JP2000514842A - 架橋した植物タンパク質の粒子、特にマイクロ粒子又はナノ粒子、調製方法、及び、これを含む化粧用、医薬用又は食品用の組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、粒子に関する。これらの粒子は、植物タンパク質間に形成される架橋、特に、植物タンパク質と、少なくとも２つのアシル化基からなるアシル化多官能性架橋剤との間で、タンパク質のアシル化され得る基とアシル化多官能性架橋剤のアシル基との間で共有結合が形成されることによる、界面架橋により形成された壁を少なくとも表面に有することを特徴とする。これらの粒子は、化粧品用、医薬品用、皮膚病薬用又は食品用の組成物の調製に用いられる。

Description

【発明の詳細な説明】 架橋した植物タンパク質の粒子、特にマイクロ粒子又はナノ粒子、調製方法、及 び、これを含む化粧用、医薬用又は食品用の組成物 本発明は、本質的に、架橋した植物タンパク質の粒子、特にマイクロ粒子又は ナノ粒子、それらを調製するための製法、それらを含む化粧用、医薬用又は食品 用の組成物に関する。技術的背景 活性物質のカプセル化が、例えば、物質の保護、又は、使用する部位での放出 を遅くしたり、若しくは、遅らせたりすることに、大きな利益があることはよく 知られている。 化粧品、医薬又は食品の分野における適用として、壁の構成成分としてもっと も広く求められている物質は、生物学的な適応性のため、天然の物質、特にタン パク質又は多糖類である。 タンパク質又は多糖類を用いるいくつかのマイクロカプセル化の製法は、Ｃｈ ａｎｇ（Ｃｈａｎｇ Ｔ．Ｍ．Ｓ．、サイエンス、１９６４、１４６、５２４− ５２５）に記載された界面重縮合方法に由来する。このよく知られた方法によれ ば、ジアミンの水溶液は、疎水性相に乳化され、その後、塩化二酸の溶液が乳化 液に添加される。アミン基は、界面で二塩化酸と結合してアミドを形成し、個々 のマイクロカプセルに仕切る膜を与える。重縮合反応は、塩化水素酸を放出し、 アルカリ性試薬の非存在下では、いくつかのアミン基をプロトン化し、それによ ってアシル化できなくするので、水相のアルカリ化により促進されることが知ら れている。架橋したタンパク質のマイクロカプセルを形成するため、ジアミンを タンパク質に置き換えた場合にも、このことは同じように適用できる。先行技術 文献に記載された製法において、タンパク質の最初の水溶液は、タンパク質のす べての遊離アミン基がアシル化できる非プロトン化構造にするため、アルカリ化 される。従って、例えば、ＬＥＶＹのＵＳ−４，７８０，３２１明細書は、架橋 した多糖類とタンパク質とにより形成された混合壁をもつマイクロカプセルの調 製に関連している。多糖類とタンパク質との最初の水溶液はアルカリ性であり、 ｐＨは、好ましくは１０よりも大きい。同様に、ＨＵＣの５，３９５，６２０明 細書中では、架橋したアテロコラーゲンとグリコサミノグリカンとの壁をもつマ イクロカプセルに関し、最初の水溶液のｐＨは、好ましくは酸性であり、上記特 許中のすべての実施例で、ｐＨ９．８のカーボネートの緩衝剤を用いている。 ＭａｒｓのＦＲ−Ａ−２，４４４，４９７明細書中では、タンパク質の水溶液 は、アルカリ性の物質又は緩衝剤の添加なしで用いられる。しかしながら、水相 は少なくとも２０％（ｗ／ｗ）の高濃度のタンパク質を含むため、その一部分は 、非プロトン化部分が膜を形成するのに用いることができる間、生成したＨＣｌ を中性化する（緩衝剤の役目）。 グルタルアルデヒドもまた、タンパク質から粒子を調製するのに用いることが できる。架橋は、一般的に、中性又はアルカリ性の媒体中で形成される。従って 、例えば、血清アルブミンは、ｐＨ７．５のリン酸塩緩衝剤（Ｓｈｅｕ Ｍ．Ｔ ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｐａｒｅｎｔｅｒ，Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．，１９８６ ，４０，２５３−２５８）中、２０％溶液中で１％グルタルアルデヒドにより架 橋することができる。しかしながら、グルタルアルデヒドとタンパク質との反応 機構は複雑であり、充分には説明されていないままである。反応が遊離グルタル アルデヒドだけでなく、グルタルアルデヒドの縮合体から生じる高分子化した形 態をも含むことはよく知られており、これらの誘導体は、直線状又は環状形態と して存在することができる。これらの異なった反応形態におけるグルタルアルデ ヒド溶液の組成物は変化しやすく、異なった要因に依拠し、そのため、その形成 される結合とその架橋の度合いは完全には制御されない；このことは、工業開発 にとって障害となる（Ｓａｌｅｈ Ａ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａ ｒｍ．，１９８９，５７，２０５−２１０）。更に、この非常に反応性に富む架 橋剤は、様々な活性要素と相互作用することができ、それによって、それらの生 物学的有効性を減少させる（Ｇｕｐｔａ Ｐ．Ｋ．ａｎｄ Ｈｕｎｇ Ｃ．Ｔ． ，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ，１９８９，６，４２７−４６２ ）。最後に、遊離アルデヒド基は、粒子上に存在することができる（Ｍａｇｅｅ Ｇ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ，１９９ ５，３７，１１−１９）。人間に使用する粒子におけるこれらの活性基の存在は 、望ましくない。例えば、空の粒子の毒性効果は、マクロファージで認められた （Ｓｕｕｎｄｅｒｓ Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，１９９１ ，６８，２６５−２７０）。 従来技術の文献の文書中で言及されたタンパク質は、動物タンパク質であり、 植物タンパク質の使用に言及しているものはない。 もし、植物タンパク質を溶解するのに用いられる水相がｐＨ９．８の炭酸ナト リウムの緩衝剤である従来技術の文書中で述べられた条件が、商業的に有効な植 物タンパク質の調製に適用されるならば、安定的なマイクロカプセルを得ること はできない。マイクロカプセルは、非常に少ない量で得られる。それらは、こわ れやすい膜を有している。：それらのいくつかは顕微鏡下の実験でしばしば開く のが認められる。それらは、多数の集合体を形成し、水の懸濁液の形態において 、４５℃で数日間のうちに、ひじょうにはやく劣化する。ｐＨ７から８のリン酸 塩緩衝剤、又は、単なる蒸留水が植物タンパク質を溶解するのに用いられるとき も、同様のことが当てはまる。 同様に、もし市販のダイズ乳液のような植物タンパク質を含む液体の調製物が 緩衝されずに直接用いられたり、又は、それらが炭酸ナトリウム又はリン酸ナト リウムの添加により緩衝されるならば、安定的なマイクロカプセルは得られない 。発明の要約 全く以外なことには、ｐＨの値が中性に近いか、又は、わずかに酸性、すなわ ち、約４．５から約８のｐＨ領域の植物タンパク質の溶液であって、少なくとも １つのカルボン酸塩、特にアルカリ金属又はアルカリ土類金属の塩、好ましくは アルカリ金属塩を含んでだものを用いて粒子が調製されれば、架橋した植物タン パク質の安定的な粒子、特にマイクロ粒子又はナノ粒子を調製することができる ことを見出した。粉末の植物タンパク質の調製剤に含まれるタンパク質を抽出す るため、上記塩を含む緩衝溶液を用いるか、又は、市販のダイズ乳液のような植 物タンパク質を含む液体調製物に上記塩を添加することのどちらかにより、植物 タンパク質のこのような溶液を得ることができる。 これらの溶液のｐＨの値が比較的低く、そして水相中に溶解したタンパク質の 濃度が低く、常に約５重量％よりも少ないので、この結果はなおいっそう予期さ れないことである。発明の目的 従って、本発明の１つの主要な目的は、植物タンパク質から、安定的な粒子、 特にマイクロ粒子若しくはナノ粒子、マイクロカプセル若しくはナノカプセル又 はマイクロ球体若しくはナノ球体の調製のための溶液を提供することからなる新 規の技術的課題を解決することである。 本発明の他の１つの主要な目的は、植物タンパク質から、安定的な粒子、特に マイクロ粒子若しくはナノ粒子、マイクロカプセル若しくはナノカプセル又はマ イクロ球体若しくはナノ球体を調製するとともに、必要に応じて、懸濁液又はエ マルジョンの形態において、１つ又はそれ以上の活性物質のカプセル化を同時に 行うことができる溶液を提供することからなる新規の技術的課題を解決すること である。 本発明の他の１つの主要な目的は、工業的規模において、特に化粧品、医薬品 又は食品工業に用いられることができる簡単な製造方法によって、上述した新し い技術的課題を解決することである。特にナノメートルから数ミリメートルまで の寸法の範囲において、とりわけ約１０ナノメートルから約３ｍｍの範囲で、粒 径を所望のままに調整することができる粒子の調製を、この溶液により好適に行 うことができる。発明の概要の説明 本発明において、粒子は、小胞性の構造又は等質的な構造のいずれかをもつこ とができる本質的に球形の粒子を意味するものと理解される。粒子は、それゆえ に、球形又はカプセルを含む。小胞性の構造の粒子では、内容物の周囲の膜を形 成する分離している外側の被覆からなり、用いられる一般的な用語としては、カ プセルであり、それぞれ、マイクロメートル又はナノメートルの単位の寸法の場 合では、特にマイクロカプセル又はナノカプセルである。画一的な等質的な構造 の粒子では、用いられる通常の用語としては、球体であり、それぞれ、マイクロ メートル又はナノメートルの単位の寸法の場合では、特にマイクロ球体又はナノ 球体である。これらの粒子は共に、本発明の必須部分を構成する。 この溶液はまた、生物学的適応性及び生物学的分解性がある粒子を好適に調製 することができる。 従って、本発明により、全く予期せぬことに、エマルジョン、特に油中水又は 水中油タイプのエマルジョンの相の界面において、植物タンパク質と、アシル化 多官能性架橋剤、特にハロゲン化二酸、好ましくは塩化二酸との界面架橋反応を 引き起こすことにより、安定的な粒子を得ることができることが見出された。 油中水タイプのエマルジョンの場合では、発明の第一の態様において、植物タ ンパク質と少なくとも１つのカルボン酸塩とを含む水相を、まず最初に疎水性相 中に乳化し、その後、架橋剤の溶液をエマルジョンに添加すると、水の小滴の界 面において、植物タンパク質の架橋した分子を含む膜が形成される。 上記粒子は、構造が破壊されることなく、水の懸濁液の形態において、４５℃ のオーブン中での長時間のインキュベーションに耐えるほど、充分に安定してい る。 上記粒子は、プロテアーゼの存在化ですみやかに溶解され、生物学的分解能力 を証明する。 乳化条件に依存して、上記粒子の大きさは、例えば高圧のホモジナイザーを用 いることにより、１ミクロン以下、すなわちナノメートルのサイズから、数百マ イクロメートル又はミリメートル若しくはそれ以上にわたる。 平均のサイズが５００μｍを超える架橋した植物タンパク質の大きな粒子、特 にカプセルを得ることができ、これらの粒子の一部は、ミリメートルを超える直 径をもつことが可能であることも見出された。これをするためには、植物タンパ ク質及び少なくとも１つのカルボン酸塩を含む水相は、穏やかな攪拌条件で、所 望により界面活性剤なしで、疎水性相中に分散することにより適当な大きさの分 散された小滴を得る。架橋剤を、その後添加して、架橋したタンパク質の膜を形 成する。 乳化が行われる前に、水相中、疎水性相中又は両相中に、少量の不溶性の親油 性物質、例えば、顔料又はレーキの形態の酸化チタン、酸化亜鉛、タルカム、ス テアリン酸カルシウム又は不溶性の着色剤、を加えることにより、粒子の平均直 径、及び、ミリメートルよりも大きなサイズの粒子の割合を増加させることがで きることも見出された。 水中油タイプのエマルジョン中の架橋反応の開始によって、粒子を得ることが できることも見出された。この場合、少なくとも２つのアシル化基をもつ多官能 性架橋剤、好ましくはハロゲン化二酸、特に塩化二酸、を含む疎水性相は、連続 的な相として用いられる植物タンパク質及び少なくとも１つのカルボン酸塩を含 む水相中で乳化される。反応は、界面で行われ、攪拌は適当な時間継続される。 分散した疎水性の小胞の周囲に膜を形成し、疎水性の内容物を含む粒子が形成さ れ、この場合にはカプセルが形成される。 従って、例えば、酢酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム又はクエン酸ナトリウ ムを含む緩衝液を用いて、粉、濃縮物又は単離物のような、様々な市販の粉状の 植物タンパク質の調製品から安定的な溶液を得ることができる。植物タンパク質 の溶液を調製するために、粉、濃縮物又は単離物は、緩衝液中に分散され、必要 に応じて温和に、例えば３０℃から５０℃の温度に加熱して、攪拌を開始する。 適当な時間の後、一般的には５分から３０分後に、不溶性の画分は、例えば、遠 心分離により除去される。緩衝剤を含む溶液中に植物タンパク質を含む上澄みは 、その後、架橋剤、特にハロゲン化二酸による界面架橋により、粒子を調製する ために、水相として用いられる。 同様に、ダイズ乳液のような液体の植物タンパク質の調製品に、酢酸ナトリウ ム又はクエン酸ナトリウムのようなカルボン酸の少なくとも１つのアルカリ金属 塩を添加することにより、これらの乳液から安定的な粒子を得ることを可能とす る水相が得られる。 また、マイクロメートルよりも非常に小さい粒径、マイクロメートルの領域の 程度の粒径、又は、大きなサイズ、すなわち、ミリメートル程度若しくはミリメ ートルを超える直径を有し、高い安定性及び高い機械的強度をもつ架橋した植物 タンパク質の粒子を得ることができることも見出した。これら粒子の平均粒径は 、この場合はマイクロカプセル又はカプセルであるが、５００μｍを超えること ができ、８００から９００μｍに達することさえでき、粒子の一部分は、ミリメ ートルを超える直径をもつことができる。 そのような大きな粒子は、例えば、適当なサイズの分散した小胞の生成物に適 合する条件下で、特に、穏やかな攪拌条件下で、所望により界面活性剤の添加を 省いて、疎水性相中で、植物タンパク質及びカルボン酸の少なくとも１つのアル カリ金属塩を含む水相を乳化することにより得ることができる。驚くべきことに 、これは、膜が弾力性を有し、圧力に耐え、水の懸濁液の形態において４５℃で 長い時間安定している、裸眼で見ることができる小胞を与える。 更に、５００μｍを超える平均直径をもつ粒子、マイクロカプセル又はカプセ ルを与える上述した条件を含む与えられた条件下で、乳化が行われる前に、水相 中、疎水性相中又は両方の相中に、少量の不溶性の親油性物質、例えば、顔料又 はレーキの形態の酸化チタン、酸化亜鉛、タルカム、ステアリン酸カルシウム又 は不溶性の着色剤、を入れることにより、粒子の平均直径及び１ｍｍを超える直 径の粒子の割合を増加させることができることを見出した。このように、乳化段 階において、不溶性の親油性物質は、油／水相の界面に移動し、大きな液滴を安 定化することにより、その後、架橋剤が添加されたときに、これらの大きな液滴 のまわりでの界面架橋を可能にする。このように形成された膜は、大きな粒径の 粒子を形成し、特にカプセル、とりわけマイクロカプセル、又は、ミリメートル の程度の直径及びおそらくは２ｍｍ若しくは３ｍｍの直径をもつカプセルを形成 する。 得られた粒子は、完全に裸眼で見ることができ、用いられる不溶性の親油性物 質の特徴に依存して、白い小胞又は着色物質の色を有する小胞の形態である。 安定的で、丈夫で、大きくて、必要に応じて着色した粒子を入手可能であると いうことは、重要な技術進歩を意味する。例えば、粒子が完全に目に見えるとい う事実は、様々な媒体中で分散体の形成にそれらが用いられるとき、これらの粒 子を含む混合物の均一性を評価することを容易にする。また、上記粒子を含む調 製品の安定性を確かめることをも容易とする。発明の詳細な説明 第一の特徴によれば、本発明は、植物タンパク質間に形成される架橋、特に、 植物タンパク質と、少なくとも２つのアシル化基からなるアシル化多官能性架橋 剤との間で、タンパク質のアシル化され得る基とアシル化多官能性架橋剤のアシ ル基との間で共有結合が形成されることによる、界面架橋により形成された壁を 少なくとも表面に有することを特徴とする粒子を取り扱う。 上記タンパク質のアシル化され得る基は、特に、アミン基、ヒドロキシル基、 チオール基及びカルボキシレート基である。 本発明においては、特に限定されずに、いかなる植物タンパク質も用いること ができる。同様に、特に限定されずに、少なくとも２つのアシル基を有する多官 能性架橋剤を用いることができる。 本発明の１つの有利な態様において、上述した植物タンパク質は、特にマメ科 の植物、とりわけ、次に示す植物：ハウチワマメ（ハウチワマメ属）、ダイズ（ ダイズ属）、エンドウ（エンドウ属）、ヒヨコエンドウ（シサー（Ｃｉｃｅｒ） ）、アルファルファ（ウマゴヤシ）、ソラマメ（ビシア（Ｖｉｃｉａ））、レン ズマメ（レンズ（Ｌｅｎｓ））、インゲン（ファセオラス（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ））、ナタネ（ブラシカ（Ｂｒａｓｓｉｃａ））若しくはヒマワリ（ヘリアンツ ス（Ｈｅｌｉａｎｔｈｕｓ））、又は、その他には、コムギ、トウモロコシ、オ オムギ、モルト及びカラスムギのような穀物から抽出される。 本発明の他の１つの有利な熊様において、上述した植物タンパク質は、粉、濃 縮物若しくは単離物のような粉状の調製品、又は、ダイズ乳液のような液体調製 品の形態で用いられる。 本発明の他の１つの有利な態様において、粉状の調製品に含まれる植物タンパ ク質を溶解するのに用いられる水溶液は、ｐＨが約４．５と約８との間の水性緩 衝液である。 ｐＨが約４．５と約８との間にあるこの溶液は、好ましくは、カルボン酸の塩 、特にカルボン酸のアルカリ金属又はアルカリ土類金属塩を用いて得られる。０ ．１重量％と２０重量％との間の濃度で、カルボン酸のアルカリ金属塩、特にナ トリウム又はカリウム塩を用いるのが好ましく、より好ましくはナトリウム塩で ある。 上述したカルボン酸は、１つの又は複数のカルボキシル基を含むことができる 。用いることのできるカルボン酸としては、特に、酢酸、シュウ酸、マロン酸、 コハク酸、グルタル酸、ジメチルグルタル酸、アジピン酸、フマル酸、マレイン 酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、乳酸及びサリチル酸である。 本発明の他の１つの有利な態様において、水相中における植物タンパク質の濃 度は、０．５重量％と５重量％との間である。 本発明の他の１つの有利な態様において、ダイズ乳液のような液体植物タンパ ク質の調製品に添加されるカルボン酸の量は、０．１重量％と２０重量％との間 であり、好ましくは５重量％と１５重量％との間であり、より好ましくは約１０ 重量％である。 本発明の他の１つの有利な態様において、粒子のサイズを増加するために、水 相中、疎水性相中又は両相中に取り入れられる不溶性の親油性物質としては、ス テアリン酸カルシウム若しくはマグネシウム、タルカム、酸化チタン若しくは酸 化亜鉛のような金属酸化物、又は、ＤＣ Ｒｅｄ ３０のような顔料の形をとっ て、若しくは、様々な着色剤の、カルシウム、アルミニウム、バリウム若しくは ジルコニウムのレーキの形をとっている不溶性の着色物質のような脂肪酸及び２ 価の金属の不溶性の塩からなる群より選択されるものが好ましい。この不溶性の 親油性物質はまた、粒子本体の中に存在してもよく、及び／又は、これらの粒子 の表面において、吸着されることもできる。 不溶性の脂肪酸塩に関する例としては、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチ ン酸、ステアリン酸、オレイン酸及びリノレン酸のような炭素数が１２と同じか 又は１２よりも大きいカルボン酸のカルシウム塩、マグネシウム塩、ストロンチ ウム塩及びバリウム塩を用いることができる。 用いることのできるレーキの例としては、次のものがある。：インジコカルミ ンアルミニウムレーキ（青）、ポンソー４Ｒアルミニウムレーキ（赤）、及び、 サンセットイエローＦＣＦアルミニウムレーキ（オレンジ）である。 本発明の他の一つの有利な態様において、粒子のサイズを増加するために、水 相中、疎水性相中又は両相中に取り入れられる上記不溶性の親油性物質の量は、 当の相あたり、０．０１重量％と２重量％との間である。 本発明の他の一つの有利な態様において、上述したアシル化多官能性架橋剤は 、二ハロゲン化酸又は二酸無水物酸を含むのが好ましい。二ハロゲン化酸として は、二ハロゲン化フタロイル、二ハロゲン化テレフタロイル、二ハロゲン化セバ コイル、二ハロゲン化グルタリル、二ハロゲン化アジポイル、二ハロゲン化スク シニルからなる群より選択されることができる。 第二の特徴によれば、本発明はまた、化粧品又は医薬品の組成物、特に皮膚病 薬の組成物、又は、食品の組成物の調製のためのこれらの粒子の使用にも及ぶ。 第三の特徴によれば、本発明はまた、このような粒子を含む、化粧品又は医薬 品の組成物、特に皮膚病薬の組成物、又は、食品の組成物にも及ぶ。 これらの組成物において、本発明の粒子の割合は、広い範囲のなかで変更でき 、最終組成物の全重量をベースとして、０．０１重量％と１０重量％との間が好 ましいであろう。 第四の特徴によれば、本発明はまた、架橋した植物タンパク質から形成された 膜とともに、上述した粒子の調製のための製造方法にも及び、上記製造方法は、 ａ）溶液中に、少なくとも１つの植物タンパク質及び少なくとも１つのカルボ ン酸塩を含む、ｐＨが約４．５と約８との間にある水溶液の形成； ｂ）油相の形成； ｃ）攪拌しながら、前記水相及び油相を混合することによるエマルジョンの形 成； ｄ）少なくとも２つのアシル化基を有するアシル化多官能性架橋剤による、少 なくともその表面において、前記架橋剤により架橋した植物タンパク質から形成 された壁を有する粒子を得るための充分な時間の前記植物タンパク質の界面架橋 ；及び、 ｅ）所望により、この方法で調製された粒子の分離 からなることを特徴とする。 本発明の他の一つの有利な態様において、上述した水溶液は、一般的に０．１ 重量％と２０重量％との間の濃度でカルボン酸塩を含むｐＨが約４．５と約８と の間にある緩衝剤を用いて、粉状の植物タンパク質の調製品から調製される。水 性緩衝液を調製するのに用いられるカルボン酸塩は、上述したものである。 用いることのできる一般的に好ましい緩衝液としては、カルボン酸を用いて得 られる緩衝液で、好ましくは生物学的適応性のあるものであり、例えば、酢酸塩 、コハク酸塩及びクエン酸塩からなる群より選択されるものである。 本発明の１つの有利な態様において、上述した水溶液は、０．１重量％と２０ 重量％との間の濃度でカルボン酸塩を添加することにより、液体植物タンパク質 の調製品から得られる。 本発明の１つの有利な態様において、上述した多官能性架橋剤は、二ハロゲン 化酸及び二酸無水物酸から選択される。上述したように、二ハロゲン化物は、二 塩化物が好ましく、上述したリストから酸を用いるのが好ましいであろう。 本発明の１つの有利な態様において、タンパク質の重量に対して架橋剤の重量 割合は、タンパク質の１重量部に対して架橋剤が０．０３重量部と７０重量部と の間である。界面架橋反応は、４と８０℃との間の温度で、好ましくは１５と３ ０℃との間の温度で、大気圧で、有利に行われる。 本発明の１つの有利な態様において、油相は、シクロヘキサン若しくはクロロ ホルム／シクロヘキサン混合物、特に１：４ｖ／ｖの割合における混合物等の容 易に除去することができる有機溶剤、又は、好ましくは、生物学的に適応性のあ る油、特にココナツオイル、２−エチルヘキシルココネート又は液体パラフィン 等の生物学的に適応性のある植物性の油のいずれかを用いて形成されるのが好ま しい。 本発明の１つの特有の態様において、製造方法が、油中水タイプのエマルジョ ン中で行われる。 他の態様において、製造方法が、水中油タイプのエマルジョン中で行われる。 本発明の製造方法のいずれにおいても、界面活性剤は、当業者によく知られた 界面活性剤から選択され、エマルジョンを助長し、又は、安定化させるのに有利 に用いられる。本発明の構成において、ＩＣＩ製、商品名Ｓｐａｎ８５（登録商 標）として市販されているトリオレイン酸ソルビタンのようなソルビトールエス テルタイプの界面活性剤を用いるのが好ましいであろう。 更に、本発明において、顔料のような不溶性の添加剤は、大きな粒子、特にカ プセル、すなわち、サイズが少なくとも約１ｍｍ又は２若しくは３ｍｍの粒子を 得るのに用いることができる。酸化チタン及び酸化亜鉛のような金属酸化物、タ ルカム、及び、顔料若しくはレーキの形態である不溶性の着色物質は、本発明に おいて、特に価値ある添加剤として、制限なく列挙することができる。 本発明において、従って、最も小さいサイズから大きなサイズまで、すなわち 、ナノメートルサイズから１ｍｍを超える大きなサイズまで、意のままに調節さ れた、言い換えれば、約２ｍｍ又は３ｍｍもの範囲に及ぶ粒子を得ることができ る。本発明はまた、“粒子”の定義の中に、カプセル又は球体をも含み、すなわ ち、特にナノカプセル若しくはナノ球体及びマイクロカプセル若しくはマイクロ 球体をも含む。 また、本発明において得られる粒子、特にマイクロカプセル、ナノカプセル又 はカプセルは、水性又は油性の内容物のどちらでも任意に有することができ、良 好な外観を有する。それらは、丈夫であり、様々な親水性又は親油性の媒体中で 、分散するのが容易である。本発明の粒子は、それらの内容物が水性又は油性の いずれであっても、水の懸濁液の形態において４５℃で安定である。 本発明の製造方法においては、懸濁液中に、様々な物質、例えば、顔料等を取 り入れることもでき、又は、溶液中に、例えば、グルコースのような糖を取り入 れることができ、又は、エマルジョン中に、例えば、油、特に液体パラフィンを 取り入れることができる。 本発明の粒子はまた、トリプシンのような酵素、又は、当業者によく知られた 他の酵素によりすみやかに溶解されることができるため、生物学的分解性もある 。 ナノ粒子、ナノ球体又はナノカプセルは、本出願人による先行の特許出願ＦＲ −Ａ−２６８３１５９＝ＷＯ９３／０８９０８に記載された製造方法を用いて調 製されてもよい。 本発明により、物質、特に、植物性の、鉱物性の若しくは合成の油、ビタミン Ａ及びビタミンＥの誘導体等のような親油性活性要素、及び、植物抽出物、アス コルビン酸、ビタミンＣ、ＰＭＧ、グルコース、有機顔料及び無機顔料のような 親水性活性要素を含む活性要素をカプセル化することができる、粒子、特に、ナ ノ球体若しくはナノカプセル及びマイクロ球体若しくはマイクロカプセルのよう な球体又はカプセルの製造が可能である。 種々の条件下で、これらの粒子の安定性は、４℃から９０℃の温度範囲で、ｐ Ｈの値が３から１１の範囲において認められた。従って、乾燥又は水和したいず れの媒体においても、４５℃で６ケ月よりも長く安定性が持続するのを認めるこ とができた。 粒子の生物学的分解能力は、トリプシン、キモトリプシン又は他のプロテアー ゼ等の種々の酵素を用いて実証された。 これらの粒子はまた、完全に生物学的適応性を有し、少しも皮膚又は目の刺激 を起こさず、経口毒性もない。 サイズにかかわりなく、本発明の粒子は、油中水若しくは水中油タイプ、親水 性ゲル、疎水性ゲル、シャンプー及びシャワーゲルのエマルジョン配合をつくる ための化粧品の組成物に用いることができる。 従って、先に述べたように、これらの粒子又はカプセルは、化粧品又は医薬品 の組成物、特に皮膚病薬、又は、食品の組成物を調製するために、当業者によく 知られた様々な活性成分又は結合剤と組み合わせて用いることができる。 本発明の他の目的、特徴及び有利な点は、次に示す実施例により明確に示され ることになるが、それらは、単に実例として与えられるものであって、それによ り本発明の範囲を限定するものではない。実施例は、本発明の不可欠な部分を構 成する。従って、技術水準と比較して新規であると思われるいかなる特徴も、そ の機能及びその一般的な特徴において、本発明の不可欠な部分を構成する。実施 例中のパーセンテージは、ことわりがない限り重量基準である。更に、ことわり がない限り、温度は、室温であり、又は、セ氏温度で表される。圧力は、ことわ りがない限り、大気圧である。 本発明の実施例１：架橋したハウチワマメ（ｌｕｐｉｎ）タンパク質で形成され た壁をもつマイクロカプセルの調製 ａ）水相の調製 ハウチワマメの粉０．７５ｇ（タンパク質４５％含有ｕｌｔｒａｆｉｎｅ ｆ ｌｏｕｒ ｏｆ ｓｗｅｅｔ ｗｈｉｔｅ ｌｕｐｉｎ（ＣＡＮＡ））を、ｐＨ ７．４の酢酸塩緩衝液１５ｍｌ中で攪拌した。その分散液を、１０分間磁気によ り攪拌し、その後、遠心分離して、上澄みを分離した。 ｂ）エマルジョン化 上澄み６ｍｌを、トリオレイン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ８５（登録商標））２ ％を含むシクロヘキサン３０ｍｌ中、５分間、２０００ｒｐｍで攪拌することに より分散した。 ｃ）架橋 クロロホルム／シクロヘキサンの混合液（１：４ ｖ／ｖ）の塩化テレフタロ イルの５％（ｗ／ｖ）溶液４０ｍｌを加えた。３０分間攪拌した後、マイクロカ プセルを、遠心分離により分離して、その後、シクロヘキサン中、次に、ポリソ ルベート２％添加したアルコール中、更に、９５％アルコール、その後水中に、 順に再懸濁により洗浄した。 これにより白い沈殿物が生じた。顕微鏡検査では、興味深い、丈夫で、透明な 球形のマイクロカプセルが見られ、それらは、ほんのわずかに斑点があり、明瞭 で均一な膜をもち、２０と５０μｍとの間のサイズであった。 上記マイクロカプセルは、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で５ケ月 間保管された後でも、そこなわれることはなかった。 本発明の実施例２：架橋したハウチワマメタンパク質で形成された壁をもつマイ クロカプセル ｐＨ７．４の酢酸塩緩衝液をｐＨ６．８の酢酸塩緩衝液に替えて、実施例１の 方法を繰り返して行った。これにより再び、２０と６０μｍとの間のサイズであ る、興味深い、丈夫で、球形のマイクロカプセルの白い沈殿物が生じた。マイク ロカプセルは、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で１６週間保管された 後でも、そこなわれることはなかった。 本発明の実施例３：架橋したハウチワマメタンパク質で形成された壁をもつマイ クロカプセル ｐＨ７．４の酢酸塩緩衝液をｐＨ５．９の酢酸塩緩衝液に替えて、実施例１の 方法を繰り返して行った。これにより再び、２０と６０μｍとの間のサイズであ る、興味深い、丈夫で、球形のマイクロカプセルの白い沈殿物が生じた。マイク ロカプセルは、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で１６週間保管された 後でも、そこなわれることはなかった。 本発明の実施例４：架橋したハウチワマメタンパク質で形成された壁をもつマイ クロカプセル ｐＨ７．４の酢酸塩緩衝液をｐＨ６のコハク酸塩緩衝液に替えて、実施例１の 方法を繰り返して行った。これにより再び、１０と５０μｍとの間のサイズであ る、興味深い、丈夫で、球形のマイクロカプセルが生じた。マイクロカプセルは 、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で１６週間保管された後でも、そこ なわれることはなかった。 本発明の実施例５：架橋したハウチワマメタンパク質で形成された壁をもつマイ クロカプセル ｐＨ７．４の酢酸塩緩衝液をｐＨ６のクエン酸塩緩衝液に替えて、実施例１の 方法を繰り返して行った。これにより再び、２０と６０μｍとの間のサイズであ る、興味深い、丈夫で、球形のマイクロカプセルが生じた。マイクロカプセルは 、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で１５週間保管された後でも、そこ なわれることはなかった。 本発明の実施例６：架橋したエンドウタンパク質で形成された壁をもつマイクロ カプセル ハウチワマメの粉を、エンドウタンパク質単離品（タンパク質含量９０％：Ｐ ｉｓａｎｅ ＨＤ（登録商標）、ＣＯＳＵＣＲＡ）に替えて、実施例１の方法を 繰り返して行った。これにより、２０と７０μmとの間のサイズである、興味深 い、丈夫で、球形のマイクロカプセルが生じた。マイクロカプセルは、水の懸濁 液の形態で、４５℃のオーブン中で４週間保管された後でも、そこなわれること はなかった。 本発明の実施例７：架橋したソラマメ（ｈｏｒｓｅ ｂｅａｎ）タンパク質で形 成された壁をもつマイクロカプセル ハウチワマメの粉を、ソラマメタンパク質濃縮品（タンパク質含量５０％：Ｃ ｏｎｃｅｎｔｒａｔ ５０（登録商標）、Ｇｅｍｅｆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅ）に 替えて、実施例１の方法を繰り返して行った。これにより、２０と６０μｍとの 間のサイズである、興味深い、丈夫で、球形のマイクロカプセルが生じた。マイ クロカプセルは、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で４ケ月間保管され た後でも、そこなわれることはなかった。 本発明の実施例８：架橋したハウチワマメタンパク質で形成された壁をもつマイ クロカプセル ａ）水相の調製 ハウチワマメの粉０．７５ｇ（タンパク質４５％含有ｕｌｔｒａｆｉｎｅ ｆ ｌｏｕｒ ｏｆ ｓｗｅｅｔ ｗｈｉｔｅ ｌｕｐｉｎ（ＣＡＮＡ））を、３５ ℃の温度に加熱されたｐＨ７．４の酢酸塩緩衝液１５ｍｌ中に分散した。その分 散液を、１５分間磁気により攪拌し、その後、遠心分離して、上澄みを分離した 。 ｂ）エマルジョン化 上澄み６ｍｌを、トリオレイン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ８５（登録商標））２ ％を含む２−エチルヘキシルココエート３０ｍｌ中、５分間、２０００ｒｐｍで 攪拌することにより分散した。 ｃ）架橋 架橋は、実施例１で述べたのと同様にして行った。 これにより、２０と６０μｍとの間のサイズである完全な球形のマイクロカプ セルが生じた。 それらは、水の懸濁液の形態で、４５℃の温度で１４週間よりも長い間保管さ れた後でも、安定的に残っていた。 トリプシン中での分解試験：湿らせたマイクロカプセル２５０ｍｇを、ｐＨ７． ５の緩衝液中のトリプシン（タイプII−Ｓ、豚の膵臓から、Ｓｉｇｍａ）の０． ４％溶液７．５ｍｌを含む試験管の中に入れた。試験管を３７℃で培養し、磁気 により攪拌した。分解を、マイクロカプセルが完全に見えなくなるまで顕微鏡検 査により観察した。 結果：マイクロカプセルは、２０分後、完全に見えなくなった。 本発明の実施例９：水溶解性活性要素を含む、架橋したハウチワマメタンパク質 で形成された壁をもつマイクロカプセル ａ）水相の調製 ハウチワマメの粉０．７５ｇ（タンパク質４５％含有ｕｌｔｒａｆｉｎｅ ｆ ｌｏｕｒ ｏｆ ｓｗｅｅｔ ｗｈｉｔｅ ｌｕｐｉｎ（ＣＡＮＡ））を、３５ ℃の温度に加熱されたｐＨ６のコハク酸塩緩衝液１５ｍｌ中に分散した。１５分 間磁気により攪拌し、その分散液を、その後遠心分離して、上澄みを分離した。 グルコースを３％濃度で上澄み中に溶解した。 エマルジョン化及び架橋は、その後、実施例８で述べたのと同様にして行った 。 マイクロカプセルを、遠心分離により分離し、その後、エチルヘキシルココエ ートで数回洗浄した。これにより、グルコースを含む２０と７０μｍとの間のサ イズである完全な球形のマイクロカプセルが生じた。 本発明の実施例１０：架橋したエンドウタンパク質で形成された壁をもつマイク ロカプセル ハウチワマメの粉を、エンドウタンパク質単離品（タンパク質含量９０％：Ｐ ｉｓａｎｅ ＨＤ（登録商標）、Ｃｏｓｕｃｒａ）に替えて、ｐＨ７．４の酢酸 塩緩衝液をｐＨ６のコハク酸塩緩衝液に替えて、実施例８で述べられた方法を繰 り返して行った。 これにより、１０と６０μｍとの間のサイズである球形のマイクロカプセルが 生じ、水の懸濁液の形態で、４５℃の温度で８週間よりも長い間保管された後で も安定的に残っていた。これらのマイクロカプセルは、実施例８で述べた条件下 で、８分間でトリプシン分解された。 本発明の実施例１１：架橋したソラマメタンパク質で形成された壁をもつマイク ロカプセル ハウチワマメの粉を、ソラマメタンパク質濃縮品（タンパク質含量５０％：Ｃ ｏｎｃｅｎｔｒａｔ ５０（登録商標）、Ｇｅｍｅｆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅ）に 替えて、実施例８で述べられた方法を繰り返して行った。これにより、１０と５ ０μｍとの間のサイズである球形のマイクロカプセルが生じ、それらは、水の懸 濁液の形態で、４５℃の温度で８週間よりも長い間保管された後でも安定的に残 っていた。マイクロカプセルは、実施例８で述べた条件下で、７５分間でトリプ シン分解された。 本発明の実施例１２：架橋したソラマメタンパク質の大粒径マイクロカプセル 酢酸塩緩衝液をｐＨ６のクエン酸塩緩衝液に替えて、トリオレイン酸ソルビタ ンの添加を省き、攪拌速度を６００ｒｐｍに減らして、実施例１１で述べられた 方法を繰り返して行った。これにより、裸眼で見ることのできる不透明なカプセ ルの大きな沈殿物を生じ、すみやかに沈殿した。 ３００のカプセルのサイズ分析を、対眼レンズにマイクロメーターを備えた顕 微鏡により行った結果、２１７μｍと１６４３μｍとの間のサイズの範囲であり 、７３５μｍの平均直径であり、ミリメートルよりも大きなサイズのマイクロカ プセルの割合が１８％であった。 マイクロカプセルの膜は、弾力があり、丈夫であることが観察された：顕微鏡 観察の薄片に圧力が及ぼされても、圧力が及ぼされている間、マイクロカプセル の直径は増加し、圧力がなくなったときに元の値に戻った。 マイクロカプセルは、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で７週間保管 された後でもそこなわれることはなかった。 本発明の実施例１３：架橋したソラマメタンパク質のマイクロカプセル：酸化チ タンを疎水性相に添加することによるサイズの増大 エマルジョン化の前に、酸化チタン０．１％を油相中で分散して、実施例１２ で述べられた方法を繰り返して行った。これにより、丈夫で、弾力性のある膜を 有するマイクロカプセルを生じ、すみやかに沈殿した。 サイズ分析を実施例１２と同様にして行った結果、２１７μｍから２１７０μ ｍのサイズの範囲であり、８９９μｍの平均直径であり、ミリメートルよりも大 きなサイズのマイクロカプセルの割合が４３％であった。 この実施例は、酸化チタンを油相に添加することが、マイクロカプセルの平均 直径及びミリメートルよりも大きなサイズのマイクロカプセルの割合を増加させ るのに有効であることを証明している。 本発明の実施例１４：架橋したハウチワマメタンパク質のマイクロカプセル：着 色剤ＤＣ Ｒｅｄ３０を水相に添加することによるサイズの増大 酢酸塩緩衝液をｐＨ６のコハク酸塩緩衝液に替えて、顔料ＤＣ Ｒｅｄ３０ ０．１％を水相中で分散して、トリオレイン酸ソルビタンを省き、攪拌速度を６ ００ｒｐｍに減らして、実施例８で述べられた方法を繰り返して行った。これに より、球形で赤色の小胞を形成した沈殿物を生じた。 その膜は、弾力があり、丈夫であることが観察された：顕微鏡観察の薄片に圧 力が及ぼされても、圧力が及ぼされている間、マイクロカプセルの直径は増加し 、圧力がなくなったときに元の値に戻った。 マイクロカプセルは、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で３ケ月間保 管された後でもそこなわれることはなかった。 これらのマイクロカプセルは、実施例８で述べた条件下で、１２分でトリプシ ン中分解された。 サイズ分析を実施例１２と同様にして行った結果、１８６μｍから１２４０μ ｍのサイズの範囲であり、６３２μｍの平均直径であり、ミリメートルよりも大 きなサイズのマイクロカプセルの割合が６％であった。 顔料ＤＣ Ｒｅｄ３０の添加を省いた他は、同一の条件で行われた比較例では 、１５０μｍから８００μmのサイズの範囲であり、３２２μｍの平均直径であ り、ミリメートルよりも大きな直径のカプセルがない、非常にきわだって小さな 直径のマイクロカプセルを生じた。 本発明の実施例１５：インジゴカルミンレーキを水相に添加することにより得ら れる架橋したハウチワマメタンパク質の大粒径マイクロカプセル 顔料ＤＣ Ｒｅｄ３０をインジゴカルミンアルミニウムレーキ（Ｃｏｌｏｒｃ ｏｎ）に替えて、実施例１４で述べられた方法を繰り返して行った。これにより 、丈夫で、弾力性のある膜を有する青色のマイクロカプセルを生じた。マイクロ カプセルは、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で５週間保管された後で もそこなわれることはなかった。 サイズ分析により、２１７μｍから１０２３μｍのサイズの範囲であり、５３ ６μｍの平均直径であり、ミリメートルよりも大きなサイズのマイクロカプセル の割合が０．３％であった。 本発明の実施例１６：ステアリン酸カルシウムを水相に添加することにより得ら れる架橋したハウチワマメタンパク質の大粒径マイクロカプセル 顔料ＤＣ Ｒｅｄ３０をステアリン酸カルシウムに替えて、実施例１４で述べ られた方法を繰り返して行った。これにより、白色のマイクロカプセルが生じ、 それらは、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で３週間保管された後でも そこなわれることはなく残っていた。 サイズ分析により、２７９μｍから１２４０μｍのサイズの範囲であり、６７ ９μｍの平均直径であり、ミリメートルよりも大きなサイズのマイクロカプセル の割合が７％であった。 本発明の実施例１７：タルカムを水相に添加することにより得られる架橋したハ ウチワマメタンパク質の大粒径マイクロカプセル 顔料ＤＣ Ｒｅｄ３０をタルカムに替えて、実施例１４で述べられた方法を繰 り返して行った。これにより、白色のマイクロカプセルが生じ、それらは、水の 懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で７週間保管された後でもそこなわれるこ とはなく残っていた。 サイズ分析により、２１７μｍから１１４７μｍのサイズの範囲であり、６６ ６μｍの平均直径であり、ミリメートルよりも大きなサイズのマイクロカプセル の割合が５％であった。 本発明の実施例１８：酸化チタンを水相に添加することにより得られる架橋した ハウチワマメタンパク質の大粒径マイクロカプセル 顔料ＤＣ Ｒｅｄ３０を酸化チタンに替えて、実施例１４で述べられた方法を 繰り返して行った。これにより、白色のマイクロカプセルが生じた。サイズ分析 を実施例１２と同様にして行い、２４８μｍから１２７１μｍのサイズの範囲で あり、６２０μｍの平均直径であり、ミリメートルよりも大きなサイズのマイク ロカプセルの割合が２％であった。 本発明の実施例１９：酸化チタンを疎水性相に添加することにより得られる架橋 したハウチワマメタンパク質の大粒径マイクロカプセル 酸化チタンを、水相に取り入れるのではなく、疎水性相に取り入れて、上記酸 化チタンを０．０５％の濃度で用いて、実施例１８で述べられた方法を繰り返し て行った。これにより、白色のマイクロカプセルが生じた。サイズ分析により、 １５５μｍから１６７４μｍのサイズの範囲であり、６７９μｍの平均直径であ り、ミリメートルよりも大きなサイズのマイクロカプセルの割合が１７％であっ た。 本発明の実施例２０：酸化チタンを疎水性相に添加することにより得られる架橋 したハウチワマメタンパク質の大粒径マイクロカプセル 酸化チタンを０．１％の濃度で用いて、実施例１９で述べられた方法を繰り返 して行った。これにより、白色のマイクロカプセルが生じた。サイズ分析により 、２１７μｍから１８６０μｍのサイズの範囲であり、８５２μｍの平均直径で あり、ミリメートルよりも大きなサイズのマイクロカプセルの割合が３７％であ った。 本発明の実施例２１：酸化チタンを水相及び疎水性相に添加することにより得ら れる架橋したハウチワマメタンパク質の大粒径マイクロカプセル 酸化チタンを、０．０５％の濃度で水相に取り入れて、０．０５％の濃度で疎 水性相に取り入れて、実施例２０に述べられた方法を繰り返して行った。 これにより、白色のマイクロカプセルが生じた。サイズ分析により、２４８μ ｍから１７９８μｍのサイズの範囲であり、８２５μｍの平均直径であり、ミリ メートルよりも大きなサイズのマイクロカプセルの割合が２６％であった。 本発明の実施例２２：酸化チタンを疎水性相に添加することにより得られる架橋 したエンドウタンパク質の大粒径マイクロカプセル トリオレイン酸ソルビタンを省き、攪拌速度を１０００ｒｐｍに減らして、酸 化チタンを０．１％の濃度で疎水性相に取り入れて、実施例１０に述べられた方 法を繰り返して行った。これにより、白色のマイクロカプセルが生じた。サイズ 分析により、１２４μｍから１１４７μｍのサイズの範囲であり、５６５μｍの 平均直径であり、ミリメートルよりも大きなサイズのマイクロカプセルの割合が ６％であった。 酸化チタンの添加を省いた他は、同一の条件で行われた比較例では、１２４μ ｍから８６８μｍのサイズの範囲であり、３４５μｍの平均直径であり、ミリメ ートルよりも大きな直径のカプセルがない、非常にきわだって小さな直径のマイ クロカプセルを生じた。 本発明の実施例２３：油性の内容物をともなう架橋したハウチワマメタンパク質 のマイクロカプセル ・水相の調製 ハウチワマメの粉２ｇを、３５℃の温度に加熱されたｐＨ６のコハク酸塩緩衝 液４０ｍｌ中に分散した。その分散液を、１５分間磁気により攪拌し、その後、 遠心分離して、上澄みを分離した。 ・油相の調製 塩化セバコイル０．３ｍｌを流動パラフィン６ｍｌに添加した。 ・エマルジョン化−架橋 油相を、水相３０ｍｌ中、５０００ｒｐｍで攪拌することにより分散し、６０ 分間架橋反応を進展させた。マイクロカプセルを、その後、蒸留水で数回洗浄し た。 これにより、１０−１５０μｍのサイズで整った形の球形のマイクロカプセル からなる上澄みを生じた。全ての油はカプセルに内包された。マイクロカプセル は、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で３ケ月間保管された後でもそこ なわれることはなかった。 本発明の実施例２４：油性の内容物をともなう架橋したソラマメタンパク質のマ イクロカプセル ハウチワマメの粉をソラマメタンパク質の調製品Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔ ５０ （登録商標）に替えて、ｐＨ６のコハク酸塩緩衝液をｐＨ７．４の酢酸塩緩衝液 に替えて、実施例２３で述べられた方法を適用した。これにより、３０−１５０ μｍのサイズで整った形のマイクロカプセルからなる上澄みを生じた。全ての油 はカプセルに内包された。 マイクロカプセルは、水の懸濁液の形態で、４５℃のオーブン中で２ケ月間保 管された後でもそこなわれることはなかった。 本発明の実施例２５：ダイズの乳液から調製されるマイクロカプセル ａ）水相の調製 酢酸ナトリウム３水和物１ｇを、蒸留水１ｍｌ中に溶解して、この溶液をＢｊ ｏｒｇダイズ乳液（Ｄｉｓｔｒｉｂｏｒｇ）１０ｍｌとともに混合した。 ｂ）エマルジョン化 水相６ｍｌを、トリオレイン酸ソルビタン２％を含むシクロヘキサン３０ｍｌ 中、５分間、２０００ｒｐｍで攪拌して分散した。 ｃ）架橋 クロロホルム／シクロヘキサンの混合液（１：４ ｖ／ｖ）中の塩化テレフタ ロイルの５％（ｗ／ｖ）溶液４０ｍｌを加えた。３０分間攪拌した後、マイクロ カプセルを、遠心分離により分離して、その後、実施例１で述べたのと同様にし て洗浄した。 遠心分離の後に、実質的にクリーム状の白色の沈殿物が得られた。顕微鏡検査 では、興味深い、球形のマイクロカプセルが見られ、それらは、微小な斑点状の 内容物、明瞭な膜をもち、１０−７０μｍのサイズであった。４５℃のオーブン 中で培養されたとき、マイクロカプセルは、水の懸濁液の形態で、１年間保管さ れた後でも、カーボポール若しくはキサンタンゲル中で、ゲル化シリコーン又は ナンキンマメオイル又はゲル化液体マイクロエマルジョン中で、懸濁液の形態で 、８ケ月半後でも、そこなわれることはなかった。 毒物学的調査が行われ、実施例４３に示した。 本発明の実施例２６：ダイズ乳液からのマイクロカプセルの調製 ＢＪＯＲＧダイズ乳液を、ＣＥＲＥＡＬ（登録商標）ダイズ乳液に替えて、実 施例２５で述べられた方法を適用した。これにより、１０−６０μｍのサイズで 球形のマイクロカプセルを生じ、それらは、水の懸濁液の形態で、４５℃のオー ブン中で５ケ月半間保管された後でもそこなわれることはなかった。 本発明の実施例２７：ダイズ乳液からのマイクロカプセルの調製 ＢＪＯＲＧダイズ乳液を、ＧＡＹＬＯＡＤ ＨＡＵＳＥＲ（登録商標）ダイズ 乳液に替えて、実施例２５で述べられた方法を適用した。これにより、１０−７ ０μｍのサイズで球形のマイクロカプセルを生じ、それらは、水の懸濁液の形態 で、４５℃のオーブン中で５ケ月半間保管された後でもそこなわれることはなか った。 本発明の実施例２８：ダイズ乳液からのマイクロカプセルの調製 酢酸ナトリウムを、水１ｍｌに０．６５ｇの割合で加えられたクエン酸ナトリ ウム２水和物に替えて、酸化チタン０．１％を、前もって３５℃の温度に加熱し た水相中に分散して、シクロヘキサンを２−エチルヘキシルココエートに替えて 、トリオレイン酸ソルビタンの添加を省き、攪拌速度を６００ｒｐｍに減らして 、実施例２５で述べられた方法を繰り返して行った。 これにより、１００から９００μｍのサイズで、丈夫で弾力性のある膜を有す る興味深い、マイクロカプセルからなる大きな白色の沈殿物を生じた。 本発明の実施例２９：ダイズ乳液から調製され、オイルエマルジョンを含むマイ クロカプセル ａ）水相の調製 酢酸ナトリウム３水和物２ｇを、蒸留水２ｍｌ中に溶解して、この溶液をＢｊ ｏｒｇ（登録商標）ダイズ乳液２０ｍｌとともに混合した。 ｂ）第一のエマルジョン化：油／水 流動パラフィン５ｍｌを、先の水相１５ｍｌ中、５分間、５０００ｒｐｍで攪 拌することにより分散した。 ｃ）第二のエマルジョン化：水／油 先のエマルジョン６ｍｌを、トリオレイン酸ソルビタン１％を含む２−エチル ヘキシルココエート３０ｍｌ中、５分間、１２００ｒｐｍで攪拌することにより 分散した。 ｄ）架橋 ココエート中の塩化テレフタロイルの５％（ｗ／ｖ）溶液４０ｍｌを加えた。 ３０分間攪拌した後、マイクロカプセルを、遠心分離により分離して、その後、 実施例１で述べたのと同様にして洗浄した。 これにより、１０から１００μｍのサイズで、液体パラフィンの屈折性の小胞 を含むマイクロカプセルを生じた。 本発明の実施例３０：ダイズ乳液から調製され、油性内容物を含むマイクロカプ セル ａ）水相の調製 酢酸ナトリウム３水和物５ｇを、蒸留水５ｍｌ中に分散して、この溶液をＢｊ ｏｒｇ（登録商標）ダイズ乳液５０ｍｌとともに混合した。 ｂ）油相の調製 塩化セバコイル０．６ｍｌを、流動パラフィン１２ｍｌに添加した。 ｃ）エマルジョン化−架橋 油相を、５０００ｒｐｍで攪拌することにより、水相中に分散し、６０分間架 橋反応を進展させた。マイクロカプセルを、その後、蒸留水で数回洗浄した。 これにより、１００−２００μｍのサイズで整った形の球形のマイクロカプセ ルが形成されたクリーム色の上澄みを生じた。全ての油はカプセルに内包された 。 ４５℃のオーブン中で培養されたとき、マイクロカプセルは、水の懸濁液の形 態で、８ケ月間保管された後でも、ゲル化シリコーン又はナンキンマメオイル中 で、懸濁液の形態で、２ケ月半後でも、そこなわれることはなかった。 本発明の実施例３１：植物タンパク質から形成される壁を有するナノカプセルの 調製 ａ）ナノカプセルを調製するために必要とされる植物タンパク質溶液の調製 ハウチワマメの粉２００ｇを、３５℃の温度に加熱したｐＨ６のコハク酸塩緩 衝液４１中に分散した。１５分間磁気による攪拌を行った後、その溶液を遠心分 離して、上澄みを取った。それは、後の段階で用いた。 ｂ）油相の調製 塩化セバコイル３０ｍｌを、流動パラフィン１００ｍｌに添加した。室温で攪 拌を行い、均一な溶液を後の段階で用いた。 ｃ）エマルジョン化／架橋 ａ）及びｂ）で調製された溶液を、３００から１２００バールの均一な圧力で 、例えば８００バールで、高圧ホモジナイザーに連続的に添加して入れた。得ら れるナノカプセルは、１ミクロンよりもサイズが小さく、非常に安定的であり、 時間により分解の問題がなく、水和した化粧品の配合を含む、たくさんの化粧品 の配合に役立たせることができる。それらは、４５℃のオーブン中で１ケ月間保 管された後でもそこなわれることはなく観察された。 本発明の実施例３２： 実施例３１−ｂ）で用いた流動パラフィン１００ｍｌを、流動パラフィン１０ ０から５００ｍｌの量に、好都合に置き替えることができた。 本発明の実施例３３： 実施例３１−ｂ）で用いた流動パラフィン１００ｍｌを、ミリスチン酸エチル １００ｍｌ、ミリスチン酸イソプロピル１００ｍｌ、オレイン酸エチル１００ｍ ｌ、酢酸ビタミンＥ１００ｍｌ、パルミチン酸ビタミンＡ１００ｍｌ、又は、安 息香酸ベンジル１００ｍｌに、好都合に置き替えることができた。いくつかの他 の油性の活性成分若しくは植物油、又は、それらの組合せもまた、同様にしてカ プセル化させることができた。 本発明の実施例３４： 実施例３１のａ）相は、次に示す調製品に置き替えることができた：ｐＨ７． ４の酢酸塩緩衝液４１中に分散されたソラマメタンパク質の濃縮物２００ｇ混合 し、３５℃で１５分間穏やかに加熱した後、その溶液を、遠心分離し、上澄みを 工程の残りで用いた。 本発明の実施例３５：植物タンパク質から形成される壁を有するナノカプセルの 調製 ａ）ナノカプセルを調製するために必要とされる混合物の調製 ハウチワマメの粉７５ｇ（タンパク質４５％含有スイートホワイトハウチワマ メの超微粒粉（ｕｌｔｒａｆｉｎｅ ｆｌｏｕｒ ｏｆ ｓｗｅｅｔ ｗｈｉｔ ｅ ｌｕｐｉｎ（ＣＡＮＡ）））を、ｐＨ７．４の酢酸塩緩衝液１．５１中に分 散した。１０分間、室温で攪拌した後、その溶液を遠心分離して、上澄みは、残 りの工程で用いた。 ｂ）架橋剤の調製 塩化テレフタロイル４００ｇを、乳鉢中で粉にして、ＣＯＤＥＸ粘着性ワセリ ン１リットルに加えた。そのすべてを機械的に攪拌した。 ｃ）エマルジョン化 ＣＯＤＥＸ粘着性ワセリンオイル（粘度指標：２５０センチポイズ）６リット ルを、攪拌しながらバットに入れ、界面活性剤（例えば、グリセロールソルビタ ンヒドロキシイソステアレートＡＲＬＡＣＥＬ７８０、ＩＣＩ）３２０ｍｌを添 加した。そのすべてを数分間攪拌した。次に、攪拌しながらａ）で調製された溶 液１ｋｇを入れ、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒａｘを用いて２００００ｒｐｍで数分間エ マルジョン化を行った。 ｄ）架橋 ｂ）段階で調製された架橋剤を含む溶液を、次に、エマルジョンに加え、その 中に存在する固形粒子も同じく添加し、充分な時間をかけて溶解した。Ｕｌｔｒ ａ−Ｔｕｒａｘによって、２００００ｒｐｍで５分間攪拌した後、その溶液を、 室温で少なくとも１８時間、回転数を減速して機械的に攪拌した。ナノ球体を、 遠心分離により、一括分離し、その上澄みをすてた（１５分間４０００ｒｐｍ） 。 ｅ）洗浄 ナノ球体を、順次、ワセリンオイルに混和可能な有機相で洗浄した。例えば、 ＤＲＡＧＯＸＡＴ（登録商標）（ＤＲＡＧＯＣＯ）、ミリスチン酸イソプロピル （ＳＴＥＡＲＩＮＥＲＩＥ ＤＵＢＯＩＳ）及び中間の鎖長のトリグリセリド（ ＳＴＥＡＲＩＮＥＲＩＥ ＤＵＢＯＩＳ）が挙げられる。それぞれの洗浄剤にお いて、ナノ球体１００ｍｌに有機相５００ｍｌを添加した。全体を数分間攪拌し 、その後遠心分離した（１５分間４０００ｒｐｍ）。得られたナノ球体は、例え ば、タンパク質又は多糖類ゲル中で、油相中又はカルボキシビニリックポリマー ゲル（カルボマー）中で懸濁することができた。 本発明の実施例３６：水溶性又は非水溶性の活性要素を含むナノカプセルの調製 ａ）で調製された溶液に、多種の活性要素、例えば、グルコース；グルタミン 、セリン、グリシン又はシステインのようなアミノ酸；カフェイン又はテオフィ リンのような活性要素；イチョウ二裂葉、ツボクサアジアチカ又はセイヨウトチ ノキのような植物抽出物を用いる他は、実施例３５で述べられたのと同様な工程 で行った。 本発明の実施例３７： ａ）で述べられた相の調製品を次のように変更する他は、実施例３６で述べら れたのと同様な工程で行った。： ３７−Ａ）ｐＨ７．４の酢酸塩緩衝液を、ｐＨ６．８の酢酸塩緩衝液に替えた 。 ３７−Ｂ）ｐＨ７．４の酢酸塩緩衝液を、ｐＨ５．９の酢酸塩緩衝液に替えた 。 ３７−Ｃ）ｐＨ７．４の酢酸塩緩衝液を、ｐＨ６のコハク酸塩緩衝液に替えた 。 ３７−Ｄ）ｐＨ７．４の酢酸塩緩衝液を、ｐＨ６のクエン酸塩緩衝液に替えた 。 ３７−Ｅ）ハウチワマメの粉を、エンドウタンパク質の単離品に替えた。 ３７−Ｆ）ハウチワマメの粉を、ソラマメタンパク質の濃縮品（タンパク質５ ０％を含む：ＧＥＭＥＦ ＩＮＤＵＳＴＲＩＥ製Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔ５０（登 録商標））に替えた。 本発明の実施例３８： 化粧品又は医薬品用途における油中水エマルジョン 油中水タイプのエマルジョン配合中のマイクロ粒子又はナノ粒子の使用３８−Ａ配合 ３８−Ｂ配合 ３８−Ｃ配合 本発明の実施例３９： 化粧品又は薬用途における水中油エマルジョン 水中油タイプのエマルジョン配合中のマイクロ粒子及びナノ粒子の使用 本発明の実施例４０： 化粧品組成物 シャンプー又はシャワーゲルタイプの配合中におけるマイクロ粒子及びナノ粒子 の使用 本発明の実施例４１： 化粧品組成物 リップスティックタイプ及び他の無水製品の配合中におけるマイクロ粒子及びナ ノ粒子の使用 本発明の実施例４２： 化粧品組成物 水性ゲル配合（眼の輪郭のゲル、スリミングゲル等）中におけるマイクロ粒子及 びナノ粒子の使用 水 ｑｓｐ１００ カルボマー ０．５ ブチレングリコール １５ フェノキシエタノール ０．５ メチルパラベン エチルパラベン プロピルパラベン ブチルパラベン 本発明の生成物 ０．０１−１０ 本発明の実施例４３： 本発明の実施例２５の生成物について、毒物学的な検査を行った。 ａ）経口毒性 この検査は、急性経口毒性の検査に関するＯＥＣＤのガイドラインに沿った実 施要綱（１９８７年２月２４日のｎｏ．４０１）により行い、体重１ｋｇ当たり ５ｇの最大服用量で実施したところ、生成物の毒性の影響に起因する肉眼で認め られる障害は発生しなかった。 実施例２５で得られた本発明の生成物（ダイズマイクロカプセル）は、５ｇ／ ｋｇよりも少ない量の服用で経口的に使用され、それにより毒性をもつことはな かった。 ｂ）眼の刺激性 この検査は、本発明の生成物（ダイズマイクロカプセル）について、１９９０ 年３月３日の法令により規定された公的方法（１９９０年１１月１４日のフラン ス共和政府の公式刊行物）により行われ、眼球の虹彩又は角膜の障害は発生しな かった。 純粋物を滴下しても、本発明の生成物（ダイズマイクロカプセル）に刺激性は 認められず、眼の許容性はとてもよいと考えることができる。 ｃ）皮膚の刺激性 この検査は、本発明の生成物（ダイズマイクロカプセル）について、１９８２ 年２月１日の法令により規定された公的方法（１９８２年２月２１日のフランス 共和政府の公式刊行物）により行われ、刺激性の現象は発生しなかった。 純粋物を塗布しても、本発明の生成物（ダイズマイクロカプセル）に刺激性は 認められず、皮膚の許容性は優れていると考えることができる。 ｄ）敏感性影響力の検査 最大限度の検査を、ＭＡＧＮＵＳＳＯＮ及びＫＬＩＧＭＡＮ（Ｊ．ＩＮＶＥＳ Ｔ．ＤＥＲＭ．１９６９年、５２巻、２６８−２７６頁）に記載された方法に適 合した方法により行った。 本発明の生成物（ダイズマイクロカプセル）は、過敏な反応を示す肉眼で認め られる反応が発生しなかった。従って、それらは、アレルギー性が少ない（クラ スＩ）と考えることができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 9/50 Ａ６１Ｋ 9/50 // Ｂ０１Ｊ 13/14 Ｂ０１Ｊ 13/02 Ｂ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＪＰ，ＫＲ，Ｕ Ｓ (72)発明者 シャンタル・ビュフェヴァン フランス国 69390 ミレーリー レ カ レ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 植物タンパク質間に形成される架橋、特に、植物タンパク質と、少なくと も２つのアシル化基からなるアシル化多官能性架橋剤との間で、タンパク質のア シル化され得る基とアシル化多官能性架橋剤のアシル基との間で共有結合が形成 されることによる、界面架橋により形成された壁を少なくとも表面に有すること を特徴とする粒子。 ２． 上述した植物タンパク質は、特にマメ科の植物、とりわけ、次に示す植物 ：ハウチワマメ（ハウチワマメ属）、ダイズ（ダイズ属）、エンドウ（エンドウ 属）、ヒヨコエンドウ（シサー（Ｃｉｃｅｒ））、アルファルファ（ウマゴヤシ ）、ソラマメ（ビシア（Ｖｉｃｉａ））、レンズマメ（レンズ（Ｌｅｎｓ））、 インゲン（ファセオラス（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ））、ナタネ（ブラシカ（Ｂｒａ ｓｓｉｃａ））若しくはヒマワリ（ヘリアンツス（Ｈｅｌｉａｎｔｈｕｓ））、 又は、その他には、コムギ、トウモロコシ、オオムギ、モルト及びカラスムギの ような穀物から抽出されることを特徴とする請求項１記載の粒子。 ３． 上述した植物タンパク質は、粉、濃縮物若しくは単離物のような粉状の調 製剤、又は、ダイズ乳液のような液体調製剤の形態で用いられることを特徴とす る請求項１又は２記載の粒子。 ４． 植物タンパク質は、ｐＨが約４．５と約８との間で、０．５重量％と５重 量％との間の濃度で水溶液中に溶解されることを特徴とする請求項３記載の粒子 。 ５． ｐＨが約４．５と約８との間にある植物タンパク質の水溶液は、０．１重 量％と２０重量％との間の濃度で、少なくとも１つのカルボン酸塩を含むことを 特徴とする請求項４記載の粒子。 ６． カルボン酸塩は、酢酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、ジ メチルグルタル酸、アジピン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、リンゴ酸、ク エン酸、乳酸及びサリチル酸からなる群より選択されるカルボン酸のアルカリ金 属又はアルカリ土類金属の塩であることを特徴とする請求項５記載の粒子。 ７． 粒子は、ステアリン酸カルシウム若しくはマグネシウム、酸化チタン若し くは酸化亜鉛のような金属酸化物、タルカム、又は、顔料の形をとっているか、 若しくは、様々な着色剤の、カルシウム、アルミニウム、バリウム若しくはジル コニウムのレーキの形をとっている不溶性の着色物質のような、脂肪酸と２価の 金属との不溶性の塩からなる群より特に選択される不溶性の親油性物質を含むこ とを特徴とする先行する請求項のうちの１つに記載の粒子。 ８． 上述した不溶性の脂肪酸塩は、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸 、ステアリン酸、オレイン酸及びリノレン酸等の炭素数が１２か又は１２よりも 大きいカルボン酸のカルシウム塩、マグネシウム塩、ストロンチウム塩及びバリ ウム塩からなる群より選択され、上述したレーキは、インジコカルミンアルミニ ウムレーキ（青）、ポンソー４Ｒアルミニウムレーキ（赤）、及び、サンセット イエローＦＣＦアルミニウムレーキ（オレンジ）からなる群より選択されること を特徴とする請求項７記載の粒子。 ９． 上述したアシル化多官能性架橋剤は、二ハロゲン化酸又は二酸無水物酸を 含有することを特徴とする先の請求項の１つに記載の粒子。 １０． 二ハロゲン化酸は、二ハロゲン化フタロイル、二ハロゲン化テレフタロ イル、二ハロゲン化セバコイル、二ハロゲン化グルタリル、二ハロゲン化アジポ イル、二ハロゲン化スクシニルから選択されることを特徴とする請求項９記載の 粒子。 １１． 粒子は、植物性の、鉱物性の若しくは合成の油、ビタミンＡ及びビタミ ンＥの誘導体等の化粧品、医薬品又は食品活性要素、並びに、植物抽出物、アス コルビン酸、又は、ビタミンＣ、ＰＭＧ、グルコース、有機顔料及び無機顔料等 の親水性活性要素を含むことを特徴とする先行する請求項のうちの１つに記載の 粒子。 １２． 粒子は、約１０ナノメートルと約３ミリメートルとの間のサイズをもつ ことを特徴とする先の請求項の１つに記載の粒子。 １３． 化粧品又は医薬品の組成物、特に皮膚病薬の組成物、又は、食品の組成 物の調製のための先行する請求項のうちの１つに記載の粒子の使用。 １４． 請求項１から１２のいずれか１つに記載の粒子を含む化粧品又は医薬品 組成物、特に皮膚病薬の組成物、又は、食品の組成物。 １５． ａ）溶液中に、少なくとも１つの植物タンパク質及び少なくとも１つの カルボン酸塩を含む、ｐＨが約４．５と約８との間にある水溶液の形成； ｂ）油相の形成； ｃ）攪拌しながら、前記水相及び油相を混合することによるエマルジョンの形 成； ｄ）少なくとも２つのアシル化基を有するアシル化多官能性架橋剤による、少 なくともその表面において、前記架橋剤により架橋した植物タンパク質から形成 された壁を有する粒子を得るための充分な時間の前記植物タンパク質の界面架橋 ；及び、 ｅ）所望により、この方法で調製された粒子の分離 からなることを特徴とする架橋した植物タンパク質の粒子の製造方法。 １６． 水相中における植物タンパク質の濃度は、約０．５重量％と約５重量％ との間であることを特徴とする請求項１５記載の製造方法。 １７． ｐＨが約４．５と約８との間にある上述した水溶液は、通常、約０．１ 重量％から２０重量％の量のカルボン酸塩を含むことを特徴とする請求項１５又 は１６記載の製造方法。 １８． 上述した多官能性架橋剤は、二ハロゲン化酸又は二酸無水物酸から選択 されることを特徴とする請求項１５から１７のうちの１つに記載の製造方法。 １９． 用いられるタンパク質の重量に対して上述した多官能性架橋剤の重量割 合は、通常、タンパク質１重量部に対して０．０３重量部から７０重量部の架橋 剤であることを特徴とする請求項１５から１８のうちの１つに記載の製造方法。 ２０． 油相は、シクロヘキサン若しくはクロロホルム／シクロヘキサン混合物 、特に１：４ｖ／ｖの割合における混合物等の容易に除去することができる有機 溶剤、又は、好ましくは、生物学的に適応性のある油、特にココナツオイル、２ −エチルヘキシルココネート又は液体パラフィン等の生物学的に適応性のある植 物性の油のいずれかを用いて形成されることを特徴とする請求項１５から１９の うちの１つに記載の製造方法。 ２１． 製造方法が、油中水タイプのエマルジョン中で行われることを特徴とす る請求項１５から２０のうちの１つに記載の製造方法。 ２２． 製造方法が、水中油タイプのエマルジョン中で行われることを特徴とす る請求項１５から２０のうちの１つに記載の製造方法。 ２３． 界面活性剤、好ましくはトリオレイン酸ソルビタンのようなソルビタン エステルタイプの界面活性剤が、エマルジョンを助長し又は安定化させるために 用いられることを特徴とする請求項１５から２２のうちの１つに記載の製造方法 。 ２４． 粒子径を増加させるため、不溶性の親油性物質が、水相、疎水性相又は 両相に添加され、前記物質は、好ましくは、脂肪酸と２価の金属との不溶性塩、 タルカム、金属酸化物、又は、顔料若しくはレーキの形態である不溶性の着色物 質からなる群より選択されることを特徴とする請求項１５から２３のうちの１つ に記載の製造方法。 ２５． 上述した脂肪酸と２価の金属との不溶性塩は、ラウリン酸、ミリスチン 酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸及びリノレン酸等の炭素数が１２ か又は１２よりも大きいカルボン酸のカルシウム塩、マグネシウム塩、ストロン チウム塩及びバリウム塩からなる群より選択され、上述した金属酸化物は、酸化 チタン及び酸化亜鉛からなる群から選択され、及び、不溶性着色物質はレーキ、 又は、ＤＣ Ｒｅｄ ３０等の有機顔料の群から選択されるか、又は、青色のイ ンジコカルミンアルミニウムレーキ、赤色のポンソー４Ｒアルミニウムレーキ、 及び、オレンジ色のサンセットイエローＦＣＦアルミニウムレーキ等の、着色剤 のカルシウム、アルミニウム、バリウム又はジルコニウムのレーキから選択され ることを特徴とする請求項２４に記載の製造方法。 ２６． 上述した不溶性の親油性物質は、当の相において、０．０１重量％と２ 重量％との間の量で取り入れられることを特徴とする請求項２４又は２５に記載 の製造方法。 ２７． 界面架橋反応は、４から８０℃の温度で、好ましくは１５から３０℃の 温度で、大気圧で行われることを特徴とする請求項１５から２６のうちの１つに 記載の製造方法。 ２８． カルボン酸塩は、酢酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、 ジメチルグルタル酸、アジピン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、リンゴ酸、 クエン酸、乳酸及びサリチル酸からなる群から選択されるカルボン酸の、アルカ リ金属又はアルカリ土類金属の塩であることを特徴とする請求項１５から２７の いずれか１つに記載の製造方法。