JP2000515503A

JP2000515503A - 極性薬剤の粘膜表面からの摂取を増進するための組成物

Info

Publication number: JP2000515503A
Application number: JP10504949A
Authority: JP
Inventors: リズベス、イルーム; ピーター、ジェームズ、ワッツ
Original assignee: ウエスト、ファルマシューティカル、サービシズ、ドラッグ、デリバリー、アンド、クリニカル、リサーチ、センター、リミテッド
Priority date: 1996-07-06
Filing date: 1997-07-07
Publication date: 2000-11-21
Also published as: GB9900050D0; CA2257563A1; KR20000023583A; AU3453997A; NO985956L; WO1998001159A2; NO985956D0; AU722724B2; EP0993305A2; GB2330533B; GB9614235D0; GB2330533A; WO1998001159A3

Abstract

(57)【要約】非代謝性胆汁酸塩類似体および治療剤を含んでなる、哺乳類の粘膜面に投与するための組成物。非代謝性胆汁酸塩類似体はコール酸およびアミノ酸の非天然型複合体であることが好ましく、特にコリルサルコシンであることが好ましい。治療剤は極性分子であることが好ましい。

Description

【発明の詳細な説明】極性薬剤の粘膜表面からの摂取を増進するための組成物本発明は、哺乳類の粘膜表面特に哺乳類の腸の基部結腸領域からの極性分子の吸収を増進するための新規組成物に関するものである。背景胃腸管への薬剤投与はヒトおよび獣医学薬剤の場合の好ましい投与方法である。ある種化合物は促進的または能動的輸送等の一層特定的機構により摂取されるが、大半の周知薬剤は通常腸から受動的拡散プロセスにより良好に吸収される。シメチジン、ラニチジン、ナトリウムクロモグリケート（cromoglycate）、ビスホスホネート（クロドロネート等の）およびカプトプリル等の極性分子は経口投与に際して貧弱な、または不規則な吸収性を見せる。インスリン、カルシトニン、副甲状腺ホルモン、またはそれらの断片（fraction）もしくは類似体、黄体形成ホルモン放出ホルモン[LHRHまたはそれらの類似体（例えばナフアレリン、ブセレリンおよびゴセレリン）]、成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、コロニー刺激因子、エリトロポイエチン、ソマトスタチン、インターフエロンおよびヘパリン等のポリペプチドおよび多糖類薬剤は、これらの極性およびサイズが原因で吸収性に劣るのみならず、また胃腸管内に存在する内在性酵素による分解可能性が原因で、経口投与ができない。もしかかる薬剤を経口投与すると、その場合の絶対生物学的利用能（すなわち全身的循環系への到達量）は非経口投与に比べて一般的に低い（例えば１％未満）。ポリペプチドの一種であるシクロスポリンは上記規則に属さない注目すべき例外である。このものは非極性であり、分配係数（オクタノール／水）は１０００を超える。この薬剤は胃腸管から極めて良好に吸収される。極性薬剤投与に伴う固有の問題点を解決するために各種の試みがなされてきたが、これらの試みには経粘膜（transumusosal）吸収および実に経口吸収が包含される。採用された戦略中には、薬剤を安定化および／または一層脂質可溶性にし、かつ脂質膜または胃腸道を横切っての拡散の公算を改善する目的での化学的修飾が包含される。他の研究者らは代謝損失を低減させるためにペプチダーゼ阻害剤（例えばアプロチニン）等の安定化剤を添加し、一方、その他の研究者らは経粘膜吸収性改善の目的で、非イオン界面活性剤形態の各種吸収増進剤、天然胆汁酸塩およびその類似体（例えばタウロジヒドロフシジン酸ナトリウム等）、リン脂質、キレート化剤およびアシルカルニチンを使用している。かかる従来の試みは関連文献中に詳しく評論されている。例えばタンパク質、ペプチドおよび他の極性薬剤の腸からの透過性を増進させるための各種の試みは SwensonおよびCuratolo（Advan．Drug Del．Rev．8，39(1992)）により評論されている。採用されているエンハンサーには、天然胆汁酸塩、およびオレイン酸等の他の材料と胆汁塩との混合物が包含される。例えば、グリココール酸ナトリウム（３０ｍＭ）および脂肪酸（リノール酸）４０ｍＭを含む混合ミセル系を用いてインスリン１０単位／ｋｇをイヌに回結腸送出する記載がScott-Moncrieffらによりなされている(J．Pharm．Sci．83，1465(1994))。生物学的利用能は１．４％であると報告された。胆汁酸塩およびその誘導体ならびに類似体（例えばタウロジヒドロフシジン酸ナトリウム）は胃腸道中に使用する場合のみならず、他の粘膜表面（鼻腔、尿生殖器道、肺および頬腔の粘膜面等）との関連で使用する際の良好な増進剤であるこは既知であるが、これらの材料は刺激性がありヒトには通常使用できないことが問題である。複合型（conjugated）胆汁酸塩は胃腸道内にも採用されている。しかしかかる材料は代謝されるので吸収増進能に劣るという問題点がある。また非複合型胆汁酸塩も、それらの物質の分泌効果により胃腸障害および下痢を引き起こし、腸特に大腸中で問題を起こすことが知られている。事実、非複合型胆汁酸塩類はこれまで緩下剤として使用される。したがって、粘膜表面からの吸収に劣る薬剤の投与に使用する吸収増進剤（en hancer）が必要とされており、このエンハンサーは粘膜表面へ容易に投与でき、低投与量で有効であり、細胞への損害が最少であり、かつ投与部位の正常生理に影響を及ぼさないものである。投与部位が腸である時、この最後の要件は水分泌および下痢の誘導を特に指す。意外なことに本発明者らは、合成胆汁酸塩誘導体コリルサルコシンを包含する非代謝性胆汁酸塩類似体と治療剤とを含む組成物の投与により上記問題点の解決ができることを見いだした。本発明者らは、コリルサルコシンを包含する非代謝性胆汁酸塩類似体が、胃腸管、鼻腔、腟、頬腔（buccal cavity）および直腸等の粘膜表面を横切って吸収される極性分子の貧弱な吸収性を改善することを見いだした。本発明の最初の局面によれば、胆汁酸塩類似体と治療剤とを含む、哺乳類粘膜表面への投与用組成物が提供され、この場合の胆汁酸塩類似体は非代謝性であることを特徴とし、この組成物は以後”本発明による組成物”と呼称する。 ”非代謝性”なる用語は、胃腸道内で経験する正常条件下に代謝され得ない化合物、例えばｐＨ範囲５から８、４０℃未満で加水分解され得ない化合物を意味する。本発明による組成物中に採用されうる化合物には、コリルサルコシン、ならびに他の非天然型で非代謝性の、コール酸とアミノ酸との複合体（conjugate ）が包含される。使用できる好ましい化合物にはコリルサルコシンが包含される。コリルサルコシンは胆汁酸代替剤として開発された複合型胆汁酸類似体である。このものはコール酸とサルコシンとの合成複合体である。ヒトの場合、このものは投与後に代謝されず、かつ非毒性（Schmassmannら、G astroenterology 104，1171-1181，(1993)）である。ウサギの結腸中に注入すると、ケノデオキシコレートが激しい水分泌の誘発をするのとは対照的に、コリルサルコシンは水吸収またはエリスリトールへの透過性には影響を与えなかった。結腸からのコリルサルコシンの吸収は少なかった。米国特許第5079240号公報は胆汁酸代替治療においてコリルサルコシンが有用であり、特に細菌性脱複合（ deconjugation）に対して抵抗性を有する見地からコリルサルコシンが有用であることを開示している。しかし、吸収促進剤としてのコリルサルコシンの使用は、これまでに開示がない。本発明による組成物は、非極性または極性の治療剤と共に使用できるが、この治療剤としては極性化合物または極性分子が好ましい。極性化合物または極性分子とは、ｐＨ７．４における水およびオクタノール間の分配係数が１０未満の化合物であると本発明では定義する。この極性化合物の分子量は１００Ｄａから１００，０００Ｄａである。好ましい範囲は３００Ｄａから３０，０００Ｄａである。必須要件ではないが、上記極性分子は無電荷であるのが好ましい。本発明による組成物中に使用するのに適する極性化合物の一覧を説明目的で次に示すが、これらのみに限定されるものではない：シメチジン、ラニチジン、ナトリウムクロモグリケート、クロドロネート（clodronate）等のビスホスホネート；カプトプリルおよびサムパトリラット（sampatrilat）等のアンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害剤；インスリン、カルシトニン、副甲状腺ホルモン、これらの断片もしくは類似体、ナフアレリン、ブセレリン、ゴセレリン等の黄体形成ホルモン放出ホルモンもしくはその類似体、成長ホルモン、成長ホルモン放出因子もしくはホルモン、副甲状腺ホルモンおよび副甲状腺関連ホルモン、コロニー刺激因子、エリトロポイエチン、ソマトスタチン、α−、β−またはγ−インターフェロン、プロインスリン、グルカゴン、バソプレッシン、デスモプレシン（desmopre ssin）、甲状腺刺激ホルモン、心房性ペプチド（atrial peptide）、組織プラスミノゲン活性化剤、因子ＶＩＩＩ、コレシストキニン、オクトレオチド（octreotide）等のポリペプチドおよびタンパク系薬剤；低分子量ヘパリン等の多糖類薬剤もしくはグリコサミニルグリコール；オリゴヌクレオチド等のアンチセンス剤；およびＤＮＡワクチン等のＤＮＡもしくは遺伝子治療用の治療遺伝子。上記治療剤の任意の組み合わせが使用できる。本発明による組成物中に使用できる好ましい治療剤には、インスリン、カルシトニン、カプトプリル、成長ホルモン，ヘパリン，ビスホスホネート、デスモプレシン、コロニー刺激因子、α−インターフエロン、γ−インターフエロン、エリトロポイエチン、副甲状腺ホルモンおよび副甲状腺関連ホルモンが包含される。本発明組成物は医薬的に許容し得る、当業者周知の各種投与形態で経口、鼻腔、腟、頬（buccally）または直腸経由で投与できる。例えば鼻腔投与は鼻スプレーを介しての溶液として、または鼻吸入器を介しての粉末として投与でき；頬投与用組成物は頬パッチもしくは頬錠剤を介して投与でき；腟投与用組成物はゲルとしてまたは腟用座薬（ペッサリー）の形態で投与でき；さらに直腸投与用組成物は座薬として投与できる。しかし、本発明組成物は錠剤、カプセルまたはペレットまたは微小球（microsphere）系の形態で経口投与するのが好ましく、これらすべの形態は当業者には周知の技法に従って処方可能である。本発明のさらなる局面によれば、本発明組成物の調製法が提供され、この調製法は非代謝性胆汁酸塩類似体と治療剤とを、医薬的に許容し得る投与形態に混合することを含む。経口投与可能な本発明組成物は、小腸または結腸特に基部（proximal）結腸、胃腸管領域へ治療剤を送達する目的に適合させ得る。一つの好ましい手段では、配合物（formulation）が小腸もしくは結腸へ到達するまでは、治療剤の放出が防止される。小腸へ到達するまでは、放出を防止させる目的で採用される手法は当業者には周知である。適切なシステムには、胃内の酸性条件下では溶解しないが、哺乳類小腸内に見られる一層アルカリ性の条件下では溶解する所謂腸溶性ポリマーで被覆した服用形態が包含される。適切な腸溶性被覆材料には、修飾セルロースポリマーおよびアクリルポマー、特に商標Eudragit^Rとして市販されるポリマーが包含される。結腸の送出の場合は国際特許出願ＰＣＴ／ＧＢ94／12394号に記載の被覆カプセルシステムが採用でき、これは薬剤含有澱粉カプセルを含む薬剤を結腸領域へ送達するための薬剤送達組成物を提供し、この場合の澱粉カプセルは、この薬剤の大半が結腸および／または末端回腸中でカプセルから放出されるように被膜が施されている。採用できる他の結腸送達システムには、国際特許出願第ＰＣＴ／ＧＢ96/01933号記載のものが包含される。その上、結腸への部位特異的送達は、微生物および／またはそこで見い出される還元性環境の作用で、とりわけ結腸環境中で分解する材料で被覆したカプセルもしくは錠剤を使用して遂行される。かかる材料の例には、アゾポリマーおよびジスルフィドポリマー（例えば、ＰＣＴ／ＢＥ 91/00006号参照）、アミロース（MilojevicらのProc．Int．Symp．Contr．Rel．Bioact．Mater.，20，288(1993 );AllwoodらのＰＣＴ／ＧＢ 90/25373号）、カルシウムペクチネート（Rubenste inらのPharm．Res.，10，258(1993)参照）、ペクチン（Pharm．Res.12，Suppl． S-221(1995)）、コンドロイチン硫酸（RubensteinらのPharm．Res.，9，276(199 2)）、修飾グアルガム（RubensteinおよびGliko-KabirのS.T.P．Pharma Science s，5，36-40，1995）、ｐ−シクロデキストリン（SiefkeらのEu．J．Pharm．Bio pharm.,40，(suppl.)，33S(1994)）、ポリマー含有糖類（SintovおよびRubenste in，ＰＣＴ／ＵＳ 91/03014号）、メタクリレート−ガラクトマンナン（Lehmann およびDreher，Proceed．Int．Symp．Contr． Rel．Bioact．Mater 18，331，1991），デキストランヒドロゲル（HovgaardおよびBrφndsted，3rd Eur．Symp．Control．Drug Del.，Abstract Book（1994）87 ）、ｐＨ−感受性ヒドロゲル（KopecekらのJ．Control．Rel.，19，121，1992）および例えばガラス状アミロース等の抵抗性澱粉−これら上部胃腸管中の酵素によっては分解されないが結腸中酵素により分解される−が包含されるが、これらのみに限定されない。本発明組成物はまた、次のシステムを包含する結腸標的システムを用いて結腸への送出もできるが、これのみに限定されない：口搏動性送達システムの一種であり、胃腸道内の予め決められた部位もしくは時間に薬剤内容物が放出されるように設計され得るPulsincap^TM System（ＷＯ 90/09168号）。この装置は頸部オリフイスをヒドロゲルプラグで封した、薬剤含有の不透過性カプセル体から実質的になる。次いでこの装置の本体上に通常のゼラチンキヤップをおく。摂取後は、このゼラチンキヤップが溶解しプラグを水和させる。予め決められ、かつ制御された時間に、この膨張したプラグが装置本体から放出されてカプセル内容物を放出し、薬剤が放出される。Time Clock Release System^TM（Pozziら、APV Cour se on Pulsatile Drug Delivery，Konigswinter，５月20圧1992）は活性薬剤含有錠剤コアが医薬用賦形剤の層で被覆された錠剤システムである。この賦形剤が水和すると表面層が設定時間に破壊する。他の使用可能システムはTime Control led Explosion Systemであり、米国特許第4871549号に記載がある（引用によってここに包含する）。さらなる賦形剤が本発明組成物中に使用できることは当業者には十分理解されるところである。例えば固体投与形態で採用できる他の賦形剤には、微晶質セルロース（例えばAvicel^R、ＦＭＣ）、ラクトース、リン酸ジカルシウムおよび澱粉（１または２種以上）：微晶質セルロース、澱粉（１または２種以上）および架橋カルボキシメチルセルロース等の崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸等の滑剤；ポビドン等の顆粒化剤；ならびにヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびヒドロキシプロピルセルロース等の放出修飾剤（modifi er）が包含される。かかる賦形剤の適切な量は活性成分（１または２種以上）および、使用する特定服用形態の独自性に応じて決められる。本発明組成物中に使用可能な非代謝性胆汁酸塩類似体の適当な量は、採用する送達の様式に応じて変わる。配合物中の活性成分量は、適切な粘膜表面において０．５から１％の濃度が提供されるように当業者により工夫を要することなく選択できる。従って、一回単位の経口投与量形態は１００ｍｇから１．５であり、これは１０から９０％ｗ／ｗの量を意味する。鼻腔送出用に適する溶液系送達形態における適当な濃度は、組成物中の非代謝性胆汁酸塩類似体の０．０５から３０％ｗ／ｖの範囲になる。本発明組成物は、粘膜表面へ容易に投与し得る利点があり、低投与量で有効であり、細胞に対する損傷が最低であり、かつ投与部位の正常生理機能に悪影響がないことを見出した。特に本発明組成物は、胃腸管経由では吸収性が劣るかまたは生物学的利用能が低いことが原因で既知技法での経口投与ができない薬剤の経口投与を可能にする利点がある。本発明のさらなる局面によれば本発明組成物を、患者好ましくはヒトの患者に投与することからなる、治療剤（特に粘度表面（特に胃腸管粘膜経由の吸収性に劣る）の改良投与方法（特に経口投与）が提供される。本発組成物に使用可能な治療剤の量は使用薬剤の種類に応じて変わる。しかし治療剤の投与量は当業者にとり工夫を必要とせずに容易に決定できることは明瞭であろう。例えば投与量の推定は、投与量の１０％が吸収されると仮定した既知注射用生成物から行える。本発明で選択された薬剤の場合に好適な投与量の幾つかは次のようである：インスリン２０ｉ．ｕ．／ｋｇカルシトニン１００単位／ｋｇカプトプリル１００ｍｇ成長ホルモン１０単位／ｋｇヘパリン１０，０００単位ビスホスホネート２００ｍｇデスモプレシン１００−３００ｐ，ｇ結腸刺激因子３百万単位／ｋｇインターフエロンα １０百万単位インターフエロンγ １８百万単位エリトロポイエチン２００単位／ｋｇ次の実施例により本発明を説明するが、発明を制限するものではない。既知エンハンサー材料グリコデオキシコレートをポジテイブ対照として用いた。無エンハンサーのインスリン含有配合物をさらなる対照として用いた。図面の簡単な説明図１は、（ａ）非代謝性胆汁酸塩類似体コリルサルコシンと併用したインスリン；（ｂ）脱複合型（deconjugated）胆汁酸塩グリコデオキシコール酸と併用したインスリン；および（ｃ）対照（胆汁酸塩またはその類似体なし）をブタに結腸経由で投与後の、血漿グルコース濃度を示す。図２は、（ａ）非代謝性胆汁酸塩類似体コリルサルコシンと併用したインスリン；（ｂ）脱複合型胆汁酸塩グリコデオキシコール酸と併用したインスリン；および（ｃ）対照（胆汁酸塩またはその類似体なし）をヒツジに鼻経由で投与後の、血漿グルコース濃度を示す。実施例１インスリンの経口吸収添加したコリルサルコシンと共にインスリンを含む配合物をブタのモデルで評価した。インスリンナトリウム（プロインスリン由来、項目コードQD339G、ロット番号 181 EM7、２８．１ＩＵ／ｍｇの純インスリン）はEli Lilly and Company，Indi anapolis，USAから入手した。予め分光分析で測定した材料純度は88％であった。これは２４．７２８ＩＵインスリン／ｍｇに該当する。使用した他の化学物質は次のようである：グリコデオキシコール酸はSigma，P oole，Dorsetから入手した。分散剤として用いたAvicel（微晶質セルロース）は Honeywill & Stein，Sutton，UKから入手した。使用できる他の分散剤には、ラクトースおよびシリカが包含される。コリルサルコシンは、J．Lillienau，C.D．らのJ．Clin．Invest．1992，420- 431およびTserngらのJ．Lipid Res.，（1977）18，404の方法に従って調製したが、ここでは先ずコリルサルコシンエチルエステルを生成させる。トリエチルアミン（１７．３ｍＬ、１２５ｍｍｏｌ）含有酢酸エチル（ＨＰＬＣ級）中の塩酸サルコシンエチルエステル（１８．６７ｇ；１２２ｍｍｏｌ）の懸濁物を室温で３０分間撹拌した。コール酸（３５．５ｇ；８７ｍｍｏｌ）およびＮ−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−ジヒドロキノリン（ＥＥＤＱ；３０ｇ；１２２ｍｍｏｌ）をこの溶液に加え、混合物を一夜還流させた。乾燥管を用いて湿気を排除した。冷却後、反応混合物を固形残渣から傾斜して分け、０．５ＭＮａＯＨ_(aq)、０．５ＨＣｌ_(aq)、水および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、蒸発させて粘性油（４６ｇ）（Ｔｈ．＝４４．１ｇ）としての標題エステルを得た。コリルサルコシンを生成するために次の操作を行った：エタノール（ＡＲ；１７５ｍｌ）中のコリルサルコシンエチルエステル（４４．１ｇ；８７ｍｍｏｌ；上記のように取得した）の溶液を還流下に加熱し、Ｋ₂ＣＯ₃溶液（１０％；１７５ｍｌ）を１５分間に亙って添加した。この溶液をさらに１５分間還流し、真空下に初期容量の１／２に減少させ、水（３００ｍｌ）で希釈、２ＭＨＣｌ_(aq) で酸性化し、酢酸エチルで抽出した。併合有機抽出物を水および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、蒸発してオフホワイトの無定形固体（２５ｇ）としてのコリルサルコシンを得た。調製された上記遊離酸は水もしくは水酸化ナトリウム水溶液には容易には溶解しなかったが、重炭酸ナトリウム水溶液には易溶であった。水性系での生物学的評価のために、水易溶性ナトリウム塩を調製した。コリルサルコシン（２５ｇ；４９ｍｍｏｌ）のメタノール溶液中に水酸化ナトリウム（２．２ｇ、５５ｍｍｏｌ）のメタノール（４０ｍｌ）溶液を添加した。エーテル（ナトリウム乾燥が最良）を用いて生成物を溶液から沈降させ、酢酸エチルで洗浄した。真空下に揮発物を除去後、白色無定形固体（２０．５ｇ）として目的物を得た。生物学的評価用各配合物の調製のために、諸成分をプラスチック製秤量ボート中に秤量し、ガラス壜に移し、穏やかに震盪して完全混合し、次いで澱粉カプセル（Capill^TM；Capsugel，Switzerlandから入手）中に満たした。充填重量約２００−２２０ｍｇを与えるカプセル混合物の組成は次のようであった：配合１インスリン１９．８ＩＵ／Ｋｇ（formulation）コリルサルコシン１８０ｍｇＡｖｉｃｅｌ^R １４ｍｇ配合２インスリン１９．８ＩＵ／Ｋｇグリコデオキシコール酸１８０ｍｇＡｖｉｃｅｌ^R １４ｍｇ配合３インスリン１９．８ＩＵ／ＫｇＡｖｉｃｅｌ^R １７２ｍｇ次いで上記粉末混合物をデシケータ中４℃で貯蔵し、使用に備えた。次いでカプセルを複数ブタに投与した。これらのブタは、回盲弁直上の末端回腸中にフイステル挿入が可能なように手術し、かつ繰り返し採血が可能なように頭部静脈にカニユーレ挿入してある。この研究には群当り３匹のブタを用い、平均重量は３０−５０Ｋｇであった。回腸フイステルを介して各ブタに一カプセルを投与した。血液試料を頻繁に採取し、血漿を分離してグルコース含有量を分析した。血漿中のインスリン濃度を標準放射免疫検定法により測定した。結果を表１および表２ならびに図１に示す。エンハンサーを添加しない対照配合（配合３）の場合、血漿グルコース濃度には測定された変化は見られなかった。これとは反対に、グリコデオキシコレート配合の場合およびコリルサルコシン配合の場合は、血液中のグルコース濃度は低減し、約６０分で最低に落ちた。この低減は両材料の場合に類似していた。表２は血漿グルコースの低減が血漿インスリン濃度の対応する増加を伴うことを示す。最高濃度は２３ｍｎ／ｌ、測定ＡＣＵが５９９ｍｎ／ｌ・分であった。驚くべきことに合成非代謝性胆汁酸塩誘導体は、脱複合型胆汁酸塩グリコデオキシコール酸の形態における陽性対照の場合と同じような吸収増進効果を与える。実施例２サケのカルシトニンの経口吸収サケのカルシトニンの配合物を、上記薬剤とマンニトールとの混合により調製した。カプセル当りの投与量は７５ｉｕ／ｋｇであった。コリルサルコシンは実施例１のように調製し、濃度１．０ｍｇ／ｋｇで添加した。混合物を澱粉カプセル（Capsugel，Switzerlandから入手のCapill^TM）中に充填し、ブタ５匹の各々に１カプセルを投与した。各カプセルは回腸フイステル経由で末端回腸中に直接投与した。血液試料を静脈アクセスの口経由で採取した。この血液を投与１５分前、および投与後５、１５、３０、４５、６０、７５、９０、１２０、１８０、２４０および３００分時点でヘパリン化４ｍｌ管中に採取した。遠心分離により血漿を分離し、標準手法を用いて低カルシウム血症応答により薬剤の薬力学的効果を測定した。血漿中の平均カルシウム濃度は９０分で基底濃度の８６％に落ちた。対照実験では、澱粉カプセルを投与量５００ｉｕ／ｋｇ（４．０９ｍｇ／投与量）のサケのカルシトニンで充填した。これら対照カプセルを上記のように４匹からなるブタ一群に与え、上記同様に血液試料を採取した。血漿カルシウム濃度は標準手法を用いて測定した。サケのカルシトニンを高投与量（５００ＩＵ／ｋｇ）で投与したにも係わらず、この対照配合物は、コリルサルコシンを用いた試験配合物におけるよりも６倍を上回る濃度で使用しても、血漿カルシウム濃度の低減を示すことがなかった。結果を表３に示す。実施例３インスリンの鼻腔吸収インスリン単独溶液、またはコリルサルコシン（０．５％）もしくはグリコデオキシコレート（０．５％）と組み合わせたインスリンの鼻腔吸収をヒツジモデルで研究した。インスリンストック溶液：容量１０ｍｌフラスコ中にインスリン（１６１．７６ｍｇ；ＱＤ３３９Ｇ）を秤量した。１４．６５ｍＭリン酸緩衝液を用いて容積を１０ｍｌに調整し、ｐＨを点検した。鼻腔配合物各胆汁酸塩配合物について、容量５ｍｌフラスコ中で所要胆汁酸塩２５ｍｇを１４．６５ｍＭリン酸緩衝液２ｍｌ中に溶解した。これに４００ＩＵ／ｍｌのインスリンのストック溶液２．５ｍｌを加えた。１４．６５ｍＭリン酸緩衝液を用いて各フラスコ内容物を５ｍｌに調整した。無胆汁酸塩インスリン溶液配合物の場合、４００ＩＵ／ｍｌインスリンストック溶液２．５ｍｌを容量５ｍｌフラスコ中に秤量した。１４．６５ｍＭリン酸緩衝液を用いてフラスコ内容物を５ｍｌに調整した。この研究には既知重量の１２匹のメス交雑種ヒツジを用いた。ヒツジの平均重量は４９．８±４．４ｋｇであった。ヒツジは通常は屋外にいたが、研究期間中は屋内に取り入れた。動物はインスリン投与に先立っては断食しなかった。研究第１日目に留置Viggo secalon カニューレを各動物の外部頸静脈の一つに約１５ｃｍ配設し、必要に応じてヘパリン添加（２５ＩＵ／ｍｌ）０．９％塩水溶液を用いてフラッシュ（flushing）により開放を保った。ヒツジを４匹ずつの３群に分け、各動物に上記配合物の一つを投与した。塩酸ケタミン２．２５ｍｇ／ｋｇを静脈投与してヒツジを鎮静化した。この目的は動物を拘束し、投与中のくしやみ対策を意図したものであった。麻酔状態は約３分間続いた。溶液配合物の鼻腔内投与の場合、溶液の適当量（０．０１ｍｌ／ｋｇ）の送出に先立ってヒツジ外鼻孔中にブルーライン臍帯カニューレを挿入した。インスリン投与に先立つ２０、１５および５分時点および投与後５、１０、１５、２０、３０、４０、６０、７５、９０、１２０、１５０、１８０および２４０分時点でヒツジのカニューレ挿入頸静脈から血液試料４．０ｍｌを採取した。血漿分離に先立って粉砕氷上に保持したヘパリン化４ｍｌ管（Lithium Heparin ，60IU，Sarstedt，Leicester，U.K.）中で血液試料を穏やかに混合した。４℃ 、約3200ｒｐｍで遠心分離して血漿を分離した。各血漿試料を二つのアリコットに分け、一つはインスリン分析用に、他方はグルコース分析用にした。次いで血漿を−２０℃で貯蔵してインスリンおよびグルコース分析に備えた。ＥＲＩＳ６１７０選択性マルチテスト分析器[Eppendorf(Olympus)]を用いて分析した。血漿グルコース濃度（基底値の％）を表４および図２に示す。インスリンの対照溶液２ＩＵ／ｋｇの投与では、平均血漿グルコース濃度は研究期間を通じて基底レベル近辺に留まる結果になった。コリルサルコシンおよびグリコデオキシコレート配合物の鼻腔投与では、平均最低血漿グルコース濃度約５８％（±５．７−６．１）の結果になった。実施例４低分子量ヘパリンおよびコリルサルコシンの配合低分子量ヘパリンのヒトへの投与用配合物を次のように調製した：低分子量ヘパリン１７４ｇコリルサルコシン１８０ｇＡｖｉｃｅｌ^R １４ｇ上記材料をＶ−ブレンダー中で混合し、アリコットをBosch充填機を用いて澱粉カプセル（Capsugel AG，Switzerlandから入手）中に充填した。この配合物は１，０００カプセルの調製用に十分である。カプセル充填平均重量は３７０ｍｇである。国際特許出願ＰＣＴ／ＧＢ95/01458号記載の方法に従って、このカプセルをポリマーの層で被覆するが、このポリマー層により、放出は胃腸管の結腸領域中でおこなわれる。方法は次のようである：２０ｇのヒドロキシプロピルメチルセルロース（Meth ocel^R；ＥＳＭ）、２ｇのＰＥＧ４００および水２００ｍｌを含む溶液でカプセルを被覆する。被覆は、底部にスプレー銃を備えたAeromatic STREA-1流動床コーター（coater）を用いて行う。各カプセルに施すＨＰＭＣの平均量は３１ｍｇである。 Eudragit^R L100の３９ｇおよびEudragit S100の１３ｇをイソプロパノール６５０ｍｌおよび水２０ｍｌの混合物中に溶解する。フタル酸ジブチル１０ｇをEu dragit溶液中に混合する。最後に、イソプロパノール可塑剤１００ｍｌを用いてタルク１０ｇを注意深くペースト状に混合する。Aeromatic STREA-1流動床コーターを用いて上記被覆用溶液を施す。ＨＰＭＣで被覆したカプセルを、カプセル当り平均８９ｍｇ重量が上乗せされるようにEudragit溶液で被覆する。ＨＰＭＣ／Eudragitで被覆したカプセルの溶解性能をＵＳＰ法１（５０rpmで回転するバスケット）を用いて試験する。試験の最初２時間は、０．１ＭＨＣｌを試験媒体として用いる。２時間後、試験媒体を０．０５Ｍリン酸緩衝液，ｐＨ６．８に変更する。一定の時間的間隔を隔て視覚的に溶解容器の澱粉残渣の出現を検査し、被膜欠陥を調べる。実施例５サムパトリラット（Sampatrilat ）およびコリルサルコシンの配合物の結腸吸収 Sampatrilat １６００ｍｇおよびコリルサルコシン１６００ｍｇを、塩酸でｐＨ７に調整した超純粋水５０ｍｌ中に溶解してSampatrilat（Pfizer Ltd.，Kent ，UK）の配合物を調製した。この配合物６．５２ｍｌ（３２ｍｇ／ｍｌSampatri lat）をブタ６匹の各回腸フイステルを介して末端回腸に直接投与した。これらのブタは実施例１のように外科的に調製した。Sampatrilat単独溶液（３２ｍｇ／ｍｌ）をクロスオーバー計画で同一ブタに投与した。投与に先立つ１５分および投与後０．５、１、１．５、２、３、４、６、８、１２、２４、３６、４８、７２、９６、１２０および１４４時間時点で血液をヘパリン化管中に採取した。遠心分離により血漿を分離し、確立された競合免疫学的検定を用いてSampatrila tの血漿濃度を測定した。結果を表５に示す。ブタ６匹のうち３匹の場合、対照配合物に比べてコリルサルコシン含有配合物では約３．６倍も結腸吸収が増加したことが判る。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成１０年８月７日（１９９８．８．７）【補正内容】請求の範囲１．胆汁酸複合体が非代謝性であることを特徴とする、胆汁酸複合体および治療剤を含む、哺乳類の粘膜表面への投与用組成物。２．胆汁酸複合体が、胆汁酸およびアミノ酸の非天然型複合体である，請求項１記載の組成物。３．胆汁酸がコール酸である、請求項２記載の組成物。４．胆汁酸複合体がコリルサルコシンである、請求項１から３のいずれか一項記載の組成物。５．治療剤が極性分子である、請求項１から４のいずれか一項記載の組成物。６．治療剤がペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質である、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。７．治療剤が硫酸化多糖類またはグリコサミノグリコールである、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。８．治療剤がヘパリンまたは低分子量ヘパリンである、請求項７記載の組成物。９．治療剤がインスリンである、請求項１から６のいずれか一項記載の組成物。１０．治療剤がカルシトニンである、請求項１から６のいずれか一項記載の組成物。１１．治療剤がデスモプレシンである、請求項１から６のいずれか一項記載の組成物。１２．治療剤が成長ホルモンである、請求項１から６のいずれか一項記載の組成物。１３．治療剤が成長ホルモン放出因子または成長ホルモン放出ホルモンである、請求項１から６のいずれか一項記載の組成物。１４．治療剤が副甲状腺ホルモンまたは副甲状腺関連ホルモンである、請求項１から６のいずれか一項記載の組成物。１５．治療剤がコロニー刺激因子である、請求項１から６のいずれか一項記載の組成物。１６．治療剤がエチトロポイエチンである、請求項１から６のいずれか一項記載の組成物。１７．治療剤がα−、β−またはγ−インタフエロンである、請求項１から６のいずれか一項記載の組成物。１８．治療剤がオリゴヌクレオチド等のアンチセンス剤である、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。１９．治療剤がＤＮＡまたは遺伝子治療用の治療遺伝子である、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。２０．治療剤がビスホスホネートである、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。２１．治療剤がアンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害剤である、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。２２．粘膜表面が胃腸管である、請求項１から２１のいずれか一項記載の組成物。２３．粘膜表面が頬腔である、請求項１から２１のいずれか一項記載の組成物。２４．粘膜表面が鼻腔である、請求項１から２１のいずれか一項記載の組成物。２５．粘膜表面が腟である、請求項１から２１のいずれか一項記載の組成物。２６．胃腸管の小腸または結腸領域への治療剤の放出に適合した、請求項１から２２項のいずれか一項記載の組成物。２７．結腸領域が基部結腸である、請求項２６記載の組成物。２８．非代謝性胆汁酸複合体および治療剤を、医薬的に許容し得る投与形態で共に混合することを特徴とする、請求項１から２７のいずれか一項記載の組成物の調製方法。２９．請求項１から２７のいずれか一つの組成物を患者に投与することを特徴とする、治療剤の改良された投与方法。３０．粘膜表面からの吸収性に劣る治療剤の改良された投与のための、薬剤の製造における、非代謝性胆汁酸複合体の使用。３１．粘膜表面が胃腸管である、請求項３０記載の使用。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 38/04 Ａ６１Ｐ 9/12 38/22 Ａ６１Ｋ 35/413 38/23 37/02 38/27 37/26 38/28 37/30 48/00 37/24 Ａ６１Ｐ 9/12 37/36 // Ａ６１Ｋ 35/413 37/43 (72)発明者ピーター、ジェームズ、ワッツイギリス国ノッチンガム、ウエスト、ブリッジフォード、ハイフィールド、ロード、 47、フラット、２

Claims

【特許請求の範囲】１．胆汁酸塩類似体が非代謝性であることを特徴とする、胆汁酸塩類似体および治療剤を含む、哺乳類の粘膜表面への投与用組成物。２．胆汁酸塩類似体が、コール酸およびアミノ酸の非天然型複合体である，請求項１記載の組成物。３．胆汁酸塩類似体がコリルサルコシンである、請求項１または２記載の組成物。４．治療剤が極性分子である、請求項１から３のいずれか一項記載の組成物。５．治療剤がペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質である、請求項１から４のいずれか一項記載の組成物。６．治療剤が硫酸化多糖類またはグリコサミノグリコールである、請求項１から４のいずれか一項記載の組成物。７．治療剤がヘパリンまたは低分子量ヘパリンである、請求項６記載の組成物。８．治療剤がインスリンである、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。９．治療剤がカルシトニンである、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。１０．治療剤がデスモプレシンである、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。１１．治療剤が成長ホルモンである、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。１２．治療剤が成長ホルモン放出因子または成長ホルモン放出ホルモンである、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。１３．治療剤が副甲状腺ホルモンまたは副甲状腺関連ホルモンである、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。１４．治療剤がコロニー刺激因子である、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。１５．治療剤がエチトロポイエチンである、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。１６．治療剤がα−、β−またはγ−インターフエロンである、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。１７．治療剤がオリゴヌクレオチド等のアンチセンス剤である、請求項１から４のいずれか一項記載の組成物。１８．治療剤がＤＮＡまたは遺伝子治療用の治療遺伝子である、請求項１から４のいずれか一項記載の組成物。１９．治療剤がビスホスホネートである、請求項１から４のいずれか一項記載の組成物。２０．治療剤がアンギオテンシン転換酵素（ＡＣＥ）阻害剤である、請求項１から４のいずれか一項記載の組成物。２１．粘膜表面が胃腸管である、請求項１から２０のいずれか一項記載の組成物。２２．粘膜表面が頬腔である、請求項１から２０のいずれか一項記載の組成物。２３．粘膜表面が鼻腔である、請求項１から２０のいずれか一項記載の組成物。２４．粘膜表面が腟である、請求項１から２０のいずれか一項記載の組成物。２５．胃腸管の小腸または結腸領域への治療剤の放出に適合した、請求項１から２１項のいずれか一項記載の組成物。２６．結腸領域が基部結腸である、請求項２５記載の組成物。２７．非代謝性胆汁酸塩類似体および治療剤を、医薬的に許容し得る投与形態で共に混合することを特徴とする、請求項１から２６のいずれか一項記載の組成物の調製方法。２８．請求項１から２６のいずれか一つの組成物を患者に投与することを特徴とする、治療剤の改良投与方法。２９．粘膜表面からの吸収性に劣る治療剤の改良された投与のための薬剤の製造における、非代謝性胆汁酸塩類似体の使用。３０．粘膜表面が胃腸管である、請求項２９記載の使用。