ES2712886T3

ES2712886T3 - Derivados de piridobenzazepina y piridobenzazocina que inhiben el factor XIa

Info

Publication number: ES2712886T3
Application number: ES15766510T
Authority: ES
Inventors: Susanne Roehrig; Alexander Hillisch; Stefan Heitmeier; Martina Victoria Schmidt; Karl-Heinz Schlemmer; Adrian Tersteegen; Martina Schäfer; Henrik Teller; Nùnez Eloisa Jimènez
Original assignee: Bayer Pharma AG
Current assignee: Bayer Pharma AG
Priority date: 2014-09-24
Filing date: 2015-09-22
Publication date: 2019-05-16
Anticipated expiration: 2035-09-22
Also published as: US10138236B2; EP3197891A1; US20170275282A1; WO2016046157A1; EP3197891B1

Abstract

Compuesto de fórmula**Fórmula** en la que A representa un enlace o -CH2-, R1 representa hidrógeno o metilo, en el que metilo puede estar sustituido con un sustituyente flúor, R2 representa hidrógeno o metilo, o R1 y R2 forman, junto con el átomo de carbono al que están unidos, un anillo de ciclopropilo, R3 representa hidrógeno, alquilo C1-C5, alcoxi C1-C4, difluorometilo, trifluorometilo, 1,1-difluoroetilo, 3,3,3-trifluoro- 2-hidroxiprop-1-ilo, 3,3,3-trifluoro-2-metoxiprop-1-ilo, 3,3,3-trifluoro-2-etoxiprop-1-ilo, prop-2-en-1-ilo, ciclopropiloxi o ciclobutiloxi, en el que alquilo puede estar sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que está constituido por flúor, ciano, hidroxi, difluorometilo, trifluorometilo, metoxi, etoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, cicloalquilo C3-C6, oxoheterociclilo de 4 a 6 miembros, 1,4-dioxanilo, oxazolilo, fenilo y piridilo, en el que cicloalquilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre sí seleccionados del grupo que está constituido por flúor, hidroxi, metilo, etilo, metoxi, etoxi, difluorometilo, trifluorometilo, difluorometoxi y trifluorometoxi, R4 representa hidrógeno, R5 representa un grupo de fórmula**Fórmula** en la que es el sitio de enlace al átomo de nitrógeno, R8 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo o heterociclilo de 5 miembros, en el que heterociclilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre sí seleccionados del grupo que está constituido por oxo, hidroxi, tioxo, sulfanilo, metilo, difluorometilo, trifluorometilo, 2-hidroxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo y 2-metoxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo, en el que metilo puede estar sustituido con un sustituyente metoxi, R9 representa hidrógeno, cloro, flúor o metilo, R10 y R11 junto con los átomos de carbono a los que están unidos forman un heterociclo de 5 miembros, en el que el heterociclo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre sí seleccionados del grupo que está constituido por oxo, cloro, hidroxi, hidroxicarbonilo, metilo, difluorometilo, trifluorometilo, 1,1,2,2,2-pentafluoroetilo, 2-hidroxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo y 2-metoxi-carbonil-1,1,2,2- tetrafluoroetilo, R12 representa hidrógeno, cloro, flúor, metilo o metoxi, Y1 representa un átomo de nitrógeno o C-R15, en el que R15 representa hidrógeno, cloro, hidroxi, metoxi o alcoxicarbonilo C1-C3, Y2 representa un átomo de nitrógeno o C-R16, en el que R16 representa hidrógeno, cloro, hidroxi o metoxi, R13 representa hidrógeno, hidroxicarbonilo, hidroxicarbonilmetilo o fenilo, en el que fenilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes flúor, R14 representa hidrógeno, cloro, flúor o metilo, Y3 representa un átomo de nitrógeno o C-R19, en el que R19 representa hidrógeno, cloro, hidroxi o metoxi, Y4 representa un átomo de nitrógeno o C-R20, en el que R20 representa hidrógeno, cloro, hidroxi o metoxi, R17 representa hidrógeno, hidroxicarbonilo, hidroxicarbonilmetilo, alcoxicarbonilo C1-C3 o aminocarbonilo, R18 representa hidrógeno, cloro, flúor o metilo, R21 representa hidrógeno, cloro, hidroxi, alquilo C1-C4, metoxi, alquilaminometilo C1-C3 o morfolinilmetilo, R22 representa hidrógeno, cloro, flúor o metilo, R23 representa hidrógeno, cloro, hidroxi o metoxi, R24 representa hidrógeno, cloro, flúor o metilo, R25 representa hidrógeno, hidroxicarbonilo o hidroxicarbonilmetilo, R26 representa hidrógeno, cloro, flúor o metilo, R27 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alcoxicarbonilo C1-C3 o alquilaminocarbonilo C1-C3, en el que alquilaminocarbonilo puede estar sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que está constituido por hidroxi, trifluorometilo, metoxi y trifluorometoxi, R28 representa hidrógeno, cloro, flúor o metilo, R31 representa hidrógeno o flúor, R32 representa hidroxi o -NHR33, en el que R33 representa hidrógeno, metilo o etilo, R34 representa hidrógeno o flúor, R35 representa hidroxi o -NHR36, en el que R36 representa hidrógeno, metilo o etilo, R37 representa hidrógeno o flúor, R38 representa hidroxi o -NHR39, en el que R39 representa hidrógeno, metilo o etilo, R40 representa hidrógeno o flúor, 25 R41 representa hidroxi o -NHR42, en el que R42 representa hidrógeno, metilo o etilo, R6 representa bromo, cloro, flúor, metilo, difluorometilo, trifluorometilo, metoxi, difluorometoxi o trifluorometoxi, R7 representa hidrógeno, cloro o flúor, 30 o una de sus sales, sus solvatos o de los solvatos de sus sales.

Description

DESCRIPCION

Derivados de piridobenzazepina y piridobenzazocina que inhiben el factor XIa

La invencion se refiere a derivados de piridobenzazepina y piridobenzazocina sustituidos y a procedimientos para su preparacion as ^ como a su uso para la preparacion de farmacos para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, en particular de enfermedades cardiovasculares, preferentemente de enfermedades tromboticas o bien tromboembolicas as ^como de edemas, como tambien de enfermedades oftalmologicas.

La coagulacion sangumea es un mecanismo protector del organismo con cuya ayuda pueden “sellarse” defectos en la pared de los vasos sangumeos de forma rapida y fiable. Asf, una perdida de sangre puede evitarse o bien mantenerse a un mmimo. La hemostasia despues de la lesion de los vasos sangumeos se realiza esencialmente mediante el sistema de coagulacion, en el cual se desencadena una cascada enzimatica de las reacciones complejas de las protemas plasmaticas. En este caso estan involucrados numerosos factores de coagulacion sangumea, cada uno de los cuales convierte, mediante activacion, respectivamente el proximo precursor inactivo en su forma activa. Al final de la cascada se encuentra la conversion del fibrinogeno soluble en la fibrina insoluble, de modo que se produce un coagulo de sangre. En la coagulacion sangumea, tradicionalmente se distingue entre el sistema intrmseco y el sistema extrmseco, que finalizan en una ruta de reaccion conjunta final. Segun esto, los factores Xa y IIa (trombina) cumplen funciones claves: El factor Xa agrupa las senales de las dos vfas de coagulacion dado que este se produce tanto mediante el factor Vlla/tissue factor (ruta extrmseca) como mediante el complejo tenasa (ruta intrmseca) a traves de la conversion del factor X. La serina proteasa Xa activada escinde la protrombina para dar trombina, la cual, mediante una serie de reacciones, transfiere los impulsos desde la cascada hasta el estado de coagulacion de la sangre.

En el pasado reciente se ha modificado la teona tradicional de las dos zonas separadas de la cascada de coagulacion (ruta extrmseca o bien intrmseca) debido a nuevos conocimientos: en estos modelos se inicia la coagulacion mediante union del factor Vila activado al factor tisular (TF). El complejo producido activa al factor X, lo que a su vez conduce a la generacion de trombina con preparacion posterior de fibrina y la activacion de trombocitos (via PAR-1) como productos finales de hemostasia que cierran la lesion. En comparacion con la posterior fase de amplificacion/propagacion es baja la velocidad de la preparacion de trombina en esta fase y esta temporalmente limitada mediante la aparicion de TFPI como inhibidor del complejo TF-FVIIa-FX.

Un componente central del paso desde la iniciacion hacia la amplificacion y propagacion de la coagulacion es el factor XIa: La trombina activa en bucles de reacoplamiento positivos ademas del factor V y el factor Vlll tambien al factor XI para dar el factor XIa, el factor IX reacciona para dar el factor IXa y a traves del complejo de factor IXa/factor VIIIa asf generado estimula mucho la activacion del factor X y con ello a su vez la formacion de trombina, lo que conduce a un fuerte crecimiento del trombo y estabiliza el trombo.

Ademas se coloca en el foco de atencion que ademas de la estimulacion a traves del factor tisular puede realizarse la activacion del sistema de coagulacion en superficies en particular cargadas negativamente, a las que pertenecen ademas de estructuras superficiales de celulas foraneas para el cuerpo (por ejemplo bacterias) tambien superficies artificiales tal como protesis vasculares, endoprotesis y sistemas circulatorios extracorporeos. Sobre la superficie tiene lugar en primer lugar la activacion del factor XII (FXII) para dar el factor Xlla, que a continuacion activa el factor XI unido a superficies celulares para dar el factor XIa. Esto conduce, tal como se ha descrito anteriormente, a la activacion posterior de la cascada de coagulacion. Ademas, el factor XIIa activa igualmente a la procalicrema plasmatica unida para dar calicrema plasmatica (PK), que por un lado conduce a la posterior activacion del factor XII en el contexto de un bucle de potenciacion, lo que tiene como consecuencia en total un refuerzo de la iniciacion de la cascada de coagulacion. Adicionalmente, PK representa una proteasa importante que libera bradicinina, que conduce por consiguiente entre otras cosas al aumento de la permeabilidad endotelial. Como otros sustratos se han descrito prorenina y prourocinasa, cuya activacion puede influir en los procesos reguladores del sistema de reninaangiotensina y de la fibrinolisis. Con ello representa la activacion de PK un importante eslabon entre procesos coaguladores e inflamatorios.

Una activacion no controlada del sistema de coagulacion o una inhibicion defectuosa de los procesos de activacion puede conducir a la formacion de trombosis locales o embolias en los vasos (arterias, venas, vasos linfaticos) o cavidades cardfacas. Ademas, una hipercoagulacion sistemica puede conducir a la amplia formacion de trombos y finalmente a la coagulopatfa de consumo en el contexto de una coagulacion intravasal diseminada. Las complicaciones tromboembolicas ademas se encuentran en los sistemas circulatorios extracorporeos, tal como por ejemplo durante una hemodialisis, asf como en las protesis vasculares o bien valvulares y endoprotesis vasculares. En el curso de muchas enfermedades cardiovasculares y metabolicas, debido a los factores sistemicos tales como por ejemplo hiperlipidemia, diabetes o tabaquismo, debido a cambios en el flujo sangumeo con estasis, tal como por ejemplo en la fibrilacion auricular, o debido a cambios patologicos en las paredes de los vasos, por ejemplo, disfunciones endoteliales o aterosclerosis, hay una creciente tendencia a la activacion de la coagulacion y activacion de trombocitos. Esta activacion indeseada y sobreabundante de la coagulacion puede conducir, mediante la formacion de trombos ricos en fibrina y plaquetas, a enfermedades tromboembolicas y complicaciones tromboticas con estados potencialmente mortales. Segun esto pueden estar involucrados tambien procesos inflamatorios. Las enfermedades tromboembolicas pertenecen por tanto ahora como antes a las causas mas frecuentes de morbilidad y mortalidad en la mayona de los pafses industrializados.

Los anticoagulantes conocidos por el estado de la tecnica, es decir sustancias para inhibir o evitar la coagulacion sangumea, tienen varias desventajas. Un procedimiento de tratamiento eficaz o bien profilaxis de enfermedades tromboticas/tromboembolicas resulta en la practica por tanto como muy difmil e insuficiente.

En el tratamiento y la profilaxis de enfermedades tromboembolicas, en primer lugar se hace uso de heparina la cual se administra de forma parenteral o subcutanea. Debido a las propiedades farmacocineticas mas favorables, se da creciente preferencia en estos dfas a la heparina de bajo peso molecular; sin embargo, las desventajas conocidas descritas a continuacion, que existen en el tratamiento con heparina, no se pueden evitar de esta manera tampoco. Asf, la heparina es ineficaz por via oral y solo tiene un tiempo de vida media comparativamente bajo. Ademas, hay un alto riesgo de hemorragia, en particular pueden producirse hemorragias cerebrales y hemorragias en el tracto gastrointestinal, y puede haber trombopenia, alopecia por medicamentos u osteoporosis. Las heparinas de bajo peso molecular tienen una probabilidad mas baja de conducir al desarrollo de trombocitopenia inducida por heparina, sin embargo, igualmente solo se pueden administrar por via subcutanea. Esto ademas se aplica al fondaparinux, un inhibidor del factor Xa selectivo producido de forma sintetica con un tiempo de vida media largo.

Una segunda clase de anticoagulantes son los antagonistas de la vitamina K. Estos incluyen, por ejemplo, 1,3-indanodionas y sobre todo sin embargo compuestos tales como warfarina, fenprocumona, dicumarol y otros derivados de cumarina que inhiben de forma no selectiva la smtesis de varios productos de ciertos factores de coagulacion dependientes de la vitamina K en el hngado. Debido al mecanismo de accion, el inicio de la accion es muy lento (latencia al inicio de accion de 36 a 48 horas). Los compuestos se pueden administrar por via oral, sin embargo, debido al alto riesgo de hemorragia y al estrecho mdice terapeutico, se requiere un ajuste individual complicado y control del paciente. Ademas, se han descrito otros efectos secundarios tales como problemas gastrointestinales, perdida de cabello y necrosis cutaneas.

Enfoques mas recientes para anticoagulantes orales estan en varias fases de evaluacion clmica o en uso clmico y han demostrado su actividad en distintos estudios. Sin embargo, tambien con la toma de estos farmacos en particular en caso de pacientes predispuestos puede llegarse a complicaciones de hemorragia. Por tanto es de central importancia en el caso de farmacos antitromboticos el espectro terapeutico: La distancia entre la dosis activa de forma terapeutica para la inhibicion de la coagulacion y la dosis con la que se pueden producir hemorragias debe ser tan grande como sea posible de modo que se consiga una actividad terapeutica maxima con un perfil de riesgo mmimo.

En distintos modelos in-vitro e in-vivo con por ejemplo anticuerpos como inhibidores del factor XIa, sin embargo tambien en modelos de desactivacion del factor XIa, se documento el efecto anti-trombotico en caso de baja/ninguna prolongacion del tiempo de hemorragia o aumento del volumen sangumeo. En estudios clmicos estaban asociados un elevado nivel de factor XIa con un aumento de tasa de acontecimiento. Por el contrario, la deficiencia del factor XI (hemofilia C) no conduda a hemorragias espontaneas y saltaba a la vista solo en el contexto de operaciones y traumatismos, sin embargo mostraba una proteccion frente a determinados acontecimientos tromboembolicos. Ademas esta asociada la calicrema plasmatica (PK) con otras enfermedades que van acompanadas de elevadas permeabilidades vasculares o enfermedades inflamatorias cronicas, tal como es esto el caso por ejemplo en la retinopatfa diabetica, el edema macular y el angioedema hereditario o bien enfermedades intestinales inflamatorias cronicas. La retinopatfa diabetica tiene como base en primer lugar una debilidad microvascular, en consecuencia de la cual se llega a un espesamiento de la membrana basal de los vasos sangumeos y a la perdida de pericitos que envuelven los vasos sangumeos, posteriormente a la obliteracion vascular con isquemia retiniana, que debido a la hipoxia retiniana producida puede conducir a permeabilidad vascular reforzada con posterior formacion de un edema macular y debido a todos estos procesos en cuestion a la perdida de vision del paciente. En el caso de angioedema hereditario (HAE), mediante la formacion reducida del inhibidor fisiologico de la calicrema inhibidor de Cl-esterasa se llega a la activacion no controlada de calicrema plasmatica y con ello a inflamaciones con formacion de edema fulminante y dolores fuertes. A partir de planteamientos experimentales con animales existen indicios de que la inhibicion de calicrema plasmatica inhibe la elevada permeabilidad vascular y por consiguiente puede impedir la formacion de un edema macular o bien de la retinopatfa diabetica o bien puede mejorar la sintomatologfa aguda del HAE. Los inhibidores de calicrema plasmatica orales pudieron usarse igualmente para la profilaxis del HAE.

En el caso de la progresion de enfermedades intestinales inflamatorias cronicas (CED) tienen sobre todo las cininas generadas por medio de la calicrema plasmatica un papel fundamental. Su accion pro-inflamatoria a traves de la activacion de receptores de bradicinina induce y potencia el desarrollo de la enfermedad. Los estudios en pacientes con enfermedad de Crohn muestran una correlacion entre la concentracion de calicrema en el epitelio intestinal y el grado de la inflamacion intestinal. Una activacion del sistema de calicrema-cinina se observo igualmente en estudios experimentales con animales. Una inhibicion de la smtesis de bradicinina mediante inhibidores de calicrema podna usarse segun esto tambien para la profilaxis y/o la terapia de enfermedades intestinales inflamatorias cronicas. Ademas puede ser especialmente atractiva tambien la combinacion de principios antitromboticos y antiinflamatorios para muchas enfermedades, para impedir el refuerzo redproco de coagulacion e inflamacion.

Un objetivo de la presente invencion es, por tanto, la facilitacion de nuevos compuestos para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, en particular de enfermedades tromboticas o bien tromboembolicas, y/o enfermedades edematosas, y/o enfermedades oftalmologicas, en particular de retinopatia diabetica o bien del edema macular, en seres humanos y animales, que presenten un gran espectro terapeutico.

El documento WO 2006/030032 describe entre otras cosas piridinonas sustituidas como moduladores alostericos del receptor mGluR2 y el documento WO 2008/079787 describe piridin-2-onas sustituidas y su uso como activadores de glucocinasa. Los documentos GB 2497806, WO 2014/154794, WO 2014/160592, WO 2015/011087 y WO 2015/063093 describen piridin-2-onas sustituidas y su uso como inhibidores del factor XIa.

El objeto de la invencion son compuestos de formula

en la que

A representa un enlace o -CH2-,

R1 representa hidrogeno o metilo,

en el que metilo puede estar sustituido con un sustituyente fluor,

R2 representa hidrogeno o metilo,

o

R1 y R2 forman, junto con el atomo de carbono al que estan unidos, un anillo de ciclopropilo,

R3 representa hidrogeno, alquilo C1-C5, alcoxi Ci-C4, difluorometilo, trifluorometilo, 1,1-difluoroetilo, 3,3,3-trifluoro-2-hidroxiprop-1-ilo, 3,3,3-trifluoro-2-metoxiprop-1-ilo, 3,3,3-trifluoro-2-etoxiprop-1-ilo, prop-2-in-1-ilo, ciclopropiloxi o ciclobutiloxi,

en el que alquilo puede estar sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que esta constituido por fluor, ciano, hidroxi, difluorometilo, trifluorometilo, metoxi, etoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, cicloalquilo C3-C6, oxo-heterociclilo de 4 a 6 miembros, 1,4-dioxanilo, oxazolilo, fenilo y piridilo,

en el que cicloalquilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre si seleccionados del grupo que esta constituido por fluor, hidroxi, metilo, etilo, metoxi, etoxi, difluorometilo, trifluorometilo, difluorometoxi y trifluorometoxi,

R4 representa hidrogeno,

R5 representa un grupo de formula

o

o

o

o

en la que # es el sitio de enlace al atomo de nitrogeno,

R8 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo o heterociclilo de 5 miembros,

en el que heterociclilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre s^ seleccionados del grupo que esta constituido por oxo, hidroxi, tioxo, sulfanilo, metilo, difluorometilo, trifluorometilo, 2-hidroxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo y 2-metoxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo,

en el que metilo puede estar sustituido con un sustituyente metoxi,

R9 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R10 y R11 junto con los atomos de carbono a los que estan unidos forman un heterociclo de 5 miembros,

en el que el heterociclo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre si seleccionados del grupo que esta constituido por oxo, cloro, hidroxi, hidroxicarbonilo, metilo, difluorometilo, trifluorometilo, 1,1,2,2,2-pentafluoroetilo, 2-hidroxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo y 2-metoxi-carbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo,

R12 representa hidrogeno, cloro, fluor, metilo o metoxi,

Y1 representa un atomo de nitrogeno o C-R15,

en el que

R15 representa hidrogeno, cloro, hidroxi, metoxi o alcoxicarbonilo C1-C3,

Y2 representa un atomo de nitrogeno o C-R16,

en el que

R16 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R13 representa hidrogeno, hidroxicarbonilo, hidroxicarbonilmetilo o fenilo, en el que fenilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes fluor,

R14 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

Y3 representa un atomo de nitrogeno o C-R19,

en el que

R19 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

Y4 representa un atomo de nitrogeno o C-R20,

en el que

R20 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R17 representa hidrogeno, hidroxicarbonilo, hidroxicarbonilmetilo, alcoxicarbonilo C1-C3 o aminocarbonilo, R18 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R21 representa hidrogeno, cloro, hidroxi, alquilo C1-C4, metoxi, alquilaminometilo C1-C3 o morfolinilmetilo, R22 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R23 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R24 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R25 representa hidrogeno, hidroxicarbonil o hidroxicarbonilmetilo,

R26 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R27 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alcoxicarbonilo C 1-C3 o alquilaminocarbonilo C1-C3,

en el que alquilaminocarbonilo puede estar sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que esta constituido por hidroxi, trifluorometilo, metoxi y trifluorometoxi,

R28 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R31 representa hidrogeno o fluor,

R32 representa hidroxi o -NHR33,

en el que

R33 representa hidrogeno, metilo o etilo,

R34 representa hidrogeno o fluor,

R35 representa hidroxi o -NHR36,

en el que

R36 representa hidrogeno, metilo o etilo,

R37 representa hidrogeno o fluor,

R38 representa hidroxi o -NHR39,

en el que

R39 representa hidrogeno, metilo o etilo,

R40 representa hidrogeno o fluor,

R41 representa hidroxi o -NHR42,

en el que

R42 representa hidrogeno, metilo o etilo,

R6 representa bromo, cloro, fluor, metilo, difluorometilo, trifluorometilo, metoxi, difluorometoxi o trifluorometoxi, R7 representa hidrogeno, cloro o fluor,

y sus sales, sus solvatos y los solvatos de sus sales.

Los compuestos de acuerdo con la invencion son los compuestos de la formula (I) y las sales, solvatos y solvatos de las sales de los mismos, y ademas los compuestos comprendidos en la formula (I) y que se especifican de aqu en adelante como ejemplos de realizacion, y las sales, solvatos y solvatos de las sales de los mismos en la medida que los compuestos comprendidos en la formula (I) y que se especifican de aqu en adelante no sean ya sales, solvatos y solvatos de las sales.

Los compuestos de acuerdo con la invencion pueden, dependiendo de su estructura, existir en diferentes formas estequiometricas, es decir, en la forma de isomeros configuracionales o ademas opcionalmente como isomeros conformacionales (enantiomeros y/o diastereomeros, incluyendo aquellos en el caso de atropisomeros). La presente invencion, por lo tanto, abarca los enantiomeros y diastereomeros, y las respectivas mezclas de los mismos. Los constituyentes estereoisomericamente uniformes se pueden aislar de estas mezclas de enantiomeros y/o diastereomeros de manera conocida; preferentemente se usan procedimientos de cromatograffa para esto, en particular la cromatograffa HPLC sobre una fase aquiral o quiral.

Si los compuestos de acuerdo con la invencion pueden presentarse en formas tautomericas, la presente invencion abarca todas las formas tautomericas.

La presente invencion ademas abarca todas las variantes isotopicas adecuadas de los compuestos de acuerdo con la invencion. Una variante isotopica de un compuesto de acuerdo con la invencion se entiende en esta memoria descriptiva que significa un compuesto en el cual al menos un atomo dentro del compuesto de acuerdo con la invencion ha sido intercambiado por otro atomo del mismo numero atomico, pero con una masa atomica diferente que la masa atomica que usualmente o predominantemente se produce en la naturaleza. Ejemplos de isotopos que pueden ser incorporados en un compuesto de acuerdo con la invencion son aquellos de hidrogeno, carbono, nitrogeno, oxfgeno, fosforo, azufre, fluor, cloro, bromo y yodo, tales como 2H (deuterio), 3H (tritio), 13C, 14C, 15N, 17O, 18O, 32P, 33P, 33S, 34S, 35S, 36S, 18F, 36Cl, 82Br, 123I, 124I, 129I y 131I. Las variantes isotopicas particulares de un compuesto de acuerdo con la invencion, especialmente aquellos en los cuales se han incorporado uno o mas isotopos radioactivos, pueden ser beneficiosos, por ejemplo, para el analisis del mecanismo de accion o de la distribucion del principio activo en el cuerpo; debido a la preparacion y deteccion comparativamente facil, especialmente los compuestos marcados con isotopos 3H o 14C son adecuados para este fin. Mas aun, la incorporacion de isotopos, por ejemplo de deuterio, puede conducir a ventajas terapeuticas particulares como consecuencia de mayor estabilidad metabolica del compuesto, tal como por ejemplo una extension de la semivida en el cuerpo o una reduccion en la dosis activa requerida; estas modificaciones de los compuestos de acuerdo con la invencion pueden, por lo tanto, en algunos casos, constituir ademas una forma de realizacion preferente de la presente invencion. Las variantes isotopicas de los compuestos de acuerdo con la invencion se pueden preparar mediante los procedimientos conocidos por los expertos en la tecnica, asf por ejemplo mediante los procedimientos que se describen a continuacion y las instrucciones reproducidas en los ejemplos de realizacion, usando las correspondientes modificaciones isotopicas de los respectivos reactivos y/o compuestos de partida.

Como sales se prefieren en el contexto de la presente invencion sales fisiologicamente aceptables de los compuestos de acuerdo con la invencion. Sin embargo, ademas estan comprendidas las sales que no son en sf mismas adecuadas para las aplicaciones farmaceuticas pero se pueden usar, por ejemplo, para el aislamiento o la purificacion de los compuestos de acuerdo con la invencion.

Las sales fisiologicamente aceptables de los compuestos de acuerdo con la invencion incluyen sales de adicion de acido de acidos minerales, acidos carboxflicos y acidos sulfonicos, por ejemplo sales de acido clortndrico, acido bromtndrico, acido sulfurico, acido fosforico, acido metanosulfonico, acido etanosulfonico, acido toluenosulfonico, acido bencenosulfonico, acido naftalenodisulfonico, acido acetico, acido trifluoroacetico, acido propionico, acido lactico, acido tartarico, acido malico, acido cftrico, acido fumarico, acido maleico y acido benzoico.

Las sales fisiologicamente aceptables de los compuestos de acuerdo con la invencion tambien incluyen sales de bases convencionales, como a modo de ejemplo y con preferencia las sales de metal alcalino (por ej., sales de sodio y potasio), sales de metal alcalinoterreo (por ej., sales de calcio y magnesio) y sales de amonio derivadas de amomaco o aminas organicas con 1 a 16 atomos de carbono, como a modo de ejemplo y con preferencia etilamina, dietilamina, trietilamina, etildiisopropilamina, monoetanolamina, dietanolamina, trietanolamina, diciclohexilamina, dimetilaminoetanol, procama, dibencilamina, A/-metilmorfolina, arginina, lisina, etilendiamina, /V-metilpiperidina y colina.

Como solvatos se designan en el contexto de la invencion aquellas formas de los compuestos de acuerdo con la invencion que, en estado solido o lfquido, forman un complejo por coordinacion con moleculas de disolvente. Los hidratos son una forma especial de los solvatos en la que la coordinacion es con agua.

En el sentido de la presente invencion, el termino “tratamiento” o “que trata” incluye la inhibicion, el retardo, la contencion, el alivio, la atenuacion, la restriccion, la reduccion, la supresion, el rechazo o la curacion de una enfermedad, una afeccion, un trastorno, una lesion o un problema de salud, el desarrollo, el curso o el avance de estos estados y/o los smtomas de estos estados. El termino “terapia” se entiende aqrn como sinonimo del termino “tratamiento”.

Los terminos “prevencion”, “profilaxis” o “exclusion” se usan como sinonimos en el contexto de la presente invencion y se refieren a la evitacion o reduccion del riesgo de contraer, experimentar, padecer o tener una enfermedad, una afeccion, un trastorno, una lesion o problema de salud, un desarrollo o un avance de estos estados y/o los smtomas de estos estados.

El tratamiento o la prevencion de una enfermedad, una afeccion, un trastorno, una lesion o un problema de salud puede ser parcial o completo.

En el contexto de la presente invencion, los sustituyentes, a menos que se especifique lo contrario, tienen el siguiente significado:

Alquilo representa un resto alquilo lineal o ramificado con 1 a 5 atomos de carbono, preferentemente de 1 a 3 atomos de carbono, a modo de ejemplo y preferentemente representa metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo, 2-metilprop-1-ilo, n-butilo, ferc-butilo y 2,2-dimetilprop-1-ilo.

Alcoxi representa un resto alcoxi lineal o ramificado con 1 a 4 atomos de carbono, preferentemente de 1 a 3 atomos de carbono, a modo de ejemplo y preferentemente representa metoxi, etoxi, n-propoxi, iso-propoxi, 2-metil-prop-1-oxi, n-butoxi y ferc-butoxi.

Alcoxicarbonilo representa un resto alcoxi lineal o ramificado, que esta unido a traves de un grupo carbonilo, con 1 a 3 atomos de carbono, preferentemente de 1 a 2 atomos de carbono, a modo de ejemplo y preferentemente representa metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, n-propoxicarbonilo y iso-propoxicarbonilo.

Alquilaminocarbonilo representa un grupo amino con uno o dos sustituyentes alquilo seleccionados de manera independiente entre sf iguales o distintos de cadena lineal o ramificados, que presentan en cada caso de 1 a 3 atomos de carbono, y que esta unido a traves de un grupo carbonilo, a modo de ejemplo y preferentemente representa metilaminocarbonilo, etilaminocarbonilo, n-propilaminocarbonilo, iso-propilaminocarbonilo, N,N-dimetilaminocarbonilo, N,N-dietilaminocarbonilo, N-etil-N-metilaminocarbonilo, N-metil-N-n-propilaminocarbonilo, N-iso-propil-N-n-propilaminocarbonilo y N,N-diisopropilaminocarbonilo. Alquilaminocarbonilo C1-C3 representa por ejemplo un resto monoalquilaminocarbonilo con 1 a 3 atomos de carbono o representa un resto dialquilaminocarbonilo con en cada caso de 1 a 3 atomos de carbono por sustituyente alquilo.

Alquilaminometilo representa un grupo amino con uno o dos sustituyentes alquilo seleccionados de manera independiente entre sf iguales o distintos de cadena lineal o ramificados, que presentan en cada caso de 1 a 3 atomos de carbono, y que esta unido a traves de un grupo metilo, a modo de ejemplo y preferentemente representa metilaminometilo, etilaminometilo, n-propilaminometilo, iso-propilaminometilo, N,N-dimetilaminometilo, N,N-dietilaminometilo, N-etil-N-metilaminometilo, N-metil-N-n-propilaminometilo, N-iso-propil-N-n-propilaminometilo y N,N-diisopropilaminometilo. Alquilaminometilo C1-C3 representa por ejemplo un resto monoalquilaminometilo con 1 a 3 atomos de carbono o representa un resto dialquilaminometilo con en cada caso de 1 a 3 atomos de carbono por sustituyente alquilo.

Cicloalquilo representa un grupo cicloalquilo monodclico con 3 a 6 atomos de carbono, a modo de ejemplo y preferentemente para cicloalquilo se mencionan ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

Heterociclilo de 5 miembros en la definicion del resto R8 representa un resto monodclico saturado, parcialmente insaturado o aromatico con 5 atomos de anillo y hasta 4 heteroatomos de la serie S, O y N, en el que un atomo de nitrogeno puede formar tambien un N-oxido, a modo de ejemplo y preferentemente representa tienilo, furilo, pirrolilo, tiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo, tetrazolilo, dihidrooxazolilo y dihidroimidazolilo.

Heterociclo de 5 miembros en la definicion de los restos R10 y R11 representa un resto monodclico saturado, parcialmente insaturado o aromatico con 5 atomos de anillo y hasta 2 heteroatomos de la serie S, O y N, en el que un atomo de nitrogeno puede formar tambien un N-oxido. Este heterociclo de 5 miembros representa junto con el anillo de fenilo al que esta unido, a modo de ejemplo y preferentemente 2,3-dihidro-1-benzotiofen-5-ilo, 1,3-dihidro-2-benzotiofen-5-ilo, 2,3-dihidro-1-benzofuran-5-ilo, 1,3-dihidro-2-benzofuran-5-ilo, indolin-5-ilo, isoindolin-5-ilo, 2,3-dihidro-1H-indazol-5-ilo, 2,3-dihidro-1H-benzimidazol-5-ilo, 1,3-dihidro-2,1-benzoxazol-5-ilo, 2,3-dihidro-1,3-benzoxazol-5-ilo, 1,3-dihidro-2,1-benzotiazol-5-ilo, 2,3-dihidro-1,3-benzotiazol-5-ilo, 1H-benzimidazol-5-ilo, 1H-indazol-5-ilo, 2H-indazol-5-ilo, 1,2-benzoxazol-5-ilo, indol-5-ilo, isoindol-5-ilo, benzofuran-5-ilo, benzotiofen-5-ilo, 2,3-dihidro-1-benzotiofen-6-ilo, 1,3-dihidro-2-benzotiofen-6-ilo, 2,3-dihidro-1-benzofuran-6-ilo, 1,3-dihidro-2-benzofuran-6-ilo, indolin-6-ilo, isoindolin-6-ilo, 2,3-dihidro-1H-indazol-6-ilo, 2,3-dihidro-1H-benzimidazol-6-ilo, 1,3-dihidro-2,1-benzoxazol-6-ilo, 2,3-dihidro-1,3-benzoxazol-6-ilo, 1,3-dihidro-2,1-benzotiazol-6-ilo, 2,3-dihidro-1,3-benzotiazol-6-ilo, 1H-benzimidazol-6-ilo, 1H-indazol-6-ilo, 2H-indazol-6-ilo, 1,2-benzoxazol-6-ilo, indol-6-ilo, isoindol-6-ilo, benzofuran-6-ilo y benzotiofen-6-ilo.

Oxo-heterociclilo de 4 a 6 miembros en la definicion del resto R3 representa un resto monodclico saturado con 4 a 6 atomos de anillo, en el que un atomo de anillo es un atomo de oxfgeno, a modo de ejemplo y preferentemente representa oxetanilo, tetrahidrofuranilo y tetrahidro-2H-piranilo.

En las formulas del grupo que puede representar R5, el punto de extremo de la lmea, junto al que se encuentra en cada caso una #, no representa un atomo de carbono o bien un grupo CH2 sino que es parte constituyente del enlace al atomo al que esta unido R5.

Se prefieren compuestos de formula (I), en la que

A representa un enlace o -CH2-,

R1 representa hidrogeno o metilo,

R2 representa hidrogeno o metilo,

o

R3 representa hidrOgeno, alquilo C1-C5, alcoxi C1-C4, difluorometilo, trifluorometilo, 1,1 -difluoroetilo, 3,3,3-trifluoro-2-hidroxiprop-1-Mo, 3,3,3-trifluoro-2-metoxiprop-1-ilo, 3,3,3-trifluoro-2-etoxiprop-1-ilo, prop-2-in-1 -ilo, ciclopropiloxi o ciclobutiloxi,

R4 representa hidrogeno,

R5 representa un grupo de formula

o

o

o

o

en la que # es el sitio de enlace al atomo de nitrogeno,

R8 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo o heterociclilo de 5 miembros,

en el que heterociclilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre si seleccionados del grupo que esta constituido por oxo, hidroxi, tioxo, sulfanilo, metilo, difluorometilo, trifluorometilo, 2-hidroxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo y 2-metoxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo, en el que metilo puede estar sustituido con un sustituyente metoxi,

R9 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R10 y R 11 junto con los atomos de carbono a los que estan unidos forman un heterociclo de 5 miembros,

en el que el heterociclo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre sf seleccionados del grupo que esta constituido por oxo, cloro, hidroxi, hidroxicarbonilo, metilo, difluorometilo, trifluorometilo, 1,1,2,2 ,2-pentafluoroetilo, 2-hidroxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo y 2-metoxi-carbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo,

R12 representa hidrogeno, cloro, fluor, metilo o metoxi,

Y1 representa un atomo de nitrogeno o C-R15,

en el que

R15 representa hidrogeno, cloro, hidroxi, metoxi o alcoxicarbonilo C1-C3,

Y2 representa un atomo de nitrogeno o C-R16,

en el que

R16 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R13 representa hidrogeno, hidroxicarbonilo, hidroxicarbonilmetilo o fenilo,

en el que fenilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes fluor,

R14 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

Y3 representa un atomo de nitrogeno o C-R19,

en el que

R19 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

Y4 representa un atomo de nitrogeno o C-R20,

en el que

R20 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R23 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R24 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R25 representa hidrogeno, hidroxicarbonil o hidroxicarbonilmetilo,

R26 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R27 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alcoxicarbonilo C1-C3 o alquilaminocarbonilo C1-C3,

R28 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R31 representa hidrogeno o fluor,

R32 representa hidroxi o -NHR33,

en el que

R33 representa hidrogeno, metilo o etilo,

R34 representa hidrogeno o fluor,

R35 representa hidroxi o -NHR36,

en el que

R36 representa hidrogeno, metilo o etilo,

y sus sales, sus solvatos y los solvatos de sus sales.

Se prefieren tambien compuestos de formula (I), en la que

A representa un enlace o -CH2-,

R1 representa hidrogeno o metilo,

R2 representa hidrogeno o metilo,

o

R3 representa hidrogeno, metilo, etilo, n-propilo, 2-metilo-prop-1-ilo, n-butilo o etoxi,

en el que metilo puede estar sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que esta constituido por difluorometilo, trifluorometilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclohexilo, oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidro-2H-piranilo y 1,4-dioxanilo,

en el que ciclopropilo, ciclobutilo, ciclohexilo y oxetanilo pueden estar sustituidos con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre si seleccionados del grupo que esta constituido por fluor, hidroxi, metilo, etilo y metoxi,

y

en el que etilo, n-propilo y n-butilo pueden estar sustituidos con un sustituyente seleccionado del grupo que esta constituido por fluor, metoxi y trifluorometoxi,

R4 representa hidrogeno,

R5 representa un grupo de formula

o

o

en la que # es el sitio de enlace al atomo de nitrogeno,

R8 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, oxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo, tetrazolilo o dihidrooxazolilo,

en el que oxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo y dihidrooxazolilo pueden estar sustituidos con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre si seleccionados del grupo que esta constituido poroxo, hidroxi, tioxo, sulfanilo, metilo, trifluorometilo y 2-hidroxicarbonil-1,1,2 ,2-tetrafluoroetilo, en el que metilo puede estar sustituido con un sustituyente metoxi,

R9 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

Y1 representa un atomo de nitrogeno o C-R15,

en el que

R15 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

Y2 representa un atomo de nitrogeno o C-R16,

en el que

R16 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R13 representa hidrogeno o hidroxicarbonilo,

R14 representa hidrogeno o fluor,

Y3 representa un atomo de nitrogeno o C-R19,

en el que

R19 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

Y4 representa un atomo de nitrogeno o C-R20,

en el que

R20 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R17 representa hidrogeno o hidroxicarbonilo,

R18 representa hidrogeno o fluor,

R31 representa hidrogeno,

R32 representa hidroxi o -NHR33,

en el que

R33 representa hidrogeno,

R34 representa hidrogeno,

R35 representa hidroxi, o

R5 representa 2,3-dihidro-1H-indazol-6-ilo, 1H-benzimidazol-6-ilo, indol-6-ilo, 2,3-dihidro-1H-indazol-5-ilo, 2,3-dihidro-1H-benzimidazol-5-ilo, indol-5-ilo, 1H-indazol-6-ilo, 1H-indazol-5-ilo o 2H-indazol-5-ilo,

en el que el heterociclo de 5 miembros en 2,3-dihidro-1H-indazol-6-ilo, 1H-benzimidazol-6-ilo, indol-6-ilo, 2,3-dihidro-1H-indazol-5-ilo, 2,3-dihidro-1H-benzimidazol-5-ilo, indol-5-ilo, 1H-indazol-6-ilo, 1H-indazol-5-ilo y 2H-indazol-5-ilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre si seleccionados del grupo que esta constituido por oxo, cloro, hidroxicarbonilo, metilo y trifluorometilo,

y

en el que el anillo de bencilo en 2,3-dihidro-1H-indazol-6-ilo, 1H-benzimidazol-6-ilo, indol-6-ilo, 2,3-dihidro-1H-indazol-5-ilo, 2,3-dihidro-1H-benzimidazol-5-ilo, indol-5-ilo, 1H-indazol-6-ilo y 1H-indazol-5-ilo puede estar sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que esta constituido por fluor y metoxi,

R6 representa cloro,

R7 representa hidrogeno,

y sus sales, sus solvatos y los solvatos de sus sales.

Se prefieren tambien compuestos de formula (I), en la que

A representa un enlace o -CH2-,

R1 representa hidrogeno,

R2 representa hidrogeno,

o

R3 representa hidrogeno, etilo o 2-metilo-prop-1-ilo, en el que etilo puede estar sustituido con un sustituyente metoxi,

R4 representa hidrogeno,

R5 representa un grupo de formula

o

o

en la que # es el sitio de enlace al atomo de nitrogeno,

R8 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo o oxadiazolilo,

en el que oxadiazolilo puede estar sustituido con un sustituyente oxo,

R9 representa hidrogeno o fluor,

Y1 representa C-R15,

en el que

R15 representa hidrogeno,

Y2 representa un atomo de nitrogeno,

R13 representa hidrogeno,

R14 representa hidrogeno,

Y3 representa C-R19,

en el que

R19 representa hidrogeno,

Y4 representa un atomo de nitrogeno,

R17 representa hidrogeno,

R18 representa hidrogeno,

R31 representa hidrogeno,

R32 representa hidroxi o -NHR33,

en el que

R33 representa hidrogeno,

R34 representa hidrogeno,

R35 representa hidroxi, o

R5 representa 2,3-dihidro-1H-indazol-6-ilo, 2,3-dihidro-1H-benzimidazol-5-ilo, 1H-indazol-5-ilo o 2H-indazol-5-ilo,

en el que el heterociclo de 5 miembros en 2,3-dihidro-1H-indazol-6-ilo, 2,3-dihidro-1H-benzimidazol-5-ilo, 1H-indazol-5-ilo y 2H-indazol-5-ilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre si seleccionados del grupo que esta constituido por oxo y metilo,

R6 representa cloro,

R7 representa hidrogeno,

y sus sales, sus solvatos y los solvatos de sus sales.

Se prefieren tambien compuestos de formula (I), en la que R1 y R2 representan hidrogeno.

Se prefieren tambien compuestos de formula (I), en la que R1 y R2 junto con el atomo de carbono al que estan unidos forman un anillo ciclopropilo.

Se prefieren tambien compuestos de formula (I), en la que

R3 representa hidrogeno, etilo o 2-metilo-prop-1-ilo,

en el que etilo puede estar sustituido con un sustituyente metoxi.

Se prefieren tambien compuestos de formula (I), en la que

R5 representa un grupo de formula

o

en la que # es el sitio de enlace al atomo de nitrogeno,

R8 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo o oxadiazolilo,

en el que oxadiazolilo puede estar sustituido con un sustituyente oxo,

R9 representa hidrogeno o fluor,

Y1 representa C-R15,

en el que

R15 representa hidrogeno,

Y2 representa un atomo de nitrogeno,

R13 representa hidrogeno,

R14 representa hidrogeno,

Y3 representa C-R19,

en el que

R19 representa hidrogeno,

Y4 representa un atomo de nitrogeno,

R17 representa hidrogeno,

R18 representa hidrogeno.

Se prefieren tambien compuestos de formula (I), en la que

R5 representa un grupo de formula

en la que # es el sitio de enlace al atomo de nitrogeno,

R31 representa hidrogeno,

R32 representa hidroxi o - NHR33,

en el que

R33 representa hidrogeno,

R34 representa hidrogeno,

R35 representa hidroxi.

Se prefieren tambien compuestos de formula (I), en la que

R5 representa 2,3-dihidro-1H-indazol-6-ilo, 2,3-dihidro-1H-benzimidazol-5-ilo, 1H-indazol-5-ilo o 2H-indazol-5-ilo, en el que el heterociclo de 5 miembros en 2,3-dihidro-1H-indazol-6-ilo, 2,3-dihidro-1H-benzimidazol-5-ilo, 1H-indazol-5-ilo y 2H-indazol-5-ilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre si seleccionados del grupo que esta constituido por oxo y metilo.

Se prefieren tambien compuestos de formula (I), en la que R6 representa cloro.

Se prefieren tambien compuestos de formula (I), en la que R7 representa hidrogeno.

Se prefieren tambien compuestos que presentan la formula (Ia)

en el que A, R1, R2, R3, R4, R5, R6 y R7 son tal como se ha definido anteriormente.

El objeto de la invention es ademas un procedimiento para la preparation de los compuestos de formula (I), o sus sales, sus solvatos o los solvatos de sus sales, en el que

[A] los compuestos de formula

en la que

A, R1, R2, R3, R4, R6, R7 y R9 tienen el significado indicado anteriormente y

R29 representa terc-butilo,

se hacen reaccionar con un acido para dar compuestos de formula

en la que

A, R1, R2, R3, R4, R6, R7 y R9 tienen el significado indicado anteriormente y R8 representa hidroxicarbonilo,

o

[B] los compuestos de formula

en la que

A, R1, R2, R3, R4, R6, R7 y R9 tienen el significado indicado anteriormente y R29 representa metilo o etilo,

se hacen reaccionar con una base para dar compuestos de formula

en la que

A, R1, R2, R3, R4, R6, R7 y R9 tienen el significado indicado anteriormente y

R8 representa hidroxicarbonilo,

o

[C] los compuestos de formula

en la que

A, R1, R2, R3, R6y R7 tienen el significado indicado anteriormente,

se hacen reaccionar con compuestos de formula

en la que

R4 y R5 tienen el significado indicado anteriormente,

en presencia de un reactivo de deshidratacion para dar compuestos de formula (I).

Los compuestos de formula (Ib) son una cantidad parcial de los compuestos de formula (I).

Los compuestos de formulas (IIa) y (IIb) forman juntos la cantidad de los compuestos de formula (II).

La reaction segun el procedimiento [A] se realiza en general en disolventes inertes, preferentemente en un intervalo de temperatura de temperatura ambiente hasta 60 °C con presion normal.

Los disolventes inertes son, por ejemplo, hidrocarburos halogenados tal como diclorometano, triclorometano, tetraclorometano o 1,2-dicloroetano, o eteres tal como tetrahidrofurano o dioxano, prefiriendose diclorometano. Los acidos son, por ejemplo, acido trifluoroacetico o acido clorhidrico en dioxano, prefiriendose acido trifluoroacetico. La reaccion segun el procedimiento [B] se realiza en general en disolventes inertes, preferentemente en un intervalo de temperatura de temperatura ambiente hasta el reflujo de los disolventes con presion normal.

Los disolventes inertes son, por ejemplo, hidrocarburos halogenados tal como diclorometano, triclorometano, tetraclorometano o 1,2-dicloroetano, alcoholes tal como metanol o etanol, eteres tal como dietileter, metil-tercbutileter, 1,2-dimetoxietano, dioxano o tetrahidrofurano, u otros disolventes tales como dimetilformamida, dimetilacetamida, acetonitrilo o piridina, o mezclas de disolventes, o mezclas de disolventes con agua, prefiriendose una mezcla de tetrahidrofurano y agua, una mezcla de metanol y agua o una mezcla de etanol y agua.

Las bases son, por ejemplo, hidroxidos alcalinos tal como hidroxido de sodio, litio o potasio, o carbonatos alcalinos tal como carbonato de cesio, carbonato de sodio o potasio, o alcoholatos tal como terc-butilato de potasio o sodio, prefiriendose hidroxido de litio o carbonato de cesio.

La reaccion segun el procedimiento [C] se realiza en general en disolventes inertes, eventualmente en presencia de una base, preferentemente en un intervalo de temperatura de 0 °C a temperatura ambiente con presion normal. Como reactivos de deshidratacion son adecuados segun esto, por ejemplo, carbodiimidas tal como N,W-dietil-, N,N'-dipropil-, N,N'-diisopropil-, N,N"-diciclohexilcarbodiimida, clorhidrato de N-(3-dimetilaminoisopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC) (opcionalmente en presencia de pentafluorofenol (PFP)), N-ciclohexilcarbodiimida-N‘-propiloximetil-poliestireno (Ps-carbodiimida) o compuestos de carbonilo tal como carbonildiimidazol, o compuestos de 1,2-oxazolio tal como 3-sulfato de 2-etil-5-fenil-1,2-oxazolio o perclorato de 2-terc-butil-5-metil-isoxazolio, o compuestos de acilamino tal como 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina, o anhidrido propanofosfonico, o cloroformiato de isobutilo, o cloruro de bis-(2-oxo-3-oxazolidinil)fosforilo o hexafluorofosfato de benzotriazoliloxitri(dimetilamino)fosfonio, o hexafluorofosfato de 0-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetra-metiluronio (HBTU), tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-1-(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronio (TPTU), fluoroborato de (benzotriazol-1 iloxi)bisdimetilamino-metilio (TBTU) o hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazoM-il)-N,N,W,N'-tetrametil-uronio (HATU), o 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tris(dimetilamino)-fosfonio (BOP), o ciano(hidroxi-imino)acetato de etilo (oxima), o hexafluorofosfato de (1-ciano-2-etoxi-2-oxoetilidenaminooxi)dimetilamino-morfolino-carbenio (COMU), o hexafluorofosfato de N-[(dimetilamino)(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-iloxi)metiliden]-N-metilmetanoaminio, o 2,4,6-trioxido de 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfina (T3P), o mezclas de estos, con bases. Preferentemente se realiza la condensacion con HATU o con T3P.

Las bases son, por ejemplo, carbonatos de metal alcalino tal como por ejemplo carbonato o hidrogenocarbonato de sodio o potasio, o bases organicas tal como trialquilaminas, por ejemplo trietilamina, N-metilmorfolina, N-metilpiperidina, 4-dimetilaminopiridina o diisopropiletilamina, o piridina. Preferentemente se realiza la condensacion con diisopropiletilamina o piridina.

Los disolventes inertes son, por ejemplo, hidrocarburos halogenados tal como diclorometano o triclorometano, hidrocarburos tal como benceno, u otros disolventes tal como nitrometano, dioxano, dimetilformamida, dimetilsulfoxido o acetonitrilo. Igualmente es posible usar mezclas de los disolventes. Se prefiere especialmente dimetilformamida.

Los compuestos de formula (IV) se conocen, pueden sintetizarse segun procedimientos conocidos a partir de los correspondientes compuestos de partida o pueden prepararse de manera analoga a los procedimientos descritos en la parte de ejemplos.

Los compuestos de formula (II) se conocen o pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de formula

en la que

A, R1, R2, R3, R6y R7 tienen el significado indicado anteriormente,

con compuestos de formula

en la que

R4 y R9 tienen el significado indicado anteriormente y

R25 *930representa metilo, etilo o terc-butilo,

en presencia de un reactivo de deshidratacion.

La reaction se realiza tal como se ha descrito para el procedimiento [C].

Los compuestos de formula (V) se conocen, pueden sintetizarse segun procedimientos conocidos a partir de los correspondientes compuestos de partida o pueden prepararse de manera analoga a los procedimientos descritos en la parte de ejemplos.

Los compuestos de formula (III) se conocen o pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de formula

en la que

A, R1, R2, R3, R6 y R7 tienen el significado indicado anteriormente y

R30 representa metilo o etilo,

con una base.

La reaccion se realiza en general en disolventes inertes, eventualmente en presencia de tamiz molecular, preferentemente en un intervalo de temperatura de temperatura ambiente a 50 °C con presion normal.

Los disolventes inertes son, por ejemplo, alcoholes tal como metanol o etanol, eteres tal como dioxano o tetrahidrofurano, o mezclas de disolventes, prefiriendose tetrahidrofurano.

Las bases son, por ejemplo, hidruro de sodio o alcoholatos tal como etilato de potasio o de sodio o metilato de potasio o de sodio, prefiriendose etilato de sodio.

Los compuestos de formula (VI) se conocen o pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de formula

en la que

A, R1, R2, R3, R6 y R7 tienen el significado indicado anteriormente y

R30 representa metilo o etilo,

con un acido.

La reaccion se realiza tal como se ha descrito para el procedimiento [A].

Los compuestos de formula (VII) se conocen o pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de formula

en la que

R3 tiene el significado indicado anteriormente,

R30 representa metilo o etilo, y

X1 representa cloro, bromo, yodo o trifluorometanosulfoniloxi,

con compuestos de formula

en la que

A, R1, R2, R6 y R7 tienen el significado indicado anteriormente y

Q1 representa -B(OH)2, un ester de acido boronico, preferentemente boronato de pinacol, o -BF3-K+, en condiciones de acoplamiento de Suzuki para dar compuestos de formula (VII).

La reaccion se realiza en general en disolventes inertes, en presencia de un catalizador, eventualmente en presencia de un reactivo de adicion, eventualmente en un microondas, preferentemente en un intervalo de temperatura de temperatura ambiente hasta 150 °C con de presion normal a 300 kPa.

Los catalizadores son, por ejemplo, catalizadores de paladio habituales para condiciones de reaccion de Suzuki, prefiriendose catalizadores tal como por ejemplo diclorobis(trifenilfosfina)-paladio, tetraquistrifenilfosfinapaladio(0), acetato de paladio(II)/trisciclohexilfosfina, tris(dibencilidenacetona)dipaladio, cloruro de bis-(difenilfosfanferrocenil)-paladio-(II), dimero de 1,3-bis(2,6-diisopropilfenil)imidazol-2-iliden(1,4-naftoquinona)paladio, alil(cloro)-(1,3-dimesitil-1,3-dihidro-2H-imidazol-2-iliden)paladio, acetato de paladio(Il)/diciclohexil-(2',4',6'-triisopropil-bifenil-2-il)-fosfina, aducto de cloruro de [1,1-bis-(difenilfosfino)-ferrocen]-paladio(II)-monodiclorometano o precatalizador XPhos [(2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfano (1:1)], prefiriendose tetraquistrifenilfosfina-paladio(0), aducto de cloruro de [1,1 -bis-(difenilfosfino)-ferrocen]-paladio(II)-monodiclorometano o precatalizador XPhos [(2'-aminobifenil-2-il)(cloro)paladio-diciclohexil(2',4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfano (1:1)].

Los reactivos de adicion son por ejemplo acetato de potasio, carbonato de cesio, potasio o de sodio, terc-butilato de potasio, fluoruro de cesio o fosfato de potasio, pudiendose encontrar estos en solution acuosa, prefiriendose reactivos de adicion tal como carbonato de potasio o solucion acuosa de fosfato de potasio.

Los disolventes inertes son, por ejemplo, eteres tal como dioxano, tetrahidrofurano o 1,2-dimetoxietano, hidrocarburos tales como benceno, xileno o tolueno, o amidas de acido carboxflico tal como dimetilformamida o dimetilacetamida, alquilsulfoxidos tal como dimetilsulfoxido, o N-metilpirrolidona o acetonitrilo, o mezclas de los disolventes con alcoholes tal como metanol o etanol y/o agua, prefiriendose tetrahidrofurano, dioxano o acetonitrilo. Los compuestos de formulas (VIII) y (IX) se conocen, pueden sintetizarse segun procedimientos conocidos a partir de los correspondientes compuestos de partida o pueden prepararse de manera analoga a los procedimientos descritos en la parte de ejemplos.

La preparation de los compuestos de partida y de los compuestos de formula (I) puede ilustrarse mediante el siguiente esquema de smtesis.

Esquema 1:

Los compuestos de acuerdo con la invention tienen un espectro util impredecible de actividad farmacologica y un buen comportamiento farmacocinetico. A este respecto se trata de compuestos que modulan la actividad proteolftica de la serina proteasa factor XIa (FXIa) y/o de la serina proteasa calicrema plasmatica (PK). Los compuestos de acuerdo con la invencion inhiben la escision enzimatica catalizada con FXIa y/o PK de sustratos que adoptan una funcion esencial en la activation de la coagulation sangumea, en la agregacion plaquetaria por medio de reduction de la trombina necesaria para la activacion de PAR-1 de las plaquetas y en procesos inflamatorios que incluyen conjuntamente en particular un aumento de la permeabilidad vascular.

Por lo tanto son adecuados para su uso como farmaco para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades en seres humanos y animales.

Otro objeto de la presente invencion es el uso de los compuestos de acuerdo con la invencion para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, en particular de enfermedades cardiovasculares, preferentemente de enfermedades tromboticas o bien tromboembolicas y/o complicaciones tromboticas o bien tromboembolicas, y/o enfermedades oftalmologicas, en particular de retinopatfa diabetica o bien del edema macular y/o enfermedades inflamatorias, en particular aquellas que estan relacionadas con la actividad excesiva de calicrema plasmatica, tal como por ejemplo el angioedema hereditario (HAE) o enfermedades inflamatorias cronicas, en particular del intestino, tal como por ejemplo enfermedad de Crohn.

El factor XIa (FXIa) es una enzima importante en el contexto de la coagulacion que puede activarse tanto mediante trombina como tambien factor XIIa (FXIIa) y por consiguiente esta implicado en dos procesos esenciales de la coagulacion: es un componente central del paso desde la initiation hacia la amplification y propagation de la coagulacion: La trombina activa en bucles de reacoplamiento positivos ademas del factor V y el factor VIII tambien al factor XI para dar el factor XIa, el factor IX reacciona para dar el factor IXa y a traves del complejo de factor IXa/factor VIIIa asi generado estimula mucho la activacion del factor X y con ello a su vez la formation de trombina, lo que conduce a un fuerte crecimiento del trombo y estabiliza el trombo.

Ademas es el factor XIa un componente importante de la iniciacion intrmseca de la coagulacion: ademas de la estimulacion a traves del factor tisular (tissue factor, TF) puede realizarse la activacion del sistema de coagulacion en superficies en particular cargadas negativamente, a las que pertenecen ademas de estructuras superficiales de celulas foraneas para el cuerpo (por ejemplo bacterias) tambien superficies artificiales tal como protesis vasculares, endoprotesis y sistemas circulatorios extracorporeos. Sobre la superficie tiene lugar en primer lugar la activacion del factor XII (FXII) para dar el factor Xlla, que a continuation activa el factor XI unido a superficies celulares para dar el factor XIa. Esto conduce, tal como se ha descrito anteriormente, a la activacion posterior de la cascada de coagulacion.

Por el contrario, la generacion de trombina en la fase de iniciacion a traves de TF/factor Vila y activacion del factor X y finalmente la formacion de trombina, permanece insensible a la reaccion fisiologica en lesiones vasculares. Esto podna aclarar por que no se encontraron prolongaciones de los tiempos de coagulacion en ratones con FXIa desactivado, como tambien en conejos y otras especies con administracion del inhibidor de FXIa. Esta baja tendencia a la hemorragia provocada por la sustancia es de gran importancia para su administracion en seres humanos en particular en pacientes con elevado riesgo de hemorragia.

Ademas, el factor Xlla activa en el contexto de la activacion intnnseca igualmente procalicrema plasmatica para dar calicrema plasmatica (PK), que conduce entre otras cosas a la activacion posterior del factor XII en el contexto de un bucle de potenciacion, lo que tiene como consecuencia en total un refuerzo de la iniciacion de la cascada de coagulacion en superficies. Una actividad inhibidora de PK de un compuesto de acuerdo con la invencion reducira por tanto la coagulacion por medio de la activacion de superficie y por consiguiente actuara de manera anticoagulante. Una ventaja podna encontrarse en la combinacion de actividad inhibidora de factor XIa y de PK, que permite una accion antitrombotica equilibrada.

Por tanto, los compuestos de acuerdo con la invencion son adecuados para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades o complicaciones que pueden surgir de la formacion de coagulos.

A las “enfermedades tromboticas o bien tromboembolicas” en el sentido de la presente invencion pertenecen enfermedades que se producen tanto en la vasculatura arterial como en la venosa y que se pueden tratar con los compuestos de acuerdo con la invencion, en particular enfermedades en las arterias coronarias del corazon, tales como smdrome coronario agudo (ACS), infarto de miocardio con elevacion del segmento ST (STEMI) y sin elevacion del segmento ST (no-STEMI), angina de pecho estable, angina de pecho inestable, reoclusiones y restenosis despues de intervenciones coronarias tales como angioplastia, implantacion de endoprotesis vascular o derivacion aortocoronaria, pero ademas enfermedades tromboticas o bien tromboembolicas en otros vasos que conducen a enfermedades oclusivas arteriales perifericas, embolias pulmonares, tromboembolias venosas, trombosis venosas, en particular en venas profundas de la pierna, y venas renales, ataques isquemicos transitorios y ademas accidente cerebrovascular trombotico y accidente cerebrovascular tromboembolico.

La estimulacion del sistema de coagulacion puede producirse por varias causas o bien enfermedades asociadas. En el contexto de las intervenciones quirurgicas, inmovilidad, encamado, infecciones, inflamacion o un cancer o tratamiento de cancer, entre otras cosas puede estar el sistema de coagulacion extremadamente activado y puede haber complicaciones tromboticas, en particular trombosis venosas. Por lo tanto, los compuestos de acuerdo con la invencion son adecuados para la profilaxis de trombosis en el contexto de intervenciones quirurgicas en pacientes que sufren de cancer. Por lo tanto, los compuestos de acuerdo con la invencion son adecuados tambien para la profilaxis de trombosis en pacientes que tienen un sistema de coagulacion activado, por ejemplo en las situaciones de estimulacion descritas.

Por tanto, los compuestos de acuerdo con la invencion tambien son adecuados para la prevencion y el tratamiento de tromboembolias cardiogenas tales como, por ejemplo, isquemias cerebrales, accidentes cerebrovasculares y tromboembolias sistemicas e isquemias, en pacientes con arritmias cardfacas agudas, intermitentes o persistentes tales como, por ejemplo, fibrilacion auricular, y en pacientes que experimentan cardioversion, ademas en pacientes con enfermedades en valvulas cardfacas o con protesis valvulares.

Ademas son adecuados los compuestos de acuerdo con la invencion para el tratamiento y la prevencion de una coagulacion intravasal diseminada (DIC), que puede producirse entre otras cosas en el contexto de una septicemia, sin embargo tambien como consecuencia de intervenciones quirurgicas, enfermedades tumorales, quemaduras u otras lesiones y mediante microtrombosis puede conducir a graves danos de organos.

Las complicaciones tromboembolicas se producen ademas en caso de anemias hemoltticas microangiopaticas y mediante contacto de la sangre con superficies extranas al cuerpo en el contexto de circulaciones sangumeas extracorporeas, tal como por ejemplo la hemodialisis, ECMO (“extracorporal membrane oxygenation"), LVAD (‘‘left ventricular assist device") y procedimientos similares, fistulas AV, endoprotesis vascular asf como protesis valvulares.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion se tienen en consideracion para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades que involucran la formacion de microcoagulos o bien depositos de fibrina en vasos sangumeos cerebrales que pueden conducir a enfermedades de demencia tales como la demencia vascular o enfermedad de Alzheimer. Aqm, el coagulo puede contribuir a la enfermedad tanto mediante oclusiones como mediante la union de otros factores relevantes de la enfermedad.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion se tienen en consideracion en particular para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades donde, ademas del componente pro-coagulante, tambien el componente proinflamatorio cumple una funcion esencial. La potenciacion mutua de la coagulacion y la inflamacion se puede prevenir en particular mediante los compuestos de acuerdo con la invencion y por tanto se puede reducir de forma decisiva la probabilidad de una complicacion trombotica. A este respecto pueden contribuir tanto el componente inhibidor del factor XIa (a traves de la inhibicion de la produccion de trombina) como tambien el componente inhibidor de PK a la accion anticoagulante y antiinflamatoria (por ejemplo por medio de bradicinina). Por tanto se puede considerar entre otras cosas el tratamiento y/o la profilaxis, en el contexto de enfermedades vasculares ateroscleroticas, inflamaciones en el contexto de enfermedades reumaticas del sistema locomotor, enfermedades inflamatorias del pulmon, tales como por ejemplo fibrosis pulmonar, enfermedades inflamatorias del rinon, tales como por ejemplo glomerulonefritis, enfermedades inflamatorios del intestino, tales como por ejemplo enfermedad de Crohn o colitis ulcerosa, o enfermedades que pueden estar presentes en el contexto de una enfermedad diabetica subyacente, tales como por ejemplo retinoparia diabetica o bien nefroparia.

En el caso de la progresion de enfermedades intestinales inflamatorias cronicas (CED) tienen entre otras cosas las cininas generadas por medio de la calicrema plasmatica un papel fundamental. Su accion pro-inflamatoria a traves de la activacion de receptores de bradicinina induce y potencia el desarrollo de la enfermedad. Los estudios en pacientes con enfermedad de Crohn muestran una correlacion entre la concentracion de calicrema en el epitelio intestinal y el grado de la inflamacion intestinal. Una activacion del sistema de calicrema-cinina se observo igualmente en estudios experimentales con animales. Una inhibicion de la smtesis de bradicinina mediante inhibidores de calicrema podria usarse segun esto tambien para la profilaxis y/o la terapia de enfermedades intestinales inflamatorias cronicas.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion se pueden usar para inhibir el desarrollo de tumores y la formacion de metastasis, y ademas para la profilaxis y/o el tratamiento de complicaciones tromboembolicas, tales como, por ejemplo, tromboembolias venosas, en pacientes con tumor, en particular los que se someten a intervenciones quirurgicas importantes o a quimioterapia o radioterapia.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion se tienen en consideracion tambien para la profilaxis y/o el tratamiento de hipertension pulmonar.

En el contexto de la presente invencion, el termino “hipertension pulmonar” incluye hipertension arterial pulmonar, hipertension pulmonar asociada con enfermedades del hemicardio izquierdo, hipertension pulmonar asociada con enfermedades pulmonares y/o hipoxia e hipertension pulmonar debida a tromboembolias cronicas (CTEPH).

La “hipertension arterial pulmonar” comprende hipertension arterial pulmonar idiopatica (IPAH), inicialmente denominada tambien hipertension pulmonar primaria), hipertension arterial pulmonar familiar (FPAH) e hipertension arterial pulmonar asociada (APAH), la cual esta asociada con colagenosis, derivacion pulmonar-sistemica congenita, hipertension portal, infecciones por VIH, la ingestion de ciertas drogas y medicamentos, con otras enfermedades (enfermedades de la glandula tiroidea, enfermedades por deposito de glucogeno, enfermedad de Gaucher, teleangiectasia hereditaria, hemoglobinoparias, trastornos mieloproliferativos, esplenectoirna), con enfermedades que tienen una contribucion capilar/venosa significativa, tales como enfermedad pulmonar-venosa oclusiva y hemangiomatosis pulmonar-capilar, y ademas hipertension pulmonar persistente de neonatos.

La hipertension pulmonar asociada con enfermedades del hemicardio izquierdo comprende la enfermedad de la auricula o el ventriculo izquierdo y defectos en la valvula mitral o aorta.

La hipertension pulmonar asociada con enfermedades pulmonares y/o hipoxia comprende enfermedades pulmonares obstructivas cronicas, enfermedad pulmonar intersticial, smdrome de apnea del sueno, hipoventilacion alveolar, mal de las alturas cronico y defectos inherentes.

La hipertension pulmonar debida a tromboembolias cronicas (CTEPH) comprende la oclusion tromboembolica de las arterias pulmonares proximales, la oclusion tromboembolica de las arterias pulmonares distales y las embolias pulmonares no tromboticas (tumor, parasitos, cuerpos extranos).

Otro objeto de la presente invencion es el uso de los compuestos de acuerdo con la invencion para la preparacion de farmacos para el tratamiento y/o la profilaxis de hipertension pulmonar asociada con sarcoidosis, histiocitosis X y linfangiomatosis.

Ademas, las sustancias de acuerdo con la invencion se tienen en consideracion tambien para el tratamiento de fibrosis pulmonar y hepatica.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion se tienen en consideracion tambien para el tratamiento y/o la profilaxis de la coagulacion intravascular diseminada en el contexto de una enfermedad infecciosa, y/o del smdrome inflamatorio sistemico (SIRS), disfuncion organica septicemica, insuficiencia organica septicemica e insuficiencia multiorganica, smdrome disneico agudo (SDA), lesion aguda del pulmon (ALI), choque septicemico y/o insuficiencia organica septicemica.

En el curso de una infeccion, puede haber una activacion generalizada del sistema de coagulacion (“coagulacion intravascular diseminada” o “coaguloparia de consumo”, denominada a continuacion como “DIC”) con microtrombosis en varios organos y complicaciones hemorragicas secundarias. Ademas, puede haber dano endotelial con aumento de permeabilidad de los vasos y filtracion de fluidos y protemas dentro del lumen extravasal.

En el transcurso posterior puede haber insuficiencia de un organo (por ejemplo insuficiencia renal, insuficiencia hepatica, insuficiencia respiratoria, deficit del sistema nervioso central e insuficiencia cardiovascular) o insuficiencia multiorganica.

En el caso de DIC, hay una activacion masiva del sistema de coagulacion en la superficie de las celulas endoteliales danadas, las superficies de cuerpos extranos o del tejido extravascular lesionado. Como consecuencia, hay coagulacion en pequenos vasos de varios organos con hipoxia y posterior disfuncion organica. Un efecto secundario es el consumo de factores de coagulacion (por ejemplo factor X, protrombina y fibrinogeno) y plaquetas, que reduce la capacidad de coagulacion de la sangre y pueden producirse hemorragias graves.

Los compuestos de acuerdo con la invencion, que inhiben calicrema plasmatica sola o en combinacion con factor XIa, se tienen en consideracion adicionalmente para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades en cuyo desarrollo esta implicada la calicrema plasmatica. Adicionalmente a la actividad anticoagulante, la calicrema plasmatica representa una importante proteasa que libera bradicinina, que por consiguiente conduce entre otras cosas al aumento de la permeabilidad endotelial. Los compuestos pueden usarse, por consiguiente, para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, que van acompanadas de formaciones de edema, tal como por ejemplo enfermedades oftalmologicas, en particular la retinopatfa diabetica o el edema macular o el angioedema hereditario.

A las “enfermedades oftalmologicas” en el sentido de la presente invencion pertenecen en particular enfermedades tal como retinopatfa diabetica, edema macular diabetico (diabetic macular edema, DME), edema macular, edema macular asociado con oclusion venosa retiniana, degeneracion macular asociada a la edad (AMD), neovascularizacion coroidea (CNV), membranas neovasculares coroideas (CNVM), edema macular cistoide (cystoid macula edema, CME), membranas epiretinales (ERM) y perforaciones de la macula, neovascularizacion coroidea asociada a miopfa, estnas angioides o bien vasculares (angioid streaks, vascular streaks), desprendimiento de retina, alteraciones atroficas de epitelio pigmentario de la retina, alteraciones hipertroficas del epitelio pigmentario de la retina, oclusion venosa retiniana, oclusion venosa retiniana coroidea, retinitis pigmentosa, enfermedad de Stargardt, retinopatfa del prematuro, glaucoma, enfermedades inflamatorias del ojo tal como por ejemplo uveitis, escleritis o endoftalmitis, cataratas, anomalfas de refraccion tal como por ejemplo miopfa, hipermetropfa o astigmatismo y queratocono, enfermedades del ojo delantero tal como por ejemplo angiogenesis corneal como consecuencia de por ejemplo queratitis, trasplante de cornea o queratoplastia, angiogenesis corneal como consecuencia de hipoxia (por ejemplo al llevar mucho tiempo lentes de contacto), Pterygium conjunctivae, edema subcorneal y edema intracorneal.

Ademas se tienen en cuenta los compuestos de acuerdo con la invencion para la profilaxis primaria de enfermedades tromboticas o tromboembolicas y/o enfermedades inflamatorias y/o enfermedades con elevada permeabilidad vascular en pacientes en los que las mutaciones genicas conducen a actividad reforzada de las enzimas o niveles elevados de los zimogenos y estos se determinan mediante correspondientes ensayos/mediciones de la actividad enzimatica o bien concentraciones de zimogenos.

Otro objeto de la presente invencion es el uso de los compuestos de acuerdo con la invencion para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, en particular de las enfermedades mencionadas anteriormente.

Otro objeto de la presente invencion es el uso de los compuestos de acuerdo con la invencion para la preparacion de un farmaco para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, en particular de las enfermedades mencionadas anteriormente.

Otro objeto de la presente invencion es un procedimiento para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, en particular de las enfermedades mencionadas anteriormente, usando una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con la invencion.

Otro objeto de la presente invencion son los compuestos de acuerdo con la invencion para su uso en un procedimiento para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, en particular de las enfermedades mencionadas anteriormente, usando una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con la invencion.

Otro objeto de la presente invencion son farmacos que contienen un compuesto de acuerdo con la invencion y uno o varios principios activos adicionales.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion se pueden usar para prevenir la coagulacion ex vivo, por ejemplo para la proteccion de organos a ser trasplantados contra el dano del organo originado por la formacion de coagulos y para proteger al receptor del organo contra la tromboembolia del organo trasplantado, para conservar los hemoderivados y derivados plasmaticos, para limpiar/pretratar cateteres y otros medios auxiliares e instrumentos medicos, para recubrir las superficies sinteticas de los medios auxiliares e instrumentos medicos que se usan in vivo o ex vivo o para muestras biologicas que podnan comprender el factor XIa o calicrema plasmatica.

Otro objeto de la presente invencion es un procedimiento para prevenir la coagulacion de la sangre in vitro, en particular en muestras de sangre en bancos o muestras biologicas que pueden contener el factor XIa o calicrema plasmatica o las dos enzimas, que se caracteriza porque se agrega una cantidad anticoagulante efectiva del compuesto de acuerdo con la invencion.

• Otro objeto de la presente invencion son farmacos que contienen un compuesto de acuerdo con la invencion y uno o varios principios activos adicionales, especialmente para el tratamiento y/o la profilaxis de las enfermedades mencionadas anteriormente. Como principios activos de combinacion adecuados se mencionan a modo de ejemplo y preferentemente:

• hipolipemiantes, en particular inhibidores de HMG-CoA-(3-hidroxi-3-metilglutaril-coenzima A) reductasa tales como, por ejemplo, lovastatina (Mevacor), simvastatina (Zocor), pravastatina (Pravachol), fluvastatina (Lescol) y atorvastatina (Lipitor);

• agentes terapeuticos coronarios/vasodilatadores, en particular inhibidores de ACE (enzima convertidora de la angiotensina) tales como, por ejemplo, captopril, lisinopril, enalapril, ramipril, cilazapril, benazepril, fosinopril, quinapril y perindopril, o antagonistas del receptor AII (angiotensina II) tales como, por ejemplo, embusartan, losartan, valsartan, irbesartan, candesartan, eprosartan y temisartan, o antagonistas p-adrenoceptores tales como, por ejemplo, carvedilol, alprenolol, bisoprolol, acebutolol, atenolol, betaxolol, carteolol, metoprolol, nadolol, penbutolol, pindolol, propanolol y timolol, o antagonistas del adrenoceptor alfa-1 tales como, por ejemplo, prazosina, bunazosina, doxazosina y terazosina, o diureticos, tales como, por ejemplo, hidroclorotiazida, furosemida, bumetanida, piretanida, torasemida, amilorida y dihidralazina, o bloqueadores del canal de calcio, tales como, por ejemplo verapamilo y diltiazem, o derivados de dihidropiridinas tales como, por ejemplo, nifedipino (Adalat) y nitrendipino (Bayotensin), o preparaciones nitro tales como, por ejemplo, 5-mononitrato de isosorbida, dinitrato de isosorbida y trinitrato de glicerol, o sustancias que originan un incremento en el guanosina monofosfato dclico (cGMP) tales como, por ejemplo, estimuladores de guanilato ciclasa soluble, por ejemplo riociguat;

• activadores del plasminogeno (tromboltticos/fibrinoltticos) y compuestos que promueven la trombolisis/fibrinolisis tales como inhibidores del inhibidor del activador del plasminogeno (inhibidores de PAI) o inhibidores del inhibidor de fibrinolisis activado por trombina (inhibidores de TAFI) tales como, por ejemplo, activador tisular del plasminogeno (tPA, por ejemplo Actilyse®), estreptocinasa, reteplasa y urocinasa o sustancias moduladoras de plasminogeno, que conducen a un refuerzo de la formacion de plasmina;

• sustancias anticoagulantes (anticoagulantes), tales como, por ejemplo, heparina (UFH), heparinas de bajo peso molecular (NMH), tales como, por ejemplo, tinzaparina, certoparina, parnaparina, nadroparina, ardeparina, enoxaparina, reviparina, dalteparina, danaparoid, semuloparina (AVE 5026), adomiparina (M118) y EP-42675/ORG42675;

• inhibidores directos de la trombina (DTI) tales como, por ejemplo, pradaxa (Dabigatran), atecegatran (AZD-0837), DP-4088, SSR-182289A, argatroban, bivalirudina y tanogitran (BiBt -986 y el profarmaco BIBT-1011), hirudina;

• inhibidores directos del factor Xa tales como, por ejemplo, rivaroxaban, apixaban, edoxaban (DU-176b), betrixaban (PRT-54021), R-1663, darexaban (YM-150), otamixaban (FXV-673/RPR-130673), letaxaban (TAK-442), razaxaban (DPC-906), DX-9065a, LY-517717, tanogitran (BIBT-986 y el profarmaco BIBT-1011), idraparinux y fondaparinux,

• sustancias inhibidoras de la agregacion plaquetaria (inhibidores de agregacion plaquetaria, inhibidores de agregacion trombodtica) tales como, por ejemplo, acido acetilsalfcilico (por ejemplo aspirina), antagonistas de P2Y12 tales como por ejemplo ticlopidina (Ticlid), clopidogrel (Plavix), prasugrel, ticagrelor, cangrelor, elinogrel, antagonistas de PAR-1 tal como por ejemplo vorapaxar, antagonistas de PAR-4, antagonistas de EP3 tales como por ejemplo DG041;

• inhibidores de la adhesion plaquetaria tales como antagonistas de GPVI y/o GPIb tales como por ejemplo revacept o caplacizumab;

• antagonistas del receptor del fibrinogeno (antagonistas de la glucoprotema Mb/IIIa) tales como, por ejemplo, abciximab, eptifibatida, tirofiban, lamifiban, lefradafiban y fradafiban;

• protema C activada humana recombinante tal como, por ejemplo, Xigris o trombomodulina recombinante;

• asf como agentes antiarntmicos;

• inhibidores de la ruta de senalizacion VEGF y/o PDGF tal como por ejemplo aflibercept, ranibizumab, bevacizumab, KH-902, pegaptanib, ramucirumab, escualamina o bevasiranib, apatinib, axitinib, brivanib, cediranib, dovitinib, lenvatinib, linifanib, motesanib, pazopanib, regorafenib, sorafenib, sunitinib, tivozanib, vandetanib, vatalanib, vargatef y E-10030;

• inhibidores de la ruta de senalizacion de angiopoyetina Tie tal como por ejemplo AMG386;

• inhibidores del receptor de tirosina cinasa Tie2;

inhibidores de la ruta de senalizacion de integrina tal como por ejemplo volociximab, cilengitid y ALG1001; inhibidores de la ruta de senalizacion de PI3K-Akt-mTor tal como por ejemplo XL-147, perifosina, MK2206, sirolimus, temsirolimus y everolimus;

corticosteroide tal como por ejemplo anecortave, betametasona, dexametasona, triamcinolona, fluocinolona y fluocinolonacetonid;

inhibidores de la ruta de senalizacion de ALK1-Smad1/5 tal como por ejemplo ACE041;

inhibidores de ciclooxigenasa tal como por ejemplo bromfenaco y nepafenaco;

inhibidores del sistema de calicrema-cinina tal como por ejemplo safotibant y ecallantid;

inhibidores de la ruta de senalizacion de 1-fosfato de esfingosina tal como por ejemplo sonepcizumab; inhibidores del receptor complemento-C5a tal como por ejemplo eculizumab;

inhibidores del receptor 5HTIa tal como por ejemplo tandospirona;

inhibidores de la ruta de senalizacion de Ras-Raf-Mek-Erk; inhibidores de la ruta de senalizacion de MAPK; inhibidores de la ruta de senalizacion de FGF; inhibidores de la proliferacion de celulas endoteliales; principios activos que inducen a la apoptosis;

• terapia fotodinamica, que esta constituida por un principio activo y la accion de la luz, siendo el principio activo por ejemplo verteporfina.

Por “combinaciones” en el sentido de la invencion se entiende no solo formas farmaceuticas que contienen todos los componentes (las denominadas combinaciones fijas), y paquetes de combinaciones que contienen los componentes separados entre sf, sino ademas componentes que se administran de forma simultanea o secuencial, en la medida que se empleen para la profilaxis y/o el tratamiento de la misma enfermedad. De igual modo es posible combinar dos o mas principios activos entre sf, es decir, se trata a este respecto en cada caso de combinaciones de dos componentes o multicomponentes.

Los compuestos de acuerdo con la invencion pueden actuar de forma sistemica y/o local. A este fin, se pueden administrar de una manera adecuada, por ejemplo por via oral, parenteral, pulmonar, nasal, sublingual, lingual, bucal, rectal, dermica, transdermica, conjuntival, otica, o en forma de un implante o endoprotesis vascular.

Los compuestos de acuerdo con la invencion se pueden administrar en las formas de administracion adecuadas para estas vfas de administracion.

Son formas de administracion adecuadas para la administracion oral aquellas que funcionan de acuerdo con el estado de la tecnica y proporcionan los compuestos de acuerdo con la invencion de forma rapida y/o de una manera modificada, y que contienen los compuestos de acuerdo con la invencion en forma cristalina y/o amorfa y/o disuelta, tal como por ejemplo comprimidos (comprimidos no recubiertos o recubiertos, por ejemplo con recubrimientos entericos o recubrimientos que son insolubles o se disuelven de una manera retardada, que controlan la liberacion del compuesto de acuerdo con la invencion), comprimidos que se disgregan rapidamente en la boca, o pelfculas/obleas, pelfculas/liofilizados, capsulas (por ejemplo capsulas de gelatina dura o blanda), comprimidos recubiertos con azucar, granulos, microgranulos, polvos, emulsiones, suspensiones, aerosoles o soluciones.

La administracion parenteral puede realizarse con evitacion de una etapa de absorcion (por ejemplo, por via intravenosa, intraarterial, intracardiaca, intraespinal o intralumbar) o con inclusion de una absorcion (por ejemplo, por via intramuscular, subcutanea, intracutanea, percutanea o intraperitoneal). Las formas de administracion adecuadas para la administracion parenteral incluyen formulaciones para inyeccion e infusion en la forma de soluciones, suspensiones, emulsiones, liofilizados o polvos esteriles.

Para la administracion extraocular (topica) son adecuadas formas de administracion que funcionan segun el estado de la tecnica que proporcionan el principio activo de manera rapida y/o modificada o bien controlada, que contienen el principio activo en forma cristalina y/o amorfa y/o disuelta, tal como por ejemplo gotas oculares, pulverizaciones y lociones (por ejemplo soluciones, suspensiones, sistemas vesiculares/coloidales, emulsiones, aerosoles), polvos para gotas oculares, pulverizaciones y lociones (por ejemplo principio activo molido, mezclas, liofilizados, principio activo precipitado), preparaciones oculares semisolidas (por ejemplo hidrogeles, hidrogeles in-situ, cremas y pomadas), insertos oculares (preparaciones solidas y semisolidas, por ejemplo bioadhesivos, pelfculas/obleas, comprimidos, lentes de contacto).

La administracion intraocular comprende por ejemplo la administracion intravftrea subretinal, subescleral, intracoroidea, subconjuntival, retrobulbar y subtenonica. Para la administracion intraocular son adecuadas formas de administracion que funcionan segun el estado de la tecnica que proporcionan el principio activo de manera rapida y/o modificada o bien controlada, que contienen el principio activo en forma cristalina y/o amorfa y/o disuelta, tal como por ejemplo inyecciones y concentrados para inyecciones (por ejemplo soluciones, suspensiones, sistemas vesiculares/coloidales, emulsiones, polvos para inyecciones (por ejemplo principio activo molido, mezclas, liofilizados, principio activo precipitado)), geles para inyecciones (preparaciones semisolidas, por ejemplo hidrogeles, hidrogeles in-situ) e implantes (preparaciones solidas, por ejemplo implantes biodegradables y no biodegradables, bombas implantables).

Se prefiere la administracion oral o bien en caso de enfermedades oftalmologicas la administracion extraocular y la administracion intraocular.

Para las otras vfas de administracion son adecuadas por ejemplo formas farmaceuticas para inhalacion (incluyendo inhaladores de polvo, nebulizadores), gotas, soluciones o pulverizaciones nasales; comprimidos para administracion lingual, sublingual o bucal, pelfculas/obleas o capsulas, supositorios, preparaciones oftalmologicas u oculares, capsulas vaginales, suspensiones acuosas (lociones, mezclas para agitar), suspensiones lipofilas, pomadas, cremas, sistemas terapeuticos transdermicos (por ej., parches), leche, pastas, espumas, polvos para espolvoreo, implantes o endoprotesis vascular.

Los compuestos de acuerdo con la invencion se pueden convertir en las formas de administracion mencionadas. Esto se puede hacer de una manera conocida per se, mezclandolos con coadyuvantes inertes, no toxicos, farmaceuticamente adecuados. Estos coadyuvantes incluyen entre otros vehffculos (por ejemplo celulosa microcristalina, lactosa, manitol), disolventes (por ejemplo polietilenglicoles lfquidos), emulsionantes y agentes dispersantes o humectantes (por ejemplo dodecilsulfato sodico, oleato de polioxisorbitano), aglutinantes (por ejemplo polivinilpirrolidona), poffmeros sinteticos y naturales (por ejemplo albumina), estabilizantes (por ejemplo, antioxidantes, tales como por ejemplo acido ascorbico), colorantes (por ejemplo, pigmentos inorganicos, tales como por ejemplo oxidos de hierro) y correctores del sabor y/o el olor.

Otro objeto de la presente invencion son farmacos que contienen al menos un compuesto de acuerdo con la invencion, preferentemente junto con uno o mas coadyuvantes inertes no toxicos, farmaceuticamente adecuados, y el uso de los mismos para los fines mencionados anteriormente.

En el caso de administracion parenteral, en general se ha hallado que es ventajoso administrar cantidades de aproximadamente 5 a 250 mg cada 24 horas para obtener resultados efectivos. En el caso de administracion oral, la cantidad es aproximadamente de 5 a 500 mg cada 24 horas.

Sin embargo, puede ser necesario donde sea apropiado desviarse de las cantidades establecidas, espedficamente en funcion del peso corporal, la via de administracion, la respuesta individual al principio activo, la naturaleza de la preparacion y el momento o el intervalo en el que tiene lugar la administracion.

Los porcentajes en las pruebas y en los ejemplos que siguen son, a menos que se indique lo contrario, porcentajes en peso; las partes son partes en peso. Las relaciones de disolvente, las relaciones de dilucion y las cifras de concentracion para las soluciones lfquido/lfquido se refieren en cada caso al volumen. La indicacion “p/v” significa “peso/volumen”. Asf, por ejemplo “10% p/v” significa: 100 ml de solucion o suspension contienen 10 g de sustancia A) Ejemplos

Abreviaturas:

Boc terc-butiloxicarbonilo

aprox. circa

d dfa(s), doblete (en RMN)

CCF cromatograffa de capa fina

DCM diclorometano

DCI ionizacion qrnmica directa (en EM)

dd doblete de dobletes (en r Mn )

DIC W,W-diisopropilcarbodiimida

DIEA W,W-diisopropiletilamina

DMAP 4-dimetilaminopiridina

DMF W,W-dimetilformamida

DMSO dimetilsulfoxido

d. t. de la teoffa (en rendimiento)

eq. equivalente(s)

ESI ionizacion por electropulverizacion (en EM)

h hora(s)

HATU hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio

HPLC cromatograffa lfquida de alta resolucion, alta presion

HV alto vacfo

CL-EM cromatograffa ffquida acoplada a espectroscopfa de masa

LDA diisopropilamida de litio

m multiplete (en RMN)

min minuto(s)

EM espectroscopfa de masas

RMN espectroscopfa de resonancia nuclear

oxima ciano(hidroxiimino)acetato de etilo

q cuarteto o cuadrupleto (en RMN)

cuant. cuantitativo

quin quinteto (en RMN)

Rp fase inversa (en HPLC)

TA temperatura ambiente

Rt tiempo de retencion (en HPLC)

s singulete (en RMN)

sxt sexteto (en RMN)

SFC cromatograffa de lfquidos supercnticos (con dioxido de carbono supercntico como fase movil)

t triplete (en RMN)

THF tetrahidrofurano

TFA acido trifluoroacetico

T3P 2,4,6-trioxido de 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfina

Procedimientos de HPLC, CL/EM y CG:

Procedimiento 1: instrumento: sistema Waters ACQUITY SQD UPLC; columna: Waters Acquity UPLC HSS T31,8 |i 50 mm x 1 mm; eluyente A: 1 l de agua 0,25 ml de acido formico al 99 %, eluyente B: 1 l de acetonitrilo 0,25 ml de acido formico al 99 %; gradiente: 0,0 min 90 % de A ^ 1,2 min 5 % de A ^ 2,0 min 5 % de A; horno: 50 °C; flujo: 0.40 ml/min; deteccion UV: 208-400 nm.

Procedimiento 2: instrumento: sistema Waters ACQUITY SQD UPLC; columna: Waters Acquity UPLC HSS T31,8 |i 50 mm x 1 mm; eluyente A: 1 l de agua 0,25 ml de acido formico al 99 %, eluyente B: 1 l de acetonitrilo 0,25 ml de acido formico al 99 %; gradiente: 0,0 min 95 % de A ^ 6,0 min 5 % de A ^ 7,5 min 5 % de A; horno: 50 °C; flujo: 0,35 ml/min; deteccion UV: 210-400 nm.

Procedimiento 3: instrumento: Micromass Quattro Premier con Waters UPLC Acquity; columna: Thermo Hypersil GOLD 1,9 |i 50 mm x 1 mm; eluyente A: 1 l de agua 0,5 ml de acido formico al 50 %, eluyente B: 1 l de acetonitrilo 0,5 ml de acido formico al 50 %; gradiente: 0,0 min 97 % de A ^ 0,5 min 97 % de A ^ 3,2 min 5 % de A ^ 4,0 min 5 % de A; horno: 50 °C; flujo: 0,3 ml/min; deteccion UV: 210 nm.

Procedimiento 4: instrumento EM: Waters (Micromass) Quattro Micro; instrumento HPLC: Agilent 1100 Serie; columna: YMC-Triart C183 |i 50 mm x 3 mm; eluyente A: 1 l de agua 0,01 mol de carbonato de amonio, eluyente B: 1 l de acetonitrilo; gradiente: 0,0 min 100 % de A ^ 2,75 min 5 % de A ^ 4,5 min 5 % de A; horno: 40 °C; flujo: 1,25 ml/min; deteccion UV: 210 nm.

Procedimiento 5: instrumento EM: Waters (Micromass) QM; instrumento HPLC: Agilent 1100 Serie; columna: Agient ZORBAX Extend-C183,0 mm x 50 mm 3,5 micrometros; eluyente A: 1 l de agua 0,01 mol de carbonato de amonio, eluyente B: 1 l de acetonitrilo; gradiente: 0,0 min 98 % de A ^ 0,2 min 98 % de A ^ 3,0 min 5 % de A ^ 4,5 min 5 % de A; horno: 40 °C; flujo: 1,75 ml/min; deteccion UV: 210 nm.

Procedimiento 6 : instrumento EM: Waters (Micromass) ZQ; instrumento HPLC: Agilent 1100 Serie; columna: Agient ZORBAX Extend-C183,0 mm x 50 mm 3,5 micrometros; eluyente A: 1 l de agua 0,01 mol de carbonato de amonio, eluyente B: 1 l de acetonitrilo; gradiente: 0,0 min 98 % de A ^ 0,2 min 98 % de A ^ 3,0 min 5 % de A ^ 4,5 min 5 % de A; horno: 40 °C; flujo: 1,75 ml/min; deteccion UV: 210 nm.

Procedimiento 7: instrumento: Thermo DFS, Trace GC Ultra; columna: Restek RTX-35, 15 m x 200 |im x 0,33 |im; flujo constante con helio: 1,20 ml/min; horno: 60 °C; entrada: 220 °C; gradiente: 60 °C, 30 °C/min ^ 300 °C (mantener durante 3,33 min).

Procedimiento 8: instrumento: Agilent MS Quad 6150; HPLC: Agilent 1290; columna: Waters Acquity UPLC HSS T3 1,8 |i 50 mm x 2,1 mm; eluyente A: 1 l de agua 0,25 ml de acido formico al 99 %, eluyente B: 1 l de acetonitrilo 0,25 ml de acido formico al 99 %; gradiente: 0,0 min 90 % de A ^ 0,3 min 90 % de A ^ 1,7 min 5 % de A ^ 3,0 min 5 % de A; horno: 50 °C; flujo: 1,20 ml/min; deteccion UV: 205-305 nm.

Procedimiento 9: instrumento: Thermo Scientific DSQII, Thermo Scientific Trace GC Ultra; columna: Restek RTX-35MS, 15 m x 200 |im x 0,33 |im; flujo constante con helio: 1,20 ml/min; horno: 60 °C; entrada: 220 °C; gradiente: 60 °C, 30 °C/min ^ 300 °C (mantener durante 3,33 min).

Procedimiento 10: instrumento EM Waters SQD; instrumento HPLC: Waters UPLC; columna: Zorbax SB-Aq (Agilent), 50 mm x 2,1 mm, 1,8 |im; eluyente A: agua 0,025 % de acido formico, eluyente B: acetonitrilo 0,025 % de acido formico; gradiente: 0,0 min 98 % de A ^ 0,9 min 25 % de A ^ 1,0 min 5 % de A ^ 1,4 min 5 % de A ^ 1,41 min 98 % de A ^ 1,5 min 98 % de A; horno: 40 °C; flujo: 0,60 ml/min; deteccion UV: DAD; 210 nm.

Procedimiento 11: instrumento EM: Waters (Micromass) Quattro Micro; Instrument Waters UPLC Acquity; columna: Waters BEH C18 1,7 |i 50 mm x 2,1 mm; eluyente A: 1 l de agua 0,01 mol de formiato de amonio, eluyente B: 1 l de acetonitrilo; gradiente: 0,0 min 95 % de A ^ 0 , 1 min 95 % de A ^ 2,0 min 15 % de A ^ 2,5 min 15 % de A ^ 2,51 min 10 % de A ^ 3,0 min 10 % de A; horno: 40 °C; flujo: 0,5 ml/min; deteccion UV: 210 nm.

Procedimiento 12: tipo de aparato EM: Thermo Scientific FT-MS; tipo de aparato UHPLC+: Thermo Scientific UltiMate 3000; columna: Waters HSST3, 2,1 mm x 75 mm, C18 1,8 |im; eluyente A: 1 l de agua 0,01 % de acido formico; eluyente B: 1 l acetonitrilo 0,01 % de acido formico; gradiente: 0,0 min 10 % de B ^ 2,5 min 95 % de B ^ 3,5 min 95 % de B; horno: 50 °C; flujo: 0,90 ml/min; deteccion UV: 210 nm/ trayectoria optima de integracion 210-300 nm.

Procedimiento 13: mediciones de CG/EM: OV-1 columna, 50 m de longitud de columna, 0,25 mm de diametro interno, 0,25 |im de espesor de pelmula; se mantiene la temperatura en primer lugar durante 1 min a 50 °C, entonces se eleva con una velocidad de 10 °C/min hasta 280 °C y allf se mantiene durante 6 min de manera isotermica; gas portador: helio con una velocidad de flujo de 2 ml/min.

Procedimiento 14: mediciones de HPLC/ESI: RP-C18 columna (150 mm x 4,6 mm) con 1 cm de columna previa, tamano de partfcula 5 |im, tamano de poro 300 A; eluyente: mezclas de acetonitrilo y agua con un 1 % de acido formico, la relacion de mezcla se modifica a lo largo de 15 min de manera lineal desde inicialmente un 77 % de agua hasta un 77 % de acetonitrilo y se mantiene entonces durante 5 min de manera isocratica; velocidad de flujo: 1 ml/min.

Microondas: Como reactor de microondas se uso un aparato de “modo unico” del tipo Emrys™ Optimizer.

Cuando los compuestos de acuerdo con la invencion se purifican por HPLC preparativa usando los procedimientos descritos anteriormente en los cuales las fases moviles contienen aditivos, tales como, por ejemplo, acido trifluoroacetico, acido formico o amomaco, los compuestos de acuerdo con la invencion se pueden obtener en forma de sal, por ejemplo, como trifluoroacetato, formiato o sal de amonio, siempre que los compuestos de acuerdo con la invencion contengan una funcionalidad lo suficientemente acida o basica. Este tipo de sal se puede convertir en la correspondiente base libre o acido libre mediante varios procedimientos conocidos por el experto en la tecnica. Si, en los intermedios de smtesis y los ejemplos de realizacion de la invencion descritos mas adelante se da un compuesto en la forma de una sal de la correspondiente base o acido, en general no se conoce la composicion estequiometrica exacta de esta sal como se ha obtenido mediante el respectivo procedimiento de preparacion y/o purificacion. A menos que se especifique en mas detalle, las adiciones a los nombres y formulas estructurales, tales como “clorhidrato”, “trifluoroacetato”, “sal de sodio” o “x HCl”, “x CF3COOH”, “x Na+” no se deben entender de forma estequiometrica en el caso de estas sales, sino que solo tienen caracter descriptivo con respecto a los componentes formadores de sales contenidos en las mismas.

Esto se aplica de igual manera si los intermedios de smtesis y los ejemplos de realizacion o las sales de los mismos se obtuvieron mediante los procedimientos de preparacion y/o purificacion descritos en la forma de solvatos, por ejemplo hidratos, cuya composicion estequiometrica (si es de un tipo definido) no se conoce.

Compuestos de partida

Procedimiento general 1A: acoplamiento de amida con HATU/DIEA

Una solucion del correspondiente acido carboxflico (1,0 eq.) en dimetilformamida (7-15 ml/mmol) se mezclo bajo argon a TA con la amina (1,1-1,2 eq.), con W,W-diisopropiletilamina (2,2 eq.) y una solucion de HATU (1,2 eq.) en por ejemplo dimetilformamida. La mezcla de reaccion se agito a TA. Tras la adicion de agua/acetato de etilo y separacion de fases se lavo la fase organica con agua y con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se seco (sulfato de sodio o sulfato de magnesio), se filtro y se concentro a vacrn. El producto bruto se purifico a continuacion o bien por medio de cromatograffa de fase normal (mezclas de ciclohexano-acetato de etilo o mezclas de diclorometano-metanol) o de RP-HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo o gradiente de agua-metanol). Procedimiento general 2A: acoplamiento de amida con T3P/DIEA

Una solucion de acido carboxflico y de la correspondiente amina (1,1-1,5 eq.) en dimetilformamida (0,15-0,05 mmol) se mezclo bajo argon a 0 °C o TA gota a gota con W,W-diisopropiletilamina (3 eq.) y anhfdrido de acido propilfosfonico (T3P, al 50 % en dimetilformamida o en acetato de etilo, 3 eq.). La mezcla de reaccion se agito a TA y a continuacion se concentro a vacfo. Tras adicion de agua/acetato de etilo y separacion de fases se extrajo la fase acuosa dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de sodio o sulfato de magnesio), se filtraron y se concentraron a vacfo. El producto bruto se purifico a continuacion o bien por medio de cromatograffa ultrarrapida (mezclas de ciclohexano-acetato de etilo o mezclas de diclorometano-metanol) o HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo o gradiente de agua-metanol).

Procedimiento general 3A: acoplamiento de amida con T3P/piridina

Una solucion del correspondiente acido carboxflico (1 eq.) y de la correspondiente amina (1,1-1,5 eq.) en piridina (aprox. 0,1-0,2 M) se calento hasta de 60 a 90 °C y se mezclo gota a gota con T3P (al 50 % en dimetilformamida o acetato de etilo, 1,5-4 eq.). Como alternativa se anadio T3P (al 50 % en dimetilformamida o acetato de etilo, 1,5-4 eq.) gota a gota a TA y entonces se agito a TA o se calento hasta de 50 a 90 °C. Tras de 1 a 20 h se enfrio la mezcla de reaccion hasta TA y se mezclo con agua y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de tampon acuosa (pH=5), con solucion acuosa, saturada de hidrogenocarbonato de sodio y con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron a vado. El producto bruto se purifico eventualmente a continuacion o bien por medio de cromatografia de fase normal (mezclas de ciclohexano-acetato de etilo o mezclas de diclorometano-metanol) o RP-HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo o gradiente de agua-metanol).

Ejemplo 1.1A

2-Fluoro-4-nitrobenzamida

Una solucion de 5,00 g (27,0 mmol) de acido 2-fluoro-4-nitrobenzoico y 2,29 g (29,7 mmol, 1,1 eq.) de acetato de amonio en 50 ml dimetilformamida se mezclo bajo argon a 0 °C con 14,1 ml (81,0 mmol, 3 eq.) de N,N-diisopropiletilamina y 47,3 ml (81,0 mmol, 3 eq.) de una solucion de T3P (al 50 % en dimetilformamida) y a continuacion se agito durante 3,5 h a TAy durante 3 h a 60 °C. Tras adicion adicional de 7,1 ml (40,5 mmol, 1,5 eq.) de N,N-diisopropiletilamina y 23,7 ml (40,5 mmol, 1,5 eq.) de una solucion de T3P (al 50 % en dimetilformamida) se agito la mezcla de reaccion durante la noche a TA y se concentro a vado. El residuo se mezclo con agua y acetato de etilo y se extrajo la fase acuosa dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 1,06 g (21 % d. t.)

LC/MS [Metodo 3]: TR = 1,21 min; MS (ESIpos): m/z = 185 (M+H)+.

Ejemplo 1.1B

4-Amino-2-fluorobenzamida

Una solucion de 1,11 g (5,88 mmol) de 2-fluoro-4-nitrobenzamida en 60 ml de etanol se hidrogeno en presencia de 111 mg de paladio (al 10 % sobre carbon activo) durante 4 h a TA y presion normal. A continuacion se filtro la mezcla de reaccion a traves de Celite y el residuo se lavo con etanol. Los filtrados combinados se concentraron a vado. El residuo se uso sin purificacion adicional. Rendimiento: 860 mg (95 % d. t.)

LC/MS [Metodo 5]: TR = 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 155 (M+H)+.

Ejemplo 1.2A

Imidazo[1,2-a]piridin-6-amina

Una solucion de 600 mg (3,68 mmol) de 6-nitroimidazo[1,2-a]piridina en 30 ml de etanol se hidrogeno en presencia de 60 mg de paladio (al 10 % sobre carbon activo) durante la noche a TAy presion normal. A continuacion se filtro la mezcla de reaccion a traves de Celite y el residuo se lavo con etanol. Los filtrados combinados se concentraron a vado y se secaron. El producto bruto se uso sin purificacion adicional en la siguiente etapa. Rendimiento: 512 mg (cuant.)

LC/MS [Metodo 5]: TR = 0,89 min; MS (ESIpos): m/z = 134 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 7,72-7,62 (m, 2H), 7,33 (d, 1H), 7,30 (d, 1H), 6,80 (dd, 1H), 4,83 (s, 2H).

Ejemplo 1.3A

1-Metilhidrazin-1,2-dicarboxilato de 1-bencil-2-ferc-butilo

Una solucion de 14,2 g (78,8 mmol) de 1-metilhidrazincarboxilato de bencilo en 100 ml de propan-2-ol se mezclo a TA con 20,6 g (94,6 mmol, 1,2 eq.) de dicarbonato de di-ferc-butilo en 42 ml de diclorometano y se agito durante 24 h a TA. La mezcla de reaccion se diluyo con diclorometano y agua. Tras la separation de fases se seco la fase organica (sulfato de sodio), se filtro y se concentro a vado. El producto bruto se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-60, mezclas de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 24,8 g (80 % de pureza, 90 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,00 min; MS (ESIneg): m/z = 279 (M-H)-.

Ejemplo 1.3B

2-Metilhidrazincarboxilato de ferc-butilo

Una solucion de 24,8 g (80 % de pureza, 70,8 mmol) de 1-metilhidrazin-1,2-dicarboxilato de 1-bencil-2-ferc-butilo en 500 ml de etanol se hidrogeno en presencia de 1,24 g de paladio (al 10 % sobre carbon activo) a TA y presion normal. A continuation se filtro la mezcla de reaccion a traves de Celite y el filtrado se concentro a vado y se seco. Rendimiento: 12,3 g (48 % de pureza, 57 % d. t.)

Ejemplo 1.3C

2-(2-Fluoro-4-nitrobenzoil)-2-metilhidrazincarboxilato de ferc-butilo

Una solucion de 9,1 g (49,3 mmol, 1,2 eq.) de acido 2-fluoro-4-nitrobenzoico en 200 ml de dimetilformamida se mezclo bajo argon a T^acon 17,1 g (53,4 mmol, 1,3 eq.) de fluoroborato de (benzotriazol-1-iloxi)bisdimetilaminometilio y 21,4 ml (123,1 mol, 3,0 eq.) de N,N-diisopropiletilamina y se agito durante 20 min a TA. Una solucion de 12,5 g (48 % de pureza, 41 mmol) de 2-metilhidrazincarboxilato de ferc-butilo en 50 ml de dimetilformamida se anadio a esto y la mezcla de reaccion se agito durante 6 h a TA. Se separo dimetilformamida a vado. Tras adicion de agua/acetato de etilo y separacion de fases se lavo la fase organica con acido dtrico acuoso al 10 % y con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se seco (sulfato de sodio), se filtro y se concentro a vado. El producto bruto se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-60, mezclas de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 8,35 g (65 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,91 min; MS (ESIneg): m/z = 312 (M-H)-,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 9,78 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,59 (t, 1H), 3,13 (s, 3H), 1,24 (s, 9H).

Ejemplo 1.3D

2-Fluoro-N-metil-4-nitrobenzohidrazida

Una solucion de 3,6 g (11,5 mmol) de 2-(2-fluoro-4-nitrobenzoil)-2-metilhidrazincarboxilato de terc-butilo en 57 ml de acido clorddrico en dioxano (4 M) se agito durante 3 h a TA. La mezcla de reaccion se concentro a vado, el residuo se suspendio en acetato de etilo y se lavo con solucion acuosa, saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La fase organica se seco (sulfato de sodio), se filtro y se concentro a vado. Rendimiento: 2,0 g (81 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,50 min; MS (ESIpos): m/z = 214 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 8,09 (m, 2H), 7,61 (dd, 1H), 3,2 (s, 3H).

Ejemplo 1.3E

2-Metil-6-nitro-1,2-dihidro-3H-indazol-3-ona

Una solucion de 2,4 g (10,9 mmol) de 2-fluoro-N-metil-4-nitrobenzohidrazida en 25 ml de dimetilformamida se mezclo a TA con 6,6 ml (37,9 mmol, 3,5 eq.) de N,N-diisopropiletilamina y se agito durante la noche a 80 °C. La mezcla de reaccion se concentro a vado y el residuo se suspendio en acetato de etilo. El solido precipitado se filtro y se seco a vado. Rendimiento: 595 mg (28 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,49 min; MS (ESIpos): m/z = 194 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 8,14 (s, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,78 (dd, 1H), 3,48 (s. 3H).

Ejemplo 1.3F

2-Metil-6-nitro-3-oxo-2,3-dihidro-1H-indazol-1-carboxilato de terc-butilo

Una solucion de 595 mg (3,0 mmol) de 2-metil-6-nitro-1,2-dihidro-3H-indazol-3-ona en 25 ml de propan-2-ol se mezclo a TA con una solucion de 0,8 g (3,7 mmol, 1,2 eq.) de dicarbonato de di-terc-butilo en 6 ml de diclorometano y se agito durante 12 h a TA. Para la mejor solubilidad de la mezcla de reaccion se anadieron 6 ml de dimetilformamida. La mezcla de reaccion se mezclo con otros 4 eq. de dicarbonato de di-terc-butilo, se agito durante 24 h a TA y a continuacion se diluyo con diclorometano y agua. Tras la separacion de fases se seco la fase organica (sulfato de sodio), se filtro y se concentro a vado. El producto bruto se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-60, mezclas de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 720 mg (80 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,04 min; MS (ESIpos): m/z = 194 (M+H-Boc)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 8,62 (d, 1H), 8,17 (dd, 1H), 8,05 (d, 1H), 3,58 (s. 3H), 1,63 (s, 9H).

Ejemplo 1.3G

6-Amino-2-metil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-indazol-1-carboxilato de ferc-butilo

Una solution de 715 mg (2,4 mmol) de 2-metil-6-nitro-3-oxo-2,3-dihidro-1H-indazol-1-carboxilato de ferc-butilo en 30 ml de etanol se hidrogeno en presencia de 52 mg de paladio (al 10 % sobre carbon activo) a TA y presion normal. A continuation se filtro la mezcla de reaction a traves de Celite y el filtrado se concentro a vatio y se seco. Rendimiento: 668 mg (cuant.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 264 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 7,36 (d, 1H), 6,94 (d, 1H), 6,53 (dd, 1H), 6,21 (s, 2H), 1,58 (s, 9H).

Ejemplo 2.1A

1-(2-Bromo-4-clorofenil)metanoamina

Una solucion de 5,00 g (23,1 mmol) de 2-bromo-4-clorobenzonitrilo en 200 ml de THF se mezclo con enfriamiento con bano de hielo con 23,1 ml (46,2 mmol) de hidruro de aluminio y litio (2 M en THF) gota a gota y se agito posteriormente durante 2 h a de 0 a 4 °C. A continuacion se anadieron gota a gota cuidadosamente de manera sucesiva 2 ml de agua, 2 ml de solucion acuosa al 20 % de hidroxido de sodio y 6 ml de agua. Se calento hasta temperatura ambiente y se agito posteriormente durante 1 h. El precipitado se separo por filtration a traves de Celite y el filtrado se concentro con presion reducida. Rendimiento: 3,52 g (53 % de pureza, 37 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,42 min; MS (ESIpos): m/z = 222 (M+H)+.

Ejemplo 2.1B

(2-Bromo-4-clorobencil)carbamato de ferc-butilo

A una solucion de 3,52 g (53 % de pureza, 8,46 mmol) de 1-(2-bromo-4-clorofenil)metanoamina en 17 ml de THF se anadieron 1,98 g (9,05 mmol) de dicarbonato de di-ferc-butilo disueltos en 17 ml de tetrahidrofurano y la solucion de reaccion resultante se calento durante la noche con reflujo. Se anadieron otros 3,69 g (16,9 mmol) de dicarbonato de di-ferc-butilo y se calento durante 48 h con reflujo. La reaccion se finalizo mediante adicion de solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, y se extrajo tres veces con metil-ferc-butileter. Las fases organicas, combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 1,63 g (60 % d. t.)

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 7,73 (d, 1H), 7,51-7,45 (m, 2H), 7,28 (d, 1H), 4,13 (d, 2H), 1,40 (s, 9H).

Ejemplo 2.1C

Acido (2-{[(ferc-butoxicarbonil)amino]metil}-5-clorofenil)borico

Se destilaron conjuntamente 1,63 g (5,08 mmol) de (2-bromo-4-clorobencil)carbamato de ferc-butilo tres veces con en cada caso 30 ml de tolueno y a continuacion se secaron a alto vado durante 1 h. A continuacion se mezclo una solucion de este (2-bromo-4-clorobencil)carbamato de ferc-butilo en 50 ml de tetrahidrofurano bajo argon a -78 °C gota a gota con 3,18 ml (5,08 mmol, 1,0 eq.) de una solucion de metil-litio (1,6 M en dietileter), se agito durante 30 min, se mezclo con 2,03 ml (5,08 mmol, 1,0 eq.) de una solucion de n-butil-litio (2,5 M en n-hexano), se agito durante 30 min y finalmente se mezclo con 570 | l (5,08 mmol, 1,0 eq.) de borato de trimetilo. Tras finalizar la adicion se dejo llegar la mezcla de reaccion hasta TA, se agito posteriormente durante 1 h a TA y a continuacion se mezclo con enfriamiento con bano de hielo gota a gota con 50 ml de una solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio. Se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. Rendimiento: 1,27 g (50 % de pureza, 44 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,90 min; MS (ESIneg): m/z = 284 (M-H)-.

Ejemplo 2.2A

1-(2-Bromo-4-clorofenil)ciclopropanoamina

Se evaporaron conjuntamente 4,00 g (18,5 mmol) de 2-bromo-4-clorobenzonitrilo tres veces con 10 ml de tolueno y se seco el residuo durante la noche a alto vado. El residuo se suspendio en 90 ml de dietileter, se mezclo con 5,59 ml (20,3 mmol) de tetra-/so-propilato de titanio y se enfrio hasta -65 °C. A continuacion se anadieron 20,3 ml (40,7 mmol) de solucion de cloruro de etilmagnesio (2 M en dietileter) y se agitaron posteriormente durante 10 min a -65 °C y durante 1 h a temperatura ambiente.

Finalmente se anadieron gota a gota 4,68 ml (36,9 mmol) de complejo de trifluoruro de boro-dietileter y se agito posteriormente la mezcla de reaccion durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se vertio en 250 ml de solucion acuosa al 10 % de hidroxido de sodio y 100 ml de dietileter y se agito posteriormente durante 1 h. Se filtro a traves de Celite, se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo dos veces con 100 ml de dietileter. Las fases organicas, combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. Rendimiento: 2,78 g (64 % de pureza, 39 % d. t.)

LC/MS [Metodo 3]: TR = 1,44 min; MS (ESIpos): m/z = 248 (M+H)+.

Ejemplo 2.2B

[1-(2-Bromo-4-clorofenil)ciclopropil]carbamato de ferc-butilo

A una solucion de 2,78 g (64 % de pureza, 7,22 mmol) de 1-(2-bromo-4-clorofenil)ciclopropanoamina en 72 ml de diclorometano se anadieron a temperatura ambiente 2,64 ml (15,2 mmol) de N,N-diisopropiletilamina y 2,68 g (12,3 mmol) de dicarbonato de di-ferc-butilo y se agito posteriormente durante la noche. La solucion de reaccion se diluyo con 50 ml de agua y se separaron las fases. La fase acuosa se extrajo una vez con 50 ml de diclorometano y las fases organicas, combinadas se lavaron con 50 ml de solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 1,27 g (51 % d. t.)

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 7,70-7,37 (m, 3H), 1,31 (s, 9H), 1,14-0,96 (m, 4H).

Ejemplo 2.2C

Acido (2-{1-[(ferc-butoxicarbonil)amino]ciclopropil}-5-clorofenil)b6rico

Se destilaron conjuntamente 1,27 g (3,66 mmol) de [1-(2-bromo-4-clorofenil)ciclopropil]carbamato de ferc-butilo tres veces con en cada caso 30 ml de tolueno y a continuaci6n se secaron a alto vado durante 1 h. A continuaci6n se mezcl6 una soluci6n de este [1-(2-bromo-4-clorofenil)ciclopropil]carbamato de ferc-butilo en 40 ml de tetrahidrofurano bajo arg6n a -78 °C gota a gota con 2,29 ml (3,66 mmol, 1,0 eq.) de una soluci6n de metil-litio (1,6 M en dietileter), se agit6 durante 30 min, se mezcl6 con 1,47 ml (3,66 mmol, 1,0 eq.) de una soluci6n de n-butil-litio (2,5 M en n-hexano), se agit6 durante 30 min y finalmente se mezcl6 con 411 |al (3,66 mmol, 1,0 eq.) de borato de trimetilo. Tras finalizar la adici6n se dej6 llegar la mezcla de reacci6n hasta TA, se agit6 posteriormente durante 1 h a TA y a continuaci6n se mezcl6 con enfriamiento con bano de hielo gota a gota con 50 ml de una soluci6n acuosa, saturada de cloruro de amonio. Se extrajo tres veces con 50 ml de acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con soluci6n acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separ6 el disolvente con presi6n reducida. Rendimiento: 0,99 g (68 % de pureza, 59 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,98 min; MS (ESIneg): m/z = 310 (M-H)-.

Ejemplo 2.3A

2-Bromo-4-cloro-1-[2-nitroetenil]benceno

Se disolvieron inicialmente 6,83 g (31,1 mmol) de 2-bromo-4-clorobenzaldehido y 5,52 g (71,6 mmol) de acetato de amonio en 78 ml de acido acetico. A continuaci6n se anadieron 4,80 ml (88,7 mmol) de nitrometano y se calent6 la mezcla de reacci6n durante 90 min con reflujo. Se enfri6 hasta temperatura ambiente, se mezcl6 con 80 ml de agua y se extrajo con diclorometano. Las fases organicas, combinadas se lavaron con agua y soluci6n acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se separ6 el disolvente con presi6n reducida. Rendimiento: 6,86 g (82 % d. t.)

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 8,29 (d, 1H), 8,17 (d, 1H), 8,06 (d, 1H), 7,99 (d, 1H), 7,62 (dd, 1H).

Ejemplo 2.3B

2-(2-Bromo-4-clorofenil)etanoamina

A una soluci6n de 38,1 ml (76,2 mmol) de borohidruro de litio (2 M en THF) en 200 ml de THF se anadieron gota a gota rapidamente a temperatura ambiente 19,3 ml (152 mmol) de clorotrimetilsilano y a continuaci6n se agit6 durante 20 min. La mezcla de reacci6n resultante se desgasific6, se anadi6 gota a gota una soluci6n de 5,00 g (19,0 mmol) de 2-bromo-4-cloro-1-[2-nitroetenil]benceno en THF y se calent6 durante 2 h con reflujo. Se enfri6 hasta temperatura ambiente y se finaliz6 la reacci6n mediante adici6n de 50 ml de metanol. El disolvente se separ6 con presi6n reducida, se mezcl6 el residuo con 50 ml de soluci6n acuosa al 20 % de hidr6xido de potasio y se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con soluci6n acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separ6 el disolvente con presi6n reducida. Rendimiento: 4,06 g (72 % de pureza, 65 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,53 min; MS (ESIpos): m/z = 236 (M+H)+.

Ejemplo 2.3C

[2-(2-Bromo-4-clorofenil)etil]carbamato de ferc-butilo

A una solucion de 4,05 g (72 % de pureza, 12,4 mmol) de 2-(2-bromo-4-dorofenil)etanoamina en 100 ml de THF se anadieron con enfriamiento con bano de hielo 2,85 g (13,1 mmol) de dicarbonato de di-ferc-butilo y 152 mg (1,24 mmol) de 4-dimetilaminopiridina. Se calento de manera espontanea hasta temperatura ambiente y se agito posteriormente durante 1 h. A continuacion se separo el disolvente con presion reducida, se suspendio el residuo en agua y se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, gradiente de ciclohexanoacetato de etilo). Rendimiento: 2,53 g (61 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,23 min; MS (ESIpos): m/z = 334 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 7,70 (d, 1H), 7,41 (dd, 1H), 7,30 (d, 1H), 6,95-6,88 (m, 1H), 3,15 (dt, 2H), 2,80 (t, 2H), 1,35 (s, 9H).

Ejemplo 2.3D

{2-[4-Cloro-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]etil}carbamato de ferc-butilo

Se dispusieron 1,04 g (3,11 mmol) de [2-(2-bromo-4-clorofenil)etil]carbamato de ferc-butilo en 15,6 ml de 1,2-dimetoxietano y se desgasifico la solucion resultante. A continuacion se anadieron 868 mg (3,42 mmol) de 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bis-1,3,2-dioxaborolano, 610 mg (6,22 mmol) de acetato de potasio y 254 mg (311 lamol) de 1,1'-bis(difenilfosfina)ferrocendicloropaladio(II) y se agito la mezcla de reaccion durante 8 h a 80 °C. La mezcla de reaccion se enfrio hasta temperatura ambiente, se filtro a traves de Celite, las tortas de filtro se lavaron posteriormente con diclorometano y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 363 mg (82 % de pureza, 25 % d. t.) y 580 mg (78 % de pureza, 38 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,41 min; MS (ESIneg): m/z = 380 (M-H)-.

Ejemplo 2.4A

(2-Bromo-4-clorofenil)metanol

En un matraz calentado se mezclo una solucion de 10,0 g (44,2 mmol) de 2-bromo-4-clorobenzaldeddo en 90 ml de metanol bajo argon y con enfriamiento con bano de hielo en porciones con 836 mg (22,1 mmol) de borohidruro de sodio y se agito durante 1 h con enfriamiento con bano de hielo. Tras adicion de 200 ml de agua se separo el metanol a vado. La fase acuosa se extrajo tres veces con en cada caso 80 ml de acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron y se concentraron a vado. Rendimiento: 7,75 g (79 % d. t.)

GC/MS [Metodo 9]: TR = 4,91 min; MS: m/z = 220 (M)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 7,70 (d, 1H), 7,54 (d, 1H), 7,48 (dd, 1H), 5,51 (t, 1H), 4,48 (d, 2H).

Ejemplo 2.4B

2-Bromo-4-clorobencil-4-metilbencenosulfonato

Una solucion de 7,75 g (35,0 mmol) de (2-bromo-4-clorofenil)metanol en 100 ml de tetrahidrofurano se mezclo bajo argon y con enfriamiento con bano de hielo con 9,82 g (175,0 mmol, 5,0 eq.) de hidroxido de potasio (previamente secado y molido) y a continuation gota a gota con una solucion de 8,17 g (42,0 mmol, 1,2 eq.) de cloruro de acido para-toluenosulfonico en 65 ml de tetrahidrofurano. La mezcla de reaccion se agito durante otros 30 min con enfriamiento con bano de hielo, tras separar el bano de hielo se dejo llegar a continuacion hasta TA y se filtro a traves de Celite. El filtrado se concentro en un rotavapor a vado (con < 35 °C de temperatura de bano de agua). El residuo se evaporo conjuntamente tres veces con hexano (10 ml y dos veces 15 ml), se seco a alto vado y se uso sin purification adicional (almacenamiento en el frigorifico). Rendimiento: 14,20 g (75 % de pureza, 81 % d. t.)

Ejemplo 2.4C

(2-Bromo-4-clorofenil)acetonitrilo

Una solucion de 14,20 g (75 % de pureza, 28,3 mmol) de 2-bromo-4-clorobencil-4-metilbencenosulfonato en 142 ml de acetonitrilo se mezclo bajo argon a TA en porciones con 6,83 g (104,9 mmol, 3,7 eq.) de cianuro de potasio y se agito durante 60 h a TA. La mezcla de reaccion se filtro a traves de Celite y el filtrado se concentro a vado. El residuo se evaporo conjuntamente varias veces con hexano y a continuacion se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (120 g gel de sflice, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 3,10 g (47 % d. t.) GC/MS [Metodo 9]: TR = 5,29 min; MS: m/z = 230 (M)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 7,87 (d, 1H), 7,61-7,53 (m, 2H), 4,09 (s, 2H).

Ejemplo 2.4D

1-(2-Bromo-4-clorobencil)ciclopropanoamina

Se destilaron conjuntamente 3,49 g (15,1 mmol) de (2-bromo-4-clorofenil)acetonitrilo tres veces con tolueno y a continuacion se seco a alto vado durante la noche. Este residuo se suspendio en 100 ml de dietileter y la solucion se mezclo bajo argon a TA con 4,4 ml (15,9 mmol, 1,05 eq.) de /so-propilato de titanio(IV) y se agito durante 5 min a TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion gota a gota con 10,1 ml (30,3 mmol, 2,0 eq.) de una solucion de bromuro de etilmagnesio (3 M en dietileter), se agito durante 30 min a TA, se mezclo rapidamente con 3,8 ml (30,3 mmol, 2,0 eq.) de complejo de trifluoruro de boro-dietileter y se agito durante otros 60 min a TA. La mezcla de reaccion se vertio en una mezcla de 250 ml de una solucion acuosa al 10 % de hidroxido de sodio y 100 ml de dietileter y se filtro a traves de Celite. Tras la separation de fases se extrajo la fase acuosa dos veces con en cada caso 50 ml de dietileter. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron, se concentraron a vado y se hicieron reaccionar sin purificacion adicional (almacenamiento en el frigorifico). Rendimiento: 3,88 g (45 % de pureza, 44 % d. t.)

LC/MS [Metodo 3]: TR = 1,56 min; MS (ESIpos): m/z = 260 (M+H)+.

Ejemplo 2.4E

[1-(2-Bromo-4-dorobencN)cidopropil]carbamato de ferc-butilo

Una solucion de 3,88 g (45 % de pureza, 6,7 mmol) de 1-(2-bromo-4-dorobendl)ddopropanoamina en 94 ml de diclorometano se mezclo con 2,5 ml (14,1 mmol, 2,1 eq.) de N,N-diisopropiletilamina y 2,5 g (11,4 mmol, 1,7 eq.) de dicarbonato de di-ferc-butilo y se agito durante la noche a TA. La mezcla de reaccion se extrajo tres veces con en cada caso 100 ml de agua. La fase acuosa se volvio a extraer una vez con 100 ml de diclorometano. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 1,03 g (43 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,32 min; MS (ESIpos): m/z = 360 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 7,70 (s, 1H), 7,45-7,38 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 2,94 (s, 2H), 1,34 (s, 9H), 0,80-0,60 (m, 4H).

Ejemplo 2.4F

Acido [2-({1-[(ferc-butoxicarbonil)amino]ciclopropil}metil)-5-clorofenil]b6rico

Se destilaron conjuntamente 7,21 g (20,0 mmol) de [1-(2-bromo-4-clorobencil)ciclopropil]carbamato de ferc-butilo tres veces con en cada caso 60 ml de tolueno y se secaron a alto vado durante la noche. A continuacion se mezclo una solucion de este [1-(2-bromo-4-clorobencil)ciclopropil]carbamato de ferc-butilo en 200 ml de tetrahidrofurano bajo argon a -78 °C gota a gota con 12,5 ml (20,0 mmol, 1,0 eq.) de una solucion de metil-litio (1,6 M en dietileter), se agito durante 30 min, se mezclo con 8,0 ml (20,0 mmol, 1,0 eq.) de una solucion de n-butil-litio (2,5 M en nhexano), se agito durante 30 min y finalmente se mezclo con 2,2 ml (20 mmol, 1,0 eq.) de borato de trimetilo. Tras finalizar la adicion se dejo llegar la mezcla de reaccion hasta TA, se agito posteriormente durante 1 h a TA y a continuacion se mezclo con enfriamiento con bano de hielo gota a gota con 210 ml de una solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio. Las sales precipitadas se filtraron y se lavaron con acetato de etilo. Los filtrados combinados se extrajeron tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio y se concentraron a vado. El residuo se seco a alto vado y se almaceno bajo argon. Rendimiento: 6,5 g (81 % de pureza, 81 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,91 min; MS (ESIneg): m/z = 324 (M-H)-.

Ejemplo 2.5A

2-Bromo-N-(ferc-butoxicarbonil)-4-clorofenilalaninato de metilo (racemato)

Una solucion de 47,8 ml (318 mmol, 2 eq.) de N,N,N',N'-tetrametiletano-1,2-diamina y 44,5 ml (318 mmol, 2 eq.) de N-isopropilpropano-2-amina (32,0 g, 318 mmol, 2 eq.) en 600 ml de tetrahidrofurano se mezclo bajo argon a -78 °C gota a gota con 127 ml (318 mmol, 2 eq.) de una solucion de n-butil-litio en hexano (2,5 M) y se agito durante 20 min a -78 °C. La mezcla de reaccion se mezclo entonces gota a gota con una solucion de 30 g (159 mmol, 1 eq.) de N-(ferc-butoxicarbonil)glicinato de metilo en 25 ml de tetrahidrofurano, manteniendose la temperatura interna por debajo de -70 °C, y se agito durante otros 60 min a esta temperatura. A continuacion se anadio una solucion de 45 g (158 mmol, 1 eq.) de 2-bromo-1-(bromometil)-4-dorobenceno en 40 ml de tetrahidrofurano gota a gota, manteniendose la temperatura interna por debajo de -69 °C. La mezcla de reaccion se agito durante otras 2 h a por debajo de -78 °C, a continuacion se dejo llegar hasta -20 °C y se extinguio con 600 ml de solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio. Tras adicion de acetato de etilo y separacion de fases se extrajo la fase acuosa con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron dos veces con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron en la mayor parte a vado hasta una presion de 10 kPa. El producto deseado cristalizo del residuo al dejar reposar durante la noche, se mezclo mediante agitacion con 80 ml de etanol, se filtro y se seco a vado. Rendimiento: 38,1 g (61 % d. t.)

GC/MS [Metodo 13]: TR = 23,23 min; MS: m/z = 391 (M)+,

1H-RMN (500 MHz, CDCls): 5 [ppm] = 7,54 (d, 1H), 7,21 (dd, 1H), 7,12 (d, 1H), 5,06 (d, 1H), 4,60 (q, 1H), 3,26 (dd, 1H), 3,24 (s, 3H), 3,05 (dd, 1 H), 1,37 (s, 9H).

Ejemplo 2.5B

[1-(2-Bromo-4-clorofenil)-3-hidroxipropan-2-il]carbamato de terc-butilo (racemato)

Una suspension de 28,3 g (72,1 mmol, 1 eq.) 2-bromo-N-(terc-butoxicarbonil)-4-clorofenilalaninato de metilo (racemato) en 470 ml de tetrahidrofurano se mezclo a 0 °C con 3,6 g (93,7 mmol, 1,3 eq.) de hidruro de aluminio y litio, manteniendose la temperatura interna de la mezcla de reaccion por debajo de 10 °C. Tras finalizar la adicion se dejo llegar la mezcla de reaccion hasta TA. Tras adicion de 300 ml de tetrahidrofurano para la mejor capacidad de agitacion se agito la mezcla de reaccion durante 2,5 h a TA. A continuacion se extinguio la mezcla de reaccion mediante adicion lenta de 280 ml de solucion acuosa, saturada de tartrato de sodio-potasio y se agito durante 20 min a TA. Tras la separacion de fases se extrajo la fase acuosa dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se suspendio en 2-metoxi-2-metilpropano, la mezcla se lavo dos veces con agua y una vez con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio y se concentro a vado. Rendimiento: 19,8 g (75 % d. t.). El residuo se uso sin purificacion adicional en la siguiente etapa.

Ejemplo 2.5C

4-(2-Bromo-4-clorobencil)-1,2,3-oxatiazolidin-3-carboxilato-2-oxido de terc-butilo (mezcla de diastereomeros)

Una solucion de 8,0 g (22,0 mmol, 1 eq.) de [1-(2-bromo-4-clorofenil)-3-hidroxipropan-2-il]carbamato terc-butilo (racemato) en 150 ml de diclorometano se mezclo bajo argon a -60 °C gota a gota con 2,08 ml (28,7 mmol, 1,3 eq.) de cloruro de tionilo. A continuacion se anadieron gota a gota 8,9 ml de piridina (110 mmol, 5 eq.), produciendose tras la adicion de pocas gotas de piridina una reaccion exotermica, aumento la temperatura de la reaccion hasta -40 °C y se enfrio de nuevo la mezcla de reaccion hasta -60 °C. Tras finalizar la adicion se dejo llegar la mezcla de reaccion durante la noche hasta TA y se extinguio con agua. Tras adicion de acetato de etilo y separacion de fases se extrajo la fase acuosa dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con una mezcla (1:1) de solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio y solucion acuosa al 20 % de acido dtrico y dos veces con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado. Rendimiento: 7,8 g (87 % d. t.). El residuo se uso sin purificacion adicional en la siguiente etapa.

HPLC/MS [Metodo 14]: TR = 17,3/17,6 min; MS (ESIpos): m/z = 434 (M+Na)+.

Ejemplo 2.5D

4-(2-Bromo-4-dorobendl)-1,2,3-oxatiazolidin-3-carboxNato-2,2-di6xido de ferc-butilo (racemato)

Una soluci6n de 20 g (48,9 mmol, 1 eq.) de 4-(2-bromo-4-clorobendl)-1,2,3-oxatiazolidin-3-carboxilato-2-6xido de ferc-butilo (mezcla de diastere6meros) en 500 ml de acetonitrilo se mezcl6 a 0 °C con 16,75 g (78,3 mmol, 1,6 eq.) de peryodato de sodio, 114 mg de tricloruro de rutenio y 125 ml de agua. La mezcla de reacci6n se agit6 durante 2,5 h, formandose un precipitado que se filtr6 a continuaci6n. El filtrado se mezcl6 con 150 ml de agua y tras adici6n de 2-metoxi-2-metilpropano y separaci6n de fases se extrajo la fase acuosa tres veces con 2-metoxi-2-metilpropano. Las fases organicas, combinadas se lavaron con soluci6n acuosa, saturada de sulfito de sodio y con soluci6n acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado, obteniendose 7,5 g de material bruto. El s6lido de la filtraci6n se extrajo tres veces con 2-metoxi-2-metilpropano caliente. Las fases organicas, combinadas se lavaron con soluci6n acuosa, saturada de sulfito de sodio y con soluci6n acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado, obteniendose 9,6 g de material bruto. Los productos brutos combinados se mezclaron mediante agitaci6n con 30 ml de acetato de etilo, se filtraron y se secaron a vado. Rendimiento: 9,4 g (45 % d. t.)

HPLC/MS [Metodo 14]: TR = 16,6 min; MS (ESIpos): m/z = 875 (2M+Na)+.

Ejemplo 2.5E

[1-(2-Bromo-4-clorofenil)-3-fluoropropan-2-il]carbamato de ferc-butilo (racemato)

Una suspensi6n de 9,3 g (21,8 mmol, 1 eq.) 4-(2-bromo-4-clorobencil)-1,2,3-oxatiazolidin-3-carboxilato-2,2-di6xido de ferc-butilo (racemato) en 250 ml de tetrahidrofurano se mezcl6 con 1,8 ml (10,9 mmol, 0,5 eq.) de trihidrofluoruro de trietilamina y 6,65 ml (47,9 mmol, 2,2 eq.) de trietilamina. La mezcla de reacci6n se agit6 durante 16 h a 55 °C y tras enfriamiento hasta TA se extingui6 con 380 ml de agua. Tras adici6n de acetato de etilo y separaci6n de fases se extrajo la fase acuosa tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron dos veces con soluci6n acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado. Se obtuvieron 7,8 g de producto bruto. Para la purificaci6n mediante cromatografia en columna se combin6 el producto bruto con material de otras mezclas de reacci6n y los 8,2 g asi obtenidos se purificaron por medio de cromatografia ultrarrapida (250 g gel de sflice, mezclas de diclorometano-metanol de 95/5 ^ 85/15). Rendimiento: 3,3 g. Otra cromatografia ultrarrapida (150 g gel de sflice, mezclas de diclorometano-metanol de 95/5 a 85/15) de la fracci6n de mezcla dio como resultado otra vez 1,3 g de producto deseado.

HPLC/MS [Metodo 14]: TR = 16,0 min; MS (ESIpos): m/z = 388 (M+Na)+,

1H-RMN (500 MHz, CDCls): 5 [ppm] = 7,51-7,49 (m, 1H), 7,46-7,41 (m, 1H), 7,22-7,16 (m, 1H), 4,97-4,51 (m, 3H), 3,33-3,05 (m, 2H), 1,27-1,07 (s a, 9H),

19F-RMN (470 MHz, CDCls): 5 [ppm] = -216,6 ppm.

Ejemplo 3.1A

4-(2-{[(fe/'c-Butoxicarbonil)amino]metil}-5-clorofenil)-1-(1-fe/'c-butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros)

Se secaron 796 mg (5,76 mmol) de carbonato de potasio en un recipiente de reaction y a continuation se anadieron 850 mg (1,86 mmol) de 1-(1-fe/'c-butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato), 1,27 g (2,23 mmol) de acido (2-{[(fe/'c-butoxicarbonil)amino]metil}-5-clorofenil)b6rico (50 % de pureza) y 18 ml de 1,4-dioxano. La mezcla de reaccion se desgasifico, se mezclo con 215 mg (186 ^mol) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) y se agito durante 1,5 h a 110 °C. Se enfrio hasta temperatura ambiente y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 685 mg (65 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,34 min; MS (ESIpos): m/z = 549 (M+H)+.

Ejemplo 3.1B

Acido 2-{4-[2-(aminometil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il}butanoico (mezcla de estereoisomeros)

Se dispusieron 680 mg (1,24 mmol) de 4-(2-{[(fe/'c-butoxicarbonil)amino]metil}-5-clorofenil)-1-(1-ferc-butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros) en 5 ml de diclorometano y se mezclaron con 954 |al (12,4 mmol) de acido trifluoroacetico. Se agito posteriormente hasta completar la reaccion a temperatura ambiente. A continuacion se separo el disolvente con presion reducida y se evaporo conjuntamente el residuo varias veces con diclorometano y tolueno. Rendimiento: 751 mg (89 % de pureza, cuantitativo)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,65 min; MS (ESIpos): m/z = 393 (M+H)+.

Ejemplo 3.1C

Acido 2-(10-cloro-2,5-dioxo-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirido[3,4-cf][2]benzazepin-3-il)butanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solution de 486 mg (1,10 mmol) de acido 2-{4-[2-(aminometil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il}butanoico (mezcla de estereoisomeros) en 11 ml de tetrahidrofurano se anadio bajo argon a tamiz molecular activado 3 A (secado durante la noche a 200 °C en el armario de secado) y se agito durante 2 h a TA. A continuation se mezclo la mezcla de reaction bajo argon a TA con 8,22 ml (22,0 mmol, 20 eq.) de una solucion de etilato de sodio (21 % en etanol, secado previamente durante 2 h a traves de tamiz molecular activado 3 A) y se agito durante 45 min a temperatura ambiente. Tras la dilution con acetato de etilo se mezclo la mezcla de reaccion con solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio y se llevo con solucion acuosa de acido clorhidrico (1 N) hasta pH 3 y de nuevo se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron tres veces con 50 ml de acido clorhidrico acuoso 0,5 M y 50 ml de solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. Rendimiento: 364 mg (95 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 347 (M+H)+.

Ejemplo 3.1D

4-{[2-(10-Cloro-2,5-dioxo-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirido[3,4-cf][2]benzazepin-3-il)butanoil]-amino}benzoato de ferc-butilo (mezcla de estereoisomeros)

Se dispusieron 75,0 mg (216 |mol) de acido 2-(10-cloro-2,5-dioxo-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirido[3,4-d][2]benzazepin-3-il)butanoico (mezcla de estereoisomeros) y 62,7 mg (324 |mol, 1.5 eq.) de 4-aminobenzoato de ferc-butilo en 5 ml de piridina. A continuacion se anadieron gota a gota 505 | l (865 |mol) de anhidrido de acido propilfosfonico (T3P, al 50 % en acetato de etilo, 4 eq.) y la solucion de reaccion se agito durante la noche a 60 °C. La reaccion se enfrio hasta temperatura ambiente y se mezclo con 50 ml de agua. Se extrajo tres veces con 30 ml de acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron tres veces con tampon pH 5 y el disolvente se separo con presion reducida. El residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 44,2 mg (39 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,9 (s, 1H), 8,55 (s a, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,87 (d, 2H), 7,76-7,72 (m, 3H), 7,54 (dd, 1H), 7,43 (d, 1H), 6,65 (s, 1H), 5,67-5,60 (m, 1H), 4,29-3,89 (2x s a, 2H), 2,26-2,15 (m, 1H), 2,11-1,97 (m, 1H), 1,54 (s, 9H), 0,92 (t, 3H).

Ejemplo 4.1A

4-(2-{1-[(ferc-Butoxicarbonil)amino]ciclopropil}-5-clorofenil)-1-(1-ferc-butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros)

Se secaron 860 mg (6,22 mmol) de carbonato de potasio en un recipiente de reaccion y a continuacion se anadieron 918 mg (2,01 mmol) de 1-(1-ferc-butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3 carboxilato de etilo (racemato), 920 mg (2,08 mmol) de acido (2-{1-[(ferc-butoxicarbonil)amino]ciclopropil}-5-clorofenil)borico (68 % de pureza) y 20 ml de 1,4-dioxano. La mezcla de reaction se desgasifico, se mezclo con 232 mg (201 |mol) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) y se agito durante 7 h a 80 °C. Se enfrio hasta temperatura ambiente, se filtro y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 149 mg (12 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,39 min; MS (ESIpos): m/z = 575 (M+H)+.

Ejemplo 4.1B

Acido 2-{4-[2-(1-aminociclopropil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il}butanoico (mezcla de estereoisomeros)

Se dispusieron 165 mg (275 |mol) de 4-(2-{1-[(fe/'c-butoxicarbonil)amino]ciclopropil}-5-clorofenil)-1-(1-fe/'c-butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros) en 3 ml de diclorometano y se mezclaron con 530 | l (6,89 mmol) de acido trifluoroacetico en porciones con enfriamiento con bano de hielo. Se agito posteriormente hasta completar la reaccion a temperatura ambiente. A continuation se separo el disolvente con presion reducida y el residuo se evaporo conjuntamente tres veces con 10 ml de tolueno. El residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 60 mg (94 % de pureza, 49 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,66 min; MS (ESIpos): m/z = 419 (M+H)+.

Ejemplo 4.1C

Acido 2-(10'-cloro-2',5'-dioxo-5',6'-dihidroespiro[cidopropan-1,7'-pirido[3,4-cf][2]benzazepin]-3'(2'H)-il)butanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solution de 60,0 mg (143 |mol) de acido 2-{4-[2-(1-aminociclopropil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il}butanoico (mezcla de estereoisomeros) en 3 ml de tetrahidrofurano se anadio bajo argon a tamiz molecular activado 3 A (secado durante la noche a 200 °C en un armario de secado) y se agito durante 2 h a TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion bajo argon a TA con 670 | l (2,87 mmol, 20 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente durante 2 h a traves del tamiz molecular activado 3 A) y se agito durante 45 min a temperatura ambiente. Tras dilution con acetato de etilo se mezclo la mezcla de reaccion con solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio y se llevo con solucion acuosa de acido clorhidrico (1 N) hasta pH 3 y se extrajo de nuevo con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con 50 ml de solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. Rendimiento: 51,8 mg (97 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,69 min; MS (ESIpos): m/z = 373 (M+H)+.

Ejemplo 4.1D

4-{[2-(10'-Cloro-2',5'-dioxo-5',6'-dihidroespiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-cf][2]benzazepin]-3'(2'H)-il)butanoil]amino}benzoato de ferc-butilo (mezcla de estereoisomeros)

Se dispusieron 52,0 mg (139 |mol) de acido 2-(10'-cloro-2',5'-dioxo-5',6'-dihidroespiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-d][2]benzazepin]-3'(2'H)-il)butanoico (mezcla de estereoisomeros) y 40,4 mg (209 |mol, 1,5 eq.) de 4-aminobenzoato de ferc-butilo en 3 ml de piridina. A continuacion se anadieron gota a gota 163 | l (558 |mol) de anhidrido de acido propilfosfonico (T3P, al 50 % en acetato de etilo, 4 eq.) y se agito la solucion de reaccion durante la noche a 60 °C y durante 2 h a 80 °C. La mezcla de reaccion se purifico directamente por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 46,9 mg (76 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,13 min; MS (ESIpos): m/z = 548 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,9 (2x s, 1H), 8,88/8,85 (2x s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,89-7,85 (m, 2H), 7,76 7,71 (m, 3H), 7,52 (dd, 1H), 7,38 (d, 1H), 6,66/6,64 (2x s, 1H), 5,68-5,61 (m, 1H), 2,28-1,99 (m, 2H), 1,54 (s, 9H), 1,52-1,45 (m, 1H), 1,21-1,12 (m, 1H), 0,98-0,81 (m, 4H), 0,63-0,54 (m, 1H).

Ejemplo 5.1A

4-Cloro-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo

Se dispusieron 9,82 g (44,6 mmol) de 4,6-dicloropiridin-3-carboxilato de etilo en 98 ml de acido acetico y se mezclaron con 4,03 g (49,1 mmol) de acetato de sodio. La mezcla de reaccion se calento durante la noche con reflujo y se vertio a continuacion en 100 ml de aguan. El precipitado se separo por filtracion con succion, se lavo con agua y se seco a alto vado. Rendimiento: 6,35 g (91 % de pureza, 64 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,61 min; MS (ESIpos): m/z = 202 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,4 (s a, 1H), 8,11 (s, 1H), 6,55 (s, 1H), 4,22 (q, 2H), 1,28 (t, 3H).

Ejemplo 5.1B

1-(2-ferc-Butoxi-2-oxoetil)-4-cloro-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo

Se agitaron 2,00 g (9,92 mmol) de 4-cloro-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo, 2,32 g (11,9 mmol) de bromoacetato de terc-butilo y 2,06 g (14,9 mmol) de carbonato de potasio en 35 ml de dimetilformamida durante 45 min a 100 °C. A continuacion se separo el disolvente con presion reducida, se suspendio el residuo en agua y se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se seco con sulfato de magnesio, se filtro y se separo el disolvente con presion reducida. Rendimiento: 3,07 g (94 % de pureza, 92 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,96 min; MS (ESIpos): m/z = 316 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 8,62 (s, 1H), 6,60 (s, 1H), 4,71 (s, 2H), 4,26 (q, 2H), 1,42 (s, 9H), 1,30 (t, 3H).

Ejemplo 5.1C

Acido [1-(2-ferc-butoxi-2-oxoetil)-5-(etoxicarbonil)-2-oxo-1,2-dihidropiridin-4-il]borico

Se dispusieron 3,07 g (9,72 mmol) de 1-(2-fe/c-butoxi-2-oxoetil)-4-cloro-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo en 35 ml de 1,4-dioxano y se desgasifico la solution. A continuation se anadieron 1,91 g (19,4 mmol) de acetato de potasio, 0,71 g (0,97 mmol) de cloruro de 1,1'-bis(difenilfosfina)ferrocen-paladio(II), 2,72 g (10,7 mmol) de 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bis-1,3,2-dioxaborolano y se agito la mezcla de reaction durante 2,5 h a 130 °C. Se enfrio hasta temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo, se filtro a traves de gel de sflice y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo, entonces mezcla de diclorometano-metanol). Rendimiento: 431 mg (69 % de pureza, 9 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 326 (M+H)+.

Ejemplo 5.1D

4-(2-{2-[(ferc-Butoxicarbonil)amino]etil}-5-clorofenil)-1-(2-ferc-butoxi-2-oxoetil)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo

Se dispusieron 386 mg (1,15 mmol) de [2-(2-bromo-4-clorofenil)etil]carbamato de ferc-butilo en 11 ml de THF y se desgasifico la solucion resultante. A continuacion se anadieron 1,00 g (75 % de pureza, 2,31 mmol) de acido [1-(2-ferc-butoxi-2-oxoetil)-5-(etoxicarbonil)-2-oxo-1,2-dihidropiridin-4-il]bor6nico, 67 mg (58 |amol) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) y 350 mg (2,31 mmol) de fluoruro de cesio y la mezcla de reaccion se agito durante la noche a 110 °C. El disolvente se separo con presion reducida, se suspendio el residuo en acetonitrilo, se filtro mediante un filtro fino y se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 ^m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 303 mg (49 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,27 min; MS (ESIpos): m/z = 535 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 8,61 (s, 1H), 7,37 (dd, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,12 (d, 1H), 6,75-6,69 (m, 1H), 6,28 (s, 1H), 4,77 (s, 2H), 4,00-3,92 (m, 2H), 3,04-2,95 (m, 2H), 2,57-2,38 (m, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,32 (s, 9H), 0,93 (t, 3H).

Ejemplo 5.1E

Acido {4-[2-(2-aminoetil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-}acetico

Se dispusieron 307 mg (574 |amol) de 4-(2-{2-[(ferc-butoxicarbonil)amino]etil}-5-clorofenil)-1-(2-ferc-butoxi-2-oxoetil)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo en 5 ml de diclorometano y se mezclaron con 633 |al (8,61 mmol) de acido trifluoroacetico. Se agito posteriormente durante 3 h. El disolvente se separo con presion reducida y el residuo se destilo conjuntamente tres veces con 2 ml de diclorometano y finalmente se liofilizo. El liofilizado se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |am, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 74 mg (30 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,63 min; MS (ESIpos): m/z = 379 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 8,42 (s, 1H), 7,41 (dd, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,14 (d, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,42 4,30 (m, 2H), 3,96 (q, 2H), 2,93-2,82 (m, 2H), 2,76-2,59 (m, 2H), 0,97 (t, 3H).

Ejemplo 5.1F

Acido (11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)acetico

Se dispusieron 74,0 mg (195 |amol) de acido {4-[2-(2-aminoetil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il}acetico en 3,9 ml de THF y se mezclaron con 15,6 mg (391 ^mol) de hidruro de sodio (60 % en aceite mineral). Se agito posteriormente durante 30 min a temperatura ambiente y a continuation se anadieron 7,8 mg (0,20 mmol) de hidruro de sodio (60 % en aceite mineral). Se agito durante 4 h y la reaction se finalizo mediante adicion de agua. Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo tres veces con 10 ml de acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 ^m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 4,6 mg (95 % de pureza, 7 % d. t.) y 6,4 mg (85 % de pureza, 8 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,56 min; MS (ESIpos): m/z = 333 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 7,86 (s, 1H), 7,72 (t, 1H), 7,45 (dd, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,23 (d, 1H), 6,28 (s, 1H), 4,64 (s, 2H), 3,47-3,21 (m, 2H), 2,98-2,89 (m, 2H).

Como alternativa puede prepararse el compuesto del trtulo tambien en analogia al procedimiento descrito en el ejemplo 9.1G. La reaccion de 36 mg (61 |amol) de acido {4-[2-(2-aminoetil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il}acetico (64 % de pureza) dio como resultado 15,4 mg (44 % de pureza, 33 % d. t.) del compuesto del trtulo. LC/MS [Metodo 3]: TR = 1,49 min; MS (ESIpos): m/z = 333 (M+H)+.

Ejemplo 5.1G

4-{[(11 -Cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H-il)acetil]amino}-benzoato de ferc-butilo

Se disolvieron 15 mg (45 |amol) de acido (11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)acetico en 0,5 ml de dimetilformamida y se mezclaron con 8,7 mg (45 |amol) de 4-aminobenzoato ferc-butilo y 0,64 mg (4,5 |amol) de oxima. A continuacion se anadieron gota a gota 7,0 |al (45 |amol) de di-/so-propilcarbodiimida y se agito la solution de reaccion durante el fin de semana a 40 °C. El disolvente se separo con presion reducida y el residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 ^m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 5,7 mg (21 % de pureza, 5 % d. t.)

LC/MS [Metodo 2]: TR = 2,94 min; MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)+.

Ejemplo 6.1A

2-Aminobutanoato de ferc-butilo (racemato)

Se dispusieron 10,0 g (44.8 mmol) de 2-bromobutanoato de ferc-butilo (racemato) en 30 ml de THF y se mezclaron a temperatura ambiente con 800 ml de solucion acuosa de hidroxido de amonio (al 25 %). Se agito posteriormente durante 96 h y a continuation se separaron todas las partes constituyentes volatiles con 10 kPa y temperatura de bano de 35 a 38 °C en un rotavapor. La fase acuosa se extrajo tres veces con 200 ml de diclorometano. Las fases organicas, combinadas se secaron, se filtraron y el disolvente se separo con presion reducida a 35 °C de temperatura de bano. Rendimiento: 5,40 g (74 % d. t.)

1H-RMN (400 MHz, CDCls): 5 [ppm] = 3,28-3,24 (m, 1H), 1,76-1,66 (m, 1H), 1,64-1,53 (m, 1H), 1,45 (s, 9H), 0,94 (t, 3H).

Ejemplo 6.1B

1-(1-ferc-Butoxi-1-oxobutan-2-il)-4-hidroxi-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato)

Se agitaron 2,66 ml (14,7 mmol) de 3-oxopentandicarboxilato de dietilo y 3,35 ml (20,5 mmol, 1,4 eq.) de acetato de dietoximetilo durante 2,5 h a 100 °C, tras enfriamiento hasta TA se evaporaron conjuntamente tres veces con tolueno y se secaron a alto vatio. El residuo se suspendio en 29,4 ml de etanol, se mezclo con enfriamiento con hielo con una solucion de 2,50 g (15,4 mmol, 1,05 eq.) de 2-aminobutanoato de ferc-butilo (racemato) en etanol y se agito durante 2 h a TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaction con 5,47 ml (14,7 mmol, 1,0 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol) y se agito durante 1 h a TA. La reaccion se finalizo mediante adicion de 100 ml de solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio y 50 ml de acetato de etilo. Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo tres veces con 50 ml de acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 2,86 g (60 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,00 min; MS (ESIpos): m/z = 326 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,9 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 5,70 (s, 1H), 4,99 (dd, 1H), 4,29 (q, 2H), 2,12 1,92 (m, 2H), 1,37 (s, 9H), 1,30 (t, 3H), 0,79 (t, 3H).

Ejemplo 6.1C

1-(1-ferc-Butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato)

Una solucion de 2,86 g (8,79 mmol) de 1-(1-ferc-butoxi-1-oxobutan-2-il)-4-hidroxi-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato) en 20 ml de diclorometano se mezclo bajo argon a -78 °C con 2,45 ml (17,6 mmol, 2,0 eq.) de trietilamina y a continuacion se mezclo en porciones con 5,99 g (14,1 mmol, 1,6 eq.) de N-(4-ferc-butilfenil) 1,1,1-trifluoro-N-[(trifluorometil)sulfonil]-metanosulfonamida. La mezcla de reaction se dejo llegar hasta TA, se agito durante la noche a TA y a continuation se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 2,76 g (69 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,23 min; MS (ESIneg): m/z = 456 (M-H)-,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 8,66 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 5,10 (dd, 1H), 4,31 (q, 2H), 2,19-1,99 (m, 2H), 1,37 (s, 9H), 1,31 (t, 3H), 0,83 (t, 3H).

Ejemplo 6.1D

4-(2-{2-[(ferc-Butoxicarbonil)amino]etil}-5-clorofenil)-1-(1-ferc-butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros)

Se secaron 429 mg (3,10 mmol) de carbonato de potasio en un recipiente de reaccion y a continuacion se anadieron 473 mg (1,03 mmol) de 1-(1-ferc-butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato), 671 mg (1,76 mmol) de {2-[4-cloro-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]etil}carbamato de ferc-butilo y 10 ml de 1,4-dioxano. La mezcla de reaccion se desgasifico, se mezclo con 119 mg (103 |amol) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) y se agito durante la noche a 110 °C. Se enfrio hasta temperatura ambiente, se filtro a traves de Celite y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 330 mg (96 % de pureza, 54 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,33 min; MS (ESIpos): m/z = 563 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 8,45/8,44 (2x s, 1H), 7,39-7,35 (m, 1H), 7,27/7,24 (2x d, 1H), 7,17/7,14 (2x d, 1H), 6,75-6,66 (m, 1H), 6,28/6,27 (2x s, 1H), 5,16-5,07 (m, 1H), 3,99-3,91 (m, 2H), 3,03-2,95 (m, 2H), 2,57-2,40 (m, 2H), 2,21-2,01 (m, 2H), 1,41/1,40 (2x s, 9H), 1,31 (s, 9H), 0,93-0,85 (m, 6H).

Ejemplo 6.1E

Acido 2-{4-[2-(2-aminoetil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il}butanoico (mezcla de estereoisomeros)

Se dispusieron 330 mg (586 |amol) de 4-(2-{2-[(ferc-butoxicarbonil)amino]etil}-5-clorofenil)-1-(1-ferc-butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros) en 5,5 ml de diclorometano y se mezclaron con 1,36 ml (17,6 mmol) de acido trifluoroacetico. Se agito posteriormente durante 6 h a temperatura ambiente. A continuacion se separo el disolvente con presion reducida y el residuo se evaporo conjuntamente dos veces con 20 ml de tolueno. Rendimiento: 328 mg (95 % de pureza, cuantitativo)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 407 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 13,2 (s a, 1H), 8,51/8,49 (2x s, 1H), 7,69 (s a, 2H), 7,44 (dd, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,23-7,21 (m, 1H), 6,31 (s, 1H), 5,23-5,17 (m, 1H), 4,00-3,94 (m, 2H), 3,00-2,85 (m, 2H), 2,77-2,58 (m, 2H), 2,25-2,03 (m, 2H), 0,94 (t, 3H), 0,88 (2x t, 3H).

Ejemplo 6.1F

Acido 2-(11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)butanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solution de 238 mg (585 |mol) de acido 2-{4-[2-(2-aminoetil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-l(2H)-il}butanoico (mezcla de estereoisomeros) en 6 ml de tetrahidrofurano se anadio bajo argon a tamiz molecular activado 3 A (secado durante la noche a 200 °C en un armario de secado) y se agito durante 2 h a TA. A continuation se mezclo la mezcla de reaction bajo argon a TA con 437 | l (1,17 mmol, 2 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente durante 2 h a traves del tamiz molecular activado 3 A) y se agito durante 40 min a temperatura ambiente. Tras dilution con acetato de etilo se mezclo la mezcla de reaccion con solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio. Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo. La fase acuosa se llevo a continuacion con solucion acuosa de acido clorhidrico (1 N) hasta pH 3 y se extrajo de nuevo con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. Rendimiento: 184 mg (87 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,68 min; MS (ESIpos): m/z = 361 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 13,1 (s a, 1H), 7,80/7,79 (2x s, 1H), 7,78-7,73 (m, 1H), 7,45 (dd, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,28-7,26 (m, 1H), 6,30 (2x s, 1H), 5,13/5,03 (2x dd, 1H), 3,45-3,23 (m, 2H), 2,98-2,89 (m, 2H), 2,18-2,05 (m, 2H), 0,84/0,83 (2x t, 3H).

Ejemplo 6.1G

4-{[2-(11-Cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)butanoil]-amino}benzoato de ferc-butilo (mezcla de estereoisomeros)

Se disolvieron 184 mg (510 |mol) de acido 2-(11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)butanoico (mezcla de estereoisomeros) en 5 ml de dimetilformamida y se mezclaron con 98,6 mg (510 |mol) de 4-aminobenzoato de ferc-butilo y 72,5 mg (510 |mol) de oxima. A continuacion se anadieron gota a gota 79,5 | l (510 imol) de di-/so-propilcarbodiimida y se agito la solucion de reaccion durante la noche a 40 °C. El disolvente se separo con presion reducida y el residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 im , 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 156 mg (97 % de pureza, 55 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,07 min; MS (ESIpos): m/z = 536 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,8 (s, 1H), 7,90-7,71 (m, 6H), 7,48-7,43 (m, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,29-7,26 (m, 1H), 6,34/6,33 (2x s, 1H), 5,63-5,55 (m, 1H), 3,48-3,23 (m, 2H), 2,99-2,90 (m, 2H), 2,24-2,03 (m, 2H), 1,54 (s, 9H), 0,91/0,90 (2x t, 3H).

Ejemplo 7.1A

2-(1,3-Dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)-4-metilpentanoato de ferc-butilo (racemato)

Se disolvieron 10,0 g (38,3 mmol) de acido 2-(1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)-4-metilpentanoico (racemato) en una mezcla de 6 ml de THF y 6 ml de ferc-butanol. A continuation se anadieron 8,77 g (40,2 mmol) de dicarbonato de di-ferc-butilo en porciones y 1,40 g (11,5 mmol) de 4-dimetilaminopiridina. Se agito posteriormente durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reaction se diluyo con 150 ml de acetato de etilo, se lavo con 100 ml de solution acuosa, saturada de cloruro de amonio, 100 ml de agua y 100 ml de solution acuosa, saturada de cloruro de sodio. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio, se filtro y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexanoacetato de etilo). Rendimiento: 11,4 g (96 % de pureza, 90 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,27 min; MS (ESIpos): m/z = 318 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 7,96-7,87 (m, 4H), 4,77 (dd, 1H), 2,18-2,08 (m, 1H), 1,87-1,78 (m, 1H), 1,50-1,39 (m, 1H), 1,34 (s, 9H), 0,89-0,85 (m, 6H).

Ejemplo 7.1B

Leucinato de ferc-butilo (racemato)

A una solucion de 11,3 g (35,6 mmol) de 2-(1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)-4-metilpentanoato de ferc-butilo (racemato) en ferc-butanol se anadieron 4,33 ml (71,2 mmol) de hidrato de hidrazina (al 80 % en agua) y se calento durante 1 min hasta ebullition. A continuacion se agito con agua y carbonato de sodio hasta que se disolviera el precipitado formado. Se extrajo tres veces con dietileter y a continuacion se acidifico con acido clorhidrico (5 M en ciclopentilmetileter) hasta pH 5. Se extrajo otra vez con dietileter. Las fases de dietileter combinadas no conteman producto y se descartaron. La fase acuosa se diluyo con acetato de etilo y agua. Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida (10 kPa, 35 °C de temperatura de bano de agua). Rendimiento: 5,65 g (39 % de pureza, 33 % d. t.)

GC/MS [Metodo 9]: TR = 2,81 min; MS: m/z = 187 (M)+.

Ejemplo 7.1C

1-(1-ferc-Butoxi-4-metil-1-oxopentan-2-il)-4-hidroxi-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato)

Se agitaron 462 | l (2,54 mmol) de 3-oxopentandicarboxilato de dietilo y 581 | l (3,56 mmol, 1,4 eq.) de acetato de dietoximetilo durante 2,5 h a 100 °C. Tras enfriamiento hasta temperatura ambiente se evaporo conjuntamente tres veces con tolueno y se seco a alto vatio. El residuo se suspendio en 2,5 ml de etanol, se mezclo con enfriamiento con hielo con una solucion de 500 mg (2,67 mmol, 1,05 eq.) de leucinato de ferc-butilo (racemato) en etanol y se agito durante la noche a temperatura ambiente. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion con 949 | l (2,54 mmol, 1,0 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol) y se agito durante la noche a temperatura ambiente. La reaccion se finalizo mediante adicion de solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo. Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo) y HPLC preparativa (mezcla de /so-hexano-/so-propanol). Rendimiento: 154 mg (90 % de pureza, 15 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,17 min; MS (ESIpos): m/z = 354 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,9 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 5,71 (s, 1H), 5,22 (dd, 1H), 4,29 (q, 2H), 2,02 1,93 (m, 1H), 1,88-1,79 (m, 1H), 1,38 (s, 9H), 1,38-1,27 (m, 1H), 1,30 (t, 3H), 0,88-0,83 (m, 6H).

Ejemplo7.1D

1-(1-ferc-Butoxi-4-metil-1-oxopentan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato)

Una solucion de 140 mg (396 |amol) de 1-(1-ferc-butoxi-4-metil-1-oxopentan-2-il)-4-hidroxi-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato) en 1 ml de diclorometano se mezclo bajo argon a -78 °C con 110 |al (792 |amol, 2,0 eq.) de trietilamina y a continuation en porciones con 262 mg (634 |amol, 1,6 eq.) de N-(4-ferc-butilfenil)-1,1,1-trifluoro-N-[(trifluorometil)sulfonil]-metanosulfonamida. La mezcla de reaccion se dejo llegar hasta temperatura ambiente, se agito durante la noche a temperatura ambiente y a continuacion se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexanoacetato de etilo). Rendimiento: 169 mg (94 % de pureza, 82 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,33 min; MS (ESIpos): m/z = 486 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 8,67 (s, 1H), 6,70 (s, 1H), 5,29 (dd, 1H), 4,32 (q, 2H), 2,08-2,00 (m, 1H), 1,96-1,88 (m, 1H), 1,37 (s, 9H), 1,43-1,33 (m, 1H), 1,31 (t, 3H), 0,89 (d, 3H), 0,87 (d, 3H).

Ejemplo 7.1E

4-(2-{2-[(ferc-Butoxicarbonil)amino]etil}-5-clorofenil)-1-(1-ferc-butoxi-4-metil-1-oxopentan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros)

Se secaron 115 mg (834 |amol) de carbonato de potasio en un recipiente de reaccion y a continuacion se anadieron 135 mg (278 |amol) de 1-(1-ferc-butoxi-4-metil-1-oxopentan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)-sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato), 122 mg (320 |amol) de {2-[4-cloro-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]etil}carbamato ferc-butilo y 2,6 ml de 1,4-dioxano. La mezcla de reaccion se desgasifico, se mezclo con 32 mg (28 |amol) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) y se agito durante 6 h a 110 °C, durante la noche a temperatura ambiente y durante otras 2 h a 110 °C. Se enfrio hasta temperatura ambiente, se filtro a traves de Celite y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 106 mg (93 % de pureza, 60 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,46 min; MS (ESIpos): m/z = 591 (M+H)+.

Ejemplo 7.1F

Acido 2-{4-[2-(2-aminoetil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il}-4-metilpentanoico (mezcla de estereoisomeros)

Se dispusieron 85,0 mg (144 |mol) de 4-(2-{2-[(fe/'c-butoxicarbonil)amino]etil}-5-clorofenil)-1-(1-fe/'c-butoxi-4-metil-1-oxopentan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros) en 1,5 ml de diclorometano y se mezclaron con 415 | l (5,39 mmol) de acido trifluoroacetico. Se agito posteriormente durante 4 h a temperatura ambiente. A continuacion se separo el disolvente con presion reducida y el residuo se evaporo conjuntamente dos veces con 20 ml de tolueno. Rendimiento: 328 mg (95 % de pureza, cuantitativo)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 435 (M+H)+.

Ejemplo 7.1G

Acido 2-(11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)-4-metilpentanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solucion de 66,0 mg (152 |mol) de acido 2-{4-[2-(2-aminoetil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il}-4-metilpentanoico (mezcla de estereoisomeros) en 1,5 ml tetrahidrofurano se anadio bajo argon a tamiz molecular activado 3 A (secado durante la noche a 200 °C en un armario de secado) y se agito durante 2 h a TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion bajo argon a TA con 113 | l (304 |mol, 2 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente durante 2 h a traves del tamiz molecular activado 3 A) y se agito durante 40 min a temperatura ambiente. Se anadieron otra vez 55,0 | l (152 |mol) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente durante 2 h a traves del tamiz molecular activado 3 A) y se agitaron durante la noche a temperatura ambiente. Tras dilucion con acetato de etilo se mezclo la mezcla de reaccion con solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio. Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo. La fase acuosa se llevo a continuacion con solucion acuosa de acido clorhidrico (1 N) hasta pH 3 y se extrajo de nuevo con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. Rendimiento: 31,3 mg (96 % de pureza, 51 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,78/0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 389 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 13,2 (s a, 1H), 7,82 (2x s, 1H), 7,80-7,74 (m, 1H), 7,45 (dd, 1H), 7,33-7,26 (m, 2H), 6,30 (s, 1H), 5,39-5,27 (m, 1H), 3,42-3,23 (m, 2H), 3,00-2,87 (m, 2H), 2,19-2,09 (m, 1H), 1,94-1,86 (m, 1H), 1,44-1,33 (m, 1H), 0,92-0,87 (m, 6H).

Ejemplo 7.1H

4-{[2-(11-Cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)-4-metilpentanoil]amino}benzoato de ferc-butilo (mezcla de estereoisomeros)

Se disolvieron 15 mg (39 |mol) de acido 2-(11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)-4-metilpentanoico (mezcla de estereoisomeros) en 400 | l de dimetilformamida y se mezclaron con 7,5 mg (39 ^mol) de 4-aminobenzoato de ferc-butilo y 5,5 mg (39 |mol) de oxima. Se anadieron gota a gota 6,0 | l (39 |mol) de di-/sopropilcarbodiimida y se agito la solution de reaction durante la noche a 40 °C. A continuation se anadieron otros 1,5 mg (8,0 |amol) de 4-aminobenzoato de ferc-butilo y 1,2 | l (8,0 |mol) de di-/so-propilcarbodiimida y se agitaron durante otras 3 h a 40 °C. El disolvente se separo con presion reducida y el residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 13,9 mg (64 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,16 min; MS (ESIpos): m/z = 564 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,9 (2x s, 1H), 7,91-7,72 (m, 6H), 7,48-7,43 (m, 1H), 7,33-7,27 (m, 2H), 6,34/6,33 (2x s, 1H), 5,87-5,80 (m, 1H), 3,47-3,23 (m, 2H), 3,02-2,87 (m, 2H), 2,19-2,09 (m, 1H), 1,93-1,83 (m, 1H), 1,54 (s, 9H), 1,49-1,38 (m, 1H), 0,96-0,91 (m, 6H).

Ejemplo 8.1A

4-[2-(11-[(ferc-Butoxicarbonil)amino]ciclopropil}metil)-5-clorofenil]-1-(1-ferc-butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros)

Se secaron 629 mg (4,55 mmol) de carbonato de potasio en un recipiente de reaccion y a continuacion se anadieron 672 mg (1,47 mmol) de 1-(1-ferc-butoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato), 800 mg (1,47 mmol) de acido [2-({1-[(ferc-butoxicarbonil)amino]ciclopropil}metil)-5-clorofenil]borico (60 % de pureza) y 14,7 ml de 1,4-dioxano. La mezcla de reaccion se desgasifico, se mezclo con 170 mg (147 |mol) de tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) y se agito durante la noche a 110 °C. Se enfrio hasta temperatura ambiente, se filtro por un filtro fino y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 249 mg (29 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,35 min; MS (ESIpos): m/z = 589 (M+H)+.

Ejemplo 8.1B

Acido 2-[4-{2-[(1-aminociclopropil)metil]-5-clorofenil}-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]butanoico (mezcla de estereoisomeros)

Se dispusieron 249 mg (423 |mol) de 4-[2-({1-[(fe/'c-butoxicarbonil)amino]ciclopropil}metil)-5-clorofenil]-1-(1-fe/'cbutoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros) en 4 ml de diclorometano y se mezclaron con 651 | l (8,45 mmol) de acido trifluoroacetico. Se agito posteriormente durante 2 h a temperatura ambiente. A continuacion se separo el disolvente con presion reducida y el residuo se evaporo conjuntamente varias veces con tolueno. Rendimiento: 263 mg (94 % de pureza, cuantitativo)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,68 min; MS (ESIpos): m/z = 433 (M+H)+.

Ejemplo 8.1C

Acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)butanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solucion de 263 mg (553 |mol) de acido 2-[4-{2-[(1-aminociclopropil)metil]-5-clorofenil}-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]butanoico (mezcla de estereoisomeros) en 5 ml de tetrahidrofurano se anadio bajo argon a tamiz molecular activado 3A (secado durante la noche a 200 °C en un armario de secado) y se agito durante 2 ha TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion bajo argon a TA con 4,13 ml (11,1 mmol, 20 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente durante 2 h a traves del tamiz molecular activado 3 A) y se agito durante 45 min a temperatura ambiente. Tras dilucion con acetato de etilo se mezclo la mezcla de reaccion con solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio y se llevo con solucion acuosa de acido clorhidrico (1 N) hasta pH 3 y se extrajo de nuevo con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se suspendio otra vez en 50 ml de acetato de etilo y se filtro a traves de Celite. El filtrado se lavo dos veces con 25 ml de acido clorhidrico acuoso (0,5 M) y 20 ml de solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se seco sobre sulfato de magnesio, se filtro y se separo el disolvente con presion reducida. Rendimiento: 124 mg (94 % de pureza, 54% d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,72/0,74 min; MS (ESIpos): m/z = 387 (M+H)+.

Ejemplo 8.1D

4 -{[2 -(11 '-C lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '-il)b u ta n o il]a m in o }b e n z o a to de fe rc -b u tilo (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

Se disolvieron 90,0 mg (219 |mol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)butanoico (mezcla de estereoisomeros) en 2,2 ml de dimetilformamida y se mezclaron con 42,3 mg (219 |mol) de 4-aminobenzoato de ferc-butilo y 21,8 mg (153 |mol) de oxima. A continuacion se anadieron gota a gota 34,1 | l (219 |mol) de di-/so-propilcarbodiimida y se agito la solucion de reaccion durante la noche a 40 °C. El disolvente se separo con presion reducida y el residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 87,2 mg (71 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,08 min; MS (ESIpos): m/z = 562 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 10,8 (2x s, 1H), 8,15/8,09 (2x s, 1H), 7,90-7,68 (m, 5H), 7,45 (dd, 1H), 7,33-7,27 (m, 2H), 6,33/6,32 (2x s, 1H), 5,72/5,62 (2x dd, 1H), 3,28-3,16 (m, 1H), 2,74-2,63 (m, 1H), 2,23-2,05 (m, 2H), 1,54 (s, 9H), 1,04-0,87 (m, 4H), 0,80-0,65 (m, 3H).

Ejemplo 9.1A

W-(Difenilmetilen)-0-metilhomoserinato de ferc-butilo (racemato)

Una solucion de 4,43 g (15,0 mmol) de N-(difenilmetilen)glicinato de ferc-butilo en 150 ml de tetrahidrofurano se mezclo bajo argon a -78 °C gota a gota con 19,5 ml (1,0 M en THF, 19,5 mmol, 1,3 eq.) de bis-(trimetilsilil)-amida de litio, se agito durante 15 min y a continuacion se mezclo gota a gota con 5,85 g (80 % de pureza, 22,5 mmol, 1,5 eq.) de 2-metoxietil-trifluorometanosulfonato. La mezcla de reaccion se agito durante otros 15 min a -78 °C, se dejo llegar hasta TA, se agito posteriormente durante 30 min y a continuacion se extinguio con agua. Tras adicion de acetato de etilo y separacion de fases se extrajo la fase acuosa dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 4,61 g (87 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,17 min; MS (ESIpos): m/z = 354 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 7,56-7,35 (m, 8H), 7,18-7,11 (m, 2H), 3,92 (dd, 1H), 3,38-3,32 (m, 1H), 3,26-3,17 (m, 1H), 3,12 (s, 3H), 2,10-1,91 (m, 2H), 1,37 (s, 9H).

Ejemplo 9.1B

0-Metilhomoserinato de ferc-butilo (racemato)

Una solucion de 4,61 g (13,0 mmol) de N-(difenilmetilen)-0-metilhomoserinato de ferc-butilo (racemato) en 150 ml de tetrahidrofurano se mezclo con 150 ml de una solucion acuosa de acido dtrico (1 M) y se agito durante 2 ha TA. A continuacion se separo tetrahidrofurano a vado. La solucion acuosa resultante se neutralizo cuidadosamente con bicarbonato de sodio solido y se extrajo dos veces con diclorometano. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron en un rotavapor a vado (>15 kPa a < 25 °C de temperatura de bano de agua). El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de diclorometanometanol). Rendimiento: 2,58 g (cuant.)

GC/MS [Metodo 9]: TR = 3,26 min; MS: m/z = 189 (M)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 3,48-3,39 (m, 1H), 3,39-3,33 (m, 1H), 3,25-3,14 (m, 1H), 3,21 (s, 3H), 1,84 1,73 (m, 1H), 1,66 (s a, 1H), 1,60-1,50 (m, 1H), 1,40 (s, 9H).

Ejemplo 9.1C

1-(1-ferc-Butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-4-hidroxi-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato)

Se agitaron 2,35 ml (90 % de pureza, 11,7 mmol) de 3-oxopentandicarboxilato de dietilo y 2,67 ml (16,3 mmol, 1,4 eq.) de acetato de dietoximetilo durante 2,5 h a 100 °C, tras enfriamiento hasta TA se evaporaron conjuntamente tres veces con tolueno y se secaron a alto vado. El residuo se suspendio en 70 ml de etanol, se mezclo con enfriamiento con hielo con una solucion de 2,32 g (12,2 mmol, 1,05 eq.) de 0-metilhomoserinato de ferc-butilo (racemato) en 20 ml de etanol y se agito durante 1 h a TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion con 4,36 ml (11,7 mmol, 1,0 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente a traves de aprox. 15 g de tamiz molecular activado 3 A), se agito durante 1 h a TA y se extinguio con solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio. El precipitado producido se filtro, se lavo con acetato de etilo y se descarto. Tras la separacion de fases de los filtrados combinados se extrajo la fase acuosa tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 2,37 g (56 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,98 min; MS (ESIneg): m/z = 354 (M-H)-,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,85 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 5,69 (s, 1H), 5,11 (dd, 1H), 4,36-4,23 (m, 2H), 3,38-3,32 (m, 1H), 3,15 (s, 3H), 3,14-3,07 (m, 1H), 2,31-2,14 (m, 2H), 1,37 (s, 9H), 1,29 (t, 3H).

Ejemplo 9.1D

1-(1-ferc-Butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato)

Una solucion de 4,49 g (12,4 mmol) de 1-(1-ferc-butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-4-hidroxi-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato) en 50 ml de diclorometano se mezclo bajo argon a -78 °C con 3,45 ml (24,8 mmol, 2,0 eq.) de trietilamina y a continuacion en porciones con 8,19 g (19,8 mmol, 1,6 eq.) de N-(4-ferc-butilfenil)-1,1,1-trifluoro-N-[(trifluorometil)sulfonil]-metanosulfonamida. La mezcla de reaccion se dejo llegar hasta TA, se agito durante 6 h a TA y a continuacion se concentro a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 4,85 g (76 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,23 min; MS (ESIpos): m/z = 488 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 8,65 (s, 1H), 6,66 (s, 1H), 5,27 (t, 1H), 4,38-4,25 (m, 2H), 3,44-3,36 (m, 1H), 3,23-3,14 (m, 1H), 3,11 (s, 3H), 2,35-2,24 (m, 2H), 1,36 (s, 9H), 1,30 (t, 3H).

Ejemplo 9.1E

4-[2-({1-[(fe/'c-Butoxicarbonil)amino]ciclopropil}metil)-5-clorofenil]-1-(1-fe/'c-butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros)

Una mezcla de 4,60 g (9,0 mmol) de 1-(1-ferc-butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato), 4,14 g (10,3 mmol, 1,15 eq.) de acido [2-({1-[(fercbutoxicarbonil)amino]cidopropil}metil)-5-dorofenil]borico y 3,72 g (26,9 mmol, 3,0 eq.) de carbonato de potasio se seco a alto vado, se puso bajo argon, se mezclo con 100 ml de dioxano y se atraveso durante 10 min con argon. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion con 732 mg (0,9 mmol, 0,1 eq.) de aducto de cloruro de [1,1-bis-(difenilfosfino)-ferrocen]-paladio(N)-monodidorometano y se agito durante 1 h a 80 °C de temperatura de bano de aceite. Tras enfriamiento hasta TA se combino la mezcla de reaccion con una mezcla de reaccion de ensayo previa, realizada de manera analoga de 200 mg (0,39 mmol) de 1-(1-ferc-butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)-sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato) y se filtro a traves de Celite. Tras el lavado con dioxano se concentraron a vado los filtrados combinados. El residuo se suspendio en agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 4,84 g (89 % de pureza, 74 % d. t. con respecto a las dos mezclas de reaccion)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,29 min; MS (ESIpos): m/z = 619 (M+H)+.

Ejemplo 9.1F

Acido 2-[4-{2-[(1-aminociclopropil)metil]-5-clorofenil}-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solucion de 4,84 g (89 % de pureza, 7,0 mmol) de 4-[2-({1-[(fe/'c-butoxicarbonil)amino]-ciclopropil}metil)-5-dorofenil]-1-(1-ferc-butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros) en 50 ml de diclorometano se mezclo bajo argon con enfriamiento con bano de hielo gota a gota con 10,7 ml (139 mmol, 20 eq.) de acido trifluoroacetico, se agito durante 5 min, se dejo llegar hasta TA, se agito durante 6,5 h a TA y a continuacion se concentro a vado. El residuo se evaporo conjuntamente dos veces con tolueno y una vez con diclorometano, se seco a alto vado y se hizo reaccionar sin purificacion adicional. Rendimiento: 4,45 g (80 % de pureza, cuant.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,62 min; MS (ESIpos): m/z = 463 (M+H)+.

Ejemplo 9.1G

A c id o 2 -(11 '-c lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -4 -m e to x ib u ta n o ic o (m ezc la de e s te re o is o m e ro s )

Una solucion de 4,37 g (80 % de pureza, 7,6 mmol) de acido 2-[4-{2-[(1-aminociclopropil)metil]-5-clorofenil}-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) en 100 ml de tetrahidrofurano se anadio bajo argon a aprox. 15 g de tamiz molecular activado 3 A (secado durante la noche a 200 °C en un armario de secado) y se agito durante 2 ha TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion bajo argon a TA con 45 ml (151 mmol, 20 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente durante 2 h a traves de aprox. 15 g de tamiz molecular activado 3 A) y se agito durante 75 min a TA. Tras dilucion con acetato de etilo se decanto la mezcla de reaccion del tamiz molecular, se mezclo con solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio y a continuacion se llevo con solucion acuosa de acido clorhidrico (1 N) hasta pH 3. Tras la separacion de fases se extrajo la fase acuosa tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de diclorometano-metanol). Rendimiento: 1,05 g (33 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 417 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 13,17-12,98 (m, 1H), 8,07/8,05 (2x s, 1H), 7,74/7,70 (2x s, 1H), 7,48-7,42 (m, 1H), 7,34-7,25 (m, 2H), 6,28 (s, 1H), 5,32/5,20 (2x t, 1H), 3,42-3,34 (m, 1H), 3,24-3,13 (m, 2H), 3,21/3,19 (2x s, 3H), 2,70 (dd, 1H), 2,41-2,30 (m, 2H), 1,01-0,92 (m, 1H), 0,80-0,72 (m, 1H), 0,72-0,63 (m, 2H).

Ejemplo 9.1H

4-{[2-(11'-Cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]amino}benzoato de ferc-butilo (mezcla de estereoisomeros)

De acuerdo con el procedimiento general 2A se hicieron reaccionar 30 mg (71 ^mol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 18 mg (93 |amol, 1,3 eq.) de 4-aminobenzoato de ferc-butilo. Tras el procesamiento acuoso se purifico el producto bruto por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 21 mg (49 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,11 min; MS (ESIpos): m/z = 592 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 10,83/10,76 (2x s, 1H), 8,14/8,08 (2x s, 1H), 7,90-7,70 (2x m, 5H), 7,48 7,43 (m, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,30-7,26 (m, 1H), 6,31 (s, 1H), 5,87/5,76 (t/dd, 1H), 3,45-3,36 (m, 1H), 3,3-3,15 (m, 2H), 3,23/3,20 (2x s, 3H), 2,75-2,63 (dd, 1H), 2,46-2,28 (m, 2H), 1,53 (s, 9H), 1,04-0,93 (m, 1H), 0,82-0,72 (m, 2H), 0,72 0,63 (m, 1H).

Ejemplo 9.2A

6 -{[2 -(11 '-C lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -4 -m e to x ib u ta n o il]a m in o }-2 -m e til-3 -o x o -2 ,3 -d ih id ro -1 H -in d a z o l-1 -c a rb o x ila to de fe rc -b u tilo (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

De acuerdo con el procedimiento general 1A se hicieron reaccionar 70 mg (168 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,1'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 51 mg (185 |amol, 1.1 eq.) de 6-amino-2-metil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-indazol-1-carboxilato de ferc-butilo. Tras el procesamiento acuoso se purifico el producto bruto por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 81 mg (73 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,95 min; MS (ESIpos): m/z = 662 (M+H)+.

Ejemplo 9.3A

5-{[2-(11'-Cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]amino}piridin-2-carboxilato de metilo (mezcla de estereoisomeros)

De acuerdo con el procedimiento general 3A se hicieron reaccionar 125 mg (300 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 50 mg (330 |amol, 1.1 eq.) de 5-aminopiridin-2-carboxilato de metilo. Se separo piridina a vado. El residuo se mezclo mediante agitacion con agua, el precipitado producido se filtro, se lavo con agua y se seco a alto vado. Rendimiento: 135 mg (89 % de pureza, 73 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 551 (M+H)+.

Ejemplo 9.4A

5-{[2-(11'-Cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]amino}tiofen-2-carboxilato de metilo (mezcla de estereoisomeros)

De acuerdo con el procedimiento general 1A se hicieron reaccionar 83 mg (200 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5-dioxo-2',5',6',8-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 36 mg (220 |amol, 1.1 eq.) de 5-aminotiofen-2-carboxilato de metilo. La mezcla de reaccion se concentro a vado. El residuo se mezclo mediante agitacion con agua, el precipitado producido se filtro, se lavo con agua y se seco a alto vado. El precipitado se purifico adicionalmente por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 66 mg (58 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 556 (M+H)+.

Ejemplo 9.5A

5-{[2-(11-Cloro-2',5-dioxo-2',5',6',8-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3-il)-4-metoxibutanoil]amino}tiofen-3-carboxilato de metilo (mezcla de estereoisomeros)

De acuerdo con el procedimiento general 1A se hicieron reaccionar 83 mg (200 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5-dioxo-2',5',6',8-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 36 mg (220 |amol, 1,1 eq.) de 5-aminotiofen-3-carboxilato de metilo. La mezcla de reaccion se concentro a vado. El residuo se mezclo mediante agitacion con agua, el precipitado producido se filtro, se lavo con agua y se seco a alto vado. Rendimiento: 116 mg (cuant.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 556 (M+H)+.

Ejemplo 9.6A

4-{[2-(11-Cloro-2',5-dioxo-2',5',6',8-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3-il)-4-metoxibutanoil]amino}tiofen-2-carboxilato de metilo (mezcla de estereoisomeros)

De acuerdo con el procedimiento general 1A se hicieron reaccionar 80 mg (192 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5-dioxo-2',5',6',8-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 33 mg (211 |amol, 1.1 eq.) de 4-aminotiofen-2-carboxilato de metilo. La mezcla de reaccion se concentro a vado. El residuo se mezclo mediante agitacion con agua, el precipitado producido se filtro, se lavo con agua y se seco a alto vado. El precipitado se purifico adicionalmente por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 83 mg (78 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,93 min; MS (ESIpos): m/z = 556 (M+H)+.

Ejemplo 10.1A

frans-4-Hidroxiciclohexanocarboxilato de metilo

A una solution de 25,0 g (165 mmol, 95 % de pureza) de acido frans-4-hidroxiciclohexanocarboxflico en 207 ml de metanol se anadieron a TA 11,4 ml de acido sulfurico y la solucion de reaction resultante se calento durante la noche con reflujo. A continuation se neutralizo con solucion acuosa, saturada de hidrogenocarbonato de sodio y se extrajo tres veces con 250 ml de acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. Se obtuvieron 25,5 g (97 % d. t.) del compuesto del tUulo.

GC/MS [Metodo 9]: TR = 3,86 min; MS: m/z = 158 (M)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 4,55 (d, 1H), 3,57 (s, 3H), 3,39-3,30 (m, 1H), 2,25-2,16 (m, 1H), 1,89-1,77 (m, 4H), 1,40-1,27 (m, 2H), 1,21-1,08 (m, 2H).

Ejemplo 10.1B

frans-4-Metoxiciclohexanocarboxilato de metilo

A una solucion de 24,6 g (149 mmol) de frans-4-hidroxiciclohexanocarboxilato de metilo en 1525 ml de diclorometano se anadieron a 0 °C (bano de hielo) 35,2 g (164 mmol) de N,N,N',N'-tetrametilnaftalen-1,8-diamina y se agito durante 30 min a TA. A continuacion se enfrio de nuevo hasta 0 °C (bano de hielo) y se anadieron 30,0 g (203 mmol) de tetrafluoroborato de trimetiloxonio. Se agito posteriormente durante la noche a TA. Debido a la reaccion incompleta se enfrio hasta 0 °C (bano de hielo) y se anadieron 30,0 g (203 mmol) de tetrafluoroborato de trimetiloxonio a la mezcla de reaccion y se agito durante otras 24 h a TA. La reaccion se finalizo mediante adicion de 1845 ml de agua, se diluyo con 1100 ml de diclorometano y se separaron las fases. La fase acuosa se extrajo tres veces con diclorometano y las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gradiente de ciclohexano/acetato de etilo) y se obtuvieron 18,4 g (72 % d. t.) del compuesto del trtulo.

GC/MS [Metodo 9]: TR = 3,54 min; MS: m/z = 172 (M)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 3,58 (s, 3H), 3,22 (s, 3H), 3,12-3,03 (m, 1H), 2,32-2,23 (m, 1H), 2,01-1,84 (m, 4H), 1,41-1,29 (m, 2H), 1,19-1,07 (m, 2H).

Ejemplo 10.1C

(frans-4-Metoxiciclohexil)metanol

A 42,8 ml (103 mmol) de hidruro de aluminio y litio (2,4 M en THF) en 307 ml de ferc-butilmetileter se anadio gota a gota lentamente a tA una solucion de 16,1 g (93,5 mmol) de frans-4-metoxiciclohexanocarboxilato de metilo en 307 ml de ferc-butilmetileter. Tras completar la adicion se calento hasta 40 °C y se agito posteriormente durante 6 h. Se enfrio hasta TA y la reaccion se finalizo mediante adicion de 37,4 ml de agua y 37,4 ml de solucion acuosa al 10 % de hidroxido de potasio. La fase organica se separo por decantation, se seco sobre sulfato de sodio, se filtro y se separo el disolvente con presion reducida. Se obtuvieron 13,0 g (96 % d. t.) del compuesto del trtulo.

GC/MS [Metodo 9]: TR = 3,09 min; MS: m/z = 144 (M)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 4,36 (t, 1H), 3,22 (s, 3H), 3,21-3,17 (m, 2H), 3,06-2,97 (m, 1H), 2,20-1,94 (m, 2H), 1,76-1,69 (m, 2H), 1,33-1,23 (m, 1H), 1,10-0,98 (m, 2H), 0,93-0,81 (m, 2H).

Ejemplo 10.1D

(frans-4-Metoxiciclohexil)metiltrifluorometanosulfonato

Se dispusieron 2,30 g (15,9 mmol) de (frans-4-metoxiciclohexil)metanol en 32 ml de diclorometano y se mezclaron a 0 °C (bano de hielo) sucesivamente con 2,79 ml (23,9 mmol) de 2,6-dimetilpiridina y 4,05 ml (23,9 mmol) de anhidrido de acido trifluorometanosulfonico. Se agito posteriormente durante 1 h a 0 °C. La reaccion se diluyo con 300 ml de dietileter y se lavo cuatro veces con 100 ml de una mezcla de acido clorhidrico acuoso 1 N y solucion acuosa saturada de cloruro de sodio (1:3). La fase organica se lavo finalmente con solucion acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio, se seco sobre sulfato de sodio, se filtro y se separo el disolvente con presion reducida. Se obtuvieron 2,49 g (17 % d. t., 30 % de pureza) del compuesto del fitulo.

GC/MS [Metodo 9]: TR = 3,76 min; MS: m/z = 276 (M)+.

Ejemplo 10.1E

N-(Difenilmetiliden)-3-(frans-4-metoxiciclohexil)alaninato de ferc-butilo (racemato)

Una solucion de 1,42 g (4,81 mmol) de N-(difenilmetilen)glicinato de ferc-butilo en 40 ml de tetrahidrofurano se mezclo bajo argon a -78 °C gota a gota con 11,1 ml (1,0 M en THF, 11,1 mmol, 2,3 eq.) de bis-(trimetilsilil)-amida de litio, se agito durante 15 min y a continuacion se mezclo gota a gota con 2,85 g (70 % de pureza, 7,21 mmol, 1,5 eq.) de (frans-4-metoxiciclohexil)metiltrifluoro-metanosulfonato. La mezcla de reaccion se agito durante otros 15 min a -78 °C, se dejo llegar hasta TA, se agito posteriormente durante la noche y a continuacion se extinguio con 50 ml de agua. Tras adicion de acetato de etilo y separacion de fases se extrajo la fase acuosa dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio y se concentraron a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Se obtuvieron 0,54 g (18 % d. t., 68 % de pureza) del compuesto del fitulo.

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,36 min; MS (ESIpos): m/z = 422 (M+H)+.

Ejemplo 10.1F

3-(frans-4-Metoxiciclohexil)alaninato de ferc-butilo (racemato)

Una solucion de 1,70 g (70 % de pureza, 2,82 mmol) de N-(difenilmetiliden)-3-(frans-4-metoxiciclohexil)alaninato de ferc-butilo (racemato) en tetrahidrofurano se mezclo con 50 ml de una solucion acuosa de acido dtrico (1 M) y se agito durante 90 min a TA. A continuacion se separo tetrahidrofurano a vado. La solucion acuosa resultante se neutralizo cuidadosamente con bicarbonato de sodio solido y se extrajo dos veces con diclorometano. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron en un rotavapor a vado (>15 kPa a < 25 °C de temperatura de bano de agua). El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de diclorometano-metanol). Se obtuvieron 739 mg (cuant.) del compuesto del fitulo.

GC/MS [Metodo 9]: TR = 5,50 min; MS: m/z = 157 (M-CO2fBu)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 3,21 (s, 3H), 3,20-3,13 (m, 1H), 3,08-2,99 (m, 1H), 2,02-1,92 (m, 2H), 1,77 1,68 (m, 2H), 1,62 (s a, 2H), 1,42-1,21 (m, 3H), 1,41 (s, 9H), 1,10-0,78 (m, 4H).

Ejemplo 10.1G

1-[1-ferc-Butoxi-3-(fi'ans-4-metoxiciclohexil)-1-oxopropan-2-il]-4-hidroxi-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato)

Se agitaron 189 | l (1,04 mmol) de 3-oxopentandicarboxilato de dietilo y 239 | l (1,46 mmol, 1,4 eq.) de acetato de dietoximetilo durante 2,5 h a 100 °C, tras el enfriamiento hasta TA se evaporaron conjuntamente tres veces con tolueno y se secaron a alto vado. El residuo se suspendio en 1 ml de etanol, se mezclo con enfriamiento con hielo con una solucion de 282 mg (1,10 mmol, 1,05 eq.) de 3-(frans-4-metoxiciclohexil)alaninato de ferc-butilo (racemato) en 1 ml de etanol y se agito durante 1 h a TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion con 390 | l (1,04 mmol, 1,0 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente a traves de aprox. 15 g de tamiz molecular activado 3 A), se agito durante 1 h a TA y se extinguio con solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio. Tras la separacion de fases se extrajo la fase acuosa tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Se obtuvieron 150 mg (34 % d. t.) del compuesto del fitulo.

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,05 min; MS (ESIpos): m/z = 424 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 10,89 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 5,70 (s, 1H), 5,26-5,18 (m, 1H), 4,32-4,26 (m, 2H), 3,19 (s, 3H), 3,06-2,97 (m, 1H), 2,00-1,75 (m, 5H), 1,65-1,57 (m, 1H), 1,37 (s, 9H), 1,29 (t, 3H), 1,05-0,83 (m, 5H).

Ejemplo 10.1H

1-[1-ferc-Butoxi-3-(fi'ans-4-metoxiciclohexil)-1-oxopropan-2-il]-6-oxo-4-{[(trifiuorometil)-sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato)

Una solucion de 274 mg (647 |mol) de 1-[1-ferc-butoxi-3-(frans-4-metoxiciclohexil)-1-oxopropan-2-il]-4-hidroxi-6-oxo-1.6- dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato) en 5 ml de diclorometano se mezclo bajo argon a -78 °C con 180 | l (1,29 mmol, 2,0 eq.) de trietilamina y a continuacion en porciones con 321 mg (776 |mol, 1,2 eq.) de N-(4-fercbutilfenil)-1,1,1-trifluoro-N-[(trifluorometil)sulfonil]-metanosulfonamida. La mezcla de reaccion se dejo llegar hasta TA, se agito durante la noche a TA y a continuacion se concentro a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Se obtuvieron 298 mg (82 % d. t.) del compuesto del fitulo.

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,27 min; MS (ESIpos): m/z = 556 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 8,65 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 5,30-5,23 (m, 1H), 4,32 (q, 2H), 3,20 (s, 3H), 3.07- 2,97 (m, 1H), 2,01-1,90 (m, 4H), 1,84-1,76 (m, 1H), 1,67-1,59 (m, 1H), 1,37 (s, 9H), 1,30 (t, 3H), 1,12-0,88 (m, 5H).

Ejemplo 10.1I

4-[2-({1-[(fe/'c-Butoxicarbonil)amino]ciclopropil}metil)-5-clorofenil]-1-[1-fe/'c-butoxi-3-(frans-4-metoxiciclohexil)-1-oxopropan-2-il]-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros)

Una mezcla de 292 mg (520 |mol) de 1-[1-fe/'c-butoxi-3-(frans-4-metoxiciclohexil)-1-oxopropan-2-il]-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato), 209 mg (520 |mol) de acido [2-({1-[(fe/'c-butoxicarbonil)amino]ddopropil}metil)-5-dorofenil]borico y 216 mg (1,56 mmol, 3,0 eq.) de carbonato de potasio se seco a alto vado, se puso bajo argon, se mezclo con 8 ml de dioxano y se atraveso durante 10 min con argon. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion con 42 mg (52 |mol, 0,1 eq.) de aducto de cloruro de [1,1-bis-(difenilfosfino)-ferrocen]-paladio(II)-monodiclorometano y se agito durante 1 h a 80 °C de temperatura de bano de aceite. Tras el enfriamiento hasta TA se filtro la mezcla de reaccion a traves de Celite. Tras el lavado con dioxano se concentraron a vado los filtrados combinados. El residuo se suspendio en agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Se obtuvieron 286 mg (79 % d. t.) del compuesto del tUulo.

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,41 min; MS (ESIpos): m/z = 687 (M+H)+.

Ejemplo 10.1J

Acido 2-[4-{2-[(1-aminociclopropil)metil]-5-clorofenil}-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3-(frans-4-metoxiciclohexil)propanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solucion de 286 mg (412 |mol) de 4-[2-({1-[(fe/'c-butoxicarbonil)amino]ciclopropil}metil)-5-clorofenil]-1-[1-fe/'cbutoxi-3-(frans-4-metoxiciclohexil)-1-oxopropan-2-il]-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros) en 4 ml de diclorometano se mezclo bajo argon con 635 | l (8,24 mmol, 20 eq.) de acido trifluoroacetico, se agito durante la noche a TA. La reaccion no estaba completa, se anadieron otros 159 | l (2,06 mmol, 5 eq.) de acido trifluoroacetico y la mezcla de reaccion tras otras 12 h a TA se concentro a vado. El residuo se evaporo conjuntamente varias veces con tolueno, se seco a alto vado y se hizo reaccionar sin purificacion adicional. Se obtuvieron 320 mg (cuant.) del compuesto del titulo.

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 531 (M+H)+.

Ejemplo 10.1K

Acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-(frans-4-metoxiciclohexil)propanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solucion de 219 mg (412 |mol) de acido 2-[4-{2-[(1-aminociclopropil)metil]-5-clorofenil}-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3-(frans-4-metoxiciclohexil)propanoico (mezcla de estereoisomeros) en 5 ml de tetrahidrofurano se anadio bajo argon a tamiz molecular activado 3 A (secado durante la noche a 200 °C en un armario de secado) y se agito durante 2 ha TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion bajo argon a TA con 3,1 ml (8,2 mmol, 20 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente durante 2 h a traves de aprox. 15 g de tamiz molecular activado 3 A) y se agito durante 60 min a TA. Tras dilucion con acetato de etilo se mezclo la mezcla de reaccion con solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio y a continuacion se llevo con solucion acuosa de acido clorhidrico (1 N) hasta pH 3. Tras la separacion de fases se extrajo la fase acuosa tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron dos veces con acido clorhidrico acuoso 0,5 N, 20 ml de solucion acuosa saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron y se concentraron a vado. Se obtuvieron 132 mg (66 % d. t.) del compuesto del trtulo.

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,83/0,84 min; MS (ESIpos): m/z = 485 (M+H)+.

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 13,25/13,05 (2x s, 1H), 8,10/8,09 (2x s, 1H), 7,77 (d, 1H), 7,45 (dd, 1H), 7,33-7,27 (m, 2H), 6,32/6,29 (2x s, 1H), 5,57-5,50/5,26-5,18 (2x m, 1H), 3,23-3,15 (m, 1H), 3,21/3,19 (2x s, 3H), 3,08-2,97 (m, 1H), 2,73-2,65 (m, 1H), 2,28-2,15 (m, 1H), 2,02-1,54 (m, 5H), 1,08-0,61 (m, 9H).

Ejemplo 10.1L

4-{[2-(11'-Cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-(frans-4-metoxiciclohexil)propanoil]amino}benzoato de etilo (mezcla de estereoisomeros)

Una solucion de 50,0 mg (103 |mol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-(frans-4-metoxiciclohexil)-propanoico (mezcla de estereoisomeros), 17,0 mg (103 imol, 1,0 eq.) de 4-aminobenzoato de etilo, 10 mg (72 |mol) de oxima y 16,1 | l (103 |mol) de N,N'-diisopropilcarbodiimida en DMF se agito durante la noche a 40 °C. A continuacion se separo el disolvente con presion reducida y el residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Se obtuvieron 42,8 mg (66 % d. t.) del compuesto del tUulo.

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,09 min; MS (ESIpos): m/z = 632 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,88/10,82 (2x s, 1H), 8,16/8,10 (2x s, 1H), 7,97-7,68 (m, 5H), 7,48-7,42 (m, 1H), 7,33-7,27 (m, 2H), 6,33/6,32 (2x s, 1H), 5,93/5,83 (2x dd, 1H), 4,29 (q, 2H), 3,25-3,15 (m, 1H), 3,22/3,20 (2x s, 3H), 3,09-2,99 (m, 1H), 2,74-2,61 (m, 1H), 2,34-1,70 (m, 6H), 1,31 (t, 3H), 1,16-0,61 (m, 9H).

Ejemplo 11.1A

1-(1-ferc-Butoxi-1-oxo-3-fenilpropan-2-il)-4-hidroxi-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato)

Se agitaron 2,1 ml (11,1 mmol) de 3-oxopentandicarboxilato de dietilo y 2,6 ml (15,5 mmol, 1,4 eq.) de acetato de dietoximetilo durante 2,5 h a 100 °C, tras el enfriamiento hasta TA se evaporaron conjuntamente tres veces con tolueno y se secaron a alto vado. El residuo se suspendio en 80 ml de etanol, se mezclo con enfriamiento con hielo con 3,0 g (11,6 mmol, 1,05 eq.) de clorhidrato de L-fenilalaninato de ferc-butilo (en 20 ml de etanol y 1,93 ml de N,N-diisopropiletilamina) y se agito durante 1 h a TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion en porciones con en total 10,4 ml (27,7 mmol, 2,5 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente a traves de aprox. 15 g de tamiz molecular activado 3 A) y se agito a TA hasta casi completar la reaccion. A continuacion se extinguio la mezcla de reaccion con solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio. El precipitado producido se filtro, se lavo con acetato de etilo y se descarto. Tras la separacion de fases de los filtrados combinados se extrajo la fase acuosa tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 3,2 g (90 % de pureza, 67 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,15 min; MS (ESIneg): m/z = 388 (M+H)+.

Ejemplo 11.1B

1-(1-ferc-Butoxi-1-oxo-3-fenilpropan-2-il)-6-oxo-4-1[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato)

Una solucion de 1,00 g (2,19 mmol) de 1-(1-ferc-butoxi-1-oxo-3-fenilpropan-2-il)-4-hidroxi-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato) en 17 ml de diclorometano se mezclo bajo argon a -78 °C con 0,61 ml (4,39 mmol, 2,0 eq.) de trietilamina y a continuacion en porciones con 1,45 g (3,51 mmol, 1,6 eq.) de N-(4-ferc-butilfenil)-1,1,1-trifluoro-N-[(trifluorometil)sulfonil]-metanosulfonamida. La mezcla de reaccion se dejo llegar hasta TA, se agito durante la noche a TA y a continuacion se concentro a vado. El residuo se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 554 mg (89 % de pureza, 43 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,30 min; MS (ESIpos): m/z = 520 (M+H)+.

Ejemplo 11.1C

4-[2-({1-[(te/'c-Butoxicarbonil)amino]ciclopropil}metil)-5-clorofenil]-1-(1-te/'c-butoxi-1-oxo-3-fenilpropan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros)

Una mezcla de 554 mg (89 % de pureza, 0,95 mmol) de 1-(1-terc-butoxi-1-oxo-3-fenilpropan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato), 439 mg (1,09 mmol, 1,15 eq.) de acido [2-({1-[(fe/-c-butoxicarboml)amino]ddopropil}-metil)-5-dorofeml]b6rico y 394 mg (2,85 mmol, 3,0 eq.) de carbonato de potasio se seco a alto vado, se puso bajo argon, se mezclo con 10 ml de dioxano y se atraveso durante 10 min con argon. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion con 78 mg (0,10 mmol, 0,1 eq.) de aducto de cloruro de [1,1-bis-(difenilfosfino)-ferrocen]-paladio(II)-monodiclorometano y se agito durante 1 h a 80 °C de temperatura de bano de aceite. Tras el enfriamiento hasta TA se filtro la mezcla de reaccion a traves de Celite. Tras el lavado con dioxano se concentraron a vado los filtrados. El residuo se suspendio en agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado.

De manera analoga se realizo una segunda mezcla de reaccion con 2,96 g (88 % de pureza, 5,01 mmol) de 1-(1-ferc-butoxi-1 -oxo-3-fenilpropan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato), los dos productos brutos se combinaron y se purificaron por medio de cromatografia ultrarrapida (gel de sflice-50, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 3,41 g (81 % de pureza, 71 % d. t. con respecto a las dos mezclas de reaccion)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,41 min; MS (ESIpos): m/z = 651 (M+H)+.

Ejemplo 11.1D

Acido 2-[4-{2-[(1-aminociclopropil)metil]-5-clorofenil}-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3-fenilpropanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solucion de 3,41 g (supuesta pureza del 75 %, 3,93 mmol) de 4-[2-({1-[(te/cbutoxicarbonil)amino]ciclopropil}metil)-5-clorofenil]-1-(1-te/'c-butoxi-1-oxo-3-fenil-propan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros) en 40 ml de diclorometano se mezclo bajo argon con enfriamiento con bano de hielo gota a gota con 6,0 ml (78,5 mmol, 20 eq.) de acido trifluoroacetico, se agito durante 5 min, se dejo llegar hasta TA, se agito durante 6 h a TA y a continuacion se concentro a vado. Dado que la reaccion no se hada realizado completamente, se disolvio el residuo otra vez en 40 ml de diclorometano, se mezclo bajo argon con enfriamiento con bano de hielo gota a gota con 6,0 ml (78,5 mmol, 20 eq.) de acido trifluoroacetico, se agito durante 5 min, se dejo llegar hasta TA y se agito durante otras 6 h a TA. A continuacion, la mezcla de reaccion se concentro a vado y el residuo se evaporo conjuntamente dos veces con tolueno, se seco a alto vado y se hizo reaccionar sin purificacion adicional. Rendimiento: 3,36 g (70 % de pureza, cuant.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,79 min; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)+.

Ejemplo 11.1E

Acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-en3]benzazocin]-3'-il)-3-fenilpropanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solucion de 1,5 g (70 % de pureza, 2,1 mmol) de acido 2-[4-{2-[(1-aminociclopropil)metil]-5-clorofenil}-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3-fenilpropanoico (mezcla de estereoisomeros) en 30 ml de tetrahidrofurano se anadio bajo argon a aprox. 4 g de tamiz molecular activado 3 A (secado durante la noche a 200 °C en un armario de secado) y se agito durante 2 ha TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion bajo argon a TA con 12,5 ml (42 mmol, 20 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente durante 2 h a traves de aprox. 15 g de tamiz molecular activado 3 A) y se agito durante 2 h a TA. La mezcla de reaccion se filtro, se mezclo con solucion acuosa, saturada de cloruro de amonio y a continuacion se llevo con solucion acuosa de acido clorhidrico (1 N) hasta pH 3. Tras la separacion de fases se extrajo la fase acuosa dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vado. El residuo se hizo reaccionar sin purificacion adicional. Rendimiento: 643 mg (63 % de pureza, 43 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,86 min; MS (ESIpos): m/z = 449 (M+H)+.

Ejemplo 11.1F

4-{[2-(11'-Cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-fenilpropanoil]amino}benzoato de ferc-butilo (mezcla de estereoisomeros)

De acuerdo con el procedimiento general 3A se hicieron reaccionar 214 mg (63 % de pureza, 0,30 mmol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-fenilpropanoico (mezcla de estereoisomeros) con 87 mg (0,45 mmol, 1,5 eq.) de 4-aminobenzoato de ferc-butilo. Tras el procesamiento acuoso se purifico el producto bruto por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 88 mg (47 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 1,21 min; MS (ESIpos): m/z = 624 (M+H)+.

Ejemplo 12.1A

1-(1-ferc-Butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato)

Se dispusieron 1,00 g (85 % de pureza, 1,74 mmol) de 1-(1-ferc-butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato), 487 mg (1,92 mmol, 1,1 eq.) de bis(pinacolato)diboron y 513 mg (5,23 mmol, 3 eq.) de acetato de potasio bajo argon en 18 ml de dioxano, se mezclaron con 42,7 mg (0,05 mmol, 0,03 eq.) de aducto de [1,1-bis-(difenilfosfino)-ferrocen]-dicloropaladiomonodiclorometano y se agitaron durante 7 h a 80 °C. La mezcla de reaccion se enfrio hasta TA, se filtro a traves de tierra de diatomeas y se lavo posteriormente con dioxano. El filtrado se concentro y se seco a 40 °C a alto vado. Rendimiento: 980 mg (80 % de pureza, 97 % d. t.).

1H-RMN (400 MHz, DMSO-cfe): 5 [ppm] = 8,31 (s, 1H), 6,39 (s, 1H), 5,12 (dd, 1H), 4,34-4,20 (m, 2H), 3,38-3,33 (m, 1H), 3,16-3,04 (m, 4H), 2,34-2,17 (m, 2H), 1,36 (s, 9H), 1,33-1,25 (m, 15H).

Ejemplo 12.1B

4-(2-{2-[(ferc-Butoxicarbonil)amino]-3-fluoropropil}-5-clorofenil)-1-(1-ferc-butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros)

Una mezcla de 399 mg (75 % de pureza, 0,82 mmol) de [1-(2-bromo-4-clorofenil)-3-fluoropropan-2-il]carbamato de ferc-butilo (racemato), 950 mg (80 % de pureza, 1,63 mmol, 2 eq.) de 1-(1-ferc-butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (racemato) y 677 mg (4,90 mmol, 6 eq.) de carbonato de potasio se seco a alto vado, se puso bajo argon, se mezclo con 18 ml de dioxano y se atraveso durante 5 min con argon. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion con 133 mg (0,16 mmol, 0,2 eq.) de aducto de cloruro de [1,1-bis-(difenilfosfino)-ferrocen]-dicloropaladio-monodiclorometano y se agito durante 6 h a 80 °C de temperatura de bano de aceite. La mezcla de reaccion se filtro a traves de tierra de diatomeas, se lavo con diclorometano/acetonitrilo y se concentro el filtrado. El producto bruto se purifico por medio de cromatografia ultrarrapida (cartucho de sflice, mezcla de ciclohexano-acetato de etilo). Rendimiento: 380 mg (60 % de pureza, 44 % d. t.)

LC/MS [Metodo 12]: TR = 2,44 min; MS (ESIpos): m/z = 625 (M+H)+.

Ejemplo 12.1C

Acido 2-{4-[2-(2-amino-3-fluoropropil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il}-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solucion de 380 mg (60 % de pureza, 0,36 mmol) de 4-(2-{2-[(ferc-butoxicarbonil)amino]-3-fluoropropil}-5-dorofenil)-1-(1-ferc-butoxi-4-metoxi-1-oxobutan-2-il)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxilato de etilo (mezcla de estereoisomeros) en 10 ml de una solucion de acido clor^drico en dioxano (4 M) se agito durante 6 h a TA. A continuacion se concentro a vado la mezcla de reaccion. El producto bruto se purifico por medio de HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo-0,1 % de acido formico). Rendimiento: 161 mg (90 % de pureza, 85 % d. t.)

LC/MS [Metodo 11]: TR = 1,25 min; MS (ESIpos): m/z = 469 (M+H)+.

Ejemplo 12.1D

Acido 2-[11-cloro-7-(fluorometil)-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il]-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros)

Una solucion de 161 mg (90 % de pureza, 0,31 mmol) de acido 2-{4-[2-(2-amino-3-fluoropropil)-5-clorofenil]-5-(etoxicarbonil)-2-oxopiridin-1(2H)-il}-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) en 4,3 ml de tetrahidrofurano se mezclo con 600 mg de tamiz molecular 4 A y se agito durante 2 h a TA. A continuacion se mezclo la mezcla de reaccion a TA con 2,3 ml (6,18 mmol, 20 eq.) de una solucion de etilato de sodio (al 21 % en etanol, secado previamente durante 2 h a traves de tamiz molecular 4 A) y se agito durante 90 min a tA. La mezcla de reaccion se mezclo con aprox. 0,7 ml de una solucion acuosa de acido clorhidrico (6 N) hasta pH 5-6 y se concentro a vado. El residuo se purifico por medio de HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo-0,1 % de acido formico). Rendimiento: 40 mg (71 % de pureza, 22 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,66 min; MS (ESIpos): m/z = 423 (M+H)+.

Ejemplo 12.1E

4-(12-[11-Cloro-7-(fluorometil)-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il]-4-metoxibutanoil}amino)benzoato de metilo (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 3A se hicieron reaccionar 28 mg (66 |amol) de acido 2-[11-cloro-7-(fluorometil)-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il]-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 15 mg (99 |amol, 1,5 eq.) de 4-aminobenzoato de metilo. El producto bruto se purifico por medio de HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo-0,1 % de acido formico). Rendimiento: 19 mg (52 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 556 (M+H)+.

Ejemplos de realizacion

Procedimiento general 1: saponificacion de un ester ferc-butfiico o de una amina protegida con Boc por medio de TFA

Una solucion del correspondiente derivado de ester ferc-butflico o de una amina protegida con Boc (1,0 eq.) en diclorometano (aprox. 25 ml/mmol) se mezclo a de 0 °C a TA con TFA (10-20 eq.) y se agito a TA durante de 1 a 8 h. A continuation se concentro a vado la mezcla de reaction. El residuo se evaporo conjuntamente varias veces con diclorometano y/o tolueno. La purification del producto bruto se realizo a continuacion por medio de RP-HPLC preparativa (gradiente de acetonitrilo-agua o gradiente de agua-metanol).

Procedimiento general 2: saponificacion de un ester metilico o etllico con hidroxido de litio

Una solucion del correspondiente ester (1,0 eq.) en una mezcla de tetrahidrofurano/agua (3:1, aprox. 7-15 ml/mmol) se mezclo a TA con hidroxido de litio (2-4 eq.) y se agito a TA. A continuacion se ajusto la mezcla de reaccion con solucion acuosa de acido clorddrico (1 N) hasta pH 1. Tras adicion de agua/acetato de etilo se extrajo la fase acuosa tres veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de sodio o sulfato de magnesio), se filtraron y se concentraron a vado. El producto bruto se purifico a continuacion o bien por medio de cromatografia de fase normal (mezclas de ciclohexano-acetato de etilo o mezclas de diclorometano-metanol) o RP-HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo o gradiente de agua-metanol).

Procedimiento general 3: acoplamiento de amida con HATU/DIEA

Una solucion del correspondiente acido carboxflico (1,0 eq.) en dimetilformamida (aprox. 7-70 ml/mmol) se mezclo bajo argon a TA con la correspondiente amina (1,1-1,2 eq.), N,N-diisopropiletilamina (DIEA) (2,2-3,0 eq.) y una solucion de HATU (1,2 eq.) en poca dimetilformamida. La mezcla de reaccion se agito a ^tA. Tras la adicion de agua/acetato de etilo y separation de fases se lavo la fase organica con agua y con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se seco (sulfato de sodio o sulfato de magnesio), se filtro y se concentro a vado. El producto bruto se purifico a continuacion o bien por medio de cromatografia de fase normal (mezclas de ciclohexano-acetato de etilo o mezclas de diclorometano-metanol) o de RP-HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo o gradiente de agua-metanol).

Procedimiento general 4: acoplamiento de amida con T3P/DIEA

Una solucion de acido carboxflico y de la correspondiente amina (1,1-1,5 eq.) en dimetilformamida (0,15-0,05 mmol) se mezclo bajo argon a 0 °C o TA gota a gota con N,N-diisopropiletilamina (3 eq.) y anddrido de acido propilfosfonico (T3P, al 50 % en dimetilformamida o en acetato de etilo, 3 eq.). La mezcla de reaccion se agito a TA y a continuacion se concentro a vado. Tras adicion de agua/acetato de etilo y separacion de fases se extrajo la fase acuosa dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de sodio o sulfato de magnesio), se filtraron y se concentraron a vado. El producto bruto se purifico a continuacion o bien por medio de cromatografia ultrarrapida (mezclas de ciclohexano-acetato de etilo o mezclas de diclorometano-metanol) o HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo o gradiente de agua-metanol).

Procedimiento general 5: acoplamiento de amida con T3P/piridina

Una solucion del correspondiente acido carboxflico (1 eq.) y de la correspondiente amina (1,1-1,5 eq.) en piridina (aprox. 0,1 M) se calento hasta de 60 a 90 °C y se mezclo gota a gota con T3P (al 50 % en dimetilformamida o acetato de etilo, 1,5-4 eq.). Como alternativa se anadio T3P (al 50 % en dimetilformamida o acetato de etilo, 1,5-4 eq.) a TA y entonces se agito a TA o se calento hasta de 50 a 90 °C. Tras de 1 a 20 h se enfrio la mezcla de reaccion hasta TA y se mezclo con agua y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion de tampon acuosa (pH=5), con solucion acuosa, saturada de hidrogenocarbonato de sodio y con solucion acuosa, saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron a vado. El producto bruto se purifico eventualmente a continuacion o bien por medio de cromatografia de fase normal (mezclas de ciclohexano-acetato de etilo o mezclas de diclorometano-metanol) o RP-HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo o gradiente de agua-metanol).

Procedimiento general 6: saponificacion de un ester metilico o etllico con carbonato de cesio

A una solucion del correspondiente ester metflico o etflico (1 eq.) en una mezcla de metanol/agua (4/1, 0,05-0,2 M) se anadio carbonato de cesio (2 eq.) y la suspension resultante se agito durante de 3 h a 8 h a de TA hasta 60 °C. La mezcla de reaccion se enfrio eventualmente hasta TA y se ajusto con acido clorhidrico acuoso (1 N) hasta pH 3. Se separo metanol a 30 °C a vado. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se secaron (sulfato de sodio o sulfato de magnesio), se filtraron y se concentraron con presion reducida. El residuo se purifico por medio de HPLC preparativa.

Procedimiento general 7: acoplamiento de amida con OXIMA/DIC

A una solucion desgasificada del correspondiente acido carboxflico (1 eq.), anilina (1 eq.) y hidroxiiminocianoacetato de etilo (oxima) (0,7 eq.) en dimetilformamida (0,06-0,1 M) se anadio gota a gota N,N'-diisopropilcarbodiimida (DIC) (1 eq.) y la solucion de reaccion resultante se agito durante de 8 h a 24 h a de TA hasta 40 °C. El disolvente se separo con presion reducida. El residuo se mezclo o bien con agua y se filtro el producto deseado o se purifico por medio de cromatografia de fase normal (gradiente de ciclohexano/acetato de etilo) o RP-HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo o gradiente de agua-metanol).

Ejemplo 1

Acido 4-{[2-(10-cloro-2,5-dioxo-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirido[3,4-cf][2]benzazepin-3-il)butanoil]-amino}benzoico (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 1 se saponificaron 42 mg (80 |amol) de 4-{[2-(10-cloro-2,5-dioxo-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirido[3,4-cf][2]benzazepin-3-il)butanoil]amino}benzoato de ferc-butilo (mezcla de estereoisomeros) con acido trifluoroacetico. El disolvente se separo con presion reducida, el residuo se evaporo conjuntamente tres veces con diclorometano y tres veces con tolueno y el residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |am, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 31 mg (80 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,77 min; MS (ESIpos): m/z = 466 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,8 (s a, 1H), 10,9 (s a, 1H), 8,54 (s a, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,91 (d, 2H), 7,77-7,71 (m, 3H), 7,54 (dd, 1H), 7,43 (d, 1H), 6,65 (s, 1H), 5,67-5,60 (m, 1H), 4,23-3,89 (2x m a, 2H), 2,27-2,14 (m, 1H), 2,11-1,98 (m, 1H), 0,93 (t, 3H).

Ejemplo 2

2-(10-Cloro-2,5-dioxo-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirido[3,4-cf][2]benzazepin-3-il)-N-[4-(5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)fenil]butanamida (mezcla de estereoisomeros)

Se dispusieron 75,0 mg (216 |mol) de acido 2-(10-cloro-2,5-dioxo-2,5,6,7-tetrahidro-3H-pirido[3,4-d][2]benzazepin-3-il)butanoico (mezcla de estereoisomeros) y 57,5 mg (324 |mol) de 3-(4-aminofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona [Zerban, G. et al., documento WO 2007/071742, ejemplo 1] en 5 ml de piridina. A continuation se anadieron gota a gota en porciones 631 | l (1,30 mmol) de anhidrido de acido propilfosfonico (T3P, al 50 % en acetato de etilo, 4 eq.) y se agito la solution de reaction durante 6 dias a 60 °C. La reaction se enfrio hasta temperatura ambiente y se mezclo con 50 ml de agua. Se extrajo tres veces con 30 ml de acetato de etilo. Las fases organicas, combinadas se lavaron tres veces con tampon pH 5 y se separo el disolvente con presion reducida. El residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 11,4 mg (10 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,08 min; MS (ESIpos): m/z = 506 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,9 (s a, 1H), 10,9 (s, 1H), 8,55 (s a, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,83-7,73 (m, 5H), 7,54 (dd, 1H), 7,43 (d, 1H), 6,66 (s, 1H), 5,68-5,60 (m, 1H), 4,29-3,90 (2x m a, 2H), 2,26-2,16 (m, 1H), 2,12-1,98 (m, 1H), 0,93 (t, 3H).

Ejemplo 3

Acido 4-{[2-(10'-cloro-2',5'-dioxo-5',6'-dihidroespiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-cf][2]benzazepin]-3'(2'H)-il)butanoil]amino}benzoico (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 1 se saponificaron 45 mg (82 |mol) de 4-{[2-(10'-cloro-2',5'-dioxo-5',6'-dihidroespiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-cf][2]benzazepin]-3'(2'H-il)butanoil]amino}benzoato de terc-butilo (mezcla de estereoisomeros) con acido trifluoroacetico. El disolvente se separo con presion reducida y el residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 32 mg (78 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,82 min; MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,8 (s a, 1H), 10,9 (2x s, 1H), 8,88/8,84 (2x s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,94-7,89 (m, 2H), 7,77-7,71 (m, 3H), 7,52 (dd, 1H), 7,39 (d, 1H), 6,66/6,65 (2x s, 1H), 5,68-5,61 (m, 1H), 2,27-2,16 (m, 1H), 2,12-1,99 (m, 1H), 1,53-1,45 (m, 1H), 1,21-1,11 (m, 1H), 0,98-0,81 (m, 4H), 0,63-0,53 (m, 1H).

Ejemplo 4

Acido 4-{[(11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)acetil]amino}-benzoico

Segun el procedimiento general 1 se saponificaron 5,7 mg (11 |amol) de 4-{[(11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)acetil}-benzoato de terc-butilo con acido trifluoroacetico. El producto bruto se purifico por medio de HPLC preparativa (procedimiento 10). Rendimiento: 0,9 mg (17 % d. t.)

LC/MS [Metodo 10]: TR = 0,85 min; MS (ESIpos): m/z = 452 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 12,7 (s a, 1H), 10,7 (s, 1H), 7,94-7,89 (m, 3H), 7,76-7,69 (m, 3H), 7,46 (dd, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,24 (d, 1H), 6,31 (s, 1H), 4,87 (s, 2H), 3,49-3,42 (m, 1H), 2,99-2,92 (m, 2H).

Ejemplo 5

2-(11-Cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)-N-[4-(5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)fenil]acetamida

Segun el procedimiento general 3 se hicieron reaccionar 10 mg (30 |amol) de acido (11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)acetico con 6,4 mg (36 |amol, 1,2 eq.) de 3-(4-aminofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona [Zerban, G. et al., documento WO 2007/071742, ejemplo 1]. El producto bruto se purifico por medio de h PlC preparativa (procedimiento 10). Rendimiento: 2,4 mg (15 % d. t.)

LC/MS [Metodo 10]: TR = 0,87 min; MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,9 (s a, 1H), 10,7 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,78 (s, 4H), 7,73 (t, 1H), 7,46 (dd, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,24 (d, 1H), 6,31 (s, 1H), 4,87 (s, 2H), 3,49-3,42 (m, 1H), 3,01-2,91 (m, 2H).

Ejemplo 6

Acido 4-{[2-(11 -cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)butanoil]-amino}benzoico (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 1 se saponificaron 155 mg (289 |amol) de 4-{[2-(11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)butanoil]amino}benzoato de terc-butilo (mezcla de estereoisomeros) con acido trifluoroacetico y 11,6 mg del producto bruto se purificaron por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |am, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 9,5 mg (7 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,8 (s a, 1H), 10,8 (s, 1H), 7,93-7,89 (m, 2H), 7,85/7,79 (2x s, 1H), 7,80 7,71 (m, 3H), 7,47-7,43 (m, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,28-7,26 (m, 1H), 6,33 (2x s, 1H), 5,63-5,56 (m, 1H), 3,51-3,24 (m, 2H), 2,99-2,90 (m, 2H), 2,23-2,01 (m, 2H), 0,92/0,90 (2x t, 3H).

Ejemplo 7

2-(11-Cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)-N-[4-(5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)fenil]butanamida (mezcla de estereoisomeros)

Se disolvieron 14 mg (39 amol) de acido 2-(11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)butanoico (mezcla de estereoisomeros) en 0,7 ml de dimetilformamida y se mezclaron con 6,9 mg (39 amol) de 3-(4-aminofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona [Zerban, G. et al., documento WO 2007/071742, ejemplo 1] y 5,5 mg (39 amol) de oxima. A continuation se anadieron gota a gota 6,2 al (39 amol) de di-/so-propilcarbodiimida y se agito la solution de reaction durante la noche a 40 °C. El disolvente se separo con presion reducida y el residuo se purifico por medio de HPLC preparativa (procedimiento 10). Rendimiento: 3,3 mg (16 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 520 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,8 (s a, 1H), 10,9 (s, 1H), 7,87-7,75 (m, 6H), 7,48-7,44 (m, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,29-7,26 (m, 1H), 6,34 (2x s, 1H), 5,63-5,56 (m, 1H), 3,51-3,23 (m, 2H), 3,00-2,90 (m, 2H), 2,25-2,03 (m, 2H), 0,92/0,91 (2x t, 3H).

Ejemplo 8

Acido 4-1[2-(11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)-4-metilpentanoil]amino}benzoico (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 1 se saponificaron 12 mg (21 amol) de 4-{[2-(11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)-4-metilpentanoil]amino}benzoato de terc-butilo (mezcla de estereoisomeros) con acido trifluoroacetico. El disolvente se separo con presion reducida, el residuo se evaporo conjuntamente tres veces con diclorometano y tres veces con tolueno y finalmente se liofilizo de acetonitrilo/agua. rendimiento: 8,6 mg (79 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,8 (s a, 1H), 10,9 (s, 1H), 7,94-7,70 (m, 6H), 7,47-7,42 (m, 1H), 7,33-7,26 (m, 2H), 6,34/6,33 (2x s, 1H), 5,87-5,80 (m, 1H), 3,47-3,23 (m, 2H), 3,00-2,87 (m, 2H), 2,17-2,06 (m, 1H), 1,94-1,84 (m, 1H), 1,51-1,39 (m, 1H), 0,97-0,91 (m, 6H).

Ejemplo 9

2 -(11 -C lo ro -2 ,5 -d io x o -5 ,6 ,7 ,8 -te tra h id ro p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in -3 (2 H )- il) -4 -m e til-N -[4 -(5 -o x o -4 ,5 -d ih id ro -1 ,2 ,4 -o x a d ia z o l-3 - il) fe n il]p e n ta n a m id a (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

Se disolvieron 15 mg (39 |mol) de acido 2-(11-cloro-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il)-4-metilpentanoico (mezcla de estereoisomeros) en 0,4 ml de dimetilformamida y se mezclaron con 6,8 mg (39 |mol) de 3-(4-aminofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona [Zerban, G. et al., 1. documento WO 2007/071742, ejemplo 1] y 5,5 mg (39 |mol) de oxima. A continuation se anadieron gota a gota 6,0 | l (39 |mol) de di-/so-propilcarbodiimida y se agito la solution de reaction durante la noche a 40 °C. Se anadieron otros 14 mg (78 |mol) de 3-(4-aminofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona y 12 | l (78 |mol) de di-/so-propilcarbodiimida y se agito hasta completar la reaccion a 40 °C. El disolvente se separo con presion reducida y el residuo por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 6,6 mg (31 % d. t.) LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,91 min; MS (ESIpos): m/z = 548 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,9 (s a, 1H), 10,9 (2x s, 1H), 7,90-7,74 (m, 6H), 7,48-7,43 (m, 1H), 7,33 7,26 (m, 2H), 6,35/6,34 (2x s, 1H), 5,87-5,80 (m, 1H), 3,46-3,23 (m, 2H), 2,99-2,87 (m, 2H), 2,18-2,08 (m, 1H), 1,94 1,84 (m, 1H), 1,51-1,39 (m, 1H), 0,97-0,91 (m, 6H).

Ejemplo 10

Acido 4-{[2-(11'-doro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)butanoil]amino}benzoico (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 1 se saponificaron 87,0 mg (155 |mol) de 4-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)butanoil]-amino}benzoato de terc-butilo (mezcla de estereoisomeros) con acido trifluoroacetico. El disolvente se separo con presion reducida, el residuo se evaporo conjuntamente varias veces con diclorometano y se purifico por medio de HpLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 61,5 mg (79 % d. t.) LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,82/0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 506 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,8 (s a, 1H), 10,8 (2x s, 1H), 8,15-8,09 (2x s, 1H), 7,94-7,69 (m, 5H), 7,45 (dd, 1H), 7,33-7,28 (m, 2H), 6,33/6,32 (2x s, 1H), 5,72/5,62 (2x dd, 1H), 3,28-3,17 (m, 1H), 2,74-2,63 (m, 1H), 2,23 2,03 (m, 2H), 1,03-0,87 (m, 4H), 0,80-0,64 (m, 3H).

Ejemplo 11

2 -(11 '-C lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -N -[4 -(5 -o x o -4 ,5 -d ih id ro -1 ,2 ,4 -o x a d ia z o l-3 - il) fe n il]b u ta n a m id a (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

Se disolvieron 8,0 mg (19 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)butanoico (mezcla de estereoisomeros) en 0,4 ml de dimetilformamida y se mezclaron con 3,3 mg (19 |amol) de 3-(4-aminofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona [Zerban, G. et al, documento WO 2007/071742, ejemplo 1] y 0,3 mg (2 |amol) de oxima. A continuacion se anadieron gota a gota 2,9 |al (19 |amol) de di-/so-propilcarbodiimida y se agito la solucion de reaccion durante la noche a 40 °C. El disolvente se separo con presion reducida y el residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |am, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)] y finalmente mediante HPLC preparativa adicional (procedimiento 10). Rendimiento: 1,1 mg (11 % d. t.)

LC/MS [Metodo 10]: TR = 0,96/0,98 min; MS (ESIpos): m/z = 546 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 12,9 (s a, 1H), 10,8 (2x s, 1H), 8,15/8,09 (2x s, 1H), 7,86-7,70 (m, 5H), 7,45 (dd, 1H), 7,33-7,27 (m, 2H), 6,33/6,32 (2x s, 1H), 5,72/5,62 (2x dd, 1H), 3,27-3,17 (m, 1H), 2,73-2,64 (m, 1H), 2,24 2,04 (m, 2H), 1,03-0,87 (m, 4H), 0,80-0,65 (m, 3H).

Ejemplo 12

Acido 4-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]amino}benzoico (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 1 se saponificaron 27 mg (45 |amol) de 4-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]-amino}benzoato de terc-butilo (mezcla de estereoisomeros) con acido trifluoroacetico. El producto bruto se purifico por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 13 mg (55 % d. t.)

LC/MS [Metodo 2]: TR = 2,27 min/2,31 min; MS (ESIpos): m/z = 536 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,75 (s a, 1H), 10,82/10,75 (2x s, 1H), 8,14/8,07 (2x s, 1H), 7,94-7,71 (2x m, 5H), 7,45 (dd, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,30-7,26 (m, 1H), 6,31 (s, 1H), 5,86/5,76 (t/dd, 1H), 3,45-3,36 (m, 1H), 3,3-3,14 (m, 2H), 3,23/3,20 (2x s, 3H), 2,75-2,65 (m, 1H), 2,44-2,30 (m, 2H), 1,04-0,93 (m, 1H), 0,82-0,72 (m, 2H), 0,72-0,64 (m, 1H).

Ejemplo 13

4 -{[2 -(11 '-C lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -4 -m e to x ib u ta n o il]a m in o }-2 -flu o ro b e n z a m id a (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

Segun el procedimiento general 5 se hicieron reaccionar 63 mg (0,15 mmol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 35 mg (0,23 mmol, 1,5 eq.) de 4-amino-2-fluorobenzamida. Tras el procesamiento acuoso se purifico el producto bruto por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 21 mg (24 % d. t.)

LC/MS [Metodo 2]: TR = 2,15 min/2,18 min; MS (ESIpos): m/z = 553 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 10,90/10,80 (2x s, 1H), 8,14/8,08 (2x s, 1H), 7,87/7,72 (2x s, 1H), 7,71-7,59 (m, 2H), 7,57-7,50 (m, 2H), 7,45 (dd, 1H), 7,42 (dd, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,29-7,25 (m, 1H), 6,32 (s, 1H), 5,84/5,73 (t/dd, 1H), 3,45-3,36 (m, 1H), 3,3-3,25 (m, 2H), 3,23/3,20 (2x s, 3H), 2,69 (dd, 1H), 2,45-2,27 (m, 2H), 1,04-0,92 (m, 1H), 0,82-0,63 (m, 3H).

Ejemplo 14

2-(11'-Cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxi-N-(2-oxo-2,3-dihidro-1H-benzimidazol-5-il)butanamida (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 3 se hicieron reaccionar 30 mg (72 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 12 mg (79 |amol, 1,1 eq.) de 5-amino-1,3-dihidro-2H-benzimidazol-2-ona. El producto bruto se purifico por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 21 mg (53 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,68 min/0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 548 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,59/10,55/10,51 (3x s, 2H), 10,37/10,33 (2x s, 1H), 8,13/8,06 (2x s, 1H), 7,89/7,71 (2x s, 1H), 7,48-7,40 (m, 2H), 7,34-7,25 (m, 2H), 7,10/7,07 (2x dd, 1H), 6,85 (d, 1H), 6,30 (s, 1H), 5,82/5,76 (t/dd, 1H), 3,43-3,35 (m, 1H), 3,3-3,15 (m, 2H), 3,23/3,21 (2x s, 3H), 2,69 (dd, 1H), 2,43-2,22 (m, 2H), 1,01-0,92 (m, 1H), 0,80-0,61 (m, 3H).

Ejemplo 15

2 -(11 '-C lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -4 -m e to x i-N -(2 -m e til-2 H -in d a z o l-5 - il)b u ta n a m id a (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

Segun el procedimiento general 3 se hicieron reaccionar 30 mg (72 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 12 mg (79 |amol, 1,1 eq.) de 2-metil-2H-indazol-5-amina. El producto bruto se purifico por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 26 mg (66 % d. t.) LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,82 min/0,83 min; MS (ESIpos): m/z = 546 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,45/10,41 (2x s, 1H), 8,26 (d, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,08 (d, 1H), 7,91/7,74 (2x s, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,45 (dt, 1H), 7,34-7,26 (m, 3H), 6,31 (s, 1H), 5,88/5,80 (t/dd, 1H), 4,13 (s, 3H), 3,45-3,36 (m, 1H), 3,3-3,16 (m, 2H), 3,24/3,21 (2x s, 3H), 2,69 (dd, 1H), 2,45-2,25 (m, 2H), 1,04-0,92 (m, 1H), 0,82-0,62 (m, 3H). Ejemplo 16

2-(11'-Cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxi-N-(pirazolo[1,5-a]piridin-5-il)butanamida (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 4 se hicieron reaccionar 83 mg (0,2 mmol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 35 mg (0,26 mmol, 1,3 eq.) de pirazolo[1,5-a]piridin-5-amina [B.C. Baguley et al. Bioorganic and Medicinal Chemistry, 2012, 20, 69-85]. Tras el procesamiento acuoso se purifico el producto bruto por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 82 mg (77 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,80 min; MS (ESIpos): m/z = 532 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,78/10,70 (2x s, 1H), 8,62 (d, 1H), 8,17-8,05 (m, 2H), 7,94-7,88 (m, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,45 (dd, 1H), 7,34-7,25 (m, 2H), 6,99 (dd, 1H), 6,51 (dd, 1H), 6,32 (s, 1H), 5,87/5,76 (t/dd, 1H), 3,46 3,77 (m, 1H), 3,3-3,15 (m, 2H), 3,24/3,21 (2x s, 3H), 2,69 (dd, 1H), 2,45-2,28 (m, 2H), 1,02-0,93 (m, 1H), 0,82-0,63 (m, 3H).

Ejemplo 17

2 -(11 '-C lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -N -(im id a z o [1 ,2 -a ]p ir id in -6 - il) -4 -m e to x ib u ta n a m id a (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

Segun el procedimiento general 3 se hicieron reaccionar 30 mg (72 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 11 mg (79 |amol, 1.1 eq.) de imidazo[1,2-a]piridin-6-amina. El producto bruto se purifico por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 21 mg (54 % d. t.) LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,63 min/0,64 min; MS (ESIpos): m/z = 532 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 11,11/10,95 (2x s, 1H), 9,60/9,51 (2x s, 1H), 8,40 (d, 1H), 8,18-8,06 (m, 2H), 7,98-7,89 (m, 1,5H), 7,89-7,82 (m, 1H), 7,76 (s, 0,5H), 7,49-7,43 (m, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,26 (dd, 1H), 6,33 (s, 1H), 5,91/5,71 (t/dd, 1H), 3,49-3,40 (m, 2H), 3,3-3,14 (m, 1H), 3,24/3,21 (2x s, 3H), 2,70 (dd, 1H), 2,47-2,37 (m, 2H), 1,04-0,92 (m, 1H), 0,83-0,65 (m, 3H).

Ejemplo 18

2-(11'-Cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-N-(1 H-indazol-5-il)-4-metoxibutanamida (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 3 se hicieron reaccionar 30 mg (72 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 11 mg (79 |amol, 1,1 eq.) de 1H-indazol-5-amina. El producto bruto se purifico por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 26 mg (68 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,77 min/0,78 min; MS (ESIpos): m/z = 532 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 13,00 (s, 1H), 10,52/10,47 (2x s, 1H), 8,14/8,10/8,07 (3x s, 2H), 8,02 (d, 1H), 7,91/7,74 (2x s, 1H), 7,53-7,42 (m, 3H), 7,31 (d, 1H), 7,29-7,26 (m, 1H), 6,32 (s, 1H), 5,89/5,81 (t/dd, 1H), 3,45 3,37 (m, 1H), 3,3-3,15 (m, 2H), 3,25/3,22 (2x s, 3H), 2,69 (dd, 1H), 2,46-2,25 (m, 2H), 1,04-0,93 (m, 1H), 0,82-0,61 (m, 3H).

Ejemplo 19

2 -(11 '-C lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -4 -m e to x i-N -(2 -m e til-3 -o x o -2 ,3 -d ih id ro -1 H -in d a z o l-6 - il)b u ta n a m id a (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

Segun el procedimiento general 1 se saponificaron 81 mg (122 |amol) de 6-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]-amino}-2-metil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-indazol-1-carboxilato de ferc-butilo (mezcla de estereoisomeros) con acido trifluoroacetico. El producto bruto se purifico por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 35 mg (51 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,70 min/0,72 min; MS (ESIpos): m/z = 562 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 10,74/10,70 (2x s, 1H), 10,23/10,21 (2x s, 1H), 8,15/8,09 (2x s, 1H), 7,89/7,73 (2x s, 1H), 7,76 (d, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,45 (dd, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,30-7,26 (m, 1H), 7,20-7,15 (m, 1H), 6,31 (s, 1H), 5,87/5,79 (t/dd, 1H), 3,45-3,37 (m, 1H), 3,3-3,15 (m, 2H), 3,23/3,21 (m, 3H), 2,69 (dd, 1H), 2,46-2,29 (m, 2H), 1,05-0,93 (m, 1H), 0,82-0,63 (m, 3H).

Ejemplo 20

Acido 5-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]amino}piridin-2-carboxflico (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 2 se saponificaron 135 mg (89 % de pureza, 218 |amol) de 5-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]amino}piridin-2-carboxilato de metilo (mezcla de estereoisomeros) en presencia de hidroxido de litio. Tras el procesamiento acuoso se purifico el producto bruto por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de aguaacetonitrilo). Rendimiento: 41 mg (35 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,70 min; MS (ESIpos): m/z = 537 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 13,0 (s a, 1H), 11,06/10,94 (2x s, 1H), 8,92/8,86 (2x d, 1H), 8,27-8,20 (m, 1H), 8,14/8,09 (2x s, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,88/7,74 (2x s, 1H), 7,45 (dd, 1H), 7,34-7,25 (m, 2H), 6,32 (s, 1H), 5,88/5,74 (t/dd, 1H), 3,45-3,38 (m, 1H), 3,3-3,15 (m, 2H), 3,24/3,21 (2x s, 3H), 2,69 (dd, 1H), 2,47-2,31 (m, 2H), 1,03-0,92 (m, 1H), 0,82-0,64 (m, 3H).

Ejemplo 21

5 -{[2 -(11 '-C lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -4 -m e to x ib u ta n o il]a m in o }p ir id in -2 -c a rb o x a m id a (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

Segun el procedimiento general 4 se hicieron reaccionar 41 mg (76 |amol) de acido 5-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]-amino}piridin-2-carboxflico (mezcla de estereoisomeros) con 7 mg (89 |amol, 1,2 eq.) de acetato de amonio. El producto bruto se purifico por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 2 mg (6 % d. t.)

LC/MS [Metodo 2]: TR = 2,03 min/2,07 min; MS (ESIpos): m/z = 536 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 11,08-10,85 (m, 1H), 8,94-8,79 (m, 1H), 8,28-8,17 (m 1H), 8,11 (d, 1H), 8,07-7,97 (m, 2H), 7,89/7,73 (2x s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,37-7,24 (m, 2H), 6,32 (s, 1H), 5,93-5,70 (2x m, 1H), 3,47-3,38 (m, 1H), 3,3-3,13 (m, 2H), 3,24/3,21 (2x s, 3H), 2,69 (dd, 1H), 2,46-2,29 (m, 2H), 1,04-0,93 (m, 1H), 0,83-0,63 (m, 3H).

Ejemplo 22

Acido 5-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]amino}tiofen-2-carboxflico (mezcla de estereoisomeros)

De acuerdo con el procedimiento general 2 se saponificaron 66 mg (0,12 mmol) de 5-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]amino}tiofen-2-carboxilato de metilo (mezcla de estereoisomeros) con hidroxido de litio. Tras el procesamiento acuoso se purifico el producto bruto por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 10 mg (15% d. t.)

LC/MS [Metodo 2]: TR = 2,31 min/2,35 min; MS (ESIpos): m/z = 542 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,6 (s a, 1H), 12,13/11,96 (2x s, 1H), 8,14/8,09 (2x s, 1H), 7,89/7,74 (2x s, 1H), 7,56-7,49 (m, 1H), 7,49-7,41 (m, 1H), 7,35-7,24 (m, 2H), 6,84-6,76 (m, 1H), 6,31 (s, 1H), 5,86/5,68 (2x dd, 1H), 3,45-3,35 (m, 1H), 3,3-3,14 (m, 2H), 3,23/3,20 (2x s, 3H), 2,70 (dd, 1H), 2,47-2,29 (m, 2H), 1,04-0,93 (m, 1H), 0,82 0,64 (m, 3H).

Ejemplo 23

A c id o 5 -{ [2 -(11 '-c lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -4 -m e to x ib u ta n o il]a m in o }tio fe n -3 -c a rb o x flic o (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

De acuerdo con el procedimiento general 2 se saponificaron 116 mg (0,21 mmol) de 5-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]amino}tiofen-3-carboxilato de metilo (mezcla de estereoisomeros) con hidroxido de litio (agitacion a 80 °C de temperatura de bano de aceite durante 50 h). Tras el procesamiento acuoso se purifico el producto bruto por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil Cl8, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 9 mg (8 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,81 min; MS (ESIpos): m/z = 542 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 12,5 (s a, 1H), 11,87/11,68 (2x s, 1H), 8,13/8,09 (2x s, 1H), 7,88/7,73 (2x s, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,49-7,41 (m, 1H), 7,35-7,25 (m, 2H), 7,04 (s, 1H), 6,31 (s, 1H), 5,85/5,66 (2x dd, 1H), 3,45-3,35 (m, 1H), 3,3-3,14 (m, 2H), 3,24/3,21 (2x s, 3H), 2,70 (dd, 1H), 2,46-2,28 (m, 2H), 1,04-0,92 (m, 1H), 0,82-0,64 (m, 3H).

Ejemplo 24

Acido 4-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]amino}tiofen-2-carboxflico (mezcla de estereoisomeros)

De acuerdo con el procedimiento general 2 se saponificaron 83 mg (0,15 mmol) de 4-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-4-metoxibutanoil]amino}tiofen-2-carboxilato de metilo (mezcla de estereoisomeros) con hidroxido de litio (agitacion a 80 °C de temperatura de bano de aceite durante 3 h). Tras el procesamiento acuoso se purifico el producto bruto por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 55 mg (68 % d. t.)

LC/MS [Metodo 2]: TR = 2,33/2,36 min; MS (ESIpos): m/z = 542 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 13,2 (s a, 1H), 11,00/10,88 (2x s, 1H), 8,13/8,09 (2x s, 1H), 7,87/7,72 (2x s, 1H), 7,85-7,77 (2x dd, 2H), 7,45 (dt, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,28 (t, 1H), 6,31 (s, 1H), 5,80/5,66 (2x dd, 1H), 3,43-3,35 (m, 1H), 3,3-3,16 (m, 2H), 3,24/3,21 (2x s, 3H), 2,69 (dd, 1H), 2,46-2,25 (m, 2H), 1,02-0,92 (m, 1H), 0,81-0,63 (m, 3H).

Ejemplo 25

A c id o 4 -{ [2 -(11 '-c lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -3 -(fra n s -4 -m e to x ic ic lo h e x il)p ro p a n o il]a m in o }b e n z o ic o (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

Segun el procedimiento general 6 se saponificaron 41 mg (65 |amol) de 4-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-(frans-4-metoxiciclohexil)propanoil]amino}-benzoato de etilo (mezcla de estereoisomeros) con 42,3 mg (130 |amol, 2 eq.) de carbonato de cesio. El producto bruto se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |am, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 6,1 mg (15 % d. t.)

LC/MS [Metodo 2]: TR = 2,69 min/2,76 min; MS (ESIpos): m/z = 604 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,80/10,75 (2x s, 1H), 8,16/8,09 (2x s, 1H), 7,92-7,62 (m, 5H), 7,48-7,43 (m, 1H), 7,33-7,27 (m, 2H), 6,33/6,32 (2x s, 1H), 5,93/5,83 (2x dd, 1H), 3,22/3,20 (2x s, 3H), 3,09-3,00 (m, 1H), 2,68 (dd, 1H), 2,34-1,70 (m, 6H), 1,16-0,61 (m, 9H).

Ejemplo 26

Amida de acido 4-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-(frans-4-metoxiciclohexil)propanoil]amino}-2-fluorobenzoico (mezcla de estereoisomeros)

De acuerdo con el procedimiento general 7 se llevaron a reaccion 50,0 mg (103 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-(frans-4-metoxiciclohexil)propanoico (mezcla de estereoisomeros), 15,9 mg (103 |amol) de 4-amino-2-fluorobenzamida, 10 mg (72 l^mol) de oxima y 16,0 ^l (103 |amol) de DIC en 1 ml de dimetilformamida. El disolvente se separo con presion reducida y el residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |am, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/ 0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 30,4 mg (47 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,87 min, 0,88 min; MS (ESIpos): m/z = 621 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,92/10,85 (2x s, 1H), 8,17/8,10 (2x s, 1H), 7,87-7,27 (m, 9H), 6,34/6,33 (2x s, 1H), 5,91/5,79 (2x dd, 1H), 3,26-3,16 (m, 1H), 3,22/3,20 (2x s, 3H), 3,10-3,00 (m, 1H), 2,67 (dd, 1H), 2,34-1,71 (m, 6H), 1,16-0,60 (m, 9H).

Ejemplo 27

2 -(11 '-C lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -3 -( fra n s -4 -m e to x ic ic lo h e x il)-N -(2 -o x o -2 ,3 -d ih id ro -1 H -b e n z im id a z o l-5 - il) -p ro p a n a m id a (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

De acuerdo con el procedimiento general 7 se llevaron a reaccion 30 mg (62 |mol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-(frans-4-metoxiciclohexil)propanoico (mezcla de estereoisomeros), 9,2 mg (62 |mol) de 5-amino-1,3-dihidro-2H-benzimidazol-2-ona, 6,2 mg (43 |mol) de oxima y 9,6 | l (62 |mol) de DIC en 1 ml de dimetilformamida. El disolvente se separo con presion reducida y el residuo se purifico por medio de HPLC preparativa [columna: Chromatorex C18, 10 |m, 125 mm x 30 mm, eluyente: gradiente de acetonitrilo/0,1 % de acido formico (de 0 a 3 min 10 % de acetonitrilo, hasta 35 min 90 % de acetonitrilo y otros 3 min 90 % de acetonitrilo)]. Rendimiento: 30,0 mg (78 % d. t.) LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,81 min, 0,84 min; MS (ESIpos): m/z = 616 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,60/10,55 (2x s, 1H), 10,51 (s, 1H), 10,39/10,37 (2x s, 1H), 8,15/8,8.08 (2x s, 1H), 7,88/7,68 (2x s, 1H), 7,47-7,26 (m, 4H), 7,10-7,02 (m, 1H), 6,88-6,81 (m, 1H), 6,32/6,31 (2x s, 1H), 5,87/5,81 (2x dd, 1H), 3,25-3,15 (m, 1H), 3,22/3,20 (2x s, 3H), 3,10-2,99 (m, 1H), 2,74-2,60 (m, 1H), 2,25-1,71 (m, 6H), 1,16-0,58 (m, 9H).

Ejemplo 28

Acido 4-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-fenilpropanoil]amino}benzoico (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 1 se saponificaron 88 mg (14 |mol) de 4-{[2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-fenilpropanoil]-amino}benzoato de ferc-butilo (mezcla de estereoisomeros) con acido trifluoroacetico. El producto bruto se purifico por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 27 mg (33 % d. t.)

LC/MS [Metodo 2]: TR = 2,83 min/2,90 min; MS (ESIpos): m/z = 568 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 12,75 (s a, 1H), 10,96/10,78 (2x s, 1H), 8,09/8,00 (2x s, 1H), 7,98-7,83 (m, 3H), 7,80-7,70 (m, 2H), 7,46-7,39 (m, 1H), 7,37-7,10 (m, 7H), 6,28/6,03 (2x dd, 1H), 6,22/6,18 (2x s, 1H), 3,64-3,46 (m, 2H), 3,20/3,03 (2x d, 1H), 2,62 (d, 0,4H), 0,97-0,83 (m, 1H), 0,76-0,56 (m, 2H), 0,36-0,21 (m, 1H).

Ejemplo 29

2 -(11 '-C lo ro -2 ',5 '-d io x o -2 ',5 ',6 ',8 '- te tra h id ro -3 'H -e s p iro [c ic lo p ro p a n -1 ,7 '-p ir id o [3 ,4 -e ][3 ]b e n z a z o c in ]-3 '- il) -N -(2 -o x o -2 ,3 -d ih id ro -1 H -b e n z im id a z o l-5 - il)-3 -fe n ilp ro p a n a m id a (m e zc la de e s te re o is o m e ro s )

Segun el procedimiento general 5 se hicieron reaccionar 30 mg (63 % de pureza, 42 |amol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-fenilpropanoico (mezcla de estereoisomeros) con 9 mg (63 |amol, 1,5 eq.) de 5-amino-1,3-dihidro-2H-benzimidazol-2-ona. El producto bruto se purifico por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 16 mg (64 % d. t.)

LC/MS [Metodo 11]: TR = 1,49 min/1,53 min; MS (ESIpos): m/z = 580 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,62/10,57/10,53/10,50/10,36 (6x s, 3H), 8,10/8,00/7,95/7,84 (4x s, 2H), 7,47-7,39 (m, 2H), 7,36-7,15 (m, 7H), 7,10/7,05 (2x dd, 1H), 6,88/6,87 (2x d, 1H), 6,22/6,02 (2x dd, 1H), 6,21/6,17 (2x s, 1H), 3,55-3,43 (m 2H), 3,20/3,03 (2x d, 1H), 2,62/2,54 (2x d, 1H), 0,96-0,84 (m, 1H), 0,75-0,56 (m, 1,5H), 0,38 0,22 (m, 1,5H).

Ejemplo 30

2-(11'-Cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-N-(2-metil-2H-indazol-5-il)-3-fenilpropanamida (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 5 se hicieron reaccionar 118 mg (63 % de pureza, 0,17 mmol) de acido 2-(11'-cloro-2',5'-dioxo-2',5',6',8'-tetrahidro-3'H-espiro[ciclopropan-1,7'-pirido[3,4-e][3]benzazocin]-3'-il)-3-fenilpropanoico (mezcla de estereoisomeros) con 37 mg (25 mmol, 1,5 eq.) de 2-metil-2H-indazol-5-amina. El producto bruto se purifico por medio de RP-HPLC preparativa (Reprosil C18, gradiente de agua-acetonitrilo). Rendimiento: 33 mg (35 % d. t.) LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,93 min/0,95 min; MS (ESIpos): m/z = 578 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 10,59/10,43 (2x s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,17/8,09/8,02/7,95/7,86 (5x s, 3H), 7,61-7,55 (m, 1H), 7,46-7,40 (m, 1H), 7,38-7,10 (m, 8H), 6,28/6,06 (2x dd, 1H), 6,22/6,18 (2x s, 1H), 4,14 (s, 3H), 3,59-3,45 (m, 2H), 3,20/3,04 (2x d, 1H), 2,62/2,54 (2x d, 1H), 0,97-0,85 (m, 1H), 0,77-0,57 (m, 2H), 0,39-0,23 (m, 1H).

Ejemplo 31

2-[11-Cloro-7-(fluorometil)-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il]-4-metoxi-N-(2-metil-2H-indazol-5-il)butanamida (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 5 se hicieron reaccionar 10 mg (24 |amol) de acido 2-[11-cloro-7-(fluorometil)-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il]-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 6,3 mg (43 |amol, 1,8 eq.) de 2-metil-2H-indazol-5-amina. El producto bruto se purifico por medio de HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo-0,1 % de acido formico). Rendimiento: 5 mg (38 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 552 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 [ppm] = 10,50-10,31 (m, 1H), 8,28-8,21 (m, 1H), 8,15-8,06 (m, 1H), 8,01-7,70 (m, 2H), 7,59-7,39 (m, 3H), 7,33-7,21 (m, 2H), 6,40-6,21 (m, 1H), 5,82-5,66 (m, 1H), 4,57-4,28 (m, 2H), 4,13 (s, 3H), 4,12-3,98 y 3,68-3,50 (2x m, 1H), 3,46-3,37 (m, 1H), 3,24-3,16 (m, 4H), 3,13-2,94 (m, 1H), 2,73-2,57 (m, 1H), 2,44 2,24 (m, 3H).

Ejemplo 32

4-({2-[11-Cloro-7-(fluorometil)-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il]-4-metoxibutanoil}amino)-2-fluorobenzamida (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 5 se hicieron reaccionar 15 mg (35 |amol) de acido 2-[11-cloro-7-(fluorometil)-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il]-4-metoxibutanoico (mezcla de estereoisomeros) con 8,5 mg (53 |amol, 1,5 eq.) de 4-amino-2-fluorobenzamida. El producto bruto se purifico por medio de HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo-0,1 % de acido formico). Rendimiento: 7 mg (35 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,73 min; MS (ESIpos): m/z = 559 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-de): 5 [ppm] = 10,79-10,69 (m, 1H), 8,02-7,22 (m, 10H), 6,39-6,23 (m, 1H), 5,77-5,58 (m, 1H), 4,56-4,27 (m, 2H), 4,14-3,96 y 3,69-3,52 (2x m, 1H), 3,45-3,36 (m, 1H), 3,23-3,15 (m, 3H), 3,14-2,95 (m, 1H), 2,72-2,57 (m, 1H), 2,46-2,26 (m, 2H).

Ejemplo 33

Acido 4-({2-[11-cloro-7-(fluorometil)-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il]-4-metoxibutanoil}amino)benzoico (mezcla de estereoisomeros)

Segun el procedimiento general 2 se hicieron reaccionar 19 mg (34 |mol) de 4-({2-[11-cloro-7-(fluorometil)-2,5-dioxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[3,4-e][3]benzazocin-3(2H)-il]-4-metoxibutanoil}amino)benzoato de metilo (mezcla de estereoisomeros). El producto bruto se purifico por medio de HPLC preparativa (gradiente de agua-acetonitrilo-0,1 % de acido formico). Rendimiento: 8 mg (43 % d. t.)

LC/MS [Metodo 1]: TR = 0,76 min; MS (ESIpos): m/z = 542 (M+H)+,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 [ppm] = 12,77 (s a, 1H), 10,78-10,62 (m, 1H), 8,00-7,69 (m, 6H), 7,53-7,41 (m, 2H), 7,34-7,19 (m, 1H), 6,39-6,21 (m, 1H), 5,81-5,69 (m, 1H), 4,56-4,28 (m, 2H), 4,13-3,96 y 3,72-3,50 (2x m, 1H), 3,53 3,37 (m, 2H), 3,23-2,94 (m, 5H), 2,72-2,57 (m, 1H), 2,44-2,24 (m, 2H).

B) Evaluacion de la actividad fisiologica

La idoneidad de los compuestos de acuerdo con la invention para el tratamiento de enfermedades tromboembolicas se puede demostrar en los siguientes sistemas de ensayo:

a) Descripciones del ensayo (in vitro)

a.1) Medicion de la inhibicion de FXIa

Para la determination de la inhibicion del factor XIa de las sustancias de acuerdo con la invencion se usa un sistema de ensayo bioqmmico, en el que se usa la reaction de un sustrato del factor XIa peptidico para la determinacion de la actividad enzimatica de factor XIa humano. A este respecto, el factor XIa escinde del sustrato del factor XIa peptidico la aminometilcoumarina (AMC) C-terminal, cuya fluorescencia se mide. Las determinaciones se realizan en placas de microtitulacion.

Las sustancias de prueba se disuelven en dimetilsulfoxido y se diluyen en serie en dimetilsulfoxido (de 3000 |M a 0,0078 |M; concentraciones finales resultantes en el ensayo: de 50 |M a 0,00013 |M). En cada caso se dispone 1 | l de las soluciones de sustancia diluidas en las cavidades de placas de microtitulacion blancas de la empresa Greiner (384 cavidades). A continuation se anaden sucesivamente 20 | l de tampon de ensayo (Tris/HCl 50 mM pH 7,4; cloruro de sodio 100 mM; cloruro de calcio 5 mM; albumina de suero bovino al 0,1 %) y 20 | l de factor XIa de la empresa Kordia (0,45 nM en tampon de ensayo). Tras 15 min de incubation se inicia la reaccion enzimatica mediante adicion de 20 | l del sustrato del factor XIa disuelto en tampon de ensayo Boc-Glu(OBzl)-Ala-Arg-AMC (10 |M en tampon de ensayo) de la empresa Bachem, se incuba durante 30 min a temperatura ambiente (22 °C) y a continuacion se realiza una medicion de fluorescencia (excitation: 360 nM, emision: 460 nM). Las emisiones medidas de los conjuntos de ensayo con sustancia de prueba se comparan con las de conjuntos control sin sustancia de prueba (exclusivamente dimetilsulfoxido en lugar de sustancia de prueba en dimetilsulfoxido) y a partir de las relaciones de concentration-action se calculan valores CI50. Los datos de action de este ensayo estan mencionados en la siguiente tabla A:

Tabla A

a.2) Determinacion de la selectividad

Para demostrar la selectividad de las sustancias con respecto a la inhibicion de FXIa se examinan las sustancias de prueba con respecto a su inhibicion de otras serina proteasas humanas, tal como factor Xa, tripsina y plasmina. Para determinar la actividad enzimatica del factor Xa (1,3 nmol/l de Kordia), tripsina (83 mU/ml de Sigma) y plasmina (0,1 |ig/ml de Kordia), estas enzimas se disuelven (50 mmol/l de tampon Tris [C,C,C-tris(hidroximetil)aminometano], 100 mmol/l de cloruro de sodio, 0,1 % de BSA [albumina de suero bovino], 5 mmol/l de cloruro de calcio, pH 7,4) y se incuban durante 15 min con sustancia de prueba en varias concentraciones en dimetilsulfoxido y con dimetilsulfoxido sin sustancia de prueba. La reaccion enzimatica luego se inicia adicionando los correspondientes sustratos (5 |imol/l de Boc-Ile-Glu-Gly-Arg-AMC de Bachem para FXa y tripsina, 50 |imol/l de MeOSuc-Ala-Phe-Lys-AMC de Bachem para plasmina). Despues de un tiempo de incubacion de 30 min a 22 °C se mide la fluorescencia (excitacion: 360 nm, emision: 460 nm). Las emisiones medidas de los conjuntos de ensayo con sustancia de prueba se comparan con los conjuntos control sin sustancia de prueba (exclusivamente dimetilsulfoxido en lugar de sustancia de prueba en dimetilsulfoxido) y a partir de las relaciones de concentracion-actividad se calculan los valores de CI⁵⁰.

a.3) Ensayo de generacion de trombina (trombograma)

La accion de las sustancias de prueba en el trombograma (ensayo de generacion de trombina de acuerdo con Hemker) se determina in vitro en plasma humano (Octaplas® de la empresa Octapharma).

En el ensayo de generacion de trombina de acuerdo con Hemker, la actividad de trombina en el plasma de coagulacion se determina midiendo los productos de escision fluorescentes del sustrato I-1140 (Z-Gly-Gly-Arg-AMC, Bachem). Las reacciones se realizan en presencia de concentraciones variables de sustancia de prueba o del correspondiente disolvente. Para iniciar la reaccion se usan los reactivos de la empresa Thrombinoscope (30 pM o 0,1 pM de factor tisular recombinante, 24 |iM de fosfolfpidos en HEPES). Ademas, se usa un calibrador de trombina de la empresa Thrombinoscope cuya actividad amidolftica es necesaria para calcular la actividad de trombina en una muestra con cantidad desconocida de trombina. La realizacion del ensayo se lleva a cabo segun las indicaciones del fabricante (Thrombionsocpe BV): se incuban 4 |il de sustancia de ensayo o del disolvente, 76 |il de plasma y 20 |il de reactivo PPP o calibrador de trombina a 37 °C durante 5 min. Despues de la adicion de 20 |il de 2,5 mM de sustrato de trombina en 20 mM de HEPES, 60 mg/ml de BSA, 102 mM de cloruro de calcio, se mide la generacion de trombina cada 20 s durante un penodo de 120 min. La medicion se lleva a cabo mediante el uso de un fluorometro (Fluoroskan Ascent) de la empresa Thermo Electron, que esta equipado con un par de filtros 390/460 NM y un distribuidor.

Mediante el uso del “software Thrombinoscope”, se calcula el trombograma y se representa mediante un grafico. Se calculan los siguientes parametros: tiempo muerto, tiempo al pico, pico, ETP (potencial de trombina endogena) y la cola de inicio.

a.4) Determinacion de la accion anticoagulante

La accion anticoagulante de las sustancias de prueba se determina in vitro en plasma humano y de rata. A este fin, se extrae sangre en una relacion de mezclado de citrato de sodio/sangre de 1:9 usando una solucion de citrato de sodio de 0,11 molar como patron. Inmediatamente despues de haberse extrafdo la sangre, se mezcla bien y se centrifuga a aprox. 4000 g durante 15 minutos. El sobrenadante se pipetea.

Se determina el tiempo de protrombina (PT, sinonimos: tiempo de tromboplastina, ensayo rapido) en presencia de concentraciones variables de sustancia de prueba o el correspondiente disolvente mediante el uso del kit de ensayo comercial (Neoplastin® de la empresa Boehringer Mannheim o Hemoliance® RecombiPlastin de la empresa Instrumentation Laboratory). Los compuestos de prueba se incuban con el plasma a 37 °C durante 3 minutos. Luego se inicia la coagulacion por adicion de tromboplastina y se determina el momento del comienzo de la coagulacion. Se determina la concentracion de la sustancia de prueba que efectua una duplicacion del tiempo de protrombina. Se determina el tiempo de tromboplastina parcial activada (APTT) en presencia de concentraciones variables de la sustancia de prueba o el correspondiente disolvente mediante el uso de un kit de ensayo comercial (reactivo PTT de la empresa Roche). Los compuestos de prueba se incuban con el plasma y el reactivo PTT (cefalina, caolm) a 37 °C durante 3 minutos. Luego se inicia la coagulacion adicionando 25 mM de cloruro de calcio y se determina el momento del comienzo de la coagulacion. Se determina la concentracion de la sustancia de prueba que efectua una prolongacion al 50 % o bien una duplicacion del APTT.

a.5) Determinacion de la actividad de calicrema plasmatica

Para la determinacion de la inhibicion de calicrema plasmatica de las sustancias de acuerdo con la invencion se usa un sistema de ensayo bioqmmico, en el que se usa la reaccion de un sustrato de calicrema plasmatica peptfdica para la determinacion de la actividad enzimatica de calicrema plasmatica humana. A este respecto, la calicrema plasmatica escinde del sustrato de calicrema plasmatica peptfdica la aminometilcoumarina (AMC) C-terminal, cuya fluorescencia se mide. Las determinaciones se realizan en placas de microtitulacion.

Las sustancias de prueba se disuelven en dimetilsulfoxido y se diluyen en serie en dimetilsulfoxido (de 3000 |iM a 0,0078 |iM; concentraciones finales resultantes en el ensayo: de 50 |iM a 0,00013 |iM). En cada caso se dispone 1 |il de las soluciones de sustancia diluidas en las cavidades de placas de microtitulacion blancas de la empresa Greiner (384 cavidades). A continuacion se anaden sucesivamente 20 |il de tampon de ensayo (Tris/HCl 50 mM pH 7,4; solucion de cloruro de sodio 100 mM; solucion de cloruro de calcio 5 mM; albumina de suero bovino al 0,1 %) y 20 |il de calicrema plasmatica de la empresa Kordia (0,6 nM en tampon de ensayo). Tras 15 min de incubacion se inicia la reaccion enzimatica mediante adicion de 20 |il del sustrato disuelto en tampon de ensayo H-Pro-Phe-Arg-AMC (10 |iM en tampon de ensayo) de la empresa Bachem, se incuba durante 30 min a temperatura ambiente (22 °C) y a continuacion se realiza una medicion de fluorescencia (excitacion: 360 nM, emision: 460 nM). Las emisiones medidas de los conjuntos de ensayo con sustancia de prueba se comparan con las de conjuntos control sin sustancia de prueba (exclusivamente dimetilsulfoxido en lugar de sustancia de prueba en dimetilsulfoxido) y a partir de las relaciones de concentracion-accion se calculan valores CI50.

Tabla B

continuacion

a.6) Determinacion de la integridad endotelial

La actividad de los compuestos de acuerdo con la invencion se caracteriza por medio de un ensayo de permeabilidad in-vitro en celulas de la vena del cordon umbilical humano “human umbilical venous cells" (HUVEC). Por medio del aparato EOS (EC IS: Electric Cell-substrate Impedance Sensing; Applied Biophysics Inc; Troy, NY) pueden medirse continuamente diferencias de la resistencia electrica transendotelial (TEER) a traves de una monocapa de celulas endoteliales que se coloco en placa a traves de electrodos de oro. Las HUVEC se siembran en una placa de electrodos con detector de 96 pocillos (96W1 E, Ibidi GmbH, Martinsried). Se induce una hiperpermeabilidad de la monocapa de celulas confluente producida por medio de estimulacion con cininogeno, precalicrema y factor XII (en cada caso 100 nM). Los compuestos de acuerdo con la invencion se anaden antes de la adicion de las sustancias indicadas anteriormente. Las concentraciones habituales de los compuestos son 1 x 10' 10 a 1 x 10-6 M.

a. 7) Determinacion de la permeabilidad in-vitro de celulas endoteliales

En otro modelo de hiperpermeabilidad se determina la actividad de las sustancias sobre la modulacion de la permeabilidad macromolecular. Las HUVEC se siembran en una membrana de filtro trans-pocillo revestida con fibronectina (placas de 24 pocillos, inserto de 6,5 mm con membrana de policarbonato 0,4 pM; Costar #3413). La membrana de filtro separa el espacio de cultivo celular superior del inferior con la capa de celulas endoteliales confluente sobre la base del espacio de cultivo celular superior. Al medio del espacio superior se anaden 250 g/ml de FITC-dextrano 40 kDa (Invitrogen, D1844). Se induce una hiperpermeabilidad de la monocapa por medio de estimulacion con cininogeno, precalicrema y factor XII (en cada caso 100 nM). Se extraen muestras de medio cada 30 min desde la camara inferior y se determina la fluorescencia relativa, como parametro de las modificaciones de la permeabilidad macromolecular dependiendo del tiempo, con un fluonmetro. Los compuestos de acuerdo con la invencion se anaden antes de la adicion de las sustancias indicadas anteriormente. Las concentraciones habituales de los compuestos son 1 x 10'10 a 1 x 10'6 M.

b) Determinacion de la accion antitrombotica (in vivo )

b. 1) Modelo de trombosis arterial (trombosis inducida por cloruro de hierro(II)) en combinacion con tiempo de hemorragia en la oreja en el conejo

La actividad antitrombotica de los inhibidores de FXIa se somete a ensayo en un modelo de trombosis arterial. A este respecto se desencadena la formacion de trombos mediante dano qmmico de una zona de la arteria carotida en el conejo. De manera simultanea se determina el tiempo de hemorragia en la oreja.

Se anestesian conejos macho (Crl:KBL (NZW)BR, Charles River) con dieta normal con un peso de 2,2 - 2,5 kg de peso corporal mediante administracion intramuscular de xilacina y ketamina (Rompun, Bayer, 5 mg/kg y Ketavet, Pharmacia & Upjohn GmbH, 40 mg/kg de peso corporal). La anestesia se respalda ademas mediante administracion intravenosa de los mismos preparados (bolo: infusion continua) a traves de la vena de la oreja derecha.

Tras la exposicion de la arteria carotida derecha se genera el dano vascular de manera que un trozo de papel de filtro (10 mm x 10 mm) sobre una tira de Parafilm® (25 mm x 12 mm) se enrolla alrededor de la arteria carotida, sin alterar debido a ello el flujo sangumeo. El papel de filtro contiene 100 |il de una solucion al 13 % de cloruro de hierro(II) (Sigma) en agua. Tras 5 min se separa el papel de filtro y se lava el vaso dos veces con solucion acuosa al 0,9 % de cloruro de sodio. 30 min tras la lesion se disecciona la arteria carotida en la zona del dano y se extrae y se pesa el material trombotico eventualmente existente.

Las sustancias de prueba se administran por via intravenosa a traves de la vena femoral a los animales anestesiados o por via oral por medio de alimentacion forzada a los animales despiertos en cada caso 5 min o bien 2 h antes del dano.

El tiempo de hemorragia en la oreja se determina 2 min tras el dano de la arteria carotida. Para ello se rasura la oreja izquierda y se coloca un corte definido de 3 mm de longitud (numero de artmulo de Klinge 10-150-10, Martin, Tuttlingen, Alemania) de manera paralela al eje longitudinal de la oreja. A este respecto se presta atencion a no lesionar ningun vaso visible. La sangre que sale eventualmente se absorbe en intervalos de 15 segundos con trozos de papel de filtro pesados de manera precisa, sin tocar directamente la herida. El tiempo de hemorragia se calcula como el intervalo de tiempo desde la colocacion del corte hasta el momento en el que ya no es detectable sangre en el papel de filtro. El volumen de sangre que ha salido se calcula tras pesada de los trozos de papel de filtro.

c) Determinacion de la accion sobre la extravasacion/formacion de edema y/o neovascularizacion en el ojo (in vivo )

c.1) Ensayo de la actividad de sustancias en el modelo de neovascularizacion coroidea inducida por laser Este estudio sirve para someter a estudio la actividad de una sustancia de prueba sobre la reduccion de la extravasacion/formacion de edema y/o la neovascularizacion coroidea en el modelo de rata de la neovascularizacion coroidea inducida por laser.

Para ello se seleccionan ratas pigmentadas de la especie Brown-Norway, que no presentan smtomas de enfermedades oftalmologicas, y se asignan a grupos de tratamiento segun el principio aleatorio. En el dfa 0 se narcotizan los animales por medio de inyeccion intraperitoneal (15 mg/kg de xilacina y 80 mg/kg de ketamina). Tras la instilacion de una gota de una solucion al 0,5 % de tropicamida para la dilatacion de las pupilas se desencadena la neovascularizacion coroidea por medio de un fotocoagulador de laser de argon de 532 nm en seis sitios definidos alrededor del nervio optico (50-75 |im de diametro, 150 mW de intensidad, 100 ms de duracion). La sustancia de prueba y el vehnculo correspondiente (por ejemplo PBS, solucion isotonica de cloruro de sodio) se administran o bien sistemicamente por via oral o bien por via intraperitoneal o localmente en el ojo mediante multiple administracion como gotas oculares o bien inyeccion intravttrea. El peso corporal de todos los animales se determina antes del inicio del estudio y a continuacion diariamente durante el estudio.

En el dfa 21 se realiza una angiograffa por medio de un retinografo de fluorescencia (por ejemplo Kowe, HRA). En narcosis y tras una nueva dilatacion de la pupila se inyecta un colorante de fluorescema sodica al 10 % por via subcutanea (s.c.). 2-10 min mas tarde se registran imagenes del fondo de ojo. La intensidad de la extravasacion/del edema, representada mediante la fuga de fluorescema, se evalua por de dos a tres observadores ciegos y se clasifica en grados de gravedad de 0 (ninguna extravasacion) a 3 (fuerte coloracion a traves de la propia lesion). Tras la muerte de los animales en el dfa 23 se extraen los ojos y se fijan en solucion al 4 % de paraformaldehndo durante una hora a temperatura ambiente. Tras un paso de lavado se cristaliza cuidadosamente la retina y se colorea el complejo coroideoescleral con un anticuerpo anti FITC-isolectina B4 y a continuacion se coloca de manera plana sobre un portaobjetos. Los preparados asf obtenidos se evaluan por medio de un microscopio de fluorescencia (Apotom, Zeiss) con una longitud de onda de excitacion de 488 nm. La superficie o bien el volumen de la neovascularizacion coroidea (en |im2 o bien |im3) se calcula mediante analisis morfometrico por medio del software Axiovision 4,6.

c.2) Ensayo de la actividad de sustancias en el modelo de retinopatia inducida por oxigeno

Se mostro que una retinopatia inducida por oxfgeno representa un modelo animal valioso para el estudio de la angiogenesis retiniana patologica. Este modelo se basa en la observacion de que una hiperoxia durante el desarrollo postnatal temprano en la retina conduce a la detencion o a la ralentizacion del crecimiento de vasos sangumeos retinianos normales. Tan pronto como los animales volvieron tras una fase de hiperoxia de 7 dfas al aire ambiente normoxico, es esto sinonimo de una relativa hipoxia, dado que en la retina faltan los vasos normales que son necesarios para garantizar un suministro suficiente del tejido neural en condiciones normoxicas. La situacion isquemica generada debido a ello conduce a la neovascularizacion anomala que muestra algunas similitudes con la neovascularizacion fisiopatologica en enfermedades oculares tal como AMD humeda. Ademas, la neovascularizacion producida es muy reproducible, cuantificable y un importante parametro para el estudio de los mecanismos patologicos y posibles tratamientos de las mas diversas formas de enfermedades de la retina.

El objetivo de este estudio es estudiar la actividad de dosis administradas diariamente de manera sistemica del compuesto de prueba sobre el crecimiento de los vasos retinianos en el modelo de retinopatia inducida por oxfgeno. Neonatos de ratones C57B1 / 6 y sus madres se exponen en el dfa 7 postnatal (PD7) a una hiperoxia (70 % de oxfgeno) durante 5 dfas. A partir de PD12, se mantienen los ratones en condiciones normoxicas (aire ambiente, 21 % de oxfgeno) hasta el PD17. Desde el dfa 12 hasta el dfa 17 se tratan los ratones diariamente con la sustancia de prueba o el correspondiente vehnculo. En el dfa 17 se narcotizan todos los ratones con isofluran y a continuacion se sacrifican mediante desnucamiento. Los ojos se extraen y se fijan en un 4 % de formalina. Tras el lavado en solucion de cloruro de sodio tamponada con fosfato se prepara la retina, se genera un preparado plano de ello y se colorea este con anticuerpo anti-isolectina B4. La cuantificacion de los vasos que crecen de nuevo se realiza usando un Zeiss ApoTome.

C) Ejemplos de realizacion de composiciones farmaceuticas

Las sustancias de acuerdo con la invencion se pueden convertir en preparaciones farmaceuticas de la siguiente forma:

Comprimido:

Composicion:

100 mg del compuesto del ejemplo 1, 50 mg de lactosa (monohidrato), 50 mg de almidon de mafz, 10 mg de polivinilpirrolidona (PVP 25) (empresa BASF, Alemania) y 2 mg de estearato de magnesio.

Peso del comprimido 212 mg. Diametro 8 mm, radio de curvatura 12 mm.

Preparacion:

La mezcla del compuesto del ejemplo 1, lactosa y almidon se granula con una solucion al 5 % (m/m) de la PVP en agua. Despues del secado, el granulado se mezcla con el estearato de magnesio durante 5 min. Esta mezcla se comprime con una prensa de preparacion de comprimidos convencional (vease anteriormente el formato del comprimido).

Suspension oral:

Composicion:

1000 mg del compuesto del ejemplo 1, 1000 mg de etanol (96 %), 400 mg de Rhodigel (goma xantana) (empresa FMC, EE.UU.) y 99 g de agua.

Una monodosis de 100 mg del compuesto de acuerdo con la invencion corresponde a 10 ml de suspension oral. Preparacion:

El Rhodigel se suspende en etanol, se anade el compuesto del ejemplo 1 a la suspension. El agua se adiciona mientras se agita. La mezcla se agita durante aprox. 6 horas hasta que se completa el hinchamiento del Rhodigel. Solucion o suspension para la administracion topica en el ojo (gotas oculares):

Una preparacion farmaceutica esteril para la administracion topica en el ojo puede prepararse mediante reconstitucion de un liofilizado del compuesto de acuerdo con la invencion en solucion esteril de cloruro de sodio. Como conservante para una solucion o suspension de este tipo es adecuado, por ejemplo, cloruro de benzalconio, tiomersal o nitrato de fenilmercurio en un intervalo de concentracion del 0,001 al 1 por ciento en peso.

Solucion o suspension para la administracion topica en el ojo (gotas oculares):

Claims

REIVINDICACIONES

1. Compuesto de formula

en la que

A representa un enlace o -CH2-,

R1 representa hidrogeno o metilo,

en el que metilo puede estar sustituido con un sustituyente fluor,

R2 representa hidrogeno o metilo,

o

R3 representa hidrogeno, alquilo C1-C5, alcoxi Ci-C4, difluorometilo, trifluorometilo, 1,1 -difluoroetilo, 3,3,3-trifluoro-2-hidroxiprop-1-ilo, 3,3,3-trifluoro-2-metoxiprop-1-ilo, 3,3,3-trifluoro-2-etoxiprop-1-ilo, prop-2-en-1-ilo, ciclopropiloxi o ciclobutiloxi,

en el que alquilo puede estar sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que esta constituido por fluor, ciano, hidroxi, difluorometilo, trifluorometilo, metoxi, etoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, cicloalquilo C3-C6, oxoheterociclilo de 4 a 6 miembros, 1,4-dioxanilo, oxazolilo, fenilo y piridilo,

R4 representa hidrogeno,

R5 representa un grupo de formula

o

o

o

o

o

en la que # es el sitio de enlace al atomo de nitrogeno,

R8 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo o heterociclilo de 5 miembros,

en el que heterociclilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre s^ seleccionados del grupo que esta constituido por oxo, hidroxi, tioxo, sulfanilo, metilo, difluorometilo, trifluorometilo, 2-hidroxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo y 2-metoxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo, en el que metilo puede estar sustituido con un sustituyente metoxi,

R9 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R10 y R11 junto con los atomos de carbono a los que estan unidos forman un heterociclo de 5 miembros, en el que el heterociclo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre si seleccionados del grupo que esta constituido por oxo, cloro, hidroxi, hidroxicarbonilo, metilo, difluorometilo, trifluorometilo, 1,1,2,2,2-pentafluoroetilo, 2-hidroxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo y 2-metoxi-carbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo,

R12 representa hidrogeno, cloro, fluor, metilo o metoxi,

Y1 representa un atomo de nitrogeno o C-R15,

en el que

R15 representa hidrogeno, cloro, hidroxi, metoxi o alcoxicarbonilo C1-C3,

Y2 representa un atomo de nitrogeno o C-R16,

en el que

R16 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R13 representa hidrogeno, hidroxicarbonilo, hidroxicarbonilmetilo o fenilo,

en el que fenilo puede estar sustituido con 1 a 2 sustituyentes fluor,

R14 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

Y3 representa un atomo de nitrogeno o C-R19,

en el que

R19 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

Y4 representa un atomo de nitrogeno o C-R20,

en el que

R20 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R23 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R24 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R25 representa hidrogeno, hidroxicarbonilo o hidroxicarbonilmetilo,

R26 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R27 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alcoxicarbonilo C1-C3 o alquilaminocarbonilo C1-C3, en el que alquilaminocarbonilo puede estar sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que esta constituido por hidroxi, trifluorometilo, metoxi y trifluorometoxi,

R28 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

R31 representa hidrogeno o fluor,

R32 representa hidroxi o -NHR33,

en el que

R33 representa hidrogeno, metilo o etilo,

R34 representa hidrogeno o fluor,

R35 representa hidroxi o -NHR36,

en el que

R36 representa hidrogeno, metilo o etilo,

R37 representa hidrogeno o fluor,

R38 representa hidroxi o -NHR39,

en el que

R39 representa hidrogeno, metilo o etilo,

R40 representa hidrogeno o fluor,

R41 representa hidroxi o -NHR42,

en el que

R42 representa hidrogeno, metilo o etilo,

o una de sus sales, sus solvatos o de los solvatos de sus sales.

2. Compuesto segun la revindication 1, caracterizado porque

A representa un enlace o -CH2-,

R1 representa hidrogeno o metilo,

R2 representa hidrogeno o metilo,

o

R3 representa hidrogeno, metilo, etilo, n-propilo, 2-metil-prop-1-ilo, n-butilo o etoxi,

en el que ciclopropilo, ciclobutilo, ciclohexilo y oxetanilo pueden estar sustituidos con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre si seleccionados del grupo que esta constituido por fluor, hidroxi, metilo, etilo y metoxi, y

R4 representa hidrogeno,

R5 representa un grupo de formula

o

o

en la que # es el sitio de enlace al atomo de nitrogeno,

en el que oxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo y dihidrooxazolilo pueden estar sustituidos con 1 a 2 sustituyentes independientemente entre si seleccionados del grupo que esta constituido por oxo, hidroxi, tioxo, sulfanilo, metilo, trifluorometiloy 2-hidroxicarbonil-1,1,2,2-tetrafluoroetilo,

en el que metilo puede estar sustituido con un sustituyente metoxi,

R9 representa hidrogeno, cloro, fluor o metilo,

Y1 representa un atomo de nitrogeno o C-R15,

en el que

R15 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

Y2 representa un atomo de nitrogeno o C-R16,

en el que

R16 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R13 representa hidrogeno o hidroxicarbonilo,

R14 representa hidrogeno o fluor,

Y3 representa un atomo de nitrogeno o C-R19,

en el que

R19 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

Y4 representa un atomo de nitrogeno o C-R20,

en el que

R20 representa hidrogeno, cloro, hidroxi o metoxi,

R17 representa hidrogeno o hidroxicarbonilo,

R18 representa hidrogeno o fluor,

R31 representa hidrogeno,

R32 representa hidroxi o -NHR33,

en el que

R33 representa hidrogeno,

R34 representa hidrogeno,

R35 representa hidroxi,

y

en el que el anillo de bencilo en 2,3-dihidro-1H-indazol-6-ilo, 1H-benzimidazol-6-ilo, indol-6-Mo, 2,3-dihidro-1H-indazol-5-ilo, 2,3-dihidro-1H-benzimidazol-5-ilo, indol-5-ilo, 1H-indazol-6-ilo y 1H-indazol-5-ilo puede estar sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que esta constituido porfluory metoxi,

R6 representa cloro,

R7 representa hidrogeno,

o una de sus sales, sus solvatos o de los solvatos de sus sales.

3. Compuesto segun una de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque

A representa un enlace o -CH²-,

R1 representa hidrogeno,

R2 representa hidrogeno,

o

R3 representa hidrogeno, etilo o 2-metil-prop-1-ilo,

en el que etilo puede estar sustituido con un sustituyente metoxi,

R4 representa hidrogeno,

R5 representa un grupo de formula

o

o

en la que # es el sitio de enlace al atomo de nitrogeno,

R8 representa hidroxicarbonilo, aminocarbonilo o oxadiazolilo,

en el que oxadiazolilo puede estar sustituido con un sustituyente oxo,

R9 representa hidrogeno o fluor,

Y1 representa C-R15,

en el que

R15 representa hidrogeno,

Y2 representa un atomo de nitrogeno,

R13 representa hidrogeno,

R14 representa hidrogeno,

Y3 representa C-R19,

en el que

R19 representa hidrogeno,

Y4 representa un atomo de nitrogeno,

R17 representa hidrogeno,

R18 representa hidrogeno,

R31 representa hidrogeno,

R32 representa hidroxi o -NHR33,

en el que

R33 representa hidrogeno,

R34 representa hidrogeno,

R35 representa hidroxi,

o

R6 representa cloro,

R7 representa hidrogeno,

o una de sus sales, sus solvatos o de los solvatos de sus sales.

4. Procedimiento para la preparation de un compuesto de formula (I) o una de sus sales, sus solvatos o de los solvatos de sus sales segun la reivindicacion 1, caracterizado porque o bien

[A] un compuesto de formula

en la que

A, R1, R2, R3, R4, R6, R7 y R9 tienen el significado indicado en la reivindicacion 1 y

R29 representa terc-butilo,

se hace reaccionar con un acido para dar un compuesto de formula

en la que

R8 representa hidroxicarbonilo,

o

[B] un compuesto de formula

en la que

R29 representa metilo o etilo,

se hace reaccionar con una base para dar un compuesto de formula

en la que

R8 representa hidroxicarbonilo,

o

[C] un compuesto de formula

en la que

A, R1, R2, R3, R6y R7 tienen el significado indicado en la reivindicacion 1,

se hace reaccionar con un compuesto de formula

en la que

R4y R5 tienen el significado indicado en la reivindicacion 1,

en presencia de un reactivo de deshidratacion para dar un compuesto de formula (I).

5. Compuesto segun una de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades.

6. Uso de un compuesto segun una de las reivindicaciones 1 a 3 para la preparacion de un farmaco para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades.

7. Uso de un compuesto segun una de las reivindicaciones 1 a 3 para la preparacion de un farmaco para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades tromboticas o bien tromboembolicas.

8. Uso de un compuesto segun una de las reivindicaciones 1 a 3 para la preparacion de un farmaco para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades oftalmologicas.

9. Uso de un compuesto segun una de las reivindicaciones 1 a 3 para la preparacion de un farmaco para el tratamiento y/o la profilaxis de angioedema hereditario o enfermedades inflamatorias del intestino, tal como enfermedad de Crohn o colitis ulcerosa.

10. Farmaco que contiene un compuesto segun una de las reivindicaciones 1 a 3 en combinacion con un coadyuvante inerte, no toxico, farmaceuticamente adecuado.

11. Farmaco segun la reivindicacion 10 para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades tromboticas o bien tromboembolicas.

12. Farmaco segun la reivindicacion 10 para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades oftalmologicas.

13. Farmaco segun la reivindicacion 10 para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de angioedema hereditario o enfermedades inflamatorias del intestino, tal como enfermedad de Crohn o Colitis ulcerosa.