JPH01224667A - ケトン体の検出用器具 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、体液、殊に尿中のケトン体を検出するための
検出用器具に関する。

（従来の技術） ケトン体は、アセト酢酸、β−オキシ酢酸、アセトン等
の総称で、生体内では主に脂肪酸から生成される。

健常者の場合でも微量のケトン体がアセトンとして１日
０．０１〜０．０２９程度尿中に排出されるが、糖質代
謝が不完全な場合には血中のケトン体が増加すると共に
、尿中にも多量に排出されるようになる。

臨床的には種々の要因でケトン体が増えるが、とりわけ
糖尿病性ケトアシド−シスの診断に尿中のケトン体の検
査は有用である。

体液中のケトン体の検出には、ケトン体とニトロプルシ
ドナトリウムの反応が知られている。この反応はアルカ
リ性条件下で進行するが、主剤のニトロプルシドナトリ
ウムがアルカリ性条件下では急速に分解してしまうとい
う欠点があるため、この分解を防止すべく、ケトン体の
検出用器具に種々の改良が加えられてきた。

そのような従来の技術の例には、ニトロプルシドナトリ
ウムを酸性ｐＨの有機フィルム形成物質でアルカリ性条
件から保護する方法や、ニトロプルシドナトリウムと共
にアルカリ性緩衝剤としてＥ　Ｄ　’ｌ’　Ａナトリウ
ム塩を用い、更に保護剤としてジメチルホルムアミドを
加えろ方法などがある。

（発明が解決しようとする課題） しかし、このような従来のケトン体の検出法には種々の
問題かある。

まず、有機フィルム形成物質でニトロプルシドナトリウ
ムを保護する方法では、有機フィルム形成物質としてポ
リビニルピロリドン−酢酸ビニル共重合体や、メチルエ
チルエーテル−無水マレイン酸共重合体などを用いるが
、このような有機フィルム形成物質は多量に使用しない
と安定性が悪く、しかしながら、多量に使用することに
上りケトン体との反応速度が低下するという欠点を有す
る。

また、ＥＤＴＡナトリウム塩とジメチルホルムアミドを
用いる方法では、ニトロプルシドナトリウムの分解を完
全に止めることができず、長期間の保存で問題がある。

本発明の目的は、このような従来のケトン体の検出法を
改良し、体液、殊に尿中のケトンを容易に検出でき、臨
床検査の分野で用いることができるようなケトン体の検
出用器具を提供することにある。

（課題を解決するための手段） 本発明者らは、上述のような課題を解決し、その目的を
達成するために鋭意研究を進めた結果、一般式： ［式中、Ｒ１はフェニル基又はメチル基を表わし、Ｒ２
は水素、置換基を有することもある炭素数１〜１８個の
直鎖状または分岐状アルキル基又は置換基を有すること
もある炭素数２〜１８の直鎖状または分岐状アルケニル
基を表す。］ で示されるシラン誘導体を用いることにより、上述のよ
うな課題が解決されることを見い出し、更に研究を進め
た結果、ニトロプルシド塩、アルカリ性緩衝剤および該
シラン誘導体を含有することを特徴とするケトン体の検
出用器具を完成するに至った。

即ち、本発明はニトロプルシド塩、アルカリ性緩衝剤お
よびシラン誘導体（Ｉ）を吸液性担体に含浸させること
により、ケトン体との反応速度を低下させることなく、
ニトロプルシド塩の分解を防止することができるケトン
体の検出用器具を提供するものである。

本発明のケトン体の検出用器具は、ニトロプルシド塩層
とアルカリ性緩衝剤層の間にシラン誘導体（１）層を存
在させることにより、保存中のニトロプルシド塩の分解
を防止することができる。これはシラン誘導体（１）層
が酸性であり、かつ耐水性の層を形成するため、ニトロ
プルシド塩が直接アルカリ層に触れるのを防ぎ、かつ吸
湿などによりニトロプルシド塩がアルカリ層に溶出する
ことも防止するため、長期間の保存安定性に極めて優れ
ている。

本発明のケトン体の検出用器具は、臨床検査で用いる場
合、使用上の簡便性や試薬の安定性を考慮し、スティッ
クの形態とするのが好ましい。このようなスティックを
作製するには、まずアルカリ性緩衝剤を吸液性担体に含
浸し、乾燥させた後、シラン誘導体（１）を含む溶液を
担体に含浸し、乾燥させ、その後、ニトロプルシド塩を
含む溶液を担体に含浸し、乾燥させて試験紙を作る。こ
のような吸液性担体の例としては、濾紙、ガラス繊維紙
、ポリエステルフリースなどが挙げられる。次に、これ
らの試薬を含浸した試験紙をプラスチックシートなどの
支持体に貼合し、スティックの形態とする。

本発明のケトン体の検出用器具に用いるニトロプルシド
塩の例としては、ニトロプルシドナトリウムがある。

アルカリ性緩衝剤は本発明の目的にかなうものであれば
、特に限定されないが、通常水溶性アミノ酸及びアルカ
リ剤から組合せて選ぶことができる。水溶性アミノ酸の
例としては、グリシン、アラニン、ε−アミノカプロン
酸などが挙げられ、アルカリ剤の例としてはリン酸二ナ
トリウム、リン酸三ナトリウム、炭酸ナトリウム、四ホ
ウ酸ナトリウム、ＥＤＴＡナトリウム塩などが挙げられ
る。

シラン誘導体（Ｉ）の具体例としては、ジフェニルシラ
ンジオール、ジェトキシジフェニルシラン、ジメチルシ
ランジオール、ジメトキシジメチルシラン、ジブトキシ
ジフェニルシラン、ジオレイルオキシジフェニルシラン
、２−エチルアミノエトキシジフェニルシランなどが挙
げられる。

本発明のケトン体の検出用器具を作製するに際して、試
験紙に含浸させる試薬の濃度は一概に定めることができ
ないが、ニトロプルシド塩は通常０．１−１０９／ｄ１
２．好ましくは０５５〜３９／ｄＱの濃度で吸液性担体
に含浸させるのがよい。また、アルカリ性緩衝剤を構成
する水溶性アミノ酸は通常３〜４０　ｇ／ｄ（１，好ま
しく　ハ５〜３０９／ｄ（１（Ｄ濃度で、アルカリ剤は
通常３〜３０ｇ／ｄＱ、好ましくはＩＯ〜２５ｇ／ｄ＋
２の濃度でそれぞれ混合してアルカリ性緩衝剤とし、吸
液性担体に含浸させる。

シラン誘導体（Ｉ）は通常０．１〜１０ｙ／ｄｃ、好ま
しくは０．５〜３　ｇｄＱの濃度で吸液性担体に含浸さ
せるのがよい。

このようにして作製したケトン体の検出用器具は、これ
を被検体としての体液、特に尿中に浸し、その呈色を既
知のケトン体濃度に対する呈色と比較することにより、
ケトン体を検出することができる。

（実施例） 次に本発明の実施例を示すが、これらは本発明を何等限
定するものではない。

実施例１ 本発明のケトン体の検出用器具の例であるスティックは
、次のようにして作製した。

１、試薬の調製 （１）アルカリ性緩衝剤の調製 アミノ酸２５ｇ、リン酸二ナトリウム１２９およびリン
酸三ナトリウム５ｇを精製水１００ｍｇで溶解する。

（２）シラン誘導体（１）溶液の調製 ジクロルジフェニルシラン１２ｇに精製水２０ｔｔｔＱ
を加えて混和した後、固体成分をとり少量の精製水で洗
浄して風乾し、白色物質を得る。この白色物質をクロロ
ホルム２ｇに溶解する。

（３）ニトロプルシド塩溶液の調製 ニトロプルシドナトリウム１　、５９、ジメチルスルホ
キシド３０ｘ（ｌおよびエタノール７０ｘＱを混合して
溶解する。

２、スティックの作製 （１）アルカリ性緩衝剤を濾紙（東洋濾紙５１４Ａ）に
含浸させ、３７℃で一昼夜乾燥後、さらに８０℃で２時
間乾燥させ、次に（２）シラン誘導体（１）溶液を含浸
させ、８０℃で３０分間乾燥させる。更に（３）ニトロ
プルシド塩溶液を含浸させ、８０℃で３０分間乾燥後、
その小片をプラスチックシートに貼合してスティックを
作製した。

実施例２ （２）シラン誘導体（１）溶液を以下のように調製する
以外は実施例１の手順に従って、同様にスティックを作
製した。

（２）シラン誘導体（Ｉ）溶液の調製 ジクロルジフェニルシラン１２ｇにエタノール５Ｊ１１
２を滴下して加え、十分に撹拌する。更にエタノールを
加えて全ｆｆ１ｌ（２となるように溶解する。

実施例３ 実施例１で作製したスティックを、次のような既知の濃
度でケトン体としてアセト酢酸を含む尿に浸すと、３０
秒以内に呈色が観察され、ケトン体の検出ができること
がわかった。

また、実施例２で作製したスティックについても同様に
試験したところ、同様の結果が得られた。

（発明の効果） 本発明のケトン体の検出用器具は、従来のタイプのもの
に比べ保存安定性が優れている上、スティックの形態を
とることにより迅速かつ簡便に体液、殊に尿中のケトン
体の検出ができることから、臨床検査に大きく寄与でき
るものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ニトロプルシド塩、アルカリ性緩衝剤および一般式
   ： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） ［式中、Ｒ＿１はフェニル基又はメチル基を表わし、Ｒ
   ＿２は水素、置換基を有することもある炭素数１〜１８
   個の直鎖状または分岐状アルキル基又は置換基を有する
   こともある炭素数２〜１８の直鎖状または分岐状アルケ
   ニル基を表す。］ で示されるシラン誘導体を吸液性担体に含浸させて成る
   ケトン体の検出用器具。 ２、シラン誘導体を含浸させた吸液性担体を支持体に結
   合したスティック状である特許請求の範囲第１項記載の
   ケトン体の検出用器具。