JP7739262B2 - 埋込型カプセル - Google Patents

Description

本発明は、治療用タンパク質又はアジュバントを放出させるための細胞カプセル化用の埋込型カプセルに関する。本発明は、特に、治療用タンパク質又はアジュバントを放出させるための、不死化細胞株のカプセル化の分野において使用することができる。

細胞カプセル化技術は、多様な領域において、高分子の長期及び／又は局所投与を可能にする。この技術は、目的の治療用タンパク質を産生させるための遺伝子改変細胞を収容する１以上の生体適合性カプセルを対象に埋め込むことに基礎をおく。このタイプのカプセルは、一般に、改変細胞の機械的保護を実現する半透膜で構成され、したがって、前記細胞と宿主の免疫細胞の接触が回避される結果、カプセル化された細胞の生存が長引く。加えて、半透膜は、移植された細胞に向けた栄養素及び酸素の流入、並びに宿主に向けた目的のタンパク質の流出を可能にし、したがって、持続的な産生が可能になる。

撤収可能なカプセル化細胞性埋込物を使用するex vivo遺伝子治療が、治療用タンパク質の局所及び／又は長期送達のための有効な戦略として開発されている。特に、患者の免疫系の活動を変調することは、種々の障害を処置する革新的な手法であると考えられており、詳細には、神経変性疾患に対する受動免疫化のためのモノクローナル抗体の長期投与や、抗がんワクチン用のアジュバントとしてのサイトカインの局所送達等、遺伝子操作されたカプセル化細胞を使用する治療スキームが開発されている（非特許文献１及び非特許文献２）。

最近では、遺伝子改変同種異系細胞（ＭＶＸ－１細胞）によって、腫瘍退縮のために有用な免疫保護及び増強活性を有する顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)の標準化された放出を可能にする、ＧＭ－ＣＳＦを分泌するカプセル化細胞を使用した、抗がん活性のある免疫化の技術が開発されている。患者免疫化は、照射を受けた自己由来腫瘍細胞と、２０ｎｇ／２４時間を超えるｈｕＧＭ－ＣＳＦを産生するＭＶＸ－１細胞を収容する２つのカプセルを合わせることにより、腫瘍沈着物から遠い健康な皮膚において行われる。これにより、注射部位において、ＧＭ－ＣＳＦの産生が可能になり、免疫系が、自己由来腫瘍細胞によって発現された腫瘍関連抗原(TAA)に曝される。ＧＭ－ＣＳＦの局所的な発現によって、抗原提示細胞(APC)が動員及び活性化され、これによって、注射部位及び全身で、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害(ADCC)及び細胞傷害性Ｔリンパ球応答の両方が誘導される（特許文献１）。こうしたカプセルを使用した臨床試験の結果は、非特許文献３において報告されている。

カプセル化技術のヒトへの適用を最適化するためには、目的の組換えタンパク質のｉｎ ｖｉｖｏ分泌の構築基盤として、安全かつ有効で埋込可能なヒト細胞株を生成することが絶対的重要事項となる。したがって、安全性及び持ちのよい効果という点でカプセル化技術に特に適する、有能な細胞株を開発することが求められている。更に、いくつかの適用例については、細胞を保存及び輸送のために冷凍する必要があり、カプセル化細胞を用いた治療戦略を推進するために、貯蔵及び輸送の間、特に、凍結した細胞を解凍した後、細胞の高い生存レベルが確保されるカプセルを開発することに、高い関心が寄せられている。

埋め込まれたカプセルは、適用及び処置レジメンに応じて、患者の身体の中に、数日から数か月にかけての長い期間を経ても残される場合がある。患者を快適にするために、詳細には、不快を最小限に抑えながら、カプセルの埋め込み及び取り出しを円滑にするために、特にコンパクトで直径の小さい埋込物にすることが望ましい。しかし、カプセルの内部体積及び周囲組織と接触する膜の表面積は、細胞生存、したがって、カプセルから放出される治療用タンパク質又はアジュバントの量に影響する。

したがって、特にコンパクトな埋込型カプセルにするために、所望の治療薬の収量及び放出速度が高い、効率的な細胞カプセル化を可能にする仕組みにすることが望ましい。

国際公開第２０１７／０６４５７１号

Lathuiliereら、２０１５、Int.J.Mol.Sci.、１６、１０５７８～１０６００ Schwenterら、２０１１、Cancer Gene Therapy.、１８、５５３～５６２ Annals of Oncology、２０１５、２６ （増刊８）： １～４． １０．１０９３／ａｎｎｏｎｃ／ｍｄｖ５１３

前述の事項を踏まえて、本発明の目的は、コンパクトで、容易に埋め込み及び取り出し可能であり、更に、目的の治療薬の高い収量及び放出速度を可能にする、治療薬を放出させるための細胞カプセル化用の埋込型カプセルを提供することである。

付着細胞及び非付着細胞両方のカプセル化に申し分なく適合している埋込型カプセルを提供することが有利である。

長い期間を経ても細胞の活性を保全する、細胞カプセル化用の埋込型カプセルを提供することも有利である。

異なるタイプの細胞を用いた異なる処置において使用することのできる、細胞カプセル化用の埋込型カプセルを提供することも有利である。

患者の不快が最小限に抑えられて挿入及び摘出が容易である埋込型カプセルを提供することも有利である。

高レベルの目的タンパク質を分泌しうる細胞の能力が解凍後も保持される良好な生存条件下でカプセル化細胞を維持しながら、冷凍及び解凍することができる、埋込型カプセルを提供することも有益である。

本発明の目的は、請求項１による仕組みを設けることにより実現された。

本明細書では、治療薬を分泌させるための液体培地中の不死化細胞を中に収納するための細胞収納室を取り囲む多孔質膜を含む細胞収納部分を含む埋込型カプセルであって、細胞収納室内で不死化細胞を整列させるように構成された、細胞収納室内に挿入された細胞支持体マトリックスを更に含む埋込型カプセルが開示される。細胞支持体マトリックスは、少なくとも１本のヤーンを含む。

「ヤーン」とは、それ自体が一般に理解されているように、編み又は紡ぎ合わされて１本になっている複数の繊維鎖を意味する。

有利な一実施形態では、前記の少なくとも１本のヤーンは、ポリエステル材料からなる、又はそれを含む。

有利な一実施形態では、細胞支持体マトリックスは、複数の前記ヤーンを含む。

有利な一実施形態では、複数のヤーンは、５本～２０本のヤーンの範囲、好ましくは、５本～１５本のヤーンの範囲内であり、たとえば、１０本前後のヤーンである。

有利な一実施形態では、ヤーンは、細胞収納室内で、室の実質上全長又は細胞収納室の少なくとも８０パーセントの長さに及ぶ。

有利な一実施形態では、細胞収納室は、ポリエステルヤーンを含む。

有利な一実施形態では、細胞収納部分は、多孔質膜の構造支持体となるように構成された、細胞収納室の中に取り付けられた膜支持体を更に含み、膜支持体は、生体適合性材料製のコイル、たとえば、ステンレス鋼コイルからなる、又はそれを含む。

有利な一実施形態では、カプセルは、外科道具によって埋込部位から埋込型カプセルを引き抜くのを可能にするように構成された、細胞収納部分の摘出器末端に連結された摘出器部分を更に含み、摘出器部分は、撤収用糸を含む。

有利な一実施形態では、撤収用糸は、ポリプロピレン糸製である。

有利な一実施形態では、摘出器部分は、撤収用糸（９）のアンカー部分（１５）が内部に挿入及び接着されているキャビティを有するアンカーチューブ（８）を含む。

有利な一実施形態では、アンカーチューブは、ポリウレタン材料からなる、又はそれを含む。

有利な一実施形態では、摘出器部分は、コネクタを含む連結部によって細胞収納部分に連結されており、コネクタは、多孔質膜の摘出器末端に挿入された部分と、アンカーチューブの連結部末端に挿入された第２の部分と、を含む。

有利な一実施形態では、コネクタは、接着剤、詳細には、たとえば光硬化性ウレタンメタクリレートタイプの光硬化性接着剤によって、アンカーチューブ及び細胞収納部分に接着されている。

有利な一実施形態では、カプセルの外径は、０．５ミリメートル～３ミリメートルの範囲、好ましくは、０．８ミリメートル～１．５ミリメートルの範囲内であり、長さが、５ミリメートル～２５ミリメートルの範囲、好ましくは、８ミリメートル～２０ミリメートルの範囲内である。

有利な一実施形態では、カプセルの長さの直径に対する比は、５～２０の範囲内である。

本発明のさらなる趣旨及び有利な態様は、請求項、並びに以下の詳細な説明及び添付の図面から明らかとなる。

ここで、本発明について、本発明の実施形態を例として図示するものであり、次のとおりである、添付の図面に関連して説明する。

本発明の一実施形態による埋込型カプセルの概略図である。 図１の線ＩＩからＩＩまでの断面図である。 カプセルの内部マトリックスを取り除いた、図２と同様の断面図である。 図３の円ＩＶの詳細図である。 図２の円Ｖの詳細図である。 従来型カプセル及び本発明の一実施形態によるカプセルを用いた試験の結果を示すグラフである。

図面に関連して、発明の一実施形態による埋込型カプセル１は、連結部４によって互いが連結された細胞収納部分２と摘出器部分３とを含む。細胞収納部分２は、通常は０．５ミリメートル～３ミリメートルの範囲となりうる直径、及び通常は５ミリメートル～２０ミリメートルの範囲、たとえば１０ミリメートル前後となりうる長さを有する、実質的に円筒形の外形を備える。長さＬの直径Ｄに対する比Ｌ／Ｄは、５～２０の範囲、好ましくは、５～１５の範囲内であることが好ましい。カプセルは、患者の組織に、埋込物の分野でそれ自体が周知であり、本明細書でこれ以上記載する必要のない、埋込用具によって埋め込むことができる。

細胞収納部分２は、カプセルに収容された細胞２４によって産生された治療薬が膜を通過して周囲組織に移るのを可能にし、また体液並びに細胞２４のための電解質及び栄養素が周囲組織から膜を介してカプセルに入るのを可能にするように構成されている多孔質膜５を含む。したがって、膜の多孔度及び種類は、特定の用途及びカプセル内に収容される細胞の種類次第となりうる。一例では、膜は、たとえば、膜を介したターゲット分子の通過を可能にするように構成された、０．６５μｍ前後の多孔度を有するポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）膜の形態になる。本発明において使用することのできる膜の一例を以下に詳述する。

膜の例示的な一実施形態は、その生体適合性のある化学組成、構造特性、並びに優れた流量、下流清浄度、低いタンパク質結合親和性等の固有の膜性能を根拠として、ポリエーテルスルホンを含む。この材料は、種々の形状及び直径の小さい管材料として押し出すことができる。

細胞収納部分２は、分泌されるタンパク質及びデバイスの埋込部位に応じて、Lathuillereら、２０１４、Biomaterials ３５ ７８０～７９０、若しくは国際公開第２０１４／１７３４４１号に記載されているような平板、又はLathuillereら、２０１５、前掲に記載のもの等の中空繊維の形態をとる場合がある。

細胞収納部分２は、たとえば、目的により細胞約１．０×１０^４個～細胞８×ｌ０^５個の間（たとえば、細胞１．０×１０^４個、５．０×１０^４個、１．０×１０^５個、３．０×１０^５個、５．０×１０^５個、８×１０^５個、又は１０^６個）等の有効量の細胞を、用途及び分泌されるタンパク質に応じて収容しうる。細胞収納部分中の正確な細胞数が、カプセル化された細胞／細胞株の増殖速度及び／又は細胞収納部分の体積に応じて変わりうることは、当業者の認めるところとなる。

多孔質膜５は、細胞収納室１３、及び細胞収納室１３内の膜支持体６を取り囲む。膜支持体は、多孔質膜を機械的に支持して、細胞収納室１３の体積の安定性を維持し、膜の破裂を防ぐ働きをする。図示した実施形態において、膜支持体は、コイル、詳細には、たとえば国際公開第２０１７／０６４５７０１号に記載されているとおり、それ自体が公知のステンレス鋼コイルの形態である。膜支持体６は、連結部４による摘出器部分３の固定にも役立つ。

図示した実施形態において、連結部４は、膜支持体６に、詳細には、本例ではステンレス鋼コイルに取り囲まれた円筒内に挿入されている、部分１０ａを有するコネクタ１０を含む。コネクタ挿入部分１０ａの直径は、コイルの摘出器末端に、互いが堅固に接続されるよう、嵌合するように設定することができる。連結部４は、摘出器部分３のアンカー８を引っかからせる固定部分１０ｂを更に含み、それによって、ここで図示する実施形態において、アンカー８は、コネクタ１０の第２の末端１０ｂに外嵌された管、好ましくは、ポリウレタン(PU)チューブの形態になる。接着剤１８ａは、細胞収納部分の摘出器末端１２ｂ、コネクタ１０上のアンカー８の連結部末端８ａそれぞれの挿入前に、コネクタに付けることができる。接着剤は、有利な例として、たとえば光硬化性ウレタンメタクリレートタイプの光硬化性接着剤（dymax 1187 M SV等）の形態にすることができる。

摘出器部分３は、埋込物を、その使用終了時に患者の組織から引き抜くための手段を設ける働きをする。図示した実施形態において、摘出器部分は、アンカーチューブ８に固定されたアンカー部分１５と、外科用具によって糸を捕らえて埋込型カプセルを引き抜くのを可能にするように構成された、アンカーチューブを超えて伸びる糸部分１６とを含む撤収用糸９を更に含む。図示した実施形態において、撤収用糸９は、たとえばポリプロピレンタイプの生体適合性ヤーン又は糸（Prolene（商標）縫合糸等）製である。

一実施形態では、１本の糸が、中空アンカーチューブ８内に伸び、ノト１５ａを含み、アンカー部分１５は、接着剤、たとえば、上述のような光硬化性接着剤によって管内に保持されており、ノットによって、撤収用糸のアンカーチューブへの接着強度が増している。したがって、撤収用糸は、患者の不快を軽減し、埋込物の容易な除去を可能にするために、しなやかであり、非常に細い。

摘出器部分３は、外科用具によって埋込物を掴んで、患者の組織からそれを引き抜くのを可能にすることを目的として、異なる形状及び構成を備えていてもよいと述べて差し支えない。

一変形形態では、撤収用糸は、アンカーチューブの存在なしに、コネクタ１０に直接固定されている、又はコネクタ１０と一体をなしていてもよい。このような一変形形態では、コネクタは、たとえば、糸が通るのを可能にする開口部を含み、埋め込まれたカプセルの患者の組織からの引き抜きを可能にすることができる。ポリウレタンチューブ、又は妥当な機械的及び生物学的性質を有する他のいずれかの材料によって、撤収用糸の連結を支える構造が設けられることが有利である。これは、組み立ての際であろうと埋め込みの際であろうと、取り扱う際に、ピンセット用の支持体として使用することもできる。

細胞収納部分２は、細胞収納室内に挿入された細胞支持体マトリックス７を更に含む。好ましい一実施形態では、細胞支持体マトリックス７は、細胞収納室１３内で長手方向に伸びる、生体適合性材料の１本以上のヤーン１４、好ましくは、複数のヤーンを含む。ヤーンは、好ましい実施形態では、膜５の摘出器末端１２ｂの位置又はこれに最も近い位置から、細胞装入末端１２ａの位置又はこれに最も近い位置へと伸びている。ヤーンは、細胞収納室１３の全長又は長さの大部分に及ぶことが好ましい。好ましい一実施形態では、ヤーンは、有利な例として、それ自体が公知であり、外科的埋込用途についてすでに承認されている、臨床グレードのポリエステル（ＰＥ）製とすることができる。そのようなポリエステルヤーンは、通常、患者の身体内での組織の縫合に使用される。本発明の有利な実施形態において使用することのできるポリエステルヤーンの一例は、たとえば、44/27-PET-5540-FTT-SS(Textile Development Associates, Inc)である。この材料は、テクスチャードポリエステル製の４０デニール２７フィラメントヤーンである。

細胞支持体マトリックス７は、特に付着細胞について、細胞収納室に収容された不死化細胞の性能を実質的に向上させ、治療薬の放出における活性及び耐久性を時間と共に増大させることがわかった。そうした付着細胞は、たとえば、細胞療法において有用な、遺伝子操作された細胞、たとえば、遺伝子操作された不死化ヒト筋芽細胞、マウス筋芽細胞、ヒト網膜色素上皮細胞、幹細胞、幹細胞由来細胞株等である。いかにしてか、こうした細胞２４は、ヤーン１４の繊維に沿って並ぶ傾向があり、したがって、治療薬の放出及び栄養素の摂取について最適化された、細胞の密度及び間隔が改善されることがわかってきている。ヤーンはまた、有利なことに、細胞がこれに付着するための全表面積を大きくする。

例示的な一実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦを分泌するヒト筋芽細胞不死化細胞が、本発明のカプセルの細胞収納部分２に装入される。こうしたカプセルは、個別化された抗腫瘍細胞免疫療法において有用である。

細胞は、成長因子又はウシ胎児血清で補充されたHam’s F12やＤＭＥＭ等の、細胞のタイプに適する細胞増殖培地に入った状態で、細胞収納部分に装入される。更に、冷凍される細胞については、冷凍用培地／凍結保存剤(cryopreservant)、たとえばグリセロールも、細胞増殖培地に加えられる。

例示的な一実施形態では、細胞収納キャビティ１３が、キャビティの実質上全長に及ぶ、キャビティ内に平行に配置された、たとえば５本～２０本のヤーン１４をその中に収納する場合がある。ヤーンは、細胞収納キャビティ１３内に、その一方の末端をキャビティに通して引っ張ることにより挿入することができ、連結部４は、多孔質膜５の中に膜支持体６及びヤーン１４を取り付けておいてから、細胞収納部分２の摘出器末端１２ｂに取り付けることができる。

細胞支持体マトリックス７は、たとえば、これをコイルの内側に通して挿入することによって膜支持体６に予め組み付けた後に、予め組み立てられたコイルと細胞支持体マトリックスを、管状の多孔質膜５に挿入してもよいと述べて差し支えない。

したがって、詳細にはヤーン１４の形態である細胞支持体マトリックス７は、所与の体積に合わせ、細胞収納室内での秩序立った細胞の分配を最適化するという非常に有益な効果を有し、分泌収量及び速度を向上させる。更に、この構成では、ヤーンのカット長を、単純に、多孔質膜チューブ及び膜支持体６のコイルの対応する長さに変更することにより、細胞収納部分の長さを容易に加減することが可能になる。その上、十分に特徴付けられた埋込可能な生体適合性ポリエステルの使用は、本デバイスの安全性に不利な影響を及ぼさない。

細胞支持体マトリックス７の存在によって、収容された細胞を、細胞の生存度に影響を及ぼすことなく冷凍及び解凍することが可能になることも認められた。マトリックス７の存在は、カプセルの冷凍及び解凍特性を向上させるが、これによって、必要なときに患者の処置に使用する準備の整った凍結状態でカプセルを長期間にわたって貯蔵することが可能になるため、このことは、特に有利である。特に、細胞、詳細には付着細胞のヤーンに沿った分布の改善が、冷凍及び解凍過程の間の高い割合での生存度の維持に寄与するものと思われる。

液体培地中の細胞は、多孔質膜５の細胞装入末端１２ａに挿入されている出口ノズル２２を含む細胞挿入デバイス２０（イラストでは部分的、摸式図的にしか示していない）によって、細胞収納室１３に挿入することができる。

埋込型カプセル１は、細胞装入デバイスを付けた、予め組み立てられた配置で供給することもできる。この実施形態では、細胞装入デバイスのノズル２２を、たとえば、接着剤１８ｃ、たとえば、すでに上述したとおりの光硬化性接着剤によって、膜の細胞装入末端１２ａに取り付けることができる。細胞装入デバイスは、カテーテルチューブを含むものにして、液体培地中の細胞を、カテーテルを介してカプセルの細胞収納室に注入するのを可能にしてもよく、細胞収納カプセル内に含まれている空気は、多孔質膜５を通り抜けて押し出される。

しかし、上述したとおり、カプセルは、使用する準備のできた状態で、不死化細胞及び培地で満たされ、細胞収納末端１２が栓（示していない）によって気密封止され、次いで、患者の処置に必要となるまで凍結される場合もある。

特定の一態様によれば、本発明との関係において適するヒト筋芽細胞不死化細胞は、ヒト筋芽細胞初代細胞から派生したものでよく、前記細胞は、ＣＤＫ４及びｈＴＥＲＴを発現し、筋芽細胞の特色を保持し、目的のタンパク質、たとえば、ヒト、ヒト化、又はキメラモノクローナル抗体（又は組換えタンパク質（たとえば、マウス又はヒト）等を分泌するように、更に遺伝子操作されている。

さらなる特定の一態様によれば、本発明との関係において適するヒト筋芽細胞不死化細胞株は、タンパク質を分泌するように更に遺伝子操作することのできる、ＣＣＯＳに受託番号１９０２で寄託されているヒト筋芽細胞細不死化胞株又はその組成物若しくは子孫でもよい。たとえば、こうした細胞には、有利なことに、ＰＧＫ（ホスホグリセリン酸キナーゼ）プロモーター、詳細には、Salmon、２０１３、Methods Mol Biol.；９４５：４１７～４８に記載されているようなヒトホスホグリセリン酸キナーゼ（ｈＰＧＫ）プロモーター等の、低酸素条件で過剰活性化されるプロモーターの制御下で目的のターゲットタンパク質を発現するように形質導入を施すことができる。

さらなる特定の一態様によれば、本発明との関係において適するヒト筋芽細胞不死化細胞は、ヒト筋芽細胞初代細胞から派生したものでよく、前記細胞は、ＣＤＫ４及びｈＴＥＲＴを発現し、筋芽細胞の特色を保持し、ＧＭ－ＣＳＦを分泌するように更に遺伝子操作されている。たとえば、本発明との関係において適するヒト筋芽細胞不死化細胞株は、ＣＣＯＳ １９０１の番号で寄託されている、ＧＭ－ＣＳＦを分泌する遺伝子操作された筋芽細胞不死化細胞（ＣＣＯＳ １９０２の番号で寄託されている派生細胞株）でよい。

本発明のカプセルによるヒトＧＭ－ＣＳＦの送達についてのin vitro及びin vivo試験
以下の実験において、Ａ群及びＢ群用の、図１に記載するとおりのカプセルと、比較のためのＣ群用の、特許文献１に記載されているようなカプセル（従来型カプセル）という、２タイプの埋込型カプセルを比較する。
Ａ群：カプセルに、本発明の細胞（ヒトＧＭ－ＣＳＦを発現するヒト筋芽細胞不死化細胞株（ＣＣＯＳ１９０１の番号で寄託されている細胞株）が装入される。
Ｂ群：カプセルに、ヒトＧＭ－ＣＳＦを発現する対照細胞株：Ｋ５６２ヒト赤白血病細胞が装入される。
Ｃ群：カプセルに、ヒトＧＭ－ＣＳＦを発現する同じ対照細胞株：Ｋ５６２ヒト赤白血病細胞が装入される。

従来型カプセルには、支持マトリックスが封入されておらず、したがって、従来型カプセルは、ヒト筋芽細胞等の付着細胞を装入するのに適していない。２種の異なるカプセルがｈｕＧＭ－ＣＳＦを生成する効率を経時的に比較するために、本発明者らは、ヒトＧＭ－ＣＳＦを発現するＫ５６２ヒト赤白血病細胞株を使用した。

Ｂ群及びＣ群のデータは、目的とされる同じ治療用タンパク質を発現する同じ遺伝子操作された細胞株を収容する２種の異なるカプセルの直接比較であるので、これにより、本発明のカプセルの性能の直接の比較が実現される。Ａ群についてのデータによって、本発明のカプセルのヒト筋芽細胞不死化細胞等の付着細胞との組合せが、ＧＭ－ＣＳＦとしての目的のタンパク質の発現について、標準のカプセルであるＫ５６２ヒト赤白血病細胞（Ｃ群）より特に有利であることが裏付けられる。

滅菌培養条件下で、細胞およそ８００，０００個をカプセルに装入した。カプセルを、培養培地において、３７℃、５％ＣＯ２で維持した。ヒトＧＭ－ＣＳＦの送達は、培養培地において、ＥＬＩＳＡ（キット番号ＫＨＣ２０１１、Thermo Fischer）を使用して定量化し、ｎｇ／２４時間で報告した（図６Ａ）。

カプセルをマウス皮下組織に１週間埋め込んだ。屠殺後、ヒトＧＭ－ＣＳＦ送達を定量化するために、カプセルを動物から撤収し、培養培地中に入れた（図６Ｂ）。加えて、マウス血清（図６Ｃ）並びにカプセル周囲の皮下組織（図６Ｄ）におけるＧＭ－ＣＳＦも定量化した。

これらのデータは、本発明のカプセルによって、in-vitro及びin-vivo両方で、カプセル化細胞による、持続的で、安定した、最も効率的なＧＭ－ＣＳＦ産生の実現が可能になるため、本発明のカプセルが、ヒト筋芽細胞不死化細胞等の付着細胞の培養に特に有用であることを裏付けるものである。

１ カプセル
２ 細胞収納部分
１２ 細胞収納末端
１２ａ 細胞装入末端
１２ｂ 摘出器末端
５ 多孔質膜，ＰＥＳ膜
１３ 細胞収納室，細胞収納キャビティ
６ 膜支持体，コイル、ステンレス鋼コイル
７ 細胞支持体マトリックス
１４ ヤーン，ポリエステルヤーン
３ 摘出器部分
８ アンカーチューブ
８ａ 連結部末端
９ 撤収用糸
１５ アンカー部分
１５ａ アンカーノット
１６ 糸部分
１８ａ 接着剤
４ 連結部
１０ コネクタ
１８ｂ 接着剤、（光）硬化性接着剤
２０ 細胞装入デバイス
２２ 出口ノズル，（細胞装入デバイスのカプセルに対する）連結部
１８ｃ 接着剤
２４ 細胞
Ｄ 膜直径（内部）
Ｌ 膜長さ
Ｌ／Ｄ 長さ／直径の比

Claims (14)

1. 治療薬を分泌させるための液体培地中の不死化細胞を中に収納するための細胞収納室（１３）を取り囲む多孔質膜（５）を含む細胞収納部分（２）を含む埋込型カプセルであって、
   前記細胞収納室内で不死化細胞を整列させるように構成された、前記細胞収納室（１３）内に挿入された少なくとも１本のヤーン（１４）を含む細胞支持体マトリックス（７）を更に含み、
   前記細胞収納部分が、前記多孔質膜（５）の構造支持体となるように構成され、前記細胞収納室（１３）の中に装着された膜支持体（６）を更に含み、
   前記膜支持体は、生体適合性材料製のコイルを含み、前記コイルの内側には、前記細胞支持体マトリックス（７）が挿入されていることを特徴とする埋込型カプセル。
2. 少なくとも１本の前記ヤーンがポリエステル材料からなる、又はポリエステル材料を含む、請求項１に記載の埋込型カプセル。
3. 前記細胞支持体マトリックス（７）が、複数の前記ヤーンを含む、請求項１に記載の埋込型カプセル。
4. 複数の前記ヤーンが、５本～２０本のヤーンの範囲である、請求項３に記載の埋込型カプセル。
5. 前記ヤーンが、前記細胞収納室内で、前記細胞収納室のほぼ全長又は前記細胞収納室の少なくとも８０パーセントの長さに及ぶ、請求項１に記載の埋込型カプセル。
6. 前記細胞収納室（１３）がポリエステルヤーンを含む、請求項１に記載の埋込型カプセル。
7. 外科道具によって埋込部位から埋込型カプセルを引き抜くのを可能にするように構成され、前記細胞収納部分の摘出器末端（１２ｂ）に連結された摘出器部分（３）を更に含み、
   前記摘出器部分は、撤収用糸（９）を含む、請求項１に記載の埋込型カプセル。
8. 前記撤収用糸（９）がポリプロピレン糸製である、請求項７に記載の埋込型カプセル。
9. 前記摘出器部分が、前記撤収用糸（９）のアンカー部分（１５）が内部に挿入及び接着されている空洞を有するアンカーチューブ（８）を含む、請求項７に記載の埋込型カプセル。
10. 前記アンカーチューブ（８）がポリウレタン材料からなる、又はポリウレタン材料を含む、請求項９に記載の埋込型カプセル。
11. 前記摘出器部分（３）が、コネクタ（１０）を含む連結部（４）によって前記細胞収納部分（２）に連結されており、
    前記コネクタ（１０）は、前記多孔質膜（５）の前記摘出器末端（１２ｂ）に挿入された部分（１０ａ）と、アンカーチューブ（８）の連結部末端（８ａ）に挿入された第２の部分（１０ｂ）と、を含む、請求項７に記載の埋込型カプセル。
12. 前記コネクタ（１０）が、接着剤（１８ａ）によって、前記アンカーチューブ（８）及び前記細胞収納部分（２）に接着されている、請求項１１に記載の埋込型カプセル。
13. 当該カプセルの外径が、０．５ミリメートル～３ミリメートルの範囲であり、長さが、５ミリメートル～２５ミリメートルの範囲である、請求項１に記載の埋込型カプセル。
14. 当該カプセルの長さの直径に対する比が、５～２０の範囲内である、請求項１に記載の埋込型カプセル。