JP5244821B2 - ヘテロ環およびホスホノキシメチル基が置換したピリジン誘導体ならびにそれらを含有する抗真菌剤 - Google Patents

Description

本発明は、新規なヘテロ環およびホスホノキシメチル基が置換したピリジン誘導体ならびにそれらを含有する抗真菌剤に関する。

近年、高度な化学療法等による免疫機能の低下した患者や高齢者が増加しているため、日和見感染の対策は益々重要性を増してきている。異なる弱毒菌による日和見感染が次々と起こっている事実が示すように、患者の抵抗力が低下するような基礎疾患がある限り感染症の問題は後を絶たない。従って、近い将来確実に訪れる高齢化社会においては、耐性菌の問題を含めた新たな感染症対策が重要な課題の一つとなることが見込まれている。

抗真菌剤の分野では、従来、例えば、深在性の真菌症の治療にはポリエン系のアムホテリシンＢやアゾール系のフルコナゾール、イトラコナゾール、ボリコナゾール等が開発されてきた。すでに上市されている既存薬には類似したメカニズムの薬剤が多く、現在ではアゾール耐性菌等の出現が問題となっている。

近年、新規メカニズムの１，３−β−グルカン合成酵素阻害剤として天然物由来の環状ヘキサペプチド型のカスポファンジンやミカファンジン等が開発されてきているが、これらの薬剤には注射剤しかないことから、抗真菌剤としてはまだ充分ではない。

このように既存の抗真菌剤では充分とはいえない状況にあり、新規なメカニズムに基づく安全性の高い薬剤の開発が切望されている。かかる新規なメカニズムに基づく抗真菌剤に関する関連技術として、特許文献１および２がある。特許文献１および２には、ＧＰＩ（glycosylphosphatidyl-inositol）アンカー蛋白質の細胞壁への輸送過程を阻害することで細胞壁表層蛋白質の発現を阻害し、細胞壁assemblyを阻害するとともに真菌が細胞へ付着するのを阻害して、病原体が病原性を発揮できないようにすることにより、感染症の発症、進展、持続に対して効果を示すピリジン誘導体が記載されている。

このような状況下において、特許文献３には、従来の抗真菌剤にはない優れた抗真菌作用を有し、物性、安全性および代謝的安定性の面でも優れた抗真菌剤として、ヘテロ環置換ピリジン誘導体が提案されている。

一方、特許文献４または５には、それぞれ、水溶性プロドラッグとして、下記式で表わされる化合物類、Ｎ−ホスホリルオキシメチルプロドラッグが開示されている。

（式中、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３は親第三級または第二級アミンを含む置換基であり、Ｒ_４およびＲ_５は、各々有機または無機残基であり、Ｘはカチオン有機または無機塩である。）

しかしながら、現在までに知られている水溶性プロドラッグでは、ＧＰＩアンカー蛋白質輸送過程の阻害に基づく優れた抗真菌作用を有し、かつ、水への溶解性および水溶液中での安定性、ならびに体内動態および安全性の面でも優れるものではなく、より優れた抗真菌剤の創製が望まれている。

国際公開第０２／０４６２６号パンフレット 国際公開第０５／０３３０７９号パンフレット 国際公開第０７／０５２６１５号パンフレット 米国特許第６，２３５，７２８ Ｂ１ 特表２００１−５２７０８３号公報

かかる事情に鑑み、本発明の目的は、優れた抗真菌作用を有し、かつ、水への溶解性および水溶液中での安定性、ならびに体内動態および安全性の面でも優れた抗真菌剤を提供することにある。

本発明者らは、上記事情に鑑み鋭意研究を重ねた結果、下記式（Ｉ）

で表される、ピリジン環上のＮ原子に、ホスホノキシメチル基を有する化合物が、優れた抗真菌作用を有するとともに、水への溶解性および水溶液中での安定性、ならびに体内動態および安全性の面でも優れることをも見出して、本発明を完成した。

すなわち、本発明の第１の態様では、
［１］下式（Ｉ）で表される化合物またはその塩；

式中、
Ｒ^１が、水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、Ｒ^１１−ＮＨ−（Ｒ^１１が、Ｃ_１−６アルキル基、ヒドロキシＣ_１−６アルキル基、Ｃ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル基、またはＣ_１−６アルコキシカルボニルＣ_１−６アルキル基を意味する。）、Ｒ^１２−（ＣＯ）−ＮＨ−（Ｒ^１２が、Ｃ_１−６アルキル基またはＣ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル基）、Ｃ_１−６アルキル基、ヒドロキシＣ_１-６アルキル基、シアノＣ_１-６アルキル基、Ｃ_１−６アルコキシ基、またはＣ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル基を意味し；
Ｒ^２が、水素原子、Ｃ_１-６アルキル基、アミノ基、またはジＣ_１-６アルキルアミノ基を意味し；
ＸおよびＹの一方が、窒素原子を、他方が、窒素原子または酸素原子を意味し；
環Ａが、ハロゲン原子もしくはＣ_１-６アルキル基を１個もしくは２個有していてもよい、５もしくは６員のへテロアリール環またはベンゼン環を意味し；
Ｚが、単結合、メチレン基、エチレン基、酸素原子、硫黄原子、−ＣＨ_２Ｏ−、−ＯＣＨ_２−、−ＮＨ−、−ＣＨ_２ＮＨ−、−ＮＨＣＨ_２−、−ＣＨ_２Ｓ−、または−ＳＣＨ_２−を意味し；
Ｒ^３が、水素原子、ハロゲン原子、または、それぞれ置換基群αから選ばれる置換基を１個もしくは２個有していてもよい、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_３−８シクロアルキル基、Ｃ_６−１０アリール基、５もしくは６員へテロアリール基、または５もしくは６員の非芳香族系へテロ環式基を意味し；
Ｒ^４が、水素原子またはハロゲン原子を意味する。
［置換基群α］
ハロゲン原子、シアノ基、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_１−６アルコキシ基、Ｃ_１−６アルコキシカルボニル基、Ｃ_３−８シクロアルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、およびＣ_２−６アルキニル基。
［２］ 前記式（Ｉ）で表わされる化合物の塩が、

式（ＩＡ）で表わされる塩である前項［１］に記載の化合物またはその塩；
前記式中、Ｑ⁻が、薬学的に許容されるアニオンを意味する。
［３］ 前記式（Ｉ）で表わされる化合物の塩が、


式（ＩＢ）で表わされる塩である前項［１］に記載の化合物またはその塩；
上式（ＩＢ）中、Ｊ^＋が、薬学的に許容されるカチオンを意味する。
［４］ 前記式（Ｉ）、（ＩＡ）または（ＩＢ）における下式（ＩＩ）

で表される部分構造が、下記の群から選ばれる部分構造である前項［１］ないし［３］のうちいずれか一項に記載の化合物またはその塩。

［５］ ＸおよびＹの一方が窒素原子で、他方が酸素原子である前項［１］ないし［４］のうちいずれか一項に記載の化合物またはその塩。
［６］ 前記式（Ｉ）、（ＩＡ）または（ＩＢ）における下式（ＩＩ）

で表される部分構造が、下式（ＩＩＩ）

で表される部分構造、または下式（ＩＶ）

で表される部分構造である前項［４］に記載の化合物またはその塩。
［７］ ＸおよびＹがともに窒素原子である前項［１］ないし［６］のうちいずれか一項に記載の化合物またはその塩。
［８］ 下式（Ｉ）、（ＩＡ）または（ＩＢ）における下式（ＩＩ）

で表される部分構造が、下式（Ｖ）

で表される部分構造または下式（ＶＩ）

で表される部分構造である前項［７］に記載の化合物またはその塩。
［９］ Ｒ^２がアミノ基である前項［１］ないし［８］のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
［１０］ Ｒ^１が、水素原子、アミノ基、またはＣ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル基である前項［９］に記載の化合物またはその塩。
［１１］ Ｒ^１がアミノ基であって、Ｒ^２が水素原子である前項［１］ないし［８］のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
［１２］ 環Ａが、ピリジン環、ベンゼン環、フラン環、チオフェン環、またはピロール環である前項［１］ないし［１１］のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
［１３］ 環Ａが、ピリジン環またはベンゼン環である前項［１２］に記載の化合物またはその塩。
［１４］ Ｚが、酸素原子、−ＣＨ_２Ｏ−、または−ＯＣＨ_２−である前項［１］ないし［１３］いずれか１項に記載の化合物またはその塩。
［１５］ 前項［１］ないし［１４］のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を含有する医薬組成物。
［１６］ 前項［１］ないし［１４］のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を含有する医薬。
［１７］ 前項［１］ないし［１４］のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を有効成分とする抗真菌剤。
［１８］ 前項［１］ないし［１４］のいずれか１項に記載の化合物またはその塩の薬理学的有効量を投与して、真菌感染症を予防および／または治療する方法。
［１９］ 抗真菌剤の製造のための前項［１］ないし［１４］のいずれか１項に記載の化合物またはその塩の使用。
を提供する。

また、本発明の第２の態様では、
［２０］ 下式（Ｉ）で表される化合物の製造方法であって、

式中、
Ｒ^１が、水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、Ｒ^１１−ＮＨ−（Ｒ^１１が、Ｃ_１−６アルキル基、ヒドロキシＣ_１−６アルキル基、Ｃ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル基、またはＣ_１−６アルコキシカルボニルＣ_１−６アルキル基を意味する。）、Ｒ^１２−（ＣＯ）−ＮＨ−（Ｒ^１２が、Ｃ_１−６アルキル基またはＣ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル基）、Ｃ_１−６アルキル基、ヒドロキシＣ_１-６アルキル基、シアノＣ_１-６アルキル基、Ｃ_１−６アルコキシ基、またはＣ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル基を意味し；
Ｒ^２が、水素原子、Ｃ_１-６アルキル基、アミノ基、またはジＣ_１-６アルキルアミノ基を意味し；
ＸおよびＹの一方が、窒素原子を、他方が、窒素原子または酸素原子を意味し；
環Ａが、ハロゲン原子もしくはＣ_１-６アルキル基を１個もしくは２個有していてもよい、５もしくは６員のへテロアリール環またはベンゼン環を意味し；
Ｚが、単結合、メチレン基、エチレン基、酸素原子、硫黄原子、−ＣＨ_２Ｏ−、−ＯＣＨ_２−、−ＮＨ−、−ＣＨ_２ＮＨ−、−ＮＨＣＨ_２−、−ＣＨ_２Ｓ−、または−ＳＣＨ_２−を意味し；
Ｒ^３が、水素原子、ハロゲン原子、または、それぞれ置換基群αから選ばれる置換基を１個もしくは２個有していてもよい、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_３−８シクロアルキル基、Ｃ_６−１０アリール基、５もしくは６員へテロアリール基、または５もしくは６員の非芳香族系へテロ環式基を意味し；
Ｒ^４が、水素原子またはハロゲン原子を意味する。
［置換基群α］
ハロゲン原子、シアノ基、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_１−６アルコキシ基、Ｃ_１−６アルコキシカルボニル基、Ｃ_３−８シクロアルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、およびＣ_２−６アルキニル基。
式（１）で表わされる化合物と、ホスホリック アシッド ジ−tert−ブチル エステル クロロメチル エステルと、塩基存在下において反応させる工程と、

（式中、環Ａ、Ｒ^１、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｘ、ＹおよびＺは前記定義と同意義を意味する。）
その後、酸により処理する工程と、
を含む製造方法。
［２１］ 前記塩基が、ヨウ化ナトリウムである前項［２０］に記載の製造方法。
［２２］ 前記酸が、トリフルオロ酢酸または塩酸である前項［２０］または［２１］に記載の製造方法。
［２３］ 下記式（ＩＡ）で表わされる化合物の塩の製造方法であって、

（式中、環Ａ、Ｒ^１、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｘ、ＹおよびＺは前記定義と同意義を意味し、Ｑ⁻が、薬学的に許容されるアニオンを意味する。）
前項［２０］ないし［２２］のいずれか一項に記載の製造方法により得られる化合物と、酸と、を反応させる工程を含む製造方法。
［２４］ 前記酸が、塩酸、臭化水素酸、硝酸および硫酸からなる群から選択される前項［２３］に記載の製造方法。
［２５］ 下記式（ＩＢ）で表わされる化合物の塩の製造方法であって、


（式中、環Ａ、Ｒ^１、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｘ、ＹおよびＺは前記定義と同意義を意味し、Ｊ^＋が、薬学的に許容されるカチオンを意味する。）
前項［２０］ないし［２２］のいずれか一項に記載の製造方法により得られる化合物と、塩基と、を反応させる工程を含む製造方法。
［２６］ 前記塩基が、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムおよびリジンからなる群から選択される前項［２５］に記載の製造方法。
を提供する。

式（Ｉ）、（ＩＡ）または（ＩＢ）で表される化合物（以下、単に「本発明化合物」という称する場合がある。）は、１）真菌のＧＰＩ生合成阻害に基づいて細胞壁表層蛋白質の発現を阻害し、細胞壁assemblyを阻害するとともに真菌が細胞へ付着するのを阻害して、病原体が病原性を発揮できないようにすることにより、感染症の発症、進展、持続に対して効果を示し、さらに、２）物性、特に、水への溶解性および水溶液中での安定性、ならびに体内動態および安全性の面でも優れており、真菌感染症の予防または治療剤として極めて有用である。

本発明の実施例２で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 無水物（１型）のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例３で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 無水物（２型）のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例４で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 無水物（３型）のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例５で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 水和物のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例６で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 酢酸和物のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例７で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 非晶質のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例８で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １塩酸塩のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例１０で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １／２硫酸塩のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例１１で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １硝酸塩のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例１２で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １臭化水素酸塩のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例１３で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム ナトリウム塩のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例１４で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １／２カルシウム塩のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例１５で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム リチウム塩のＸ線回折パターンを示す。 本発明の実施例１６で得られた２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム カリウム塩のＸ線回折パターンを示す。 本発明の一の実施態様にて、マウスにおける薬物動態評価法において測定された実施例１の化合物およびその親化合物である活性体の血漿中濃度を測定した結果を示す図である。 本発明の別の実施態様にて、サルにおける薬物動態評価法において測定された実施例１の化合物およびその親化合物である活性体の血漿中濃度を測定した結果を示す図である。

以下に、本明細書において記載する記号、用語等の定義、本発明の実施の形態等を示して、本発明を詳細に説明する。なお、本発明は以下の実施の形態に限定されるものではなく、その要旨の範囲内で種々変形して実施することができる。

本明細書中においては、化合物の構造式が便宜上一定の異性体を表すことがあるが、本発明には化合物の構造上生じ得るすべての幾何異性体、不斉炭素に基づく光学異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体等の異性体および異性体混合物を含み、便宜上の式の記載に限定されるものではなく、いずれか一方の異性体でも混合物でもよい。したがって、本発明の化合物には、分子内に不斉炭素原子を有し光学活性体およびラセミ体が存在することがありうるが、本発明においては限定されず、いずれもが含まれる。また、結晶多形が存在することもあるが同様に限定されず、いずれかの単一の結晶形であっても二以上の結晶形からなる混合物であってもよい。そして、本発明化合物には無水物と水和物等の溶媒和物とが包含される。

本明細書において使用する「Ｃ_１−６アルキル基」とは、炭素数１〜６個の脂肪族炭化水素から任意の水素原子を１個除いて誘導される一価の基である、炭素数１〜６個の直鎖状または分枝鎖状のアルキル基を意味し、具体的には例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ｓｅｃ−ペンチル基、ネオペンチル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基、１，１−ジメチルプロピル基、１，２−ジメチルプロピル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、１−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基、３，３−ジメチルブチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基、１，１，２−トリメチルプロピル基、１，２，２−トリメチルプロピル基、１−エチル−１−メチルプロピル基、１−エチル−２−メチルプロピル基等が挙げられ、好ましくはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等である。

本明細書において使用する「Ｃ_２−６アルケニル基」とは、二重結合を１〜２個含んでいてもよい炭素数２〜６個の直鎖状または分枝鎖状のアルケニル基を意味し、具体的には例えば、エテニル基、１−プロペニル基、２−プロペニル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、２−メチル−１−プロペニル基、ペンテニル基、３−メチル−２−ブテニル基、ヘキセニル基、ヘキサンジエニル基等が挙げられ、好ましくはエテニル基、１−プロペニル基、２−プロペニル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、２−メチル−１−プロペニル基、３−メチル−２−ブテニル基等である。

本明細書において使用する「Ｃ_２−６アルキニル基」とは、三重結合を１〜２個含んでいてもよい炭素数２〜６個の直鎖状または分枝鎖状のアルキニル基を意味し、具体的には例えば、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、１−ブチニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基、ペンチニル基、ヘキシニル基、ヘキサンジイニル基等が挙げられ、好ましくはエチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、１−ブチニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基等である。

本明細書において使用する「Ｃ_３−８シクロアルキル基」とは、炭素数３〜８個の環状の脂肪族炭化水素基を意味し、具体的には例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基等が挙げられ、好ましくはシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基等である。

本明細書において使用する「Ｃ_１−６アルコキシ基」とは、前記定義「Ｃ_１−６アルキル基」の末端に酸素原子が結合した基であることを意味し、具体的には例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ｎ−ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、ｓｅｃ−ペンチルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、１−メチルブトキシ基、２−メチルブトキシ基、１，１−ジメチルプロポキシ基、１，２−ジメチルプロポキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基、イソヘキシルオキシ基、１−メチルペンチルオキシ基、２−メチルペンチルオキシ基、３−メチルペンチルオキシ基、１，１−ジメチルブトキシ基、１，２−ジメチルブトキシ基、２，２−ジメチルブトキシ基、１，３−ジメチルブトキシ基、２，３−ジメチルブトキシ基、３，３−ジメチルブトキシ基、１−エチルブトキシ基、２−エチルブトキシ基、１，１，２−トリメチルプロポキシ基、１，２，２−トリメチルプロポキシ基、１−エチル−１−メチルプロポキシ基、１−エチル−２−メチルプロポキシ基等が挙げられ、好ましくはメトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基等である。

本明細書において使用する「ヒドロキシＣ_１−６アルキル基」とは、前記定義「Ｃ_１−６アルキル基」中の任意の水素原子を、水酸基で置換した基を意味し、具体的には、ヒドロキシメチル基、１−ヒドロキシエチル基、２−ヒドロキシエチル基、１−ヒドロキシ−ｎ−プロピル基、２−ヒドロキシ−ｎ−プロピル基、３−ヒドロキシ−ｎ−プロピル基、１−ヒドロキシ−イソプロピル基、２−ヒドロキシ−イソプロピル基、３−ヒドロキシ−イソプロピル基、１−ヒドロキシ−ｔｅｒｔ−ブチル基等が挙げられ、好ましくは、ヒドロキシメチル基、１−ヒドロキシエチル基、２−ヒドロキシエチル基等である。

本明細書において使用する「シアノＣ_１−６アルキル基」とは、前記定義「Ｃ_１−６アルキル基」中の任意の水素原子を、シアノ基で置換した基を意味し、具体的には、シアノメチル基、１−シアノエチル基、２−シアノエチル基、１−シアノ−ｎ−プロピル基、２−シアノ−ｎ−プロピル基、３−シアノ−ｎ−プロピル基、１−シアノ−イソプロピル基、２−シアノ−イソプロピル基、３−シアノ−イソプロピル基、１−シアノ−ｔｅｒｔ−ブチル基等が挙げられ、好ましくは、シアノメチル基、１−シアノエチル基、２−シアノエチル基等である。

本明細書において使用する「Ｃ_１−６アルコキシカルボニル基」とは、前記定義「Ｃ_１−６アルコキシ基」の末端にカルボニル基が結合した基であることを意味し、具体的には例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、ｎ−プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基等が挙げられる。

本明細書において使用する「Ｃ_１−６アルコキシカルボニルＣ_１−６アルキル基」とは、前記定義「Ｃ_１−６アルコキシカルボニル基」の末端に、前記定義「Ｃ_１−６アルキル基」が結合した基であることを意味し、具体的には例えば、メトキシカルボニルメチル基、メトキシカルボニルエチル基、エトキシカルボニルメチル基、エトキシカルボニルエチル基等が挙げられる。

本明細書において使用する「Ｃ_６−１０アリール基」とは、炭素数６〜１０の芳香族の炭化水素環式基をいい、具体的には例えば、フェニル基、１−ナフチル基、２−ナフチル基、インデニル基、アズレニル基、ヘプタレニル基等が挙げられ、好ましくはフェニル基、１−ナフチル基、２−ナフチル基等である。

本明細書中において使用する「Ｃ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル基」とは、前記定義「Ｃ_１−６アルキル基」中の任意の水素原子を、前記定義「Ｃ_１−６アルコキシ基」で置換した基を意味し、具体的には例えば、メトキシメチル基、エトキシメチル基、ｎ−プロポキシメチル、メトキシエチル基、エトキシエチル基等が挙げられる。

本明細書において使用する「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を意味する。

本明細書において使用する「ヘテロ原子」とは、窒素原子、硫黄原子または酸素原子を意味する。

本明細書において使用する「５もしくは６員のヘテロアリール環」とは、環を構成する原子の数が５もしくは６であり、環を構成する原子中に１から複数個のヘテロ原子を含有する芳香族の環を意味する。具体的には例えば、フラン環、チオフェン環、ピロール環、ピリジン環、ピラジン環、ピリダジン環、ピリミジン環、トリアゾール環（１，２，３−トリアゾール環、１，２，４−トリアゾール環等）、テトラゾール環（例えば１Ｈ−テトラゾール環、２Ｈ−テトラゾール環等）、チアゾール環、ピラゾール環、オキサゾール環、イソオキサゾール環、イソチアゾール環、オキサジアゾール環、チアジアゾール環等が挙げられる。

本明細書において使用する「５もしくは６員ヘテロアリール基」とは、環を構成する原子の数が５もしくは６であり、環を構成する原子中に１から複数個のヘテロ原子を含有する芳香族の環から任意の位置の水素原子を１個除いて誘導される一価の基を意味する。具体的には例えば、フリル基（例えば２−フリル基、３−フリル基等）、チエニル基（例えば２−チエニル基、３−チエニル基等）、ピロリル基（例えば１−ピロリル基、２−ピロリル基、３−ピロリル基等）、ピリジル基（例えば２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基等）、ピラジニル基、ピリダジニル基（例えば３−ピリダジニル基、４−ピリダジニル基等）、ピリミジニル基（例えば２−ピリミジニル基、４−ピリミジニル基、５−ピリミジニル基等）、トリアゾリル基（例えば１，２，３−トリアゾリル基、１，２，４−トリアゾリル基等）、テトラゾリル基（例えば１Ｈ−テトラゾリル基、２Ｈ−テトラゾリル基等）、チアゾリル基（例えば２−チアゾリル基、４−チアゾリル基、５−チアゾリル基等）、ピラゾリル基（例えば３−ピラゾリル基、４−ピラゾリル基等）、オキサゾリル基（例えば２−オキサゾリル基、４−オキサゾリル基、５−オキサゾリル基等）、イソオキサゾリル基（例えば３−イソオキサゾリル基、４−イソオキサゾリル基、５−イソオキサゾリル基等）、イソチアゾリル基（例えば３−イソチアゾリル基、４−イソチアゾリル基、５−イソチアゾリル基等）、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基等が挙げられる。

本明細書において使用する「５もしくは６員の非芳香族系へテロ環式基」とは、環を構成する原子の数が５もしくは６であり、環を構成する原子中に１から複数個のヘテロ原子を含有する非芳香族の環から任意の位置の水素原子を１個除いて誘導される一価の基を意味する。具体的には例えば、ピロリジニル基、ピペラジニル基、ピペリジニル基、モルホリニル基、テトラヒドロフリル基、テトラヒドロピラニル基等が挙げられる。

本明細書中において使用する「ジＣ_１−６アルキルアミノ基」とは、アミノ基中の２個の水素原子を、それぞれ同一のまたは異なる、前記定義「Ｃ_１−６アルキル基」で置換した基を意味し、具体的には例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−イソプロピルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ブチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−イソブチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｓｅｃ−ブチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｎ−プロピル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｎ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−イソブチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｓｅｃ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基等が挙げられ、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基等である。

本明細書において使用する「置換基を１個または２個有していてもよい」とは、置換可能な部位に、任意に組み合わせて１または２個の置換基を有してもよいことを意味する。

本明細書において使用する「Ｑ⁻」とは、薬学的に許容されるアニオンを意味し、薬学的に許容される有機酸または無機酸に由来するため、特定のアニオンには限定されないが、これらの有機酸または無機酸としては例えば以下のものが例示できる。すなわち、有機酸としては脂肪族や芳香族等の、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸等が挙げられ、無機酸としては、塩酸、硫酸、リン酸、フッ化水素酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸等が挙げられる。

本明細書において使用する「Ｊ^＋」とは、薬学的に許容されるカチオンを意味し、以下のカチオンに限定されるわけではないが、具体的には、ナトリウムイオン、カリウムイオン、リチウムイオン等のアルカリ金属イオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン等のアルカリ土類金属イオン、または、メチルアミン、エチルアミン、もしくはシクロヘキシルアミン等のアルキルアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、もしくはトリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン等の水酸基で置換されたアルキルアミン、リジン、アルギニン、もしくはヒスチジン等のアミノ酸、ピペリジン、モルホリン等の有機塩基由来のアンモニウムイオン等が挙げられる。

Ｒ^１は、水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_１−６アルコキシ基、Ｃ_１−６アルキルアミノ基、ヒドロキシＣ_１−６アルキルアミノ基またはＣ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル基を意味し、特に、水素原子、アミノ基、またはＣ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル基が好ましく、該Ｃ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル基としては、メトキシメチル基が好ましい。

Ｒ^２は、水素原子、アミノ基、またはジＣ_１−６アルキルアミノ基を意味し、水素原子またはアミノ基が好ましい。

ＸおよびＹの一方は、窒素原子を、他方は、窒素原子または酸素原子を意味する。

ＸおよびＹを含む下式（ＩＩ）

で表される部分構造は、下記に表されるような構造を有し、それぞれ左端が単結合を介してピリジン環の３位に結合し、かつ、右端はメチレン基を介してＡ環に結合する場合が好ましい。

例えば、式（ＩＩＩ）の部分構造を有する場合は、本発明化合物の親化合物、つまり、ホスホノキシメチル基が導入される前の化合物の構造は下式のようになる。

ＸおよびＹは、その一方が窒素原子で、他方が酸素原子である場合、または、ＸおよびＹとがともに窒素原子である場合が好ましく、ＸおよびＹの一方が窒素原子で、他方が酸素原子である場合は、ＸおよびＹを含む下式（ＩＩ）

で表される部分構造は、下式（ＩＩＩ）もしくは（ＩＶ）に表されるような構造を有し、それぞれ左端が単結合を介してピリジン環の３位に結合し、かつ、右端はメチレン基を介してＡ環に結合する場合が好ましく、

また、ＸおよびＹとが、ともに窒素原子である場合は、ＸおよびＹを含む下式（ＩＩ）

で表される部分構造は、下式（Ｖ）もしくは（ＶＩ）に表されるような構造を有し、それぞれ左端が単結合を介してピリジン環の３位に結合し、かつ、右端はメチレン基を介してＡ環に結合する場合が好ましい。

環Ａは、ハロゲン原子もしくはＣ_１−６アルキル基を１個もしくは２個を有していてもよい、５もしくは６員のへテロアリール環またはベンゼン環を意味し、ピリジン環、ベンゼン環、フラン環、チオフェン環、またはピロール環である場合が好ましく、さらに、ピリジン環、ベンゼン環、またはチオフェン環が好ましく、特に、ピリジン環またはベンゼン環が好ましい。

Ｚは、単結合、メチレン基、エチレン基、酸素原子、硫黄原子、−ＣＨ_２Ｏ−、−ＯＣＨ_２−、−ＮＨ−、−ＮＨＣＨ_２−、−ＣＨ_２ＮＨ−、−ＣＨ_２Ｓ−、または−ＳＣＨ_２−を意味し、このうちメチレン基、酸素原子、−ＣＨ_２Ｏ−、または−ＯＣＨ_２−が好ましく、特に、酸素原子、−ＣＨ_２Ｏ−、または−ＯＣＨ_２−が好ましい。

Ｒ^３は、水素原子、ハロゲン原子、または、それぞれ置換基群αから選ばれる置換基を１個または２個有していてもよい、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_３−８シクロアルキル基、Ｃ_６−１０アリール基、または５もしくは６員環へテロアリール基を意味する。
［置換基群α］
ハロゲン原子、シアノ基、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_１−６アルコキシ基、Ｃ_１−６アルコキシカルボニル基、Ｃ_３−８シクロアルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、およびＣ_２−６アルキニル基

Ｒ^３として好ましい基を例示すると、ｎ−ブチル基、シクロプロピル基、フェニル基、フルオロフェニル基、フリル基、クロロフリル基、メチルフリル基、チエニル基、ブロモチエニル基、メチルチエニル基、ピリジル基、またはメチルピリジル基が挙げられ、特に、ｎ−ブチル基、シクロプロピル基、フェニル基、フルオロフェニル基、ピリジル基、またはメチルピリジル基が好ましい。

ＺおよびＲ^３は、それぞれ任意の組合せにより、環Ａの置換基を構成することができる。そのように構成される環Ａの置換基としてのＲ^３−Ｚ−の好ましい例を例示すると、フェノキシ基、ベンジルオキシ基、２−フルオロ−ベンジルオキシ基、３−フルオロ−ベンジルオキシ基、４−フルオロ−ベンジルオキシ基、ピリジン−２−イルオキシメチル基、６−メチル−ピリジン−２−イルオキシメチル基、ピリジン−２−イルメトキシ基、６−メチル−ピリジン−２−イルメトキシ基、４−メチル−ピリジン−２−イルメトキシ基、ブトキシメチル基、またはシクロプロピルメトキシ基が挙げられる。

本明細書において使用する「塩」とは、一価のカウンターイオンまたは二価のカウンターイオンを形成できる化合物または原子との塩を意味する。具体的には、無機酸（たとえば、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、硝酸等）との塩、有機酸（たとえば、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、またはトリフルオロ酢酸等）との塩、または、無機塩基（たとえば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、リチウム塩等）との塩、有機塩基（たとえば、メチルアミン塩、エチルアミン塩、ｔ−ブチルアミン塩、シクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン塩、リジン塩、ピペリジンまたはモルホリン等）との塩を意味する。モノ−及びビス−塩は用語「塩」に含まれる。そして、本発明に係る化合物の塩にはその塩の無水物と水和物等のその塩の溶媒和物とが包含される。

本明細書において使用する「抗真菌剤」は、真菌感染症の予防剤および／または治療剤を意味する。

本発明に係る化合物は、慣用されている方法により錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、被覆錠剤、カプセル剤、シロップ剤、トローチ剤、吸入剤、坐剤、注射剤、軟膏剤、眼軟膏剤、テープ剤、点眼剤、点鼻剤、点耳剤、パップ剤、ローション剤等として製剤化することができる。

製剤化には通常用いられる賦形剤、結合剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤や、および必要により安定化剤、乳化剤、吸収促進剤、界面活性剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、抗酸化剤等を使用することができ、一般に医薬品製剤の原料として用いられる成分を配合して常法により製剤化される。例えば経口製剤を製造するには、本発明に係る化合物と賦形剤、さらに必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤等を加えた後、常法により散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、被覆錠剤、カプセル剤等とする。

これらの成分としては、例えば、大豆油、牛脂、合成グリセライド等の動植物油；例えば、流動パラフィン、スクワラン、固形パラフィン等の炭化水素；例えば、ミリスチン酸オクチルドデシル、ミリスチン酸イソプロピル等のエステル油；例えば、セトステアリルアルコール、ベヘニルアルコール等の高級アルコール；シリコン樹脂；シリコン油；例えば、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ひまし油、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマー等の界面活性剤；例えば、ヒドロキシエチルセルロース、ポリアクリル酸、カルボキシビニルポリマー、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース等の水溶性高分子；例えば、エタノール、イソプロパノール等の低級アルコール；例えば、グリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ソルビトール等の多価アルコール；例えば、グルコース、ショ糖等の糖；例えば、無水ケイ酸、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、ケイ酸アルミニウム等の無機粉体、精製水等が挙げられる。賦形剤としては、例えば、乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、マンニトール、ソルビット、結晶セルロース、二酸化ケイ素等が、結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、メチルセルロース、エチルセルロース、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリプロピレングリコール・ポリオキシエチレン・ブロックポリマー、メグルミン等が、崩壊剤としては、例えば、澱粉、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、クエン酸カルシウム、デキストリン、ペクチン、カルボキシメチルセルロース・カルシウム等が、滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ、硬化植物油等が、着色剤としては医薬品に添加することが許可されているものが、矯味矯臭剤としては、例えば、ココア末、ハッカ脳、芳香散、ハッカ油、竜脳、桂皮末等が用いられる。これらの錠剤・顆粒剤には糖衣、その他、必要により適宜コーティングすることはもちろん差支えない。また、シロップ剤や注射用製剤等の液剤を製造する際には、本発明に係る化合物にｐＨ調整剤、溶解剤、等張化剤等と、必要に応じて溶解補助剤、安定化剤等を加えて、常法により製剤化する。外用剤を製造する際の方法は限定されず、常法により製造することができる。すなわち、製剤化にあたり使用する基剤原料としては、医薬品、医薬部外品、化粧品等に通常使用される各種原料を用いることが可能である。使用する基剤原料として具体的には、例えば、動植物油、鉱物油、エステル油、ワックス類、高級アルコール類、脂肪酸類、シリコン油、界面活性剤、リン脂質類、アルコール類、多価アルコール類、水溶性高分子類、粘土鉱物類、精製水等の原料が挙げられ、さらに必要に応じ、例えば、ｐＨ調整剤、抗酸化剤、キレート剤、防腐防黴剤、着色料、香料等を添加することができるが、本発明に係る外用剤の基剤原料はこれらに限定されない。また、必要に応じて分化誘導作用を有する成分、血流促進剤、殺菌剤、消炎剤、細胞賦活剤、ビタミン類、アミノ酸、保湿剤、角質溶解剤等の成分を配合することもできる。なお、上記基剤原料の添加量は、通常外用剤の製造にあたり設定される濃度になる量である。

本発明に係る化合物を投与する場合、その形態は特に限定されず、通常用いられる方法により経口投与でも非経口投与でもよい。例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、トローチ剤、吸入剤、坐剤、注射剤、軟膏剤、眼軟膏剤、テープ剤、点眼剤、点鼻剤、点耳剤、パップ剤、ローション剤等の剤として製剤化し、投与することができる。

本発明に係る医薬の投与量は、症状の程度、年齢、性別、体重、投与形態・塩の種類、疾患の具体的な種類等に応じて適宜選ぶことができる。

投与量は患者の、疾患の種類、症状の程度、患者の年齢、性差、薬剤に対する感受性差等により著しく異なるが、経口剤の場合は、通常成人として１日あたり、１−１００００ｍｇ、好ましくは１０−２０００ｍｇを１日１−数回に分けて投与する。注射剤の場合は、通常成人として１日あたり、通常０．１ｍｇ−１００００ｍｇであり、好ましくは１ｍｇ−２０００ｍｇである。

［一般的製造方法］
式（Ｉ）、（ＩＡ）および（ＩＢ）で表される化合物（以下、化合物（Ｉ）、化合物（ＩＡ）および化合物（ＩＢ）という。）の製造方法について説明する。

リン酸エステルの一般的製造方法
［製造方法１］ 化合物（Ｉ）、(ＩＡ)および(ＩＢ)の製造方法

（式中、環Ａ、Ｒ^１、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｑ⁻、およびＪ^＋は前記定義と同意義を意味する。）

化合物（１−１）は、後述する参考例等に記載の方法を用いて製造することができる。また、化合物（１−１）は国際公開ＷＯ ２００７/０５２６１５ Ａ１公報に記載された方法等により製造することもできる。

［工程１−１］
本工程は、化合物（１−１）とホスホリック アシッド ジ−tert−ブチル エステル クロロメチル エステルをヨウ化ナトリウム存在下に反応させた後、酸処理により化合物（Ｉ）を得る工程である。
化合物（１−１）とホスホリック アシッド ジ−tert−ブチル エステル クロロメチル エステルをヨウ化ナトリウム存在下に反応させる時に用いる溶媒としては、出発原料をある程度溶解するものであり、かつ、反応を阻害しないものであれば、特に制限はないが、例えば、塩化メチレン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素系溶媒、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテルなどのエーテル系溶媒、酢酸エチルなどのエステル系溶媒、アセトニトリル、テトラメチレンスルホランまたはこれらの混合溶媒などを用いることができ、好ましくは酢酸エチル、テトラヒドロフランあるいはアセトニトリルを用いる。ホスホリック アシッド ジ−tert−ブチル エステル クロロメチル エステルは化合物（１−１）に対して1当量から１０当量用いることができ、好ましくは1当量から２当量用いる。ヨウ化ナトリウムは化合物（１−１）に対して1当量から１０当量用いることができ、好ましくは1当量から２当量用いる。反応温度は０℃から６０℃であり、好ましくは４℃から室温である。反応時間は４時間から２１６時間である。
酸処理に用いる酸としてはトリフルオロ酢酸などの有機酸、塩酸などの鉱酸を用いることができ、好ましくは塩酸、トリフルオロ酢酸を用いる。酸処理に際しては、前段階の反応溶媒に酸をそのまま加えてもよいし、一旦溶媒を減圧濃縮した後、適切な溶媒たとえばジクロロメタンなどに変えて酸を加えてもよい。反応温度は−１０℃から室温であり、反応時間は５分間から２時間である。

［工程１−２］
本工程は、化合物（Ｉ）と酸を反応させて化合物（ＩＡ）を得る工程である。本反応に用いる酸としては薬学的に許容されるものであれば特に制約は無いが、塩酸、臭化水素酸、硝酸などの１塩基酸、硫酸などの２塩基酸がある。本反応に用いる溶媒としては、出発原料をある程度溶解するものであり、かつ、反応を阻害しないものであれば、特に制限はないが、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリジノンなどのアミド系溶媒、メタノール、エタノールなどアルコール系溶媒、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、水、またはこれらの混合溶媒などを用いることができる。１塩基酸は化合物（Ｉ）に対して１当量を用い、２塩基酸は化合物（Ｉ）に対して１当量あるいは０．５当量用いる。反応温度は０℃から室温であり、反応時間は５分から４時間である。

［工程１−３］
本工程は、化合物（Ｉ）と塩基を反応させて化合物（ＩＢ）を得る工程である。本反応に用いる塩基としては薬学的に許容されものであれば特に制約はないが、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの無機塩基、リジンなどの有機塩基がある。本反応に用いる溶媒としては、出発原料をある程度溶解するものであり、かつ、反応を阻害しないものであれば、特に制限はないが、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリジノンなどのアミド系溶媒、メタノール、エタノールなどアルコール系溶媒、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、水、またはこれらの混合溶媒などを用いることができる。１酸塩基は化合物（Ｉ）に対して１当量を用い、２酸塩基は化合物（Ｉ）に対して１当量あるいは０．５当量用いる。反応温度は０℃から室温であり、反応時間は５分から４時間である。

本発明に係る化合物は、例えば以下の実施例、参考例および製造例等に記載した方法により製造することができる。ただし、これらは例示的なものであって、本発明に係る化合物は如何なる場合も以下の具体例に限定されるものではない。

［参考例１］３−（３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン

製造例１−１−５に記載の（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル）−アセトヒドロキシモイル クロライド（５１０ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）と国際公開第０７/０５２６１５号公報の製造例１−２−３に記載の３−エチニル−ピリジン−２−イルアミン（１５０ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液に、室温でトリエチルアミン（７０８μＬ、５．０８ｍｍｏｌ）を加え、室温で９５分攪拌した。反応溶液に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、それを無水硫酸マグネシウムで乾燥し、その溶媒を減圧下留去した。残渣をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、標記化合物（１２０ｍｇ、２６％）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：4.08(2H,s), 5.37(2H,s), 6.33(1H,s), 6.45(2H,brs), 6.79−6.82(2H,m), 6.88−6.91(1H,m), 7.30(2H,d,J=8.1Hz), 7.45(2H,d,J=8.1Hz), 7.57−7.61(1H,m), 7.85(1H,d,J=7.3Hz), 8.03(1H,d,J=5.5Hz), 8.17(1H,m).

出発物質（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル）−アセトヒドロキシモイル クロリドは以下の方法で合成した。

［製造例１−１−１］（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル）メタノール

１，４−ベンゼンジメタノール（５．５ｇ、４０ｍｍｏｌ）、２−フルオロピリジン（１．３ｇ、１３ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）の混合物に、０℃で水素化ナトリウム（１．４ｇ、４０ｍｍｏｌ、６６％ ｉｎ ｏｉｌ）を加え、室温で２０分間と７０℃で１時間攪拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、その溶媒を減圧下留去した。残渣をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘプタン＝１：１）で精製し、標記化合物（１．９ｇ、６６％）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm):4.71(2H,s), 5.38(2H,s), 6.81(1H,td,J=0.9,8.4Hz), 6.89(1H,ddd,J=0.9,5.1,7.1Hz), 7.37−7.47(4H,m), 7.59(1H,ddd,J=2.0,7.1,8.3Hz), 8.17(1H,ddd,J=0.7,2.0,5.1Hz).

［製造例１−１−２］４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンズアルデヒド

製造例１−１−１に記載の（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル）メタノール（１．９ｇ、８．６ｍｍｏｌ）と塩化メチレン（３０ｍＬ）の混合物に、二酸化マンガン（１５ｇ、１７ｍｍｏｌ）を室温で加え、その温度で終夜攪拌した。反応混合物をセライトを用いてろ過し、その溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘプタン＝１：４）で精製し、標記化合物（７７０ｍｇ、４２％）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm):5.48(2H,s), 6.85(1H,d,J=8.2Hz), 6.90−6.93(1H,m), 7.60−7.64(3H,m), 7.89(2H,d,J=8.1Hz), 8.16(1H,dd,J=1.3,4.9Hz), 10.0(1H,s).

［製造例１−１−３］２−（４−（（Ｅ）−２−ニトロ−ビニル）−ベンジルオキシ）−ピリジン

製造例１−１−２に記載の４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンズアルデヒド（２３．４ｇ、１１０ｍｍｏｌ）、ニトロメタン（３３．６ｇ、５５０ｍｍｏl）、酢酸アンモニウム（１７．０ｇ、２２０ｍｍｏｌ）そして酢酸（２００ｍＬ）の混合物を１００℃で１時間４５分撹拌した。反応溶液を氷冷撹拌しながら少量の水を加え、析出した固体をろ取し、標記化合物（２１．０ｇ、７４．５％）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):5.41(2H,s), 6.91(1H,dd,J=0.8,8.4Hz), 6.99−7.10(1H,m), 7.53(2H,d,J=8.0Hz), 7.72−7.79(1H,m), 7.86(2H,d,J=8.0Hz), 8.13(1H,d,J=10Hz), 8.15-8.20(1H,m), 8.23(1H,d,J=10Hz).

［製造例１−１−４］２−(４−（２−ニトロ−エチル）−ベンジルオキシ)−ピリジン

製造例１−１−３に記載の２−（４−（（Ｅ）−２−ニトロ−ビニル）−ベンジルオキシ）−ピリジン（２１．０ｇ、８１．９ｍｍｏｌ）、酢酸（２１ｍＬ）、ジメチルスルホキシド（２００ｍＬ）の溶液に、適宜冷却しながら室温で水素化ホウ素ナトリウム（４．９６ｇ、１３１ｍｍｏｌ）を加えた。水素化ホウ素ナトリウムを加えた後、冷浴を除き室温で１５分間撹拌した。反応溶液を水と酢酸エチルに分配した。酢酸エチル層を水で２回、食塩水で１回洗浄し、それを無水硫酸マグネシウムで乾燥し、その溶媒を減圧下留去した。残渣をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘプタン＝１：３）で精製し、標記化合物（１６．３ｇ、７７．１％）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):3.23(2H,t,J=6.8Hz), 4.85(2H,t,J=6.8Hz), 5.32(2H,s) 6.82−6.88(1H,m), 6.96−7.01(1H,m), 7.28(2H,d,J=8.0Hz), 7.38(2H,d,J=8.0Hz), 7.69−7.74(1H,m), 8.15−8.19(1H,m).

［製造例１−１−５］４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル−アセトヒドロキシモイル クロリド

メタノール（７５ｍＬ）にリチウム ワイアー（３２３ｍｇ、４６．６ｍｍｏｌ）を加え溶解した。その混合溶液に製造例１−１−４に記載の２−(４−（２−ニトロ−エチル）−ベンジルオキシ)−ピリジン（６．０ｇ、２３．３ｍｍｏｌ）を加え、反応溶液を減圧下濃縮した。残渣にトルエンを加え、その溶媒を減圧下濃縮した。得られた残渣の塩化メチレン（９０ｍＬ）とテトラヒドロフラン（４５ｍＬ）の溶液を−７８℃に冷却し、撹拌下にチタニウム（ＩＶ）クロリド（８．１５ｍＬ、７４．４ｍｍｏｌ）を加えた。チタニウム（ＩＶ）クロリドを加え終わったら反応溶液を０℃で１０分間、ついで室温で３０分撹拌した。反応溶液を氷水に展開し酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、硫酸マグネシウムをろ過により取り除いた。ろ液を中性シリカゲルを敷いたグラスフィルター（酢酸エチルで溶出）に通した。得られた溶出液を減圧下濃縮した。残渣に少量の酢酸エチルを加え、析出した固体をろ取し標記化合物（１．８６ｇ、２８．８％）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):3.82(2H,s), 5.33(2H,s), 6.84−6.89(1H,m), 6.97−7.01(1H,m), 7.25(2H,d,J=8.4Hz), 7.41(2H,d,J=8.4Hz), 7.70−7.76(1H,m), 8.15-8.18(1H,m), 11.7(1H,s).

また、製造例１−１−５の標記化合物は下記の別法で合成することもできる。

[製造例１−２−１]２−（４−ブロモ−ベンジルオキシ）−ピリジン

４−ブロモベンジルアルコール（２５ｇ、１３０ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ―ジメチルホルムアミド（１２５ｍＬ）溶液に室温でカリウム ｔｅｒｔ−ブトキシド（１５．８ｇ、１４１ｍｍｏｌ）を加え、５４℃で１０分間撹拌した。４０℃から５８℃で、その反応溶液に２−フルオロピリジン（１５ｍＬ、１５４ｍｍｏｌ）を加え、さらに６５℃で３０分間撹拌した。反応溶液を室温とし、水と酢酸エチルを加え分液した。水層をさらに酢酸エチル（２回）で抽出した。酢酸エチル層を合わせ、水（３回）と食塩水（１回）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過した。そのろ液を減圧下濃縮した。残渣にジエチルエーテルを加え、減圧下濃縮することにより、標記化合物（３４ｇ）を粗生成物として得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):5.33(2H,s), 6.87−6.90(1H,m), 6.98−7.02(1H,m) 7.38−7.44(2H,m), 7.55−7.60(2H,m), 7.71−7.76(1H,m), 8.15−8.18(1H,m).

[製造例１−２−２]４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンズアルデヒド

製造例１−２−１に記載の２−（４−ブロモ−ベンジルオキシ）−ピリジン(３４ｇ、１２８ｍｍｏｌ)のテトラヒドロフラン溶液（１２０ｍＬ）に、−７８℃でｎ−ブチルリチウム（５０ｍＬ、２．６Ｍ ヘキサン溶液、１３４ｍｍｏｌ）を滴下した。３０分撹拌した後、その反応溶液に−７８℃でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ、１３４ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で撹拌した。反応溶液に水と酢酸エチルを加え分液した。酢酸エチル層を水（２回）と食塩水（１回）で洗浄した。水層を合わせ酢酸エチルで抽出した。得られた酢酸エチル層を水（２回）と食塩水（１回）で洗浄した。先に得られた酢酸エチル層と今回得られた酢酸エチル層を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過した。そのろ液を減圧下濃縮することにより、標記化合物（２６．８ｇ）を粗生成物として得た。

[製造例１−２−３]２−（４−（（Ｅ）−２−ニトロ−ビニル）−ベンジルオキシ）−ピリジン

製造例１−２−２に記載の４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンズアルデヒド（２６．８ｇ、１２６ｍｍｏｌ）、ニトロメタン（３４ｍＬ、６３０ｍｍｏl）、酢酸アンモニウム（１９ｇ、２５２ｍｍｏｌ）および酢酸（９０ｍＬ）の混合物を１００℃で１時間３０分撹拌した。反応溶液に酢酸エチルと水を加え分液した。その有機層を分離し、水（５回）と飽和重曹水（１回）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過した。そのろ液を減圧下濃縮することにより、標記化合物（３１ｇ）を粗生成物として得た。

[製造例１−２−４]２−(４−（２−ニトロ−エチル）−ベンジルオキシ)−ピリジン

製造例１−２−３に記載の２−（４−（（Ｅ）−２−ニトロ−ビニル）−ベンジルオキシ）−ピリジン（３０．８ｇ、１２０ｍｍｏｌ）と酢酸（７．４ｍＬ）のジメチルスルホキシド（１５０ｍＬ）の溶液に、３０℃以下で水素化ホウ素ナトリウム（２．４５ｇ、６４．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応溶液を室温で４０分間撹拌した。反応溶液に３０℃以下で水と酢酸エチルとジエチルエーテルを加え、水と有機層に分配した。水層を酢酸エチルで抽出した。先に得られた有機層と酢酸エチル層合わせ、水（３回）と食塩水（１回）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過した。そのろ液を減圧下濃縮した。残渣をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘプタン＝１：４）で精製し、標記化合物（１５．２ｇ）を得た。

[製造例１−２−５]４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル−アセトヒドロキシモイル クロリド

製造例１−２−４に記載の２−(４−（２−ニトロ−エチル）−ベンジルオキシ)−ピリジン（１５．２ｇ、５９ｍｍｏｌ）のメタノール（８０ｍＬ）溶液にリチウムメトキシド（４．４９ｇ，１１８ｍｍｏｌ）を加え、３分間撹拌した。反応溶液を減圧下濃縮した。残渣にトルエンを加え、その溶媒を減圧下濃縮した。得られた残渣の塩化メチレン（１００ｍＬ）とテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）の溶液を−６６℃に冷却し、撹拌下にチタニウム（ＩＶ）クロリド（２０．８ｍＬ、１８９ｍｍｏｌ）を加えた。反応溶液を０℃で１０分間撹拌し、ついで室温で３０分撹拌した。反応溶液を氷水に注ぎ、室温で３０分撹拌した。反応溶液に酢酸エチルとジエチルエーテルを加え分液した。有機層を水（３回）と食塩水（１回）で洗浄した。水層を合わせ酢酸エチル（２回）で抽出した。酢酸エチル層を合わせ水（３回）と食塩水（１回）で洗浄した。先の有機層と酢酸エチル層を合わせ、無水硫酸マグネシウムと硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。そのろ液を減圧下濃縮することにより、標記化合物（１１．５ｇ）を粗生成物として得た。

また、参考例１の標記化合物は下記の別法１から３で合成することもできる。

［参考例１の別法１］３−（３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン

塩化亜鉛（８．８２ｇ）とテトラヒドロフラン（１３０ｍＬ）の混合物に、０℃で、国際公開第０７/０５２６１５号公報の製造例１−２−３に記載の３−エチニル−ピリジン−２−イルアミン（３．００ｇ、純度９８％）と、製造例１−２−５に記載の４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル−アセトヒドロキシモイル クロリド（１７．４ｇ、純度９４％）を加えた。反応混合物を室温とし、水浴を用いて内温を２８℃以下に保ちながらトリエチルアミン（９．０２ｍＬ）を滴下した。反応混合物を室温で２０分間攪拌し、次いで３５℃で１時間攪拌した。反応混合物を室温とし、反応混合物に塩化アンモニウム水溶液と酢酸エチルを加え、次いで、アンモニア水溶液をｐＨ約８まで加え、抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、それを無水硫酸マグネシウムで乾燥し、その溶媒を減圧下留去した。残渣をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝３：２）で精製し、次いで、tert−ブチルメチルエーテルとヘプタンの混合溶媒を用いて結晶化し、標記化合物（５．３２ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：4.07(2H,s), 5.37(4H,brs), 6.25(1H,s), 6.71(1H,dd,J=4.8,7.7Hz), 6.79−6.81(1H,m), 6.89(1H,ddd,J=0.8,5.0,7.0Hz), 7.30(2H,d,J=7.9Hz), 7.44(2H,d,J=8.1Hz), 7.58(1H,ddd,J=2.0,7.1,8.4Hz), 7.70(1H,dd,J=1.8,7.7Hz), 8.14(1H,dd,J=1.8,4.9Hz), 8.17−8.18(1H,m).

参考例１の別法１では、出発物質４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル−アセトヒドロキシモイル クロリドは以下の方法で合成した。

［製造例１−３−１］メチル ３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル）−オキシラン−２−カルボキシレート

製造例１−１−２に記載の４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンズアルデヒド（２４．８ｇ）とテトラヒドロフラン（１６０ｍＬ）の混合物に−１５℃でメチル クロロアセテート（１０．２ｍＬ）を加え、次いで、同温でソジウム メトキシド（２３．７ｍＬ、２８％メタノール溶液）を加えた。反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、室温で２時間攪拌した。酢酸（６ｍＬ）を含む氷水（８００ｍＬ）に反応混合物を加え、反応混合物を室温とした。反応混合物に酢酸エチルを加え抽出し、次いで有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。その溶媒を減圧下留去し、標記化合物（３０．２ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：3.51(1H,d,J=1.8Hz), 3.83(3H,s), 4.11(1H,d,J=1.8Hz), 5.38(2H,s), 6.81(1H,td,J=0.9,8.4Hz), 6.89(1H,ddd,J=0.9,5.1,7.1Hz), 7.29−7.31(2H,m), 7.47(2H,d,J=8.2Hz), 7.59(1H,ddd,J=2.0,7.1,8.4Hz), 8.17(1H,ddd,J=0.8,2.0,5.1Hz).

［製造例１−３−２］ソジウム ３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル）−オキシラン−２−カルボキシレート

製造例１−３−１に記載のメチル ３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル）−オキシラン−２−カルボキシレート（１９．９ｇ）とエタノール（３００ｍＬ）の混合物に０℃でソジウム メトキシド（１４．２ｍＬ、２８％メタノール溶液）、水（１．３ｍＬ）、テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）を順次加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物にジエチルエーテル（２００ｍＬ）を加え、析出した固体をろ取し、標記化合物（１４．３ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CD₃OD)δ(ppm)：3.31(1H,d,J=1.8Hz), 3.88(1H,d,J=1.8Hz), 5.33(2H,s), 6.84(1H,td,J=0.9,8.2Hz), 6.94(1H,ddd,J=0.9,5.1,7.1Hz), 7.29−7.31(2H,m), 7.42(2H,d,J=8.2Hz), 7.68(1H,ddd,J=2.0,7.1,8.4Hz), 8.12(1H,ddd,J=0.7,2.0,5.1Hz).

［製造例１−３−３］４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル−アセタルデヒド

製造例１−３−２に記載のソジウム ３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル）−オキシラン−２−カルボキシレート（９．９５ｇ）、トルエン（２００ｍＬ）、水（１２０ｍＬ）、酢酸（１６ｍＬ）の混合物を７３℃で９０分間撹拌した。反応混合物を室温とし、反応混合物に酢酸エチルを加え抽出し、次いで有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。その溶媒を減圧下留去し、標記化合物（６．８２ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：3.70(2H,d,J=2.2Hz), 5.38(2H,s), 6.81(1H,td,J=0.8,8.2Hz), 6.89(1H,ddd,J=0.9,5.1,7.1Hz), 7.24(2H,d,J=8.1), 7.48(2H,d,J=8.1Hz), 7.59(1H,ddd,J=2.0,7.1,8.4Hz), 8.18(1H,ddd,J=0.6,2.0,5.0Hz), 9.75(1H,t,J=2.4).

［製造例１−３−４］４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル−アセタルデヒド オキシム（Ｅ／Ｚ混合物）

ヒドロキシルアミン硫酸塩（１９．７ｇ）と水（２５０ｍＬ）の混合物に、０℃で１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（２４０ｍＬ）を加え、同温で１５分間攪拌した。次いで、反応混合物に、同温で、製造例１−３−３に記載の（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル）−アセタルデヒド（２７．３ｇ）とメタノール（２５０ｍＬ）の混合物を滴下し、室温で終夜攪拌した。析出した固体をろ取し、標記化合物（２０．３ｇ）をＥ体とＺ体の混合物として得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：3.54(2H,d,J=6.2Hz), 3.74(2H,d,J=5.3Hz), 5.36(2H+2H,s), 6.79−6.81(1H+1H,m), 6.87−6.90(1H+2H,m), 7.22−7.24(2H+2H,m), 7.42−7.44(2H+2H,m), 7.53(1H,t,J=6.3 Hz), 7.56−7.61(1H+1H,m), 8.17−8.18(1H+1H,m)(underbar=E or Z).

［製造例１−３−５］４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル−アセトヒドロキシモイル クロリド

製造例１−３−４に記載の４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−フェニル−アセタルデヒド オキシム（Ｅ／Ｚ混合物）（１３２ｍｇ）とＮ,Ｎ-ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）の混合物に、室温でＮ−クロロスクシニミド（７２．８ｍｇ）を加えた。次いで、同温で、反応混合物に塩酸ガスを吹き込み、同温で９０分間撹拌した。反応混合物に酢酸エチルと水を加え抽出し、次いで有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。その溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をジエチルエーテルとヘプタンの混合溶媒で洗浄し、標記化合物（１２３ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：3.81(2H,s), 5.36(2H,s), 6.81(1H,d,J=8.2Hz), 6.88−6.91 (1H,m), 7.28(2H,d,J=8.1), 7.43(2H,d,J=8.1Hz), 7.57−7.62(1H,m), 8.17−8.19(1H,m).

［参考例１の別法２］３−（３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン

製造例１−４−２に記載のジ−tert−ブチル （３−(３−（４−（（ピリジン−２−イルオキシ）メチル）ベンジル)イソキサゾール−５−イル）ピリジン−２−イル）イミドジカルボネート（１１．８ｇ、純度約７０％）、ジクロロメタン（１２０ｍＬ）の溶液に０℃でトリフルオロ酢酸（４０ｍＬ）を加えた。室温で１４時間撹拌した。反応溶液に２０℃以下で飽和重曹水を加え酢酸エチルで抽出し、ついでＮＨ−シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝１：１）で精製した。溶媒を減圧濃縮し、得られた残渣にtert−ブチルメチルエーテルを加え固体をろ取し、標記化合物（７．２９ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d6)δ(ppm)：4.04(2H,s), 5.32(2H,s), 6.26(2H,brs), 6.69(1H,dd,J=4.8,8.0Hz), 6.81(1H,s), 6.83−6.87(1H,m), 6.97−7.00(1H,m), 7.33(2H,d,J=8.0Hz), 7.40(2H,d,J=8.0Hz), 7.69−7.74(1H,m), 7.87(1H,dd,J=2.0,7.6Hz), 8.08(1H,dd,J=2.0,7.6Hz), 8.15−8.17(1H,m).

出発物質ジ−tert−ブチル （３−(３−（４−（（ピリジン−２−イルオキシ）メチル）ベンジル)イソキサゾール−５−イル）ピリジン−２−イル）イミドジカルボネートは以下の方法で合成した。

［製造例１−４−１］ ジ−tert−ブチル （３−エチニルピリジン−２−イル）イミドジカルボネート

国際公開第０７/０５２６１５号公報の製造例１−２−３に記載の３−エチニル−ピリジン−２−イルアミン（６．３４ｇ）、ジ−tert−ブチル ジカルボネート（５８．５ｇ）、トリエチルアミン（２７．１ｇ）、４−ジメチルアミノピリジン（６５５ｍｇ）、テトラヒドロフラン（２５４ｍＬ）を室温で１８時間撹拌した。反応溶液にシリカゲルを加え溶媒を減圧濃縮した。得られたシリカゲルをシリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、標記化合物（１５ｇ）を白色個体として得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d6)δ(ppm)：1.32(18H,s), 4.59(1H,s), 7.39−7.44(1H,m), 7.99−8.03(1H,m), 8.46−8.48(1H,m).

［製造例１−４−２］ ジ−tert−ブチル （３−(３−（４−（（ピリジン−２−イルオキシ）メチル）ベンジル)イソキサゾール−５−イル）ピリジン−２−イル）イミドジカルボネート

製造例１−４−１に記載のジ−tert−ブチル （３−エチニルピリジン−２−イル）イミドジカルボネート（１２ｇ）、製造例１−１−４に記載の２−（４−（２−ニトロ−エチル）−ベンジルオキシ）ピリジン（１９．４ｇ）、４−ジメチルアミノピリジン（２３０ｍｇ）、テトラヒドロフラン（２００ｍＬ）の溶液に室温撹拌下にジ−tert−ブチル ジカルボネート（２８．８ｇ）を４回に分けて８時間かけて加えた。加え終わった後室温でさらに２２時間撹拌した。反応溶液にシリカゲルを加え溶媒を減圧濃縮した。得られたシリカゲルをシリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝３：１ついで２:１）で精製し、標記化合物を含む油状物（１１．８ｇ、目的物を約７０％含む）を得た。

製造例１−４−２のジ−tert−ブチル （３−(３−（４−（（ピリジン−２−イルオキシ）メチル）ベンジル)イソキサゾール−５−イル）ピリジン−２−イル）イミドジカルボネートは、下記の別法１または２でも合成できる。

［製造例１−５−１］ ジ−tert−ブチル （３−(３−（４−（（ピリジン−２−イルオキシ）メチル）ベンジル)イソキサゾール−５−イル）ピリジン−２−イル）イミドジカルボネート（製造例１−４−２の別法１）

製造例１−４−１に記載のジ−tert−ブチル （３−エチニルピリジン−２−イル）イミドジカルボネート（２.０ｇ）、製造例１−１−４に記載の２−（４−（２−ニトロ−エチル）−ベンジルオキシ）ピリジン（２．４４ｇ）、トリエチルアミン（０．０８６μＬ）、テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）の溶液に５０℃撹拌下にフェニルイソシアネート（２．８ｍＬ）を４回に分けて５．５時間かけて加えた。加え終わった後５０℃でさらに２時間撹拌した。反応溶液にＮＨ−シリカゲルを加え溶媒を減圧濃縮した。得られたＮＨ−シリカゲルをＮＨ−シリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝３：１）で精製した。得られた溶液を減圧濃縮しシリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝３：１ついで２：１）で精製し、標記化合物（２．２ｇ）を油状物として得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d6)δ(ppm)：1.18(18H,s), 4.07(2H,s), 5.32(2H,s), 6.58(1H,s), 6.83−6.86(1H,m), 6.96−7.01(1H,m), 7.29(2H,d,J=8.0Hz), 7.40(2H,d,J=8.0Hz), 7.58(1H,dd,J=4.8,7.6Hz), 7.69−7.74(1H,m), 8.15−8.18(1H,m), 8.34(1H,dd,J=2.0,7.6Hz), 8.59(1H,dd,J=2.0,5.2Hz).

［製造例１−６−１］ ジ−tert−ブチル （３−(３−（４−（（ピリジン−２−イルオキシ）メチル）ベンジル)イソキサゾール−５−イル）ピリジン−２−イル）イミドジカルボネート（製造例１−４−２の別法２）

製造例１−６−２に記載の４−メチレン−２−オキソ−４Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−１−カルボキシリック アシッド ｔｅｒｔ−ブチル エステル（１．４８ｇ）、製造例１−１−４に記載の２−（４−（２−ニトロ−エチル）−ベンジルオキシ）ピリジン（２．９ｇ）、ジ−tert−ブチル ジカルボネート（６．１４ｇ）、４−ジメチルアミノピリジン（６８．６ｍｇ）、テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）を室温で２時間撹拌した。反応溶液にシリカゲルを加え溶媒を減圧濃縮した。得られたシリカゲルをシリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝３：１ついで１：１ついで１：２）で精製し標記化合物（２．１ｇ）を油状物として得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d6)δ(ppm)：1.18(18H,s), 4.07(2H,s), 5.32(2H,s), 6.58(1H,s), 6.83−6.86(1H,m), 6.96−7.01(1H,m), 7.29(2H,d,J=8.0Hz), 7.40(2H,d,J=8.0Hz), 7.58(1H,dd,J=4.8,7.6Hz), 7.69−7.74(1H,m), 8.15−8.18(1H,m), 8.34(1H,dd,J=2.0,7.6Hz), 8.59(1H,dd,J=2.0,5.2Hz).

出発物質４−メチレン−２−オキソ−４Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−１−カルボキシリック アシッド ｔｅｒｔ−ブチル エステルは、以下の方法で合成した。

［製造例１−６−２］４−メチレン−２−オキソ−４Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−１−カルボキシリック アシッド ｔｅｒｔ−ブチル エステル

１−（２−アミノ−ピリジン−３−イル）−エタノン（９９０ｍｇ）、ジ−tert−ブチル ジカルボネート（７．９２ｇ）、４−ジメチルアミノピリジン（８８．８ｍｇ）、トリエチルアミン（４．９５ｍＬ）、テトラヒドロフラン（１６．５ｍｌ）を室温で２４時間撹拌した。反応溶液にシリカゲルを加え溶媒を減圧濃縮した。得られたシリカゲルをシリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、標記化合物（１．４８ｇ）を油状物として得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d6)δ(ppm)：1.56(9H,s), 5.01(1H,d,J=3.6Hz), 5.45(1H,d,J=3.6Hz), 7.28(1H,dd,J=4.8,8.0Hz), 8.25(1H,dd,J=1.6,8.0Hz), 8.36(1H,dd,J=1.6,4.8Hz).

［参考例１の別法３］３−（３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン

窒素雰囲気下、製造例１−８−２に記載の２−（４−（５−ヨード−イソキサゾール−３−イルメチル）−ベンジルオキシ）−ピリジン(２００ｍｇ)、製造例１−７−２に記載の２−Ｎ−ブトキシカルボニル−３−ピリジンボロン酸（１３４ｍｇ）、炭酸ナトリウム(８２ｍｇ)、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（５９ｍｇ）、１，２−ジメトキシエタン(６ｍＬ)および水（１ｍＬ）の混合物を８０℃で２時間撹拌した。その混合物を室温まで冷却し、酢酸エチルと水を加えた。その有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過した。そのろ液をシリカゲルに吸着した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝４：１〜１：１〜酢酸エチル）にて精製し、標記化合物（１１６ｍｇ）を得た。

出発物質２−Ｎ−ブトキシカルボニル−３−ピリジンボロン酸は以下の方法で合成した。

［製造例１−７−１］ピリジン−２−イル−カルバミック アシッド tert-ブチル エステル

tert−ブチルアルコール（６５０ｍＬ）とジ−tert−ブチルカーボネート（２４ｇ）の溶液にゆっくり２−アミノピリジン（９．４ｇ）を加えた。その混合物を室温で２４時間撹拌した。その反応溶液を減圧濃縮し、その残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝１：１）で精製し、標記化合物（１８ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)：1.47(9H,s), 6.99−7.03(1H,m), 7.70−7.74(1H,m), 7.77−7.80(1H,m), 8.23−8.24(1H,m), 9.72(1H,brs).

［製造例１−７−２］２−Ｎ−ブトキシカルボニル−３−ピリジンボロン酸

製造例１−７−１に記載のピリジン−２−イル−カルバミック アシッド tert-ブチル エステル(１６ｇ)とＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン(２５ｇ)のテトラヒドロフラン溶液(４００ｍＬ)を−７０℃に冷却し、ｎ−ブチルリチウム（７８ｍＬ、２．６４Ｍ ヘプタン溶液）を１時間で滴下し、１０分間撹拌した。その混合物を−１０℃から−６℃の間まで昇温し、その温度で２時間撹拌した。再び、その溶液を−７０℃まで冷却し、トリイソブチル ボレート(５８ｇ)を１時間で滴下した。その混合物を０℃まで昇温した後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えた。生成した黄色固体にエーテルを加え、撹拌した後、固体をろ取し、エーテルと水で洗浄した。その固体を減圧下乾燥し、標記化合物（１４ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)：1.32−1.41(9H,m), 6.80−6.84(1H,m), 7.95−8.13(2H,m).

参考例１の別法３における出発物質２−（４−（５−ヨード−イソキサゾール−３−イルメチル）−ベンジルオキシ）−ピリジンは以下の方法で合成した。

［製造例１−８−１］２−（４−（５−トリ−ｎ−ブチルスタニル−イソキサゾール−３−イルメチル）−ベンジルオキシ）−ピリジン

トリ−ｎ−ブチルエチニルチン（３ｇ）、製造例１−１−４に記載の２−（４−（２−ニトロ−エチル）−ベンジルオキシ）−ピリジン（４．９ｇ）そして４−ジメチルアミノピリジン（１１６ｍｇ）のテトラヒドロフラン溶液（９０ｍＬ）に、ジ−tert−ブチルジカーボネート（７．３ｇ）のテトラヒドロフラン溶液（３０ｍＬ）を加え、室温で１５時間撹拌した。その混合物に酢酸エチルと水を加えた。その有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過した。そのろ液をシリカゲルに吸着させた後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝４：１）にて精製し、標記化合物（５．３ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)：0.81−0.85(9H,m), 1.08−1.12(6H,m), 1.23−1.30(6H,m), 1.46−1.54(6H,m), 4.00(2H,s), 5.30(2H,s), 6.40(1H,s), 6.83−6.86(1H,m), 6.97−7.00(1H,m), 7.25−7.26(2H,m), 7.36−7.38(2H,m), 7.69−7.74(1H,m), 8.15−8.17(1H,m).

［製造例１−８−２］２−（４−（５−ヨード−イソキサゾール−３−イルメチル）−ベンジルオキシ）−ピリジン

製造例１−８−１に記載の２−（４−（５−トリ−ｎ−ブチルスタニル−イソキサゾール−３−イルメチル）−ベンジルオキシ）−ピリジン(５．１ｇ)のテトラヒドロフラン溶液(１５ｍＬ)に、０℃でヨウ素（２．５ｇ）を加えた。その混合物を２０分間その温度で撹拌した。その混合物に１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液と酢酸エチルを加えた。その有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過した。そのろ液を濃縮し、その残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン：酢酸エチル＝１０：１〜４：１）にて精製し、標記化合物（２．４ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)：3.99(2H,s), 5.31(2H,s), 6.66(1H,s), 6.84−6.87(1H,m), 6.97−7.00(1H,m), 7.26(2H,d,J=8Hz), 7.39(2H,d,J=8Hz), 7.70−7.74(1H,m), 8.16−8.17(1H,m).

以下、参考例１に記載の３−（３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミンの製造例の別法を説明する。

［参考例２］ｔｅｒｔ−ブチル （３−アセチルピリジン−２−イル）カルバメートの合成

窒素雰囲気下、１−（２−アミノピリジン−３−イル）エタノン（５０ｇ，３６８ｍｍｏｌ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネイト（１２０ｇ，５５２ｍｍｏｌ）とｔｅｒｔ−ブタノール（２００ｍＬ）の混合物を９０℃で３時間撹拌した。冷却後、減圧下溶媒を留去し、残渣にｎ−ヘプタン（５００ｍＬ）を加え、析出している固体を濾取し、標記化合物（７７ｇ）を黄色固体として得た。
¹H-NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm):1.54(9H,s), 2.64(3H,s), 7.03(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.16(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.63(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz), 10.82(1H,brs).

［参考例３］エチル ５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−カルボキシレートの合成

窒素雰囲気下、ｔｅｒｔ−ブチル （３−アセチルピリジン−２−イル）カルバメート（６００ｍｇ，２．２９ｍｍｏｌ）、シュウ酸ジエチル（６６９ｍｇ，４．５８ｍｍｏｌ）のトルエン（５．０ｍＬ）溶液に、室温でカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（５１４ｍｇ，４．５８ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。トルエン（５．０ｍＬ）を加えて１時間撹拌した後、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２５７ｍｇ，２．２９ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。反応混合液へ塩酸ヒドロキシルアミン（４７７ｍｇ，６．８７ｍｍｏｌ）とエタノール（１０ｍＬ）を加えて１時間撹拌した後、水（１．０ｍＬ）を加え、室温で終夜撹拌した。水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、濃縮した。濃縮残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（１９２ｍｇ）を加え、８０℃で６時間撹拌した。冷却後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下溶媒を留去し、標記化合物（４４３ｍｇ）を白色固体として得た。
¹H-NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm):1.45(3H,t,J＝7.2Hz), 4.49(2H,q,J＝7.2Hz), 5.40(2H,brs), 6.79(1H,dd,J＝5.2,7.6Hz), 6.91(1H,s), 7.81(1H,dd,J＝2.0,7.6Hz), 8.21(1H,dd,J＝2.0,5.2Hz).

［参考例４］[５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−イル]メタノールの合成

窒素雰囲気下、エチル ５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−カルボキシレート（３８１ｍｇ，１．６３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３．８ｍＬ）とエタノール（３．８ｍＬ）の懸濁液に、０℃で水素化ホウ素ナトリウム（２０１ｍｇ，４．８９ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、２０℃で２１時間撹拌した。氷水浴冷却下、反応混合液へ２Ｎ塩酸（２．４６ｍＬ，４．８９ｍｍｏｌ）を滴下し、０℃で１０分間、室温で３０分間撹拌した。氷水浴冷却下、５％炭酸水素ナトリウム水溶液を滴下して塩基性とした後、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下溶媒を留去した。残渣をテトラヒドロフラン（１．４ｍＬ）に懸濁し、０℃で水素化ホウ素ナトリウム（６７ｍｇ，１．６３ｍｍｏｌ）を加え、メタノール（１．４ｍＬ）で洗い込んだ。室温で１時間撹拌した後、６０℃で５時間撹拌した。氷水浴冷却下、反応混合液へ１Ｎ塩酸（１．６３ｍＬ，１．６３ｍｍｏｌ）を滴下し、０℃で１０分間、室温で３０分間撹拌した。氷水浴冷却下、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を滴下して塩基性とした後、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下溶媒を留去し、標記化合物（２５８ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
¹H-NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):4.56(2H,d,J＝5.6Hz), 5.54(1H,t,J＝5.6Hz), 6.27(2H,brs), 6.72(1H,dd,J＝4.8,7.6Hz), 6.90(1H,s), 7.90(1H,dd,J＝2.0,7.6Hz), 8.10(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

参考例５〜１０は、参考例３および４の別途合成法である。

［参考例５］ Ｎ−（３−アセチルピリジン−２−イル）−２，２−ジメチルプロパナミドの合成

１−（２−アミノピリジン−３−イル）エタノン（２７２ｍｇ，２ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（２４ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．６４ｍＬ，４．６ｍｍｏｌ）、およびトルエン（２ｍＬ）の混合物に室温で塩化ピバロイル（０．５２ｍＬ，４．２ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で１時間、６０℃で５時間攪拌した。２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチル−４Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−４−イル ピバレート^＊の生成を確認後、反応混合物に水（２ｍＬ）および５Ｎ塩酸（０．８ｍＬ）を加え、室温で３０分間攪拌した。反応混合物を分液し、水層に５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍＬ）を加えて、トルエンで抽出した。溶媒を減圧下留去し、途中析出した固形分を濾過し、標記化合物（４１５ｍｇ）を得た。
¹H-NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm):1.33(9H,s), 2.64(3H,s), 7.10(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.17(1H,dd,J＝2.0,7.6Hz), 8.64(1H,dd,J=2.0,4.8Hz).

^＊２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチル−４Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−４−イル ピバレート
¹H-NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm):1.09(9H,s), 1.32(9H,s), 2.05(3H,s), 7.14(1H,dd,J＝4.8,7.6Hz), 7.71(1H,dd,J＝2.0,7.6Hz), 8.51(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

参考例６〜７は、参考例５の別途合成法である。

［参考例６］２−ｔｅｒｔ−ブチル−４Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−４−オンの合成

２−アミノニコチン酸（１３．８ｇ，１００ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（１．２ｇ，１０ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（５５．８ｍＬ，４００ｍｍｏｌ）、およびＮ−メチルピロリドン（１４０ｍＬ，４２ｍｍｏｌ）の混合物に０℃で塩化ピバロイル（２４．１ｇ，２００ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下終了後室温で終夜攪拌した。反応混合物に水を加え、トルエンで抽出し、有機層を水と飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過後、溶媒を減圧下留去した。残渣にｎ−ヘプタンを加え、０℃で懸濁撹拌した後、濾過し、標記化合物（１６．６ｇ）を得た。
¹H-NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm):1.45(9H,s), 7.48(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.52(1H,dd,J＝2.0,7.6Hz), 8.97(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

［参考例７］Ｎ−（３−アセチルピリジン−２−イル）−２，２−ジメチルプロパナミドの合成

２−ｔｅｒｔ−ブチル−４Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−４−オン（１０．２ｇ，５０ｍｍｏｌ）およびテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）の混合物に−７８℃でメチルマグネシウムブロミド（０．９７Ｍ テトラヒドロフラン溶液，１００ｍＬ，９７ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下終了後−７８℃で３０分間攪拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液と水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を塩化アンモニウム水溶液で洗浄した。溶媒を減圧下留去し、途中析出した固形分を濾過し、標記化合物（９．１ｇ）を得た。
¹H-NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm):1.33(9H,s), 2.64(3H,s), 7.10(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.17(1H,dd,J＝2.0,7.6Hz), 8.64(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

［参考例８］エチル ５−｛２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）アミノ］ピリジン−３−イル｝イソキサゾール−３−カルボキシレートの合成

Ｎ−（３−アセチルピリジン−２−イル）−２，２−ジメチルプロパナミド（８．０８ｇ，３６．７ｍｍｏｌ）、シュウ酸ジエチル（１０．０ｍＬ，７３．４ｍｍｏｌ）、およびエタノール（３６ｍＬ）の混合物に−２５℃でカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（８．２３ｇ，７３．４ｍｍｏｌ）を加え、−２５℃で１時間攪拌した。反応混合物に水（７２ｍＬ）を加えて室温で攪拌後、トルエン（３６ｍＬ）を加えて分層し、得られた水層をさらにトルエン（３６ｍＬ）で洗浄した。５Ｎ塩酸（１４ｍＬ）および塩酸ヒドロキシルアミン（５．１０ｇ，７３．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分間攪拌した。反応混合物に５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１４ｍＬ）を加え、トルエンで抽出した後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣にエタノール（３５ｍＬ）およびトリエチルアミン（５ｍＬ）を加え、８０℃から８５℃で６時間攪拌した。反応混合物にｎ−ヘプタン（１０５ｍＬ）を加え、析出した固体を濾過し、標記化合物（６．９０ｇ）を得た。
¹H-NMR Spectrum (DMSO−d6)δ(ppm):1.19(9H,s), 1.32(3H,t), 4.37(4H,q), 7.12(1H,s), 7.46(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.25(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.58(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz), 10.03(1H,s).

［参考例９］Ｎ−｛３−［３−（ヒドロキシメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝−２，２ジメチルプロパナミドの合成

エチル ５−｛２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）アミノ］ピリジン−３−イル｝イソキサゾール−３−カルボキシレート（１１１ｇ，３５０ｍｍｏｌ）、エタノール（１１０ｍＬ）、およびテトラヒドロフラン（３５０ｍＬ）の混合物に室温で水素化ホウ素ナトリウム（１３．２ｇ，３５０ｍｍｏｌ）を加え、室温で６時間攪拌した。反応混合物に水（３５０ｍＬ）および５Ｎ塩酸（９０ｍＬ）を加え、室温で３０分間攪拌後、５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１１０ｍＬ）を加え、酢酸エチルとテトラヒドロフランの混合液で抽出し、有機層を水と飽和食塩水で洗浄した。溶媒を減圧下留去し、［５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−イル］メタノールが一部混入した標記化合物（８３．８ｇ）を黄色固体として得た。
¹H-NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):1.20(9H,s), 4.52(2H,d,J＝6.0Hz), 5.53(1H,t,J＝6.0Hz), 6.70(1H,s), 7.44(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.19(1H,dd,J＝5.6,7.6Hz), 8.53(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz), 9.89(1H,brs).

［参考例１０］[５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−イル]メタノールの合成

参考例９にて得たＮ−｛３−［３−（ヒドロキシメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝−２，２ジメチルプロパナミド（８２．８ｇ）およびメタノール（３５０ｍＬ）の混合物に室温で５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（３５０ｍＬ）を加え、５７〜６０℃で１４時間攪拌した。反応混合物に酢酸（１００ｍＬ）を加え、析出した固体を濾過し、標記化合物（４２．２ｇ）を灰白色固体として得た。
¹H-NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):4.54(2H,s), 5.57(1H,brs), 6.25(2H,brs), 6.71(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 6.90(1H,s), 7.90(1H,dd,J＝1.6,7.6Hz), 8.09(1H,dd,J＝1.6,4.8Hz).

参考例１１〜１３は、参考例５〜１０の別途合成法である。

［参考例１１］ Ｎ−（３−アセチルピリジン−２−イル）−２，２−ジメチルプロパナミドの合成

１５００Ｌ反応缶に１−（２−アミノピリジン−３−イル）エタノン（４０．０ｋｇ，２９４ｍｏｌ）を加えた後、トルエン（約１５ｋｇ）で洗い込んだ。続いて、トルエンが合計３４７ｋｇになるようにトルエンを加えた後、塩化ピバロイル（５３．１ｋｇ，１．５Ｍ／Ｍ）を加えた。トリエチルアミン（２３．８ｋｇ，０．８Ｍ／Ｍ）を内温３０℃以下で滴下し、内温２０〜３０℃で１時間以上撹拌した。再びトリエチルアミン（２３．８ｋｇ，０．８Ｍ／Ｍ）を内温３０℃以下で滴下後、内温２０〜３０℃で２時間以上攪拌し、反応が終了していることをＨＰＬＣにて確認した。
ブライン冷却下、水（１００Ｌ）を内温３０℃以下で滴下し、続いて、３５％塩酸（４９．０ｋｇ，１．６Ｍ／Ｍ）を内温３０℃以下で滴下した。反応溶液を５分間攪拌後、１５分間以上静置し、下層（ａ）をポリ容器に取り分けた。水（１００Ｌ）を加え、５分間攪拌した後、１５分以上静置した。下層（ｃ）をポリ容器に取り分け、上層（ｄ）を取り出した後、下層（ａ）および下層（ｃ）を１５００Ｌ反応缶へ戻した。ブライン冷却下、酢酸エチル（２８９ｋｇ）を加え、続いて４８．７％水酸化ナトリウム水溶液（４３．４ｋｇ，１．８Ｍ／Ｍ）を内温３０℃以下で滴下し、５分間攪拌後、下層のｐＨが８〜９であることをＵＮＩＶ試験紙にて確認した。１５分以上静置した後、下層（ｅ）、上層（ｆ）をそれぞれ取り分け、下層（ｅ）を１５００Ｌ反応缶へ戻した。酢酸エチル（１４４ｋｇ）を加え、５分間攪拌後、１５分間以上静置し、下層（ｇ）、上層（ｈ）をそれぞれ取り分けた。下層（ｇ）を１５００Ｌ反応缶へ戻して酢酸エチル（１４４ｋｇ）を加え、５分間攪拌後、１５分以上静置した。下層（ｉ）を取り出した後、上層（ｆ）と上層（ｈ）を１５００Ｌ反応缶へ戻し、酢酸エチル（約１５ｋｇ）で洗い込んだ。
１５００Ｌ反応缶に戻した有機層を減圧濃縮し（温水５０℃）、濃縮液が約２００Ｌになった時点で濃縮を一旦終了した。濃縮液をＳＵＳ容器に取り出し、缶内をトルエン（１７ｋｇ）で洗い出した。取り出した濃縮液の約半量を３００Ｌ反応缶へ入れ，トルエン（９ｋｇ）で洗い込んだ。濃縮液をさらに減圧濃縮し（温水５０℃）、コンデンサーからの留出量が減ったところで残りの濃縮液を３００Ｌ反応缶へ入れ、トルエン（９ｋｇ）で洗い込んだ。減圧濃縮を再開した（温水５０℃〜７０℃）。留出が殆んど無くなった時点で、水冷却を開始し、内温５０℃以下でトルエン（５２ｋｇ）を加えた。減圧濃縮を再開した（温水５０〜８０℃）。外温８０℃、減圧度−０．０９０ＭＰａ以上で留出を認めなくなった時点で濃縮を終了し、内温２０〜３０℃でエタノール（６１ｋｇ）を加えた。
窒素雰囲気下，缶内のエタノール溶液をＳＵＳ容器に取り出し、エタノール（１３ｋｇ）で洗い出した。取り出した溶液を１５００Ｌ反応缶へ加えた後、エタノール（１３ｋｇ）で洗い込み、標記化合物のエタノール溶液（目的物を６９．４ｋｇ含有，収率：１０７．３％）を得た。
ＨＰＬＣ条件 カラム：YMC-Pack Pro C18 (5μm, 150x4.6mmI.D., YMC)，移動相：アセトニトリル／水／酢酸アンモニウム=３００／７００／１〜９００／１００／１（ｖ／ｖ／ｗ）。

［参考例１２］エチル ５−｛２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）アミノ］ピリジン−３−イル｝イソキサゾール−３−カルボキシレートの合成

窒素気流下、１５００Ｌ反応缶中のＮ−（３−アセチルピリジン−２−イル）−２，２−ジメチルプロパナミドのエタノール溶液（前工程の収率を１００％と仮定、２９４ｍｏｌ）にシュウ酸ジエチル（６４．４ｋｇ，１．５Ｍ／Ｍ）を加えた。ブライン循環を開始し、予め冷却しておいた２２％ｔｅｒｔ−ブトキシカリウムエタノール溶液（２１２．５ｋｇ，１．４５Ｍ／Ｍ）を内温１０℃以下で滴下した。内温−５〜１０℃で３０分以上攪拌後、反応が終了していることをＨＰＬＣにて確認した。
次いで、ヒドロキシルアミン塩酸塩（４０．８ｋｇ，２．０Ｍ／Ｍ）を内温１０℃以下で加え、内温１０℃以下で１時間以上攪拌した。次に、予め調製し冷却しておいた含水エタノール（エタノール（１５．３ｋｇ）／水（５．２ｋｇ））を発熱に注意しながら内温２０℃以下で滴下し、水（５８２Ｌ）を内温３０℃以下で滴下した。温水（２８℃）循環に切り替え、内温２０〜３０℃でエチル ４−｛２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）アミノ］ピリジン−３−イル｝−２−（ヒドロキシイミノ）−４−オキソブタノエイト（約１０ｇ）を加えた。目視にて固体の析出を確認した後、内温１５〜２５℃で終夜攪拌した。反応が終了していることをＨＰＬＣにて確認した後、溶液のｐＨが６．５０〜７．００になるまで４８．７％水酸化ナトリウム水溶液を内温１０〜２５℃で滴下した（１８．１ｋｇ使用）。内温１０〜２０℃で３時間以上攪拌後、６回に分けて遠心分離機で固液分離を行った。各遠心毎に、予め調製した含水エタノール（エタノール（２．４ｋｇ）／水（１２ｋｇ））でケーキを洗浄した後、洗液の色が無色透明になるまで水（約２００Ｌ）で洗浄した。さらに３０分以上遠心分離を行った後、ｗｅｔ固体をポリ袋に取り出した。次いで、棚式乾燥機にて、４５〜５０℃の温水循環下、減圧乾燥し、固体（７１．５２ｋｇ）を得た。
次に、１５００Ｌ反応缶に上記で得られた固体（７１．４５ｋｇ）を加え、エタノール（約７ｋｇ）で洗い込んだ。続いて、エタノールを合計２２６ｋｇになるように加え、トリエチルアミン（２１．６ｋｇ，１Ｍ／Ｍ）を加えた。温水（７５℃）循環を開始し、内温７０〜７５℃で１４〜１６時間攪拌し、反応が終了していることをＨＰＬＣにて確認した。次いで、ｎ−ヘプタン（４８８．７ｋｇ）を内温５５〜７５℃で滴下した。その後、内温５０〜５３℃でエチル ５−｛２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）アミノ］ピリジン−３−イル｝イソキサゾール−３−カルボキシレート（約５ｇ）を加え、内温４５〜５０℃で固体が析出していることを目視にて確認した。次いで、温水の温度を徐々に下げ、内温１５℃以下まで冷却した後、さらに、ブラインもしくは冷水冷却により内温０〜１０℃で終夜攪拌した。ろ過機を用いて懸濁液をろ過し、ｎ−ヘプタン／エタノール混合溶液（ｎ−ヘプタン（７０ｋｇ）／エタノール（１０ｋｇ））、次いでｎ−ヘプタン（８０ｋｇ）で洗浄した。窒素にて１５分以上乾燥を行った後、ｗｅｔ固体をＳＵＳ容器に取り出した。ｗｅｔ固体を棚式乾燥機にて、４５〜５０℃の温水循環下、減圧乾燥し、標記化合物（５４．５５ｋｇ，収率：５８．６％）を得た。
¹H-NMR Spectrum (DMSO−d6)δ(ppm):1.19(9H,s), 1.32(3H,t), 4.37(4H,q), 7.12(1H,s), 7.46(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.25(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.58(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz), 10.03(1H,s).
ＨＰＬＣ条件 カラム：YMC-Pack Pro C18 (5μm, 150x4.6mmI.D., YMC)，移動相：アセトニトリル／水／酢酸アンモニウム＝３００／７００／１〜９００／１００／１（ｖ／ｖ／ｗ）。

［参考例１３］[５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−イル]メタノールの合成

窒素気流下，１５００Ｌ反応缶にエチル ５−｛２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）アミノ］ピリジン−３−イル｝イソキサゾール−３−カルボキシレート（５４．５ｋｇ，１７２ｍｏｌ）を加え、メタノール（４．９ｋｇ）で洗い込んだ。続いて、メタノールが合計１０８ｋｇになるようにメタノールを加え、トリエチルアミン（８．７ｋｇ，０．５Ｍ／Ｍ）を連続して加えた。温水（６０℃）循環を開始後、内温５０〜６０℃で２時間以上攪拌し、反応が終了していることをＨＰＬＣ（条件１）にて確認した。
次いで、水冷却を開始し、内温３０℃以下でテトラヒドロフラン（１２１ｋｇ）を加えた。ブライン冷却に切り替え、窒素気流下、水素化ホウ素ナトリウム（７．１５ｋｇ，１．１Ｍ／Ｍ）を内温０〜１０℃で５時間以上かけて分割添加した。水素化ホウ素ナトリウムの添加終了後、ジャケットを冷水（４．０℃）循環に切り替え、内温０〜１０℃で終夜攪拌した。翌日、水素化ホウ素ナトリウム（１．３０ｋｇ，０．２Ｍ／Ｍ）を内温０〜１０℃で１時間以上かけて分割添加した。ジャケットを冷水に切り替え、３時間以上かけて内温を２０〜３０℃に昇温し、さらに、そのまま内温２０〜３０℃で終夜攪拌を行った。翌日、反応の進行具合をＨＰＬＣにて確認したが、反応はほとんど進行していなかったため、再度冷却し、水素化ホウ素ナトリウム（１．３０ｋｇ，０．２Ｍ／Ｍ）を内温０〜１０℃で分割添加した。内温０〜１０℃で１時間以上攪拌した後、ジャケットを冷水循環に切り替え、２時間以上かけて内温１５〜２５℃に昇温した。１時間以上攪拌した後、反応が終了していることをＨＰＬＣ（条件１）にて確認し、終夜攪拌した。
翌日、４８．７％水酸化ナトリウム水溶液（７１ｋｇ，５Ｍ／Ｍ）を内温５０℃以下で滴下後、続いて水（１３３Ｌ）を内温５０℃以下で滴下した。温水（５０〜８０℃）循環を開始し、内温５０〜６０℃で２０時間以上攪拌した後、反応が終了していることをＨＰＬＣ（条件２）にて確認した。
次いで、水冷却下、水（７３Ｌ）を滴下した。冷水（１５℃）冷却に切り替え、内温１５〜３０℃で[５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−イル]メタノールを加え、固体の析出を確認後、水（２１８Ｌ）を滴下し、続いてブライン冷却下、３５％塩酸（１１５ｋｇ）を内温１５〜３０℃で滴下し、水（３Ｌ）で洗い込んだ。内温１５〜３０℃で５分以上攪拌した後、ｐＨメーターにて反応溶液のｐＨが４．００〜５．００であることを確認し、内温１５〜３０℃で１時間以上攪拌した。次いで、溶液のｐＨが７．００〜８．００になるまで４８．７％水酸化ナトリウム水溶液を滴下し（１７．１ ｋｇ使用）、終夜静置した。翌日、撹拌および減圧を開始し、コンデンサーからの留出を確認後、温水（４０℃）循環を開始した。温水（３５〜４５℃）、減圧度６８ｃｍＨｇ以上、内温３０℃以上の条件下、１時間以上濃縮を行った。窒素にて減圧を解除し、水（約２０Ｌ）で缶壁に付着した固体を洗い込んだ。内温１５〜３０℃で３時間以上撹拌し、終夜静置した。翌日、内温１５〜２５℃の範囲内にあることを確認し、スラリー液を２回にわけて遠心分離機で固液分離した。各遠心毎に、水（約２００Ｌ）で洗浄し、液切れ後１時間遠心分離を行った後、ｗｅｔ固体をポリ袋に取り出した。次いで、棚式乾燥機にて、４５〜５０℃の温水循環下、減圧乾燥し、標記化合物（２６．５７ｋｇ，収率：８０．９％）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):4.54(2H,s), 5.57(1H,brs), 6.25(2H,brs), 6.71(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 6.90(1H,s), 7.90(1H,dd,J＝1.6,7.6Hz), 8.09(1H,dd,J＝1.6,4.8Hz).
ＨＰＬＣ条件１ カラム：YMC-Pack Pro C18 (5μm, 150x4.6mmI.D., YMC)，移動相：アセトニトリル／水／酢酸アンモニウム=３００／７００／１〜９００／１００／１（ｖ／ｖ／ｗ）。
ＨＰＬＣ条件２ カラム：YMC-Pack ODS-AQ (5μm, 150x4.6mmI.D., YMC)，移動相：アセトニトリル／水／８５％リン酸／１−オクタンスルホン酸ナトリウム=１６１．３／８３８．７／１／１．１〜９００／１００／１／１．１（ｖ／ｖ／ｖ／ｗ）。

参考例１４〜１５は、参考例１０の別途合成法である。

［参考例１４］[５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−イル]メタノール シュウ酸塩の合成

エチル ５−｛２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）アミノ］ピリジン−３−イル｝イソキサゾール−３−カルボキシレート（３．１７ｇ，１０ｍｍｏｌ）、エタノール（３ｍＬ）、およびテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）の混合物に室温で水素化ホウ素ナトリウム（０．３８ｇ，１０ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下から室温にて終夜攪拌した。反応混合物を５等分したうちの１つに５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（２ｍＬ）を加え、５５℃にて終夜攪拌した。反応混合物に水を加え、メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテルとテトラヒドロフランの混合液で抽出し、有機層にシュウ酸（０．１８ｇ，２ｍｍｏｌ）を加えた。析出した固体を濾過し、標記化合物（０．３９ｇ）を白色固体として得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):4.54(2H,s), 6.31(2H,brs), 6.72(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 6.89(1H,s), 7.90(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.09(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

［参考例１５］[５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−イル]メタノールの合成

［５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−イル］メタノール シュウ酸塩（０．３９ｇ）および水（２ｍＬ）の混合物に室温で５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（０．５ｍＬ）を加え、析出した固体を濾過し、標記化合物（０．１８ｇ）を白色固体として得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)：4.54(2H,s), 5.57(1H,brs), 6.25(2H,brs), 6.71(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 6.90(1H,s), 7.90(1H,dd,J＝1.6,7.6Hz), 8.09(1H,dd,J＝1.6,4.8Hz).

［参考例１６］３−[３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル]ピリジン−２−アミンの合成

［５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−イル］メタノール（０．１９ｇ，１ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（１ｍＬ）の混合物に、塩化チオニル（０．１５ｍＬ，２ｍｍｏｌ）、ベンゾトリアゾール（０．２６ｇ，２．２ｍｍｏｌ）およびテトラヒドロフラン（１ｍＬ）の混合物を氷冷下にて加え、室温にて３０分間攪拌した。反応混合物に水および５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えアルカリ性とした後、酢酸エチルにて抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。溶媒を減圧下留去し、標記化合物（０．２１ｇ）を淡黄色固体として得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):4.84(2H,s), 6.31(2H,brs), 6.72(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 7.04(1H,s), 7.91(1H,dd,J＝1.6,7.6Hz), 8.11(1H,dd,J＝1.2,4.8Hz).

［参考例１７］ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝イミドジカーボネートの合成

３−［３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−アミン（４２０ｍｇ，２．０１ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（２６．８ｍｇ，０．２２０ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（２．１ｍＬ）の混合物に、室温で、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネイト（９２４ｍｇ，４．２４ｍｍｏｌ）を加え撹拌した。２５時間後、反応液へ水を加えトルエンで抽出した後、有機層を５％食塩水で洗浄し、減圧下溶媒を留去し、標記化合物（８８０ｍｇ）を淡黄色油状物として得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm):1.33(18H,s), 4.63(2H,s), 6.66(1H,s), 7.45(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.30(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.62(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

参考例１８〜２１は、参考例９〜１０および参考例１６〜１７の別途合成法である。

［参考例１８］ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（ヒドロキシメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝カルバメイトの合成

エチル ５−｛２−［（２，２−ジメチルプロパノイル）アミノ］ピリジン−３−イル｝イソキサゾール−３−カルボキシレート（１．５９ｇ，５ｍｍｏｌ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネイト（１．３１ｇ，６ｍｍｏｌ）、およびテトラヒドロフラン（５ｍＬ）の混合物に室温で４−ジメチルアミノピリジン（６１ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌後、６０℃で６時間攪拌した。反応混合物にエタノール（２．５ｍＬ）および水素化ホウ素ナトリウム（０．５７ｇ，１５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で３０分間攪拌後、室温終夜攪拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を水と飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過後、溶媒を減圧下留去し、標記化合物（１．６０ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl3)δ(ppm):1.47(9H,s), 4.83(2H,s), 6.63(1H,s), 7.17(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 7.58(1H,s), 7.97(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.51(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

［参考例１９］ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝カルバメートの合成

窒素雰囲気下、ベンゾトリアゾール（３．５５ｇ，２９．５ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（１０ｍＬ）に溶解し、氷水冷下、塩化チオニル（２．０６ｍＬ，２６．８ｍｍｏｌ）を滴下し、塩化チオニル−ベンゾトリアゾール（１：１．１）のＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド溶液を調製した。
窒素雰囲気下、ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（ヒドロキシメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝カルバメート（７８１ｍｇ，２．６８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（２．７ｍＬ）に溶解し、氷水冷下、上記した塩化チオニル−ベンゾトリアゾール（１：１．１）のＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド溶液（６ｍＬ，１４．４ｍｍｏｌ）を滴下し、同温で１時間撹拌した後、室温で撹拌した。１時間２０分後、氷水冷下、塩化チオニル−ベンゾトリアゾール（１：１．１）のＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド溶液（２．２ｍＬ，５．１２ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で１時間撹拌した。氷水冷下、反応液へ１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液とｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを加え、塩基性とした後、抽出した。有機層を０．５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液、５％食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下溶媒を留去し、標記化合物の粗体（９５３ｍｇ）を淡黄色油状物として得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm):1.47(9H,s), 4.65(2H,s), 6.67(1H,s), 7.20(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 7.44(1H,brs), 8.01(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.52(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

［参考例２０］ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝イミドジカーボネートの合成

ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝カルバメートの粗体（１．１３ｇ，３．１７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（７．０ｍＬ）に溶解し、氷水冷下、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネイト（７６１ｍｇ，３．４９ｍｍｏｌ）を加えＴＨＦ（３．０ｍＬ）で洗い込んだ。次いで、４−ジメチルアミノピリジン（３９．１ｍｇ，０．３１７ｍｍｏｌ）を加えた後、室温で撹拌した。５時間後、氷水冷下、反応液へ酢酸エチルと５％食塩水を加え、抽出した。有機層を５％食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、標記化合物（１．１４ｇ）を淡黄色固体として得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：1.33(18H,s), 4.63(2H,s), 6.66(1H,s), 7.45(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.30(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.62(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

［参考例２１］ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝イミドジカーボネートの合成

窒素気流下、５００Ｌ反応缶１に［５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−イル］メタノール（２６．００ｋｇ，１３６．０ｍｏｌ）と１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン（１４３ｋｇ，５．５ｗ／ｗ，洗い込み用に一部取分け）を加え、攪拌を開始した。内温３５〜４５℃で１時間以上攪拌し、［５−（２−アミノピリジン−３−イル）イソキサゾール−３−イル］メタノールの溶解後、冷却した．内温５〜２５℃で塩化チオニル（１９．４０ｋｇ，１６３．１ｍｏｌ，１．２Ｍ／Ｍ）を滴下した。滴下終了後、取分けた１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノンで塩化チオニルを洗い込み、内温５〜２５℃で１２時間以上攪拌した。ＨＰＬＣ分析で反応終了を確認した後、内温０〜２５℃で約３６％水酸化ナトリウム水溶液（４８％水酸化ナトリウム水溶液（１５．９ｋｇ，水酸化ナトリウムとして１９０．８ ｍｏｌ，１．４Ｍ／Ｍ）と水（５．３ｋｇ，０．２ｗ／ｗ）の混液）を滴下し、次いで内温１５〜３５℃で酢酸エチル（１６４ｋｇ，６．３１ｗ／ｗ）および水（７４．２ｋｇ，２．８５ｗ／ｗ）を滴下した。さらに、内温０〜２５℃で約８％水酸化ナトリウム水溶液（４８％水酸化ナトリウム溶液（１３．６ｋｇ，水酸化ナトリウムとして１６３．２ｍｏｌ，１．２０Ｍ／Ｍ）と水（６８．０ｋｇ，２．６ｗ／ｗ）の混液）を滴下し、内温を１５〜３０℃に調整した後、同温度範囲で３０分以上攪拌し、３０分以上静置した。下層と上層を別々に取出し、それぞれ１／２重量ずつを５００Ｌ反応缶１及び５００Ｌ反応缶２に加えた。
５００Ｌ反応缶１の後処理は以下のように実施した。攪拌を開始して水（５２ｋｇ，２ｗ／ｗ）を加えた後、内温０〜２５℃で約８％水酸化ナトリウム水溶液（４８％水酸化ナトリウム水溶液（１１．３ｋｇ，水酸化ナトリウムとして１３５．６ｍｏｌ，１．０Ｍ／Ｍ）と水（５６．５ｋｇ，２．１７ｗ／ｗ）の混液）を少しずつ滴下し、下層のｐＨを７．００〜８．５０（実測値：ｐＨ７．８４）に調整した。この時、約８％水酸化ナトリウム水溶液は３５．５５ｋｇ使用した。続いて、内温を１５〜３０℃に調整し、３０分以上攪拌後、終夜静置した。翌日、ｐＨがｐＨ７．５９であることを再度確認した後、上層と下層をそれぞれ分取し、下層のみを５００Ｌ反応缶１に戻した後、酢酸エチル（８２ｋｇ，３．１５ｗ／ｗ）を加えた。内温１５〜３０℃で５分攪拌後、３０分以上静置し、下層（ｐＨ７．５５）を除去した。缶に残した上層に分取しておいた上層および５％食塩水（食塩（３．３ｋｇ，０．１３ｗ／ｗ）と水（６１８ｋｇ，２．３８ｗ／ｗ）の混液）を加え、内温１５〜３０℃で５分攪拌後、３０分以上静置して下層（ｐＨ８．２３）を除去した。さらに、水（６５ｋｇ，２．５ｗ／ｗ）を加えて、内温１５〜３０℃で５分攪拌後、終夜静置して下層（ｐＨ７．０４）を除去した。
５００Ｌ反応缶２の後処理は、５００Ｌ反応缶１の操作と並行して同じ作業を実施した。
次に、５００Ｌ反応缶２の上層を５００Ｌ反応缶１に移送し、温水４５〜５５℃、減圧度−０．０７０〜−０．０８５ＭＰａで内容液が約２００Ｌとなるまで減圧濃縮した。ここに酢酸エチル（１４１ｋｇ，５．４２ｗ／ｗ）を加えて、再び同条件で減圧濃縮した。この操作をさらに２回繰り返した後、４度目の酢酸エチル（１４１ｋｇ，５．４２ｗ／ｗ）を添加する前後でのＨＰＬＣ分析により内容液の３−[３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル]ピリジン−２−アミン含量を確認し、内溶液中の３−[３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル]ピリジン−２−アミン含有量（２３．３５ｋｇ，１１１．４ｍｏｌ）とその収率（８１．９％）を算出した。続いて、もう一度同じ条件で３−[３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル]ピリジン−２−アミン含量が１０．０〜１３．０％になるまで減圧濃縮を行い、３−[３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル]ピリジン−２−アミンの酢酸エチル溶液を得た。
窒素気流下，５００Ｌ反応缶１内の３−[３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル]ピリジン−２−アミンの酢酸エチル溶液（前工程で得た全量，２３．３５ｋｇ（１１１．４ｍｏｌ）を含有）を攪拌し、内温１５〜２５℃でジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネイト（５３．４７ｋｇ，２４５．０ｍｏｌ，２．２Ｍ／Ｍ）を加え、酢酸エチル（２ｋｇ）で洗い込んだ。ここに、あらかじめ調製した４−ジメチルアミノピリジンの酢酸エチル溶液（４−ジメチルアミノピリジン（０．４０９ｋｇ，３．３５ｍｏｌ，０．０３Ｍ／Ｍ）と酢酸エチル（８ｋｇ）の混液）を加え、酢酸エチル（１ｋｇ）で洗い込んだ後、内温１０〜３０℃で２２時間以上攪拌した。ＨＰＬＣ分析により反応の終了を確認した後、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン（５０ｋｇ，２．１２ｗ／ｗ）を加えた。４５〜５５℃の温水循環下、減圧度−０．０９２ＭＰａ以上かつ液留出が弱まるまで減圧濃縮し、ＧＣ分析により酢酸エチル含量が７．０％であることを確認後、内温３０℃以下まで冷却し、終夜静置した。翌日、濃縮残渣にメタノール（１１１ｋｇ，４．７４ｗ／ｗ）を加えて１０分以上攪拌し、固体が析出していないことを確認後、溶液を２分割した。次に２分割した溶液を５００Ｌ反応缶１及び２にそれぞれ加え、それぞれメタノール（各９ｋｇ，各０．４ｗ／ｗ）で洗い込んだ。この際、２分割する前の溶液（２２５．６５ｋｇ）をＨＰＬＣ分析した結果、目的のジ−ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝イミドジカーボネート含量は１９．３７％、含まれているジ−ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝イミドジカーボネート重量は４３．７１ｋｇ（１０６．６ｍｏｌ，収率：９５．７％）であった。
５００Ｌ反応缶１について、以下のように処理した。攪拌を開始後、内温３５〜４５℃で水（３５ｋｇ，１．５ｗ／ｗ）を３０分以上かけて滴下し、内温３５〜４０℃でジ−ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝イミドジカーボネート（０．０１０ｋｇ）を加えた。内温３５〜４０℃で３０分以上攪拌後、固体の析出を確認し、さらに同温度範囲で１時間以上攪拌した。続いて、内温３５〜４５℃で水（３５ｋｇを３回，各１．５ｗ／ｗ）をそれぞれ３０分以上かけて滴下した後、３時間以上かけて内温５〜１５℃まで冷却し、同温度範囲で１２時間以上攪拌した。遠心分離機で２回に分けて固液分離し、含水メタノール（メタノール（１回につき７ｋｇ，０．３ｗ／ｗ）と水（１回につき２７ｋｇ，１．１４ｗ／ｗ）の混液）で洗浄した。洗浄終了後、３０分以上遠心分離を行い、標記化合物のｗｅｔ固体（２５．８０ｋｇ）を得た。このｗｅｔ固体を混合型真空乾燥機に投入し、外温４５〜５５℃で２４時間以上真空乾燥し、標記化合物（２１．０９ｋｇ）を淡黄色固体として得た。
５００Ｌ反応缶２について、上記と並行して同じ操作を行い、標記化合物（２１．２２ｋｇ）を淡黄色固体として得た。
以上より、標記化合物（４２．３１ｋｇ，収率：９２．７％）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：1.33(18H,s), 4.63(2H,s), 6.66(1H,s), 7.45(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.30(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.62(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).
ＨＰＬＣ条件 カラム：YMC-Pack Pro C18 (5μm, 150x4.6mmI.D., YMC)，移動相：アセトニトリル／水／酢酸アンモニウム=３００／７００／１〜９００／１００／１（ｖ／ｖ／ｗ）。
ＧＣ条件 カラム：DB-624 (30m, 0.53mmI.D., Film 3μm, Agilent)。

［参考例２２］エチル ５−｛２−［（２、２−ジメチルプロポキシカルボニル）アミノ］ピリジン−３−イル｝イソキサゾール−３−カルボキシレート

国際公開第０８／１３６２７９号パンフレットの明細書製造例３−３−１に記載の方法で合成した４−メチレン−２−オキソ−４Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−１−カルボキシリック アシッド ｔｅｒｔ−ブチル エステル（２．７１ｇ、１０．３７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４．２mＬ、３０ｍｍｏｌ）、およびテトラヒドロフラン（３０ｍL）の混合物に０℃でエチル ２−クロロ−２−（ヒドロキシイミノ）アセテート（４．５ｇ、３０ｍｍｏｌ）を２時間かけて加えた後、室温で１４時間攪拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を水と飽和食塩水で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過後、溶媒を減圧下留去した。残渣をｎ−ヘキサンと酢酸エチルが１：１の混合液で懸濁して洗浄し、標記化合物（１．５６ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl3)δ(ppm):1.44(3H,t,J=6.8Hz), 1.46(9H,s), 4.47(4H,q,J＝7.2Hz), 6.95(1H,s), 7.22(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 7.42(1H,bs), 8.05(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.52(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

［参考例２３］エチル ５−｛２−［ビス（２、２−ジメチルプロポキシカルボニル）アミノ］ピリジン−３−イル｝イソキサゾール−３−カルボキシレート

エチル ５−｛２−［（２、２−ジメチルプロポキシカルボニル）アミノ］ピリジン−３−イル｝イソキサゾール−３−カルボキシレート（１．４６ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１．４６ｇ、６．６９ｍｍｏｌ）、およびテトラヒドロフラン（２５ｍＬ）の混合物に室温で４−ジメチルアミノピリジン（３０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１４時間攪拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を水と飽和食塩水で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過後、溶媒を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝3：１ついで１：１）にて精製し、標記化合物（１．９６ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl3)δ(ppm):1.36(18H,s), 1.46(3H,t,J＝6.8Hz), 4.47(4H,q,J＝6.8Hz), 6.93(1H,s), 7.46(1H,dd,J＝4.8,7.6Hz), 8.29(1H,d,J＝7.6Hz), 8.64(1H,d,J＝4.8Hz).

［参考例２４］ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（ヒドロキシメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝イミドジカーボネート

エチル ５−｛２−［ビス（２，２−ジメチルプロポキシカルボニル）アミノ］ピリジン−３−イル｝イソキサゾール−３−カルボキシレート（１．７３ｇ，４ｍｍｏｌ）、エタノール（５ｍＬ）、およびテトラヒドロフラン（５ｍＬ）の混合物に０℃で水素化ホウ素ナトリウム（０．１５ｇ，４ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。さらに水素化ホウ素ナトリウム（０．１５ｇ，４ｍｍｏｌ）を加え、室温で３時間攪拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を水と飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過後、溶媒を減圧下留去した。残渣にｎ−ヘキサン−酢酸エチル（１：１）の混合液を加えて懸濁撹拌した後、濾過し、標記化合物（１．０２ｇ）を得た。
¹H-NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm):1.33(18H,s), 4.81(2H,s), 6.60(1H,s), 7.43(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.27(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.60(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

［参考例２５］ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（ブロモメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝イミドジカーボネート

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（ヒドロキシメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝イミドジカーボネート（０．７８ｇ，２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．９５ｍＬ，１４ｍｍｏｌ）、および１，２−ジメトキシエタン（１０ｍＬ）の混合物に０℃で三臭化リン（０．３７ｍＬ，４ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で２時間攪拌後、５０℃で３０分間攪拌した。反応混合物を０℃に冷却後、水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過後、溶媒を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、標記化合物（０．１４ｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl3)δ(ppm):1.33(18H,s), 4.45(2H,s), 6.63(1H,s), 7.43(1H,dd,J＝4.8,8.0Hz), 8.28(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.61(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz).

［参考例２６］２−［（４−ブロモベンジル）オキシ］ピリジンの合成

窒素雰囲気下、４−ブロモベンジルアルコール（１８ｇ，９４．３ｍｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（８５ｍＬ）溶液に、室温下でカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１１．５ｇ，９９ｍｍｏｌ）を少しずつ加え１０分間撹拌した。この溶液に、水浴冷却下、２−フルオロピリジン（１２．３ｇ，１２３ｍｍｏｌ）を３０分間で滴下した。室温で２時間撹拌した後、酢酸エチルと５％食塩水を加え抽出した。有機層を水、５％食塩水で順次洗浄した後、減圧下溶媒を留去し、標記化合物（２４．３ｇ）を黄色油状物として得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：5.33(2H,s), 6.87−6.70(1H,m), 6.98−7.02(1H,m), 7.38−7.44(2H,m), 7.55−7.60(2H,m), 7.71−7.76(1H,m), 8.15−8.18(1H,m).

参考例２７は、参考例２６の別途合成法である。

［参考例２７］２−［（４−ブロモベンジル）オキシ］ピリジンの合成

窒素雰囲気下、４−ブロモベンジルアルコール（６００ｇ，３．２１ｍｏｌ）と２−フルオロピリジン（３４３ｇ，３．５３ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０６９ｍＬ）溶液に、７℃冷却下、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（３９６ｇ，３．５３ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３２０８ｍＬ）溶液を滴下した（６３ｍｉｎ，９．２〜２０．５℃）。２２℃で３時間撹拌した後、５％炭酸水素ナトリウム水溶液（炭酸水素ナトリウム：１６０ｇと水：３２０８ｍＬから調製）を滴下した（２０ｍｉｎ，２１．０〜２３．９℃）。次いでヘプタン（３２２０ｍＬ）を加え抽出、有機層を水（８００ｍＬ）で洗浄した。減圧濃縮（約３２００ｍＬまで）、エタノール（１６０４ｍＬ）を加え、減圧濃縮した（約３２００ｍＬまで）。次いで、ヘプタン（３２００ｍＬ）を加え減圧濃縮、さらにヘプタン（３２００ｍＬ）を加え減圧濃縮し、標記化合物のヘプタン溶液（目的物を７８９ｇ含有，２６０３ｇ）を褐色油状物として得た（収率：９３．２％）。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：5.33(2H,s), 6.87−6.70(1H,m), 6.98−7.02(1H,m), 7.38−7.44(2H,m), 7.55−7.60(2H,m), 7.71−7.76(1H,m), 8.15−8.18(1H,m).

［参考例２８］｛４−［（ピリジン−２−イロキシ）メチル］フェニル｝ボロン酸の合成

窒素雰囲気下、２−［（４−ブロモベンジル）オキシ］ピリジン（５０ｇ，１９０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）溶液を−７８℃に冷却し、２．６Ｍのｎ−ブチルリチウムヘキサン溶液（８８ｍＬ，２２８ｍｍｏｌ）を滴下した。４５分間撹拌した後、同温でトリメトキシボラン（２９．６ｇ，２８５ｍｍｏｌ）を滴下した。３０分後、飽和塩化アンモニウム水溶液と水を加えてクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和塩化アンモニウム水溶液と飽和食塩水の混合液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒を留去した。残渣へアセトニトリル（２００ｍＬ）を加え、７０℃で３０分間懸濁撹拌した後、冷却し、４℃で終夜撹拌した。析出している固体を濾過し、標記化合物（１１．２ｇ）を白色固体として得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：4.62(2H,s), 5.42(2H,s), 6.83(1H,d,J＝8.4Hz), 6.87−6.92(1H,m), 7.50(2H,d,J＝8.0Hz), 7.57−7.62(1H,m), 7.75(2H,d,J＝8.0Hz), 8.16−8.19(1H,m).

［参考例２９］２−｛［４−（５，５−ジメチル−１，３，２−ジオキサボリナン−２−イル）ベンジル］オキシ｝ピリジンの合成

２−［（４−ブロモベンジル）オキシ］ピリジン（７８９ｇ，２．９９ｍｏｌ）のヘプタン溶液（２６０３ｇ）にヘプタン（９３９ｍＬ）、テトラヒドロフラン（１１９９ｍＬ）を加え、窒素雰囲気下、撹拌しながらドライアイス／エタノールバスでゆっくりと冷却した。４５分後、冷却を中断、内温：−１２℃で２−［（４−ブロモベンジル）オキシ］ピリジン（０．９ｇ）を加えた。冷却を再開、−２０℃／ｈで冷却した。約３時間後、１．６６Ｍ ｎ−ブチルリチウムヘキサン溶液（１９８０ｍＬ，３．２９ｍｏｌ）を滴下した（８０ｍｉｎ，−６７．０〜６１．４℃）。０．５時間撹拌した後、同温でトリイソプロポキシボラン（６７４ｇ，３．５６ｍｏｌ）を滴下した（１３４ｍｉｎ，−６８．２〜６０．３℃）。同温で０．５時間撹拌後、氷水バス冷却に換え、終夜撹拌した（外温：０℃）。翌日、水（５６００ｍＬ）を滴下、分液装置に移して水層へ抽出した（ｐＨ：１１．２）。酢酸エチル（４８００ｍＬ）を加え、撹拌しながら濃塩酸（約２８０ｍＬ）を滴下し（内温２０℃以下）、ｐＨ：７．１に調整した。有機層を分液、５％食塩水（約９００ｇ）で洗浄後、減圧下濃縮した。残渣にイソプロピルアルコール（３３００ｍＬ）を加え減圧濃縮、さらにイソプロピルアルコール（３３００ｍＬ）を加え減圧濃縮し、｛４−［（ピリジン−２−イロキシ）メチル］フェニル｝ボロン酸（６４６ｇ）のイソプロピルアルコール溶液（２６７１ｇ）を得た（収率：９４．４％）。得られた溶液を６０℃に加熱し、２，２−ジメチル−１，３−プロパンジオール（３５４ｇ，３．４１ｍｏｌ）の入った容器へ吸引濾過して不溶物を除去ながら加え、次いでイソプロピルアルコール（６８５ｍＬ）で洗い込んだ。溶解確認後、バス温度：２０℃で撹拌、内温：２８．８℃で結晶析出を確認した。１．５時間後、バス温度：−２０℃とし、終夜撹拌した。析出した結晶を濾過、０℃に冷却した少量のイソプロピルアルコールで結晶を洗浄した。減圧乾燥し、標記化合物（７７９ｇ）を白色結晶として得た（収率：９２．２％）。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)：0.94(6H,s), 3.74(4H,s), 5.35(2H,s), 6.87(1H,d,J＝8.4Hz), 6.96−7.00(1H,m), 7.39(2H,d,J＝8.0Hz), 7.67−7.74(3H,m), 8.14−8.17(1H,m).

［参考例３０］ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ［３−（３−｛４［（ピリジン−２−イロキシ）メチル］ベンジル｝イソキサゾール−５−イル）ピリジン−２−イル］イミドジカーボネートの合成

窒素雰囲気下、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝イミドジカーボネート（１６４ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）、｛４−［（ピリジン−２−イロキシ）メチル］フェニル｝ボロン酸（１３８ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（３９１ｍｇ，１．２０ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（３．９ｍｇ，５ｍｏｌ％）、および１，２−ジメトキシエタン（２．０ｍＬ）の混合物に［１，１’−ビス（ジフェニルフォスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）・ジクロロメタンコンプレックス（１６．４ｍｇ，５ｍｏｌ％）を加え、８０℃で１．５時間撹拌した。｛４−［（ピリジン−２−イロキシ）メチル］フェニル｝ボロン酸（４６ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）を追加し、さらに４．５時間撹拌した。冷却後、酢酸エチルと５％食塩水を加え、不溶物を濾過した後、濾液を分液ロートへ移し分層した。有機層を５％食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、標記化合物（１７３ｍｇ）を淡黄色油状物として得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：1.23(9H,s), 4.05(2H,s), 5.34(2H,s), 6.32(1H,s), 6.76−6.79(1H,m), 6.86−6.90(1H,m), 7.28(2H,d, J＝8.0Hz), 7.38−7.43(3H,m), 7.55−7.60(1H,m), 8.15−8.18(1H,m), 8.27(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz), 8.57(1H,dd,J＝2.0,7.6Hz).

［参考例３１］３−（３−（４−ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ［３−（３−｛４［（ピリジン−２−イロキシ）メチル］ベンジル｝イソキサゾール−５−イル）ピリジン−２−イル］イミドジカーボネート（２８．８ｍｇ，５１．６μｍｏｌ）をアセトニトリル（０．６ｍＬ）に溶解し、氷水冷下、濃塩酸（６０μＬ，６９０μｍｏｌ）を滴下し同温で１時間撹拌した。さらに濃塩酸（１４０μＬ，１．６１ｍｍｏｌ）を滴下し、同温で１時間、２０℃で３．５時間撹拌した。氷水冷下、反応液に０．５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液と酢酸エチルを加え、抽出した。有機層を５％食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下溶媒を留去し、標記化合物（１８．３ｍｇ）を淡黄色油状物として得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：4.07(2H,s), 5.37(2H,s), 5.42(2H,brs), 6.25(1H,s), 6.71(1H,dd,J＝5.2,7.6Hz), 6.80(1H,d,J＝8.4Hz), 6.87−6.91(1H,m), 7.30(2H,d,J＝7.6Hz), 7.44(2H,d,J＝7.6Hz), 7.56−7.61(1H,m), 7.70(1H,dd,J＝2.0,7.6Hz), 8.14(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz), 8.16−8.19(1H,m).

参考例３２〜３３は、参考例３０〜３１の別途合成法である。

［参考例３２］ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ［３−（３−｛４［（ピリジン−２−イロキシ）メチル］ベンジル｝イソキサゾール−５−イル）ピリジン−２−イル］イミドジカーボネートの合成

１バッチ目は以下のように実施した。あらかじめ窒素置換した５００Ｌ反応缶２に、窒素気流下、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ｛３−［３−（クロロメチル）イソキサゾール−５−イル］ピリジン−２−イル｝イミドジカーボネート（２０．８０ｋｇ，５０．７５ｍｏｌ）、２−｛［４−（５，５−ジメチル−１，３，２−ジオキサボリナン−２−イル）ベンジル］オキシ｝ピリジン（１９．６１ｋｇ，６６．００ｍｏｌ，１．３０Ｍ／Ｍ）、（オキシジ−２，１−フェニレン）ビス（ジフェニルホスフィン）（１．３６７ｋｇ，２．５４ｍｏｌ，０．０５Ｍ／Ｍ）、炭酸カリウム（９．１１ｋｇ，６５．９１ｍｏｌ，１．３０Ｍ／Ｍ）を加えた後、缶内を再度窒素置換してＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１４７ｋｇ，７．０８ｗ／ｗ）を加え、攪拌を開始した。次いで、内温１５〜２５℃で、−０．０９０ＭＰａ以上の減圧度で３〜５分維持してから、窒素で減圧を解除した。この操作を合計５回繰り返して溶液の脱気をした。脱気終了後、酢酸パラジウムのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液（酢酸パラジウム（０．５７０ｋｇ，２．５４ｍｏｌ，０．０５Ｍ／Ｍ）と脱気済のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（９．８ｋｇ，０．５ｗ／ｗ，洗い込み用に一部取分け）の混液）を加え、取分けた脱気済のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドで洗い込んだ。続けて、１０分攪拌した後、直ちに内温２０〜３０℃で脱気済の水（１０．４ｋｇ，０．５ｗ／ｗ）を滴下し、減圧度−０．０８７ＭＰａまで減圧して窒素で減圧を解除する操作を３回繰り返した。その後、速やかに約６０℃の温水を循環して内温を５５〜６５℃に調節し、加熱開始から３時間攪拌した。ＨＰＬＣ分析により反応の終了を確認した後、内温０〜２５℃でトルエン（９０ｋｇ，４．３４ｗ／ｗ）を加え、同温度範囲で水（１５６ｋｇ，７．５ｗ／ｗ）を滴下した。続いて、内温１５〜３０℃で３０分攪拌後、３０分以上静置して下層を除去した。缶内の上層に水（１０４ｋｇ，５．０ｗ／ｗ）を加え、内温１５〜３０℃で５分攪拌後、終夜静置し、不溶物を含まない下層のみを除去した。上層と不溶物を含む下層をセライト５０３ＲＶ（２．８ｋｇ，０．１３５ｗ／ｗ）を敷いたろ過器で加圧ろ過し、トルエン（１８．０ｋｇ，０．８６７ｗ／ｗ，送り出し、洗い込み用に一部取分けた）で缶及びろ過器をかけ洗った。得られたろ液及び洗液を５００Ｌ反応缶２に戻し、先に取分けたトルエンで洗い込んだ。その後、内温を１５〜３０℃に調整した後、３０分以上静置して下層を除去した。攪拌速度をほぼ最大に調節し、内温１５〜３０℃でｎ−ヘプタン（１５２ｋｇ，７．３２ｗ／ｗ）を１時間以上かけて滴下した後、同温度範囲で２時間以上攪拌した。続いて、内温１５〜３０℃でチオシアヌル酸（０．９０ｋｇ，５．０８ｍｏｌ，０．１Ｍ／Ｍ）を３０分以上かけて分割投入後、同温度範囲で１時間以上攪拌した。再び内温１５〜３０℃でチオシアヌル酸（０．９０ｋｇ，５．０８ｍｏｌ，０．１Ｍ／Ｍ）を３０分以上かけて分割投入し、同温度範囲で終夜攪拌した。終夜攪拌後、缶の内容液を、あらかじめ準備しておいたろ過器で活性炭ろ過し、ｎ−ヘプタン−トルエン混液（ｎ−ヘプタン（１３０ｋｇ）とトルエン（８３ｋｇ）の混液，一部活性炭（精製白鷺）の湿潤用に取分け）で缶及びろ過器を洗い込んだ。再度、チオシアヌル酸（１．８０ｋｇ，１０．１６ｍｏｌ，０．２Ｍ／Ｍ）を投入した後、同量のセライト５０３ＲＶ、活性炭（精製白鷺）及びｎ−ヘプタン−トルエン混液を用いて活性炭ろ過処理を行なった。そこで，得られたろ液及び洗液を５００Ｌ反応缶１に加え、４０〜７０℃の温水循環下、内容液が目視で約１００Ｌとなるまで減圧濃縮した。なお、濃縮残渣は２バッチ目の活性炭ろ過が終了するまで、窒素雰囲気下、内温３０℃以下で静置した。
２バッチ目として上記と同様の操作を実施した。２バッチ目のろ液及び洗液を５００Ｌ反応缶１に加え、１バッチ目の濃縮残渣と合わせて減圧濃縮を開始した。６０〜７０℃の温水循環下、留出が弱まったところで、トルエン（１４４ｋｇ）を添加した後、再度、６０〜７０℃の温水循環下、留出が弱まるまで減圧濃縮した。ここで、濃縮残渣を分析し、濃縮残渣中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル ［３−（３−｛４［（ピリジン−２−イロキシ）メチル］ベンジル｝イソキサゾール−５−イル）ピリジン−２−イル］イミドジカーボネート含量及びトルエン含量からトルエン／目的物の比率（０．１６７ｗ／ｗ）を算出した。トルエン（２９．６６ｋｇ，トルエン／目的物の比率０．７００ｗ／ｗ相当）を添加し、内温１５〜３０℃で３０分以上攪拌して、標記化合物のトルエン溶液（目的物を４２．３７ｋｇ含有，収率：７４．７％）を得た。
ＨＰＬＣ条件 カラム：CAPCELL PAK C18 MGII (5μm, 150x4.6mmI.D., SHISEIDO)，移動相：アセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸=１８０／８２０／１〜９００／１００／１（ｖ／ｖ／ｖ）。

［参考例３３］３−（３−（４−ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ［３−（３−｛４［（ピリジン−２−イロキシ）メチル］ベンジル｝イソキサゾール−５−イル）ピリジン−２−イル］イミドジカーボネートのトルエン溶液（４２．３７ｋｇ（７５．８５ ｍｏｌ）含有）に内温−５〜２０℃でギ酸（１８１ｋｇ，４．２７ｗ／ｗ）を滴下し、内温を２２〜３２℃で１９〜２０時間攪拌した。ＨＰＬＣ分析で反応終了を確認した後、内温−５〜１０℃まで冷却し、内容液を２分割して５００Ｌ反応缶１及び２にそれぞれ加えた。
５００Ｌ反応缶１について、以下のように後処理を実施した。攪拌下、内温−５〜２０℃で水（７４ｋｇ，１．７５ｗ／ｗ）を滴下し、さらに内温０〜２５℃でｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（３１．４ｋｇ，０．７４ｗ／ｗ）とｎ−ヘプタン（２９．０ｋｇ，０．６８４ｗ／ｗ）を加えた。内温１５〜２５℃で５分攪拌し、３０分以上静置して下層を分取した。下層を缶に戻し、再び内温０〜２５℃でｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（３１．４ｋｇ，０．７４ｗ／ｗ）とｎ−ヘプタン（２９．０ｋｇ，０．６８４ｗ／ｗ）を加え、内温１５〜２５℃で５分攪拌後、３０分以上静置して、もう一度下層を分取した。下層を缶に戻し、まず、内温０〜２５℃で４８％水酸化ナトリウム水溶液（１１６ｋｇ，水酸化ナトリウムとして１３９２．０ｍｏｌ，１８．３５Ｍ／Ｍ）を滴下した。次に、同温度範囲で酢酸エチル（９６ｋｇ，２．２６ｗ／ｗ）を加え、４８％水酸化ナトリウム水溶液（２０．５ｋｇ，水酸化ナトリウムとして２４６．０ｍｏｌ，３．２４Ｍ／Ｍ）を滴下した。さらに、ここに同温度範囲で約８％水酸化ナトリウム水溶液（４８％水酸化ナトリウム水溶液（１２．７ｋｇ，水酸化ナトリウムとして１５２．４ｍｏｌ，２．００Ｍ／Ｍ）と水（６４ｋｇ，１．５ｗ／ｗ）の混液）を下層のｐＨがｐＨ８．００〜９．００，実測値：ｐＨ８．５８）となるまで滴下した（０．７５ｋｇ使用）。その後、内温２０〜３０℃で１時間以上攪拌してから終夜静置後、下層のｐＨを再確認（実測値ｐＨ８．２９）し、下層を除去した。缶に残った上層に約５％炭酸水素ナトリウム水溶液（炭酸水素ナトリウム（５．３ｋｇ，６３．０９ｍｏｌ）と水（１０１ｋｇ，２．３７５ｗ／ｗ）の混液）を加え、内温２０〜３０℃で１時間以上攪拌後、３０分以上静置した。下層（ｐＨ８．６０）を除去した後、上層に水（１０６ｋｇ，２．５ｗ／ｗ）を加え、内温２０〜３０℃で１時間以上攪拌後、３０分以上静置して、再び下層（ｐＨ７．１７）を除去した。
５００Ｌ反応缶２について、５００Ｌ反応缶１と並行して同様の後処理を実施した。
５００Ｌ反応缶１の内容液を５００Ｌ反応缶２に移送し、５５〜６５℃の温水循環下、内容液が約１００Ｌとなるまで減圧濃縮した。次に、濃縮残渣にエタノール（４２ｋｇ，１．０ｗ／ｗ）と酢酸エチル（９６ｋｇ，２．２６ｗ／ｗ）を加え５分攪拌した後、５５〜６５℃の温水循環下、減圧度−０．０９２ＭＰａ以上でほぼ留出を認めなくなるまで減圧濃縮した。ここで、結晶の析出を認めたため、結晶が完全に溶解するまで少しずつ酢酸エチルを加えた（１３．８５ｋｇ使用）。さらにエタノール（１８．３ｋｇ）及び酢酸エチル（６．７ｋｇ）を加えた後、内温を５０〜５５℃に調整し、結晶が溶解していることを目視にて確認後、内温４５〜５５℃でｎ−ヘプタン（３３．５ｋｇ，０．７９ｗ／ｗ）を３０分以上かけて滴下した。続いて、内温４５〜５０℃で、国際公開第０８／１３６２７９号パンフレットの明細書実施例18に記載の方法で合成できる３−（３−（４−ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン（０．０１１ｋｇ）を加え、結晶の析出を確認後、同温度範囲で１時間以上攪拌した。内温４５〜５５℃でｎ−ヘプタン（６６．９ｋｇ，１．５８ｗ／ｗ）を１時間以上かけて滴下した後、４時間以上かけて内温０〜１０℃まで冷却し、同温度範囲で５時間以上攪拌した。内容液をサンプリングし、目的物の結晶化率が９４％であることを確認した後、懸濁液を加圧ろ過し、結晶をエタノール−酢酸エチル−ｎ−ヘプタン混液（エタノール（３．６０ｋｇ，０．０８５ｗ／ｗ）と酢酸エチル（４．１５ｋｇ，０．０９８ｗ／ｗ）とｎ−ヘプタン（１８．８１ｋｇ，０．４４４ｗ／ｗ）の混液）、エタノール−ｎ−ヘプタン混液（エタノール（７．２５ｋｇ，０．１７１ｗ／ｗ）とｎ−ヘプタン（１８．８１ｋｇ，０．４４４ｗ／ｗ）の混液）の順にかけ洗いを行い、標記化合物のｗｅｔ粗結晶（３６．５２ｋｇ）を微黄色結晶として得た。
あらかじめ窒素置換した５００Ｌ溶解缶に、得られた３−（３−（４−ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミンのｗｅｔ粗結晶（３６．５２ｋｇ）およびエタノール（５７．９ｋｇ，２．３７ｗ／ｗ）を順次加え、内温７０〜７５℃まで加熱し、結晶を溶解させた。この溶解液を保温したままＳＵＳフィルターを通じて５００Ｌ晶析缶へ移送し、外温約６５℃で温めておいたエタノール（１９．３ｋｇ，０．８ｗ／ｗ）で５００Ｌ溶解缶及びＳＵＳフィルターを洗い込んだ。次に、ろ液を内温５５〜６０℃に調整して、缶内の溶液が均一であることを確認した。その後、内温をゆっくりと４８〜５１℃まで冷却したところ、結晶が析出した。再度、内温５５〜６０℃まで加熱して結晶を溶解した後、速やかに内温４８〜５１℃まで冷却し、直ちに、国際公開第０８／１３６２７９号パンフレットの明細書実施例18に記載の方法で合成できる３−（３−（４−ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン（０．０１１ｋｇ）を加えた。続いて、内温４５〜５０℃で結晶の析出を目視にて確認後、内温４３〜４７℃で１時間〜１時間３０分攪拌し、４時間以上かけて内温０〜１０℃まで冷却した。ここで、析出した結晶をサンプリングし、その結晶形が標準品と同一であることを確認した後、同温度範囲で終夜攪拌した。翌日、結晶形が標準品と同一であることを確認した後、結晶を遠心分離機で２回に分けて固液分離し、それぞれエタノール１９．３ｋｇの約１／２量でかけ洗い、目的物のｗｅｔ結晶（２４．２３ｋｇ）を得た。このｗｅｔ結晶を混合型真空乾燥機に投入し、外温２０〜３０℃で６時間以上、外温３５〜４５℃で１２時間以上減圧乾燥し、標記化合物（２３．５２ｋｇ，６５．６３ｍｏｌ，収率：８６．８％）を淡黄色結晶として得た。
¹H−NMR Spectrum (CDCl₃)δ(ppm)：4.07(2H,s), 5.37(2H,s), 5.42(2H,brs), 6.25(1H,s), 6.71(1H,dd,J＝5.2,7.6Hz), 6.80(1H,d,J＝8.4Hz), 6.87−6.91(1H,m), 7.30(2H,d,J＝7.6Hz), 7.44(2H,d,J＝7.6Hz), 7.56−7.61(1H,m), 7.70(1H,dd,J＝2.0,7.6Hz), 8.14(1H,dd,J＝2.0,4.8Hz), 8.16−8.19(1H,m).
ＨＰＬＣ条件 カラム：CAPCELL PAK C18 MGII (5μm, 150x4.6mmI.D., SHISEIDO)，移動相：アセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸=１８０／８２０／１〜９００／１００／１（ｖ／ｖ／ｖ）。

［実施例１］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム
2-Amino-1-((phosphonooxy)methyl)-3-(3-((4-((2-pyridinyloxy)methyl)phenyl)methyl)-5-isoxazolyl)-pyridinium

ホスホリック アシッド ジ−tert−ブチル エステル クロロメチル エステル（１．５ｇ、５．６ｍｍｏｌ）とヨウ化ナトリウム（４２０ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ）とテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）の混合物に、参考例１に記載の３−（３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン（１．０ｇ、２．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜攪拌した。反応混合物を０℃に冷却し、同温でトリフルオロ酢酸（１７ｍＬ）を滴下した。反応混合物を室温とし３０分間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮し残渣をゲルろ過（三菱化成、ＣＨＰ２０Ｐ、水ついでメタノールで溶出）した。溶出液を減圧濃縮した後、残渣をＯＤＳカラム（水：アセトニトリル：トリフルオロ酢酸＝１０００：１０：１ついで１０００：２００：１．２ついで１０００：２５０：１．２５ついで１５００：５００：２）で精製した。溶出液を減圧濃縮し、残渣に少量のメタノールとエーテルを加え、析出した固体をろ取した。６０℃で２．５時間温風乾燥し標記化合物（３８０ｍｇ、２９％）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CD₃OD:D₂O=1:1)δ(ppm):4.08(2H,s), 5.33(2H,s), 5.75(2H,d,J=10Hz), 6.85(1H,d,J=8.4Hz), 6.96−7.40(3H,m), 7.35(2H,d,J=8.0Hz), 7.41(2H,d,J=8.0Hz), 7.69−7.74(1H,m), 8.15−8.18(1H,m), 8.26(1H,dd,J=1.2,7.2Hz), 8.35(1H,dd,J=1.2,6.8Hz).

［実施例２］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 無水物（１型）
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム（３０ｍｇ）を８０℃のジメチルスルホキシドに懸濁し、ついで撹拌しながら水と酢酸を加え透明な溶液とした。ついで溶液を室温に戻し、析出した結晶を濾取し標記化合物１５ｍｇを得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)： 4.07(2H,s), 5.33(2H,s), 5.72(2H,d,J＝9.2Hz), 6.84−6.87(1H,m), 6.97−7.20(2H,m), 6.98(1H,s), 7.35(2H,d,J＝8.4Hz), 7.42(2H,d,J＝8.4Hz), 7.69−7.74(1H,m), 8.15−8.18(1H,m), 8.25(1H,dd,J＝1.6,7.2Hz), 8.33−8.37(1H,m).

［実施例３］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 無水物（２型）
ホスホリック アシッド ジ−tert−ブチル エステル クロロメチル エステル（５４１ｍｇ，２．１ｍｍｏｌ）とテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）の混合物に、４℃で参考例１に記載の３−（３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン(３００ｍｇ，０．８４ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（２５１ｍｇ，１．７ｍｍｏｌ）を加え、４℃で６６時間撹拌した。反応混合物に氷冷下で２Ｎ塩酸水溶液（１０ｍＬ）を加え、室温で３．５時間攪拌した。反応混合物に酢酸エチル（１０ｍＬ）と水（１０ｍＬ）を加え、抽出した。水層を分離し、水層に酢酸エチル（１０ｍＬ）を加え、次いで水層のｐＨが２になるまで１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加え、抽出した。水層を分離し、水層に酢酸エチル（１０ｍＬ）を加え、次いで水層のｐＨが２．５になるまで１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加え、抽出した。水層を分離し、水層に酢酸エチル（１０ｍＬ）を加え、次いで水層のｐＨが３になるまで１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加え、抽出した。水層を分離し、水層のｐＨが４になるまで１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加え、水層を終夜室温で攪拌した。析出した結晶をろ過し、ｐＨ＝４の水（２ｍＬ）と酢酸エチル（２ｍＬ）で順次洗浄し、標記化合物（６８ｍｇ、１７％）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):4.08(2H,s), 5.33(2H,s), 5.73(2H,d,J＝9.2Hz), 6.84−6.87(1H,m), 6.97−7.04(3H,m), 7.35(2H,d,J＝8.1Hz), 7.42(2H,d,J＝8.1Hz), 7.70−7.74(1H,m), 8.16−8.18(1H,m), 8.25(1H,dd,J＝1.5,7.5Hz), 8.34−8.36(1H,m).

［実施例４］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 無水物（３型）
2-Amino-1-((phosphonooxy)methyl)-3-(3-((4-((2-pyridinyloxy)methyl)phenyl)methyl)-5-isoxazolyl)-pyridinium
クロロメチル ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフェイト（６．７３ｇ，２６ｍｍｏｌ）とテトラヒドロフラン（２２ｍＬ）の混合物に、ヨウ化ナトリウム（６．０３ｇ，４０ｍｍｏｌ）と銅粉（１２７ｍｇ，２ｍｍｏｌ）を加え、室温にて撹拌した。５時間後、実施例１に記載の３−（３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン(７．１７ｇ，２０ｍｍｏｌ）、トルエン（２０ｍＬ）と５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（２２ｍＬ）を加え、室温にて撹拌した。２３時間後、クロロメチル ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフェイト（３．６３ｇ，１４ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（３．２５ｇ，２１．５ｍｍｏｌ）、銅粉（６８ｍｇ，１．０８ｍｍｏｌ）とテトラヒドロフラン（１２ｍＬ）から上記と同様に調製した混合物を加え、室温にて撹拌した。２０時間後、濾過して不溶物を除いた後、有機層を分離した。得られた有機層に、氷水浴冷却下、５Ｎ塩酸（２２ｍＬ）を滴下し、室温にて撹拌した。２．５時間後、反応混合物に酢酸エチル（３５ｍＬ）を加え、氷水浴冷却下、５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を滴下し、ｐＨ１０．５〜１１．０に調整した。水層を分離し、酢酸エチル（３５ｍＬ）で洗浄し、同様の操作をさらに２回繰り返した。得られた水層にアセトニトリル（７０ｍＬ）を加え、室温にて１時間撹拌した後、濾過して不溶物を除いた。水層を分離し、アセトニトリル（７０ｍＬ）を加え、氷水浴冷却下にて０．５時間撹拌した後、冷蔵庫で終夜保管した。翌日、濾過して不溶物を除き、得られた水層に５Ｎ塩酸を滴下し、ｐＨ３．５に調整した。少量の２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウムを加え、室温で終夜撹拌した。１８時間後、析出した固体をろ過し、水（８ｍＬ）、水−アセトニトリル（１：１）（８ｍＬ）、アセトニトリル（８ｍＬ）で順次洗浄した後、減圧乾燥し、標記化合物の粗固体（３．３９ｇ）を淡褐色固体として得た。
得られた粗個体（３．３９ｇ）に亜硫酸ナトリウム（３．３９ｇ）と水（６７．７ｍＬ）を加え、室温にて撹拌した。０．５時間後、不溶物が無いことを確認した後、アセトニトリル（１３．５ｍＬ）を加えた。５Ｎ塩酸を滴下すると徐々に結晶が析出し、ｐＨ３．５に調整した後、室温にて終夜撹拌した。１７時間後、析出した結晶をろ過し、水−アセトニトリル（１：１）（１４ｍＬ）、アセトニトリル（２１ｍＬ）で順次洗浄した後、減圧乾燥し、標記化合物（２．９８ｇ）を淡黄色結晶として得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):4.08(2H,s), 5.33(2H,s), 5.73(2H,d,J=9.2Hz), 6.84-6.87(1H,m), 6.97−7.04(3H,m), 7.35(2H,d,J=8.1Hz), 7.42(2H,d,J=8.1Hz), 7.70−7.74(1H,m), 8.16−8.18(1H,m), 8.25(1H,dd,J=1.5,7.5Hz), 8.34-8.36(1H,m).

［実施例５］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 水和物
ホスホリック アシッド ジ−tert−ブチル エステル クロロメチル エステル（４３ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）とアセトン（１ｍＬ）の混合物に、室温で参考例１に記載の３−（３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミン(３０ｍｇ，０．０８４ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（２５ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）を加え、４℃で１７時間撹拌し、次いで、室温で３日間撹拌した。反応混合物に室温でテトラヒドロフラン（１ｍＬ）および２Ｎ塩酸水溶液（１ｍＬ）を加え、室温で１．５時間攪拌した。反応混合物に、氷冷下で、酢酸エチルを加え、次いで、同温で、水層のｐＨが７．５になるまで５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えた。水層を分離し、室温で、水層のｐＨが５になるまで１Ｎ塩酸水溶液を加えた。室温で水層に酢酸エチルを加え、同温で終夜攪拌した。析出した結晶をろ過し、ｐＨ＝４の水（２ｍＬ）とイソプロパノール（２ｍＬ）で順次洗浄し、標記化合物（９．７ｍｇ、２３％）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm):4.07(2H,s), 5.32(2H,s), 5.69(2H,d,J＝9.3Hz), 6.84−6.89(2H,m), 6.97−7.00(2H,m), 7.34(2H,d,J＝8.1Hz), 7.41(2H,d,J＝8.2Hz), 7.69−7.74(1H,m), 8.16−8.19(2H,m), 8.27(1H,d,J＝6.6Hz).

［実施例６］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 酢酸和物
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム（３０ｍｇ）を８０℃のエタノールに懸濁し、ついで撹拌しながら酢酸を加え透明な溶液とした。ついで溶液を室温に戻し、析出した固体を濾取し標記化合物２２ｍｇを得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)： 1.91(3H,s), 4.08(2H,s), 5.33(2H,s), 5.73(2H,d,J＝9.6Hz), 6.84−6.87(1H,m), 6.97−7.30(2H,m), 6.98(1H,s), 7.35(2H,d,J＝8.0Hz), 7.42(2H,d,J＝8.0Hz), 7.69−7.74(1H,m), 8.15−8.18(1H,m), 8.25(1H,dd,J＝1.6,7.6Hz), 8.36(1H,dd,J＝1.6,6.4Hz).

［実施例７］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム 非晶質
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム（５０ｍｇ）を０．０２３％アンモニア水（２５ｍＬ）に溶解後、凍結乾燥し、標記化合物を得た。

［実施例８］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １塩酸塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム（１００ｍｇ）を、水（１ｍＬ）、メタノール（１ｍＬ）に懸濁し、ついで撹拌しながら２N 塩酸０．５ｍＬを加え透明な溶液とした。ついでアセトン１３ｍＬを加え、超音波を当て析出した固体を濾取し白色固体９７ｍｇを得た。得られた固体97mgを水１ｍＬに溶かし、アセトン１９ｍＬを加え超音波を当て析出した白色固体を濾取し標記化合物９２ｍｇを得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)： 4.10(2H,s), 5.33(2H,s), 5.96(2H,d,J＝12.8Hz), 6.84−6.87(1H,m), 6.97−7.01(1H,m), 6.99(1H,s), 7.08(1H,t,J＝7.2Hz), 7.35(2H,d,J＝8.0Hz), 7.42(2H,d,J＝8.0Hz), 7.70−7.75(1H,m), 8.15−8.18(1H,m), 8.31(2H,d,J＝7.2Hz).

［実施例９］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １塩酸塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム（５０ｍｇ）を、水（０．５ｍＬ）、メタノール（０．５ｍＬ）に懸濁し、ついで撹拌しながら２Ｎ 塩酸２１４μＬを加え透明な溶液とした。ついでアセトンを溶液が少し濁るまで加え３０分間撹拌した。析出した固体を濾取し標記結晶（３３ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)： 4.10(2H,s), 5.33(2H,s), 5.98(2H,d,J＝12.8Hz), 6.84−6.87(1H,m), 6.97−7.01(1H,m), 6.99(1H,s), 7.07−7.11(1H,m), 7.35(2H,d,J＝7.6Hz), 7.42(2H,d,J＝7.6Hz), 7.70−7.75(1H,m), 8.15−8.18(1H,m), 8.28−8.33(2H,m).

［実施例１０］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １／２硫酸塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム（５０ｍｇ）を、水（０．５ｍＬ）、メタノール（０．５ｍＬ）、２Ｎ 硫酸（５２．５ｍｇ）に溶かした。アセトン（約０．５ｍＬ）を加え白濁させ室温でしばらく撹拌した。白濁溶液に超音波を当てた後、析出した固体を濾取し標記結晶（３８ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)： 4.10(2H,s), 5.33(2H,s),
5.94(2H,d,J=12.4Hz), 6.84-6.87(1H,m), 6.97-7.01(2H,m),
7.06-7.10(1H,m), 7.35(2H,d,J=8.4Hz) 7.42(2H,d,J=8.4Hz), 7.70-7.75(1H,m), 8.15-8.18(1H,m), 8.28-8.32(2H,m).

［実施例１１］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １硝酸塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジン（５０ｍｇ）に室温にて９％硝酸水溶液を透明な溶液になるまで加えた。濃縮した後残渣に水を加え不溶物を濾去した。濾液を濃縮し、残渣に少量のメタノールとアセトンを加えた。濃縮し、残渣に少量のエタノールを加え超音波を当てた後２分間還流した。室温に戻し析出した固体を濾取し標記結晶（３５ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)： 4.10(2H,s), 5.33(2H,s), 5.98(2H,d,J＝13.6Hz), 6.86(1H,d,J＝8.4Hz), 6.97−7.01(2H,m), 7.09(1H,dd,J＝7.6,7.6Hz), 7.35(2H,d,J＝8.0Hz), 7.42(2H,d,J＝8.0Hz), 7.70−7.75(1H,m), 8.15−8.18(1H,m), 8.26−8.34(2H,m).

［実施例１２］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １臭化水素酸塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム
（５０ｍｇ）を、水（０．５ｍＬ）、メタノール（０．５ｍＬ）、２Ｎ 臭化水素酸（０．３ｍＬ）に溶かした。少量のアセトンを加え溶液を白濁させしばらく放置した。析出した固体を濾取し標記結晶（４４ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)： 4.10(2H,s), 5.33(2H,s), 5.98(2H,d,J＝13.2Hz), 6.84−6.87(1H,m), 6.98−7.01(2H,m), 7.09(1H,dd,J＝7.6,7.6Hz), 7.35(2H,d,J＝8.0Hz), 7.42(2H,d,J＝8.0Hz), 7.70−7.75(1H,m), 8.15−8.18(1H,m), 8.27−8.33(2H,m).

［実施例１３］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム ナトリウム塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム
（５０ｍｇ）をメタノール（３ｍＬ）に懸濁し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（０．１０７ｍＬ）を加えた。その溶液を２時間室温にて撹拌した後、減圧下濃縮した。その残渣に適量のアセトンを加え、黄色結晶を析出させた。析出した黄色結晶をろ取し、減圧下室温で乾燥し、標記化合物（２６ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (D₂O)δ(ppm)： 3.96(2H,s), 5.12(2H,s), 5.62(2H,d,J＝2.3Hz), 6.60(1H,s), 6.70(1H,d,J＝2.1Hz), 6.84−6.88(2H,m), 7.21(2H,d,J＝1.8Hz), 7.29(2H,d,J＝1.8Hz), 7.27−7.59(1H,m), 7.90−7.98(3H,m).

［実施例１４］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １／２カルシウム塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム（３０ｍｇ）を水（０．５ｍＬ）に懸濁させ、室温で１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（０．０６４ｍＬ）を加え、次いで酢酸カルシウム１水和物（５．６ｍｇ）の水（０．３２ｍＬ）溶液を加えた。反応混合物を室温で終夜攪拌した。析出した結晶を遠心機を用いて沈降させ、上澄みと分離した。結晶を水（２ｍＬ）で２回洗浄し、次いでアセトン（２ｍＬ）で１回洗浄し、標記化合物（１２ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (CD₃OD/D₂O=1/1)δ(ppm)： 4.13(2H,s), 5.29(2H,s), 5.79(2H,d,J＝8.8Hz), 6.85(1H,s), 6.88−6.90(1H,m), 7.02−7.06(2H,m), 7.37(2H,d,J＝8.2Hz), 7.44(2H,d,J＝8.4Hz), 7.74−7.78(1H,m), 8.09−8.11(1H,m), 8.17−8.19(1H,m), 8.23(1H,dd,J＝1.6,7.6Hz).

［実施例１５］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム リチウム塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム
（５０ｍｇ）をメタノール（３ｍＬ）に懸濁し、４Ｍ水酸化リチウム水溶液（０．０２７ｍＬ）を加えた。その混合物を２０時間室温にて撹拌した後、減圧下濃縮した。その残渣に適量のアセトンを加え、黄色結晶を析出させた。析出した黄色結晶をろ取し、減圧下室温で乾燥し、標記化合物（３５ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (D₂O)δ(ppm)： 3.96(2H,s), 5.13(2H,s), 5.59(2H,d,J＝2.2Hz), 6.59(1H,s), 6.71(1H,d,J＝2.1Hz), 6.79(1H,t,J＝1.8Hz), 6.85−6.88(1H,m), 7.21(2H,d,J＝2.1Hz), 7.29(2H,d,J＝2.1Hz), 7.56−7.60(1H,m), 7.88−7.94(3H,m).

［実施例１６］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム カリウム塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム（６５ｍｇ）をメタノール（３ｍＬ）に懸濁し、１Ｍ水酸化カリウム（０．１０７ｍＬ）を加えた。その混合物を１６時間室温にて撹拌した後、減圧下濃縮した。その残渣に適量のアセトンを加え、黄色結晶を析出させた。析出した黄色結晶をろ取し、減圧下室温で乾燥し、標記化合物（２３ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (D₂O)δ(ppm)： 3.96(2H,s), 5.12(2H,s), 5.62(2H,d,J＝2.3Hz), 6.60(1H,s), 6.70(1H,d,J＝2.1Hz), 6.85−6.88(2H,m), 7.21(2H,d,J＝2.1Hz), 7.29(2H,d,J＝2.1Hz), 7.55−7.60(1H,m), 7.90−7.92(2H,m), 7.93−7.97(1H,m).

［実施例１７］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム リン酸塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム（３０ｍｇ）をメタノール（０．５０ｍＬ）、水（０．５０ｍＬ）に懸濁させ、室温でリン酸（８５％、０．１１ｍＬ）を加えて溶解させた。反応混合物にアセトン（３．０ｍＬ）を滴下し、無色懸濁液とした。溶媒をデカンテーションにより除去し、標記化合物（２７ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)： 4.16(2H,s), 5.38(2H,s), 5.92(2H,d,J＝12.0Hz), 6.87(1H,s), 7.11(1H,dd,J＝7.0,8.0Hz), 7.15(1H,d,J=8.0Hz), 7.21(1H,ddd,J＝1.5,6.0,7.0Hz), 7.40(2H,d,J＝8.0Hz), 7.48(2H,d,J＝8.0Hz), 8.01(1H,ddd,J＝1.5,7.0,9.0Hz), 8.17−8.20(2H,m), 8.29(1H,dd,J＝1.5,8.0Hz).

［実施例１８］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム（３０ｍｇ）を水（１．０ｍＬ）に懸濁させ、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン（９９％、１５．１ｍｇ）と水（０．１２ｍｌ）を加えて溶解させた。反応混合物を減圧濃縮し、残渣にメタノール（１．０ｍＬ）を加え、溶解した。溶液を減圧濃縮後、アセトン（４．０ｍＬ）を加え、溶媒をデカンテーションにより除去し、標記化合物（６９％、２７ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)： 2.76(3H,s), 3.15(1H,dd,J＝9.5,13.0Hz), 3.20(1H,dd,J＝3.5,13.0Hz), 3.62−3.67(3H,m), 3.71−3.76(2H,m), 3.79−3.82(3H,m), 4.05−4.10(2H,m), 4.12(2H,s), 5.28(2H,s), 5.79(2H,d,J＝9.0Hz), 6.83(1H,s), 6.88(1H,d,J＝8.5Hz), 7.01−7.05(2H,m), 7.36(2H,d,J＝8.0Hz), 7.43(2H,d,J＝8.0Hz), 7.72−7.78(1H,m), 8.09(1H,dd,J＝1.5,5.0Hz), 8.17(1H,dd,J＝1.5,6.5Hz), 8.20(1H,dd,J＝1.5,7.5Hz).

［実施例１９］２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム １リジン塩
２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウム（５０ｍｇ）、L−リジン（１５．６ｍｇ）をエタノール（２ｍＬ）、水（１ｍＬ）に溶かし、ついで溶媒を減圧濃縮した。残渣にエタノール（１ｍＬ）を加え固体を懸濁し濾取した。得られた固体をメタノールに溶かした後濃縮した。残渣に少量のメタノールを加え６０〜７０℃に加温した。一旦固体が溶けた後、結晶が析出してきたので濾取し標記結晶（２５ｍｇ）を得た。
¹H−NMR Spectrum (DMSO−d₆)δ(ppm)： 1.25−1.42(4H,m), 1.53−1.62(2H,m), 1.72−1.80(2H,m), 2.86(2H,t,J＝8.0Hz), 3.59(1H,t,J＝5.6Hz), 3.95(2H,s), 5.10(2H,s), 5.62(2H,d,J＝9.2Hz), 6.58(1H,s), 6.67(1H,d,J＝8.4Hz), 6.82−6.88(2H,m), 7.19(2H,d,J＝7.6Hz), 7.27(2H,d,J＝7.6Hz), 7.53−7.58(1H,m), 7.86−7.91(2H,m), 7.97(1H,d,J＝7.2Hz).

（粉末Ｘ線回折測定）
実施例で得られた各結晶および各非晶質について、試料約５ｍｇを乳鉢で粉砕後、測定用アルミニウムパンにのせて以下の条件で測定した。
使用装置：Ｘ線ＤＳＣシステム：ＴＴＲ−ＩＩＩ（理学電機株式会社製）
使用Ｘ線：ＣｕＫα線
ゴニオメーター：ＴＴＲ−ＩＩＩ水平ゴニオメーター
カウンター：シンチレーションカウンター
サンプルプレート：アルミニウム
ターゲット：Ｃｕ
管電圧：５０ｋＶ
管電流：３００ｍＡ
スキャンスピード：２．０００°／ｍｉｎ
走査軸：２θ／θ
走査範囲：２θ＝２．０００〜３５．０００°
発散スリット：０．５ｍｍ
発散縦制限スリット：２ｍｍ
散乱スリット：開放
受光スリット：開放
サンプリング幅：０．０２°
積算回数：１

各実施例で得られた各結晶および各非晶質の粉末Ｘ線回折パターンを、それぞれ図１〜図１４に示し、上記各結晶の回折角（２θ）の代表的なピークおよび相対強度を、表１に示した。

式（Ｉ）で表される本発明化合物は、マウスのカンジダ全身感染実験により、顕著に平均生存日数が改善し、さらに、物性、特に水への溶解性および水溶液中での安定性、ならびに安全性の面でも優れており、真菌感染症の予防剤または治療剤として極めて有用である。

１．水への溶解性の比較試験例
親化合物である参考例１に記載の３−（３−（４−（ピリジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル）−イソキサゾール−５−イル）−ピリジン−２−イルアミンと実施例１の化合物を、２５℃において、Britton-Robinson緩衝液（イオン強度０．３）への溶解度を比較した。表２はその結果を示す。

表２に示す結果から明らかなように、実施例１の化合物は、各種ｐＨ領域において、その親化合物よりも水への溶解性が顕著に増大していることが判明した。

[薬理試験例]
２．マウスのカンジダ全身感染実験
(1).接種菌液の調製
C. albicans E81022株を、サブローデキストロース寒天培地（Difco）に35℃、24時間静置培養し、回収した菌体を滅菌生理食塩水（大塚製薬）に懸濁した。血球計算盤にて菌数を数え、2x10⁷cells/mLとなるように滅菌生理食塩水で希釈したものを接種菌液とした。
(2).感染
接種菌液0.2mLをマウス尾静脈へ接種した（4x10⁶cells/mouse）。
(3).薬剤溶液の調整および治療
実施例１の化合物はpH10の50mMグリシン緩衝液（和光純薬工業）にて13mg/mLおよび3.25mg/mLに溶解後、5%グルコース（大塚製薬）にて10倍希釈した。菌接種30分後および9時間後に、薬剤溶液0.2mLを尾静脈内へ投与した。薬剤投与量は2.5および10mg/kg（活性体換算）とし、一群の動物数は5匹で行った。
(4).効果の判定
感染防御効果は、感染14日後まで生死を観察し、平均生存日数を算出することにより判定した。

２.に記載の測定法で、実施例１の化合物について、カンジダ全身感染防御効果を測定
した。その結果、表２に示す通り、実施例１の化合物を投与したマウスは、非投与群と比較して長期に亘り生存し、実施例１の化合物がin vivoにおいて感染防御効果を示すことが明らかとなった。

なお、実施例１の化合物は、in vitroにおいて、親化合物（参考例１）に対して1/100以下の活性しか示さなかった。このことから、実施例１の化合物が生体内でプロドラッグとして作用したことが示された。

３．マウスにおける薬物動態評価
(1).投与液の調製
実施例１の化合物は、pH9の50mMグリシン緩衝液（和光純薬工業）にて0.45mg/mLに溶解し、活性体は5%グルコース（大塚製薬）を含む10mM塩酸溶液（和光純薬工業）にて0.45mg/mLに溶解した。
(2).投与、採血および血漿採取
5週齢の雌性ICR系マウス（日本チャールス・リバー）を使用し、2匹を1群とし、本発明化合物および活性体を3mg/kgの投与量で尾静脈内へ投与した。投与後0.25, 0.5, 1.5, 3, 5, 8時間に尾静脈に穿刺し、ヘパリン処理したピペットで血液を採取した。採取した血液はサンプリングチューブに入れ氷冷下保存後、4℃、10,500xgで5分間遠心分離した。得られた血漿を正確に5μL分取し、分析時まで−20℃で保存した。
(3).血漿中濃度測定法
実施例１の化合物および活性体の血漿中濃度は液体クロマトグラフ質量分析計（LC−MS）を用いて測定し、内部標準法にて定量した。イミプラミン塩酸塩（SIGMA）を、濃度が0.5μmol/Lになるようにアセトニトリルおよびメタノール（1:1）混合溶液に溶解し、内部標準物質溶液（IS溶液）を調製した。血漿を融解後、IS溶液を50μL加えて混合し、4℃、1500xgで10分間遠心分離（除蛋白）した後、上清をLC-MS(Waters)にて分析した。得られたクロマトグラムにおいて、実施例１の化合物およびその親化合物である活性体化合物のピークならびに内部標準物質に対応するピークの面積を、MassLynx(Waters)で解析し、内部標準法にて、血漿中に含まれる化合物の濃度を算出した。

３．に記載の測定法で、実施例１の化合物および活性体の血漿中濃度を測定した。その結果、図１５に示す通り、実施例１の化合物の血漿中濃度は、投与後速やかに低下し、活性体の血漿中濃度は、実施例１の化合物投与直後から速やかに上昇し、活性体投与時と類似した血漿中濃度推移を示した。以上より、実施例１の化合物はマウス体内において速やかに活性体に変換することが示唆された。

４．サルにおける薬物動態評価
(1).投与液の調製
実施例１の化合物はpH9の50mMグリシン緩衝液(和光純薬工業)にて1.5mg/mLに溶解し、その親化合物である活性体は5%グルコース(大塚製薬)を含む10mM塩酸溶液（和光純薬工業）にて1mg/mLに溶解した。
(2).投与、採血および血漿採取
5年齢の雄性カニクイザル（GFD）を使用し、2匹を1群とし、実施例１の化合物および活性体を0.4mg/kgの投与量で橈骨皮静脈内へ投与した。採血は投与後0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6時間に橈骨皮静脈よりヘパリン処理したシリンジを用いて行った。血液は採取後サンプリングチューブに入れ氷冷下保存後、4℃、10,500xgで5分間遠心分離した。得られた血漿を正確に50μL分取し、分析時まで−20℃で保存した。
(3).血漿中濃度測定法
実施例１の化合物および活性体の血漿中濃度は液体クロマトグラフ質量分析計（LC−MS）を用いて測定し、内部標準法にて定量した。イミプラミン塩酸塩（SIGMA）を、濃度が0.5μmol/Lになるようにアセトニトリルおよびメタノール（1:1）混合溶液に溶解し、内部標準物質溶液（IS溶液）を調製した。血漿を融解後、IS溶液を200μL加えて混合し、4℃、1500xgで10分間遠心分離（除蛋白）した後、上清をLC−MS(Waters)にて分析した。得られたクロマトグラムにおいて実施例１の化合物および活性体化合物のピークならびに内部標準物質に対応するピークの面積を、MassLynx(Waters)で解析し、内部標準法にて、血漿中に含まれる化合物の濃度を算出した。

４．に記載の測定法で、実施例１の化合物投与後の活性体の血漿中濃度を測定した。その結果、図１６に示す通り、実施例１の化合物投与直後から活性体の血漿中濃度は速やかに上昇し、活性体投与時と類似した血漿中濃度推移を示した。なお、実施例１の化合物の血漿中濃度は検出限界以下であった。以上より、実施例１の化合物はサル体内において速やかに活性体に変換することが示唆された。

本出願は、２００７年１２月２７日に米国特許商標庁へ出願された米国仮出願番号第６１/０１７,０５３号、および２００７年１２月２７日に日本国特許庁へ出願された日本特許出願（特願２００７−３３６９７７）に基づくものであり、その内容は、ここに参照として取り込まれる。

本発明によれば、式（Ｉ）、（ＩＡ）または（ＩＢ）で表される本発明化合物は、１）真菌のＧＰＩ生合成阻害に基づいて細胞壁表層蛋白質の発現を阻害し、細胞壁assemblyを阻害するとともに真菌が細胞へ付着するのを阻害して、病原体が病原性を発揮できないようにすることより、感染症の発症、進展、持続に対して効果を示し、２）物性、特に、水への溶解性および水溶液中での安定性、ならびに体内動態および安全性の面でも優れており、真菌感染症の予防または治療剤として極めて有用である。

Claims (5)

1. 下式
   により表される２−アミノ−１−（（ホスホノオキシ）メチル）−３−（３−（（４−（（２−ピリジニルオキシ）メチル）フェニル）メチル）−５−イソキサゾリル）−ピリジニウムの化合物またはその塩。
2. 請求項１に記載の化合物またはその塩を含有する医薬組成物。
3. 請求項１に記載の化合物またはその塩を含有する医薬。
4. 請求項１に記載の化合物またはその塩を有効成分とする抗真菌剤。
5. 抗真菌剤の製造のための請求項１に記載の化合物またはその塩の使用。