JPH01128995A - アントラサイクリン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は式Ｉ 〔ここで式中、Ｒ１およびＲ２は異なって１／）て、そ
れぞれ式■ で示される糖残基Ｒｏａ（Ｌ−ロドスアミン）まｔこは
弐■ で示される糖の組合せのＲｏａ−ｄＦｓＤ−ＣｉｎＢ（
ここでＲｏａ：Ｌ−ロドスアミンＨｄＦ：２−デオキシ
−Ｌ−７：ｆｆ−ス；　Ｄ−ＣｉｎＢ　：　Ｄ−シネル
ロースＢ）を表す〕で示されるアントラサイクリン誘導
体並びにその薬学的に許容しうる酸付加塩に関する。

本発明はまた、Ｒ１およびＲ２が相異なっていて、それ
ぞれがＲｏａ　（Ｌ−ロドスアミン）または糖の組合せ
のＲｏａ−ｄＦ＝Ｌ−ＣｉｎＢ　（ここでＲｏａ：Ｌ−
（７ドスアミン；ｄＦ：２−デオキシ−Ｌ−７コース；
　Ｌ　−ＣｉｎＢ：　Ｌ−シネルロースＢ）を示しそし
てヨーロッパ特許出願第Ａ　Ｏ，１３１，９４２号明細
書に記載のようにして得ることができる式Ｉの化合物を
エピマー化することからなる、式Ｉの化合物の製造方法
に関する。その製法はａ）ヨーロッパ特許出願第Ａ１０
，１３１．９４２号明細書に記載のようにして得ること
ができる前記化合物を直接適当な塩基性試薬で処理する
か、またはｂ）ヨーロッパ特許出願第Ａ１０，１３１，
１８１号明細書に記載されているようにして得ることが
できる、すなわちＹ−１１，４７２菌株（ＤＳＭ２６５
８）を培養し、その菌糸体および培養が液を有機溶媒で
抽出し、その残留物をヨーロッパ特許出願Ａ１０，１３
１，９４２号明細書に記載のように薄い強酸または中程
度の強酸で処理することによって得られる粗混合物を６
．５〜８．０のｐＨに調整したシリカゲル上でクロマト
グラフィーにかけるかのいずれかによって行われる。

前記ａ）法では、出発化合物（「サイトロジンＳ」また
は「サイトロジンＴＪ）を、無機塩基例えばアルカリ金
属水酸化物（例えばＮａ０Ｈ）または塩基性アンモニウ
ム塩（例えば酢酸アンモニウム）または有機塩基（例え
ばトリエチルアミンもしくは水酸化テトラエチルアンモ
ニウム）を単独または混合物で含有する溶媒混合物で処
理する。本発明化合物は互いに分離されそして常套のク
ロマトグラフィー法、例えば６．５〜８．０、好ましく
は８，０のｐＨに調整したシリカゲル上でのカラムクロ
マトグラフィーによって精製されることができる。

前記ｂ）の変法では、ヨーロッパ特許出願第１０．１３
１，９４２号明細書に記載のように酸処理によって得ら
れた加水分解生成物を、酸で洗浄しそしてアルカリ金属
水酸化物溶液例えば水酸化ナトリウム溶液でｐＨを６．
５〜８．０好適には７．０〜７．５に調整した好ましく
はシリカゲル上において酸成分を全く含有していない溶
媒混合物でクロマトグラフィー処理を行って本発明化合
物を単離する。

本発明方法で得られる化合物の例は下記のとおりである
。

５°−二ピーサイト口ジンＳ： 赤色、無定形物質。メタノール、酢酸エチル、クロロホ
ルムおよびトルエンに易溶、水およびヘキサンに不溶。

薄層クロマトグラフイｍ：メルク６０Ｆｚｓａシリカゲ
ル、 溶媒系：クロロホルム／メタノール／氷酢酸／水−７０
／　２０／　１０／　２、 ＵＶｍａｘ　：　２３５．２５５（Ｓｈ）、２９０．４
９５ｎｍ（メタノール／１０％　ＩＮ　ＨＣＱ中ｉ：ｔ
；イテ）。

’ＨＮＭＲ，１，ベクトル：第１ｒ！ｌＪ参照。

ＣａａＨａａＮｘＯｌｔ、分子量（計算値）　９４０（
ＦＡＢ−ＭＳ−ｔ’確認された）。

前記５″′−二ピーサイト口ジンＳはＲ１がＲＯａヲ意
味しそしてＲ１がＲｏａ−ｄＦｓＤ−ＣｉｎＢを意味す
る式１式％ このようにして製造された式１の化合物は、細胞増殖抑
制作用が高くしかも毒性、特に腎毒性が低い点に特徴が
あり、それ故に腫瘍症の治療例えば悪性腫瘍の治療に使
用することができる。

本発明化合物の細胞増殖抑制活性は、以下に記載のよう
に３種の異なる腫瘍細胞系統における細胞増殖試験で測
定された。

指数的成長相にあるＬ１２１０ＳＡ５４９または１（Ｔ
２９の腫瘍細胞を、ＲＰＩＪＩ　１６４０中５Ｘ　１０
’細胞／ｍＱの細胞密度で９６−ウェルの微量滴定プレ
ート中において種々の濃度の試験物質とともに７２時間
培養する（３７℃、Ｃ０ｆｆ１５％、相対湿度９５％）
。試験物質の代りに新しい培地を用いて培養した細胞を
対照物として用いる。各々の物質濃度および対照物につ
いてそれぞれ繰り返しの測定を行う。

６５時間後に、２．５ｍ９／ｍＱの濃度（ＰＢＳ中に溶
解されている）のＭＴＴ溶液（ＭＴＴ　：　３−　（４
，５−ジメチルチアゾリル）−２，５−ジフェニルテト
ラゾリウムブロマイド）５０μａを加える。ＮＴＴは生
細胞によって赤色の不溶性ホルマザンに還元される。

ＭＴＴとともに７〜２４時間（使用する細胞の性質によ
る）培養後、上澄み液を吸引によって慎重に除去する。

各ウェルにＤＭＳＯ１００μａを加えルコトによって最
初は不溶性のホルマザン色素を溶解し、引続いて慎重に
浸盪する。Ｆ１ｏｗ３４０ＣＣ１ｏチスキャン光度計を
用いて４９２ｎｏｒの波長にある得られた着色溶液の吸
光度を測定する。

結果は未処置対照物に対する、試験物質で培養後の吸光
度の割合として報告される。反復測定値の変化率は１５
％以下である。

５−一二ビーサイト口ジンＳについて以下の値が測定さ
れた。

［Ｃ５ｏ（μｇ／１１１２） Ｌ１２１０　　　　　ＨＴ２９　　　　　Ａ３４９８Ｘ
１０−”　　　　　２．１Ｘ１０−”　　　３．４Ｘ１
０−”すなわち、これらの化合物およびその酸付加塩は
腫瘍治療用の医薬として使用されうる。該化合物は投与
形態により種々の方法で投与されうる。

通常、該化合物または例えばＤ−グルコン酸によるその
酸付加塩は、薬学的に慣用のビヒクルまたは希釈剤と混
合して投与される。すなわち、例えばそれらは単独で、
あるいはビヒクル例えばマルトースまたはラクトースと
一緒に混合して、あるいは無毒性錯体例えばデオキシリ
ボ核酸錯体として投与されうる。

代表的な投与法は、本発明化合物を蒸留水または生理学
的塩水中に溶解した溶液の注射である。これらの溶液は
腹腔内、静脈内または動脈内に注射することができる。

１日当たりの服用量および単一服用量は、連続的または
断続的に投与される全用量があらかじめ限定された範囲
を越えないようにして動物実験および試験管内テストか
ら決めることができる。すなわち、一つの治療周期に対
する全服用量は体重１ｋｇ当たり約０．５〜５ｍｇであ
る。この服用量は適当なフラクションに分けて７日間に
わたって投与されうる。しかしながら、ヒトまたは動物
を治療するための特定的な服用量は、患者の個々の状態
の要素例えば年令、体重、性、過敏性、食餌、服用時間
、服用するその他の医薬、患者の身体状態および病気の
程度に応じて決定されうる。

以下に、本発明化合物の製造を実施例で記載する。各成
分は以下に記載の測定条件下で同定される。

プロトン共鳴スペクトル（’ＨＮＭＲスペクトル）はプ
ルカー　（ＢＲＵＫＥＲ）ＨＸ−２７０７一リエ変換核
磁気共鳴分光計を用いて２７０ＭＨｚで記録された。濃
度は９９．８％ＣＤＣｌ２３０．５ｍ１２あたり２〜４
　ｍｇであった。

製造の直後、各溶液を９９．５％Ｄ２０中における５％
Ｎａ２ＧＯ３０，１ｍＱとともに振盪させた。

添付図面中の星印＊で示される信号は、０．１％範囲の
低分子量不純物から並びに溶媒残留物から由来している
。

質量スペクトルはＦＡＢ（高速原子ボンバードメント）
イオン源を使用するＡＥＩ　ＭＳ−９０２Ｓ質量分光計
で記録された。各物質は、随時塩化アンモニウムが添加
されてイオン源中のチオグリセロールのマトリックス中
に導入された。

吸収スペクトルは、 ａ）水／メタノール　ｌ：９、 ｂ）メタノール中におけるｌＯ％ＩＮ　ＨＣＱ。

Ｃ）メタノール中におけるｌＯ％ＩＮ　ＮａＯＨ中で２
００〜７００ｎｍにおいて記録された。

物質濃度はｌＯ〜３０ｍｅ／　ｍｇであった。最大吸収
がｎｍで示される。

実施例１：加水分解による方法 ストレプトミセスプルプラセンス（ＳＬｒｅｐｔｏｍ−
ｙｃｅｓ　ｐｕｒｐｕｒａｓｃｅｎｓ）　０５Ｍ２６５
ｇによる発酵から得られた粗塩基性グリコシド混合物（
ヨーロッパ特許比＠Ａ　Ｏ，１３１，９４２号明細書参
照）７５０ｇを撹拌下０．１Ｎ　ＨＣｌ２４　Ｑ中に２
０°Ｃで溶解し、そのｐＨを２Ｎ　ＨＣＱで１．１に調
整した。１６時間後、反応溶液を５Ｎ　ＮａＯＨ″ｃ′
ｐＨ１，８に調整し、次イテそれぞれトルエン６１２で
３回振盪することによって抽出し、その後そのｐＨを２
Ｎ　ＮａＯＨで順次ｐＨ３，４，５および７に調整した
。これらｐＨ値の各々において、その溶液をそれぞれＣ
ＨＣＱ、　ｌで５回抽出した。

ｐＨ５の抽出物は真空中での蒸発後に８１．６ｇの残留
物を与えた。

実施例２：塩基性シリカゲル上で加水分解生成物をクロ
マトグラフィーにかける方 法 実施例１に記載の加水分解生成物１５９をＣＨＣＱ３／
メタノ−、ル／水−１３０／　４０／　５０（下方相）
の混合物５０ｍｆｆ中に溶解し、スチールカラム（６０
Ｘ６ｃｍ、　ｐＨ８，０／２０〜４５μ、６０Ａ１グレ
一ス社製のシリカゲル１　、１ＪＺ９を充填）に適用し
、次いで加圧下毎分１５ｍ１２の流速で前記混合物を用
いてクロマトグラフィーにかけた。１５ｍＱの各フラク
ションを集め、ＴＬＣ（前記参照）により分析し次いで
適当な方法で合体した。真空中で蒸発させた後に下記の
収量が得られた。

クラクション　　ｇＴＬＣ １−５９１，９ ６０−８０１，５ ８１−１ｏｏ　　　　　２．４　　　　　主として５′
＃−二ピーサイト口ジンＳおよびサイトロジン５ １０１−１４５　　　１．７　　　　　サイトロジン５
１４６−２５０　　　３．８ 最後まで　　　１．２ （メタノール７１２を使掬） 実施例３：逆相物買上でのクロマトグラフィーによる方
法 サイトロジンＳと５〜−二ビーサイト口ジンＳとの混合
物２ｇを水（Ｈ，ＰＯ，でｐＨ３，０に調整）中に溶解
した０、５％（Ｖ／Ｖ）　　）リエチルアミンの溶液９
０ｍＱ中に溶解し、スチールカラム（２５０Ｘ　３２ｍ
ｍ。

逆相リクロソルブＲＰ−１８、ｌＯμ（メルク）１１０
ｇを加圧下に充填）に適用し次いで加圧下に、水（Ｈ，
ＰＯ，でｐＨ３，０にした）／アセトニトリルー８４／
１６中における１０（次に７）％トリエチルアミンの移
動相２１次に３α）を用いてクロマトグラフィーにかけ
た。毎分１０ｍＡの流速で、１．５１２の初留分の後に
ｌＯｍＱの各７ラクシヨンを集めた。２ＮＮａＯＨを加
えテｐＨを７．５ニした後に、ＣＨＣｌ２３　テ抽出し
そして各フラクションをＦＬＣによって試験し次いで適
当な方法で合体した。真空中で、蒸発させた後に下記の
生成物が得られた。

フラクション　ｙ　　　　　　　　　　　　ＴＬＣｌ−
５９４０極性生成物 ６０−１６０　　　　３７５　　　　　主にエビ−サイ
、トロジン５１６１−３０４　　　８６０　　　　　主
にサイトロシア５３０５−３２０　　　４６０　　　　
　すみれ色の混合物、サイトロジンＳと類似のＲｆ フラクション６０〜１６０の生成物、および前記のよう
に７％（Ｖ／Ｖ）　トリエチルアミンを含有する移動相
を用いてクロマトグラフィーを繰り返したところ、’Ｈ
ＮＭＲスペクトルによれば３５％以上の純度を有する５
″−エピ−サイトロジンＳが全部で９７ｍｇ得られた。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明化合物である５−一二ピーサイト口ジ
ンＳの’ＨＮＭＲスペクトルを示す。 特許出願人　　ヘキスト・アクチェンゲゼルシャフト外
２名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）下記の式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔ここで式中、Ｒ＿１およびＲ＿２は異なっていて、そ
   れぞれ式II ▲数式、化学式、表等があります▼II で示される糖残基Ｒｏａ（Ｌ−ロドスアミン）または式
   III ▲数式、化学式、表等があります▼III で示される糖の組合せのＲｏａ−ｄＦ＝Ｄ−ＣｉｎＢ（
   ここでＲｏａ：Ｌ−ロドスアミン；ｄＦ：２−デオキシ
   −Ｌ−フコース；Ｄ−ＣｉｎＢ：Ｄ−シネルロースＢ）
   を表す〕で示される化合物並びにその薬学的に許容しう
   る酸付加塩。 ２）上記式中、Ｒ＿１が糖残基Ｒｏａを示し、そしてＲ
   ＿２が糖の組合せのＲｏａ−ｄＦ＝Ｄ−ＣｉｎＢを示す
   請求項１記載の式 I の化合物並びにその薬学的に許容
   し得る酸付加塩。 ３）上記式中、Ｒ＿１が糖の組合せのＲｏａ−ｄＦ＝Ｄ
   −ＣｉｎＢを示しそしてＲ＿２が糖残基Ｒｏａを示す請
   求項１記載の式 I の化合物。 ４）Ｒ＿１およびＲ＿２が異なっていて、糖残基Ｒｏａ
   または糖の組合せのＲｏａ−ｄＦ＝ＣｉｎＢ（ここでＣ
   ｉｎＢはＬ−シネルロースＢを示す）を示す式 I の化
   合物をエピマー化することからなる請求項１記載の化合
   物の製造方法。 ５）ａ）上記出発物質を直接塩基性試薬で処理するか、
   またはｂ）ヨーロッパ特許出願書１０，１３１，１８１
   号明細書に記載のようにして得ることができる、すなわ
   ちＹ−１１，４７２菌（ＤＳＭ２６５８）を培養し、そ
   の菌糸体および培養濾液を有機溶媒で抽出し次いで得ら
   れた残留物をヨーロッパ特許出願１０，１３１，９４２
   号明細書に記載のように薄い強酸または中程度の強酸で
   処理することによって得られる混合物を６．５〜８．０
   のｐＨに調整したシリカゲル上でクロマトグラフィーに
   かけるかのいずれかである請求項４記載の方法。 ６）塩基性試薬がアルカリ金属水酸化物、塩基性アンモ
   ニウム塩または有機塩基である請求項５記載の方法。 ７）シリカゲルを水酸化ナトリウム溶液でｐＨ７〜７．
   ５に調整する請求項５記載の方法。 ８）請求項１記載の化合物を含有する薬剤。 ９）細胞増殖抑制作用を有する薬剤の調製における請求
   項１記載の化合物の使用。