ES2619848T3 - Procedimiento de recuperación de L-treonina de caldo de fermentación de L-treonina usando un agente no disolvente - Google Patents
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Abstract
Un procedimiento de recuperación de L-treonina de un caldo de fermentación de un microorganismo productor de L-treonina, que comprende: separar los cuerpos microbianos del caldo de fermentación que contiene L-treonina obtenido cultivando los microorganismos productores de L-treonina y filtrando el caldo de fermentación separado para obtener un filtrado; concentrar el filtrado; y hacer reaccionar el filtrado concentrado con un agente no disolvente para obtener cristales esféricos de Ltreonina.
Description
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DESCRIPCION
Procedimiento de recuperacion de L-treonina de caldo de fermentacion de L-treonina usando un agente no disolvente
Campo tecnico
La presente invencion se refiere a un procedimiento de recuperacion de L-treonina desde el caldo de fermentacion de un microorganismo productor de L-treonina usando un agente no disolvente y, mas particularmente, a un procedimiento de recuperacion de L-treonina cristalina usando un procedimiento de anegacion en el que el caldo de fermentacion de un microorganismo productor de L-treonina se filtra y el filtrado se concentra y se hace reaccionar con un agente no disolvente para cristalizar L-treonina, a L-treonina cristalina recuperada usando el procedimiento y a un aditivo de piensos que contiene la L-treonina cristalina.
Antecedentes de la tecnica
La L-treonina, que es un aminoacido esencial, se usa principalmente en formulaciones completas de aminoacidos, suplementos nutricionales y similares. Recientemente, se ha usado L-treonina como aditivo para pienso para animales junto con L-lisina y, por tanto, ha aumentado la demanda de L-treonina.
La L-treonina se produce principalmente por fermentacion y concentracion-cristalizacion. Es decir, los cuerpos microbianos se retiran del caldo de fermentacion de microorganismos productores de L-treonina por filtracion o separacion centnfuga, el pH del filtrado obtenido se ajusta, y despues el filtrado de pH ajustado se concentra con disolvente que se retira para recuperar la L-treonina cristalina en forma de una aguja.
Sin embargo, cuando se usa el procedimiento concentracion-cristalizacion, el rendimiento de recuperacion de L- treonina cristalina es bajo. En el procedimiento de concentracion-cristalizacion, para mantener la eficacia de separacion de la pasta cristalina concentrada y la calidad del producto, una solucion o caldo que contiene L-treonina se concentra hasta el intervalo del 50 al 70 % de L-treonina. Como la cristalizacion se realiza calentando el filtrado de un caldo de fermentacion que contiene L-treonina para evaporar un disolvente, la cristalizacion transcurre a una alta temperatura, y una gran cantidad de L-treonina se disuelve en el filtrado, es decir, la solucion madre consiguiente. Por tanto, cuando la pasta cristalina se separa usando un separador, una cantidad relativamente grande de L-treonina permanece en la solucion madre y, por tanto, su recuperacion es imposible.
Ademas, la forma de aguja de la L-treonina cristalina, generada en el procedimiento de concentracion-cristalizacion, crea una gran desventaja. En ausencia de aditivos o agentes no disolventes, la forma cristalina de L-treonina es delgada, larga y con forma de aguja. Por lo tanto, la L-treonina cristalina formada en el procedimiento de concentracion-cristalizacion esta en forma de aguja delgada, con una longitud de aproximadamente 50 a 250 pm. Se produce aglomeracion en la pasta cristalina entre los cristales de L-treonina en forma de aguja y, de ese modo, la viscosidad de la pasta cristalina aumenta, provocando una reduccion en la eficacia de separacion cuando se separan los cristales. Si se disminuye la eficacia de separacion, se disminuye la productividad de L-treonina y permanecen impurezas en los productos de L-treonina y, por tanto, se degrada la calidad del producto. Los cristales de L-treonina en forma de aguja tambien reducen la capacidad de flujo del producto y, por tanto, esto causa un monton de inconvenientes cuando los consumidores usan el producto. Generalmente, los consumidores usan L- treonina como aditivo de pienso para animales. La L-treonina se anade al pienso para animales usando un sistema manual o automatico. En este caso, una reduccion en la capacidad de flujo de la L-treonina causa problemas en el uso de dicho sistema de mezcla manual o automatico de pienso para animales, y esto a menudo conduce a reclamaciones de los consumidores. Ademas, la fuerte tendencia de los cristales de L-treonina en forma de aguja a aglomerarse conduce a conglomeracion y apelmazamiento durante su almacenamiento a largo plazo y transporte. Debido a la aglomeracion, los consumidores a menudo puede que tengan que procesar los productos aglomerados de L-treonina para obtener L-treonina antes de usarlos. En una era de competicion global, cualquier reclamacion de los consumidores y el consecuente dano a la reputacion del producto puede constituir un problema tan grande como debilitar la organizacion de una empresa. Por tanto, la baja capacidad de flujo de los cristales de L-treonina en forma de aguja puede ejercer una seria desventaja.
La publicacion de patente coreana n.° 2000-0013855 divulga un procedimiento de purificacion de L-treonina desde un caldo de fermentacion de L-treonina por recristalizacion. Sin embargo, este procedimiento se realiza en cuatro etapas de modo que el procedimiento es excesivamente complicado con un moton de equipo necesario. Ademas, se usa una torre de resina de intercambio ionico para recuperar la perdida de solucion madre y, por tanto, se usa una gran cantidad de acido, base y agua. Ademas, en todas las etapas de cristalizacion, se usa un procedimiento de concentracion-cristalizacion para formar los cristales de L-treonina en forma de aguja, lo que provoca una baja capacidad de flujo de los productos de L-treonina.
La publicacion de patente coreana n.° 2000-0013854 divulga un procedimiento de purificacion de L-treonina usando electrodialisis. Este procedimiento puede reducir la cantidad de acido, base y agua usada en comparacion con un procedimiento convencional de resina de intercambio ionico. Sin embargo, como la solucion de L-treonina que pasa a traves de un electrodializador se concentra a presion reducida para producir un producto de L-treonina en forma de aguja, la capacidad de flujo del producto es baja. Ademas, en comparacion con el caso de concentrar directamente
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un filtrado de un caldo de fermentacion microbiana, tarda mas de 6 horas en pasar a traves del electrodializador. Por tanto, la productividad del producto de L-treonina es baja.
Los documentos US-A-5 087 566, US-A-5 264 353 y US-A-4 427 774 divulgan procedimientos para la recuperacion de L-treonina desde un caldo de fermentacion que comprende, despues de completarse el cultivo, filtracion o centrifugacion, y recuperacion de L-treonina desde el filtrado resultante por combinacion de tratamiento de intercambio ionico, elucion, concentracion del eluyente y adicion de un agente no disolvente.
Divulgacion de la invencion
Problema tecnico
Por lo tanto, aun existe una necesidad de desarrollar un procedimiento mejorado de recuperacion de L-treonina, que puede resolver los inconvenientes de los consumidores que estan causados por el bajo rendimiento de recuperacion de L-treonina desde caldo de fermentacion, y la baja capacidad de flujo del producto de L-treonina como resultado de las formas de los cristales de L-treonina.
Solucion tecnica
La presente invencion proporciona un procedimiento de recuperacion de L-treonina cristalina desde el caldo de fermentacion de un microorganismo productor de L-treonina por cristalizacion por anegacion.
De acuerdo con la presente invencion, se proporciona un procedimiento de recuperacion de L-treonina desde un caldo de fermentacion de un microorganismo productor de L-treonina, comprendiendo el procedimiento: separar cuerpos microbianos del caldo de fermentacion que contiene L-treonina que se obtiene cultivando un microorganismo productor de L-treonina y filtrando el caldo para obtener un filtrado; concentrar el filtrado; y hacer reaccionar el filtrado concentrado con un agente no disolvente para obtener cristales esfericos de L-treonina.
Los microorganismos usados en fermentacion para preparar el caldo de fermentacion que contiene L-treonina pueden ser cualquier microorganismo que pueda producir L-treonina.
Los microorganismos usados en producir L-treonina pueden ser una cepa transformada de Escherichia coli. La cepa transformada se cultiva en un medio inclinado para obtener un cultivo de siembra y despues, usando el cultivo de siembra, se realizan el precultivo y el cultivo principal para producir finalmente el caldo de fermentacion que contiene L-treonina. El caldo de fermentacion producido puede contener del 5 al 15 % en peso de L-treonina.
La separacion de los cuerpos microbianos desde el caldo de fermentacion de un microorganismo puede realizarse por un procedimiento seleccionado del grupo que consiste en filtracion, separacion centnfuga y tratamiento termico.
El caldo puede filtrarse por filtracion en membrana y, por tanto, se separa en un filtrado y un lodo que contiene los microorganismos. La filtracion en membrana se realiza para retirar los cuerpos microbianos en el caldo de fermentacion. En la filtracion en membrana, los cuerpos microbianos que no pasan a traves de los poros de la membrana y las impurezas adicionales se retiran del caldo de fermentacion y se obtiene solamente una solucion que puede pasar a traves de los poros de la membrana como filtrado. En el presente documento, el residuo que no puede pasar a traves de los poros de la membrana y, por tanto, no se obtiene como filtrado, se menciona como lodo, y el lodo puede desecharse en un procedimiento de purificacion de L-treonina.
Un filtro de membrana usado en la filtracion en membrana puede ser cualquier filtro que pueda separar los cuerpos microbianos del caldo de fermentacion. Las condiciones de funcionamiento del filtro de membrana pueden establecerse facilmente por los expertos en la materia para separar los cuerpos microbianos del caldo de fermentacion. Por ejemplo, el caldo de fermentacion puede calentarse hasta aproximadamente 60 °C con antelacion a una presion transmembrana (TMP) de 1,2 a 1,5. La TMP se refiere a un valor que representa la intensidad de la presion que se aplica en una direccion horizontal contra una solucion que fluye en una direccion vertical, e indica la presion dada al filtro de membrana por la solucion en el filtro de membrana. El tamano de los poros del filtro de membrana usado puede seleccionarse facilmente por los expertos en la materia.
De acuerdo con una realizacion de la presente invencion, puede formarse una capa de gel en aproximadamente 1 hora despues de comenzar la filtracion en membrana. La formacion de la capa de gel es para mantener el flujo permeado del filtrado a un cierto nivel durante un largo periodo de tiempo formando una delgada capa de los cuerpos microbianos sobre una superficie de la membrana de filtracion. Si no se forma una capa de gel, el flujo permeado del filtrado disminuye rapidamente y, por tanto, el filtrado puede que no se obtenga apropiadamente y el filtro de membrana debe lavarse mas frecuentemente. Despues de completarse la formacion de la capa de gel, el filtrado se obtiene a traves del filtro de membrana.
El filtrado obtenido a traves de la filtracion en membrana se concentra. El procedimiento de concentracion es para reducir la carga en procedimientos posteriores disminuyendo la cantidad del filtrado, y el procedimiento de concentracion tambien es para facilitar la formacion cristalina aumentando la concentracion de L-treonina en el filtrado.
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El procedimiento de recuperacion de L-treonina desde el caldo de fermentacion de microorganismos de acuerdo con la presente invencion incluye concentrar el filtrado obtenido separando los cuerpos microbianos productores de L- treonina del caldo de fermentacion.
El procedimiento de concentracion del filtrado obtenido despues de separar los cuerpos microbianos puede realizarse por concentracion a presion reducida. Preferentemente, la concentracion a presion reducida puede realizarse en un concentrador a una temperatura de 65 a 75 °C a una presion de vado de 90,66 a 93,32 kPa (680 a 700 mm-Hg). Las condiciones de la concentracion a presion reducida pueden ajustarse dependiendo del progreso de la concentracion o para ajustar la velocidad del progreso.
De acuerdo con una realizacion de la presente invencion, la cantidad de solidos totales en el filtrado puede ajustarse al intervalo del 20 al 30 % en peso por concentracion.
De acuerdo con una realizacion de la presente invencion, la cantidad de L-treonina en el filtrado concentrado puede estar en el intervalo del 5 al 25 % en peso. Preferentemente, la cantidad de L-treonina en el filtrado concentrado puede estar en el intervalo del 10 al 15 % en peso.
El procedimiento de recuperacion de L-treonina desde el caldo de fermentacion de un microorganismo de acuerdo con la presente invencion incluye hacer reaccionar el filtrado concentrado con un agente no disolvente para obtener cristales de L-treonina.
Los cristales de L-treonina pueden obtenerse del filtrado concentrado que contiene L-treonina por cristalizacion por anegacion usando agente no disolvente. En la cristalizacion por anegacion, se reduce rapidamente la solubilidad de un material diana disuelto en una solucion usando agente no disolvente y, por tanto, se induce facilmente una alta supersaturacion a temperatura ambiente, provocando la recuperacion de los cristales del material diana con un alto rendimiento. La expresion "agente no disolvente" usada en el presente documento se refiere a un disolvente en el que el material diana no es soluble a un nivel detectable.
En una realizacion de la presente invencion, el agente no disolvente puede ser al menos un disolvente seleccionado del grupo que consiste en metanol, etanol, propanol, isopropanol y mezclas de los mismos. Preferentemente, el agente no disolvente usado en la presente invencion puede ser metanol.
La supersaturacion de los cristales diana en la cristalizacion por anegacion puede formarse por dos procedimientos. Uno es anadir una solucion que contiene un material diana (por ejemplo, caldo de fermentacion que contiene L- treonina filtrado y concentrado) al agente no disolvente (por ejemplo, metanol). El otro es anadir el agente no disolvente a la solucion que contiene el material diana. Es decir, cuando el agente no disolvente esta contenido en un cristalizador, el caldo de fermentacion que contiene L-treonina, a anadirse posteriormente al agente no disolvente en el cristalizador, esta contenido en un tanque de almacenamiento de material de partida; o, cuando el caldo de fermentacion que contiene L-treonina esta contenido en el cristalizador, el metanol, a anadirse posteriormente al concentrado de L-treonina en el cristalizador, esta contenido en el tanque de almacenamiento de material de partida. Las FIG. 2A y 2B son imagenes microscopicas que muestran formas cristalinas que dependen del procedimiento de formacion del estado supersaturado en la cristalizacion por anegacion de acuerdo con una realizacion de la presente invencion. La FIG. 2A es una imagen microscopica de un resultante de anegacion obtenido anadiendo metanol como agente no disolvente a un filtrado concentrado, y la FIG. 2B es una imagen microscopica de un resultante de anegacion obtenido anadiendo un filtrado concentrado a metanol como agente no disolvente. Como se ilustra en las FIG. 2A y 2B, cuando el concentrado de L-treonina contenido en el tanque de almacenamiento de material de partida se anade al metanol contenido en el cristalizador a un caudal constante, que es el procedimiento usado para producir el resultante mostrado en la FIG. 2B, pueden obtenerse cristales de L-treonina mas duros y mas esfericos.
De acuerdo con una realizacion de la presente invencion, la reaccion del filtrado concentrado con el agente no disolvente puede realizarse anadiendo el filtrado concentrado al agente no disolvente en el cristalizador.
De acuerdo con una realizacion de la presente invencion, la reaccion del filtrado concentrado con el agente no disolvente puede realizarse anadiendo el agente no disolvente al filtrado concentrado en el cristalizador.
De acuerdo con una realizacion de la presente invencion, el filtrado concentrado o el agente no disolvente puede anadirse al cristalizador a un caudal de 1,0 a 5,0 g/min, y preferentemente de 1,0 a 3,0 g/min. Cuando el caudal es mayor de 3,0 g/min, la intensidad de los cristales resulta debil, mientras que cuando el caudal es inferior de 1,0 g/min, se forman cristales finos. Por tanto, el caudal puede mantenerse preferentemente a 1,0 hasta 3,0 g/min.
Usando el procedimiento descrito anteriormente, se mezcla metanol en el cristalizador y el concentrado de L- treonina para producir un estado supersaturado, que provoca la formacion de cristales esfericos de L-treonina. La FIG. 3 es un grafico que muestra la nucleacion cristalina y la aglomeracion de L-treonina medida usando un analizador Lasentec de tamano de partfculas, para analizar el mecanismo de cristalizacion en la cristalizacion por anegacion. Como se muestra en la FIG. 3, el tamano de las partfculas de los cristales crece durante el periodo de anegacion, y el tamano de las partfculas de los cristales disminuye despues del periodo de anegacion. Por otro lado, la cantidad de partfculas producidas tiende a aumenta de forma continua con el tiempo.
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En la cristalizacion por anegacion, el tanque de almacenamiento en que se pone el material diana a cristalizar o el agente no disolvente y el cristalizador en el que realmente se realiza la cristalizacion se mantienen a una temperatura espedfica. La temperatura, volumen y tasa de inyeccion de reactivos en la cristalizacion por anegacion afectan a la forma, tamano y similares de las partfculas cristalinas.
De acuerdo con una realizacion de la presente invencion, la temperatura del filtrado concentrado que contiene L- treonina puede estar en el intervalo de 60 a 70 °C.
De acuerdo con una realizacion de la presente invencion, la temperatura del agente no disolvente puede estar en el intervalo de 20 a 30 °C.
De acuerdo con una realizacion de la presente invencion, la temperatura del filtrado concentrado que contiene L- treonina puede ser de 70 °C, y la temperatura del agente no disolvente puede ser de 20 °C.
Generalmente, cuando la temperatura del agente no disolvente se aumenta, el tamano del cristalino esferico se aumenta. En una realizacion de la presente invencion, cuando la cristalizacion se realiza anadiendo el concentrado de L-treonina a una temperatura de 70 °C a metanol de una temperatura de 20 °C, pueden obtenerse cristales grandes.
Ademas, en la cristalizacion por anegacion, es importante la cantidad del agente no disolvente usado. Cuando la cantidad del agente no disolvente usado se reduce, se reduce el efecto de reduccion de la solubilidad; por otro lado, cuando la cantidad del agente no disolvente usado es grande, aumenta el coste.
En una realizacion de la presente invencion, el volumen del agente no disolvente usado puede ser de 1,0 a 3,0 veces el volumen del filtrado concentrado. En una realizacion de la presente invencion, cuando la cantidad de metanol usado es de 1,0 a 3,0 veces el volumen del concentrado de L-treonina al 15-25%, se obtiene un rendimiento cristalino optimizado.
En una realizacion de la presente invencion, cuando los cristales esfericos de L-treonina generados por la cristalizacion por anegacion se separan usando un separador y despues se secan, pueden obtenerse cristales esfericos de L-treonina que tienen un contenido de al menos el 98,5% de L-treonina con un rendimiento de recuperacion de al menos el 95%.
En una realizacion de la presente invencion, el procedimiento de recuperacion de L-treonina desde el caldo de fermentacion de un microorganismo usando el agente no disolvente puede incluir adicionalmente separar los cristales de L-treonina que tienen un tamano promedio de partfcula de 80 a 100 pm.
En una realizacion de la presente invencion, el filtrado concentrado se hace reaccionar con el agente no disolvente para obtener L-treonina cristalina, y despues el agente no disolvente se recupera de una solucion madre separada y puede reutilizarse. Como se ilustra en la FIG. 1, los cristales se forman por la reaccion del filtrado concentrado con el agente no disolvente y se separan, y el agente no disolvente en la solucion madre que queda despues de la separacion se recupera por destilacion y puede reutilizarse.
La L-treonina cristalina se recupera del caldo de fermentacion de un microorganismo productor de L-treonina usando el agente no disolvente.
Puede prepararse un aditivo para piensos que contiene la L-treonina cristalina recuperada del caldo de fermentacion de un microorganismo producto de L-treonina usando el agente no disolvente.
La L-treonina cristalina recuperada del caldo de fermentacion usando el agente no disolvente es esferica a diferencia de la L-treonina cristalina recuperada usando un procedimiento de concentracion convencional, tiendo, por tanto, buena capacidad de flujo y alta densidad aparente. Por consiguiente, cuando la L-treonina cristalina de la presente invencion se usa como aditivo para piensos, puede contribuir a una reduccion en los costes de transporte.
En una realizacion de la presente invencion, la L-treonina cristalina recuperada puede tener un contenido de al menos el 98,5%, un contenido de humedad de menos del 1% y una densidad aparente de 930 ± 50 kg/m3.
A partir de ahora en el presente documento, la presente invencion se describira mas espedficamente con referencia a los siguientes ejemplos. Los siguientes ejemplos son solamente con propositos ilustrativos y no pretenden limitar el alcance de la invencion.
Efectos ventajosos
De acuerdo con el procedimiento de recuperacion de cristales esfericos de L-treonina usando el agente no disolvente para reducir la solubilidad de L-treonina en una solucion, los cristales pueden recuperarse reduciendo la solubilidad de la L-treonina en una solucion madre a temperatura ambiente a diferencia de la cristalizacion por concentracion realizada a alta temperatura y, por tanto, puede obtenerse un alto rendimiento de recuperacion cristalina. Ademas, en comparacion con los cristales convencionales de L-treonina con forma de aguja, los cristales esfericos de L-treonina obtenidos usando el agente no disolvente de acuerdo con la presente invencion tienen
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excelente capacidad de flujo, que proporciona un facil envasado y manipulacion, y una alta densidad aparente, que conduce a una reduccion en los costes de transporte, y que potencia de ese modo la satisfaccion de los usuarios.
Descripcion de los dibujos
Las caractensticas y ventajas anteriores y otras de la presente invencion llegaran a ser mas evidentes describiendo en detalle realizaciones ejemplares de las mismas con referencia a los dibujos adjuntos en los que:
la FIG. 1 es un diagrama de flujo esquematico que muestra un procedimiento de recuperacion de L-treonina, de acuerdo con una realizacion de la presente invencion;
las FIG. 2A y 2B son imagenes microscopicas que muestran formas cristalinas que dependen del procedimiento de produccion del estado supersaturado en la cristalizacion por anegacion de acuerdo con una realizacion de la presente invencion, en la que la FIG. 2A es una imagen microscopica de un resultante de anegacion obtenido anadiendo metanol como agente no disolvente a un filtrado concentrado y la FIG. 2B es una imagen microscopica de un resultante de anegacion obtenido anadiendo un filtrado concentrado a metanol como agente no disolvente; y la FIG. 3 es un grafico que muestra el modo en el que prosigue la nucleacion cristalina con el tiempo en la cristalizacion por anegacion, que se observo usando un analizador Lasentec de tamano de partfculas.
Modo para la invencion
Recuperacion de L-treonina cristalina desde caldo de fermentacion que contiene L-treonina
Se cultivo Escherichia coli FTR2533 recombinante que produce L-treonina en un medio de produccion (glucosa 40 g/l, (NH4)2SO4 6-9 g/l, MgSO4 4-6 g/l, KH2PO4 2-4 g/l, FeSO4 80-90 mg/l, MnSO4 10-13 mg/l, CoCh 4-6 mg/l, Na2MoO4 1-3 mg/l, ZnSO4 1-3 mg/l y H3BO3 0,3-0,8 mg/l) a 33 °C durante 65 horas para producir un caldo de fermentacion que contiene L-treonina. Se anadieron 100 l del caldo de fermentacion producido por fermentacion a un filtro de membrana. Despues, el caldo de fermentacion se filtro por el filtro de membrana y se obtuvo un filtrado que tiene un 9,5% de L-treonina y un 12,0% de solidos totales. El filtrado se concentro a presion reducida hasta la cantidad de solidos totales del 24,2 % en peso y despues se almaceno en un tanque de almacenamiento de material de partida a una temperatura constante de 70 °C. Se puso metanol en un volumen 2,0 veces el del concentrado de L-treonina en un cristalizador. Despues, aunque el concentrado de L-treonina en el tanque de almacenamiento de material de partida se anadio al cristalizador a una tasa de 2,0 g/min, el metanol y el concentrado de L-treonina se hicieron reaccionar en el cristalizador; el concentrado de L-treonina y el metanol se mezclaron completamente usando un agitador a 300 rpm. Despues de anadirse la cantidad total del concentrado de L-treonina al cristalizador, la mezcla resultante se agito durante 30 minutos. Despues, se separo una pasta cristalina usando un separador. El cristalino separado se seco en una secadora a una temperatura de 60 °C durante 2 horas para obtener cristales de L-treonina que teman un contenido del 98,5% con un rendimiento de recuperacion del 96%. En el presente documento, el producto de L-treonina tema una densidad aparente de 953,3 kg/m3, un contenido de humedad del 0,4% y un contenido de material inorganico del 0,3%.
Aunque la presente invencion se ha mostrado y descrito particularmente con referencia a realizaciones ejemplares de la misma, los expertos en la materia entenderan que pueden hacerse diversos cambios en la forma y los detalles. Se apreciara que la invencion puede modificarse dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas.
Claims (4)
- REIVINDICACIONES1. Un procedimiento de recuperacion de L-treonina de un caldo de fermentacion de un microorganismo productor de L-treonina, que comprende:separar los cuerpos microbianos del caldo de fermentacion que contiene L-treonina obtenido cultivando los 5 microorganismos productores de L-treonina y filtrando el caldo de fermentacion separado para obtener unfiltrado;concentrar el filtrado; yhacer reaccionar el filtrado concentrado con un agente no disolvente para obtener cristales esfericos de L- treonina.10 2. El procedimiento de la reivindicacion 1, en el que la reaccion del filtrado concentrado con un agente no disolventese realiza anadiendo el filtrado concentrado al agente no disolvente contenido en un cristalizador o anadiendo el agente no disolvente al filtrado concentrado contenido en un cristalizador.
- 3. El procedimiento de la reivindicacion 1, en el que el agente no disolvente se selecciona del grupo que consiste en metanol, etanol, propanol, isopropanol y mezclas de los mismos.15 4. El procedimiento de la reivindicacion 1, en el que el volumen del agente no disolvente usado es de 1,0 a 3,0 vecesel volumen del filtrado concentrado.
- 5. El procedimiento de la reivindicacion 1, en el que una temperatura del filtrado concentrado esta en el intervalo de 60 a 70 °C.
- 6. El procedimiento de la reivindicacion 1, en el que una temperatura del agente no disolvente esta en el intervalo de20 20 a 30 °C.
Applications Claiming Priority (3)
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