JPH0115822B2

JPH0115822B2 -

Info

Publication number: JPH0115822B2
Application number: JP55085243A
Authority: JP
Inventors: Juzo Yanagihara; Koji Noguchi; Makoto Pponda
Original assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1980-06-25
Filing date: 1980-06-25
Publication date: 1989-03-20
Also published as: CS228510B2; JPS5730945A

Description

【発明の詳細な説明】

〔産業上の利用分野〕本発明はゲルパーミエーシヨンクロマトグラフ
イー用親水性充填剤の製造方法に関する。更に詳
しくはイソシアヌレート環を骨格に含む架橋ポリ
ビニルアルコールゲルより成り制御されたポアと
十分な強度をもつゲルパーミエーシヨンクロマト
グラフイー用親水性充填剤の製造方法に関する。〔従来の技術〕ゲルパーミエーシヨンクロマトグラフイー（以
下GPCという）は、ゲルを充填したカラムを用
い、充填剤（以下ゲルという）内のポアサイズよ
り小さい分子サイズの成分がその大きさに応じて
ゲル内へ浸透し、大きい成分はゲルの外を素通り
する原理を利用して、分子サイズの大きい成分か
ら順次分離溶出させる、液体クロマトグラフイ
ー、の一種である。 GPCは分離または分析の際に用いる溶媒によ
つて有機溶媒系と水溶媒系に分類される。このう
ち、水溶媒系のゲルパーミエーシヨンクロマトグ
ラフイーは生化学関連分野での利用価値が高いた
め、最近注目を集めており、とりわけ高速処理で
きるゲルの開発が強く望まれている。これまで水溶媒系GPC用ゲルとして、デキス
トランをエピクロルヒドリンで架橋して成るゲル
（商品名セフアデツクス、フアルマシア社、スウ
エーデン）が知られており、よく使用されてい
る。このゲルは水に溶解したデキストランを逆相
懸濁系でエピクロルヒドリンで架橋することによ
り得られ、ウオーターリゲイン（保水量、以下
W_Rという）がゲルの性質を決定し、W_Rの高いの
がゲルの利点とされている（特公昭47−21405号
公報参照）。しかし、このゲルは製法や物性から
もわかるように、分離に用いるポアが架橋の網目
からなる軟質ゲルといわれるものであり、機械的
強度が小さいので高速GPC用ゲルとして用いる
ことはできなかつた。次に、例えば酢酸ビニルと１，４−ブタンジオ
ールジビニルエーテルの共重合体からなる粒子を
ケン化することにより水溶媒系のゲルが得られる
ことも知られている（特公昭44−20917号公報参
照）。しかし当該出願の発明者であるW.Heitzも
認めるように、このゲルは重合に用いた単量体の
共重合性が良くない（W.Heitz.J.Chromatogr.53
37（1970）参照）ので生成したゲルは十分な強
度をもたず、高速GPC用として実用化すること
はできなかつた。更に、例えばジエチレングリコールジメタクリ
レートやグリシジルメタクリレートと酢酸ビニル
との共重合体粒子をケン化し、そしてエピクロル
ヒドリンで架橋することによつて機械的強度の大
きい水溶媒系ゲルが得られるといわれている（特
開昭52−138077号公報参照）。しかしこの方法で
得られたゲルは、その骨格中にエステル基または
カルボキシル基等の酸や塩基の存在によつて加水
分解したり、被分離成分によつては吸着作用を及
ぼす官能基が存在するので好ましくない。さらに、また酢酸ビニルとトリアジン環構造を
有する架橋剤よりなる共重合体をケン化すること
によつてポリビニルアルコールゲルが得られるこ
とも公知である（特開昭55−58203号公報参照）。
この方法によると、架橋剤量または重合時に加え
られる希釈剤の種類および量を適当に組み合わせ
ることにより、ゲルの含水量（ポアサイズ）を変
えうるといわれている。しかしこのゲルは、特開
昭55−58203号公報に記載されているように、高
分子水溶液の脱塩に使用することを目的として製
造されたものであり、そのため実際得られたゲル
は、無機イオンだけがゲル内へ浸透できるような
小さいポアをもつもので、塩と分子量が高くゲル
内へ浸透できない蛋白質とを分離するのには使用
できるが、分子量の高い成分を相互に分離する可
能性についてはまつたくふれられていない。しか
も高分子水溶液の脱塩を目的としているため、42
〜28メツシユ（つまり350〜590μｍ）程度の粒径
の大きいゲルで充分であり、特に機械的強度を必
要とされる50μｍ以下のゲルについては何ら記載
されていない。しかし、高速GPCによつて分子量の異なる
種々の成分を分離、分析するためには、被分離成
分の分子の大きさに応じて厳密に制御されたポア
をもち、かつ十分な機械的強度を有する小粒径の
ゲルを充填剤として用いなければならない。〔発明の目的〕本発明者らはかかる従来技術の現状に鑑み、上
記した要件を満足するGPC用ゲルを開発すべく
鋭意研究の結果、イソシアヌレート環を骨格に含
む架橋ポリビニルアルコールゲルよりなり、分離
すべき被分離成分の分子量に応じたサイズのポア
を有し、従つて高分子量成分相互の分離も可能で
あり、かつ高速GPCに適した十分な機械的強度
をもつゲルの開発に成功し本発明をなすに至つ
た。〔発明の構成〕即ち、本発明に従えば、カルボン酸ビニルエス
テルと下記式(a)で表されるイソシアヌレート環を有する化合物（ただしR₁、R₂およびR₃は、それぞれ独立に、−
CH₂−CH＝CH₂、−CH₂−Ｃ≡CH又は

【式】を示す）との共重合体を加水分解して得られる架橋ポリビ
ニルアルコールゲルにおいて、カルボン酸ビニル
エステルと前記化合物(a)の量を架橋度Ｘが0.25≦
Ｘ≦0.4 （ただしＸ＝W₂／M₂×３／W₁／M₁×n₁＋W₁／M₂×３ M₁：カルボン酸ビニルエステルの分子量 M₂：化合物(a)の分子量 W₁：重合に用いたカルボン酸ビニルエステルの
重量（ｇ） W₂：重合に用いた化合物(a)の重量（ｇ） n₁：カルボン酸ビニルエステル１分子が有するビ
ニル基の数）の範囲になるように用い、更に、単量体100重量
部に対し、単量体を溶解するが水には溶解しにく
い有機溶媒20〜200重量部と、単量体に溶解する
線状重合体10重量部以下との混合物を単量体に加
えて懸濁共重合を行い、かつ加水分解して得られ
るゲルが下記の(A)〜(D)の物性 (A) 水酸基密度（q_OH）10.2≦q_OH≦11.2meq／ｇ (B) 保水量（W_R）0.5≦W_R≦2.5ｇ／ｇ (C) 比表面積（Ｓ）５≦Ｓ≦1000m²／ｇ (D) 排除限界分子量（Mlim）10⁴≦Mlim≦10⁸ を有するゲルパーミエーシヨンクロマトグラフイ
ー用親水性充填剤の製造方法が提供される。本発明のゲルの親水性は水酸基に基因する。水
酸基の密度（以下q_OHという）は、ゲル乾燥重量
あたり10.2〜11.2meq／ｇ（ただしＸ＝0.25のと
き）の範囲になるように設定すべきである。この
とき加水分解によつてゲルの骨格中のエステル基
が水酸基に変わつた割合、つまり加水分解率は81
〜100％となり、Ｘが高い場合も加水分解率がこ
の範囲にあるのがよい。q_OHがこの範囲より大き
いとゲルの機械的強度が低下し、逆に小さい場合
には、ゲルの親水性が減少して吸着性が現れるの
でいずれも好ましくない。なお、q_OHは、ゲルを
ピリジン溶媒中で無水酢酸と反応させて水酸基と
反応して消費した無水酢酸の量またはゲルの重量
変化を測定し、これから計算して求めることがで
きる。１ｇの乾燥ゲルが１ｍmolの無水酢酸と反
応したときのq_OHが1meq／ｇである。本発明のゲルは、前述の如く、保水量（以下、
W_Rという）が0.5〜2.5ｇ／ｇの範囲になければな
らない。W_Rとはゲルを水と平衡にしたときにゲ
ルが粒子内に含みうる水の量をゲル乾燥重量あた
りの値として表示したものである。つまりW_Rは
GPC作用を及ぼすゲル内の孔量の目安となる。
W_Rが大きくなると水中においてゲル単位体積あ
たりの骨格を形成する部分、つまりゲルそのもの
の重量が相対的に低下する。そのためW_Rが大き
すぎると水中においてゲルの機械的強度が低下す
るので、流速を高くすることができず、充填カラ
ムの圧力損失も大きくなる。W_Rが小さすぎると
GPC作用を及ぼす粒子内孔量が少なくなるので
ゲルの分離性能は低下する。したがつてW_Rが適
当な範囲にあることは水溶媒系高速GPCゲルの
物性上極めて重要である。従来の軟質ゲルは排除限界分子量（以下Mlim
という）、つまりゲル粒子内に浸透できない成分
の最低分子量が大きくなれば、必然的にW_Rが増
大し機械的強度が低下する性質をもつていた。つ
まり、軟質ゲルの場合にはMlimを大きくするた
めには、架橋度を低くして網目を広げなければな
らないので、必然的にW_Rが高くなりかつ機械的
強度が低下した。これに対し、本発明のゲルは、
Mlimに関係なくW_Rが0.5〜2.5ｇ／ｇの範囲にあ
りMlimの高いゲルでも高速GPCに用いることが
可能である。このことは高速GPC用水溶媒系ゲ
ルとして画期的なことである。W_Rは蒸留水と十
分平衡にしたゲルを遠心分離器にかけてゲル表面
に付着している水を除去したのち、その重量
（W₁）を測定しさらにそのゲルを乾燥して乾燥後
の重量（W₂）を求め次式によつて求めることが
できる。 W_R＝W₁−W₂／W₂ W_Rの値は実用上からは1.0〜2.5ｇ／ｇの範囲に
あるのが更に好ましい。本発明のゲルは前述の如くその乾燥状態におけ
る比表面積（以下、Ｓという）が５〜1000m²／ｇ
の範囲にあることが必要である。この比表面積Ｓ
はゲルの構造と密接な関係をもつ。一般に架橋構
造をもつ有機合成高分子はその高分子と親和性の
ある溶媒中で膨潤し、乾燥すると収縮する。膨潤
時に溶媒が満たされているポアが架橋の網目だけ
で維持されている軟質ゲルの場合は、乾燥すると
網目は広がつた状態を維持できなくなつてつぶれ
てしまい、ポアはほとんど消失する。この場合の
比表面積はほとんど粒子の外側だけの値となるた
め一般に１m²／ｇ以下の低い値を示す。一方ポア
がしつかりした構造をもつ硬質ゲルの場合は乾燥
してもポアは多少収縮するものの膨潤時の状態を
ほとんど維持する、つまりパーマネントポアを有
する。したがつて前記比表面積は粒子内部に微細
孔が存在するため、軟質ゲルの値よりはるかに高
い値を示す。本発明のゲルはMlimの高いもので
もポアがしつかりした構造をもつているため乾燥
時の比表面積は高い値を示す。比表面積の値が前
記の範囲より小さいゲルは微細孔をほとんど持た
ない均一架橋型の構造（軟質ゲル）をしているこ
とを意味し、高速GPC用ゲルとして好ましくな
い。本発明のゲルの比表面積は実用上からは10〜
500m²／ｇの範囲にあるのがより好ましい。比表面積の測定方法はいろいろあるが、本発明
では最も一般的な窒素ガスによるBET法で求め
るものとする。また比表面積測定に用いるサンプ
ルは十分に乾燥しておかねばならない。本発明の
ゲルは親水性が大で乾燥しにくいので、水にぬれ
たゲルをアセトンと平衡にしたのち60℃以下で減
圧乾燥するのがよい。本発明のゲルのMlimは広い範囲にわたつて変
えうる。前述の如く、Mlimはゲルのポア内へ浸
透できない分子の分子量の下限を表す値である。
この値より小さい分子量の成分間については
GPCによる分離が可能であるが、この値より大
きい分子量の成分はゲルのポアに入れず、ゲル粒
子の間隙を素通りして出て行き、分子量に関係な
くほとんど同じ溶出容量をもつため、分離するこ
とができない。MlimはGPCの検量線から求めら
れる。検量線はゲルを充填したカラムについて横
軸に溶出容量、縦軸に分子量の対数を目盛つたグ
ラフに分子量既知のサンプルの測定データをプロ
ツトして得られ、縦軸にほとんど平衡な線と、そ
れに続く負の勾配をもつた線からなる。本発明におけるMlimは、分子量既知の標準物
質としてポリエチレングリコールまたはデキスト
ランを用い、蒸留水を溶媒として求めた検量線の
縦軸に平行な線の延長と、傾斜した線の延長が交
わる点の縦軸の値として表される。なお、通常市
販されている水溶性標準高分子は分子量200万以
下のものしかないので、Mlimが200万以上のゲ
ルについては完全な検量線を求めることができな
い。したがつてこのようなゲルのMlimは正確に
は求められないが、分子量200万までの検量線の
延長と、同様な条件で測定したMlimの低いゲル
の縦軸に平行な線の延長との交点よりMlimの値
を推定する。本発明のゲルは、ポリエチレングリ
コールやデキストランの分子量既知の標準サンプ
ルを用いて得られた値で10⁴〜10⁸の広い範囲の
Mlimをもつ。本発明のゲルの平均粒径（以下_Wという）は
通常は４〜200μｍ、好ましくは４〜100μｍの範
囲にあるのが良く、高速GPC用ゲルとして用い
る場合は、５〜50μｍの範囲にあるのが更に好ま
しい。_Wは、小粒径の場合はコールターカウン
ター（米国コールターエレクトロニクス社）によ
り、また大粒径の場合は顕微鏡またはフルイを用
いて測定し粒子径diの表れる頻度をniとすれば次
式によつて求められる。 _W＝Σ（nidi⁴）／Σ（nidi³）充填剤を小粒径化することによりGPCの分離
能が向上することはよく知られている。しかし小
粒径のゲルを充填したカラムに高流速で溶媒を通
液するためには、ゲルの機械的強度が十分大きく
なければならない。従来の軟質ゲルの場合、小粒
径化と共に通液速度が低下したが、本発明のゲル
は機械的強度が大きいので前述のような小粒径で
も高流速に耐えられる。前記のような物性をもつ本発明のゲルは、前述
の如く、カルボン酸ビニルエステルとイソシアヌ
レート環を有するビニル化合物(a)をこれらの単量
体を溶解するが水には溶解しにくい有機溶媒、ま
たは該有機溶媒と前記単量体に溶解する線状重合
体との混合物の共存下に懸濁重合し、得られた共
重合体を加水分解することによつて得られる。本発明において用いられるカルボン酸ビニルエ
ステルとは、重合可能なカルボン酸ビニルエステ
ル基を一つ以上有する化合物のことで、酢酸ビニ
ル、プロピオン酸ビニル、酪酸ビニル、カプロン
酸ビニル、ピバリン酸ビニル、アジピン酸ジビニ
ル、等の脂肪族カルボン酸ビニルエステル化合物
や安息香酸ビニル、フタル酸ジビニル等の芳香族
カルボン酸ビニルエステル化合物のことである。
なかでも重合性や重合後の加水分解の容易性から
酢酸ビニル、プロピオン酸ビニル、酪酸ビニル、
カプロン酸ビニル、アジピン酸ジビニル等が好ま
しく、さらに孔径や孔径分布の制御し易さより、
アジピン酸ジビニルを単独でもしくは他のカルボ
ン酸ビニルエステルと併用して用いるのが特に好
ましい。次に本発明において使用するトリアリルイソシ
アヌレート環を有する化合物とは下記(a)の構造を
もつ化合物のことで本発明において架橋剤として
用いられる。（ただし、R₁、R₂及びR₃は、それぞれ独立に、−
CH₂−CH＝CH₂・−CH₂−Ｃ≡CH又は

【式】を示す。）中でもR₁、R₂、およびR₃がすべて−CH₂−CH
＝CH₂であるトリアリルイソシアヌレートは入手
が容易であり、ビニルエステル類との共重合性が
良く、かつ得られるゲルの物性をすぐれているの
で好ましい。単量体中のイソシアヌレート環を有する化合物
の割合は架橋度Ｘが0.25≦Ｘ≦0.4（Ｘの定義は前
記した通り）の範囲になるように設定すべきであ
る。架橋度Ｘの値が前記範囲より低いと十分な機
械的強度をもつたゲルが得られず、高いと被分離
成分を吸着することがあるためいずれも好ましく
ない。また本発明ではカルボン酸ビニルとイソシアヌ
レート環を有する化合物(a)とを懸濁共重合させる
際に、単量体を溶解するが水には溶解しにくい有
機溶媒、または該有機溶媒と単量体に溶解する線
状重合体の混合物を単量体に加えなければならな
い。これらの有機溶媒や線状重合体は得られる共
重合体にパーマネントポアを形成させると共にそ
のポアの孔量、孔径あるいは孔径分布を制御する
ために用いられる。単量体を溶解するが水に溶解しにくい有機溶媒
とは、水への溶解度が20℃で３ｇ／水100ｇ以下
の溶媒を意味し、具体的には、トルエン、キシレ
ン、ヘプタン、オクタン、シクロヘキサン、酢酸
ｎ−ブチル、酢酸iso−ブチル、酢酸ｎ−ヘキシ
ル、メチルイソブチルケトン、ｎ−ヘプタノール
等のことである。該有機溶媒は単量体100重量部に対して20〜200
重量部の範囲で用いられる。この範囲より少ない
とゲルの孔量が少なくなりすぎるため分離性能が
低下し、多すぎるとゲルの機械的強度が不足する
のでいずれも好ましくない。有機溶媒の量は実用
上からは30〜150重量部の範囲にあるのがよい。単量体に溶解する線状重合体とは、単量体に１
重量％以上の濃度で溶解する線状重合体のこと
で、例えばポリ酢酸ビニルやポリスチレンのこと
で、単量体100重量部に対して10重量部以下、好
ましくは0.1〜10重量部、更に好ましくは0.3〜10
重量部の範囲で用いられる。かかる線状重合体を
前記有機溶媒と併用することによつて、より孔径
の大きい、即ちMlimが10⁴〜10⁸のゲルを製造す
ることができる。ただし、線状重合体の量が10重
量部を超えると、ゲルの機械的強度が不十分とな
るので好ましくない。重合に際して用いられる開始剤は、通常の懸濁
重合に用いられる一般的なラジカル重合開始剤で
よく、例えば２−2′−アゾビスイソブチロニトリ
ル、２−2′−アゾビス−（２，４−ジメチルバレ
ロニトリル）、等のアゾ系の開始剤や、過酸化ベ
ンゾイル、過酸化ラウロイル等の過酸化物系の開
始剤を用いることができる。懸濁重合を行う際には、水相にはポリビニルア
ルコールやメチルセルロース等の通常用いられる
有機高分子系の懸濁安定剤を加えておくのがよ
く、必要によりリン酸ナトリウム等のPH緩衝剤を
併用してもよい。懸濁安定剤の種類や量或いは撹
拌速度を変えることによつて、重合によつて得ら
れる粒状共重合体の粒径を変えることができる。重合によつて得られた粒状共重合体を抽出して
線状重合体、残留単量体あるいは有機溶媒を除い
たのち、生成共重合体の加水分解反応を行う。加
水分解反応とはケン化反応またはエステル交換反
応のことで、水やアルコールまたはその混合液を
溶媒として、酸またはアルカリを用いて公知のよ
うにして行われる。加水分解反応後、得られたゲ
ルは必要により分級を行つてGPC用の充填剤と
して用いることができる。本発明のゲルはMlimの大きいものでもW_Rが適
当に小さく、乾燥状態における比表面積が高いと
いう特性をもつ。このような特性から本発明ゲル
は湿潤状態と乾燥状態でポアの構造変化の少な
い、いわゆるパーマネントポアをもつた硬質ゲル
であることが明らかである。したがつて、軟質ゲ
ルにくらべて、Mlimの大小にかかわらずゲルの
機械的強度が大きく、小粒径化してもゲルを充填
したカラムに溶媒を高流速で通液できる。一般に
クロマトグラフイーでは充填剤が小さくなると分
離性能が良くなる傾向にある。本発明のゲルは粒
径を小さくすることにより高分離能化が可能であ
り、しかも高流速で通液できるため、分離時間を
著しく短縮できる。このような本発明のゲルのす
ぐれた特性はゲルの製造時にイソシアヌレート環
を有するビニル化合物、および単量体混合液に加
えられる有機溶媒や線状重合体の量が前述の範囲
で用いられたときに得られる。いずれの範囲が満
たされなくても本発明のゲルは得られない。たと
えば前記した特開昭55−58203号公報の実施例に
従つて製造されたゲル（以下の比較例参照）はい
ずれもパーマネントポアをもたないため比表面積
がほとんどない。つまり機械的強度の小さい軟質
ゲルのような構造をもつので平均粒径10μｍ前後
の小粒径のゲルを用いると充填カラムへの溶媒の
通液速度が遅くなり高速GPC用ゲルとして用い
ることはできない。さらに比較例で得られたゲル
はMlimが低く高分子水溶液に脱塩はできても高
分子量成分相互の分離に不適当なことは明らかで
ある。さらに本発明のゲルは水酸基を親水性基として
骨格に保有しているので水に溶媒するほとんどの
成分に対して吸着を示さない。したがつて水溶性
合成高分子、多糖類あるいは蛋白質等の分離、分
析において溶出容量と分子量の対数の関係がほと
んど直線、またはなめらかな曲線である検量線が
えられる。しかもゲルのポアサイズは被分離成分
の分子の大きさに応じてコントロールすることが
可能である。したがつて高分子水溶液の脱塩のみ
ならず広い範囲の分子量をもつ水溶性合成高分
子、多糖類、あるいは蛋白質等の高速GPCによ
る短時間の分離、分析に用いることが可能になつ
た。以下に本発明の実施例を比較例と共に説明する
が、本発明の技術的範囲をこれらの実施例に限定
するものでないことはいうまでもない。実施例１酢酸ビニル100ｇ及びトリアリルイソシアヌレ
ート32ｇ（Ｘ＝0.25）、酢酸ブチル99ｇ、ポリ酢
酸ビニル（重合度500）6.6ｇ並びに２，2′−アゾ
ビスイソブチロニトリル2.6ｇよりなる均一混合
液とポリビニルアルコール（重合度500、ケン化
率89％）２％を含む水溶液１を２フラスコに
入れ、撹拌しながら65℃で18時間さらに75℃で５
時間加熱して懸濁重合を行い粒状共重合体を得
た。濾過、水洗、次いでアセトン抽出後、カセイ
ソーダ47ｇ及びメタノール２よりなる溶液中で
40℃で20時間、共重合体の加水分解反応を行つ
た。得られた粒子を水中で沈降分級を行つて平均
粒径（_W）14.2μｍの架橋ポリビニルアルコール
ゲルを得た。乾燥したゲル一定量をピリジン−無
水酢酸溶液中で105℃で反応し、反応前後のゲル
の重量変化より水酸基密度（q_OH）を求めたとこ
ろ11.2meq／ｇであつた。また水と平衡状態にあ
るゲルをグラスフイルターに入れ3000rpmで遠心
脱水したのち、グラスフイルター上部のゲルを一
定量秤量し、さらにゲルを乾燥したのち再度秤量
し、前後の重量変化よりゲルの保水量（W_R）を
求めたところ1.80ｇ／ｇであつた。さらに乾燥ゲ
ルの比表面積を窒素ガスを用いたBET法で求め
たところ65m²／ｇであつた。このゲルを内径7.5mm、長さ50cmのステンレス
製カラムに充填してデキストランやポリエチレン
グリコールの水溶液を測定したところ、分子量の
大きい方が先に溶出した。デキストランの排除限
界分子量は1.5×10⁶であつた。また0.075N硫酸ナ
トリウムおよび0.1Mリン酸ナトリウムを含む水
溶液を溶媒として、アルブミン、オブアルブミン
及びミオグロビンの分析をUV検出器（280nｍ）
を用いて行つたところ、分子量の高い順にかつ高
い回収率で溶出された。サンプルの測定は流速１
ml／minでおこなわれいずれも20分以内で分析を
終了した。実施例２酢酸ビニル100ｇ及びトリアリルイソシアヌレ
ート32ｇ（Ｘ＝0.25）、酢酸ブチル99ｇポリ酢酸
ビニル（重合度500）4.0ｇ並びに２，2′−アゾビ
スイソブチロニトリル2.6ｇよりなる均一混合液
を実施例１と同様に懸濁重合し、得られた粒子の
加水分解反応を行つた。得られたゲルの物性は、
Ｄ_W＝15.1μｍ、q_OH＝10.8meq／ｇ、W_R＝1.92
ｇ／ｇ及び比表面積42m²／ｇであつた。このゲル
を実施例１と同様にカラムに充填し、デキストラ
ンを分析に求めたMlimは８×10⁵であつた。比較例１酢酸ビニル90ｇ及びトリアリルイソシアヌレー
ト4.5ｇ（Ｘ＝0.017）、ドルエン60ｇ並びに過酸
化ベンゾイル0.9ｇよりなる均一混合液をポリビ
ニルアルコール（重合度500、ケン化率89％）２
％を含む水溶液210ｇと共に１フラスコに入れ
60℃、16時間の懸濁重合を行つた。得られた粒子
をカセイソーダ50ｇ、メタノール100ｇ及び100ｇ
の混合液中で60℃でケン化反応を行つた。得られ
たゲルの物性は_W＝14.8μｍ、q_OH＝18.2meq／
ｇ、W_R＝3.31ｇ／ｇ及び比表面積0.1m²／ｇで乾
燥時にはゲル内にほとんどポアがないことが示さ
れた。さらにこのゲルを本発明と同様に内径7.5
mm長さ50cmのステンレス製カラム充填して水を流
そうとしたが、約0.1ml／min以上の流速では圧
力が著しく上昇し、極めて低流速でしか分析に使
用できなかつた。ポリエチレングリコール水溶液
を分析して求めたMlimは約1000でありアルブミ
ン、オブアルブミン、ミオグロビンを分析したと
ころいずれもほとんど同じ溶出容量（下表）で溶
出された。このことからこのゲルはこれらの蛋白
質相互の分離には用い得ないことがわかつた。ま
たそれぞれのサンプルの測定には２〜３時間の長
時間を要した。

【表】比較例２比較例１においてトルエン60ｇのかわりにトル
エン30ｇ用いた以外は、比較例１と同様に行つて
ゲルを得た。ゲルの物性は_W＝14.1μｍ q_OH＝
19.5meq／ｇ及びW_R＝2.65ｇ／ｇで、比表面積は
ほとんど０でこのゲルも乾燥時にはポアをもたな
かつた。このゲルのMlimを比較例１と同様にし
て求めたところ約800であつた。アルブミン等蛋
白は当然のことながらほとんど同じ溶出容量で溶
出され、蛋白質相互の分離には用い得ないことが
示された。

Claims

【特許請求の範囲】１カルボン酸ビニルエステルと下記式(a)で表さ
れるイソシアヌレート環を有する化合物（ただしR₁、R₂およびR₃は、それぞれ独立に、−
CH₂−CH＝CH₂、−CH₂−Ｃ≡CH又は
【式】を示す）との共重合体を加水分解して得られる架橋ポリビ
ニルアルコールゲルにおいて、カルボン酸ビニル
エステルと前記化合物(a)の量を架橋度Ｘが0.25≦
Ｘ≦0.4 （ただしＸ＝W₂／M₂×３／W₁／M₁×n₁＋W₂／M₂×３ M₁：カルボン酸ビニルエステルの分子量 M₂：化合物(a)の分子量 W₁：重合に用いたカルボン酸ビニルエステルの
重量（ｇ） W₂：重合に用いた化合物(a)の重量（ｇ） n₁：カルボン酸ビニルエステル１分子が有するビ
ニル基の数）の範囲になるように用い、更に、単量体100重量
部に対し、単量体を溶解するが水には溶解しにく
い有機溶媒20〜200重量部と、単量体に溶解する
線状重合体10重量部以下との混合物を単量体に加
えて懸濁共重合を行い、かつ加水分解して得られ
るゲルが下記の(A)〜(D)の物性を有することを特徴
とするゲルパーミエーシヨンクロマトグラフイー
用親水性充填剤の製造方法。 (A) 水酸基密度（q_OH）10.2≦q_OH≦11.2meq／ｇ (B) 保水量（W_R）0.5≦W_R≦2.5ｇ／ｇ (C) 比表面積（Ｓ）５≦Ｓ≦1000m²／ｇ (D) 排除限界分子量（Mlim）10⁴≦Mlim≦10⁸