ES2990183T3 - (N-)Acetil-L-leucina para su uso en el tratamiento de traumatismo craneoencefálico - Google Patents

Abstract

La presente divulgación proporciona métodos para tratar enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes, por ejemplo, lesión cerebral traumática, en un paciente que lo necesita mediante la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, éster etílico de L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, o acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

(N-)Acetil-L-leucina para su uso en el tratamiento de traumatismo craneoencefálico

Antecedentes de la invención

Campo de la invención

La presente divulgación proporciona acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso en métodos para tratar traumatismo craneoencefálico, en un paciente que lo necesita administrando una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Antecedentes de la invención

La acetil-DL-leucina se ha usado en Francia para tratar vértigo agudo desde 1957. Un estudio de FDG-|iPET en un modelo de rata de una laberíntectomía unilateral aguda (Zwergalet al.(2016) Brain Struct Funct; 221(1): 159 70) mostró un efecto significativo de un enantiómero L, N-acetil-L-leucina, sobre la compensación postural por activación del vestíbulo-cerebelo y una desactivación del tálamo posterolateral (Guntheret al.(2015) PLoS One; 10(3): e0120891). La mejora sintomática de la ataxia cerebelosa usando acetil-DL-leucina se mostró en una serie de casos con pacientes cerebelosos (Struppet al.(2013) J Neurol; 260(10): 2556-61). Otra serie de casos no encontró beneficio (Pelzet al.(2015) J Neurol; 262(5): 1373-5). El análisis cuantitativo de la marcha mostró que la acetil-DL-leucina mejoró la variabilidad temporal de la marcha en pacientes con ataxia cerebelosa (Schnieppet al.(2015) Cerebellum; 3:8). En un estudio de un mes que implicaba 12 pacientes con Niemann-Pick tipo C (NPC), se mostró mejora sintomática de la ataxia (Bremivaet al.(2015) Neurology; 85(16): 1368-75). Se usaron acetil-DL-leucina, acetil-D-leucina y acetil-L-leucina en el tratamiento de pérdida vestibular, desequilibrio postural, balanceo de cabeza, pérdida vestibular unilateral (UVL) y nistagmoin vivoen gatos (Tighiletet al.(2015) Eur J Pharmacology; 769:342-9). Además, un estudio de PET en pacientes con ataxia a los que se administró acetil-DL-leucina demostró un metabolismo aumentado en el mesencéfalo y el tronco cerebral inferior en pacientes que responden (Becker-Benseet al.(2015) Abstract EAN).

Los documentos WO 2018/029657 y WO 2018/029658 describen el uso de leucina y acetil-leucina para tratar determinadas enfermedades neurodegenerativas tales como la enfermedad de Alzheimer (EA), esclerosis múltiple (EM), enfermedad de Parkinson (EP) y esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y trastornos de almacenamiento lisosómico de la cera (LSD). En el documento WO 2018/029658, un modelo de ratón de la enfermedad de Niemann-Pick de tipo C (NPC) mostró que el cerebro de ratón NPC1 mostró acumulación de LC3-II, y la administración de acetil-DL-leucina estaba asociada con una disminución de LC3-II, indicativa de una restauración parcial del flujo autofágico. El documento WO 2018/007864 describe composiciones de gotas oculares que comprenden salbutamol, ramiprilato, eplerenona y N-acetil-DL-leucina para uso en el tratamiento de neuritis óptica. El documento US2014/080885 se refiere a métodos para tratar traumatismo craneoencefálico usando (±)-[3-(9H-carbazol-4-iloxi)-2-hidroxipropil] [2-(2-metoxifenoxi)etil]amina.

La inflamación provocada por la producción de citocinas proinflamatorias, por ejemplo, IL-1 p y quimiocinas es la base de diversas enfermedades neurodegenerativas, neuroinflamatorias, mitocondriales y otras. Véase, por ejemplo, Chakrabartiet al.,Curr Alzheimer Res. 15 (10):894-904 (2018); Cherryet al.,Journal of Neuroinflammation 11:98 (2014); Inácioet al.,Journal of Neuroinflammation 12:211 (2015); Lappalainenet al.,Am J Respir Cell Mol Biol 32:311-318 (2005); Cocciaet al.,J. Exp. Med. 209; 1595-1609 (2012); Ray, Journal of the American College of Cardiology 63:1735-1438 (2014); Renet al.,Brain Res Rev. 60(1):57-64 (2009); Frank-Cannonet al.,Molecular Neurodegeneration 4:47 (2009); DiAbatoet al.,J Neurochem 139(supl. 2):136-153 (2016); Amoret al.,Immunology 142:151-166 (2013); Chenet al.,Molecular Medicine Reports 13:3391-3396 (2016); Tuttolomonadoet al.,Drug Design, Development and Therapy 8: 2221-2239 (2014); Honget al.,Int Neurourol J 20 supl. 1: S2-7 (2016); Guet al.,Journal of Biological Regulators & Homeostatic Agents 29:787-791 (2015); Belarbiet al.,Journal of Neuroinflammation 9:23 (2012); Abdulkhaleqet al.,Veterinary World, EISSN: 2231-0916 (disponible en www.veterinaryworld.org/Vol.11/May-2018/9.pdf); Frankolaet al.,CNS Neurol Disord Drug Targets 10(3):391-403 (2011); Habbaset al.,Cell 163:1730-1741 (2015); Debrayet al.,Current Opinion in Pediatrics 20:471-482 (2008); Niyazovet al.,Mol Syndromol 7: 122-137 (2016).

Por ejemplo, el traumatismo craneoencefálico (“TBI”) es un trastorno devastador asociado con una morbimortalidad significativa. Las incidencias de TBI continúan aumentando en vista del crecimiento de la población y los aumentos en acontecimientos relacionados con lesiones tales como accidentes de tráfico. Otras emergencias tales como desastres naturales, lesiones deportivas, caídas, asaltos y conflicto militar contribuyen significativamente a casos de TBI. Sólo en los Estados Unidos, se estima que más de 1,5 millones de personas sufren un TBI cada año. El TBI varía en gravedad, variando de leve, a moderada, a grave, y puede ser focal o difusa. Las lesiones focales se producen en una ubicación específica, mientras que las lesiones difusas están asociadas con disfunción axonal potencialmente extendida y daño vascular. El tratamiento con acetil-L-leucina atenúa la muerte de las células neuronales después de un traumatismo craneoencefálico en ratones (Sarkaret al.bioRxiv (2019), 1-20).

El daño al cerebro por TBI se produce en dos fases. La fase primaria inicial es el propio acontecimiento de traumatismo craneal, que es irreversible y sólo puede someterse a medidas preventivas para minimizar el grado de daño, seguido de una fase secundaria en curso, que comienza en el momento de la lesión y continúa en los días siguientes hasta semanas a años. Esta fase secundaria conduce a una variedad de respuestas fisiológicas, celulares y moleculares dirigidas a restaurar la homeostasis del tejido dañado, que puede conducir a una lesión cerebral secundaria.

Existe una necesidad en la técnica de agentes farmacéuticos para tratar enfermedades que responden a la modulación de la expresión de mediadores proinflamatorios.

Breve sumario de la invención

El objeto de la invención es tal como se define en las reivindicaciones adjuntas.

Los métodos de tratamiento dados a conocer a lo largo de la solicitud se usan como sinónimos con formatos de producto limitados para el propósito para la indicación médica mencionada. El solicitante ha descubierto inesperadamente que la acetil-L-leucina modula la expresión de mediadores proinflamatorios en un modelo de control de traumatismo craneoencefálico inducido por impacto cortical (CCI) en ratones. Por tanto, en un aspecto, la invención proporciona acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso en un método para tratar un traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de un traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al sujeto.

Sin desear estar limitado por ninguna teoría particular, se cree que la leucina, acetil-DL-leucina, acetil-D-leucina y acetil-L-leucina modulan la neuroinflamación, que es una ruta para combatir las cascadas moleculares que contribuyen a la neuroinflamación y otras enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes. Por ejemplo, la lesión cerebral secundaria en pacientes con TBI puede caracterizarse por una respuesta hiperreactiva, donde un exceso de citocinas proinflamatorias puede desempeñar un papel en el mantenimiento de la función cerebral, así como en la reparación después de<t>B<i>. La lesión cerebral inducida por traumatismo craneal puede desencadenar una liberación excesiva y/o incontrolada de estas citocinas, particularmente interleucina (IL)-1 p, IL-6 y factor de necrosis tumoral (TNF)-a , lo que puede dar como resultado un daño cerebral significativo. Se ha informado que las citocinas proinflamatorias desempeñan un papel en la patofisiología de enfermedades neurodegenerativas tales como EA, EM, EP y ELA (Wei-Weiet al.,Mol. Med. 2016; 13(4):3391-3396), y se ha identificado que son un sello distintivo de los trastornos genéticos-neurodegenerativos tales como los gangliosidados de<g>M1 y GM2 (Jeyakumaret al.,Brain 2003; 126(Pt 4):974-87). Además, la alteración de la función lisosómica normal en las enfermedades por almacenamiento lisosómico (LSD) se ha asociado con anomalías en la inflamación, tales como citocinas proinflamatorias anormalmente elevadas. (Simonaro, Journal of Inborn Errors of Metabolism & Screening, vol. 4: 1-8 (2016)).

Además, sin desear estar limitado por ninguna teoría particular, también se cree según la presente divulgación que DL-leucina, L-leucina, D-leucina, éster etílico de L-leucina, acetil-DL-leucina, acetil-D-leucina y acetil-L-leucina modulan la proteína Tau asociada a microtúbulos (que es un sustrato de autofagia) y/o el conjugado de fosfatidiletanolamina-cadena ligera 3 de proteína asociada a microtúbulos 1A/1B (LC3-II), que pueden ser marcadores de TBI. La LC3-II es un marcador de la formación de autofagosomas, y niveles aumentados de LC3-II pueden reflejar aclaramiento alterado de vacuolas autofágicas. Se forman autofagosomas, pero no se eliminan. La autofagia se ve afectada en la EA, y los cerebros con EA muestran niveles aumentados de LC3-II.

En un aspecto, la invención proporciona acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso en un método para tratar un traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de un traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al sujeto.

Se describen además métodos para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades enumeradas en las tablas 1-17, véase a continuación. Un “compuesto de la divulgación” se refiere en conjunto a acetil-DL-leucina (“ADLL”), acetil-L-leucina (“ALL”, “NAL” o “NALL”), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Se da a conocer además un compuesto de la divulgación para su uso en el tratamiento de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o para su uso en el tratamiento de un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades enumeradas en las tablas 117, véase a continuación.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso en el tratamiento de TBI en un sujeto que lo necesita, o para su uso en el tratamiento de un síntoma de TBI en un sujeto que lo necesita.

Se da a conocer además el uso de un compuesto de la divulgación para la fabricación de un medicamento para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o para la fabricación de un medicamento para tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades enumeradas en las tablas 1-17, véase a continuación.

Se da a conocer además el uso de un compuesto de la divulgación para la fabricación de un medicamento para tratar TBI en un sujeto que lo necesita, o para la fabricación de un medicamento para tratar TBI en un sujeto que lo necesita.

Se da a conocer además una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la divulgación y un portador farmacéuticamente aceptable para su uso en el tratamiento de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o para su uso en el tratamiento de un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades enumeradas en las tablas 1-17, véase a continuación. En otro aspecto, la presente divulgación proporciona acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso en un método para tratar un traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, en la que tratar el síntoma de un traumatismo craneoencefálico en un sujeto comprende modular la expresión de mediadores proinflamatorios, por ejemplo, citocinas proinflamatorias y quimiocinas proinflamatorias en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al sujeto. En otro aspecto, los mediadores proinflamatorios incluyen, pero no se limitan a, NOS2, IL-18, IFNb, IL-1 p, TNFa , NOX2, NLRP3, SOCS3, ARG1, IL-10, IL-4ra y/o YM1.

Debe entenderse que tanto el sumario anterior como la siguiente descripción detallada son únicamente a modo de ejemplo y explicación, y no son restrictivos de la invención tal como se reivindica.

Descripción detallada de los dibujos

La figura 1 es un esquema que muestra la dosificación de NAL y el plan experimental para el modelo de TBI inducido por impacto cortical. Los ratones se alimentaron por vía oral con NAL y se recogieron tejidos corticales los días 1, 3 y 7 después del TBI para análisis bioquímicos.

La figura 2 es un gráfico de barras que muestra el cambio de peso corporal en ratones 7 días después del tratamiento con NAL (N-acetil-L-leucina o acetil-L-leucina) tras TBI.

La figura 3 es un gráfico de barras que muestra la evaluación de la memoria espacial en ratones 7 días después del tratamiento con NAL tras TBI usando la prueba del laberinto en Y.

La figura 4 es un gráfico de barras que muestra la expresión de IL-16 en ratones 3 días después del tratamiento con NAL tras CCI.

La figura 5 es un gráfico de barras que muestra la expresión de IL-1 p en ratones 3 días después del tratamiento con NAL tras CCI.

La figura 6 es un gráfico de barras que muestra la expresión de IFNb en ratones 3 días después del tratamiento con NAL tras CCI.

La figura 7 es un gráfico de barras que muestra la expresión de Arg1 en ratones 3 días después del tratamiento con NAL tras CCI.

La figura 8 es un gráfico de barras que muestra la expresión de SOCS3 en ratones 3 días después del tratamiento con NAL tras CCI.

La figura 9 es un gráfico de barras que muestra la expresión de TNF en ratones 3 días después del tratamiento con NAL tras CCI.

La figura 10 es un gráfico de barras que muestra la expresión de IL-18 en ratones 3 días después del tratamiento con NAL tras CCI.

La figura 11 es una evaluación de análisis de inmunotransferencia de tipo Western de la autofagia y la muerte celular después del tratamiento con NAL tras CCI.

La figura 12 es un gráfico de barras que muestra los niveles de fodrina/b-actina después del tratamiento con NAL tras CCI.

La figura 13 es un gráfico de barras que muestra los niveles de LC3-II/b-actina después del tratamiento con NAL tras CCI.

La figura 14 es un histograma de la razón de la expresión de LC3-II a pIM-tubulina en el cerebelo de cerebros de NPC1 de ratón a las 9-12 semanas de edad tratados con ADLL, ALL, Ad L, DLL, LL, DL, LLE y miglustat (miglu.) durante 3 semanas en relación con el cerebelo de NPC1 no tratado (n = 4, media ± E.E.M.).

La figura 15 es un histograma de la razón de APP-CTF: expresión de APP de longitud completa en el cerebelo de cerebros con NPC1 de ratón a las 9-12 semanas de edad tratados con ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL, LLE y miglustat (miglu.) durante 3 semanas en relación con cerebelo de NPC1 no tratado (n = 4, media ± E.E.M.). La figura 16 es un histograma de la razón de APP-CTF-6: expresión de APP de longitud completa en el cerebelo de cerebros con NPC1 de ratón a las 9-12 semanas de edad tratados con ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE durante 3 semanas en relación con el cerebelo de NPC1 no tratado.

La figura 17 es un histograma de la razón de APP-CTF-7: expresión de APP de longitud completa en el cerebelo de cerebros con NPC1 de ratón a las 9-12 semanas de edad tratados con ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE durante 3 semanas en relación con el cerebelo de NPC1 no tratado (n = 4, media ± E.E.M.).

La figura 18 es un histograma de la razón de LC3-II normalizada a pIII-tubulina (expresada como un porcentaje de neuronas corticales primarias de rata no tratadas (n = 1)) que se trataron con U18666A (2 |ig/ml, 24 h) en ausencia o presencia de ADL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE (1 mM, 24 h).

La figura 19 es un histograma de la razón de APP-CTF 6 y 7 normalizados a sus CTF respectivos en células no tratadas (expresado como un porcentaje de neuronas corticales primarias de rata no tratadas (n = 1) que se trataron con U18666A (2 |ig/ml, 24 h) en ausencia o presencia de ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE (1 mM, 24 h).

La figura 20 son ocho inmunotransferencias de tipo Western de tau (5E2), sinaptofisina y pIII-tubulina en neuronas corticales primarias de rata (cultivos enriquecidos en neuronas (NE) y neuronglia (NG)) en ausencia y presencia de ADL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE (1 mM, 5 días).

La figura 21 es un histograma de la razón de tau de longitud completa normalizada a pIII-tubulina en cultivos de NE a DIV14 en ausencia y presencia de ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE (1 mM, 5 días).

La figura 22 es un histograma de la razón de tau truncada (clon 5E2) normalizada a pIII-tubulina en cultivos de NG a DIV14 en ausencia y presencia de ADL, ALL, ADL, D<l>L, LL, DL, y LLE (1 mM, 5 días).

La figura 23 es un histograma de la razón de sinaptofisina normalizada a pIII-tubulina en cultivos de NE a DIV14 (expresada como porcentaje de lisados de control no tratados; n = 4, media ± E.E.M.) en ausencia y presencia de ADL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE (1 mM, 5 días).

La figura 24 es un histograma de la razón de sinaptofisina normalizada a pIII-tubulina en cultivos de NG a DIV14 (expresada como porcentaje de lisados de control no tratados; n = 4, media ± E.E.M.) en ausencia y presencia de ADL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE (1 mM, 5 días).

La figura 25 es un gráfico de barras que muestra el volumen lisomal en células de ovario de hámster chino de tipo natural y nulas para NPC1 tratadas con ALL durante siete días a las concentraciones indicadas (n = 4). La figura 26 es un gráfico de barras que muestra el volumen lisomal en células de ovario de hámster chino de tipo natural y nulas para NPC1 tratadas con LEE durante siete días a las concentraciones indicadas (n = 4). La figura 27 es un gráfico de barras que muestra el volumen lisomal en células de ovario de hámster chino de tipo natural y nulas para NPC1 tratadas con LL durante siete días a las concentraciones indicadas (n = 3).

La figura 28 es una evaluación de análisis de inmunotransferencia de tipo Western de lisado de tejido cortical de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo para detectar productos de degradación de afodrina.

La figura 29 es un gráfico de barras que muestra el análisis densitométrico de a-fodrina con respecto a actina. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, **p<0,01 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 30 es una serie de cuatro imágenes de secciones de cerebro cortical de ratón con TBI alimentadas con vehículo o NALL teñidas para TUNEL. Los datos se presentan como media ± EEM. n=3 para los ratones con TBI alimentados con vehículo y 4 para los alimentados con NALL.

La figura 31 es un gráfico de barras que muestra la cuantificación del área para las secciones de cerebro cortical de ratón con TBI teñidas para TUNEL. Los datos se presentan como media ± EEM. n=3 para los ratones con TBI alimentados con vehículo y 4 para los alimentados con NALL.

La figura 32 es un gráfico de barras que muestra la cuantificación celular para las secciones de cerebro cortical de ratón con TBI teñidas para TUNEL. Los datos se presentan como media ± EEM. n=3 para los ratones con TBI alimentados con vehículo y 4 para los alimentados con NALL.

La figura 33 es una evaluación de análisis de inmunotransferencia de tipo Western de lisado de tejido cortical de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo para el marcador autofagosomal LC3 y proteínas de carga autofágica p62/SQSTM1.

La figura 34 es un gráfico de barras que muestra el análisis densitométrico de LC3-II con respecto a actina. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 35 es un gráfico de barras que muestra el análisis densitométrico de p62 con respecto a actina. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 36 es un gráfico de barras que muestra los niveles relativos de ARNm deNOS2en las cortezas de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, ***p<0,001, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 37 es un gráfico de barras que muestra los niveles relativos de ARNm deNLRP3en las cortezas de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, ***p<0,001, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 38 es un gráfico de barras que muestra los niveles relativos de ARNm deIL-1fien las cortezas de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, ***p<0,001, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 39 es un gráfico de barras que muestra los niveles relativos de ARNm deTNF-aen las cortezas de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, ***p<0,001, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 40 es un gráfico de barras que muestra los niveles relativos de ARNm deIFN-fien las cortezas de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, ***p<0,001, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 41 es un gráfico de barras que muestra los niveles relativos de ARNm deNOX2en las cortezas de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, ***p<0,001, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 42 es un gráfico de barras que muestra los niveles relativos de ARNm deSOCS3en las cortezas de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, ***p<0,001, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 43 es un gráfico de barras que muestra los niveles relativos de ARNm deYM-1en las cortezas de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, ***p<0,001, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 44 es un gráfico de barras que muestra los niveles relativos de ARNm deIL-4raen las cortezas de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, ***p<0,001, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 45 es un gráfico de barras que muestra los niveles relativos de ARNm deArg-1en las cortezas de ratones simulados y con TBI alimentados con NALL o vehículo. Los datos se presentan como media ± EEM. n=5, ***p<0,001, *p<0,05 (ANOVA bidireccional con pruebas posteriores de Bonferroni).

La figura 46 es una imagen que muestra la pérdida de células de Purkinje cerebelosas que progresa desde los lóbulos anterior a posterior y la activación microglial en ratonesNpc1-/-no tratados y ratonesNpc1-/-tratados con ADLL, ALL y ADL. Los cerebelos se tiñeron con calbindina-b (células de Purkinje) o CD68 (microglía activada). La figura 47 es un gráfico de dispersión que muestra la supervivencia de las células de Purkinje a los 59 días de edad en ratonesNpc1-1-no tratados y ratonesNpc1-1-tratados con ADLL, ALL y ADL.

La figura 48 es un gráfico de dispersión que muestra la frecuencia de microglía activada positiva para CD68 a los 59 días de edad en ratonesNpc1-/-no tratados y ratonesNpc1-/-tratados con ADLL, ALL y ADL. Se midió la densidad celular de CD68 en el cerebelo. n = 5 animales por grupo. Media ± DE, ***p< 0,0009 (ANOVA de un factor).

La figura 49 es un gráfico de líneas que muestra el resultado de la función motora (recorrido del haz) en el modelo de TBI de impacto cortical controlado con ratones tratados con NAL.

La figura 50 es un gráfico de barras que muestra el resultado de la memoria espacial (laberinto en Y) en el modelo de TBI de impacto cortical controlado con ratones tratados con NAL.

La figura 51 es un gráfico de barras que muestra el resultado del reconocimiento de objetos (NOR) novedoso en el modelo de TBI de impacto cortical controlado con ratones tratados con NAL.

Descripción detallada de la invención

Un “sujeto”, tal como se usa en el presente documento, puede ser un vertebrado, mamífero o animal doméstico. Por tanto, las composiciones según la divulgación pueden usarse para tratar cualquier mamífero, por ejemplo, ganado (por ejemplo, un caballo, vaca, oveja o cerdo), mascotas (por ejemplo, un gato, perro, conejo o cobaya), un animal de laboratorio (por ejemplo, un ratón o rata), o pueden usarse en otras aplicaciones veterinarias. En una realización, el sujeto es un ser humano. “Sujeto” y “paciente” se usan indistintamente.

Como se usa en el presente documento, las formas singulares “un”, “una” y “el/la” incluyen referencias plurales. Los términos “aproximadamente” y “alrededor de” significan que son casi los mismos que un número o valor al que se hace referencia que incluye un grado aceptable de error para la cantidad medida dada la naturaleza o precisión de las mediciones.

Tal como se usa en el presente documento, los términos “aproximadamente” y “alrededor de” deben entenderse generalmente para abarcar ± 20 % de una cantidad, frecuencia o valor especificados. Las cantidades numéricas dadas en el presente documento son aproximadas a menos que se indique lo contrario, lo que significa que el término “alrededor de” o “aproximadamente” puede inferirse cuando no se indique expresamente.

Los términos “administrar”, “administración” o “que administra”, tal como se usan en el presente documento, se refieren a (1) proporcionar, dar, dosificar y/o prescribir por un profesional sanitario o su agente autorizado o bajo su dirección, un compuesto de la divulgación y (2) introducir, tomar o consumir por el paciente o la propia persona, un compuesto de la divulgación. Cualquier referencia a “leucina”, “acetil-DL-leucina” y “acetil-L-leucina” o cualquier otro compuesto de la divulgación, incluye sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, incluso si no se indica expresamente.

A menos que se indique lo contrario, el término “leucina” se refiere a L-leucina.

Una “sal farmacéuticamente aceptable” tal como se denomina en el presente documento, es cualquier preparación salina que sea apropiada para su uso en una aplicación farmacéutica. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales de amina, tales como N,N'-dibenciletilendiamina, cloroprocaína, colina, amoniaco, dietanolamina y otras hidroxialquilaminas, etilendiamina, N-metilglucamina, procaína, N-bencilfenetilamina, 1-paraclorobencil-2-pirrolidin-1'-ilmetilbencimidazol, dietilamina y otras alquilaminas, piperazina, tris(hidroximetil)aminometano y similares; sales de metales alcalinos, tales como litio, potasio, sodio y similares; sales de metales alcalinotérreos, tales como bario, calcio, magnesio y similares; sales de metales de transición, tales como zinc, aluminio y similares; otras sales metálicas, tales como hidrogenofosfato de sodio, fosfato de disodio y similares; ácidos minerales, tales como clorhidratos, sulfatos y similares; y sales de ácidos orgánicos, tales como acetatos, lactatos, malatos, tartratos, citratos, ascorbatos, succinatos, butiratos, valeratos, fumaratos y similares.

Un compuesto de la divulgación puede formularse y administrarse a un sujeto según enseñanzas conocidas en la técnica. Por ejemplo, acetil-DL-leucina, acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, puede formularse como una composición farmacéutica. La composición farmacéutica puede comprender acetil-DL-leucina, acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, y un portador farmacéuticamente aceptable. La referencia a la composición farmacéutica abarca el agente activo solo, es decir, acetil-DL-leucina, acetil-L-leucina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, o en forma de una composición farmacéutica. Tal como se usa en el presente documento, un compuesto de la divulgación se refiere a acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

La composición farmacéutica puede tomar cualquiera de un número de formas diferentes dependiendo, en particular, de la manera en que va a usarse. Por tanto, por ejemplo, puede estar en forma de polvo, comprimido, cápsula, líquido, pomada, crema, gel, hidrogel, aerosol, pulverización, disolución micelar, parche transdérmico, suspensión de liposomas o cualquier otra forma adecuada que pueda administrarse a una persona o animal que necesite tratamiento.

Un “portador farmacéuticamente aceptable” tal como se denomina en el presente documento, es cualquier compuesto conocido o combinación de compuestos conocidos, por ejemplo, excipientes, portadores, etc., que se sabe por los expertos en la técnica que son útiles en la formulación de composiciones farmacéuticas. Se apreciará que el portador de la composición farmacéutica debe ser uno que sea tolerado por el sujeto al que se le da.

En una realización, el portador farmacéuticamente aceptable puede ser un sólido, y la composición puede estar en forma de un polvo o comprimido. Un portador sólido farmacéuticamente aceptable puede incluir, pero no se limita a, una o más sustancias que también pueden actuar como agentes aromatizantes, tampones, lubricantes, estabilizantes, solubilizantes, agentes de suspensión, agentes humectantes, emulsionantes, colorantes, cargas, deslizantes, adyuvantes de compresión, aglutinantes inertes, edulcorantes, conservantes, colorantes, recubrimientos o agentes disgregantes de comprimidos. El portador también puede ser un material encapsulante. En los polvos, el portador puede ser un sólido finamente dividido que está mezclado con los agentes activos finamente divididos según la invención. En comprimidos, el agente activo puede mezclarse con un portador que tiene las propiedades de compresión necesarias en proporciones adecuadas y compactarse en la forma y tamaño deseados. Los polvos y comprimidos pueden contener, por ejemplo, hasta el 99 % de los agentes activos. Los portadores sólidos adecuados incluyen, por ejemplo, fosfato de calcio, estearato de magnesio, talco, azúcares, lactosa, dextrina, almidón, gelatina, celulosa, polivinilpirrolidina, ceras de bajo punto de fusión y resinas de intercambio iónico. En otra realización, el portador farmacéuticamente aceptable puede ser un gel y la composición puede estar en forma de una crema o similar.

El portador puede incluir, pero no se limita a, uno o más excipientes o diluyentes. Ejemplos de tales excipientes son gelatina, goma arábiga, lactosa, celulosa microcristalina, almidón, glicolato de sodio de almidón, hidrogenofosfato de calcio, estearato de magnesio, talco, dióxido de silicio coloidal y similares.

En otra realización, el portador farmacéuticamente aceptable puede ser un líquido. En una realización, la composición farmacéutica está en forma de una disolución. Los portadores líquidos se usan para preparar disoluciones, suspensiones, emulsiones, jarabes, elixires y composiciones presurizadas. Un compuesto de la divulgación puede disolverse o suspenderse en un portador líquido farmacéuticamente aceptable tal como agua, un disolvente orgánico, una mezcla de ambos o aceites o grasas farmacéuticamente aceptables. El portador líquido puede contener otros aditivos farmacéuticos adecuados tales como solubilizantes, emulsionantes, tampones, conservantes, edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes de suspensión, agentes espesantes, colorantes, reguladores de la viscosidad, estabilizantes u osmorreguladores. Los ejemplos adecuados de portadores líquidos para administración oral y parenteral incluyen agua (que contiene parcialmente aditivos como los anteriores, por ejemplo, derivados de celulosa, tales como disolución de carboximetilcelulosa de sodio), alcoholes (incluyendo alcoholes monovalentes y alcoholes polivalentes, por ejemplo, glicoles) y sus derivados, y aceites (por ejemplo, aceite de coco y aceite de cacahuete fraccionados). Para administración parenteral, el portador también puede ser un éster oleoso tal como oleato de etilo y miristato de isopropilo. Los portadores líquidos estériles son útiles en composiciones estériles en forma líquida para administración parenteral. El portador líquido para composiciones presurizadas puede ser un hidrocarburo halogenado u otro propulsor farmacéuticamente aceptable.

Las composiciones farmacéuticas líquidas, que son disoluciones o suspensiones estériles, pueden utilizarse mediante, por ejemplo, inyección intramuscular, intratecal, epidural, intraperitoneal, intravenosa y subcutánea. El agente activo puede prepararse como una composición sólida estéril que puede disolverse o suspenderse en el momento de la administración usando agua estéril, solución salina u otro medio inyectable estéril apropiado.

Las composiciones pueden administrarse por vía oral en forma de una disolución o suspensión estéril que contiene otros solutos o agentes de suspensión (por ejemplo, suficiente solución salina o glucosa para hacer que la disolución sea isotónica), sales biliares, goma arábiga, gelatina, monooleato de sorbitano, polisorbato 80 (ésteres oleato de sorbitol y sus anhídridos copolimerizados con óxido de etileno) y similares. Las composiciones también pueden administrarse por vía oral en forma de composición líquida o sólida. Las composiciones adecuadas para administración oral incluyen formas sólidas, tales como píldoras, cápsulas, gránulos, comprimidos y polvos, y formas líquidas, tales como disoluciones, jarabes, elixires y suspensiones. Las formas útiles para administración parenteral incluyen disoluciones, emulsiones y suspensiones estériles.

Las composiciones pueden administrarse alternativamente por inhalación (por ejemplo, por vía intranasal). Las composiciones también pueden formularse para uso tópico. Por ejemplo, pueden aplicarse cremas o pomadas a la piel.

Un compuesto de la divulgación puede incorporarse dentro de un dispositivo de liberación lenta o retardada. Tales dispositivos pueden insertarse, por ejemplo, sobre o bajo la piel, y el medicamento puede liberarse durante semanas o incluso meses. Tales dispositivos pueden ser ventajosos cuando se requiere el tratamiento a largo plazo con un compuesto de la divulgación usado según la presente divulgación y que puede requerir una administración frecuente (por ejemplo, al menos administración diaria).

En una realización, la composición farmacéutica es una forma de dosificación oral sólida, tal como un comprimido. En comprimidos, el agente activo puede mezclarse con un vehículo, tal como un portador farmacéuticamente aceptable, que tiene las propiedades de compresión necesarias en proporciones adecuadas y compactarse en la forma y tamaño deseados. Los comprimidos pueden contener hasta el 99 % en peso de los agentes activos.

Las composiciones farmacéuticas en forma de dosificación oral sólida, tales como comprimidos, pueden prepararse mediante cualquier método conocido en la técnica farmacéutica. Las composiciones farmacéuticas se preparan normalmente mezclando el agente activo con portadores convencionales farmacéuticamente aceptables.

Un comprimido puede formularse tal como se conoce en la técnica. Tanganil®, por ejemplo, incluye almidón de trigo, almidón de maíz pregelatinizado (maíz), carbonato de calcio y estearato de magnesio como excipientes. Los mismos, o similares, excipientes, por ejemplo, pueden emplearse con la presente divulgación.

La composición de cada comprimido de 700 mg de Tanganil® es tal como sigue: 500 mg de acetil-DL-leucina, 88 mg de almidón de trigo, 88 mg de almidón de maíz pregelatinizado (maíz), 13 mg de carbonato de calcio y 11 mg de estearato de magnesio. Los mismos comprimidos, por ejemplo, pueden emplearse en los métodos de la presente divulgación.

Tal como se comentó anteriormente, un compuesto de la divulgación puede formularse y administrarse como una composición farmacéutica tomando cualquier número de formas diferentes. Por ejemplo, un compuesto de la divulgación puede formularse como una composición farmacéutica para facilitar su suministro a través de la barrera hematoencefálica. Como ejemplo adicional, un compuesto de la divulgación puede formularse como una composición farmacéutica para evitar la barrera hematoencefálica. Las formulaciones que facilitan la administración a través de la barrera hematoencefálica o que son adecuadas para la administración de una manera que evita la barrera hematoencefálica pueden usarse para preparar y administrar leucina (no acetilada) tal como se describe en el presente documento.

En una realización, la composición farmacéutica, por ejemplo, que comprende acetil-L-leucina, o sal de la misma, se formula para nanoadministración, por ejemplo, sistemas de fármaco-portador coloidales. Los ejemplos adecuados incluyen, pero no se limitan a liposomas, nanopartículas (por ejemplo, nanopartículas poliméricas, lipídicas e inorgánicas), nanogeles, dendrímeros, micelas, nanoemulsiones, polimerosomas, exosomas y puntos cuánticos. Véase, por ejemplo, Patelet al.,“Crossing the Blood-Brain Barrier: Recent Advances in Drug Delivery to the Brain”, CNS Drugs 31:109-133 (2017); Kabanovet al.,“New Technologies for Drug Delivery across the Blood Brain Barrier”, Curr Pharm Des., 10(12):1355-1363 (2004); Chenget al.,“Highly Stabilized Curcumin Nanoparticles Tested in an In Vitro Blood-Brain Barrier Model and in Alzheimer's Disease Tg2576 Mice,” The AAPS Journal, vol. 15, n.° 2, págs. 324-336 (2013); Lahdeet al.“Production of L-Leucine Nanoparticles under Various Conditions Using an Aerosol Flow Reactor Method”, Journal of Nanomaterials, vol. 2008, ID de artículo 680897 (2008).

En una realización, la composición farmacéutica, por ejemplo, que comprende acetil-L-leucina, o sal de la misma, se formula para la administración directa al sistema nervioso central (SNC), tal como mediante inyección o infusión. Las formulaciones y los métodos de suministro directo al SNC son conocidos en la técnica. Véase, por ejemplo., la patente estadounidense n.° 9.283.181. Los ejemplos de tal administración incluyen, pero no se limitan a, administración intranasal, intraventricular, intratecal, intracraneal y mediante injerto de mucosa nasal. En una realización, la composición farmacéutica se formula para (y se administra por) administración intranasal. Véase, por ejemplo, Hansonet al.,“Intranasal delivery derivates the blood-brain barrier to target therapeutic agents to the central nervous system and treat neurodegenerative disease,” BMC Neurosci. 9 (supl. 3):S5 (2008). En una realización, la composición farmacéutica se formula para (y se administra por) administración a través de un injerto de mucosa nasal. En una realización, la composición farmacéutica se formula para (y se administra por) inyección o infusión intracerebroventricular. En otra realización, la composición farmacéutica se formula para (y se administra por) inyección o infusión intracisternal intratecal. En una realización, la composición farmacéutica se formula para (y se administra por) inyección o infusión lumbar intratecal.

Pueden usarse diversas técnicas incluyendo, sin limitación, inyección a través de una perforación o punción cisternal o lumbar o similares como se conoce en la técnica. Pueden usarse diversos dispositivos, ya sean internos (por ejemplo, implantados) o externos, para la administración como se conoce en la técnica, tales como bombas, catéteres, depósitos, etc. En una realización, el intervalo de administración es una vez cada dos semanas.

En una realización, el intervalo de administración es una vez al mes. En una realización, el intervalo de administración es una vez cada dos meses. En una realización, el intervalo de administración es dos veces al mes. En una realización, el intervalo de administración es una vez a la semana. En una realización, el intervalo de administración es dos veces o varias veces por semana. En una realización, el intervalo de administración es diario. En una realización, la administración es continua, tal como infusión continua.

En una realización, la dosis o cantidad equivalente de un compuesto de la divulgación puede ajustarse para explicar su suministro directo al SNC o su suministro a través de la barrera hematoencefálica.

La presente divulgación describe un compuesto de la divulgación, incluyendo composiciones farmacéuticas del mismo, para tratar diversas enfermedades, trastornos, afecciones y síndromes en un sujeto que lo necesita. Tal como se usa en el presente documento, “traumatismo craneoencefálico” se refiere a cualquier lesión del cerebro que tenga una fase inicial que consiste en al menos un acontecimiento de traumatismo craneal (es decir, un objeto que entra en el cerebro y/o carga(s) o fuerza(s) en el cerebro que provoca que el cerebro se mueva rápidamente y/o de manera no natural dentro del cráneo del sujeto) y una fase secundaria resultante que comprende alteraciones fisiológicas, celulares y/o moleculares resultantes del traumatismo craneal. Los ejemplos de traumatismo craneal incluyen objetos que penetran en el cráneo, tales como balas, flechas y otros objetos físicos que pasan a través del cráneo y entran en el cerebro; cargas o fuerzas de impacto aplicadas a la cabeza u otras partes del cuerpo del paciente; traumatismo inducido quirúrgicamente; temblores creados por explosiones; temblores creados por medios no explosivos, tales como lesiones deportivas, accidentes de vehículos, colapso de edificios y terremotos, por ejemplo. Los resultados de un TBI pueden ser de diversos tipos, y todas las formas de TBI están dentro del alcance de la presente divulgación. Por ejemplo, el TBI puede variar en gravedad desde un breve cambio en el estado mental o la conciencia hasta un periodo extendido de inconsciencia o pérdida de memoria. En una realización, el TBI fue infligida por una conmoción cerebral. En una realización, el t Bi fue infligida por una contusión. En una realización, el TBI fue infligida por una lesión en cabeza abierta. En otra realización, el TBI fue infligida por una lesión de cabeza cerrada. En una realización, el TBI fue infligida por una lesión focal. En otra realización, el TBI fue infligida por una lesión difusa. En una realización, la forma de TBI es TBI leve. En otra realización, la forma de TBI es TBI moderada. En otra realización, la forma de TBI es TBI grave.

Un “sujeto que lo necesita” tal como se usa en el presente documento puede ser cualquier sujeto que tenga un TBI o un síntoma de TBI. El sujeto puede haber sido diagnosticado o no con TBI. Por ejemplo, el sujeto puede no tener todavía un diagnóstico (clínico o de otro modo) de TBI, pero puede tener uno o más síntomas de TBI. El sujeto también puede tener un marcador bioquímico u otro marcador similar identificable de un TBI.

Una “cantidad terapéuticamente eficaz” del compuesto de la divulgación es cualquier cantidad que, cuando se administra a un sujeto, es la cantidad que se necesita para producir el efecto deseado, que, para la presente divulgación, puede ser terapéutica y/o profiláctica. La dosis puede determinarse según diversos parámetros, tales como el compuesto específico de la divulgación usado; la edad, peso y estado del paciente que va a tratarse; la vía de administración; y el régimen requerido. Un médico podrá determinar la vía de administración y la dosificación requeridas para cualquier paciente particular. Por ejemplo, una dosis diaria puede ser de desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 225 mg por kg, desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 150 mg por kg, o desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 100 mg por kg de peso corporal.

Tal como se usa en el presente documento, “tratar” o “tratamiento” se refiere a cualquier indicio de éxito en la prevención, detención o mejora de TBI en un sujeto, y/o prevención, detención o mejora de uno cualquiera o más síntomas de TBI en un sujeto, incluyendo cualquier parámetro objetivo o subjetivo tal como reducción; remisión; prevención, disminución, inhibición o eliminación de uno o más síntomas; hacer que TBI sea más tolerable para el sujeto; ralentización del empeoramiento de TBI; o mejora del bienestar físico o mental del sujeto que lo necesita.

Los términos “tratar” o “tratamiento” también engloban, por ejemplo, inducir la inhibición, regresión o estasis de TBI o un síntoma de la misma. Por ejemplo, el tratamiento de un paciente o sujeto que necesita tratamiento para TBI incluye reducir un síntoma de TBI en el sujeto, inducir respuesta clínica, inhibir o reducir la progresión de TBI, o inhibir o reducir una complicación de TBI.

La prevención, detención o mejora de una lesión o patología de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome, tal como la prevención, disminución, inhibición o eliminación de uno o más síntomas de enfermedad, trastorno, afección o síndrome puede basarse en parámetros objetivos y/o subjetivos, incluyendo, por ejemplo, los resultados de examen/exámenes físico(s), examen/exámenes neurológico(s) y/o evaluación/evaluaciones psiquiátrica(s). El éxito del tratamiento para determinadas enfermedades enumeradas en las tablas 1-17, por ejemplo, TBI, puede medirse o evaluarse, por ejemplo, comparando la gravedad de la enfermedad (por ejemplo, parámetros objetivos y/o subjetivos de TBI) antes de que se inicie el tratamiento con un compuesto de la divulgación, con la gravedad de la enfermedad (por ejemplo, parámetros objetivos y/o subjetivos de TBI) después del inicio del tratamiento con un compuesto de la divulgación. Por ejemplo, la gravedad del TBI puede evaluarse usando una escala, índice, clasificación o puntuación. En una realización, el tratamiento descrito en el presente documento mejora dicha evaluación desde un valor o grado característico de un sujeto sintomático hasta un valor o grado característico de un sujeto no sintomático. En una realización, el tratamiento descrito en el presente documento mejora dicha evaluación en comparación con un nivel de referencia. El nivel de referencia puede ser, por ejemplo, la afección del sujeto antes de iniciar cualquier tratamiento para la enfermedad, por ejemplo, TBI, o antes de iniciar el tratamiento para la enfermedad con un compuesto de la divulgación. Alternativamente, el nivel de referencia puede ser, por ejemplo, la afección del sujeto después de un determinado periodo de tiempo en el tratamiento para la enfermedad. En una realización, el tratamiento con un compuesto de la divulgación tal como se describe en el presente documento mejora la evaluación del sujeto (por ejemplo, escala, índice, clasificación o puntuación de parámetros objetivos y/o subjetivos) en comparación con un nivel de referencia en al menos un 10 %, al menos un 20 %, al menos un 30 %, al menos un 40 % o al menos un 50 %. En una realización, la evaluación se mejora en al menos un 60 %, al menos un 70 %, al menos un 80 %, al menos un 90 % o un 100 %.

Por ejemplo, en una realización, la gravedad de la enfermedad del paciente, por ejemplo, TBI, puede cuantificarse mediante la escala de coma de Glasgow (GCS). La GCS es la puntuación acumulativa de tres áreas de examen: función ocular, verbal y motora. Para el examen ocular, el paciente se clasifica de 1 a 4 tal como sigue: 1 - sin abertura del ojo a ninguna estimulación, 2 - abertura del ojo solamente en respuesta al dolor, 3 - abertura del ojo al habla, y 4 - los ojos se abren espontáneamente. Para el examen verbal, el paciente se clasifica de 1 a 5 como sigue: 1 - sin respuesta verbal, 2 sonidos incomprensibles, 3 - palabras inapropiadas, 4 -confusos y 5 - orientados. Para el examen motor, el paciente se clasifica de 1 a 6 tal como sigue: 1 - sin respuesta motora, 2 - extensión al dolor, 3 - flexión anómala al dolor, 4 - retirada al dolor, 5 - localiza el dolor y 6 -obedece órdenes. La puntuación GCS es la suma de las tres puntuaciones recibidas para las respuestas ocular, verbal y motora. En general, el TBI se clasifica como leve, moderado o grave basándose en la escala de coma de Glasgow tal como sigue: leve: GCS > 13, moderado: GCS 9-12 y grave: GCS < 8. El nivel de recuperación de pacientes con TBI puede cuantificarse mediante la escala de resultados de Glasgow (GOS). La escala de resultados de Glasgow es una puntuación de 5 niveles: 1 - muerto, 2 - estados vegetativos, 3 - gravemente discapacitados, 4 - moderadamente discapacitados y 5 - buena recuperación. La GOS se divide frecuentemente en resultados “favorables” (moderadamente discapacitados y buena recuperación) y resultados “desfavorables” (muerto, estado vegetativo y gravemente discapacitados).

Un “síntoma” de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome incluye cualquier manifestación clínica o de laboratorio asociada con la enfermedad, trastorno, afección o síndrome y no se limita a lo que el sujeto puede sentir u observar. Por ejemplo, los síntomas de TBI incluyen, pero no se limitan a, pérdida de conciencia, confusión, inquietud, agitación, desorientación, pérdida de memoria, cefalea, aturdimiento, mareo, visión borrosa u ojos cansados, fatiga o letargia, cambio en el patrón del sueño, cambios conductuales o del estado de ánimo, problemas con la memoria, concentración, atención y/o pensamiento, nauseas o vómitos repetidos, convulsiones o crisis epilépticas, incapacidad para despertarse del sueño, habla farfullante, debilidad o entumecimiento en las extremidades y pérdida de coordinación.

En una realización, un compuesto de la divulgación puede administrarse, por ejemplo, a una dosis que oscila entre aproximadamente 500 mg y aproximadamente 30 g al día o que oscila entre aproximadamente 500 mg y aproximadamente 15 g al día, tal como que oscila entre aproximadamente 1,5 g y aproximadamente 10 g al día, opcionalmente por vía oral sólida u oral líquida. Un compuesto de la divulgación puede administrarse, por ejemplo, en una dosis según Tanganil®, que se prescribe a adultos en una dosis de 1,5 g a 2 g al día, 3-4 comprimidos en dos dosis, por la mañana y por la noche.

Si se administra un único enantiómero, es decir, acetil-L-leucina, las dosis pueden reducirse en consecuencia. Por ejemplo, si solo se administra acetil-L-leucina, la dosis puede oscilar entre aproximadamente 250 mg y aproximadamente 15 g al día, oscilar entre aproximadamente 250 mg y aproximadamente 10 g al día, u oscilar entre aproximadamente 250 mg y aproximadamente 5 g al día, tal como entre aproximadamente 0,75 g y aproximadamente 5 g al día.

En una realización, la dosis administrada oscila entre aproximadamente 1 g y aproximadamente 30 g al día, entre aproximadamente 1 g y aproximadamente 15 g al día, entre aproximadamente 1 g y aproximadamente 10 g al día, o entre aproximadamente 1,5 g y aproximadamente 7 g al día, entre 15,1 g y aproximadamente 30 g al día, entre 16 g y aproximadamente 30 g al día, entre 17 g y aproximadamente 30 g al día, entre 18 g y aproximadamente 30 g al día, entre 19 g y aproximadamente 30 g al día, o entre 20 g y aproximadamente 30 g al día. Puede ser desde aproximadamente 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 ó 14 g hasta aproximadamente 15 g al día. Puede ser desde aproximadamente 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ó 9 g hasta aproximadamente 10 g al día. Puede ser desde 15,1, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 25, 27, 28 ó 29 g hasta aproximadamente 30 g al día. Puede ser más de aproximadamente 1,5 g al día, pero menos de aproximadamente 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6 ó 5 g al día. En una realización, la dosis oscila entre aproximadamente 4 g y aproximadamente 6 g al día. En una realización, la dosis oscila entre aproximadamente 4 g y aproximadamente 5 g al día. En una realización, la dosis es de aproximadamente 4,5 g al día. En una realización, la dosis es de aproximadamente 5 g al día. En una realización, la dosis es de aproximadamente 1 g al día, aproximadamente 2 g al día, aproximadamente 3 g al día, aproximadamente 4 g al día, aproximadamente 5 g al día, aproximadamente 6 g al día, aproximadamente 7 g al día, aproximadamente 8 g al día, aproximadamente 9 g al día, aproximadamente 10 g al día, aproximadamente 11 g al día, aproximadamente 12 g al día, aproximadamente 13 g al día, aproximadamente 14 g al día o aproximadamente 15 g al día. En otra realización, la dosis es de aproximadamente 16 g al día, aproximadamente 17 g al día, aproximadamente 18 g al día, aproximadamente 19 g al día o aproximadamente 20 g al día. En otra realización, la dosis es de aproximadamente 21 g al día, aproximadamente 22 g al día, aproximadamente 23 g al día, aproximadamente 24 g al día, aproximadamente 25 g al día, aproximadamente 26 g al día, aproximadamente 27 g al día, aproximadamente 28 g al día, aproximadamente 29 g al día o aproximadamente 30 g al día. En una realización, estas dosis se administran en una forma de dosificación oral sólida, en particular comprimidos. En otra realización, estas dosis son para acetil-leucina cuando está en su forma racémica. Las dosis de acetil-leucina cuando está presente un exceso enantiomérico pueden ser menores, por ejemplo, aproximadamente un 50 % menores. Los intervalos de dosis indicados anteriormente cuando se reducen a la mitad también están abarcados explícitamente por la presente divulgación.

En una realización, la dosis diaria total puede extenderse a través de múltiples administraciones, es decir, la administración puede producirse dos o más veces al día para lograr la dosis diaria total. Como ejemplo, el número requerido de comprimidos para proporcionar la dosis diaria total de un compuesto de la divulgación puede dividirse entre dos administraciones (por ejemplo, por la mañana y por la noche) o tres administraciones (por ejemplo, por la mañana, el mediodía y la noche). Cada dosis puede administrarse adecuadamente con o sin alimento. Por ejemplo, la acetil-L-leucina o la acetil-DL-leucina pueden dosificarse aproximadamente 1 o aproximadamente 2 horas antes de las comidas, tal como al menos aproximadamente 20 minutos, al menos aproximadamente 30 minutos, al menos aproximadamente 40 minutos, o al menos aproximadamente 1 hora antes de las comidas, o pueden dosificarse aproximadamente 1, aproximadamente 2, o aproximadamente 3 horas después de las comidas, tal como esperar al menos aproximadamente 20 minutos, al menos aproximadamente 30 minutos, al menos aproximadamente 1 hora, al menos aproximadamente 1,5 horas, al menos aproximadamente 2 horas, o al menos aproximadamente 2,5 horas después de las comidas. Por ejemplo, una dosis diaria total de 4,5 g de acetil-DL-leucina puede administrarse como tres comprimidos de Tanganil® (o equivalentes) antes, con, o después del desayuno, tres comprimidos adicionales antes, con, o después del almuerzo y tres comprimidos adicionales antes, con, o después de la cena.

En una realización, con respecto a TBI, la administración de un compuesto de la divulgación según la presente divulgación se inicia en o alrededor (por ejemplo, en el plazo de 24 horas) del momento del traumatismo craneal. En una realización, la administración se inicia después de un periodo de tiempo (por ejemplo, días, semanas, meses o incluso años) después de un traumatismo craneal. En una realización, la administración se inicia después de que se diagnostica (clínicamente o de otro modo) que el sujeto tiene TBI. En una realización, la administración se inicia después de que se diagnostica que el sujeto tiene TBI usando la escala de coma de Glasgow (GCS). En una realización, el sujeto tenía una puntuación de GCS de 13-15. En otra realización, el sujeto tenía una puntuación de GCS de 9-12. En otra realización, el sujeto tenía una puntuación de GCS de 3-8. En una realización, la administración se inicia antes del traumatismo craneal (o antes de un traumatismo craneal posterior si ya se han producido uno o más traumatismos craneales) a un sujeto en riesgo de sufrir TBI. En una realización, la administración se inicia en, alrededor o después del momento en que se encuentra que un sujeto tiene un marcador bioquímico u otro marcador similar identificable de TBI. En una realización, la administración se inicia en, alrededor o después del momento en que un sujeto experimenta uno o más síntomas de TBI.

La duración del tratamiento para TBI o un síntoma de la misma puede ser, por ejemplo, aproximadamente siete días o más, aproximadamente dos semanas o más, aproximadamente tres semanas o más, aproximadamente un mes o más, aproximadamente seis semanas o más, aproximadamente siete semanas o más, o aproximadamente dos meses o más. En una realización, es de aproximadamente tres meses o más, aproximadamente cuatro meses o más, aproximadamente cinco meses o más o aproximadamente seis meses o más. La duración del tratamiento puede ser de aproximadamente 1 año o más, aproximadamente 2 años o más, aproximadamente 4 años o más, aproximadamente 5 años o más, o aproximadamente 10 años o más. La duración del tratamiento puede ser la vida del sujeto.

Cualquiera y todas las combinaciones de forma de dosificación, cantidad de dosis, pauta de dosificación y duración del tratamiento se contemplan y abarcan por la divulgación. En una realización, la dosis es de aproximadamente 4 g a aproximadamente 10 g al día, tomada a lo largo de una, dos o tres administraciones al día, para una duración de tratamiento de aproximadamente dos meses o más. En otra realización, la dosis es más de 4 g, pero no más de 5 g al día, tomada a lo largo de una, dos o tres administraciones al día, para una duración de tratamiento de aproximadamente seis meses o más. La forma de dosificación puede ser una forma de dosificación oral sólida, en particular comprimidos.

Un compuesto de la divulgación puede usarse como monoterapia (por ejemplo, uso del agente activo solo) para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome, por ejemplo, una enfermedad, trastorno, afección o síndrome proporcionado en una cualquiera de las tablas 1-17, en un sujeto. Alternativamente, un compuesto de la divulgación puede usarse como un adjunto a, o en combinación con, otras terapias conocidas para tratar TBI o un síntoma de TBI.

También se da a conocer un kit para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome, por ejemplo, una enfermedad, trastorno, afección o síndrome proporcionado en una cualquiera de las tablas 1-17, en un sujeto, que comprende un medio para diagnosticar o pronosticar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome, y un compuesto de la divulgación.

El kit puede comprender además tampones o disoluciones acuosas. El kit puede comprender además instrucciones para usar el compuesto de la divulgación según un método de la presente divulgación.

Todas las características descritas en el presente documento (incluyendo cualquier reivindicación, resumen y dibujos adjuntos), y/o todas las etapas de cualquier método dado a conocer de este modo, pueden combinarse con cualquiera de los aspectos anteriores en cualquier combinación, excepto combinaciones en las que al menos algunas de tales características y/o etapas son mutuamente excluyentes.

La expresión “una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en el que la modulación de uno o más mediadores proinflamatorios proporciona un beneficio” y similares se refiere a (i): una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en el que uno o más mediadores proinflamatorios son importantes o necesarios, por ejemplo, para el inicio, progreso o expresión de esa enfermedad, trastorno, afección o síndrome, o; (ii) una enfermedad, trastorno, afección o síndrome que se sabe que responde a la modulación de un mediador proinflamatorio. Los ejemplos de tales enfermedades incluyen, pero no se limitan a, enfermedades neuroinflamatorias, enfermedades neurológicas, enfermedades autoinmunitarias, afecciones proteinopáticas neurodegenerativas, afecciones psiquiátricas, por ejemplo, depresión y enfermedades mitocondriales. Los mediadores proinflamatorios se conocen bien en la técnica. Véase, por ejemplo, “Really Essential Medical Immunology,” 2a ed., Rabson, Roitt, Delves (Blackwell, 2005). Los mediadores proinflamatorios a modo de ejemplo no limitativos incluyen citocinas, por ejemplo, interleucina (IL)-1 p, IL-8, factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a), IL-6 e IL-12, quimiocinas y factores de crecimiento.

En una realización, la presente divulgación proporciona acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso en un método para tratar un traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de un traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. Otra divulgación relacionada se refiere a un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 1.

Tabla 1

En una realización, la invención proporciona acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso en un método para tratar el traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación. Otras enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes se proporcionan en la tabla 2.

Tabla 2

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 3.

Tabla 3

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome neuroinflamatorio en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome neuroinflamatorio en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto.

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación, al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 4.

Tabla 4

En otra realización, la presente divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 5. En otra realización, la presente divulgación proporciona un método para tratar traumatismo craneoencefálico.

Tabla 5

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome neurológico en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome neurológico en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto.

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 6.

Tabla 6

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 7.

Tabla 7

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome autoinmunitario en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome autoinmunitario en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto.

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 8.

Tabla 8

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 9.

Tabla 9

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome proteinopático neurodegenerativo en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome proteinopático neurodegenerativo en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto.

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 10.

Tabla 10

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 11.

Tabla 11

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome psiquiátrico en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome psiquiátrico en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 12.

Tabla 12

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 13.

Tabla 13

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome mitocondrial en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome mitocondrial en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto.

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 14.

Tabla 14

En otra realización, la presente divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 15.

Tabla 15

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndrome proporcionados en la tabla 16.

Tabla 16

atrofia muscular espinal

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación al sujeto, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 17.

Tabla 17

En otra realización, la presente divulgación proporciona acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso en un método para tratar un traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto de aproximadamente 1 g a aproximadamente 30 g de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día. En otra realización, se administran al sujeto de aproximadamente 2 g a aproximadamente 15 g de una acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día. En otra realización, se administran al sujeto de aproximadamente 3 g a aproximadamente 10 g de una acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día. En otra realización, se administran al sujeto de aproximadamente 4 g a aproximadamente 8 g de una acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día. En otra realización, se administran al sujeto de aproximadamente 4 g a aproximadamente 5 g de una acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día. En otra realización, se administran al sujeto de aproximadamente 15,1 g a aproximadamente 30 g de una acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día. En otra realización, se administran al sujeto aproximadamente 5 g de una acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día.

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome, por ejemplo, una enfermedad, trastorno, afección o síndrome proporcionado en una cualquiera de las tablas 1-17, en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome, por ejemplo, una enfermedad, trastorno, afección o síndrome proporcionado en una cualquiera de las tablas 1-17, en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome, por ejemplo, una enfermedad, trastorno, afección o síndrome proporcionado en una cualquiera de las tablas 1-17, en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome, por ejemplo, una enfermedad, trastorno, afección o síndrome proporcionado en una cualquiera de las tablas 1-17, en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de éster etílico de L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de éster etílico de L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de éster etílico de L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

En otra realización, la presente divulgación proporciona un método para tratar un traumatismo craneoencefálico, en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el traumatismo craneoencefálico. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de traumatismo craneoencefálico.

Se da a conocer además un método para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome, por ejemplo, una enfermedad, trastorno, afección o síndrome proporcionado en una cualquiera de las tablas 1-17, en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

En otra realización, la presente divulgación proporciona un método para tratar un traumatismo craneoencefálico, en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de un traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el traumatismo craneoencefálico. En otra realización, se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma del traumatismo craneoencefálico.

En otra realización, la presente divulgación proporciona un método para modular la expresión de uno o más mediadores proinflamatorios, por ejemplo, citocinas proinflamatorias y quimiocinas proinflamatorias, en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación. En otra realización, los mediadores proinflamatorios son uno cualquiera o más de NOS2, IL-18, IFNb, IL-1 p, TNFa, NOX2, NLRP3, SOCS3, ARG1, IL-10, IL-4ra o YM1.

En otra realización, la administración de un compuesto de la divulgación reduce o inhibe la neuroinflamación en un sujeto que lo necesita. En otra realización, la neuroinflamación reducida o inhibida comprende una reducción o inhibición de citocinas proinflamatorias excesivas. En otra realización, se inhibe o reduce la neuroinflamación en comparación con la neuroinflamación en un sujeto afectado por un TBI, al que no se le administra el compuesto de la divulgación.

En otra realización, la administración de un compuesto de la divulgación modula los niveles elevados de la proteína Tau asociada a microtúbulos y/o el conjugado de fosfatidiletanolamina-cadena ligera 3 de proteína asociada a microtúbulos 1A/1B (LC3-II) en un sujeto que necesita tratamiento para TBI. En una realización, se modulan los niveles elevados de proteína Tau y/o LC3-II en comparación con los niveles elevados de proteína Tau y/o LC3-II en un sujeto afectado por una enfermedad, trastorno, afección o síndrome, por ejemplo, una enfermedad, trastorno, afección o síndrome proporcionado en una cualquiera de las tablas 1-17, por ejemplo, TBI, al que no se le administra el compuesto de la divulgación.

En otra realización, la administración de un compuesto de la divulgación es eficaz para mejorar la recuperación del sujeto que lo necesita. En otra realización, se mejora la recuperación en comparación con la recuperación de un sujeto afectado por una enfermedad, trastorno, afección o síndrome, por ejemplo, una enfermedad, trastorno, afección o síndrome proporcionado en una cualquiera de las tablas 1-17, por ejemplo, TBI, al que no se le administra el compuesto de la divulgación.

En otra realización, la recuperación se evalúa usando la escala de resultados de Glasgow (GOS). En una realización, la administración de leucina, acetil-leucina o cualquier otro compuesto de la divulgación, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, es eficaz para aumentar el porcentaje de sujetos con un resultado “favorable” en la GOS en al menos un 10 %, al menos un 20 %, al menos un 30 %, al menos un 50 % o al menos un 70 % en comparación con un nivel de referencia, tal como en comparación con la de sujetos afectados por TBI a los que no se les administró leucina, acetil-leucina o sal farmacéuticamente aceptable de las mismas. En una realización, se evalúa al sujeto usando la GOS tres meses después de infligir lesión. En otra realización, se evalúa al sujeto usando la GOS seis meses después infligir lesión. En otra realización, se evalúa al sujeto usando la<g>O<s>12 meses o más después de infligir lesión.

En otra realización, la administración de un compuesto de la divulgación es eficaz para mejorar la función cognitiva en el sujeto que lo necesita. En otra realización, se mejora la función cognitiva en comparación con la función cognitiva de un sujeto afectado por un TBI, al que no se le administra el compuesto de la divulgación. En una realización, la función cognitiva es memoria. En una realización, la memoria es memoria a largo plazo. En otra realización, la función cognitiva es aprendizaje. En otra realización, la función cognitiva es navegación espacial.

En otra realización, la administración de un compuesto de la divulgación reduce o inhibe al menos un síntoma de un TBI, en un sujeto que lo necesita. En otra realización, se reduce o inhibe al menos un síntoma en comparación con el/los síntoma(s) en un sujeto afectado por un TBI, al que no se le administra el compuesto de la divulgación. En otra realización, la afección es TBI, y al menos un síntoma de TBI es confusión, mareo, desorientación, pérdida de coordinación, pérdida de memoria, incapacidad para formar nuevos recuerdos, alteraciones del sueño, cambios conductuales o del estado de ánimo, agitación aumentada, depresión, convulsiones y/o crisis epilépticas.

En otra realización, la administración de un compuesto de la divulgación reduce la gravedad de al menos un síntoma de un TBI, en al menos un 10 %, al menos un 20 %, al menos un 30 %, al menos un 40 %, al menos un 50 %, al menos un 70 %, al menos un 90 % o un 100 % en comparación con un nivel de referencia, tal como en comparación con un sujeto afectado por un TBI, al que no se le administra la acetil-leucina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

En otra realización, la administración de un compuesto de la divulgación es eficaz para mejorar el nivel de actividad física y/o mental del sujeto en el mismo. En otra realización, se mejora la recuperación en comparación con la recuperación de un sujeto afectado por un TBI, al que no se le administra el compuesto de la divulgación. En otra divulgación, la administración de un compuesto de la divulgación es eficaz para tratar la encefalitis. En otra realización, la encefalitis es encefalitis infecciosa. En otra realización, la encefalitis es encefalitis autoinmunitaria. Los síntomas de la encefalitis incluyen, pero no se limitan a, cefalea, síntomas leves de tipo gripe (dolores, fatiga, fiebre ligera), fotosensibilidad, rigidez del cuello, somnolencia o letargo, irritabilidad aumentada, crisis epilépticas, cambios en la alerta, confusión o alucinaciones, pérdida de energía, pérdida de apetito, marcha inestable, náuseas y vómitos, cambios de personalidad y problemas para hablar y/o cambios de habla. En algunas realizaciones, los síntomas de la encefalitis son movimientos anómalos (corea, descoordinación), síntomas motores atípicos, por ejemplo, ataxia o hemiparesia, o crisis epilépticas.

En otra divulgación, la encefalitis está provocada por una infección de las vías respiratorias altas, una enfermedad que provoca diarrea, náuseas y vómitos, sarampión, paperas, rubéola, varicela, virus del herpes simple, virus del Nilo Occidental, rabia, enfermedad de Lyme, tuberculosis, sífilis, una infección provocada por parásitos, por ejemplo, toxoplasmosis, o una reacción autoinmunitaria en un sujeto. Por tanto, se da a conocer además un método para prevenir la encefalitis en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la divulgación, en el que el sujeto tiene una infección de las vías respiratorias altas, una enfermedad que provoca diarrea, náuseas y vómitos, sarampión, paperas, rubéola, varicela, virus del herpes simple, virus del Nilo Occidental, rabia, enfermedad de Lyme, tuberculosis, sífilis, una infección provocada por parásitos, por ejemplo, toxoplasmosis, o una reacción autoinmunitaria.

En otra realización, la administración de un compuesto de la divulgación es eficaz para tratar un trastorno del sueño asociado con un traumatismo craneoencefálico, por ejemplo, dificultad para conciliar el sueño y/o permanecer dormido, fatiga, adormecimiento, apnea del sueño, narcolepsia y/o somnolencia, por ejemplo, somnolencia diurna excesiva.

En otra realización, la administración de un compuesto de la divulgación es eficaz para tratar una anomalía metabólica en el SNC. En otra realización, la administración de un compuesto de la divulgación es eficaz para tratar enfermedades y/o síntomas asociados con una anomalía metabólica en el SNC. En otra realización, la anomalía metabólica es un desequilibrio del metabolismo de la glucosa. En otra realización, la anomalía metabólica es un desequilibrio del metabolismo de la glucosa en el cerebelo. En otra realización, la administración de un compuesto de la divulgación aumenta el metabolismo de la glucosa, por ejemplo, en el cerebelo, en el SNC.

La divulgación también proporciona las siguientes realizaciones particulares.

Realización I: Leucina, acetil-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, para su uso en un método para tratar un traumatismo craneoencefálico (TBI) en un sujeto que lo necesita.

Realización II: Leucina, acetil-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, para su uso en un método según la realización I, en la que el método comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de la leucina, acetil-leucina, o sal farmacéuticamente aceptable de las mismas.

Realización III: Leucina, acetil-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, para su uso en un método según cualquiera de las realizaciones I y II, en la que la leucina es DL-leucina o la acetil-leucina es acetil-DL-leucina.

Realización IV: Leucina, acetil-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, para su uso en un método según cualquiera de las realizaciones I y II, en la que la leucina o acetil-leucina tiene un exceso enantiomérico del enantiómero L o del enantiómero D.

Realización V: Leucina, acetil-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, para su uso en un método según cualquiera de las realizaciones I-IV, en la que el método comprende administrar la acetil-leucina al sujeto que lo necesita en una cantidad terapéuticamente eficaz de aproximadamente 1 g a aproximadamente 15 g al día, de aproximadamente 1 g a aproximadamente 10 g al día, de aproximadamente 1,5 g a aproximadamente 7 g al día, de aproximadamente 4 g a aproximadamente 6 g al día, o de aproximadamente 4 g a aproximadamente 5 g al día.

Realización VI: Un método para inhibir o reducir uno o más síntomas de un traumatismo craneoencefálico (TBI) en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de leucina, acetil-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas.

Realización VII: El método según la realización VI, en el que la leucina es DL-leucina o la acetil-leucina es acetil-DL-leucina.

Realización VIII: El método según la realización VI, en el que la leucina o acetil-leucina tiene un exceso enantiomérico del enantiómero L o del enantiómero D.

Realización IX: El método según cualquiera de las realizaciones VI-VIII, en el que la cantidad terapéuticamente eficaz es de aproximadamente 1 g a aproximadamente 15 g al día, de aproximadamente 1 g a aproximadamente 10 g al día, de aproximadamente 1,5 g a aproximadamente 7 g al día, de aproximadamente 4 g a aproximadamente 6 g al día, o de aproximadamente 4 g a aproximadamente 5 g al día.

La divulgación también proporciona las siguientes realizaciones particulares.

Realización 1. Un compuesto de la divulgación para su uso en el tratamiento de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o para su uso en el tratamiento de un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 1.

Realización 2. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 2.

Realización 3. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 3.

Realización 4. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 4.

Realización 5. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 5.

Realización 6. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que la enfermedad, trastorno, afección o síndrome es traumatismo craneoencefálico.

Realización 7. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 6.

Realización 8. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 7.

Realización 9. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 8.

Realización 10. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 9

Realización 11. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 10.

Realización 12. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 11

Realización 13. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 12.

Realización 14. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 13.

Realización 15. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 14.

Realización 16. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 15.

Realización 17. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 1, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 16.

Realización 18. El compuesto de la divulgación para su uso según una cualquiera de las realizaciones 1-17, en el que se administran al sujeto de aproximadamente 1 g a aproximadamente 30 g del compuesto de la divulgación al día.

Realización 19. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 18, en el que se administran al sujeto de aproximadamente 2 g a aproximadamente 15 g del compuesto de la divulgación al día.

Realización 20. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 19, en el que se administran al sujeto de aproximadamente 3 g a aproximadamente 10 g del compuesto de la divulgación al día.

Realización 21. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 20, en el que se administran al sujeto de aproximadamente 4 g a aproximadamente 8 g del compuesto de la divulgación al día.

Realización 22. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 21, en el que se administran al sujeto de aproximadamente 4 g a aproximadamente 5 g del compuesto de la divulgación al día.

Realización 23. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 22, en el que se administran al sujeto aproximadamente 5 g del compuesto de la divulgación al día.

Realización 24. El compuesto de la divulgación para su uso según una cualquiera de las realizaciones 1-23, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 25. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 24, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 26. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 24, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 27. El compuesto de la divulgación para su uso según una cualquiera de las realizaciones 1-23, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 28. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 27, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 29. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 27, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 30. El compuesto de la divulgación para su uso según una cualquiera de las realizaciones 1-23, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 31. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 30, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 32. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 30, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 32A. El compuesto de la divulgación para su uso según una cualquiera de las realizaciones 1-23, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 32B. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 32A, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 32C. El compuesto de la divulgación para su uso según la realización 32A, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 33. Uso de un compuesto de la divulgación para la fabricación de un medicamento para tratar una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o para la fabricación de un medicamento para tratar un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 1.

Realización 34. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 2. Realización 35. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 3. Realización 36. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 4. Realización 37. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 5. Realización 38. El uso según la realización 37, en el que la enfermedad, trastorno, afección o síndrome es traumatismo craneoencefálico.

Realización 39. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 6. Realización 40. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 7. Realización 41. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 8. Realización 42. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 9. Realización 43. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 10.

Realización 44. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 11.

Realización 45. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 12.

Realización 46. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 13.

Realización 47. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 14.

Realización 48. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 15.

Realización 49. El uso según la realización 33, en el que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 16.

Realización 50. El uso según una cualquiera de las realizaciones 33-49, en el que se administra al sujeto de aproximadamente 1 g a aproximadamente 30 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 51. El uso según la realización 50, en el que se administran al sujeto de aproximadamente 2 g a aproximadamente 15 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 52. El uso según la realización 51, en el que se administran al sujeto de aproximadamente 3 g a aproximadamente 10 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 53. El uso según la realización 52, en el que se administran al sujeto de aproximadamente 4 g a aproximadamente 8 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 54. El uso según la realización 53, en el que se administran al sujeto de aproximadamente 4 g a aproximadamente 5 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 55. El uso según la realización 54, en el que se administran al sujeto aproximadamente 5 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 56. El uso según una cualquiera de las realizaciones 33-55, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 57. El uso según la realización 56, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 58. El uso según la realización 56, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 59. El uso según una cualquiera de las realizaciones 33-55, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. Realización 60. El uso según la realización 59, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 61. El uso según la realización 59, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 62. El uso según una cualquiera de las realizaciones 33-55, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 63. El uso según la realización 62, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 64. El uso según la realización 62, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 64A. El uso según una cualquiera de las realizaciones 33-55, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. Realización 64B. El uso según la realización 64A, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 64C. El uso según la realización 64A, en el que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 65. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la divulgación y un portador farmacéuticamente aceptable para su uso en el tratamiento de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, o para su uso en el tratamiento de un síntoma de una enfermedad, trastorno, afección o síndrome en un sujeto que lo necesita, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 1.

Realización 66. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 2.

Realización 67. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 3.

Realización 68. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 4.

Realización 69. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 5.

Realización 70. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que la enfermedad, trastorno, afección o síndrome es traumatismo craneoencefálico.

Realización 71. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 6.

Realización 72. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 7.

Realización 73. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 8.

Realización 74. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 9.

Realización 75. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 10.

Realización 76. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 11.

Realización 77. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 12.

Realización 78. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 13.

Realización 79. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 14.

Realización 80. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 15.

Realización 81. La composición farmacéutica para su uso según la realización 65, en la que las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes son uno cualquiera o más de las enfermedades, trastornos, afecciones o síndromes proporcionados en la tabla 16.

Realización 82. La composición farmacéutica para su uso según una cualquiera de las realizaciones 65-81, en la que se administran al sujeto de aproximadamente 1 g a aproximadamente 30 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 83. La composición farmacéutica para su uso según la realización 82, en la que se administran al sujeto de aproximadamente 2 g a aproximadamente 15 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 84. La composición farmacéutica para su uso según la realización 83, en la que se administran al sujeto de aproximadamente 3 g a aproximadamente 10 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 85. La composición farmacéutica para su uso según la realización 84, en la que se administran al sujeto de aproximadamente 4 g a aproximadamente 8 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 86. La composición farmacéutica para su uso según la realización 85, en la que se administran al sujeto de aproximadamente 4 g a aproximadamente 5 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 87. La composición farmacéutica para su uso según la realización 86, en la que se administran al sujeto aproximadamente 5 g de un compuesto de la divulgación al día.

Realización 88. La composición farmacéutica para su uso según una cualquiera de las realizaciones 65-87, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 89. La composición farmacéutica para su uso según la realización 88, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 90. La composición farmacéutica para su uso según la realización 88, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 91. La composición farmacéutica para su uso según una cualquiera de las realizaciones 65-87, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 92. La composición farmacéutica para su uso según la realización 91, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 93. La composición farmacéutica para su uso según la realización 91, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-DL-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 94. La composición farmacéutica para su uso según una cualquiera de las realizaciones 65-87, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 95. La composición farmacéutica para su uso según la realización 94, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 96. La composición farmacéutica para su uso según la realización 94, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 96A. La composición farmacéutica para su uso según una cualquiera de las realizaciones 65-87, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 96B. La composición farmacéutica para su uso según la realización 96A, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Realización 96C. La composición farmacéutica para su uso según la realización 96A, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-D-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de la enfermedad, trastorno, afección o síndrome.

Ejemplos

Ejemplo 1

A un paciente varón que padecía traumatismo craneoencefálico se le administró acetil-DL-leucina a una dosis de 3 g al día durante la primera semana, seguido de una dosis de 5 g al día. Los terapeutas y las enfermeras del paciente informaron que el paciente presentaba un comportamiento más activo después del tratamiento con acetil-DL-leucina. La medicación se detuvo posteriormente y el nivel de actividad del paciente volvió a su nivel original antes del tratamiento con acetil-DL-leucina.

Ejemplo 2

Eficacia de N-acetil-L-leucina en el modelo de ratón de TBI por CCI

Modelo de impacto cortical controlado

Se realizó TBI inducido por impacto cortical controlado (CCI) en ratones machoC57BL6/J(20-25 g). Brevemente, después de realizar una incisión mediana de 10 mm a lo largo del cráneo, se retrajeron la piel y la fascia, y se realizó una craneotomía de 4 mm en el aspecto central del hueso parietal izquierdo de ratones bajo anestesia quirúrgica (isoflurano al 2-3 % evaporado en una mezcla gaseosa que contenía el 70 % de N<2>O y el 30 % de O<2>). Se indujo lesión moderada en el cerebro expuesto mediante un dispositivo de impacto neumático controlado por microprocesador y accionado por aire comprimido personalizado que tenía una punta de 3,5 mm de diámetro con una velocidad de impacto de 6 m/s y una profundidad de deformación de 2 mm.

Tratamiento con NAL

Se disolvió N-acetil-L-leucina (“NAL” o “NALL”) en etanol para preparar una disolución de 50 mg/ml que después se diluyó en agua para dar una disolución de 10 mg/ml. Se administraron por vía oral aproximadamente 0,25 ml de la disolución de NAL (10 mg/ml) en ratones a una dosis de 10 mg/kg (2,5 mg de NAL/25 g de ratón) mediante sonda oral cada día después de TBI inducido por CCI durante 4 días. Los ratones también se alimentaron con NAL a 0,5 mg/kg de pienso en polvo mezclado con gel de dieta durante hasta 7 días después de la lesión. Véase la figura 1. No se observó ninguna diferencia significativa en la ingesta de alimentos entre los ratones simulados y con TBI alimentados con NALL (datos no mostrados). Aunque se detectó una ligera disminución en el peso corporal en ratones con TBI tratados con vehículo, no se observó ningún cambio apreciable en el peso corporal en ratones con TBI tratados con NALL (datos no mostrados).

Muerte celular después de TBI

Se determinó el nivel de productos de escisión de a-fodrina en cortezas de ratones con TBI y simulados tratados con vehículo y tratados con NALL mediante análisis de inmunotransferencia de tipo Western y usando el ensayo TUNEL para evaluar si el tratamiento con NALL disminuye la muerte de células corticales después de TBI.

Análisis de inmunotransferencia de tipo Western

Se diseccionaron y procesaron aproximadamente 5 mm de tejido de la corteza ipsilateral alrededor del sitio de lesión de ratones con TBI o el tejido correspondiente del mismo volumen alrededor de la misma región cortical de ratones simulados. Los lisados tisulares se resolvieron en geles de SDS-PAGE al 4-20 % (Bio-Rad, 5671095) y se transfirieron a una membrana de PVDF (Millipore, IPVH00010) usando transferencia semiseca (Bio-Rad), se bloquearon con leche desnatada al 5 % en solución salina tamponada con Tris con Tween 20 al 0,05 % (TBST), se sondaron con anticuerpos primarios en BSA al 1 % en TBST durante la noche a 4 °C y se incubaron con anticuerpos secundarios conjugados con HRP (KPL, 474-1506, 474-1806, 14-16-06 y 14-13-06) en disolución de bloqueo a temperatura ambiente durante 1 h. Las bandas de proteínas se detectaron usando un kit de quimioluminiscencia (Pierce, 34076) y se visualizaron usando el sistema Chemi-doc (Bio-Rad). La intensidad de las bandas se analizó usando el software Image Lab (Bio-Rad) y se normalizó con respecto al control de carga (P-actina). Anticuerpos primarios: LC3 (1:1000; Novus, NB100-2220), p62/SQSTM1 (1:1000; BD Bioscience, 610832), p-actina/ACTB (1:10.000; A1978) y fodrina/espectrina (1:5000; Enzo Life Science International, BML-FG6090).

Ensayo TUNEL

Se cortaron secciones congeladas (20 |im) a partir de cerebros de ratones simulados y con TBI alimentados con vehículo o NAL fijados con paraformaldehído al 4 % (PFA, pH 7, 4) y protegidos en sacarosa al 30 %. Se realizó un ensayo TUNEL en las secciones de cerebro congeladas usando el kit de detección de apoptosisin situApopTag (Millipore, S7165) según el protocolo del fabricante. Las imágenes después del ensayo TUNEL se adquirieron usando un microscopio invertido Nikon Ti-E fluorescente, a 20X (CFI Plan APO VC 20X NA 0,75 WD 1 mm).

El TBI induce la escisión de a-fodrina mediada tanto por calpaína como por caspasa generando fragmentos de 145-150 kDa y 150-120 kDa, respectivamente. Se observó un nivel inferior de fragmentos de a-fodrina de 145 150 kDa en las cortezas de ratones alimentados con NALL en comparación con las cortezas de ratones alimentados con vehículo después de TBI, lo que indica el beneficio protector de NALL en la prevención de la muerte de células corticales. Véanse las figuras 28 y 29. También se detectaron niveles inferiores de células positivas para TUNEL en las secciones de cerebro de ratones lesionados alimentados con NALL en comparación con ratones con TBI alimentados con vehículo, lo que indica el papel protector de NALL en la atenuación de la muerte celular después de TBI. Véanse las figuras 30, 31 y 32.

Flujo autofágico después de TBI

La autofagia es un proceso de degradación celular dependiente de lisosomas que se interrumpe debido al daño lisosómico después de TBI. Véanse, por ejemplo, Sarkaret al.,Autophagy 10:2208-2222 (2014); Sarkaret al.,Autophagy, 1-20 (2019). Se evaluó si la atenuación de la muerte celular después del tratamiento con NALL en ratones con TBI está mediada a través del restablecimiento del flujo autofágico. Los resultados se presentan en las figuras 11-13 y 33-35.

Los niveles de LC3-II y p62/SQSTM1 en los lisados de tejido cortical preparados a partir de ratones con TBI y sin tratamiento previo alimentados con vehículo y NAL se determinaron mediante análisis de inmunotransferencia de tipo Western. Se detectó una disminución en los niveles de LC3-II en el cerebro de ratones alimentados con NALL en comparación con ratones tratados con vehículo el día 1 después de TBI. Véanse las figuras 33 y 34. También se observó una disminución en el nivel de p62/SQSTM1 en la corteza de ratones alimentados con NALL en comparación con ratones tratados con vehículo después de TBI. Véanse las figuras 33 y 35. Estos resultados demuestran que NALL mejora el flujo autofágico y, por tanto, restablece su función neuroprotectora en las cortezas de ratones después de TBI.

Citocinas inflamatorias en cerebro de ratones con TBI

Se determinó el nivel de expresión de los marcadores proinflamatorios de tipo M1 Nos2, Nlrp3, IL-1 p, TNF, IFNp y Nox2 en el área perilesional en cortezas de ratones con TBI mediante rt-PCR en tiempo real. También se determinó el nivel de expresión de los marcadores de tipo M2 Socs3, YM-1, IL4ra y Arg-1 en tejido cortical. Los resultados se presentan en las figuras 2-10 y 36-45.

PCR en tiempo real

Se convirtió el ARN total aislado de la corteza ipsilateral usando el mini kit miRNeasy (Qiagen, n.° de cat.

217004) en ADNc usando el kit de alta capacidad de ARN a ADNc (Applied Biosystem, n.° de cat. 4387406) según las instrucciones del fabricante. Se usó una mezcla maestra universal II de ADNc TaqMan® (Applied Biosystems, n.° de cat. 4440040) para realizar la amplificación por PCR cuantitativa en tiempo real tal como se describió previamente usando ensayo de expresión génica 20x TaqMan® (Applied Biosystems) para los siguientes genes de ratón:Gapdh(Mm99999915_g1),NLRP3(Mm00840904_m1),NOX2(Mm01287743_m1),iNOS(Mm00440502_m 1),TNFa(Mm00443258_m1),IFnfil(Mm00439552_s1),IL-10(Mm01288386_m1),IL1b(Mm00434228_m1),Arg1(Mm00475988_m1),SOCS3(Mm00545913_s1),YM-1(Mm00657889_mH) eIL-4ra(Mm01275139_m1) (Applied Biosystems). Las reacciones se amplificaron y cuantificaron usando un sistema de PCR en tiempo real 7900HT Fast y el software correspondiente (Applied Biosystems). Se calculó la expresión génica relativa normalizada con respecto aGapdhbasándose en el método de Ct comparativo.

Se observaron niveles elevados de todos los marcadores proinflamatorios de tipo M1, que comenzaron desde el día 1 y alcanzaron un máximo el día 3 después de la lesión en todas las cortezas de ratones con TBI, independientemente del tratamiento. Véanse las figuras 36-41. Pero se observó una disminución del nivel de ARNm de IFNp y Nox2 en las cortezas de ratones alimentados con NAL en comparación con cortezas de ratones con TBI alimentados con vehículo.

De manera similar a los marcadores de tipo M1, se observó una mayor expresión de los marcadores de tipo M2 Socs3, YM-1, IL4ra y Arg-1 en el tejido cortical de todos los ratones con TBI en comparación con los animales simulados. Véanse las figuras 42-45. Entre estos marcadores, el tratamiento con NAL redujo los niveles de Arg-1 en la corteza de ratón lesionada en comparación con ratones con TBI alimentados con vehículo. Los niveles de Socs3, YM-1 e IL-4ra permanecieron inalterados en cortezas de ratones alimentados con NAL en comparación con ratones simulados.

Estos resultados demuestran que NAL reduce la expresión de varios marcadores inflamatorios, indicando así una disminución global de la neuroinflamación después de TBI en ratones.

Estadística

Todos los datos se presentan como media ± error estándar de la media (EEM). Se realizó un ANOVA unilateral seguido de una pruebaa posterioriapropiada (de Tukey) tal como se especifica en las leyendas de las figuras. Para los datos con sólo dos grupos se usó la prueba de la t de Student bilateral con la misma varianza. Un valor dep< 0, 05 se consideró estadísticamente significativo.

Ejemplo 3

Flujo EAL en ratones NPC

La deposición de amiloide p y la acumulación de vacuolas autofágicas son características patológicas de la enfermedad de Alzheimer (EA). La desregulación de la ruta endosomal-autofágica-lisosomal (EAL), que perjudica el procesamiento de la proteína precursora amiloide, es uno de los primeros cambios en la EA. Xu y Ren, Annu Rev Physiol. 77:57-80 (2015). Las enfermedades por almacenamiento lisosómico tales como NPC también presentan disfunción autofágica con cambios patológicos reminiscentes de las características observadas en la EA, tales como axones distróficos, dendritas ectópicas, ovillos neurofibrilares y agregación de amiloide. Bolandet al.,The Journal of Biological Chemistry 285: 37415-37426 (2010).

Se investigó la eficacia de ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE para aliviar el deterioro del flujo EAL en ratones NPC1. La acetil-DL-leucina (ADLL) y el éster etílico de L-leucina (LLE) fueron eficaces para restablecer el flujo autofágico con respecto a la reducción de los niveles de LC3-II (figura 14). Pero la reducción de los niveles de LC3-II provocada por ADLL y LLE no estuvo acompañada por una reducción concomitante de APP-CTF, particularmente CTF-6 y CTF-7 (figura 15). Sin desear estar limitado por ninguna teoría particular, es posible que ADL y LLE reduzcan la acumulación de vacuolas autofágicas (AV) inhibiendo la formación de autofagosomas, posiblemente a través de la activación de mTORC1. A pesar de su capacidad para reducir la acumulación de AV, su incapacidad para reducir los niveles elevados de APP-CTF sugiere que ADL y LLE no mejoran la propia capacidad digestiva lisosomal. Sorprendentemente, la L-leucina redujo la acumulación de CTF-6 en ratones NPC1 (figura 16). Además, la acetil L-leucina (ALL), la acetil D-leucina (ADL) y la L-leucina (LL) redujeron la expresión de CTF-7, lo que indica alguna mejora en la proteólisis lisosomal (figura 17). Los efectos positivos de la acetil D-leucina, la acetil L-leucina y la D-leucina sobre el aclaramiento de CTF-7 en ratones NPC1 sugieren que pueden promover la fusión endosomal-lisosomal sin impactar en el aclaramiento de autofagosomaslisosomas.

Ejemplo 4

Fusión lisosomal en neuronas corticales primarias

Las neuronas tienen una distribución heterogénea de orgánulos que pertenecen a la ruta EAL, que van desde el soma celular hasta neuritas distales. Estos incluyen autofagosomas, endosomas y anfisomas (endosomas fusionados con autofagosomas). U18666A es un agente farmacológico que induce un fenotipo similar a NPC1 en células inhibiendo la proteína NPC1 y previniendo la fusión endosomal-lisosomal. La supresión mediada por U18666A de la fusión de autofagosomas-lisosomas y la fusión endosomal-lisosomal provoca un aumento de LC3-II y APP-CTF-1 a APP-CTF-5 mientras que previene la producción de CTF-6 y CTF-7. Bolandet al.,The Journal of Biological Chemistry 285: 37415-37426 (2010).

Se investigó la eficacia de ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE para aliviar el deterioro mediado por U18666A de la fusión de autofagosomas-lisosomas y la fusión endosomal-lisosomal. En este ensayo basado en células de flujo EAL alterado, la reaparición de los niveles basales de APP-CTF-6 y APP-CTF-7 proporcionó una indicación de fusión endosomal-lisosomal mejorada.

Las neuronas corticales primarias de rata (DIV14) que se trataron con U18666A (2 |ig/ml, 24 h) tuvieron una ausencia completa de<c>TF-6 y CTF-7 (figura 18). El tratamiento con U18666A durante un periodo de 24 h no provocó ningún aumento de la acumulación de LC3-II (figura 18).

Las neuronas se trataron conjuntamente con U18666A (2 |ig/ml) junto con ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE (1 mM, 24 h). Todos los cultivos neuronales que se trataron conjuntamente mostraron signos de fusión endosomallisosomal mejorada tal como resulta evidente por la reaparición de las cantidades basales de CTF-6 y CTF-7 en estas células (figura 18). ALD, ALL, y ALD redujeron los niveles de LC3-II inferiores a los niveles basales (figura 18). Esto sugiere que estos tres compuestos potenciaron tanto la fusión de autofagosomas-lisosomas como la fusión endosomal-lisosomal en neuronas corticales primarias.

Ejemplo 5

Formas truncadas de tau en cocultivos de neuronas-células gliales

Se investigó la eficacia de ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE para reducir los niveles de tau truncada en cultivos de neuronas-células gliales (NG). Los resultados de este estudio se proporcionan en las figuras 20-24. Un objetivo de este estudio fue determinar si ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE conferían neuroprotección intrínseca manteniendo la función neuronal en condiciones de sobrecrecimiento celular, o si actuaban indirectamente a través de la modulación no autónoma de células gliales. Independientemente de si los compuestos actúan directa o indirectamente sobre las neuronas, la prevención de la generación de tau truncada confiere efectos beneficiosos a la integridad neuronal.

Los cultivos se trataron durante cinco días (DIV 9 - 14) con 1 mM de ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL o LLE, y posteriormente se evaluaron para determinar varios marcadores específicos de neuronas que podrían proporcionar una lectura sobre la salud neuronal: pIN-tubulina, tau de longitud completa, tau truncada (anticuerpo 5<e>2) y sinaptofisina. ADLL, ALL, ADL, DLL, LL,<d>L y LLE fueron bien tolerados en cultivos de NE y<n>G, tal como resulta evidente por niveles consistentemente iguales de sinaptofisina y pIII-tubulina detectados en muestras no tratadas (control) y tratadas con fármaco (figuras 20, 23 y 24). Ninguno de ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE redujo los niveles basales de tau truncada en cultivos de NG en DIV14 (figura 20 y figura 22). Estos hallazgos sugieren que ADLL, ALL, ADL, DLL, LL, DL y LLE son particularmente útiles para tratar afecciones neurodegenerativas que implican acumulación de sustrato en la red EAL.

Ejemplo 6

Volúmenes lisosómicos medidos mediante citometría de flujo

Se cultivaron células de ovario de hámster chino (CHO) de tipo natural y nulas para NPC1 en matraces de cultivo T75 y se trataron durante 7 días con N-acetil-L-leucina (ALL), clorhidrato de éster etílico de L-leucina (LLE) o L-leucina (1 ó 5 mM, adquiridos de Sigma-Aldrich) antes de la extracción. Las células se tripsinizaron, se centrifugaron (270 x g, 5 min), se lavaron dos veces con PBS 1x, se centrifugaron de nuevo y se tiñeron con LysoTracker-green DND-26 100 nM (Invitrogen) en PBS durante 20 min a temperatura ambiente. Después de la incubación, las células se centrifugaron (800 x g, 5 min), se resuspendieron en 0,5 ml de tampón FACS (BSA al 0,1 %, NaN30,02 M en PBS 1x) y se mantuvieron en hielo para el análisis de citometría de flujo (BD Biosciences FACSCanto II o Accuri C6 Plus). El citómetro se calibró usando perlas Cytometer Setup & Tracking (BD), y la compensación se realizó usando células teñidas con Lysotracker o yoduro de propidio usando el software BD FACSDiva (BD) o el software BD Accuri C6 Plus (BD) antes del ensayo. El experimento y el análisis se realizaron en 10.000 células registradas para obtener valores de mediana para el análisis estadístico adicional. Los resultados se muestran en las figuras 25-27.

Ejemplo 7

Supervivencia de células de Purkinje

Los ratonesNpc1-/-presentan neurodegeneración progresiva con pérdida de células de Purkinje cerebelosas que progresa de los lóbulos anterior a posterior, acompañada por activación microglial (figura 46). El tratamiento con ADLL aumentó la supervivencia de células de Purkinje a los 59 días de edad en relación con compañeros de camadaNpct'-no tratados: un 133 % más células de Purkinje estaban presentes en los lóbulos I y II (p= 0,0027) y un 402 % más de células Purkinje en el lóbulo III (p=0,0108). Otros tratamientos no mejoraron la supervivencia de células de Purkinje en ningún lóbulo cerebeloso (lóbulo I-II p= 0,107, lóbulo III p= 0,157, lóbulo IV-V p=0,533 deNpc1-/-tratados con ALL; lóbulo I-II p= 0,60, lóbulo III p= 0,11, lóbulo IV-V p= 0,766 deN pctAtratados con ADL, en comparación conNpc1-/-UT) (figuras 46 y 47). Además, el tratamiento con LLA redujo (en un 20 %, p=0,0177) la frecuencia de microglía activada positiva para CD68. Otros tratamientos no tuvieron impacto(p=0,1353 para Npc1-/-tratados con ADLL,p =0,0553 paraNpc1-/-tratados con ADL en comparación conNpc1-/-UT) (figuras 46 y 48). ADL no medió en ningún efecto neuroprotector a largo plazo. La combinación de supervivencia aumentada de neuronas y un entorno menos inflamatorio en el cerebro podría mejorar la función cerebral, la calidad de vida y retrasar la progresión de la enfermedad en sujetos humanos.

Ejemplo 8

Modelo de impacto cortical controlado

Los ratones se sometieron a TBI por impacto cortical controlado moderado o cirugía simulada. Los ratones tratados con NAL se trataron con NAL oral comenzando después de la recuperación inicial después de la cirugía (mediante sonda oral, diariamente durante 4 días) y continuando durante la duración del experimento (con pienso, a voluntad). Los ratones tratados con vehículo recibieron una administración equivalente de vehículo por sonda oral seguido de pienso convencional. Grupo: simulado vehículo = 5 ratones; simulado NAL = 4 ratones; TBI vehículo = 10 ratones; y TBA NAL = 9 ratones. Los resultados funcionales se evaluaron hasta 28 días después de la cirugía en las evaluaciones de marcha por barra (función motora), laberinto en Y (memoria espacial) y reconocimiento de objetos novedosos (NOR, memoria no espacial). Los resultados se proporcionan en la figura 49, la figura 50 y la figura 51, respectivamente.

Debe entenderse que las realizaciones y ejemplificaciones anteriores no pretenden ser limitativas en ningún aspecto del alcance de la divulgación, y que las reivindicaciones presentadas en el presente documento pretenden abarcar todas las realizaciones y ejemplificaciones estén o no explícitamente presentadas en el presente documento.

Claims (11)

REIVINDICACIONES

1. Acetil-L-leucina, o sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso en un método para tratar un traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, o tratar un síntoma de un traumatismo craneoencefálico en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al sujeto.

2. Acetil-L-leucina, o sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso según la reivindicación 1, en la que se administran al sujeto de 1 g a 30 g de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día.

3. Acetil-L-leucina, o sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso según la reivindicación 2, en la que se administran al sujeto de 2 g a 15 g de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día.

4. Acetil-L-leucina, o sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso según la reivindicación 3, en la que se administran al sujeto de 3 g a 10 g de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día.

5. Acetil-L-leucina, o sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso según la reivindicación 4, en la que se administran al sujeto de 4 g a 8 g de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día.

6. Acetil-L-leucina, o sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso según la reivindicación 5, en la que se administran al sujeto de 4 g a 5 g de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día.

7. Acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso según la reivindicación 6, en la que se administran al sujeto 5 g de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, al día.

8. Acetil-L-leucina, o sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el traumatismo craneoencefálico.

9. Acetil-L-leucina, o sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en la que se administra al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de acetil-L-leucina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para tratar el síntoma de un traumatismo craneoencefálico.

10. Acetil-L-leucina, o sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en la que tratar el síntoma de un traumatismo craneoencefálico en un sujeto comprende modular la expresión de uno o más mediadores proinflamatorios en el sujeto con un traumatismo craneoencefálico.

11. Acetil-L-leucina, o sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para su uso según la reivindicación 10, en la que el uno o más mediadores proinflamatorios son NOS2, IL-18, IFNb, IL-1 p, TNFa, NOX2, NLRP3, SOCS3, ARG1, IL-10, IL-4ra o YM1.