ES2549087T3

ES2549087T3 - Derivados de aminodihidrotiazina como inhibidores de BACE para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer

Info

Publication number: ES2549087T3
Application number: ES09739419.1T
Authority: ES
Inventors: James Edmund Audia; Dustin James Mergott; Scott Martin Sheehan; Brian Morgan Watson
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 2008-05-02
Filing date: 2009-04-15
Publication date: 2015-10-22
Anticipated expiration: 2029-04-15
Also published as: HUE025520T2; WO2009134617A1; JP2015051980A; HRP20150941T1; NZ588300A; KR101253835B1; JP2011519854A; SI2297120T1; IL208350A0; JP5658139B2; MA32351B1; CN102015667B; PT2297120E; KR20100125475A; TWI431004B; CR11776A; EA016955B1; EP2297120A1; TW200946522A; IL208350A

Abstract

Un compuesto de Fórmula I:**Fórmula** en la que: n es 0, 1 o 2; R1 es pirimidinilo, pirazinilo opcionalmente sustituido con cloro o flúor, o piridinilo opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados cada uno, de manera independiente, entre cloro, flúor y alcoxi C1-C3; R2 es seleccionado, en cada caso de manera independiente, entre cloro o flúor; R3 es hidrógeno o alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido con hidroxi; y R4 es hidrógeno o alquilo C1-C3; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

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base adecuada, tal como carbonato de cesio, carbonato de sodio o carbonato de potasio. Dichas reacciones se llevan a cabo en un disolvente adecuado, tal como 1,2-dimetoxietano, agua, etanol, acetonitrilo, dimetilformamida o dioxano, o mezclas de los mismos.

Como alternativa, se hace reaccionar un compuesto de cualquiera de las fórmulas (1a) a (1e) con un compuesto de

5 fórmula (3) en una reacción de acoplamiento de Stille usando un reactivo de paladio adecuado, tal como cloruro de bis(trifenilfosfin)paladio (II), PdCl2 o tetraquistrifenilfosfina de paladio, en presencia de un aditivo adecuado, tal como cloruro de litio o fluoruro de cesio. Dichas reacciones se llevan a cabo en un disolvente adecuado, tal como tolueno o DMF, o mezclas de los mismos.

En una etapa opcional, se puede formar una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de Fórmula I

10 mediante la reacción de una base libre apropiada de Fórmula I con un ácido farmacéuticamente aceptable apropiado en un disolvente adecuado en condiciones convencionales. Además, la formación de dichas sales puede producirse de forma simultánea, tras la desprotección de un grupo protector de nitrógeno. La formación de dichas sales es bien conocida y apreciada en la técnica.

Los compuestos de fórmula (1a) se pueden preparar mediante dos variantes. Los Esquemas II y III representan las

15 etapas sintéticas que comienzan con un compuesto apropiado de fórmula (i), dando un compuesto de fórmula (1a) en el que R6 sea metilo o etilo, y R5 sea un grupo protector de nitrógeno adecuado, tal como acetilo, benzoílo o tbutoxicarbonilo.

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En el Esquema II, se hace reaccionar un compuesto de fórmula (i) con amida de ácido 2-metil-propano-2-sulfínico en

20 presencia de Ti(OEt)4 en un disolvente adecuado, tal como THF, dando un compuesto de fórmula (ii). Se prepara un compuesto de fórmula (iii) mediante la adición de n-BuLi a diisopropilamina en un disolvente adecuado, tal como THF. Se añade el compuesto de acetato apropiado seguido por un exceso de triisopropóxido de clorotitanio. Se añade un compuesto de fórmula (ii) a la solución de un compuesto de fórmula (iii), dando un compuesto de fórmula (iv). La desprotección de la amina se lleva a cabo mediante procedimientos conocidos en la técnica y es seguida por

25 la reducción del éster al alcohol mediante procedimientos bien conocidos en la técnica, por ejemplo, mediante el uso de hidruro de litio y aluminio o borohidruro de litio. Al alcohol (v), se añade isotiocianato de benzoílo. El compuesto intermedio se trata con HCl para facilitar tanto la formación de tiezeno como la eliminación del grupo benzoílo, y, a continuación, se añade un grupo protector de nitrógeno adecuado, dando un compuesto de la fórmula (1a).

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En el Esquema III, se añade un exceso de bromuro de vinilmagnesio a un compuesto de fórmula (i) en un disolvente adecuado, tal como THF, dando un compuesto de fórmula (vi). El alcohol (vi) se trata con cloruro de tionilo o PBr3 en un disolvente adecuado, tal como hexano o etanol, seguido de la adición de tiourea, dando un compuesto de fórmula (vii). Se trata el compuesto de fórmula (vii) con ácido a una temperatura elevada, proporcionando la aminotiazina racémica que se protege con un grupo protector de nitrógeno adecuado y se somete a condiciones de purificación, tales como cromatografía o cristalización quiral, dando un compuesto de fórmula (1a).

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El Esquema IV representa las etapas sintéticas que parten de un compuesto apropiado de fórmula (ii), dando un

10 compuesto de fórmula (1b). Se añade un exceso de cloruro de 2-metilalilmagnesio a una solución de un compuesto de fórmula (ii) en un disolvente adecuado, tal como diclorometano. Se trata el producto intermedio resultante con una solución de HCl en un disolvente adecuado, tal como dioxano, dando un compuesto de fórmula (viii). Se hace reaccionar la amina (viii) con isotiocianato de benzoílo en un disolvente adecuado, tal como THF, dando un compuesto de fórmula (ix). El tratamiento de un compuesto de fórmula (ix) con un exceso de yodo en un disolvente

15 adecuado, tal como diclorometano, dará un compuesto de fórmula (x). Por último, la adición de hidruro de tri-Nbutilestaño y AIBN en un disolvente adecuado, tal como tolueno, dará un compuesto de fórmula (1b).

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Las abreviaturas usadas en el presente documento se definen de acuerdo con Aldrichimica Acta, Vol. 17, Nº 1, 1984. Otras abreviaturas se definen de la siguiente manera: "SCX" es intercambio catiónico fuerte; "aprox." es aproximadamente; "EtOAc" es acetato de etilo; "MeOH" es metanol; "DCM" es diclorometano; "THF" es tetrahidrofurano; "Et2O" es éter dietílico; "(OEt)" es etóxido; "equiv" es equivalentes; "FRET" es transferencia de

5 energía de resonancia de fluorescencia; "RFU" es unidad relativa de fluorescencia; "DMEM" es medio de Eagle modificado por Dulbecco; "F12" es medio F12 de Ham; "FBS" es suero bovino fetal.

Los datos de espectrometría de masas, a menos que se especifique lo contrario, se obtienen a través de EMCL: columna Xbridge C18 (2,1 x 50 m x 3,5 m) a una temperatura de 50 ºC  10 ºC con un caudal de 1 ml/min. El sistema de elución es de ACN del 5 al 100 % p/bicarbonato de amonio 10 mM (pH 10) durante 7,0 minutos y luego

10 manteniendo en ACN al 100 % durante 1,0 minutos junto con ionización por electronebulización (intervalo de exploración de 100-800 uma; paso de 0,2 uma; Fragmentador 80v; ganancia de 1,0; umbral de 80).

Se purifican algunos compuestos mediante HPLC, procedimiento A: columna Xterra RP18 (30 x 300 mm) a temperatura ambiente con un caudal de 40 ml/min. El sistema de elución es o coincide con un gradiente isocrático de (acetonitrilo:(HCl al 0,1 % en H2O)) 0:100 durante 1-5 minutos, seguido de un gradiente lineal de (acetonitrilo:

15 (HCl al 0,1 % en H2O)) 0:100 a (acetonitrilo:(HCl al 0,1 % en H2O)) 50:50 durante 20 minutos. Cualquier otra condición de HPLC se especifica de otra manera.

Preparación 1

[1-(5-Bromo-2,4-difluoro-fenil)-etiliden]-amida de ácido (R)-2-metil-propan-2-sulfínico

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20 A una solución de 1-(5-bromo-2,4-difluoro-fenil)-etanona (19 g, 64,7 mmol, 1 equiv.) y amida de ácido (R)-2-metilpropan-2-sulfínico (10,2 g, 84,1 mmol, 0,76 equiv) en THF (0,3 M, 215 ml), se añade Ti(OEt)4 (29,5 g, 129 mmol, 2,0 equiv) en una sola porción a temperatura ambiente. Se calienta la reacción hasta 70 ºC y se deja agitar durante 18 h. Se enfría la reacción hasta la temperatura ambiente, y se vierte en agua. Se filtra la suspensión resultante a través de un lecho corto de tierra de diatomeas y se lava con acetato de etilo. Se recoge el filtrado y se extrae con

25 acetato de etilo. Se combinan las capas orgánicas, se secan sobre sulfato de sodio, se filtran y se concentran a presión reducida, dando un residuo. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice, eluyendo con un gradiente lineal de hexano a hexano:acetato de etilo (3:1) durante 20 minutos, dando el compuesto del título (81 % de rendimiento): EM (m/z): 338, 340 (M + 1).

Los siguientes compuestos de la Tabla 1 se preparan esencialmente como se describe en la preparación de la [1-(530 bromo-2,4-difluoro-fenil)etiliden]-amida de ácido (R)-2-metil-propano-2-sulfínico.

Tabla 1

Prep. Nº: Denominación química Datos físicos EM (m/z)

1a: [1-(3-Bromo-4-fluoro-fenil)-etiliden]-amida de ácido (R)-2-metil-propan-2-sulfínico 320, 322 (M+1)

1b: [1-(5-Bromo-2-fluoro-fenil)-etiliden]-amida de ácido (R)-2-metil-propan-2-sulfínico 320, 322 (M+1)

1c: (R)-N-(1-(3-Bromofenil)etiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida 302, 304 (M+1)

1d: (R)-N-(1-(5-Bromo-2-chlorofenil)etiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida 336, 338 (M+1)

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Preparación 2

Metiléster de ácido (S)-3-((R)-2-metil-propano-2-sulfinilamino)-3-(5-bromo-2,4-difluoro-fenil)-butírico

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Se añade n-butil-litio (41,9 ml, 105 mmol, 2 equiv) (2,5 M en hexano) a una solución a -78 ºC de diisopropilamina

5 (10,6 g, 105 mmol, 2 equiv) en THF (262 ml). Después de 15 minutos, se añade acetato de metilo (7,7 g, 105 mmol, 2 equiv) gota a gota, y se deja la reacción en agitación durante 30 minutos. A la reacción, se añade gota a gota una solución de triisopropóxido de clorotitanio (31,6 g, 115 mmol, 2,2 equiv) en THF (50 ml). Después de agitar durante 60 minutos a -78 ºC, se añade una solución de [1-(3-bromo-fenil)etiliden]-amida de ácido 2-metil-propan-2-sulfínico (12,2 g, 40,4 mmol, 1 equiv) en THF (50 ml) gota a gota. Se agita la reacción durante 3 h a -78 ºC. Se inactiva la

10 reacción con una solución saturada de cloruro de amonio (100 ml), se calienta hasta la temperatura ambiente y se diluye con agua (100 ml). Se filtra la suspensión resultante a través de un lecho corto de tierra de diatomeas y se lava con acetato de etilo. Se recoge el filtrado y se extrae con acetato de etilo. Se combinan las capas orgánicas y se secan sobre sulfato de sodio, se filtran y se concentran a presión reducida, dando un residuo. El residuo se purifica por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de hexano:acetato de etilo (5:1) a

15 hexano:acetato de etilo (10:7) durante 20 minutos, dando el compuesto del título (72 % de rendimiento): EM (m/z): 412, 414 (M + 1).

Los siguientes compuestos de la Tabla 2 se preparan esencialmente como se describe en la preparación del metiléster de ácido (S)-3-((R)-2-metil-propano-2-sulfinilamino)-3-(5-bromo-2,4-difluoro-fenil)-butírico.

Tabla 2

Prep. Nº: Denominación química Datos físicos EM (m/z)

2a: (S)-Etil-3-(5-bromo-2,4-difluorofenil)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)butanoato 426, 428 (M+1)

2b: Metiléster de ácido (S)-3-((R)-2-metil-propan-2-sulfinilamino)-3-(3-bromo-4-fluorofenil)-butírico 394, 396 (M+1)

2c: Metiléster de ácido (S)-3-((R)-2-metil-propan-2-sulfinilamino)-3-(5-bromo-2-fluorofenil)-butírico 394, 396 (M+1)

2d: Metiléster de ácido (S)-3-((R)-2-metil-propan-2-sulfinilamino)-3-fenil-butírico 376 378 (M+1)

2e: (S)-Metil-3-(5-bromo-2-clorofenil)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)butanoato 410, 412 (M+1)

20 Preparación 3 Clorhidrato de (S)-metil-3-amino-3-(2,4-difluorofenil)-butanoato

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A una solución de metiléster de ácido (S)-3-((R)-2-metil-propan-2-sulfinilamino)-3-fenil-butírico (15,5 g; 37,6 mmol; 1 equiv) y metanol (100 ml), se añade cloruro de hidrógeno (4 M en dioxano) (100 ml, 400 mmol, 11 equiv) en una

25 sola porción. Se agita la reacción a temperatura ambiente durante 1 h. Se elimina el disolvente a presión reducida, dando el compuesto del título que se usa sin purificación adicional (> 95 % de rendimiento): EM (m/z): 306, 308 (M + 1).

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Los siguientes compuestos de la Tabla 3 se preparan esencialmente como se describe en la preparación del clorhidrato de (S)-metil-3-amino-3-(2,4-difluorofenil)-butanoato.

Tabla 3

Prep. Nº: Denominación química Datos físicos EM (m/z)

3a: Clorhidrato de (S)-metil-3-amino-3-(3-bromo-4-fluorofenil)-butanoato 290, 292 (M+1)

3b: Clorhidrato de (S)-metil-3-amino-3-(5-bromo-2-fluorofenil)-butanoato 290, 292 (M+1)

3c: Clorhidrato de (S)-metil-3-amino-3-(4-fluorofenil)-butanoato 272, 274 (M+1)

3d: Clorhidrato de (S)-metil-3-amino-3-(5-bromo-2-chlorofenil)butanoato 306, 308 (M+1)

3e: Clorhidrato de (S)-etil-3-amino-3-(2,4-difluorofenil)-butanoato 322, 324 (M+1)

Preparación 4

5(S)-3-amino-3-(5-bromo-2,4-difluorofenil)butan-1-ol imagen15

A una solución a 0 ºC de clorhidrato de (S)-etil-3-amino-3-(2,4-difluorofenil)-butanoato (40,2 g, 90,5 mmol, 1 equiv) en THF (180 ml), se añade hidruro de litio y aluminio (1 M en THF) (118 ml, 118 mmol) durante 45 minutos manteniendo la temperatura de reacción interna por debajo de 15 ºC. Se deja calentar la mezcla de reacción hasta la

10 temperatura ambiente y se agita durante 1,5 h. Se enfría la reacción hasta 0 ºC y se inactiva mediante la adición gota a gota de agua (4,5 ml), hidróxido de sodio 2 M (4,5 ml) y agua (13,6 ml). Se retira el sólido resultante por filtración y se lava con acetato de etilo. Se seca el filtrado sobre MgSO4 y se filtra. Se elimina el disolvente a presión reducida, dando el compuesto del título que se usó sin purificación adicional (rendimiento del 71 %, pureza del 73 % determinada por EMCL): EM (m/z): 280, 282.

15 Preparación 5

(S)-3-Amino-3-(3-bromo-fenil)-butan-1-ol

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A una solución a 0 ºC de clorhidrato de (S)-metil-3-amino-3-(4-fluorofenil)-butanoato (14 g, 38,6 mmol, 1 equiv]) en THF (200 ml), se añade borohidruro de litio (1,67 g, 77,1 mmol, 2 equiv) con cuidado. Después de 5 minutos, se

20 calienta la mezcla de reacción hasta 50 ºC y se agita. Al terminar, se enfría la reacción en un baño de hielo y se inactiva mediante la adición gota a gota de agua. Se acidifica la reacción con HCl 1 N (100 ml). Después de agitar durante 1 h, se basifica la solución con NaOH 5 N y se extrae con diclorometano. Se combinan las capas orgánicas, se secan sobre sulfato de sodio, se filtran y se concentran a presión reducida, dando el compuesto del título (rendimiento del 94 %): EM (m/z): 244,0 y 246,0 (M + 1).

25 Los siguientes compuestos de la Tabla 4 se preparan esencialmente de acuerdo con la preparación del (S)-3-amino3-(3-bromo-fenil)-butan-1-ol.

Tabla 4

Prep. Nº: Denominación química Datos físicos EM (m/z)

5a: (S)-3-Amino-3-(3-bromo-4-fluorofenil)butan-1-ol 262, 264 (M+1)

5b: (S)-3-Amino-3-(5-bromo-2-fluorofenil)butan-1-ol 262, 264 (M+1)

5c: (S)-3-Amino-3-(5-bromo-2-chlorofenil)butan-1-ol 278, 280 (M+1)

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Preparación 13

N-(4-(3-Bromofenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-il)acetamida

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A una solución a 0 ºC de 4-(3-bromo-fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2-ilamina (10 g, 35 mmol, 1 equiv) y

5 trietilamina (4,3 g, 42 mmol, 1,2 equiv) en diclorometano (70 ml), se añade cloruro de acetilo gota a gota (2,8 g, 35 mmol, 1 equiv) durante 5 minutos. Se deja calentar la reacción hasta la temperatura ambiente. Después de 1 h, se diluye la reacción con diclorometano y se extrae con agua. Se separan las capas orgánicas, se secan sobre sulfato de magnesio, se filtran y se concentran a presión reducida. El residuo resultante se purifica por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con hexano:acetato de etilo (1:1), dando el compuesto del título (rendimiento del 87 %):

10 EM (m/z): 327, 329 (M + 1).

Preparación 14

(S)-N-[4-(3-Bromo-fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2-il]-acetamida

Se purifica 4-(3-bromo-fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2-ilamina (20 g, 61 mmol) mediante separación de HPLC quiral [columna: Chiralpak AD de 8 x 32 cm; eluyente: 60:40:0,2 (alcohol

15 isopropílico:heptanos:dimetiletilamina); caudal: 350 ml/min a UV de 260 nm]. Se aísla el segundo isómero en eluir para proporcionar el compuesto del título enriquecido enantioméricamente (35 % de rendimiento): EM (m/z): 327, 329 (M + 1).

Preparación 15

terc-Butiléster del ácido (S)-[4-(2,4-difluoro-5-pirimidin-5-il-fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2-il]-carbámico

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A una solución a 100 ºC de (S)-4-(5-bromo-2,4-difluorofenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-amina (12,6 g, 29,9 mmol, 1 equiv) en 1,2-dimetoxietano:agua:etanol (15:7:5, 300 ml), se añade un ácido pirimidin-5-borónico (25 g, 203 mmol, 6,8 equiv), seguido de carbonato de cesio (58 g, 180 mmol, 6 equiv) y cloruro de bis(trifenilfosfin)paladio

(II) (4,2 g, 6,0 mol, 0,2 equiv). Después de 40 minutos, se enfría la reacción hasta la temperatura ambiente, se diluye

25 con agua y se extrae con acetato de etilo. Se seca la fase orgánica sobre sulfato de magnesio, se filtra y se concentra a presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente escalonado de hexanos:acetato de etilo (7:3) a hexanos:acetato de etilo (1:1), dando el compuesto del título (67 % de rendimiento): EM (m/z) : 421 (M + 1).

Los siguientes compuestos de la Tabla 8 se preparan esencialmente como se describe en la preparación del terc30 butiléster del ácido (S)-[4-(2,4-difluoro-5-pirimidin-5-il-fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2-il]-carbámico .

Tabla 8

Prep. Nº: Denominación química Datos físicos EM (m/z)

15a: (S)-N-{4-[3-(5-Metoxi-piridin-3-il)-fenil]-4-metil-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin2-il}-acetamida 356 (M+1)

15b: (S)-N-(4-(3-(5-cloro-2-fluoropiridin-3-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3tiazin-2-il)acetamida 378 (M+1)

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(Continuación)

Prep. Nº: Denominación química Datos físicos EM (m/z)

15c: terc-Butiléster del ácido (S)-[4-(4-fluoro-3-pirimidin-5-il-fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H[1,3]tiazin-2-il]-carbámico 403 (M+1)

15d: terc-Butiléster del ácido (S)-[4-(2-fluoro-5-pirimidin-5-il-fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H[1,3]tiazin-2-il]-carbámico 403 (M+1)

15e: (S)-N-[4-Metil-4-(3-pirimidin-5-il-fenil)-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2il]-acetamida 327 (M+1)

15f: terc-Butiléster del ácido (S)-{4-[4-fluoro-3-(2-fluoro-piridin-3-il)-fenil]-4-metil-5,6dihidro-4H-[1,3]tiazin-2-il}-carbámico 420 (M+1)

15g: terc-Butiléster del ácido (S)-{4-[2,4-difluoro-5-(2-fluoro-piridin-3-il)-fenil]-4-metil-5,6dihidro-4H-[1,3]tiazin-2-il}-carbámico 438 (M+1)

15h: (S)-terc-Butil-4-(2,4-difluoro-5-(5-fluoropiridin-3-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3tiazin-2-ilcarbamato 438 (M+1)

15i: (S)-4-(2-Cloro-5-(5-cloro-2-fluoropiridin-3-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H1,3-tiazin-2-amina1 370, 372 (M+1)

15j: N-{4-[3-(5-Metoxi-piridin-3-il)-fenil]-4-metil-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2-il} -acetamida 356 (M+1)

15k: (S)-N-(4-(3-(2-Fluoropiridin-3-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2il)acetamida 344 (M+1)

1 El grupo t-butoxicarbonilo se escindió en condiciones de reacción.

Preparación 16

(S)-4-(3-(2-fluoropiridin-3-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-amina

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5 A una solución de (S)-N-(4-(3-(2-fluoropiridin-3-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-il)acetamida (450 mg, 1,3 mmol) en metanol (40 ml), se añade una solución de K2CO3 (210 mg, 1,5 mmol) en metanol:agua (2:1, 15 ml). Se agita la reacción a temperatura ambiente durante 6 h. Se retira el disolvente a presión reducida y se disuelve el residuo en acetato de etilo. Se lava la capa de acetato de etilo con agua y solución acuosa saturada de NaCl, se seca sobre sulfato de sodio, se filtra y se concentra a presión reducida, dando un residuo. El residuo se purifica

10 usando cromatografía en columna SCX, dando el compuesto del título (rendimiento del 65 %): EM (m/z): 302 (M + 1).

Preparación 17

(S)-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-amina

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15 A una solución de (S)-terc-butil-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-ilcarbamato (1,1 g, 2,7 mmol) y metanol (10 ml), se añade ácido trifluoroacético (10 ml). Se calienta la mezcla de reacción a 60 ºC.

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Después de 15 h, se elimina el disolvente a presión reducida. Se añade agua al residuo resultante y se basifica la mezcla con bicarbonato de sodio saturado. Se extrae la fase acuosa básica con diclorometano. Se separa la fase orgánica, se seca sobre sulfato de sodio, se filtra y se retira el disolvente a presión reducida, dando el compuesto del título (rendimiento del 62 %): EM (m/z): 303, 305 (M + 1).

Preparación 18

(S)-Ν-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-il)acetamida

A una solución de (S)-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-amina (550 mg, 1,8 mmol, 1,0 equiv) en tetrahidrofurano (20 ml), se añade piridina (720 mg, 9,0 mmol, 5 equiv) y anhídrido de ácido acético (220 mg, 2,2 mmol, 1,2 equiv). Después de 10 minutos, se vierte la reacción en agua y se extrae la mezcla acuosa con diclorometano. Se separa la fase orgánica y se lava con HCl 1 N y solución acuosa saturada de NaCl, se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y se concentra a presión reducida, dando el compuesto del título (83 % del rendimiento): EM (m/z) 345, 347 (M + 1).

Preparación 19

(S)-terc-butil-4-(4-fluoro-3-(pirazin-2-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-ilcarbamato

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Se irradia una solución de terc-butiléster de ácido (S)-[4-(3-bromo-4-fluoro-fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2il]carbámico (100 mg, 250 mol, 1 equiv), tetraquis(trifenilfosfin)paladio (14 mg, 12,40 mol, 0,05 equiv.) y 2tributilestanilpirazina (96 mg, 250 mol, 1 equiv) en dioxano (3 ml) en un horno de microondas de calidad de laboratorio a una temperatura de 130 ºC y se mantiene durante 20 minutos. Se elimina el disolvente a presión reducida y el residuo se purifica por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de rampa de hexano a hexano:acetato de etilo (1:4) de 20 min, dando el compuesto del título (rendimiento del 14 %, pureza del 90 % según lo determinado por EMCL): EM (m/z): 403 (M+1).

Preparación 20

(S)-N-(4-(4-Fluoro-3-(3-fluoropirazin-2-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-il)acetamida

A una solución de (S)-N-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-il)acetamida (500 mg, 1,5 mmol, 1 equiv), 2-fluoro-3-(tributilestanil)pirazina (1,7 g, 4,3 mmol, 3,0 equiv) en tolueno (15 ml), se añade cloruro de bis(trifenilfosfin)paladio (II) (51 mg, 72 mol, 0,05 equiv.) y cloruro de litio (92 mg, 2,2 mmol, 1,5 equiv). Se irradia la reacción en un horno de microondas de calidad de laboratorio a una temperatura de 130 ºC y se mantiene durante 3 h. Se elimina el disolvente a presión reducida y se purifica el residuo por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de rampa de hexano a hexano:acetato de etilo (1:1) de 20 min, dando el compuesto del título (rendimiento del 31 %): EM (m/z): 363 (M + 1).

El siguiente compuesto de la Tabla 9 se prepara esencialmente de acuerdo con la preparación de (S)-N-(4-(4-fluoro3-(3-fluoropirazin-2-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2-il)acetamida.

Tabla 9

Prep. Nº: Denominación química Datos físicos EM (m/z)

20a: (S)-N-(4-(2,4-difluoro-5-(3-fluoropirazin-2-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3tiazin-2-il)acetamida 381 (M+1)

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Preparación 27

(S)-3-(3-Bromo-fenil)-N-metoxi-N-metil-3-(R)-(2-metil-propan-2-sulfinilamino)-butiramida

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A una solución a -78 ºC de clorhidrato de N,O-dimetilhidroxilamina (12 g, 130 mmol, 5,0 equiv) en THF (200 ml), se

5 añade n-butil-litio (100 ml, 250 mmol, 10 equiv) (2,5 M en hexanos) mediante una cánula. Se agita la reacción durante 15 minutos y se añade una solución de metiléster de ácido (S)-3-((R)-2-metil-propan-2-sulfinilamino)-3-fenilbutírico (9,5 g, 25 mmol, 1,0 equiv) en THF (50 ml) gota a gota. Se calienta la reacción hasta -60 ºC, y se mantiene a esa temperatura durante 1 h. Se inactiva la reacción con solución acuosa saturada de cloruro de amonio, se diluye con agua y se extrae con acetato de etilo. Se extrae la fase orgánica con agua, solución acuosa saturada de NaCl,

10 se seca sobre sulfato de sodio, se filtra y se concentra bajo presión reducida, dando el compuesto del título (rendimiento del 60 %): EM (m/z): 405, 407 (M+1).

Los siguientes compuestos de la Tabla 10 se preparan esencialmente como se ha descrito en la preparación de (S)3-(3-bromo-fenil)-N-metoxi-N-metil-3-(R)-(2-metil-propan-2-sulfinilamino)-butiramida.

Tabla 10

Prep. Nº: Denominación química Datos físicos EM (m/z)

27a: (S)-3-(3-bromo-4-fluorofenil)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-N-metoxi-Nmetilbutanamida 423, 425 (M+1)

27b: (S)-3-(5-bromo-2,4-difluorofenil)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-N-metoxi-Nmetilbutanamida 441, 443 (M+1)

15 Preparación 28 [(S)-1-(3-Bromo-fenil)-1-metil-3-oxo-butil]-amida de ácido (R)-2-metil-propan-2-sulfínico

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A una solución a -78 ºC de (S)-3-(3-bromo-fenil)-N-metoxi-N-metil-3-(R)-(2-metil-propan-2-sulfinilamino)-butiramida (1,5 g, 3,7 mmol; 1,0 equiv) en THF (53 ml), se añade bromuro de metilmagnesio (6,2 ml, 18,5 mmol, 5,0 equiv. y se

20 deja que la reacción se caliente hasta la temperatura ambiente. Después de 1 h, la reacción se enfría hasta -78 ºC y se inactiva con solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se diluye la mezcla con agua y se extrae con acetato de etilo. Se seca la fase orgánica sobre sulfato de sodio, se filtra y se concentra a presión reducida, dando el compuesto del título (> 95 % de rendimiento): EM (m/z) 360, 362 (M + 1).

Los siguientes compuestos de la Tabla 11 se preparan esencialmente como se ha descrito en la preparación de [(S)25 1-(3-bromo-fenil)-1-metil-3-oxo-butil]-amida de ácido (R)-2-metil-propan-2-sulfínico.

Tabla 11

Prep. Nº: Denominación química Datos físicos EM (m/z)

28a: (R)-N-((S)-2-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-oxopentan-2-il)-2-metilpropan-2sulfinamida 378, 380 (M+1)

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(Continuación)

Prep. Nº: Denominación química Datos físicos EM (m/z)

7: Diclorhidrato de (S)-4-(2-fluoro-5-pirimidin-5-il-fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2ilamina 303 (M+1)

8: Clorhidrato de (S)-4-[4-fluoro-3-(2-fluoro-piridin-3-il)-fenil]-4-metil-5,6-dihidro-4H[1,3]tiazin-2-ilamina12 320 (M+1)

9: Clorhidrato de (S)-4-(2,4-difluoro-5-(2-fluoropiridin-3-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3tiazin-2-amina13 338 (M+1)

10: Clorhidrato de (S)-4-(2-cloro-5-(5-cloro-2-fluoropiridin-3-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H1,3-tiazin-2-amina14 370, 372 (M+1)

11: Diclorhidrato de (S)-4-(2,4-difluoro-5-(5-fluoropiridin-3-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H1,3-tiazin-2-amina 338 (M+1)

12: Diclorhidrato de (S)-4-(4-fluoro-3-(pirazin-2-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-2amina13 303 (M+1)

13: (+/-) ((4S,6S)-2-amino-4-metil-4-(3-(pirimidin-5-il)fenil)-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-6il)metanol 315 (M+1)

14: ((4S,6S)-2-amino-4-metil-4-(3-(pirimidin-5-il)fenil)-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin-6-il)metanol 315 (M+1)

15: Diclorhidrato de (4S,6R)-4,6-dimetil-4-(3-(pirimidin-5-il)fenil)-5,6-dihidro-4H-1,3-tiazin2-amina13 299 (M+1)

16: Diclorhidrato de (4S,6R)-4-(2,4-difluoro-5-(pirimidin-5-il)fenil)-4,6-dimetil-5,6-dihidro4H-1,3-tiazin-2-amina13 335 (M+1)

17: (+/-) 2-((4S,6S)-2-amino-4-(4-fluoro-3-(pirimidin-5-il)fenil)-4-metil-5,6-dihidro-4H-1,3tiazin-6-il)propan-2-ol 361 (M+1)

12Purificado mediante cristalización en acetonitrilo 13Purificado mediante HPLC preparativa en fase inversa, método A14HCl 1 M en éter usado en lugar de HCl (g)

Ejemplo 18

Diclorhidrato de (S)-4-metil-4-(3-pirimidin-5-il-fenil)-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2-ilamina

Se agita una solución de (S)-N-[4-metil-4-(3-pirimidin-5-il-fenil)-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2-il]-acetamida (2,7 g,

5 8,3 mmol, 1,0 equiv) en cloruro de hidrógeno 5 Ν (50 ml, 250 mmol, 30 equiv) a 100 ºC durante 2 h. Se enfría la reacción y se retiran las sustancias volátiles a presión reducida. El residuo resultante se disuelve en agua y se extrae con acetato de etilo. Se neutraliza la fase acuosa con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrae con acetato de etilo. Se seca la fase orgánica sobre sulfato de sodio, se filtra y se concentra a presión reducida, dando un residuo. El residuo se filtra a través de un tapón de gel de sílice y se lava con acetato de etilo. Se

10 lava más el tapón de gel de sílice con acetato de etilo que contiene acetato de etilo e isopropilamina al 10 %. Se recoge el lavado de isopropilamina al 10 % en acetato de etilo se recoge y se elimina el disolvente a presión reducida. Se disuelve la amina libre resultante en una solución de 100 ml de agua que contiene 14 ml de HCl 1 N. Se liofiliza la solución resultante, dando el compuesto del título (rendimiento del 81 %): EM (m/z): 285 (M+1).

Los siguientes compuestos de la Tabla 24 se preparan esencialmente como se ha descrito en la preparación del 15 diclorhidrato de (S)-4-metil-4-(3-pirimidin-5-il-fenil)-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2-ilamina.

Tabla 24

Prep. Nº: Denominación química Datos físicos EM (m/z)

19: Diclorhidrato de (S)-4-[3-(5-metoxi-piridin-3-il)-fenil]-4-metil-5,6-dihidro-4H-[1,3]tiazin-2ilamina15 314 (M+1)

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Tabla 29

Estructura: BACE ELISA de A(1-40) en HEK 293 Swe ELISA de A(1-42) en HEK 293 Swe ELISA de A-(140) en neuronas de PDAPP ELISA de A-(142) en neuronas de PDAPP

116.000: 21.400 35.300

28.000: 13.200 16.400 7.820 10.400

>100.000: 16.500 23.700 28.100 46.800

17Todos los datos de la Tabla 29 se presentan como CI50 (nM)

Los compuestos de la presente invención se formulan preferentemente como composiciones farmacéuticas administradas por una variedad de vías. Lo más preferentemente, dichos compuestos son para la administración oral. Dichas composiciones farmacéuticas y procedimientos de preparación de las mismas son bien conocidos en la

5 técnica. Véase, por ejemplo, “Remington: The Science and Practice of Pharmacy” (A. Gennaro, et. al., eds., XIX ed., Mack Publishing Co., 1995).

En general, los compuestos de Fórmula I son eficaces en un amplio intervalo de dosis. Por ejemplo, las dosis diarias normalmente están en el intervalo de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal. En algunos casos, los niveles de dosis por debajo del límite inferior del intervalo mencionado anteriormente pueden ser 10 más que adecuados, mientras que, en otros casos, se pueden emplear dosis aún mayores sin causar ningún efecto secundario perjudicial y, por lo tanto, el intervalo de dosis anterior no pretende limitar el alcance de la invención de ningún modo. Se entenderá que la cantidad de compuesto realmente administrada será determinada por un médico, a la luz de las circunstancias pertinentes, entre las que se incluyen la afección que se vaya a tratar, la vía de administración seleccionada, el compuesto o compuestos administrados en realidad, la edad, el peso y la respuesta

15 de cada paciente, y la gravedad de los síntomas del paciente.

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Claims

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