ES3036708T3

ES3036708T3 - Toothpaste composition for alleviating dentin hypersensitivity

Info

Publication number: ES3036708T3
Application number: ES19799399T
Authority: ES
Inventors: Joo Hwang Park; Ji Hyun Lee
Original assignee: Hysensbio Co Ltd
Current assignee: Hysensbio Co Ltd
Priority date: 2018-05-09
Filing date: 2019-04-17
Publication date: 2025-09-23
Anticipated expiration: 2039-04-17
Also published as: JP2021519811A; MX2020011864A; WO2019216568A1; RU2758490C1; PL3791856T3; EP3791856B1; KR101956579B1; HRP20250975T1; CN112105340B; JP7107600B2; SG11202011070WA; EP3791856C0; EP3791856A1; AU2019265169A1; AU2019265169B2; BR112020022685B1; BR112020022685A2; EP3791856A4; US20210369584A1; CA3099665A1

Abstract

La presente invención se refiere a una composición de pasta de dientes para aliviar la hipersensibilidad dentinaria, que comprende un péptido compuesto por una secuencia de aminoácidos de la siguiente fórmula general 1. Fórmula general 1: KY-R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-R8 En la fórmula general 1, R1 es arginina (R), lisina (K) o glutamina (Q), R2 es arginina (R) o glutamina (Q), R3, R4 y R5 son respectivamente arginina (R) o lisina (K), R6 es asparagina (N) o serina (S), y R7 y R8 son lisina (K) o tirosina (Y). (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Composición de dentífrico para aliviar hipersensibilidad dentinaria

Antecedentes de la invención

1. Campo de la invención

La presente invención se refiere a una composición de dentífrico y, más específicamente, la presente invención se refiere a una composición de dentífrico para prevenir o aliviar la hiperestesia dentinaria mediante inducción de la remineralización fisiológica de los defectos en la dentina que constituye un diente.

2. Descripción de la técnica relacionada

La hiperestesia dentinaria, comúnmente conocida como 'dentina sensible', es un síntoma común experimentado por el 8 % al 57 % de la población adulta. En particular, el caso de la enfermedad periodontal, que es la enfermedad más común en Corea, del 72,5 % al 98 % de los pacientes sufren de 'dentina sensible' (Fuente: National Health Information Portal Medical Information; http://health.cdc.go.kr/health/Main.do).

La hiperestesia dentinaria se puede definir como un dolor causado por la exposición de los túbulos dentinarios que transmiten todos los estímulos externos al nervio pulpar. Esto hace que el nervio pulpar sea más sensible al mismo estímulo. Aunque no hay nervios en la dentina en sí, podemos percibir los cambios porque el estímulo de la temperatura fría se transmite a través de los túbulos dentinarios a los nervios dentro de la pulpa.

En la dentina, que ocupa la mayor parte del diente, hay túbulos dentinarios que se extienden desde la pulpa hasta el esmalte. Estos túbulos están llenos de líquido. El diámetro aumenta hacia la pulpa y tiene una estructura densa. Debido a estas estructuras distintas, los estímulos externos pueden transmitirse rápidamente al nervio pulpar. Si la superficie dentinaria está dañada y aumenta el número de túbulos dentinarios expuestos, puede provocar una reacción más sensible de lo habitual al mismo estímulo.

Actualmente, hay dos formas de hiperestesia dentinaria, dependiendo del principio de acción. Una es interferir con la transmisión de señales del nervio que transmite el dolor y la otra es bloquear los túbulos dentinarios expuestos para aliviar los síntomas.

El fosfato dipotásico (K<2>HPO<4>) se ha utilizado ampliamente en un procedimiento para interferir con la transmisión de señales de los nervios que transmiten dolor. Sin embargo, el fosfato dipotásico tiene un bajo efecto de bloqueo del dolor y debe usarse repetidamente y no es un procedimiento de tratamiento eficaz porque limita el sentido de la masticación.

A continuación, se usan hidrógeno fosfato de calcio (CaHPO<4>), flúor, oxalato, arginina (aminoácido) y carbonato de calcio (CaCO<3>) para bloquear los túbulos dentinarios. En los últimos años, considerando la inconveniencia de recibir tratamiento en la consulta del dentista para la hipersensibilidad dentinaria, se comercializan pastas dentífricas para prevenir o aliviar la sensibilidad dentinaria, incluyendo fosfato de calcio, sílice de tipo dental, cloruro de estroncio, carbonato de calcio o fosfato tricálcico, como ingredientes activos. Sin embargo, estos también son materiales extraños diferentes de la dentina original, por lo que se crearía un espacio en el área límite periférica entre la dentina y los materiales extraños. El nervio quedaría expuesto de nuevo después de que el material extraño se separara del sellado y provocaría una recurrencia de la sensibilidad dentinaria.

El documento KR 101772449 B1 se refiere a un péptido novedoso utilizado para promover la regeneración dentinaria o la pulpa dental y para tratar la hiperestesia dentinaria. El documento US2017189287 se refiere a una composición de limpieza dental que tiene un alto efecto de remineralización en el esmalte dental desmineralizado. El documento CN10645685 se refiere a una composición oral líquida que contiene una emulsión y a un procedimiento para mejorar la capacidad de recuperación por congelación de esta.

Sumario de la invención

Las realizaciones de los presentes conceptos inventivos pueden proporcionar una composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria, que comprende un péptido que incluye una secuencia de aminoácidos de la siguiente fórmula 1:

K-Y-R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-R8 (Fórmula 1)

en donde R1 es arginina(R), lisina(K) o glutamina(Q);

R2 es arginina(R) o glutamina(Q);

R3, R4 y R5 son arginina(R) o lisina(K), respectivamente;

R6 es asparagina(N) o serina(S); y

R7 y R8 son lisina (K) o tirosina (Y), respectivamente,

en donde dicha composición de dentífrico incluye 0,0015-0,0025 partes en peso del péptido, 31,00-33,00 partes en peso de fosfato tricálcico, 0,045-0,055 partes en peso de hidroxiapatita y 20-22 partes en peso de agua purificada,

en donde dicha composición de dentífrico forma una película delgada sobre la superficie de dicha dentina e induce la remineralización en dicha superficie de dicha dentina y túbulo dentinario al unirse con los iones de fosfato-calcio liberados de dicho fosfato tricálcico.

Las realizaciones de los presentes conceptos inventivos también pueden proporcionar una composición para el cuidado bucal que comprende un péptido que incluye una secuencia de aminoácidos cualquiera de SEQ ID NOS: 1 a 96.

Según realizaciones de los presentes conceptos inventivos, la composición de dentífrico puede incluir agente humectante en 33-37 partes en peso, modificador de viscosidad en 4,4-5,4 partes en peso, agente tensioactivo en 1,1 1,3 partes en peso, agente aromatizante en 0,8-0,9 partes en peso y agente diluyente en 0,04-0,06 partes en peso basado en 100 partes en peso de la composición.

Según realizaciones de los presentes conceptos inventivos, la composición de dentífrico puede incluir de 0,15-0,25 partes en peso de ácido aminocaproico y de 1,9-2,1 partes en peso de alantoína basado en 100 partes en peso de la composición.

Según realizaciones de los presentes conceptos inventivos, el agente humectante puede ser solución de D-sorbitol o solución de PCA de sodio o glicerina concentrada, el modificador de viscosidad puede ser ácido silícico hidratado, goma xantana o CMC (sal sódica de carboximetilcelulosa), el agente tensioactivo puede ser cocoilmetiltaurato de sodio, el agente aromatizante es extracto de té verde, extracto de camomila, extracto de romero, tintura de mirra, tintura de ratania, tintura de manzanilla, aceite de masilla 40 HF-60662, extracto de propóleo, extracto de semilla de pomelo, menta verde B71228 o aceite de menta 81689 y el agente diluyente puede ser hidroxiapatita.

Según realizaciones de los presentes conceptos inventivos, el agente humectante puede incluir de 80-83 % en peso de la solución de D-sorbitol, de 7-8 % en peso de la solución de PCA de sodio y de 10-12 % en peso de la glicerina concentrada.

Según realizaciones de los presentes conceptos inventivos, el modificador de viscosidad puede incluir de 79-85 % en peso del ácido silícico hidratado, de 4-8 % en peso de goma xantana y de 11-13 % en peso de la CMC.

Efecto de la invención

Los presentes conceptos inventivos pueden proporcionar una composición de dentífrico que previene o alivia la hiperestesia dentinaria sellando los defectos expuestos del túbulo dentinario a través de la remineralización fisiológica dentinaria.

Otros aspectos, ventajas y características destacadas de las realizaciones serán evidentes para los expertos en la materia a partir de la siguiente descripción detallada, que, tomada junto con los dibujos que acompañan, divulga realizaciones a modo de ejemplo de la divulgación.

Breve descripción de los dibujos

La FIG. 1A es un gráfico que muestra los resultados de comparar el efecto de los respectivos grupos del péptido incluido en la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención en la expresión de DSPP, que es un gen marcador de diferenciación de odontoblastos.

La FIG. 1B es un gráfico que muestra los resultados de comparar los niveles de expresión del gen marcador de diferenciación de odontoblastos Dspp en células MDPC-23 tratadas con los péptidos incluidos en la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención. La FIG. 1C es un gráfico que muestra los resultados de comparar los niveles de expresión de los genes marcadores de diferenciación de odontoblastos, Dspp, Dmp1 y nestina en células MDPC-23 tratadas con péptidos del grupo 11 y grupo 12 incluidos en la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención.

La FIG. 1D es un gráfico que muestra los resultados de la evaluación de la citotoxicidad de los péptidos incluidos en la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención.

La FIG. 2 es un resultado de medir el peso molecular a través del análisis MALDI-TOF para confirmar la estabilidad del péptido contenido en la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención. En la figura 2, A muestra el peso molecular del propio péptido contenido en la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención. En la figura 2, B muestra el peso molecular del péptido contenido en el estado de la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención.

La FIG. 3 muestra la permeabilidad de la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención. Se mezcló un reactivo de tinción de fluorescencia (rodamina B) y se trató durante 1 minuto en el diente expuesto a los túbulos dentinarios y luego se observó con un microscopio de fluorescencia.

La FIG. 4 muestra los resultados de comparar la capacidad de sellado del túbulo dentinario con la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con la realización de la presente invención (ejemplo 3), ejemplo de prueba comparativa 3-1 y ejemplo de prueba comparativa 3-2.

A-D muestran los túbulos dentinarios tratados únicamente con agua purificada (ejemplo de prueba comparativa 3 1), E-H muestran los túbulos dentinarios cepillados usando una composición de dentífrico sin el péptido en comparación con la realización de la presente invención (ejemplo de prueba comparativa 3-2) e I-L muestran los túbulos dentinarios cepillados usando una composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con la realización de la presente invención (barra de escala: A, E, I, 100 pm; B, F, J, 20 pm; C, G, K, 20 pm; D, H, L, 10 pm). En cada caso, las porciones de dentina con túbulos dentinarios expuestos se lavaron 3 veces con agua destilada después de cepillar una vez al día durante 1 minuto y luego se sumergieron en saliva artificial. Después de repetir este proceso durante 2 semanas, la capacidad de sellar los túbulos dentinarios se observó con un microscopio electrónico de barrido.

Descripción detallada de las realizaciones preferidas

A continuación, se hará referencia en detalle a realizaciones, cuyos ejemplos se ilustran en los dibujos que acompañan, en donde los números de referencia similares se refieren a elementos similares en todo el documento. En este sentido, las presentes realizaciones pueden tener diferentes formas y no deben interpretarse como limitadas a las descripciones expuestas en el presente documento. A menos que se defina de otra manera, todos los términos que incluyen términos técnicos y científicos usados en el presente documento tienen el mismo significado que entendido comúnmente por un experto en la materia a la que pertenece esta divulgación. Se entenderá además que los términos, como los definidos en los diccionarios de uso común, deben interpretarse con un significado que sea consistente con su significado en el contexto de la técnica relevante y no se interpretarán en un sentido idealizado o demasiado formal a menos que así se defina expresamente en el presente documento. Además, los términos que se describirán más adelante se definen teniendo en cuenta las contribuciones en las presentes divulgaciones, que pueden variar de acuerdo con la intención del usuario o la práctica.

La divulgación será descrita ahora más completamente en lo sucesivo con referencia a los dibujos que acompañan, en los que se muestran realizaciones ilustrativas de la divulgación. Esta divulgación puede, sin embargo, incorporarse de muchas formas diferentes y no debe interpretarse como limitada a las realizaciones que se muestran en el presente documento; más bien, estas realizaciones se proporcionan para que esta divulgación sea exhaustiva y completa y transmita completamente el alcance de la divulgación a los expertos en la materia. Sin embargo, como se presenta como un ejemplo, la presente invención no se limita a éstas y la presente invención se define únicamente por el alcance de las reivindicaciones que se describirán más adelante.

Se entenderá que los términos "comprende" y/o "que comprende", cuando se usan en la presente memoria descriptiva, especifican la presencia de los componentes indicados, esto significa que puede contener más componentes, en lugar de excluir otros componentes, a menos que haya un artículo particularmente contrario.

En lo sucesivo en el presente documento, se describen con más detalle las realizaciones de la presente invención.

Un odontoblasto puede referirse a una célula que sintetiza y secreta proteínas y polisacáridos que componen la matriz dentinaria. Es una célula columnar que está en contacto con la predentina (dentina no calcificada) y forma una capa celular en la periferia de la pulpa dental. Es una célula diferenciada (que se convierte en una célula derivada del ectodermo mesenquimal) implicada en la calcificación dentinaria. En la etapa de desarrollo, un odontoblasto mira hacia el esmalte entre las células de la papila dental, involucradas en la calcificación dentinaria.

Un péptido, incluido en la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención (en lo sucesivo, 'péptido promotor de la diferenciación de odontoblastos'), no presenta citotoxicidad, pero es posible aumentar el nivel de expresión de los genes marcadores de diferenciación de odontoblastos DSPP, Dmp1 y nestina. Cuando se trasplantaen vivocon células de tejido pulpar, las células de tejido pulpar pueden formar un tejido de dentina/similar a dentina.

El péptido promotor de diferenciación de odontoblastos incluye péptidos mutantes que tienen una secuencia diferente de la secuencia de aminoácidos que constituye la secuencia de aminoácidos y al menos un residuo de aminoácido, siempre que pueda promover la regeneración dentinaria o tratar la hiperestesia dentinaria.

Los intercambios de aminoácidos en proteínas y polipéptidos, que generalmente no alteran la actividad molecular, se conocen en la técnica. Los intercambios que ocurren más comúnmente son residuos de aminoácidos Ala/Ser, Val/Ile, Asp/Glu, Thr/Ser, Ala/Gly, Ala/Thr, Ser/Asn, Ala/Val, Ser/Gly, Thy/Phe, Ala/Pro, Lys/Arg, Asp/Asn, Leu/Ile, Leu/Val, Ala/Glu, Asp/Gly, en ambas direcciones. El péptido puede incluir péptidos que tienen una estabilidad estructural mejorada frente al calor, pH, etc., o capacidad mejorada para promover la regeneración dentinaria o la pulpa dental debido a la alteración o modificación de la secuencia de aminoácidos.

Por ejemplo, aunque la glutamina, que es un aminoácido ácido en la posición 3 del péptido de la SEC ID NO: 1 de la presente invención, se sustituye por un aminoácido básico, lisina o arginina, los efectos del péptido de la presente invención pueden obtenerse tal cual; aunque la arginina, que es un aminoácido básico en la posición 4 o 5 del péptido de la SEC ID NO: 1, se sustituye por un aminoácido ácido glutamina o un aminoácido básico lisina, los efectos del péptido de la presente invención pueden obtenerse tal cual; aunque la lisina, que es un aminoácido básico en la posición 6, 7 o 9 del péptido de la SEC ID NO: 1, se sustituye por un aminoácido básico arginina o un aminoácido aromático tirosina, los efectos del péptido de la presente invención pueden obtenerse tal cual; aunque la asparagina, que es un aminoácido ácido en la posición 8 del péptido de la SEC ID NO: 1, se sustituye por un aminoácido neutro serina, los efectos del péptido de la presente invención pueden obtenerse tal cual; y aunque la tirosina, que es un aminoácido aromático en la posición 10 del péptido de la SEC ID NO: 1, está sustituida por un aminoácido básico lisina, los efectos del péptido de la presente invención pueden obtenerse tal cual.

Como tal, aunque los aminoácidos ácidos, los aminoácidos básicos o los aminoácidos aromáticos que constituyen el péptido de la presente invención se sustituyen con aminoácidos que tienen las mismas propiedades o se sustituyen con diferentes aminoácidos ácidos, aminoácidos básicos, aminoácidos neutros o aminoácidos aromáticos, respectivamente, los efectos del péptido de la presente invención pueden obtenerse tal cual. Por lo tanto, es evidente que una variante peptídica que tiene una secuencia que incluye uno o más residuos de aminoácidos diferentes de los de la secuencia de aminoácidos que constituye el péptido de la presente invención también se incluye en el alcance del péptido de la presente invención.

Además, aunque se añaden aminoácidos arbitrarios en el extremo N-terminal o C-terminal del péptido de la prevención, los efectos del péptido de la presente invención pueden obtenerse tal cual. Por lo tanto, un péptido preparado añadiendo aminoácidos arbitrarios en el extremo N-terminal o C-terminal del péptido de la presente invención también se incluye en el alcance del péptido de la presente invención. Por ejemplo, se puede ejemplificar un péptido preparado añadiendo de 1 a 300 aminoácidos en el extremo N-terminal o C-terminal del péptido de la presente invención, como otro ejemplo, se puede ejemplificar un péptido preparado añadiendo de 1 a 100 aminoácidos en el extremo N-terminal o C-terminal del péptido de la presente invención y a modo de otro ejemplo más, se puede ejemplificar un péptido preparado añadiendo de 1 a 24 aminoácidos en el extremo N-terminal o C-terminal del péptido de la presente invención.

El ARNm del gen DSPP en células MDPC-23 tratadas con el péptido promotor de diferenciación de odontoblastos, en comparación con el nivel de ARNm del gen DSPP en células MDPC-23 (control) no tratadas con el péptido promotor de diferenciación de odontoblastos, fue 1,3 veces o más (tablas 13 a 24).

Como se ha informado hasta ahora, se sabe que a medida que aumenta el nivel de ARNm de DSPP, se promueve la diferenciación de odontoblastos y la regeneración de dentina y, por lo tanto, se puede observar que 128 tipos de péptidos aumentan el nivel de ARNm del gen Dspp, que a su vez puede exhibir el efecto de promover la diferenciación de odontoblastos y la regeneración dentinaria (Taduru Sreenath et al., THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, vol. 278, n.° 27, edición de 4 de julio, págs. 24874-24880, 2003; William T. Butler et al., Connective Tissue Research, 44 (Suplemento 1): 171-178, 2003).

El péptido incluido en la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria puede usarse en una forma única del péptido o una forma polipeptídica de 2 o más repeticiones del péptido y el péptido también puede usarse en una forma compleja de un fármaco que tiene un efecto terapéutico sobre enfermedades dentinarias o de la pulpa dental unidas en el extremo N-terminal o C-terminal del péptido.

Ejemplo 1:

Síntesis de péptidos para promover diferenciación de odontoblastos

Diferenciación

Los presentes inventores sintetizaron un péptido (SEQ ID NO: 1) que muestra el efecto de promover la regeneración dentinaria o tejidos de pulpa dental mediante un procedimiento de 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc) y sintetizaron péptidos de respectivos grupos (tablas 1 a 12) sustituyendo los aminoácidos del péptido sintetizado.

N-KYQRRKKNKY-C (SEQ ID NO: 1)

En primer lugar, los péptidos del grupo 1 se sintetizaron usando el péptido de SEQ ID NO: 1 o sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina (tabla 1).

T l 11

A continuación, los péptidos del grupo 2 se sintetizaron sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina o sustituyendo un aminoácido en la posición 8 del péptido de SEQ ID<n>O: 1 con serina (tabla 2).

A continuación, los péptidos del grupo 3 se sintetizaron sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina o sustituyendo un aminoácido en la posición 9 del péptido de SEQ ID<n>O: 1 con tirosina (tabla 3).

A continuación, los péptidos del grupo 4 se sintetizaron sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina, sustituyendo un aminoácido en la posición 8 del péptido de SEQ ID NO: 1 con serina, sustituyendo un aminoácido en la posición 9 del péptido de SEQ ID NO: 1 con tirosina o sustituyendo un aminoácido en la posición 10 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina (tabla 4).

T l 41

A continuación, los péptidos del grupo 5 se sintetizaron sustituyendo un aminoácido en la posición 3 del péptido de SEQ ID NO: 1 con arginina, sustituyendo un aminoácido en la posición 4 del péptido de SEQ ID NO: 1 con glutamina o sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina (tabla

A continuación, los péptidos del grupo 6 se sintetizaron sustituyendo un aminoácido en la posición 3 del péptido de SEQ ID NO: 1 con arginina, sustituyendo un aminoácido en la posición 4 del péptido de SEQ ID NO: 1 con glutamina, sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina o sustituyendo un aminoácido en la posición 8 del péptido de SEQ ID NO: 1 con serina (tabla 6).

A continuación, los péptidos del grupo 7 se sintetizaron sustituyendo un aminoácido en la posición 3 del péptido de SEQ ID NO: 1 con arginina, sustituyendo un aminoácido en la posición 4 del péptido de SEQ ID NO: 1 con glutamina, sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina, sustituyendo un aminoácido en la posición 9 del péptido de SEQ ID NO: 1 con tirosina o sustituyendo un aminoácido en la posición 10 del péptido de s Eq ID NO: 1 con lisina (tabla 7).

A continuación, los péptidos del grupo 8 se sintetizaron sustituyendo un aminoácido en la posición 3 del péptido de SEQ ID NO: 1 con arginina, sustituyendo un aminoácido en la posición 4 del péptido de SEQ ID NO: 1 con glutamina, sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina, sustituyendo un aminoácido en la posición 8 del péptido de SEQ ID NO: 1 con serina, sustituyendo un aminoácido en la posición 9 del péptido de SEQ ID NO: 1 con tirosina o sustituyendo un aminoácido en la posición 10 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina (tabla 8).

T l 1

continuación

A continuación, los péptidos del grupo 9 se sintetizaron sustituyendo un aminoácido en la posición 3 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina, sustituyendo un aminoácido en la posición 4 del péptido de SEQ ID NO: 1 con glutamina o sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina (tabla 9).

A continuación, los péptidos del grupo 10 se sintetizaron sustituyendo un aminoácido en la posición 3 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina, sustituyendo un aminoácido en la posición 4 del péptido de SEQ ID NO: 1 con glutamina, sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina o sustituyendo un aminoácido en la posición 8 del péptido de SEQ ID NO: 1 con serina (tabla 10).

A continuación, los péptidos del grupo 11 se sintetizaron sustituyendo un aminoácido en la posición 3 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina, sustituyendo un aminoácido en la posición 4 del péptido de SEQ ID NO: 1 con glutamina, sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina, sustituyendo un aminoácido en la posición 9 del péptido de SEQ ID NO: 1 con tirosina o sustituyendo un aminoácido en la posición 10 del péptido de<s>E<q>ID NO: 1 con lisina (tabla 11).

Por último, los péptidos del grupo 12 se sintetizaron sustituyendo un aminoácido en la posición 3 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina, sustituyendo un aminoácido en la posición 4 del péptido de SEQ ID NO: 1 con glutamina, sustituyendo cualquier aminoácido en las posiciones 5 a 7 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina o arginina, sustituyendo un aminoácido en la posición 8 del péptido de SEQ ID NO: 1 con serina, sustituyendo un aminoácido en la posición 9 del péptido de SEQ ID NO: 1 con tirosina o sustituyendo un aminoácido en la posición 10 del péptido de SEQ ID NO: 1 con lisina (tabla 12).

T l 121

Ejemplo 2: verificación del efecto de promover la regeneración dentinaria usando los odontoblastos

Ejemplo 2-1: validación del efecto de los péptidos sobre la actividad del promotor de DSPP (sialofosfoproteína dentinaria).

En primer lugar, células MDPC-23, que son odontoblastos derivados de ratón, se cultivaron en medio DMEM que contenía 10 % de FBS, 5 % de CO2 y 37 °C.

A continuación, las células MDPC-23 cultivadas se dispensaron en una placa de 24 pocillos a 5 * 104 células por pocillo, se incubaron durante 24 horas. Y posteriormente, usando reactivo Lipofectamine Plus™, las células cultivadas se transformaron introduciendo un recombinante (vector pGL3), se introdujeron el promotor de DSPP y el gen de luciferasa. Las células MDPC-23 transformadas se trataron con los péptidos de los grupos 1 a 12 sintetizados en el ejemplo 1, respectivamente, y se cultivarán durante 48 horas. Luego se midió la actividad de luciferasa y se comparó el nivel promedio (Fig. 1a). Como control, se utilizaron células MDPC-23 transformadas sin un péptido promotor de diferenciación de odontoblastos.

La FIG. 1A es un gráfico que muestra el efecto de cada péptido proporcionado en la presente invención sobre la expresión de DSPP, un gen marcador de diferenciación de odontoblastos, para cada grupo. Como se muestra en la FIG. 1A, cada péptido proporcionado en la presente invención mostró un valor de aproximadamente 1,3 veces o más del nivel de actividad de luciferasa medido en el grupo de control en su conjunto, pero la diferencia se mostró para cada grupo y el péptido del grupo 12 fue el más alto. Y el siguiente nivel más alto de actividad de luciferasa fue del péptido del grupo 11.

Por lo tanto, se verificó que los péptidos proporcionados por la presente invención muestran un efecto de activación del promotor de DSPP.

Ejemplo 2-2: verificación del efecto de los péptidos sobre el nivel de expresión del gen DSPP, un gen marcador de diferenciación de odontoblastos

Las células MDPC-23 cultivadas en el ejemplo 2-1 se trataron con los péptidos de cada grupo sintetizados en el ejemplo 1, luego se cultivaron durante 48 horas. El nivel de ARNm de la DSPP, un gen marcador de diferenciación de odontoblastos, expresado en las células MDPC-23 y el nivel de ARNm medido de cada gen DSPP se convirtió en una relación relativa al nivel de ARNm del gen DSPP medido en el control (tablas 13 a 24). Además, se comparó el valor promedio del nivel de ARNm del gen DSPP medido de acuerdo con los péptidos de cada grupo (Fig. 1B). En este momento, como control, se usaron células MDPC-23 que no se trataron con el péptido que promueve la diferenciación de odontoblastos.

El nivel de expresión del gen DSPP se midió a través de RT-PCR y análisis de PCR en tiempo real: específicamente, el ARN total se extrajo de las células MDPC-23 usando el reactivo TRIzol. 2 |jg del ARN total, 1 j l de transcriptasa inversa y 0,5 jg de oligo (oligo; dT) se usaron para sintetizar ADNc. El ADNc sintetizado se usó en una reacción en cadena de polimerasa en tiempo real. La reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real se realizó en un sistema de detección de secuencias ABI PRISM 7500 (Applied Biosystems) y una mezcla maestra de PCR SYBR GREEN (Takara, Japón). La reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real se realizó en condiciones de 94 °C, 1 min; 95 °C, 15 s; 60 °C, 34 segundos para 40 ciclos. Los resultados se analizaron mediante un procedimiento de ciclo umbral (CT, del inglés cycle threshold) comparativo. En este momento, el gen Gapdh se usó como grupo de control interno y el valor medido se repitió tres veces. Se usaron el valor medio y el valor de desviación estándar de estos.

Dspp_F: 5'-ATTCCGGTTCCCCAGTTAGTA-3'(SEQ ID NO: 97)

Dspp_R: 5'-CTGTTGCTAGTGGTGCTGTT-3' (SEQ ID NO: 98)

Gapdh_F: 5'-AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-3'(SEQ ID NO: 99)

Gapdh_R: 5'-TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA-3' (SEQ ID NO: 100)

T l 11

continuación

T l 11

T l 221

T l 241

Como se muestra en las tablas 13 a 24, en comparación con el nivel de ARNm del gen DSPP medido en el grupo de control, se confirmó que los niveles de ARNm del gen DSPP del grupo experimental tratado con el péptido eran todos 1,3 veces o más. En particular, se confirmó que todos los péptidos del grupo 11 mostraron un valor de 3 veces o más en el nivel de ARNm del gen DSPP y todos los péptidos del grupo 12 mostraron un valor de 3,8 veces o más en el nivel de ARNm del gen DSPP.

Además, la FIG. 1B es un gráfico que compara el nivel de expresión del gen DSPP, un marcador de diferenciación de odontoblastos, en células MDPC-23 tratadas con un péptido promotor de diferenciación de odontoblastos. Como se muestra en la FIG. 1B, cuando se trató el péptido para promover la diferenciación de odontoblastos, el nivel de ARNm del gen DSPP, que es un marcador para la diferenciación de odontoblastos, aumenta. Similar al de la FIG. 1A, se confirmó que se midió un valor de aproximadamente 1,3 veces o más en comparación con el nivel de ARNm del gen DSPP en el grupo de control.

Ejemplo 2-3: verificación del efecto del péptido sobre el nivel de expresión de los genes marcadores de diferenciación de odontoblastos DSPP, Dmp1 y genes nestina

A partir de los resultados del ejemplo 2-2, se confirmó que el péptido promotor de diferenciación de odontoblastos podría aumentar el nivel de ARNm del gen DSPP y, en particular, los péptidos de los grupos 11 y 12 pueden aumentar el nivel de ARNm del gen DSPP al menos 3 veces o más.

En consecuencia, se confirmó si los péptidos de los grupos 11 y 12 también pueden aumentar los niveles de ARNm de los genes Dmp1 y nestina, que son otros genes marcadores de diferenciación de odontoblastos.

Los siguientes cebadores se usaron con el procedimiento del ejemplo 2-2. Se usaron los péptidos de los grupos 11 y 12, afectando así a los niveles de expresión de los genes Dmp1 y nestina. Se midió el efecto del péptido promotor de diferenciación y se comparó el nivel promedio (Fig. 1C). En este momento, como grupo de control, se usaron células MDPC-23 sin un péptido promotor de diferenciación de odontoblastos.

Dmp1_F: 5'-CATTCTCCTTGTGTTCCTTTGGG-3'(SEQ ID NO 101)

Dmp1_R: 5'-TGTGGTCACTATTTGCCTGTG-3' (SEQ ID NO 102)

Nestina_F: 5'-CCCTGAAGTCGAGGAGCTG-3'(SEQ ID NO 103)

Nestina_R: 5'-CTGCTGCACCTCTAAGCGA-3'(SEQ ID NO 104)

La Fig. 1C es un gráfico que muestra los resultados de comparar los niveles de expresión del marcador de diferenciación de odontoblastos DSPP, genes Dmp1 y nestina en células MDPC-23 tratadas con los péptidos de los grupos 11 y 12. Como se muestra en la figura 1c, cuando se trató el péptido promotor de diferenciación de odontoblastos, los niveles de expresión del marcador de diferenciación de odontoblastos DSPP, genes Dmp1 y nestina aumentaron, pero el nivel de aumento para cada gen fue diferente. Se confirmó que el péptido del grupo 12 era más eficaz.

Dado que se sabe que cada gen marcador de diferenciación está implicado en la diferenciación de odontoblastos y la calcificación dentinaria, los péptidos proporcionados en la presente invención se analizaron en lo que respecta a si promueven la regeneración dentinaria.

Ejemplo 2-4: evaluación de la citotoxicidad de péptidos en células de tejido pulpar

Las células de la pulpa dental humana se separaron de las muelas del juicio de 10 adultos (de 18 a 22 años) en la Facultad de Odontología, Seoul National University (Universidad de Seúl). De manera detallada, todos los experimentos se realizaron después de la aprobación de la Junta de Revisión Institucional y de obtener el consentimiento informado de los pacientes. Las muelas del juicio se fracturaron de acuerdo con un procedimiento de Jung HS et al. (J Mol Histol.(2011)) para exponer las pulpas dentales y los tejidos de la pulpa dental se separaron con pinzas. Cada uno de los tejidos de pulpa dental separados se cortó en pequeños trozos con una cuchilla de afeitar, se dispusieron en un platillo de 60 mm, se cubrieron con un cubreobjetos y posteriormente se cultivaron en un medio Eagle modificado de Dulbecco.

A continuación, las células de tejido de pulpa dental obtenidas se dispensaron en una placa de 96 pocillos, por lo que el número de células por pocillo era de aproximadamente 3 * 103, cultivadas durante 24 horas. Posteriormente, los péptidos de los grupos 11 o 12 se trataron a una concentración de 10 o 50 ug/ml. Y se incubó de nuevo durante 1, 3 o 5 días. Las células cultivadas se lavaron con PBS, se añadieron 20 pl de solución de MTT y posteriormente se hicieron reaccionar a aproximadamente 37 °C durante 4 horas. Después de que se completara la reacción, se eliminó la solución de MTT, se añadieron 100 pl de DMSO y se midió la absorbancia a una longitud de onda de 540 nm (Fig.1D). En este momento, como control, se usaron células de tejido pulpar cultivadas sin el péptido.

La FIG. 1D es un gráfico que muestra la citotoxicidad de un péptido que promueve la diferenciación de oblastos a células de tejido de pulpa dental. Como se muestra en la FIG. 1D, se confirmó que la tasa de supervivencia de las células del tejido pulpar estaba al mismo nivel que la del grupo de control incluso cuando se añadió el péptido promotor de diferenciación de odontoblastos.

Ejemplo 3: preparación de una composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria

Etapa 1

Mezcla de agua purificada y solución de D-sorbitol

Etapa 2

Se añadieron fosfato tricálcico, ácido aminocaproico, alantoína, ácido silícico hidratado, solución de PCA de sodio, hidroxiapatita, péptido (SEQ ID NO: 96), stevia tratada con enzimas y xilitol y se agitaron en un agitador durante aproximadamente 40 minutos (condiciones de agitación: PALETAS 10~ 30 rpm, DISPERSAR 500~600 rpm, HOMO 2400~3200 rpm)

Etapa 3

Añadir glicerina (concentrada) y goma xantana y agitar durante aproximadamente 40 minutos (condiciones de agitación: PALETAS 10~30 rpm, DISPERSAR 500~600 rpm, HOMO 2400~3200 rpm)

Etapa 4:

Se añadió glicerina (concentrada), sal sódica de carboximetilcelulosa (CMC) y se agitó durante aproximadamente 40 minutos (condiciones de agitación: PALETAS 10 ~30 rpm, DISPERSAR 500~600 rpm, HOMO 2400~3200 rpm) Etapa 5

Añadir cocoilmetiltaurato de sodio y agitar durante aproximadamente 20 minutos (condiciones de agitación: PALETAS 10~30 rpm, DISPERSAR 450~650 rpm),

Etapa 6

Añadir extracto de té verde, extracto de camomila, extracto de romero, tintura de mirra, tintura de ratania, tintura de manzanilla, aceite de masilla 40, extracto de propóleo, extracto de semilla de pomelo, hierbabuena, aceite de menta y agitar durante aproximadamente 15 minutos (condiciones de agitación: PALETAS 10~30 rpm, DISPERSAR 450~650 rpm)

Cada etapa se agita en condiciones de presión reducida (-760 mmHg)

T l 21

Preparación de composiciones del ejemplo comparativo

Ejemplo comparativo 3-1:

Agua purificada preparada del mismo volumen que en el ejemplo 3

Ejemplo comparativo 3-2:

Entre los ingredientes del ejemplo 3, todos los ingredientes distintos de los que no contenían un péptido promotor de diferenciación de odontoblastos (SEQ ID NO: 96) se prepararon para contener el mismo

Ejemplo de prueba 1:

Análisis MALDI-TOF de composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con el ejemplo 3 A. Preparación de una solución de composición de dentífrico disolviendo aproximadamente 0,5 g de una muestra de la composición de dentífrico proporcionada en el ejemplo 3 en aproximadamente 1 ml de agua destilada B. Centrifugar la solución de A. a aproximadamente 15.000 rpm durante aproximadamente 10 minutos y recoger el sobrenadante

C. Se mezclaron 2 ul del sobrenadante recogido en B. con 2 ul de la solución de sustrato (10mg/ml de ácido aciano-4-hidroxicinámico (CHCA) en TFA al 0,1 %/ACN (1:1, v/v)) y se realizó un análisis<m>A<l>DI-TOF (UltraflexIlI TOF/TOF (Bruker Daltonics)) (Fig. 2, B).

Ejemplo de prueba 2:

Observación de la permeabilidad de los túbulos dentinarios de la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con el ejemplo 3

A. Cortar el diente para exponer los túbulos dentinarios

Cortar la corona del diente extraído de la persona horizontalmente con una sierra de diamante para exponer los túbulos dentinarios y luego lavar dos veces durante aproximadamente 5 minutos con una solución tampón de fosfato B. Limpieza del diente amputado

El diente previamente cortado se hizo reaccionar con una solución de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA, pH 7,4) de 0,5 M durante aproximadamente 5 minutos y luego se lavó dos veces durante aproximadamente 5 minutos con una solución tampón de fosfato.

C. Adición de un reactivo de tinción fluorescente a la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria de acuerdo con el ejemplo 3

Se añadió 0,1 % del reactivo de tinción fluorescente a la composición de dentífrico para aliviar la hiperestesia dentinaria que contiene el péptido promotor de diferenciación de odontoblastos (SEQ ID NO: 96), se mezcló bien y, a continuación, se cepilló el diente cortado expuesto a los túbulos dentinarios durante aproximadamente 1 minuto. D. Observación de la penetración de la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria

El diente cortado cepillado se lavó 3 veces con agua destilada y luego se cortó longitudinalmente a un grosor de aproximadamente 0,5 mm para que los túbulos dentinarios del diente cortado parecieran largos usando una sierra de diamante y se observó el grado de penetración con un microscopio de fluorescencia (Fig. 3)

Ejemplo de prueba 3:

Observación de la capacidad de sellado de los túbulos dentinarios de la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria de acuerdo con el ejemplo 3

A. Preparación de saliva artificial

La composición de la saliva artificial se muestra en la siguiente tabla 26.

^ El agua purificada se añadió a la concentración final de cada componente en la tabla 2 y se mezcló y se añadió el último fosfato de potasio (K2HPO4).

^ El pH de la saliva artificial se midió cerca de 7,2, similar a la saliva humana.

B. Elaboración de muestras de túbulos dentinarios

El diente humano extraído se cortó horizontalmente usando una sierra de diamante para lograr una muestra dentinaria con grosor de 1mm, con túbulos dentinarios expuestos.

*

La muestra dentinaria se hizo reaccionar durante aproximadamente 5 minutos en una solución de ácido fosfórico al 32 % para exponer completamente los túbulos dentinarios y, a continuación, se lavó tres veces con agua purificada durante aproximadamente 5 minutos. Entonces, la muestra dentinaria se lavó 6 veces en un limpiador ultrasónico durante aproximadamente 5 minutos para exponer completamente los túbulos dentinarios.

Posteriormente, se lavó tres veces con una solución tampón de fosfato y se almacenó.

C. Observación de la capacidad de sellado de los túbulos dentinarios de la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria

Usando la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria de acuerdo con el ejemplo 3, la muestra se cepilló durante aproximadamente 1 minuto con la muestra de túbulo dentinario, se lavó 3 veces con agua destilada y luego se hizo reaccionar con la saliva artificial durante aproximadamente 24 horas.

Después de repetir este proceso durante 2 semanas, se lavó tres veces con agua destilada, se secó y se observó el grado de bloqueo del túbulo dentinario con un microscopio electrónico de barrido (S-4700, HITACHI, Tokio, Japón) (FIG. 4, I-L).

Ejemplo de prueba comparativa 3-1:

Usando el agua purificada preparada en el ejemplo comparativo 3-1, se cepilló la muestra de túbulo dentinario durante aproximadamente 1 minuto, se lavó 3 veces con agua destilada y luego se hizo reaccionar durante aproximadamente 24 horas en saliva artificial.

Después de repetir este proceso durante 2 semanas, las muestras se lavaron con agua destilada 3 veces, se secaron y se observó el grado de bloqueo del túbulo dentinario con un microscopio electrónico de barrido (Fig. 4, A-D).

Ejemplo de prueba comparativa 3-2:

Usando el dentífrico preparado en el ejemplo comparativo 3-1, se cepilló la muestra de túbulo dentinario durante aproximadamente 1 minuto, se lavó 3 veces con agua destilada y luego se hizo reaccionar durante aproximadamente 24 horas en saliva artificial.

Después de repetir este proceso durante 2 semanas, las muestras se lavaron con agua destilada 3 veces, se secaron y se observó el grado de bloqueo del túbulo dentinario con un microscopio electrónico de barrido (Fig. 4, E-H).

A través del ejemplo de prueba 1, se puede confirmar la estabilidad del péptido contenido en la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria de acuerdo con la realización de la presente invención. La FIG. 2 es el resultado de medir el peso molecular a través del análisis MALDI-TOF para confirmar la estabilidad del péptido contenido en la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención. En la FIG. 2A se muestra el peso molecular del propio péptido contenido en la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención. En la FIG. 2B se muestra el peso molecular del péptido contenido en el estado de la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención.

Haciendo referencia a la FIG. 2, se observó que el péptido contenido en la composición de dentífrico de acuerdo con el ejemplo 3 tenía el mismo pico (peso molecular de aproximadamente 1384 Da) que el valor medido del peso molecular y, a través de esto, se confirmó la estabilidad del péptido promotor de diferenciación dentinaria mixta en la composición de dentífrico (véase la Fig. 2 y A).

De acuerdo con el ejemplo de prueba 2, como resultado de observar la permeabilidad del túbulo dentinario de la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria de acuerdo con el ejemplo 3 con un microscopio de fluorescencia, como se muestra en la FIG. 3, en el caso del diente tratado con la composición, se observó intensamente fluorescencia en la superficie dentinaria. Además, se observó la penetración del reactivo de tinción fluorescente a lo largo del lado inferior de los túbulos dentinarios expuestos.

A continuación, los resultados de comparar el ejemplo de prueba 3 y los ejemplos de prueba comparativos 3-1 y 3-2 son como se muestran en la FIG. 4. La FIG. 4 es un conjunto de imágenes que comparan la capacidad de sellado de los túbulos dentinarios de la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria de acuerdo con el ejemplo 3, el ejemplo comparativo 3-1 y el ejemplo comparativo 3-2. Y más detalladamente, A-D muestran los túbulos dentinarios de la dentina tratados solo con agua purificada (ejemplo comparativo 3-1) y E-H muestran la composición de dentífrico sin péptido promotor de diferenciación de odontoblastos (ejemplo comparativo 3-2) e I-L muestran los túbulos dentinarios que han reaccionado con la composición, incluyendo un péptido para el cuidado bucal que previene o alivia hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención. Uno (barra de tamaño: A, E, I, 100 |jm; B, F, J, 20 pm; C, G, K, 20 pm; D, H, L, 10 pm).

Como puede observarse en la FIG. 4, se pudo observar que los túbulos dentinarios se bloquearon por remineralización en los túbulos dentinarios al reaccionar con la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención.

La FIG. 4 es una imagen ampliada de los túbulos dentinarios bloqueados por la composición que incluye un péptido para el cuidado bucal que previene o alivia hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención y muestra los resultados de la remineralización en los túbulos dentinarios bloqueados y las superficies dentinarias.

Como anteriormente, la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención forma una película delgada sobre la dentina y al mismo tiempo se une fuertemente a los iones de fosfato-calcio liberados del fosfato tricálcico y remineraliza los túbulos dentinarios expuestos y las superficies dentinarias. En otras palabras, la composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria de acuerdo con una realización de la presente invención induce la remineralización no solo en la superficie de los túbulos dentinarios expuestos, sino también dentro del túbulo dentinario, exhibiendo así el efecto de aliviar y/o prevenir la hiperestesia dentinaria.

"Este estudio fue respaldado por el proyecto de desarrollo tecnológico del Ministerio de PYMES y Nuevas Empresas en 2017 [S2462696]"

Claims

REIVINDICACIONES

1. Composición de dentífrico para aliviar hiperestesia dentinaria, que comprende un péptido que consiste en una secuencia de aminoácidos de la siguiente fórmula 1:

K-Y-R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7-R8 (Fórmula 1)

en donde R1 es arginina(R), lisina(K) o glutamina(Q);

R2 es arginina(R) o glutamina(Q);

R3, R4 y R5 son arginina(R) o lisina(K), respectivamente;

R6 es asparagina(N) o serina(S); y

R7 y R8 son lisina (K) o tirosina (Y), respectivamente,

2. La composición de la reivindicación 1, en donde dicho péptido es una secuencia de aminoácidos cualquiera de SEQ ID NOS: 1 a 96.

3. La composición de la reivindicación 1, en donde dicha composición de dentífrico comprende agente humectante en 33-37 partes en peso, modificador de viscosidad en 4,4-5,4 partes en peso, agente tensioactivo en 1,1-1,3 partes en peso, agente aromatizante en 0,8-0,9 partes en peso basado en 100 partes en peso.

4. La composición de la reivindicación 1, en donde dicha composición de dentífrico comprende de 0,15-0,25 partes en peso de ácido aminocaproico y de 1,9-2,1 partes en peso de alantoína basado en 100 partes en peso.

5. La composición de la reivindicación 3, en donde dicho agente humectante es una solución de D-sorbitol, solución de PCA de sodio, glicerina concentrada o una mezcla de éstas,

dicho modificador de viscosidad es ácido silícico hidratado, goma xantana, CMC (sal sódica de carboximetilcelulosa) o una mezcla de éstas,

dicho agente tensioactivo es cocoilmetiltaurato de sodio,

dicho agente aromatizante es extracto de té verde, extracto de manzanilla, extracto de romero, tintura de mirra, tintura de ratania, tintura de manzanilla, aceite de masilla 40 HF-60662, extracto de propóleo, extracto de semilla de pomelo, menta verde B71228, aceite de menta 81689 o una mezcla de éstos.

6. La composición de la reivindicación 5, en donde dicho agente humectante comprende del 80-83 % en peso de dicha solución de D-sorbitol, del 7-8 % en peso de dicha solución de PCA de sodio y del 10-12 % en peso de dicha glicerina concentrada.

7. La composición de la reivindicación 5, en donde dicho modificador de viscosidad comprende del 79-85 % en peso de dicho ácido silícico hidratado, del 4-8 % en peso de dicha goma xantana y del 11-13 % en peso de dicha CMC.

8. La composición de dentífrico de acuerdo con la reivindicación 1 para su uso en un procedimiento para aliviar hiperestesia dentinaria en un sujeto que lo necesite, comprendiendo el procedimiento administrar la composición de dentífrico a la superficie dentinaria de dicho sujeto.