ES2434955T3 - Uso de la metaloproteinasa de matriz-10 (mmp-10) para tratamientos trombolíticos - Google Patents
Uso de la metaloproteinasa de matriz-10 (mmp-10) para tratamientos trombolíticosInfo
- Publication number
- ES2434955T3 ES2434955T3 ES08736676T ES08736676T ES2434955T3 ES 2434955 T3 ES2434955 T3 ES 2434955T3 ES 08736676 T ES08736676 T ES 08736676T ES 08736676 T ES08736676 T ES 08736676T ES 2434955 T3 ES2434955 T3 ES 2434955T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- mmp
- tpa
- plasminogen
- plasminogen activator
- upa
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 title claims abstract description 45
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 title claims abstract description 34
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 108010076497 Matrix Metalloproteinase 10 Proteins 0.000 title claims description 75
- 102000011695 Matrix Metalloproteinase 10 Human genes 0.000 title claims 5
- 102100028848 Stromelysin-2 Human genes 0.000 claims abstract description 74
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 claims abstract description 43
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 claims abstract description 43
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 claims abstract description 43
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims abstract description 23
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 4
- 101710108792 Stromelysin-2 Proteins 0.000 claims abstract 4
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 claims description 51
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 claims description 51
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 claims description 49
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 claims description 12
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 claims description 11
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 claims description 11
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims description 9
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 6
- 101710145796 Staphylokinase Proteins 0.000 claims description 4
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 claims description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 abstract description 9
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 abstract description 3
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 abstract description 3
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 40
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 39
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 39
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 39
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 31
- 102100030416 Stromelysin-1 Human genes 0.000 description 18
- VKUYLANQOAKALN-UHFFFAOYSA-N 2-[benzyl-(4-methoxyphenyl)sulfonylamino]-n-hydroxy-4-methylpentanamide Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1S(=O)(=O)N(C(CC(C)C)C(=O)NO)CC1=CC=CC=C1 VKUYLANQOAKALN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 101710108790 Stromelysin-1 Proteins 0.000 description 17
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 13
- 230000020764 fibrinolysis Effects 0.000 description 11
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 9
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 9
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 9
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 9
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 9
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 9
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 9
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 9
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 7
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 7
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 description 6
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 6
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 5
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 5
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 5
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 5
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 4
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 229960000103 thrombolytic agent Drugs 0.000 description 4
- 101000774685 Agkistrodon contortrix contortrix Snake venom metalloproteinase fibrolase Proteins 0.000 description 3
- 101000851165 Bothrops pirajai Snake venom metalloproteinase BpirMP Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 3
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 3
- LKDMKWNDBAVNQZ-UHFFFAOYSA-N 4-[[1-[[1-[2-[[1-(4-nitroanilino)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)NC(C)C(=O)NC(C)C(=O)N1CCCC1C(=O)NC(C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 LKDMKWNDBAVNQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 5,5-diethylbarbituric acid Chemical compound CCC1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100026802 72 kDa type IV collagenase Human genes 0.000 description 2
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 2
- 108090000617 Cathepsin G Proteins 0.000 description 2
- 102000004173 Cathepsin G Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 2
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102100030417 Matrilysin Human genes 0.000 description 2
- 108090000855 Matrilysin Proteins 0.000 description 2
- 102000000380 Matrix Metalloproteinase 1 Human genes 0.000 description 2
- 108010016113 Matrix Metalloproteinase 1 Proteins 0.000 description 2
- 102000000422 Matrix Metalloproteinase 3 Human genes 0.000 description 2
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 2
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 2
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 2
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol monododecyl ether Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCO SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 125000001475 halogen functional group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 2
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 2
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 108091007196 stromelysin Proteins 0.000 description 2
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NCQJBPXXRXOIJD-UHFFFAOYSA-N 3-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-naphthalen-2-ylpropanoic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C(CC(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C)=CC=C21 NCQJBPXXRXOIJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710151806 72 kDa type IV collagenase Proteins 0.000 description 1
- 108010067219 Aggrecans Proteins 0.000 description 1
- 102000016284 Aggrecans Human genes 0.000 description 1
- 206010003178 Arterial thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241001631457 Cannula Species 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 206010072043 Central nervous system haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010008132 Cerebral thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 206010014522 Embolism venous Diseases 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000545744 Hirudinea Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000577874 Homo sapiens Stromelysin-2 Proteins 0.000 description 1
- 201000001429 Intracranial Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 108060005987 Kallikrein Proteins 0.000 description 1
- 102000001399 Kallikrein Human genes 0.000 description 1
- 102000007547 Laminin Human genes 0.000 description 1
- 108010085895 Laminin Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 108010016165 Matrix Metalloproteinase 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010016160 Matrix Metalloproteinase 3 Proteins 0.000 description 1
- 108010015302 Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 description 1
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 108010035030 Platelet Membrane Glycoprotein IIb Proteins 0.000 description 1
- 102100033237 Pro-epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 108010008125 Tenascin Proteins 0.000 description 1
- 102000007000 Tenascin Human genes 0.000 description 1
- 108010039185 Tenecteplase Proteins 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108060005989 Tryptase Proteins 0.000 description 1
- 102000001400 Tryptase Human genes 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 101710181748 Venom protease Proteins 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 1
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 description 1
- 230000000240 adjuvant effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 229960002319 barbital Drugs 0.000 description 1
- 230000003851 biochemical process Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000008468 bone growth Effects 0.000 description 1
- 230000007211 cardiovascular event Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 208000035474 group of disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 229940106780 human fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 208000019420 lymphoid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- GUAQVFRUPZBRJQ-UHFFFAOYSA-N n-(3-aminopropyl)-2-methylprop-2-enamide Chemical compound CC(=C)C(=O)NCCCN GUAQVFRUPZBRJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000018341 negative regulation of fibrinolysis Effects 0.000 description 1
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000031915 positive regulation of coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000003087 receptor blocking agent Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000008684 selective degradation Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000003998 snake venom Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- XQTLDIFVVHJORV-UHFFFAOYSA-N tecnazene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=C(Cl)C(Cl)=CC(Cl)=C1Cl XQTLDIFVVHJORV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000216 tenecteplase Drugs 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 208000004043 venous thromboembolism Diseases 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/49—Urokinase; Tissue plasminogen activator
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
La presente invención se refiere al uso de la metaloproteinasa dematriz MMP-10 en la preparación de una composición farmacéuticaútil para la terapia trombolítica, pudiendo además contener dichacomposición un activador del plasminógeno. Adicionalmente, la presente invención se refiere a dicha composición farmacéutica parael tratamiento de afecciones trombóticas.
Description
Uso de la metaloproteinasa de matriz-10 (mmp-10) para tratamientos trombolíticos
Campo de la invención
Esta invención se refiere a composiciones farmacéuticas que incluyen la metaloproteinasa de matriz-10 (MMP-10) y más particularmente, una combinación de MMP-10 y un activador del plasminógeno y a su uso para tratamiento y terapia trombolíticos.
El sistema hemostático es el encargado de mantener la fluidez circulatoria y prevenir la hemorragia en respuesta a un ataque vascular. La hemostasia fisiológica está controlada tanto por los mecanismos que promueven la coagulación y la formación de fibrina, como por los que favorecen su degradación o fibrinolisis. Una activación excesiva de la coagulación o un defecto de la fibrinólisis desembocan en la formación de coágulos que obstruyen los vasos sanguíneos (trombosis intravascular), causando isquemia y necrosis. Sin embargo, una situación general de hiperfibrinolisis favorecerá la aparición de hemorragias.
Las enfermedades cardiovasculares de naturaleza aterotrombótica constituyen hoy la principal causa de morbilidadmortalidad. Dentro de este grupo de enfermedades, los procesos trombóticos constituyen el principal mecanismo desencadenante de los eventos cardiovasculares agudos de mayor relevancia clínica, como el infarto agudo de miocardio (IM) o el accidente cerebrovascular (ictus).
En consecuencia, todas las estrategias para el tratamiento de accidentes cardiovasculares y en general de los eventos trombóticos, deben promover necesariamente la recanalización rápida de la luz arterial obstruida por el trombo, para restaurar el flujo sanguíneo hacia los tejidos y evitar así un daño mayor. Es lo que se denomina comúnmente como terapia trombolítica.
Puesto que la fibrinólisis es el proceso bioquímico subyacente a la trombolisis, la terapia trombolítica busca en primer lugar favorecer la degradación de la red de fibrina que mantiene unido el coágulo.
Puesto que la plasmina es la enzima que cataliza la lisis y la degradación de la fibrina, el primer objetivo para lograr una rápida disolución del coágulo es maximizar la generación de plasmina.
Con este propósito, a partir de 1980 se introdujo el uso de los activadores del plasminógeno, capaces de activar la conversión del plasminógeno (proenzima inactiva) en plasmina activa: activador tisular del plasminógeno (tPA), activador del plasminógeno urocinasa (uPA) u otros agentes similares.
Baker [Clin. Appl. Trombosis/Hemostasis, 2002; 8:291-314] realiza una revisión del estado de la técnica en terapia trombolítica y de los agentes trombolíticos en uso o desarrollo, su aplicación clínica, así como ventajas e inconvenientes. En este documento Baker formula también las características que un agente trombolítico ideal debería cumplir: 1) trombolisis rápida, para la pronta restauración del flujo arterial o venoso; 2) especificidad por la fibrina, para que la fibrinolisis se limite a las áreas de trombosis aguda con una fibrinólisis sistémica reducida; 3) duración sostenida de su acción; 4) especificidad por el trombo, para evitar efectos sobre el fibrinógeno, otras proteínas de la coagulación y para no alterar la hemostasis primaria; 5) ausencia de efectos secundarios; y 6) bajo coste.
En el caso del infarto agudo de miocardio y de la isquemia cerebrovascular aguda (ictus) el éxito del tratamiento trombolítico conduce a un incremento en la supervivencia de los pacientes y a una mejor recuperación de la función del tejido isquémico [White HD et al.; N. Engl. J. Med., 1987; 317:850–855]; [Suwanwela N y Koroshetz WJ; Annu. Rev. Med., 2007; 58:89-106]. Desafortunadamente, el tratamiento fibrinolítico tiene fracasos y efectos secundarios.
Casi el 40 % de los pacientes con infarto agudo de miocardio no responden al tratamiento fibrinolítico y no consiguen una óptima recanalización de la arteria obstruida por el trombo [Armstrong PW and Collen D; Circulation, 2001; 103:2862-2866].
Para solucionar este problema actualmente, en lugar de la trombolisis farmacológica, se utiliza la angioplastia percutánea primaria como tratamiento de reperfusión, más eficaz que el tratamiento trombolítico en términos de reducción de mortalidad, reinfarto y hemorragia. Sin embargo en muchos casos no se puede utilizar la angioplastia (no disponibilidad de laboratorios de hemodinámica o distancia geográfica no asumible) y es entonces cuando se realiza tratamiento trombolítico. Por consiguiente, es deseable el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas que permitan mejorar la eficacia del tratamiento trombolítico, por ejemplo programas de tratamiento fibrinolítico prehospitalario, nuevos agentes trombolíticos (tenecteplase), o nuevas combinaciones farmacológicas (es decir, reducir el agente fibrinolítico a la mitad de la dosis y añadir un agente bloqueante del receptor plaquetario GP IIb/IIIa) [Brouwer MA et al.; Heart, 2004; 90:581-588]. Además existe una considerable mortalidad asociada con el tratamiento fibrinolítico debido a complicaciones hemorrágicas, sobre todo hemorragia del sistema nervioso central y hemorragias mayores, con una incidencia que oscila entre el 2 y 14 %.
En el caso de la isquemia cerebrovascular aguda el tratamiento trombolítico con tPA recombinante en las tres primeras horas siguientes al comienzo de los síntomas es el único esquema que ha demostrado alguna eficacia por sí mismo. Desafortunadamente, en el 25-30 % de los casos, el tratamiento fracasa, el trombo no se lisa y la arteria bloqueada no se permeabiliza. Además, el tratamiento con tPA presenta un porcentaje importante de complicaciones hemorrágicas (hasta el 5 % cursan con hemorragia sintomática) y muchos médicos temen esta complicación. Por esta razón, una gran mayoría de pacientes que podrían beneficiarse de este tratamiento no lo reciben. Otro problema asociado a la administración de tPA, potencialmente más grave que el riesgo hemorrágico, es la toxicidad sobre el sistema nervioso central que muchas veces es la responsable del fracaso terapéutico [Cheng T et al.; Nat. Med., 2006; 12:1278-1285]. Por lo tanto, reducir el riesgo hemorrágico de la administración de tPA podría cambiar la percepción de la seguridad de este fármaco y aumentar su uso. En consecuencia, sigue siendo necesaria la selección de agentes y combinaciones terapéuticas que permitan reducir la toxicidad del tPA, bien directamente o indirectamente, disminuyendo la dosis necesaria para tratar el ictus.
Puesto que existen otras enzimas diferentes a la plasmina que pueden degradar directamente el fibrinógeno y la fibrina, también se está investigando su potencial uso para el tratamiento trombolítico. Entre estas enzimas se incluyen proteasas endógenas de leucocitos (elastasa y catepsina G), proteasas de venenos de serpientes, o de sanguijuelas, o proteasas de algunas bacterias.
En el documento EP1060747, se describe el uso de metaloproteinasas fibrinolíticas que exhiben una actividad significativa para cortar proteolíticamente y degradar la fibrina y el fibrinógeno. Entre estas metaloproteinasas fibrinolíticas se incluyen la MMP-2 (gelatinasa A), la MMP-3 (estromelisina 1), MMP-7 (matrilisina), MMP-9 y muy particularmente la metaloproteinasa de membrana MMP-MT1. Meses más tarde, Bini y colaboradores recogen y amplían estos mismos hallazgos [Biochemistry, 1999; 38: 13928-13936]. Sin embargo, ni en estos ni en otros trabajos posteriores se aportan datos sobre la eficacia de estas metaloproteinasas fibrinolíticas en la lisis y degradación de la fibrina que forma los coágulos, bien sea para obtener una más rápida disolución del coágulo, o bien sea proporcionando una mayor selectividad para la degradación de la fibrina en el coágulo respetando el fibrinógeno sistémico.
El objeto de la presente invención es proporcionar composiciones y combinaciones terapéuticas alternativas para el tratamiento trombolítico que favorezcan la lisis de los coágulos mediante una degradación selectiva de la fibrina y que ayuden a minimizar los efectos adversos asociados a otros tratamientos trombolíticos (hemorragias, toxicidad, etc.).
Breve descripción de las figuras
Figura 1. Ensayo de turbidimetría del plasma recalcificado expresado como los valores de absorbancia a 405 nm frente al tiempo que dura el experimento en minutos. A: La gráfica recoge las diferencias en la formación del coágulo (absorbancia máxima) del plasma solo (control) o en presencia de MMP-10 (200 nM) o MMP-3 (200 nM).; B: La gráfica representa la formación y lisis del coágulo de fibrina del plasma recalcificado en presencia de los activadores del plasminógeno tPA (30 U/ml) y uPA (135 U/ml) solos, o combinados con MMP-10 (200 nM) y también en presencia de una dosis equivalente de la MMP-3 (200 nM) combinada con tPA (30 U/ml).
Figura 2. Placa de fibrina polimerizada en la que se muestran las áreas de lisis producidas por el tPA (1 U/ml) y la MMP-10 (200 nM) solas, o añadidas en combinación unas con otras.
Figura 3. Ensayo de turbidimetría que ilustra la diferencia en el tiempo de lisis del coágulo de fibrina con distintas dosis de tPA (20, 25 y 30 U/ml). La combinación de MMP-10 (200 nM) con tPA (20 U/ml) acorta el tiempo de lisis en relación al activador solo.
Figura 4. Ensayo de actividad de la MMP-10 (100 nM) en plasma con un sustrato fluorescente de las estromelisinas. La concentración de anticuerpo monoclonal (MAb) que inhibe la actividad de la MMP-10 en plasma se determinó mediante la reducción en la pendiente en la formación del sustrato. Como un control, se utilizó un anticuerpo control de isotipo IgG.
Figura 5. Ensayo de turbidimetría del plasma recalcificado con MMP-10 (200 nM) en presencia o ausencia de un anticuerpo monoclonal (MAb) que inhibe la actividad de la MMP-10 y de un anticuerpo control de isotipo (IgG).
Figura 6. Placa de fibrina ilustrando las diferencias en el área de lisis producida por el tPA (1 U/ml) y la MMP-10 (200 nM) en presencia o ausencia de un anticuerpo monoclonal que inhibe la actividad de la MMP-10 (MAb) y el anticuerpo control de isotipo (IgG).
Descripción detallada de la invención
Esta invención se refiere en primer lugar al uso o empleo de la metaloproteinasa de matriz-10 (MMP-10) en la preparación de un medicamento para tratamiento y terapia trombolítica.
La MMP-10, o estromelisina-2 se localiza en el cromosoma 11 y la expresan diversos tipos celulares como las células endoteliales, monocitos y fibroblastos [Madlener M and Werner S; Gene, 1997; 202:75-81]. Se sabe que
puede ser activada por plasmina, calicreína, triptasa, elastasa y catepsina G y puede degradar un amplio rango de sustratos de la matriz extracelular, como agrecano, elastina, fibronectina, gelatina, laminina, tenascina-C, vitronectina y colágenos tipo II, III, IV, IX, X, XI. Además, la MMP-10 puede activar otras metaloproteinasas de matriz, como la proMMP-1, -3, -7, -8 y –9 [Nakamura H et al.; Eur. J. Biochem., 1998; 253:67-75].
Asimismo es conocido que la MMP-10 participa en diversos procesos fisiológicos, como el crecimiento óseo o la cicatrización de heridas. Además, se halla sobreexpresada en córneas de pacientes con retinopatía diabética y se ha relacionado con algunos tipos de carcinomas, así como con tumores linfoides. Diversos estudios in vitro han demostrado que, en cultivos de queratinocitos, la expresión de MMP-10 puede inducirse tanto por factores de crecimiento (factor de crecimiento epidérmico, de queratinocitos o TGF-beta), como por citocinas proinflamatorias (TNF-alfa, IL-1beta) [Rechardt O et al.; J. Invest. Dermatol., 2000; 115:778-787]; [Li de Q et al.; Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2003; 44:2928-2936].
Igualmente en divulgaciones anteriores a esta invención se ha descrito que la MMP-10:
- -
- puede constituir un biomarcador inflamatorio de riesgo vascular [Montero I et al.; J. Am. Col. Cardiol., 2006; 47:1369-1378] [Orbe J et al.; J. Thromb. Haemost.; 2007; 5:91-97];
- -
- se induce en células endoteliales que están formando capilares en matrices de colágeno 3D y participa en la regresión de la formación de capilares mediante la activación de la MMP-1 [Saunders WB et al.; J. Cell Sci., 2005; 118:2325-2340]; y que
- -
- juega un papel fundamental en el mantenimiento de las uniones intracelulares que preservan la integridad vascular en los procesos de remodelado y angiogénesis [Chang S et al.; Cell, 2006; 126:321-334].
En la presente invención, se ha ensayado el efecto de la MMP-10 y de la MMP-3 en la formación y lisis de coágulos sobre plasma humano, así como en otros modelos in vitro de degradación de fibrina polimerizada.
Los autores de la invención han podido comprobar que la MMP-10 no tiene una actividad trombolítica directa y que no es capaz de degradar por sí misma el fibrinógeno o la fibrina. Sorprendentemente, han comprobado también que, en presencia de agentes activadores de la trombolisis, particularmente activadores del plasminógeno, la MMP-10 favorece la disolución de los coágulos de fibrina y reduce el tiempo de lisis. La MMP-10 actúa por tanto como un facilitador o adyuvante de la acción trombolítica de otros activadores de la trombolisis.
Por el contrario, una metaloproteinasa de matriz fibrinolítica como la MMP-3, con actividad proteolítica directa sobre la fibrina y el fibrinógeno, no reduce los tiempos de lisis del coágulo que por sí solos proporcionan los activadores de la trombolisis.
En el contexto de la presente invención se entiende por “terapia trombolítica” aquella terapia que, en situaciones clínicas de isquemia de origen trombótico, busca la reperfusión o restauración del flujo sanguíneo mediante la lisis y rápida disolución de los coágulos que obstaculizan la circulación y comprometen la función orgánica. Estas situaciones clínicas incluyen en particular la terapia trombolítica en el infarto agudo de miocardio, en las trombosis cerebrales (más particularmente el infarto cerebral agudo o ictus), así como otros tromboembolismos venosos (por ejemplo embolismo pulmonar o trombosis venosa profunda) y trombosis arterial periférica.
De un modo más particular la presente invención se refiere al uso o empleo de la MMP-10 y de un activador del plasminógeno en la preparación de un medicamento o composición farmacéutica para tratamiento y terapia trombolítica mediante administración simultánea, separada o secuencial.
En el contexto de la presente invención, un activador del plasminógeno es un compuesto que activa la conversión del plasminógeno inactivo en plasmina, mediante la ruptura del enlace peptídico entre Arg560 y Val561 del plasminógeno. En particular se incluyen entre estos activadores del plasminógeno: la urocinasa (uPA), el activador tisular del plasminógeno (tPA), la estreptocinasa y la estafilocinasa.
En una realización particular de la presente invención el activador del plasminógeno es tPA.
En otra realización particular el activador del plasminógeno es uPA.
En otra realización particular adicional, como activador del plasminógeno puede utilizarse un derivado o fragmento de los activadores del plasminógeno mencionados que conserve su capacidad de cortar y activar el plasminógeno y para el que el efecto facilitador de la MMP-10 sea efectivo. Un experto en la materia podrá comprobar fácilmente este efecto por sí mismo, por ejemplo mediante ensayos in vitro de formación y lisis de coágulos como los que se describen en los ejemplos 1 a 4 de la presente invención. Longstaff y Thelwell [FEBS Letters, 2005; 579: 3303-3309] revisan algunos de los activadores del plasminógeno actualmente en uso o en desarrollo, entre los que el experto puede elegir, para su empleo en combinación con la MMP-10 según la presente invención.
Ventajosamente, la MMP-10 al no interaccionar con el fibrinógeno/fibrina circulantes y ser capaz de facilitar la acción de los activadores del plasminógeno, permitiría reducir la dosis del trombolítico manteniendo la eficacia para lisar el coágulo, pero sin inducir fibrinolisis sistémica, lo que conllevaría una menor incidencia de complicaciones
hemorrágicas. Asimismo, permitiría reducir la toxicidad derivada del tratamiento trombolítico con agentes como el tPA.
De acuerdo con otro aspecto, la presente invención se refiere también a una combinación farmacéutica que comprende, por separado o en una misma composición, MMP-10 y un activador del plasminógeno, mezclados con excipientes o vehículos farmacéuticamente aceptables. El activador del plásminógeno en la combinación puede ser cualquiera de los mencionados anteriormente.
Dicha combinación es útil para el tratamiento y terapia trombolítica en mamíferos, particularmente en seres humanos, en cualquiera de las situaciones clínicas ya mencionadas.
Los orígenes de la MMP-10 y del activador del plasminógeno de la combinación farmacéutica no constituyen un aspecto crítico de la invención. Los principios activos pueden obtenerse por extracción y purificación a partir de fluidos o tejidos biológicos mediante procedimientos de ingeniería genética o recombinante o por cualquier otra técnica convencional.
Dependiendo de las circunstancias, a determinar en cada caso mediante los ensayos farmacológicos y clínicos habituales, los ingredientes activos de la combinación farmacéutica pueden administrarse simultáneamente, separadamente o secuencialmente.
Según una realización de la invención, los principios activos (MMP-10 y activador del plasminógeno) pueden estar contenidos en una misma composición farmacéutica. En otros casos, los principios activos pueden estar contenidos en composiciones farmacéuticas separadas, cada uno de ellos en su propio recipiente mezclado con excipientes o vehículos farmacéuticamente aceptables.
Las composiciones farmacéuticas con los principios activos bien sea una o varias, pueden presentarse tanto en forma sólida (p.ej. liofilizados en viales para posterior reconstitución en una solución adecuada) como también en forma líquida.
En una realización particular, estas composiciones con los principios activos constituyen un kit para tratamiento o terapia trombolítica, que opcionalmente puede incluir otros componentes, tales como: contenedores con soluciones para la reconstitución de los principios activos, cánulas, goteros con suero fisiológico para aplicación intravenosa e instrucciones de uso, etc.
Las composiciones farmacéuticas con los ingredientes activos pueden administrarse por cualquier vía apropiada, por ejemplo, por vía oral, parenteral, rectal o tópica, para lo que incluirán los excipientes y vehículos farmacéuticamente aceptables necesarios para la formulación de la forma de administración deseada.
En una realización particular, la administración es parenteral, por ejemplo mediante inyección intravenosa, o se administra localmente mediante cateterización para administración in situ en las proximidades del trombo.
Cuando la combinación farmacéutica sea para administración separada, ambos ingredientes activos podrán estar también contenidos en composiciones farmacéuticas adecuadas para administración por vías diferentes.
Las cantidades de MMP-10 y de activador del plasminógeno que pueden estar presentes en las composiciones de la combinación farmacéutica proporcionada por esta invención pueden variar dentro de un amplio intervalo, pero siempre en cantidades terapéuticamente eficaces.
La dosificación para cada protocolo de tratamiento trombolítico con las composiciones de la combinación farmacéutica de la invención dependerá de numerosos factores, incluyendo la edad, estado del paciente, la severidad de la situación clínica a tratar, la ruta y frecuencia de administración y del activador del plasminógeno que en cada caso se vaya a administrar.
En una realización típica, las cantidades y dosificaciones del activador del plasminógeno serán menores a las que se utilizarían para ese mismo activador del plasminógeno cuando no se incluye MMP-10 en la combinación terapéutica. Por otra parte, las cantidades de MMP-10 se ajustarán en función del efecto que se desee conseguir: una mayor eficiencia trombolítica manteniendo las dosis del activador del plasminógeno; o una reducción de las dosis de activador del plasminógeno manteniendo la eficiencia trombolítica.
En otro aspecto, esta invención se refiere a una combinación farmaceútica o un kit de la invención, como ya han quedado descritos, para terapia trombolítica.
En otro aspecto adicional, la invención se refiere también a un procedimiento para tratamiento y terapia trombolítica que comprende la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de MMP-10. En una realización particular, dicho procedimiento comprende también la administración de un activador del plasminógeno, bien sea por administración simultánea, separada o secuencial. Cualquiera de las composiciones y combinaciones farmacéuticas mencionadas anteriormente podrían utilizarse para este procedimiento.
Los siguientes ejemplos ilustran la invención y no deben ser considerados limitativos del ámbito de la misma.
Los ejemplos ilustran los efectos sobre la actividad fibrinolítica y trombolítica de las metaloproteinasas de matriz MMP-10 y MMP-3, bien sea directamente o en combinación con algunos activadores del plasminógeno: urocinasa (uPA) y activador tisular del plasminógeno (tPA).
Lo siguiente se ha empleado para los ejemplos:
− MMP-10 recombinante, obtenida como enzima de 58 kDa con un 20-30 % de enzima madura de 48 kDa
(R&D Systems, 910-MP, Abingdon, Reino Unido), que se reconstituyó con tampón TCNB (Tris-HCl 50 mM,
pH 7,5, CaCl2 10 nM, NaCl 150 mM, Brij35 al 0,05 %).
− MMP-3 recombinante, obtenida como proenzima de 52 kDa (R&D Systems, 513-MP, Abingdon, Reino Unido), suministrada en una solución con Tris 12,5 nM, CaCl2 5 nM, Brij35 al 0,025 % y glicerol al 50 %.
− Urocinasa (uPA) (Vedim Pharma SA; 628602, Barcelona, España).
− Activador tisular del plasminógeno (tPA) recombinante (Boerhinger Ingelheim; 985937 Actilyse®, Ingelheim, Alemania).
Para la evaluación de la actividad trombolítica se utilizó un procedimiento turbidimétrico monitorizando la formación y lisis del coágulo de fibrina sobre muestras de plasma, de acuerdo con el protocolo descrito previamente por von dern Borne y colaboradores [Blood, 1995; 86:3035-3042].
Por otra parte, evaluando la actividad sobre la lisis de fibrina, se realizaron ensayos en placas de fibrina, siguiendo el procedimiento descrito por Edward [J. Clin. Path., 1972; 25: 335-337].
Ejemplo 1: efecto de la MMP-10 y MMP-3 en la formación y lisis de coágulos
Como se ha mencionado anteriormente, mediante el procedimiento descrito por von dern Borne y colaboradores, se llevó a cabo una evaluación del efecto de la MMP-10 y de la MMP-3 sobre el sistema hemostático. En este procedimiento, se valoran los cambios de turbidez/absorbancia durante la formación y lisis de coágulos como un indicador de la duración ambos procesos. La medida de la turbidez se realiza por lectura de la absorbancia a 405 nm durante las fases de formación y lisis de coágulos, utilizando un lector fotométrico, en nuestro caso un lector de ELISA (Fluostar Optima, BMG Labtech). El incremento de turbidez/absorbancia indica la formación del coágulo de fibrina, mientras que el descenso de este parámetro indica la lisis del coágulo.
Para la formación del coágulo, se mezclaron en un pocillo de microplaca 75 µl de plasma citratado, 75 µl de tampón HEPES (HEPES 25 mM, NaCl 137 mM, KCl 3,5 mM, CaCl2 6 mM, MgCl2 1,2 mM y BSA al 0,1 %, pH = 7,5) y 10 µl de CaCl2 150 mM. La placa se incubó a 37ºC y se midió la absorbancia a 405 nm durante 2 h, con lecturas cada 30 segundos.
Estudiando el efecto de la MMP-10 en la formación del coágulo, se añadió MMP-10 activada (50, 100 y 200 nM) a la mezcla inicial de plasma y tampón HEPES. Antes de su utilización en los experimentos, la MMP-10 se activó mediante tratamiento térmico a 37ºC durante 1 h.
En ensayos paralelos, se analizó también el efecto sobre la formación del coágulo con la MMP-3 (200 nM). En este caso la MMP-3 se activó previamente con acetato de p-aminofenilmercurio 1 mM (APMA, 164610, EMD Biosciences, La Jolla, EE.UU.) a 37ºC durante 24 h.
Como se observa en la Figura 1A, la MMP-10 no indujo cambios ni en la velocidad de formación del coágulo ni en el máximo de turbidez alcanzada con ninguna de las dosis empleadas (Tabla 1). Sin embargo, la MMP-3 indujo un descenso del 50 % en el máximo de absorbancia/turbidez del coágulo formado, probablemente por su acción proteolítica directa sobre el fibrinógeno.
Estos resultados demuestran que la MMP-10, a diferencia de lo descrito para la MMP-3, no altera la tasa de formación del coágulo por no presentar actividad fibrinolítica frente al fibrinógeno.
Posteriormente, se estudió la tasa de lisis de coágulo de fibrina y para ello, como en el apartado anterior, se empleó plasma recalcificado en tampón HEPES al que simultáneamente con la MMP-10 (o MMP-3 en su caso) se añadió un activador del plasminógeno para elegir bien 30 U/ml de activador tisular del plasminógeno (tPA) o bien 135 U/ml de urocinasa (uPA) al comienzo de la turbidimetría.
Las concentraciones de tPA y uPA a utilizarse se determinaron en estudios anteriores de dosis-respuesta, donde la dosis de elección fue aquella que lisaba completamente el coágulo de fibrina en un plazo de dos horas (2 h).
Como se observa en la Figura 1B y tabla 1, la MMP-10 en ausencia de tPA y uPA no produjo la lisis del coágulo de fibrina, mientras que en presencia de los activadores tPA o uPA indujo un aumento significativo en la tasa de lisis del coágulo de fibrina. Con la máxima dosis de MMP-10 ensayada (200 nM) el acortamiento del tiempo de lisis (tiempo
al que se lisa la mitad del coágulo) fue de 15 min (52,9 min frente a 68,3 min, p < 0,01) en presencia de tPA y de 5 min en presencia de uPA (42 min frente a 47,5 min, p < 0,05). Esta reducción del tiempo de lisis supone un porcentaje de acortamiento de un 20 % en presencia del tPA y de un 10 % con el uPA.
Por el contrario, la MMP-3 no modificó la tasa de lisis del coágulo en presencia de tPA.
Estos resultados indican que la MMP-10, a diferencia de la MMP-3, no es capaz de digerir la fibrina pero sí aumenta el efecto fibrinolítico de los activadores del plasminógeno y de la fibrinolisis (tPA o uPA). La MMP-10, al no poseer capacidad para actuar sobre la fibrinolisis endógena, evitaría o atenuaría la aparición de hemorragias, lo que la convierte en un buen candidato para su utilización como coadyuvante de la terapia trombolítica.
Tabla 1. Tiempo de lisis del coágulo de fibrina (expresado en minutos), en presencia de los activadores del plasminógeno (tPA o uPA).
- tPA 30 U/ml
- tPA 20 U/ml tPA 15 U/ml uPA 135 U/ml
- Control
- 68,3 102,0 125,3 47,5
- MMP-10 50 nM
- 65,5 - - -
- MMP-10 100 nM
- 61,2 - - -
- MMP-10 200 nM
- 52,9 84,7 108,7 42,0
- MMP-3 200 nM
- 76,3 - - -
- Anti-MMP-10 (MAb)
- No lisis - - No lisis
- Control isotipo (IgG)
- 74,3 - - 48,3
De acuerdo con el procedimiento de Edward mencionado anteriormente, se hizo un estudio del efecto sobre la lisis de fibrina midiendo el halo o área de lisis que se produce en una placa de fibrina polimerizada.
Las placas de fibrina se preparan a partir de una solución de 6 mg/ml de fibrinógeno humano (Sigma, F3879, Sant Louis, MO, EE.UU.) en tampón veronal (BioWhittaker, 12-624E, Cambrex, MD, EE.UU.) a 37ºC, que se filtra y a la que se añade un volumen igual de CaCl2 (50 mM). Esta solución (6 ml) se mezcla con 1 unidad internacional (unidades NIH) de trombina (Enzyme Research Lab; HT1200a, Swansea, Reino Unido) y se deja polimerizar durante 6 h.
Para valorar la capacidad fibrinolítica, sobre distintas placas de fibrina se añadió: tPA (1 U/ml), MMP-10 (200 nM), o una combinación de ambos.
Como se muestra en la Figura 2, la MMP-10 sola no produjo lisis sobre la fibrina polimerizada, mientras que el tPA produjo un marcado halo. Sin embargo, la combinación de tPA con MMP-10 aumentó significativamente el área de lisis de fibrina polimerizada (188,6 %), hecho que confirma el efecto facilitador de la fibrinolisis que presenta la MMP10 en combinación con activadores del plasminógeno como agentes fibrinolíticos.
Ejemplo 3: efecto de la coadministración de MMP-10 y un agente trombolítico (tPA o uPA) en la lisis de coágulos
Dado el efecto de la MMP-10 en la lisis inducida por tPA, se plantea la cuestión de confirmar si es posible reducir la dosis de tPA (que presenta problemas hemorrágicos y de toxicidad neurológica) y emplear la MMP-10 como un coadyuvante obteniendo el mismo efecto trombolítico.
En el ensayo de turbidimetría realizado según el procedimiento descrito en el ejemplo 1 anteriormente, los autores de la presente invención encontraron que la presencia de MMP-10 (200 nM) en combinación con el tPA permite reducir la dosis de tPA un 33 % (de 30 a 20 U/ml) obteniendo el mismo tiempo de lisis de coágulo (Figura 3, tabla 1).
Este resultado indica que en un sujeto que necesite terapia trombolítica, la MMP-10 proporciona la ruta para aumentar la fibrinolisis y lisis del coágulo reduciendo simultáneamente la dosis de tPA y por tanto, minimizando los problemas de hemorragias y toxicidad producidos por este fármaco.
Ejemplo 4: inhibición de la fibrinolisis y lisis de coágulos inducida por tPA con anticuerpos anti-MMP-10
De acuerdo con los resultados de los Ejemplos 1 y 2, se hizo un análisis de la especificidad del efecto de la MMP-10 sobre la lisis de fibrina en el coágulo inducida por tPA añadiendo simultáneamente diferentes dosis de MMP-10 activa, en presencia (relación 1:2) y ausencia de un anticuerpo monoclonal que bloquea su actividad (R&D Systems, MAB9101, Abingdon, Reino Unido), o de anticuerpo control de isotipo murino IgG2B (eBioscience, 16-4732, San Diego, CA, EE.UU.) a la misma concentración que el anticuerpo.
La relación de enzima:anticuerpo que bloquea la actividad del enzima se analizó previamente en un ensayo de
5 actividad para la MMP-10 en una microplaca tapizada con un anticuerpo anti-MMP-10 (R&D systems, Clon110343) y utilizando el sustrato fluorogénico de estromelisinas (MCA-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nval-Trp-Arg-Lys-[DNP]-NH2) (R&D systems; ES002, Abingdon, Reino Unido) [Lombard et al.; Biochimie, 2005; 87:265-272]. La fluorescencia (excitación a 320 nm y emisión a 405 nM) se midió en un espectrofluorímetro (SpectraMAX GeminiXS, Molecular Devices, CA, EE.UU.) durante 1 h habiéndose encontrado que la relación 1:2 inhibe completamente la concentración
10 de enzima activa (Figura 4).
Los resultados muestran que el efecto coadyuvante sobre la fibrinolisis es específico de la MMP-10, ya que se revierte en presencia del anticuerpo anti-MMP-10. Este efecto es bastante destacable cuando dicho anticuerpo se añade bloqueando la actividad endógena de la MMP-10 plasmática (Figura 5). Los resultados establecen que la ausencia de MMP-10 en el plasma impide la lisis del coágulo de fibrina incluso en presencia de tPA o uPA (Tabla 1).
15 Estos resultados se corroboraron en los ensayos sobre placa de fibrina polimerizada. Como se muestra en la Figura 6, en presencia del anticuerpo anti-MMP-10 se reduce el área de lisis producido por la combinación tPA:MMP-10 (91,2 % frente a 188,6 %), mientras que el anticuerpo control no tiene ningún efecto (184,6 %). Estos datos confirman que el empleo de un anticuerpo inhibidor de la MMP-10 bloquea la disolución farmacológica de coágulos de fibrina.
Claims (15)
- REIVINDICACIONES1.- Uso de la metaloproteinasa de matriz-10 MMP-10 en la preparación de un medicamento para terapia trombolítica.
- 2.- Uso según la reivindicación 1, caracterizado porque dicho medicamento además comprende un activador del plasminógeno seleccionado entre: activador del plasminógeno tisular tPA, el activador de urocinasa uPA, la estreptocinasa, la estafilocinasa y un derivado o fragmento de dichos activadores del plasminógeno que conserve su capacidad de activar el plasminógeno.
- 3.- Uso según la reivindicación 2, caracterizado porque el medicamento es adecuado para la administración simultánea, separada o secuencial de dichos componentes.
- 4.- Uso según la reivindicación 2, caracterizado porque el activador del plasminógeno está seleccionado entre: tPA y un derivado o fragmento de tPA que conserve su capacidad de activar el plasminógeno.
- 5.- Uso según la reivindicación 4, caracterizado porque el activador del plasminógeno es tPA.
- 6.- Uso según la reivindicación 2, caracterizado porque el activador del plasminógeno está seleccionado entre: uPA y un derivado o fragmento de uPA que conserve su capacidad de activar el plasminógeno.
- 7.- Uso según la reivindicación 6, caracterizado porque el activador del plasminógeno es uPA.
- 8.- Una combinación farmacéutica para administración simultánea, separada o secuencial, caracterizada porque comprende una metaloproteinasa de matriz-10 MMP-10 y un activador del plasminógeno mezclados con excipienteso vehículos farmacéuticamente aceptables, en los que el activador del plasminógeno está seleccionado entre: el activador del plasminógeno tisular tPA, el activador de urocinasa uPA, la estreptocinasa, la estafilocinasa y un derivado o fragmento de dichos activadores del plasminógeno que conserve su capacidad de activar el plasminógeno.
- 9.- Una combinación farmacéutica según la reivindicación 8, caracterizada porque el activador del plasminógeno es tPA.
- 10.- Una combinación farmacéutica según la reivindicación 8, caracterizada porque el activador del plasminógeno es uPA.
- 11.- Un kit caracterizado porque comprende la metaloproteinasa de matriz-10 MMP-10 y un activador del plasminógeno, como combinación farmacéutica para su administración simultánea, separada o secuencial para tratamiento trombolítico, en el que el activador del plasminógeno está seleccionado entre: el activador del plasminógeno tisular tPA, el activador de urocinasa uPA, la estreptocinasa, la estafilocinasa y un derivado o fragmento de dichos activadores del plasminógeno que conserve su capacidad de activar el plasminógeno.
- 12.- Un kit según la reivindicación 11, caracterizado porque el activador del plasminógeno es tPA.
- 13.- Un kit según la reivindicación 11, caracterizado porque el activador del plasminógeno es uPA.
- 14.- Metaloproteinasa de matriz-10 MMP-10 para su uso en terapia trombolítica.
- 15.- Una combinación farmaceútica según cualquiera de las reivindicaciones 8-10, o un kit según cualquiera de las reivindicaciones 11-13, para terapia trombolítica.Figura 1 Figura 2Figura 3Figura 4 Figura 5Absorbancia 405 nmFigura 6
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES200700501A ES2335167B1 (es) | 2007-02-26 | 2007-02-26 | Uso de la metaloproteinasa de matriz-10 (mmp10) para tratamientos tromboliticos. |
| ES200700501 | 2007-02-26 | ||
| PCT/ES2008/000072 WO2008104620A1 (es) | 2007-02-26 | 2008-02-11 | Uso de la metaloproteinasa de matriz-10 (mmp-10) para tratamientos trombolíticos |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2434955T3 true ES2434955T3 (es) | 2013-12-18 |
Family
ID=39720863
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES200700501A Withdrawn - After Issue ES2335167B1 (es) | 2007-02-26 | 2007-02-26 | Uso de la metaloproteinasa de matriz-10 (mmp10) para tratamientos tromboliticos. |
| ES08736676T Active ES2434955T3 (es) | 2007-02-26 | 2008-02-11 | Uso de la metaloproteinasa de matriz-10 (mmp-10) para tratamientos trombolíticos |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES200700501A Withdrawn - After Issue ES2335167B1 (es) | 2007-02-26 | 2007-02-26 | Uso de la metaloproteinasa de matriz-10 (mmp10) para tratamientos tromboliticos. |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20100040596A1 (es) |
| EP (1) | EP2127669B1 (es) |
| JP (1) | JP5244824B2 (es) |
| CN (1) | CN101678089A (es) |
| AU (1) | AU2008220733B2 (es) |
| BR (1) | BRPI0807708A2 (es) |
| CA (1) | CA2679501A1 (es) |
| ES (2) | ES2335167B1 (es) |
| MX (1) | MX2009009092A (es) |
| RU (1) | RU2489163C2 (es) |
| WO (1) | WO2008104620A1 (es) |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5830468A (en) * | 1995-05-17 | 1998-11-03 | The New York Blood Center, Inc. | Fibrin(ogen) degradation by fibrinolytic matrix metalloproteinase |
| EP1060747A3 (en) * | 1999-06-16 | 2001-12-05 | New York Blood Center, Inc. | Fibrin(ogen) degradation and clot lysis by fibrinolytic metalloproteinase |
| JP2005503820A (ja) * | 2001-10-01 | 2005-02-10 | ブラッドリー・エイチ・ストラウス | 完全動脈閉塞においてガイドワイヤーの通過を容易にするコラゲナーゼの使用 |
| RU2216348C1 (ru) * | 2002-11-14 | 2003-11-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное предприятие "Техноген" | Фармацевтическая композиция, обладающая тромболитическим и фибринолитическим действием |
-
2007
- 2007-02-26 ES ES200700501A patent/ES2335167B1/es not_active Withdrawn - After Issue
-
2008
- 2008-02-11 WO PCT/ES2008/000072 patent/WO2008104620A1/es not_active Ceased
- 2008-02-11 MX MX2009009092A patent/MX2009009092A/es not_active Application Discontinuation
- 2008-02-11 EP EP08736676.1A patent/EP2127669B1/en active Active
- 2008-02-11 BR BRPI0807708-8A2A patent/BRPI0807708A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2008-02-11 RU RU2009135422/15A patent/RU2489163C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-02-11 CA CA002679501A patent/CA2679501A1/en not_active Abandoned
- 2008-02-11 CN CN200880013936A patent/CN101678089A/zh active Pending
- 2008-02-11 US US12/449,748 patent/US20100040596A1/en not_active Abandoned
- 2008-02-11 JP JP2009551229A patent/JP5244824B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2008-02-11 AU AU2008220733A patent/AU2008220733B2/en not_active Ceased
- 2008-02-11 ES ES08736676T patent/ES2434955T3/es active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX2009009092A (es) | 2009-09-04 |
| WO2008104620A1 (es) | 2008-09-04 |
| ES2335167B1 (es) | 2011-01-24 |
| EP2127669B1 (en) | 2013-08-14 |
| BRPI0807708A2 (pt) | 2014-06-03 |
| CN101678089A (zh) | 2010-03-24 |
| EP2127669A4 (en) | 2012-01-11 |
| AU2008220733A1 (en) | 2008-09-04 |
| RU2489163C2 (ru) | 2013-08-10 |
| JP5244824B2 (ja) | 2013-07-24 |
| ES2335167A1 (es) | 2010-03-22 |
| RU2009135422A (ru) | 2011-04-10 |
| AU2008220733B2 (en) | 2013-09-12 |
| JP2010519327A (ja) | 2010-06-03 |
| WO2008104620A8 (es) | 2009-10-15 |
| CA2679501A1 (en) | 2008-09-04 |
| US20100040596A1 (en) | 2010-02-18 |
| EP2127669A1 (en) | 2009-12-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2254414T3 (es) | Composicion farmaceutica comprendiendo un factor vlla y un inhibidor tfpi. | |
| Marder et al. | Plasmin induces local thrombolysis without causing hemorrhage: a comparison with tissue plasminogen activator in the rabbit | |
| ES2968254T3 (es) | Plasminógeno para su uso en la prevención o el tratamiento de la trombosis aguda y la trombosis crónica | |
| ES2761730T3 (es) | Composiciones y procedimientos para contrarrestar la inhibición del factor Xa | |
| Balami et al. | Thrombolytic agents for acute ischaemic stroke treatment: the past, present and future | |
| ES2212802T3 (es) | Degradacion de fibrina/fibrinogeno y lisis de coagulos mediante una metaloproteinasa de matriz fibrinolitica. | |
| Flight et al. | Comparison of textilinin-1 with aprotinin as serine protease inhibitors and as antifibrinolytic agents | |
| ES2390391T3 (es) | Composiciones para tratamiento anti-fibrinolítico | |
| ES2332576T3 (es) | Factores activadores del plasminogeno no neurotoxicos para el tratamiento terapeutico de apoplejias. | |
| RU2745847C2 (ru) | Новые ингибиторы тромбина | |
| US8541370B2 (en) | Use of matrix metalloproteinase-10 (MMP-10) for thrombolytic treatments | |
| ES2335167B1 (es) | Uso de la metaloproteinasa de matriz-10 (mmp10) para tratamientos tromboliticos. | |
| ES2257794T3 (es) | Procedimientos para tratar trastornos vasculares con proteina c activada. | |
| ES2373713T3 (es) | PÉPTIDOS PARA LA REGULACIÓN DE UROQUINASA (uPA) Y ACTIVADOR DE PLASMINÓGENO DE TIPO TEJIDO (tPA) Y MÉTODO PARA OPTIMIZAR LA EFICACIA TERAPÉUTICA. | |
| EP1414479A1 (en) | Peptide for regulation of tissue plasminogen activator | |
| JP5236952B2 (ja) | 改善された特性を有するｆｘｉｉｉバリアント | |
| WO1995033471A1 (en) | Intravasal thrombolysis | |
| US7271143B1 (en) | Peptides for regulation of urokinase (uPA) and tissue type (tPA) plasminogen activator and method of optimizing therapeutic efficacy | |
| Hedner et al. | 3.3 Characterizing Hereditary and Acquired Defects of Plasminogen | |
| KR20050043733A (ko) | 인자 ⅶ 폴리펩티드와 ｐａｉ-1 폴리펩티드를 포함하는약학적 조성물 | |
| Cleutjens | Regulation of Cardiac Extracellular Matrix Remodeling Following Myocardial Infarction. | |
| de Hingh | Anastomotic healing in the intestine: pre-clinical studies with the emphasis on the role of gelatinases and the effect of peritonitis. |