ES2874882T3 - Derivados de carboxamida - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula (I): **(Ver fórmula)** o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde R1 es alquilo (C3-C6) o cicloalquilo (C3-C6); R2 es metilo; R3 se selecciona entre alquilo ramificado (C6-C10), alquenilo ramificado (C6-C10), cicloalquenilo (C5-C8), cicloalquilo (C5- C8) o Het; donde el cicloalquenilo (C5-C8) o cicloalquilo (C5-C8) no está sustituido o está sustituido con uno, dos, tres o cuatro sustituyentes R4; y donde Het está sustituido con uno, dos, tres o cuatro sustituyentes R4; cada R4 se selecciona independientemente entre halo, alquilo (C1-C4), haloalquilo (C1-C4), alcoxi (C1-C4) o haloalcoxi (C1-C4); o dos grupos R4, cuando están unidos al mismo átomo de carbono, se pueden considerar conjuntamente con el átomo de carbono al cual están unidos para formar un anillo de ciclopentilo, tetrahidrofurano o dioxolano; donde Het es un anillo heterocíclico totalmente saturado o parcialmente saturado de 5 o 6 miembros que comprende a) 1 átomo de oxígeno en la posición 2 o 3, o b) 2 átomos de oxígeno en las posiciones 2 y 5, o 2 y 6, donde la numeración se proporciona respecto al punto de unión; y el cicloalquilo (C5-C8) puede ser un anillo monocíclico o un sistema anular con puente que contiene 5, 6, 7 u 8 átomos de carbono.

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados de carboxamida

Campo de la invención

La presente invención describe compuestos orgánicos útiles en terapia. Los compuestos presentan propiedades como inhibidores selectivos de Smurf-1 y, por lo tanto, pueden ser útiles en el tratamiento de una serie de trastornos tales como, por ejemplo, hipertensión arterial pulmonar, glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), proteinuria, curación de heridas, así como también EPOC y asma.

Antecedentes de la invención

Smurf-1 (siglas en inglés referentes al factor regulador de la ubiquitinación de Smad 1) es un miembro de la familia HECT de ligasas de la ubiquitina E3 que marcan sustratos específicos para la degradación proteolítica mediante la vía proteolítica dependiente de la ubiquitina. Los sustratos principales de Smurf-1 incluyen RhoA, el receptor de la proteína morfogenética ósea (BMP) (BMPR) 1 y 2, smadl y 5, el factor asociado al receptor de TNFa (TRAF) 6 y myD88 (Andrews, P.S. et al. Assay Drug Dev. Technol. 2010). Teniendo en cuenta la lista de sustratos, Smurf-1 ejerce funciones establecidas en la regulación de la señalización de BMP (Chen, D et al. Growth Factors, 2004), la polaridad de células neuronales (Stiess, M. y Bradke, F. Neuron, 2011), la migración celular (Huang, C. Cell Adh. Migr. 2010), la invasión de células tumorales (Sahai, E. et al. JCB, 2007), la autofagia mitocondrial (Orvedahl, A. Nature, 2011), la proliferación de células madre mesenquimales (Zhao, L. et al. J. Bone Miner. Res. 2010) y la transición epitelialmesenquimal (EMT) (Ozdamar, B et al. Science 2005).

La hipertensión arterial pulmonar (HAP) es una enfermedad agresiva y compleja de múltiples etiologías que puede resultar mortal, y se caracteriza por una vasculopatía pulmonar progresiva que conduce a una insuficiencia/hipertrofia del ventrículo derecho y, en la mayoría de los casos, a una muerte prematura. Las terapias farmacológicas actuales son paliativas. Por ejemplo, el documento WO2009/011850 describe compuestos que son eficaces para el tratamiento de ciertas afecciones y enfermedades, especialmente afecciones y enfermedades inflamatorias. Aunque se han observado mejoras en la esperanza de vida, las terapias actuales, que se centran en alterar los elementos vasoconstructivos de la enfermedad, no detienen ni invierten el avance de la enfermedad, y el trasplante (de los dos pulmones o del pulmón-corazón) sigue siendo el único tratamiento curativo. Teniendo en cuenta el efecto limitado de las clases de tratamiento actuales, se necesitan terapias novedosas que se dirijan a la remodelación vascular pulmonar progresiva subyacente de la HAP.

Las mutaciones de la línea germinal en el gen del receptor de la proteína morfogenética ósea II (BMPR-II), que es un receptor de la superfamilia del factor de crecimiento transformante p (TGF-p), son prevalentes en un setenta por ciento de las formas heredables y algunas formas esporádicas de la HAP idiopática (HAPI). Las proteínas morfogenéticas óseas son moléculas de señalización que pertenecen a la superfamilia de TGF- p. Las proteínas morfogenéticas óseas se identificaron originariamente por su capacidad para inducir la formación de cartílago y hueso, y posteriormente se identificaron por ser proteínas multifuncionales que regulan un amplio espectro de funciones tales como la proliferación, diferenciación y apoptosis en una gran variedad de tipos de células, que incluyen osteoblastos, células epiteliales, neuronas, células inmunitarias y células de músculos lisos. Hasta la fecha, se han identificado > 20 BMP de mamífero, pero solo tres receptores de tipo I y tres de tipo II (BMPR-I y BMPR-II, respectivamente) que son capaces de unirse a BMP han sido clonados en mamíferos. Las proteínas morfogenéticas óseas son sintetizadas y secretadas por varios tipos de células, incluidas las células endoteliales y células de músculos lisos vasculares pulmonares. Además de mutaciones en BMPR-I y -II, los pulmones de pacientes con HAP no familiar presentan unos niveles considerablemente reducidos de BMPR-1 y -II vascular, lo que implica que la señalización alterada de BMP desempeña un papel central en muchas formas de HAP (Du, L et al. N. Eng. J. Med, 2003). La restauración de la señalización de BMP en la vasculatura pulmonar de pacientes con HAP es, por consiguiente, de interés considerable en el desarrollo de agentes terapéuticos novedosos contra la remodelación para el tratamiento de HAP.

Se ha demostrado que Smurf-1 regula la degradación de BMPR-I, -II y smad1 y 5 en varios tipos de células, que incluyen osteoblastos (Zhao, M et al. JBC, 2003), mioblastos (Ying, SX et al. JBC, 2003), epitelio pulmonar (Shi W, et al. Am. J. Physiol. Cell. Mol. Physiol, 2004), tejido neuronal (Kallan, T et al. Mol. Cell. Biol, 2009) y células endocardíacas (Towsend, TA, et al. Cells Tissues Organs, 2011). Recientemente, han surgido los primeros datos que ponen de manifiesto la función de Smurf-1 en la HAP, donde se observaron unos mayores niveles de Smurf-1 en modelos preclínicos de monocrotalina e hipoxia crónica in-vivo para HAP y se asociaron con una reducción de la expresión de BMPR1 y 2 (Murakami, K, et al. Exp. Biol. Med, 2010 y Yang, J. et al. Circ. Res, 2010).

Compendio de la invención

Se siguen necesitando nuevos tratamientos y terapias para la hipertensión arterial pulmonar. La invención proporciona compuestos, sales o cocristales farmacéuticamente aceptables de estos, composiciones farmacéuticas de estos y combinaciones de estos, donde los compuestos son inhibidores de Smurf-1.

De acuerdo con un primer aspecto de la invención, la Realización 1, se proporciona un compuesto de fórmula (I):

o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este, donde

R1 es alquilo (C³-C⁶) o cicloalquilo (C³-C⁶);

R2 es metilo;

R3 se selecciona entre alquilo ramificado (C⁶-C¹⁰), alquenilo ramificado (C⁶-C¹⁰), cicloalquenilo (C5-Cs), cicloalquilo (C⁵-Cs) o Het; donde el cicloalquenilo (Cs-Cs) o cicloalquilo (Cs-Cs) no está sustituido o está sustituido con uno, dos, tres o cuatro sustituyentes R4; y donde Het está sustituido con uno, dos, tres o cuatro sustituyentes R4;

cada R4 se selecciona independientemente entre halo, alquilo (C¹-C⁴), haloalquilo (C¹-C⁴), alcoxi (C¹-C⁴) o haloalcoxi (C¹-C⁴); o

dos grupos R4, cuando están unidos al mismo átomo de carbono, se pueden considerar conjuntamente con el átomo de carbono al cual están unidos para formar un anillo de ciclopentilo, tetrahidrofurano o dioxolano; donde Het es un anillo heterocíclico totalmente saturado o parcialmente saturado de 5 o 6 miembros que comprende a) 1 átomo de oxígeno en la posición 2 o 3, o b) 2 átomos de oxígeno en las posiciones 2 y 5, o 2 y 6, donde la numeración se proporciona respecto al punto de unión; y

el cicloalquilo (Cs-Cs) puede ser un anillo monocíclico o un sistema anular con puente que contiene 5, 6, 7 u S átomos de carbono.

En otra realización, se proporciona un compuesto de Fórmula (I) tal como se ha definido anteriormente o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

En otra realización, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con la definición de la fórmula (I), o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este o subfórmulas de este, y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables. En otra realización, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con la definición de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de este o subfórmulas de este, y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.

En otra realización, la invención proporciona un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de este o subfórmulas de este, para su uso en el tratamiento de un trastorno o enfermedad que se selecciona entre hipertensión pulmonar, incluida la hipertensión arterial pulmonar (HAP), fibrosis, artritis reumatoide, curación de fracturas, glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), proteinuria, curación de heridas, así como también EPOC y asma, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de acuerdo con la definición de la fórmula (I), o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este o subfórmulas de este o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de estas. En algunas realizaciones, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con la definición de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de este. En otras realizaciones, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con un subgénero de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de este. Otras realizaciones más proporcionan un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de este o subfórmulas de este, para su uso en el tratamiento de un trastorno o enfermedad que se selecciona entre glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), proteinuria, curación de heridas, Ep Oc y asma.

En otra realización, la invención proporciona una combinación, en particular una combinación farmacéutica, que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de acuerdo con la definición de la fórmula (I), o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este o subfórmulas de este, y uno o más agentes terapéuticamente activos.

En la presente se describen diversas realizaciones de la invención.

Descripción detallada

Por consiguiente, la invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este, tal como se ha descrito anteriormente en la presente como Realización 1.

Realización 2. Un compuesto de acuerdo con la Realización 1 o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este, donde R1 es isopropilo, ciclobutilo o ciclohexilo.

En otra realización. Un compuesto de acuerdo con la Realización 1 o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este, donde R1 es ciclohexilo.

Realización 3. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las Realizaciones precedentes o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este, donde R3 se selecciona entre 2,2-dimetilpentilo, 2,2-dimetilpent-2-enilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, tetrahidropiranilo, dihidropiranilo, dioxanilo, tetrahidrofuranilo, dioxolanilo y biciclo[2.2.2]octanilo; donde el anillo de ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexenilo o biciclo[2.2.2]octanilo no está sustituido o está sustituido con uno, dos, tres o cuatro sustituyentes R4; y donde el tetrahidropiranilo, dihidropiranilo, dioxanilo, tetrahidrofuranilo o dioxolanilo está sustituido con uno, dos, tres o cuatro sustituyentes R4;

cada R4 se selecciona independientemente entre halo, alquilo (C¹-C⁴), haloalquilo (C¹-C⁴), alcoxi (C¹-C⁴) o haloalcoxi (C¹-C⁴); o

dos grupos R4, cuando están unidos al mismo átomo de carbono, se pueden considerar conjuntamente con el átomo de carbono al cual están unidos para formar un anillo de tetrahidrofurano o dioxolano.

Realización 4. Un compuesto de acuerdo con cualquier Realización precedente o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este, donde R3 es

o

y m es 1,2, 3 o 4.

En otra realización. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las Realizaciones precedentes o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este, donde R3 es

(R4)m/~~Q ,

o C h

y m es 1,2, 3 o 4.

Realización 5. Un compuesto de acuerdo con cualquier Realización precedente o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este, donde cada R4 se selecciona independientemente entre metilo, isopropilo, tert-butilo y metoxi.

Realización 6. Un compuesto de fórmula (I), de acuerdo con la Realización 1, donde el compuesto se selecciona entre

Ejemplo 1

[N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4-isopropilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida];

Ejemplo 1.1

N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(6-etil-4-metilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida;

Ejemplo 1.2

N-(2-C¡dohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(6,6-d¡met¡lddohex-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxamida;

Ejemplo 1.3

[N-(2-C¡dohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(4-et¡lddohex-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxamida];

Ejemplo 1.4

[5-(4-(terf-But¡l)ddohex-1-en-1-¡l)-N-(2-ddohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da];

Ejemplo 1.5

[W-(2-C¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(4-met¡lc¡dohex-1-en-1-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da];

Ejemplo 1.6

5-(C¡dohept-1-en-1-¡l)-N-(2-ddohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da; Ejemplo 1.7

[W-(2-C¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(4-(tr¡fluoromet¡l)c¡dohex-1-en-1-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da];

Ejemplo 2

N-(2-C¡dohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(esp¡ro[4.5]dec-7-en-8-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 2.1

[N-(2-C¡dohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(1-oxaesp¡ro[4.5]dec-7-en-8-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da];

Ejemplo 2.2

N-(2-C¡dohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(4,4-d¡met¡lddohex-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 3

N-(2-C¡dohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(4,4-d¡met¡lddopent-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 4

[W-(2-C¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(2-oxaesp¡ro[4.5]dec-7-en-8-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da];

Ejemplo 5

[W-(2-C¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(4-¡sopropox¡c¡dohex-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da];

Ejemplo 6

N-(2-C¡dohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(4,4-d¡met¡lddohex¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da; Ejemplo 6.1

[N-(2-C¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(3,3-d¡met¡lddopent¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da]; Ejemplo 7

N-(2-C¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(3,3-d¡met¡lbut¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da; Ejemplo 8

(Z)-N-(2-C¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(3,3-d¡met¡lbut-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 9

(£)-N-(2-C¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡ razol-4-¡l)-5-(3,3-d¡met¡lbut-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 10

5-C¡dohex¡l-N-(2-ddohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡ razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 11

N-(2-C¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(1,4-d¡oxaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 12

5-(6-(ferf-but¡l)-4-metox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-ddohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 13

5-(6-(ferf-but¡l)-4-metox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-ddohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 14

5-(6-(ferf-but¡l)-4-metox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-ddobut¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 15

5-(6-(ferf-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-ddobut¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 16

5-(6-(ferf-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-ddohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 17

5-(6-(ferf-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-¡soprop¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 18

N-(2-ddohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(6-¡soprop¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 19

N-(2-ddohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(6-met¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 20

N-(2-C¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-((2R,3S)-3,5,5-trimet¡M,4-d¡oxan-2-¡l)¡soxazol-3-carboxamida;

Ejemplo 21.1

[5-(4-Bromo-5-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-ddohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da];

Ejemplo 21.2

N-(2-ddohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(5-met¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 22

N-(2-ddohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(5-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 23

5-(4-(2-bromopropan-2-¡l)tetrah¡drofuran-2-¡l)-N-(2-ddohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 24

N-(2-ddohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(4-¡soprop¡ltetrah¡drofuran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 25

5-(4-(terf-but¡l)-1,3-d¡oxolan-2-¡l)-N-(2-ddohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 26

N-(2-C¡dohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(5,5-d¡met¡M,3-d¡oxan-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

o una sal o cocr¡stal farmacéut¡camente aceptable de este.

En otra real¡zac¡ón. Un compuesto de fórmula (I), de acuerdo con la Real¡zac¡ón 1, donde el compuesto se selecc¡ona entre

Ejemplo 20

W-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-((2R,3S)-3,5,5-tr¡met¡l-1,4-d¡oxan-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 26

W-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(5,5-d¡met¡l-1,3-d¡oxan-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 2.2

N-(2-C¡dohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(4,4-d¡met¡lddohex-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

Ejemplo 2.1

[N-(2-C¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(1-oxaesp¡ro[4.5]dec-7-en-8-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da] y

Ejemplo 11

N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡hidro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(1,4-d¡oxaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l)¡soxazol-3-carboxamida;

o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de este.

Realización 7. Un compuesto de fórmula (I), de acuerdo con la Realización 1, donde el compuesto es Ejemplo 20

N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-il)-4-met¡l-5-((2R,3S)-3,5,5-tr¡met¡l-1,4-d¡oxan-2-¡l)¡soxazol-3-carboxamida o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de esta.

Realización 8. Un compuesto de fórmula (I), de acuerdo con la Realización 1, donde el compuesto es Ejemplo 26

N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-pirazol-4-¡l)-5-(5,5-d¡met¡l-1,3-d¡oxan-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxamida o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de esta.

En otra realización. Un compuesto de fórmula (I), de acuerdo con la Realización 1, donde el compuesto es Ejemplo 2.2

N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(4,4-dimet¡lc¡clohex-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxamida o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de esta.

En otra realización 13. Un compuesto de fórmula (I), de acuerdo con la Realización 1, donde el compuesto es Ejemplo 2.1

[N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-dih¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(1-oxaesp¡ro[4.5]dec-7-en-8-¡l)¡soxazol-3-carboxamida] o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de esta.

Realización 9. Un compuesto de fórmula (I), de acuerdo con la Realización 1, donde el compuesto es Ejemplo 11

N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡hidro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(1,4-d¡oxaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l)¡soxazol-3-carboxamida o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de esta.

Tal como se utiliza en la presente, el término «halo» (o halógeno) se refiere a flúor, bromo, cloro o yodo, en particular flúor o cloro. Los grupos y restos sustituidos con halógeno tales como alquilo sustituido con halógeno (haloalquilo) pueden estar mono-, pol¡- o perhalogenados.

Tal como se utiliza en la presente, el término «heteroátomos» se refiere a átomos de nitrógeno (N), oxígeno (O) o azufre (S), en particular nitrógeno u oxígeno.

Tal como se utiliza en la presente, el término «alquilo» se refiere a un resto hidrocarbonado ramificado o no ramificado totalmente saturado que tiene hasta 10 átomos de carbono. A menos que se indique lo contrario, alquilo se refiere a restos hidrocarbonados que tienen de 1 a 10 átomos de carbono, de 1 a 6 átomos de carbono o de 1 a 4 átomos de carbono. Los ejemplos representativos de alquilo incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, ¡sobutilo, ferf-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo, n-hexilo, 3-metilhexilo, 2,2-dimetilpentilo, 2,3-dimetilpentilo, nheptilo, n-octilo, n-nonilo, n-decilo y similares. Los ejemplos representativos de alquilo ramificado incluyen isopropilo, sec-butilo, ¡sobutilo, ferf-butilo, isopentilo, 3-metilhexilo, 2,2- dimetilpentilo, 2,3-dimetilpentilo y similares. Un alquilo sustituido es un grupo alquilo que contiene uno o más, tal como uno, dos o tres sustituyentes seleccionados entre grupos halógenos, hidroxi o alcoxi.

Tal como se utiliza en la presente, el término «haloalquilo» se refiere a un alquilo tal como se ha definido en la presente, que está sustituido con uno o más grupos halo tal como se definen en la presente. El haloalquilo puede ser monohaloalquilo, di haloalquilo o polihaloalquilo, incluido perhaloalquilo. Un monohaloalquilo puede tener un yodo, bromo, cloro o fluoro dentro del grupo alquilo. Los grupos dihaloalquilo y polihaloalquilo pueden tener dos o más átomos halo idénticos, o una combinación de grupos halo diferentes dentro del alquilo. Normalmente, el polihaloalquilo contiene hasta 12 o 10 u 8 o 6 o 4 o 3 o 2 grupos halo. Los ejemplos de haloalquilo incluyen fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, clorometilo, diclorometilo, triclorometilo, pentafluoroetilo, heptafluoropropilo, difluoroclorometilo, diclorofluorometilo, difluoroetilo, difluoropropilo, dicloroetilo y dicloropropilo. Un perhaloalquilo se refiere a un alquilo que tiene todos los átomos de hidrógeno reemplazados con átomos halo.

Tal como se utiliza en la presente, el término «alcoxi», se refiere a alquil-O-, donde alquilo se ha definido anteriormente en la presente. Los ejemplos representativos de alcoxi incluyen metoxi, etoxi, propoxi, 2-propoxi, butoxi, terf-butoxi, pentiloxi, hexiloxi, ciclopropiloxi-, ciclohexiloxi- y similares. Normalmente, los grupos alcoxi tienen 1-4 átomos de carbono.

Tal como se utiliza en la presente, el término «haloalcoxi» se refiere a un alcoxi tal como se ha definido en la presente, que está sustituido con uno o más grupos halo tal como se definen en la presente.

Tal como se utiliza en la presente, el término «cicloalquilo» se refiere a grupos hidrocarbonados saturados monocíclicos, bicíclicos, tricíclicos o espirocíclicos de 3-8 átomos de carbono. A menos que se proporcione lo contrario, cicloalquilo se refiere a grupos hidrocarbonados cíclicos que tienen entre 3 y 6 o entre 5 y 8 átomos de carbono anulares.

Tal como se utiliza en la presente, el término «cicloalquenilo» se refiere a grupos hidrocarbonados parcialmente saturados monocíclicos, bicíclicos o espirocíclicos de 3-8 átomos de carbono. A menos que se proporcione lo contrario, cicloalquenilo se refiere a grupos hidrocarbonados cíclicos que tienen entre 3 y 6 o entre 5 y 8 átomos de carbono anulares.

Dependiendo de la elección de los materiales de partida y los procedimientos, los compuestos se pueden encontrar presentes en forma de uno de los posibles isómeros o como mezclas de estos, por ejemplo, como isómeros ópticos puros, o como mezclas de isómeros tales como racematos y mezclas de diastereómeros, dependiendo del número de átomos de carbono asimétricos. Se pretende que la presente invención incluya todos los posibles isómeros de este tipo, incluidas las mezclas racémicas, mezclas diastereoméricas y formas ópticamente puras. Los isómeros (R) y (S) ópticamente activos pueden prepararse utilizando sintones quirales o reactivos quirales, o pueden resolverse utilizando técnicas convencionales. Si el compuesto contiene un doble enlace, el sustituyente puede tener la configuración E o Z. Si el compuesto contiene un cicloalquilo disustituido, el sustituyente del cicloalquilo puede tener una configuración cis o trans. También se pretende que todas las formas tautoméricas estén incluidas.

Tal como se utilizan en la presente, los términos «sal» o «sales» se refieren a una sal de adición de ácido o adición de base de un compuesto de la invención. El término «sales» incluye, en particular, «sales farmacéuticamente aceptables». La expresión «sales farmacéuticamente aceptables» se refiere a sales que conservan la efectividad biológica y las propiedades de los compuestos de esta invención, y que normalmente no son indeseadas desde un punto de vista biológico o de otra forma.

Los compuestos de la invención, es decir, los compuestos de fórmula (I) que contienen grupos capaces de actuar como dadores y/o aceptores de enlaces de hidrógeno pueden ser capaces de formar cocristales con formadores de cocristales adecuados. Estos cocristales se pueden preparar a partir de compuestos de fórmula (I) mediante procedimientos de formación de cocristales conocidos. Tales procedimientos incluyen moler, calentar, cosublimar, cofundir o poner en contacto en solución los compuestos de fórmula (I) con el formador de cocristales en condiciones de cristalización y aislar los cocristales formados de este modo. Los formadores de cocristales adecuados incluyen los descritos en el documento WO 2004/078163. Por lo tanto, la invención proporciona además cocristales que comprenden un compuesto de fórmula (I).

En muchos casos, los compuestos de la presente invención son capaces de formar sales de ácidos y/o bases y/o cocristales en virtud de la presencia del grupo carboxamida o grupos similares a este.

Se pueden formar sales de adición de ácido o cocristales farmacéuticamente aceptables con ácidos orgánicos y ácidos inorgánicos.

Los ácidos inorgánicos a partir de los cuales se pueden obtener sales o cocristales incluyen, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares.

Los ácidos orgánicos a partir de los cuales se pueden obtener sales o cocristales incluyen, por ejemplo, ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malónico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido toluenosulfónico y similares.

Se pueden formar sales de adición de base o cocristales farmacéuticamente aceptables con bases orgánicas e inorgánicas.

Las bases inorgánicas a partir de las cuales se pueden obtener sales o cocristales incluyen, por ejemplo, sales de amonio y metales de las columnas I a XII de la tabla periódica. En determinadas realizaciones, las sales se obtienen a partir de sodio, potasio, amonio, calcio, magnesio, plata y zinc; algunas sales particularmente adecuadas incluyen sales de amonio, potasio, sodio, calcio y magnesio.

Las bases orgánicas a partir de las cuales se pueden obtener sales o cocristales incluyen, por ejemplo, aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas que incluyen aminas sustituidas de origen natural, aminas cíclicas, resinas de intercambio iónico básicas y similares. Determinadas aminas orgánicas incluyen colinato, lisina, meglumina, piperazina y trometamina.

En otro aspecto, la presente invención proporciona compuestos de fórmula (I) en forma de sal o cocristal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, besilato, bromuro/bromhidrato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, caprato, cloruro/clorhidrato, citrato, etandisulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, yodhidrato/yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/dihidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tosilato trifenatato o xinafoato.

En una realización, la presente invención proporciona N-(2-ciclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R,3S)-3,5,5-trimet¡M ,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida en forma de sal o cocristal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, besilato, bromuro/bromhidrato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, caprato, cloruro/clorhidrato, citrato, etandisulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, yodhidrato/yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/dihidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tosilato trifenatato o xinafoato.

En otra realización, la presente invención proporciona N-(2-ciclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5-dimetil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida en forma de sal o cocristal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, besilato, bromuro/bromhidrato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, caprato, cloruro/clorhidrato, citrato, etandisulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, yodhidrato/yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/dihidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tosilato trifenatato o xinafoato.

En otra realización, la presente invención proporciona N-(2-ciclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida en forma de sal o cocristal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, besilato, bromuro/bromhidrato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, caprato, cloruro/clorhidrato, citrato, etandisulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, yodhidrato/yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/dihidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tosilato trifenatato o xinafoato.

En otra realización, la presente invención proporciona [N-(2-ciclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1-oxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida] en forma de sal o cocristal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, besilato, bromuro/bromhidrato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, caprato, cloruro/clorhidrato, citrato, etandisulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, yodhidrato/yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/dihidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tosilato trifenatato o xinafoato.

En otra realización, la presente invención proporciona W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida en forma de sal o cocristal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, besilato, bromuro/bromhidrato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, caprato, cloruro/clorhidrato, citrato, etandisulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, yodhidrato/yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/dihidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tosilato trifenatato o xinafoato.

En otro aspecto, la presente invención proporciona compuestos de fórmula (I) en forma de sal o cocristal de sodio, potasio, amonio, calcio, magnesio, plata, zinc, colinato, lisina, meglumina, piperazina o trometamina.

En una realización, la presente invención proporciona N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida en forma de sal o cocristal de sodio, potasio, amonio, calcio, magnesio, plata, zinc, colinato, lisina, meglumina, piperazina o trometamina.

En una realización, la presente invención proporciona N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5-dimetil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida en forma de sal o cocristal de sodio, potasio, amonio, calcio, magnesio, plata, zinc, colinato, lisina, meglumina, piperazina o trometamina.

En una realización, la presente invención proporciona N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida en forma de sal o cocristal de sodio, potasio, amonio, calcio, magnesio, plata, zinc, colinato, lisina, meglumina, piperazina o trometamina.

En una realización, la presente invención proporciona [N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1-oxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida] en forma de sal o cocristal de sodio, potasio, amonio, calcio, magnesio, plata, zinc, colinato, lisina, meglumina, piperazina o trometamina.

En una realización, la presente invención proporciona N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida en forma de sal o cocristal de sodio, potasio, amonio, calcio, magnesio, plata, zinc, colinato, lisina, meglumina, piperazina o trometamina.

También se pretende que cualquier fórmula proporcionada en la presente represente formas no marcadas, así como formas marcadas isotópicamente de los compuestos. Los compuestos marcados isotópicamente tienen estructuras representadas por las fórmulas proporcionadas en la presente, salvo que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o un número másico seleccionado. Algunos ejemplos de isótopos que se pueden incorporar a compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro tales como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18F 31P, 32P, 35S, 36Cl, 123I, 124I, 125I, respectivamente. La invención incluye diversos compuestos marcados isotópicamente tal como se definen en la presente, por ejemplo, aquellos en los que están presentes isótopos radiactivos tales como 3H y 14C, o aquellos en los que están presentes isótopos no radiactivos tales como 2H y 13C. Tales compuestos marcados isotópicamente son útiles en estudios metabólicos (con 14C), estudios de la cinética de reacción (con, por ejemplo, 2H o 3H), técnicas de detección o de obtención de imágenes, tales como la tomografía por emisión de positrones (PET) o la tomografía computarizada de emisión monofotónica (SPECT), que incluyen ensayos de distribución tisular de fármacos o sustratos, o en el tratamiento radiactivo de pacientes. En particular, un compuesto marcado o 18F puede ser particularmente deseable para estudios de PET o SPECT. Generalmente se pueden preparar compuestos de fórmula (I) marcados isotópicamente mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica o mediante procesos análogos a los descritos en los Ejemplos y Preparaciones adjuntos utilizando un reactivo marcado isotópicamente apropiado en lugar del reactivo no marcado empleado previamente.

Además, la sustitución con isótopos más pesados, particularmente deuterio (es decir, 2H o D), puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas como resultado de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, una mayor semivida in vivo o requisitos de dosificación reducidos o una mejora en el índice terapéutico. Se sobreentiende que el deuterio en este contexto se considera un sustituyente de un compuesto de fórmula (I). La concentración de un isótopo más pesado de este tipo, específicamente deuterio, se puede definir a través del factor de enriquecimiento isotópico. La expresión «factor de enriquecimiento isotópico», tal como se utiliza en la presente, significa la relación entre la abundancia isotópica y la abundancia natural de un isótopo especificado. Si un sustituyente en un compuesto de esta invención se denomina deuterio, dicho compuesto tendrá un factor de enriquecimiento isotópico para cada átomo de deuterio designado de al menos 3500 (52,5% de incorporación de deuterio en cada átomo de deuterio designado), al menos 4000 (60% de incorporación de deuterio), al menos 4500 (67,5% de incorporación de deuterio), al menos 5000 (75% de incorporación de deuterio), al menos 5500 (82,5% de incorporación de deuterio), al menos 6000 (90% de incorporación de deuterio), al menos 6333,3 (95% de incorporación de deuterio), al menos 6466,7 (97% de incorporación de deuterio), al menos 6600 (99% de incorporación de deuterio) o al menos 6633,3 (99,5% de incorporación de deuterio).

Los solvatos farmacéuticamente aceptables de acuerdo con la invención incluyen aquellos en los que el disolvente de cristalización puede estar sustituido con isótopos, por ejemplo, D²O, d6-acetona, d6-DMSO.

La expresión «portador farmacéuticamente aceptable», tal como se utiliza en la presente, incluye todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, surfactantes, antioxidantes, conservantes (por ejemplo, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos), agentes isotónicos, agentes retardantes de la absorción, sales, conservantes, estabilizantes farmacológicos, aglutinantes, excipientes, agentes desintegrantes, lubricantes, agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, colorantes y similares y combinaciones de estos, tal como serían conocidos por los expertos en la técnica (remítase, por ejemplo, a Remington's Pharmaceutical Sciences, 18.a ed. Mack Printing Company, 1990, págs. 12891329). Salvo en lo que concierne a cualquier portador convencional que sea incompatible con el principio activo, se contempla su uso en las composiciones terapéuticas o farmacéuticas.

La expresión «una cantidad terapéuticamente eficaz» de un compuesto de la presente invención se refiere a una cantidad del compuesto de la presente invención que provocará la respuesta biológica o médica de un sujeto, por ejemplo, la reducción o inhibición de una actividad enzimática o proteica, o que mejora los síntomas, alivia afecciones, retrasa o ralentiza la progresión de la enfermedad o previene una enfermedad, etc. En una realización, la expresión «una cantidad terapéuticamente eficaz» se refiere a la cantidad del compuesto de la presente invención, tal como se define en la presente, que, cuando se administra a un sujeto, es eficaz para (1) aliviar, inhibir, prevenir y/o mejorar al menos parcialmente una afección, o un trastorno o una enfermedad (i) mediado por Smurf-1, o (ii) asociado con la actividad de Smurf-1, o (iii) caracterizado por la actividad (normal o anómala) de Smurf-1; o (2) reducir o inhibir la actividad de Smurf-1; o (3) reducir o inhibir la expresión de Smurf-1. En otra realización, la expresión «una cantidad terapéuticamente eficaz» se refiere a la cantidad del compuesto de la presente invención, tal como se describe en la presente, que, cuando se administra a una célula, o un tejido o un material biológico no celular, o un medio, es eficaz para reducir o inhibir al menos parcialmente la actividad de Smurf-1; o reducir o inhibir al menos parcialmente la expresión de Smurf-1.

El término «sujeto», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un animal. Normalmente, el animal es un mamífero. Un sujeto también se refiere, por ejemplo, a primates (por ejemplo, seres humanos, hombres o mujeres), vacas, ovejas, cabras, caballos, perros, gatos, conejos, ratas, ratones, peces, pájaros y similares. En determinadas realizaciones, el sujeto es un primate. En otras realizaciones más, el sujeto es un ser humano.

El término «inhibir», «inhibición» o «que inhibe», tal como se utiliza la presente, se refiere a la reducción o supresión de una afección, síntoma, trastorno o enfermedad concretos, o una disminución significativa en la actividad basal de una actividad o proceso biológico.

El término «tratar», «que trata» o «tratamiento» de cualquier enfermedad o trastorno, tal como se utiliza la presente, se refiere, en una realización, a mejorar la enfermedad o trastorno (es decir, ralentizar o detener o reducir el desarrollo de la enfermedad o al menos uno de los síntomas clínicos de esta). En otra realización, «tratar», «que trata» o «tratamiento» se refiere a mitigar o mejorar al menos un parámetro físico, incluidos aquellos que pueden no ser perceptibles por el paciente. En otra realización más, «tratar», «que trata» o «tratamiento» se refiere a la modulación de la enfermedad o trastorno, ya sea físicamente (por ejemplo, estabilización de un síntoma discernible), fisiológicamente (por ejemplo, estabilización de un parámetro físico) o ambas. En otra realización más, «tratar», «que trata» o «tratamiento» se refiere a prevenir o retrasar la aparición o el desarrollo o avance de la enfermedad o trastorno.

Tal como se utiliza en la presente, un sujeto «necesita» un tratamiento si dicho sujeto se beneficiaría, desde un punto de vista biológico, médico o en su calidad de vida, de dicho tratamiento.

Tal como se utiliza en la presente, se debe interpretar que el término "un", "una", "el", "la" y términos similares utilizados en el contexto de la presente invención (especialmente en el contexto de las reivindicaciones) cubren tanto el singular como el plural a menos que se indique lo contrario en la presente o el contexto lo contradiga claramente.

Todos los métodos descritos en la presente se pueden llevar a cabo en cualquier orden adecuado, a menos que se indique lo contrario en la presente o el contexto lo contradiga claramente. El uso de todos y cada uno de los ejemplos o lenguaje a modo de ejemplo (por ejemplo, «tal/es como») proporcionados en la presente tiene por objeto únicamente ilustrar mejor la invención y no supone ninguna limitación del alcance de la invención que por lo demás se reivindica.

Cualquier átomo asimétrico (por ejemplo, carbono o similar) del (de los) compuesto(s) de la presente invención puede estar presente en forma racémica o enantioméricamente enriquecida, por ejemplo, la configuración (R), (S) o (R,S). En ciertas realizaciones, cada átomo asimétrico tiene al menos un 50% de exceso enantiomérico, al menos un 60% de exceso enantiomérico, al menos un 70% de exceso enantiomérico, al menos un 80% de exceso enantiomérico, al menos un 90% de exceso enantiomérico, al menos un 95% de exceso enantiomérico o al menos un 99% de exceso enantiomérico en la configuración (R) o (S). Los sustituyentes en átomos con dobles enlaces insaturados pueden estar presentes, si es posible, en forma cis (Z) o trans (E).

Por consiguiente, tal como se utiliza en la presente, un compuesto de la presente invención, tal como se describe en la presente, puede estar en forma de uno de los posibles isómeros, rotámeros, atropisómeros, tautómeros o mezclas de estos, por ejemplo, como racematos, isómeros ópticos (enantiómeros), diastereómeros, isómeros geométricos (cis o trans) sustancialmente puros o mezclas de estos.

Cualesquiera mezclas resultantes de isómeros se pueden separar, basándose en las diferencias fisicoquímicas de los constituyentes, en los racematos, diastereómeros, isómeros ópticos o geométricos puros o sustancialmente puros, por ejemplo, mediante cromatografía y/o cristalización fraccionada.

Cualesquiera racematos resultantes de productos finales o intermedios se pueden resolver en los enantiómeros ópticos mediante métodos conocidos, por ejemplo, mediante la separación de las sales diastereoméricas de estos, obtenidas con una base o ácido ópticamente activo, y la liberación del compuesto ácido o básico ópticamente activo.

En particular, se puede emplear, por lo tanto, un resto de carácter básico para resolver los compuestos de la presente invención, tal como se describe en la presente, en sus enantiómeros ópticos, por ejemplo, mediante cristalización fraccionada de una sal formada con un ácido ópticamente activo, por ejemplo, ácido tartárico, ácido dibenzoiltartárico, ácido diacetiltartárico, ácido di-0,0'-p-toluoiltartárico, ácido mandélico, ácido málico o ácido canfor-10-sulfónico. Los productos racémicos también se pueden resolver mediante cromatografía quiral, por ejemplo, cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) utilizando un adsorbente quiral.

Además, los compuestos de la presente invención, tal como se describen en la presente, incluidas sus sales, también se pueden obtener en forma de sus hidratos o pueden incluir otros disolventes utilizados para su cristalización. Los compuestos de la presente invención pueden formar solvatos de forma inherente o por diseño con disolventes farmacéuticamente aceptables (que incluyen agua); por lo tanto, se pretende que la invención englobe tanto formas solvatadas como no solvatadas. El término «solvato» se refiere a un complejo molecular de un compuesto de la presente invención (incluidas las sales farmacéuticamente aceptables de este) con una o más moléculas de disolvente. Dichas moléculas de disolvente son las que se utilizan comúnmente en la técnica farmacéutica, que se sabe que son inocuas para el receptor, por ejemplo, agua, etanol y similares. El término «hidrato» se refiere al complejo donde la molécula de disolvente es agua.

Los compuestos de la presente invención, tal como se describen en la presente, incluidas las sales, cocristales, hidratos y solvatos de estos, pueden formar polimorfos de manera inherente o por diseño.

Esquemas genéricos

Habitualmente, los compuestos de fórmula (I) se pueden preparar de acuerdo con los Esquemas proporcionados más adelante.

Los compuestos de la presente invención, tal como se describen en la presente, se pueden preparar mediante las rutas descritas en los siguientes Esquemas o en los Ejemplos.

Todas las abreviaturas son como se definen en la sección de los ejemplos más adelante en la presente.

Esquema 1

Paso 1

Acoplam iento cruzado

cata izado con Pd

Paso 2

0 s 0 4

Donde X e Y son independientemente H o -alquilo (C¹-C⁶).

Paso 1: Una reacción de acoplamiento cruzado catalizada con paladio.

Condiciones habituales: Catalizador de paladio (0); un compuesto de boro, estaño o zinc adecuado tal como un ácido borónico, éster de tipo boronato o estannano; base orgánica o inorgánica; en agua; en un disolvente adecuado a 80­ Condiciones preferidas: Dicloruro de bis(difenilfosfino)ferroceno-paladio (II), sal trifluoroborato de vinilo, trietilamina en etanol a 90 °C

Paso 2: Dihidroxilación

Condiciones habituales: Tetraóxido de osmio; un cooxidante adecuado tal como N-óxido de N-metilmorfolina; en un disolvente adecuado

Condiciones preferidas: Se puede utilizar tetraóxido de osmio (Admix alfa o Admix beta) para acceder a diol quirales, con un aditivo adecuado tal como metanosulfonamida. Un sistema de disolventes preferido es f-butanol/agua.

Paso 3: Escisión oxidativa

Condiciones habituales: Peryodato de sodio en un sistema de disolventes de THF/agua

Esquema 2

Donde R2 es metilo, se puede preparar un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con el Esquema 2.

Donde X2 e Y2 se definen de manera que, junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos, formen el sustituyente R3.

Paso 1: Formación del boronato de vinilo

Condiciones habituales: a) Formación del enol en presencia de una base fuerte tal como LDA o LHMDS, seguida por la desactivación con una sulfonamida o sulfonato de haloalquilo adecuado para obtener la forma enólica estabilizada. b) Borilación catalizada con paladio (0) del enolato utilizando un catalizador de paladio (0) adecuado y bis(pinacolato)diboro

Condiciones preferidas: a) LDA en THF a -78 °C, a continuación desactivación con 1,1,1-trifluoro-N-(piridin-2-il)-N-((trifluorometil)sulfonil)metanosulfonamida. b) Complejo de dicloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferrocenopaladio (II) con diclorometano, y bispinacolatodiboro, acetato de potasio, en dioxano, a 80-100 °C, durante 4-16 h.

Paso 2: Acoplamiento cruzado catalizado con paladio.

Condiciones habituales: Tal como se han descrito en el Esquema 1, paso 1

Condiciones preferidas: Complejo de dicloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferrocenopaladio (II) con diclorometano, carbonato de potasio (2 M en agua) en MeCN a 80 °C, durante 1,5 h

Paso 3a: Saponificación

Condiciones habituales: Una base acuosa adecuada, opcionalmente con un codisolvente adecuado tal como THF Condiciones preferidas: Hidróxido de sodio (ac.) 2 M con THF a t.a. durante 30 min

Paso 3b: Acoplamiento de amida

Condiciones habituales: Un reactivo de acoplamiento adecuado tal como HATU, T3P, EDCI etc, en presencia de una base adecuada tal como trietilamina, DIPEA etc., en un disolvente aprótico adecuado.

Condiciones preferidas: HATU y DIPEA en DMF a t.a. durante aproximadamente 2 h

Paso 4: Hidrogenación

Un compuesto de fórmula (I), donde R3 contiene un doble enlace C=C, se puede convertir en un compuesto de fórmula (I), donde R3 está totalmente saturado, mediante una reacción de hidrogenación.

Condiciones habituales: Un catalizador de paladio no soluble, hidrógeno gaseoso, en un disolvente adecuado tal como un alcohol

Condiciones preferidas: Paladio sobre carbón al 10% e hidrógeno gaseoso en etanol

Esquema 3

cuando X3 es Br o I, el producto del paso 3 también es un compuesto de fórmula (I).

Paso 1: Una reacción de Prins

Condiciones habituales: Un catalizador ácido y un agente deshidratante adecuado en un disolvente clorado.

Condiciones preferidas: (i) Ácido trifluoroacético y tamices moleculares en DCM; o (ii) InBr3 y bromuro de trimetilsililo en DCM; o (iii) InOTf3 y triflato de trimetilsililo en DCM.

Paso 2a: Una reacción de saponificación tal como se ha descrito en el Esquema 2, paso 3a

Paso 2b: Una inversión de Mitsunobu

Condiciones habituales: Una triarilfosfina, dialquilazodicarboxilato y ácido benzoico, en un disolvente adecuado tal como THF a t.a.

Condiciones preferidas: Trifenilfosfina, diisopropilazodicarboxilato y ácido 2,4-dinitrobenzoico, en THF a t.a.

Paso 2c: Metilación

Condiciones habituales: Una base fuerte adecuada y un agente alquilante en un disolvente adecuado Condiciones preferidas: Hidruro de sodio y yoduro de metilo en DMF

Paso 2d, paso 3a, paso 4a: Una reacción de saponificación tal como se ha descrito en el Esquema 2, paso 3a Paso 2e, 3b y 4b: Un acoplamiento de amida tal como se ha descrito en el Esquema 2, paso 3b

Paso 5: Una hidrogenación tal como se ha descrito en el Esquema 2, paso 4

Esquema 4

Paso 1: Una reacción de Prins tal como se ha descrito en el Esquema 3, paso 1

Paso 2a: Una reacción de saponificación tal como se ha descrito en el Esquema 2, paso 3a Paso 2b: Un acoplamiento de amida tal como se ha descrito en el Esquema 2, paso 3b Paso 3: Una hidrogenación tal como se ha descrito en el Esquema 2, paso 4

Esquema 5

P 1

Paso 1: Formación de acetal

Condiciones habituales: Un catalizador de tipo ácido fuerte en un disolvente adecuado en condiciones de deshidratación

Condiciones preferidas: pTSOH y tolueno en condiciones de Dean Stark a 110 °C durante 2-16 h.

Paso 2a: Una reacción de saponificación tal como se ha descrito en el Esquema 2, paso 3a

Paso 2b: Un acoplamiento de amida tal como se ha descrito en el Esquema 2, paso 3b

Esquema 6

PG es un grupo protector adecuado tal como tbutildimetilsililo

X6 e Y6 son cada uno independientemente H o -alquilo (C¹-C⁶).

Paso 1: Protección

Condiciones habituales: Un grupo protector adecuado tal como un cloruro de trialquilsililo, en presencia de una base adecuada en un disolvente adecuado.

Condiciones preferidas: Cloruro de tbutildimetilsililo en presencia de trietilamina y DMAP en DMF.

Paso 2: Una reacción de alquilación

Condiciones habituales: Un bromuro de alilo en presencia de una base adecuada en un disolvente adecuado Condiciones preferidas: 3-Bromo-2-metilprop-1-eno e hidruro de sodio en THF.

Paso 3a: Una reacción de saponificación tal como se ha descrito en el Esquema 2, paso 3a

Paso 3b: Un acoplamiento de amida tal como se ha descrito en el Esquema 2, paso 3b

Paso 4: Desprotección

Condiciones habituales: Una fuente de fluoruro en un disolvente adecuado

Condiciones preferidas: TBAF en THF

Paso 5: Una reacción de ciclación

Condiciones habituales: Trifluoroacetato de mercurio (II) y óxido de mercurio (II) en THF a temperatura ambiente, a continuación adición de trietilborano y borohidruro de sodio a -78 °C.

La invención incluye además cualquier variante de los procesos de la presente, en la que se utilice un producto intermedio que se pueda obtener en cualquier etapa de estos como material de partida y se lleven a cabo los pasos restantes, o en la que los materiales de partida se formen in situ en las condiciones de reacción, o en la que los componentes de reacción se utilicen en forma de sus sales o material ópticamente puro.

Los compuestos de la invención y los intermedios también se pueden convertir los unos en los otros de acuerdo con métodos generalmente conocidos por los expertos en la materia.

En otro aspecto, la presente invención, tal como se describe en la presente, proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y un portador farmacéuticamente aceptable. En una realización adicional, la composición comprende al menos dos portadores farmacéuticamente aceptables tales como los descritos en la presente. A efectos de la presente invención, a menos que se designen de otro modo, los solvatos e hidratos se consideran, por lo general, composiciones. Preferentemente, los portadores farmacéuticamente aceptables son estériles. La composición farmacéutica puede formularse para vías de administración particulares tales como la administración oral, administración parenteral y administración rectal, etc. Además, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden preparar en forma sólida, que incluye cápsulas, comprimidos, píldoras, gránulos, polvos o supositorios, o en forma líquida, que incluye soluciones, suspensiones o emulsiones. Las composiciones farmacéuticas se pueden someter a operaciones farmacéuticas convencionales tales como esterilización y/o pueden contener diluyentes inertes, agentes lubricantes o agentes tamponantes convencionales, así como adyuvantes, tales como conservantes, estabilizantes, agentes humectantes, emulsionantes y tampones, etc.

Habitualmente, las composiciones farmacéuticas son comprimidos o cápsulas de gelatina que contienen el principio activo junto con uno o más de entre:

a) diluyentes, por ejemplo, lactosa, dextrosa, sacarosa, manitol, sorbitol, celulosa y/o glicina;

b) lubricantes, por ejemplo, sílice, talco, ácido esteárico, su sal de magnesio o calcio y/o polietilenglicol; para comprimidos también

c) aglutinantes, por ejemplo, silicato de magnesio y aluminio, pasta de almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica y/o polivinilpirrolidona; si se desea

d) desintegrantes, por ejemplo, almidones, agar, ácido algínico o su sal de sodio, o mezclas efervescentes; y e) absorbentes, colorantes, aromas y edulcorantes.

Los comprimidos pueden estar recubiertos con películas o tener un recubrimiento entérico de acuerdo con métodos conocidos en la técnica.

Las composiciones adecuadas para administración oral incluyen una cantidad eficaz de un compuesto de la invención en forma de comprimidos, grageas, suspensiones acuosas u oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas duras o blandas, o jarabes o elixires. Las composiciones destinadas a uso oral se preparan de acuerdo con cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas, y las composiciones de este tipo pueden contener uno o más agentes seleccionados del grupo constituido por agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes colorantes y agentes conservantes con el fin de proporcionar preparados farmacéuticamente refinados y de gusto agradable. Los comprimidos pueden contener el principio activo mezclado con excipientes atóxicos, farmacéuticamente aceptables, que sean adecuados para la elaboración de comprimidos. Estos excipientes son, por ejemplo, diluyentes inertes tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio; agentes granulantes y desintegrantes, por ejemplo, almidón de maíz o ácido algínico; agentes aglutinantes, por ejemplo, almidón, gelatina o goma arábiga; y agentes lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos no se recubren o se recubren mediante técnicas conocidas para retrasar la desintegración y la absorción en el tracto gastrointestinal y, de esta manera, proporcionar una acción sostenida durante un periodo más largo. Por ejemplo, se puede utilizar un material retardante tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo. Las formulaciones para uso oral se pueden presentar como cápsulas de gelatina dura, donde el principio activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blanda, donde el principio activo se mezcla con agua o un medio oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.

Ciertas composiciones inyectables son soluciones o suspensiones isotónicas acuosas, y favorablemente se preparan supositorios a partir de emulsiones o suspensiones grasas. Dichas composiciones pueden esterilizarse y/o contener adyuvantes tales como agentes conservantes, estabilizantes, humectantes o emulsionantes, promotores de disolución, sales para regular la presión osmótica y/o tampones. Además, también pueden contener otras sustancias valiosas desde el punto de vista terapéutico. Dichas composiciones se preparan de acuerdo con métodos convencionales de mezcla, granulación o recubrimiento, respectivamente, y contienen aproximadamente 0,1-75%, o contienen aproximadamente 1-50%, del principio activo.

Las composiciones adecuadas para aplicación transdérmica incluyen una cantidad eficaz de un compuesto de la invención con un portador adecuado. Los portadores adecuados para suministro transdérmico incluyen disolventes absorbibles farmacológicamente aceptables para facilitar el paso a través de la piel del hospedador. Por ejemplo, los dispositivos transdérmicos adoptan la forma de un apósito que comprende un elemento de soporte, un depósito que contiene el compuesto opcionalmente con portadores, opcionalmente una barrera que controla la velocidad para suministrar el compuesto de la piel del hospedador con una velocidad controlada y predeterminada durante un periodo de tiempo prolongado, y un medio para fijar el dispositivo a la piel.

Las composiciones adecuadas para aplicación tópica, por ejemplo, a la piel y los ojos, incluyen suspensiones, soluciones acuosas, pomadas, cremas, geles o formulaciones pulverizables, por ejemplo, para el suministro por aerosol o similares. Dichos sistemas de suministro tópico serán particularmente apropiados para la aplicación dérmica, por ejemplo, para el tratamiento del cáncer de piel, por ejemplo, para el uso profiláctico en cremas de protección solar, lociones, espráis y similares. Por tanto, son particularmente adecuados para su uso en formulaciones tópicas, incluidas las cosméticas, muy conocidas en la técnica. Estas pueden contener solubilizantes, estabilizantes, agentes potenciadores de la tonicidad, tampones y conservantes.

Tal como se utiliza en la presente, una aplicación tópica también puede referirse a una inhalación o a una aplicación intranasal. Se pueden suministrar convenientemente en forma de un polvo seco (ya sea solo, como una mezcla, por ejemplo, una mezcla seca con lactosa, o una partícula de componentes mixtos, por ejemplo, con fosfolípidos) desde un inhalador de polvo seco o una presentación de espray en aerosol desde un recipiente presurizado, bomba, pulverizador, atomizador o nebulizador, con o sin el uso de un propelente adecuado.

La presente invención, tal como se describe en la presente, proporciona además composiciones farmacéuticas y formas farmacéuticas anhidras que comprenden los compuestos de la presente invención como principios activos, ya que el agua puede facilitar la degradación de ciertos compuestos.

Las composiciones farmacéuticas y las formas farmacéuticas anhidras de la invención se pueden preparar utilizando ingredientes anhidros o que contengan poca humedad, y condiciones de baja humectación o baja humedad. Una composición farmacéutica anhidra se puede preparar y almacenar de manera que mantenga su naturaleza anhidra. Por consiguiente, las composiciones anhidras se envasan utilizando materiales que se sabe que evitan la exposición al agua de modo que se puedan incluir en kits de vademécum adecuados. Los ejemplos de envases adecuados incluyen envases de láminas metálicas selladas herméticamente, plásticos, recipientes de dosis unitarias (por ejemplo, viales), envases de tipo blíster y envases de tiras.

La invención proporciona además composiciones farmacéuticas y formas farmacéuticas que comprenden uno o más agentes que reducen la velocidad a la que se descompondrá el compuesto de la presente invención como principio activo. Tales agentes, que se denominan en la presente «estabilizantes», incluyen antioxidantes tales como el ácido ascórbico, tampones de pH o tampones salinos, etc.

Los compuestos de fórmula (I) en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, presentan propiedades farmacológicas valiosas, por ejemplo, propiedades moduladoras de Smurf-1 , por ejemplo, como las indicadas en las pruebas in vivo e in vitro tal como se proporcionan en las siguientes secciones y, por tanto, están indicados para terapia o para uso como productos químicos de investigación, por ejemplo, como compuestos de referencia.

Los compuestos de la invención o la sales farmacéuticamente aceptables de estos son útiles en el tratamiento de varias afecciones, que incluyen:

Hipertensión pulmonar, incluida la hipertensión arterial pulmonar (HAP)

Fibrosis

Artritis reumatoide

Curación de fracturas

Glaucoma

Telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH)

Proteinuria

Curación de heridas

EPOC

Asma

Hipertensión arterial pulmonar (HAP)

La hipertensión arterial pulmonar presenta una patobiologímult aifactorial. La vasoconstricción, la remodelación de la pared de los vasos pulmonares y la trombosis contribuyen a incrementar la resistencia vascular pulmonar en la HAP (Humbert et al, J. Am. Coll. Cardiol., 2004.). Los compuestos de la presente invención descritos en la presente son útiles en el tratamiento de la HAP y sus síntomas. Se deberá sobreentender que la hipertensión arterial pulmonar engloba las siguientes formas de hipertensión pulmonar: HAP idiopática (HAPI); HAP heredable (HAPH); HAP inducida por fármacos o toxinas, HAP asociada con otras afecciones (HAPA) tal como HAP asociada con enfermedades de tejidos conectivos, HAP asociada con una infección por VIH, HAP asociada con hipertensión portal, HAP asociada con enfermedades cardíacas congénitas, HAP asociada con esquistosomiasis, HAP asociada con anemia hemolítica crónica o hipertensión pulmonar persistente del recién nacido (Galié et al., ERJ, 2009; Simonneau et al., JACC, 2009). La HAP idiopática se refiere a una HAP de origen indeterminado. La HAP heredable se refiere a una HAP de la que se sospecha o existe constancia de que es de transmisión hereditaria, incluidas las que contienen mutaciones en el receptor de BMP, BMPR2 o las que tienen mutaciones en ALK1 o en la endoglina (con o sin talangiectasia hemorrágica hereditaria).

Se deberá sobreentender que la HAP asociada con fármacos o toxinas engloba la HAP asociada con la ingesta de aminorex, un compuesto de fenfluramina ( por ejemplo, fenfluramine o dexfenfluramina), ciertos aceites tóxicos (por ejemplo, aceite de colza), alcaloides de pirrolizidina (por ejemplo, rooibos), monocrotalina, anfetaminas, L-triptófano, metanfetaminas, cocaína, fenilpropanolamina, hierba de San Juan, agentes quimioterapéuticos o ISRS (inhibidores selectivos de la recaptación de serotonina).

Se deberá sobreentender que la HAP asociada con enfermedades de tejidos conectivos engloba la HAP asociada con esclerosis sistémica, fibrosis pulmonar, polimiositis, artritis reumatoide, síndrome de Sjogren o HAP asociada con lupus eritematoso sistémico.

Se deberá sobreentender que la HAP asociada con enfermedades cardíacas congénitas engloba pacientes con derivaciones de sistémicas a pulmonares, HAP asociada con el síndrome de Eisenmenger, defectos atriales-sépticos o ventriculares-sépticos pequeños o HAP asociada con una operación quirúrgica cardíaca correctiva.

Se deberá sobreentender que la HAP asociada con anemia hemolítica crónica engloba pacientes con anemias adquiridas y hereditarias crónicas, incluidos pacientes con anemia de células falciformes, talasemia, esferocitosis hereditaria, estomatocitosis y anemia hemolítica microangiopática.

Los síntomas de la HAP incluyen disnea, angina, síncope y edema (McLaughlin et al., Circulation, 2006, 114:1417-1431). Los compuestos de la presente invención descritos en la presente son útiles en el tratamiento de los síntomas de HAP.

Hipertensión pulmonar (HP)

Se deberá sobreentender que la hipertensión pulmonar (HP) se asocia con las siguientes afecciones agrupadas de acuerdo con la clasificación clínica de Dana Point (Simonneau, G et al. JACCC, 2009):

Grupo 1' - Se deberá sobreentender que la HP se asocia con pacientes que padecen una enfermedad venooclusiva pulmonar (EVOP) y hemangiomatosis capilar pulmonar (HCP).

Grupo 2 - HP asociada con una enfermedad cardíaca del lado izquierdo, incluidos los pacientes con enfermedades valvulares o ventriculares del lado izquierdo.

Grupo 3 - HP como resultado de enfermedades pulmonares y/o hipoxia. Se deberá sobreentender que las enfermedades pulmonares que dan como resultado HP engloban pacientes con fibrosis pulmonar, enfisema, fibrosis pulmonar y enfisema combinados, bronquiectasia, fibrosis quística y enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC).

Grupo 4 - HP asociada con tromboembolismo crónico (HPTEC).

Grupo 5 - HP asociada con etiologías indefinidas o multifactoriales. Se debe sobreentender que esta categoría de pacientes con HP engloba pacientes en uno de los siguientes grupos: 1) trastornos mieloproliferativos crónicos, que incluyen policitemia vera, trombocitemia esencial o leucemia mieloide crónica; 2) trastornos sistémicos, que incluyen sarcoidosis, afecciones que dan como resultado la destrucción del lecho capilar pulmonar tales como fibrosis, compresión extrínseca de las arterias pulmonares grandes, pacientes con histiocitosis pulmonar de células de Langerhan, linfangioleiomiomatosis, neurofibromatosis de tipo 1 y vasculitis asociada con anticuerpos citoplasmáticos anti-neutrófilos; 3) trastornos metabólicos, que incluyen la enfermedad de almacenamiento de glucógeno, deficiencia de glucosa-6-fosfatasa, enfermedad de Gaucher y enfermedades de las tiroides (hipotiroidismo e hipertiroidismo); 4) engloba pacientes con tumores que se expanden en el lumen de la arteria pulmonar, oclusión de la microvasculatura pulmonar mediante embolias tumorales metastásicas, fibrosis mediastinal o pacientes con enfermedad renal terminal que reciben hemodiálisis a largo plazo.

Fibrosis

Se ha demostrado que la desregulación de las vías de señalización de TGFp/BMP desempeña una función causal en la fibrosis de varios órganos, que incluyen el riñón, corazón, pulmón, piel, páncreas e hígado, así como en la esclerosis sistémica y patologías asociadas (tal como han revisado Leask y Abraham, FASEB, 2004). Se ha demostrado que BMP7 contrarresta la transición epithelial-mesenquimal (TEM) inducida por TGFp1 (Zeisberg, M et al. Nat. Med, 2003) y la inducción de colágeno (Izumi, N et al. AJP. Lung, Cell, Mol., Physiol. 2005), ambas mecanismos clave en el desarrollo de la fibrosis. La evidencia directa de la función de Smurf-1 en las patologías fibróticas se demostró en un modelo en ratón de obstrucción ureteral unilateral (OUU) de fibrosis tubulointersticial progresiva del riñón donde había mayores niveles de Smurf-1 presentes en los riñones enfermos asociados con menores niveles del sustrato protector de Smurf-1, Smad7 (Fukasawa, H et al. PNAS, 2004). Más recientemente, se ha sugerido una función de Smurf-1 en la fibrosis pulmonar en datos generados en células epiteliales pulmonares que identifican un papel crucial para el sustrato de Smurf-1 Smad7 a la hora de limitar la Te M (Shukla, MA, et al. Am. J. Resp. Cell. Mol. Biol. 2009). Los compuestos de la presente invención descritos en la presente son útiles en el tratamiento de la fibrosis y sus síntomas. Se deberá sobreentender que la fibrosis engloba lo siguiente: pacientes con fibrosis pulmonar, fibrosis pulmonar idiopática, fibrosis quística, cirrosis, fibrosis endomiocárdica, fibrosis mediastinal, mielofibrosis, fibrosis retroperitoneal, fibrosis masiva progresiva, fibrosis sistémica nefrogénica, enfermedad de Crohn, queloide, infarto de miocardio antiguo, escleroderma (esclerosis sistémica), artrofibrosis o capsulitis adhesiva.

Artritis reumatoide

Las citocinas proinflamatorias tales como el factor de necrosis tumoral alfa (TNFa) desempeñan una función clave en el inicio y el mantenimiento de afecciones inflamatorias crónicas tales como la artritis reumatoide (AR). Habitualmente se asocia una reducción en la densidad ósea con la AR y se ha demostrado que Smurf-1 desempeña una función clave en la mediación de la pérdida ósea inducida por la AR. Se ha demostrado que TNFa desencadena la degradación proteolítica de los sustratos de Smurf-1 Smad1 y Runx2, los cuales son ambos esenciales para la actividad de los osteoblastos de formación de los huesos. La evidencia directa a favor de esta correlación se demostró en ratones KO de smurf-1 donde TNFa ejerció un efecto nulo sobre la actividad de los osteoclastos en huesos de ratones KO de Smurf-1 pero no en los de ratones correspondientes de origen natural (Guo, R et al. JBC, 2008). Los compuestos de la presente invención descritos en la presente son útiles en el tratamiento de la artritis reumatoide y sus síntomas. Se deberá sobreentender que la AR engloba pacientes con inflamación crónica de la membrana sinovial como efecto secundario de la inflamación de las células sinoviales, exceso de fluido sinovial y formación de tejido fibroso en las articulaciones. Además, la AR también deberá englobar pacientes con AR provocada por un granuloma necrotizante, vasculitis, pioderma gangrenoso, síndrome de Sweet, eritema nodoso, paniculitis lobular, atrofia de la piel digital, eritema palmar o debilitamiento difuso de la piel. La AR también se extiende a otros órganos y en la presente englobará pacientes con fibrosis de los pulmones, amiloidosis renal, aterosclerosis como resultado de AR, pericarditis, endocarditis, insuficiencia del ventrículo izquierdo, valvulitis y fibrosis. La AR también englobará pacientes con afecciones oculares de episcleritis, queratoconjuntivitis seca, trastornos hematológicos de anemia hemolítica autoinmune por anticuerpos calientes, neutropenia y trombocitosis, afecciones neurológicas de neuropatía periférica, mononeuritis múltiple y síndrome del túnel carpiano, osteoporosis y linfoma.

Curación de fracturas

En este caso la vía de BMP desempeña una función y los inhibidores de Smurf-1 incrementan la señalización de BMP. Los compuestos de la presente invención descritos en la presente son útiles en el tratamiento de la curación de fracturas. Se deberá sobreentender que la curación de fracturas engloba la técnica de reparación de fracturas óseas mediante la cual se implanta quirúrgicamente en el sitio de la fractura ósea un implante endostial que contiene poros en los que pueden migrar osteoblastos y tejido conector de soporte. La administración de inhibidores de Smurf-1 tras la inserción del implante descrito anteriormente puede facilitar la integración del implante y acelerar la recuperación potenciando la proliferación de células madre mesenquimales que se diferencian en osteoblastos (Zhao, M et al. JBC, 2004).

Glaucoma

Una presión intraocular (PIO) elevada representa uno de los mayores factores de riesgo para el glaucoma de ángulo abierto primario (GAAP). La PIO se mantiene en la cámara anterior por acción del humor acuoso que se produce en el cuerpo ciliar y se secreta a través de la región de la red trabecular. En pacientes con glaucoma se ha observado un incremento de la resistencia a la secreción del humor acuoso que se asocia con la acumulación de la deposición de matriz extracelular (MEC) en la región de la red trabecular. Esta patología de la MEC en pacientes con GAAP se asemeja a la fibrosis inducida por las proteínas TGFb en muchos sistemas no oculares. El incremento de la PIO inducido por TGFb2 ha sido demostrado en modelos preclínicos in vivo y ex vivo. En varios estudios clínicos de pequeña escala, también se ha observado que el nivel de la proteína TGFb2 en el humor acuoso es elevado en pacientes con GAAP. La modulación de la actividad de TGFb en pacientes con glaucoma podría potencialmente reducir la PIO y proporcionar terapias novedosas contra el glaucoma (Wordinger RJ JOURNAL OF OCULAR PHARMACOLOGYAND THERAPEUTICS

Volumen 30, Número 2, 2014). Teniendo en cuenta la función de Smurf1 en la regulación de la señalización de TGFb a través de sus sustratos BMP9 y SMAD 7, los compuestos de la presente invención (o sus sales farmacéuticamente aceptables) que se describen en la presente serían útiles en el tratamiento del glaucoma.

Telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH)

La telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), también conocida como síndrome de Osler-Weber-Rendu, es un trastorno genético de los vasos sanguíneos que afecta de 1:5000 a 1:40000. Una persona con THH tiene tendencia a formar vasos sanguíneos que carecen de capilares normales entre una arteria y una vena, lo que provoca que la sangre arterial bajo presión elevada fluya directamente en una vena, la cual puede romperse y provocar un sangrado. Los síntomas de la THH se pueden manifestar como de moderados a graves, experimentando un 90-95% de los pacientes sangrados nasales en la edad adulta, desarrollando un 90-95% telangiectasias en la cara o las manos en la madurez y desarrollando un 40% malformaciones arteriovenosas pulmonares (MAV) que pueden suponer un riesgo significativo. Las MAV también se pueden producir en el cerebro, hígado e intestino, con diferentes grados de gravedad en las implicaciones para la salud. La THH se puede tratar, de la manera más habitual con terapia de coagulación, embolización o eliminación quirúrgica del tejido afectado. Las mutaciones de THH provocan haploinsuficiencia en la señalización de BMP (Ricard et al. Blood, 2010) que da como resultado un defecto en la maduración de los vasos y una ramificación excesiva de la vasculatura que se atribuye, en parte, a una señalización defectuosa de BMP9 (Choi, et al. PlosOne, 2013). Smurf1 reduce la señalización de BMP (Murakami Exp. Biol. Res. 2010 y Cao, et al. Sci. Rep.

2014) y se ha descrito que se expresa en las células endoteliales (Crose, et al. JBC, 2009 y Human Protein Atlas and GeneCards) y, por consiguiente, los inhibidores de Smurf1 podrían servir para restablecer la señalización de BMP y corregir las anomalías de la angiogénesis. En este sentido, los compuestos de la presente invención (o sus sales farmacéuticamente aceptables) que se describen en la presente serían útiles en el tratamiento de la THH.

Proteinuria

Unas cantidades anómalas de proteína en la orina son uno de los primeros signos de una enfermedad renal crónica, que puede ser el resultado de hipertensión, diabetes o enfermedades asociadas con la inflamación de los riñones. Si se deja sin tratar, una enfermedad renal crónica puede evolucionar hasta una enfermedad renal terminal e insuficiencia renal. Smurf1 participa en múltiples mecanismos asociados con la función renal y la proteinuria. El sustrato de Smurf1 que es el miembro A de la familia de genes homólogos de Ras (RhoA) desempeña una función crítica en la regulación de la migración de los podocitos renales. La sinaptopodina hace posible la formación de fibra de estrés en los podocitos renales bloqueando la capacidad de Smurf1 de unirse a RhoA y ubiquitinarlo, con lo que propicia de este modo la motilidad de los podocitos y la modulación de las propiedades tamizantes de la barrera de filtración de podocitos del riñón (Asanuma, et al. Nat. CellBiol. 2006). Además, el antagonista intracelular del factor de crecimiento transformante (TGF) p, Smad7 desempeña una función protectora clave en el riñón. Se ha demostrado que la actividad de Smurfl ubiquitina y degrada Smad7, lo cual conduce a una fibrosis tubulointerstitial y disfunción renal (Fukasawa, et al. PNAS 2004). Conjuntamente, estos informes sugieren que un inhibidor de Smurfl podría permitir la migración de podocitos y el mantenimiento de la barrera de filtración de podocitos además de bloquear la propagación de la señalización profibrótica, proporcionando el riñón en última instancia un beneficio terapéutico para la proteinuria. Por consiguiente, los compuestos de la invención (o sus sales farmacéuticamente aceptables) serían útiles en el tratamiento de la proteinuria.

Curación de heridas

Las heridas que no se curan crónicas se producen en la mayoría de los casos en personas de más de 60 años de edad, y provocan un dolor físico muy significativo; se clasifican en grandes rasgos en tres grupos: úlceras venosas, úlceras diabéticas y de presión. El tiempo exacto de actividad de las vías de señalización del factor de crecimiento transformante (TGF) p y de la proteína morfogénica ósea (BMP) es esencial para una curación normal de las heridas, ya que regula procesos de procuración claves de migración de fibroblastos y deposición de matriz extracelular, influjo de células inflamatorias, angiogénesis y reepitelialización (Pakyari, M et al. Adv. Wound Care 2013). Una activación prolongada de TGF p puede dar como resultado una curación de heridas retardada y la intervención terapéutica de heridas que no se curan establecidas con anticuerpos anti-TGF p da como resultado una mejor curación y una menor hipertrofia de las cicatrices (Lu et al. J. Am. Coll. Surg. 2005). Smurfl regula el grado de señalización de TGF p y BMP (Murakami Exp. Biol. Res. 2010 y Cao, et al. Sci. Rep. 2014, Wang et al. J. Cell. Mol. Med. 2012) y, por consiguiente, cabe anticipar que un inhibidor de Smurf1 normalizaría el exceso de señalización de TGF p, lo que permitiría la curación de heridas crónicas. Por consiguiente, los compuestos de la invención (o sus sales farmacéuticamente aceptables), tal como se describen en la presente, serían útiles en el tratamiento de heridas que no se curan crónicas y/o la curación de heridas en general.

EPOC y asma

La remodelación de las vías respiratorias es evidente en pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) o asma . Las características predominantes de la remodelación de las vías respiratorias en el asma son fibrosis, espesamiento de la membrana basal, incremento de los números de glóbulos rojos y una mayor masa de células de músculos lisos con una mayor respuesta contráctil que se cree que es inducida por una inflamación crónica responsable de la hipersensibilidad de las vías respiratorias y la obstrucción reversible de las vías respiratorias (Carroll et al. Am.Rev Resp. Dis. 1993, Metcalfe, et al. Physiol. Rev. 1997 y Roche, et al. Lancet 1989). En la EPOC, la remodelación pulmonar se caracteriza por la desorganización del epitelio en las vías respiratorias grandes con metaplasia escamosa, hiperplasia de células caliciformes e hipersecreción de mucosidad y la remodelación de las vías respiratorias pequeñas con expansión del músculo liso, fibrosis y destrucción alveolar en el desarrollo de enfisema que da como resultado en última instancia la restricción del flujo de aire (De, Decramer, et al. Lancet, 2012, Pain et al. Eur. Respir. Rev. 2014 y Chung, Proc. Am. Thorac. Soc. 2005). En ambas enfermedades, existe constancia de una reducción de la señalización de BMP (Kariyawasam, et al. Am. J Resp. Crit. Care Med. 2008) y un incremento de TGF p (Mak. et al. Respir. Med. 2009 y Chakir et al. J. All. Clin. Immunol. 2003) que se relacionan con un mecanismo de prorremodelación tal como una transición de fibroblasto-mesenquimal (Araya, et al. J. Clin. Invest. 2007), deposición de la matriz extracelular (Baarsma, et al. Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. PHysiol. 2011) e inflamación (Chakir et al. J. All. Clin. Immunol. 2003). Los inhibidores de Smurf1 pueden normalizar la señalización de TGF p en células de prorremodelización críticas tales como fibroblastos y músculo liso y bloquear el avance de la remodelación, lo que daría como resultado un beneficio terapéutico para pacientes con EPOC o asma. Por consiguiente, los compuestos de la invención (o sus sales farmacéuticamente aceptables), tal como se describen en la presente, serían útiles en el tratamiento de EPOC y/o asma.

Por tanto, como una realización adicional, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en terapia. En una realización adicional, la terapia se selecciona a partir de una enfermedad que se puede tratar mediante la inhibición de Smurf-1. En otra realización, la enfermedad se selecciona a partir de la lista mencionada anteriormente, convenientemente hipertensión pulmonar, que incluye

hipertensión arterial pulmonar (HAP), fibrosis, artritis reumatoide y curación de fracturas;

más convenientemente hipertensión arterial pulmonar (HAP). En otra realización, la enfermedad se selecciona entre glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), proteinuria, curación de heridas, EPOC y asma.

En otra realización, la invención proporciona un compuesto de Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de este, tal como se describe en la presente, para su uso en el tratamiento de una enfermedad que se trata mediante la inhibición de Smurf-1, que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente aceptable de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este. En una realización adicional, la enfermedad se selecciona a partir de la lista mencionada anteriormente, convenientemente hipertensión pulmonar, que incluye hipertensión arterial pulmonar (HAP), fibrosis, artritis reumatoide y curación de heridas;

más convenientemente hipertensión arterial pulmonar (HAP).

En otra realización más, la invención proporciona un compuesto de Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de este, tal como se describe en la presente, para su uso en el tratamiento de un trastorno o enfermedad mediante la inhibición de Smurf-1, que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente aceptable de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde el trastorno o enfermedad se selecciona entre glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), proteinuria, curación de heridas, EPOC y asma.

En una realización de la presente invención, se proporciona N-(2-ciclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R,3S)-3,5,5-trimet¡M,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de esta para su uso en el tratamiento de

hipertensión pulmonar, que incluye hipertensión arterial pulmonar (HAP), fibrosis, artritis reumatoide y curación de fracturas;

más convenientemente hipertensión arterial pulmonar (HAP).

En otra realización de la presente invención, se proporciona W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R,3S)-3,5,5-trimet¡M,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida o una sal farmacéuticamente aceptable de esta para su uso en el tratamiento de glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), proteinuria, curación de heridas, EPOC y asma.

En otra realización de la presente invención, se proporciona W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5-dimetil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de esta para su uso en el tratamiento de hipertensión pulmonar, que incluye hipertensión arterial pulmonar (HAP), fibrosis, artritis reumatoide y curación de fracturas; más convenientemente hipertensión arterial pulmonar (HAP).

En otra realización más de la presente invención, se proporciona W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5-dimetil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o una sal farmacéuticamente aceptable de esta para su uso en el tratamiento de glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), proteinuria, curación de heridas, EPOC y asma.

En otra realización de la presente invención, se proporciona W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de esta para su uso en el tratamiento de hipertensión pulmonar, que incluye hipertensión arterial pulmonar (HAP), fibrosis, artritis reumatoide y curación de fracturas; más convenientemente hipertensión arterial pulmonar (HAP).

En otra realización más de la presente invención, se proporciona W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o una sal farmacéuticamente aceptable de esta para su uso en el tratamiento de glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), proteinuria, curación de heridas, EPOC y asma.

En otra realización de la presente invención, se proporciona [W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1-oxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida] o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de esta para su uso en el tratamiento de hipertensión pulmonar, que incluye hipertensión arterial pulmonar (HAP), fibrosis, artritis reumatoide y curación de fracturas; más convenientemente hipertensión arterial pulmonar (HAP).

En otra realización de la presente invención, se proporciona [W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1-oxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida] o una sal farmacéuticamente aceptable de esta para su uso en el tratamiento de glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), proteinuria, curación de heridas, EPOC y asma.

En otra realización de la presente invención, se proporciona W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de esta para su uso en el tratamiento de hipertensión pulmonar, que incluye hipertensión arterial pulmonar (HAP), fibrosis, artritis reumatoide y curación de fracturas; más convenientemente hipertensión arterial pulmonar (HAP).

En una realización adicional de la presente invención, se proporciona N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida o una sal farmacéuticamente aceptable de esta para su uso en el tratamiento de glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), proteinuria, curación de heridas, EPOC y asma.

La combinación o composición farmacéutica de la presente invención puede estar en una dosificación unitaria de aproximadamente 1-1000 mg del (de los) principio(s) activo(s) para un sujeto de aproximadamente 50-70 kg, o de aproximadamente 1-500 mg o de aproximadamente 1-250 mg o de aproximadamente 1-150 mg o de aproximadamente 0,5-100 mg, o de aproximadamente 1-50 mg de los principios activos. La dosificación terapéuticamente eficaz de un compuesto, la composición farmacéutica o las combinaciones de estos depende de la especie del sujeto, el peso corporal, la edad y el estado del individuo, el trastorno o enfermedad que se esté tratando, o su gravedad. Un facultativo, médico o veterinario experto puede determinar fácilmente la cantidad eficaz de cada uno de los principios activos necesaria para prevenir, tratar o inhibir el avance del trastorno o la enfermedad.

Las propiedades de dosificación citadas anteriormente se pueden demostrar en pruebas in vivo e in vitro que utilizan convenientemente mamíferos, por ejemplo, ratones, ratas, perros, monos u órganos aislados, tejidos y preparados de estos. Los compuestos de la presente invención se pueden aplicar in vitro en forma de soluciones, por ejemplo, soluciones acuosas, e in vivo por vía enteral, parenteral, convenientemente por vía intravenosa, por ejemplo, en forma de una suspensión o en solución acuosa. La dosificación in vitro puede variar entre concentraciones de aproximadamente 10'3 molar y 10'9 molar. Una cantidad terapéuticamente eficaz in vivo puede variar en función de la vía de administración entre aproximadamente 0,1-500 mg/kg o entre aproximadamente 1-100 mg/kg.

La actividad de un compuesto de acuerdo con la presente invención se puede evaluar mediante los siguientes métodos in vivo e in vitro.

Ensayo farmacéutico

Los compuestos de la invención y sus sales farmacéuticamente aceptables, a los que se hace referencia en lo sucesivo en la presente, de manera alternativa, como «agentes de la invención», son útiles como productos farmacéuticos. En particular, los compuestos son inhibidores selectivos de Smurf-1 y se pueden evaluar en los siguientes ensayos.

Para determinar la selectividad frente a la ligasa HECT E3 de los compuestos, se empleó un panel de ensayos de autoubiquitinilación de la ligasa HECT E3 (Smurf-1, Smurf-2, WWP1, WWP2, ITCH, Nedd4, Nedd4L y E6AP). La conjugación de la ubiquitina con un sustrato proteico es un proceso de múltiples pasos. En un paso inicial que requiere ATP, se forma un enlace de tioéster entre el extremo carboxilo de la ubiquitina y un residuo interno de cisteína de la enzima activadora de la ubiquitina (E1). A continuación, la ubiquitina activada se transfiere a un residuo específico de cisteína de una enzima conjugadora de la ubiquitina (E2). E2s dona la ubiquitina a una ligasa HECT E3 (E3) desde la cual se transfiere a la proteína sustrato. Las ligasas HECT E3 se pueden autoubiquitinilar. Este evento se detecta en el ensayo de TR-FRET (siglas en inglés referentes a la transferencia de energía por resonancia de fluorescencia resuelta en el tiempo) que se utiliza en este panel. La mezcla de reacción contiene E1, E2, E3 con marca, ubiquitina conjugada con biotina, el compuesto y ATP en un tampón adecuado y se incuba durante 45 minutos para que tenga lugar la autoubiquitinilación de la ligasa E3. Para medir el grado de ligasa E3 ubiquitinilada mediante TR-FRET, después de que se complete la reacción se añade el fluoróforo dador criptato de europio (criptato de Eu3+), conjugado con estreptavidina que se une posteriormente a la ubiquitina biotinilada, y la aloficocianina modificada XL665 (fluoróforo aceptor primario HTRF®) acoplada con un anticuerpo específico para la marca (HA, His o GST), que reconoce las proteínas de fusión de la ligasa E3 respectivas. Cuando estos dos fluoróforos interactúan mediante una interacción biomolecular (en este caso, la ubiquitinilación de la ligasa E3), una porción de la energía capturada por el criptato durante la excitación se libera mediante una emisión de fluorescencia a 620 nm, mientras que la energía remanente se transfiere a XL665. A continuación, esta energía es liberada por XL665 como una florescencia específica a 665 nm. La luz a 665 nm es emitida únicamente mediante FRET con europio. Debido a que en el ensayo hay criptato de europio presente, la luz a 620 nm se detecta incluso cuando la interacción biomolecular no consigue acercar XL665 a poca distancia.

La autoubiquitinilación de Smurf-1 en las células conduce a la degradación proteosómica de Smurf-1. Por consiguiente, la inhibición del dominio catalítico de Smurf-1 elimina la degradación y autoubiquitinilación de Smurf-1, lo que conduce a una acumulación de la proteína Smurf-1 inhibida en la célula.

La actividad celular de los compuestos en el dominio HECT de Smurf-1 se evalúa midiendo la acumulación de la proteína Smurf-1 en células HEK293 que expresan de forma estable Smurf-1 con marca Prolabel bajo el control de un promotor inducible por tetraciclina, utilizando el kit de detección de ProLabel PathHunter de DiscoverX. Esta tecnología mide la cantidad de Smurf-1 con marca de Prolabel en un ensayo enzimático de complementación del lisado celular. En esta estrategia, un fragmento de complementación pequeño de 4 kDa de beta-galactosidasa, denominado ProLabel, se expresa como una fusión N-terminal con Smurf-1 humano. Esta marca es el dador enzimático (DE) y permite la detección de los niveles de proteína diana después de la complementación con la porción más grande de betagalactosidasa, que se denomina AE, de aceptor enzimático, para formar una enzima beta-galactosidasa funcional. El AE se añade de forma exógena a los lisados celulares. La actividad enzimática se mide utilizando un sustrato quimioluminiscente y es proporcional a la cantidad de enzima reconstituida y, por tanto, los niveles de Smurf-1.

Los compuestos de prueba y de referencia se preparan con una concentración de 180x [final] en DMSO al 90% y se diluyen con un factor de 1:3 en DMSO al 90%.

Para el panel de ensayo bioquímico, se transfieren 50 nl de los compuestos de prueba, compuestos de referencia y control de tampón/DMSO a los pocillos respectivos de una placa PS de «volumen pequeño» GREINER blanca de 384 pocillos. El panel de ensayo se ejecuta a temperatura ambiente en una estación de manipulación de líquidos Biomek FX. A las placas de ensayo que contenían 50 nl de soluciones de compuesto o de control en DMSO al 90%, se añadieron 4,5 ul de solución de ligasa E3 por pocillo, seguidos de 4,5 ul de la mezcla preincubada de E1/E2/Ub o la ubiquitina prediluida (control BAJO). Las placas se agitaron enérgicamente después de cada adición. En este ensayo, las concentraciones de los compuestos estaban comprendidas en el intervalo de 3 nM a 10 uM en una curva de respuesta-dosis de 8 puntos.

Después de 45 min de incubación, se detuvieron las reacciones de ubiquitinilación añadiendo 4,5 ul de NEM 2 mM, seguidos inmediatamente de 4,5 ul de una solución de detección que incluía el anticuerpo marcado con XL665 y el europio acoplado con estreptavidina para obtener un volumen total de 18 ul. Después de un tiempo de incubación de 45 min en la oscuridad, las placas se transfirieron al lector de fluorescencia Pherastar para medir la señal de TR-FRET.

Para el ensayo celular, a continuación se transfieren 250 nl de los compuestos de prueba, compuestos de referencia y control de tampón/DMSO a los pocillos respectivos de una placa de cultivo tisular CELLSTAR, uClear de GREINER PS, blanca de 384 pocillos de 120 ul estéril. Para distribuir la solución de compuesto de forma uniforme en el medio antes de añadir las células, se añaden 10 ul del medio de cultivo celular a cada pocillo de la placa que contiene el compuesto utilizando el dispensador MULTIDROP 384 y se agita enérgicamente. Las células se despegan del frasco después de una incubación corta con tripsina-EDTA, se cuentan y se diluyen hasta una concentración de 1,5x106células/mL en medio de cultivo. La expresión de Smurf-1 se induce añadiendo doxicilina hasta una concentración final de 0,2 ug/mL. Se añaden 10 ul de la suspensión de células a cada pocillo de las placas que contienen el compuesto utilizando el dispensador MULTIDROP 384. Las placas se incuban durante toda la noche a 37 °C con un 5% de CO². En este ensayo, las concentraciones de los compuestos estaban comprendidas en el intervalo de 6,75 nM a 22,5 uM en una curva de respuesta-dosis de 8 puntos.

Después de la incubación durante toda la noche con los compuestos de la presente invención, tal como se describe en la presente, los niveles de Smurf-1 se determinan utilizando el kit de detección de Prolabel PathHunter de DiscoverX. En primer lugar, se añaden manualmente 10 ul de una solución de trabajo de lisis/detección de CL utilizando una pipeta por pasos de múltiples canales, seguido de la adición de 5 ul de aceptor enzimático AE. Las placas se mezclan en un agitador de placas y se incuban durante 2-3 horas a temperatura ambiente antes de medir la señal quimioluminiscente en el lector de placas PherStar.

Los compuestos de los Ejemplos, que se muestran más adelante en la presente, tienen unos valores de CI⁵⁰ para Smurf-1 en las mediciones de los datos que se han descrito anteriormente tal como se muestran en la Tabla A.

Tabla A.

El compuesto de la presente invención, tal como se describe en la presente, se puede administrar simultáneamente con uno o más agentes terapéuticos diferentes o antes o después de estos. El compuesto de la presente invención, tal como se describe en la presente, se puede administrar por separado, por la misma vía de administración o una diferente, o junto, en la misma composición farmacéutica, con los otros agentes. Un agente terapéutico es, por ejemplo, un compuesto químico, péptido, anticuerpo, fragmento de anticuerpo o ácido nucleico, que es terapéuticamente activo o potencia la actividad terapéutica cuando se administra a un paciente en combinación con un compuesto de la invención, tal como se describe en la presente.

En una realización, la invención proporciona un producto que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este y al menos un agente terapéutico diferente como un preparado combinado para su uso simultáneo, separado o secuencial en una terapia. En una realización, la terapia es el tratamiento de una enfermedad o afección mediada por Smurf-1. Los productos proporcionados como un preparado combinado incluyen una composición que comprende el compuesto de fórmula (I) y el o los otros agentes terapéuticos juntos en la misma composición farmacéutica, o el compuesto de fórmula (I) y el o los otros agentes terapéuticos en forma separada, por ejemplo, en forma de un kit.

En una realización, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este y otro(s) agente(s) terapéutico(s). Opcionalmente, la composición farmacéutica puede comprender un portador farmacéuticamente aceptable, tal como se ha descrito anteriormente.

En una realización, la invención proporciona un kit que comprende dos o más composiciones farmacéuticas separadas, y al menos una de ellas contiene un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este. En una realización, el kit comprende medios para mantener por separado dichas composiciones, tales como un recipiente, frasco dividido o envase de aluminio dividido. Un ejemplo de un kit de este tipo es un envase de tipo blíster, como los utilizados habitualmente para el envasado de comprimidos, cápsulas y similares.

El kit de la invención se puede utilizar para administrar diferentes formas farmacéuticas, por ejemplo, oral y parenteral, para administrar las composiciones separadas a intervalos posológicos diferentes, o para valorar las composiciones separadas entre sí. Para facilitar el cumplimiento, el kit de la invención normalmente comprende instrucciones para su administración.

En las terapias combinadas de la invención, el compuesto de la invención y el otro agente terapéutico pueden ser elaborados y/o formulados por el mismo fabricante o por fabricantes diferentes. Además, el compuesto de la invención y el otro agente terapéutico pueden ser integrados en una terapia combinada: (i) antes de dispensar el producto combinado a los facultativos (por ejemplo, en el caso de un kit que comprende el compuesto de la invención y el otro agente terapéutico); (ii) por parte de los propios médicos (o bajo la dirección del médico) poco antes de la administración; (iii) en los propios pacientes, por ejemplo, durante la administración secuencial del compuesto de la invención y el otro agente terapéutico.

Por consiguiente, la invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento de una enfermedad o afección mediada por Smurf-1, donde el medicamento se prepara para su administración con otro agente terapéutico. La invención también proporciona otro agente terapéutico para su uso en el tratamiento de una enfermedad o afección mediada por Smurf-1, donde el medicamento se administra con un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

La invención también proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad o afección mediada por Smurf-1, donde el compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este se prepara para su administración con otro agente terapéutico. La invención también proporciona otro agente terapéutico para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad o afección mediada por Smurf-1, donde el otro agente terapéutico se prepara para su administración con un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este. La invención también proporciona un compuesto de fórmula (I) para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad o afección mediada por Smurf-1, donde el compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este se administra con otro agente terapéutico. La invención también proporciona otro agente terapéutico para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad o afección mediada por Smurf-1, donde el otro agente terapéutico se administra con un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

La invención también proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento de una enfermedad o afección mediada por Smurf-1, donde el paciente ha sido tratado previamente (por ejemplo, en las últimas 24 horas) con otro agente terapéutico. La invención también proporciona otro agente terapéutico para su uso en el tratamiento de una enfermedad o afección mediada por Smurf-1, donde el paciente ha sido tratado previamente (por ejemplo, en las últimas 24 horas) con un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

Los siguientes ejemplos están destinados a ilustrar la invención. Las temperaturas se dan en grados centígrados. Si no se menciona lo contrario, todas las evaporaciones se realizan a presión reducida, normalmente entre aproximadamente 15 mm de Hg y 100 mm de Hg (= 20-133 mbar). La estructura de los productos finales, intermedios y materiales de partida se confirma mediante métodos analíticos estándar, por ejemplo, microanálisis y características espectroscópicas, por ejemplo, MS, IR, RMN. Las abreviaturas utilizadas son las convencionales en la técnica.

Todos los materiales de partida, componentes, reactivos, ácidos, bases, agentes deshidratantes, disolventes y catalizadores utilizados para sintetizar los compuestos de la presente invención se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por un experto en la técnica. Además, los compuestos de la presente invención se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por un experto en la técnica tal como se muestra en los siguientes ejemplos.

Condiciones Generales:

Los espectros de masas se adquirieron en sistemas LC-MS, SFC-MS o GC-MS utilizando métodos de ionización por electronebulización, químicos y de impacto electrónico a partir de una serie de instrumentos de las siguientes configuraciones: Sistemas de HPLC Agilent 1100 con un espectrómetro de masas Agilent 6110 [M+H]+ se refiere al ión molecular protonado de la especie química.

Los espectros de RMN se ejecutaron en espectrómetros de RMN Bruker AVANCE de 400 MHz o 500 MHz utilizando ICON-RMN, bajo el control del programa TopSpin. Los espectros se midieron a 298 K, a menos que se indique lo contrario, y se midieron por referencia respecto a la resonancia del disolvente.

Instrumentación

Métodos de MS: Utilizando sistemas de HPLC Agilent 1100 con un espectrómetro de masas Agilent 6110.

pHbajo v002

Columna Phenomenex Gemini C1850 x 4,6 mm, 3,0 |jm

Temperatura de la columna 50 °C

Eluyentes A: H²O, B: metanol, ambos con un 0,1% de TFA

Tasa de flujo 1,0 mL/min

Gradiente de un 5% a un 95% de B en 2,0 min, 0,2 min con un 95% de B

2minLC v003

Columna Waters BEH C1850 x 2,1 mm, 1,7 |jm

Temperatura de la columna 50 °C

Eluyentes A: H²O, B: acetonitrilo, ambos con un 0,1% de TFA

Tasa de flujo 0,8 mL/min

Gradiente 0,20 min con un 5% de B; de un 5% a un 95% de B en 1,30 min, 0,25 min con un 95% de B 8minpHba¡ov01:

Columna: Waters Acquity CSH 1,7 jm , 2,1 x 100 mm

Temperatura:

Fase móvil: A: agua 0,1% de ácido fórmico B: acetonitrilo 0,1% de ácido fórmico

Tasa de flujo: 0,7 mL/min

Gradiente: 0,0 min 2% de B, 0,3-6,5 min 2-98% de B, 6,5-7,5 min 98% de B, 7,5-8,0 min 5-98% de B 2minpHba¡o:

Columna: Waters Acquity CSH 1,7 jm , 2,1 x 50 mm

Temperatura:

Fase móvil: A: agua 0,1% de ácido fórmico B: acetonitrilo 0,1% de ácido fórmico

Tasa de flujo: 1,0 mL/min

Gradiente: 0,0 min 5% de B, 0,2-1,3 min 5-98% de B, 1,3-1,55 min 98% de B, 1,55-1,6 min 98-5% de B 2minpHba¡ov01:

Columna: Waters Acquity CSH 1,7 jm , 2,1 x 50 mm

Temperatura:

Fase móvil: A: agua 0,1% de ácido fórmico B: acetonitrilo 0,1% de ácido fórmico

Tasa de flujo: 1,0 mL/min

Gradiente: 0,0 min 5% de B, 0,2-1,55 min 5-98% de B, 1,55-1,75 min 98% de B, 1,75-1,8 min 98-5% de B

2m¡npHbaiov03:

Columna: Waters Acquity CSH 1,7 jm , 2,1 x 50 mm

Temperatura:

Fase móvil: A: agua 0,1% de ácido fórmico B: acetonitrilo 0,1% de ácido fórmico

Tasa de flujo: 1.0 mL/min

Gradiente: 0,0 min 5% de B, 0,2-1.8 min 5-98% de B, 1,8-2,1 min 98% de B, 2,1-2,3 min 98% de B 2minpHelevadov03:

Columna: Waters Acquity CSH 1,7 |jm, 2,1 x 50 mm

Temperatura:

Fase móvil: A:agua 0,1% de amoniaco B: acetonitrilo 0,1% de amoniaco

Tasa de flujo: 1.0 mL/min

Gradiente: 0,0 min 5% de B, 0,2-1,8 min 5-98% de B, 1,8-2,1 min 98% de B, 2,1-2,3 min 98-5% de B 10minpHbaiov01:

Columna: Waters Acquity CSH 1,7 jm , 2,1 x 100 mm

Temperatura:

Fase móvil: A: agua 0,1% de ácido fórmico B: acetonitrilo 0,1% de ácido fórmico

Tasa de flujo: 0,7 mL/min

Gradiente: 0,0 min 2% de B, 0,5-8,0 min 2-98% de B, 8,0-9,0 min 98% de B, 9,0-9,1 min 98-2% de B LCMS (SRPb)

Columna: Acquity HSS T32,1 x 50 mm, 1,8 micras

Temperatura de la columna: 60 °C

Eluyentes: A: H²O (0,05% de ácido fórmico, acetato de amonio 3,75 mM)

B: acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico)

Tasa de flujo: 1,0 mL/min

Gradiente de un 5% a un 98% en 1,4 min

Abreviaturas:

ac. acuoso(a)

a ancho

d doblete

dd doblete de dobletes

DBU 1,8-diazabicicloundec-7-eno

DCM diclorometano

DIBAL-H hidruro de diisobutilaluminio

DIPEA dietilisopropilamina

DME dimetoxietano

DMF N,N-dimetilformamida

DMSO sulfóxido de dimetilo

°C grados centígrados

EDCI 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida

Et2O éter dietílico

EtOAc acetato de etilo

EtOH etanol

EtaN trietilamina

HATU 1 -hexafluorofosfato de 3-óxido de (1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio HCl ácido clorhídrico

h hora(s)

H²SO⁴ ácido sulfúrico

K²CO³ carbonato de potasio

KHMDS bis(trimetilsilil)amiduro de potasio

KOAc acetato de potasio

LCMS cromatografía líquida y espectrometría de masas

LDA diisopropilamiduro de litio

M molar

MgSO4 sulfato de magnesio

MeCN acetonitrilo

MeOH metanol

MS espectrometría de masas

Mult(s) multiplete(s)

mg miligramo

min minuto(s)

mL mililitro

mmol milimol

m/z relación entre masa y carga

NaBH4 borohidruro de sodio

NaH hidruro de sodio

NaHCOa hidrogenocarbonato de sodio

NaOH hidróxido de sodio

Na2SO4 sulfato de sodio

n-BuLi butillitio

NH⁴CI cloruro de amonio

NMP W-metilpirrolidona

RMN resonancia magnética nuclear

PdCl²(PPhs⁾² dicloruro de (bistrifenilfosfina)paladio

PdCl²(dppf) dicloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferrocenopaladio (II)

PdCl²(dppf)-CH²Cl² complejo de dicloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferrocenopaladio (II) y diclorometano Pd(PhsP)4 tetrakis(trifenilfosfina)paladio (⁰ )

ppm partes por millón

TsOH ácido p-toluenosulfónico

c cuartete

rac racémico

tR tiempo de retención

s singlete

t triplete

TBAI yoduro de tetrabutilamonio

TBAF fluoruro de tetrabutilamonio

TBME éter ferf-butil metílico

TFA ácido trifluoroacético

THF tetrahidrofurano

TMSCI cloruro de trimetilsililo

TMSOTf triflato de trimetilsililo

UV ultravioleta

Preparación de los compuestos finales

Ejemplo 1:

[M-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1tf-pirazol-4-il)-5-(4-isopropilciclohex-1-en-1 -il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]

Paso 1: [Trifluorometanosulfonato de 4-isopropilciclohex-1-en-1-ilo]

Una solución de 4-isopropilciclohexanona (1 g, 7,13 mmol) en THF anhidro (3 mL) en atmósfera de nitrógeno y enfriada hasta -70 °C se trató gota a gota con LDA 2 M (en THF/heptano/etilbenceno) (4,28 mL, 8,56 mmol). Después de que se completara la adición, se permitió que la mezcla se agitara a -70 °C durante 1,5 horas. Se añadió a la mezcla una solución de 1,1,1-trifluoro-N-(p¡ridm-2-il)-N-((trifluoromet¡l)sulfon¡l)metanosulfonam¡da (2,81 g, 7,84 mmol) en THF anhidro (2 mL). La reacción se mantuvo a -70 °C, se agitó durante 3 h, se desactivó cuidadosamente con agua y se dejó reposar durante toda la noche. La mezcla resultante se extrajo con éter dietílico y los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaOH (ac.) al 10%, se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar un material crudo. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con isohexano al 100% proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCla) 55,76 (1H, t), 2,45-2,30 (2H, mults), 2,22 (1H, d a), 1,99-1,90 (2H,mults), 1,61-1,52 (1H, mult), 1,48-1,36 (2H, mults), 0,93 (6H, dd).

Paso 2: [2-(4-Isoprop¡lc¡clohex-1-en-1-¡l)-4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolano]

Una solución agitada de [trifluorometanosulfonato de 4-¡soprop¡lc¡clohex-1-en-1-¡lo] (1,75 g, 6,43 mmol) en dioxano (30 mL) se trató con bispinacolatodiboro (1,714 g, 6,75 mmol), acetato de potasio (1,892 g, 19,28 mmol) y aducto de PdCl²(dppf).CH²Cl² (0,157 g, 0,193 mmol) y la mezcla se agitó a 80 °C durante 6 h. La mezcla resultante se diluyó con EtOAc y se lavó con agua. La fase orgánica se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida para proporcionar un material crudo. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-30% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título.

Paso 3: [5-(4-Isoprop¡lc¡clohex-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de etilo]

En un vial para microondas de 2-5 mL, se añadió [2-(4-¡soprop¡lc¡clohex-1-en-1-¡l)-4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-dioxaborolano] (282 mg, 1,127 mmol), 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio A) (264 mg, 1,127 mmol), PdCh(dppf) (82 mg, 0,113 mmol), carbonato de potasio (467 mg, 3,38 mmol), MeCN (2 mL) y agua (0,667 mL). El vial se purgó con nitrógeno, se selló y se colocó en un microondas a 80 °C durante 1 h. La mezcla resultante se diluyó con EtOAc y agua, y se separaron las fases. Los componentes orgánicos se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para obtener un crudo de aceite marrón. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-10% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,73 minutos; MS m/z [M+H]+ 278,5; Método 2minpHbajov03

Paso 4: [Ácido 5-(4-¡soprop¡lc¡clohex-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxíl¡co]

A una solución de [5-(4-¡soprop¡lc¡clohex-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de etilo] (92 mg, 0,332 mmol) en THF (5 mL) y MeOH (3 mL), se añadió hidróxido de sodio (ac.) 2 M (0,166 mL, 0,332 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla resultante se concentró a presión reducida y se diluyó con agua. La fase acuosa se lavó con EtOAc, se acidificó con HCl (ac.) 2 M y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,70 minutos; MS m/z [M+H]+ 250,2; Método 2minpHbajov03

Paso 5: [N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(4-¡soprop¡lc¡clohex-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxamida]

A una solución de [ácido 5-(4-¡soprop¡lc¡clohex-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxíl¡co] (42 mg, 0,168 mmol) en DCM anhidro (3 mL) en atmósfera de nitrógeno, se añadió DMF (0,026 mL, 0,337 mmol) seguida de cloruro de oxalilo (0,016 mL, 0,185 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Se añadió 4-am¡no-2-c¡clohex¡l-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D) (38,8 mg, 0,185 mmol) y a continuación trietilamina (0,070 mL, 0,505 mmol) y la mezcla se agitó durante 30 min. Se añadió agua y la mezcla se agitó enérgicamente antes de hacerla pasar a través de un cartucho separador de fases. El eluyente orgánico se recolectó y se concentró a presión reducida para obtener un aceite naranja. El material crudo se disolvió en DMSO (0,9 mL) y se purificó utilizando cromatografía de fase inversa automatizada dirigida por la masa con un gradiente de 9,5 minutos de 50-98% de MeCN en agua (0,1% de ácido fórmico). La fracción del producto se concentró a presión reducida. La fracción acuosa remanente se trató con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y se extrajo con DCM, haciendo pasar los extractos orgánicos a través de un cartucho separador de fases. Se eliminó el disolvente con una corriente de aire y se secó a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 4,98 minutos; MS m/z [M+H]+ 441,4; Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 8,04 (1H, s a), 6,33 (1H, s), 4,06 (1H, tt), 3,26 (3H, s), 2,62 (1H, d a), 2,48-2,35 (2H, mults), 2,31 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,05-1,86 (8H,mults), 1,71 (1H, d a), 1,60-1,52 (1H,mults), 1,43-1,17 (5H, mults), 0,96 (3H, d), 0,94 (3H, d).

Los Ejemplos 1.1 a 1.2 se prepararon mediante un método similar al del Ejemplo 1 reemplazando la 4-isopropilciclohexanona (Paso 1) por el derivado de tipo cetona adecuado (que o bien se encuentra disponible a partir de proveedores comerciales o se obtiene mediante preparaciones descritas más adelante en la presente).

Ejemplo 1.1:

Una mezcla diastereomérica de W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-il)-5-(6-etil-4-metilciclohex-1 -en-1 -il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

LC-MS: tR = 4,90 minutos; MS m/z [M+H]+ 441,1; Método 8minpHbajov01

Ejemplo 1.2:

W-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-il)-5-(6,6-dimetilciclohex-1-en-1 -il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

LC-MS: tR = 4,60 minutos; MS m/z [M+H]+ 427,7; Método 8minpHbajov01

Los Ejemplos 1.3 a 1.7 se prepararon mediante un método similar al del Ejemplo 1 reemplazando el 2-(4-isopropilciclohex-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (Paso 3) por el derivado de tipo ácido borónico o dioxaborolano adecuado (que o bien se encuentra disponible a partir de proveedores comerciales o se obtiene mediante preparaciones descritas más adelante en la presente).

Ejemplo 1.3:

[W-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-il)-5-(4-etilciclohex-1-en-1 -il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]

LC-MS: tR = 4,77 minutos; MS m/z [M+H]+ 427,6; Método 8minpHbajov01

Ejemplo 1.4:

[5-(4-(fert-Butil)ciclohex-1-en-1 -il)-W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]

LC-MS: tR = 5,16 minutos; MS m/z [M+H]+ 455,4; Método 8minpHbajov01

Ejemplo 1.5:

[W-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-il)-4-metil-5-(4-metilciclohex-1-en-1 -il)isoxazol-3-carboxamida]

LC-MS: tR = 4,47 minutos; MS m/z [M+H]+ 414,5; Método 8minpHbajov01

Ejemplo 1.6:

5-(Ciclohept-1-en-1 -il)-W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

LC-MS: tR = 4,42 minutos; MS m/z [M+H]+ 413,6; Método 8minpHbajov01

Ejemplo 1.7:

[W-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-il)-4-metil-5-(4-(trifluorometil)ciclohex-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxamida]

LC-MS: tR = 1,36 minutos; MS m/z [M+H]+ 467,4; Método 2minpHbajov03

Ejemplo 2:

W-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-il)-4-metil-5-(espiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida

A una solución de ciclopentanocarbaldehído (Aldrich) (0,82 g, 8,36 mmol) en tolueno anhidro (10 mL), se añadió cetona metil vinílica (Alfa Aesar) (0,684 mL, 8,36 mmol) seguida de una cantidad catalítica de H²SO⁴ concentrado (0,045 mL, 0,836 mmol). La mezcla se calentó a 45 °C durante 1,5 horas, a continuación se calentó a reflujo durante 1 hora utilizando una trampa de Dean-Stark. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se añadió más cetona metil vinílica (Alfa Aesar) (0,684 mL, 8,36 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 hora, se dejó enfriar hasta temperatura ambiente y se trató con una solución acuosa de NaHCO³ 1 M (30 mL). La solución acuosa se extrajo con tolueno y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-20% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCh) 56,74 (1H, d), 5,86 (1H, d), 2,45 (2H, t), 1,92 (2H, t), 1,80-1,71 (4H, mults a), 1,71-1,61 (4H, mults a).

Paso 2: Espiro[4.5]decan-8-ona

Una solución de espiro[4.5]dec-6-en-8-ona (442 mg, 2,94 mmol) en etanol (15 mL) se purgó con nitrógeno y se trató con Pd-C al ¹⁰ %, 50% de contenido de agua (Alfa Aesar, 38303) (313 mg, 2,94 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas en atmósfera de hidrógeno, se filtró a través de Celite® y se lavó con etanol. El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCh) 52,31-2,25 (4H, t), 1,72-1,66 (4H, t), 1,65-1,60 (4H, mults a), 1,53-1,47 (4H, mults a). Paso 3: Trifluorometanosulfonato de espiro[4.5]dec-7-en-8-ilo

Se añadió n-BuLi 1,6 M en hexano (1,900 mL, 3,04 mmol) a una solución agitada de diisopropilamina (0,454 mL, 3,19 mmol) en THF anhidro (20 mL) en atmósfera de nitrógeno a -78 °C. Se permitió que la solución se calentara hasta 0 °C durante 20 minutos antes de enfriarla de nuevo hasta -78 °C. Se añadió una solución de espiro[4.5]decan-8-ona (0,440 g, 2,89 mmol) en THF anhidro (5 mL) durante 5 minutos y la solución se agitó a -78 °C durante 50 minutos antes de añadir una solución de 2-[W,Ñ-bis(trifluorometilsulfonil)amino]piridina (Alfa Aesar) (1,141 g, 3,19 mmol) en THF anhidro (5 mL). La mezcla se agitó y se permitió que se calentara hasta temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se desactivó con NaHCO3 acuoso saturado (4 mL). La porción acuosa se extrajo con TBME (x2) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaOH acuoso al 10% y salmuera, se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-30% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título.

Paso 4: 4,4,5,5-Tetrametil-2-(espiro[4.5]dec-7-en-8-il)-1,3,2-dioxaborolano

A una solución agitada de trifluorometanosulfonato de espiro[4.5]dec-7-en-8-ilo (635 mg, 2,234 mmol) en 1,4-dioxano anhidro (15 mL), se añadió bis(pinacolato)diboro (Alfa Aesar) (567 mg, 2,234 mmol) seguido de acetato de potasio (Acros) (438 mg, 4,47 mmol) y aducto de PdCh(dppf).CH²Cl² (Alfa Aesar) (54,7 mg, 0,067 mmol). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno y se calentó hasta ⁸⁰ °C durante 16 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró a través de Celite® y se lavó con TBME. El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre EtOAc (50 mL) y agua (50 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera (30 mL), se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-30% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título.

Paso 5: 4-Metil-5-(espiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxilato de etilo

En un vial para microondas de 2-5 mL que contenía una solución de 4,4,5,5-tetrametil-2-(espiro[4.5]dec-7-en-8-il)-1,3,2-dioxaborolano (168 mg, 0,641 mmol) en MeCN (2 mL), se añadió 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio A) (150 mg, 0,641 mmol) seguido de K²CO^{3 ( 266} mg, 1,923 mmol), aducto de PdCh(dppf).CH²Cl² (Alfa Aesar) (52,3 mg, 0,064 mmol) y agua (1 mL). El vial se purgó con nitrógeno, se selló y se trató en un microondas (Biotage Smith Initiator) a 90 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se repartió entre agua (20 mL) y EtOAc (20 mL) y la fase orgánica se lavó con salmuera (20 mL), se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener un aceite naranja. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-30% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,75 minutos; MS m/z [M+H]+ 290,4; Método 2minpHbajov03

Paso 6: Ácido 4-metil-5-(espiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxílico

A una solución agitada de 4-metil-5-(espiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxilato de etilo (180 mg, 0,622 mmol) en etanol (10 mL), se añadió NaOH (ac.) 2 M (0,311 mL, 0,622 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua (30 mL) y se acidificó hasta pH 5-6 mediante la adición de HCl (ac.) 2 M. La fracción acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 mL) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,61 minutos; MS m/z [M+H]+ 262,3; Método 2minpHbajov03

Paso 7: N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(espiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida

A una solución agitada de ácido 4-metil-5-(espiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxílico (95 mg, 0,364 mmol) en NMP anhidra (3 mL), se añadió HATU (152 mg, 0,400 mmol) seguido de 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D) (84 mg, 0,400 mmol) y trietilamina (0,111 mL, 0,800 mmol) y esto se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (30 mL) y NaOH (ac.) 1 M (30 mL) y la fase orgánica se lavó con agua (30 mL) y salmuera (30 mL), se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener un aceite naranja. El material crudo se disolvió en DMSO y se purificó utilizando cromatografía de fase inversa automatizada dirigida por UV con un gradiente de 9,5 minutos de 50-98% de MeCN en agua (0,1% de ácido fórmico). La fracción del producto se añadió a EtOAc (50 mL) y se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO³ (50 mL). Los extractos orgánicos se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,59 minutos; MS m/z [M+H]+ 453,7; Método 2minpHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCls) 58,21 (1H, s a), 6,19 (1H, mult), 4,00 (1H, tt), 3,25 (3H, s), 2,46-2,40 (2H, mults a), 2,23 (3H, s), 2,14 (3H, s), 2,10-2,05 (2H, mults), 1,99-1,88 (2H, mults), 1,84-1,74 (4H, mults a), 1,66-1,53 (7H, mults a), 1,41-1,35 (4H, mults a), 1,34-1,23 (2H, mults a), 1,21-1,10 (1H, mult a).

Ejemplo 2,1:

[W-(2-CiclohexN-1,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-M)-4-metil-5-(1-oxaespiro[4.5]dec-7-en-8-N)isoxazol-3-carboxamida]

El compuesto del título se preparó mediante un método similar al del Ejemplo 2 reemplazando la espiro[4.5]decan-8-ona (Paso 3) por [1-oxaespiro[4.5]decan-8-ona] (Fluorochem);

LC-MS: tR = 1,10 minutos; MS m/z [M+H]+ 455,5; Método 2minpHbajov01

Ejemplo 2.2:

W-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-N)-5-(4,4-dimetNciclohex-1-en-1 -il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

El compuesto del título se preparó mediante un método similar al del Ejemplo 2 reemplazando el 4,4,5,5-tetrametil-2-(espiro[4.5]dec-7-en-8-il)-1,3,2-dioxaborolano (Paso 5) por el éster pinacólico del ácido 4,4-dimetilciclohexen-1-ilborónico (Combi Blocks);

LC-MS: tR = 5,52 minutos; MS m/z 427,6 [M+H]+; Método 10minpHbajov01

Ejemplo 3:

W-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-M)-5-(4,4-dimetilcidopent-1-en-1 -M)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Paso 1: Trifluorometanosulfonato de 4,4-dimetilciclopent-1-en-1-ilo

A una solución agitada de 4,4-dimetilciclopent-2-enona (Atlantic) (0,500 g, 4,54 mmol) en THF anhidro (25 mL) en atmósfera de nitrógeno a -78 °C, se añadió L-Selectride 1 M en t Hf (4,539 mL, 4,54 mmol). La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 1 hora y se trató con una solución de 1,1,1-trifluoro-N-(piridin-2-il)-N-((trifluorometil)sulfonil)metanosulfonamida (Alfa Aesar) (1,626 g, 4,54 mmol) en THF anhidro (5 mL). La mezcla se agitó y se permitió que se calentara hasta temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se repartió entre hexano (60 mL) y agua (50 mL), las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con hexano (50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaOH acuoso al 10% (40 mL) y salmuera (40 mL), se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para obtener un aceite de color amarillo pálido. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con isohexano al 100% proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCls) 55,54 (1H, mult), 2,42-2,39 (2H, mult), 2,23-2,20 (2H, mult), 1,17 (3H, s), 1,17 (3H, s). Paso 2: 2-(4,4-Dimetilciclopent-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano

A una solución agitada de trifluorometanosulfonato de 4,4-dimetilciclopent-1-en-1-ilo (367 mg, 1,503 mmol) en 1,4-dioxano anhidro (10 mL), se añadió bis(pinacolato)diboro (Alfa Aesar) (382 mg, 1,503 mmol) seguido de acetato de potasio (Acros) (295 mg, 3,01 mmol) y aducto de PdCl²(dppf).CH²Cl² (Alfa Aesar) (36,8 mg, 0,045 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 80 °C y se agitó durante 16 horas. La mezcla resultante se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró a través de Celite® y se lavó con TBME (100 mL). El filtrado orgánico se lavó con agua (50 mL) y salmuera (30 mL), se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener un aceite marrón. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con isohexano al 100% proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCls) 56,34-6,31 (1H, mult), 2,21-2,18 (2H, mult), 2,17-2,14 (2H, mult), 1,20 (12H, s) 0,99 (6H, s).

Paso 3: 5-(4,4-Dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

En un vial para microondas de 2-5 mL que contenía una solución de 2-(4,4-dimetilciclopent-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (214 mg, 0,966 mmol) en acetonitrilo (2 mL), se añadió 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio A) (226 mg, 0,966 mmol) seguido de K²CO³ (400 mg, 2,90 mmol), aducto de PdCl²(dppf).CH²Cl² (Alfa Aesar) (79 mg, 0,097 mmol) y agua (1 mL). El vial se purgó con nitrógeno, se selló y se calentó en un microondas (Biotage Smith Initiator) a 90 °C durante 1 hora. La mezcla resultante se filtró a través de Celite® y se lavó con EtOAc (50 mL). El filtrado se lavó con agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener un aceite marrón. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con isohexano al 100% proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,64 minutos; MS m/z [M+H]+ 250,9/251,5; Método 2minpHbajov03

Paso 4: Ácido 5-(4,4-dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico

A una solución agitada de 5-(4,4-dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (243 mg, 0,975 mmol) en etanol (5 mL), se añadió NaOH (ac.) 2 M (0,975 mL, 1,949 mmol) y la solución se agitó a temperatura ambiente. Tras completarse, la mezcla de reacción se diluyó con agua (30 mL) y se acidificó hasta pH 5-6 mediante la adición de HCl (ac.) 2 M. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 mL) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron con MgSO⁴ y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,46 minutos; MS m/z [M+H]+ 222,5; Método 2minpHbajov03.

Paso 5: N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

A una solución agitada de ácido 5-(4,4-dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (105 mg, 0,475 mmol) en NMP anhidra (3 mL), se añadió HATU (198 mg, 0,522 mmol) seguido de 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D) (109 mg, 0,522 mmol) y trietilamina (0,146 mL, 1,044 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se repartió entre EtOAc (20 mL) y NaOH (ac.) 1 M (20 mL) y la fase orgánica se lavó con agua (20 mL) y salmuera (20 mL), se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-60% de EtOAc en isohexano proporcionó un material crudo. El material crudo se disolvió en DMSO y se purificó utilizando cromatografía de fase inversa automatizada dirigida por la masa con un gradiente de 9,5 minutos de 40-80% de MeCN en agua (0,1% de ácido fórmico). La fracción del producto se añadió a EtOAc (50 mL) y se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (50 mL). Los extractos orgánicos se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,40minutos; MS m/z [M+H]+ 413,1/414,6; Método 2minpHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCb) 58,09 (1H, s a), 6,27 (1H, t a), 4,06 (1H, tt), 3,27 (3H, s), 2,66 (2H, mult), 2,40 (2H, mult), 2,34 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,06-1,95 (2H, mults a), 1,92-1,83 (4H, mults a), 1,75-1,68 (1H, mult a), 1,44-1,31 (2H, mults a), 1,30-1,23 (1H, mult a), 1,19 (6H, s).

Ejemplo 4:

[W-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-M)-4-metM-5-(2-oxaespiro[4.5]dec-7-en-8-M)isoxazol-3-carboxamida]

Paso 1: 1,4-Dioxaespiro[4.51decan-8-carboxilato de etilo

Una mezcla de 4-oxociclohexanocarboxilato de etilo (11,7 g, 68,7 mmol), etilenglicol (5,75 mL, 103 mmol) y p-TsOH (0,620 g, 3,26 mmol) en tolueno (60 mL) se agitó a reflujo utilizando una trampa de Dean-Stark para recolectar agua durante 4 h. La mezcla resultante se enfrió hasta temperatura ambiente, se desactivó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (30 mL) y se diluyó con agua EtOAc (100 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera (30 mL), se secó con sulfato de sodio anhidro y se filtró. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar un aceite amarillo. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCb) 54,14 (2H, c), 3,96 (4H, s), 2,38-2,31 (1H, mult a), 1,99-1,91 (2H, mults a), 1,87-1,76 (4H, mults a), 1,61-1,53 (2H, mults a), 1,26 (3H, t).

Paso 2: 8-(2-(Benciloxi)etil)-1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-carboxilato de etilo

Se añadió (8-alil-1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)metanol (6 g, 28,0 mmol) en THF anhidro (100 mL) a una solución enfriada previamente de Kh Md S (1 M en THF) (36,4 mL, 36,4 mmol) en THF (100 mL) a -78 °C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a esta temperatura durante 2 h y se añadió una solución de ((2-bromoetoxi)metil)benceno (5,31 mL, 33,6 mmol) en THF (100 mL). Se permitió que la mezcla de reacción se calentara hasta temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se desactivó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se añadió EtOAc. Los extractos orgánicos se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-40% de EtOAc en isohexano proporcionó un material crudo. El material crudo se adsorbió de nuevo sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-20% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 57,36-7,31 (2H, mults), 7,30-7,26 (3H, mults), 4,39 (2H, s), 4,01 (2H, c), 3,84 (4H, s), 3,40 (2H, t), 2,05-1,98 (2H, mults a), 1,78 (2H, t), 1,61-1,54 (2H, mults a), 1,49-1,41 (4H, mults a), 1,12 (3H, t).

Paso 3: [1,4,10-Trioxadiespiro[4.2.4. 2] tetradecan-9-ona]

Se desgasificó [8-(2-(benciloxi)etil)-1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-carboxilato de etilo] (1,6 g, 4,59 mmol) en etanol (5 mL) y se rellenó completamente con nitrógeno. Se añadió Pd-C (0,147 g, 1,378 mmol) y la mezcla se agitó en atmósfera de hidrógeno. T ras completarse, la mezcla de reacción se filtró a través de un cartucho de Celite®, eluyendo con EtOH. El filtrado se recolectó y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCla) 54,29 (2H, t), 3,97 (4H, mult), 2,19 (2H, t), 2,08-1,99 (2H, mults a), 1,97-1,89 (2H, mults a), 1,71-1,56 (4H, mults a).

Paso 5: [1,4,10-Trioxadiespiro[4.2.4. 2]tetradecan-9-ol]

Se enfrió 1,4,10-trioxadiespiro[4.2.4. 2]tetradecan-9-ona (880 mg, 4,15 mmol) en tolueno (30 mL), en atmósfera de nitrógeno, hasta -78 °C y se trató con DlBAL-H 1 M (1 M en tolueno) (4,56 mL, 4,56 mmol). La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 2 horas. La mezcla resultante se trató con una solución acuosa de ácido acético al 10% (18 mL)/ hielo 60 g) y se agitó durante 5 min con cloroformo (150 mL). La fracción acuosa se separó y se extrajo con cloroformo (x3) y los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCla) 55,13 (1H, s), 4,11 (1H, mult), 3,97 (4H, mult), 3,93 (1H, mult), 2,12 (1H, s), 1,95-1,77 (3H, mults a), 1,76-1,60 (6H, mults a), 1,58-1,49 (1H, mults a).

Paso 6: [1,4,10-Trioxadiespiro[4.2.4.2]tetradecano]

A una solución agitada de trietilsilano (1,965 mL, 12,30 mmol) en DCM (40 mL), en atmósfera de nitrógeno, a -78 °C, se añadió sucesivamente ácido trifluoroacético (0,948 mL, 12,30 mmol) y [1,4,10-trioxadiespiro[4.2.4.2]tetradecan-9-ol] (0,878 g, 4,1 mmol) en DCM (40 mL) a -78 °C. La mezcla resultante se calentó lentamente hasta 0 °C y se agitó durante 2 horas. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título.

Paso 7: [2-Oxaespiro[4.5]decan-8-ona]

Una solución agitada de 1,4,10-trioxadiespiro[4.2.4.2]tetradecano (813 mg, 4,1 mmol) en acetona (28 mL) a temperatura ambiente se trató con una solución acuosa de HCl al 10% (12,46 mL, 41,0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla resultante se diluyó con salmuera (40 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 30 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 30 mL) y salmuera (1 x 30 mL), se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCb) 53,96 (2H, t), 3,70 (2H, s), 2,45-2,36 (4H, mults a), 1,95-1,89 (6H, mults).

Paso 8: [Trifluorometanosulfonato de 2-oxaespiro[4.5]dec-7-en-8-ilo]

Una solución de diisopropilamina (0,407 mL, 2,85 mmol) en THF (25 mL), en atmósfera de nitrógeno, se enfrió hasta -78 °C y se trató con n-BuLi (1.0 M en hexanos) (1,702 mL, 2,72 mmol). La mezcla de reacción se calentó hasta 0 °C en 30 min y se enfrió hasta -78 °C antes de añadir 2-oxaespiro[4.5]decan-8-ona (400 mg, 2,59 mmol) en THF (25 mL).

Después de 1,5 horas a -78 °C, la mezcla de reacción se trató con 1,1,1-trifluoro-N-(piridm-2-¡l)-N-((trifluorometil)sulfonil)metanosulfonamida (1208 mg, 3,37 mmol) en THF (10 mL) y se permitió que se calentara hasta temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y a continuación se diluyó con EtOAc. La fase orgánica se secó con MgSO4, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-25% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCb) 55,77 (1H, t), 3,92 (2H, t), 3,56 (2H, mult), 2,46-2,29 (2H, mult a), 2,25-2,22 (2H, mult a), 1,83-1,76 (4H, mults a).

Paso 9: [4,4,5,5-Tetramet¡l-2-(2-oxaesp¡ro[4.5]dec-7-en-8-¡l)-1,3,2-d¡oxaborolano]

Se trataron [trifluorometanosulfonato de 2-oxaespiro[4.5]dec-7-en-8-ilo] (270 mg, 0,943 mmol) y 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (251 mg, 0,990 mmol) en dioxano (5 mL) con acetato de potasio (185 mg, 1,886 mmol) y la mezcla se desgasificó y se rellenó completamente con nitrógeno. Se añadió el aducto de PdCh(dppf).CH²Cl² (23,11 mg, 0,028 mmol) y la mezcla se calentó hasta 80 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción cruda se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-15% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCla) 56,54 (1H, mult), 3,88 (2H, t), 3,52 (2H, mult), 2,24-2,18 (2H, mults a), 2,15-2,12 (2H, mults a), 1,76-1,68 (2H, mults a), 1,62-1,57 (2H, mults a), 1,28 (12H, s).

Paso 10: ^-M etil^-^-oxaesp iro^^dec^-en^-il^soxazo l^-carboxila to de etilo]

Se combinaron [4,4,5,5-tetramet¡l-2-(2-oxaesp¡ro[4.5]dec-7-en-8-¡l)-1,3,2-d¡oxaborolano] (0,172 g, 0,651 mmol), 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio A) (0,183 g, 0,781 mmol) y Cs2cO3 (0,849 g, 2,60 mmol) en DME (3 mL) y agua (1,250 mL). Se añadió el aducto de PdCl²(dppf).CH²Cl² (0,016 g, 0,020 mmol) y la mezcla se desgasificó y se rellenó completamente con nitrógeno. La mezcla se agitó en un microondas a 90 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción bifásica se separó y la fase orgánica se adsorbió sobre sílice. La purificación mediante cromatografía eluyendo con un gradiente de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCla) 56,27 (1H, mult), 4,42 (2H, c), 3,91(2H, t), 3,56 (2H, mult), 2,56-2,51 (2H, mults a), 2,31­ 2,27 (2H, mults a), 2,28 (3H, s), 1,83-1,72 (4H, mults a), 1,41 (3H, t).

Paso 11: [Ácido 4-met¡l-5-(2-oxaesp¡ro[4.5]dec-7-en-8-¡l)¡soxazol-3-carboxíl¡co]

Se trató [4-met¡l-5-(2-oxaesp¡ro[4.5]dec-7-en-8-¡l)¡soxazol-3-carbox¡lato de etilo] (170 mg, 0,584 mmol) en MeOH (3,60 mL) y THF (6 mL) a temperatura ambiente con NaOH (ac.) 2 M (0,584 mL, 1,167 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente y se trató con HCl (ac.) 2 M (0,2 mL) y EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 0,61 minutos; MS m/z [M+H]+ 264,4; Método 2minpHelevadov03

Paso 12: [N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(2-oxaesp¡ro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida]

Una solución de [ácido 4-met¡l-5-(2-oxaesp¡ro[4.5]dec-7-en-8-¡l)¡soxazol-3-carboxíl¡co] (40 mg, 0,152 mmol) en DMF (3 mL) se trató con 4-am¡no-2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-1H-p¡razol-3(2H)-ona (Intermedio D) (38,2 mg, 0,182 mmol), DIPEA (0,106 mL, 0,608 mmol) y HATU (75 mg, 0,198 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Se añadió agua a la mezcla y la fracción acuosa se extrajo con EtOAc (x2). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con cloruro de litio (ac.) 0,5 M, se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-5% de MeOH en EtOAc proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,19 minutos; MS m/z [M+H]+ 455,5; Método 2minpHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCb) 58,31 (1H, s), 6,23 (1H, mult), 4,01 (1H, tt), 3,88 (2H, t), 3,53 (2H, s), 3,26 (3H, s), 2,51­ 2,44 (2H, mults a), 2,28-2,25 (2H, mults), 2,23 (3H, s), 2,14 (3H, s), 1,98-1,87 (2H, mults a), 1,81-1,70 (8H, mults), 1,65-1,58 (1H, mult a), 1,38-1,33 (1H, mult a), 1,31-1,25 (1H, mult a), 1,18-1,05 (1H mult a).

[W-(2-CiclohexiM ,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-M)-5-(4-isopropoxicidohex-1 -en-1 -il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]

Paso 1: 1,4-Dioxaespiro[4.5]decan-8-ol

A una solución agitada del acetal monoetilénico de la 1,4-ciclohexadiona (Aldrich) (2 g, 12,81 mmol) en MeOH anhidro (30 mL) a 0 °C, se añadió NaBH4 (0,727 g, 19,21 mmol) en porciones, mantenido la temperatura por debajo de 5 °C. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 15 minutos y a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla resultante se concentró a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCls) 53,96 (4H, s), 3,86-3,78 (1H, mult a), 1,94-1,79 (4H, mults a), 1,73-1,76 (4H, mults a), 1,43 (1H, s a).

Paso 2: 8-Isopropoxi-1,4-dioxaespiro[4.5]decano

A una solución agitada de 1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-ol (0,5 g, 3,16 mmol) en 2-yodopropano (5,37 g, 31,6 mmol), se añadió óxido de plata (I) (1,392 g, 6,01 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente. Tras completarse, la suspensión resultante se diluyó con EtOAc y la suspensión se filtró a presión reducida. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener un aceite de color amarillo pálido. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-30% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 53,84 (4H, s), 3,63 (1H, mult), 3,44 (1H, mult), 1,72-1,62 (4H, mults a), 1,53-1,42 (4H, mults a), 1,06 (3H, s), 1,05 (3H, s).

Paso 3: 4-Isopropoxiciclohexanona

A una solución agitada de 8-isopropoxi-1,4-dioxaespiro[4.5]decano (0,464 g, 2,317 mmol) en THF (2 mL) y agua (2 mL), se añadió p-TsOH (0,080 g, 0,463 mmol). La mezcla se calentó hasta 100 °C durante toda la noche. Se permitió que la mezcla resultante se enfriara hasta temperatura ambiente y se repartió entre EtOAc (30 mL) y agua (30 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera (30 mL), se secó con MgSO4 y se filtró. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 53,78 (1H, mult), 3,73 (1H, mult), 2,40-2,31 (2H, mults a), 2,27-2,18 (2H, mults a), 1,96-1,87 (2H, mults a), 1,85-1,75 (2H, mults a), 1,12 (3H, s), 1,11 (3H, s).

Paso 4: [Trifluorometanosulfonato de 4-isopropoxiciclohex-1-en-1-ilo]

Se añadió nBuLi 1,6 M en hexano (Aldrich) (1,285 mL, 2,057 mmol) a una solución de diisopropilamina (Acros) (0,307 mL, 2,155 mmol) en THF anhidro (30 mL) en atmósfera de nitrógeno a -78 °C. Se permitió que la solución se calentara hasta 0 °C durante 30 minutos antes de enfriarla de nuevo hasta -78 °C. Se añadió una solución de 4-isopropoxiciclohexanona (306 mg, 1,959 mmol) en THF anhidro (5 mL) durante 5 minutos y la mezcla se agitó a -78 °C durante 1 hora antes de añadir una solución de 2-[W,W-bis(trifluorometilsulfonil)amino]piridina (Alfa Aesar) (772 mg, 2,155 mmol) en THF anhidro (5 mL). La mezcla se agitó y se permitió que se calentara hasta temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se desactivó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (30 mL) y la fracción acuosa se extrajo con TBME (2 x 20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaOH acuoso al 10% (30 mL) y salmuera (30 mL), se secaron con MgSO⁴, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-10% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 55,76 (1H, mult), 3,72-3,63 (2H, mults), 2,44-2,30 (3H, mults a), 2,14-2,06 (1H, mult), 1,86-1,73 (2H, mults a), 1,09-1,04 (6H, mults).

Paso 5: [2-(4-Isopropoxiciclohex-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano]

A una solución agitada de [trifluorometanosulfonato de 4-isopropoxiciclohex-1-en-1-ilo] (459 mg, 1,592 mmol) en dioxano anhidro (15 mL), se añadió bis(pinacolato)diboro (Alfa Aesar) (404 mg, 1,592 mmol) seguido de acetato de potasio (Acros) (313 mg, 3,18 mmol) y aducto de PdCl²(dppf).CH²Cl² (Alfa Aesar) (39,0 mg, 0,048 mmol). El matraz se purgó con nitrógeno y se calentó hasta 80 °C durante toda la noche. La mezcla resultante se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró a través de Celite® y se lavó con TBME. El filtrado orgánico se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre EtOAc (50 mL*) y agua (50 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera (30 mL), se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-30% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título.

Paso 6: [5-(4-Isopropoxiciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo]

En un vial para microondas de 2-5 mL que contenía una solución de [2-(4-isopropoxiciclohex-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano] (375 mg, 1,410 mmol) en acetonitrilo (2 mL), se añadió 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio A) (330 mg, 1,410 mmol) seguido de K²CO³ (585 mg, 4,23 mmol), aducto de PdCl²(dppf).CH²Cl² (11,51 mg, 0,014 mmol) y agua (2 mL). El vial se purgó con nitrógeno y se trató en un microondas (Biotage Smith Initiator) a 80 °C durante 90 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre agua (30 mL) y EtOAc (30 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera (30 mL), se secó con MgSO4, se filtró a través de un lecho de Celite® y el filtrado se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-60% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,33 minutos; MS m/z [M+H]+ 294,4; Método 2minpHbajov01

Paso 7: [Ácido 5-(4-isopropoxiciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico]

A una solución agitada de [5-(4-isopropoxiciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo] (393 mg, 1,340 mmol) en THF (3 mL) y etanol (3 mL), se añadió NaOH (ac.) 2 M (4,179 mL, 8,36 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente. Tras completarse, la mezcla resultante se vertió sobre agua (20 mL) y se ajustó el pH hasta un pH de 6 con la adición de HCl (ac.) 1 M. La fracción acuosa se extrajo con EtOAc (30 mL) y los extractos orgánicos se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,13 minutos; MS m/z [M+H]+ 266,1; Método 2minpHbajov01

Paso______8: [N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4-isopropoxiciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]

A una solución agitada de ácido 5-(4-isopropoxiciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (174 mg, 0,656 mmol) en NMP anhidra (3 mL), se añadió Ha TU (274 mg, 0,721 mmol) seguido de 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D) (151 mg, 0,721 mmol) y trietilamina (0,201 mL, 1,443 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se repartió entre EtOAc (20 mL) y NaOH (ac.) 1 M (20 mL) y la fase orgánica se lavó con agua (30 mL) y salmuera (30 mL), se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El material crudo se disolvió en DMSO y se purificó utilizando cromatografía de fase inversa dirigida por UV con un gradiente de 40-80% de MeCN en agua (0,1% de ácido fórmico) durante 9,5 minutos. La fracción del producto se añadió a EtOAc (50 mL) y se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (50 mL). La fase orgánica se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,19 minutos; MS m/z [M+H]+ 457,3; Método 2minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 59,47 (1H, s), 6,27 (1H, mult), 3,91 (1H, mult), 3,75 (1H, mult), 3,75-3,67 (1H, mult a), 3,22 (3H, s), 2,58-2,40 (4H, mults a), 2,19 (3H, s), 2,19-2,09 (1H, mults a), 2,06-2,01 (4H, mults), 1,99 (1H, mult), 1,96­ 1,86 (1H, mult a), 1,82-1,74 (2H, mults a), 1,72-1,58 (4H, mults a), 1,38-1,24 (2H, mults a), 1,11-1,07 (6H, mults).

Ejemplo 6:

W-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilcidohexil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Una solución de N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (Ejemplo 2.2) (40 mg, 0,094 mmol) en etanol (20 mL) se purgó con nitrógeno y se trató con Pd-C al 10%, 50% de contenido de agua (Alfa Aesar, 38303) (14,97 mg, 0,141 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de hidrógeno durante 3 horas. La mezcla resultante se filtró a través de Celite® y se lavó con etanol seguido de DCM. El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo se hizo pasar a través de un cartucho de sílice-TMT de 500 mg, eluyendo con etanol:éter (1:1). El filtrado se recolectó y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS; tR = 1,33 minutos; MS m/z [M+H]+ 429,5; Método 2minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 59,40 (1H, s), 3,92 (1H, tt), 3,21 (3H, s), 2,84 (1H, mult), 2,07 (3H, s), 2,02 (3H, s), 2,03-1,95 (2H, mults), 1,82-1,58 (9H, mults), 1,50-1,43 (2H, mults), 1,37-1,22 (5H, mults), 0,97 (3H, s), 0,95 (3H, s). Ejemplo 6,1:

[M-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1tf-pirazol-4-il)-5-(3,3-dimetilciclopentil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]

El compuesto del título se preparó mediante un método similar al del Ejemplo 6 reemplazando la N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (Ejemplo 2.2) (Paso 1) por N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (Ejemplo 3).

LC-MS: tR = 1,46 minutos; MS m/z [M+H]+ 415,1/416,4; Método 2minpHbajov03

Ejemplo 7:

W-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(3,3-dimetilbutil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Paso 1: 5-(3,3-Dimetilbut-1-in-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Se desgasificaron 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio A) (100 mg, 0,427 mmol) y 3,3-dimetilbut-1-ino (0,058 mL, 0,470 mmol) en acetonitrilo (3 mL) y se rellenaron completamente con nitrógeno. Se añadió diciclohexilamina (0,085 mL, 0,427 mmol), Cul (2,85 mg, 0,015 mmol) y PdCl2(PPh3)2 (7,50 mg, 10,68 |jmol). La mezcla se agitó en un microondas a 100 °C durante 45 min. La mezcla resultante se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-10% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,53 minutos; MS m/z [M+H]+ 236,4; Método 2minpHbajov03

Paso 2: Ácido 5-(3,3-dimetilbut-1-in-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico

Se trató 5-(3,3-dimetilbut-1-in-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (101 mg, 0,429 mmol) en THF (3 mL) y MeOH (1,800 mL) a temperatura ambiente con NaOH (ac.) 2 M (0,429 mL, 0,859 mmol) durante 1 hora. Se añadió HCl (ac.) 2 M (0.6 mL) y agua, y la fracción acuosa se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 514,07 (1H, s a), 2,14 (3H, s), 1,33 (9H, s).

Paso 3: N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(3,3-d¡met¡lbut-1-¡n-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxamida

Se trató el ác¡do 5-(3,3-d¡met¡lbut-1-¡n-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxíl¡co (85 mg, 0,410 mmol) y 4-am¡no-2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-1H-p¡razol-3(2H)-ona (Intermed¡o D) (86 mg, 0,410 mmol) en DMF (2 mL) con DlpEA (0,287 mL, 1,641 mmol) y HATU (172 mg, 0,451 mmol) a temperatura amb¡ente y se ag¡taron durante 16 horas. La mezcla resultante se d¡luyó con agua y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgán¡cos comb¡nados se lavaron con una soluc¡ón (ac.) de cloruro de l¡t¡o 0,5 M, se secaron con MgSO4, se f¡ltraron y se el¡m¡nó el d¡solvente a pres¡ón reduc¡da. El mater¡al crudo se adsorb¡ó sobre síl¡ce y la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en ¡sohexano proporc¡onó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,42 m¡nutos; MS m/z [M+H]+ 399,7; Método 2m¡npHbajov03

Paso_____ 4: N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(3,3-d¡met¡lbut¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da

Se desgas¡f¡có N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(3,3-d¡met¡lbut-1-¡n-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da (30 mg, 0,075 mmol) en etanol (5 mL), se rellenó completamente con n¡trógeno y se añad¡ó Pd-C (16,02 mg, 7,53 ^mol). La mezcla se ag¡tó en una atmósfera de h¡drógeno. Tras completarse, la mezcla de reacc¡ón se f¡ltró a través de Cel¡te® y se el¡m¡nó el d¡solvente a pres¡ón reduc¡da. El mater¡al crudo se adsorb¡ó sobre síl¡ce y la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en ¡sohexano proporc¡onó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,37 m¡nutos; MS m/z [M+H]+ 403,1/404,4; Método 2m¡npHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCls) 57,97 (1H, s a), 4,04 (1H, tt), 3,24 (3H, s), 2,72-2,66 (2H, mult), 2,19 (3H, s), 2,16 (3H, s), 2,04-1,92 (2H, mults a), 1,90-1,81 (4H, mults a), 1,70 (1H, mult a), 1,60-1,54 (2H, mult), 1,43-1,29 (2H, mults a), 1,27­ 1,18 (1H, mult a), 0,96 (9H, s).

Ejemplo 8:

(Z)-W-(2-CiclohexN-1,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-N)-5-(3,3-dimetNbut-1-en-1 -il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Paso 1: (Z)-N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(3,3-d¡met¡lbut-1-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da Se trató N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(3,3-d¡met¡lbut-1-¡n-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da (Ejemplo 7, Paso 3) (30 mg, 0,075 mmol) en EtOAc (3 mL) con 2,2'-(etano-1,2-d¡¡lb¡s(sulfanod¡¡l))d¡etanol (13,72 mg, 0,075 mmol) y Pd-sulfato de bar¡o al 5% (16,02 mg, 7,53 ^mol). La mezcla se desgas¡f¡có, se rellenó completamente con n¡trógeno y la mezcla se ag¡tó en una atmósfera de h¡drógeno a temperatura amb¡ente durante toda la noche. Se añad¡ó más Pd-sulfato de bar¡o al 5% (16,02 mg, 7,53 ^mol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente en una atmósfera de h¡drógeno durante 16 horas. La mezcla resultante se f¡ltró a través de Cel¡te® eluyendo con EtOAc y se el¡m¡nó el d¡solvente a pres¡ón reduc¡da. El material crudo se adsorb¡ó sobre síl¡ce y la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en ¡sohexano proporc¡onó el compuesto del título;

LC-MS: tR =1,35 m¡nutos; MS m/z [M+H]+ 401,2; Método 2m¡npHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCls) 57,94 (1H, s a), 6,00 (1H, d, J = 12,9 Hz), 5,91 (1H, d, J = 12,9 Hz), 4,01-3,92 (1H, tt), 3,16 (3H, s), 2,13 (3H, s), 2,09 (3H, s), 1,96-1,84 (2H, mults a), 1,82-1,74 (4H, mults a), 1,62 (1H, mult a), 1,34-1,23 (2H, mult), 1,19-1,10 (1H, mult a), 1,05 (9H, s).

Ejemplo 9:

(E)-W-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1 H-pirazol-4-il)-5-(3,3-dimetilbut-1 -en-1 -il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Paso 1: (£)-Tributil(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)estannano

Se añadió hidruro de tributilestaño (1,637 mL, 6,09 mmol) gota a gota a una solución de 3,3-dimetilbut-1-ino (500 mg, 6,09 mmol) y Pd(Ph3P)4 (70 mg, 0,06 mmol) en THF (4 mL) a 0 °C en la oscuridad. Después de 30 minutos de agitación, la mezcla de reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con isohexano al 100% proporcionó el compuesto del título.

Paso 2: (£)-5-(3,3-Dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Se disolvieron (£)-tributil(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)estannano (1194 mg, 0,8 mmol) y 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio A) (187 mg, 0,8 mmol) en dioxano (6 mL) y la mezcla se desgasificó completamente y se rellenó con nitrógeno. Se añadió Pd(Ph³P⁾⁴ (92 mg, 0,080 mmol) y la mezcla se agitó a 100 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción cruda se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-10% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCls) 56,64 (1H, d, J = 17 Hz), 6,19 (1H, d, J = 17 Hz), 2,23 (3H, s), 1,45 (3H, t), 1,16 (9H, s). Paso 3: Ácido (£)-5-(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico

Se trató (£)-5-(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (160 mg, 0,674 mmol) en THF (3 mL) y MeOH (1,8 mL) con NaOH (ac.) 2 M (1,349 mL, 2,70 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla resultante se trató con HCl (ac.) 2 M y se extrajo con acetato de etilo (x3). Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título.

Paso 4: (£)-N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Se trató el ácido (£)-5-(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (102 mg, 0,487 mmol) y 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D) (112 mg, 0,536 mmol) en DMF (2 mL) con DlPEA (0,341 mL, 1,950 mmol) y HATU (222 mg, 0,585 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla resultante se trató con agua y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con LiCl (ac.) 0,5 M, se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,41 minutos; MS m/z [M+H]+ 401,0/402,5; Método 2minpHbajov03

1H RMN (400 MHz, MeOD) 56,64 (1H, d, J = 17 Hz), 6,33 (1H, d, J = 17 Hz), 4,16 (1H, tt), 3,36 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,20-2,09 (2H, mults a), 2,17 (3H, s), 1,95-1,82 (4H, mults a), 1,76-1,69 (1H, mult a), 1,50-1,38 (2H, mults a), 1,35­ 1,25 (1H, mult a), 1,18 (9H, s).

Ejemplo 10:

5-CiclohexM-W-(2-ciclohexiM,5-dimetM-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-M)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Paso 1: Ácido 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxílico

A una solución de 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio A) (8,65 g, 37,0 mmol) en MeOH (100 mL), se añadió NaOH (ac.) 2 M (18,48 mL, 37,0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos y la mezcla resultante se acidificó utilizando HCl (ac.) 1 M y se concentró a presión reducida para eliminar el MeOH. La fracción acuosa se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (x3) y los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título; LC-MS: tR = 0,82 minutos; MS m/z [M+H]+ 206,0; Método 2minpHbajo

Paso 2: 5-Bromo-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida Una solución de DMF (5,33 mL, 68,8 mmol) en DCM (200 mL) se enfrió hasta 0 °C y se trató con cloruro de oxalilo (3,31 mL, 37,9 mmol). Se añadió ácido 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxílico (7,09 g, 34,4 mmol) y se agitó enfriando con hielo durante 10 min. Se añadieron 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D) (7,92 g, 37,9 mmol) y trietilamina (14,39 mL, 103 mmol) a 0 °C y la mezcla se agitó a esta temperatura durante 30 min. La mezcla resultante se diluyó con DCM y se lavó con una solución (ac.) saturada de NaHcOs. La fase orgánica se secó con MgSO4, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con TBME al 100% proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 0,93minutos; MS m/z [M+H]+ 397,2/400,2; Método 2minpHbajo

Paso 3: 5-Ciclohexil-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida A 5-bromo-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (75 mg, 0,189 mmol), se añadió bromuro de ciclohexilzinc (II) (0,5 M en THF) (1133 ^L, 0,566 mmol) y bis(tri-f-butilfosfina)paladio (0) (9,65 mg, 0,019 mmol) y la mezcla se agitó a 100 °C en un microondas durante 30 minutos. La mezcla resultante se diluyó con EtOAc y se filtró, y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,12 minutos; MS m/z [M+H]+ 401,0/402,4; Método 2minpHbajo

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 59,40 (1H, s), 3,90 (1H, m), 3,20 (3H, s), 2,90 (1H, m), 2,05 (3H, s), 2,00 (3H, s), 2,80­ 1,00 (20H, m).

Ejemplo 11:

W-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-M)-4-metM-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-M)isoxazol-3-carboxamida

Paso 1: Trifluorometanosulfonato de 1,4-dioxaespiro[4.5]dec-7-en-8-ilo

Una solución agitada del acetal monoetilénico de la 1,4-ciclohexadiona (Aldrich) (2 g, 12,81 mmol) en THF anhidro (30 mL) en atmósfera de nitrógeno se enfrió hasta -70 °C y se añadió LDA 0,6 M (en heptano/THF/etilbenceno) (25,6 mL, 15,37 mmol) gota a gota, manteniendo la temperatura por debajo de -65 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 20 min a -70 °C antes de tratarla gota a gota con una solución de 2-[N,N-bis(trifluorometilsulfonil)amino]piridina (Alfa Aesar) (5,05 g, 14,09 mmol) en THF anhidro (10 mL) durante 30 minutos, asegurándose de que la temperatura no excediera los -65 °C. La mezcla de reacción se agitó a -70 °C durante 1 hora, antes de permitir que se calentara hasta temperatura ambiente gradualmente y se agitó durante toda la noche. La mezcla resultante se desactivó con NaHCO3 acuoso saturado (100 mL) y se extrajo con TBME (2 x 150 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaOH (ac.) al 10% (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-10% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 55,80 (1H, mult), 3,91 (4H, mult), 2,51-2,49 (2H, mult), 2,49-2,43 (2H, mults a), 2,37­ 2,34 (2H, mults a), 1,86-1,81 (2H, mults).

Paso 2: 4,4,5,5-Tetrametil-2-(1,4-dioxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)-1,3,2-dioxaborolano

A una solución agitada de trifluorometanosulfonato de 1,4-dioxeaspiro[4.5]dec-7-en-8-ilo (1,19 g, 4,13 mmol) en dioxano anhidro (15 mL), se añadió bis(pinacolato)diboro (Alfa Aesar) (1,048 g, 4,13 mmol) seguido de acetato de potasio (Acros) (0,810 g, 8,26 mmol) y aducto de PdCl²(dppf).CH²Cl² (Alfa Aesar) (0,101 g, 0,124 mmol). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno y se agitó a 80 °C durante toda la noche. La mezcla resultante se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró a través de Celite® y se lavó con TBME. El filtrado orgánico se concentró a presión reducida y se repartió entre EtOAc (50 mL) y agua (50 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera (30 mL), se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-30% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título.

Paso 3: 4-Metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxilato de etilo

En un vial para microondas de 2-5 mL que contenía una solución de 4,4,5,5-tetrametil-2-(1,4-dioxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)-1,3,2-dioxaborolano (586 mg, 2,200 mmol) en acetonitrilo (2 mL), se añadió 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio D) (515 mg, 2,200 mmol) seguido de K²CO³ (912 mg, 6,60 mmol), aducto de PdCl²(dppf).CH²Cl² (17,97 mg, 0,022 mmol) y agua (0,667 mL). El vial se purgó con nitrógeno y se agitó en un microondas (Biotage Smith Initiator) a 80 °C durante 1 hora y a 100 °C durante 30 minutos. La mezcla resultante se repartió entre agua (30 mL) y EtOAc (30 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera (30 mL), se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener un aceite naranja. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-40% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 6,26 (1H, mult), 4,37 (2H, c), 3,93 (4H, s), 2,62-2,56 (2H, mults a), 2,47-2,43 (2H, mults), 2,23 (3H, s), 1,82 (2H, mult), 1,23 (3H, t).

Paso 4: 4-Metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxilato de etilo

Una solución de 4-metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxilato de etilo (556 mg, 1,896 mmol) en etanol (20 mL) se purgó con nitrógeno y a continuación se trató con Pd-C al 10%, 50% del contenido de agua (Alfa Aesar, 38303) (303 mg, 2,84 mmol). La mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se filtró a través de Celite® y se lavó con etanol y DCM. El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo se hizo pasar a través de un cartucho de sílice-TMT de 500 mg, eluyendo con etanol:éter (1:1). Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,11 minutos; MS m/z [M+H]+ 296,2; Método 2minpHbajov01

Paso 5: Ácido 4-metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxílico

A una solución agitada de 4-metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxilato de etilo (558 mg, 1,889 mmol) en THF (5 mL), se añadió NaOH (ac.) 2 M (4,179 mL, 8,36 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. La mezcla resultante se vertió sobre agua (20 mL) y se ajustó el pH hasta un pH de 5­ 6 mediante la adición de HCl (ac.) 1 M. La fracción acuosa se extrajo con EtOAc (30 mL) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 0,89 minutos; MS m/z [M+H]+ 268,2; Método 2minpHbajov01

Paso 6: N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1 H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida

A una solución agitada de ácido 4-metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxílico (239 mg, 0,894 mmol) en NMP anhidra (3 mL), se añadió HATU (374 mg, 0,984 mmol) seguido de 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D) (206 mg, 0,984 mmol) y trietilamina (0,274 mL, 1,967 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla resultante se repartió entre EtOAc (20 mL) y NaOH 1 M (20 mL). La fase orgánica se lavó con agua (30 mL) y salmuera (30 mL), se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-2% de MeOH en DCM proporcionó un material crudo. El material aislado se disolvió en DMSO (2 mL) y se lavó disgregándolo con agua (30 mL). La suspensión resultante se filtró a presión reducida y el sólido se lavó con agua (20 mL) y se permitió que se secara al vacío para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 0,96 minutos; MS m/z [M+H]+ 459,5: Método 2minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 59,41 (1H, s), 3,96-3,86 (5H, mults), 3,21 (3H, s), 3,02 (1H, mult), 2,07 (3H, s), 2,05­ 1,92 (2H, mults a), 2,02 (3H, s), 1,84-1,72 (8H, mults a), 1,70-1,57 (5H, mults a), 1,38-1,23 (2H, mults a), 1,22-1,11 (1H, mult a).

Ejemplo 12:

Una mezcla de 5-((2S,4S,6R)-6-(tert-butN)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-N)-N-(2-ciclohexN-1 ,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y 5-((2R,4R,6S)-6-(tert-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Paso 1: 5-(1-Hidroxibut-3-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

A una solución de 5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio C) (350 mg, 1,911 mmol) en DCM (19 mL), se añadió aliltrimetilsilano (276 ^L, 1,911 mmol) y la mezcla se enfrió hasta -78 °C. Una solución de trifluoruro de boro eterado (278 ^L, 2,198 mmol) en DCM (5 mL) se enfrió hasta -78 °C y se añadió a la mezcla de reacción en 5 min. La mezcla de reacción se agitó durante 15 min y se añadió trietilamina (266 ^L, 1,911 mmol). La mezcla de reacción se mantuvo a -78 °C durante 15 minutos y se permitió que se calentara hasta temperatura ambiente. La mezcla resultante se desactivó mediante la adición de una solución acuosa saturada de NaHCÜ3 (10 mL) y se extrajo con DCM (2 x 10 mL). Los extractos orgánicos combinados se hicieron pasar a través de un cartucho separador de fases y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-40% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,06 minutos; MS m/z [M+H]+ 225,8/226,4; Método 2minpHbajov03

Paso 2:

2a: Una mezcla racémica de 5-((2S,4S,6R)-6-(te/'f-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2R,4R,6S)-6-(terf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

y 2b: Una mezcla racémica de 5-((2S,4R,6S)-6-(terf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2R,4S,6R)-6-(tert-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

A una solución de 5-(1-hidroxibut-3-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (140 mg, 0,622 mmol) en DCM (6,2 mL), se añadió pivalaldehído (67,5 ^L, 0,622 mmol). Se añadió TMSOTf (112 ^L, 0,622 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Se añadió MeOH (2 mL) y la mezcla resultante se repartió entre agua (5 mL) y DCM, se separaron las fases y la fracción acuosa se extrajo con DCM (2 x 5 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na2SO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-50% de EtOAc en isohexano proporcionó los compuestos del título;

2a: Una mezcla racémica de 5-((2S,4S,6R)-6-(te/f-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2R,4R,6S)-6-(te/f-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo LC-MS: tR = 1,64 minutos; MS m/z [M+H]+ 326,6; Método 2minpHbajov03

2b: Una mezcla racémica de 5-((2S,4R,6S)-6-(te/f-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2R,4S,6R)-6-(te/f-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo LC-MS: tR = 1,54 minutos; MS m/z [M+H]+ 326,6; Método 2minpHbajov03

Paso 3: Una mezcla racémica de ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(te/f-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2R,4R,6S)-6-(te/f-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico

A una solución de una mezcla racémica de 2a: 5-((2S,4S,6R)-6-(te/f-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2R,4R,6S)-6-(te/f-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (9 mg, 0,028 mmol) en MeOH (0,45 mL) y THF (0,75 mL), se añadió NaOH (ac.) 2 M (59,9 ^L, 0,120 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla resultante se concentró a presión reducida para obtener un residuo, el cual se diluyó con NaOH (ac.) 2 M (5 mL) y se lavó con DCM (5 mL). La fase acuosa se acidificó con HCl (ac.) 1 M (8 mL) y se extrajo con DCM (3 x 5 mL). Los extractos orgánicos combinados se hicieron pasar a través de un cartucho separador de fases y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar una mezcla racémica de ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(te/t-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2R,4R,6S)-6-(te/t-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico;

LC-MS: tR = 1,44minutos; MS m/z [M+H]+ 298,5; Método 2minpHbajov03

Paso 4: Mezcla de 5-((2S,4S,6R)-6-(te/t-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y 5-((2R,4R,6S)-6-(te/t-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

A una solución de una mezcla racémica de ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(te/t-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2R,4R,6S)-6-(te/t-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (9 mg, 0,030 mmol) en NMP (0,3 mL), se añadió HATU (12,66 mg, 0,033 mmol) seguido de 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D) (6,33 mg, 0,030 mmol) y Et3N (8,39 ^L, 0,061 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se repartió entre EtOAc (10 mL) y una solución acuosa saturada de NaHCO3 (10 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera (10 mL), secó con MgSO4, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-10% de MeOH en DCM proporcionó el compuesto del título; LC-MS: tR = 4,57 minutos; MS m/z [M+H]+ 489,3; Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, CDCls) 58,06 (1H, s a), 4,98 (1H, dd), 4,06 (1H, tt), 3,82 (1H, mult), 3,50 (1H, dd), 3,40 (3H, s), 3,26 (3H, s), 2,28 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,14-2,07 (1H, mults), 2,05-1,82 (8H, mults a), 1,71 (1H, mult a), 1,51 (1H, mult), 1,43-1,29 (2H, mults a), 1,29-1,17 (1H, mult a), 0,92 (9H, s).

Ejemplo 13:

Una mezcla de 5-((2S,4R,6R)-6-(tert-butN)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-N)-N-(2-ciclohexN-1 ,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y 5-((2R,4S,6S)-6-(tert-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

El Ejemplo 13 se preparó mediante un método similar al del Ejemplo 12 reemplazando 2a por 2b en el Paso 3; LC-MS: tR = 4,40minutos; MS m/z [M+H]+ 489,4; Método 8minpHbajov01

Ejemplo 13a: 5-((2S,4R,6R)-6-(tert-Butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o 5-((2R,4S,6S)-6-(tert-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y Ejemplo 13b: 5-((2S,4R,6R)-6-(tert-Butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o 5-((2R,4S,6S)-6-(tert-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

La separación quiral del Ejemplo 13 utilizando cromatografía de fluidos supercríticos proporcionó los enantiómeros individuales:

Detalles del método:

Columna: Chiralcel OD-H 250 x 10 mm, 5 um a 35 °C

Fase móvil: 35% de isopropanol 0,1% v/v de DEA / 65% de CO²

Flujo: 10 mL/min

Detección: UV a 220 nm

Instrumento: Berger Minigram SFC1

Ejemplo 13a: 5-((2S,4R,6R)-6-(tert-Butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o 5-((2R,4S,6S)-6-(tert-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida Tiempo de retención de SFC = 4,86 min

LCMS: tR 1,42 minutos MS m/z [M+H]+ 489,5; Método 2minpHbajov03

Ejemplo 13b: 5-((2S,4R,6R)-6-(tert-Butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o 5-((2R,4S,6S)-6-(tert-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida Tiempo de retención de SFC = 2,85 min

LCMS: tR 1,42 minutos MS m/z [M+H]+ 489,5; Método 2minpHbajov03

Ejemplo 14:

Una mezcla diastereomérica de 5-((2S,4R,6S)-6-(terf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-W-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y 5-((2S,4S,6R)-6-(tert-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Paso 1: Una mezcla de 5-((2R,4S,6S)-6-(fe/f-butil)-4-(2,2,2-trifluoroacetoxi)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,4R,6R)-6-(fe/f-butil)-4-(2,2,2-trifluoroacetoxi)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Se combinaron 5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (100 mg, 0,546 mmol) y 2,2-dimetilhex-5-en-3-ol (Intermedio F) (70,0 mg, 0,546 mmol) en DCM (12 mL) y se trataron con tamices moleculares secados en el horno (100 mg, 0,546 mmol) y TFA (3,15 mL, 40,9 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se añadió pivaldehído (0,059 mL, 0,546 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se desactivó con una solución acuosa saturada de NaHCO³ y se extrajo con DCM (x3). Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título.

Paso 2: Una mezcla de 5-((2R,4S,6S)-6-(fe/f-butil)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,4R,6R)-6-(fe/f-butil)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Se disolvió sodio (45,7 mg, 1,988 mmol) en etanol y la solución resultante se añadió a temperatura ambiente a una mezcla de 5-((2R,4S,6S)-6-(fe/f-butil)-4-(2,2,2-trifluoroacetoxi)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,4R,6R)-6-(fe/f-butil)-4-(2,2,2-trifluoroacetoxi)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (270 mg, 0,663 mmol) en EtOH (5 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se añadió HCl (ac.) 0,1 M (50 mL) y la fracción acuosa se separó y se extrajo con EtOAc (x3). Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título.

Paso 4: Una mezcla de 5-((2R,6S)-6-(fe/f-butil)-4-oxotetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,6R)-6-(fe/f-butil)-4-oxotetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Una mezcla de 5-((2R,4S,6S)-6-(fe/f-butil)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,4R,6R)-6-(fe/f-butil)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (35 mg, 0,112 mmol) en DCM (20 mL) se trató a temperatura ambiente con el reactivo de Dess-Martin (47,7 mg, 0,112 mmol) y se agitó durante 30 min. Se añadió una solución acuosa saturada de metabisulfito de sodio y la mezcla se agitó durante 15 min. Las fases resultantes se separaron y la fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO³. La porción acuosa se extrajo con DCM y los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-40% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCla) 54,78 (1H, dd), 4,38 (2H, c), 3,34 (1H, dd), 2,83 (1H, mult), 2,62-2,56 (1H, mults), 2,45­ 2,33 (2H, mults a), 2,21 (3H, s), 1,35 (3H, t), 0,90 (9H, s).

Paso 5: Una mezcla diastereomérica del compuesto ácido 5-((2R,4R,6S)-6-(ferf-butil)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(ferf-butil)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (1:1)

Una mezcla de 5-((2R,6S)-6-(ferf-butil)-4-oxotetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,6R)-6-(ferf-butil)-4-oxotetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (420 mg, 1,358 mmol) en THF (20 mL) se enfrió hasta -78 °C y se trató con L-Selectride 1 M en THF (1,426 mL, 1,426 mmol) y se agitó a -78 °C durante 3 h. La mezcla resultante se desactivó con ácido acético y se lavó con HCl (ac.) 1 M. La fracción acuosa se extrajo con EtOAc (x2). Todas las fases orgánicas se combinaron, se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-50% de EtOAc en isohexano proporcionó un material crudo. El material crudo se disolvió en THF, se trató con NaOH (ac.) 2 M y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla resultante se acidificó utilizando HCl (ac.) 1 M y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,10 minutos; MS m/z [M+H]+ 284,3; Método 2minpHbajov03

Paso 6: Una mezcla diastereomérica del compuesto 5-((2R,4R,6S)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de metilo y 5-((2R,4S,6S)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de metilo (1:1) y el compuesto 5-((2S,4R,6R)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de metilo y 5-((2S,4S,6R)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de metilo (1:1)

Una mezcla diastereomérica del compuesto ácido 5-((2R,4R,6S)-6-(ferf-butil)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(ferf-butil)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (1:1) (31 mg, 0,109 mmol) en DMF (0,5 mL) se añadió a una solución de hidruro de sodio (10,94 mg, 0,274 mmol) en DMF (2 mL) a 0 °C. Se permitió que la mezcla se calentara hasta temperatura ambiente, se agitó durante 2 horas y se añadió yodometano (0,068 mL, 1,094 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se desactivó con HCl (ac.) 2 M y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con LiCl (ac.) 0,5 M y salmuera, se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-30% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título.

Paso 7: Una mezcla diastereomérica de ácido 5-((2R,4R,6S)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico

Una mezcla diastereomérica del compuesto 5-((2R,4R,6S)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de metilo y 5-((2R,4S,6S)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de metilo (1:1) y el compuesto 5-((2S,4R,6R)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de metilo y 5-((2S,4S,6R)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de metilo (1:1) (14 mg, 0,045 mmol) en THF (1 mL) y MeOH (0,6 mL) se trató con NaOH (ac.) 2 M (0,090 mL, 0,180 mmol) a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla resultante se trató con HCl (ac.) 2 M (4 mL) y se extrajo con EtOAc (x2). Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

Paso 8: Una mezcla diastereomérica de ácido 5-((2R,4R,6S)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2R,4S,6S)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2S,4R,6R)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (20 mg, 0,067 mmol) y 4-amino-2-ciclobutil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio E) (12,80 mg, 0,071 mmol) en DMF (0,5 mL) se trató con DIPEA (0,047 mL, 0,269 mmol) y HATU (33,2 mg, 0,087 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se trató con agua y se extrajo con EtOAc (x2). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con cloruro de litio (ac.) 0,5 M y salmuera, se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,38 minutos; MS m/z [M+H]+ 461,6; Método 2minpHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCla) 58,10 (1H, s a), 4,99 (1H, d), 4,63 (1H, mult), 3,82 (1H, mult), 3,51 (1H, d), 3,41 (3H, s), 3,28 (3H, s), 2,88-2,75 (2H, mults a), 2,41-2,31 (2H, mults a), 2,28 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,14-2,06 (1H, mult a), 1,99­ 1,83 (3H, mults a), 1,83-1,72 (1H, mult a), 1,52 (1H, mult), 0,92 (9H, s).

Ejemplo 15:

5-(6-(ferí-butN)tetrahidro-2W-piran-2-N)-W-(2-ciclobutiM,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-N)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Paso 1: Una mezcla de 5-((2R,6S)-4-bromo-6-(fe/f-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de etilo y 5-((2S,6R)-4-bromo-6-(fe/if-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de et¡lo (1:1)

A un matraz enfr¡ado con h¡elo en atmósfera de n¡trógeno que contenía 2,2-d¡met¡lhex-5-en-3-ol (Intermed¡o F) (400 mg, 3,12 mmol) y bromuro de ¡nd¡o (III) (55,4 mg, 0,156 mmol) en DCM anh¡dro (31 mL), se añad¡ó bromotrimet¡ls¡lano (0,405 mL, 3,12 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó con refr¡gerac¡ón de h¡elo durante 30 m¡n. En un segundo matraz, una soluc¡ón de 5-form¡l-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de et¡lo (Intermed¡o C) (572 mg, 3,12 mmol) en DCM anh¡dro (31 mL) en atmósfera de n¡trógeno se enfrió con h¡elo. Esta se añad¡ó al primer matraz gota a gota en 30 m¡n con refr¡gerac¡ón de h¡elo. La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó con refr¡gerac¡ón de h¡elo durante 1,5 h y a temperatura amb¡ente durante toda la noche. Se añad¡ó p¡valdehído (0,085 mL, 0,781 mmol) a la mezcla de reacc¡ón y esta se ag¡tó durante 2 horas. Se añad¡ó más p¡valdehído (0,085 mL, 0,781 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante toda la noche. A la mezcla resultante, se añad¡ó una soluc¡ón acuosa saturada de NaHCO3 (ac.) y la mezcla se ag¡tó enérg¡camente durante 2 m¡n. La mezcla resultante se h¡zo pasar a través de un cartucho separador de fases y el eluyente orgán¡co se recolectó y se concentró a pres¡ón reduc¡da. El material crudo se adsorb¡ó sobre síl¡ce y la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía eluyendo con 0-30% de EtOAc en ¡sohexano proporc¡onó los compuestos del título;

LC-MS; tR = 1,68 m¡nutos; MS m/z [M+H]+ 376,4; Método 2m¡npHbajov03

Paso 2: Una mezcla de 5-((2R,6S)-6-(fe/f-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de et¡lo y 5-((2S,6R)-6-(fe/f-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de et¡lo (1:1)

A una mezcla de 5-((2R,6S)-4-bromo-6-(fe/f-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de et¡lo y 5-((2S,6R)-4-bromo-6-(fe/f-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de et¡lo (1:1) (233 mg, 0,623 mmol) en EtoH (7,1 mL) y EtOAc (0,7 mL) con un flujo de n¡trógeno, se añad¡ó Pd/C al 10% (26,5 mg, 0,249 mmol) y la mezcla se ag¡tó en atmósfera de h¡drógeno a temperatura amb¡ente durante 7 horas. Se añad¡ó b¡carbonato de sod¡o (209 mg, 2,490 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó en atmósfera de h¡drógeno durante toda la noche. Se añad¡ó más Pd/C al 10% (26,5 mg, 0,249 mmol) y se s¡gu¡ó ag¡tando en atmósfera de h¡drógeno durante toda la noche. La mezcla resultante se f¡ltró a través de un cartucho de Cel¡te® eluyendo con EtOAc y se el¡m¡nó el d¡solvente orgán¡co a pres¡ón reduc¡da. El material crudo se adsorb¡ó sobre síl¡ce y la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía eluyendo con 0-50% de EtOAc en ¡sohexano proporc¡onó los compuestos del título;

LC-MS: tR = 1,72 m¡nutos; MS m/z [M+H]+ 296,3; Método 2m¡npHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCla) 54,54 (1H, d), 4,66 (2H, c), 3,01 (1H, d), 2,19 (3H, s), 1,94 (1H, mult), 1,83-1,77 (1H, mult), 1,73-1,48 (3H, mults), 1,34 (3H, t), 1,35-1,26 (1H, mults), 0,84 (9H, s).

Paso 3: Una mezcla de ác¡do 5-((2R,6S)-6-(fe/f-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxíl¡co y ác¡do 5-((2S,6R)-6-(fe/f-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxíl¡co (1:1)

A una soluc¡ón ag¡tada de 5-((2R,6S)-6-(fe/if-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de et¡lo y 5-((2S,6R)-6-(fe/f-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de et¡lo (1:1) (112 mg, 0,379 mmol) en THF (2 mL) y MeOH (1,2 mL) a temperatura amb¡ente, se añad¡ó NaOH (ac.) 2 M (0,209 mL, 0,417 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se diluyó con EtOAc y agua. Se separaron las fases y la fase acuosa se lavó con EtOAc (x2). La fase acuosa se volvió ácida mediante la adición de HCl (ac.) 2 M y se extrajo con EtOAc (x3). Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar los compuestos del título;

LC-MS; tR 1,57 minutos; MS m/z [M+H]+ 268,3; Método 2minpHbajov03

Paso 4: 5-((2S,6R)-6-(ferf-Butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y 5-((2R,6S)-6-(ferf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-dimeíil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

A una solución de una mezcla de ácido 5-((2R,6S)-6-(ferf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2S,6R)-6-(ferf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (1:1) (40 mg, 0,150 mmol) en Dc M anhidro (3 mL) en atmósfera de nitrógeno, se añadió cloruro de oxalilo (0,014 mL, 0,165 mmol) y DMF (0,023 mL, 0,299 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos y se añadió 4-amino-2-ciclobutil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio E) (27,1 mg, 0,150 mmol) y trietilamina (0,063 mL, 0,449 mmol).

La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Se añadió agua a la mezcla resultante y se agitó enérgicamente antes de hacerla pasar a través de un cartucho separador de fases. Las fracciones orgánicas se recolectaron y se eliminó el disolvente a presión reducida. A continuación, el material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en isohexano proporcionó un material crudo como una mezcla de enantiómeros.

La separación quiral del material utilizando cromatografía de fluidos supercríticos proporcionó los enantiómeros individuales:

Detalles del método:

Columna: Phenomenex LUX C2250 x 10 mm, 5 um a 35 °C

Fase móvil: 50% de metanol 0,1% v/v de DEA / 50% de CO²

Flujo: 10 mL/min

Detección: UV a 220 nm

Instrumento: Berger Minigram SFC Sistema 2

Ejemplo 15a: 5-((2S,6R)-6-(ferf-Butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o 5-((2R,6S)-6-(ferf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2.3- dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

SFC quiral: í ^r = 14,26 min

LC-MS: í ^r = 4,59 minutos; MS m/z [M+H]+ 431,5; Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, CDCla) 58,28 (1H, s a), 4,69-4,59 (2H, mults), 3,32 (3H, s), 3,10 (1H, d), 2,83 (2H, mults), 2,41­ 2,34 (2H, mults), 2,29 (3H, s), 2,23 (3H, s), 2,03 (1H, d

), 1,96-1,60 (6H, mults), 1,45-1,33 (1H, mults), 0,93 (9H, s). Ejemplo 15b: 5-((2R,6S)-6-(ferf-Butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o 5-((2S,6R)-6-(ferf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2.3- dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

SFC quiral: í ^r = 18,40 min

LC-MS: í ^r = 4,58 minutos; MS m/z [M+H]+ 431,5; Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, CDCla) 58,28 (1H, s a), 4,69-4,59 H, mults), 3,32 (3H, s), 3,10 (1H, d), 2,83 (2H, mults), 2,41­ 2,34 (2H, mults), 2,29 (3H, s), 2,23 (3H, s), 2,03 (1H, d

), 1,96-1,60 (6H, mults), 1,45-1,33 (1H, mults), 0,93 (9H, s). Ejemplo 16:

5-((2S,6R)-6-(ferf-Butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o 5-((2R,6S)-6-(ferf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-d i h id ro-1 H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxam ida

El compuesto del título se preparó mediante un método similar al del Ejemplo 15 reemplazando la 4-amino-2-ciclobutil-1,5-dimetil-1 H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio E) en el Paso 4 por 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1 H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D). La separación quiral utilizando cromatografía de fluidos supercríticos proporcionó un enantiómero individual:

Detalles del método:

Columna: Chiralpak OD-H 250 x 10 mm, 5 ^m 35 °C

Fase móvil: CO² sc:isopropanol 0,1% de DEA

Flujo: 10 mL/min

Detección: UV a 220 nm

Instrumento: Berger Minigram SFC1

5-((2S,6R)-6-(fe/f-Butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o 5-((2R,6S)-6-(fe/if-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

tR de SFC quiral = 8,19 min;

LC-MS: tR = 4,87 minutos; MS m/z [M+H]+ 459,5; Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, CDCls) 57,99 (1H, s), 4,53 (1H, dd), 3,97 (1H, tt), 3,18 (3H, s), 3,01 (1H, dd), 2,20 (3H, s), 2,12 (3H, s), 1,96-1,86 (2H, mults), 1,83-1,74 (4H, mults), 1,72-1,49 (6H, mults), 1,35-1,22 (2H, mults), 1,21-1,11 (2H, mults), 0,84 (9H, s).

Ejemplo 17:

Una mezcla de 5-((2R,6S)-6-(tert-ButN)tetrahidro-2H-piran-2-M)-N-(2-isopropM-1,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y 5-((2S,6R)-6-(terf-butM)tetrahidro-2H-piran-2-M)-N-(2-isopropiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Paso 1: Una mezcla de 5-((2R,6S)-6-(fe/f-butil)-4-yodotetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,6R)-6-(fe/f-butil)-4-yodotetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (1:1)

A una solución agitada de 5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (1 g, 5,46 mmol), 2,2-dimetilhex-5-en-3-ol (Intermedio F) (0,700 g, 5,46 mmol) y yoduro de sodio (0,818 g, 5,46 mmol) en MeCN anhidro (20 mL) en atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente, se añadió TMSCl (0,698 mL, 5,46 mmol) gota a gota en 10 segundos. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió pivaldehído (0,593 mL, 5,46 mmol) a la mezcla resultante y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas. La mezcla resultante se diluyó con EtOAc y se lavó con una solución (ac.) de tiosulfato de sodio al 10% (x1) y agua (x1). La fase orgánica se secó con MgSO4, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. A continuación, el material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-50% de EtOAc en isohexano proporcionó los compuestos del título;

LC-MS: tR = 1,76 minutos; MS m/z [M+H]+ 422,3; Método 2minpHbajov03

Paso 2: Una mezcla de 5-((2R,6S)-6-(tert-butil)-5,6-dihidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,6R)-6-(terf-butil)-5,6-dihidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (1:1)

A una solución de una mezcla de 5-((2R,6S)-6-(terf-butil)-4-yodotetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,6R)-6-(terf-butil)-4-yodotetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (1:1) (794 mg, 1,885 mmol) en tolueno (3,8 mL), se añadió DBU (0,284 mL, 1,885 mmol) y esto se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió DBU (0,142 mL, 0,94 mmol) a la mezcla resultante y esto se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla resultante se diluyó con EtOAc y agua, y se separaron las fases. La fase acuosa se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. A continuación, el material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-20% de EtOAc en isohexano proporcionó los compuestos del título;

LC-MS: tR = 1,64 minutos; MS m/z [M+H]+ 294,5; Método 2minpHbajov03

Paso 3: Una mezcla de 5-((2R,6S)-6-(terf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,6R)-6-(terf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

A una solución de una mezcla de 5-((2R,6S)-6-(tert-butil)-5,6-dihidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,6R)-6-(tert-butil)-5,6-dihidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (1:1) (212 mg, 0,723 mmol) en etanol (14,5 mL) en atmósfera de nitrógeno, se añadió Pd/C al 10% (769 mg, 0,723 mmol). La mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se filtró a través de un cartucho de Celite® en atmósfera de nitrógeno, eluyendo con EtOAc. Se eliminó el disolvente orgánico a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en isohexano proporcionó los compuestos del título;

LC-MS: tR = 1,70 minutos; MS m/z [M+H]+ 296,4; Método 2minpHbajov03

Paso 4: Ácido 5-((2R,6S)-6-(terf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2S,6R)-6-(tertbutil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (1:1)

A una solución de una mezcla de 5-((3R,6S)-6-(terf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,6R)-6-(terf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (100 mg, 0,339 mmol) en THF (3 mL) y MeOH (1,8 mL), se añadió NaOH (ac.) 2 M (0,186 mL, 0,372 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se concentró a presión reducida y el residuo se diluyó con EtOAc y agua. La fase orgánica se extrajo con NaOH (ac.) 0,1 M. Las fases acuosas combinadas se acidificaron con HCl (ac.) 1 M y se extrajeron con EtOAc (x3). Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar los compuestos del título;

LC-MS: tR = 1,52 minutos; MS m/z [M+H]+ 268,4; Método 2minpHbajov03

Paso 5: Una mezcla de 5-((2R,6S)-6-(terf-Butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-isopropil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1 H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y 5-((2S,6R)-6-(terf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-isopropil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (1:1)

A una solución de una mezcla de ácido 5-((2R,6S)-6-(terf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2S,6R)-6-(terf-butil)tetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (1:1) (77 mg, 0,288 mmol) en Dc M (2 mL) en atmósfera de nitrógeno, se añadió cloruro de oxalilo (0,026 mL, 0,302 mmol) y DMF (2,230 |j L, 0,029 mmol). Se añadieron 4-amino-2-isopropil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio G) (48,7 mg, 0,288 mmol) y trietilamina (0,161 mL, 1,152 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió NaOH 1 M y DCM a la mezcla resultante y la mezcla se hizo pasar a través de una columna separadora de fases. La fase orgánica se secó con MgSO4, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. A continuación, el material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en isohexano proporcionó los compuestos del título;

LC-MS: tR = 4,50 minutos; MS m/z [M+H]+ 419,5; Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 59,50 (1H, s), 4,72 (1H, mult), 4,36 (1H, mult), 3,22 (3H, s), 3,16 (1H, d), 2,14 (3H, s), 2,04 (3H, s), 1,99-1,90 (1H, mult), 1,84-1,78 (1H, mult), 1,70-1,59 (3H, mult a), 1,35 (6H, d), 1,38-1,23 (1H, mult a), 0,88 (9H, s).

Ejemplo 18:

Una mezcla de W-(2-ciclohexM-1,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1R-pirazol-4-N)-5-((2R,6R)-6-isopropN-3,6-dihidro-2H-piran-2-M)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1 H-pirazol-4-il)-5-((2R,6S)-6-isopropil-5,6-dihidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-N)-5-((2s,6R)-6-isopropN-5,6-dihidro-2H-piran-2-N)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1R-pirazol-4-il)-5-((2S,6S)-6-isopropil-3,6-dihidro-2R-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

El compuesto del título se preparó de forma análoga al Intermedio C, Paso 1.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 56,86 (1H, dd), 6,02 (1H, d), 5,69 (1H, d), 4,37 (2H, c), 2,19 (3H, s), 1,33 (3H, t). Paso 2: Ácido 4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxílico

Se disolvió 4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxilato de etilo (250 mg, 0,993 mmol) en THF (5,3 mL) y MeOH (3,2 mL) y a esto se añadió NaOH (ac.) 2 M (497 ^L, 0,993 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. La mezcla resultante se concentró a presión reducida y se trató con HCl 2 M (5 mL) y agua (5 mL). Se añadió DCM a la fracción acuosa, lo cual dio como resultado la formación de una emulsión. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo resultante se suspendió en DCM (25 mL) y se hizo pasar a través de una columna separadora de fases. Se eliminó el disolvente orgánico a presión reducida para proporcionar el compuesto del título; LC-MS: tR = 1,04 minutos: MS m/z [M+H]+ 154,1: Método 2minpHbajov03

Paso 3: N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxamida

Una suspensión de ácido 4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxílico (172 mg, 0,809 mmol) en DCM (10 mL) enfriada hasta 0 °C se trató con cloruro de oxalilo (0,142 mL, 1,617 mmol) y DMF (4 gotas). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 hora y a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en DCM (8 mL). Se añadió 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (169 mg, 0,809 mmol) (Intermedio D) y trietilamina (0,338 mL, 2,426 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se diluyó con agua (15 mL) y se extrajo con DCM (x2). Los extractos orgánicos se combinaron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 20-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR 1,11 minutos: MS m/z [M+H]+ 345,4: Método 2minpHbajov03

Paso 4: N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxamida

A una solución de N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxamida (53 mg, 0,154 mmol) en THF (1 mL) y agua (0,5 mL), se añadió peryodato de sodio (99 mg, 0,462 mmol) y Os EnCat™ (OsO4 microencapsulado) (10,26 mg, 3,08 ^mol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se filtró a través de un tapón de algodón y el eluyente se concentró a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCls) 510,09 (1H, s), 8,34 (1H, s a), 4,07 (1H, mult), 3,32 (3H, s), 2,57 (3H, s), 2,23 (3H, s), 2,08­ 1,95 (2H, mults a), 1,94-1,80 (4H, mults a), 1,71 (1H, mult a), 1,44-1,30 (2H, mults a), 1,30-1,16 (1H, mult a).

Paso 5: N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-3H-pirazol-4-il)-5-(1-hidroxibut-3-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Una solución de N-(2-ciclohexil-1,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-N)-5-formil-4-metNisoxazol-3-carboxamida (53 mg, 0,153 mmol) en THF (1,5 mL) se enfrió hasta 0 °C y se añadió bromuro de alilmagnesio 1 M en Et²O (337 ^L, 0,337 mmol) gota a gota en 15 min. La mezcla de reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se añadió NH⁴Cl (ac.). La fase acuosa se extrajo con DCM (x3). Los extractos orgánicos combinados se hicieron pasar a través de un cartucho separador de fases y se eliminó el disolvente orgánico a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 50-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título.

Paso 6: Una mezcla de N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-((2R,6R)-6-¡soprop¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da y N-(2-ciclohexil-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1 H-pirazol-4-il)-5-(^R ^S^-isoprop il^^-d ih idro^H -p iran^-il^-m etilisoxazo l^-carboxam ida y N -^-c ic lohex iM ^-d im etil^ -oxo^^-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-((2S,6R)-6-¡soprop¡l-5,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da y N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-((2S,6S)-6-¡soprop¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Una solución de N-(2-ciclohexil-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(1-h¡drox¡but-3-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3- carboxamida (26 mg, 0,054 mmol) en DCM (0,5 mL) se enfrió hasta 0 °C y se añadió isobutiraldehído (5,38 |jL, 0,059 mmol) y TMSOTf (10,66 ^L, 0,059 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 hora y a temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió una solución (ac.) saturada de NH⁴Cl a la mezcla resultante y esto se extrajo con DCM (x3). Los extractos orgánicos combinados se hicieron pasar a través de un cartucho separador de fases y se eliminó el disolvente orgánico a presión reducida. El material crudo se disolvió en DMSO y se purificó utilizando una cromatografía de fase inversa automatizada dirigida por UV con un gradiente de 9,5 minutos de 30-70% de MeCN en agua (0,1% de ácido fórmico) utilizando una columna Xselect CSH Prep C18 para proporcionar los compuestos del título como una mezcla de alquenos, la relación propuesta de productos según Rm N es de 3:2 para 4- eno:3-eno; la estereoquímica propuesta es syn.

LC-MS: tR = 1,40 minutos; MS m/z [M+H]+ 443,3: Método 2minpHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCls) 58,13 - 8,07 (m, 2H), 6,08 - 6,03 (m, 1H), 5,936 - 5,92 (m, 1H), 5,80 - 5,73 (m, 2H), 5,46 -5,42 (m, 1H), 4,85 (dd, J = 10,37, 3,3, 1H), 4,18 - 4,14 (m, 1H), 4,10 - 4,04 (m, 3H), 3,43 - 3,40 (m, 1H), 3,32 - 3,24 (m, 7H), 2,30 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,24 - 2,21 (m, 8H), 2,02 - 1,50 (m, 16H), 1,44 - 1,06 (m, 8H), 1,01-0,94 (m, 12H). Ejemplo 19:

Una mezcla de W-(2-ciclohexN-1,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1R-pirazol-4-N)-4-metN-5-((2S,6S)-6-metN-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida y W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1 H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R,6R)-6-metil-3,6-dihidro-2H-piran-2-M)isoxazol-3-carboxamida

y

Paso 1: 5-(1-H¡drox¡but-3-en-1-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de etilo Una solución de trifluoruro de boro dietileterado (54,1 ^L, 0,427 mmoL) en DCM (0,3 mL) se enfrió hasta -78 °C. En un matraz por separado, una solución de 5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio C) (68 mg, 0,371 mmol) y aliltrimetilsilano (59,0 ^L, 0,371 mmol) en DCM se enfrió hasta -78 °C y esta solución se añadió gota a gota a la solución de trifluoruro de boro dietileterado. La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 1 hora y a temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió una solución saturada de NaHCO3 (ac.) (5 mL) a la mezcla resultante y esto se extrajo con DCM (x3). Los extractos orgánicos combinados se hicieron pasar a través de un cartucho separador de fases y el eluyente se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-50% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,07 minutos; MS m/z [M+H]+ 226,1: Método 2minpHbajov03

Paso 2: 4-Met¡l-5-(6-met¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carbox¡lato de etilo

Una solución de 5-(1-hidroxibut-3-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (35 mg, 0,155 mmol) en DCM (1 mL) se trató con acetaldehído (8,72 ^L, 0,155 mmol) y la mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C. Se añadió una solución de TMSOTf (80,4 ^L, 0,465 mmol) en DCM (1,5 mL) enfriada hasta 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 minutos y a temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió una solución saturada de cloruro de amonio (ac.) (2 mL) a la mezcla resultante y esto se extrajo con DCM (x3). Los extractos orgánicos combinados se hicieron pasar a través de un cartucho separador de fases y el eluyente se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,32 minutos: MS m/z [M+H]+ 252,2: Método 2minpHbajov03

Paso 3: Ácido 4-metil-5-(6-metil-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxílico

A una solución de 4-metil-5-(6-metil-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxilato de etilo (14 mg, 0,056 mmol) en MeOH (0,2 mL) y THF (0,3 mL), se añadió NaOH (ac.) 2 M (27,9 ^L, 0,056 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla resultante se concentró a presión reducida y se añadió NaOH (ac.) 2 M (1 mL) y agua (1 mL). La fracción acuosa se extrajo con DCM (x3) y los extractos orgánicos combinados se hicieron pasar a través de un cartucho separador de fases. El eluyente se concentró a presión reducida para proporcionar el compuesto del título.

Paso 4: Mezcla racémica de W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2S,6S)-6-metil-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida y W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R,6R)-6-metil-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida

A una solución de ácido 4-metil-5-(6-metil-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxílico (12,03 mg, 0,054 mmoL) en NMP (0,5 mL), se añadió HATU (20,49 mg, 0,054 mmol). Se añadieron 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D) (11,28 mg, 0,054 mmol) y trietilamina (7,49 ^L, 0,054 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se repartió entre hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado (10 mL) y EtOAc (10 mL). Los componente orgánicos se lavaron con salmuera (10 mL), se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 40-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 3,65 minutos: MS m/z [M+H]+ 415,3: Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, CDCls) 57,98 (s, 1H), 5,86 - 5,77 (m, 1H), 5,68 - 5,60 (m, 1H), 4,77 (dd, J = 10,9, 3,3 Hz, 1H), 4,37 (s, 1H), 4,04 - 3,93 (m, 1H), 3,31 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 3,26 (s, 3H), 2,67 - 2,54 (m, 1H), 2,31 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 2,19 -2,08 (m, 7H), 2,02 - 1,87 (m, 2H), 1,86 - 1,72 (m, 2H), 1,64 - 1,59 (m, 1H), 1,36 - 1,05 (m, 7H).

Ejemplo 20:

M-(2-CiclohexiM ,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-M)-4-metil-5-((2R,3S)-3,5,5-trimetiM,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida

Paso 1: 5-((1 R,2S)-2-((ferf-Butildimetilsilil)oxi)-1-hidroxipropil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Se añadió cloruro de ferf-butildimetilsililo (6,3 g, 41,5 mmol) en porciones a 5-((1R,2S)-1,2-dihidroxipropil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio B) (8,65 g, 37,7 mmol), 4-dimetilaminopiridina (1,38 g, 11,32 mmol) y trietilamina (5,80 mL) en DMF (100 mL) a 0 °C y se permitió que la reacción se calentara hasta temperatura ambiente. Después de 18 h, la reacción se repartió entre EtOAc y salmuera, se lavó con cloruro de amonio acuoso saturado y salmuera, se secó con Na2SO4 y se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con un 15% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título; LC-MS: tR = 1,59 minutos; MS m/z [M+H]+ 344,4; Método 2minpHbajov03

Paso 2: 5-((1R,2S)-2-((terf-Butildimetilsilil)oxi)-1-((2-metilalil)oxi)propil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 2-metilalil 5-((1R,2S)-2-((terf-butildimetilsilil)oxi)-1-((2-metilalil)oxi)propil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Se añadió NaH (700 mg de una dispersión al 60% p en aceite mineral, 17,47 mmol) en porciones a 5-((1R,2S)-2-((terfbutildimetilsilil)oxi)-1-hidroxipropil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (3,0 g, 8,73 mmol) en THF (75 mL) a temperatura ambiente, seguido de 3-bromo-2-metilprop-1-eno (8,81 mL, 87 mmol) gota a gota en 10 minutos. Se añadió yoduro de tetrabutilamonio (2,58 g, 6,99 mmol) y la reacción resultante se calentó a 58 °C durante 2 horas. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se desactivó secuencialmente con salmuera (75 mL) y EtOAc (75 mL), se secó con Na2SO4 y se concentró a presión reducida para proporcionar los compuestos del título crudos como una mezcla aproximadamente 9:1;

LC-MS: tR = 1,90 minutos; MS m/z [M+H]+ 398,5; Método 2minpHbajov03

LC-MS: tR = 1,95 minutos; MS m/z [M+H]+ 424,5; Método 2minpHbajov03

Paso 3: Ácido 5-((1R,2S)-2-((tert-butildimetilsilil)oxi)-1-((2-metilalil)oxi)propil)-4-metilisoxazol-3-carboxílico

Se añadió hidróxido de litio monohidratado (3,20 g, 76 mmol) en porciones a una mezcla de 5-((1R,2S)-2-((terfbutildimetilsilil)oxi)-1-((2-metilalil)oxi)propil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 2-metilalil 5-((1R,2S)-2-((terfbutildimetilsilil)oxi)-1-((2-metilalil)oxi)propil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo [4,5 g como una mezcla aproximadamente 9:1 que contenía yoduro de tetrabutilamonio residual (25% p/p)] en THF/agua (300 mL, 1,5/1,0) y la mezcla resultante se calentó cuidadosamente a 70 °C. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, se separaron las fases y la fracción acuosa remanente se acidificó con ácido clorhídrico acuoso 1 M y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos se combinaron y se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 y se concentraron a presión reducida para proporcionar el compuesto del título crudo;

LC-MS: tR = 1,75 minutos; MS m/z [M+H]+ 370,5; Método 2minpHbajov03

Paso 4: 5-((1R,2S)-2-((tert-Butildimetilsilil)oxi)-1-((2-metilalil)oxi)propil)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Se añadió 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D) (2,63 g, 12,55 mmol) en porciones al ácido 5-((1R,2S)-2-((terf-butildimetilsilil)oxi)-1-((2-metilalil)oxi)propil)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (4,14 g, ~70% p/p) en DMF (100 mL) y a continuación se añadió DlPEA (7,8 mL, 44,8 mmol) y HATU (4,8 g, 12,55 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 18 h, la mezcla de reacción se repartió entre EtOAc y salmuera. La fase acuosa se extrajo con EtOAc y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 y se concentraron a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 50-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,77 minutos; MS m/z [M+H]+ 561,8; Método 2minpHbajov03

Paso 5: N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-((1R,2S)-2-hidroxi-1-((2-metilalil)oxi)propil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Se añadió fluoruro de tetrabutilamonio (15,16 mL, 15,16 mmol) gota a gota a 5-((1 R,2S)-2-((tert-butildimetilsilil)oxi)-1-((2-metilalil)oxi)propil)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (5,06 g, 7,58 mmol (asumiendo una pureza de un 76%)) en THF (160 mL) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla resultante se desactivó mediante la adición secuencial de agua y (150 mL) y EtOAc (200 mL). Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 y se concentraron a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 50-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,12 minutos; MS m/z [M+H]+ 447,5; Método 2minpHbajov03

Paso 6: N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1 H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida

Se añadió trifluoroacetato mercúrico (3,92 g, 9,19 mmol) en porciones a N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-((1R,2S)-2-hidroxi-1-((2-metilalil)oxi)propil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (3,59 g, 8,03 mmol) en THF (160 mL) a temperatura ambiente. Se añadió óxido mercúrico rojo (1,99 g, 9,19 mmol) y la mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente. Después de 1 h, la reacción se enfrió hasta -78 °C y se añadió trietilborano (16,84 mL, 16,84 mmol) gota a gota seguido de borohidruro de sodio (579 mg, 15,31 mmol) en porciones. Después de 1 h a -78 °C, se permitió que la reacción se calentara gradualmente hasta temperatura ambiente. La mezcla resultante se desactivó mediante la adición de salmuera y EtOAc, se separó, se secó con Na2SO4 y se concentró a presión reducida. Se añadieron DCM (200 mL) y Biotage Si-Tiol (17g, carga de 1,4 mmol/g, ~3 eq.) y la suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La reacción se filtró, se lavó con DCM y se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 90-95% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título (ee > 95%);

LC-MS: tR = 1,16minutos; MS m/z [M+H]+ 447,5; Método 2minpHbajov03

1H RMN. ([400MHz], [DMSO] 9,55 (1H, s), 4,36 (1H, d), 4,09 (1H, m), 3,91 (1H, m), 3,65 (1H, d), 3,42 (1H, d), 3,21 (3H, s), 2,16 (3H, s), 2,03 (3H, s), 1,98 (2H, m), 1,78 (2H, m), 1,64 (3H, m), 1,37 (3H, s), 1,31 (2H, m), 1,17 (1H, m), 1,10 (3H, s), 0,87 (3H, d).

Ejemplo 21.1

21.1 [5-(4-Bromo-5-metMtetrahidro-2W-piran-2-M)-W-(2-ciclohexiM ,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1 W-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]

y Ejemplo 21.2: W-(2-ciclohexiM,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-N)-4-metN-5-(5-metN-3,6-dihidro-2W-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida

Paso 1: [5-(4-Bromo-5-metiltetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo]

A una mezcla enfriada con hielo de 2-metilbut-3-en-1-ol (Aldrich) (0,171 mL, 1,638 mmol), bromuro de indio (III) (28,3 mg, 0,082 mmol) y DCM anhidro (10 mL) en atmósfera de nitrógeno, se añadió bromotrimetilsilano (0,213 mL, 1,638 mmol). La mezcla de reacción se agitó con refrigeración de hielo durante 30 min. Se añadió una solución enfriada con hielo de 5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio C) (300 mg, 1,638 mmol) en DCM anhidro (2 mL) a la mezcla de reacción en un periodo de 5 minutos. La mezcla de reacción se agitó con refrigeración de hielo y se calentó hasta temperatura ambiente durante el fin de semana. La mezcla resultante se trató con NaHCO3 acuoso saturado (10 mL) con agitación a 0 °C. La mezcla resultante se hizo pasar a través de un cartucho separador de fases y se eliminó el disolvente eluyente a presión reducida. El material crudo se disolvió en DMSO y se purificó utilizando cromatografía de fase inversa automatizada dirigida por UV con un gradiente de 9,5 minutos de 50-98% de MeCN en agua (0,1% de ácido fórmico). Las fracciones de producto se añadieron a EtOAc (50 mL) y se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (50 mL). Los extractos orgánicos se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,47minutos; MS m/z [M+H]+332,2/334,2: Método 2minpHbajov03

Paso 2: [5-(4-Bromo-5-metiltetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de potasio] y (R)-4-metil-5-(5-metil-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxilato de potasio y (S)-4-metil-5-(5-metil-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxilato de potasio

A una solución de [5-(4-bromo-5-metiltetrahidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo] (211 mg, 0,635 mmol) en THF anhidro (5 mL), se añadió trimetilsilanolato de potasio (Aldrich) (107 mg, 0,953 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente y se sometió a sonicación. Se añadió más THF y la mezcla se agitó durante 3 horas. La mezcla resultante se concentró a presión reducida para proporcionar una mezcla de los compuestos del título;

LC-MS: tR = 1,07minutos; MS m/z [M+H]+ 224,2; tR = 1,20minutos; MS m/z [M+H]+ 306,2: Método 2minpHbajov03.

Paso 3: [5-(4-Bromo-5-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-metilisoxazol-3-carboxamida] y una mezcla del compuesto (R)-N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(5-met¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da y (S)-N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(5-met¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da (1:1)

A una soluc¡ón ag¡tada de 5-(4-bromo-5-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de potas¡oy 4-met¡l-5-(5-met¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carbox¡lato de potas¡o (mezcla cruda) (217 mg, 0,634 mmol) en NMP anh¡dra (4 mL), se añad¡ó HATU (Fluorochem) (265 mg, 0,697 mmol), 4-am¡no-2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-1H-p¡razol-3(2H)-ona (Intermed¡o D) (133 mg, 0,634 mmol) y tr¡et¡lam¡na (0,194 mL, 1,395 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante toda la noche y se repart¡ó entre EtOAc (25 mL) y NaOH 1 M (25 mL). Los extractos orgán¡cos se lavaron con agua (30 mL) y salmuera (30 mL), se secaron con MgSO4, se f¡ltraron y se concentraron a pres¡ón reduc¡da. El material crudo se d¡solv¡ó en DMSO y se purificó ut¡l¡zando cromatografía de fase ¡nversa automat¡zada d¡r¡g¡da por UV con un grad¡ente de 9,5 m¡nutos de 30-70% de MeCN en agua (0,1% de ác¡do fórm¡co). Las fracc¡ones de producto se añad¡eron a EtOAc (50 mL) y se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (50 mL). Las fases orgán¡cas se secaron con MgSO4, se filtraron y se el¡m¡nó el d¡solvente a pres¡ón reduc¡da para proporc¡onar los compuestos del título.

Ejemplo 21,1: [5-(4-Bromo-5-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da] LC-MS: tR = 1,30m¡nutos; m S m/z [M+H]+ 497,5: Método 2m¡npHbajov03 1H RMN (400 MHz, CDCls) 57,88 (1H, s), 4,47 (1H, mult), 4,03-3,87 (2H, mults a), 3,80-3,72 (1H, mult), 3,14 (3H, s), 2,43-2,36 (1H, mult a), 2,13 (3H, s), 2,08 (3H, s), 2,01 (1H, mult a), 1,91-1,80 (3H, mults a), 1,79-1,68 (5H, mults a), 1,58 (1H, mult a), 1,31-1,18 (2H, mults a), 1,16-1,05 (1H, mult a), 0,95 (3H, d).

Ejemplo 21,2: N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(5-met¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da LC-MS: tR = 1,25 m¡nutos; MS m/z [M+H]+ 415,4: Método 2m¡npHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCls) 58,04 (1H, s), 5,63 (1H, mult), 4,78 (1H, dd), 4,26-4,00 (3H, mults a), 3,26 (3H, s), 2,72­ 2,61 (1H, mult a), 2,28 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,07-1,93 (3H, mults a), 1,92-1,81 (5H, mults a), 1,75-1,66 (2H, mults a), 1,67 (3H, s), 1,44-1,30 (2H, mults a), 1,30-1,18 (1H, mult a).

Ejemplo 22:

W-(2-ciclohexiM,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-M)-4-metil-5-((2ft,5ft)-5-metNtetrahidro-2W-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida

A una mezcla del compuesto (R)-N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(5-met¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da y (S)-N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1 H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(5-met¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da (1:1) (Ejemplo 21.2) (35 mg, 0,084 mmol) en EtOH (15 mL) con un flujo de n¡trógeno, se añad¡ó Pd-C (3,59 mg, 0,034 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente en una atmósfera de h¡drógeno a 0,35 bar durante 2 horas. La mezcla resultante se filtró a través de Cel¡te® y se lavó con etanol. El filtrado se concentró a pres¡ón reduc¡da y se h¡zo pasar a través de un cartucho de 1 g de síl¡ce-TMT de B¡otage con gravedad. El cartucho se lavó con etanol y se concentró el eluyente a pres¡ón reduc¡da. El material crudo se d¡solv¡ó en DMSO y se purificó ut¡l¡zando cromatografía de fase ¡nversa automat¡zada d¡r¡g¡da por UV con un grad¡ente de 9,5 m¡nutos de 30-70% de MeCN en agua (0,1% de ác¡do fórm¡co). Las fracc¡ones de producto se añad¡eron a EtOAc (30 mL) y se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (30 mL). Los extractos orgán¡cos se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron a pres¡ón reduc¡da para proporc¡onar el compuesto del título;

LC-MS: tR 1,23 m¡nutos; MS m/z [M+H]+ 417,4; Método 2m¡npHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCh) 58,35 (1H, mult), 4,77 (1H, mult), 4,17-3,99 (2H, mults), 3,72 (1H, dd), 3,50 (1H, dd), 3,34 (3H, mult), 2,29-2,22 (6H, mults), 2,08-1,97 (4H, mults), 1,86 (3H, mults), 1,75 (1H, mult), 1,63 (1H mult), 1,37 (2H, mult), 1,30-1,22 (3H, mult), 1,05 (2H, mult), 0,87 (1H, mult).

La separac¡ón qu¡ral del Ejemplo 22 ut¡l¡zando cromatografía de flu¡dos supercrít¡cos proporc¡onó dos enant¡ómeros ¡nd¡v¡duales del d¡astereómero cis y una mezcla racém¡ca del d¡astereómero trans:

Detalles del método:

Columna: Chiralpak AD-H 250 x 10 mm, 5 um a 35 °C

Fase móvil: 30% de metanol / 70% de CO²

Flujo: 10 mL/min

Detección: UV a 220 nm

Instrumento: Berger Minigram SFC2

Ejemplo 22.a Estereoisómero único de N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(5-metiltetrahidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida

Tiempo de retención de SFC = 9,74 min

1H RMN (400 MHz, CDCls) 58,04 (1H, s a), 4,80-4,75 (1H, mult a), 4,05 (1H, tt), 3,76-3,70 (1H, dd), 3,55-3,48 (1H, dd), 3,25 (3H, s), 2,28 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,07-1,93 (2H, mults a), 1,93-1,75 (8H, mults a), 1,71 (1H, mult a), 1,67­ 1,58 (1H, mult a), 1,44-1,30 (2H, mults a), 1,30-1,18 (1H, mult a), 1,05 (3H, d).

Ejemplo 22.b:

Estereoisómero único de N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1 H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(5-metiltetrahidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida

Tiempo de retención de SFC = 8,12 min

1H RMN (400 MHz, CDCls) 58,10 (1H, s a), 4,79-4,76 (1H, mult a), 4,06 (1H, tt), 3,75-3,70 (1H, dd), 3,53-3,48 (1H, dd), 3,27 (3H, s), 2,28 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,03-1,95 (2H, mult), 1,92-1,77 (8H, mults a), 1,71 (1H, mult a), 1,66-1,59 (1H, mult a), 1,42-1,32 (2H, mults a), 1,27-1,20 (1H, mult a), 1,05 (3H, d).

Ejemplo 22.c:

Una mezcla de N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2S, 5R)-5-metiltetrahidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida y N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R, 5S)-5-metiltetrahidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida

Tiempo de retención de SFC = 5,84 min

1H RMN (400 MHz, CDCb) 58,10 (1H, s a), 4,50 (1H, dd), 4,10-3,98 (2H, mults a), 3,26 (3H, s), 3,17 (1H, t), 2,27 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,09-1,92 (4H, mults a), 1,93-.177 (7H, mults a), 1,71 (1H, d a), 1,42-1,17 (3H, mults a), 0,87 (3H, d).

Ejemplo 23:

Una mezcla de 5-((2R,4S)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-N)-M-(2-ciclohexiM ,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y 5-((2S,4R)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-N)-W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1R-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Paso 1: 2,2-Dimetilbut-3-en-1-ol

A una solución de 2,2-dimetilbut-3-in-1-ol (PharmaBlocks) (3 g, 30,6 mmol) en éter dietílico anhidro (40 mL), se añadió 2,2'-(etano-1,2-diilbis(sulfanodiil))dietanol (5,57 g, 30,6 mmol) seguido de Pd al 5% en sulfato de bario (Aldrich) (6,51 g, 3,06 mmol). La mezcla se desgasificó, se rellenó completamente con nitrógeno y se agitó en una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla resultante se filtró a presión reducida y se lavó el catalizador con éter dietílico. El filtrado se concentró cuidadosamente a presión reducida para eliminar la mayor parte del disolvente. La suspensión resultante se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCls) 55,71 (1H, dd), 5,05-4,97 (2H, mults), 3,27 (2H, s), 1,41 (1H, mult a), 0,95 (6H, s).

Paso 2: Una mezcla de 5-((2R,4S)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,4R)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

A una mezcla enfriada con hielo de 2,2-dimetilbut-3-en-1-ol (328 mg, 3,28 mmol), bromuro de indio (111) (56,6 mg, 0,164 mmol) y DCM anhidro (20 mL) en atmósfera de nitrógeno, se añadió bromotrimetilsilano (0,425 mL, 3,28 mmol) y la mezcla resultante se agitó con refrigeración de hielo durante 30 min. Se añadió una solución enfriada con hielo de 5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio C) (600 mg, 3,28 mmol) en DCM anhidro (2 mL) a la mezcla de reacción en un periodo de 15 minutos y la mezcla de reacción se agitó con refrigeración de hielo durante 85 minutos. La mezcla resultante se trató con NaHCÜ3 acuoso saturado (10 mL) con agitación a 0 °C. La mezcla bifásica se hizo pasar a través de un cartucho separador de fases y el filtrado se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-60% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,48minutos; MS m/z [M+H]+ 346,2/348,2: Método 2minpHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCls) 5 5,12 (1H, dd), 4,45 (2H, c), 4,10-4,01 (2H, mult), 2,73-2,65 (1H, mult), 2,46-2,39 (1H, mult), 2,27 (3H, s), 1,82 (3H, s), 1,80 (3H, s), 1,43 (3H, t).

Paso 3: Una mezcla de ácido 5-((2R,4S)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2S,4R)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico

A una solución agitada de una mezcla de 5-((2R,4S)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo y 5-((2S,4R)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (442 mg, 1,277 mmol) en THF (10 mL) y MeOH ⁽¹ mL), se añadió NaOH (ac.) 2 M (1,277 mL, 2,55 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente. Tras completarse la reacción, se añadió agua (20 mL) y se acidificó hasta un pH de 5-6 mediante la adición de HCl (ac.) 1 M. La fracción acuosa se extrajo con EtÜAc (40 mL) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron con MgSÜ4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,18 minutos; MS m/z [M+H]+ 318,4/320,5: Método 2minpHbajov03

Paso 4: Una mezcla de 5-((2R,4S)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-il)-W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y 5-((2S,4R)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-il)-W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

A una mezcla agitada de DMF (0,073 mL, 0,943 mmol) en DCM anhidro (15 mL) en atmósfera de nitrógeno a 0 °C, se añadió cloruro de oxalilo (0,045 mL, 0,519 mmol). Después de 5 minutos, se añadió una solución de una mezcla de ácido 5-((2R,4S)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico y ácido 5-((2S,4R)-4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (150 mg, 0,471 mmol) en DCM anhidro (3 mL) y la mezcla de reacción se agitó durante 10 minutos. Se añadieron una solución de 4-amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermedio D) (109 mg, 0,519 mmol) en DCM anhidro (2 mL) y trietilamina (0,197 mL, 1,414 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 40 minutos. La mezcla resultante se repartió entre DCM (30 mL) y NaHCO3 acoso saturado (30 mL). Los extractos orgánicos se hicieron pasar a través de una columna separadora de fases y el eluyente se concentró a presión reducida. El material crudo se disolvió en DMSO y se purificó utilizando cromatografía de fase inversa automatizada dirigida por UV con un gradiente de 9,5 minutos de 30-70% de MeCN en agua (0,1% de ácido fórmico). Las fracciones de producto se añadieron a EtOAc (50 mL) y se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (50 mL). Las fases orgánicas se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar los compuestos del título;

LC: tR = 1,26 min: Método 2minLowpHv03:

1H RMN (400 MHz, CDCb) 58,06 (1H, s a), 5,19 (1H, t), 4,53 (1H, mult), 4,40 (1H, mult), 4,05 (1H, tt), 3,26 (3H, s), 2,92-2,77 (2H, mult a), 2,28 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,06-1,94 (2H, mults a), 1,92-1,83 (4H, mults a), 1,72 (3H, s), 1,72­ 1,63 (1H, mults a), 1,64 (3H, s), 1,44-1,30 (2H, mults a), 1,29-1,19 (1H, mult a).

Ejemplo 24:

Una mezcla de W-(2-ciclohexN-1,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1W-pirazol-4-N)-5-((2ft,4ft)-4-isopropiltetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida y W-(2-cidohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-lH-pirazol-4-il)-5-((2S,4S)-4-isopropiltetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Se añadió Pd-C (5,18 mg, 0,049 mmol) a 5-(4-(2-bromopropan-2-il)tetrahidrofuran-2-il)-N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (62 mg, 0,122 mmol) en etanol (10 mL) con un flujo de nitrógeno. La mezcla se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 0,35 bar y temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió NaHCO3 (40,9 mg, 0,487 mmol) a la mezcla de reacción y la mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 0,35 bar y temperatura ambiente durante 2,5 horas. La mezcla resultante se filtró a través de Celite® y se lavó con EtOH. El filtrado se hizo pasar a través de un cartucho de 1 g de sílice-TMT de Biotage y el eluyente se eliminó a presión reducida. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa-MS con un gradiente de 9,5 minutos de 30-98% de MeCN en agua (0,1% de TFA). Las fracciones de producto se disolvieron en EtOAc (20 mL) y se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (20 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera (10 mL), secó con MgsO4, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar los compuestos del título;

LC-MS: tR = 1,30 minutos; MS m/z [M+H]+ 431,5: Método 2minpHbajov03.

La separación quiral del Ejemplo 24 utilizando cromatografía de fluidos supercríticos proporcionó los enantiómeros individuales.

Detalles del método:

Columna: Chiralpak IB, 250 x 10 mm, 5 um a 35 °C

Fase móvil: 40% de isopropanol 0,1% v/v de DEA / 60% de CO²

Flujo: 10 mL/min

Detección: UV a 220 nm

Instrumento: Berger Minigram SFC1

Ejemplo 24.a: N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-((2R,4R)-4-isopropiltetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o

N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-((2S,4S)-4-isopropiltetrahidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

tR de SFC = 3,99 min

LC-MS; tR = 1,30 minutos; MS m/z [M+H]+ 431,5; Método 2minpHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCla) 57,99 (1H, s a), 5,09 (1H, mult), 4,09 (1H, t), 4,10-4,00 (1H, tt), 3,69 (1H, t), 3,24 (3H, s), 2,45-2,36 (1H, mult), 2,25 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,18-2,09 (1H, mult a), 2,06-1,93 (2H, mults a), 1,91-1,83 (5H, mults a), 1,71 (1H, mult a), 1,67-1,60 (1H, mult a), 1,44-1,30 (2H, mults a), 1,29-1,19 (1H, mult a), 1,00 (3H, d), 0,95 (3H, d).

Ejemplo 24.b: N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-((2R,4R)-4-¡soprop¡ltetrah¡drofuran-2-¡l)-4- metilisoxazol-3-carboxamida o N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1 H-p¡razol-4-¡l)-5-((2S,4S)-4-¡soprop¡ltetrah¡drofuran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da

tR de SFC = 5,42 m¡n

LC-MS: tR 1,30 m¡nutos; MS m/z [M+H]+ 431,6: Método 2m¡npHbajov03

1H RMN (400 MHz, CDCla) 58,06 (1H, s a), 5,12-5,06 (1H, mult), 4,12-4,01 (2H, mults), 3,69 (1H, t), 3,26 (3H, s), 2,44­ 2,36 (1H, mult), 2,26 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,18-2,08 (1H, mult), 2,05-1,95 (2H, mults a), 1,91-1,83 (5H, mults a), 1,71 (1H, mult a), 1,68-1,59 (1H, mult), 1,44-1,31 (2H, mults a), 1,30-1,19 (1H, mult a), 1,00 (3H, s), 0,95 (3H, s).

Ejemplo 25:

5- (4-(ferí-butil)-1,3-dioxolan-2-N)-M-(2-ciclohexiM,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1tf-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

Paso 1: 5-(4-(te/t-But¡l)-1,3-d¡oxolan-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de et¡lo

A una soluc¡ón de 5-form¡l-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de et¡lo (Intermed¡o C) (50 mg, 0,273 mmol) en tolueno (0,5 mL), se añad¡ó 3,3-d¡met¡lbutano-1,2-d¡ol (32,3 mg, 0,273 mmol) y la mezcla se calentó a 110 °C durante 4,5 horas. La mezcla resultante se repartió entre EtOAc y agua, y la fase orgán¡ca se secó con MgSO4, se f¡ltró y se el¡m¡nó el d¡solvente a pres¡ón reduc¡da. El mater¡al crudo se adsorb¡ó sobre síl¡ce y la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en ¡sohexano proporc¡onó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,42m¡nutos; MS m/z [M+H]+ 284,3: Método 2m¡npHelevadov03

Paso 2: 5-(4-(te/t-But¡l)-1,3-d¡oxolan-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de potas¡o

A una soluc¡ón de 5-(4-(te/f-but¡l)-1,3-d¡oxolan-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de et¡lo (42 mg, 0,148 mmol) en THF (4 mL), se añad¡ó tr¡met¡ls¡lanolato de potas¡o (19,02 mg, 0,148 mmol) y la mezcla se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 1,5 horas. La mezcla resultante se concentró a pres¡ón reduc¡da para proporc¡onar el compuesto del título.

Paso 3: Una mezcla de 5-((2R,4R)-4-(te/f-but¡l)-1,3-d¡oxolan-2-¡l)-N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da y 5-((2R,4S)-4-(te/t-but¡l)-1,3-d¡oxolan-2-¡l)-N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1 H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da y 5-((2S,4R)-4-(te/t-but¡l)-1,3-d¡oxolan-2-¡l)-N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da y 5-((2S,4S)-4-(te/t-but¡l)-1,3-d¡oxolan-2-¡l)-N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da

A una soluc¡ón de 5-(4-(te/t-but¡l)-1,3-d¡oxolan-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carbox¡lato de potas¡o (43,5 mg, 0,148 mmol) en NMP (0,7 mL), se añad¡ó HATU (62,0 mg, 0,163 mmol), tr¡et¡lam¡na (45,5 ^L, 0,326 mmol) y 4-am¡no-2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-1H-p¡razol-3(2H)-ona (Intermed¡o D) (31,0 mg, 0,148 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante toda la noche. Se añad¡ó agua y EtOAc a la mezcla resultante. Los componentes orgán¡cos se lavaron con salmuera (x2), se secaron con MgSO4, se filtraron y se el¡m¡nó el d¡solvente a pres¡ón reduc¡da. El mater¡al crudo se adsorb¡ó sobre síl¡ce y la pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía eluyendo con 0-100% de EtOAc en ¡sohexano proporc¡onó el compuesto del título como una mezcla de d¡astereo¡sómeros.

Ejemplo 25a-25d:

5-((2R,4R)-4-(tert-ButN)-1,3-dioxolan-2-N)-W-(2-ciclohexN-1,5-dimetN-3-oxo-2,3-dihidro-1R-pirazol-4-N)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o 5-((2R,4S)-4-(tert-butN)-1,3-dioxolan-2-N)-N-(2-ciclohexN-1,5-dimetM-3-oxo-2,3-dihidro-1 H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o 5-((2S,4R)-4-(terf-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-dclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-M)-4-metilisoxazol-3-carboxamida o 5-((2S,4S)-4-(tertbutil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ciclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

La separación quiral de 5-(4-(fe/f-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ddohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida utilizando cromatografía de fluidos supercríticos proporcionó los enantiómeros individuales.

Detalles del método:

Columna: Chiralpak IB, 250 x 10 mm, 5 um a 35 °C

Fase móvil: 35% de isopropanol 0,1% v/v de DEA / 65% de CO²

Flujo: 10 mL/min

Detección: UV a 220 nm

Instrumento: Berger Minigram SFC1

Ejemplo 25a: Estereoisómero único de 5-(4-(fe/f-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ddohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida SFC: tR = 3,36 min

LC-MS: tR = 4,11 minutos; MS m/z [M+H]+ 447,6: Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, CDCls) 58,29 (1H, s a), 6,02 (1H, s), 4,14-4,00 (2H, mults), 3,97-3,87 (2H, mults), 3,36 (3H, s), 2,31 (3H, s), 2,23 (3H, s), 2,09-1,97 (2H, mults), 1,88 (3H, t a), 1,73 (1H, d a), 1,44-1,31 (2H, mults), 1,30-1,20 (2H, mults), 1,01 (9H, s).

Ejemplo 25b: Estereoisómero único de 5-(4-(fe/f-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ddohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida SFC quiral: tR = 3,78 min

LC-MS: tR = 4,12 minutos; MS m/z [M+H]+ 447,5; Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, CDCls) 58,06 (1H, s a), 6,19 (1H, s), 4,16-4,00 (3H, mults), 3,85 (1H, t), 3,30 (3H, s), 2,30 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,07-1,94 (2H, mults), 1,87 (3H, t a), 1,72 (1H, d a), 1,45-1,20 (4H, mults), 0,99 (9H, s).

Ejemplo 25c: Estereoisómero único de 5-(4-(fe/f-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ddohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida SFC quiral: tR = 4,05 min

LC-MS: tR = 4,09 minutos; MS m/z [M+H]+ 447,5; Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, CDCls) 57,99 (1H, s a), 6,02 (1H, s), 4,10-4,01 (2H, mults), 3,97-3,87 (2H, mults), 3,25 (3H, s), 2,32 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,06-1,93 (2H, mults), 1,88 (3H, t a), 1,71 (1H, d a), 1,44-1,30 (2H, mults), 1,30-1,20 (2H, mults), 1,00 (9H, s).

Ejemplo 25d: Estereoisómero único de 5-(4-(fe/f-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-cidohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida SFC quiral: tR = 5,95 min

LC-MS: tR = 4,15 minutos; MS m/z [M+H]+ 447,6; Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, CDCls) 58,00 (1H, s a), 6,20 (1H, s), 4,16-4,09 (2H, mults), 4,07-4,00 (2H, mults), 3,27 (3H, s), 2,30 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,07-1,94 (2H, mults), 1,87 (3H, t a), 1,72 (1H, d a), 1,45-1,20 (4H, mults), 0,99 (9H, s). Ejemplo 26:

W-(2-Ciclohexil-1 ,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5-dimetiM,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida

El compuesto del título se preparó mediante un método similar al del Ejemplo 25 reemplazando el 3,3-dimetilbutano-1,2-diol (Paso 1) por 2,2-dimetilpropano-1,3-diol;

LC-MS: tR = 3,68 minutos; MS m/z [M+H]+ 433,4; Método 8minpHbajov01

1H RMN (400 MHz, CDCh) 57,98 (1H, s), 5,58 (1H, s), 3,96 (1H, tt), 3,71 (2H, d), 3,55 (2H, d), 3,18 (3H, s), 2,26 (3H, s), 2,11 (3H, s), 1,97-1,86 (2H, mults), 1,80-1,74 (3H, mults), 1,62 (1H, d a), 1,33-1,11 (4H, mults), 1,23 (3H, s), 0,75 (3H, s).

Intermedio A:

5-Bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Paso 1: 4-Metil-5-oxo-4,5-dihidroisoxazol-3-carboxilato de etilo

A oxalilpropionato de dietilo (300 g, 1,48 mol) en etanol (2 L), se añadió clorhidrato de hidroxilamina (124 g, 1,78 mol) y la mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante 3 horas. La mezcla resultante se enfrió hasta temperatura ambiente y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se trató con agua y DCM, y la fracción acuosa se extrajo con DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCls) 54,40 (2H, c), 2,09 (3H, s), 1,38 (3H, t).

Paso 2: 5-Bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Se agitaron conjuntamente 4-metil-5-oxo-4,5-dihidroisoxazol-3-carboxilato de etilo (42,5 g, 248 mmol) y oxibromuro de fósforo (199 g, 695 mmol) y se calentaron hasta 80 °C. Se añadió trietilamina (34,6 mL, 248 mmol) gota a gota en 15 min y la mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 3 horas. La mezcla resultante se enfrió hasta temperatura ambiente. Se añadió DCM (400 mL) y la mezcla se vertió sobre hielo (~400 mL) con agitación. Se añadió NaOH (ac.) 2 M (1250 mL) hasta obtener un pH de 7 y se separaron las fases resultantes. La fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 300 mL) y los extractos orgánicos resultantes se combinaron, se lavaron con agua (400 mL), una solución de tiosulfato de sodio (solución al 5% p/v, 400 mL), agua (400 mL) y salmuera (400 mL). Los extractos orgánicos se secaron con MgSO4 y carbón vegetal, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-30% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,02 minutos: MS m/z [M+H]+ 234,0: Método 2minpHbajo

1H RMN (400MHz, CDCls) 54,47 (2H, c), 2,21 (3H, s), 1,44 (3H, t).

Intermedio B:

5-((1 R,2S)-1,2-Dihidroxipropil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Paso 1: (E)-4-Metil-5-(prop-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxilato de etilo

Una suspensión de frans-1-propeniltrifluoroborato de potasio (9,86 g, 66,7 mmol), aducto de PdCl²(dppf).DCM (907 mg, 1,11 mmol), 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio A) (13 g) y trietilamina (7,7 mL) en EtOH (250 mL) se desgasificó al vacío y se volvió a rellenar con nitrógeno antes de calentarla a 90 °C durante 18 h. Después de enfriarla hasta temperatura ambiente, la reacción se repartió entre EtOAc y salmuera, se separó, se secó con MgSO⁴ y se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 5-10% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,30 minutos; MS m/z [M+H]+ 196,2; Método 2minpHbajov03

Paso 2: 5-((1R,2S)-1,2-Dihidroxipropil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Se añadió (E)-4-metil-5-(prop-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxilato de etilo (500 mg, 2,56 mmol) en ferf-BuOH-agua (1 mL) a una mezcla de AD-mix-beta (3,59 g, 7,63 mmol), metanosulfonamida (731 mg, 7,68 mmol), AD-mix-p modificada (DHQD)²PHAL (80 mg, 0,102 mmol) y tetraóxido de osmio (0,836 mL de una solución al 2,5% p en ferf-BuOH, 0.067 mmol) en ferf-BuOH-agua (1:1, 19 mL) y la mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. Se añadió sulfito de sodio (3,9 g) en una porción y la reacción se dejó agitar durante 30 min. Se separaron las fases y la fase de EtOAc se secó con Na2SO4 y se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 65-75% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título (ee = 96%);

LC-MS: tR = 0,78 minutos; MS m/z [M+H]+ 230,2; Método 2minpHbajov03

Intermedio C:

5-Formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Paso 1: 4-Metil-5-vinilisoxazol-3-carboxilato de etilo

Se agitaron 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo (Intermedio A) (15 g, 64,1 mmol) y tributil(vinil)estannano (22,48 mL, 77 mmol) en dioxano anhidro (250 mL) y se purgaron con nitrógeno durante 90 minutos a temperatura ambiente. Se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio (3,70 g, 3,20 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 100 °C durante toda la noche. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo (250 mL) y agua (250 mL) y se separó. Se añadió una solución de fluoruro de sodio (~1 M, 250 mL) a la fase orgánica y la suspensión resultante se filtró a través de Celite®. Se separaron las fases y los componentes orgánicos se lavaron con agua y salmuera, se secaron con MgSO4 y se filtraron. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-30% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título; LC-MS: tR = 1,20 minutos: MS m/z [M+H]+ 182,5: Método 2minpHbajov03

Paso 2: 5-Formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo

A 4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxilato de etilo (3 g, 16,56 mmol) en THF (40 mL) y agua (20 mL) a temperatura ambiente, se añadió peryodato de sodio (10,62 g, 49,7 mmol) y osmio ENc At 40 (828 mg, 0,248 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante el fin de semana. La mezcla resultante se filtró a través de Celite® (5 g) y se lavó con EtOAc. Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se suspendió en DCM, se sometió a sonicación y se hizo pasar a través de un cartucho separador de fases. Se recolectó el eluyente y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400MHz, CDCls) 5 10,12 (1H, s), 4,50 (2H, c), 2,56 (3H, s), 1,46 (3H, s).

Intermedio D:

4-Amino-2-ciclohexiM,5-dimetiMH-pirazol-3(2H)-ona

Paso 1: 2-Ciclohexil-5-metil-1 H-pirazol-3(2H)-ona

Se añadió clorhidrato de ciclohexilhidrazina (AK Scientific) (700 g, 4643 mmol) a una solución agitada de DCM (3000 mL) y una solución de hidróxido de sodio 2 M enfriada con hielo (1778 mL, 3556 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 10 minutos a temperatura ambiente. Se separaron las fases resultantes y la fase acuosa se extrajo con DCM (4 x 2000 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El sólido resultante se disolvió en agua (1300 mL) y a esto se le añadió ácido acético (1300 mL) y acetoacetato de etilo (Fluka) (450 mL, 3556 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 85 °C durante 1 hora. La mezcla resultante se concentró a sequedad a presión reducida y el residuo se disolvió en DCM (3000 mL) y agua (1000 mL). El pH se ajustó hasta un pH de 9 utilizando K²CO³ (ac.) 2 M, se separaron las fases y el extracto orgánico se lavó con salmuera (1 x 2 L). La primera fase acuosa se saturó con cloruro de sodio y las fases acuosas combinadas se extrajeron con DCM (4 x 2 L). Los extractos orgánicos combinados se secaron con sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar un sólido. El sólido crudo se pulverizó, se añadió TBME (2000 mL) y la mezcla se agitó a 50 °C durante 1 hora, seguida de 1 hora a temperatura ambiente. La suspensión resultante se filtró y se lavó el sólido con TBME (4 x 500 mL). El sólido aislado se secó al vacío a 45 °C durante 16 horas para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 510,62 (1H, s a), 5,06 (1H, s), 3,89 (1H, mult), 1,98 (3H, s), 1,81-1,55 (7H, mults), 1,36­ 1,22 (2H, mults), 1,18-1,05 (1H, mult).

Paso 2: 2-Ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona

Una suspensión de 2-ciclohexil-5-metil-1H-pirazol-3(2H)-ona (525 g, 2834 mmol) en W,W-dimetilformamida (2200 mL) se calentó hasta 40 °C y se añadió yoduro de metilo (532 mL, 8502 mmol). La mezcla de reacción se calentó hasta 70 °C durante 20 horas. Se añadió más yoduro de metilo (177 mL, 2834 mmol) y la mezcla se agitó a 75 °C durante 3,5 horas, a continuación a 80 °C durante 20 horas. La mezcla resultante se concentró a presión reducida y el residuo se lavó disgregándolo con TBME (2000 mL). El producto se recolectó mediante filtración y se lavó con TBME (5x 500 mL) para obtener un sólido. El sólido aislado se suspendió en DCM (2500 mL) y agua (500 mL) y el pH se ajustó hasta un pH de 9 utilizando una solución acuosa de K²CO³2 M (1700 mL). Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 500 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (1000 mL) y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se disolvió en acetato de etilo (2000 mL), se secó con sulfato de sodio anhidro y se filtró a través de 200 g de gel de sílice (40-63 ^m), eluyendo con MeOH al 10% en EtOAc (7 x 300 mL). El filtrado se concentró a presión reducida y se secó a 65 °C para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 55,02 (1H, s), 3,84 (1H, tt), 3,14 (3H, s), 2,06 (3H, s), 1,98-1,86 (2H, mults), 1,78-1,53 (5H, mults), 1,33-1,20 (2H, mults), 1,18-1,04 (1H, mult).

Paso 3: 2-Ciclohexil-1,5-dimetil-4-nitro-1 H-pirazol-3(2H)-ona

A ácido trifluoroacético (1940 mL) enfriado hasta -15 °C, se añadió 2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (535 g, 2231 mmol) y la mezcla de reacción se enfrió hasta 0°C. Se añadió ácido nítrico al 90% (211 mL, 4461 mmol) gota a gota en 90 minutos, manteniendo la temperatura por debajo de 15 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a 10 °C. La mezcla resultante se vertió lentamente sobre agua-hielo (8 L) y se agitó durante 30 minutos. El sólido se recolectó mediante filtración y se lavó con agua (2 x 2 L), una solución saturada de bicarbonato de sodio (1 x 2 L), agua (2 x 2 L), TBME (3 x 2 L) y heptano (2 x 2 L). El sólido aislado se secó en un horno de vacío para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 54,06 (1H, tt), 3,61 (3H, s), 2,57 (3H, t), 2,15-2,03 (2H, mults), 1,81-1,65 (4H, mults), 1,64-1,55 (1H, mult), 1,38-1,24 (2H, mults), 1,19-1,06 (1H, mult).

Paso 4: 4-Amino-2-ciclohexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona

A 2-ciclohexil-1,5-dimetil-4-nitro-1H-pirazol-3(2H)-ona (415 g, 1,73 mol) en MeOH (4500 mL) y THF (4500 mL), se añadió Pd/C al 10% (70 g) y la mezcla de reacción se hidrogenó a 0,1 bar y TA durante 57,5 h. La mezcla resultante se filtró a través de un filtro a presión y se lavó con metanol (1x1 L) y THF (2x1 L). El filtrado se concentró a presión reducida para obtener un aceite de color rojo oscuro. El aceite se disolvió inmediatamente en TBME (4 L), se concentró a presión reducida hasta aprox. 2 L y se le añadió un núcleo de cristalización (100 mg). La suspensión se agitó durante 2 h a TA y se enfrió en un baño de hielo durante 1 h. El sólido se recolectó mediante filtración y se lavó con TBME enfriado con hielo en porciones hasta que el filtrado se volvió incoloro y se secó al vacío para obtener el compuesto del título;

LC-MS: tR 0,55 minutos; MS m/z 210,1 [M+H]+; Método (SRPb)

1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 53,68 (1H, tt), 3,53 (2H, s a), 2,77 (3H, s), 1,96-1,83 (2H, mults), 1,92 (3H, s), 1,78-1,69 (2H, mults), 1,64-1,53 (3H, mults), 1,33-1,19 (2H, mults), 1,17-1,04 (1H, mult).

Intermedio E:

4-Amino-2-ciclobutil-1,5-dimetiM H-pirazol-3(2H)-ona

Paso 1: 2-Ciclobutilidenhidrazinocarboxilato de fe/f-butilo

Una mezcla de ciclobutanona (16,96 mL, 227 mmol) e hidrazinocarboxilato de fe/f-butilo (30 g, 227 mmol) en isohexano (378 mL) en atmósfera de nitrógeno se agitó a reflujo durante 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. La suspensión resultante se filtró y se lavó el sólido con isohexano (x2). El sólido se secó al vacío a 30 °C para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400MHz, CDCls) 57,16 (1H, s a), 3,02 (2H, mult), 2,81 (2H, mult), 2,10-2,00 (2H, mult), 1,53 (9H, s).

Paso 2: 2-Ciclobutilhidrazinocarboxilato de fe/f-butilo

Una solución de 2-ciclobutilidenhidrazinocarboxilato de fe/f-butilo (5,0 g, 27,1 mmol) en THF (50 mL) se añadió gota a gota en 1,5 horas a una solución de un complejo de borano-tetrahidrofurano (33,9 mL, 33,9 mmol) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 horas. Se añadió boranotetrahidrofurano (3 mL, 3 mmol) gota a gota y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se desactivó cuidadosamente mediante la adición de agua (50 mL) y la mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se diluyó con agua (30 mL) y se extrajo con EtOAc (2 x 200 mL), utilizando salmuera para facilitar la separación. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 0-10% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título.

Paso 3: 1 -Ciclobutil-2-metilhidrazina

Una solución de 2-ciclobutilhidrazinocarboxilato de fe/f-butilo (1,0 g, 5,37 mmol) en THF (26,8 mL) se añadió gota a gota a una solución de hidruro de aluminio y litio 2,4 M en THF (11,63 mL, 27,9 mmol) en atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la adición, la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 20 horas. La mezcla resultante se enfrió utilizando un baño de hielo y a esta se le añadió agua (1 mL), NaOH al 15% (1 mL) y agua (3 mL). La suspensión resultante se agitó durante 15 minutos y a continuación se filtró a través de Celite®. Se añadió HCl (4 M en dioxano, 1,4 mL, 5,6 mmol) al filtrado y se eliminó el disolvente a presión reducida, formando un azeótropo con EtOH (x2). La mezcla se lavó disgregándola con éter y el sólido resultante se filtró y se lavó con éter. El sólido se secó a presión reducida para proporcionar el compuesto del título.

Paso 4: (S)-2-((fe/f-Butoxicarbonil)amino)-3-oxobutanoato de metilo

Una solución de peryodinano de Dess-Martin (2,84 g, 6,69 mmol) en DCM (50 mL) se añadió a una solución del éster metílico de la Boc-L-treonina (1,3 g, 5,57 mmol) en DCM (20 mL) a temperatura ambiente y en atmósfera de nitrógeno. La suspensión blanca se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla resultante se diluyó con DCM (50 mL) y se desactivó mediante la adición de NaHCO3 (ac.) saturado (50 mL) que contenía sulfito de sodio 0,5 M (6,2 g). Se separaron las fases y la fase orgánica se lavó con NaHCO3 (ac.) saturado (50 mL) y agua, se secó con MgSO4, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 10-50% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400MHz, CDCb) 55,72 (1H, d a), 5,07 (1H, d), 3,84 (3H, s), 2,38 (3H, s), 1,46 (9H, s).

Paso 5: (2-Ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)carbamato de ferf-butilo

Una solución de (S)-2-((ferf-butoxicarbonil)amino)-3-oxobutanoato de metilo (400 mg, 1,730 mmol) en EtOAc (6,407 mL) se trató con 1 -ciclobutil-2-metilhidrazina (284 mg, 2,076 mmol) y a continuación con acetato de sodio (213 mg, 2,59 mmol). La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y a 80 °C durante 4 horas. La mezcla resultante se diluyó con agua (10 mL) y se añadió EtOAc. Se separaron las fases y la acuosa se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en EtOAc y se añadió isohexano. La suspensión resultante se filtró y se lavó el sólido con isohexano. El filtrado se concentró a presión reducida. A continuación, el material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía eluyendo con 50-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

1H RMN (400MHz, CDCla) 56,19 (1H, s a), 4,61 (1H, mult), 3,23 (3H, s), 2,85-2,72 (2H, mults), 2,39-2,30 (2H, mults), 2,17 (3H, s), 1,93-1,83 (1H, mult), 1,81-1,71 (1H, mult), 1,48 (9H, s).

Paso 6: 4-Amino-2-ciclobutil-1,5-dimetil-1 H-pirazol-3(2H)-ona

A una solución de (2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)carbamato de ferf-butilo en DCM (5 mL), se añadió ácido sulfúrico (0,034 mL, 0,634 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió más ácido sulfúrico (0,068 mL, 1,268 mmol) a la mezcla de reacción y se agitó durante 2 horas. La mezcla resultante se diluyó con DCM y agua, y se separaron las fases. La fase acuosa se volvió básica mediante la adición gota a gota de NaOH (ac.) 2 M. La fase acuosa se extrajo con DCM (x3) y los extractos orgánicos combinados se hicieron pasar a través de un cartucho separador de fases. El eluyente se concentró a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400 MHz, CDCb) 54,54 (1H, mult), 2,94 (3H, s), 2,72 (2H, mults), 2,43 (2H, s a), 2,36-2,26 (2H, mults), 2,04 (3H, s), 1,90-1,78 (1H, mult), 1,78-1,67 (1H, mult).

Intermedio F:

2,2-Dimetilhex-5-en-3-ol

A una solución de trimetilacetaldehído (10,2 mL, 90,9 mmol) en éter dietílico (200 mL) a 0 °C se añadió bromuro de alilmagnesio (100 mL, 1 M en éter). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 hora. La mezcla resultante se desactivó con cloruro de amonio saturado y se extrajo con éter dietílico. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 y se filtraron. Se eliminó cuidadosamente el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

1H RMN (400MHz, CDCb) 55,95-5,83 (1H, mult), 5,18 (1H, mult), 5,15 (1H, mult), 3,28 (1H, mult), 2,45-2,35 (1H, mult), 2,06-1,95 (1H, mult), 1,62 (1H, s), 0,95 (9H, s).

Intermedio G:

4-Amino-2-isopropiM,5-dimetiMH-pirazol-3(2H)-ona

Paso 1: 2-((((9H-Fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-3-hidroxibutanoato de metilo

A una solución de ácido 2-((((9H-fluoren-9-il)metox¡)carbon¡l)ammo)-3-h¡drox¡butanoico (5 g, 14,65 mmol) en MeOH (50 mL), se añadió H²SO⁴ (0,781 mL, 14,65 mmol). La mezcla de reacción se agitó a reflujo durante toda la noche. La mezcla resultante se enfrió hasta temperatura ambiente y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía utilizando un gradiente de 0-100% de EtOAc en isohexano proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,27minutos; MS m/z [M+H]+ 356,3: Método 2minpHbajov03

Paso 2: 2-((((9H-Fluoren-9-¡l)metox¡)carbon¡l)am¡no)-3-oxobutanoato de metilo

A una solución de 2-((((9H-fluoren-9-¡l)metox¡)carbon¡l)am¡no)-3-h¡drox¡butanoato de metilo (1,5 g, 4,22 mmol) en DCM (25 mL), se añadió peryodinano de Dess-Martin (1,790 g, 4,22 mmol) en porciones. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se diluyó con DCM y una solución 1:1 de carbonato de sodio (ac.) 2 M y sulfito de sodio (ac.) saturado y se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se separaron las fases y la fase orgánica se secó con MgSO4 y se filtró. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,36 minutos; MS m/z [M+H]+ 354,3: Método 2minpHbajov03

Paso 3: (2-Isoprop¡l-5-met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)carbamato de (9H-fluoren-9-il)metilo

A una solución de 2-((((9H-fluoren-9-¡l)metox¡)carbon¡l)am¡no)-3-oxobutanoato de metilo (2,766 g, 7,83 mmol) en HCl 1,25 M en etanol (25 mL), se añadió clorhidrato de isopropilhidrazina (1,298 g, 11,74 mmol). La mezcla de reacción se agitó a reflujo. T ras completarse, la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía utilizando un gradiente de 0-100% de EtOAc en isohexano y 10% de MeOH en EtOAc proporcionó un material crudo. El material crudo se disolvió en IPA, al cual se le añadió agua para obtener una mezcla turbia que se sometió a sonicación y se dejó reposar a temperatura ambiente. La suspensión resultante se filtró y el sólido se secó a presión reducida para proporcionar el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,14 minutos; MS m/z [M+H]+ 378,3/379,3: Método 2minpHbajov03

Paso 4: (2-Isoprop¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)carbamato de (9H-fluoren-9-il)metilo

A una solución de (2-¡soprop¡l-5-met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)carbamato de (9H-fluoren-9-il)metilo (2,109 g, 5,59 mmol) en DMF (30 mL), se añadió yoduro de metilo (2,80 mL, 44,7 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 90 °C durante toda la noche. La mezcla resultante se desactivó con IPA y agua, y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con MgSO4, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía utilizando un gradiente de 0-10% de MeOH en EtOAc proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,20 minutos; MS m/z [M+H]+ 392,4: Método 2minpHbajov03

Paso 5: 4-Am¡no-2-¡soprop¡l-1,5-d¡met¡l-1H-p¡razol-3(2H)-ona

A una solución de (2-¡soprop¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)carbamato de (9H-fluoren-9-il)metilo (2,047 g, 5,23 mmol) en DMF (30 mL), se añadió piperidina (2,59 mL, 26,1 mmol) a temperatura ambiente. Tras completar la adición, la mezcla de reacción se añadió a agua (30 mL). La suspensión resultante se diluyó con agua (100 mL) y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se extrajeron con HCl (ac.) 2 M y los extractos acuosos ácidos se neutralizaron con una solución saturada de bicarbonato de sodio y se introdujeron en un cartucho C18. La columna se eluyó con agua y la fracción acuosa recolectada se suspendió con SCX-2 y se filtró. La resina se lavó con MeOH y amoniaco 7 M en MeOH. El MeOH y el disolvente del filtrado acuoso se eliminaron a presión reducida. Se añadió MeOH (150 mL) a la mezcla resultante, se sometió a sonicación, se filtró y se concentró el filtrado a presión reducida. Se añadió EtOH a la mezcla resultante y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida. El material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía utilizando un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM proporcionó un material crudo. El material crudo en MeOH se suspendió con SCX-2 (30 g). La suspensión se filtró y se lavó con MeOH. A continuación, la resina se eluyó con NH³7 M en MeOH. El amoniaco en metanol se concentró a presión reducida para proporcionar un material crudo. A continuación, el material crudo se adsorbió sobre sílice y la purificación mediante cromatografía utilizando un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM proporcionó el compuesto del título;

LC-MS: tR = 1,48 minutos; MS m/z [M+H]+ 170,2: 8minpHelevadov01

1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 59,72 (2H, s a), 4,42 (1H, mult), 3,28 (3H, s), 2,25 (3H, s), 1,36 (6H, d).

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de fórmula (I):

   

   o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde

   R1 es alquilo (C³-C⁶) o cicloalquilo (C³-C⁶);

   R2 es metilo;

   R3 se selecciona entre alquilo ramificado (C⁶-C¹⁰), alquenilo ramificado (C⁶-C¹⁰), cicloalquenilo (C5-Cs), cicloalquilo (C⁵-Cs) o Het; donde el cicloalquenilo (C5-Cs) o cicloalquilo (C5-Cs) no está sustituido o está sustituido con uno, dos, tres o cuatro sustituyentes R4; y donde Het está sustituido con uno, dos, tres o cuatro sustituyentes R4;

   cada R4 se selecciona independientemente entre halo, alquilo (C¹-C⁴), haloalquilo (C¹-C⁴), alcoxi (C¹-C⁴) o haloalcoxi (C¹-C⁴); o

   dos grupos R4, cuando están unidos al mismo átomo de carbono, se pueden considerar conjuntamente con el átomo de carbono al cual están unidos para formar un anillo de ciclopentilo, tetrahidrofurano o dioxolano;

   donde Het es un anillo heterocíclico totalmente saturado o parcialmente saturado de 5 o 6 miembros que comprende a) 1 átomo de oxígeno en la posición 2 o 3, o b) 2 átomos de oxígeno en las posiciones 2 y 5, o 2 y 6, donde la numeración se proporciona respecto al punto de unión; y

   el cicloalquilo (C5-Cs) puede ser un anillo monocíclico o un sistema anular con puente que contiene 5, 6, 7 u S átomos de carbono.

   2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde R1 es isopropilo, ciclobutilo o ciclohexilo.

   3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde R3 se selecciona entre 2,2-dimetilpentilo, 2,2-dimetilpent-2-enilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, tetrahidropiranilo, dihidropiranilo, dioxanilo, tetrahidrofuranilo, dioxolanilo y biciclo[2.2.2]octanilo; donde el anillo de ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexenilo o biciclo[2.2.2]octanilo no está sustituido o está sustituido con uno, dos, tres o cuatro sustituyentes R4; y donde el anillo de tetrahidropiranilo, dihidropiranilo, dioxanilo, tetrahidrofuranilo o dioxolanilo está sustituido con uno, dos, tres o cuatro sustituyentes R4; y

   cada R4 se selecciona independientemente entre halo, alquilo (C¹-C⁴), haloalquilo (C¹-C⁴), alcoxi (C¹-C⁴) o haloalcoxi (C¹-C⁴); o

   dos grupos R4, cuando están unidos al mismo átomo de carbono, se pueden considerar conjuntamente con el átomo de carbono al cual están unidos para formar un anillo de tetrahidrofurano o dioxolano.

   4. El compuesto de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde R3 es

   

   o

   y m es 1,2, 3 o 4.

   5. El compuesto de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde cada R4 se selecciona independientemente entre metilo, isopropilo, fe/f-butilo y metoxi.

   6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que se selecciona del grupo constituido por:

   [N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4-isopropilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida];

   N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(6-etil-4-metilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida;

   N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(6,6-dimetilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida;

   [N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4-etilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida];

   [5-(4-(ferf-Butil)ciclohex-1-en-1-il)-N-(2-ciclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida];

   [N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(4-metilciclohex-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxamida];

   5-(Ciclohept-1-en-1-il)-N-(2-ciclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; [N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(4-(trifluorometil)ciclohex-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxamida];

   N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(espiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida;

   [N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1-oxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida];

   N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida;

   N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida;

   [N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(2-oxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida];

   [N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4-isopropoxiciclohex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida];

   N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclohexil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida;

   [W-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(3,3-dimetilciclopentil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(3,3-dimetilbutil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; (Z)-N-(2-CiclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-5-(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida;

   (£)-N-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pi razol-4-il)-5-(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida;

   5-Ciclohexil-W-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pi razol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida;

   W-(2-Ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida;

   5-(6-(ferf-butil)-4-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclohexiM,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida;

   5-(6-(te/f-but¡l)-4-metox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-ddobut¡M ,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-metilisoxazol-3-carboxamida;

   5-(6-(te/f-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-ddobut¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

   5-(6-(te/f-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-ddohex¡M ,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

   5-(6-(te/f-but¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-¡soprop¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

   N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(6-¡soprop¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

   N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(6-met¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da;

   N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-((2R,3S)-3,5,5-trimet¡M,4-d¡oxan-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da;

   [5-(4-Bromo-5-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)-N-(2-ddohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da];

   N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(5-met¡l-3,6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da;

   N-(2-c¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-(5-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da;

   5-(4-(2-bromopropan-2-¡l)tetrah¡drofuran-2-¡l)-N-(2-c¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

   N-(2-c¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(4-¡soprop¡ltetrah¡drofuran-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

   5-(4-(te/t-but¡l)-1,3-d¡oxolan-2-¡l)-N-(2-c¡dohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

   N-(2-C¡clohex¡l-1,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(5,5-d¡met¡l-1,3-d¡oxan-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da;

   o una sal farmacéut¡camente aceptable de este.

   7. Un compuesto de acuerdo con la re¡v¡nd¡cac¡ón 1, que es N-(2-ddohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-4-met¡l-5-((2R,3S)-3,5,5-trimet¡M,4-d¡oxan-2-¡l)¡soxazol-3-carboxam¡da que t¡ene la s¡gu¡ente fórmula:

   

   una sal farmacéut¡camente aceptable de este.

   8. Un compuesto de acuerdo con la re¡v¡nd¡cac¡ón 1, que es N-(2-ddohex¡M,5-d¡met¡l-3-oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-p¡razol-4-¡l)-5-(5,5-d¡met¡l-1,3-d¡oxan-2-¡l)-4-met¡l¡soxazol-3-carboxam¡da que t¡ene la s¡gu¡ente fórmula:

   

   una sal farmacéuticamente aceptable de este.

   9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es N-(2-ciclohexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida que tiene la siguiente fórmula:

   

   con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 9 o una sal farmacéuticamente aceptable de este y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.

   11. Una combinación que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 9 o una sal farmacéuticamente aceptable de este y uno o más agentes terapéuticamente activos.

   12. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso como medicamento.

   13. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 9 o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento de un trastorno o enfermedad que se selecciona entre hipertensión pulmonar, incluida la hipertensión arterial pulmonar (HAP), fibrosis, artritis reumatoide y curación de fracturas.

   14. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 9 o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento de un trastorno o enfermedad que se selecciona entre glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditaria (THH), proteinuria, curación de heridas, EPOC y asma.

   15. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o 7 a 9, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, para su uso de acuerdo con la reivindicación 13, donde la fibrosis es fibrosis pulmonar idiopática.