ES3034597T3 - Compositions for chelating metals at low temperatures - Google Patents

Abstract

Un método para realizar una reacción de quelación que comprende poner en contacto un metal divalente con un compuesto de Fórmula (I): o una sal del mismo en donde: cada uno de R1-R4 se selecciona independientemente del grupo que consiste en CH2COORa y CH2C(=O)NHRa; cada uno de R5-R12 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -LX; cada Ra se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -LX; cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo ausente y un grupo de enlace; y cada X es un agente biológico; y en donde el contacto ocurre a una temperatura por debajo de aproximadamente 40°C para formar una composición quelada. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Composiciones para quelar metales a bajas temperaturas

ANTECEDENTES

Los metales radiactivos se utilizan a menudo para el diagnóstico por imagen y la terapia con radionucleidos para enfermedades. Para estos fines, los radiometales suelen estar unidos a moléculas que suelen denominarse "ligandos". Estos ligandos pueden ser anticuerpos, aptámeros, péptidos, fragmentos de anticuerpos o pequeñas moléculas diseñadas para unirse específicamente y con gran afinidad a las proteínas presentes en la enfermedad, pero a menudo no están presentes (o lo están en muy baja concentración) en células normales. Por lo tanto, el ligando actúa como vehículo para administrar la radiación (en forma de metal radiactivo) al lugar de la neoplasia en el cuerpo. Para aplicaciones de diagnóstico y seguimiento del cáncer, los ligandos liberan metales radiactivos que emiten fotones y positrones para la obtención de imágenes SPECT y PET. Para la terapia, los ligandos liberan metales radiactivos que emiten partículas tales como partículas beta y alfa o electrones Auger. En la mayoría de los casos, la unión del radiometal al ligando requiere una modificación del ligando para incluir una estructura molecular que se denomina quelante.

Existe una necesidad constante de ligandos radiomarcados para usos diagnósticos y terapéuticos.

Parket al.,ACS Medicinal Chemistry Letters, vol. 5, n.° 9, 2014, páginas 979-982, Liet al.,Applied Radiation and Isotopes, vol. 127, 2017, páginas 52-60, documento WO 2013/029616 A1 y Zhanget al.,Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, vol. 21, n.° 11,2011, páginas 3423-3426 describen cada uno de ellos un método para llevar a cabo una reacción de quelación utilizando DOTA o un derivado de DOTA como quelante para obtener péptidos radiomarcados.

El documento WO 93/21963 A2 describe los derivados DOTA como ligandos para radioquímicos y la conjugación de los respectivos complejos con anticuerpos.

Ariñez-Sorianoet al.,CrystEngComm, vol. 18, n.° 22, 2016, páginas 4196-4204 describe un método para llevar a cabo una reacción de quelación utilizando un derivado DOTA como quelante para obtener ácido benzoico radiomarcado. Otros conjugados de complejos metálicos de quelantes basados en DOTA se describen en los documentos US 2017/266304 A1, WO 2017/165473 A1, US 2008/193384 A1, Corbinet al.,Bioorganic and Medicinal Chemistry, vol.

26, 2018, páginas 5274-5279, US 5435 990 A y US 9 579 404 B2. En la medida en que la descripción que sigue define métodos para tratar o métodos para diagnosticar enfermedades con los compuestos descritos, debe entenderse que se refiere a tales compuestos para su uso en el tratamiento o diagnóstico de dichas enfermedades.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

El objeto de la invención se define por las reivindicaciones adjuntas.

SUMARIO DE LA DIVULGACIÓN

La divulgación proporciona un método para realizar una reacción quelante que comprende poner en contacto un metal divalente con un compuesto de Fórmula (I):

o una sal del mismo en donde:

cada uno de R<1>-R<4>se selecciona independientemente del grupo que consiste en CH<2>COOR<a>y CH<2>C(=O)NHR<a>;

cada uno de R<5>-R<12>se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada Ra se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en ausente y un grupo de enlace; y cada X es un agente biológico o un ligando; y

en donde el contacto se produce a una temperatura inferior a aproximadamente 40 °C para formar una composición quelada.

La divulgación proporciona un método para diagnosticar una enfermedad en un paciente que lo necesita, que comprende:

(a) realizar una reacción de quelación que comprende poner en contacto un metal divalente con un compuesto de fórmula (I):

o una sal del mismo en donde:

cada uno de R<1>-R<4>se selecciona independientemente del grupo que consiste en CH<2>COOR<a>y CH<2>C(=O)NHR<a>;

cada uno de R<5>-R<12>se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X; cada R<a>se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en ausente y un grupo de enlace; y

cada X es un agente biológico o un ligando; y

en donde el contacto se produce a una temperatura inferior a aproximadamente 40 °C para formar una composición quelada; y

(b) administrar la composición quelada al paciente en las dos horas siguientes a la reacción de quelación

La divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad en un paciente que lo necesita, que comprende administrar una composición quelada al paciente en las dos horas siguientes a la quelación de la composición quelada, en donde la composición quelada comprende un compuesto de Fórmula I quelado con un metal divalente, en donde el compuesto de Fórmula I comprende:

o una sal del mismo en donde:

cada uno de R<1>-R<4>se selecciona independientemente del grupo que consiste en CH<2>COOR<1>y CH<2>C(=O)NHR<a>;

cada uno de R<5>-R<12>se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada Ra se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en ausente y un grupo de enlace; y cada X es un agente biológico.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

Figura 1.Estructuras químicas de DOTA, DOTAM y LTMMC. DOTA tiene una carga neta de -2, DOTAM tiene una carga neta de 2, y LTMMC es neutra. Además de los grupos carboxilo y amida, todos los sitios indicados con un asterisco (*) en el LTMMC pueden utilizarse para enlazar con uno o más ligandos.

Figura 2.Ejemplo de síntesis de un quelante de 1a generación con grupo funcional NCS.

Figuras 3A y 3B.Estructuras de LTMMC ilustrativas VMT-01(Fig. 3A)y VMT-02(Fig. 3B)

Figura 4.Compuesto de la eficacia de radiomarcaje del Pb-203. Se consigue un marcaje superior al 95 % en 15 minutos a 4 °C (pH 5,3). Para experimentos a 4 °C, los reactivos se enfriaron previamente durante 24 h a 4 °C antes de iniciar la reacción de radiomarcaje con el quelante PSC unido a un péptido.

Figura 5.Esta figura ofrece una comparación de VMT-01 con DOTA.

Figura 6.Estabilidad de VMT-01 en suero a 37 °C por radio HPLC.

Figura 7.Resultados del ensayo de VMT-01 a 4 °C.

Figura 8.Resultados del ensayo de VMT-01 a temperatura ambiente.

Figura 9.Resultados del ensayo de VMT-01 a 40 °C.

Figura 10.Resultados del ensayo de VMT-01 a 80 °C.

Figuras 11-15.Ejemplos de estructuras bifuncionales

Figura 16.Ejemplo del PSC conjugado con un péptido, en este caso, un análogo de un péptido conocido como octreotida que se utiliza para el diagnóstico por imagen y la terapia de tumores cancerosos que expresan el receptor somatostático de subtipo II.

LaFigura 17proporciona la estructura del ácido (3S,10S,14S)-1-((1R,4S)-4-(((R)-6-(2-(7-(2-amino-2-oxoetil)-4.10- bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)acetamido)-2-(4-(4-yodofenil)butanamido)hexanamido)metil)ciclohexil)-3-(naftalen-2-ilmetil)-1,4,12-trioxo-2,5,11,13-tetraazahexadecan-10,14,16-tricarboxílico.

Figura 18proporciona la estructura del ácido (3S,10S,14S)-1-((1r,4S)-4-((2-(7-(2-amino-2-oxoetil)-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)acetamido)metil)ciclohexil)-3-(naftalen-2-ilmetil)-1,4,12-trioxo-2,5,11,13-tetraazahexadecan-10,14,16-tricarboxílico

LaFigura 19proporciona la estructura del ácido (15S,19S)-1-(7-(2-amino-2-oxoetil)-4,10-bis(carboximetil)-1.4.7.10- tetraazaciclododecan-1-il)-2,9,17-trioxo-3,10,16,18-tetraazahenicosan-15,19,21-tricarboxílicoFigura 20.LTMMC-VMT-01 se radiomarcó con 64Cu2+ a temperatura ambiente. Se radiomarcó 1 nmol de PSC-VMT-01 con 37 KBq de 64Cu2+ a 25-80 °C durante 10-30 minutos. El rendimiento del radiomarcaje se verificó mediante cromatografía instantánea en capa fina (iTLC). Los experimentos se realizaron por duplicado (N=2).

DESCRIPCIÓN DETALLADA

El objeto de la invención se define por las reivindicaciones adjuntas.

Los quelantes tienen propiedades especiales que permiten que los radiometales se adhieran fácilmente al ligando. El plomo (Pb) es un elemento metálico cuyas propiedades están empezando a resultar valiosas para el diagnóstico radiométrico por imagen y la terapia con radionúclidos. La razón de ello es que hay dos isótopos de Pb que representan un par que puede aplicarse a la imagen (Pb-203) y a la terapia (Pb-212).

Se ha desarrollado un quelante para isótopos de Pb que presenta propiedades sorprendentes para la reacción de radiometalación. Mientras que las reacciones de radiometalación de isótopos de Pb se llevan a cabo generalmente a temperaturas superiores a 80 °C (durante 45 min a 2 h), se ha descubierto recientemente una composición de materia que permite el marcaje de Pb-203 y Pb-212 a bajas temperaturas (<37 °C). Como se utilizan en el presente documento, estos quelantes se denominan "quelantes metálicos macrocíclicos de baja temperatura" (LTMMC). Los datos recogidos hasta la fecha muestran que la reacción de radiometalación se completa casi al 100 % a temperaturas tan bajas como 4 °C en 15 minutos o menos. La reacción se produce más rápidamente que con otros quelantes utilizados para reacciones con Pb y el acoplamiento radiometal-quelante es estable en suero. Esto es importante porque permite llevar a cabo la reacción de radiometalación con isótopos de Pb para moléculas que son potencialmente inestables a temperaturas más altas, necesarias para la radiometalación de isótopos de Pb, y también permite una reacción de radiometalación rápida a bajas temperaturas, que se prefiere para la preparación de estos radiofármacos para uso clínico.

Los datos también muestran que la reacción de marcaje se produce más rápidamente que en el estado actual de la técnica. La velocidad de la reacción a bajas temperaturas tiene valor particularmente para la radiofarmacia, donde se preparan radiofármacos para diagnóstico y terapias para la obtención de imágenes y la terapia de los pacientes. La rapidez de la reacción a temperatura ambiente hace que las soluciones de ligando modificado con quelante y de radiometal puedan mezclarse simplemente y en pocos minutos, la reacción de radiometalación se completa, y el fármaco radiactivo está listo para su administración inmediata al paciente.

Compuestos LTMMC

La presente divulgación proporciona una estructura molecular que permite el radiomarcaje con radionúclidos divalentes a baja temperatura. En su forma útil, la divulgación se conecta mediante una molécula enlazadora a un ligando diseñado para unirse a células cancerosas y permitir la administración de radiación para la obtención de imágenes y la terapia de tumores.

Quelante LTMMC Enlazador Ligando

El enlazador es una cadena molecular que conecta el quelante con el ligando. En determinadas realizaciones, el enlazador es polietilenglicol, una cadena alifática, o una cadena polipeptídica. El ligando es un agente de interés, tal como un péptido, anticuerpo, fragmento de anticuerpo o una molécula pequeña.

En determinadas realizaciones, el método de la presente divulgación quela un compuesto de Fórmula (I):

o una sal del mismo en donde:

cada uno de R1-R4 se selecciona independientemente del grupo que consiste en CH2COORa y CH2C(=O)NHRa; cada uno de R5-R12 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada Ra se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en ausente y un grupo de enlace; y cada X es un agente biológico; y

en donde el contacto se produce a una temperatura inferior a aproximadamente 40 °C para formar una composición quelada.

En determinadas realizaciones, dos de R1-R4 son COORa y dos de R1-R4 son C(=O)NHRa.

En determinadas realizaciones, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (la):

En determinadas realizaciones, el metal divalente es plomo (Pb) o cobre (Cu). En determinadas realizaciones, el metal divalente es un radionúclido.

En determinadas realizaciones, el radionúclido es Pb-203 o Pb-212.

En una realización, el quelante LTMMC tiene la estructura:

En determinadas realizaciones, el LTMMC se radiomarca a bajas temperaturas con metales divalentes para la obtención de imágenes con radionúclidos y la terapia del cáncer. Por ejemplo, el LTMMC se radiomarca con Pb-212, Pb-203, Cu-64 o Cu-67.

En determinadas realizaciones, el LTMMC tiene la estructura de VMT-01 o VMT-02(Figuras 3A, 3B)

En determinadas realizaciones, se proporcionan estructuras bifuncionales ilustrativas en lasFiguras 11-15.

En una realización, el LTMMC se conjugó con un péptido, en este caso, un análogo de un péptido conocido como octreotida que se utiliza para el diagnóstico por imagen y la terapia de tumores cancerosos que expresan el receptor somatostático de subtipo II.Figura 16.

LaFigura 17proporciona la estructura del ácido (3S,10S,14S)-1-((1R,4S)-4-(((R)-6-(2-(7-(2-amino-2-oxoetil)-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)acetamido)-2-(4-(4-yodofenil)butanamido)hexanamido)metil)ciclohexil)-3-(naftalen-2-ilmetil)-1,4,12-trioxo-2,5,11,13-tetraazahexadecan-10,14,16-tricarboxílico.

LaFigura 18proporciona la estructura del ácido (3S,10S,14S)-1-((1r,4S)-4-((2-(7-(2-amino-2-oxoetil)-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)acetamido)metil)ciclohexil)-3-(naftalen-2-ilmetil)-1,4,12-trioxo-2,5,11,13-tetraazahexadecan-10,14,16-tricarboxílico.

LaFigura 19proporciona la estructura del ácido (15S,19S)-1-(7-(2-amino-2-oxoetil)-4,10-bis(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecan-1-il)-2,9,17-trioxo-3,10,16,18-tetraazahenicosan-15,19,21-tricarboxílico.

Se utilizan las siguientes definiciones, salvo que se indique lo contrario: halo o halógeno es fluoro, cloro, bromo o yodo. Alquilo, alcoxi, alquenilo, alquinilo, etc. denotan grupos tanto lineales como ramificados; pero la referencia a un radical individual tal como el propilo abarca solo el radical de cadena lineal, refiriéndose específicamente a un isómero de cadena ramificada tal como el isopropilo.

El término "alquilo", por sí mismo o como parte de otro sustituyente, significa, salvo que se especifique lo contrario, un radical hidrocarburo de cadena lineal o ramificada, que tiene el número de átomos de carbono indicado (es decir, C<1-8>significa de uno a ocho carbonos). Los ejemplos incluyen alquilo (C<1>-C<8>), alquilo (C<2>-C<8>), alquilo (C<1>-C<6>), alquilo (C<2>-C<a>) y alquilo (C<3>-C<6>). Los ejemplos de grupos alquilo incluyen metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, sec-butilo, n-pentilo, n-hexilo, n-heptilo, n-octilo, y homólogos e isómeros superiores.

El término "alquenilo" se refiere a un radical alquilo insaturado que tiene uno o más enlaces dobles. Los ejemplos de dichos grupos alquilo insaturados incluyen vinilo, 2-propenilo, crotilo, 2-isopentenilo, 2-(butadienilo), 2,4-pentadienilo, 3-(1,4-pentadienilo) y los homólogos e isómeros superiores.

El término "alquinilo" se refiere a un radical alquilo insaturado que tiene uno o más enlaces triples. Algunos ejemplos de tales grupos alquilo insaturados son etinilo, 1- y 3-propinilo, 3-butinilo y homólogos e isómeros superiores.

El término "alcoxi" se refiere a un grupo alquilo unido al resto de la molécula a través de un átomo de oxígeno ("oxi").

El término "tioalquilo" se refiere a un grupo alquilo unido al resto de la molécula a través de un grupo tio.

El término "cicloalquilo" se refiere a un anillo formado por carbonos, saturado o parcialmente insaturado (no aromático) que tiene de 3 a 8 átomos de carbono (es decir, (carbociclo C<3>-C<8>). El término también incluye múltiples sistemas de anillos formados por carbonos, condensados (p. ej., sistemas de anillos que comprenden 2, 3 o 4 anillos carbocíclicos). Por consiguiente, "carbociclo" incluye los carbociclos multicíclicos, tales como los carbociclos bicíclicos (p. ej., los carbociclos bicíclicos que tienen aproximadamente de 3 a 15 átomos de carbono, de aproximadamente 6 a 15 átomos de carbono, o de 6 a 12 átomos de carbono, tales como biciclo[3.1.0]hexano y biciclo[2.1.1]hexano), y los carbociclos policíclicos (p. ej., carbociclos tricíclicos y tetracíclicos con hasta aproximadamente 20 átomos de carbono). Los anillos del sistema de anillos condensados múltiples pueden conectarse entre sí mediante enlaces de condensación, espiro y puente cuando lo permitan los requisitos de valencia. Por ejemplo, los carbociclos multicíclicos pueden conectarse entre sí a través de un único átomo de carbono para formar una conexión espiro (p. ej., espiropentano, espiro[4,5]decano, etc.), a través de dos átomos de carbono adyacentes para formar una conexión condensada (p. ej., carbociclos tales como decahidronaftaleno, norsabinano, norcarano) o a través de dos átomos de carbono no adyacentes para formar una conexión de puente (p. ej., norbornano, biciclo[2.2.2]octano, etc.). Los ejemplos no limitativos de cicloalquilos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, biciclo[2.2.1]heptano, pinano y adamantano.

El término "arilo", como se utiliza en el presente documento, se refiere a un único anillo aromático formado por carbonos o a un sistema de múltiples anillos formados por carbonos, condensados en donde al menos uno de los anillos es aromático. Por ejemplo, en determinadas realizaciones, un grupo arilo tiene de 6 a 20 átomos de carbono, de 6 a 14 átomos de carbono, de 6 a 12 átomos de carbono o de 6 a 10 átomos de carbono. El arilo incluye un radical fenilo. El arilo también incluye múltiples sistemas de anillos de carbono condensados (p. ej., sistemas de anillos que comprenden 2, 3 o 4 anillos) que tienen de aproximadamente 9 a 20 átomos de carbono, en los que al menos un anillo es aromático y en donde los demás anillos pueden ser aromáticos o no aromáticos (es decir, cicloalquilos). Los anillos del sistema de anillos condensados múltiples pueden conectarse entre sí mediante enlaces de condensación, espiro y puente cuando lo permitan los requisitos de valencia. Debe entenderse que el punto de unión de un sistema de anillos condensados múltiples, como se ha definido anteriormente, puede estar en cualquier posición del sistema de anillos, incluyendo una porción aromática o carbociclo del anillo. Los ejemplos no limitativos de grupos arilo incluyen, pero sin limitación, fenilo, indenilo, indanilo, naftilo, 1, 2, 3, 4-tetrahidronaftilo, antracenilo y similares.

El término "heterociclo" se refiere a un anillo único saturado o parcialmente insaturado que tiene al menos un átomo distinto del carbono en el anillo, en donde el átomo se selecciona del grupo que consiste en oxígeno, nitrógeno y azufre; el término también incluye sistemas de anillos condensados múltiples que tienen al menos uno de estos anillos saturados o parcialmente insaturados, cuyos sistemas de anillos condensados múltiples se describen más adelante. Por lo tanto, el término incluye anillos simples saturados o parcialmente insaturados (p. ej., anillos de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros) de aproximadamente 1 a 6 átomos de carbono y de aproximadamente 1 a 3 heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en oxígeno, nitrógeno y azufre en el anillo. Los átomos de azufre y nitrógeno también pueden estar presentes en sus formas oxidadas. Los heterociclos ilustrativos incluyen, pero sin limitación, azetidinilo, tetrahidrofuranilo y piperidinilo. El término "heterociclo" también incluye sistemas de anillos condensados múltiples (p. ej., sistemas de anillos que comprenden 2, 3 o 4 anillos) en donde un único anillo heterociclo (como se ha definido anteriormente) puede condensarse con uno o más grupos seleccionados de cicloalquilo, arilo y heterociclo para formar el sistema de anillos condensados múltiples. Los anillos del sistema de anillos condensados múltiples pueden conectarse entre sí mediante enlaces de condensación, espiro y puente cuando lo permitan los requisitos de valencia. Debe entenderse que los anillos individuales del sistema de anillos condensados múltiples pueden conectarse en cualquier orden entre sí. También debe entenderse que el punto de unión de un sistema de anillos condensados múltiples (como se ha definido anteriormente para un heterociclo) puede estar en cualquier posición del sistema de anillos condensados múltiples, incluida una porción del heterociclo, arilo y carbociclo del anillo. En una realización, el término heterociclo incluye un heterociclo de 3-15 miembros. En una realización, el término heterociclo incluye un heterociclo de 3-10 miembros. En una realización, el término heterociclo incluye un heterociclo de 3-8 miembros. En una realización, el término heterociclo incluye un heterociclo de 3-7 miembros. En una realización, el término heterociclo incluye un heterociclo de 3-6 miembros. En una realización, el término heterociclo incluye un heterociclo de 4-6 miembros. En una realización, el término heterociclo incluye un heterociclo monocíclico o bicíclico de 3-10 miembros que comprende de 1 a 4 heteroátomos.

En una realización, el término heterociclo incluye un heterociclo monocíclico o bicíclico de 3-8 miembros que comprende de 1 a 3 heteroátomos. En una realización, el término heterociclo incluye un heterociclo monocíclico de 3 6 miembros que comprende de 1 a 2 heteroátomos. En una realización, el término heterociclo incluye un heterociclo monocíclico de 4-6 miembros que comprende de 1 a 2 heteroátomos. Los heterociclos ilustrativos incluyen, pero no se limitan a aziridinilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, homopiperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, tetrahidrofuranilo, dihidrooxazolilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, 1,2,3,4-tetrahidroquinolilo, benzoxazinilo, dihidrooxazolilo, cromanilo, 1,2-dihidropiridinilo, 2,3-dihidrobenzofuranilo, 1,3-benzodioxolilo, 1,4-benzodioxanilo, espiro[ciclopropano-1,1'-isoindolinil]-3'-ona, isoindolinil-1-ona, 2-oxa-6-azaespiro[3.3]heptanilo, imidazolidin-2-ona imidazolidina, pirazolidina, butirolactama, valerolactama, imidazolidinona, hidantoína, dioxolano, ftalimida y 1,4-dioxano.

El término "heteroarilo", como se utiliza en el presente documento, se refiere a un anillo aromático simple que tiene al menos un átomo distinto del carbono en el anillo, en donde el átomo se selecciona del grupo que consiste en oxígeno, nitrógeno y azufre; "heteroarilo" también incluye sistemas de anillos condensados múltiples que tienen al menos uno de estos anillos aromáticos, cuyos sistemas de anillos condensados múltiples se describen más adelante. Por lo tanto, "heteroarilo" incluye anillos aromáticos simples de aproximadamente 1 a 6 átomos de carbono y aproximadamente 1 4 heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en oxígeno, nitrógeno y azufre. Los átomos de azufre y nitrógeno también pueden estar presentes en forma oxidada siempre que el anillo sea aromático. Los sistemas de anillos heteroarilo ilustrativos incluyen, pero sin limitación, piridilo, pirimidinilo, oxazolilo o furilo. "Heteroarilo" también incluye sistemas de anillos condensados múltiples (p. ej., sistemas de anillos que comprenden 2, 3 o 4 anillos) en donde un grupo heteroarilo, como se ha definido anteriormente, se condensa con uno o más anillos seleccionados de cicloalquilo, arilo, heterociclo y heteroarilo. Debe entenderse que el punto de unión para un sistema de anillos condensados heteroarilo o heteroarilo múltiple puede estar en cualquier átomo adecuado del sistema de anillos condensados heteroarilo o heteroarilo múltiple, incluyendo un átomo de carbono y un heteroátomo (p. ej., un nitrógeno). Los heteroarilos ilustrativos incluyen, pero sin limitación, piridilo, pirrolilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirazolilo, tienilo, indolilo, imidazolilo, triazolilo, tetrazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, furilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, quinolilo, isoquinolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, indazolilo, quinoxalilo y quinazolilo.

El término "alcoxicarbonilo", como se utiliza en el presente documento, se refiere a un grupo (alquilo)-O-C(=O)-, en donde el término alquilo tiene el significado definido en el presente documento.

El término "alcanoloxi", como se utiliza en el presente documento, se refiere a un grupo (alquilo)-C(=O)-O-, en donde el término alquilo tiene el significado definido en el presente documento.

Como se utiliza en el presente documento, el término "heteroátomo" pretende incluir oxígeno (O), nitrógeno (N), azufre (S) y silicio (Si).

Como se utiliza en el presente documento, una línea ondulada "'nnn'"que cruza un enlace en una estructura química indica el punto de unión del enlace que cruza el enlace ondulado en la estructura química con el resto de una molécula.

Los términos “tratar”, "tratamiento" o "para tratar", en la medida en que se refiera a una enfermedad o afección, incluye inhibir la enfermedad o afección, eliminar la enfermedad o afección y/o aliviar uno o más síntomas de la enfermedad o afección. Los términos "tratar'1, "tratamiento" o "para tratar" también se refieren al tratamiento terapéutico y/o al tratamiento profiláctico o a las medidas preventivas, en donde el objeto es prevenir o ralentizar (disminuir) un cambio o trastorno fisiológico no deseado, tales como, por ejemplo, el desarrollo o diseminación de un cáncer.

Por ejemplo, los resultados clínicos beneficiosos o deseados incluyen, pero sin limitación, el alivio de los síntomas, la disminución del alcance de la enfermedad o trastorno, la estabilización del estado (es decir, no empeoramiento) de la enfermedad o trastorno, el retraso o la ralentización de la progresión de la enfermedad, la mejora o el alivio del cuadro clínico o trastorno y la remisión (ya sea parcial o total), ya sea detectable o indetectable. "Tratar", "tratamiento" o "para tratar", también puede significar prolongar la supervivencia en comparación con la supervivencia esperada si no se recibe tratamiento. Aquellos que necesitan tratamiento incluyen aquellos que ya padecen la enfermedad o trastorno, así como aquellos propensos a tener la enfermedad o trastorno o aquellos en los que se quiera prevenir la enfermedad o trastorno.Enuna realización "tratar", "tratamiento" o "para trata" no incluye la evitación o la prevención.

La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" o "cantidad eficaz" incluye, pero no se limita a una cantidad de un compuesto que (i) trata o previene la enfermedad, la afección o el trastorno particular, (ii) atenúa, mejora o elimina uno o más síntomas de la enfermedad, la afección o el trastorno particular, o (iii) previene o retarda la aparición de uno o más síntomas de la enfermedad, la afección o el trastorno particular descritos en el presente documento.

El término "mamífero" se refiere a los seres humanos, primates no humanos superiores, roedores, animales domésticos, vacas, caballos, cerdos, ovejas, perros y gatos. En una realización, el mamífero es un ser humano. El término "paciente" se refiere a cualquier animal, incluidos los mamíferos. En una realización, el paciente es un paciente mamífero. En una realización, el paciente es un paciente humano.

Los compuestos divulgados en el presente documento también pueden existir como isómeros tautómeros en determinados casos. Aunque solo se puede representar una estructura de resonancia deslocalizada, todas estas formas están contempladas dentro del alcance de la divulgación.

Se entiende por un experto en la materia que esta divulgación también incluye cualquier compuesto reivindicado que puede ser enriquecido en cualquiera o todos los átomos por encima de las relaciones isotópicas de origen natural con uno o más isótopos tales como, pero sin limitación, deuterio (<2>H o D). Como ejemplo no limitativo, un grupo -CH<3>puede estar sustituido por -CD<3>.

Las composiciones farmacéuticas de la divulgación pueden comprender uno o más excipientes. Cuando se utiliza en combinación con las composiciones farmacéuticas de la divulgación, el término "excipientes" se refiere generalmente a un ingrediente adicional que se combina con el compuesto de fórmula (I) o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo para proporcionar una composición correspondiente. Por ejemplo, cuando se utiliza en combinación con las composiciones farmacéuticas de la divulgación, el término "excipientes" incluye, pero no se limita a: portadores, aglutinantes, agentes disgregantes, lubricantes, agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, recubrimientos, conservantes y colorantes.

Las definiciones y convenciones estereoquímicas usadas en el presente documento siguen de forma general el S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, Nueva York; y Eliel, E. y Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley &

Sons, Inc., Nueva York, 1994. Los compuestos de la divulgación pueden contener centros asimétricos o quirales y, por lo tanto, existen en diferentes formas estereoisómeras. Se pretende que todas las formas estereoisómeras de los compuestos de la invención, incluyendo, pero sin limitación, diastereómeros, enantiómeros y atropisómeros, así como mezclas de los mismos, tales como mezclas racémicas, formen parte de la presente divulgación. Muchos compuestos orgánicos existen en formas ópticamente activas, es decir, tienen la capacidad de rotar el plano de luz polarizada. En la descripción de un compuesto ópticamente activo, los prefijos D y L o R y S, se usan para indicar la configuración absoluta de la molécula en torno a su centro o centros quirales. Los prefijos d y 1 o (+) y (-) se emplean para designar el sentido de rotación del plano de luz polarizada por el compuesto, significando (-) o 1 que el compuesto es levógiro. Un compuesto con el prefijo (+) o d es dextrógiro. Para una estructura química dada, estos estereoisómeros son idénticos salvo por que son imágenes especulares entre sí. Un estereoisómero específico puede denominarse también enantiómero, y una mezcla de dichos isómeros se denomina con frecuencia mezcla enantiomérica. Una mezcla 50:50 de enantiómeros se denomina mezcla racémica o racemato, que puede producirse cuando no ha habido estereoselección ni estereoespecificidad en una reacción o proceso químico. Las expresiones "mezcla racémica" y "racemato" se refieren a una mezcla equimolar de dos especies enantioméricas, desprovista de actividad óptica.

Los expertos en la materia apreciarán que los compuestos de la divulgación que tienen un centro quiral pueden existir y aislarse en formas ópticamente activas y racémicas. Algunos compuestos pueden presentar polimorfismo. Debe entenderse que la presente divulgación abarca cualquier forma racémica, ópticamente activa, polimórfica o estereoisomérica, o mezclas de las mismas, de un compuesto de la divulgación, que posee las propiedades útiles descritas en el presente documento, siendo bien conocido en la técnica el modo de preparar formas ópticamente activas (por ejemplo, por resolución de la forma racémica mediante técnicas de recristalización, mediante síntesis a partir de materiales de partida ópticamente activos, mediante síntesis quiral o mediante separación cromatográfica utilizando una fase estacionaria quiral).

Cuando un enlace en una fórmula de un compuesto del presente documento se dibuja de forma no estereoquímica (p. ej., plana), el átomo al que se une el enlace incluye todas las posibilidades estereoquímicas.

Cuando un enlace de una fórmula de un compuesto de este documento se dibuja de una manera estereoquímica definida (p. ej., negrita, con borde en negrita, a rayas o con borde a rayas), debe entenderse que el átomo al que está unido el enlace estereoquímico está enriquecido en el estereoisómero absoluto representado, salvo que se indique lo contrario. En una realización, el compuesto puede ser al menos un 51 % del estereoisómero absoluto representado. En otra realización, el compuesto puede ser al menos un 60 % del estereoisómero absoluto representado. En otra realización, el compuesto puede ser al menos un 80%del estereoisómero absoluto representado. En otra realización, el compuesto puede ser al menos un 90 % del estereoisómero absoluto representado. En otra realización, el compuesto puede ser al menos un 95 % del estereoisómero absoluto representado. En otra realización, el compuesto puede ser al menos un 99 % del estereoisómero absoluto representado.

El término "residuo", tal como se aplica al residuo de un compuesto, se refiere a un compuesto que ha sido modificado de cualquier manera que dé como resultado la creación de una valencia abierta en el sitio de la valencia abierta. La valencia abierta puede crearse mediante la eliminación de 1 o más átomos del compuesto (p. ej., la eliminación de un solo átomo, tal como el hidrógeno, o la eliminación de más de un átomo, tal como un grupo de átomos que incluya, entre otros, una amina, hidroxilo, metilo, amida (p. ej., -C(=O)NH2) o grupo acetilo). La valencia abierta también puede crearse mediante la conversión química de un primer grupo funcional del compuesto en un segundo grupo funcional del compuesto (p. ej., la reducción de un grupo carbonilo, sustitución de un grupo carbonilo por una amina), seguido de la eliminación de 1 o más átomos del segundo grupo funcional para crear la valencia abierta.

A continuación, los valores específicos indicados para los radicales, sustituyentes e intervalos, son solo para ilustración; no excluyen otros valores definidos u otros valores dentro de intervalos definidos para los radicales y sustituyentes. Debe entenderse que pueden combinarse dos o más valores. También debe entenderse que los valores enumerados a continuación en el presente documento (o subconjuntos de ellos) pueden excluirse.

Grupo de enlace L

En ciertas realizaciones de la divulgación L es un grupo de enlace que une el resto del compuesto de fórmula I a un agente biológico. La naturaleza del grupo de enlace L no es crítica siempre que el conjugado resultante conserve las propiedades biológicas útiles descritas en el presente documento.

En una realización de la divulgación, el grupo de enlace tiene un peso molecular desde aproximadamente 20 dalton hasta aproximadamente 20.000 dalton.

En una realización de la divulgación, el grupo de enlace tiene un peso molecular desde aproximadamente 20 dalton hasta aproximadamente 5.000 dalton.

En una realización de la divulgación, el grupo de enlace tiene un peso molecular desde aproximadamente 20 dalton hasta aproximadamente 1.000 dalton.

En una realización de la divulgación, el grupo de enlace tiene un peso molecular de aproximadamente 20 dalton a aproximadamente 200 dalton.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace tiene una longitud desde aproximadamente 5 ángstroms hasta aproximadamente 60 ángstroms.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace separa el antígeno del resto del compuesto de fórmula I sobre aproximadamente 5 ángstroms hasta aproximadamente 40 ángstroms, incluidos, de longitud.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es una cadena de hidrocarburo divalente, ramificada o sin ramificar, saturada o insaturada, que tiene de 2 a 25 átomos de carbono, en donde uno o más (p. ej., 1, 2, 3 o 4) de los átomos de carbono está opcionalmente sustituido por (-O-), y en donde la cadena está opcionalmente sustituida en el carbono con uno o más (p. ej., 1, 2, 3 o 4) sustituyentes seleccionados de alcoxi (C-i-Ca), cicloalquilo (C3-C6), alcanoílo (C1-C6), alcanoloxi (C1-C6), alcoxicarbonilo (C1-C6), tioalquilo (C1-C6), azido, ciano, nitro, halo, hidroxi, oxo (=O), carboxi, arilo, ariloxi, heteroarilo y heteroariloxi.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es una cadena de hidrocarburo divalente, ramificada o sin ramificar, saturada o insaturada, que tiene de 2 a 10 átomos de carbono, en donde uno o más (p. ej., 1, 2, 3 o 4) de los átomos de carbono está opcionalmente sustituido por (-O-), y en donde la cadena está opcionalmente sustituida en el carbono con uno o más (p. ej., 1, 2, 3 o 4) sustituyentes seleccionados de alcoxi (C1-C6), cicloalquilo (C3-C6), alcanoílo (C1-C6), alcanoloxi (C1-C6), alcoxicarbonilo (C1-C6), tioalquilo (C1-C6), azido, ciano, nitro, halo, hidroxi, oxo (=O), carboxi, arilo, ariloxi, heteroarilo, y heteroarilo oxi.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es una cadena de hidrocarburo divalente, ramificada o sin ramificar, saturada o insaturada, que tiene de 2 a 25 átomos de carbono, en donde la cadena está opcionalmente sustituida en el carbono con uno o más (p. ej., 1, 2, 3 o 4) sustituyentes seleccionados de alcoxi (C1-C6), cicloalquilo (C3-C6), alcanoílo (C1-C6), alcanoloxi (C1-C6), alcoxicarbonilo (C1-C6), tioalquilo (C1-C6), azido, ciano, nitro, halo, hidroxi, oxo (=O), carboxi, arilo, ariloxi, heteroarilo, y heteroarilo oxi.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es una cadena de hidrocarburo divalente, ramificada o sin ramificar, saturada o insaturada, que tiene de 2 a 10 átomos de carbono, en donde la cadena está opcionalmente sustituida en el carbono con uno o más (p. ej., 1, 2, 3 o 4) sustituyentes seleccionados de alcoxi (C1-C6), cicloalquilo (C3-C6), alcanoílo (Ci-Ca), alcanoloxi (Ci-Ca), alcoxicarbonilo (C-i-Ca), tioalquilo (Ci-Ce), azido, ciano, nitro, halo, hidroxi, oxo (=O), carboxi, arilo, ariloxi, heteroarilo y heteroariloxi.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es una cadena de hidrocarburo divalente, ramificada o sin ramificar, saturada o insaturada, que tiene de 2 a 10 átomos de carbono.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es una cadena de hidrocarburo divalente, ramificada o sin ramificar, saturada, que tiene de 2 a 10 átomos de carbono.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es una cadena de hidrocarburo divalente, sin ramificar, saturada, que tiene de 2 a 10 átomos de carbono.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es una cadena de hidrocarburo divalente, sin ramificar, saturada, que tiene de 2 a 6 átomos de carbono.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es una cadena de hidrocarburo divalente, sin ramificar, saturada, que tiene de 2 a 4 átomos de carbono.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace comprende una cadena polietilenoxi. En otra realización de la divulgación, la cadena polietilenoxi comprende 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 unidades etilenoxi repetidas.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es un radical divalente formado a partir de una proteína.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es un radical divalente formado a partir de un péptido.

En otra realización de la divulgación, el grupo de enlace es un radical divalente formado a partir de un aminoácido.

En determinadas realizaciones, L es polietilenglicol, una cadena alifática, o una cadena polipeptídica.

En la técnica se conocen otros enlazadores. Véase, p. ej., Bandari RP, Jiang Z, Reynolds TS, Bemskoetter NE, Szczodroski AF, Bassuner KJ, Kirkpatrick DL, Rold TL, Sieckman GL, Hoffman TJ, Connors JP, Smith CJ. Synthesis and biological evaluation of copper-64 radiolabeled [DUPA-6-Ahx-(NODAGA)-5-Ava-BBN(7-14)NH2], a novel bivalent targeting vector having affinity for two distinct biomarkers (GRPr/PSMA) of prostate cancer. Nucl Med Biol. 2014;41(4):355-363. doi: 10.1016/j.nucmedbio.2014.01.001. PubMed PMID: 24508213; PMCID:PMC4041584;

Dumont RA, Tamma M, Braun F, Borkowski S, Reubi JC, Maecke H, Weber WA, Mansi R. Targeted radiotherapy of prostate cancer with a gastrin-releasing peptide receptor antagonist is effective as monotherapy and in combination with rapamycin. J Nucl Med. 2013;54(5):762-769. doi: 10.2967/jnumed.112.112169. PubMedPMID: 23492884; Gourni E, Mansi R, Jamous M, Waser B, Smerling C, Burian A, Buchegger F, Reubi JC, Maecke HR. N-terminal modifications improve the receptor affinity and pharmacokinetics of radiolabeled peptidic gastrin-releasing peptide receptor antagonists: examples of 68Ga- and 64Cu-1abeled peptides for PET imaging. J Nucl Med. 2014;55(10): 1719-1725. doi:

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Mansi R, Abiraj K, Wang X, Tamma ML, Gourni E, Cescato R, Berndt S, Reubi JC, Maecke HR. Evaluation of three different families of bombesin receptor radioantagonists for targeted imaging and therapy of gastrin releasing peptide receptor (GRP-R) positive tumors. J Med Chem. 2015;58(2):682-691. doi: 10.1021/jm5012066. PubMed PMID: 25474596; Pan D, Xu YP, Yang RH, Wang L, Chen F, Luo S, Yang M., Yan Y. A new (68)Ga-1abeled BBN peptide with a hydrophilic linker for GRPR-targeted tumor imaging. Amino Acids. 2014;46(6):1481-1489. doi: 10.1007/s00726-014-1718-y. PubMed PMID: 24633452; Stott Reynolds TJ, Schehr R, Liu D., Xu J., Miao Y, Hoffman TJ, Rold TL, Lewis MR, Smith CJ. Characterization and evaluation of DOTA-conjugated Bombesin/RGD-antagonists for prostate cancer tumor imaging and therapy. Nucl Med Biol. 2015;42(2):99-108. doi: 10.1016/j.nucmedbio.2014.10.002. PubMed PMID: 25459113.

Ligandos

Anticuerpos y fragmentos de anticuerpos

El término "anticuerpo" como se utiliza en el presente documento incluye, aunque no de forma limitativa, anticuerpos obtenidos a partir de preparaciones policlonales y monoclonales, así como lo siguiente: (i) moléculas de anticuerpos quiméricos (véase, por ejemplo, Winteret al.(1991) Nature 349:293-299; y la patente de EE. UU. n.° 4.816.567); (ii) fragmentos F(ab')2 y F(ab); (iii) moléculas Fv (heterodímeros no covalentes, véase, por ejemplo, Inbaret al.(1972) Proc. Natl. Acad. Sci.<u>S<a>69:2659-2662; y Ehrlichet al.(1980) Biochem 19:4091-4096); (iv) moléculas Fv monocatenarias (sFv) (véase, por ejemplo, Hustonet al.(1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883); (v) construcciones de fragmentos de anticuerpos diméricos y triméricos; (vi) moléculas de anticuerpos humanizados (véase, por ejemplo, Riechmannet al.(1988) Nature 332:323-327; Verhoeyanet al.(1988) Science 239:1534-1536; y la publicación de patente del Reino Unido n.° GB 2.276.169, publicada el 21 de septiembre de 1994); (vii) Minianticuerpos o minicuerpos (es decir, cadenas polipeptídicas de sFv que incluyen dominios de oligomerización en sus extremos C-terminales, separados del sFv por una región bisagra; véase, p. ej., Packet al.(1992) Biochem 31:1579-1584; Cumberet al.(1992) J. Immunology 149B:120-126); y, (vii) cualquier fragmento funcional obtenido a partir de dichas moléculas, en donde dichos fragmentos conservan las propiedades de unión específica de la molécula de anticuerpo original.

Los "anticuerpos" (Ab) y las "inmunoglobulinas" (Ig) se refieren a glucoproteínas que tienen características estructurales similares. Aunque los anticuerpos muestran especificidad de unión a un antígeno específico, las inmunoglobulinas incluyen tanto anticuerpos como otras moléculas similares a anticuerpos que carecen de especificidad antigénica. Los polipéptidos de este último tipo, por ejemplo, se producen a bajos niveles por el sistema linfático y a niveles aumentados por mielomas.

Las expresiones "anticuerpo" e "inmunoglobulina" se utilizan indistintamente en el sentido más amplio e incluyen anticuerpos monoclonales (p. ej., anticuerpos monoclonales de longitud completa o intactos), anticuerpos policlonales, anticuerpos monovalentes, anticuerpos multivalentes, anticuerpos multiespecíficos (p. ej., anticuerpos biespecíficos siempre que presenten la actividad biológica deseada) y también pueden incluir ciertos fragmentos de anticuerpos. Un anticuerpo puede ser quimérico, humano, humanizado y/o madurado por afinidad.

Como se utiliza en el presente documento, el término "anticuerpo" incluye los scFv, anticuerpos humanizados, totalmente humanos o quiméricos, anticuerpos monocatenarios, diacuerpos y fragmentos de anticuerpos de unión a antígeno (p. ej., fragmentos Fab). En determinadas realizaciones, el fragmento de anticuerpo no contiene la región del dominio constante de un anticuerpo. En determinadas realizaciones, el fragmento de anticuerpo tiene menos de 500 aminoácidos de longitud, tales como entre 200-450 aminoácidos de longitud, o menos de 400 aminoácidos de longitud.

Las expresiones "se une específicamente" cuando se refiere a una proteína, "específicamente inmunológicamente con reactividad cruzada con", o simplemente "específicamente inmunorreactivo con" cuando se refiere a un anticuerpo, se refiere a una reacción de unión que es determinante de la presencia de la proteína en la presencia de una población heterogénea de proteínas y otros productos biológicos. Por lo tanto, en las condiciones designadas, un ligando específico se une preferentemente con una proteína en particular y no se une en una cantidad significativa con otras proteínas presentes en la muestra. Una molécula o ligando (p. ej., un anticuerpo) que se une específicamente a una proteína tiene una constante de asociación de al menos 103 M'1 o 104 M-1, a veces 105 M'1 o 106 M-1, en otros casos 106 M’1 o 107 M-1, preferentemente 108 M_1 a 109 M-1, y más preferentemente, aproximadamente 1010 M_1 a 1011 M_1 o superior. Puede usarse una diversidad de formatos de inmunoensayo para seleccionar anticuerpos que son específicamente inmunorreactivos con una proteína en particular. Por ejemplo, se usan rutinariamente inmunoensayos ELISA en fase sólida para seleccionar anticuerpos monoclonales específicamente inmunorreactivos con una proteína. Véase, p. ej., Harlow y Lane (1988) Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Publications, Nueva York, para una descripción de formatos y condiciones de inmunoensayo que pueden usarse para determinar la inmunorreactividad específica.

Aptámeros

Los aptámeros son oligonucleótidos monocatenarios que pueden plegarse de forma natural en diferentes estructuras tridimensionales, que tienen la capacidad de unirse específicamente a las biosuperficies, un compuesto diana o una fracción. La expresión "cambio conformacional" se refiere al proceso por el cual un ácido nucleico, tal como un aptámero, adopta una estructura secundaria o terciaria diferente. El término "pliegue" puede sustituirse por cambio conformacional.

Los aptámeros tienen ventajas sobre las moléculas de afinidad más tradicionales, tales como los anticuerpos, ya que son muy estables, pueden sintetizarse fácilmente y manipularse químicamente con relativa facilidad. La síntesis de aptámeros es potencialmente mucho más barata y reproducible que las pruebas de diagnóstico basadas en anticuerpos. Los aptámeros se producen mediante síntesis química en fase sólida, un proceso preciso y reproducible con coherencia entre los lotes de producción. Un aptámero puede producirse en grandes cantidades mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y una vez conocida la secuencia, puede ensamblarse a partir de nucleótidos individuales de origen natural y/o nucleótidos sintéticos. Los aptámeros son estables en almacenamiento a largo plazo a temperatura ambiente, y, si se desnaturalizan, los aptámeros pueden renaturalizarse fácilmente, una característica que no comparten los anticuerpos. Asimismo, los aptámeros tienen el potencial de medir concentraciones de ligando en órdenes de magnitud inferiores (partes por billón o incluso cuatrillón) a las de las pruebas de diagnóstico basadas en anticuerpos. Estas características de los aptámeros los hacen atractivos para aplicaciones de diagnóstico.

Los aptámeros son típicamente oligonucleótidos que pueden ser oligodesoxinucleótidos monocatenarios, oligorribonucleótidos u oligodesoxinucleótidos u oligorribonucleótidos modificados. El término "modificado" engloba nucleótidos con una base y/o azúcar modificados covalentemente. Por ejemplo, los nucleótidos modificados incluyen nucleótidos que tienen azúcares unidos covalentemente a grupos orgánicos de bajo peso molecular distintos de un grupo hidroxilo en la posición 3' y distintos de un grupo fosfato en la posición 5'. Así, los nucleótidos modificados también pueden incluir azúcares 2' sustituidos, tales como 2'-O-metil-; 2-O-alquil; 2-O-alil; 2'-S-alquil; 2'-S-alil; 2'-fluoro-; 2'-halo o 2-azido-ribosa, análogos carbocíclicos de azúcares a-anoméricos; azúcares epiméricos, tales como arabinosa, xilosas o lixosas, azúcares de piranosa, azúcares de furanosa y sedoheptulosa.

Los nucleótidos modificados son conocidos en la técnica e incluyen, por ejemplo, y no a modo de limitación, purinas y/o pirimidinas alquiladas; purinas y/o pirimidinas aciladas; u otros heterociclos. Estas clases de pirimidinas y purinas son conocidas en la técnica e incluyen, pseudoisocitosina; N4, N4-etanocitosina; 8-hidroxi-N6-metiladenina; 4-acetilcitosina, 5-(carboxihidroxilmetil) uracilo; 5-fluorouracilo; 5-bromouracilo; 5-carboximetilaminometil-2-tiouracilo; 5-(carboximetilaminometil)-uracilo; dihidrouracilo; inosina; N6-isopentil-adenina; 1-metiladenina; 1-metilpseudouracilo; 1-metilguanina; 2,2-dimetilguanina; 2-metiladenina; 2-metilguanina; 3-metilcitosina; 5-metilcitosina; N6-metiladenina; 7-metilguanina; 5-metilaminometil uracilo; 5-metoxi amino metil-2-tiouracilo; p-D-manosilqueosina; 5-metoxicarbonilmetiluracilo; 5-metoxiuracilo; 2-metiltio-N6-isopenteniladenina; éster metílico del ácido uracil-5-oxiacético; pseudouracilo; 2-tiocitosina; 5-metil-2-tiouracilo, 2-tiouracilo; 4-tiouracilo; 5-metiluracilo; éster metílico del ácido N-uracilo-5-oxiacético, ácido uracil 5-oxiacético; queosina; 2-tiocitosina; 5-propiluracilo; 5-propilcitosina; 5-etiluracilo; 5-etilcitosina; 5-butiluracilo; 5-pentiluracilo; 5-pentilcitosina; y 2,6,-diaminopurina; metilpseudouracilo; 1-metilguanina; 1-metilcitosina.

Los aptámeros de la divulgación se sintetizan utilizando nucleótidos enlazados fosfodiéster convencionales y se sintetizan utilizando técnicas estándar de síntesis en fase sólida o en fase de solución que se conocen en la técnica. Los enlaces entre nucleótidos pueden utilizar moléculas de enlace alternativas. Por ejemplo, grupos de enlace de fórmula P(O)S, (tioato); P(S)S, (ditioato); P(O)NR'2; P(O)R'; P(O)OR6; CO; o CONR'2 en donde R es H (o una sal) o alquilo (1-12C) y R6 es alquilo (1-9C) se une a nucleótidos adyacentes mediante -O- o -S-.

En determinadas realizaciones de la presente divulgación, la parte del aptámero se une al receptor 2 del factor de crecimiento epidérmico humano (HER2). En determinadas realizaciones, se realizan modificaciones en la parte del aptámero. Las modificaciones adicionales de la parte del aptámero incluyen la modificación 2'O-metilo de las pirimidinas. En otras realizaciones, todos los nucleótidos del aptámero están modificados con 2'O-metilo. Como alternativa, las pirimidinas, o todos los nucleótidos, pueden modificarse con 2'fluoro (tanto pirimidinas como purinas). Otras modificaciones de los nucleótidos del aptámero incluyen conjugados de alto peso molecular como la pegilación, modificaciones a base de lípidos (p. ej., colesterol) o nanopartículas (p. ej., PEI o quitosano) para mejorar el perfil farmacocinético/dinámico de la quimera.

En determinadas realizaciones, se introducen modificaciones en la secuencia madre del aptámero. Se pueden utilizar diferentes nucleótidos siempre que se mantenga la estructura del tallo.

Moléculas pequeñas

El compuesto de Fórmula I de la presente divulgación puede enlazarse operativamente a una o más entidades de molécula pequeña. En determinadas realizaciones, la entidad es una etiqueta fluorescente, etiqueta de afinidad, una proteína, un sustrato sólido, una superficie celular o un componente celular. En determinadas realizaciones, el componente celular es una pared celular o una membrana celular. En determinadas realizaciones, el sustrato sólido es un componente de sílice, celulosa, acetato de celulosa, nitrocelulosa, nailon, poliéster, polietersulfona, poliolefina o fluoruro de polivinilideno, o combinaciones de los mismos. En determinadas realizaciones, el sustrato sólido es un filtro, perla magnética, óxido metálico, partícula de látex, placas de micro-valoración, perla de poliestireno o CD-ROM.

Polipéptidos

El término "aminoácido", comprende los residuos de los aminoácidos naturales (p. ej., Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Glu, Gln, Gly, His, Hyl, Hyp, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr y Val) en forma D o L, así como aminoácidos no naturales (p. ej., fosfoserina, fosfotreonina, fosfotirosina, hidroxiprolina, gamma-carboxiglutamato; ácido hipúrico, ácido octahidroindol-2-carboxílico, estatina, ácido 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-carboxílico, penicilamina, ornitina, citrulina, a-metil-alanina, parabenzoilfenilalanina, fenilglicina, propargilglicina, sarcosina, y terc-butilglicina). El término también comprende los aminoácidos naturales y no naturales que llevan un grupo protector amino convencional (p. ej., acetilo o benzoiloxicarbonilo), así como aminoácidos naturales y no naturales protegidos en el carboxi terminal (p. ej., como un alquilo (C1-C6), fenil o bencil éster o amida; o como una a-metilbencilamida). Otros grupos protectores amino y carboxi adecuados son conocidos por los expertos en la materia (véase, por ejemplo, T. W. Greene,Protecting Groups In Organic Synthesis;Wiley: Nueva York, 1981, y las referencias citadas en el mismo). Un aminoácido puede unirse al resto de un compuesto de fórmula I a través del carboxi terminal, el amino terminal, o a través de cualquier otro punto de unión conveniente, tales como, por ejemplo, a través del azufre de la cisteína.

Los términos "polipéptido", "péptido", y "proteína" se usan indistintamente para referirse a polímeros de aminoácidos de cualquier longitud. Los péptidos y polipéptidos pueden estar compuestos enteramente de material sintético, análogos no naturales de los aminoácidos, o, es una molécula quimérica de aminoácidos peptídicos en parte naturales y en parte análogos no naturales de aminoácidos. En un aspecto, un polipéptido se utiliza en una composición, sistema celular o proceso de la divulgación (p. ej., una célula hospedadora que tenga un plásmido que exprese al menos una enzima de la divulgación). Además, polipéptido puede referirse a compuestos que comprenden polímeros de aminoácidos unidos covalentemente a otro grupo funcional (p. ej., grupo solubilizante, un grupo objetivo, PEG, grupo no aminoácido, u otro agente terapéutico).

Los aminoácidos pueden abreviarse utilizando la siguiente designación entre paréntesis: Prolina (Pro), Valina (Val), Lisina (Lys), Ornitina (Orn), Norleucina (Nle), Glicina (Gly), Triptófano (Trp), Alanina (Ala), Fenilalanina (Phe), Arginina (Arg), Histidina (His), Ácido glutámico (Glu), Ácido aspártico (Asp), Serina (Ser), Metionina (Met), Isoleucina (Ile), Tirosina (Tyr), Ciclohexilalanina (Cha), 4-fluoro-D-fenilglicina (4-fluoro-D-Phg), 2-tienil-D-alanina (D-Thi).

Las composiciones polipeptídicas de la divulgación pueden contener cualquier combinación de componentes estructurales no naturales. Los residuos peptídicos individuales pueden unirse mediante enlaces peptídicos, otros enlaces químicos o medios de acoplamiento, tales como, p. ej., glutaraldehído, ésteres de N-hidroxisuccinimida, maleimidas bifuncionales, N,N'-diciclohexilcarbodiimida (DCC) o N,N'- diisopropilcarbodiimida (DIC). Entre los grupos de enlace que pueden ser una alternativa a los enlaces amida tradicionales ("enlace peptídico") se incluyen, p. ej., cetometileno (p. ej., -C(=O)-CH2- por -C(=O)-NH-), aminometileno (CH2-NH), etileno, olefina (CH=CH), éter -CH2-O, tioéter (CH2-S), tetrazol, tiazol, retroamida, tioamida, o éster (véase, por ejemplo, Spatola (1983) en Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides and Proteins, Vol. 7, págs. 267-357, "Peptide Backbone Modifications", Marcel Dekker, N.Y.).

Los polipéptidos utilizados para practicar el método de la divulgación pueden modificarse mediante procesos naturales, tales como el procesamiento postraduccional (p. ej., fosforilación, acilación, etc.), o mediante técnicas de modificación química, y los polipéptidos modificados resultantes. Pueden producirse modificaciones en cualquier parte del polipéptido, incluyendo la cadena principal peptídica, las cadenas laterales de aminoácidos y el extremo amino o carboxilo. Se apreciará que el mismo tipo de modificación puede estar presente en el mismo grado o en grados variables en varios sitios de un polipéptido dado. También un polipéptido dado puede tener muchos tipos de modificaciones. Las modificaciones incluyen acetilación, acilación, ADP-ribosilación, amidación, unión covalente de flavina, unión covalente de un resto hemo, unión covalente de un nucleótido o derivado de nucleótido, unión covalente de un lípido o derivado de lípido, unión covalente de un fosfatidilinositol, reticulación, ciclización, formación de enlaces disulfuro, desmetilación, formación de enlaces cruzados covalentes, formación de cisteína, formación de piroglutamato, formilación, gamma-carboxilación, glicosilación, formación de anclaje a GPI, hidroxilación, yodación, metilación, miristoilación, oxidación, PEGilación, procesamiento proteolítico, fosforilación, prenilación, selenoilación, sulfatación y adición de aminoácidos a proteínas mediada por ARN de transferencia, tal como arginilación. Véase, p. ej., Creighton, T. E., Proteins-Structure and Molecular Properties 2nd Ed., W. H. Freeman and Company, Nueva York (1993);

Posttranslational Covalent Modification of Proteins, B. C. Johnson, Ed., Academic Press, Nueva York, págs. 1-12 (1983).

Las moléculas "biológicamente activas" incluyen un molécula o compuesto que provoca o modula una respuesta fisiológica. En un aspecto, un compuesto biológicamente activo estimula los receptores de melanocortina, preferentemente receptores MCI.

Por "modular" y "modulación" se entiende que la actividad de una o más proteínas o subunidades proteicas se regula al alza o a la baja, de modo que la expresión, el nivel o la actividad es mayor o menor que la observada en ausencia del modulador. Por ejemplo, el término "modular" puede significar "inhibir" o "estimular".

"Secuencia C-terminal" incluye la referencia al final de la cadena de aminoácidos que termina normalmente, pero no necesariamente, con un grupo carboxilo. La convención para escribir secuencias peptídicas es poner el extremo C-terminal a la derecha y escribir la secuencia desde el extremo N-terminal hasta el extremo C. La secuencia C-terminal puede comprender de 1 a 100 aminoácidos, preferentemente de 2 a 15 aminoácidos y aún más preferentemente de 3 a 10 aminoácidos. La secuencia C-terminal puede terminar con un grupo carboxilo o el extremo puede modificarse mediante métodos bien conocidos en la técnica para incluir un miembro funcional (p. ej., un grupo diana, señal de retención, lípido y ancla).

El término "péptido" describe una secuencia de 2 a 25 aminoácidos (p. ej., como se define más arriba) o residuos peptidílicos. La secuencia puede ser lineal o cíclica. Por ejemplo, un péptido cíclico puede prepararse o ser el resultado de la formación de puentes disulfuro entre dos residuos de cisteína en una secuencia. Un péptido puede unirse al resto de un compuesto de fórmula I a través del carboxi terminal, el amino terminal, o a través de cualquier otro punto de unión conveniente, tales como, por ejemplo, a través del azufre de una cisteína. Preferentemente, un péptido comprende de 3 a 25, o de 5 a 21 aminoácidos. Los derivados peptídicos pueden prepararse como se divulga en los números de patente de EE. UU. 4.612.302; 4.853.371; y 4.684.620, o como se describe en los Ejemplos siguientes. Las secuencias peptídicas específicamente mencionadas en el presente documento se escriben con el amino terminal a la izquierda y el carboxi terminal a la derecha.

Agentes antihiperproliferativos

Las expresiones "trastorno proliferativo celular" y "trastorno proliferativo" se refieren a trastornos que se asocian a algún grado mensurable de proliferación celular anormal. En una realización, el trastorno proliferativo celular es cáncer.

"Tumor", como se utiliza en el presente documento, se refiere a todo el crecimiento y proliferación de células neoplásicas, ya sean malignas o benignas, y a todas las células y tejidos precancerosos y cancerosos. Los términos "cáncer", "canceroso", "trastorno proliferativo celular", "trastorno proliferativo" y "tumor" no son mutuamente excluyentes, como se cita en el presente documento.

Los términos "cáncer" y "canceroso" se refieren a o describen la afección fisiológica en mamíferos que se caracteriza normalmente por crecimiento y proliferación celular no regulados. Los ejemplos de cáncer incluyen, pero sin limitación, carcinoma, linfoma (p. ej., linfoma de Hodgkin y no Hodgkin), blastoma, sarcoma y leucemia. Los ejemplos más particulares de cánceres incluyen cáncer de células escamosas, cáncer de pulmón microcítico, cáncer de pulmón no microcítico, adenocarcinoma del pulmón, carcinoma escamoso del pulmón, cáncer de peritoneo, cáncer hepatocelular, carcinoma de células renales, cáncer gastrointestinal, cáncer gástrico, cáncer de esófago, cáncer pancreático, glioma, cáncer de cuello del útero, cáncer de ovario, cáncer de hígado, cáncer de vejiga, hepatoma, cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama endocrino resistente), cáncer de colon, cáncer de recto, cáncer de pulmón, carcinoma de endometrio o uterino, carcinoma de las glándulas salivales, cáncer de riñón, cáncer de hígado, cáncer de próstata, cáncer de vulva, cáncer de tiroides, carcinoma hepático, melanoma, leucemia y otros trastornos linfoproliferativos y diversos tipos de cáncer de cabeza y cuello.

La expresión "tumor pulmonar" se refiere a cualquier tumor del pulmón, incluidos, aunque no de forma limitativa, carcinoma pulmonar microcítico y el carcinoma pulmonar no microcítico, incluyendo este último, aunque no de forma limitativa, adenocarcinoma, carcinoma escamoso y carcinoma de células grandes.

El término "neoplasia" o "célula neoplásica" se refiere a un tejido o célula anormal que prolifera más rápidamente que los tejidos o células normales correspondientes y continúa creciendo tras la eliminación del estímulo que inició el crecimiento.

Por "célula tumoral pulmonar" se entiende una célula tumoral pulmonar, ya seain vivooin vitroy abarca células derivadas de tumores pulmonares primarios o tumores pulmonares metastásicos, así como líneas celulares derivadas de dichas células.

Como se utilizan en el presente documento, "tratamiento" (y las variaciones tales como "tratar" o "tratando") se refieren a la intervención clínica en un intento de alterar el transcurso natural del individuo o célula que se esté tratando y puede realizarse para profilaxis o durante el transcurso de la patología clínica. Los efectos deseables del tratamiento incluyen impedir la aparición o recurrencia de la enfermedad, el alivio de los síntomas, la disminución de cualquier consecuencia patológica directa o indirecta de la enfermedad, prevenir la metástasis, disminuir la velocidad de progresión de la enfermedad, mejorar o paliar la patología y remisión o pronóstico mejorado.

Como se utiliza en el presente documento, la expresión "agente anticanceroso" incluye los agentes terapéuticos que eliminan las células cancerosas; ralentizan el crecimiento tumoral y la proliferación de las células cancerosas; y mejoran o previenen uno o más de los síntomas del cáncer. Un agente anticanceroso incluye sales farmacéuticamente aceptables. La expresión "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a sales que retienen la actividad biológica deseada de los compuestos identificados anteriormente, e incluyen sales de adición de ácidos y sales de adición de bases farmacéuticamente aceptables. Las sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables adecuadas pueden prepararse a partir de un ácido inorgánico o de un ácido orgánico. Ejemplos de tales ácidos inorgánicos son ácido clorhídrico, sulfúrico y fosfórico. Los ácidos orgánicos apropiados pueden seleccionarse de clases de ácidos orgánicos alifáticos, ciclo alifáticos, aromáticos, carboxílicos heterocíclicos y sulfónicos, ejemplos de los cuales son fórmico, acético, propiónico, succínico, glicólico, glucónico, láctico, málico, tartárico, cítrico, fumárico, maleico, alquilsulfónico, arilsulfónico. Se puede encontrar información adicional sobre sales farmacéuticamente aceptables en Remington's Pharmaceutical Sciences, 19a edición, Mack Publishing Co., Easton, Pa. 1995. En el caso de agentes que son sólidos, los expertos en la materia entienden que los compuestos de la invención, agentes y sales pueden existir en diferentes formas cristalinas o polimórficas, todas las cuales están destinados a estar dentro del alcance de la presente divulgación y fórmulas especificadas.

En determinadas realizaciones, el agente anticanceroso es un inhibidor de la vía MAPK, incluyendo, aunque no de forma limitativa, cobimetinib, dabrafenib, y/o trametinib.

La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" o "cantidad eficaz" es una cantidad suficiente para obtener los resultados clínicos deseados o beneficiosos. Una cantidad eficaz puede administrarse en una o más administraciones. Una cantidad eficaz suele ser suficiente para paliar, mejorar, estabilizar, revertir, ralentizar o retrasar la progresión de la patología.

La presente divulgación proporciona un "compuesto sustancialmente puro". La expresión "compuesto sustancialmente puro" se utiliza en el presente documento para describir una molécula, tal como un polipéptido (p. ej., un polipéptido que se une a una diana, o un fragmento del mismo) que está sustancialmente exento de otras proteínas, lípidos, hidratos de carbono, ácidos nucleicos y otros materiales biológicos con los que se asocia de forma natural. Por ejemplo, una molécula sustancialmente pura, tal como un polipéptido, puede ser de al menos 60 %, en peso seco, la molécula de interés. La pureza de los polipéptidos puede determinarse mediante métodos estándar que incluyen, p. ej., electroforesis en gel de poliacrilamida (p. ej., SDS-PAGE), cromatografía en columna (p. ej., cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)), y análisis de secuencias de aminoácidos aminoterminales.

"Tratamiento", "para tratar", "tratar" o "terapia", como se utiliza en el presente documento, se refiere a administrar, a un mamífero, agentes capaces de provocar una profilaxis, efecto curativo u otro efecto beneficioso en el individuo. Además, el tratamiento puede adicionalmente atenuar o mejorar una enfermedad o los síntomas de una enfermedad en un sujeto.

En determinadas realizaciones, el conjugado se administra junto con una modalidad adicional de terapia convencional contra el cáncer. En determinadas realizaciones, la terapia adicional contra el cáncer es quimioterapia y/o radioterapia. En determinadas realizaciones, el mamífero es un ser humano.

En determinadas realizaciones del método descrito anteriormente, el tumor reduce su volumen en al menos un 10 %. En determinadas realizaciones, el tumor se reduce en cualquier cantidad entre 1-100%. En determinadas realizaciones, la absorción tumoral de agentes de imagen molecular, tal como desoxiglucosa fluorada-18, fluoro-18 timidina u otro agente de imagen molecular adecuado, se reduce en cualquier cantidad entre 1-100%. En determinadas realizaciones, el agente de imagen es fluoro-18 desoxi-glucosa, fluoro-18 timidina u otro agente de imagen molecular adecuado. En determinadas realizaciones, los síntomas del mamífero (tales como rubor, náuseas, fiebre u otras dolencias asociadas a la enfermedad cancerosa) se alivian.

Composiciones farmacéuticas

La administración de un compuesto como una sal ácida o básica farmacéuticamente aceptable puede ser apropiada. Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables son sales de adición de ácido orgánico formadas con ácidos que forman un anión fisiológicamente aceptable, por ejemplo, tosilato, metanosulfonato, acetato, citrato, malonato, tartrato, succinato, benzoato, ascorbato, a-cetoglutarato y a-glicerofosfato. También pueden formarse sales inorgánicas adecuadas, incluyendo sales clorhidrato, sulfato, nitrato, bicarbonato y carbonato.

Las sales farmacéuticamente aceptables pueden obtenerse usando procedimientos convencionales bien conocidos en la técnica, por ejemplo, haciendo reaccionar un compuesto suficientemente básico tal como una amina con un ácido adecuado que proporciona un anión fisiológicamente aceptable. Se pueden preparar sales de metal alcalino (por ejemplo, sodio, potasio o litio) o de metal alcalinotérreo (por ejemplo, calcio) de ácidos carboxílicos.

Los presentes compuestos pueden administrarse por vía sistémica, p. ej., vía oral, junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable, tal como un diluyente o un portador comestible asimilable, inerte. Pueden incluirse en cápsulas de gelatina dura o blanda, pueden comprimirse en comprimidos o incorporarse directamente a los alimentos de la dieta del paciente. Para la administración terapéutica oral, el compuesto activo puede combinarse con uno o más excipientes y usarse en forma de comprimidos comestibles, comprimidos bucales, trociscos, cápsulas, elixires, suspensiones, jarabes, obleas y similares. Dichas composiciones y preparaciones deberían contener al menos un 0,1 % de compuesto activo. El porcentaje de las composiciones y preparaciones puede, por supuesto, variar y puede estar convenientemente entre aproximadamente el 2 a aproximadamente el 60 % del peso de una forma farmacéutica unitaria determinada. La cantidad de compuesto activo en tales composiciones terapéuticamente útiles es tal que se obtendrá un nivel dosificación eficaz.

Los comprimidos, trocitos, píldoras, cápsulas y similares también pueden contener lo siguiente: se pueden añadir aglutinantes tales como goma de tragacanto, goma arábiga, almidón de maíz o gelatina; excipientes tales como fosfato dicálcico; un agente disgregante tal como almidón de maíz, almidón de patata, ácido algínico y similares; un lubricante, tal como estearato de magnesio; y un agente edulcorante tal como sacarosa, fructosa, lactosa o aspartamo o un agente saborizante tal como menta, aceite de gaulteria o aroma de cereza. Cuando la forma farmacéutica unitaria es una cápsula, esta puede contener, además de materiales del tipo anterior, un portador líquido, tal como un aceite vegetal o un polietilenglicol. Puede haber otros materiales diversos como recubrimientos o para modificar de otro modo la forma física de la forma farmacéutica unitaria sólida. Por ejemplo, los comprimidos, las píldoras o las cápsulas pueden recubrirse con gelatina, cera, goma laca o azúcar y similares. Un jarabe o elixir puede contener el compuesto activo, sacarosa o fructosa como agente edulcorante, metilo y propilparabenos como conservantes, un colorante y un saborizante como sabor a cereza o naranja. Por supuesto, cualquier material que se utilice para preparar cualquier forma farmacéutica unitaria debe ser farmacéuticamente aceptable y sustancialmente no tóxico en las cantidades empleadas. Además, el compuesto activo puede incorporarse en preparaciones y dispositivos de liberación sostenida.

El compuesto activo puede administrarse también por vía intravenosa o intraperitoneal mediante infusión o inyección. Pueden prepararse soluciones del compuesto activo o sus sales en agua, opcionalmente mezcladas con un tensioactivo no tóxico. También se pueden preparar dispersiones en glicerol, polietilenglicoles líquidos, triacetina y mezclas de los mismos y en aceites. En condiciones normales de almacenamiento y uso, estos preparados contienen un conservante para prevenir el crecimiento de microorganismos.

Las formas farmacéuticas adecuadas para inyección o infusión pueden incluir soluciones o dispersiones acuosas estériles o polvos estériles que comprenden el principio activo que está adaptado para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones inyectables o infusibles estériles, opcionalmente encapsuladas en liposomas. En todos los casos, la forma farmacéutica final debe ser estéril, fluida y estable en las condiciones de fabricación y almacenamiento. El portador o vehículo líquido puede ser un disolvente o un medio de dispersión líquido que comprenda, por ejemplo, agua, etanol, un poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicoles líquidos y similares), aceites vegetales, ésteres de glicerilo no tóxicos y mezclas adecuadas de los mismos. La fluidez adecuada puede mantenerse, por ejemplo, mediante la formación de liposomas, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersiones o mediante el uso de tensioactivos. La prevención de la acción de microorganismos puede lograrse mediante diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico, timerosal y similares. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, tampones o cloruro de sodio.

La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede lograrse mediante el uso en las composiciones de agentes retardadores de la absorción, por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina.

Se preparan soluciones inyectables estériles incorporando los compuestos activos en la cantidad requerida en el disolvente apropiado con otros diversos ingredientes enumerados anteriormente, según sea necesario, seguido de esterilización por filtrado. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos preferidos de preparación son el secado al vacío y las técnicas de liofilización, que producen un polvo del principio activo más cualquier principio deseado adicional presente en las soluciones filtradas previamente estériles.

Para la administración tópica, los presentes compuestos pueden aplicarse en forma pura, es decir, cuando son líquidos. Sin embargo, puede ser deseable administrarlos en la piel en forma de composiciones o formulaciones, junto con un portador dermatológicamente aceptable, que puede ser sólido o líquido.

Los vehículos sólidos útiles incluyen sólidos finamente divididos tales como talco, arcilla, celulosa microcristalina, sílice, alúmina y similares. Los portadores líquidos útiles incluyen agua, alcoholes o glicoles o mezclas de aguaalcohol/glicol, en las que los presentes compuestos pueden disolverse o dispersarse a niveles eficaces, opcionalmente con la ayuda de tensioactivos no tóxicos. Se pueden añadir adyuvantes tales como fragancias y agentes antimicrobianos adicionales para optimizar las propiedades para un uso dado. Las composiciones líquidas resultantes pueden aplicarse desde compresas absorbentes, utilizarse para impregnar vendas y otros apósitos, o pulverizarse sobre la zona afectada mediante pulverizadores de tipo bomba o aerosol.

Espesantes tales como polímeros sintéticos, ácidos grasos, sales y ésteres de ácidos grasos, alcoholes grasos, celulosas modificadas o los materiales minerales modificados también pueden emplearse con soportes líquidos para formar pastas untables, geles, pomadas, jabones y similares, para su aplicación directa sobre la piel del usuario.

Se conocen ejemplos de composiciones dermatológicas útiles que pueden utilizarse para administrar los compuestos de la presente divulgación a la piel; por ejemplo, véase Jacquetet al.(patente de EE. UU. n.° 4.608.392), Geria (patente de EE. UU. n.° 4.992.478), Smithet al.(patente de EE. UU. n.° 4.559.157) y Wortzman (patente de EE. UU. n.° 4.820.508).

La dosis del agente varía en función de la edad, peso y afección del sujeto. El tratamiento puede iniciarse con pequeñas dosis que contengan dosis inferiores a las óptimas, e ir incrementándose hasta conseguir un efecto deseado, o incluso óptimo según las circunstancias. En general, la dosis es de aproximadamente 450 - 600 mg/kg/día en pacientes que pesan menos de 20 kg, o de 9,9 - 13,0 g/m2/día en pacientes de mayor tamaño. Dosis más altas o más bajas, sin embargo, también se contemplan y están, así, dentro de los límites de esta divulgación. Un médico puede recetar una pequeña dosis y observar el efecto sobre los síntomas del sujeto. Posteriormente, puede aumentar la dosis si es conveniente. En general, se administra a una concentración que proporciona resultados eficaces sin causar efectos secundarios perjudiciales o nocivos, y puede administrarse como una dosis unitaria única o, si se desea, en subunidades convenientes administradas en momentos adecuados.

Una composición farmacéutica de la divulgación se formula para que sea compatible con su vía de administración prevista. Por ejemplo, el agente terapéutico puede introducirse directamente en el cáncer de interés mediante inyección directa. Adicionalmente, los ejemplos de vías de administración incluyen la administración oral, parenteral, p. ej., intravenosa, infusión lenta, intradérmica, subcutánea, oral (p. ej., ingestión o inhalación), transdérmica (tópica), transmucosa y rectal. Dichas composiciones comprenden típicamente el agente y un portador farmacéuticamente aceptable. Como se utiliza en el presente documento, "portador farmacéuticamente aceptable" pretende incluir todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y retardantes de la absorción y similares, compatibles con la administración farmacéutica y una forma dietética basada en alimentos. El uso de tales medios y agentes para sustancias farmacéuticamente activas es bien conocido en la técnica y los alimentos como vehículo de administración son bien conocidos en la técnica.

Las soluciones o suspensiones pueden incluir los siguientes componentes: un diluyente estéril tal como agua para inyección, solución salina (p. ej., solución salina tamponada con fosfato (PBS)), aceites no volátiles, un poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido y similares), glicerina u otros disolventes sintéticos; agentes antibacterianos y antifúngicos tales como los parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, timerosal y similares; antioxidantes tales como ácido ascórbico o bisulfito sódico; agentes quelantes tales como ácido etilendiaminotetraacético; tampones, tales como acetatos, citratos o fosfatos y agentes para el ajuste de la tonicidad tales como cloruro sódico o dextrosa. La fluidez adecuada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de las dispersiones, y mediante el uso de tensioactivos. En muchos casos, es preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes tales como manitol o sorbitol, y cloruro sódico en la composición. La administración prolongada de las composiciones inyectables se puede efectuar incluyendo un agente que retrase la absorción. Tales agentes incluyen, por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina. La preparación parenteral puede encerrarse en ampollas, jeringuillas desechables o viales multidosis hechos de vidrio o plástico.

Puede ser ventajoso formular las composiciones en una forma farmacéutica unitaria para facilitar la administración y la uniformidad de la dosis. La forma farmacéutica unitaria como se utiliza en el presente documento se refiere a unidades físicamente individuales adecuadas como dosis unitarias para un individuo que ha de tratarse; conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de compuesto activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado junto con el portador farmacéutico necesario. Las formas farmacéuticas unitarias de la divulgación dependen de la cantidad de un compuesto necesaria para producir el efecto o efectos deseados. La cantidad necesaria de un compuesto puede formularse en una sola dosis, o puede formularse en múltiples unidades de dosificación. El tratamiento puede requerir una dosis única o dosis repetidas.

"Administración sistémica", como se utiliza en el presente documento, se refiere a la administración de un agente o composición que conduce a una amplia biodistribución de un agente activo dentro de un organismo. Algunas técnicas de administración pueden conducir a la administración sistémica de determinados agentes, pero no otros. La administración sistémica significa que una cantidad útil, preferentemente terapéutica, de un agente se expone a la mayoría de las partes del cuerpo. Para obtener una amplia biodistribución generalmente se requiere un tiempo de vida en sangre tal que el agente no se degrade o elimine rápidamente [tal como por órganos de primer paso (hígado, pulmón, etc.) o por unión celular inespecífica rápida], antes de alcanzar un lugar de enfermedad distal al lugar de administración. La administración sistémica de partículas lipídicas puede realizarse por cualquier medio conocido en la técnica, incluye, por ejemplo, intravenosa, subcutánea e intraperitoneal. En una realización preferida, la administración sistémica de partículas lipídicas se realiza por vía intravenosa.

"Administración local", como se utiliza en el presente documento, se refiere a la administración de un agente activo directamente a un lugar diana dentro de un organismo. Por ejemplo, un agente puede administrarse localmente mediante inyección directa en el lugar de la enfermedad, otra zona diana, o un órgano diana tal como la piel.

El término "mamífero" se refiere a cualquier especie de mamífero tal como ser humano, ratón, rata, perro, gato, hámster, cobaya, conejo, ganado y similares.

Los términos "tratar" y "tratamiento" se refieren al tratamiento terapéutico y a las medidas profilácticas o preventivas, en donde el objetivo es prevenir o disminuir un cambio o trastorno fisiológico no deseado, tal como el desarrollo o la diseminación del cáncer. Para los fines de esta divulgación, los resultados clínicos beneficiosos o deseados incluyen, pero sin limitación, el alivio de los síntomas, la disminución del alcance de la enfermedad, la estabilización del cuadro clínico (es decir, no empeoramiento), el retraso o la ralentización de la progresión de la enfermedad, la mejora o el alivio del cuadro clínico y la remisión (ya sea parcial o total), ya sea detectable o indetectable. "Tratamiento" también puede significar prolongar la supervivencia en comparación con la supervivencia esperada si no se recibe tratamiento. Aquellos que necesitan tratamiento incluyen aquellos que ya padecen la afección o trastorno, así como aquellos propensos a tener la afección o trastorno o aquellos en los que se quiera prevenir la afección o trastorno.

Como se utiliza en el presente documento, el término "aproximadamente" significa ±10 %.

En determinadas realizaciones, la presente divulgación proporciona un método para realizar una reacción quelante que comprende poner en contacto un metal divalente con un compuesto de Fórmula (I):

o una sal del mismo en donde:

cada uno de R<1>-R<4>se selecciona independientemente del grupo que consiste en CH<2>COOR<a>y CH<2>C(=O)NHR<a>;

cada uno de R<5>-R<12>se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada R<a>se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en ausente y un grupo de enlace; y cada X es un agente biológico; y en donde el contacto se produce a una temperatura inferior a aproximadamente 40 °C para formar una composición quelada.

En determinadas realizaciones, dos de R<1>-R<4>son COOR<a>y dos de R<1>-R<4>son C(=O)NHR<a>.

En determinadas realizaciones, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (la):

En determinadas realizaciones, el metal divalente es un radionúclido.

En determinadas realizaciones, el radionúclido es Pb-203 o Pb-212.

En determinadas realizaciones, L es polietilenglicol, una cadena alifática, o una cadena polipeptídica.

En determinadas realizaciones, L es un grupo de enlace hidrófobo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática.

En determinadas realizaciones, L es un grupo de enlace hidrófilo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática.

En determinadas realizaciones, L es una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas.

En determinadas realizaciones, L es una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas que incluye inserciones de piperidina.

En determinadas realizaciones, L es PEG<n>, en donde n es 1-10.

En determinadas realizaciones, n es 2-4.

En determinadas realizaciones, n es 4.

En determinadas realizaciones, L es un grupo de enlace alifático (ALP) de 2 o 4 carbonos.

En determinadas realizaciones, L es un grupo enlazador a base de piperidina (PIP) con características mixtas. En determinadas realizaciones, el agente biológico es un ligando.

En determinadas realizaciones, el ligando es un péptido, un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, o un agente de molécula pequeña.

En determinadas realizaciones, la temperatura está entre 0 °C y 40 °C.

En determinadas realizaciones, la temperatura está entre aproximadamente 0-37 °C.

En determinadas realizaciones, la temperatura está entre aproximadamente 0-10 °C.

En determinadas realizaciones, la temperatura es de aproximadamente 4 °C.

En determinadas realizaciones, la reacción de quelación procede hasta un nivel superior al 95 % en menos de dos horas.

En determinadas realizaciones, la reacción de quelación procede hasta un nivel superior al 95 % en menos de 30 minutos.

En determinadas realizaciones, la presente divulgación proporciona un método para diagnosticar una enfermedad en un paciente que lo necesita, que comprende:

(a) realizar una reacción de quelación que comprende poner en contacto un metal divalente con un compuesto de fórmula (I):

o una sal del mismo en donde:

cada uno de R<1>-R<4>se selecciona independientemente del grupo que consiste en CH<2>COOR<3>y CH<2>C(=O)NHR<a>;

cada uno de R5-R12 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X; cada Ra se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en ausente y un grupo de enlace; y cada X es un agente biológico; y

en donde el contacto se produce a una temperatura inferior a aproximadamente 40 °C para formar una composición quelada; y

(b) administrar la composición quelada al paciente en las dos horas siguientes a la reacción de quelación.

En determinadas realizaciones, la presente divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad en un paciente que lo necesita, que comprende administrar una composición quelada al paciente en las dos horas siguientes a la quelación de la composición quelada, en donde la composición quelada comprende un compuesto de Fórmula I quelado con un metal divalente, en donde el compuesto de Fórmula I comprende:

o una sal del mismo en donde:

cada uno de R<1>-R<4>se selecciona independientemente del grupo que consiste en CH<2>COOR<1>y CH<2>C(=O)NHR<a>;

cada uno de R<5>-R<12>se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada R<a>se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X;

cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en ausente y un grupo de enlace; y cada X es un agente biológico.

En determinadas realizaciones, la enfermedad es una enfermedad hiperproliferativa.

En determinadas realizaciones, la enfermedad es cáncer.

En determinadas realizaciones, dos de R1-R4 son COORa y dos de R1-R4 son C(=O)NHRa.

En determinadas realizaciones, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (la):

En determinadas realizaciones, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (Ib):

En determinadas realizaciones, el metal divalente es plomo (Pb) o cobre (Cu).

En determinadas realizaciones, el metal divalente es un radionúclido.

En determinadas realizaciones, el radionúclido es Pb-203 o Pb-212.

En determinadas realizaciones, L es polietilenglicol, una cadena alifática, o una cadena polipeptídica.

En determinadas realizaciones, L es un grupo de enlace hidrófobo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática.

En determinadas realizaciones, L es un grupo de enlace hidrófilo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática.

En determinadas realizaciones, L es una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas.

En determinadas realizaciones, L es una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas que incluye inserciones de piperidina.

En determinadas realizaciones, L es PEG<n>, en donde n es 1-10.

En determinadas realizaciones, n es 2-4.

En determinadas realizaciones, n es 4.

En determinadas realizaciones, L es un grupo de enlace alifático (ALP) de 2 o 4 carbonos.

En determinadas realizaciones, L es un grupo enlazador a base de piperidina (PIP) con características mixtas. En determinadas realizaciones, el agente biológico es un ligando.

En determinadas realizaciones, el ligando es un péptido, un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, o un agente de molécula pequeña.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra por vía oral o parenteral.

En determinadas realizaciones, el método comprende además administrar una composición anticancerosa.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra en una dosis única.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra en dosis múltiples.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra secuencialmente diariamente durante varios días.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra una vez por semana durante 1 mes.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra una vez por semana durante un máximo de 6 meses.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra en una dosis de hasta 1 mCi para la obtención de imágenes médicas.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra en una dosis de hasta 10 mCi para la obtención de imágenes médicas.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra en una dosis de hasta 50 mCi para la obtención de imágenes médicas.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra en una dosis de hasta 0,1 mCi para el tratamiento médico de los tumores cancerosos.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra en una dosis de hasta 1 mCi para el tratamiento médico de los tumores cancerosos.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra en una dosis de hasta 10 mCi para el tratamiento médico de los tumores cancerosos.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra en una dosis de hasta 100 mCi para el tratamiento médico de los tumores cancerosos.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra durante más de un mes.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra durante más de un año.

En determinadas realizaciones, el compuesto de Fórmula I se administra a una dosis de al menos 1500 mg/día. La divulgación se ilustrará ahora por los siguientes Ejemplos no limitantes.

EJEMPLO 1

Se necesita un nuevo quelante metálico macrocíclico de baja temperatura (LTMMC) para radiofármacos. Las anteriores variantes disponibles dan lugar a una carga formal neta y requerían altas temperaturas para el marcaje con metales tales como Pb-203 o Pb-212.Figura 1.Igualmente, las reacciones con las dos variantes conocidas anteriormente (DOTA, que tiene una carga de -2, y DOTAM, que tiene una carga 2) también tardan mucho en quelarse (p. ej., 45 min a 80 °C). Lo mismo ocurre con un DOTA tricarboxílico, que tiene una carga de -1. Tanto el DOTA como el DOTAM están disponibles en el mercado. Se sintetizó un nuevo quelante metálico macrocíclico de baja temperatura (LTMMC, también denominado VMT01), que tiene una carga neutra. Fue posible quelar tanto plomo (Pb) como cobre (Cu) con este compuesto. En laFigura 2.se proporciona un ejemplo de síntesis de un quelante de primera generación con grupo funcional NCS. Se proporcionan estructuras LTMMC ilustrativas en lasFiguras 3A, 3B(VMT_01 y VMT-02).

Se comparó la eficacia del radiomarcado con Pb-203 y Pb-212 para estas dos especies. Se observó que el LTMMC conjugaba los marcajes de VMT01 incluso a 4 °C (96% en 15 minutos), lo que fue muy sorprendente porque normalmente, para este tipo de marcaje se requieren altas temperaturas utilizando, por ejemplo, el VMT02 conjugado con DOTA.Figura 4.

Se realizó un estudio para comparar un LTMMC (VMT-01) con DOTA.Figura 5.Se observó que el LTMMC se marcaba más rápidamente y a baja temperatura (>98 % de incorporación en 15 min). Igualmente, la composición era estable durante días en suero (37 °C).Figura 6.No inhibe la afinidad de los péptidos y se funcionalizó fácilmente para péptidos, mAb, aptámeros, etc. Por otra parte, se demostró la fabricación a escala comercial.

El compuesto se testó a 4 °C.Se concentró el 203Pb (1 mCi) utilizando los métodos descritos por Liet. al.(2017) en 400 |jl de tampón NaOAc de pH=6 y se añadieron a 57 j l de tampón NaOAc de pH=4 que contenía 20 |jg de péptido VMT-01 hasta alcanzar un pH final=5,4. El vial de reacción se almacenó a 4 °C. Se aplicaron imágenes de cromatografía instantánea en capa fina (iTLC) para confirmar la eficacia del radiomarcaje. Se depositaron 2 j l de péptido VMT-01 marcado con 203Pb y de control positivo sin 203Pb2+ en la tira iTLC (10 cm x 2 cm) que se secó a 90 °C durante al menos 2 h antes de su uso. Las tiras de muestra se revelaron en la fase móvil de NaOAc 0,2 M con EDTA 20 mM. Las tiras se analizaron con un generador de imágenes por fósforo Typhoon FLA7000 (GE Healthcare). La pureza radioquímica se calculó integrando los recuentos de radiactividad en el frente del disolvente (Rf=l) y comparándolos con los recuentos integrados en el origen (Rf=0) utilizando ImageQuant Analysis Toolbox TL 7.0 (GE Healthcare). Los resultados del estudio a 4 °C se proporcionan en laFigura 7.

El compuesto se testó a temperatura ambiente.Se concentró 203Pb (0,5 mCi) utilizando los métodos descritos por Liet. al.(2017) en 500 pl de tampón NaOAc de pH=6 y se añadieron a 72,5 pl de tampón NaOAc de pH=4 que contenía 10 pg de péptido VMT-01 hasta alcanzar un pH final=5,4. El vial de reacción se dejó sobre el banco de trabajo y se guardó protegido de la luz. Se aplicaron imágenes de cromatografía instantánea en capa fina (iTLC) para confirmar la eficacia del radiomarcaje. Se depositaron 2 pl de péptido VMT-01 marcado con 203Pb y de control positivo sin 203Pb2+ en la tira iTLC (10 cm x 2 cm) que se secó a 90 °C durante al menos 2 h antes de su uso. Las tiras de muestra se revelaron en la fase móvil de NaOAc 0,2 M con EDTA 20 mM. Las tiras se analizaron con un generador de imágenes por fósforo Typhoon FLA7000 (GE Healthcare). La pureza radioquímica se calculó integrando los recuentos de radiactividad en el frente del disolvente (Rf=1) y comparándolos con los recuentos integrados en el origen (Rf=0) utilizando ImageQuant Analysis Toolbox TL 7.0 (GE Healthcare). Los resultados del estudio a temperatura ambiente se proporcionan en laFigura 8.

El compuesto se testó a 40 °C.Se concentró el 203Pb (0,5 mCi) utilizando los métodos descritos por Liet. al.(2017) en 500 pl de tampón NaOAc de pH=6 y se añadieron a 72,5 pl de tampón NaOAc de pH=4 que contenía 10 pg de péptido VMT-01 hasta alcanzar un pH final=5,4. El vial de reacción se calentó a 40 °C utilizando un ThermoMixer. Se aplicaron imágenes de cromatografía instantánea en capa fina (iTLC) para confirmar la eficacia del radiomarcaje. Se depositaron 2 pl de péptido VMT-01 marcado con 203Pb y de control positivo sin 203Pb2+ en la tira iTLC (10 cm x 2 cm) que se secó a 90 °C durante al menos 2 h antes de su uso. Las tiras de muestra se revelaron en la fase móvil de NaOAc 0,2 M con EDTA 20 mM. Las tiras se analizaron con un generador de imágenes por fósforo Typhoon FLA7000 (GE Healthcare). La pureza radioquímica se calculó integrando los recuentos de radiactividad en el frente del disolvente (Rf=l) y comparándolos con los recuentos integrados en el origen (Rf=0) utilizando ImageQuant Analysis Toolbox TL 7.0(GeHealthcare). Los resultados del estudio a temperatura ambiente se proporcionan en laFigura 9.

El compuesto se testó a 80 °C.Se concentró el 203Pb (0,5 mCi) utilizando los métodos descritos por Liet. al.(2017) en 500 pl de tampón NaOAc de pH=6 y se añadieron a 72,5 pl de tampón NaOAc de pH=4 que contenía 10 pg de péptido VMT-01 hasta alcanzar un pH final=5,4. El vial de reacción se calentó a 80 °C utilizando un ThermoMixer. Se aplicaron imágenes de cromatografía instantánea en capa fina (iTLC) para confirmar la eficacia del radiomarcaje. Se depositaron 2 pl de péptido VMT-01 marcado con 203Pb y de control positivo sin 203Pb2+ en la tira iTLC (10 cm x 2 cm) que se secó a 90 °C durante al menos 2 h antes de su uso. Las tiras de muestra se revelaron en la fase móvil de NaOAc 0,2 M con EDTA 20 mM. Las tiras se analizaron con un generador de imágenes por fósforo Typhoon FLA7000 (GE Healthcare). La pureza radioquímica se calculó integrando los recuentos de radiactividad en el frente del disolvente (Rf=1) y comparándolos con los recuentos integrados en el origen (Rf=0) utilizando ImageQuant Analysis Toolbox TL 7.0 (GE Healthcare). Los resultados del estudio a temperatura ambiente se proporcionan en laFigura 10.

Se proporcionan estructuras bifuncionales ilustrativas en lasFiguras 11-15.

También se observó que el quelante podía quelarse a temperatura ambiente con radionúclidos de cobre, como se muestra en laFigura 20.

Aunque la memoria descriptiva y los ejemplos anteriores divulgan totalmente y permiten la presente invención, estos no tienen por objeto limitar el alcance de la invención, que se define en las reivindicaciones adjuntas al presente documento.

El uso de los términos "un" y "uno/una" y "el/la" y referentes similares en el contexto de la descripción de la invención debe interpretarse de modo que cubra tanto el singular como el plural, a menos que se indique lo contrario en el presente documento o el contexto lo contradiga claramente. Las expresiones "que comprende/n", "que tiene/n", "que incluye/n", y "que contiene/n" se han de interpretar como expresiones abiertas (es decir, que significan "que incluye/n, pero sin limitación"), salvo que se indique lo contrario. En el presente documento, la enumeración de intervalos de valores pretende únicamente servir como método abreviado para referirse individualmente a cada uno de los distintos valores comprendidos en el intervalo, salvo que se indique lo contrario en el presente documento y cada valor separado se incorpora a la memoria descriptiva como si se enumerara de manera individual en el presente documento. Todos los métodos descritos en el presente documento pueden realizarse en cualquier orden adecuado a menos que se indique lo contrario en el presente documento o que el contexto lo contradiga claramente. El uso de todos y cada uno de los ejemplos, o de expresiones que denoten ejemplos (por ejemplo, "tal como") proporcionados en el presente documento, pretende meramente ilustrar mejor la invención y no plantea una limitación al alcance de la invención, salvo que se indique lo contrario. Ninguna expresión de la memoria descriptiva debe interpretarse en el sentido de que indica algún elemento no reivindicado como esencial para la práctica de la invención.

En el presente documento se describen realizaciones de esta invención, incluido el mejor modo conocido por los inventores para llevar a cabo la invención. Las variaciones de esas realizaciones pueden resultar evidentes para los expertos en la materia tras la lectura de la descripción anterior.

Claims (11)

1. REIVINDICACIONES 1. Un método para llevar a cabo una reacción de quelación que comprende contactar un metal divalente con un
2. cada uno de R5-R12 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X; cada Ra se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X; cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en polietilenglicol, una cadena alifática, o una cadena polipeptídica, un grupo de enlace hidrófobo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática, un grupo de enlace hidrófilo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática, una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas, PEGn en donde n es 1-10, un grupo de enlace alifático (ALP) de 2 o 4 carbonos, una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas, incluidas inserciones de piperidina, y una cadena de hidrocarburo divalente, ramificada o sin ramificar, saturada o insaturada, que tiene de 2 a 25 átomos de carbono, en donde la cadena está opcionalmente sustituida en el carbono con uno o más cicloalquilo (C3-C6), en donde el cicloalquilo (C3-C6) es un anillo formado por carbonos, saturado o parcialmente insaturado (no aromático) que incluye múltiples sistemas de anillos saturados, condensado formados por carbonos; cada X es un ligando, en donde el ligando es un péptido, un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, un aptámero o un agente de molécula pequeña; en donde el metal divalente es plomo (Pb); y en donde el contacto se produce a una temperatura inferior a 40 °C para formar una composición quelada. 2. El método de la reivindicación 1, en donde el compuesto de fórmula (Ia) es un compuesto de fórmula (Ib):
3. 3. El método de la reivindicación 1, en donde el metal divalente es un radionucleido, en donde el radionúclido es preferentemente Pb-203 o Pb-212.
4. 4. El método de la reivindicación 1, en donde L es una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas que incluyen inserciones de piperidina.
5. 5. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde L es PEGn en donde n es 2-4, preferiblemente 4.
6. 6. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en donde la temperatura está entre 0 °C y 40 °C, preferiblemente entre aproximadamente 0-37 °C, más preferiblemente entre aproximadamente 0-10 °C, lo más preferiblemente sobre 4 °C.
7. 7. Una composición quelada para su uso en el diagnóstico de una enfermedad en un paciente que la necesite, que comprende un compuesto de Fórmula Ia quelado con un metal divalente, en donde el compuesto de Fórmula Ia comprende:

   o una sal del mismo en donde: cada uno de R5-R12 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X; cada Ra se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X; cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en polietilenglicol, una cadena alifática, o una cadena polipeptídica, un grupo de enlace hidrófobo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática, un grupo de enlace hidrófilo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática, una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas, PEGn en donde n es 1-10, un grupo de enlace alifático (ALP) de 2 o 4 carbonos, una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas, incluidas inserciones de piperidina, y una cadena de hidrocarburo divalente, ramificada o sin ramificar, saturada o insaturada, que tiene de 2 a 25 átomos de carbono, en donde la cadena está opcionalmente sustituida en el carbono con uno o más cicloalquilo (C3-C6), en donde el cicloalquilo (C3-C6) es un anillo formado por carbonos, saturado o parcialmente insaturado (no aromático) que incluye múltiples sistemas de anillos saturados, condensados formados por carbonos; y cada X es un ligando seleccionado del grupo que consiste en péptido, un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, un aptámero o un agente de molécula pequeña; en donde el metal divalente es plomo (Pb); y en donde la composición quelada debe administrarse al paciente en las dos horas siguientes a la reacción de quelación.
8. 8. La composición quelada para su uso de la reivindicación 7, en donde la enfermedad es una enfermedad hiperproliferativa, preferiblemente cáncer.
9. 9. Una composición quelada para su uso en el tratamiento de una enfermedad en un paciente que la necesite, en donde la composición quelada comprende un compuesto de Fórmula la quelado con un metal divalente, en donde el compuesto de Fórmula la comprende:

   o una sal del mismo en donde: cada uno de R5-R12 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X; cada Ra se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X; cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en polietilenglicol, una cadena alifática, o una cadena polipeptídica, un grupo de enlace hidrófobo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática, un grupo de enlace hidrófilo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática, una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas, PEGn en donde n es 1-10, un grupo de enlace alifático (ALP) de 2 o 4 carbonos, una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas, incluidas inserciones de piperidina, y una cadena de hidrocarburo divalente, ramificada o sin ramificar, saturada o insaturada, que tiene de 2 a 25 átomos de carbono, en donde la cadena está opcionalmente sustituida en el carbono con uno o más cicloalquilo (C3-C6), en donde el cicloalquilo (C3-C6) es un anillo formado por carbonos, saturado o parcialmente insaturado (no aromático) que incluye múltiples sistemas de anillos saturados, condensados formados por carbonos; cada X es un ligando; en donde el ligando es un péptido, un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, un aptámero o un agente de molécula pequeña; en donde el metal divalente es plomo (Pb); y en donde la composición quelada debe administrarse al paciente en las dos horas siguientes a la quelación de la composición quelada.
10. 10. La composición quelada para su uso de la reivindicación 9, en donde la enfermedad es una enfermedad hiperproliferativa, preferiblemente cáncer.
11. 11. Una composición quelada que comprende un compuesto de Fórmula la quelado con un metal divalente, en donde el compuesto de Fórmula la comprende:

    o una sal del mismo en donde: cada uno de R5-R12 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X; cada Ra se selecciona independientemente del grupo que consiste en H y -L-X; cada L se selecciona independientemente del grupo que consiste en polietilenglicol, una cadena alifática, o una cadena polipeptídica, un grupo de enlace hidrófobo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática, un grupo de enlace hidrófilo que incluye sustituciones de heteroátomos en la cadena alifática, una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas, PEGn en donde n es 1-10, un grupo de enlace alifático (ALP) de 2 o 4 carbonos, una mezcla de entidades hidrófilas e hidrófobas, incluidas inserciones de piperidina, y una cadena de hidrocarburo divalente, ramificada o sin ramificar, saturada o insaturada, que tiene de 2 a 25 átomos de carbono, en donde la cadena está opcionalmente sustituida en el carbono con uno o más cicloalquilo (C3-C6), en donde el cicloalquilo (C3-C6) es un anillo formado por carbonos, saturado o parcialmente insaturado (no aromático) que incluye múltiples sistemas de anillos saturados, condensados formados por carbonos; cada X es un ligando; en donde el ligando es un péptido, un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, un aptámero o un agente de molécula pequeña; y en donde el metal divalente es plomo (Pb).