ES2552311T3

ES2552311T3 - Derivados heterocíclicos

Info

Publication number: ES2552311T3
Application number: ES09754921.6T
Authority: ES
Inventors: Sung Oh Ahn; Chan Hee Park; Jun Hwan Im; Soon Ok Lee; Kyoung June Lee; Seong Wook Cho; Kwang Seok Ko; Sun Young Han; Won Il Lee
Original assignee: C&C Research Laboratories
Current assignee: C&C Research Laboratories
Priority date: 2008-03-31
Filing date: 2009-03-31
Publication date: 2015-11-27
Anticipated expiration: 2029-03-31
Also published as: PT2266989E; US8394792B2; CA2718709C; JP5314123B2; IL208203A0; KR101250297B1; IL208203A; CN102015726B; TWI500622B; CN102015726A; BRPI0909691A8; HUE026261T2; CA2718709A1; SI2266989T1; EP2266989B1; TWI613203B; EA201071144A1; AU2009252166B9; HRP20151098T1; TW201522347A

Abstract

Un compuesto derivado heterocíclico que tiene la Fórmula I:**Fórmula** en el que, en la Fórmula I, cada uno de X1, X2 y X3 es independientemente carbono o nitrógeno, con la condición de que al menos uno de X1, X2, y X3 sea nitrógeno, cada uno de R1, R2, R3 y R4 pueden ser iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre el grupo que consiste en hidrógeno; hidroxi; alquilo C1-C6; alquenilo C2-C7; alquinilo C2- C7; hidroxialquilo C1-C6; haloalquilo C1-C6; alcoxi C1-C6; haloalcoxi C1-C6; halógeno; fenilo; ciano; nitro; amino; un grupo ácido carboxílico; un grupo ácido fosfórico; N-óxido; amida; alquilamida C1-C6; aldehído; ácido hidroxámico; alquilsulfuro C1-C6; alquiltioxo C1-C6; alquilsulfonilo C1-C6; oximaalquilo C1-C6; aminoalquilo C1-C6; alquilcarbonilalquilo C3-C8; alcanoílo C2-C7; alcoxicarbonilo C2-C7; alcanoiloxi C2-C7; mono o bicicloalquilo C3-C12; cicloalquilalquilo C4-C12; arilo C6-C12; un mono o policarbociclilo C3-C12 saturado o insaturado; y un mono o poliheterociclilo saturado o insaturado de entre 3 y 12 miembros que contiene entre 1 y 3 heteroátomos, con la condición de que cuando X1 es nitrógeno, R2 no existe; cuando X2 es nitrógeno, R3 no existe; y cuando X3 es nitrógeno, R4 no existe, o cada uno de los pares R1-R2, R2-R3 y R3-R4 pueden estar independientemente condensados para formar un carbociclo o un heterociclo saturado o insaturado de entre 5 y 11 miembros, cada uno de R5, R6, R7 y R8 pueden ser iguales o diferentes y se seleccionan independientemente de entre el grupo que consiste en hidrógeno; hidroxi; alquilo C1-C6; alquenilo C2-C7; alquinilo C2-C7; hidroxialquilo C1-C6; haloalquilo C1-C6; alcoxi C1-C6; haloalcoxi C1-C6; alcanoílo C2-C7; un grupo ácido fosfórico; N-óxido; amida; alquilamida C1-C6; aldehído; ácido hidroxámico; alquilsulfuro C1-C6; alquiltioxo C1-C6; alquilsulfonilo C1-C6; oximaalquilo C1-C6; aminoalquilo C1-C6; alquilcarbonilalquilo C3-C8; halógeno; fenilo; ciano; nitro; amino; y un grupo ácido carboxílico, o R5 y R6 junto con un átomo de carbono al que están unidos pueden formar un grupo carbonilo (C>=O) o un grupo tioxo (C>=S), o R7 y R8 junto con un átomo de carbono al que están unidos pueden formar un grupo carbonilo (C>=O) o un grupo tioxo (C>=S), L puede formar un grupo carbonilo (-C(>=O)-), un grupo sulfonilo (-S(>=O)2-), alquilcarbonilo C1-C6, carbonilalquilo C1- C6 o un grupo tioxo (-C(>=S)-), e Y se selecciona de entre el grupo que consiste en un mono o policarbociclilo C3-C12 saturado o insaturado sustituido con R9, R10 y R11; y un mono o poliheterociclilo saturado o insaturado de entre 3 y 12 miembros que contiene entre 1 y 3 heteroátomos y que está sustituido con R9, R10 y R11, en la que cada uno de R9, R10 y R11 se selecciona independientemente de entre el grupo que consiste en hidrógeno; hidroxi; alquilo C1-C6; alquenilo C2-C7; alquinilo C2-C7; hidroxialquilo C1-C6; haloalquilo C1-C6; alcoxi C1-C6; haloalcoxi C1-C6; halógeno; alquilsulfuro C1-C6; alquiltioxo C1-C6; ácido hidroxámico; fenilo; ciano; nitro; amino; un grupo ácido carboxílico; amida; alquilamida C1-C6; alcanoílo C2-C7; aldehído; éster C3-C8; esteroxi C3-C8; alquilsulfonilo C1-C6; oximaalquilo C1-C6; aminoalquilo C1-C6; alquilcarbonilalquilo C3-C8; un grupo ácido fosfórico; y N-óxido, con la condición de que cuando Y es fenilo, i) al menos uno de R9, R10 y R11 es hidroxi o ii) todos los R9, R10 y R11 son distintos a hidrógeno si ninguno de R9, R10 y R11 es hidroxi, y cuando Y es piridinilo, al menos uno de R9, R10 y R11 no es hidrógeno, o un racemato o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

Description

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Como ejemplos representativos del compuesto de la Fórmula I de acuerdo con la presente invención, pueden mencionarse los siguientes compuestos:

(3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 1); (3,5-dibromo-4-metoxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 2); sal del ácido bromhídrico de la (3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 3); (3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 4); (3,5-dibromo-4-metoxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 5); (3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 6); (3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-(6-metil-2,3-dihidro-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 7); (3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-(2,2-dimetil-2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 8); (3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-(7-ciclopropil-2,3-dihidro-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 9); sal del ácido bromhídrico de la (3-cloro-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 10); sal del ácido bromhídrico de la (3-bromo-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 11); (2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-(4-hidroxi-3-trifluorometil-fenil)-metanona (compuesto 12); sal del ácido bromhídrico de la (3,5-dicloro-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 13); (3-cloro-4-hidroxi-5-nitro-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 14); sal del ácido bromhídrico de la (3,5-dicloro-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 15); sal del ácido bromhídrico de la (3-bromo-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 16); sal del ácido bromhídrico de la (3-cloro-4-hidroxi-5-nitro-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 17); sal del ácido bromhídrico de la (3-cloro-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 18); (2,3-dihidro-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)-(4-hidroxi-3-trifluorometil-fenil)-metanona (compuesto 19); (3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-(7-fenil-2,3-dihidro-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 20); 2,6-dicloro-4-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-sulfonil)-fenol (compuesto 21); (3,5-dibromo-4-metoxi-fenil)-(7-trifluorometil-2,3-dihidro-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 22 1); (3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-(7-trifluorometil-2,3-dihidro-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 22 2); ácido 2,5-dibromo-4-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-carbonil)-benzoico (compuesto 23); metil éster del ácido [2,6-dibromo-4-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-carbonil)-fenoxi]-acético (compuesto 24); (7-bromo-2,3-dihidro-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-1-il)-(3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-metanona (compuesto 25); (2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-(3-fluoro-4-hidroxi-fenil)-metanona (compuesto 26); (3,5-dibromo-4-metoxi-fenil)-(7-metil-2,3-dihidro-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 27 -1); (3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-(7-metil-2,3-dihidro-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 27 -2); (3,5-difluoro-4-metoxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 28); (3,5-difluoro-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 29); (5-cloro-2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-(3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-metanona (compuesto 30); (2,6-dicloro-piridin-4-il)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 31); (2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-(6-hidroxi-piridin-3-il)-metanona (compuesto 32); sal del ácido clorhídrico de(3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 33); (3-cloro-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 34); 4-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-sulfonil)-fenol (compuesto 35-1); 2,6-dibromo-4-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-sulfonil)-fenol (compuesto 35-2); (3-cloro-4-hidroxi-5-nitro-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 36); (3-cloro-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 37); (3-bromo-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 38); (3,5-dicloro-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-metanona (compuesto 39); (3-bromo-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 40); (3,5-dicloro-4-hidroxi-fenil)-(2,3-dihidro-pirido[3,4-b][1,4]oxazin-1-il)-metanona (compuesto 41); 2-(3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-1-(2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-etanona (compuesto 42); (2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-(3-metoxi-isoxazol-5-il)-metanona (compuesto 43); (2,3-dihidro-pirido[4,3-b][1,4]oxazin-4-il)-(3-hidroxi-isoxazol-5-il)-metanona (compuesto 44); (3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-[7-(4-trifluorometil-fenil)-2,3-dihidro-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-1-il]-metanona (compuesto 45); (3,5-dibromo-4-hidroxi-fenil)-[7-(2-trifluorometil-fenil)-2,3-dihidro-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-1-il]-metanona (compuesto 46);

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Ejemplo de síntesis de intermedio (1)

Síntesis de 5-metil-2,3-dihidro-1H-pirido[2,3-b][1,4] oxazina

5 a) Síntesis de 5-metil-1H-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-2-ona

Se disolvió 3-amino-5-metil-piridin-2-ol (1,32 g, 10,6 mmol) en 50 ml de N,N-dimetilformamida anhidra en una atmósfera de nitrógeno, y a la misma se añadió gota a gota una solución de cloruro de cloroacetilo (1,02 ml, 10 12,72 mmol) a la temperatura ambiente. Después de agitar durante 30 minutos, a la misma se añadió gota a gota carbonato de potasio (3,7 g, 26,5 mmol) a la temperatura ambiente, y la mezcla de reacción se calentó a 100 ºC y después se agitó durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente y la reacción se inactivó mediante la adición de agua. La capa orgánica se extrajo con acetato de etilo y la capa orgánica combinada se lavó con agua y una solución salina saturada, se secó sobre sulfato de sodio anhidro (Na2SO4), se filtró y se

15 evaporó a presión reducida, para obtener un sólido de color amarillo pajizo (424 mg). El sólido resultante se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz); δ = 10,2 (s a, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 4,74 (s, 2H), 2,00 (s, 3H). EM (ESI); 165,0 (M+ + 1).

20 b) Síntesis de 5-metil-2,3-dihidro-1H-pirido[2,3-b][1,4] oxazina

Se disolvió 5-metil-1H-pirido[2,3-b][1,4]oxazin-2-ona (424 mg, 2,58 mmol) en 20 ml de tetrahidrofurano anhidro en una atmósfera de nitrógeno, y después se enfrió hasta 0 ºC. A la misma se añadió gota a gota hidruro de litio y aluminio 1,0 M disuelto en tetrahidrofurano (5,16 ml, 5,16 mmol) y después se agitó durante 30 minutos. La 25 temperatura de la reacción se elevó hasta la temperatura ambiente y después se agitó durante 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió de nuevo hasta 0 ºC y a la misma se añadieron gota a gota agua (0,2 ml), una solución de hidróxido sódico al 10 % (0,4 ml) y agua (0,6 ml), por este orden, y se agitó vigorosamente a la temperatura ambiente durante 1 hora. El precipitado formado se filtró y se lavó con un exceso de acetato de etilo. El filtrado se lavó con agua y una solución salina saturada, se secó sobre sulfato de sodio anhidro (Na2SO4), se filtró y se evaporó

30 a presión reducida para obtener la 5-metil-2,3-dihidro-1H-pirido[2,3-b1[1,4] oxazina en forma de un sólido de color blanco (100 mg, 26 % en dos etapas).

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El filtrado se lavó con agua y una solución salina saturada, se secó sobre sulfato de sodio anhidro (Na2SO4), se filtró y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó mediante una cromatografía en columna sobre sílice eluyendo con un disolvente de diclorometano:metanol = 50:1. Las fracciones que contienen el producto se recogieron y se evaporaron para obtener un sólido de color amarillo (385 mg, 70 %). RMN 1H (DMSO-d6, 300 MHz); δ = 7,47 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 5,81 (s, 1H), 4,19 (m, 2H), 6,72 (m, 2H).

Ejemplo experimental 1: ensayo de inhibición de la actividad de recaptación del urato a través del hURATI

[Sobreexpresión del hURAT1 mediante una transfección temporal en una línea celular de riñón humana]

Se incubó una línea celular de riñón humana, la HEK293, mediante el uso de medio OptiMEM en una placa de 100 mm a (3 x 106 células) durante 24 horas. Con objeto de la expresión del hURAT1, se preparó una solución de mezcla de transfección (18 µl de Fugene6:6 µg de ADN de hURAT1 = 3:1, en 600 µl de medio OptiMEM / placa) y se mantuvo durante 15 minutos a la temperatura ambiente. En cada placa se inyectaron 600 µl de la solución de mezcla y después se incubaron a 37 ºC en una estufa de incubación celular durante 24 horas. La línea celular HEK293 con el hURAT1 sobreexpresado se tripsinizó y se recogieron las células. Las células se resuspendieron en medio y se sembraron a 6 x 105 células/pocillo, y se incubaron durante 24 horas en placas de 24 pocillos cuya superficie fue recubierta con Poli-D-Lisina.

[Ensayo de transporte del ácido úrico en la línea celular HEK293 con el hURAT1 sobreexpresado]

Cada compuesto de la presente invención preparado en los ejemplos se disolvió en DMSO en forma de una solución madre de muestra concentrada 1.000 veces con varias concentraciones para analizar. Para cada concentración se diluyó la solución de madre de muestra en PBS (1 µl en 800 µl de PBS) en forma de una muestra de trabajo concentrada 1,25 veces, para obtener unas concentraciones finales de 0,01, de 0,1, de 1 y de 10 µM. La línea celular HEK293 con el hURAT1 sobreexpresado se lavó con 1 ml de PBS. Después del lavado, se desechó el PBS y la solución de muestra se diluyó 1,25 veces con PBS. Se llevó a cabo una preincubación de las células con 200 µl/pocillo de la solución de muestra elaborada anteriormente durante 30 minutos a 37 ºC en estufa de incubación celular. Después de la incubación, cada pocillo se trató con 50 µl de PBS que contiene ácido [14C]-úrico 500 µM (100 µM final de ácido úrico/pocillo). Las células se incubaron durante 2 minutos. Las células se lavaron dos veces con 1 ml de PBS.

Para medir la captación de ácido úrico, cada pocillo se trató con 150 µl de tampón M-per (PIERCE) y se mantuvo a 37 ºC en una estufa de incubación celular durante 30 minutos para elaborar lisados celulares. Se transfirieron 150 µl de los lisados celulares a un tubo de ensayo y se añadieron 4 ml de coctel de centelleo. El valor de CPM del ácido [14C]-úrico absorbido en las células fue detectado mediante el uso de un contador de centelleo líquido. La CI50 para la inhibición de la captación del ácido úrico por parte de cada muestra de prueba se analizó mediante un procesado numérico computacional. Los resultados se muestran en la Tabla 1.

[Tabla 1] Nivel de inhibición de la recaptación de ácido úrico

Compuesto Nº: CI50 (µM) hURAT Compuesto Nº CI50 (µM) hURAT Compuesto Nº CI50 (µM) hURAT

1: 0,079 22 -1 0,0888 49 0,311

2: 0,1365 22 -2 0,0043 50 0,0044

3: 0,0165 24 0,3635 51 0,0115

4: 0,023 25 0,0073 52 0,0103

5: 0,1745 27 -1 0,036 53 0,0562

6: 0,0565 27 -2 0,012 55 0,0488

7: 0,3 29 0,2346 58 0,7417

8: 0,353 30 0,028 61 0,002

9: 0,02 35 -2 0,277 62 0,1284

10: 0,334 36 0,1745 63 0,0123

11: 0,175 37 0,2117 64 0,007

12: 0,0408 38 0,0964 65 0,003

13: 0,337 39 0,0884 66 0,0358

14: 0,1255 41 0,3755 67 0,0078

15: 0,458 42 0,2 68 0,0232

16: 0,93 45 0,0197 69 0,0331

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Compuesto Nº: CI50 (µM) de la CYP2C9 Compuesto Nº CI50 (µM) de la CYP2C9 Compuesto Nº CI50 (µM) de la CYP2C9

3: 24,5 30 > 40 52 > 20

4: 24,3 31 > 20 53 10,27

6: 3,05 32 > 20 54 > 6

7: > 20 34 19,58 55 8,87

8: > 20 35 -1 > 20 56 > 20

9: > 20 35 -2 > 20 57 > 20

10: > 60 36 1,93 58 > 20

11: > 60 37 > 20 59 > 20

12: > 60 38 > 20 60 > 20

13: > 60 39 > 20 61 1,23

14: 16,56 40 15,09 62 > 20

15: 4,5 41 > 20 63 1,11

16: 3,5 42 18,39 64 5,54

18: 9,7 43 > 20 65 12,43

19: 6,8 44 > 20 66 1,34

20: 5,2 45 1,18 68 1,39

21: 1,11 46 1,09 69 > 20

22 -1: 13,42 47 -1 > 20 70 10,79

22 -2: 9,45 47 -2 > 20 71 > 20

24: > 20 48 1,68 74 16,71

25: > 20 49 > 20 75 11,58

27 -1: > 20

Ejemplo experimental 3: ensayo de la solubilidad según el pH

[Primera solución] 5 Se disolvieron 2,0 g de cloruro de sodio en 7,0 ml de ácido clorhídrico y agua para crear el volumen total de

1.000 ml. Esta solución era incolora y transparente. Su pH era de aproximadamente 1,2.

[Segunda solución]

10 A 250 ml de una solución de dihidrogenofosfato de potasio de 0,2 mol/l se añadieron 118 ml de una solución de hidróxido de sodio de 0,2 mol/l y agua para crear el volumen total de 1.000 ml. Esta solución era incolora y transparente. Su pH era de aproximadamente 6,8.

15 [Experimento]

Para los compuestos de la presente invención preparados en los ejemplos, se prepararon las muestras de prueba de cada una de la primera y la segunda solución con una concentración de 2 mg/ml. Esta solución de muestra de prueba se agitó durante 10 segundos, se le aplicaron ultrasonidos durante 1 minuto y se calentó a 37 ºC durante 2

20 horas. La solución de muestra de prueba caliente se filtró para eliminar los compuestos no disueltos en la misma. A partir de la solución filtrada se tomaron 100 µl de la solución completamente disuelta y se añadieron 100 µl de acetonitrilo a la misma para elaborar la solución de muestra de prueba. Para cada análisis de la solución de muestra de prueba, se midió la solubilidad mediante el uso de una cromatografía líquida. Los resultados del ensayo de solubilidad de la primera y de la segunda solución se muestran en la Tabla 3.

25 [Tabla 3] Solubilidad

Compuesto Nº: Solubilidad (µg/ml) Compuesto Nº Solubilidad (µg/ml)

pH 1,2: pH 6,8 pH 1,2 pH 6,8

1: 56,1 276,8 33 1.576,5 809,5

3: 1.420,1 886,5 35 -2 1.458,1 233,7

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Claims

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