JP7737306B2 - Ｔ細胞に結合する多機能性分子および自己免疫障害を処置するためのその使用 - Google Patents

Ｔ細胞に結合する多機能性分子および自己免疫障害を処置するためのその使用

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Description

関連出願
本出願は、２０１９年２月２１日に出願された米国仮出願第６２／８０８，７１３号および２０２０年１月３日に出願された米国仮出願第６２／９５７，０４５号に対する優先権を主張し、これらのそれぞれのすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットで電子的に提出され、参照によりその全体が本明細書に組み込まれている配列表を含む。２０２０年２月１９日に作製された前記ＡＳＣＩＩコピーは、Ｅ２０７０－７０２４ＷＯ ＳＬ．ｔｘｔと命名され、サイズは１，５１９，５７８バイトである。
Ｔ細胞を介した抗原認識は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）と抗原主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）との相互作用に依存する。ヘテロ二量体のＴＣＲは、大部分のＴ細胞が発現するα鎖とβ鎖の組合せ（αβＴＣＲ）からなり、すなわちγδ鎖（γδＴＣＲ）がＴ細胞の約１～５％にしか存在しない。非常に多様なＴＣＲレパートリーは、効果的な免疫系の基本的な特性である。しかしながら、免疫レパートリーは、癌、自己免疫、炎症、および感染症などの疾患の発症および進行に伴って大きく変化し得る。
自己免疫は、免疫系の異常な調節に起因する場合がある。これは、患者自身の細胞を攻撃する自己反応性ＴＣＲクローンによって生じ得る。自己免疫疾患に対する改善された療法が必要である。
本開示は、特に、（ｉ）Ｔ細胞上のＴＣＲ可変ベータ鎖（ＴＣＲＢＶ）抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）に結合する抗原結合性ドメインと；（ｉｉ）免疫細胞エンゲージャー（例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｔ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される）；（ｉｉｉ）サイトカイン分子；および／または（ｉｖ）間質改変部分のうちの１つ、２つまたはすべてとを含む新規な多特異性または多機能性分子に関する。用語「多特異性」または「多機能性」は、本明細書において互換的に使用される。
理論に拘泥するものではないが、自己免疫疾患ではＴＣＲバイアスが存在する場合がある。このバイアスは、疾患の原因となる、または症状と関連する優性の自己反応性ＴＣＲクローンと関連している場合がある。例えば、自己反応性クローン型を含むＴ細胞を除去または枯渇させることによって、ＴＣＲレパートリーをリバランスさせることは、関連する自己免疫疾患を処置し、および／または自己免疫疾患の症状を低減させることができる。したがって、本明細書に開示される多特異性または多機能性分子は、標的細胞（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型を含むか、またはバイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原を含むＴ細胞）において、免疫細胞（例えば、ＮＫ細胞、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞またはマクロファージから選択される免疫エフェクター細胞）を標的化（例えば、局在化、架橋化および／または活性化）することが期待される。本明細書に記載される多特異性分子を使用して免疫細胞の近接性および／または活性を増加させることは、標的細胞（例えば、ＴＣＲＢＶ、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原を含むＴ細胞）に対する免疫応答を増強し、それによってより有効な療法（例えば、より有効な自己免疫疾患療法）を提供することが期待される。理論に拘泥するものではないが、標的細胞（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型を含むＴ細胞、例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型を含まないＴ細胞を含まないＴ細胞）に対する標的化された局所免疫応答は、本明細書に記載される多特異性分子の全身毒性の効果を低減させると考えられる。非自己反応性Ｔ細胞をより少ない程度で標的とする（例えば、非自己反応性Ｔ細胞を標的としない）自己反応性Ｔ細胞集団に対する標的化免疫応答は、すべてのＴ細胞の全身性アブレーションよりも有害作用が少ないと考えられる。
したがって、本明細書では、特に、前述の部分を含む多特異性分子（例えば、多特異性または多機能性抗体分子）、該分子をコードする核酸、前述の分子を産生する方法、および前述の分子を使用して自己免疫疾患を処置する方法が提供される。また、本明細書では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、該分子をコードする核酸、前述の分子を産生する方法、および抗ＴＣＲβＶ抗体分子を使用して自己免疫疾患を処置する方法が提供される。
さらに、例えば、多特異性分子または抗ＴＣＲβＶ抗体分子を用いて、自己免疫疾患との関連で、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型を枯渇させる（例えば、ｉｎ ｖｉｖｏで枯渇される）方法が提供される。一部の実施形態では、本方法は、ＴＣＲＢＶ使用におけるクローンバイアス、例えば自己反応性サブ集団に関連するものを患者において特定するステップ、およびこの分析に応答して、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原に標的化された多機能性分子を投与して、クローンバイアスを減少させ、例えば、排除し、正常なＴＣＲＢＶ分布を促進する、例えば、確立するために、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原に標的化される多機能性分子を投与するステップを伴う。
したがって、一態様では、本開示は、
（ｉ）Ｔ細胞受容体可変ベータ（ＴＣＲＢＶ）、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する、例えば、選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）（ａ）ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｔ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される免疫細胞エンゲージャー；
（ｂ）サイトカイン分子またはサイトカイン阻害剤分子；および
（ｃ）細胞死受容体（死受容体：death receptor）シグナルエンゲージャー
のうちの１つ、２つ、またはすべてと
を含む、多機能性分子を特徴とする。
一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む。
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される多機能性分子をコードする核酸分子を特徴とする。
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される核酸分子を含むベクター、例えば、発現ベクターを特徴とする。
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される核酸分子またはベクターを含む宿主細胞を特徴とする。
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される多機能性分子を作製する、例えば、産生する方法であって、適切な条件下、例えば、遺伝子発現および／またはホモもしくはヘテロ二量体化に適した条件下で、本明細書に開示される宿主細胞を培養するステップを含む、方法を特徴とする。
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される多機能性分子を含む医薬組成物を特徴とする。
別の態様では、本開示は、ＴＣＲバイアスを処置する方法であって、それを必要とする対象に、本明細書に開示される多機能性分子を投与するステップを含み、多機能性分子がＴＣＲバイアスを処置するのに有効な量で投与される、方法を特徴とする。
別の態様では、本開示は、自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を処置する方法であって、それを必要とする対象に、本明細書に開示される多機能性分子を投与するステップを含み、多機能性分子が自己免疫疾患を処置するのに有効な量で投与される、方法を特徴とする。
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される多機能性分子を使用して、ＴＣＲバイアスまたは自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する）の処置を必要とする対象を特定する方法であって、対象がＴＣＲバイアス（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型）および／または前記バイアスに関連する自己免疫疾患を有するかどうかを決定するステップ（例えば、それを直接的または間接的に決定するステップ、例えば、それに関する情報を得るステップ）を含み、
対象がＴＣＲバイアス（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型）および／または前記バイアスに関連する自己免疫疾患を有すると決定したことに応答して、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する抗原結合性ドメインを含む多機能性分子を使用する処置の候補として対象を特定する、方法を特徴とする。
別の態様では、本開示は、ＴＣＲバイアス（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型）および／または前記バイアスに関連する自己免疫疾患の処置を必要とする対象を評価する方法であって、対象がＴＣＲバイアス（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型）を有するかどうかを決定するステップ（例えば、それを直接的または間接的に決定するステップ、例えば、それに関する情報を得るステップ）を含む、方法を特徴とする。
さらに別の態様では、本明細書には、自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）の処置を必要とする対象における自己免疫疾患を処置する方法であって、前記対象に、有効量、例えば、治療有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を投与するステップを含み、それによって障害を処置する、方法が開示される。
別の態様では、本開示は、自己免疫障害（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を有する対象におけるＴ細胞集団を枯渇させる方法であって、Ｔ細胞集団を、有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）と接触させるステップを含む、方法を提供する。
一部の実施形態では、接触させるステップは、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏで生じる。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に開示される抗体分子ではない。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性よりも低い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２、５、もしくは１０分の１未満の）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβＶ１２に結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性を上回る（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２倍、５倍、もしくは１０倍上回る）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ Ｖ１２に結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、ＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２、５、もしくは１０倍を超える）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１またはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１に結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、ＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約２、５、もしくは１０倍を超える）親和性および／または結合特異性で、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１またはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１に結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、Ｆｃ領域、例えば、エフェクター機能を有するＦｃ領域、例えば、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）および／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を有するＦｃ領域を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、例えば、野生型Ｆｃ領域と比較して、エフェクター機能が増強されたＦｃ領域を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ヒトＩｇＧ１領域またはヒトＩｇＧ４領域を含む。
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子をコードする核酸分子を特徴とする。
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される核酸分子を含むベクター、例えば、発現ベクターを特徴とする。
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される核酸分子またはベクターを含む宿主細胞を特徴とする。
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子を作製する、例えば、産生する方法であって、適切な条件下、例えば、遺伝子発現および／またはホモもしくはヘテロ二量体化に適した条件下で、本明細書に開示される宿主細胞を培養するステップを含む、方法を特徴とする。
別の態様では、本開示は、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子を含む医薬組成物を特徴とする。
前述の多機能性分子、核酸、ベクター、宿主細胞、または方法のいずれかのさらなる特徴は、以下の列挙された実施形態のうちの１つまたは複数を含む。
当業者であれば、本明細書に記載される本発明の特定の実施形態に対する多数の同等物を、日常的な実験のみを使用して認識するかまたは確認することができる。このような同等物は、以下の列挙された実施形態によって包含されることが意図される。
列挙された実施形態
１．（ｉ）Ｔ細胞受容体可変ベータ（ＴＣＲＢＶ）、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する、例えば、選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）（ａ）ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｔ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される免疫細胞エンゲージャー；
（ｂ）サイトカイン分子またはサイトカイン阻害剤分子；および
（ｃ）細胞死受容体シグナルエンゲージャー
のうちの１つ、２つ、またはすべてと
を含む、多機能性分子。
２．ＴＣＲＢＶ抗原が、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応し、例えば、対象、例えば、患者、例えば、自己免疫疾患を有する対象または患者に存在する、実施形態１の多機能性分子。
３．多機能性分子が、
（ｉ）ＴＣＲＢＶ抗原、例えば、本明細書に記載されるように、抗ＴＣＲＢＶ抗体分子によって認識されるエピトープと同一もしくは類似のエピトープに特異的に結合し；
（ｉｉ）本明細書に記載されるように、抗ＴＣＲＢＶ抗体分子と同一もしくは類似の結合親和性もしくは特異性、またはその両方を示し；
（ｉｉｉ）本明細書に記載されるように、抗ＴＣＲＢＶ抗体分子の結合を阻害し、例えば、競合的に阻害し；
（ｉｖ）本明細書に記載されるように、抗ＴＣＲＢＶ抗体分子と同一もしくは重複のエピトープと結合し；または
（ｖ）本明細書に記載されるように、抗ＴＣＲＢＶ抗体分子との結合に競合し、および／または同一のエピトープと結合する、実施形態１および２のいずれかの多機能性分子。
４．抗原結合性ドメインが、表１３もしくは１４から選択される１つまたは複数のＣＤＲ、フレームワーク領域、可変ドメイン、重鎖もしくは軽鎖、または抗原結合性ドメイン、あるいはそれらと実質的に同一の配列を含む、実施形態３の多機能性分子。
５．抗原結合性ドメインがＴＣＲβ Ｖ６（例えば、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）に特異的に結合する、実施形態１から４のいずれかの多機能性分子。
６．抗原結合性ドメインが、抗体Ａ－Ｈ．１もしくは抗体Ａ－Ｈ．２に由来するか、または表１Ａに記載されるか、あるいは表１Ａのヌクレオチド配列、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる、少なくとも１つ（例えば、１つ、２つ、３つ、もしくは４つ）の可変領域またはその抗原結合性断片を含む、実施形態５の多能性細胞分子。
７．抗原結合性ドメインが、表１Ａに示されるかまたは表１Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列（あるいは表１Ａに示されるアミノ酸配列に対して１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つもしくはそれ以上の変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有するか、または表１Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされる配列）を含む重鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（または総合的にＣＤＲのすべて）を含む、実施形態５または６のいずれかの多機能性分子。
８．抗原結合性ドメインが、表１Ａに示されるかまたは表１Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列（あるいは表１Ａに示されるアミノ酸配列に対して１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つもしくはそれ以上の変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有するか、または表１Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされる配列）を含む軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（または総合的にＣＤＲのすべて）を含む、実施形態５から７のいずれかの多機能性分子。
９．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号２、配列番号１０または配列番号１１の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべて、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１または配列番号９の重鎖相補性決定領域１（ＨＣ ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つまたはすべて
を含む、実施形態５から８のいずれかの多機能性分子。
１０．抗原結合性ドメインが、配列番号２のＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３、ならびに配列番号１のＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３を含む、実施形態５から８のいずれかの多機能性分子。
１１．抗原結合性ドメインが、配列番号１０のＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３、ならびに配列番号９のＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３を含む、実施形態５から８のいずれかの多機能性分子。
１２．抗原結合性ドメインが、配列番号１１のＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３、ならびに配列番号９のＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３を含む、実施形態５から８のいずれかの多機能性分子。
１３．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号６のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号８のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列；および／または
（ｉｉ）配列番号３のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む、実施形態５から８のいずれかの多機能性分子。
１４．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号６のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号８のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；および／または
（ｉｉ）配列番号３のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む、実施形態５から８のいずれかの多機能性分子。
１５．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号５１のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５２のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５３のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列；および／または
（ｉｉ）配列番号４５のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４６のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号４７のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む、実施形態５から８のいずれかの多機能性分子。
１６．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号５１のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５２のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５３のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）および／または
（ｉｉ）配列番号４５のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４６のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号４７のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む、実施形態５から８のいずれかの多機能性分子。
１７．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号５４のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５５のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５６のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列；および／または
（ｉｉ）配列番号４８のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４９のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５０のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む、実施形態５から８のいずれかの多機能性分子。
１８．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号５４のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５５のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５６のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）および／または
（ｉｉ）配列番号４８のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４９のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５０のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む、実施形態５から８のいずれかの多機能性分子。
１９．抗原結合性ドメインが、例えば、図１Ｂに示されるように、例えば、配列番号２、１０、または１１の、抗体Ａ－Ｈ．１または抗体Ａ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態５から１８のいずれかの多機能性分子。
２０．抗原結合性ドメインが、例えば、図１Ｂに示されるように、例えば、配列番号２、１０、または１１の、抗体Ａ－Ｈ．１または抗体Ａ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態５から１９のいずれかの多機能性分子。
２１．抗原結合性ドメインが、例えば、図１Ｂに示されるように、例えば、配列番号２、１０、または１１の、抗体Ａ－Ｈ．１または抗体Ａ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態５から２０のいずれかの多機能性分子。
２２．抗原結合性ドメインが、例えば、図１Ｂに示されるように、例えば、配列番号２、１０、または１１の、抗体Ａ－Ｈ．１または抗体Ａ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域４（ＶＬＦＷＲ４）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態５から２１のいずれかの多機能性分子。
２３．抗原結合性ドメインが、配列番号２の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）、軽鎖フレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）、軽鎖フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）、および軽鎖フレームワーク領域４（ＶＬＦＷＲ４）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態５から２２のいずれかの多機能性分子。
２４．抗原結合性ドメインが、配列番号１０の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）、軽鎖フレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）、軽鎖フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）、および軽鎖フレームワーク領域４（ＶＬＦＷＲ４）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態５から２２のいずれかの多機能性分子。
２５．抗原結合性ドメインが、配列番号１１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）、軽鎖フレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）、軽鎖フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）、および軽鎖フレームワーク領域４（ＶＬＦＷＲ４）を含む、実施形態５から２２のいずれかの多機能性分子。
２６．抗原結合性ドメインが、Ｋａｂａｔの番号付けによる１０位での変化、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えばフレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）を含む軽鎖可変ドメインを含み、１０位での変化がフェニルアラニン、例えば、セリンからフェニルアラニンへの置換である、実施形態５から２５のいずれかの多機能性分子。
２７．抗原結合性ドメインが、Ｋａｂａｔの番号付けによる３６および４６から選択される位での１つまたは複数の（例えば、１つまたは２つの）変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えばフレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）を含む軽鎖可変ドメインを含み、３６位での変化がヒスチジン、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換であり、４６位での変化がアラニン、例えば、アルギニンからアラニンへの置換である、実施形態５から２６のいずれかの多機能性分子。
２８．抗原結合性ドメインが、Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位での変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えばフレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含み、８７位での変化がフェニルアラニン、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換である、実施形態５から２７のいずれかの多機能性分子。
２９．抗原結合性ドメインが、例えば、配列番号１０のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）１０位でのフェニルアラニン、例えばＫａｂａｔの番号付けによる１０位での置換、例えばセリンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）；（ｂ）３６位でのヒスチジン、例えばＫａｂａｔの番号付けによる３６位での置換、例えばチロシンからヒスチジンへの置換、および４６位でのアラニン、例えばＫａｂａｔの番号付けによる４６位での置換、例えばアルギニンからアラニンへの置換を含むフレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）；ならびに（ｃ）８７位でのフェニルアラニン、例えばＫａｂａｔの番号付けによる８７位での置換、例えばチロシンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む、実施形態５から２８のいずれかの多機能性分子。
３０．抗原結合性ドメインが、例えば、配列番号１１アミノ酸配列に示されるように、（ａ）３６位でのヒスチジン、例えばＫａｂａｔの番号付けによる３６位での置換、例えばチロシンからヒスチジンへの置換、および４６位でのアラニン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる４６位での置換、例えばアルギニンからアラニンへの置換を含むフレームワーク領域２（ＦＲ２）；ならびに（ｂ）８７位でのフェニルアラニン、例えばＫａｂａｔの番号付けによる８７位での置換、例えばチロシンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む、実施形態５から２８のいずれかの多機能性分子。
３１．抗原結合性ドメインが、例えば、図１Ａに示されるように、例えば、配列番号１または９の、抗体Ａ－Ｈ．１または抗体Ａ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態５から３０のいずれかの多機能性分子。
３２．抗原結合性ドメインが、例えば、図１Ａに示されるように、例えば、配列番号１または９の、抗体Ａ－Ｈ．１または抗体Ａ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域２（ＶＨＦＷＲ２）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態５から３１のいずれかの多機能性分子。
３３．抗原結合性ドメインが、例えば、図１Ａに示されるように、例えば、配列番号１または９の、抗体Ａ－Ｈ．１または抗体Ａ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域３（ＶＨＦＷＲ３）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態５から３２のいずれかの多機能性分子。
３４．抗原結合性ドメインが、例えば、図１Ａに示されるように、例えば、配列番号１または９の、抗体Ａ－Ｈ．１または抗体Ａ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域４（ＶＨＦＷＲ４）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態５から３３のいずれかの多機能性分子。
３５．抗原結合性ドメインが、配列番号１の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）、重鎖フレームワーク領域２（ＶＨＦＷＲ２）、重鎖フレームワーク領域３（ＶＨＦＷＲ３）、および重鎖フレームワーク領域４（ＶＨＦＷＲ４）を含む、実施形態５から３４のいずれかの多機能性分子。
３６．抗原結合性ドメインが、配列番号９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）、重鎖フレームワーク領域２（ＶＨＦＷＲ２）、重鎖フレームワーク領域３（ＶＨＦＷＲ３）、および重鎖フレームワーク領域４（ＶＨＦＷＲ４）を含む、実施形態５から３４のいずれかの多機能性分子。
３７．抗原結合性ドメインが、Ｋａｂａｔの番号付けによる７３および９４から選択される位置で１つまたは複数の（例えば、１つまたは２つの）変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含む、フレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＶＨＦＷＲ３）を含む重鎖可変ドメインを含み、７３位での変化が、スレオニン、例えば、グルタミン酸からスレオニンへの置換、および９４位での変化が、グリシン、例えば、アルギニンからグリシンへの置換である、実施形態５から３６のいずれかの多機能性分子。
３８．抗原結合性ドメインが、例えば、配列番号１０のアミノ酸配列に示されるように、７３位でのスレオニン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる７３位での置換、例えば、グルタミン酸からスレオニンへの置換、および９４位でのグリシン、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる９４位での置換、例えば、アルギニンからグリシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む重鎖可変ドメインを含む、実施形態５から３７のいずれかの多機能性分子。
３９．抗原結合性ドメインが、抗体Ａ－Ｈ．１の重鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号９；および抗体Ａ－Ｈ．１の軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号１０、または図１Ａおよび１Ｂに示されるものを含む、実施形態５から１８のいずれかの多機能性分子。
４０．抗原結合性ドメインが、抗体Ａ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号９；および抗体Ａ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号１１、または図１Ａおよび１Ｂに示されるものを含む、実施形態５から１８のいずれかの多機能性分子。
４１．抗原結合性ドメインが、
配列番号９のアミノ酸配列、配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号９のアミノ酸配列から１、２、５、１０もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および／または
配列番号１０のアミノ酸配列、配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、配列番号１０のアミノ酸配列から１、２、５、１０もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態５から１８のいずれかの多機能性分子。
４２．抗原結合性ドメインが、
配列番号９のアミノ酸配列、配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号９のアミノ酸配列から１、２、５、１０もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および／または
配列番号１１のアミノ酸配列、配列番号１１のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号１１のアミノ酸配列から１、２、５、１０もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態５から１８のいずれかの多機能性分子。
４３．抗原結合性ドメインが、ＴＣＲβ Ｖ１２（例えば、ＴＣＲβ Ｖ１２－３＊０１）に特異的に結合する、実施形態１から４のいずれかの多機能性分子。
４４．抗原結合性ドメインが、表２Ａに記載されるか、または表２Ａのヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる、少なくとも１つ（例えば、１つ、２つ、３つ、もしくは４つ）の可変領域またはその抗原結合性断片を含む、実施形態４３の多能性幹細胞分子。
４５．抗原結合性ドメインが、表２Ａに示されるかまたは表２Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列（あるいは表２Ａに示されるアミノ酸配列に対して１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つもしくはそれ以上の変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有するか、または表２Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされる配列）を含む重鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（または総合的にＣＤＲのすべて）を含む、実施形態４３または４４のいずれかの多機能性分子。
４６．抗原結合性ドメインが、表２Ａに示されるかまたは表２Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列（あるいは表２Ａに示されるアミノ酸配列に対して１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つもしくはそれ以上の変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有するか、または表２Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされる配列）を含む軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（または総合的にＣＤＲのすべて）を含む、実施形態４３から４５のいずれかの多機能性分子。
４７．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号１６、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、もしくは配列番号３０の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣＣＤＲ３）のうちの１つ、２つまたはすべて；ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１５、配列番号２３、配列番号２４、もしくは配列番号２５の重鎖相補性決定領域１（ＨＣ ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つまたはすべて
を含む、実施形態４３から４６のいずれかの多機能性分子。
４８．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号２０のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２１のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号２２のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列；および／または
（ｉｉ）配列番号１７のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１８のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号１９のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む、実施形態４３から４７のいずれかの多機能性分子。
４９．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号２０のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２１のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１７のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１８のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号１９のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む、実施形態４３から４７のいずれかの多機能性分子。
５０．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号６３のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列；および／または
（ｉｉ）配列番号５７のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む、実施形態４３から４７のいずれかの多機能性分子。
５１．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号６３のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）および／または
（ｉｉ）配列番号５７のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む、実施形態４３から４７のいずれかの多機能性分子。
５２．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号６６のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６７のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６８のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列；および／または
（ｉｉ）配列番号６０のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６１のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６２のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む、実施形態４３から４７のいずれかの多機能性分子。
５３．抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号６３のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）および／または
（ｉｉ）配列番号５７のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む、実施形態４３から４７のいずれかの多機能性分子。
５４．抗原結合性ドメインが、例えば、図２Ｂに示されるように、例えば、配列番号１６または２６～３０の、軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態４３から５３のいずれかの多機能性分子。
５５．抗原結合性ドメインが、例えば、図２Ｂに示されるように、例えば、配列番号１６または２６～３０の、軽鎖フレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態４３から５４のいずれかの多機能性分子。
５６．抗原結合性ドメインが、例えば、図２Ｂに示されるように、例えば、配列番号１６または２６～３０の軽鎖フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態４３から５５のいずれかの多機能性分子。
５７．抗原結合性ドメインが、例えば、図２Ｂに示されるように、例えば、配列番号１６または２６～３０の軽鎖フレームワーク領域４（ＶＬＦＷＲ４）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態４３から５６のいずれかの多機能性分子。
５８．抗原結合性ドメインが、配列番号１６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）、軽鎖フレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）、軽鎖フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）、および軽鎖フレームワーク領域４（ＶＬＦＷＲ４）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態４３から５７のいずれかの多機能性分子。
５９．抗原結合性ドメインが、配列番号２６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）、軽鎖フレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）、軽鎖フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）、および軽鎖フレームワーク領域４（ＶＬＦＷＲ４）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態４３から５７のいずれかの多機能性分子。
６０．抗原結合性ドメインが、配列番号２７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）、軽鎖フレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）、軽鎖フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）、および軽鎖フレームワーク領域４（ＶＬＦＷＲ４）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態４３から５７のいずれかの多機能性分子。
６１．抗原結合性ドメインが、配列番号２８の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）、軽鎖フレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）、軽鎖フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）、および軽鎖フレームワーク領域４（ＶＬＦＷＲ４）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態４３から５７のいずれかの多機能性分子。
６２．抗原結合性ドメインが、配列番号２９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）、軽鎖フレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）、軽鎖フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）、および軽鎖フレームワーク領域４（ＶＬＦＷＲ４）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態４３から５７のいずれかの多機能性分子。
６３．抗原結合性ドメインが、配列番号３０の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）、軽鎖フレームワーク領域２（ＶＬＦＷＲ２）、軽鎖フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）、および軽鎖フレームワーク領域４（ＶＬＦＷＲ４）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態４３から５７のいずれかの多機能性分子。
６４．抗原結合性ドメインが、Ｋａｂａｔの番号付けによる１、２、および４から選択される位置で１つまたは複数の（例えば、１つ、２つ、または３つの）変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）を含む軽鎖可変ドメインを含み、１位での変化が、アスパラギン酸、例えば、アラニンからアスパラギンへの置換であり、２位での変化が、アスパラギン、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換であり、４位での変化は、ロイシン、例えばメチオニンからロイシンへの置換である、実施形態４３から５７のいずれかの多機能性分子。
６５．抗原結合性ドメインが、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６、６９、および７１から選択される位置で１つまたは複数の（例えば、１つ、２つ、または３つの）変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＶＬＦＷＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含み、６６位での変化が、グリシン、例えば、リジンからグリシンへの置換、６９位での変化が、アスパラギン、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換、および７１位での変化が、チロシン、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換である、実施形態４３から５７または６４のいずれかの多機能性分子。
６６．抗原結合性ドメインが、例えば、配列番号２６のアミノ酸配列に示されるように、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位での置換、例えばイソロイシンからアパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびにＫａｂａｔの番号付けによる６９位での置換、例えばスレオニンからアパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位での置換、例えばフェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む、実施形態４３から５７、６４、または６５のいずれかの多機能性分子。
６７．抗原結合性ドメインが、例えば、配列番号２７のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる１位での置換、例えばアラニンからアスパラギン酸への置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる２位での置換、例えばイソロイシンからアパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位での置換、例えばスレオニンからアパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位の置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む、実施形態４３から５７、６４または６５のいずれかの多機能性分子。
６８．抗原結合性ドメインが、例えば、配列番号２８のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる２位での置換、例えばセリンからアスパラギンへの置換；およびＫａｂａｔの番号付けによる４位での置換、例えばメチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）；ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位での置換、例えばスレオニンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位での置換、例えばフェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む、実施形態４３から５７、６４、または６５のいずれかの多機能性分子。
６９．抗原結合性ドメインが、例えば、配列番号２９のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる２位での置換、例えばセリンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）；ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位での置換、例えばリジンからグリシンへの置換；Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位での置換、例えばスレオニンからアスパラギンへの置換；およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位の置換、例えばアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む、実施形態４３から５７、６４または６５のいずれかの多機能性分子。
７０．抗原結合性ドメインが、例えば、図２Ａに示されるように、例えば、配列番号１５または２３～２５の、重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態４３から６９のいずれかの多機能性分子。
７１．抗原結合性ドメインが、例えば、図２Ａに示されるように、例えば、配列番号１５または２３～２５の、重鎖フレームワーク領域２（ＶＨＦＷＲ２）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態４３から７０のいずれかの多機能性分子。
７２．抗原結合性ドメインが、例えば、図２Ａに示されるように、例えば、配列番号１５または２３～２５の、重鎖フレームワーク領域３（ＶＨＦＷＲ３）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態４３から７１のいずれかの多機能性分子。
７３．抗原結合性ドメインが、例えば、図２Ａに示されるように、例えば、配列番号１５または２３～２５の、重鎖フレームワーク領域４（ＶＨＦＷＲ４）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態４３から７２のいずれかの多機能性分子。
７４．抗原結合性ドメインが、配列番号２３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）、重鎖フレームワーク領域２（ＶＨＦＷＲ２）、重鎖フレームワーク領域３（ＶＨＦＷＲ３）、および重鎖フレームワーク領域４（ＶＨＦＷＲ４）を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
７５．抗原結合性ドメインが、配列番号２４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）、重鎖フレームワーク領域２（ＶＨＦＷＲ２）、重鎖フレームワーク領域３（ＶＨＦＷＲ３）、および重鎖フレームワーク領域４（ＶＨＦＷＲ４）を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
７６．抗原結合性ドメインが、配列番号２５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）、重鎖フレームワーク領域２（ＶＨＦＷＲ２）、重鎖フレームワーク領域３（ＶＨＦＷＲ３）、および重鎖フレームワーク領域４（ＶＨＦＷＲ４）を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
７７．抗原結合性ドメインが、配列番号２３、２４、または２５の重鎖フレームワーク領域１～４を含む重鎖；および配列番号２６、２７、２８、２９、または３０の軽鎖フレームワーク領域１～４を含む軽鎖を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
７８．抗原結合性ドメインが、
配列番号２３、配列番号２４もしくは配列番号２５のアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列、配列番号２３、配列番号２４もしくは配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２３、配列番号２４もしくは配列番号２５のアミノ酸配列から１、２、５、１０もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および／または
配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９もしくは配列番号３０のアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９もしくは配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９もしくは配列番号３０のアミノ酸配列から１、２、５、１０もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
７９．抗原結合性ドメインが、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２６のアミノ酸配列、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２６のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
８０．抗原結合性ドメインが、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２７のアミノ酸配列、配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２７のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
８１．抗原結合性ドメインが、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２８のアミノ酸配列、配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２８のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
８２．抗原結合性ドメインが、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２９のアミノ酸配列、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２９のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
８３．抗原結合性ドメインが、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号３０のアミノ酸配列、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号３０のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
８４．抗原結合性ドメインが、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２６のアミノ酸配列、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２６のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
８５．抗原結合性ドメインが、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２７のアミノ酸配列、配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２７のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
８６．抗原結合性ドメインが、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２８のアミノ酸配列、配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２８のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
８７．抗原結合性ドメインが、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２９のアミノ酸配列、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２９のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
８８．抗原結合性ドメインが、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号３０のアミノ酸配列、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号３０のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
８９．抗原結合性ドメインが、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２６のアミノ酸配列、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２６のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
９０．抗原結合性ドメインが、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２７のアミノ酸配列、配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２７のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
９１．抗原結合性ドメインが、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２８のアミノ酸配列、配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２８のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
９２．抗原結合性ドメインが、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２９のアミノ酸配列、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２９のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
９３．抗原結合性ドメインが、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号３０のアミノ酸配列、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一のアミノ酸配列、または配列番号３０のアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基で異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む、実施形態４３から７３のいずれかの多機能性分子。
９４．第１の抗原結合性ドメインが、ＴＣＲＢＶ抗原を含むＴ細胞受容体に対してより高い親和性を有し、必要に応じて第１の抗原結合性ドメインとＴＣＲＢＶ抗原を含むＴ細胞受容体との間の結合に対するＫＤが、第１の抗原結合性ドメインとＴＣＲＢＶ抗原を含まないＴ細胞受容体との間の結合に対するＫＤの４０％、３０％、２０％、１０％、１％、０．１％、または０．０１％未満である、実施形態１から９３のいずれか１つの多機能性分子。
９５．例えば、リンパ球（例えば、Ｔ細胞）上の、第１の抗原結合性ドメインのＴＣＲＢＶ抗原への結合が、リンパ球、例えば、Ｔ細胞を活性化しない、先行する実施形態のいずれかの多機能性分子。
９６．例えば、リンパ球（例えば、Ｔ細胞）上の、第１の抗原結合性ドメインのＴＣＲＢＶ抗原への結合が、（例えば、Ｔ細胞増殖、Ｔ細胞活性化マーカー（例えば、ＣＤ６９またはＣＤ２５）の発現、および／またはサイトカイン（例えば、ＴＮＦαおよびＩＦＮγ）の発現によって測定した場合）、リンパ球、例えば、Ｔ細胞をほとんど活性化しない、先行する実施形態のいずれかの多機能性分子。
９７．多機能性分子が、ＴＣＲＢＶ抗原を含んでいないリンパ球よりもＴＣＲＢＶ抗原を含むリンパ球に優先的に結合し、必要に応じて多機能性分子とＴＣＲＢＶ抗原を含むリンパ球との間の結合が、多機能性分子とＴＣＲＢＶ抗原を含まないリンパ球との間の結合よりも１０、２０、３０、４０、または５０倍を超えて大きい、先行する実施形態のいずれかの多機能性分子。
９８．多機能性分子が、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｔ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される免疫細胞エンゲージャーを含む、実施形態１から９７のいずれか１つの多機能性分子。
９９．免疫細胞エンゲージャーが、免疫細胞、例えば、エフェクター細胞に結合し、活性化する、実施形態９８の多機能性分子。
１００．免疫細胞エンゲージャーが、免疫細胞、例えば、エフェクター細胞に結合するが活性化しない、実施形態９８の多機能性分子。
１０１．免疫細胞エンゲージャーが、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞への結合および活性化を媒介するＴ細胞エンゲージャー、またはＴ細胞への結合を媒介するが、活性化を媒介しないＴ細胞エンゲージャーである、実施形態９８から１００のいずれか１つの多機能性分子。
１０２．Ｔ細胞エンゲージャーが、ＴＣＲα、ＴＣＲγ、ＴＣＲζ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ４０、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＴＩＭ１、ＳＬＡＭ、ＣＤ２、ＣＤ３、またはＣＤ２２６に結合し、例えば、Ｔ細胞エンゲージャーが抗ＣＤ３抗体分子である、実施形態１０１の多機能性分子。
１０３．免疫細胞エンゲージャーが，ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞への結合および活性化を媒介するＮＫ細胞エンゲージャー、またはＮＫ細胞への結合を媒介するが、活性化を媒介しないＮＫ細胞エンゲージャーである、実施形態９８から１００のいずれか１つの多機能性分子。
１０４．ＮＫ細胞エンゲージャーが、抗体分子、例えば、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＤＮＡＭ１、ＤＡＰ１０、ＣＤ１６（例えば、ＣＤ１６ａ、ＣＤ１６ｂ、またはその両方）、ＣＲＴＡＭ、ＣＤ２７、ＰＳＧＬ１、ＣＤ９６、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＮＫｐ８０、ＣＤ２４４（ＳＬＡＭＦ４または２Ｂ４としても公知である）、ＳＬＡＭＦ６、ＳＬＡＭＦ７、ＫＩＲ２ＤＳ２、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＫＩＲ３ＤＳ１、ＫＩＲ２ＤＳ３、ＫＩＲ２ＤＳ５、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＣＤ９４、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｅ、またはＣＤ１６０に結合する（例えば、活性化する）、例えば抗体分子またはリガンドから選択され、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、活性化する）抗体分子またはリガンドである、実施形態１０３の多機能性分子。
１０５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである、実施形態１０３の多機能性分子。
１０６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、ＮＫ細胞とエンゲージすることができる、実施形態１０４または１０５のいずれかの多機能性分子。
１０７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、またはＣＤ１６に結合する抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである、実施形態１０３から１０６のいずれか１つの多機能性分子。
１０８．多機能性分子が、
（ｉ）ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、もしくはＣＤ１６のエピトープ、例えば、本明細書に記載されるように、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、もしくは抗ＣＤ１６抗体分子によって認識されるエピトープと同一もしくは類似のエピトープに特異的に結合し；
（ｉｉ）本明細書に記載されるように、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、もしくは抗ＣＤ１６抗体分子と同一もしくは類似の結合親和性もしくは特異性またはその両方を示し；
（ｉｉｉ）本明細書に記載されるように、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、もしくは抗ＣＤ１６抗体分子の結合を阻害し、例えば、競合的に阻害し；
（ｉｖ）本明細書に記載されるように、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、もしくは抗ＣＤ１６抗体分子と同一もしくは重複するエピトープと結合し；または
（ｖ）本明細書に記載されるように、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、もしくは抗ＣＤ１６抗体分子との結合に競合し、および／または同一のエピトープと結合する、先行するいずれかの実施形態の多機能性分子。
１０９．抗ＮＫｐ３０または抗ＮＫｐ４６抗体分子が、表７～１０から選択される１つまたは複数のＣＤＲ、フレームワーク領域、可変ドメイン、重鎖もしくは軽鎖、または抗原結合性ドメイン、あるいはそれらと実質的に同一の配列を含む、実施形態１０３から１０８のいずれかの多機能性分子。
１１０．ＮＫ細胞エンゲージャーが、ＮＫｐ３０に結合する抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである、実施形態１０３から１０９のいずれかの多機能性分子。
１１１．リンパ球、例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原を含むリンパ球の溶解が、ＮＫｐ３０によって媒介される、実施形態１０３から１１０のいずれかの多機能性分子。
１１２．ＴＣＲＢＶ抗原の非存在下でＮＫ細胞とインキュベートした場合、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化しない、実施形態１０３から１１１のいずれかの多機能性分子。
１１３．ＮＫ細胞が、ＮＫｐ３０を発現するＮＫ細胞であり、ＴＣＲＢＶ抗原がまた存在する場合に、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化する、実施形態１０３から１１２のいずれかの多機能性分子。
１１４．ＮＫ細胞が、ＮＫｐ３０を発現するＮＫ細胞ではなく、ＴＣＲＢＶ抗原がまた存在する場合に、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化しない、実施形態１０３から１１３のいずれかの多機能性分子。
１１５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、
（ｉ）配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または、１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または、１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに
（ｉｉ）配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、または４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または、１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０６５のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または、１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１０３から１１３のいずれかの多機能性分子。
１１６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、
（ｉ）配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／もしくは配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに
（ｉｉ）配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および／もしくは配列番号６０６５のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１１５の多機能性分子。
１１７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、
（１）配列番号６００３の重鎖可変領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；および／あるいは
（２）配列番号６０６６の軽鎖可変領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０６８のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１０３から１１６のいずれかの多機能性分子。
１１８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、
（１）配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；および
（２）配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０６８のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１１７の多機能性分子。
１１９．ＮＫ細胞エンゲージャーが、
（ｉ）配列番号６１２１のアミノ酸配列（または配列番号６１２１と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および／または
（ｉｉ）配列番号６１３５のアミノ酸配列（または配列番号６１３５と少なくとも約９３％、９５％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む、実施形態１０３から１１８のいずれか１つの多機能性分子。
１２０．ＮＫ細胞エンゲージャーが，配列番号６１４８または６１４９のアミノ酸配列（または配列番号６１４８もしくは６１４９と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖を含む、実施形態１０３から１１９のいずれかの多機能性分子。
１２１．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１５０のアミノ酸配列（または配列番号６１５０と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む、実施形態１０３から１２０のいずれかの多機能性分子。
１２２．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１４８または６１４９のアミノ酸配列（または配列番号６１４８もしくは６１４９と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖、および配列番号６１５０のアミノ酸配列（または配列番号６１５０と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む、実施形態１０３から１２１のいずれかの多機能性分子。
１２３．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０１４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１５のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０１７のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１６のいずれかの多機能性分子。
１２４．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０１４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１５のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０１６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０１７のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１２３の多機能性分子。
１２５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１２３のアミノ酸配列（または配列番号６１２３と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１２４の多機能性分子。
１２６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０１８の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１９のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２０のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０２１のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１６のいずれかの多機能性分子。
１２７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０１８の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１９のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２０のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０２１のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１２６の多機能性分子。
１２８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１２４のアミノ酸配列（または配列番号６１２４と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１２７の多機能性分子。
１２９．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０２２の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２３のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２４のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０２５のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１６のいずれかの多機能性分子。
１３０．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０２２の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０２３のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２４のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０２５のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１２９の多機能性分子。
１３１．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１２５のアミノ酸配列（または配列番号６１２５と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１３０の多機能性分子。
１３２．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０２６の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２７のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０２９のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１６のいずれかの多機能性分子。
１３３．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０２６の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０２７のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０２９のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１３２の多機能性分子。
１３４．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１２６のアミノ酸配列（または配列番号６１２６と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１３３の多機能性分子。
１３５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０３０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０３４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１６のいずれかの多機能性分子。
１３６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０３０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０３２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０３３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０３４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１３５の多機能性分子。
１３７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１２７のアミノ酸配列（または配列番号６１２７と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１３６の多機能性分子。
１３８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０３５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０３８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１６のいずれかの多機能性分子。
１３９．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０３５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０３６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０３７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０３８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１３８の多機能性分子。
１４０．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１２８のアミノ酸配列（または配列番号６１２８と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１３９の多機能性分子。
１４１．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０７７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１０３から１１６または１２３から１４０のいずれかの多機能性分子。
１４２．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０７７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１４１の多機能性分子。
１４３．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１３７のアミノ酸配列（または配列番号６１３７と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態１４２の多機能性分子。
１４４．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０８１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０８２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０８３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０８４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１０３から１１６または１２３から１４０のいずれかの多機能性分子。
１４５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０８１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０８２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０８３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０８４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１４４の多機能性分子。
１４６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１３８のアミノ酸配列（または配列番号６１３８と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態１４５の多機能性分子。
１４７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０８５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０８６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０８７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０８８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１０３から１１６または１２３から１４０のいずれかの多機能性分子。
１４８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０８５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０８６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０８７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０８８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１４７の多機能性分子。
１４９．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１３９のアミノ酸配列（または配列番号６１３９と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態１４８の多機能性分子。
１５０．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０８９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０９０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０９１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０９２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１０３から１１６または１２３から１４０のいずれかの多機能性分子。
１５１．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０８９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０９２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１５０の多機能性分子。
１５２．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１４０のアミノ酸配列（または配列番号６１４０と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態１５１の多機能性分子。
１５３．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０９３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０９４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０９５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、または配列番号６０９６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれから１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１０３から１１６または１２３から１４０のいずれかの多機能性分子。
１５４．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０９３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０９６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む、実施形態１５３の多機能性分子。
１５５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１４１のアミノ酸配列（または配列番号６１４１と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態１５４の多機能性分子。
１５６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、
（ｉ）配列番号６００７の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに
（ｉｉ）配列番号６０７０の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１０３から１１４のいずれかの多機能性分子。
１５７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、
（ｉ）配列番号６００７の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに
（ｉｉ）配列番号６０７０の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１５６の多機能性分子。
１５８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、
（１）配列番号６０１０の重鎖フレームワーク変域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに／あるいは
（２）配列番号６０７３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、または１５７のいずれかの多機能性分子。
１５９．ＮＫ細胞エンゲージャーが、
（１）配列番号６０１０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および
（３）配列番号６０７３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１５８の多機能性分子。
１６０．ＮＫ細胞エンゲージャーが、
（ｉ）配列番号６１２２のアミノ酸配列（または配列番号６１２２と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および／または
（ｉｉ）配列番号６１３６のアミノ酸配列（または配列番号６１３６と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む、実施形態１０３から１１４または１５６から１５９のいずれか１つの多機能性分子。
１６１．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１５１または６１５２のアミノ酸配列（または配列番号６１５１もしくは６１５２と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖を含む、実施形態１０３から１１４または１５６から１６０のいずれかの多機能性分子。
１６２．ＮＫ細胞エンゲージャーが，配列番号６１５３のアミノ酸配列（または配列番号６１５３と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む、実施形態１０３から１１４または１５６から１６１のいずれかの多機能性分子。
１６３．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１５１または６１５２のアミノ酸配列（または配列番号６１５１もしくは６１５２と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖、および配列番号６１５３のアミノ酸配列（または配列番号６１５３と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む、実施形態１０３から１１４または１５６から１６２のいずれかの多機能性分子。
１６４．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０３９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０４２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、または１５７のいずれかの多機能性分子。
１６５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０３９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０４２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１６４の多機能性分子。
１６６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１２９のアミノ酸配列（または配列番号６１２９と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１６５の多機能性分子。
１６７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０４３の重鎖可変領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０４６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、または１５７のいずれかの多機能性分子。
１６８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０４３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０４６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１６７の多機能性分子。
１６９．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１３０のアミノ酸配列（または配列番号６１３０と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１６８の多機能性分子。
１７０．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０４７の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４８のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４９のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０５０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、または１５７のいずれかの多機能性分子。
１７１．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０４７の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４８のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４９のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０５０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１７０の多機能性分子。
１７２．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１３１のアミノ酸配列（または配列番号６１３１と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１７１の多機能性分子。
１７３．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０５１の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０５２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０５３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０５４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、または１５７のいずれかの多機能性分子。
１７４．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０５１の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０５２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０５３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０５４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１７３の多機能性分子。
１７５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１３２のアミノ酸配列（または配列番号６１３２と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１７４の多機能性分子。
１７６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０５５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０５６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０５７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０５８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、または１５７のいずれかの多機能性分子。
１７７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０５５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０５６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０５７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０５８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１７６の多機能性分子。
１７８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１３３のアミノ酸配列（または配列番号６１３３と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１７７の多機能性分子。
１７９．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０５９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０６０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０６１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０６２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、または１５７のいずれかの多機能性分子。
１８０．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０５９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０６１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０６２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、実施形態１７９の多機能性分子。
１８１．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１３４のアミノ酸配列（または配列番号６１３４と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態１８０の多機能性分子。
１８２．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０９７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１００のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、１５７、または１６４から１８１のいずれかの多機能性分子。
１８３．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６０９７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１００のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１８２の多機能性分子。
１８４．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１４２のアミノ酸配列（または配列番号６１４２と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態１８３の多機能性分子。
１８５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１０１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１０４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、１５７、または１６４から１８１のいずれかの多機能性分子。
１８６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１０１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１０２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１０３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１０４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１８５の多機能性分子。
１８７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１４３のアミノ酸配列（または配列番号６１４３と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態１８６の多機能性分子。
１８８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１０５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１０８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、１５７、または１６４から１８１のいずれかの多機能性分子。
１８９．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１０５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１０６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１０７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１０８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１８８の多機能性分子。
１９０．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１４４のアミノ酸配列（または配列番号６１４４と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態１８９の多機能性分子。
１９１．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１０９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１１２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、１５７、または１６４から１８１のいずれかの多機能性分子。
１９２．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１０９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１１２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１９１の多機能性分子。
１９３．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１４５のアミノ酸配列（または配列番号６１４５と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態１９２の多機能性分子。
１９４．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１１３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１１６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、１５７、または１６４から１８１のいずれかの多機能性分子。
１９５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１１３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１１６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１９４の多機能性分子。
１９６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１４６のアミノ酸配列（または配列番号６１４６と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態１９５の多機能性分子。
１９７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１１７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１２０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１０３から１１４、１５６、１５７、または１６４から１８１のいずれかの多機能性分子。
１９８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１１７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１２０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１９７の多機能性分子。
１９９．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１４７のアミノ酸配列（または配列番号６１４７と少なくとも約９３％、９５％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態１９８の多機能性分子。
２００．ＮＫ細胞エンゲージャーが、ＮＫｐ４６に結合する抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである、実施形態１０３から１０６のいずれかの多機能性分子。
２０１．リンパ腫細胞の溶解がＮＫｐ４６によって媒介される、実施形態２００の多機能性分子。
２０２．ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）の非存在下でＮＫ細胞と共にインキュベートした場合、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化しない、実施形態２００または２０１のいずれかの多機能性分子。
２０３．ＮＫ細胞がＮＫ細胞を発現するＮＫｐ４６であり、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）もまた存在する場合、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化する、実施形態２００から２０２のいずれか１つの多機能性分子。
２０４．ＮＫ細胞がＮＫｐ４６を発現するＮＫ細胞ではなく、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）もまた存在する場合、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化しない、実施形態２００から２０３のいずれか１つの多機能性分子。
２０５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１８２のアミノ酸配列（または配列番号６１８２と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態２００から２０４のいずれか１つの多機能性分子。
２０６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１８３のアミノ酸配列（または配列番号６１８３と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態２００から２０５のいずれか１つの多機能性分子。
２０７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１８１のアミノ酸配列（または配列番号６１８１と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むｓｃＦＶを含む、実施形態２００から２０５の多機能性分子。
２０８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、ＮＫＧ２Ｄに結合する抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである、実施形態１０３から１０６のいずれかの多機能性分子。
２０９．リンパ腫細胞の溶解がＮＫＧ２Ｄによって媒介される、実施形態２０８の多機能性分子。
２１０．ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）の非存在下でＮＫ細胞と共にインキュベートした場合、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化しない、実施形態２０８または２０９のいずれかの多機能性分子。
２１１．ＮＫ細胞がＮＫＧ２Ｄを発現するＮＫ細胞であり、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）もまた存在する場合、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化する、実施形態２０８から２１０のいずれか１つの多機能性分子。
２１２．ＮＫ細胞がＮＫＧ２Ｄを発現するＮＫ細胞ではなく、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）もまた存在する場合、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化しない、実施形態２０８から２１１のいずれか１つの多機能性分子。
２１３．ＮＫ細胞エンゲージャーが配列番号６１７６のアミノ酸配列（または配列番号６１７６と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態２０８から２１２のいずれか１つの多機能性分子。
２１４．ＮＫ細胞エンゲージャーが，配列番号６１７７のアミノ酸配列（または配列番号６１７７と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態２０８から２１３のいずれか１つの多機能性分子。
２１５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１７５のアミノ酸配列（または配列番号６１７５と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むｓｃＦＶを含む、実施形態２０８から２１４のいずれかの多機能性分子。
２１６．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１７９のアミノ酸配列（または配列番号６１７９と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態２０８から２１２のいずれか１つの多機能性分子。
２１７．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１８０のアミノ酸配列（または配列番号６１８０と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態２０８から２１２または２１６のいずれか１つの多機能性分子。
２１８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１７８のアミノ酸配列（または配列番号６１７８と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むｓｃＦＶを含む、実施形態２０８から２１２、２１６または２１７のいずれかの多機能性分子。
２１９．ＮＫ細胞エンゲージャーが、ＣＤ１６に結合する抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである、実施形態１０３から１０６のいずれかの多機能性分子。
２２０．リンパ腫細胞の溶解がＣＤ１６によって媒介される、実施形態２１９の多機能性分子。
２２１．ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）の非存在下でＮＫ細胞と共にインキュベートされた場合、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化しない、実施形態２１９または２２０のいずれかの多機能性分子。
２２２．ＮＫ細胞がＣＤ１６を発現するＮＫ細胞であり、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）もまた存在する場合、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化する、実施形態２１９から２２１のいずれか１つの多機能性分子。
２２３．ＮＫ細胞がＣＤ１６を発現するＮＫ細胞ではなく、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）もまた存在する場合、多機能性分子がＮＫ細胞を活性化しない、実施形態２１９から２２２のいずれか１つの多機能性分子。
２２４．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１８５のアミノ酸配列（または配列番号６１８５と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む、実施形態２１９から２２３のいずれか１つの多機能性分子。
２２５．ＮＫ細胞エンゲージャーが、配列番号６１８６のアミノ酸配列（または配列番号６１８６と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む、実施形態２１９から２２４のいずれか１つの多機能性分子。
２２６．ＮＫ細胞エンゲージャーが，配列番号６１８４のアミノ酸配列（または配列番号６１８４と少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むｓｃＦＶを含む、実施形態２１９から２２５のいずれかの多機能性分子。
２２７．ＮＫ細胞エンゲージャーがリガンドであり、必要に応じてリガンドが免疫グロブリン定常領域、例えば、Ｆｃ領域をさらに含む、実施形態１０３の多機能性分子。
２２８．ＮＫ細胞エンゲージャーが、ＮＫｐ４４またはＮＫｐ４６のリガンド、例えば、ウイルスＨＡである、実施形態２２７の多機能性分子。
２２９．ＮＫ細胞エンゲージャーが、ＤＡＰ１０のリガンド、例えば、ＮＫＧ２Ｄの共受容体である、実施形態２２７の多機能性分子。
２３０．ＮＫ細胞エンゲージャーが、ＣＤ１６のリガンド、例えば、ＣＤ１６ａ／ｂリガンド、例えば、抗体Ｆｃ領域をさらに含むＣＤ１６ａ／ｂリガンドである、実施形態２２７の多機能性分子。
２３１．免疫細胞エンゲージャーが、Ｂ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞のうちの１つまたは複数への結合、またはその活性化、またはその両方を仲介する、実施形態９８から１００のいずれか１つの多機能性分子。
２３２．免疫細胞エンゲージャーが、ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）もしくはＣＤ７０リガンド；ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；ＯＸ４０に対する抗体分子；ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）；Ｔｏｌｌ様受容体のアゴニスト（例えば、ＴＬＲ４、例えば、恒常的活性なＴＬＲ４）（ｃａＴＬＲ４）またはＴＬＲ９アゴニスト）；４１ＢＢ；ＣＤ２アゴニスト；ＣＤ４７；またはＳＴＩＮＧアゴニスト、またはそれらの組合せのうちの１つまたは複数から選択される、Ｂ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞エンゲージャーを含む、実施形態２３１の多機能性分子。
２３３．免疫細胞エンゲージャーが、Ｂ細胞エンゲージャー、例えば、ＣＤ４０Ｌ、ＯＸ４０Ｌ、もしくはＣＤ７０リガンド、またはＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子である、実施形態９８から１００のいずれか１つの多機能性分子。
２３４．免疫細胞エンゲージャーが、マクロファージ細胞エンゲージャー、例えば、ＣＤ２アゴニスト；ＣＤ４０Ｌ；ＯＸ４０Ｌ；ＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）のアゴニスト（例えば、ＴＬＲ４、例えば、恒常的活性なＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４）またはＴＬＲ９アゴニスト）；ＣＤ４７；またはＳＴＩＮＧアゴニストである、実施形態９８から１００のいずれか１つの多機能性分子。
２３５．免疫細胞エンゲージャーが、樹状細胞エンゲージャー、例えば、ＣＤ２アゴニスト、ＯＸ４０抗体、ＯＸ４０Ｌ、４１ＢＢアゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニストまたはそれらの断片（例えば、ＴＬＲ４、例えば、恒常的活性なＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４））、ＣＤ４７アゴニスト、またはＳＴＩＮＧアゴニストである、実施形態９８から１００のいずれか１つの多機能性分子。
２３６．ＳＴＩＮＧアゴニストが、サイクリックジヌクレオチド、例えば、サイクリックジ－ＧＭＰ（ｃｄＧＭＰ）、サイクリックジ－ＡＭＰ（ｃｄＡＭＰ）、またはそれらの組合せを含み、必要に応じて、２’，５’または３’，５’リン酸塩連結を有するものであり、例えば、ＳＴＩＮＧアゴニストが多機能性分子と共有結合的にカップリングされている、実施形態２３４または２３５の多機能性分子。
２３７．多機能性分子がサイトカイン分子を含む、実施形態１から９７のいずれか１つの多機能性分子。
２３８．サイトカイン分子が、インターロイキン－２（ＩＬ－２）、インターロイキン－７（ＩＬ－７）、インターロイキン－１２（ＩＬ－１２）、インターロイキン－１５（ＩＬ－１５）、インターロイキン－１８（ＩＬ－１８）、インターロイキン－２１（ＩＬ－２１）、もしくはインターフェロンγ、またはそれらの断片もしくはバリアント、あるいは前述のサイトカインのいずれかの組合せから選択される、実施形態２３７の多機能性分子。
２３９．サイトカイン分子が単量体または二量体である、実施形態２３７または２３８の多機能性分子。
２４０．サイトカイン分子が、受容体二量体化ドメイン、例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメインをさらに含む、実施形態２３７から２３９のいずれか１つの多機能性分子。
２４１．サイトカイン分子（例えば、ＩＬ－１５）および受容体二量体化ドメイン（例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメイン）が共有結合的に連結されず、例えば、非共有結合的に会合している、実施形態２４０の多機能性分子。
２４２．多機能性分子がサイトカイン阻害剤分子を含む、実施形態１から９７のいずれかの多機能性分子。
２４３．サイトカイン阻害剤分子がＴＧＦ－ベータ阻害剤である、実施形態２４２の多機能性分子。
２４４．ＴＧＦ－ベータ阻害剤が、（ｉ）ＴＧＦ－ベータ１；（ｉｉ）ＴＧＦ－ベータ２；（ｉｉｉ）ＴＧＦ－ベータ３；（ｉｖ）（ｉ）および（ｉｉ）；（ｖ）（ｉ）および（ｉｉｉ）；（ｖｉ）（ｉｉ）および（ｉｉｉ）；または（ｖｉｉ）（ｉ）、（ｉｉ）、および（ｉｉｉ）を阻害する（例えば、その活性を低減する）、実施形態２４２または２４３のいずれかの多機能性分子。
２４５．ＴＧＦ－ベータ阻害剤が、ＴＧＦ－ベータを阻害する（例えば、その活性を低減する）ことができるＴＧＦ－ベータ受容体（例えば、ＴＧＦ－ベータ受容体の細胞外ドメイン）の一部、またはその機能的断片もしくはバリアントを含む、実施形態２４２から２４４のいずれかの多機能性分子。
２４６．ＴＧＦ－ベータ阻害剤が、（ｉ）ＴＧＦＢＲ１；（ｉｉ）ＴＧＦＢＲ２；（ｉｉｉ）ＴＧＦＢＲ３；（ｉｖ）（ｉ）および（ｉｉ）；（ｖ）（ｉ）および（ｉｉｉ）；（ｖｉ）（ｉｉ）および（ｉｉｉ）；または（ｖｉｉ）（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）の一部を含む、実施形態２４５の多機能性分子。
２４７．ＴＧＦ－ベータ阻害剤が、表１６から選択されるアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２４２から２４６のいずれかの多機能性分子。
２４８．多機能性分子が、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導性リガンド（ＴＲＡＩＬ）分子、細胞死受容体分子、または細胞死受容体に特異的に結合する抗原結合性ドメインから選択される細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含む、実施形態１から９７のいずれかの多機能性分子。
２４９．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、例えばＴＣＲＢＶ抗原を含むリンパ球（例えば、Ｔ細胞）における細胞死受容体シグナル伝達を活性化し、例えば、前記細胞におけるアポトーシスまたは細胞死を誘導する、実施形態２４８の多機能性分子。
２５０．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、ＴＣＲＢＶ抗原を含むリンパ球以外の細胞上の細胞死受容体シグナル伝達を活性化しない、実施形態２４８または２４９のいずれかの多機能性分子。
２５１．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、ＴＲＡＩＬ分子、例えば、１つまたは複数のＴＲＡＩＬポリペプチドまたはその断片を含む、実施形態２４８から２５０のいずれかの多機能性分子。
２５２．ＴＲＡＩＬ分子が、細胞死受容体４（ＤＲ４）または細胞死受容体５（ＤＲ５）に特異的に結合する、実施形態２５１の多機能性分子。
２５３．ＴＲＡＩＬ分子が、例えば野生型ＴＲＡＩＬポリペプチドに対して、短縮されたＴＲＡＩＬポリペプチドを含む、実施形態２５１または２５２のいずれかの多機能性分子。
２５４．ＴＲＡＩＬ分子が、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸９５～２８１に対応する少なくとも残基、例えば、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸９５～２８１に対応する残基を含む短縮されたＴＲＡＩＬ分子を含む、実施形態２５３の多機能性分子。
２５５．ＴＲＡＩＬ分子が、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸９５～２８１を含み、例えば、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸１～９４を含まない短縮されたＴＲＡＩＬポリペプチドを含む、実施形態２５４の多機能性分子。
２５６．ＴＲＡＩＬ分子が、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸１２２～２８１に対応する少なくとも残基、例えば、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸１２２～２８１に対応する残基を含む短縮されたＴＲＡＩＬ分子を含む、実施形態２５３の多機能性分子。
２５７．ＴＲＡＩＬ分子が、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸１２２～２８１を含み、例えば、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸１～１２１を含まない短縮されたＴＲＡＩＬポリペプチドを含む、実施形態２５６の多機能性分子。
２５８．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、１、２、または３つのＴＲＡＩＬ分子を含む、実施形態２５１から２５７のいずれかの多機能性分子。
２５９．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、細胞死受容体、例えば、細胞死受容体４（ＤＲ４）または細胞死受容体５（ＤＲ５）に特異的に結合する抗原結合性ドメインを含む、実施形態２４８から２５０のいずれかの多機能性分子。
２６０．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、細胞死受容体に特異的に結合する１つ、２つ、または３つの抗原結合性ドメインを含む、実施形態２５９の多機能性分子。
２６１．細胞死受容体に特異的に結合する抗原結合性ドメインがＤＲ５に結合する、実施形態２５９または２６０のいずれかの多機能性分子。
２６２．細胞死受容体に特異的に結合する抗原結合性ドメインが、チガツズマブ、ドロジツマブ、またはコナツムマブを含む、実施形態２５９から２６１のいずれかの多機能性分子。
２６３．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、表１１から選択されるアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２４８から２６２のいずれかの多機能性分子。
２６４．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、配列番号６１５７のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２４８から２６３のいずれかの多機能性分子。
２６５．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、配列番号６１５８のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２４８から２６３のいずれかの多機能性分子。
２６６．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、配列番号６１５９のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２４８から２６３のいずれかの多機能性分子。
２６７．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、配列番号６１６０のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２４８から２６３のいずれかの多機能性分子。
２６８．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、配列番号６１６１のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２４８から２６３のいずれかの多機能性分子。
２６９．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、配列番号６１６２のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２４８から２６３のいずれかの多機能性分子。
２７０．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、配列番号６１６３のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２４８から２６３のいずれかの多機能性分子。
２７１．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、配列番号６１６４のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２４８から２６３のいずれかの多機能性分子。
２７２．細胞死受容体シグナルエンゲージャーが、配列番号６１６５のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態２４８から２６３のいずれかの多機能性分子。
２７３．Ｔ細胞エンゲージャーがＴＣＲβに結合する、実施形態１０２の多機能性分子。
２７４．Ｔ細胞エンゲージャーが、ＣＤ３に結合する（例えば、および一部の実施形態では、活性化する）抗原結合性ドメイン（例えば、抗体分子またはその断片）を含む、実施形態２７３の多機能性分子。
２７５．Ｔ細胞エンゲージャーが、ＴＣＲＢＶ抗原を含むリンパ球に結合しない、実施形態２７３または２７４のいずれかの多機能性分子。
２７６．Ｔ細胞エンゲージャーが、ＴＣＲＢＶを含むリンパ球を活性化しない、実施形態２７３から２７５のいずれかの多機能性分子。
２７７．多機能性分子が、
（ｉ）免疫細胞エンゲージャー（例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャー）およびサイトカイン分子、
（ｉｉ）免疫細胞エンゲージャー（例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャー）およびサイトカイン阻害剤分子、
（ｉｉｉ）免疫細胞エンゲージャー（例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャー）および細胞死受容体シグナルエンゲージャー、
（ｉｖ）サイトカイン分子および細胞死受容体シグナルエンゲージャー、
（ｖ）サイトカイン阻害剤分子および細胞死受容体シグナルエンゲージャー、
（ｖｉ）免疫細胞エンゲージャー（例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャー）、サイトカイン分子、および細胞死受容体シグナルエンゲージャー、または
（ｖｉｉ）免疫細胞エンゲージャー（例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャー）、サイトカイン阻害剤分子、および細胞死受容体シグナルエンゲージャー
を含む、実施形態１から２７６のいずれか１つの多機能性分子。
２７８．多機能性分子が、以下の構成：
Ａ，Ｂ－［二量体化モジュール］－Ｃ，－Ｄ
を含み、ここで、
（ａ）二量体化モジュールは、免疫グロブリン定常ドメイン、例えば、重鎖定常ドメイン（例えば、ホモ二量体もしくはヘテロ二量体重鎖定常領域、例えば、Ｆｃ領域）、または免疫グロブリン可変領域（例えば、Ｆａｂ領域）の定常ドメインを含み；
（ｂ）Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤは、独立して、不在であるか、（ｉ）ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する抗原結合性ドメイン；（ｉｉ）Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される免疫細胞エンゲージャー；（ｉｉｉ）サイトカイン分子またはサイトカイン阻害剤分子；（ｉｖ）細胞死受容体シグナルエンゲージャー；または（ｖ）間質改変部分であるが、ただし、
Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤのうちの少なくとも１つ、２つ、または３つは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する抗原結合性ドメインを含むこと、ならびに
残りのＡ、Ｂ、Ｃ、およびＤのいずれかは、不在であるか、または免疫細胞エンゲージャー、サイトカイン分子、サイトカイン阻害剤分子、細胞死受容体シグナルエンゲージャー、もしくは間質改変部分のうちの１つを含む、実施形態１から２７７のいずれか１つの多機能性分子。
２７９．（１）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子を含み；
（２）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子を含み；
（３）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、サイトカイン分子を含み；
（４）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、サイトカイン阻害剤分子を含み；
（５）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（６）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子を含み；
（７）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子を含み；
（８）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、サイトカイン分子を含み；
（９）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、サイトカイン阻害剤分子を含み；
（１０）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（１１）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子を含み；
（１２）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子を含み；
（１３）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、サイトカイン分子を含み；
（１４）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、サイトカイン阻害剤分子を含み；
（１５）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（１６）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子、および（ｂ）サイトカイン分子を含み；
（１７）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子、および（ｂ）サイトカイン阻害剤分子を含み；
（１８）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子、および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（１９）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、および（ｂ）サイトカイン分子を含み；
（２０）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、および（ｂ）サイトカイン阻害剤分子を含み；
（２１）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（２２）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、（ａ）サイトカイン分子および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（２３）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、またはＤは、（ａ）サイトカイン阻害剤分子および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（２４）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子、および（ｂ）サイトカイン分子を含み；
（２５）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子、および（ｂ）サイトカイン阻害剤分子を含み；
（２６）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子、および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（２７）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子、および（ｂ）間質改変部分を含み；
（２８）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、および（ｂ）サイトカイン分子を含み；
（２９）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、および（ｂ）サイトカイン阻害剤分子を含み；
（３０）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（３１）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、（ａ）サイトカイン分子および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（３２）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣまたはＤは、（ａ）サイトカイン阻害剤分子および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（３３）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子、および（ｂ）サイトカイン分子を含み；
（３４）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子、および（ｂ）サイトカイン阻害剤分子を含み；
（３５）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子、および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（３６）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、および（ｂ）サイトカイン分子を含み；
（３７）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、および（ｂ）サイトカイン阻害剤分子を含み；
（３８）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（３９）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、（ａ）サイトカイン分子および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含み；
（４０）Ａは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃは、ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢまたはＤは、（ａ）サイトカイン阻害剤分子および（ｂ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含む、実施形態２７８の多機能性分子。
２８０．二量体化モジュールが、対になった孔と突起（「ノブ・イン・ホール」）、静電相互作用、または鎖交換のうちの１つまたは複数を含む１つまたは複数の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）を含む、実施形態２７８または２７９の多機能性分子。
２８１．１つまたは複数の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）が、例えば、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域の、３４７、３４９、３５０、３５１、３６６、３６８、３７０、３９２、３９４、３９５、３９７、３９８、３９９、４０５、４０７、または４０９のうちの１つまたは複数から選択される位置でのアミノ酸置換を含み、必要に応じて１つまたは複数の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）が、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、もしくはＹ４０７Ｖ（例えば、孔またはホールに対応する）、またはＴ３６６Ｗ（例えば、突起またはノブに対応する）、あるいはそれらの組合せから選択されるアミノ酸置換を含む、実施形態２８０の多機能性分子。
２８２．リンカー、例えば、抗原結合性ドメインと免疫細胞エンゲージャー、抗原結合性ドメインとサイトカイン分子、抗原結合性ドメインと間質改変部分、免疫細胞エンゲージャーとサイトカイン分子、免疫細胞エンゲージャーとサイトカイン分子、免疫細胞エンゲージャーと間質改変部分、サイトカイン分子と間質改変部分、サイトカイン分子と間質改変部分、抗原結合性ドメインと二量化モジュール、免疫細胞エンゲージャーと二量化モジュール、サイトカイン分子と二量化モジュールまたは間質改変部分と二量化モジュールのうちの１つまたは複数の間にリンカーをさらに含む、実施形態１から２８１の多機能性分子。
２８３．リンカーが、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、または非ヘリックスリンカーから選択される、実施形態２８２記載の多機能性分子。
２８４．リンカーがペプチドリンカーである、実施形態２８２または２８３の多機能性分子。
２８５．ペプチドリンカーがＧｌｙおよびＳｅｒを含む、実施形態２８４の多機能性分子。
２８６．配列番号７２４８～７２５１または７２５２～７２５３および７７～７８から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２８５の多機能性分子。
２８７．（ｉ）ＴＣＲＢＶ抗原に選択的に結合する第１の抗原結合性ドメイン、および
（ｉｉ）ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子
を含む多機能性分子。
２８８．ＮＫ細胞エンゲージャーが抗ＮＫｐ３０抗体分子を含む、実施形態２８７の多機能性分子。
２８９．ＮＫ細胞エンゲージャーが抗ＮＫｐ４６抗体分子を含む、実施形態２８７の多機能性分子。
２９０．（ｉ）Ｔ細胞受容体可変ベータ（ＴＣＲＢＶ）、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する、例えば、選択的に結合する第１の抗原結合性ドメイン、および
（ｉｉ）細胞死受容体シグナルエンゲーター
を含む多機能性分子。
２９１．（ｉ）Ｔ細胞受容体可変ベータ（ＴＣＲＢＶ）、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する、例えば、選択的に結合する第１の抗原結合性ドメイン、および
（ｉｉ）サイトカイン阻害剤分子、例えば、ＴＧＦ－ベータ阻害剤
を含む多機能性分子。
２９２．多機能性分子がＴＣＲＢＶ抗原に一価で結合する、実施形態１から２９１のいずれかの多機能性分子。
２９３．多機能性分子が、多価で、例えば、二価、三価、四価、五価、六価、七価、八価、九価、または十価で、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する、実施形態１から２９１のいずれか１つの多機能性分子。
２９４．多機能性分子が、ＴＣＲＢＶ抗原を発現するリンパ球上のＴＣＲＢＶ抗原に結合する、実施形態２から２６１のいずれかの多機能性分子。
２９５．多機能性分子が、例えば、免疫細胞エンゲージャーを介して、免疫細胞に一価で結合する、先行する実施形態のいずれかの多機能性分子。
２９６．多機能性分子が、例えば、免疫細胞エンゲージャーを介して、多価で、例えば、二価、三価、四価、五価、六価、七価、八価、九価、または十価で免疫細胞に結合する、実施形態１から２９４のいずれか１つの多機能性分子。
２９７．抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を媒介する重鎖定常領域、例えば、Ｆｃ領域をさらに含む、先行する実施形態のいずれかの多機能性分子。
２９８．補体依存性細胞毒性（例えば、Ｃ１ｑを介する）を媒介する重鎖定常領域、例えば、Ｆｃ領域をさらに含む、先行する実施形態のいずれかの多機能性分子。
２９９．実施形態１から２９８のいずれか１つの多機能性分子をコードする核酸分子。
３００．実施形態２９９の核酸分子を含む、ベクター、例えば、発現ベクター。
３０１．実施形態２９９の核酸分子または実施形態３００のベクターを含む宿主細胞。
３０２．実施形態１から２９８のいずれか１つの多機能性分子または抗体分子を作製する、例えば、産生する方法であって、適切な条件、例えば、遺伝子発現および／またはホモもしくはヘテロ二量体化に適した条件下で、実施形態３０１の宿主細胞を培養するステップを含む、方法。
３０３．実施形態１から２９８のいずれか１つの多機能性分子と、薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定化剤とを含む医薬組成物。
３０４．ＴＣＲバイアスを処置する方法であって、それを必要とする対象に、実施形態１から２９８のいずれか１つの多機能性分子を投与するステップを含み、多機能性分子がＴＣＲバイアスを処置するのに有効な量で投与される、方法。
３０５．自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を処置する方法であって、それを必要とする対象に、実施形態１から２９８のいずれか１つの多機能性分子を投与するステップを含み、多機能性分子が自己免疫疾患を処置するのに有効な量で投与される、方法。
３０６．処置を必要とする対象を特定し、評価し、または選択するステップをさらに含み、特定し、評価し、または選択するステップは、対象がＴＣＲバイアスまたは自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を有するかどうかを決定するステップ（例えば、それを直接的に決定するかまたは間接的に決定するステップ、例えば、それに関する情報を得るステップ）を含む、実施形態３０４または３０５のいずれかの方法。
３０７．対象がＴＣＲバイアスまたは自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を有すると決定したことに応答して、
必要に応じて、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）に結合する抗原結合性ドメインを含む多機能性分子を使用して処置するための対象を選択するステップ、および
ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）に結合する抗原結合性ドメインを含む多機能性分子を投与するステップ
をさらに含む、実施形態３０６の方法。
３０８．ＴＣＲバイアスを処置する方法であって、
対象がＴＣＲバイアスを有すると決定したことに応答して、それを必要とする対象に、請求項１から２９８のいずれか１項に記載の多機能性分子を投与するステップを含み、多機能性分子がＴＣＲバイアスを処置するのに有効な量で投与される、方法。
３０９．自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を処置する方法であって、
対象が自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を有すると決定したことに応答して、それを必要とする対象に、請求項１から２９８のいずれか１項に記載の多機能性分子を投与するステップを含み、多機能性分子が、自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を処置するのに有効な量で投与される、方法。
３１０．対象が、ＴＣＲバイアス（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型）および／または前記バイアスに関連する自己免疫疾患を有する、実施形態３０４から３０９のいずれかの方法。
３１１．実施形態１から２９８のいずれかの多機能性分子を使用して、癌の処置を必要とする対象を特定する方法であって、対象がＴＣＲバイアス（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型）および／または前記バイアスに関連する自己免疫疾患を有するかどうかを決定するステップ（例えば、それを直接的に決定するかまたは間接的に決定するステップ、例えば、それに関する情報を得るステップ）を含み、
対象がＴＣＲバイアス（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型）および／または前記バイアスに関連する自己免疫疾患を有すると決定したことに応答して、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する抗原結合性ドメインを含む多機能性分子を使用する処置の候補として対象を特定し、必要に応じてＴＣＲＢＶ抗原に結合しない（例えば、異なるＴＣＲＢＶ抗原に結合する）抗原結合性ドメインを含む多機能性分子を使用する処置の候補として対象を特定しない、方法。
３１２．ＴＣＲＢＶ抗原に結合する抗原結合性ドメインを含む多機能性分子を使用する処置の候補として対象を特定したことに応答して、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する抗原結合性ドメインを含む多機能性分子で対象を処置する（例えば、対象に投与する）ステップをさらに含む、実施形態３１１の方法。
３１３．ＴＣＲバイアス（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型）および／または前記バイアスに関連する自己免疫疾患の処置を必要とする対象を評価する方法であって、対象がＴＣＲバイアスを有するか否かを決定するステップ（例えば、それを直接的に決定するかまたは間接的に決定するステップ、例えば、それに関する情報を得るステップ）を含む、方法。
３１４．評価に応答して、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する抗原結合性ドメインを含む多機能性分子で対象を処置する（例えば、対象に投与する）ステップをさらに含む、実施形態３１３の方法。
３１５．ＴＣＲバイアスが自己免疫疾患と関連する、実施形態３０４から３１４のいずれか１つの方法。
３１６．自己免疫疾患が、チャーグ－ストラウス症候群、サルコイドーシス、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、１型糖尿病、自己免疫性肝炎（例えば、１型または２型）、原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性肝硬変、多発性硬化症、ギランバレー症候群およびＡＭＡＮ（軸索および神経の神経障害）、慢性炎症性脱髄性多発神経障害（ＣＩＤＰ）、横断性脊髄炎、トロサハント症候群（ＴＨＳ）、デビック病（視神経脊髄炎）、傍腫瘍性小脳変性症（ＰＣＤ）、ランバート・イートン症候群、乾癬、強皮症、ＣＲＥＳＴ（石灰沈着症、レイノー現象、食道運動障害、手指硬化症、および毛細血管拡張症）症候群、疱疹状皮膚炎、皮膚筋炎、水疱性類天疱瘡、瘢痕性類天疱瘡／良性粘膜類天疱瘡、類天疱瘡、関節リウマチ（ＲＡ）、乾癬性関節炎、再発性多発性軟骨炎、慢性再発性多発性骨髄炎（ＣＲＭＯ）、血管炎、川崎病、多発血管炎性肉芽腫症（ＧＰＡ）、ベーチェット病（血管炎）、高安動脈炎、結節性多発動脈炎、顕微鏡的多発血管炎（ＭＰＡ）、白血球破砕性血管炎、コーガン症候群、ブドウ膜炎、末梢ブドウ膜炎（扁平部炎）、強膜炎、自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）、ドレスラー症候群、リウマチ熱、エヴァンス症候群、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）、溶血性貧血、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、多発性筋炎、若年性皮膚筋炎（ＪＤＭ）および若年性多発性筋炎（ＪＰＭ）を含む若年性筋炎（ＪＭ）、シェーグレン症候群、眼瘢痕性類天疱瘡、または橋本甲状腺炎から選択される、実施形態３１５の方法。
３１７．第２の治療処置を施すステップをさらに含む、実施形態３０４から３１６のいずれかの方法。
３１８．第２の治療処置が、治療剤（例えば、化学療法剤、生物剤、ホルモン療法）、放射線、または外科手術を含む、実施形態３１７の方法。
３１９．自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）の処置を必要とする対象における自己免疫疾患を処置する方法であって、前記対象に、有効量の、例えば、治療有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を投与するステップを含み、それによって障害を処置する、方法。
３２０．自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を有する対象におけるＴ細胞集団を枯渇させる方法であって、Ｔ細胞集団を、有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）と接触させるステップを含む、方法。
３２１．接触させるステップがｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏで生じる、請求項３２０に記載の方法。
３２２．抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ｉ）米国特許第５，８６１，１５５号に開示されている抗体分子ではなく；
（ｉｉ）米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、１６Ｇ８マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より小さい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０分の１未満の）親和性および／もしくは結合特異性でＴＣＲβＶ１２に結合するか；
（ｉｉｉ）米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、１６Ｇ８マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、１０倍を超える）親和性および／もしくは結合特異性でＴＣＲβＶ１２に結合するか；
（ｉｉｉ）米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、ＴＭ２３マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、１０倍を超える）親和性および／もしくは結合特異性で、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１に結合するか；または
（ｉｖ）米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、ＴＭ２３マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、１０倍を超える）親和性および／もしくは結合特異性で、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１に結合する、請求項３１９から３２１のいずれか１項に記載の方法。
３２３．抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、Ｆｃ領域、例えば、エフェクター機能を有するＦｃ領域、例えば、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）および／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を有するＦｃ領域を含む、請求項３１９から３２２のいずれか１項に記載の方法。
３２４．抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、例えば、野生型Ｆｃ領域と比較して、エフェクター機能が増強されたＦｃ領域を含む、請求項３２３に記載の方法。
３２５．抗ＴＣＲβＶ抗体分子がヒトＩｇＧ１領域またはヒトＩｇＧ４領域を含む、請求項３１９から３２４のいずれか１項に記載の方法。
３２６．請求項３１９または３２１から３２５のいずれか１項に記載の方法であって、自己免疫疾患が、チャーグ－ストラウス症候群、サルコイドーシス、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、１型糖尿病、自己免疫性肝炎（例えば、１型または２型）、原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性肝硬変、多発性硬化症、ギランバレー症候群およびＡＭＡＮ（軸索および神経の神経障害）、慢性炎症性脱髄性多発神経障害（ＣＩＤＰ）、横断性脊髄炎、トロサハント症候群（ＴＨＳ）、デビック病（視神経脊髄炎）、傍腫瘍性小脳変性症（ＰＣＤ）、ランバート・イートン症候群、乾癬、強皮症、ＣＲＥＳＴ（石灰沈着症、レイノー現象、食道運動障害、手指硬化症、および毛細血管拡張症）症候群、疱疹状皮膚炎、皮膚筋炎、水疱性類天疱瘡、瘢痕性類天疱瘡／良性粘膜類天疱瘡、類天疱瘡、関節リウマチ（ＲＡ）、乾癬性関節炎、再発性多発性軟骨炎、慢性再発性多発性骨髄炎（ＣＲＭＯ）、血管炎、川崎病、多発血管炎性肉芽腫症（ＧＰＡ）、ベーチェット病（血管炎）、高安動脈炎、結節性多発動脈炎、顕微鏡的多発血管炎（ＭＰＡ）、白血球破砕性血管炎、コーガン症候群、ブドウ膜炎、末梢ブドウ膜炎（扁平部炎）、強膜炎、自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）、ドレスラー症候群、リウマチ熱、エヴァンス症候群、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）、溶血性貧血、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、多発性筋炎、若年性皮膚筋炎（ＪＤＭ）および若年性多発性筋炎（ＪＰＭ）を含む若年性筋炎（ＪＭ）、シェーグレン症候群、眼瘢痕性類天疱瘡、または橋本甲状腺炎から選択される、方法。
３２７．抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、表１Ａ、２Ａ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ａもしくは１３Ａに提供されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数（例えば、３つすべて）；および／または表１Ａ、２Ａ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ａもしくは１３Ａに提供されるＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数（例えば、３つすべて）、あるいはそれらと少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有する配列を含む抗原結合性ドメインを含む、請求項３１９から３２６のいずれか１項に記載の方法。
３２８．抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、表１Ａ、２Ａ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ａもしくは１３Ａに提供される可変重鎖（ＶＨ）および／または可変軽鎖（ＶＬ）、あるいはそれらと少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である配列を含む、請求項３１９から３２７のいずれか１項に記載の方法。
別途定義されない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって広く理解されているものと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものに類似またはそれと同等の方法および材料を、本発明の実施または試験において使用することができるが、好適な方法および材料が、以下に記載されている。本明細書に記載されるすべての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、参照によりその全体が組み込まれる。矛盾が生じた場合には、定義を含め、本明細書が優先される。加えて、材料、方法、および実施例は、例示に過ぎず、限定することを意図するものではない。
本発明の他の特性および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかであろう。
図１Ａ～１Ｂは、抗体Ａ供給源のマウスＶＨおよびＶＬフレームワーク１、ＣＤＲ１、フレームワーク２、ＣＤＲ２、フレームワーク３、ＣＤＲ３、およびフレームワーク４領域の、それらのそれぞれのヒト化配列とのアラインメントを示す図である。Ｋａｂａｔ ＣＤＲを太字で、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲを斜体で、組合せＣＤＲをボックスで示す。復帰突然変異したフレームワークの位置には、二重下線が施される。図１Ａは、マウス抗体Ａ（配列番号１）およびヒト化抗体Ａ－Ｈ（配列番号９）のＶＨ配列を示す。図１Ｂは、マウス抗体Ａ（配列番号２）およびヒト化抗体Ａ－Ｈ（配列番号１０および配列番号１１）のＶＬ配列を示す。 図１Ｂは、マウス抗体Ａ（配列番号２）およびヒト化抗体Ａ－Ｈ（配列番号１０および配列番号１１）のＶＬ配列を示す。 図２Ａ～２Ｂは、抗体Ｂ供給源のマウスＶＨおよびＶＬフレームワーク１、ＣＤＲ１、フレームワーク２、ＣＤＲ２、フレームワーク３、ＣＤＲ３、およびフレームワーク４領域の、それらのそれぞれのヒト化配列とのアラインメントを示す図である。Ｋａｂａｔ ＣＤＲを太字で、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲを斜体で、組合せＣＤＲをボックスで示す。復帰突然変異したフレームワークの位置には、二重下線が施される。図２Ａは、マウス抗体Ｂ（配列番号１５）およびヒト化ＶＨ配列Ｂ－Ｈ．１Ａ～Ｂ－Ｈ．１Ｃ（配列番号２３～２５）のＶＨ配列を示す。図２Ｂは、マウス抗体Ｂ（配列番号１６）およびヒト化ＶＬ配列Ｂ－Ｈ．１Ｄ～Ｂ－Ｈ．１Ｈ（配列番号２６～３０）のＶＬ配列を示す。 図２Ｂは、マウス抗体Ｂ（配列番号１６）およびヒト化ＶＬ配列Ｂ－Ｈ．１Ｄ～Ｂ－Ｈ．１Ｈ（配列番号２６～３０）のＶＬ配列を示す。 図２Ｂは、マウス抗体Ｂ（配列番号１６）およびヒト化ＶＬ配列Ｂ－Ｈ．１Ｄ～Ｂ－Ｈ．１Ｈ（配列番号２６～３０）のＶＬ配列を示す。 対応する抗体がマップされたＴＣＲＢＶ遺伝子ファミリーおよびサブファミリーの系統樹を示す図である。サブファミリーの同一性は以下の通りである：サブファミリーＡ：ＴＣＲβ Ｖ６；サブファミリーＢ：ＴＣＲβ Ｖ１０；サブファミリーＣ：ＴＣＲβ Ｖ１２；サブファミリーＤ：ＴＣＲβ Ｖ５；サブファミリーＥ：ＴＣＲβ Ｖ７；サブファミリーＦ：ＴＣＲβ Ｖ１１；サブファミリーＧ：ＴＣＲβ Ｖ１４；サブファミリーＨ：ＴＣＲβ Ｖ１６；サブファミリーＩ：ＴＣＲβ Ｖ１８；サブファミリーＪ：ＴＣＲβ Ｖ９；サブファミリーＫ：ＴＣＲβ Ｖ１３；サブファミリーＬ：ＴＣＲβ Ｖ４；サブファミリーＭ：ＴＣＲβ Ｖ３；サブファミリーＮ：ＴＣＲβ Ｖ２；サブファミリーＯ：ＴＣＲβ Ｖ１５；サブファミリーＰ：ＴＣＲβ Ｖ３０；サブファミリーＱ：ＴＣＲβ Ｖ１９；サブファミリーＲ：ＴＣＲβ Ｖ２７；サブファミリーＳ：ＴＣＲβ Ｖ２８；サブファミリーＴ：ＴＣＲβ Ｖ２４；サブファミリーＵ：ＴＣＲβ Ｖ２０；サブファミリーＶ：ＴＣＲβ Ｖ２５；およびサブファミリーＷ：ＴＣＲβ Ｖ２９サブファミリー。サブファミリーメンバーは、本明細書では「ＴＣＲベータＶ（ＴＣＲβＶ）」というセクションに詳細に記載されている。 図４は、ＮＫ９２細胞に対するＮＫｐ３０抗体の結合を示すグラフである。パーセント－ＡＦ７４７陽性集団としてデータを算出した。 図５は、ＮＫｐ３０抗体によるＮＫ９２細胞の活性化を示すグラフである。ハムスター抗ＮＫｐ３０ ｍＡｂを使用してデータを生成した。
（ｉ）Ｔ細胞受容体可変ベータ（ＴＣＲＢＶ）、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する、例えば、選択的に結合する抗原結合性ドメインと、（ｉｉ）（ａ）Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー（例えば、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、もしくはＣＤ１６に結合する分子）、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される免疫細胞エンゲージャー；（ｂ）サイトカイン分子またはサイトカイン阻害剤分子；および（ｃ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーのうちの１つ、２つ、またはすべてとを含む、複数（例えば、２つまたはそれより多く）の機能性（または結合特異性）を含む多機能性分子（本明細書において「多特異性分子」と称されることもある）が本明細書に開示される。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、表１３または表１４に見出される配列または配列の部分を含む。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、表７～１０に見出される配列または配列の部分を含むＮＫ細胞エンゲージャーを含む。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、表１３または表１４に見出される配列または配列の部分を含み、免疫細胞エンゲージャーは、表７～１０に見出される配列または配列の部分を含むＮＫ細胞エンゲージャーを含む。
一実施形態では、多特異性または多機能性分子は、二特異性（もしくは二機能性）分子、三特異性（もしくは三機能性）分子、または四特異性（もしくは四機能性）分子である。
一部の実施形態では、多機能性分子は、リンパ球、例えば、Ｔ細胞の表面上のＴＣＲＢＶ抗原に結合する抗原結合性ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＢＶ抗原はバイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応し、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原を含むＴＣＲは、対象（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患を有する対象）のＴＣＲレパートリーもしくはリンパ球（例えば、Ｔ細胞）プールにおいて過剰発現され得るか、または他の対象（例えば、非自己免疫疾患対象）におけるレベルより高いレベルで発現され得る。
理論に拘泥するものではないが、本明細書に開示される多特異性または多機能性分子は、例えば、細胞表面上に、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）を発現する細胞（例えば、リンパ球、例えば、Ｔ細胞）の存在下で、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞またはマクロファージから選択される免疫エフェクター細胞）を局在化させる（例えば、架橋する）かつ／または活性化させることが期待される。本明細書に記載の多特異性または多機能性分子を使用してＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）を発現する細胞（例えば、リンパ球、例えば、Ｔ細胞）の存在下で免疫細胞の近接性および／または活性を増加させることは、標的細胞に対する免疫応答を増強し、それによって（例えば、バイアスされたＴＣＲおよび／またはバイアスされたＴＣＲを発現するＴ細胞のレベルを減少させることによって）より有効な療法を提供することが期待される。別の実施形態では、細胞死誘導性部分（例えば、細胞死受容体シグナルエンゲージャー）も含む多機能性分子を用いてＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）を発現する細胞（例えば、リンパ球、例えば、Ｔ細胞）を標的化することは、（例えば、バイアスされたＴＣＲおよび／またはバイアスされたＴＣＲを発現するＴ細胞のレベルを減少させることによって）標的細胞の死を促進すると考えられる。
理論に拘泥するものではないが、一部の実施形態では、特定のＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）に特異的であるが、Ｔ細胞受容体の他のまたはすべての種類に対して特異性を有しない多特異性または多機能性分子を利用することによって、Ｔ細胞全般に対して免疫細胞の近接性もしくは活性を増加させるまたはＴ細胞全般において細胞死を促進するという有害効果が軽減され得ることが期待される。このように、本明細書に開示される多特異性または多機能性分子の使用は、Ｔ細胞全般に対して免疫細胞の近接性もしくは活性を必然的に増加させることなくバイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原を含む細胞に対して免疫細胞の近接性もしくは活性を増加させ得るか、またはＴ細胞全般において細胞死を必然的に増加させることなくバイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原を含む細胞において細胞死を促進し得ると考えられる。
したがって、特に、前述の部分を含む多特異性または多機能性分子（例えば、多特異性または多機能性抗体分子）、それをコードする核酸、前述の分子を産生する方法、および前述の分子を使用して、疾患または障害、例えば、自己免疫疾患またはＴＣＲバイアスを処置する方法が本明細書において提供される。
定義
一部の実施形態では、多機能性分子は、免疫細胞エンゲージャーを含む。「免疫細胞係合体」とは、免疫細胞、例えば、免疫応答に関与する細胞に結合および／または活性化する１つまたは複数の結合特異性を指す。実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、および／またはマクロファージ細胞から選択される。免疫細胞エンゲージャーは、抗体分子、受容体分子（例えば、全長受容体、受容体断片、またはそれらの融合体（例えば、受容体－Ｆｃ融合体））、または免疫細胞抗原（例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞抗原、Ｂ細胞抗原、樹状細胞抗原、および／またはマクロファージ細胞抗原）に結合するリガンド分子（例えば、全長リガンド、リガンド断片、またはそれらの融合体（例えば、リガンド－Ｆｃ融合体））であり得る。実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、標的免疫細胞に特異的に結合し、例えば、標的免疫細胞に優先的に結合する。例えば、免疫細胞エンゲージャーが抗体分子である場合、それは、約１０ｎＭ未満の解離定数で、免疫細胞抗原（例えば、Ｔ細胞抗原、ＮＫ細胞抗原、Ｂ細胞抗原、樹状細胞抗原、および／またはマクロファージ細胞抗原）に結合する。
一部の実施形態では、多機能性分子は、サイトカイン分子を含む。本明細書で使用される場合、「サイトカイン分子」とは、サイトカインの全長、断片またはバリアント；さらに、受容体ドメイン、例えば、サイトカイン受容体二量化ドメインを含むサイトカイン；または、天然に存在するサイトカインの少なくとも１つの活性化を誘発する、サイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、サイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）を指す。一部の実施形態では、サイトカイン分子は、インターロイキン－２（ＩＬ－２）、インターロイキン－７（ＩＬ－７）、インターロイキン－１２（ＩＬ－１２）、インターロイキン－１５（ＩＬ－１５）、インターロイキン－１８（ＩＬ－１８）、インターロイキン－２１（ＩＬ－２１）、もしくはインターフェロンγ、またはこれらの断片もしくはバリアント、または前述のサイトカインのいずれかの組合せから選択される。サイトカイン分子は、モノマーまたは二量体であり得る。実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体二量体化ドメインをさらに含むことができる。他の実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、ＩＬ－１５ＲａまたはＩＬ－２１Ｒから選択されるサイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）である。
本明細書で使用される場合、例えば、抗体分子、サイトカイン分子、受容体分子において使用される用語「分子」は、改変されていない（例えば、天然に存在する）分子の少なくとも１つの機能および／または活性化が残る限り、全長の天然に存在する分子、ならびにバリアント、例えば、機能性バリアント（例えば、切断、断片、突然変異（例えば、実質的に類似の配列）またはその誘導体化された形態）を含む。
本明細書で使用される場合、用語「自己免疫」疾患、障害、または状態は、身体の免疫系がそれ自身の細胞または組織を攻撃する疾患を指す。自己免疫疾患は、自己抗原または自家抗原に対して不適切に産生されるかつ／または過度に産生される自家抗体の産生をもたらし得る。自己免疫疾患としては、心臓血管疾患、リウマチ性疾患、腺疾患、胃腸疾患、皮膚疾患、肝臓疾患、神経学的疾患、筋肉疾患、腎臓疾患、生殖に関する疾患、結合組織疾患および全身性疾患が挙げられるがこれらに限定されない。一部の実施形態では、自己免疫疾患は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、先天免疫細胞（例えば、マクロファージ、好酸球、もしくはナチュラルキラー細胞）、または補体媒介性経路により媒介される。
特定の用語を以下に定義する。
本明細書で使用される場合、冠詞「ある（ａ）」および「ある（ａｎ）」は、冠詞の文法的対象物の１つまたは複数、例えば、少なくとも１つを指す。用語「ある（ａ）」または「ある（ａｎ）」の使用は、本明細書における用語「含んでいる」と共に使用される場合、「１つ」を意味し得るが、「１つまたは複数」、「少なくとも１つ」および「１または１を超える」の意味とも一致する。
本明細書で使用される場合、「約」および「ほぼ」は、一般に、測定の性質または精度を与えられて測定された量についての許容可能な誤差の程度を意味する。誤差の例示的な程度は、所定の範囲の値の２０パーセント（％）以内であり、典型的には１０％以内であり、より典型的には５％以内である。
本明細書で使用される「抗体分子」とは、少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン配列を含む、タンパク質、例えば、免疫グロブリン鎖またはその断片を指す。抗体分子は、抗体（例えば、全長抗体）および抗体断片を包含する。ある実施形態では、抗体分子は、全長抗体の抗原結合もしくは機能的断片、または全長免疫グロブリン鎖を含む。例えば、全長抗体は、天然に存在するか、または正常な免疫グロブリン遺伝子断片の組換えプロセスによって形成される免疫グロブリン（Ｉｇ）分子（例えば、ＩｇＧ抗体）である。実施形態では、抗体分子は、免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な抗原結合部分、例えば、抗体断片を指す。抗体断片、例えば、機能性断片は、抗体の一部、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆ（ａｂ）２、可変断片（Ｆｖ）、ドメイン抗体（ｄＡｂ）、または一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。機能性抗体断片は、インタクトな（例えば、全長）抗体によって認識されるものと同じ抗原に結合する。用語「抗体断片」または「機能性断片」はまた、重鎖および軽鎖の可変領域からなる「Ｆｖ」断片、または軽鎖および重鎖の可変領域がペプチドリンカーによって連結されている組換え一本鎖ポリペプチド分子（「ｓｃＦｖタンパク質」）などの可変領域からなる単離された断片を含む。一部の実施形態では、抗体断片は、抗原結合活性を有さない抗体の部分、例えば、Ｆｃ断片または単一アミノ酸残基を含まない。例示的な抗体分子は、全長抗体および抗体断片、例えば、ｄＡｂ（ドメイン抗体）、一本鎖、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、およびＦ（ａｂ’）２断片、ならびに一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む。
本明細書で使用される場合、「免疫グロブリン可変ドメイン配列」とは、免疫グロブリン可変ドメインの構造を形成することができるアミノ酸配列を指す。例えば、配列は、天然に存在する可変ドメインのアミノ酸配列の全部または一部を含み得る。例えば、配列は、１個、２個、もしくはそれ以上のＮ末端またはＣ末端アミノ酸を含むかまたは含まない場合があり、あるいはタンパク質構造の形成に適合する他の改変を含む場合がある。
実施形態では、抗体分子は、単一特異性であり、例えば、単一のエピトープに対する結合特異性を含む。一部の実施形態では、抗体分子は、多特異性であり、例えば、それは、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列は、第１のエピトープに対して結合特異性を有し、第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列は、第２のエピトープに対して結合特異性を有する。一部の実施形態では、抗体分子は、二特異性抗体分子である。「二特異性抗体分子」とは、本明細書で使用される場合、１を超える（例えば、２、３、４、またはそれを超える）エピトープおよび／または抗原に対する特異性を有する抗体分子を指す。
本明細書で使用される「抗原」（Ａｇ）とは、例えば、ある種の免疫細胞の活性化および／または抗体生成を伴う、免疫応答を引き起こすことができる分子を指す。ほとんどすべてのタンパク質またはペプチドを含む任意の高分子は、抗原であり得る。抗原はまた、ゲノム組換え体またはＤＮＡから誘導され得る。例えば、免疫応答を誘導することができるタンパク質をコードするヌクレオチド配列または部分的ヌクレオチド配列を含む任意のＤＮＡは、「抗原」をコードする。実施形態では、抗原は、遺伝子の全長ヌクレオチド配列によってのみコードされる必要はなく、また、抗原は、遺伝子によって全くコードされる必要もない。実施形態では、抗原は、合成され得るか、または他の生物学的成分を有する生物学的試料、例えば、組織試料、血液試料、細胞、もしくは流体に由来し得る。本明細書で使用される場合、「ＴＣＲＢＶ抗原」は、免疫応答を惹起し得るか、または抗原結合性ドメインにより標的化され得る任意のＴＣＲ可変ベータ鎖またはその部分を含む。一部の実施形態では、バイアスされたＴＣＲクローン型は、クローン型を含む細胞のほとんど、例えば、すべてが、例えば、それらの表面上に、呈する１つまたは複数のＴＣＲＢＶ抗原により特徴付けられ得る。
抗体分子の「抗原結合部位」または「結合部位」とは、抗原結合に関与する抗体分子、例えば、免疫グロブリン（Ｉｇ）分子の一部を指す。実施形態では、抗原結合部位は、重鎖（Ｈ）および軽鎖（Ｌ）の可変領域（Ｖ）のアミノ酸残基によって形成される。超可変領域と呼ばれる、重鎖および軽鎖の可変領域内の３つの高度に分岐ストレッチは、「フレームワーク領域」（ＦＲ）と呼ばれる、より保存された隣接領域間に配置される。ＦＲは、免疫グロブリン中の超可変領域の間で、およびそれに隣接して天然に見出されるアミノ酸配列である。実施形態では、抗体分子において、軽鎖の３つの超可変領域および重鎖の３つの超可変領域は、三次元空間において互いに対して配置されて、結合抗原の三次元表面に相補的な抗原結合表面を形成する。重鎖および軽鎖のそれぞれの３つの超可変領域は、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」と呼ばれる。フレームワーク領域およびＣＤＲは、例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．ら（１９９１年）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ公開番号９１－３２４２、およびＣｈｏｔｈｉａ，Ｃ．ら（１９８７年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６巻：９０１～９１７ページにおいて定義され、記載されている。各可変鎖（例えば、可変重鎖および可変軽鎖）は、典型的には、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成され、アミノ酸の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、およびＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端に配列される。
本明細書で使用される場合、「免疫細胞」とは、免疫系において機能する、例えば、感染および異物の作用物質に対して防御する、種々の細胞のいずれかを指す。実施形態では、この用語は、白血球、例えば、好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球、および単球を含む。先天性白血球には、食細胞（例えば、マクロファージ、好中球、および樹状細胞）、肥満細胞、好酸球、好塩基球、およびナチュラルキラー細胞が含まれる。先天性白血球は、接触を通じてより大きな病原体を攻撃するか、微生物を飲み込んで殺滅させることによって病原体を特定し、排除し、適応免疫応答の活性化のメディエーターである。適応免疫系の細胞は、リンパ球と呼ばれる特殊なタイプの白血球である。Ｂ細胞およびＴ細胞は、重要なタイプのリンパ球であり、骨髄の造血幹細胞に由来する。Ｂ細胞は、体液性免疫応答に関与し、Ｔ細胞は、細胞性免疫応答に関与する。用語「免疫細胞」は、免疫エフェクター細胞を含む。
「免疫エフェクター細胞」という用語は、本明細書で使用される場合、免疫応答、例えば、免疫エフェクター応答の促進に関与する細胞を指す。免疫エフェクター細胞の例は、限定されないが、Ｔ細胞、例えば、アルファ／ベータＴ細胞およびガンマ／デルタＴ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、および肥満細胞を含む。
用語「エフェクター機能」または「エフェクター応答」は、細胞の特殊化された機能を指す。Ｔ細胞のエフェクター機能は、例えば、細胞溶解活性、またはサイトカインの分泌を含むヘルパー活性であり得る。
本発明の組成物および方法は、特定の配列、またはそれに対して実質的に同一もしくは類似の配列、例えば、特定の配列に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％同一である、またはそれ以上同一である配列を有するポリペプチドおよび核酸を包含する。アミノ酸配列との関連で、用語「実質的に同一」が本明細書において使用され、第１および第２のアミノ酸配列が共通の構造ドメインおよび／または共通の機能活性を有し得るように、ｉ）第２のアミノ酸配列と同一であるか、あるいはｉｉ）第２アミノ酸配列における整列されたアミノ酸残基の保存的置換である、十分な数または最小限の数のアミノ酸残基を含有する第１アミノ酸を指す。例えば、共通の構造ドメインを含有するアミノ酸配列は、参照配列、例えば、本明細書で提供される配列に対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有する。
ヌクレオチド配列との関連で、用語「実質的に同一」が本明細書において使用され、第１および第２ヌクレオチド配列が、共通の機能活性を有するポリペプチドをコードする、または共通のポリペプチド構造ドメインまたは共通のポリペプチド機能活性をコードするように、第２核酸配列におけるアラインされたヌクレオチドと同一である、十分な数または最小限の数のヌクレオチドを含有する第１核酸配列を指す。例えば、参照配列、例えば本明細書で提供される配列に対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するヌクレオチド配列。
用語「バリアント」とは、参照アミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有するか、または実質的に同一のヌクレオチド配列によりコードされるポリペプチドを指す。一部の実施形態では、バリアントは、機能的バリアントである。
用語「機能的バリアント」とは、参照アミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有するポリペプチド、または実質的に同一のヌクレオチド配列によりコードされ、参照アミノ酸配列の１つまたは複数の活性化を有し得るポリペプチドを指す。
配列間の相同性または配列同一性（これらの用語は本明細書において互換的に使用される）の計算は以下のように行われる。
２つのアミノ酸配列または２つの核酸配列の同一性パーセントを決定するため、最適な比較目的のために配列がアラインメントされる（例えば、最適アラインメントのために、第１および第２アミノ酸または核酸配列の１つまたは両方にギャップが導入され得、非相同配列は比較目的のために無視され得る）。好ましい実施形態では、比較目的のためにアラインされた参照配列の長さは、参照配列の長さの少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、さらに好ましくは少なくとも５０％、６０％、なおさらに好ましくは少なくとも７０％、８０％、９０％、１００％である。次に、対応するアミノ酸位置またはヌクレオチド位置のアミノ酸残基またはヌクレオチドが比較される。第１配列の位置が、第２配列での対応する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチドによって占められる場合、分子は、その位置にて同一である（本明細書で使用される場合、アミノ酸または核酸「同一性」は、アミノ酸または核酸「相同性」と等しい）。
２つの配列間の同一性パーセントは、配列によって共有される同一位置の数の関数であり、２つの配列の最適アラインメントのために導入する必要がある、ギャップ数および各ギャップの長さが考慮に入れられる。
配列の比較および２つの配列間の同一性パーセントの決定は、数学的アルゴリズムを用いて達成することができる。好ましい実施形態では、２つのアミノ酸配列間の同一性パーセントは、Ｂｌｏｓｓｕｍ６２マトリックスまたはＰＡＭ２５０マトリックス、および１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップの重みおよび１、２、３、４、５、または６の長さの重みのいずれかを用いて、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍにて入手可能である）のＧＡＰプログラムに組み込まれているＮｅｅｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ（（１９７０年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８巻：４４４～４５３ページ）アルゴリズムを用いて決定される。さらに別の好ましい実施形態では、２つのヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍにて入手可能である）のＧＡＰプログラムを使用して、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックスおよび４０、５０、６０、７０、または８０のギャップの重みおよび１、２、３、４、５、または６の長さの重みを用いて決定される。特に好ましいセットのパラメーター（および別段の指定がない限り使用されるべきであるもの）は、ギャップペナルティ１２、ギャップ伸張ペナルティ４、およびフレームシフトギャップペナルティ５を有するＢｌｏｓｓｕｍ６２スコアマトリックスである。
２つのアミノ酸配列間またはヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、ＰＡＭ１２０残基重み付け表、ギャップ長ペナルティ１２およびギャップペナルティ４を用いて、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれたＥ．ＭｅｙｅｒｓおよびＷ．Ｍｉｌｌｅｒ（（１９８９年）ＣＡＢＩＯＳ、４巻：１１～１７ページ）のアルゴリズムを使用して決定することができる。
本明細書に記載される核酸およびタンパク質配列は、例えば、他のファミリーメンバーまたは関連配列を同定するために、公開データベースに対する検索を行うための「クエリー配列」として用いることができる。このような検索は、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９０年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５巻：４０３～１０ページのＮＢＬＡＳＴおよびＸＢＬＡＳＴプログラム（バージョン２．０）を用いて行うことができる。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索は、本発明の核酸分子と相同なヌクレオチド配列を得るために、ＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、ワードレングス＝１２を用いて行うことができる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索は、本発明のタンパク質分子と相同なアミノ酸配列を得るために、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、ワードレングス＝３を用いて行うことができる。比較目的のためのギャップドアラインメントを得るために、ギャップドＢＬＡＳＴは、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９７年）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５巻：３３８９～３４０２ページに記載されているように利用することができる。ＢＬＡＳＴおよびギャップドＢＬＡＳＴプログラムを利用する場合、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴおよびＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトパラメーターを使用することができる。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖを参照。
本発明の分子は、それらの機能に実質的な影響を及ぼさない、さらなる保存的または非必須アミノ酸置換を有し得ることが理解される。
用語「アミノ酸」は、天然または合成のいずれであっても、アミノ官能性と酸官能性の両方を含み、天然に存在するアミノ酸のポリマーに含まれ得るすべての分子を包含することを意図する。例示的なアミノ酸には、天然に存在するアミノ酸；そのアナログ、誘導体および同族体；バリアント側鎖を有するアミノ酸アナログ；ならびに先述のいずれかのすべての立体異性体が含まれる。本明細書で使用される場合、用語「アミノ酸」は、ＤまたはＬ光学異性体とペプチド模倣体の両方を含む。
「保存的アミノ酸置換」とは、アミノ酸残基が、類似の側鎖を有するアミノ酸残基で置換されるものである。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野において定義されている。これらのファミリーには、塩基性側鎖（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分枝側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸が含まれる。
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」（一本鎖の場合）は、本明細書において互換的に使用され、任意の長さのアミノ酸のポリマーを指す。ポリマーは、直鎖状または分枝鎖状であり得て、修飾アミノ酸を含み得、非アミノ酸により割り込まれ得る。これらの用語はまた、修飾されているアミノ酸ポリマー；例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、または標識成分とのコンジュゲーションなどの任意の他の操作を包含する。ポリペプチドは、天然源から単離することができ、真核生物もしくは原核生物宿主からの組換え技術により産生することができ、または合成手法の産生物であり得る。
用語「核酸」、「核酸配列」、「ヌクレオチド配列」、または「ポリヌクレオチド配列」、および「ポリヌクレオチド」は、互換的に使用される。それらは、デオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチド、またはそれらのアナログのいずれかの長さのヌクレオチドのポリマー形態を指す。ポリヌクレオチドは、一本鎖または二本鎖のいずれかであり得、一本鎖である場合、コード鎖または非コード（アンチセンス）鎖であり得る。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチドおよびヌクレオチドアナログなどの修飾ヌクレオチドを含み得る。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド成分によって割り込まれ得る。ポリヌクレオチドは、重合後、例えば、標識成分とのコンジュゲーションによってさらに修飾され得る。核酸は、組換えポリヌクレオチド、またはゲノム、ｃＤＮＡ、天然に存在しないかもしくは非天然配列で別のポリヌクレオチドに連結されている半合成、または合成起源のポリヌクレオチドであり得る。
用語「単離された」とは、本明細書で使用される場合、その元の環境または天然の環境（例えば、天然に存在する場合には自然環境）から取り出される材料を指す。例えば、生きている動物に存在する天然に存在するポリヌクレオチドまたはポリペプチドは単離されないが、天然系の共存物質の一部または全部からヒトの介入によって分離された同一のポリヌクレオチドまたはポリペプチドが単離される。このようなポリヌクレオチドは、ベクターの一部であり得、および／またはこのようなポリヌクレオチドもしくはポリペプチドは、組成物の一部であり得、このようなベクターまたは組成物は、天然に見出される環境の一部ではないという点で依然として単離され得る。
本発明の種々の態様を以下にさらに詳細に説明する。追加の定義は、明細書全体にわたって記載される。
抗体分子
一実施形態では、抗体分子は、ＴＣＲＢＶ抗原、例えば、（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）に結合する。一部の実施形態では、ＴＣＲＢＶ抗原は、例えば、哺乳動物、例えば、ヒト、ＴＣＲＢＶ抗原である。一部の実施形態では、抗体分子は、リンパ球、例えば、Ｔ細胞、例えば、哺乳動物、例えば、ヒト、リンパ球、例えば、Ｔ細胞上のＴＣＲＢＶ抗原に結合する。例えば、抗体分子は、例えば、リンパ球、例えば、Ｔ細胞の表面上に、ＴＣＲＢＶを含むＴＣＲの部分として、発現されるＴＣＲＢＶ抗原に特異的に結合する。
一実施形態では、抗体分子は単一特異性抗体分子であり、単一のエピトープに結合する。例えば、単一特異性抗体分子は、それぞれが同じエピトープに結合する複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を有する。
一実施形態では、抗体分子は、多特異性または多機能性抗体分子であり、例えば、それは複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列のうちの第１のものは第１のエピトープに対する結合特異性を有し、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列のうちの第２のものは第２のエピトープに対する結合特異性を有する。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、同じ抗原、例えば、同じタンパク質（または多量体タンパク質のサブユニット）上にある。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップする。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップしない。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、異なる抗原、例えば、異なるタンパク質（または多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。一実施形態では、多特異性抗体分子は、第３、第４または第５の免疫グロブリン可変ドメインを含む。一実施形態では、多特異性抗体分子は、二特異性抗体分子、三特異性抗体分子、または四特異性抗体分子である。
一実施形態では、多特異性抗体分子は二特異性抗体分子である。二特異性抗体は、２つだけの抗原に対して特異性を有する。二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列および第２のエピトープに対して結合特異性を有する第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列により特徴付けられる。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、同じ抗原、例えば、同じタンパク質（または多量体タンパク質のサブユニット）上にある。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップする。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップしない。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、異なる抗原、例えば、異なるタンパク質（または多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列および軽鎖可変ドメイン配列ならびに第２のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列および軽鎖可変ドメイン配列を含む。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体および第２のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体を含む。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体、またはその断片、および第２のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体、またはその断片を含む。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖもしくはＦａｂ、またはその断片、および第２のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖもしくはＦａｂ、またはその断片を含む。
一実施形態では、抗体分子は、ダイアボディ、および一本鎖分子の他に、抗体の抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖ）を含む。例えば、抗体分子は、重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列（本明細書でＶＨと略記される）、および軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列（本明細書でＶＬと略記される）を含むことができる。一実施形態では、抗体分子は、重鎖および軽鎖を含むかまたはからなる（本明細書で半抗体と称される。別の例では、抗体分子は、２つの重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列および２つの軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列を含み、それによって、２つの抗原結合性部位、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｃ、Ｆｄ、Ｆｄ’、Ｆｖ、一本鎖抗体（例えばｓｃＦｖ）、単一可変ドメイン抗体、ダイアボディ（Ｄａｂ）（二価および二特異性）、ならびにキメラ（例えば、ヒト化）抗体を形成し、これらは全長抗体の修飾によって産生されるか、または組換えＤＮＡ技術を使用してｄｅ ｎｏｖｏで合成されるものであってもよい。これらの機能的抗体断片は、それらの各々の抗原または受容体と選択的に結合する能力を保持する。抗体および抗体断片は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、およびＩｇＥが挙げられるがそれに限定されない抗体の任意のクラスから、ならびに抗体の任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４）からのものであり得る。抗体分子の調製物は、モノクローナルまたはポリクローナルであり得る。抗体分子はまた、ヒト、ヒト化、ＣＤＲグラフト化、またはｉｎ ｖｉｔｒｏで生成された抗体であり得る。抗体は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４から選択される重鎖定常領域を有し得る。抗体はまた、例えば、カッパまたはラムダから選択される軽鎖を有し得る。「免疫グロブリン」（Ｉｇ）という用語は、本明細書で「抗体」という用語と交換可能に使用される。
抗体分子の抗原結合性断片の例としては、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価断片である、Ｆａｂ断片、（ｉｉ）ヒンジ領域においてジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片である、Ｆ（ａｂ’）２断片、（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなる、Ｆｄ断片、（ｉｖ）抗体の単一のアームのＶＬおよびＶＨドメインからなる、Ｆｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなる、ダイアボディ（ｄＡｂ）断片、（ｖｉ）ラクダまたはラクダ化可変ドメイン、（ｖｉｉ）一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、例えば、Ｂｉｒｄら、（１９８８） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３～４２６ページ；およびＨｕｓｔｏｎら、（１９８８） Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８５：５８７９～５８８３ページを参照）、（ｖｉｉｉ）単一ドメイン抗体が挙げられる。これらの抗体断片は、当業者に公知の従来技術を使用して得られ、断片は、インタクトな抗体と同じ方式で有用性についてスクリーニングされる。
抗体分子としては、インタクトな分子の他に、その機能的断片が挙げられる。抗体分子の定常領域は、抗体の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異され得る。
抗体分子はまた単一ドメイン抗体であり得る。単一ドメイン抗体は、その相補性（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ）決定領域が単一ドメインポリペプチドの部分である抗体を含むことができる。例としては、重鎖抗体、軽鎖を天然に欠いている抗体、従来の４鎖抗体に由来する単一ドメイン抗体、操作された抗体および抗体に由来するもの以外の単一ドメインスキャフォールドが挙げられるがそれに限定されない。単一ドメイン抗体は、当該技術分野における任意のもの、または任意の将来的な単一ドメイン抗体であってもよい。単一ドメイン抗体は、マウス、ヒト、ラクダ、ラマ、魚、サメ、ヤギ、ウサギ、およびウシが挙げられるがそれに限定されない任意の種に由来してもよい。本発明の別の態様によれば、単一ドメイン抗体は、軽鎖を欠いている重鎖抗体として公知の天然に存在する単一ドメイン抗体である。そのような単一ドメイン抗体は、例えば、ＷＯ９４０４６７８に開示されている。明確性の理由から、軽鎖を天然に欠いている重鎖抗体に由来するこの可変ドメインは、４鎖免疫グロブリンの従来のＶＨからそれを区別するためにＶＨＨまたはナノボディとして本明細書で知られる。そのようなＶＨＨ分子は、ラクダ科の種、例えば、ラクダ、ラマ、ヒトコブラクダ、アルパカおよびグアナコにおいて産生された抗体に由来することができる。ラクダ科以外の他の種が、軽鎖を天然に欠いている重鎖抗体を産生することがあり、そのようなＶＨＨは本発明の範囲内である。
ＶＨおよびＶＬ領域は、「フレームワーク領域」（ＦＲまたはＦＷ）と称されるより保存された領域が差し挟まれた、「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域にさらに分割することができる。
フレームワーク領域およびＣＤＲの範囲は、多数の方法によって精密に定義されている（Ｋａｂａｔ， Ｅ． Ａ．ら、（１９９１） Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｕ．Ｓ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ． ９１－３２４２；Ｃｈｏｔｈｉａ， Ｃ．ら、（１９８７） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９６：９０１～９１７ページ；およびＯｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用されるＡｂＭの定義を参照。一般に、例えば、「Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｄｏｍａｉｎｓ」、Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｌａｂ Ｍａｎｕａｌ（Ｄｕｅｂｅｌ， Ｓ．およびＫｏｎｔｅｒｍａｎｎ， Ｒ．編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ、Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ）を参照）。
「相補性決定領域」、および「ＣＤＲ」という用語は、本明細書で使用される場合、抗原特異性および結合親和性を付与する抗体可変領域内のアミノ酸の配列を指す。一般に、各重鎖可変領域中に３つのＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）および各軽鎖可変領域中に３つのＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）がある。
所与のＣＤＲの精密なアミノ酸配列の境界は、Ｋａｂａｔら、（１９９１）、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ（「Ｋａｂａｔ」番号付けスキーム）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉら、（１９９７） ＪＭＢ ２７３、９２７～９４８ページ（「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキーム）に記載のものを含む、多数の公知のスキームのいずれかを使用して決定することができる。本明細書で使用される場合、「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号スキームに従って定義されるＣＤＲは、「超可変ループ」と称されることもある。
例えば、Ｋａｂａｔの下で、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）中のＣＤＲアミノ酸残基は、３１～３５（ＨＣＤＲ１）、５０～６５（ＨＣＤＲ２）、および９５～１０２（ＨＣＤＲ３）と番号付けされ、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）中のＣＤＲアミノ酸残基は、２４～３４（ＬＣＤＲ１）、５０～５６（ＬＣＤＲ２）、および８９～９７（ＬＣＤＲ３）と番号付けされる。Ｃｈｏｔｈｉａの下で、ＶＨ中のＣＤＲアミノ酸は、２６～３２（ＨＣＤＲ１）、５２～５６（ＨＣＤＲ２）、および９５～１０２（ＨＣＤＲ３）と番号付けされ、ＶＬ中のアミノ酸残基は、２６～３２（ＬＣＤＲ１）、５０～５２（ＬＣＤＲ２）、および９１～９６（ＬＣＤＲ３）と番号付けされる。
各ＶＨおよびＶＬは、典型的には、以下の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端へと並んだ３つのＣＤＲおよび４つのＦＲを含む。
抗体分子は、ポリクローナルまたはモノクローナル抗体であり得る。
「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」という用語は、本明細書で使用される場合、単一の分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対して単一の結合特異性および親和性を表し示す。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術によって、またはハイブリドーマ技術を使用しない方法（例えば、組換え法）によって作製することができる。
抗体は、組換えによって産生することができ、例えば、ファージディスプレイまたはコンビナトリアル法によって産生することができる。
抗体を生成するためのファージディスプレイおよびコンビナトリアル法は、当該技術分野において公知である（例えば、Ｌａｄｎｅｒら、米国特許第５，２２３，４０９号；Ｋａｎｇら、国際公開ＷＯ９２／１８６１９；Ｄｏｗｅｒら、国際公開ＷＯ９１／１７２７１；Ｗｉｎｔｅｒら、国際公開ＷＯ９２／２０７９１；Ｍａｒｋｌａｎｄら、国際公開ＷＯ９２／１５６７９；Ｂｒｅｉｔｌｉｎｇら、国際公開ＷＯ９３／０１２８８；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、国際公開ＷＯ９２／０１０４７；Ｇａｒｒａｒｄら、国際公開ＷＯ９２／０９６９０；Ｌａｄｎｅｒら、国際公開ＷＯ９０／０２８０９；Ｆｕｃｈｓら、（１９９１） Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７０～１３７２ページ；Ｈａｙら、（１９９２） Ｈｕｍ Ａｎｔｉｂｏｄ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ３：８１～８５ページ；Ｈｕｓｅら、（１９８９） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５～１２８１ページ；Ｇｒｉｆｆｔｈｓら、（１９９３） ＥＭＢＯ Ｊ １２：７２５～７３４ページ；Ｈａｗｋｉｎｓら、（１９９２） Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２２６：８８９～８９６ページ；Ｃｌａｃｋｓｏｎら、（１９９１） Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４～６２８ページ；Ｇｒａｍら、（１９９２） ＰＮＡＳ ８９：３５７６～３５８０ページ；Ｇａｒｒａｄら、（１９９１） Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７３～１３７７ページ；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、（１９９１） Ｎｕｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ １９：４１３３～４１３７ページ；およびＢａｒｂａｓら、（１９９１） ＰＮＡＳ ８８：７９７８～７９８２ページ（これらのすべての内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に記載される通りである）。
一実施形態では、抗体は、完全ヒト抗体（例えば、ヒト免疫グロブリン配列からの抗体を産生するように遺伝子操作されたマウスにおいて作製される抗体）、または非ヒト抗体、例えば、齧歯動物（マウスもしくはラット）、ヤギ、霊長動物（例えば、サル）、ラクダ抗体である。好ましくは、非ヒト抗体は齧歯動物（マウスまたはラット抗体）である。齧歯動物抗体を産生する方法は当該技術分野において公知である。
ヒトモノクローナル抗体は、マウス系ではなくヒト免疫グロブリン遺伝子を持つトランスジェニックマウスを使用して生成することができる。目的の抗原を用いて免疫化されたこれらのトランスジェニックマウスからの脾臓細胞を使用して、ヒトタンパク質からのエピトープに対して特異的親和性を有するヒトｍＡｂを分泌するハイブリドーマが産生される（例えば、Ｗｏｏｄら、国際出願ＷＯ９１／００９０６、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉら、ＰＣＴ国際公開ＷＯ９１／１０７４１；Ｌｏｎｂｅｒｇら、国際出願ＷＯ９２／０３９１８；Ｋａｙら、国際出願９２／０３９１７；Ｌｏｎｂｅｒｇ， Ｎ．ら、１９９４ Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６～８５９ページ；Ｇｒｅｅｎ， Ｌ．Ｌ．ら、１９９４ Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔ． ７：１３～２１ページ；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｓ．Ｌ．ら、１９９４ Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８１：６８５１～６８５５ページ；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎら、１９９３ Ｙｅａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ ７：３３～４０ページ；Ｔｕａｉｌｌｏｎら、１９９３ ＰＮＡＳ ９０：３７２０～３７２４ページ；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎら、１９９１ Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２１：１３２３～１３２６ページを参照）。
抗体分子は、可変領域、またはその部分、例えば、ＣＤＲが、非ヒト生物、例えば、ラットまたはマウスにおいて生成されたものであり得る。キメラ、ＣＤＲグラフト化、およびヒト化抗体は、本発明の範囲内である。非ヒト生物、例えば、ラットまたはマウスにおいて生成され、次に、ヒトにおける抗原性を減少させるために、例えば、可変フレームワークまたは定常領域において修飾された抗体分子は、本発明の範囲内である。
「有効ヒト」タンパク質は、中和抗体応答、例えば、ヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）応答を実質的に誘起しないタンパク質である。ＨＡＭＡは、多数の状況において、例えば、例えば慢性または再発性の疾患状態の処置において、抗体分子が繰り返し投与される場合に、問題となり得る。ＨＡＭＡ応答は、血清からの抗体クリアランスの増加（例えば、Ｓａｌｅｈら、Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．、３２：１８０～１９０ページ（１９９０）を参照）のため、そしてまた潜在的なアレルギー性反応（例えば、ＬｏＢｕｇｌｉｏら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ、５：５１１７～５１２３ページ（１９８６）を参照）のため、繰返しの抗体投与を潜在的に有効でないものとさせることがある。
キメラ抗体は、当該技術分野において公知の組換えＤＮＡ技術によって産生することができる（Ｒｏｂｉｎｓｏｎら、国際公開ＰＣＴ／ＵＳ８６／０２２６９；Ａｋｉｒａら、欧州特許出願第１８４，１８７号；Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ， Ｍ．、欧州特許出願第１７１，４９６号；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、欧州特許出願第１７３，４９４号；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、国際出願ＷＯ８６／０１５３３；Ｃａｂｉｌｌｙら、米国特許第４，８１６，５６７号；Ｃａｂｉｌｌｙら、欧州特許出願第１２５，０２３号；Ｂｅｔｔｅｒら、（１９８８ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０４１～１０４３ページ）；Ｌｉｕら、（１９８７） ＰＮＡＳ ８４：３４３９～３４４３ページ；Ｌｉｕら、１９８７、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １３９：３５２１～３５２６ページ；Ｓｕｎら、（１９８７） ＰＮＡＳ ８４：２１４～２１８ページ；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａら、１９８７、Ｃａｎｃ． Ｒｅｓ． ４７：９９９～１００５ページ；Ｗｏｏｄら、（１９８５） Ｎａｔｕｒｅ ３１４：４４６～４４９ページ；およびＳｈａｗら、１９８８、Ｊ． Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． ８０：１５５３～１５５９ページを参照）。
ヒト化またはＣＤＲグラフト化抗体は、ドナーＣＤＲで置き換えられた（重およびまたは軽免疫グロブリン（ｉｍｍｕｏｇｌｏｂｕｌｉｎ）鎖のうちの）少なくとも１つまたは２つであるが一般に３つすべてのレシピエントＣＤＲを有する。抗体は、非ヒトＣＤＲの少なくとも部分で置き換えられていてもよく、またはＣＤＲの一部のみが非ヒトＣＤＲで置き換えられていてもよい。抗原への結合のために要求されるＣＤＲの数を置き換えることのみが必要である。好ましくは、ドナーは、齧歯動物抗体、例えば、ラットまたはマウス抗体であり、レシピエントは、ヒトフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークである。典型的には、ＣＤＲを提供する免疫グロブリンは「ドナー」と呼ばれ、フレームワークを提供する免疫グロブリンは「アクセプター」と呼ばれる。一実施形態では、ドナー免疫グロブリンは非ヒト（例えば、齧歯動物）である。アクセプターフレームワークは、天然に存在する（例えば、ヒト）フレームワークもしくはコンセンサスフレームワーク、またはそれに対して約８５％もしくはより高い、好ましくは、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一である配列である。
本明細書で使用される場合、「コンセンサス配列」という用語は、関連配列のファミリーにおいて最も頻繁に生じるアミノ酸（またはヌクレオチド）から形成される配列を指す（例えば、Ｗｉｎｎａｋｅｒ、Ｆｒｏｍ Ｇｅｎｅｓ ｔｏ Ｃｌｏｎｅｓ（Ｖｅｒｌａｇｓｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ １９８７）を参照。タンパク質のファミリーにおいて、コンセンサス配列中の各位置は、ファミリーにおいてその位置において最も頻繁に生じるアミノ酸によって占有される。２つのアミノ酸が等しく頻繁に生じる場合、いずれかをコンセンサス配列に含めることができる。「コンセンサスフレームワーク」は、コンセンサス免疫グロブリン配列中のフレームワーク領域を指す。
抗体分子は、当該技術分野において公知の方法によってヒト化させることができる（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｓ． Ｌ．、１９８５、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２～１２０７ページ、Ｏｉら、１９８６、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４、ならびにＱｕｅｅｎら、米国特許第５，５８５，０８９号、米国特許第５，６９３，７６１号および米国特許第５，６９３，７６２号（これらのすべての内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
ヒト化またはＣＤＲグラフト化抗体分子は、ＣＤＲグラフト化またはＣＤＲ置換によって産生することができ、それにおいて免疫グロブリン鎖の１つ、２つ、またはすべてのＣＤＲを置き換えることができる。例えば、米国特許第５，２２５，５３９号；Ｊｏｎｅｓら、１９８６ Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５５２～５２５ページ；Ｖｅｒｈｏｅｙａｎら、１９８８ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４；Ｂｅｉｄｌｅｒら、１９８８ Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４１：４０５３～４０６０ページ；Ｗｉｎｔｅｒ、米国特許第５，２２５，５３９号（これらのすべての内容はこれにより明示的に参照により本明細書に組み込まれる）を参照。Ｗｉｎｔｅｒは、本発明のヒト化抗体を調製するために使用され得るＣＤＲグラフト化方法を記載する（１９８７年３月２６日に出願された英国特許出願第２１８８６３８Ａ号；Ｗｉｎｔｅｒ、米国特許第５，２２５，５３９号）（その内容は明示的に参照により本明細書に組み込まれる）。
具体的なアミノ酸が置換、欠失または付加されたヒト化抗体分子もまた本発明の範囲である。ドナーからのアミノ酸を選択する基準は、米国特許第５，５８５，０８９号、例えば、米国特許第５，５８５，０８９号の第１２～１６欄、例えば、米国特許第５，５８５，０８９号の第１２～１６欄に記載されている（その内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）。抗体をヒト化する他の技術は、１９９２年１２月２３日に公開されたＰａｄｌａｎら、ＥＰ５１９５９６Ａ１に記載されている。
抗体分子は一本鎖抗体であり得る。一本鎖抗体（ｓｃＦＶ）は操作されていてもよい（例えば、Ｃｏｌｃｈｅｒ， Ｄ．ら、（１９９９） Ａｎｎ Ｎ Ｙ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ８８０：２６３～８０ページ；およびＲｅｉｔｅｒ， Ｙ．、（１９９６） Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２：２４５～５２ページを参照）。一本鎖抗体は、二量体化または多量体化して、同じ標的タンパク質の異なるエピトープに対して特異性を有する多価抗体を生成することができる。
さらに他の実施形態では、抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、およびＩｇＥの重鎖定常領域から選択される、特に、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の（例えば、ヒト）重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域を有する。別の実施形態では、抗体分子は、例えば、カッパまたはラムダの（例えば、ヒト）軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。定常領域は、抗体の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、および／または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異され得る。一実施形態では、抗体は、エフェクター機能を有し、かつ補体を固定することができる。他の実施形態では、抗体は、エフェクター細胞をリクルートせず、かつ補体を固定しない。別の実施形態では、抗体は、Ｆｃ受容体に結合する低減した能力を有し、または該能力を有しない。例えば、それは、Ｆｃ受容体への結合をサポートしないアイソタイプまたはサブタイプ、断片または他の突然変異体であり、例えば、それは、突然変異誘発されたＦｃ受容体結合性領域を有し、またはそれを欠失している。
抗体定常領域を変更する方法は当該技術分野において公知である。変更された機能、例えば、エフェクターリガンド、例えば、細胞上のＦｃＲ、または補体のＣ１成分に対する変更された親和性を有する抗体は、抗体の定常部分中の少なくとも１つのアミノ酸残基を異なる残基で置き換えることによって産生することができる（例えば、ＥＰ３８８，１５１Ａ１、米国特許第５，６２４，８２１号および米国特許第５，６４８，２６０号（これらのすべての内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。マウス、または他の種の免疫グロブリンに応用された場合にこれらの機能を低減または排除する類似の種類の変更が記載され得る。
抗体分子は、誘導体化または別の機能分子（例えば、別のペプチドもしくはタンパク質）に連結させることができる。本明細書で使用される場合、「誘導体化」された抗体分子は、修飾された抗体分子である。誘導体化の方法としては、蛍光部分、放射性ヌクレオチド、毒素、酵素または親和性リガンド、例えば、ビオチンの付加が挙げられるがそれに限定されない。よって、本発明の抗体分子は、免疫接着分子を含む、本明細書に記載の抗体の誘導体化および他に修飾された形態を含むことが意図される。例えば、抗体分子は、１つまたは複数の他の分子実体、例えば、別の抗体（例えば、二特異性抗体もしくはダイアボディ）、検出可能な剤、細胞傷害剤、医薬剤、および／または抗体もしくは抗体部分の別の分子（例えば、ストレプトアビジンコア領域もしくはポリヒスチジンタグ）との会合を媒介することができるタンパク質もしくはペプチドに（化学的カップリング、遺伝子融合、非共有結合的会合またはその他によって）機能的に連結させることができる。
１つの種類の誘導体化された抗体分子は、（例えば、二特異性抗体を作出するために、同じ種類または異なる種類の）２つまたはより多くの抗体を架橋することによって産生される。好適なクロスリンカーとしては、適切なスペーサー（例えば、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル）またはホモ二官能性（例えば、スベリン酸ジサクシンイミジル）によって分離された２つの別個に反応性の基を有するヘテロ二官能性のものが挙げられる。そのようなリンカーは、Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌから入手可能である。
多特異性または多機能性抗体分子
本明細書で定義される多特異性および多機能性分子の例示的な構造は、全体を通じて記載されている。例示的な構造は、Ｗｅｉｄｌｅ Ｕら、（２０１３） Ｔｈｅ Ｉｎｔｒｉｇｕｉｎｇ Ｏｐｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｍｕｌｔｉｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｆｏｒｍａｔｓ ｆｏｒ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ． Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ＆ Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ １０： １～１８ページ（２０１３）；およびＳｐｉｅｓｓ Ｃら、（２０１５） Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｆｏｒｍａｔｓ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ６７： ９５～１０６ページ（これらのそれぞれの全内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）にさらに記載されている。
実施形態では、多特異性抗体分子は、異なる部位が異なる抗原に特異的である１つより多くの抗原結合性部位を含むことができる。実施形態では、多特異性抗体分子は、同じ抗原上の１つより多く（例えば、２つまたはより多く）のエピトープに結合することができる。実施形態では、多特異性抗体分子は、標的細胞（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原を含むリンパ球（例えば、Ｔ細胞））に特異的な抗原結合性部位および免疫エフェクター細胞に特異的な異なる抗原結合性部位を含む。一実施形態では、多特異性抗体分子は二特異性抗体分子である。二特異性抗体分子は、５つの異なる構造群：（ｉ）二特異性免疫グロブリンＧ（ＢｓＩｇＧ）、（ｉｉ）追加の抗原結合性部分を付加されたＩｇＧ、（ｉｉｉ）二特異性抗体断片、（ｉｖ）二特異性融合タンパク質、および（ｖ）二特異性抗体コンジュゲートに分類することができる。
ＢｓＩｇＧは、各抗原について一価のフォーマットである。例示的なＢｓＩｇＧフォーマットとしては、ｃｒｏｓｓＭａｂ、ＤＡＦ（ｔｗｏ－ｉｎ－ｏｎｅ）、ＤＡＦ（ｆｏｕｒ－ｉｎ－ｏｎｅ）、ＤｕｔａＭａｂ、ＤＴ－ＩｇＧ、ノブ・イン・ホール（ｋｎｏｂｓ－ｉｎ－ｈｏｌｅｓ）共通ＬＣ、ノブ・イン・ホールアセンブリー、電荷対、Ｆａｂアーム交換、ＳＥＥＤボディ、ｔｒｉｏｍａｂ、ＬＵＺ－Ｙ、Ｆｃａｂ、κλボディ、直交Ｆａｂが挙げられるがそれに限定されない。Ｓｐｉｅｓｓら、Ｍｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ６７（２０１５）：９５～１０６ページを参照。例示的なＢｓＩｇＧとしては、抗ＣＤ３アームおよび抗ＥｐＣＡＭアームを含有するカツマキソマブ（Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｔｒｉｏｎ Ｐｈａｒｍａ、Ｎｅｏｐｈａｒｍ）、ならびにＣＤ３およびＨＥＲ２を標的化するエルツマキソマブ（Ｎｅｏｖｉｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ）が挙げられる。一部の実施形態では、ＢｓＩｇＧは、ヘテロ二量体化のために操作された重鎖を含む。例えば、重鎖は、「ノブ・イントゥー・ホール」（ｋｎｏｂｓ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅｓ）戦略、ＳＥＥＤプラットフォーム、（例えば、κλボディ中の）共通重鎖、およびヘテロ二量体Ｆｃ領域の使用を使用してヘテロ二量体化のために操作することができる。Ｓｐｉｅｓｓら、Ｍｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ６７（２０１５）：９５～１０６ページを参照。ＢｓＩｇＧにおけるホモ二量体の重鎖対合を回避するために使用されてきた戦略としては、ノブ・イン・ホール、デュオボディ（ｄｕｏｂｏｄｙ）、アジメトリック（ａｚｙｍｅｔｒｉｃ）、電荷対、ＨＡ－ＴＦ、ＳＥＥＤボディ、および差次的なプロテインＡ親和性が挙げられる。同文献を参照。ＢｓＩｇＧは、異なる宿主細胞中での成分抗体の別々の発現およびその後の精製／ＢｓＩｇＧへのアセンブリーによって産生することができる。ＢｓＩｇＧはまた、単一の宿主細胞中での成分抗体の発現によって産生することができる。ＢｓＩｇＧは、例えば、プロテインＡおよび逐次的ｐＨ溶出を使用する、親和性クロマトグラフィーを使用して精製することができる。
追加の抗原結合性部分を付加されたＩｇＧは、二特異性抗体分子の別のフォーマットである。例えば、単一特異性ＩｇＧは、例えば、重鎖または軽鎖のいずれかのＮまたはＣ末端において、追加の抗原結合性単位を単一特異性ＩｇＧに付加することによって二特異性を有するように操作することができる。例示的な追加の抗原結合性単位としては、単一ドメイン抗体（例えば、可変重鎖または可変軽鎖）、操作されたタンパク質スキャフォールド、および対合した抗体可変ドメイン（例えば、単鎖可変断片または可変断片）が挙げられる。同文献を参照。付加されたＩｇＧフォーマットの例としては、二重可変ドメインＩｇＧ（ＤＶＤ－Ｉｇ）、ＩｇＧ（Ｈ）－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－（Ｈ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－（Ｌ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ，Ｈ）－Ｆｖ、ＩｇＧ（Ｈ）－Ｖ、Ｖ（Ｈ）－ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）－Ｖ、Ｖ（Ｌ）－ＩｇＧ、ＫＩＨ ＩｇＧ－ｓｃＦａｂ、２ｓｃＦｖ－ＩｇＧ、ＩｇＧ－２ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ４－Ｉｇ、ザイボディ（ｚｙｂｏｄｙ）、およびＤＶＩ－ＩｇＧ（４－ｉｎ－１）が挙げられる。Ｓｐｉｅｓｓら、Ｍｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ６７（２０１５）：９５～１０６ページを参照。ＩｇＧ－ｓｃＦｖの例は、ＩＧＦ－１ＲおよびＨＥＲ３に結合するＭＭ－１４１（Ｍｅｒｒｉｍａｃｋ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）である。ＤＶＤ－Ｉｇの例としては、ＩＬ－１αおよびＩＬ－１βに結合するＡＢＴ－９８１（ＡｂｂＶｉｅ）、ならびにＴＮＦおよびＩＬ－１７Ａに結合するＡＢＴ－１２２（ＡｂｂＶｉｅ）が挙げられる。
二特異性抗体断片（ＢｓＡｂ）は、抗体定常ドメインの一部またはすべてを欠いた二特異性抗体分子のフォーマットである。例えば、一部のＢｓＡｂはＦｃ領域を欠いている。実施形態では、二特異性抗体断片は、単一の宿主細胞中でのＢｓＡｂの効率的な発現を許容するペプチドリンカーによって接続された重鎖および軽鎖領域を含む。例示的な二特異性抗体断片としては、ナノボディ、ナノボディ－ＨＡＳ、ＢｉＴＥ、ダイアボディ、ＤＡＲＴ、ＴａｎｄＡｂ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ－ＣＨ３、ダイアボディ－ＣＨ３、トリプルボディ、ミニ抗体、ミニボディ、ＴｒｉＢｉミニボディ、ｓｃＦｖ－ＣＨ３ ＫＩＨ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－ＣＨ－ＣＬ－ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆ（ａｂ’）２－ｓｃＦｖ２、ｓｃＦｖ－ＫＩＨ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ－Ｆｃ、四価ＨＣＡｂ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ－Ｆｃ、ダイアボディ－Ｆｃ、タンデムｓｃＦｖ－Ｆｃ、およびイントラボディが挙げられるがそれに限定されない。同文献を参照。例えば、ＢｉＴＥフォーマットはタンデムｓｃＦｖを含み、成分ｓｃＦｖは、Ｔ細胞上のＣＤ３、およびリンパ球、例えば、Ｔ細胞上のＴＣＲＢＶ抗原に結合する。
二特異性融合タンパク質としては、例えば、追加の特異性および／または機能性を加えるために、他のタンパク質に連結された抗体断片が挙げられる。二特異性融合タンパク質の例は、ＨＬＡ提示ペプチドを認識する親和性成熟したＴ細胞受容体に連結された抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含むｉｍｍＴＡＣである。実施形態では、より高い価数を有する二特異性抗体分子を生成するためにドック－アンド－ロック（ｄｏｃｋ－ａｎｄ－ｌｏｃｋ）（ＤＮＬ）法を使用することができる。また、アルブミン結合性タンパク質またはヒト血清アルブミンへの融合は、抗体断片の血清半減期を延長させることができる。同文献を参照。
実施形態では、ＢｓＡｂ分子を作出するために化学的コンジュゲーション、例えば、抗体および／または抗体断片の化学的コンジュゲーションを使用することができる。同文献を参照。例示的な二特異性抗体コンジュゲートとしては、ＣｏｖＸボディフォーマットが挙げられ、該フォーマットでは、低分子量薬物が、各Ｆａｂアームまたは抗体もしくはその断片中の単一の反応性リシンに部位特異的にコンジュゲートしている。実施形態では、コンジュゲーションは、低分子量薬物の血清半減期を向上させる。例示的なＣｏｖＸボディは、ＶＥＧＦまたはＡｎｇ２のいずれかを阻害する２つの短いペプチドにコンジュゲートした抗体を含むＣＶＸ－２４１（ＮＣＴ０１００４８２２）である。同文献を参照。
抗体分子は、例えば、宿主系中での少なくとも１つまたは複数の成分の、組換え発現によって産生することができる。例示的な宿主系としては、真核細胞（例えば、哺乳動物細胞、例えば、ＣＨＯ細胞、または昆虫細胞、例えば、ＳＦ９もしくはＳ２細胞）および原核細胞（例えば、Ｅ． ｃｏｌｉ）が挙げられる。二特異性抗体分子は、異なる宿主細胞中での成分の別々の発現およびその後の精製／アセンブリーによって産生することができる。代替的に、抗体分子は、単一の宿主細胞中での成分の発現によって産生することができる。二特異性抗体分子の精製は、例えば、プロテインＡおよび逐次的ｐＨ溶出を使用する、親和性クロマトグラフィーなどの、様々な方法によって行うことができる。他の実施形態では、親和性タグ、例えば、ヒスチジン含有タグ、ｍｙｃタグ、またはストレプトアビジンタグを精製のために使用することができる。
ＣＤＲグラフト化スキャフォールド
実施形態では、抗体分子は、ＣＤＲグラフト化スキャフォールドドメインである。実施形態では、スキャフォールドドメインは、フィブロネクチンドメイン、例えば、フィブロネクチンＩＩＩ型ドメインに基づく。フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）ドメインの全体的なフォールドは、最小の機能的抗体断片、抗体重鎖の可変ドメインのそれに密接に関係する。Ｆｎ３の末端には３つのループがあり、ＢＣ、ＤＥおよびＦＧループの位置は、抗体のＶＨドメインのＣＤＲ１、２および３のそれにおおよそ対応する。Ｆｎ３はジスルフィド結合を有さず、したがって、Ｆｎ３は、抗体およびそれらの断片とは異なり、還元条件下で安定である（例えば、ＷＯ９８／５６９１５、ＷＯ０１／６４９４２、ＷＯ００／３４７８４を参照）。Ｆｎ３ドメインは、例えば、本明細書に記載の抗原／マーカー／細胞に結合するドメインを選択するために、（例えば、本明細書に記載のＣＤＲまたは超可変ループを使用して）修飾または変更することができる。
実施形態では、スキャフォールドドメイン、例えば、フォールディングしたドメインは、抗体、例えば、モノクローナル抗体の重鎖可変ドメインから３つのベータ鎖を欠失させることにより作出される「ミニボディ」スキャフォールドに基づく（例えば、Ｔｒａｍｏｎｔａｎｏら、１９９４、Ｊ Ｍｏｌ． Ｒｅｃｏｇｎｉｔ． ７：９、およびＭａｒｔｉｎら、１９９４、ＥＭＢＯ Ｊ． １３：５３０３～５３０９ページを参照）。「ミニボディ」は、２つの超可変ループを提示するために使用することができる。実施形態では、スキャフォールドドメインは、Ｖ様ドメイン（例えば、Ｃｏｉａら、ＷＯ９９／４５１１０を参照）、または２つのジスルフィド結合によって一緒に保持された７４残基の６鎖ベータシートサンドイッチであるテンダミスタチン（ｔｅｎｄａｍｉｓｔａｔｉｎ）に由来するドメインである（例えば、ＭｃＣｏｎｎｅｌｌおよびＨｏｅｓｓ、１９９５、Ｊ Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２５０：４６０を参照）。例えば、テンダミスタチンのループは、例えば、本明細書に記載のマーカー／抗原／細胞に結合するドメインを選択するために、（例えば、ＣＤＲまたは超可変ループを使用して）修飾または変更することができる。別の例示的なスキャフォールドドメインは、ＣＴＬＡ－４の細胞外ドメインに由来するベータ－サンドイッチ構造である（例えば、ＷＯ００／６００７０を参照）。
他の例示的なスキャフォールドドメインとしては、Ｔ細胞受容体、ＭＨＣタンパク質、細胞外ドメイン（例えば、フィブロネクチンＩＩＩ型リピート、ＥＧＦリピート）、プロテアーゼ阻害剤（例えば、Ｋｕｎｉｔｚドメイン、エコチン、およびＢＰＴＩなど）、ＴＰＲリピート、トリフォイル（ｔｒｉｆｏｉｌ）構造、ジンクフィンガードメイン、ＤＮＡ結合性タンパク質、特に、単量体ＤＮＡ結合性タンパク質、ＲＮＡ結合性タンパク質、酵素、例えば、プロテアーゼ（特に、不活性化プロテアーゼ）、ＲＮａｓｅ、シャペロン、例えば、チオレドキシン、および熱ショックタンパク質、ならびに細胞内シグナル伝達ドメイン（例えば、ＳＨ２およびＳＨ３ドメイン）が挙げられるがそれに限定されない。例えば、米国特許出願公開第２００４０００９５３０号および米国特許第７，５０１，１２１号（参照により本明細書に組み込まれる）を参照。
実施形態では、スキャフォールドドメインは、例えば、以下の基準：（１）アミノ酸配列、（２）いくつかの相同ドメインの配列、（３）三次元構造、および／または（４）ｐＨ、温度、塩分、有機溶媒、酸化剤濃度の範囲にわたる安定性データのうちの１つまたは複数によって評価および選択される。実施形態では、スキャフォールドドメインは、小さい、安定なタンパク質ドメイン、例えば、１００個、７０個、５０個、４０個または３０個未満のアミノ酸のタンパク質である。ドメインは、１つもしくは複数のジスルフィド結合を含んでもよく、または金属、例えば、亜鉛をキレートしてもよい。
抗体ベースの融合物
抗体のＮまたはＣ末端に取り付けられた追加の結合性実体を含有する様々なフォーマットを生成することができる。単鎖またはジスルフィド安定化ＦｖもしくはＦａｂを有するこれらの融合物は、各抗原に対して二価の結合特異性を有する四価分子の生成をもたらす。ＩｇＧとのｓｃＦｖおよびｓｃＦａｂの組合せは、３つまたはより多くの異なる抗原を認識することができる分子の産生を可能にする。
抗体－Ｆａｂ融合物
抗体－Ｆａｂ融合物は、第１の標的に対する伝統的な抗体および抗体重鎖のＣ末端に融合した第２の標的に対するＦａｂを含む二特異性抗体である。一般的に、抗体およびＦａｂは共通の軽鎖を有する。抗体融合物は、（１）標的融合物のＤＮＡ配列を操作すること、および（２）標的ＤＮＡを好適な宿主細胞にトランスフェクトして融合タンパク質を発現させることにより産生させることができる。Ｃｏｌｏｍａ， Ｊら、（１９９７） Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ １５：１５９によって記載されるように、抗体－ｓｃＦｖ融合物は、ＣＨ３ドメインのＣ末端とｓｃＦｖのＮ末端との間の（Ｇｌｙ）－Ｓｅｒリンカーによって連結されてもよいようである。
抗体－ｓｃＦｖ融合物
抗体－ｓｃＦｖ融合物は、伝統的な抗体および抗体重鎖のＣ末端に融合した特有の特異性のｓｃＦｖを含む二特異性抗体である。ｓｃＦｖは、直接的にまたはリンカーペプチドを通じてｓｃＦｖの重鎖を通じてＣ末端に融合させることができる。抗体融合物は、（１）標的融合物のＤＮＡ配列を操作すること、および（２）標的ＤＮＡを好適な宿主細胞にトランスフェクトして融合タンパク質を発現させることにより産生させることができる。Ｃｏｌｏｍａ， Ｊら、（１９９７） Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ １５：１５９によって記載されるように、抗体－ｓｃＦｖ融合物は、ＣＨ３ドメインのＣ末端とｓｃＦｖのＮ末端との間の（Ｇｌｙ）－Ｓｅｒリンカーによって連結されてもよいようである。
可変ドメイン免疫グロブリンＤＶＤ
関連するフォーマットは、より短いリンカー配列によってＶドメインのＮ末端に配置された第２の特異性のＶＨおよびＶＬドメインから構成される二重可変ドメイン免疫グロブリン（ＤＶＤ）である。
他の例示的な多特異性抗体フォーマットとしては、例えば、以下：米国特許出願公開第２０１６０１１４０５７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０２４３７７５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４００５１８３３号、米国特許出願公開第２０１３００２２６０１号、米国特許出願公開第２０１５００１７１８７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１２０２０１７４６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０１３３６３８Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０２６６５６８Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０１４５３４０Ａ１号、ＷＯ２０１５１２７１５８Ａ１、米国特許出願公開第２０１５０２０３５９１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３２２２２１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０３０３３９６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１１０２９３６１３号、米国特許出願公開第２０１３００１７２００Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０１０２１３５Ａ１号、ＷＯ２０１５１９７５９８Ａ２、ＷＯ２０１５１９７５８２Ａ１、米国特許第９３５９４３７号、米国特許出願公開第２０１５００１８５２９号、ＷＯ２０１６１１５２７４Ａ１、ＷＯ２０１６０８７４１６Ａ１、米国特許出願公開第２００８００６９８２０Ａ１号、米国特許第９１４５５８８Ｂ号、米国特許第７９１９２５７号、および米国特許出願公開第２０１５０２３２５６０Ａ１号に記載のものが挙げられる。全長抗体－Ｆａｂ／ｓｃＦａｂフォーマットを利用する例示的な多特異性分子としては、以下：米国特許第９３８２３２３Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１４００７２５８１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３０８２８５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０１６５６３８Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０２６７６８６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３７７２６９Ａ１号、米国特許第７７４１４４６Ｂ２号、およびＷＯ１９９５００９９１７Ａ１に記載のものが挙げられる。ドメイン交換フォーマットを利用する例示的な多特異性分子としては、以下：米国特許出願公開第２０１５０３１５２９６Ａ１号、ＷＯ２０１６０８７６５０Ａ１、米国特許出願公開第２０１６００７５７８５Ａ１号、ＷＯ２０１６０１６２９９Ａ１、米国特許出願公開第２０１６０１３０３４７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０１６６６７０号、米国特許第８７０３１３２Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１００３１６６４５号、米国特許第８２２７５７７Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１３００７８２４９号に記載のものが挙げられる。
Ｆｃ含有実体（ミニ抗体）
ミニ抗体としても公知のＦｃ含有実体は、ｓｃＦｖを定常重鎖領域ドメイン３のＣ末端（ＣＨ３－ｓｃＦｖ）および／または異なる特異性を有する抗体のヒンジ領域（ｓｃＦｖ－ヒンジ－Ｆｃ）に融合させることにより生成することができる。ＩｇＧのＣＨ３ドメインのＣ末端に融合した（ペプチドリンカーを有さない）ジスルフィド安定化可変ドメインを有する三価の実体もまた作製することができる。
Ｆｃ含有多特異性分子
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、免疫グロブリン定常領域（例えば、Ｆｃ領域）を含む。例示的なＦｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４の重鎖定常領域、より特には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択することができる。
一部の実施形態では、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるために、変更、例えば、突然変異される。
他の実施形態では、第１および第２の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、第１および第２のＦｃ領域）の境界部は、例えば、操作されていない境界部、例えば、天然に存在する境界部と比較して、二量体化を増加または減少させるために、変更、例えば、突然変異される。例えば、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）の二量体化は、第１および第２のＦｃ領域のＦｃ境界部に、対になった孔と突起（「ノブ・イン・ホール」）、静電相互作用、または鎖交換のうちの１つまたは複数を提供し、それによって、例えば、操作されていない境界部と比較して、より高い比のヘテロ多量体：ホモ多量体が形成されることにより、増強させることができる。
一部の実施形態では、多特異性分子は、例えば、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域の、３４７、３４９、３５０、３５１、３６６、３６８、３７０、３９２、３９４、３９５、３９７、３９８、３９９、４０５、４０７、または４０９のうちの１つまたは複数から選択される位置において、対になったアミノ酸置換を含む。例えば、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、またはＹ４０７Ｖ（例えば、孔またはホールに対応する）、およびＴ３６６Ｗ（例えば、突起またはノブに対応する）から選択される対になったアミノ酸置換を含むことができる。
他の実施形態では、多機能性分子は、半減期延長剤、例えば、ヒト血清アルブミンまたはヒト血清アルブミンに対する抗体分子を含む。
ヘテロ二量体化抗体分子および作製方法
正しくない重鎖対合の問題に対処するために多特異性抗体を産生する様々な方法が開示されてきた。例示的な方法は以下に記載される。例示的な多特異性抗体フォーマットおよび前記多特異性抗体を作製する方法もまた、例えば、Ｓｐｅｉｓｓら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ６７（２０１５）９５～１０６ページ、およびＫｌｅｉｎら、ｍＡｂ ４：６、６５３～６６３ページ、２０１２年１１月／１２月（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
ヘテロ二量体化二特異性抗体は天然のＩｇＧ構造に基づき、２つの結合性アームが異なる抗原を認識する。定義された一価（および同時の）抗原結合を可能にするＩｇＧ由来のフォーマットは、軽鎖誤対合を最小化する技術（例えば、共通軽鎖）と組み合わせた強制的な重鎖ヘテロ二量体化により生成される。強制的な重鎖ヘテロ二量体化は、例えば、ノブ・イン・ホールまたは鎖交換操作ドメイン（ＳＥＥＤ）を使用して、得ることができる。
ノブ・イン・ホール
米国特許第５，７３１，１１６号、米国特許第７，４７６，７２４号およびＲｉｄｇｗａｙ， Ｊら、（１９９６）Ｐｒｏｔ． Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ９（７）：６１７～６２１ページに記載されるノブ・イン・ホールは、概して、（１）１つまたは両方の抗体のＣＨ３ドメインを突然変異させてヘテロ二量体化を促進すること、および（２）ヘテロ二量体化を促進する条件下で突然変異した抗体を組み合わせることを伴う。「ノブ」または「突起」は、典型的には、親抗体中の小さいアミノ酸をより大きいアミノ酸で置き換えること（例えば、Ｔ３６６ＹまたはＴ３６６Ｗ）により作出され、「ホール」または「孔」は、親抗体中のより大きい残基をより小さいアミノ酸で置き換えること（例えば、Ｙ４０７Ｔ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａおよび／またはＹ４０７Ｖ）により作出される。
Ｆｃドメインを含む二特異性抗体のために、Ｆｃ部分の正しいヘテロ二量体化を促進するための重鎖の定常領域への特定の突然変異の導入を利用することができる。いくつかのそのような技術は、Ｋｌｅｉｎら（ｍＡｂ（２０１２）４：６、１～１１ページ）（その内容はこれにより参照により全体が本明細書に組み込まれる）において総説されている。これらの技術としては、抗体重鎖のうちの１つのＣＨ３ドメインのうちの１つへのバルク残基の導入を伴う「ノブ・イントゥー・ホール」（ＫｉＨ）アプローチが挙げられる。このバルク残基は、対になった重鎖の他のＣＨ３ドメイン中の相補的な「ホール」にフィットし、それによって、重鎖の正しい対合が促進される（例えば、米国特許第７６４２２２８号を参照）。
例示的なＫｉＨ突然変異としては、「ノブ」重鎖中のＳ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗおよび「ホール」重鎖中のＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖが挙げられる。他の例示的なＫｉＨ突然変異は、追加の必要に応じた安定化性Ｆｃシステイン突然変異と共に、表１において提供される。
他のＦｃ突然変異はＩｇａｗａおよびＴｓｕｎｏｄａにより提供されており、彼らは、他の鎖のＣＨ３ドメイン中の３つの正に荷電した残基と対合する１つの鎖のＣＨ３ドメイン中の３つの負に荷電した残基を同定した。これらの特定の荷電した残基対は、Ｅ３５６－Ｋ４３９、Ｅ３５７－Ｋ３７０、Ｄ３９９－Ｋ４０９およびその逆である。単独でまたは新たに同定されたジスルフィド架橋と組み合わせて、以下の３つの鎖Ａ中の突然変異：Ｅ３５６Ｋ、Ｅ３５７ＫおよびＤ３９９Ｋの他に、鎖Ｂ中のＫ３７０Ｅ、Ｋ４０９Ｄ、Ｋ４３９Ｅのうちの少なくとも２つを導入することにより、それらは、同時にホモ二量体化を抑制しながら非常に効率的なヘテロ二量体化に有利に働くことができた（Ｍａｒｔｅｎｓ Ｔら、「Ａ ｎｏｖｅｌ ｏｎｅ－ａｒｍｅｄ ａｎｔｉｃ－ Ｍｅｔ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ｖｉｖｏ．」、Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００６；１２：６１４４～５２ページ；ＰＭＩＤ：１７０６２６９１）。Ｘｅｎｃｏｒは、構造算出および配列情報の組合せに基づいて４１個のバリアント対を定義し、それをその後に最大のヘテロ二量体化についてスクリーニングして、鎖Ａ上のＳ３６４Ｈ、Ｆ４０５Ａ（ＨＡ）および鎖Ｂ上のＹ３４９Ｔ、Ｔ３９４Ｆ（ＴＦ）の組合せを定義した（Ｍｏｏｒｅ ＧＬら、「Ａ ｎｏｖｅｌ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｆｏｒｍａｔ ｅｎａｂｌｅｓ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｂｉｖａｌｅｎｔ ａｎｄ ｍｏｎｏｖａｌｅｎｔ ｃｏ－ｅｎｇａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｔａｒｇｅｔ ａｎｔｉｇｅｎｓ．」、ＭＡｂｓ ２０１１；３：５４６～５７ページ；ＰＭＩＤ：２２１２３０５５）。
多特異性抗体のヘテロ二量体化を促進するための他の例示的なＦｃ突然変異としては、以下の参考文献（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）：ＷＯ２０１６０７１３７７Ａ１、米国特許出願公開第２０１４００７９６８９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０１９４３８９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０２５７７６３号、ＷＯ２０１６０７１３７６Ａ２、ＷＯ２０１５１０７０２６Ａ１、ＷＯ２０１５１０７０２５Ａ１、ＷＯ２０１５１０７０１５Ａ１、米国特許出願公開第２０１５０３５３６３６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０１９９２９４Ａ１号、米国特許第７７５０１２８Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１６０２２９９１５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０３４４５７０Ａ１号、米国特許第８００３７７４Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０３３７０４９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０１７５７０７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０２４２０７５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０１９５８４９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１２０１４９８７６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０２００３３１Ａ１号、米国特許第９３０９３１１Ｂ２号、米国特許第８５８６７１３号、米国特許出願公開第２０１４００３７６２１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０１７８６０５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３６３４２６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４００５１８３５Ａ１号および米国特許出願公開第２０１１００５４１５１Ａ１号に記載のものが挙げられる。
安定化性システイン突然変異もまた、ＫｉＨおよび他のＦｃヘテロ二量体化促進性バリアントと組み合わせて使用されている（例えば、米国特許第７１８３０７６号を参照）。他の例示的なシステイン修飾としては、例えば、米国特許出願公開第２０１４０３４８８３９Ａ１号、米国特許第７８５５２７５Ｂ２号、および米国特許第９０００１３０Ｂ２号に開示されるものが挙げられる。
鎖交換操作ドメイン（ＳＥＥＤ）
鎖交換操作ドメイン（ＳＥＥＤ）Ｃ（Ｈ）３ヘテロ二量体を工作することによって二特異性かつ非対称性の融合タンパク質の設計をサポートするヘテロ二量体Ｆｃプラットフォームが公知である。ヒトＩｇＧおよびＩｇＡ Ｃ（Ｈ）３ドメインのこれらの誘導体は、ヒトＩｇＡおよびＩｇＧ Ｃ（Ｈ）３配列の交互のセグメントから構成される相補的なヒトＳＥＥＤ Ｃ（Ｈ）３ヘテロ二量体を作出する。もたらされるＳＥＥＤ Ｃ（Ｈ）３ドメインの対は、哺乳動物細胞中で発現された場合に優先的に会合してヘテロ二量体を形成する。ＳＥＥＤボディ（Ｓｂ）融合タンパク質は、１つまたは複数の融合パートナーに遺伝子連結されていてもよい［ＩｇＧ１ヒンジ］－Ｃ（Ｈ）２－［ＳＥＥＤ Ｃ（Ｈ）３］からなる（例えば、Ｄａｖｉｓ ＪＨら、「ＳＥＥＤｂｏｄｉｅｓ： ｆｕｓｉｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｓｔｒａｎｄ ｅｘｃｈａｎｇｅ ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｄｏｍａｉｎ （ＳＥＥＤ） ＣＨ３ ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒｓ ｉｎ ａｎ Ｆｃ ａｎａｌｏｇｕｅ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｆｏｒ ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ ｂｉｎｄｅｒｓ ｏｒ ｉｍｍｕｎｏｆｕｓｉｏｎｓ ａｎｄ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．」、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ Ｓｅｌ ２０１０；２３：１９５～２０２ページ；ＰＭＩＤ：２０２９９５４２および米国特許第８８７１９１２号（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
デュオボディ
正しい重鎖対合を有する二特異性抗体を産生するための「デュオボディ」技術は公知である。デュオボディ技術は、産生後交換反応において安定な二特異性ヒトＩｇＧ１抗体を生成するための３つの基本的なステップを伴う。第１のステップにおいて、第３の定常（ＣＨ３）ドメイン中に単一のマッチした突然変異をそれぞれ含有する２つのＩｇＧ１が、標準的な哺乳動物組換え細胞系を使用して別々に産生される。その後に、これらのＩｇＧ１抗体は、回収および精製のための標準的な方法に従って精製される。産生および精製後（産生後）、２つの抗体は調整された実験室条件下で組み換えられて、非常に高い収率（典型的には＞９５％）で二特異性抗体産物をもたらす（例えば、Ｌａｂｒｉｊｎら、ＰＮＡＳ ２０１３；１１０（１３）：５１４５～５１５０ページおよびＬａｂｒｉｊｎら、Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ２０１４；９（１０）：２４５０～６３ページ（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
静電相互作用
ホモ二量体形成が静電気的に不都合であるように荷電性アミノ酸を有するＣＨ３アミノ酸変化を使用して多特異性抗体を作製する方法が開示されている。ＥＰ１８７０４５９およびＷＯ２００９０８９００４は、宿主細胞中での異なる抗体ドメインの共発現の際のヘテロ二量体形成に有利に働くための他の戦略を記載する。これらの方法において、重鎖定常ドメイン３（ＣＨ３）、両方のＣＨ３ドメイン中のＣＨ３－ＣＨ３境界部を作り上げる１つまたは複数の残基は、ホモ二量体形成が静電気的に不都合であり、かつヘテロ二量体化が静電気的に好都合であるように荷電性アミノ酸で置き換えられる。静電相互作用を使用して多特異性分子を作製する追加の方法は、米国特許出願公開第２０１０００１５１３３号、米国特許第８５９２５６２Ｂ２号、米国特許第９２０００６０Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１４０１５４２５４Ａ１号、および米国特許第９３５８２８６Ａ１号を含む参考文献（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
共通軽鎖
軽鎖誤対合は、二特異性ＩｇＧの均質な調製物を生成するために回避される必要がある。これを達成する１つのやり方は、共通軽鎖の原理、すなわち、１つの軽鎖を共有するが依然として別々の特異性を有する２つのバインダーを組み合わせることの使用を通じたものである。単量体の混合物からの所望の二特異性抗体の形成を増強する例示的な方法は、二特異性抗体のヘテロマー可変重鎖領域のそれぞれと相互作用するための共通の可変軽鎖を提供することによる。共通軽鎖を有する二特異性抗体の組成物およびその産生方法は、例えば、米国特許第７１８３０７６Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１１０１７７０７３Ａ１号、ＥＰ２８４７２３１Ａ１、ＷＯ２０１６０７９０８１Ａ１、およびＥＰ３０５５３２９Ａ１（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
ＣｒｏｓｓＭａｂ
軽鎖誤対合を低減するための別のオプションはＣｒｏｓｓＭａｂ技術であり、これは、二特異性抗体の１つの半分のＦａｂ中のＣＨ１およびＣＬドメインを交換することによって非特異的Ｌ鎖誤対合を回避する。そのようなクロスオーバーバリアントは結合特異性および親和性を保持するが、Ｌ鎖誤対合が予防されるように２つのアームを異なるものとさせる。（Ｋｌｅｉｎら、上掲に総説されるように）ＣｒｏｓｓＭａｂ技術は、正しい対合の形成を促進するように重鎖と軽鎖との間のドメインスワッピングを伴う。簡潔に述べれば、２つの別個の軽鎖－重鎖対を使用することによって２つの抗原に結合し得る二特異性ＩｇＧ様ＣｒｏｓｓＭａｂ抗体を構築するために、２ステップ修飾プロセスが応用される。最初に、二量体化境界部は、ヘテロ二量体化アプローチ、例えば、ノブ・イントゥー・ホール（ＫｉＨ）技術を使用して各重鎖のＣ末端中に操作されて、１つの抗体（例えば、抗体Ａ）および第２の抗体（例えば、抗体Ｂ）からの２つの別個の重鎖のヘテロ二量体のみが効率的に形成されることが確実にされる。次に、可変重鎖（ＶＨ）および可変軽鎖（ＶＬ）ドメインを一貫したままに保って、１つの抗体の定常重鎖１（ＣＨ１）および定常軽鎖（ＣＬ）ドメインが交換される（抗体Ａ）。ＣＨ１およびＣＬドメインの交換は、修飾抗体（抗体Ａ）軽鎖は修飾抗体（抗体Ａ）重鎖とのみ効率的に二量体化し、非修飾抗体（抗体Ｂ）軽鎖は非修飾抗体（抗体Ｂ）重鎖とのみ効率的に二量体化するため、所望の二特異性ＣｒｏｓｓＭａｂのみが効率的に形成されることを確実にした（例えば、Ｃａｉｎ， Ｃ．、ＳｃｉＢＸ ４（２８）；ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｃｉｂｘ．２０１１．７８３（その内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
共通重鎖
単量体の混合物からの所望の二特異性抗体の形成を増強する例示的な方法は、二特異性抗体のヘテロマー可変軽鎖領域のそれぞれと相互作用するための共通の可変重鎖を提供することによる。共通重鎖を有する二特異性抗体の組成物およびその産生方法は、例えば、米国特許出願公開第２０１２０１８４７１６号、米国特許出願公開第２０１３０３１７２００号、および米国特許出願公開第２０１６０２６４６８５Ａ１号（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
アミノ酸修飾
正しい軽鎖対合を有する多特異性抗体の代替的な組成物およびその産生方法としては、様々なアミノ酸修飾が挙げられる。例えば、Ｚｙｍｅｗｏｒｋｓは、軽鎖と重鎖との間の境界部の部分であり、各重鎖と所望の軽鎖との優先的な対合を作製する、ＣＨ１および／もしくはＣＬドメイン中の１つもしくは複数のアミノ酸修飾、ＶＨおよび／もしくはＶＬドメイン中の１つもしくは複数のアミノ酸修飾、またはこれらの組合せを有し、それによって、ヘテロ二量体対の２つの重鎖および２つの軽鎖が細胞中で共発現された場合に、第１のヘテロ二量体の重鎖が、他のものよりも軽鎖の１つと優先的に対合する、ヘテロ二量体を記載する（例えば、ＷＯ２０１５１８１８０５を参照）。他の例示的な方法は、ＷＯ２０１６０２６９４３（Ａｒｇｅｎ－Ｘ）、米国特許出願公開第２０１５０２１１００１号、米国特許出願公開第２０１４００７２５８１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６００３９９４７Ａ１号、および米国特許出願公開第２０１５０３６８３５２号に記載されている。
ラムダ／カッパフォーマット
ラムダ軽鎖ポリペプチドおよびカッパ軽鎖ポリペプチドを含む多特異性分子（例えば、多特異性抗体分子）は、ヘテロ二量体化を可能とするために使用することができる。ラムダ軽鎖ポリペプチドおよびカッパ軽鎖ポリペプチドを含む二特異性抗体分子を生成する方法は、２０１７年９月２２日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ１７／５３０５３（これにより参照により全体が本明細書に組み込まれる）に開示されている。
実施形態では、多特異性分子は、多特異性抗体分子、例えば、２つの結合特異性を含む抗体分子、例えば、二特異性抗体分子を含む。多特異性抗体分子は、
第１のエピトープに特異的なラムダ軽鎖ポリペプチド１（ＬＬＣＰ１）、
第１のエピトープに特異的な重鎖ポリペプチド１（ＨＣＰ１）、
第２のエピトープに特異的なカッパ軽鎖ポリペプチド２（ＫＬＣＰ２）、および
第２のエピトープに特異的な重鎖ポリペプチド２（ＨＣＰ２）
を含む。
「ラムダ軽鎖ポリペプチド１（ＬＬＣＰ１）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイト重鎖可変領域と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化することができる十分な軽鎖（ＬＣ）配列を含むポリペプチドを指す。一実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＬＬＣＰ１は、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、ＬＣ－ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、およびＣＨ１、またはそのエピトープの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＬＬＣＰ１は、そのＨＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する（ＫＬＣＰ２は、そのＨＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する）。本明細書の他の箇所に記載されるように、ＬＬＣＰ１は、ＨＣＰ２に対してよりもＨＣＰ１に対してより高い親和性を有する。
「カッパ軽鎖ポリペプチド２（ＫＬＣＰ２）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイト重鎖可変領域と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ２と複合体化することができる十分な軽鎖（ＬＣ）配列を含むポリペプチドを指す。一実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＫＬＣＰ２は、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、ＬＣ－ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、およびＣＨ１、またはそのエピトープの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ２と複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＫＬＣＰ２は、そのＨＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する（ＬＬＣＰ１は、そのＨＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する）。
「重鎖ポリペプチド１（ＨＣＰ１）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイトＬＬＣＰ１と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化することができる十分な重鎖（ＨＣ）配列、例えば、ＨＣ可変領域配列を含むポリペプチドを指す。一実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、それは、ＣＨ２および／またはＣＨ３領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＨＣＰ１は、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３、または（ｉ）そのエピトープの特異的結合を媒介し、ＬＬＣＰ１と複合体化し、（ｉｉ）本明細書に記載されるように、ＫＬＣＰ２とは対照的にＬＬＣＰ１に対して優先的に複合体化し、かつ（ｉｉｉ）本明細書に記載されるように、ＨＣＰ１の別の分子とは対照的にＨＣＰ２に対して優先的に複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＨＣＰ１は、そのＬＬＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する（ＫＬＣＰ２は、そのＨＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する）。
「重鎖ポリペプチド２（ＨＣＰ２）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイトＬＬＣＰ１と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化することができる十分な重鎖（ＨＣ）配列、例えば、ＨＣ可変領域配列を含むポリペプチドを指す。一実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、それは、ＣＨ２および／またはＣＨ３領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＨＣＰ１は、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３、または（ｉ）そのエピトープの特異的結合を媒介し、ＫＬＣＰ２と複合体化し、（ｉｉ）本明細書に記載されるように、ＬＬＣＰ１とは対照的にＫＬＣＰ２に対して優先的に複合体化し、かつ（ｉｉｉ）本明細書に記載されるように、ＨＣＰ２の別の分子とは対照的にＨＣＰ１に対して優先的に複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＨＣＰ２は、そのＫＬＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する（ＬＬＣＰ１は、そのＨＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する）。
本明細書に開示される多特異性抗体分子の一部の実施形態では、
ＬＬＣＰ１は、ＨＣＰ２に対してよりもＨＣＰ１に対してより高い親和性を有し、かつ／または
ＫＬＣＰ２は、ＨＣＰ１に対してよりもＨＣＰ２に対してより高い親和性を有する。
実施形態では、ＨＣＰ１に対するＬＬＣＰ１の親和性は、ＨＣＰ２に対するその親和性より十分に高く、それによって、予め選択された条件下、例えば、例えばｐＨ７の水性緩衝液中、例えばｐＨ７の生理食塩水中、または生理的条件下で、多特異性抗体分子の少なくとも７５、８０、９０、９５、９８、９９、９９．５、または９９．９％は、ＨＣＰ１と複合体化した、または結び付けられたＬＬＣＰ１を有する。
本明細書に開示される多特異性抗体分子の一部の実施形態では、
ＨＣＰ１は、ＨＣＰ１の第２の分子に対してよりもＨＣＰ２に対してより高い親和性を有し、かつ／または
ＨＣＰ２は、ＨＣＰ２の第２の分子に対してよりもＨＣＰ１に対してより高い親和性を有する。
実施形態では、ＨＣＰ２に対するＨＣＰ１の親和性は、ＨＣＰ１の第２の分子に対するその親和性より十分に高く、それによって、予め選択された条件下、例えば、例えばｐＨ７の水性緩衝液中、例えばｐＨ７の生理食塩水中、または生理的条件下で、多特異性抗体分子の少なくとも７５％、８０、９０、９５、９８、９９ ９９．５または９９．９％は、ＨＣＰ２と複合体化した、または結び付けられたＨＣＰ１を有する。
別の態様では、多特異性抗体分子を作製、または産生する方法が本明細書に開示される。方法は、（ｉ）～（ｉｖ）が会合する条件下で、
（ｉ）第１の重鎖ポリペプチド（例えば、第１の重鎖可変領域（第１のＶＨ）、第１のＣＨ１、第１の重鎖定常領域（例えば、第１のＣＨ２、第１のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）を提供するステップ、
（ｉｉ）第２の重鎖ポリペプチド（例えば、第２の重鎖可変領域（第２のＶＨ）、第２のＣＨ１、第２の重鎖定常領域（例えば、第２のＣＨ２、第２のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）を提供するステップ、
（ｉｉｉ）第１の重鎖ポリペプチド（例えば、第１のＶＨ）と優先的に会合するラムダ鎖ポリペプチド（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬλ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬλ）、または両方）を提供するステップ、および
（ｉｖ）第２の重鎖ポリペプチド（例えば、第２のＶＨ）と優先的に会合するカッパ鎖ポリペプチド（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬκ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬκ）、または両方）を提供するステップ
を含む。
実施形態では、第１および第２の重鎖ポリペプチドは、ヘテロ二量体化を増強するＦｃ境界部を形成する。
実施形態では、（ｉ）～（ｉｖ）（例えば、（ｉ）～（ｉｖ）をコードする核酸）は、単一の細胞、例えば、単一の哺乳動物細胞、例えば、ＣＨＯ細胞に導入される。実施形態では、（ｉ）～（ｉｖ）は、細胞中で発現される。
実施形態では、（ｉ）～（ｉｖ）（例えば、（ｉ）～（ｉｖ）をコードする核酸）は、異なる細胞、例えば、異なる哺乳動物細胞、例えば、２つまたはより多くのＣＨＯ細胞に導入される。実施形態では、（ｉ）～（ｉｖ）は、細胞中で発現される。
一実施形態では、方法は、例えば、ラムダおよび／またはカッパ特異的精製、例えば、親和性クロマトグラフィーを使用して、細胞発現抗体分子を精製するステップをさらに含む。
実施形態では、方法は、細胞発現多特異性抗体分子を評価することをさらに含む。例えば、精製された細胞発現多特異性抗体分子は、質量分析を含む、当該技術分野において公知の技術によって分析することができる。一実施形態では、精製された細胞発現抗体分子は、切断、例えば、パパインを用いて消化されて、Ｆａｂ部分をもたらし、質量分析を使用して評価される。
実施形態では、方法は、高い収率、例えば、少なくとも７５％、８０、９０、９５、９８、９９ ９９．５または９９．９％で、正しく対になったカッパ／ラムダ多特異性の、例えば、二特異性の抗体分子を産生する。
他の実施形態では、多特異性の、例えば、二特異性の、抗体分子は、
（ｉ）第１の重鎖ポリペプチド（ＨＣＰ１）（例えば、第１の重鎖可変領域（第１のＶＨ）、第１のＣＨ１、第１の重鎖定常領域（例えば、第１のＣＨ２、第１のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）であって、例えば、第１のエピトープに結合する、ＨＣＰ１、
（ｉｉ）第２の重鎖ポリペプチド（ＨＣＰ２）（例えば、第２の重鎖可変領域（第２のＶＨ）、第２のＣＨ１、第２の重鎖定常領域（例えば、第２のＣＨ２、第２のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）であって、例えば、第２のエピトープに結合する、ＨＣＰ２、
（ｉｉｉ）第１の重鎖ポリペプチド（例えば、第１のＶＨ）と優先的に会合するラムダ軽鎖ポリペプチド（ＬＬＣＰ１）（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬｌ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬｌ）、または両方）であって、例えば、第１のエピトープに結合する、ＬＬＣＰ１、および
（ｉｖ）第２の重鎖ポリペプチド（例えば、第２のＶＨ）と優先的に会合するカッパ軽鎖ポリペプチド（ＫＬＣＰ２）（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬｋ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬｋ）、または両方）であって、例えば、第２のエピトープに結合する、ＫＬＣＰ２
を含む。
実施形態では、第１および第２の重鎖ポリペプチドは、ヘテロ二量体化を増強するＦｃ境界部を形成する。実施形態では、多特異性抗体分子は、Ｆｃ定常、ＣＨ２－ＣＨ３ドメイン（ノブ修飾を有する）に接続された第１の重鎖可変領域にヘテロ二量体化したハイブリッドＶＬｌ－ＣＬｌを含む第１の結合特異性、およびＦｃ定常、ＣＨ２－ＣＨ３ドメイン（ホール修飾を有する）に接続された第２の重鎖可変領域にヘテロ二量体化したハイブリッドＶＬｋ－ＣＬｋを含む第２の結合特異性を有する。
ＴＣＲベータＶ抗原結合性ドメイン
免疫系の多様性は、膨大な数の病原体に対する防御を可能にする。生殖系列ゲノムの大きさは限られているため、多様性は、Ｖ（Ｄ）Ｊ組換えの過程だけでなく、ヌクレオチドの接合部（Ｖ－ＤセグメントとＤ－Ｊセグメントの間の接合部）の欠失および偽ランダムで鋳型化されていないヌクレオチドの付加によっても達成される。ＴＣＲベータ遺伝子は、多様性を生み出すために遺伝子配列を受ける。
ＴＣＲ Ｖベータレパートリーは、例えば、機能的遺伝子セグメントにおいて７つの頻繁に起こる不活性化多型、および２つのＶベータ遺伝子セグメントを包含する大きな挿入／欠失関連多型のために、個体と集団との間で変化する。本開示は、例えば、本明細書に記載されるように、例えば、ヒトＴＣＲベータＶ鎖（ＴＣＲβＶ）、例えば、ＴＣＲβＶ遺伝子ファミリー（グループとも呼ばれる）、例えば、ＴＣＲβＶサブファミリー（サブグループとも呼ばれる）に結合する、例えば、特異的に結合する、とりわけ、抗体分子およびその断片を提供する。ＴＣＲベータＶファミリーおよびサブファミリーは、当該技術分野において公知であり、例えばＹａｓｓａｉら（２００９年）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ ６１巻（７号）４９３～５０２ページ；Ｗｅｉ Ｓ．およびＣｏｎｃａｎｎｏｎ Ｐ．（１９９４年）Ｈｕｍａｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ４１巻（３号）２０１～２０６ページに記載されている。本明細書に記載される抗体は、組換え抗体、例えば、組換え非マウス抗体、例えば、組換えヒトまたはヒト化抗体であり得る。
ある態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβＶ、例えば、ＴＣＲβＶファミリー、例えば、遺伝子ファミリーまたはそのバリアントに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲＢＶ遺伝子ファミリーは、例えば、本明細書に記載されるように、例えば、図３、表８Ａまたは８Ｂに記載されるように、１つまたは複数のサブファミリーを含む。一部の実施態様では、ＴＣＲβＶ遺伝子ファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１６サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１８サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１３サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ３サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ３０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２８サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２３サブファミリー、またはＴＣＲβ Ｖ２６サブファミリーを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーはまた、ＴＣＲβ Ｖ１３．１としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－２＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１またはＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１、またはそれらのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβＶ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲ βＶ６－２＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１は、配列番号１および／または配列番号２によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１は、配列番号９および／または配列番号１０によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、配列番号９および／または配列番号１１によって認識され、例えば結合される。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーはまた、ＴＣＲβ Ｖ１２としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０２、ＴＣＲβ Ｖ１０－３＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ１０－２＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーはまた、ＴＣＲβ Ｖ８．１としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１２－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１２－３＊０１、もしくはＴＣＲβ Ｖ１２－５＊０１、またはそれらのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２は、配列番号１５および／または配列番号１６によって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２は、配列番号２３～２５のいずれか１つ、および／または配列番号２６～３０のいずれか１つによって認識され、例えば結合される。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ５サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１、またはそれらのバリアントから選択される。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ７サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ７－７＊０１、ＴＣＲβ Ｖ７－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ７－８＊０２、ＴＣＲβ Ｖ７－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ７－２＊０２、ＴＣＲβ Ｖ７－２＊０３、ＴＣＲβ Ｖ７－２＊０１、ＴＣＲβ Ｖ７－３＊０１、ＴＣＲβ Ｖ７－９＊０３、もしくはＴＣＲβ Ｖ７－９＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１１サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１１－１＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１１－２＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ１１－３＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１４サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１４＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１６サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１６＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１８サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１８＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ９サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ９＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ９＊０２、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１３サブファミリーは、ＴＣＲβＶ１３＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ４サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ４－２＊０１、ＴＣＲβ Ｖ４－３＊０１、もしくはＴＣＲβ Ｖ４－１＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ３サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ３－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１５サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１５＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ３０サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ３０＊０１、もしくはＴＣＲβ Ｖ３０＊０２、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１９サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１９＊０１、もしくはＴＣＲβ Ｖ１９＊０２、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２７サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２７＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２８サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２８＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２４サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２４－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２０サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２０－１＊０１、もしくはＴＣＲβ Ｖ２０－１＊０２、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２５サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２５－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２９サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２９－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
抗ＴＣＲβＶ抗体
低い配列類似性（例えば、異なるＴＣＲβＶサブファミリーを認識する異なる抗体分子の中での低い配列同一性）を有するにもかかわらず、ＴＣＲβＶタンパク質上の構造的に保存された領域、例えば、ドメインを認識し、かつ類似の機能（例えば、類似のサイトカインプロファイル）を有する、抗体の新規のクラス、すなわち、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の発見が本明細書に開示される。そのため、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は構造－機能関係性を共有する。
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶ：ＴＣＲアルファ複合体の境界部を認識しない、例えば、それに結合しない。
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の定常領域を認識しない、例えば、それに結合しない。ＴＣＲＢＶ領域の定常領域に結合する例示的な抗体は、Ｖｉｎｅｙら（Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ． １９９２ Ｄｅｃ；１１（６）：７０１～１３ページ）に記載されるＪＯＶＩ．１である。
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の相補性決定領域（例えば、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３）のうちの１つまたは複数（例えば、すべて）を認識しない、例えば、それに結合しない。
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶ領域に結合する（例えば、特異的に結合する）。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の結合は、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャー」）のサイトカインプロファイルとは異なるサイトカインプロファイルをもたらす。一部の実施形態では、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーは、ＣＤ３分子（例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子）、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を含む。一部の実施形態では、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーは、ＯＫＴ３抗体またはＳＰ３４－２抗体である。
一態様では、本開示は、例えば、本明細書に、例えば、図３、表８Ａ、または表８Ｂに記載される、ヒトＴＣＲβＶ、例えば、ＴＣＲβＶ遺伝子ファミリー、例えば、ＴＣＲβＶサブファミリーのうちの１つまたは複数に結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１６サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１８サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１３サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ３サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ３０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２８サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２３サブファミリー、もしくはＴＣＲβ Ｖ２６サブファミリーから選択される１つもしくは複数のＴＣＲβＶサブファミリー、またはそのバリアントに結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－２＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーに結合する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－２＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０２、ＴＣＲβ Ｖ１０－３＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ１０－２＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーに結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ１２－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１２－３＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ１２－５＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーに結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ Ｖ５サブファミリーに結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ１２に結合しないか、または米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より低い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍低い）親和性および／もしくは結合特異性でＴＣＲβ Ｖ１２に結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ Ｖ１２に結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ Ｖ１２以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）に結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１にもＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１にも結合せず、または米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるマウス抗体Ｃもしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より低い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％もしくは約２、５、もしくは１０倍低い）親和性および／もしくは結合特異性でＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１に結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるマウス抗体Ｃまたはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１またはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１に結合する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるマウス抗体Ｃまたはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１またはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）に結合する。
抗ＴＣＲβ Ｖ６抗体
よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－２＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１またはＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１を含むＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－２＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１は、配列番号４３の核酸配列、またはその８５％、９０％、９５％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列によってコードされる。
配列番号４３
ＡＴＧＡＧＣＡＴＣＧＧＣＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＴＧＴＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＡＧＴＧＡＡＴＧＣＴＧＧＴＧＴＣＡＣＴＣＡＧＡＣＣＣＣＡＡＡＡＴＴＣＣＡＧＧＴＣＣＴＧＡＡＧＡＣＡＧＧＡＣＡＧＡＧＣＡＴＧＡＣＡＣＴＧＣＡＧＴＧＴＧＣＣＣＡＧＧＡＴＡＴＧＡＡＣＣＡＴＧＡＡＴＡＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＡＧＡＣＣＣＡＧＧＣＡＴＧＧＧＧＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＴＴＣＡＴＴＡＣＴＣＡＧＴＴＧＧＴＧＣＴＧＧＴＡＴＣＡＣＴＧＡＣＣＡＡＧＧＡＧＡＡＧＴＣＣＣＣＡＡＴＧＧＣＴＡＣＡＡＴＧＴＣＴＣＣＡＧＡＴＣＡＡＣＣＡＣＡＧＡＧＧＡＴＴＴＣＣＣＧＣＴＣＡＧＧＣＴＧＣＴＧＴＣＧＧＣＴＧＣＴＣＣＣＴＣＣＣＡＧＡＣＡＴＣＴＧＴＧＴＡＣＴＴＣＴＧＴＧＣＣＡＧＣＡＧＴＴＡＣＴＣ
一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１は、配列番号４４のアミノ酸配列、またはその８５％、９０％、９５％、９９％もしくはより高い同一性を有するアミノ酸配列を含む。
配列番号４４
ＭＳＩＧＬＬＣＣＡＡＬＳＬＬＷＡＧＰＶＮＡＧＶＴＱＴＰＫＦＱＶＬＫＴＧＱＳＭＴＬＱＣＡＱＤＭＮＨＥＹＭＳＷＹＲＱＤＰＧＭＧＬＲＬＩＨＹＳＶＧＡＧＩＴＤＱＧＥＶＰＮＧＹＮＶＳＲＳＴＴＥＤＦＰＬＲＬＬＳＡＡＰＳＱＴＳＶＹＦＣＡＳＳＹ
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、非マウス抗体分子、例えば、ヒトまたはヒト化抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、ヒト抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、ヒト化抗体分子である。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、単離されているか、または組換えである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａにおけるヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）の配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つの抗原結合性領域、例えば、可変領域またはその抗原結合性断片を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａ中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つ、２つ、３つまたは４つの可変領域を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａ中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体分子からの少なくとも１つまたは２つの重鎖可変領域を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号２３１または３２９０のコンセンサス配列を有する重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａ中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つまたは２つの軽鎖可変領域を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号２３０または３２８９のコンセンサス配列を有する軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、ＩｇＧ４、例えば、ヒトＩｇＧ４の重鎖定常領域を含む。さらに別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、ＩｇＧ１、例えば、ヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域を含む。一実施形態では、重鎖定常領域は、表３Ａに示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、カッパ軽鎖定常領域、例えば、ヒトカッパ軽鎖定常領域を含む。一実施形態では、軽鎖定常領域は、表３Ａに示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａ中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）からの少なくとも１つ、２つ、または３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表１Ａに示されるか、または表１Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表１Ａに示されるか、または表１Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａ中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体の軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表１Ａに示されるか、または表１Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表１Ａに示されるか、または表１Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表１Ａに示されるか、または表１Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖および軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたは６つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表１Ａに示されるか、または表１Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの６つすべてのＣＤＲ、または密接に関連したＣＤＲ、例えば、同一であるか、もしくは少なくとも１つのアミノ酸変更であるが２つ、３つもしくは４つ以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表１Ａに記載の抗体の重鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表１Ａに示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１Ａに示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表１Ａに記載の抗体の軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表１Ａに示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１Ａに示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａにおけるヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表１Ａに示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１Ａに示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａにおけるヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表１Ａに示されるＫａｂａｔの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１Ａに示されるＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２またはＡ－Ｈ．６８の対応する超可変ループと同じカノニカルな構造、例えば、本明細書に記載の抗体の重鎖および／または軽鎖可変ドメインの少なくともループ１および／またはループ２と同じカノニカルな構造を有する少なくとも１つ、２つ、または３つの超可変ループを含む。例えば、超可変ループのカノニカルな構造の記載についてＣｈｏｔｈｉａら、（１９９２） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２７：７９９～８１７ページ；Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎら、（１９９２） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２７：７７６～７９８ページを参照。これらの構造は、これらの参考文献に記載の表の検査によって決定することができる。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８か、もしくは表１Ａに記載される抗体の重鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表１Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表１Ａに記載の抗体の軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表１Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａにおけるヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表１Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａにおけるヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表１Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表１Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔら、Ｃｈｏｔｈｉａらに従って定義されるか、または表１Ａに記載されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの定義によるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
一部の実施形態では、表１Ａに示される組合せＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲおよびＣｈｏｔｈｉａ ＣＤＲを含むＣＤＲである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表１Ａにおいて組合せＣＤＲとして同定されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表１Ａに記載される「組合せ」ＣＤＲによるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
一実施形態、例えば、可変領域、ＣＤＲ（例えば、組合せＣＤＲ、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲもしくはＫａｂａｔ ＣＤＲ）、または本明細書、例えば、表１Ａにおいて言及される他の配列を含む一実施形態では、抗体分子は、単一特異性抗体分子、二特異性抗体分子、二価抗体分子、二重パラトープ性抗体分子、または抗体の抗原結合性断片を含む抗体分子、例えば、半抗体もしくは半抗体の抗原結合性断片である。ある特定の実施形態では、抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子を含む。
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号２、配列番号１０もしくは配列番号１１の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべて、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１もしくは配列番号９の重鎖相補性決定領域１（ＨＣ ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべて
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、配列番号２のＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３、ならびに配列番号１のＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、配列番号１０のＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３、ならびに配列番号９のＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、配列番号１１のＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３、ならびに配列番号９のＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３を含む。
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号６のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号８のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号３のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号６のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号８のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号３のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５１のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５２のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５３のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号４５のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４６のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号４７のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５１のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５２のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５３のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号４５のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４６のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号４７のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５４のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５５のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５６のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号４８のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４９のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５０のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５４のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５５のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５６のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号４８のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４９のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５０のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子の軽鎖または重鎖可変フレームワーク（例えば、少なくともＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、および必要に応じてＦＲ４を包含する領域）は、（ａ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基のうちの少なくとも８０％、８５％、８７％ ９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％、もしくは１００％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｂ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基の２０％～８０％、４０％～６０％、６０％～９０％、もしくは７０％～９５％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｃ）非ヒトフレームワーク（例えば、齧歯動物フレームワーク）、または（ｄ）例えば抗原性もしくは細胞傷害性決定因子を除去するように、修飾されている、例えば、脱免疫化（ｄｅｉｍｍｕｎｉｚｅｄ）、もしくは部分的にヒト化されている非ヒトフレームワークから選択することができる。一実施形態では、軽鎖または重鎖可変フレームワーク領域（特に、ＦＲ１、ＦＲ２および／またはＦＲ３）は、ヒト生殖系列遺伝子のＶＬまたはＶＨセグメントのフレームワークに対して少なくとも７０、７５、８０、８５、８７、８８、９０、９２、９４、９５、９６、９７、９８、９９％同一のまたは同一の軽鎖または重鎖可変フレームワーク配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つ、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２またはＡ－Ｈ．６８のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図１Ａ、または配列番号９に示される、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する重鎖可変ドメインを含む。
代替的に、または本明細書に記載の重鎖置換と組み合わせて、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つ、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２またはＡ－Ｈ．６８のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図１Ｂ、または配列番号１０もしくは配列番号１１に示される、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くのアミノ酸変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する軽鎖可変ドメインを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、図１Ａに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの重鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、図１Ｂに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの軽鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域１を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域２を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域３を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域４を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる１０位における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、１０位におけるフェニルアラニン、例えば、セリンからフェニルアラニンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域２（ＦＲ２）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ２は、Ｋａｂａｔの番号付けによる３６位におけるヒスチジン、例えば、３６位における置換、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ２は、Ｋａｂａｔの番号付けによる４６位におけるアラニン、例えば、４６位における置換、例えば、アルギニンからアラニンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位におけるフェニルアラニン、例えば、８７位における置換、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、配列番号１０のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる１０位におけるフェニルアラニン、例えば、１０位における置換、例えば、セリンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる３６位におけるヒスチジン、例えば、３６位における置換、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４６位におけるアラニン、例えば、４６位における置換、例えば、アルギニンからアラニンへの置換を含むフレームワーク領域２（ＦＲ２）、ならびに（ｃ）Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位におけるフェニルアラニン、例えば、８７位における置換、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、配列番号１１のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる３６位におけるヒスチジン、例えば、３６位における置換、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４６位におけるアラニン、例えば、４６位における置換、例えば、アルギニンからアラニンへの置換を含むフレームワーク領域２（ＦＲ２）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位におけるフェニルアラニン、例えば、８７位における置換、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域２（ＦＲ２）および（ｃ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、図１Ａに示されるように、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域１を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、図１Ａに示されるように、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域２を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、図１Ａに示されるように、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域３を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、図１Ａに示されるように、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域４を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む重鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる７３位におけるスレオニン、例えば、７３位における置換、例えば、グルタミン酸からスレオニンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる９４位におけるグリシン、例えば、９４位における置換、例えば、アルギニンからグリシンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列重鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、配列番号１０のアミノ酸配列に示されるように、Ｋａｂａｔの番号付けによる７３位におけるスレオニン、例えば、７３位における置換、例えば、グルタミン酸からスレオニンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる９４位におけるグリシン、例えば、９４位における置換、例えば、アルギニンからグリシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む重鎖可変ドメインを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号９、または図１Ａおよび図１Ｂに示されるものを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１の軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号１０のもの、または図１Ａおよび図１Ｂに示されるものを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号１１、または図１Ａおよび図１Ｂに示されるものを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１の重鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号９、およびＡ－Ｈ．１の軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号１０、または図１Ａおよび図１Ｂに示されるものを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号９、およびＡ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号１１、または図１Ａおよび図１Ｂに示されるものを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子の重鎖もしくは軽鎖可変ドメイン、または両方は、本明細書に開示されるアミノ酸に対して実質的に同一である、例えば、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．６８のうちのいずれか１つ、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８から選択されるか、もしくは表１Ａに記載されるか、もしくは表１Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の可変領域に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一である、または本明細書に記載の抗体の可変領域から少なくとも１個もしくは５個の残基、かつ４０個、３０個、２０個、もしくは１０個未満の残基が異なる、アミノ酸配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表１Ａに示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一である、もしくは表１Ａに示される配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なる配列を有する少なくとも１つ、２つ、３つ、または４つの抗原結合性領域、例えば、可変領域を含む。別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表１Ａに示されるヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるか、もしくは表１Ａに示される配列から３個、６個、１５個、３０個、もしくは４５個以下のヌクレオチドが異なる配列を有する核酸によってコードされるＶＨおよび／またはＶＬドメインを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
配列番号９のアミノ酸配列、配列番号９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号９のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および／または
配列番号１０のアミノ酸配列、配列番号１０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号１０のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
配列番号９のアミノ酸配列、配列番号９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号９のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および／または
配列番号１１のアミノ酸配列、配列番号１１のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号１１のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、全長抗体またはその断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、もしくは一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ））である。実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、モノクローナル抗体または単一の特異性を有する抗体である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子はまた、ヒト化、キメラ、ラクダ、サメ、またはｉｎ ｖｉｔｒｏで生成された抗体分子であり得る。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、ヒト化抗体分子である。抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子の重鎖および軽鎖は、全長であり得（例えば、抗体は、少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全重鎖、および少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全軽鎖を含むことができる）、または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ断片、単一ドメイン抗体、ダイアボディ（ｄＡｂ）、二価抗体、もしくは二特異性抗体もしくはその断片、その単一ドメインバリアント、もしくはラクダ抗体）を含むことができる。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子の形態である。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、およびＩｇＥの重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域（Ｆｃ）を有する。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２（例えば、ヒトＩｇＧ１、またはＩｇＧ２）の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、重鎖定常領域はヒトＩｇＧ１である。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、例えば、本明細書に記載されるように、Ｆｃ領域バリアントを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、カッパまたはラムダ、好ましくはカッパ（例えば、ヒトカッパ）の軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。一実施形態では、定常領域は、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異されている。例えば、定常領域は、例えば、ヒトＩｇＧ１と比較して、Ｆｃ受容体結合を変更するために２９６位（ＭからＹへ）、２９８位（ＳからＴへ）、３００位（ＴからＥへ）、４７７位（ＨからＫへ）および４７８位（ＮからＦへ）において突然変異されている（例えば、突然変異した位置は、配列番号２１２もしくは２１４の１３２位（ＭからＹへ）、１３４位（ＳからＴへ）、１３６位（ＴからＥへ）、３１３位（ＨからＫへ）および３１４位（ＮからＦへ）、または配列番号２１５、２１６、２１７もしくは２１８の１３５位（ＭからＹへ）、１３７位（ＳからＴへ）、１３９位（ＴからＥへ）、３１６位（ＨからＫへ）および３１７位（ＮからＦへ）に対応する）。
抗体Ａ－Ｈ．１は、配列番号３２７８のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。抗体Ａ－Ｈ．２は、配列番号３２７８のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号３２７９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。抗体Ａ－Ｈ．６８は、配列番号１３３７のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。
追加の例示的なヒト化抗ＴＣＲＢ Ｖ６抗体が表１Ａにおいて提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ６は、表１Ａにおいて提供されるように、抗体Ａ、例えば、ヒト化された抗体Ａ（抗体Ａ－Ｈ）である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表１Ａにおいて提供されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、ならびに／もしくは表１Ａにおいて提供されるＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、またはこれらに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗体Ａは、表１Ａにおいて提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表１Ａに記載の抗体のＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表１Ａに記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
親和性成熟したヒト化抗体Ａ－Ｈ ＶＬ配列のアラインメント（出現順にそれぞれ配列番号３３７７～３３８９）
コンセンサスＶＬ：配列番号２３０
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＮＶ Ｇ／Ｅ／Ａ／Ｄ Ｎ／Ｄ Ｒ／Ｋ ＶＡＷ Ｙ／Ｈ ＱＱＫＰＧＫＡＰＫＡＬＩＹＳＳＳＨＲＹ Ｋ／Ｓ ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＦＫＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
コンセンサスＶＬ：配列番号３２８９
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＮＶＸ１Ｘ２Ｘ３ＶＡＷＸ４ＱＱＫＰＧＫＡＰＫＡＬＩＹＳＳＳＨＲＹＸ５ ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＦＫＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（Ｘ１は、Ｇ、Ｅ、ＡまたはＤであり、Ｘ２はＮまたはＤであり、Ｘ３はＲまたはＫであり、Ｘ４はＹまたはＨであり、Ｘ５はＫまたはＳである）
親和性成熟したヒト化抗体Ａ－Ｈ ＶＨ配列のアラインメント（出現順にそれぞれ配列番号３３９０～３４３６）
コンセンサスＶＨ：配列番号２３１
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧ Ｈ／Ｔ／Ｇ／Ｙ Ｄ／Ｔ／Ｓ Ｆ Ｈ／Ｒ／Ｄ／Ｋ／Ｔ Ｌ／Ｄ／Ｋ／Ｔ／Ｎ Ｗ／Ｆ／Ｔ／Ｉ／Ｙ／Ｇ ＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧ Ｒ／Ｗ Ｖ／Ｉ／Ｆ Ｆ／Ｓ／Ｙ Ａ／Ｐ ＧＳＧ Ｎ／Ｓ Ｔ／Ｖ／Ｙ／Ｉ Ｋ／Ｒ ＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡ Ｇ／Ｖ Ｓ Ｙ／Ｉ ＹＳ Ｙ／Ａ Ｄ／Ｇ ＶＬＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ
コンセンサスＶＨ：配列番号３２９０
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＸ１Ｘ２ＦＸ３Ｘ４Ｘ５ＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＸ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９ＧＳＧＸ１０Ｘ１１Ｘ１２ＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＸ１３ＳＸ１４ＹＳＸ１５Ｘ１６ＶＬＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（Ｘ１はＨまたはＴまたはＧまたはＹであり、Ｘ２はＤまたはＴまたはＳであり、Ｘ３はＨまたはＲまたはＤまたはＫまたはＴであり、Ｘ４はＬまたはＤまたはＫまたはＴまたはＮであり、Ｘ５はＷまたはＦまたはＴまたはＩまたはＹまたはＧであり、Ｘ６はＲまたはＷであり、Ｘ７はＶまたはＩまたはＦであり、Ｘ８はＦまたはＳまたはＹであり、Ｘ９はＡまたはＰであり、Ｘ１０はＮまたはＳであり、Ｘ１１はＴまたはＶまたはＹまたはＩであり、Ｘ１２はＫまたはＲであり、Ｘ１３はＧまたはＶであり、Ｘ１４はＹまたはＩであり、Ｘ１５はＹまたはＡであり、Ｘ１６はＤまたはＧである）
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲＶｂ抗体は、配列番号２３０（３０位はＧ、Ｅ、ＡもしくはＤであり、３１位はＮもしくはＤであり、３２位はＲもしくはＫであり、３６位はＹもしくはＨであり、かつ／または５６位はＫもしくはＳである）のコンセンサス配列を有するＶＬを有する抗原結合性ドメインを有する。
一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲＶｂ抗体は、配列番号２３１（２７位はＨもしくはＴもしくはＧもしくはＹであり、２８位はＤもしくはＴもしくはＳであり、３０位はＨもしくはＲもしくはＤもしくはＫもしくはＴであり、３１位はＬもしくはＤもしくはＫもしくはＴもしくはＮであり、３２位はＷもしくはＦもしくはＴもしくはＩもしくはＹもしくはＧであり、４９位はＲもしくはＷであり、５０位はＶもしくはＩもしくはＦであり、５１位はＦもしくはＳもしくはＹであり、５２位はＡもしくはＰであり、５６位はＮもしくはＳであり、５７位はＴもしくはＶもしくはＹもしくはＩであり、５８位はＫもしくはＲであり、９７位はＧもしくはＶであり、９９位はＹもしくはＩであり、１０２位はＹもしくはＡであり、かつ／または１０３位はＤもしくはＧである）のコンセンサス配列を有するＶＨを有する抗原結合性ドメインを有する。
抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体
よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ Ｖ１２、例えば、ＴＣＲβ Ｖ１２－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１２－３＊０１またはＴＣＲβ Ｖ１２－５＊０１を含むＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーはＴＣＲβ Ｖ１２－４＊０１を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーはＴＣＲβ Ｖ１２－３＊０１を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は非マウス抗体分子、例えば、ヒトまたはヒト化抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子はヒト抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子はヒト化抗体分子である。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、単離されているか、または組換えである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つの抗原結合性領域、例えば、可変領域もしくはその抗原結合性断片、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つ、２つ、３つもしくは４つの可変領域、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つもしくは２つの重鎖可変領域、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つもしくは２つの軽鎖可変領域、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、ＩｇＧ４、例えば、ヒトＩｇＧ４の重鎖定常領域を含む。さらに別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、ＩｇＧ１、例えば、ヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域を含む。一実施形態では、重鎖定常領域は、表３Ａに示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、カッパ軽鎖定常領域、例えば、ヒトカッパ軽鎖定常領域を含む。一実施形態では、軽鎖定常領域は、表３Ａに示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表２Ａに示されるか、または表２Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表２Ａに示されるか、または表２Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表２Ａに示されるか、または表２Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表２Ａに示されるか、または表２Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表２Ａに示されるか、または表２Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖および軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたは６つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表２Ａに示されるか、または表２Ａに示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの６つすべてのＣＤＲ、または密接に関連したＣＤＲ、例えば、同一であるか、もしくは少なくとも１つのアミノ酸変更であるが２つ、３つもしくは４つ以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載される選択された抗体の重鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載される抗体の軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされるような抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示されるＫａｂａｔの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示されるＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載の抗体の対応する超可変ループと同じカノニカルな構造、例えば、本明細書に記載の抗体の重鎖および／または軽鎖可変ドメインの少なくともループ１および／またはループ２と同じカノニカルな構造を有する少なくとも１つ、２つ、または３つの超可変ループを含む。例えば、超可変ループのカノニカルな構造の記載についてＣｈｏｔｈｉａら、（１９９２） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２７：７９９～８１７ページ；Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎら、（１９９２） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２７：７７６～７９８ページを参照。これらの構造は、これらの参考文献に記載の表の検査によって決定することができる。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載される選択された抗体の重鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載される抗体の軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされるような抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示されるＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載される選択された抗体の重鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示される組合せＣＤＲの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示される組合せＣＤＲによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載される抗体の軽鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示される組合せＣＤＲの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示される組合せＣＤＲによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａにおけるヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示される組合せＣＤＲの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示される組合せＣＤＲによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされるような抗体の重鎖および軽鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表２Ａに示される組合せＣＤＲの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表２Ａに示される組合せＣＤＲによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
一部の実施形態では、表１Ａに示される組合せＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲおよびＣｈｏｔｈｉａ ＣＤＲを含むＣＤＲである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表１Ａにおいて組合せＣＤＲとして同定されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表１Ａに記載される「組合せ」ＣＤＲによるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、ＫａｂａｔらおよびＣｈｏｔｈｉａらに従って定義されるか、または表１Ａに記載されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの定義によるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
一実施形態では、例えば、本明細書、例えば、表２Ａにおいて言及される可変領域、ＣＤＲ（例えば、組合せＣＤＲ、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲもしくはＫａｂａｔ ＣＤＲ）、または他の配列を含む一実施形態では、抗体分子は、単一特異性抗体分子、二特異性抗体分子、二価抗体分子、二重パラトープ性抗体分子、または抗体の抗原結合性断片を含む抗体分子、例えば、半抗体もしくは半抗体の抗原結合性断片である。ある特定の実施形態では、抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号１６、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９もしくは配列番号３０の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべて、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１５、配列番号２３、配列番号２４もしくは配列番号２５の重鎖相補性決定領域１（ＨＣ ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべてを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号２０のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２１のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号２２のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号１７のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１８のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号１９のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号２０のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２１のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１７のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１８のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号１９のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６３のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号５７のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６３のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号５７のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６６のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６７のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６８のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号６０のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６１のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６２のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６３のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４のＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５のＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号５７のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８のＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９のＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子の軽鎖または重鎖可変フレームワーク（例えば、少なくともＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、および必要に応じてＦＲ４を包含する領域）は、（ａ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基のうちの少なくとも８０％、８５％、８７％ ９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％、もしくは１００％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｂ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基の２０％～８０％、４０％～６０％、６０％～９０％、もしくは７０％～９５％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｃ）非ヒトフレームワーク（例えば、齧歯動物フレームワーク）、または（ｄ）例えば抗原性もしくは細胞傷害性決定因子を除去するように、修飾されている、例えば、脱免疫化、もしくは部分的にヒト化されている非ヒトフレームワークから選択することができる。一実施形態では、軽鎖または重鎖可変フレームワーク領域（特に、ＦＲ１、ＦＲ２および／またはＦＲ３）は、ヒト生殖系列遺伝子のＶＬまたはＶＨセグメントのフレームワークに対して少なくとも７０、７５、８０、８５、８７、８８、９０、９２、９４、９５、９６、９７、９８、９９％同一のまたは同一の軽鎖または重鎖可変フレームワーク配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表２Ａに記載のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図２Ａおよび図２Ｂに示されるか、または配列番号２３～２５における、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する重鎖可変ドメインを含む。
代替的に、または本明細書に記載の重鎖置換と組み合わせて、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図２Ａおよび図２Ｂに示されるか、または配列番号２６～３０における、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くのアミノ酸変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する軽鎖可変ドメインを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、図２Ａに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの重鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、図２Ｂに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの軽鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域１を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域２を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域３を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域４を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数の、例えば、すべての、位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位におけるアスパラギン酸、例えば、１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位におけるアスパラギン、例えば、２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、Ｋａｂａｔの番号付けによる４位におけるロイシン、例えば、４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数の、例えば、すべての、位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位におけるグリシン、例えば、６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位におけるアスパラギン、例えば、６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる７１位におけるチロシン、例えば、７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２６のアミノ酸配列に示されるように、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびにＫａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２７のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２８のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、セリンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２９のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、セリンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リジンからグリシンへの置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、アラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２９のアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、セリンからグリシンへの置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、アラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、および（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域１を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域２を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域３を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域４を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、重鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号２０～２３、または図２Ａに示されるものを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号２６～３０、または図２Ｂに示されるものを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、重鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号２３～２５、ならびに軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号２６～３０、または図２Ａおよび図２Ｂに示されるものを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子の重鎖もしくは軽鎖可変ドメイン、または両方は、本明細書に開示されるアミノ酸に対して実質的に同一である、例えば、本明細書に記載の抗体、例えば、表２Ａに記載されるか、もしくは表２Ａ中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の可変領域に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一である、または本明細書に記載の抗体の可変領域から少なくとも１個もしくは５個の残基、かつ４０個、３０個、２０個、もしくは１０個未満の残基が異なるアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表２Ａに示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるか、もしくは表２Ａに示される配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なる配列を有する少なくとも１つ、２つ、３つ、または４つの抗原結合性領域、例えば、可変領域を含む。別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表２Ａに示されるヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるか、もしくは表２Ａに示される配列から３個、６個、１５個、３０個、もしくは４５個以下のヌクレオチドが異なる配列を有する核酸によってコードされるＶＨおよび／またはＶＬドメインを含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３、配列番号２４もしくは配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２３、配列番号２４もしくは配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３、配列番号２４もしくは配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および／または
配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９もしくは配列番号３０のアミノ酸配列、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９もしくは配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９もしくは配列番号３０のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２６のアミノ酸配列、配列番号２６のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２７のアミノ酸配列、配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２７のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２８のアミノ酸配列、配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２８のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２９のアミノ酸配列、配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２９のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３のアミノ酸配列、配列番号２３のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号３０のアミノ酸配列、配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号３０のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２６のアミノ酸配列、配列番号２６のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２７のアミノ酸配列、配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２７のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２８のアミノ酸配列、配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２８のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２９のアミノ酸配列、配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２９のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４のアミノ酸配列、配列番号２４のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号３０のアミノ酸配列、配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号３０のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２６のアミノ酸配列、配列番号２６のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２７のアミノ酸配列、配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２７のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２８のアミノ酸配列、配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２８のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２９のアミノ酸配列、配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２９のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５のアミノ酸配列、配列番号２５のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号３０のアミノ酸配列、配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号３０のアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、全長抗体またはその断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、もしくは一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ））である。実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、モノクローナル抗体または単一の特異性を有する抗体である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子はまた、ヒト化、キメラ、ラクダ、サメ、またはｉｎ ｖｉｔｒｏで生成された抗体分子であり得る。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子はヒト化抗体分子である。抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子の重鎖および軽鎖は、全長であり得（例えば、抗体は、少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全重鎖、および少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全軽鎖を含むことができる）、または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ断片、単一ドメイン抗体、ダイアボディ（ｄＡｂ）、二価抗体、もしくは二特異性抗体もしくはその断片、その単一ドメインバリアント、もしくはラクダ抗体）を含むことができる。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子の形態である。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、およびＩｇＥの重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域（Ｆｃ）を有する。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２（例えば、ヒトＩｇＧ１、またはＩｇＧ２）の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、重鎖定常領域はヒトＩｇＧ１である。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、カッパまたはラムダ、好ましくはカッパ（例えば、ヒトカッパ）の軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。一実施形態では、定常領域は、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異されている。例えば、定常領域は、Ｆｃ受容体結合を変更するために２９６位（ＭからＹへ）、２９８位（ＳからＴへ）、３００位（ＴからＥへ）、４７７位（ＨからＫへ）および４７８位（ＮからＦへ）において突然変異されている（例えば、突然変異した位置は、配列番号２１２もしくは２１４の１３２位（ＭからＹへ）、１３４位（ＳからＴへ）、１３６位（ＴからＥへ）、３１３位（ＨからＫへ）および３１４位（ＮからＦへ）、または配列番号２１５、２１６、２１７もしくは２１８の１３５位（ＭからＹへ）、１３７位（ＳからＴへ）、１３９位（ＴからＥへ）、３１６位（ＨからＫへ）および３１７位（ＮからＦへ）に対応する）。
抗体Ｂ－Ｈ．１は、配列番号３２８０のアミノ酸配列を含む第１の鎖および配列番号３２８１のアミノ酸配列を含む第２の鎖を含む。
本開示の追加の例示的な抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体が表２Ａにおいて提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ１２は、表２Ａにおいて提供されるように、抗体Ｂ、例えば、ヒト化された抗体Ｂ（抗体Ｂ－Ｈ）である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表２Ａにおいて提供されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、ならびに／もしくは表２Ａにおいて提供されるＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗体Ｂは、表２Ａにおいて提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体
よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ Ｖ５に結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ５サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
本開示の例示的な抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体が表１０Ａにおいて提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５は、表１０Ａにおいて提供されるように、抗体Ｃ、例えば、ヒト化された抗体Ｃ（抗体Ｃ－Ｈ）である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表１０Ａにおいて提供されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、ならびに／もしくは表１０Ａにおいて提供されるＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗体Ｃは、表１０Ａにおいて提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
本開示の例示的な抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体が表１１Ａにおいて提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５は、表１１Ａにおいて提供されるように、抗体Ｅ、例えば、ヒト化された抗体Ｅ（抗体Ｅ－Ｈ）である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表１１Ａにおいて提供されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、ならびに／もしくは表１１Ａにおいて提供されるＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗体Ｅは、表１１Ａにおいて提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗体Ｅは、配列番号３２８４のアミノ酸配列を含む重鎖および／もしくは配列番号３２８５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体分子は、表１０Ａに記載の抗体のＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体分子は、表１０Ａに記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体分子は、表１１Ａに記載の抗体のＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体分子は、表１１Ａに記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
抗ＴＣＲβ Ｖ１０抗体
よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１２としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０２、ＴＣＲβ Ｖ１０－３＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ１０－２＊０１、またはそのバリアントを含む。
本開示の例示的な抗ＴＣＲβ Ｖ１０抗体が表１２Ａにおいて提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ１０は、表１２Ａにおいて提供されるように、抗体Ｄ、例えば、ヒト化された抗体Ｄ（抗体Ｄ－Ｈ）である。一部の実施形態では、抗体Ｄは、表１２Ａにおいて提供される１つもしくは複数（例えば、３つ）の軽鎖ＣＤＲおよび／もしくは１つもしくは複数（例えば、３つ）の重鎖ＣＤＲ、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗体Ｄは、表１２Ａにおいて提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ１０抗体分子は、表１２Ａに記載の抗体のＶＨもしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ１０抗体分子は、表１２Ａに記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
追加の抗ＴＣＲＶβ抗体
本開示の追加の例示的な抗ＴＣＲβＶ抗体が表１３Ａにおいて提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、例えば、表１３Ａにおいて提供されるように、ヒト化された抗体である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表１３Ａにおいて提供されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、ならびに／もしくは表１３Ａにおいて提供されるＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表１３Ａにおいて提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
サイトカイン分子およびサイトカイン阻害剤分子
サイトカインは、一般に、例えば、シグナル伝達経路を通じて、細胞活性に影響を及ぼすポリペプチドである。よって、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインは有用であり、細胞膜の外側からシグナルを伝達して細胞内の応答をモジュレートする受容体媒介性のシグナル伝達と関連付けられ得る。サイトカインは、免疫応答のメディエーターであるタンパク質性のシグナル伝達化合物である。それらは、増殖、分化および細胞生存／アポトーシスを含む多くの異なる細胞機能を制御し、サイトカインはまた、ウイルス感染症および自己免疫疾患を含むいくつかの病態生理学的プロセスに関与する。サイトカインは、自然免疫系（単球、マクロファージ、樹状細胞）ならびに適応免疫系（ＴおよびＢ細胞）の両方の様々な細胞によって様々な刺激下で合成される。サイトカインは、炎症促進性および抗炎症性の２つの群に分類することができる。ＩＦＮγ、ＩＬ－１、ＩＬ－６およびＴＮＦ－アルファを含む炎症促進性サイトカインは、主に、自然免疫細胞およびＴｈ１細胞に由来する。ＩＬ－１０、ＩＬ－４、ＩＬ－１３およびＩＬ－５を含む抗炎症性サイトカインは、Ｔｈ２免疫細胞から合成される。
本開示は、とりわけ、１つまたは複数のサイトカイン分子、例えば、免疫調節性（例えば、炎症促進性）サイトカインおよびそのバリアント、例えば、機能的バリアントを含む、例えば、それを含有するように操作された多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。よって、一部の実施形態では、サイトカイン分子は、インターロイキンまたはそのバリアント、例えば、機能的バリアントである。一部の実施形態では、インターロイキンは炎症促進性インターロイキンである。一部の実施形態では、インターロイキンは、インターロイキン－２（ＩＬ－２）、インターロイキン－１２（ＩＬ－１２）、インターロイキン－１５（ＩＬ－１５）、インターロイキン－１８（ＩＬ－１８）、インターロイキン－２１（ＩＬ－２１）、インターロイキン－７（ＩＬ－７）、またはインターフェロンガンマから選択される。一部の実施形態では、サイトカイン分子は炎症促進性サイトカインである。
ある特定の実施形態では、サイトカインは一本鎖サイトカインである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、多鎖サイトカインである（例えば、サイトカインは、２つまたはより多くの（例えば、２つの）ポリペプチド鎖を含む。例示的な多鎖サイトカインはＩＬ－１２である。
有用なサイトカインの例としては、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－２１、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－β、ＩＦＮ－γ、ＭＩＰ－１α、ＭＩＰ－１β、ＴＧＦ－β、ＴＮＦ－α、およびＴＮＦβが挙げられるがそれに限定されない。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインは、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－２１、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＭＩＰ－１α、ＭＩＰ－１βおよびＴＧＦ－βの群から選択されるサイトカインである。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインは、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＦＮ－α、およびＩＦＮ－γの群から選択されるサイトカインである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、Ｎ－および／またはＯ－グリコシル化部位を除去するために突然変異される。グリコシル化の排除は、組換え産生において得られ得る製造物の均質性を増加させる。
一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ－２である。詳細な実施形態では、ＩＬ－２サイトカインは、活性化Ｔリンパ球細胞の増殖、活性化Ｔリンパ球細胞の分化、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）活性、活性化Ｂ細胞の増殖、活性化Ｂ細胞の分化、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖、ＮＫ細胞の分化、活性化Ｔ細胞またはＮＫ細胞によるサイトカイン分泌、およびＮＫ／リンパ球活性化キラー（ＬＡＫ）抗腫瘍細胞傷害性からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。別の特定の実施形態では、ＩＬ－２サイトカインは、ＩＬ－２受容体のアルファ－サブユニットに対して低減した結合親和性を有する突然変異体ＩＬ－２サイトカインである。ベータ－およびガンマ－サブユニット（それぞれＣＤ１２２およびＣＤ１３２としても公知）と共に、アルファ－サブユニット（ＣＤ２５としても公知）は、ヘテロ三量体高親和性ＩＬ－２受容体を形成するが、β－およびγ－サブユニットのみからなる二量体受容体は、中親和性ＩＬ－２受容体と称される。ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＥＰ２０１２／０５１９９１（これにより参照により全体が本明細書に組み込まれる）に記載されるように、ＩＬ－２受容体のアルファ－サブユニットに対して低減した結合を有する突然変異体ＩＬ－２ポリペプチドは、野生型ＩＬ－２ポリペプチドと比較して、制御性Ｔ細胞中でＩＬ－２シグナル伝達を誘導する低減した能力を有し、Ｔ細胞中でより少ない活性化誘導性細胞死（ＡＩＣＤ）を誘導し、かつｉｎ ｖｉｖｏでの低減した毒性プロファイルを有する。低減した毒性を有するそのようなサイトカインの使用は、Ｆｃドメインの存在に起因して長い血清半減期を有する本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドにおいて特に有利である。一実施形態では、本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドの突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、突然変異されていないＩＬ－２サイトカインと比較して、ＩＬ－２受容体のアルファ－サブユニット（ＣＤ２５）に対する突然変異体ＩＬ－２サイトカインの親和性を低減しまたは消失させるが、中親和性ＩＬ－２受容体（ＩＬ－２受容体のβおよびγサブユニットからなる）に対する突然変異体ＩＬ－２サイトカインの親和性を保存する少なくとも１つのアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、１つまたは複数のアミノ酸突然変異はアミノ酸置換である。詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、ヒトＩＬ－２の残基４２、４５、および７２に対応する位置から選択される１つ、２つまたは３つの位置における１つ、２つまたは３つのアミノ酸置換を含む。より詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、ヒトＩＬ－２の残基４２、４５および７２に対応する位置における３つのアミノ酸置換を含む。よりいっそう詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、アミノ酸置換Ｆ４２Ａ、Ｙ４５ＡおよびＬ７２Ｇを含むヒトＩＬ－２である。一実施形態では、突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、ヒトＩＬ－２の３位に対応する位置におけるアミノ酸突然変異を追加的に含み、これはＩＬ－２のＯ－グリコシル化部位を排除する。特に、前記追加のアミノ酸突然変異は、スレオニン残基をアラニン残基によって置き換えるアミノ酸置換である。本発明において有用な特定の突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、ヒトＩＬ－２の残基３、４２、４５および７２に対応する位置における４つのアミノ酸置換を含む。特定のアミノ酸置換は、Ｔ３Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５ＡおよびＬ７２Ｇである。ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＥＰ２０１２／０５１９９１および付加された実施例において実証されるように、前記四重突然変異体ＩＬ－２ポリペプチド（ＩＬ－２ ｑｍ）は、ＣＤ２５への検出可能な結合を呈さず、Ｔ細胞においてアポトーシスを誘導する低減した能力を呈し、制御性Ｔ細胞（Ｔ．ｓｕｂ．ｒｅｇ ｃｅｌｌｓ）においてＩＬ－２シグナル伝達を誘導する低減した能力を呈し、かつｉｎ ｖｉｖｏでの低減した毒性プロファイルを呈する。しかしながら、それは、エフェクター細胞においてＩＬ－２シグナル伝達を活性化させ、エフェクター細胞の増殖を誘導し、かつＮＫ細胞により二次的なサイトカインとしてＩＦＮ－γを生成させる能力を保持する。
上記の実施形態のいずれかによるＩＬ－２または突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、発現または安定性の増加などのさらなる利点を提供する追加の突然変異を含んでもよい。例えば、１２５位におけるシステインは、ジスルフィド架橋によるＩＬ－２二量体の形成を回避するために、アラニンなどの中性アミノ酸で置き換えられてもよい。そのため、ある特定の実施形態では、本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドのＩＬ－２または突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、ヒトＩＬ－２の残基１２５に対応する位置における追加のアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、前記追加のアミノ酸突然変異はアミノ酸置換Ｃ１２５Ａである。
詳細な実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのＩＬ－２サイトカインは、配列番号７２２７
［ＡＰＴＳＳＳＴＫＫＴＱＬＱＬＥＨＬＬＬＤＬＱＭＩＬＮＧＩＮＮ ＹＫＮＰＫＬＴＲＭＬＴＦＫＦＹＭＰＫＫＡＴＥＬＫＨＬＱＣＬＥＥＥＬＫＰＬＥＥＶＬＮＬＡＱＳＫＮＦＨＬ ＲＰＲＤＬＩＳＮＩＮＶＩＶＬＥＬＫＧＳＥＴＴＦＭＣＥＹＡＤＥＴＡＴＩＶＥＦＬＮＲＷＩＴＦＡＱＳＩＩＳＴＬＴ］
のポリペプチド配列を含む。別の詳細な実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのＩＬ－２サイトカインは、配列番号７２２８［ＡＰＡＳＳＳＴＫＫＴ ＱＬＱＬＥＨＬＬＬＤ ＬＱＭＩＬＮＧＩＮＮ ＹＫＮＰＫＬＴＲＭＬＴＡＫＦＡＭＰＫＫＡＴＥＬＫＨＬＱＣＬＥ ＥＥＬＫＰＬＥＥＶＬＮＧＡＱＳＫＮＦＨＬ ＲＰＲＤＬＩＳＮＩＮ ＶＩＶＬＥＬＫＧＳＥＴＴＦＭＣＥＹＡＤＥＴＡＴＩＶＥＦＬＮＲＷＩＴＦＡＱＳＩＩＳＴＬＴ］のポリペプチド配列を含む。
別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ－１２である。詳細な実施形態では、前記ＩＬ－１２サイトカインは一本鎖ＩＬ－１２サイトカインである。よりいっそう詳細な実施形態では、一本鎖ＩＬ－１２サイトカインは、配列番号７２２９
［ＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳ］のポリペプチド配列を含む。一実施形態では、ＩＬ－１２サイトカインは、ＮＫ細胞の増殖、ＮＫ細胞の分化、Ｔ細胞の増殖、およびＴ細胞の分化からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。
別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ－１０である。詳細な実施形態では、前記ＩＬ－１０サイトカインは一本鎖ＩＬ－１０サイトカインである。よりいっそう詳細な実施形態では、一本鎖ＩＬ－１０サイトカインは、配列番号７２３０
［ＳＰＧＱＧＴＱＳＥＮＳＣＴＨＦＰＧＮＬＰＮＭＬＲＤＬＲＤＡＦＳＲＶＫＴＦＦＱＭＫＤＱＬＤＮＬＬＬＫＥＳＬＬＥＤＦＫＧＹＬＧＣＱＡＬＳＥＭＩＱＦＹＬＥＥＶＭＰＱＡＥＮＱＤＰＤＩＫＡＨＶＮＳＬＧＥＮＬＫＴＬＲＬＲＬＲＲＣＨＲＦＬＰＣＥＮＫＳＫＡＶＥＱＶＫＮＡＦＮＫＬＱＥＫＧＩＹＫＡＭＳＥＦＤＩＦＩＮＹＩＥＡＹＭＴＭＫＩＲＮＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＳＰＧＱＧＴＱＳＥＮＳＣＴＨＦＰＧＮＬＰＮＭＬＲＤＬＲＤＡＦＳＲＶＫＴＦＦＱＭＫＤＱＬＤＮＬＬＬＫＥＳＬＬＥＤＦＫＧＹＬＧＣＱＡＬＳＥＭＩＱＦＹＬＥＥＶＭＰＱＡＥＮＱＤＰＤＩＫＡＨＶＮＳＬＧＥＮＬＫＴＬＲＬＲＬＲＲＣＨＲＦＬＰＣＥＮＫＳＫＡＶＥＱＶＫＮＡＦＮＫＬＱＥＫＧＩＹＫＡＭＳＥＦＤＩＦＩＮＹＩＥＡＹＭＴＭＫＩＲＮ］のポリペプチド配列を含む。別の詳細な実施形態では、ＩＬ－１０サイトカインは単量体ＩＬ－１０サイトカインである。より詳細な実施形態では、単量体ＩＬ－１０サイトカインは、配列番号７２３１
［ＳＰＧＱＧＴＱＳＥＮＳＣＴＨＦＰＧＮＬＰＮＭＬＲＤＬＲＤＡＦＳＲＶＫＴＦＦＱＭＫＤＱＬＤＮＬＬＬＫＥＳＬＬＥＤＦＫＧＹＬＧＣＱＡＬＳＥＭＩＱＦＹＬＥＥＶＭＰＱＡＥＮＱＤＰＤＩＫＡＨＶＮＳＬＧＥＮＬＫＴＬＲＬＲＬＲＲＣＨＲＦＬＰＣＥＮＧＧＧＳＧＧＫＳＫＡＶＥＱＶＫＮＡＦＮＫＬＱＥＫＧＩＹＫＡＭＳＥＦＤＩＦＩＮＹＩＥＡＹＭＴＭＫＩＲＮ］のポリペプチド配列を含む。一実施形態では、ＩＬ－１０サイトカインは、サイトカイン分泌の阻害、抗原提示細胞による抗原提示の阻害、酸素ラジカル放出の低減、およびＴ細胞増殖の阻害からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。サイトカインがＩＬ－１０である本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドは、例えば、炎症性障害の処置における、炎症の下方調節のために特に有用である。
別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ－１５である。詳細な実施形態では、前記ＩＬ－１５サイトカインは、ＩＬ－１５受容体のα－サブユニットに対して低減した結合親和性を有する突然変異体ＩＬ－１５サイトカインである。理論に拘泥するものではないが、ＩＬ－１５受容体のアルファ－サブユニットへの低減した結合を有する突然変異体ＩＬ－１５ポリペプチドは、野生型ＩＬ－１５ポリペプチドと比較して、身体の全体を通じて線維芽細胞に結合する低減した能力を有し、向上した薬物動態および毒性プロファイルをもたらす。記載される突然変異体ＩＬ－２および突然変異体ＩＬ－１５エフェクター部分などの低減した毒性を有するサイトカインの使用は、Ｆｃドメインの存在に起因して長い血清半減期を有する本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドにおいて特に有利である。一実施形態では、本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドの突然変異体ＩＬ－１５サイトカインは、突然変異していないＩＬ－１５サイトカインと比較して、ＩＬ－１５受容体のアルファ－サブユニットに対する突然変異体ＩＬ－１５サイトカインの親和性を低減しまたは消失させるが、中親和性ＩＬ－１５／ＩＬ－２受容体（ＩＬ－１５／ＩＬ－２受容体のベータ－およびガンマ－サブユニットからなる）に対する突然変異体ＩＬ－１５サイトカインの親和性を保存する少なくとも１つのアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、アミノ酸突然変異はアミノ酸置換である。詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ－１５サイトカインは、ヒトＩＬ－１５の残基５３に対応する位置においてアミノ酸置換を含む。より詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ－１５サイトカインは、アミノ酸置換Ｅ５３Ａを含むヒトＩＬ－１５である。一実施形態では、突然変異体ＩＬ－１５サイトカインは、ヒトＩＬ－１５の７９位に対応する位置においてアミノ酸突然変異を追加的に含み、これはＩＬ－１５のＮ－グリコシル化部位を排除する。特に、前記追加のアミノ酸突然変異は、アスパラギン残基をアラニン残基によって置き換えるアミノ酸置換である。よりいっそう詳細な実施形態では、ＩＬ－１５サイトカインは、配列番号７２３２
［ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＡＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＡＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ］のポリペプチド配列を含む。一実施形態では、ＩＬ－１５サイトカインは、活性化Ｔリンパ球細胞の増殖、活性化Ｔリンパ球細胞の分化、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）活性、活性化Ｂ細胞の増殖、活性化Ｂ細胞の分化、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖、ＮＫ細胞の分化、活性化Ｔ細胞またはＮＫ細胞によるサイトカイン分泌、およびＮＫ／リンパ球活性化キラー（ＬＡＫ）抗腫瘍細胞傷害性からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。
多特異性または多機能性ポリペプチド中のエフェクター部分として有用な突然変異体サイトカイン分子は、当該技術分野において周知の遺伝学的または化学的方法を使用して欠失、置換、挿入または修飾によって調製することができる。遺伝学的方法は、コーディングＤＮＡ配列の部位特異的突然変異誘発、ＰＣＲ、および遺伝子合成などを含んでもよい。正しいヌクレオチド変化は、例えばシークエンシングによって検証することができる。置換または挿入は、天然アミノ酸残基の他に非天然アミノ酸残基を伴ってもよい。アミノ酸修飾としては、グリコシル化部位の付加もしくは除去または炭水化物の取付けなどの化学修飾の周知の方法が挙げられる。
一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＧＭ－ＣＳＦである。詳細な実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦサイトカインは、顆粒球、単球または樹状細胞において増殖および／または分化を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＦＮ－αである。詳細な実施形態では、ＩＦＮ－αサイトカインは、ウイルス感染細胞におけるウイルス複製の阻害、および主要組織適合複合体Ｉ（ＭＨＣ Ｉ）の発現の上方調節からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。別の詳細な実施形態では、ＩＦＮ－αサイトカインは、腫瘍細胞において増殖を阻害することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＦＮγである。詳細な実施形態では、ＩＦＮ－γサイトカインは、マクロファージ活性の増加、ＭＨＣ分子の発現の増加、およびＮＫ細胞活性の増加の群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＬ－７である。詳細な実施形態では、ＩＬ－７サイトカインは、Ｔおよび／またはＢリンパ球の増殖を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＬ－８である。詳細な実施形態では、ＩＬ－８サイトカインは、好中球において走化性を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＭＩＰ－１αである。詳細な実施形態では、ＭＩＰ－１αサイトカインは、単球およびＴリンパ球細胞において走化性を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＭＩＰ－１βである。詳細な実施形態では、ＭＩＰ－１βサイトカインは、単球およびＴリンパ球細胞において走化性を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＴＧＦ－βである。詳細な実施形態では、ＴＧＦ－βサイトカインは、単球における走化性、マクロファージにおける走化性、活性化マクロファージにおけるＩＬ－１発現の上方調節、および活性化Ｂ細胞におけるＩｇＡ発現の上方調節からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。
一実施形態では、本発明の多特異性または多機能性ポリペプチドは、対照サイトカインについてよりも少なくとも約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５または１０倍高い解離定数（ＫＤ）でサイトカイン受容体に結合する。別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドは、２つまたはより多くのエフェクター部分を含む対応する多特異性または多機能性ポリペプチドについてよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、または１０倍高いＫＤでサイトカイン受容体に結合する。別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドは、２つまたはより多くのサイトカインを含む対応する多特異性または多機能性ポリペプチドについてよりも約１０倍高い解離定数ＫＤでサイトカイン受容体に結合する。
一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、サイトカイン分子を含む。実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカインの全長、断片もしくはバリアント；サイトカイン受容体ドメイン、例えば、サイトカイン受容体二量体化ドメイン；またはサイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、サイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）を含む。
一部の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８、ＩＬ－７、ＩＬ－２１、もしくはインターフェロンガンマ、もしくはその断片もしくはバリアント、または上記のサイトカインの任意の組合せから選択される。サイトカイン分子は、単量体または二量体であり得る。実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体二量体化ドメインをさらに含むことができる。
他の実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、ＩＬ－１５ＲａまたはＩＬ－２１Ｒから選択されるサイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）である。
一実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ－１５、例えば、ヒトＩＬ－１５（例えば、アミノ酸配列：
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号７０１７）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号７０１７のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態では、サイトカイン分子は、受容体二量体化ドメイン、例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメインを含む。一実施形態では、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメインは、アミノ酸配列：
ＭＡＰＲＲＡＲＧＣＲＴＬＧＬＰＡＬＬＬＬＬＬＬＲＰＰＡＴＲＧＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬ（配列番号７０１８）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号７０１８のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、多特異性分子のサイトカイン分子（例えば、ＩＬ－１５）および受容体二量体化ドメイン（例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメイン）は、例えば、リンカー（例えば、Ｇｌｙ－Ｓｅｒリンカー、例えば、アミノ酸配列ＳＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＧＳＬＱ（配列番号７０１９）を含むリンカーを介して、共有結合的に連結されている。他の実施形態では、多特異性分子のサイトカイン分子（例えば、ＩＬ－１５）および受容体二量体化ドメイン（例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメイン）は、共有結合的に連結されておらず、例えば、非共有結合的に会合している。
他の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ－２、例えば、ヒトＩＬ－２（例えば、アミノ酸配列：
ＡＰＴＳＳＳＴＫＫＴＱＬＱＬＥＨＬＬＬＤＬＱＭＩＬＮＧＩＮＮＹＫＮＰＫＬＴＲＭＬＴＦＫＦＹＭＰＫＫＡＴＥＬＫＨＬＱＣＬＥＥＥＬＫＰＬＥＥＶＬＮＬＡＱＳＫＮＦＨＬＲＰＲＤＬＩＳＮＩＮＶＩＶＬＥＬＫＧＳＥＴＴＦＭＣＥＹＡＤＥＴＡＴＩＶＥＦＬＮＲＷＩＴＦＣＱＳＩＩＳＴＬＴ（配列番号７０２０）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号７０２０のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。
他の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ－１８、例えば、ヒトＩＬ－１８（例えば、アミノ酸配列：
ＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤ（配列番号７０２１）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号７０２１のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。
他の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ－２１、例えば、ヒトＩＬ－２１（例えば、アミノ酸配列：
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号７０２２）その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号７０２２のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。
さらに他の実施形態では、サイトカイン分子は、インターフェロンガンマ、例えば、ヒトインターフェロンガンマ（例えば、アミノ酸配列：
ＱＤＰＹＶＫＥＡＥＮＬＫＫＹＦＮＡＧＨＳＤＶＡＤＮＧＴＬＦＬＧＩＬＫＮＷＫＥＥＳＤＲＫＩＭＱＳＱＩＶＳＦＹＦＫＬＦＫＮＦＫＤＤＱＳＩＱＫＳＶＥＴＩＫＥＤＭＮＶＫＦＦＮＳＮＫＫＫＲＤＤＦＥＫＬＴＮＹＳＶＴＤＬＮＶＱＲＫＡＩＨＥＬＩＱＶＭＡＥＬＳＰＡＡＫＴＧＫＲＫＲＳＱＭＬＦＲＧ（配列番号７０２３）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号７０２３のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。
ＴＧＦ－ベータ阻害剤
本開示は、特に、１つまたは複数のサイトカイン阻害剤分子、例えば、免疫調節性（例えば、炎症促進性）サイトカインの阻害剤およびそのバリアント、例えば、機能的バリアントを含む、例えば、含有するように操作された多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子をさらに提供する。したがって、一部の実施形態では、サイトカイン阻害剤分子はＴＧＦ－ベータ阻害剤である。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦ－ベータに結合し、それを阻害する、例えば、ＴＧＦ－ベータの活性を低減させる。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦ－ベータ１を阻害する（例えば、その活性を低減させる）。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦ－ベータ２を阻害する（例えば、その活性を低減させる）。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦ－ベータ３を阻害する（例えば、その活性を低減させる）。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦ－ベータ１およびＴＧＦ－ベータ３を阻害する（例えば、これらの活性を低減させる）。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦ－ベータ１、ＴＧＦ－ベータ２、およびＴＧＦ－ベータ３を阻害する（例えば、これらの活性を低減させる）。
一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、ＴＧＦ－ベータを阻害する（例えば、その活性を低減させる）ことができるＴＧＦ－ベータ受容体の部分（例えば、ＴＧＦ－ベータ受容体の細胞外ドメイン）、またはその機能的断片もしくはバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦＢＲ１ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ１の細胞外ドメインまたはその機能的バリアント）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦＢＲ２ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ２の細胞外ドメインまたはその機能的バリアント）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦＢＲ３ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ３の細胞外ドメインまたはその機能的バリアント）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦＢＲ１ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ１の細胞外ドメインまたはその機能的バリアント）およびＴＧＦＢＲ２ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ２の細胞外ドメインまたはその機能的バリアント）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦＢＲ１ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ１の細胞外ドメインまたはその機能的バリアント）およびＴＧＦＢＲ３ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ３の細胞外ドメインまたはその機能的バリアント）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤はＴＧＦＢＲ２ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ２の細胞外ドメインまたはその機能的バリアント）およびＴＧＦＢＲ３ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ３の細胞外ドメインまたはその機能的バリアント）を含む。
ＴＧＦ－ベータ阻害剤として使用され得る例示的なＴＧＦ－ベータ受容体ポリペプチドは、ＵＳ８９９３５２４、ＵＳ９６７６８６３、ＵＳ８６５８１３５、ＵＳ２０１５００５６１９９、ＵＳ２００７０１８４０５２、およびＷＯ２０１７０３７６３４において開示されており、これらのすべては参照により全体が本明細書に組み込まれる。
一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、ＴＧＦＢＲ１の細胞外ドメインまたはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２５７、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２５８、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２５９、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２６６のアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２６７のアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。
一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、ＴＧＦＢＲ２の細胞外ドメインまたはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２６０、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２６１、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２６２のアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２６３のアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２６４のアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２６５のアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。
一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、ＴＧＦＢＲ３の細胞外ドメインまたはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２６８、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２６９、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、配列番号７２７０のアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。
一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、１つだけのＴＧＦ－ベータ受容体細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－ベータ阻害剤は、例えば、リンカーを介して、連結された、２つまたはそれより多く（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、またはそれより多く）のＴＧＦ－ベータ受容体細胞外ドメインを含む。
免疫細胞エンゲージャー
本明細書に開示される多特異性または多機能性分子の免疫細胞エンゲージャーは、免疫細胞、例えば、免疫エフェクター細胞への結合、および／またはその活性化を媒介することができる。一部の実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャー、またはこれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャーのうちの１つ、２つ、３つ、もしくはすべて、またはこれらの組合せから選択される。免疫細胞エンゲージャーは、免疫系のアゴニストであり得る。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、抗体分子、リガンド分子（例えば、免疫グロブリン定常領域、例えば、Ｆｃ領域をさらに含むリガンド）、小分子、ヌクレオチド分子であり得る。
ナチュラルキラー細胞エンゲージャー
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞は、抗体非依存性の方式で腫瘍およびウイルス感染細胞を認識および破壊する。ＮＫ細胞の調節は、ＮＫ細胞表面上の受容体を活性化および阻害することによって媒介される。活性化受容体の１つのファミリーは、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４およびＮＫｐ４６を含む天然細胞傷害性受容体（ＮＣＲ）である。例えば、ＮＣＲは、がん細胞上のヘパラン硫酸の認識によって腫瘍標的化を開始させることができる。ＮＫＧ２Ｄは、活性化キラー（ＮＫ）細胞において刺激性および共刺激性の両方の自然免疫応答を提供する受容体であり、細胞傷害活性に繋がる。ＤＮＡＭ１は、細胞間接着、リンパ球シグナル伝達、細胞傷害性ならびに細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）およびＮＫ細胞によって媒介されるリンホカイン分泌に関与する受容体である。ＤＡＰ１０（ＨＣＳＴとしても公知）は、リンパ球様および骨髄性細胞においてＫＬＲＫ１と会合して活性化受容体ＫＬＲＫ１－ＨＣＳＴを形成する膜貫通アダプタータンパク質であり、この受容体は、ＭＨＣクラスＩ鎖関連ＭＩＣＡおよびＭＩＣＢ、ならびにＵ（必要に応じてＬ１）６結合性タンパク質（ＵＬＢＰ）などの細胞表面リガンドを発現する標的細胞に対する細胞傷害性の誘発において大きな役割を果たし、ＫＬＲＫ１－ＨＣＳＴ受容体は、腫瘍に対する免疫サーベイランスにおいて役割を果たし、腫瘍細胞の細胞溶解のために要求され、実際に、ＫＬＲＫ１リガンドを発現しない黒色腫細胞は、ＮＫ細胞によって媒介される免疫サーベイランスを免れる。ＣＤ１６は、ＩｇＧのＦｃ領域に対する受容体であり、複合体化または凝集ＩｇＧ、そして単量体ＩｇＧにも結合し、それによって、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）およびファゴサイトーシスなどの他の抗体依存性応答を媒介する。理論に拘泥するものではないが、上記に開示されたもののような受容体（例えば、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ３６、ＮＫＧ２Ｄ、またはＣＤ１６）に結合し、動員し、および／または活性化するＮＫ細胞エンゲージャーは、標的細胞、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）を含む細胞に免疫系活性を標的化し、例えば、標的細胞の細胞死または溶解を促進し得ると考えられる。
本開示は、特に、ＮＫ細胞への結合および／またはＮＫ細胞の活性化を媒介する１または複数のＮＫ細胞エンゲージャーを含むように操作された多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。したがって、一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＤＮＡＭ１、ＤＡＰ１０、ＣＤ１６（例えば、ＣＤ１６ａ、ＣＤ１６ｂ、または両方）、ＣＲＴＡＭ、ＣＤ２７、ＰＳＧＬ１、ＣＤ９６、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＮＫｐ８０、ＣＤ２４４（ＳＬＡＭＦ４または２Ｂ４としても公知である）、ＳＬＡＭＦ６、ＳＬＡＭＦ７、ＫＩＲ２ＤＳ２、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＫＩＲ３ＤＳ１、ＫＩＲ２ＤＳ３、ＫＩＲ２ＤＳ５、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＣＤ９４、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｅ、またはＣＤ１６０に結合する（例えば、活性化する）抗原結合性ドメインまたはリガンドから選択される。
一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメイン（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現するかまたは提示されるＮＫｐ３０）であり、表７～１０に開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列、フレームワーク領域（ＦＷＲ）アミノ酸配列、または可変領域アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメイン（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現するかまたは提示されるＮＫｐ３０）であり、米国特許第６，９７９，５４６号、米国特許第９，４４７，１８５号、ＰＣＴ出願公開第２０１５／１２１３８３Ａ１号、ＰＣＴ出願公開第２０１６／１１０４６８Ａ１号、ＰＣＴ出願公開第２００４／０５６３９２Ａ１号、または米国出願公開第２００７０２３１３２２Ａ１号に開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列、フレームワーク領域（ＦＷＲ）アミノ酸配列、または可変領域アミノ酸配列を含み、それらの配列は参照により本明細書に組み込まれる。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインの、ＮＫ細胞への結合は、ＮＫ細胞を活性化する。ＮＫｐ３０（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現するかまたは提示される、ＮＫｐ３０）に結合する抗原結合性ドメインは、ＮＫｐ３０、ＮＫ細胞、またはその両方を標的化すると言うことができる。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、表７、表１８、または表８に開示される１つまたは複数のＣＤＲ（例えば、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、および／またはＶＬＣＤＲ３）、またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、表７、表１８、または表８に開示される１つまたは複数のフレームワーク領域（例えば、ＶＨＦＷＲ１、ＶＨＦＷＲ２、ＶＨＦＷＲ３、ＶＨＦＷＲ４、ＶＬＦＷＲ１、ＶＬＦＷＲ２、ＶＬＦＷＲ３、および／またはＶＬＦＷＲ４）、またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、表９に開示されるＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、表９に開示されるＶＨドメインのいずれかは、表９に開示されるＶＬドメインのいずれかと対を形成して、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインを形成することができる。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、表１０に開示されるアミノ酸配列、またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３を含むＶＨ、ならびに軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００１、および７３１５のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００１、および６００２のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００８、および６００９のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、７３８５、および７３１５のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、７３１８、および６００９のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。
一部の実施形態では、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３２６、７３２７、および７３２９のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号６０６３、６０６４、および７２９３のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号６０７０、６０７１、および６０７２のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号６０７０、６０６４、および７３２１のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。
一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００１、７３１５、７３２６、７３２７、および７３２９のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００１、６００２、６０６３、６０６４、および７２９３のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００８、６００９、６０７０、６０７１、および６０７２のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、７３８５、７３１５、６０７０、６０６４、および７３２１のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、７３１８、６００９、６０７０、６０６４、および７３２１のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。
一部の実施形態では、ＶＨは、配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含み、および／またはＶＬは、配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号７３０２および７３０５のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号７３０２および７３０９のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。
一部の実施形態では、ＶＨは、配列番号６１２１または６１２３～６１２８からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含み、および／またはＶＬは、配列番号７２９４または６１３７～６１４１からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨは、配列番号６１２２または６１２９～６１３４からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含み、および／またはＶＬは、配列番号６１３６または６１４２～６１４７からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号７２９５および７２９６のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号７２９７および７２９６のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号６１２２および６１３６のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、配列番号７３１０のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、配列番号７３１１のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、配列番号６１８７、６１８８、６１８９または６１９０のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインは、配列番号６０００のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０６３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＨ、ならびに配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインは、配列番号６０００のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０６３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００７の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインは、配列番号６００７のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７０の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００７の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＨ、ならびに配列番号６０７０の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインは、配列番号６００７のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０７０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０６６のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしく１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０６６のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０７３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１０のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７３のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または、１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１０のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしく１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０７３のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１５のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０１６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０１７のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１４のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１５のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０１７のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１８の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１９のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２０のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０２１のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１８のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１９のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２０のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０２１のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０８２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０８３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０８４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８１のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０８２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０８３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０８４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０２２の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０２３のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２４のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０２５のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０２２のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２３のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２４のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０２５のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０８６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０８７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０８８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８５のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０８６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０８７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０８８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０２６の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０２７のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０２９のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０２６のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２７のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０２９のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０９２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８９のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０９０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０９２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０３２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０３３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０３４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３０のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０３４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０９３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０９６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０９３のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０９４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０９６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０３６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０３７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０３８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３５のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０３８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０４２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３９のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０４２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０９７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１００のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０９７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０９８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１００のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０４３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０４６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０４３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０４６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１０２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１０３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１０４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０１のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６１０２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１０４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０４７の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４８のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４９のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０５０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０４７のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４８のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４９のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０５０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１０６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１０７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１０８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０５のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６１０６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１０８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５１の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０５２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０５３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０５４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５１のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０５２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０５３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０５４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１１２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０９のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６１１０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１１２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０５６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０５７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０５８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５５のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０５６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０５７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０５８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１１３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１１６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１１３のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６１１４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１１６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０６１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０６２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５９のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０６０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０６１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０６２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１１７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１２０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１１７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（もしくは１つ、２つ、もしくは３つだけの突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（もしくは１つだけの突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（もしくは１つだけの突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１２０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４８のアミノ酸配列（または配列番号６１４８に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４９のアミノ酸配列（または配列番号６１４９に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５０のアミノ酸配列（または配列番号６１５０に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４８のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４９のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４８のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６１５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４９のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６１５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５１のアミノ酸配列（または配列番号６１５１に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５２のアミノ酸配列（または配列番号６１５２に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５３のアミノ酸配列（または配列番号６１５３に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５１のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５２のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５１のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６１５３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５２のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６１５３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインはｓｃＦｖを含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号：６１８７～６１９０から選択されるアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ４６（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＮＫｐ４６）に結合する抗原結合性ドメインであり、表１５において開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列、フレームワーク領域（ＦＷＲ）アミノ酸配列、または可変領域アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞へのＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫｐ４６に結合する抗原結合性ドメインの結合はＮＫ細胞を活性化させる。ＮＫｐ４６（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＮＫｐ４６）に結合する抗原結合性ドメインは、ＮＫｐ４６、ＮＫ細胞、または両方を標的化すると言及され得る。
一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫＧ２Ｄ（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＮＫＧ２Ｄ）に結合する抗原結合性ドメインであり、表１５において開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列、フレームワーク領域（ＦＷＲ）アミノ酸配列、または可変領域アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞へのＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫＧ２Ｄに結合する抗原結合性ドメインの結合はＮＫ細胞を活性化させる。ＮＫＧ２Ｄ（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＮＫＧ２Ｄ）に結合する抗原結合性ドメインは、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫ細胞、または両方を標的化すると言及され得る。
一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ１６（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＣＤ１６）に結合する抗原結合性ドメインであり、表１５において開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列、フレームワーク領域（ＦＷＲ）アミノ酸配列、または可変領域アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞へのＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、ＣＤ１６に結合する抗原結合性ドメインの結合はＮＫ細胞を活性化させる。ＣＤ１６（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＣＤ１６）に結合する抗原結合性ドメインは、ＣＤ１６、ＮＫ細胞、または両方を標的化すると言及され得る。
一実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーはＮＫｐ３０のリガンドであり、例えば、Ｂ７－６であり、例えば、
ＤＬＫＶＥＭＭＡＧＧＴＱＩＴＰＬＮＤＮＶＴＩＦＣＮＩＦＹＳＱＰＬＮＩＴＳＭＧＩＴＷＦＷＫＳＬＴＦＤＫＥＶＫＶＦＥＦＦＧＤＨＱＥＡＦＲＰＧＡＩＶＳＰＷＲＬＫＳＧＤＡＳＬＲＬＰＧＩＱＬＥＥＡＧＥＹＲＣＥＶＶＶＴＰＬＫＡＱＧＴＶＱＬＥＶＶＡＳＰＡＳＲＬＬＬＤＱＶＧＭＫＥＮＥＤＫＹＭＣＥＳＳＧＦＹＰＥＡＩＮＩＴＷＥＫＱＴＱＫＦＰＨＰＩＥＩＳＥＤＶＩＴＧＰＴＩＫＮＭＤＧＴＦＮＶＴＳＣＬＫＬＮＳＳＱＥＤＰＧＴＶＹＱＣＶＶＲＨＡＳＬＨＴＰＬＲＳＮＦＴＬＴＡＡＲＨＳＬＳＥＴＥＫＴＤＮＦＳ（配列番号７２３３）のアミノ酸配列、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２３３のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ウイルスＨＡである、ＮＫｐ４４またはＮＫｐ４６のリガンドである。ウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）は、ウイルスの表面上にある糖タンパク質である。ＨＡタンパク質は、シアル酸糖部分を介してウイルスが細胞の膜に結合することを可能とし、これは細胞膜とのウイルス膜の融合に寄与する（例えば、Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２００１ Ｓｅｐ；３１（９）：２６８０～９ページ、「Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｒａｌ ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎｓ ｂｙ ＮＫｐ４４ ｂｕｔ ｎｏｔ ｂｙ ＮＫｐ３０」；およびＮａｔｕｒｅ ２００１ Ｆｅｂ ２２；４０９（６８２３）：１０５５～６０ページ、「Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｈａｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎｓ ｏｎ ｖｉｒｕｓ－ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ＮＫｐ４６ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ｌｙｓｉｓ ｂｙ ｈｕｍａｎ ＮＫ ｃｅｌｌｓ」（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、またはＵＬＢＰ１から選択されるＮＫＧ２Ｄのリガンドであり、例えば、
（ｉ）ＭＩＣＡは、
ＥＰＨＳＬＲＹＮＬＴＶＬＳＷＤＧＳＶＱＳＧＦＬＴＥＶＨＬＤＧＱＰＦＬＲＣＤＲＱＫＣＲＡＫＰＱＧＱＷＡＥＤＶＬＧＮＫＴＷＤＲＥＴＲＤＬＴＧＮＧＫＤＬＲＭＴＬＡＨＩＫＤＱＫＥＧＬＨＳＬＱＥＩＲＶＣＥＩＨＥＤＮＳＴＲＳＳＱＨＦＹＹＤＧＥＬＦＬＳＱＮＬＥＴＫＥＷＴＭＰＱＳＳＲＡＱＴＬＡＭＮＶＲＮＦＬＫＥＤＡＭＫＴＫＴＨＹＨＡＭＨＡＤＣＬＱＥＬＲＲＹＬＫＳＧＶＶＬＲＲＴＶＰＰＭＶＮＶＴＲＳＥＡＳＥＧＮＩＴＶＴＣＲＡＳＧＦＹＰＷＮＩＴＬＳＷＲＱＤＧＶＳＬＳＨＤＴＱＱＷＧＤＶＬＰＤＧＮＧＴＹＱＴＷＶＡＴＲＩＣＱＧＥＥＱＲＦＴＣＹＭＥＨＳＧＮＨＳＴＨＰＶＰＳＧＫＶＬＶＬＱＳＨＷ（配列番号７２３４）
のアミノ酸配列、その断片、もしくはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２３４のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列
を含み、
（ｉｉ）ＭＩＣＢは、
ＡＥＰＨＳＬＲＹＮＬＭＶＬＳＱＤＥＳＶＱＳＧＦＬＡＥＧＨＬＤＧＱＰＦＬＲＹＤＲＱＫＲＲＡＫＰＱＧＱＷＡＥＤＶＬＧＡＫＴＷＤＴＥＴＥＤＬＴＥＮＧＱＤＬＲＲＴＬＴＨＩＫＤＱＫＧＧＬＨＳＬＱＥＩＲＶＣＥＩＨＥＤＳＳＴＲＧＳＲＨＦＹＹＤＧＥＬＦＬＳＱＮＬＥＴＱＥＳＴＶＰＱＳＳＲＡＱＴＬＡＭＮＶＴＮＦＷＫＥＤＡＭＫＴＫＴＨＹＲＡＭＱＡＤＣＬＱＫＬＱＲＹＬＫＳＧＶＡＩＲＲＴＶＰＰＭＶＮＶＴＣＳＥＶＳＥＧＮＩＴＶＴＣＲＡＳＳＦＹＰＲＮＩＴＬＴＷＲＱＤＧＶＳＬＳＨＮＴＱＱＷＧＤＶＬＰＤＧＮＧＴＹＱＴＷＶＡＴＲＩＲＱＧＥＥＱＲＦＴＣＹＭＥＨＳＧＮＨＧＴＨＰＶＰＳＧＫＶＬＶＬＱＳＱＲＴＤ（配列番号７２３５）のアミノ酸配列、その断片、もしくはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２３５のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列
を含み、または
（ｉｉｉ）ＵＬＢＰ１は、
ＧＷＶＤＴＨＣＬＣＹＤＦＩＩＴＰＫＳＲＰＥＰＱＷＣＥＶＱＧＬＶＤＥＲＰＦＬＨＹＤＣＶＮＨＫＡＫＡＦＡＳＬＧＫＫＶＮＶＴＫＴＷＥＥＱＴＥＴＬＲＤＶＶＤＦＬＫＧＱＬＬＤＩＱＶＥＮＬＩＰＩＥＰＬＴＬＱＡＲＭＳＣＥＨＥＡＨＧＨＧＲＧＳＷＱＦＬＦＮＧＱＫＦＬＬＦＤＳＮＮＲＫＷＴＡＬＨＰＧＡＫＫＭＴＥＫＷＥＫＮＲＤＶＴＭＦＦＱＫＩＳＬＧＤＣＫＭＷＬＥＥＦＬＭＹＷＥＱＭＬＤＰＴＫＰＰＳＬＡＰＧ（配列番号７２３６）のアミノ酸配列、その断片、もしくはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２３６のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列
を含む。
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＥＣＴＩＮ２またはＮＥＣＬ５から選択されるＤＮＡＭ１のリガンドであり、例えば、
（ｉ）ＮＥＣＴＩＮ２は、
ＱＤＶＲＶＱＶＬＰＥＶＲＧＱＬＧＧＴＶＥＬＰＣＨＬＬＰＰＶＰＧＬＹＩＳＬＶＴＷＱＲＰＤＡＰＡＮＨＱＮＶＡＡＦＨＰＫＭＧＰＳＦＰＳＰＫＰＧＳＥＲＬＳＦＶＳＡＫＱＳＴＧＱＤＴＥＡＥＬＱＤＡＴＬＡＬＨＧＬＴＶＥＤＥＧＮＹＴＣＥＦＡＴＦＰＫＧＳＶＲＧＭＴＷＬＲＶＩＡＫＰＫＮＱＡＥＡＱＫＶＴＦＳＱＤＰＴＴＶＡＬＣＩＳＫＥＧＲＰＰＡＲＩＳＷＬＳＳＬＤＷＥＡＫＥＴＱＶＳＧＴＬＡＧＴＶＴＶＴＳＲＦＴＬＶＰＳＧＲＡＤＧＶＴＶＴＣＫＶＥＨＥＳＦＥＥＰＡＬＩＰＶＴＬＳＶＲＹＰＰＥＶＳＩＳＧＹＤＤＮＷＹＬＧＲＴＤＡＴＬＳＣＤＶＲＳＮＰＥＰＴＧＹＤＷＳＴＴＳＧＴＦＰＴＳＡＶＡＱＧＳＱＬＶＩＨＡＶＤＳＬＦＮＴＴＦＶＣＴＶＴＮＡＶＧＭＧＲＡＥＱＶＩＦＶＲＥＴＰＮＴＡＧＡＧＡＴＧＧ（配列番号７２３７）のアミノ酸配列、その断片、もしくはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２３７のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含み、または
（ｉｉ）ＮＥＣＬ５は、
ＷＰＰＰＧＴＧＤＶＶＶＱＡＰＴＱＶＰＧＦＬＧＤＳＶＴＬＰＣＹＬＱＶＰＮＭＥＶＴＨＶＳＱＬＴＷＡＲＨＧＥＳＧＳＭＡＶＦＨＱＴＱＧＰＳＹＳＥＳＫＲＬＥＦＶＡＡＲＬＧＡＥＬＲＮＡＳＬＲＭＦＧＬＲＶＥＤＥＧＮＹＴＣＬＦＶＴＦＰＱＧＳＲＳＶＤＩＷＬＲＶＬＡＫＰＱＮＴＡＥＶＱＫＶＱＬＴＧＥＰＶＰＭＡＲＣＶＳＴＧＧＲＰＰＡＱＩＴＷＨＳＤＬＧＧＭＰＮＴＳＱＶＰＧＦＬＳＧＴＶＴＶＴＳＬＷＩＬＶＰＳＳＱＶＤＧＫＮＶＴＣＫＶＥＨＥＳＦＥＫＰＱＬＬＴＶＮＬＴＶＹＹＰＰＥＶＳＩＳＧＹＤＮＮＷＹＬＧＱＮＥＡＴＬＴＣＤＡＲＳＮＰＥＰＴＧＹＮＷＳＴＴＭＧＰＬＰＰＦＡＶＡＱＧＡＱＬＬＩＲＰＶＤＫＰＩＮＴＴＬＩＣＮＶＴＮＡＬＧＡＲＱＡＥＬＴＶＱＶＫＥＧＰＰＳＥＨＳＧＩＳＲＮ（配列番号７２３８）のアミノ酸配列、その断片、もしくはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２３８のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
さらに他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫＧ２Ｄのアダプターである、ＤＡＰ１０のリガンドである（例えば、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ． ２００５ Ｍａｙ ２４；１０２（２１）：７６４１～７６４６ページ；およびＢｌｏｏｄ、１５ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１１ Ｖｏｌｕｍｅ １１８、Ｎｕｍｂｅｒ １１（これらのそれぞれの全内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ１６ａ／ｂリガンドである、ＣＤ１６のリガンド、例えば、抗体Ｆｃ領域をさらに含むＣＤ１６ａ／ｂリガンドである（例えば、Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２０１３；４：７６を参照；これは、ＣＤ１６を通じてＮＫ細胞を誘発するために抗体がＦｃをどのように使用するのかを議論しており、その内容の全体は本明細書に組み込まれる）。
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＥＣＬ２である、ＣＲＴＡＭのリガンドであり、例えば、ＮＥＣＬ２は、アミノ酸配列：
ＱＮＬＦＴＫＤＶＴＶＩＥＧＥＶＡＴＩＳＣＱＶＮＫＳＤＤＳＶＩＱＬＬＮＰＮＲＱＴＩＹＦＲＤＦＲＰＬＫＤＳＲＦＱＬＬＮＦＳＳＳＥＬＫＶＳＬＴＮＶＳＩＳＤＥＧＲＹＦＣＱＬＹＴＤＰＰＱＥＳＹＴＴＩＴＶＬＶＰＰＲＮＬＭＩＤＩＱＫＤＴＡＶＥＧＥＥＩＥＶＮＣＴＡＭＡＳＫＰＡＴＴＩＲＷＦＫＧＮＴＥＬＫＧＫＳＥＶＥＥＷＳＤＭＹＴＶＴＳＱＬＭＬＫＶＨＫＥＤＤＧＶＰＶＩＣＱＶＥＨＰＡＶＴＧＮＬＱＴＱＲＹＬＥＶＱＹＫＰＱＶＨＩＱＭＴＹＰＬＱＧＬＴＲＥＧＤＡＬＥＬＴＣＥＡＩＧＫＰＱＰＶＭＶＴＷＶＲＶＤＤＥＭＰＱＨＡＶＬＳＧＰＮＬＦＩＮＮＬＮＫＴＤＮＧＴＹＲＣＥＡＳＮＩＶＧＫＡＨＳＤＹＭＬＹＶＹＤＰＰＴＴＩＰＰＰＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＩＬＴＩＩＴＤＳＲＡＧＥＥＧＳＩＲＡＶＤＨ（配列番号７２３９）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２３９のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ７０である、ＣＤ２７のリガンドであり、例えば、ＣＤ７０は、アミノ酸配列：
ＱＲＦＡＱＡＱＱＱＬＰＬＥＳＬＧＷＤＶＡＥＬＱＬＮＨＴＧＰＱＱＤＰＲＬＹＷＱＧＧＰＡＬＧＲＳＦＬＨＧＰＥＬＤＫＧＱＬＲＩＨＲＤＧＩＹＭＶＨＩＱＶＴＬＡＩＣＳＳＴＴＡＳＲＨＨＰＴＴＬＡＶＧＩＣＳＰＡＳＲＳＩＳＬＬＲＬＳＦＨＱＧＣＴＩＡＳＱＲＬＴＰＬＡＲＧＤＴＬＣＴＮＬＴＧＴＬＬＰＳＲＮＴＤＥＴＦＦＧＶＱＷＶＲＰ（配列番号７２４０）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２４０のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、Ｌ－セレクチン（ＣＤ６２Ｌ）である、ＰＳＧＬ１のリガンドであり、例えば、Ｌ－セレクチンは、アミノ酸配列：
ＷＴＹＨＹＳＥＫＰＭＮＷＱＲＡＲＲＦＣＲＤＮＹＴＤＬＶＡＩＱＮＫＡＥＩＥＹＬＥＫＴＬＰＦＳＲＳＹＹＷＩＧＩＲＫＩＧＧＩＷＴＷＶＧＴＮＫＳＬＴＥＥＡＥＮＷＧＤＧＥＰＮＮＫＫＮＫＥＤＣＶＥＩＹＩＫＲＮＫＤＡＧＫＷＮＤＤＡＣＨＫＬＫＡＡＬＣＹＴＡＳＣＱＰＷＳＣＳＧＨＧＥＣＶＥＩＩＮＮＹＴＣＮＣＤＶＧＹＹＧＰＱＣＱＦＶＩＱＣＥＰＬＥＡＰＥＬＧＴＭＤＣＴＨＰＬＧＮＦＳＦＳＳＱＣＡＦＳＣＳＥＧＴＮＬＴＧＩＥＥＴＴＣＧＰＦＧＮＷＳＳＰＥＰＴＣＱＶＩＱＣＥＰＬＳＡＰＤＬＧＩＭＮＣＳＨＰＬＡＳＦＳＦＴＳＡＣＴＦＩＣＳＥＧＴＥＬＩＧＫＫＫＴＩＣＥＳＳＧＩＷＳＮＰＳＰＩＣＱＫＬＤＫＳＦＳＭＩＫＥＧＤＹＮ（配列番号７２４１）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２４１のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＥＣＬ５である、ＣＤ９６のリガンドであり、例えば、ＮＥＣＬ５は、アミノ酸配列：
ＷＰＰＰＧＴＧＤＶＶＶＱＡＰＴＱＶＰＧＦＬＧＤＳＶＴＬＰＣＹＬＱＶＰＮＭＥＶＴＨＶＳＱＬＴＷＡＲＨＧＥＳＧＳＭＡＶＦＨＱＴＱＧＰＳＹＳＥＳＫＲＬＥＦＶＡＡＲＬＧＡＥＬＲＮＡＳＬＲＭＦＧＬＲＶＥＤＥＧＮＹＴＣＬＦＶＴＦＰＱＧＳＲＳＶＤＩＷＬＲＶＬＡＫＰＱＮＴＡＥＶＱＫＶＱＬＴＧＥＰＶＰＭＡＲＣＶＳＴＧＧＲＰＰＡＱＩＴＷＨＳＤＬＧＧＭＰＮＴＳＱＶＰＧＦＬＳＧＴＶＴＶＴＳＬＷＩＬＶＰＳＳＱＶＤＧＫＮＶＴＣＫＶＥＨＥＳＦＥＫＰＱＬＬＴＶＮＬＴＶＹＹＰＰＥＶＳＩＳＧＹＤＮＮＷＹＬＧＱＮＥＡＴＬＴＣＤＡＲＳＮＰＥＰＴＧＹＮＷＳＴＴＭＧＰＬＰＰＦＡＶＡＱＧＡＱＬＬＩＲＰＶＤＫＰＩＮＴＴＬＩＣＮＶＴＮＡＬＧＡＲＱＡＥＬＴＶＱＶＫＥＧＰＰＳＥＨＳＧＩＳＲＮ（配列番号７２３８）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２３９のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ７２である、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）のリガンドであり、例えば、ＣＤ７２は、アミノ酸配列：
ＲＹＬＱＶＳＱＱＬＱＱＴＮＲＶＬＥＶＴＮＳＳＬＲＱＱＬＲＬＫＩＴＱＬＧＱＳＡＥＤＬＱＧＳＲＲＥＬＡＱＳＱＥＡＬＱＶＥＱＲＡＨＱＡＡＥＧＱＬＱＡＣＱＡＤＲＱＫＴＫＥＴＬＱＳＥＥＱＱＲＲＡＬＥＱＫＬＳＮＭＥＮＲＬＫＰＦＦＴＣＧＳＡＤＴＣＣＰＳＧＷＩＭＨＱＫＳＣＦＹＩＳＬＴＳＫＮＷＱＥＳＱＫＱＣＥＴＬＳＳＫＬＡＴＦＳＥＩＹＰＱＳＨＳＹＹＦＬＮＳＬＬＰＮＧＧＳＧＮＳＹＷＴＧＬＳＳＮＫＤＷＫＬＴＤＤＴＱＲＴＲＴＹＡＱＳＳＫＣＮＫＶＨＫＴＷＳＷＷＴＬＥＳＥＳＣＲＳＳＬＰＹＩＣＥＭＴＡＦＲＦＰＤ（配列番号７２４２）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２４２のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＬＥＣ２Ｂ（ＡＩＣＬ）である、ＮＫｐ８０のリガンドであり、例えば、ＣＬＥＣ２Ｂ（ＡＩＣＬ）は、アミノ酸配列：
ＫＬＴＲＤＳＱＳＬＣＰＹＤＷＩＧＦＱＮＫＣＹＹＦＳＫＥＥＧＤＷＮＳＳＫＹＮＣＳＴＱＨＡＤＬＴＩＩＤＮＩＥＥＭＮＦＬＲＲＹＫＣＳＳＤＨＷＩＧＬＫＭＡＫＮＲＴＧＱＷＶＤＧＡＴＦＴＫＳＦＧＭＲＧＳＥＧＣＡＹＬＳＤＤＧＡＡＴＡＲＣＹＴＥＲＫＷＩＣＲＫＲＩＨ（配列番号７２４３）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２４３のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ４８である、ＣＤ２４４のリガンドであり、例えば、ＣＤ４８は、アミノ酸配列：
ＱＧＨＬＶＨＭＴＶＶＳＧＳＮＶＴＬＮＩＳＥＳＬＰＥＮＹＫＱＬＴＷＦＹＴＦＤＱＫＩＶＥＷＤＳＲＫＳＫＹＦＥＳＫＦＫＧＲＶＲＬＤＰＱＳＧＡＬＹＩＳＫＶＱＫＥＤＮＳＴＹＩＭＲＶＬＫＫＴＧＮＥＱＥＷＫＩＫＬＱＶＬＤＰＶＰＫＰＶＩＫＩＥＫＩＥＤＭＤＤＮＣＹＬＫＬＳＣＶＩＰＧＥＳＶＮＹＴＷＹＧＤＫＲＰＦＰＫＥＬＱＮＳＶＬＥＴＴＬＭＰＨＮＹＳＲＣＹＴＣＱＶＳＮＳＶＳＳＫＮＧＴＶＣＬＳＰＰＣＴＬＡＲＳ（配列番号７２４４）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号７２４４のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーはウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）であり、ＨＡは、インフルエンザウイルスの表面上に見出される糖タンパク質である。それは、上気道中の細胞または赤血球などの膜上にシアル酸を有する細胞へのウイルスの結合の原因となる。ＨＡは、少なくとも１８の異なる抗原を有する。これらのサブタイプは、Ｈ１～Ｈ１８と命名されている。ＮＣＲはウイルスタンパク質を認識することができる。ＮＫｐ４６は、インフルエンザのＨＡならびにセンダイウイルスおよびニューカッスル病ウイルスを含むパラミクソウイルスのＨＡ－ＮＡと相互作用できることが示されている。ＮＫｐ４６の他に、ＮＫｐ４４もまた、異なるインフルエンザサブタイプのＨＡと機能的に相互作用することができる。
細胞死受容体シグナルエンゲージャー
細胞死受容体、例えば、細胞死受容体４および５（ＤＲ４およびＤＲ５、それぞれＴＲＡＩＬ－Ｒ１およびＴＲＡＩＬ－Ｒ２としても公知）は、正常なヒト組織において広く発現される三量体Ｉ型膜貫通タンパク質である。細胞死受容体の活性化は、細胞死を誘導する細胞内シグナル伝達を引き起こす。ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）（Ａｐｏ２Ｌとしても公知）は、細胞死受容体に結合して、それらの細胞死誘導性シグナル伝達を活性化させる三量体タンパク質である（Ａｍａｒａｎｔｅ－ＭｅｎｄｅｓおよびＧｒｉｆｆｉｔｈ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ． ２０１５ Ｎｏｖ；１５５：１１７－３１ページ）。
本開示は、特に、標的細胞（例えば、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原を含むＴ細胞）上の細胞死受容体への結合および／または細胞死受容体シグナル伝達の活性化を媒介する１つまたは複数の細胞死受容体シグナルエンゲージャーを含有するように操作された多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。したがって、一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、１つもしくは複数のＴＲＡＩＬポリペプチドもしくはその断片（ＴＲＡＩＬ分子）、１つもしくは複数の細胞死受容体もしくはその断片（細胞死受容体分子）、または細胞死受容体に特異的に結合する（かつ例えば、細胞死受容体シグナル伝達を活性化させる）１つもしくは複数の抗原結合性ドメインを含む。理論に拘泥するものではないが、標的細胞上の細胞死受容体シグナル伝達を活性化させることができる細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、標的細胞、例えば、標的疾患細胞（例えば、ＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原を含むＴ細胞）の死を誘導することができる。
細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、当業者に公知のＴＲＡＩＬおよび細胞死受容体のバージョンからのまたはそれに由来するＴＲＡＩＬ分子および／または細胞死受容体分子を含み得る。一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーはヒトＴＲＡＩＬ分子または細胞死受容体分子を含む。一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーはマウスＴＲＡＩＬ分子または細胞死受容体分子を含む。一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは哺乳動物ＴＲＡＩＬ分子または細胞死受容体分子を含む。一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、（例えば、野生型ＴＲＡＩＬ分子または細胞死受容体分子と比較して）短縮されたＴＲＡＩＬ分子または細胞死受容体分子を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸９５～２８１に対応する残基を少なくとも含む短縮されたＴＲＡＩＬ分子、例えば、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸９５～２８１に対応する残基を含む短縮されたＴＲＡＩＬ分子を含む。一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、ヒトＴＲＡＩＬの９５～２８１の残基を含む短縮されたＴＲＡＩＬ分子を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸１２２～２８１に対応する残基を少なくとも含む短縮されたＴＲＡＩＬ分子、例えば、ヒトＴＲＡＩＬのアミノ酸１２２～２８１に対応する残基を含む短縮されたＴＲＡＩＬ分子を含む。一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、ヒトＴＲＡＩＬの１２２～２８１の残基を含む短縮されたＴＲＡＩＬ分子を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、１つ、２つ、または３つのＴＲＡＩＬ分子を含む（例えば、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、それぞれ単量体、二量体、または三量体ＴＲＡＩＬ分子である）。一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、１つ、２つ、または３つの細胞死受容体分子を含む（例えば、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、それぞれ単量体、二量体、または三量体細胞死受容体分子である）。一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、細胞死受容体（例えば、１つまたは複数の細胞死受容体、例えば、同じまたは異なる細胞死受容体）に特異的に結合する１つ、２つ、または３つの抗原結合性ドメインを含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、表１１から選択されるアミノ酸配列（または表１１から選択される配列に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、配列番号６１５７のアミノ酸配列（または配列番号６１５７に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、配列番号６１５８のアミノ酸配列（または配列番号６１５８に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、配列番号６１５９のアミノ酸配列（または配列番号６１５９に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、配列番号６１６０のアミノ酸配列（または配列番号６１６０に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、配列番号６１６１のアミノ酸配列（または配列番号６１６１に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、配列番号６１６２のアミノ酸配列（または配列番号６１６２に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、配列番号６１６３のアミノ酸配列（または配列番号６１６３に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、配列番号６１６４のアミノ酸配列（または配列番号６１６４に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、配列番号６１６５のアミノ酸配列（または配列番号６１６５に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む。
一部の実施形態では、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、本開示の多機能性分子の別の成分と同じポリペプチド鎖上に含まれ、例えば、細胞死受容体シグナルエンゲージャーは、例えば、融合タンパク質として、リンパ球細胞（例えば、Ｔ細胞）上のＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）、免疫細胞エンゲージャー、サイトカイン分子、またはサイトカイン阻害剤分子に優先的に結合する第１の抗原結合性ドメインの重鎖および／または軽鎖と同じポリペプチド鎖上に含まれる。一部の実施形態では、多機能性分子は、細胞死受容体シグナルエンゲージャーおよびＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）に優先的に結合する第１の抗原結合性ドメインの軽鎖を含む融合タンパク質を含む。一部の実施形態では、多機能性分子は、細胞死受容体シグナルエンゲージャーおよびＴＣＲＢＶ抗原（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型に対応するＴＣＲＢＶ抗原）を発現するリンパ球を選択的に標的化する第１の抗原結合性ドメインの軽鎖を含む融合タンパク質を含む。
Ｔ細胞エンゲージャー
本開示は、とりわけ、Ｔ細胞への結合および／またはその活性化を媒介する１つまたは複数のＴ細胞エンゲージャーを含有するように操作されている多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。したがって、一部の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、ＣＤ３、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ、ＴＣＲζ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ４０、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＴＩＭ１、ＳＬＡＭ、ＣＤ２、またはＣＤ２２６のうちの１つまたは複数に結合する（例えば、一部の実施形態では、それを活性化させる）抗原結合性ドメインまたはリガンドから選択される。他の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、ＣＤ３、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ、ＴＣＲζ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ４０、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＴＩＭ１、ＳＬＡＭ、ＣＤ２、またはＣＤ２２６のうちの１つまたは複数に結合し、かつそれを活性化させない抗原結合性ドメインまたはリガンドから選択される。
Ｂ細胞、マクロファージおよび樹状細胞エンゲージャー
概括的に言えば、Ｂリンパ球としても公知のＢ細胞は、リンパ球サブタイプの白血球の一種である。それらは、抗体を分泌することによって適応免疫系の液性免疫成分において機能する。追加的に、Ｂ細胞は、抗原を提示し（それらはまた、プロフェッショナル抗原提示細胞（ＡＰＣ）として分類される）、サイトカインを分泌する。マクロファージは、ファゴサイトーシスを介して細胞残屑、外来物質、微小生物、がん細胞を貪食および消化する白血球の一種である。ファゴサイトーシスの他に、それらは非特異的な防御（自然免疫）において重要な役割を果たし、そしてまた、リンパ球などの他の免疫細胞を動員することによって特異的な防御機構（適応免疫）の開始を助ける。例えば、それらは、Ｔ細胞への抗原提示主体として重要である。炎症の増加および免疫系の刺激の他に、マクロファージはまた、重要な抗炎症性の役割を果たし、サイトカインの放出を通じて免疫反応を減少させることができる。樹状細胞（ＤＣ）は、抗原材料のプロセシングにおいて機能し、それを細胞表面上で免疫系のＴ細胞に対して提示する抗原提示細胞である。
本開示は、とりわけ、Ｂ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞への結合および／またはその活性化を媒介する１つまたは複数のＢ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞エンゲージャーを含む、例えば、含有するように操作されている、多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。
よって、一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）もしくはＣＤ７０リガンド；ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；ＯＸ４０に対する抗体分子；ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）；Ｔｏｌｌ様受容体のアゴニスト（例えば、本明細書に記載されるもの、例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４）、もしくはＴＬＲ９アゴニスト）；４１ＢＢ；ＣＤ２；ＣＤ４７；もしくはＳＴＩＮＧアゴニスト、またはこれらの組合せのうちの１つまたは複数から選択されるＢ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞エンゲージャーを含む。
一部の実施形態では、Ｂ細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０Ｌ、ＯＸ４０Ｌ、もしくはＣＤ７０リガンド、またはＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子である。
一部の実施形態では、マクロファージエンゲージャーはＣＤ２アゴニストである。一部の実施形態では、マクロファージエンゲージャーは、ＣＤ４０ＬもしくはＣＤ４０に結合する抗原結合性ドメインもしくはリガンド、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト（例えば、本明細書に記載されるもの）、例えば、ＴＬＲ９もしくはＴＬＲ４（例えば、ｃａＴＬＲ４（構成的活性型ＴＬＲ４）、ＣＤ４７、またはＳＴＩＮＧアゴニストに結合する抗原結合性ドメインである。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド、例えば、サイクリックジＧＭＰ（ｃｄＧＭＰ）またはサイクリックジＡＭＰ（ｃｄＡＭＰ）である。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストはビオチン化されている。
一部の実施形態では、樹状細胞エンゲージャーはＣＤ２アゴニストである。一部の実施形態では、樹状細胞エンゲージャーは、ＯＸ４０Ｌ、４１ＢＢ、ＴＬＲアゴニスト（例えば、本明細書に記載されるもの）（例えば、ＴＬＲ９アゴニスト、ＴＬＲ４（例えば、ｃａＴＬＲ４（構成的活性型ＴＬＲ４））、ＣＤ４７、またはおよびＳＴＩＮＧアゴニストのうちの１つまたは複数に結合するリガンド、受容体アゴニスト、または抗体分子である。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド、例えば、サイクリックジＧＭＰ（ｃｄＧＭＰ）またはサイクリックジＡＭＰ（ｃｄＡＭＰ）である。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストはビオチン化されている。
他の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、Ｂ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞のうちの１つまたは複数への結合、またはその活性化を媒介する。例示的なＢ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）もしくはＣＤ７０リガンド；ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；ＯＸ４０に対する抗体分子；ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）；Ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４）もしくはＴＬＲ９アゴニスト）；４１ＢＢアゴニスト；ＣＤ２；ＣＤ４７；もしくはＳＴＩＮＧアゴニスト、またはこれらの組合せのうちの１つまたは複数から選択することができる。
一部の実施形態では、Ｂ細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０Ｌ、ＯＸ４０Ｌ、もしくはＣＤ７０リガンド、またはＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子のうちの１つまたは複数から選択される。
他の実施形態では、マクロファージ細胞エンゲージャーは、ＣＤ２アゴニスト；ＣＤ４０Ｌ；ＯＸ４０Ｌ；ＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；Ｔｏｌｌ様受容体アゴニストもしくはその断片（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４））；ＣＤ４７アゴニスト；またはＳＴＩＮＧアゴニストのうちの１つまたは複数から選択される。
他の実施形態では、樹状細胞エンゲージャーは、ＣＤ２アゴニスト、ＯＸ４０抗体、ＯＸ４０Ｌ、４１ＢＢアゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニストもしくはその断片（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４））、ＣＤ４７アゴニスト、またはＳＴＩＮＧアゴニストのうちの１つまたは複数から選択される。
一実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、アミノ酸配列：
ＱＶＳＨＲＹＰＲＩＱＳＩＫＶＱＦＴＥＹＫＫＥＫＧＦＩＬＴＳＱＫＥＤＥＩＭＫＶＱＮＮＳＶＩＩＮＣＤＧＦＹＬＩＳＬＫＧＹＦＳＱＥＶＮＩＳＬＨＹＱＫＤＥＥＰＬＦＱＬＫＫＶＲＳＶＮＳＬＭＶＡＳＬＴＹＫＤＫＶＹＬＮＶＴＴＤＮＴＳＬＤＤＦＨＶＮＧＧＥＬＩＬＩＨＱＮＰＧＥＦＣＶＬ（配列番号７２４５）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号７２４５のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
別の実施形態では、ＣＤ４０Ｌは、アミノ酸配列：
ＭＱＫＧＤＱＮＰＱＩＡＡＨＶＩＳＥＡＳＳＫＴＴＳＶＬＱＷＡＥＫＧＹＹＴＭＳＮＮＬＶＴＬＥＮＧＫＱＬＴＶＫＲＱＧＬＹＹＩＹＡＱＶＴＦＣＳＮＲＥＡＳＳＱＡＰＦＩＡＳＬＣＬＫＳＰＧＲＦＥＲＩＬＬＲＡＡＮＴＨＳＳＡＫＰＣＧＱＱＳＩＨＬＧＧＶＦＥＬＱＰＧＡＳＶＦＶＮＶＴＤＰＳＱＶＳＨＧＴＧＦＴＳＦＧＬＬＫＬ（配列番号７２４６）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号７２４６のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
さらに他の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド、例えば、サイクリックジＧＭＰ（ｃｄＧＭＰ）、サイクリックジＡＭＰ（ｃｄＡＭＰ）、またはこれらの組合せを含み、必要に応じて２’，５’または３’，５’リン酸連結を有する。
一実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、４１ＢＢリガンド、例えば、アミノ酸配列：
ＡＣＰＷＡＶＳＧＡＲＡＳＰＧＳＡＡＳＰＲＬＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号７２４７）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号７２４７のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む４１ＢＢリガンドを含む。
Ｔｏｌｌ様受容体
Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）は、ショウジョウバエＴｏｌｌタンパク質のホモログである進化的に保存された受容体であり、微生物病原体によって排他的に発現される病原体関連微生物パターン（ＰＡＭＰ）、または壊死したもしくは死にゆく細胞から放出される内因性分子である危険関連分子パターン（ＤＡＭＰ）として公知の高度に保存された構造モチーフを認識する。ＰＡＭＰは、リポ多糖（ＬＰＳ）、ペプチドグリカン（ＰＧＮ）およびリポペプチドなどの様々な細菌細胞壁成分の他に、フラジェリン、細菌ＤＮＡおよびウイルス二本鎖ＲＮＡを含む。ＤＡＭＰは、熱ショックタンパク質などの細胞内タンパク質の他に、細胞外基質からのタンパク質断片を含む。対応するＰＡＭＰまたはＤＡＭＰによるＴＬＲの刺激は、シグナル伝達カスケードを開始させて、ＡＰ－１、ＮＦ－κＢおよびインターフェロン調節因子（ＩＲＦ）などの転写因子の活性化に繋がる。ＴＬＲによるシグナル伝達は、インターフェロン（ＩＦＮ）、炎症促進性サイトカインおよび適応免疫応答を指令するエフェクターサイトカインの産生を含む、様々な細胞応答をもたらす。ＴＬＲは、多数の炎症性および免疫障害に結び付けられており、がんにおいて役割を果たす（Ｒａｋｏｆｆ－Ｎａｈｏｕｍ Ｓ．およびＭｅｄｚｈｉｔｏｖ Ｒ．、２００９． Ｔｏｌｌ－ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ． Ｎａｔ Ｒｅｖｓ Ｃａｎｃｅｒ ９：５７－６３ページ）。
ＴＬＲは、ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）およびＴｏｌｌ／ＩＬ－１受容体（ＴＩＲ）ドメインと呼ばれる保存された領域を含有する細胞質テイルを含有する細胞外ドメインによって特徴付けられるＩ型膜貫通タンパク質である。１０個のヒトおよび１２個のマウスＴＬＲが特徴付けられており、それらは、ヒトにおけるＴＬＲ１～ＴＬＲ１０、ならびにマウスにおけるＴＬＲ１～ＴＬＲ９、ＴＬＲ１１、ＴＬＲ１２およびＴＬＲ１３であり、ＴＬＲ１０のホモログは偽遺伝子である。ＴＬＲ２は、細菌リポタンパク質、リポマンナンおよびリポタイコ酸を含む、グラム陽性細菌からの様々なＰＡＭＰの認識のために必須である。ＴＬＲ３は、ウイルス由来の二本鎖ＲＮＡに結び付けられている。ＴＬＲ４は、主に、リポ多糖によって活性化される。ＴＬＲ５は細菌フラジェリンを検出し、ＴＬＲ９は、非メチル化ＣｐＧ ＤＮＡに対する応答のために要求される。最後に、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８は、小さい合成の抗ウイルス分子を認識し、一本鎖ＲＮＡはそれらの天然リガンドであることが報告された。ＴＬＲ１１は、尿路病原性Ｅ． ｃｏｌｉおよびＴｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉからのプロフィリン様タンパク質を認識することが報告されている。ＴＬＲの特異性のレパートリーは、互いとヘテロ二量体化するＴＬＲの能力によって拡張されるようである。例えば、ＴＬＲ２およびＴＬＲ６の二量体は、ジアシル化リポタンパク質に対する応答のために要求され、ＴＬＲ２およびＴＬＲ１は、相互作用してトリアシル化リポタンパク質を認識する。ＴＬＲの特異性はまた、ＬＰＳに応答してＴＬＲ４と複合体を形成するＭＤ－２およびＣＤ１４などの、様々なアダプターおよびアクセサリー分子によって影響される。
ＴＬＲシグナル伝達は、炎症性サイトカインの産生に繋がるＭｙＤ８８依存性経路、ならびにＩＦＮ－βの刺激および樹状細胞の成熟と関連付けられるＭｙＤ８８非依存性経路という少なくとも２つの別個の経路からなる。ＭｙＤ８８依存性経路は、ＴＬＲ３を除いてすべてのＴＬＲに共通である（Ａｄａｃｈｉ Ｏら、１９９８、「Ｔａｒｇｅｔｅｄ ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＭｙＤ８８ ｇｅｎｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｌｏｓｓ ｏｆ ＩＬ－１－ ａｎｄ ＩＬ－１８－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．」、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、９（１）：１４３～５０ページ）。ＰＡＭＰまたはＤＡＭＰによって活性化されると、ＴＬＲは、ヘテロまたはホモ二量体化して、細胞質ＴＩＲドメインを介してアダプタータンパク質の動員を誘導する。個々のＴＬＲは、異なるアダプター分子の使用によって異なるシグナル伝達応答を誘導する。ＴＬＲ４およびＴＬＲ２シグナル伝達は、ＭｙＤ８８依存性経路に関与するアダプターＴＩＲＡＰ／Ｍａｌを要求する。ＴＬＲ３は、アダプターＴＲＩＦ／ＴＩＣＡＭ－１を通じて、ＭｙＤ８８非依存性の方式で、二本鎖ＲＮＡに応答してＩＦＮ－βの産生を誘発する。ＴＲＡＭ／ＴＩＣＡＭ－２は、その機能がＴＬＲ４経路に制限されたＭｙＤ８８非依存性経路に関与する別のアダプター分子である。
ＴＬＲ３、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８およびＴＬＲ９は、ウイルス核酸を認識し、Ｉ型ＩＦＮを誘導する。Ｉ型ＩＦＮの誘導に繋がるシグナル伝達の機序は、活性化されるＴＬＲに依存して異なる。それらは、抗ウイルス防御、細胞成長および免疫調節において不可欠な役割を果たすことが公知の転写因子のファミリー、インターフェロン調節因子、ＩＲＦを伴う。３つのＩＲＦ（ＩＲＦ３、ＩＲＦ５およびＩＲＦ７）は、ウイルス媒介性のＴＬＲシグナル伝達の直接的なトランスデューサーとして機能する。ＴＬＲ３およびＴＬＲ４はＩＲＦ３およびＩＲＦ７を活性化させ、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８はＩＲＦ５およびＩＲＦ７を活性化させる（Ｄｏｙｌｅ Ｓら、２００２、「ＩＲＦ３ ｍｅｄｉａｔｅｓ ａ ＴＬＲ３／ＴＬＲ４－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｇｅｎｅ ｐｒｏｇｒａｍ．」、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、１７（３）：２５１～６３ページ）。さらには、ＴＬＲ９リガンドＣｐＧ－Ａによって刺激されるＩ型ＩＦＮ産生は、ＰＩ（３）ＫおよびｍＴＯＲによって媒介されることが示されている（Ｃｏｓｔａ－Ｍａｔｔｉｏｌｉ Ｍ．およびＳｏｎｅｎｂｅｒｇ Ｎ． ２００８、「ＲＡＰｐｉｎｇ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｙｐｅ Ｉ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｉｎ ｐＤＣｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｍＴＯＲ．」、Ｎａｔｕｒｅ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ９：１０９７～１０９９ページ）。
ＴＬＲ－９
ＴＬＲ９は、ＤＮＡ分子中の非メチル化ＣｐＧ配列を認識する。ＣｐＧ部位は、細菌ゲノムまたはウイルスＤＮＡと比較して脊椎動物ゲノム上で比較的希少（約１％）である。ＴＬＲ９は、Ｂリンパ球、単球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、および形質細胞性樹状細胞などの免疫系の多数の細胞によって発現される。ＴＬＲ９は、細胞内、エンドソーム区画内において発現され、ＣｐＧモチーフリッチなＤＮＡへの結合によって免疫系にウイルスおよび細菌感染を警告するように機能する。ＴＬＲ９シグナルは、炎症促進性反応を開始させる細胞の活性化に繋がり、Ｉ型インターフェロンおよびＩＬ－１２などのサイトカインの産生をもたらす。
ＴＬＲアゴニスト
ＴＬＲアゴニストは、１つまたは複数のＴＬＲ、例えば、ヒトＴＬＲ－１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０のうちの１つまたは複数をアゴナイズすることができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の付属的剤はＴＬＲアゴニストである。一部の実施形態では、ＴＬＲアゴニストは、ヒトＴＬＲ－９を特異的にアゴナイズする。一部の実施形態では、ＴＬＲ－９アゴニストはＣｐＧ部分である。本明細書で使用される場合、ＣｐＧ部分は、配列：５’－Ｃ－ホスフェート－Ｇ－３’、すなわち、１つのみのホスフェートによって分離されたシトシンおよびグアニンを有する直鎖状ジヌクレオチドである。
一部の実施形態では、ＣｐＧ部分は、少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、２５個、２６個、２７個、２８個、２９個、３０個、またはより多くのＣｐＧジヌクレオチドを含む。一部の実施形態では、ＣｐＧ部分は、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、２５個、２６個、２７個、２８個、２９個、または３０個のＣｐＧジヌクレオチドからなる。一部の実施形態では、ＣｐＧ部分は、１～５個、１～１０個、１～２０個、１～３０個、１～４０個、１～５０個、５～１０個、５～２０個、５～３０個、１０～２０個、１０～３０個、１０～４０個、または１０～５０個のＣｐＧジヌクレオチドを有する。
一部の実施形態では、ＴＬＲ－９アゴニストは合成ＯＤＮ（オリゴデオキシヌクレオチド）である。ＣｐＧ ＯＤＮは、特定の配列状況（ＣｐＧモチーフ）において非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含有する短い合成の一本鎖ＤＮＡ分子である。ＣｐＧ ＯＤＮは、ゲノム細菌ＤＮＡ中に見出される天然のホスホジエステル（ＰＯ）骨格とは対照的に、部分的または完全にホスホロチオエート化（ＰＳ）した骨格を持つ。クラスＡ、ＢおよびＣというＣｐＧ ＯＤＮの３つの主要なクラスがあり、これらは免疫賦活活性において異なる。ＣｐＧ－Ａ ＯＤＮは、ＰＯ中央ＣｐＧ含有パリンドロームモチーフおよびＰＳ修飾３’ポリ－Ｇストリングによって特徴付けられる。それらは、ｐＤＣからの高いＩＦＮ－α産生を誘導するが、ＴＬＲ９依存性ＮＦ－κＢシグナル伝達および炎症促進性サイトカイン（例えば、ＩＬ－６）産生の弱い刺激因子である。ＣｐＧ－Ｂ ＯＤＮは、１つまたは複数のＣｐＧジヌクレオチドを有する全長ＰＳ骨格を含有する。それらは、Ｂ細胞およびＴＬＲ９依存性ＮＦ－κＢシグナル伝達を強く活性化させるが、ＩＦＮ－α分泌を弱く刺激する。ＣｐＧ－Ｃ ＯＤＮは、クラスＡおよびＢの両方の特徴を兼ね備える。それらは、完全なＰＳ骨格およびＣｐＧ含有パリンドロームモチーフを含有する。ＣクラスＣｐＧ ＯＤＮは、ｐＤＣからの強いＩＦＮ－α産生の他に、Ｂ細胞刺激を誘導する。
リンカー
本明細書に開示される多特異性または多機能性分子は、リンカー、例えば、抗原結合性ドメインとサイトカイン分子との間、抗原結合性ドメインと免疫細胞エンゲージャーとの間、抗原結合性ドメインと間質改変部分との間、サイトカイン分子と免疫細胞エンゲージャーとの間、サイトカイン分子と間質改変部分との間、免疫細胞エンゲージャーと間質改変部分との間、抗原結合性ドメインと免疫グロブリン鎖定常領域との間、サイトカイン分子と免疫グロブリン鎖定常領域との間、免疫細胞エンゲージャーと免疫グロブリン鎖定常領域との間、または間質改変部分と免疫グロブリン鎖定常領域との間のうちの１つまたは複数におけるリンカーをさらに含み得る。実施形態では、リンカーは、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、もしくは非ヘリックスリンカー、またはこれらの組合せから選択される。
一実施形態では、多特異性分子は、１つ、２つ、３つ、または４つのリンカー、例えば、ペプチドリンカーを含み得る。一実施形態では、ペプチドリンカーは、ＧｌｙおよびＳｅｒを含む。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、ＧＧＧＧＳ（配列番号７２４８）；ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７２４９）；ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７２５０）；およびＤＶＰＳＧＰＧＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７２５１）から選択される。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、Ａ（ＥＡＡＡＫ）ｎＡ（配列番号７２９１）ファミリーのリンカー（例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ． （２００１） １４ （８）： ５２９－５３２に記載される）である。これらは、ｎが２～５の範囲である剛直なヘリックスリンカーである。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、ＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号７２５２）；ＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号７２５３）；ＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号７７）；およびＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号７８）から選択される。
核酸
前述の多特異性または多機能性分子をコードする核酸もまた、開示される。
ある特定の実施形態では、本発明は、本明細書に記載される抗体分子の重鎖および軽鎖可変領域およびＣＤＲまたは超可変ループをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を特徴とする。例えば、本発明は、本明細書に開示される抗体分子のうちの１つまたは複数から選択される抗体分子の、重鎖および軽鎖可変領域をそれぞれコードする、第１および第２の核酸を特徴とする。核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一であるか、または３個、６個、１５個、３０個、もしくは４５個以下のヌクレオチドが、本明細書の表に示される配列と異なる配列を含む。
ある特定の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または１つもしくは複数の置換、例えば、保存的置換を有する配列）を含み得る。他の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または１つもしくは複数の置換、例えば、保存的置換を有する配列）を含み得る。なおも別の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるアミノ酸配列を有する重鎖および軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または１つもしくは複数の置換、例えば、保存的置換を有する配列）を含み得る。
ある特定の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列を有する重鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、それに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または本明細書に記載されるストリンジェンシー条件下においてハイブリダイズすることができる配列）を含み得る。別の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列を有する軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または本明細書に記載されるストリンジェンシー条件下においてハイブリダイズすることができる配列）を含み得る。なおも別の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列を有する重鎖および軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または本明細書に記載されるストリンジェンシー条件下においてハイブリダイズすることができる配列）を含み得る。
ある特定の実施形態では、核酸は、本明細書に開示されるサイトカイン分子、免疫細胞エンゲージャー、または間質改変部分をコードするヌクレオチド配列を含み得る。
別の態様では、本出願は、本明細書に記載される核酸を含む宿主細胞およびベクターを特徴とする。核酸は、本明細書において以下により詳細に記載されるように、同じ宿主細胞または別個の宿主細胞に存在する単一のベクターまたは別個のベクターに存在し得る。
ベクター
さらに、本明細書に記載される多特異性または多機能性分子をコードするヌクレオチド配列を含むベクターが本明細書で提供される。一実施形態では、ベクターは、本明細書に記載の多特異性または多機能性分子をコードするヌクレオチドを含む。一実施形態では、ベクターは、本明細書に記載のヌクレオチド配列を含む。ベクターとしては、ウイルス、プラスミド、コスミド、ラムダファージ、または酵母人工染色体（ＹＡＣ）が挙げられるが、これらに限定されない。
多数のベクター系を用いることができる。例えば、１つのクラスのベクターは、動物ウイルス、例えば、ウシパピローマウイルス、ポリオーマウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、バキュロウイルス、レトロウイルス（ラウス肉腫ウイルス、ＭＭＴＶ、もしくはＭＯＭＬＶ）、またはＳＶ４０ウイルスなどに由来するＤＮＡエレメントを利用する。別のクラスのベクターは、ＲＮＡウイルス、例えば、セムリキ森林ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、およびフラビウイルスに由来するＲＮＡエレメントを利用する。
加えて、ＤＮＡが染色体に安定に組み込まれた細胞を、トランスフェクトされた宿主細胞の選択を可能にする１つまたは複数のマーカーを導入することによって、選択することができる。マーカーは、例えば、栄養要求性宿主に対するプロトトロピー、殺生物剤耐性（例えば、抗生物質）、または重金属、例えば、銅に対する耐性などを提供し得る。選択可能なマーカー遺伝子は、発現させようとするＤＮＡ配列に直接的に連結させるか、または共形質転換によって同じ細胞に導入するかのいずれかを行うことができる。最適なｍＲＮＡの合成には、追加のエレメントも必要とされ得る。これらのエレメントとしては、スプライスシグナル、ならびに転写プロモーター、エンハンサー、および終結シグナルを挙げることができる。
構築物を含む発現ベクターまたはＤＮＡ配列を、発現のために調製した後、発現ベクターを、適切な宿主細胞にトランスフェクトまたは導入することができる。例えば、プロトプラスト融合、リン酸カルシウム沈降、エレクトロポレーション、レトロウイルス形質導入、ウイルストランスフェクション、遺伝子銃、脂質に基づくトランスフェクション、または他の従来的な技法など、様々な技法を用いてこれを達成することができる。プロトプラスト融合の場合、細胞を、培地において成長させ、適切な活性に関してスクリーニングする。
結果として得られたトランスフェクトした細胞の培養、および産生される抗体分子の回収のための方法および条件は、当業者に公知であり、本明細書に基づいて、用いられる具体的な発現ベクターおよび哺乳動物宿主細胞に応じて変更または最適化することができる。
細胞
別の態様では、本出願は、本明細書に記載される核酸を含む宿主細胞およびベクターを特徴とする。核酸は、同じ宿主細胞または別個の宿主細胞に存在する単一のベクターまたは別個のベクターに存在し得る。宿主細胞は、真核生物細胞、例えば、哺乳動物細胞、昆虫細胞、酵母細胞、または原核生物細胞、例えば、大腸菌であってもよい。例えば、哺乳動物細胞は、培養した細胞または細胞系であり得る。例示的な哺乳動物細胞としては、リンパ球細胞系（例えば、ＮＳＯ）、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）、ＣＯＳ細胞、卵母細胞、およびトランスジェニック動物に由来する細胞、例えば、乳腺上皮細胞が挙げられる。
本発明はまた、本明細書に記載される抗体分子をコードする核酸を含む宿主細胞も提供する。
一実施形態では、宿主細胞は、抗体分子をコードする核酸を含むように遺伝子操作されている。
一実施形態では、宿主細胞は、発現カセットを使用することによって遺伝子操作されている。「発現カセット」という語句は、ヌクレオチド配列を指し、そのような配列と適合性のある宿主における遺伝子の発現を達成することができる。そのようなカセットとしては、プロモーター、イントロンありまたはなしのオープンリーディングフレーム、終結シグナルを挙げることができる。例えば、誘導性プロモーターなど、発現を達成するのに必要であるかまたは役に立つ追加の因子もまた、使用することができる。
本発明はまた、本明細書に記載されるベクターを含む宿主細胞も提供する。
細胞は、真核生物細胞、細菌細胞、昆虫細胞、またはヒト細胞であり得るが、これらに限定されない。好適な真核生物細胞としては、Ｖｅｒｏ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＣＯＳ細胞、ＣＨＯ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＢＨＫ細胞、およびＭＤＣＫＩＩ細胞が挙げられるが、これらに限定されない。好適な昆虫細胞としては、Ｓｆ９細胞が挙げられるが、これに限定されない。
使用および組合せ治療
本明細書に記載の方法は、本明細書に記載の多特異性分子を使用すること、例えば、本明細書に記載の医薬組成物を使用することによって、対象における免疫状態または障害、例えば、自己免疫疾患を処置するステップを含む。対象における自己免疫障害、例えば、自己免疫疾患の症状を低減または寛解させる方法の他に、ＴＣＲバイアスを矯正するまたは減少させる（例えば、均衡のとれたＴＣＲレパートリーまたは自己免疫疾患を有しない人により類似したＴＣＲレパートリーを再確立する）方法もまた提供される。
一実施形態では、免疫状態または障害は、チャーグ－ストラウス症候群、サルコイドーシス、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、１型糖尿病、自己免疫性肝炎（例えば、１型または２型）、原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性肝硬変、多発性硬化症、ギランバレー症候群およびＡＭＡＮ（軸索および神経の神経障害）、慢性炎症性脱髄性多発神経障害（ＣＩＤＰ）、横断性脊髄炎、トロサハント症候群（ＴＨＳ）、デビック病（視神経脊髄炎）、傍腫瘍性小脳変性症（ＰＣＤ）、ランバート・イートン症候群、乾癬、強皮症、ＣＲＥＳＴ（石灰沈着症、レイノー現象、食道運動障害、手指硬化症、および毛細血管拡張症）症候群、疱疹状皮膚炎、皮膚筋炎、水疱性類天疱瘡、瘢痕性類天疱瘡／良性粘膜類天疱瘡、類天疱瘡、関節リウマチ（ＲＡ）、乾癬性関節炎、再発性多発性軟骨炎、慢性再発性多発性骨髄炎（ＣＲＭＯ）、血管炎、川崎病、多発血管炎性肉芽腫症（ＧＰＡ）、ベーチェット病（血管炎）、高安動脈炎、結節性多発動脈炎、顕微鏡的多発血管炎（ＭＰＡ）、白血球破砕性血管炎、コーガン症候群、ブドウ膜炎、末梢ブドウ膜炎（扁平部炎）、強膜炎、自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）、ドレスラー症候群、リウマチ熱、エヴァンス症候群、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）、溶血性貧血、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、多発性筋炎、若年性皮膚筋炎（ＪＤＭ）および若年性多発性筋炎（ＪＰＭ）を含む若年性筋炎（ＪＭ）、シェーグレン症候群、眼瘢痕性類天疱瘡、または橋本甲状腺炎から選択される。
一部の実施形態では、免疫状態または障害、例えば、自己免疫疾患は、糖尿病（例えば、１型糖尿病）である。
一実施形態では、多特異性分子（または医薬組成物）は、処置または予防しようとする疾患にとって適切な方式で投与される。投与の回数および頻度は、患者の状態、ならびに患者の疾患の種類および重症度などの因子によって決定される。適切な投薬量は、臨床試験によって決定され得る。例えば、「有効量」または「治療量」が示される場合、投与しようとする医薬組成物（または多特異性分子）の厳密な量は、免疫障害の重症度／特徴、感染症または転移の程度、対象の年齢、体重、および状態における個々の違いを考慮して、医師によって決定され得る。実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、１０４～１０９個の細胞／体重ｋｇ、例えば、１０５～１０６個の細胞／体重ｋｇの投薬量で投与され得、これらの範囲内のすべての整数値が含まれる。実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、これらの投薬量で複数回投与されてもよい。実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、免疫療法において説明されている注入技法を使用して投与してもよい（例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．， Ｎｅｗ Ｅｎｇ． Ｊ． ｏｆ Ｍｅｄ． ３１９：１６７６， １９８８を参照されたい）。
実施形態では、多特異性分子または医薬組成物は、対象に非経口的に投与される。実施形態では、細胞は、静脈内、皮下、腫瘍内、節内（ｉｎｔｒａｎｏｄａｌｌｙ）、筋肉内、皮内、または腹腔内で、対象に投与される。実施形態では、細胞は、腫瘍またはリンパ節に直接的に、投与される、例えば、注射される。実施形態では、細胞は、注入（例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．， Ｎｅｗ Ｅｎｇ． Ｊ． ｏｆ Ｍｅｄ． ３１９：１６７６， １９８８に記載される）または静脈内プッシュ（ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ｐｕｓｈ）として投与される。実施形態では、細胞は、注射可能なデポー製剤として投与される。
実施形態では、対象は、哺乳動物である。実施形態では、対象は、ヒト、サル、ブタ、イヌ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウサギ、ラット、またはマウスである。実施形態では、対象は、ヒトである。実施形態では、対象は、例えば、１８歳未満、例えば、１７歳未満、１６歳未満、１５歳未満、１４歳未満、１３歳未満、１２歳未満、１１歳未満、１０歳未満、９歳未満、８歳未満、７歳未満、６歳未満、５歳未満、４歳未満、３歳未満、２歳未満、１歳未満、またはそれ未満の小児対象である。実施形態では、対象は、成人、例えば、少なくとも１８歳、例えば、少なくとも１９歳、２０歳、２１歳、２２歳、２３歳、２４歳、２５歳、２５～３０歳、３０～３５歳、３５～４０歳、４０～５０歳、５０～６０歳、６０～７０歳、７０～８０歳、または８０～９０歳である。
併用療法
本明細書に開示される多特異性または多機能性分子は、第２の治療剤または手法と併用して使用することができる。
実施形態では、多特異性または多機能性分子および第２の治療剤または手法は、対象が自己免疫障害を有すると診断された後に投与／実施される。実施形態では、多特異性または多機能性分子、および第２の治療剤または手法は、同時にまたは並行して投与される／行われる。例えば、１つの処置の送達は、第２の送達を開始する場合、例えば、処置の投与に重複がある場合、なおも生じている。他の実施形態では、多特異性または多機能性分子、および第２の治療剤または手法は、連続的に投与される／行われる。例えば、一方の処置の送達は、他方の処置の送達が開始する前に停止する。
実施形態では、併用療法は、いずれかの薬剤単独による単独療法よりも、より効果的な処置をもたらすことができる。実施形態では、第１および第２の処置の併用は、第１または第２の処置単独よりも有効である（例えば、症状および／またはバイアスされたＴＣＲＢＶクローン型細胞に対応するＴＣＲＢＶ抗原を含むＴ細胞のより大きな減少をもたらす）。実施形態では、併用療法は、単独療法として投与された場合に類似の効果を達成するために通常必要とされる第１または第２の処置の用量と比較して、第１または第２の処置のより低い用量の使用を可能にする。実施形態では、併用療法は、部分的な相加効果、完全な相加効果、または相加効果より大きい効果を有する。
一実施形態では、多特異性または多機能性分子は、療法、例えば、当該技術分野において公知の自己免疫疾患療法と併用して投与される。多特異性または多機能性分子の投与および療法は、連続的（重複を伴うまたは伴わない）であるかまたは同時であり得る。多特異性または多機能性分子の投与は、療法の経過中、連続的または断続的であり得る。
免疫チェックポイント阻害剤
他の実施形態では、本明細書に記載される方法は、多特異性または多機能性分子と併用した免疫チェックポイント阻害剤の使用を含む。この方法は、ｉｎ ｖｉｖｏの治療プロトコールにおいて使用することができる。
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、チェックポイント分子を阻害する。例示的なチェックポイント分子には、限定されないが、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７－Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、ＨＶＥＭ（ＴＮＦＲＳＦ１４またはＣＤ２７０）、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＭＨＣクラスＩ、ＭＨＣクラスＩＩ、ＧＡＬ９、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、およびＡ２ａＲが含まれる。例えば、参照により本明細書に組み込まれるＰａｒｄｏｌｌ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ １２．４（２０１２年）：２５２～６４ページを参照されたい。
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＰＤ－１阻害剤、例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブまたはピジリズマブなどの抗ＰＤ－１抗体である。ニボルマブ（ＭＤＸ－１１０６、ＭＤＸ－１１０６－０４、ＯＮＯ－４５３８、またはＢＭＳ－９３６５５８とも呼ばれる）は、ＰＤ１を特異的に阻害する完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体である。例えば、米国特許第８，００８，４４９号および国際公開第２００６／１２１１６８号を参照されたい。ペンブロリズマブ（Ｌａｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ、ＭＫ－３４７５、ＭＫ０３４７５、ＳＣＨ－９００４７５、またはＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）とも呼ばれる；Ｍｅｒｃｋ）は、ＰＤ－１に結合するヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体である。例えば、Ｈａｍｉｄ，Ｏ．ら（２０１３年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３６９巻（２号）：１３４～４４ページ、米国特許第８，３５４，５０９号および国際公開第２００９／１１４３３５号を参照されたい。ピジリズマブ（ＣＴ－０１１またはＣｕｒｅ Ｔｅｃｈとも呼ばれる）は、ＰＤ１に結合するヒト化ＩｇＧ１ｋモノクローナル抗体である。例えば、国際公開第２００９／１０１６１１号を参照されたい。一実施形態では、ＰＤ－１の阻害剤は、実質的に同一または類似の配列、例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブまたはピジリズマブの配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％同一であるまたはそれを超える配列を有する抗体分子である。追加の抗ＰＤ１抗体、例えば、ＡＭＰ ５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）は、例えば、米国特許第８，６０９，０８９号、米国特許出願公開第２０１０／０２８３３０号、および／または米国特許出願公開第２０１２／０１１４６４９号に記載されている。
一部の実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、イムノアドヘシン、例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリンのＦｃ領域）に融合されたＰＤ－１リガンド（例えば、ＰＤ－Ｌ１またはＰＤ－Ｌ２）の細胞外／ＰＤ－１結合部分を含むイムノアドヘシンである。実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、Ｂ７－Ｈ１とＰＤ－１の間の相互作用を遮断するＰＤ－Ｌ２ Ｆｃ融合可溶性受容体であるＡＭＰ－２２４（Ｂ７－ＤＣＩｇ、例えば、国際公開第２０１１／０６６３４２号および国際公開第２０１０／０２７８２７号に記載される）である。
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、例えば、抗体分子である。一部の実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ－４７３６、ＭＳＢ－００１０７１８Ｃ、またはＭＤＸ－１１０５である。一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（Ａ０９－２４６－２とも呼ばれる；Ｍｅｒｃｋ Ｓｅｒｏｎｏ）であり、ＰＤ－Ｌ１に結合するモノクローナル抗体である。例示的なヒト化抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、例えば、国際公開第２０１３／０７９１７４号に記載されている。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、例えば、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０抗体は、例えば、国際公開第２０１０／０７７６３４号に記載されている。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＭＤＸ－１１０５（ＢＭＳ－９３６５５９とも呼ばれる）であり、例えば、国際公開第２００７／００５８７４号に記載されている。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＭＤＰＬ３２８０Ａ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）であり、ＰＤ－Ｌ１に対するヒトＦｃ最適化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である。例えば、米国特許第７，９４３，７４３号および米国特許出願公開第２０１２／００３９９０６号を参照されたい。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１の阻害剤は、実質的に同一または類似の配列、例えば、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ－４７３６、ＭＳＢ－００１０７１８Ｃ、またはＭＤＸ－１１０５の配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％同一であるまたはそれを超える配列を有する抗体分子である。
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＰＤ－Ｌ２阻害剤、例えば、ＡＭＰ－２２４（ＰＤ１とＢ７－Ｈ１の間の相互作用を遮断するＰＤ－Ｌ２ Ｆｃ融合可溶性受容体である）である。例えば、国際公開第２０１０／０２７８２７号および国際公開第２０１１／０６６３４２号を参照されたい。
一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＬＡＧ－３阻害剤、例えば、抗ＬＡＧ－３抗体分子である。実施形態では、抗ＬＡＧ－３抗体は、ＢＭＳ－９８６０１６（ＢＭＳ９８６０１６とも呼ばれる、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）である。ＢＭＳ－９８６０１６および他のヒト化抗ＬＡＧ－３抗体は、例えば、米国特許出願公開第２０１１／０１５０８９２号、国際公開第２０１０／０１９５７０号、および国際公開第２０１４／００８２１８号に記載されている。
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、例えば、米国特許第８，５５２，１５６号、国際公開第２０１１／１５５６０７号、欧州特許第２５８１１１３号および米国特許出願公開第２０１４／０４４７２８号に記載される、抗ＴＩＭ３抗体分子などのＴＩＭ－３阻害剤である。
実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ－４阻害剤、例えば、抗ＣＴＬＡ－４抗体分子である。例示的な抗ＣＴＬＡ４抗体には、トレメリムマブ（以前はチシリムマブ、ＣＰ－６７５，２０６として公知であるＰｆｉｚｅｒのＩｇＧ２モノクローナル抗体）、およびイピリムマブ（ＭＤＸ－０１０とも呼ばれる、ＣＡＳ Ｎｏ．４７７２０２－００－９）が含まれる。他の例示的な抗ＣＴＬＡ－４抗体は、例えば、米国特許第５，８１１，０９７号に記載されている。
参考文献による組み込み
本明細書に記載されるすべての刊行物および特許は、個々の刊行物または特許の各々が、参照により組み込まれるように具体的におよび個別に指示されているかのように、それらの全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれる。
実施例１：抗ＮＫｐ３０抗体を生成するためのアルメニアンハムスターの免疫化
簡潔に述べれば、完全フロイントアジュバント中のヒトＮＫｐ３０タンパク質の細胞外ドメインを用いてアルメニアンハムスターを免疫化し、不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）中のＮＫｐ３０を用いて１４日目および２８日目に２回ブーストした。５６日目にさらに１回のＩＦＡ中のブーストを与え、３日後に動物を回収した。脾臓を収集し、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３マウス骨髄腫細胞系と融合させた。１２５ｕｌ中の０．９×１０＾５細胞／ウェルを９６ウェルプレートに入れ、選択用のＨＡＴまたはＨＴ、ならびに必要に応じて７日目、１１日目およびその後のＨｙｂｒｉｄｏｍａ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｆａｃｔｏｒ（最終１％）の非存在または存在下で２０％のウシ胎仔血清、４ｍＭのＬ－グルタミン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、５０Ｕのペニシリン、５０μｇのストレプトマイシンおよび５０μＭの２－ＭＥを補足した１２５μｌのＩ－２０＋２ＭＥ＋ＨＡＴ（ＩＭＤＭ（４ｇ／Ｌグルコース）を与えた。融合の約２週後（細胞は約５０％コンフルエント）に上清を収集し、結合についてアッセイした。
実施例２：ＮＫｐ３０ ｍＡｂについてのハイブリドーマスクリーニング
Ｅｘｐｉ２９３細胞にＢＧ１６０（ｈＮＫｐ３０細胞抗原）をトランスフェクトし、１８時間後にスクリーニングを行った。スクリーニングの日に、トランスフェクトされた細胞を０．０５×１０＾６／ｍＬに希釈し、抗アルメニアンハムスターＦｃ Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８を０．４ｕｇ／ｍＬの最終濃度まで加えた。５０ｕＬ（２，５００細胞）のこの混合物を３８４ウェルプレートの各ウェルに加えた。二次（ｓｅｃｏｎｄａｒｙ）と共に同じ密度の非トランスフェクト２９３細胞を陰性対照として使用した。５ｕＬのハイブリドーマ上清を細胞混合物に加え、プレートを３７℃で１時間インキュベートした。プレートを次にＭｉｒｒｏｒｂａｌｌ上でイメージングした。陽性クローンを同定し、段階希釈によりサブクローニングしてクローン選択ハイブリドーマを得た。同じプロトコールを使用した再確認後にハイブリドーマ細胞を回収し、対応する重鎖および軽鎖配列を取得した。対応する抗体のその後の発現およびさらなる検証のためにＤＮＡをｐｃＤＮＡ３．４にサブクローニングした。
実施例３：ＮＫ９２細胞へのＮＫｐ３０抗体の結合
０．５％のＢＳＡおよび０．１％のアジ化ナトリウムを含有するＰＢＳ（染色緩衝液）を用いてＮＫ－９２細胞を洗浄し、２００，０００細胞／ウェルで９６ウェルＶ底プレートに加えた。ハムスターＮＫｐ３０抗体を２．０倍段階希釈で細胞に加え、室温で１時間インキュベートした。染色緩衝液を用いてプレートを２回洗浄した。ＡＦ６４７に共役したハムスターＦｃに対する二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ、１２７－６０５－１６０）を１：１００希釈（１．４ｍｇ／ｍｌストック）で加え、細胞と共に４℃で３０分間インキュベートし、続いて染色緩衝液を用いて洗浄した。細胞をその後に、４％のパラホルムアルデヒドを用いて室温で１０分間固定した。プレートをＣｙｔｏＦＬＥＸ ＬＳ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）上で読み取った。パーセント－ＡＦ７４７陽性集団としてデータを算出した（図４）。
実施例４：ＮＫ９２細胞系を使用するＮＫｐ３０抗体の活性を測定するためのバイオアッセイ
ＮＫｐ３０抗体をＰＢＳ中で３倍段階希釈し、平底９６ウェルプレート中２～８℃で終夜インキュベートした。プレートをＰＢＳ中で２回洗浄し、ＩＬ－２を含有する増殖培地に４０，０００個のＮＫ－９２細胞を加えた。３７℃、５％のＣＯ２の加湿されたインキュベーターでプレートを１６～２４時間インキュベートした後に上清を収集した。ＭＳＤアッセイの使用説明書にしたがって上清中のＩＦＮγレベルを測定した（図５）。ハムスターアイソタイプＩｇＧとインキュベートされた細胞から収集した上清を陰性対照として使用し、ＮＫｐ３０モノクローナル抗体（Ｒ＆Ｄ、クローン２１０８４７）とインキュベートされた細胞からの上清を陽性対照として利用した。ハムスター抗ＮＫｐ３０ ｍＡＢを使用してデータを生成した。
実施例５：ヒト化抗ＮＫｐ３０抗体の生成および特徴付け
一連のハムスター抗ＮＫｐ３０抗体を選択した。これらの抗体は、ヒトＮＫｐ３０およびカニクイザルＮＫｐ３０に結合し、ＮＫ－９０細胞からのＩＦＮγ産生を誘導することが示された（データ示さず）。例示的なハムスター抗ＮＫｐ３０抗体１５Ｅ１、９Ｇ１、１５Ｈ６、９Ｄ９、３Ａ１２、および１２Ｄ１０のＶＨおよびＶＬ配列を表９に開示する。１５Ｅ１、９Ｇ１、および１５Ｈ６に基づく例示的なヒト化抗ＮＫｐ３０抗体のＶＨおよびＶＬ配列も表９に開示する。これらの抗体のＫａｂａｔ ＣＤＲを表１８および表８に開示する。
１５Ｅ１に基づく２つのヒト化された構築物を選択した。第１の構築物ＢＪＭ０４０７は、配列番号７３０２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号７３０５のアミノ酸配列を含むラムダ軽鎖可変領域を含むＦａｂである。その対応するｓｃＦｖ構築物ＢＪＭ０８５９は配列番号７３１０のアミノ酸配列を含む。第２の構築物ＢＪＭ０４１１は、配列番号７３０２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号７３０９のアミノ酸配列を含むカッパ軽鎖可変領域を含むＦａｂである。その対応するｓｃＦｖ構築物ＢＪＭ０８６０は配列番号７３１１のアミノ酸配列を含む。ＢＪＭ０４０７およびＢＪＭ０４１１は、同等の生物物理学的特徴、例えば、ＮＫｐ３０に対する結合親和性および熱安定性を示した。ｓｃＦｖ構築物ＢＪＭ０８５９およびＢＪＭ０８６０もまた同等の生物物理学的特性を示した。
均等物
当業者は、本明細書に記載される本発明の具体的な実施形態に対する多くの均等物を、単に日常的な実験を用いて認識するか、または確認することができる。このような均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図される。本明細書は以下の発明の開示を包含する。
［項目１］（ｉ）Ｔ細胞受容体可変ベータ（ＴＣＲＢＶ）、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する、例えば、選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）（ａ）ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｔ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される免疫細胞エンゲージャー；
（ｂ）サイトカイン分子またはサイトカイン阻害剤分子；および
（ｃ）細胞死受容体シグナルエンゲージャー
のうちの１つ、２つ、またはすべてと
を含む、多機能性分子。
［項目２］（ｉ）Ｔ細胞受容体可変ベータ（ＴＣＲＢＶ）、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する、例えば、選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子と
を含む、多機能性分子。
［項目３］ＮＫ細胞エンゲージャーが抗ＮＫｐ３０抗体分子を含む、項目２に記載の多機能性分子。
［項目４］ＮＫ細胞エンゲージャーが抗ＮＫｐ４６抗体分子を含む、項目２に記載の多機能性分子。
［項目５］（ｉ）Ｔ細胞受容体可変ベータ（ＴＣＲＢＶ）、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する、例えば、選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）細胞死受容体シグナルエンゲージャーと
を含む、多機能性分子。
［項目６］（ｉ）Ｔ細胞受容体可変ベータ（ＴＣＲＢＶ）、例えば、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する、例えば、選択的に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）サイトカイン阻害剤分子と
を含む、多機能性分子。
［項目７］項目１から６のいずれか１項に記載の多機能性分子をコードする核酸分子。
［項目８］項目７に記載の核酸分子を含むベクター、例えば、発現ベクター。
［項目９］項目７に記載の核酸分子または項目８に記載のベクターを含む宿主細胞。
［項目１０］項目１から６のいずれか１項に記載の多機能性分子または抗体分子を作製する、例えば、産生する方法であって、適切な条件下、例えば、遺伝子発現および／またはホモもしくはヘテロ二量体化に適した条件下で、項目９に記載の宿主細胞を培養するステップを含む、方法。
［項目１１］項目１から６のいずれか１項に記載の多機能性分子と、薬学的に許容される担体、賦形剤または安定化剤とを含む医薬組成物。
［項目１２］ＴＣＲバイアスを処置する方法であって、それを必要とする対象に、項目１から６のいずれか１項に記載の多機能性分子を投与するステップを含み、多機能性分子がＴＣＲバ
イアスを処置するのに有効な量で投与される、方法。
［項目１３］自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を処置する方法であって、それを必要とする対象に、項目１から６のいずれか１項に記載の多機能性分子を投与するステップを含み、多機能性分子が自己免疫疾患を処置するのに有効な量で投与される、方法。
［項目１４］ＴＣＲバイアスを処置する方法であって、
対象がＴＣＲバイアスを有すると決定したことに応答して、それを必要とする対象に、項目１から６のいずれか１項に記載の多機能性分子を投与するステップ
を含み、多機能性分子がＴＣＲバイアスを処置するのに有効な量で投与される、方法。
［項目１５］自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を処置する方法であって、
対象が自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を有すると決定したことに応答して、それを必要とする対象に、項目１から６のいずれか１項に記載の多機能性分子を投与するステップ
を含み、多機能性分子が自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を処置するのに有効な量で投与される、方法。
［項目１６］項目１から６のいずれかに記載の多機能性分子を使用して、癌の処置を必要とする対象を特定する方法であって、対象がＴＣＲバイアス（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型）および／または前記バイアスに関連する自己免疫疾患を有するかどうかを決定するステップ（例えば、それを直接的にまたは間接的に決定するステップ、例えば、それに関する情報を得るステップ）を含み、
対象がＴＣＲバイアス（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型）および／または前記バイアスに関連する自己免疫疾患を有すると決定したことに応答して、ＴＣＲＢＶ抗原に結合する抗原結合性ドメインを含む多機能性分子を使用する処置の候補として対象を特定し、必要に応じてＴＣＲＢＶ抗原に結合しない（例えば、異なるＴＣＲＢＶ抗原に結合する）抗原結合性ドメインを含む多機能性分子を使用する処置の候補として対象を特定しない、方法。
［項目１７］ＴＣＲバイアス（例えば、バイアスされたＴＣＲＢＶクローン型）および／または前記バイアスに関連する自己免疫疾患の処置を必要とする対象を評価する方法であって、対象がＴＣＲバイアスを有するかどうかを決定するステップ（例えば、それを直接的に決定するかまたは間接的に決定するステップ、例えば、それに関する情報を得るステップ）を含む、方法。
［項目１８］自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）の処置を必要とする対象における自己免疫疾患を処置する方法であって、前記対象に、有効量の、例えば、治療有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）を投与するステップを含み、それによって障害を処置する、方法。
［項目１９］自己免疫疾患（例えば、ＴＣＲバイアスに関連する自己免疫疾患）を有する対象におけるＴ細胞集団を枯渇させる方法であって、Ｔ細胞集団を、有効量の、Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する（例えば、特異的に結合する）抗体分子（「抗ＴＣＲβＶ抗体分子」）と接触させるステップを含む、方法。
［項目２０］接触させるステップがｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏで生じる、項目１９に記載の方法。
［項目２１］抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、
（ｉ）米国特許第５，８６１，１５５号に開示されている抗体分子ではなく；
（ｉｉ）米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、１６Ｇ８マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より小さい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０分の１未満の）親和性および／もしくは結合特異性でＴＣＲβＶ１２に結合するか；
（ｉｉｉ）米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、１６Ｇ８マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、１０倍を超える）親和性および／もしくは結合特異性でＴＣＲβＶ１２に結合するか；
（ｉｉｉ）米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、ＴＭ２３マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、１０倍を超える）親和性および／もしくは結合特異性で、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１に結合するか；または
（ｉｖ）米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるように、ＴＭ２３マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より大きい（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、１０倍を超える）親和性および／もしくは結合特異性で、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１に結合する、項目１８から２０のいずれか１項に記載の方法。
［項目２２］抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、Ｆｃ領域、例えば、エフェクター機能を有するＦｃ領域、例えば、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）および／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を有するＦｃ領域を含む、項目１８から２１のいずれか１項に記載の方法。
［項目２３］抗ＴＣＲβＶ抗体分子が、例えば、野生型Ｆｃ領域と比較して、エフェクター機能が増強されたＦｃ領域を含む、項目２２に記載の方法。
［項目２４］抗ＴＣＲβＶ抗体分子がヒトＩｇＧ１領域またはヒトＩｇＧ４領域を含む、項目１８から２３のいずれか１項に記載の方法。

Claims (22)

  1. （ｉ）Ｔ細胞受容体ベータ可変領域（ＴＣＲβＶ）に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
    （ｉｉ）ＮＫｐ３０に結合する第２の抗原結合性ドメインと
    を含み、第１の抗原結合性ドメインが、単一ドメイン抗体、ラクダ抗体、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、またはＦａｂを含み、第２の抗原結合性ドメインが、ＮＫｐ３０を発現するＮＫ細胞を活性化し、第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）各々、配列番号：６０００，配列番号：６００１，および配列番号：６００２の配列を含む、重鎖相補性決定領域１（ＨＣＣＤＲ１）配列、重鎖相補性決定領域２（ＨＣＤＲ２）配列、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣＣＤＲ３）配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；および各々、配列番号：６０６３，配列番号：６０６４，および配列番号：７２９３の配列を含む、軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＣＤＲ１）配列、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣＣＤＲ２）配列、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣＣＤＲ３）配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
    （ｉｉ）各々、配列番号：７３１３，配列番号：６００１，および配列番号：６００２の配列を含む、ＨＣＣＤＲ１配列、ＨＣＣＤＲ２配列、およびＨＣＣＤＲ３配列を含むＶＨ；および各々、配列番号：６０６３，配列番号：６０６４，および配列番号：７２９３の配列を含む、ＬＣＣＤＲ１配列、ＬＣＣＤＲ２配列、およびＬＣＣＤＲ３配列を含むＶＬ；
    （ｉｉｉ）各々、配列番号：６００７，配列番号：６００８，および配列番号：６００９の配列を含む、ＨＣＣＤＲ１配列、ＨＣＣＤＲ２配列、およびＨＣＣＤＲ３配列を含むＶＨ；および各々、配列番号：６０７０，配列番号：６０７１，および配列番号：６０７２の配列を含む、ＬＣＣＤＲ１配列、ＬＣＣＤＲ２配列、およびＬＣＣＤＲ３配列を含むＶＬ；
    （ｉｖ）各々、配列番号：７３１３，配列番号：６００８，および配列番号：６００９の配列を含む、ＨＣＣＤＲ１配列、ＨＣＣＤＲ２配列、およびＨＣＣＤＲ３配列を含むＶＨ；および各々、配列番号：６０７０，配列番号：６０７１，および配列番号：６０７２の配列を含む、ＬＣＣＤＲ１配列、ＬＣＣＤＲ２配列、およびＬＣＣＤＲ３配列を含むＶＬ；
    （ｖ）各々、配列番号：７３１３，配列番号：７３８５，および配列番号：７３１５の配列を含む、ＨＣＣＤＲ１配列、ＨＣＣＤＲ２配列、およびＨＣＣＤＲ３配列を含むＶＨ；および各々、配列番号：６０７０，配列番号：６０６４，および配列番号：７３２１の配列を含む、ＬＣＣＤＲ１配列、ＬＣＣＤＲ２配列、およびＬＣＣＤＲ３配列を含むＶＬ；
    （ｖｉ）各々、配列番号：７３１３，配列番号：７３１８，および配列番号：６００９の配列を含む、ＨＣＣＤＲ１配列、ＨＣＣＤＲ２配列、およびＨＣＣＤＲ３配列を含むＶＨ；および各々、配列番号：６０７０，配列番号：６０６４，および配列番号：７３２１の配列を含む、ＬＣＣＤＲ１配列、ＬＣＣＤＲ２配列、およびＬＣＣＤＲ３配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉ）各々、配列番号：７３１３，配列番号：６００８，および配列番号：６００９の配列を含む、ＨＣＣＤＲ１配列、ＨＣＣＤＲ２配列、およびＨＣＣＤＲ３配列を含むＶＨ；および各々、配列番号：６０７０，配列番号：６０７１，および配列番号：６０７２の配列を含む、ＬＣＣＤＲ１配列、ＬＣＣＤＲ２配列、およびＬＣＣＤＲ３配列を含むＶＬ；または
    （ｖｉｉｉ）各々、配列番号：７３１３，配列番号：６００１，および配列番号：７３１５の配列を含む、ＨＣＣＤＲ１配列、ＨＣＣＤＲ２配列、およびＨＣＣＤＲ３配列を含むＶＨ；および各々、配列番号：７３２６，配列番号：７３２７，および配列番号：７３２９の配列を含む、ＬＣＣＤＲ１配列、ＬＣＣＤＲ２配列、およびＬＣＣＤＲ３配列を含むＶＬ；
    を含む、多特異性分子。
  2. 多特異性分子が、以下の構成：
    Ａ，Ｂ－［二量体化モジュール］－Ｃ，－Ｄ
    を含み、ここで、
    （ａ）二量体化モジュールは、免疫グロブリン定常ドメインを含み；
    （ｂ）Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤのうちの少なくとも１つは、ＴＣＲβＶ抗原に結合する第１の抗原結合性ドメインを含み、残りのＡ、Ｂ、Ｃ、およびＤのいずれかは、ＮＫｐ３０に結合する第２の抗原結合性ドメインを含む、請求項１に記載の多特異性分子。
  3. 第２の抗原結合性ドメインが
    （ｉ）配列番号：６１２１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７２９４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉ）配列番号：６１２３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１３７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉｉ）配列番号：６１２４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１３８に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｖ）配列番号：６１２５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１３９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖ）配列番号：６１２６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４０に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉ）配列番号：６１２７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉ）配列番号：６１２２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１３６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉｉ）配列番号：６１２９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｘ）配列番号：６１３０に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘ）配列番号：６１３１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉ）配列番号：６１３２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉ）配列番号：６１３３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉｉ）配列番号：６１３４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｖ）配列番号：７２９５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７２９６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｖ）配列番号：７２９７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７２９８に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｖｉ）配列番号：６１２２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１３６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｖｉｉ）配列番号：７２９８に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７２９９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｖｉｉｉ）配列番号：７３００に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７３０５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｘ）配列番号：７３０１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７３０６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｘ）配列番号：７３０２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７３０７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｘｉ）配列番号：７３０３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７３０８に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；または
    （ｘｘｉｉ）配列番号：７３０４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７３０９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    を含む、請求項１または２に記載の多特異性分子。
  4. 第２の抗原結合性ドメインが
    （ｉ）配列番号：６１２１に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７２９４に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉ）配列番号：６１２３に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１３７に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉｉ）配列番号：６１２４に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１３８に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｖ）配列番号：６１２５に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１３９に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖ）配列番号：６１２６に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４０に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉ）配列番号：６１２７に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４１に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉ）配列番号：６１２２に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１３６に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉｉ）配列番号：６１２９に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４２に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｘ）配列番号：６１３０に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４３に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘ）配列番号：６１３１に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４４に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉ）配列番号：６１３２に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４５に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉ）配列番号：６１３３に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４６に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉｉ）配列番号：６１３４に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１４７に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｖ）配列番号：７２９５に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７２９６に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｖ）配列番号：７２９７に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７２９８に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｖｉ）配列番号：６１２２に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：６１３６に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｖｉｉ）配列番号：７２９８に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７２９９に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｖｉｉｉ）配列番号：７３００に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７３０５に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｘ）配列番号：７３０１に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７３０６に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｘ）配列番号：７３０２に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７３０７に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｘｉ）配列番号：７３０３に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７３０８に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
    （ｘｘｉｉ）配列番号：７３０４に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：７３０９に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    を含む、請求項１～３のいずれか１項に記載の多特異性分子。
  5. 第２の抗原結合性ドメインの結合により活性化したＮＫ細胞が、第２の抗原結合性ドメインを含まないＩｇＧ抗体の結合後に発現するインターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）のレベルと比較して、ＩＦＮγを増加したレベルで発現する、請求項１～４のいずれか１項に記載の多特異性分子。
  6. ＴＣＲβＶに結合する第１の抗原結合性ドメインが、ＴＣＲβＶ６サブファミリー、ＴＣＲβＶ１０サブファミリー、ＴＣＲβＶ１２サブファミリー、ＴＣＲβＶ５サブファミリー、ＴＣＲβＶ７サブファミリー、ＴＣＲβＶ１１サブファミリー、ＴＣＲβＶ１４サブファミリー、ＴＣＲβＶ１６サブファミリー、ＴＣＲβＶ１８サブファミリー、ＴＣＲβＶ９サブファミリー、ＴＣＲβＶ１３サブファミリー、ＴＣＲβＶ４サブファミリー、ＴＣＲβＶ３サブファミリー、ＴＣＲβＶ２サブファミリー、ＴＣＲβＶ１５サブファミリー、ＴＣＲβＶ３０サブファミリー、ＴＣＲβＶ１９サブファミリー、ＴＣＲβＶ２７サブファミリー、ＴＣＲβＶ２８サブファミリー、ＴＣＲβＶ２４サブファミリー、ＴＣＲβＶ２０サブファミリー、ＴＣＲβＶ２５サブファミリー、ＴＣＲβＶ２９サブファミリー、ＴＣＲβＶ１サブファミリー、ＴＣＲβＶ１７サブファミリー、ＴＣＲβＶ２１サブファミリー、ＴＣＲβＶ２３サブファミリー、またはＴＣＲβＶ２６サブファミリーを含むＴＣＲβＶサブファミリーに結合する、請求項１～５のいずれか１項に記載の多特異性分子。
  7. ＴＣＲβＶに結合する第１の抗原結合性ドメインが、ＴＣＲβＶ６－４＊０１、ＴＣＲβＶ６－４＊０２、ＴＣＲβＶ６－９＊０１、ＴＣＲβＶ６－８＊０１、ＴＣＲβＶ６－５＊０１、ＴＣＲβＶ６－６＊０２、ＴＣＲβＶ６－６＊０１、ＴＣＲβＶ６－２＊０１、ＴＣＲβＶ６－３＊０１、ＴＣＲβＶ６－１＊０１、ＴＣＲβＶ１２－４＊０１、ＴＣＲβＶ１２－３＊０１、ＴＣＲβＶ１２－５＊０１、ＴＣＲβＶ５－５＊０１、ＴＣＲβＶ５－６＊０１、ＴＣＲβＶ５－４＊０１、ＴＣＲβＶ５－８＊０１、ＴＣＲβＶ５－１＊０１、ＴＣＲβＶ１０－１＊０１、ＴＣＲβＶ１０－１＊０２、ＴＣＲβＶ１０－３＊０１、またはＴＣＲβＶ１０－２＊０１に結合する、請求項１～６のいずれか１項に記載の多特異性分子。
  8. ＴＣＲβＶに結合する第１の抗原結合性ドメインが
    （ｉ）配列番号：１１３１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１３６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉ）配列番号：１１３２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１３７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉｉ）配列番号：１１３３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１３８に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｖ）配列番号：１１３４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１３９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖ）配列番号：１１３５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１４０に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉ）配列番号：１１５３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１５８に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉ）配列番号：１１５４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１５９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉｉ）配列番号：１１５５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１６０に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｘ）配列番号：１１５６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１６１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘ）配列番号：１１５７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１６２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉ）配列番号：１１９７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２０３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉ）配列番号：１１９８に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２０４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉｉ）配列番号：１１９９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２０５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｖ）配列番号：１２００に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２０６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；または
    （ｘｖ）配列番号：１２０１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２０７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    を含む、請求項１～７のいずれか１項に記載の多特異性分子。
  9. ＴＣＲβＶに結合する第１の抗原結合性ドメインが
    （ｉ）配列番号：１２２０に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２２４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉ）配列番号：１２２１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２２５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉｉ）配列番号：１２２２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２２６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｖ）配列番号：１２２３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２２７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖ）配列番号：１２４１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２４４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉ）配列番号：１２４２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２４５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉ）配列番号：１２４３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２４６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉｉ）配列番号：１２６０に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２６４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｘ）配列番号：１２６１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２６５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘ）配列番号：１２６２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２６６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉ）配列番号：１２６３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２６７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉ）配列番号：１２８３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２７９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉｉ）配列番号：１２８４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２８０に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｖ）配列番号：１２８５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２８１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；または
    （ｘｖ）配列番号：１２８６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２８２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    を含む、請求項１～７のいずれか１項に記載の多特異性分子。
  10. ＴＣＲβＶに結合する第１の抗原結合性ドメインが
    （ｉ）配列番号：１１３１に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１３６に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉ）配列番号：１１３２に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１３７に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉｉ）配列番号：１１３３に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１３８に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｖ）配列番号：１１３４に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１３９に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖ）配列番号：１１３５に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１４０に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉ）配列番号：１１５３に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１５８に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉ）配列番号：１１５４に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１５９に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉｉ）配列番号：１１５５に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１６０に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｘ）配列番号：１１５６に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１６１に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘ）配列番号：１１５７に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１１６２に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉ）配列番号：１１９７に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２０３に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉ）配列番号：１１９８に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２０４に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉｉ）配列番号：１１９９に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２０５に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｖ）配列番号：１２００に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２０６に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
    （ｘｖ）配列番号：１２０１に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２０７に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ
    を含む、請求項１～８のいずれか１項に記載の多特異性分子。
  11. ＴＣＲβＶに結合する第１の抗原結合性ドメインが
    （ｉ）配列番号：１２２０に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２２４に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉ）配列番号：１２２１に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２２５に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｉｉ）配列番号：１２２２に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２２６に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｖ）配列番号：１２２３に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２２７に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖ）配列番号：１２４１に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２４４に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉ）配列番号：１２４２に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２４５に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉ）配列番号：１２４３に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２４６に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｖｉｉｉ）配列番号：１２６０に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２６４に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｉｘ）配列番号：１２６１に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２６５に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘ）配列番号：１２６２に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２６６に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉ）配列番号：１２６３に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２６７に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉ）配列番号：１２８３に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２７９に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｉｉ）配列番号：１２８４に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２８０に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    （ｘｉｖ）配列番号：１２８５に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２８１に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
    （ｘｖ）配列番号：１２８６に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ，および配列番号：１２８２に記載のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    を含む、請求項１０に記載の多特異性分子。
  12. 多特異性分子が
    （ｉ）ＴＣＲβＶに結合する第１の重鎖ポリペプチド；
    （ｉｉ）ＮＫｐ３０に結合する第２の重鎖ポリペプチド；
    （ｉｉｉ）ＴＣＲβＶに結合する第１の軽鎖ポリペプチド；および
    （ｉｖ）ＮＫｐ３０に結合する第２の軽鎖ポリペプチド
    をさらに含み、第１の重鎖ポリペプチドおよび第２の重鎖ポリペプチドはヘテロ二量体化を増強するＦｃ境界部を形成する、請求項１～１１のいずれか１項に記載の多特異性分子。
  13. 第１の軽鎖ポリペプチドがラムダ軽鎖ポリペプチドであり、第２の軽鎖ポリペプチドがカッパ軽鎖ポリペプチドである、請求項１２に記載の多特異性分子。
  14. １以上のサイトカイン分子をさらに含む、請求項１～１３のいずれか１項に記載の多特異性分子。
  15. サイトカイン分子が、インターロイキン－２（ＩＬ－２）またはその機能的断片またはバリアント、インターロイキン－７（ＩＬ－７）またはその機能的断片またはバリアント、インターロイキン－１２（ＩＬ－１２）またはその機能的断片またはバリアント、インターロイキン－１５（ＩＬ－１５）またはその機能的断片またはバリアント、インターロイキン－１８（ＩＬ－１８）またはその機能的断片またはバリアント、インターロイキン－２１（ＩＬ－２１）またはその機能的断片またはバリアント、およびインターフェロンガンマまたはその機能的断片またはバリアント、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１４に記載の多特異性分子。
  16. 多特異性分子が、第１の免疫グロブリン可変領域配列および第２の免疫グロブリン可変領域配列をさらに含み、第１の免疫グロブリン可変領域配列がＴＣＲβＶに対して結合特異性を有し、第２の免疫グロブリン可変領域配列がＮＫｐ３０に対して結合特異性を有する、請求項１～１５のいずれか１項に記載の多特異性分子。
  17. ＴＣＲβＶに結合する第１の抗原結合性ドメインおよびＮＫｐ３０に結合する第２の抗原結合性ドメインリンカーをさらに含む、請求項１～１６のいずれか１項に記載の多特異性分子。
  18. リンカーが、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、および非ヘリックスリンカーからなる群から選択される、請求項１７に記載の多特異性分子。
  19. バイアスされたＴＣＲβＶクローン型を含むＴ細胞集団を枯渇させることにおいて使用するための、請求項１～１８のいずれか１項に記載の多特異性分子を含む医薬組成物。
  20. ｉｎ ｖｉｖｏで使用するための、請求項１９に記載の医薬組成物。
  21. 請求項１～１８のいずれか１項に記載の多機能性分子をコードする配列を含む、組換えポリヌクレオチド。
  22. 請求項１～１８のいずれか１項に記載の多機能性分子の作製方法であって、遺伝子発現、および／またはホモもしくはヘテロ二量体化のために適した条件下で、請求項２１に記載の組換えポリヌクレオチドを含む宿主細胞を培養することを含む、方法。
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