ES2642787T3 - Anticuerpos con actividad de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos mejorada, métodos para su producción y uso - Google Patents

Anticuerpos con actividad de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos mejorada, métodos para su producción y uso Download PDF

Info

Publication number
ES2642787T3
ES2642787T3 ES11167183.0T ES11167183T ES2642787T3 ES 2642787 T3 ES2642787 T3 ES 2642787T3 ES 11167183 T ES11167183 T ES 11167183T ES 2642787 T3 ES2642787 T3 ES 2642787T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
antibodies
antibody
glycosylation
cells
adcc activity
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES11167183.0T
Other languages
English (en)
Inventor
Daniel Schindler
Harry M Meade
Timothy Edmunds
John Mcpherson
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Genzyme Corp
LFB USA Inc
Original Assignee
Genzyme Corp
LFB USA Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Genzyme Corp, LFB USA Inc filed Critical Genzyme Corp
Application granted granted Critical
Publication of ES2642787T3 publication Critical patent/ES2642787T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Active legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/283—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against Fc-receptors, e.g. CD16, CD32, CD64
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/04—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from milk
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2875—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF/TNF superfamily, e.g. CD70, CD95L, CD153, CD154
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2878—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/12—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production isolated from milk
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/72—Increased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

El uso de células epiteliales mamarias de mamíferos no humanos para mejorar la unión de la región Fc de un anticuerpo IgG o anticuerpos IgG a un receptor FcγRIII en comparación con un anticuerpo o anticuerpos derivados de un cultivo de células, en donde dichas células son de un mamífero no humano tratado mediante ingeniería genética para expresar el anticuerpo en su leche, y en donde el modelo de glicosilación del anticuerpo se modifica produciendo el anticuerpo o los anticuerpos en las células.

Description

imagen1
imagen2
imagen3
imagen4
imagen5
imagen6
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
el núcleo.
La Fig. 11 demuestra la unión de anticuerpos a células CHO que expresan CD137. La Fig. 11A proporciona los resultados para células CHO sin CD137 (testigo negativo); la Fig. 11B proporciona los resultados para células CHO que expresan CD137. La curva con trazo oscuro en cada gráfica es para la tinción con un anticuerpo anti-DNP irrelevante.
La Fig. 12 ilustra el exterminio potenciado de células CHO que expresan CD137 por parte de un anticuerpo derivado de la leche en un ensayo de ADCC.
La Fig. 13 proporciona resultados de un análisis de biosensor de la unión IgG1-sFcgRIIIa. La Fig. 13a muestra los resultados con el anticuerpo de leche de cabra; la Fig. 13B muestra los resultados con el anticuerpo de leche de ratón; la Fig. 13C muestra los resultados con el anticuerpo del cultivo de células; la Fig. 13D muestra los resultados con anticuerpo aglicosilado de leche de ratón.
La Fig. 14 ilustra un kit que comprende un anticuerpo con actividad de ADCC mejorada.
DESCRIPCIÓN DETALLADA
Se ha descubierto que anticuerpos producidos en la leche de animales transgénicos tienen una actividad de ADCC mejorada en relación con anticuerpos recombinantes producidos a través del cultivo de células in vitro. El modelo de glicosilación de anticuerpos que tienen actividad de ADCC mejorada también ha sido evaluado. Se proporcionan composiciones de anticuerpos producidos en células epiteliales mamarias al igual que los métodos de su producción y uso.
En un aspecto de la invención, los anticuerpos tienen actividad de ADCC mejorada. Tal como se utiliza en esta memoria, “actividad de ADCC mejorada” pretende referirse a un anticuerpo o composición del mismo que exhibe una mayor actividad de ADCC cuando se produce por un método que altera su modelo de glicosilación que cuando se produce por un método que no altera su modelo de glicosilación o el nivel de actividad de ADCC que posee antes de la alteración de su modelo de glicosilación según se proporciona en esta memoria. Anticuerpos con actividad de ADCC mejorada incluyen aquellos que antes de la alteración no exhibían actividad de ADCC alguna. Tal como se utiliza en esta memoria, “modelo de glicosilación” se refiere al conjunto de hidratos de carbono que están presentes en un anticuerpo individual o en un grupo de anticuerpos. Se pueden realizar cambios al modelo de glicosilación alterando la glicosilación de un anticuerpo o de un grupo de anticuerpos. El cambio del modelo de glicosilación de una composición de anticuerpos pretende abarcar casos en los que ha cambiado la glicosilación de un anticuerpo individual, un subconjunto de los anticuerpos en las composiciones o la totalidad de los anticuerpos en la composición. El modelo de glicosilación se puede determinar por muchos métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, métodos para analizar hidratos de carbono en proteínas han sido descritos en la solicitudes de patente de EE.UU. publicadas como US 2006-0057638 y US 2006-0127950.
La glicosilación es importante para el plegamiento correcto, la fijación de objetivos, la bioactividad y el aclaramiento de glicoproteínas terapéuticas. Con el desarrollo, por ejemplo, de animales transgénicos como sistemas de expresión, se ha apreciado que diferentes fondos genéticos resultan en diferentes niveles de expresión y glicosilación de las proteínas producidas. La glicosilación de proteínas transgénicamente derivadas aisladas de la leche de cabra es diferente a la de proteínas recogidas de un cultivo de células (Denman et al., 1991). En antitrombina humana producida transgénicamente, el tipo de glicosilación es dependiente del sitio. Oligosacáridos fucosilados y sialilados se encontraron en las posiciones Asn96 y Asn192, mientras que Asn155 tenía un oligosacárido oligomanosa (Edmunds et al., 1998). La glicosilación dependiente del sitio también se encontró en interferón gamma producido en la leche de ratón (James et al., 1995).
La glicosilación es una modificación post-traducción que puede producir una diversidad de formas de proteínas finales en el estado natural. Moléculas de IgG se glicosilan en el residuo Asn297 del dominio CH2, dentro de la región Fc. Determinadas alteraciones en la estructura de los hidratos de carbono también pueden afectar a la función del anticuerpo o a la eficacia terapéutica. Por ejemplo, en enfermedades tales como artritis reumatoide se ha documentado una incidencia mayor que la normal de estructuras agalactosilo (que parecen ser específicas para un hidrato de carbono asociado a Fc de IgG) (Parekh et al., 1985; Rademacher et al. 1988a). Se ha propuesto que esta estructura aglicosilada es más móvil que la estructura observada normalmente en esta región y, así, puede inducir cambios en la estructura cuaternaria de la glicoproteína, contribuir a la inmunogenicidad del anticuerpo o puede por sí misma contribuir a una función aberrante del anticuerpo (Rademacher et al. 1988b; Axford et al. 1992). Sin embargo, en este estado patológico, esta estructura sólo es una de numerosa glicoformas observadas.
En algunas realizaciones, los anticuerpos proporcionados en esta memoria tienen una actividad de ADCC al
8 5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
menos dos veces superior a la actividad de ADCC de anticuerpos derivados del cultivo de células epiteliales no mamarias. En otras realizaciones, la glicosilación de los anticuerpos es modificada por los métodos proporcionados, y la actividad de ADCC de los anticuerpos modificados es al menos dos veces superior a la actividad de ADCC de la versión no modificada del mismo anticuerpo. En algunas realizaciones, los anticuerpos tienen al menos una actividad de ADCC 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25 ó 30 veces superior. Los anticuerpos proporcionados se obtienen a partir de la expresión en células epiteliales mamarias de mamíferos. A anticuerpos de este tipo también se les alude en esta memoria como anticuerpos derivados de células epiteliales mamarias. En algunas realizaciones, los anticuerpos se obtienen de la expresión en la leche de un animal transgénico no humano. A anticuerpos de este tipo se les alude también en esta memoria como “anticuerpos derivados de la leche”. Tal como se utiliza en esta memoria, “transgénica” se refiere a una célula que incluye una molécula de ácido nucleico que ha sido insertada artificialmente en una célula o en un antecesor de la misma, y se convierte en parte del genoma del animal que se desarrolla a partir de esa célula. El término se utiliza también con referencia a un animal que ha tenido una molécula de ácido nucleico que ha sido insertada artificialmente en sus células o genoma.
Generalmente, en algunas realizaciones, la glicosilación exhibe un modelo de glicosilación con elevado contenido en manosa. Tal como se utiliza en esta memoria, un “modelo de glicosilación con alto contenido en manosa” pretende aludir a un anticuerpo que contiene al menos una oligomanosa o una composición de anticuerpos en donde al menos el 30% de los anticuerpos contiene al menos una oligomanosa. En algunas realizaciones, al menos el 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% o más de los hidratos de carbono de los anticuerpos son oligomanosa. En algunas realizaciones, al menos el 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% o más de los hidratos de carbono de los anticuerpos son oligomanosa no fucosilada. En otras realizaciones, menos del 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5% o menos de los hidratos de carbono de los anticuerpos contienen fucosa. Todavía en otras realizaciones, los anticuerpos son de bajo contenido en fucosa y de alto contenido en oligomanosa. Por lo tanto, en realizaciones adicionales, al menos el 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% o 90% o más de los hidratos de carbono de los anticuerpos son oligomanosa y menos del 50%, 40%, 30%, 20%, 10% o 5% de los hidratos de carbono de los anticuerpos contienen fucosa. Por lo tanto, todavía en una realización adicional, al menos el 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% o 90% o más de los hidratos de carbono de los anticuerpos son oligomanosa no fucosilada y menos del 50%, 40%, 30%, 20%, 10% o 5% de los hidratos de carbono de los anticuerpos contienen fucosa. Una realización de la invención pertenece a anticuerpos con actividad de ADCC incrementada que no tienen un azúcar 1,6-fucosa en la cadena pesada. En una realización, la unión de la región Fc de los anticuerpos al receptor FcγRIII encontrado en monocitos, macrófagos y células asesinas naturales es potenciada si el anticuerpo carece de la fucosa en el núcleo que se encuentra fijada al sitio de glicosilación Asn297 en la región Fc (p. ej. una fucosa enlazada a la base de la estructura biantenaria).
Otros anticuerpos con modelos de glicosilación específicos se describen en esta memoria en los Ejemplos. Tal como se utiliza en esta memoria, cuando se comentan composiciones de anticuerpos, las composiciones pueden ser homogéneas o heterogéneas en la glicosilación.
Los anticuerpos se pueden seleccionar en cuanto a su capacidad de unirse a receptores u otras proteínas tales como las implicadas en un proceso patológico y/o de ADCC. Los anticuerpos se pueden dirigir a cualquier marcador celular en el que la provisión de un anticuerpo dirigido al mismo y que tenga actividad de ADCC proporcionaría un beneficio terapéutico. Los anticuerpos incluyen los que pueden unir antígenos diana tales como marcadores de células tumorales. Ejemplos de marcadores de células y enfermedades a título de ejemplo contemplados en esta memoria incluyen CD3, CD4, CD5, CD8, CD14, CD15, CD16, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD25, CD32B, CD30, CD33, CD37, CD38, CD40, CD40L, CD46, CD52, CD54, CD59, CD74, CD80, CD126, CD138, CD137 o GPIIbIIIa. En algunas realizaciones, los anticuerpos se pueden dirigir contra HM1.24, HLA-DR, MUC1, tenascina, PIGF, VEGF, un oncogen, un producto de oncogen, un antígeno de necrosis, antígeno 17-A1, IL-2, T101, TAC, IL-6, TRAIL-R1, gangliósido GD3 o TRAIL-R2. Otras dianas incluyen: anticuerpos anti-CD3 (p. ej. linfoma no Hodgkin; enfermedad autoinmune -SLE), anticuerpos anti-CD16 (p. ej. FcRIII), anticuerpos anti-CD19
(p. ej. linfoma no Hodgkin), anti-CD20, anti-CD32B (p. ej. FcRIIB y alergia), anticuerpos anti-CD30 (p. ej. enfermedad de Hodgkin), anti-GPIIbIIIa (p ej. trombosis), anti-TNF-α (p. ej artritis reumatoide y enfermedad de Crohn), anticuerpos anti-TEM para marcadores endoteliales de tumores (p. ej. para el control de la angiogénesis – anticáncer). Una vez unidos a marcadores de células tumorales, los anticuerpos de la invención pueden recluir monocitos, macrófagos y células asesinas naturales para atacar a las células tumorales. Por lo tanto, los anticuerpos con ADCC mejorada pueden considerarse inmunomoduladores que pueden ser eficaces en la contracción de tumores sólidos y en la prevención de su recurrencia.
Amplios estudios demostraron que la estimulación de CD137 por parte de su ligando natural o por parte de anticuerpos agonistas potenciaba una respuesta anti-tumor que resultaba en la regresión de tumores en ratón establecidos en diversos modelos. CD137 (también denominada 4-1BB) es una glicoproteína de la membrana que se expresa en varios tipos de células linfoides. Se ha informado que un anticuerpo monoclonal agonista contra
9
imagen7
imagen8
imagen9
imagen10
imagen11
imagen12
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
En algunas realizaciones, la construcción que codifica el anticuerpo (o polipéptido de fusión a anticuerpo) deseado es impulsada por al menos un promotor de beta-caseína. En otras realizaciones, el mamífero transgénico no humano es un ungulado. Todavía en otras realizaciones, el mamífero transgénico no humano es una cabra.
En algunas realizaciones, los anticuerpos producidos por el mamífero transgénico se producen a un nivel de al menos 1 gramo por litro de leche producida.
Animales transgénicos, capaces de una expresión de anticuerpos recombinantes, también se pueden generar de acuerdo con métodos conocidos en la técnica (véase, p. ej. la patente de EE.UU. nº 5.945.577). Animales adecuados para la expresión transgénica incluyen, pero no se limitan a cabras, ovejas, bisontes, camellos, vacas, cerdos, conejos, búfalos, caballos, ratas, ratones o llamas. Animales adecuados incluyen también ganado bovino, caprino, ovino y porcino, los cuales se refieren a diversas especies de vacas, cabras, ovejas y cerdos (o cerdas), respectivamente. Animales adecuados incluyen también ungulados. Tal como se utiliza en esta memoria, “ungulado” es o se refiere a un mamífero cuadrúpedo, típicamente herbívoro, con pezuñas que incluye, sin limitación ovejas, cerdos, cabras, ganado vacuno y caballos. En una realización, los animales se generan cotransfectando células primarias con construcciones separadas que contienen las cadenas pesada y ligera. Estas células se utilizan luego para la transferencia nuclear. Alternativamente, si se utilizó micro-inyección para generar los animales transgénicos, las construcciones se co-inyectan. Si se necesitaran realizar alteraciones a los niveles de glicosilación, se puede utilizar en una realización, la mutagénesis dirigida al sitio.
La clonación resultará en una multiplicidad de animales transgénicos – cada uno de ellos capaz de producir un anticuerpo u otra construcción de gen de interés. Los métodos de producción incluyen el uso de los animales clonados y las crías de esos animales. En algunas realizaciones, los animales clonados son ganado caprino, bovino o ratones. La clonación abarca también la transferencia nuclear de fetos, transferencia nuclear, trasplante de tejidos y órganos y la creación de crías quiméricas.
Una etapa del proceso de clonación comprende transferir el genoma de una célula que contiene el transgen de interés a un oocito enucleado. Tal como se utiliza en esta memoria, “transgen” se refiere a cualquier trozo de una molécula de ácido nucleico que está insertado artificialmente en una célula o un antecesor de la misma y que se convierte en parte del genoma de un animal que se desarrolla a partir de esa célula. Un transgen de este tipo puede incluir un gen que es parcial o enteramente exógeno (es decir, extraño) al animal transgénico, o puede representar un gen que tenga identidad con un gen endógeno del animal.
Fuentes de mamíferos adecuadas para oocitos incluyen cabras, ovejas, vacas, cerdos, conejos, cobayas, ratones, hámsteres, ratas, primates no humanos, etc. Preferiblemente, los oocitos se obtienen de ungulados, y lo más preferiblemente de cabras o ganado vacuno. Métodos para el aislamiento de oocitos son bien conocidos en la técnica. Esencialmente, el proceso comprende aislar oocitos de los ovarios o del tracto reproductor de un mamífero, p. ej. una cabra. Una fuente fácilmente disponible de oocitos de ungulados es de animales hembras inducidos hormonalmente. Para el uso con éxito de técnicas tales como ingeniería genética, transferencia nuclear y clonación, los oocitos pueden ser preferiblemente madurados in vivo antes de que estas células se puedan utilizar como células receptoras para la transferencia nuclear y antes de que sean fertilizadas por la célula espermática para desarrollarse en un embrión. Oocitos de metafase II, que han sido madurados in vivo se han utilizado con éxito en técnicas de transferencia nuclear. Esencialmente, oocitos de metafase II maduros se recogen quirúrgicamente de animales no super-ovulados o super-ovulados varias horas después del comienzo del celo o después de la inyección de gonadotropina coriónica humana (hCG – siglas en inglés) o una hormona similar.
Una de las herramientas utilizadas para predecir la cantidad y calidad de la proteína recombinante expresada en la glándula mamaria es través de la inducción de la lactancia (Ebert KM, 1994). La lactancia inducida permite la expresión y el análisis de proteínas procedentes de la fase temprana de la producción transgénica más que de la primera lactancia natural que resulta de la preñez, que es al menos de un año más tarde. La inducción de la lactancia se puede realizar ya sea hormonal o manualmente. Es posible que diversos procesos de lactancia, especialmente la lactancia inducida hormonalmente, puedan afectar a la regulación transcripcional de glicosiltransferasas en glándulas mamarias. Oligosacáridos N-enlazados procedentes de varias muestras de lactancia de animales clonados eran similares excepto por el contenido de NeuGc. Los hidratos de carbono en la producción de anticuerpos transgénicos a partir de la lactancia natural contenían mayores cantidades de NeuGc que de otros procesos de lactancia, incluso a pesar de que era equiparable el contenido en ácido siálico global en muestras de diferentes lactancias. Igualmente, parece ser que las proteínas transgénicas producidas en la leche de cabras están también constituidas por una mezcla compleja de especies de proteína individuales (Zhou, 2005).
Fracciones de IgG purificadas con proteína A, aisladas de muestras de leche agrupadas de cada una de las líneas se analizaron in vitro para caracterizar la especificidad de unión a anticuerpos y la afinidad y la mejora dependiente de la dosis de la proliferación de células T. En una realización, preparados quiméricos glicosilados y aglicosilados
16 5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
derivados de la leche con respecto al mAb GW original.
Se estableció la producción de ratones transgénicos sanos con características de crecimiento y reproductoras normales y niveles razonables (> 1 mg/ml) de anticuerpo bioactivo. La producción en ratones con una construcción dada puede ser un precursor para trabajar en una producción a gran escala en especies tales como ganado caprino o bovino. La producción y caracterización de anti-CD137 quimérico condujo al ensayo de uno o más de estos preparados en un modelo de ratón para demostrar la actividad anti-tumoral in vivo. Las construcciones de anticuerpo quiméricas tanto glicosiladas como aglicosiladas se utilizaron después para generar cabras transgénicas para que expresaran anti-CD137 en su leche.
La capacidad de modificar los genomas de los animales a través de una tecnología transgénica ofrece nuevas alternativas al fabricante de proteínas recombinantes con modelos de glicosilación modificados. La producción de productos farmacéuticos recombinantes humanos en la leche de animales de granja transgénicos resuelve muchos de los problemas asociados con biorreactores microbianos (p. ej. carencia de modificaciones post-traducción, plegamiento inadecuado de proteínas, elevados costes de purificación) o biorreactores de células animales (p. ej. elevados costes de capital, medios de cultivo costosos, bajo rendimiento). La presente invención incluye, en algunas realizaciones, el uso de la producción transgénica de anticuerpos en la leche de animales transgénicos homozigóticos para un gen deseado que optimiza el modelo de glicosilación de esas moléculas.
De acuerdo con otra realización, el modelo de glicosilación de una molécula diana puede modificarse, por ejemplo, a través de la alteración en la alimentación a un mamífero no humano (Kerr et al., 2003).
Se describen además métodos para producir un anticuerpo, que comprenden recoger el anticuerpo de la leche de un mamífero transgénico no humano, tratado mediante ingeniería genética para expresar el anticuerpo en su leche, y determinar la actividad de ADCC del anticuerpo. En algunas realizaciones, la actividad de ADCC se compara con la actividad de ADCC de anticuerpos expresados en el cultivo de células. En otras realizaciones el anticuerpo se recoge de células epiteliales mamarias en cultivo tratadas mediante ingeniería genética para expresar el anticuerpo, y se determina la actividad de ADCC del anticuerpo. En algunas realizaciones, la actividad de ADCC se compara con la actividad de ADCC de anticuerpos expresados en cultivo de células. En algunas realizaciones, las células del cultivo de células son células epiteliales no mamarias. Se proporcionan a continuación ensayos para evaluar la actividad de ADCC en los Ejemplos y también se conocen en la técnica.
Tal como se utiliza en esta memoria, la expresión “sustancialmente puras” significa que las proteínas están esencialmente exentas de otras sustancias en una medida práctica y apropiada para su uso pretendido. En particular, las proteínas son lo suficientemente puras y están lo suficientemente exentas de otros constituyentes biológicos de sus células hospedantes con el fin de ser útiles, por ejemplo, en la secuenciación de las proteínas, o para producir preparados farmacéuticos. En algunas realizaciones, por lo tanto, los anticuerpos son sustancialmente puros.
Tal como se utiliza en esta memoria con respecto a polipéptidos, “aislado” significa separado de su entorno natural y presentes en una cantidad suficiente para permitir su identificación o uso. Aislado, cuando se refiere a una proteína o polipéptido, significa, por ejemplo: (i) producido de forma selectiva mediante clonación de expresión o
(ii) purificado tal como mediante cromatografía o electroforesis. Proteínas o polipéptidos aislados pueden, pero no necesitan ser sustancialmente puros. Debido a que un polipéptido aislado se puede mezclar con un vehículo farmacéuticamente aceptable en un preparado farmacéutico, el polipéptido puede comprender sólo un pequeño porcentaje en peso del preparado. El polipéptido está, no obstante, aislado en el sentido de que ha sido separado de las sustancias con las que puede estar asociado en sistemas vivos, es decir, aislado de otras proteínas. En algunas realizaciones, por lo tanto, los anticuerpos están aislados.
Los anticuerpos exhiben una actividad de ADCC mejorada, lo cual es un factor importante en el uso con éxito de anticuerpos monoclonales en la terapia. La unión simultánea de la región constante o Fc de los anticuerpos de la invención puede inducir una respuesta biológica. Una de estas respuestas es la inducción de la apoptosis celular en la célula diana o ADCC. La ADCC funciona a través de la unión de la región Fc a los receptores gamma de Fc que están situados sobre la superficie de monocitos, macrófagos y células asesinas naturales. Tras la unión al receptor, estas células son activadas y liberan citoquinas y radicales libres oxidantes que pueden matar a la célula diana (la célula que contenía la diana antígeno).
Por lo tanto, en un aspecto se describen preparados de anticuerpos con actividad de ADCC incrementada y, por lo tanto, propiedades terapéuticas mejoradas. Las composiciones proporcionadas se pueden utilizar para tratar a un sujeto en el que la actividad de ADCC conferiría al menos algún beneficio médico. Por lo tanto, la composición proporcionada puede utilizarse para tratar a un sujeto con una enfermedad. En algunas realizaciones, los anticuerpos se pueden utilizar para tratar a un sujeto mejorando la actividad de ADCC en un sujeto a través de la
17
imagen13
imagen14
imagen15
imagen16
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
tipo permiten que los compuestos de la invención sean formulados en forma de comprimidos, píldoras, grageas, cápsulas, líquidos, geles, jarabes, soluciones acuosas, suspensiones y similares, para la ingesta por vía oral por parte de un sujeto a tratar. Preparados farmacéuticos para uso oral se pueden obtener en forma de un excipiente sólido, moliendo opcionalmente una mezcla resultante y tratando la mezcla de gránulos, después de añadir compuestos auxiliares adecuados, si se desea, para obtener comprimidos o núcleos de grageas. Excipientes adecuados son, en particular, cargas tales como azúcares, incluidas lactosa, sacarosa, manitol o sorbitol; preparados de celulosa tales como, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, fécula de patata, gelatina, goma tragacanto, metil-celulosa, hidroxipropilmetil-celulosa, carboximetilcelulosa sódica y/o polivinilpirrolidona (PVP). Si se desea, se pueden añadir agentes desintegrantes tales como la polivinilpirrolidona reticulada, agar o ácido algínico o una sal de los mismos tal como alginato de sodio. Opcionalmente, las formulaciones orales se pueden también formular en disolución salina o tampones, es decir EDTA para neutralizar las condiciones ácidas internas o se pueden administrar sin soporte alguno.
También se contemplan específicamente formas de dosificación orales de los anticuerpos. El componente o los componentes pueden modificarse químicamente de modo que sea eficaz el suministro por vía oral de los anticuerpos. Generalmente, la modificación química contemplada es la fijación de al menos un resto a los anticuerpos, en que dicho resto permite (a) la inhibición de la proteólisis; y (b) la absorción en el torrente sanguíneo procedente del estómago o del intestino. También se desea el incremento en la estabilidad global de los anticuerpos y el incremento en el tiempo de circulación en el cuerpo. Ejemplos de restos de este tipo incluyen: polietilenglicol, copolímeros de etilenglicol y propilenglicol, carboximetil-celulosa, dextrano, poli(alcohol vinílico) polinvinil-pirrolidona y poliprolina. Abuchowski y Davis, 1981, “Soluble Polymer-Enzyme Adducts” en: Enzymes as Drugs, Hocenberg y Roberts, comps., Wiley-Interscience, Nueva York, NY, págs. 367-383; Newmark et al., 1982,
J. Appl. Biochem. 4:185-189. Otros polímeros que podrían utilizarse son poli-1,3-dioxolano y poli-1,3,6-tioxocano. Se prefieren para uso farmacéutico, tal como se ha indicado antes, restos de polietilenglicol.
Para las composiciones, la localización de liberación puede ser el estómago, el intestino delgado (el duodeno, el yeyuno o el íleon) o el intestino grueso. Un experto en la técnica tiene formulaciones disponibles que no se disolverán en el estómago pero que liberarán el material en el duodeno o en otra parte del intestino. Preferiblemente, la liberación evitará los efectos perjudiciales del entorno del estómago, ya sea mediante protección del anticuerpo o mediante liberación del material biológicamente activo más allá del entorno del estómago tal como en el intestino.
Para asegurar una resistencia gástrica completa, es esencial un revestimiento impermeable a al menos pH 5,0. Ejemplos de los ingredientes inertes más comunes que se utilizan como revestimientos entéricos son acetatotrimelitato de celulosa (CAT – siglas en inglés), ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa (HPMCP – siglas en inglés), HPMCP 50, HPMCP 55, poli(acetato-ftalato de vinilo) (PVAP – siglas en inglés), Eudragit L30D, Aquateric, acetatoftalato de celulosa (CAP – siglas en inglés), Eudragit L, Eudragit S y goma laca. Estos revestimientos se pueden utilizar en forma de películas mixtas.
Un revestimiento o mezcla de revestimientos también se puede utilizar en comprimidos que no estén destinados para la protección frente al estómago. Éstos pueden incluir revestimientos de azúcares o revestimientos que hacen al comprimido más fácil de tragar. Las cápsulas pueden consistir en una envuelta dura (tal como gelatina) para el suministro del producto terapéutico seco, es decir, polvo; para formas líquidas se puede utilizar una envuelta de gelatina blanda. El material de la envuelta de sellos podría ser almidón espeso o incluso papel comestible. Para píldoras, pastillas, comprimidos moldeados o triturados de comprimidos, se pueden utilizar técnicas de formación de masa en húmedo.
El agente terapéutico puede estar incluido en la formulación en forma de materiales en múltiples partículas finas en forma de gránulos o nódulos de un tamaño de partícula de aproximadamente 1 mm. La formulación del material para la administración de la cápsula también podría ser en forma de un polvo, tacos ligeramente comprimidos o incluso en forma de comprimidos. El agente terapéutico podría prepararse por compresión.
Colorantes y agentes saboreantes pueden estar todos ellos incluidos. Por ejemplo, las composiciones se pueden formular (tal como mediante encapsulación en liposomas o microesferas) y luego pueden estar adicionalmente contenidas dentro de un producto comestible tal como una bebida refrigerada que contiene colorantes y agentes saboreantes.
Se puede diluir o incrementar el volumen del agente terapéutico con un material inerte. Los diluyentes podrían incluir hidratos de carbono, especialmente manitol, a-lactosa, lactosa anhidra, celulosa, sacarosa, dextranos modificados y almidón. También se pueden utilizar determinadas sales inorgánicas en calidad de cargas, incluidos trifosfato de calcio, carbonato de magnesio y cloruro de sodio. Algunos diluyentes comercialmente disponibles son Fast-Flo, Emdex, STA-Rx 1500, Emcompress y Avicell.
22
imagen17
imagen18
imagen19
imagen20
imagen21
imagen22
imagen23
imagen24
imagen25
imagen26
imagen27
imagen28
imagen29
imagen30
imagen31
imagen32
imagen33
imagen34
imagen35

Claims (1)

  1. imagen1
ES11167183.0T 2005-10-21 2006-10-23 Anticuerpos con actividad de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos mejorada, métodos para su producción y uso Active ES2642787T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US72905405P 2005-10-21 2005-10-21
US729054P 2005-10-21

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2642787T3 true ES2642787T3 (es) 2017-11-20

Family

ID=37820635

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES11167183.0T Active ES2642787T3 (es) 2005-10-21 2006-10-23 Anticuerpos con actividad de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos mejorada, métodos para su producción y uso
ES06844220T Active ES2417147T3 (es) 2005-10-21 2006-10-23 Anticuerpos con actividad de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos mejorada, métodos para su producción y uso

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES06844220T Active ES2417147T3 (es) 2005-10-21 2006-10-23 Anticuerpos con actividad de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos mejorada, métodos para su producción y uso

Country Status (13)

Country Link
US (3) US20080118501A1 (es)
EP (3) EP2388273B1 (es)
JP (2) JP5328019B2 (es)
KR (3) KR20080068089A (es)
CN (2) CN103435695A (es)
AU (1) AU2006304886B2 (es)
CA (1) CA2626542C (es)
DK (2) DK1945666T3 (es)
ES (2) ES2642787T3 (es)
IL (1) IL218943A0 (es)
NZ (1) NZ568433A (es)
PL (1) PL1945666T3 (es)
WO (1) WO2007048077A2 (es)

Families Citing this family (61)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20080019905A9 (en) * 2005-02-18 2008-01-24 Strome Scott E Method of using an anti-CD137 antibody as an agent for radioimmunotherapy or radioimmunodetection
ES2642787T3 (es) * 2005-10-21 2017-11-20 Lfb Usa, Inc. Anticuerpos con actividad de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos mejorada, métodos para su producción y uso
US7846724B2 (en) 2006-04-11 2010-12-07 Hoffmann-La Roche Inc. Method for selecting CHO cell for production of glycosylated antibodies
WO2008030564A2 (en) * 2006-09-08 2008-03-13 Verenium Corporation Aglycosylated antibodies and methods of making and using those antibodies
FR2915398B1 (fr) * 2007-04-25 2012-12-28 Lab Francais Du Fractionnement "ensemble de moyens pour le traitement d'une pathologie maligne, d'une maladie auto-immune ou d'une maladie infectieuse"
EP1995309A1 (en) * 2007-05-21 2008-11-26 Vivalis Recombinant protein production in avian EBx® cells
US8647626B2 (en) 2007-10-02 2014-02-11 Avaxia Biologics, Incorporated Compositions comprising TNF-specific antibodies for oral delivery
WO2009046168A1 (en) * 2007-10-02 2009-04-09 Avaxia Biologics, Inc. Antibody therapy for use in the digestive tract
ES2336873B1 (es) * 2007-11-07 2011-01-24 Proyecto De Biomedicina Cima, S.L. Composicion farmaceutica para el tratamiento de cancer.
CA2717614A1 (en) * 2008-03-11 2009-09-17 Genentech, Inc. Antibodies with enhanced adcc function
WO2009124109A1 (en) 2008-04-04 2009-10-08 The Government Of The U.S. A. As Represented By The Secretary Of The Dept. Of Health &Human Services Human monoclonal antibodies specific for cd22
US20110229460A1 (en) * 2008-05-01 2011-09-22 Gtc Biotherapeutics, Inc. anti-cd137 antibody as an agent in the treatment of inflammatory conditions
WO2010036443A1 (en) * 2008-09-26 2010-04-01 Eureka Therapeutics, Inc. Cell lines and proteins with variant glycosylation pattern
WO2010042433A1 (en) * 2008-10-06 2010-04-15 Bristol-Myers Squibb Company Combination of cd137 antibody and ctla-4 antibody for the treatment of proliferative diseases
TWI409079B (zh) * 2009-08-14 2013-09-21 Roche Glycart Ag 非典型岩藻醣化ｃｄ２０抗體與苯達莫斯汀（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ）之組合療法
US20110117087A1 (en) 2009-10-26 2011-05-19 Reinhard Franze Method for the production of a glycosylated immunoglobulin
FR2962908A1 (fr) 2010-07-20 2012-01-27 Lfb Biotechnologies Formulation d'anticorps anti-cd20
AU2011350895B2 (en) 2010-12-30 2015-05-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Glycols as pathogen inactivating agents
FR2976811A1 (fr) 2011-06-22 2012-12-28 Lfb Biotechnologies Utilisation d'un anticorps anti-cd20 a haute adcc pour le traitement de la maladie de waldenstrom
CN103827134A (zh) 2011-07-20 2014-05-28 泽普泰恩股份有限公司 多肽分离方法
EP2741769B1 (en) 2011-08-10 2019-01-02 Laboratoire Français du Fractionnement et des Biotechnologies Highly galactosylated antibodies
US20130302274A1 (en) * 2011-11-25 2013-11-14 Roche Glycart Ag Combination therapy
EP2809773B1 (en) 2012-01-30 2020-09-02 Dr. Reddy's Laboratories Limited Process of modulating man5 and/or afucosylation content of glycoprotein composition
US20150017687A1 (en) * 2012-01-30 2015-01-15 Dr. Reddy's Laboratories Limited Method for obtaining a glycoprotein composition
CN104884080A (zh) 2012-08-03 2015-09-02 Lfb美国股份有限公司 抗凝血酶在体外膜式氧合中的用途
SMT201900242T1 (it) 2012-12-03 2019-05-10 Bristol Myers Squibb Co Incremento dell'attivita' anti-cancro di proteine di fuzione a fc immunomodulatrici
EP2931749B1 (fr) 2012-12-17 2019-04-24 Laboratoire Francais du Fractionnement et des Biotechnologies Societe Anonyme Utilisation d'anticorps monoclonaux pour le traitement de l'inflammation et d'infections bacteriennes
KR20160002713A (ko) * 2013-02-13 2016-01-08 라보라토이레 프란카이즈 듀 프락티온네먼트 에트 데스 바이오테크놀로지스 고도로 갈락토실화된 항-tnf-알파 항체 및 이의 용도
KR20160003634A (ko) * 2013-02-13 2016-01-11 라보라토이레 프란카이즈 듀 프락티온네먼트 에트 데스 바이오테크놀로지스 고도로 갈락토실화된 항-her2 항체 및 이의 용도
EP2956003A2 (en) 2013-02-13 2015-12-23 Laboratoire Français du Fractionnement et des Biotechnologies Proteins with modified glycosylation and methods of production thereof
MX2015010429A (es) 2013-02-13 2016-05-16 Lab Francais Du Fractionnement Cetuximab con glicosilación modificada y sus usos.
DK2991683T3 (da) 2013-05-02 2019-11-04 Glykos Finland Oy Konjugater af et glykoprotein eller en glykan med en toksisk ladning
CA2916566A1 (fr) 2013-07-05 2015-01-08 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Matrice de chromatographie d'affinite
FR3016633B1 (fr) 2014-01-17 2018-04-13 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Immunoglobuline anti-toxine du charbon
WO2015164723A1 (en) 2014-04-25 2015-10-29 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods and compositions for treating metastatic breast cancer and other cancers in the brain
FR3025515B1 (fr) 2014-09-05 2016-09-09 Lab Francais Du Fractionnement Procede de purification d'un anticorps monoclonal
FR3034420A1 (fr) 2015-03-31 2016-10-07 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps monoclonaux anti-cd303
FR3038517B1 (fr) 2015-07-06 2020-02-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Utilisation de fragments fc modifies en immunotherapie
CN105886656B (zh) * 2016-06-24 2019-11-12 河北医科大学第四医院 Gif基因在食管鳞癌诊治中的应用
CN106199005B (zh) * 2016-07-26 2019-02-01 浙江大学 采用cd137表达量检测淋巴细胞抗大肠癌活性的方法
CN107987160A (zh) * 2016-10-26 2018-05-04 无锡科捷诺生物科技有限责任公司 一种无岩藻糖基化的单克隆抗体
US10780080B2 (en) * 2016-11-23 2020-09-22 Translational Drug Development, Llc Benzamide and active compound compositions and methods of use
FR3060394B1 (fr) 2016-12-16 2019-05-24 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Combinaison d'anticorps anti-cd303 et anti-amhrii
FR3060395B1 (fr) 2016-12-16 2019-05-24 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Combinaison d'anticorps anti-cd303 et anti-her2
CN107083362A (zh) * 2017-06-19 2017-08-22 金浩范 一种自体nk细胞制备方法及实施该方法的试剂盒
EP3498293A1 (en) 2017-12-15 2019-06-19 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Treatment of monogenic diseases with an anti-cd45rc antibody
FR3076294B1 (fr) 2017-12-29 2022-01-28 Lab Francais Du Fractionnement Procede de purification d'anticorps a partir de lait brut
CN112566938B (zh) 2018-06-03 2025-04-01 拉姆卡普生物测试有限公司 针对ceacam5和cd47的双特异性抗体
EP3626265A1 (en) 2018-09-21 2020-03-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anti-human cd45rc antibodies and uses thereof
EP3636320A1 (en) * 2018-10-09 2020-04-15 Numab Therapeutics AG Antibodies targeting cd137 and methods of use thereof
TWI839395B (zh) * 2018-10-09 2024-04-21 瑞士商Ｎｕｍａｂ治療公司 靶向cd137的抗體及其使用方法
CN113614107A (zh) 2019-01-23 2021-11-05 Encefa公司 Cd31竞争剂及其用途
EP3831849A1 (en) 2019-12-02 2021-06-09 LamKap Bio beta AG Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47
KR20230121772A (ko) 2020-12-18 2023-08-21 람카프 바이오 베타 엘티디. Ceacam5 및 cd47에 대한 이중특이적 항체
CN112724263B (zh) * 2021-04-02 2021-08-03 上海偌妥生物科技有限公司 改造抗cd20单克隆抗体以提高其药物疗效的方法及其应用
CN113648405B (zh) * 2021-08-19 2023-06-02 重庆医科大学 一种口服重组幽门螺杆菌蛋白疫苗纳米粒及其制备方法
PL4401842T3 (pl) 2021-09-16 2025-11-24 Aboleris Pharma Domeny wiążące przeciwko ludzkiemu CD45RC i ich zastosowania
CA3223956A1 (en) 2021-12-20 2023-06-29 Vetoquinol Sa Anti-canine interleukine-31-receptor a (il-31ra) antibodies and the uses thereof
CN119998319A (zh) 2022-06-16 2025-05-13 拉姆卡普生物测试有限公司 针对ceacam5和cd47的双特异性抗体与针对ceacam5和cd3的双特异性抗体的组合治疗
WO2024165823A2 (fr) 2023-02-09 2024-08-15 Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives Fragment fab mutant pour l'obtention de conjugués mono- ou bi-fonctionnalisés site-spécifiques
WO2025114614A1 (en) 2023-11-30 2025-06-05 Vetoquinol Sa Anti-canine interleukine-4-receptor alpha (il-4rα) antibodies and the uses thereof

Family Cites Families (75)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2459619B1 (fr) * 1979-06-26 1983-07-29 Agronomique Inst Nat Rech Procede pour l'obtention a partir de lactoserum, d'un produit enrichi en alpha-lactalbumine et applications dudit procede
US4257774A (en) * 1979-07-16 1981-03-24 Meloy Laboratories, Inc. Intercalation inhibition assay for compounds that interact with DNA or RNA
US4361544A (en) * 1980-03-03 1982-11-30 Goldenberg Milton David Tumor localization and therapy with labeled antibodies specific to intracellular tumor-associated markers
GB8308235D0 (en) * 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) * 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
DE3432718C1 (de) * 1984-09-06 1986-05-22 Biotest Pharma GmbH, 6000 Frankfurt Verfahren zur Herstellung einer Loesung von Milch- und/oder Kolostralimmunglobulinen
US5366894A (en) * 1986-06-30 1994-11-22 Pharmaceutical Proteins Limited Peptide production
US4946778A (en) * 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US5750172A (en) * 1987-06-23 1998-05-12 Pharming B.V. Transgenic non human mammal milk
US4873316A (en) * 1987-06-23 1989-10-10 Biogen, Inc. Isolation of exogenous recombinant proteins from the milk of transgenic mammals
US5202238A (en) * 1987-10-27 1993-04-13 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US4897465A (en) * 1988-10-12 1990-01-30 Abbott Laboratories Enrichment and concentration of proteins by ultrafiltration
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
US6362325B1 (en) * 1988-11-07 2002-03-26 Advanced Research And Technology Institute, Inc. Murine 4-1BB gene
US6303121B1 (en) * 1992-07-30 2001-10-16 Advanced Research And Technology Method of using human receptor protein 4-1BB
US6355476B1 (en) * 1988-11-07 2002-03-12 Advanced Research And Technologyinc Nucleic acid encoding MIP-1α Lymphokine
US20060002904A9 (en) * 1988-11-07 2006-01-05 Kwon Byoung S Receptor and related products and methods
US5175384A (en) 1988-12-05 1992-12-29 Genpharm International Transgenic mice depleted in mature t-cells and methods for making transgenic mice
US5633076A (en) * 1989-12-01 1997-05-27 Pharming Bv Method of producing a transgenic bovine or transgenic bovine embryo
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5965789A (en) * 1991-01-11 1999-10-12 American Red Cross Engineering protein posttranslational modification by PACE/furin in transgenic non-human mammals
JP3507486B2 (ja) 1991-03-15 2004-03-15 アムジエン・インコーポレーテツド 顆粒球コロニー刺激因子の肺内投与
US5714350A (en) * 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
AU6827094A (en) * 1993-05-07 1994-12-12 Immunex Corporation Cytokine designated 4-1bb ligand and human receptor that binds thereto
US7211259B1 (en) * 1993-05-07 2007-05-01 Immunex Corporation 4-1BB polypeptides and DNA encoding 4-1BB polypeptides
US7138500B1 (en) * 1993-05-07 2006-11-21 Immunex Corporation Antibodies to human 4-1BB
WO1995003402A1 (en) * 1993-07-22 1995-02-02 Merck & Co., Inc. EXPRESSION OF HUMAN INTERLEUKIN-1β IN A TRANSGENIC ANIMAL
CA2172165C (en) * 1993-09-16 2003-12-02 Byoung S. Kwon Human receptor h4-1bb
US5827690A (en) * 1993-12-20 1998-10-27 Genzyme Transgenics Corporatiion Transgenic production of antibodies in milk
CA2184688A1 (en) * 1994-03-09 1995-09-14 Pedro Antonio Prieto Transgenic animals producing oligosaccharides and glycoconjugates
AU707440B2 (en) * 1994-03-29 1999-07-08 Celltech Therapeutics Limited Antibodies against E-selectin
US5451569A (en) 1994-04-19 1995-09-19 Hong Kong University Of Science And Technology R & D Corporation Limited Pulmonary drug delivery system
EP0690452A3 (en) 1994-06-28 1999-01-07 Advanced Micro Devices, Inc. Electrically erasable memory and method of erasure
CA2205091A1 (en) * 1994-12-23 1996-07-04 Zeneca Limited Chemical compounds
DE69624436T2 (de) * 1995-04-08 2003-08-28 Lg Chemical Ltd., Seoul/Soul Humaner 4-1bb spezifischer humaner antikörper und diesen produzierende zellinie
US6998467B1 (en) 1995-04-28 2006-02-14 The Hospital For Sick Children Antibody specific for presenilin 1 and method of use thereof
US5874240A (en) * 1996-03-15 1999-02-23 Human Genome Sciences, Inc. Human 4-1BB receptor splicing variant
US6268487B1 (en) * 1996-05-13 2001-07-31 Genzyme Transgenics Corporation Purification of biologically active peptides from milk
ATE230801T1 (de) * 1996-10-03 2003-01-15 Canon Kk Verfahren zur detektion von zielnukleinsäure, verfahren zu ihrer quantifizierung und pyrylium- verbindungen zur chemilumineszenz-analyse
IL129138A0 (en) * 1996-10-11 2000-02-17 Bristol Myers Squibb Co Methods and compositions for immunomodulation
US5945577A (en) 1997-01-10 1999-08-31 University Of Massachusetts As Represented By Its Amherst Campus Cloning using donor nuclei from proliferating somatic cells
EP0990001B1 (en) * 1997-05-29 2006-05-10 Agresearch Limited Processes for production of immunoglobulin a in milk
US20030175754A1 (en) 1998-06-29 2003-09-18 Incyte Genomics, Inc. RVP-1 variant differentially expressed in crohns disease
KR20000034847A (ko) * 1998-11-17 2000-06-26 성재갑 인간 4-1비비 분자에 대한 인간화 항체 및 이를 포함하는 약학조성물
US20030096976A1 (en) * 1998-11-17 2003-05-22 Hong Hyo Jeong Humanized antibodies LB-00503 and LB-00506 specific for human 4-1BB and pharmaceutical compositions comprising said humanized antibodies
US7414170B2 (en) * 1999-11-19 2008-08-19 Kirin Beer Kabushiki Kaisha Transgenic bovines capable of human antibody production
CA2399561A1 (en) * 2000-02-03 2001-08-09 Lennart Hammarstrom Ruminant mhc class i-like fc receptors
FR2807767B1 (fr) * 2000-04-12 2005-01-14 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps monoclonaux anti-d
WO2002036141A2 (en) * 2000-11-02 2002-05-10 Immunex Corporation Method of enhancing lymphocyte-mediated immune responses
WO2003006058A1 (en) * 2001-07-12 2003-01-23 Wyeth Cd25+ differential markers and uses thereof
AU2002364935A1 (en) * 2001-10-09 2003-06-23 Mayo Foundation For Medical Education And Research Enhancement of immune responses by 4-1bb-binding agents
US7053202B2 (en) * 2001-10-19 2006-05-30 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Immunoglobulin DNA cassette molecules, monobody constructs, methods of production, and methods of use therefor
US20040132101A1 (en) * 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US20030223989A1 (en) * 2002-04-18 2003-12-04 Pluenneke John D. CD137 agonists to treat patients with IgE-mediated conditions
US20040109847A1 (en) * 2002-07-15 2004-06-10 Lieping Chen Treatment and prophylaxis with 4-1BB-binding agents
NZ537277A (en) * 2002-07-18 2008-04-30 Crucell Holland Bv Recombinant production of mixtures of antibodies
JP2006500921A (ja) * 2002-07-30 2006-01-12 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー ヒト４−１ｂｂに対するヒト化抗体
US20040025193A1 (en) * 2002-08-01 2004-02-05 Yann Echelard Method for the rapid selection of homozygous primary cell lines for the production of transgenic animals by somatic cell nuclear transfer
BR0316643A (pt) * 2002-11-27 2005-10-11 Gtc Biotherapeutics Inc Anticorpos modificados estavelmente produzidos no leite e método de produzir os mesmos
AU2003290059A1 (en) * 2002-12-16 2004-07-09 Herbert Schwarz Use of cd137 antagonists for the treatment of tumors
US7355008B2 (en) * 2003-01-09 2008-04-08 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US7471635B2 (en) * 2003-07-16 2008-12-30 Qlogic, Corporation Method and apparatus for test pattern generation
AU2004266159A1 (en) * 2003-08-22 2005-03-03 Biogen Idec Ma Inc. Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same
US7288638B2 (en) * 2003-10-10 2007-10-30 Bristol-Myers Squibb Company Fully human antibodies against human 4-1BB
US7045295B2 (en) * 2004-04-02 2006-05-16 Hematologics, Inc. Method for collecting purified cells
US20080019905A9 (en) * 2005-02-18 2008-01-24 Strome Scott E Method of using an anti-CD137 antibody as an agent for radioimmunotherapy or radioimmunodetection
EP1850872A4 (en) * 2005-02-15 2008-10-15 Gtc Biotherapeutics Inc METHOD FOR USE OF ANTI-CD-137 ANTIBODY AS RADIOIMMUN THERAPY OR RADIO IMMUNE DETECTION MEANS
WO2006088447A1 (en) * 2005-02-15 2006-08-24 Gtc Biotherapeutics, Inc. An anti-cd137 antibody as an agent in the treatement of cancer and glycosylation variants thereof
US20060182744A1 (en) * 2005-02-15 2006-08-17 Strome Scott E Anti-CD137 antibody as an agent in the treatment of cancer and glycosylation variants thereof
AU2005336263A1 (en) * 2005-09-09 2007-03-15 Glycofi, Inc. Immunoglobulin comprising predominantly a man7GlcNAc2, Man8GlcNAc2 glycoform
DK1945665T3 (da) * 2005-10-21 2012-02-06 Genzyme Corp Antistof-baserede terapimidler med forhøjet ADCC-aktivitet
ES2642787T3 (es) * 2005-10-21 2017-11-20 Lfb Usa, Inc. Anticuerpos con actividad de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos mejorada, métodos para su producción y uso
US20110229460A1 (en) * 2008-05-01 2011-09-22 Gtc Biotherapeutics, Inc. anti-cd137 antibody as an agent in the treatment of inflammatory conditions
US10798205B2 (en) 2016-04-13 2020-10-06 Facebook, Inc. Cache system for live broadcast streaming

Also Published As

Publication number Publication date
US20080118501A1 (en) 2008-05-22
EP2388272A1 (en) 2011-11-23
JP5328019B2 (ja) 2013-10-30
CN103435695A (zh) 2013-12-11
WO2007048077A2 (en) 2007-04-26
JP2009512694A (ja) 2009-03-26
CN101484470B (zh) 2014-07-23
KR20140133958A (ko) 2014-11-20
EP1945666A2 (en) 2008-07-23
DK2388273T3 (en) 2017-10-09
EP2388273B1 (en) 2017-07-05
NZ568433A (en) 2012-07-27
JP2012250984A (ja) 2012-12-20
AU2006304886B2 (en) 2012-04-12
IL218943A0 (en) 2012-05-31
WO2007048077A3 (en) 2007-07-05
DK1945666T3 (da) 2013-07-01
AU2006304886A1 (en) 2007-04-26
EP1945666B1 (en) 2013-03-27
CA2626542A1 (en) 2007-04-26
CA2626542C (en) 2018-07-03
KR20130089673A (ko) 2013-08-12
PL1945666T3 (pl) 2013-09-30
US20200255518A1 (en) 2020-08-13
CN101484470A (zh) 2009-07-15
KR20080068089A (ko) 2008-07-22
ES2417147T3 (es) 2013-08-06
EP2388273A1 (en) 2011-11-23
US20140046033A1 (en) 2014-02-13
KR101507027B1 (ko) 2015-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6331658B1 (en) Genetically engineered mammals for use as organ donors
ES2529769T3 (es) Anticuerpos glicomanipulados
JP5087625B2 (ja) 非ヒトトランスジェニック動物におけるヒトまたはヒト化免疫グロブリンの発現強化
EA010594B1 (ru) Слитые белки taci-иммуноглобулина
JP2021104064A (ja) ヒト化シグナル調節タンパク質遺伝子を有する非ヒト動物
JP6309166B2 (ja) ヒト特定分子およびヒトＦｃγ受容体ファミリーを発現するトランスジェニック非ヒト動物
CN102766210A (zh) 人ctla-4抗体及其应用
EA025962B1 (ru) АНТИТЕЛА, ОБЛАДАЮЩИЕ ПОВЫШЕННОЙ АФФИННОСТЬЮ К СВЯЗЫВАНИЮ С Fc-РЕЦЕПТОРОМ И ЭФФЕКТОРНОЙ ФУНКЦИЕЙ
CN101595128B (zh) 免疫应答增强的转基因动物和用于制备其的方法
US7892539B2 (en) Modulation of an innate immune response by altering TRIAL-R signaling
JP2008532939A (ja) ニワトリにおける抗体の組織特異的発現
JP2018515073A (ja) Ｆｃ融合タンパク質のトランスジェニック産生
EA015897B1 (ru) Применение человеческого моноклонального антитела к ил-15 в составе композиции и лекарственного препарата (варианты), композиция и лекарственный препарат, его включающие
JP2014516046A (ja) がん若しくは腫瘍の治療用の又はアジュバントとして使用される可溶性タンパク質ｃｄ５又はｃｄ６
KR20230121327A (ko) 비인간 당사슬이 제거되고 인간　fcgrt　유전자를 갖는 인간화 마우스 및 그 용도
Chen et al. RANK IVVY motif plays crucial roles in osteoclastogenesis
JP7735260B2 (ja) 老化に影響を及ぼす物質の同定方法
Brem et al. Transgenesis in rabbits
Brem Generation of recombinant antibody transgenic farm animals
JP5186637B2 (ja) トランスジェニック非ヒト哺乳動物およびその利用
TWI223585B (en) Chimeric animal and method for producing the same
WO1998058051A1 (en) Transgenically produced prolactin
JP2005192468A (ja) Ｅ３ユビキチンリガーゼ遺伝子導入トランスジェニック動物
Thomas A feasibility study of oncogene transgenic mice as therapeutic models in cytokine research
WO2007094462A1 (ja) ゲノムが改変された非ヒト動物またはその子孫