JP2811608B2 - ホスホン酸アミド誘導体およびエンドセリン変換酵素阻害剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規なホスホン酸アミ
ド誘導体およびそれを用いるエンドセリン変換酵素阻害
剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】ブタ大動脈内皮細胞の培養上清中から単
離される２１個のアミノ酸残基からなるペプチドである
エンドセリン（ＥＴ−１）が、冠動脈、肺動脈などの種
々の動脈を内皮非依存的に収縮させ、しかも冠動脈収縮
のＥＣ₅₀が４×１０^-10 Ｍ程度の極めて強力で且つ持続
性のある血管作動性物質であることが知られている。Ｅ
Ｔ−１が強力な血管平滑筋収縮作用と血圧上昇作用とを
有することから、ＥＴ−１は高血圧症の発症原因に深く
関わっていると考えられている。

【０００３】生体内でＥＴ−１前駆体のプロセッシング
によりビッグエンドセリン（big ＥＴ−１）が生じる。
big ＥＴ−１の血管収縮活性はＥＴ−１のそれの約１／
１００であるが、big ＥＴ−１を生体に投与すると血圧
が上昇することから、big ＥＴ−１がエンドセリン変換
酵素（ＥＣＥ）の作用を受けてＥＴ−１を産生し、ＥＴ
−１の作用により血圧が上昇すると考えられる。big Ｅ
Ｔ−１を生体に投与する前に、金属プロテアーゼ阻害剤
として知られているホスホラミドンを投与しておくと、
血圧の上昇が抑制されることから、ホスホラミドンが、
エンドセリン変換酵素の作用を阻害するためにＥＴ−１
の産生が抑制され、そのために血圧の上昇が抑制される
と考えられる（European Journal of Pharmacology,18
5,103-106(1990)参照）。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】エンドセリン変換酵素
活性を阻害する作用（エンドセリン変換酵素阻害活性）
が強く、優れた血圧降下作用を有する新規な物質を提供
する。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明は、下記式（１）

【０００６】

【化２】

【０００７】（式中、Ａはロイシン、イソロイシン及び
フェニルアラニンからなる群から選ばれたアミノ酸残基
を表わし、Ｔｒｐはトリプトファン残基を表わし、Ｒ
は、同一でも異なっていてもよく、低級アルキル基、低
級アルコキシ基、又はハロゲン原子を表わし、Ｘは水素
原子又はアルカリ金属を表わし、Ｙは水素原子、アルカ
リ金属又は低級アルキル基を表わし、ｍは０〜３の整数
であり、ｎは１〜４の整数である）で表わされることを
特徴とするホスホン酸アミド誘導体およびそれを用いる
エンドセリン変換酵素阻害剤を提供する。

【０００８】上記式（１）において、Ｒは、好ましくは
炭素原子数１〜４の低級アルキル基（特に、メチル及び
エチル）、炭素原子数１〜４の低級アルコキシ基（特
に、メトキシ及びエトキシ）、又は塩素、フッ素のよう
なハロゲン原子であることが好ましい。Ｘ及びＹで表わ
されるアルカリ金属としてはナトリウム及びカリウムが
好ましい。Ｙで表わされる低級アルキル基としては、炭
素原子数１〜４の低級アルキル基、特にメチル、エチル
及びイソプロピルが好ましい。ｍは０又は１であること
が好ましく、特に０である（即ち、式（１）においてフ
ェニル基が置換基を有しない）ことが好ましい。

【０００９】本発明のホスホン酸アミド誘導体のうち、
特に好ましい化合物は以下に例示するものである。 （Ａ） Ph-CH₂-P(O)(ONa)-Leu-Trp-ONa （Ｂ） Ph-(CH₂)₂-P(O)(ONa)-Leu-Trp-ONa （Ｃ） Ph-(CH₂)₂-P(O)(ONa)-Ile-Trp-ONa （Ｄ） Ph-(CH₂)₂-P(O)(ONa)-Ile-Trp-OCH₃ （Ｅ） Ph-(CH₂)₂-P(O)(ONa)-Phe-Trp-ONa （Ｆ） Ph-(CH₂)₄-P(O)(ONa)-Leu-Trp-ONa （Ｇ） Ph-(CH₂)₄-P(O)(ONa)-Ile-Trp-ONa （Ｈ） Ph-(CH₂)₂-P(O)(OH)-Leu-Trp-OH （Ｉ） Ph-(CH₂)₂-P(O)(OH)-Ile-Trp-OH

【００１０】上記各式において、Ｐｈはフェニル基を表
わし、ＬｅｕはＬ−ロイシン残基を表わし、ＩｌｅはＬ
−イソロイシン残基を表わし、ＰｈｅはＬ−フェニルア
ラニン残基を表わし、ＴｒｐはＬ−トリプトファン残基
を表わす。

【００１１】上記化合物のうち、（Ａ）、（Ｂ）及び
（Ｆ）の化合物は、ホスホラミドンとLeu-Trp の基を含
んでいる点で共通しているが、ホスホラミドンはグリコ
シル基を有しているのに対して、本発明の化合物はフェ
ニルアルキレン基を有している点で異なっており、本発
明の化合物はホスホラミドンとは全く別異の化合物であ
る。

【００１２】次に、本発明の化合物のエンドセリン変換
酵素阻害活性について示す。エンドセリン変換酵素阻害
活性は下記のようにして測定した。

【００１３】［エンドセリン変換酵素の抽出］体重２５
０〜２６０ｇの雄性ウイスターラットを頚静脈切断によ
り脱血後、肺を摘出した。ラット肺を氷冷１０ｍＭリン
酸緩衝化生理食塩水（ｐＨ７．２）中で気管支等を切除
した後、１０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）中に
おいて、テフロンホモジナイザー１０００r.p.m.、３回
の上下動で破砕した後、１８００×ｇ、２０分間遠心分
離して残渣を除去した。続いて３００００×ｇ、９０分
間遠心分離し、膜画分を沈殿として得た。この沈殿を
０．５％トリトンＸ−１００を含む１０ｍＭトリス塩酸
緩衝液（ｐＨ７．４）に懸濁後、テフロンホモジナイザ
ー１０００r.p.m.、２回の上下動でホモジナイズし、可
溶化した。これを３００００×ｇ、９０分間遠心分離
し、上清を膜抽出画分とした。この画分を陰イオン交換
カラムクロマトグラフィー（ＤＥ５２、Whatman 社）に
付し、０−０．５Ｍ食塩の濃度勾配によって溶出した。
得られた各画分のエンドセリン変換活性を、下記に示す
ような測定法により検出し、エンドセリン変換活性を有
する画分をプールした。

【００１４】［エンドセリン変換酵素活性］ １．酵素活性測定 基質であるブタbig ＥＴ−１の１０μｌ（１０ピコモ
ル）と０．１Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．０）とを、
最終容量１２５μｌになるように反応試験管に入れて、
前記のようにして得られたエンドセリン変換活性を有す
る画分１００μｌを加え、反応を開始した。３７℃、３
時間インキュベーションした後、沸騰水中に１分間置い
て反応を停止させ、１５００×ｇ、１０分間遠心分離し
て上清を得た。この上清中に生成したＥＴ−１量を、Ｅ
Ｔ−１特異的なラジオイムノアッセイによって測定し
た。

【００１５】２．酵素阻害活性 エンドセリン変換酵素阻害活性は、検体の存在下と非存
在下とにおけるエンドセリン変換酵素活性を測定し、そ
の阻害率にて示した。即ち、前記の酵素活性測定の最初
に、０．１Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解し
た検体を最終濃度１０^-4Ｍとなるように反応試験管に加
え、酵素反応を行なった。

【００１６】阻害率は、検体を含む反応液中のＥＴ−１
量（ａ）と、検体を含まない反応液中のＥＴ−１量
（ｂ）と、酵素液の代わりに０．１Ｍトリス塩酸緩衝液
（ｐＨ７．０）を加えた試験管中のバックグランドのＥ
Ｔ−１量（ｃ）とから下記の式（Ａ）により求めた。

【００１７】 阻害率＝［（ｂ−ａ）／（ｂ−ｃ）］×１００（％）・・・・・（Ａ）

【００１８】下記の実施例及び比較例で得られたホスホ
ン酸アミド誘導体の、ラット肺膜画分のエンドセリン変
換酵素活性に対する阻害率は、表１に示す通りであっ
た。また、表１には、同様にして得たホスホラミドンの
阻害率についても示す。

【００１９】

【００２０】表１の結果から明らかなように、本発明の
化合物である各実施例で得られた化合物は、ホスホラミ
ドンと同等のエンドセリン変換酵素阻害活性を示すのに
対して、本発明の範囲外の比較例１で得られた化合物
は、エンドセリン変換酵素阻害活性が著しく弱い。

【００２１】本発明のホスホン酸アミド誘導体は、エン
ドセリン変換酵素活性に対して強い阻害活性を有してお
り、本態性高血圧症、急性心不全、腎不全、脳血管れん
縮（くも膜下出血後）、妊娠中毒症、冠れん縮、心筋梗
塞、糖尿病、喘息発作、レイノー症候群などに対して薬
理効果を有する。

【００２２】［参考例１］ ａ） ジベンジル ４−フェニルブチルホスホネ−ト
（Ｒ１ａ） 窒素雰囲気下、ジベンジルホスファイト６．１５ｇ（２
５ミリモル）のジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（４０
ｍｌ）溶液を−１５℃に冷却し、６０％水素化ナトリウ
ム１．１０ｇ（２７．５ミリモル）を加え、０℃以下で
１．５時間撹拌した。次に、１−ブロモ−４−フェニル
ブタン５．０ｇ（２５ミリモル）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶
液を、反応液が０℃以上に昇温しないようにして滴下し
た。室温で一夜撹拌し、反応液を減圧下濃縮した。残渣
をエ−テルに溶解し、水洗した後、無水硫酸ナトリウム
で乾燥させた。これから溶媒を留去し、無色油状物を得
た。これをシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、標
題化合物６．９０ｇ（収率；７０．０％）を無色油状物
として得た。

【００２３】ｂ） ジベンジル ２−フェネチルホスホ
ネ−ト（Ｒ１ｂ） ジベンジルホスファイト１．３１ｇ（５．０ミリモル）
及び１−ブロモ−２−フェニルエタン０．９３ｇ（５．
０ミリモル）から、化合物（Ｒ１ａ）の合成と同様の方
法で合成し、標題化合物１．１１ｇ（収率；６０．７
％）を得た。

【００２４】ｃ） ジベンジルベンジルホスホネ−ト
（Ｒ１ｃ） ジベンジルホスファイト２．６４ｇ（１０．０ミリモ
ル）及びベンジルブロマイド１．２６ｇ（１０．０ミリ
モル）から、化合物（Ｒ１ａ）の合成と同様の方法で合
成し、標題化合物０．９３ｇ（収率；２６％）を得た。

【００２５】［参考例２］ ａ） ベンジル ４−フェニルブチルホスホノクロリデ
−ト（Ｒ２ａ） 化合物（Ｒ１ａ）３．０ｇ（７．６ミリモル）の四塩化
炭素（４．６ｍｌ）溶液に、氷冷下で五塩化リン１．６
６ｇ（８．０ミリモル）を加え３０分間撹拌した。反応
温度を１０℃／１５分の割合で７０℃まで昇温し、７０
℃にて３０分間撹拌した。反応溶液を減圧下（１ｍｍＨ
ｇ）７０℃に２時間保ち、溶媒及び副生成物（オキシ塩
化リン、塩化ベンジル）を減圧留去し、これを更に精製
することなく次の反応に用いた。

【００２６】ｂ） ベンジル ２−フェネチルホスホノ
クロリデ−ト（Ｒ２ｂ） 化合物（Ｒ１ｂ）２．１０ｇ（５．７３ミリモル）か
ら、化合物（Ｒ２ａ）の合成と同様の方法で合成した。

【００２７】ｃ） ベンジル ベンジルホスホノクロリ
デ−ト（Ｒ２ｃ） 化合物（Ｒ１ｃ）０．８８６ｇ（２．５１ミリモル）か
ら、化合物（Ｒ２ａ）の合成と同様の方法で合成した。

【００２８】［実施例１］ ａ） Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−フェニルアラ
ニル−Ｌ−トリプトファン ベンジルエステル（１ａ） Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−フェニルアラニン
５．３１ｇ（２０．０ミリモル）、Ｌ−トリプトファン
ベンジルエステル塩酸塩６．８１ｇ（２０．６ミリモ
ル）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール２．７０ｇ
（２０．０ミリモル）を、乾燥テトラヒドロフラン（Ｔ
ＨＦ）（５０ｍｌ）に懸濁させ、−１５℃で１５分間撹
拌した。この懸濁液に、１−エチル−３−（３’−ジメ
チルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＷＳＣ・
ＨＣｌ）４．１７ｇ（２１．７５ミリモル）及びトリエ
チルアミン１．６ｍｌ（２２ミリモル）を加え、室温で
一夜撹拌した後、溶媒を留去し、残渣を酢酸エチルに溶
解した。有機層を１Ｎ−ＨＣｌ、水、飽和重曹水の順で
洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後濃縮し、得られた
残渣をカラムクロマトグラフィ−で精製し標題化合物
８．１５ｇ（収率；７５．３％）を得た。

【００２９】1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；１．３
５（９Ｈ，ｓ）， ２．９９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝
６Ｈｚ），３．１５−３．３５（２Ｈ，ｍ），４．２５
−４．９５（２Ｈ，ｍ），５．００−５．１５（２Ｈ，
ｍ），６．２５−６．６７（２Ｈ，ｍ），７．００−
７．３６（１５Ｈ，ｍ），７．８５−８．００（１Ｈ，
ｍ）

【００３０】ｂ） Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−トリプ
トファン ベンジルエステル塩酸塩（１ｂ） 化合物（１ａ）８．００ｇ（１４．８ミリモル）を９０
％ギ酸（１３３ｍｌ）に溶解し、室温で３時間撹拌す
る。反応液を濃縮し、１．４規定塩酸−ジオキサン（１
２．５ｍｌ）に溶解し、１５分間撹拌した。この溶液に
エーテル（１２０ｍｌ）を加え、析出した結晶を濾取
し、エーテルで洗浄後室温で減圧乾燥し、標題化合物
６．２４ｇ（収率：８８．３％）を得た。

【００３１】1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ） δ；２．８
８−３．３５（４Ｈ，ｍ），４．０３−４．８８（２
Ｈ，ｍ），５．０７（２Ｈ，ｓ）， ７．００
−７．５４（１５Ｈ，ｍ）

【００３２】ｃ） Ｎ−（Ｏ−ベンジル−Ｐ−２−フェ
ネチルホスホニル）−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−トリ
プトファン ベンジルエステル（１ｃ） 化合物（１ｂ）９５６ｍｇ（２．０ミリモル）を乾燥塩
化メチレン（８ｍｌ）に懸濁し、冷却下トリエチルアミ
ン０．８４ｍｌ（６．０ミリモル）を加えた。氷冷撹拌
下、化合物（Ｒ２ｂ）の乾燥塩化メチレン（５ｍｌ）溶
液（２．８ミリモル）を約１５分で滴下し、そのまま一
晩撹拌した。 反応液を水洗し、溶媒を留去した。残渣を
酢酸エチルに溶解し、１規定塩酸、水、飽和重曹水、
水、飽和食塩水の順に洗浄した。有機層を無水硫酸ナト
リウムで乾燥し、溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカ
ラムクロマトグラフィーで精製し、標題化合物４１１ｍ
ｇ（収率；２９．４％）を得た。

【００３３】1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；１．２
−２．０（２Ｈ，ｍ）， ２．３−３．４（６Ｈ，
ｍ），３．８−４．２（６Ｈ，ｍ）， ６．４−８．０
（２８Ｈ，ｍ）

【００３４】ｄ） Ｎ−（２−フェネチルホスホニル）
−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−トリプトファン 二ナト
リウム塩（１ｄ） 化合物（１ｃ）８２ｍｇ（０．１２ミリモル）、エタノ
ール（６．５ｍｌ）、水（６．５ｍｌ）、重曹１９．５
ｍｇ（０．２３ミリモル）、及び１０％パラジウム−炭
素１３．５ｍｇの混合物を水素雰囲気下で、一夜室温で
撹拌した。触媒を瀘別後、 溶媒を留去し、 残渣を水に溶
解し凍結乾燥することにより標題化合物７１ｍｇ（定量
的) を得た。

【００３５】1Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ） δ：１．１−
１．３（２Ｈ，ｍ）， ２．２−２．４（２Ｈ，ｍ），
２．５−２．９（２Ｈ，ｍ）， ３．１−３．３（２
Ｈ，ｍ），３．８−４．０（１Ｈ，ｍ）， ４．４−
４．６（１Ｈ，ｍ），７．０−７．４（１５Ｈ，ｍ）

【００３６】［実施例２］ ａ） Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−ロイシル−Ｌ
−トリプトファン ベンジルエステル（２ａ） Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−ロイシン２．４９ｇ
（１０．０ミリモル）及びＬ−トリプトファンベンジル
エステル塩酸塩３．３１ｇ（１０．０ミリモル）から、
化合物（１ａ）の合成と同様の方法で合成し、標題化合
物４．７７ｇ（収率；９４％）を得た。

【００３７】1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；０．８
５（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ），１．０−１．８（３Ｈ，
ｍ），１．４０（９Ｈ，ｓ），３．３０（２Ｈ，ｄ，Ｊ
＝５Ｈｚ），３．８−４．２（１Ｈ，ｍ）， ４．
５−５．２（２Ｈ，ｍ），５．０５（２Ｈ，ｓ），
６．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），６．７−
８．２（１１Ｈ，ｍ）

【００３８】ｂ） Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトファン
ベンジルエステル塩酸塩（２ｂ） 化合物（２ａ）４．５６ｇ（９．０ミリモル）から、化
合物（１ｂ）の合成と同様の方法で合成し、標題化合物
３．８９ｇ（収率；９７％）を得た。

【００３９】1 Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ） δ；
０．６−２．０（９Ｈ，ｍ）， ２．８−３．５（２
Ｈ，ｍ），３．６−４．０（１Ｈ，ｍ）， ４．４−
４．８（１Ｈ，ｍ），５．０２（２Ｈ，ｓ），
６．６−７．７（１０Ｈ，ｍ），８．２８（３Ｈ，
ｓ）， ９．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），１
０．９９（１Ｈ，ｓ）

【００４０】ｃ） Ｎ−（Ｏ−ベンジル−Ｐ−ベンジル
ホスホニル）−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトファン ベ
ンジルエステル（２ｃ） 化合物（２ｂ）３１０ｍｇ（０．７ミリモル）及び化合
物（Ｒ２ｃ）１．０ミリモルから、化合物（１ｃ）の合
成と同様の方法で合成し 標題化合物２３ｍｇ（収率；
４％）を得た。

【００４１】1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；０．７
３（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ），１．０−１．７（３Ｈ，
ｍ），２．６−３．４（４Ｈ，ｍ）， ３．０−
４．０（１Ｈ，ｍ），４．４−５．１（５Ｈ，ｍ），
６．６−８．５（２３Ｈ，ｍ），

【００４２】ｄ） Ｎ−ベンジルホスホニル−Ｌ−ロイ
シル−Ｌ−トリプトファン 二ナトリウム塩（２ｄ） 化合物（２ｃ）６２ｍｇ（０．１ミリモル）から、化合
物（１ｄ）の合成と同様の方法で合成し、標題化合物４
３ｍｇ（収率；８８％）を得た。

【００４３】1Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ） δ；０．７４
（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝５Ｈｚ）， ０．８−１．６（３Ｈ，
ｍ），２．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１９Ｈｚ），２．９−
３．７（３Ｈ，ｍ），４．３−４．６（１Ｈ，ｍ），
６．８−７．９（１０Ｈ，ｍ）

【００４４】［実施例３］ ａ） Ｎ−（Ｏ−ベンジル−Ｐ−２−フェネチルホスホ
ニル）−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトファン ベンジル
エステル（３ａ） 化合物（２ｂ）３１０ｍｇ（０．７ミリモル）及び化合
物（Ｒ２ｂ）１．０ミリモルから、化合物（１ｃ）の合
成と同様の方法で合成し 標題化合物７０ｍｇ（収率；
１５％）を得た。

【００４５】1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；０．８
１（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ），１．０−２．２（５Ｈ，
ｍ），２．５−３．０（２Ｈ，ｍ）， ３．０−
４．０（３Ｈ，ｍ），４．４−５．１（５Ｈ，ｍ），
６．５−７．７（２２Ｈ，ｍ），８．３２（１Ｈ，
ｓ）

【００４６】ｂ） Ｎ−（２−フェネチルホスホニル）
−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトファン二ナトリウム塩
（３ｂ） 化合物（３ａ）７４ｍｇ（０．１１ミリモル）から、化
合物（１ｄ）の合成と同様の方法で合成し、標題化合物
５５ｍｇ（収率；９５％）を得た。

【００４７】1Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ） δ；０．４−
１．０（６Ｈ，ｍ），１．０−２．０（５Ｈ，ｍ），
２．４−２．９（２Ｈ，ｍ），２．９−３．７（３Ｈ，
ｍ），４．３−４．６（１Ｈ，ｍ），６．８−７．９
（１０Ｈ，ｍ）

【００４８】［実施例４］ ａ） Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−イソロイシル
−Ｌ−トリプトファンベンジルエステル（４ａ） Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−イソロイシン２．３
１ｇ（１０ミリモル）及びＬ−トリプトファンベンジル
エステル塩酸塩３．３１ｇ（１０ミリモル）から、化合
物（１ａ）の合成と同様の方法で合成し、標題化合物
３．５８ｇ（収率；７０％）を得た。

【００４９】1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；０．８
３（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．０−１．９（３Ｈ，
ｍ），１．４２（９Ｈ，ｓ），３．２９（２Ｈ，ｄ，Ｊ
＝５Ｈｚ），３．７−４．０（１Ｈ，ｍ）， ４．７
−５．２（２Ｈ，ｍ），５．０４（２Ｈ，ｓ），
６．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），６．７−８．
２（１１Ｈ，ｍ）

【００５０】ｂ）Ｌ−イソロイシル−Ｌ−トリプトファ
ン ベンジルエステル塩酸塩（４ｂ） 化合物（４ａ）３．３０ｇ（６．５ミリモル）から、化
合物（１ｂ）の合成と同様の方法で合成し、標題化合物
２．５５ｇ（収率；８８％）を得た。

【００５１】1 Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ） δ；
０．６−２．０（９Ｈ，ｍ）， ２．６−３．８（３
Ｈ，ｍ），４．３−４．７（１Ｈ，ｍ）， ５．００
（２Ｈ，ｓ），６．６−７．６（１０Ｈ，ｍ）， ８．
２７（３Ｈ，ｓ），９．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈ
ｚ），１０．９９（１Ｈ，ｓ）

【００５２】ｃ） Ｎ−（Ｏ−ベンジル−Ｐ−２−フェ
ネチルホスホニル）−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−トリプト
ファン ベンジルエステル（４ｃ） 化合物（４ｂ）４００ｍｇ（１．０ミリモル）及び化合
物（Ｒ２ｂ）１．４ミリモルから、化合物（１ｃ）の合
成と同様の方法で合成し、標題化合物９８ｍｇ（収率；
２１％）を得た。

【００５３】1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；０．５
−２．２（１１Ｈ，ｍ）， ２．５−３．８（５Ｈ，
ｍ），４．５−５．１（１Ｈ，ｍ）， ５．０１（２
Ｈ，ｓ），５．０４（２Ｈ，ｓ） ６．３−
７．６（２２Ｈ，ｍ），７．８−８．１（１Ｈ，ｍ）

【００５４】ｄ） Ｎ−（２−フェネチルホスホニル）
−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−トリプトファン 二ナトリウ
ム塩（４ｄ） 化合物（４ｃ）９８ｍｇ（０．１５ミリモル）から、化
合物（１ｄ）の合成と同様の方法で合成し、標題化合物
７６ｍｇ（収率；９６％）を得た。

【００５５】1Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ） δ；０．３−
１．０（８Ｈ，ｍ）， １．０−２．０（３Ｈ，ｍ），
２．４−２．９（２Ｈ，ｍ）， ２．９−３．８（３
Ｈ，ｍ），４．３−４．７（１Ｈ，ｍ）， ６．８−
７．８（１０Ｈ，ｍ）

【００５６】［実施例５］ ａ） Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−イソロイシ
ル−Ｌ−トリプトファンメチルエステル（５ａ） Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−イソロイシン５．
３０ｇ（２０．０ミリモル）及びＬ−トリプトファンメ
チルエステル塩酸塩５．０９ｇ（２０．０ミリモル）か
ら、化合物（１ａ）と同様の方法で合成し、標題化合物
７．１４ｇ（収率；７５．９％）を得た。

【００５７】1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；０．８
２−０．８９（６Ｈ，ｍ）， １．０４−１．６４（２
Ｈ，ｍ），１．７９−１．８０（１Ｈ，ｍ）， ３．２
９−３．３４（２Ｈ，ｍ），３．６６（３Ｈ，ｓ），
４．０４−４．０６（１Ｈ，ｍ），４．８９−４．９３
（１Ｈ，ｍ）， ５．０５（２Ｈ，ｓ），５．３４（１
Ｈ，ｂｒｓ）， ６．４３（１Ｈ，ｍ），６．９
３−８．０５（１１Ｈ，ｍ）

【００５８】ｂ） Ｌ−イソロイシル−Ｌ−トリプトフ
ァン メチルエステル（５ｂ） 化合物（５ａ）７．１４ｇ（１５．２ミリモル）をメタ
ノール（５０ｍｌ）に溶解し、これに１０％パラジウム
炭素（７１０ｍｇ）を加え水素雰囲気下で一夜撹拌し
た。濾過により触媒を除去し、濾液を減圧下濃縮するこ
とによって標題化合物３．０６ｇ（収率；６３．５％）
を得た。

【００５９】1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ） δ；０．８
０−１．６８（９Ｈ，ｍ）， ３．１１−３．３３（３
Ｈ，ｍ），３．６６（３Ｈ，ｓ）， ４．７
４−４．８５（１Ｈ，ｍ），６．９７−７．６２（６
Ｈ，ｍ）

【００６０】ｃ） Ｎ−（Ｏ−ベンジル−Ｐ−２−フェ
ネチルホスホニル）−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−トリプト
ファン メチルエステル（５ｃ） 化合物（５ｂ）６６３ｍｇ（２．０ミリモル）及び化合
物（Ｒ２ｂ）２．８ミリモルから、化合物（１ｃ）の合
成と同様の方法で合成し、標題化合物２５８ｍｇ（収
率；２１．９％）を得た。

【００６１】1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；０．６
−２．２（１１Ｈ，ｍ）， ２．６−３．０（２Ｈ，
ｍ），３．２−３．３５（２Ｈ，ｍ）， ３．４−３．
８（４Ｈ，ｍ），４．５−５．１（３Ｈ，ｍ），
７．４−８．２（１８Ｈ，ｍ）

【００６２】ｄ） Ｎ−（２−フェネチルホスホニル）
−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−トリプトファン メチルエス
テル ナトリウム塩《（１Ｓ，２Ｓ）−１−［（ｓ）−
２−（３−インドリル）−１−メトキシカルボニルエチ
ルカルバモイル］−２−メチルブチルアミノフェニルエ
チルホスフィン酸 ナトリウム》（５ｄ） 化合物（５ｃ）１３６ｍｇ（０．２３ミリモル）から、
化合物（１ｄ）の合成と同様の方法で合成し、標題化合
物１１４ｍｇ（収率；９５．０％）を得た。

【００６３】1Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ） δ；０．７−
１．３（８Ｈ，ｍ）， １．４−１．８（３Ｈ，ｍ），
２．５−２．７（２Ｈ，ｍ），３．２−３．４（２Ｈ，
ｍ），３．４−３．６（４Ｈ，ｍ）， ４．６−４．８
（１Ｈ，ｍ），７．０−７．６（１０Ｈ，ｍ）

【００６４】［実施例６］ ａ） Ｎ−（Ｏ−ベンジル−Ｐ−４−フェニルブチルホ
スホニル）−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトファン ベン
ジルエステル（６ａ） 化合物（２ｂ）２３５０ｍｇ（５．３ミリモル）及び化
合物（Ｒ２ａ）７．５ミリモルから、化合物（１ｃ）の
合成と同様の方法で合成し、標題化合物４６３ｍｇ（収
率；１３．７％）を得た。

【００６５】1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；０．６
−１．０（６Ｈ，ｍ）， １．２−２．１（９Ｈ，
ｍ），２．４−２．６（２Ｈ，ｍ）， ３．１５−
３．３５（２Ｈ，ｍ），３．６−４．０（１Ｈ，ｍ），
４．６５−５．２５（５Ｈ，ｍ），６．８−７．６
（２２Ｈ，ｍ）， ８．１−８．４（１Ｈ，ｍ）

【００６６】ｂ） Ｎ−（４−フェニルブチルホスホニ
ル）−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトファン 二ナトリウ
ム塩（６ｂ） 化合物（６ａ）２３２ｍｇ（０．３５ミリモル）から、
化合物（１ｄ）の合成と同様の方法で合成し、標題化合
物１８１ｍｇ（収率；９２．７％）を得た。

【００６７】1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ） δ；０．８
１−０．９０（６Ｈ，ｍ）， １．４７−１．６６（９
Ｈ，ｍ），２．５１−２．６１（２Ｈ，ｍ）， ３．１
７−３．５８（３Ｈ，ｍ），４．５６−４．５９（１
Ｈ，ｍ）， ６．９３−７．６３（１０Ｈ，ｍ）

【００６８】［実施例７］ ａ） Ｎ−（Ｏ−ベンジル−Ｐ−４−フェニルブチルホ
スホニル）−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−トリプトファン
ベンジルエステル（７ａ） 化合物（４ｂ）２１１０ｍｇ（４．８ミリモル）及び化
合物（Ｒ２ａ）６．８ミリモルから、化合物（１ｃ）の
合成と同様の方法で合成し、標題化合物１３０８ｍｇ
（収率；３０．３％）を得た。

【００６９】1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；０．６
−０．８（６Ｈ，ｍ）， ０．８−１．７５（９
Ｈ，ｍ），２．３−２．５５（２Ｈ，ｍ）， ３．０
−３．３（２Ｈ，ｍ），３．４５−３．７（１Ｈ，
ｍ）， ４．５５−５．０５（５Ｈ，ｍ），６．７−
７．５５（２２Ｈ，ｍ）， ８．１−８．４（１Ｈ，
ｍ）

【００７０】ｂ） Ｎ−（４−フェニルブチルホスホニ
ル）−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−トリプトファン 二ナト
リウム塩（７ｂ） 化合物（７ａ）２３２ｍｇ（０．３５ミリモル）から、
化合物（１ｄ）の合成と同様の方法で合成し、標題化合
物２０９ｍｇ（収率；９９．０％）を得た。

【００７１】1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ） δ；０．６
３−１．２５（８Ｈ，ｍ）， １．４４−１．６７（７
Ｈ，ｍ），２．５２−２．６１（２Ｈ，ｍ）， ３．１
４−３．５３（３Ｈ，ｍ），４．６１−４．６３（１
Ｈ，ｍ）， ６．９４−７．６３（１０Ｈ，ｍ）

【００７２】［比較例１］ ａ） Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−アラニル−Ｌ
−トリプトファン ベンジルエステル（比１ａ） Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−アラニン３．７８ｇ
（２０．０ミリモル）及びＬ−トリプトファンベンジル
エステル塩酸塩６．８１ｇ（２０．６ミリモル）から、
化合物（１ａ）と同様の方法で合成し、標題化合物１
０．７４ｇ（定量的）を得た。

【００７３】1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；１．２
７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）， １．４０（９Ｈ，
ｓ），３．３１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ）， ４．１
（１Ｈ，ｂｒｓ），４．９２−４．９６（１Ｈ，ｍ），
５．０７（２Ｈ，ｓ），６．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
８Ｈｚ）， ６．８１（１Ｈ，ｓ），７．０７−７．５
１（１０Ｈ，ｍ）， ８．０８（１Ｈ，ｂｒｓ）

【００７４】ｂ） Ｌ−アラニル−Ｌ−トリプトファン
ベンジルエステル塩酸塩（比１ｂ） 化合物（比１ａ）１０．８ｇ（２０．０ミリモル）か
ら、化合物（１ｂ）の合成と同様の方法で合成し、標題
化合物６．２９ｇ（収率；７８．３％）を得た。

【００７５】1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ） δ；
１．３４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ），３．１１−３．２
６（２Ｈ，ｍ），３．８７−３．８８（１Ｈ，ｍ），
４．５９−４．６５（１Ｈ，ｍ），６．９７−７．５１
（１０Ｈ，ｍ），８．３１（３Ｈ，ｂｒｓ），９．１０
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１１．０３（１Ｈ，ｓ）

【００７６】ｃ） Ｎ−（Ｏ−ベンジル−Ｐ−２−フェ
ネチルホスホニル）−Ｌ−アラニル−Ｌ−トリプトファ
ン ベンジルエステル（比１ｃ） 化合物（比１ｂ）８０４ｍｇ（２．０ミリモル）及び化
合物（Ｒ２ｂ）２．８ミリモルから、化合物（１ｃ）の
合成と同様の方法で合成し、標題化合物２８８ｍｇ（収
率；２３．１％）を得た。

【００７７】1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；１．２
４（３Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７，１６Ｈｚ），１．８−２．０
（２Ｈ，ｍ）， ２．７−２．９（２Ｈ，ｍ），３．２
−３．４（２Ｈ，ｍ）， ３．７−３．９（１Ｈ，
ｍ），４．７−５．２（５Ｈ，ｍ）， ６．７−７．９
（２３Ｈ，ｍ）

【００７８】ｄ） Ｎ−（２−フェネチルホスホニル）
−Ｌ−アラニル−Ｌ−トリプトファン二ナトリウム塩
（比１ｄ） 化合物（比１ｃ）１４６ｍｇ（０．２３ミリモル）か
ら、化合物（１ｄ）の合成と同様の方法で合成し、標題
化合物１１７ｍｇ（定量的）を得た。

【００７９】1Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ） δ；１．１４
（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）， １．６−１．８（２Ｈ，
ｍ），２．５−２．７（２Ｈ，ｍ）， ３．１−
３．４（２Ｈ，ｍ），３．６−３．７（１Ｈ，ｍ），
４．４−４．６（１Ｈ，ｍ），７．１−７．７（１
０Ｈ，ｍ）

【００８０】

【発明の効果】本発明の化合物は、エンドセリン変換酵
素阻害活性が強く、優れた血圧降下作用を有し、種々の
血管障害疾患に対する医薬の有効成分（エンドセリン変
換酵素阻害剤）として有用な物質である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ // Ｃ０７Ｋ 101:02 (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) C07K 5/062 A61K 31/66 ABN A61K 31/66 ABU A61K 31/66 ACV C07K 5/065 C07K 101:02 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)

Claims (2)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記式（１） 【化１】 （式中、Ａはロイシン、イソロイシン及びフェニルアラ
   ニンからなる群から選ばれたアミノ酸残基を表わし、Ｔ
   ｒｐはトリプトファン残基を表わし、Ｒは、同一でも異
   なっていてもよく、低級アルキル基、低級アルコキシ
   基、又はハロゲン原子を表わし、Ｘは水素原子又はアル
   カリ金属を表わし、Ｙは水素原子、アルカリ金属又は低
   級アルキル基を表わし、ｍは０〜３の整数であり、ｎは
   １〜４の整数である）で表わされることを特徴とするホ
   スホン酸アミド誘導体。
2. 【請求項２】 上記式（１）で表わされるホスホン酸ア
   ミド誘導体からなるエンドセリン変換酵素阻害剤。