ES2710602T3 - 2-Amino-3,5-difluoro-3,6-dimetil-6-fenil-3,4,5,6-tetrahidropiridinas como inhibidores de BACE1 para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer - Google Patents

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Abstract

Un compuesto de fórmula I**Fórmula** en donde Ar se selecciona del grupo que consiste en fenilo, piridilo, pirimidilo, pirazinilo, imidazolilo, pirazolilo, tiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, y donde Ar está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados entre halógeno, CN, alquilo C1-C6 , alquenilo C2-C6 , alquinilo C2-C6 , fluoroalquilo C1-C6 o alcoxi C1-C6; y R1 es uno o más de hidrógeno, halógeno, fluoroalquilo C1-C3 o alquilo C1-C3 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

DESCRIPCION
2-Amino-3,5-difluoro-3,6-dimetil-6-fenil-3,4,5,6-tetrahidropiridinas como inhibidores de BACE1 para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer
Campo de la invencion
La presente invencion proporciona compuestos que actuan como inhibidores de BACE1. Los aspectos separados de la invencion se dirigen a composiciones farmaceuticas que comprenden dichos compuestos y a los usos de los compuestos para tratar trastornos neurodegenerativos y cognitivos.
Tecnica anterior
La demencia es un smdrome clmico caracterizado por deficiencias en multiples areas de la cognicion que no pueden explicarse por el envejecimiento normal, una disminucion notable de la funcion y la ausencia de delirio. Ademas, suelen estar presentes smtomas neuropsiquiatricos y hallazgos neurologicos focales. La demencia se clasifica adicionalmente en funcion de la etiologfa. La enfermedad de Alzheimer (EA) es la causa mas comun de demencia, seguida de la EA mixta y la demencia vascular, la demencia con cuerpos de Lewy (DCL) y la demencia fronto­ temporal. Los depositos p-amiloides y los ovillos neurofibrilares se consideran caracterizaciones patologicas principales asociadas con la EA, que se caracterizan por perdida de memoria, cognicion, razonamiento, juicio y orientacion. Tambien se ven afectadas, a medida que avanza la enfermedad, las capacidades motoras, sensoriales y lingufsticas hasta que se produce un deterioro global de las multiples funciones cognitivas. Los depositos de pamiloide son predominantemente un agregado de peptido Ap, que a su vez es un producto de la proteolisis de la protema precursora de amiloide (APP) como parte de la ruta p-amiloidogenica. El peptido Ap resulta de la escision de la APP en el extremo C-terminal por una o mas Y-secretasas y en el extremo N-terminal por la p-secretasa 1 (BACE1) tambien conocida como aspartil proteasa 2. La actividad de BACE1 se correlaciona directamente con la generacion de peptido Ap a partir de APP.
Los estudios indican que la inhibicion de BACE1 impide la produccion de peptido Ap. Ademas, BACE1 se localiza junto con su sustrato APP en los compartimentos de Golgi y endocfticos (Willem M, et al. Semin. Cell Dev. Biol, 2009, 20, 175-182). Estudios de desactivacion de genes en ratones han demostrado la ausencia de formacion de peptidos amiloides mientras los animales estan sanos y son fertiles (Ohno M, et al. Neurobiol. Dis., 2007, 26, 134­ 145.). La anulacion genetica de BACE1 en ratones que expresan APP en exceso ha demostrado la ausencia de formacion de placa y la reversion de los deficits cognitivos (Ohno M, et al. Neuron; 2004, 41, 27-33). Los niveles de BACE1 estan elevados en los cerebros de los pacientes con EA esporadica (Hampel y Shen, Scand. J. Clin. Lab. Invest. 2009, 69, 8-12).
Estos hallazgos convergentes indican que la inhibicion de BACE1 puede ser una diana terapeutica para el tratamiento de la EA, asf como para trastornos para los cuales es beneficiosa la reduccion de los depositos de Ap. AstraZeneca anuncio el descubrimiento de AZD3839, un potente inhibidor clmico de BACE1 candidato para el tratamiento de la EA (Jeppsson, F., et al. J. Biol. Chem., 2012, 287, 41245-41257) en octubre de 2012. El esfuerzo que condujo al descubrimiento de AZD3839 fue descrito con mas detalle porGinman, T., et al. J. Med. Chem., 2013, 56, 4181-4205. La publicacion de Ginman describe los problemas que se superaron en relacion con el descubrimiento y la identificacion de AZD3839. Estos problemas relacionados con la mala penetracion de la barrera hematoencefalica y el flujo de salida mediado por la glicoprotema P de los compuestos dan como resultado una falta de exposicion cerebral.
El manuscrito de Ginman planteo la hipotesis de que las diferencias en la exposicion cerebral se debfan en gran medida a las estructuras del nucleo y se proporcionaron datos de Relacion de la Actividad con la Estructura, en donde las propiedades in vitro de los compuestos referidos se distribuyeron en cuatro tablas segun los subtipos del nucleo. En la tabla 4, se describen una serie de compuestos que contienen amidina que se consideraron interesantes desde una perspectiva de la actividad. Sin embargo, los datos sugieren que el nucleo que contiene amidina no mostro un perfil favorable de permeabilidad de la barrera hematoencefalica.
Investigadores de Hoffmann-La Roche y Siena Biotech tambien informaron sobre el descubrimiento de compuestos que contienen amidina (Woltering, T. J., et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 23, 4239-4243). Se encontro que estos compuestos (compuestos 17 y 18 en el documento) no tienen ningun efecto in vivo (falta de reduccion de Ap40 en el cerebro en ratones de tipo salvaje).
Contrariamente a las ensenanzas de Ginman, et al. y Woltering, T. J., et al., los autores de la presente invencion han descubierto una serie de compuestos de amidina que penetran en el cerebro. Por consiguiente, la presente invencion se refiere a nuevos compuestos que tienen actividad inhibidora de BACE1, a su preparacion, a su uso medico y a los medicamentos que los comprenden.
Compendio de la invencion
Un objetivo de la presente invention es proporcionar compuestos que inhiban BACE1. Por consiguiente, la presente invention se refiere a compuestos de Formula I
Figure imgf000003_0001
en donde Ar se selecciona del grupo que consiste en fenilo, piridilo, pirimidilo, pirazinilo, imidazolilo, pirazolilo, tiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, y donde Ar esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes seleccionados entre halogeno, CN, alquilo C1-C6 , alquenilo C2-C6 , alquinilo C2-C6, fluoroalquilo C1-C6 o alcoxi C1-C6 y
R1 es uno o mas de hidrogeno, halogeno, fluoroalquilo C1-C3 o alquilo C1-C3
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En una realization, la presente invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso en terapia.
La presente invencion proporciona adicionalmente una composition farmaceutica que comprende un compuesto de Formula I o una de sus sales farmaceuticamente aceptables y un portador farmaceuticamente aceptable.
En una realizacion, la invencion proporciona el uso de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo en la fabrication de un medicamento para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo.
En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso en un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo.
En una realizacion, la presente invencion proporciona un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo que comprende administrar una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo a un paciente que lo necesite.
Otras realizaciones de la invencion se proporcionan inmediatamente a continuation:
En una realizacion, el compuesto de la presente invencion tiene la formula Ia o Ib
Figure imgf000003_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En una realizacion, R1 es F o H, concretamente F.
En una realizacion, el compuesto de la presente invencion tiene la Formula Ia y R1 es F.
En una realizacion, Ar esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes seleccionados entre F, Cl, Br, CN, alquilo C1-C3 , fluoroalquilo C1-C3 o alcoxi C1-C3.
En una realizacion, Ar es fenilo opcionalmente sustituido.
En una realizacion, Ar es piridilo opcionalmente sustituido.
En una realizacion, Ar es pirimidilo opcionalmente sustituido.
En una realizacion, Ar es pirazinilo opcionalmente sustituido.
En una realizacion, Ar es imidazolilo opcionalmente sustituido.
En una realizacion, Ar es pirazolilo opcionalmente sustituido.
En una realizacion, Ar es tiazolilo opcionalmente sustituido.
En una realizacion, Ar es oxazolilo opcionalmente sustituido.
En una realizacion, Ar es isoxazolilo opcionalmente sustituido.
En una realizacion, el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:
W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-fluoropicolinamida,
W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-metoxi pirazino-2-carboxamida,
W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-metoxipicolinamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-fluoropicolinamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-metoxi pirazino-2-carboxamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-2-metiloxazol-4-carboxamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-metoxipicolinamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxi-d3) picolinamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-cloropicolinamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-1-metil-1H-imidazol-2-carboxamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(trifluorometil)pirazino-2-carboxamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-4-metiltiazol-2-carboxamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-2-(difluorometil)oxazol-4-carboxamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-1-(difluorometil)-1H-pirazol-3-carboxamida
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(difluorometil)pirazino-2-carboxamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-4-clorobenzamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-cianopicolinamida,
W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4,5-difluorofenil)-5-(metoxid3)picolinamida,
W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxi-d3) picolinamida,
W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxi-d3) pirazino-2-carboxamida,
W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-ciano-3-metilpicolinamida,
W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4,5-difluorofenil)-5-(metoxid3)picolinamida,
W-(3-((2R,3R,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxi-d3) picolinamida,
W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-bromopicolinamida
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Una realizacion separada se dirige a una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de la lista anterior y un portador farmaceuticamente aceptable.
Otra realizacion esta dirigida a un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo que comprende administrar una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la lista anterior al paciente que lo necesita.
Otra realizacion mas esta dirigida al uso de un compuesto de la lista anterior para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo.
En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de la lista anterior para su uso en terapia.
Otra realizacion mas de la invencion esta dirigida a un compuesto de la lista anterior para su uso en el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo.
Descripcion detallada de la invencion
La presente invencion se basa en el descubrimiento de que los compuestos de Formula I son inhibidores de BACE1, y como tales, son utiles para el tratamiento de trastornos relacionados. Ciertos aspectos de la invencion se explican con mayor detalle a continuacion, pero no se pretende que esta descripcion sea un catalogo detallado de todas las diferentes formas en que se puede implementar la invencion, o todas las caractensticas que se pueden anadir a la presente invencion. Por lo tanto, se pretende que la siguiente memoria descriptiva ilustre algunas realizaciones de la invencion, y no especifique exhaustivamente todas las permutaciones, combinaciones y variaciones de las mismas. Como se emplea en la presente memoria, el termino "alquilo C1-C6" se refiere a un hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que tiene de uno a seis atomos de carbono inclusive. Ejemplos de C1-C6 alquilo incluye, pero no se limita a, metilo, etilo, 1 -propilo, 2-propilo, 1-butilo, 2-butilo, 2-metil-2-propilo, 2-metil-1 -propilo, n-pentilo y n-hexilo. Del mismo modo, el termino "alquilo C1-C3” se refiere a un hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que tiene de uno a tres atomos de carbono inclusive. Los ejemplos de C1-C3 incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo y n-propilo.
Asimismo, el termino "alcoxi C1-C6" se refiere a un grupo alcoxi saturado de cadena lineal o ramificada que tiene de uno a seis atomos de carbono inclusive con la valencia abierta en el oxfgeno. Los ejemplos de alcoxi C1-C6 incluyen, pero no se limitan a, metoxi, etoxi, n-butoxi, t-butoxi y n-hexiloxi.
Como se emplea en la presente memoria, el termino "fluoroalquilo C1-C6” se refiere a un hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que tiene de uno a seis atomos de carbono inclusive, sustituido con uno o mas atomos de fluor. Los ejemplos de fluoroalquilo C1-C6 incluyen, pero no se limitan a, trifluorometilo, pentafluoroetilo, 1 -fluoroetilo, monofluorometilo, difluorometilo, 1,2-difluoroetilo y 3,4 difluorohexilo. Del mismo modo, el termino "fluoroalquilo C1-C3” se refiere a un hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que tiene de uno a tres atomos de carbono inclusive, sustituido con uno o mas atomos de fluor por atomo de carbono.
El termino "halogeno" se refiere a fluor, cloro, bromo y yodo.
El termino "alquenilo C2-C6" se refiere a un grupo alquenilo ramificado o no ramificado que tiene de dos a seis atomos de carbono y un doble enlace, que incluye, entre otros, etenilo, propenilo y butenilo.
El termino "alquinilo C2-C6" se refiere a un grupo alquinilo ramificado o no ramificado que tiene de dos a seis atomos de carbono y un triple enlace, que incluye, entre otros, etinilo, propinilo y butinilo.
Como se emplea en la presente memoria, se pretende que la expresion "cantidad eficaz" cuando se aplica a un compuesto de la invencion, indique una cantidad suficiente para causar un efecto biologico pretendido. Se pretende que la expresion "cantidad terapeuticamente eficaz" cuando se aplica a un compuesto de la invencion indique una cantidad del compuesto que es suficiente para mejorar, paliar, estabilizar, invertir, retardar o retrasar la progresion de un trastorno o estado de enfermedad, o de un srntoma del trastorno o enfermedad. En una realizacion, el metodo de la presente invencion proporciona la administracion de combinaciones de compuestos. En tales casos, la "cantidad eficaz" es la cantidad del compuesto en dicha combinacion suficiente para causar el efecto biologico deseado.
Los terminos "tratamiento" o "tratar" como se emplean en la presente memoria significan mejorar o revertir el progreso o la gravedad de una enfermedad o trastorno, o mejorar o revertir uno o mas smtomas o efectos secundarios de dicha enfermedad o trastorno. "Tratamiento" o "tratar", como se emplean en la presente memoria, tambien significan inhibir o bloquear, como en el caso de retrasar, detener, restringir, impedir u obstruir el progreso de un sistema, afeccion o estado de una enfermedad o trastorno. Para los fines de esta invencion, "tratamiento" o "tratar" significa adicionalmente un enfoque para obtener resultados clmicos beneficiosos o deseados, donde los "resultados clmicos beneficiosos o deseados" incluyen, sin limitacion, el alivio de un smtoma, la disminucion del grado de un trastorno o enfermedad, la estabilizacion (es decir, no empeoramiento) de una enfermedad o estado de enfermedad, el retraso o ralentizacion de una enfermedad o estado patologico, la mejora o paliacion de una enfermedad o estado patologico, y la remision de una enfermedad o trastorno, ya sea parcial o total.
La presente invencion se basa en el descubrimiento de que los compuestos de Formula I son inhibidores de BACE1, y como tales, son utiles para el tratamiento de trastornos cuyas caractensticas patologicas comprenden depositos de p-amiloide y ovillos neurofibrilares, tales como trastornos neurodegenerativos o cognitivos.
Se espera que los compuestos de la presente invencion, como se comento anteriormente, sean utiles en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer debido a sus efectos sobre los depositos de p-amiloide y los ovillos neurofibrilares. Esto incluye la enfermedad de Alzheimer familiar donde los pacientes portan mutaciones en genes espedficos mtimamente involucrados en la produccion de peptido Ap. Sin embargo, es importante tener en cuenta que los agregados del peptido Ap no se limitan a la enfermedad de Alzheimer familiar, sino que tambien son caractensticas patofisiologicas importantes de la enfermedad de Alzheimer esporadica mas comun [Mol Cell Neurosci, 66, 3-11, 2015].
Tambien se cree que los compuestos de la presente invencion son utiles en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer en estadio temprano, es decir, estadios de la enfermedad donde los cambios biologicos y estructurales han comenzado, pero las manifestaciones clmicas de la enfermedad todavfa no se han hecho evidentes o aun no estan bien desarrolladas. La enfermedad de Alzheimer en estadio temprano puede, de hecho, comenzar anos antes de que se manifieste cualquier signo clmico de la enfermedad. La enfermedad de Alzheimer en estadio temprano incluye la enfermedad de Alzheimer prodromica, la enfermedad de Alzheimer preclmica y el deterioro cognitivo leve. Aunque el deterioro cognitivo leve puede no estar relacionado con la enfermedad de Alzheimer, a menudo es una fase de transicion a la enfermedad de Alzheimer o debida a la enfermedad de Alzheimer. La enfermedad de Alzheimer preclmica y prodromica son estadios asintomaticos, y generalmente se diagnostican por la presencia de biomarcadores relacionados con la enfermedad de Alzheimer. En este contexto, se cree que los compuestos de la presente invencion son utiles para ralentizar la progresion de la enfermedad de Alzheimer en estadio temprano, tal como un deterioro cognitivo leve, a la enfermedad de Alzheimer. Tambien se cree que los compuestos de la presente invencion son utiles en el tratamiento de la perdida de memoria, los deficits de atencion y la demencia asociados con la enfermedad de Alzheimer.
Otras enfermedades, ademas del continuo de la enfermedad de Alzheimer, se caracterizan por depositos de pamiloide y ovillos neurofibrilares. Esto incluye, p. ej., la Trisoirna 21 tambien conocida como smdrome de Down. Los pacientes que padecen smdrome de Down tienen un cromosoma 21 adicional cuyo cromosoma contiene el gen de la protema precursora de amiloide (APP). El cromosoma 21 adicional lleva a la expresion en exceso de la APP, lo que conduce a un aumento de los niveles de peptido Ap, lo que eventualmente causa un riesgo notablemente mayor de desarrollar la enfermedad de Alzheimer observada en pacientes con smdrome de Down [Alzheimer S and Dementia, 11, 700-709, 201]. La angiopatfa amiloide cerebral tambien se caracteriza por depositos de p-amiloide y ovillos neurofibrilares en los vasos sangumeos del sistema nervioso central [Pharmacol Reports, 67, 195-203, 2015] y, como tal, se espera que sea tratable con los compuestos de la presente invencion.
En una realizacion, la presente invencion proporciona un metodo para el tratamiento de una enfermedad seleccionada entre enfermedad de Alzheimer (familiar o esporadica), enfermedad de Alzheimer preclmica, enfermedad de Alzheimer prodromica, deterioro cognitivo leve, smdrome de Down y angiopatfa amiloide cerebral, comprendiendo el metodo la administracion de un cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo a un paciente que lo necesite.
La presente invencion proporciona ademas un metodo para inhibir BACE1 en un paciente que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
La presente invencion tambien proporciona un metodo para inhibir la escision mediada por p-secretasa de la protema precursora de amiloide, que comprende administrar a un paciente que necesita tal tratamiento una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En realizaciones adicionales, la presente invencion proporciona el uso de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad seleccionada entre enfermedad de Alzheimer (familiar o esporadica), enfermedad de Alzheimer preclmica, enfermedad de Alzheimer prodromica, deterioro cognitivo leve, smdrome de Down o angiopatfa amiloide cerebral.
La presente invencion tambien proporciona el uso de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para la fabricacion de un medicamento para la inhibicion de BACE1. La presente invencion proporciona adicionalmente el uso de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para la fabricacion de un medicamento para la inhibicion de la produccion o acumulacion de peptido Ap.
En una realizacion, la presente invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso en un metodo para el tratamiento de una enfermedad seleccionada entre enfermedad de Alzheimer (familiar o esporadica), enfermedad de Alzheimer preclmica, enfermedad de Alzheimer prodromica, deterioro cognitivo leve, smdrome de Down o angiopatia amiloide cerebral.
En una realizacion, la presente invencion se refiere a un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso en un metodo para inhibir bAc EI o en un metodo para inhibir la produccion o acumulacion de peptido Ap.
En una realizacion adicional, la invencion proporciona una formulacion farmaceutica adaptada para cualquiera de los tratamientos y usos anteriores.
En una realizacion, un mairnfero es un ser humano.
En una realizacion, el paciente es un paciente humano.
La presente invencion tambien comprende sales de los presentes compuestos, tfpicamente, sales farmaceuticamente aceptables. Tales sales incluyen sales de adicion de acido farmaceuticamente aceptables. Las sales de adicion de acido incluyen sales de acidos inorganicos y de acidos organicos.
Los ejemplos representativos de acidos inorganicos adecuados incluyen los acidos clorhfdrico, bromhfdrico, yodhfdrico, fosforico, sulfurico, sulfamico, mtrico y similares. Los ejemplos representativos de acidos organicos adecuados incluyen los acidos formico, acetico, tricloroacetico, trifluoroacetico, propionico, benzoico, cinamico, cftrico, fumarico, glicolico, itaconico, lactico, metanosulfonico, maleico, malico, malonico, mandelico, oxalico, pmrico, piruvico, salfcilico, susccmico, metanosulfonico, etanosulfonico, tartarico, ascorbico, pamoico, bismetilen salidlico, etanodisulfonico, gluconico, citraconico, aspartico, palmttico, etilendiaminotetraacetico (EDTA), glicolico, paminobenzoico, glutamico, bencenosulfonico, p-toluenosulfonico, acidos teofilin aceticos, as^ como las 8-haloteofilinas (por ejemplo, 8-bromoteofilina y similares). Otros ejemplos de sales de adicion de acidos organicos o inorganicos farmaceuticamente aceptables incluyen las sales farmaceuticamente aceptables enumeradas en S. M. Berge, y col., J. Pharm. Sci., 1977, 66, 2.
Ademas, los compuestos de esta invencion pueden existir en formas no solvatadas y solvatadas con disolventes farmaceuticamente aceptables tales como agua, etanol y similares.
Los compuestos de la presente invencion pueden tener uno o mas centros asimetricos y se pretende que cualquier isomero optico (es decir, enantiomeros o diastereomeros), como isomeros opticos separados, puros o parcialmente purificados y cualquier mezcla de los mismos, incluidas mezclas racemicas, es decir, una mezcla de estereoisomeros, se incluya dentro del alcance de la invencion.
En este contexto, se entiende que cuando se especifica la forma enantiomerica, el compuesto esta en exceso enantiomerico, p. ej., esencialmente en forma pura. En consecuencia, una realizacion de la invencion se refiere a un compuesto de la invencion que tiene un exceso enantiomerico de al menos 60%, al menos 70%, al menos 80%, al menos 85%, al menos 90%, al menos 96%, preferiblemente al menos 98%.
Las formas racemicas se pueden resolver en las antfpodas opticas mediante metodos conocidos, por ejemplo, mediante la separacion de sus sales diastereomericas con un acido opticamente activo, y liberando el compuesto de amina opticamente activo mediante tratamiento con una base. La separacion de tales sales diastereomericas se puede lograr, p. ej. por cristalizacion fraccionada. Los acidos opticamente activos adecuados para este proposito pueden incluir, pero no se limitan a, acidos d- o l-tartaricos, mandelicos o canforsulfonicos. Otro metodo para resolver racematos en las antfpodas opticas se basa en la cromatograffa sobre una matriz opticamente activa. Los compuestos de la presente invencion tambien se pueden resolver mediante la formacion y separacion cromatografica de derivados diastereomericos a partir de reactivos derivatizantes quirales, tales como reactivos alquilantes o acilantes quirales, seguido de la escision del coadyuvante quiral. Cualquiera de los metodos anteriores se puede aplicar para resolver las antfpodas opticas de los compuestos de la invencion per se o para resolver las antfpodas opticas de productos intermedios sinteticos, que se pueden convertir a continuacion, mediante los metodos descritos en la presente memoria, en los productos finales resueltos opticamente que son los compuestos de la invencion.
Se pueden utilizar metodos adicionales para la resolucion de isomeros opticos, conocidos por los expertos en la tecnica. Tales metodos incluyen aquellos comentados porJ. Jaques, A. Collet y S. Wilen en Enantiomers, Racemates, and Resolutions, John Wiley and Sons, Nueva York, 1981. Los compuestos opticamente activos tambien se pueden preparar a partir de materiales de partida opticamente activos.
La presente invencion proporciona adicionalmente una composicion farmaceutica que comprende una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un portador farmaceuticamente aceptable. La presente invencion tambien proporciona una composicion farmaceutica que comprende una cantidad terapeuticamente eficaz de uno de los compuestos espedficos descritos en la Seccion Experimental y un portador farmaceuticamente aceptable.
Los compuestos de la invencion se pueden administrar solos o combinados con portadores o excipientes farmaceuticamente aceptables, en dosis unicas o multiples. Las composiciones farmaceuticas de acuerdo con la invencion se pueden formular con portadores o diluyentes farmaceuticamente aceptables, asf como cualquier otro coadyuvante y excipiente conocido de acuerdo con tecnicas convencionales tales como las descritas en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22a edicion, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 2013.
Las composiciones farmaceuticas para administracion oral incluyen formas de dosificacion solidas tales como capsulas, comprimidos, grageas, pfldoras, pastillas, polvos y granulos. Cuando sea apropiado, las composiciones se pueden preparar con recubrimientos tales como recubrimientos entericos o se pueden formular para proporcionar una liberacion controlada del ingrediente activo tal como una liberacion sostenida o prolongada de acuerdo con metodos bien conocidos en la tecnica. Las formas de dosificacion lfquidas para administracion oral incluyen soluciones, emulsiones, suspensiones, jarabes y elixires. Las composiciones farmaceuticas para administracion parenteral incluyen soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones inyectables, acuosas y no acuosas esteriles, asf como polvos esteriles para su reconstitucion en soluciones o dispersiones inyectables esteriles antes de su uso. Otras formas de administracion adecuadas incluyen, pero no se limitan a, supositorios, pulverizaciones, pomadas, cremas, geles, inhalantes, parches dermicos e implantes.
Las dosis orales tfpicas vanan de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal por dfa. Los compuestos de esta invencion se utilizan generalmente como una base libre o como una sal farmaceuticamente aceptable de los mismos. Se prepara una sal farmaceuticamente aceptable de un compuesto de Formula I, p. ej. de una manera convencional, tratando una solucion o suspension de una base libre de Formula I con un equivalente molar de un acido farmaceuticamente aceptable. Los ejemplos representativos de acidos organicos e inorganicos adecuados se han descrito anteriormente.
Los portadores farmaceuticos adecuados incluyen diluyentes o cargas solidos inertes, soluciones acuosas esteriles y diversos disolventes organicos. Los ejemplos de portadores solidos incluyen lactosa, terra alba, sacarosa, ciclodextrina, talco, gelatina, agar, pectina, acacia, estearato de magnesio, acido estearico y alquil eteres inferiores de celulosa. Los ejemplos de portadores lfquidos incluyen, pero no se limitan a, jarabe, aceite de cacahuete, aceite de oliva, fosfolfpidos, acidos grasos, aminas de acidos grasos, polioxietileno y agua. De manera similar, el portador o diluyente puede incluir cualquier material de liberacion sostenida conocido en la tecnica, tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo, solo o mezclado con una cera. Las composiciones farmaceuticas formadas combinando los compuestos de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable de los mismos y un portador farmaceuticamente aceptable se administran facilmente en una variedad de formas de dosificacion adecuadas para las rutas de administracion descritas. Las formulaciones se pueden presentar convenientemente en forma de dosificacion unitaria por metodos conocidos en la tecnica farmaceutica.
Si se utiliza un portador solido para la administracion oral, la preparacion se puede comprimir en comprimidos, colocar en una capsula de gelatina dura en forma de polvo o pelets, o puede estar en forma de un trocisco o pastilla. La cantidad de portador solido variara ampliamente pero variara de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 1 g por unidad de dosificacion. Si se utiliza un portador lfquido, la preparacion puede estar en forma de un jarabe, emulsion, capsula de gelatina blanda o lfquido inyectable esteril, tal como una suspension o solucion lfquida acuosa o no acuosa.
Los compuestos de la presente invencion son como se muestra en los ejemplos de potentes inhibidores de BACE1 y son capaces de disminuir el nivel de peptido Ap en el cerebro y el plasma de ratas, por lo que se cree que dichos compuestos son utiles en el tratamiento de trastornos neurodegenerativos y cognitivos, cuyas caractensticas patologicas comprenden depositos de Ap y ovillos neurofibrilares, tales como por ejemplo enfermedad de Alzheimer. Puede ser beneficioso combinar un compuesto de la presente invencion con otro paradigma de tratamiento util en el tratamiento de semejante enfermedad, p. ej., la enfermedad de Alzheimer.
Las protemas Tau son abundantes en las neuronas. Las protemas Tau son solubles y muy labiles a la fosforilacion y se unen a la tubulina proporcionando la regulacion y modulacion del ensamblaje de la tubulina, es decir, eventualmente la estructura y la estabilidad microtubular. Las protemas Tau solamente se pueden asociar con la tubulina en el estado mas desfosforilado, y la fosforilacion/desfosforilacion actua como un interruptor que controla la asociacion de la tubulina. La Tau fosforilada constituye una parte importante de los ovillos neurofibrilares que son una de las caractensticas de la enfermedad de Alzheimer.
La llamada hipotesis de Tau sugiere el direccionamiento de estos ovillos patologicos, uno de cuyos componentes principales es la protema Tau fosforilada, como paradigma de tratamiento para la enfermedad de Alzheimer. En particular, se han sugerido inmunoterapias, tanto activas como pasivas, como una forma de direccionamiento a los ovillos neurofibrilares de Tau. En la inmunoterapia activa, se inyecta un antigeno patogeno en el paciente y el sistema inmunitario innato provoca una respuesta inmunitaria. Esto desencadena la maduracion de las celulas B que generan anticuerpos de alta afinidad contra el antfgeno administrado. En una inmunoterapia pasiva, la activacion del sistema inmunitario innato se evita infundiendo un anticuerpo espedfico contra el antigeno. Se sugiere que el sistema de eliminacion inherente elimina a continuacion el ligando unido al anticuerpo. Existe evidencia sustancial de la eficacia de la inmunoterapia tanto activa como pasiva dirigida a la protema Tau fosforilada como tratamiento para la enfermedad de Alzheimer [Alzheimer's and Dementia, 7 (4, supl.) S480-481; J Neurosci 30, 16559-16556, 2010; J Neurosci, 27, 9115-9129, 2007].
En una realizacion, la invencion proporciona un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., enfermedad de Alzheimer, comprendiendo el metodo la administracion de una cantidad terapeuticamente eficaz de dos componentes (1) un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y (2) un compuesto util en inmunoterapia de Tau activa o pasiva a un paciente que lo necesite. Dicho compuesto util en la inmunoterapia pasiva de Tau puede ser un anticuerpo dirigido contra la protema Tau fosforilada. Dicho compuesto util en la inmunoterapia activa de Tau puede ser un fragmento de la secuencia de aminoacidos de la protema Tau que tras la inyeccion a un paciente provoca la generacion de un anticuerpo anti- protema Tau fosforilada en dicho paciente. La administracion de acuerdo con esta realizacion de la invencion puede ser simultanea, o puede haber un intervalo de tiempo entre la administracion de los dos componentes.
En una realizacion, la invencion se refiere al uso de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un compuesto util en inmunoterapia de Tau activa o pasiva en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de trastornos neurodegenerativos o cognitivos, p. ej., enfermedad de Alzheimer. En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un compuesto util en inmunoterapia de Tau activa o pasiva para su uso en un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., enfermedad de Alzheimer.
En una realizacion, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un compuesto util en inmunoterapia de Tau activa o pasiva y un portador farmaceuticamente aceptable.
Otro paradigma para el tratamiento del trastorno neurodegenerativo y cognitivo, p. ej. la enfermedad de Alzheimer, consiste en atacar los peptidos Ap. Se ha sugerido que esto se puede lograr mediante una inmunoterapia pasiva o activa dirigida a los peptidos Ap [J Neurosci, 34, 11621-11630, 2014; J Neurosci 33, 4923-4934, 2013]. Combinado con los compuestos de la presente invencion, esto intentana lograr el mismo mecanismo patologico a traves de dos rutas diferentes. Los anticuerpos anti-Ap (inyectados directamente al paciente o generados en el paciente como resultado de una inmunoterapia activa) eliminan los depositos de Ap en el cerebro, mientras que los compuestos de la presente invencion bloquean o reducen la acumulacion adicional de peptido Ap.
En una realizacion, la invencion proporciona un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., la enfermedad de Alzheimer, comprendiendo el metodo la administracion de una cantidad terapeuticamente eficaz de dos componentes (1) un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y (2) un compuesto util en inmunoterapia activa o pasiva contra peptido Ap a un paciente que lo necesite. Dicho compuesto util en la inmunoterapia pasiva contra peptido Ap puede ser un anticuerpo anti-peptido Ap, tal como gantenerumab, solanezumab, aducanumab o crenezumab. Dicho compuesto util en la inmunoterapia activa contra peptido Ap puede ser un fragmento de la secuencia de aminoacidos del peptido Ap que, tras inyectarlo en un paciente, provoca anticuerpos anti-peptido Ap en dicho paciente. La administracion de acuerdo con esta realizacion de la invencion puede ser simultanea, o puede haber un intervalo de tiempo entre la administracion de los dos componentes.
En una realizacion, la invencion se refiere al uso de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un compuesto util en inmunoterapia activa o pasiva contra peptido Ap en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., la enfermedad de Alzheimer. En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un compuesto util en inmunoterapia activa o pasiva contra peptido Ap para su uso en un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., la enfermedad de Alzheimer.
En una realizacion, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un compuesto util en inmunoterapia activa o pasiva contra peptido Ap y un portador farmaceuticamente aceptable.
El antagonista del receptor de NMDA (N-metil-D-aspartato) memantina y los inhibidores de la acetilcolin esterasa donepezilo, rivastigmina y galantamina son medicamentos aprobados para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.
En una realizacion, la invencion proporciona un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., la enfermedad de Alzheimer, comprendiendo el metodo la administracion de una cantidad terapeuticamente eficaz de dos componentes (1) un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y (2) un antagonista del receptor de NMDA o un inhibidor de acetilcolin esterasa a un paciente que lo necesite. La administracion de acuerdo con esta realizacion de la invencion puede ser simultanea, o puede haber un intervalo de tiempo entre la administracion de los dos componentes.
En una realizacion, la invencion se refiere al uso de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un antagonista del receptor de NMDA o un inhibidor de la acetilcolin esterasa en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento del trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., la enfermedad de Alzheimer.
En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un antagonista del receptor de NMDA o un inhibidor de acetilcolin esterasa para su uso en un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., la enfermedad de Alzheimer.
En una realizacion, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un antagonista del receptor de NMDA o un inhibidor de acetilcolin esterasa y un portador farmaceuticamente aceptable.
Las convulsiones o la actividad epileptiforme tambien estan asociadas con la enfermedad de Alzheimer, incluyendo los estadios tempranos de la enfermedad de Alzheimer, y el tratamiento de dicha actividad epileptica, que busca normalizar la hiperactividad del hipocampo, puede formar parte del paradigma de tratamiento de la enfermedad de Alzheimer [JAMA Neurol, 70, 1158-1166, 2013; J Neurosci Res, 93, 454, 465, 2015; Neuron, 74, 647-474, 2012; Neurepsychpharm, 35, 1016-1025, 2010; CNS Neurosci Ther, 19, 871-881, 2013]. Los antiepilepticos utiles incluyen antagonistas del receptor de NMDA y moduladores de los canales ionicos, tales como topiramato, levetiracetam y lamotrigina.
En una realizacion, la invencion proporciona un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., la enfermedad de Alzheimer, comprendiendo el metodo la administracion de una cantidad terapeuticamente eficaz de dos componentes (1) un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y (2) un antiepileptico a un paciente que lo necesite. La administracion de acuerdo con esta realizacion de la invencion puede ser simultanea, o puede haber un intervalo de tiempo entre la administracion de los dos componentes.
En una realizacion, la invencion se refiere al uso de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un antiepileptico en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., la enfermedad de Alzheimer.
En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un antiepileptico para su uso en un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej. la enfermedad de Alzheimer.
En una realizacion, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un antiepileptico y un portador farmaceuticamente aceptable.
La evidencia emergente sugiere que la inflamacion tiene un papel causal en la patogenesis de la enfermedad de Alzheimer y que la neuroinflamacion no es un sistema pasivo activado por los depositos de p-amiloide emergentes y los ovillos neurofibrilares, sino que tambien contribuye a la patogenesis en sf misma [Lancet Neurol, 14, 388-405, 2015; J Alz Dis, 44, 385-396, 2015; Neurol, 84, 2161-2168, 2015]. De esto se deduce que los farmacos antiinflamatorios, tales como los AINE (farmacos antiinflamatorios no esteroides), los inhibidores de TNFa, tales como el etanercept y los inhibidores de la MAP quinasa p38, tales como VX-745 (5-(2,6-diclorofenil)-2 -((2,4-difluorofenil)tio)-6H-pirimido[1,6-b]piridazin-6-ona) pueden ser utiles en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.
En una realizacion, la invencion proporciona un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., la enfermedad de Alzheimer, comprendiendo el metodo la administracion de una cantidad terapeuticamente eficaz de dos componentes (1) un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y (2) un medicamento antiinflamatorio a un paciente que lo necesite. La administracion de acuerdo con esta realizacion de la invencion puede ser simultanea, o puede haber un intervalo de tiempo entre la administracion de los dos componentes.
En una realizacion, la invencion se refiere al uso de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un farmaco antiinflamatorio en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej. la enfermedad de Alzheimer.
En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un farmaco antiinflamatorio para su uso en un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej. la enfermedad de Alzheimer.
En una realizacion, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un farmaco antiinflamatorio y un portador farmaceuticamente aceptable.
Ademas, se ha demostrado la eficacia en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer para los inhibidores de la agregacion de la protema Tau, tales como TRX-0237, tambien conocido como Azul de Metileno, y los ISRS (Inhibidores Selectivos de la Recaptacion de Serotonina), tales como el citalopram [Behav Pharmacol, 26, 353-368, 2015; Sci Transl Med, 6 (236re4), 2014].
En una realizacion, la invencion proporciona un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., la enfermedad de Alzheimer, comprendiendo el metodo la administracion de una cantidad terapeuticamente eficaz de dos componentes (1) un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y (2) un inhibidor de la agregacion de la protema Tau o un ISRS a un paciente que lo necesite. La administracion de acuerdo con esta realizacion de la invencion puede ser simultanea, o puede haber un intervalo de tiempo entre la administracion de los dos componentes.
En una realizacion, la invencion se refiere al uso de un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un inhibidor de la agregacion de la protema Tau o un ISRS en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej. la enfermedad de Alzheimer. En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un inhibidor de la agregacion de la protema Tau o un farmaco ISRS para su uso en un metodo para el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo o cognitivo, p. ej., la enfermedad de Alzheimer.
En una realizacion, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un inhibidor de la agregacion de la protema Tau o un farmaco ISRS y un portador farmaceuticamente aceptable.
Seccion experimental
Los compuestos de la presente invencion de formula general I, en donde R1 y Ar se definen como antes se pueden preparar por los metodos descritos en los siguientes esquemas de reaccion 1-7 y en los ejemplos. En los metodos descritos, es posible hacer uso de variantes o modificaciones, que son conocidas por los qmmicos expertos en la tecnica o que podnan ser evidentes para los expertos en la tecnica. Ademas, otros metodos para preparar compuestos de la invencion seran facilmente evidentes para el experto en la tecnica a la luz de los siguientes esquemas de reaccion y ejemplos.
Por ejemplo, el Esquema 2 describe el uso de grupos protectores selectivos durante la smtesis de los compuestos de la invencion. Un experto en la tecnica podna seleccionar el grupo protector apropiado para una reaccion particular. Ademas, puede ser necesario incorporar estrategias de proteccion y desproteccion para los sustituyentes tales como grupos amino, amido, ceto e hidroxilo en los metodos sinteticos descritos a continuacion para sintetizar los compuestos de Formula I. Los metodos para la proteccion y desproteccion de tales grupos son bien conocidos en la tecnica, y se pueden encontrar en T. Green, et al., Protective Groups in Organic Synthesis, 1991, 2a Edicion, John Wiley & Sons, Nueva York.
Para los compuestos, que pueden existir en forma de una mezcla o en un equilibrio entre dos o mas tautomeros, solo un tautomero esta representado en los esquemas, aunque puede que no sea el tautomero mas estable. Para los compuestos, que pueden existir en formas isomericas enantiomericas, estereoisomericas o geometricas, se especifica su configuracion geometrica; de lo contrario la estructura representa una mezcla de estereoisomeros. Los datos analfticos de LC-MS se obtuvieron utilizando los siguientes metodos.
Metodo A:
Se ejecuto LC-MS en Waters Aquity UPLC-MS que consiste en Waters Aquity, incluyendo el administrador de columnas, el administrador de disolventes binarios, el organizador de muestras, el detector de PDA (que funciona a 254 nm), el detector ELS y SQ-MS equipados con una fuente APPI que funciona en modo de iones positivos.
Condiciones de LC: La columna era Acquity UPLC BEH C18 1,7 pm; 2,1x150 mm que funciona a 60°C con 0,6 mL/min de un gradiente binario que consiste en agua acido trifluoroacetico al 0,05% (A) y acetonitrilo agua al 5% acido trifluoroacetico al 0,03% (B). Gradiente: 0,00 min: B al 10%; 3,00 min: B al 99,9%; 3,01 min: B al 10%; 3,60 min: B al 10%. Tiempo total de ejecucion: 3,60 min.
Metodo B:
Se ejecuto LC-MS en Waters Acquity UPLC-MS que consiste en Waters Acquity, incluyendo el administrador de columnas, el administrador de disolventes binarios, el organizador de muestras, el detector de PDA (que funciona a 254 nm), el detector ELS y TQ-MS equipado con una fuente APPI que funciona en modo de iones positivos.
Condiciones de LC: La columna era Acquity UPLC BEH C18 1,7 ^m; 2,1x50 mm que funciona a 60°C con 1,2 mL/min de un gradiente binario que consiste en agua acido trifluoroacetico al 0,05% (A) y acetonitrilo agua al 5% acido trifluoroacetico al 0,05% (B). Gradiente: 0,00 min: B al 10%; 1,00 min: B al 100%; 1,01 min: B al 10%; 1,15 min: B al 10%. Tiempo total de ejecucion: 1,15 min.
Los espectros de RMN H1 se registraron a 600 MHz en un aparato Bruker Avance AV-NI-600 o a 400 MHz en un aparato Bruker Avance AV-NI-400 o un aparato Varian 400. Los valores de desplazamiento qmmico se expresan en valores de ppm relativos. Las siguientes abreviaturas se utilizan para la multiplicidad de senales de RMN: s = singlete, d = doblete, t = triplete, q = cuartete, dd = doblete doble, ddd = doble doblete de dobletes, dt = triplete doble, br = ancho y m = multiplete
Los compuestos de las formulas generales Via y VIb se pueden preparar como se muestra en el Esquema 1.
Esquema 1
Figure imgf000012_0001
donde R1 es como se define en la formula I y R2 es un grupo alquilo tal como metilo o etilo. Los compuestos de formula general IV (Esquema 1) se pueden preparar haciendo reaccionar compuestos de formula II con una sulfinamida tal como III en presencia de un acido de Lewis/agente de secado tal como tetraetoxido de titanio. El tratamiento de los compuestos de formula IV con compuestos de formula general V tales como bromofluoroacetato de etilo en presencia de polvo de Zn o en presencia de dietilcinc y cloruro de tris (trifenilfosfina) rodio (I) proporciona los compuestos de formulas generales VIa y VIb que se pueden separar por cromatografia.
Los compuestos de las formulas generales XIIa y XIIb se pueden preparar como se muestra en el Esquema 2.
Esquema 2
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donde R2 y R3 son grupos alquilo tales como metilo o etilo y R4 es un grupo protector tal como terc-butoxi carbonilo.
Los compuestos de formula VII (Esquema 2) se pueden preparar por tratamiento de compuestos de formula Via con un agente reductor tal como hidruro de diisobutilaluminio. En algunos casos, el compuesto VII podria estar en equilibrio con la forma hidratada. El tratamiento de los compuestos de formula general VII en condiciones tales como 2-(dietoxifosforil)-2-fluoroacetato de etilo en presencia de cloruro de litio y una base tal como N,N-diisopropiletilamina proporciona compuestos de formula general VIII en forma E o Z o una mezcla de las mismas. Los compuestos de formula general IX se obtienen por hidrogenacion de compuestos de formula general VIII en presencia de un catalizador tal como paladio sobre carbono. Los compuestos de formula general X se obtienen por tratamiento de compuestos de formula general IX con un acido tal como el acido clorhidrico en metanol seguido de calentamiento del intermedio en un disolvente de mayor punto de ebullition, tales como tolueno o xilenos, en presencia de una base, tal como trietilamina. Los compuestos de formula general XI se obtienen por tratamiento de compuestos de formula general X con dicarbonato de di-terc-butilo en presencia de una cantidad catalUica de N,N-dimetil-4-aminopiridina. Los compuestos de formulas generales XIIa y XIIb se obtienen por tratamiento de los compuestos de formula general XI con una base tal como hexametildisilazida de litio seguido de alquilacion con un haluro de alquilo. Los mismos procedimientos descritos anteriormente tambien se pueden utilizar para la smtesis de compuestos de formulas generales XIIc y XIId a partir de VIb.
Como ejemplo y en donde R1 es fluor en la position 2 del anillo de fenilo o en donde el anillo de fenilo esta sustituido con dos atomos de fluor en las posiciones 2 y 3, el compuesto de formula general XVIIa se puede preparar como se muestra en el Esquema 3.
Esquema 3
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donde R4 es un grupo protector tal como ferc-butoxi carbonilo.
Los compuestos de formula general XIIIa se obtienen tratando los compuestos de formula general XIIa con acido mtrico. Esto desprotegera el radical amida y nitrara el anillo de benceno en la position indicada. La reduction del grupo nitro de compuestos de formula general XIIIa, seguida por la protection del radical anilina formado, proporciona compuestos de formula general XVa. El tratamiento de los compuestos de formula general XVa con un reactivo tal como el reactivo de Lawesson (2,4-bis (4-metoxifenil)-1,3,2,4-ditiadifosfetano-2,4-disulfuro) proporciona compuestos de formula general XVIa. La desproteccion de XVIa en condiciones tales como acido trifluoroacetico en diclorometano proporciona el compuesto XVIIa. Alternativamente, el orden de las reacciones se puede cambiar y los compuestos de formula general XIIIa se pueden hacer reaccionar con un reactivo tal como el reactivo de Lawesson para obtener compuestos de formula general XXIa, que despues de la reduccion del grupo nitro tambien proporcionan compuestos de formula general XVIIa (Esquema 4).
Esquema 4
Figure imgf000014_0002
Como ejemplo y en donde R1 es fluor en la posicion orto del anillo de fenilo o en donde el anillo de fenilo esta sustituido con dos atomos de fluor en las posiciones 2 y 3, el compuesto de formula general XVIIb (Esquema 5) se puede preparar mediante los mismos procedimientos que se muestran en el Esquema 3 y 4 pero partiendo de un compuesto de formula general XIIb. Asimismo, se pueden utilizar los mismos procedimientos para la smtesis de compuestos de formulas generales XVIIc y XVIId a partir de XIIc y XIId, respectivamente.
Esquema 5
Figure imgf000015_0001
donde R4 es un grupo protector tal como ferc-butoxi carbonilo.
Los compuestos de formula general XIIIa tambien se pueden preparar como se muestra en el Esquema 6. Partiendo de acetofenonas sustituidas con nitro de formula general IIb, se pueden preparar los compuestos de formula general VIII como se describe en los Esquemas 1 y 2. Los compuestos de formula general IX se pueden obtener por reduction selectiva del radical olefrnico de los compuestos de formula general VIII. Los compuestos de formula general XIIIa se pueden preparar como se describe para los compuestos de formula general XIIa en el Esquema 2. Del mismo modo, los compuestos de formulas generales XIIIb, XIIIc y XIIId tambien se pueden preparar como se muestra en el Esquema 6 a partir de acetofenonas sustituidas con nitro de formula general IIb.
Esquema 6
Figure imgf000015_0002
donde R1 se define como en la fórmula I y R3 es un grupo alquilo tal como metilo o etilo
Los compuestos de la formula general I se pueden preparar como se muestra en el Esquema 7.
Esquema 7
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donde R1 y Ar se definen como en la formula I.
Los compuestos de formula general XX (Esquema 7) se pueden preparar haciendo reaccionar compuestos de formula general XVII con un cloruro de acido carboxflico de formula general XVIII o mediante reaccion con un acido carboxflico de formula general XIX utilizando procedimientos conocidos por los qmmicos expertos en la tecnica. El tratamiento de compuestos de formula general XX con amomaco proporciona compuestos de formula general I. En algunos casos, la adicion de un reactivo oxidante tal como hidroperoxido de terc-butilo podria ser necesaria para facilitar la reaccion.
Preparacion de los intermedios
Intermedio: (R)-N-[1-(2-fluorofenil)etiliden]-2-metil-propano-2-sulfinamida
Figure imgf000016_0002
A una solucion de 1-(2-fluorofenil)etanona (100 g, 723,9 mmoles) y (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (105,28 g, 868,68 mmoles) en THF (2,00 L) se le tetraetoxititanio (33 a0ñ,a2d6ió g, 1,45 moles). La solucion se calento a 80°C y se agito durante 18 horas. La reaccion se sofoco con agua (500 mL) y a continuacion se extrajo con acetato de etilo (500 mL, 4 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (500 mL), se secaron sobre Na2sO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por cromatografia en gel de sflice (altura de la columna: 250 mm, diametro: 100 mm, gel de sflice de malla 100-200, eter de petroleo/acetato de etilo = 10/1, 5/1) para proporcionar (R)-N-/'1-(2-fluorofenil)etilideno]-2-metil-propano-2-sulfinamida (150 g, 86% de rendimiento).
Intermedios: (2R,3R)-3-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2-fluoro-3-(2-fluorofenil)butanoato de etilo y (2S,3R)-3-[[(R)-tercbutilsulfinil]amino]-2-fluoro-3-(2-fluorofenil)butanoato de etilo
Figure imgf000016_0003
A una suspension de (R)-N-/'1-(2-fluorofenil)etilideno]-2-metil-propano-2-sulfinamida (20 g, 82,9 mmoles), 2-bromo-2-fluoro-acetato de etilo (30,66 g, 165,8 mmoles) y Rh(PPh3)3Cl (2,30 g, 2,49 mmoles) en Th F anhidro (400 mL) se le anadio Et2Zn (1 M en THF, 249 mL) gota a gota a 0°C durante un periodo de 10 minutos en argon durante el cual la temperatura se mantuvo por debajo de 5°C. La mezcla de reaccion se calento a 30°C y se agito a 30°C durante 18 horas. La reaccion se sofoco con agua (150 mL), se filtro y a continuacion se extrajo con acetato de etilo (3 x 500 mL). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera saturada (40 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por cromatografia instantanea sobre gel de sflice (eter de petroleo:acetato de etilo = 100:1 a 3:1) para proporcionar (2R,3R)-3-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2-fluoro-3-(2 fluorofenil)butanoato de etilo (11,2 g, 39% de rendimiento) y una fraccion impura que contema (2S,3R)-3-[[(R)-tercbutilsulfinil]amino]-2-fluoro-3-(2-fluorofenil)butanoato de etilo. Despues de la purificacion por HPLC preparativa de la ultima fraccion, se aislo (2S,3R)-3-[[(R)-fe/r-butilsulfinil]amino]-2-fluoro-3-(2-fluorofenil)-butanoato (0,8 g, rendimiento del 3%).
Se preparo (2R,3R)-3-(((R)-terc-butilsulfinil)amino)-3-(2,3-difluorofenil)-2-fluorobutanoato de etilo de una manera similar a partir de (R)-N-/"1-(2,3-difluorofenil)etilideno]-2-metil-propano-2-sulfinamida
Intermedio: (4S,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2-fluorofenil)hex-2-enoato de de etilo
Figure imgf000017_0001
A una solucion de (2R,3R)-3-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2-fluoro-3-(2-fluorofenil)butanoato de etilo (10,0 g, 28,8 mmoles) en THF (200 mL) se le DIBAL-H (hid arñuardoió de diisobutilaluminio) (1 M en THF, 143,9 mL) gota a gota a -78°C durante un periodo de 30 minutos bajo N2. La solucion de reaccion de color amarillo se agito a -78°C durante 3,5 horas. La reaccion se sofoco con agua (200 mL), se filtro y se extrajo con acetato de etilo (200 mL, 4 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera saturada (200 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vac'io para proporcionar el producto bruto (R)-N-((2R,3R)-3-fluoro-2-(2-fluorofenil)-4-oxobutan-2-il)-2-metilpropano-2-sulfinamida (8,0 g, bruto). A una suspension de 2-dietoxifosforil-2-fluoro-acetato de etilo (5,13 g, 21,2 mmoles), DIPEA (N,N-diisopropiletilamina (1,18 g, 9,1 mmoles) y LiCl (386 mg, 9,1 mmoles) en acetonitrilo (150 mL) se le una solucion de ( aRñ)-aNd-ió((2R,3R)-3-fluoro-2-(2-fluorofenil)-4-oxobutan-2-il)-2-metilpropano-2-sulfinamida (2,30 g, 7,58 mmoles) en acetonitrilo (20 mL) gota a gota a 0°C durante un periodo de 10 minutos bajo N2. La suspension se calento a 25°C, se agito durante 18 horas. La reaccion se concentro a vado, el residuo se extrajo con acetato de etilo (100 mL, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera saturada (100 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por cromatografia instantanea sobre gel de sflice (eter de petroleo/acetato de etilo = 5:1, 1:1) para proporcionar (4S,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2-fluorofenil)hex-2-enoato de etilo (3,44 g, 8,79 mmoles, 49,8% de rendimiento).
Se preparo (4R,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2-fluorofenil)hex-2-enoato de etilo de una manera similar a partir de (2S,3R)-3-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2-fluoro-3-(2-fluorofenil)butanoato
Se preparo (4S,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2,3-difluorofenil)hex-2-enoato de etilo de manera similar a partir de (2R,3R)-3-(((R)-terc-butilsulfinil)amino)-3-(2,3-difluorofenil)-2-fluorobutanoato de etilo Intermedio: (4S,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2-fluorofenil)-hexanoato de etilo
Figure imgf000017_0002
A una solucion de (4S,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2-fluorofenil)hex-2-enoato de etilo (13,77 g, 35,18 mmoles) en acetato de etilo (500 mL) se le Pd/C (10%, 2,00 g, humedo). a Lñaad siuóspension de color negro se desgasifico a vado y se purgo con H2 varias veces. La mezcla se agito bajo H2 (3,44 bares (50 psi)) a 30°C durante 18 horas. La suspension se filtro y el filtro se concentro para proporcionar un producto de (4S,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2-fluorofenil)hexanoato de etilo (10,5 g, 75,9% de rendimiento).
Se preparo (4R,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2-fluorofenil)hexanoato de etilo de manera similar a partir de (4R,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2-fluorofenil)hex-2-enoato de etilo
Se preparo (4S,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2,3-difluorofenil)hexanoato de etilo de manera similar a partir de (4S,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2,3 -difluorofenil)hex-2-enoato de etilo Intermedio: (5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluorofenil)-6-metilpiperidin-2-ona
Figure imgf000018_0001
A una solucion de (4S,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2-fluorofenil)-hexanoato de etilo (10,50 g, 26,69 mmoles) en MeOH (100 mL) se le Hcl/MeOH (4 M añ,a 5d0ió mL) de una vez a 30°C bajo N2. La solucion incolora se agito a 30°C durante 2 horas. La solucion se concentro a vado para proporcionar (4S,5S)-5-amino-2,4-difluoro-5-(2-fluorofenil)hexanoato de etilo bruto (6,50 g, 21,35 mmoles, 80% de rendimiento) que se disolvio en tolueno (100 mL) y trietilamina (2,19 g, 21,64 mmoles) adicional. La solucion incolora se agito a 110°C durante 18 horas. La reaccion se concentro a vaco, el residuo se purifico por cromatografia instantanea sobre gel de sflice (eter de petroleo: acetato de etilo = 3:1 ~ 1:1) para proporcionar (5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluorofenil)-6-metil-piperidin-2-ona (4,50 g, 17,6 mmoles, 78,2% de rendimiento).
Se preparo (5R,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluorofenil)-6-metilpiperidin-2-ona de manera similar a partir de (4R,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2-fluorofenil)hexanoato. Se preparo (5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2,3-difluorofenil)-6-metilpiperidin-2-ona de manera similar a partir de (4S,5R)-5-[[(R)-terc-butilsulfinil]amino]-2,4-difluoro-5-(2,3-difluorofenil)hexanoato
Intermedio: (2R,3S)-3,5-Difluoro-2-(2-fluorofenil)-2-metil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de terc-butilo
Figure imgf000018_0002
A una solucion de (5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluorofenil)-6-metil-piperidin-2-ona (4,50 g, 18,50 mmoles) y dicarbonato de di-terc-butilo (8,08 g, 37,0 mmoles) en THF (100 mL) se le N,N-dimetilpiridin-4-amina (113 m agñ,a 9d2ió5 ^moles) de una vez a 25°C bajo N2. La solucion incolora se agito a 25°C durante 48 horas. La solucion se sofoco con agua (100 mL) y se extrajo con acetato de etilo (100 mL, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera saturada (50 mL), se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por cromatografia instantanea sobre gel de sflice (eter de petroleo/acetato de etilo = 20/1, 5/1) para proporcionar (2R,3S)-3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2-metil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de terc-butilo (4,70 g, 13,0 mmoles, 70,3% de rendimiento).
Se preparo (2R,3R)-3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2-metil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo de manera similar a partir de (5R,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluorofenil)-6-metilpiperidin-2-ona.
Se preparo (2R,3S)-3,5-difluoro-2-(2,3-difluorofenil)-2-metil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo de manera similar a partir de (5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2,3-difluorofenil)-6-metilpiperidin-2-ona
Intermedios: (2R,3S,5R)-3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo y (2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo
Figure imgf000018_0003
A una solucion de (2R,3S)-3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2-metil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de terc-butilo (1,50 g, 4,37 mmoles) en t Hf (30 mL) se le LiHMDS (bis(trim aeñtialsdiilóil)amiduro de litio) (1 M, 8,74 mL) gota a gota a -78°C durante un periodo de 10 minutos bajo N2. La solucion se agito a -78°C durante 1 hora y a continuacion a la solucion se le yodo amñaedtaióno (3,10 g, 21,9 mmoles). La solucion de reaccion se agito a -78°C durante otros 45 minutos. A continuacion, la solucion se dejo calentando a 25°C y se agito durante 18 horas. La reaccion se sofoco lentamente con hielo y a continuacion se extrajo con acetato de etilo (30 mL, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera saturada (30 mL, dos veces), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vaco. El residuo se purifico por cromatografia instantanea sobre gel de sflice (eter de petroleo:acetato de etilo = 15:1, 10:1) para proporcionar los productos (2R,3S,5R)-3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de terc-butilo (550 mg, 1,54 mmoles, 35,2% de rendimiento) y (2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de terc-butilo (600 mg, 1,68 mmoles, 38,4% de rendimiento). Se preparo de (2R,3R,5S)-3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo de una manera similar a partir de (2R,3R)-3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2-metil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo
Se prepararon (2R,3S,5R)-3,5-difluoro-2-(2,3-difluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo y (2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2-(2,3-difluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo de manera similar a partir de (2R,3S)-3,5-difluoro-2-(2,3-difluorofenil)-2-metil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo Intermedio: (3R,5S,6R)-3,5-Difluoro-6-(2-fluoro-5-nitro-fenil)-3,6-dimetil-piperidin-2-ona
Figure imgf000019_0001
A (2R,3S,5R) -3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo- (1,20 g, 3,36 mmoles) en acido trifluoroacetico (5,69 mL, 73,9 mmoles) se le H2SO4(1,27 mL, 25,9 mmole asñ),ad aió continuacion a la solucion se le HNO3 (1,16 mL, 16 a,8ña mdmióoles), la solucion se agito a 0°C durante 30 minutos, a continuacion la solucion se agito a 50°C durante 18 horas, el LCMS no mostro material de partida, la solucion se vertio en agua con hielo (p/p = 1/1) (50 mL) y se alcalinizo a pH> 11 utilizando NaOH acuoso 5n . La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (50 mL, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera saturada (100 mL), se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por cromatografia instantanea sobre gel de sflice (eter de petroleo/acetato de etilo = 10/1, 2/1) para proporcionar (3R,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitro-fenil)-3,6-dimetil-piperidin-2-ona (1,0 g, 99% de rendimiento).
Se preparo (3S,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidin-2-ona de manera similar a partir de (2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo
Se preparo (3S,5R,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidin-2-ona de manera similar a partir de (2R,3R,5S)-3,5-difluoro-2-(2-fluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo.
Se preparo (3R,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2,3-difluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidin-2-ona de manera similar a partir de (2R,3S,5R)-3,5-difluoro-2-(2,3-difluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo.
Se preparo (3S,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2,3-difluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidin-2-ona de manera similar a partir de (2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2-(2,3-difluorofenil)-2,5-dimetil-6-oxo-piperidino-1-carboxilato de ferc-butilo.
Intermedio: (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidin-2-ona
Figure imgf000019_0002
A una solucion de (3R,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitro-fenil)-3,6-dimetil-piperidin-2-ona (1,10 g, 3,64 mmoles) en acetato de etilo ( 1 0 0 mL) se le Pd/C (1 0 %, humedo, 0,5 g a)ña badjioó N2. La suspension se desgasifico a vado y se purgo con H2 varias veces. La mezcla se agito bajo H2 (1,03 bares (15 psi)) a 25°C durante 18 horas. La mezcla de reaccion se filtro y el producto filtrado se concentro para proporcionar (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidin-2-ona (950 mg, 3,49 mmoles, 96% de rendimiento).
Se preparo (3S,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluorofenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetilpiperidin-2-ona de manera similar a partir de (3S,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidin-2-ona.
Intermedio: N-[3-[(2R,3S,5R)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-oxo-2-piperidil]-4-fluorofenil]carbamato de ferc-butilo
Figure imgf000019_0003
A una mezcla de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidin-2-ona (750 mg, 2,75 mmoles) en NaHCO3 acuoso (5 mL) y diclorometano (20 mL) se le dicarbonato de ferc-butilo (1,8 a0ñ ga,d 8ió,26 mmoles) de una vez a 25°C bajo N2. La mezcla incolora se agito a 25°C durante 18 horas. La mezcla se sofoco con agua ( 20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (50 mL, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera saturada (50 mL, dos veces), se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por cromatografia instantanea sobre gel de sflice (eter de petroleo/acetato de etilo = 10/1, 1/1) para proporcionar N-[3-[(2R,3S,5R)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-oxo-2-piperidil]-4-fluoro-fenil]carbamato de ferc-butilo (850 mg, 83% de rendimiento).
Se preparo N-[3-[(2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-oxo-2-piperidil]-4-fluoro-fenil]carbamato de ferc-butilo de manera similar a partir de (3S,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidin-2-ona.
Intermedio: N-[3-[(2R,3S,5R)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-tioxo-2-piperidil]-4-fluoro-fenil]carbamato de ferc-butilo
Figure imgf000020_0001
A una suspension de N-[3-[(2R,3S,5R)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-oxo-2-piperidil]-4-fluoro-fenil]carbamato de fercbutilo (250 mg, 671 ^mol) en tolueno (10 mL) se le reactivo de Lawesson (2, 4- abñisad (i4ó-metoxifenil)-1,3,2,4-ditiadifosfetano-2,4-disulfuro) (149 mg, 369 ^moles) de una vez a 90°C bajo N2. La mezcla se agito a 90°C durante 1 hora. La mezcla se concentro a presion reducida. El residuo se purifico por cromatografia instantanea sobre gel de sflice (eter de petroleo/acetato de etilo = 10/1, 1/1) para proporcionar N-[3-[(2R,3S,5R)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-tioxo-2-piperidil]-4-fluoro-fenil]carbamato de ferc-butilo (230 mg, 88% de rendimiento).
Se preparo N-[3-[(2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-tioxo-2-piperidil]-4-fluoro-fenil]carbamato de ferc-butilo de manera similar a partir de N-[3-[(2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-oxo-2-piperidil]-4-fluoro-fenil]carbamato de ferc-butilo.
Intermedio: (3R,5S,6R)-6-(5-Amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona
Figure imgf000020_0002
A una solucion de N-[3-[(2R,3S,5R)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-tioxo-2-piperidil]-4-fluorofenil]carbamato de ferc-butilo (500 mg, 1,29 mmoles) en diclorometano (20 mL) se le HCl/MeOH (10 mL) de una v aeñzad aió 25°C bajo N2. La mezcla se agito a 25°C durante 18 horas. La mezcla se concentro a presion reducida. El residuo se disolvio en agua (10 mL), el pH de la solucion se alcalinizo a pH = 7-8 utilizando una solucion acuosa saturada de NaHCO3 , la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (20 mL, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera saturada (20 mL, dos veces), se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por cromatografia instantanea sobre gel de sflice (eter de petroleo/acetato de etilo = 10/1, 1/1) para proporcionar (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona (318 mg, 85,5% de rendimiento).
Se preparo (3S,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona de manera similar a partir de N-[3-[(2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-tioxo-2-piperidil]-4-fluoro-fenil]carbamato de ferc-butilo.
Intermedio: (3S,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona
Figure imgf000020_0003
A una suspension de (3S,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidin-2-ona (4,50 g, 14,89 mmoles) en tolueno (100 mL) se le reactivo de Lawe asñsaodnió (3,31 g, 8,19 moles) de una vez a 90°C bajo N2. La mezcla se agito a 90°C durante 2 horas. La mezcla se concentro a vado. El residuo se purifico por cromatografia instantanea sobre gel de sflice (eter de petroleo/acetato de etilo) para proporcionar (3S,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona (4,0 g, 84% de rendimiento).
Se preparo (3S,5R,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona de manera similar a partir de (3S,5R,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidin-2-ona.
Se prepare (3S,5S,6R)-6-(2,3-difluoro-5-nitrofenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona de manera similar a partir de (3S,5S,6R)-6-(2,3-difluoro-5-nitrofenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetilpiperidin-2-ona.
Se prepare (3R,5S,6R)-6-(2,3-difluoro-5-nitrofenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona de manera similar a partir de (3R,5S,6R)-6-(2,3-difluoro-5-nitrofenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetilpiperidin-2-ona.
Intermedio: (3S,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluorofenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona
Figure imgf000021_0001
A una solucion de (3S,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona (4,50 g, 14,14 mmoles) y NH4Cl (3,78 g, 70,70 mmoles) en etanol (80 mL) y agua (20 mL) se le anadio polvo de hierro (3,95 g, 70,70 mmoles) de una vez a 25°C bajo N2. La suspension de color negro se agito a 25°C durante 18 horas. La mezcla se filtro y el producto filtrado se concentro a presion reducida. El residuo se extrajo con acetato de etilo (100 mL x 3). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera saturada (100 mL), se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por cromatografia instantanea sobre gel de sflice (eter de petroleo/acetato de etilo) para proporcionar (3S,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluorofenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona (2,59 g, 61% de rendimiento). RMN H1 (CDCl3400 m Hz TMS): 58,33 (s, 1H), 6,93-6,87 (m, 1H), 6,62-6,60 (m, 1H), 6,45-6,44 (m, 1H), 5,38-5,26 (m, 1H), 3,73 (s, 2H), 2,65 -2,58 (m, 1H), 2,00-1,86 (m, 1H), 1,80 (s, 3H), 1,68 (d, J = 20,8 Hz, 3H). [a]20,D = -58 ° (c = 0,1 g/100 mL, MeOH).
Se preparo (3S,5R,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona de manera similar a partir de (3S,5R,6R)-3,5-difluoro-6-(2-fluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona.
Se preparo (3S,5S,6R)-6-(5-amino-2,3-difluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona de manera similar a partir de (3S,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2,3-difluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona.
Se preparo (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2,3-difluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona de manera similar a partir de (3R,5S,6R)-3,5-difluoro-6-(2,3-difluoro-5-nitrofenil)-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona.
Intermedio: cf3-5-(metoxi-cf3)pirazino-2-carboxilato de metilo
Figure imgf000021_0002
Se añadió sodio (0,094 g, 4,10 mmoles) en pequenas porciones a metanol-cf4 (2,94 mL) y la mezcla de reaccion se agito hasta que todo el sodio hubo reaccionado. La solucion se a otra solucion de 5-cloropirazi anñaa-2d-ió carboxilato de metilo (0,6 g, 3,48 mmoles) en metanol-cf4 (0,98 mL). La mezcla de reaccion se agito durante 1,5 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se concentro a vado. Se anadieron 2 mL de agua. La mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4 y concentro a vado para proporcionar cf3-5-(metoxi-d3)pirazino-2-carboxilato de metilo.
Intermedio: acido 5-(metoxi-cf3)pirazino-2-carboxflico
Figure imgf000021_0003
Se disolvio cf3-5-(metoxi-cf3)pirazino-2-carboxilato de metilo (424 mg, 2,43 mmoles) en agua (3 mL) y 1,4-dioxano (3 mL). Se aña hdidióroxido de litio (146 mg, 6,09 mmoles) y la mezcla de reaccion se agito durante 1 hora. La mezcla de reaccion se evaporo hasta aproximadamente 2 mL y se extrajo con eter dietilreo. La fase organica se extrajo con NaOH 1 M y las fases acuosas combinadas se acidularon a pH 2 con HCl 6 N (ac.). La mezcla se enfrio en un bano de hielo, y el compuesto solido se recogio para proporcionar acido 5-(metoxi-cf3)pirazino-2-carboxflico.
Intermedio: 5-(metoxi-cf3)picolinato de metilo
Figure imgf000022_0001
Se disolvio 5-hidroxipicolinato de metilo (2,88 g, 18,8 mmoles) en dimetilformamida (108 mL) bajo argon. Se anadio carbonato de potasio (7,20 g, 52,1 mmoles) y la suspension de color naranja se agito durante 45 minutos a temperatura ambiente. Se añ yaoddióometano-cf3 (1,41 mL, 22,6 mmoles). La mezcla de reaction se agito durante 2 horas. Se añadió agua. La mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4y se concentro a vaco y se purifico por cromatografia en columna sobre gel de sflice (heptano:acetato de etilo) para proporcionar 5-(metoxi-d3) picolinato de metilo.
Intermedio: acido 5-(metoxi-d3)picolmico
Figure imgf000022_0002
Se disolvio 5-metoxi-d3)picolinato de metilo (200 mg, 1,175 mmoles) en agua (1,5 mL) y 1,4-dioxano (3 mL). Se anadio hidroxido de litio (70,4 mg, 2,94 mmoles) y la mezcla de reaccion se agito durante 1 hora. La mezcla de reaccion se evaporo hasta aproximadamente 2 mL y se extrajo con eter dietiflco. La fase organica se extrajo con NaOH 1 M y las fases acuosas combinadas se acidularon a pH 2 con HCl 6 N (ac.). La mezcla se enfrio en un bano de hielo y se formo un producto precipitado. El producto precipitado se recogio para proporcionar acido 5-(metoxid3)picolmico.
Preparation de los compuestos de la invention.
Ejemplo 1 N-(3-((2R,3S,5S)-6-Amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-fluoropicolinamida (compuesto 1)
Figure imgf000022_0003
A una solution de acido 5-fluoropicolmico (0,019 g, 0,14 mmoles) en DMF (1 mL), se le aña HdAióTU (hexafluorofosfato de 3-oxido de 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio) (0,046 g, 0,12 mmoles), la solucion se agito durante 5 minutos. A continuation se le anadieron (3S,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluorofenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona (0,025 g, 0,092 mmoles) y DIPEA (N,N-diisopropiletilamina) (0,08 mL, 0,46 mmoles). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Se NH4Cl añ aacudoióso saturado y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. El residuo se disolvio en amoniaco 7 M en metanol (2 mL). La mezcla se agito a 65°C durante la noche, se concentro a presion reducida y se purifico por cromatografia en columna sobre gel de sflice (heptano:acetato de etilo). El aceite obtenido se disolvio en acetato de etilo y se lavo con NaHCO3 acuoso saturado/agua (1/1) cinco veces. La fase organica se concentro a presion reducida para proporcionar N-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-fluoropicolinamida (0,019 mmoles, 21% de rendimiento). RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,64 (s, 1H), 8,74 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,23 (dd, J = 8,7, 4,6 Hz, 1H), 7,98 (td, J = 8,7, 2,9 Hz, 1H), 7,89 - 7,75 (m, 2H), 7,16 (dd, J = 11,8, 8,6 Hz, 1H), 6,11 (s, 2H), 5,23 -5,03 (m, 1H), 2,37 -2,26 (m, 1H), 2,01 - 1,84 (m, 1H), 1,62 (d, J = 23,9 Hz, 3H), 1,52 (d, J = 1,1 Hz, 3H).
CL-EM (m/z) 395,4 (MH+); tR = 0,47 minutos (Metodo B)
Los siguientes compuestos se prepararon de manera similar al ejemplo 1:
Ejemplo 2 N-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-metoxipirazino-2-carboxamida (compuesto 2)
Figure imgf000022_0004
Preparada a partir de (3S,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-metoxipirazino-2-carboxflico.
RMN H1 (600 MHz, DMSO) 5 10,53 (s, 1H), 8,88 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,41 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,82 (m, 1H), 7,16 (dd, J = 11,9, 8,7 Hz, 1H), 6,10 (ancho s, 2H), 5,18-5,07 (m, 1H), 4,03 (s, 3H), 2,37 -2,26 (m, 1H), 1,99-1,83 (m, 1H) 1,53 (d, J = 23,9 Hz, 3H), 1,52 (s, 3H). CL-EM (m/z) 408,4 (MH+); tR = 0,47 minutos (Metodo B)
Ejemplo 3 N-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-metoxipicolinamida (compuesto 3)
Figure imgf000023_0001
Preparada a partir de (3S,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5­ metoxipicolmico.
RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,46 (s, 1H), 8,43 - 8,34 (m, 1H), 8,16 - 8,06 (m, 1H), 7,85 (ddd, J = 8,7, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,79 (dd, J = 7,3, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,7, 2,8 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 11,9, 8,8 Hz, 1H), 6,46 - 5,73 (m, 2H), 5,20 - 5,06 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 2,37 - 2,22 (m, 1H), 2,02-1,84 (m, 1H) ), 1,62 (d, J = 23,9 Hz, 3H), 1,52 (m, 3H). CL­ EM (m/z) 407,4 (MH+); tR = 0,48 minutos (Metodo B)
Ejemplo 4 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-fluoropicolinamida (compuesto 4)
Figure imgf000023_0002
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-fluoropicolmico.
RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,77 (s, 1H), 8,73 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,22 (dd, J = 8,7, 4,6 Hz, 1H), 7,97 (td, J = 8,7, 2,8 Hz, 1H), 7,82 - 7,73 (m, 1H), 7,71 (dd, J = 7,2, 2,6 Hz, 1H), 7,17 (dd, J = 11,7, 8,8 Hz, 1H), 6,25 (s, 2H), 5,12 (dd, J = 48,0, 2,5 Hz, 1H), 2,45 - 2,25 (m, 1H), 1,76 - 1,58 (m, 1H), 1,56 (s, 3H), 1,53 (d, J = 22,1 Hz, 3H). LC-MS (m/z) 395.1 (m H+); tR = 0,46 minutos (Metodo A)
Ejemplo 5 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-metoxipirazino-2-carboxamida (compuesto 5)
Figure imgf000023_0003
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-metoxipirazino-2-carboxflico.
RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,67 (s, 1H), 8,67 (s, 1H), 8,41 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,76 (m, 1H), 7,71 (dd, J = 7,2, 2,6 Hz, 1H), 7,17 (dd, J = 11,7, 8,8 Hz, 1H), 6,30 (ancho s, 2H), 5,12 (dd, J = 47,9, 2,5 Hz, 1H), 4,02 (s, 3H), 2,38 -2,28 (m, 1H), 1,73-1,58 (m, 1H), 1,56 (s, 3H), 1,53 (d, J = 22,1 Hz, 3H). CL-EM (m/z) 408,2 (MH+); tR = 0,48 minutos (Metodo A)
Ejemplo 6 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-2-metiloxazol-4-carboxamida (compuesto 6)
Figure imgf000024_0001
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 2-metiloxazol-4-carboxflico.
RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,37 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 7,78 - 7,72 (m, 1H), 7,71 - 7,66 (m, 1H), 7,18 (dd, J = 11,6, 8,9 Hz, 1H), 5,22 - 5,09 (m, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,43 -2,33 (m, 1H), 1,75 - 1,62 (m, 1H), 1,60 (s, 3H), 1,56 (d, J = 22,1 Hz, 3H). LC-MS (m/z) 381,1 (MH+); tR = 0,43 minutos (Metodo A)
Ejemplo 7 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-metoxipicolinamida (compuesto 7)
Figure imgf000024_0002
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-metoxipicolmico.
RMN H1 (600 MHz, DMSO) 5 10,61 (s, 1H), 8,41 - 8,30 (m, 1H), 8,14 - 8,07 (m, 1H), 7,80 - 7,74 (m, 1H), 7,71 (dd, J = 7,3, 2,8 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 8,8,2,8 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 11,8, 8,8 Hz, 1H), 6,27 (s, 2H), 5,19 - 5,05 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 2,45 - 2,27 (m, 1H), 1,76-1,59 (m, 1H), 1,56 (s, 3H), 1,53 (d, J = 22,1 Hz, 3H). CL-EM (m/z) 407,1 (MH+); tR = 0,5 minutos (Metodo A)
Ejemplo 8 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxi-cf3) picolinamida (Compuesto 8)
Figure imgf000024_0003
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-(metoxi-ds)picolrnico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 5 10,72 (s, 1H), 8,39 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,80 - 7,75 (m, 1H), 7,60 (dd, J = 8,7, 2,9 Hz, 1H), 7,21 (dd, J = 11,6, 9,0 Hz, 1H), 5,21 (d, J = 47,5 Hz, 1H), 2,46 - 2,38 (m, 1H), 1,82 - 1,66 (m, 1H), 1,64 (s, 3H), 1,61 (d, J = 22,1 Hz, 3H). LC-MS (m/z) 410 (MH+); tR = 0,49 (Metodo A)
Ejemplo 9 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-cloropicolinamida (Compuesto 9)
Figure imgf000024_0004
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 4-clorobenzoico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 5 10,83 (s, 1H), 8,78 (dd, J = 2,4, 0,7 Hz, 1H), 8,18 (dd, J = 8,4, 2,4 Hz, 1H), 8,15 (dd, J = 8,4, 0,7 Hz, 1H), 7,78 (ddd, J = 8,7, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,71 (dd, J = 7,3, 2,7 Hz, 1H), 7,17 (dd, J = 11,7, 8,8 Hz, 1H), 6,21 (s, 2H), 5,11 (ddd, J = 48,2,4,7, 2,1 Hz, 1H), 2,34 (dddd, J = 20,7, 15,6, 8,9, 4,8 Hz, 1H), 1,72 - 1,57 (m, 1H), 1,56 (s, 3H), 1,53 (d, J = 22,1 Hz, 3H). CL-EM (m/z) 411,1 (MH+); tR = 0,53 (Metodo A)
Ejemplo 10 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-1-metil-1H-imidazol-2-carboxamida (Compuesto 10)
Figure imgf000025_0001
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-feml)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 1-metil-1H-imidazol-2-carboxHico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 5 10,53 (s, 1H), 7,72 (ddd, J = 8,7, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 7,3, 2,7 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 0,7 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 11,8, 8,8 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 6,16 (s, 2H), 5,15 - 5,04 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 2,32 (dddd, J = 20,8, 15,5, 8,9, 4,9 Hz, 1H), 1,71 - 1,56 (m, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,51 (d, J = 22,1 Hz, 3H). CL-EM (m/z) 380,1 (MH+); tR = 0,42 (Metodo A)
Ejemplo 11 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofeml)-5-(trifluorometil)pirazino-2-carboxamida (Compuesto 11)
Figure imgf000025_0002
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-feml)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-(trifluorometil)pirazino-2-carboxflico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 511,13 (s, 1H), 9,44 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 9,30 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7,81 (ddd, J = 8,7, 4,1,2,8 Hz, 1H), 7,74 (dd, J = 7,2, 2,7 Hz, 1H), 7,20 (dd, J = 11,7, 8,8 Hz, 1H), 6,23 (s, 2H), 5,18 - 5,06 (m, 1H), 2,34 (dddd, J = 20,7, 15,6, 9,0, 4,8 Hz, 1H), 1,71-1,58 (m, 1H), 1,56 (s, 3H), 1,53 (d, J = 22.0 Hz, 3H). CL-EM (m/z) 446,1 (MH+); tR = 0,53 (Metodo A)
Ejemplo 12 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-4-metiltiazol-2-carboxamida (Compuesto 12)
Figure imgf000025_0003
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-feml)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 4-metiltiazol-2-carboxflico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,91 (s, 1H), 7,78 - 7,72 (m, 1H), 7,71 - 7,67 (m, 2H), 7,16 (dd, J = 11,7, 8,8 Hz, 1H), 6,21 (s, 2H), 5,16 - 5,05 (m, 1H), 2,50 (t, J = 2,0 Hz, 3H), 2,38 - 2,27 (m, 1H), 1,70 - 1,56 (m, 1H), 1,55 (s, 3H), 1,52 (d, J = 22,0 Hz, 3H). LC-MS (m/z) 397,1 (MH+); tR = 0,5 (Metodo A)
Ejemplo 13 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofeml)-2-(difluorometil)oxazol-4-carboxamida (Compuesto 13)
Figure imgf000025_0004
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-feml)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 1-(difluorometil)-1H-pirazol-3-carboxflico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,54 (s, 1H), 9,04 (s, 1H), 7,67 (ddd, J = 8,7, 4,2, 2,8 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 7,2, 2,7 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 51,9 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 11,7, 8,8 Hz, 1H), 6,17 (s, 2H), 5,10 (ddd, J= 48,2, 4,5, 2,1 Hz, 1H), 2,38 -2,27 (m, 1H), 1,69 - 1,56 (m, 1H), 1,55 (s, 3H), 1,51 (d, J = 22,0 Hz, 3H). CL-EM (m/z) 417,1 (MH+); tR = 0,47 (Metodo A)
Ejemplo 14 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofeml)-1-(difluorometil)-1H-pirazol-3-carboxamida (Compuesto 14)
Figure imgf000026_0001
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-feml)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-(metoxi-ds)pirazino-2-carboxnico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 5 10,52 (s, 1H), 8,41 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,92 (t, J = 58,7 Hz, 1H), 7,69 (ddd, J = 8,7, 4,1,2,8 Hz, 1H), 7,63 (dd, J = 7,3, 2,7 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 11,8, 8,8 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,19 (s, 2H), 5,11 (ddd, J = 48,2, 4,5, 2,1 Hz, 1H), 2,39 - 2,26 (m, 1H), 1,73 - 1,56 (m, 1H), 1,55 (s, 3H), 1,51 (d, J = 22,0 Hz, 3H). LC-MS (m/z) 416,1 (MH+); tR = 0,46 (Metodo A)
Ejemplo 15 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofeml)-5-(difluorometil)pirazino-2-carboxamida (Compuesto 15)
Figure imgf000026_0002
Preparado a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-feml)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-ciano-3-metilpicolmico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 511,06 (s, 1H), 9,38 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 9,09 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,81 (ddd, J = 8,7, 4,1, 2,8 Hz, 1H), 7,74 (dd, J = 7,2, 2,7 Hz, 1H), 7,26 (t, J = 54,0 Hz, 1H), 7,20 (dd, J = 11,7, 8,8 Hz, 1H), 6,22 (s, 2H), 5,12 (ddd, J = 48,2, 4,6,2,1 Hz, 1H), 2,41 -2,28 (m, 1H), 1,72-1,58 (m, 1H), 1,56 (s, 3H), 1,53 (d, J = 22,0 Hz, 3H). CL-EM (m/z) 428,1 (MH+); tR = 0,48 (Metodo A)
Ejemplo 16 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofeml)-4-clorobenzamida (Compuesto 16)
Figure imgf000026_0003
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-(metoxi-ds)picolrnico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,45 (s, 1H), 7,96 - 7,92 (m, 2H), 7,70 (ddd, J = 8,7, 4,1,2,8 Hz, 1H), 7,62 - 7,58 (m, 2H), 7,54 (dt, J = 7,2, 3,6 Hz, 1H), 7,16 (dd, J = 11,8, 8,8 Hz, 1H), 6,17 (s, 2H), 5,11 (ddd, J = 48,2, 4,6, 2,1 Hz, 1H), 2,38 - 2,28 (m, 1H), 1,71 - 1,57 (m, 1H), 1,56 (s, 3H), 1,50 (d, J = 22,0 Hz, 3H). CL-EM (m/z) 410,1 (MH+); tR = 0,54 (Metodo A)
Ejemplo 17 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofeml)-5-cianopicolinamida (Compuesto 17)
Figure imgf000026_0004
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-cianopicolmico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 5 10,99 (s, 1H), 9,19 (dd, J = 2,1, 0,9 Hz, 1H), 8,57 (dd, J = 8,2, 2,1 Hz, 1H), 8,28 (dd, J = 8,2, 0,9 Hz, 1H), 7,79 (ddd, J = 8,7, 4,1, 2,9 Hz, 1H), 7,72 (dd, J = 7,2, 2,7 Hz, 1H), 7,18 (dd, J = 11,7, 8,8 Hz, 1H), 6,20 (s, 2H), 5,17 - 5,05 (m, 1H), 2,41 -2,26 (m, 1H), 1,69 - 1,56 (m, 1H), 1,55 (s, 3H), 1,52 (d, J = 22,1 Hz, 3H). LC-MS (m/z) 402,1 (MH+); tR = 0,47 (Metodo A)
Ejemplo 18 N-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4,5-difluorofeml)-5-(metoxi-cf3)picolinamida (Compuesto 18)
Figure imgf000027_0001
Preparada a partir de (3R,5S,6R)-6-(5-amino-2,3-difluoro-feml)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 2-(difluorometil)oxazol-4-carboxnico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,89 (s, 1H), 8,38 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,08 - 8,01 (m, 1H), 7,63 - 7,58 (m, 2H), 5,22 - 5,09 (m, 1H), 2,47 - 2,35 (m, 1H), 1,85 - 1,69 (m, 1H) ), 1,62 (s, 3H), 1,58 (d, J = 22,1 Hz, 3H). CL-EM (m/z) 428,1 (MH+); tR = 0,54 (Metodo A)
Ejemplo 19 N-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridm-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxid3)- picolinamida (Compuesto 19)
Figure imgf000027_0002
Preparada a partir de (3S,5S,6RJ-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-(metoxi-d3)picolmico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,46 (s, 1H), 8,39 (dd, J = 2,9, 0,5 Hz, 1H), 8,12 (dd, J = 8,7, 0,5 Hz, 1H), 7,86 - 7,80 (m, 1H), 7,78 (dd, J = 7,3, 2,7 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,7, 2,9 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 11,8, 8,8 Hz, 1H), 6,07 (s, 2H), 5,12 (dd, J = 48,5, 6,1 Hz, 1H), 2,35 -2,27 (m, 1H), 1,98 - 1,84 (m, 1H), 1,61 (d, J = 23,9 Hz, 3H), 1,51 (s, 3H). LC-MS (m/z) 410 (MH+); tR = 0,49 (Metodo A)
Ejemplo 20 N-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxid3)pirazino-2-carboxamida (Compuesto 20)
Figure imgf000027_0003
Preparada a partir de (3S,5S,6RJ-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-(metoxi-ds)picolrnico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,52 (s, 1H), 8,88 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,86 - 7,78 (m, 2H), 7,16 (dd, J = 11,6, 8,9 Hz, 1H), 6,13 (s, 2H), 5,12 (dd, J = 48,6, 5,3 Hz, 1H), 2,35 -2,28 (m, 1H), 2,01 - 1,84 (m, 1H), 1,62 (d, J = 23,9 Hz, 3H), 1,52 (s, 3H). CL-EM (m/z) 411,2 (MH+); tR = 0,48 (Metodo A)
Ejemplo 21 N-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-ciano-3-metilpicolinamida (Compuesto 21)
Figure imgf000027_0004
Preparada a partir de (3S, 5S, 6RJ-6-(5-amino-2-fluoro-feml)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-cloropicolmico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 5 10,77 (s, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,89 - 7,82 (m, 1H), 7,64 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,17 (dd, J = 11,5, 9,1 Hz, 1H), 6,20 (s, 2H), 5,18 -5,06 (m, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,37 -2,28 (m, 1H), 1,97 - 1,83 (m, 1H), 1,62 (d, J = 23,9 Hz, 3H), 1,52 (s, 3H). LC-MS (m/z) 416 (MH+); tR = 0,51 (Metodo B) Ejemplo 22 N-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4,5-difluorofenil)-5-(metoxi-d3)picolinamida (Compuesto 22)
Figure imgf000028_0001
Preparada a partir de (3S,5S,6RJ-6-(5-amino-2,3-difluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-(difluorometil)pirazino-2-carboxnico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,68 (s, 1H), 8,39 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,04 - 7,98 (m, 1H), 7,68 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,7, 2,9 Hz, 1H), 6,36 (s, 2H), 5,10 (dd, J = 48,6, 6,2 Hz, 1H), 2,38 - 2,29 (m, 1H), 2,08 - 1,91 (m, 1H), 1,63 (d, J = 23,7 Hz, 3H), 1,53 (s, 3H). CL-EM (m/z) 428,2 (MH+); tR = 0,54 (Metodo A)
Ejemplo 23 N-(3-((2R,3R,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxicf3)-picolinamida (Compuesto 23)
Figure imgf000028_0002
Preparada a partir de (3S,5R,6R)-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-(metoxi-ds)picolrnico. RMN H1 (600 MHz, DMSO) 510,27 (s, 1H), 8,39 (dd, J = 2,9, 0,4 Hz, 1H), 8,14 - 8,11 (m, 1H), 8,08 (dd, J = 7,3, 2,8 Hz, 1H), 7,87 -7,82 (m, 1H), 7,62 (dd, J = 8,7, 2,9 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 12,0, 8,8 Hz, 1H), 6,00 (s, 2H), 5,23 - 5,13 (m, 1H), 2,46 - 2,33 (m, 2H), 1,62 (d, J = 22,0 Hz, 3H), 1,36 (s, 3H). CL-EM (m/z) 410,1 (MH+); tR = 0,52 (Metodo B)
Ejemplo 24 N-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-bromopicolinamida (Compuesto 24)
Figure imgf000028_0003
Preparada a partir de (3S,5S,6RJ-6-(5-amino-2-fluoro-fenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetil-piperidino-2-tiona y acido 5-bromopicolmico.
RMN H1 (600 MHz, DMSO) 5 10,70 (s, 1H), 8,86 (dd, J = 2,3, 0,7 Hz, 1H), 8,32 (dd, J = 8,4, 2,3 Hz, 1H), 8,08 (dd, J = 8,4, 0,6 Hz, 1H), 7,92 - 7,76 (m, 2H), 7,17 (dd, J = 11,8, 8,7 Hz, 1H), 6,17 (s, 2H), 5,19 - 5,07 (m, 1H), 2,39 -2,25 (m, 1H), 2,03 - 1,83 (m, 1H), 1,62 (d, J = 23,9 Hz, 3H), 1,53 (s, 3H). CL-EM (m/z) 455,1 (MH+); tR = 0,54 (Metodo B)
Estereoqmmica
Los cristales se obtuvieron por recristalizacion de 5-bromo-N-(3-((2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-tioxopiperidin-2-il)-4-fluorofenil)picolinamida en una mezcla de heptano y acetato de etilo. La estructura de la 5-bromo-N-(3-((2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-tioxopiperidin-2-il)-4-fluorofenil)picolinamida se dilucido por cristalografia de rayos X de dichos cristales. La estructura muestra la configuracion absoluta y relativa de la 5-bromo-N-(3-((2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-tioxopiperidin-2-il)-4-fluorofenil)picolinamida. La 5-bromoN-(3-((2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-tioxopiperidin-2-il)-4-fluorofenil)picolinamida se preparo como se describe en el ejemplo 1 a partir de (3S,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluorofenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona y acido 5-bromopicolmico.
Figure imgf000029_0001
Figura 1: Estructura de rayos X de 5-bromo-N-(3-((2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-tioxopiperidin-2-il)-4-fluorofenil)picolinamida
Las configuraciones absolutas de los compuestos ilustrados de la presente invention se pueden racionalizar de este modo. La 5-bromoN-(3-((2R,3S,5S)-3,5-difluoro-2,5-dimetil-6-tioxopiperidin-2-il)-4-fluorofenil)picolinamida se preparo a partir de (3S,5S,6R)-6-(5-amino-2-fluorofenil)-3,5-difluoro-3,6-dimetilpiperidino-2-tiona que se preparo a partir de XIIa (R4 = ferc-butoxi carbonilo) como se muestra en el Esquema 7, confirmando as ^ la configuration absoluta de XIIa. Como consecuencia de ello, tambien se confirma la configuracion absoluta de XIIb (R4 = ferc-butoxi carbonilo).
Figure imgf000029_0002
Esquema 8. Fundamento para la asignacion de estereoqmmica absoluta y relativa de los compuestos ilustrados. R4 = ferc-butoxi carbonilo
Pruebas farmacologicas
Ensayo de union de BACE1
El ensayo de union se realizo como un ensayo basado en SPA utilizando una forma biotinilada de BACE1 humana expresada de forma recombinante y posteriormente purificada a partir de celulas HEK293 Freestyle. El ensayo de union se realizo en tampon de acetato de sodio 50 mM, pH 4,5 que contema NaCl 50 mM y Tween-20 al 0,03% en placas 384 de fondo transparente blanco (Corning num. 3653). Se mezclo el radioligando ([3H]-N-((1S,2R)-1-bencil-3-ciclopropilamino-2-hidroxi-propil)-5-(metanosulfonil-metil-amino)-N-((R)-1-fenil-etil)-isoftalamida 10 nM (concentration final) (TRQ11569 adquirido de GE Healthcare) con el compuesto de ensayo a una concentration dada, BACE1 humana 6 nM (concentracion final) y 25 pg de esferas de SPA con nucleo de PVT recubiertas con estreptavidina (RPNQ0007, GE Healthcare Life Sciences) en un volumen total de 40 pl. Se analizaron varias concentraciones de cada compuesto de prueba en el ensayo para la determinacion de la CI50. Las placas se incubaron durante una hora a temperature ambiente y se contaron en un contador Wallac Trilux. Se determinaron la union total y la no espedfica utilizando un tampon y 1 pM (concentracion final) del inhibidor de referencia de BACE1 de alta afinidad (S)-6-[3-cloro-5-(5-prop-1-inil-piridin-3-il)-tiofen-2-il]-2-imino-3,6-dimetil-tetrahidro-pirimidin-4-ona, respectivamente. Para cada compuesto de prueba, se determino un valor de CI50 (la concentracion que media una inhibicion de 50% de la union espedfica del radioligando) a partir de la curva de concentracion-respuesta y se utilizo para calcular la Ki a partir de la ecuacion Ki= CI50/ (1 L/Kd), donde L y Kd son la concentracion final del radioligando utilizado en el ensayo y la constante de disociacion del radioligando, respectivamente. La Kd del radioligando se determino a partir de experimentos de union de saturacion.
Tabla 1: afinidad de union de compuestos seleccionados
Compuesto Num. BACE1 Ki (nM)
1 30
2 26
3 23
4 98
5 51
6 58
7 39
8 58
9 36
10 820
11 190
12 99
13 62
14 45
15 100
16 220
17 39
18 6,8
19 20
20 21
21 4,1
22 3,6
23 81
24 4,3
Ensayo de eficacia de BACE1
El ensayo de eficacia se realizo como un ensayo basado en FRET utilizando un kit BACE1 disponible comercialmente (Life Technologies, P2985). Se preincubaron 2 pl de compuesto de prueba a 10 pM (concentracion final) y 15 pl de enzima BACE1 del kit (concentracion final 3 nM) durante 15 minutos a temperatura ambiente antes de la adicion de 15 pl de sustrato del kit (concentracion final 250 nM) y se incubaron durante 90 minutos adicionales a temperatura ambiente. La placa de ensayo se leyo posteriormente en un Pherastar (Ex540/Em590). La actividad de la enzima observada en presencia del compuesto de ensayo se normalizo a la actividad de la enzima observada en presencia de tampon y 10 pM (concentracion final) del inhibidor de referencia de BACE1 de alta afinidad (S)-6-[3-Cloro-5-(5-prop-1-inil-piridin-3-il)-tiofen-2-il]-2-imino-3,6-dimetil-tetra-hidropirimidin-4-ona, respectivamente. La eficacia de los compuestos de prueba se evaluo a 10 pM (concentracion final) y se definio como el porcentaje de inhibicion de la actividad de la enzima utilizando la ecuacion: % de inhibicion = 100% - actividad de la enzima normalizada en porcentaje.
Tabla 2: Actividad BACE1 de compuestos seleccionados
Compuesto Num. Inhibicion de BACE1 a 10 pM (%)
1 103
2 99
3 102
4 101
6 101
7 102
8 100
9 109
10 115
11 104
12 118
13 108
14 112
15 108
16 103
18 101
19 106
20 106
21 117
22 101
23 107
24 103
Evaluacion de los niveles de Ap en el cerebro y el plasma de rata despues de la inhibicion de BACE1.
Animales
Todo el cuidado de las ratas y los procedimientos experimentales fueron aprobados por el personal veterinario de Lundbeck, de acuerdo con la legislacion danesa. Las ratas se mantuvieron en una instalacion de barrera con un ciclo de luz/oscuridad de 12/12 h y acceso a agua y comida ad libitum.
Tratamiento de ratas no sometidas a tratamiento previo
Se adquirieron ratas Sprague Dawley macho adultas jovenes de aproximadamente 250 g de peso de Charles River y recibieron 0-30 mg/kg de vehfculo (HP betaCD al 10% MeSO4 1m , pH 2,5) o compuestos de prueba (disueltos en vehnculo) solo por sonda oral (p.o). Los compuestos se dosifican a un volumen de 5 mL/kg. Se establecieron cohortes de 5-10 animales para cada condicion de tratamiento.
Los animales sometidos a tratamiento fueron controlados de cerca por personal veterinario para detectar cualquier signo de toxicidad. Los parametros de control incluyeron el peso corporal, la apariencia ffsica, los cambios en la apariencia del pelaje, la aparicion de un comportamiento no provocado y respuestas mitigadas o exageradas a estfmulos externos.
Recogida de tejidos
A T = 180 minutos despues de la dosificacion inicial, los animales se aturdieron y se decapitaron con una guillotina. La muestra de sangre del tronco se realizo en tubos recubiertos con EDTA despues de la decapitacion del animal. La sangre se centrifugo a 2200 G a 4°C durante 15 minutos y el plasma se recogio y se congelo a -80°C. La sangre se dividio en alfcuotas para el analisis ELISA de Ap y DMPK. Inmediatamente despues del sacrificio, el cerebro se extrajo y se dividio en 2 mitades. Las mitades derechas de los cerebros se congelaron instantaneamente en hielo seco y se almacenaron a -80°C. Las mitades izquierdas se diseccionaron; tomando el prosencefalo frontal para el ELISA de Ap y utilizando el resto para el analisis DMPK. Estas muestras tambien se congelaron instantaneamente en hielo seco y se almacenaron a -80°C hasta su uso para el analisis.
Procesamiento de tejidos.
Las muestras de la corteza se descongelaron ligeramente en hielo humedo antes de su homogeneizacion con un aparto de dispersion de pequeno volumen (T10 basico ULTRA-TURRAX®) que se ajusto a una velocidad de 5 durante aproximadamente 5-7 segundos. El tejido se proceso en un volumen 10 veces mayor que el peso, por ejemplo, se homogeneizaron 100 mg de tejido en 1000 pL de tampon de homogeneizacion. Tampon de homogeneizacion: 50 mL de agua Milli Q NaCl 50 nM dietilamina (DEA) al 0,2% 1 comprimido de coctel inhibidor de Proteasa Completa inhibidor de serina proteasa irreversible hidrocloruro de fluoruro de 4-(2-aminoetil) bencenosulfonilo 1 nM (AEBSF).
Despues de la homogeneizacion, se recogieron alfcuotas de 450 pL de las muestras en un tubo Eppendorf de 1,5 mL y se colocaron en hielo humedo, se NP-40 al 0,5% ( a5ñ0a pdli)ó a todas las muestras y a continuacion se incubaron en hielo durante 30 minutos. Despues de lo cual todas las muestras se sometieron a sonicacion utilizando un homogeneizador Ultrasonic con sonido homogeneo de 20 kHz (SONOPLUS HD2070, Bandelin Electronic) con 10 pulsos ajustados a una potencia de 12-13% para extraer todas las especies de Ap. Las muestras se centrifugaron a continuacion (Microcentnfuga Ole Dich 157 MPRF) a 20000G durante 20 minutos a 4°C. Despues de la centrifugacion, se pipetearon 285 pL del sobrenadante en tubos de microtubos de 600 pL y se neutralizaron con 15 pL de tampon Tris-HCl 1M.
Protocolo ELISA
Se utilizo el kit WAKO 294-62501 de amiloide Abeta Humano/Rata (40) para todos los analisis ELISA. Se colocaron muestras de plasma de 30 pL o 30 pL de los sobrenadantes de la corteza generados como se describe anteriormente en tubos de microtubos de 600 pL en hielo humedo. A esto, se le anadieron 30 pL de urea 8M (AppliChem A1049, 9025) para generar una dilucion a la mitad. Los sobrenadantes de plasma y corteza se incubaron en hielo durante 30 minutos. Las filas patron se prepararon a partir de la provision de partida de peptidos patron proporcionada en el kit y el diluyente patron que contema Urea 1,6 M (200 pL de Urea 8M 800 pL de diluyente patron) y Urea 0,8 M (400 pL de Urea 8M 3600 pL de diluyente Patron). Se preparo una dilucion en serie a la mitad de Ap40 de 100 pmoles/mL a 0 pmoles/L para el ensayo.
Despues de la incubacion con urea, todas las muestras se diluyeron adicionalmente mediante la adicion de un diluyente patron 5 veces del kit. Esto se hizo anadiendo 240 pL de Diluyente Patron a 60 pL de mezcla de muestra/urea, que a continuacion se mezclo bien. Se pipetearon 100 pL de cada muestra diluida en los pocillos designados de la placa ELISA por duplicado. A continuacion se cubrio la placa y se incubo durante la noche a 4°C. Al dfa siguiente, el kit de ELISA se llevo a temperatura ambiente antes de su uso. La placa incubada se lavo 5 veces con la solucion de lavado 20x diluida en agua Milli Q. Se aplicaron 100 pL de producto conjugado de HRP a cada pocillo, y la placa se cubrio y se incubo a 4°C durante 1 h. El lavado se repitio de nuevo 5 veces. Se aplicaron 100 pL de solucion 3,3',5,5'-tetrametilbencidina (TMB) a cada pocillo y la placa se cubrio e incubo en la oscuridad a temperatura ambiente durante 30 minutos. A continuacion, se aplicaron 100 pL de solucion STOP a cada pocillo, y la placa se leyo a una longitud de onda de 450 nm en un espectrofotometro (Labsystems Multiscan Ascent) en los 30 minutos posteriores a la adicion de la solucion STOP a los pocillos.
La concentracion de Ap en las muestras se determino basandose en una curva patron generada a partir de los patrones que conteman concentraciones conocidas de Ap40 sintetico. Los expertos en la tecnica apreciaran que las extracciones con la dietilamina (DEA) y urea liberaran Ap soluble y Ap insoluble, respectivamente. Dado que el kit ELISA esta validado y se utiliza ampliamente, se acepta que siempre que las condiciones de tratamiento y las condiciones de ensayo sean las mismas para cada compuesto sometido a prueba, el ensayo debe proporcionar datos solidos consistentes para los compuestos sometidos a prueba y producir discrepancias mmimas.
Analisis de los datos
Para determinar la concentracion de Ap40 en las muestras, los valores interpolados de las muestras cargadas en las placas se multiplican por 20 para contabilizar las diluciones realizadas cuando se anadieron los volumenes de DEA, urea y solucion de neutralizacion. Los valores se calculan como el cambio porcentual en Ap40 en comparacion con los animales tratados con vehuculo.
El compuesto 4 se administro a dosis de 10 mg/kg p.o. y las muestras de cerebro y plasma se recogieron 3 horas despues de la dosis y las siguientes exposiciones se midieron como se describe anteriormente.
Bioanalisis de muestras de cerebro y plasma
La TC se determino en plasma y en producto homogeneizado de cerebro utilizando la cromatograffa UltraPerformance LC® (UPLC®) seguida de deteccion de MS-en tandem (MS/MS).
Aparato:
Tecan Genesis RSP 200; Biomek NXP, Beckman Coulter; Centnfuga Sigma 4K15; Acquity UPLC, AWaters; Sciex API4000 TQ, Applied Biosystems; Soporte logico de MS: version Analyst 1.4.1
Productos quimicos
Acetonitrilo, grado HPLC, Fluka, Num. 34967N; Metanol, grado HPLC, Sigma-Aldrich, Lote 9003S; Acido formico, grado HPLC, Riedel-de Haen, Lote 51660; Agua purificada, Millipore Synergy UV
Preparacion de la muestra
El producto homogeneizado de cerebro se preparo homogeneizando el cerebro 1:4 (v/v) con agua:2-propanol:DMSO (50:30:20 v/v/v) seguido de centrifugacion y recogida del sobrenadante. Los patrones de calibracion y las muestras QC se prepararon utilizando un robot Hamilton. Se agregaron 150 pL de ISTD en acetonitrilo (1 ng/mL ISTD) a 25 pL de patrones de calibracion, muestras QC y muestras de prueba (plasma y producto homogeneizado de cerebro) utilizando un robot Biomek. Despues de la centrifugacion (6200 g, 4°C, 20 min), se transfirieron 100 pL de sobrenadante de cada muestra a una nueva placa y se mezclaron con 100 pL de agua con acido formico al 0,1% utilizando un robot Biomek (archivo de metodos de transferencia InVivo). Despues de una centrifugacion rapida (6200 g, 4°C, 5 min), las muestras se colocaron en el muestreador automatico.
Analisis UPLC-MS/MS
La deteccion de MS/MS se realizo con un aparato Sciex API 4000 de Applied Biosystems en modo de ionizacion por electropulverizacion de ion positivo. Se detectaron TC e ISTD a una razon de masa con respecto a carga (m/z) de precursor > producto. Se utilizo nitrogeno para el nebulizador y los gases de colision. El area del pico se correlaciono linealmente con la concentracion en plasma y en cerebro de los analitos en el intervalo de 1,00 - 1000 ng/mL de plasma y 5,00 - 5000 ng/g de cerebro (corregida por dilucion). Si la concentracion de farmaco en la muestra de plasma/cerebro era superior a 1.000 ng/mL o 5.000 ng/g, la muestra se dilufa adecuadamente en plasma blanco/producto homogeneizado de cerebro blanco antes del analisis.
Sistema cromatografico
Columnas analfticas:
Waters Acquity UPLC HSS C18 SB (pH 2-8) 1,8 pm, 2,1x30 mm.
Fase movil A: acido formico ac. al 0,1% o hidroxido de amonio ac. al 0,1%.
Fase movil B: acetonitrilo con acido formico ac. al 0,1% o hidroxido de amonio ac. al 0,1%.
Lavado debil: Metanol
Lavado fuerte: acetonitrilo/isopropanol/acido formico (50/50/2 v/v/v)
Flujo: 0,6 mL/min
Tiempo de ejecucion: 3 min.
Para desechar: 0-0,5 min.
Temperatura: 40°C
Gradiente:
Figure imgf000033_0001
Tabla 3: Resultados para el compuesto 3
Figure imgf000034_0001
Tabla 4: Resultados para el compuesto 19
Figure imgf000034_0002
Tabla 5: Resultados para el compuesto 20
Figure imgf000034_0003
Como se muestra en las tablas 3, 4 y 5, los compuestos de la presente invencion pueden atravesar la barrera hematoencefalica y mostrar eficacia en el SNC.
Ensayo MDCK-MDR1
La permeabilidad de los compuestos de prueba se evaluo en celulas MDCK-MDR1 que se cultivaron hasta confluencia (4-6 dfas) en una placa Transwell 96. Los compuestos de prueba se diluyeron con el tampon de transporte (HBSS BSA al 1%) a una concentracion de 0,5 pM y se aplicaron al lado apical o basolateral de la monocapa celular. La penetracion de los compuestos de prueba en la direccion A a B o la direccion B a A se determino por triplicado a lo largo de un tiempo de incubacion de 60 minutos a 37°C y CO2 al 5% con una humedad relativa de 95%. Los compuestos de prueba se cuantificaron mediante analisis LC-MS/MS basado en las razones de area de picos del analito/IS en los pocillos tanto receptores como donadores de la placa Transwell.
El coeficiente de permeabilidad aparente Papp (cm/s) se calculo mediante la ecuacion:
Papp = (dCr/dt) x Vr (A x C0)
Donde dCr/dt es la concentracion acumulada de compuesto en la camara receptora como una funcion del tiempo (pM/s); Vr es el volumen de la solucion en la camara receptora (0,05 mL en el lado apical; 0,25 mL en el lado basolateral); A es el area de superficie para el transporte, es decir, 0,0804 cm2 para el area de la monocapa; C0 es la concentracion inicial en la camara donadora (pM).
Los compuestos se clasifican como sustratos de Pgp cuando la razon de flujo de salida (Papp BA / Papp AB) es > 2. Tabla 5: Actividad BACE1 de compuestos seleccionados
Figure imgf000034_0004
Figure imgf000035_0001
Como se muestra en la tabla 5, la mayona de los compuestos ilustrados de la presente invencion tienen razones de flujo de salida MDCK-MDR1 por debajo de 2 y, por lo tanto, es probable que puedan cruzar la barrera hematoencefalica (E Kerns, L Di, Drug-like Properties: Concepts, Structure Design and Methods (2008) Elsevier).

Claims (1)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto de formula I
    Figure imgf000036_0002
    en donde Ar se selecciona del grupo que consiste en fenilo, piridilo, pirimidilo, pirazinilo, imidazolilo, pirazolilo, tiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, y donde Ar esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes seleccionados entre halogeno, CN, alquilo Ci-C6 , alquenilo C2-C6 , alquinilo C2-C6 , fluoroalquilo Ci-C6 o alcoxi Ci-C6; y
    R1 es uno o mas de hidrogeno, halogeno, fluoroalquilo C1-C3 o alquilo C1-C3
    o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
    2. Un compuesto segun la reivindicacion 1, en donde el compuesto es de formula la o Ib
    Figure imgf000036_0001
    o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
    3. El compuesto segun la reivindicacion 1 o 2, en donde R1 es F o H.
    4. El compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde Ar esta opcionalmente sustituido con uno o mas F, Cl, Br, CN, alquilo Ci-C3, fluoroalquilo Ci-C3 o alcoxi Ci-C3
    5. El compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde Ar es fenilo opcionalmente sustituido.
    6. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde Ar es piridilo opcionalmente sustituido. 7. El compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde Ar es pirazinilo opcionalmente sustituido.
    8. El compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde Ar es imidazolilo opcionalmente sustituido.
    9. El compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde Ar es pirazolilo opcionalmente sustituido.
    10. El compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde Ar es oxazolilo opcionalmente sustituido.
    11. El compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde Ar es tiazolilo opcionalmente sustituido.
    12. El compuesto segun la reivindicacion 1, en donde el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:
    N-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-fluoropicolinamida,
    N-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-metoxipirazino-2 -carboxamida,
    N-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5
    metoxipicolinamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-fluoropicolinamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-metoxi pirazino-2-carboxamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-2-metiloxazol-4-carboxamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-metoxipicolinamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxi-d3) picolinamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-cloropicolinamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-1-metiMH-imidazol-2-carboxamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(trifluorometil) pirazino-2-carboxamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-4-metiltiazol-2-carboxamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-2-(difluorometil)oxazol-4-carboxamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-1-(difluorometil)-1H-pirazol-3-carboxamida
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(difluorometil)pirazino-2-carboxamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-4-clorobenzamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-cianopicolinamida,
    W-(3-((2R,3S,5R)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4,5-difluorofenil)-5-(metoxid3)picolinamida,
    W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxi-d3) picolinamida,
    W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxi-d3) pirazino-2-carboxamida,
    W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-ciano-3-metilpicolinamida,
    W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4,5-difluorofenil)-5-(metoxi-d 3)picolinamida,
    W-(3-((2R,3R,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-(metoxi-d3) picolinamida,
    W-(3-((2R,3S,5S)-6-amino-3,5-difluoro-2,5-dimetil-2,3,4,5-tetrahidropiridin-2-il)-4-fluorofenil)-5-bromopicolinamida
    o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
    13. Una composicion farmaceutica que comprende el compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-12 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un portador farmaceuticamente aceptable.
    14. Un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-12, para su uso en terapia.
    15. Un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1-12, para su uso en un metodo para el tratamiento de una enfermedad seleccionada entre enfermedad de Alzheimer (familiar o esporadica), enfermedad de Alzheimer preclmica, enfermedad de Alzheimer prodromica, deterioro cognitivo leve, smdrome de Down y angiopatia amiloide cerebral.
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Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MA40941A (fr) 2014-11-10 2017-09-19 H Lundbeck As 2-amino-5,5-difluoro-6-(fluorométhyl)-6-phényl-3,4,5,6-tétrahydropyridines comme inhibiteurs de bace1
CR20170187A (es) 2014-11-10 2018-02-01 H Lundbeck As 2-Amino-3,5-difluoro-6-metil-6-fenil-3,4,5,6-tetrahidropiridinas en calidad de inhibidores de BACE1 para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer
JO3458B1 (ar) 2014-11-10 2020-07-05 H Lundbeck As 2- أمينو-6- (دايفلوروميثيل) – 5، 5- ديفلورو-6-فينيل-3،4، 5، 6-تيتراهيدروبيريدين كمثبطات bace1
JO3627B1 (ar) 2015-04-30 2020-08-27 H Lundbeck As إيميدازو بيرازينونات على هيئة مثبطات pde1
TW201717948A (zh) 2015-08-10 2017-06-01 Ｈ 朗德貝克公司 包括給予２－胺基－３，５，５－三氟－３，４，５，６－四氫吡啶的聯合治療
US20180244645A1 (en) * 2015-08-12 2018-08-30 H. Lundbeck A/S 2-amino-3-fluoro-3-(fluoromethyl)-6-methyl-6-phenyl-3,4,5,6-tetrahydropyridines as bace1 inhibitors
US10034861B2 (en) 2016-07-04 2018-07-31 H. Lundbeck A/S 1H-pyrazolo[4,3-b]pyridines as PDE1 inhibitors
CN106366073B (zh) * 2016-10-24 2018-11-30 扬子江药业集团南京海陵药业有限公司 一种盐酸替吡嘧啶的制备方法
BR112018013084A2 (pt) 2016-10-28 2018-12-11 H Lundbeck As tratamentos de combinação compreendendo a administração de imidazopirazinonas
SG11201903770UA (en) 2016-10-28 2019-05-30 H Lundbeck As Combination treatments comprising imidazopyrazinones for the treatment of psychiatric and/or cognitive disorders
WO2018114910A1 (en) * 2016-12-21 2018-06-28 H. Lundbeck A/S 6-amino-5-fluoro-5-(fluoromethyl)-2,3,4,5-tetrahydropyridin-2-yl-phenyl-5-(methoxy-d3)-pyrazine-2-carboxamides and fluorinated derivatives thereof as bace1 inhibitors
LT3723807T (lt) 2017-12-14 2021-12-10 H. Lundbeck A/S Kombinuoti gydymai, apimantys 1h-pirazolo[4,3-b]piridinų vartojimą
AR113926A1 (es) 2017-12-14 2020-07-01 H Lundbeck As Derivados de 1h-pirazolo[4,3-b]piridinas
US11535611B2 (en) 2017-12-20 2022-12-27 H. Lundbeck A/S Pyrazolo[3,4-B]pyridines and imidazo[1,5-B]pyridazines as PDE1 inhibitors
CN109970681A (zh) * 2019-04-19 2019-07-05 安徽海康药业有限责任公司 一种瑞格列奈的合成方法
CN113720930A (zh) * 2021-07-26 2021-11-30 南京一诺医药科技有限公司 一种hplc-ms/ms联用检测人血浆中奥美拉唑的方法
CN114235985A (zh) * 2021-11-25 2022-03-25 南京海纳医药科技股份有限公司 一种hplc-ms/ms联用检测人血浆中胍法辛的方法

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002100399A1 (en) 2001-06-12 2002-12-19 Elan Pharmaceuticals, Inc. Macrocycles useful in the treatment of alzheimer's disease
GB0124928D0 (en) 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
BRPI0307351B8 (pt) 2002-02-12 2021-05-25 Smithkline Beecham Corp composto, composição farmacêutica, uso de um composto, e, processo para preparar um composto
AR077277A1 (es) 2009-07-09 2011-08-17 Lilly Co Eli Compuestos de biciclo (1,3)tiazin-2-amina formulacion farmaceutica que lo comprende y su uso para la manufactura de un medicamento util para el tratamiento de la enfermedad de alzheimer
AU2011263797B2 (en) * 2010-06-09 2014-06-05 Janssen Pharmaceutica Nv 5,6-dihydro-2H-[1,4]oxazin-3-yl-amine derivatives useful as inhibitors of beta-secretase (BACE)
EA201391029A1 (ru) 2011-01-12 2014-01-30 Новартис Аг Производные оксазина и их применение при лечении неврологических нарушений
CA2824220C (en) 2011-01-13 2020-09-01 Novartis Ag Novel heterocyclic derivatives and their use in the treatment of neurological disorders
US8754075B2 (en) 2011-04-11 2014-06-17 Hoffmann-La Roche Inc. 1,3-oxazines as BACE1 and/or BACE2 inhibitors
WO2012147763A1 (ja) 2011-04-26 2012-11-01 塩野義製薬株式会社 オキサジン誘導体およびそれを含有するｂａｃｅ１阻害剤
US8987255B2 (en) 2011-06-07 2015-03-24 Hoffmann-La Roche Inc. Halogen-alkyl-1,3 oxazines as BACE1 and/or BACE2 inhibitors
UY34278A (es) 2011-08-25 2013-04-05 Novartis Ag Derivados novedosos de oxazina y su uso en el tratamiento de enfermedades
US8338413B1 (en) 2012-03-07 2012-12-25 Novartis Ag Oxazine derivatives and their use in the treatment of neurological disorders
HK1206597A1 (en) 2012-03-20 2016-01-15 艾朗制药股份有限公司 Spirocyclic dihydro-thiazine and dihydro-oxazine bace inhibitors, and compositions and uses thereof
WO2014056816A1 (en) 2012-10-10 2014-04-17 F. Hoffmann-La Roche Ag COMBINATION OF AN Aβ ANTIBODY AND A BACE INHIBITOR
US9556135B2 (en) * 2012-10-12 2017-01-31 Amgen, Inc. Amino-dihydrothiazine and amino-dioxido dihydrothiazine compounds as beta-secretase antagonists and methods of use
EP2912035A4 (en) 2012-10-24 2016-06-15 Shionogi & Co DERIVATIVES OF DIHYDROOXAZINE OR OXAZEPINE HAVING BACE1 INHIBITING ACTIVITY
CA2902212C (en) 2013-03-01 2020-10-13 Amgen Inc. Perfluorinated 5,6-dihydro-4h-1,3-oxazin-2-amine compounds as beta-secretase inhibitors and methods of use
TWI639607B (zh) 2013-06-18 2018-11-01 美國禮來大藥廠 Ｂａｃｅ抑制劑
TW201609700A (zh) 2014-02-19 2016-03-16 Ｈ 朗德貝克公司 ２－胺基－３，５，５－三氟－３，４，５，６－四氫吡啶作爲ｂａｃｅ１抑制劑用於治療阿茲海默症
TW201623295A (zh) 2014-04-11 2016-07-01 塩野義製藥股份有限公司 具有ｂａｃｅ１抑制活性之二氫噻及二氫衍生物
MA40941A (fr) 2014-11-10 2017-09-19 H Lundbeck As 2-amino-5,5-difluoro-6-(fluorométhyl)-6-phényl-3,4,5,6-tétrahydropyridines comme inhibiteurs de bace1
CR20170187A (es) 2014-11-10 2018-02-01 H Lundbeck As 2-Amino-3,5-difluoro-6-metil-6-fenil-3,4,5,6-tetrahidropiridinas en calidad de inhibidores de BACE1 para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer
JO3458B1 (ar) 2014-11-10 2020-07-05 H Lundbeck As 2- أمينو-6- (دايفلوروميثيل) – 5، 5- ديفلورو-6-فينيل-3،4، 5، 6-تيتراهيدروبيريدين كمثبطات bace1
TW201717948A (zh) 2015-08-10 2017-06-01 Ｈ 朗德貝克公司 包括給予２－胺基－３，５，５－三氟－３，４，５，６－四氫吡啶的聯合治療
US20180244645A1 (en) 2015-08-12 2018-08-30 H. Lundbeck A/S 2-amino-3-fluoro-3-(fluoromethyl)-6-methyl-6-phenyl-3,4,5,6-tetrahydropyridines as bace1 inhibitors

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Publication number Publication date
WO2016075062A1 (en) 2016-05-19
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