eksresija RNK HCV-a je kvantitativno određena, kao što je opisano u uputstvu Perkin Elmera,
korišćenjem ABI Prism 7700 detektora sekvence.
Biološki primeri
Reprezentativna jedinjenja pronalaska su procenjena u testu replikon ćelije HCV-a i/ili u nekolicini od prikazanih testova specifičnosti. Na primer, u enzimskom testu je utvrđeno da Jedinjenje 34 ima IC50od 23 nanomola (nM) u odnosu na NS3/4A BMS soja. Slične vrednosti inhibitorne moći su dobijene sa publikovanim H77C (IC60od 3 nM) i J4L6S (IC50od 2.9 nM)
sojevima. EC50vrednost u replikon testu je bila 166 nM.
U testovima specifičnosti, utvrđeno je da isto jedinjenje ima sledeću aktivnost: HLE > 100 u.M;
PPE > 200 \ iM; Himotripsin > 200 jiM; Katepsin B > 200 |aM. Ovi rezultati pokazuju da je ova porodica jedinjenja visoko specifična za NS3 proteazu i da mnogi od njenih članova inhibiraju replikaciju HCV replikona.
Jedinjenja tekućeg pronalaska su ispitana i utvrđeno je da imaju aktivnosti u sledećim rasponima: Raspon IC50 aktivnosti (NS3/4A BMS soja): A je 10 - 100 mikromola ( u. M) ; B je 1 - 10 uM;
C je 0.1 - 1 u.M; D je < 0.1 uM
Raspon EC50 aktivnosti (za testirana jedinjenja): A je 10 - 100 u.M; B je 1 - 10 p.M; C je 0.1 - 1 u,M; D je < 0.1 u.M
Obrati pažnju da korišćenjem broja Patentnog primera i broja Patentnog jedinjenja, prikazanih u tabeli, ovde mogu biti nađene strukture jedinjenja.
U skladu sa ovim pronalaskom, jedinjenja poželjno imaju biološku aktivnost (EC50) od 10 u.M
ili manju, poželjnije 1 (J.M ili manju, a najpoželjnije 100 nM ili manju.
Deo M:
Tabela 2.
Slede jedinjenja, koja se mogu proizvesti korišćenjem postupaka, koji su ovde opisani a, naročito u delovima A do K dela Primera i još preciznije, u delovima B, E, F i G. Osim toga, treba razjasniti da svaka od grupa B, R3, R2i R,, prikazana u nastavku, može biti zamenjena bilo kojom od grupa koje su prikazane primerima u delovima A do K i drugde u okviru patenta ili označena Formulom I. Na primer, R3grupa u Tabeli 2 je prikazana kao t-butil grupa, međutim, stručnjak praktičar će prepoznati da za svaku od svih ispod navedenih, ova grupa može biti zamenjena izopropilnom grupom ili sa C,.6alkilom, supstituisanim sa alkoksi. Ili B grupa, prikazana ispod, može biti zamenjena sa terc-butil ureom, za sve dole navedene.

Claims (49)

1. Jedinjenje sa formulom: gde: (a) R, je: C^alkil, C3.7cikloalkil ili C4.10alkilcikloalkil; (b) m je 1 ili 2; (c) n je 1 ili 2; (d) R2je: H, C^alkil, C2.6alkenil ili C3.7cikloalkil, svaki opciono supstituisan sa halogenom; (e) R3je C,.8alkil, opciono supstituisan sa: halo, cijano, amino, C^gdialkilamino, C6.10aril, C7.14alkilaril, C^alkoksi, karboksi, hidroksi, ariloksi, C7.14alkilariloksi, C2.6alkilestar, C8.15alkilarilestar, C3.12alkenil, C3.7cikloalkil ili C4.10alkilcikloalkil, gde su cikloalkil ili alkilcikloalkil opciono supstituisani sa hidroksi, C^alkilom, C2.6alkenilom ili C16alkoksi; ili R3zajedno sa atomom ugljenika za koji je vezan obrazuje C3.7cikloalkilnu grupu, opciono supstituisanu sa C2.6alkenilom; (f) Y je: H, fenil, supstituisan sa nitro, piridil, supstituisan sa nitro ili C^alkil opciono supstituisan sa cijano, OH ili C3_7cikloalkilom; uz uslov da ukoliko su R4ili R5H, onda je Y H; (g) B je: H, C^alki, R4-(C=0)-, R40(C=0)-, R4-N(R5)-C(=0)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4S02- ili R4-N(R5)-S02-; (h) R4je (i) C^^alkil, opciono supstituisan sa fenilom, karboksilom, C^alkanoilom, 1-3 halogena, hidroksi, -OC(0)C1.6alkilom, C^alkoksi, amino, opciono supstituisan sa C^alkilom, amido ili (niži alkil) amido; (ii) C3.7cikloalkil, C3.7cikloalkoksi ili C4.10alkilcikloalkil, svaki opciono supstituisan sa hidroksi, karboksilom, (C^alkoksOkarbonilom, amino, opciono supstituisan sa C,_6alkilom, amido ili (niži alkil) amido; (iii) C6.10aril ili C7.16arilalkil, svaki opciono supstituisan sa C,_6alkilom, halogenom, nitro, hidroksi, amido, (niži alkil) amido ili amino, opciono supstituisan sa C^alkilom; (iv) Het; (v) biciklo(1.1.1)pentan; ili (vi) -C(0)OC^alkil, C2.6alkenil ili C2.6alkinil; (i) R5je H; C^alkil, opciono supstituisan sa 1-3 halogena; ili C^alkoksi, uz uslov da je R4C^alkil; (j) X je: O, S, SO, S02, OCH2, CH20 ili NH; (k) R' je Het; ili<C>6.10-aril ili C7.14alkilaril, opciono supstituisan sa R<a>;i (I) R<a>je: C16alkil, C3.7cikloalkil, C^alkoksi, C3.7cikloalkoksi, halo-C^alkil, CF3, mono-ili di-halo-C,.6alkoksi, cijano, halo, tioalkil, hidroksi, alkanoil, N02, SH, amino, C^alkilamino, di(C,.6)alkilamino, difC^g) alkilamid, karboksil, (C1.6)karboksiestar, C^alkilsulfon, C^alkilsulfonamid, difC,.6)alkil(alkoksi)amin, C6.10aril, C7.14alkilaril ili 5-7 člani monociklični heterocikl; uz uslov da X-R' nije ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili prolek.
2. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1, n a z n a č e n o time što je R1C3. 7cikloalkil.
3. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1, n a z n a č e n o time što je R2: C.,. 6alkil, C2.6alkenil ili C3.7cikloalkil.
4. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 3, n a z n a č e n o time što je R2C2. 6alkenil.
5. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1, n a z n a č e n o time što je R3Cv8alkil, opciono supstituisan sa: C6arilom, C^alkoksi, karboksi, hidroksi, ariloksi, C7.14alkilariloksi, C2.6alkilestrom, C8.15alkilaril-estrom, C3.12alkenilom, C3.7cikloalkilom ili C4.10alkilcikloalkilom.
6. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 5, n a z n a č e n o time što je R3C,. 8alkil, opciono supstituisan sa C^alkoksi; ili C3.7cikloalkil.
7. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1, naznačeno time štojeYH.
8. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1, n a z n a č e n o time što je B: H, C^alki, R4-(C=0)-, R40(C=0)-, R4-N(R5)-C(=0)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4S02- ili R4-N(R5)-S02-.
9. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 8, n a z n a č e n o time što je B: R4-(C=0)-, R40(C=0)- ili R4-N(R5)-C(=0)-.
10. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 9, naznačeno time što je B R40(C=0)- i R4je C^alkil.
11. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1, n a z n a č e n o time što je R4(i) C^^alkil, opciono supstituisan sa fenilom, karboksilom, C^alkanoilom, 1-3 halogena, hidroksi, Cv6alkoksi; (ii) C3.7cikloalkil, C3.7cikloalkoksi ili C4.10alkilcikloalkil; ili (iii) C6.10aril ili C7.16<a>rilalkil, svaki opciono supstituisan sa C^alkilom ili halogenom.
12. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 11, n a z n a č e n o time što je R4(i) C^alkil, opciono supstituisan sa 1-3 halogena ili C16alkoksi; ili (ii) C3.7cikloalkil ili C4.10alkilcikloalkil.
13. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1, n a z n a č e n o time što je R5H ili C^alkil, opciono supstituisan sa 1-3 halogena.
14. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 13, n a z n a č e n o time što je R5H.
15. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1, n a z n a č e n o time što je X O ili NH.
16. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1, n a z n a č e n o time što je R' Het; ili C610aril, opciono supstituisan sa R<a>.
17. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 16, n a z n a č e n o time što je R' Het.
18. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1, naznačeno time što heterocikl sadrži 1 ili 2 atoma azota i, opciono, atom sumpora ili atom kiseonika u prstenu.
19. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 18, n a z n a č e n o time što je heterocikl supstituisan sa najmanje jednim od: C^alkila, C^alkoksi, halo, C6.10arila, C7.14alkilarila ili 5-7 članog monocikličnog heterocikla.
20. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1, n a z n a č e n o time što je R<a>: C?_6alkil, C3.7cikloalkil, C^alkoksi, halo-C,.6alkil, halo, amino, C6aril ili 5-7 člani monociklični heterocikl.
21. Jedinjenje, koje ima formulu: u kojoj: (a) R., je C3.7cikloalkil; (b) R2je C^alkil, C2.6alkenil ili C3.7cikloalkil; (c) R3je C,.8alkil, opciono supstituisan sa: C6arilom, C^alkoksi, karboksi, hidroksi, ariloksi, C7.14alkilariloksi, C2.6alkilestrom, C8.15alkilaril-estrom, C3.12alkenilom, C3.7cikloalkilom ili C4. 10alkilcikloalkilom; (d) Y je H; (e) B je: H, C^alki, R4-(C=0)-, R40(C=0)-, R4-N(R5)-C(=0)-, R4-N(R5)-C(=S)-, R4S02- ili R4-N(R5)-S02-; (f) R4je (i) C110alkil, opciono supstituisan sa fenilom, karboksilom, C^alkanoilom, 1-3 halogena, hidroksi, C^alkoksi; (ii) C37cikloalkil, C3.7cikloalkoksi ili C4.10alkilcikloalkil; ili (iii) C6.10aril ili C7.16arilalkil, svaki opciono supstituisan sa C^alkilom ili halogenom; (g) R5je H i'i C^alkil, opciono supstituisan sa 1-3 halogena; (h) X je O ili NH; (i) R' je Het; ili C^-aril, opciono supstituisan sa R<a>; i (j) R<a>je: C^alkil, C37cikloalkil, C^alkoksi, halo-C^alkil, halo, amino, C6aril ili 5-7 člani monociklični heterocikl; uz uslov da Xa-R' nije ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili prolek.
22. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 21, n a z n a č e n o time što je R' biciklični heterocikl.
23. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 22, n a z n a č e n 0 time što heterocikl sadrži 1 ili 2 atoma azota i, opciono, atom sumpora ili atom kiseonika u prstenu.
24. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 22, n a z n a č e n 0 time što je heterocikl supstituisan sa najmanje jednim od: C^alkila, C,.6alkoksi, halo, C6arila i 5-7 članog monocikličnog heterocikla.
25. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 21, n a z n a č e n o time što je R' biciklični heterocikl, koji sadrži 1 atom azota i, koji je supstituisan sa metoksi ili najmanje jednim od C6arila i 5-7 članog monocikličnog heterocikla.
26. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 21, n a z n a č e n 0 time što je R' monociklični heterocikl.
27. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 26, n a z n a č e n 0 time što heterocikl sadrži 1 ili 2 atoma azota i, opciono, atom sumpora ili atom kiseonika u prstenu.
28. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 26, n a z n a č e n o time što je heterocikl supstituisan sa najmanje jednim od: C^alkila, C^alkoksi, halo, C6.10arila, C7.14alkilarila ili 5-7 članog monocikličnog heterocikla.
29. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 21, n a z n a č e n o time što je R' monociklični heterocikl, koji sadrži 1 ili 2 atoma azota i, koji je supstituisan sa metoksi ili najmanje jednim od C6arila i 5-7 članog monocikličnog heterocikla.
30. Jedinjenje, koje ima formulu u kojoj: (a) R, je C3.7cikloalkil; (b) R2je C2.6alkenil; (c) R3 je C18alkil; (d) Y je H; (e) B je R40(C=0)- ili R4-N(R5)-C(=0)-; (f) R4je C1l0alkil; (9) R5 je H; (h) R' je biciklični heterocikl opciono supstituisan sa R<a>; i (i) R<a>je C^alkil, C^alkoksi, halo, C6aril ili 5-7 člani monociklični heterocikl; uz uslov da O- R' nije ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili prolek.
31. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 30, n a z n a č e n o time što je R, ciklopropil ili ciklobutil.
32. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 30, n a z n a č e n o time što je R2vinil.
33. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 30, n a z n a č e n o time što je R3t-butil.
34. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 30, n a z n a č e n o time što je R4t-butil.
35. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 30, n a z n a č e n o time što je R' hinolin ili izohinolin, opciono supstituisan sa R<a>.
36. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 30, n a z n a č e n o time što je R, ciklopropil, R2je vinil, R3je t-butil, R4je t-butil i R' je izohinolin supstituisan sa R<a>.
37. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 36, n a z n a č e n o time što je R<a>C,_6alkoksi.
38. Jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 37, n a z n a č e n o time što R<a>dalje obuhvata najmanje jedan C6aril ili 5-7 člani monociklični heterocikl.
39. Postupak lečenja infekcije HCV-om kod pacijenta, naznačen tim e što uključuje primenjivanje pacijentu terapeutski delotvorne količine jedinjenja, kao u patentnom zahtevu 1 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvata ili proleka.
40. Postupak inhibiranja NS3 proteaze HCV-a, naznačen time što uključuje primenjivanje pacijentu kome je to potrebno, terapeutski delotvorne količine jedinjenja, kao u patentnom zahtevu 1 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvata ili proleka.
41. Smeša, naznačena time što obuhvata jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili prolek i, farmaceutski prihvatljiv nosač.
42. Smeša, kao u patentnom zahtevu 41, naznačena time što dalje obuhvata dodatni agens za imunomodulaciju.
43. Smeša, kao u patentnom zahtevu 42, n a z n a č e n a time što je dodatni agens za imunomodulaciju odabran iz grupe, koja se sastoji od a-, (3- i 8-interferona.
44. Smeša, kao u patentnom zahtevu 41, naznačena time što dalje obuhvata antivirusni agens.
45. Smeša, kao u patentnom zahtevu 44, n a z n a č e n a time što je antivirusni agens odabran iz grupe, koja se sastoji od ribavirina i amantadina.
46. Smeša, kao u patentnom zahtevu 41, naznačena time što dalje obuhvata inhibitor proteaze HCV-a, koji nije jedinjenje, kao u patentnom zahtevu 1.
47. Smeša, kao u patentnom zahtevu 46, n a z n a č e n a time što dalje obuhvata inhibitor mete u životnom ciklusu HCV-a, a koja nije NS3 proteaza HCV-a.
48. Smeša, kao u patentnom zahtevu 47, n a z n a č e n a time što je druga meta odabrana iz grupe, koja se sastoji od: helikaze, polimeraze, metaloproteaze i njihovih mešavina.
49. Upotreba smeše, kao u patentnom zahtevu 41, n a z n a č e n a time što je za proizvodnju leka za lečenje hepatitis C virusne infekcije kod pacijenta.
YU100504A 2002-05-20 2003-05-20 Inhibitori virusa hepatitis c RS52407B (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US38205502P 2002-05-20 2002-05-20
PCT/US2003/015755 WO2003099274A1 (en) 2002-05-20 2003-05-20 Hepatitis c virus inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RS100504A true RS100504A (sr) 2007-02-05
RS52407B RS52407B (sr) 2013-02-28

Family

ID=29584353

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
YU100504A RS52407B (sr) 2002-05-20 2003-05-20 Inhibitori virusa hepatitis c

Country Status (33)

Country Link
US (9) US6995174B2 (sr)
EP (2) EP1505963B9 (sr)
JP (1) JP4312710B2 (sr)
KR (2) KR20100093140A (sr)
CN (3) CN101024671B (sr)
AR (3) AR040080A1 (sr)
AT (1) ATE506104T1 (sr)
AU (1) AU2003241510B2 (sr)
BR (1) BR0311132A (sr)
CA (1) CA2486308C (sr)
CO (1) CO5640083A2 (sr)
CY (1) CY1112108T1 (sr)
DE (1) DE60336807D1 (sr)
DK (1) DK1505963T3 (sr)
ES (1) ES2363131T3 (sr)
GE (1) GEP20063938B (sr)
HR (1) HRP20041085B1 (sr)
IL (1) IL164987A (sr)
IS (1) IS7530A (sr)
MX (1) MXPA04011440A (sr)
MY (1) MY140680A (sr)
NO (1) NO332427B1 (sr)
NZ (1) NZ536539A (sr)
PE (1) PE20040517A1 (sr)
PL (1) PL226561B1 (sr)
PT (1) PT1505963E (sr)
RS (1) RS52407B (sr)
RU (3) RU2317303C1 (sr)
SI (1) SI1505963T1 (sr)
TW (1) TWI306452B (sr)
UA (1) UA80973C2 (sr)
WO (1) WO2003099274A1 (sr)
ZA (1) ZA200409162B (sr)

Families Citing this family (282)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060199773A1 (en) * 2002-05-20 2006-09-07 Sausker Justin B Crystalline forms of (1R,2S)-N-[(1,1-dimethylethoxy)carbonyl]-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-[(6-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy]-L-prolyl-1-amino-N-(cyclopropylsulfonyl)-2-ethenyl-cyclopropanecarboxamide, monopotassium salt
MY140680A (en) * 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
EP1601685A1 (en) * 2003-03-05 2005-12-07 Boehringer Ingelheim International GmbH Hepatitis c inhibiting compounds
JP4682140B2 (ja) * 2003-03-05 2011-05-11 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｃ型肝炎インヒビターペプチド類縁体
EP1629000B1 (en) * 2003-04-16 2009-02-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic isoquinoline peptide inhibitors of hepatitis c virus
US7176208B2 (en) * 2003-04-18 2007-02-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
CA2522577C (en) 2003-05-21 2011-04-26 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor compounds
US7273851B2 (en) 2003-06-05 2007-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Tri-peptide hepatitis C serine protease inhibitors
UY28525A1 (es) 2003-09-22 2005-04-29 Boehringer Ingelheim Int Péptidos macrociclicos activos contra en virus de la hepatitis c
US7491794B2 (en) 2003-10-14 2009-02-17 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
US7132504B2 (en) 2003-11-12 2006-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7135462B2 (en) 2003-11-20 2006-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7309708B2 (en) 2003-11-20 2007-12-18 Birstol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2549851C (en) 2004-01-21 2012-09-11 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
SE0400199D0 (sv) * 2004-01-30 2004-01-30 Medivir Ab HCV Protease inhbitors
BRPI0506948B1 (pt) 2004-01-30 2018-09-18 Medivir Ab inibidores de serina protease ns-3 de hcv
TWI368507B (en) 2004-02-20 2012-07-21 Boehringer Ingelheim Int Viral polymerase inhibitors
WO2005090383A2 (en) * 2004-03-15 2005-09-29 Boehringer Ingelheim International, Gmbh Process for preparing macrocyclic dipeptides which are suitable for the treatment of hepatitis c viral infections
BRPI0509467A (pt) * 2004-03-30 2007-09-11 Intermune Inc compostos macrocìclicos como inibidores de replicação viral
CA2568008C (en) 2004-05-25 2014-01-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for preparing acyclic hcv protease inhibitors
EP1763531A4 (en) * 2004-06-28 2009-07-01 Boehringer Ingelheim Int ANALOGUE OF HEPATITIS-C INHIBITING PEPTIDES
WO2006010127A2 (en) * 2004-07-09 2006-01-26 Medisyn Technologies, Inc. Therapeutic compound and treatments
PT1778702E (pt) 2004-07-16 2011-10-18 Gilead Sciences Inc Compostos antivirais
UY29016A1 (es) * 2004-07-20 2006-02-24 Boehringer Ingelheim Int Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c
ES2366478T3 (es) 2004-07-20 2011-10-20 Boehringer Ingelheim International Gmbh Análogos peptídicos inhibidores de la hepatitis c.
RU2408587C2 (ru) 2004-08-24 2011-01-10 Астразенека Аб Производные пиримидинсульфонамида в качестве модуляторов рецепторов хемокинов
EP1797111B1 (en) * 2004-08-27 2011-06-22 Schering Corporation Acylsulfonamide compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
US7846915B2 (en) 2004-10-20 2010-12-07 Resverlogix Corporation Stilbenes and chalcones for the prevention and treatment of cardiovascular diseases
US7323447B2 (en) 2005-02-08 2008-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7402596B2 (en) 2005-03-24 2008-07-22 Renovis, Inc. Bicycloheteroaryl compounds as P2X7 modulators and uses thereof
AU2006242475B2 (en) 2005-05-02 2011-07-07 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
US7592336B2 (en) * 2005-05-10 2009-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7601686B2 (en) 2005-07-11 2009-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TWI389908B (zh) * 2005-07-14 2013-03-21 Gilead Sciences Inc 抗病毒化合物類
TWI387603B (zh) 2005-07-20 2013-03-01 Merck Sharp & Dohme Ｈｃｖ ｎｓ３蛋白酶抑制劑
US20080200497A1 (en) * 2005-07-20 2008-08-21 Bailey Murray D Hepatitis C Inhibitor Peptide Analogs
KR101294467B1 (ko) * 2005-07-25 2013-09-09 인터뮨, 인크. Ｃ형 간염 바이러스 복제의 신규 거대고리형 억제제
EP1919898B1 (en) 2005-07-29 2011-01-26 Tibotec Pharmaceuticals Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
US8410109B2 (en) 2005-07-29 2013-04-02 Resverlogix Corp. Pharmaceutical compositions for the prevention and treatment of complex diseases and their delivery by insertable medical devices
PE20070343A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
AU2006274862B2 (en) 2005-07-29 2012-03-22 Medivir Ab Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus
EP1913016B1 (en) 2005-08-01 2013-01-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Macrocyclic peptides as hcv ns3 protease inhibitors
CA2618682C (en) 2005-08-12 2011-06-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
BRPI0617274A2 (pt) 2005-10-11 2011-07-19 Intermune Inc compostos e métodos para a inibição de replicação viral de hepatite c
US7772183B2 (en) 2005-10-12 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7741281B2 (en) 2005-11-03 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7816348B2 (en) 2006-02-03 2010-10-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
TWI464148B (zh) 2006-03-16 2014-12-11 Evotec Us Inc 作為ｐ２ｘ7調節劑之雙環雜芳基化合物與其用途
UA100666C2 (uk) * 2006-04-11 2013-01-25 Новартіс Аг Інгібітори нсv/віл та їх застосування
GB0609492D0 (en) 2006-05-15 2006-06-21 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
US7728148B2 (en) * 2006-06-06 2010-06-01 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Acyclic oximyl hepatitis C protease inhibitors
US20080187516A1 (en) * 2006-06-06 2008-08-07 Ying Sun Acyclic oximyl hepatitis c protease inhibitors
GB0612423D0 (en) 2006-06-23 2006-08-02 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
UY30437A1 (es) * 2006-06-26 2008-01-31 Enanta Pharm Inc Quinoxalinil macroceclicos inhibidores de serina proteasa del virus de la hepatitis c
RU2008152171A (ru) * 2006-07-05 2010-08-10 Интермьюн, Инк. (Us) Новые ингибиторы вирусной репликации гепатита с
US7935670B2 (en) 2006-07-11 2011-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
DK2041156T3 (en) * 2006-07-13 2014-02-24 Achillion Pharmaceuticals Inc 4-AMINO-4-OXOBUTANOYL Peptides AS INHIBITORS OF VIRUS REPLICATION
US20090035267A1 (en) * 2007-07-31 2009-02-05 Moore Joel D Acyclic, pyridazinone-derived hepatitis c serine protease inhibitors
US7635683B2 (en) * 2006-08-04 2009-12-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl tripeptide hepatitis C virus inhibitors
US20090098085A1 (en) * 2006-08-11 2009-04-16 Ying Sun Tetrazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US7687459B2 (en) * 2006-08-11 2010-03-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis C virus protease inhibitors
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
US20080038225A1 (en) * 2006-08-11 2008-02-14 Ying Sun Triazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
EP2054388A4 (en) 2006-08-17 2009-10-28 Boehringer Ingelheim Int VIRAL POLYMERASE INHIBITORS
CN101583372A (zh) 2006-10-24 2009-11-18 默克公司 Hcv ns3蛋白酶抑制剂
WO2008051475A2 (en) 2006-10-24 2008-05-02 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
AU2007309546A1 (en) 2006-10-24 2008-05-02 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. HCV NS3 protease inhibitors
MY164469A (en) * 2006-10-27 2017-12-15 Msd Italia Srl Hcv ns3 protease inhibitors
US8377874B2 (en) 2006-10-27 2013-02-19 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
US20080107625A1 (en) * 2006-11-01 2008-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of Hepatitis C Virus
US20080107623A1 (en) * 2006-11-01 2008-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of Hepatitis C Virus
US8343477B2 (en) 2006-11-01 2013-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
US20080108632A1 (en) * 2006-11-02 2008-05-08 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
US7772180B2 (en) 2006-11-09 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2008070358A2 (en) * 2006-11-16 2008-06-12 Phenomix Corporation N-cyclopropyl-hydroxyproline-based tripeptidic hepatitis c serine protease inhibitors containing an isoindole, pyrrolopyridine, pyrrolopyrimidine or pyrrolopyrazine heterocycle in the side chain
US7763584B2 (en) 2006-11-16 2010-07-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7888464B2 (en) 2006-11-16 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8003604B2 (en) 2006-11-16 2011-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9828597B2 (en) 2006-11-22 2017-11-28 Toyota Motor Engineering & Manufacturing North America, Inc. Biofunctional materials
EP2121707B1 (en) 2006-12-20 2012-12-05 Istituto di Ricerche di Biologia Molecolare P. Angeletti S.R.L. Antiviral indoles
CA2672737A1 (en) 2006-12-20 2008-11-06 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
GB0625345D0 (en) 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
GB0625349D0 (en) 2006-12-20 2007-01-31 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic compounds
WO2008086053A1 (en) * 2007-01-03 2008-07-17 Virobay, Inc. Hcv inhibitors
WO2008095058A1 (en) * 2007-02-01 2008-08-07 Taigen Biotechnology Co. Ltd. Hcv protease inhibitors
MX2009008099A (es) 2007-02-01 2009-12-14 Resverlogix Corp Compuestos para la prevencion y tratamiento de enfermedades cardiovasculares.
BRPI0807087A2 (pt) * 2007-02-08 2014-06-10 Tibotec Pharm Ltd Inibidores de hcv macrocíclicos substituídos de pirimidina
JP2010519339A (ja) * 2007-02-26 2010-06-03 アキリオン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド Ｈｃｖ複製阻害剤として有用な三級アミン置換ペプチド
WO2008134398A1 (en) * 2007-04-26 2008-11-06 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Oximyl dipeptide hepatitis c protease inhibitors
US8377872B2 (en) 2007-04-26 2013-02-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Cyclic P3 tripeptide hepatitis C serine protease inhibitors
US20080267917A1 (en) * 2007-04-26 2008-10-30 Deqiang Niu N-functionalized amides as hepatitis c serine protease inhibitors
US20080317712A1 (en) * 2007-04-26 2008-12-25 Deqiang Niu Arylpiperidinyl and arylpyrrolidinyl tripeptide hepatitis c serine protease inhibitors
US7910587B2 (en) * 2007-04-26 2011-03-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl dipeptide hepatitis C virus inhibitors
SG174809A1 (en) * 2007-05-03 2011-10-28 Intermune Inc Macrocyclic compounds useful as inhibitors of hepatitis c virus
AU2008251425A1 (en) * 2007-05-10 2008-11-20 Array Biopharma, Inc. Novel peptide inhibitors of hepatitis C virus replication
US20090005387A1 (en) * 2007-06-26 2009-01-01 Deqiang Niu Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis c virus serine protease inhibitors
WO2009005690A2 (en) * 2007-06-29 2009-01-08 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
TWI395746B (zh) 2007-06-29 2013-05-11 Gilead Sciences Inc 抗病毒性化合物
CA2692145C (en) 2007-06-29 2015-03-03 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
JP2010533699A (ja) 2007-07-17 2010-10-28 イステイチユート・デイ・リチエルケ・デイ・ビオロジア・モレコラーレ・ピ・アンジエレツテイ・エツセ・ピー・アー Ｃ型肝炎感染症の治療のための大環状インドール誘導体
WO2009010804A1 (en) 2007-07-19 2009-01-22 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Macrocyclic compounds as antiviral agents
WO2009018657A1 (en) 2007-08-03 2009-02-12 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
WO2009042668A2 (en) 2007-09-24 2009-04-02 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Urea-containing peptides as inhibitors of viral replication
US8419332B2 (en) * 2007-10-19 2013-04-16 Atlas Bolt & Screw Company Llc Non-dimpling fastener
WO2009055335A2 (en) * 2007-10-25 2009-04-30 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
US8383583B2 (en) 2007-10-26 2013-02-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic, pyridazinone-containing hepatitis C serine protease inhibitors
CL2008003384A1 (es) * 2007-11-14 2009-12-11 Enanta Pharm Inc Compuestos derivados de quinoxalina macrocíclica, inhibidores de serina proteasa; composicion farmaceutica que los comprende; y su uso en el tratamiento de la hepatitis c.
JP2011503201A (ja) 2007-11-14 2011-01-27 エナンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 大環状テトラゾリルｃ型肝炎セリンプロテアーゼ阻害剤
US8030307B2 (en) * 2007-11-29 2011-10-04 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic, C5-substituted proline derivatives as inhibitors of the hepatitis C virus NS3 protease
US8263549B2 (en) * 2007-11-29 2012-09-11 Enanta Pharmaceuticals, Inc. C5-substituted, proline-derived, macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
CA2708042A1 (en) 2007-12-05 2009-06-11 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl derivatives
WO2009076166A2 (en) * 2007-12-05 2009-06-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Oximyl hcv serine protease inhibitors
CN101977621A (zh) * 2007-12-05 2011-02-16 益安药业 氟化三肽hcv丝氨酸蛋白酶抑制剂
CA2709089A1 (en) 2007-12-14 2009-06-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic oximyl hepatitis c serine protease inhibitors
US8273709B2 (en) 2007-12-14 2012-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Triazole-containing macrocyclic HCV serine protease inhibitors
CN103483251A (zh) 2007-12-19 2014-01-01 贝林格尔.英格海姆国际有限公司 病毒聚合酶抑制剂
US8309685B2 (en) 2007-12-21 2012-11-13 Celgene Avilomics Research, Inc. HCV protease inhibitors and uses thereof
AU2013231052B2 (en) * 2007-12-21 2015-09-10 Bristol-Myers Squibb Holdings Ireland Unlimited Company Crystalline forms of n-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-l-valyl-(4r)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-n-((1r,2s)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-l-prolinamide
TW200932255A (en) * 2007-12-21 2009-08-01 Avila Therapeutics Inc HCV protease inhibitors and uses thereof
US8202996B2 (en) 2007-12-21 2012-06-19 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of N-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-N- ((1R,2S)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-L-prolinamide
US8293705B2 (en) 2007-12-21 2012-10-23 Avila Therapeutics, Inc. HCV protease inhibitors and uses thereof
TWI487522B (zh) * 2007-12-21 2015-06-11 賽基艾維洛米斯研究股份有限公司 Ｈｃｖ蛋白酶抑制劑及其用途（一）
JP2011510927A (ja) * 2008-01-24 2011-04-07 エナンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｈｃｖセリンプロテアーゼ阻害剤としての二フッ素化トリペプチド
MX2010008108A (es) * 2008-01-24 2010-09-22 Enanta Pharm Inc Inhibidores de proteasa de serina de tripéptido de virus de hepatitis c (hcv) que contienen heteroarilo.
AR070413A1 (es) 2008-02-04 2010-04-07 Idenix Pharmaceuticals Inc Inhibidores macrociclicos de proteasa de serina
CA2719008A1 (en) * 2008-03-20 2009-09-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Fluorinated macrocyclic compounds as hepatitis c virus inhibitors
MX2010011306A (es) * 2008-04-15 2010-11-09 Intermune Inc Nuevos inhibidores macrociclicos de la replicacion del virus de la hepatitis c.
US8163921B2 (en) 2008-04-16 2012-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2720850A1 (en) 2008-04-28 2009-11-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Hcv ns3 protease inhibitors
US20090285773A1 (en) * 2008-05-15 2009-11-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20090285774A1 (en) * 2008-05-15 2009-11-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
CN101580535B (zh) * 2008-05-16 2012-10-03 太景生物科技股份有限公司 丙型肝炎病毒蛋白酶抑制剂
US7964560B2 (en) 2008-05-29 2011-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2300491B1 (en) 2008-05-29 2016-01-06 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
KR101629356B1 (ko) 2008-06-26 2016-06-13 리스버로직스 코퍼레이션 퀴나졸리논 유도체의 제조방법
WO2010014134A1 (en) 2008-07-02 2010-02-04 Idenix Pharamaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
SI2540350T1 (sl) 2008-07-22 2015-01-30 Merck Sharp & Dohme Corp. Kombinacije makrocikliäśnih kinoksalinske spojine, ki je hcv ns3 proteazni inhibitor z drugimi hcv uäśinkovinami
RU2373952C1 (ru) * 2008-07-30 2009-11-27 Юрий Михайлович Амбалов Способ лечебного питания больных хроническим гепатитом с, получающих комплексную противовирусную терапию
US8188137B2 (en) 2008-08-15 2012-05-29 Avila Therapeutics, Inc. HCV protease inhibitors and uses thereof
WO2010023892A1 (ja) * 2008-08-29 2010-03-04 Jsr株式会社 Ｎ－カルボキシアミノ酸無水物及びアミノ酸カーバメート化合物の製造方法
US8207341B2 (en) 2008-09-04 2012-06-26 Bristol-Myers Squibb Company Process or synthesizing substituted isoquinolines
UY32099A (es) * 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
US8044087B2 (en) 2008-09-29 2011-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20100080770A1 (en) * 2008-09-29 2010-04-01 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US8563505B2 (en) 2008-09-29 2013-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8383094B2 (en) * 2008-10-01 2013-02-26 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20100272674A1 (en) * 2008-12-04 2010-10-28 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
AU2009324643B2 (en) * 2008-12-10 2014-08-28 Achillion Pharmaceuticals, Inc. New 4-amino-4-oxobutanoyl peptides as inhibitors of viral replication
NZ592705A (en) * 2008-12-10 2013-02-22 Achillion Pharmaceuticals Inc 4-amino-4-oxobutanoyl peptide cyclic analogues, inhibitors of viral replication
US8283310B2 (en) 2008-12-15 2012-10-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
UY32325A (es) 2008-12-19 2010-07-30 Gilead Sciences Inc Inhibidores de ns3 proteasa del vhc
AU2009330333A1 (en) 2008-12-22 2011-07-07 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
AU2010203656A1 (en) 2009-01-07 2011-07-21 Scynexis, Inc. Cyclosporine derivative for use in the treatment of HCV and HIV infection
CA2747417C (en) 2009-01-08 2017-01-03 Resverlogix Corp. Compounds for the prevention and treatment of cardiovascular disease
US8741917B2 (en) 2009-01-15 2014-06-03 Rutgers, The State University Of New Jersey Benzo [C] phenanthridines as antimicrobial agents
US8102720B2 (en) * 2009-02-02 2012-01-24 Qualcomm Incorporated System and method of pulse generation
TWI438200B (zh) 2009-02-17 2014-05-21 必治妥美雅史谷比公司 Ｃ型肝炎病毒抑制劑
AR075584A1 (es) * 2009-02-27 2011-04-20 Intermune Inc COMPOSICIONES TERAPEUTICAS QUE COMPRENDEN beta-D-2'-DESOXI-2'-FLUORO-2'-C-METILCITIDINA Y UN DERIVADO DE ACIDO ISOINDOL CARBOXILICO Y SUS USOS. COMPUESTO.
WO2010101967A2 (en) 2009-03-04 2010-09-10 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Phosphothiophene and phosphothiazole hcv polymerase inhibitors
KR101913109B1 (ko) 2009-03-18 2018-10-31 리스버로직스 코퍼레이션 신규한 소염제
US8796466B2 (en) 2009-03-30 2014-08-05 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2010118078A1 (en) 2009-04-08 2010-10-14 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors
DK2421533T3 (en) 2009-04-22 2019-01-07 Resverlogix Corp Hitherto unknown anti-inflammatory agents
WO2010127307A1 (en) * 2009-04-30 2010-11-04 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
MX2011012155A (es) 2009-05-13 2012-02-28 Enanta Pharm Inc Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c.
US8232246B2 (en) * 2009-06-30 2012-07-31 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
EP2459582B1 (en) 2009-07-30 2015-05-27 Merck Sharp & Dohme Corp. Hepatitis c virus ns3 protease inhibitors
TW201117812A (en) 2009-08-05 2011-06-01 Idenix Pharmaceuticals Inc Macrocyclic serine protease inhibitors
HRP20161025T1 (hr) * 2009-09-15 2016-11-04 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Inhibitori proteaze hcv-a
CN105001302A (zh) * 2009-09-28 2015-10-28 英特穆恩公司 C型肝炎病毒复制的环肽抑制剂
US8415374B2 (en) * 2009-10-12 2013-04-09 Bristol-Myers Squibb Company Combinations of hepatitis C virus inhibitors
WO2011049908A2 (en) * 2009-10-19 2011-04-28 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bismacrokyclic compounds as hepatitis c virus inhibitors
US20110274648A1 (en) 2009-11-11 2011-11-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110269956A1 (en) 2009-11-11 2011-11-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110281910A1 (en) 2009-11-12 2011-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
WO2011063076A1 (en) 2009-11-19 2011-05-26 Itherx Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating hepatitis c virus with oxoacetamide compounds
US8377980B2 (en) 2009-12-16 2013-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
AR079528A1 (es) * 2009-12-18 2012-02-01 Idenix Pharmaceuticals Inc Inhibidores de arileno o heteroarileno 5,5-fusionado del virus de la hepatitis c
US8362020B2 (en) 2009-12-30 2013-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20110178107A1 (en) * 2010-01-20 2011-07-21 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
US8680071B2 (en) 2010-04-01 2014-03-25 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US8933096B2 (en) 2010-06-09 2015-01-13 Rugers, The State University of New Jersey Antimicrobial agents
US10988714B2 (en) 2010-06-21 2021-04-27 Regents Of The University Of Minnesota Methods of facilitating removal of a fingerprint from a substrate or a coating
US9388370B2 (en) * 2010-06-21 2016-07-12 Toyota Motor Engineering & Manufacturing North America, Inc. Thermolysin-like protease for cleaning insect body stains
US11015149B2 (en) 2010-06-21 2021-05-25 Toyota Motor Corporation Methods of facilitating removal of a fingerprint
US9121016B2 (en) 2011-09-09 2015-09-01 Toyota Motor Engineering & Manufacturing North America, Inc. Coatings containing polymer modified enzyme for stable self-cleaning of organic stains
US8796009B2 (en) 2010-06-21 2014-08-05 Toyota Motor Engineering & Manufacturing North America, Inc. Clearcoat containing thermolysin-like protease from Bacillus stearothermophilus for cleaning of insect body stains
CA2803890A1 (en) 2010-06-25 2011-12-29 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
US20120196794A1 (en) * 2010-08-06 2012-08-02 Bristol-Myers Squibb Company Combinations of Hepatitis C Virus Inhibitors
BR112013006693B1 (pt) 2010-09-21 2022-07-12 Enanta Pharmaceuticals, Inc Compostos inibidores da serino protease hcv derivada de prolina macrocíclica
WO2012039717A1 (en) 2010-09-24 2012-03-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
CN103328466B (zh) 2010-11-01 2016-08-03 Rfs制药公司 Hcv ns3蛋白酶抑制剂
WO2012082672A2 (en) * 2010-12-14 2012-06-21 Merck Sharp & Dohme Corp. Process and intermediates for preparing macrolactams
CN103649079B (zh) 2010-12-22 2016-11-16 Abbvie公司 丙型肝炎抑制剂及其用途
US8951964B2 (en) 2010-12-30 2015-02-10 Abbvie Inc. Phenanthridine macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
CA2822556A1 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Enanta Pharmaceuticals, Inc Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
WO2012109398A1 (en) 2011-02-10 2012-08-16 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors, pharmaceutical compositions thereof, and their use for treating hcv infections
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
EP2691409B1 (en) 2011-03-31 2018-02-21 Idenix Pharmaceuticals LLC. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US20120252721A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating drug-resistant hepatitis c virus infection with a 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitor
US8957203B2 (en) 2011-05-05 2015-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
JP6110846B2 (ja) * 2011-05-27 2017-04-05 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤としての重水素が導入されたトリペプチド
CA2837481A1 (en) * 2011-05-27 2012-12-06 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Substituted aliphanes, cyclophanes, heteraphanes, heterophanes, hetero-heteraphanes and metallocenes useful for treating hcv infections
US8691757B2 (en) 2011-06-15 2014-04-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN102911254A (zh) * 2011-08-02 2013-02-06 上海唐润医药科技有限公司 Hcv蛋白酶抑制剂
AR088441A1 (es) 2011-09-12 2014-06-11 Idenix Pharmaceuticals Inc Compuestos de carboniloximetilfosforamidato sustituido y composiciones farmaceuticas para el tratamiento de infecciones virales
JP2014526474A (ja) 2011-09-12 2014-10-06 アイディニックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ウイルス感染の治療のための化合物および薬学的組成物
EP2768838A1 (en) 2011-10-14 2014-08-27 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Substituted 3',5'-cyclic phosphates of purine nucleotide compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
SE1450130A1 (sv) 2011-10-21 2014-05-07 Abbvie Inc Förfaranden för att behandla hcv innefattande minst två direktverkande antivirala agenser, ribavirin men inte interferon
EP2583680A3 (en) 2011-10-21 2013-06-12 Abbvie Inc. Mono (PSI-7977) or combination treatment of DAAs for use in treating HCV
LT2773354T (lt) 2011-11-01 2019-08-12 Resverlogix Corp. Geriamosios greitai atsipalaiduojančios pakeistų chinozolinų vaisto formos
US9328138B2 (en) 2011-11-15 2016-05-03 Msd Italia S.R.L. HCV NS3 protease inhibitors
CN104185420B (zh) 2011-11-30 2017-06-09 埃默里大学 用于治疗或预防逆转录病毒和其它病毒感染的抗病毒jak抑制剂
CN107964006A (zh) 2012-01-11 2018-04-27 艾伯维公司 用于制备hcv蛋白酶抑制剂的方法
CA2858814A1 (en) 2012-01-12 2013-07-18 Rfs Pharma, Llc Hcv ns3 protease inhibitors
US9822108B2 (en) 2012-01-13 2017-11-21 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
US20130217644A1 (en) 2012-02-13 2013-08-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical Compositions of 2'-C-Methyl-Guanosine, 5'-[2[(3-Hydroxy-2,2-Dimethyl-1-Oxopropyl)Thio]Ethyl N-(Phenylmethyl)Phosphoramidate]
EP2822656B1 (en) 2012-03-07 2016-10-19 Institute of Cancer Research: Royal Cancer Hospital (The) 3-aryl-5-substituted-isoquinolin-1-one compounds and their therapeutic use
CA2868002C (en) 2012-03-21 2021-07-13 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
US20130302414A1 (en) 2012-05-07 2013-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Solubilized capsule formulation of 1,1-dimethylethyl [(1s)-1-carbamoyl)pyrrolidin-1-yl]carbonyl}-2,2-dimethylpropyl]carbamate
US20150119317A1 (en) 2012-05-07 2015-04-30 Bristol-Myers Squibb Company Oral solid dosage formulation of 1,1-dimethylethyl [(1s)-1-carbamoyl)pyrrolidin-1-yl]carbonyl}-2,2-dimethylpropyl]carbamate
US9109001B2 (en) 2012-05-22 2015-08-18 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′,5′-cyclic phosphoramidate prodrugs for HCV infection
GEP20176800B (en) 2012-05-22 2018-01-10 Idenix Pharmaceuticals Llk D-amino acid compounds for liver disease
WO2013177195A1 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3',5'-cyclic phosphate prodrugs for hcv infection
UA119315C2 (uk) 2012-07-03 2019-06-10 Гіліад Фармассет Елелсі Інгібітори вірусу гепатиту с
DK2882714T3 (da) * 2012-08-08 2020-01-20 Merck Patent Gmbh (aza-)isoquinolinonderivater
CN111848711A (zh) 2012-10-08 2020-10-30 埃迪尼克斯医药有限责任公司 用于hcv感染的2′-氯核苷类似物
BR112015007879A2 (pt) 2012-10-19 2017-07-04 Bristol Myers Squibb Co inibidores do vírus da hepatite c
WO2014063019A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Dinucleotide compounds for hcv infection
US10723754B2 (en) 2012-10-22 2020-07-28 Idenix Pharmaceuticals Llc 2′,4′-bridged nucleosides for HCV infection
US9643999B2 (en) 2012-11-02 2017-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2914613B1 (en) 2012-11-02 2017-11-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US9334279B2 (en) 2012-11-02 2016-05-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9409943B2 (en) 2012-11-05 2016-08-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN103804208B (zh) * 2012-11-14 2016-06-08 重庆博腾制药科技股份有限公司 一种丙肝药物中间体的制备方法
EP2938624A1 (en) 2012-11-14 2015-11-04 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. D-alanine ester of sp-nucleoside analog
US20140140951A1 (en) 2012-11-14 2014-05-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-Alanine Ester of Rp-Nucleoside Analog
WO2014080291A2 (en) 2012-11-21 2014-05-30 Rvx Therapeutics Inc. Biaryl derivatives as bromodomain inhibitors
US9073878B2 (en) 2012-11-21 2015-07-07 Zenith Epigenetics Corp. Cyclic amines as bromodomain inhibitors
US9211300B2 (en) 2012-12-19 2015-12-15 Idenix Pharmaceuticals Llc 4′-fluoro nucleosides for the treatment of HCV
WO2014096965A2 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Rvx Therapeutics Inc. Novel heterocyclic compounds as bromodomain inhibitors
US9339541B2 (en) 2013-03-04 2016-05-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiophosphate nucleosides for the treatment of HCV
EP2970358B1 (en) 2013-03-04 2021-06-30 Idenix Pharmaceuticals LLC 3'-deoxy nucleosides for the treatment of hcv
EP2964664B1 (en) 2013-03-07 2017-01-11 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
EP2970195B1 (en) 2013-03-14 2017-08-02 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Processes for producing sovaprevir
US11484534B2 (en) 2013-03-14 2022-11-01 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
US9085607B2 (en) 2013-03-15 2015-07-21 Achillion Pharmaceuticals, Inc. ACH-0142684 sodium salt polymorph, composition including the same, and method of manufacture thereof
BR112015023351A2 (pt) 2013-03-15 2017-07-18 Achillion Pharmaceuticals Inc forma cristalina de sovaprevir, composição farmacêutica, e, método para tratar um distúrbio
US9006423B2 (en) 2013-03-15 2015-04-14 Achillion Pharmaceuticals Inc. Process for making a 4-amino-4-oxobutanoyl peptide cyclic analogue, an inhibitor of viral replication, and intermediates thereof
US9187515B2 (en) 2013-04-01 2015-11-17 Idenix Pharmaceuticals Llc 2′,4′-fluoro nucleosides for the treatment of HCV
WO2014197578A1 (en) 2013-06-05 2014-12-11 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 1',4'-thio nucleosides for the treatment of hcv
EP3027636B1 (en) 2013-08-01 2022-01-05 Idenix Pharmaceuticals LLC D-amino acid phosphoramidate pronucleotides of halogeno pyrimidine compounds for liver disease
US9611223B2 (en) 2013-09-11 2017-04-04 Institute Of Cancer Research: Royal Cancer Hospital (The) 3-aryl-5-substituted-isoquinolin-1-one compounds and their therapeutic use
WO2015042375A1 (en) 2013-09-20 2015-03-26 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
WO2015061683A1 (en) 2013-10-25 2015-04-30 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate and d-alanine thiophosphoramidate pronucleotides of nucleoside compounds useful for the treatment of hcv
EP3063165A1 (en) 2013-11-01 2016-09-07 Idenix Pharmaceuticals LLC D-alanine phosphoramidate pronucleotides of 2'-methyl 2'-fluoro guanosine nucleoside compounds for the treatment of hcv
US9458150B2 (en) 2013-11-08 2016-10-04 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
WO2015081297A1 (en) 2013-11-27 2015-06-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 2'-dichloro and 2'-fluoro-2'-chloro nucleoside analogues for hcv infection
US10683321B2 (en) 2013-12-18 2020-06-16 Idenix Pharmaceuticals Llc 4′-or nucleosides for the treatment of HCV
WO2015103490A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 Abbvie, Inc. Solid antiviral dosage forms
EP3113763A1 (en) 2014-03-05 2017-01-11 Idenix Pharmaceuticals LLC Solid prodrug forms of 2'-chloro-2'-methyl uridine for hcv
US20170135990A1 (en) 2014-03-05 2017-05-18 Idenix Pharmaceuticals Llc Pharmaceutical compositions comprising a 5,5-fused heteroarylene flaviviridae inhibitor and their use for treating or preventing flaviviridae infection
US20170066779A1 (en) 2014-03-05 2017-03-09 Idenix Pharmaceuticals Llc Solid forms of a flaviviridae virus inhibitor compound and salts thereof
WO2015161137A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3'-substituted methyl or alkynyl nucleosides for the treatment of hcv
EP3160983A1 (en) 2014-06-25 2017-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
JP6903585B2 (ja) 2015-03-13 2021-07-14 レスバーロジックス コーポレイション 補体関連疾患の治療のための組成物および治療方法
WO2017062500A2 (en) 2015-10-05 2017-04-13 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Activators of autophagic flux and phospholipase d and clearance of protein aggregates including tau and treatment of proteinopathies
US10513528B2 (en) 2016-02-25 2019-12-24 Taxis Pharmaceuticals, Inc. Synthetic processes and intermediates
EA201892448A1 (ru) 2016-04-28 2019-06-28 Эмори Юниверсити Алкинсодержащие нуклеотидные и нуклеозидные терапевтические композиции и связанные с ними способы применения
CN107641099A (zh) * 2016-07-20 2018-01-30 广东东阳光药业有限公司 取代的4‑羟基喹啉类化合物的制备方法
WO2018026877A1 (en) 2016-08-05 2018-02-08 Calitor Sciences, Llc Process for preparing substituted quinolin-4-ol compounds
US10774093B2 (en) 2017-03-30 2020-09-15 Taxis Pharmaceuticals, Inc. Synthetic processes and synthetic intermediates
US11472778B2 (en) * 2017-06-20 2022-10-18 University Of Massachusetts Hepatitis C virus NS3/4A protease inhibitors
CN110156684A (zh) * 2019-06-28 2019-08-23 珠海市柏瑞医药科技有限公司 一种去甲乌药碱及其药用盐的合成工艺
US20230218644A1 (en) 2020-04-16 2023-07-13 Som Innovation Biotech, S.A. Compounds for use in the treatment of viral infections by respiratory syndrome-related coronavirus
US12083099B2 (en) 2020-10-28 2024-09-10 Accencio LLC Methods of treating symptoms of coronavirus infection with viral protease inhibitors
CN113402450B (zh) * 2021-01-13 2023-11-24 上海睿腾医药科技有限公司 一种2-溴-4-氯吡啶的纯化方法
EP4536356A1 (en) 2022-06-08 2025-04-16 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyridinamine derivatives and their use as potassium channel modulators

Family Cites Families (181)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US185001A (en) 1876-12-05 Improvement in measuring-faucets
JPS57123181A (en) 1981-01-23 1982-07-31 Mitsubishi Paper Mills Ltd Preparation of pyrazolo (1,5-a) pyridine derivative
EP0475255A3 (en) * 1990-09-12 1993-04-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Process for the preparation of optically pure (s)-alpha-((tert-butylsulfonyl)methyl)hydro cinnamic acid
US5610054A (en) 1992-05-14 1997-03-11 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Enzymatic RNA molecule targeted against Hepatitis C virus
MY147327A (en) 1995-06-29 2012-11-30 Novartis Ag Somatostatin peptides
GB9517022D0 (en) 1995-08-19 1995-10-25 Glaxo Group Ltd Medicaments
US5633388A (en) 1996-03-29 1997-05-27 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treatment of hepatitis C
JPH11513890A (ja) 1996-05-10 1999-11-30 シェーリング コーポレイション Ｃ型肝炎ウイルスｎｓ３プロテアーゼの合成インヒビター
CZ298749B6 (cs) 1996-10-18 2008-01-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitory serinových proteáz a farmaceutické prostředky s jejich obsahem
GB9623908D0 (en) 1996-11-18 1997-01-08 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
PT958287E (pt) 1997-01-23 2002-12-31 Hoffmann La Roche Inibidores de sulfamida-metaloprotease
AU7127298A (en) 1997-04-14 1998-11-11 Emory University Serine protease inhibitors
GB9707659D0 (en) 1997-04-16 1997-06-04 Peptide Therapeutics Ltd Hepatitis C NS3 Protease inhibitors
DK1003775T3 (da) * 1997-08-11 2005-05-30 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Hepatitis C-inhibitorpeptider
WO1999007734A2 (en) 1997-08-11 1999-02-18 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor peptide analogues
IT1299134B1 (it) 1998-02-02 2000-02-29 Angeletti P Ist Richerche Bio Procedimento per la produzione di peptidi con proprieta' inibitrici della proteasi ns3 del virus hcv, peptidi cosi' ottenibili e peptidi
EP1066247B1 (en) 1998-03-31 2006-11-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hepatitis c virus ns3 protease
GB9812523D0 (en) 1998-06-10 1998-08-05 Angeletti P Ist Richerche Bio Peptide inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
ATE298317T1 (de) 1998-07-27 2005-07-15 Angeletti P Ist Richerche Bio Diketosäure-derivate als hemmstoffe von polymerasen
AR022061A1 (es) * 1998-08-10 2002-09-04 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Peptidos inhibidores de la hepatitis c, una composicion farmaceutica que los contiene, el uso de los mismos para preparar una composicion farmaceutica, el uso de un producto intermedio para la preparacion de estos peptidos y un procedimiento para la preparacion de un peptido analogo de los mismos.
US6323180B1 (en) 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
JP2002523371A (ja) 1998-08-21 2002-07-30 バイロファーマ・インコーポレイテッド ウイルス感染および関連疾患を治療または予防するための化合物、組成物および方法
CA2343522A1 (en) 1998-09-04 2000-03-16 Viropharma Incorporated Methods for treating or preventing viral infections and associated diseases
EP1115286A4 (en) 1998-09-25 2003-07-23 Viropharma Inc METHOD FOR TREATING AND PREVENTING VIRAL INFECTIONS AND DISEASES RELATED TO THEM
UA74546C2 (en) 1999-04-06 2006-01-16 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Macrocyclic peptides having activity relative to hepatitis c virus, a pharmaceutical composition and use of the pharmaceutical composition
US6566365B1 (en) 1999-11-04 2003-05-20 Biochem Pharma Inc. Method for the treatment of Flaviviridea viral infection using nucleoside analogues
CA2363274A1 (en) 1999-12-27 2001-07-05 Japan Tobacco Inc. Fused-ring compounds and use thereof as drugs for hepatitis c
US20040034041A1 (en) 2000-05-10 2004-02-19 Dashyant Dhanak Novel anti-infectives
WO2002000808A1 (en) 2000-06-23 2002-01-03 General Electric Company Silicone pressure sensitive adhesive composition
US6448281B1 (en) 2000-07-06 2002-09-10 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Viral polymerase inhibitors
GB0017676D0 (en) 2000-07-19 2000-09-06 Angeletti P Ist Richerche Bio Inhibitors of viral polymerase
US7244721B2 (en) 2000-07-21 2007-07-17 Schering Corporation Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
CZ303213B6 (cs) 2000-07-21 2012-05-23 Schering Corporation Peptidové inhibitory serinové proteázy NS3 a farmaceutický prostredek
PE20020506A1 (es) 2000-08-22 2002-07-09 Glaxo Group Ltd Derivados de pirazol fusionados como inhibidores de la proteina cinasa
CA2429359A1 (en) * 2000-11-20 2002-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c tripeptide inhibitors
JP2004525150A (ja) 2001-03-30 2004-08-19 スミスクライン ビーチャム コーポレーション 治療用化合物としてのピラゾロピリジン類の使用
US6867185B2 (en) 2001-12-20 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
CA2369711A1 (en) 2002-01-30 2003-07-30 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
CA2369970A1 (en) * 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
CA2370396A1 (en) 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
US6642204B2 (en) * 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6828301B2 (en) 2002-02-07 2004-12-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for hepatitis C viral protease inhibitors
EP1506172B1 (en) * 2002-05-20 2011-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
DE60334205D1 (en) 2002-05-20 2010-10-28 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclische sulfonamid-hepatitis-c-virus-hemmer
MY140680A (en) * 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
US20060199773A1 (en) 2002-05-20 2006-09-07 Sausker Justin B Crystalline forms of (1R,2S)-N-[(1,1-dimethylethoxy)carbonyl]-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-[(6-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy]-L-prolyl-1-amino-N-(cyclopropylsulfonyl)-2-ethenyl-cyclopropanecarboxamide, monopotassium salt
PL213029B1 (pl) * 2002-05-20 2012-12-31 Bristol Myers Squibb Co Podstawiona pochodna cykloalkilowa, zawierajaca ja kompozycja oraz ich zastosowanie
US20040033959A1 (en) 2002-07-19 2004-02-19 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions for hepatitis C viral protease inhibitors
US20050075279A1 (en) 2002-10-25 2005-04-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
WO2004041201A2 (en) 2002-11-01 2004-05-21 Viropharma Incorporated Benzofuran compounds, compositions and methods for treatment and prophylaxis of hepatitis c viral infections and associated diseases
US7601709B2 (en) 2003-02-07 2009-10-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
WO2004072243A2 (en) 2003-02-07 2004-08-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
EP1601685A1 (en) 2003-03-05 2005-12-07 Boehringer Ingelheim International GmbH Hepatitis c inhibiting compounds
JP4682140B2 (ja) 2003-03-05 2011-05-11 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｃ型肝炎インヒビターペプチド類縁体
WO2004093915A1 (en) 2003-04-02 2004-11-04 Boehringer Ingelheim International, Gmbh Pharmaceutical compositions for hepatitis c viral protease inhibitors
EP1629000B1 (en) * 2003-04-16 2009-02-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic isoquinoline peptide inhibitors of hepatitis c virus
AU2004231987C1 (en) 2003-04-18 2010-09-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
CA2522577C (en) 2003-05-21 2011-04-26 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor compounds
WO2004113365A2 (en) 2003-06-05 2004-12-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c serine protease tri-peptide inhibitors
US7125845B2 (en) 2003-07-03 2006-10-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Aza-peptide macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
UY28525A1 (es) 2003-09-22 2005-04-29 Boehringer Ingelheim Int Péptidos macrociclicos activos contra en virus de la hepatitis c
AU2004282148A1 (en) 2003-10-10 2005-04-28 Vertex Pharmaceuticals Incoporated Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease
HRP20130098T1 (hr) 2003-10-14 2013-02-28 F. Hoffmann - La Roche Ag MAKROCIKLIÄŚKE KARBOKSILNE KISELINE I ACILSULFONAMIDNI SPOJEVI KAO INHIBITORI REPLIKACIJE HCV-a
US7132504B2 (en) * 2003-11-12 2006-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN1902216A (zh) 2003-11-20 2007-01-24 先灵公司 丙肝病毒ns3蛋白酶的去肽化抑制剂
US7309708B2 (en) * 2003-11-20 2007-12-18 Birstol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7135462B2 (en) * 2003-11-20 2006-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2549851C (en) 2004-01-21 2012-09-11 Boehringer Ingelheim International Gmbh Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
BRPI0506948B1 (pt) 2004-01-30 2018-09-18 Medivir Ab inibidores de serina protease ns-3 de hcv
WO2005090383A2 (en) * 2004-03-15 2005-09-29 Boehringer Ingelheim International, Gmbh Process for preparing macrocyclic dipeptides which are suitable for the treatment of hepatitis c viral infections
BRPI0509467A (pt) 2004-03-30 2007-09-11 Intermune Inc compostos macrocìclicos como inibidores de replicação viral
WO2006016930A2 (en) 2004-05-14 2006-02-16 Intermune, Inc. Methods for treating hcv infection
CA2568008C (en) 2004-05-25 2014-01-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for preparing acyclic hcv protease inhibitors
EP1763531A4 (en) 2004-06-28 2009-07-01 Boehringer Ingelheim Int ANALOGUE OF HEPATITIS-C INHIBITING PEPTIDES
US7868037B2 (en) 2004-07-14 2011-01-11 Ptc Therapeutics, Inc. Methods for treating hepatitis C
PT1778702E (pt) 2004-07-16 2011-10-18 Gilead Sciences Inc Compostos antivirais
UY29016A1 (es) 2004-07-20 2006-02-24 Boehringer Ingelheim Int Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c
ES2366478T3 (es) 2004-07-20 2011-10-20 Boehringer Ingelheim International Gmbh Análogos peptídicos inhibidores de la hepatitis c.
EP1797111B1 (en) 2004-08-27 2011-06-22 Schering Corporation Acylsulfonamide compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
WO2006033878A1 (en) 2004-09-17 2006-03-30 Boehringer Ingelheim International, Gmbh Process for preparing macrocyclic hcv protease inhibitors
WO2007001406A2 (en) 2004-10-05 2007-01-04 Chiron Corporation Aryl-containing macrocyclic compounds
JP2008517896A (ja) 2004-10-21 2008-05-29 ファイザー・インク Ｃ型肝炎ウイルスプロテアーゼの阻害剤並びにそれを用いた組成物及び治療
US7323447B2 (en) 2005-02-08 2008-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
ES2439732T3 (es) 2005-03-08 2014-01-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh Procedimiento para preparar compuestos macrocíclicos
AU2006242475B2 (en) 2005-05-02 2011-07-07 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
US7592336B2 (en) 2005-05-10 2009-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2006130553A2 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Hcv protease inhibitors
WO2006130687A2 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Liver/plasma concentration ratio for dosing hepatitis c virus protease inhibitor
US20060281689A1 (en) 2005-06-02 2006-12-14 Schering Corporation Method for modulating activity of HCV protease through use of a novel HCV protease inhibitor to reduce duration of treatment period
US20060287248A1 (en) 2005-06-02 2006-12-21 Schering Corporation Asymmetric dosing methods
US20060276407A1 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Methods of treating hepatitis C virus
US20060276406A1 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Methods of treating hepatitis C virus
US20060276404A1 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Anima Ghosal Medicaments and methods combining a HCV protease inhibitor and an AKR competitor
EP1891089B1 (en) 2005-06-02 2014-11-05 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV protease inhibitors in combination with food
US20060276405A1 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Methods for treating hepatitis C
ES2572980T3 (es) 2005-06-02 2016-06-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Combinación de inhibidores de la proteasa del VHC con un tensioactivo
AU2006252623A1 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Controlled-release formulation useful for treating disorders associated with hepatitis C virus
US7601686B2 (en) 2005-07-11 2009-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TW200738742A (en) * 2005-07-14 2007-10-16 Gilead Sciences Inc Antiviral compounds
TWI389908B (zh) 2005-07-14 2013-03-21 Gilead Sciences Inc 抗病毒化合物類
US20080200497A1 (en) 2005-07-20 2008-08-21 Bailey Murray D Hepatitis C Inhibitor Peptide Analogs
TWI387603B (zh) 2005-07-20 2013-03-01 Merck Sharp & Dohme Ｈｃｖ ｎｓ３蛋白酶抑制劑
KR101294467B1 (ko) 2005-07-25 2013-09-09 인터뮨, 인크. Ｃ형 간염 바이러스 복제의 신규 거대고리형 억제제
WO2007014925A1 (en) 2005-07-29 2007-02-08 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocylic inhibitors of hepatitis c virus
PE20070343A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
JO2768B1 (en) 2005-07-29 2014-03-15 تيبوتيك فارماسيوتيكالز ليمتد Large cyclic inhibitors of hepatitis C virus
EP1919898B1 (en) 2005-07-29 2011-01-26 Tibotec Pharmaceuticals Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
TWI393723B (zh) 2005-07-29 2013-04-21 Tibotec Pharm Ltd Ｃ型肝炎病毒之大環抑制劑（九）
US7700552B2 (en) 2005-07-29 2010-04-20 Medivir Ab Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus
RU2436787C2 (ru) 2005-07-29 2011-12-20 Тиботек Фармасьютикалз Лтд. Макроциклические ингибиторы вируса гепатита с
TWI383980B (zh) 2005-07-29 2013-02-01 Tibotec Pharm Ltd Ｃ型肝炎病毒之大環抑制劑
PE20070210A1 (es) 2005-07-29 2007-04-16 Tibotec Pharm Ltd Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
AU2006274862B2 (en) 2005-07-29 2012-03-22 Medivir Ab Macrocyclic inhibitors of hepatitis C virus
EP1915382A2 (en) 2005-08-01 2008-04-30 Phenomix Corporation Hepatitis c serine protease inhibitors and uses therefor
EP1913016B1 (en) 2005-08-01 2013-01-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Macrocyclic peptides as hcv ns3 protease inhibitors
AR055395A1 (es) 2005-08-26 2007-08-22 Vertex Pharma Compuestos inhibidores de la actividad de la serina proteasa ns3-ns4a del virus de la hepatitis c
BRPI0617274A2 (pt) 2005-10-11 2011-07-19 Intermune Inc compostos e métodos para a inibição de replicação viral de hepatite c
US7772183B2 (en) 2005-10-12 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7741281B2 (en) 2005-11-03 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2007082131A1 (en) 2006-01-09 2007-07-19 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of hydroxy substituted heterocycles
CA2644389A1 (en) 2006-03-03 2007-09-20 Schering Corporation Pharmaceutical combinations of hcv-protease and -ires inhibitors
GB0609492D0 (en) 2006-05-15 2006-06-21 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
US8268776B2 (en) * 2006-06-06 2012-09-18 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocylic oximyl hepatitis C protease inhibitors
US20070281884A1 (en) 2006-06-06 2007-12-06 Ying Sun Macrocyclic oximyl hepatitis C protease inhibitors
GB0612423D0 (en) 2006-06-23 2006-08-02 Angeletti P Ist Richerche Bio Therapeutic agents
UY30437A1 (es) 2006-06-26 2008-01-31 Enanta Pharm Inc Quinoxalinil macroceclicos inhibidores de serina proteasa del virus de la hepatitis c
RU2008152171A (ru) 2006-07-05 2010-08-10 Интермьюн, Инк. (Us) Новые ингибиторы вирусной репликации гепатита с
US7935670B2 (en) 2006-07-11 2011-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
DK2041156T3 (en) 2006-07-13 2014-02-24 Achillion Pharmaceuticals Inc 4-AMINO-4-OXOBUTANOYL Peptides AS INHIBITORS OF VIRUS REPLICATION
US20090035267A1 (en) 2007-07-31 2009-02-05 Moore Joel D Acyclic, pyridazinone-derived hepatitis c serine protease inhibitors
WO2008019303A2 (en) 2006-08-04 2008-02-14 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Pyridazinonyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US7635683B2 (en) * 2006-08-04 2009-12-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl tripeptide hepatitis C virus inhibitors
CA2656816A1 (en) 2006-08-04 2008-02-14 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Tetrazolyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
WO2008021960A2 (en) 2006-08-11 2008-02-21 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Triazolyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US7687459B2 (en) * 2006-08-11 2010-03-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis C virus protease inhibitors
WO2008022006A2 (en) 2006-08-11 2008-02-21 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Arylalkoxyl hepatitis c virus protease inhibitors
US7605126B2 (en) * 2006-08-11 2009-10-20 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Acylaminoheteroaryl hepatitis C virus protease inhibitors
US20080038225A1 (en) 2006-08-11 2008-02-14 Ying Sun Triazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US20090035268A1 (en) 2007-08-01 2009-02-05 Ying Sun Tetrazolyl acyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US7582605B2 (en) * 2006-08-11 2009-09-01 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Phosphorus-containing hepatitis C serine protease inhibitors
CN101583372A (zh) 2006-10-24 2009-11-18 默克公司 Hcv ns3蛋白酶抑制剂
WO2008051475A2 (en) 2006-10-24 2008-05-02 Merck & Co., Inc. Hcv ns3 protease inhibitors
AU2007309546A1 (en) 2006-10-24 2008-05-02 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. HCV NS3 protease inhibitors
US8377874B2 (en) 2006-10-27 2013-02-19 Merck Sharp & Dohme Corp. HCV NS3 protease inhibitors
MY164469A (en) 2006-10-27 2017-12-15 Msd Italia Srl Hcv ns3 protease inhibitors
US8343477B2 (en) 2006-11-01 2013-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
US20080107623A1 (en) 2006-11-01 2008-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of Hepatitis C Virus
US20080107625A1 (en) 2006-11-01 2008-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of Hepatitis C Virus
US20080108632A1 (en) 2006-11-02 2008-05-08 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Hcv protease inhibitors
US7772180B2 (en) 2006-11-09 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8003604B2 (en) 2006-11-16 2011-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7888464B2 (en) 2006-11-16 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7763584B2 (en) 2006-11-16 2010-07-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2008070358A2 (en) 2006-11-16 2008-06-12 Phenomix Corporation N-cyclopropyl-hydroxyproline-based tripeptidic hepatitis c serine protease inhibitors containing an isoindole, pyrrolopyridine, pyrrolopyrimidine or pyrrolopyrazine heterocycle in the side chain
ES2470568T3 (es) 2006-11-17 2014-06-24 Janssen R&D Ireland Inhibidores macroc�clicos del virus de la hepatitis C
RU2533830C2 (ru) 2007-02-01 2014-11-20 Тиботек Фармасьютикалз Лтд. Полиморфные формы макроциклического ингибитора hcv
BRPI0806853B1 (pt) 2007-02-01 2018-03-20 Janssen Sciences Ireland Uc Processos e intermediários para preparar um inibidor de protease macrocíclico de hcv
WO2008095058A1 (en) 2007-02-01 2008-08-07 Taigen Biotechnology Co. Ltd. Hcv protease inhibitors
WO2008096001A1 (en) 2007-02-08 2008-08-14 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Hcv inhibiting macrocyclic phenylcarbamates
WO2008096002A1 (en) 2007-02-08 2008-08-14 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Hcv inhibiting macrocyclic phosphonates and amidophosphates
BRPI0807087A2 (pt) 2007-02-08 2014-06-10 Tibotec Pharm Ltd Inibidores de hcv macrocíclicos substituídos de pirimidina
WO2008098368A1 (en) 2007-02-16 2008-08-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Inhibitors of hepatitis c ns3 protease
AU2008217187A1 (en) 2007-02-20 2008-08-28 Novartis Ag Macrocyclic compounds as HCV NS3 protease inhibitors
JP2010519339A (ja) 2007-02-26 2010-06-03 アキリオン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド Ｈｃｖ複製阻害剤として有用な三級アミン置換ペプチド
CN101663294A (zh) 2007-04-24 2010-03-03 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 Hcv蛋白酶抑制剂中间体的制备方法
US20080274080A1 (en) 2007-04-26 2008-11-06 Yat Sun Or Aza-peptide macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
US20080287449A1 (en) 2007-04-26 2008-11-20 Deqiang Niu Aza-tripeptide hepatitis c serine protease inhibitors
WO2008134398A1 (en) 2007-04-26 2008-11-06 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Oximyl dipeptide hepatitis c protease inhibitors
US20080279821A1 (en) * 2007-04-26 2008-11-13 Deqiang Niu Arylpiperidinyl and arylpyrrolidinyl macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
SG174809A1 (en) 2007-05-03 2011-10-28 Intermune Inc Macrocyclic compounds useful as inhibitors of hepatitis c virus
AU2008251425A1 (en) 2007-05-10 2008-11-20 Array Biopharma, Inc. Novel peptide inhibitors of hepatitis C virus replication
CA2692145C (en) 2007-06-29 2015-03-03 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
TWI395746B (zh) * 2007-06-29 2013-05-11 Gilead Sciences Inc 抗病毒性化合物
WO2009010804A1 (en) 2007-07-19 2009-01-22 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Macrocyclic compounds as antiviral agents
WO2009014730A1 (en) 2007-07-26 2009-01-29 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors
US8202996B2 (en) * 2007-12-21 2012-06-19 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of N-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-N- ((1R,2S)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-L-prolinamide
AR070413A1 (es) * 2008-02-04 2010-04-07 Idenix Pharmaceuticals Inc Inhibidores macrociclicos de proteasa de serina
US8163921B2 (en) * 2008-04-16 2012-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
SI2540350T1 (sl) * 2008-07-22 2015-01-30 Merck Sharp & Dohme Corp. Kombinacije makrocikliäśnih kinoksalinske spojine, ki je hcv ns3 proteazni inhibitor z drugimi hcv uäśinkovinami
US8207341B2 (en) * 2008-09-04 2012-06-26 Bristol-Myers Squibb Company Process or synthesizing substituted isoquinolines

Also Published As

Publication number Publication date
AU2003241510A1 (en) 2003-12-12
CN1299677C (zh) 2007-02-14
EP1505963B1 (en) 2011-04-20
EP1505963A4 (en) 2008-12-24
RU2315039C1 (ru) 2008-01-20
PE20040517A1 (es) 2004-08-25
US20090274656A1 (en) 2009-11-05
ZA200409162B (en) 2006-02-22
CA2486308C (en) 2012-04-10
CO5640083A2 (es) 2006-05-31
US20150005342A1 (en) 2015-01-01
US6995174B2 (en) 2006-02-07
PL373411A1 (en) 2005-08-22
DE60336807D1 (en) 2011-06-01
US8710229B2 (en) 2014-04-29
US7915291B2 (en) 2011-03-29
US20110311482A1 (en) 2011-12-22
RU2298001C2 (ru) 2007-04-27
CN1974596B (zh) 2010-07-28
PT1505963E (pt) 2011-06-28
AR040080A1 (es) 2005-03-16
RU2317303C1 (ru) 2008-02-20
US8299094B2 (en) 2012-10-30
US7449479B2 (en) 2008-11-11
PL226561B1 (pl) 2017-08-31
EP1505963A1 (en) 2005-02-16
GEP20063938B (en) 2006-10-10
US20060172950A1 (en) 2006-08-03
TWI306452B (en) 2009-02-21
JP2005533028A (ja) 2005-11-04
HRP20041085A2 (en) 2005-08-31
KR20040111656A (ko) 2004-12-31
AR087051A2 (es) 2014-02-12
TW200403993A (en) 2004-03-16
EP2340830A3 (en) 2011-12-28
US9227940B2 (en) 2016-01-05
AR090649A2 (es) 2014-11-26
US20160067302A1 (en) 2016-03-10
RU2315039C9 (ru) 2014-02-10
SI1505963T1 (sl) 2011-10-28
MXPA04011440A (es) 2005-02-14
KR101005958B1 (ko) 2011-01-05
US20040106559A1 (en) 2004-06-03
NZ536539A (en) 2007-02-23
ES2363131T3 (es) 2011-07-21
US8507722B2 (en) 2013-08-13
CN101024671A (zh) 2007-08-29
BR0311132A (pt) 2005-03-08
EP1505963B9 (en) 2011-09-21
IL164987A (en) 2011-06-30
CN101024671B (zh) 2010-08-18
CY1112108T1 (el) 2015-11-04
DK1505963T3 (da) 2011-08-08
EP2340830A2 (en) 2011-07-06
JP4312710B2 (ja) 2009-08-12
HRP20041085B1 (hr) 2014-01-31
HK1070287A1 (en) 2005-06-17
NO332427B1 (no) 2012-09-17
RS52407B (sr) 2013-02-28
RU2004137480A (ru) 2005-08-10
AU2003241510B2 (en) 2006-11-02
MY140680A (en) 2010-01-15
ATE506104T1 (de) 2011-05-15
NO20044807L (no) 2004-12-16
US20130267713A1 (en) 2013-10-10
IL164987A0 (en) 2005-12-18
KR20100093140A (ko) 2010-08-24
UA80973C2 (uk) 2007-11-26
WO2003099274A1 (en) 2003-12-04
US8889871B2 (en) 2014-11-18
US20140163231A1 (en) 2014-06-12
CN1668297A (zh) 2005-09-14
CN1974596A (zh) 2007-06-06
US20120330019A1 (en) 2012-12-27
IS7530A (is) 2004-11-16
US9636375B2 (en) 2017-05-02
CA2486308A1 (en) 2003-12-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9636375B2 (en) Hepatitis C virus inhibitors
JP4271148B2 (ja) 置換シクロアルキルｐ１’ｃ型肝炎ウイルスインヒビター
AU2006233208B2 (en) Hepatitis C virus inhibitors
HK1070287B (en) Hepatitis c virus inhibitors