JPH0121897B2 - - Google Patents

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JPH0121897B2
JPH0121897B2 JP14813680A JP14813680A JPH0121897B2 JP H0121897 B2 JPH0121897 B2 JP H0121897B2 JP 14813680 A JP14813680 A JP 14813680A JP 14813680 A JP14813680 A JP 14813680A JP H0121897 B2 JPH0121897 B2 JP H0121897B2
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JP14813680A
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JPS5772048A (en
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Sugio Mabe
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Olympus Corp
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Olympus Optical Co Ltd
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Publication of JPS5772048A publication Critical patent/JPS5772048A/ja
Publication of JPH0121897B2 publication Critical patent/JPH0121897B2/ja
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    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/17Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
    • G01N21/25Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
    • G01N21/27Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands using photo-electric detection ; circuits for computing concentration
    • G01N21/272Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands using photo-electric detection ; circuits for computing concentration for following a reaction, e.g. for determining photometrically a reaction rate (photometric cinetic analysis)

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  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Mathematical Physics (AREA)
  • Theoretical Computer Science (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
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  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は生化学成分の分析技術、特に吸光度の
時間的変化量を測定して測定対象成分の有無、濃
度または活性値を精度良く、正確にしかも広い範
囲に亘つて測定する方法に関するものである。
このような吸光度の時間的変化量を測定して濃
度または活性値を求める方法は反応速度測定法と
呼ばれ、例えばダルタミン酸オキサロ酢酸トラン
スアミナーゼ(GOT)やグルタミン酸ピルビン
酸トランスアミーゼ(GPT)等の酵素量の測定
において採用されている。この反応速度測定法
は、反応終了時点の吸光度を読取つて、その値か
ら所定項目の定量を行なう終末点測定法に比べ、
正常値付近のような低値において精度が劣るた
め、従来から種々の改良が提案されている。
例えば、特開昭54−113383号公報には、少く共
三点において吸光度の測光を行ない、最初の二点
の吸光度から求めた吸光度変化が所定の値よりも
大きいか小さいかを判定し、大きい場合、すなわ
ち測定対象成分の濃度または活性値が大きい場合
にはその吸光度変化量から測定対象の濃度または
活性値を求め、小さい場合、すなわち測定対象成
分の濃度または活性値が低値の場合には第1と第
3の測光点から求めた吸光度変化量から濃度また
は活性値を求めるようにした酵素量測定方法が記
載されている。かゝる測定方法において、第1と
第2の測光点との間での吸光変化量を比較する所
定の値は、通常は正常値上限付近が精度的に重要
視されることからこの付近の値が設定される。し
たがつて、この測定方法によれば、低値では第1
と第3の測光点での吸光度変化量から測定対象成
分の濃度または活性値を求めることになり、この
吸光度変化量は測定時間が長いことから比較的大
きく、したがつて精度の高い分析が可能である。
しかし、試薬濃度的には、もつと高値まで例えば
第3の測光点まで直線反応を継続する場合もあ
る。このような場合には、第1と第2の測光点と
の間での吸光度変化量が設定値以上であつても、
第3の測定点での吸光度を用いて第1と第3の測
光点との間の吸光度変化量を採用した方が、変化
量として大きな値をとることができるから測定精
度を向上させることができるが、この測定方法に
おいては、第1と第2の測光点との間の吸光度変
化量が設定値以下のときにのみ第3の測定点での
吸光度が採用されるため、特に設定値をわずかに
越えた付近すなわち正常値上限をわずかに越えた
付近の精度が悪い欠点がある。しかし、この欠点
を除去するために設定値を第3の測光点まで直線
反応を行なう最大値にすると、試薬の劣化や調整
誤差等により間違つた結果を引き起す恐れがあ
る。
本発明の目的は、上述した種々の不具合を解決
し、試薬濃度を十分利用して低値はもとより高値
においても高精度の分析ができる成分分析方法を
提供しようとするものである。
本発明の成分分析方法は、分析を行なうべき検
液をその反応過程において複数回測光して複数の
測光値データを記憶すると共にその最終測光値デ
ータと基準値とを比較し、最終測光値データが基
準値に達しないときは、この最終測光値データを
含む複数の測光値データから所定の測光値データ
を選択してこの選択された測光値データに基いて
検液の成分分析を行ない、前記最終測光値データ
が前記基準値を超えるときは、この最終測光値デ
ータを含まない複数の測光値データから所定の測
光値データを選択してこの選択された測光値デー
タに基いて検液の成分分析を行なうことを特徴と
するものである。
本発明の成分分析方法はさらに、分析を行なう
べき検液をその反応過程において分析項目に応じ
て予じめ定めた最終測光時間の範囲内で基準値と
比較しながら複数回測光して複数の測光値データ
を記憶し、測光値データが前記基準値を超えたと
きは、当該測光値データを含まないそれまでの測
光値データに基いて検液の成分分析を行ない、前
記最終測光時間における最終測光値データが前記
基準値を超えないときは、当該最終測光値データ
を含む複数の測光値データから所定の測光値デー
タ選択してこの選択された測光値データに基いて
検液の成分分析を行なうことを特徴とするもので
ある。
以下図面を参照して本発明を詳細に説明する。
第1図は本発明の成分分析方法の一例を説明す
るための線図であり、横軸は反応時間を、縦軸は
吸光度(O.D)をそれぞれ表わし、符号a,bお
よびcはGOT反応曲線のモデルを示す。本例で
は、第1〜第5の測光点1〜5を設定する。これ
ら測光点は装置構成上1つの測光位置に検液を静
止させて間欠的に測光するようにして設定しても
よく、あるいは第1〜第5の測光位置を設け、こ
れら測光位置に検液を順次搬送させて測光するよ
うにしてもよい。また、各測光点間の間隔は等間
隔でもよいし、所要に応じて異ならせてもよい。
第1図において吸光度値Arefは検液の吸光度を
判定する基準レベルであり、吸光度値Aendは検
液の反応終末吸光度レベルである。なお、本例で
は基準レベルArefは反応終末吸光度レベルAend
よりも若干高くするが、反応終末吸光度レベル
Aendと同一レベルに設定してもよい。
本発明の第1の方法においては、全ての検液に
対して各測光点での吸光度を記憶すると共に、第
5の測光点5での吸光度と基準レベルArefとを
比較し、この比較結果に基いて高値検体に対して
は第1〜第3の測光点1〜3での吸光度を用いて
GOT濃度または活性値を求め、低値検体に対し
ては第1、4および5の測光点1、4および5で
の吸光度を用いてGOTの濃度または活性値を求
める。すなわち、第5の測光点5での吸光度が基
準レベルArefよりも大きいときは、第1および
第4の測光点1および4の吸光度を用いて濃度ま
たは活性値を求めると共に、第4および第5の測
光点4および5の吸光度を用いて同様に濃度また
は活性値を求め、これら両者を比較して直線反応
か否かをチエツクし、直線反応であるとき、すな
わち両者の値が等しいときはいずれか一方の値を
選択するか、または第1および第5の測光点1お
よび5の吸光度を用いて濃度または活性値を算出
する。したがつて、この算出方法は反応曲線c以
下の濃度または活性値の検体に適用される。ま
た、第5の測光点5までの吸光度が基準レベル
Arefよりも小さいときは、第3の測光点3での
吸光度と基準レベルArefとを比較する。こゝで、
第3の測光点3での吸光度の方が基準レベル
Arefよりも大きければ、第1および第2の測光
点1および2の吸光度を用いて算出した濃度また
は活性値と、第2および第3の測光点2および3
の吸光度を用いて算出した濃度または活性値とを
比較して直線反応か否かをチエツクし、直線反応
であるときはそのいずれか一方の値を選択する
か、または第1および第3の測光点1および3の
吸光度を用いて濃度または活性値を算出する。し
たがつて、この算出方法は反応曲線bとcとの間
の濃度または活性値の検体に適用される。
なお、第5の測光点5での吸光度が基準レベル
Aref以上であつて、直線反応でないこと、すな
わち第1および第4の測光点1および4の吸光度
から求めた濃度または活性値と、第4および第5
の測光点4および5の吸光度から求めた濃度また
は活性値とが異なる場合には、高値検体における
と同様に第1および第3の測光点での吸光度から
濃度または活性値を算出してもよいし、検体を再
検するような指示を出してもよい。また、高値検
体の場合において、第3の測光点3での吸光度が
基準レベルArefよりも小さいときは、異常値と
して検体を希釈し再検するような指示を出した
り、あるいは第2の測光点2での吸光度と基準レ
ベルArefとを比較し、吸光度が基準レベルより
も大きいときは第1および第2の測光点1および
2の吸光度から濃度または活性値を算出すること
もできる。
本発明の第2の方法においては、各測光点での
吸光度と基準レベルArefとを比較し、基準レベ
ルArefよりも吸光度が大きいときはその値を記
憶する。最終測光点である第5の測光点5よりも
以前のある測光点で、吸光度が基準レベルAref
を超えたときは、当該測光点よりも以前の任意ま
たは所定の測光点での吸光度を用いて濃度または
活性値を算出し、第5の測光点5においても吸光
度が基準レベルArefを超えないときは、この第
5の測光点5での吸光度を含む所定の測光点での
吸光度、例えば第1から第5までの測光点1から
5の比較的大きい吸光度変化量から濃度または活
性値を算出する。また、第5の測光点5において
吸光度が基準レベルArefを超えたときは、例え
ば第1から第4までの測光点1から4での比較的
大きい吸光度変化量から濃度または活性値を算出
する。
この第2の方法によれば、上記の第1の方法が
全ての検液に対して第5の測光点5での吸光度と
基準レベルArefとを比較し、高温の場合には次
に第3の測光点3での吸光度と基準レベルAref
とを比較して濃度または測定値を算出するのに比
べて、各測光点での吸光度を基準レベルArefと
比較するものであるから、第1の方法よりも濃度
または活性値を早く算出することができ、検体処
理速度が速くなる利点がある。
なお、本発明は上述した例にのみ限定されるも
のではなく、幾多の変更または変形が可能であ
る。例えば上述した例では測光点を5つ設定した
が、この測光点の数は分析項目に応じて設定する
ことができる。また、複数の測光点を予じめ設定
し、この複数の測光点のなかで分析項目に応じて
最終測光点を設定することもできる。更に、上述
した例ではGOTのような吸光度減少反応に本発
明を適用したが、本発明は第2図に示すような吸
光度増加反応の分析にも有効に適用することがで
きる。この場合には、基準レベルArefを反応最
終吸光度Amaxと等しいかこれよりも若干知い値
で、反応曲線が彎曲しだす点付近に設定すればよ
い。
以上詳細に説明したように、本発明では従来の
ように反応の初期において長い測定時間のデータ
を使用するか否かを判定するものではなく、全て
の検液についてほゞ反応終期の測光値データを用
いて濃度または活性値を算出するものであるか
ら、試薬濃度を十分使つた分析ができ、したがつ
て低値のみならず高値での分析精度をも向上させ
ることができる。
【図面の簡単な説明】
第1図は本発明の成分分析方法の一例を説明す
るための線図、第2図は同じく他の例を説明する
ための線図である。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1 分析を行なうべき検液をその反応過程におい
    て複数回測光して複数の測光値データを記憶する
    と共にその最終測光値データと基準値とを比較
    し、最終測光値データが基準値に達しないとき
    は、この最終測光値データを含む複数の測光値デ
    ータから所定の測光値データを選択してこの選択
    された測光値データに基いて検液の成分分析を行
    ない、前記最終測光値データが前記基準値を越え
    るときは、この最終測光値データを含まない複数
    の測光値データから所定の測光値データを選択し
    てこの選択された測光値データに基いて検液の成
    分分析を行なうことを特徴とする成分分析方法。 2 分析を行なうべき検液をその反応過程におい
    て分析項目に応じて予じめ定めた最終測光時間の
    範囲内で基準値と比較しながら複数回測光して複
    数の測光値データを記憶し、測光値データが前記
    基準値を越えたときは、当該測光値データを含ま
    ないそれまでの測光値データに基いて検液の成分
    分析を行ない、前記最終測光時間における最終測
    光値データが前記基準値を越えないときは、当該
    最終測光値データを含む複数の測光値データから
    所定の測光値データを選択してこの選択された測
    光値データに基いて検液の成分分析を行なうこと
    を特徴とする成分分析方法。
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JP2732448B2 (ja) * 1987-04-28 1998-03-30 株式会社島津製作所 自動レート分析法
CN102680415A (zh) * 2011-03-16 2012-09-19 中国农业科学院作物科学研究所 一种用比色法测定生物组织内草酰乙酸含量的方法

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