JPH0134337B2 - - Google Patents
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- JPH0134337B2 JPH0134337B2 JP55148135A JP14813580A JPH0134337B2 JP H0134337 B2 JPH0134337 B2 JP H0134337B2 JP 55148135 A JP55148135 A JP 55148135A JP 14813580 A JP14813580 A JP 14813580A JP H0134337 B2 JPH0134337 B2 JP H0134337B2
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- JP
- Japan
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- absorbance
- reagent
- change
- amount
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/251—Colorimeters; Construction thereof
- G01N21/253—Colorimeters; Construction thereof for batch operation, i.e. multisample apparatus
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
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- G01N21/27—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands using photo-electric detection ; circuits for computing concentration
- G01N21/274—Calibration, base line adjustment, drift correction
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/11—Automated chemical analysis
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
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- Y10T436/11—Automated chemical analysis
- Y10T436/113332—Automated chemical analysis with conveyance of sample along a test line in a container or rack
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- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は生化学成分の分析技術、特に複数の測
光位置間での吸光度の時間的変化量を測定して測
定対象成分の有無、濃度または活性値を精度良
く、正確に測定する方法に関するものである。
光位置間での吸光度の時間的変化量を測定して測
定対象成分の有無、濃度または活性値を精度良
く、正確に測定する方法に関するものである。
このような吸光度の時間的変化量を測定して濃
度または活性値を求める方法は反応速度測定法と
呼ばれ、例えばグルミタン酸オキサロ酢酸トラン
スアミナーゼ（GOT）やグルミタン酸ピルビン
酸トランスアミナーゼ（GPT）等の酸素量の測
定において採用されている。この反応速度測定法
を採用する分析装置としては、１つの測光位置を
設け、この位置に検体を所定時間静止させて連続
的または間欠的に吸光度を測定してその時間的変
化量を検出し、この変化量に基いて濃度または活
性値を算出するようにしたものがある。しかし、
精度の高い分析を行なうためには、十分大きな吸
光度の変化量を得る必要があり、このためには、
１つの測光位置に各検体を相当長い時間静止させ
ておく必要がある。このため、かかる分析装置
は、検体の処理速度が遅く、したがつて検体の処
理能力が悪い欠点がある。
度または活性値を求める方法は反応速度測定法と
呼ばれ、例えばグルミタン酸オキサロ酢酸トラン
スアミナーゼ（GOT）やグルミタン酸ピルビン
酸トランスアミナーゼ（GPT）等の酸素量の測
定において採用されている。この反応速度測定法
を採用する分析装置としては、１つの測光位置を
設け、この位置に検体を所定時間静止させて連続
的または間欠的に吸光度を測定してその時間的変
化量を検出し、この変化量に基いて濃度または活
性値を算出するようにしたものがある。しかし、
精度の高い分析を行なうためには、十分大きな吸
光度の変化量を得る必要があり、このためには、
１つの測光位置に各検体を相当長い時間静止させ
ておく必要がある。このため、かかる分析装置
は、検体の処理速度が遅く、したがつて検体の処
理能力が悪い欠点がある。
このような欠点を除去するため、例えば第１図
に示すようにターンテーブル１に複数のキユベツ
ト２を保持し、ターンテーブル１を連続的または
間欠的に矢印方向に回動させながら、先ず位置Ａ
において試料と試薬とをキユベツト２に定量分注
し、その吸光度を位置Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆおよび
Ｇにおいて順次測定し、位置Ｈにおいてキユベツ
ト２内の検液を排出すると共にキユベツト２を洗
浄して次の検液の分注に備えるようにした分析装
置が提案された。この分析装置においては、同一
検体を複数の測光位置Ｂ〜Ｇに順次搬送してその
吸光度を測定するものであるから、分析処理能力
を向上させることができるが、各測光位置での迷
光の違い、プリアンプ等の電気的特性の違い、キ
ユベツト位置に対する光軸のずれ等に基く各測光
位置での検量線の直線性すなわち濃度と吸光度と
の関係の差異を補正する必要がある。また、反応
速度測定方法においては、試薬自体の吸光度の経
時変化が分析結果に誤差となつて現われるため、
この試薬自体の吸光度の時間的変化量も補正する
必要がある。
に示すようにターンテーブル１に複数のキユベツ
ト２を保持し、ターンテーブル１を連続的または
間欠的に矢印方向に回動させながら、先ず位置Ａ
において試料と試薬とをキユベツト２に定量分注
し、その吸光度を位置Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆおよび
Ｇにおいて順次測定し、位置Ｈにおいてキユベツ
ト２内の検液を排出すると共にキユベツト２を洗
浄して次の検液の分注に備えるようにした分析装
置が提案された。この分析装置においては、同一
検体を複数の測光位置Ｂ〜Ｇに順次搬送してその
吸光度を測定するものであるから、分析処理能力
を向上させることができるが、各測光位置での迷
光の違い、プリアンプ等の電気的特性の違い、キ
ユベツト位置に対する光軸のずれ等に基く各測光
位置での検量線の直線性すなわち濃度と吸光度と
の関係の差異を補正する必要がある。また、反応
速度測定方法においては、試薬自体の吸光度の経
時変化が分析結果に誤差となつて現われるため、
この試薬自体の吸光度の時間的変化量も補正する
必要がある。
このため、かかる分析装置においては、従来以
下の手順に従つて分析操作を行なつている。
下の手順に従つて分析操作を行なつている。
(1) 装置の０％、100％合わせ。
(2) 試薬ブランクの測定。
試薬ブランク液（試薬自体）の単位時間当り
の吸光度変化量ΔEBを測定する。
の吸光度変化量ΔEBを測定する。
(3) 濃度または活性値変換係数の算出。
これには試料量vS、試薬量vR、光路長ｄ、検
液の分子吸光係数εを用いて、Ｉ＝VT／（ε
×ｄ×vS）より求める場合（ただしVT＝vS＋
vR）と、既知の濃度（活性値）ｃの標準液また
はコントロール血清等を試料として使用して単
位時間当りの吸光度変化量ΔESを求め、Ｉ＝
ｃ／（ΔES−ΔEB）より算出する場合とがあ
る。
液の分子吸光係数εを用いて、Ｉ＝VT／（ε
×ｄ×vS）より求める場合（ただしVT＝vS＋
vR）と、既知の濃度（活性値）ｃの標準液また
はコントロール血清等を試料として使用して単
位時間当りの吸光度変化量ΔESを求め、Ｉ＝
ｃ／（ΔES−ΔEB）より算出する場合とがあ
る。
(4) 未知試料の測定。
未知試料の単位時間当りの吸光度変化量ΔEv
を求め、Ｉ×（ΔEv−ΔEB）より測定結果を得
る。
を求め、Ｉ×（ΔEv−ΔEB）より測定結果を得
る。
上記試薬ブランクは、一般には空気または水を
通過する光量を基準に、試薬自体を複数回測光し
て求めるが、第１図に示す分析装置においてキユ
ベツト２に試薬のみを分注し、キユベツト２に空
気または水のみを入れたときの透過光量を基準に
して各測光位置での試薬吸光度を測定し、これら
試薬吸光度の測光位置の差から試薬ブランクを求
める場合には、各測光位置での検量線の直線性が
厳密に一致していないと正確に求めることができ
ない。これを解決する方法として、試薬ブランク
を含め、全検体を定められた複数の測光位置での
吸光度からその時間的変化量を求めて分析するよ
うにすれば、測光位置間の差は常に一定と考えら
れるから、試薬ブランクを吸光度変化量として記
憶することも可能であるが、複数の測光位置での
複数の吸光度から検体ごとに適切な吸光度を選択
して分析する場合には、検体ごとに測光位置が異
なるので試薬ブランクとして吸光度変化量を記憶
することはできない。
通過する光量を基準に、試薬自体を複数回測光し
て求めるが、第１図に示す分析装置においてキユ
ベツト２に試薬のみを分注し、キユベツト２に空
気または水のみを入れたときの透過光量を基準に
して各測光位置での試薬吸光度を測定し、これら
試薬吸光度の測光位置の差から試薬ブランクを求
める場合には、各測光位置での検量線の直線性が
厳密に一致していないと正確に求めることができ
ない。これを解決する方法として、試薬ブランク
を含め、全検体を定められた複数の測光位置での
吸光度からその時間的変化量を求めて分析するよ
うにすれば、測光位置間の差は常に一定と考えら
れるから、試薬ブランクを吸光度変化量として記
憶することも可能であるが、複数の測光位置での
複数の吸光度から検体ごとに適切な吸光度を選択
して分析する場合には、検体ごとに測光位置が異
なるので試薬ブランクとして吸光度変化量を記憶
することはできない。
上記の不具合を解決する方法として、空気また
は水の透過光量ではなく、試薬ブランク液の透過
光量を基準にして検液の吸光度を算出するように
した分析方法が特開昭55−87030号公報において
提案された。しかし、この分析方法においては試
薬の劣化または調整ミス等で試薬ブランク出力が
正しい値になつていなくとも測定値を算出してし
まうため、分析精度および信頼性の点に問題があ
る。
は水の透過光量ではなく、試薬ブランク液の透過
光量を基準にして検液の吸光度を算出するように
した分析方法が特開昭55−87030号公報において
提案された。しかし、この分析方法においては試
薬の劣化または調整ミス等で試薬ブランク出力が
正しい値になつていなくとも測定値を算出してし
まうため、分析精度および信頼性の点に問題があ
る。
本発明の目的は上述した種々の不具合を解決
し、各測光位置での検量線の直線性が完全に一致
していなくても精度の良い分析結果が得られる成
分分析方法を提供しようとするものである。
し、各測光位置での検量線の直線性が完全に一致
していなくても精度の良い分析結果が得られる成
分分析方法を提供しようとするものである。
本発明は、試料と試薬とを含む検液の吸光度を
複数の測光位置において順次測定して吸光度の時
間的変化量を検出し、この吸光度の時間的変化量
に基いて検液中の所定成分の濃度または活性値を
分析するにあたり、前記複数の測光位置において
水または空気に対する試薬の吸光度を順次測定し
て予め記憶し、次に前記複数の測光位置において
検液の吸光度を順次測定して、その各測光位置で
の検液の吸光度と予め記憶した対応する測光位置
での前記試薬の吸光度との差を求めて各測光位置
における検液の吸光度を補正し、これら補正され
た検液の吸光度に基いて該検液の前記吸光度の時
間的変化量を検出することを特徴とするものであ
る。
複数の測光位置において順次測定して吸光度の時
間的変化量を検出し、この吸光度の時間的変化量
に基いて検液中の所定成分の濃度または活性値を
分析するにあたり、前記複数の測光位置において
水または空気に対する試薬の吸光度を順次測定し
て予め記憶し、次に前記複数の測光位置において
検液の吸光度を順次測定して、その各測光位置で
の検液の吸光度と予め記憶した対応する測光位置
での前記試薬の吸光度との差を求めて各測光位置
における検液の吸光度を補正し、これら補正され
た検液の吸光度に基いて該検液の前記吸光度の時
間的変化量を検出することを特徴とするものであ
る。
第２図は本発明の成分分析方法を説明するため
の線図である。本例では第１図に示した分析装置
に適用した場合を示し、縦軸は吸光度を、横軸は
時間をそれぞれ示す。本発明の成分分析方法を第
１図に示す構成の分析装置に適用する場合の測定
手順は以下の通りである。
の線図である。本例では第１図に示した分析装置
に適用した場合を示し、縦軸は吸光度を、横軸は
時間をそれぞれ示す。本発明の成分分析方法を第
１図に示す構成の分析装置に適用する場合の測定
手順は以下の通りである。
(1) 装置の０％、100％合わせ。
これは従来と同じである。
(2) 試薬ブランクの測定。
本発明では試薬ブランク液の単位時間当りの
吸光度変化量を測定するのではなく、キユベツ
トに空気または水のみを収容したときの透過光
量を基準として、すなわちこのときの透過率を
100％として各測光位置Ｂ〜Ｇでの試薬ブラン
ク液の吸光度を測定してそれぞれ記憶する。こ
の場合、各測光位置での検量線の直線性は完全
に一致していないので、各測光位置での試薬ブ
ランクは第２図の破線Ｊのようになる。
吸光度変化量を測定するのではなく、キユベツ
トに空気または水のみを収容したときの透過光
量を基準として、すなわちこのときの透過率を
100％として各測光位置Ｂ〜Ｇでの試薬ブラン
ク液の吸光度を測定してそれぞれ記憶する。こ
の場合、各測光位置での検量線の直線性は完全
に一致していないので、各測光位置での試薬ブ
ランクは第２図の破線Ｊのようになる。
(3) 濃度または活性値変換係数の算出。
既知の濃度（活性値）ｃの試料を用いて測定
する場合には、各測光位置ごとにその吸光度を
測定し、同一測光位置での記憶した試薬ブラン
ク液の吸光度との差をそれぞれ求め、その値の
測光位置間の差から単位時間当りの吸光度変化
量を算出し、この吸光度変化量に基いて変換係
数を求める。
する場合には、各測光位置ごとにその吸光度を
測定し、同一測光位置での記憶した試薬ブラン
ク液の吸光度との差をそれぞれ求め、その値の
測光位置間の差から単位時間当りの吸光度変化
量を算出し、この吸光度変化量に基いて変換係
数を求める。
(4) 未知試料の測定。
未知試料（検体）を測光位置Ｂ〜Ｇで順次測
光すると、各測光位置での吸光度は例えば第２
図に実線Ｋで示すようになる。なお、第２図の
一点鎖線Ｌは各測光位置での検量線の直線性が
完全に一致している場合に予想される検体の吸
光度変化特性を示す。本発明では、先ず各測光
位置ごとに測定した検体の吸光度と同一測光位
置での記憶した試薬ブランクとの差を求めて検
体の吸光度を補正する。このようにすれば、第
３図に実線Ｍで示すようにほぼ検体にのみ依存
する吸光度変化特性を得ることができるから、
これら補正された吸光度の測光位置間の差を求
めて単位時間当りの検体の吸光度変化量を算出
し、この値に基いて検体中の所定成分の濃度ま
たは活性値を求める。
光すると、各測光位置での吸光度は例えば第２
図に実線Ｋで示すようになる。なお、第２図の
一点鎖線Ｌは各測光位置での検量線の直線性が
完全に一致している場合に予想される検体の吸
光度変化特性を示す。本発明では、先ず各測光
位置ごとに測定した検体の吸光度と同一測光位
置での記憶した試薬ブランクとの差を求めて検
体の吸光度を補正する。このようにすれば、第
３図に実線Ｍで示すようにほぼ検体にのみ依存
する吸光度変化特性を得ることができるから、
これら補正された吸光度の測光位置間の差を求
めて単位時間当りの検体の吸光度変化量を算出
し、この値に基いて検体中の所定成分の濃度ま
たは活性値を求める。
以上本発明においては、各測光位置ごとに試薬
ブランク液の空気または水に対する吸光度を記憶
する必要があるため記憶容量が若干増加するが、
総合的には上述したように検体の処理能力が上が
る効果と、各測光位置での検量線の直線性が完全
に一致していなくても精度のよい分析ができる効
果とがあるから、記憶容量の若干の増加は何ら問
題にはならない。
ブランク液の空気または水に対する吸光度を記憶
する必要があるため記憶容量が若干増加するが、
総合的には上述したように検体の処理能力が上が
る効果と、各測光位置での検量線の直線性が完全
に一致していなくても精度のよい分析ができる効
果とがあるから、記憶容量の若干の増加は何ら問
題にはならない。
なお、上述した説明では試薬ブランク液吸光度
を記憶するようにしたが、測光位置間の差は位置
固有のフアクターとして、予じめ吸光度既知の検
液を測定して各測光位置間の差を記憶することも
できる。これは、各測光位置での吸光度が使用す
る既知検液の吸光度となるようにそのゲインを調
整することでもよい。
を記憶するようにしたが、測光位置間の差は位置
固有のフアクターとして、予じめ吸光度既知の検
液を測定して各測光位置間の差を記憶することも
できる。これは、各測光位置での吸光度が使用す
る既知検液の吸光度となるようにそのゲインを調
整することでもよい。
上述したように本発明においては、各測光位置
での検量線の直線性が完全に一致していなくても
精度のよい分析結果を得ることができる。ここ
で、各測光位置での検量線の直線性の差は、試薬
ブランク液の吸光度と検体の吸光度とに大きな差
がある場合に大きく作用するが、試薬ブランクと
検体の吸光度とに大きな差が出るのは異常高濃度
（高活性）の場合であり、誤差の割合としては少
ない。また、最も精度が要求される正常値上限か
ら境界値附近では吸光度変化量も少なく、試薬ブ
ランクと検体の吸光度との差は小さいから、本発
明により測光位置間の補正を行なえば精度の良い
分析を行なうことができる。
での検量線の直線性が完全に一致していなくても
精度のよい分析結果を得ることができる。ここ
で、各測光位置での検量線の直線性の差は、試薬
ブランク液の吸光度と検体の吸光度とに大きな差
がある場合に大きく作用するが、試薬ブランクと
検体の吸光度とに大きな差が出るのは異常高濃度
（高活性）の場合であり、誤差の割合としては少
ない。また、最も精度が要求される正常値上限か
ら境界値附近では吸光度変化量も少なく、試薬ブ
ランクと検体の吸光度との差は小さいから、本発
明により測光位置間の補正を行なえば精度の良い
分析を行なうことができる。
第１図は本発明の成分分析方法を適用し得る分
析装置の要部の一例の構成を示す線図、第２図お
よび第３図は本発明の成分分析方法を説明するた
めの線図である。 １……ターンテーブル、２……キユベツト、Ａ
……試料・試薬分注位置、Ｂ〜Ｇ……測光位置、
Ｈ……洗浄位置。
析装置の要部の一例の構成を示す線図、第２図お
よび第３図は本発明の成分分析方法を説明するた
めの線図である。 １……ターンテーブル、２……キユベツト、Ａ
……試料・試薬分注位置、Ｂ〜Ｇ……測光位置、
Ｈ……洗浄位置。
Claims (1)
- １ 試料と試薬とを含む検液の吸光度を複数の測
光位置において順次測定して吸光度の時間的変化
量を検出し、この吸光度の時間的変化量に基いて
検液中の所定成分の濃度または活性値を分析する
にあたり、前記複数の測光位置において水または
空気に対する試薬の吸光度を順次測定して予め記
憶し、次に前記複数の測光位置において検液の吸
光度を順次測定して、その各測光位置での検液の
吸光度と予め記憶した対応する測光位置での前記
試薬の吸光度との差を求めて各測光位置における
検液の吸光度を補正し、これら補正された検液の
吸光度に基いて該検液の前記吸光度の時間的変化
量を検出することを特徴とする成分分析方法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55148135A JPS5772047A (en) | 1980-10-24 | 1980-10-24 | Component analyzing method |
| DE19813142116 DE3142116A1 (de) | 1980-10-24 | 1981-10-23 | "verfahren zum analysieren chemischer substanzen in fluessigkeitsporben" |
| US06/550,507 US4539296A (en) | 1980-10-24 | 1983-11-10 | Method of analyzing chemical substances |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55148135A JPS5772047A (en) | 1980-10-24 | 1980-10-24 | Component analyzing method |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5772047A JPS5772047A (en) | 1982-05-06 |
| JPH0134337B2 true JPH0134337B2 (ja) | 1989-07-19 |
Family
ID=15446044
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP55148135A Granted JPS5772047A (en) | 1980-10-24 | 1980-10-24 | Component analyzing method |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4539296A (ja) |
| JP (1) | JPS5772047A (ja) |
| DE (1) | DE3142116A1 (ja) |
Families Citing this family (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4798798A (en) * | 1983-08-17 | 1989-01-17 | Kraft, Inc. | Apparatus for monitoring a chemical process |
| JPH0776771B2 (ja) * | 1984-07-30 | 1995-08-16 | 株式会社東芝 | 自動化学分析装置 |
| JPH0690211B2 (ja) * | 1984-09-21 | 1994-11-14 | オリンパス光学工業株式会社 | 免疫学的分析装置およびその方法 |
| JPS61194336A (ja) * | 1985-02-25 | 1986-08-28 | Toshiba Corp | 自動化学分析装置 |
| JPH0629852B2 (ja) * | 1985-08-26 | 1994-04-20 | 富士写真フイルム株式会社 | 偏倚乾式分析要素を用いた液体試料中の被検物質の定量分析方法 |
| US4737464A (en) * | 1985-09-26 | 1988-04-12 | Molecular Devices Corporation | Solid-state optical assay imaging apparatus |
| US4826775A (en) * | 1986-03-04 | 1989-05-02 | Alfa-Laval Ab | Dilution apparatus and method |
| JPS6361956A (ja) * | 1986-09-03 | 1988-03-18 | Fuji Photo Film Co Ltd | 化学分析装置 |
| US5230863A (en) * | 1987-07-21 | 1993-07-27 | Si Industrial Instruments, Inc. | Method of calibrating an automatic chemical analyzer |
| JPS6468642A (en) * | 1987-09-09 | 1989-03-14 | Toshiba Corp | Reaction rate measuring method |
| US5106583A (en) * | 1989-03-08 | 1992-04-21 | Applied Biosystems, Inc. | Automated protein hydrolysis system |
| US5171531A (en) * | 1989-10-25 | 1992-12-15 | Hewlett-Packard Company | Apparatus for automatic delivery of a vial to an automated sampling system |
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