ES2917979T3 - Derivados de Piridazina 1,4-disustituidos y su uso para tratar afecciones relacionadas con la deficiencia de SMN - Google Patents

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Abstract

La presente invención proporciona un compuesto de fórmula IA o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma; 5 (IA) Un método para fabricar los compuestos de la invención y sus usos terapéuticos. La presente invención proporciona una combinación de agentes farmacológicamente activos y una composición farmacéutica. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Derivados de Piridazina 1,4-disustituidos y su uso para tratar afecciones relacionadas con la deficiencia de SMN
Campo de la invención
LISTA DE SECUENCIAS
La presente solicitud contiene un Listado de secuencias que ha sido presentado electrónicamente en formato ASCII y que se incorpora a la presente por referencia en su totalidad. Dicha copia ASCII, creada el 24 de septiembre de 2014, se denomina PAT055815-WO-PCT_SL.txt y tiene un tamaño de 1835 bytes.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
La atrofia muscular espinal proximal (AME) es un grupo heredado, clínicamente heterogéneo de trastornos neuromusculares que se caracteriza por la degeneración de las células del asta anterior de la médula espinal. Los pacientes padecen debilidad simétrica de los músculos del tronco y las extremidades, viéndose las piernas más afectadas que los brazos y quedando los músculos proximales más débiles que los distales; el diafragma, los músculos faciales y oculares quedan exentos. Existen tres formas de AME de inicio en la infancia (tipos I, II y III) y una forma IV de inicio en la edad adulta clasificada de forma relativamente reciente, todas las cuales se pueden distinguir en función de la edad de inicio y la gravedad del curso clínico que se evalúa mediante un examen clínico, biopsia muscular y electromiografía (EMG) (Munsat TL, Davies KE (1992)).
El tipo I (enfermedad de Werdnig-Hoffmann) es la forma más aguda y grave, con inicio antes de los seis meses y fallecimiento por lo general antes de los dos años; los niños nunca pueden sentarse sin ayuda. Los síntomas de la enfermedad pueden estar presentes en el útero, como una reducción de los movimientos fetales; al nacer; o más a menudo, dentro de los primeros cuatro meses de vida. Los niños afectados son particularmente flácidos, experimentan dificultades de alimentación y respiración diafragmática, y se caracterizan por una debilidad general en los músculos respiratorios intercostales y accesorios. Los niños afectados nunca se sientan ni se aguantan de pie y por lo general fallecen antes de los 2 años de edad; el fallecimiento se debe generalmente a una insuficiencia respiratoria.
El tipo II (forma intermedia, crónica) tiene un inicio entre los seis y dieciocho meses de edad; las fasciculaciones musculares son comunes y los reflejos tendinosos se reducen progresivamente. Los niños no pueden aguantarse de pie ni caminar sin ayuda. Por lo general no se manifiestan problemas de alimentación ni deglución en la AME de tipo II, aunque en algunos pacientes puede ser necesaria una sonda de alimentación. La mayoría de los pacientes desarrollan por lo general una escoliosis muscular progresiva que puede requerir corrección quirúrgica. Al igual que en los pacientes con la enfermedad de tipo I, la eliminación de las secreciones traqueales y la tos pueden suponer dificultades debido a una función bulbar deficiente y al hecho de que los músculos intercostales están debilitados. Estos pacientes presentan hipotonía profunda, parálisis flácida simétrica y no controlan el movimiento de la cabeza.
El tipo III (enfermedad de Kugelberg-Welander o atrofia muscular espinal juvenil) es una forma leve crónica, que comienza después de los 18 meses de edad; se consigue un desarrollo motriz normal y se puede evitar la deambulación hasta edades variables. Estos pacientes desarrollan a menudo escoliosis y se observan con frecuencia síntomas de sobreuso articular, provocados en general por la debilidad. La esperanza de vida es casi normal, pero la calidad de vida se ve afectada en gran medida.
Los tipos I, II y III evolucionan con el tiempo, acompañados de un deterioro de la afección del paciente.
El tipo IV de inicio en la edad adulta se caracteriza por debilidad en la segunda o tercera década de la vida, con un deterioro motriz leve que no va acompañado de problemas respiratorios ni nutricionales. La AME del adulto se caracteriza por un inicio insidioso y una evolución muy lenta. Los músculos bulbares rara vez se ven afectados en el tipo IV. No está claro que la AME de tipo IV esté etiológicamente relacionada con las formas de tipo I-III.
Otras formas de atrofia muscular espinal incluyen la enfermedad relacionada con el cromosoma X, atrofia muscular espinal con dificultad respiratoria (AMEDR), atrofia muscular espinal y bulbar (enfermedad de Kennedy o atrofia muscular bulboespinal) y atrofia muscular espinal distal.
La AME se debe a mutaciones en el gen de Supervivencia de MotoNeuronas (SMN), que existe en dos formas en los seres humanos (SMN1 y SMN2). La pérdida de SMN es perjudicial para las neuronas motoras y produce insuficiencia neuromuscular, una característica distintiva de la enfermedad. Desde un punto de vista genético, la AME es una afección autosómica recesiva, provocada por la alteración del gen SMN1, que se encuentra localizado en 5q13 (Lefebvre S. et al. (1995) Cell 80: 155-165). Más de un 98 % de los pacientes con atrofia muscular espinal tienen una alteración homocigótica de SMN1 por deleción, reordenamiento o mutación. Todos estos pacientes, sin embargo, conservan al menos una copia de SMN2.
A nivel genómico, solo se han encontrado cinco nucleótidos que diferencian el gen SMN1 del gen SMN2. Además, los dos genes producen ARNm idénticos, excepto por un cambio silencioso de nucleótidos en el exón 7, es decir, un cambio C ^ T seis pares de bases dentro del exón 7 en SMN2. Esta mutación modula la actividad de un potenciador del corte y empalme del exón (Lorson y Androphy (2000) Hum. Mol. Genet. 9:259-265). El resultado de este y de los otros cambios de nucleótidos en las regiones intrónicas y promotoras es que la mayoría de SMN2 se cortan y empalman de forma alternativa y sus transcritos carecen de los exones 3, 5 o 7. Por el contrario, el ARNm transcrito a partir del gen SMN1 es por lo general un ARNm de longitud completa con solo una pequeña fracción de sus transcritos cortada y empalmada para eliminar el exón 3, 5 o 7 (Gennarelli et al. (1995) Biochem. Biophys. Res. Commun. 213:342-348; Jong et al. (2000) J. Neurol. Sci. 173:147-153). Todos los sujetos con AME tienen al menos una, y por lo general de dos a cuatro copias del gen SMN2, que codifica la misma proteína que SMN1; sin embargo, el gen SMN2 produce solo niveles bajos de proteína SMN de longitud completa.
La proteína SMNA7 no es funcional y se cree que se degrada rápidamente. Alrededor de un 10 % del pre-ARNm de SMN2 se corta y empalma de forma adecuada y posteriormente se traduce en proteína SMN de longitud completa (FL-SMN), siendo el resto la copia de SMNA7. La eficacia del corte y empalme de SMN2 podría depender de la gravedad de la enfermedad, y la producción de un transcrito de longitud completa de SMN2 podría variar de un 10 % a un 50 %. Además, la presencia o ausencia del gen SMN1, aproximadamente un 90 % del cual se convierte en la proteína y el producto del gen FL-SMN, influye en la gravedad de la AME en el hecho de si puede compensar o no las copias truncadas de SMNA7. Un nivel bajo de proteína SMN permite el desarrollo embrionario, pero no es suficiente para mantener la supervivencia de las neuronas motoras de la médula espinal.
La gravedad clínica de los pacientes con AME se correlaciona inversamente con el número de genes SMN2 y con el nivel de proteína SMN funcional producida (Lorson C L et al. (1999) PNAS; 96:6307-6311) (Vitali T. et al. (1999) Hum Mol Genet; 8:2525-2532) (Brahe C. (2000) Neuromusc. Disord.; 10:274-275) (Feldkotter M, et al. (2002) Am J Hum Genet; 70:358-368)(Lefebvre S, et al. (1997) Nature Genet; 16:265-269) (Coovert D D, et al. (1997) Hum Mol Genet; 6:1205-1214) (Patrizi A L, et al. (1999) Eur J Hum Genet; 7:301-309).
Las estrategias terapéuticas actuales para la AME se centran principalmente en elevar los niveles de proteína SMN de longitud completa (de origen natural), modular el corte y empalme hacia la inclusión del exón 7, estabilizar la proteína de origen natural y, en menor medida, en restaurar la función muscular en la AME proporcionando apoyo trófico o inhibiendo la atrofia del músculo esquelético.
El mecanismo que conduce a la pérdida de motoneuronas y a la atrofia muscular sigue siendo desconocido, aunque la disponibilidad de modelos animales de la enfermedad está aumentando rápidamente los conocimientos en este campo (Frugier T et al. (2000) Hum Mol. Genet. 9:849-58; Monani U R et al. (2000) Hum Mol Genet 9:333-9; Hsieh-Li H M et al. (2000) Nat Genet 24:66-70; Jablonka S et al. (2000) Hum Mol. Genet. 9:341-6). Además, la función de la proteína SMN sigue siendo parcialmente desconocida y los estudios indican que puede estar involucrada en el metabolismo del ARNm (Meister G et al. (2002). Trends Cell Biol. 12:472-8; Pellizzoni L, et al. (2002). Science. 298: 1775-9) y probablemente en el transporte de proteínas/ARNm hacia las uniones neuromusculares (Ci-fuentes-Diaz C et al. (2002) Hum Mol. Genet.
11: 1439-47; Chan Y B et al. (2003) Hum Mol. Genet. 12:1367-76; McWhorter M L et al. (2003) J. Cell Biol. 162:919-31; Rossoll W et al. (2003) J. Cell Biol. 163:801-812).
Además de las AME, se ha descrito por otra parte que una subclase de artrogriposis múltiple congénita de tipo neurogénico (AMC congénita) involucra la eliminación del gen SMN1, lo que sugiere que cierto grado de patología en los afectados probablemente se deba a unos niveles bajos de neurona motora SMN (L. Burgien et al., (1996) J. Clin. Invest. 98(5):1130-32). La AMC congénita afecta a seres humanos y animales, por ejemplo, caballos, ganado, ovejas, cabras, cerdos, perros y gatos. (M. Longeri et al., (2003) Genet. Sel. Evol. 35:S167-S175). Además, se ha demostrado que el riesgo de desarrollar esclerosis lateral amiotrófica (ELA) o la gravedad de esta se correlacionan con unos niveles bajos de neurona motora SMN.
No existe ninguna cura para la AME disponible hasta la fecha y, por lo tanto, sería favorable proporcionar métodos novedosos para modular SMN con el fin de tratar a los afectados de AME, de AMC congénita neurogénica, ELA u otras afecciones relacionadas con la deficiencia de SMN. Sería además favorable proporcionar dianas farmacológicas novedosas que se pudieran utilizar como base para desarrollar terapias o diagnósticos efectivos para tales afecciones neuronales.
COMPENDIO DE LA INVENCIÓN
Se siguen necesitando nuevos tratamientos y terapias para la atrofia muscular espinal. La invención proporciona compuestos, sales de estos, formulaciones farmacéuticas de estos y combinaciones de estos donde los compuestos son moduladores de la atrofia muscular espinal. La invención proporciona además un modulador de SMN (por ejemplo, un compuesto de la invención) para su uso en el tratamiento, la prevención o la mejora de la atrofia muscular espinal.
En la presente se describen diversas realizaciones de la invención. Se reconocerá que las características especificadas en cada realización se pueden combinar con otras características especificadas para proporcionar realizaciones adicionales.
En ciertos aspectos, los moduladores de SMN proporcionados en la presente son compuestos de Fórmula I y sales de estos:
Figure imgf000004_0001
En otra realización, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con la definición de la fórmula (I), o subfórmulas de esta, y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.
En otra realización, la invención proporciona una combinación, en particular una combinación farmacéutica, que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de acuerdo con la definición de la fórmula (I), o subfórmulas de esta, y uno o más agentes terapéuticamente activos.
Una realización de la invención consiste en proporcionar un modulador de SMN, o una composición farmacéutica que lo comprende, para su uso en el tratamiento, la prevención o la mejora de una afección relacionada con la deficiencia de SMN.
Otra realización de la invención consiste en un modulador de SMN para su uso en la modulación de la proteína SMN. En otra realización, dicho modulador de SMN es capaz de incrementar uno o más de entre los niveles de FL-SMN o SMNA7. En otra realización más, dicho modulador de SMN es capaz de evitar que el exón 7 se corte y empalme a partir del transcrito de SMN.
La presente invención se basa en el descubrimiento de que los moduladores de SMN de la invención (por ejemplo, compuestos de fórmula (I)) son capaces de modular las proteínas SMN, por ejemplo, mediante la activación de promotores de SMN, la modulación del corte y empalme (por ejemplo, evitar que el exón 7 se separe del gen SMN) y/o la modulación de la estabilidad de la proteína SMN.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
Como se ha mencionado anteriormente, la presente invención proporciona compuestos que modulan la actividad de SMN. Tales compuestos se pueden utilizar in vivo o in vitro para modular (preferentemente incrementar) la producción y la actividad de SMN en varios contextos.
En una primera realización, se proporcionan compuestos de Fórmula (IA) y sales farmacéuticamente aceptables de estos, que modulan la actividad de s Mn . Los compuestos de Fórmula I se representan mediante la estructura (IA):
Figure imgf000004_0002
donde A es un heterociclo o heteroarilo bicíclico que tiene 9 o 10 átomos anulares y 1 o 2 átomos de N anulares y 0 o 1 átomos de O, donde dicho heterociclo o heteroarilo bicíclico está sustituido con 0, 1,2, 3, 4 o 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre -C(O)NH2, -C(O)O-(alquilo C1-C4), arilo, oxo, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino; y B es un grupo de fórmula:
Figure imgf000005_0001
donde m, n y p se seleccionan independientemente entre 0 o 1; R, Ri , R2, R3 y R4 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C1-C4, donde dicho alquilo está opcionalmente sustituido con hidroxi, amino o mono- y di(alquil C1-C4)amino; R5 y R6 se seleccionan independientemente entre hidrógeno y flúor; o R y R3, considerados de manera combinada, forman un anillo heterocíclico condensado de 5 o 6 miembros que tiene 0 o 1 heteroátomos anulares adicionales seleccionados entre N, O o S; R1 y R3, considerados de manera combinada, forman un grupo alquileno C1-C3; R1 y R5, considerados de manera combinada, forman un grupo alquileno C1-C3; R3 y R4, considerados de manera combinada con el átomo de carbono al cual están unidos, forman un cicloalquilo C3-C6 espirocíclico; X es CRaRb, O, NR7 o un enlace; R7 es hidrógeno o alquilo C1-C4; Ra y Rb se seleccionan independientemente entre hidrógeno y alquilo C1-C4, o Ra y Rb, considerados de manera combinada, forman un grupo alquileno C2-C5 divalente; Z es CR8 o N; cuando Z es N, X es un enlace; R8 es hidrógeno o, considerado de manera combinada con R6, forma un doble enlace; o B es un grupo de fórmula:
Figure imgf000005_0002
donde p y q se seleccionan independientemente del grupo que consiste en 0, 1 y 2; R9 y R13 se seleccionan independientemente entre hidrógeno y alquilo C1-C4; R10 y R14 se seleccionan independientemente entre hidrógeno, amino, mono- y di(alquil C1-C4)amino y alquilo C1-C4, donde dicho alquilo está opcionalmente sustituido con hidroxi, amino o mono- y di(alquil C1-C4)amino; R11 es hidrógeno, alquilo C1-C4, amino o mono- y di(alquil C1-C4)amino; R12 es hidrógeno o alquilo C1-C4; o R9 y R11, considerados de manera combinada, forman un azaciclo saturado que tiene de 4 a 7 átomos anulares que está opcionalmente sustituido con 1-3 grupos alquilo C1-C4; o R11 y R12, considerados de manera combinada, forman un azaciclo saturado que tiene de 4 a 7 átomos anulares que está opcionalmente sustituido con 1-3 grupos alquilo C1-C4.
En una segunda realización, se proporciona un compuesto, o una sal de este, de acuerdo con la primera realización donde el compuesto es de Fórmula (I):
Figure imgf000005_0003
donde A es un heteroarilo bicíclico que tiene 10 átomos anulares y 1 o 2 átomos de N anulares, donde dicho heteroarilo bicíclico está sustituido con 0, 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente entre oxo, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino; y B es un grupo de fórmula:
Figure imgf000006_0001
donde m, n y p se seleccionan independientemente entre 0 o 1; R, Ri , R2, R3 y R4 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C1-C4, donde dicho alquilo está opcionalmente sustituido con hidroxi, amino o mono- y di(alquil C1-C4)amino; R5 y R6 se seleccionan independientemente entre hidrógeno y flúor; o R y R3, considerados de manera combinada, forman un anillo heterocíclico condensado de 5 o 6 miembros que tiene 0 o 1 heteroátomos anulares adicionales seleccionados entre N, O o S; R1 y R3, considerados de manera combinada, forman un grupo alquileno C1-C3; R1 y R5, considerados de manera combinada, forman un grupo alquileno C1-C3; R3 y R4, considerados de manera combinada con el átomo de carbono al cual están unidos, forman un cicloalquilo C3-C6 espirocíclico; X es CRaRb, O, NR7 o un enlace; R7 es hidrógeno o alquilo C1-C4; Ra y Rb se seleccionan independientemente entre hidrógeno y alquilo C1-C4, o Ra y Rb, considerados de manera combinada, forman un grupo alquileno C2-C5 divalente; Z es CR8 o N; cuando Z es N, X es un enlace; R8 es hidrógeno o, considerado de manera combinada con R6, forma un doble enlace; o B es un grupo de fórmula:
Figure imgf000006_0002
donde p y q se seleccionan independientemente del grupo que consiste en 0, 1 y 2; R9 y R13 se seleccionan independientemente entre hidrógeno y alquilo C1-C4; R10 y R14 se seleccionan independientemente entre hidrógeno, amino, mono- y di(alquil C1-C4)amino y alquilo C1-C4, donde dicho alquilo está opcionalmente sustituido con hidroxi, amino o mono- y di(alquil C1-C4)amino; R11 es hidrógeno, alquilo C1-C4, amino o mono- y di(alquil C1-C4)amino; R12 es hidrógeno o alquilo C1-C4; o R9 y R11, considerados de manera combinada, forman un azaciclo saturado que tiene de 4 a 7 átomos anulares que está opcionalmente sustituido con 1-3 grupos alquilo C1-C4; o R11 y R12, considerados de manera combinada, forman un azaciclo saturado que tiene de 4 a 7 átomos anulares que está opcionalmente sustituido con 1-3 grupos alquilo C1-C4.
En una tercera realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera o segunda, o una sal de este, donde A se selecciona entre:
Figure imgf000006_0003
Figure imgf000007_0001
y 5
donde u y v son cada uno, independientemente, 0, 1, 2 o 3; y cada Ra y Rb se seleccionan, independientemente, entre ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo y alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
En una cuarta realización, se proporciona el compuesto de una cualquiera de las realizaciones primera a tercera, o una sal de este, donde A se selecciona entre:
Figure imgf000007_0002
Figure imgf000008_0001
ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo y alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
En otra realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a cuarta, donde A está sustituido en la posición orto con un grupo hidroxilo.
En una quinta realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a cuarta, o una sal de este, donde A se selecciona entre:
Figure imgf000008_0002
En una sexta realización, se proporciona el compuesto de una cualquiera de las realizaciones primera a quinta, o una sal de este, donde A tiene un único átomo de N.
En una séptima realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a sexta, o una sal de este, donde el compuesto es de fórmula II:
Figure imgf000009_0001
donde Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
En una octava realización, se proporciona el compuesto, o una sal de este, de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a sexta, donde el compuesto es de fórmula III:
Figure imgf000009_0002
donde Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
En una novena realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a sexta, o una sal de este, donde el compuesto es de fórmula IV:
Figure imgf000009_0003
donde Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
En una décima realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a sexta, o una sal de este, donde el compuesto es de fórmula V:
Figure imgf000010_0001
donde Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
En una undécima realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a sexta, o una sal de este, donde el compuesto es de fórmula VI:
Figure imgf000010_0002
donde Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
En una duodécima realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a sexta, o una sal de este, donde el compuesto es de fórmula VII:
Figure imgf000010_0003
donde Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
En una decimotercera realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a sexta, o una sal de este, donde el compuesto es de fórmula VIII:
Figure imgf000010_0004
donde Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
En una decimocuarta realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a decimotercera, o una sal de este, donde B es un grupo de fórmula:
Figure imgf000011_0001
donde m, n y p se seleccionan independientemente entre 0 o 1; R, R1, R2, R3 y R4 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C1-C4, donde dicho alquilo está opcionalmente sustituido con hidroxi, amino o mono- y di(alquil C1-C4)amino; R5 y R6 son hidrógeno; o R y R3, considerados de manera combinada, forman un anillo heterocíclico condensado de 5 o 6 miembros que tiene 0 o 1 heteroátomos anulares adicionales seleccionados entre N, O o S; R1 y R3, considerados de manera combinada, forman un grupo alquileno C1-C3; R1 y R5, considerados de manera combinada, forman un grupo alquileno C1-C3; R3 y R4, considerados de manera combinada con el átomo de carbono al cual están unidos, forman un cicloalquilo C3-C6 espirocíclico; X es CRaRb, O, NR7 o un enlace; Ra y Rb se seleccionan independientemente entre hidrógeno y alquilo C1-C4, o Ra y Rb, considerados de manera combinada, forman un grupo alquileno C2-C5 divalente; Z es CR8 o N; cuando Z es N, X es un enlace; R8 es hidrógeno o, considerado de manera combinada con R6, forma un doble enlace.
En una decimoquinta realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a decimotercera, o una sal de este, donde B es un grupo de fórmula:
Figure imgf000011_0002
donde p y q se seleccionan independientemente del grupo que consiste en 0, 1 y 2; R9 y R13 se seleccionan independientemente entre hidrógeno y alquilo C1-C4; R10 y R14 se seleccionan independientemente entre hidrógeno, amino, mono- y di(alquil C1-C4)amino y alquilo C1-C4, donde dicho alquilo está opcionalmente sustituido con hidroxi, amino o mono- y di(alquil C1-C4)amino; R11 es hidrógeno, alquilo C1-C4, amino o mono- y di(alquil C1-C4)amino; R12 es hidrógeno o alquilo C1-C4; o R9 y R11, considerados de manera combinada, forman un azaciclo saturado que tiene de 4 a 7 átomos anulares que está opcionalmente sustituido con 1-3 grupos alquilo C1-C4; o R11 y R12, considerados de manera combinada, forman un azaciclo saturado que tiene de 4 a 7 átomos anulares que está opcionalmente sustituido con 1-3 grupos alquilo C1-C4.
En una decimosexta realización, se proporciona el compuesto de una cualquiera de las realizaciones primera a decimoquinta, donde B se selecciona del grupo que consiste en:
Figure imgf000011_0003
Figure imgf000012_0001
y
donde X es O o N(Me) o NH; y R17 es hidrógeno o metilo.
En una decimoséptima realización, se proporciona el compuesto, o una sal de este, de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a decimosexta, donde B es:
Figure imgf000012_0002
En una decimooctava realización, se proporciona el compuesto, o una sal de este, de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a decimoséptima, donde X es -O-.
En una decimonovena realización, se proporciona el compuesto, o una sal de este, de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a decimooctava, donde X es N(Me).
En una vigésima realización, se proporciona un compuesto, o una sal de este, que se selecciona del grupo que consiste en:
7-hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona;
6- (6-((3aR,6aS)-5-metilhexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
7- hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona;
6-(6-(metil(1,2,2,6,6-pentametilpiperidi n-4-il)amino)piridazi n-3-il)quinolin-7-ol;
2- metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-morfolinoquinolin-7-ol;
4-cloro-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
3- bromo-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
3-etil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
3-(1H-imidazol-1-il)-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)quinolin-7-ol;
3- isopropil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
6- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3,7-diol;
7- hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3-carbonitrilo;
6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
4- (dimetilamino)-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-7-ol;
- doro-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
- metoxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
- (3-(benciloxi)isoquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina;
-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1,6-diol;
-(6-(metil(1,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
- cidopropil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
- (1-(benciloxi)isoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina;
- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
- metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)quinolin-7-ol; - metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
-etoxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
- doro-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-6-ol;
-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)quinolin-7-ol;
- doro-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-6-ol;
-bromo-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-6-ol;
-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
- bromo-3-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
- hidroxi-1-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona;
,3-dimetil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinoxalin-6-ol;
- metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinoxalin-6-ol;
- metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinoxalin-6-ol;
- metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-7-ol;
-(azetidin-1-il)-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
- hidroxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4-carbonitrilo; -cidopropil-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol; -metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(tetrahidro-2H-piran-4-il)quinolin-7-ol; -Metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(oxetan-3-il)quinolin-7-ol;
-(dimetilamino)-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol; -hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-4(1H)-ona;
- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-7-ol;
- hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona; -hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona; -hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo;
-hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo;
-hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo;
- hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carboxamida;
- hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carboxamida;
-hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carboxamida;
-hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carboxilato de metilo;
- hidroxi-7-(6-(piperazin-1-il)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo;
- hidroxi-6-(6-(piperazin-1-il)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo;
-(6-(piperazin-1-il)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
-(6-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-7-ol;
-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
,3-dimetil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
-hidroxi-3-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo;
- amino-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
-hidroxi-1,3-dimetil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-2,4(1H,3H)-diona; -hidroxi-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona;
- metil-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-2H-indazol-6-ol;
- metil-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-1H-indazol-6-ol;
- hidroxi-2-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1(2H)-ona;
- etil-6-hidroxi-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)pi ridazin-3-il)isoquinolin-1(2H)-ona;
-etoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
- (6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-1,6-diol;
-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-piridazin-3-il)-3-fenilisoquinolin-6-ol;
- metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
-ciclopropil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
-isopropil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
-propil-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
3-Isopropil-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol y
3- metil-7-(6-(piperazin-1-il)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol.
En una vigesimoprimera realización, se proporciona un compuesto, o una sal de este, que se selecciona del grupo que consiste en:
7-hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona;
6- (6-((3aR,6aS)-5-metilhexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
7- hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona;
6-(6-(metil(1,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
2- metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-morfolinoquinolin-7-ol;
4- cloro-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
3- bromo-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
3-etil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
3-(1H-imidazol-1-il)-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)quinolin-7-ol;
3- isopropil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
6- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3,7-diol;
7- hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3-carbonitrilo;
6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
4- (dimetilamino)-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-7-ol;
3- cloro-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
4- metoxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
6- (3-(benciloxi)isoquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina;
8- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
7- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1,6-diol;
7-(6-(metil(1,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
1- ciclopropil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
6- (1-(benciloxi)isoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina;
7- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
2- metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)quinolin-7-ol;
2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
4-etoxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol y
4-doro-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol.
En una vigesimosegunda realización, se proporciona un compuesto, o una sal de este, que se selecciona del grupo que consiste en:
7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
2- metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinoxalin-6-ol;
3- metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinoxalin-6-ol;
6- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-7-ol;
7- hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo y
1-amino-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol.
En una vigesimotercera realización, se proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a vigesimotercera, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.
En una vigesimocuarta realización, se proporciona una combinación que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a vigesimosegunda, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y uno o más coagentes terapéuticamente activos.
En una vigesimoquinta realización, se proporciona un compuesto, o una sal de este, de una cualquiera de las realizaciones primera a vigesimosegunda para su uso en el tratamiento, la prevención o la mejora de una afección relacionada con la deficiencia de SMN.
En una vigesimosexta realización, se proporciona el compuesto para su uso de la vigesimoquinta realización, donde dicha afección relacionada con la deficiencia de SMN es atrofia muscular espinal.
En una vigesimoséptima realización, se proporciona un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a vigesimosegunda, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso como medicamento.
En una vigesimoctava realización, se proporciona un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones primera a vigesimosegunda, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento de una afección relacionada con la deficiencia de SMN.
En una vigesimonovena realización, se proporciona el compuesto de acuerdo con la vigesimoctava realización, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento de la atrofia muscular espinal.
A efectos de interpretación de la presente memoria descriptiva, se aplicarán las siguientes definiciones y, cuando proceda, las expresiones y los términos utilizados en singular también incluirán el plural y viceversa.
La expresión «modulador de SMN», tal como se utiliza en la presente, incluye agentes, tales como los compuestos de la invención, que poseen la capacidad de modular, por ejemplo, incrementar, los niveles de proteína SMN mediante al menos uno de los múltiples mecanismos posibles. Un conjunto no limitante de mecanismos incluye la activación del promotor de SMN, la modulación del corte y empalme (por ejemplo, evitar que el exón 7 se separe del gen SMN) y la modulación de la estabilidad de la proteína s Mn . Los moduladores de SMN pueden modular, por ejemplo, incrementar los niveles de FL-SMN y/o SMNA7 a través de cualquiera de dichos mecanismos, y/o pueden evitar que SMNA7 se degrade.
La expresión «compuestos de la invención», tal como se utiliza en la presente, incluye, sin carácter limitante, los compuestos de fórmula (I).
La expresión «afecciones relacionadas con la deficiencia de SMN», tal como se utiliza en la presente, incluye, sin carácter limitante, atrofia muscular espinal (AME), artrogriposis múltiple congénita de tipo neurogénico (AMC congénita) y esclerosis lateral amiotrófica (ELA).
La expresión «atrofia muscular espinal», «AME», tal como se utiliza en la presente, incluye tres formas de AME de inicio en la infancia: El tipo I (enfermedad de Werdnig-Hoffmann); tipo II (forma intermedia, crónica), tipo III (enfermedad de Kugelberg-Welander o atrofia muscular espinal juvenil); tipo IV de inicio en la edad adulta; así como otras formas de AME, que incluyen la enfermedad relacionada con el cromosoma X, atrofia muscular espinal con dificultad respiratoria (AMEDR), atrofia muscular espinal y bulbar (enfermedad de Kennedy o atrofia muscular bulboespinal) y atrofia muscular espinal distal.
A efectos de interpretación de la presente memoria descriptiva, se aplicarán las siguientes definiciones y, cuando proceda, las expresiones y los términos utilizados en singular también incluirán el plural y viceversa.
La expresión «alquilo C1-10», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un resto hidrocarbonado ramificado o no ramificado totalmente saturado que tiene de 1 a 10 átomos de carbono. Las expresiones «alquilo C1-6» y «alquilo C1-4» deben interpretarse de forma correspondiente. Los ejemplos representativos de alquilo C1-10 incluyen, sin carácter limitante, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, isobutilo, ferf-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo, nhexilo, 3-metilhexilo, 2,2-dimetilpentilo, 2,3-dimetilpentilo, n-heptilo, n-octilo, n-nonilo y n-decilo.
La expresión «alquileno C1-10», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un grupo alquilo divalente tal como se ha definido anteriormente en la presente que tiene de 1 a 10 átomos de carbono. Las expresiones «alquileno C1-6» y «alquileno C1-4» deben interpretarse de forma correspondiente. Los ejemplos representativos de alquileno C1-10 incluyen, sin carácter limitante, metileno, etileno, n-propileno, isopropileno, n-butileno, sec-butileno, isobutileno, ferf-butileno, npentileno, isopentileno, neopentileno, n-hexileno, 3-metilhexileno, 2,2-dimetilpentileno, 2,3-dimetilpentileno, n-heptileno, n-octileno, n-nonileno y n-decileno.
La expresión «haloalquilo C1-10», tal como se utiliza en la present, se refiere a un grupo alquilo C1-10, tal como se define en la presente, donde al menos uno de los átomos de hidrógeno se reemplaza por un átomo de halógeno. El grupo haloalquilo C1-10 puede ser monohaloalquilo C1-10, dihaloalquilo C1-10 o polihaloalquilo C1-10, que incluye perhaloalquilo C1-10. Un monohaloalquilo C1-10 puede tener un yodo, bromo, cloro o fluoro dentro del grupo alquilo. Los grupos dihaloalquilo C1-10 y polihaloalquilo C1-10 pueden tener dos o más átomos de halógeno iguales o una combinación de diferentes grupos halogenados dentro del alquilo. Normalmente, el grupo polihaloalquilo C1-10 contiene hasta 12, o 10, u 8, o 6, o 4, o 3, o 2 grupos halogenados. Los ejemplos no limitantes de haloalquilo C1-10 incluyen fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, clorometilo, diclorometilo, triclorometilo, pentafluoroetilo, heptafluoropropilo, difluoroclorometilo, diclorofluorometilo, difluoroetilo, difluoropropilo, dicloroetilo y dicloropropilo. Un grupo perhaloalquilo C1-10 se refiere a un grupo alquilo C1-10 que tiene todos los átomos de hidrógeno reemplazados por átomos de halógeno.
El término «arilo» se refiere a un grupo hidrocarbonado aromático que tiene 6-20 átomos de carbono en la porción anular. Normalmente, el arilo es un arilo monocíclico, bicíclico o tricíclico que tiene 6-20 átomos de carbono e incluye uno o más anillos aromáticos condensados con uno o más anillos hidrocarbonados no aromáticos. Algunos ejemplos no limitantes incluyen fenilo, naftilo o tetrahidronaftilo.
La expresión «alcoxi C1-10», tal como se utiliza en la presente, se refiere a (alquil C i-10)-O-, donde el alquilo C1-10 se ha definido anteriormente en la presente. Los ejemplos representativos de alcoxi C1-10 incluyen, sin carácter limitante, metoxi, etoxi, propoxi, 2-propoxi, butoxi, ferf-butoxi, pentiloxi, hexiloxi, heptiloxi, octiloxi- y deciloxi-.
El término «heterociclilo» o «heterociclo», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un anillo o sistema anular no aromático saturado o insaturado, que es un anillo monocíclico de 4, 5, 6 o 7 miembros que contiene 1,2 o 3 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, un sistema anular bicíclico de 7, 8, 9, 10, 11 o 12 miembros que contiene 1, 2, 3, 4 o 5 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, o un sistema anular tricíclico de 10, 11, 12, 13, 14 o 15 miembros y que contiene 1, 2, 3, 4, 5, 6 o 7 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, donde el N y el S también se pueden oxidar opcionalmente hasta varios estados de oxidación. El grupo heterocíclico puede estar unido mediante un heteroátomo o un átomo de carbono. Los heterociclos pueden incluir anillos condensados o con puentes, así como anillos espirocíclicos. Los ejemplos de heterociclos incluyen tetrahidrofurano (THF), dihidrofurano, 1,4-dioxano, morfolina, 1,4-ditiano, piperazina, piperidina, 1,3-dioxolano, imidazolidina, imidazolina, pirrolina, pirrolidina, tetrahidropirano, dihidropirano, oxatiolano, ditiolano, 1,3-dioxano, 1,3-ditiano, oxatiano y tiomorfolina.
La expresión «cicloalquilo C3-12», tal como se utiliza en la presente, se refiere a grupos hidrocarbonados monocíclicos, bicíclicos o tricíclicos saturados o insaturados de 3-12 átomos de carbono. La expresión «cicloalquilo C3-18» se refiere a un grupo hidrocarbonado monocíclico totalmente saturado o insaturado de 3-8 átomos de carbono. Los grupos hidrocarbonados monocíclicos a modo de ejemplo incluyen, sin carácter limitante, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo y ciclohexenilo. Los grupos hidrocarbonados bicíclicos a modo de ejemplo incluyen bornilo, indilo, hexahidroindilo, tetrahidronaftilo, decahidronaftilo, biciclo[2.1.1]hexilo, biciclo[2.2.1 ]heptilo, biciclo[2.2.1]heptenilo, 6,6-dimetilbiciclo[3.1.1 ]heptilo, 2,6,6-trimetilbiciclo[3.1.1 ]heptilo, biciclo[2.2.2]octilo. Los grupos hidrocarbonados tricíclicos a modo de ejemplo incluyen, por ejemplo, adamantilo.
La expresión «cicloalquiloxi C3-12», tal como se utiliza en la presente, se refiere a (cicloalquil C3-12)-O-, donde el cicloalquilo C3-12 se ha definido anteriormente en la presente. Los ejemplos representativos de cicloalquiloxi C3-12 incluyen, sin carácter limitante, grupos monocíclicos tales como ciclopropoxi, ciclobutoxi, ciclopentiloxi, ciclopenteniloxi, ciclohexiloxi y ciclohexeniloxi y similares. Los grupos hidrocarbonados bicíclicos a modo de ejemplo incluyen borniloxi, indiloxi, hexahidroindiloxi, tetrahidronaftiloxi, decahidronaftiloxi, biciclo[2.1.1]hexiloxi, biciclo[2.2.1]heptiloxi, bicido[2.2.1]hepteniloxi, 6,6-dimetilbicido[3.1.1]heptiloxi, 2,6,6-trimetilbiciclo[3.1.1]heptiloxi, bicido[2.2.2]octiloxi y similares. Los grupos hidrocarbonados tricíclicos a modo de ejemplo incluyen, por ejemplo, adamantiloxi.
El término «ariloxi», tal como se utiliza en la presente, se refiere tanto a un grupo --O-arilo como a un grupo --O-heteroarilo, donde el arilo y heteroarilo se han definido en la presente.
El término «heteroarilo», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un anillo aromático monocíclico de 5, 6 o 7 miembros que contiene 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, un sistema anular bicíclico condensado de 8, 9 o 10 miembros que contiene 1,2, 3, 4 o 5 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, o un sistema anular tricíclico condensado de 11, 12, 13 o 14 miembros que contiene 1,2, 3, 4, 5 o 6 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, donde al menos uno de los anillos de los sistemas anulares bicíclico o tricíclico es totalmente aromático. Los grupos heteroarilo habituales incluyen 2- o 3-tienilo, 2- o 3-furilo, 2- o 3-pirrolilo, 2-, 4- o 5-imidazolilo, 3-, 4- o 5- pirazolilo, 2-, 4- o 5-tiazolilo, 3-, 4- o 5-isotiazolilo, 2-, 4- o 5-oxazolilo, 3-, 4- o 5-isoxazolilo, 3- o 5-1,2,4-triazolilo, 4- o 5-1,2,3-triazolilo, tetrazolilo, 2-, 3- o 4-piridilo, 3- o 4-piridazinilo, 3-, 4- o 5-pirazinilo, 2-pirazinilo, 2-, 4- o 5-pirimidinilo, 1-, 2-, 3-, 5-, 6-, 7- u 8-indolizinilo, 1- , 3-, 4-, 5-, 6- o 7-isoindolilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- o 7-indolilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- o 7-indazolilo, 2-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-purinilo, 1-, 2- , 3-, 4-, 6-, 7-, 8- o 9-quinolizinilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-quinolinilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-isoquinolinilo, 1-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-ftalazinilo, 2-, 3-, 4-, 5- o 6-naftiridinilo, 2-, 3-, 5-, 6-, 7- u 8-quinazolinilo, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-cinolinilo, 2-, 4-, 6- o 7-pteridinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-4aH-carbazolilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-carbazaolilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8- o 9-carbolinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 6-, 7-, 8-, 9- o 10-fenantridinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8- o 9-acridinilo, 1-, 2-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8- o 9-perimidinilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 8-, 9- o 10-fenatrolinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 6-, 7-, 8- o 9-fenazinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 6-, 7-, 8-, 9- o 10-fenotiazinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 6-, 7-, 8-, 9- o 10-fenoxazinilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, o 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8-, 9- o 10-bencisoqinolinilo, 2-, 3-, 4- o tieno[2,3-jb]furanilo, 2-, 3-, 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, 10 - u 11-7H-pirazino[2,3-c]carbazolilo, 2-, 3-, 5-, 6- o 7-2H-furo[3,2-jb]-piranilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 7- u 8-5H-pirido[2,3-d]-o-oxazinilo, 1-, 3- o 5-1H-pirazolo[4,3-d]-oxazolilo, 2-, 4- o 5-4H-imidazo[4,5-d]tiazolilo, 3-, 5- u 8-pirazino[2,3-d]piridazinilo, 2-, 3-, 5- o 6- imidazo[2,1-jb]tiazolilo, 1-, 3-, 6-, 7-, 8- o 9-furo[3,4-c]cinolinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 8-, 9-, 10 u 11-4H-pirido[2,3-c]carbazolilo, 2-, 3-, 6- o 7-imidazo[1,2-jb][1,2,4]triaz¡nilo, 7-benzo[¿]tienilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-benzoxazolilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-bencimidazolilo, 2-, 4-, 4-, 5-, 6- o 7-benzotiazolilo, 1-, 2-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8- o 9- benzoxapinilo, 2-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-benzoxazinilo, 1-, 2-, 3-, 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, 10-u 11-1H-pirrolo[1,2-jb][2]benzazapinilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-quinolinilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-isoquinolinilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- o 7-indolilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- o 7-benzo[b]tienilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-benzoxazolilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-bencimidazolilo y 2­ , 4-, 5-, 6- o 7-benzotiazolilo.
El término «halógeno» o «halo», tal como se utiliza en la presente, se refiere a fluoro, cloro, bromo y yodo.
El término «isómeros», tal como se utiliza en la presente, se refiere a diferentes compuestos que tienen la misma fórmula molecular, pero difieren en la disposición y configuración de los átomos. Asimismo, la expresión «un isómero óptico» o «un estereoisómero», tal como se utiliza en la presente, se refiere a cualquiera de las diversas configuraciones estereoisoméricas que pueden existir para un compuesto determinado de la presente invención e incluye isómeros geométricos. Se entiende que un sustituyente puede estar unido a un centro quiral de un átomo de carbono. Por lo tanto, la invención incluye enantiómeros, diastereómeros o racematos del compuesto. Los «enantiómeros» son un par de estereoisómeros cuyas imágenes especulares no se pueden superponer entre sí. Una mezcla 1:1 de un par de enantiómeros es una mezcla «racémica». El término se utiliza para designar una mezcla racémica cuando proceda. Los «diastereoisómeros» son estereoisómeros que tienen al menos dos átomos asimétricos, pero que no son imágenes especulares entre sí. La estereoquímica absoluta se especifica de acuerdo con el sistema R-S de Cahn-Ingold-Prelog. Cuando un compuesto es un enantiómero puro, la estereoquímica en cada carbono quiral puede especificarse mediante R o S. Los compuestos resueltos, cuya configuración absoluta es desconocida, pueden designarse (+) o (-) dependiendo de la dirección (dextrógira o levógira) en la que hacen girar el plano de la luz polarizada en la longitud de onda de la línea D del sodio. Ciertos compuestos descritos en la presente contienen uno o más centros o ejes asimétricos y, por lo tanto, pueden dar lugar a enantiómeros, diastereómeros y otras formas estereoisoméricas que pueden definirse, en términos de su estereoquímica absoluta, como (R) o (S). Se pretende que la presente invención incluya todos los isómeros posibles de este tipo, incluidas las mezclas racémicas, formas ópticamente puras y mezclas de intermedios. Se pueden preparar isómeros (R) y (S) con actividad óptica utilizando sintones quirales o reactivos quirales, o se pueden resolver utilizando técnicas convencionales. Si el compuesto contiene un doble enlace, el sustituyente puede tener la configuración E o Z. Si el compuesto contiene un cicloalquilo disustituido, el sustituyente del cicloalquilo puede tener una configuración cis o trans. También se pretende que todas las formas tautoméricas estén incluidas.
Tal como se utilizan en la presente, los términos «sal» o «sales» se refieren a una sal de adición de ácido o de adición de base de un compuesto de la invención. El término «sales» incluye, en particular, «sales farmacéuticamente aceptables». La expresión «sales farmacéuticamente aceptables» se refiere a sales que conservan la eficacia biológica y las propiedades de los compuestos de esta invención y que normalmente no son indeseables desde un punto de vista biológico o de otro tipo. En muchos casos, los compuestos de la presente invención son capaces de formar sales de adición de ácido y/o base en virtud de la presencia de grupos amino y/o carboxilo o grupos similares a estos.
Se pueden formar sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables con ácidos inorgánicos y ácidos orgánicos, por ejemplo, sales de tipo acetato, aspartato, benzoato, besilato, bromuro/bromhidrato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, canforsulfonato, cloruro/clorhidrato, cloroteofilonato, citrato, etandisulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hipurato, yodhidrato/yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, laurilsulfato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/dihidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, estearato, succinato, sulfosalicilato, tartrato, tosilato y trifluoroacetato.
Los ácidos inorgánicos a partir de los cuales se pueden obtener sales incluyen, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares.
Los ácidos orgánicos a partir de los cuales se pueden obtener sales incluyen, por ejemplo, ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malónico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido toluensulfónico, ácido sulfosalicílico y similares. Se pueden formar sales de adición de base farmacéuticamente aceptables con bases orgánicas e inorgánicas.
Las bases inorgánicas a partir de las cuales se pueden obtener sales incluyen, por ejemplo, sales de amonio y metales de las columnas I a XII de la Tabla Periódica. En determinadas realizaciones, las sales se obtienen a partir de sodio, potasio, amonio, calcio, magnesio, hierro, plata, cinc y cobre; las sales especialmente adecuadas incluyen sales de amonio, potasio, sodio, calcio y magnesio.
Las bases orgánicas a partir de las cuales se pueden obtener sales incluyen, por ejemplo, aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas que incluyen aminas sustituidas de origen natural, aminas cíclicas, resinas de intercambio iónico básicas y similares. Algunas aminas orgánicas incluyen isopropilamina, benzatina, colinato, dietanolamina, dietilamina, lisina, meglumina, piperazina y trometamina.
Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención se pueden sintetizar a partir de un compuesto precursor, un resto básico o ácido, mediante métodos químicos convencionales. Por lo general, las sales de este tipo se pueden preparar haciendo reaccionar las formas de ácido libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base apropiada (tal como hidróxido, carbonato, bicarbonato de Na, Ca, Mg o K, o similares), o haciendo reaccionar las formas de base libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica del ácido apropiado. Las reacciones de este tipo normalmente se llevan a cabo en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de los dos. Por lo general, siempre que sea posible, es deseable el uso de medios no acuosos tales como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Se pueden consultar listas de sales adecuadas adicionales, por ejemplo, en «Remington's Pharmaceutical Sciences», 20.a ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985); y en «Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use» de Stahl y Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Alemania, 2002).
También se pretende que cualquier fórmula proporcionada en la presente represente formas no marcadas, así como también formas marcadas isotópicamente de los compuestos. Los compuestos marcados isotópicamente tienen estructuras representadas por las fórmulas proporcionadas en la presente, con la excepción de que se reemplazan uno o más átomos por un átomo que tiene una masa atómica o un número másico seleccionados. Los ejemplos de isótopos que se pueden incorporar a los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tales como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18F 31P, 32P, 35S, 36Cl, 125I, respectivamente. La invención incluye diversos compuestos marcados isotópicamente tal como se definen en la presente, por ejemplo, aquellos en los que están presentes isótopos radiactivos tales como 3H, 13C y 14C. Tales compuestos marcados isotópicamente son útiles en estudios metabólicos (con 14C), estudios de la cinética de reacción (con, por ejemplo, 2H o 3H), técnicas de detección o de obtención de imágenes, tales como la tomografía por emisión de positrones (PET) o la tomografía computarizada de emisión monofotónica (SPECT), que incluyen ensayos de distribución tisular de fármacos o sustratos, o en el tratamiento radiactivo de pacientes. En particular, un compuesto marcado o 18F puede ser particularmente deseable para estudios de PET o SPECT. Los compuestos marcados isotópicamente de esta invención y los profármacos de estos se pueden preparar en general llevando a cabo los procedimientos divulgados en los esquemas o en los ejemplos y preparaciones que se describen más adelante sustituyendo un reactivo no marcado isotópicamente por un reactivo marcado isotópicamente que se pueda adquirir fácilmente.
Además, la sustitución con isótopos más pesados, particularmente deuterio (es decir, 2H o D) puede proporcionar determinadas ventajas terapéuticas resultantes de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, una mayor semivida in vivo o menores requisitos de dosificación o una mejora en el índice terapéutico. Se entiende que el deuterio en este contexto se considera un sustituyente de un compuesto de fórmula (I). La concentración de un isótopo más pesado de este tipo, específicamente el deuterio, se puede definir mediante el factor de enriquecimiento isotópico. La expresión «factor de enriquecimiento isotópico», tal como se utiliza en la presente, se refiere a la relación entre la abundancia isotópica y la abundancia natural de un isótopo especificado. Si un sustituyente en un compuesto de esta invención se denomina deuterio, dicho compuesto tiene un factor de enriquecimiento isotópico para cada uno de los átomos de deuterio designados de al menos 3500 (52,5 % de incorporación de deuterio en cada átomo de deuterio designado), al menos 4000 (60 % de incorporación de deuterio), al menos 4500 (67,5 % de incorporación de deuterio), al menos 5000 (75 % de incorporación de deuterio), al menos 5500 (82,5 % de incorporación de deuterio), al menos 6000 (90 % de incorporación de deuterio), al menos 6333,3 (95 % de incorporación de deuterio), al menos 6466,7 (97 % de incorporación de deuterio), al menos 6600 (99 % de incorporación de deuterio) o al menos 6633,3 (99,5 % de incorporación de deuterio).
Los compuestos de fórmula (I) marcados isotópicamente se pueden preparar generalmente mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica o mediante procesos análogos a los descritos en los Ejemplos y Preparaciones adjuntos utilizando unos reactivos marcados isotópicamente apropiados en lugar del reactivo no marcado empleado previamente.
Los solvatos farmacéuticamente aceptables de acuerdo con la invención incluyen aquellos en los que el disolvente de cristalización puede estar sustituido isotópicamente, por ejemplo, D2O, d6-acetona, d6-DMSO.
Los compuestos de la invención, es decir, los compuestos de fórmula (I) que contienen grupos capaces de actuar como dadores y/o aceptores de puentes de hidrógeno, pueden ser capaces de formar cocristales con formadores de cocristales adecuados. Estos cocristales se pueden preparar a partir de compuestos de fórmula (I) mediante procedimientos de formación de cocristales conocidos. Tales procedimientos incluyen moler, calentar, cosublimar, cofundir o poner en contacto en solución los compuestos de fórmula (I) con el formador de cocristales en condiciones de cristalización y aislar los cocristales formados de este modo. Los formadores de cocristales adecuados incluyen los descritos en el documento WO 2004/078163. Por lo tanto, la invención proporciona además cocristales que comprenden un compuesto de fórmula (I).
La expresión «una cantidad terapéuticamente eficaz» de un compuesto de la presente invención se refiere a una cantidad del compuesto de la presente invención que provocará la respuesta biológica o médica de un sujeto, por ejemplo, la reducción o inhibición de una actividad enzimática o proteica, o la mejora de los síntomas, el alivio de afecciones, el retraso o la demora de la progresión de la enfermedad o la prevención de una enfermedad, etc. En una realización no limitante, la expresión «una cantidad terapéuticamente eficaz» se refiere a la cantidad del compuesto de la presente invención que, cuando se administra a un sujeto, es eficaz para (1) aliviar, inhibir, prevenir y/o mejorar al menos parcialmente una afección, o un trastorno o una enfermedad (i) mediado por el gen o el producto del gen de Supervivencia de MotoNeuronas (SMN), o por la degradación de SMNA7, o por los niveles relativos de FL-SMN y SMNA7 (ii) asociado con la actividad de SMN o (iii) caracterizado por la actividad (normal o anómala) de SMN; o (2) reducir o inhibir la actividad de SMN; o (3) reducir o inhibir la expresión de SMN1 o SMN2.
En otra realización no limitante, la expresión «una cantidad terapéuticamente eficaz» se refiere a la cantidad del compuesto de la presente invención que, cuando se administra a una célula, o un tejido, o un material biológico no celular, o un medio, es eficaz para reducir o inhibir al menos parcialmente la actividad de SMN; o reducir o inhibir al menos parcialmente la expresión de SMN, en ambos casos mediante la modulación de los niveles relativos de FL-SMN y SMNA7.
Las expresiones «cantidad terapéuticamente eficaz» y «cantidad eficaz» se utilizan en la presente para referirse a una cantidad suficiente para reducir al menos en aproximadamente un 15 por ciento, preferentemente en al menos un 50 por ciento, más preferentemente en al menos un 90 por ciento y de la manera más preferente prevenir, un déficit significativo desde un punto de vista clínico en la actividad, función y respuesta del hospedador. Como alternativa, una cantidad terapéuticamente eficaz es suficiente para provocar una mejora en una afección/síntoma significativo desde un punto de vista clínico en el hospedador.
La cantidad eficaz puede variar dependiendo de factores tales como el tamaño y el peso del sujeto, el tipo de enfermedad o el compuesto particular de la invención. Por ejemplo, la elección del compuesto de la invención puede afectar a lo que constituye una «cantidad eficaz». Un experto en la técnica tendría la capacidad de estudiar los factores contenidos en la presente y hacer la determinación con respecto a la cantidad eficaz de los compuestos de la invención sin demasiada experimentación.
El régimen de administración puede afectar a lo que constituye una cantidad eficaz. El compuesto de la invención se puede administrar al sujeto antes o después del inicio de una afección relacionada con la deficiencia de SMN. Además, se pueden administrar varias dosis divididas, así como también dosis escalonadas, a diario o de manera secuencial, o la dosis se puede infundir de forma continuada, o puede ser una inyección en bolo. Además, las dosificaciones del (de los) compuesto(s) de la invención se pueden aumentar o reducir proporcionalmente según lo indiquen las exigencias de la situación terapéutica o profiláctica.
Tal como se utiliza en la presente, el término «sujeto» se refiere a un animal. Normalmente el animal es un mamífero. Un sujeto también se refiere, por ejemplo, a primates (por ejemplo, seres humanos, hombres o mujeres), vacas, ovejas, cabras, caballos, perros, gatos, conejos, ratas, ratones, peces, pájaros y similares. En determinadas realizaciones, el sujeto es un primate. En otras realizaciones más, el sujeto es un ser humano.
Tal como se utiliza en la presente, el término «inhibir», «inhibición» o «que inhibe» se refiere a la reducción o supresión de una afección, síntoma o trastorno o enfermedad determinados, o una disminución significativa en la actividad de referencia de una actividad o proceso biológico.
Tal como se utiliza en la presente, el término «tratar», «que trata» o «tratamiento» de cualquier enfermedad o trastorno, se refiere, en una realización, a mejorar la enfermedad o el trastorno (es decir, ralentizar o detener o reducir el desarrollo de la enfermedad o al menos uno de los síntomas clínicos de esta). En otra realización, «tratar», «que trata» o «tratamiento» se refiere a aliviar o mejorar al menos un parámetro físico incluidos los que pueden no ser perceptibles por el paciente. En otra realización más, «tratar», «que trata» o «tratamiento» se refiere a modular la enfermedad o trastorno, ya sea físicamente (por ejemplo, mediante la estabilización de un síntoma discernible), fisiológicamente (por ejemplo, mediante la estabilización de un parámetro físico) o ambas. En otra realización más, «tratar», «que trata» o «tratamiento» se refiere a prevenir o retrasar la aparición o el desarrollo o avance de la enfermedad o trastorno.
Tal como se utiliza en la presente, un sujeto «necesita» un tratamiento si dicho sujeto se beneficiaría desde un punto de vista biológico, médico o en su calidad de vida de un tratamiento de este tipo.
Tal como se utiliza en la presente, se debe interpretar que el término «un», «uno/a», «el/la» y términos similares utilizados en el contexto de la presente invención (especialmente en el contexto de las reivindicaciones) abarcan tanto el singular como el plural a menos que se indique lo contrario en la presente o el contexto lo contradiga claramente.
Todos los métodos descritos en la presente se pueden llevar a cabo en cualquier orden adecuado, a menos que se indique lo contrario en la presente o el contexto lo contradiga claramente. El uso de todos y cada uno de los ejemplos o lenguaje ilustrativo (por ejemplo, «tal/es como») proporcionados en la presente tiene por objeto únicamente ilustrar mejor la invención y no supone ninguna limitación del alcance de la invención por lo demás reivindicado.
Cualquier átomo asimétrico (por ejemplo, carbono o similar) del compuesto o compuestos de la presente invención, puede estar presente en forma racémica o enantioméricamente enriquecida, por ejemplo, la configuración (R), (S) o (R,S). En ciertas realizaciones, cada átomo asimétrico tiene al menos un 50 % de exceso enantiomérico, al menos un 60 % de exceso enantiomérico, al menos un 70 % de exceso enantiomérico, al menos un 80 % de exceso enantiomérico, al menos un 90 % de exceso enantiomérico, al menos un 95 % de exceso enantiomérico o al menos un 99 % de exceso enantiomérico en la configuración (R) o (S). Los sustituyentes en los átomos con enlaces insaturados pueden, si es posible, estar presentes en forma cis (Z) o trans (E).
Por consiguiente, tal como se utiliza en la presente, un compuesto de la presente invención puede estar en forma de uno de los posibles isómeros, rotámeros, atropisómeros, tautómeros o mezclas de estos, por ejemplo, como racematos, isómeros ópticos (enantiómeros), diastereómeros, isómeros geométricos (cis o trans) sustancialmente puros o mezclas de estos.
Cualesquiera mezclas resultantes de isómeros se pueden separar, basándose en las diferencias fisicoquímicas de los constituyentes, en los racematos, diastereómeros, isómeros geométricos u ópticos puros o sustancialmente puros, por ejemplo, mediante cromatografía y/o cristalización fraccionada.
Cualesquiera racematos resultantes de productos finales o intermedios se pueden resolver en los enantiómeros ópticos mediante métodos conocidos, por ejemplo, mediante la separación de las sales diastereoméricas de estos, obtenidas con una base o ácido ópticamente activo, y la liberación del compuesto ácido o básico ópticamente activo. En particular, se puede emplear de este modo un resto básico para resolver los compuestos de la presente invención en sus enantiómeros ópticos, por ejemplo, mediante la cristalización fraccionada de una sal formada con un ácido ópticamente activo, por ejemplo, ácido tartárico, ácido dibenzoiltartárico, ácido diacetiltartárico, ácido di-0,0'-p-toluoiltartárico, ácido mandélico, ácido málico o ácido canfor-10-sulfónico. Los productos racémicos también se pueden resolver mediante cromatografía quiral, por ejemplo, cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) utilizando un adsorbente quiral.
Los compuestos de la presente invención se obtienen en forma libre, como una sal de estos, o como derivados de tipo profármaco de estos.
Cuando hay tanto un grupo básico como un grupo ácido presente en la misma molécula, los compuestos de la presente invención también pueden formar sales internas, por ejemplo, moléculas zwitteriónicas.
Además, los compuestos de la presente invención, incluidas sus sales, también se pueden obtener en forma de sus hidratos, o pueden incluir otros disolventes utilizados para su cristalización. Los compuestos de la presente invención pueden formar solvatos intrínsecamente o mediante diseño con disolventes farmacéuticamente aceptables (incluida el agua); por lo tanto, se pretende que la invención abarque formas tanto solvatadas como no solvatadas. El término «solvato» se refiere a un complejo molecular de un compuesto de la presente invención (incluidas las sales farmacéuticamente aceptables de este) con una o más moléculas de disolvente. Dichas moléculas de disolvente son las que se utilizan comúnmente en la técnica farmacéutica, que se sabe que son inocuas para el receptor, por ejemplo, agua, etanol y similares. El término «hidrato» se refiere al complejo donde la molécula de disolvente es agua.
Los compuestos de la presente invención, incluidas las sales, hidratos y solvatos de estos, pueden formar polimorfos intrínsecamente o mediante diseño.
Se describe además cualquier variante de los presentes procesos, en la que se utiliza un producto intermedio que se puede obtener en cualquier etapa de estos como material de partida y se realizan los pasos restantes, o en la que los materiales de partida se forman in situ en las condiciones de reacción, o en la que los componentes de reacción se utilizan en forma de sus sales o material ópticamente puro.
Los compuestos de la invención y los intermedios también se pueden convertir los unos en los otros de acuerdo con métodos generalmente conocidos por los expertos en la materia.
En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y un portador farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica se puede formular para rutas particulares de administración tales como administración oral, administración parenteral y administración rectal, etc. Además, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden elaborar en una forma sólida (que incluye, sin carácter limitante, cápsulas, comprimidos, píldoras, gránulos, polvos o supositorios) o en una forma líquida (que incluye, sin carácter limitante, soluciones, suspensiones o emulsiones). Las composiciones farmacéuticas se pueden someter a operaciones farmacéuticas convencionales tales como esterilización y/o pueden contener diluyentes inertes, agentes lubricantes o agentes tamponantes convencionales, así como adyuvantes, tales como conservantes, estabilizantes, humectantes, emulsionantes y tampones, etc.
Habitualmente, las composiciones farmacéuticas son comprimidos o cápsulas de gelatina que comprenden el principio activo junto con
diluyentes, por ejemplo, lactosa, dextrosa, sacarosa, manitol, sorbitol, celulosa y/o glicina;
lubricantes, por ejemplo, sílice, talco, ácido esteárico, su sal de magnesio o calcio y/o polietilenglicol; para comprimidos también
aglutinantes, por ejemplo, silicato de magnesio y aluminio, pasta de almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio y/o polivinilpirrolidona; si se desea
desintegrantes, por ejemplo, almidones, agar, ácido algínico o su sal de sodio, o mezclas efervescentes; y/o
absorbentes, colorantes, sabores y edulcorantes.
Los comprimidos se pueden recubrir con películas o con un recubrimiento entérico de acuerdo con métodos conocidos en la técnica.
Las composiciones adecuadas para administración oral incluyen una cantidad eficaz de un compuesto de la invención en forma de comprimidos, grageas, suspensiones acuosas u oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas duras o blandas, o jarabes o elixires. Las composiciones destinadas a uso oral se preparan de acuerdo con cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas y tales composiciones pueden contener uno o más agentes seleccionados del grupo que consiste en agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y agentes conservantes con el fin de proporcionar preparados farmacéuticamente elegantes y apetitosos. Los comprimidos pueden contener el principio activo mezclado con excipientes atóxicos, farmacéuticamente aceptables, que sean adecuados para la elaboración de comprimidos. Estos excipientes son, por ejemplo, diluyentes inertes tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio; agentes granulantes y desintegrantes, por ejemplo, almidón de maíz o ácido algínico; agentes aglutinantes, por ejemplo, almidón, gelatina o goma arábiga; y agentes lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos no se recubren o se recubren mediante técnicas conocidas para retrasar la disgregación y la absorción en el tubo gastrointestinal y, de esta manera, proporcionar una acción sostenida durante un periodo más largo. Por ejemplo, se puede utilizar un material retardante tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo. Las formulaciones para uso oral se pueden presentar como cápsulas de gelatina dura donde el principio activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blanda, donde el principio activo se mezcla con agua o un medio oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.
Ciertas composiciones inyectables son soluciones o suspensiones isotónicas acuosas, y favorablemente se preparan supositorios a partir de emulsiones o suspensiones grasas. Dichas composiciones pueden esterilizarse y/o contener adyuvantes tales como agentes conservantes, estabilizantes, humectantes o emulsionantes, promotores de disolución, sales para regular la presión osmótica y/o tampones. Además, también pueden contener otras sustancias valiosas desde el punto de vista terapéutico. Dichas composiciones se preparan de acuerdo con métodos convencionales de mezcla, granulación o recubrimiento, respectivamente, y contienen aproximadamente un 0,1-75 %, o contienen aproximadamente un 1-50 %, del principio activo.
Las composiciones adecuadas para aplicación transdérmica incluyen una cantidad eficaz de un compuesto de la invención con un portador adecuado. Los portadores adecuados para la administración transdérmica incluyen disolventes absorbibles farmacológicamente aceptables para facilitar el paso a través de la piel del hospedador. Por ejemplo, los dispositivos transdérmicos se encuentran en forma de un vendaje que comprende un miembro de soporte, un depósito que contiene el compuesto opcionalmente con portadores, opcionalmente una barrera de control de la velocidad para suministrar el compuesto a la piel del hospedador a una velocidad controlada y predeterminada durante un periodo de tiempo prolongado y medios para fijar el dispositivo a la piel.
Las composiciones adecuadas para la aplicación tópica, por ejemplo, a la piel y los ojos, incluyen suspensiones, soluciones acuosas, pomadas, cremas, geles o formulaciones pulverizables, por ejemplo, para el suministro por aerosol o similares. Tales sistemas de suministro tópico serán adecuados en particular para la aplicación dérmica, por ejemplo, para el tratamiento del cáncer de piel, por ejemplo, para el uso profiláctico en lociones, aerosoles, cremas de protección solar y similares. Por lo tanto, son especialmente adecuados para su uso en formulaciones tópicas, incluidas las cosméticas, muy conocidas en la técnica. Estas pueden contener solubilizantes, estabilizantes, agentes potenciadores de la tonicidad, tampones y conservantes.
Tal como se utiliza en la presente, una aplicación tópica también puede referirse a una inhalación o a una aplicación intranasal. Se pueden suministrar convenientemente en forma de un polvo seco (ya sea solo, como una mezcla, por ejemplo, una mezcla seca con lactosa, o una partícula de componentes mixtos, por ejemplo, con fosfolípidos) desde un inhalador de polvo seco o una presentación de pulverizador de aerosol desde un recipiente a presión, bomba, pulverizador, atomizador o nebulizador, con o sin el uso de un propulsor adecuado.
La presente invención proporciona además composiciones farmacéuticas y formas farmacéuticas anhidras que comprenden los compuestos de la presente invención como principios activos, ya que el agua puede facilitar la degradación de ciertos compuestos.
Las composiciones farmacéuticas y las formas farmacéuticas anhidras de la invención se pueden preparar utilizando ingredientes anhidros o que contengan poca humedad, y condiciones de baja humectación o baja humedad. Una composición farmacéutica anhidra se puede preparar y almacenar de manera que se mantenga su naturaleza anhidra. Por consiguiente, las composiciones anhidras se envasan utilizando materiales que se sabe que evitan la exposición al agua de modo que se puedan incluir en kits de formulación adecuados. Los ejemplos de envases adecuados incluyen, sin carácter limitante, envases de láminas metálicas selladas herméticamente, plásticos, recipientes de dosis unitarias (por ejemplo, viales), envases de tipo blíster y envases de tiras.
La invención proporciona además composiciones farmacéuticas y formas farmacéuticas que comprenden uno o más agentes que reducen la velocidad a la que se descompondrá el compuesto de la presente invención como principio activo. Tales agentes, que se denominan en la presente «estabilizantes», incluyen, sin carácter limitante, antioxidantes tales como el ácido ascórbico, tampones de pH o tampones salinos, etc.
Los compuestos de fórmula I en forma libre o en forma salina exhiben propiedades farmacológicas valiosas, por ejemplo, propiedades moduladoras de la producción de proteína SMN de longitud completa, por ejemplo, como las indicadas en las pruebas in vitro e in vivo tal como se proporcionan en las siguientes secciones y, por lo tanto, están indicados para terapia o para uso como productos químicos de investigación, por ejemplo, como compuestos de referencia.
Por tanto, como una realización adicional, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal de este para su uso en terapia. En una realización adicional, la terapia se selecciona a partir de una enfermedad que se puede tratar mediante la modulación de la producción de proteína SMN de longitud completa. En otra realización, la enfermedad se selecciona a partir de la lista mencionada anteriormente, convenientemente atrofia muscular espinal.
En otra realización, la invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal de este para su uso en el tratamiento de una enfermedad que se trata modulando la producción de la proteína SMN de longitud completa. En una realización adicional, la enfermedad se selecciona a partir de la lista mencionada anteriormente, convenientemente atrofia muscular espinal.
Por tanto, como una realización adicional, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal de este para su uso en el tratamiento de una enfermedad que se puede tratar mediante la modulación de la producción de la proteína SMN. En otra realización, la enfermedad se selecciona a partir de la lista mencionada anteriormente, convenientemente atrofia muscular espinal.
La combinación o composición farmacéutica de la presente invención puede estar en una dosificación unitaria de aproximadamente 0,01-1000 mg del (de los) principio(s) activo(s) para un sujeto de aproximadamente 50-70 kg o aproximadamente 1-20 kg, o de aproximadamente 1-500 mg o aproximadamente 1-250 mg o aproximadamente 1-150 mg o aproximadamente 0,5-100 mg, o aproximadamente 0,01-1 mg o aproximadamente 0,01-0,1 mg o aproximadamente 1­ 50 mg de los principios activos. La dosificación terapéuticamente eficaz de un compuesto, la composición farmacéutica o las combinaciones de estos depende de la especie del sujeto, el peso corporal, la edad y el estado del individuo, el trastorno o enfermedad que se esté tratando, o su gravedad. Un facultativo, médico o veterinario experto puede determinar fácilmente la cantidad eficaz de cada uno de los principios activos necesaria para prevenir, tratar o inhibir el avance del trastorno o la enfermedad.
Las propiedades de dosificación citadas anteriormente se pueden demostrar en pruebas in vivo e in vitro que utilizan convenientemente mamíferos, por ejemplo, ratones, ratas, perros, monos u órganos aislados, tejidos y preparados de estos. Los compuestos de la presente invención se pueden aplicar in vitro en forma de soluciones, por ejemplo, soluciones acuosas, e in vivo por vía enteral, parenteral, convenientemente por vía intravenosa, por ejemplo, en forma de una suspensión o en solución acuosa. La dosificación in vitro puede variar entre concentraciones de aproximadamente 10-3 molar y 10-9 molar. Una cantidad terapéuticamente eficaz in vivo puede variar en función de la vía de administración entre aproximadamente 0,1-500 mg/kg o entre aproximadamente 1-100 mg/kg.
El compuesto de la presente invención se puede administrar simultáneamente con uno o más agentes terapéuticos diferentes o antes o después de estos. El compuesto de la presente invención se puede administrar por separado, mediante una vía de administración idéntica o diferente, o de forma conjunta en la misma composición farmacéutica que los otros agentes.
En una realización, la invención proporciona un producto que comprende un compuesto de fórmula (I) y al menos un agente terapéutico diferente como un preparado combinado para uso simultáneo, separado o secuencial en terapia. En una realización, la terapia es el tratamiento de una atrofia muscular espinal. Los productos proporcionados como un preparado combinado incluyen una composición que comprende el compuesto de fórmula (I) y el (los) otro(s) agente(s) terapéutico(s) juntos en la misma composición farmacéutica, o el compuesto de fórmula (I) y el (los) otro(s) agente(s) terapéutico(s) en forma separada, por ejemplo, en forma de un kit.
En una realización, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) y otro(s) agente(s) terapéutico(s). Opcionalmente, la composición farmacéutica puede comprender un portador farmacéuticamente aceptable, como se ha descrito anteriormente.
En una realización, se proporciona un kit que comprende dos o más composiciones farmacéuticas separadas, y al menos una de ellas contiene un compuesto de Fórmula (I). En una realización, el kit comprende medios para mantener por separado dichas composiciones, tales como un recipiente, frasco dividido o envase de aluminio dividido. Un ejemplo de un kit de este tipo es un envase de tipo blíster, como los utilizados habitualmente para el envasado de comprimidos, cápsulas y similares.
El kit se puede utilizar para administrar formas farmacéuticas diferentes, por ejemplo, orales y parenterales, para administrar las composiciones separadas en intervalos de dosificación diferentes, o para titular las composiciones separadas unas frente a otras. Para facilitar el cumplimiento, el kit normalmente comprende instrucciones para su administración.
En las terapias combinadas de la invención, el compuesto de la invención y el otro agente terapéutico pueden ser elaborados y/o formulados por el mismo fabricante o por fabricantes diferentes. Además, el compuesto de la invención y el otro agente terapéutico pueden ser integrados en una terapia combinada: (i) antes de dispensar el producto combinado a los facultativos (por ejemplo, en el caso de un kit que comprende el compuesto de la invención y el otro agente terapéutico), (ii) por parte de los propios facultativos (o bajo la supervisión del facultativo) poco antes de la administración; (iii) en los mismos pacientes, por ejemplo, durante la administración secuencial del compuesto de la invención y el otro agente terapéutico.
Los siguientes ejemplos están destinados a ilustrar la invención. Las temperaturas se indican en grados centígrados. Si no se menciona lo contrario, todas las evaporaciones se realizan a presión reducida, normalmente entre aproximadamente 15 mm de Hg y 100 mm de Hg (= 20-133 mbar). La estructura de los productos finales, intermedios y materiales de partida se confirma mediante métodos analíticos estándar, por ejemplo, microanálisis y características espectroscópicas, por ejemplo, MS, IR, RMN. Las abreviaturas utilizadas son las convencionales en la técnica.
Todos los materiales de partida, bloques estructurales, reactivos, ácidos, bases, agentes deshidratantes, disolventes y catalizadores utilizados para sintetizar los compuestos de la presente invención se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por el experto en la técnica (Houben-Weyl 4.a Ed. 1952, Methods of Organic Synthesis, Thieme, Volumen 21). Además, los compuestos de la presente invención se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por un experto en la técnica tal como se muestra en los siguientes ejemplos.
Preparaciones de los compuestos
Se entiende que en la siguiente descripción, las combinaciones de sustituyentes y/o variables de las fórmulas representadas son permisibles solo si tales contribuciones dan como resultado compuestos estables.
Los expertos en la técnica también apreciarán que en los procesos descritos a continuación los grupos funcionales de los compuestos intermedios pueden requerir ser protegidos con grupos protectores adecuados. Tales grupos funcionales incluyen hidroxi, fenol, amino y ácido carboxílico. Los grupos protectores adecuados para hidroxi o fenol incluyen trialquilsililo o diarilalquilsililo (por ejemplo, t-butildimetilsililo, t-butildifenilsililo o trimetilsililo), tetrahidropiranilo, bencilo, bencilo sustituido, metilo y similares. Los grupos protectores adecuados para amino, amidino y guanidino incluyen t-butoxicarbonilo, benciloxicarbonilo y similares. Los grupos protectores adecuados para el ácido carboxílico incluyen ésteres de alquilo, arilo o arilalquilo.
Los grupos protectores se pueden añadir o eliminar de acuerdo con técnicas estándar, que son muy conocidas por los expertos en la técnica, y como se describe en la presente. El uso de grupos protectores se describe detalladamente en Green, T.W. y P.G.M. Wutz, Protective Groups in Organic Synthesis (1999), 3.a Ed., Wiley. El grupo protector también puede ser una resina polimérica, tal como una resina Wang o una resina de cloruro de 2-clorotritilo.
Los expertos en la técnica también apreciarán que, aunque tales derivados protegidos de los compuestos de esta invención pueden no poseer actividad farmacológica como tales, pueden administrarse a un sujeto y posteriormente ser metabolizados en el cuerpo para formar compuestos de la invención que sean farmacológicamente activos. Tales derivados se pueden describir por lo tanto como «profármacos».
Los siguientes esquemas de reacción ilustran métodos para preparar compuestos de esta invención. Se sobreentiende que un experto en la técnica sería capaz de preparar estos compuestos mediante métodos similares o mediante métodos conocidos por un experto en la técnica. En general, los componentes de partida y los reactivos se pueden obtener de proveedores tales como Sigma Aldrich, Lancaster Synthesis, Inc., Maybridge, Matrix Scientific, TCI y Fluorochem USA, Strem, otros proveedores comerciales, o se pueden sintetizar de acuerdo con fuentes conocidas por los expertos en la técnica, o se pueden preparar como se describe en esta invención. A, B, X, R, R1, R2, R3, R4 se definen como en la memoria descriptiva, a menos que se definan específicamente.
En general, los compuestos de tipo piridazina de Fórmula (I) de esta invención se pueden sintetizar siguiendo el procedimiento general descrito en el Esquema 1.
Figure imgf000025_0001
Los materiales de partida para el esquema de reacción anterior se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden preparar de acuerdo con métodos conocidos por un experto en la técnica o mediante métodos divulgados en la presente. En general, los compuestos de la invención se preparan en el Esquema 1 de reacción anterior como se indica a continuación:
La dihalopiridazina (1) reacciona en una reacción de desplazamiento o una reacción de acoplamiento cruzado mediada por un metal (Buchwald) con un alcohol o una amina (B) para proporcionar el intermedio de tipo piridazina (2). La reacción de acoplamiento cruzado mediada por un metal de transición, tal como una reacción de Suzuki, entre el compuesto de tipo haluro (2) y un compuesto de tipo arilo o heteroarilo sustituido A , tal como el ácido de un boronato o un éster de tipo boronato, proporciona el compuesto (3) de Fórmula (I) de la invención.
De manera complementaria, los compuestos de Fórmula (I) se pueden sintetizar siguiendo el procedimiento general descrito en el Esquema 2.
Esquema general 2
acopiam iento cruzado Buchwald o
Figure imgf000026_0001
Formula I
Los materiales de partida para el esquema de reacción anterior se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden preparar de acuerdo con métodos conocidos por un experto en la técnica o mediante métodos divulgados en la presente. En general, los compuestos de la invención se preparan en el Esquema 2 de reacción anterior como se indica a continuación:
La dihalopiridazina (1) reacciona en una reacción de acoplamiento cruzado mediada por un metal de transición, tal como una reacción de Suzuki, con un compuesto de tipo arilo o heteroarilo sustituido A , tal como un ácido o éster de boronato, para proporcionar el intermedio de tipo piridazina (4). El intermedio de tipo piridazina (4) reacciona mediante una reacción de desplazamiento con un alcohol o una amina (B) para proporcionar la piridazina (3) de Fórmula (I) de la invención.
Los compuestos de Fórmula (I) también se pueden preparar siguiendo el procedimiento general descrito en el Esquema 3.
Esquema general 3
acoplamiento cruzado acoplamiento cruzado
Figure imgf000026_0002
ormu a
Los materiales de partida para el esquema de reacción anterior se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden preparar de acuerdo con métodos conocidos por un experto en la técnica o mediante métodos divulgados en la presente. En general, los compuestos de la invención se preparan en el Esquema 3 de reacción anterior como se indica a continuación:
La dihalopiridazina (1) reacciona en una reacción de acoplamiento cruzado mediada por un metal de transición, tal como una reacción de Suzuki, con un compuesto de tipo arilo o heteroarilo sustituido A , tal como un ácido o éster de boronato, para proporcionar el intermedio de tipo piridazina (4). El intermedio de tipo piridazina (4) reacciona mediante un segundo acoplamiento cruzado mediado por un metal, tal como una reacción de Suzuki, para proporcionar la piridazina (3) de Fórmula (I) de la invención.
Los Esquemas generales 1, 2 y 3 se pueden llevar a cabo para varios grupos aromáticos A tales como fenoles, naftilos y heteroarilos sustituidos y similares, y para varios grupos de tipo amino o alcohol B tales como aminopiperidinas, piperazinas, homopiperazinas, 4-hidroxipiperidinas sustituidas y similares, para proporcionar los compuestos de Fórmula (I) de la invención. Pueden ser necesarias estrategias rutinarias de grupos protectores para conseguir los compuestos finales de Fórmula (I).
Todos los materiales de partida, bloques estructurales, reactivos, ácidos, bases, agentes deshidratantes, disolventes, catalizadores y atrapadores utilizados para sintetizar los compuestos de la presente invención se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por un experto en la técnica. Además, los compuestos de la presente invención se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por un experto en la técnica tal como se muestra en los siguientes ejemplos.
Los siguientes ejemplos están destinados a ilustrar la invención. Las temperaturas se indican en grados centígrados. Si no se menciona lo contrario, todas las evaporaciones se realizan a presión reducida, preferentemente entre aproximadamente 15 mm de Hg y 100 mm de Hg (= 20-133 mbar). La estructura de los productos finales, intermedios y materiales de partida se confirma mediante métodos analíticos estándar, por ejemplo, microanálisis y características espectroscópicas, por ejemplo, LCMS, RMN, CHN. Las abreviaturas utilizadas son las convencionales en la técnica y se proporciona una lista de ellas al final de la sección experimental.
PREPARACIÓN 1
Intermedio 1: Síntesis de 6-cloro-N-met¡l-N-(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na:
Figure imgf000027_0001
Una soluc¡ón de 3,6-d¡clorop¡r¡daz¡na (4.00 g. 26.8 mmol) y N,2,2,6,6-pentamet¡lp¡per¡d¡n-4-am¡na (7.32 g. 43.0 mmol) en butan-1-ol (67 mL) se calentó a 120 °C durante 72 h. Se el¡m¡nó el d¡solvente med¡ante evaporac¡ón rotator¡a y el res¡duo se repart¡ó entre agua y DCM. a cont¡nuac¡ón la fase acuosa se extrajo ad¡c¡onalmente con DCM. Las fases orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con agua. salmuera. se secaron con MgSO4 y se concentraron al vacío. El mater¡al crudo de color negro se ag¡tó en una pequeña cant¡dad de EtOAc durante toda la noche y el sól¡do blanquec¡no resultante se recolectó para proporc¡onar 6-cloro-N-met¡l-N-(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na. Intermedio 1 (4.18 g). MS (M+1) = 283.5. 1H RMN (400 MHz. METANOL-d4) 57.40 (d. J=9.60 Hz. 1H). 7.14 (d. J=9.60 Hz. 1H). 4.96-5.13 (m. 1H). 2.93 (s.
3H). 1.59-1.68 (m. 2H). 1.51 (t. J=12.38 Hz. 2H). 1.20 (s. 6H). 1.33 (s. 6H).
PREPARACIÓN 2
Intermed¡o 2: Síntes¡s de 6-cloro-N-(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na
Figure imgf000027_0002
Una mezcla de 3.6-d¡clorop¡r¡daz¡na (6.26 g. 42.0 mmol) y 2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-am¡na (14.7 mL. 84 mmol) se ag¡tó a 120 °C durante 1 h. s¡n d¡solvente. Se añad¡ó butan-1-ol (40 mL) a esta mezcla y la reacc¡ón se ag¡tó a 120 °C durante 1 h. La mezcla se enfr¡ó hasta temperatura amb¡ente y se repart¡ó entre agua y DCM. La fase orgán¡ca se secó con MgSO4. se f¡ltró y se concentró. El mater¡al crudo se recr¡stal¡zó en aceton¡tr¡lo para proporc¡onar 6-cloro-N-(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na. Intermedio 2 (7.3 g) como un sól¡do blanquec¡no. MS (M+1) = 269.2. 1H RMN (400 MHz. CLOROFORMO-d) 57.08 (d. J=9.3 Hz. 1H). 6.54 (d. J=9.3 Hz. 1H). 4.53 (d. J=7.6 Hz. 1H). 4.05-4.26 (m. 1H).
1.98 (dd. J=12.6. 3.8 Hz. 2H). 1.22 (s. 6H). 1.08 (s. 6H). 0.93 (t aparente. J=12.1 Hz. 2H).
PREPARACIÓN 3
Intermed¡o 3: Síntes¡s de 3-cloro-6-(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡lox¡)p¡r¡daz¡na
Figure imgf000027_0003
A una soluc¡ón de 2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-ol (106 mg. 0.67 mmol) en DMF (6.7 mL). se añad¡ó NaH (al 60 % p. 35 mg. 0.87 mmol). La soluc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 30 m¡n. a cont¡nuac¡ón se añad¡ó 3.6-d¡clorop¡r¡daz¡na (100 mg. 0.67 mmol) y la reacc¡ón se ag¡tó durante 1 h. La mezcla de reacc¡ón cruda se d¡luyó con EtOAc. La fase orgán¡ca se lavó con agua (5x). salmuera. se secó con Na2SO4. se f¡ltró y se concentró a pres¡ón reduc¡da para proporc¡onar 3-cloro-6-(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡lox¡)p¡r¡daz¡na. Intermedio 3 (135 mg). MS (M+1) = 270.2. 1H Rm N (400 MHz. CLOROFORMO-d) 57.53 (s. 1H). 7.37 (d. J=9.1 Hz. 1H). 6.91 (d. J=9.1 Hz. 1H). 5.68-5.78 (m. 1H). 2.20 (dd. J=12.4. 4.0 Hz. 2H). 1.32 (s. 6H). 1.27-1.29 (m. 2H). 1.20 (s. 6H).
PREPARACIÓN 4
Intermed¡o 4: Síntes¡s de 6-cloro-N-met¡l-N-(1.2.2.6.6-pentamet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na
Figure imgf000028_0001
A una suspensión de 6-doro-N-(1,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina, Intermedio 2 (4,0 g, 14,1 mmol) en DMF (140 mL) enfriada hasta 0 °C, se añadió NaH (al 60 % p, 735 mg, 18,39 mmol) en porciones. La mezcla de reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 60 min. Después de 60 minutos, se añadió yoduro de metilo (0,88 mL, 14,1 mmol) y la reacción se agitó durante 3 h adicionales, a continuación se desactivó lentamente con agua a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con EtOAc. La fase orgánica se lavó con agua (5x), salmuera, se secó con MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida para proporcionar 6-cloro-N-metil-N-(1,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina, Intermedio 4 (3,98 g). MS (M+1) = 297,0. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 67,10 (d, J=9,6 Hz, 1H), 6,69 (d, J=9,6 Hz, 1H), 4,79-5,00 (m, 1H), 2,86 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,61-1,73 (m, 2H), 1,48-1,57 (m, 2H), 1,14 (s, 6H), 1,10 (s, 6H).
PREPARACIÓN 5
Intermedio 5: Síntesis de (3aR,6aS)-2-(6-cloropiridazin-3-il)-5-metiloctahidropirrolo[3,4-c]pirrol
Figure imgf000028_0002
A una solución de 3,6-dicloropiridazina (0,596 g, 4,00 mmol) en butan-1-ol (10 mL), se añadió DIPEA (1,40 mL, 8,00 mmol) y 2-metiloctah¡dropirrolo[3,4-c]p¡rrol (0,505 g, 4,00 mmol). La solución se calentó a 120 °C durante toda la noche. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-25 % de amoniaco 2 N en MeOH, en DCM) para proporcionar (3aR,6aS)-2-(6-cloropiridazin-3-il)-5-metiloctahidropirrolo[3,4-c]pirrol, Intermedio 5 (0,67 g), como un sólido blanquecino. MS (M 1) = 239,1.1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 67,47 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,11 (d, J=9,6 Hz, 1H), 3,58-3,70 (m, 4H), 3,47 (dd, J=10,9, 7,3 Hz, 2H), 3.3 (2H, parcialmente ocultos bajo el pico de disolvente residual de metanol), 3,15 (d, J= 11,1 Hz, 2H), 2,80 (s, 3H).
PREPARACIÓN 6
Intermedio 6: Síntesis de ácido (7-metox¡quinol¡n-6-¡l)borón¡co
Figure imgf000028_0003
Paso 1: 6-Bromo-7-metoxiquinolina
En un matraz de fondo redondo de 100 mL, una solución de ácido sulfúrico (7,1 mL, 130 mmol) en agua (6,5 mL) se trató con ácido 3-nitrobencenosulfónico (7,07 g, 34,8 mmol) y glicerol (8,7 mL, 120 mmol) para obtener una suspensión espesa de color gris. La suspensión se calentó hasta 110 °C y se añadió 4-bromo-3-metoxianilina (6,7 g, 33 mmol), lo cual dio como resultado una suspensión. Se añadieron cantidades adicionales de agua (6 mL), glicerol (6 mL) y ácido sulfúrico (6 mL), y la temperatura se incrementó hasta 140 °C. Después de aproximadamente 3 h, la mezcla se convirtió en una solución homogénea de color marrón oscuro. La solución se enfrió hasta temperatura ambiente, se vertió sobre hielo y se ajustó el pH hasta 8 mediante la adición de hidróxido de amonio concentrado. La mezcla se extrajo con EtOAc/éter dietílico 1:1 (5x), se secó con Mg2SO4 y se concentró para obtener un líquido marrón. La cromatografía en gel de sílice (0-20 % de EtOAc en DCM) proporcionó el compuesto del título, el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía en gel de sílice (0-20 % de MeOH en DCM) para proporcionar 6-bromo-7-metoxiquinolina (3,94 g) como un sólido blanquecino. MS (M+1) = 240,1. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 68,86 (dd, J=4,0, 1,5 Hz, 1H), 8,01-8,12 (m, 2H), 7,53 (s, 1H), 7,34 (dd, J=8,1, 4,5 Hz, 1H), 4,07 (s, 3H).
Paso 2: Ácido (7-metoxiquinolin-6-il)borónico
Se añadió butillitio (1,6 M en heptano, 4,90 mL, 7,90 mmol) gota a gota a una solución de 6-bromo-7-metoxiquinolina (1,71 g, 7,18 mmol) enfriada hasta -78 °C. La solución se agitó durante 0,5 h, una vez transcurrido este tiempo se añadió borato de trimetilo (2,0 mL, 18 mmol) en una única porción. Se permitió que la reacción se calentara hasta temperatura ambiente y se agitó durante toda la noche. La reacción cruda se concentró a sequedad y a continuación se concentró en heptano (2x). Los sólidos resultantes se hicieron pasar a través de un lecho de gel de sílice (80 mL, medición en seco) eluyendo con DCM/MeOH 9:1 para proporcionar el ácido (7-metoxiquinolin-6-il)borónico, Intermedio 6 , como un sólido naranja (778 mg). MS (M+1) = 204,1
PREPARACIÓN 7
Intermedio 7: Síntesis de ácido (6-metox¡¡soquinol¡n-7-¡l)borón¡co
Figure imgf000029_0001
Paso 1. 7-Bromo-6-metoxiisoquinolina
La 7-bromo-6-metoxiisoquinolina se preparó como se describe en el documento W02007000240. MS (M+1) = 240,3. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 69,08 (s, 1H), 8,49 (d, J=5,8 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,56 (d, J=5,8 Hz, 1H), 7,11 (s, 1H), 4,05 (s, 3H).
Paso 2. Ácido (6-metoxiisoquinolin-7-il)borónico
En un matraz de fondo redondo de 50 mL, se añadieron 7-bromo-6-metoxiisoquinolina (300 mg, 1,26 mmol), bis(pinacolato)diboro (640 mg, 2,52 mmol), acetato de potasio (742 mg, 7,56 mmol) y PdCb(dppf).CH2Cb (103 mg, 0,126 mmol). Se añadió 1,4-dioxano (0,2 M) y el matraz se sometió al vacío/purgó con N2 (3x). La mezcla de reacción se agitó a 100 °C durante 2 h. La reacción se completó después de 3 h, lo que se determinó mediante un análisis por LC/MS; solo se observó el ácido borónico (no se observó el éster de tipo boronato del pinacol). La mezcla se diluyó con EtOAc, se filtró a través de Celite® y se concentró para proporcionar el ácido (6-metoxiisoquinolin-7-il)borónico, Intermedio 7, el cual se utilizó sin purificación adicional. MS (M+1) = 204,4
PREPARACIÓN 8
Intermedio 8: Síntesis de ácido (7-metox¡¡soquinol¡n-6-¡l)borón¡co
Figure imgf000029_0002
Paso 1: (E)-N-(4-Bromo-3-metoxibenciliden)-2,2-dimetoxietanamina
En un matraz de fondo redondo de 100 mL dotado de una trampa de Dean-Stark y un condensador de reflujo, se calentaron a reflujo 4-bromo-3-metoxibenzaldehído (3,65 g, 17,0 mmol) y 2,2-dimetoxietanamina (1,32 mL, 18,6 mmol) en benceno (37 mL) durante toda la noche. La mezcla se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título como un aceite de color ámbar (3,65 g). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 8,20-8,26 (m, 1H), 7,58 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,40 (d, J=1,5 Hz, 1H), 7,10 (dd, J=1,76, 8,0 Hz, 1H), 4,69 (t, J=5,4 Hz, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,78 (dd, J=1,3, 5,3 Hz, 2H), 3,43 (s, 6H).
Paso 2: 6-Bromo-7-metoxiisoquinolina
En un matraz de fondo redondo de 100 mL, se introdujeron (E)-N-(4-bromo-3-metoxibenciliden)-2,2-dimetoxietanamina (3,65 g, 12,1 mmol) y THF (24 mL) para obtener una solución de color tostado. En atmósfera de N2, la mezcla se enfrió hasta 0 °C y se añadió cloroformiato de etilo (1,16 mL, 12,1 mmol) gota a gota. Después de 5 min, se añadió fosfito de trietilo (2,54 mL, 14,5 mmol) gota a gota y se permitió que la mezcla se calentara hasta temperatura ambiente y se agitó durante toda la noche. El análisis por LC/Ms indicó que el material de partida se había consumido y la mezcla se concentró al vacío. Se añadió tolueno y se eliminó al vacío (2x). El residuo crudo se disolvió en cloroformo (39 mL) y se añadió TiCU (5,17 mL, 46,8 mmol) para obtener una solución marrón. La solución se calentó a reflujo durante dos días en atmósfera de N2. La formación del producto se confirmó mediante un análisis por LC/MS y la solución se enfrió hasta temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió sobre un baño de agua/hielo (300 mL) y se agitó durante varias horas. El pH se ajustó hasta un pH neutro con hidróxido de amonio acuoso, tras lo cual se formó un precipitado marronoso. Se añadió EtOAc (200 mL) y la mezcla se agitó durante 1 h, a continuación se filtró a través de Celite® para eliminar el material insoluble. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2x 200 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío para proporcionar el producto crudo. La cromatografía en gel de sílice (columna de 80 g, 30-80 % de EtOAc/heptano) proporcionó el compuesto del título (1,64 g). MS (M+1) = 238,3. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 59,16 (s, 1H), 8,45 (d, J=5,8 Hz, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,52 (d, J=5,5 Hz, 1H), 7,25 (s, 1H), 4,05 (s, 3H).
Paso 3: Ácido (7-metoxiisoquinolin-6-il)borónico
En un matraz de fondo redondo de 50 mL, se añadieron 6-bromo-7-metoxiisoquinolina (400 mg, 1,68 mmol), bis(pinacolato)diboro (853 mg, 3,36 mmol), acetato de potasio (989 mg, 10,1 mmol), pdCh(dppf).CH2Cl2 (137 mg, 0,168 mmol) y 1,4-dioxano (10 mL). El matraz se sometió al vacío/purgó con N2 (3x), a continuación se agitó a 100 °C durante 2 h. La mezcla se diluyó con EtOAc y se filtró a través de Celite® para proporcionar el ácido (7-metoxiisoquinolin-6-il)borónico, Intermedio 8, el cual se utilizó sin purificación adicional. MS (M+1) = 204,4
PREPARACIÓN 9
Intermedio 9: Síntesis de 6-(7-metox¡qu¡nol¡n-6-¡l)-N-met¡l-N-(2.2.6.6-tetrametilp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na
Figure imgf000030_0001
Se acopló 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)pyridazin-3-amina (Intermedio 1, 0,660 g, 2,334 mmol) con el ácido (7-metoxiquinolin-6-il)borónico (Intermedio 6 , 0,771 g, 3,27 mmol), utilizando el MÉTODO GENERAL 1-2 para el acoplamiento de Suzuki. La mezcla se diluyó con agua, se extrajo con DCM (5x) y se concentró. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 4-1 para proporcionar 6-(7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina, Intermedio 9 (0.857 g), como un sólido amarillo. MS (M+1) = 406,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,80 (dd, J=4,3, 1,8 Hz, 1H), 8,37 (d, J=7,1 Hz, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,84 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,44 (dd, J=8,1,4,5 Hz, 1H), 7,15 (d, J=10,1 Hz, 1H), 5,25 (t, J=12,4 Hz, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 1,66-1,74 (m, 2H), 1,51-1,63 (m, 2H), 1,37 (s, 6H), 1,23 (s, 6H).
PREPARACIÓN 10
Intermedio 10: Síntesis de (2-amino-4-bromo-5-metox¡fen¡l)metanol
Figure imgf000030_0002
Paso 1: Ácido 4-bromo-5-fluoro-2-nitrobenzoico
De acuerdo con el procedimiento de Beaulieu, P. et al., documento WO 2010037210, una mezcla de ácido 4-bromo-3-fluorobenzoico (10,0 g, 45,7 mmol) y ácido sulfúrico concentrado (75 mL) se agitó hasta que se formó una solución homogénea (~15 min). Se añadió nitrato de potasio (4,85 g, 47,9 mmol) en porciones en 5 min y se permitió que la mezcla de reacción se agitara durante toda la noche. La mezcla se vertió sobre 500 mL de hielo picado. Una vez que se derritió el hielo, la mezcla se extrajo con acetato de etilo/éter dietílico 1:1 (3x). Los extractos se lavaron con salmuera, se secaron con MgSO4 y se concentraron para proporcionar el ácido 4-bromo-5-fluoro-2-nitrobenzoico como un sólido de color amarillo claro (12,14 g). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8,18 (d, Jh-f =5,6 Hz, 1H), 7,61 (d, Jh-f =7,6 Hz, 1H).
Paso 2: 4-Bromo-5-fluoro-2-nitrobenzoato de metilo
Se añadió cloruro de oxalilo (4,18 mL, 47,7 mmol) gota a gota a una suspensión de ácido 4-bromo-5-fluoro-2-nitrobenzoico (11,46 g, 43,4 mmol) en DCM (175 mL) y DMF catalítica (100 uL). Después de 3 h, se eliminaron los componentes volátiles mediante evaporación rotatoria. El residuo remanente se disolvió en DCM (25 mL) y se añadió en porciones a metanol que se estaba agitando rápidamente (100 mL). Se eliminó de nuevo el disolvente y el residuo se concentró en tolueno (2x) para proporcionar 4-bromo-5-fluoro-2-nitrobenzoato de metilo como un líquido amarillo (12,07 g), con el cual se prosiguió sin purificación. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,39 (d, Jh-f =5,6 Hz, 1H), 7,71 (d, Jh-f =8,1 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H).
Paso 3: 4-Bromo-5-metoxi-2-nitrobenzoato de metilo
Se añadió metóxido de sodio (solución al 25 % p en metanol, 10,9 mL, 47,7 mmol) a una solución de 4-bromo-5-fluoro-2-nitrobenzoato de metilo (12,07 g, 43,4 mmol) en metanol (125 mL) y se permitió que la solución se agitara durante toda la noche, durante este tiempo se formó un precipitado espeso. La mezcla se diluyó con agua (400 mL) y los sólidos se aislaron mediante filtración y se lavaron con agua. Los sólidos se disolvieron en acetato de etilo y la solución se lavó con NaHCO3 saturado, salmuera, se secó con MgSO4 y se concentró para proporcionar 4-bromo-5-metoxi-2-nitrobenzoato de metilo (10,55 g) como un sólido blanquecino. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,27 (s, 1H), 7,07 (s, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,95 (s, 3H).
Paso 4: 2-Amino-4-bromo-5-metoxibenzoato de metilo
Se añadió zinc en polvo (6,24 g, 95,4 mmol) en porciones en 30 min (¡precaución! se puede producir una reacción exotérmica) a una solución de 4-bromo-5-metoxi-2-nitrobenzoato de metilo (3,076 g, 10,60 mmol) en DCM/AcOH 3:1 (55 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante tres días. La mezcla se filtró a través de Celite®, lavando el lecho de filtración con EtOAc, y se concentró. El producto crudo se disolvió de nuevo en EtOAc, se lavó con NaHCO3 saturado, salmuera, se secó con MgSO4 y se concentró para obtener un aceite amarillo. La concentración del aceite en tolueno (2x) proporcionó 2-amino-4-bromo-5-metoxibenzoato de metilo como un sólido amarillo (2,737 g). MS (M+1) = 262,1. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,37 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,85 (s, 3H).
Paso 5: (2-Amino-4-bromo-5-metoxifenil)metanol
A una solución de hidruro de aluminio y litio (1,0 M en THF, 11,5 mL, 11,5 mmol) en THF (52 mL) enfriada hasta -78 °C, se añadió 2-amino-4-bromo-5-metoxibenzoato (2,724 g, 10,47 mmol) como una solución en THF (30 mL) gota a gota con una jeringa en 10 min. Se permitió que el baño de refrigeración se calentara hasta temperatura ambiente durante 2 h. La reacción se desactivó mediante la adición lenta de acetato de etilo. La solución se diluyó adicionalmente con acetato de etilo (100 mL) y se agitó rápidamente durante dos días con una solución saturada de sal de Rochelle (tartrato de sodio y potasio). Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3x) y éter. Las fases orgánicas combinadas se secaron con MgSO4 y se concentraron para proporcionar (2-amino-4-bromo-5-metoxifenil)metanol, Intermedio 10 (2,358 g), como un sólido naranja, el cual se utilizó sin purificación adicional. MS (M+1) = 232,1. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 56,97 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 4,53 (s, 2H), 3,78 (s, 3H).
PREPARACIÓN 11
Intermedio 11: Síntesis de 4-cloro-2-met¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡ridaz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
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Paso 1: (Z)-3-((4-Bromo-3-metoxifenil)amino)but-2-enoato de etilo
A una mezcla de 4-bromo-3-metoxianilina (5,00 g, 24,8 mmol) y acetoacetato de etilo (3,1 mL, 25 mmol), se añadieron 3 gotas (~ 0,1 mL) de HCl 1 M. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche, a continuación se diluyó con DCM, se neutralizó con NaHCO3 acuoso y se extrajo con DCM. Los extractos se secaron con Na2SO4 y se concentraron. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (0-20 % de EtOAc en heptano) para proporcionar (Z)-3-((4-bromo-3-metoxifenil)amino)but-2-enoato de etilo como un sólido blanco (4,05 g). MS (M+1) = 315,9. 1H RMN (CLOROFORMO-d) 5: 10,41 (s a, 1H), 7,46 (d, J=8,6 Hz, 1H), 6,61 (s, 1H), 6,56-6,60 (m, 1H), 4,73 (s a, 1H), 4,16 (c, J=7,1 Hz, 2H), 3,88 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,30 (t, J=7,1 Hz, 3H).
Paso 2: 6-Bromo-7-metoxi-2-metilquinolin-4(1H)-ona
Una mezcla de (Z)-3-((4-bromo-3-metoxifenil)amino)but-2-enoato de etilo (4,0 g, 12 mmol) en éter difenílico (12 mL) se calentó a 190 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción de color marrón se enfrió hasta temperatura ambiente y se diluyó con éter dietílico. El sólido se filtró, se lavó con éter y se secó en un horno de vacío a 50 °C durante toda la noche para proporcionar 6-bromo-7-metoxi-2-metilquinolin-4(1H)-ona como un sólido de color marrón claro (2,64 g). MS (M+1) = 270,1. 1H RMN (DMSO-d6) 5: 11,54 (s a, 1H), 8,11 (s, 1H), 6,99 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 3,93 (s, 3H), 2,30 (s, 3H).
Paso 3: Ácido (7-metoxi-2-metil-4-oxo-1,4-dihidroquinolin-6-il)borónico y 7-metoxi-2-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinolin-4(1H)-ona
A una mezcla de 6-bromo-7-metoxi-2-metilquinolin-4(1H)-ona (1,00 g, 3,73 mmol), bis(pinacolato)diboro (2,84 g, 11,2 mmol), dppf (207 mg, 0,37 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 (304 mg, 0,37 mmol) y KoAc (2,2o g, 22,4 mmol), se añadieron 1,4-dioxano (15 mL) y DMF (3,0 mL). La mezcla de reacción se sometió al vacío y se rellenó de nuevo con nitrógeno (4x), a continuación se calentó a 90 °C durante toda la noche. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, a continuación se filtró a través de Celite® lavando con EtOAc y a continuación con MeOH al 10 % en DCM, y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo. Se obtuvo una mezcla de ácido (7-metoxi-2-metil-4-oxo-1,4-dihidroquinolin-6-il)borónico (262 mg) y 7-metoxi-2-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinolin-4(1H)-ona (269 mg) como un sólido de color marrón claro después de una cromatografía en gel de sílice (0-15 % de MeOH en DCM). Ácido (7-metoxi-2-metil-4-oxo-1,4-dihidroquinolin-6-il)borónico: MS (M+1) = 234,1. 1H RMN (DMSO-d6) 811,39 (s a, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,72 (s, 2H), 6,76-6,88 (m, 1H), 5,76 (s, 1H), 3,86 (s, 3H), 2,29 (s, 3H). 7-Metoxi-2-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinolin-4(1H)-ona: MS (M+1) = 316,0. 1H RMN (CLOROFORMO-d) 812,03 (s a, 1H), 8,68 (s, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,10 (s, 1H), 3,73 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 1,28 (s, 12H).
Paso 4: 7-Metoxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona
En un vial para microondas, se añadieron el ácido (7-metoxi-2-metil-4-oxo-1,4-dihidroquinolin-6-il)borónico (396 mg, 1,69 mmol), 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina, (Intermedio 1, 400 mg, 1,41 mmol), Pd(PPh3)4 (123 mg, 0,11 mmol) y Na2CO3 (375 mg, 3,54 mmol), seguidos de la adición de 1,4-dioxano/agua 4:1 (7,5 mL). La mezcla de reacción se cerró herméticamente, a continuación se sometió al vacío y se rellenó de nuevo con nitrógeno (4x), y se calentó con irradiación de microondas a 110 °C durante 1 hora. La mezcla se filtró a través de Celite® lavando con EtOAc. El filtrado resultante se concentró y se acidificó hasta un pH de 3 con HCl 4 M en 1,4-dioxano. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) seguida de cromatografía en gel de sílice (0-30 % de MeOH en DCM) proporcionó 7-metoxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona (475 mg) como un sólido de color morado oscuro. MS (M+1) = 436,1. 1H RMN (METANOL-d4) 88,37 (s, 1H), 7,70 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,12 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,13 (s, 1H), 5,21 (t, J=12,1 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,00 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 1,65-1,73 (m, 2H), 1,51­ 1,61 (m, 2H), 1,37 (s, 6H), 1,22 (s, 6H).
Paso 5: 6-(4-Cloro-7-metoxi-2-metilquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Una mezcla de 7-metoxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona (495 mg, 1,14 mmol) y oxicloruro de fósforo (2,5 mL, 27 mmol) se cerró herméticamente y se calentó con irradiación de microondas a 110 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se vertió sobre 50 mL de hielo picado y a continuación se basificó mediante una adición lenta de K2CO3 sólido. La mezcla se extrajo con DCM (3x). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na2SO4 y se concentraron para proporcionar el producto crudo. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 5 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico) proporcionó 6-(4-cloro-7-metoxi-2-metilquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina como un sólido amarillo (350 mg). MS (M+1) = 454,0. 1H RMN (METANOL-d4) 88,60 (s, 1H), 8,12 (d, J=10,1 Hz, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,53 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,36 (t, J=12,1 Hz, 1H), 4,12 (s, 3H), 3,12(s, 3H), 2,85 (s, 3H), 1,95-2,14 (m, 4H), 1,66 (s, 6H), 1,57 (s, 6H).
Paso 6: 4-Cloro-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol
Se sometió 6-(4-cloro-7-metoxi-2-metilquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (195 mg, 0,43 mmol) a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-3 utilizando tribromuro de boro (solución 1 M en DCM, 2,49 mL, 2,49 mmol). La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3­ 1, cartucho de 2 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico) proporcionó 4-cloro-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol, Intermedio 11, como un sólido de color naranja claro (172 mg, 93 % de pureza), el cual se utilizó en reacciones posteriores sin purificación adicional. LC/MS tR = 0,50 min. MS (M+1) = 440,2. 1H RMN (METANOL-d4) 88,54 (s, 1H), 8,26 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,34 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,23 (t, J=12,0 Hz, 1H), 3,04 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 1,71-1,80 (m, 2H), 1,59-1,71 (m, 2H), 1,44 (s, 6H), 1,29 (s, 6H).
PREPARACIÓN 12
Intermedio 12: Síntesis de 4-cloro-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡ridaz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000032_0001
Paso 1: 5-(((4-Bromo-3-metoxifenil)amino)metilen)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-4,6-diona
A una mezcla de 4-bromo-3-metoxianilina (5,10 g, 25,2 mmol) y 2,2-dimetil-1,3-dioxan-4,6-diona (ácido de Meldrum, 4,37 g, 30,3 mmol) en EtOH (30 mL), se añadió ortoformiato de trietilo (5,0 mL, 30 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante toda la noche. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y el sólido se filtró, se lavó con EtOAc y se secó para proporcionar 5-(((4-bromo-3-metoxifenil)amino)metilen)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-4,6-diona como un sólido amarillo (2,93 g). MS (M-1) = 355,8. 1H RMN (CLOROFORMO-d) 5 11,25 (d, J=14,1 Hz, 1H), 8,62 (d, J=14,1 Hz, 1H), 7,59 (d, J=8,1 Hz, 1H), 6,72-6,78 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 1,77 (s, 6H).
Paso 2: 6-Bromo-7-metoxiquinolin-4(1H)-ona
Una mezcla de 5-(((4-bromo-3-metoxifenil)amino)metilen)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-4,6-diona (2,60 g, 7,30 mmol) en éter difenílico (15 mL) se calentó a 185 °C durante 40 minutos. La mezcla de color marrón se enfrió hasta temperatura ambiente se diluyó con éter dietílico. El sólido se filtró, se lavó con éter dietílico y se secó en un horno de vacío a 50 °C durante toda la noche para proporcionar 6-bromo-7-metoxiquinolin-4(1H)-ona como un sólido de color marrón claro (1,56 g). MS (M+1) = 256,1. 1H RMN (DMSO-d6) 511,67 (s a, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,86 (dd, J=7,6, 5,6 Hz, 1H), 7,05 (s, 1H), 5,99 (d, J=7,6 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H).
Paso 3: 7-Metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinolin-4(1 H)-ona
y ácido (7-metoxi-4-oxo-1,4-dihidroquinolin-6-il)borónico
A una mezcla de 6-bromo-7-metoxiquinolin-4(1H)-ona (0,92 g, 2,72 mmol), dppf (151 mg, 0,272 mmol), PdCh(dppf).CH2Cl2 (222 mg, 0,272 mmol) y KOAc (1,33 g, 13,6 mmol), se añadieron 1,4-dioxano (7 mL) y DMF (0,7 mL). La mezcla de reacción se sometió al vacío y se rellenó de nuevo con nitrógeno (4x), a continuación se calentó a 80 °C durante 0,5 horas. A continuación, se añadió bis(pinacolato)diboro (1,72 g, 6,79 mmol) y la mezcla se calentó a 90 °C durante toda la noche. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró a través de Celite®, se lavó con MeOH/DCM 9:1 y a continuación con MeOH/DCM 1:1. Los filtrados se concentraron al vacío. Después de una cromatografía en gel de sílice (0-30 % de MeOH en DCM), se obtuvieron 7-metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinolin-4(1H)-ona (380 mg) y ácido (7-metoxi-4-oxo-1,4-dihidroquinolin-6-il)borónico (270 mg, ~ 50 % de pureza). MS (M+1) = 302,0 y 220,2, respectivamente.
Paso 4: 7-Metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona
En un recipiente para microondas, se combinaron 7-metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinolin-4(1H)-ona (380 mg, 1,69 mmol), 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina, (Intermedio 1, 250 mg, 0,88 mmol), Pd(PPh3)4 (51 mg, 0,044 mmol), Na2CO3 acuoso (2,5 M,1,1 mL, 2,2 mmol) y 1,4-dioxano (4 mL). El recipiente se sometió al vacío y se rellenó de nuevo con nitrógeno (4x), y se calentó con irradiación de microondas a 110 °C durante 1,5 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se diluyó con MeOH (3 mL), se filtró a través de Celite® y se lavó con MeOH/DCM 9:1 y a continuación con MeOH/DCM 1:1. El filtrado resultante se concentró y se acidificó hasta un pH de 3 con HCl 1 M en éter dietílico. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) seguida de cromatografía en gel de sílice (0-20 % de NH3 2 M/MeOH en DCM) proporcionó 7-metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona (370 mg) como un sólido de color marrón claro. MS (M+1) = 422,1. 1H RMN (METANOL-d4) 58,45 (s, 1H), 7,91 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,76 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,16 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,10 (s, 1H), 6,28 (d, J=7,1 Hz, 1H), 5,39 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 1,78-1,90 (m, 4H), 1,54 (s, 6H), 1,41 (s, 6H).
Paso 5: 6-(4-Cloro-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Una mezcla de 7-metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona (59 mg, 0,14 mmol), oxicloruro de fósforo (0,65 mL, 7,0 mmol) y acetonitrilo (0,60 mL) se cerró herméticamente y se calentó con irradiación de microondas a 100 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se vertió sobre hielo picado y se basificó mediante una adición lenta de K2CO3 sólido. La mezcla se extrajo con DCM (3x). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na2SO4 y se concentraron para proporcionar el producto crudo. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico) seguida de cromatografía en gel de sílice (0-20 % de MeOH en DCM) proporcionó 6-(4-cloro-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina como un sólido marrón (70 mg). MS (M+1) = 440,1
Paso 6: 4-Cloro-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol
Se sometió 6-(4-cloro-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (62 mg, 0,14 mmol) a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-3 utilizando tribromuro de boro (solución 1 M en d Cm , 0,70 mL, 0,70 mmol). La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico) seguida de cromatografía en gel de sílice (0-20 % de NH31,5 M/MeOH en DCM) proporcionó 4-cloro-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol, Intermedio 12, como un sólido blanco (21 mg). LC/MS tR = 0,50 min. MS (M+1) = 426,2. 1H RMN (METANOL-d4) 5 8,63 (d, J=5,1 Hz, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,28 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,46 (d, J=4,0 Hz, 1H), 7,34 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,22 (t, J=11,9 Hz, 1H), 3,06 (s, 3H), 1,69-1,79 (m, 2H), 1,57-1,68 (m, 2H), 1,43 (s, 6H), 1,27 (s, 6H).
PREPARACIÓN 13
Intermedio 13: Síntesis de 4-cloro-7-(6-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-6-ol
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Paso 1: 5-(((3-Cloro-4-metoxifenil)amino)metilen)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-4,6-diona
Se añad¡eron tr¡etox¡metano (11 mL, 64 mmol) y 2,2-d¡met¡l-1,3-d¡oxan-4,6-d¡ona (ác¡do de Meldrum, 10,7 g, 74,2 mmol) a 3-cloro-4-metox¡an¡l¡na (10,0 g, 63,5 mmol) en etanol (60 mL). La mezcla se ag¡tó a reflujo durante toda la noche. Se añad¡ó una porc¡ón ad¡c¡onal de tr¡etox¡metano (2,1 mL, 13 mmol) y 2,2-d¡met¡l-1,3-d¡oxan-4,6-d¡ona (2,74 g, 19,0 mmol) a la reacc¡ón y la mezcla se ag¡tó a reflujo durante 3 h. La mezcla se enfr¡ó hasta temperatura amb¡ente y el prec¡p¡tado se recolectó med¡ante f¡ltrac¡ón y se lavó con etanol para proporc¡onar 5-(((3-cloro-4-metox¡fen¡l)am¡no)met¡len)-2,2-d¡met¡l-1,3-d¡oxan-4,6-d¡ona como un sól¡do be¡ge (18,5 g). MS (M-1) = 310,2. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 811,20 (d, J=14,4 Hz, 1H), 8,47 (d, J=14,5 Hz, 1H), 7,79 (d, J=2,8 Hz, 1H), 7,54 (dd, J=8,9, 2,8 Hz, 1H), 7,19 (d, J=9,0 Hz, 1H), 3,87 (s, 3H), 1,67 (s, 6H).
Paso 2: 7-Cloro-6-metoxiquinolin-4(1H)-ona y 5-cloro-6-metoxiquinolin-4(1H)-ona
Se calentó 5-(((3-cloro-4-metox¡fen¡l)am¡no)met¡len)-2,2-d¡met¡l-1,3-d¡oxan-4,6-d¡ona (12,9 g, 41,4 mmol) en éter d¡feníl¡co (100 mL) a 190 °C durante 2 horas. La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó hasta temperatura amb¡ente y se d¡luyó con éter d¡etíl¡co (100 mL). El sól¡do se f¡ltró y se lavó con éter d¡etíl¡co para proporc¡onar una mezcla de 7-cloro-6-metox¡qu¡nol¡n-4(1H)-ona y 5-cloro-6-metox¡qu¡nol¡n-4(1H)-ona (7.54 g) con una relac¡ón de 4:1 (que se determ¡nó med¡ante 1H RMN). 7-Cloro-6-metox¡qu¡nol¡n-4(1H)-ona: MS (M+1) = 210,1. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 87,95 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 6,33 (d, J=7,3 Hz, 1H), 4,01 (s, 3H). 5-Cloro-6-metox¡qu¡nol¡n-4(1H)-ona: MS (M+1) = 210,1. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 87,81 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,57 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,52 (d, J=9,2 Hz, 1H), 6,22 (d, J= 7,2 Hz, 1H), 3,97 (s, 3H).
Paso 3: 6-Metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona
Una mezcla de 7-cloro-6-metox¡qu¡nol¡n-4(1H)-ona y 5-cloro-6-metox¡qu¡nol¡n-4(1H)-ona (1,42 g, 6,67 mmol), tetrah¡drox¡d¡boro (1,82 g, 20,3 mmol), precatal¡zador de XPhos de 2.a generac¡ón (0,27 g, 0,34 mmol), XPhos (0,32 g, 0,68 mmol) y acetato de potas¡o (1,99 g, 20,3 mmol) se ag¡taron en etanol (70 mL) a 80 °C durante 2 h. Se añad¡ó una soluc¡ón acuosa de K2CO3 (1,8 M, 15 mL, 27 mmol) a la reacc¡ón a temperatura amb¡ente segu¡da del Intermedio 1 (1,92 g, 6,77 mmol). La mezcla se ag¡tó a 80 °C durante toda la noche. La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó hasta temperatura amb¡ente, se f¡ltró y se concentró al vacío. El res¡duo se ac¡d¡f¡có hasta un pH de 1 ut¡l¡zando HCl 1 M (60 mL) y se f¡ltró. El f¡ltrado se lavó con DCM (2x) y a cont¡nuac¡ón se bas¡f¡có hasta un pH de 11 con una soluc¡ón saturada de K2CO3. La fase acuosa se extrajo con DCM/MeOH 9:1 (3x). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron con Na2SO4 anh¡dro, se f¡ltraron y se concentraron a pres¡ón reduc¡da. El mater¡al crudo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en gel de síl¡ce (grad¡ente de 2-15 % de amon¡aco 7 M en MeOH, en DCM) para proporc¡onar 6-metox¡-7-(6-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-4(1H)-ona (0,45 g) como un sól¡do marrón. MS (M+1) = 422,4. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 87,99 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,93 (d, J=9,7 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,16 (d, J=9,7 Hz, 1H), 6,38 (d, J=7,2 Hz, 1H), 5,21-5,33 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,03 (s, 3H), 1,72 (dd, J=12,7, 3,5 Hz, 2H), 1,60 (t, J=12,4 Hz, 2H), 1,40 (s, 6H), 1,25 (s, 6H).
Paso 4: 6-(4-Cloro-6-metoxiquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se calentó 6-metox¡-7-(6-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-4(1H)-ona (0,22 g, 0,52 mmol) en ox¡cloruro de fósforo (1,5 mL) con m¡croondas a 100 °C durante 2 h. La mezcla de reacc¡ón se vert¡ó sobre h¡elo p¡cado y se bas¡f¡có med¡ante una ad¡c¡ón lenta de una soluc¡ón saturada de K2CO3. La mezcla se extrajo con DCM (3x). Los extractos orgán¡cos comb¡nados se secaron con Na2SO4 y se concentraron a pres¡ón reduc¡da. El mater¡al crudo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en gel de síl¡ce (grad¡ente de 2-15 % de amon¡aco 7 M en MeOH, en DCM) para proporc¡onar 6-(4-cloro-6-metox¡qu¡nol¡n-7-¡l)-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na (0,20 g) como un sól¡do marrón. MS (M+1) = 440,5. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 88,66 (d, J=4,8 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H), 7,87 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,68 (d, J=4,9 Hz, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,16 (d, J=9,7 Hz, 1H), 5,26 (t, J=12,3 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H), 3,03 (s, 3H), 1,72 (dd, J=12,6, 3,6 Hz, 2H), 1,59 (t, J=12,4 Hz, 2H), 1,39 (s, 6H), 1,24 (s, 6H).
Paso 5: 4-Cloro-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol
Se añadió una solución de BBr3 en DCM (1 M, 0,7 mL, 0,7 mmol) a 6-(4-cloro-6-metoxiquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (0,10 g, 0,24 mmol) en DCM (2,2 mL) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió MeOH a la reacción y se concentró el disolvente a presión reducida. El material crudo se solubilizó con amoniaco 2 M en MeOH y DMSO y se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (de un 15 a un 45 % de acetonitrilo en agua, con modificador de hidróxido de amonio 5 mM) para proporcionar 4-cloro-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol (9 mg). LC/MS tR = 0,56 min. MS (M+1) = 426,3. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,60 (d, J=4,8 Hz, 1H), 8,47 (s, 1H), 8,33 (d, J=9,8 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,61 (d, J=4,8 Hz, 1H), 7,39 (d, J=9,9 Hz, 1H), 5,17-5,47 (m, 1H), 1,78 (dd, J=12,9, 3,7 Hz, 2H), 1,67 (t, J=12,4 Hz, 2H), 1,46 (s, 6H), 1,30 (s, 6H).
MÉTODOS GENERALES MÉTODO GENERAL 1-1
Procedimiento representativo para el acoplamiento de Suzuki
Una mezcla de un intermedio de tipo cloropiridazina, tal como el Intermedio 1 (1,0 equivalente), trifosfato de potasio (5,0 equivalentes) y precatalizador de XPhos de 2.a generación (0,07 equivalentes), en DMF (0,3 M) se desgasifica mediante una purga de vacío/N2 (3x) y se calienta a 50 °C. A continuación, se añade una solución de 50 o 100 mg/mL de ácido borónico, tal como el Intermedio 7 o el Intermedio 8 , en DMF en alícuotas de 1 mL cada 2-3 h hasta que se consume el Intermedio 1. La reacción se enfría hasta temperatura ambiente, se filtra a través de Celite® lavando con EtOAc y se concentra parcialmente. El producto crudo se purifica mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) y cromatografía en gel de sílice.
MÉTODO GENERAL 1-2
Procedimiento representativo para el acoplamiento de Suzuki
Una mezcla de un intermedio de tipo cloropiridazina, tal como el Intermedio 1 (1,0 equivalente), un reactivo de tipo ácido borónico (1,5-2 equivalentes) y Na2CO3 (3 equivalentes) en DME/agua 3:1 (0,12 M) en un vial para microondas se desgasifica con una corriente de nitrógeno anhidro. Se añade Pd(PPh3)4 (0,1 equivalentes) a la mezcla de reacción y el vial se cierra herméticamente y se calienta en un reactor de microondas Biotage® Initiator a 140 °C durante 30 min. La mezcla se diluye con agua y se extrae con DCM (4x). Los extractos orgánicos se secan con MgSO4, se filtran y se concentran para proporcionar el producto crudo. El producto crudo se purifica mediante cromatografía de sílice tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 4-1.
MÉTODO GENERAL 2-1
Procedimiento representativo para la desprotección de metoxi utilizando piridinaHCl
Se calientan el sustrato con metoxi (1 equivalente) y clorhidrato de piridina (20-30 equivalentes) a 160-190 °C durante 15­ 120 min en un reactor de microondas Biotage® Initiator. La mezcla de reacción se solubiliza con MeOH/DMSO y se purifica mediante HPLC preparativa de fase inversa (de un 15 a un 45 % de acetonitrilo en agua, con modificador de hidróxido de amonio 5 mM).
MÉTODO GENERAL 2-2
Procedimiento representativo para la desprotección de metoxi utilizando piridinaHCl
Se calientan el sustrato con metoxi (1 equivalente) y clorhidrato de piridina (20-25 equivalentes) a 160-190 °C durante 15­ 120 min en un reactor de microondas Biotage® Initiator. La mezcla de reacción se solubiliza con MeOH y la solución se añade a una mezcla de bicarbonato de sodio sólido (30 equivalentes) y gel de sílice (~ 6 g/mmol de sustrato con metoxi) y se concentra a sequedad. La cromatografía en columna tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 4-1 proporciona el producto.
MÉTODO GENERAL 2-3
Procedimiento representativo para la desprotección de metoxi utilizando tribromuro de boro (BBr3)
El sustrato con metoxi (1,0 equivalente) se disuelve en DCM (0,03 M) y la solución se enfría hasta 0 °C. Se añade tribromuro de boro (solución 1 M en DCM, 3-10 equivalentes) gota a gota. La mezcla de reacción cruda se agita a temperatura ambiente durante toda la noche. Si la reacción no se completa, se puede calentar a reflujo durante 4-24 h.
La mezcla de reacción se diluye con DCM y agua. La fase orgánica se diluye con EtOAc y se lava con NaHCO3 saturado (2x), agua y salmuera, y se seca con Na2SO4 o MgSO4. El producto crudo se purifica mediante HPLC preparativa de fase inversa, cromatografía en gel de sílice (MÉTODOS GENERALES 4-1) o mediante recristalización.
MÉTODO GENERAL 2-4
Procedimiento representativo para la desprotección de metoxi utilizando tiofenol
Se añaden tiofenol (5,0 equivalentes) y carbonato de potasio (1,0 equivalente) al sustrato con metoxi (1,0 equivalente) en NMP (0,2 M) y la reacción se calienta a 190 °C durante 15-30 min en un reactor de microondas Biotage® Initiator. La mezcla de reacción se purifica mediante adsorción y liberación tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 3-1 y el producto se purifica mediante HPLC preparativa de fase inversa o cromatografía en gel de sílice.
MÉTODO GENERAL 3-1
Procedimiento representativo para una purificación por adsorción y liberación (SCX) / formación de base libre
El producto crudo se disuelve en MeOH y se introduce en un cartucho de SiliaBond® con ácido propilsulfónico (Silicycle, Inc.) o un cartucho de SCX Bond Elut (Agilent Technologies, Inc.) acondicionado previamente con MeOH o acetonitrilo. El cartucho se lava con MeOH o acetonitrilo y el producto se libera mediante un elución con amoniaco 2-7 N en MeOH. La concentración del eluyente proporciona el producto purificado.
MÉTODO GENERAL 4-1
Procedimiento representativo para una purificación por cromatografía en gel de sílice
El producto crudo (ya sea sin disolvente, disuelto en DCM o añadido a un soporte sólido tal como gel de sílice o Celite®) se somete a una cromatografía en columna ultrarrápida de fase normal utilizando cartuchos de gel de sílice preempaquetados RediSep®Rf (Teledyne Isco, Inc.) con un gradiente de elución de 1-20 % de amoniaco en MeOH (concentración de 1,5 N o 3,5 N), en DCM.
MÉTODO GENERAL 5-1
Procedimiento representativo para una borilación catalizada por iridio
A una mezcla desgasificada del sustrato (1,0 equivalente), bis(pinacolato)diboro (1,50 equivalentes) y 4,4'-d¡-ferfbutilbipiridilo (0,1 equivalentes) en 1,4-dioxano (0,3 M), se añade [Ir(COD)(OMe)]2 (0,05 equivalentes). La mezcla se calienta a 85 °C durante toda la noche. La solución de ácido borónico resultante se puede utilizar directamente en la reacción posterior u opcionalmente el ácido borónico se aísla y se purifica. Normalmente, el éster de tipo boronato del pinacol no se observa como producto de la reacción.
MÉTODO GENERAL 6-1
Procedimiento representativo para la eliminación de metales
El paladio residual y otros contaminantes metálicos determinados se pueden eliminar de los productos de reacción mediante la disolución en un disolvente adecuado (por ejemplo, THF, DCM o acetonitrilo) y la agitación con una resina de dimercaptotriazina (DMT) SiliaMetS® (Silicycle, Inc.) durante 4-24 h utilizando 3-5 equivalentes respecto a la cantidad de catalizador de paladio (u otro metal) utilizada. La filtración y el lavado de la resina, seguidos de una concentración, proporcionan el producto purificado.
MÉTODO GENERAL 7-1
Procedimiento representativo para la formación de un éster de tipo boronato
Se añaden bis(pinacolato)diboro (2,0 equivalentes), KOAc (6,0 equivalentes) y PdCl2(dppf).CH2Cl2 (0,1 equivalentes) a un recipiente que contiene un bromuro de arilo (1,0 equivalente). Se añade d Ms O (0,2 M) y el recipiente de reacción se somete al vacío, a continuación se rellena con N2 (2x), y se calienta a 100 °C durante toda la noche. La mezcla de reacción se enfría hasta temperatura ambiente, a continuación se filtra a través de Celite® (embudo de filtración preempaquetado) utilizando EtOAc y se concentra al vacío para proporcionar el producto crudo, el cual se purifica mediante cromatografía en gel de sílice (EtOAc/heptano).
EJEMPLOS
Los siguientes compuestos se prepararon a partir de la cloropiridazina correspondiente al Intermedio 1, Intermedio 4 o Intermedio 5, y el ácido 7-metoxiquinolin-6-il)borónico (Intermedio 6), de acuerdo con el MÉTODO GENERAL 1-2, seguido de la desprotección de metoxi y purificación tal como se expone en el MÉTODO GENERAL 2-2. Se formó la sal de ti o clorhidrato mediante la disolución de la base libre en HCl acuoso 1 M 3 e uivalentes se uida de liofilización.
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Ejemplo 2-1: Síntesis de 2-met¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡ridaz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000037_0001
A una solución del Intermedio 11 (22 mg, 0,050 mmol) en MeOH (2 mL) en atmósfera de nitrógeno, se añadió paladio sobre carbón (al 10 % p, 5,9 mg, 0,005 mmol) y una gota de HCl concentrado. La mezcla se sometió al vacío y se rellenó de nuevo con hidrógeno (4x), y se agitó rápidamente durante toda la noche. La mezcla se filtró a través de Celite®, se lavó con MeOH y se concentró. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaSond® con ácido propilsulfónico) y la purificación mediante HPLC preparativa de fase inversa proporcionó 2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol como un sólido de color amarillo claro (11,5 mg). LC/MS tR = 0,39 min. MS (M+1) = 406,0. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,20 (s, 1H), 8,16 (d, J=9,6 Hz, 1H), 8,12 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,26 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,17 (d, J=8,6 Hz, 1H), 5,09 (t, J=12,1 Hz, 1H), 2,98 (s, 3H), 2,64 (s, 3H), 1,62-1,72 (m, 2H), 1,50-1,60 (m, 2H), 1,38 (s, 6H), 1,22 (s, 6H).
Ejemplo 3-1: Síntesis de 7-(6-(met¡l(1.2.2.6.6-pentamet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-il)¡soqu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000038_0001
Paso 1. 6-(6-Metoxiisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(1,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
El compuesto del título (63 mg, 0,15 mmol) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 1-1 para la reacción de Suzuki del Intermedio 4 (75 mg, 0,25 mmol) y el Intermedio 7 (77 mg, 0,38 mmol). MS (M+1) = 420,1
Paso 2. 7-(6-(Metil(1,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol
El compuesto del título (26 mg) se preparó a partir de 6-(6-metoxiisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(1,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (63 mg, 0,150 mmol) siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-4 para la desmetilación utilizando tiofenol. El residuo crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (de un 25 a un 50 % de acetonitrilo en agua, con modificador de hidróxido de amonio 5 mM). LC/MS tR = 0,38 min. MS (M+1) = 406,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 9,57 (s, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,48 (d, J=10,0 Hz, 1H), 8,40 (d, J=6,8 Hz, 1H), 8,21 (d, J=6,8 Hz, 1H), 7,70 (d, J=9,8 Hz, 1H), 7,64 (s, 1H), 5,35 (s a, 1H), 3,18 (s, 3H), 2,94 (s, 3H), 2,24-2,36 (m, 2H), 2,10-2,19 (m, 2H), 1,66 (s, 6H), 1,61 (s, 6H). Ejemplo 3-2: Síntesis de 7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)¡soqu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000038_0002
Paso 1. 6-(6-Metoxiisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
En un vial de 30 mL con un tapón de tipo septum, se introdujeron 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina, Intermedio 1 (200 mg, 0,71 mmol), trifosfato de potasio (751 mg, 3,54 mmol), precatalizador de XPhos de 2.a generación (39 mg, 0,05 mmol) y DMF (2,5 mL). La mezcla se desgasificó mediante vacío/purga (3x) y se calentó a 50 °C. Se añadió una solución del Intermedio 7 en DMF (100 mg/mL) en alícuotas de 1 mL cada 2-3 h hasta que se consumió el Intermedio 1. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró a través de una columna de Celite® lavando con EtOAc y se concentró parcialmente. La mezcla se diluyó con MeOH y se acidificó hasta un pH < 4 con HCl 1 M. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) seguida de una elución a través de un lecho de gel de sílice (10-50 % de MeOH/DCM) proporcionó el compuesto del título (130 mg), con el cual se prosiguió sin purificación adicional. MS (M+1) = 406,7
Paso 2. 7-(6-(Metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol
Se_ desprotegió 6-(6-metoxiisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-4 para la desmetilación utilizando tiofenol. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) seguida de HPLC preparativa de fase inversa (de un 25 a un 50 % de acetonitrilo en agua, modificador de hidróxido de amonio 5 mM) proporcionó el compuesto del título (63 mg). LC/MS tR = 0,39 min. MS (M+1) = 392,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 59,13 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,37 (d, J=10,0 Hz, 1H), 8,28 (d, J=5,8 Hz, 1H), 7,64 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,40 (d, J=10,0 Hz, 1H), 7,30 (s, 1H), 5,27 (s a., 1H), 3,07 (s, 3H), 1,76-1,85 (m, 2H), 1,65-1,75 (m, 2H), 1,48 (s, 6H), 1,33 (s, 6H).
Ejemplo 3-3: Síntesis de 7-(6-((2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)ox¡)p¡r¡daz¡n-3-¡l)¡soqu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000039_0001
Paso 1. 6-Metoxi-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolina
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 1-1 para la reacción de Suzuki a partir del Intermedio 3 (200 mg, 0,741 mmol) y el Intermedio 7 (256 mg, 1,26 mmol). MS (M+1) = 393,0
Paso 2. 7-(6-((2,2,6,6-Tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol
El compuesto del título (66 mg) se preparó a partir de 6-metoxi-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolina siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-4 para la desmetilación utilizando tiofenol. LC/MS tR = 0,38 min. MS (M+1) = 379,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 59,50 (s, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,49 (d, J=9,5 Hz, 1H), 8,28-8,33 (m, 1H), 8,12 (d, J=6,8 Hz, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,41 (d, J=9,3 Hz, 1H), 5,80 (tt, J=4,1, 10,7 Hz, 1H), 2,43 (dd, J=4,0, 13,8 Hz, 2H), 1,80 (dd, J=11,2, 13,4 Hz, 2H), 1,56 (s, 6H), 1,48 (s, 6H).
Ejemplo 3-4: Síntesis de 7-(6-((3aR,6aS)-5-metilhexahidropirrolo[3,4-c1pirrol-2(1H)-il)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol
Figure imgf000039_0002
Paso 1. 6-Metoxi-7-(6-((3aR, 6aS)-5-metilhexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2( 1 H)-il)piridazin-3-il)isoquinolina
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 1-1 para la reacción de Suzuki a partir del Intermedio 5 (75 mg, 0,314 mmol) y el Intermedio 7 (108 mg, 0,534 mmol). MS (M+1) = 362,5
Paso 2. 7-(6-((3aR,6aS)-5-Metilhexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol
El compuesto del título (21 mg) se preparó a partir de 6-metoxi-7-(6-((3aR,6aS)-5-metilhexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)piridazin-3-il)isoquinolina siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-4 para la desmetilación utilizando tiofenol. LC/MS tR = 0,33 min. MS (M+1) = 348,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 59,03 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,28 (d, J=9,8 Hz, 1H), 8,18 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,53 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,20 (t, J=4,9 Hz, 2H), 3,63-3,73 (m, 2H), 3,53-3,62 (m, 2H), 3,09-3,17 (m, 2H), 2,99-3,08 (m, 2H), 2,78 (dd, J=2,9, 10,2 Hz, 2H), 2,49 (s, 3H).
Ejemplo 3-5: Síntesis de 1-c¡cloprop¡l-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)¡soqu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000039_0003
Paso 1. Ácido 3-(benciloxi)-4-yodobenzoico
Se añadió bromuro de bencilo (7 mL, 57,8 mmol) a una mezcla de ácido 3-hidroxi-4-yodobenzoico (5,13 g, 18,9 mmol) y K2CO3 (8,0 g, 58 mmol) en acetona (200 mL). A continuación, la mezcla se calentó a reflujo durante toda la noche. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y a continuación se filtró a través de un lecho pequeño de Celite®. El filtrado se concentró al vacío. Se añadió MeOH (30 mL) al residuo seguido de NaOH 1 M (94 mL, 94 mmol). La mezcla resultante se calentó en un baño de aceite a 70 °C durante 1 h. A continuación, la mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y posteriormente se concentró al vacío hasta aproximadamente la mitad del volumen de partida para eliminar el MeOH. La solución resultante se diluyó con agua (20 mL) y a continuación se extrajo con Et2O (2 x 100 mL). La fase orgánica se lavó con NaOH 1 M (50 mL) y las fases acuosas combinadas se acidificaron lentamente hasta un pH de 2 utilizando HCl concentrado. Se añadió acetato de etilo (150 mL) al precipitado resultante. Tras una separación, la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 150 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (6,6 g). MS (M+1) = 353,5. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 12,93 (s a, 1H), 7,93 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,48-7,57 (m, 3H), 7,41 (t, J=7,3 Hz, 2H), 7,28-7,35 (m, 2H), 5,26 (s, 2H).
Paso 2. (3-(Benciloxi)-4-yodofenil)metanol
Se añadió una solución de complejo de borano y tetrahidrofurano (1,0 M en THF, 7,83 mL, 7,83 mmol) lentamente a una solución enfriada (baño de hielo) de ácido 3-(benciloxi)-4-yodobenzoico (1,98 g, 5,59 mmol) en THF (50 mL). Una vez completada la adición, se permitió que la mezcla de reacción se calentara hasta temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo durante 5 min y a continuación se desactivó lentamente con HCl 1 M (10 mL). A continuación, la reacción se diluyó con agua (20 mL) y se extrajo con Et2O (3 x 50 mL). La fase orgánica se lavó sucesivamente con NaHCO3 acuoso saturado y salmuera. Los componentes orgánicos se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío para proporcionar el compuesto del título como un aceite espeso incoloro (1,9 g). MS (M-OH) = 323,0
Paso 3. 2-(3-(Bendloxi)-4-yodobendloxi)tetrahidro-2H-pirano
Se añadió ácido p-toluenosulfónico monohidratado (0,215 g, 1,129 mmol) a una solución de (3-(benciloxi)-4-yodofenil)metanol (1,92 g, 5,64 mmol) y 3,4-dihidro-2H-pirano (0,64 mL, 6,8 mmol) en DCM (50 mL) a temperatura ambiente. Después de 2 h, la solución se diluyó con DCM (30 mL) y a continuación se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (2 x 20 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El aceite resultante se conservó a un vacío elevado durante toda la noche. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (80 g de gel de sílice, 2-30 % de EtOAc/heptano) para proporcionar el producto deseado como un aceite espeso incoloro. (2,0 g, 4,7 mmol). MS (M+H2O) = 442,2. 1H r MN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,76 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,51 (d, J=7,6 Hz, 2H), 7,39 (t, J=7,3 Hz, 2H), 7,29-7,35 (m, 1H), 6,92 (d, J=2,0 Hz, 1H), 6,74 (dd, J=8,1, 1,52 Hz, 1H), 5,18 (s, 2H), 4,71 (d, J=12,6 Hz, 1H), 4,66 (t, J=3,5 Hz, 1H), 4,47 (d, J=12,1 Hz, 1H), 3,82-3,93 (m, 1H), 3,46-3,58 (m, 1H), 1,80-1,94 (m, 1H), 1,68-1,79 (m, 1H), 1,50-1,68 (m, 4H).
Paso 4. 2-(2-(Bendloxi)-4-((tetrahidm-2H-piran-2-iloxi)metíl)fenil)-4,4,5,5-tetmmetil-1,3,2-dioxaborolano
Siguiendo el MÉTODO GENERAL 7-1 para la formación de un éster de tipo boronato con 2-(3-(benciloxi)-4-yodobenciloxi)tetrahidro-2H-pirano (1,96 g, 4,62 mmol), se obtuvo el compuesto del título (1,96 g). MS (M+H2O) = 442,3.
1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,68 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,61 (d, J=7,6 Hz, 2H), 7,36 (t, J=7,3 Hz, 2H), 7,30 (d, J=7,1 Hz, 1H), 6,94-7,00 (m, 2H), 5,14 (s, 2H), 4,77 (d, J=12,6 Hz, 1H), 4,68 (t, J=3,5 Hz, 1H), 4,54 (d, J=12,6 Hz, 1H), 3,85-3,95 (m, 1H), 3,48-3,57 (m, 1H), 1,82-1,94 (m, 1H), 1,50-1,78 (m, 5H), 1,37 (s, 12H).
Paso 5. (3-(Benciloxi)-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenil)metanol
Se añadió 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1, 503 mg, 1,78 mmol) a un matraz de fondo redondo que contenía 2-(2-(benciloxi)-4-((tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)metil)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1,96 g, 3,23 mmol). Se añadieron Na2CO3 (566 mg, 5,34 mmol) y Pd(PPIi3)4 (230 mg, 0,20 mmol) y a continuación se añadió DME/agua 4:1 (15 mL). El matraz de reacción se dotó de un condensador de reflujo y el matraz se sometió al vacío y se rellenó con N2 (2x), a continuación se calentó en un baño de aceite a 100 °C durante toda la noche (18 h). La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y a continuación se filtró a través de Celite® con un lavado de MeOH. El filtrado se acidificó hasta un pH de 2 utilizando HCl 1 M y a continuación se calentó a 70 °C durante 1 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y a continuación se filtró a través de Celite® lavando con MeOH. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 20 g) proporcionó el compuesto del título (750 mg) como un sólido amorfo de color amarillo, después de someterlo a un vacío elevado durante varias horas. MS (M+1) = 461,4. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,74 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,68 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,41 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,36 (t, J=7,3 Hz, 2H), 7,27-7,33 (m, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,94-7,06 (m, 2H), 5,16 (s, 2H), 5,09 (t, J=5,8 Hz, 2H), 4,54 (d, J=5,6 Hz, 2H), 2,90 (s, 3H), 1,38-1,63 (m, 5H), 1,28 (s a, 6H), 1,13 (s a, 6H).
Paso 6. 3-(Bendloxi)-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperídin-4-il)amino)pirídazin-3-il)benzaldehído
A un matraz de fondo redondo de 50 mL que contenía (3-(benciloxi)-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenil)metanol (218 mg, 0,47 mmol) y DCM (2,4 mL), se añadió dióxido de manganeso (259 mg, 2,98 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h y se añadió dióxido de manganeso adicional (123 mg, 1,42 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h, a continuación se filtró a través de Celite® y se concentró al vacío para proporcionar 3-(benciloxi)-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)benzaldehído (217 mg). MS (M+1) = 459,5
Paso 7. 1-(3-(Bendloxi)-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetmmetilpiperídin-4-il)amino)pirídazin-3-iQfenil)-2-nitroetanol
A un matraz de fondo redondo de 50 mL que contenía 3-(benciloxi)-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)benzaldehído (200 mg, 0,44 mmol) y MeOH (2,2 mL), se añadieron nitrometano (0,47 mL, 0,87 mmol) y NaOH acuoso 1 M (1,3 mL, 1,31 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h y a continuación el pH se ajustó hasta 6-7 con HCl acuoso 1 M. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) y la concentración de las fracciones que contenían el producto proporcionaron 1-(3-(benciloxi)-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenil)-2-nitroetanol (176 mg). MS (M+1) = 520,5
Paso 8. 2-Amino-1-(3-metoxi-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenil)etanol
A un matraz de fondo redondo de 50 mL que contenía 1-(3-(benciloxi)-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenil)-2-nitroetanol (176 mg, 0,40 mmol) en MeOH (5,0 mL), se añadió paladio sobre carbón al 10 % (211 mg, 0,20 mmol). La suspensión resultante se agitó en atmósfera de hidrógeno a presión atmosférica y temperatura ambiente durante 18 h. La suspensión se filtró a través de Celite® y el lecho del filtro se lavó con MeOH. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) y la concentración de las fracciones que contenían el producto proporcionaron 2-amino-1-(3-metoxi-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenil)etanol (164 mg). MS (M+1) = 414,5
Paso 9. N-(2-Hidroxi-2-(3-metoxi-4-( 6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenil)etil)ddopropanocarboxamida
En un matraz de fondo redondo de 50 mL, se combinaron 2-amino-1-(3-metoxi-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenil)etanol (250 mg, 0,61 mmol), ácido ciclopropanocarboxílico (104 mg, 1,21 mmol), DIPEA (0,42 mL, 2,42 mmol) y HATU (230 mg, 0,61 mmol) en DCM (1,5 mL) y DMF (1,5 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 45 min, se acidificó con un exceso de ácido acético y se concentró al vacío. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) y la concentración de las fracciones que contenían el producto proporcionaron N-(2-hidroxi-2-(3-metoxi-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenil)etil)ciclopropanocarboxamida (112 mg). MS (M+1) = 482,6
Paso 10. 6-(1-Cidopmpil-6-metoxüsoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)pindazin-3-amina
A un matraz de fondo redondo de 50 mL que contenía N-(2-hidroxi-2-(3-metoxi-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenil)etil)ciclopropanocarboxamida (68 mg, 0,14 mmol) en acetonitrilo (1,4 mL), se añadió óxido cloruro de fósforo (POCb, 0,66 mL, 0,71 mmol). La mezcla se calentó a 60 °C durante 1 h, a continuación se añadió POCb adicional (0,66 mL, 0,71 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante 18 h. Se añadió POCb adicional (0,66 mL, 0,71 mmol) y tolueno (1,4 mL) y la reacción se calentó a 90 °C durante 1 h. A continuación, la mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se desactivó con una cantidad mínima de agua y se concentró al vacío. La purificación mediante SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) y la concentración de las fracciones que contenían el producto proporcionaron 6-(1-ciclopropil-6-metoxiisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (63 mg). MS (M+1) = 446,1
Paso 11. 1-Cidopropil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpipendin-4-iQamino)pindazin-3-il)isoquinolin-6-ol
Siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-3 estándar para la desprotección de metoxi utilizando tribromuro de boro, se obtuvo el compuesto del título. LC/MS tR = 0,43 min. MS (M+1) = 430,41H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,74 (s, 1H), 8,18 (d, J=10,0 Hz, 1H), 8,01 (d, J=5,8 Hz, 1H), 7,26 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,13-7,20 (m, 2H), 4,99-5,16 (m, 1H), 2,97 (s, 3H), 2,69­ 2,78 (m, 1H), 1,66-1,74 (m, 2H), 1,45-1,57 (m, 2H), 1,35 (s, 6H), 1,20 (s, 7H), 1,06-1,14 (m, 4H).
Ejemplo 3-6: Síntesis de 7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)¡soauinol¡n-1.6-d¡ol
Figure imgf000041_0001
Paso 1. 7-Bromo-1-etoxi-6-metoxiisoquinolina
En un vial de 30 mL, se disolvió 7-bromo-1-cloro-6-metoxiisoquinolina (200 mg, 0,734 mmol) parcialmente en etóxido de sodio en etanol (3 M, 2 mL, 6,00 mmol) y la mezcla se calentó durante 18 h a 80 °C. La mezcla se enfrió y se eliminó el disolvente al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (5-30 % de EtOAc/heptano) para proporcionar el compuesto del título (157 mg). MS (M+1) = 284,0. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,46 (s, 1H), 7,95 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,09 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,03 (s, 1H), 4,53 (c, J=7,2 Hz, 2H), 4,02 (s, 3H), 1,50 (t, J=7,2 Hz, 3H).
Paso 2: 1-Etoxi-6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina
Siguiendo el MÉTODO GENERAL 7-1 para la formación de un éster de tipo boronato, 7-bromo-1-etoxi-6-metoxiisoquinolina (53 mg, 0,188 mmol) proporcionó el compuesto del título (60 mg). MS (M+1) = 330,0
Paso 3. 6-(1-Etoxi-6-metoxiisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 1-1 para la reacción de Suzuki a partir del Intermedio 1 (35 mg, 0,12 mmol) y 1-etoxi-6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina (60 mg). MS (M+1) = 450,2
Paso 4. 7-(6-(Metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1,6-diol
El compuesto del título (11 mg, 0,024 mmol) se preparó a partir de 6-(1-etoxi-6-metoxiisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-4 para la desprotección utilizando tiofenol. LC/MS tR = 0,50 min. MS (M+1) = 408,3. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,57 (s, 1H), 8,48 (d, J=9,8 Hz, 1H), 8,08 (d, J=10,0 Hz, 1H), 7,25 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,17 (s, 1H), 6,60 (d, J=7,0 Hz, 1H), 4.8-5.1 (la señal del metino está oculta bajo un pico amplio de H2O), 3,21 (s, 3H), 2,12 (d, J=12,5 Hz, 2H), 1,99-2,07 (m, 2H), 1,66 (s, 6H), 1,59 (s, 6H)).
Ejemplo 3-7: Síntesis de 6-h¡drox¡-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)¡soquinol¡n-1-carbon¡tr¡lo
Figure imgf000042_0001
Paso 1. 2-Óxido de 7-bromo-6-metoxiisoquinolina
A un matraz de fondo redondo de 50 mL que contenía 7-bromo-6-metoxiisoquinolina (preparada tal como se describe en el documento W02007000240) (200 mg, 0,84 mmol) en DCM (4,2 mL), se añadió ácido m-cloroperoxibenzoico (mCPBA, 269 mg, 1,09 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, se diluyó con DCM y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, a continuación con tiosulfato de sodio acuoso saturado y salmuera. La fase orgánica resultante se secó con sulfato de sodio y se concentró al vacío para proporcionar 2-óxido de 7-bromo-6-metoxiisoquinolina (213 mg). MS (M+1) = 256,3
Paso 2. 7-Bromo-6-metoxiisoquinolin-1-carbonitrilo
A un matraz de fondo redondo de 50 mL que contenía 2-óxido de 7-bromo-6-metoxiisoquinolina (181 mg, 0,71 mmol) en acetonitrilo (3,6 mL), se añadieron TEA (0,20 mL, 1,43 mmol) y trimetilsilanocarbonitrilo (0,29 mL, 2,14 mmol). La mezcla se calentó a reflujo a 82 °C durante 2 h, se enfrió y se concentró al vacío. El residuo se basificó con Na2CO3 acuoso saturado, se extrajo con DCM, se secó con MgSO4 , se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-20 % de EtOAc/heptano) para proporcionar 7-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-carbonitrilo (184 mg). MS (M+1) = 265,0
Paso 3. 6-Metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolin-1-carbonitrilo
Siguiendo el MÉTODO GENERAL 7-1 para la formación de un éster de tipo boronato, 7-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-carbonitrilo (184 mg, 0,70 mmol) proporcionó 6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolin-1-carbonitrilo (217 mg). MS (M+1) = 311,5
Paso 4. 6-Metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo
Siguiendo el MÉTODO GENERAL 1-1 para el acoplamiento de Suzuki, 6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolin-1-carbonitrilo (100 mg, 0,32 mmol)
y 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina, (Intermedio 1, 61 mg, 0,22 mmol) proporcionan 6-metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo (15 mg). m S (M+1) = 431,6 Paso 5. 6-Hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo
Siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-1 estándar para la desprotección de metoxi, se obtuvo el compuesto del título. LC/MS tR = 0,51. MS (M+1) = 417,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,63 (s, 1H), 8,55 (d, J=5,8 Hz, 1H), 8,50 (d, J=9,8 Hz, 1H), 7,89-8,04 (m, 2H), 7,49 (s, 1H), 5,05-5,24 (m, 1H), 3,23 (s, 3H), 2,01-2,21 (m, 4H), 1,69 (s, 6H), 1,59 (s, 6H).
Ejemplo 4-1: Síntesis de 6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)¡soqu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000043_0001
Paso 1. 6-(7-Metoxiisoquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
El compuesto del título (300 mg) se preparó a part¡r del Intermedio 1 (240 mg. 0.849 mmol) y el Intermedio 7 (350 mg.
1.724 mmol) s¡gu¡endo el MÉTODO GENERAL 1-1 para el acoplam¡ento de Suzuk¡. MS (M+1) = 406.5
Paso 2. 6-(6-(Metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-7-ol
El compuesto del título (72 mg) se preparó a part¡r de 6-(7-metox¡¡soqu¡nol¡n-6-¡l)-N-met¡l-N-(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na (300 mg. 0.740 mmol) s¡gu¡endo el MÉTODO GENERAL 2-4 para la desmet¡lac¡ón ut¡l¡zando t¡ofenol. LC/MS tR = 0.39 m¡n. MS (M+1) = 392.3. 1H RMN (400 MHz. METANOL-d4) 58.97 (s. 1H). 8.33 (s. 1H). 8.26 (d. J=9.8 Hz.
1H). 8.16 (d. J=5.8 Hz. 1H). 7.71 (d. J=5.8 Hz. 1H). 7.40 (s. 1H). 7.29 (d. J=10.0 Hz. 1H). 5.23 (s a. 1H). 2.97 (s. 3H). 1.59­ 1.79 (m. 4H). 1.41 (s. 6H). 1.26 (s. 6H).
Ejemplo 5-1: Síntes¡s de 8-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
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Paso 1: 7-(Benciloxi)-8-bromoquinolina
A una mezcla de 8-bromoqu¡nol¡n-7-ol (Chen. X. et al.. WO 2010054006; 1257 mg. 5.61 mmol) y K2CO3 (2.32 g. 16.8 mmol) en DMF (12 mL). se añad¡ó bromuro de benc¡lo (730 uL. 6.2 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante toda la noche. La mezcla se calentó hasta 50 °C durante 3 h para desplazar la reacc¡ón hasta una convers¡ón total. Después de enfr¡ar hasta temperatura amb¡ente. la mezcla se d¡luyó con EtOAc/éter d¡etíl¡co 1:1. se lavó con agua (6x) y salmuera. se secó con MgSO4 y se concentró para obtener un líqu¡do marrón. La cromatografía en columna (eluc¡ón con DCM y a cont¡nuac¡ón con 0-10 % de EtOAc en DCM) proporc¡onó 7-(benc¡lox¡)-8-bromoqu¡nol¡na (801 mg) como un sól¡do blanquec¡no. MS (M+1) = 314.1. 1H RMN (400 MHz. CLOROFORMO-d) 59.05 (dd. J=1.8. 4.29 Hz. 1H). 8.13 (dd. J=1.8.
8.34 Hz. 1H). 7.77 (d. J=8.6 Hz. 1H). 7.56 (d. J=7.1 Hz. 2H). 7.31-7.47 (m. 5H). 5.39 (s. 2H).
Paso 2: Ácido (7-(benciloxi)quinolin-8-il)borónico
Se añad¡ó but¡ll¡t¡o (2.5 M en heptano. 0.42 mL. 1.1 mmol) gota a gota a una soluc¡ón de 7-(benc¡lox¡)-8-bromoqu¡nol¡na (300 mg. 0.95 mmol) enfr¡ada hasta -78 °C. La soluc¡ón se ag¡tó durante 0.5 h. una vez transcurr¡do este t¡empo se añad¡ó borato de tr¡met¡lo (0.270 mL. 2.4 mmol) y la soluc¡ón se calentó lentamente hasta temperatura amb¡ente y se ag¡tó durante toda la noche. El anál¡s¡s por LC/MS ¡nd¡ca una convers¡ón completa del bromuro en el ác¡do borón¡co. La soluc¡ón se evaporó en un rotavapor hasta sequedad y se concentró en heptano (2x) para proporc¡onar el ác¡do (7-(benc¡lox¡)qu¡nol¡n-8-¡l)borón¡co crudo (276 mg) como un sól¡do blanquec¡no. MS (M+1) = 280.2. Basándose en el anál¡s¡s por LC/MS. se est¡mó que el rend¡m¡ento del ác¡do borón¡co fue cas¡ cuant¡tat¡vo y este mater¡al se ut¡l¡zó d¡rectamente en el acoplam¡ento de Suzuk¡ poster¡or.
Paso 3: 6-(7-(Benciloxi)quinolin-8-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Una mezcla de 6-cloro-N-met¡l-N-(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na. (Intermedio 1.200 mg. 0.707 mmol). ác¡do (7-(benc¡lox¡)qu¡nol¡n-8-¡l)borón¡co crudo (0.95 mmol est¡mados) y carbonato de sod¡o (300 mg. 2.83 mmol) en DME/agua 3:1 (8 mL) se desgas¡f¡có con una comente de n¡trógeno anh¡dro durante 5 m¡n. Se añad¡ó tetrak¡s(tr¡fen¡lfosf¡na)palad¡o (0) (123 mg. 0.106 mmol) y la mezcla se calentó a 140 °C con ¡rrad¡ac¡ón de m¡croondas durante 30 m¡n. La reacc¡ón se d¡luyó con DCM/agua y se extrajo con DCM (4x). Los extractos se ac¡d¡f¡caron con HCl (4 equ¡valentes) en MeOH y se concentraron. El mater¡al crudo se somet¡ó a una pur¡f¡cac¡ón por absorc¡ón y l¡berac¡ón tal como se descr¡be en el MÉTODO GENERAL 3-1. segu¡da de una cromatografía en gel de síl¡ce tal como se descr¡be en el MÉTODO GENERAL 4-1 para proporcionar 6-(7-(benciloxi)quinolin-8-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina como una espuma de color marrón claro (214 mg). MS (M+1) = 482,5
Paso 4: 8-(6-(Metil(2,2,6,6-tetrametilpiperídin-4-il)amino)pirídazin-3-il)quinolin-7-ol
A una solución de 6-(7-(benciloxi)quinolin-8-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (176 mg, 0,365 mmol) en EtOAc/MeOH 1:1 (3,6 mL) en atmósfera de nitrógeno, se añadió paladio sobre carbón (al 10 % p, 39 mg, 0,037 mmol). La atmósfera se reemplazó por hidrógeno (globo) y la mezcla se agitó rápidamente durante toda la noche. El matraz se rellenó con nitrógeno, se diluyó con DCM, se filtró a través de Celite® y se concentró. La cromatografía en gel de sílice tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 4-1 proporcionó 8-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol como una espuma amarilla (100 mg). LC/MS tR = 0,41 min. MS (M+1) = 392,3. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 88,83 (d, J=10,1 Hz, 1H), 8,75 (dd, J=4,3, 1,8 Hz, 1H), 8,22 (dd, J=8,1, 1,5 Hz, 1H), 7,81 (d, J=9,1 Hz, 1H), 7,24-7,38 (m, 3H), 5,12 (t, J=12,4 Hz, 1H), 3,04 (s, 3H), 1,68-1,77 (m, 2H), 1,52-1,65 (m, 2H), 1,39 (s, 6H), 1,24 (s, 6H).
Ejemplo 6-1: Síntesis de 7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡ridaz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000044_0001
Paso 1: 7-Bromo-6-metoxiquinolina
De acuerdo con el procedimiento general de Martínez, R. et al., J. Org. Chem. 2008, 73, 9778-9780, en un matraz de fondo redondo de 100 mL, una mezcla de (2-amino-4-bromo-5-metoxifenil)metanol (Intermedio 10, 2,36 g, 9,14 mmol), benzofenona (3,33 g, 18,3 mmol), KOtBu (2,05 g, 18,3 mmol) y etanol (0,53 mL, 9,1 mmol) en 1,4-dioxano (30 mL) se calentó a 80 °C durante 2 h. La reacción se diluyó con EtOAc y se extrajo con HCl 1 M (3x). Los extractos ácidos se lavaron con éter, se basificaron hasta un pH de 10 y se extrajeron con EtOAc (5x). Los extractos se lavaron con salmuera, se secaron con MgSO4 y se concentraron para obtener un aceite naranja. La cromatografía en gel de sílice (2-60 % de EtOAc en DCM) proporcionó 7-bromo-6-metoxiquinolina (603 mg) como un sólido amarillo. MS (M+1) = 238,1. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,80 (dd, J=4,5, 1,5 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,12 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,43 (dd, J=8,3, 4,3 Hz, 1H), 7,12 (s, 1H), 4,04 (s, 3H).
Paso 2: Ácido (6-metoxiquinolin-7-il)borónico
Se añadió butillitio (1,6 M en heptano, 1,90 mL, 3,04 mmol) gota a gota en el transcurso de una hora a una solución de 7-bromo-6-metoxiquinolina (0,603 g, 2,53 mmol) y borato de triisopropilo (0,823 mL, 3,55 mmol) en THF (12.6 mL) enfriada hasta -78 °C. Una vez completada la adición, se retiró el baño de refrigeración y se permitió que la suspensión se calentara hasta temperatura ambiente. El análisis por LC/MS indicó una conversión casi cuantitativa en el ácido borónico. La mezcla se concentró, a continuación el residuo se concentró secuencialmente en tolueno y en heptano, para proporcionar el ácido (6-metoxiquinolin-7-il)borónico como una espuma naranja, que se utilizó inmediatamente sin purificación. MS (M+1) = 204,2
Paso 3. 6-(6-Metoxiquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
El acoplamiento de Suzuki entre 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina, (Intermedio 1, 100 mg, 0,354 mmol) y el ácido (6-metoxiquinolin-7-il)borónico (0,530 mmol) utilizando el MÉTODO GENERAL 1-2, la purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 2 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico), cromatografía en gel de sílice (MÉTODO GENERAL 4-1) y eliminación de paladio (MÉTODO GENERAL 6-1, SiliaMetS® DMT (232 mg, 0,141 mmol)) proporcionaron 6-(6-metoxiquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina como un sólido de color amarillo claro (105 mg). MS (M+1) = 406,3. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 88,73 (dd, J=4,5, 1,5 Hz, 1H), 8,34 (d, J=7,6 Hz, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,83 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,49-7,55 (m, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,15 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,25 (t, J=12,4 Hz, 1H), 4,01 (s, 3H), 3,02 (s, 3H), 1,66-1,76 (m, 2H), 1,51-1,64 (m, 2H), 1,38 (s, 6H), 1,23 (s, 6H).
Paso 4. 7-(6-(Metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol
Se sometió 6-(6-metoxiquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-1. El material crudo se sometió a cromatografía en gel de sílice (MÉTODO GENERAL 4-1) dos veces, para proporcionar 7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol como un sólido de color amarillo claro (35 mg). LC/MS tR = 0,47 min. MS (M+1) = 392,3.
1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 88,67 (dd, J=4,0, 1,5 Hz, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,30 (d, J=10,1 Hz, 1H), 8,18 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,45 (dd, J=8,3, 4,3 Hz, 1H), 7,37 (d, J=10,1 Hz, 1H), 7,33 (s, 1H), 5,09-5,24 (m, 1H), 3,05 (s, 3H), 1,67-1,76 (m, 2H), 1,53-1,65 (m, 2H), 1,40 (s, 6H), 1,24 (s, 6H).
Ejemplo 6-2: Síntesis de 2-met¡l-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡dazin-3-¡l)qu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000045_0001
Paso 1. 7-Bromo-6-metoxi-2-metilquinolina
De acuerdo con el proced¡m¡ento general de Matsug¡, M et al., Tetrahedron Lett., 2000, 41, 8523, a una soluc¡ón de 3-bromo-4-metox¡an¡l¡na (1,00 g, 4,95 mmol) en HCl 6 M (25 mL) y tolueno (6 mL) calentada hasta 100 °C, se añad¡ó crotonaldehído (0,407 mL, 4,95 mmol) gota a gota. Se cont¡nuó ag¡tando durante 2 h a 100 °C y a cont¡nuac¡ón se perm¡t¡ó que la mezcla se enfr¡ara hasta temperatura amb¡ente. Se el¡m¡nó la fase de tolueno y la fase acuosa se bas¡f¡có hasta un pH de 7 med¡ante una ad¡c¡ón lenta de NaOH 2 M. La fase acuosa se extrajo con DCM (6x) y se concentró hasta obtener un res¡duo verde. S¡gu¡endo el proced¡m¡ento general para la pur¡f¡cac¡ón de qu¡nol¡nas descr¡to por Le¡r, C. M. J. Org. Chem., 1977, 42, 911, el res¡duo se d¡solv¡ó en HCl 1 M (75 mL) y se añad¡ó cloruro de z¡nc (1,349 g, 9,90 mmol), lo cual d¡o como resultado la formac¡ón ¡nmed¡ata de un sól¡do pegajoso de color oscuro. La son¡cac¡ón y ag¡tac¡ón de la mezcla transformó el sól¡do pegajoso en un prec¡p¡tado de color marrón claro. Los sól¡dos se a¡slaron med¡ante f¡ltrac¡ón, se lavaron con HCl 1 M, 2-propanol y a cont¡nuac¡ón agua. Los sól¡dos se repart¡eron entre EtOAc/éter d¡etíl¡co 1:1 y agua/h¡dróx¡do de amon¡o concentrado 1:1. La fase orgán¡ca se lavó con agua y salmuera, se secó con MgSO4 y se concentró hasta obtener un res¡duo de color marrón oscuro, const¡tu¡do por una mezcla de los dos pos¡bles reg¡o¡sómeros de la c¡clac¡ón. La cromatografía en gel de síl¡ce (grad¡ente de 3-40 % de EtOAc en DCM) proporc¡onó el compuesto del título más móv¡l, 7-bromo-6-metox¡-2-met¡lqu¡nol¡na (365 mg), TLC (DCM/EtOAc 4:1) Rf 0,6, MS (M+1) = 254,0, 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 88,10-8,18 (m, 1H), 7,38 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,32 (s, 1H), 3,99 (s, 3H), 2,66 (s, 3H), y el menos móv¡l, 5-bromo-6-metox¡-2-met¡lqu¡nol¡na (70 mg), TLC (4:1 DCM/EtOAc) Rf 0,4, MS (M+1) = 254,0, 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 88,49 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,98 (d, J=9,1 Hz, 1H), 7,67 (d, J=9,1 Hz, 1H), 7,48 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,03 (s, 3H), 2,71 (s, 3H).
Paso 2. Ácido (6-metoxi-2-metilquinolin-7-il)borónico
Se añad¡ó but¡ll¡t¡o (1,6 M en heptano, 0,41 mL, 0,65 mmol) gota a gota en el transcurso de 1 h a una soluc¡ón de 7-bromo-6-metox¡-2-met¡lqu¡nol¡na (150 mg, 0,60 mmol) y borato de tr¡¡soprop¡lo (0,180 mL, 0,77 mmol) enfr¡ada hasta -78 °C. Una vez completada la ad¡c¡ón, la reacc¡ón se ag¡tó a -78 °C durante una hora y a cont¡nuac¡ón se perm¡t¡ó que se calentara hasta temperatura amb¡ente y se ag¡tó durante toda la noche. El anál¡s¡s por LC/MS muestra una relac¡ón de 9:1 del ác¡do borón¡co del título respecto al subproducto desbromado (6-metox¡-2-met¡lqu¡nol¡na). Se el¡m¡nó el d¡solvente med¡ante evaporac¡ón rotator¡a y el sól¡do resultante se concentró en heptano (2x) para proporc¡onar el ác¡do (6-metox¡-2-met¡lqu¡nol¡n-7-¡l)borón¡co crudo (MS (M+1) = 218,1), el cual se ut¡l¡zó d¡rectamente en el acoplam¡ento de Suzuk¡ poster¡or ut¡l¡zando un rend¡m¡ento est¡mado de un 90 % basado en el anál¡s¡s por LC/MS.
Paso 3: 6-(6-Metoxi-2-metilquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se somet¡eron 6-cloro-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na, Intermedio 1 (107 mg, 0,38 mmol) y el ác¡do (6-metox¡-2-met¡lqu¡nol¡n-7-¡l)borón¡co crudo a un acoplam¡ento de Suzuk¡ ut¡l¡zando el MÉTODO GENERAL 1-2. La reacc¡ón se repart¡ó entre DCM/agua, se extrajo con DCM (3x), se secó con MgSO4 y se concentró. El mater¡al crudo se somet¡ó a cromatografía en gel de síl¡ce (MÉTODO GENERAL 4-1) para proporc¡onar 6-(6-metox¡-2-met¡lqu¡nol¡n-7-¡l)-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na (149 mg) como un sól¡do blanquec¡no. MS (M+1) = 420,1. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 88,21 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,81 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,38-7,46 (m, 2H), 7,15 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,25 (t, J=12,4 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,02 (s, 3H), 2,69 (s, 3H), 1,67-1,76 (m, 2H), 1,54-1,64 (m, 2H), 1,39 (s, 6H), 1,24 (s, 6H).
Paso 4. 2-Metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol
Se somet¡ó 6-(6-metox¡-2-met¡lqu¡nol¡n-7-¡l)-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na (140 mg, 0,317 mmol) a cond¡c¡ones de desprotecc¡ón de metox¡ tal como se descr¡be en el MÉTODO GENERAL 2-2. El mater¡al crudo se somet¡ó a cromatografía en gel de síl¡ce (MÉTODO GENERAL 4-1) para proporc¡onar 2-met¡l-7-(6-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-6-ol (97 mg) como un sól¡do de color amar¡llo claro. LC/MS tR = 0,47 m¡n. MS (M+1) = 406,1. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 88,31 (s, 1H), 8,28 (d, J=10,1 Hz, 1H), 8,07 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,38 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 5,09-5,25 (m, 1H), 3,05 (s, 3H), 2,68 (s, 3H), 1,67-1,77 (m, 2H), 1,54-1,65 (m, 2H), 1,40 (s, 6H), 1,24 (s, 6H).
Ejemplo 7-1: Síntesis de la sal de tipo clorhidrato de 3-cloro-6-(6-(metil(2.2.6.6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol
Figure imgf000046_0001
Paso 1: 6-(3-Cloro-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperídin-4-il)pirídazin-3-amina
Se sometió 6-(7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2.2.6.6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 9. 50 mg.
0.123 mmol) a una borilación de acuerdo con el MÉTODO GENERAL 5-1. con la excepción de que la reacción se calentó a 65 °C durante toda la noche. A la solución de ácido borónico crudo. se añadieron agua (400 uL) y CuCb (49.7 mg. 0.370 mmol). La mezcla se calentó a 65 °C durante 1 h. a continuación se permitió que se agitara a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla se repartió entre DCM/agua y se lavó con DCM (6x). La fase acuosa se acidificó hasta un pH de 1 y se concentró a sequedad. La purificación por SCX de los sólidos resultantes (MÉTODO GENERAL 3-1) seguida de cromatografía en gel de sílice (MÉTODO GENERAL 4-1) proporcionó 6-(3-cloro-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2.2.6.6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (18 mg) como un sólido de color amarillo claro. MS (M+1) = 440.3
Paso 2: 3-Cloro-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol
Se sometió 6-(3-cloro-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2.2.6.6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (18 mg) a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-2. El material crudo se sometió a cromatografía en gel de sílice (MÉTODO GENERAL 4-1) para proporcionar el compuesto del título. El sólido se disolvió en HCl acuoso (1.0 M. 0.21 mL. 0.205 mmol)/agua (300 uL) y la solución se liofilizó durante toda la noche para proporcionar la sal de tipo clorhidrato de 3-cloro-6-(6-(metil(2.2.6.6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol (14 mg) como un sólido de color naranja/amarillo. LC/MS tR = 0.53 min. Ms (M+1) = 426.3. Base libre: 1H RMN (400 MHz. METANOL-d4) 88.68 (d. J=2.5 Hz. 1H). 8.33-8.39 (m. 2H). 8.27 (d. J=10.1 Hz. 1H). 7.44 (s. 1H). 7.35 (d. J=10.1 Hz. 1H).
5.14-5.25 (m. 1H). 3.05 (s. 3H). 1.68-1.77 (m. 2H). 1.54-1.66 (m. 2H). 1.41 (s. 6H). 1.25 (s. 6H).
Ejemplo 7-2: Síntesis de 3-bromo-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡dazin-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000046_0002
Paso 1: 6-(3-Bromo-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se sometió 6-(7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2.2.6.6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 9. 100 mg.
0.247 mmol). a una borilación de acuerdo con el MÉTODO GENERAL 5-1. A la solución de ácido borónico crudo. se añadieron agua (800 uL) y CuBr2 (165 mg. 0.740 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla se repartió entre DCM/agua. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (5x) y DCM (2x). y los extractos orgánicos combinados se concentraron. La cromatografía en gel de sílice (MÉTODO GENERAL 4-1) proporcionó 6-(3-bromo-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2.2.6.6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (73 mg) como un sólido de color amarillo claro. MS (M+1) = 484.3. 1H RMN (400 MHz. METANOL-d4) 88.84 (d. J=2.5 Hz. 1H). 8.57 (d. J=2.0 Hz. 1H). 8.11 (s. 1H). 7.84 (d. J=9.6 Hz. 1H). 7.53 (s. 1H). 7.15 (d. J=9.6 Hz. 1H). 5.27 (t. J=12.1 Hz. 1H). 4.03 (s. 3H). 3.02 (s. 3H).
1.66-1.75 (m. 2H). 1.52-1.63 (m. 2H). 1.38 (s. 6H). 1.23 (s. 6H).
Paso 2. 3-Bromo-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol
Se sometió 6-(3-bromo-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2.2.6.6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (73 mg) a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-2. El material crudo se sometió a cromatografía en gel de sílice (MÉTODO GENERAL 4-1) para proporcionar 3-bromo-6-(6-(metil(2.2.6.6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol (36 mg) como un sólido de color amarillo intenso. LC/MS tR = 0.53 min. MS (M+1) = 472.2. 1H RMN (400 MHz. METANOL-d4) 8 ppm 8.74 (d. J=2.0 Hz. 1H). 8.51 (s. 1H). 8.32 (s. 1H). 8.26 (d. J=10.1 Hz. 1H). 7.41 (s. 1H). 7.34 (d. J=10.1 Hz. 1H). 5.13-5.27 (m. 1H). 3.04 (s. 3H). 1.69-1.78 (m. 2H). 1.55-1.67 (m.
2H). 1.41 (s. 6H). 1.26 (s. 6H).
Ejemplo 7-3: Síntesis de 7-h¡drox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-3-carbon¡tr¡lo
Figure imgf000047_0001
A un v¡al que contenía 3-bromo-6-(6-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol (Ejemplo 7-2.
52 mg. 0.11 mmol). Pd(PPh3)4 (13 mg. 0.01 mmol) y c¡anuro de z¡nc (26 mg. 0.22 mmol). se añad¡ó DMF (1 mL). La mezcla se cerró hermét¡camente y se calentó en un reactor de m¡croondas B¡otage® In¡t¡ator a 120 °C durante 1 h. Se añad¡ó yoduro de cobre (4 mg. 0.02 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se calentó con ¡rrad¡ac¡ón de m¡croondas a 120 °C durante 1 h. La mezcla de reacc¡ón cruda se enfr¡ó hasta temperatura amb¡ente. se f¡ltró a través de Cel¡te® y se pur¡f¡có med¡ante HPLC preparat¡va de fase ¡nversa (de un 15 a un 45 % de aceton¡tr¡lo en agua. con mod¡f¡cador de h¡dróx¡do de amon¡o 5 mM). Las fracc¡ones que contenían el producto se concentraron al vacío para proporc¡onar 7-h¡drox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-3-carbon¡tr¡lo como un sól¡do marrón (5 mg). LC/MS tR = 0.51 m¡n. MS (M+1) = 417.2. 1H RMN (400 MHz. DMSO-d6) 59.01 (d. J=2.0 Hz. 1H). 8.87 (d. J=2.0 Hz. 1H). 8.64 (s. 1H). 8.20-8.36 (m.
2H). 7.38-7.46 (m. 2H). 5.10 (s a. 1H). 2.99 (s. 3H). 1.44-1.74 (m. 4H). 1.32 (s. 6H). 1.17 (s. 6H).
Ejemplo 7-4: Síntes¡s de 6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)-3-(1-met¡l-1H-¡m¡dazol-4-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000047_0002
Paso 1. Ácido (7-metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3-il)borónico
El compuesto del título se s¡ntet¡zó a part¡r de 6-(7-metox¡qu¡nol¡n-6-¡l)-N-met¡l-N-(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na (Intermedio 9). s¡gu¡endo el MÉTODO GENERAL 5-1 para la bor¡lac¡ón y se pur¡f¡có s¡gu¡endo el MÉTODO GENERAL 3-1 para proporc¡onar el ác¡do (7-metox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-3-¡l)borón¡co. MS (M+1) = 450.5
Paso 2. 6-(7-Metoxi-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)quinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se añad¡eron ác¡do 7-metox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-3-¡l)borón¡co (0.24 g.
0.53 mmol). 4-bromo-1-met¡l-1H-¡m¡dazol (0.26 g. 1.6 mmol) y Na2CO3 (0.20 g. 1.9 mmol) a un v¡al para m¡croondas. A cont¡nuac¡ón. se añad¡ó Pd(PPh3)4 (0.05 g. 0.04 mmol) segu¡do de la ad¡c¡ón de 1.4-d¡oxano (2.2 mL) y agua (0.6 mL). La mezcla de reacc¡ón se selló hermét¡camente y se calentó en un reactor de m¡croondas B¡otage® In¡t¡ator a 130 °C durante 1 h. Se añad¡ó una soluc¡ón de NaHCO3 a la reacc¡ón y la fase acuosa se extrajo con DCM (3x). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron con Na2SO4 anh¡dro. se f¡ltraron y se concentraron a pres¡ón reduc¡da. El mater¡al crudo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en gel de síl¡ce (grad¡ente de 1-10 % de amon¡aco 7 M en MeOH. en DCM) para obtener 6-(7-metox¡-3-(1-met¡l-1H-¡m¡dazol-4-¡l)qu¡nol¡n-6-¡l)-N-met¡l-N-(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na como un sól¡do amar¡llo (25 mg). MS (M+1) = 486.6
Paso 3. 6-(6-(Metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)quinolin-7-ol
S¡gu¡endo el MÉTODO GENERAL 2-1. la desprotecc¡ón de metox¡ de 6-(7-metox¡-3-(1-met¡l-1H-¡m¡dazol-4-¡l)qu¡nol¡n-6-¡l)-N-met¡l-N-(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)p¡r¡daz¡n-3-am¡na (0.05 g. 0.10 mmol) proporc¡onó 6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)-3-(1-met¡l-1H-¡m¡dazol-4-¡l)qu¡nol¡n-7-ol como un sól¡do marrón (5 mg). LC/MS tR = 0.44 m¡n. MS (M+1) = 472.3. 1H RMN (400 MHz. DMSO-d6) 5 13.52 (s a. 1H). 9.19 (d. J=2.0 Hz. 1H). 8.55 (s. 1H).
8.54 (d. J=2.0 Hz. 2H). 8.34 (d. J=10.0 Hz. 1H). 7.80 (d. J=1.0 Hz. 1H). 7.73 (d. J=1.0 Hz. 1H). 7.43 (d. J=10.0 Hz. 1H).
7.35 (s. 1H). 5.02 (s a. 1H). 3.74 (s. 3H). 2.99 (s. 3H). 1.55 (dd. J=12.0. 3.5 Hz. 2H). 1.45 (t. J=12.0 Hz. 2H). 1.27 (s. 6H).
1.10 (s. 6H).
Ejemplo 7-5: Síntes¡s de la sal de t¡po clorh¡drato de 3-(1H-¡m¡dazol-1-¡l)-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000048_0001
Paso 1. 6-(3-(1H-Imidazol-1-il)-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperídin-4-il)pirídazin-3-amina
Se añadieron ácido 7-metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3-il)borónico (Ejemplo 7-4 Paso 1, 0,06 g, 0,14 mmol), imidazol (0,06 g, 0,8 mmol) y nitrato de cobre (II) hemi(pentahidratado) (0,04 g, 0,2 mmol) a tetrametiletilendiamina (0,03 mL, 0,20 mmol) en metanol (2 mL). La mezcla de reacción se calentó a 40 °C durante toda la noche. Se añadió una solución de hidróxido de amonio al 28 % a la reacción y la fase acuosa se extrajo con DCM (3x). Las fases orgánicas combinadas se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 1-10 % de amoniaco 7 M en MeOH, en DCM) para proporcionar 6-(3-(1H-imidazol-1-il)-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina. MS (M+1) = 472,5. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 89,13 (d, J=2,6 Hz, 1H), 8,60 (d, J=2,6 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,89 (d, J=9,7 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,19 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,31 (s a, 1H), 4,08 (s, 3H), 3,05 (s, 3H), 1,75 (dd, J=12,3, 2,9 Hz, 2H), 1,56-1,70 (m, 2H), 1,42 (s, 6H), 1,27 (s, 6H).
Paso 2. Sal de tipo clorhidrato de 3-(1H-imidazol-1-il)-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol
y 7-metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3-ol
Siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-1, la desprotección de metoxi de 6-(7-metoxi-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)quinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (0,04 g, 0,07 mmol) proporcionó una mezcla de 7-metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3-ol (25 mg, MS (M+1) = 422,5) y 6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)quinolin-7-ol, los cuales se separaron mediante HPLC preparativa de fase inversa. Se suspendió 6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3-(1 -metil-1H-imidazol-4-il)quinolin-7-ol en acetonitrilo/H2O (3/1 mL). A continuación, se añadió HCl acuoso 1 M (3 equivalentes) y se concentró el disolvente al vacío para proporcionar la sal de tipo clorhidrato de 6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)quinolin-7-ol como un sólido amarillo (9,1 mg). LC/MS tR = 0,42 min. MS (M+1) = 458,4. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 89,74 (s, 1H), 9,19 (d, J=2,5 Hz, 1H), 9,10-9,19 (m, 1H), 8,74 (d, J=2,5 Hz, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,33 (d, J=10,0 Hz, 1H), 8,17-8,26 (m, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,52-7,65 (m, 2H), 5,08-5,24 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 2,04 (t, J=12,5 Hz, 2H), 1,80 (d, J=12,5 Hz, 2H), 1,55 (s, 6H), 1,49 (s, 6H).
Ejemplo 7-6: Síntesis de la sal de tipo formiato de 6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3,7-diol.
Figure imgf000048_0002
Se añadió una solución 1 M de BBr3 en DCM (1,2 mL, 1,2 mmol) a 7-metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3-ol (Ejemplo 7-5 Paso 2 , 50 mg, 0,12 mmol) en DCM (0,6 mL) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Se añadió MeOH a la reacción y se concentró el disolvente a presión reducida. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (de un 5 a un 20 % de acetonitrilo en agua, con modificador de ácido fórmico al 0,1 %). El disolvente se concentró al vacío para proporcionar la sal de tipo formiato de 6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3,7-diol (3 mg). LC/MS tR = 0,42 min. MS (M+1) = 408,3. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 813,07 (s a, 1H), 8,49 (d, J=2,5 Hz, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,32 (d, J=10,0 Hz, 1H), 8,29 (s, 2H), 7,50 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,41 (d, J=10,0 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 4,91-5,18 (m, 1H), 2,99 (s, 3H), 1,62 (d, J=7,5 Hz, 4H), 1,35 (s, 6H), 1,20 (s, 6H).
Ejemplo 8-1: Síntesis de 3-et¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000049_0001
Paso 1: 6-Bromo-3-etil-7-metoxiquinolina
Siguiendo el procedimiento general de Mierde, V. y Verpoort et al., Tetrahedron Lett., 2009, 50, 201, una solución de (2-amino-5-bromo-4-metoxifenil)metanol (Ramurthy, S. et al., WO 2008079988; 0,886 g, 3,82 mmol) y butiraldehído (0,344 mL, 3,82 mmol) se calentó a 80 °C en 1,4-dioxano (9 mL) durante 2 h. Se añadieron benzofenona (0,765 g, 4,20 mmol) y tert-butóxido de potasio (0,514 g, 4,58 mmol) y la mezcla se calentó a 120 °C durante 0,5 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc, se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado y salmuera. La fase orgánica se extrajo con HCl 1 M (3x). Los extractos ácidos se basificaron hasta un pH de 12 mediante la adición de NaOH 2 M y se extrajeron con EtOAc (3x) y éter dietílico (2x). Los extractos orgánicos se concentraron hasta obtener un residuo amarillo, el cual se sometió a cromatografía de gel de sílice (2-30 % de EtOAc en DCM) para proporcionar 6-bromo-3-etil-7-metoxiquinolina (433 mg) un sólido amarillo. MS (M+1) = 267,9. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,69 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,04 (d, J=1,0 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 4,03 (s, 3H), 2,84 (c, J=7,6 Hz, 2H), 1,34 (t, J=7,6 Hz, 3H).
Paso 2: Ácido (3-etil-7-metoxiquinolin-6-il)borónico
A partir de 6-bromo-3-etil-7-metoxiquinolina (150 mg, 0,564 mmol), se obtuvo el ácido 3-etil-7-metoxiquinolin-6-il)borónico (0,564 mmol, conversión cuantitativa estimada basándose en el análisis por LC/MS. MS (M+1) = 232,1) de una manera similar a la expuesta en el Ejemplo 5-1, Paso 2. Este material se utilizó directamente en el acoplamiento de Suzuki posterior.
Paso 3: 6-(3-Etil-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se sometieron 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1, 115 mg, 0,407 mmol) y el ácido 3-etil-7-metoxiquinolin-6-il)borónico crudo (132 mg, 0,564 mmol) a un acoplamiento de Suzuki utilizando el MÉTODO GENERAL 1-2. La reacción se repartió entre DCM/agua, se extrajo con d Cm (3x), se secó con MgSO4 y se concentró para obtener un sólido de color amarillo claro. El material crudo se sometió a cromatografía en gel de sílice (MÉTODO GENERAL 4-1) para proporcionar 6-(3-etil-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (100 mg). MS (M+1) = 434,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 8,70 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,17 (d, J=1,5 Hz, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,83 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,15 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,26 (t, J=12,4 Hz, 1H), 4,01 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 2,81-2,92 (m, 2H), 1,66-1,75 (m, 2H), 1,51-1,62 (m, 2H), 1,32-1,42 (m, 9H), 1,23 (s, 6H).
Paso 4. 3-Etil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol
Se sometió 6-(3-etil-7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (100 mg, 0,231 mmol) a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-2. El material crudo se sometió a cromatografía en gel de sílice (MÉTODO GENERAL 4-1) para proporcionar 3-etil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol como un sólido amarillo (81 mg). LC/MS tR = 0,44 min. MS (M+1) = 420,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 8,63 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,27 (d, J=9,6 Hz, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,35 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,10-5,23 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 2,84 (c, J=7,6 Hz, 2H), 1,67-1,75 (m, 2H), 1,54-1,65 (m, 2H), 1,40 (s, 6H), 1,36 (t, J=7,6 Hz, 3H), 1,24 (s, 6H).
Ejemplo 8-2: Síntesis de 3-¡soprop¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡dazin-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000049_0002
Utilizando los procedimientos descritos en el Ejemplo 8-1, Pasos 1-4, partiendo de 3-metil butanal y (2-amino-5-bromo-4-metoxifenil)metanol, se obtuvo 3-isopropil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol como un sólido de color amarillo claro LC/MS tR = 0,47 min. MS (M+1) = 434,5. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,66 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,34 (s, 1H), 8,27 (d, J=10,1 Hz, 1H), 8,15 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,34 (d, J=10,1 Hz, 1H), 5,15 (t, J=12,4 Hz, 1H), 3,13 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 1,67-1,75 (m, 2H), 1,53-1,64 (m, 2H), 1,36-1,42 (m, 12H), 1,23 (s, 6H).
Ejemplo 9-1: Síntesis de 7-h¡drox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2(1H)-ona
Figure imgf000050_0001
Paso 1: 1-Óxido de 6-bromo-7-metoxiquinolina
A una soluc¡ón de 6-bromo-7-metox¡qu¡nol¡na (PREPARACIÓN 6 Paso 1.2 g. 8.40 mmol) en DCM (42 mL), se añad¡ó met¡ltr¡oxorren¡o (VII) (0.209 g. 0.840 mmol). La soluc¡ón se ag¡tó durante 5 m¡n. una vez transcurr¡do este t¡empo se añad¡ó peróx¡do de h¡drógeno (al 30 % p en agua. 1.03 mL. 10.1 mmol). Se perm¡t¡ó que la soluc¡ón se ag¡tara durante toda la noche. durante este t¡empo se formó un prec¡p¡tado espeso. La mezcla se d¡luyó con heptano y los sól¡dos se a¡slaron med¡ante f¡ltrac¡ón y se lavaron con heptano. El secado de los sól¡dos al vacío proporc¡onó 1-óx¡do de 6 -bromo-7-metox¡qu¡nol¡na (1.76 g). MS (M+1) = 255.9. 1H RMN (400 MHz. METANOL-d4) 58.57 (dd. J=6.1. 1.0 Hz. 1H). 8.28 (s.
1H). 7.95 (d. J=8 . 6 Hz. 1H). 7.93 (s. 1H). 7.34 (dd. J=8.3. 6.3 Hz. 1H). 4.01 (s. 3H).
Paso 2: 6-Bromo-7-metoxiquinolin-2(1H)-ona
Se añad¡ó anhídr¡do tr¡fluoroacét¡co (1.4 mL. 9.9 mmol) gota a gota a 1-óx¡do de 6-bromo-7-metox¡qu¡nol¡na (0.26 g. 1.03 mmol) en DMF (7 mL) y la mezcla se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante toda la noche. Se añad¡ó agua (20 mL) a la reacc¡ón y el sól¡do resultante se recolectó med¡ante f¡ltrac¡ón. El sól¡do se lavó d¡sgregándolo con aceton¡tr¡lo cal¡ente y se f¡ltró para proporc¡onar 6-bromo-7-metox¡qu¡nol¡n-2(1H)-ona (0.17 g). MS (M+1) = 256.0. 1H RMN (400 MHz. DMSO-d6) 58.60 (d. J=6.1 Hz. 1H). 8.49 (s. 1H). 7.98 (s. 1H). 7.86 (d. J=8.4 Hz. 1H). 7.38 (dd. J=8.4. 6.1 Hz. 1H). 4.05 (s. 3H).
Paso 3: Ácido (7-metoxi-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-6-il)borónico y 7-metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinolin-2(1H)-ona
Se calentaron b¡s(p¡nacolato)d¡boro (0.33 g. 1.31 mmol). KOAc (0.19 g. 2.0 mmol). PdCh(dppf).CH2Cl2 (0.03 g. 0.03 mmol) y 6-bromo-7-metox¡qu¡nol¡n-2(1H)-ona (0.17 g. 0.65 mmol) en DMSO (3.3 mL) hasta 80 °C durante 3 h. Se añad¡eron porc¡ones ad¡c¡onales de b¡s(p¡nacolato)d¡boro (0.17 g. 0.66 mmol) y KOAc (0.19 g. 2.0 mmol) y la mezcla se calentó a 80 °C durante toda la noche. La mezcla se enfr¡ó hasta temperatura amb¡ente y el prec¡p¡tado se recolectó med¡ante f¡ltrac¡ón para proporc¡onar 7-metox¡-6-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)qu¡nol¡n-2(1H)-ona. El f¡ltrado se d¡luyó con agua y la fase acuosa se extrajo con cloroformo/propan-2-ol 3:1 (2x). A las fases orgán¡cas comb¡nadas. se añad¡ó la 7-metox¡-6-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)qu¡nol¡n-2(1H)-ona recolectada prev¡amente y se concentró el d¡solvente al vacío para proporc¡onar una mezcla (0.18 g) de 7-metox¡-6-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)qu¡nol¡n-2(1H)-ona (MS (M+1 ) = 302.2) y ác¡do (7-metox¡-2-oxo-1.2-d¡h¡droqu¡nol¡n-6-¡l)borón¡co (MS (M+1 ) = 2 2 0.1 ).
Paso 4: 7-Metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il) quinolin-2(1H)-ona
Una mezcla de ác¡do (7-metox¡-2-oxo-1.2-d¡h¡droqu¡nol¡n-6-¡l)borón¡co y 7-metox¡-6-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)qu¡nol¡n-2(1H)-ona (0.18 g). (Intermedio 1.0.17 g. 0.60 mmol). Na2CO3 (0.19 g. 1.8 mmol) y Pd(PPh3)4 (0.07 g. 0.06 mmol) en 1.4-d¡oxano/agua 6:1 (3 mL) se calentó en un reactor de m¡croondas B¡otage® In¡t¡ ator a 130 °C durante 1 h. Se añad¡eron d¡clorometano y HCl 1 M. La fase acuosa se lavó con DCM (2x) y a cont¡nuac¡ón se bas¡f¡có hasta un pH de 9 con una soluc¡ón saturada de K2CO3. La fase acuosa se extrajo con DCM (3x). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron con Na2SO4 anh¡dro. se f¡ltraron y se concentraron a pres¡ón reduc¡da. El mater¡al crudo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en gel de síl¡ce (grad¡ente de 2-10 % de amon¡aco 7 M en MeOH. en DCM) para proporc¡onar 7-metox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l) qu¡nol¡n-2(1H)-ona (16 mg). MS (M+1) = 422.3
Paso 5: 7-Hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona
S¡gu¡endo el MÉTODO GENERAL 2-1. la desprotecc¡ón de metox¡ de 7-metox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2(1H)-ona (16 mg. 0.038 mmol) proporc¡onó 7-h¡drox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2(1H)-ona (3.6 mg). LC/MS tR = 0.44 m¡n. MS (M+1) = 408.2. 1H RMN (400 MHz. METANOL-d4) 58.21 (d. J=10.0 Hz. 1H). 8.14 (s. 1H). 7.95 (d. J=9.5 Hz. 1H). 7.36 (d. J=10.0 Hz. 1H). 6.87 (s. 1H). 6.44 (d. J=9.5 Hz. 1H). 5.09-5.23 (m. 1H). 3.04 (s. 3H). 1.76 (dd. J=12.5. 3.5 Hz. 2H). 1.65 (t. J=12.5 Hz. 2H). 1.44 (s. 6 H). 1.29 (s. 6 H).
Ejemplo 9-2: Síntes¡s de la sal de t¡po clorh¡drato de 7-h¡drox¡-1-met¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2(1H)-ona
Figure imgf000051_0001
Paso 1. 6-Cloro-7-metoxiquinolina
El compuesto del título se sintetizó a partir de 4-doro-3-metoxianilina de una manera análoga a la PREPARACIÓN 6 Paso 1. MS (M+1) = 194,0. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,80 (dd, J=4,5, 1,5 Hz, 1H), 8,26 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,45 (dd, J=8,5, 4,5 Hz, 1H), 4,07 (s, 3H).
Paso 2. 1-Óxido de 6-cloro-7-metoxiquinolina
Se añadió metiltrioxorrenio (0,03 g, 0,12 mmol) a 6-cloro-7-metoxiquinolina (1,69 g, 8,73 mmol) en DCM (40 mL). A continuación, se añadió una solución de peróxido de hidrógeno (al 50 % p en agua, 1,0 mL, 17 mmol) a 5 °C y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió una porción adicional de metiltrioxorrenio (0,03 g, 0,12 mmol) seguida de peróxido de hidrógeno (al 50 % p en agua, 1,0 mL, 17 mmol) y la reacción se agitó durante 4 h. El precipitado se recolectó mediante filtración para proporcionar 1-óxido de 6-cloro-7-metoxiquinolina como un sólido beige (1,8 g). MS (M+1) = 210,0. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 8,59 (d, J=6,0 Hz, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,85 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,39 (dd, J=8,5, 6,0 Hz, 1H), 4,05 (s, 3H).
Paso 3. 6-Cloro-7-metoxiquinolin-2(1H)-ona
Se añadió anhídrido trifluoroacético (6,0 mL, 42 mmol) gota a gota a 1-óxido de 6-cloro-7-metoxiquinolina (1,18 g, 5,63 mmol) en DMF (8,0 mL) a 5 °C. La mezcla de reacción se calentó en un reactor de microondas Biotage® Initiator a 100 °C durante 30 min. Se añadió agua (20 mL) a la reacción y el sólido resultante se recolectó mediante filtración. El sólido se lavó disgregándolo con acetonitrilo caliente y se filtró para proporcionar 6-cloro-7-metoxiquinolin-2(1H)-ona (0,39 g). MS (M+1) = 210,1. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 11,70 (s a, 1H), 7,79 (d, J=9,5 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,37 (dd, J=9,5, 2,0 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H).
Paso 4. 6-Cloro-7-metoxi-2-metilquinolin-2(1H)-ona
Se añadió bis(trimetilsilil)amiduro de potasio (0,5 M en tolueno, 2,7 mL, 1,4 mmol) a 6-cloro-7-metoxiquinolin-2(1H)-ona (0,20 g, 0,95 mmol) en tolueno (5 mL) y la mezcla se agitó durante 10 min a temperatura ambiente. Se añadió yodometanol (0,07 mL, 1 mmol) a la reacción y la mezcla se agitó durante 2 h a 50 °C. Se añadió una porción adicional de bis(trimetilsilil)amiduro de potasio (0,5 M en tolueno, 2,7 mL, 1,4 mmol) y la mezcla se agitó durante 10 min a temperatura ambiente. Se añadió yodometano (0,08 mL, 1 mmol) a la reacción y la mezcla se agitó a 50 °C durante toda la noche. Se añadió agua a la reacción y la fase acuosa se extrajo con DCM (3x). Las fases orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 50-100% de EtOAc/EtOH 3:1, en heptano) para obtener 6-cloro-7-metoxi-1-metilquinolin-2(1H)-ona (0,14 g). MS (M+1) = 224,1. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 57,82 (d, J=9,3 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,11 (s, 1H), 6,58 (d, J=9,4 Hz, 1H), 4,08 (s, 3H), 3,78 (s, 3H).
Paso 5. 7-Metoxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona.
Se agitaron 6-cloro-7-metoxi-1-metilquinolin-2(1H)-ona (0,14 g, 0,62 mmol), tetrahidroxidiboro (0,22 g, 2,5 mmol), precatalizador de XPhos de 2.a generación (0,01 g, 0,02 mmol), XPhos (0,02 g, 0,04 mmol) y acetato de potasio (0,24 g, 2,47 mmol) en etanol (6,5 mL) a 80 °C durante 30 min. Se añadió una solución acuosa de K2CO3 (1,8 M, 1,1 mL, 2,0 mmol) a la reacción a temperatura ambiente seguida del Intermedio 1 (0,23 g, 0,80 mmol). La mezcla se agitó a 80 °C durante 2 h, a continuación se añadió una solución al 4 % de Na2CO3 a la reacción y la fase acuosa se extrajo con DCM (3x). Las fases orgánicas combinadas se extrajeron con HCl 2 M (3x). Las fases acuosas ácidas combinadas se basificaron hasta un pH de 11 con NaOH 6 H y a continuación se extrajeron con DCM (3x). Las fases orgánicas combinadas se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 2-15 % de amoniaco 7 N en MeOH, en DCM) para obtener una mezcla inseparable de 7-metoxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona y el Intermedio 1 (0,26 g). MS (M+1) = 436,5
Paso 6. Sal de tipo clorhidrato de 7-hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona.
Se añadió una solución 1 M de BBr3 en DCM (0,2 mL, 3 mmol) a una mezcla de 7-metoxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona y el Intermedio 1 (0,03 g) en DCM (0.6 mL) a 5 °C y la reacción se agitó a 5 °C durante 2 h. Se concentró el disolvente a presión reducida. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (de un 5 a un 20 % de acetonitrilo en agua, con modificador de ácido fórmico al 7,5 %). Se obtuvo la base libre de las fracciones que contenían el producto siguiendo el MÉTODO GENERAL 3-1. El sólido resultante se suspendió en acetonitrilo/H2O (3/1 mL). Se añadió HCl acuoso 1 M (3 equivalentes) y se concentró el disolvente al vacío para proporcionar el clorhidrato de 7-hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona como un sólido amarillo (5 mg). LC/MS tR = 0,48 min. MS (M+1) = 422,2. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 58,95-9,08 (m, 1H), 8,21-8,41 (m, 2H), 7,99-8,16 (m, 1H), 7,84 (d, J=9,5 Hz, 1H), 7,49-7,74 (m, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,45 (d, J=9,5 Hz, 1H), 5,00-5,20 (m, 1H), 3,57 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 1,99 (t, J=13,0 Hz, 2H), 1,80 (d, J=13,0 Hz, 2H), 1,53 (s, 6H), 1,46 (s, 6H).
Ejemplo 10-1: Síntesis de 4-metox¡-2-met¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡ridaz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000052_0001
A una mezcla del Intermedio 11 (150 mg, 0,32 mmol) en MeOH (1,5 mL), se añadió NaOMe (al 25 % p en metanol, 0,36 mL, 1,6 mmol). La mezcla se calentó a 120 °C con irradiación de microondas durante 1 h. Se añadió una porción adicional de NaOMe (al 25 % p en metanol, 0,2 mL) y a continuación la mezcla se calentó a 130 °C durante 2 h. La mezcla se diluyó con una solución acuosa de NaHCO3 y se extrajo con DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na2SO4 y se concentraron al vacío para obtener un sólido de color marrón claro. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-10 % de NH32 M en MeOH /DCM) y a continuación mediante HPLC preparativa de fase inversa para obtener el compuesto del título como un sólido blanco (82 mg). LC/MS tR = 0,41 min. MS (M+1) = 436,3. 1H RMN (METANOL-d4) 58,39 (s, 1H), 8,11 (d, J=10,1 Hz, 1H), 7,27 (d, J=10,1 Hz, 1H), 7,24 (s, 1H), 6,66 (s, 1H), 5,09 (t, J=12,1 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H), 3,00 (s, 3H), 2,59 (s, 3H), 1,64-1,74 (m, 2H), 1,51-1,62 (m, 2H), 1,39 (s, 6H), 1,23 (s, 6H).
Ejemplo 10-2: Síntesis de 2-met¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)-4-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000052_0002
A una mezcla del Intermedio 11 (22 mg, 0,046 mmol) en NMP (0,8 mL), se añadió pirrolidina (26,3 mg, 0,370 mmol). La mezcla se calentó a 130 °C con irradiación de microondas durante 2 h. La mezcla se enfrió hasta ^temperatura ambiente, se acidificó mediante la adición de HCl 1 M en éter y se sometió a una purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico). El producto crudo se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa de fase inversa para obtener 2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(pirrolidin-1-il)quinolin-7-ol como un sólido de color amarillo claro (7,5 mg). LC/MS tR = 0,44 min. MS (M+1) = 475,2. 1H RMN (METANOL-d4) 5 8,59 (s, 1H), 8,14 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,14 (d, J=9,6 Hz, 1H), 6,77 (s, 1H), 6,23 (s, 1H), 5,20 (t, J=12,4 Hz, 1H), 3,91 (s a, 4H), 2,99 (s, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,03-2,17 (m, 4H), 1,71 (d, J=3,5 Hz, 2H), 1,51-1,64 (m, 2H), 1,39 (s, 6H), 1,24 (s, 6H).
Los siguientes compuestos a modo de ejemplo se prepararon a partir del Intermedio 11 y la amina o el alcóxido de sodio adecuado de acuerdo con las preparaciones del Ejemplo 10-1 o Ejemplo 10-2.
Figure imgf000052_0003
Figure imgf000053_0002
Ejemplo 11-1: Síntesis de 2-met¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)amino)p¡r¡daz¡n-3-¡l)-4-(1-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)quinol¡n-7-ol
Figure imgf000053_0001
Paso 1: 6-(7-Metoxi-2-metil-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)quinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperídin-4-il)pirídazin-3-amina
Una mezcla de 6-(4-doro-7-metoxi-2-metilquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (35 mg, 0,077 mmol) de la PREPARACIÓN 11 Paso 5, 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-metilpirazol (48,1 mg, 0,231 mmol), precatalizador de XPhos (CAS N.° 1028206-56-5, 5,70 mg, 7,71 umol) y carbonato de cesio (100 mg, 0,308 mmol) en 1,4-dioxano (1 mL) y agua (0,25 mL) se sometió al vacío, se rellenó con N2 (4x) y se calentó con irradiación de microondas a 120 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró y se acidificó hasta un pH de 3 mediante la adición de HCl 4 M en 1,4-dioxano. La purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico) proporcionó el producto crudo como una mezcla ~2:1 (23 mg) de 6-(7-metoxi-2-metil-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)quinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (MS (M+1) = 500,2) y 7-metoxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona.
Paso 2: 2-Metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)quinolin-7-ol
La mezcla de 6-(7-metoxi-2-metil-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)quinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina y 7-metoxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona (21 mg) se sometió a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-1 utilizando piridinaHCl. La purificación por HPLC preparativa de fase inversa proporcionó 2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-( 1 -metil-1 H-pirazol-4-il)quinolin-7-ol como un sólido amarillo (4,6 mg). LC/MS tR = 0,42 min. MS (M+1) = 486,3. 1H RMN (METANOL-d4) 58,43 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,02 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,24 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,20 (s, 1H), 5,14 (t, J=12,1 Hz, 1H), 4,04 (s, 3H), 2,99 (s, 3H), 2,64 (s, 3H), 1,66-1,79 (m, 2H), 1,53-1,66 (m, 2H), 1,41 (s, 6H), 1,26 (s, 6H).
Ejemplo 12-1: Síntesis de la sal de tipo formiato de 4-metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-¡l)qu¡nolin-6-ol
Figure imgf000054_0001
A 4-cloro-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol (Intermedio 13, 0,05 g, 0,12 mmol) en MeOH (0,2 mL), se añadió NaOMe (al 25 % p en metanol, 0,3 mL, 10 mmol). La mezcla se calentó a 165 °C con irradiación de microondas durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con DMSO (5 mL), se acidificó con ácido fórmico (0,5 mL) y se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (de un 5 a un 20 % de acetonitrilo en agua, con un 7,5 % de ácido fórmico como modificador) para proporcionar la sal de tipo formiato de 4-metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol (6 mg) como un sólido amarillo. LC/MS tR = 0,42 min. MS (M+1) = 422,5. 1H RMN (METANOL-d4) 58,57 (d, J=5,5 Hz, 1H), 8,40 (s a, 2H), 8,35 (s, 1H), 8,33 (d, J=10,0 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,42 (d, J=10,0 Hz, 1H), 6,96 (d, J=5,5 Hz, 1H), 5,48 (m, 1H), 4,12 (s, 3H), 3,08 (s, 3H), 2,05-1,94 (m, 4H), 1,68 (s, 6H), 1,53 (s, 6H).
Ejemplo de referencia 13-1: Síntesis de la sal de tipo clorhidrato de 7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-¡l)am¡no)p¡ridaz¡n-3-¡l)qu¡noxal¡n-6-ol
Figure imgf000054_0002
Paso 1: 4-Bromo-5-etoxibenceno-1,2-diamina
Se añadió ácido acético (2 mL) gota a gota a 4-bromo-5-etoxi-2-nitroanilina (5,00 g, 19,2 mmol) y zinc (6,47 g, 99,0 mmol) en CH2O 2 (100 mL) a 4 °C (¡precaución! La reacción es exotérmica). Una vez finalizada la reacción exotérmica, se añadió una porción adicional de AcOH (2 mL) a 4 °C y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante tres días. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar 4-bromo-5-etoxibenceno-1,2-diamina (8,41 g). MS (M+1) = 231,2
Paso 2: 6-Bromo-7-etoxiquinoxalina
Se añadió glioxal (8,8 M en agua, 1,7 mL, 15,0 mmol) a 4-bromo-5-etoxibenceno-1,2-diamina (1,16 g, 5,00 mmol) en THF (50 mL) y la mezcla de reacción se agitó durante 3 h. Se añadió gel de sílice (6 g) a la reacción y se concentró el disolvente al vacío. El material se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 10-50 % de EtOAc/EtOH 3:1, en heptano) para obtener 6-bromo-7-etoxiquinoxalina (0,94 g). MS (M+1) = 255,2, 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 58,91 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,81 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 4,32 (c, J=7,0 Hz, 2H), 1,46 (t, J=7,0 Hz, 3H).
Paso 3: 6-(7-Etoxiquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Siguiendo el procedimiento general de Bernhardt, S.; Manolikakes, G.; Kunz, T.; Knochel, P. Angew. Chem. Int. Ed. 2011, 50, 9205 -9209, se introdujo Zn(OPiv)2-2 LiCl (1,64 g, 4,64 mmol) en un matraz de tipo Schlenk dotado de una barra agitadora magnética y un septum y se secó durante 5 min al vacío con una pistola de calor. La sal de zinc se disolvió en THF anhidro (10 mL). Se añadió 6-bromo-7-etoxiquinoxalina (0,94 g, 3,71 mmol) y la mezcla se agitó durante 5 min a temperatura ambiente. Se añadieron limaduras de magnesio (0,23 g, 9,28 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 4 h. La solución se transfirió con una cánula a otro matraz de reacción. Se añadieron el Intermedio 1 (0,88 g, 3,09 mmol) y dicloruro de [1,3-bis(2,6-diisopropilfenil)imidazol-2-iliden](3-cloropiridil)paladio (II) (0,21 g, 0,31 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 5 días. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se eliminaron los componentes volátiles al vacío. Se añadió HCl acuoso 2 M al material crudo y la fase acuosa se lavó con DCM y se basificó hasta un pH de 11 con NaOH acuoso 6 M. El precipitado se recolectó mediante filtración y el filtrado se extrajo con DCM/MeOH 9:1 (3x). Los extractos orgánicos y el precipitado recolectado se mezclaron y se eliminaron los componentes volátiles al vacío. El material crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 2-15 % de amoniaco 7 M en MeOH, en DCM) seguida de una segunda purificación mediante HPLC preparativa de fase inversa (25-50 % de acetonitrilo en agua, con NH4OH 5 mM como modificador). Se obtuvo 6-(7-etoxiquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (0,05 g) como un sólido marrón. MS (M+1) = 421,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,84 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,78 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,34 (s, 1H), 7,95 (d, J=9,5 Hz, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,20 (d, J=9,5 Hz, 1H), 5,24-5,49 (m, 1H), 4,35 (c, J=7,0 Hz, 2H), 3,05 (s, 3H), 1,76 (dd, J=12,5, 3,5 Hz, 2H), 1,64 (t, J=12,5 Hz, 2H), 1,51 (t, J=7,0 Hz, 3H), 1,43 (s, 6H), 1,28 (s, 6H).
Paso 4: Sal de tipo clorhidrato de 7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinoxalin-6-ol.
Se añadió una solución de BBr3 en DCM (1 M, 1,0 mL, 1 mmol) rápidamente a 6-(7-etoxiquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (0,04 mg, 0,10 mmol) en DCM (1 mL). La mezcla de reacción se agitó a 40 °C durante 4 días. Se añadió MeOH a la reacción a 0 °C y se concentró el disolvente a presión reducida. El material crudo se disolvió con DMSO/amoniaco 7 N en MeOH 2:1 (6 mL) y se purificó mediante Hp Lc preparativa de fase inversa (15­ 40 % de acetonitrilo en agua, con hidróxido de amonio 5 mM como modificador). Las fracciones que contenían el producto se concentraron al vacío y el sólido resultante se disolvió en acetonitrilo/H2O 4:1 (5 mL). Se añadió HCl acuoso 1 M (3 equivalentes) y se concentró el disolvente al vacío para proporcionar clorhidrato de 7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinoxalin-6-ol como un sólido marrón (26 mg). LC/MS tR = 0,48 min. Ms (M+1) = 393,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,89 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,83 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,54 (d, J=10,0 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,11 (d, J=10,0 Hz, 1H), 7,58 (s, 1H), 4,97 (s a, 1H), 3,25 (s, 3H), 1,95-2,29 (m, 4H), 1,67 (s, 6H), 1,59 (s, 6H).
PREPARACIÓN 14
Intermedio 14: Síntesis de 7-bromo-6-metoxi¡soqu¡nol¡n-1-ol
Figure imgf000055_0001
En un vial para microondas de 10 mL, se disolvió 7-bromo-1-cloro-6-metoxiisoquinolina (240 mg, 0,881 mmol) en ácido acético (5041 |jl, 88 mmol). La mezcla se calentó a 150 °C durante 180 min en un microondas. A continuación, se añadió agua al recipiente de la reacción. El precipitado resultante se recolectó, se lavó con agua y a continuación se dejó secar al vacío para proporcionar 7-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-ol, Intermedio 14 (171 mg, 0,660 mmol, 74,9 % de rendimiento). MS (M+1) = 256,3. 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 511,27 (d, J=3,26 Hz, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,20 (dd, J=5,77, 7,03 Hz, 1H), 6,52 (d, J=7,03 Hz, 1H), 3,96 (s, 3H).
PREPARACIÓN 15
Intermedio 15: Síntesis de 2-h¡drox¡-4-metox¡-5-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)benzaldehído
Figure imgf000055_0002
Paso 1: 5-Bromo-2-hidroxi-4-metoxibenzaldehído
En un matraz de 250 mL, se disolvió 2-hidroxi-4-metoxibenzaldehído (5 g, 32,9 mmol) en ácido acético (65,7 mL) y se enfrió hasta 0 °C, a continuación se añadió lentamente Br2 (1,862 mL, 36,1 mmol) en 10 mL de ácido acético. Una vez completada la adición, se permitió que la mezcla de reacción se calentara hasta temperatura ambiente y se agitó durante 2 h. Se añadieron 100 mL de agua al matraz de reacción y el precipitado blanco resultante se filtró y se lavó con agua. Un secado al vacío proporcionó el compuesto del título (6,8 g, 29,4 mmol, 90 % de rendimiento). MS (M+1) = 233,3. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 511,45 (s, 1H), 9,70 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 6,49 (s, 1H), 3,96 (s, 3H).
Paso 2: 2-Hidroxi-4-metoxi-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzaldehído
El compuesto del título (4,9 g, 17,6 mmol, 82 % de rendimiento) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 7-1 para la formación de un éster de tipo boronato a partir de 5-bromo-2-hidroxi-4-metoxibenzaldehído (5,0 g, 21,64 mmol) y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-5 % de MeOH/DCM). MS (M+1) = 279,3.
PREPARACIÓN 16
Intermedio 16: Síntesis de trifluorometanosulfonato de 2-formil-5-metoxi-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-i l)fenilo
Figure imgf000056_0001
Paso 1: 2-Hidroxi-4-metoxi-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)benzaldehído
El compuesto del título (3,5 g, 8,78 mmol, 53 %) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 9-1 para la reacción de Suzuki del Intermedio 1 (4,7 g, 16,62 mmol) y el Intermedio 15 (7,86 g, 28,3 mmol). MS (M+1) = 399,2.
Paso 2: Trifluorometanosulfonato de 2-formil-5-metoxi-4-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenilo En un matraz de 100 mL, se disolvieron 2-hidroxi-4-metoxi-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)benzaldehído (2,07 g, 5,19 mmol) y N-feniltrifluorometanosulfonimida (3,71 g, 10,39 mmol) en DCM (26,0 mL) en atmósfera de N2. Se añadió TEA (2,90 mL, 20,78 mmol) y la mezcla heterogénea se agitó durante varias horas a TA hasta que se observó una disolución completa. La reacción se agitó durante toda la noche, a continuación se arrastró con una cantidad mínima de DCM y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (1-20 % de MeOH/DCM, se eluye con un 5 % de MeOH, columna pretratada con TEA). Las fracciones recolectadas se concentraron y se sometieron a un vacío elevado durante varios días para proporcionar el compuesto del título (2,3 g, 4,03 mmol, 78 % de rendimiento). MS (M+1) = 399,2.
PREPARACIÓN 17
Intermedio 17: Síntesis de trifluorometanosulfonato de 2-formil-5-metoxi-4-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)fenilo
Figure imgf000056_0002
Paso 1: 2-Hidroxi-4-metoxi-5-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)benzaldehído
El compuesto del título (3,5 g, 8,78 mmol, 53 %) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 9-1 para la reacción de Suzuki del Intermedio 15 (2,63 g, 9,45 mmol) y el Intermedio 3 (1,5 g, 5,56 mmol). MS (M 1) = 386,5. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 59,82 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,85 (d, J = 9,35 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 9,09 Hz, 1H), 6,56 (s, 1H), 5,76-5,90 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 2,24 (dd, J = 4,04, 12,38 Hz, 2H), 1,35 (m, 8H), 1,14-1,27 (s, 6H).
Paso 2. Trifluorometanosulfonato de 2-formil-5-metoxi-4-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)fenilo Se disolvieron 2-Hidroxi-4-metoxi-5-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)benzaldehído (500 mg, 1,297 mmol) y N-feniltrifluorometanosulfonimida (927 mg, 2,59 mmol) en DCM (6486 ^L) en atmósfera de N2. Se añadió trietilamina (723 ^L, 5,19 mmol) y la mezcla heterogénea se agitó durante varias horas a temperatura ambiente hasta que se observó una disolución completa. Después de agitar durante toda la noche, la reacción se arrastró con una cantidad mínima de diclorometano y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (1-20 % de MeOH/DCM, se eluyó con un 5 % de MeOH, columna pretratada con TEA) para proporcionar el compuesto del título (650 mg, 1,256 mmol, 97 % de rendimiento). MS (M 1) = 518,1.
MÉTODO GENERAL 8-1:
Procedimiento representativo para la formación de la base libre con MP-carbonato
La sal del producto y ácido trifluoroacético procedente de la purificación por HPLC preparativa de fase inversa se disuelve en MeOH y se introduce en un cartucho de PL-HCO3 MP® (Agilent Technologies) acondicionado previamente con MeOH. A continuación, el cartucho se lava con exceso de MeOH para proporcionar el producto en forma de base libre. MP-carbonato, que es una base unida a una resina, también se puede adquirir de Biotage (número del producto 800267 para 10 gramos). El nombre químico para MP-carbonato es metilpoliestireno-carbonato de trietilamonio macroporoso.
MÉTODO GENERAL 9-1 para la reacción de Suzuki
Procedimiento representativo para el acoplamiento de Suzuki con Pd2(dba)3 y SPhos
Una mezcla de un intermedio de tipo cloropiridazina, tal como el Intermedio 1 (1,0 equivalente), un reactivo de tipo ácido borónico (1,5-2 equivalentes), SPhos (0,2 equivalentes), Pd2(dba)3 (0,05 equivalentes) y K3PO4 (3 equivalentes) en dioxano/agua 4:1 (0,2 M) se calentó en un baño de aceite a 100 °C durante 18 h. La mezcla se concentró al vacío y el residuo crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (1-30 % de MeOH/DCM, columna pretratada con TEA). MÉTODO GENERAL 10-1 para la reacción de Sonogashira
Procedimiento representativo para la reacción de Sonogashira
Se disolvió el Intermedio 16 o el Intermedio 17 (1 equivalente) en acetonitrilo anhidro (tamices moleculares de 5 A) y TEA (0,1 M, relación: 3:1). Se añadieron acetileno (4 equivalentes), Cul (0,6 equivalentes) y Pd(PPh3)2Cl2 (0,3 equivalentes). El recipiente se purgó con N2 y se agitó a temperatura ambiente durante 6 h. La mezcla se concentró al vacío. El residuo crudo se arrastró con diclorometano y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (1-20 % de MeOH/DCM, se eluye con un 10 % de MeOH, columna pretratada con TEA) y se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional.
MÉTODO GENERAL 11-1 para la formación de la isoquinolina
Procedimiento representativo para la ciclación del aldehído
En un vial para microondas, el producto procedente de la reacción de Sonogashira (1 equivalente) y NH3 (2 M en MeOH) (2-5 mL) se combinaron y se calentaron en un microondas durante 30 min a 150 °C. El producto crudo se concentró, se diluyó con una cantidad mínima de MeOH y se purificó mediante HPLC prep. (0,1 % de TFA/MeCN/H2O) o se prosiguió con él sin purificación adicional.
Ejemplo 14-1: Síntesis de 6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-¡l)auinol¡n-7-ol
Figure imgf000057_0001
Utilizando los procedimientos descritos en el Ejemplo 8-1, Pasos 1-4, partiendo de 2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acetaldehído y (2-amino-5-bromo-4-metoxifenil)metanol, se obtuvo 6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)quinolin-7-ol como un sólido de color amarillo claro. LC/MS tR = 0,48 min. MS (M+1) = 476,5. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,71 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,31 (d, J=9,6 Hz, 1H), 8,20 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,38 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,15-5,29 (m, 1H), 4,12 (d, J=11,1 Hz, 2H), 3,57-3,73 (m, 2H), 3,07 (m, 4H), 1,87-2,00 (m, 4H), 1,72-1,81 (m, 2H), 1,60-1,71 (m, 2H), 1,45 (s, 6H), 1,29 (s, 6H).
Ejemplo 15-1: Síntesis de 3-cloro-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000058_0001
Utilizando los procedimientos descritos en el Ejemplo 7-1, Pasos 1-2, partiendo de 6-(6-metoxiquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Ejemplo 6-1 Paso 3, 50 mg, 0,123 mmol), se obtuvo 3-cloro-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol (6 mg) como un sólido de color amarillo claro. LC/MS tR = 0,57 min. MS (M+1) = 426,2.
Ejemplo 15-2: Síntesis de 3-bromo-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡dazin-3-¡l)qu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000058_0002
Utilizando los procedimientos descritos en el Ejemplo 7-2, Pasos 1-2, partiendo de 6-(6-metoxiquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Ejemplo 6-1 Paso 3, 200 mg, 0,493 mmol), se obtuvo 3-bromo-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol (48 mg) como un sólido de color amarillo claro. LC/MS tR = 0,60 min. MS (M+1) = 472,1. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,71 (d, J=2,3 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,42 (d, J=2,2 Hz, 1H), 8,34 (d, J=9,9 Hz, 1H), 7,40 (d, J=9,9 Hz, 1H), 7,30 (s, 1H), 5,37-5,17 (m, 1H), 3,08 (s, 3H), 1,75 (dd, J=36,1, 12,5 Hz, 4H), 1,47 (s, 6H), 1,32 (s, 6H).
Ejemplo 15-3: Síntesis de 3-met¡l-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000058_0003
Paso 1. 7-Bromo-6-metoxi-3-metilquinolina
De acuerdo con el procedimiento general de Matsugi, M et al., Tetrahedron Lett., 2000, 41, 8523, a una solución de 3-bromo-4-metoxianilina (1,00 g, 4,95 mmol) en HCl 6 M (25 mL) y tolueno (6 mL) calentada hasta 100 °C, se añadió metacroleína (0,408 mL, 4,95 mmol) gota a gota. Se siguió calentando durante dos horas. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se separaron las fases. La fase acuosa se basificó hasta un pH de 12 mediante la adición de NaOH 2 M, se extrajo con DCM (5x) y acetato de etilo (2x). Los componentes orgánicos combinados se secaron con MgSO4 y se concentraron para proporcionar un residuo verde. La cromatografía en gel de sílice (gradiente de 3-40 % de EtOAc en DCM) proporcionó el compuesto del título más móvil, 7-bromo-6-metoxi-3-metilquinolina (373 mg) como un sólido blanquecino, TLC (DCM/EtOAc 9:1) Rf 0,6, MS (M+1) = 254,2, 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,57 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,18 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 4,01 (s, 3 H), 2,50 (s, 3 H), y el isómero menos móvil, 5-bromo-6-metoxi-3-metilquinolina, (245 mg) como un sólido marrón, t Lc (9:1 DCM/EtOAc) Rf 0,6, MS (M+1) = 254,2, 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,63 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,35-8,43 (m, 1H), 8,03 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,66 (d, J=9,1 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H), 2,59 (s, 3H).
Paso 2. Ácido (6-metoxi-3-metilquinolin-7-il)borónico
Utilizando los procedimientos descritos en el Ejemplo 6-2, Paso 2, partiendo de 7-bromo-6-metoxi-3-metilquinolina (373 mg), se obtuvo el ácido (6-metoxi-3-metilquinolin-7-il)borónico como un sólido blanquecino (176 mg) tras la purificación del producto crudo mediante cromatografía en gel de sílice (12 g de gel de sílice, 2-30 % de MeOH en DCM en 30 volúmenes de columna). MS (M+1) = 218,3. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,54 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 3,95 (s, 3H), 2,52 (s, 3H).
Paso 3. 6-(6-Metoxi-3-metilquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Utilizando los procedimientos descritos en el Ejemplo 6-2, Paso 3, partiendo del ácido (6-metoxi-3-metilquinolin-7-il)borónico (172 mg, 0,79 mmol), se obtuvo 6-(6-metoxi-3-metilquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (144 mg) como un sólido de color amarillo claro. MS (M+1) = 420,6. 1H RMN (400 MHz, MEt ANOL- d4) 5 ppm 8,59 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,81 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,14 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,23 (t, J=12,4 Hz, 1H), 3,99 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 2,54 (s, 3H), 1,66-1,74 (m, 2H), 1,51-1,62 (m, 2H), 1,38 (s, 6H), 1,23 (s, 6H).
Paso 4. 3-Metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol
Se sometió 6-(6-metoxi-3-metilquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (144 mg, 0,34 mmol) a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-2. El material crudo se sometió a cromatografía en gel de sílice (MÉTODO GENERAL 4-1) para proporcionar 3-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol como un sólido amarillo (107 mg). LC/MS tR = 0,49 min MS (M+1) = 406,6. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,54 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,28 (d, J=10,1 Hz, 1H), 7,95 (s a., 1H), 7,37 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,24 (s, 1H), 5,08-5,24 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 2,51 (s, 3H), 1,68-1,77 (m, 2H), 1,54-1,66 (m, 2H), 1,40 (s, 6H), 1,24 (s, 6H).
Ejemplo 16-1: Síntesis de 5-bromo-3-met¡l-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡ridaz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000059_0001
A una solución de 3-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol (Ejemplo 15-3, 36 mg, 0,089 mmol) en DCM (1 mL), se añadió N-bromosuccinimida (19 mg, 0,11 mmol). Después de agitar durante una hora, la mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con bisulfito de sodio saturado y salmuera, se secó con sulfato de magnesio y se concentró a presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice de acuerdo con el MÉTODO GENERAL 4-1 para proporcionar 5-bromo-3-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol (20 mg) como un sólido amarillo. LC/MS tR = 0,58 min. MS (M+1) = 486,4. 1H Rm N (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,58 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,38 (s, 1H), 8,34 (d, J=10,1 Hz, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,40 (d, J=10,1 Hz,1H), 5,22 (m,1H), 3,07 (s, 3H), 2,59 (s, 3H), 1,73-1,82 (m, 2H), 1,60-1,72 (m, 2H), 1,46 (s, 6H), 1,30 (s, 6H).
Ejemplo de referencia 17-1: Síntesis de 6 hidroxi-1-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-¡l)quinol¡n-4(1H)-ona
Figure imgf000059_0002
Paso 1: 6-Metoxi-1-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona
Se agitaron 6-metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1 H)-ona (PREPARACIÓN 13, Paso 3) (0,07 g, 0,17 mmol), yodometano (0,05 g, 0,32 mmol) y KH (al 50 % en peso en parafina, 0,02 g, 0,03 mmol) en THF anhidro (2,0 mL) y DMF anhidra (0,6 mL) a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno anhidro durante 1 h. Se añadió una solución de bicarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La fase acuosa se extrajo con DCM/MeOH 9:1 (3x). Las fases orgánicas combinadas se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 2-15 % de amoniaco 7 M en MeOH, en DCM) para proporcionar 6-metoxi-1-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il) quinolin-4(1H)-ona como un sólido marrón (90 mg). MS (M+1) = 436,5. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,10 (s, 1H), 8,02 (d, J=7,4 Hz, 1H), 7,98 (d, J=9,8 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,18 (d, J=9,7 Hz, 1H), 6,33 (d, J=7,4 Hz, 1H), 5,47-5,30 (m, 1H), 4,01 (s, 3H), 4,01 (s, 3H), 3,03 (s, 3H), 1,79 (d, J=13,1 Hz, 2H), 1,70 (t, J=12,9 Hz, 2H), 1,47 (s, 6H), 1,32 (s, 6H).
Paso 2: 6-Hidroxi-1-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona
Se añadió una solución de BBr3 (1,0 M en DCM, 1,0 mL, 1,0 mmol) a 6-metoxi-1-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona (0,09 g, 0,20 mmol) en DCM (2,0 mL) y la reacción se agitó a reflujo durante 5 h. A continuación, la mezcla de reacción se añadió gota a gota a MeOH (10 mL) y se concentró el disolvente a presión reducida. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (de un 15 a un 40 % de acetonitrilo en agua, con modificador de hidróxido de amonio 5 mM) y las fracciones que contenían el producto se concentraron al vacío. El sólido resultante se suspendió en acetonitrilo/agua (3/1 mL) y a continuación se añadió HCl acuoso 1 M (3 equivalentes). Se concentró el disolvente al vacío para proporcionar la sal de tipo clorhidrato de 6-hidroxi-1-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4(1H)-ona como un sólido amarillo (28 mg). LC/MS tR = 0,43 min. MS (M+1) = 422,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,80 (d, J=7,0 Hz, 1H), 8,58 (d, J=10,2 Hz, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,06 (d, J=10,0 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,13 (d, J=6,7 Hz, 1H), 5,02 (a.s, 1H), 4,43 (s, 3H), 3,26 (s, 3H), 2,27-2,02 (m, 4H), 1,68 (s, 6H), 1,59 (s, 6H).
Ejemplo de referencia 18-1: Síntesis de 2,3-dimetil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-¡l)qu¡noxalin-6-ol
Figure imgf000060_0001
Paso 1: 6-Bromo-7-etoxi-2,3-dimetilquinoxalina
Se añadió biacetilo (0,51 mL, 5,85 mmol) a 4-bromo-5-etoxibenceno-1,2-diamina (Ejemplo 13-1, Paso 1) (1,04 g, 4,50 mmol) y cloruro de amonio (0,24 g, 4,50 mmol) en MeOH (45 mL) y la reacción se agitó a reflujo durante 3 h. Se añadió gel de sílice (6 g) y se eliminó el disolvente al vacío. La cromatografía en gel de sílice (gradiente de 5-40 % de EtOAc/EtOH 3:1, en heptano) proporcionó 6-bromo-7-etoxi-2,3-dimetilquinoxalina como un sólido naranja (1,04 g). MS = 281,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,15 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 4,28 (c, J=7,0 Hz, 2H), 2,70 (s, 3H), 2,70 (s, 3H), 1,55 (t, J=7,0 Hz, 3H).
Paso 2: Ácido (7-etoxi-2,3-dimetilquinoxalin-6-il)borónico
Se añadieron bis(pinacolato)diboro (0,50 g, 2,0 mmol), KOAc (0,29 g, 3,0 mmol) y PdCh (dppf).CH2Cl2 (0,06 g, 0,07 mmol) a 6-bromo-7-etoxi-2,3-dimetilquinoxalina (0,28 g, 0,99 mmol) en dioxano (5 mL). La mezcla se calentó a 80 °C durante toda la noche en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA, se filtró a través de Celite® (embudo de filtración preempaquetado) lavando con EtOAc y se concentró al vacío para proporcionar el ácido (7-etox¡-2,3-dimetilquinoxalin-6-il)borónico como un sólido negro. Ms (M+1) = 247,1.
Paso 3: 6-(7-Etoxi-2,3-dimetilquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se añadieron ácido (7-etoxi-2,3-dimetilquinoxalin-6-il)borónico (0,49 g, 1,98 mmol), 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (0,85 g, 3,00 mmol) y Na2CO3 (0,81 g, 3,9 mmol) a un vial para microondas. A continuación, se añadió Pd(PPh3)4 (0,23 g, 0,20 mmol) seguido de la adición de 1,4-dioxano (8,5 mL) y agua (1,4 mL). La mezcla de reacción se selló herméticamente y se calentó en un reactor de microondas Biotage® Initiator a 130 °C durante 1 h. Se añadió una solución de NaHCO3 a la reacción y la fase acuosa se extrajo con DCM (3x). Las fases orgánicas combinadas se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 1-15 % de amoniaco 7 M en MeOH, en DCM) seguida de una segunda purificación mediante HPLC preparativa de fase inversa (5-20 % de acetonitrilo en agua, con un 7,5% de ácido fórmico como modificador). Se obtuvo la base libre de las fracciones que contenían el producto mediante adsorción y liberación utilizando SiliaBond® con ácido propilsulfónico (4 eq, acetonitrilo como eluyente y una solución de amoniaco 2 N en MeOH para liberar el material). Se concentró el disolvente al vacío para obtener 6-(7-etoxi-2,3-dimetilquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpi peridi n-4-il)piridazin-3-amina como un sólido amarillo (0,35 g). MS (M+1) = 449,5. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,23 (s, 1H), 7,93 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,20 (d, J=9,7 Hz, 1H), 5,31 (t, J=12,6 Hz, 1H), 4,32 (c, J=7,0 Hz, 2H), 3,06 (s, 3H), 2,77 (s, 3H), 2,75 (s, 3H), 1,77 (dd, J=12,6, 3,5 Hz, 2H), 1,64 (t, J=12,4 Hz, 2H), 1,50 (t, J=7,0 Hz, 3H), 1,44 (s, 6H), 1,29 (s, 6H).
Paso 4: 2,3-Dimetil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinoxalin-6-ol
Se añadió una solución de BBr3 (1,0 M en DCM, 7,7 mL, 7,7 mmol) a 6-(7-etoxi-2,3-dimetilquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (0,35 g, 0,77 mmol) en DCM (7 mL). La mezcla de reacción se agitó a 40 °C durante toda la noche. La mezcla de reacción se añadió a MeOH (50 mL) a 0 °C y se concentró el disolvente a presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 1-15 % de amoniaco 7 M en MeOH, en DCM). Las fracciones que contenían el producto se concentraron al vacío y el sólido resultante se disolvió en acetonitrilo/agua 4:1 (15 mL). Se añadió HCl acuoso 1 M (3 equivalentes) y se concentró el disolvente al vacío para proporcionar la sal de tipo clorhidrato de 2,3-dimetil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinoxalin-6-ol como un sólido amarillo (0,26 g). LC/MS tR = 0,53 min. MS (M+1) = 421,3. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 8,52 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,11 (a.s, 1H), 7,56 (s, 1H), 4,92 (parcialmente oculto bajo el pico de agua residual, 1H), 3,25 (s, 3H), 2,86 (s, 3H), 2,81 (s, 3H), 2,36-1,95 (m, 4H), 1,66 (s, 6H), 1,58 (s, 6H).
Ejemplos de referencia 18-2 y 18-3: Síntesis de 2-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-¡l)qu¡noxalin-6-ol y 3-met¡l-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡ridaz¡n-3-¡l)qu¡noxal¡n-6-ol
Figure imgf000061_0001
Paso 1: 6-Bromo-7-etoxi-2-metilquinoxalina y 7-bromo-6-etoxi-2-metilquinoxalina
Se añadió 2-oxopropanal (8,26 g, 45,8 mmol) gota a gota a 4-bromo-5-etoxibenceno-1,2-diamina (Ejemplo 13-1 Paso 1) (8,41 g, 36,4 mmol) en THF (360 mL) y la reacción se agitó durante toda la noche. Se eliminó el disolvente al vacío y el material crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 25-50 % de EtOAc/EtOH 3:1, en heptano) para obtener una mezcla de 6-bromo-7-etoxi-2-metilquinoxalina y 7-bromo-6-etoxi-2-metilquinoxalina (2,04 g). MS (M+1) = 269,1. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) como una mezcla 1,7:1,0 de regioisómeros 58,67 (s) y 8,60 (s) (1H), 8,30 (s) y 8,26 (s) (1H), 7,36 (s) y 7,35 (s) (1H), 4,26 (c, J=7,0 Hz) y 4,26 (c, J=7,0 Hz) (2H), 2,71 (s, 3H), 1,57 (t, J=6,9 Hz) y 1,54 (t, 7,0 Hz) (3H).
Paso 2: 6-Etoxi-2-metil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinoxalina, ácido (7-etoxi-3-metilquinoxalin-6-il)borónico, y 7-etoxi-2-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinoxalina y ácido (7-etoxi-2-metilquinoxalin-6-il)borónico
Se calentaron bis(pinacolato)diboro (4,85 g, 19,1 mmol), KOAc (2,25 g, 22,3 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 (0,47 g, 0,08 mmol), 6-bromo-7-etoxi-2-metilquinoxalina y 7-bromo-6-etoxi-2-metilquinoxalina (2,04 g, 7,64 mmol) en dioxano (75 mL) a 80 °C durante toda la noche. La mezcla de reacción se enfrió hasta Ta , se filtró a través de Celite® (embudo de filtración preempaquetado) lavando con EtOAc y se concentró al vacío. La cromatografía en gel de sílice (gradiente de 5-30 % de MeOH en DCM) proporcionó una mezcla 2,1:1,0 de ácido (7-etoxi-3-metilquinoxalin-6-il)borónico, ácido (7-etox¡-2-metilquinoxalin-6-il)borónico y 6-etoxi-2-metil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinoxalina, 7-etoxi-2-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinoxalina como un aceite de color oscuro. (M+1) = 233,3 y 315,3.
Paso 3: 6-(7-Etoxi-3-metilquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina y 6-(7-etoxi-2-metilquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Una mezcla de 6-etoxi-2-metil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinoxalina, ácido (7-etoxi-3-metilquinoxalin-6-il)borónico, 7-etoxi-2-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinoxalina y ácido (7-etoxi-2-metilquinoxalin-6-il)borónico, 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1, 2,52 g, 8,90 mmol), fosfato de tripotasio acuoso (0,5 M, 36 mL, 18 mmol), precatalizador de XPhos de 2.a generación (0,21 g, 0,27 mmol) y XPhos (0,12 g, 0,27 mmol) en THF/agua 1:1 (64 mL) se agitó a 50 °C durante toda la noche. La mezcla de reacción se concentró al vacío y se diluyó con agua. La fase acuosa se extrajo con DCM/MeOH 9:1 (3x). Las fases orgánicas combinadas se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. La cromatografía en gel de sílice (gradiente 1-15 % de amoniaco 7 M en MeOH, en DCM) proporcionó 6-(7-etoxi-3-metilquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina y 6-(7-etoxi-2-metilquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (2,60 g) como una mezcla de regioisómeros 2:1). MS (M+1) = 435,5. 1H RMN (400 MHz, MEt ANOL-d4) 58,75 (s) y 8,68 (s) (1H), 8,27 (s) y 8,23 (s) (1H), 7,91 (d, J=9,7 Hz) y 7,90 (d, J=9,7 Hz) (1H), 7,52 (s) y 7,46 (s) (1H), 7,20-7,10 (m, 1H), 5,27 (t, J=12,6 Hz, 1H), 4,31 (c, J=7,0 Hz) y 4,30 (c, J=6,9 Hz) (2H), 3,02 (s) y 2,93 (s) (3H), 2,75 (s) y 2,74 (s) (3H), 1,72 (dd, J=12,5, 3,5 Hz) y 1,68-1,50 (m) (4H), 1,48 (t, J=7,0 Hz) y 1,48 (t, J=7,0 Hz) (3H), 1,39 (s) y 1,33 (s) (6H), 1,24 (s) y 1,20 (s) (6H).
Paso 4: 2-Metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinoxalin-6-ol y 3-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinoxalin-6-ol
Se añadió una solución de BBr3 (1,0 M en DCM, 16 mL, 16 mmol) a 6-(7-etoxi-2-metilquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidi n-4-il)piridazin-3-amina y 6-(7-etoxi-3-metilquinoxalin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (0,70 g, 1,61 mmol) en DCM (16 mL) y la reacción se agitó a reflujo durante toda la noche. A continuación, la mezcla se añadió gota a gota a MeOH (50 mL) a 0 °C y se concentró el disolvente a presión reducida. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (de un 15 a un 40 % de acetonitrilo en agua, con modificador de hidróxido de amonio 5 mM) y los regioisómeros se separaron mediante SFC preparativa (columna AS-H 21 x 250 mm, 15 % de MeOH NH4OH 10 mM en CO2). Se eliminó el paladio residual en cada uno de ellos utilizando el MÉTODO GENERAL 6-1. Los dos sólidos se suspendieron por separado en acetonitrilo/agua 3:1 (8 mL). Se añadió HCl acuoso 1 M (3 equivalentes) y se concentró el disolvente al vacío para proporcionar dos sólidos amarillos, el regioisómero mayoritario (56 mg) y el regioisómero minoritario (19 mg). Los intentos de determinar la estructura por RMN no fueron capaces de distinguir de forma concluyente los dos regioisómeros.
Regioisómero mayoritario, 18-3 LC/MS tR = 0,49 min. MS (M+1) = 407,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,80 (s, 1H), 8,53 (d, J=9,9 Hz, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,08 (d, J=10,0 Hz, 1H), 7,50 (s, 1H), 5,00 (parcialmente oculto bajo el pico de agua residual, 1H) 3,23 (s, 3H), 2,80 (s, 3H), 2,19-1,99 (m, 4H), 1,66 (s, 6H), 1,58 (s, 6H).
Regioisómero minoritario, 18-2 LC/MS tR = 0,50 min; MS (M+1) = 407,3. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,86 (s, 1H), 8,54 (d, J=9,9 Hz, 1H), 8,34 (s, 1H), 8,10 (d, J=9,9 Hz, 1H), 7,56 (s, 1H), 4,97 (parcialmente oculto bajo el pico de agua residual, 1H), 3,24 (s, 3H), 2,77 (s, 3H), 2,23-1,98 (m, 4H), 1,66 (s, 6H), 1,58 (s, 6H).
Ejemplo 19-1: Síntesis de 4-metox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡ridaz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000062_0001
A una mezcla del Intermedio 12 (19,5 mg, 0,046 mmol) en MeOH (0,8 mL), se añadió NaOMe (al 25 % p en metanol, 0,084 mL, 0,37 mmol). La mezcla se calentó a 120 °C con irradiación de microondas durante 1 h. Se añadió una porción adicional de NaOMe (al 25% p en metanol, 0,08 mL) y a continuación la mezcla se calentó a 130 °C durante 2 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se acidificó mediante la adición de HCl 1 M en éter y se sometió a una purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico). El producto crudo se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa de fase inversa para obtener el compuesto del título como un sólido blanco (8 mg). LC/MS tR = 0,39 min. MS (M+1) = 422,3. 1H RMN (METANOL-d4) 58,50 (s, 1H), 8,47 (d, J=5,6 Hz, 1H), 8,14 (d, J=10,1 Hz, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,24 (d, J=10,1 Hz, 1H), 6,74 (d, J=5,6 Hz, 1H), 5,07 (t, J=12,1 Hz, 1H), 4,02 (s, 3H), 2,94 (s, 3H), 1,58-1,70 (m, 2H), 1,46-1,58 (m, 2H), 1,32 (s, 6H), 1,16 (s, 6H).
Ejemplo 20-1: Síntesis de 4-(azet¡d¡n-1-¡l)-2-met¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000062_0002
A una mezcla del Intermedio 11 (31 mg, 0,070 mmol) en NMP (0,8 mL), se añadió azetidina (0,047 mL, 0,70 mmol). La mezcla se calentó a 130 °C con irradiación de microondas durante 2 h. La mezcla se enfrió hasta ^temperatura ambiente, se acidificó mediante la adición de HCl 1 M en éter y se sometió a una purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico). El producto crudo se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa de fase inversa para obtener 4-(azetidin-1 -il)-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidi n-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-7-ol como un sólido de color amarillo claro (16 mg). LC/MS tR = 0,48 min. Ms (M+1) = 461,3. 1H RMN (METANOL-d4) 58,17 (s, 1H), 8,11 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,14 (d, J=9,6 Hz, 1H), 6,74 (s, 1H), 5,81 (s, 1H), 5,22 (t, J=12,4 Hz, 1H), 4,62 (t, J=7,6 Hz, 4H), 2,99 (s, 3H), 2,56 (dt, J=15,5, 7,6 Hz, 2H), 2,44 (s, 3H), 1,66-1,75 (m, 2H), 1,54-1,66 (m, 2H), 1,40 (s, 6H), 1,25 (s, 6H).
Ejemplo 20-2: Síntesis de 7-hidroxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4-carbonitrilo
Figure imgf000063_0001
Una mezcla del Intermedio 11 (40 mg, 0,091 mmol), cianuro de zinc (21 mg, 0,18 mmol) y tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (11 mg, 9,1 |jmol) en NMP (1 mL) se sometió al vacío, se rellenó con N2 (4x) y se calentó con irradiación de microondas a 150 °C durante 1,5 h. La mezcla de reacción se filtró a través de celite, se lavó con MeOH, se concentró y se sometió a una purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaSond® con ácido propilsulfónico). El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa para obtener 7-hidroxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4-carbonitrilo como un sólido amarillo (22 mg). LC/MS tR = 0,54 min. MS (M+1) = 431,3. 1H RMN (METANOL-d4) 58,37 (s, 1H), 8,24 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,33 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,23 (t, J=11,9 Hz, 1H), 3,05 (s, 3H), 2,71 (s, 3H), 1,70-1,81 (m, 2H), 1,58-1,69 (m, 2H), 1,43 (s, 6H), 1,27 (s, 6H).
Ejemplo 20-3: Síntesis de 4-c¡cloprop¡l-2-met¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡ridaz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000063_0002
Paso 1: 6-(4-Cidopropil-7-metoxi-2-metilquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetmmetilpiperidin-4-il)pindazin-3-amina
Un matraz que contenía una mezcla de 6-(4-cloro-7-metoxi-2-metilquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (PREPARACIÓN 11 Paso 5, 48 mg, 0,11 mmol), ciclopropiltrifluoroborato (24 mg, 0,16 mmol), n-butildi-1-adamantilfosfina (5 mg, 0,013 mmol) y carbonato de cesio (103 mg, 0,32 mmol) en tolueno (1 mL) y agua (0,1 mL) se sometió al vacío, se rellenó con N2 (4x) y se calentó a 100 °C durante 7 h. La mezcla de reacción se concentró y se acidificó mediante la adición de HCl 1 M en éter. La purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 2 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico) proporcionó el producto crudo como un sólido de color marrón claro (50 mg, 93% de pureza).
Paso 2: 4-Cidopropil-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetmmetilpipendin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol
Se sometió 6-(4-ciclopropil-7-metoxi-2-metilquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (50 mg, 0,10 mmol) a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-3 utilizando BBr3. La purificación por HPLC preparativa de fase inversa proporcionó 4-ciclopropil-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol como un sólido beige (28 mg). LC/MS tR = 0,46 min. MS (M+1) = 446,3. 1H RMN (METANOL-d4) 58,70 (s, 1H), 8,29 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,32 (d, J=9,6 Hz, 1H), 6,86 (s, 1H), 5,17 (t, J=12,4 Hz, 1H), 3,04 (s, 3H), 2,60 (s, 3H), 2,53-2,65 (m, 1H), 1,67-1,80 (m, 2H), 1,54-1,67 (m, 2H), 1,41 (s, 6H), 1,26 (s, 6H), 1,21-1,24 (m, 2H), 0,88-0,95 (m, 2H).
Ejemplo 20-4: Síntesis de 4-(3.6-d¡h¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)-2-met¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nolin-7-ol
Figure imgf000063_0003
Una mezcla del Intermedio 11 (27 mg, 0,061 mmol), éster pinacólico del ácido 3,6 dihidro-2H-piran-4-borónico (38,7 mg, 0,18 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (7 mg, 6 jm ol) y NaHCO3 (solución acuosa 1 M, 0,18 mL, 0,18 mmol) en 1,4-dioxano (0,8 mL) se sometió al vacío, se rellenó con N2 (4x) y se calentó con irradiación de microondas a 120 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite®, se lavó con MeOH, se concentró y se sometió a una purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico). El producto crudo se purificó adicionalmente mediante cromatografía en gel de sílice (MÉTODO GENERAL 4-1) para obtener 4-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol como un sólido amarillo (27 mg). LC/MS tR = 0,43 min. MS (M+1) = 488,3. 1H RMN (METANOL-d4) 58,36 (s, 1H), 8,12 (d, J=10,1 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,30 (d, J=10,1 Hz, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,01 (t, J=1,5 Hz, 1H), 5,14 (t, J=12,1 Hz, 1H), 4,41 (c, J=2,5 Hz, 2H), 4,04 (t, J=5,3 Hz, 2H), 3,03 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 2,56 (dd, J=4,5, 2,5 Hz, 2H), 1,67-1,74 (m, 2H), 1,52-1,64 (m, 2H), 1,39 (s, 6H), 1,20-1,27 (m, 6H).
Ejemplo 20-5: Síntesis de la sal de tipo formiato de 2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(tetrah¡dro-2H-piran-4-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000064_0001
Una mezcla del Ejemplo 20-4 (14 mg, 0,029 mmol), Pd-C (3 mg, al 10 % p sobre carbón, 3 |jmol), Pd(OH)2 (2,0 mg, al 20 % p sobre carbón, 3 jmol) y una gota de una solución acuosa concentrada de HCl en metanol (10 mL) se sometió al vacío, se rellenó con H2 (4x) y se agitó en atmósfera de H2 (50 psi) en un hidrogenador agitador Parr a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite®, se lavó con MeOH, se concentró y se sometió a una purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico). El producto crudo se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa de fase inversa para obtener la sal de tipo formiato de 2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(tetrahidro-2H-piran-4-il)quinolin-7-ol como un sólido amarillo (6 mg). LC/MS tR = 0,42 min. MS (M+1) = 490,4. 1H RMN (METANOL-d4) 58,42 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,23 (d, J=9,8 Hz, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,25 (d, J=9,8 Hz, 1H), 7,11 (s, 1H), 5,40 (p, J=8,0 Hz, 1H), 4,07-3,97 (m, 2H), 3,68 (m, 3H), 2,97 (s, 3H), 2,57 (s, 3H), 1,94-1,75 (m, 8H), 1,57 (s, 6H), 1,42 (s, 6H).
Ejemplo 20-6: Síntesis de 2-met¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)-4-(oxetan-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000064_0002
A una mezcla del Intermedio 11 (46 mg, 0,11 mmol), 3-yodooxetano (27 mg, 0,15 mmol), FeSO4.7H2O (10 mg, 0,034 mmol) y H2SO4 (0,024 mL, 0,45 mmol, ~ 1 gota) en d Ms O (0,5 mL), se añadió H2O2 (solución acuosa al 30 %, 0,035 mL, 0,34 mmol) a temperatura ambiente. Después de 30 min, se añadió otra porción de FeSO4.7H2O (9,5 mg, 0,034 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 40 min. Se añadió más FeSO4.7H2O (9,5 mg, 0,034 mmol) y H2O2 (solución acuosa al 30 %, 0,035 mL, 0,34 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 60 min, se trató con Na2S2O3 (0,5 mL, solución acuosa al 20 %) y se sometió a una purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 2 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico). El producto crudo se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa de fase inversa para obtener 2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(oxetan-3-il)quinolin-7-ol (5 mg) como un sólido amarillo. MS (M+1) = 462,3. 1H RMN (METANOL-d4) 58,22 (d, J=10,1 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,26-7,35 (m, 2H), 5,29 (dd, J=8,1, 5,6 Hz, 2H), 5,08 (c, J=7,9, 1H), 4,97 (dd, J = 7,1, 5,7 Hz, 2H), 3,03 (s, 3H), 2,69 (s, 3H), 1,71 (dd, J = 12,6, 3,6 Hz, 2H), 1,59 (t, J = 12,4 Hz, 2H), 1,40 (s, 6H), 1,24 (s, 6H).
Ejemplo 21-1: Síntesis de la sal de tipo diformiato de 4-(dimetilamino)-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilp¡peridin-4-¡l)am¡no)p¡r¡dazin-3-¡l)qu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000064_0003
A una mezcla del Intermedio 12 (45 mg, 0,094 mmol) en NMP (1 mL), se añadió dimetilamina (2 M en THF, 0,25 mL, 0,50 mmol). La mezcla se calentó a 140 °C con irradiación de microondas durante 1,5 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se acidificó mediante la adición de HCl 1 M en éter y se sometió a una purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaSond® con ácido propilsulfónico). El producto crudo se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa de fase inversa para obtener la sal de tipo diformiato de 4-(dimetilamino)-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol como un sólido de color amarillo claro (25 mg). LC/MS tR = 0,43 min. MS (M+1) = 435,3. 1H RMN (METANOL-d4) 8,71 (s, 1H), 8,46 (s, 2H), 8,28 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 6,82 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 5,49 (tt, J = 11,0, 5,0 Hz, 1H), 3,54 (s, 6H), 3,08 (s, 3H), 2,05 - 1,93 (m, 5H), 1,66 (s, 6H), 1,52 (s, 6H).
Ejemplo de referencia 22-1: Síntesis de 7-hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-4(1H)-ona
Figure imgf000065_0001
Paso 1: Ácido 2-amino-5-bromo-4-metoxibenzoico
A una mezcla de ácido 4-metoxiantranílico (0,67 g, 4,0 mmol) en DCM (10 mL) y DMF (3 mL), se añadió NBS (0,71 g, 4,0 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h, a continuación se concentró y se sometió a cromatografía en gel de sílice (5-100 % de EtOAc/heptano) para proporcionar el ácido 2-amino-5-bromo-4-metoxibenzoico como un sólido beige (1,30 g, que contenía 1 equivalente de succinamida). MS (M-1) = 244,3/246,3. 1H RMN (DMSO-d6) 5 7,76 (s, 1H), 6,42 (s, 1H), 3,79 (s, 3H). Este material se utilizó sin purificación adicional.
Paso 2: 6-Bromo-7-metoxiquinazolin-4(1H)-ona
Una mezcla de ácido 2-amino-5-bromo-4-metoxibenzoico (1,25 g, 3,6 mmol) y acetato de formimidamida (0,75 g, 7,2 mmol) en EtOH (15 mL) se calentó a reflujo durante 24 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y el sólido se filtró, se lavó con agua y se secó para proporcionar 6-bromo-7-metoxiquinazolin-4(1H)-ona como un sólido blanco (0,858 g). MS (M+1) = 255,0/257,0. 1H RMN (DMSO-d6) 5 12,30 (s a, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,25 (s, 1H), 4,00 (s, 3H).
Paso 3: 7-Metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolin-4(1 H)-ona
Una mezcla de 6-bromo-7-metoxiquinazolin-4(1H)-ona (385 mg, 1,51 mmol), dppf (84 mg, 0,15 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 (123 mg, 0,15 mmol) y KOAc (899 mg, 9,1 mmol) en 1,4-dioxano (6 mL) y DMF (1 mL) se sometió al vacío y se rellenó de nuevo con nitrógeno (4x), a continuación se calentó a 90 °C durante 45 min. A continuación, se añadió bis(pinacolato)diboro (1,15 g, 4,5 mmol) y la mezcla se calentó a 100 °C durante 21 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. Tras una cromatografía en gel de sílice (0-20 % de MeOH en DCM), se obtuvo 7-metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolin-4(1 H)-ona (305 mg, ~61 % de pureza) como un sólido marrón. MS (M+1) = 303,1.
Paso 4: 7-Metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-4(1H)-ona
En un recipiente para microondas, se combinaron 7-metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolin-4(1H)-ona (305 mg, ~61 % de pureza, 0,62 mmol), 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina, (Intermedio 1, 145 mg, 0,51 mmol), Pd(PPh3)4 (47 mg, 0,041 mmol), Na2CO3 acuoso (2,0 M, 0,64 mL, 1,3 mmol) y 1,4-dioxano (2,4 mL). El recipiente se sometió al vacío y se rellenó de nuevo con nitrógeno (4x), y se calentó con irradiación de microondas a 110 °C durante 1 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se acidificó hasta un pH de 2 con HCl 4 M en 1,4-dioxano. La purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) seguida de cromatografía en gel de sílice (0­ 20 % de MeOH en DCM) proporcionó 7-metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-4(1H)-ona (137 mg) como un sólido de color marrón claro. MS (M+1) = 423,1. 1H RMN (METANOL-d4) 58,47 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,81 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,15 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,25 (t, J=12,4 Hz, 1H), 4,02 (s, 3H), 3,03 (s, 3H), 1,72 (m, 2H), 1,60 (m, 2H), 1,41 (s, 6H), 1,26 (s, 6H).
Paso 5: 7-Hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-4(1H)-ona
Se sometió 7-metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-4(1H)-ona (32 mg, 0,076 mmol) a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-3 utilizando tribromuro de boro (solución 1,0 M en Dc M, 0,38 mL, 0,38 mmol). La purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico) seguida de HPLC preparativa de fase inversa proporcionó 7-hidroxi-6-(6 (metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-4(1H)-ona como un sólido blanco (10 mg). LC/MS tR = 0,45 min. MS (M+1) = 409,2. 1H RMN (METANOL-d4) 58,63 (s, 1H), 8,22 (d, J=9,6 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,37 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,12 (s, 1H), 5,19 (t, J=12,0 Hz, 1H), 3,03 (s, 3H), 1,71-1,81 (m, 2H), 1,59-1,71 (m, 2H), 1,44 (s, 6H), 1,29 (s, 6H).
Ejemplo 23-1: Síntesis de 6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡ridaz¡n-3-¡l)qu¡nazol¡n-7-ol
Figure imgf000066_0001
Paso 1: 2-Amino-4-metoxibenzaldehído
A una suspensión de alcohol 2-amino-4-metoxibencílico (2 g, 13,1 mmol) en DCM (30 mL), se añadió MnO2 (6,81 g, 78 mmol) a temperatura ambiente. Después de agitar durante toda la noche, la mezcla se filtró a través de Celite®, se lavó con DCM, se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (5-50 % de EtOAc/heptano) para proporcionar 2- amino-4-metoxibenzaldehído (0,99 g) como un sólido amarillo. MS (M+1) = 152,2. 1H RMN (Cloroformo-d) 5 9,74 (s, 1H), 7,40 (d, J=8,6 Hz, 1H), 6,35 (dd, J=8,7, 2,4 Hz, 1H), 6,23 (s, 2H), 6,09 (d, J=2,3 Hz, 1H), 3,84 (d, J = 4,1 Hz, 3H).
Paso 2: 2-Amino-5-bromo-4-metoxibenzaldehído
A una solución de 2-amino-4-metoxibenzaldehído (0,99 g, 6,6 mmol) en THF (20 mL), se añadió NBS (1,17 g, 6,6 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h y a continuación se desactivó con Na2S2O3 (5 mL, solución acuosa al 20 %). Después de agitar durante 5 min, la mezcla se diluyó con una solución acuosa de NaHCO3 y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4, se concentraron al vacío y se sometieron a cromatografía en gel de sílice (5-50 % de EtOAc/heptano) para proporcionar 2-amino-5-bromo-4-metoxibenzaldehído (0,79 g) como un sólido amarillo. MS (M+1) = 230,1/232,1. 1H Rm N (Cloroformo-d) 59,59 (s, 1H), 7,52 (s, 1H), 6,21 (s, 2H), 6,03 (s, 1H), 3,83 (s, 3H).
Paso 3: 6-Bromo-7-metoxiquinazolina
Una mezcla de 2-amino-5-bromo-4-metoxibenzaldehído (350 mg, 1,52 mmol) y acetato de formimidamida (238 mg, 2,28 mmol) en EtOH (10 mL) se calentó a reflujo durante 16 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró. El residuo se basificó con una solución acuosa de NaHCO3 y se extrajo con DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na2SO4, se concentraron al vacío y se sometieron a cromatografía en gel de sílice (0-30 % de EtOAc/heptano) para proporcionar 6-bromo-7-metoxiquinazolina (253 mg) como un sólido amarillo. MS (M+1) = 239,0/241,0. 1H RMN (Cloroformo-d) 59,28 (s, 1H), 9,23 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 4,11 (s, 3H).
Paso 4: 7-Metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolina
A una mezcla de 6-bromo-7-metoxiquinazolina (253 mg, 0,95 mmol), dppf (53 mg, 0,095 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 (78 mg, 0,095 mmol) y KOAc (561 mg, 5,7 mmol), se añadió 1,4-dioxano (5 mL). La mezcla de reacción se sometió al vacío y se rellenó de nuevo con nitrógeno (4x), a continuación se calentó a 90 °C durante 30 min. A continuación, se añadió bis(pinacolato)diboro (726 mg, 2,9 mmol) y la mezcla se calentó a 90 °C durante 16 h. Se añadieron cantidades adicionales de bis(pinacolato)diboro (242 mg, 0,95 mmol), dppf (26,4 mg, 0,048 mmol) y PdCl2(dppf).CH2Cl2 (39 mg, 0,048 mmol) y la mezcla se calentó a 95 °C durante 23 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró a través de Celite® lavando con MeOH/DCM 9:1. Los filtrados se concentraron al vacío. Tras una cromatografía en gel de sílice (0-20 % de MeOH en DCM), se obtuvo 7-metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolina (180 mg, ~67 % de pureza) como un sólido marrón. MS (M+1) = 287,2.
Paso 5: 6-(7-Metoxiquinazolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se acopló 7-metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolina (180 mg, ~67 % de pureza, 0,42 mmol) con 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1, 100 mg, 0,35 mmol), utilizando el mismo método que en el Ejemplo 20-6 Paso 4 para el acoplamiento de Suzuki. El producto crudo se purificó mediante una purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) seguida de cromatografía en gel de sílice tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 4-1 para proporcionar 6-(7-metoxiquinazolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3- amina (28,9 mg) como un sólido de color marrón claro. MS (M+1) = 407,3. 1H RMN (METANOL-d4) 59,41 (s, 1H), 9,14 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,82 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,12 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,24 (t, J=12,1 Hz, 1H), 4,07 (s, 3H), 3,00 (s, 3H), 1,62-1,73 (m, 2H), 1,48-1,60 (m, 2H), 1,36 (s, 6H), 1,17-1,26 (m, 6H).
Paso 6: 6-(6-(Metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-7-ol
Se sometió 6-(7-metoxiquinazolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (28 mg, 0,069 mmol) a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-3 utilizando tribromuro de boro (solución 1,0 M en DCM, 0,41 mL, 0,41 mmol). La purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 1 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico) seguida de HPLC preparativa de fase inversa proporcionó 6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-7-ol como un sólido amarillo (16 mg). LC/MS tR = 0,46 min. MS (M+1) = 393,2. 1H RMN (METANOL-d4) 89,20 (s, 1H), 8,91 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,25 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,29 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,20 (s, 1H), 5,18-5,36 (m, 1H), 3,03 (s, 3H), 1,75-1,83 (m, 2H), 1,64-1,74 (m, 2H), 1,46 (s, 6H), 1,31 (s, 6H).
Ejemplo 24-1: Síntesis de 7-hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3,4-dih¡droqu¡nol¡n-2(1H)-ona
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Paso 1: 6-Bromo-7-hidroxi-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona
A una solución de 7-hidroxi-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona (590 mg, 3,5 mmol) en DMF (3 mL), se añadió NBS (655 mg, 3,7 mmol) a 0 °C en tres porciones en 30 min. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche y a continuación se desactivó con Na2S2O3 (5 mL, solución acuosa al 20 %). Después de agitar durante 5 min, la mezcla se diluyó con NaHCO3 acuoso y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4, se concentraron al vacío y se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (5-50 % de EtOAc/heptano) para proporcionar 6-bromo-7-hidroxi-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona (0,82 g) como un sólido amarillo. MS (M 1) = 241,9/243,9. 1H RMN (Metanol-d4) 87,24 (s, 1H), 6,47 (s, 1H), 2,84 (t, J=7,6 Hz, 2H), 2,47-2,56 (m, 2H).
Paso 2: 6-Bromo-7-metoxi-1 -metil-3,4-dihidroquinolin-2( 1 H)-ona
A una solución de 6-bromo-7-hidroxi-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona (650 mg, 2,7 mmol) en DMF (3 mL), se añadió K2CO3 (557 mg, 4,0 mmol) a temperatura ambiente. Después de 5 min, se añadió Mel (0,185 ml, 2,9 mmol) y la mezcla se agitó durante toda la noche. La mezcla se desactivó con agua y se extrajo con EtOAc (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 y se concentraron para proporcionar el producto crudo. Se obtuvieron 6-bromo-7-metoxi-1-metil-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona (174 mg) y 6-bromo-7-metoxi-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona (396 mg) después de una purificación por cromatografía en gel de sílice (5-50 % de EtOAc/heptano). MS (M+1) = 269,9/271,9 y 255,9/257,9, respectivamente.
Paso 3: 7-Metoxi-1-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona
A una mezcla de 6-bromo-7-metoxi-1-metil-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona (170 mg, 0,63 mmol), dppf (34,9 mg, 0,063 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 (51,4 mg, 0,063 mmol) y KOAc (371 mg, 3,78 mmol), se añadió 1,4-dioxano (2 mL). La mezcla de reacción se sometió al vacío y se rellenó de nuevo con nitrógeno (4x), a continuación se calentó a 90 °C durante 20 min. A continuación, se añadió bis(pinacolato)diboro (479 mg, 1,89 mmol) y la mezcla se calentó a 98 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró a través de Celite® lavando con MeOH/DCM 9:1. Los filtrados se concentraron al vacío. Tras una cromatografía en gel de sílice (0-10 % de MeOH en DCM), se obtuvo 7-metoxi-1-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona (500 mg, ~38 % de pureza) como un sólido marrón. MS (M+1) = 318,4.
Paso 4: 7-Metoxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona
Se acopló 7-metoxi-1-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona (470 mg, ~38 % de pureza, 0,56 mmol) con 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1, 110 mg, 0,39 mmol), utilizando el mismo método que en el Ejemplo 20-6 Paso 4 para el acoplamiento de Suzuki. El producto crudo se purificó mediante una purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) seguida de cromatografía en gel de sílice tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 4-1 para proporcionar 7-metoxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona (92 mg) como un sólido blanco. m S (M+1) = 438,2. 1H RMN (METANOL-d4) 87,84 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,16 (d, J=9,6 Hz, 1H), 6,85 (s, 1H), 5,42-5,55 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,43 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 2,92 (t, J=7,3 Hz, 2H), 2,60-2,70 (m, 2H), 1,90-2,02 (m, 4H), 1,64 (s, 6H), 1,52 (s, 6H).
Paso 5: 7-Hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona Se sometió 7-metoxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona (91 mg, 0,21 mmol) a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-3 utilizando tribromuro de boro (solución 1,0 M en DCM, 1,04 mL, 1,04 mmol). La purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 2 g de SiliaSond® con ácido propilsulfónico) seguida de HPLC preparativa de fase inversa proporcionó 7-hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona como un sólido amarillo (69 mg). LC/MS tR = 0,51 min. MS (M+1) = 424,4. 1H RMN (METANOL-d4) 58,04 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,28 (d, J=9,6 Hz, 1H), 6,69 (s, 1H), 5,03 (t, J=12,4 Hz, 1H), 3,34 (s, 3H), 2,99 (s, 3H), 2,90 (t, J=7,1 Hz, 2H), 2,63 (t, J=7,1 Hz, 2H), 1,63-1,72 (m, 2H), 1,50-1,61 (m, 2H), 1,38 (s, 6H), 1,22 (s, 6H).
Ejemplo 25-1: Síntesis de 7-hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3,4-dih¡droqu¡nolin-2( 1 H)-ona
Figure imgf000068_0001
Paso 1: N-(4-Bromo-2-formil-5-metoxifenil)acetamida
A una mezcla de 2-amino-5-bromo-4-metoxibenzaldehído (1,1 g, 4,2 mmol) en DCM (30 mL), se añadió piridina (1,68 mL, 20,8 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se enfrió hasta 0 °C y se añadió cloruro de acetilo (1,48 mL, 20,8 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche, se desactivó con agua y se extrajo con DCM (3x). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na2SO4 y se concentraron para proporcionar el producto crudo. La cromatografía en gel de sílice (5-50 % de EtOAc/heptano) proporcionó N-(4-bromo-2-formil-5-metoxifenil)acetamida (498 mg). MS (M+1) = 271,9/273,9. 1H RMN (Cloroformo-d) 5 11,37 (s, 1H), 9,73 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 4,02 (s, 3H), 2,28 (s, 3H).
Paso 2: 6-Bromo-7-metoxi-2-metilquinazolina
Una mezcla de N-(4-bromo-2-formil-5-metoxifenil)acetamida (138 mg, 0,41 mmol) y amoniaco (solución 2,0 M en metanol, 4.1 mL, 8,1 mmol) se calentó a 75 °C durante 4 h en un vial cerrado herméticamente provisto de una salida de aire generada con una aguja de calibre 22. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se concentró y se sometió a cromatografía en gel de sílice (5-60 % de EtOAc/heptano) para proporcionar 6-bromo-7-metoxi-2-metilquinazolina (103 mg) como un sólido amarillo. MS (M+1) = 252,9/254,9. 1H RMN (Cloroformo-d) 59,04 (s, 1H), 8,02 (d, J=3,1 Hz, 1H), 7,21 (s, 1H), 3,99 (d, J=3,2 Hz, 3H), 2,78 (s, 3H).
Paso 3: 7-Metoxi-2-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolina
A una mezcla de 6-bromo-7-metoxi-2-metilquinazolina (103 mg, 0,41 mmol), dppf (23 mg, 0,041 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 (33 mg, 0,041 mmol) y KOAc (240 mg, 2,44 mmol), se añadió 1,4-dioxano (2,5 mL). La mezcla de reacción se sometió al vacío y se rellenó de nuevo con nitrógeno (4x), a continuación se calentó a 90 °C durante 20 min. A continuación, se añadió bis(pinacolato)diboro (310 mg, 1,22 mmol) y la mezcla se calentó a 98 °C durante 16 h. Se añadieron cantidades adicionales de bis(pinacolato)diboro (207 mg, 0,81 mmol), dppf (23 mg, 0,041 mmol) y PdCl2(dppf).CH2Cl2 (33 mg, 0,041 mmol) y la mezcla se calentó a 98 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró a través de Celite®, lavando con MeOH/DCM 9:1. Los filtrados se concentraron al vacío. Tras una cromatografía en gel de sílice (0-10 % de MeOH en DCM), se obtuvo 7-metoxi-2-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolina (157 mg, ~72 % de pureza) como un sólido marrón. MS (M+1) = 301,0.
Paso 4: 6-(7-Metoxi-2-metilquinazolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se acopló 7-metoxi-2-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolina (180 mg, ~72 % de pureza, 0,37 mmol) con 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1, 80 mg, 0,283 mmol), utilizando el mismo método que en el Ejemplo 20-6 Paso 4 para el acoplamiento de Suzuki. El producto crudo se purificó mediante una purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) seguida de cromatografía en gel de sílice tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 4-1 para proporcionar 6-(7-metoxi-2-metilquinazolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (90 mg) como un sólido amarillo. MS (M+1) = 421,1. 1H RMN (METANOL-d4) 5 9,34 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,82 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,15 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,25 (t, J=12,9 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H), 3.01 (s, 3H), 2,82 (s, 3H), 1,70 (dd, J=12,5, 3,6 Hz, 2H), 1,58 (t, J=12,4 Hz, 2H), 1,38 (s, 6H), 1,23 (s, 6H).
Paso 5: 6-(6-(Metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-7-ol
Se sometió 6-(7-metoxi-2-metilquinazolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (92 mg, 0,21 mmol) a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-4 utilizando tiofenol (0,028 mL, 0,27 mmol). La purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1, cartucho de 2 g de SiliaBond® con ácido propilsulfónico) seguida de HPLC preparativa de fase inversa proporcionó 6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-7-ol como un sólido amarillo (27 mg). LC/MS tR = 0,47 min. MS (M+1) = 407,2. 1H RMN (METANOL-d4) 89,17 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,25 (d, J=9,7 Hz, 1H), 7,32 (d, J=9,8 Hz, 1H), 7,17 (s, 1H), 5,25 (t, J=13,1 Hz, 1H), 3,03 (s, 3H), 2,74 (s, 3H), 1,79 (dd, J=12,9, 3,7 Hz, 2H), 1,69 (t, J=12,5 Hz, 2H), 1,47 (s, 6H), 1,32 (s, 6H).
Ejemplo 26-1: Síntesis de 7-h¡drox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)¡soquinol¡n-1-carbon¡tr¡lo
Figure imgf000069_0001
Paso 1: 2-Óxido de 6-bromo-7-metoxiisoquinolina
A un matraz de fondo redondo de 50 mL que contenía 6-bromo-7-metoxiisoquinolina (preparada tal como se describe en el Ejemplo 3-7) (100 mg, 0,42 mmol) en DCM (2,1 mL), se añadió metiltrioxorrenio (m To , 4,2 mg, 0,02 mmol). La mezcla se enfrió hasta 0 °C y se añadió peróxido de hidrógeno acuoso al 50 % (57 mg, 0,84 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. A continuación, se añadieron 5-10 mg de dióxido de manganeso y la reacción se agitó durante 2 h, a continuación se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar 2-óxido de 6-bromo-7-metoxiisoquinolina (213 mg). MS (M+1) = 256,3
Paso 2: 7-Hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo
Se preparó 7-hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1 -carbonitrilo a partir de 2-óxido de 6-bromo-7-metoxiisoquinolina de acuerdo con la síntesis de 6-metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo (tal como se describe en el Ejemplo 3-7) LC/MS tR = 0,54 MS (M+1) = 417,2 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 88,44 (d, J= 5,4 Hz, 2H), 8,25 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 8,00 (d, J= 5,5 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,25 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 5,34-5,04 (m, 1H), 3,06 (s, 3H), 1,78 (dd, J= 12,7, 3,5 Hz, 2H), 1,58 (t, J= 12,5 Hz, 2H), 1,43 (s, 6H), 1,27 (s, 6H).
Ejemplo 26-2: Síntesis de 7-h¡drox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2-carbon¡tr¡lo
Figure imgf000069_0002
Se preparó 7-hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo a partir de 6-cloro-7-metoxiquinolina de acuerdo con la síntesis del Ejemplo 26-1. LC/MS tR =0,51. MS (M+1) = 417,2 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 88,70 (s, 1H), 8,54 (dd, J= 8,5, 0,8 Hz, 1H), 8,33 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 7,82 (d, J= 8,3 Hz, 1H), 7,51-7,37 (m, 2H), 5,21-4,94 (m, 1H), 2,99 (s, 3H), 1,68-1,42 (m, 4H), 1,30 (s, 6H), 1,14 (s, 6H).
Ejemplo 26-3: Síntesis de 6-h¡drox¡-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2-carbon¡tr¡lo
Figure imgf000069_0003
Se preparó 6-hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo a partir de 7-bromo-6-metoxiquinolina de acuerdo con la síntesis del Ejemplo 26-1. LC/MS tR = 0,54. MS (M+1) = 417,2 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 58,71 (s, 1H), 8,50 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 8,41 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 7,90 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 7,48-7,39 (m, 2H), 5,26-4,78 (m, 1H), 3,00 (s, 3H), 1,66-1,41 (m, 5H), 1,29 (s, 6H), 1,12 (s, 6H).
Ejemplo 26-4: Síntesis de 6-hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carboxamida
Figure imgf000070_0001
Paso 1: 6-Metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carboxamida
Una mezcla de 6-metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo (87 mg, 0,202 mmol), hidróxido de potasio (acuoso al 10 %, 0,15 mL, 0,263 mmol) y peróxido de hidrógeno (acuoso al 33 %, 0,08 mL, 0,909 mmol) se calentó a 40 °C durante 1 h. La purificación por SCX (MÉTODO GENERAL 3-1) proporcionó 6-metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carboxamida (91 mg). MS (M+1) = 449,5
Paso 2: 6-Hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperídin-4-il)amino)pirídazin-3-il)isoquinolin-1-carboxamida
Se sometió 6-metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carboxamida a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-1 y a continuación se obtuvo la base libre mediante el MÉTODO GENERAL 8-1 para proporcionar el compuesto del título (10,9 mg). LC/MS tR = 0,43. MS (M+1) = 435,2 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,90 (s a., 1H), 8,04-8,20 (m, 2H), 7,48 (d, J=6,02 Hz, 1H), 7,29-7,44 (m, 1H), 7,18 (d, J=9,54 Hz, 1H), 7,00 (s, 1H), 5,06-5,35 (m, 1H), 3,02 (s, 3H), 1,65-1,76 (m, 2H), 1,49-1,62 (m, 2H), 1,39 (s, 6H), 1,23 (s, 6H).
Ejemplo 26-5: Síntesis de 7-h¡drox¡-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2-carboxam¡da
Figure imgf000070_0002
Se aisló 7-hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carboxamida como un subproducto de la desprotección de metoxi de 7-metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo (Ejemplo 26-2) utilizando el MÉTODO GENERAL 2-1. LC/MS tR = 0,48. MS (M+1) = 435,3 1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 58,64 (s, 1H), 8,45 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 8,35 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 8,24 (d, J= 2,9 Hz, 1H), 7,96 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 7,71 (d, J= 2,8 Hz, 1H), 7,50-7,38 (m, 2H), 5,31-4,88 (m, 1H), 2,99 (s, 3H), 1,57 (s, 4H), 1,30 (s, 6H), 1,14 (s, 6H).
Ejemplo 26-6: Síntesis de 6-h¡drox¡-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2-carboxam¡da
Figure imgf000070_0003
Se aisló 6-hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carboxamida como un subproducto de la desprotección de metoxi de 6-metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo (Ejemplo 26-3) utilizando el MÉTODO GENERAL 2-1. LC/MS tR = 0,52. MS (M+1) = 435,3 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 88,53 (s, 1H), 8,28 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,14 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,28 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 5,22 (m, 1H), 3,06 (s, 3H), 1,80 (dd, J= 12,8, 3,4 Hz, 2H), 1,63 (t, J= 12,0 Hz, 2H), 1,45 (s, 6H), 1,29 (s, 6H).
Ejemplo 26-7: Síntesis de 6-h¡drox¡-7-(6-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2-carbox¡lato de metilo
Figure imgf000071_0001
Se a¡sló 6-h¡drox¡-7-(6-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2-carbox¡lato de met¡lo como un subproducto en la desprotecc¡ón de 6-metox¡-7-(6-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2-carbon¡tr¡lo (Ejemplo 26-3) med¡ante el MÉTODO GENERAL 2-1. LC/MS tR = 0,57. MS (M+1) = 450,31H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 88,53 (s, 1H), 8,35-8,19 (m, 2H), 8,06 (dd, J= 8,5, 1,5 Hz, 1H), 7,42-7,29 (m, 2H), 5,35-5,08 (m, 1H), 4,04 (d, J= 1,5 Hz, 3H), 3,05 (s, 3H), 1,74 (dd, J= 12,7, 3,6 Hz, 2H), 1,63 (t, J= 12,5 Hz, 2H), 1,43 (s, 6H), 1,27 (s, 6H).
Ejemplo 27-1: Síntes¡s de 6-h¡drox¡-7-(6-(p¡peraz¡n-1-¡l)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2-carbon¡tr¡lo
Figure imgf000071_0002
Paso 1: 4-(6-(2-C¡ano-6-metox¡qu¡nol¡n-7-¡l)p¡r¡daz¡n-3-¡l)p¡peraz¡n-1-carbox¡lato de terf-but¡lo
Se preparó 4-(6-(2-c¡ano-6-metox¡qu¡nol¡n-7-¡l)p¡r¡daz¡n-3-¡l)p¡peraz¡n-1-carbox¡lato de terf-but¡lo a part¡r del ác¡do (2-c¡ano-6-metox¡qu¡nol¡n-7-¡l)borón¡co y 4-(6-clorop¡r¡daz¡n-3-¡l)p¡peraz¡n-1-carbox¡lato de terf-but¡lo med¡ante las cond¡c¡ones de Suzuk¡ descr¡tas en el MÉTODO GENERAL 1-1 (170 mg). MS (M+1) = 447,3.
Paso 2: 6-Hidroxi-7-(6-(piperazin-1-il)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo
Se somet¡ó 4-(6-(2-c¡ano-6-metox¡qu¡nol¡n-7-¡l)p¡r¡daz¡n-3-¡l)p¡peraz¡n-1-carbox¡lato de terf-but¡lo a cond¡c¡ones de desprotecc¡ón de Boc y metox¡ tal como se descr¡be en el MÉTODO GENERAL 2-1. El sól¡do resultante se suspend¡ó en aceton¡tr¡lo:H2O (3:1 mL). Se añad¡ó HCl acuoso 1 M (3 equivalentes) y se concentró el d¡solvente al vacío para proporc¡onar el compuesto del título (8,6 mg). LC/MS tR = 0,48. MS (M+1) = 333,1 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 88,72 (s, 1H), 8,56 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 8,46 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 7,95 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 7,75 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 4,00 (m, 4H), 3,27 (s a, 4H).
Ejemplo 27-2: Síntes¡s de 7-h¡drox¡-6-(6-(p¡peraz¡n-1-¡l)p¡r¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-2-carbon¡tr¡lo
Figure imgf000071_0003
Paso 1: 4-(6-(2-Ciano-7-metoxiquinolin-6-il)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo
Se preparó 4-(6-(2-c¡ano-7-metox¡qu¡nol¡n-6-¡l)p¡r¡daz¡n-3-¡l)p¡peraz¡n-1-carbox¡lato de tert-but¡lo a part¡r de 7-metox¡-6-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)qu¡nol¡n-2-carbon¡tr¡lo y 4-(6-clorop¡r¡daz¡n-3-¡l)p¡peraz¡n-1-carbox¡lato de tert-but¡lo med¡ante las cond¡c¡ones de Suzuk¡ descr¡tas en el MÉTODO Ge NErAl 1-1 (100 mg). MS (M+1) = 447,4 Paso 2: 7-Hidroxi-6-(6-(piperazin-1-il)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo
Se sometió 4-(6-(2-ciano-7-metoxiquinolin-6-il)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo a condiciones de desprotección de Boc y metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-1. La formación de la base libre mediante Sc X, tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 3-1, proporcionó el compuesto del título (1,9 mg). LC/MS tR = 0,45. MS (M+1) = 333,1 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 58,47-8,36 (m, 2H), 8,27 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 7,62 (d, J= 8,3 Hz, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,42 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 3,90-3,70 (m, 4H), 3,20-2,97 (m, 4H).
Ejemplo 27-3: Síntesis de 7-(6-(p¡peraz¡n-1-¡l)p¡r¡daz¡n-3-¡l)isoqu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000072_0001
Paso 1: 4-(6-(6-Metoxiisoquinolin-7-il)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo
Se preparó 4-(6-(6-metoxiquinolin-7-il)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo a partir de 6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolin-1-carbonitrilo y 4-(6-cloropiridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo mediante las condiciones de Suzuki descritas en el MÉTo Do GENERAL 1-1 (340 mg). MS (M+1) = 422,6
Paso 2: 7-(6-(Piperazin-1-il)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol
Se sometió 4-(6-(6-metoxiisoquinolin-7-il)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo a condiciones de desprotección de Boc y metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-1 para proporcionar el compuesto del título (11,3 mg). LC/MS tR = 0,31. MS (M+1) = 308,1 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 59,17 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,41 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 8,35 (d, J= 5,8 Hz, 1H), 7,68-7,57 (m, 2H), 7,29 (s, 1H), 3,74-3,55 (m, 4H), 2,94-2,73 (m, 4H).
Ejemplo 28-1: Síntesis de 7-(6-(1.2.3.6-tetrah¡drop¡r¡d¡n-4-¡l)pir¡daz¡n-3-¡l)qu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000072_0002
Paso 1: 4-(6-cloropiridazin-3-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de tert-butilo
Una mezcla de 3,6-dicloropiridazina (265 mg, 1,78 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de tert-butilo (500 mg, 1,62 mmol) y Na2CO3 (514 mg, 4,85 mmol) en dioxano (3,1 mL) y agua (0,5 mL) se desgasificó con una corriente de nitrógeno anhidro durante 5 min. Se añadió el aducto PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (66 mg, 0,08 mmol) y la mezcla se desgasificó durante 5 min más con nitrógeno anhidro y se calentó a 80 °C durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró al vacío, se diluyó con agua y se extrajo con d Cm . El extracto orgánico se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-100 % de EtOAc/Hep) para proporcionar 4-(6-cloropiridazin-3-il)-5,6-dihidropiridin-1 (2H)-carboxilato de tert-butilo (192 mg). MS -tert-butilo (M+1) = 240,4
Paso 2: 4-(6-(6-Metoxiquinolin-7-il)piridazin-3-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de tert-butilo
Se preparó 4-(6-(6-metoxiquinolin-7-il)piridazin-3-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de tert-butilo a partir de 4-(6-cloropiridazin-3-il)-5,6-dihidropiridin-1 (2H)-carboxilato de tert-butilo y 6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinolina (preparada como en el Ejemplo 6-1) mediante las condiciones de Suzuki descritas en el MÉTODO GENERAL 1-1 (175 mg). MS (M+1) = 419,1
Paso 3: 7-(6-(1,2,3,6-Tetrahidropiridin-4-il)piridazin-3-il)quinolin-6-ol
Se sometió 4-(6-(6-metoxiquinolin-7-il)piridazin-3-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de terf-butilo a condiciones de desprotección de Boc y metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-3 para proporcionar el compuesto del título (2,0 mg). LC/MS tR = 0,40. MS (M+1) = 305,1 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 58,97 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 8,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,59 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,89 (dd, J = 8,3, 4,7 Hz, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,04 - 6,77 (m, 1H), 4,03 (d, J = 3,5 Hz, 2H), 3,57 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,14 (d, J = 6,3 Hz, 2H).
Ejemplo 29-1: Síntesis de 1-met¡l-6-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)isoqu¡nol¡n-7-ol
Figure imgf000073_0001
Paso 1: 6-Bromo-7-metoxi-1-metilisoquinolina
A una mezcla de 2-óxido de 6-bromo-7-metoxiisoquinolina (160 mg, 0,630 mmol), preparada del mismo modo que en el Ejemplo 26-1, y THF (3,2 mL) enfriada hasta 0 °C, se añadió bis(ciclopentadienil)-|j-cloro(dimetilaluminio)-|jmetilenetitanio (reactivo de Tebbe) (0,5 M en tolueno, 1,4 mL, 0,693 mmol). La mezcla se agitó a 0 °C durante 1 h, se desactivó con NaOH acuoso 5,0 N y se extrajo con DCM (3x). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na2SO4 y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-5 % de MeOH/DCM) para proporcionar 6-bromo-7-metoxi-1-metilisoquinolina (43 mg). MS (M+1) = 254,3
Paso 2: 7-Metoxi-1 -metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina
Se preparó 7-metoxi-1-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina a partir de 6-bromo-7-metoxi-1-metilisoquinolina mediante la formación de un éster de tipo boronato tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 7­ 1 (132 mg). MS (M+1) = 300,5
Paso 3: 6-(7-Metoxi-1-metilisoquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se preparó 6-(7-metoxi-1-metilisoquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina a partir de 7-metoxi-1-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina y 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1) mediante las condiciones de Suzuki descritas en el MÉTODO GENERAL 1-1 (177 mg). MS (M+1) = 420,6
Paso 4: 1-Metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-7-ol
Se sometió 6-(7-metoxi-1-metilisoquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-1 y a continuación se obtuvo la base libre mediante el MÉTODO GENERAL 8-1 para proporcionar el compuesto del título (8,0 mg). LC/MS tR = 0,42. MS (M+1) = 406,3 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 58,52 (s, 1H), 8,38 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 8,15 (d, J= 5,7 Hz, 1H), 7,58 (d, J= 5,7 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,39 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 2,98 (s, 3H), 2,79 (s, 3H), 1,65-1,36 (m, 4H), 1,26 (s, 6H), 1,09 (s, 6H).
Ejemplo 29-2: Síntesis de 1-met¡l-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)¡soqu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000073_0002
Paso 1: N-( 1-(3-Bromo-4-metoxifenil)etil)-2,2-dimetoxietanamina
Una mezcla de 2,2-dimetoxietanamina (2,5 g, 24,01 mmol) y 1-(3-bromo-4-metoxifenil)etanona (5,0 g, 21,83 mmol) en tolueno en un matraz de 250 mL dotado de un adaptador de dean-stark y un condensador se calentó hasta 140°C durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. Al aceite resultante, se añadió MeOH (112 mL) seguido de NaBH4 (1,6 g, 41,9 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3,5 h, se enfrió hasta 0 °C y se acidificó con HCl acuoso 1 N, a continuación se concentró al vacío para eliminar el MeOH. La mezcla acuosa resultante se lavó con DCM, se basificó con NaOH acuosol N y se extrajo con DCM. El extracto orgánico se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío para proporcionar N-(1-(3-bromo-4-metoxifenil)etil)-2,2-dimetoxietanamina (2,1 g). MS (M+1) = 319,7.
Paso 2: 7-Bromo-6-metoxi-1-metilisoquinolina
A un vial para microondas de 2 mL que contenía N-(1-(3-bromo-4-metoxifenil)etil)-2,2-dimetoxietanamina (250 mg, 0,786 mmol) enfriado hasta -78°C, se añadió ácido clorofulfónico (0,53 mL, 7,86 mmol) lentamente. Luego, se permitió que la mezcla se agitara a temperatura ambiente durante 18 h y a continuación se añadió gota a gota a agua-hielo. La mezcla acuosa resultante se lavó con éter dietílico, se basificó con Na2CO3 acuoso saturado y se extrajo con DCM (2x). Los extractos orgánicos resultantes se secaron con Na2SO4 y se concentraron al vacío para proporcionar 7-bromo-6-metoxi-1-metilisoquinolina (86 mg). MS (M+1) = 254,0.
Paso 3: 6-Metoxi-1-metil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina
Se preparó 6-metoxi-1-metil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina a partir de 7-bromo-6-metoxi-1-metilisoquinolina mediante la formación de un éster de tipo boronato tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 7­ 1. MS (M+1) = 300,5.
Paso 4: 6-(6-Metoxi-1-metilisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se preparó 6-(6-metoxi-1-metilisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina a partir de 6-metoxi-1-metil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina y 6-cloro-N-metN-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio I) mediante las condiciones de Suzuki descritas en el MÉTODO GENERAL 1-1 (156 mg). MS (M+1) = 420,6.
Paso 5: 1-Metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol
Se sometió 6-(6-metoxi-1-metilisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-1 y a continuación se obtuvo la base libre mediante el MÉTODO GENERAL 8-1 para proporcionar el compuesto del título (6,0 mg). LC/MS tR = 0,41. (M+1) = 404,1 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 58,95 (s, 1H), 8,55 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 8,21 (d, J= 6,8 Hz, 1H), 8,03 (d, J= 6,8 Hz, 1H), 7,68 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 7,58 (s, 1H), 5,55-5,23 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 3,14 (s, 3H), 2,07-1,98 (m, 4H), 1,66 (s, 6H), 1,54 (s, 6H).
Ejemplo 29-3: Síntesis de 1.3-d¡met¡l-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)¡soqu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000074_0001
Paso 1: N-(1,1-Dimetoxipropan-2-iliden)-1-fenilmetanamina
Una mezcla de 1,1-dimetoxipropan-2-ona (12,7 mL, 105 mmol), fenilmetanamina (10 mL, 91 mmol) y sulfato de magnesio (11,0 g, 91 mmol) en DCM (91 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y se concentró al vacío para proporcionar N-(1,1-dimetoxipropan-2-iliden)-1-fenilmetanamina. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 57,34 (d, J= 5,0 Hz, 4H), 7,32-7,18 (m, 1H), 4,56 (d, J= 1,6 Hz, 2H), 3,44 (s, 6H), 1,95 (s, 3H).
Paso 2: N-Bencil-1,1-dimetoxipropan-2-amina
A una mezcla de N-(1,1-dimetoxipropan-2-iliden)-1-fenilmetanamina (18,9 g, 91 mmol) en MeOH (101 ml) enfriada hasta -78 °C, se añadió NaBH4 (4,0 g, 105 mmol) en porciones en 20 min. La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3 días y se concentró al vacío. La suspensión resultante se arrastró con tolueno, se lavó con agua y cloruro de amonio acuoso saturado, a continuación se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío para proporcionar N-bencil-1,1-dimetoxipropan-2-amina (19,0 g). MS (M+1) = 210,0.
Paso 3: 1,1-Dimetoxipropan-2-amina
Una mezcla de N-bencil-1,1-dimetoxipropan-2-amina (19,0 g, 91 mmol) y paladio sobre carbón al 10 % (0,97 g, 0,910 mmol) en MeOH (182 mL) se agitó a 50 psi con atmósfera de hidrógeno durante 18 h. A continuación, la suspensión se filtró a través de Celite y se concentró al vacío para proporcionar 1,1-dimetoxipropan-2-amina (10,8 g). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 53,93 (d, J= 5,9 Hz, 1H), 3,38 (s, 3H), 3,35 (s, 3H), 2,95 (p, J= 6,4 Hz, 1H), 1,04 (d, J= 6,5 Hz, 3H).
Paso 4: N-( 1-(3-Bromo-4-metoxifenil)etil)-1,1-dimetoxipropan-2-amina
Una mezcla de 1,1-dimetoxipropan-2-amina (0,5 g, 4,20 mmol), 1-(3-bromo-4-metoxifenil)etanona (1,2 g, 5,0 mmol) e isopropóxido de titanio (IV) (2,5 mL, 8,39 mmol) en THF (5 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. A continuación, la mezcla se enfrió hasta 0 °C, se añadió NaBH4 (0,48 g, 12,59 mmol) seguido de EtOH (5 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Se añadió hidróxido de amonio acuoso 1 N y la reacción se filtró a través de Celite. El filtrado se extrajo con éter y el extracto orgánico se extrajo con HCl acuoso 1 N. La mezcla acuosa se basificó con NaOH acuoso 1 N y se extrajo con éter (2x). Los extractos orgánicos se secaron con Na2SO4 y se concentraron al vacío para proporcionar N-(1-(3-bromo-4-metoxifenil)etil)-1,1-dimetoxipropan-2-amina (0,94 g). MS (M+1) = 334,1.
Paso 5: 7-Bromo-6-metoxi-1,3-dimetilisoquinolina
A un vial para microondas de 5 mL que contenía N-(1-(3-bromo-4-metoxifenil)etil)-1,1-dimetoxipropan-2-amina (1 g, 1,81 mmol) enfriado hasta -78°C, se añadió ácido clorofulfónico (2,2 mL, 32,5 mmol) lentamente. Luego, se permitió que la mezcla se agitara a temperatura ambiente durante 18 h y a continuación se añadió gota a gota a agua-hielo. El material acuoso resultante se lavó con éter, se basificó con Na2CO3 acuoso saturado y se extrajo con DCM (2x). Los extractos orgánicos resultantes se secaron con Na2SO4 y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (20-80 % de EtOAc/Hep) para proporcionar 7-bromo-6-metoxi-1,3-dimetilisoquinolina (298 mg). MS (M+1) = 268,0.
Paso 6: 6-Metoxi-1,3-dimetil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina
Se preparó 6-metoxi-1,3-dimetil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina a partir de 7-bromo-6-metoxi-1,3-dimetilisoquinolina mediante la formación de un éster de tipo boronato tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 7-1 (135 mg). MS (M+1) = 314,1.
Paso 7: 6-(6-Metoxi-1,3-dimetilisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se preparó 6-(6-metoxi-1,3-dimetilisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina a partir de 6-metoxi-1,3-dimetil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina y 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1) mediante las condiciones de Suzuki descritas en el MÉTODO GENERAL 1-1 (253 mg). MS (M+1) = 434,2.
Paso 8: 1,3-Dimetil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol
Se sometió 6-(6-metoxi-1,3-dimetilisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-1 y a continuación se obtuvo la base libre mediante el MÉTODO GENERAL 3-1 para proporcionar el compuesto del título (9,7 mg). LC/MS tR = 0,43. MS (M+1) = 420,2 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 58,58 (s, 1H), 8,48 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,16 (s, 1H), 5,21 - 4,85 (m, 1H), 3,33 (s, 3H), 2,99 (s, 3H), 2,88 (s, 3H), 1,63-1,37 (m, 4H), 1,28 (s, 6H), 1,11 (s, 6H).
Ejemplo 30-1: Síntesis de 7-hidroxi-3-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo
Figure imgf000075_0001
Paso 1: N-(4-Bromo-3-metoxibencil)-1,1-dimetoxipropan-2-amina
A una mezcla de 4-bromo-3-metoxibenzaldehído (500 mg, 2,325 mmol) y 1,1-dimetoxipropan-2-amina (preparada como en el Ejemplo 29-3) (610 mg, 5,12 mmol) en THF (4,7 mL), se añadió triacetoxiborohidruro de sodio (749 mg, 3,53 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, se diluyó con EtOAc, se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado, agua y salmuera, y se secó con MgSO4 para proporcionar N-(4-bromo-3-metoxibencil)-1,1-dimetoxipropan-2-amina (700 mg). MS (M+1) = 319,9
Paso 2: 6-Bromo-7-metoxi-3-metilisoquinolina
A un vial para microondas de 5 mL que contenía N-(4-bromo-3-metoxibencil)-1,1-dimetoxipropan-2-amina (5,8 g, 18,26 mmol) enfriado hasta -78 °C, se añadió ácido clorosulfónico (12,2 mL, 183 mmol) lentamente. A continuación, se permitió que la mezcla se agitara a temperatura ambiente durante 18 h y se añadió gota a gota a agua-hielo. La mezcla acuosa resultante se lavó con éter dietílico, se basificó con Na2CO3 acuoso saturado y se extrajo con DCM (2x). Los extractos orgánicos resultantes se secaron con Na2SO4 y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (20-80 % de EtOAc/Hep) para proporcionar 6-bromo-7-metoxi-3-metilisoquinolina (630 mg). MS (M+1) = 254,0
Paso 3: 2-Óxido de 6-bromo-7-metoxi-3-metilisoquinolina a una mezcla de 6-bromo-7-metoxi-3-metilisoquinolina (630 mg, 2,50 mmol) y MTO (24,9 mg, 0,100 mmol) en DCM (12,5 mL) enfriada hasta 0 °C, se añadió peróxido de hidrógeno (0,31 mL, 5,00 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. Se añadieron 5-10 mg de MnO2 y la mezcla de reacción se agitó durante 2 h. La suspensión se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar 2-óxido de 6-bromo-7-metoxi-3-metilisoquinolina (610 mg). MS (M+1) = 269,9
Paso 4: 6-Bromo-7-metoxi-3-metilisoquinolin-1-carbonitrilo
A una mezcla de 2-óxido de 6-bromo-7-metoxi-3-metilisoquinolina (585 mg, 2,18 mmol) y cianuro de trimetilsililo (351 mL, 2,62 mmol) en DCM (10,9 mL), se añadió cloruro de dimetilcarbamoílo (200 mL, 2,18 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, se desactivó con un exceso de Na2CO3 acuoso saturado y se extrajo con DCM (2X). Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 y se concentraron al vacío para proporcionar 6-bromo-7-metoxi-3-metilisoquinolin-1-carbonitrilo (756 mg). MS (M+1) = 279,0
Paso 5: 7-Metoxi-3-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolin-1-carbonitrilo
Se preparó 7-metoxi-3-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) isoquinolin-1-carbonitrilo a partir de 6-bromo-7-metoxi-3-metilisoquinolin-1-carbonitrilo mediante la formación de un éster de tipo boronato tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 7-1 (702 mg). MS (M+1) = 325,1.
Paso 6: 7-Metoxi-3-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo
Se preparó 7-metoxi-3-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo a partir de 7-metoxi-3-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolin-1-carbonitrilo y 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1) mediante las condiciones de Suzuki descritas en el MÉTODO GENERAL 1-1 (960 mg). MS (M+1) = 445,4.
Paso 7: 7-Hidroxi-3-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo Se sometió 7-metoxi-3-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-1 y a continuación se obtuvo la base libre mediante el MÉTODO GENERAL 3-1 para proporcionar el compuesto del título (11,6 mg). LC/MS tR = 0,46. MS (M+1) = 431,4 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 58,34 (s, 1H), 8,24 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,26 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 5,18 (d, J= 12,0 Hz, 1H), 3,06 (s, 3H), 2,68 (s, 3H), 1,76 (dd, J= 12,7, 3,4 Hz, 2H), 1,57 (t, J= 12,6 Hz, 2H), 1,41 (s, 6H), 1,25 (s, 6H).
Ejemplo 31-1: Síntesis de 1-am¡no-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-il)¡soqu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000076_0001
Paso 1: 2-(7-Bromo-6-metoxiisoquinolin-1-il)isoindolin-1,3-diona
A una mezcla de 2-óxido de 7-bromo-6-metoxiisoquinolina (preparada tal como se describe en el Ejemplo 3-7 (300 mg, 1,18 mmol), ftalimida (191 mg, 1,29 mmol) y tributilamina (0,6 mL, 2,48 mmol) en DCM (5,2 mL), se añadió cloruro de benzoílo (0,2 mL, 1,71 mmol) en DCM (0,74 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 h, se desactivó con agua y se extrajo con DCM. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-100 % de EtOAc/Hep) para proporcionar 2-(7-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-il)isoindolin-1,3-diona (257 mg). MS (M+1) = 385,0
Paso 2: 2-(6-Metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolin-1-il)isoindolin-1,3-diona
Se preparó 2-(6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolin-1-il)isoindolin-1,3-diona a partir de 2-(7-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-il)isoindolin-1,3-diona mediante la formación de un éster de tipo boronato tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 7-1. El sólido resultante se agitó en éter dietílico y se filtró, lavando con éter dietílico para proporcionar el producto (110 mg). MS (M+1) = 430,9
Paso 3: 6-Metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-amina
Una mezcla de 2-(6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolin-1 -il)isoindolin-1,3-diona (110 mg, 0,256 mmol), 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (108 mg, 0,383 mmol), acetato de potasio (271mg, 1,28 mmol) y precatalizador de Xphos (20,1 mg, 0,026 mmol) en DMF (1,3 mL), se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla se diluyó con un exceso de MeOH, se filtró a través de Celite y se concentró al vacío. Al material crudo, se añadieron hidrazina (ac. al 35 %, 68,8 pL, 0,767 mmol) y MeOH (2 mL). La mezcla se calentó a 60 °C durante 48 h y se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (acetonitrilo en agua, con modificador de hidróxido de amonio 5mM) para proporcionar 6-metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-amina (15 mg). MS (M+1) = 421,3
Paso 4: 1-Amino-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol
Se sometió 6-metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-amina a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-1 y a continuación se obtuvo la base libre mediante el MÉTODO GENERAL 3-1 para proporcionar el compuesto del título (5,1 mg). LC/MS tR = 0,43. MS (M+1) = 405,3 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 68,55 (s, 1H), 8,32 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 9,9 Hz, 1 H), 7,07 (s, 1 H), 6,81 (d, J = 6,1 Hz, 1 H), 5,28 - 5,04 (m, 1 H), 3,01 (s, 3H), 1,78 - 1,50 (m, 4H), 1,41 (s, 6H), 1,25 (s, 6H).
Ejemplo de referencia 32-1: Síntesis de 7-hidroxi-1,3-dimetil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-2.4(1 H,3H)-diona
Figure imgf000077_0001
Paso 1: 7-(Benciloxi)-6-bromoquinazolin-2,4(1H,3H)-diona
Una mezcla de ácido 2-amino-4-(benciloxi)-5-bromobenzoico (500 mg, 1,55 mmol) y urea (3,7 g, 62,1 mmol) se calentó a 150 °C durante 48 h. A continuación, la reacción se enfrió hasta 100 °C, se añadió un exceso de agua y la mezcla se agitó durante 5 min, a continuación se enfrió hasta temperatura ambiente. El producto precipitó y se filtró para proporcionar 7-(benciloxi)-6-bromoquinazolin-2,4(1H,3H)-diona (341 mg). MS (M+1) = 348,9.
Paso 2: 7-(Benciloxi)-6-bromo-1,3-dimetilquinazolin-2,4( 1H, 3H)-diona
Una mezcla de 7-(benciloxi)-6-bromoquinazolin-2,4(1H,3H)-diona (292 mg, 0,841 mmol), K2CO3 (581 mg, 4,21 mmol) y Mel (0,174 mL, 2,78 mmol) en DMF (4,2 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se diluyó con agua y el precipitado resultante se filtró y se lavó con éter para proporcionar 7-(benciloxi)-6-bromo-1,3-dimetilquinazolin-2,4(1 H,3H)-diona (207 mg). MS (M+1) = 377,0.
Paso 3: 7-(Bendloxi)-1,3-dimetil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolin-2,4(1H,3H)-diona
Se preparó 7-(benciloxi)-1,3-dimetil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolin-2,4(1 H,3H)-diona a partir de 7-(benciloxi)-6-bromo-1,3-dimetilquinazolin-2,4(1H,3H)-diona mediante la formación de un éster de tipo boronato tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 7-1 (115 mg). MS (M+1) = 423,2.
Paso 4: 7-(Benciloxi)-1,3-dimetil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-2,4(1H,3H)-diona
Se preparó 7-(benciloxi)-1,3-dimetil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-2,4(1H,3H)-diona a partir de 7-(benciloxi)-1,3-dimetil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolin-2,4(1H,3H)-diona y 6-doro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1) mediante las condiciones de Suzuki descritas en el MÉTODO GENERAL 1-2 (129 mg). MS (M+1) = 543,2.
Paso 5: 7-Hidroxi-1,3-dimetil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-2,4(1H,3H)-diona
A un matraz de 50 mL que contenía 7-(benciloxi)-1,3-dimetil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-2,4(1H,3H)-diona (93 mg, 0,171 mmol), se añadió HBr (al 33 % en AcOH, 1,4 mL, 8,57 mmol). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, se desactivó con un exceso de agua y se purificó por SCX mediante el MÉTODO GENERAL 3-1 para proporcionar el compuesto del título (16,8 mg). LC/MS tR = 0,51. MS (M+1) = 453,2 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 58,45 (s, 1H), 8,28 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 7,35 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,99 (m, 1H), 3,49 (s, 3H), 3,30 (s, 3H), 2,95 (s, 3H), 1,59-1,37 (m, 4H), 1,27 (s, 6H), 1,11 (s, 6H).
Ejemplo de referencia 33-1: Síntesis de 6-hidroxi-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-¡l)benzo[d1oxazol-2(3H)-ona
Figure imgf000078_0001
Paso 1: 5-Bromo-6-metoxibenzo[d]oxazol-2(3H)-ona
Una mezcla de 6-metoxibenzo[d]oxazol-2(3H)-ona (400 mg, 2,422 mmol) y bromo (0,19 mL, 3,63 mmol) en agua (1,3 mL, 72,7 mmol) y AcOH (1,4 mL, 24,22 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y el producto se filtró para proporcionar 5-bromo-6-metoxibenzo[d]oxazol-2(3H)-ona (535 mg) como un precipitado blanco. MS (M+1) = 243,9.
Paso 2: 6-Metoxi-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona
Se preparó 6-metoxi-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona a partir de 5-bromo-6-metoxibenzo[d]oxazol-2(3H)-ona mediante la formación de un éster de tipo boronato tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 7-1 (400 mg). MS (M+1) = 292,1.
Paso 3: 6-Metoxi-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona
Se preparó 6-metoxi-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona a partir de 6-metoxi-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona y 6-cloro-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1) mediante las condiciones de Suzuki descritas en el MÉTODO GENERAL 1-2 (77 mg). MS (M+1) = 412,2.
Paso 4: 6-Hidroxi-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona
Se sometió 6-metoxi-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-3 para proporcionar el compuesto del título (3,3 mg). LC/MS tR = 0,46. MS (M+1) = 398,21H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 57,92 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,18 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 6,86 (s, 1H), 5,04 (t, J= 12,5 Hz, 1H), 3,00 (s, 3H), 1,73 (dd, J= 12,8, 3,4 Hz, 2H), 1,53 (t, J= 12,4 Hz, 2H), 1,39 (s, 6H), 1,23 (s, 6H).
Ejemplo de referencia 34-1: Síntesis de 2-met¡l-5-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)-2H-¡ndazol-6-ol
Figure imgf000079_0001
Paso 1: 5-Bromo-6-metoxi-1-metil-1H-indazol y 5-bromo-6-metoxi-2-metil-2H-indazol
A una suspensión de NaH (85 mg, 2,11 mmol) en DMF (4 mL) a 0 °C, se añadió 1H-indazol-6-ol (400 mg, 1,76 mmol) en DMF (4 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 min, se enfrió hasta 0 °C y se añadió MeI (0,17 mL, 2,64 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, se desactivó con un exceso de NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con EtOAc. El extracto orgánico se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-100 % de EtOAc/Hep) para proporcionar 5-bromo-6-metoxi-1-metiMH-indazol (276 mg). MS (M+1) = 243,0 y 5-bromo-6-metoxi-2-metil-2H-indazol (76 mg). MS (M+1) = 243,0.
Paso 2: 6-Metoxi-2-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2H-indazol
Se preparó 6-metoxi-2-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2H-indazol a partir de 5-bromo-6-metoxi-2-metil-2H-indazol mediante la formación de un éster de tipo boronato tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 7-1 (88 mg). MS (M+1) = 289,1.
Paso 3: 6-(6-Metoxi-2-metil-2H-indazol-5-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
Se preparó 6-(6-metoxi-2-metil-2H-indazol-5-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina a partir de 6-metoxi-2-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2H-indazol y 6-cloro-N-metiJ-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (Intermedio 1) mediante las condiciones de Suzuki descritas en el MÉTODO GENERAL 1-2 (101 mg). MS (M+1) = 409,3.
Paso 4: 2-Metil-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-2H-indazol-6-ol
Se sometió 6-(6-metoxi-2-metil-2H-indazol-5-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina a condiciones de desprotección de metoxi tal como se describe en el MÉTODO GENERAL 2-3 para proporcionar el compuesto del título (12,5 mg). LC/MS tR = 0,43. MS (M+1) = 395,2. 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 58,19-8,06 (m, 3H), 7,30 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 5,08 (t, J= 12,5 Hz, 1H), 4,14 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 1,69 (dd, J= 12,7, 3,6 Hz, 2H), 1,58 (t, J= 12,5 Hz, 2H), 1,39 (s, 6H), 1,23 (s, 6H).
Ejemplo de referencia 34-2: Síntesis de 1-met¡l-5-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-il)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-¡l)-1H-¡ndazol-6-ol
Figure imgf000079_0002
Se preparó 1-metil-5-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-1 H-indazol-6-ol de la misma manera que en el Ejemplo de referencia 34-1 (9,4 mg). LC/MS tR = 0,48. MS (M+1) = 395,3. 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 58,24­ 8,12 (m, 2H), 7,95 (d, J= 1,0 Hz, 1H), 7,32 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 6,93 (d, J= 0,9 Hz, 1H), 5,14-4,99 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 1,69 (dd, J= 12,7, 3,6 Hz, 2H), 1,57 (t, J= 12,4 Hz, 2H), 1,38 (s, 6H), 1,23 (s, 6H).
Ejemplo de referencia 35-1: Síntesis de la sal de tipo clorhidrato de 6-hidroxi-2-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-il)¡soqu¡nol¡n-1(2H)-ona
Figure imgf000080_0001
Paso 1: 7-Bromo-6-metoxi-2-metilisoquinolin-1(2H)-ona
En un matraz de 100 mL, se añadió KHMDS (3,31 mL, 1,653 mmol) al Intermedio 14 (210 mg, 0,827 mmol) en dioxano (12 mL) a 0 °C y se agitó durante 0,5 h. Se añadió yoduro de metilo (0,078 mL, 1,240 mmol) y se permitió que la mezcla se agitara a temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió agua (50 mL) para desactivar la reacción y a continuación la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (100 mL). Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2X). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (20-60 % de EtOAc/Hep, columna Isco de 24 g) para proporcionar 7-bromo-6-metoxi-2-metilisoquinolin-1(2H)-ona como un sólido amarillento, (112 mg, 0,409 mmol, 49,5 % de rendimiento). MS (M+1) = 270,1. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,61 (s, 1H), 7,08 (d, J=7,53 Hz, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,40 (d, J=7,28 Hz, 1H), 3,99 (s, 3H), 3,59 (s, 3H).
Paso 2: Ácido (6-metoxi-2-metil-1-oxo-1,2-dihidroisoquinolin-7-il)borónico
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 7-1 para la formación de un éster de tipo boronato a partir de 7-bromo-6-metoxi-2-metilisoquinolin-1(2H)-ona. MS (M+1) = 234,2 (ácido borónico), 316,2 (éster borónico).
Paso 3: 6-Metoxi-2-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1 (2H)-ona
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 1-1 para la reacción de Suzuki del Intermedio 1 (70 mg, 0,25 mmol) y el ácido (6-metoxi-2-metil-1-oxo-1,2-dihidroisoquinolin-7-il)borónico (100 mg, 0,43 mmol). MS (M+1) = 436,6.
Paso 4: 6-Hidroxi-2-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1(2H)-ona
El compuesto del título (48 mg, 0,103 mmol, 49,7 % de rendimiento) se preparó a partir de 6-metoxi-2-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1(2H)-ona (90 mg, 0,207 mmol) siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-3 para la desmetilación utilizando tribromuro de boro. El residuo crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (10-30 % de MeCN/agua, con un 0,01 % de TFA como modificador). LC/MS tR = 0,50 min. MS (M+1) = 422,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,59 (s, 1H), 8,48 (d, J=10,04 Hz, 1H), 8,06 (d, J=10,04 Hz, 1H), 7,45 (d, J=7,28 Hz, 1H), 7,10-7,19 (m, 1H), 6,61 (d, J=7,28 Hz, 1H), 5,02 (s a., 1H), 3,60 (s, 3H), 3,20 (s, 3H), 1,99-2,15 (m, 4H), 1,65 (s, 6H), 1,58 (s, 6H).
Ejemplo de referencia 35-2: Síntesis de 2-etil-6-hidroxi-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-1(2H)-ona
Figure imgf000080_0002
Paso 1: 7-Bromo-2-etil-6-metoxiisoquinolin-1(2H)-ona
En un vial de 30 mL, se añadió LiHMDS (2,4 mL, 1,2 mmol) al Intermedio 14 (75 mg, 0,295 mmol) en dioxano (1,5 mL) a TA y se agitó durante 0,5 h. A continuación, se añadió yoduro de etilo (70 |j L, 0,885 mmol) y la mezcla se agitó durante toda la noche a 80 °C y se dejó agitar durante toda la noche. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se añadió agua (10 mL) para desactivar la reacción y la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (15 mL). Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (20­ 60 % de EtOAc/Hep, columna Isco de 12 g, se eluye con un 40 % de EtOAc) para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillento (62 mg, 0,220 mmol). MS (M 1) = 283,9. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 58,30 (s, 1H), 7,51 (d, J=7,33 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 6,60 (d, J=7,33 Hz, 1H), 3,90-4,01 (m, 5H), 1,23 (t, J=7,07 Hz, 3H).
Paso: 2-Etil-6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolin-1(2H)-ona
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 7-1 para la formación de un éster de tipo boronato a partir de 7-bromo-2-etil-6-metoxiisoquinolin-1(2H)-ona. El producto crudo se utilizó sin purificación adicional. MS (M+1) = 248,1 (ácido borónico), 330,1 (éster borónico).
Paso 3: 2-Etil-6-metoxi-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-1(2H)-ona
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 1-1 para la reacción de Suzuki del Intermedio 3 (50 mg, 0,185 mmol) y 2-etil-6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolin-1(2H)-ona (68,7 mg, 0,278 mmol). MS (M+1) = 437,2.
Paso 4: 2-Etil-6-hidroxi-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-1(2H)-ona
El compuesto del título (9 mg, 0,019 mmol, 13,18 % de rendimiento) se preparó a partir de 2-etil-6-metoxi-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-1 (2H)-ona (63 mg, 0,144 mmol) siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-3 para la desmetilación utilizando tribromuro de boro. El residuo crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (10-30 % de ACN/agua, con un 0,01 % de TFA como modificador). LC/MS tR = 0,53 min. m S (M+1) = 423,2. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,75 (d, J=9,35 Hz, 1H), 8,70 (s, 1H), 7,97-8,05 (m, 3H), 7,51 (d, J=7,33 Hz, 1H), 7,20 (s, 1H), 6,66 (d, J=7,33 Hz, 1H), 5,69-5,84 (m, 1H), 4,10 (c, J=7,07 Hz, 2H), 2,53 (dd, J=3,79, 13,64 Hz, 2H), 1,99 (m, 2H), 1,66 (s, 6H), 1,62 (s, 6H), 1,38 (t, J=7,07 Hz, 3H).
Ejemplo 35-3: Síntesis de 1-etox¡-7-(6-(met¡l(2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡r¡daz¡n-3-il)¡soqu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000081_0001
Paso 1: 7-Bromo-1-etoxi-6-metoxiisoquinolina
En un vial de 30 mL, se disolvió parcialmente 7-bromo-1-cloro-6-metoxiisoquinolina (200 mg, 0,734 mmol) en 2 mL de una solución de etóxido de sodio 3 M (2 mL, 6,00 mmol) y se agitó a 80 °C durante toda la noche. La mezcla se concentró al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (columna Isco de 12 g, 5-30 % de EtOAc/Hep) para proporcionar el compuesto del título (157 mg, 0,556 mmol, 76 % de rendimiento). MS (M+1) = 284,0. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 58,46 (s, 1H), 7,95 (d, J=5,8 Hz, 1H), 7,09 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,03 (s, 1H), 4,53 (c, J=7,1 Hz, 2H), 4,02 (s, 3H), 1,50 (t, J=7,0 Hz, 3H).
Paso 2: 1-Etoxi-6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 7-1 para la formación de un éster de tipo boronato a partir de 7-bromo-2-etil-6-metoxiisoquinolin-1(2H)-ona. MS (M+1) = 248,1 (ácido borónico), 330,1 (éster borónico).
Paso 3: 6-(1-Etoxi-6-metoxiisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 1-1 para la reacción de Suzuki del Intermedio 1 (100 mg, 0,354 mmol) y 1-etoxi-6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina (150 mg, 0,607 mmol). MS (M+1) = 450,1.
Paso 4: 1-Etoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol
El compuesto del título (10 mg, 0,022 mmol, 10 % de rendimiento) se preparó a partir de 6-(1-etoxi-6-metoxiisoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina (100 mg, 0,222 mmol) siguiendo el MÉTODO GENERAL 2­ 3 para la desmetilación utilizando tribromuro de boro. El residuo crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (10-30 % de MeCN/agua, con un 0,01 % de TFA como modificador). LC/MS tR = 0,56 min. m S (M+1) = 436,3. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 8,64 (s, 1H), 8,24 (d, J=10,04 Hz, 1H), 7,81 (d, J=6,02 Hz, 1H), 7,36 (d, J=10,04 Hz, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,12 (d, J=6,02 Hz, 1H), 5,29 (s a., 1H), 4,54 (c, J=7,03 Hz, 2H), 3,05 (s, 3H), 1,69-1,87 (m, 4H), 1,48­ 1,56 (m, 9H), 1,36 (s, 6H).
Ejemplo 35-4: Síntesis de 7-(6-((2.2.6.6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)ox¡)p¡r¡daz¡n-3-¡l)¡soqu¡nol¡n-1.6-d¡ol
Figure imgf000082_0001
Paso 1: 6-Etoxi-6-metoxi-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolina
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 1-1 para la reacción de Suzuki del Intermedio 3 (30 mg, 0,111 mmol) y 1-etoxi-6-metoxi-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoquinolina (50 mg, 0,151 mmol). MS (M+1) = 437,6.
Paso 2: 5-Bromo-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpipendin-4-il)oxi)pindazin-3-il)isoquinolin-1,6-diol
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó a partir de 1-etoxi-6-metoxi-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolina (45 mg, 0,103 mmol) siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-3 para la desmetilación utilizando tribromuro de boro. El residuo crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (15-40 % de ACN/agua, con modificador de NH4OH 5 mM). MS (M+1) = 475,0.
Paso 3. 7-(6-((2,2,6,6-Tetrametilpipendin-4-il)oxi)pindazin-3-il)isoquinolin-1,6-diol
En un vial de 30 mL, se combinaron 5-bromo-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-1,6-diol (5 mg, 10,56 |jmol) y Pd-C (11,24 mg, 10,56 |jmol) en etanol (volumen: 1500 |jL) con unas gotas de HCl 1 N. El vial se purgó con H2 durante 5 min y se agitó durante toda la noche con un globo de H2 a temperatura ambiente. El residuo crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (10-30 % de MeCN/agua, con un 0,01 % de TFA como modificador) para proporcionar el compuesto del título (1 mg, 0,002 mmol, 23 % de rendimiento). LC/MS tR = 0,49 min. MS (M+1) = 395,1. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,72 (s, 1H), 8,36 (d, J=9,54 Hz, 1H), 7,30 (d, J=9,54 Hz, 1H), 7,08 (d, J=7,28 Hz, 1H), 7,04 (s, 1H), 6,49 (d, J=7,28 Hz, 1H), 5,75 (t, J=4,14 Hz, 1H), 2,42 (dd, J=4,02, 13,80 Hz, 2H), 1,68-1,80 (m, 2H), 1,54 (s, 6H), 1,45 (s, 6H).
Ejemplos 36-1 a 36-6:
Los siguientes compuestos se prepararon a partir del triflato Intermedio 16 o Intermedio 17 y un alquino, de acuerdo con el MÉTODO GENERAL 10-2 para la reacción de Sonogashira, seguida de una ciclación de la aminâ de acuerdo con el MÉTODO GENERAL 10-3 y a continuación una desprotección de metoxi tal como se expone en el MÉTODO GENERAL 2-1. Los productos se purificaron mediante HPLC preparativa de fase inversa (10-30 % de MeCN/agua, con un 0,01 % de TFA como modificador).
- -
Figure imgf000082_0002
Figure imgf000083_0001
Figure imgf000084_0002
Ejemplo 37-1: Síntesis de 3-met¡l-7-(6-(p¡peraz¡n-1-¡l)p¡r¡dazin-3-¡l)¡soqu¡nol¡n-6-ol
Figure imgf000084_0001
Paso 1: 4-(6-(5-Formil-4-hidroxi-2-metoxifenil)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo
El compuesto del título (107 mg, 0,258 mmol, 21,43 % de rendimiento) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 9-1 para la reacción de Suzuki de 4-(6-doropiridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo (4,7 g, 16,62 mmol) y el Intermedio 15 (500 mg, 1,8 mmol). Se eliminó el dioxano al vacío y se añadieron EtOAc/DCM y agua. Se separaron las fases y la fase acuosa se lavó con DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentraron a vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (5-80 % de EtOAc/Hep). MS (M+1) = 415,5. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 511,57-11,51 (m, 1H), 9,85 - 9,79 (m, 1H), 8,26-8,20 (m, 1H), 7,82-7,73 (m, 1H), 6,97-6,89 (m, 1H), 6,58 - 6,52 (m, 1H), 3,96-3,90 (m, 3H), 3,70 (s, 4H), 3,65-3,56 (m, 4H), 1,53-1,47 (m, 9H).
Paso 2: 4-(6-(5-Formil-2-metoxi-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)fenil)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo
En un vial de 20 mL, se disolvieron 4-(6-(5-formil-4-hidroxi-2-metoxifenil)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo (100 mg, 0,241 mmol) y N-feniltrifluorometanosulfonimida (172 mg, 0,483 mmol) en DCm (1,21 mL) en atmósfera de N2. Se añadió TEA (135 |j L, 0,965 mmol) y la mezcla heterogénea se agitó durante varias horas a temperatura ambiente hasta que se observó una disolución completa. La reacción se agitó durante toda la noche, a continuación se arrastró con una cantidad mínima de DCM y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (10-80 % de EtOAc/Hep, columna pretratada con TEA). Las fracciones recolectadas se concentraron y se sometieron a un vacío elevado durante varios días para proporcionar el compuesto del título (125 mg, 0,229 mmol, 95 % de rendimiento). MS (M+1) = 547,3. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 510,14 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 7,77 (d, J= 9,54 Hz, 1H), 6,92-6,98 (m, 2H), 3,98 (s, 3H), 3,57-3,82 (m, 8H), 1,50 (s, 9H).
Paso 3: 4-(6-(5-Formil-2-metoxi-4-(prop-1-in-1-il)fenil)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 10-1 para la reacción de Sonogashira de 4-(6-(5-formil-2-metoxi-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)fenil)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo (50 mg, 0,091 mmol) y prop-1-ino (18 mg, 0,457 mmol). MS (M+1) = 437,6.
Paso 4: 4-(6-(6-Metoxi-3-metilisoquinolin-7-il)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo
El compuesto del título (producto no aislado) se preparó siguiendo el MÉTODO GENERAL 11-1 para la ciclación del aldehído a partir de 4-(6-(5-formil-2-metoxi-4-(prop-1-in-1-il)fenil)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de tert-butilo (39 mg, 0,089 mmol). MS (M+1) = 436,5.
Paso 5: 3 -Metil-7-(6-(piperazin-1-il)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol
El compuesto del título (5 mg, 0,015 mmol, 16.85 % de rendimiento) se preparó a partir de 4-(6-(6-metoxi-3-metilisoquinolin-7-il)piridazin-3-il)piperazin-1-carboxilato de ferf-butilo (39 mg, 0,090 mmol) siguiendo el MÉTODO GENERAL 2-1 para la desmetilación utilizando clorhidrato de piridina. El residuo crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (10-30 % de ACN/agua, con un 0,01 % de TFA como modificador). Lc /MS tR = 0,35 min. MS (M+1) = 322,01. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 58,89 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,19 (d, J=9,85 Hz, 1H), 7,38 (d, J=9,85 Hz, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,06 (s, 1H), 3,55-3,68 (m, 4H), 2,85-2,94 (m, 4H), 2,50 (s, 3H).
CONDICIONES DE LC/MS
Columna: UPLC Acquity BEH C18 1,7 um, 2,1 x 30 mm de Waters (N.° de componente: 186002349)
Tasa de flujo: 1 mL/min
Temperatura: 55 °C (temp. de la columna)
Composiciones de la fase móvil:
A. 0,05 % de ácido fórmico en agua.
B. 0,04 % de ácido fórmico en metanol.
Gradiente:
Figure imgf000085_0001
ABREVIATURAS
Figure imgf000085_0002
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Ejemplo biológico 1:
Se utilizó un ELISA celular para SMN con el fin de medir los efectos de compuestos de bajo peso molecular sobre el aumento de la proteína SMN. Se sembraron células de una línea celular de mioblastos derivada del modelo de ratón SMNdelta7 (cedida cordialmente por Steve Burden, NYU) en una placa de 384 pocillos con una densidad de 3000 células/pocillo y se trataron con los compuestos durante 24 horas. Se prepararon placas de captura ELISA recubriendo placas de 384 pocillos (Immulon 4HBX) con 0,5 ug/mL de mAb anti-SMN (BD Science, número de catálogo 610647) a 4 °C durante toda la noche. Las placas se lavaron 5 veces con 110 |jL de PBS-Tween (Tween-20 al 0,05 %, PBST), se bloquearon con 100 j L de BSA al 1 % en PBST durante 2 horas y se lavaron (5 veces) con 100 j L de PBST. Después de 24 horas de tratamiento con el compuesto, las células se sometieron a lisis en un tampón RIPA modificado, en hielo durante 1 hora. A continuación, se añadieron 20 j L de lisado y 20 j L de BSA al 1 % a las placas de captura ELISA y se incubaron a 4 °C durante toda la noche. Las placas se lavaron (5 veces) con PBST y a continuación se incubaron con una dilución 1:100 de anticuerpo policlonal primario anti-SMN de conejo (Santa cruz, número de catálogo SC-15320) a temperatura ambiente durante 1 hora y posteriormente se lavaron (5 veces) con 110 uL de PBST. Esto fue seguido por la adición del anticuerpo secundario anti-IgG de conejo producido en cabra-HRP 1:100 (Cell Signaling, número de catálogo 7074) durante 1 hora. A continuación, las placas se lavaron con PBST y se incubaron con 40 |jL de sustrato TMB (Cell Signaling, número de catálogo 7004L) a temperatura ambiente durante 1-10 minutos con agitación. La reacción se detuvo mediante la adición de 40 j L de solución de parada (Cell signaling, número de catálogo 7002L) y se midió la absorción a 450 nm. Los datos se registraron como el incremento de la activación respecto al control de DMSO y CE50.
Condición 1 del ensayo de ELISA: intervalo de concentración del compuesto 20 nM-10 uM; condición 2 del ensayo de ELISA: concentración del compuesto 100 pM - 10 uM. Datos generados en el Ejemplo biológico 1 utilizando las condiciones de ELISA 1 o 2.
Ejemplo biológico 2:
Constructo indicador completo de SMN2:
Se construyó un indicador de Luciferasa de corte y empalme pSMN2 de acuerdo con Zhang et al., («An in vivo reporter system for measuring increased inclusion of exon 7 in SMN2 mRNA: potential therapy of SMA». Gene Ther. octubre de 2001; 8(20):1532-8) mediante PCR de solapamiento. El fragmento de PCR final que contenía Exón6-Intrón6-Exón7(con una inserción de C antes de 49T)-Intrón7-Exón8-Luciferasa se insertó en el sitio BamHI y NotI del vector de expresión pCAG-IRESblast (Chen et al., «Establishment and Maintenance of Genomic Methylation Patterns in Mouse Embryonic Stem Cells by Dnmt3a and Dnmt3b». Mol Cell Biol. agosto de 2003; 23(16):5594-605).
El ADNc del exón1-exón6 de SMN2 humano se amplificó mediante PCR (cebador directo: ACGGATCCATGGCGATGAGCAGCGG (SEQ ID NO: 1); cebador inverso: GCCAGTATGATAGCCACTCATGTACC (SEQ ID NO: 2)), y el Exón6-Intrón6 (cebador directo: ATAATTCCCCCACCACCTCCC (SEQ ID NO: 3); cebador inverso: CATTCCCTACAATCAATTTCAAATCAGAG (SEQ ID NO: 4)) se fusionó mediante PCR de solapamiento para crear el fragmento Exón1-Intrón6, y se insertó en el indicador de Luciferasa de corte y empalme pSMN2 mediante los sitios BamHI y HindIII para crear el indicador de corte y empalme de exón1-6 pSMN2.
Se amplificó un fragmento de 5,1 kb del promotor de SMN2 a partir de ADN genómico humano mediante PCR (cebador directo: CAGCT AGCACGCGT AAGCT CT GATT GGT GAGCGAT GGTGG (SEQ ID NO: 5); cebador inverso: CACTCGAGAGCAAACCCGCGGGTGCGCAGCG (SEQ ID NO: 6)) y se insertó entre el sitio MluI y el sitio BamHI (atenuado utilizando un kit de atenuación de ADN, Takara, n.° de cat. 6025) del indicador de corte y empalme de exón1-6 pSMN2 con el fin de reemplazar el promotor de p-actina de gallina y el potenciador inicial inmediato de citomegalovirus humano, para finalizar el indicador completo de pSMN2.
Clon estable del indicador completo de SMN2 en células NSC34:
El indicador completo de pSMN2 se transfectó de forma estable en células NSC34 utilizando Lipofectamina 2000, las cuales se seleccionaron posteriormente en medio que contenía blasticidina durante dos semanas. Las colonias resistentes a la blasticidina se cribaron según la señal de luciferasa y la respuesta a SAHA, así como también según RT-PCR para determinar un corte y empalme alternativo del Exón7.
Ensayo de genes indicadores:
La línea estable del indicador completo de SMN2 NSC34 se cultivó en DMEM (Invitrogen, Cat:11965) 10 % de FBS 7|jg/mL de blasticidina. Las células en medio de cultivo sin blasticidina se sembraron en una placa de 384 pocillos con una densidad de 6000 células/pocillo y se trataron con los compuestos durante 24 horas. La señal de la luciferasa se evaluó mediante un ensayo de BrightGlo. Se añadió un volumen equivalente de reactivo de BrightGlo (Promega, n^ de cat. E2620) a las células y se incubaron durante 10 minutos a temperatura ambiente. La señal luminiscente se registró en un lector de placas Bio Tek o Envision.
Condiciones del ensayo de genes indicadores: intervalo de concentración del compuesto 3 nM-10 uM.
Tabla de actividad: Los datos generados en el Ejemplo biológico 3 se generaron utilizando los métodos descritos en el Ejemplo biológico 1 o Ejemplo biológico 2. _____________________ _____________________________________
Número
del
Figure imgf000088_0001
Ejemplo
Ejemplo o Ejemplo de referencia biológico Actividad de SMN Nombre del compuesto
Figure imgf000088_0002
4-cloro-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-Pre aración 11 1 280 nM factor de 26 il uinolin-7-ol
Figure imgf000088_0003
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idin-
Figure imgf000094_0002
Comparación del factor de activación y la potencia según ELISA de SMN (tal como se describe en el Ejemplo biológico 1) para piridazinas 6,6-heterocíclicas sustituidas con hidroxi en orto, con alcoxi en orto y no sustituidas:
Figure imgf000094_0001
Figure imgf000094_0003
Figure imgf000095_0001

Claims (12)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, de acuerdo con la Fórmula (I)
Figure imgf000096_0002
donde
u y v son cada uno, independientemente, 0, 1, 2 o 3; y
cada Ra y Rb se selecciona, independientemente, entre ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo y alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino; y
Figure imgf000096_0001
Figure imgf000097_0001
un compuesto, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, que se selecciona del grupo que consiste en:
6- hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carboxamida;
7- hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carboxamida;
6-hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carboxamida; y
6-hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2-carboxilato de metilo.
2. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde el compuesto es de fórmula II:
Figure imgf000097_0002
Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
3. Un compuesto, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, de acuerdo con la reivindicación 1, donde el compuesto es de fórmula III:
Figure imgf000097_0003
Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
4. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde el compuesto es de fórmula IV:
Figure imgf000097_0004
Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
5. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde el compuesto es de fórmula V:
Figure imgf000098_0001
Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo
C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
6. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde el compuesto es de fórmula VI:
Figure imgf000098_0002
Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo
C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
7. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde el compuesto es de fórmula VII:
Figure imgf000098_0003
Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo
C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
8. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde el compuesto es de fórmula VIII:
Figure imgf000098_0004
Rc y Rd se seleccionan cada uno, independientemente, entre hidrógeno, ciano, halógeno, hidroxi, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C4, alquinilo C2-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquilo C3-C7, heterociclilo, heteroarilo, heterociclil(alquilo C1-C4), (alquil C1-C4)arilo, (alquil C1-C4)heterociclilo, (alquil C1-C4)heteroarilo, (alcoxi C1-C4)arilo, (alcoxi C1-C4)heterociclilo, (alcoxi C1-C4)heteroarilo, alcoxi C1-C4 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C4, amino y mono- y di(alquil C1-C4)amino.
9. Un compuesto, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, de acuerdo con la reivindicación 1, que se selecciona del grupo que consiste en
7-hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona;
6- (6-((3aR,6aS)-5-metilhexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
7- hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-2(1H)-ona;
6-(6-(metil(1,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
2- metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-morfolinoquinolin-7-ol;
4-cloro-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
3- bromo-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-7-ol;
3-etil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
3-(1H-imidazol-1-il)-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)quinolin-7-ol;
3- isopropil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
6- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3,7-diol;
7- hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-3-carbonitrilo;
6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
4- (dimetilamino)-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-7-ol;
3- cloro-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
4- metoxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
6- (3-(benciloxi)isoquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina;
8- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
7- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1,6-diol;
7-(6-(metil(1,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
1- ciclopropil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
6- (1-(benciloxi)isoquinolin-7-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)piridazin-3-amina;
7- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
2- metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)quinolin-7-ol;
2- metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
4-etoxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
4- cloro-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-6-ol;
6- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)quinolin-7-ol;
3- cloro-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-6-ol;
3-bromo-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-6-ol;
3- metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
5- bromo-3-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
4- metoxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-7-ol;
4-(azetidin-1-il)-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
7- hidroxi-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-4-carbonitrilo;
4-ciclopropil-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
4-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)-2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(tetrahidro-2H-piran-4-il)quinolin-7-ol;
2-Metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(oxetan-3-il)quinolin-7-ol;
4-(dimetilamino)-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
6- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinazolin-7-ol;
7- hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona;
7-hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)isoquinolin-1 -carbonitrilo;
7-hidroxi-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo;
6-hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo;
6- hidroxi-7-(6-(piperazin-1-il)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo;
7- hidroxi-6-(6-(piperazin-1-il)piridazin-3-il)quinolin-2-carbonitrilo;
7-(6-(piperazin-1-il)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
7-(6-( 1,2,3,6-tetrahidropi ridi n-4-il)piridazin-3-il)quinolin-6-ol;
1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-7-ol;
1-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
1,3-dimetil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
7-hidroxi-3-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)isoquinolin-1 -carbonitrilo;
1-etoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-1,6-diol;
7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-piridazin-3-il)-3-fenilisoquinolin-6-ol;
3-metil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
3-ciclopropil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
3-isopropil-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
3-propil-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
3-isopropil-7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
3- metil-7-(6-(piperazin-1-il)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)quinolin-7-ol;
7-(6-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
7-(6-((3aR,6aS)-5-metilhexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol;
6-hidroxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-1-carbonitrilo;
6- (6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-7-ol;
2-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-4-(pirrolidin-1-il)quinolin-7-ol;
4- metoxi-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)pi ridazin-3-il)quinolin-6-ol;
7- hidroxi-1-metil-6-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)-3,4-dihidroquinolin-2(1H)-ona; y 1-amino-7-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)isoquinolin-6-ol.
10. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.
11. Una combinación que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 , o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y uno o más coagentes terapéuticamente activos.
12. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento de la atrofia muscular espinal, artrogriposis múltiple congénita de tipo neurogénico y esclerosis lateral amiotrófica.
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