ES2857524T3

ES2857524T3 - Parche vascular con matriz de seda y método de fabricación del mismo

Info

Publication number: ES2857524T3
Application number: ES16857625T
Authority: ES
Inventors: Hae-Yong Kweon; You-Young Jo; Kwang-Gill Lee; Kee-Young Kim
Original assignee: Korea Rural Development Administration
Current assignee: Korea Rural Development Administration
Priority date: 2015-10-21
Filing date: 2016-06-07
Publication date: 2021-09-29
Anticipated expiration: 2036-06-07
Also published as: KR101602791B1; US10772988B2; US20180264170A1; EP3365036B1; HUE053640T2; EP3365036A4; WO2017069367A1; EP3365036A1; JP2018536451A; CN108136074A

Abstract

Parche vascular que comprende una pieza (20, 30, 40) de una matriz de seda plana (10) producida a partir de gusanos de seda.

Description

DESCRIPCIÓN

Parche vascular con matriz de seda y método de fabricación del mismo

Campo técnico

[0001] La presente invención se refiere a un parche vascular que utiliza una matriz de seda y a un método de fabricación del mismo y, más en concreto, a un parche vascular que utiliza una matriz de seda y a un método de fabricación del mismo, donde el parche vascular es biocompatible, es eficaz para mantener el diámetro interior de los vasos sanguíneos y favorece el crecimiento de células endoteliales vasculares en un defecto vascular, a diferencia de los parches vasculares existentes.

Antecedentes de la técnica

[0002] Durante la cirugía oral y maxilofacial, pueden producirse lesiones vasculares en la disección del cuello, la extirpación o reconstrucción de un cáncer oral, un traumatismo maxilofacial o la eliminación quirúrgica de lesiones cercanas a los principales vasos sanguíneos. Los posibles tratamientos de las lesiones vasculares pueden incluir la ligadura de los vasos sanguíneos dañados o el cierre directo de los defectos vasculares. Sin embargo, cuando se ligan los vasos sanguíneos más grandes, como la arteria carótida, que suelen encontrarse al diseccionar el cuello, se informa de que se producen con gran frecuencia diversas complicaciones, como infartos cerebrales y similares. Además, en el caso de que una pared vascular con una lesión grave sea tratada a la fuerza mediante un cierre directo, el diámetro del vaso sanguíneo se estrecha, provocando indeseablemente un infarto cerebral debido a la oclusión vascular o complicaciones neurológicas debidas al deterioro de la función vascular. Por lo tanto, existe una necesidad fundamental de desarrollar métodos y materiales sencillos para el tratamiento de los vasos sanguíneos dañados con el fin de mantener sus funciones y regenerar los defectos vasculares.

[0003] Se ha utilizado un parche vascular en los daños cardiovasculares para disminuir las complicaciones como la oclusión vascular causada por una reducción del diámetro del vaso sanguíneo debido al cierre directo. Se ha informado acerca de numerosos resultados que comparan el tratamiento del daño vascular mediante cierre directo y el tratamiento del daño vascular utilizando un parche vascular, y predominan los informes en los que se muestran mejores resultados con el tratamiento mediante un parche vascular.

[0004] Sin embargo, los parches vasculares convencionales fabricados con polímeros sintéticos (PET, ePTFE) o Gore-Tex provocan una obstrucción vascular por trombosis y también calcificación debido a la bioincompatibilidad, lo que imposibilita el desempeño de las funciones vasculares durante un largo periodo de tiempo. Asimismo, son materiales no degradables y presentan una baja biocompatibilidad, provocando indeseablemente inflamación o necrosis tisular. Además, estos parches vasculares son caros y resultan difíciles de aplicar en los vasos sanguíneos relativamente finos de las zonas orales y maxilofaciales debido a que están fabricados a medida para aplicaciones cardiovasculares.

[0005] Por consiguiente, se están investigando parches vasculares que estén fabricados a partir de materiales naturales, sean biocompatibles y puedan conservar la morfología de los vasos sanguíneos sin crisis vasooclusiva.

[0006] Entre las técnicas relacionadas se incluye una presentada en un simposio en 2003 por la Sociedad Coreana de Biotecnología y Bioingeniería (Desarrollo de parche vascular utilizando células madre mesenquimales y matriz biocompatible), y la publicación de solicitud de patente coreana n.° 10-2013-0051602 («3D Silk fibroin fiber characterized in dermal substitution and method of preparation for the same»). El documento de patente US 2012/0171256 da a conocer sistemas de material de seda electrohilado para la curación de heridas.

Exposición de la invención

Problema técnico

[0007] Por consiguiente, un objeto de la presente invención es proporcionar un parche vascular utilizando una matriz de seda y un método de fabricación del mismo, donde el parche vascular está fabricado a partir de un material biocompatible y, por lo tanto, presenta una baja reacción a cuerpos extraños en tejido in vivo, y puede desarrollar células endoteliales sin ninguna reacción inflamatoria para regenerar de esta manera nuevas paredes vasculares, en comparación con los parches vasculares existentes, y también puede reducirse el estrechamiento del diámetro interior del vaso sanguíneo, manteniendo de esta manera el índice de flujo sanguíneo y el diámetro interior del vaso sanguíneo.

[0008] Otro objeto de la presente invención es proporcionar un parche vascular utilizando una matriz de seda y un método de fabricación del mismo, donde el proceso de fabricación es sencillo y, por consiguiente, se puede reducir el coste de fabricación en comparación con la fabricación de parches vasculares típicos.

[0009] El problema técnico según la presente invención no está limitado a los objetos anteriores, y los expertos en la materia entenderán obviamente otros objetos no descritos en el presente documento a partir de la siguiente descripción.

Solución al problema

[0010] Para lograr los objetos anteriores, la presente invención proporciona un parche vascular de conformidad con las reivindicaciones utilizando una matriz de seda, que está configurada para someter una matriz de seda que tiene una sección transversal con un primer grosor, producida por gusanos de seda, a una división plana en dos o más piezas de matriz de seda que tienen una forma predeterminada con el primer grosor.

[0011] Además, la presente invención proporciona un parche vascular de conformidad con las reivindicaciones utilizando una matriz de seda, que está configurado para someter una matriz de seda que tiene una sección transversal con un primer grosor, producida por gusanos de seda, a una división de grosor en dos o más partes de matriz de seda que tienen un segundo grosor, que es inferior al primer grosor.

[0012] Además, la presente invención proporciona un parche vascular de conformidad con la reivindicaciones utilizando una matriz de seda, que está configurado para someter una matriz de seda que tiene una sección transversal con un primer grosor, producida por gusanos de seda, a una división plana en dos o más piezas de matriz de seda que tienen una forma predeterminada con el primer grosor, y cada una de las piezas de matriz de seda que tienen el primer grosor se somete a una división de grosor en piezas de matriz de seda que tienen un segundo grosor, que es inferior al primer grosor.

Efectos ventajosos de la invención

[0013] Según la presente invención, el parche vascular no necesita retirarse en un proceso adicional después de haber sido utilizado para una sutura de un defecto vascular, puede mostrar una capacidad de cultivo celular excepcional y es eficaz para mantener el índice de flujo sanguíneo y el diámetro interior del vaso sanguíneo, a diferencia de los parches vasculares existentes.

[0014] Además, el método de fabricación del parche vascular puede reducir el coste de fabricación gracias al sencillo proceso de fabricación, en comparación con la fabricación de los parches vasculares típicos.

Breve descripción de los dibujos

[0015]

La FIG. 1 ilustra la producción de una matriz de seda para su uso en un parche vascular según la presente invención, a partir de gusanos de seda;

Las FIG. 2A y 2B ilustran los resultados de la observación visual de la morfología de la matriz de seda a diferentes grosores de 0,01 mm y 0,7 mm, respectivamente, utilizada para un parche vascular según la presente invención; La FIG. 3 ilustra el proceso de fabricación del parche vascular del ejemplo 1 según la presente invención;

La FIG. 4 ilustra el proceso de fabricación del parche vascular del ejemplo 2 según la presente invención;

La FIG. 5 ilustra el proceso de fabricación del parche vascular del ejemplo 3 según la presente invención;

La FIG. 6 ilustra imágenes de microscopía electrónica de barrido (SEM) de las morfologías de la superficie del parche vascular que utiliza la matriz de seda según la presente invención y el parche vascular de Gore-Tex utilizado como control;

La FIG. 7 ilustra las imágenes de sutura de los defectos vasculares utilizando el parche vascular de la invención, el parche vascular de Gore-Tex como control y el cierre directo como otro control;

La FIG. 8 es un gráfico que ilustra la velocidad sistólica máxima, una semana y tres semanas después de que se suturaran los defectos vasculares; y

La FIG. 9 ilustra las imágenes de sección transversal de los tejidos, dos semanas después de que se repararan los defectos vasculares utilizando el parche vascular de la invención, el parche vascular de Gore-Tex como control y el cierre directo como otro control;

Mejor modo para llevar a cabo la invención

[0016] A menos que se indique lo contrario, los significados de los términos, descripciones, etc., dados a conocer en la presente memoria pueden ser los utilizados normalmente en la técnica a la que pertenece la presente invención. En lo sucesivo, se proporcionará una descripción detallada de la presente invención.

[0017] Los parches vasculares artificiales convencionales están hechos principalmente de poliéster y Gore-Tex (material de PTFE). Un parche artificial debe aplicarse teniendo en cuenta el potencial de infección, el potencial de vasodilatación después de la anastomosis, la vasooclusión debido a trombosis, el sangrado a través de los huecos entre los materiales de sutura vascular, y las propiedades de los materiales operativos. Recientemente, W.L. Gore (Flagstaff, AZ, EE. UU.), ha desarrollado un parche de Gore-Tex, pero todavía no se ha informado sobre los resultados de su uso a largo plazo asociados a la expansión de los vasos sanguíneos o la hiperplasia neointimal, y además sufre toxicidad in vivo después de su uso a largo plazo o al permanecer como material extraño in vivo.

[0018] Por lo tanto, en la presente invención, se fabrica el parche vascular utilizando una matriz de seda, en el que se adopta un material biocompatible, no se produce ninguna reacción inflamatoria inmediata después de la aplicación in vivo, y se pueden mostrar excelentes efectos de adhesión y proliferación celular. A continuación, se encuentra una descripción del mismo, hecha con referencia a varios ejemplos.

[0019] A continuación, se especifica el método de fabricación de un parche vascular utilizando una matriz de seda del ejemplo 1 según la presente invención, como se ilustra en la FIG. 3.

1. Primera etapa: Preparación de piezas de matriz de seda que tienen un primer grosor

[0020] Una matriz de seda que tiene una sección transversal con un primer grosor, producida a partir de gusanos de seda, se somete a una división plana en dos o más piezas que tienen una forma adecuada, obteniendo así piezas de matriz de seda que tienen el primer grosor.

[0021] Cuando los gusanos de seda se convierten en gusanos de seda maduros, para protegerse, comienzan a transformarse en crisálidas hilando capullos. Cuando un gusano de seda se transforma en una crisálida, hila un capullo para hacer una envoltura de crisálida que tiene una forma redonda y alargada. La envoltura tiene forma ovalada y muestra varios colores dependiendo del tipo de gusano de seda, y ambos extremos de la misma son ligeramente puntiagudos y gruesos. Sin embargo, durante la formación de los capullos de los gusanos de seda, cuando se mueve una hoja en la que están colocados los gusanos de seda para alterar la formación de los capullos normales de los gusanos de seda, los gusanos de seda no hacen capullos. Artificialmente, se hace que los gusanos de seda hilen capullos en la hoja desplazando la hoja en la que están colocados los gusanos de seda, por lo que los capullos se hilan en forma de hoja plana, produciendo una matriz de seda.

[0022] En función de las características anteriores, como se muestra en la FIG. 1 según un modo de realización de la presente invención, los gusanos de seda se colocan en una hoja, y la hoja se inclina a una pendiente (15° a 30°) hasta un punto que se evita que los gusanos de seda se caigan de la hoja, de manera que los gusanos de seda se ven obligados a desplazarse sobre la hoja e hilan capullos, preparando de esta manera una matriz de seda (FIG. 2A y 2B), que tiene una sección transversal con un primer grosor, de interés en la presente invención, que se somete a una división plana en dos o más piezas que tienen una forma apropiada para que sean adecuadas para las aplicaciones deseadas, produciendo piezas de matriz de seda 20 que tienen el primer grosor, como se ilustra en la FIG. 3. En resumen, la matriz de seda que tiene una sección transversal con un primer grosor se somete a una división plana utilizando un cortador, como una cuchilla o tijeras, formando así las piezas de matriz de seda 20 que tienen el primer grosor y una forma adecuada.

[0023] Como se ilustra en la FIG. 2A, las piezas de matriz de seda 20 que tienen el primer grosor y la forma adecuada, obtenidas sometiendo la matriz de seda 10 que tiene el primer grosor a una división plana, se pueden utilizar sin cambios ya que la matriz de seda 10 que tiene el primer grosor se produce a un grosor adecuado para utilizarse como un parche vascular. Además, se puede llevar a cabo de forma adicional una compactación o tratamiento estéril y tratamiento químico, según sea necesario. Por ejemplo, se puede inhibir una trombosis mediante el uso de 4-hexilresorcinol, que es un componente antotrombótico.

[0024] En el caso en el que la hoja sobre la que se colocan los gusanos de seda se desplace para formar una matriz de seda plana, su desplazamiento puede realizarse de diferentes maneras. La hoja puede desplazarse de forma que se rote, se incline hacia arriba y hacia abajo repetidamente y/o hacia la izquierda y hacia la derecha, o vibre. De forma alternativa, la hoja puede desplazarse mediante una combinación de rotación e inclinación repetida hacia arriba y hacia abajo y/o hacia la izquierda y hacia la derecha. El número o velocidad de procesos de desplazamiento o inclinación puede ajustarse de forma adecuada para asegurar que la matriz de seda tenga la forma deseada.

[0025] La forma de la hoja sobre la que se colocan los gusanos de seda no está limitada. Se puede aplicar una forma circular o una forma rectangular. De forma alternativa, se puede aplicar cualquier forma mientras que los gusanos de seda no hilen capullos normalmente en respuesta al desplazamiento de la hoja.

[0026] En otra modificación, a continuación se especifica el método de fabricación de un parche vascular utilizando una matriz de seda del ejemplo 2 según la presente invención, como se ilustra en la FIG. 4.

1. Primera etapa: Preparación de partes de matriz de seda que tienen un segundo grosor

[0027] Una matriz de seda que tiene una sección transversal con un primer grosor, producida a partir de gusanos de seda, se somete a una división de grosor en dos o más partes que tienen un segundo grosor, que es inferior al primer grosor.

[0028] La matriz de seda 10 que tiene el primer grosor se produce a partir de gusanos de seda de manera que los gusanos de seda hilan capullos mientras se ven forzados a moverse sobre la hoja, como en la descripción de la FIG. 3. La matriz de seda 10 que tiene el primer grosor se puede configurar como se ilustra en la FIG. 2B, de manera que los hilos resultantes del hilado de capullos de los gusanos de seda se apilan en una dirección de altura para formar así diversos grosores (múltiples capas).

[0029] El primer grosor de la matriz de seda 10 puede variar dependiendo del número de gusanos de seda utilizados para preparar la matriz de seda y el periodo de tiempo que requieren los gusanos de seda para hilar capullos.

[0030] Como se muestra en la FIG. 4, cuando la matriz de seda 10 que tiene el primer grosor es gruesa, puede someterse a una división de grosor en dos o más partes que tienen un grosor adecuado para utilizarse en un parche vascular, formando así partes de matriz de seda 30 que tienen un segundo grosor. El segundo grosor es inferior al primer grosor debido a dicha división de grosor.

[0031] Las partes de matriz de seda 30 que tienen el segundo grosor se pueden utilizar sin cambios como parche vascular. De forma alternativa, se pueden utilizar partes de las partes de la matriz de seda 30 que tienen el segundo grosor ajustando su tamaño para que sea adecuado para algún uso final. Además, se puede llevar a cabo de forma adicional una compactación o tratamiento estéril y tratamiento químico, según sea necesario. Por ejemplo, se puede inhibir una trombosis mediante el uso de 4-hexilresorcinol, que es un componente antotrombótico.

[0032] En una modificación adicional, a continuación se especifica el método de fabricación de un parche vascular utilizando una matriz de seda del ejemplo 3 según la presente invención, como se ilustra en la FIG. 5.

[0033] Una matriz de seda que tiene una sección transversal con un primer grosor, producida a partir de gusanos de seda, se somete a una división plana en dos o más piezas que tienen una forma adecuada, formando así piezas de matriz de seda 20 que tienen el primer grosor.

[0034] En este caso, las piezas de matriz de seda 20 que tienen el primer grosor se forman de la misma manera que en la primera etapa de la descripción de la FIG. 3.

[0035] Cuando el primer grosor de las piezas de matriz de seda 20 formadas de esta manera es adecuado para utilizarse en un parche vascular, dichas piezas de matriz de seda se pueden utilizar sin cambios. En el caso en el que las piezas de matriz de seda sean gruesas y difíciles de utilizar, deben someterse adicionalmente a la siguiente segunda etapa para que tengan un grosor adecuado para parches vasculares. A continuación, se describe la segunda etapa. 2. Segunda etapa: Preparación de piezas de matriz de seda (parche vascular) que tienen un segundo grosor [0036] Se preparan piezas de matriz de seda 40 que tienen un segundo grosor, adecuadas para utilizarse como parche vascular.

[0037] Las piezas de matriz de seda 20 que tiene el primer grosor, obtenidas en la primera etapa, están configuradas como se ilustra en la FIG. 2B, de manera que los hilos resultantes del hilado de capullos de los gusanos de seda se apilan en una dirección de altura para formar así diversos grosores (múltiples capas).

[0038] El primer grosor de las piezas de matriz de seda 20 puede variar dependiendo del número de gusanos de seda utilizados para preparar la matriz de seda y el periodo de tiempo que requieren los gusanos de seda para hilar capullos.

[0039] Cuando las piezas de matriz de seda 20 que tienen el primer grosor son adecuadas para su uso en un parche vascular, se pueden utilizar sin cambios. Como se ilustra en la FIG. 5, en el caso en el que las piezas de matriz de seda sean gruesas, cada una de las piezas de matriz de seda que tiene el primer grosor, obtenidas en la primera etapa, se somete a una división de grosor en dos o más piezas que tienen un grosor adecuado para servir como parche vascular, produciedo piezas de matriz de seda 40 que tienen un segundo grosor. Como tal, el segundo grosor es inferior al primer grosor debido a la división de grosor.

[0040] Las piezas de matriz de seda 40 que tienen un segundo grosor se pueden utilizar sin cambios como parche vascular para cualquier propósito. Además, se puede llevar a cabo de forma adicional una compactación o tratamiento estéril y tratamiento químico, según sea necesario. Por ejemplo, se puede inhibir una trombosis mediante el uso de 4-hexilresorcinol, que es un componente antotrombótico.

[0041] Se puede conseguir una mejor comprensión de la presente invención a través de los siguientes ejemplos y ejemplos de ensayos, que se exponen para ilustrar, pero no han de interpretarse como limitativos del alcance de la presente invención.

<Ejemplo 1> Fabricación de parche vascular 1 de la invención

[0042] Como se ilustra en la FIG. 1, 15 los gusanos de seda maduros se colocaron en una hoja, y la hoja se inclinó gradualmente a 20° con respecto al suelo. Tras una hora, la hoja se inclinó gradualmente de nuevo en la dirección opuesta. De esta manera, los gusanos de seda hilaron capullos mientras se movían, produciendo una matriz de seda 10 en la conformación mostrada en la FIG. 2A.

[0043] El proceso de inclinación anterior se llevó a cabo durante un día, se mantuvo el equilibrio durante dos días, y se realizó de nuevo el proceso de inclinación anterior, por el que se produjo una matriz de seda a partir de los gusanos de seda en aproximadamente tres días. La matriz de seda tenía un grosor de aproximadamente 0,01 mm.

[0044] Como se muestra en la FIG. 3, la matriz de seda 10 se cortó con unas tijeras para realizar una división plana en forma rectangular, formando de esta manera piezas de matriz de seda 20, que se esterilizaron después, fabricando así un parche vascular 1 según la presente invención.

<E¡emplo 2> Fabricación de parche vascular 2 de la invención

[0045] Como se ilustra en la FIG. 1, 30 los gusanos de seda maduros se colocaron en una hoja, y la hoja se inclinó gradualmente a 20° con respecto al suelo. Tras una hora, la hoja se inclinó gradualmente de nuevo en la dirección opuesta. De esta manera, los gusanos de seda hilaron capullos mientras se movían, produciendo una matriz de seda 10 en la conformación mostrada en la FIG. 2B.

[0046] El proceso de inclinación anterior se llevó a cabo durante un día, se mantuvo el equilibrio durante dos días, y se realizó de nuevo el proceso de inclinación anterior, por el que se produjo una matriz de seda a partir de los gusanos de seda en aproximadamente tres días. La matriz de seda tenía un grosor de aproximadamente 0,7 mm.

[0047] Como se muestra en la FIG. 4, se desprendió la matriz de seda 10 que tenía un grosor de 0,7 mm para realizar una división de grosor, formando de esta manera partes de matriz de seda 30 que tenían un grosor de 0,2 mm, que se esterilizaron después, fabricando de esta manera un parche vascular 2 según la presente invención.

<Ejemplo 3> Fabricación de parche vascular 3 de la invención

[0048] Como se ilustra en la FIG. 1, 30 los gusanos de seda maduros se colocaron en una hoja, y la hoja se inclinó gradualmente a 20° con respecto al suelo. Tras una hora, la hoja se inclinó gradualmente de nuevo en la dirección opuesta. De esta manera, los gusanos de seda hilaron capullos mientras se movían, produciendo una matriz de seda 10 en la conformación mostrada en la FIG. 2B.

[0049] El proceso de inclinación anterior se llevó a cabo durante un día, se mantuvo el equilibrio durante dos días, y se realizó de nuevo el proceso de inclinación anterior, por el que se produjo una matriz de seda a partir de los gusanos de seda en aproximadamente tres días. La matriz de seda tenía un grosor de aproximadamente 0,7 mm.

[0050] La matriz de seda se cortó para realizar una división plana en una forma rectangular, formando así piezas de matriz de seda 20.

[0051] Como se ilustra en la FIG. 5, se desprendieron las piezas de matriz de seda 20 que tenían un grosor de 0,7 mm para realizar una división de grosor, obteniendo de esta manera piezas de matriz de seda 40 que tenían un grosor de 0,2 mm, después de lo cual se sumergieron 10 g de las piezas de matriz de seda 40 durante 24 horas en una solución al 3 % de 4-hexilresorcinol como agente antitrombótico. Las piezas de matriz de seda 40 impregnadas con 4-hexilresorcinol se colocaron en un horno de secado a 45 °C para volatilizar el alcohol. Después de la evaporación del alcohol, la matriz de seda resultante presentaba un peso de 10,3 g, seguido de un proceso de esterilización (gas de óxido de etileno (EO)), lo que dio lugar al parche 3 según la presente invención.

<Ejemplo 4> Fabricación de parche vascular 4 de la invención

[0052] Se fabricó un parche vascular 4 según la presente invención de la misma manera que en el ejemplo 3, con la excepción de que se formaron piezas de matriz de seda 40 que tenían un grosor de 0,3 mm.

<Ejemplo 5> Fabricación de parche vascular 5 de la invención

[0053] Se fabricó un parche vascular 5 según la presente invención de la misma manera que en el ejemplo 3, con la excepción de que se formaron piezas de matriz de seda 40 que tenían un grosor de 0,5 mm.

<Ejemplo de ensayo 1> Evaluación de la morfología de la matriz de seda utilizada para el parche vascular de la invención

1. Método del ensayo

[0054] Para evaluar la morfología de la matriz de seda de las FIG. 2A y 2B, esta se observó con un aumento predeterminado utilizando SEM, y se observó como control la superficie de un parche vascular de Gore-Tex comercialmente disponible.

2. Resultados del ensayo

[0055] Como se ilustra en la FIG. 6, cuando se observaron mediante SEM las morfologías de los parches vasculares de la presente invención y el control, se encontró una diferencia morfológica con respecto a la forma de los poros o la superficie de la membrana. Por lo que respecta al parche vascular hecho de Gore-Tex, en la superficie de la membrana plana se observaron poros que tenían un intervalo y un tamalo predeterminados.

[0056] Sin embargo, la superficie del parche vascular de la presente invención se configuró de manera que las hebras de fibra que tenían diversos grosores se apilaron irregularmente de forma repetida y se pudieron observar muchos poros entre las hebras de fibra apiladas. Por lo tanto, el parche vascular de la presente invención presenta una estructura porosa y, por consiguiente, se considera eficaz para mantener el índice de flujo sanguíneo y el diámetro interior de los vasos sanguíneos.

<Ejemplo de ensayo 2> Medición de las propiedades mecánicas del parche vascular de la invención

[0057] Para medir las propiedades mecánicas del parche vascular con matriz de seda según la presente invención, se realizó una prueba de tracción utilizando una máquina de ensayo universal (DAEYEONG, Corea).

[0058] Se fabricaron muestras analíticas a un tamaño de 2,5 x 0,07 mm (ancho x largo), y la membrana fabricada se estiró a una longitud de ensayo de 10 mm y a una velocidad de 10 mm/min.

[0059] Los resultados se muestran a continuación en la tabla 1.

T l 11

[0060] Como se desprende de la tabla 1, los parches vasculares de la presente invención presentaron una resistencia a la tracción y una elongación diferentes dependiendo del grosor, y la resistencia a la tracción y la elongación del parche vascular aumentaron al aumentar el grosor del mismo.

<Ejemplo de ensayo 3> Análisis ultrasónico

1. Método del ensayo

(1) Sutura del defecto vascular

[0061] El defecto vascular se suturó utilizando el parche vascular del ejemplo 3. Este ensayo se llevó a cabo utilizando siete ratas blancas. Específicamente, se rasuró la parte de la arteria carótida derecha de cada rata blanca y se desinfectó la piel. En la parte expuesta de la arteria carótida derecha, se formó un defecto vascular con un tamaño de 0,5 x 1 mm utilizando microtijeras. El defecto formado se reconstruyó utilizando el parche vascular anterior, y el parche vascular se fijó utilizando monofilamento de nailon 10-0 (Ailee, Corea).

[0062] Como control 1, se utilizó un parche vascular de Gore-Tex comercialmente disponible, y se suturó un defecto vascular de la misma manera que en el caso anterior.

[0063] Como control 2, se suturó un defecto vascular mediante cierre directo utilizando monofilamento de nailon 10-0 (Ailee, Corea).

[0064] En la FIG. 7 se ilustran las imágenes de sutura de los defectos vasculares mediante procesos individuales. (2) Análisis ultrasónico

[0065] Para evaluar la circulación y la estenosis del defecto vascular suturado, se realizó un análisis ultrasónico. Como factor ultrasónico, se midió la velocidad sistólica máxima (PSV, por sus siglas en inglés), y se evaluó, por tanto, si se logró la regeneración funcional vascular.

2. Resultados del ensayo

[0066] La FIG. 8 es un gráfico que ilustra los valores de PSV, una semana y tres semanas después de que se suturaran los defectos vasculares. En el gráfico de la FIG. 8, una semana después de que se suturaran los defectos vasculares, se midió que la PSV era de 37,26 ± 7,26 cm/s cuando se utilizaba el parche vascular de la invención, 32,74 ± 10,50 cm/s cuando se utilizaba el parche vascular de Gore-Tex como control 1, y 75,23 ± 27,05 cm/s con el cierre directo. Según los resultados del análisis de varianza (ANOVA), las diferencias entre los tres grupos resultaron ser estadísticamente significativas (p=0,007).

[0067] En el gráfico de la FIG. 8, tres semanas después de que se suturaran los defectos vasculares, se midió que la PSV era de 35,67 ± 2,62 cm/s para el parche vascular de la invención, 35,36 ± 7,27 cm/s para el parche vascular de Gore-Tex como control 1, y 48,36 ± 6,15 cm/s con el cierre directo como control 2. Según los resultados del análisis de varianza (ANOVA), las diferencias entre los tres grupos resultaron ser estadísticamente significativas (p=0,007).

[0068] Después de trasplantar el parche vascular en la carótida externa de la rata blanca, se midieron los cambios de PSV del vaso sanguíneo. En conclusión, el parche vascular de la presente invención presentó un cambio de PSV (cm/s) del 20 % o menos, en concreto entre el 1 % y el 20 %. Por lo tanto, el parche vascular con la matriz de seda según la presente invención mostró que el cambio de PSV se mantuvo de manera estable.

<Ejemplo de ensayo 4> Ensayo histológico

1. Método del ensayo

[0069] Se realizó un análisis histológico para medir el grosor de la pared vascular del defecto vascular suturado y el diámetro del vaso sanguíneo y para evaluar si el parche vascular provocaba una reacción de cuerpo extraño. Específicamente, se ligaron ambos lados del vaso sanguíneo para mantener el diámetro del vaso sanguíneo, y se tomaron muestras de ambos vasos bajo la condición de que la sangre quedara retenida en el vaso. Las muestras vasculares obtenidas de esta manera se inmovilizaron con alcohol. Las muestras vasculares se tiñeron con hematoxilina y eosina. Se observaron las secciones transversales de las muestras inmovilizadas y teñidas. La FIG. 9 ilustra las secciones transversales de los tejidos dos semanas después de la sutura vascular utilizando el parche vascular de la invención (ejemplo 3), el parche de Gore-Tex como control 1, y el cierre directo como control 2.

[0070] 2. Resultados del ensayo

[0071] Como se ilustra en la FIG. 9, según los resultados histológicos, no se observó ninguna reacción de cuerpo extraño alrededor del parche vascular que utiliza la matriz de seda según la presente invención. La pared vascular reconstruida no se distinguía específicamente del tejido periférico, y el diámetro interior del vaso sanguíneo se mantuvo. Con respecto al control con el parche vascular de Gore-Tex, el diámetro interior del vaso sanguíneo no se modificó mucho, pero se produjo un sobrecrecimiento de la pared interna del vaso sanguíneo en algunas muestras. Con respecto al control mediante cierre directo, el diámetro interior del vaso sanguíneo se estrechó considerablemente.

[0072] Por lo tanto, el parche vascular según la presente invención redujo considerablemente el sobrecrecimiento de la pared vascular y el estrechamiento del diámetro interno del vaso sanguíneo, y resultó por lo tanto eficaz para mantener el índice de flujo sanguíneo y el diámetro interior del vaso sanguíneo, en comparación con el uso de un parche vascular de Gore-Tex convencional o el cierre directo.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Parche vascular que comprende una pieza (20, 30, 40) de una matriz de seda plana (10) producida a partir de gusanos de seda.

2. Parche vascular según la reivindicación 1, donde la pieza (20, 30, 40) de matriz de seda plana (10) está esterilizada.

3. Parche vascular según la reivindicación 1 o 2, donde la pieza (20, 30, 40) de matriz de seda plana (10) está compactada.

4. Método de fabricación de un parche vascular, que comprende:

una primera etapa consistente en preparar una matriz de seda plana (10) que tiene una sección transversal de un primer grosor a partir de gusanos de seda, y

una segunda etapa consistente en someter la matriz de seda plana (10) a una división plana en dos o más piezas (20) de matriz de seda (10) que tienen una forma predeterminada o a una división de grosor en dos o más piezas (30, 40) de matriz de seda.

5. Método según la reivindicación 4, donde la división de la matriz de seda plana (10) es una división plana en dos o más piezas (20) de matriz de seda plana (10), donde cada pieza (20) presenta el primer grosor.

6. Método según la reivindicación 4, donde la división de la matriz de seda plana (10) es una división de grosor en dos o más piezas (30) de matriz de seda plana (10), donde cada pieza (30) presenta un segundo grosor que es inferior al primer grosor.

7. Método según la reivindicación 5, donde el método comprende además una tercera etapa consistente en someter cada una de las piezas (20) de matriz de seda plana (10) a una división de grosor en dos o más piezas (40) de matriz de seda plana (10) que tienen un segundo grosor, donde el segundo grosor es inferior al primer grosor

8. Método según cualquiera de las reivindicaciones 4 a 7, que comprende además una etapa consistente en compactar las piezas (20, 30, 40) de matriz de seda plana (10) obtenidas en las etapas anteriores.

9. Método de cualquiera de las reivindicaciones 4 a 8, que comprende además una etapa consistente en realizar al menos un proceso de esterilización, antes o después de cada etapa.