JP2000514840A - 成長ホルモン分泌促進物質としての置換ジペプチドの酒石酸塩 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、成長ホルモン分泌促物質であって、外因性成長ホルモンのレベルの増加に有用である、２−アミノ−Ｎ−(１−(２，４−ジフルオロ−ベンジルオキシメチル)−２−オキソ−２−[３−オキソ−３ａ−ピリジン−２−イルメチル−２−(２，２，２−トリフルオロエチル)−２，３，３ａ，４，６，７−ヘキサヒドロ−ピラゾロ[４，３−ｃ]ピリジン−５−イル]−エチル)−２−メチル−プロピオンアミドの(Ｌ)−酒石酸塩に関する。もう一つの態様では、本発明は、前記化合物の合成に有用なある種の中間体を提供する。本発明の化合物の(Ｌ)−酒石酸塩は、骨粗鬆症、インスリン耐性、および成長ホルモン欠乏症に伴うその他の病状または疾病の治療および／または予防に有用である。また、本発明の化合物の(Ｌ)−酒石酸塩は、ビスホスホネート化合物；エストロゲン、プレマリンおよび所望であればプロゲステロン；エストロゲンアゴニストまたはアンタゴニスト；またはカルシトニンと組み合わせて用いた場合、骨粗鬆症の治療に有用である。さらに、本発明は、医薬組成物に関する。さらに、本発明は、ヒトまたはその他の動物に、アルファー−２アドレナリン作用性アゴニストおよび本発明の化合物の(Ｌ)−酒石酸塩の組み合わせを投与することを含む方法に関する。

Description

【発明の詳細な説明】 成長ホルモン分泌促進物質としての置換ジペプチドの酒石酸塩 発明の背景 本発明は、成長ホルモン分泌促進物質である２−アミノ−Ｎ−{１−(Ｒ)−(２ ，４−ジフルオロ−ベンジルオキシメチル)−２−オキソ−２−[３−オキソ−３ ａ−(Ｒ)−ピリジン−２−イルメチル−２−(２，２，２−トリフルオロ−エチ ル)−２，３，３ａ，４，６，７−ヘキサヒドロ−ピラゾール[４，３−ｃ]ピリ ジン−５−イル]−エチル}−２−メチル−プロピオンアミドの(Ｌ)−(＋)−酒石 酸塩に関する。 成長ホルモン(growth hormone)（ＧＨ）は、脳下垂体から分泌され、成長能を 持つ身体の全組織の成長を刺激する。さらに、成長ホルモンは、身体の代謝プロ セスに以下の基礎的影響を持つことが知られている： １． 実質上、身体の全細胞でのタンパク合成速度の増加； ２． 身体の細胞での炭水化物利用速度の減少；および、 ３． 遊離脂肪酸の移動性の増加およびエネルギーとしての脂肪酸の利用。 成長ホルモンの欠乏は、結果として様々な医療障害をもたらす。子供の場合、 小人症の原因となる。成人では、ＧＨ欠乏の結果、体重が徹底的に減少し、同時 に体脂肪全体、特に体幹領域での体脂肪が増加する。骨格筋および心筋の量なら びに筋肉強度の減少は、運動能力を明らかに減少させる。また、骨密度も減少す る。外因性の成長ホルモンを投与すると、代謝変化の多くが元に戻ることが分か った。さらなる治療効果としては、ＬＤＬコレステロールが減少し、心理的安寧 が改善される。 成長ホルモンレベルの増加を所望する場合、一般的に、外因性成長ホルモンを 提供することによって、または成長ホルモンの生成および／または放出を刺激す る薬剤を投与することによって、その問題を解決してきた。いずれの場合も、ペ プチジル類化合物の注射による投与を必要とする。当初、成長ホルモンの原料は 死体の下垂体からの抽出物であった。この生成物は、結果として高価であり、原 料である下垂体に関連する疾病を成長ホルモンのレシピエントに感染させてしま う可能性があると言う危険性をはらんでいる（例えばヤコブ−クロイツフェルト 病）。最近、組換型成長ホルモンが入手可能になり、もはや如何なる疾病感染の 危険性も無くなったが、非常に高価な生成物を注射または鼻噴霧しなければなら ないことに変わりはない。 ＧＨ欠乏の大部分は、ＧＨ放出の欠陥によるものであり、ＧＨの下垂体での合 成の欠陥が主たる原因で起こるものではない。それ故、血清中のＧＨレベルを正 常化するための代替戦略は、成長ホルモン分泌細胞(somatotrophs)からのその放 出を刺激することである。ＧＨ分泌の増加は、脳および視床下部の様々な神経伝 達物質系を刺激または阻害することによって達成することができる。結果として 、下垂体のＧＨ分泌を刺激する合成成長ホルモン−放出剤の開発が求められ、こ れらの開発は高価で不便なＧＨ置換療法以上の様々な利益をもたらすことができ る。生理学的制御経路に沿った作用による最も望ましい薬剤は、ＧＨ分泌を刺激 し、そして外因性ＧＨの投与による望ましくない副作用につながるＧＨの過剰レ ベルを、完全な負のフィードバックループの力で回避するであろう。 ＧＨ分泌の生理学的薬理学的刺激物質には、アルギニン、Ｌ−３，４−ジヒド ロキシフェニルアラニン（Ｌ−ＤＯＰＡ）、グルカゴン、バソプレシン、および インスリン誘導ヒポグリセミア、ならびに睡眠および興奮のような活性が含まれ 、これらは、多分、ソマトスタチン分泌を減少させるか、または既知の分泌促進 物質である成長ホルモン放出因子(growth hormone releasing factor)（ＧＨＲ Ｆ）または未知の外因性成長ホルモン−放出ホルモンまたはこれらのすべての分 泌を増加させるかのいずれかの様なある様式で視床下部に作用することによって 、間接的に成長ホルモンを下垂体から放出させる原因となる。 また、本発明は、インスリン非依存性糖尿病(Non-Insulin Dependent Diabete s)（ＮＩＤＤ）の様なインスリン耐性状態、ならびに哺乳動物の肥満および加齢 に伴う糖血調節力(glycemic control)の減少を治療する方法であって、下に示す 式Ｉの化合物のＬ−(＋)−酒石酸塩の有効量を上記の哺乳動物に投与することを 含む、上記の治療方法に関する。 ＧＦＲと関連する類似のペプチジル化合物または合衆国特許第４，４１１，８ ９０号のペプチドのような外因性成長ホルモンの放出を刺激する別の化合物が開 発された。これらのペプチドは、成長ホルモンよりかなり小さい分子であるが、 なお、様々なプロテアーゼの作用を受けやすい。多くのペプチドと同様に、それ らの経口によるバイオアベイラビリテー能は低い。 ＷＯ９４／１３６９６は、成長ホルモンの放出を促進するある種のスピロピペ リジンおよびその同族体に関連する。好ましい化合物は、以下に示す一般構造を 持つ化合物である。 ＷＯ９４／１１０１２は、成長ホルモンの放出を促進するある種のジペプチド に関連する。これらジペプチドは、以下の一般構造 （式中、Ｌは、である）を持つ。 ＷＯ９４／１１０１２およびＷＯ９４／１３６９６の化合物は、甲状腺ホルモ ンまたはビスホスホネートと組み合わせると、骨粗鬆症の治療に有効であると、 報告されている。 同時係属ＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＩＢ ９６／０１３５３（国際出願日、１９９６ 年１２月４日、ここに本譲渡人に譲渡された）は、本願書の式Iの化合物の医薬 として許容しうる塩の一般的開示を公開し、本発明の式Ｉの化合物の遊離塩基を 開示し請求している。 以下に示す、式Ｉの化合物のＬ−(＋)−酒石酸塩は、製剤のしやすさ、溶解度 の高さ、安定性の良さのような、有益な性質を持ち、非結晶形よりも簡単に精製 することのできる、結晶の形で単離することができる。発明の要約 本発明は、式Ｉの化合物のＬ−(＋)−酒石酸塩を提供する。 ＊は、立体化学中心を示す。好ましい式Ｉの化合物は、立体配置３ａ−(Ｓ)， １−(Ｒ)；３ａ−(Ｓ)，１−(Ｓ)；３ａ−(Ｒ)，１−(Ｓ)；および／または３ａ −(Ｒ)，１−(Ｒ)の異性体を持つ立体化学混合物または個々の異性体である。 また、本発明は； 式（Ｅ） の化合物の(Ｄ)−酒石酸塩または(Ｌ)−酒石酸塩の製造方法であって、式（Ｄ） の化合物を、(Ｄ)−酒石酸または(Ｌ)−酒石酸と、約８：１から約９：１のアセ トン：水の混合物中、温度約０℃から室温で反応させることを含み、好ましくは 、(Ｄ)−酒石酸を式（Ｄ）の化合物と反応させ、式（Ｅ）の化合物がＲ−配置を 持つ、前記化合物の製造方法： 式（Ｊ） の化合物の製造方法であって、式（Ｅ）の化合物を、式（Ｘ） （式中、Ｐｒｔはアミン保護基であり、ＸはＯＨ、−Ｏ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキルまた はハロである）の化合物と、有機塩基およびペプチドカップリング試薬の存在下 、約−７８℃〜約−２０℃の温度で、反応させることを含み、好ましくは、ペプ チドカップリング試薬が１−プロパンホスホン酸環状無水物であり、式Ｘの化合 物がＲ−立体配置を持ち、そして式Ｅの化合物がＲ−立体配置を持ち、より好ま しくは、Prtがtert-ブトキシカルボニルである、前記化合物の製造方法：ならび に、 式Ｉ の化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩の製造方法であって、式（Ｅ）の化合物を、式（Ｘ） （式中、Prtは、アミン保護基であり、ＸはＯＨ、−Ｏ(Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルまた はハロである）の化合物と、有機塩基およびペプチドカップリング試薬の存在下 、約−７８℃〜約−２０℃の温度で、反応させて、式（Ｊ） の化合物を得、式（Ｊ）の化合物を適当な脱保護条件下で脱保護して、式（Ｋ） の化合物を得、式（Ｋ）の化合物を(Ｌ)−(＋)−酒石酸と、反応不活性溶媒中で 反応させて、式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を得ることを含み、好ましく は、Prtがtert−ブトキシカルボニルであり、より好ましくは、ペプチドカップ リング試薬が１−プロパンホスホン酸環状無水物であり、式Ｉの化合物の絶対配 置および相対配置が３ａ−(Ｒ)、１−(Ｒ)である、前記の製造方法； を提供する。 その他の態様では、本発明は： 式 ［(Ｄ)−酒石酸塩または(Ｌ)−酒石酸塩が望ましい］化合物のＲ，Ｓ−鏡像体混 合物、Ｒ−鏡像体またはＳ−鏡像体； 式 （式中、Prtは、ｔ−ＢＯＣ、ＦＭＯＣおよびＣＢＺからなる基より選択された アミン保護基である）の化合物の３ａ−(Ｒ，Ｓ)，１−(Ｒ)ジアステレオマー混 合物、３ａ−(Ｒ)，１−(Ｒ)ジアステレオマーまたは３ａ−(Ｓ)，１−(Ｒ)ジア ステレオマー； 式の化合物のＲ，Ｓ−鏡像体混合物、Ｒ−鏡像体またはＳ−鏡像体；ならびに、 式 （式中、ＸはＯＨ、−Ｏ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキルまたはハロであり、Prtはアミン保 護基であり、そして、好ましくは、ＸがＯＨであり、PrtがＢＯＣであり、立体 中心がＲ立体配置である）の化合物のＲ，Ｓ−鏡像体混合物、Ｒ鏡像体またはＳ 鏡像体： を提供する。 さらにもう一つの態様では、本発明［上記の式（Ｉ）の化合物］は： ヒトまたは動物に有効量の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与するこ とを含む、ヒトまたはその他の動物の外因性成長ホルモンのレベルを増加させる 方法； 医薬として許容しうるキャリヤーおよびある量の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)− 酒石酸塩を含む、医薬組成物； ヒトまたはその他の動物の成長ホルモンの外因性生成または放出の増加に有効 な医薬組成物であって、医薬として許容しうるキャリヤー、有効量の請求項１記 載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩、ならびにＧＨＲＰ−６、ヘキサレリ ン(Hexarelin)、ＧＨＲＰ−１、成長ホルモン放出因子（growth hormone releas ing factor）(ＧＲＦ)、ＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２およびＢ−ＨＴ９２０またはそ の類似体からなる群より選択される成長ホルモン分泌促進物質を含む、上記の医 薬組成物； 骨粗鬆症を治療または予防する方法であって、骨粗鬆症の治療または予防に有 効なある量の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を、そのような治療または予 防を必要とするヒトまたはその他の動物に投与することを含む、前記の方法； 成長ホルモンによって治療または予防することができる疾病または状態を治療 または予防する方法であって、そのような治療または予防を必要とするヒトまた はその他の動物に、外因性成長ホルモンの放出促進に有効なある量の式Ｉの化合 物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを含み、好ましくは、疾病または状態 がうっ血性心不全、肥満または加齢による虚弱であり、また、好ましくは疾病ま たは状態がうっ血性心不全であり、より好ましくは、疾病または状態が加齢によ る虚弱である、前記方法； 骨折治癒を促進する方法、大手術後のタンパク質異化作用応答を減衰させる方 法、慢性疾患による悪液質およびタンパク質損失を減少させる方法、創傷治癒を 促進する方法、または熱傷患者または大手術を受けた患者の回復を促進する方法 であって、そのような治療を必要とする哺乳動物に外因性成長ホルモンの放出の 促進に有効なある量の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを含 み、好ましくは、大手術を受けた患者の回復を促進し、また、好ましくは、骨折 修復を促進する、前記方法； 筋力、運動性、皮膚層の維持、代謝ホメオスタシスまたは腎臓ホメオスタシス を改良する方法であって、そのような治療を必要とするヒトまたはその他の動物 に、外因性成長ホルモンの放出促進に有効なある量の式Ｉの化合物の(Ｌ)-(＋) −酒石酸塩を投与することを含む、前記の方法； 骨粗鬆症を治療または予防する方法であって、骨粗鬆症のヒトまたはその他の 動物に、有効量のビスホスホネート化合物および式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒 石酸塩を投与することを含み、好ましくは、ビスホスホネート化合物がイバンド ロネート(ibandronate)であり；好ましくは、ビスホスホネート化合物がアレン ドロネート(alendronate)である、前記の方法； 骨粗鬆症を治療または予防する方法であって、骨粗鬆症のヒトまたはその他の 動物に、有効量のエストロゲンまたはプレマリン（登録商標）（Ｐｒｅｍａｒｉ ｎ^R）および式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩、および所望であればプロゲ ステロン、を投与することを含む、前記方法； 骨粗鬆症を治療または予防する方法であって、骨粗鬆症のヒトまたはその他の 動物に、有効量のカルシトニンおよび式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投 与することを含む、前記方法； ＩＧＦ−１欠乏症のヒトまたはその他の動物のＩＦＧ−１レベルを増加させる 方法であって、ＩＧＦ−１欠乏症のヒトまたはその他の動物に、有効量の式Ｉの 化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを含む、前記方法； 骨粗鬆症を治療する方法であって、骨粗鬆症のヒトまたはその他の動物に有効 量のエストロゲンアゴニストまたはアンタゴニストおよび式Ｉの化合物の(Ｌ)− (＋)−酒石酸を投与することを含み；好ましくは、エストロゲンアゴニストまた はアンタゴニストがタモキシフェン、ドロロキシフェン、ラロキシフェン、また はイドキシフェンであり；また、好ましくは、エストロゲンアゴニストまたはア ンタゴニストが、シス−６−(４−フルオローフェニル)−５−[４−(２−ピペリ ジン−１−イル−エトキシ)−フェニル]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフ タレン−２−オール；(−)−シス−６−フェニル−５−[４−(２−ピロリジン− １−イル−エトキシ)−フェニル]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン −２−オール；シス−６−フェニル−５−[４−(２−ピロリジン−１−イル−エ トキシ)−フェニル]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール ；シス−１−[６’−ピロロジノエトキシ−３’−ピリジル]−２−フェニル−６ −ヒドロキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン；１−(４’−ピロ リジノエトキシフェニル)−２−(４”−フルオロフェニル)−６−ヒドロキシ− １，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン；シス−６−(４−ヒドロキシフェ ニル)−５−[４−(２−ピペリジン−１−イル−エトキシ)−フェニル]−５，６ ，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール；または１−(４’−ピロリ ジノールエトキシフェニル)−２−フェニル−６−ヒドロキシ−１，２，３，４ −テトラヒドロ−イソキノリンである；上記方法； 筋肉量を増加させる方法であって、そのような治療を必要とするヒトまたはそ の他の動物に有効量の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを含 む、前記方法； 成長ホルモン欠乏症児の成長を促進する方法であって、成長ホルモン欠乏症児 に有効量の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを含む、前記方 法； 哺乳動物のインスリン耐性を治療する方法であって、有効量の式Ｉの化合物の (Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を前記哺乳動物に投与することを含み；好ましくは、イン スリン耐性と関連する状況がＩ型糖尿病、II型糖尿病、高血糖症、グルコース耐 性欠陥、またはインスリン耐性症候群であり；また、好ましくは、インスリン耐 性と関連する状況が肥満または老齢と関連する；前記方法； 外因性成長ホルモンのレベルを増加させる方法であって、それを必要とするヒ トまたはその他の動物に、有効量の機能性ソマトスタチンアンタゴニスロおよび 式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを含み、好ましくは、機能 性ソマトスタチンアンタゴニストがアルファ−２−アドレナリンアゴニストであ る、前記方法；ならびに、 うっ血性心不全、肥満または加齢と関連する虚弱を治療または予防する方法で あって、それが必要なヒトまたはその他の動物に、有効量の機能性ソマトスタチ ンアンタゴニストおよび式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを 含む前記方法： を提供する。 式Ｉの化合物は、成長ホルモンの放出を促進し、様々な生理学的条件下で安定 であり、そして、非経口、鼻または、経口経路で投与することができる。本発明の詳細な説明 式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩は、化合物を作成する科学技術として知 られている方法を含む、以下の方法に従って作成することができる。式Ｉの化合 物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を製造するある方法を、本発明のさらなる特徴として 提供し、以下に示す反応スキームで説明する。 本発明の化合物は、以下に示す； ３ａ−(Ｒ)，１−(Ｒ)配置と呼ばれる、絶対配置および相対配置を持つ。この化 合物は、以下に記載する方法に従って製造することができる。 成長ホルモンを放出する式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩は、インビトロ で、成長ホルモンの分泌が下垂体レベルでどのように調節されるかを理解する唯 一の道具として有用である。これには、年齢、性別、栄養素、グルコース、アミ ノ酸、脂肪酸、ならびに断食状態および非断食状態の様な、成長ホルモン分泌に 影響すると考えられる、または影響することが知られている多くの因子の評価に 利用することが含まれる。さらに、式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩は、そ の他のホルモンがどのように成長ホルモン放出活性に影響するかを評価するため に用いることもできる。例えば、ソマスタチンは成長ホルモンの放出を阻害する ことが、既に立証されている。 式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を、ヒトを含む動物に投与すると、イン ビボで成長ホルモンを放出することができる。式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石 酸塩は、ＧＨの欠乏に関連する症状の治療；肉質を改良するための、食肉生産高 を上昇させた動物の成長刺激または飼料効率の増強；乳牛の毎日の牛乳生産高の 上昇；骨または傷の治癒の改良；および、生命をつかさどる諸器官の改良；に有 用である。式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩は、外因性ＧＨ分泌を誘導する ことによって、体内組成を変化させ、その他のＧＨに依存する代謝、免疫または 成長のプロセスを修正するであろう。例えば、本発明の化合物は、ニワトリ、七 面鳥、（ヒツジ、ブタ、ウマ、畜牛のような）家畜動物、ペット動物（例えばイ ヌ）に与えることができ、また、養殖に有効で、魚の成長を促進しそしてタンパ ク質／脂肪比率を改善することができる。さらに、下垂体が成長ホルモンを放出 する能力を持つか否かを直接決定するための診断用手段として、式Ｉの化合物の (Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を、インビボでヒトに投与することもできる。例えば、式 Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を、インビボで子供に投与することもできる 。そのような投与の前および後に採取した血清サンプルを、成長ホルモンについ てアッセイすることもできる。これらのサンプルのそれぞれの成長ホルモン量を 比較することは、成長ホルモンを放出する患者の下垂体の能力を直接測定する手 段となるであろう。 従って、本発明は、その範囲内に、活性成分として医薬として許容しうるキャ リヤーと共に式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を含む、医薬組成物を含む。 所望するならば、医薬組成物は、さらに、式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩 に加えて同化促進薬剤(anabolic agent)、または異なる活性を示すもう一つの化 合物、例えば抗生作用を持つ成長許容剤(antibiotic growth permittant)または 骨粗鬆症治療剤を、または組み合わせると効果が上がり副作用が減るその他の医 薬活性物質と共に、含むことができる。 成長促進剤および同化促進剤は、この技術分野では周知であり、これらに限定 するものではないが、ＴＲＨ、ＰＴＨ、ジエチルスチベステロール、エストロゲ ン、β−アゴニスト、テオフィリン、同化促進ステロイド、エンケファリン、プ ロスタグランジンＥ、合衆国特許第３，２３９，３４５号に開示された化合物（ その開示を参照としてここに採用する）、例えばゼラノール、合衆国特許第４， ０３６，９７９号に開示された化合物（その開示を参照としてここに採用する） 、例えばスルベノックス、および合衆国特許第４，４１１，８９０号に開示され たペプチド（その開示を参照としてここに採用する）が含まれる。 式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩は、合衆国特許第４，４１１，８９０号 （その開示をここに参照として採用する）および公開番号ＷＯ８９／０７１１０ 、ＷＯ８９／０７１１１、に記載されたような成長ホルモン放出ペプチドである ＧＨＲＰ−６およびＧＨＲＰ−１、およびＢ−ＨＴ９２０ならびにヘキサレリン 、ＷＯ９３／０４０８１に記載されたような新たに発見されたＧＨＲＰ−２の様 な その他の成長ホルモン分泌促進物質；または成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲ Ｈ、またＧＲＦと呼ばれている）およびその類似体；または成長ホルモンおよび その類似体；またはＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２を含むソマトメジン；またはク ロニジン、キシラジン、デトミジンおよびメデトミジン（クロニジンは合衆国特 許第３，２０２，６６０号に開示されており、ここに参照として採用する、キシ ラジンは合衆国特許第３，２３５，５５０号に開示されており、ここに参照とし て採用する、およびメデトミジンは合衆国特許第４，５４４，６４４号に開示さ れており、ここに参照として採用する）の様なアドレナリン作用性アゴニスト； または、スミトリプタンの様なセロトニン５ＨＴＩＤアゴニスト；またはフィソ スチグミンおよびピリドスチグミンのようなソマトスタチンあるいはその放出を 阻害する薬剤；と組み合わせると、哺乳動物の外因性ＧＨレベルの増加に有用で ある。式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩をＧＲＦと組み合わせると、結果と して外因性成長ホルモンの相乗的増加をもたらす。 当業者らに周知のように、成長ホルモンの既知の用途および潜在的用途は、多 彩であり多項目である［「ヒト成長ホルモン」("Human Growth Hormone")、Ｓｔ ｒｏｂｅｌおよびＴｈｏｍａｓ，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａ１ Ｒｅｖｉｅ ｗｓ，４６，１−３４，１９９４；Ｔ．Ｒｏｓｅｎら、Ｈｏｒｍ Ｒｅｓ．，４ ３，９３−９９、１９９５；Ｍ．Ｄｅｇｅｒｂｌａｄら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ ｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１３３，１８０−１８８、 １９９５；Ｊ．Ｏ．Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１３０，２２４−２２８，１９９４；Ｋ． Ｃ．Ｃｏｐｅｌａｎｄら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｅｎｄｏ ｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，Ｖｏｌ．７８，Ｎｏ．５ ，１０３４０−１０４７；Ｊ．Ａ．Ａｌｏｉら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉ ｎｉｃａｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，Ｖ ｏｌ．７９，Ｎｏ．４，９４３−９４９；Ｆ．Ｃｏｒｄｉｄｏら、Ｍｅｔａｂ． Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．，４４（６），７４５−７４８，１９９５；Ｋ．Ｍ．Ｆａｉ ｒｈａｌｌら、Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．，１４５（３），４１７−４２６， １９９５；ＲＭ．Ｆｒｉｅｂｏｅｓら、Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ， ６１（５），５８４−５８９、１９９５；および、Ｍ．Ｌｌｏｖｅｒａら、Ｉｎ ｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、６１（１），１３８−１４１、１９９５を参照のこと］ 。このように、外因性成長ホルモンの放出を刺激する目的での式Ｉの化合物の( Ｌ)−(＋)−酒石酸塩の投与は、成長ホルモンそれ自身と同様の効果または用途 を持ちうる。これらの多様な成長ホルモンの用途は以下の様に要約することがで きる；初老のヒトの成長ホルモン放出の刺激；成長ホルモン欠乏症の成人の治療 ；グルココルチコイドの異化を促進する副作用の防止；骨粗鬆症の治療；免疫系 の刺激；創傷治癒の促進；骨折修復の促進；成長遅滞の治療；ＰＣＴ出願ＷＯ９ ５／２８１７３およびＷＯ９５／２８１７４に開示したようなうっ血性心不全の 治療（うっ血性心不全の治療への効力についての成長ホルモン分泌促進物質のア ッセイ方法の一例は、Ｒ．Ｙａｎｇら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．９２ ，Ｎｏ．２，ｐ２６２、１９９５に開示されている）;急性あるいは慢性の腎不 全(renal failure)または腎機能不全(renal insufficiency)の治療；成長ホルモ ン欠乏症児を含む生理学的小人症、慢性疾患による小人症の治療；肥満治療；プ ラーダー−ウィリー症候群およびターナー症候群による成長遅滞の治療；熱傷患 者または胃腸手術のような大手術後の回復の促進および入院期間の減少；子宮内 成長遅滞、骨格形成異常、副腎皮質機能亢進症およびクッシング症候群の治療； ストレス患者の成長ホルモンの置換；軟骨形成不全症(osteochondorodysplasias )、ヌーナン症候群、睡眠障害、アルツハイマー病、創傷治癒遅滞および社会性 喪失(psychosocial deprivation)の治療；肺機能不全(pulmonary dysfunction) および通風装置依存症(ventilator dependency)の治療；大手術後のタンパク質 異化応答の減衰、呼吸不良症候群の治療；癌またはＡＩＤＳのような慢性疾患に よる悪液質およびタンパク質損失の減少；ＴＰＮ(total parenteral nutrition) （完全非経口栄養法）患者の体重増加およびタンパク質獲得の促進；膵島細胞症 を含む高インスリン血症の治療；排卵誘発、並びに胃潰瘍および十二指腸潰瘍の 予防および治療のためのアジュバント治療；胸腺発達の刺激および胸腺機能の加 齢による衰えの予防；長期間血液透析を受けている患者の付随療法；予防接種後 の免疫抑制患者の治療および抗体応答の強化；虚弱老人の筋力の改善、筋肉量、 運動性の増加、皮膚の厚さ、代謝ホメオスタシス、腎臓ホメオスタシスの維持； 骨芽 細胞、骨の再生および軟骨成長の刺激；末梢および薬剤誘導の神経細胞障害、ギ ヤン−バレー症候群、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、脳血管性発作および 脱髄疾患のような神経性疾患の治療；ペット動物の免疫系の刺激およびペット動 物の加齢による疾病の治療；家畜の成長促進；並びに、ヒツジの羊毛成長の刺激 。 数多くの化合物が上に列挙した疾病治療への努力または治療指標に現在用いら れており、これらは当業者らに既知であろう。治療薬のいくつかは上記の通りで あるが、これら治療薬を成長促進剤と組み合わせると、これらの様々な治療薬の 同化を促進し、好ましい性質が表れる。このような組み合わせの内、治療薬およ び式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩は、これらの化合物および分泌促進物質 を単独で用いた場合に効果のある投与量レベルの１／１００から１倍までの範囲 の投与量を、独立的に、順番に、または同時に投与することができる。骨吸収を 阻害し、骨粗鬆症を予防し、骨折を減少させ、骨折治癒を強化し、骨形成を刺激 し、そして骨密度(bone mineral density)を増加させる組み合わせ治療は、ビス ホスホネートおよび式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩の組み合わせによって 、実現することができる。ビスホルホネートとＧＨ分泌促進物質を用いた組み合 わせ療法の議論に関しては、ＰＣＴ出願ＷＯ９５／１１０２９を参照のこと。こ のような効用を持つビスホスフォネートの用途については、例えば、Ｈａｍｄｙ ，Ｎ．Ａ．Ｔ．，Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｂｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ ｉｎ Ｍｅｔ ａｂｏｌｉｃ Ｂｏｎｅ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｅｎｄｏｃ ｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，１９９３，４，１９−２５、に論評されている。こ のような効用を持つビスホスフェートには、限定するわけではないが、アレンド ロネート、チルドロネート、ジメチル−ＡＰＤ、リセドロネート、エチドロネー ト、ＹＭ−１７５、クロドロネート、パミドロネートおよびＢＭ−２１０９９５ （イバンドロネート）が含まれる。それらの効能に従って、ビスホスホネートで は毎日の経口投薬レベル０．１ｍｇ−５ｇを、そして、式Ｉの化合物の(Ｌ)−( ＋)−酒石酸塩では毎日の投薬量レベル０．０１ｍｇ／ｋｇ−２０ｍｇ／ｋｇ体 重を、骨粗鬆症患者に投与すると、有効な治療効果が得られる。 式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を、哺乳動物のエストロゲンアゴニスト ／アンタゴニストと組み合わせることもできる。任意のエストロゲンアゴニスト ／アンタゴニストを、本発明の本態様の第二の化合物として用いることもできる 。用語「エストロゲンアゴニスト／アンタゴニスト」は、エストロゲンレセプタ ーと結合し、骨の代謝回転を阻害し、そして骨の損失を防ぐ化合物を指す。特に 、エストロゲンアンタゴニストは、ここでは、哺乳動物組織内のエストロゲンレ セプターと結合する能力を持ち、一つあるいはそれより多くの組織中でエストロ ゲンの作用を擬態する能力を持つ、化学化合物と定義される。エストロゲンアン タゴニストは、ここでは、哺乳動物の組織中のエストロゲンレセプター部位に結 合する能力を持ち、一つあるいはそれより多くの組織中でのエストロゲン作用を ブロックする能力を持つ、化学化合物と定義される。当業者は、そのような活性 を、エストロゲン結合アッセイ、標準的な骨の組織形態計測およびデンシトメー ター法を含む標準アッセイに従って、容易に測定する（Ｅｒｉｋｓｅｎ，Ｅ．Ｆ ．ら、Ｂｏｎｅ Ｈｉｓｔｏｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｙ，Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９９４，１−７４；Ｇｒｉｅｒ，Ｓ．Ｊ．ら、Ｔｈｅ Ｕｓｅ ｏｆ Ｄｕａｌ−Ｅｎｅｒｇｙ Ｘ−Ｒａｙ Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｍ ｅｔｒｙ Ｉｎ Ａｎｉｍａｌｓ，Ｉｎｖ．Ｒａｄｉｏｌ．，１９９６、３１（ １）：５０−６２；Ｗａｈｎｅｒ，Ｈ．Ｗ．およびＦｏｇｅｌｍａｎ，Ｉ．，Ｔ ｈｅ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ；Ｄｕａｌ Ｅ ｎｅｒｇｙ Ｘ−Ｒａｙ Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｍｅｔｒｙ ｉｎ Ｃｌｉｎｉ ｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ．，Ｍａｒｔｉｎ Ｄｕｎｉｔｚ Ｌｔｄ．，Ｌｏｎ ｄｏｎ，１９９４，１−２９６を参照のこと）。これらの化合物の様々を、以下 に記載し引用しているが、その他のエストロゲンアゴニスト／アンタゴニストも 当業者らには既知であろう。好ましいエストロゲンアゴニスト／アンタゴニスト は、ドロロキシフェン（フェノール，３−[１−[４[２−(ジメチルアミノ)エト キシ]−フェニル]−２−フェニル−１−ブテニル]−，(Ｅ)−）および合衆国特 許第５，０４７，４３号に開示されている関連化合物であり、その開示をここに 参照として採用する。 もう一つの好ましいエストロゲンアゴニスト／アンタゴニストは、タモキシフ ェン：（エタナミン，２−[４−(１，２−ジフェニル−１−ブテニル）フェノキ シ]−Ｎ，Ｎ−ジメチル，(Ｚ)−２−，２−ヒドロキシ−１，２，３−プロパン ト リーカルボキシレート（１：１））および合衆国特許第４，５３６，５１６号に 開示された関連化合物であり、その開示をここに参照として採用する。もう一つ の関連化合物は、合衆国第４，６２３，６６０号に開示された４−ヒドロキシタ モキシフェンであり、その開示はここに参照として採用される。 もう一つの好ましいエストロゲンアゴニスト／アンタゴニストは、ラロキシフ ェン：（メタノン、[６−ヒドロキシ−２−(４−ヒドロキシフェニル)ベンゾ[ｂ ]チエン−３−イル][４−[２−(１−ピペリジニル)エトキシ]フェニル]−、ヒド ロクロリド）および合衆国第４，４１８，０６８号に開示された関連化合物であ り、その開示をここに参照として採用する。 その他の好ましいエストロゲンアゴニスト／アンタゴニストは、イドキシフェ ン：ピロリジン，１−[４−[[１−(４−ヨードフェニル)−２−フェニル−１− ブテニル]フエノキシ]エチル]、および合衆国第４，８３９，１５５号に開示さ れた関連化合物であり、その開示をここに参照として採用する。 その他の好ましいエストロゲンアゴニスト／アンタゴニストには、一般に譲渡 された合衆国第５，５５２，４１２号に記載された様な化合物が含まれ、その開 示をここに参照として採用する。そこに記載された特に好ましい化合物は： シス−６−(４−フルオロ−フェニル)−５−[４−(２−ピペリジン−１−イル −エトキシ)−フェニル]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オ ール； (−)−シス−６−フェニル−５−[４−(２−ピロリジン−１−イル−エトキシ ]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール； シス−６−フェニル−５−[４−(２−ピロリジン−１−イル−エトキシ)−フ ェニル]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール； シス−１−[６’−ピロロジノエトキシ−３’−ピリジル]−２−フェニル−６ −ヒドロキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン； １−(４’−ピロリジノエトキシフェニル)−２−(４”−フルオロフェニル)− ６−ヒドロキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン； シス−６−(４−ヒドロキシフェニル)−５−[４−(２−ピペリジン−１−イル −エトキシ)−フェニル]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オ ール；および、 １−(４’−ピロリジノエトキシフェニル)−２−フェニル−６−ヒドロキシ− １，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン； である。 その他のエストロゲンアゴニスト／アンタゴニストは、合衆国特許第４，１３ ３，８１４号に記載されており、その開示をここに参照として採用する。合衆国 特許第４，１３３，８１４号は、２−フェニル−３−アロイル−ベンゾチオフェ ンおよび２−フェニル−３−アロイルベンゾチオフェン-1-オキシドの誘導体を 開示する。 以下の段落では、様々な抗再吸収剤の好ましい投与量の範囲を提供する。 用いた抗再吸収剤の量は、骨損失阻害剤としてのその活性によって測定される 。この活性は、上記のようなプロトコールを用いて、個々の化合物の薬物動態学 および骨損失を阻害するその最小最大有効投与量によって、決定される。 一般的に、本発明の、例えば骨粗鬆症を治療する、エストロゲンアゴニスト／ アンタゴニストの、活性ついての有効投与量は、（本発明の式Ｉの化合物の(Ｌ) −(＋)−酒石酸塩と組み合わせて用いた場合、）０．０１−２００ｍｇ／ｋｇ／ 日、好ましくは、０．５−１００ｍｇ／ｋｇ／日、の範囲である。 詳細には、ドロロキシフェンの有効投与量は、０．１−４０ｍｇ／ｋｇ／日、 好ましくは、０．１−５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内にある。 詳細には、ラロキシフェンの有効投与量は、０．１−１００ｍｇ／ｋｇ／日、 好ましくは、０．１−１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内にある。 詳細には、タモキシフェンの有効投与量は、０．１−１００ｍｇ／ｋｇ／日、 好ましくは、０．１−５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内にある。 特に、シス−６−(４−フルオロ−フェニル)−５−[４−(２−ピペリジン−１ −イル)−フェニル]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール ； (−)−シス−６−フェニル−５−[４−(２−ピロリジン−１−イル−エトキシ )−フェニル]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール； シス−６−フェニル−５−[４−(２−ピロリジン−１−イル−エトキシ)−フ ェ ニル]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール； シス−１−[６’−ピロロジノエトキシ−３’−ピリジル]−２−フェニル−６ −ヒドロキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン； １−(４’−ピロリジノエトキシフェニル)−２−(４”−フルオロフェニル)− ６−ヒドロキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン； シス−６−(４−ヒドロキシフェニル)−５−[４−(２−ピペリジン−１−イル −エトキシ)−フェニル]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オ ール；または、 １−(４’−ピロリジノエトキシフェニル)−２−フェニル-６−ヒドロキシ−１ ，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン： についての有効投与量は、０．０００１−１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、 ０．００１−１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内である。 詳細には、４−ヒドロキシタモキシフェンの有効投与量は、０．０００１−１ ００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、０．００１−１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内に ある。ラット下垂体細胞からのＧＨ放出の刺激に関するアッセイ 培養したラット下垂体細胞からのＧＨ分泌刺激能を持つ化合物を、以下のプロ トコールを用いて同定する。また、この試験は、標準との比較での投与量レベル の決定に有用である。細胞を週齢６週の雄のＷｉｓｔａｒラットの下垂体から単 離する。断頭後、下垂体前葉を、カルシウムまたはマグネシウムを含まない冷た い無菌のハンクス平衡塩溶液（Hank's balanced salt solutlon）（ＨＢＳＳ） 内に取る。組織を細かく切り刻み、次に、１０Ｕ／ｍｌの細菌プロテアーゼ（Ｅ Ｃ３．４．２４．４、Ｓｉｇｍａ Ｐ−６１４１、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉｓｓ ｏｕｒｉ）／ＨＢＳＳを用いて、機械補助酵素分散を二回行う。組織−酵素混合 物を攪拌フラスコ中に入れ、３０ｒｐｍ、５％ ＣＯ₂大気中、約３７℃で約３ ０分間攪拌するが、約１５分および約３０分間後、１０ｍｌピペットを用い、手 で粉砕する。この混合物を、２００ｘｇで約５分間、遠心分離する。ウマの血清 （最終濃度３５％）を、上清に加え、過剰のプロテアーゼを中和する。ペレット を、新たにプロテアーゼ（１０Ｕ／ｍｌ）中に再縣濁し、前記条件下でさらに約 ３０分間攪拌し、そして手で粉砕し、最後に２３エージの針を通過させる。再度 、ウマ血清（最終濃度３５％）を加え、次いで両方の消化物からの細胞を合わせ 、ペレットにし（２００ｘｇで約１５分間）、４．５ｇ／ｌグルコース、１０％ ウマ血清、２．５％ウシ胎児血清、１％の非必須アミノ酸、１００Ｕ／ｍｌナイ スタチンおよび５０ｍｇ／ｍｌゲンタマイシン硫酸塩（Ｇｉｂｃｏ、Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）を補充した培養基（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ）（Ｄ−ＭＥＭ））中に再縣濁 し、計数する。細胞を、４８穴のＣｏｓｔａｒ^TM（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓ ｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ）皿に６．０−６．５ｘ１０⁴細胞／ｃｍ²を塗布し、培養 基中で３−４日間、培養する。 ＧＨ分泌アッセイの直前、培養穴を放出用培地(release medium)で二度リンス し、次に、放出用培地（２５ｍＭ Ｈｅｐｅｓ，ｐＨ７．４で平衡化され、０． ５％のウシ血清アルブミンを含む、Ｄ−ＭＥＭ）中、３７℃で３０分間、平衡化 した。試験化合物をＤＭＳＯ中に溶解し、次いで前もって暖めておいた放出用培 地中で希釈する。アッセイは、４重に行う。個々の培養穴に０．５ｍｌの放出用 培地（ベヒクルまたは試験化合物を含む）を加えることによって、アッセイを開 始する。インキュベーションを約３７℃で約１５分間行い、次いで、２０００ｘ ｇで約１５分間遠心分離して細胞物質を除去し、放出用培地を採取することによ ってアッセイを終結させる。以下に記載した標準ラジオイムノアッセイプロトコ ールによって、上清中のラット成長ホルモン濃度を定量する。ラット成長ホルモンの測定 ラットの成長ホルモン濃度は、ラット成長ホルモン対照標準調製物（ＮＩＤＤ Ｋ−ｒＧＨ−ＲＰ−２）およびＤｒ．Ａ．Ｐａｒｌｏｗ（Ｈａｒｂｏｒ−ＵＣＬ Ａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｔｏｒｒｅｎｃｅ，ＣＡ）から入手した、 サルで産生させたラット成長ホルモン抗血清（ＮＩＤＤＫ−抗−ｒＧＨ−Ｓ−５ ）を用いて、二重抗体ラジオイムノアッセイによって、定量された。さらに、ラ ット成長ホルモン（１．５Ｕ／ｍｇ．＃Ｇ２４１４，Ｓｃｒｉｐｐｓ Ｌａｂ ｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を、トレーサーとして用いるために、クロラミ ンＴ法によって比活性おおよそ３０μＣｉ／μｇにヨウ素化する。サルのＩｇＧ （ＩＣＮ／Ｃａｐｐｅｌ，Ａｕｒｏｒａ，ＯＨ）＋ポリエチレングリコールＭＷ １０，０００−２０，０００に、最終濃度が４．３％になるようにヤギの抗血 清を加えることによって、免疫複合体を得る；回収は遠心分離によって行う。こ のアッセイは、上記の基本レベルのチューブ当たり、ラットの成長ホルモン０． ０８−２．５μｇの作用範囲(working range)を持つ。試験化合物の静脈投与後の外因性刺激によるラットの成長ホルモンの放出につい てのアッセイ 日齢２１日の雌のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒ ｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）を、化合物試 験の前、おおよそ１週間、局所動物飼養条件（２４℃、１２時間は明、１２時間 は暗、のサイクル）に慣れさせる。すべてのラットが、無制限に、水および市販 のペッレット状食餌（Ａｇｗａｙ Ｃｏｕｎｔｒｙ Ｆｏｏｄ，Ｓｙｒａｃｕｓ ｅ ＮＹ）に近づけるようにする。ＮＩＨ Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａ ｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ａｎｉｍａｌｓに従って 、実験を行う。 実験日、試験化合物を、食塩水中に１％エタノール、１ｍＭ 酢酸および０． １％ウシ血清アルブミンを含むベヒクルに溶解する。ラットの体重を測定し、ペ ントバルビタールナトリウム（Ｎｅｍｂｕｔｏｌ^R、５０ｍｇ／ｋｇ体重）の腹 腔内注射を通して麻酔する。麻酔薬投与の１４分後、尾の先に傷を付け、微小遠 心管中に血液を滴らすことによって、血液サンプルを採取する（基準血液サンプ ル、おおよそ１００μｌ）。麻酔薬投与の１５分後、試験化合物を、尾静脈への 静脈注射（全注射量１ｍｌ／ｋｇ体重）によって、送達する。化合物投与後、５ 、１０および１５分後、尾からさらに血液サンプルを採取する。遠心分離（１０ ℃、１４３０ｘｇで１０分間）によって血清を分離するまで、血液サンプルを氷 上に保つ。上記のラジオイムノアッセイによる血清成長ホルモンの定量を行うま では、血清を−８０'Ｃに保っておく。イヌへの経口投与後の外因性刺激による成長ホルモンの放出の評価 投与の日、おおよその投与量の試験化合物を計り取り、水に溶解する。投与量 ０．５−３ｍｌ／ｋｇ容量を、栄養食餌療法によって、それぞれの投与レジメン 毎に２−４頭のイヌに、送達する。血液サンプル（５ｍｌ）を、頸静脈から、直 接静脈穿刺によって、投与前、そして投与後０．１７、０．３３、０．５、０． ７５、１、２、４、６、８および２４時間に、リチウムヘパリンを含む５ｍｌの Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒｓを用いて収集する。調製された血漿は、分析するまで− ２０℃に保存される。イヌの成長ホルモンの測定 イヌ成長ホルモン（ヨウ素化するための抗原および対照標準調製物ＡＦＰ−１ ９８３Ｂ）ならびにＤｒ．Ａ．Ｐａｒｌｏｗ（Ｈａｒｂｏｒ−ＵＣＬＡ、Ｍｅｄ ｉｃａｌ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｔｏｒｒｅｎｃｅ，ＣＡ）から入手したサルで産生さ せたイヌの成長ホルモン抗血清（ＡＦＰ−２１４５２５７８）を用いた標準ラジ オイムノアッセイプロトコールによって、イヌの成長ホルモン濃度を定量する。 トレーサーは、イヌの成長ホルモンのクロラミンＴ−ヨウ素化によって、比活性 が２０−４０μＣｉ／μｇになるように、生成される。免疫複合体は、ヤギの抗 血清を、サルのＩｇＧ（ＩＣＮ／Ｃａｐｐｅｌ，Ａｕｒｏｒａ，ＯＨ）＋ポリエ チレングリコール、ＭＷ１０，０００−２０，０００に、最終濃度が４．３％に なるように加えることによって、得られる。このアッセイにより、０．０８−２ ．５μｇのイヌＧＨ／チューブの作用範囲を示した。長期経口投与後のイヌのイヌ成長ホルモンおよびインスリン成長因子−１レベル の評価 イヌは、７日または１４日のいずれかの間、毎日、試験化合物を摂取する。投 与の田ま毎日、適当な投与量の試験化合物を計り取り、水に溶かす。個々の投与 レジメン毎に５頭のイヌを用い、０．３−５ｍｌ／ｋｇの容量を栄養食餌療法に よって送達する。血液サンプルを、０、３、７、１０および１４日に収集する。 血液サンプル（５ｍｌ）を、投与前、投与後０．１７、０．３３、０．４、０． ７５４、１、２、３、６、８、１２および２４時間、０、７および１４日に、リ チウムヘパリンを含む５ｍｌのＶａｃｕｔａｉｎｅｒを用いて、頸静脈の直接静 脈穿刺によって、得る。さらに、血液を、投与前、および８時間後、３および１ ０日後に引き抜く。調製血漿は、分析するまで、−２０℃に保存される。雌ラットの研究 この研究では、エストロゲンの欠乏したおよびエストロゲン供給の充分な雌ラ ットでの、体重、身体組成およびグルコース、インスリン、ラクトースおよび脂 質の非断食血漿濃度への擬似ＧＨＲＰによる長期治療効果を評価する。ＧＨ放出 薬剤の静脈内投与への血清ＧＨレベルの急性応答を、投与最終日に評価した。処 置期間を通して、体重を毎週モニターし、さらに身体組成ならびにグルコース、 インスリン、ラクトース、コレステロールおよびトリグリセリドの血漿レベルを 処置終了時に評価した。 処女の雌Ｓｐｒａｇｕｅ−ＤａｗｌｅｙラットをＣｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）から入手し、週齢 およそ１２週で左右の卵巣摘出（Ｏｖｘ）または擬似手術（Ｓｈａｍ）を行った 。擬似手術では、いったん卵巣を体外に出し、そして腹腔内に戻した。手術後、 ラットを、標準動物飼養条件（約２４℃で１２時間は明／１２時間は暗のサイク ル）下、２０ｃｍｘ３２ｃｍｘ２０ｃｍのケージ内で一匹づつ飼育した。全ラッ トは、水および市販のペレット食（Ａｇｗａｙ ＰｒｏＬａｂ ３０００，Ａｇ ｗａｙ Ｃｏｕｎｔｒｙ Ｆｏｏｄ，Ｉｎｃ．，Ｓｙｒａｃｕｓｅ，ＮＹ）に自 由に接近できるようにした。実験は、ＮＩＨ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａ ｌｓに従って、行われた。 手術のおおよそ７ヶ月後、ＳｈａｍおよびＯＶＸラットの体重を測定し、ラン ダムにグループ分けした。経口栄養食餌療法で、ラットに、毎日、ベヒクル（１ ％エタノール／蒸留脱イオン水）、０．５ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇの成長 ホルモン放出薬剤のいずれか１ｍｌを、９０日間、投与した。研究中、毎週ラッ トの体重を測定した。最終経口投与の２４時間後、試験薬剤に対する血清成長ホ ルモン（ＧＨ）の急性応答を、以下の方法に従って、評価した。ペントバルビタ ールナトリウム５０ｍｇ／ｋｇでラットを麻酔した。麻酔ラットの体重を測定し 、基準血液サンプル（〜１００μｌ）を尾静脈から収集した。次いで、試験薬剤 （成長ホルモン放出薬剤またはベヒクル）を、尾静脈を通して、１ｍｌを静脈内 投与した。注射のおおよそ１０分後、二度目の１００μｌの血液サンプルを尾か ら収集した。血液を約４℃で凝血させ、次いで、２０００ｘｇで約１０分間、遠 心分離した。血清は約−７０℃に保存した。前記のラジオイムノアッセイで、血 清成長ホルモン濃度を定量した。この方法の後、麻酔したそれぞれのラットの全 身を、二重エネルギーＸ線吸収計（ＤＥＸＡ、Ｈｏｌｏｇｉｃ ＱＤＲ １００ ０／Ｗ，Ｗａｌｔｈａｍ ＭＡ）によってスキャニングした。頸動脈穿刺によっ て、ヘパリン化チューブ中に最終血液サンプルを収集した。血漿を遠心分離によ って単離し、上記のように凍結保存した。 Ｂｉｎａｘ Ｃｏｒｐ．（Ｐｏｒｔｌａｎｄ，Ｍａｉｎｅ）のキットを用いた ラジオイムノアッセイによって、血漿インスリンを定量する。アッセイ内変動係 数は、≦１０％である。血漿トリグリセリド、全コレステロール、グルコースお よびラクトースレベルを、Ａｂｂｏｔｔ ＶＰ^TMおよびVＰ Ｓｕｐｅｒ Ｓｙ ｓｔｅｍ^R Ａｕｔｏａｎａｌｙｚｅｒ（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉ ｅｓ，Ｉｒｖｉｎｇ，Ｔｅｘａｓ）を用い、それぞれ、Ａ−Ｇｅｎｔ^TM トリグ リセリド、コレステロールおよびグルコース試験試薬システムならびにＳｉｇｍ ａ製ラクトースキットを用いて、測定する。血漿インスリン、トリグリセリド、 全コレステロールおよび成長ホルモン放出ペプチド（ＧＨＲＰ）または式Ｉの化 合物のような擬似ＧＨＲＰのラクトース低下活性を、ベヒクル処理対照群と共に 、統計分析（非対合ｔ−ｔｅｓｔ）によって定量する。 式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を、経口、非経口（例えば、筋肉内、腹 腔内、静脈内あるいは皮下注射または移植）、鼻腔、膣内、直腸、舌下、または 局所経由で、投与することができ、医薬として許容しうるキャリヤーと調合する と、それぞれの投与形路に適当な投与形を提供することができる。 経口投与用の固体投与形には、カプセル、錠剤、ピル、粉末および顆粒が含ま れる。このような固体投与形では、式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を、ス クロース、ラクトースまたはスターチのような、少なくとも一つの不活性な医薬 として許容しうるキャリヤーと、混合する。また、そのような投与形は、通常、 そのような不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えばステアリン酸マグネシウム のような潤滑剤、を含むことができる。カプセル、錠剤およびピルの場合、投与 形は、バッファー化薬剤を含むこともできる。錠剤およびピルを、腸管コーティ ング(enteric coating)で、さらに調製することもできる。 経口投与用の液体服用形は、医薬として許容しうるエマルジョン、溶液、縣濁 液、シロップ、水のような、この技術分野で通常用いられる不活性希釈剤を含む エレキシルを含む。また、そのような不活性希釈剤の他、組成物は、湿潤剤、エ マルジョン化薬剤、縣濁剤、甘味料、香味料および香料のようなアジュバントを 含むこともできる。 本発明による非経口投与用調製物は、無菌水溶液または非水性溶液、縣濁液ま たはエマルジョンを含む。非水溶性溶媒またはベヒクルの例は、プロピレングリ コール、ポリエチレングリコール、オリーブ油およびコーン油のような野菜油、 ゼラチンならびにオレイン酸エチルのような注射可能な有機エステルである。そ のような投与形もまた、保存剤、湿潤剤、エマルジョン剤および分散剤のような アジュバントを含むことができる。それらは、例えば、細菌残留フィルターを通 したろ過によって、組成物中に滅菌剤を入れることによって、組成物に放射線照 射することによって、または、組成物を加熱することによって、滅菌することが できる。また、それらを滅菌固体組成物の形で製造し、滅菌水またはいくつかの その他の無菌の注射可能媒体に、使用直前に溶解することもできる。 直腸または膣内投与用組成物は、好ましくは、活性物質に加えて、ココアバタ ーまたは坐薬ワックスのような補助剤を含むことのできる坐薬である。 また、鼻腔または舌下投与用組成物は、この技術分野で周知の標準的な補助剤 を加えて製造することができる。 本発明の組成物中の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩の投与量は、変える ことができる；しかしながら、適当な投与形が得られるような量であることが必 要である。選択された投与量は、所望する治療効果、投与経路、そして治療の期 間に依存する。一般的に、０．０００１−１００ｍｇ／ｋｇ体重の投与レベルを 、毎日、ヒトおよびその他の動物（例えば哺乳動物）に投与すると、成長ホルモ ンが効果的に放出される。 好ましい投与量範囲は、０．０１−５０ｍｇ／ｋｇ体重／日であり、単一の投 与量として投与することができ、また複数回の投与量に分けることもできる。 以下のスキームは、式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩の合成について説明 している。印^*nは、立体化学中心を示している。スキーム中、Ｐｒｔ゛は、任意 の適当なアミノ保護基を示すために用いられており、これらは当業者らには既知 であろう。 以下に、前記スキームに示された反応の各段階について記載する。以下の記載 では、アミノ保護基Ｐｒｔは、好ましいアミノ保護基ＢＯＣで示されている。 段階 ａ：約０℃から室温、好ましくは０℃で、アセトン、メチルエチルケ トン、または、好ましくはＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）のような反応不活性 極性非プロトン性溶媒中の化合物Ａ溶液に、ピコリルクロリド塩酸塩、Ｌｉ₂Ｃ Ｏ₃、ＣｓＣＯ₃または好ましくは炭酸カリウムのような炭酸塩、およびヨウ化カ リウムまたはヨウ化テトラブチルアンモニウムを加える。約−２０℃〜約７０℃ 、好ましくは０℃で、約２〜１６時間、好ましくは約２時間、攪拌し、その後、 氷浴を除き、ＤＡＢＣＯ（１，４−ジアゾビシクロ[２．２．２]オクタン）(1,4 -diazobicyclo[2.2.2]octane)を加える。反応混合物を、約１５−３０分間攪拌 し、水およびトルエン、ジメチルエーテル、または好ましくはＩＰＥ（イソプロ ピルエーテル）の様な非極性有機溶媒中に注ぎ入れる。有機層を分離し、この技 術分野で既知の標準的方法を用いて作業を進めると、化合物Ｂが得られる。 段階 ｂ：ＣＦ₃ＣＨ₂ＮＨＮＨ₂の７０％水溶液を、エタノール、水または トルエン中の水溶液として用い、好ましくは、ＣＦ₃ＣＨ₂ＮＨＮＨ₂の７０％水 溶液をトルエンで抽出する。最初、エタノール、または好ましくはトルエンのよ うな有機溶媒中の化合物Ｂの溶液に、無水２，２，２−トリフルオロエチルヒド ラジンを含むトルエン抽出物を加え、次に酢酸を加える。反応混合物を約６０− １１０℃、好ましくは７０℃に、約３０分−１２時間、好ましくは２時間、加熱 する。反応混合物を室温まで冷却し、ＮａＨＣＯ₃のような塩基性水溶液で中和 する。有機層を分離し、この技術分野で既知の標準的方法を用いて作業を進める と、化合物Ｃが得られる。 段階 ｃ：ＩＰＥまたはエタノール中のＨＣｌのような酸、トリフリック酸 、メタンスルホン酸のようなアルキルスルホン酸を、ＥｔＯＨ、ＩＰＥ、または 、好ましくはＣＨ₂Ｃｌ₂のような反応不活性有機溶媒中の化合物Ｃの溶液に加え る。混合物を約１−２時間攪拌し、次いで約０℃から室温、好ましくは０℃に冷 却し、次いで、トリエチルアミンのようなアミン塩基、またはＮＨ₄ＯＨを混合 物に加える。混合物を室温に暖め、さらなる有機溶媒で希釈し、そしてこ の技術分野で既知の標準的方法を用いて作業を進めると、化合物Ｄが得られる。 段階 ｄ：(Ｄ)−または(Ｌ)−酒石酸、好ましくは(Ｄ)−酒石酸を、室温で 、アセトン／水（約８：１から約９：１）中の化合物Ｄに加える。混合物を室温 で約１５分間〜一晩、好ましくは一晩攪拌し、固体をろ過し、集め、そして冷ア セトンで洗浄すると、式Ｅ化合物が得られる。好ましくは、化合物Ｅは、単一鏡 像体の(Ｄ)−酒石酸塩である。 段階 ｅ：ＴＨＦ／ＤＭＦ（約１：１から約２：１）中のＮ−ＢＯＣ−セリ ン、好ましくはＮ−ＢＯＣ−(Ｄ)−セリン（化合物Ｆ）の溶液に、約０℃で、ｎ −ＢｕＬｉまたはカリウムtert−ブトキシド溶液を加える。反応混合物を、約０ ℃で約１０−３０分間、好ましくは２０分間、攪拌し、次いで、２，４−ジフル オロベンジルブロミドを加える。室温に暖め、約６−２４時間攪拌の後、反応混 合物を真空下で濃縮し、ＴＨＦを除去し、１Ｎ ＨＣｌの様な酸性水溶液を加え 、混合物のｐＨを約３に調整する。次いで反応混合物を水およびＣＨ₃Ｃｌ₂また はＩＰＥのような有機溶媒の間で分配する。有機溶液を、この技術分野で既知の 標準的方法を用いて作業を進めると、化合物Ｇが得られる。この化合物Ｇは、好 ましくは、立体中心にＲ-配座を持ち、また(Ｄ)−鏡像体としても知られている 。 段階 ｆ：ＴＨＦ、ＣＨ₂Ｃｌ₂、ＩＰＥまたはその混合物、好ましくはＣＨ₂ Ｃｌ₂／ＩＰＥ（約１：１）の様な有機溶媒中の化合物Ｇの溶液に、メタンスル ホン酸のようなアルキルスルホン酸を加える。固体をろ過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＩＰ Ｅ混合液（１：１）で洗浄すると、化合物Ｈが得られる。この化合物は、好まし くは立体中心にＲ−配座を持ち、また(Ｄ)−鏡像体としても知られる。 段階 ｇ： ＴＨＦ／水（約４：１）中の化合物Ｈの溶液に、２−tert−ブ トキシカルボニルアミノ−２−メチルプロピオン酸−２，５−ジオキソ−ピロリ ジン−１−イルエステルおよびトリエチルアミンのようなアルキルアミンを加え る。反応混合物を、室温で約１−２４時間攪拌し、１０％クエン酸水溶液のよう な酸性水溶液を加えて急冷する。混合物を、酢酸エチルのような有機溶媒で分配 し、そして有機層を分離し、この技術分野で既知の標準的方法を用いて作業を進 めると、化合物Ｘが得られる。この化合物は、好ましくは、立体中心にＲ−配座 を持ち、また(Ｄ)−鏡像体としても知られている。化合物Ｘは、酸、アルキルエ ステル、または酸ハロゲン化物であることができ、Ｘは、ＯＨ、−Ｏ(Ｃ₁−Ｃ₄) アルキルまたはハロであり、酸が好ましい。 段階 ｈ：(ａ) 化合物Ｅ、好ましくは単一鏡像体である(Ｄ)−酒石酸塩を 、約−３５℃〜０℃、好ましくは約−６℃で、酢酸エチルに加える。溶液を約− ３０〜−５０℃に冷却し、次に、トリエチルアミンのようなアルキルアミンを加 える。反応混合物を、約３０−９０分間、約−７８℃〜約−２０℃で攪拌しろ過 すると、化合物Ｅの遊離塩基溶液が得られる。 (ｂ) 化合物Ｘ中のＸがＯＨである場合、好ましくは立体中心がＲ配座を持 つ化合物Ｘを、約−７８℃〜約−２０℃、好ましくは−３５℃で、段階ｈ（ａ） からの化合物Ｅの遊離塩基を含む酢酸エチル溶液の様な反応不活性有機溶媒、ト リエチルアミンのようなアルキルアミンおよびＰＰＡＡ（１−プロパンホスホン 酸環状無水物）(1-propane phosphonic acid cyclic anhydride)（酢酸エチル中 ５０％）に、加える。反応混合物を約１−２４時間攪拌し、この技術分野で既知 の標準的方法を用いて作業を進めると、化合物Ｊが得られ、この化合物は、好ま しくは、絶対配置および相対配置３ａ−(Ｒ)、１−(Ｒ)を持つ。 化合物Ｘ中のＸがＣｌである場合、化合物Ｘを、約−７８℃で、化合物Ｅの遊 離塩基を含むジクロロメタン溶液のような反応不活性溶媒およびトリエチルアミ ンのようなアルキルアミンに、加える。反応混合物を約１〜２４時間、約０〜３ ０℃で攪拌し、次に、この技術分野で既知の標準的方法を用いて作業を進めると 、化合物Ｊが得られ、この化合物は、好ましくは、絶対配置および相対配置、３ ａ−(Ｒ)、１−(Ｒ)、を持つ。 化合物Ｘ中のＸが−Ｏ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキル（メチルが好ましい）である場合、 化合物Ｘを、遊離塩基または結合塩基（好ましくはアルミニウム）の化合物Ｅの ジクロロメタンのような反応不活性溶媒中の溶液［化合物Ｅの結合塩基（−ＮＭ 、式中、Ｍ＝Ｌｉ、Ｎａ、Ｋ、ＭｇまたはＡｌ、好ましくはアルミニウム）は、 遊離アミン塩基を適当な試薬（例えば、Ｍ＝Ｌｉの場合、ブチルリチウムまたは ＬＤＡ；Ｍ＝Ｎａの場合、ＮａＨまたはＮａＮ(ＳｉＭｅ₃)₂；または、Ｍ＝Ｋの 場合、ＫＨまたはＫＮ(ＳｉＭｅ₃)₂；または、Ｍ＝Ｍｇの場合、任意のアルキル グ リニヤール試薬、好ましくはジエチルマグネシウムブロミド；または、Ｍ＝Ａｌ の場合、任意のトリアルキルアンモニウム試薬）好ましくはトリメチルアルミニ ウムと反応させることによって製造される］に加え、得られた反応混合物を、約 １−２４時間、約−２０〜１１０℃で攪拌し、この技術分野で既知の標準的方法 に従って作業を進めると、化合物Ｊが得られ、この化合物は、好ましくは、絶対 配置および相対配置、３ａ−(Ｒ)、１−(Ｒ)を持つ。 段階 ｉ：ＥｔＯＨ中のＨＣｌ、ＣＨ₂Ｃｌ₂中のメタンスルホン酸またはト リフリック酸(triflic acid)の様な酸を、約０℃から室温で、ＣＨ₂Ｃｌ₂、ＩＰ ＥまたはＴＨＦ中の化合物Ｊに加える。混合物を約４０分から約４時間、室温で 攪拌し、次に、ＮａＨＣＯ₃のような飽和させた塩基性水溶液を、溶液が中性ｐ Ｈになるまで加える。有機層を分離し、そしてこの技術分野で既知の標準的方法 に従って進めると、化合物Ｋが得られ、この化合物は、好ましくは、全体配置お よび相対配置、３ａ−(Ｒ)、１−(Ｒ)を持つ。 段階 ｊ：アルコール、好ましくはメタノール中の化合物Ｋ溶液に、Ｌ−( ＋)酒石酸を加える。反応混合物を約１−１２時間攪拌し、ろ過し、濃縮する。 粗残渣を酢酸エチルのような有機溶媒で希釈し、加熱し、ゆっくり室温まで冷却 させる。固体をろ過し、乾燥すると、式Ｉ化合物のＬ−(＋)酒石酸塩が白色の結 晶として得られ、この酒石酸塩は、好ましくは、絶対配置および相対配置、３ａ −(Ｒ)、１−(Ｒ)を持つ。 以下の実施例は、さらに説明する目的でのみ提供されたものであり、開示され た発明を制限するつもりのものではない。 シリカゲルを、カラムクロマトグラフィーに用いた。融点は、Ｂｕｃｈｉ ５ １０装置で測定し、修正はしていない。プロトンＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉ ａｎ ＸＬ−３００、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＣ−３００、Ｖａｒｉａｎ Ｕｎｉｔｙ ４００またはＢｒｕｋｅｒ ＡＣ−２５０、２５℃で記録した。化学シフトは 、トリメチルシランから下流へのｐｐｍ(Parts per million)で表した。実施例１ ２−アミノ−Ｎ−{１−(２，４−ジフルオロ−ベンジルオキシメチル)−２−オ キ ソ−２−[３−オキソ−３ａ−ピリジン−２−イルメチル−２−(２，２，２−ト リフルオロ−エチル)−２，３，３ａ，４，６，７−ヘキサヒドロ−ピラゾロ[４ ，３−ｃ]ピリジン−５−イル]−エチル}−２−メチル−プロピオンアミド Ｌ −(＋)酒石酸 Ａ． ４−オキソ−３−ピリジン−２−イルメチル−ピペラジン−１，３−ジカ ルボキシル酸 １−tert−ブチルエステル ３−エチルエステル ４−オキソ−ピペリジン−１，３−ジカルボキシル酸 １−tert−ブチルエス テル ３−エチルエステル（１０．３４ｇ、３８．２ｍｍｏｌ）／ＤＭＦ（４０ ｍｌ）溶液に、約０℃で、ピコリルクロリド塩酸塩（５．７ｇ、３４．７ｍｍｏ ｌ）カルボン酸カリウム（１４．４ｇ、１０４．１ｍｍｏｌ）およびヨウ化カリ ウム（５．７６ｇ、３４．７ｍｍｏｌ）を、加えた。約０℃で約２時間、攪拌の 後、氷浴を除去し、ＤＡＢＣＯ（９７３ｍｇ、８．６８ｍｍｏｌ）を加えた。反 応混合物を約３０分間攪拌し、水およびＩＰＥの混合物中に注ぎ入れた。有機層 を分離し、飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液および飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ₂Ｓ Ｏ₄上で乾燥させ、真空下で濃縮した。粗残渣をヘキサンから結晶化すると、白 色固体が得られた（８．１９ｇ、収率６５％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ： １．１７(ｔ，３Ｈ)、１．４８(ｓ，９Ｈ)、１．５５(ｓ，２Ｈ)、２．６１(ｍ ，１Ｈ)、２．７１(ｍ，１Ｈ)、３．３１−３．５(ｍ，３Ｈ)、４．１１(ｄ，２ Ｈ)、４．４９(ｄ，１Ｈ)、７．０６(ｂｒ ｓ，１Ｈ)、７．１７(ｄ，１Ｈ)、 ７．５４(ｍ，１Ｈ)、８．４０(ｓ，１Ｈ)． Ｂ． ３−オキソ−３ａ−ピリジン−２−イルメチル−２−(２，２，２−トリ フルオロ−エチル)−２，３，３ａ，４，６，７−ヘキサヒドロ−ピラゾロ[４， ３−ｃ]ピリジン−５−カルボキシル酸 tert−ブチルエステル ＣＦ₃ＣＨ₂ＮＨＮＨ₂（３２５ｍｌ、１．９８６ｍｏｌ）（Ａｌｄｒｉｃｈよ り入手）の７０％水溶液を、トルエン（３ｘ１２００ｍｌ）で抽出した。段階Ａ に記載の方法に従って作成された生成物（６００ｇ、１．６５５ｍｏｌ）／トル エン（９００ｍｌ）の溶液に、最初に、無水２，２，２−トリフルオロエチルヒ ドラジンを含むトルエン抽出物を、次に酢酸（１２１．４ｇ、１．９８６ｍｏ ｌ）を加えた。反応混合物を約７０℃で約２時間加熱し、次いで、もう一つのト ルエン抽出物である７０％ ２，２，２−トリフルオロエチルヒドラジン（５０ ｇ）水溶液を加えた。反応混合物を約８０℃で約３．５時間加熱し、室温に冷却 し、そして飽和ＮａＨＣＯ₃（２リットル）水溶液で希釈した。トルエン層を分 離し、飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ、そして真空下で 濃縮すると、油脂が得られた（７５４．８ｇ）。メタノール／水から結晶化する と、所望の生成物が白色固体として得られた（６０９．５ｇ）。¹Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ₃）δ：１．５０(ｓ，９Ｈ)、２．５３(ｄ，１Ｈ)、２．７０（ｂｒ ｓ，２Ｈ)、２．８８(ｂｒ ｓ，１Ｈ)、３．３１(ｍ，２Ｈ)、３．９７(ｍ， １Ｈ）、４．１９(ｍ，１Ｈ)、４．４６(ｂｒ ｓ，１Ｈ)、４．６３(ｂｒ ｓ ，１Ｈ)、７．０６(ｍ，２Ｈ)、７．５１(ｍ，１Ｈ)、８．３４(ｍ，１Ｈ)． Ｃ． ３ａ−ピリジン−２−イルメチル−２−(２，２，２−トリフルオロエチ ル) ２，３ａ，４，５，６，７−ヘキサヒドロピラゾロ［４，３−ｃ]ピリジン−３ −オン メタンスルホン酸（１１．６ｇ、１２１ｍｍｏｌ）を段階Ｂからの生成物（１ ０ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）／ＣＨ₂Ｃｌ₂（１００ｍｌ）溶液に、約３０分以上か けて、滴加した。反応混合物を約１時間攪拌し、次いで約０℃に冷却し、次いで 、トリエチルアミン（１８．６ｍｌ、１３３．１ｍｍｏｌ）を、添加漏斗を通し て加えた。混合物を、室温で約１時間以上暖め、さらにＣＨ₂Ｃｌ₂で希釈し、飽 和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、ＮａＳＯ₄上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮す ると、生成物が白色固体として得られた（７．２ｇ）。¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ：２．５１−２．７２(ｍ，４Ｈ)、３．３５(ｍ，２Ｈ)、３．４９(ｍ，２ Ｈ)、４．０３(ｍ，１Ｈ)、４．２５(ｍ，１Ｈ)、７．０８(ｄ，２Ｈ)、７．５ １(ｔ，１Ｈ)、８．３７(ｄ，１Ｈ)． Ｄ． ３ａ−ピリジン−２−イルメチル−２−(２，２，２−トリフルオロエチ ル)−２，３ａ，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−ピラゾロ[４，３−ｃ]ピリジ ン −３−オン(Ｄ)−酒石酸塩 機械スターラーを装備し、乾燥させ窒素パージした５リットルの丸底フラスコ 内で、Ｄ−(−)酒石酸（１２９ｇ、０．８６ｍｍｏｌ）を、段階Ｃで作成したア セトン／水（９：１、２４３０ｍｌ）中の化合物（２４３ｇ、０．７８ｍｏｌ） に、約１７℃で加えた。混合物を室温で一晩攪拌し、ろ過し、固体を集め、冷ア セトンで洗浄し、そして、真空下で乾燥させた。生成物を、黄色の固体として得 た（２８４ｇ、収率７８．８％）。 Ｅ． ２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−(２，４−ジフルオロ−ベン ジルオキシ)−プロピオン酸 ＴＨＦ（７リットル）およびＤＭＦ（３リットル）の混合物中のＮ−Ｂｏｃ− (Ｄ)−セリン（４５２ｇ、２．２０２６ｍｏｌ）の溶液に、約０℃で、カリウム tert−ブトキシド溶液（５１５．８ｇ、４．５９６３ｍｏｌ）を、加えた。反応 混合物を約０℃で約３０分間攪拌し、次いで、２，４−ジフルオロベンジルブロ ミド（４５６．５ｇ、２．２０５１ｍｏｌ）を加えた。室温に暖めた後、反応混 合物を真空下で濃縮して、ＴＨＦを除去した。反応混合物を４．５リットルのＨ₂ Ｏおよび４．５リットルのＩＰＥで分配した。層を分離し、１Ｎ ＨＣｌで水 層のｐＨを約３に調整した。水層を４リットルのＩＰＥで二度抽出した。有機溶 液をＮａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ、真空下で濃縮すると、黄色のろう状の固体が得ら れた（５１８．０ｇ、収率７０．９％）．¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．４ ４(ｓ，９Ｈ)、３．７３(ｍ，１Ｈ)、３．９４(ｄ，１Ｈ)、４．４４(ｂｒ ｓ ，１Ｈ)、４．５４(ｓ，２Ｈ)、５．３４(ｍ，１Ｈ)、６．７８(ｍ，１Ｈ)、６ ．８４(ｍ，１Ｈ)、７．３０(ｍ，１Ｈ)． Ｆ． ２−アミノ−３−(２，４−ジフルオロ−ベンジルオキシ)−プロピオン酸 、メタンスルホン酸塩 ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＩＰＥ（１：１、１２ｍｌ）中の段階Ｅからの生成物（１．１９ ｇ、３．５９ｍｍｏｌ）溶液に、シリンジを通して約１０分間以上かけて、メタ ンスルホン酸（１．７２ｇ、１７．９５ｍｍｏｌ）を加えた。瞬時に、固体が溶 液から沈殿した。約１時間後、固体をろ過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＩＰＥ混合物（１： １）で洗浄すると、９３９ｍｇの生成物が得られた（収率８０％）。 Ｇ． ２−(２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−プロピオニル アミノ)−３−(２，４−ジフルオロ−ベンジルオキシ)−プロピオン酸 ＴＨＦ／水（４：１、１０ｍｌ）中の段階Ｆからの生成物（５２０ｍｇ、１， ４６ｍｍｏｌ）溶液に、２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−プ ロピオン酸−２，５−ジオキソ−ピロリジン−１−イルエステル（４３８ｍｇ、 １．４６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３６９ｍｇ、３．６５ｍｍｏｌ） を加えた。反応混合物を、室温で約１時間攪拌し、１０％クエン酸水溶液（１０ ｍｌ）で急冷した。約１５分後、酢酸エチル（５０ｍｌ）を加え、有機層を分離 し、そして飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ、そして真空 下で濃縮すると、泡（５３４．１ｍｇ、収率８８％）が得られた。¹Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤ₃ＯＤ）δ：１．３８(ｂｒ Ｓ、１５Ｈ)、３．７７(ｄ，１Ｈ)、３．９ ２(ｄ，１Ｈ)、４．５２(ｍ，３Ｈ)、６．９２(ｍ，１Ｈ)、７．４１(ｍ，１Ｈ) 、７．５８(ｄ，１Ｈ)． Ｈ． ( １−{１−(２，４−ジフルオロ−ベンジルオキシメチル)−２−オキソ− ２−[３−オキソ−３ａ−ピリジン−２−イルメチル−２−(２，２，２−トリフ ルオロ−エチル)−２，３，３ａ，４，６，７−ヘキサヒドローピラゾロ[４，３ −ｃ]ピリジン−５−イル]エチルカルバモイル}−１−メチル−エチル)−カルバ ミド酸 tert−ブチルエステル （ａ） 段階Ｄに従って作成された化合物（５１７ｇ、１．１２ｍｏｌ）を、 約−６℃で、メカニカルスターラーを装備し乾燥し窒素パージした１２リットル の丸底フラスコ中の酢酸エチル（５１７０ｍｌ）に加えた。溶液を約−４０℃に 冷却し、次いでトリエチルアミン（３９８ｍｌ、２．８６ｍｏｌ）を約４５分以 上かけて加えた。反応混合物を、約−５０℃〜約−４０℃の温度で約９０分間、 攪拌し、窒素でパージした２２リットルの丸底フラスコ内にろ過し、そして酢酸 エチル（２０６８ｍｌ、約−５０℃まで前もって冷却済）で洗浄する と、遊離塩基が白色固体として得られた。 （ｂ） 段階Ｇに従って作成された化合物（４２５ｍｇ、１．０２ｍｏｌ）を 、約−３０℃で、段階Ｈ（ａ）からの生成物、トリエチルアミン（６５４ｍｌ、 ４．６９ｍｏｌ）およびＰＰＡＡ(1-puropanephosphonic acid cyclic anhydrid e)（１−プロパンホスホン酸環状無水物）（５０％／酢酸エチル、９１６ｍｌ、 １．５３ｍｏｌ）を含む酢酸エチル溶液に加えた。反応混合物を、約１時間攪拌 し、水および飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ、そして真 空下で濃縮すると、生成物が油脂として得られた（６３６ｍｇ、収率８７．８％ ）。 Ｉ． ２−アミノ−Ｎ−{１−(２，４−ジフルオロ−ベンジルオキシメチル)− ２−オキソ−２−[３−オキソ−３ａ−ピリジン−２−イルメチル−２−(２，２ ，２−トリフルオロ−エチル)−２，３，３ａ，４，６，７−ヘキサヒドロ−ピ ラゾロ{４，３−ｃ]ピリジン−５−イル］−エチル}−２−メチル−プロピオン アミド メタンスルホン酸（２５８．３ｍｌ、３．９８ｍｏｌ）を、約１５℃で約５５ 分以上かけて、メカニカルスターラーを装備した乾燥し窒素パージした２２リッ トルの丸底フラスコ中の段階Ｈからの生成物（５６６ｇ、０．７９６ｍｏｌ）／ ＣＨ₂Ｃｌ₂（１１，３２０ｍｌ）に滴加した。混合物を約２０℃で約４０分間攪 拌し、そして飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液を、ｐＨが約７．８になるまで加えた。有 機層を分け、水および飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥し、そ して真空下で濃縮すると、油脂状の生成物が得られた（３８８．８ｇ、収率８０ ％）。 Ｊ． ２−アミノ−Ｎ−{１−(２，４−ジフルオロ−ベンジルオキシメチル)− ２−オキソ−２−[３−オキソ−３ａ−ピリジン−２−イルメチル−２−(２，２ ，２−トリフルオロ−エチル)−２，３，３ａ，４，６，７−ヘキサヒドロ−ピ ラゾロ[４，３−ｃ]ピリジン−５−イル]−エチル}−２−メチル−プロピオンア ミド Ｌ−(＋)酒石酸塩 メカニカルスターラーを装備した１２リットルの丸底フラスコ中の段階Ｉから の生成物溶液（３７０ｇ、０．６ｍｍｏｌ）／メタノール（４，０７０ｍｌ）に 、Ｌ−(＋)酒石酸（９０ｇ、０．６ｍｏｌ）を加えた。反応混合物を約２２℃で 約９０分間攪拌し、ろ過し、そして濃縮した。粗残渣を酢酸エチル（４，５６０ ｍｌ）で希釈し、約７０℃に加熱し、そしてゆっくりと約１７時間以上かけて、 室温まで冷却した。固体をろ過し、そして乾燥させると白色の結晶が得られた。 ｍｐ．１８８−1８９℃（３４８．４６ｇ、収率７６％）．¹Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯ Ｈ、ｄ４）δ：８．２８(ｄ，１Ｈ)、７．５９(ｔ，１Ｈ)、７．４１−７．３９ (ｍ，１Ｈ)、７．１８−７．１３(ｍ，１Ｈ)、６．９２(ｔ，１Ｈ)、５．２（ｔ ，１Ｈ)、４．５６(ｂｓ，３Ｈ)、４．３６(ｓ，２Ｈ)、４．３１−４．２５(ｍ ，１Ｈ)、４．１３−４．０６(ｍ，１Ｈ)、３．７８(ｄ，２Ｈ)、３．２１(ｔ， １Ｈ)、３．１８−２．９６(ｍ，２Ｈ)、２．６５−２．５５(ｍ，２Ｈ)、１． ５７(ｄ，６Ｈ)、．ＭＳ：ＭH＋６１ｌ、［ａ］⁵⁸⁹＋２２．０３（ｃ＝１１．９ 、ＭｅＯＨ）．

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 38/00 Ａ６１Ｋ 45/00 38/23 Ａ６１Ｐ 3/04 45/00 3/10 Ａ６１Ｐ 3/04 5/02 3/10 9/04 5/02 17/02 9/04 19/00 17/02 19/10 19/00 25/20 19/10 Ｃ０７Ｄ 401/06 25/20 471/04 １０７Ａ Ｃ０７Ｄ 401/06 Ａ６１Ｋ 37/02 471/04 １０７ 37/30 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ， ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，Ｌ Ｓ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ， ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，Ｅ Ｅ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ， ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，Ｍ Ｋ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ， ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，Ｙ Ｕ，ＺＷ (72)発明者 レフカー，ブルース・アレン アメリカ合衆国コネチカット州06335，ゲ ールズ・フェリー，イーグル・リッジ・ド ライブ 21 (72)発明者 マーリ，ジェリー・アンソニー アメリカ合衆国コネチカット州06423，イ ースト・ハダム，テイター・ヒル・ロード 404

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．式Ｉ の化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩。 ２． 立体化学配置が３ａ−Ｓ、１−Ｒである、請求項１記載の式Ｉの化合 物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩 ３． 立体化学配置が３ａ−Ｓ、１−Ｓである、請求項１記載の式Ｉの化合 物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩 ４． 立体化学配置が３ａ−Ｒ、１−Ｓである、請求項１記載の式Ｉの化合 物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩 ５． 立体化学配置が３ａ−Ｒ、１−Ｒである、請求項１記載の式Iの化合 物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩 ６． 式(Ｅ) の化合物の(Ｄ)−酒石酸塩または(Ｌ)−酒石酸塩の製造方法であって、式(Ｄ) の化合物を、(Ｄ)−酒石酸または(Ｌ)−酒石酸と、約８：１から約９：１のアセ トン：水の混合物中、温度約０℃〜室温で、反応させることを含む、前記の製造 方法。 ７． (Ｄ)−酒石酸を式(Ｄ)の化合物と反応させ、式(Ｅ)の化合物がＲ−配 置を持つ、請求項６記載の方法。 ８． 式(Ｊ) の化合物の製造方法であって、式(Ｅ) の化合物を、式(Ｘ) （式中、Prtはアミン保護基であり、ＸはＯＨ、−Ｏ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキルまたは ハロである）の化合物と、有機塩基およびペプチドカップリング試薬存在下、約 −７８℃〜約−２０℃の温度で反応させることを含む、前記の製造方法。 ９． ペプチドカップリング試薬が１−プロパンホスホン酸環状無水物であ り、式Ｘの化合物がＲ−配置を持ち、そして式Ｅの化合物がＲ−配置を持つ、請 求項８記載の製造方法。 １０． Prtがtert−ブトキシカルボニルである、請求項９記載の製造方法。 １１． 式Ｉ の化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩の製造方法であって、式(Ｅ) の化合物を、式(Ｘ) （式中、Prtは、アミン保護基であり、ＸはＯＨ、−Ｏ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキルまた はハロである）の化合物と、有機塩基およびペプチドカップリング試薬の存在下 、約−７８℃〜約−２０℃の温度で反応させて、式(Ｊ) の化合物を得、式(Ｊ)化合を、適当な脱保護条件下で脱保護して、式(Ｋ) の化合物を得、式(Ｋ)の化合物を(Ｌ)−(＋)−酒石酸と、反応不活性溶媒中で反 応させ、式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を得ることを含む、前記の製造方 法。 １２． Prtがtert−ブトキシカルボニルである、請求項１１記載の製造方法 。 １３． ペプチドカップリング試薬が１−プロパンホスホン酸環状無水物であ り、式Ｉの化合物が絶対配置および相対配置３ａ−(Ｒ)、１−(Ｒ)を持つ、請求 項１２記載の方法。 １４． ヒトまたはその他の動物において、外因性成長ホルモンのレベルを増 加させる方法であって、そのようなヒトまたは動物に、有効量の請求項１記載の 式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを含む、前記の方法。 １５． 医薬として許容しうるキャリヤーおよびある量の請求項１記載の式Ｉ の化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を含む、医薬組成物。 １６． ヒトまたはその他の動物において、成長ホルモンの外因性の生成およ び放出の増加に有効な医薬組成物であって、医薬として許容しうるキャリヤー、 有効量の請求項Ｉ記載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩、およびＧＨＲＰ −６、ヘキサレリン、ＧＨＲＰ−１、成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）、ＩＧＦ −１、ＩＧＦ−２およびＢ−ＨＴ９２０またはその類似体からなる群より選択さ れた成長ホルモン分泌促進物質を含む、前記の医薬組成物。 １７． 骨粗鬆症の治療または予防に有効な量の請求項１記載の式Ｉの化合物 の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を、そのような治療または予防を必要とするヒトまたは その他の動物に投与すること含む、骨粗鬆症の治療方法または予防方法。 １８． 外因性成長ホルモンの放出を促進するのに有効な量の請求項１記載の 式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を、そのような治療または予防を必要とす るヒトまたはその他の動物に投与することを含む、成長ホルモンにより治療また は予防することのできる疾病または病状を治療または予防する方法。 １９． 疾病または病状が、うっ血性心不全、肥満または加齢に伴う虚弱であ る、請求項１８記載の方法。 ２０． 疾病または病状がうっ血性心不全である、請求項１９記載の方法。 ２１． 疾病または病状が加齢に伴う虚弱である、請求項１９記載の方法。 ２２． 骨折修復の促進、大手術後のタンパク質異化応答の減弱、慢性疾患に よる悪液質およびタンパク質損失の減少、創傷治癒の促進、または、熱傷患者あ るいは大手術を受けた患者の回復の促進、のための方法であって、そのような治 療を必要とする哺乳動物に、外因性成長ホルモンの放出の促進に有効な量の請求 項１記載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを含む、前記方 法。 ２３． 大手術を受けた患者の回復を促進するための、請求項２２記載の方法 。 ２４． 骨折修復を促進するための、請求項２２記載の方法。 ２５． 筋力、運動性、皮膚厚の維持、代謝ホメオスタシスまたは腎臓ホメオ スタシスを改良する方法であって、そのような治療を必要とするヒトまたはその 他の動物に、外因性成長ホルモン放出の促進に有効な量の請求項１記載の式Ｉの 化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを含む、前記の改良方法。 ２６． 骨粗鬆症のヒトまたはその他の動物に、有効量のビスホスホネート化 合物および請求項１記載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与すること を含む、骨粗鬆症の治療方法または予防方法。 ２７． ビスホスホネート化合物がイバンドロネートである、請求項２６記載 の骨粗鬆症の治療方法。 ２８． ビスホスホネート化合物がアレンドロネートである、請求項２６記載 の骨粗鬆症の治療方法。 ２９． 骨粗鬆症のヒトまたはの他の動物に、有効量のエストロゲンまたはプ レマリン（登録商標）および請求項１記載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸 塩、および所望であればプロゲステロンを投与することを含む、骨粗鬆症の治療 方法または予防方法。 ３０． 骨粗鬆症のヒトまたはその他の動物に、有効量のカルシトニンおよび 請求項１記載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを含む、骨 粗鬆症の治療方法。 ３１． ＩＧＦ−１欠乏症のヒトまたはその他の動物に、有効量の請求項１記 載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを含む、ＩＧＦ−１の 欠乏したヒトまたはその他の動物のＩＧＦ−１レベルを増加させる方法。 ３２． 骨粗鬆症のヒトまたはその他の動物に、有効量のエストロゲンアゴニ ストまたはアンタゴニストおよび請求項１記載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒 石酸塩を投与することを含む、骨粗鬆症の治療方法。 ３３． エストロゲンアゴニストまたはアンタゴニストがタモキシフェン、ド ロロキシフェン、ラロキシフェンたはイドキシフェンである、請求項３２記載の 方法。 ３４． エストロゲンアゴニストまたはアンタゴニストが、cis−６−(４−フ ルオロ−フェニル)−５−[４−(２−ピペリジン−１−イル−エトキシ)−フェニ ル]−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール；(ｃ)−cis−６ −フェニル−５−[４−(２−ピロリジン−１−イル−エトキシ)−フェニル]−５ ，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール；cis−６−フェニル− ５−[４−(２−ピロリジン−１−イル−エトキシ)−フェニル]−５，６，７，８ −テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール；cis−１−[６’−ピロロジノエトキ シ−３’−ピリジル]−２−フェニル−６−ヒドロキシ−１，２，３，４−テト ラヒドロ−ナフタレン；１−(４’−ピロリジノエトキシフェニル)−２−(４” −フルオロフェニル)−６−ヒドロキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキ ノリン；cis−６−(４−ヒドロキシフェニル)−５−[４−(２−ピペリジン−１ −イル−エトキシ)−フェニル]−５，６，７，８−テトラヒドローナフタレン− ２−オール；または、１−(４’−ピロリジールエトキシフェニル)−２−フェニ ル−６−ヒドロキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン：である、 請求項３２記載の方法。 ３５． 筋肉量を増加させる方法であって、そのような治療を必要とするヒト またはその他の動物に、有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒 石酸塩を投与することを含む、前記の方法。 ３６． 成長ホルモン欠乏症児に有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物の(Ｌ) −(＋)−酒石酸塩を投与することを含む、成長ホルモン欠乏症児の成長を促進す る方法。 ３７． 哺乳動物のインスリン耐性を治療する方法であって、前記哺乳動物に 有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与することを 含む、前記の方法。 ３８． インスリン耐性に伴う病状が、Ｉ型糖尿病、II型糖尿病、高血糖症、 グルコース耐性障害、またはインスリン耐性症候群である、請求項３７記載の方 法。 ３９． インスリン耐性に伴う病状が、肥満または加齢と関連する、請求項３ ７記載の方法。 ４０． 外因性成長ホルモンのレベルを増加させる方法であって、そのような 必要性のあるヒトまたはその他の動物に、有効量の機能性ソマトスタチンアンタ ゴニストおよび請求項１記載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投与する ことを含む、前記の方法。 ４１． 機能性ソマトスタチンアンタゴニストがアルファ−２アドレナリン作 用性アゴニストである、請求項４０記載の方法。 ４２． うっ血性心不全、肥満または加齢に伴う虚弱を治療または予防する方 法であって、そのような必要性のあるヒトまたはその他の動物に、有効量の機能 性ソマトスタチンアンタゴニストおよび請求項１記載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−( ＋)−酒石酸塩を投与することを含む、前記の方法。 ４３． 式 の化合物のＲ，Ｓ−鏡像体混合物、Ｒ−鏡像体またはＳ−鏡像体。 ４４． 請求項４３記載の化合物の(Ｄ)−酒石酸塩または(Ｌ)−酒石酸塩。 ４５． 式（式中、Prtはｔ−ＢＯＣ、ＦＭＯＣおよびＣＢＺからなる基より選択されるア ミン保護基である）の化合物の、３ａ−(Ｒ，Ｓ)，１−(Ｒ)ジアステレオマー混 合物、３ａ−(Ｒ)，１−(Ｒ)ジアステレオマー、または３ａ−(Ｓ)，１−(Ｒ)ジ アステレオマー。 ４６． 式 の化合物のＲ，Ｓ−鏡像体混合物、Ｒ−鏡像体またはＳ−鏡像体。 ４７． 式 （式中、ＸはＯＨ、−Ｏ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキルまたはハロであり、Prtはアミン保 護基である）の化合物のＲ，Ｓ−鏡像体混合物、Ｒ−鏡像体またはS−鏡像体。 ４８． ＸがＯＨであり、PrtがＢＯＣであり、立体中心がＲ−配置である、 請求項４７記載の化合物。 ４９． 睡眠障害に罹った哺乳動物の睡眠障害を治療する方法であって、前記 哺乳動物に、有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物の(Ｌ)−(＋)−酒石酸塩を投 与することを含む、前記の治療方法。