JPH01229097A - 油脂中のコレステロールの分解法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は油脂中のコレステロールを分解する方法に関す
るものである。

〔従来の技術〕

近年健康に対する関心が高まっており、特に食品中に含
まれているコレステロールの過剰摂取が動脈硬化症や心
筋梗塞等の成人病の主要原因となっていることから、食
餌性コレステロールの摂取を抑えることが重大な関心事
となっている。このために動物性脂肪や卵製品が嫌われ
、替りにコレステロールを含まない植物性油脂を利用し
た食品の需要が伸びている。さらには既に食品中に含ま
れているコレステロールを分解、除去した低コレステロ
ール食品の開発も検討されている。この方法としては、
アースロバフタ−属のような微生物を用いる方法（特開
昭５７−８６２５７号公報）、アセトンのような有機溶
媒を用いてコレステロールを抽出除去する方法（特開昭
４７−１９０６２号公報）、ならびに炭酸ガスを用いる
超臨界抽出法による方法（特公昭６２−５１０９２号公
報）等が知られている。

〔発明が解決しようとする課題〕

しかしながら、このような従来のコレステロールを分解
、除去する方法は、食品中の限られた製品、具体的には
卵、肉、牛乳等に応用されているだけであり、コレステ
ロールが含まれている油脂からコレステロールを選択的
に分解、除去することは難しい。

さらに、これらの方法は、油脂中のコレステロール含意
を減少させることはできても、完全に除去することが蔑
しいという問題点がみられる。

本発明の目的は、上記のような問題点を解決するため、
油脂中のコレステロールを選択的にかつ完全に分解、除
去することが可能な油脂中のコレステロールの分解法を
提案しようとするものである。

〔課題を解決するための手段〕

本発明は、コレステロール分解能を有するロドコッカス
属の微生物、またはその培養により得られるコレステロ
ール分解酵素を油脂に作用させることを特徴とする油脂
中のコレステロール分解法である。

本発明のコレステロールの分解の対象となる油脂は、コ
レステロールを含む油脂であれば、油脂の種類、性状に
関係なく全ての油脂が含まれ、特にコレステロール含量
の多い動物性油脂、例えば豚脂、牛脂、乳脂、魚油等が
適している。

本発明において用いる微生物は、ロドコッカス属に属す
るコレステロール分解能を有する細菌であり、単独で用
いてもよく、組合わせて用いることも可能である。具体
的には、ロドコッカス・エクイ（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕ
ｓ　ｅｑｕｉ）、　ロドコッカス・エリトロホリス（Ｒ
ｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ　ｅｒｙｔｈｒｏｐｈｏｌｉｓ）
、　ロドコッカス°ロドクロウス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃ
ｕｓ　ｒｈｏｄｏｃｈｒｏｕｓ）。

ロドコッカス・コラリナス （Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ　ｃｏｒａｌｌｉｎｕｓ）な
どが例示される。

これらの微生物はそのままでもコレステロールの分解に
使用できるが、コレステロールを含む培地中で培養を行
って、菌体または培養液をコレステロールの分解に使用
するのが好ましい。

これらの微生物の培養は、培地として炭素源、窒素源、
無機塩、ビタミン類等を含む通常用いられている培地を
使用して、一般に採用されている条件によって行うこと
ができるが、誘導酵素であるコレステロール分解酵素の
産生を促進し、コレステロール分解能を高めるために、
培地中の炭素源としてコレステロールを培地中に０．０
５〜０．２重量％、好ましくは０．１重量％　を添加す
ることが望ましい。

培養条件としては、好気条件下で、回転数１００〜３０
０ｒｐｍ、好ましくは２００ｒｐｍの振どう培養器で、
培地の初発ｐＨが６〜８、培養温度が３０〜３７℃、培
養時間が２４〜７２時間で培養を行うのが好ましい。

培養終了後、培養液を遠心分１ｌｌ（例えば６０００ｒ
ｐｎ＋で３０分間）等により菌体と上澄液とに分離後、
菌体はコレステロール分解能を有する微生物菌体として
、上澄液は限外濾過等により濃縮後コレステロール分解
酵素液として利用できる。

これらの微産物菌体またはコレステロール分解酵素と油
脂とを混合振とうすることにより、油脂中のコレステロ
ールは選択的にかつ完全に分解される。

混合振とうには通常用いられている振どう培養器を利用
することができるが、好ましくは毎分２００回転の振ど
うが良い、振どう温度は、使用する油脂の融点よりも高
いことが望ましいが、温度が５０℃以上になるとコレス
テロール分解能は著しく低下するので、両者の中間にお
いて選択される。

混合振どう時間は１２〜７２時間、好ましくは２４〜４
８時間である。混合振どう後、微生物菌体または酵素を
分離することにより、コレステロールが分離された―脂
が得られる。

なお、油脂に微生物菌体または酵素を作用させる方法は
混合振とうに限らず、攪拌、混練など、他の方法でもよ
い。

また本発明の微生物菌体および分解酵素は、−船釣な固
定化法である担体結合法、架橋法、包括法等により固定
化して用いることも可能である。

〔発明の効果〕 本発明によれば、ロドコッカス属の微生物またはその培
養により得られるコレステロール分解酵素を用いたので
、油脂中のコレステロールを選択的にかつ完全に分解す
ることができ、コレステロールを含まない油脂が得られ
る。

こうして得られるコレステロールを全く含まない油脂、
特に動物性油脂を食品に応用することにより、コレステ
ロールの摂取を抑えることができる。

〔実施例〕

以下、本発明を実施例によって具体的に説明する。

なお、各例中、％は重量％を示す。油脂中のコレステロ
ール含意は、油脂をアルカリで鹸化し、不鹸化物をベン
ゼンで抽出後、パラトルエンスルホン酸によるＰＥＡＲ
３ＯＮの方法（ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ、、２５．８１３（１９５３））により比色定量を行
った・ またコレステロールの完全分解については、ＴＬＣにて
コレステロールのないことを確認した。

実施例１ コレステロール０．１％、酵母エキス０．５％、　Ｎ）
１４ＮＯ３０，１％、ＫＨ，Ｐｏ、　０．０２５％、Ｍ
ｇＳＯ４・７）１２００．０２５％、Ｆｅ５０．・７）
１２００．０００１％を含む液体培地（ｐＨ７，０）　
１１２を、１２０℃で１５分間滅菌後、この培地にロド
コッカス・エクイの前培養液を無菌的にｌｏｍＱ接種し
、３７℃で４８時時間上う培養した。培養液を毎分６０
００回転で３０分間遠心分離し、微生物菌体５ｇと上澄
液（コレステロール分解酵素）８００＋ａｌｌ　を得た
。いずれもコレステロール分解能を有していた。

実施例２ 実施例１で示した微生物菌体を０．０１Ｍリン酸緩衝液
（ｐＨ７，０）　ニ懸濁後、豚脂（ＭＰ［融点］３１℃
、ＩＶ〔よう素価〕６５．５Ｖ（１−ｔン化価）１９５
）ト３７℃テ４８時間混合振どう（回転数２０Ｏｒｐｍ
）を行い、油脂のコレステロール含量を詣定した結果を
第１表に示す、豚脂中のコレステロールは４８時間後に
は完全に分解されていた。

実施例３ 実施例１で示したコレステロール分解酵素を含む上澄液
を限外濾過で５倍に濃縮した後、濃縮液１５ｍＱと魚油
（ＩＶ：１６７、ＳＶ：　１８７）５０ｇ　ト３７℃で
４８時間混合振どう（回転数２０Ｏｒｐｍ）を行い、魚
油中のコレステロール含意を甜定した結果を第１表に示
す。

魚油中のコレステロールは４８時間後には完全に分解さ
れていた。

実施例４ コレステロール０．１％、酵母エキス０．５％、Ｎ８４
ＮＯ３０，１％、に）Ｉ、Ｐｏ、　０．０２５％、　Ｍ
ｇＳＯ４・７）１，００．０２５％、Ｆｅ５０．１Ｈ２
００，０００１％を含む液体培地（ＰＨ７，０）　Ｉ　
Ｑを、１２０℃で１５分間滅菌後、この培地にロドコッ
カス・エリトロホリスの前培養液を無菌的に１０ｍＱ接
種して、３７℃で２４時間培養し、培養液中よりコレス
テロール分解能を有する微生物菌体４．５ｇを得た。上
記菌体２ｇを０．０１Ｍリン酸緩衝液（ｐ）１７．０）
１０ｎＲに懸濁後、牛脂（ＭＰ：４１℃、ＩＶ：４９、
ＳＶ：　１９５）５０ｇと４５℃で４８時間混合振とう
して牛脂中のコレステロールを分解した。油脂中のコレ
ステロール含量を第１表に示す。

以上の結果より、本発明の方法により油脂中のコレステ
ロールは完全に分解されることがわかる。

代理人　弁理士　柳　原　　　成

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）コレステロール分解能を有するロドコッカス属の
   微生物、またはその培養により得られるコレステロール
   分解酵素を油脂に作用させることを特徴とする油脂中の
   コレステロール分解法。